CH635846A5

CH635846A5 - Antibiotiques de cephalosporine a large spectre.

Info

Publication number: CH635846A5
Application number: CH1295478A
Authority: CH
Inventors: Allen Samuel Katner
Original assignee: Lilly Co Eli
Priority date: 1977-12-20
Filing date: 1978-12-19
Publication date: 1983-04-29
Also published as: AT364189B; GB2010256A; IT7831016A0; FR2412553A1; ATA908378A; ZA787110B; IE782502L; HU181875B; MX5586E; EP0002605A1; DK540278A; DE2861493D1; LU80669A1; PH15368A; IE47696B1; RO75804A; CA1140112A; GR72240B; IT1112300B; GB2010256B

Description

L'invention concerne de nouveaux antibiotiques pharmaceutiques de la catégorie des céphalosporines.

Des efforts de recherche importants ont concerné la mise au point de nouveaux dérivés de céphalosporine pour le trai-65 tement de maladies infectieuses chez l'homme. Très récemment, on a découvert que certaines céphalosporines portant en position C-7 un substituant

2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-méthoxyiminoacétamido et en

3

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position C-3 des substituants comprenant les groupements acétoxyméthyle, carbamoyloxyméthyle, (1-méthyl-tétrazol-5-ylthio)-méthyle et (l,3,4-thiadiazol-2-ylthio)méthyle, présentent une activité vis-à-vis des microorganismes gram-posi-tifs et gram-négatifs (brevets Belges N° 852 860, 852 971, 850 662 et 853 545; demande de brevet Allemand publiée avant examen N° 2 704 712 et demande de brevet Japonais N° 125 826/1976).

La présente invention concerne une nouvelle catégorie de dérivés de céphalosporine ayant en position C-7 un groupement 2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(hydroxy ou alcoxy en Ci-Ci)-iminoacétamido et en position C-3 un groupement

4-(alkyl en Ci-C4)-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-tria-zin-3-ylthiométhyle. Les composés de cette invention présentent une excellente activité antibiotique à large spectre vis-à-vis des organismes gram-positifs et gram-négatifs. Les pré-5 sents composés présentent une activité antibiotique supérieure, en particulier vis-à-vis des microorganismes gram-positifs, si on les compare à d'autres dérivés de céphalosporine, y compris les céphalosporines récemment décrites ayant un substituant 2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-alcoxyiminoacéta-io mido en position C-7.

Les composés de cette invention ont la formule

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• — CCCMH—

il N'

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I

dans laquelle R est un atome d'hydrogène, un cation métal alcalin ou un groupement ester choisi parmi acétoxyméthyle, 1-acétoxyéthyle, pivaloyloxyméthyle, 1-pivaloyloxyéthyle, carboéthoxyoxyméthyle, 1-carboéthoxyoxyéthyle et phtali-dyle; Ri est un atome d'hydrogène ou un groupement méthoxy; R2 est un atome d'hydrogène; R3 est un atome d'hydrogène ou un groupement alkyle en C1-C4; et R4 est un groupement alkyle en C1-C4.

On prépare les composés de formule I par un procédé qui consiste à faire réagir un composé de formule

R?—

é

/\ 1

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1

COORs

II

dans laquelle Rs est un atome d'hydrogène, un cation de métal alcalin ou un groupement protecteur ester du groupement carboxy; R<> est un groupement acétoxy, un atome de chlore, de brome ou d'iode ou un groupement de formule

-5—•

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1 l

III

I

P«4

et Rv est un groupement amino, amino substitué par un groupement protecteur silyle, chlorhydrate d'amine ou un groupement de formule

30

dans laquelle Rs est un atome d'hydrogène ou un groupement 2s protecteur du groupement amino; dans l'un ou l'autre ordre avec un thiol de formule rY

• èv ..

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N I

35 Ra quand Rt. est autre qu'un groupement de formule III, et avec un agent d'acylation de formule

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45

VI

RaNH/ \

»—CCONH-II N I

RaO

IV

qui est sous forme du chlorure, du bromure ou d'un ester réactif quand R7 est autre qu'un groupement de formule IV; à 50 couper le groupement protecteur du groupe amino, et, si Rs est un radical formant ester autre que acétoxyméthyle, 1-acétoxyéthyle, pivaloyloxyméthyle, 1-pivaloyloxyéthyle, carboéthoxyoxyméthyle, 1-carboéthoxyoxyéthyle ou phtalidyle, à recueillir le composé de formule I sous forme de l'acide ou 55 du sel de métal alcalin.

Dans la formule I précédente, R3 est un atome d'hydrogène ou un groupement alkyle en C1-C4 et R4 est un groupement alkyle en C1-C4. Par «alkyle en C1-C4», on désigne les groupements méthyle, éthyle, n-propyle, isopropyle, n-butyle, 60 s-butyle, isobutyle ou t-butyle. De préférence, R3 est un groupement méthyle. Les groupements préférés représentés par R4 sont les groupements méthyle et éthyle et mieux encore R4 est un groupement méthyle.

Des exemples du substituant résultant en C-3 des dérivés 65 de céphalosporine de la présente invention où R4 est tel que défini précédemment comprennent les groupements 4-méthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazin-3-ylthio-méthyle; 4-éthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-tria-

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zin-3-yIthiométhyle; 4-n-propyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-di-hydro-1,2,4-triazin-3-ylthiométhyle; 4-iso-propyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazin-3-ylthio-méthyle; 4-n-butyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l ,2,4-tria-zin-3-ylthiométhyle;4-s-butyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-di-hydro-1,2,4-triazin-3-ylthiométhyle; et 4-iso-butyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazin-3-ylthio-méthyle.

