KR960005730B1 - α-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 제조방법 - Google Patents

α-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 제조방법 Download PDF

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마사노부 아지오까
아끼히로 야마구찌
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미쓰이도오아쓰가가꾸 가부시끼가이샤
사와무라 하루오
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Abstract

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Description

α-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 제조방법
본 발명은 α-L-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 (이후에는 "α-APM"으로 약칭함)의 제조방법에 관한 것이다.
α-APM은 디펩티드계 감미료로서 널리 공지되어 있다. 이것은 양질의 감미특성 및 수크로오즈의 감미도의 200배에 가까운 높은 감미도를 가져서, 다이어트 감미료로서의 그의 수요가 매우 증가되고 있다.
α-APM은 L-아스파라긴산 및 L-페닐알라닌 메틸 에스테르로 형성된 디펩티드 화합물이다. 그의 제조방법으로서는 화학적 제조방법을 중심으로 하여, 다수의 방법이 공지되어 있으나, N-보호-L-아스파라긴산 무수물 및 L-페닐알라닌을 출발원료로 하는 방법이 일반적이다.
예를 들면, N-벤질옥시카르보닐-L-아스파라긴산 무수물 및 L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 염을 적어도 L-페닐알라닌 메틸에스테르의 염과 같은 양의 염기를 함유하는 불활성 용매내에서 반응시키고, 이렇게 형성된 N-벤질옥시카르보닐-α-L-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 (이후에는 "Z-α-APM"으로 약칭함)를 알칼리 염으로서 물내에 용해시키고, 용액을 산성화하고, 용액을 수불혼화성 유기 용매로 추출한 다음 추출물을 메탄올내에서 촉매 수소화함으로써 α-APM을 수득하는 방법이 공지되어 있다 (미합중국 제3,808,190호). 그러나, 이 방법에서는 추출시 산 및 알칼리의 사용으로 인하여 Z-α-APM의 가수분해가 발생하여서 α-L-아스파틸-L-페닐알라닌 (이후에는 "α-AP"로 약칭함)이 촉매 환원후에 부산물로서 생성된다.
또한, 일본국 특공소 제 40071/1976호는, 유기 용매내에서 N-벤질옥시카르보닐아스파라긴산 무수물과 L-페닐알라닌 메틸에스테르를 축합함으로써 수득된 Z-α-APM을 용매로서의 아세트산 또는 아세트산 및 물의 혼합 용액내에서 촉매 수소화시키는 α-APM의 제조방법을 공개한다. 그러나, 이 방법은 환원후에 α-APM을 단리하기 위하여 증류에 의해 아세트산을 제거해야 한다. 그러나, 감미를 갖지 않는 3-벤질-6-카르복시메틸-2, 5-디케토피페라진 (이후에는 "DKP"로 약칭함)이 증류시 형성되어 수율의 감소 및 품질의 열화를 야기한다.
일본국 특공소 제 25537/1982호는, Z-α-APM을 플라티늄-족 촉매를 사용하여 광산 수용액의 존재하에 환원시킨 다음 결과 반응 생성물의 수용액을 중화하는 α-APM의 제조방법을 공개한다. 그러나, 이 방법은 환원시 광산에 의한 생성 α-APM의 가수분해로 인하여 α-AP가 부산물로서 생성되기 때문에 환원후에 수용액을 염기로 중화시키는 단계를 필요로 한다. 또한 상기 광산 및 염기로 부터 형성된 염이 단리된 α-APM에 혼합되는 것을 피할 수 없으므로 아스파탐의 품질의 저하를 결과한다.
일본국 특공소 제25538/1982호는 N-벤질옥시카르보닐아스파라긴산 무수물 및 L-페닐알라닌 메틸 에스테르를 유기 지방족 용매내에서 반응시키고, 생성 Z-α-APM을 단리후에 또는 단리하지 않고, 철-족 촉매 및 플라티늄-족 촉매로 구성된 군으로 부터 선택된 적어도 하나의 촉매 존재하에 촉매 수소화시키고, 생성 α-APM을 광산 수용액내에 용해시킨 다음, 용액을 중화하는 α-APM의 제조방법을 공개한다. 그러나 이렇게 수득된 Z-α-APM은 반응에 부적절한 고체 형태이며, 이것을 분쇄하는 것은 어렵다. 이 방법은 또한, 상기한 방법과 유사하게 광산 수용액의 사용으로 인하여, α-APM이 가수분해되어 감미를 갖지 않는 α-AP를 부산물로서 생성하며 무기염은 정제된 α-APM내에 바람직하지 않게 혼합되는 추가의 단점을 갖는다.
상기 임의의 통상적인 기술에 있어서, 출발 원료로서 N-벨질옥시카르보닐-L-아스파라긴산을 사용하는 것은 목적 물질로서의 α-APM 외에 부산물 β-APM의 생성을 피할 수 없게 한다. β-APM은 감미 효과를 갖지 않을 뿐만아니라 반대로 쓴맛을 부여하여 이를 포함하는 것은 α-APM의 상업적 가치를 저하시킨다.
상기 α-APM 및 β-APM의 혼합물로 부터 β-APM을 단리하기 위한 방법으로서, 일본국 특개소 제6306/1974호는 α-APM 및 β-APM을 β-레조르실산과 수성 매체내에서 접촉시켜서 α-APM을 난용성 부가물로 전환하여, α-APM을 불순물인 β-APM으로 부터 분리하는 방법을 공개한다.
이 방법은 다량으로 함유된 불순물로 부터 α-APM을 분리할 수는 있으나, β-레조르실산올 α-APM 및 β-APM과 동량으로 사용하는 것과 α-APM부가 생성물을 그의 묽은 수용액으로 부터 그를 단리한후에 물로부터 재결정화 해야 하는 것으로 인한 귀찮은 조작을 필요로 하며 고가의 α-APM의 회수율이 낮기 때문에 경제적으로 불리하다.
한편, 일본국 특개소 제 41425/1974호는 β-APM을 함유하는 α-APM을 수용 매체내에서 할로겐화 수소산과 접촉시킴으로써 α-APM의 난용성 할로겐화수소산염을 형성하여 불순물로서 공존하던 β-APM을 분리하는 방법을 공개한다. 과량의 할로겐화수소산 수용액을 사용함으로써 실행되는 이 분리방법은 β-APM을 함유하고 있는 α-APM으로 부터 β-APM을 분리하는데 좋다. 그러나, 할로겐화수소산의 수용액내에서의 용해로 인하여 α-APM의메틸 에스테르의 가수분해가 진행되어, α-APM의 할로겐화수소산염의 회수열이 낮고 반응기 재질로서 고가의 내산성 물질을 사용해야만 한다는 단점을 갖는다.
