KR920700545A - 개량된 생물학적 곤충 조절제 및 그의 제조방법과 그를 사용한 곤충 조절방법 - Google Patents

개량된 생물학적 곤충 조절제 및 그의 제조방법과 그를 사용한 곤충 조절방법

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KR920700545A
KR920700545A KR1019910700241A KR910700241A KR920700545A KR 920700545 A KR920700545 A KR 920700545A KR 1019910700241 A KR1019910700241 A KR 1019910700241A KR 910700241 A KR910700241 A KR 910700241A KR 920700545 A KR920700545 A KR 920700545A
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죠 엘. 케이
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Abstract

내용 없음

Description

개량된 생물학적 곤충 조절제 및 그의 제조방법과 그를 사용한 곤충 조절방법
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는RI및Ⅲ 제한 지도와 지도 단위들로 나타낸 AcMNPV 게놉상의egt유전자의 위치를 나타낸 AcMNPV 게놀의 개략적인 도면이고, 제2도는유전자 지역의 제한 엔도뉴클레아제 지도를 묘사한 패널 A, 오픈 리딩 프레임에 대한 결합서열을 컴퓨터 보조 분석한 결과를 나타낸 패널 B, 정지 코돈을 나타내는 수직선, 결합서열이“번역된”각 DNA 가닥들(1, 2, 3, 1′,2′,3′)에 대한 세개의 잠정적인 오픈 리딩 프레임들, EGT로 표신된에 상응하는 오픈 리딩 프레임(2)을 나타낸,유전자의 결합서열 및 그것의 분석 결과를 개략적으로 요약한 도면이고, 제3도는 AcMNPV (A)및 재조합 바이러스인 vEGIZ (B)및 vEGTDEL (C)의 egt유전자 지역의 구조들과 빗금친 부분의Z 유전자를 나타낸 개략적인 도면이다.

Claims (54)