Dans la formule précédente, R est un atome d'hydrogène, un cation de métal alcalin ou le résidu d'un groupement ester du groupement acide carboxylique défini ci-après. L'expression «groupement protecteur ester du groupement acide carboxylique» (Rs) désigne un quelconque groupement ester utilisé pour bloquer ou protéger la fonction acide carboxylique en C4 de la céphalosporine pendant que l'on effectue des réactions intéressant d'autres sites fonctionnels. De tels groupements protecteurs esters sont notés pour leur facilité de coupure, par exemple par des procédés hydrolytiques ou hydro-génolytiques, en acide carboxylique correspondant. Des exemples des groupements protecteurs appropriés formant un ester sont les groupements t-butyle, 1-méthylcyclohexyle, benzyle, 4-méthoxybenzyle, 4-nitrobenzyle, acétoxyméthyle,

1-acétoxyéthyle, pivaloyloxyméthyle, 1-pivaloyloxyéthyle, carboéthoxyméthyle, 1-carboéthoxyoxyéthyle, phtalidyle,

2-iodoéthyle, 2-bromoéthyle, benzhydryle, phénacyle, 4-halophénacyle, diméthylallyle, 2,2,2-trichloroéthyle, méthoxyméthyle, tri(alkyl en Ci-C3)silyle et succinimidomé-thyle. D'autres groupements protecteurs connus du groupement acide carboxylique sont décrits par E. Haslam dans «Protective Groups in Organic Chemistry», J.F.W. McOmie, Ed., Plenum Press, New York, 1973, chapitre 5. La nature de tels groupements n'est pas déterminante; cependant, en raison de leur disponibilité, de leur facilité de manipulation et d'autres propriétés indiquées, on préfère certains groupements protecteurs du groupement acide carboxylique. Une sélection préférée de groupements protecteurs ester du groupement acide carboxylique comprend les groupements acétoxyméthyle, 1-acétoxyéthyle, pivaloyloxyméthyle, 1-pivaloyloxyéthyle, carboéthoxyoxyméthyle, 1-carboxyé-thoxyoxyéthyle et phtalidyle. Un autre groupe préféré de tels groupements comprend les groupements benzhydryle, 4-nitrobenzyle et t-butyle.

On préfère particulièrement les composés dans lesquels R est un atome d'hydrogène; les acides libres représentés par les composés dans lesquels R est un atome d'hydrogène et les sels de métaux alcalins correspondants, comme les sels de sodium, de potassium et de lithium, sont les plus actifs des composés de la présente invention. Les composés de la présente invention où R est un groupement protecteur ester du groupement acide carboxylique sont utilisés essentiellement comme intermédiaires conduisant aux acides libres et aux sels de métaux alcalins. En plus de servir comme intermédiaires conduisant aux acides libres, les présents composés dans lesquels R est un groupement acétoxyméthyle, 1-acétoxyéthyle, pivaloyloxyméthyle, 1-pivaloyloxyéthyle, carboéthoxyoxyméthyle, 1-carboéthoxyoxyéthyle et phtalidyle présentent cependant des caractéristiques d'absorption améliorée, donnant des taux sanguins supérieurs, par rapport aux acides libres de la présente invention quand on les utilise par administration non-parentérale.

R2 dans la formule précédente représentant les composés de formule I est un atome d'hydrogène. L'expression «groupement protecteur du groupement amino» (Rs) désigne les groupements que l'on peut utiliser pour bloquer ou protéger le groupement amino pendant que l'on effectue des réactions sur d'autres sites fonctionnels. De nombreux groupements protecteurs du groupement amino et leur préparation et leurs propriétés sont connus de l'homme de l'art. Des exemples des groupements protecteurs appropriés sont les groupements chloroacétyle, 4-nitrobenzyloxycarbonyle, 2,2,2-trichloroé-thoxycarbonyle, t-butyloxycarbonyle, benzyloxycarbonyle et trityle. Des groupements protecteurs classiques similaires du groupement amino comme ceux décrits par J. W. Barton dans «Protective Groups in Organic Chemistry», J.F.W. McOmie, Ed., Plenum Press, New York, 1973, chapitre 2, conviennent également. Les groupements protecteurs préférés du groupement amino sont les groupements t-butyloxycarbonyle, benzyloxycarbonyle et trityle. Le groupement trityle est nettement préféré.

Le substituant constituant la chaîne latérale en C-7 des composés de formule I est un groupement 2-[2-(amino pro-tégé)-thiazol-4-yl]-2-(hydroxy ou alcoxy en Ci-C4)iminoacé-tamido. En ce qui concerne la configuration du groupement hydroxyimino ou alcoxyimino, par rapport à la fonction car-boxamido adjacente, les composés peuvent exister sous forme de l'isomère syn (eis) ou anti. On préfère les isomères syn dans la présente invention. La configuration syn est notée au point de vue structure comme indiquée dans la formule partielle suivante:

». •—CCONH—

V !'.

Les groupements suivants sont des exemples de la chaîne latérale en C-7 des présents dérivés de céphalosporine:

2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-méthoxyiminoacétamido, 2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-éthoxyiminoacétamido, 2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)-2-isopropoxyiminoacéta-mido,*)

2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-n-propoxyiminoacétamido,

2-(2-t-butyloxycarbonylaminothiazol-4-yl)-2-s-butoxyimi-

noacétamido,*)

2-(2-benzyloxycarbonylaminothiazol-4-yl)-2-hydroxyimi-noacétamido,*)

2-[2-(2-chloroacétamido)thiazol-4-yl]-2-méthoxyiminoacéta-mido,*)

2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-hydroxyiminoacétamido,

2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)-2-éthoxyiminoacétamido,*)

2-[2-(2,2,2-trichloroéthoxycarbonylamino)thiazol-4-yl]-2-iso-

propoxyiminoacétamido,*)

2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-n-butoxyiminoacétamido,

2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-isopropoxyiminoacétamido, et

2-(2-benzyloxycarbonylaminothiazol-4-yl)-2-méthoxyimi-

noacétamido.*)

*) avant la coupure du groupement protecteur.

On notera que les composés de la présente invention peuvent se tautomériser sur le groupement 2-aminothiazol-4-yle de la chaîne latérale en C-7 et sur le groupement 1,2,4-triazin-3-yle en C-3. La tautomérisation possible de chacun de ces deux groupements est illustrée par les formules partielles ci-dessous:

4

s

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60

5

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En C-7

il—CCONH— \ X >-CCONH-

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En C-3

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I I

R4 R4

Pour les besoins de la présente invention, les formules moléculaires, quand elles représentent une des possibilités, doivent être considérées comme représentant également les formes tautomères.

Comme on l'a décrit brièvement, on prépare les composés 30 de formule I à partir d'un composé à noyau céphalosporine de formule II en acylant en position 7 et en déplaçant à la position 3, étapes que l'on peut effectuer dans l'un ou l'autre ordre. Si on dispose d'un composé de départ qui porte le groupement triazinethiol de formule III ou aminothiazole de 35 formule IV, alors seulement l'une des étapes d'acylation et de déplacement sera nécessaire pour préparer le composé désiré de formule I. En général, les étapes d'acylation et de déplacement se font selon des techniques connues dans le domaine des céphalosporines. 40

On effectue l'étape d'acylation en faisant réagir un composé de formule II dans laquelle Rj est un groupement amino, halohydrate du groupement amino ou amino substitué par un groupement protecteur silylique, avec un agent d'acylation de formule VI. Le composé de formule II peut 45 être sous forme d'un acide, d'un sel de métal alcalin ou d'un ester, comme cela peut être commode dans un cas particulier. Evidemment, le composé doit être sous forme ester si Rô représente un atome d'halogène. Si on désire utiliser un composé de formule II sous forme ester, Rs peut alors représenter 50 l'un quelconque des groupements protecteurs du groupements carboxy qui ont été décrits précédemment, ou bien il peut également représenter un ester silylique.

