KR880002608B1

KR880002608B1 - 펩타이드 유도체의 제법

Info

Publication number: KR880002608B1
Application number: KR8203911A
Authority: KR
Inventors: 윌킨슨 새뮤엘
Original assignee: 마이클 피이터 쟉슨; 더 웰캄 화운데이션 리미팃드
Priority date: 1977-11-24
Filing date: 1982-08-30
Publication date: 1988-12-04
Also published as: AT386211B; GB1604850A; DK523078A; US4343795A; JPS5492938A; KR830000214A; US4362717A; KR830000215A; PL211164A1; FI70415B; IL56028A; IT1106143B; ATA836278A; FI783589A; JPS6318600B2; KR830000683A; IE47517B1; HU186729B; KR860000453B1; US4363800A

Abstract

내용 없음.

Description

펩타이드 유도체의 제법

본 발명은 의약 및 수의약품으로서 유용한 펩타이드와 그의 유도체의 제조방법에 관한 것이다.

특히 본 발명은 몰핀작용을 가진 펩타이드와 그의 유도체에 관한 것이다. 일반적으로 또한 본 명세서에서 사용되듯이 몰핀작용제는 천연 알칼로이드의 생물학적 활성을 억제시키는 생물학적 활성을 가진 화합물이다.

몰핀의 약물학적 성질과 치료적 용도는 문헌(예를들면, 뉴욕 맥밀린 회사에 의해 출판된 "The Pharmacological Basis of Therapeutics"Goodman, L.S. 및 Gilman, A. eds., 제3판(1965), 특히 15장 247-266 페이지 및 런던 Phamaceutical Press 에 의해 출판된 "Matindale ; The Extra Pharamacopoeia"Blacow.N.W.ed., 제20판(1972), 특히 1100-1106 페이지 등)에 상세히 기록되어 있는데 이런 모든 문헌들은 여기서 참고로 이용된다. 그러나 잘 알려진 바와같이(Goodman, L.S.et al., loc.cit16장)몰핀을 반복투여하면 그 약에 대한 감수성이 커져서 탐닉이 생기고 내성이 커지며 투약을 중지했을때 금단증상이 나타난다. 오랫동안 몰핀의 단점이 없으면서도 몰핀과 같은 작용을 가진 화합물을 얻기 위해 연구가 계속되었다.

본 발명은 생체내 및 시험관내에서 몰핀작용을 나타내는 다음 구조식( I )을 가진 신규한 펩타이드와 그의염 및 그의 산부가염을 제공한다.

R¹-(X¹)_m-(X²)_n-X³-X⁴-Gly-X⁶-X⁷-(X⁸)_p-(X⁹)_q-R²( I )

상기 구조식( I )에서 R¹은 수소, 알케닐 또는 알킬이고, X¹과 X²는 같거나 다르며 각각 염기성 아미노산의 기(D 또는 L)이고, X³는 구조식 Q¹

의 L-기이며, 여기서 Q¹은 하이드록시, 알콕시, 알카노일옥시, 알킬, 니트로, 트리플루오로메틸, 아미노, N-알킬아미노, N,N-디알킬아미노, 할로겐 및 벤질옥시이고, R³는 수소 또는 알킬이며, X⁴는 구조식 알킬

Z.

의 D-기이고 여기서 알킬은 1-3개의 탄소수를 가지고 있고 Z는 -O-, -S-,-SO-, 또는 -SO₂-이고, a는 1,2 또는 3이며 b는 0 또는 1이다.

X⁶는 구조식 Q²

의 L-기이고, 여기서 Q²는 하이드록시, 알콕시, 알카노일옥시, 알킬, 니트로, 트리플루오로메틸, 아미노, N-알킬아미노, N,N-디알킬아미노, 할로겐, 벤질옥시, 메틸설파이드, 메틸설폭사이드, 메틸설폰 또는 수소이고, R⁴는 수소 또는 알킬기이다.

X⁷은 L-프로릴, L-하이드록시프로릴, L-호모프로릴, L-피페코리닐, L-트레오닐, L-세릴, 싸이클로루실, D-프로릴, D-하이드록시프로릴, D-메틸오닐, D-메틸오닐설폭 사이드, D-메티오닐설폰, D-이소루실, D-루실, D-노르루실, D-발릴, D-노르발릴, D-세릴, D-트레오닐, D-호모프로릴, D-피페코리닐 또는 D-알라닐이다.

X⁸및 X⁹는 같거나 다르며 각각 세릴(D 또는 L체)트레오닐 (D 또는L체)이다.

R²는 -OR⁵기(여기서 R⁵는 수소 또는 알킬)또는 -NR⁶R⁷기(여기서 R⁶와 R⁷은 같거나 다르며 각각 수소, 알킬, 또는 벤질이다). 또는 R⁶, R⁷및 질소원자가 결합하여 피롤리디노, 피페리디노 또는 모르폴리노를 구성한다. 또는 R²는 구조식 -CH₂OR⁸(여기서 R⁸은 수소 또는 알카노일)의 C-말단아미노산잔기의 1-카르복실기를 치환시킨 기를 나타내고 m.n.p. 및 q는 각각 0 또는 1이다. m.n.p. 및 q가 각각 0이고 R¹은 수소, X³는 L-티로실, X⁴는 D-메티오닐, D-메티오닐 설폭사이드 또는 D-메티오닐설폰이고 X⁶는 L-페닐알라닐, L-4-니트로페닐알라닐, L-4-클로로페닐알라닐 또는 L-4-메틸페닐알라닐이고, X⁷은 L-프로필, D-프로릴, D-메티오닐, D-메티오닐설폭사이드, D-메티오닐설폰, D-루실 또는 싸이클로루실일때는 R²는 -NR⁶R⁷(여기서 R⁶와 R⁷중 하나는 수소이고 나머지는 알킬 또는 벤질 이거나, R⁶, R⁷및 질소원자가 결합하여 모르폴리노, 피페리디노, 또는 피롤리디노 기를 형성시킨다)이 아니고 또한 X⁶가 L-페닐 알라닐이고 X⁷이 L-프로릴일때는 R⁶는 상술한 바와같은 -CH₂OR⁸기이다.

위에서와 같이 아미노산과 그의 기에서 사용한 약자는 당분야에 공지된 것들이고 예를들면 문헌 Biochemistry, 11, 1726(1972)에서 찾아볼 수 있다. 위에서와 아래의 모든 기술에서는 의미하는 것은 특별한 언급이 없는한 글리신을 제외하고는 모두 L-아미노산 및 그의 기에 관한 것이다. 염기성 아미노산이란 2개의 염기성기와 하나의 카르복실기를 가진 아미노산을 의미하는데 예를들면 X¹과 X²는 라이실(D 및 L), 호모아르기닐(D 및 L), 오르니틸(D 및 L), 히스티딜(D 및 L), α,γ-디아미노-부티릴(D 및 L) 및 아르기닐(D 및 L)이라 할 수 있다.