상기한 바와 같이 산부가물로서 일단 단리된 α-APM의 광산염으로 부터 α-APM을 수득하기 위하여, 중화단계가 필요하다. 이 중화 조작은 α-APM의 광산염을 물에 용해하고, 염기를 용액에 첨가하여 중화한 다음 결정으로 형성된 α-APM을 분리함으로써 일반적으로 실행된다. α-APM이 수용액내에서 상당량 손실되기 때문에, 수율이 낮아진다. 여액은 광산 및 염기로 부터 형성된 다량의 염을 함유하기 때문에, 이것을 다시 앞의 단계에서 사용하기는 곤란하다. 이 방법으로 단리된 α-APM은 다량의 염을 함유하기 때문에, 재결정화 및 탈염과 같은 조작이 최종 생성물을 수득하기 위하여 필요하기 때문에 수율이 더 낮아진다.
상기한 바와 같이, 전술한 공지 α-APM의 제조방법은 하나 이상의 단점을 수반하며 공업적인 제조방법으로서 완전하게 만족스럽지 못하다. 특히, 통상적인 Z-α-APM의 환원 단계에서의 문제점을 해결하기 위해서는, 환원 반응을 수성 매체에서 실행하는 것이 바람직하다. 그러나 지금까지의 어느 방법도 상기 수성 용매내에서의 환원에 절절한 수성 Z-α-APM 현탁액을 효율적으로 얻을 수 없었다. 또한, Z-β-APM을 함유하는 Z-α-APM의 촉매 환원후의 α-APM의 단리시 고수율 및 고순도로 α-APM을 수득하는 어떤 방법도 발견되지 않았다.
본 발명의 목적은 낮은 불순물 함량을 갖는 α-APM을 고수율로 제조하는 공업적이고 효율적인 제조방법을 제공하는 것이다.
본 발명자들은 상기 문제점들을 극복하기 위하여 광범위한 연구를 진행하였다. 그 결과, 수성 용매내에서 Z-α-APM의 촉매 환원에 의해 α-APM을 제조시 미세입자 형태의 Z-α-APM의 수성 현탁액을 사용함으로써 반응을 빠르게 진행시키고 또한 부산물, 특히 α 및 β의 조합으로 인하여 4개종의 이성질체를 갖는 L-아스파틸-L-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 형성을 감소시킴을 발견하였다. 또한, 30중량% 이하의 Z-β-APM을 함유하는 Z-α-APM이 원료 물질로서 사용되는 경우, Z-α-APM의 수용액이 플라티늄-족 촉매의 존재하에 환원된후, 이렇게 형성된 α-APM이 완전히 용해되는 온도에서 촉매는 제거되고, 여액을 β-APM이 석출되지 않는 온도로 냉각하고, 석출된 α-APM을 수집한 다음 수용액으로부터 재결정화 하고, 재결정화 단계에서 분리되고 α-APM을 함유하는 수용액을 Z-α-APM의 수성현탁액에 사용하기 위하여 재순환시킬때 촉매 수소화후의 β-이성질체에 대한 α-이성질체의 비율(α/β 비율) 및 α-APM의 단리 수율 모두가 개선될 수 있음을 발견하였으며, 이로써 본 발명이 완성되었다.
본 발명의 방법에 따르면, Z-α-APM의 반응에 의해 고수율로 짧은 시간내에 α-APM의 수용액을 수득할 수 있다. 또한, 반응 혼합물로 부터 촉매 및 필요하다면 톨루엔을 제거한후에 반응 혼합물을 단순히 냉각함으로써 α-APM을 수득할 수 있다. 그의 재결정화는 α-APM을 고순도로 제공할 수 있다. Z-α-APM의 환원단계시, 재결정화 단계에서 분리되고 α-APM을 함유하는 수용액을 제사용함으로써, 환원후의 β-APM에 대한 α-APM의 비율은 출발 Z-APM의 α/β 비율보다 커지게 되어 결정화 단계에서 β-APM의 결정을 허여하지 않는 조건하에서 α-APM의 결정화 및 분리시 고수율을 달성할 수 있다. 또한, 재결정 단계에서 분리된 수용액을 가열 및 응축과 같은 단계를 통해서 가공시킬 필요없이 다시 사용할 수 있어서, DKP 및 α-AP와 같은 불순물이 형성되지 않는다. 또한, 임의의 광산을 사용함이 없이 Z-APM으로 부터 α-APM을 수득할 수 있다. 그러므로, 중화단계가 필요하지 않다. 그러므로, 그렇게 제조된 α-APM은 광산 및 염기로 부터 형성될 임의의 다른 염을 함유하지 않는다. 상기한 바와 같이, 본 발명의 방법은 실질적으로 불순물이 없는 고순도 α-APM의 효율적인 제조방법으로서 공업적으로 사용될 수 있다.
본 발명의 첫번째 양심에 있어서는, N-벤질옥시카르보닐-α-L-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 촉매 수소화에 의한 α-L-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 제조방법이 제공되며, 이는 상기 촉매 수소화를 평균 입경 800μm 이하의 입자 형태의 N-벤질옥시카르보닐-α-L-아스파틸-L-페닐알라닌 메텔 에스테르를 함유하는 수성 현탁액내에서 실행하는 것으로 구성된다.
본 발명의 두번째 양상에 있어서는, 30중량% 이하의 N-벤질옥시-β-L-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르를 함유하는 N-벤질옥시카르보닐--α-L-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 수성 현탁액을 수소로 플라티늄-족 촉매 존재하에 환원하고, 촉매를 여과해내고, 여액을 β-L-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르가 석출되지 않는 온도로 냉각하고, 석출된-α-L-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르를 수집하고, 이렇게 수집된 여액을 수성 용매내에 고온에서 용해하고, 생성 용액을 냉각하고, 석출된-α-L-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르를 수집하고 세척하여 정제된-α-L-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르를 수득하고, 정제 단계에서 분리되고 α-L-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르를 함유하는 수용액을 Z-α-APM의 수성 현탁액에 사용하기 위하여 재순환시키는 것으로 구성되는 α-L-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 제조방법이 또한 제공된다.
본 발명의 첫번째 양상의 주요한 특징은 수성 용매내에서의 Z-α-APM 촉매 수소화시 미세입자 형태의 Z-α-APM의 수성 현탁액을 사용한다는데 있다. 원료 물질, Z-α-APM은 통상적으로 N-벤질옥시카르보닐아스파라긴산 무수물 (이후에는 "Z-Asp 무수물"로 약칭함)을 L-페닐알라닌 메텔 에스테르 (이후에는 "L-PM"으로 약칭함)와 유기 용매내에서 반응시킴으로써 수득되며 소량의 미반응 Z-Asp 무수물을 함유한다. 이 Z-α-APM이 물과 불혼화성인 유기 용매, 예컨대 아세트산내에서 촉매 수소화될때, α-APM은 Z-Asp 무수물과 반응한후에 촉매 수소화되어 두개의 이성질체, α-L-아스파틸-α-L-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 및 β-L-아스파틸--α-L-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르가 형성된다. 원료물질, Z-α-APM이 Z-β-APM을 함유하면, α 및 β의 조합으로 인하여 네개의 이성질체(이후에는 선택적으로 "A2PM"으로 약칭함)가 형성된다. 그러나, 이 환원 반응이 수성 용매내에서 실행될때 A2PM의 생산은 감소된다. 보다 큰 입경을 갖는 Z-α-APM의 수성 현탁액이 사용된다면, 그의 효과는 작다. 미세한 Z-α-APM의 사용은 A2PM의 생산을 상당히 저하할 수 있다.
