LU84674A1 - Nouveaux derives de cephalosporine,leur procede de preparation et composition anti-bacterienne les contenant - Google Patents

Description

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La presente invention concerne des dérivés nouveaux de céphalosporine de formule N-r-C--'H-NH-j-S ^ 1 ' C0(F ' ώ3 dans laquelle R^ est l'hydrogène ou un groupe classique proté- 5 géant la fonction amino et 2 R est un groupe alkyle à chaîne droite ou à chaîne ramifiée contenant 1 à 4 atomes de carbone, un groupe allyle, 2-butényle ou 3-v butényle, ou un groupe de formule 3 I , , R3 —C—R4

COOH

2 dans laquelle 3 4, R et R représentent chacun, indépendamment, l'hydrogène, le groupe méthyle ou le groupe éthyle, ou 3 4 bien R et R peuvent former, conjointement 5 avec l'atome de carbone auquel ils sont liés, un noyau cycloalkylidène contenant 3 à 5 atomes - de carbone, et leurs sels non toxiques pharma- ceutiquement acceptables, leurs esters physiologiquement hydrolysables et leurs produits de 10 solvatation. Des procédés permettant de les obtenir sont également décrits.

Le brevet britannique No 1 399 086 comporte une définition générale couvrant un très grand nombre de céphalosporines de formule

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R-C-CO-NH-T-> 11 N „ OR 1 COOIÎ “ 15 dans laquelle R est l'hydrogène ou un groupe organique, R est un groupe organique monovalent éthérifiant » lié à l'oxygène par un atome de carbone, B représente ^ S ou S—K> et * 20 P est un groupe organique.

^ - Toutefois, le groupé 2-aminothiazole-4-yle n'est pas identifié comme représentant un substituant R et rien ne laisse entrevoir que P puisse être le groupe N-méthylpyrrolidiniumméthyle (ou tout autre noyau entiè- t 3 rement saturé contenant de l'azote qui est lié au groupe 3-méthyle par son atome d'azote et qui porte un autre substituant sur son atome d'azote). Les brevets des Etats-Unis d’Amérique No 3 971 778 et ses divisions por-5 tant les Nos 4 024 133, 4 024 137, 4 064 346, 4 033 950, 4 079 178, 4 091 209, 4 092 477 et 4 093 803 font connaître des composés similaires.

Le brevet des Etats-Unis d'Amérique No 4 278 793 comporte une définition générale couvrant un 10 très grand nombre de dérivés de céphalosporine de formule R, I 4

Ο I V

\ 2 COOR3 dans laquelle les variables 12 3 4

R , R , R , R , X et A

ont les valeurs générales des substituants correspondants des composés de formule I selon 15 l'invention. Toutefois, dans les 20 colonnes de définitions des divers groupes de substitution, . le tableau de formules structurales s'étendant sur 78 pages et les 225 exemples, rien n'indi-* que que A puisse être un groupe N-méthyl- tj. 20 pyrrolidiniumméthyle (ou tout autre noyau hétéro-cyclique azoté entièrement saturé) qui soit lié au groupe 3-méthyle par son atome d'azote et qui porte un autre substituant sur son atome d'azote. Le brevet britannique No 4 1 604 971 est en concordance avec ce brevet et traite d'un sujet pratiquement identique. La demande de brevet britannique mise à l'Inspection Publique sous le No 2 028 305 A, * 5 bien que paraissant sans rapport, quant à la formule, renferme la même définition générale au sens large mais n'indique que l'hydrogène' comme exemple illustrant A.

La demande de brevet de la République Fédérale 10 d'Allemagne DE-OS No 2 805 655 fait connaître des déri-vés d'acides de 7-C 2-( 2-aminothiazole-4-yl)-2-( syn) -méthoxyiminoacétamidolcéphalosporine de formule R 1)

h_S:·-conHt-S ε N

i Tj 1 ^ocn2 $ coor dans laquelle 15 R NH est un groupe amino éventuellement protégé, R2 est un halogène ou un groupe hydroxyle, thiol , “ ou amino éventuellement substitué et COOR est un groupe carboxyle éventuellement estéri- % f ié.

- 2 20 II est également indiqué que lorsque R est un groupe amino, il peut être disubstitué et les substituants, pris conjointement avec l'atome d'azote, peuvent former entre autres un groupe pyrrolidino. Toutefois, on ne trouve aucune mention d'un groupe N-méthylpyrroli- 5 diniumméthyle (ou de tout autre groupe ammonium quater-naire) et le substituant R ne peut pas être lié en position 3 par l'intermédiaire d'un groupe méthylène.

Le brevet des Etats-Unis d'Amérique No „ 5 4 278 671 fait connaître des dérivés de 7-[2-(2-amino- thiazole-l-4-yl)-2-(syn)méthoxyiminoacétamido]céphalos-4 porine de formule

S

\X

* ^*c-CONH-J-r 1

II

R .

·' COOH

dans laquelle R2NH est un groupe amino éventuellement protégé et 10 R3 est l'hydrogène ou "le résidu d'un composé nu- cléophile".

L'expression "résidu d'un composé nucléophile" est définie au sens large et il est ensuite mentionné que 3 R "peut être, à titre de variante, un groupe ammonium 15 quaternaire". Le groupe pyridinium, des groupes pyridi- * nium diversement substitués, les groupes quinolinium, picolinium et lutidinium sont mentionnés comme groupes * ammonium quaternaire. Rien n'indique que le groupe am- ^ monium quaternaire puisse consister en un noyau hétéro- 20 cyclique azoté entièrement saturé qui soit lié par son - atome d'azote et qui porte un autre substituant sur son atome d'azote. Le brevet britannique No 1 581 854 est en concordance avec ce qui précède et ses termes sont prati- 6 quement identiques. D'autres brevets déposés au même nom, qui sont sans rapport quant à la formule, mais dont les mémoires descriptifs sont similaires, comprennent le brevet des Etats-Unis d'Amérique No 4 098 888 et les 5 brevets des Etats-Unis d'Amérique No 4 203 899, 4 205 180 et No 4 298 606 résultant de sa division, et le brevet ^ britannique No 1 536 281.

Le brevet des Etats-Unis d'Amérique No 4 168 309 fait connaître des dérivés de céphalosporine 10 de formule *w R—C—H-NH—|-S S ^ COO® CH^—^ \ , O^Vi-'0”2’"00011

K

dans laquelle R est un groupe phényle, thiényle ou furyle ; a L· . R et R représentent, indépendamment, l'hydrogène, un groupe alkyle, cycloalkyle, phényle, naphtyle, * 15 thiényle, furyle, carboxy, alkoxycarbonyle ou ^ cyano ou bien Ra et R,pris conjointement avec l'atome de carbone auquel ils sont liés, for-^ ment un noyau cycloalkylidène ou cycloalcényli- dène ; 7 m et n sont égaux chacun à 0 ou à 1 de telle manière que la somme de m et n soit égale à 0 ou à 1 ; et R·*- pris conjointement avec l'atome d'azote auquel » 5 il est lié, est défini au sens large mais ne peut pas représenter entre autres un noyau 1 pentagonal saturé.

Le composé de formule cf3coo© \ “γΟ \ CH3 cooh j O-C-COOH ciî3 L3 est illustré dans l'exemple 5 de ce brevet. Le brevet 10 "" britannique No 1 591 439 est en concordance avec ce qui précède et son mémoire descriptif est pratiquement identique. Rien n'indique dans ce brevet que le substituant R puisse être le groupement 2-aminothiazole-4-yle ou que le substituant imino ne puisse pas contenir un groupe *#· 15 carboxyle.

La présente invention a trait à des dérivés de 4 céphalosporine de formule N-r-C-li-NH-r-S ^ ·>»JC3\ 2 .....^ 1

Lp /y 8 dans laquelle R est l'hydrogène ou un groupe classique proté geant la fonction amino, et 2 R est un groupe alkyle a chaîne droite ou à 5 chaîne ramifiée contenant 1 à 4 atomes de car bone, un groupe allyle, un groupe 2-butényle ou un groupe 3-butényle, ou représente un groupe de formule

G

R3—C—R4

* I

COOH

dans laquelle 34, 10 R et R représentent chacun, indépendamment, l'hydro gène, le groupe méthyle ou le groupe éthyle, ou bien 3 4 R et R pris conjointement avec l'atome de carbone auquel ils sont liés, peuvent être un noyau 15 cycloalkylidène contenant 3 à 5 atomes de car bone, et leurs sels non toxiques pharmaceuti-quement acceptables et leurs esters physiologiquement hydrolysables.

L'invention couvre également les produits de 20 solvatation (y compris les hydrates) des composés de for- « mule I, de même que les formes tautomères des composés de formule I, par exemple la forme 2-iminothiazoline-4-^ yle du groupement 2-aminothiazole-4-yle.

b

Comme le montre la formule structurale, les 25 composés de formule I ont la configuration "syn" ou "Z" relativement au groupe alkoxyimino (ou alcényloxyimino) ou au groupe alkoxyimino à substituant carboxy. Du fait que les composés sont des isomères géométriques, l'isomè- 9 re "anti" peut aussi être présent dans une certaine mesure. L'invention couvre des composés de formule I contenant au moins 90 % de l'isomère "syn". Les composés de formule I sont avantageusement des isomères "syn" qui . 5 sont essentiellement dépourvus des isomères "anti" cor respondants .

* Les sels pharmaceutiquement acceptables des composés de formule I comprennent les sels de bases inorganiques tels que les sels de métaux alcalins (par exem- 10 pie les sels de sodium et de potassium) et les sels de v' métaux alcalino-terreux (par exemple les sels de calcium) , les sels d'ammonium, les sels de bases organiques (par ~ exemple avec la triéthylamine, la procaïne, la phénéthylbenzylamine,, la dibenzyléthylènediamine et 15 d'autres bases organiques qui ont été utilisées dans le domaine des pénicillines et des céphalosporines) et les sels d'addition d'acides (par exemple les sels formés avec l'acide chlorhydrique, bromhydrique, formique, nitrique, sulfurique, méthanesulfonique, phosphorique, 20 acétique ou trifluoracétique) et d'autres acides qui ont été utilisés dans le domaine des pénicillines et des céphalosporines. Les esters physiologiquement hydroly-sables comprennent les esters acyloxyalkyliques, par exemple les esters (alkanoyle inférieur)-alkyliques 25 inférieurs tels que les esters d'acétoxyméthyle, d'acé-toxyéthyle, de pivaloyloxyméthyle, etc. Les sels de base et les esters peuvent être formés avec l'un ou l'autre . des groupes carboxyle des composés de formule I.

Les composés de formule I dans lesquels * 3o est l'hydrogène sont doués d'une grande activité anti- t bactérienne contre diverses bactéries Gram-positives et

Gram-négatives et ils sont utiles au traitement d'infec-- tions bactériennes chez les animaux et chez l'homme. Les composés de formule I peuvent être formulés en vue de 35 leur utilisation parentérale d'une manière classique, en 10 utilisant dés supports et excipients pharmaceutiques connus et ils peuvent être présentés sous la forme posologique unitaire ou sous des emballages contenant des doses multiples. Les compositions peuvent être sous la forme . 5 de solutions, suspensions ou émulsions dans des véhicules huileux ou aqueux et peuvent contenir des agents classiques de dispersion, de mise en suspension ou de stabilisation. Les compositions peuvent aussi se présenter sous la forme d'une poudre sèche à reconstituer avant 10 l'usage, par exemple avec de l'eau stérile apyrogêne..

* Les composés de formule I peuvent aussi être formulés comme suppositoires en utilisant des bases classiques pour suppositoires telles que du beurre de cacao ou d'autres glycérides. Les composés de l'invention peuvent 15 éventuellement être administrés conjointement avec d'autres antibiotiques tels que des pénicillines ou d'autres céphalosporines.