구조식( I )에서 Q¹, Q², R¹, R³, R⁴, R⁵, R⁶및 R⁷중의 알킬기, Q¹및 R²중의 알콕시, 알카노일옥시, N-알킬아미노 및 N,N-디알킬 아미노중의 알킬기나 알킬기들, 및 R⁸중의 알카노일중의 알킬기들은 각각 1-4개의 탄소수를 가지고 있고 바람직하기로는 1-2개의 탄소수 즉 메틸 또는 에틸인 것이 좋다. Q¹및 Q²중의 N,N-디알킬아미노 중의 알킬기들은 같거나 다를 수 있고 Q¹및 Q²중의 할로겐기는 각각 불소, 염소, 브롬, 요오드일 수 있다.

X⁴에 대한 정의로 특히 다음과 같은 기

및 그의 상응하는 설폭사이드와 설폰을 들 수 있다.

구조식( I )의 펩타이드중 산부가염에서 활성은 염기에 있고, 산은 비록 약물학적으로나 약제학적으로 수용체에 치료목적상 잘 이용되지만 덜 중요하다. 그러한 적당한 산의 예로는

(a) 무기산 : 염산, 브롬산, 인산, 메타인산, 질산 및 황산.

(b) 유기산 : 주석산, 초산, 구연산, 능금산, 젖산, 푸마르산, 안식향산, 글라이코린산, 글루콘산, 구론산, 호박산, 및 P-톨루엔설폰산 같은 아릴 설폰산이 있다.

약물학적이나 약제학상 사용가능한 산부가염은 사용불가능한 염들(예를들어 불화수소산염이나 과염소산염)과 함께 염기의 분리와 정제에 유용하고 물론 사용불가능한 염들도 당분야에 공지된 방법으로 허용가능한 염을 제조하는데 가치가 있다. 유리아미노기들을 함유한 이러한 펩타이드들은 모노-또는 폴리-산부가염의 형태로 얻어질 수 있거나 또는 여러가지 산들의 혼합염의 형태로 얻어질 수 있다.

마찬가지로 양이온과 카르복실음 이온으로 된 펩타이드의 염에서 양이온 종류는 비록 치료목적으로는 약물학적이나 약제학적으로 수용체에 곧잘 허용되지만 별로 중요하지 않다. 그러한 적당한 양이온의 예로는 소디움 및 칼륨이 있다.

구조식 ( I )의 펩타이드 및 그의 염과 산부가염의 몰핀활성은 아래와 같은데 이것은 단지 설명하기 위한 것이지 어떤 제한이 있는것이 아니다.

(A) 시험관내 시험

(i) 휴스(Hughes)등의 방법(Brain Research, 88(1975)296)에 따라 주파수 0.1Hz에서 시험했을때 생쥐의 적출된 수정관의 신경자극에 의한 수축을 억제시키고 공지의 마약성 길항제인 날록손(1-N-아릴-7,8-디하이드로-14-하이드록시노르모르피논)에 의해 억제작용을 해소시킨다.

(ii)페튼(Paton)의 방법(Brit. J. Pharmacol., 12(1957)119-127)으로 적출한 기니아 피그의 회장을 전기적으로 흥분수축시킨 것을 억제시킨다. (각 내장의 분절은 양극에 연결시키고 2-3g의 하중으로 매달았다. 흥분 측정기의 주파수는 0.1Hz이고 기간은 0.4ms 전압은 최소시에 30-40 볼트이고 수축은 등간격으로 전환되었다)

(B) 생체내 시험

(i) 이 화합물은 예를들어 에디엔비(Eddy, N.B)등의 변법(J. Pharm, Exp, Therap, 107, 385(1953))에 따라 시험했을때 당분야에 알려진 생쥐의 "가열판"표준시험에 효과적인 진통작용을 나타낸다. 이 화합물은 뇌혈관내 주사로 투여하고 이 작용은 날록손으로 해소된다. 예를 더 들면 이 화합물들은 헨더샷(Hendershot)등의 방법(J. Pharm, Exp, 125(1959),237)의 변형에 따라 시험했을때 생쥐에게 초산으로 야기시킨 통증을 감소시키는데 효과가 있다. 이 화합물들은 경구투여시키며 이 통증의 감소는 날록손에 의해 해소된다.

(ii)이 화합물들은 보우러(Boura)등의 방법(Brit, J, Pharmacol., 39, (1970)225)에 따라 기니아 피그에 시험했을때 진해작용을 나타낸다.

(iii)이 화합물들은 지사작용을 나타내는데 예를들면 피마자유로 야기된 쥐에서의 설사를 감소시키는데 효과적이다.

구조식( I )의 펩타이드, 그의 염 및 그의 산부가염은 많은 약물학적 표준시험으로 평가해 볼때 또한 쥐와 생쥐같은 실험동물에서 마취작용을 유발시키고 지속시킨다는 것을 알았다.

이 화합물들은 정맥주사나 뇌혈관 주사같은 비경구적 투여을 포함한 여러경로를 통해 투여했을때 이 점에서 효과가 있다. 이 화합물들의 마취작용을 설명하면 아래와 같은데 여기에서 어떤 제한이 있는것은 아니다.

(i)정향반사의 상실 : 이것을 클로랄하이드레이트(2,2,2-트리클로로-1,1-에탄디올), 우레탄(에틸 카르바메이트) 및 바르비튜레이트(바르비탈산의 유도체)와 같은 인정할 만한 마취제의 특성이다. 이 반사가 없는 동물은 밑으로 대고 뒤집어 놓았을때 정상위치로 뒤집어지거나 뒤집어 지려고 하지도 않는다.

(ii)귓바퀴 반사의 상실 : 여기서는 줄이나 소식자를 귓바퀴속으로 접어넣는다. 정상적인 대조동물에서는 그 귓바퀴를 흔들거나 뒤틀게 한다.

(iii)각막반사상실 : 여기서는 각막을 줄이나 유사체로 가볍게 건드린다. 정상적인 대조동물에서는 눈을 껌벅이게 된다. 이 반사는 인간에게 임상적으로 중요한데 그것은 일반적인 마취유도시에 가장 늦게 상실되는 반사중의 하나인 것이다.

상기한 (i) (ii)및 (iii)각각의 효과는 공지의 마약성 길항제인 날록손(1-N-알릴-7,8-디하이드로-14-하이드록시 노르모르피논)을 투여하여 회복시킬 수 있다. 그러나 모르핀 자체는 급성거환(acute bolus)주사로 치사량까지 투여했을때 생쥐와 같은 실험동물에서 정향반사가 상실되지 않는다는 것이 알려졌다.