본 발명의 첫번째 양상에 따라서 방법에 사용되는 Z-α-APM은 불순물로서 Z-β-APM을 함유할 수도 있다.
본 발명의 두번째 양상에 따르면, (a) 30중량% 이하의 Z-β-APM을 함유하는 Z-α-APM이 수성 용매내에 현탁된후에, 플라티늄-족 촉매 존재하에 촉매 수소화되고, (b) 단계 (a)에서 수득된 반응 혼합물로 부터 생성 α-APM이 완전히 용해되는 온도에서 촉매를 제거하고, 필요하다면, 부산물로 형성된 톨루엔을 상분리에 의해 제거하고, (c) 단계 (b)에서 수득된 수용액을 β-APM이 석출되지 않는 온도로 냉각하고, 석출된 α-APM을 고체-액체 분리하여 조 APM을 수득하고, (d) 단계 (c)에서 수득된 조 APM을 수성 용매내에서 고온에서 용해한다음 냉각하여 α-APM을 석출하고, 석출된 α-APM을 고체-액체 분리한후 수득된 정제 APM을 세척하고, (e) 단계 (d)에서 고체-액체 분리 및 세척함으로써 수득되고 α-APM을 함유하는 수용액의 분획을 단계 (a)의 수성 용매로서 재사용한다.
본 발명의 두번째 양상의 주요한 특징은, 단계 (d)에서 분리되고 α-APM을 함유하는 수용액의 분획을 촉매 수소화 단계 (a)에서 수성용매로서 재사용한다는데 있다. 재결정화 단계에서 분리된 수용액의 분획내용, α-APM의 양은 재결정화 온도 및 세척 용액의 양에 따라서 변화할 수는 있을지라도 예를들면 5℃에서 재결정화시 여액 또는 세척액 100g 당 약 0.6g의 양으로 α-APM이 함유되어 있다. 수용액 분획은 또한 감미료로서 적절하지 않은 β-APM 또는 DKP를 함유한다. 그러나 β-APM 또는 DKP를 그 자체로 폐기하는 것은 바람직하지 않은데, 그의 폐기는 수율에 있어서의 감소를 결과하기 때문이다. 그러므로, 이를 앞의 단계로 재순환시키는 것이 필수적이다.
단계 (d)에서 분리된 수용액의 분획을 단계 (d)에서와 같은 상태로 재순환시키는 것이 기술적으로 가능하다. 그러나 이 방법에 따르면, β-APM, DKP등이 재순환된 수용액에 축적되어 최종 생성물이 이들 불순물과 혼합된다.
단계 (d)에서 분리된 α-APM을 함유하는 수용액의 분획이 본 발명에서와 같이 단계 (a)의 Z-APM의 환원단계로 재순환될때, β-APM 및 DKP와 같은 부산물을 단계 (c)의 조 APM의 단리시 분리된 용액내로 제외하여 개별적으로 가수분해시켜서 L-페닐알라닌 및 L-아스파라긴산을 수집한다. 그러므로 이들 부산물은 다음 단계, 즉 단계 (d)에 실질적인 영향을 미치지 않으므로, 재순환된 용액내에 축적되지 않으며 단계 (a)에서 재사용된다. 따라서, 단계 (d)로 부터 수득하는 정제 APM은 매번 동일한 조건하에서 저순도 조 농축물로 부터 분리되므로 정제된 APM은 안정한 고순도 풀질을 갖는다. α-APM은 단계 (d)로 부터 재순환되는 용액내에 함유되어 있기 때문에, 단계 (a)에서의 환원 반응후의 용액내의 β-APM에 대한 α-APM의 비율은 원료 물질내의 Z-β-APM에 대한 Z-α-APM의 비율보다 커서 단계 (c)의 α-APM 및 β-APM 사이의 분리 효율은 높아진다. 단계 (a) 내지 (d) 동안의 Z-α-APM을 기준으로 하는 α-APM의 전체 수율은 보다 높아진다.
임의의 Z-β-APM-함유 Z-α-APM이 그의 합성 방법에는 상관없이 본 발명의 두번째 양상에 사용될 수 있다. 그러나 30중량% 이하의 양이 Z-α-APM 함유 Z-β-APM이 하기 이유로 인하여 효율적으로 사용될 수 있다. α-APM 및 β-APM은 물내에서 실질적으로 동일한 용해도를 갖기 때문에, 30중량% 이상의 양으로 Z-β-APM을 포함하는 것은 환원 촉매를 여과에 의해 제거한후에, 여액을 β-APM이 석출되지 않고 석출된 α-APM이 단리되는 온도로 냉각한다 할지라도 α-APM의 낮은 수율을 결과한다. 그러므로, 다량의 α-APM이 여액내의 β-APM과 함께 손실되므로 효율이 손상된다.
본 발명의 첫번째 및 두번째 단계 모두에 있어서, 출발물질, 즉 Z-α-APM은 유기 용매로서 단계 (c) 및 (d)에서의 α-APM이 결정화를 저해하지 않는한 소량의 유기 용매를 함유할 수 있다. 유기 용매의 특정예는, 저급지방족 알콜, 예컨대 메틸알콜, 에틸알콜, n-프로필 알콜 및 이소프로필알콜; 에테르, 예컨대, 테트라히드로푸란 및 디옥산; 니트릴, 예컨대 아세토니트릴 및 프로피오니트릴; 유기 카르복실산, 예컨대 포름산, 아세트산 및 프로피온산; 방향족 탄화수소, 예컨대, 벤젠, 톨루엔 및 크셀렌; 및 염소화탄화수소, 예컨대 디클로로메탄 및 1,2-디클로로에탄을 포함한다.
본 발명의 방법에 사용되는 Z-α-APM 현탁액은 물을 유기용매내 Z-α-APM의 용액과 혼합함으로써 제조할 수 있다.
(1) 유기 용매가 물과 혼화성이라면, 석출된 Z-α-APM을 여과등에 의해 분리한 다음 이를 물에 현탁하는 것만이 필요하다. 상기 유기 용매의 예는 유기 카르복실산, 예컨대 아세트산 및 프로피온산; 아미드, 예컨대 디메틸포름아미드, 디메틸아세트아미드 및 N, N'-디메틸이미다졸리디논; 및 케톤, 예컨대 아세톤, 메틸 에틸 케톤 및 메틸 이소프로필케톤을 포함한다.
상기 방법에서 미립 Z-α-APM을 수득하기 위하여 물을 Z-α-APM을 함유하는 유기용매와 혼합시 물을 Z-α-APM을 함유하는 유기용매에 첨가하는 것이 바람직하다. 상기 혼합은 일반적으로 교반기가 장치된 결정기내에서 실행된다. Z-α-APM의 입자계는 혼합시 교반속도가 빠를 수록 보다 작아지기 때문에 교반 속도를 증가시키는 것이 바람직하다. 혼합은 통상적으로 교반 블레이드의 말단 선속도로 0.1m/초 이상에서, 바람직하게는 0.2m/초 이상의 속도에서 실행된다.