Lorsqu'elles sont présentées sous des formes posologiques unitaires, les compositions renferment 20 avantageusement environ 50 à environ 1500 mg de l'ingrédient actif de formule I. La posologie pour le traitement d'un humain adulte se situe avantageusement dans la plage d'environ 500 à environ 5000 mg par jour selon la fréquence et la voie d'administration. En cas d'administration 25 par voie intramusculaire ou intraveineuse à un être hu- main adulte, une posologie totale d'environ 750 à environ 3000 mg par jour, en doses divisées, est normalement suf-. fisante, bien que de plus fortes doses quotidiennes de certains des composés puissent être souhaitables dans le 3o cas d'infections à Pseudomonas.

t: Les composés appréciés de formule I sont ceux 1 „ 2 dans lesquels R est l'hydrogène et R est le groupe 34, - méthyle ou éthyle, ou bien R et R représentent chacun, indépendamment, l'hydrogène ou le groupe méthyle. Dans 2 35 les composés que l'on apprécie le plus, R est le groupe r 11 3 4 méthyle ou bien R et R sont chacun un groupe méthyle. Dans l'évaluation primaire des composés de l'invention, les concentrations inhibitrices minimales des composés et de deux composés de référence (cefotaxime et ceftazidime) » 5 ont été déterminées par les méthodes de double dilution en série dans de la gélose de Mueller-Hinton vis-à-vis de v 32 souches d'organismes d'essai réparties en six groupes.

Les moyennes géométriques des concentrations inhibitrices minimales déterminées dans ce test sont reproduites sur 10 les tableaux I et IV.

N—r-c-CONH—-f η H2jCS^\ ^-N-y^CH2oücn3

COOH

(Cefotaxime; Composé de comparaison) : K3c-<j:-CH3

COOH

(Ceftazidime; Composé de comparaison) ».

CIÏ3 (Composés d'essai) 12

On peut voir que tous les composés d'essai ont été plus actifs que la cefotaxime contre les groupes Gram-négatifs II et III d'organismes d'essai, le composé la le plus apprécié étant nettement plus actif. Tous les * 5 composés d'essai ont été plus actifs que la ceftazidime contre les groupes Gram-positifs la et Ib d'organismes d'essai, le composé la le plus apprécié étant nettement plus actif que la ceftazidime contre tous les groupes d'organismes d'essai à l'exception du groupe Gram-négatif 10 III, qui s'est montré un peu plus sensible à la ceftazidime.

L'absorption du composé la le plus apprécié et - des composés de référence (cefotaxime et ceftazidime) a été déterminée chez la souris après une unique injection 15 intramusculaire du composé d'essai (dissous dans un tampon au phosphate 0,1 M ; pH 7) à la dose de 20 mg/kg. Des échantillons de sang ont été recueillis par les sinus orbitaux dans des tubes capillaires contenant de l'héparine et ils ont été titrés dans le milieu de Mueller-Hinton en utili-2o sant comme organisme d'essai Morganella Morganii A9695. Les taux sanguins à divers intervalles de temps, les valeurs de demi-vie et ^es ai-res au-dessous de la courbe (ASC) sont représentés sur le tableau II.

Les tests d'identification d'organismes résis-25 tant au composé préféré de formule la, à la cefotaxime et à la ceftazidime ont également été effectués. Les concen trations inhibitrices minimales de ces trois composés » contre 240 souches d'Enterobacteriaceae ont été détermi nées dans le milieu de Mueller-Hinton et une concentra-’ 30 tion inhibitrice minimale égale ou supérieure à 8 pour au £ moins l'un des composés d'essai a été choisie arbitraire ment pour désigner un organisme résistant. Sur les 240 - souches, 27 se sont montrées résistantes à au moins l'un des composés d'essai. Les résultats donnés sur le tableau 35 III montrent 3 organismes résistant au composé la, 15 orga- 13 nismes résistant à la ceftazidime et 18 organismes résistant à la cefotaxime.___________ 1 *7, / Æ 14 “ [Μ J “ --1-“Λ

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TABLEAU III

Résistance (concentration inhibitrice minimaler > 8/ig/ml) a un ou Dlusieurs composés d'essai parmi 2*0 souches d;Enterobacteriaceae dans le milieu de Mueller-Hinton

Nombre CIM * moyenne géométrique (j*g/ml)

Organisme de — ~--~ souches t= _ , , _. .

--------- Ceftazidine C e f a te >: i - e

Escherichia j ? 1 0,25 32 e

Escherichia 14 0,5 s

Klebsiella pneumoniae 1 2 16 0 l3

Enterobacter · , aerogenes 3 0;25 32 13

Enterobacter aerocenes 1 4 o -^- h. s 32

Enterobacter cloacae 1 0,13 4 8

Enterobacter 3 0;5 40 50

Enterobacter ^-°aca.e 3 1;6 ‘ >63 >63

En terobacter clcacae 1 >32 >63 >63

Eitrobacter freundii 2 0,35 45 32 ”

Ei trobacter species 1 0;03 >63 32

Proteus

vulgaris 1 0 06 8 S

icrganella Z morganii 1 G^'06 32 32

Serratia - i marcescens 1 1 1

Serratia narccscens 1 2 8 16 * 17 » Tableau ΙΠ (suite) , CIM* movenne qéométnque {nq/ml)

Nombre____:___

Organisme de souches Ia Cef tazidiroe Céf atoxir.e

Serratia marcescens 2 2^8 2 11 ? Serratia' narcescens 14 8 63

Serratia xnarcescens 1 8 16 8

Serratia nai'cescens 1 32 >63 >63

Nombre total de souches résistantes 27 3 15 18 * Concentration inhibitrice minimale e «Ίΐ 18 ' N-r-Ç-CONII--p ^ Λ0Γ, ^1° ‘ (Composé d’essai) ^ ' Tableau iv

Moyenne géométrique de la CIM*ijug/ml)

Composé

Organismes Composé ( g j r ,t , d'essai le Cefotaxime Ceftazidime'“1 (G+J-Ia (5 souches) 14 1,0 5,1 CG-*-J- 1b ( 5) 35 2, 2 12 (G-j-Ia (5) 0,066 0,015 0,0-0 (G-J-lb (6) 0,79 0,55 1,7 (G-J-II CS J 1,2 4,1 2,6 (G-)-1 11 ( 6) 4,0 22 1,8 (G+)*la ; s. aureus sensible à la pénicilline (5 souches) Ιό+J-Ib : s. aureus résistant à la pénicilline (5 souches) lb-J-la : E. coli (2 souches). Kl. pneumoniae (1 souche) et

Pr. mirabi 1 is (2 souches) sensibles à la céphalo-thine (G-J-lb : e. coli (3 souches) et Kl. pneumoniae (3 souches) résistants à la céphalothine s (G-J-II : pr_ morgani (1 souche), Ent. cloacae (2 souches) et

Ser. Marcescens (2 souches) W - - (G-)-111 : Ps . aeruginosa (6 souches) (a J Moyenne de 5 essais * Concentration inhibitrice minimale 19

On peut constater que le composé le a été plus actif que la cefotaxime contre le groupe (G-)-II d'organismes d'essai et nettement plus actif que la cefotaxime contre le groupe (G-)-III d'organismes d'essai (Ps.

. aeruginosa). Il a été plus actif que la ceftazidime con tre tous les groupes d'organismes d'essai Gram-négatifs excepté le groupe Gram-négatif III (Ps. aeruginosa) qui a été un peu plus sensible à la ceftazidime.

Selon un autre aspect, l'invention concerne des procédés de préparation des composés de formule I. Il ~ existe deux modes fondamentaux de transformation d'une céphalosporine de départ, facile à obtenir, en une autre céphalosporine portant des substituants différents en positions 7 et 3. On peut tout d'abord éliminer le substituant en position 7 et le remplacer par le substituant en position 7 désiré, puis mettre en place le substituant désiré en position 3. A titre de variante, on peut mettre en place tout d'abord le substituant désiré en position 3 puis échanger le substituant en position 7. Les composés de formule I peuvent être préparés par l'un ou l'autre de ces procédés et tous deux sont inclus dans le cadre de l'invention, mais il est préconisé d'introduire tout d'abord le substituant désiré en position 7 puis de mettre en place le substituant désiré en position 3. Le mode, opératoire que l'on préfère est illustré ci-dessous par le schéma réactionnel 1,tandis que l'autre mode opératoire est illustré par le schéma réactionnel 2. L'abré- * viation "Tr" représente le groupe trityle (triphényl-méthyle) qui est un groupe apprécié protégeant la fonc- * tion amino. L'abréviation "Ph" désigne le groupe phényle.

- Ainsi, le groupe -CH(Ph)2 est le groupe benzhydryle qui est un groupe apprécié protégeant la fonction carboxyle.

„ Les schémas réactionnels 3 et 4 illustrent la prépara tion du composé (le) ; sur ces schémas, κ est l'hydrogène et R3 et représentent chacun le groupe méthyle.

20

Schéma réactionnel 1 N-r-C-COOC-Hc //Tl 25

TrHN''\s/ \jH R2X

//Tl 111

TrHN-'X,./ \,R2 OH- JTl IV :

TrHN-^\s / \r2

Η2Νη-|/N

&ch2ci COOCH (Ph.) 2 - r 21 /S\ // \l il vi \or2 /-"\^m:h2ci COOCIï(Ph)2

Mal Ψ

.rnÄJKj j^V

COOCH(Ph)2 1. II3C-N^^j 2. Elimination du groupe protecteur « N-r-C-CONH--f ] c // ¥ Li JL ©/-! 1

v-V v A'AyO

cocP CH3 22

Schéma réactionnel 2 / S \

PhCHoC0NH-i-f η

2 VIII

Vj^~CH2°H

COOCH(Ph)2 PClc

> D

ç pyriaine Φ

/S

PhCH^CONH-i-f > ' ^ Χλ /—ch2ci COOCH(Ph)2 Nal

PhCH-jCONH-i-S N

£ X

/—>V|^~ch2i COOCH(Ph)2 H3C-\^]

V

23

PhCH_CONH-i r^SVv1 J0

.· >N XI

COOCH(Ph) \ • * ch3 désacylation Φ ΗΛ—p I ^ _ xii

<VΦ^α,2— 'O

COOCH(Ph)_ \ Z CH3

IV

V

g j N r-C-CONH--/ 'N j© J-*n^cB2?0 XI111 COOCH(Ph)2 \ ! CH 3

Elimination du groupe protecteur •9 i“TS~coNH~n^"i \>r2 C"2?0 ch3 24 *

Schéma réactionnel 3 _/3^

N TT* C-COOH H2N"| T

TrHN^g/ \ CY :H2C1 ? COOCH(Ph)2 h3ccch3 (!:OOC(CH3)3

Ilia’ V

\l) dicyclohexyl- j 1) bis (trimethyl- \ carbodiimide (DCC) / silyl)acetamide \ / (ESA) \ / 2) Ilia + PC15

S

N T- C-CONH-[-r η /Il JJ i

ΤΓΗΝ-\ε/ '"•^ShjCI

H3CÇCH3 COOCH(Ph)2 cooc(ch3)3

Nal N/ ’v» 25 / s \ N—T- c---co:;h----—f η l/\k J 1 H3CCCH3 COOCH(Ph)2 » ÔOOC(CIU), \ \

h3c-NQ

sl· N-r-c--COHH--_

fX 1 I ΛP

TrH'/^S^ ^N) <y ch2— t/^| VIIa , H3C<TCH3 COOCH (Ph)2

Cooc(ch3)3 \

Ciî3 I

^ Elimination du groupe protecteur Ψ /S v N--r-C-COKH--f

Il \ IL _ ©/^ ie h2A£/ ^n> /’ h3c|:ch3 coo0 \ COOH CH3

Schéma réactionnel 4

PhCH CONH-j-S "N )

VIII

J—Vj^ch2oh COOCH(Ph)2 PC15 pyridine

\C

26

PhCH2CONH-j-r IX

/~iVj^XH2Cl COOCH(Ph)2 t

Nal Ξ Ψ

PhCH2CONH-t-f ^ χ COOCH(Ph)2

H3C-nQ

Ψ

PhCH2CONH-j-p | P XI

l ©Λ-1

/J

COOCH(Ph)2 \ désacylation \l· 3 27 » "21-J©

' (+) ^ XII

T - COOCH(Ph) \ 2 CH3 lila1

DCC

Ψ N— c-C0NH——ß

Tr™·^^ \? ®Q VIIa H3cicH3 COOCH(Ph)2 ^OOC(CH3)3 \ CH3

Elimination du groupe protecteur .