구조식( I )펩타이드와 그의 염 및 그의 산부가염을 세분하면 다음과 같은 화합물을 들 수 있다.

(i)R¹이 수소이고, (ii)m과 n은 모두 0이고, (iii)X³는 L-티로실이고, (iv)X⁴는 D-메티오닐, D-메티오닐 설폭사이드 또는 D-메티오닐설폰이고 좋기로는 D-메티오닐 또는 D-메티오닐 설폭사이드이고 D-메티오닐 설폭사이드가 바람직하다. (v)X⁶는 L-페닐알라닐 또는 L-4-니트로페닐알라닐이고 L-4-니트로페닐알라닐이 더 좋다. (vi)X⁷은 L-프로릴 또는 D-프로릴이고 L-프로릴이 좋다. (vii)p와 q는 모두 0이고, (viii)R²는 -OR⁵(여기서 R⁵는 수소가 좋다), (여기서 R⁷은 수소 또는 알킬이 좋고 수소인 것이 바람직하다), 또는 -CH₂OR⁸(여기서 R⁸은 수소가 좋다)이다. 더욱 더 세분하면 구조식 -H-Tyr-X⁴-Gly-X⁶-X⁷-R²로 나타내는 펩타이드와 그 염 산부가염을 들 수 있다.

윗식에서 X4는 D-메틸오닐, D-메티오닐설폭사이드 또는 D-메티오닐 설폰이고, X⁶은 L-페닐알라닐, L-4-클로로페닐알라닐 또는 L-4-니트로페닐알라닐이고, X⁷은 D-프로릴, L-프로릴, D-루실, D-메티오닐설폭사이드 또는 싸이클로루실이고, R²는 구조식( I )에서 정의한 바와같다. 더욱 더 세분하면 구조식 -H-Tyr-X⁴-GLy-Phe(4NO₂)-X⁷-R²인 펩타이드와 그의 산부가염을 들 수 있다.

윗식에서 X⁴는 D-메티오닐설폭사이드 또는 D-메티오닐설폰이고 X⁷은 L-프로릴 또는 D-프로릴이고 R²는 1-4개의 탄소수를 가진 아미노 모노알킬아미노이다.

구조식( I )의 펩타이드 및 그의 염과 산부가염들은 유사한 구조를 가진 화합물의 제조방법으로 당분야에 알려진 어떤 방법으로도 제조할 수 있다. 그리하여 이들은 펩타이드 합성의 고전적 방법이나 고상공정을 이용한 적당한 아미노산의 일련의 커플링에 의하거나 우선 제조한 다음 펩타이드 보조단위를 커플링시켜 제조할 수 있다.

이러한 반응은 아미노산에 관게없이 카르복실산기의 활성화와 미반응 아미노 및 카르복실산기의 보호등에 영향을 받는다. 이러한 기술은 펩타이드 분야에서 기본적인 것이다.

적당한 활성기와 보호기 및 라세미체를 최소로하는 적당한 반응조건(커플링반응과 보호기제거반응 모두)에 대한 상세한 내용은 다음 문헌에서 발결할 수 있는데 이런 모든 문헌은 여기에서 참고로 하는 것이고 완전히 예를 든것에 불과하며 절대 과장하거나 제한하려는 뜻이 없다.

(a) 영국특허 번호 1,042,487 : 1,048,086 및 1,281,383

(b) Schroder and Lu"ebke, "The Peptides"(Academic Press) (1965).

(c) Bellean and Malek, J.Am, Chem.Soc.,90, 165(1968).

(d) Tilak, Tetrahedron Letters, 846(1970).

(e) Beyerman, Helv, Chim, Acta., 56, 1729(1973).

(f) Stewart and Young, "Solid Phase Peptide Synthesis"(W.H.Freeman and Co.,) (1969).

반응조건에 따라 구조식( I )의 펩타이드는 유리염기 형태 또는 산부가염이나 염형태로 얻어진다. 산부가 염은 유리염기나 다른 산의 염으로 얻어진다. 산부가염은 유리염기나 다른 산의 염으로 전환될 수 있고 염기들은 그의 산부가염으로 전환될 수 있는데 이런 기술은 당분야에서 알려져 있다. 따라서 펩타이드는 그의 염으로 전환될 수 있고 그 염은 잘 알려진 가술에 따라 펩타이드나 다른 염으로 전환될 수 있다.

펩타이드 분야에 종사하는 사람들은 아르기닐(D 또는 L)과 호모아르기닐(D 또는 L)기들은 상술한 바와 같은 방법으로 펩타이드 결합을 이룰뿐만 아니라 오르니틸기(D 또는 L)나 라이실기(D 또는 L)의 각각을 1-구아닐-3,5-디메틸피라졸과 같은 시약을 사용하여 구아닐화하여 그의 보조단위에서나 결합된 고리내에 그 자리에서 형성시킬 수도 있다는 것을 잘 이해할 것이다.

또한 구조식( I )의 펩타이드의 자체내의 전환도 가능하다는 것도 알 수 있을 것이다. 이와같은 R²가 -NR⁶R⁷인 펩타이드는 예를들어 메틸에스테르 같은 펩타이드 알킬에스테르(여기서 R²는 R⁵가 알킬인 -OR⁵임)를 적당하게 암모니아나 헤테로싸이클릭 염기 또는 모노-또는 디-아민과 반응시켜 제조할 수 있다. 이 펩타이드 에스테르는 펩타이드 산(R²는 R⁵가 수소인 -OR⁵임)으로부터 대표적인 에스테르화 반응을 이용하여 제조할 수 있고 이 에스테르는 바누화에 의해 펩타이드 산으로 전환시킬 수 있다.

X³나 X⁶기에서 하이드록시기인 Q¹이나 Q²는 예를들어 디아조에탄으로 메톡시기를 제공하듯이 적당한 디아조알칸을 사용하여 알콕시나 벤질옥시기로 전환시킬 수 있다. Q¹과 Q²중의 벤질옥시 및 알카노일옥시기는 메탄올내에서 10% 팔라듐함유 활성탄 촉매를 사용하여 가수 소분해하고 각각 알칼리 가수분해시켜 하이드록시기로 전환시킬수 있으며 하이드록시기는 일반적인 알카노일화 반응에 의해 알카노일옥시기로 전환시킬 수 있다. 이러한 모든것을 펩타이드 기술분야에서 공지된 기술이며 반응조건과 적당한 보호반응 및 보호기 제거반응에 대한 상세한 내용은 상술한 문헌을 참조할 수 있다.

구조식( I )의 펩타이드는 이미 상술한 바와같이 약물학적으로 또는 약제학적으로 허용되는 염류와 산부가염과 함께 모르핀 활성을 가지고 있기 때문에 모르핀유사 효과를 가진 약물을 사용해야 하는 어떤 질환에 의약과 수의약으로 포유동물의 치료에 사용될 수 있다.

