LU87440A1 - Verfahren zur herstellung antidotumtragender mikro-und makroorganismen,welche zur verminderung der die kulturpflanzen schaedigenden wirkung von thiolcarbamaten und chloracetaniliden geeignet sind,und deren anwendung - Google Patents
Verfahren zur herstellung antidotumtragender mikro-und makroorganismen,welche zur verminderung der die kulturpflanzen schaedigenden wirkung von thiolcarbamaten und chloracetaniliden geeignet sind,und deren anwendung Download PDFInfo
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Classifications
-
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- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
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Description
^ L-335Ü
8' “7 Ί 1 3¾ GRAND-DUCHL· DE LUXEMBOURG
J........%.....t u . M . , M..,
Monsieur le Ministre du 24 janvier 1989 JsUML de l’Économie et des Classes Moyennes _ ,,,. , Service de la Propriété Intellectuelle
OtredellVrt.....................-........ I IIP LUXEMBOURG
Demande de Brevet d’invention ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- (1) I. Requête
Es.z.akma.g.y..arQ.r.sz.à.g.i......V.eg.y±miiv.ek,,-......3..7..9..2.....S...a4.ôjbi,h.Qiiÿ../........H.Qngx.le..,_____________ ( 2) représentée......par Monsieur Jean Waxweiler,_55 rue des Bruyères,_________
Howald, agissant en qualité de mandataire______ __ _ _ ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- (3) dépose(nt) ceYing±.-.au.at.rs.......janvier......ml.l_.,n.s.u.f........c.e.nt„..qu..a.tre-yingt-neuf ( 4) à i.5 ,00 heures, au Ministère de l’Économie et des Classes Moyennes, à Luxembourg: L la présente requête pour l’obtention d’un brevet d’invention concernant:
Verfahren......Z4ir~H©rsteli4ffig--^tidatïffli4rag®n:d®r-MikEO=._«nd--------------- ( 5)
Makroarganismen..,.......w.e.lch.e......z.ur......Verminderung.......der.......die......Kulturpflanzen schädigenden.....Wirkung von Thiolcarbamaten und Chloracetaniliden geeignet sind,.......und deren Anwendung____________________________________ _______________________________________________________________________ 2. la description en langue ...............™.i.l.Ë—ËB.™.™..................................................de l’invention en trois exemplaires; 3............./....................................................planches de dessin, en trois exemplaires; 4. la quittance des taxes versées au Bureau de l’Enregistrement à Luxembourg, le ,..2.4.01.1339.........................; 5. la délégation de pouvoir, datée de..............S,ai.ôbâbonY..................................... le .............18.01.1989................_ ; 6. le document d’ayant cause (autorisation); déelare(nt) en assumant la responsabilité de cette déclaration, que l’(es) inventeur(s) est (sont): ( 6) ..................voir.......annexe.................................................................................................................................................................................................................................................................................................
revendique(nt) pour la susdite demande de brevet la priorité d’une (des) demande(s) de ( 7) ....................................................L..........................................................................................................déposée(s) en (8) ......L....................................................................................................................................
le (9) ................L................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................
sous le N° (10).........../.........................................................................................................................................................................................................................................................................................................................
au nom de (11).........L............................................................................................................................................................................................................................................................................................................................
élit(élisent) domicile pour lui (elle) et, si désigné, pour son mandataire, à Luxembourg .....................................................................................
55.......rue......des.......Bruyères···,.......Howald-.......................................................................................................-..................................................................................... (12) sollicite(nt) la délivrance d’un brevet d’invention pour l’objet décrit et représenté dans les annexes susmentionnées, avec ajournement de cette délivrance à.....;..........ÇA../...........................................................................................................................................................................mois. (13)
Le (MpôSâfiX/mandataire:................................................................................................................................................................................................................... (14) Π. Procès-verbal de Dépôt
La susdite demande de brevet d’invention a été déposée au Ministère de l’Économie et des Classes Moyennes, Service de la Propriété Intelljptu€|ff|Srtaq^embourg, en date du: 24.01.1989 i fi ’’··> '3 Pf- k Ministre de l’Économie et des Classes Moyennes, à --...........heures 11 i I; p-d· B, s Le chef du service de la propriété intellectuelle, \’<\ w Â: W ·..._ ^ _..<ÿ / A 68007__ EXPLICATIONS RELATIVES AU FO RMUL AÎRfiô&B ÉPÔT, (1) s'il y a lieu "Demande de certificat d’addition au brevet principal, h In demande de brevet principal No............du............” - (2) inscrire les nom, prénom, profession.
adresse du demandeur, lorsque celui-ci est un particulier ou les dénomination sociale, forme juridique, adresse du siège social, lorsque le demandeur est une personne morale - (3) inscrire Λ f\A A I les nom, prénom, adresse du mandataire agréé. conseil en propriété industrielle, muni d’un pouvoir spécial, s’il y a lieu: "représenté par............agissant en qualité de mandataire” r\(J l f\J - (4) date de dépôt en toutes lettres - (5) titre de l'invention - (6) inscrire les noms, prénoms, adresses des inventeurs ou l’indication "(voir) désignation séparée (suivra)”, lorsque la dési- • * «* * gnation se fait ou se fera dans un document séparé, ou encore l'indication ”ne pas mentionner”, lorsque l’inventeur signe ou signera un document de non-mention à joindre à une désignation h.
VERFAHREN ZUR HERSTELLUNG ANTIDOTUMTRAGENDER MIKRO- UND MAKROORGANISMEN, WELCHE ZUR VERMINDERUNG DER DIE KULTURPFLANZEN SCHÄDIGENDEN WIRKUNG VON THIOLCARBAMATEN UND CHLORACETANILIDEN GEEIGNET SIND, UND DEREN ANWENDUNG
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung antidotumtragender Mikro- und Makroorganismen, welche zur Verminderung der die Kulturpflanzen schädigenden Wirkung von Thiolcarbamaten der allgemeinen Formel (l), 5 0 .
Ri^N-C“S-R5 (i)
A
A4401-803 10 worin L-3350
BESCHREIBUNG
ZU EINER PATENTANMELDUNG IM
GROSSHERZOGTUM LUXEMBURG
EszakmagyarorszAgi Vegyimiivek 3792 Sajôbâbony
Ungarn
Verfahren zur Herstellung antidotumtragender Mikro-und Makroorganismen, welche zur Verminderung der die Kulturpflanzen schädigenden Wirkung von Thiolcarbamaten und Chloracetaniliden geeignet sind, und deren Anwendung i Μ - 2 - % R^ und R£ gleich oder verschieden sind, und für eine
Ci-e^kyl- oder C3_gCycloalkylgruppe stehen; oder und R2 mit dem Stickstoffatom eine Hexa-methylenimino-Gruppe bilden; und 5 Rg eine C^_gAlkylgruppe bedeutet, oder von Chloracetaniliden der allgemeinen Formel (VIII),
JL
10
•p 1' L
K5 0 worin RA und R_ gleich oder verschieden sind und für Wasserstoff 4 b 15 oder eine ^Alkylgruppe stehen; und
Rg eine C^_gAlkyl-, C2_gAlkenyl-, (C^^gAlkoxyJ-iC^^g- olkyl)- oder Pyrazolyl-(c^_3alkyl)-Gruppe bedeutet, geeignet sind, und deren Anwendung.