Les groupements ester silylique ont été souvent décrits et utilisés dans la synthèse de dérivés de céphalosporine. Ils sont 55 facilement obtenus en faisant réagir le groupement acide en position 4 d'une céphalosporine avec un agent de silylation qui est commodément un silazane comme le N-triméthylsily-lacétamide, le triméthylchlorosilane, la bis(triméthyl-silyl)amine, la triméthylsilylméthylamine, le N,0-bis(trimé- 60 thylsilyl)acétamide, le N,0-bis(triméthylsilyl)trifluoroacéta-mide, le N-triméthylsilyl-N-méthyltrifluoroacétamide et le N-triméthylsilylimidazole. Les esters silyliques se forment par contact de l'acide avec l'agent de silylation dans des conditions de réaction modérées. 65

On effectue l'étape d'acylation sur des composés de formule II où le groupement R7 est un groupement amino non substitué, halohydrate du groupement amino ou amino substitué par un groupement silyle. Les groupements silyle appropriés sont les mêmes que ceux qui ont été décrits comme des groupements protecteurs silyliques appropriés. Ainsi, si l'on désire effectuer l'acylation sur un composé protégé par un groupement silyle, il est très commode de faire réagir le noyau céphem désiré de formule II, sous forme acide, où R7 est un groupement amino non substitué, avec un agent de silylation en formant ainsi le composé de formule II où le groupement 7-amino et le groupement acide en position 4 sont tous deux protégés par le même groupement silyle.

Les acides 2-[2-(amino protégé)-thiazol-4-yl]-2-(alcoxy en C1-C4 ou hydroxy)iminoacétiques de formule VI que l'on utilise pour acyler les 3-triazinylthiométhylcéphalosporines décrites précédemment sont préparés selon les modes opératoires décrits dans le brevet Belge N° 850 662. En général, on obtient les acides iminoacétiques à partir du 2-acétyl-2-hydroxyiminoacétate d'éthyle (1) par alkylation éventuelle de la fonction hydroxyimino; (2) bromation par le brome dans le chlorure de méthylène à la température ambiante pour obtenir le 2-(a-bromoacétyl)-2-(hydroxyimino ou alcoxyi-mino en Ci-C4)acétate d'éthyle; (3) par réaction avec la thiourée dans l'éthanol aqueux pour former le 2-(2-amino-thiazol-4-yl)-2-(hydroxyimino ou alcoxyimino en Ci-C4)-acétate d'éthyle; (4) par blocage du groupement 2-amino avec un groupement protecteur; et (5) par désestéri-fication catalysée par une base.

Le groupement amino du composé de formule VI peut être protégé ou non, comme cela peut être approprié dans chaque cas. Si l'on désire un groupement protecteur, il est choisi dans la catégorie de groupements décrits précédemment. De tels groupements sont connus depuis longtemps dans le domaine des céphalosporines ainsi que dans la chimie organique générale, et sont facilement ajoutés au groupement 2-amino par des étapes de réactions connues.

La formule du composé de formule VI est représentée sous forme acide, mais le composé est en fait utilisé comme agent d'acylation en le transformant d'abord évidemment en un chlorure ou un bromure d'acide ou en ester activé. De tels esters activés comprennent les esters formés avec des agents représentés typiquement par le dicyclohexylcarbodiimide, le chloroformiate d'isobutyle, la 2-éthoxy-N-éthoxycar-bonyl-l,2-dihydroquinoléine, le chloroformiate de méthyle, le chloroformiate d'éthyle, l'hydroxypentachlorobenzène, le

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N,N-diisopropylcarbodiimide, le N-cyclohexyÌ-N'-(2-mor-pholinoéthyl)carbodiimide et d'autres réactifs apparentés qui sont maintenant bien connus dans la littérature. De tels esters activés sont largement utilisés dans la réaction d'acylation et sont utilisés ainsi depuis longtemps.

On effectue les acylations dans des solvants organiques inertes à une température comprise entre environ — 20°C et environ +50°C. Les températures allant de 0°C à la température ambiante sont les plus commodes et sont préférées. Le solvant dans lequel on effectue l'acylation n'est absolument pas déterminant. Souvent, l'acétone aqueuse est un solvant particulièrement commode. Dans d'autres cas, les hydrocarbures halogénés comme le dichlorométhane, le trichloroé-thane, le chlorobenzène, etc., sont commodes. Les cétones en général, comprenant la méthyléthylcétone et la méthylisobu-tylcétone, sont utiles comme le sont les éthers comprenant particulièrement l'éther diéthylique et le tétrahydrofuranne. Les chimistes organiciens verront que la gamme de solvants organiques inertes souvent utilisés dans les réactions comme les acylations peuvent être utilisées dans ces acylations, comme on s'y attendrait.

Quand l'agent d'acylation est sous forme d'un halogénure, le mélange réactionnel doit contenir un accepteur d'hydra-cide pour améliorer l'efficacité de la réaction. Des bases simples comme les aminés tertiaires et les hydroxides, carbonates et bicarbonates de métaux alcalins peuvent être utilisées comme accepteurs d'hydracide de la façon habituelle.

Les composés de formule II où Rs est un groupement acé-toxy sont évidemment les dérivés bien connus de la céphalosporine C que l'on obtient facilement par fermentation. Les composés de formule II où Re est un atome de chlore, de brome ou d'iode, sont préparés par exemple par le procédé d'halogénation du brevet des E.U.A. N° 4 042 585 à partir des dérivés 3-exométhylènecépham correspondants.

On peut préparer les composés de formule II où Ri est un groupement méthoxy, selon la méthode de Koppel et Koehler, J. Am. Che. Soc. 95,2403 (1973). De tels composés à groupement 7-méthoxy peuvent également être préparés à partir des dérivés 3-exométhylènecepham, et un groupement Re chloro ou bromo peut être simultanément mis en place, par les procédés des brevets des E.U.A. N° 4 048 160 ou 4048 163.

Comme on l'a décrit, le composé de formule II où R7 est un groupement autre que l'aminothiazole de formule IV, peut être acylé soit avant soit après fixation du groupement tria-zine de formule II en position 3 de la molécule de céphalosporine. En général, on préfère préparer le composé de formule II où Re est le groupement triazine de formule III et effectuer l'acylation comme étape finale de la préparation des composés de formule II. Cependant, l'ordre des étapes de déplacement et d'acylation n'est pas important et les composés sont efficacement préparés de l'une ou l'autre façon.