그의 특수한 용도를 예를들어 언급하면 다음과같은 것이 포함된다.

(1)통증의 해소(진통제), 예를들어 신장산통이나 간산통에서와 같은 평활근 경련에 의해 일어나는 통증, 암과같은 말초질환에 의한 통증, 수술후기의 통증, 및 분만시의 통증의 해소. (2)진정작용, 예를들면 마취전에 사용하는 약제 : 진온작용, 수면작용, 특히 통증이나 기침때문에 잠못이룰때 : 및 일반적인 불안해소. (3)진해작용. (4)호흡곤란의 해소, 예를들면 급성좌심실 부전이나 폐부종에 의한 호흡곤란해소. (5)회장간 누공설치수술이나 결장조루수술 후 변비유동작용 및 설사나 이질의 치료시. (6)행복감의 유도 및 우울증의 치료, 예를들면 암과같은 말초질환의 통증해소에 병행하여 사용할때, 구조식( I )의 펩타이드와 그의 약물학적 및 약제학적으로 사용가능한 염과 산부가염은 포유동물에서 마취효과의 유도 및 지속에 의약 및 수의약품으로 사용될 수 있다. 펩타이드나 그의 염은 단일마취제로서 단독으로나 그의 작용을 보조해주거나 보충해주는 하나나 그 이상의 물질과 결합시켜 투여할 수 있다.

이러한 보조제는 펩타이드나 그 염을 투여하기 전이나 동시에 또는 후에 투여할 수 있고 동시에 투여할때에는 별도의 용량이나 복합제제로 하여 여러가지 물질을 투여할 수 있다.

이 펩타이드나 그의 염은 클로로디아제폭사이드(7-클로로-2-메틸아미노-5-페닐-3H-1,4-벤조디아제핀-4-옥사이드), 다아제팜(7-클로로-1,4-디하이드로-1-메틸-5-페닐-2H-1,4-벤조디아제핀-2-온) 및 옥사제팜(7-클로로-1,3-디하이드로-3-하이드록시-5-페닐-2H-1,4-벤조디아제핀-2-온)같은 벤조디아제핀 진온제와 함께 투여할 가능성도 있다.

또한 이 펩타이드와 그의 염은 다른 마취제 예를들면 티오펜탈 소디움(소디움 5-에틸-5-(1-메틸부틸)-2-티오바르비튜레이트)같은 바르비튜레이트를 미리 투여하여 일으킨 마취를 지속시킬 목적으로 투여할 수도 있다.

구조식( I )의 펩타이드와 그의 약물학적 또는 약제학적으로 허용되는 염들과 산부가염의 중요한 용도는 마취영역에서 정적상태, 주변자극에 대해 정신적인 무관심 상태 및 무감각상태라고 특징지을 수 있는 상태인 "신경억제성 진통상태"라는 상태로의 유도 및 지속에 있다.

참고 : 예를들면 1974년 W.B.Saunders 에 의해 출판된 Dorland'S Illustrated Medical Dictionary, 25판 1041페이지 및 1975년 Macmillan 출판사에 의해 출판된 Goodman, L. S and Gilman, A. eds의 The Pharmacological Basis of Therapeutics 5판, 특히 제8장, 97-101페이지, 이 모든것은 여기에 참고로 기록한 것이다.)

이러한 상태는 어느정도 환자의 협조가 필요한 기관지검사, X-선 감사, 화상드레싱 및 방광겸 검사와 같은 작업을 수행하는데 아주 바람직하다고 임상학자들에게 알려져 있다. 또한 마약성 진통제인 구연산 펜타닐(N-(1-페네틸-4-피페리딜)구연산 프로피온아닐리드와 신경억제제인 드로페리돌(1-{1-[3-(P-플루오로벤조일)프로필]-1,2,3,6-테트라하이드로-4-피리딜}-2-벤즈이미다졸리논)으로 구성된 약제 조성물은 이런 상태에서 사용할 수 있다고 알려졌다.

수의약품에서 마약성 진통제인 염산에토르핀(4,5α-에톡시-3-하이드록시-6-메톡시-α,17-디메틸-α-프로필-6,14-에테노모르피난-7α(R)-메타놀염산염)을 아세프로마진(1-10-{3-(디메틸아미노)프로필}-10H-페노티아진-2-일 에타논)이나 메토트라메프라진(2-메톡시-N,N,β-트리메틸-10H-페노티아진-10-프로피나민)중 하나와 결합시킨 2가지 조성물은 예를들어 골절정복 ; 상처봉합 및 거세시와 같은 신경억제 효과가 필요한 경우에 사용될 수 있는 것으로 알려졌다. 이제까지 신경억제성 진통효과가 상기한 바와같은 약품조성물을 투여하므로써 만이 성취되어 왔다. 구조식( I )의 펩타이드와 그의 사용가능한 염 및 산부가염들은 다른 부가적인 약제의 필요없이 단독으로 이러한 효과를 나타냄으로써 의약 및 수의 약분야에서 가치있는 부가품이 되고 중요한 임상적인 개가를 올렸다.

구조식( I )의 펩타이드와 그의 염 및 산부가염에 대해 이제까지 기술한 각각의 용도, 즉 마취(예를들면 신경억제성 진통효과)의 유도나 지속에 이용하느냐 아니면 모르핀유사 효과를 갖는 약제로서 사용하느냐 또는 투여용량은 투여방법과 원하는 효과에 필요한 정도 및 성질에 따라 다르고 궁극적으로 의사나 수의사의 처방에 따를 것이다.

그러나 일반적으로 이러한 용도로 사용시에 용량은 포유동물 체중 kg당 0.0025μg-40mg 좋기로는 0.025μg-10.0mg/kg 더 좋기로는 0.01μg-4.0mg/kg, 가장 적당하기로는 0.25-400μg/kg(모두 펩타이드 염기로 계산한것)일 것이다.

지사제로 사용시에는 인간의 경구용 상용량은 3mg의 단일 제제를 하루 2-3회 투여하고 전해제로 경구투여시는 30mg 단일 제제로 하루 2-3회 투여한다.

활성성부은 효과를 얻을 수 있는 어떤 적당한 경로를 통해서도 투여할 수 있는데 적당한 경로로는 경구투여, 직장투여, 비강투여, 국소(박칼정)투여, 질내투여 및 주사투여(피하주사, 근육주사 및 정맥주사를 포함하여)등이 있다. 바람직한 투여경로는 얻고자 하는 효과에 따라 여러가지인데 예를들면 분만시의 통증해소를 위해서는 직접척수에 투여하는 것이 바람직하다.

이 활성물질을 화합물원료 그대로 투여할 수도 있지만 약제학적 제형제제로 투여하는 것이 더 좋다.

