SU1470199A3 - Способ получени пептидов или их кислотно-аддитивных солей - Google Patents

Способ получени пептидов или их кислотно-аддитивных солей Download PDF

Info

Publication number
SU1470199A3
SU1470199A3 SU782691552A SU2691552A SU1470199A3 SU 1470199 A3 SU1470199 A3 SU 1470199A3 SU 782691552 A SU782691552 A SU 782691552A SU 2691552 A SU2691552 A SU 2691552A SU 1470199 A3 SU1470199 A3 SU 1470199A3
Authority
SU
USSR - Soviet Union
Prior art keywords
solution
phe
gly
tyr
boc
Prior art date
Application number
SU782691552A
Other languages
English (en)
Inventor
Вилкинсон Сэмюель
Original Assignee
Дзе Велкам Фаундейшн Лимитед (Фирма)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Дзе Велкам Фаундейшн Лимитед (Фирма) filed Critical Дзе Велкам Фаундейшн Лимитед (Фирма)
Application granted granted Critical
Publication of SU1470199A3 publication Critical patent/SU1470199A3/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
    • C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/665—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans derived from pro-opiomelanocortin, pro-enkephalin or pro-dynorphin
    • C07K14/675—Beta-endorphins
    • C07K14/6755—Beta-endorphins with at least 1 amino acid in D-form
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/12—Antidiarrhoeals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/665—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans derived from pro-opiomelanocortin, pro-enkephalin or pro-dynorphin
    • C07K14/70—Enkephalins
    • C07K14/702—Enkephalins with at least 1 amino acid in D-form
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Abstract

Изобретение касаетс  производства пептидов, в частности пептида ф-лы I H-Tyr-X-Gly-Phe(4-NO,)-Pro-- -NH , где X D-Met или D-Met(O), или их кислотно-аддитивных солей, которые как биологически-активные не- I mecTsa могут быть использованы в медицине . Цель - создание новых более активных и менее токсичных веществ указанного класса. Синтез пептида ведут реакцией трипептида II с дипеп- тидом III Boc-Tyr-X-GlyOH (И) и H-phe(4-N02)-Pro-Y (III), где X - указано-, Y Ш или ОСН,. ПолученГогГа - О с11 о брГоа ы Г2иа- .. koM (перевод в КН.,-группу) с последующим отщеплением защитной группы (Вое) и вьщелением целевого продукта в свободном виде или в виде кислотно-аддитивной соли. Новые пептиды обладают противодиарейной, противо- кашлевой и анальгетической активност ми при дозах 0,02-0,03 мг/кг, 10 мг/кг и 50 мг/кг соответственно при токсичности LDjo 500 мг/кг. 1 табл,

Description

I
Изобретение относитс  к способу получени  пептидов или их кислотно- аддитивных солей - новых биологически активных соединений, которые могут найти применение в медицине.
Цель изобретени  - способ получени  новых производных в р ду пептидов , малотоксичных и обладающих высокой противодиарейной, противокашле вой и анальгетической активностью.
Прин ты следующие сокращени : DMF - диметилформамид; THF - тетра- гидрофуран; DCC1 - дициклогексил- карбодиимид; НОВТ - 1 -оксибензотри- азол; - Ы-метилморфолин DCV 2
-дициклогексилмочевина; БОС - третичный бутилоксикарбонил.
Хроматографию осуществл ют в тонком слое силикагел  на пластинах фирмы Merc с использованием следующих систем растворителей.
2. Смесь «-бутанола, уксусной кислоты и воды в соотношении 3:1:1. v 3. Хлороформ:метанол:32%-на  уксусна  кислота 120:90:40, метанолг32%-ный аммиак 120:90.40.
7.Смесь хлороформа, метанола и 32%-ного водного раствора уксусной кислоты в соотношении 120:90:5.
8.Смесь хлороформа, метанола и
О 880 аммиака в соотношении 120:Уи:з.
4
СО
Ы
Высокоразрешающую жидкостную хроматографию провод т на колонках: Zor-вах С-8, 4,6 мм х 25 см, в качестве подвижной фазы используют
Туг
3i-Het
смесь ацетонитрила и 0,1 М ацетата аммони , рН 4,0. Скорость протока 2 мл/мин, определение при длине волны 254 нм,
П1.
пример 1. H-Tyr-DMet(0)-Gly- -Phe(4NOj)ProNHa.
BOC-D-Met. Gly. ОМе (1).
