MX2011006913A - Extractos de planta de la especie acronychia y su uso. - Google Patents

Extractos de planta de la especie acronychia y su uso.

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Victoria Anne Gordon
Paul Warren Reddell
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Abstract

La invención se refiere a extractos de planta y moléculas bioactivas derivadas de la planta del género Acronychia y su uso como antioxidantes, antibacterianos, antihelmínticos, antiinflamatorios, quimio-conservadores de cáncer, aditivos alimenticios y componentes de fragancia en farmacéuticos, nutracéuticos, alimentos y cosméticos.

Description

EXTRACTOS DE PLANTA DE LA ESPECI E A CRONYCHIA Y SU USO Campo de la invención La invención se refiere a extractos de planta y moléculas bioactivas derivadas de la planta género Acronychia y su uso como antioxidantes, antibacterianos, antihelmínticos, anti-inflamatorios, quimio-preventivos de cáncer, aditivos al imenticios y componentes de fragancia en farmacéuticos, nutracéuticos, alimentos y cosméticos.
Antecedentes de la invención El biodescubrimiento es un campo de acción que investiga y clasifica productos naturales bioactivos a parti r de ambientes naturales tales como plantas, microorganismos, suelos y vida marina. En el biodescubrimiento, los materiales biológicos son clasificados por moléculas teniendo propiedades las cuales pueden ser de beneficio terapéutico para usarse en el tratamiento de humanos o animales, para uso en composiciones cosméticas, para uso como aditivos alimenticios o componentes de fragancia.
Breve descripción de la i nvención La presente i nvención se basa en parte en el descubrimiento de que extractos de la fruta de la especie Acronychia tiene actividad antibacteriana , anti helm íntica, antioxidante, anti-inflamatorio y/o anticáncer.
En un primer aspecto de la invención, se proporciona un método para tratar o prevenir una infección bacteriana que comprende administrar a un sujeto una cantidad efectiva de un extracto a partir de una especie de Acronychia.
En un aspecto adicional de la invención , se proporciona un método para tratar o prevenir una infección helm íntica en un sujeto que comprende ad ministrar una cantidad efectiva de u n extracto a partir de una especie Acronychia.
En otro aspecto de la invención , se proporciona un método para tratar o prevenir un desorden de proliferación cel ular comprendiendo administrar a un sujeto una cantidad efectiva de un extracto a partir de una especie Acronychia.
En otro aspecto de la invención , se proporciona un método para tratar o prevenir una enfermedad o desorden inflamatorio comprendiendo administrar a un sujeto una cantidad efectiva de un extracto a partir de una especie Acronychia.
En un aspecto ad icional de la invención se proporciona un método para tratar o prevenir una enfermedad o desorden relacionado con tensión oxidante comprendiendo administrar a un sujeto una cantidad efectiva de un extracto a partir de una especie Acronychia.
Todavía en otro aspecto de la invención se proporciona un método para tratar o prevenir una infección bacteriana comprendiendo administrar a un sujeto una cantidad efectiva de un compuesto de fórmula (I) : en donde A es un grupo arito o un grupo heteroarilo; Z es seleccionado de -O-, -S- y -NR4-; Y es seleccionado de un enlace covalente y -(CH2)P-; Ri es seleccionado de -C5-C2oalquilo, -C5-C2oalquenilo, -C5-C20alquinilo y -C3-C8cicloalquilo; R2 es seleccionado de hidrógeno, -d-C6alquilo, -C2-C6alquenilo, - C2-C6alquinilo, -C3-C8cicloalquilo, hidroxi , -Od-Cealquilo, -OC2-C6alquenilo, -OC2-C6alquinilo, -OC3-C8cicloalquilo, t i o I , -SC^Cealquilo, -SC2-C6alquenilo, -SC2-C6alquinilo, -SC3-C8c¡c!oalquilo, -NR4C1-C6alquilo, -NR4C2-C6alquenilo, -NR4C2-C6alquinilo y -NR4C3-C8cicloalquilo; R3 es seleccionado de -C02H o un equivalente isoestérico de un grupo carboxi; R4 es seleccionado de hidrógeno y -C Cealquilo; y p es un entero de 1 a 10; o una sal farmacéuticamente del mismo.
Todavía en otro aspecto de la invención se proporciona un compuesto de la fórmula (I I): en donde A es un grupo arito o un grupo heteroarilo; Z es seleccionado de -O-, -S- y -NR4-; Y es seleccionado de un enlace covalente y -(CH2)P-; Ri es seleccionado de -C5-C2oalquilo, -C5-C2oalquenilo, -C5-C2oalquinilo y -C3-C8cicloalquilo; R2 es seleccionado de -Ci-C6alquilo, -C2-C6alquenilo, -C2-C6alquinilo, -C3-C8cicloalquilo, hidroxi, -OCi-C6alquilo, -OC2-C6alquenilo, -OC2-C6alquinilo, -OC3-C8cicloalquilo, tiol, -Sd-Cealquilo, -SC2-C6alquenilo, -SC2-C6alquinilo, -SC3-C8cicloalquilo, -NR4C1-C6alquilo, -NR4C2-C6alquenilo, -NR C2-C6alquinilo y -NR4C3-C8cicloalquilo; R3 es seleccionado de -C02H o un equivalente isoestérico de un grupo carboxi; R4 es seleccionado de hidrógeno y -C^Cealquilo; y p es un entero de 1 a 10; o una sal farmacéuticamente del mismo.
En un aspecto adicional de la invención, se proporciona una composición farmacéutica comprendiendo un extracto de especie Acronychia o un compuesto de fórmula (I) o fórmula (II) y una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En otro aspecto adicional de la invención se proporciona una composición de sabor o fragancia que comprende un extracto de una especie Acronychia, comprendiendo dicho extracto al menos uno de: 1-etenil-1-metil-2,4-bis(1-metiletenil)ciclohexano, 2,6-di-ter-butilbenzoquinona, 2,5-di-ter-butil-1,4-benzoquinona, tetracontano-1 ,40-diol y 2 ,2,5,5-tetramet¡l-biciclo[6.3.0]undec-1 (8)-enona .
Todavía en otro aspecto de la invención , se proporciona una composición cosmética, alimento o fragancia comprendiendo un extracto a partir de u na especie Acronychia, en donde el extracto es obtenido mediante un método comprendiendo extracción de agua o alcohol inicial y una subsecuente extracción de acetato de etilo.
En un aspecto adicional de la invención , se proporciona el uso de un extracto a partir de una especie Acronychia como un com ponente de fragancia o sabor en un alimento u otra composición.
E n otro aspecto de la invención , se proporciona el uso de un extracto de u na especie Acronychia como un aditivo al imenticio, un componente de fragancia o un antioxidante, un componente antiinflamatorio o uno antibacteriano de una composición cosmética.
Descripción detallada de la invención La planta de género Acronychia es un miembro de la familia cítrica (Ruaceae) y comprende aproximadamente 50 especie que ocurre de manera natural en Australia , las Islas del Pacífico, Malasia y Asia. Extractos de cualquiera de estas especies pueden ser usados en la invención. En algunas modalidades, el extracto es obtenido a partir de la especie Acronychia natural de Australia incluyendo A. aberrans, A. acidula, A. acronychioides, A. acuminate, A. baeuerlenii, A. chooreechillum, A. crassipetala, A . eungellensis, A. imperl 'orate, A. laevis, A. littoralis, A. oblongifolia, A. octanara, A. parviflora, A. pauciflora, A. pubescens, A. especies (Bativia Downs), A. suberosa, A. vestita y A. wilcoxiana. En modalidades particulares, el extracto es obtenido a parti r de A. acidula, A. aberrans, A. acronychioides o A. crassipetala, especialmente A. acidula.
El extracto puede ser obtenido a parti r de cualq uier parte de la planta, tal como la fruta , la semilla, la corteza , la hoja, la flor, las ra íces y la madera . En modalidades particu lares, el extracto es obtenido a partir de la fruta de la planta.
Por ejemplo, la biomasa obtenida a partir de la fruta de la planta es sometida a extracción de solvente inicial , por ejemplo con un solvente polar, por ejemplo, agua o un alcohol , tal como metanol o etanol . La extracción inicial es concentrada entonces y dil uida con agua y sometida extracción con un segundo solvente, por ejemplo, acetato de etilo. Las muestras de solvente a partir de la segunda extracción son depositadas y sometidas a separación mediante fraccionamiento de HPLC preparatoria. Las fracciones son analizadas mediante H PLC analítica y depositada de acuerdo con el tiempo de retención de compuestos encontrados en las muestras. Las fracciones depositadas son pesadas, bioensayadas y analizadas mediante H PLC analítica. Fraccionamiento adicional usando una o más HPLC preparatoria es realizado para aislar compuestos específicos. Cada compuesto es bioensayado y su estructura identificada por técnicas espectrométricas de masa (LC y GC) , NMR y UV.
En un aspecto de la invención, se proporciona un método para tratar o prevenir u na infección bacteriana comprendiendo administrar a un sujeto una cantidad efectiva de un extracto a parti r de una especie Acronychia.
En algunas modalidades, el extracto es obtenido a partir de A. acidula.
La infección bacteriana puede ser provocada mediante una bacteria Gram positiva o Gram negativa , especialmente bacteria G ram positiva incluyendo bacterias del género Bacill us (por ejemplo, B. subtilis, B. anthracis, B. cereus, B. firmis, B. licheniformis, B. megaterium, B. pumilus, B. coagulans, B. pantothenticus, B. alvei, B. brevis, B. circulans, B. laterosporus, B. macerans, B. polymyxa, estearothermophilus, B. thuringiensis, B. sphaericus), Sthapylococcus (por ejemplo, S. aureus, S. epidermis, S. haemolyticus, S. saprophyticus) , Streptococcus (por ejem plo , S. pyogenes, S. pneumoniae, S. agalactiae, S. pyogenes, S. agalactiae, S. dysgalactiae, S. equismilis, S. equi, S. zooepidemicus, S. anginosus, S. salivarius, S. milleri, S. sanguis, S. mitior, S. mutans, S. faecalis, S. faecium, S. bovis, S. equinus, S. uberus, S. avium) , Aerococcus, Gemella, Corynebacterium, Listeria, Kurthia, Lactobacillus, Erysipelothrix, Arachnia, Actinomyces, Propionibacteriu , Rothia , Bifidobacterium , Clostridium , Eubacteriu , Nocardia , Mycobacterium.
En algunas modalidades, se obtienen compuestos específicos a partir del extracto y son usados en el método para tratar o prevenir infecciones bacterianas, o derivados o análogos de tales compuestos son usados. Por ejemplo , compuestos adecuados obtenidos a partir del extracto, derivados o análogos de tales compuestos, son compuestos de fórmula (I): en donde A es un grupo arilo o un grupo heteroarilo; Z es seleccionado de -O-, -S- y -NR4-; Y es seleccionado de un enlace covalente y -(CH2)p-¡ F?! es seleccionado de -C5-C2oalqu¡lo, -C5-C2oalquenilo, -C5-C2oalquinilo y -C3-C8cicloalquilo; R2 es seleccioando de hidrógeno, -C n-Cealquilo, -C2-Cealquenilo, -C2-C6alquinilo, -C3-C8cicloalquilo, hidroxi, -OC i-Cealquilo, -OC2-C6alquenilo, -OC2-C6alquin¡lo, -OC3-C8cicloalquilo, tiol, -SC i-Cealquilo, -SC2-C6alquenilo, -SC2-C6alquinilo, -SC3-C8cicloalquilo, -NR4C1-C6alquilo, -NR C2-C6alquenilo, -NR4C2-C6alquinilo y -NR4C3-C8cicloalquilo; R3 es seleccionado de -C02H o un equivalente isoestérico de un grupo carboxi ; R4 es seleccionado de hidrógeno y -C i-C6alquilo; y p es un entero de 1 a 10; o una sal farmacéuticamente del mismo.
Compuestos particulares de fórmula (I) son compuestos de fórmula (IA): Y es seleccionado de un enlace covalene y -(CH2)P; R^ es seleccionado de -C5-C2oalquilo, -C5-C2oalquenilo y -C3-C8cicloalquilo; R2 es seleccioando de hidrógeno, -d-CGalqu¡lo, -C2-C6alquenilo, -C2-C6alquinilo, -C3-C8cicloalquilo, hidroxi, -OC^Cealquilo, -OC2-C6alquenilo, -OC2-C6alquinilo y -OC3-C8cicloalquilo; R3 es seleccionado de -C02H o un equivalente isoestérico de un grupo carboxi; y y p es un entero de 1 a 10; o una sal farmacéuticamente del mismo.
En modalidades particulares de fórmula (I) uno o más de los siguientes aplica: A es un grupo arilo, especialmente fenilo, Z es -O- o -S, especialmente -O-; Y es -(CH2)P-, donde p es 1 a 10, especialmente 1 a 6, más especialmente 1 a 4, muy especialmente 2; es seleccionado de -C5-C20alquilo, -C5-C20alquenilo, especialmente -C5-C2oalquenilo, por ejemplo, -C5-Ci5alquenilo teniendo 1 a 3 dobles enlaces, especialmente -C15alquenilo, tal como farnesilo; R2 es hidrógeno, hidroxilo, -OC Cealquilo, -OC2-C6alquenilo y - OC3-C8cicloalquilo, especialmente hidrógeno, hidroxilo u -Od-Csalquilo, más especialmente hidrógeno u -OCi-Csalquilo, muy especialmente hidrógeno u -OCH3; R3 es -C02H.