Aus der Praxis des Pflanzenschutzes ist es allgemein 20 bekannt, dass Thiolcarbamate der allgemeinen Formel (i), besonders EPTC [S-Ethyl-N,N-di(n-propyl)-thiolcarbamatJ,
Butylat [S-Ethyl-N,N-di(isobutyl)thiolcarbamat], Vernolat [S-Propyl-N,N-di(n-propyl)thiolcarbamat], Ethiolat [S-Ethyl--N,N-diethyl-thiolcarbamatJ, Cycloat [S-Ethyl-N-ethyl-N-25 -cyclohexyl-thiolcarbamat), Molinat [S-ethyl-N,N-hexamethylen--thiolcarbamat), sowie Chloracetanilide der allgemeinen Formel (vill), besonders Alachlor (2-Chlor-2*^’-diethyl-N-methoxy-methyl-acetanilid), Acetochlor (2-Chlor-2*-ethyl-S*-methy1--N-ethoxymethyl-acetanilid)und Propachlor (2-CKbr-N-isopropyl-30 -acetaruLid) sehr wirksame Herbizide sind. Ein gemeinsamer Nachteil beider herbiziden Wirkstoffklassen besteht darin, dass diese eine verhältnismässig niedrige Selektivität gegen einige Kulturpflanzen, z.B. gegen Mais aufweisen.
In der gewöhnlichen herbiziden Dosis können hauptsächlich 35 EPTC, Vernolat und Acetochlor bedeutende phytotoxische - 3 - a Symptome hervorrufen.
Vor etwa 25 fahren hatte Hoffmann anerkannt, dass es Verbindungen - z.B, 1,8-Naphthalsäureanhydrid-Derivate - gibt, die den phytotoxischen Effekt erniedrigen. Von diesem Zeit-5 punkt wurde die Forschung solcher synthetischen Verbindungen begonnen und in weitem Kreis ausgewickelt, die den auf die Kulturpflanzen ausgeübten schädigenden Effekt der Herbizide antagonisieren können«
In den folgenden ungarischen Patentschriften werden Antidota 10 verschiedener Typen bekanntgemacht;
Nr. 165 736; Verbindungen des Typs von Dichloracetamid-Derivaten, z.B. N,N-Dially1-2,2-dichloracetarnid (Kodenummer R-25 788) als Antidota gegen Thiolcarbamate ;
Nr. 168 977; Antidota des Typs von Oxazolidinen und Thiazoli-15 dinen, die besonders bei Thiolcarbamaten anwendbar sind;
Nr. 170 214; Gegengifte (Antidota) des Typs von Thiazolidin-sulfoxiden und Thiazolidinsulfonen, die bei Thiolcarbamaten und Chloraceteniliden anwendbar sind;
Nr, 173 775; Gegengifte (Antidota) des Sulfidtyps für Antidotie-20 ren von Thiolcarbamaten;
Nr. 176 867; Oxazolidinderivate für Antidotieren von Thiolcarbamaten ;
Nr. 179 643; N-Benzoylsulfonyl-carbamate für Antidotieren von Thiolcarbamaten; 25 Nr. 180 069; N-Benzoylsulfonyl-thiolcarbamate für Antidotieren von Thiolcarbamaten;
Nr. 180 068; 2,3-Dibrompropionamid-Derivate für Antidotieren von Thiolcarbamanten;
Nr. 174 487, 176 784, 180 422, 181 621, 183 997, 185 400 und 30 188 135; Antidota des Typs von substituierten Acetamiden gegen Thiolcarbamate und Cftbracetanilide.
Nrn. 176 669, 176 796, 178 892 und 178 895 ; Antidotierende Wirkung von Dicarbonsäurederivativen mit den von den obigen verschiedenen Strukturen gegen Thiolcarbamate und/oder Chlor- 35 acetanilide; sowie - 4 -
Nrn. 178 883, 179 092 und 179 093; Naphthalincarbonsäure--Derivativen als Antidota gegen Thiolcarbamate und/oder Chloracetanilide.
Eine Ergebnis der zur Erhöhung der Selektivität von 5 Thiolcarbamaten dienenden Forschungen wurde von 0. E. Casida und Mitarbeitern in 1974 mit dem Titel "Thiocarbamate sulfoxide herbicides" mitgeteilt. Das Wesen dieser Mitteilung besteht darin, dass das Sulfoxid von EPTC, das eine Zersetzungsprodukt von EPTC ist, eine gute herbizide Wirkung ausübt, aber den 10 Mais nicht schädigt. Diese Anerkennung der Auktoren hat sich aber nur bis zur selbständigen Verwendung des EPTC-Sulfoxides erstreckt, welches in dem praktischen Pflanzenschutz wegen einiger nachteiligen Eigenschaften (z.B. es kann nicht in allen Böden verwendet werden) nicht gebraucht wird.
15 Trotz der hohen Anzahl der Patentschriften, in welchen die
Forschungsergebnisse bekanntgemacht wurden, ist es nicht gelungen, eine Verbindung zu finden, mit deren Hilfe der allgemeine Schutz der Kulturpflanzen gegen den schädigenden Effekt der verschiedenen Herbizide gelöst werden könnte. Diese Tat-20 sache wird auch dadurch unterstützt, dass die zu?Aufklärung der antidotierenden Wirkung gerichteten Forschungen keinen einheitlichen Standpunkt hirsichtlich der biochemischen Prozesse, die sich nach der Zugabe von Antidota abspielen, bzw. hinsichtlich der Einflüsse dieser Verbindungen 25 auf die in den Kulturpflanzen durch die herbiziden Wirkstoffe hervorgerufen Prozesse ergeben konnten.
Im Laufe unserer Forschungen zur Verminderung der die Kulturpflanzen schädigenden Wirkung von Herbiziden der Typen Thiolcarbamaten der allgemeinen Formel (i) und Chlor-30 ecetaniliden der allgemeinen Formel (VIIl) wurde es gefunden, dass die in dem mit den Thiolcarbamatender allgemeinen Formel (i) vorbehandelten Boden, weiterhin in Mikro- und Makroorganismen entstehenden Verbindungen der allgemeinen Formeln (il) bis (VIl), 35 - 5 - ^>N- C-S-"R3 5 κ* ο 0 (II) 0 10 u - Il ^/N-C-S-Rs . , T}/ Il Il . tm) K* 0 0 15 N-C-S -glutathion.
V' U 3 (IV) 20 ^ 0 25 ri
„1/N-C-S-CIV CH-C00H
V' Il 'I (V)
2 ο N
30
?1>N-C-S-CH,-CH-COOH
D-^ Il 1 \ (vi)
*2 0 NH-C-CK-COOH
Il z 35 0 . .
- 6 - r^n-c-s-ch2-çh-cooh X l 0-Ç-CHrCOOH(VII) 0 10 wo in den allgemeiner, Formeln (i) bis (VIll) R, und R„ gleich oder verschieden sind, und für eine C X 2 w X“*6
Alkyl- oder C3_gCycloalkylgruppe stehen; oder R^ und R2 mit dem Stickstoffatom, an welchem sie gebunden sind, eine Hexamethylenimino-Gruppe 15 bilden;
Rg eine ^Alkylgruppe bedeutet; R^ und Rg gleich oder verschieden sind, und Wasserstoff oder eine gAlkylgruppe bedeuten;
Rg fpr für eine C^gAlkyl-, C2_gAlkenyl-, (Cj^^gAlkoxy)- 20 -(C^_3alkyl)- oder Pyrazolyl-(C^_3alkyl)-Gruppe steht, oder deren acylierte oder esterifizierte Derivate für den Schutz gegen die Phytotoxizität beider cbigen herbiziden Wirkstoffe erfolgreich verwendet werden können, wenn man die 25 Verbindungen der allgemeinen Formeln (i) bis (VIl) vor der
Behandlung oder gleichzeitig mit der Behandlung oder nach der Behandlung mit den herbiziden Wirkstoffen auf den Boden ausbringt .