본 발명의 동물용이나 인간치료에 사용할 제제는 상술한 바와같이 하나 또는 그 이상의 사용가능한 담체와 임의의 치료성문과 함께 활성성분으로 구성된다. 담체(들)은 제제의 다른 성분과 조제가능해야 하고 그의 수용체에 무해하여야 한다. 이 제제에는 펩타이드류와 조제할 수 없다고 알려진 다른 물질이나 산화제가 포함되지 않는것이 좋다.

비록 어떤 경우에 가장 적당한 투여경로는 활성성분과 치료하는 상태에 좌우되지만 적당한 제제로는 경구제, 직장좌제, 비강투여제, 국소제(박칼제), 질좌제 또는 주사제(피하주사, 근육주사 및 정맥주사를 포함함)등이 있다. 그 제제는 간단히 단위제형으로 약제학 분야에서 잘알려진 방법으로 만들어진다. 모든방법은 활성성분을 하나 또는 그 이상의 보조 성분으로된 담체와 결합시키는 단계를 포함한다. 일반적으로 이 제제는 균일하고 미세하게 활성성분을 액체담체나 미세한 고형담체와 결합시키고 필요에 따라 이 생성물을 원하는 제형으로 성형시켜 제조한다.

본 발명의 경구투여에 적당한 제형은 캅셀이나 카시아(cachet) 또는 정제인데 여기에는 미리 측정한 양만큼의 활성성분을 산제나 과립제 또는 용액제나 수용액이나 비수용액의 현탁제 또는 수중 유액 에멀젼이나 유중수액 에멀젼으로 함유시킨다. 또한 활성성분은 블루스(bolus)나 연약(electuary) 또는 페이스트 상태로 존재할 수 있다.

정제는 임의의 하나나 그 이상의 보조성분과 함께 형틀로 성형하거나 압축하여 제조할 수 있다. 압축정제는 활성성분을 임의의 결합제, 활체, 불활성 부형제, 윤활제, 계면활성제 또는 현탁화제와 함께 산제나 과힙제의 형태로 흘러보내어 적당한 기계로 압축하여 제조할 수 있다. 습제정제(moulded Tablets)은 분말화된 화합물의 혼합물을 불활성 액상부형제로 습윤하여 적당한 기계로 만들수 있다. 직장용제형은 코코아 버터같은 일반적인 담체와 함께 좌제로 만드는 반면 비강투여용 제형은 활성성분을 물이나 유액으로 혼합하여 바강투여용 점적액으로 만든다.

구강내의 국소투여용 제형에는 활성성분을 보통 슈크로스와 아카시아 또는 트라가칸트 같은 방향성 기제와 혼합한 함당정제(lozenge)와 활성성분은 젤라틴, 글리세린이나 슈크로스 및 아카시아의 같은 불활성기제와 혼합한 향정(pastille)이 있다.

질내투여에 적당한 제형에는 활성성분외에 적당하다고 당분야에서 알려진 담체를 함유한 페사리, 크림, 페이스트나 스프레이등이 있다. 주사투여에 적당한 제형에는 수용체의 혈액과 등장인 용액으로 만든 활성성분의 멸균수용액이 있다. 이러한 제형은 고형의 활성성분을 물에 용해하여 수용액을 만들고 이 용액을 멸균하고 수용체의 혈액과 등장액으로 만들어 쉽게 제조될 수 있다. 이 제제는 예를들어 밀봉된 앰플이나 바이알 같은 1회용 또는 다회용 용기에 넣을 수 있다.

담체가 고체인 비강투여에 적당한 제형에는 분말이 든 용기에 코에대고 코로 급히 흡입하여 투여될 수 있는 20-500 미크론의 입자크기를 가진 입자가 거친 산제가 있다.

상기한 성분외에 본 발명의 제제에는 희석제, 완충제, 향료, 결합제, 계면활성제, 농화제, 활제, 보존제(항산화제를 포함하여)등의 하나 또는 그 이상의 부가적인 성분을 함유할 수 있다. 인간이나 동물용 제형에는 상기한 단위제형에 활성성분을 0.125μg-2g, 좋기로는 1.25μg-200mg 가장 좋기로는 12.5μg-20mg 함유하는 것이 편리하다.(모드 펩타이드 염기를 기준으로 계산된것임).

다음의 실시예는 본 발명을 설명하기 위한 것이지 본 발명을 한정시키기 위한 것이 아니다. 모든 온도는 섭씨를 의미한다.

[실험]

다음 약자는 본 명세서 전반에 걸쳐 사용된다.

HOBT : 1-하이드록시벤조트리아졸 Pe : 석유 에테르

DCCI : 디싸이클로헥실카르보디이미드 EtOAc : 초산에틸

DCU : 디싸이클로헥실우레아 Z : 벤질옥시카르보닐

NNM : N-메틸모르폴린 Bu : 3급 부틸

DMF : 디메틸포름아마이드 BOC : 3급 부틸옥시카르보닐

Pr : 이소프로판올 Bzl : 벤질

Pr₂O : 디이소프로필 에테르

펩타이드는 메르크실리카겔 판상에서 다음 용매계로 TLC로 측정되었다.

1. 메틸에틸케톤

2. n-부탄올 : 초산 : 물(3 : 1 : 1)

3. 클로로포름 : 메탄올 : 32% 초산(120 : 90 : 40)

4. 클로로포름 : 메탄올 : 32% 암모니아(120 : 90 : 40)

5. n-부탄올 : 초산 : 초산에틸 : 물(1 : 1 : 1: 1)

6. 클로로포름 : 메탄올(8 : 1)

7. 클로로포름 : 메탄올 : 32% 초산(120 : 90 : 5)

8. 클로로포름 : 메탄올 : 32% 암모니아(120 : 90 : 5)

선광도는 벤딕스 NPL 자동 편광계로 측정되었다. 펩타이드 가수분해물(6N.HCl, 텅빈 밀봉 튜브안에서 110°로 24시간 동안)의 아미노산 조성은 베크만 쓰핀코 모델 120C 아미노산분석기나 랭크 크로모스탁 아미노산 분석기로 측정되었다.

다음의 일반적인 공정은 펩타이드 합성전반에 걸쳐 사용되었다.