Compuestos particularmente útil de fórmula (I) son: ácido 3-(4-farnesiloxifenil)propiónico y ácido 3-(4-farnesiloxi-3-metoxifenil) pro pión ico El término "alquilo" se refiere a grupos hidrocarburo lineales y ramificados opcionalmente substituidos teniendo 1 a 20 átomos carbono. Donde es apropiado, el grupo alquilo puede tener un número especificado de átomos de carbono, por ejemplo, -Ci-Ce alquilo, el cual incluye grupos alquilo teniendo 1 , 2, 3, 4, 5 o 6 átomos de carbono en arreglos lineales o ramificados. Ejemplos no limitantes de grupos alquilo incluyen metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, s- y t-butilo, pentilo, 2-metilbutilo, 3-metilbutilo, hexilo, heptilo, 2-metilpentilo, 3- metilpentilo, 4-metilpentilo, 2-etilbutilo, 3-etg i I butil o , octilo, nonilo, decilo, undecilo, dodecilo, tridecilo, tetradecilo, pentadecilo y similares.
El término "alquenilo" se refiere a grupos hidrocarburo lineales o ramificados, insaturados, opcionalmente substituidos, teniendo 2 hasta 20 átomos de carbono y teniendo al menos un doble enlace. Donde es apropiado, el grupo alquenilo puede tener un número especificado de átomos de carbono, por ejemplo, C2-C6 alquenilo, el cual incluye grupos alquenilo teniendo 2, 3, 4, 5 o 6 átomos de carbono en arreglos lineales o ramificados. Ejemplos no limitantes de grupos alquenilo incluyen, etenilo, propenilo, isopropenilo, butenilo, s- y t-butenilo, 3-metilbut-2-enilo, pentenilo, hexenilo, hept-1 ,3-dienilo, hex-1 ,3-dienilo, hexa- ,3,5-trienilo, heptenilo, octenilo, 3,7-dimetil-octa-2,6-dienilo, nonenilo, decenilo, undecenilo y farnesilo y similares.
El término "alquinilo" se refiere a grupos hidrocarburo lineales o ramificados insaturados, opcinalmente substitidos, teniendo 2 hasta 20 átomos de carbono y teniendo al menos un triple enlace. Donde es apropiado, el grupo alquinilo puede tener un número especificado de átomos de cabono, por ejemplo, grupos C2-C6 alquinilo tienen 2, 3, 4, 5 o 6 átomos de carbono en arreglos lineales o ramificados. Ejemplos no limitantes de grupos alquinilo incluyen etinilo, propinilo, butinilo, pentinilo, hexinilo y similares.
Los términos "cicloalquilo" se refieren a grupos de carbono monocíclicos, bicíclicos o tricíclicos saturados o insaturados, opcionalmente substutidos. Donde es apropiado, el grupo cicloalquilo puede tener un número especificado de átomos de carbono, por ejemplo, C3-C6 cicloalquilo es un grupo carbocíclico teniendo 3, 4, 5 o 6 átomos de carbono. Ejemplos no limitantes pueden incluir ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclopentenilo, ciclohexilo, ciclohexenilo, ciclohexadienilo, cicloheptilo y ciclooctilo y similares.
"Arilo" significa un sistema de anillos carbocíclico monocíclico o bicícliclo de 6 a 10 miembros de átomos de carbono teniendo hasta 7 átomos en cada anillo, en donde al menos un anillo es aromático. Ejemplos de grupos arilo Incluyen, pero no están limitados a, fenilo, naftilo y tetrahidronaftilo. El arilo puede comprender 1 -2 anillos de benceno. Si dos anillos aromáticos están presentes, entonces los anillos pueden ser fusionados juntos, de manera que los anillos adyacentes comparten un enlace común.
El término "heteroarilo" como se usa en la presente, significa un anillo monocíclico o bicíclico estable de hasta 7 átomos en cada anillo, en donde al menos un anillo es aromático y al menos un anillo contiene desde 1 -4 heteroátomos, seleccionados de azufre, oxígeno y nitrógeno. Heteroarilo incluyen, pero no está limitado a, oxazolilo, tiazolilo, tienilo, furilo, 1 -isobenzofuranilo, pirrolilo, imidazolilo, pirazolilo, isotiazolilo, isooxazolilo, piridilo, pirazinilo, pirimidinilo, piradazinilo, indolizinilo, isoindolilo, indolilo, purinilo, ftalazinilo, 1 ,2,3-triazolilo, 1 ,2,4-triazolilo, 1 ,2,3-oxadiazolilo, 1 ,2,4-oxadiazolilo, 1 ,2,5-oxadiazolilo, 1 ,3,4-oxadiazolilo, 1 ,2,3,4-oxatriazolilo, 1 ,2,3,5-oxatriazolilo, 1 ,3,5-triazinilo, 1 ,2,4-triazinilo, 1 ,2,3-triazinilo, benzofuranilo, isobenzofuranilo, tionaftenilo, isotionaftenilo, indoleninilo, 2-isobenzazolilo, 1 , 5-pirid i ni lo, pirano[3,4-b]pirrolilo, isoindazolilo, indoxazinilo, benzoxazolilo, quinolinilo, isoquinolinilo, cinolinilo, quinazolinilo, naftiridinilo, pirido[3,4-b]piridinilo, pirido[3,2-b]piridinilo, pirido[4,3-b]piridinilo, acridinilo, carbazolilo, quinaoxalinilo, pirazolilo, benzotriazolilo, tiofenilo, isoquinolinilo, piridinilotetrahidroquinolinilo, benzazepinilo, benzodioxanilo, benzoxepinilo, benzodiazepinilo, benzotiazepinilo y benzotiepinilo y similares.
El término "equivalente isostérico de un grupo carboxi" se refiere a un grupo, el cual es fisioquímica o topológicamente similar a grupo carboxilato o ácido carboxílico. Ejemplos de isoésteres de carboxilato o ácido carboxílico adecuados incluyen pero no están limitados a, tetrazol, tetrazolato, -CON H-tetrazol, oxidiazol , fosfato (-P03H2), N-(aril o heteroari l)-sulfonamidas, acilsulfonamidas y ácido sulfónico (-S03H) (Ver Patani y La Voie, 1 996 Chem Rev. 96: 3147-31 76).
Los grupos alquilo , alquenilo, alquini lo, cicloalqui lo, arilo y heteroari lo pueden ser substituidos con uno o más substituyentes seleccionados independientemente de -F, -Cl , -Br, -I , -C02R, -CN , -OR, -S R, -N(R)2, -N02, -NROR, -ON(R)2, -SOR, -S02R , -S03R, -SON(R)2, -S02N (R)2, -S03N (R)2, -P(R)3, -P(=0)(R)3, -OSi(R)3, -OB(R)2 en donde R es seleccionado de hidrógeno, -C^-C20 a lquilo, -C2-C20 alquenilo, -C2-C20 alquinilo, -C3-C8 cicloalquilo, arilo, heteroarilo, heterociclilo, arilalquilo, heteroari lalqui lo, heterociclilalilo, -CrC,0 haloalqui lo, -d-C i o dihaloalquilo y -C T -C KJ trihaloalquilo.
El término "halo" se refiere a flúor (fluoro) , cloro (cloro) , bromo (bromo) y yodo (yodo) .
"Heterocíclico" o "heterociclilo" se refiere a un anillo no aromático teniendo 3 a 8 átomos en el anillo y de esos átomos 1 a 4 son heteroátomos, siendo aislado o fusionado dicho anillo a un segundo anillo seleccionado de anillo al icíclico de 3 a 7 miembros conteniendo 0 a 4 heteroátomos, en donde dichos heteroátomos son seleccionados independientemente de O, N y S . Heterocíclico incluye grupos heterocíclicos parcial y completamente saturados. Sistemas heterocíclicos pueden ser unidos a otra porción vía cualquier número de átomos de carbono o heteroátomos del radical y pueden ser tanto saturados como insaturados, lo cual incluye todas las formas de porciones de carbohidrato. Ejemplos no limitantes de heterocíclico incluyen pirrolidinilo, pirrolinilo, piranilo, piperidinilo, piperazinilo, morfolinilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidrotiofenilo, pirazolinilo, ditiolilo, oxatiolilo, dioxanilo, dioxinilo, oxazinilo, azepinilo, diazepinilo, tiazepinilo, oxepinilo y tiapinilo, imidazolinilo, tiomorfolinilo y similares.
El término "sal" como se usa en al presente, incluye sales farmacéuticamente aceptables y aquéllas consideradas adecuadas para ingestión por humanos y animales. Ejemplos de sales adecuadas incluyen sales de metales alcalinos y alcalino-térreos, sales de amonio, aluminio, hierro, amina, glucosamina, cloruro, sulfato, sulfonato, bisulfato, nitrato, citrato, tartrato, bitartrato, fosfato, carbonato, bicarbonato, malato, maleato, napsilato, fumarato, succinato, acetato, benzoato, tereftalato, palmoato, pectinato, piperazina y S-metilmetionina y similares.
En otro aspecto de la invención, se proporciona un compuesto de fórmula (II): donde A es un grupo arilo o un grupo heteroarilo; Z es seleccionado de -O-, -S- y -NR4-¡ Y es seleccionado de un enlace covalente y -(CH2)P-; Ri es seleccionado de -C5-C2oalquilo, -C5-C2oalquenilo, -C5-C2oalquinilo y -C3-C8cicloalquilo; R2 es seleccionado de -Ci-C6alquilo, -C2-C6alquenilo, -C2-C6alquinilo, -C3-C8cicloalquilo, hidroxi, -Od-Cealquilo, -OC2-C6alquenilo, -OC2-C6alquinilo, -OC3-C8cicloalquilo, tiol, -Sd-Cealquilo, -SC2-C6alquenilo, -SC2-C6alquihilo, -SC3-C8cicloalquilo, -NRíd-Cealquilo, -NR4C2-C6alquenilo, -NR C2-C6alquinilo y -NR C3-C8cicloalquilo; R3 es seleccionado de -C02H o un equivalente isoestérico de un grupo carboxi ; R4 es seleccionado de hidrógeno y -d-Cealquilo; y p es un entero de 1 a 10; o una sal farmacéuticamente del mismo.
Compuestos particulares de fórmula (II) incluyen compuestos de fórmula (HA): Y es seleccionado de un enlace covalente y -(CH2)P-; R, es seleccionado de -C5-C2oalquilo, -C5-C20alquenilo y -C3-C8cicloalquilo; R2 es seleccionado de -Ci-C6alquilo, -C2-C6alquenilo, -C3-C8cicloalquilo, hidroxi, -OCi-C6alquilo, -OC2-C8alquenilo, -OC2-C6alquinilo y -OC3-C8cicloalquilo¡ R3 es seleccionado de -C02H o un equivalente isoestérico de un grupo carboxi ; p es un entero de 1 a 10; o una sal farmacéuticamente del mismo. En modalidades partiuclares de fórmula (I I) , uno o más de los siguientes aplican: A es un grupo arilo, especialmente fenilo, Z es -O- o -S-, especialmente -O-; Y es -(CH2)P-, donde p es 1 a 1 0, especialmente 1 a 16, más especial mente 1 a 4, muy especialmente 2; R, es seleccionado de -C5-C2oalq uilo o -C5-C2oalquenilo, especialmente -C5-C20alquenilo teniendo 1 a 3 dobles enlaces, especialmente y -Ci 5alquenilo, tal como farnesilo; R2 es seleccionado de hidroxilo, -OCi-C6alquilo, -OC2-C6alquenilo y -OC3-C8cicloalquilo, especialmente hidroxilo o -OC^-Cealquilo, más especialmente -OCi-C3alqui lo, muy especial mente -OCH3; R3 es-C02H .
U n compuesto particular de fórmula (I I) es ácido 3-(4-farnesiloxi-3-metoxifenil) propión ico Aunque algunos de los compuestos de fórmulas (I) o (I I) pueden ser obtenidos mediante extracción , otros pueden ser obtenidos mediante manipulación de compuestos aislados o mediante síntesis de materiales de inicio adecuados.
Por ejemplo, compuestos de fórmula (I) o (I I) , en los cuales Z es oxígeno y es diferente de farnesilo, pueden ser obtenidos al hidrolizar el g rupo de éter farnesilo y reemplazarlo con otro grupo alquilo, alquenilo, alquinilo o cicloalqui lo.
La cadena alquenilo, Y, puede extenderse mediante adición nucleofílica con un grupo carboxi alquilo protegido al grupo carboxi R3 seguido por reducción y el iminación del grupo hidroxilo resultante, la desprotección del grupo carboxialquilo protegido puede ser realizada entonces.