Die Erfindung besteht daher in der Gesamtheit der Ver-30 fahren, im Laufe deren die im Boden oder auf der Oberfläche des Bodens lebenden, auf einem natürlichen oder künstlichen Wege genmanipulierten Mikro- oder Makroorganismen oder deren Organ-, Gewebe- oder Zellkulturen oder Zellkomponenten mit den Verbindungen der allgemeinen Formeln (i) bis (VIl), 35 bevorzugt mit EPTC behandelt werden.
, Im Laufe des Behandlungsverfahrens üben die aus den
Verbindungen der allgemeinen Formeln (i) bis (VII) entstehenden Zersetzungsprodukte, bevorzugt irgendeine der Verbindungen der allgemeinen Formeln (il) bis (vil), oder 5 deren Gemisch, oder irgendeines deren esteriffeierter oder scylierter Derivate eine herbizid-ontidotierende Wirkung aus und binden sich an den Mikro- oder Makroorganismen.
So werden als Endresultat antidotumtragende, lebende Organismen erhalten.
10 Die Erfindung betrifft weiterhin ein Verfahren zur Ver wendung der durch die obigen Verfahren hergestellten, antidotumtragenden Mikro- und Makroorganismen zur Verminderung der die Kulturpflanzen schädigenden Wirkung der Thiolcarbamate der allgemeinen Formel (i) und der Chloracetanilide der allge-15 meinen Formel (VIII).
Diese Mikro- und Makroorganismen werden dann in frischer Form oder nach Konsevieren durch Lyophilisierung oder durch Aufträgen auf einen Träger in ihrer ursprünglichen Form oder nach der Aufarbeitung durch Zerkleinern, Pulverisieren, 20 Extrahieren, Trocknen oder auf eine andere Weise, vor der
Behandlung, oder gleichzeitig mit der Behandlung (in der Form eines Fabrikskombiration oder Tankmischung) oder nach der Behandlung mit den Herbiziden, in irgendwelchem Zeitpunkt bis zur Keimung der Kulturpflanze zur Behandlung der Ackerfeld-25 böden verwendet, wodurch die Selektivität der herbiziden
Verbindungen der allgemeinen Formeln (i) bis (VIII) gegen die Kulturpflanzen, bevorzugt gegen den Mais erhöht wird.
Die Erfindung wird an Hand der folgenden Beispiele näher er läutet, ist jedoch nicht auf diese Beispiele beschränkt, 30 Beispiel 1
Prüfung des mit dem zu den herbiziden Wirkstoffen der allgemeinen Formel (i) gehörenden EPTC vorbehandelten Bodens, als eines Trägers der antidotierenden Stoffwechselprodukte mikrobiellen Ursprungs 35 Feldboden, mit einem pH-KCl-Wert von 5,7 und Gebundenheit - 8 - : ? » » von 46 AK, der insgesamt 0,03% Salz, 1,9% Humus, 14,8 ppm N03+N02, 735 ppm P20g, 853 PPm Κ2°’ 246 PPm M9> 60 PPm Na’ 2,1 ppm Zn, 3,2 ppm Cu und 151 ppm Mn enthielt, wurde mit einer Dosis von 8 1/ha des 72% Wirkstoff enthaltenden 5 Witox 72 EC (als einer Formulierung des herbiziden Wirkstoffes EPTC), bzw. mit einer Dosis von 8 1/ha des 72% EPTC und 8% AD-67 [N-(2,2-Dichloracety1)-l-oxa-4-azabicyclo[4,5]decan] als Antidotum enthaltenden Alirox 80 EC vorbehandelt.
Von diesem Boden wurden je 600 g in Zuchtgefässe einge-10 wogen und darin wurde je 10 Körner verschiedener Typen von
Hybridmaisen, sowie je 20 Körner von Mohrenhirse als Unkraut gesät.
Am 11. Tage nach dem Aussäen wurde die Grünmasse und die Sprosslänge der unter HGMIP-400/D Tageslichtlampen mit 15 einer Beleuchtungsperiode von 16 Stunden gezüchteten und täglich bis der Wasserkapazität des Bodens berieselten Pflanzen abgemessen und das Aussenbild des Maises mittels der folgenden Skala bonitiert; 4; starke Deformation, Torsion; 20 3: mittelmässige Deformation, Torsion; 2; schwache Phytotoxizität; 1; intakte, gesunde Pflanze.
Darauffolgend wurden die Pflanzen am 14. Tag nach dem ersten Säen wieder in die Zuchtgefässe eingesät, dann wurde 25 der Boden mit einer Dosis von 8 1/ha, bzw. 20 1/ha des 72% EPTC enthaltenden Witox 72 EC behandelt. Am 11. Tage nach dem zweiten Säen wurden die Grünmasse und die Sprosslänge des Maises abgemessen.
Aus den Angaben der Tabelle I, kann es bestätigt werden, 30 dass die verschiedenen Typen der in den mit EPTC, sowie mit durch AD-67 antidotierten EPTC vorbehandelten Boden gesäten Hybridmaise sowohl die Dosis von 8 1/ha als auch von 20 1/ha günstig ertrugen, während die als Unkraut gesäte Mohrenhirse vernichtet wurde.
35 - 9 -
„ Tabelle I
Gestaltung der Sprosslänge, der Grünmasse und Aussen-bildes von Hybridmaisen, sowie die Veränderung den Grünmasse der Mohrenhirse unter der Wirkung der Behand-5 lung mit EPTC
Unbehandelte Dosis von EPTC
Kontrolle 8 1/ha 20 1/ha
Sprosslänge des Maises 10 (cm/Einzelpflanze)
Erstes Säen 21 8
Zweites Säen 19 19 19
Grünmasse des Maises (cm/Einzelpflanze) 15 Erstes Säen 0,56 0,49
Zweites Säen 0,5 0,59 0,63
Bonitierung (Mais)
Erstes Säen 2,0 1,2
Zweites Säen 2,0 2,0 2,0.
20 Grünmasse der Mohrenhirse (g/Gefäss)
Erstes Säen 0,15 0
Zweites Säen 0,14 0 0 25 Beispiel 2
Ein Versuch wurde in Laboratoriums-Zuchtgefässen ausgeführt, um die aufeinander ausgeübte synergistische, antagonistische Wirkung von verschiedenen Typen der Thiolcarbama-te und antidotumtragender Bakterien (Bakteriumsuspension 30 NI-86/21 EPTC 250) zu prüfen 1. Materialien, Geräte und Methode 1.1 Herstellung der Bakteriumsuspension NI-86/21 Reine Stammkultur des aus dem Boden isolierten, EPTC--abbauenden Bakteriums NI-86/21 wurde auf 5 ml schräges 35 Nutrient-Nährmedium mit der folgenden Zusammensetzung geimpft: A . fc - 10 - , Fleischauszug 1 g
Hefe 2 g
Pepton 5 g
Na Cl 5 g 5 Agar 20 g
Destilliertes Wasær ’ÏOOO ml pH 7,4
Solche Kulturen wurden angewandt, die älter als 3-4 Tage, aber jünger als 120 Tage waren. Darauffolgend wurde 10 in dem Reagenzglas vermehrten Bakterien in 10 ml sterili siertes, destilliertes Wasser gewaschen. Die derart gewonne- g ne Suspension enthielt etwa 10 /ml Bakterien. In Erlenmeyer--Flaschen von 500 ml wurden je 200 ml physiologische Nährsalzlösung gegossen, deren Zusammensetzung die folgende war: 15 NH4N03 0,5 g KH2P04 0,4 g l<2HP04 1,6 g
NaCl 0,1 g
MgS04.2H20 0,2 g 20 CaCl2.2H20 0,5 mg
CuSO^·5H20 0,5 mg
FeS04»7H20 0,5 mg
ZnCl2 0,5 mg.