N r-C-CONH--<

„ ‘ „2«O

h3c|:ch3 cocP \ COOH CH3 28

Bien que les schémas réactionnels ci-dessus illustrent des modes opératoires à plusieurs étapes appréciés pour la préparation des composés de formule I, il y a lieu de remarquer que d'autres matières de départ et , 5 d'autres modes opératoires peuvent être utilisés pour préparer les composés intermédiaires utilisés dans l'étape clé de chaque schéma réactionnel. Ainsi, dans le schéma réactionnel 1, l'étape clé est la réaction du composé VII avec la N-méthylpyrrolidine. Le composé VII peut lui-10 même être préparé par d'autres procédés. De même, l'étape clé du schéma réactionnel 2 est l'acylation du composé XII avec le composé IV. Les deux composés XII et - IV peuvent être préparés par d'autres modes opératoires.

L'étape clé du schéma réactionnel 3 est la 15 réaction du composé Via avec la N-méthylpyrrolidine. Le composé Via peut lui-même être préparé par d'autres procédés. De même, l'étape clé dans le schéma réactionnel 4 est l'acylation du composé XII avec le composé Ilia'. Les deux composés XII et Ilia' peuvent être pré-20 parés par d'autres modes opératoires.

La présente invention propose un procédé de préparation de composés de formule H-r-C-il-NH-j-S "'h

h„O\ 2 «P'YvvO

«2« S W Î0(P

dans laquelle 2 R est un groupe alkyle à chaîne droite ou à chaîne ramifiée contenant 1 à 4 atomes de carbone, allyle, 2-butényle ou 3-butényle, ou représente un groupe de formule 25 29 R3 — c—R4 l

COOH

dans laquelle R^ et représentent chacun, indépendamment, l'hydrogè ne, le groupe méthyle ou le groupe éthyle, ou 3 bien 3 4 5 R et R pris conjointement avec l'atome de carbone auquel ils sont liés, peuvent représenter un noyau cycloalkylidène contenant 3 à 5 atomes de carbone, et leurs sels non toxiques pharmaceu-tiquement acceptables, leurs esters physiologi-10 quement hydrolysables et leurs produits de sol vatation, procédé qui consiste à faire réagir un composé de formule

0 S

N—r-C-H--NH-|-'h λΛΗ* RA·· ”v COOB1 - dans laquelle R a la définition donnée ci-dessus, 15 B1 est un groupe classique protégeant la fonction carboxyle et 2 B est un groupe classique protégeant la fonction amino, avec la N-méthylpyrrolidine pour * produire un composé de formule \ 30 Ο ε Ν-γ— C-Ü-ΝΗ-|-S ^

«^rvyO

COOB (/Η puis à éliminer tous les groupes protecteurs par des moyens classiques ; ou bien qui consiste à faire réagir un composé de formule

O

/—\Tfi—^—NHn—v // \\k . i XIVa

B2HN^\s/ J~~ \j^CH2I

R3 -tj:—R4 COOB1 COOB3 dans laquelle 5 R 3 et R ^ ont les définitions données ci-dessus, 1 O r B et B sont des groupes classiques protégeant la fonction carboxyle et 2 • B est un groupe classique protégeant la fonction amino, avec la N-méthylpyrrolidine pour produi-f 10 re un composé de formule

v O

N-r-C-Ü-NH-i-S 'N es svAjK JXXkâq ~ R3-<U< COOB1 / ^ COOB1 3 r 31 t / puis à éliminer tous les groupes protecteurs par des moyens classiques.

On conduit la réaction dans un solvant organique non aqueux tel que le chlorure de méthylène, le • 5 chloroforme, l'éther éthylique, l'hexane, l'acétate d'éthyle, le tétrahydrofuranne, 1'acétonitrile etc., ou des mélanges de ces solvants. La réaction est avantageusement conduite à une température allant d'environ -10 à environ +50 C ; on préfère normalement la conduire a la 10 température ambiante. On doit utiliser au moins 1 mole de N-méthylpyrrolidine par mole de composé XIV ou XTVa ; on préfère normalement utiliser un excès d'environ 50 à ' 100 % de N-méthylpyrrolidine.

Des groupes protégeant la fonction carboxyle 13 15 avantageux à utiliser comme groupes B et B dans la réaction ci-dessus sont bien connus de l'homme de l'art et comprennent des groupes aralkyle tels que les groupes benzyle, p-méthoxybenzyle, p-nitrobenzyle et diphénylméthyle (benzhydryle ) ; des groupes alkyle tels 20 que tertio-butyle ; des groupes halogénalkyle tels que 2,2,2-trichloréthyle et d'autres groupes protégeant la fonction carboxyle décrits dans la littérature, par exemple dans le brevet britannique No 1 399 086. On préfère utiliser des groupes protégeant la fonction carboxyle qui 25 sont aisément éliminés par traitement avec un acide. Des groupes protégeant la fonction carboxyle particulièrement appréciés sont des groupes benzhydryle et tertio-butyle.

* Des groupes protégeant la fonction amino qui sont avantageux à utiliser comme groupes B sont égale- 30 ment bien connus dans 1'art antérieur et comprennent le v groupe trityle et des groupes acyle tejls que le groupe chloracétyle. On préconise l'utilisation de groupes protégeant la fonction amino qui sont aisément éliminés par traitement avec un acide, par exemple le groupe trityle. 35 La présente invention propose également un procédé de préparation de composés de formule 32 S-pC-Ü-SH-j-S ^ . J$\> ; * dans laquelle R 2 est un groupe alkyle à chaîne droite ou à chaîne ramifiée contenant 1 à 4 atomes de carbone, allyle, 2-butényle ou 3-butényle, ou 5 représente un groupe de formule R3—C—R4

COOH

dans laquelle R^ et R4 représentent chacun, indépendamment, l'hydrogène, le groupe méthyle ou le groupe éthyle, ou bien R ^et R4 pris conjointement avec l'atome de carbone auquel ils sont liés, peuvent représenter un noyau cycloalkylidène contenant 3 à 5 atomes de carbone, et leurs sels non toxiques pharmaceu- ’ tiquement acceptables, leurs esters physiologi- 15 quement hydrolysables et leurs produits de solvatation, " procédé qui consiste à acyler un composé de formule - H N-,-^

2 1 I P

J, ^ XVI

coob <4 33 ou un dérivé N-silylique de ce composé, formule dans laquelle B est l'hydrogène ou un groupe classique proté geant la fonction carboxyle, avec un dérivé , 5 acylant d'un acide de formule »

N-r-C-COOH

, -OX,

B HN XS DR

dans laquelle 2 B est un groupe classique protégeant la fonction amino et 2 R a la définition donnée ci-dessus, pour produire 10 un composé de formule O s N-v-C-2--NH-<-f ] P --- C00BX (/h3 s· et à éliminer ensuite tous les groupes protecteurs, ou à acyler un composé XVI ou un dérivé N-silylique de ce composé avec un dérivé acylant d'un acide de formule 34

>ς--r— C-COOH

À^K

b2h»'^'s' O

r3-<U< I 3 COOB·3 dans laquelle i 2 B est un groupe classique protégeant la fonction amino, 3 B est un groupe classique protégeant la fonction 5 carboxyle et R3 et représentent chacun, indépendamment, l'hydrogène, le groupe méthyle ou le groupe éthyle, ou bien 3 4 R et R pris conjointement avec l'atome de carbone au-10 quel ils sont liés, peuvent représenter un noyau cycloalcénylidène ayant 3 à 5 atomes de carbone, pour produire un composé de formule U----.-C----^----K’H-|--S "b J0

Ji \K JI

b2hn^\s/ \0 - y J xva

r3-C-K4 C0031 /H

* ’ j 3 C00B3 puis à éliminer tous les groupes protecteurs.

35

Les dérivés acylants de l'acide de formule XVII ou XVIIa comprennent les halogénures d'acide (et notamment le chlorure d'acide), les anhydrides d'acide mixtes (tels que les anhydrides d'acide formés avec l'acide • 5 pivalique ou un halogénoformiate tel que le chloro- formiate d'éthyle) et des esters activés (tels que ceux qui peuvent être formés avec le N-hydroxybenzotriazole en présence d'un agent de condensation tel que le di-cyclohexylcarbodiimide). On peut également conduire 10 l'acylation en utilisant l'acide libre de formule XVII ou XVIIa en présence d'un agent de condensation tel que le dicyclohexylcarbodiimide, le carbonyldiimidazole ou un sel d'isoxazolium. L'expression "dérivé acylant" de l'acide de formule XVII ou XVIIa que l'on utilise dans le 15 présent mémoire désigne l'acide libre lui-même en présence d'un agent de condensation tel que décrit ci-dessus. Le dérivé acylant de l'acide de formule XVII ou XVIIa que l'on préconise est le chlorure d'acide, utilisé avantageusement en présence d'un accepteur d'acide (et 20 notamment d'un accepteur d'acide du type d'une amine tertiaire telle que la triéthylamine, la diméthylaniline ou la pyridine).

Lorsque l'acylation est conduite avec un halo-génure d'acide, il est possible d'utiliser un milieu 25 réactionnel aqueux, mais un milieu non aqueux est préférable. Lorsque des anhydrides d'acide, des esters activés ou l'acide libre en présence d'un agent de condensation 5 sont utilisés pour l'acylation, le milieu réactionnel doit être non aqueux. Des solvants particulièrement ap-30 préciés pour la réaction d'acylation sont des hydrocarbures halogénés tels que le chlorure de méthylène et le chloroforme, mais on peut utiliser des amides tertiaires tels que le diméthylacétamide ou le diméthyl-formamide ainsi que d'autres solvants classiques tels que 35 le tétrahydrofuranne, 1'acétonitrile, etc.

36

On peut conduire la réaction d'acylation à une température d'environ -50 à environ +50°C. Toutefois, on la conduit avantageusement à une température égale ou inférieure à la température ambiante et notamment à une î 5 température d'environ -30 à environ 0°C. Il est habituellement préférable d'acyler le composé de formule XVI avec ' une quantité à peu près stoechiométrique de l'agent acylant de formule XVII ou XVIIa, bien qu'on puisse utiliser un léger excès (par exemple 5 à 25 %) de l'agent lO acylant.

Il est préférable que le composé de formule XVI soit acylé sous la forme de son dérivé N-silylique (lorsqu'on utilise un mélange réactionnel non aqueux). Cette opération est avantageusement conduite in situ par simple 15 addition d'un agent silylant convenable (par exemple le N,0-bistriméthylsilylacétamide) à la solution du composé XVI avant l'addition de l'agent acylant de formule XVII ou XVIIa. On préconise l'utilisation d'environ 3 moles d'agent silylant par mole de composé XVI, bien que cela 20 ne soit pas déterminant. Le composé silylique est aisément éliminé après acylation par l'addition d’eau.

Les agents acylants de formule XVII ou XVIIa, y compris leurs dérivés à fonctions carboxyle et amino protégées, sont connus dans l'art antérieur ou peuvent 25 être préparés par des procédés connus. Ainsi, l'acide (Z)-2-(2-tertio-butoxycarbonylprop-2-oxyimino)-2-(2-tritylamino-thiazole-4-yl)acétique (Ilia) a été préparé » par le mode opératoire général décrit dans le brevet des

Etats-Unis d'Amérique No 4 258 041 et dans la demande de 30 brevet britanique No 2 025 398. Le point de fusion qui y # est mentionné est de 152-156°C (décomposition) mais en répétant la mesure, on a trouvé un point de fusion de 174-175°C (décomposition).