Una persona experta en la téncia sería capaz de determinar condiciones adecuadas para obtener derivados de compuestos aislados, por ejemplo, por referencia a textos que se refieren a metodolog ía sintética, ejemplos de los cuales son Smit M. B. y March J . , March's Advanced Organic Chemistry, quinta edición , John Wiley & Sons I nc. , 2001 y Larock R.C. , Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers Ltd . , 1 989. Adicionalmente, manipulaciones selectivas de grupos funcionales pueden requeri r protección de otros grupos funcionales. Grupos de protección adecuados para prevenir reacciones laterales no deseadas son provistas en Green y Wuts, Protectiv Groups in Organis Synthesis, John Wiley & Sons INcl. , 3a edición , 1 999.
En un aspecto adicional de la invención se proporciona un método para tratar o prevenir una infección helm íntica en un sujeto que comprende administrar una cantidad efectiva de une xtracto a partir de una especie Acronychia.
E n modalidades preferidas, el helminto (gusano) es u n nemátodo, tremátodo o céstodo , especialmente Haemonchus contortus, Trichnella spiralis, H. placei, Bursaphelenchus xylophilus, Ostertagia circumcincta, O. ostertagi, Mecistocirrus digitatus, Trychostrongylus axei, Trichuris trichiura, T. vulpis, T. campánula, T. suis, T. ovis, Bunostomum trigoncephalu, B. phleboyomum, Oesophagostomum cloumbianum, O. radiatum, Cooperia curticei, C. punctata, C. oncophora, C. pectinata, Strongyloides papillosus, Chabertia ovina, Anclystoma duodenale, A. braziliense, A. tubaeforme, A. caninum, Ascaris lumbricoides, Enterobius vermicularis, E. gregorü, Ascaris lumbricoides, Paragonimus Westermani, Clonorchis sinensis, Fasciola hepática, Taenia solium, T. saginata, Capillaria aerophila, Necator americanus, especies del género Trichurs, Baylisascaris, Aphelencoides, Meliodogyne, Heterodera, Globodera, Nacobbus, Pratylencus, Ditlenchus, Xiphinema, Longidorus, Thchodorus, Nematodirus.
En otro aspecto de la invención , se proporciona un método para tratar o prevenir un desorden celular comprendiendo administrar a un sujeto una cantidad efectiva de un extracto obtenido de una especie Acronychia.
En algunas modalidades, el desorden proliferativo celular es un cáncer, especialmente donde el cáncer es seleccionado de leucemia, melanoma, cáncer de próstata, cáncer de pecho, cáncer ovárico, carcinoma de células básales, carcinoma de células escamosas, fi brosarcoma, cáncer de colon , cáncer de pulmón, un neoplasma y otros cánceres de tumor sólido. En otras modalidades, el desorden proliferativo celular es u n desorden prol iferativo celular es no mal igno, por ejemplo, u na hiperplasia prostética benigna .
Todavía en otra modalidad de la presente invención , se proporciona un método para tratar o prevenir u n desorden inflamatorio que comprende administrar a un sujeto una cantidad efectiva de un extracto a parti r de la especie Acronychia.
En algunas modalidades de este aspecto , el desorden inflamatorio es inflamación general , artritis reumatoide, colitis, sepsis bacteriana o un desorden asociado con un malfuncionamiento del sistema inmune, tal como un desorden autoinmune. En algunas modal idades, el desorden i nflamatorio es sepsis bacteriana. En algunas modalidades, el compuesto de la invención es capaz de inmunomodulación , especialmente inmunosupresión . Los compuestos de la invención también son útiles como agentes inmunosupresores en transplante de órganos.
En otro aspecto, se proporiocna un método para tratar o prevenir una enfermedad o desorden relacionado con tensión oxidante, comprendiendo administrar a un sujeto una cantidad efectiva de un extracto a partir de una especie Acronychia.
En algunas modalidades, la enfermedad o desorden relacionado con tensión oxidante es una enfermedad o desorden , de la cual un sujeto puede beneficiarse tomando antioxidantes. Por ejemplo, los antioxidantes son benéficos para tratar o prevenir enfermedad cardiovascular, tal como insuficiencia cardiaca , ataque al corazón y accidente cerebrovascular; enfermedades infecciosas tales como H IV/AIDS, y hepatitis; cáncer; enfermedades de envejecimiento, tales como artritis, degeneración macular, glaucoma y cataratas; enfermedades d epulmón , tales como enfisema, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD) y síndrome de insuficiencia respiratoria del adulto; y desórdenes neurológicos o neurodegenerativos, tales como enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson , esclerosis múltiple, enfermedad de H untington , demencia y deterioro cognitivo, especial mente deterioro cognitivo en animales de com pañ ía , tales como perros.
En algunas modalidades, el extracto de especies Acronychia es una composición antioxidante anti-inflamatoria. Esto es particularmente útil para el tratamiento de desórdenes neurológicos tal como enfermedad de Alzheimer.
En algunas modalidades, el extracto puede estar en la forma de una composición nutracéutica que refuerza las defensas antioxidantes del sujeto. La composición nutracéutica puede ser tomada como un suplemento mientras que el sujeto está sufriendo de una enfermedad o desorden o puede ser tomada como una medida preventiva para prevenir o retardar el inicio de una enfermedad o desorden relacionado con tensión oxidante.
El extracto de especie Acronychia puede ser administrado a cualquier sujeto en necesidad de tratamiento para una infección bacteriana , un desorden prol iferativo celular, una enfermedad inflamatoria o una enfermedad o desorden relacionado con tensión oxidante o a un sujeto quien está en necesidad de prevención de cualuqiera de estos desórdens. El término "sujeto" como se usa en la presente incluye humanos, primates, animales de ganado (por ejemplo, borregos, cerdos, ganado vacuno, caballos, burros) , animales de pruebas de laboratorio (por ejemplo, ratones, conejos, ratas, conejillos de I ndias) , animales de compañía (por ejemplo, perros, gatos), aves (por ejemplo, pollos, patos, gansos, pericos, cacatúas, palomas, pinzones, aves de rapiña, rátidas, codornices, canarios) , animales salvajes en cautiverio (por ejemplo, zorras, canguros, venados) y reptiles (por ejemplo, lagartos y serpientes) . En algunas modalidades, el sujeto es humano, un ani mal de compañ ía, un animal de ganado o un animal de prueba de laboratorio. En modalidades particulares, el sujeto es un humano, un animal de compañ ía o animal de ganado.
Una cantidad efectiva del extracto será dependiente del procedimiento de extracción y la fuente del extracto, es decir, la especie Acronychia usada y si el extracto contiene prdominantemente un compuesto o contiene muchos compuestos. U na "cantidad efectiva" significa una cantidad necesaria al menos en parte para alcanzar la respuesta deseada, o para retardar el inicio o inhibir la progresión o detener por completo, el inicio o progresión de una condición particular siendo tratada. La cantidad varía dependiendo de la salud y condición física del individuo a ser tratado, el grupo taxonómico de individuo a ser tratado, el grado de protección deseado, la formulación de la composición, la valoración de la situación médica y otros factores relevantes. Se espera que la cantidad caerá en un rango relativamente amplio que puede ser determinado a través de ensayos de rutina. Una cantidad efectiva en relación a un paciente humano, por ejemplo, puede caer en el rango de aproximadamente 0.1 ng por kg de peso corporal a 1 g por kg de peso corporal por dosificación. La dosificación está de preferencia en el rango de 1 g hasta 1 g por kg de peso corporal por dosificación, tal como en el rango de 1 mg hasta 1 kg de peso corporal por dosificación. En una modalidad, la dosificación está en el rango de 1 mg hasta 500 mg por kg de peso corporal por dosificación . En otra modalidad, la dosificación está en el rango de 1 mg hasta 250 mg por kg de peso corporal por dosificación. Todavía en otra modalidad, la dosificación está en el rango de 1 mg hasta 100 mg por kg de peso corporal por dosificación, tal como hasta 50 mg por kg de peso corporal por dosificación. Todavía en otra modalidad, la dosificación está en el rango de 1 pg hasta 1 mg por kg de peso corporal por dosificación. Los regímenes de dosificación pueden ser ajustados para proporcionar la respuesta terapéutica óptima. Por ejemplo, varias dosis divididas pueden ser administradas de manera diaria, semanal, mensual u otro intervalo de tiempo adecuado, o la dosis puede ser reducida proporcionalmente como se indica por las exigencias de la situación.
Haciendo referencia en la presente a "tratamiento" y "profilaxis" se va a considerar en su contexto más amplio. El términ o "tratamiento" no implica necesariamente que el sujeto sea tratado hasta la recuperación total. De manera similar, "profilaxis" no necesariamente significa que el sujeto no contraerá eventualmente una condición de enfermedad. De acuerdo con esto, tratamiento y profilaxis incluyen mejora de los síntomas de una condición particular o prevenir o reducir de otra manera el riesgo de desarrollar una ocndicon particular. El término "profilaxis" puede ser considerado como que reduce la severidad o inicio de una condición particular. "Tratamiento" también puede reducir la severidad de una condición existente.
En otra modalidad, se proporciona el uso de un extracto a partir de una especie Acronychia en la fabricación de un medicamento para tratar o prevenir una infección bacteriana, una infección helmíntica, un desorden proliferativo celular, una enfermedad o desorden inflamatorio o un desorden relacionado con tensión oxidante.
Todavía en otra modalidad, se proporciona el uso de un compuesto de la fórmula (I): en donde A es un grupo arilo o un grupo heteroarilo; Z es seleccionado de -O-, -S- y -NR4-; Y es seleccionado de un enlace covalente y -(CH2)P-; R es seleccionado de -C5-C2oalquilo, -C5-C2oalquenilo, -C5-C20alquinilo y -C3-C8cicloalquilo; R2 es seleccionado de hidrógeno, -d-Cealquilo, -C2-C6alquenilo, -C2-C6alquinilo, -C3-C8cicloalquilo, hidroxi, -OC^Cealquilo, -OC2-C6alquenilo, -OC2-C6alquinilo, -OC3-C8cicloalquilo, tiol, -SC!-Cealquilo, -SC2-C6alquenilo, -SC2-C6alquinilo, -SC3-C8cicloalquilo, -NR4C1-C6alquilo, -NR4C2-C6alquenilo, -NR4C2-C6alquinilo y -NR4C3-C8cicloalquilo; R3 es seleccionado de -C02H o un equivalente isoestérico de un grupo carboxi ; R4 es seleccionado de hidrógeno y -C^Cealquilo; y p es un entero de 1 a 10; o una sal farmacéuticamente del mismo, en la fabricación de un medicamento para tratar o prevenir una infección bacteriana.
En algunas modalidades, el extracto puede ser incorporado en una composición nutracéutica pretendida para mejorar la salud y bienestar de un sujeto. En algunas modalidades, la composición nutracéutica es una composición nutracéutica antioxidante.
Aunque es posible que el extracto pueda ser usado en un método en forma pura, por ejemplo, como un polvo seco, es posible que el extracto sea formulado en una composición farmacéutica o nutracéutica con un portador, diluyente y/o excipiente farmacéuticamente aceptable.
La forma de dosificación y proporciones para uso farmacéutico y composiciones son fácilmente determinables por una persona de habilidad en la técnica.
Las formas de dosificación incluyen tabletas, dispersiones, suspensiones, inyecciones, soluciones, jarabes, trociscos, cápsulas, supositorios, aerosoles, parches transdérmicos y similares. Estas formas de dosificación también puedne incluir inyectar o implantar dispositivos diseñados específicamente para, o modificados para, liberación controlada de la composición farmacéutica. La liberación controlada del agente terapéutico puede ser efectuada al recubrir el mismo, por ejemplo, con polímeros hidrofóbicos incluyendo resinas acrílicas, ceras, alcoholes alfiáticos mayores, ácidos polilácticos y poliglicólidos y ciertos derivados de celulosa, tal como hidroxipropilmetil celulosa. Además, la liberación controlada puede ser afectada al usar otras matrices poliméricas, liposomas y/o microesferas.
Portadores farmacéuticamente aceptables para administración sistémica también pueden ser incorporados en las composiciones de esta invención.
Adecuadamente, la composición farmacéutica comprende un excipiente farmacéuticamente aceptable. Por "excipiente farmacéuticamente aceptable" se quiere decir un relleno sólido o líquido, diluyente o substancia encapasulante que pueda usarse de manera segura en administración sistémica. Dependiendo de la ruta particular de administración, una variedad de portadores, bien conocidos en la técnica, pueden ser usados. Estos portadores o excipientes pueden ser seleccionados de un grupo que incluye azúcares, almidones, celulosa y sus derivados, malta, gelatina, talco, sulfato de calcio, aceites vegetales, aceites sintéticos, polioles, ácido algínico, soluciones amortiguadas con fosfato, emulsificantes, solución salina isotónica y agua libre de pirógeno.
Cualquier ruta de administración adecuada puede ser empleada al proporcionar un humano o no humano con la composición farmacéutica de la invención. Por ejemplo, oral, rectal, parenteral, sublingual, bucal, intravenosa, intraarticular, intra-muscular, intra-dérmica, subcutánea, por inhalación, intraocular, intraperitoneal, intracerebroventricular, transdérmica y similares pueden ser empleadas.