Dazu wurde der Wirkstoff EPTC bis auf eine Konzentration von 25 250 ppm gegeben. Danach wurden je 2 ml der Bakteriumsuspen sion in die Flaschen eingemischt, die dann 24 Stunden lang auf einer Maschine geschüttelt wurden, um antidotumtragende Bakterien zu erhalten.
Darauffolgend wurde die Selektivität der in den einzel-30 nen Behandlungen verwendeten Herbizide (EPTC, Butylat, Verno- lat, Molinat) in sich selbst, sowie in Kombinationen mit je 10 ml der antidotumtragenden Bakteriumsuspension NI-86/21 EPTC 250 untersucht.
Zuchtgefässversuch 35 Als Zuchtgefässe wurden mit PVC-Folien bekleidete Kunst- - U - . stoffgefässe mit einer Aufnahmefähigkeit von je etwa 800 g p
Boden, mit einer Oberfläche von 0,8 dm angewandt. In diese Gefässe wurden zuerst je 400 g lufttrockner, oberflächlicher Feldboden mit einem pH-Wert von 5,7, Humusge-5 halt von 1,95%, Gebundenheit (nach Arany) von 46 eingewogen. Darin wurden je 10 Körner des Hybridmaises Pioneer 3707, je 20 Körner der gezüchteten Mohrenhirseart "Alföldi 1" und je 0,5 g der roten Rispenhirse gesät. Die Aussaat wurde mit je 10 Boden bedeckt und eine 6 1/ha Dosis von EPTC, bzw.
10 Vernolat, bzw, Molinat Wirkstoff, oder eine 24 1/ha Dosis von Butylat aus den Fabriksformulierungen von ÉMV (Chemische Werke von Nord-Ungarn) ausgebracht. Die behandelte Bodenoberfläche wurde mit je 100g Boden bedeckt und je 10 ml des Biopräparates NI-86/21 EPTC 250 wurden gemäss der folgenden 15 Behandlungsliste auf die Bodenoberfläche aufgebracht. Behandlungsliste 0 Unbehandelte Kontrolle 1 EPTC 6 1/ha 2 EPTC 6 1/ha + NI-86/21 EPTC 250 10 ml 2Q 3 Butylat 24 1/ha 4 Butylat 24 1/ha + NI-86/21 EPTC 250 10 ml 5 Vernolat 6 1/ha 6 Vernolat 6 1/ha + NI-86/21 EPTC 250 10 ml 7 Molinat 6 1/ha 25 8 Molinat 6 1/ha + NI-86/21 EPTC 250 10 ml
Ergebnisse des Zichtgefässversuches Die Ergebnisse dieses Versuches sind in den Tabellen II, III und IV zusammengefasst.
Aus der Tabelle II ist es ersichtlich, dass die Spross-3q länge des Maises in der unbehandelten Kontrolle 22 cm betrug. Wurden EPTC, bzw. Vernolat, bzw. Molinat in einer Dosis von 6 1/ha, bzw. Butylat in einer Dosis von 24 1/ha in sich selbst angewandt, so wurden die Sprosslängen bedeutend vermindert (9, 11, 13, bzw. 12 cm). Dagegen, wenn je 10 ml des Biopräpa-35 rates NI-86/21 EPTC 250 zu den oben angeführten Herbiziden - 12 - * gegeben wurden* so wurde die Sprosslänge vermindernde Wir kung von EPTC, Butylat und Vernolat aufgehoben (21, 23, bzw.
21 cm), wogegen die Phytotoxizität von Molinat unverändert blieb (17 cm).
5 Die in den Tabelle III zusammengefassten Angaben, die die
Veränderung der Grünmasse des Maises betreffen, zeigen ein der Sprosslänge ähnliches Bild.
Durch Verwendung von NI-86/21 EPTC 250 in einer Dosis von je 10 ml/Zuchtgefäss wurde der Mais gegen den schädigenden 10 Effekt der Herbizide EPTC, Butylat und Vernolat völlig geschützt.
Dies wird auch durch die Tabelle IV sehr klar veranschaulicht, wobei der ausgezeichnete Antidotumeffekt dieses Biopräparates durch das Aussenbild des Maises beurteilt werden ^5 konnte.
Die als Unkraut gesäte rote Rispenhirse und Mohrenhirse wurden in allen Behandlungen vernichtet, d.h. diese Pflanzen wurden durch das Biopräparat NI-86/21 EPTC 250 nicht ge-sc hützt.
20 Tabelle II
Vermindeong der durch die Herbizide EPTC, Butylat, Vernolat und Molinat auf die Sprosslänge des Maises ausgeübten Phytotoxizität mit dem Biopräparat NI-86/21 EPTC 250 25 Herbizide Dosis Sprosslänge des Maises (cm/Ein- 1/ha zelpflanze) - Biopräparat NI-86/21 _EPTC 250_ EPTC 6 9 21
Butylat 24 12 23 30 Vernolat 6 11 21
Molinat 6 13 17
Die Sprosslänge des unbehandelten Kontrollmaises betrug 22 cm.
35 - 13 -
• Tabelle III
Wirkung der Kombinationen der Herbizide EPTC, Butylat, Verno-lat und Molinat mit dem Biopräparat NI-86/21 EPTC 250 auf die Grünmasse des Maises 5 ----—-----—
Herbizide Dosis Grünmasse des Maises (10"2 Ein- i/h zelpflanze ) ' Biopräparat NI-86/21 _____Z___EPTC 250 _ EPTC 6 51 86 10 Butylat 24 60 83
Vernolat 6 54 88
Molinat 6 57 64
Die Grünmasse des unbehandelten Kontrollmaises betrug _ ο 15 82 x 10 g/Einzelpflanze«
Tabelle IV
Wirkung der Kombinationen der Herbizide EPTC, Butylat, Vernolat und Molinat mit dem Biopräparat NI-86/21 EPTC 250 auf das Aussenbild des Maises 20 ' ——
Herbizide Dosis Aussenbild des Maises (%) 1/ha - Biopräparat NI-86/21 _________EPTC 250_ EPTC 6 55 100 25 Butylat 24 61 100
Vernolat 6 63 100
Molinat 6 58 61
Das Aussenbild des unbehandelten Kontrollmaises wurde 30 als 100% genommen.
Bonitierungsskala 100 %: intakter, sich normal entwickelnder Mais 99-87%: schwache Phytotoxizität, Sprossdeformation 86-75%: mittelmässige Sprossdeformation, Torsion 35 75-51%: starke Sprossdeformation, Vernichtung 50%: der Mais wurde vernichtet, blieb in der Keimscheide.
- 14 -
Beispiel 3
Die Wirkung von verschiedenen Mengen der Suspension des gemäss dem Beispiel 2 hergestellten antidotumtragenden Bakteriums NI-86/21 EPTC 250 auf die Selektivität von EPTC 5 wurde geprüft.