СНА-СОЛЬ BOC-D-Мет (28,38 г) сус- 45 пендируют в этилацетате (150 мл) и смешивают полученную суспензгао с раствором KHSO. (13,5) в воде (75 мл). После полного растворени  органическую фазу отдел ют, дважды 50 промывают водой (2x60 мл), высушивЬ- ют над безводным MgS04 и концентрируют . Полученную масл нистую жидкость раствор ют в тетрагидрофуране (90 мл), охлаждают раствор до -25 С и обраба- /55 тывают N-диметилморфолином (6,66 г) и изобутилхлорформиатом (8,60 г). Реакционную смесь перемешивают в течение 2 мин при и затем обрабатывают предварительно охлажденный до -25°С раствором Gly (7,53 г) и N-метилморЬолина (6,06 г) в диметилформамиде (90 мл). После выf
держки в течение 2 ч при -15 С реакционную смесь перенос т в лед ную баню, обрабатывают 2 М раствором KHCOj (72 мл) и перемешивают в течение 30 мин. После этого растворитель отгон ют в вакууме, а остаток распредел ют между этипацетатом (350 мл) и водой (75 мл). Органический слой затем промывают 5%-ньм раствором лимонной кислоты ( мл), 5%-ным раст раствором NaHCO) (2«50 мл) и водой ( мл). Экстракт высушивают над безводным MgSO и уп;аривают досуха, после чего сухой остаток растирают с петролейным эфиром.
15
Выход: 18,12 г (94% от теоретич.). Результаты тонкослойной хроматографии: одно п тно в 2,7,8.
Н D-Met,Gly, ОМе.НС (2).
BOC-D-Met.Gly.OMe (1) (18,1 г) суспендируют в анизоле (150 мл) и обрабатывают полученную суспензию смесью М НС1 и уксусной кислоты , (440 мл). Смесь перемешивают при .ком- натной температуре в течение 30 мин. Образующийс  продукт осаждают путем добавлени  сухого эфира, отдел ют его фильтрацией и тщательно промьша- ют сухим эфиром. Полученный сырой продукт раствор ют в воде (450 мл) и раствор дважды промывают эфиром дл  удалени  остатков анизола. Водный раствор вымораживают. В результате получают 13,77т продукта (выход 95% от теоретич.). Результаты тонкослойной хроматографии: чистьй
продукт (2,7,8).
BOC,-Tyr D-Met.Gly..OMe (3). ВОСТ-Туг (16,59 г) раствор ют в тетрагидрофуране (80 мл), охлаткдают до -25°С и добавл ют к нему N-метил- морфолин (5,96 г), а затем при быстром перемешивании изобутилхлорфор- миат (7,69 г). После выдержки в течение 2 мин при к смеси добавл ют предварительно охлажденный раствор D-Met,.Gly,.ОМе.НС (13,77 г) и N-метилхлорформиата (5,42 г) в ди- метилформамиде (80 мл) и продолжают перемешивание при -15 С в течение 2,5 ч. Затем смесь помещают в лед ную баню и обрабатывают в течение 30 мин 2 М раствором КНСОз (65 мл). Остаток, полученный после отгонки растворителей в вакууме, раствор ют в смеси этилацетата (360 мл) и воды (70 мл). Органическую фазу отдел ют и промывают 5%-ньм раствором лимонной кислоты (2-50 мл), 5%-ным раствором NaHCOj (2 «50 мл) и водой (2 50 мл). После высушивани  (MgS04).и удалени  растворител  твердый остаток растирают с эфиром. В результате получают 21,16 г (81,6% от теоретилируют с помощью тонкослойной хроматографии (7). Установлено, что реакци  заканчиваетс  через 45 мин. Пос ле окончани  реакции метанол отгон ют в вакууме, водный раствор охлаж- .дают льдом и нейтрализуют 1 М раствором НС1 (110 мл). Выпадающий в осадок продукт отфильтровывают, промывают несколько раз водой и высушивают над Ра05. Выход: 20,18 г (98% от теоретич.). Результаты тонкослойной хроматографии: одно п тно в 2,7,8.
Рассчитано,%: С 53,73; Н 6,6Г, N 8,96.
CiiH3,NjO-,S
Найдено,%: G 53,55; Н 6,62, N 8,76.
BOC-Tyr.D-Met(O). Gly (5). Раствор BOC-Tyr.D-Met.Gly ( 5,48) 20 в метаноле (120 мл) обрабатывают
двум  эквивалентами перекиси водорода (2,7 мл 29,4%-ного раствора). Протекание реакции контролируют с помощью высокоскоростной колоночной жидкостной хроматографии. После выдержки смеси в течение 20 ч при комнатной температуре ее упаривают досуха и растирают остаток с эфиром. Вы- xo;f: 5,46 г (96,5% от теоретического ). Т.пл. 186-188°С (с разложением).