37

Préparation No 1 TrHN'^'S'^ OR2 (Z)-2~méthoxyimino-2-(2-tritylaminothiazole-4-yl)acétate 1 d'éthyle (Ilia)

Un mélange de (Z)-2-hydroxyimino-2-(2-trityl-5 amino-thiazole-4-yl)acétate d'éthyle (II) (5,00 g, 10,9 mmoles) , de CH^I (2,04 ml, 32,8 mmoles) et de K^CO^ (4,54 g, 32,8 mmoles) dans du diméthyl-sulfoxyde (DMSO) anhydre (100 ml) a été agité à la température ambiante pendant environ 16 heures puis versé dans l’eau (250 ml). 2o Le précipité qui s'est formé a été recueilli par filtration, lavé à l'eau et séché en donnant le composé indiqué dans le titre (5,15 g, rendement quantitatif). Point de fusion : 115°C (décomposition).

RMN : <5 CDC13 ppm 1,32 ( 3H, t) , 3,98 ( 3H, s), 4,30 15 (2H, q), 6,42 (1H, s), 7,2 (1H, m) 7,25 (15H, s).

Les composés Illb, IIIc et Illd ont été préparés par le mode opératoire général indiqué ci-dessus, ’ mais en remplacement du iodure de méthyle par l'iodure approprié.

2 38

Composé R rendement p.f. (°C) p.f. (eC) % indiqué dans la littérature 1 5 (1)

Ilia méthyle 100 115° (déc.) env. 120 ° (déc. )

Illb éthyle 67 97-98 * IIIc isopropyle 26 51-55 *

Illd allyle * * * 10 * L'ester a été hydrolysé sans être isolé (1)Tetrahedron, 34, 2233 (1978)

Préparation No 2 jTVk ” i

TrHN,x \ g/ \)j>2 I

i acide (Z)-2-méthoxyimino-2-(2-tritylaminothiazole-4-yl) acétique (IVa) 15 L'ester éthylique Ilia préparé dans la Prépa ration No 1 (6,00 g, 1^,7 mmoles) dans l'éthanol (120 ml) a été traité avec de 1'hydroxyde de sodium 2N (12,7 ml) à la température ambiante pendant environ 16 h. Le pH du mélange réactionnel a été ajusté à 8 par l'addition de 20 neige carbonique en poudre et le solvant a été évaporé sous pression réduite. Le résidu a été dissous dans l'eau (100 m]) et la solution a été acidifiée avec HCl IN à pH 2 * puis extraite à l'acétate d'éthyle (3 x 50 ml). Les ex traits rassemblés ont été lavés avec une solution aqueuse 25 saturée de NaCl, déshydratés et évaporés. Le résidu a été cristallisé dans un mélange d'acétate d'éthyle et d'hexane en donnant 5,56 g (rendement 98 %) du produit indiqué dans le titre, p.f. 138-143°C (décomposition).

39 RMN :iCDC13 ppm 3,89 (3H, s), 6,52 (1H, s), 7,2 (15H, s).

Les composés IVb, IVc et IVd ont été préparés par le mode opératoire général indiqué ci-dessus, s 5 Composé R rendement p.f. p.f. (°C, déc.) % (°C, déc.) indiqué dans la littérature (1) IVa méthyle 98 138-143 env. 140 IVb éthyle 85 140-145 non rapporté 10 IVc isopropyle 85 166-169 env. 170

Illd allyle 66 170-178 env. 170 ς (1)Tétrahédron, 34, 2233 (1978)

Préparation No 3 3-hydroxyméthyl-7-phénylacétamido-3-céphem-4-carboxylate 15 de benzhydryle (VIII)

On a ajouté le sel de sodium de l'acide 7-phénylacétamidocéphalosporanique (5 g, 12,1 mmoles) en une seule portion à une suspension sous agitation d'un tampon au phosphate (pH 7, 162,5 ml) et de son de blé 20 (20 g, état sec) à la température ambiante. On a suivi l'évolution de la réaction par chromatographie en phase liquide sous haute pression jusqu'à ce que l'hydrolyse soit achevée (5 heures). On a filtré la suspension pour enlever le son de blé et on a refroidi le filtrat à 5-25 10°C en vue d'une estérification du produit extrait. On a ajouté du chlorure de méthylène (32 ml) à la solution ’ refroidie, puis une solution 0,5 M de diphényldiazo- méthane dans le chlorure de méthylène (24 ml). On a ensuite ajusté le pH à 3,0 avec de l'acide phosphorique à * 30 28 %. Au bout d'une heure, on a laissé la température du mélange réactionnel s'élever à 20°C. On a ajouté lente-- ment de l'heptane (56 ml) et on a recueilli par filtra tion, à l'état cristallin, le produit résultant indiqué dans le titre. Le rendement du produit indiqué dans le 35 titre a été de 3,0 g (50 %).

40

Préparation No 4 7-amino-3-chlorométhyl-3-céphem-4-carboxylate de benzhydryle (V)

On a ajouté de la pyridine (3,2 g, 40 mmoles) à , 5 une suspension de PCl^. (8,3 g, 40 mmoles) dans (100 ml) et on a agité le mélange pendant 20 minutes à 20°C. On a ajouté au mélange du 3-hydroxy-méthyl-7-phényl-acétamido-3-céphem-4-carboxylate de benzhydryle préparé dans la Préparation No 3 (5,1 g, 10 mmoles) sous 2o agitation à -40°C, en une seule portion. On a agité le mélange à -10°C pendant 15 minutes et on l'a laissé reposer entre -10 et -15°C pendant 7 heures. On a ajouté y à la solution refroidie (-20°C) du propane-1,3-diol (10 ml) et on a laissé reposer le mélange à -20°C pendant 25 16 heures puis on l'a maintenu sous agitation à la température ambiante pendant 20 minutes. La solution résultante a été lavée avec de l'eau glacée (2 χ 20 ml) et une solution aqueuse saturée de NaCl (10 ml), déshydratée sur MgSO^ et concentrée sous vide. Le résidu 20 gommeux (12 g) a été dissous dans un mélange de CHCl^ et de n-hexane (2:1) et soumis à la chromatographie en utilisant une colonne de gel de silice (200 g) et le même solvant comme éluant. Les fractions contenant le composé indiqué dans le titre ont été évaporées sous vide 25 et le résidu a été trituré avec du n-hexane en donnant le produit indiqué dans le titre (2,1 g, 51 %) fondant au-dessus de 110°C (décomposition).

, Spectre infra rouge 3400, 2800, 1785, 1725 cm ^ xEtOH occ , „1% icm qn UV: r~ 265 nm (E, 160) .

max 1cm ** RMN:SDMS°“d6+CDCl3 3,69 (2H, s), 4,43 (2H, s), 5,09 ppm - (1H, d, J = 4,5Hz), 5,24 (1H, d, J = 4,5Hz) , 6,87 (1H, s), 7,3 (10, m).

41

Exemple 1 7- Γ( Z ) -2-méthoxyimino-2- ( 2-aminothiazole-4-yl ) acétamidp] -3- [.( 1-méthyl-l-pyrrolidinium)méthyl] -3-céphem-4-carboxylate (la) * 5 a . 3-chlorornéthy 1-7 j]( Z ) -2-méthoxyimino-2-( 2-tritylamino- thiazole-4-yl)acétamido] -3-céphem-4-carboxylate de benzhydryle (Via1)

Le 7-amino-3-chlorornéthyl-3-céphem-4-carboxylate de benzhydryle obtenu dans la préparation No 4 10 (2,29 g, 5,52 mmoles) dans du CH^CN (57 ml) a été traité U.

avec du bis(triméthylsilyl)acétamide (BSA, 4,09 ml, 16,6 mmoles) à la température ambiante pendant 50 minutes, ce qui a donné une solution claire. On a ajouté à cette solution, une solution de chlorure d'acide que l'on avait 15 préparée à partir d'acide (Z)-2-méthoxyimino-2-(2-trityl-aminothiazole-4-yl)acétique (iVa) (2,04 g, 4,60 mmoles) et de PClg (1,15 g, 5,52 mmoles) dans du chlorure de méthylène (20 ml). Le mélange a été agité à la température ambiante pendant 30 minutes, versé dans de l'eau 20 froide (200 ml) et extrait à l'acétate d'éthyle (3 x 100 ml). Les extraits rassemblés ont été lavés avec une solution aqueuse de chlorure de sodium, déshydratés et évaporés. Le sirop résiduel (4g) a été chromatographié sur une colonne de gel de silice (150 g), l'élution 25 étant effectuée avec des mélanges à 10:1 et à 3:1 de toluène et d'acétate d'éthyle, successivement. Les fractions contenant le composé désiré ont été rassemblées et évaporées en donnant 2,61 g (68 %) de composé Via' sous la forme d'une poudre amorphe.

30 RMN :5CDC13 3,50 (2H, s), 4,02 ( 3H, s), 4,33 (2H,. s), ~ 4,98 (1H, d), 5,87 (1H, q), 6,65 (1H, s), 6,90 (1H, s), 7,3 (25h, m).

i 42 B. 3-iodométhyl-7 \[ Z)-2-méthoxyimino-2-(2-tritylamino-thiazole-4-yl)acétamidcQ -3-céphem-4-carboxylate de benzhydryle (VIXa1)

Un mélange du dérivé 3-chlorométhylique (Via1) 5 (1,50 g, 1,79 mmole) et de Nal (1,34 g, 8,93 mmoles) dans de la méthyl-éthylcétone (30 ml) a été agité à la température ambiante pendant une heure. Après évaporation du solvant, le résidu a été dissous dans de l'acétate d'éthyle (100 ml) et la solution a été lavée avec de 10 l'eau, une solution aqueuse de Na„So0^ et une solution aqueuse de NaCl, déshydratée et évaporée en donnant le composé Vlla' indiqué dans le titre (1,47 g, 89 %) sous la forme d'une poudre amorphe.

RMN : 5CDC13 1 ppm 3,55 (2H, ABq), 4,00 (3H, s), 15 4,25 (2H, s)., 4,97 (lH,d), 5,80 (1H, q), 6,65 (1H, s) , 6,90 (1H, s) , 7,3 (25H, m).

C. 7- Ç( Z)-2-méthoxyimino-2-(aminothiazole-4-yl)acétamido] -3- Ç( l-méthyl-l-pyrrolidinium)méthyl] -3-céphem-4- 20 carboxylate (la)

Un mélange de composé Vlla' (4,5 g, 4,83 mmoles) et de N-méthylpyrrolidine (0,65 ml, 6,28 mmoles) dans Cî^C^ (45 ml) a été agité à la température ambiante pendant 20 minutes. De l'éther (300 ml) a été ajouté au 25 mélange pour séparer le sel quaternaire de la céphalosporine protégée, que l'on a recueillie par filtration et traitée avec de l'acide trifluoracëtique (TFA) à 90 % (40 ml) à la température ambiante pendant 1 heure. Le mélange a ensuite été évaporé au-dessous de 30 20°C sous pression réduite. Le résidu a été trituré avec de l'éther, ce qui a donné le sel de TFA du composé la (2,40 g) que l'on a dissous dans du méthanol (5 ml) et dont on a traité la solution avec une solution IM de 2-éthylhexoate de sodium (SEH) dans l'acétate d'éthyle 35 (8 ml) à la température ambiante pendant 30 minutes.

43

Après l'addition d'acétate d'éthyle (100 ml), le précipité (1,94 g) formé a été recueilli par filtration. L'analyse par chromatographie en phase liquide sous haute pression a montré que le produit brut était pur à 7 % î 5 avec un rapport de 1:8 de l'isomère û à 1'isomèreΔ . La purification du produit par chromatographie en phase liquide sous haute pression a été répétée trois fois (Lichrosorb RP-18, 8 X 300 mm, élution avec du méthanol aqueux à 5 % ou un tampon au phosphate d'ammonium 0,01 M 10 (pH 7,2) contenant 5 % de méthanol pour obtenir 35 mg (1,5 %)du produit indiqué dans le titre, sous la forme d'une poudre incolore. Pureté estimée (par v chromatographie en phase liquide sous haute pression) = 90 %. p.f. = 150°C (décomposition).