Während des Zuchtgefässversuches wurden mit PVC-Folie bekleidete Kunststoffzuchtgefässe mit einer Oberfläche von 2 0,8 dm , mit einer Aufnahmefähigkeit von 800 g lufttrockenem Boden angewandt, in welche zuerst je 400 g Boden eingewogen 10 wurden.
Dieser mittelmässig gebundene obere Feldboden hatte einen Humusgehalt von 1,95% und einen pH-Wert von 5,7. Als Testpflanzen wurden je 10 Körner des Hybridmaises Pioneer 3707, 20 Körner von Mohrenhirse und 0,5 g Rispenhirse gesät. Die Aus-15 saat wurde durch je 100 g Boden bedeckt,dann wurden die Behandlungen mit Thiolcarbamat, bzw. mit dem Biopräparat NI-86/ /21 EPTC 250 wie folgt ausgeführt.
Behandlungen 0 Unbehandelte Kontrolle 20 1 EPTC 6 1/ha (Wirkstoff) 2 EPTC 6 1/ha + NI-86/21 EPTC 250 1000 1/ha 3 EPTC 6 1/ha + NI-86/21 EPTC 250 5000 1/ha 4 EPTC 6 1/ha + NI-86/21 EPTC 250 10000 1/ha 5 EPTC 6 1/ha + NI-86/21 EPTC 250 20000 1/ha 25 Die behandelte Bodenoberfläche wurde wiederholt mit je 100 g Boden bedeckt.
Der Versuch wurde am 10. Tage nach der Behandlung boni-tiert, wenn die Sprosslänge und Grünmasse des Maises, sowie die Grünmasse der Mohrenhirse und Rispenhirse gemessen 30 wurden.
Aus der Tabelle V ergibt sich der Vorteil der Kombinationen von EPTC und NI-86/21 EPTC 250.
Tabelle V
Wirkung des Bicpräparates NI-86/21 EPTC 250 auf die Phyto-35 toxizität von EPTC in Maiskulturen (Angaben als % der unbehandelten Kontrolle) t - 15 -
Behandlungen Mais______ Mohrenhirse Rispen-
GrünmaSSe Sprosslänge Grünes®® hirse % % Grün — masse % 1 EPTC 6 1/ha 74 41 0 0 5 2 EPTC 6 1/ha +NI-86/21 EPTC 250 1000 1/ha 117 115 0 0 3 EPTC 6 1/ha 10 + NI-86/21 EPTC 250 5000 1/ha 113 112 0 0 4 EPTC 6 1/ha + NI-86/21 15 EPTC 250 10000 1/ha 95 113 0 0 5 EPTC 6 1/ha + NI-86/21 EPTC 250 20 20000 1/ha_U8_113_0_0
Beispiel 4
Zuchtgefässversuche wurden ausgeführt, um die antidotieren-de Wirkung des Bakteriums NI-86/21 und die der lyophilisierten Formen des antidotumtragenden Bakteriums NI-86/21 EPTC 250 25 gegen EPTC, Butylat, Vernolat und Acetochlor zu vergleichen.
1. Materialien, Geräte und Methode 1.1 Herstellung der Proben dés lyophilisierten NI-86/21 und NI-86/21 EPTC 250
Eine reine Stammkultur von NI-86/21 wurde auf ein schräges 30 Nutrient-Nährmedium (Zusammensetzung siehe im Beispiel 2) in fünf Reagenzgläsern geimpft. Die 3 Tage lang bei Raumtemperatur gezüchtete Bakteriummasse wurde in je 5 ml physiologische Lösung (Zusammensetzung siehe im Beispiel 2) gewaschen. Oe 0,1 ml Mengen der derart vorbereiteten Bakteriumsuspension wurden 35 in 100 Petri-Schalen an Nutrientplatten zerstreut. Nach einer « * - 16 -
Inkubation von 4 Tagen bei 25 °C wurde die Bakteriumkolonie in je 3 ml physiologischer Lösung suspendiert, die dann zu zehnen in 10 Erlenmeyer-Flaschen mit 100 ml Volumen eingetragen wurden, um 10 x 30 ml Bakteriumsuspension zu gewinnen.
5 Von denen wurden 3 x 30 ml mit 3 x 8 ^ul EPTC behandelt und dann bis zur an dem von diesem Zeitpunkt berechneten 5.
Tage ausgeführten Lyophilisierung bei -10 °C gehalten.
Die Lyophilisierung wurde bei -40 °C in einem "Labor MIM" Gerät ohne die Anwendung von Schutzkolloid durchgeführt.
]^0 Bei der Anwendung wurden die lyophilisierten Produkte NI-86/21 und NI-86/21 EPTC 250 in je 60 ml Leitungswasser in einer jeden Flasche resuspendiert und dann gleichzeitig mit den Behandlungen mit dem Herbiziden präemergent (vor Auflauf) oder pres°win9 (vor dem Säen)verbraucht.
15 1.2 Zuchtgefässversuch
Es wurden mit PVC-Folie bekleidete Kunststoffzuchtgefässe 2 mit einer Oberfläche von 0,8 dm , mit einer Aufnahmefähigkeit von je 800 g Boden angewandt.
In diese Gefässe wurden zuerst je 400 g lufttrockener 20 Feldboden mit einem Humusgehalt von 1,95%, mit einem pH-Wert von 5,7, mit einem Gebundenheit (nach Arany) von 46 eingewogen. Darauf wurden je 10 Körner von Mais Pioneer 3909, sowie je 20 Körner von Mohrenhirse HIBAR gesät. Die Aussagt wurde mit je 100 g Boden bedeckt und dann wurden eine 6 1/ha Dosis von 25 EPTC, bzw. 12 1/ha Dosis von Butylat, bzw. eine 6 1/ha Dosis von Vernolat, oder 3 1/ha Dosis von Acetochlor ausgebracht.
Auf diese behandelte Oberfläche wurden die aus dem
Lyophylisat des Bakteriums NI-86/21 gewonnene Suspension in 3 3 3 3 einer Dosis von 0,05 x 10 , 0,5 x 10 , 10 oder 2,5 x 10 30 1/ha, sowie das Biopräparat NI-86/21 EPTC 250 in den selben
Dosen/iusge^raciit· Schliesslich wurde die Bodenoberfläche wiederholt durch je 100 g Boden bedeckt.
Behandlungen EPTC 6 1/ha 35 EPTC 6 1/ha +NI-86/21 0,05 - 0,5 - 1,0 - 2,5 X 103 1/ha 3 - 17 - EPTC 6 1/ha + NI-86/21 EPTC 250 0,05-0,5-1,0-2,5x10 1/ha
Butylat 12 1/ha
Butylat 12 1/ha + NI-86/21 0,05-0,5-1,0-2,5x10 1/ha 5 Butylat 12 1/ha + NI-86/21 EPTC 250 0,05-0,5-1,0-2,5 x x 103 1/ha
Vernolat 6 1/ha
Vernolat 6 1/ha + NI-86/21 0,05-0,5-1,0-2,5xl03 1/ha
Vernolat 6 1/ha + NI-86/21 EPTC 250 0,05-0,5-1,0-2,5x 10 xlO3 1/ha
Acetochlor 3 1/ha
Acetochlor 3 1/ha + NI-86/21 0,05-0,5-1,0-2,5x10 1/ha
Acetochlor 3/1/ha + NI-86/21 EPTC 250 0,05-0,5-1,0-2,5x xlO3 1/ha 15 Jede Behandlung wurde. in fünf Wiederholungen durchge führt.