Le déplacement d'un groupement acétoxy ou d'un atome de chlore, de brome ou d'iode à partir de la position Rr> du composé de formule II est effectué selon des modes opératoires connus dans la littérature. Voir par exemple le brevet Belge N° 831 787, qui décrit le déplacement nucléophile aqueux d'un groupement Ro acétoxy et son remplacement par le groupement triazine de formule III. De tels déplacements aqueux sont effectués à des températures comprises entre 20°C et 80°C dans des milieux de réaction aqueux qui sont de préférence tamponnés à un pH compris entre 5 et 8.

Le déplacement des groupements Ró acétoxy peut également être effectué, en particulier sur les composés de formule II qui sont des acides où Rs est un atome d'hydrogène, dans des conditions essentiellement anhydres par simple contact du composé 3-acétoxyméthylé de formule II avec le triazine-thiol de formule V. De tels déplacements sont effectués de préférence à des températures de 50°C à 140°C, dans une grande variété de solvants comprenant les hydrocarbures aromatiques, les acides alcanoïques, les esters alkyliques d'acides alcanoïques, des composés aromatiques nitrés, des composés aliphatiques nitrés, les nitriles et les cétones. D'autres renseignements sur ce procédé peuvent être trouvés dans le brevet Belge n° 864 459.

On peut facilement placer le groupement triazine de formule III en position Râ du composé de formule II par déplacement d'un substituant Rs halo. De tels déplacements sont effectués par réaction du thiol de formule V avec le composé de formule II où R& est un atome d'halogène, dans un solvant organique inerte à des températures modérées, comme de 0°C à 50°C. Le déplacement nécessite seulement un agent de fixation d'hydracide, comme décrit précédemment, pour se faire en rendement élevé dans des périodes de temps moyennes. On donne ci-dessous un exemple d'un tel déplacement.

On peut placer la triazine de formule III sur le composé de formule II qui est à l'état protégé ou qui porte le groupement acide en position 4 et le groupement amino en position 7 sous forme non protégée. Le déplacement peut être effectué d'une façon ou d'une autre sauf que, comme décrit précédemment, le déplacement non aqueux du groupement acétoxy doit être effectué sur un noyau sous forme acide. Les groupements protecteurs des groupements carboxy et amino ont été décrits précédemment.

La dernière étape de la synthèse des composés de formule I consiste à éliminer les groupements protecteurs Rs et les groupements protecteurs Rs, si on en a utilisé dans la synthèse. De tels groupements comme indiqués précédemment sont courants dans la chimie organique et sont enlevés par les modes opératoires habituels. Par exemple, des groupements protecteurs du groupement carboxy comme les groupements benzhydryle, t-butyle et 4-méthoxybenzyle sont facilement enlevés par un traitement par un acide fort comme l'acide formique ou l'acide trifluoroacétique. On sait que d'autres groupements protecteurs du groupement carboxy, comme le groupement 2,2,2-trichloroéthyle, sont facilement enlevés par réduction comme par le zinc et l'acide acétique. Encore d'autres groupements, comme le groupement 4-nitrobenzyle, sont le plus facilement enlevés par hydrogénation comme en présence d'un catalyseur à base de métal noble.

Les groupements silyle protecteurs du groupement carboxy ainsi que les groupements silyle protecteurs du groupement amino sont très commodément enlevés par hydrolyse par simple contact du composé protégé avec de l'eau ou un alcool. Ainsi, on peut très facilement enlever un groupement protecteur du groupement amino et un groupement protecteur du groupement carboxy tous deux en une seule étape, quand tous deux sont des groupements silyle.

Les groupements protecteurs du groupement amino en général sont'enlevés par des procédés connus dans la technique antérieure. Par exemple, les groupements protecteurs comme le groupement trityle sont facilement enlevés par contact avec un acide fort, en particulier l'acide formique. D'autres groupements protecteurs du groupement amino couramment utilisés comme le groupement chloroacétyle sont enlevés par contact du composé protégé avec la thio-urée en présence d'une base. En général, les groupements protecteurs du groupement amino sont enlevés par les moyens hydrolytiques classiques dans des conditions modérées et peuvent souvent être enlevés au cours de la même étape que celle qui permet d'enlever un groupement protecteur du groupement carboxy.

Il est souvent avantageux de recueillir le produit de formule I sous forme d'un sel de métal alcalin. On prépare facilement de tels sels de la façon habituelle par simple contact de l'acide avec une base de métal alcalin, comme un hydroxyde

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ou un carbonate de sodium, de potassium ou de lithium, dans un solvant comme l'acétone aqueuse ou un alcool aqueux.

Des exemples des dérivés de 7-méthoxy-céphalosporine biologiquement actifs de la présente invention sont:

L'acide 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-méthoxyiminoacéta-mido]-7-méthoxy-3-(4-méthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazin-3-ylthio)méthyl-3-céphem-4-carboxylique,

L'acide 7-[2-(2-aminothiazol-4-yI)-2-hydroxyiminoacéta-mido]-7-méthoxy-3-(4-éthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazin-3-ylthio)méthyl-3-céphem-4-carboxylique,

L'acide 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-éthoxyiminoacéta-mido]-7-méthoxy-3-(4-isopropyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazin-3-ylthio)méthyl-3-céphem-4-carboxylique,

L'acide 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-propoxyiminoacéta-mido]-7-méthoxy-3-(4-isopropyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazin-3-ylthio)méthyl-3-céphem-4-carboxylique,

L'acide 7-[2-(2-aminothiazoI-4-yl)-2-isobutoxyiminoacéta-mido]-7-méthoxy-3-(4-méthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazin-3-yIthio)méthyl-3-céphem-4-carboxylique,

et les sels de lithium, de potassium et de sodium correspondants de chacun des dérivés de 7-méthoxycéphalosporine précédents.