(a)커플링은 DMF 에서 수행되고 DCCL에 의해 중개되었다. (b)아미노산에스테르 염산염은 트리에틸아민이나 N-메틸모르폴린 같은 3급 염기를 부가하여 유리에스테르로 전환되었다. (c)광학적으로 활성인 카르복시 말단아미노산을 가진 펩타이드가 단편 축합과정에 들어갔을때 커플링 단게에서 HOBT를 가했다. (d)커플링 반응은 4℃의 냉실에서 24시간 동안 진행되었다. (e)커플링 반응후 산과 염기를 씻어 미반응의 반응물을 제거하므로써 정제했다. (f)알카리 비누화는 메탄올 수용액내에서 N-NaOHl로 PH11.5-12.0 로 하여 자동적정기로 수행되었다. (g)벤질옥시카르보닐 보호기는 메탄올/초산내에서 10% 팔라듐 함유 활성탄으로 가수소 분해시켜 제거시켰다. (h)상기 가수소 분해결과 생성된 초산염은 메탄올성 염산을 가해 상응하는 염산염으로 전환되었다. (i)벤질보호기는 메탄올내에서 10% 팔라듐 함유활성 탄으로 가수소 분해시켜 제거시켰다. (j)3급 부틸 및 3급 부틸옥시카르보닐 보호기를 청소장치로서 아닐졸의 존재하에서 초산내에서 N-염산으로 제거시켰다. 분해는 60-90분간 진행시켰다. (k)스레오닌과 세린의 알콜성기에 있는 OBu 보호기는 10%의 물을 함유한 트리플루오로 초산으로 이분해는 90분간 진행되었다. (l)최종 펩타이드는 염산염의 형태로 분리되고 수용액으로부터 동결 건조시켰다.

[실시예 1]

H.Tyr.D-Met.Gly.Phe(4NO₂).Pro.NH2

이것은 표1에 나타난 도해에 따라 제조되었다.

생성물은 우선 염산부가염의 형태로 분리시키고 암모니움 아세테이트 완충액(0.001M-0.5M)으로 구배 용출시켜 카르복실메틸 셀룰로우스(CMC 52)상에서 정제시켰다. 수용액으로부터 동결건조시킨 다음 이 초산 부가염은 다음과 같은 특성으로 나타내었다. Rf : 0.52²: 0.83³: 0.47⁸

[실시예 2]

H.Tyr.D-Met(0).Gly.Phe(4NO₂).Pro,NH₂

이것은 실시예 1의 초산부가염을 빙초산내에서 과산화수소로 산화시키므로서 얻어졌다. 초산부가염 형태의 이 생성물은 수용액에서 동결건조시킨 후 다음과 같은 특성을 나타내었다.

Rf : 0.40²: 0.68⁴

BOC-D-Met.DCHA 염(28.38g)을 초산에틸(150ml)에 현탁시키고 물(75ml)에 녹일 KHSO₄(13.5g)의 용액과 함께 교반하였다. 용해가 완결될때 유기상을 분리하여, 물(2×60ml)로 두번 세척하고 무수 황상마그네슘 상에서 건조시키고 농축시켰다. 결과 유분을 THF(90ml)에 용해시키고 -25℃로 냉각하여 NMM(6.66g) 및 이소 부틸 클로로포름에이트(8.60g)으로 처리하였다. 이 반응혼합물을 -15℃에서 2분간 교반한후, DMF(90ml)에 녹인 Gly.OMe.HCl(7.53g) NMM(6.06g)의 미리 냉각(-25℃)된 용액으로 처리하였다. -15℃에서 2시간후 이 반응혼합물을 빙용에 옮기고, 2몰 KHCO-₃용액(12ml)로 처리하고 30분 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 제거하고, 그 잔사를 초산에틸(350ml)와 물(75ml)사이로 분배한후, 유기층을 5% 구면산용액(2×50ml), 5% NaHCO₃용액(2×50ml) 및 물(2×50ml)로 세척하였다. 추출물을 무수 황상마그네슘 상에 건조, 증발하여 석유 에테르로 분쇄한 고체를 얻었다.

수율 18.12g,94%, TLC : 2,7,8에서 단일 반점.

D-Met.Gly.OMe.HCl(2)

BOC-D-Met.Gly.OMe(1) (18.1g)을 아니솔(150ml)에 현탁시키고 M HCl/초산(440ml)로 처리하였다. 혼합물을 실온에서 30분간 교반하였다. 생성물을 건조 에테르의 첨가에 의하여 침전시키고, 여과하여 수집한후, 건조 에테르로 잘 세척하였다. 조 생성물을 물(450ml)에 용해시키고 용액을 에테르로 두번 세척하여 잔류 아니솔을 제거하였다. 수용성 용액을 동결건조하여 13.77g(생성물) 95%을 수득하였다. TLC : 2, 7, 8에서 순수

BOC-Try.D-Met.Gly.OMe(3)

BOC-Tyr(16.59g)을 THE(80ml)에 용해시키고 -25℃로 냉각하여, NMM (5.96g)을 가한후 급속히 교반하면서 이소부틸클로로 포름에이트(7.69g)을 가하였다.

-15℃에서 2분후, DMF(80ml)에 녹인 D-Met.GLy.OMe.HCl와 NMM (5.42g)의 미리 냉각된 용액을 가하고 교반을 -15℃에서 2.5시간 동안 계속하였다.

혼합물을 빙욕에 옮기로 2M KHCO₃용액 (65ml)로 30분간 처리하였다.

용매를 진공하에서 증발하여 제거한후 얻어진 잔사를 초산에틸(360ml)와 물(70ml)의 혼합물에 용해하였다.

유기상을 분리하여 5% 구연산 용액(2×50ml), 5% NaHCO₃용액 (2×50ml) 및 물(2×50ml)로 세척하였다. 건조(MgSO₄)하고 용매를 제거한후, 잔류 고체를 에테르로 분쇄하여 보호된 트리펩타이드의 21.16g(81.6%)을 수득하였다. TLC (2,7,8)에서 순수

BOC-Try.D-Met.Gly(4)

보호된 트리펩타이드(3) (21.1g)을 메탄올(350ml)와 물(150ml)의 혼합물에 용해시키고 2M NaOH (55ml)로 처리하여 비누화시켰다.

반응을 TLC (7)로 조정하고 45분후 완결된 것을 알았다. 메탄을을 진공하에 제거하고 수용성 용액을 얼음속에서 냉각시키고 M HCL (110ml)로 중화하였다. 침전 생성물을 여과하고 물로 여러번 세척하여 P₂O₅상에서 건조하였다.

수율 20.18g, 98%. TLC : 2, 7, 8에서 단일반점.

C₂₁H₃₁N₃O₇S 에 대한

이론치 : C,53.73 ; H,6.61 ; N,8.96%

실험치 : C,53.55 ; H,6.62 ; N,8.76%

BOC-Try.D-Met(O).Gly(5)

메탄올 (120ml)에 녹인 BOC-Try.D-Met.Gly (5.48g)의 용액을 2당량 과산화수소(29.4% 용액 2ml)로 처리하였다.

반응을 HPLC로 조정하였다. 실온에서 20시간후 , 혼합물을 건조, 증발하고 에테르로 분쇄하였다.