Die Pflanzen wurden bis zum 10. Tage nach der Behandlung unter Tageslichtlampen von HgMIF/400 W, mit einer Lichtstärke von etwa 15 KLX, mit Beleuchtungsperioden von 16 20 Stunden gezüchtet. Das Wasser wurde täglich bis zur Wasserkapazität von oben ergänzt.
Es wurden die Grünmasse der Pflanzen und die Sprosslänge des Maises gemessen. Der Grad der Torsion des Maises wurde aufgrund der im Beispiel 1 beschriebenen Skala bewertet, 25 2. Ergebnisse und Folgerungen
Aus den Ergebnissen, die in Tabellen VI-XIII zusammengefasst sind, kann es bestätigt werden, dass das Lyophilisat, welches aus dem auf einem 250 ppm EPTC enthaltenden Boden gezüchteten Bakterium NI-86/21 hergestellt wurde, eine be-25 deutende Antidotumwirkung ausübt. Eine Dosis von 500, bzw. 1000, bzw. 2500 1/ha des von uns hergestellten Lyophilisates NI-86/21 EPTC 250 beseitigt die auf den Mais ausgeübte phytotoxische Wirkung von 6 1/ha des EPTC, bzw. 12 1/ha von Butylat, bzw. 6 1/ha von Vernolat oder 3 1/ha von Aceto-35 chlor. Ohne eine Vorbehandlung mit EPTC weist das Bakterium - 18 - ’ NI-86/21 keinen antidotierenden Effekt auf.
Tabelle VI
Die herbizid-antidotierende Wirkung zunehmender Dosen der
Bakteriumsuspension NI-86/21 bei 6 1/ha Dosis des Herbizides 5 EPTC im Mais
Dosis _Mais_ von Sprosslänge Grün- Bonitierungs- EPTC NI-86/21 cm/Einzel- masse wert 1/ha 103 1/ha pflanze g/Gefäss 10 6 0 4,4 2,1 4 6 0,05 4,8 2,8 4 6 0,5 5,0 3,4 4 6 1,0 5,3 3,4 4 6 2,5 7,6 3,9 3 15 Unbehandelte
Kontrolle 18,9 5,0 1 SZD5% 1,7 0,8
20 Tabelle VII
Die herbizid-antidotierende Wirkung zunehmender Dosen des Biopräparates NI-86/21 EPTC 250 bei 6 1/ha Dosis des Herbizides EPTC im Mais 25 Dosis Qfi/p'i _Mais_ von NI-86/2-. Sprosslänge Grünmasse Bonitierungs- EPTC EPCT 250 cm/Einzel- wert 1/ha ^q3 -jy^g pflanze g/Gefäss 6 0 4,4 2,1 4 6 0,05 5,9 3,1 3 30 6 0,5 18,6 5,1 1 6 1,0 20,9 5,7 1 22,5 5,8 1
Unbehandelte
Kontrolle 18,9 5,0 1 35 SZD5% 1,7 0,8 - 19 -
Tabelle VIII
Die herbizid-antidotierende Wirkung zunehmender Dosen der Bakteriumsuspension NI-86/21 bei 12 1/ha Dosis des Herbizides Butylat im Mais 5 Dosis Mais von NI-86/21 Sprosslänge Grünmasse Bonitie-
Butylat ,n3 ,/h cm/Einzel- rungswert 1/ha 1 V a pflanze g/Gefäss 10 12 0 16,1 4,6 3 12 0,05 16,3 4,6 3 12 0,5 17,4 4,8 2 12 1,0 16,7 4,6 2 12 2,5 15,5 4,1 2 15 Unbehandelte
Kontrolle 18,9 5,0 1 SZD5% 1,7 0,8
20 Tabelle IX
Die herbizid-antidotierende Wirkung zunehmender Mengen des Biopräparates NI-86/21 EPTC 250 bei 12 1/ha Dosis des Herbizides Butylat im Mais
Dosis von NI-86/21 _Mais_ 2>. Butylat EPTC 250 Sprosslänge Grünmasse Bonitieruncs-l/’na ^q3 , cm/Einzel- g/Gefäss wert ___pflanze_ 12 0 16,1 5,5 3 12 0,05 16,0 5,0 2 12 0,5 18,1 5,1 2 30 12 1,0 18,5 5,0 1 12 2,5 18,7 5,0 1
Unbehandelte
Kontrolle 18,9 5,0 1 35 SZDg^ 1,7 0,8 4 - 20 -
5 Tabelle X
Die herbizid-antidotierende Wirkung zunehmender Dosen der Bakteriumsuspension NI-86/21 bei 6 1/ha Dosis von Vernolat im Mais__ 5 Dosis NI-86/21 _Ma is__ von 3 Sprosslänge Grünmasse Bonitierungs-
Vernolat ΙΟ0* 1/ha cm/Einzel- g/Gefäss wert 1/ha pflanze 6 0 7,5 4,1 4 10 6 0,05 6,3 3,7 4 6 0,5 8,1 4,0 4 6 1,0 7,7 4,1 4 6 2,5 12,2 4,6 3
Unbehandelte 15 Kontrolle 18,9 5,0 1 SZDp-o/ 1,7 0,8 S/o
Tabelle XI
20 Die herbizid-antidotierende Wirkung zunehmender Dosen des
Biopräparates NI-86/21 EPTC 250 bei 6 1/ha Dosis des Herbizides Vernolat im Mais
Dosis NI-86/21 _Mais_ von EPTC 250 Sprosslänge Grünmasse Bonitie-
Vernolat ln3 . cm/Einzel- g/Gefäss rungswert 25 1/ha 1 V a pflanze 6 0 7,5 4,1 4 6 0,05 8,8 4,3 4 6 0,5 16,6 4,6 3 30 6 1,0 18,7 5,1 2 6 2,5 19,0 5,0 1
Unbehandelte
Kontrolle 18,9 5,0 1 35 SZD5% 1,7 0,0 - 21 - «
Tabelle XII
Die herbizid-antidotierende Wirkung zunehmender Dosen der Bakteriumsuspension NI-86/21 bei 3 1/ha Dosis des Herbizides Acetochlor im Mais 5 Dosis von NI-86/21 _Mais_
Acetochlor .. 3 . Sprosslänge Grünmasse Bonitierungs-1/ha ' 8 cm/Einzel- g/Gefäss wert pflanze 3 Ô 16,0 57i 3 3 0,05 16,4 4,1 3 10 3 0,5 16,6 4,8 2 3 1,0 17,3 4,8 2 3 2,5 17,9 4,7 2
Unbehandelte
Kontrolle 18,9 5,0 1 15 -—________ SZDg^) 0,8
Tabelle XIII
Die herbizid-antidotierende Wirkung zunehmender Dosen des 20 Biopräparates NI-86/21 EPTC 250 bei 3 1/ha Dosis des Herbizides Acetochlor im Mais
Dosis von NI-86/21 ___Mais_
Acetochlor EPTC 250 Sprosslänge Grünmasse Bonitierungs- 1/ha iq3 -|y. cm/Einzel- 9/Gefäss wert 25 _-uj -L/na pflanze___ 3 0 16>° 3,9 3 3 0,05 18,9 5jl 2 3 0,5 19,1 5,4 1 3 ljO 20,8 5,5 j 30 3 2>5 21,4 6,0 1
Unbehandelte
Kontrolle 18,9 5j0 1 ' 1 - - - - - SZD5% 1,7 0,8 35 ---‘ --- Λ - 22 -
Beispiel 5
Ein Laboratoriums-Zuchtgefässversuch wurde ausgeführt, um die EPTC-antagonisierende Wirkung der aus dem Sprosse und Wurzel der mit EPTC vorbehandelten Maispflänzchen gewonne-5 nen acetonischen und wässrigen Filtrate, sowie der zurückbleibenden faserigen Stoffe in Maiskultur zu prüfen.