(2) 유기 용매가 물과 불혼화성일지라도, 물과 공비 혼합물을 형성하거나 물보다 낮은 비점을 갖는한 본 발명의 방법에 사용될 수 있다. 즉, 수성 현탁액은 z-α-APM이 함유되어 있는 유기 용매를 물과 혼합한후에 유기 용매를 증류시킴으로써 제조할 수 있다. 상기 유기 용매의 예는 탄화수소, 예컨대 벤젠, 톨루엔 및 n-헥산; 및 에스테르, 예컨대 에틸 아세테이트, 부틸 아세테이트, 아밀 아세테이트, 메틸 프로피오네이트 및 에틸 프로피오네이트를 포함한다.
상기 방법에 있어서 유기 용매내의 Z-α-APM의 농도에 부여도는 특별한 제한은 없으나, 농도는 일반적으로 5% 내지 30%일 수 있다. N-벤질옥시카르보닐-L-아스파라긴산 무수물 및 L-페닐알라닌 메틸 에스테르 사이의 반응이 상기 유기 용매내에서 실행될때, 반응 혼합물이 그 자체로서 사용될 수 있다.
물과 불혼화성인 유기 용매가 사용될때, 유기 용매내의 Z-α-APM 용액을 제조하고, 용액을 한번에 물과 함께 혼합한 다음 유기 용매를 증류시키는 것이 가능하다. 이 방법에 따르면, 침전된 Z-α-APM 결정이 함께 점착하는 경향이 있어서, 입경이 보다 커진다. 미립 Z-α-APM의 수성 현탁액을 수득하기 위해서는, 유기 용매 용액을 물내로 적가하는 동안 유기 용매를 증류한다. 이 방법으로 작고 균일한 입경의 Z-α-APM을 함유하는 현탁액을 수득할 수 있어서, 그로 인해 이후 환원 단계의 반응 속도가 보다 빨라지고 부산물의 형성이 상당히 감소된다.
유기 용매의 증류는 60℃ 이하에서 실행된다. 온도가 60℃ 이상이라면, 석출된 Z-α-APM은 서로 점착되어 입경이 증가된다. 그 결과, 이후 환원 반응의 속도는 극도로 지연되어, 부산물의 생성을 결과한다. 환원 반응에 있어서의 수성 Z-α-APM 현탁액내의 Z-α-APM의 입경은 통상적으로 10~800㎛이다. 입경이 작을수록, 환원 반응이 빨라진다. 반응 시간이 짧을 수록, α-AP 및 DKP와 같은 불순물의 생성이 적어지고 α-APM의 수율은 높아진다. 바람직하게는, 평균 입경이 200㎛ 이하인 Z-α-APM의 현탁액이 환원에 사용된다.
본 발명에 따라서 촉매 수소화가 실행되는 수성 용매는 물 또는 물 및 저급 알콜의 혼합물이다. 저급 알콜의 예는 메탄올, 에탄올 및 프로판올이며, 메탄올이 특히 바람직하다. 이 수성 용매는 소량의 하나 이상의 다른 유기 용매를 함유할 수 있다.
환원에서 사용될 수 있는 촉매의 예는 팔라듐-족 촉매, 예컨대, 팔라듐, 플라티늄, 코발트, 니켈, 루데늄 및 로듐을 포함한다. 이들 중에서, 팔라듐이 특히 적절하다. 예를 들면, 팔라듐-탄소가 바람직하다. 촉매의 양에 부여되는 특별한 제한은 없으나, 촉매를 Z-APM을 기준으로 하여 0.51~10중량%의 양으로 사용하는 것이 바람직하다. 환원은 표준 압력 또는 고온하에서 실행할 수 있다.
본 발명의 환원온도는 80℃ 이하, 바람직하게는 40~60℃이다. 환원시간으로서는, 온도에 따라서 변화할 수 있으나 2~10시간이 일반적으로 충분하다.
본 발명의 방법에 있어서 수성 현탁액내 Z-α-APM의 농도에 부여되는 특별한 제한은 없으나, 일반적으로 약 3% 내지 약 20%일 수 있다. 이렇게 제조된 현탁액의 농도가 20%를 초과한다면, 현탁액의 교반이 어려워지고 Z-α-APM의 입자 크기가 점점 커지기 때문에 상기 고농도는 바람직하지 않다. 그러나, 약 3% 이하의 농도는 용적 효율이 낮기 때문에 경제적이지 않다. 농도가 높다면, 환원후에 형성된 α-APM이 완전히 용해되지 않고 슬러리의 형태를 취해서, 촉매가 그 자체로 여과될 수 없다. 그러나, 환원 반응은 상기 상태에 있어서도 완결될 수 있다. 상기 경우에 있어서도, 촉매는 용매를 첨가하거나 반응 혼합물을 온도를 상승시킴으로써 그리고 α-APM을 용해시킴으로써 여과할 수 있다.
환원후에 촉매가 여과되는 온도는 생성 α-APM등이 완전히 용해되는 온도보다 낮다. 80℃ 이상에서는, α-L-아스파틸-L-페닐알라닌 및 DKP가 α-APM등의 가수분해 및 분자간 고리화에 의해 각각 형성되어서, α-APM의 단리 수율이 낮아진다. 촉매를 바람직하게 40~60℃에서 여과한다. 촉매 여과시의 α-APM의 농도는 바람직하게는 그 온도에서의 α-APM의 포화용액의 농도에 근접한다. 농도는 40~60℃의 온도에서 약 2~4중량%일 수 있다. 상기 농도 보다 상당히 낮은 농도에서, 냉각시 보다 적은 결정이 석출되어 수율이 떨어진다.
벤질옥시카르보닐기의 제거에 의해 형성된 톨루엔은, 비록 톨루엔을 환원 반응 도중 또는 후에 증발시킴으로써 제거할 수 있지만, 통상적으로 촉매 제거후에 상분리에 의해 제거한다.
촉매를 여과한 후에, 필요하다면, 톨루엔을 분리하고 여액을 냉각하여 조 α-APM의 결정을 수집한다. 냉각 방법에 부여되는 특별한 제한은 없다. 간접 냉각이 적용된다면, 냉각은 기계적인 교반을 포함하는 강제-대류 열전달 또는 전도 열전달에 의해 실행될 수 있다. 직접 냉각 방법으로서는, 용매를 감압 조건하에서 증발시켜서, 증발의 잠열에 의존하여 냉각을 실행할 수 있다.
β-APM이 포화되는 예정된 온도보다 높은한 임의의 석출온도가 적용될 수 있다. 그러나, 가능한한 낮은 온도에서 석출을 실행하여 수율을 높일 수 있는 것이 바람직하다.