  1. 개량된 생물학적 곤충 조절제에 있어서, 엑디스테로이드 변이 효소를 암호화하는 자연 발생적인 유전자가 불활성화된 곤충병원체를 포함하는 개량된 생물학적 곤충 조절제.
  2. 제1항에 있어서, 상기 유전자가유전자인 개량된 생물학적 곤충 조절제.
  3. 제2항에 있어서, 상기 곤충 병원체가 곤충 바이러스인 개량된 생물학적 곤충 조절제.
  4. 제3항에 있어서, 상기 곤충 바이러스가 배큘로바이러스인 개량된 생물학적 곤충 조절제.
  5. 제4항에 있어서, 상기 배큘로바이러스가 핵 다면성바이러스증 바이러스인 개량된 생물학적 곤충 조절제.
  6. 제5항에 있어서, 상기 핵 다면성 바이러스중 바이러스가 오토그래파 캘리포르니카(Autographa californica)핵 다면성 바이러스중 바이러스 및 오르기아 슈도츄가타(Orgyia pseudotsugata)핵 다면성 바이러스중 바이러스 중에서 선택한 개량된 생물학적 생물학적 곤충 조절제.
  7. 제6항에 있어서, 엑티스테로이드 UDP-글루코실 트랜스피라제를 암호화하는 불활성화된 유전자를 포함하는 상기 곤충 바이러스가 vEGTz및 vECTDEL 중에서 선택한 것인 개량된 생물학적 곤충 조절제.
  8. 제3항에 있어서, 상기 곤충 바이러스에 감염된 곤충세포들 내에서 형질발현 할수 있고, 탈피에 악영향을 주는 단백질을 암호화는, 적어도 하나의 이형의 유전자를 삽입함으로써 그 곤충 바이러스를 더 변이시킨 개량된 생물학적 곤충 조절제.
  9. 제8항에 있어서, 상기 이형의 유전자를 전흉선 주성 호르몬, 부호화 호르몬 및 유충 호르몬 에스테라제로 구성된 단백질들을 암호화하는 유전자들 사이에 선택한 개량된 생물학적 곤충 조절제.
  10. 제9항에 있어서, 상기 이형의 유전자가 전흉선 주성 호르몬으로 구성된 단백질을 암호화하는 유전자인 개량된 생물학적 곤충 조절제.
  11. 제10항에 있어서, 전흉선 주성 호르몬으로 구성된 단백질을 암호화하는 이형의 유전자 vEGT-SpPTTH인 개량된 생물학적 곤충 조절제.
  12. 제9항에 있어서, 상기 이형의 유전자가 부화 호르몬으로 구성된 단백질을 암호화하는 유전자인 개량된 생물학적 곤충 조절제.
  13. 제12항에 있어서, 부화 호르몬으로 구성된 단백질을 암호화하는 이형의 유전자가 vEGT-SpPEH인 개량된 생물학적 곤충 조절제.
  14. 제9항에 있어서, 상기 이형의 유전자가 유충 호르몬 에스테라제로 구성된 단백질을 암호화하는 유전자인 개량된 생물학적 곤충 조절제.
  15. 제14항에 있어서, 유충 호르몬 에스테라제로 구성된 단백질로 암호화하는 이형의 유전자가 vEGT-SpjHE인 개량된 생물학적 곤충 조절제.
  16. 개량된 생물학적 곤충 조절제의 제조방법에 있어서, a)탈피에 악영향을 주는 단백질을 암호화하는 유전자를 분리하고, b)상기 유전자를 자연적으로 발현하지 않는 유기체에 상기 유전자를 삽입하는, 개량된 생물학적 곤충 조절제의 제조방법.
  17. 제16항에 있어서, 상기 유전자가 엑디스테로이드 UDP-글루코실 트랜스피라제, 전흉선 주성 호르몬, 보화 호르몬 및 유충 호르몬 에스테라제 및 유충 호르몬 에스타제로 구성된 탈피에 악영향을 주는 단백질들 중에서 선택된 단백질을 암호화하는 개량된 생물학적 곤충 조절제의 제조방법.
  18. 제17항에 있어서, 상기 유기체가유전자를 발현하지 않는 곤충 바이러스인 개량된 곤충 조절제의 제조방법.
  19. 제18항에 있어서, 상기 유전자가 배큘로바이러스로부터 수득한 것인 개량된 생물학적 곤충 조절제의 제조방법.
  20. 제19항에 있어서, 상기 배큘로바이러스가 핵 다면성 바이러스중 바이러스인 개량된 생물학적 곤충 조절제의 제조방법.
  21. 제20항에 있어서, 상기 핵 다면성 바이러스중 바이러스를 오토그래파 캘리포르니카()핵 다면성 바이러스중 바이러스 및 오르기아 슈도츄가타()핵 다면성 바이러스중 바이러스로 구성된 핵 다면성 바이러스 중에서 선택하는 개량된 생물학적 곤충 조절제의 제조방법.