1. Materialien, Geräte, Methode 1.1 Verfahren zur Herstellung eines antidotumtragenden Maises lO Es wurden mit PVC-Folie bekleidete Kunststoffgefässe mit einer Oberfläche von 4 dm , mit einer Aufnahmenfähigkeit von je 6000 g lufttrockenem Boden angewandt. In diese Gefässe wurden zuerst je 4000 g oberer Feldboden mit einem Humusgehalt von 1,95%, mit einem pH-Wert von 5,7 und mit 15 einer Gebundenheit (nach Arany) von 46 eingewogen. Darauf wurden je 50 Körner des Meises Pioneer 3707 gesät, die dann durch je 1000 g Boden bedeckt wurden. Darauffolgend wurden die Behandlungen der mit (e) markierten Zuchtgefässe mit je einer 6 1/ha Dosis von EPTC durchgeführt. Die derart be-20 handelte Bodenoberfläche wurde wiederholt mit je 1000 g Boden bedeckt.
Die Maispflanzen, welche die Behandlung (E) bekamen, wurden bis zum 14# Tage nach der Behandlung unter Täjeslicht-lampen von HGMIF/400 W, mit einer Lichtstärke von etwa 11 25 KLX, mit einer täglichen Beleuchtungsperiode von 16 Stunden bei einer Temperatur von 26+4 °C gezüchtet.
Das für Berieseln gebrauchte Wasser wurde täglich bis zur Wasserkapazität von oben ergänzt. Am 14. Tage wurde der Spross der Pflanzen in jedem Zuchtgefäss gesondert abge-30 schnitten, bzw. die Wurzeln wurden aus dem Boden herausgewaschen.
1.2. Ausgewinnung der Filtrate und der faserigen Stoffen aus dem Mais 1.2.1 Aufarbeitung des Sprosses des mit EPTC vorbe-35 handelten [Behandlung (e)J Maises - 23 - 55 g von dem Sprosse des mit EPTC vorbehandelten [Behandlung (E)J Maises wurden sofort nach dem Abschneiden in einer Turmixmaschine in 500 ml Wasser zerkleinert. Der so erhaltene Grus wurde halbiert, 250 ml wurden durch ein Laboratoriume-5 -Vakuumfilter filtriert und davon wurde ein wässriges Filtrat (Sz) gewonnen, welches mit der Kode E-Ha-Vi-Sz bezeichnet wu rde,
Oer auf dem Filter gebliebene faserige Stoff wurde in einem Scheidetrichter mit 50 ml Aceton geschüttelt und die 10 Acetonphase wurde niedergelassen. Diese Phase wurde mit der Kode E-Ha-Ac-Sz bezeichnet.
Der zurückbleibende 250 ml wässrige Grus wurde durch ein Vakuumfilter filtriert und der auf dem Filter gebliebene faserige Stoff wurde als eine selbständige Probe behandelt, 15 welches mit der Kode E-Ha-Vi-R bezeichnet wurde.
1,2.2 Aufarbeitung der Wurzel des mit EPTC vorbehandelten Maises
Man arbeitete wie oben beschrieben, mit der Ausnahme , dass 28 g mit einem Messer zerkleinerte Wurzel in einer 20 turmixmaschine mit 400 ml Leitungswasser behandelt wurden.
Aus 200 ml Grus wurden das wässrige und dann das acetonische Filtrat gewonnen bzw. der faserige Stoff wurde aus dem anderer 200 ml erhalten.
Die Koden der derart gewonnenen Materialien sind wie 25 folgt: E-Gyö-Vi-Sz
E-Gyö-Vi-R
E-Gyö-AC-Sz.
1.3 Prüfung der EPTC-antagonisierenden Wirkung der 30 aus dem Mais gewonnenen Filtrate und Fasern im
Zuchtgefäss 1. Anordnung des Versuches
Es wurden mit PVC-Folie bekleidete Kunststoffgefässe mit 2 einer Oberfläche von 0,8 dm , mit einer Aufnahmefähigkeit 35 von je 800 g Boden angewandt. In diese Gefässe wurden zuerst * - 24 - ' je 400 g oberer Feldboden mit den unter 1*1 beschriebenen
Eigenschaften eingewogen. Darauf wurden je 10 Körner des Maises Pioneer 3707 gesät,.Diese Aussaat wurde mit je 100 g Boden bedeckt, dann wurde EPTC in einer Dosis von 5 6 1/ha ausgebracht. Die derart behandelte Bodenoberflâche und die unbehandelten Gefässe wurden wiederholt mit je 10 g Boden bedeckt und auf diese Bodenoberflächen wurden je 1.00 ml wässriges Filtrat, bzw. je 100 g faserige Substanz, bzw. je 5 ml acetonisches Filtrat appliziert.
10 Die Pflanzen wurden bis zum 7. Tage nach dem Säen unter den unter 1.1 beschriebenen Bedingungen gezüchtet, dann wurden die Sprosslänge und die Grünmasse des Maises abgemessen, und das Aussenbild des Maises wurde mittels der im Beispiel 1 beschriebenen Bonitierungsskala bewertet,
15 Tabelle XIV
Wirkung der aus dem Sprosse (Ha) des mit EPTC (6 1/ha) vorbehandelten (e) Maises gewonnenen wässrigen (Vi) und acetonischen (Ac) Filtrate (Sz), sowie der zurückbleibenden faserigen Substanzen (r) auf die Selektivität des Her-20 bizides EPTC (6 1/ha) im Mais _Mais_
Behandlungen Sprosslänge Grünmasse Bonitierungs- cm/Einzel- 10-2 g/Ein- wert _Pflanze Ölpflanze_ 25 Unbehandelte
Kontrolle 19 72 2,0 EPTC 9 56 1,2 EPTC +(E-Ha-Vi-Sz) 19 62 1,8 EPTC +(E-Ha-Vi-R) lg 72 2,0 30 EPTC + (E-Ha-Ac-Sz) 20 70 2,0 E-Ha-Vi-Sz 20 72 2,0 E-Ha-Vi-R 20 79 2,0 E-Ha-Ac-Sz 18 68 2,0 35 Aus den Angaben der Tabelle XIV geht es hervor, dass * - 25 - die aus dem Sprosse der mit einer Dosis von 6 1/ha von EPTC vorbehandelten Maispflänzchen gewonnenen Extrakte, sowie der zurückbleibende faserige Stoff den phytotoxischen Effekt des Herbizides (6 1/ha EPTC) völlig beseitigt hat. Das Er-5 gebnis der Antidotumwirkung dieser Biopräparate besteht darin, dass die Sprosslänge und das Aussenbild der Kulturpflanze ebenso intakt und gesund,wie die der unbehandelten Kontrolle, sind.
Tabelle XV
3.0 Wirkung der aus der Wurzel (Gyö) des mit EPTC (6 1/ha) vorbe-handelten (e) Maises gewonnenen wässrigen (Vi) und aceto-nischen (Ac) Filtrate (Sz), sowie der zurückbleibenden faserigen Stoffen (R) auf die Selektivität des Herbizides EPTC (6 1/ha) im Mais_ 15 _ Mais _
Behandlungen Sprosslänge Grünmasse Bonitierungs- cm/Emzel- _ -2 „ .