침전된 조 α-APM의 결정을 고체-액체 분리에 적용하기 위한 방법으로서는, 여과 또는 원심분리와 같은 통상적인 방법이 사용될 수 있다.
수성 용매로 부터 재결정화 시킴으로써 이렇게 수득된 조 α-APM을 정제하기 위한 방법으로서는, 조 α-APM을 80℃ 이하, 바람직하게는 40~60℃의 온도에서 2~4중량%의 농도로 용해시킨다. 생성 용액을 5℃ 이하로 냉각한다. 침전된 α-APM의 결정을 여과에 의해 수집한 다음 세척하여, β-APM이 완전히 없는 α-APM을 단리한다. 여기에서 분리된 α-APM의 수용액을 재순환하고 단계 (a)의 Z-APM의 환원에 재사용한다. 여과액 및 세척액의 합한 수용액은 일반적으로 하기 조성을 갖는다 : 약 0.6중량% α-APM, 약 0.065중량%의 β-APM, 약 0.01중량%의 DKP, 및 약 0.01중량%의 α-AP, 상기한 바와 같이 Z-APM의 환원단계에 수용액을 재사용하는 것은 환원 단계에서의 β-APM에 대한 α-APM의 비율을 출발 Z-APM의 α/β 비율보다 높게 하여, α이성질체의 석출 및 분리가 용이할 수 있다.
본 발명의 방법은 하기 실시예의 의해 이후에 상세히 기술될 것이다.
[참고예 1]
아세트산 (658.8g) 내의 L-페닐알라닌 메틸 에스테르 (358.4g)의 용액 및 아세트산 (4382g) 내의 N-벤질옥시카르보닐아스파라긴산 무수물 (505.9g)의 용액을 15~20℃에서 3시간 동안 반응시킨후에, 생성 반응 혼합물을 1813g으로 농축했다. 지름 15cm의 교반 블레이드가 장치되어 있는 10ℓ-반응기내에서 300rpm에서 교반하여 농축물을 25℃에서 30분간 물 (3530g)내로 적가했다. 석출된 Z-α-APM 및 Z-β-APM의 혼합물을 여과에 의해 수집하고 건조하여, Z-APM 결정 (856.9g)을 수득했다. 고성능 액체 크로마토그래피에 (HLC)의해 분석한 결과, 결정은 Z-α-APM (658.1g) 및 Z-β-APM (164.5g)을 함유하는 것으로 발견되었다.
[실시예 1]
아세트산 (137.17g) 내의, 참고예 1에서 수득하고 Z-α-APM (76.8g, 0.179 몰)을 함유하는 Z-APM (100g)의 용액을 10cm 지름을 가지며 400rpm에서 작동하는 교반 블레이드에서 의해 교반하에 물 (369.5g)내로 부었다. 석출된 Z-α-APM을 여과에 의해 수집했다. 90㎛의 평균 입경을 갖는 Z-α-APM (72.40g)을 함유하는 이렇게 수득된 습윤 케익 (201.0g)에, 물 (1348.4g)을 첨가했다. 5% 팔라듐 탄소 (50% 습윤, 2.93g)을 첨가한 후에 60℃에서 촉매 수소화했다. 반응을 3시간내에 완결했다. 여과에 의한 촉매 제거후에 수득된 용액은 α-APM (48.74g, 0.1656 몰), DKP (0.30g), α-AP (0.21g) 및 A2PM (0.0146g)을 함유하는 것으로 발견되었다.
[실시예 2]
아세트산 (137.17g) 내의, 참고예 1에서 수득하고 Z-α-APM (76.8g, 0.179 몰)을 함유하는 Z-APM (100g)의 용액을 10cm 지름을 가지며 200rpm에서 작동하는 교반 블레이드에 의해 교반하에 물 (369.53g) 내로 부었다. 석출된 Z-α-APM을 여과에 의해 수립했다. 600㎛의 평균 입경을 갖는 Z-α-APM (72.4g)을 함유하는 이렇게 수득된 습윤 케익 (201.0g)에, 물 (1348.4g)을 첨가했다. 5% 팔라듐 탄소 (50% 습윤, 2.93g)을 첨가한 후에 60℃에서 촉매 수소화했다. 반응을 3시간내에 완결했다. 여과에 의한 촉매 제거후에 수득된 용액은 α-APM (48.74g, 0.1656 몰), DKP (0.30g), α-AP (0.21g) 및 A2PM (0.0054g)을 함유하는 것으로 발견되었다.
[비교예 1]
아세트산 (137.17g) 내의, 참고예 1에서 수득하고 Z-α-APM (76.8g, 0.179 몰)을 함유하는 Z-APM (100g)의 용액을 10cm 지름을 가지며 400rpm에서 작동하는 교반 블레이드에 의해 교반하에 물 (369.53g) 내로 부었다. 석출된 Z-α-APM을 여과에 의해 수집했다. 3000㎛의 평균 입경을 갖는 Z-α-APM (72.40g)을 함유하는 이렇게 수득된 습윤 케익 (200.97g)에, 물 (1348.4g)을 첨가했다. 5% 팔라듐 탄소 (50% 습윤, 2.93g)을 첨가한 후에 60℃에서 5시간동안 촉매 수소화했다. 그러나 반응은 완결되지 않았다. 여과에 의한 촉매 제거후에 수득된 용액은 Z-α-APM (31.9g, 0.07453 몰), α-APM (27.26g, 0.09263 몰), DKP (0.98g), α-AP (2.08g) 및 A2PM (0.0054g)을 함유하는 것으로 발견되었다.
[실시예 3]
1,2-디클로로에탄 (55.72g, 이후에는 "EDC"로 약칭함) 내의 L-페닐알라닌 메틸 에스테르 (17.83g)의 용액 및 EDC (370.5g) 내의 N-벨질옥시카르보닐아스파라긴산 무수물 (26.0g)의 용액을 15~20℃에서 3시간동안 축합했다. EDC (426.21g) 내의 이렇게 수득된 Z-α-APM (35.37g) 및 Z-β-APM (7.25g)의 용액을 EDC를 중류하면서 40℃, 감압하에서 1시간동안 물 (749.37g)에 적가하여 현탁액 (777.7g)을 수득했다. Z-α-APM 및 Z-β-APM 모두는 120㎛의 평균입경을 갖는 것으로 발견되었다.
[실시예 4]
에틸 아세테이트 (426.21g) 내의 참고예 1에서 수득한 Z-α-APM (40.96g)의 용액을 에틸 아세테이트를 증류하면서 60℃, 감압하에서 1시간동안 물 (749.37g)에 적가하여, 현탁액 (725.2g)을 수득했다. Z-α-APM의 평균 입경은 170㎛인 것으로 발견되었다.
[실시예 5]
클로로포름 (426.21g) 내의, 참고예 1에서 수득한 Z-α-APM (40.96g)의 용액을 40℃에서 감압하에서 유지하였으며, 여기에 클로로포름을 60℃에서 증류시키면서 1시간동안 물 (749.47g)을 적가했다. 현탁액 (750g)을 수득했다. Z-α-APM의 평균 입경은 650㎛인 것으로 발견되었다.