수율 5.46g, 96.5% M.P.186-188

C₂₁H₃₁N₃O₈S에 대한

이론치 : C,51.96 ; H,6.39 ; N,8.66

실험치 : C,52.13 ; H,6.38 ; N,8.53

BOC-Phe(4NO₂).Pro.OMe(6)

BOC-Phe(NO₂) (31.0g)을 DMF(150ml)에 용해시키고, HOBT (27.0g)을 가하고 혼합물을 DCCI(20.6g)을 가하기 전에 -5℃로 냉각하였다. 온도를 -5℃로 30분간 유지시키면서 DMF (30ml)에 녹인 Pro -OMe.HCl (16.55g)과 NMM (10.1g)의 용액을 가하였다. 반응혼합물을 5℃에서 20분간 교반한후 여과하여 DCU를 제거하였다. 진공하에서 증발하여 초산에틸 (1500ml)에 용해된 유분을 수득하여 5% 구연산 용액(2×250ml) 5% NaCO₃용액 (2×250ml) 및

포화 염화나트륨(2×250ml)로 세척하였다. 유기상을 건조, 농축하여 500ml를 얻었다.

DCU을 여과하여 제거하고 여액을 증발하여 특성을 알 수 없는 검을 수득하였다.

Phe(4NP₂).Pro.DMe.HCl(7)

보호된 디펩타이드 (21.41g)을 초산에틸(300ml)에 용해시키고 용액을 0℃로 냉각하였다. 온드을 0℃로 유지하면서 건조 염소가스를 45분간 용액 속으로 통과시켰다. 용액을 50ml로 농축시키고 건조 에테르(300ml)로 희석하였다. 냉각한후, 생성물을 여과하여 건조 에테르로 잘 세척하고 P₂O₅/NaOH상에서 건조하였다.

수율 15.64g, 85% m.p. 145-148°

C₁₅H₂₀N₃O₅Cl에 대한

이론치 : C,50.35 ; H,5.59 ; N,11.75%

실험치 : C,50.03 ; H,5.81 ; N,11.45%

BOC-Tyr.D-Met(O).Gly.Phe (4NO₂).Pro.OMe(8)

DMF (30ml)에 녹인 BOC-Tyr.D-Met(O).Gly (1.0g)의 용액을 -5℃로 냉각하고 HOBT (0.56g)과 DCCI (0.42g)으로 처리하였다. 혼합물을 -5℃에서 40분간 교반한후 DMF (5ml)에 녹인 NMM (0.21g)과 Phe (NO₂).Pro.OMe.HCl (0.74g)의 용액을 가하여 커플링 반응을 5℃에서 20시간 동안 진행하였다.

DCU를 여과하여 제거하고 여액을 진공하에 농축시켰다. 조 생성물을 초산에틸 (100ml)와 물(20ml)사이로 분배하였다. 유기층을 5% 구연산 용액 (2×20ml), 5% NaHCO₃용액 (2×20ml) 및 최종적으로 물(2×20ml)으로 세척하였다. 무수 황산마그네슘에서 건조·증발하여 에테르로 분쇄한 후, 무정형 고체 1.0g (62%)을 수득하였다. TLC (2)는 더 이상 정제되지 않는 생성물중 약간의 DCU의 존재를 나타냈다.

BOC-Tyr.D-Met(O).Gly.Phe (4NO₂).Pro.NH₂(9)

완전히 보호된 펜타펩타이드(1.0g)을 메탄올(15ml)에 용해시키고 용액을 얼음/염으로 냉각하여 암모니아로 포화시켰다. 플라스크를 밀봉시키고 혼합물을 실온에서 6시간동안 정체시켰다. 암모니아와 메탄올을 조심스럽게 제거한 후 생성물을 초산에틸/에테르로 부터 얻었다.

0.81g.83%, TLC (2,7,8)는 DCU의 존재와 출발물질의 적은 비를 나타냈다. 이 물질을 더 이상 정제함이 없이 다음 단계로 수행했다.

H.Tyr.D-Met(O).Gly.Phe (4MO₂).Pro.NH₂(10)

BOC-Tyr.D-Met(O).Gly.Phe (NO₂).Pro.NH₂(0.81g)을 아니솔(14ml)에 현탁시키고 M HCl/초산(80ml)로 처리하였다. 실온에서 45분후, 반응혼합물을 건조, 증발하고 잔사를 에테르로 분쇄하였다. 조 생성물을 카르복시메틸셀루로오스의 2.5×25㎝ 컬럼상에서 이온교환 크로마토그라피로 정제하였다.

용출물을 PH 0.1에서 0.005M-0.2M 초산암모늄으로 직선구배하였다.

수율 0.33%g, TLC 및 HPLC로 순수

C₃₀H₃₉N₇O₉S, CH₃CO₂H.H₂O에 대한

이론치 : C,51.13 ; H,6.00 ; N,13.05%

실험치 : C,50.83 ; H,6.06 ; N,12.91%

다음 펩타이드들은 상기와 실시예와 유사한 펩타이드 화합분야표준방법으로 특징적인 데이타를 가지고 제조되었다.

C-말단 유도체는 관례에 따라 표기했는데 예를들면 -NH₂: 아마이드, -NHEt : 에틸 아미이드, -OMe : 메틸에스테르등이다.

실시예5와 6의 화합물의 C-말단유도체(Pro.ol,에컨대 프로리놀)에서 프로릴기의 1-카르복실기는 -CH₂OH기로 치환된다.

이 화합물 제조시에 -Pro.ol기는 적당한 보조시약을 H.Pro.ol과 반응시켜 유도되고 프로린메틸에스테르(H.Pro.OMe)를 소디움보로하이드라이드로 환원시켜 제조되었다. 최종적인 중간체는 각각의 경우에 상응하는 BOC-티로실펜타펩타이드였는데 이것은 아니졸 존재하에 트리플루오로초산으로 반응시켜 보호기를 제거시켰다.

다음 반응은 파라위치가 CH₃.S-, CH₃.SO- 및 CH₃.SO₂- 잔기를 함유한 황에 의해 치환된 페닐알라닌의 유사체의 제조방법을 설명한 것이다.

이것은 실시예17, 18 및 19의 펩타이드에 나타나 있다.

DL아미노산은 클레스코트등의 방법(J.A.C.S.79 4332 (1957)에 따라 제조되었다. 아래 그 개요를 기록한다. 숫자는 상기 문헌에서 사용된 화합물에 따라 붙여진 것이다.

DL아미노산의 각각은 아세틸화되고 돼지신장의 아실분해효소에 의해 용해되어 L-아미노산과 D-아세틸아미노산으로 된다.

[Biochm.Biophys, Acta 148, 414 (1967), Helv, Chim, Acta 59, 2181 (1976)]

다음은 N-아세틸-P-메틸설피닐-DL-페닐알라닌의 효소분해를 설명한다 ; 아세틸-DL-아미노산6.75g (25미리몰)을 150ml에 용해하고 N-NH₂OH용액을 가해 PH를 7.5로 조정시켰다.