D'autres exemples des composés biologiquement actifs de la présente invention sont les suivants:

L'acide 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-méthoxyiminoacéta-

mido]-3-(4-éthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-

3-ylthio)méthyl-3-céphem-4-carboxylique,

L'acide 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-hydroxyiminoaeéta-

mido]-3-(4-méthyl-5-oxo-6-

hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)méthyl-3-

céphem-4-carboxylique,

L'acide 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-éthoxyiminoacéta-mido]-3-(4-méthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)méthyl-3-céphem-4-carboxylique,

L'acide 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-hydroxyiminoacéta-

mido]-3-(4-éthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazin-

3-ylthio)méthyl-3-céphem-4-carboxylique,

L'acide 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-méthoxyiminoacéta-

mido]-3-(4-isopropyl-5-oxo-6-

hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)méthyl-3-

céphem-4-carboxylique,

L'acide 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-propoxyiminoacéta-mido]-3-(4-n-butyl-5-oxo-6-

hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazin-3-ylthio)méthyl-3-céphem-4-carboxylique,

L'acide 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-méthoxyiminoacéta-mido]-3-(4-méthyl-5-oxo-6-

hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazin-3-ylthio)méthyl-3-céphem-4-carboxylique,

L'acide 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-isobutoxyiminoacéta-mido]-3-(4-méthyl-5-oxo-6-

hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazin-3-ylthio)méthyl-3-céphem-4-carboxylique,

L'acide 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-hydroxyiminoacéta-mido]-3-(4-n-butyl-5-oxo-6-

hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazin-3-ylthio)méthyl-3-céphem-4-carboxylique,

et les sels de lithium, de potassium et de sodium correspondants de chacun des acides céphalosporaniques précédents.

Un groupe préféré des présents dérivés de céphalosporine comprend ceux représentés par la formule I où R.4 est un groupement méthyle ou éthyle; les composés représentés quand R.4 est un groupement méthyle sont nettement préférés dans ce groupe.

Des composés préférés de formule I sont également ceux représentés quand Ri est un atome d'hydrogène.

Un autre groupe préféré des composés de la présente invention comprend ceux représentés quand R3 est un groupement alkyle en C1-C4; les composés nettement préférés dans ce groupe sont ceux représentés quand R3 est un groupement méthyle.

Un autre groupe préféré des composés de céphalosporine de la présente invention comprend ceux dans lesquels R est un atome d'hydrogène ou un cation de métal alcalin; on préfère encore davantage dans ce groupe les composés où en outre R: est un atome d'hydrogène. Ces céphalosporines nettement préférées de type amino-acide selon la présente invention sont celles qui présentent en particulier une activité antibiotique. Les composés où R et R2 sont autres qu'un atome d'hydrogène sont essentiellement utiles comme intermédiaires conduisant aux plus actifs des composés de la présente invention.

Les nouveaux acides carboxyliques dérivés de céphalosporine et leurs sels de métaux alcalins sont utiles pour combattre les infections chez les mamifères à sang chaud, quand on les administre par voie parentérale à des doses non toxiques comprises entre environ 10 et 500 mg/kg de poids corporel. La dose réelle utilisée variera selon des techniques bien connues dans le domaine médical pour l'administration des antibiotiques de céphalosporine et sera déterminée par des facteurs comme la nature et l'importance de l'infection que l'on traite, la fréquence et la durée de l'administration, l'état général du patient et des facteurs similaires.

Les composés peuvent être utilisés dans une grande variété de formes posologiques orales ou parentérales, seuls ou en mélange avec d'autres substances. Les compositions pharmaceutiques peuvent être un mélange de 0,01 à 99% d'un composé de formule I avec un support pharmaceutique qui peut être une substance solide ou une substance liquide dans laquelle les composés peuvent être dissous, en dispersion ou en suspension. Ils peuvent être sous forme posologique unitaire. Les compositions solides peuvent prendre la forme de comprimés, de poudre, de sirops secs, de cachets, de granulés, de capsules, de pilules, de suppositoires ou de préparations solides similaires. Les compositions liquides peuvent prendre la forme de produits injectables, d'onguents, de dispersions, de produits à inhaler, de suspensions, de solutions, d'émulsions, de sirops ou d'élixirs. Elles peuvent être aromatisées et colorées, et les comprimés, granulés et capsules peuvent être enrobés.

Tous les diluants classiques (par exemple amidon, saccharose, lactose, carbonate de calcium, kaolin); charges (par exemple, lactose, sucre, sel, glycine, amidon, carbonate de calcium, phosphate de calcium, kaolin, bentonite, talc, sor-bitol); liants (par exemple, amidon, gomme arabique, gélatine, glucose, alginate de sodium, gomme adragante, car-boxyméthylcellulose, sirop, sorbitol, polyvinylpyrrolidone); agents de délitement (par exemple amidon, gélose, carbonates, laurylsulfate de sodium); lubrifiants (par exemple acide stéarique, talc, paraffine, acide borique, silice, benzoate de sodium, polyéthylèneglycol, huile de cacao, stéarate de magnésium); agents émulsifiants (par exemple lécithine, monooléate de sorbitanne, gomme arabique); agents de mise en suspension (par exemple sorbitol, méthylcellulose, glucose ou sirop de sucre, gélatine, hydroxyéthylcellulose, carboxy-méthylcellulose, gel de stéarate d'aluminium, graisses hydrogénées); solvants (par exemple eau, tampon, huile d'arachide,

s

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huile de sésame, oléate de méthyle); agents de conservation (par exemple p-hydroxybenzoate de méthyle ou d'éthyle, acide sorbique); agents colorants comestibles, substances aromatiques, agents solubilisants, tampons, agents stabilisants, analgésiques, agents de mise en dispersion, agents mouillants, antioxydants, etc., peuvent être utilisés s'ils n'exercent pas d'effet nuisible sur les composés, selon les précédés classiques dans le domaine.

Les composés sous forme de sel sont solubles dans l'eau et sont commodément utilisés sous forme de solutions pour l'injection intraveineuse, intramusculaire ou sous-cutanée. Les composés peuvent être dissous dans des solvants aqueux ou huileux pour l'injection pour donner une solution dans une ampoule, mais en général une conservation plus prolongée est possible en préparant une composition en flacon contenant des cristaux, de la poudre, des microcristaux ou un lyophilisât de composé, et en dissolvant ou en mettant en suspension le médicament avant son utilisation dans lesdits solvants pour l'injection. La préparation peut contenir un agent de conservation.

Cette invention fournit également un procédé de traitement ou de prévention des infections bactériennes chez l'homme ou les animaux, en administrant à l'homme ou à l'animal une quantité efficace d'un composé de formule I à

une dose quotidienne de 10 à 500 mg/kg de poids corporel, par exemple à des intervalles de 3 à 12 heures. De préférence, le composé est administré sous forme d'une composition pharmaceutique comme décrit précédemment.

s On a essayé les composés de formule I vis-à-vis de microorganismes gram-positifs et gram-négatifs types pour déterminer l'intervalle de leur efficacité en tant qu'antibiotiques. On a trouvé que les composés sont remarquablement puissants. Les données types suivantes sont données simplement io pour aider le lecteur à comprendre le large intervalle d'effet de ces composés. La méthode d'essai utilisée est un essai de dilution sur milieu classique type, et les résultats sont donnés sous forme de la concentration minimale du composé, en microgrammes par ml, qui se révèle inhiber la croissance des 15 microorganismes.