  22. 제16항에 있어서, 상기 유기체를 곤충 병원체, 비 식물 병우너성 박테리아, 식물-군체형성 박테리아, 곤충 병원성 박테리아, 곤충 병원성 균류 및 곤충 병원성 식물중에서 선택하는 개량된 생물학적 곤충 조절제의 제조방법.
  23. 유기체 내의 엑디스테로이드 변이 효소를 암호화하는 유전자를 불활성화시키는 개량된 생물학적 곤충조절제의 제조방법에 있어서, 상기 유전자가 유기체의 게놀의 본래의 부분인 개량된 생물학적 곤충 조절제의 제조방법.
  24. 제23항에 있어서, 상기 유전자가 엑디스테로이드 UDP-글루코실 트랜스피라제를 암호화하는 개량된 생물학적 곤충 조절제의 제조방법.
  25. 제24항에 있어서, 상기 유기체가 곤충 바이러스인 개량된 생물학적 곤충 조절제 제조방법.
  26. 제25항에 있어서, 상기 곤충 바이러스가 배큘로바이러스인 개랴된 생물학적 곤충 조절제의 제조방법.
  27. 제26항에 있어서, 상기 배큘로바이러스가 핵 다면성 바이러스중 바이러스인 개량된 생물학적 곤충 조절제의 제조방법.
  28. 제23항에 있어서, 엑디스테로이드 UDP-글루코실 트랜스퍼라제를 암호화하는 유전자를 불활성화시키는 삭제된 오토그래파 캘리포르니카()핵 다면성 바이러스중 바이러스중 바이러스 유도체를 곤충세포내에서 상기 바이러스의 일련의 사건후에 분리하는 개량된 생물학적 곤충 조절제의 제조방법.
  29. 제27항에 있어서, 상기 핵 다면성 바이러스중 바이러스를 오토그래파 캘리포르니카()핵 다면성 바이러스증 바이러스 및 오르기아 슈도츄가타()핵 다면성 바이러스증 바이러스중에서 선택하는 개량된 생물학적 곤충 조절제의 제조방법.
  30. 제29항에 있어서, 상기 핵 다면성 바이러스중 바이러스를 vEGTZ및 vEGTDEL 중에서 선택하는 개량된 생물학적 곤충 조절제의 제조방법.
  31. 제23항에 있어서, 곤충 세로내에서 형질발현이 가능하고 탈피에 악영향을 주는 단백질을 암호화하는 이형의 유전자를 삽입함으로써 상기 유기체를 유전적으로 더 변이시키는 개량된 생물학적 곤충 조절제의 제조방법.
  32. 제31항에 있어서, 탈피에 악영향을 주는 단백질 암호화하는 상기 제2의 유전자를 전흉선 주성 호르몬, 부화호르몬 및 유충 호르몬 에스테라제를 암호화하는 유저자들 중에서 선택하는 개량된 생물학적 곤충 조절제의 제조방법.
  33. 엑디스테로이드 변이 효소를 암호화하는 유전자를 발현시키기 위해 유전적으로 강화시킨 곤충 조절제에 곤충을 노출시키는 곤충 조절 방법에 있어서, 상기 엑디스테로이드 변이 효소가 상기 곤충에 대해 반대의 악영향을 미치게 되는 곤충 조절방법.
  34. 엑디스테로이드 변이 효소를 암호화하는 유전자를 포함하는 곤충 조절제에 곤충을 노출시키는 곤충 조절 방법에 있어서, 상기 엑디스테로이드 변이 효소를 암호화하는 유전자를 불활성화시킨 곤충 조절 방법.
  35. 제34항에 있어서, 상기 유전자가 엑디스테로이드 UDP-글루코실 트래스퍼라제를 암호화하는 곤충 조절 방법.
  36. 제35항에 있어서, 상기 곤충 조절제가 곤충 바이러스인 곤충 조절 방법.
  37. 제36항에 있어서, 상기 곤충 바이러스가 배큘로바이러스인 곤충 조절 방법.
  38. 제37항에 있어서, 상기 배큘로바이러스를 오토그래파 캘리포르니카()핵 다면성 바이러스중 바이러스 및 오르기아 슈도츄가타()핵 다면성 바이러스중 바이러스중에서 선택하는 개량된 곤충 조절방법.
  39. 제38항에 있어서, 상기 바이러스에 감염된 곤충 세포내에서 형질발현이 가능하고, 탈피에 악영향을 주는 단백질을 암호화하는 이형의 유전자를 삽입함으로써 상기 유전자를 불활성화 시키는 곤충 조절 방법.