아실 분해효소 50mg과 초산코발트 200mg을 가하고 혼합물을 38℃에서 하룻밤 동안 서서히 교반시켰다.

초산을 가해 PH를 5.5로 조절하고 이 용액을 4×30㎝ 컬럼의 Dowex AG 50×2수지를 통과시켰다. 이 컬럼을 물로 씻고 L-아미노산을 0.5m 암모니아로 용출시켰다.

L- 아미노산류는 t-부틸옥시카르보닐 유도체로 전환되었고 펩타이드 화학에서의 일반적인 방법으로 펩타이드 고리로 통합되었다.

일반적인 방법은 아래 도식에 나타낸 바와 같다. 여러가지 커플링단계는 DCCI/HOBT에 의해서 중개되거나 혼합무수물과정에 의해 전달될 수 있다.

다음은 L-(-)-피페콜린산(L-(-)-헥사하이드로피리딘-2-카르복실산)을 함유한 유사물질의 제조방법을 설명한 것이다.

실시예12의 펩타이드 합성에는 중간체로서 L-(-)-피페콜린산의 아미드가 필요하다. 이것은 다음 반응식에 의해 얻어졌다.

그런다음 실시예12의 펩타이드 합성은 이미 상술한 방법과 유사한 방법으로 잰행되고 BOC.Try-D-Met-Gly.OH와

를 단편 축합한다.

그러면 이 펩타이드는

가 되고 이것으로 부터 청소장치로서 아니솔의 존재하에 빙초산내에서 N-염산에 의해 보호기를 제거시킨다.

다음은 β-호모프로린(피롤리딘-2-초산)을 함유한 유사물질의 제조방법을 설명한다.

BOC.L-프로린은 M.A.Ondetti와 S.L.Engel(J.Med.Chem.,18.761 (1975))에 의해 기술된 바와 같은 성질을 갖는다.

BOC.L-호모프로는 위에서 언급한 혼합무수물방법에 의해/BOC.L-호모프로.NH₂로 전환되고 이것으로부터 N.HCl/HOAC로 보호기를 제거시켜 L-호모프로.NH₂HCL이 얻어진다.

실시예21의 펩타이드는 단편

로 부터 일반적인 방법으로 제조된다.

제2위치에 있는 Met잔기는 H₂O₂로 처리함으로써 설폭사이드로 전환될 수 있다.

[표 1]

[실시예 27 : 약물학적 활성]

상기한 실시예들의 펩타이드들을 표준약물시험법에 따라 다음과 같은 활성시험을 하였다.

(A) 가열판 시험에서의 생쥐들의 진통효과 (Eddy, N.B 등 J.Pharm,Exp, Therap, (1953) 107,385 방법의 변형으로 펩타이드는 뇌혈관내 주사 투여함).

(B) 쥐에서의 지사효과, 이 시험에서는 쥐들을 24시간동안 굶기고 펩타이드를 피하주사 또는 경구투여하고 15분후에 쥐 한마리당 피마자유 1ml를 경구투여했다.

(C) 진해효과 시험에서는, 기니아 피그에 본 발명 화합물을 경구 또는 피하주사한 30분후에 20% 구연산을 함유한 에어로졸을 흡입시켰다. 5분동안 에어로졸속에서 기침하는 숫자를 세었다.

이 방법은 Boura,A.L.A.,Green,,A.F. 와 Saunders,I.A.Br.J.Pharmac., 1970년 5월, Vol 39,No.1,225페이지에 기술되어 있다.

(D) 생쥐의 뒤틀림 시험에서의 진통효과, (Hendershot등의 방법의 변법, (J.Pharm,Exp,Therap., 125(1959), 237펩타이드는 경구투여함).

얻어진 결과로 부터 각각의 ED₅₀이 계산되었다(예를들면 시험동물 50%에 적당한 효과를 나타내는데 필요한 용량)N.T는 시험하지 않았음을 의미함.

[실시예 28 : 약제학적 제제]

A) 정제 성형(20ml/정)

구조식( I ) 화합물 20mg

락토스 76mg

옥수수전분 10mg

젤라틴 2mg

마그네슘 스테아레이트 2mg

구조식( I )화합물을 락토스 및 옥수수전분과 혼합한다.

젤라틴 수용액으로 과립화하고 과립을 건조시킨 다음 마그네슘 스테아레이트를 가하고 압축하여 정제당 110mg의 정제를 생성시킨다.

B) 좌제(5mg/생성물)

구조식 ( I ) 화합물 250mg

좌제용 기제(Massa Esterinum C)를 가하여 100g으로 만든다.

좌제용기제를 40℃에서 용해하고 조금씩 미세한 분말 형태로 구조식( I )화합물과 혼합하고 균일할때 까지 섞는다. 틀 한개당 2g인 틀에 붓고 방치시킨다. Massa Eaterinum C는 포화된 식물성 지방산의 모노.디. 및 트리글리세라이드의 혼합물로 이루어진 상업적으로 이용할 수 있는 좌제기제이다. 이것은 헨켈사(Henkel International, Dusseldorf)에서 시판하고 있다.

질좌약 (5mg/생성물)

구조식( I )화합물 5mg

락토스 400mg

포비돈 5mg

마그네슘스테아레이트 5mg

구조식( I )화합물과 락토스를 혼합하고 50% 에탄올 수용액에서 포비돈용액으로 과립화시킨다. 과립을 건조시키고 마그네슘 스테아레이트를 가한다음 적당한 모양의 펀취에서 압축하여 질좌약 1정당 415mg으로 만든다.

동결건조 주사제(100mg/바이알)

구조식( I )화합물 100mg

주사용증류수를 가하여 2.0ml로 만든다.

구조식( I )화합물을 주사용 증류수에 용해하고 이 용액을 0.2μm 크기의 구멍을 가진 여과막을 통과시켜 무균상태로 하고 여액을 무균 상태의 수용기에 모은다. 무균상태에서 무균의 유리바이알에 바이알 당2ml씩 채우고 동결건조시킨다음 알루미늄 밀봉막으로 싼 무균 고무마개로 밀봉시킨다.

이 주사제는 사용직전에 적량의 주사용 증류수 또는 주사용식염수를 가하여 다시 액체로 만든다. 위에서 구조식( I )화합물의 중량은 각각의 경우에 펩타이드 염기로서 계산되었다.

Claims

암모니아와 다음 구조식의 화합물을 반응시킴을 특징으로 하는 H-Tyr-D-Met(O)-Gly-Phe(4NO₂)-Pro-OR⁵

다음 구조식의 펩타이드 또는 그 염을 제조하는 방법.

H-Tyr-D-Met(O)-Gly-Phe(4NO₂)-Pro-NH₂여기서 R⁵는 알킬임.