Le composé A dans le tableau ci-dessous est le sel de sodium de l'acide 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-méthoxyimi-noacétamido]-3-(4-méthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)méthyl-3-20 céphem-4-carboxylique, et le composé B est l'acide 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-méthoxyiminoacéta-mido]-3-(4-éthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazin-3-ylthio)méthyl-3-céphem-4-carboxylique. Les deux composés sont les isomères syn.

Enterobacter aerogenes Salmonella sp. Serratia sp. Proteus morganii Staph. aureus Streptococcus sp.

A 0,25 0,25 0,25 0,25 2 0,125

B 2 1 1 1 4 0,06

Haemophilus influenza Shigella Sonnei Escherichia coli Klebsiella sp.

A 0,125 0,25 0,25 0,125

B 0,06 0,5 0,5 0,06

Les préparations et exemples suivants sont donnés pour mieux aider le lecteur à comprendre les composés de formule I et le procédé permettant de les préparer. Dans les préparations et les exemples ci-dessous, il est entendu que le groupement aminothiazole constitue l'isomère syn à moins d'indications contraires.

Préparation 1

A 20 ml d'eau, on ajoute 3,46 g (12,0 mmoles) d'acide 7-formamido-3-acétoxyméthyl-3-céphem-4-carboxyliqueet 2,0 g (12,55 mmoles) de 3-mercapto-4-méthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazine. On agite le mélange résultant et on ajoute progressivement de l'hydroxyde de sodium 1N jusqu'à ce que le pH reste à une valeur constante de 7,0. Puis on agite le mélange résultant à environ 55°C pendant 26 heures. On concentre la solution résultante jusqu'à 20 ml et on l'acidifie jusqu'à pH 1,2 par addition d'acide chlorhydrique 3N avec refroidissement. On filtre le précipité résultant et on le place immédiatement sous une cloche pour le sécher sous vide. On broie le matériau séché dans un mortier avec pilon (2,75 g) et on le triture trois fois, à chaque fois 6® avec 150 ml d'alcool isopropylique à l'ébullition. On évapore à siccité la solution d'alcool isopropylique et on triture le résidu deux fois avec 30 ml d'acétate d'éthyle. On filtre la substance insoluble, on la lave avec de l'acétate d'éthyle et on la sèche, ce qui donne 1,56 g d'acide 7-forma 65

mido-3-(4-méthyl-5-oxo-6-

hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazin-3-ylthio)méthyl-3-céphem-4-carboxylique.

Préparation 2

On agite le produit de la préparation 1 (0,74 g) dans 12 ml de méthanol sec et on ajoute 1,5 ml d'acide chlorhydrique concentré, période pendant laquelle se produit une dissolution totale. Après une courte période de temps, un solide blanc commence à précipiter. On poursuit l'agitation pendant 1,7 heure et le mélange devient épais avec un précipité blanc. On filtre le précipité et on le sèche. On montre par CCM que le produit (0,346 g) est un échantillon très pur du chlorhydrate de l'acide 7-amino-3-(4-méthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazin-3-ylthio)méthyl-3-céphem-4-carboxylique.

Préparation 3

A une suspension de 3,71 g (10 mmoles) d'acide 7-amino-3-(4-méthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-tria-zin-3-ylthio)méthyl-3-céphem-4-carboxylique dans 50 ml de chlorure de méthylène et 50 ml de méthanol, on ajoute 1,94 g (10 mmoles) de diphényldiazométhane. On laisse le mélange réactionnel sous agitation pendant une nuit à la température ambiante. Puis on ajoute 500 mg supplémentaires de diphényldiazométhane. Au bout de deux heures, on filtre le mélange réactionnel et on concentre le filtrat sous vide jusqu'à une huile. On dissout ce produit dans environ 25 ml de chlorure de méthylène et on ajoute la solution résultante à de l'hexane goutte à goutte en agitant. Il se forme un solide amorphe jaune brun clair. La filtration fournit, après séchage, 2,8 g (52%) de

7-amino-3-(4-méthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-tria-

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zin-3-ylthio)méthyl-3-céphem-4-carboxylate de benzhydryle: RMN (CDCb) S 3,33 (s, 3, CHs sur N), 3,5 (m, 4, H en C:, H en Ci), 4,86 (q, 2, H en Có, H en Ci), 7,0 (s, 1, CH du benzhydryle), 7,36 (s, 10, H aromatiques).

Exemple 1

A une solution de 0,55 g (1 mmole) de 7 amino-3-(4-méthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-tria-zin-3-ylthio)méthyI-3-céphem-4-carboxylate de benzhydryle et de 886 mg (2 mmoles) d'acide 2-(2-tritylamino-4-thia-zolyl)-2-méthoxyiminoacétique dans 15 ml de chlorure de méthylène, on ajoute 208 mg (1 mmole) de dicyclohexylcar-bodiimide. Après avoir agité le mélange pendant 6 heures à la température ambiante, on filtre le mélange réactionnel. On concentre le filtrat sous vide jusqu'à une huile que l'on dissout ensuite dans de l'acétate d'éthyle et on lave successivement avec une solution diluée de bicarbonate de sodium, de l'eau et une saumure. Puis on sèche la solution d'acétate d'éthyle sur sulfate de sodium anhydre et on l'évaporé sous vide à siccité, ce qui donne 800 mg (83%) de 7-[2-(2-tritylamino-4-thiazolyl)-2-méthoxyiminoacét-amido]-3-(4-méthyl-5-oxo-6-

hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazin-3-ylthio)méthyl-3-céphem-4-carboxylate de benzhydryle sous forme d'un solide amorphe rouge: RMN (CDCb, DMSO d-6) 8 3,3 (s, 3, CH3 sur N), 3,7 (s, 2, H en Ci), 4,1 (s, 3, -OCHa), 5,2 (d, 1, J = 5,0 Hz, H en Cs), 5,8 (q, 1, J = 5,0 et 8,0 Hz, H en Ci), 6,8 (s, 1, H en Cs du thiazolyle), 7,0 (s, 1, CH du benzhydryle) et 7,4 (s, 25, H aromatiques des groupements trityle et benzhydryle).