Composiciones farmacéuticas de la presente invención adecuadas para administración pueden ser presentadas en unidades discretas, tales como viales, cápsulas, saquitos o tabletas, conteniendo cada una una cantidad predeterminada de uno o más compuestos farmacéuticamente activos de la invención, como un polvo o gránulos o como una solución o una suspensión en un líquido acuoso, un líquido no acuoso, una emulsión aceite-en-agua o una emulsión agua-en-aceite. Tales composiciones pueden ser preparadas mediante cualquier método de farmacia pero todos los métodos incluyen el paso de llevar a asociación un extracto o uno o más compuestos farmacéuticamente activos de la invención con el portador, el cual constituye uno o más ingredientes necesarios. En general, las composiciones son preparadas al mezclar de manera uniforme e íntima, los agentes de la invención con portadores líquidos o portadores sólidos finamente divididos o ambos, y entonces, si es necesario, configurar el producto a la presentación deseada.
En polvos, el portador es un sólido finamente dividido, el cual está en una mezcla con el componente activo finamente dividido.
En las tabletas, el componente activo es mezclado con el portador teniendo la capacidad de unión necesaria en proporciones adecuadas y compactadas en la forma y tamaño deseados.
Los polvos y tabletas de preferencia contienen desde cinco o diez hasta aproximadamente setenta por ciento del extracto o compuesto activo. Los portadores adecuados son carbonato de magnesio, estearato de magnesio, talco, azúcar, lactosa, pectina, dextrina, almidón, gelatina, tragacanto, metilcelulosa, carboximetilcelulosa de sodio, una cera de baja fusión, manteca de cacao y similares. El término "preparación" pretende incluir la formulación del compuesto activo con material encapsulante como portador que proporciona una cápsula en la cual el componente activo o extracto, con o sin portadores, está rodeado por un portador, el cual está en asociación así con él. De manera similar, los cachets y losanges son incluidos. Tabletas, polvos, cápsulas, pildoras, cachets y losanges pueden usarse como formas sólidas adecuadas para adminsitracion oral.
Las preparaciones de forma líquida incluyen soluciones, suspensiones y emulsiones, por ejemplo, soluciones de agua o agua-propilenglicol. Por ejemplo, las preparaciones líquidas de inyección parenteral pueden formularse como soluciones en solución acuosa de polietilenglicol.
El extracto o compuestos pueden formularse de esta manera para adminsitración parenteral (por ejemplo, mediante inyección, por ejemplo, inyección de bolo o infusión continua) y pueden presentarse en forma de dosis de unidad con un conservador adicionado. Las composiciones pueden tomar tales formas como suspensiones, soluciones o emulsiones en vehíuclos oleosos o acuosos, y pueden contener agentes de formulación, tales como agentes de suspensión, estabilización y/o dispersión. De manera alternativa, el ingrediente activo puede estar en forma de polvo, obtenido mediante aislamiento aséptico de sólido estéril o mediante liofilización de solución, por constitución con un vehículo adecuado, por ejemplo, agua estéril, libre de pirógeno, antes de usarse.
Las soluciones acuosas adecuadas para uso oral pueden prepararse al disolver el componente o extracto activo en agua y adicionar colorantes, sabores, agentes estabilizantes y espesantes adecuados, según se desee.
Suspensiones acuosas adecuadas para uso oral pueden hacerse al dispersar el componente o extracto activo finamente dividido en agua con material viscoso, tal como gomas naturales o sintéticas, resinas, metilcelulosa, carboximetilcelulosa de sodio u otros agentes de suspensión bien conocidos.
También se incluyen preparaciones de forma sólida, las cuales pretenden ser convertidas, en breve antes de usarse, a preparciones de forma líquida para adminsitración oral. Tales formas líquidas incluyen soluciones, suspensiones y emulsiones. Estas preparaciones pueden contener, además del componente o extracto activo, colorantes, sabores, estabilizantes, amortiguadores, endulzantes artificiales y naturales, dispersantes, espesantes, agentes solubilizantes y similares.
Para administración tópica a la epidermis, el extracto o compuestos pueden ser formulados como ungüentos, cremas o lociones, o como un parche transdérmico. Ungüentos y cremas, pueden, por ejemplo, ser formuladas con una base acuosa u oleosa con la adición de agentes espesantes y/o gelificantes adecuados. Las lociones pueden ser formuladas con una base acuosa u oleosa y en general también contendrán uno o más agentes emulsificantes, agentes estabilizantes, agentes dispersantes, agentes de suspensión, agentes espesantes o agentes colorantes.
Las formulaciones adecuada spara ad ministración tópica en la boca incluyen losanges comprendiendo agente o extracto activo en una base saborizada, usualmente sacarosa y acacia o tragacanto; pastillas comprendiendo el ingrediente activo en una base inerte, tal como gelatina y glicerina o sacarosa y acacia ; y enjuagues bucales comprendiendo el ingrediente activo en un portador l íquido adecuado.
Las sol uciones o suspensiones son aplicadas di rectamente a la cavidad nasal mediante medios convencionales, por ejemplo, con u n gotero, pipeta o atomización . Las formulaciones puedne ser provistas en forma simple o de múltiples dosis. En el último caso de un gotero o pipeta, esto puede lograrse al administrar el paciente un volumen predeterminado, aprpiado, de la solución o suspensión . En el caso de una atomización , esto puede lograrse, por ejemplo , por medio de una bomba de atomización de atomización medida . Para mejorar la entrega nasal y retención los compuestos o extracto pueden ser encapsulados con ciclodextrinas o formulados con sus agentes esperados para i ntensificar la entrega y retención en la mucosa nasal .
La administración al trato respiratorio también puede lograrse por medio de una formulaicon de aerosol , en la cual el ingrediente o extracto activo es provisto en un paquete presurizado con un propulsor adecuado, tal como clorofluorocarburo (C FC), por ejemplo, diclorodiflorometano, triclorofluorometano o diclorotetrafluoroetano, dióxido de carbono u otro gas adecuado. El aerosol puede contener también convenientemente un surfactante tal como lecitina. La dosis de medicamento puede ser controlada mediante la provisión de una válvula dosificadora .
De manera alternativa, los ingredientes activos pueden ser provistos en la forma de un polvo seco, por ejemplo , una mezcla de polvo del compuesto o extracto en una base de polvo adecuada, tal como lactosa , almidón , derivados de almidón, tales como hidroxi propilmetil celulosa y polivinilpirrolidona (PVP) .
Convenientemente, el portador de polvo formará un gel en la cavidad nasal . La composición de polvo puede ser presentada en forma de dosificación de unidad, por ejemplo, en cápuslas o cartuchos de, por ejemplo, gelatina o paquetes de burbuja a parti r de los cuales el polvo puede ser administrado por medio de un inhalador.
En formulaciones pretendidas para adminsitracion al tracto respiratorio, incluyendo formulaciones intranasales, el compuesto o extrato generamente tendrá un pequeño tamaño de pa rtícula, por ejemplo, del orden de 1 a 1 0 mieras o menos. Tal tamaño de partícula puede ser obtenido pormedios conocidos en la técnica, por ejemplo, mediante micronización .
Todavía en otro aspecto de la invención , se proporciona el uso de un extracto a parti r de una especie Acronychia en la fabricación de un medicamento para tratar o prevenir una infección bacteriana, un desorden prol iferativo celular, una enfermedad o desorden inflamatorio o una enfermedad o desorden relacionado con tensión oxidante.
En otro aspecto de la invención, el extracto de especie Acronychia puede i ncorporarse en una composición cosmética para sus propiedades anti bacterianas, anti-inflamatorias y/o antioxidantes.
Composiciones cosméticas adecuadas incluyen cremas faciales, lociones corporales, cremas de manos, bases de maquillaje, formulaciones anti-envejecimiento y anti-arrugas, lavado y pelado de cara, composiciones de remoción de maquillaje y similares.
La formulación de composiciones cosméticas incluyendo componentes antioxidantes y/o antibacterianos es conocida en la técnica.
En un aspecto adicional de la invención , se proporciona una composición cosmética comprendiendo un extracto a partir de una especie Acronyhchia , en donde el extracto es obten ido mediante un método que comprende extracción de agua o alcohol in icial y una subsecuente extracción de acetato de etilo.
En otro aspecto de la invención , el extracto de una especie Acronychia es usado como un aditivo al imenticio, un componente de fragancia o un componente antioxidante o antibacteriano de una composición cosmética.
Los extractos a partir de especie Acronychia tienen componentes volátiles, los cuales proporcionan sabor y fragancias. Estos componentes volátiles puedne ser usados como un aditivo alimenticio en algimentos, tales como jaleas, helado, dulces y salsas. De manera alternativa, el extracto conteniendo componentes volátiles pueden ser usados como una fragancia en perfumes, cosméticos, prod uctos para el hogar, tales como limpiadores, desodorantes, jabones, champúes, acondicionadores y similares.
La formulación de tales productos para el hogar o productos para el cuidado personal conteniendo fragancias es bien conocido en la téncica. Por ejemplo, el extracto puede ser incluido en el producto para el hogar o producto para el cuidado personal en una cantidad en el rango de 2-5%.
Un número de compuestos volátiles fueron aislados del extracto de A. acidula como se muestra en la Fig ura 1 . Los compuestos identificados incluyen 1 -etenil-1 -metil-2,4-bis(1 -metiletenil)ciclohexano, 2 ,6-di-ter-butil benzoquinona , 2, 5-di-ter-butil-1 ,4-benzoquinona , tetracontano-1 ,40-diol y 2,25, 5-tetrameti l-biciclo[6.3.0]undec-1 (8)-enona. Cantidades más pequeñas de componentes volátiles no identificados también fueron encontrados mediante espectrometría de masa.
Componentes volátiles del extracto pueden ser aislados mediante métodos conocidos en la técnica, tal como destilación , extracción de fluido supercrítico (SPE), extracción asistida por microondas (MAE) , extracción de solvente, extracción de l íquido presurizado (PLE) , extracción ultrasónica y extracción de fase sólida.
E n otro aspecto de la presente invención , se proporciona una composición de sabor o fragancia comprendiendo uno o más de los siguientes compuestos: 1 -etenil-1 meti l-2,4-bis(1 -metiletenil)ciclohexano, 2,6-di-ter-butilbenzoquinona , 2 ,5-di-ter-buti 1-1 ,4-benzoquinona, Tetracontano-1 ,40-diol y 2 ,2,5, 5-tetrametil-biciclo[6.3.0]undec-1 (8)-enona.
En algunas modalidades, la composición de sa bor o fragancia contiene al menos dos de los componentes listados antes. En algunas modal idades, la composición de sabor o fragancia contiene todos los componentes l istados antes.
Breve descripción de los dibujos La Figura 1 proporciona trazas espectrométricas de masa de compuestos volátiles menores presentes en un extracto de A. acidula.
Con el fin de que la invención sea entendida fácil mente y puesta en práctica , modalidades particulares serán descritas ahora mediante los siguientes ejemplos no limitantes.
Ejem plos Procedimientos de clasificación Actividad antioxidante Ensayo de DPPH para depuración de radicales Antecedentes Este ensayo se basa en el uso de DPPH de radicales libres estable, el cual es un color violeta profundo. Cuando una solución de DPPH es mezclada con aquélla de una substancia que puede donar un átomo de hidrógeno (por ejemplo, un antioxidante) , da lugar a la forma reducida de DPPH , con la pérdida de este color violeta.
Materiales 2,2-difenil-1 -pircril-hidrazil (DPPH) ; MW:394 Etanol Muestra a ser ensayada a diluciones requeridas Lector de microplaca sintonizable VERSAmax - Molecular Devices Método 1 . Una solución 0.1 mM de DPPH en etanol (3.94 mg de DPPH en 100 mi de etanol) fue preparada. De manera alternativa (si se van a hacer diluicones seriales en la placa) una solución 10x de DPPH (1 mM, 3.94 mg en 10ml de etanol) fue preparada. Las soluciones fueron almacenadas a 4°C durante unas cuantas semanas pero perdieron color con el tiempo. 2. 90 µ? de solución DPPH 1 x se adicionó a cada cavidad usada en la placa de 96 cavidades. 3. 10 µ? de muestra a ser ensayada se adicionaron a las cavidades conteniendo DPPH (para una dilución final de 1 /1 0) o 10 µ? de una dilución de muestra. Cada muestra fue ensayada por triplicado. Un control negativo de 10 µ? de etanol se usó reemplazando la muestra. Un control positivo de una concentración conocida de catequina se usó si fue requerido. Si las muestras fueron coloreadas, las cavidades de control de etanol y 1 0 µ? de muestra se usaron como blancos de color. 4. Si las diluciones seriales de muestra son realizadas en la placa, 90 µ? de etanol fueron adicionados a las cavidades. 10 µ? de muestra se adicionaron a la cavidad superior y se diluyeron serialmente 10 µ? hacia abajo de la placa, removiendo 10 µ? de la última cavidad diluida para asegurar una cantidad igual en cada cavidad. 10 µ? de DPPH 10x se adicionaron a cada cavidad. 5. Después de combinar la muestra y DPPH, las placas se dejaron a temperatura ambiente durante 20 minutos antes de leer sobre el lector de placa a una longitud de onda de 51 7 nm.
Peroxidación de lípidos en plasma humano Antecedentes La inhibición de peroxidación de lípidos es un objetivo principal para antioxidantes. Se ha mostrado por Itoh et al. 2004, Biochemical Pharmacoloy, 68, 81 3-818 (y referencias citadas en el mismo) que la oxidación mediada por radicales de plasma humano genera in vitro hidroperóxido de éster de colesterilo (CEOOH) como un producto mayor, con cantidades más pequeñas de hidróxido de éster de colesterilo (CEOH) e hidro(per)óxido de fosfolípido. En consecuencia, el grado de peroxidación de lípido en plasma puede estimarse a partir de la formación de hidroperóxido de éster de colesterilo (CEOOH).