15 Spectre infra-rouge :9KBr cm-1 1770, 1660, 1620 _ , , max

Spectre ultra-violet : >tampon au phosphate, pH7 nm (£) 235 (16200), 258 max (15400)

Spectre RMN :ÆD2°ppm 2,31 (4H, m), 3,08 (3H, s), 3,63 20 (4H , m), 4,09 (3H, s), 5,43 (1H, d, J = 4,8 Hz), 5,93 (1H, d), 7,08 (1H, s) .

Exemple 2 7-Û Z)-2-méthoxyimino-2-(2-aminothiazole-4-yl)acétamidol -25 3 [( 1-méthyl-l-pyrrolidinium)méthyll -3-céphem-4- carboxylate (la)

On a ajouté 2,42 g (28,5 mmoles) de 1-méthyl- a pyrrolidine en une seule portion à la température am-* biante à une solution sous agitation de 20,4 g (21,9 30 mmoles) de composé Vlla' dans 150 ml de chlorure de méthylène anhydre. Le mélange a été agité pendant 5 minutes et versé dans 1000 ml d'éther sous agitation énergique pour former un précipité qui a été filtré, lavé à l'éther (5 X 30 ml) et séché sous vide en donnant 19,3 g 35 du produit protégé sous la forme d'une poudre jaune pâle.

44

Spectre infra-rouge cm”* 3400, 1780 (s), 1740 , 1675, 1530

Chromatographie sur couche mince : solvant = éthanol-CHClg (1:3), Rf=0,30 (Rf=0,95 * 5 pour le composé Vlla1)

La substance solide a été dissoute dans 185 ml de mélange à 99:1 d'acide trifluoroacétique et d'eau, agitée pendant 1 heure à la température ambiante et concentrée à environ 30 ml au-dessous de 10°C. Le concentré 10 a été versé dans 1000 ml d'éther sous agitation énergique pour former un précipité qui a été filtré, lavé à l'éther (5 X 40 ml) et séché sous vide en donnant 10,6 g d'une poudre de couleur jaune pâle. La poudre a été dissoute dans 20 ml de méthanol et la solution a été filtrée. On a 15 ajouté au filtrat 45 ml de SEH 0,8 M dans l'acétate d'éthyle. La suspension résultante a été versée dans 400 ml d'acétate d'éthyle et filtrée en donnant 8,08 g d'une substance solide qui consistait en un mélange du composé 2 indiqué dans le titre et de l'isomère Δ correspondant 2 2 2 20 (Δ /Δ =1:8) comme représenté par l'analyse par chromatographie en phase liquide sous haute pression ("Lichrosorb RP-18", 10-15 % de méthanol dans un tampon au phosphate 0,01 M, pH7). Un second essai effectué à partir de 28,9 g (31,0 mmoles) de composé Vlla' a donné 16,0 g du produit 25 brut (Δ /Δ =1:8). L'isolement de l'isomère Δ désiré du produit brut total (24,08 g) par chromatographie préparative en phase liquide sous haute pression (système * 500, Waters Associates, PrepPAK 500/C^g, 5-10 % de CH^OH) a donné 769 mg du composé la.

30 Exemple 3 7- Γ(Z) -2-méthoxyimino-2 ( 2- ( 2-aminothiazole-4-yl) acétamidol- 3-, [( l-méthyl-l-pyrrolidinium)méthylj -3-céphem-4-- carboxylate (la)

On a effectué une série d'essais pour déterminer 35 l'effet du solvant,de sa quantité et de la durée de réaction sur le-ren- 45 3 2 dement en compose la et sur le rapport Δ ! b, dans le produit réactionnel. Le mode opératoire général a été le suivant :

On a ajouté une solution de N-méthylpyrrolidine « 5 (0,01 ml, 0,097 mmole) dans l'éther (0,1 ml) à une sus pension du dérivé 3-iodométhylique Vlla'(45 mg, 0,048 » mmole) dans la quantité indiquée du solvant mentionné, et on a agité le mélange à la température ambiante pendant la période indiquée. Le mélange réactionnel a été dilué à 10 l'éther (5 ml) et le précipité résultant a été recueilli par filtration et mélangé avec du TFA à 90 %. Le mélange a été agité pendant 1 heure et évaporé à sec sous pression réduite, à une température inférieure à 20°C, 3 2 pour obtenir le produit. Le rapportΔ/Δ dans le produit 15 a été déterminé par chromatographie en phase liquide sous haute pression ("Lichrosorb RP-18" ; phase mobile, tampon au phosphate d'ammonium 0,01 M (pH 7,2) contenant 15 % de 3 2 CH^OH ; temps de rétention,Δ 6,60 minutes, Δ 5,56 minutes). Le rendement en produit et le rapport des 3 2 20 isomères Δ /Δ pour chaque essai sont indiqués ci-dessous.

Rapport de

Vlla' (en g)Durée de Rende- 25 No de au solvant réaction ment Rapport 3 / 2 l'essai Solvant {en ml) (min.) (%) Δ 1 2 3 4 5 6 7 8

Cri7Cl, 1:20 15 75 1/8 2 CHjCl2-Hther ll/lüj 1:100 15 . 25 4/1 3 5 Acétate d‘éthyle-éther (1/10) l:ldO 15 27 4/1 4 30 4 Acétate d · éthyle -éther (1/10) 1:100 60 64 2/1 5

Ether 1:100 15 31 b/i 6

Etner 1:100 60 62 5/1 7

Ether 1:60 15 55 5,5/1 8

Ether 1:60 60 82 l/l 46

Exemple 4 7- £( Z)-2-éthoxyimino- 2-(2-aminothiazole-4-yl)acétamido]- 3- [( l-méthyl-l-pyrrolidinium)méthvl1 -3-cëphem'-4-carboxylate (Ib) 5 A. 3-chlorométhyl-7 [(Z)-2-éthoxyimino-2-(2-tritvlamino-thiazole-4-yl)acétamido!-3-céphem-4-carboxylate de . benzhydryle (VIb)

On a ajouté du pentachlorure de phosphore (500 mg)à une solution d'acide (Z) 2-éthoxyimino-2-(2-10 tritylaminothiazole-4-yl)acétique (IVb) (1,095 g, 2,4 mmoles) dans du dichlorométhane (20 ml). Après agitation pendant 1 heure à la température ambiante, le mélange a été ajouté en une seule portion à une solution refroidie à la glace du composé V (1,083 g, 2,4 mmoles) et de BSA 15 (1 ml) dans du dichlorométhane (20 ml). Après agitation pendant 1/2 heure, le mélange réactionnel a été versé dans une solution aqueuse à 10 % de bicarbonate de sodium (200 ml) et extraite au chloroforme (100 ml). L'extrait a’ été lavé à l'eau, déshydraté sur du sulfate de magnésium 20 et évaporé sous pression réduite.

Le résidu a été chromatographié sur une colonne de gel de silice. L'élution au chloroforme a donné le composé VIb sous la forme d'une poudre amorphe, en quantité de 1,76 g (86 %).

25 RMN ; <5CDCl3 ppm 1,40 ( 3H, t, CH2CH3) , 3,53 (2H, ABq, 2-CH2) , 4,37 (2H, s, -CH2C1), 4,60 (2H, q, -CH2CH3) , 4,90 (1H, d, 6—H), 5,89 (1H, d, 7-H), 6,88 (1H, s), (H de thiazole), 6,91 (1H, s, (CH de benzhydryle) 30 B. 7 [(Z)-2-éthoxyimino-2-(2-tritvlamindthiazole-4-yl)acétamidoj-3-iodométhyl-3-céphem-4-carboxylate de diphénylméthyle(Vllb)

Un mélange de composé VIb (1,07 g, 1,25 mmoles) et de Nal (562 mg, 2,75 mmoles) dans l'acétone (20ml) a 35 été agité pendant 1 heure. Le mélange a été filtré et le 47 filtrat a été versé dans de l'eau et extrait à l'acétate d'éthyle. La phase organique a été lavée successivement avec une solution aqueuse à 5 % de Na2S2C>3, de l'eau et une solution aqueuse saturée de NaCl, déshydratée sur du ï 5 sulfate de magnésium et évaporéeen donnant 1,04 g (89 %) du composé Vllb.

RMN: ÔCDC13PPm 3,55 (2H, q, 2-CH2), 4,27 ( 2H, s, CH2-I } 5,02 (1H, d, 6-H), 5,87 (1H, d, 7-H), 6,68 (1H, s,H du noyau de thiazole), 6,93 (1H, s, 10 (CH de benzhydryle) C. 7 [( Z ) -2-éthoxyimino-2- ( 2-aminothiazole-4-yl ) acétamido]- 3-E(l-méthyl-l-pyrrolidinium)méthyll-3-céphem-4-carboxylate (Ib)

Un mélange du composé Vllb (333 mg, 0,35 15 mmole) et de N-méthylpyrrolidine (60 mg, 0,7 mmole) dans CH2C12 (5 ml)a été agité pendant 1/2 heure à la température ambiante puis évaporé sous vide. Le résidu a été lavé à l'éther et dissous dans du TFA aqueux à 90 %.

Après repos pendant 1/2 heure à la température ambiante, 20 le mélange a été concentré sous pression réduite. De 1'éther a été ajouté au concentré pour séparer le produit quaternisé qui a été recueilli par filtration et dissous dans une petite quantité de méthanol. La solution a été chromatographiéesur une colonne de HP-2 (40 ml).

25 L'élution avec du méthanol aqueux à 30 /^suivie d'une lyophilisation,a donné 0,062 g d'un mélange des isomères 2323 Δ et Δ (δ :Δ = 5:1). Le mélange a été purifié par * chromatographie en phase liquide sous haute pression ("Lichrosorb RP-18, 8 x 300 mnii 15 % de méthanol) et -3 30 l'isomèreΔ (Ib) désiré a été isolé sous la forme d'une poudre jaune pâle en quantité de 4,9 mg (2,7 %).

Spectre ultra-violet :Xta,nPon au phosphate, pH 7 235 max (15000),258 (14000) 48 Résonance magnétique nucléaire : 6 D2° ppm 1,43 (3H, t), 2,33 (4H, m), 3,10 (3H, s, 3,64 (4H, m), 4,36 (2H, q) , 5,44 (1H, d), 5,95 (1H, d), 7,08 (1H, s) .

* 5 Exemple 5 7-Γ(Z)-2~(2-propoxyimino)-2-(2-aminothiazole-4- yl) acétamido] -3- [( l-méthyl-l-pyrrolidinium)méthyi] -3- céphem-4-carboxylate (le) A. 3-chlorométhyl-7 Γ(Z)-2-(2-propoxyimino)-2-(2-10 tritylaminothiazole-4-yl)acétamido] -3-céphem-4-carboxylate de diphénylméthyle (Vie)

Un mélange d'acide (Z)-2-(2-propoxyimino)-2-(2-tritylamino-thiazole-4-yl)acétique (IVc) (707 mg, 1,5 mmole ) et de pentachlorure de phosphore (344 mg, 1,65 15 mmole) dans du dichlorométhane (14 ml) a été agité à la température ambiante pendant 1 heure et versé dans une solution du composé V (677 mg, 1,5 mmole) et de BSA (1,1_ ml, 4,5 mmoles) dans du dichlorométhane (15 ml). Le mélange réactionnel a été agité à la température ambiante 20 pendant 30 minutes, dilué à l'acétate d'éthyle (200 ml) et à l'eau (3 X 100 ml), déshydraté sur du sulfate de sodium et évaporé en donnant 1,4 g (100 %) de composé Vie.