  40. 제39항에 있어서, 탈피에 악영향을 주는 단백질 암호화는 상기 제2의 유전자를 전흉선 주성 호르몬, 부화 호르몬 및 유충 호르몬 에스테라제를 암호화하고 상기 바이러스에 감염된 곤충 세포내에서 형질발현이 가능한 유전자 중에서 선택하는 곤충 조절 방법.
  41. 곤충 조절제 및 농업용 적당한 담체를 포함하는 살충제 조성물에 있어서, 상기 곤충 조절제를 엑디스테로이드 UDP-글루코실 트랜스피라제를 암호화하는 자연 발생적인 유전자를 불활성화하기 위해 유전적으로 변이시킨 살충제 조성물.
  42. 제41항에 있어서, 탈피에 악영향을 미치는 단백질을 암호화하는 이형의 유전자를 형질발현시키기 위해 유전적으로 좀더 변이시키는 곤충 조절제를 포함하는 살충제 조성물.
  43. 제41항 또는 42항에 있어서, 상기 곤충 조절제가 곤충 바이러스인 살충제 조성물.
  44. 제43항에 있어서, 상기 곤충 바이러스가 배큘로바이러스인 살충제 조성물.
  45. 제44항에 있어서, 상기 배큘로바이러스가 핵 다면성 바이러스중 바이러스인 살충제 조성물.
  46. 제45항에 있어서, 상기 핵 다면성 바이러스 중 바이러스가 오토그래파 캘리포르니카() 및 오르기아 슈도츄가타() 중에서 선택한 핵 다면성 바이러스중 바이러스인 살충제 조성물.
  47. 엑디스테로이드 UDP-글루코실 트랜스퍼라제를 암호화하는 유전자의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 제조합 DNA 분자.
  48. 제47항에 있어서, 상기 서열이 표 1에 나타난 바와같은 뉴클레오티드 149에서 튜클레오티드 1670까지의 서열 또는 그와 기능적으로 동등한 서열인 제조합 DNA 분자.
  49. 제25항에 따른 개량된 곤충 조절제의 제조방법을 이용하여 제조한 곤충 바이러스.
  50. vEGTZ를 제조하는 방법에 있어서, a)제한 엔도뉴클레아제RI 및I으로 pUCBCPsB를 절단하고 그 결과 생긴 큰 단편을 정제하고, b)제한 엔도뉴클레아제RI 및 AhaⅢ으로 pSKS104로부터Z 유전자를 절단하고, c)pEGTZ를 형성하기 위해 T4 DNA 폴리머라제로I 블런트 말단을 만든 후 상기Z 유전자를 상기 pUCBCPsB의 큰 EcoRI-Xbal 단편과 함께 연결하고 d) SF세표에 PEGTZ 및 AcMNPV를 동시 감열시키고, e)β-갈락토시다제의 형질발현으로 바이러스 재조합체를 확인하고, f)상기 재조합체 vEGTZ를 정제하는, vEGTZ의 제조방법.
  51. vEGTDEL을 제조하는 방법에 있어서, a)제한 엔도뉴클레아제RI 및I으로 pUCBCPsB를 절단하고 그 결과 생기는 큰 단편을 정제하고, b)(a)과정의 상기 큰 DNA 단편의 양쪽 블런트 말단을 만들고, c)(b)과 정의 상기 큰 DNA 단편을 연결하고, d)상동의 재조합이 가등하도록 SF세포속에 pEGTDEL 및 vEGTZ를 동시 감열시키고, e)β-갈락토시다제의 형질발현시키지 않음으로써 상기 재조합 VEGTDEL을 확일하고, f)상기 재조합체 vEGTDEL을 정제하는, vEGTDEL의 제조방법.
  52. 재조합 (액디스테로 이드) UDP-글루코실 트랜스퍼라제에 있어서, 표1의 아미노산 서열을 포함하거나 적어도 그와 70%상동하는 이미노산 서열을 가지는 엑디스테로이드 UDP-글루코실 트랜스퍼라제를 포함하는 제조하 엑디스테로이드 UDP0글루코실 트랜스퍼라제.
  53. 본질적으로 순수한 엑디스테로이드 UDP-글루코실 트랜스퍼라제에 있어서, 표1의 아미노산을 포함하거나 적어도 그와 70% 상동하는 아미노산 서열을 포함하는 본질적으로 순수한 엑디스테로이드 UDP-글루코실트랜스퍼라제.
  54. 제53항의 엑디스테로이다 UDP-글로코실 트랜스퍼라제에 대해 특이적인 모노크로날 또는 폴리크로날 항체.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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