Exemple 2

On met environ 500 mg de l'ester benzhydrylique obtenu dans l'exemple 1 ci-dessus en suspension dans 10 ml d'acide formique aqueux à 50% et on chauffe au bain-marie pendant 5 minutes. Puis on agite le mélange à 50-60°C sur une plaque chauffante pendant 45 minutes. Après avoir laissé le mélange refroidir à environ 30°, on le filtre et on concentre le filtrat sous vide jusqu'à un résidu huileux. La trituration du résidu par l'alcool éthylique donne, par filtration, un solide amorphe brun clair qu'on lave ensuite avec du chlorure de méthylène. On obtient 161 mg de produit (56%). Une Chromatographie liquide sous pression élevée montre que le produit est de l'acide 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-méthoxyiminoacé-tamido]-3-(4-méthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazin-3-ylthio)méthyl-3-céphem-4-carboxylique très pur: RMN (DMSO d-6) 8 3,29 (s, 3, CHs en N), 3,65 (s, 2, H en C2), 3,03 (s, 3, OCH3), 4,10 (q, 2, H en Cj), 5,15 (d, 1, J = 5,0 Hz, H en Ce), 5,77 (q, 1, J = 5,0 et 8,0 Hz, H en Ci), 6,73 (s, 1, H en Cs du thiazole), 7,20 (s, 2, NH2), 9,58 (d, 1, J = 8,0 Hz, NH de la chaîne latérale).

Exemple 3

On agite et on refroidit dans un bain de glace et d'éthanol un mélange de 84 ml d'eau, de 42 ml d'acétone, de 2,42 g de bicarbonate de sodium et de 2,87 g de chlorhydrate de l'acide 7-amino-3-(4-méthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazin-3-ylthio)méthyl-3-céphem-4-carboxylique,. Quand les solides se sont dissous, on ajoute une solution de 2,34 g du chlorure de l'acide 2-(2-chloroacétylamino-4-thiazolyl)-2-méthoxyiminoacé-tique dans 42 ml d'acétone. On agite le mélange réactionnel dans le bain de refroidissement pendant 95 minutes et pendant 10 minutes après avoir enlevé le bain de refroidissement. On évapore l'acétone dans un évaporateur rotatif à la température ambiante, on ajoute au résidu 50 ml d'acétate d'éthyle et on acidifie le mélange à pH 2,2 avec de l'acide chlorhydrique dilué. On filtre les solides, on les lave soigneusement à l'eau et on les sèche sous vide à la température ambiante, ce qui donne 3,76 g du produit de l'exemple 2 sous la forme N-chloroacétylée.

L'analyse par RMN dans le DMSO d-6 indique un singulet à un proton à 5 7,44 ppm; l'analyse du chlore est de 5,52%; analyse calculée pour le chlore pour C20H19N8O8S3CI: 5,62%.

Exemple 4

On transforme 4,4 g d'acide 2-(2-tritylamino-4-thia-zolyl)-2-méthoxyiminoacétique en chlorure d'acide et on le dissout dans de l'acétone. On ajoute la solution acétonique à une suspension à la température de la glace de 3,86 g de chlorhydrate de 7-amino-3-(4-méthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-di-hydro-1,2,4-triazin-3-ylthio)méthyl-3-céphem-4-carboxylate de 4-nitrobenzyle et de 4,77 g de bisulfite de sodium dans 200 ml d'acétone. Après l'addition, on enlève le bain de glace et on agite le mélange réactionnel pendant 20 minutes. Puis on sépare les solides par filtration, on les dissout dans de l'acétate d'éthyle et on les lave successivement avec une solution de bicarbonate de sodium, de l'acide chlorhydrique IN, de l'eau et une saumure. Puis on sèche la solution d'acétate d'éthyle sur sulfate de sodium et on la concentre jusqu'à une huile jaune. On dissout l'huile dans du dichlorométhane et on la filtre, et on purifie le filtrat par passage sur un tampon de gel de silice, en éluant d'abord avec du dichlorométhane puis avec un mélange 1:9 d'acétate d'éthyle et de dichlorométhane. On obtient un total de 2,4 g de 7-[2-(2-tritylamino-4-thia-zolyl)-2-méthoxyiminoacét-

amido]-3-(4-méthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-tria-zin-3-ylthio)méthyl-3-céphem-4-carboxylate de 4-nitrobenzyle, p.f. 140-146°C.

On enlève par hydrogénation le groupement ester 4-nitro-benzylique du produit intermédiaire précédent et l'on obtient 85 mg de l'acide correspondant à partir de 1,5 g de l'intermédiaire précédent. On met l'acide en suspension dans 5 ml d'acide formique à 50%. On chauffe la suspension brièvement au bain-marie à 60-80°C et on agite le mélange doucement pendant 10 minutes. Puis on refroidit et on filtre le mélange réactionnel. L'addition d'eau au filtrat donne un précipité que l'on enlève par filtration. On concentre le filtrat sous vide pour obtenir une huile jaune que l'on dissout dans quelques millilitres d'éthanol dénaturé. On ajoute l'éther éthylique jusqu'à ce que la précipitation soit totale. On filtre la suspension et l'on obtient 18 mg de produit identique au produit de l'exemple 2.

Exemple 5

On dissout 30 mg du produit de l'exemple 3 dans 1 ml d'un solvant, on ajoute une petite quantité de base puis on ajoute 7,3 mg de thiourée. Puis on agite le mélange réactionnel à la température ambiante et on suit les réactions par Chromatographie sur couche mince. On identifie le produit de l'exemple 2 à l'état pratiquement pur après des durées de réaction de 5 à 24 heures dans divers cas. Les solvants et les bases utilisés avec succès dans le procédé précédent sont les suivants:

a) diméthylformamide plus triéthylamine b) diméthylformamide plus acétate de sodium c) eau plus bicarbonate de sodium d) pyridine (pas de base supplémentaire)

Exemple 6

On agite 10 g de 7-[2-(2-tritylamino-4-thiazolyl)-2-méthoxy-iminoacétamido]-3-bromométhyl-3-céphem-4-carboxylate de 4-nitrobenzyle à la température ambiante de 40 ml de diméthylformamide avec 2,5 g de 3-mercapto-4-méthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-di-hydro-l,2,4-triazine pendant 6 heures. On ajoute 0,5 g sup-

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plémentaire de thiol et on agite le mélange pendant 16 heures supplémentaires. Puis on verse le mélange réactionnel dans un mélange 1:1 d'acétate d'éthyle et d'acide chlorhydrique aqueux dilué, et on lave la couche organique successivement avec de l'acide chlorhydrique dilué, de l'eau, une solution aqueuse diluée de bicarbonate de sodium et une saumure.