Método El efecto de muestras para reducir la peroxidación de lípidos en plasma humano dializado fue realizado siguiendo el método de Itoh et al. 2004. Brevemente este involucró: 1 . La sangre se recolectó en ácido etilendiaminotetraacético (EDTA) conteniendo tubos de voluntario sano después de ayuno durante la noche. El plasma fue obtenido mediante centrifugación a 1580 x g durante 10 min a 4°C. El plasma fue dializado usando una membrana de diálisis durante 1 8 h a 4°C en PBS para el iminar ácido ascórbico y otros antioxidantes de peso molecular pequeño , solubles en agua que estuvieron presentes. 2. 2,2'-azobis(4-metoxi-2 ,4-dimetilvaleronitrilo) (MeO-AMVN) lipofílico (concentración final 0.2 mM) se adicionó a una solución PBS conteniendo 1 0% en volumen de plasma humano dializado con y sin 6.66 % volumen de solución de muestra y la mezcla se incubó a 37°C durante 1 h. 3. Los prod uctos de peroxidación de l ípido fueron extraídos con cloroformo/metanol (2/1 en volumen) y la capa de cloroformo se analizó.
El hidroperóxido de éster de colesterilo (CEOOH) e hidróxido de éster de colesteri lo (CEOH) se midieron a 234 nm mediante H PLC con un detector espectrofotométrico usando una columna ODS (Wakosil-l l 5C 18RS , 5 um , 250 mm x 4.6 mm) con acetonitrilo/alcohol isopropílico/agua (44/54/2 en volumen) eluido a 1 ml/min .
Ensayos anti bacterianos Revisión Las bacterias usadas en estos estudios fueron: · Streptococcus salivarius K40 • Bacillus subtilis Todos los ensayos antibacterianos fueron realizados en un gabinete de flujo laminar usando el protocolo descrito más adelnte. El crecimiento o no crecimiento fue valorado visualmente y mediante lector de ELI SA. El punto final es reportado como la dilución mínima (calculada también en pg/ml para las fracciones más potentes) requirió inhibir totalmente el crecimiento sobre el periodo de tratamiento de 24 h.
Método 1) Un cultivo iniciador fue fijado al raspar una punta a través de una alícuota congelada de cultivo bacteriano y colocar en 10 mi de caldo Columbia dentro de un tubo falcon. Esto se colocó entonces en un agitador bacteriano a 37°C a 210 rpm durante la noche. 2) Se hizo una lectura de blanco en el espectrofotómetro a 600 nm usando 210 µ? de caldo Columbia. Una lectura de 200 µ? del cultivo iniciador fue tomada entonces. 3) En cálculos, se deseó una concentración final de 0.005. La fórmula usada para dilución de x mi de iniciador fue: x * A600 = 0.0005 * volumen deseado 4) 90 ul de MeOH se adicionaron a cada cavidad de una placa con fondo plano de 96 cavidades. 10 µ? de muestra sea adicionaron a la cavidad superior y se diluyeron 1:10 hacia abajo de la placa. De manera alternativa, las filas superiores fueron dejadas vacías de MeOH y 100 µ? de muestra se adicionaron y entonces se diluyeron a 1:10 hacia abajo de la placa. 5) Las placas se dejaron secar entonces a cada cavidad de la placa. La placa fue colocada entonces en el incubador bacteriano a 37°C durante la noche. El siguiente día la placa fue calificada bajo el microscopio para inhibición (solución transparente indicando 100% de inhibición comprada con solución turbia para controles) y agregación.
Para cuantificación, las placas fueron leídas a 405 nm (ELISA) .
Clasificación nematicida Un bioensayo antihelm íntico, aplicable a todos los nemátidos parasíticos con etapas de ciclo de vida de vida libre, se usó como una clasificación para detectar actividad y potencia de extractos crudos de especie Acronychia contra nematodos parasíticos. El ensayo determina los efectos de extractos de prueba sobre desarrollo larval y sigue el método descrito por Gilí et al . (1995) INt. J. Parasitol. 25: 463-470.
Brevemente, en este ensayo huevos del nemátodo Haemonchus contortus cepa McMaster) se aplicaron a la superficie de una matriz de agar conteniendo la muestra de prueba y se permitió que se desarrollara a través de la etapa infecciosa L3 (6 días) . En este momento, la etapa de desarrollo larval alcanzado y cualquier característica inusual (deformidad , parálisis, toxicidad) fueron notadas mediante examinación microscópica. Para detemrinar la potencia de los extractos, se usó una serie de diluciones de dos veces del extracto padre y la lectura de este ensayo es un título de dilución .
Ensayo anti-inflamatorio y neuroprotector Antecedentes La producción de óxido nítrico y la citocina pro-inflamatoria TNF se asocian con tensión oxidante y procesos inflamatorios en general, y están cada vez más implicados en el desarrollo de condiciones neurológicas relacionadas con la edad, incluyendo la enfermedad de Alzheimer. Un sistema de ensayo para medir LPS o producción inducida con interferón-? o LPS de óxido nítrico en células microgliales de murino N-1 1 , puede usarse para identificar fracciones y compuestos con actividad anti-inflamatoria, neuroprotectora y antioxidante. Los "estándares de oro" para comparación en este ensayo son los bioflavonoides, apigenina y diosmetina.
Método Mantenimiento celular Se cultivaron microglia N-1 1 en matraces de 175 cm2 en Medio Eagle modificado de Dulbecco (DMEM) (Invitrogen) conteniendo 5% de suero bovino fetal (FBS) (Invitrogen) y L-glutamina 2mM (Invitrogen) además de solución antibiótica de penicilina y estreptomicina al 1 % (Invitrogen). Todas las líneas celulares fueron mantenidas en 5% C02 a 37°C.
Concentración de células Una vez que las céulas habían crecido a confluencia dentro del matraz de cultivo, se removieron usando un gendarme de goma, como se opone a tratamiento de tripsina, el cual es conocido por ser responsable de remover los receptores unidos a membrana, tal como RAGE. La suspensión celular fue concentrada entonces mediante centrifugación durante 3 minutos a 900 x g y se resuspendió en un volumen pequeño de DMEM conteniendo 0.1 % FBS.
Cuenta celular Volúmenes iguales de solución celualr resuspendida y azul Tripano (0.1 %) se mezclaron a un volumen total de 20 µ? . La mitad de la mezcla se colocó sobre un portaobjetos de conteo Neubauer. Dieciséis cuadrados de igual tamaño fueron vistos y contados bajo un microscopio. El número de células por microlitro de solución celular fue calculado, al usar la siguiente ecuación: conteo celular x 2 (factor de dilución por azul tripano) x 10 (1 /100 de volumen total contado) = número de células por microlitro.
Dispensado de células en placas Una vez que la concentración de suspensión celular fue determinada, el volumen de medio fue ajustado a la concentración requerida. Esto se logró al dividir el número total de células requeridas por el número de células por microlitro. 100 µ? de suspensión celular se administraron a cada cavidad de una placa de 96 cavidades para dar un total de células deseadas de 5x104 células por cavidad. Para los experimentos usando placas de 6 cavidades, 1 .2x106 células por cavidad fueron distribuidas en cada cavidad con un volumen total final de 2 mi por cavidad. Para experimentos usando placas de 24 cavidades, 3x105 células por cavidad fueron distribuidas en cada cavidad con un volumen total final de 1 mi por cavidad. Las placas fueron centrifugadas a 500 x g durante 5 minutos para permitir una distribución uniforme.
Activación de células Siguiendo el dispensado de céluals en placas, las placas fueron incubadas durante la noche a 37°C para permitir el asentamiento y unión al fondo de las cavidades. Antes de la activación, medios acondicionados fueron reemplazados con DMEM fresco conteniendo 0.1 FBS para minimizar el efecto de crecimiento durante la experimentación.
Lipopolisacárido Una solución madre de 1000 pg/ml de LPS de E. coli (serotipo 0127:B8) en PBS estéril fue usada para diluicones celulares. Las concentraciones de LPS que varían desde 0.1 g/ml hasta 100 pg µ/ml se usaron para la construcción de una curva de activación dependiente de la dosis. Una concentración de 10 pg/ml se usó para activar células en ensayos con extractos. lnterferón-? Una solución de stock de 1000 U/ml de IFN-? de murino (Lote # 10098) se usó en conjunción con DMEM con 0.1% FBS. Una curva de activación dependiente de la dosis fue construida usando concentraciones de IFN-? variando desde 0.1 U/ml hasta 500U/ml. Una concentración de 10U/ml se usó para activar células en ensayos con extractos.
Activación de céulas para ensayos con extractos Debido a la naturaleza incosistente de LPS para activar células, se usó una combinación de 10 pg/ml de LPS y 10U/MI de IFN-? para activar células para ensayos con extractos.
Determinación de óxido nítrico Se determinó óxido nítrico mediante la cuantificación de reactivo de Griess de nitrito, uno de sus productos de reacción estables. El reactivo de Griess se llevó a volúmenes iguales de 1 % sulfanilamida y 0.1 % naftilen-diamina en 5% HCI, y en la presencia de nitrito forma un color violeta. Una curva estándar usando concentraciones conocidas de nitruto de sodio fue construida, y la absorbancia de cada muestra fue medida a 545 nm usando un Wallac VICTOR3 V Multilabel Counter (Perkin Elmer). 75 µ? de sobrenadante de cada cavidad activada se transfirieron a una placa de 96 cavidades fresca y se mezclaron con volúmenes iguales de reactivo de Gries. La absorbancia se midió, permitiendo el cálculo de concentración de nitrito de la curva estándar de nitrito de sodio.
Ensayo de viabilidad de células azul Alamar El azul Alamar es un indicador redox fluorescente usado para medir las viabilidades celulares. I nvolucra la reducción celular de resazurina mediante enzimas mitocondriales celulares, produciendo un producto soluble (resorufina), el cual es directamente proporcional al número celular. Las células fueron incubadas con 100 µ? por cavidad de una solución de 1 % resazurina y DMEM (0.1 % FBS) durante 2 horas a 37°C en placas de 96 cavidades. El volumen total se ajustó para placas de 24 cavidades, de manera que cada cavidad se incubó con 500 µ?. La fluorescencia fue examinada a 454/595 nm y se expresó como un porcentaje de las células de control, siguiendo la substracción de lecturas de soporte.
Ensayos de actividad anticáncer Clasificación de células preliminares de extractos crudos Revisión La potencia de extractos crudos etanólicos es valorada contra 5 líneas celulares (4 líneas de tumoor y una línea de células humanas normales) en formato de placa de 96 cavidades. Los valores de IC50 son calculados a partir de 7 diluciones de 10 veces seriales en las 5 líneas celulares.
Método Las células normales son fibroblastos humanos primarios (NFF): las líneas de células de tumor usadas son melanoma MM418c5 (una línea celular pigmentada, para detectar agentes depigmentantes), cáncer de pecho MCF-7, cáncer ovárico CI80-13S (resistente a cisplatina; altamente sensible a medicamentos mitocondriales) y una línea de cáncer de próstata LnCAP. 1 . Las células son escasamente sembradas y se permite que crezcan en medio de cultivo de tejido (RPMI 1640 + 10% FCS + pen/estrep) durante 5-7 días para proporcionar datos de supervivencia de células tipo clonogénico. 2. La cantidad de suspensión celular requerida para dar 4000 células por volumen de 1 00 µ? fue calculada. Esto requirió que la suspensión celular se mezclara con medio de cultivo de tejido (con tirosina adicionada) para hacer el volumen requerido. 3. La suspensión celular se platinó a 1 00 µ? por cavidad en placas de cultivo de tejido de 96 cavidades de fondo plano, antes de colocarse en un incubador humidificado, de 50% C02, a 37°C . 4. 2 µ? de la fracción requerida fue colocada entonces en la cavidad superior (fila A) de una placa y se mezcló usando una pipeta antes de diluirse serialmente 1 : 1 0 hacia debajo de la placa a la fila G . Las placas fueron incubadas nuevamente a 37°C durante 3-4 días antes de ser valoradas bajo un microscopio de luz para viabi lidad celular y cambios morfológicos, en particular depigmentación e hi per-pigmentacion de células.
Clasificación celular preliminar de fracciones S 1 /S2 Método para placas de células mezcladas 1 . Cuatro líneas celulares diferentes [N FF; NCF7, MM96L (melanoma) y K562 (leucemia)] suspendidas en medio de cultivo de tejido (RPM I 1640 + 1 0% ECS + pen/estrep) se contaron . 2. La cantidad de suspensión celular requerida para dar 1 000 MM96L, 2000 K562, 3000 MCF7 y 5000 N FF por volumen de 1 00 µ? fue calculada. Esta suspensión celular requerida a partir de cada l ínea celular se mezcló junta y se adicionó medio de cultivo de tejido para llevar al volumen requerido. 3. La suspensión celular mezclada se platinó a 1 00 µ? por cavidad en placas de cultivo de tejido de 96 cavidades, de fondo plano, antes de colocarse en un incubador humidificado, de 5% C02, de 37°C durante la noche. 4. 2 µ? de la muestra requerida fue colocada entonces en la cavidad superior (fila A) de una placa y se mezcló usando una pipeta antes de ser diluida serialmente 1 : 1 0 habia abajo de la placa a la fila G. 5. Las placas fueron incubadas nuevamente a 37°C durante 3-4 días antes de ser valoradas bajo un microscopio de luz para viabilidad celular y cambios morfológicos.