KB37 “1

Spectre infra-rouge : v ce 25 3360, 3020, 3060, 2960, 1785, 1725, 1680, 1520, 1500, 1450, 1375, 1300, 1250, 1160, 1090, 1060, 1010, 990, 840, 740, 700.

’ Spectre ultra violet : AEt0Hnm(6.) 240 (24600), 260 (20700) * max 30 Résonance magnétique nucléaire : CDCl δ 3 ppm 1,35 (6H, d, J=6Hz) , 3/50 (2H, s), 4,35(2H, s), 4,58 (1H, m, J=6Hz), 5,00 (1H, d, J=4,5Hz), 5,91 (1H, d-d, J=4,5$9Hz;d par D20 J=4,5Hz), 6,68 (1H, s), 6,88 (1H, s), 7,25 (25H, s).

49 B. 3-iodométhyl-7- [( Z)-2-(2-propoxyimino)-2-(2-trityl-aminothiazole-4-ylacétamido3-3-céphem-4-carboxylate de diphénylméthyle (Vile)

Un mélange du composé Vie (500 mg, 0,55 mmole) * 5 et d'iodure de sodium (248 mg, 1,66 mmole) dans l'acétone (10 ml) a été agité à la température ambiante pendant 50 * minutes. Après évaporation, le résidu a été dissous dans de l'acétate d'éthyle (15 ml, la solution a été lavée successivement avec une solution aqueuse à 10 % de thio- 10 sulfate de sodium (10 ml), de l'eau (10 ml) et une solution aqueuse de NaCl (10 ml), déshydratée sur du sulfate de sodium et évaporée en donnant 494 mg (90 %) du composé (Vile) indiqué dans le titre.

Spectre infra rouge : KBr -1 15 v CItl 3360, 3040 , 3020, 2960, 1785, 1720, 1680, max 1600, 1520, 1500, 1450, 1370, 1300, 1230, 1150, 1115, 1080, 990, 900, 840, 750, 700,

Spectre ultra violet : λ Et0H nm (£)240 (24900), 260 (19400). max 11111 K 1 20 Spectre de résonance magnétique nucléaire : 6CDC13 ppm 1,30 (6H, d, J=6Hz) , 3,37^3,70 ( 1H chacun, d, J =16Hz), 4,22 (2H, s), 4,55 (1H, m, J = 6Hz), 4,95 (1H, d, J=4,5 Hz), 5,83 (1H, d-d, J=4,5Ç9Hz; d parE^O) , 6,66 (1H, s), 6,87 25 (1H, s), 7,25 (25 (25H, s).

C. 7-C(Z)-2-(2-propoxyimino)-2-(2-aminothiazole-4-yl) acétamidol-3-[(l-méthyl-l-pyrrolidinium)méthylj -3-céphem-4-carboxylate (le)

Un mélange du composé Vile (545 mg, 0,55 mmole) et de 1-méthylpyrrolidine (70 mg, 0,82 mmole) dans du dichlorométhane (10 ml) a été agité à la température ambiante pendant 30 minutes et dilué à l'éther (100 ml). Le précipité résultant a été recueilli par filtration.

50

Une solution du précipité dans du TFA à 90 % (4,5 ml) a été agitée à la température ambiante pendant 30 minutes et évaporée sous vide. Le résidu a été trituré avec de l'éther en donnant 317 mg du produit brut qui a été ’ 5 chromatographie sur une colonne de HP-20 (50 ml), élue avec de l'eau (500 ml) et du méthanol à 30 % (500 ml).

L'éluat méthanolique à 30 % a été concentré et lyophilisé 2 3 2/ en donnant 109 mg d'un mélange des isomèresa et a (δ Δ = 6/1), dont 100 mg ont été purifiés par chromatogra-10 phie en phase liquide sous haute pression ("Lichrosorb RP-18, MeOH à 15 %) en donnant 5 mg (3 %) du composé le désiré indiqué dans le titre.

Spectre ultra violet : λ -tamP°n a PH 7 nm( )236 (15100), 252 (14600) max 15 Spectre de résonance magnétique nucléaire : ôD2° ppm 1,42 (6H, d, J=6Hz), 2,33 (4H, s), 3,10 (3H, s), 3,65 (4H, s), 3,838*4,23 (1H chacun, d, J=17Hz), 5,45 (1H, d, J=4,5Hz), 5,95 (1H, d, J=4,5Hz), 7,05 (1H, s).

20 Exemple 6 Z) -2-allyloxyimino-2- ( 2-aminothiazole-4-yl) acétamidoj-3-C( l-méthyl-l-pyrrolidinium)méthyl!l -3-céphem-4-carboxylate (Id) A. 7— C(Z)-2-allyloxyimino-2-(2-tritylaminothiazole-4-25 yl)acétamidoj-3-chlorométhyl-3-céphem-4-carboxylate de benzhydryle (VId)

On a ajouté du BSA (1,1 ml, 4,5 mmoles) à une * suspension du composé V (1,35 g, 3 mmoles) dans du chlorure de méthylène (20 ml), et on a agité le mélange 30 pendant 30 minutes à la température ambiante jusqu'à ce qu'il devienne une solution limpide. Un mélange d'acide (Z)-2-allyloxyimino-2-(2-tritylaminothiazole-4-yl)-acétique (IVd) (1,40 g, 3,0 mmoles) et de pentachlorure de phosphore (690 mg, 3,3 mmoles) dans du chlorure de 35 méthylène (20 ml) a été agité pendant 15 minutes à la 51 température ambiante et versé en une seule portion dans la solution du composé V triméthylsilylé. Le mélange a été agité pendant 20 minutes à la température ambiante et dilué avec de l'acétate d'éthyle (200 ml), lavé avec du - 5 bicarbonate de sodium aqueux et de l'eau, déshydraté et évaporé sous pression réduite. Le résidu huileux a été purifié par chromatographie sur colonne de gel de silice (Wako-gel, C-200, 30 g). La colonne a été éluée avec du chloroforme et les fractions contenant le produit 10 désiré ont été rassemblées. Par évaporation sous pression réduite, on a obtenu le composé indiqué dans le titre (VId) sous la forme d'une poudre amorphe ; rendement 2,32 g (89 %), Point de fusion 100-115°C (décomposition).

Spectre infra-rouge : TCR*r —1 15 cm 3990, 1790, 1730, 1680, 1530, 1380, 1250, maX 1160, 1020

Spectre de résonance magnétique nucléaire 6CDC13 ppm 3'50 (2H' 2"H)' 4'32 (2H' s' 3“CH2)' 4'6 6,1 (7H, m, CH2CH=CH2 et 6,7-H), 6,70 (1H, 20 s, H de thiazole), 6,90 (1H, s, Ph2CH), 7,1- 7,6 (30H, m, protons de phényle).

Analyse : • calculé pour C^qH^qN^Oç-S^I . l/SCHCl^ : C % H % N % S % Cl % ’v 25 64,05 4,45 7,73 7,08 7,82 trouvé : 64,13 4,61 7,50 6,85 7,55 63,99 4,64 7,30 6,85 7,46 52 B. 7- C(Z)-2-Allyloxyimino-2-(tritylaminothiazole)-4-yl) acétamido]] -3-iodométhyl-3-céphem-4-carboxylate de benzhydryle (Vlld)

Un mélange du composé VId (2,30 g, 2f65 mmoles) 5 et d'iodure de sodium (2 g, 13,3 mmoles) dans l'acétone (15 ml) a été agité pendant 1 heure à la température anbian-te puis évaporé souspression réduite. Une solution du résidu huileux dans l'acétate d'éthyle (200 ml) a été lavée avec du thiosulfate de sodium à 10 % et de l'eau et évaporée 2o sous pression réduite en donnant le composé Vlld sous la v forme d'une poudre amorphe qui a été utilisée dans l'étape suivante sans autre purification. Rendement 2,52 g (99%).

T C. 7 — C(Z)-2~Allyloxyimino-2-(2-aminothiazole-4-yl)acétamidoj- 3-[( l-méthyl-l-pyrrolidinium)méthyî|-3-céphem-4-carboxy-15 late (Id)

Un mélange du composé Vlld (478 mg, 0,5 mmole) et de N-méthylpyrrolidine (0,05 ml, 0,5 mmole) dans du chlorure de méthylène (5 ml) a été agité pendant 20 mi- * nutes à la température ambiante et dilué avec de l'éther 2o (50 ml) pour faire précipiter le produit quaternisé (rendement 500 mg). Un mélange du produit quaternisé et de TFA (2 ml) a été laissé au repos à la température ambiante pendant 1 heure et demie et dilué avec de l'éther pour précipiter le sel de TFA brut du produit (rendement 25 265 mg) qui a été chromatographié sur une colonne de HP-20 (1,8 x 18 cm). La colonne a été éluée avec de l'eau et du méthanol aqueux à 30 %. L'éluat méthanolique a été évaporé sous pression réduite et le résidu a été lyophilisé « en donnant une poudre amorphe (rendement 124 mg) qui con- ·? . 3q tenait le produit désiré (17 %) et l'isomère Δ correspondant (83 %). Le mélange a été purifié par chromatogra-phie en phase liquide sous haute pression (Lichrosorb RP-18; NH4H2P04 Ο,ΟΙΜ (pH 7) : CH3OH=85:15). L'éluat a été acidifié à pH 3 avec de 11 acide chlorhydrique dilué 35 et chromatographié sur une colonne de HP-20 (1,8 x 10 cm).

53

La colonne a été éluée avec de l'eau puis avec du inéthanol aqueux à 30 %. L'éluat méthanolique a été évaporé sous pression réduite et le résidu a été lyophilisé en donnant le composé (Id) indiqué dans le titre, sous la forme . 5 d'une poudre amorphe (rendement 13 mg, 5,1 %). P.F. 155°C

(décomposition).

_ , . _ KBr -i » Spectre infra-rouge :v cm max • 3600-2800, 1770, 1670, 1610, 1530, 1200.

^ Spectre ultra-violet :χ ^amPon a ^ max 10 nm(s) 235 (16600), 253 (15600).

Résonance magnétique nucléaire :6D2®ppm 2,1-2,5 (4H, m, H de pyrrolidine), 3,10 (3H, s, NCH3), 3,4-3,8 (4H, m, H de pyrrolidine), 5,95 (1H, d, 4Hz, -H), 15 7,10 (1H, s, H de thiazole).

Exemple 7 7-^2- (2-Aminothiazole-4-yl) - (Z) -2- (2-carboxyprop-2-oxyimino)— acétamidoJ-3- (1-méthyl-l-pyrrolidinium)méthylJ-3-céphem- 4-carboxylate (le) 20 A. 3-Chlorométhyl-7- Ç(2)-2-(2-t-butoxycarbonylprop-2-oxyimino-2-(2-tritylaminothiazole-4-yl)acëtamidoj-3-céphem- 4-carboxylate de benzhydryle (Va)

Mode opératoire 1

Un mélange d'acide (Z)-2-(2-t-butoxycarbonyl-* 25 prop-2-oxyimino)-2-(2-tritylaminothiazole-4-yl)acétique . (Ilia') (1,94 g, 3,6 mmoles), de DDC (742 mg, 3,6 mmoles) et de N-hydroxybenzotriazole (486 mg, 3,6 mmoles) dans du tétrahydrofuranne (THF) (45 ml) a été agité à la température ambiante pendant 45 minutes, période pendant laquelle 30 ia dicyclohexylurée s'est séparée. La dicyclohexylurée a 54 été enlevée par filtration et le filtrat a été mélangé avec le composé V (1,5 g, 3,6 mmoles). Le mélange a été agité pendant la nuit à la température ambiante puis évaporé sous vide. L'huile résiduelle a été dissoute dans du . 5 chloroforme (20 ml), lavée avec une solution aqueuse sa turée de bicarbonate de sodium et une solution aqueuse - saturée de chlorure de sodium, déshydratée sur du sul fate de magnésium et évaporée à sec. Le résidu (3,9 g) a été dissous dans un mélange de n-hexane et de CHCl^ (1:2) 10 et la solution a été chargée sur une colonne de gel de ’i silice (40 g) en utilisant le même mélange de solvants.