25
30
г -,5.5
формамид).
.
1,0° (, диметил- 1,3 (С 1, диметил формамид).,
Рассчитано,%: С 51,96, Н 6,39, N 8,66.
С ,,Н 5,Ы50„3
40
Найдено, %: С 52,13, Н 6,38;
N 8,53.
BOC-Phe(NO,2) .Рго.ОМе (в).
BOC-Phe(N05) (31,0 г) раствор ют в диметилформамиде (150 мл), после 45 чего добавл ют к полученному раствору 1-окси-бензотриазол (27,0 г), охлаждают смесь до -5°С и затем добавл ют к ней дициклогексилмочевину (20,6 г). Смесь выдерживают в течеполучают 21,16 г (81,6% от теорети- . - - „;Г-5°С, в т ни коточеского выхода) - «--:;°/;; Га;о- РЬ-х к нГй добавл ют раствор Рго-ОМе, тида. По данным тонкослойной хромато f , .,
графии (2,7,8), полученный продукт не содержит примесей.
BOC-Tyr.D-Met.Gly (4).
f 4 Л Л сс
Л. J л. i « 1-« - /л-хЗащищенный трипептид (3) (21,1 г) раствор ют в смеси метанола (350 мл) и воды (150 мл) М провод т омыление путем обработки 2 М раствором NaOH (55 мл). Протекание реакции контре1и1Л л лсгг j,jv cijj i «t
HCl (16,55 г) и N-метилморфолина (10,1 г) в диметилформамиде (30 мл). Реакционную смесь перемешивают в течение 20 ч при 5 С и затем отфильтро вывают от дициклогексилмочевины. После упаривани  в вакууме получают масл нистую жидкость, которую раство р ют в этилацетате (1500 мл) и про
15
е ЭУ
лируют с помощью тонкослойной хроматографии (7). Установлено, что реакци  заканчиваетс  через 45 мин. Пос ле окончани  реакции метанол отгон ют в вакууме, водный раствор охлаж- .дают льдом и нейтрализуют 1 М раствором НС1 (110 мл). Выпадающий в осадок продукт отфильтровывают, промывают несколько раз водой и высушивают над Ра05. Выход: 20,18 г (98% от теоретич.). Результаты тонкослойной хроматографии: одно п тно в 2,7,8.
Рассчитано,%: С 53,73; Н 6,6Г, N 8,96.
CiiH3,NjO-,S
Найдено,%: G 53,55; Н 6,62, N 8,76.
BOC-Tyr.D-Met(O). Gly (5). Раствор BOC-Tyr.D-Met.Gly ( 5,48) 20 в метаноле (120 мл) обрабатывают
двум  эквивалентами перекиси водорода (2,7 мл 29,4%-ного раствора). Протекание реакции контролируют с помощью высокоскоростной колоночной жидкостной хроматографии. После выдержки смеси в течение 20 ч при комнатной температуре ее упаривают досуха и растирают остаток с эфиром. Вы- xo;f: 5,46 г (96,5% от теоретического ). Т.пл. 186-188°С (с разложением).
25
30
г -,5.5
формамид).
.
1,0° (, диметил- 1,3 (С 1, диметилформамид ).,
Рассчитано,%: С 51,96, Н 6,39, N 8,66.
С ,,Н 5,Ы50„3
Найдено, %: С 52,13, Н 6,38;
N 8,53.
BOC-Phe(NO,2) .Рго.ОМе (в).
BOC-Phe(N05) (31,0 г) раствор ют в диметилформамиде (150 мл), после чего добавл ют к полученному раствору 1-окси-бензотриазол (27,0 г), охлаждают смесь до -5°С и затем добавл ют к ней дициклогексилмочевину (20,6 г). Смесь выдерживают в тече - - „;Г-5°С, в т ни котоРЬ-х к нГй добавл ют раствор Рго-ОМе, f , .,
1и1Л л лсгг j,jv cijj i «t
HCl (16,55 г) и N-метилморфолина (10,1 г) в диметилформамиде (30 мл). Реакционную смесь перемешивают в течение 20 ч при 5 С и затем отфильтровывают от дициклогексилмочевины. После упаривани  в вакууме получают масл нистую жидкость, которую раствор ют в этилацетате (1500 мл) и про
ьшaют 5%-ным раствором лимонной кислоты ( мл), 5%-ным раствором NaHCOj (2х250 мл) и полунасыщенным раствором NaCl (2250 мл). Органическую фазу высушивают и концентрируют до 500 мл. Выпадающий осадок дициклогексилмочевины отфильтровыва- JOT, а фильтрат упаривалт, получа  в результате смолу, которую не идентифицируют .