Método para placas celulares de MM418c5 6. La línea de células de melanoma MM418c5 suspendida en medio de cultivo de tejido (RPMI 1640 + 10% FCS + pen/estrep + 250 pg/ml tirosina) fue contada. 7. La cantidad de suspensión celular requerida para dar 4000 células por volumen de 100 µ fue calculada. Esta suspensión celular requerida fue mezclada con medio de cultivo de tejido (con tirosina adicionada) para llevar al volumen requerido. 8. La suspensión celular fue platinada a 100 µ? por cavidad en placas de cultivo de tejido de 96 cavidades, con fondo plano, antes de colocarse en un incubador humidificado, de 5% C02, de 37°C durante la noche. 9. 2 µ? de la muestra requerida se colocó entonces en la cavidad superior (fila A) de una placa y se mezcló usando una pipeta antes de ser diluida serialmente 1 : 1 0 hacia abajo de la placa a la fila G. 10. Las placas fueron incubadas nuevamente a 37°C durante 3-4 d ías antes de ser valorada bajo un microscopio de luz para viabilidad celular y cambios morfológicos, en particular depigmentación e hiper-pigmentación de células.
Definición de componentes de sabor y fragancia Antecedentes La microextracción de fase sólida (SPME) es una preparación de muestra y método de introducción de muestra , en el cual la división de analitos a partir de una muestra hacia un polímero, recubierto sobre una barilla de sílice fusionado de normalmente 1 cm de longitud por 1 00 µ?? de diámetro. La fibra es sujetada hacia el extremo de un tubo de acero inoxidable fino contenido en un dispositivo similar a jeri nga , y protegido por una aguja de acero inoxidable exterior. El émbolo del dispositivo es deprimido para exponer la fibra a la matriz de muestra , retraída en el extremo del tiempo de muestreo y entonces deprimida nuevamente para exponer la fibra a una interfase de desorción para análisis mediante GC-MS. La SPME proporciona una alternativa a espacio superior GC para análisis de volátiles en un amplio rango de situaciones (Pawlisyzn J 1 999: Applications of Solid Phase Microextraction , Royal Society of Chemistry) .
Método Fruta congelada de Acronychia acidula se cortó en cubos de aproximadamente 5 mm y se molió suavemente en un mortero para romper las células exteriores y para liberar los componentes volátiles. La fruta picada fue transferida entonces inmediatamente a un recipiente de vidrio equipado con un septo. Un sujetador de fibra SP E comercial (Supelco Analytical, US) y fibra (polidimetilsiloxano, 100 µ?t? de película 57310-U) se insertó a través del septo y se usó el émbolo para bajar y exponer la fibra a la mezcla volátil en el recipiente de vidrio durante 15 minutos. La fibra se retrajo entonces y posteriormente se desorbió y analizó mediante GC-MS: Ejemplo 1: Preparación de extracto crudo Fruta congelada de Acronychia acidula se rebanó en cubos de aproximadamente 5 mm, cubiertos generosamente con etanol (~2 I) y se agitó durante la noche. Este extracto se filtró entonces y la mayoría del solvente se removió mediante evaporación rotatoria para dar un concentrado acuoso (el extracto crudo).
Ejemplo 2: Primer fraccionamiento usando una columna de sílice (S1) Preparación de extracto para columna S1 1. 200 mi a 1 I de agua milli-Q se adicionaron a extracto crudo seco o concentrado (el extracto debería tener todos los solventes además de agua secada, el volumen de agua usado fue dependiente de la cantidad de extracto). 2. El mismo volumen de acetato de etilo se adicionó a la muestra y se mezcló antes de transferir a un embudo de separación. Este es agitado durante ~30 segundos, teniendo cuidado de liberar la presión en el embudo frecuentemente. 3. Se permitió que las dos capas se separaran, entonces se recolectaron por separado. 4. La capa acuosa fue colocada nuevamente en el embudo, entonces se repitieron los pasos 2-3. 5. Una muestra de 1 mi de cada capa se recolectó y se almacenó, entonces las capas individuales se secaron sobre el evaporador rotatorio y se pesaron . 6. Las capas de acetato de etilo se combinaron y se disolvieron en una pequeña cantidad de solvente de acetato antes de almacenarse a 4°C o -20°C hasta que se requirió para cromatografía de columna de sílice.
Método para columna de sílice piloto (S1 ) Preparación de columna: 1 . 1 g de Merck Silica Gel 60 (0.063-0.2 mm) se pesó en un vaso de laboratorio de 1 00 mi. 2. Se cubrió sílice con ~10 mi de éter de petróleo y se mezclaron profundamente con una espátula. 3. El sílice se vació directamente después de agitar en una columna de vidrio de 1 cm de diámetro interno, la llave de la columna se abrió y se permitió que el sílice corriera a través durante un par de minutos. 4. La llave se cerró y el sílice se permitió que se asentara durante al menos una hora (de preferencia durante la noche). La parte superior de la columna fue cubierta con un sello hermético para prevenir que el solvente se evaporara. 5. Después del asentamiento, cualquier burbuja en la columna fue sacada con golpes suaves. Si cualquier burbuja de aire grande estuviera presente, el lecho entero fue agitado y se permitió que se volviera a asentar. 6. La altura de la columna fue registrada (aproximadamente 3 cm).
Preparación de muestra: 7. Aproximadamente 1 50 mg del extracto crudo concentrado apropiado fueron medidos en un pequeño matraz de fondo redondo. 8. La muestra se secó mediante evaporación rotatoria y el peso se registró. 9. La muestra seca se volvió a disolver en acetato de etilo en un volumen igual a 2 veces la masa de la muestra. 10. El éter de petróleo fue adicionado entonces a la muestra en pequeños volúmenes (20-50 µ?) hasta que la muestra comenzó a precipitar fuera de la solución. El precipitado fue re-disuelto al adicionar una pequeña cantidad de acetato de etilo. El volumen de éter de petróleo adicionado fue registrado. El volumen de carga siempre debería estar por debajo de 2 mi. 1 1 . Se usó una pipeta de 200 µ? para medir de manera precisa un sexto de la carga (~20 mg). Esta fue colocada en la última cavidad en un conjunto de 24 cavidades (dos filas) de una placa de 96 cavidades de 2 mi (polipropileno, químicamente resistente).
Fraccionamiento de muestra: 12. 4 mi de cada una de las siguientes proporciones de solvente se prepararon como se muestra en la Tabla 1 : Tabla 1 1 3. Se permitió que el solvente en la columna levigara hasta el nivel del solvente justo por arriba del sílice. 14. La carga restante fue corrida suavemente había debajo de los lados de la columna usando una pipeta de Pasteur de 1 mi, teniendo cuidado de asegurarse que la carga fuera uniforme. Los lados de la columna fueron enjuagados entonces con una pequeña cantidad de solvente para remover cualquier carga. 1 5. La llave fue abierta y la carga se permitió que se moviera sobre la columna. 1 6. Usando una pi peta de Pasteur como antes, se adicionó la primera mezcla de sovlente a la columna teniendo cuidado de no alterar el sílice. 1 7. Se permitió que el solvente se moviera a través de la col umna y para cada solvente se recolectaron fracciones de 2ml secuencialmente en la placa de 96 cavidades de 2 mi . 1 8. Lo anterior se repitió para cada solvente asegurando que el solvente previo había eluido a la parte superior de la columna antes de la adición de nuevo solvente. 1 9. Las fracciones en la placa de 96 cavidades se secaron al soplar nitrógeno sobre ellas. 20. 400 µ? de etanol se adicionaron a cada fracción seca y se mezclaron usando una pipeta para disovler las muestras. 100 µ? de cada muestra se transfirieron a cada una de 3 placas de 96 cavidades de fondo redondo.
Ejemplo 3 : Método 2 para el fraccionamiento de extracto crudo (S2) Extracción : 1 . Fruta de A. acidula (5090 g) se extrajo una vez con etanol (5.0 I) durante 24 h y se filtró para proporcionar 3025 g de residuo. Este residuo fue molido usando una "Super blender" de Philli ps para dar material bien dividido y extraído dos veces con EtOH (4.0 L y 3.0 I) durante 24 h a temperatura am biente. 2. Muestras de alícuotas (2 mí) se mantuvieron de cada extracto: EB 1 328-EtOH-1 (de 6400 mi) , EB1 328-EtOH-2 (de 4250 mi) , EB1 328-EtOH-3 (de 2400 mi). 3. Los extractos se combinaron y se removió etanol mediante evaporación rotatoria. El residuo (~1600 mi) se extrajo con EtOAc (5x650 mi) . Se removió EtOAc mediante evaporación rotatoria para dar 53 de material oleoso obscuro. Se mantuvieron las siguientes muestras de alícuota (2 mi) : · Fase acuosa después de la extracción (de 1 630 mi) se etiquetó como: • Extracto de acetato de eti lo (de 3260 mi) se etiquetó como EB 1 328-EtOAc.
Columna de sílice: S2 El extracto final (53 g) se disolvió en EtOAc (1 50 mi) y sílice (aproximadamente 1 06 g) se adicionó con el fin de preparar una suspensión homogénea. El hexano ( 1 00 mi) fue adicionado y los solventes fueron removidos. La mezcla residual se secó a 50°C/20 Torr durante 1 h. La columna fue empacada con síl ice y la carga seca obtenida fue adicionada a la parte superior de la colu mna (424 g de sílice, diámetro de columna 1 0 cm x1 3.0 cm y la carga seca sobre sílice 3.0 cm, total ~1200 mi) , la cual se levigó, usando succión de vacío, con los solventes indicados en la Tabla 2 y las fracciones se recolectaron como se muestra en la Tabla 3.
Tabla 2. Mezclas de solvente para S2.
PS = éter de petróleo Las fracciones recolectadas se secaron y se transfirieron a viales de 4.5 mi como soluciones en un solvente adecuado (ver Tabla 3). Las muestras analíticas de fracciones fueron preparadas mediante dilución de cantidad de 45 µ? de soluciones de fracción a 1 mi de MeOH. La fracción grande (EB1328-S2-4) se dejó para cristalización fraccionada para proporcionar tres muestras (ver Tabla 3) .
Tabla 3. Lista de fracciones recolectadas EB1 328-S2.
## Título de Volumen Solvente para Tara + Tara, g Muestra, fracción de muestras muestra, g fracción, 9 mi 1 EB1328-S2-1 600 Hexanos + 208.900 207.615 1.285 acetona 2 EB1328-S2-2 600 Hexanos + 2 1.070 207.950 3.120 acetona 3 EB1328-S2-3 600 Acetona 210.835 209.685 1.150 4-1 EB1328-S2-4 n/a Acetona 9.768 5.442 4.326 sólido impuro 4-2 EB1328-S2-4 n/a Acetona 5.535 5.435 0.100 sólido 4-3 EB1328-S2-4 600 Acetona 6.210 5.455 0.755 sólido 4-4 EB1328-S2-4 n/a Acetona 49.715 46.180 3.535 mi 5 EB1328-S2-5 600 Acetona 209.270 207.950 1.320 6 EB1328-S2-6 600 Acetona 331.340 327.760 3.580 7 EB1238-S2-7 600 Acetona 210.155 209.685 0.470 8 EB1328-S2-8 600 Acetona 343.635 338.300 5.335 9 EB1328-S2-9 600 Acetona 209.110 207.950 1.160 10 EB1328-S2-10 600 Acetona 345.070 341.360 3.710 11 EB1328-S2-11 600 Acetona 210.250 209.685 0.565 12 EB1328-S2-12 600 Acetona 342.620 339.610 3.010 13 EB1328-S2-13 600 Acetona 144.510 141.925 2.585 aceite 13-1 EB1328-S2- 600 H20 7.151 5.471 1.680 13S 14 EB1328-S2-14 600 Acetona 148.660 146.515 2.145 aceite 14-1 EB1328-S2- 600 H20 6.476 5.446 1.030 14S 15 EB1328-S2-15 600 Acetona 340.155 340.070 0.085 16 EB1328-S2-16 600 Acetona 337.315 336.815 0.500 17 EB1328-S2-17 600 Acetona+MeOH 34 .495 340.995 0.500 18 EB1328-S2-18 600 Acetona+MeOH 341.555 340.870 0.685 19 EB1328-S2-19 600 Acetona+MeOH 337.280 336.280 1.000 20 EB1328-S2-20 600 MeOH 336.485 335.840 0.645 21 EB1328-S2-21 600 MeOH 340.625 339.890 0.735 22 EB1328-S2-22 600 MeOH 338.070 334.665 3.405 Recuperación de material de EB13 28_S2: 48.4 g/~53.0 g x100 = 91.3%. 48.4 Total Las fracciones EB1 328-S2-4 (1 2.42 g) , EB 1 328-S2- 13 y EB1 328-S2-14 se solidificaron sobre evaporación y EB 1 328-S2-4 se re-cristalizó a partir de hexano/acetona para proporcionar tres fracciones (sólido -EB 1 328-S2-4sólido, sólido impuro - EB 1 328-S2-4sólido impuro, y aceite - EB1 328-S2-4ml), las cuales se analizaron mediante GCMS. La fracción EB1 328-S2-sólida de acuerdo con GCMS es un compuesto simple con tiempo de retención de 28.20 mi n . Las fracciones EB1328-S2-4sólido impuro y EB 1328-S2-4ml , excluyendo compuestos volátiles, consisten de cuatro componentes principales con tiempos de retención (Rt) 7.06, 27.96, 28.20, 33.71 min . El componente mayor tanto para fracciones EB 1 328-S2-4sólido impuro como EB1 328-S2-4ml tiene R, de 27.96 min con concentración de aproximadamente 77% y 63% respectivamente.
