KR920002786A - 클로닝된 n-메틸하이단토이나제 - Google Patents

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KR920002786A
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부쳐 헬무트
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Abstract

내용 없음

Description

클로닝된 N-메틸하이단토이나제
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 길이가 약 0.6kb인 NMHase유전자 단편을 갖고 있는, 아트로박터로 부터 얻은 6kb길이의 EcoRI단편을 표시한다.
제2도는 NMHase유전자를 암호화한 3.0kb 길이의 영역을 갖고 있는, 아트로박터로 부터 얻은 3.7kb 길이의 Sall 단편을 표시한다.
제3도는 NMHase 유전자의 3'-말단 부분을 표시한다.

Claims (23)

  1. (1)서열번호 1에 표시된 핵산 서열, (2)유전암호의 축퇴범위내에서 이것에 상응하는 서열 또는 (3)엄격한 조건하에서 (1) 및/또는 (2)의 서열과 접종서열을 하는 서열을 가지며 N-메틸하이단토이나제 활성을 지닌 단백질을 암호화하는 DNA.
  2. 제1항에 정의된 DNA의 하나 또는 몇개의 카피를 함유한 재조합 벡터.
  3. 제2항에 있어서, 원핵생물용 벡터인 재조합 벡터.
  4. 제2항 또는 제3항에 있어서, 플라즈미드인 재조합 벡터.
  5. 플라즈미드 pBP010.
  6. 제2항 내지 제4항중 어느 한 항에 있어서, 제1항의 DNA가 조절가능한 프로모터의 조절하에 있는 재조합 벡터.
  7. 제6항에 있어서, 조절가능한 프로모터가 살모넬라 티피무룸으로 부터 얻은 mg1 프로모터의 재조합 벡터.
  8. 프라즈미드 pBP006.
  9. 제1항의 DNA 또는 제2항 내지 제7항중 어느 한 항의 벡터로 형질전화된 셀.
  10. 제9항에 있어서, 박테리아인 셀.
  11. 제10항에 있어서, E. coli인 셀.
  12. (1) 셀을 제1항의 DNA 또는 제2항 내지 제8항중 어느 한 항의 벡터로 형질전환시키고, (2) 형질전환된 셀을 적당한 배지에서 배양하며, (3) 상기 배지나 셀로 부터 단백질을 분리하는 것으로 NMHase 활성을 지닌 단백질의 제조방법.
  13. 제12항에 있어서, E. coli가 상기 셀로서 사용되는 방법.
  14. 제12항에 또는 제13항에 있어서, NMHase활성을 지닌 단백질을 암호화한 유전자가 조절가능하 프로머터의 조절하에 있는 DNA 또는 벡터가 형질전한에 사용되는 방법.
  15. 제12항 내지 제14항중 어느 한 항에 있어서, 형질전환된 셀이 최적 배양 조건에 못미치는 조건하에서 배양되는 방법.
  16. 제15항에 있어서, 상기 셀이 최소 배지내에서 배양되는 방법.
  17. 제15항 또는 제16항에 있어서, 상기 셀이 30℃인 최대 인큐베이션 온도에서 인큐베이팅되는 방법.
  18. 제15항 내지 제17항중 어느 한 항에 있어서, 배지내로의 산소공급을 감소시킨 방법.
  19. 제12항 내지 제18항중 어느 한 항에 있어서, 조절가능한 프로모터가 단지 불완전하게 유도되는 방법.
  20. 제12항 내지 제19항중 어느 한 항에 있어서, NMHase 1단위 (U)당 약 3.8nmol의 N-메틸하이단로인이 안정화를 위해 NMHase에 부가되는 방법.
  21. 제20항에 있어서, NMHase가 상승된 온도에서 N-메틸하이단토인 용액고 함께 인큐베이팅되는 방법.
  22. 제12항 내지 제21항중 어느 한 항의 방법에 따라 얻은 NMHase활성을 갖는 단백질.
  23. 제22항에 정의된 단백질을 함유한, 액체내 크레아티닌 함량을 정량하기 위한 시약.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
KR1019910011455A 1990-07-06 1991-07-06 클로닝된 n-메틸하이단토이나제 KR950010819B1 (ko)

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