Les fractions contenant le composé indiqué dans le titre ont été évaporées sous vide en donnant 1,3 g (39 %) du composé Va fondant au-dessus de 100°C (en se décomposant).

15 Spectre infra-rouge : cm"·^ 3990, 1790, 1715,1690 max

Spectre ultra-violet :

TütOH

λ nm 240 (E** 280), 265 (E** 190).

max 1nm i icm 1cm Résonance magnétique nucléaire : gCDClg ppm 1,45 (9H, s), 1,63$ 1,66 20 (6H, s chacun), 3,49 (2H, large s), 4,34 (2H, s), 4,96 (1H, d, J=4,5Hz), 5,90 (1H, d-d, J=4,5^7.5), 6,66 (1H, s), 6,86 (1H, s), 7,0-7.5 (25H, m), 8,23 (1H, d, J=7,5Hz).

“ 25 Mode opératoire 2 r Une solution du composé V (1,86 g, 4,49 mmoles) dans CH^CN (46,5 ml) a été traitée avec du BSA (3,33 ml, 13,5 mmoles) à la température ambiante pendant 50 minutes en donnant une solution claire. On a ajouté à la solution 30 une solution de chlorure d'acide que l'on avait préparée à 55 partir du composé Ilia' (2,56 g, 4,49 mmoles) et de PC1,.

(1,12 g, 5,38 mmoles) dans du chlorure de méthylène (26 ml). Le mélange a été agité à la température ambiante pendant 30 minutes, versé dans de l'eau froide (100 ml) Ä 5 et extrait à l'acétate d'éthyle (3 x 50 ml). Les extraits rassemblés ont été lavés avec une solution aqueuse de *

NaCl, déshydratée et évaporée. Le sirop résiduel (5g) a été chromatographie sur une colonne de gel de silice (100 g) par élution avec un mélange à 10:1 de toluène et 10 d'acétate d'éthyle. Les fractions contenant le composé

"V

désiré ont été rassemblées et évaporées en donnant 2,84 g (65 %) de composé Va.

B. 7- L(Z) -2- (2-t-Butoxycarbonylprop-l-oxyimino) -2- (2-tri-> tylaminothiazole-4-yl) acétamido.-] -3-iodométhyl-3-céphem-4-15 carboxylate de benzhydryle (Via)

Un mélange de composé Va (500 mg, 0,53 mraole) et de Nal (240 mg, 1,6 mmole ) dans l'acétone (3 ml) a été agité pendant 2 heures à la température ambiante puis évaporé sous vide. On a ajouté au résidu 20 ml de 2Q CH2C12 et 10 ml d'eau. La phase organique a été lavée avec une solution à 10 % en poids/volume de thiosulfate de sodium (5 ml) et du chlorure de sodium aqueux (5 ml), déshydraté sur MgSO^ et évaporé à sec en donnant 540 mg (90 %) de composé Via sous la forme d'une poudre amorphe 25 fondant à 106°C (décomposition).

Spectre infrarouge ; vKBr cm-1 3350, 1790, 1690.

max «

Spectre ultra-violet ; \ EtOH nm 340 (e^° 270), 3 o max 1 cm 265 (E1% 190).

1 cm CDC1 Résonance magnétique nucléaire î 6 3 ppm 1,44 (9H,s), 1,65 (6H,s), 3,54 (1H), 35 4,28 (2H,s), 4,98 (lH,d , 56 J=4,5Hz), 5,85 (1H, d-d, J=4,5 $ 7,5Hz), 6,70 (1H, s), 6,90 (1H, s), 7,1-7,5 (25H,m).

C. 7-/2-(2-aminothiazole-4-yl)-(2)-2-(2-carboxyprop-2-oxyiroino) -acétamido/-3-/ (l-méthyl-l-pyrrolidinium) méthyl/-5 3-céphem-4-carboxylate (le) . On a laissé reposer à la température ambiante pendant 30 minutes, un mélange du dérivé iodomëthyligue Via (538 mg, 0,51 mmole) et de N-méthylpyrrolidine (0,079 ml, 0,076 mmole) dans du chlorure de méthylène (10,8 ml)fpuis > 10 on l'a dilué avec de l'éther (80 ml). Le précipité qui s'est formé a été recueilli par filtration et lavé à l'éther en donnant 420 mg du produit quaternisé qui a été débarrassé du groupe protecteur avec de l'acide trifluor-acétique à 90 % (TFA) (4,2 ml) à la température ambiante 15 pendant une heure. Le mélange réactionnel a ensuite été évaporé à sec. On a ajouté de l'éther au résidu pour obtenir le sel de TFA brut du composé la (245 mg, rende- -ment quantitatif) qui consistait en un mélange à 1:4 des isomères A3 et û2. Le produit brut a été soumis à une purifica-20 tion par chromatographie en phase liquide sous haute pression /Lichrosorb RP-18, 4 x 300 mm, ëlution avec un tampon au phosphate d'ammonium 0,01 M (pH 7,0) contenant 10 % de CH^OH/. La fraction contenant le produit désiré a été recueillie et évaporée à un faible volume. Le concen-25 tré a été ajusté à un pH d'environ 2 par l'addition de HCl 1 M et il a été chargé sur une colonne de HP-20 (2 x 15 cm) pour enlever le sel inorganique. La colonne a « été lavée à l'eau (1000 ml) et éluée avec du méthanol à 30 %, L'éluant a été évaporé et le produit a été lyophi-30 li-sé en donnant 21 mg (10 %) du composé (le) indiqué dans U· le titre, sous la forme d'une poudre incolore. P.F. 160°C (décomposition).

Spectre infrarouge : vKBr cm ^ 3400, 1775, 1610.

max 57 spectre ultra-violet , λ tamP'on au Phosphate, max 237 (15700) , 257 (155500).

Résonance magnétique nucléaire : 6 D2^ ppm 5 1,65 (6H,s), 2,3 (4H,m) , 3,09 (3H,s), 3,6 (4H,m) , 4,0 (2H,m) , 5,44 (1H, d, J=4,8Hz), 5,94 (lH,d), 7,15 (lH,s).

EXEMPLE 8 > On a suivi le mode opératoire général de 10 l'exemple 7, à la différence qu'on a remplacé l'acide ? (Z)-2-(2-t~butoxycarbonylprop-2-oxyimino)-2-(2-trityl- aminothiazole-4-yl)acétique par une quantité équimolaire des acides suivants : acide (Z)-2-(t-butoxycarbonylmêthoxyimino)-2-(2-tritvl-15 aminothiazole-4-yl)acétique acide (Z)-2-(1-t-butoxycarbonyléthoxyimino)-2-(2-trityl- 1 aminothiazole-4-yl)acétique acide (Z)-2-(2-t-butoxycarbonylbut-2-oxyimino)-2-(2-tritylaminothiazole-4-yl)acétique 20 acide (Z)-2-(3-t-butoxycarbonylpent-3-oxyimino)-1-(2-tritylaminothiazole-4-yl)acétique, acide (Z)-2-(1-t-butoxycarbonylcycloprop-l-oxyimino)-2-(2-tritylaminothiazole-4-yl)acétique, acide (Z)-2-(1-t-butoxycarbonylcyclobut-l-oxyimino)-2-25 (2-tritylaminothiazole-4-yl)acétique, et acide (Z)-2- (1-t-butoxycarbonylcyclopent-l-oxyimino)-2-(2-tritylaminothiazole-4-yl)acétique, et on a produit respectivement les composés suivants : 7-/2- (2-aminothiazoleT14-yl) - (Z) -2- (carboxyméthoxyimino) 30 acétamido/--3-/ (1-méthyl-l-pyrrolidinlum) méthyl/-3-céphem- . 4-carboxylate, 7-/2-(2-aminothiazole-4-yl)-(Z)-2-(1-carboxyëthoxyimino) acëtamido/-3 -/ ( 1 -mëthyl-1 -pyrrolidinium) méthyl/-3-céphem-4-carboxylate, 58 7-/2- (2-aininothiazole-4-yl) - (7,)-2- (2-carboxybut-2-oxyimi.no) -acétamido/-3-/ (1-méthyl-l-pyrrolidinium) methy3./-3-céphem-4-carboxylate, 7-/2-(2-aminothiazole-4-yl)-(Z)-2-(3-carboxypent-3-oxy- . 5 imino)-acétamido/-3-/(1-méthyl-l-pyrrolidinium)méthyl/- 3-céphem-4-carboxylate, ' 7-/2-(2-aminothiazole-4-yl)-(Z)-2-(1-carboxycycloprop-l- oxyimino)-acëtamido/-3-/(1-mêthyl-l-pyrrolidinium) méthyJL/-3-céphem-4-carboxylate, 10 7-/2-(2-aminothiazole-4-yl)-(Z)-2-(1-carboxycyclobut-l- oxyimino)acëtamido/—3-/(1-méthyl-l-pyrrolidinium)méthyl/-3-cëphem-4-carboxylate, et - 7-/2-(2-aminothiazole-4-yl)-(Z)-2-(1-carboxycyclopent-l- oxyimino) acëtamido/-3-/ (1-méthyl-l-pyrrolidinium) méthyl/-15 3-céphem-4-carboxylate, respectivement. 1

Claims (10)

59

1 Jl 1 Γ Θ/"", XVa bhnA,s/ Xj, ^ H2-N R3-Ç-R COOB1 / I 3 CH3 COOB J 65 puis à éliminer tous groupes protecteurs par des moyens classiques.

1. Composés caractérisés en ce qu'ils répondent à la formule : 8 N-C-C-C-NH-I-r η dans laquelle R1 est l'hydrogène ou un groupe classique / 5 protégeant la fonction amino et R est ion groupe alkyle à chaîne droite ou à chaîne ramifiée contenant 1 à 4 atomes de carbone, un groupe allyle, 2-butényle ou 3~ butényle ou un groupe de formule :

2. Le 7-/(Z) -2-méthoxyimino-2·^ (2-aminothiazole- 4-yl) acétamido/-3-/(l-méthyl-l-pyrrolidinium) -méthyl/-3- 20 céphem-4-carboxylate, le 7-/'(Z) -2-éthoxyimino-2^(2-amino-thiazole-4-yl)acétamido/~3-(l-méthyl-l-pyrrolidinium)-méthyl/-3-céphem-4-carboxylate, le 7-/Tz)-2-(2-propoxy-imino)-2-(2-aminothiazole-4-ylacétamido7_3-(1-méthyl-l-pyrrolidinium)méthyl}-3-céphem-4-carboxylate, le 7-/(Z)- 60 2-allyloxyimino-2- (2-aminothiazole-4-yl) -acétamido/-3- ( 1 -méthy1-1 -pyrrolidinim)méthyl7-3-céphem-4~carboxylate ou un sel non toxique pharmaceutiquement acceptable ou un produit de solvatation de ces composés ou le 7-/2-(2-aminothiazole-4-yl)-(Z)-2-(2-carboxyprop-2-oxydiriino) * 5 acétaMdo7-3-/Tl -méthy 1-1 -pyrrolidinium) méthyl7-3-céphem-4-carboxylate ou un sel non toxique pharmaceutiquement acceptable ou un ester physio- » logiquement hydrolysable ou un produit de solvatation de ce composé suivant la revendication 1.