Las fracciones EB 1 328-S2-13 y EB 1 328-S2-14 se filtraron para recolección y los precipitados formados se lavaron con acetona. De acuerdo con 1 H y 3C N MR, el sólido recolectado de ambas fracciones fue ácido cítrico [Olennikov et al . Chem . Nat. Compounds, 2005, 41 (4), p 467-468].
Análisis de GCMS Cromatógrafo: Shimadzu GC-1 7A Ver. 3, espectrómetro de masa: MS QP5050A, ionización a 70 eV, columna : DB-5ms - diámetro 0.32 mm x 30 m x 0.25 µ?t?, gas portador: He, flujo total 32.2 ml/min , flujo de columna 1 .3 ml/min , temperatura de inyector: 250°C. Programa estándar: 1 mi n a 140°C, seguido por un aumento de temperatura de 5°C/min y se dejó durante 30 min a 290°C.
Ejemplo 4: Resultados de estuidos preliminares a partir de extractos crudos Los extractos etanólicos crudos de fruta de Acronychia acidula y otras tres especies de Acronychia (A. aberrans, A. acronychioides y A. crassipetala) se clasificaron en una variedad de ensayos para caracterizar sus actividades antioxidante, antibacteriana , anti-inflamatoria y anti-cáncer (Tabla 4) . Los extractos crudos fueron ensayados usando el método de DPP H como un ensayo para depuración de radicales, ensayo de peroxidación de lípidos, ensayo de crecimiento antibacteriano y ensayos de clasificación anti-cáncer preli minares como se describe antes. o Tabla 4: Resumen de resultados de clasificación prel imi nar de extractos crudos de especie Acronychia O Datos expresados en equivalentes de trolox para ensayo de ORAC y equivalentes de catequina para ensayo de DPPH. inhibición de producción de óxido nítrico inducido por LPS en células microgliales N 1. 3Lín«as celulares: CI80-13S = ovario; LnCAP = próstata; MCF7 = pecho; MM418c5 = melanoma; NFF = normal. inhibición de desarrollo de larvas de Haemonchus contortus expresado como la última dilución a la cual se observó actividad en una dilución serial de 2 veces.
Estudios adicionales se enfocaron entonces sobre A. acidula como la especie para aislamiento guiado por actividad para identificar las fracciones "activas" específicas en la fruta debido a su disponibilidad de plantaciones comerciales de peq ueña escala .
Ejem plo 5 : Identificación de fracciones bioactivas La cromatografía instantánea en sílice de un extracto de acetato de etilo de Acronychia acidula (ver método S 1 en los protocolos anteriores) se usó como la primera etapa para deconvolucionar la mezcla compleja en el extracto crudo para identificar fracciones biológicamente activas. Fracciones específicas con actividad antibaceriana y anticáncer moderadamente potentes fueron identificadas (Tabla 5) , mientras que la fuerte actividad anti-i nflamatoria/antioxidante (<0.05 mg mi" 1) estuvo presente en muchas de las fracciones.
Tabla 5: Resultados de clasificación de extracto fraccionado S1 de A. acidula (EB1 328) Fracción Anti bacteriano1 AntiAnti-cáncer3 Anticáncer Inhibición de inflamatorio2 Toxicidad Toxicidad crecimiento de ¡ NOS en células en células S. salivarius (IC50, mg mi"1) mezcladas MM418c5 (mg mi" 1 ) (mg mi" 1 ) 1 2 0.492 0.0002 0.002 2 2 0.050 0.02 0.02 3 3 0.054 0.02 0.02 4 2 0.050 0.02 0.02 5 3± 0.050 0.02 0.02 6 3± 0.054 0.02 0.02 7 2 0.050 0.02 0.02 8 2± 0.050 0.02 0.02 9 2± 0.046 0.02 0.02 10 1± 0.046 0.02 0.02 11 2± 0.042 0.02 0.02 12 2 0.050 0.02 0.02 13 0 0.042 0.02 0.02 14 1 0.046 - 0.02 15 1 0.071 - 0.02 16 1± 0.050 - 0.02 17 1 0.054 - 0.02 18 2 0.058 - 0.02 19 1 0.088 - 0.02 20 0 0.434 - 0.02 21 0 0.054 0.02 0.02 22 0 0.042 <0.02 0.02 Carga 1 0.046 0.02 0.02 salivarius a 24 h, los datos se refieren a la primera fila en la placa de prueba inhibición de producción de óxido nítrico inducida por LPS en células microgliales N11 3Comprende la mezcla de 4 l íneas celulares: melanoma MM96L; leucemia K562; pecho MCF7; normal Fraccionamiento de mayor escala su bsecuente (S2) fue realizado para cuantificar de manera más precisa la actividad antibacteriana y anticáncer en A. acidula.
Tabla 6. Puntos finales antibacterianos y a nticáncer en extracto fraccionado de S2 de A. acidula (EB 1 328) Fracción Antibacteriano1 Anticáncer2 Anticáncer2 Punto fi nal para Punto final para Punto final para inhibición de toxicidad en toxicidad en crecimiento de células células S. salivarius mezcladas MM41 8C5 (M9 mi"1 ) (pg mi"1 ) (M9 mi" 1) 1 23 23 2 57 57 3 1 02 230 21 4 67 61 64 5 1 1 7 265 264 6 71 6 716 7 94 64 8 97 97 9 232 232 10 742 67 11 502 113 113 12 602 602 13 517 517 14 429 429 15 n/a 17 16 100 100 17 100 100 18 609 137 137 19 200 200 20 129 129 21 147 147 22 681 681 Dilución mínima requerida para inhibir totalmente el crecimiento de S. salivarius a 24 h, datos expresados en pg mi"1 de fracción 2Punto final es la concentración mínima a la cual todas las células en una cavidad fueron aniquiladas Ejemplo 6 Para identificar de manera más específica las fracciones y compuestos con la actividad antibacteriana, 10 g de polvo secado por congelación de A. acidula (EB1328) se extrajeron tres veces con éter de petróleo (3x50 mi). Los extractos combinados se concentraron a sequedad en un evaporador rotatorio y el residuo resultante (0.248 g) se disolvió en metanol (grado de HPLC) a 10 mg/ml y se separó mediante HPLC . La purificación de HPLC se real izó usando la columna de fase invertida de C 1 8 Gracevydac (100x4.60 mm, 120A) a una velocidad de flujo de 0.5 ml/min de metanol/agua (80/20 v/v y entonces gradiente a 1 00% de metanol) . Las fracciones de H PLC (0.5 mi) se recolectaron usando el recolector de fracción de Gilson FC204 y se probaron por actividad antibacteriana contra Streptococcus salivarius. Los resultados que muestran fracciones activas en la prueba antibacteriana son presentados en la Tabla 7.
Tabla 7: Las fracciones de H PLC de Acronychia acidula (E B1 328) que muestran actividad inhibitoria contra Streptococcus salivarius *Ag = agregación, ± = inhibición parcial Para identificar adicionalmente los componentes antibacterianos activos en A. acidula, las fracciones que se correlacionan a los tres picos dominantes (tiempos de retención 1 5.0-1 8.0, 18.1 -20.0 y 20.1 -22.8) fueron depositadas por separado. La pureza de las fracciones de HPLC recolectadas fue confirmada al correr muestras con un sistema de solvente de HPLC alterno (0.5 ml/min de metanol/agua 70/30 ml/min) y mediante análisis de GC-MS. En la base de análisis de HPLC, la pureza de pico fue 85-95%.
La fracción de activo 22 (codificada como EB1328-QL02) fue determinada mediante GC-MS como material puro con M+ 370.5. Los espectros de 1 H y 1 3C NMR fueron registrados y son mostrados en la Tabla 8. 1 H y 1 3C NMR probaron esta estructura como el compuesto conocido ácido 3-(4-farnesiloxifenil)propiónico (CAS No. 126269-87-2); esta estructura fue designada con el identificador EBC1 1 1 .
Tabla 8. Datos de NMR en CDCI3 a 125/500 MHz No. 13c 1H Multiplicidad (J en Hz) 1 178.5 2 35.8 2.66 t (7.8) 3 29.8 2.91 t (7.8) V 132.1 2', 6' 129.2 7.121 d (8.7) 3', 5' 1 14.7 6.86 d (8.7) 4' 157.4 " 64.9 4.52 d (6.5) " 119.6 5.50 td (6.5, 1.2) " 141.1 " 39.6 2.09 m " 26.2 2.14 m " 123.7 5.12 m " 135.4 " 39.7 1.98 m " 26.7 2.07 m 0" 124.3 5.10 m 1" 131.3 2" 25.7 1.69 d (1.0) 3" 16.7 1.74 s 4" 16.0 1.61 s 5" 17.7 1.61 s EBC111 Peso molecular = 370,54 Fórmula molecular = C24H3,03 La fracción activa 20 (Tabla 7) (3.3 mg) fue purificada mediante HPLC para dar 1.17 mg de compuesto puro adecuado para análisis de NMR. Esta fracción (codificó EB1328-QL01) se determinó mediante LCMS por estar cerca al material puro con m/z 423.5 M+Na+. 1H NMR (500 MHz, cloroformo-d) d ppm 1.57 (s, 6 H), 1.65 (s, 3 H), 1.69 (s, 3 H), 1.92 - 1.96 (m, 2 H), 2.00 - 2.06 (m, 4 H), 2.07 - 2.13 (m, 2 H), 2.64 (t, J=7.5 Hz, 2 H), 2.88 (t, J=7.5 Hz, 2 H), 3.83 (s, 3 H), 4.56 (d, J=6.2 Hz, 2 H), 5.07 (q, J=7.1 Hz, 2 H), 5.48 (t, J=6.2 Hz, 1 H), 6.69 (d, J=7.8 Hz, 1 H), 6.71 (s, 1 H), 6.77 (d, J=7.8 Hz, 1 H). 13C NMR (126 MHz, cloroformo-d) d ppm 16.00, 16.67, 17.68, 25.69, 26.22, 26.71, 30.32, 35.34, 39.56, 39.68, 44.85, 65.95, 111.85, 113.38, 119.91, 119.99, 123.77, 124.34, 131.32, 135.35, 140.52, 143.42, 146.79, 149.41, 176.09. 13C NMR demostró el aislado para ser una estructura previamente no reportada relacionada a EBC111, esta nueva estructura fue designada como EBC125.
Peso molecular = 400,56 Fórmula molecular = C25H3SO Las fracciones separadas y los dos compuestos aislados de A. acidula (EB1328) se probaron adicionalmente por actividad contra S. salivarius (Tabla 9).
Tabla 9: Actividad inhibitoria contra Streptococcus salivarius de fracciones de HPLC y dos compuestos puros aislados de Acronychia acidula (EB1 328) *Ag=agregación , ± = inhibición parcial Ejemplo 7: Identificación de componentes de sabor y fragancia Los componentes volátiles probablemente responsables de características de sabor y fragancia de fruta Acronychia acidula fueron determinados mediante microextracción de fase sólida (SPME) acoplada a GC-MS como se describe antes.
El análisis de GC-MS identificó que estaban presentes tres volátiles mayores: • 1 -etenil-1 -metil-2 ,4-bis(1 -metiletenil)-ciclohexano · 2.6-di-ter-buti lbenzoquinona • Tetracontano-1 ,40-diol y registró unos 6 volátiles menores adicionales (Figura 1 ).

Claims (28)

REIVINDICACIONES
1 . Un método para tratar o prevenir una infección bacteriana, infección helm íntica, un desorden prol iferativo celular, una enfermedad o desorden inflamatorio o un desorden relacionado con tensión oxidante comprendiendo administrar a un sujeto una cantidad efectiva de un extracto a partir de una especie Acronychia.