[실시예 6]
부틸 아세테이트 (576.0g) 내의, 참고예 1에서 수득하고 Z-α-APM (48.33g, 0.1128 몰)의 용액을 물(780g)에 첨가했다. 부탈 아세테이트를 45℃, 감압하에서 1시간동안 증류시켜서, 현탁액 (796g)을 수득했다. Z-α-APM의 평균 입경은 220㎛인 것으로 발견되었다. 5% 팔라듐 탄소 (50% 습윤, 2.87g)을 첨가한 후에 60℃에서 촉매 수소화했다. 반응을 3시간내에 완결했다. 여과에 의한 촉매 제거후에 수득된 용액은 α-APM (31.56g), DKP (0.51g), α-AP (0.63g) 및 A2PM (0.025g)을 함유하는 것으로 발견되었다.
[실시예 7]
EDC (220.74g) 내의, 참고예 1에서 수득하고 Z-α-APM (23.33g, 0.05446 몰)의 용액을 EDC를 증류하면서 40℃, 감압하에서 1시간동안 물 (377.8g)에 첨가하여, 현탁액 (403.5g)을 수득했다. Z-α-APM의 평균 입경은 110㎛인 것으로 발견되었다. 물 (131.8g)을 첨가하고 5% 팔라듐 탄소 (50% 습윤, 1.08g)을 또한 첨가한 후에 60℃에서 촉매 수소화했다. 반응을 3시간내에 완결했다. 여과에 의해 촉매를 제거한 후에 수득한 용액은 α-APM (15.50g, 0.05267 몰), DKP (0.17g), α-AP (0.32g) 및 A2PM (0.005g)을 함유하는 것으로 발견되었다.
[비교예 2]
EDC (426.21g) 내의, Z-α-APM (40.96g, 0.09561 몰)의 용액을 EDC를 증류하면서 80℃, 감압하에서 물 (749.37g)에 적가하여, 현탁액 (649.7g)을 수득했다. Z-α-APM의 평균입경은 1200㎛인 것으로 발견되었다. 물 (402.3g)을 첨가하고 5% 팔라듐 탄소 (50% 습윤, 2.15g)을 더 첨가한 후에, 80℃에서 6시간동안 촉매 환원시켰다. 그러나, 반응은 완결되지 않았다. 여과에 의해 촉매를 제거한 후에 수득된 용액은 Z-α-APM (7.84g, 0.01830 몰), α-APM (16.47g, 0.05596 몰), DKP (3.97g), α-AP (0.53g) 및 A2PM (0.09g)을 함유하는 것으로 발견되었다.
[실시예 8]
Z-α-APM (8.6g) 및 Z-α-APM (34.2g)의 혼합물을 물 (610g) 내에 현탁하고, 여기에 5% 팔라듐-탄소 (0.9g)을 첨가했다. 생성 혼합물을 60℃, 표준 압력하에서 2시간동안 촉매 환원시킨 후에, 촉매를 동일한 온도에서 여과했다. 톨루엔층을 분리한 후에, 수층을 점진적으로 냉각한 다음 5℃에서 1시간동안 교반했다. 동일한 온도에서, 침전된 결정을 여과에 의해 수집한 후에 세척하여 습윤 α-APM 케익 (64.0g)을 단리했다.
이렇게 단리된 습윤 α-APM 케익에 물 (472.7g)을 첨가하고 60℃에서 용해시켰다. 수득된 용액을 점진적으로 냉각한 다음 5℃에서 1시간동안 교반했다. 동일한 온도에서, 침전된 결정을 여과에 의해 수집하고, 물로 세척한 다음 건조하여, α-APM (15.6g)을 단리했다. 동시에, α-APM (3.7g) 및 β-APM (0.4g)을 함유하는 여액-세척액 혼합물을 또한 수득했다.
수득된 결정을 고성능 액체 크로마토그래피에 의해 분석했다. 그 결과, α-APM의 함량은 15.1g (Z-α-APM을 기준으로 하여 64.0%)이고 β-APM은 전혀 함유되어 있지 않은 것으로 발견되었다.
Z-β-APM (8.6g) 및 Z-α-APM (34.2g)의 혼합물을 재결정화 여액-세척액 혼합물 (528g) 및 물 (227g)의 혼합물내에 현탁하고, 여기에 5% 팔라듐-탄소 (0.9g)을 첨가했다. 생성 혼합물을 60℃, 표준 압력에서 2시간동안 촉매 환원시키고, 촉매를 동일한 온도에서 여과하고 톨루엔층을 분리했다. 수층을 점진적으로 5℃로 냉각하고, 동일한 온도에서, 침전된 결정을 여과에 의해 수집한 다음 세척하여서, 습윤 α-APM 케익(75.1g)을 단리했다.
이렇게 단리된 습윤 α-APM 케익에 물 (529.4g)을 첨가하고 60℃에서 용해시켰다. 수득된 용액을 점진적으로 냉각한 다음 5℃에서 1시간동안 교반했다. 동일한 온도에서, 침전된 결정을 여과에 의해 수집하고, 물로 세척한 다음 건조시켜서 α-APM (18.4g)을 단리했다. 동시에, α-APM (4.1g) 및 α-APM (0.4g)을 함유하는 여액-세척액 혼합물을 또한 수득했다.
수득된 결정을 고성능 액체 크로마토그래피에 의해 분석했다. 그 결과, α-APM의 함량은 17.9g (Z-α-APM을 기준으로 하여 76.2g)이며 β-APM은 전혀 함유되지 않은 것으로 발견되었다. 또한, Cℓ, SO4및 Na 이온의 함량은 모두 10ppm 이하인 것으로 발견되었다.
[실시예 9]
Z-β-APM (8.6g) 및 Z-α-APM (34.2g)의 혼합물을 실시예 8에서 수득한 재결정화 여액-세척액 혼합물 (610.7g) 및 물(117.1g)의 혼합물에 현탁하고, 거기에 5% 팔라듐-탄소 (0.9g)를 첨가했다. 생성 혼합물은 40℃, 표준 압력에서 3시간동안 촉매 환원시킨 후에, 침전된 결정을 60℃에서 용해하고, 촉매를 동일한 온도에서 여과하고 톨루엔층을 분리했다. 수층을 점진적으로 5℃로 냉각하고 1시간동안 교반하고, 동일한 온도에서, 침전된 결정을 여과에 의해 수집한 다음 세척하여, 습윤 α-APM 케익 (77.1g)을 단리했다.
이렇게 단리된 습윤 α-APM 케익에 물 (539.5g)을 첨가하고 60℃에서 용해시켰다. 수득된 용액을 점진적으로 냉각한 다음 5℃에서 1시간동안 교반했다. 동일한 온도에서, 침전된 결정을 여과에 의해 수집하고, 물로 세척한 다음 건조하여 α-APM (18.5g)을 단리했다. 동시에, α-APM (4.2g) 및 β-APM (0.4g) 함유하는 여액-세척액 혼합물 (635.8g)을 또한 수득했다.