Puis on filtre la couche organique et on la concentre sous vide jusqu'à une mousse. On obtient 10,5 g de produit brut que l'on purifie par Chromatographie sur gel de silice et l'on obtient 1,5 g de 7-[2-(2-tritylamino-4-thiazolyl)-2-méthoxy-iminoacétamido]-3-(4-méthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-di-hydro-1,2,4-triazin-3-ylthio)méthyl-3-céphem-4-carboxylate de 4-nitrobenzyle. On ajoute 100 mg du produit précédent à 5 ml d'acide formique aqueux à 50% et on chauffe au bain-marie en agitant pendant 10 minutes. Puis on refroidit le mélange et on le filtre et on concentre le filtrat sous vide jusqu'à une huile. On triture l'huile avec de l'éthanol dénaturé et on isole le solide par filtration, ce qui donne 42 mg du produit de l'exemple 2 sous forme de l'ester 4-nitrobenzylique.

L'hydrogénation du produit précédent donne le produit de l'exemple 2 sous forme essentiellement pure.

Exemple 7

On effectue une acylation essentiellement selon le procédé de l'exemple 3, mais la réaction se fait à la température ambiante. Les substances de départ sont 1,85 g d'acide 7-amino-3-(4-méthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazin-3-ylthio)méthyl-3-céphem-4-carboxylique et 1,58 g du chlorure de l'acide 2-(2-chloro-acétyIamino-4-thiazolyl)-2-méthoxyamino-acétique sous forme de l'isomère anti. On fait réagir 1,06 g du produit obtenu à la température ambiante avec la thiourée et le bicarbonate de sodium comme décrit dans l'exemple 5 et

10

l'on obtient 0,55 g d'acide 7-[2-(2-amino-thia-zolyl)-2-méthoxyiminoacétamido]-3-(4-méthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)méthyl-3-céphem-4-carboxylique, qui est essentiellement sous forme s de l'isomère anti, facilement identifié par RMN qui indique un singulet à un proton représentant le proton en C-5 du cycle thiazole, à 5 7,98 ppm.

Exemple 8

io On met 1,9 g (7 mmoles) d'acide 7-aminocéphalospora-nique en suspension dans 70 ml d'acétonitrile sec et on ajoute 7 ml de N,0-bis(triméthylsilyl)acétamide. On agite le mélange vigoureusement puis on le refroidit dans un mélange de glace et d'acétone sous atmosphère d'azote et on ajoute 7 mmoles 15 d'acide 2-(2-tritylamino-4-thiazolyl)-2-méthoxyiminoacé-tique. Après avoir agité le mélange réactionnel pendant 10 minutes, on enlève le bain de glace et on poursuit l'agitation pendant une heure. On concentre la solution à mi-volume sous vide et on la verse dans 200 ml d'eau. Après 15 minutes 20 d'agitation, on acidifie le mélange aqueux à pH 1,7 avec de l'acide chlorhydrique à 20%, et on sépare le produit intermédiaire par filtration, ce qui donne 4,5 g d'acide 7-[2-(2-trityla-mino-4-thiazolyl)-2-méthoxyiminoacétamido]céphalospora-nique.

25 On débloque le produit précédent avec de l'acide formique comme décrit dans l'exemple 2, et on en combine 113 mg avec 70 mg de 3-mercapto-4-méthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazine et 38 mg de bicarbonate de sodium dans 6 ml d'un tampon de pH 6,4. On maintient le 30 mélange aqueux à pH 6,2 et on le maintient à 55°C pendant 22 heures. On contrôle la réaction par Chromatographie sur couche mince et on identifie le produit par CCM comme étant identique au produit de l'exemple 2.

B

Claims

635846

REVENDICATIONS 1. Dérivé de céphalosporine de formule

R2NH

Raû

dans laquelle R est un atome d'hydrogène, un cation de métal alcalin ou le reste d'un ester choisi parmi acétoxyméthyle, 1-acétoxyéthyle, pivaloyloxyméthyle, 1-pivaloyloxyéthyle, carboéthoxyoxyméthyle, 1-carboéthoxyoxyéthyle et phtali-dyle; Ri est un atome d'hydrogène ou un groupement méthoxy; R: est un atome d'hydrogène; R3 est un atome d'hydrogène ou un groupement alkyle en C1-C4; et R4 est un groupement alkyle en C1-C4.
2. Composé selon la revendication 1, où R4 est un groupement méthyle.
3. Composé selon la revendication 1 ou 2, où Ri est un atome d'hydrogène.
4. Composé selon la revendication 3, où R3 est un groupement méthyle.
5. Composé selon la revendication 3 ou 4, où R est un atome d'hydrogène ou un cation de métal alcalin.
6. Composé selon la revendication 5, où R2 est un atome d'hydrogène.
7. Composé selon la revendication 1, qui est l'acide 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-méthoxyiminoacétamido]-3-(4-méthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazin-3-ylthio)-méthyl-3-céphem-4-carboxylique.
8. Composé selon la revendication 1, qui est le sel de sodium de l'acide 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-méthoxyimi-noacétamido]-3-(4-méthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)-méthyl-3-céphem-4-carboxylique.
9. Composé de formule I selon l'une des revendications 1 à 8, qui est l'isomère syn.
10. Composition pharmaceutique comprenant un support inerte acceptable sur le plan pharmaceutique et un composé de formule I selon l'une des revendications 1 à 9.
11. Procédé de préparation d'un composé de formule I selon la revendication 1, qui consiste à faire réagir un composé de formule

(I)

/\/ V '

•

I I

COOR R4

et R7 est un groupement amino, amino substitué par un groupement protecteur silyle, halohydrate d'amine ou un groupe-15 ment de formule

20

RsNH

l—!

'V

-CCONH-

II N

IV

RsO

25 où R8 est un atome d'hydrogène ou un groupement protecteur du groupement amino; dans l'un ou l'autre ordre, avec un thiol de formule

HS—*

35

V

quand Rô est autre qu'un groupement de formule III et avec un agent d'acylation de formule m

OH

45

RsNH' " 0

N l

RaO

'N

VI

II

I

COORs .

dans laquelle Rs est un atome d'hydrogène, un cation de métal alcalin ou le reste d'un groupement ester; Ró est un groupement acétoxy ou un atome de chlore, de brome ou d'iode ou un groupement de formule

III

qui est sous forme du chlorure, du bromure ou d'un ester 50 activé quand R7 est autre qu'un groupement de formule IV; à couper le groupement protecteur du groupement amino; et si Rs est un radical formant ester autre que acétoxyméthyle, 1-acétoxyéthyle, pivaloyloxyméthyle, 1-pivaloyloxyéthyle, carboéthoxyoxyméthyle, 1-carboéthoxyoxyéthyle et phtali-55 dyle, à couper le reste Rs et à recueillir le composé de formule I sous forme de l'acide ou du sel de métal alcalin.

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