2. Un método para tratar o preveni r una i nfección bacteriana comprendiendo administrar a un sujeto una cantidad efectiva de u n compuesto de fórmula (I) : en donde A es un gru po arilo o un grupo heteroarilo; Z es seleccionado de -O-, -S- y -N R4-; Y es seleccionado de un enlace covalente y -(CH2)P-; Ri es seleccionado de -C5-C2oalqui lo, -C5-C2oalquenilo, -C5-C20alquinilo y -C3-C8cicloalquilo; R2 es seleccionado de hidrógeno, -Ci-Cealquilo, -C2-C6alquenilo, - C2-C6alquinilo, -C3-C8cicloalquilo, hidroxi , -OC^Cealquilo, -OC2-C6alquenilo, -OC2-C6alquinilo, -OC3-C8cicloalquilo, tiol, -Sd-Cealquilo, -SC2-C6alquenilo, -SC2-C6alquinilo, -SC3-C8cicloalquilo, -NR4Ci-C6alquilo, -N R C2-C6alqueni lo, -N R C2-C6alquinilo y -N R C3-C8cicloalqui lo; R3 es seleccionado de -C02H o un equivalente isoestérico de un grupo carboxi ; R4 es seleccionado de hidrógeno y -C i-C6alquilo; y p es un entero de 1 a 10; o una sal farmacéuticamente del mismo.
3. Un método de acuerdo con la reivindicación 2, en donde el compuesto es un compuesto de fórmula (IA) : Y es seleccionado de un enlace covalente y -(CH2)P-; R, es seleccionado de -C5-C2oalquilo, -C5-C2oalqueni lo y -C3-CsCicloalquilo; R2 es seleccionado de hidrógeno, -Ci-Cealquilo, -C2-C6alquenilo, -C2-C6alquinilo, -C3-C8cicloalquilo, hidroxi, -OCi-C6alqui lo, -OC2-C6alquenilo, -OC2-C6alquinilo, -OC3-C8cicloalquilo; R3 es seleccionado de -C02H o un equivalente isoestérico de un grupo carboxi ; p es un entero de 1 a 10; o una sal farmacéuticamente del mismo.
4. Un método de acuerdo con la reivindicación 2 o reivindicación 3 , en donde R^ es C5-C15 alquenilo teniendo 1 a 3 dobles enlaces.
5. U n método de acuerdo con la reivindicación 4, en donde Ri es farnesilo.
6. Un método de a cuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 2 a 5, en donde R2 es hidrógeno o -Od-C3 alquilo.
7. Un método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 2 a 3, en donde R3 es -C02H .
8. Un método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 2 a 7, en donde Y es -(CH2)P-.
9. U n método de acuerdo con la reivindicación 8, en donde p es 1 a 4.
1 0. U n método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en donde la infección bacteriana es provocada por una bacteria Gram positiva o Gram negativa.
1 1 . Un método de acuerdo con la reivindicación 1 0, en donde las bacterias son seleccionadas del género Bacillus, Staphylococcus, Streptococcus, Aerococcus, Gemella , Corynebacterium , Listeria, Kurthia, Lactobacillus, Erisipelothrix, Arachnia, Actinomyces, Propionibacterium, Rothia, Bifidobacterium, Clostridium , Eubacterium, Nocardia y Mycobacterium .
1 2. U n método de acuerdo con la reivindicación 1 1 , en donde las bacterias son seleccionadas de B. subtilis, B. anthracis, B. cereus, B. firmis, B. licheniformis, B. megaterium, B. pumilus, B. coagulans, B. pantothenticus, B. alvei, B. brevis, B. circulans, B. laterosporus, B. macerans, B. polymyxa, esterothermophilus, B. thuringiensis, B. sphaericus, S. aureus, S. epidermidis, S. hameolyticus, S. sapropyticus, S. pyogenes, S. pneumoniae, S. agalactiae, S. pyogenes, S. agalactiae, S. dysgalactiae, S. equisimilis, S. equi, S. zooepidemicus, S. anginosus, S. salivarius, S. miller, S, sanguis, S. mitior, S. mutans, S. faecalis, S. faecium, S. bovis, S. equinus, S. uberus y S. avium.
13. Un compuesto de fórmula (II): en donde A es un grupo arilo o un grupo heteroarilo; Z es seleccionado de -O-, -S- y -NR4-; Y es seleccionado de un enlace covalente y -(CH2)P-; Ri es seleccionado de -C5-C2oalquilo, -C5-C2oalquenilo, -C5-C2oalquinilo y -C3-C8cicloalquilo; R2 es seleccionado de -Ci-Csalquilo, -C2-C6alquenilo, -C2-C6alquinilo, -C3-C8cicloalquilo, hidroxi, -OCi-Cealquilo, -OC2-C6alquenilo, -OC2-C6alquinilo, -OC3-C8cicloalquilo, tiol, -SC^-Cealquilo, -SC2-C6alquenilo, -SC2-C6alquinilo, -SC3-C8cicloalquilo, -NR4Ci-C6alquilo, -NR4C2-C6alquenilo, -NR4C2-C6alquinilo y -NR4C3-C8cicloalquilo; R3 es seleccionado de -C02H o un equivalente isoestérico de un grupo carboxi; R4 es seleccionado de hidrógeno y -Ci-Cealquilo; y p es un entero de 1 a 10; o una sal farmacéuticamente del mismo.
14. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 13, en donde el compuesto es un compuesto de fórmula (NA): Y es seleccionado de un enlace covalente y -(CH2)P-; Rt es seleccionado de -C5-C2oalquilo, -C5-C20alquenilo y -C3-C8cicloalquilo; R2 es seleccionado de -C^Cealquilo, -C2-C6alqueni lo, -C2-C6alquinilo, -C3-C8cicloalquilo, hidroxi , -Od-Cealqui lo, -OC2-C6alquenilo, -OC2-C6alqui nilo y -OC3-C8cicloalquilo; R3 es seleccionado de -C02H o un equivalente isoestérico de un grupo carboxi ; p es un entero de 1 a 10; o una sal farmacéuticamente del mismo.
1 5. U n compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 3 o 14, en donde Ri es C5-C1 5 alquenilo teniendo 1 a 3 dobles enlaces.
1 6. U n compuesto de acuerdo con la reivi ndicación 1 5, en donde Ri es farnesilo.
1 7. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 3 a 1 6, en donde R2 es hidroxi , -Od-Ce alquilo, OC2-C6 alquenilo o -OC3-C8 cicloalquilo.
1 8. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 17, en donde R2 es -OC†-C3 alquilo.
19. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 3 a 18, en donde R3 es -C02H.
20. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 13 a 19, en donde Y es -(CH2)P-.
21. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 20, en donde p es 1 a 4.
22. Una composición farmacéutica que comprende un extracto de la especie Acronychia o un compuesto de fórmula (I) o fórmula (II) y una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.
23. Una composición de sabor o fragancia comprendiendo un extracto de una especie Acronychia, comprendiendo dicho extracto al menos uno de: 1-etenil-1-metil-2,4-bis(1-metiletenil)ciclohexano, 2,6-di-ter-butilbenzoquinona, 2,5-di-ter-butil-1 ,4-benzoquinona, Tetracontano-1 ,40-diol y 2,2,5,5-tetrametil-biciclo[6.3.0]undec-1 (8)-enona.
24. Una composición cosmética, alimenticia o de fragancia comprendiendo un extracto a partir de una especie ACronychia, en donde el extracto es obtenido mediante un método comprendiendo extracción de agua o alcohol inicial y una subsecuente extracción de acetato de etilo.
25. El uso de un extracto a partir de una especie Acronychia como un componente de fragancia o sabor en un alimento u otra composición.
26. El uso de un extracto a partir de una especie Acronychia en la fabricación de un medicamento para tratar o prevenir una infección bacteriana, una infección helmíntica, un desorden proliferativo celular, una enfermedad o desorden inflamatorio o un desorden relacionado a tensión oxidante.
27. El uso de un compuesto de fórmula (I) : en donde A es un grupo arilo o un grupo heteroarilo; Z es seleccionado de -O-, -S- y -N R -; Y es seleccionado de un enlace covalente y -(CH2)P-; R T es seleccionado de -C5-C2oalqui lo, -C5-C2oalquenilo, -C5-C2oalquinilo y -C3-C8cicloalquilo; R2 es seleccionado de hidrógeno, -(.VCealqui lo, -C2-C6alquenilo, -C2-C6alquinilo, -C3-C8cicloalquilo, hidroxi , -OCi-Cealqui lo, -OC2-C6alquenilo, -OC2-C6alquinilo, -OC3-Cacicloalquilo, tiol, -Sd-Cealquilo, -SC2-C6alquenilo, -SC2-C6alquinilo, -SC3-C8cicloalquilo, -NRnCi-Cealquilo, -N R4C2-C6alquenilo, -N R4C2-C6alquinilo y -N R4C3-C8cicloalqui lo; R3 es seleccionado de -C02H o un equivalente isoestérico de un grupo carboxi ; R4 es seleccionado de hidrógeno y -C i-C6alqui lo; y p es un entero de 1 a 1 0; o una sal farmacéuticamente del mismo.
28. El uso de una especie Acronychia como un aditivo alimenticio, un componente de fragancia o un antioxidante, un antibacteriano, un antihelmíntico o un componente anti-inflamatorio de una composición cosmética.
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Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9814659B2 (en) 2012-04-02 2017-11-14 Johnson & Johnson Consumer Inc. Methods of lightening the skin
CA3077331A1 (en) 2017-09-28 2019-04-04 Johnson & Johnson Consumer Inc. Cosmetic compositions and method of treating the skin
US20210002678A1 (en) * 2018-03-20 2021-01-07 Manus Bio, Inc. Enzymes, cells and methods for production of 3-(4-farnesyloxyphenyl)propionic acid and derivatives thereof
US20200030226A1 (en) * 2018-07-27 2020-01-30 Johnson & Johnson Consumer Inc. Botanical and bacterial extracts displaying retinol-like activity
WO2020021477A2 (en) 2018-07-27 2020-01-30 Johnson & Johnson Vision Care, Inc. Compositions and methods for treating the eye
US11197841B2 (en) 2019-07-23 2021-12-14 Johnson & Johnson Surgical Vision, Inc. Compositions and methods for treating the eye
US10966948B2 (en) 2019-07-23 2021-04-06 Johnson & Johnson Surgical Vision, Inc. Compositions and methods for treating the eye
KR20210038635A (ko) 2018-07-27 2021-04-07 존슨 앤드 존슨 서지컬 비전, 인코포레이티드 눈 치료용 조성물 및 방법
CN109991340B (zh) * 2019-05-17 2022-03-29 无限极（中国）有限公司 基于谱效关系的制首乌的质量检测方法
US11969454B2 (en) 2019-11-19 2024-04-30 Johnson & Johnson Surgical Vision, Inc. Compositions and methods for treating the eye
CN112823789B (zh) * 2019-11-19 2024-05-10 强生外科视力公司 用于治疗眼睛的组合物和方法
CN110964668B (zh) * 2019-12-26 2021-05-04 浙江大学 抗大肠杆菌蜂房芽孢杆菌菌株及其在化妆品中的防腐应用

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS6172719A (ja) * 1984-09-17 1986-04-14 Teikoku Seiyaku Kk 抗高脂血症剤
JPS61126013A (ja) * 1984-11-20 1986-06-13 Kuraray Co Ltd 香料組成物
DE3738406A1 (de) 1987-11-12 1989-05-24 Henkel Kgaa Sebosuppressive topische zubereitungen
JPH0469364A (ja) * 1990-07-09 1992-03-04 Riken Koryo Kogyo Kk 強誘電性液晶化合物
CN1086725A (zh) * 1993-08-11 1994-05-18 杨华 避邪保健香囊
JPH07118132A (ja) * 1993-10-18 1995-05-09 Shiseido Co Ltd 紫外線吸収性皮膚化粧料
JP4113602B2 (ja) 1997-04-04 2008-07-09 株式会社資生堂 ピロリジン誘導体及び抗潰瘍剤、抗菌剤
KR100615389B1 (ko) * 2002-08-23 2006-08-25 (주)헬릭서 다래 추출물을 함유하는 알러지성 질환 및 비알러지성염증 질환의 예방 및 개선용 건강 기능 식품
US20060014987A1 (en) 2003-07-07 2006-01-19 Lan Huang Synthesis of beta-elemene, intermediates thereto, analogues and uses thereof
JP4547193B2 (ja) * 2004-06-18 2010-09-22 株式会社カネボウ化粧品 香料組成物
CN101044107A (zh) * 2004-07-07 2007-09-26 长途国际有限公司 ( － ) －β －榄香烯 , ( － ) －β－榄香醛 , ( － ) －β －榄香醇,( － ) －β －氟化榄香烯及它们的类似物 ,中间产物和合成物的合成及应用
JP2008505893A (ja) * 2004-07-07 2008-02-28 ロング レンジ インターナショナル ユーエスエー リミテッド，インコーポレイテッド マイナス型ベータエレメン、マイナス型ベータエレメナル、マイナス型ベータエレメノール、マイナス型ベータフッ化エレメンとそれらの類似体、中間体及び薬剤の合成とその利用法
EP1754514A1 (en) * 2005-03-03 2007-02-21 Wella Aktiengesellschaft Agent and method for colouring keratin fibres
JP2007230955A (ja) * 2006-03-02 2007-09-13 National Institute Of Advanced Industrial & Technology 共重合性をもつ希土類金属錯体、その製造方法及びそれを用いた樹脂組成物
EP1886990A1 (en) 2006-08-01 2008-02-13 Neuropharma S.A. Phenyl-prenyl-ether derivatives for the treatment of cognitive neurodegenerative or neuronal diseases or disorders
CN101199498A (zh) * 2007-08-02 2008-06-18 海南碧凯药业有限公司 一种抗人乳头瘤病毒感染的药物

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