KR930013111A - 바실러스의 파라-니트로벤질 에스테라제를 암호화하는 재조합 dna 화합물 및 발현벡터 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 바실러스 서브틸리스로 부터의 PNB에스테라제를 암호화하는 단리된 DNA화합물, 및 재조합 DNA클로닝 및 발현벡터를 제공한다. 본 발명은 또한 이 벡터를 사용하여 형질전환시킨 숙주세포 및 재조합 DNA기술에 의해 PNB에스테라제를 생성하는 방법도 제공한다.
Description
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 플라스미드 pNBE1의 제한 효소 부위와 작용지도이다.
제2도는 플라스미드 pNB106R의 제한 효소 부위와 작용지도이다.
제3도는 플라스미드 pNB106RM의 제한 효소 부위와 작용지도이다.
Claims (13)
- 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)의 PNB에스테라제 활성을 암호화하는 DNA 서열을 포함하는 단리된 DNA 화합물.
- 제1항에 있어서, 명세서에 개시한 바와같은 서열 식별변호:2의 단백질을 암호화하는 단리돤 DNA 화합물.
- 제1항에 있어서, 암호화 가닥이 명세서에 개시한 바와 같은 서열 식별번호:1을 포함하는 단리된 DNA화합물.
- 제1항 내지 제3항중 어느 한 항에 따른 DNA 서열을 포함하는 제조합 DNA 벡터.
- 제4항에 있어서, 상기 PNB에스테라제 활성을 암호화하는 DNA의 발현을 유도하기 위해 위치한 프로모터를 또한 포함하는 제조합 DNA 벡터.
- 제5항에 있어서, 상기 프로모터가 에쉐리히아 콜라이(Escherichia coli)에 작용하는 제조합 DNA 벡터.
- 제4항 내지 제6항중 어느 한 항에 따른 재조합 DNA 벡터를 사용하여 형질전환시킨 숙주세포.
- 제4항 내지 제6항중 어느 한 항에 따른 재조합 DNA벡터를 사용하여 형질전환시킨 에쉐리히아 콜라이 세포.
- (a) PNB 에스테라제 활성을 발현시킬수 있는 재조합 숙주 세포에서 작용하는 프로모터 및 해독 활성화서열 및 (b) 상기 프로모터 및 해독 활성화 서열로 부터의 발현을 위해 위치한 바실러스 서브틸리스의 PNB 에스테라제 활성을 암호화하는 DNA 서열을 포함하는 재조합 DNA 발현 벡터를 사용하여 상기 숙주 세포를 형질전환시킴을 포함하는, 상기 숙주 세포를 제작하는 방법.
- (a)숙주 세포에서 작용하는 프로모터 및 해독 활성화 서열 및 (b) 상기 프로모터 및 해독 활성화 서열로 부터의 발현을 위해 위치한 바실러스 서브틸리스의 PNB 에스테라제 활성을 암호화하는 DNA 서열을 포함하는 재조합 DNA 발현 벡터를 사용하여 형질전환시킨 숙주 세포를 유전자 발현에 적합한 조건하에 배양함을 포함하는, PNB 에스테라제 활성을 발현시키는 방법.
- 제10항에 있어서, 상기 재조합 DNA 발현 벡터가 제2항 또는 제3항에 따른 DNA 서열을 포함하는 방법.
- 제11항에 있어서, 상기 숙주 세포가 에쉐리히아 콜라이인 방법.
- 세팔로스포린 PNB 에스테르 또는 1-카바세팔로스포린 PNB 에스테라제를 제10항, 제11항 또는 제12항의 공정에 의해 제조된 PNB 에스테라제와 반응시킴을 포함하는, 상기 에스테르로부터 p-니트로벤질 그룹을 제거하는 방법.※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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