수득된 결정을 고성능 액체 크로마토그래피에 의해 분석했다. 그 결과, α-APM의 함량은 17.9g (Z-α-APM을 기준으로 하여 76.2%)이고 β-APM은 전혀 함유되지 않은 것으로 발견되었다.
[실시예 10~17]
실시예 9의 재결정화 여액을 재사용하여, 조작을 실시예 9와 유사한 방법으로 실행했다.
상기 조작을 8회 반복했다. 실시예 8~17의 α-APM의 단리 수율을 표 1에 나타낸다.
β-APM은 실시예 17까지의 어느 샘플에도 함유되어 있지 않았다.
[실시예 18]
Z-β-APM (12.8g) 및 Z-α-APM (30g)의 혼합물을 물 (529.5g) 내에 현탁하고, 여기에 5% 팔라듐-탄소 (0.9g)를 첨가했다. 생성 혼합물을 60℃, 표준 압력하에서 2시간동안 촉매 환원시킨 후에, 촉매를 동일한 온도에서 여과했다. 톨루엔층을 분리한 후에, 수층을 점진적으로 냉각한 다음 5℃에서 1시간동안 교반했다. 동일한 온도에서, 침전된 결정을 여과에 의해 수집한 후에 세척하여 습윤 α-APM 케익 (50.0g)을 단리했다.
이렇게 단리된 습윤 α-APM 케익에 물 (350.0g)을 첨가하고 60℃에서 용해시켰다. 수득된 용액을 점진적으로 냉각한 다음 5℃에서 1시간동안 교반했다. 동일한 온도에서, 침전된 결정을 여과에 의해 수집하고, 물로 세척한 다음 건조하여, α-APM (11.9g)을 단리했다. 동시에, α-APM (2.9g) 및 β-APM (11.9g)을 함유하는 여액-세척액 혼합물을 또한 수득했다.
수득된 결정을 고성능 액체 크로마토그래피에 의해 분석했다. 그 결과, α-APM의 함량은 11.5g (Z-α-APM을 기준으로 하여 55.8%)이고 β-APM은 전혀 함유되어 있지 않은 것으로 발견되었다.
[실시예 19]
Z-β-APM (12.8g) 및 Z-α-APM (34.2g)의 혼합물을 실시예 18에서 수득한 재결정화 여액-세척액 혼합물 (411.9g) 및 물 (196.4g)의 혼합물내에 현탁하고, 여기에 5% 팔라듐-탄소 (0.9g)을 첨가했다. 생성 혼합물을 60℃, 표준 압력에서 2시간동안 촉매 환원시키고, 촉매를 동일한 온도에서 여과하고 톨루엔층을 분리했다. 수층을 점진적으로 5℃로 냉각하고, 1시간동안 교반하고, 동일한 온도에서, 침전된 결정을 여과에 의해 수집한 다음 세척하여서, 습윤 α-APM 케익 (58.7g)을 단리했다.
이렇게 단리된 습윤 α-APM 케익에 물 (396.9g)을 첨가하고 69℃에서 용해시켰다. 수득된 용매를 점진적으로 냉각한 다음 5℃에서 1시간동안 교반했다. 동일한 온도에서, 침전된 결정을 여과에 의해 수집하고, 물로 세척한 다음 건조시켜서 α-APM (13.5g)을 단리했다.
수득된 결정을 고성능 액체 크로마토그래피에 의해 분석했다. 그 결과, α-APM의 함량은 13.1g (Z-α-APM을 기준으로 하여 63.6%)이며 β-APM은 전혀 함유되지 않은 것으로 발견되었다.
[비교예 3]
Z-β-APM (10.7g) 및 Z-α-APM (42.8g)의 혼합물을 메칸올 (235 ml) 내지 현탁하고, 여기에 1N-염산 (210 ml) 및 5% 팔라듐-탄소 (4.7g)를 첨가했다. 생성 혼합물을 실온, 표준 압력하에서 3시간동안 촉매 환원시킨 후에, 촉매를 여과하고 여액내 메탄올을 감압하에서 증류시켰다. 실온에서 침전된 결정을 여과에 의해 수집한 후에 세척하여 α-APM 히드로클로라이드의 습윤 케익 (36.9g)을 단리했다.
이렇게 단리된 α-APM 히드로클로라이드의 습윤 케익에 물 (265 ml)을 첨가한 후에, 10% 수성암모니아로 실온에서 중화했다. 생성용액을 5℃로 냉각시키고, 이 온도에서 용액을 1시간동안 교반했다. 동일한 온도에서, 침전된 결정을 여과에 의해 수집하고, 물로 세척한 다음 건조하여, α-APM (14.9g)을 단리했다.
수득된 결정을 고성능 액체 크로마토그래피에 의해 분석했다. 그 결과, α-APM의 함량은 14.4g (Z-α-APM을 기준으로 하여 61.2%)이고 β-APM은 전혀 함유되어 있지 않은 것으로 발견되었다. 그러나, Cl 이온의 함유량은 300ppm인 것으로 발견되었다.
[비교예 4]
(재결정화 단계에서의 여액 및 세척액의 재사용)
Z-β-APM (160.5g) 및 Z-α-APM (642g)의 혼합물을 물 (9150g)에 현탁하고, 여기에서 5% 팔라듐-탄소 (13.5g)을 첨가했다. 생성혼합물을 60℃, 표준 압력에서 3시간동안 촉매 환원시키고, 촉매를 동일한 온도에서 여과하고 톨루엔층을 분리했다. 수층을 점진적으로 5℃로 냉각하고, 1시간동안 교반하고 동일한 온도에서, 침전된 결정을 여과에 의해 수집한 다음 세척하여서, 습윤 α-APM 케익 (960.7g)을 단리했다.
이렇게 단리된 습윤 α-APM 케익의 일부 (64.0g)에 물 (472.7g)을 첨가하고, 60℃에서 용해시켰다. 수득된 용액을 점진적으로 냉각한 다음 5℃에서 1시간동안 교반했다. 동일한 온도에서, 침전된 결정을 여과에 의해 수집하고, 물로 세척한 다음 건조시켜서 α-APM (15.6g)을 단리했다. 동시에 α-APM (3.7g) 및 β-APM (0.4g)을 함유하는 여액-세척액 혼합물로 또한 수득했다.
수득된 결정을 고성능 액체 크로마토그래피에 의해 분석했다. 그 결과, α-APM의 함량은 15.1g (Z-α-APM을 기준으로 하여 64.9%)이며 β-APM은 전혀 함유되지 않은 것으로 발견되었다.
습윤 α-APM 케익의 일부 (64.0g)를 다음에 취하여, 여기에, 재결정화 여액-세척액 혼합물 (528g)을 첨가하여 습윤 α-APM 케익을 60℃에서 용해시켰다. 생성 용액을 점진적으로 냉각한 다음 5℃에서 1시간동안 교반했다. 동일한 온도에서, 침전된 결정을 여과에 의해 수집하고 물로 세척한 다음 건조하여, α-APM (17.9g)을 단리했다. 수득한 결정을 고성능 액체 크로마토그래피에 의해 분석했다. 그 결과, α-APM의 함량은 17.4g (Z-α-APM을 기준으로 하여 76.2%)이며 β-APM은 전혀 포함되어 있지 않았다.