3 I 4 R3—C—R4 COOH 64 3 4 dans laquelle R et R représentent chacun, indépendamment, l'hydrogène, le groupe méthyle ou le groupe éthyle, ou 3 4 bien R et R peuvent former, conjointement avec l'atome de carbone auquel ils sont liés,un noyau cycloalkylidène . 5 contenant 3 à 5 atomes de carbone, et de leurs sels non ? toxiques pharmaceutiquement acceptables, leurs esters » physiologiquement hydrolysables ou leurs produits de solvatation, procédé caractérisé en ce qu'il consiste à faire réagir un composé de formule : r. N-rr-C-6-NH-S ^ // ^\Î! \ f I xiv b2hn/\s/ \qr2 ÿ ZU2I n COOB1 π s N--r-C-Ö-Mp—_\ , y/Vk i . XIVa· p3_Lr4 1 R P K COOB • 3 COOB·5 2 3 4 10 dans laquelle R , R et R ont les définitions données 1 3 ci-dessus, B et B sont des groupes classiques protégeant 2 la fonction carboxyle, B est un groupe classique protégeant la fonction amino, avec la N-méthylpyrrolidine pour produire un composé de formule N-rC-Ü-NH-i-S ^ J9 COOB1 ou O ^ 3 N--r-C-Ü-NH-i-"N jp

3 I 4 R3—C—R4 COOH * 3 4 dans laquelle R et R représentent chacun, indépendamment, , l'hydrogène, le groupe méthyle ou le groupe éthyle, ou 3 4 bien R et R , pris conjointement avec l'atome de carbone auquel ils sont liés, peuvent représenter un noyau 5 cycloalkylidène contenant 3 à 5 atomes de carbone, ou d'un sel non toxique pharmaceutiquement acceptable, d'un ester physiologiquement hydrolysable ou d'un produit de solvatation de ce composé, procédé caractérisé en ce qu'il consiste ä acyler un composé de formule /S. H2NT-f η p I xvi coob1 üj 10 ou iin dérivé N-silylique de ce composé, formule dans laquelle B"*" est l'hydrogène ou un groupe classique protégeant la fonction carboxÿLe,avec vin dérivé acylant d'un acide de formule N-χ-Ç-COOH // XVII ou b’hAs/ V N-r-C-COOH O XVIIa R3- :-B4 :oob3 2 63 dans laquelle B est un groupe classique protégeant la 3 fonction amino, B est un groupe classique protégeant la 3 4 fonction carboxyle et R et R ont les définitions données ci-dessus, pour produire un composé de formule N-r-C-Ü-NH-i-S 'N p) /¾ Π b2hn^V s / \or2 J H2-N 1 xv coob1 ou B2nr\s) \ r3-c-r4 coob1 /„ I 3 -3 COOB-3 5 et à éliminer ensuite tout groupe protecteur.

3. Composition antibactérienne, caractérisée en ce qu’elle 10 comprend une quantité efficace du point de vue antibactérien d'au-iroins un composé suivant la revendication 1, de préférence le 7-/Tz) -2-méthoxy-imino-2- (2-aminothiazole-4-yl) -acétamidc7-3-/fl-méthy 1-1 -pyrrolidinium) -ræthyl7-3-céphem-4-carboxylate ou un sel non toxique pharmaceutiquement acceptable ou un produit de solvatation de ce composé et un excipient 15 pharmaceutique inerte.

3 I 4 R3—C—‘R4 COOH 3 4 10 dans laquelle R et R représentent chacun, indépendamment, l'hydrogène, le groupe méthyle ou le groupe éthyle, ou 3 4 bien R et R peuvent former, conjointement avec l'atome de carbone auquel ils sont liés, un noyau cyclo-alkylidène contenant 3 à 5 atomes de carbone, ce composé existant 15 également sous la forme d'un sel non toxique, pharmaceuti-quement acceptabletou d'un ester physiologiquement hydroly- * sable ou d'un produit de solvatation.

4. Composition antibactérienne sous la forme posologique unitaire, caractérisée en ce qu'elle contient environ 50 à environ 1500 mg d' au moins un composé suivant la revendication 1 et un excipient pharmaceutique inerte, le composé étant de préférence le 7-/TZ)-2- 20 méthoxyimino-2- (2-aminothiazole-4-yl) -acétamido7-3-/_ ( 1 -méthy 1-1 -pyrro lidinium) méthyl-3-céphem-4-carboxylate ou un sel non toxique pharmaceutiquement acceptable ou un produit de solvatation de ce composé.

5. Composition antibactérienne active contre des bactéries Gram-négatives, caractérisée en ce qu'elle 25 comprend une quantité efficace du point de vue antibactérien d'au moins un composé suivant la revendication 1, * dans lequel R1 a la définition donnée dans la revendi- 3 4- cation 1 et R et R représentent chacun, indépendamment, % l’hydrogène, le groupe méthyle ou le groupe éthyle, ou • 3 4 30 bien R et R peuvent former, conjointement avec l'atome u ' de carbone auquel ils sont liés, un noyau cycloalkyli- ~ dène contenant 3 à 5 atomes de carbone, ou un sel non toxique pharmaceutiquement acceptable, un ester physiologiquement hydrolysable ou un produit de solvatation de 61 ce composé et un excipient pharmaceutique inerte, le composé étant de préférence le 7-/2-(2-aminothiazole-4-yl) - (Z) -2- (2-carboxyprop-2-oxyimino) acét ami do/--3-/ (1-méthyl-3-/(1-méthyl-l-pyrrolidinium)méthyl/-3-céphem-4- * 5 carboxylate ou un sel non toxique pharmaceutiguement acceptable, un ester physiologiquement hydrolysable ou un produit de solvatation de ce composé.

6. Composition antibactérienne active contre des bactéries Gram-négatives sous la forme posologique 10 unitaire, caractérisée en ce qu'elle comprend environ 50 w à environ 1500 mg d'au moins un composé suivant la revendication 1, dans lequel R1 a la définition donnée - dans la revendication 1 et R^ et R^ représentent indé pendamment l'hydrogène, le groupe méthyle ou le groupe - 3 4 15 ethyle ou bien R et R peuvent former, conjointement avec l'atome de carbone auquel ils sont liés, un noyau cycloalkylidène contenant 3 à 5 atomes de carbone, de préférence le 7-/2-(2-aminothiazole-4-yl)-(Z)-2-(2-carboxy-prop-2-oxyimino) acétamido7-3-/(1-méthyl-l-pyrrolidinium) 20 méthyl/-3-cëphem-4-carboxylate ou un sel non toxique phar-maceutiquement acceptable ou un ester physiologiquement hydrolysable ou un produit de solvatation de ce composé.

7. Procédé de préparation de composés de formule N-r- C-- H-N H-j-S ^ c0° éj * a- dans laquelle R1 est l'hydrogène ou un groupe classique 2 j 25 protégeant la fonction amino et R est un groupe alkyle - à chaîne droite ou à chaîne ramifiée contenant 1 à 4 atomes de carbone, un groupe allyle, 2-butényle ou 3-butényle ou représente un groupe de formule 62

8. Procédé de préparation de composés de formule N-r— Ç-Ü-NH-j-S ^ h2N^5\or2 c“2/0 1 • ‘ co° éa3 * 2 dans laquelle R est un groupe alkyle à chaîne droite ou » à chaîne ramifiée contenant 1 à 4 atomes de carbone, allyle, 2-butënyle ou 3-butényle,ou représente un groupe 10 de formule

9. Procédé suivant l'une des revendications 7 et 8, pour la préparation du 7-/2-(2-aminothiazole-4-5 yl)-(Z)-2-(2-carboxyprop-2-oxyimino)-acétamido/-3-/(1-? méthyl-l-pyrrolidinium)méthyl/-3-céphem-4-carboxylate i (le) ou d'un sel non toxique pharmaceutiquement acceptable, d'un ester physiologiquement hydrolysable ou d'un produit de solvatation de ce composé, procédé caractérisé en ce 10 qu'il consiste à faire réagir un mélange de 7-amino-3-^ chlorométhyl-3-céphem-4-carboxylate de benzhydryle, d'acide (Z)-2-(2-t-butoxycarbonylprop-2-oxyimino)-2-(2-tritylamino-thiazole-4-yl)acétique, DCC, de N-hydroxybenzotriazole dans un solvant organique pour former le 3-chloromëthyl-7-/Tz)-15 2-(2-tertio-butoxycarbonylprop-2-oxyimino-2-(2-tritylamino- thiazole-4-yl)-acétamido/-3-céphem-4-carboxylate de benzhydryle (If) ou bien, à titre de variante, à faire réagir un mélange de 7-amino-3-chloromëthyl-3-céphem-4-carboxylate de benzhydryle et de bis-(triméthylsilyl)acétamide avec 20 un chlorure d’acide (Z)-2-(2-t-butoxycarbonylprop-2-oxy- imino)-2-(2-tritylaminothiazole-4-yl)acétique, pour former le composé (If), puis à faire réagir ce dernier avec un iodure, pour obtenir le 7-/(Z)-2-(2-t-butoxycarbonylprop-2-oxyimino)-2-(2-tritylaminothiazole-4-yl)-acétamido/-3-25 iodométhyl-3-céphem-4-carboxylate de benzhydryle (Ig) que l'on fait ensuite réagir avec la N-méthylpyrrolidine dans un solvant organique pour obtenir le composé (Ih), et finalement, à éliminer la protection du composé (Ih) pour A obtenir le composé (le) indiqué dans le titre, fondant à * 30 160°C en se décomposant et/ou, le cas échéant, à convertir le composé (le) en ses sels non toxiques pharmaceutiquement acceptables, ses esters physiologiquement hydrolysables et ses produits de. solvatation.

10. Procédé suivant l'une des revendications 7 35 et 8, pour la préparation de composés de formule : y 66 r , 8 __· ^sHor2 j—1 - ' c0° A, * w * 1 2 ’ dans laquelle κ est l'hydrogène et κ est le groupe méthyle, éthyle, isopropyle, ou allyle, ou d'un sel non toxique, pharmaceutiquement acceptable ou d'un produit de solvatation de ce composé, procédé caractérisé 5 en ce qu'il consiste à faire réagir un mélange de 7-amino-3-chlorométhyl-3-céphem-4-carboxylate de benzhydryle et de bis-(triméthylsilyl) acétamide avec un chlorure d'acide (Z)-2-méthoxyimino-2-(2-tritylaminothiazole-4-yl)acétique ou d'acide (Z)-2-ëthoxyimino-2-(2-tritylamino-thiazole-4-10 yl)acétique ou d'acide (Z)-2-(2-propoxyimino)-2-(2-trityl-amino-thiazole-4-yl)acétique ou d'acide (Z)-2-allyloxy-imino-2-(2-tritylaminothiazole-4-yl)acétique pour former le dérivé condensé correspondant contenant un groupe 2-méthoxyimino ou 2-éthoxyimino ou 2-propoxyimino ou 2-15 allyloxyimino, puis à faire réagir le dérivé condensé avec un iodure pour obtenir le dérivé 3-iodomêthyle correspondant, à faire ensuite réagir ledit dérivé 3-iodo-méthylique avec la N-méthyl-pyrrolidine dans un solvant organique ou dans un mélange de solvants organiques 20 pour obtenir le dérivé de pyrrolidinium correspondant et, finalement, à éliminer la protection dudit dérivé de * pyrrolidinium pour obtenir le 7-/(Z) -2-méthoxyimino-2-(2- * aminothiazole-4-yl)acétamido/-3-/(1-méthyl-l-pyrrolidinium)- * méthyl7-3-céphem-4-carboxylate ou le 7-/(Z)-2-ëthoxyimino- ^ 25 2-(2-aminothiazole-4-yl)acétamido/-3-/ (1-méthyl-l-pyrroli- V1 dinium)-méthyl./-3-cêphem-4-carboxylate ou le 7-/(Z)-2- - (2-propoxyimino)-2-(2-aminothiazole-4-yl)acêtamido/-3- ( 1-méthyl-l-pyrrolidinium) méthy]./-3-céphem-4-carboxylate, ou le 7-/(Z)-2-allyloxyimino-2-(2-aminothiazole-4-yl) t ι· Γ 67 ac§tamido7-3-/Tl-mëthyl-l-pyrrolidinium)méthyl/-3-céphem- 4-carboxylate et/ou, le cas échéant, à convertir lesdits dérivés éliminés des groupes protecteurs en un sel ou produit de solvatation non toxique pharmaceutiquement s 5 acceptable. »3 * 1 Λ