_P*·"» zelpflanze"
Unbehardelte 20 Kontrolle 19 72 2,0 EPTC 9 56 1,2 EPTC + (E-Gyö-Vi-Sz) 5 16 1,0 EPTC + (E-Gyö-Vi-R) 19 72 2,0 EPTC + (E-Gyö-Ac-Sz) 18 70 2,0 25 E-Gyö-Vi-Sz 7 22 1,4 E-Gyö-Vi-R 20 73 2,0 E-Gyö-Ac-Sz 19 68 2,0
Es geht aus den Angaben der Tabelle XV klar hervor, dass das acetonische Filtrat, sowie der faserige Stoff die 30 aus der Wurzel der mit einer 6 1/ha Dose von EPTC vorbehandelten Maispflänzchen gewonnen wurden, eine ausgezeichnete Antidotumwirkung ausüben.
35
Claims (4)
1. Verfahren zur Herstellung antidotumtragender Mikroorganismen, welche zur Verminderung der die Kulturpflanzen schädigenden Wirkung von Thiolcarbamaten der allgemeinen 5 Formel (i), 0 r,^n-c-s-r5 Ci) Rr worin R. und R0 gleich oder verschieden sind, und für eine C, 1 d 1-b Alkyl- oder C3_gCycloalkylgruppe stehen; oder 15 und R mit dem Stickstoffatom eine Hexamethylen- imino-Gruppe bilden; und R3 eine C^gAlkylgruppe bedeutet, oder von Chloracetaniliden der allgemeinen Formel (VIII) υ 20 v ^nn>ch,ci ltm> »5 ö 25 worin R4 und Rg gleich oder verschieden sind, und für Wasserstoff oder eine ^^Alkylgruppe stehen; und Rg eine C^_gAlkyl-, gAlkenyl-, (C^ gAlkoxy)- -(Cj_3alkyl)- oder Pyrazolyl-(C^ ^alkyl)-Gruppe 30 bedeutet, geeignet sind, dadurch gekennzeichnet, dass man die in den Feldböden lebenden, oder unter Laboratoriumsbedingungen hergestellten, vermehrten und in einer Menge von 0,001 bis 99 Masse% in irgendeine physiologische Suspension 35 gebrachten, natürlichen oder genmanipulierten Mikroorganismen / « - 27 - mit irgendeiner der Verbindungen der allgemeinen Forneln (II) bis (VIl), o o 10 0 TV II 1/N-C-S-T?3 V' II h 5 „ * 0 0 ' ^N - Ç - S - gluto** ton (IV) » ^ 0 ^N-C-S-CH.-CH-COOH (V) π/ II \
25 K* 0 NH* ^n-c-s-ch2-ch-cooh-(>0 30 ^ b nh-c-chz-cooh II o 35 Λ A « - 28 - % ”’>N-C-S-CHrÇH-COOH (VII) ^z n 0-C-CHZ-COOH
5. II * 0 worin R^j R2 und R3 gleich wie oDen sind, oder mit deren acylierten oder esterifizierten Derivaten, oder mit deren 0,00GL bis 99 Masse% Gemischen untereinander oder mit 10 anderen Pestiziden, Regulatoren, Antidota, Kunstdüngern oder anderen organischen oder anorganischen, natürlichen oder synthetischen Stoffen in solchen Mengen, die 5-50C00 g/ha . Wirkstoff, bzw. 0,002-5000 ppm Wirkstoff entsprechen, behandelt, dann die derart antidotumtragend 15 gewordenen Mikroorganismen nötigenfalls durch Lyophilisie- ren oder durch Aufträgen an einen organischen oderan anorganischen Träger konserviert, und schliesslich gegebenenfalls durch Zerkleinern, Pulverisieren, Extraktion oder auf eine andere Weise aufarbeitet.
2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass man einen Bakterienstamm mit der Stammbuchnummer Nl-86/21 mit den Verbindungen der allgemeinen Formeln (i) bis (VIl) behandelt, und derart eine antidotumtragende Bakte·* riumsuspension herstellt.
3. Verfahren zur Herstellung antidotumtragender Makroor ganismen, welche zur Verminderung der die Kulturpflanzen schädigenden Wirkung von Thiolcarbamaten der allgemeinen Formel (i), 0 30 _|| (I) R,^N-C-S-Rs Ri worin
35 R^ und R^ gleich oder verschieden sind, und für eine 0 » - 29 - T « £. * gAlkyl- oder C3 gCycloalkylgruppe stehen· oder R-^ und Rg mit dem Stickstoffatom eine Hexamethylen-imino-Gruppe bilden} und Rg eine C-^gAlkylgruppe bedeutet, 5 oder von Chloracetaniliden der allgemeinen Formel (VIII), JL Α-κ,Λ (vin) 10 "R worin 5 Q r4 und Rg gleich oder verschieden sind, und für Wasserstoff oder eine Cj-sAlkylgruppe stehen; und Rg eine C^gAlkyl-, C^gAlkenyl-, (C^ 3Alkoxy)-(C^_3alkyl)-15 oder Fyrazolyl-(C^ 3alkyl)-Gruppe bedeutet, geeignet sind, dadurch gekennzeichnet, dass man irgendeine Art der in Feldböden lebenden oder unter Laboratoriumsbedingungen in einem flüssigen oder festen physiologischen Medium gezüchteten, natürlichen oder genmanipulierten Makro-20 Organismen, bevorzugt genmanipulierten Pflanzen der höheren Ordnung, oder deren Organ-, Gewebe- oder Zellkultur mit irgendeiner der Verbindungen der allgemeinen Formeln (i) bis (VII), worin R^, und R^ gleich wie oben sind, oder mit deren acylierten oder esterifizierten Derivaten, oder mit 25 deren O,0OQL bis 99 Masse% Gemischen untereinander oder mit anderen Pestiziden, Regulatoren, Antidota, Kunstdüngern oder anderen organischen oder anorganischen, natürlichen oder synthetischen Stoffen in solchen Mengen, die 5-50000 g/ha Wirkstoff, bzw. 0,002~5CC0 ppm Wirkstoff entsprehcen, be-30 handelt, dann die derart antidotumtragend gewordenen Makro-organismeri binnen 30 Tagen nach der Behandlung einernt und nötigenfalls konserviert und/oder durch Zerkleinern, Pulverisieren, Extraktion, Trocknen oder auf eine andere Weise aufarbeitet.
4. Verfahren zur Verminderung der Kulturpflanzen schädi- 5» ¥ -Sorgenden Wirkung von Thidcarbamaten der allgemeinen Formel (i) oder Chloracetaniliden der allgemeinen Formel (vill), worin R-^, Rg, ^3» Rg und Rg gleich, wie in den Ansprüchen 1 und 3 sind, dadurch gekennzeichnet, dass man die Ackerfeldböden vor dem Säen oder Auflauf der Kulturpflanzen, vor der Behandlung oder gleichzeitig mit der Behandlung oder nach der Behandlung mit dem das Thiolcarbamat der allgemeinen Formel (i) oder Chloracetanilid der allgemeinen Formel (VIIl) als Wirkstoff enthaltenden Präparat in irgendeinem Zeitpunkt bis zur Keimung der Kulturpflanze in einer Dosis von 5-5000 1/ha der Präparate behandàlt, welche die antidotumtragenden Mikro- oder Makroorganismen nach einem der Ansprüche 1 bis 3 in einer Menge von 0,0001 bis 99 Masse% enthalten.
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