상기 조작 (여액-세척액 혼합물의 재사용)을 4회 반복했다. α-APM의 단리 수율을 표 2에 나타낸다.
세번째 재사용부터, β-APM이 이렇게 단리된 α-APM 내에 0.1~0.3% 농도로 함유되어 있었다. 그러므로 재결정화를 다시 실행해야 할 필요가 있었다.
[실시예 20]
아세트산 (111.4g) 내의 L-페닐알라닌 메틸 에스테르 (60.6g)의 용액 및 아세트산 (741.0g) 내의 N-벤질옥시카르보닐 아스파라긴산 무수물 (52.0g)의 용액을 15~20℃에서 3시간동안 반응시킨 후에 생성 반응 혼합물을 306.6g으로 농축했다. 농축물을 10cm 지름을 가지며 400rpm에서 작동하는 교반 블레이드가 장치된 1-ℓ 반응기내에서 교반하에 25℃에서 물 (597.0g) 내로 30분동안 적가했다. 석출된 Z-α-APM 및 Z-β-APM의 혼합물을 여과에 의해 수집하여, 90㎛의 평균 입경을 갖는 습윤케익을 수득했다. HLC 분석의 결과, 결정은 Z-α-APM (113.8g) 및 Z-β-APM (26.7g)을 함유하는 것으로 발견되었다.
습윤 케익의 일부 (146.8g)을 실시예 3에서 수득한 재결정화 여액-세척액 혼하물 (610.7g) 및 물 (117.1g)의 혼합물에 용해한 후에 5%-팔라듐-탄소 (0.9g)을 첨가했다. 생성 혼합물을 60℃, 표준압력하에서 2시간동안 촉매 환원시키고, 촉매를 동일한 온도에서 여과하고 톨루엔 층을 분리했다. 수층을 점진적으로 5℃로 냉각하고 동일한 온도에서 1시간동안 교반했다. 침전된 결정을 여과에 의해 수집한 다음 세척하여 α-APM (26.2g)을 함유하는 습윤케익 (87.3g)을 단리했다. HLC 분석의 결과, 모두 α-APM을 기준으로 하는 불순물의 함량은 하기와 같은 것으로 발견되었다 : 0.6% DKP, 0.4% α-AP 및 0.03% A2PM, 습윤 α-APM 케익에 물 (522.0g)을 첨가하고 60℃에서 용해시켰다. 수득된 용액을 5℃로 점진적으로 냉각하고 동일한 온도에서 1시간동안 교반했다. 침전된 결정을 여과에 의해 수집하고 물로 세척한 다음 건조하여 α-APM (21.6g)을 수득했다. HLC 분석의 결과 α-APM의 함량은 21.0g (Z-α-APM을 기준으로 하여 71.4%)인 반면에 불순물의 함량은 0.2% DIP, 0.1% α-AP 및 0.03% A2PM인 것으로 발견되었으며 β-APM은 검출되지 않았다.

Claims (11)

  1. 촉매 수소화플 평균 입경 800㎛ 이하의 입자 형태의 N-벤질옥시카르보닐-α-L-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테를 함유하는 수성 현탁액내에서 실행하는 것으로 구성되는, N-벤질옥시카르보닐-α-L-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 촉매 수소화에 의한 α-L-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 제조방법.
  2. 제1항에 있어서, N-벤질옥시카르보닐-α-L-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르는 N-벤질옥시카르보닐아스파라긴산 무수물 및 L-페닐알라닌 메틸 에스테르를 유기 용매내에서 반응시킴으로써 수득한 것인 방법.
  3. 제1항에 있어서, 평균 입경 800㎛ 이하인 입자를 함유하는 수성 현탁액이 유기 용매내 N-벤질옥시카르보닐-α-L-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 용액을 물과 혼합하고, 침전된 결정을 분리하고 결정을 수용액내에 현탁시킴으로써 수득한 것인 방법.
  4. 제1항에 있어서, 평균 입경 800㎛ 이하인 입자를 함유하는 수성 현탁액이 유기 용매내 N-벤질옥시카르보닐-α-L-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 용액을 물과 혼합하고 유기용매를 60℃ 이하의 온도에서 증류시킴으로써 수득한 것인 방법.
  5. 제1항에 있어서, 평균 입경 800㎛ 이하인 입자를 함유하는 수성 현탁액이 유기 용매내 N-벤질옥시카르보닐-α-L-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 용액을 물에 적가하면서 60℃ 이하의 온도에서 유기 용매를 증류시킴으로써 수득한 것인 방법.
  6. 30중량% 이하의 N-벤질옥시-β-L-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르를 함유하는 N-벤질옥시카르보닐-α-L-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 수성 현탁액을 수소로 플라타늄-족 촉매 존재하에 환원하고, 촉매를 여과해내고, 여액을 β-L-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르가 석출되지 않는 온도로 냉각하고, 석출된 α-L-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르를 수집하고, 이렇게 수집된 여액을 수성 용매내에 고온에서 용해하고, 생성 용액을 냉각하고, 석출된 α-L-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르를 수집하고 세척하여 정제된 α-L-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르를 수득하고, 정제단계에서 분리되고 α-L-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르를 함유하는 수용액을 수성 현탁액에 사용하기 위하여 재순환시키는 것으로 구성되는 α-L-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 제조방법.
  7. 제6항에 있어서, N-벤질옥시카르보닐-α-L-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르가 N-벤질옥시카르보닐아스파라긴산 무수물 및 L-페닐알라닌 메틸 에스테르를 유기 용매내에서 반응시킴으로써 수득한 것인 방법.
  8. 제6항에 있어서, 수성 현탁액이 평균 입경 800㎛ 이하인 입자를 함유하는 방법.
  9. 제8항에 있어서, 평균 입경 800㎛ 이하의 입자를 함유하는 수성 현탁액이 유기 용매내 N-벤질옥시카르보닐-α-L-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 용액을 물과 혼합하고, 침전된 결정을 분리하고 결정을 수용액내에 현탁시킴으로써 수득한 것인 방법.
  10. 제6항에 있어서, 수성 현탁액이 유기 용매내 N-벤질옥시카르보닐-α-L-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 및 N-벤질옥시카르보닐-β-L-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 혼합물의 용액을 물과 혼합하고 60℃ 이하의 온도에서 유기 용매를 증류시킴으로써 수득한 것인 방법.
  11. 제10항에 있어서, 수성 현탁액이 유기 용매내 N-벤질옥시카르보닐-α-L-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 및 N-벤질옥시카르보닐-β-L-아스파틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 혼합물의 용액을 물에 적가하면서 60℃ 이하의 온도에서 유기 용매를 증류시킴으로써 수득한 것인 방법.
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