H.Phe (N0.2). Pro.OMe.HCl (7), Защищенньй дипептид (21,41 г) / раствор ют в этилацетате (300 мл) и охлаждают полученный раствор до , после чего пропускают .через него сухой газообразный хлористый водород в течение 45 мин, поддержива  температуру 0°С, Затем раствор концентрируют до 50 мл и разбавл ют сухим эфиром (300 мл). После вымораживани  продукт отфильтровывают, тщательно промывают сухим эфиром и высушивакуг над смесью Р205 и NaOH.
Выход: 15,64 г (85% от теоретич.) Т.пл. 145-148 с.
- 15,7 (, МеОН)
J-r Lcljf 17,6° (, МеОН),
Рассчитано,%: С 50,35; Н 5,59, 11,75.
BOC-Tyr.D.Met (0).Gly.Phe (N0). .ProNH-2 (0,81 r) суспендируют в анизоле (14 мл) и обрабатывают суспензию одномол рной смесью НС1 и уксусной кислоты (80 мл). После выдержки реакционной смеси в течение 45 мин при комнатной температуре ее упаривают досуха и остаток растирают с
35
CijH.NjOsCl
Найдено,%: С 50,03, Н 5,81, N 11,45.
BOC-Tyr.D-Met (0). Gly.Phe (NO.) .Pro.OMe (8)«
Раствор BOC-Tyr.D-Met(O). Gly (1,0 r) в диметилформамиде (30 мл) охАавдают до -5-С, после чего обраба-40 Полученный продукт подверга- тывают его 1-оксибензотриазолом к,т очистке с помощью ионообменной
хроматографии на колонке 2, см, заполненной карбоксиметилцеллюлозой. Элюирование осуществл ют при Лг1ней- ном градиенте 0,,2 М ацетата аммони  при рН 5,1. Выход: 0,33 г. По данным тонкослойной и высокоскоростной колоночной жидкостной хроматографии , полученный продукт не со45
(0,56 г.) и дициклогексилкарбодиими- дом (0,42 г). Смесь перемешивают в течение 40 мин при , затем добавл ют к ней раствор Phe (NO/|).Pro .OMe.HCl (0,74j и N- метилморфолина (0,21 г) в диметилформамиде (5 мл) и провод т реакцию сочетани  при 5°С в течение 20 ч. Выпадающий осадок дициклогексилмочевины отфильтро- держит примесей, вывают, а фильтрат концентрируют в вакууне. Сырой продукт распредел ют между этипацетатом (100 мл) и водой (20 мл). Органический слой промывают 5%-ным раствором лимонной кислоты ( мл), 5%-нь1М раствором NaHCO ( мл) и водой ( мл), высушивают над безводным MgSO, и упаривают , получа  в результате аморфный
Рассчитано,%: С 51,15; Н 6,00, N 13,05.
СзоН„Ы70 -СН5СО.
Найдено,%: С 50,83; Н 6,06 N 12,91,
Rf 0,53-, 0,13
MD- 6,3 (,2). Rf 0,32, 0,65 0,64.
10
) 25
4701998
твердый остаток, который после растирани  с эфиром весит 1,0 г (62% от теоретич. выхода). По данным тонкослойной хроматографии (2), в полученном продукте присутствует некоторое количество дициклогексилмочевины. дальнейщую очистку не провод т, , BOC-Tyr.D-Met(O).Gly.Phe (N0). .Pro-NH, (9).
Полностью защищенный пентапептид (1,0 г) раствор ют в метаноле (150 мл), раствор охлаждают в смеси льда с солью и насыщают аммиаком. 5 После этого колбу закрывают и оставл ют смесь в течение 6 дней при комнатной температуре. Затем после тщательного удалени  аммиака и метанола образующийс  продукт экстрагируют смесью этилацетата и зфира. Выход: 0,81. г (83% от теоретич.). По данным тонкослойной хроматографии (2,7,8), полученный продукт содержит некоторое количество дициклогексилмочевины и небольшое количество исходного материала. Полученньй продукт используют на следующей стадии без дополнительной очистки.
20
H.Tyr.D-Met (0).Gly.Phe (N0). .PrONH,, (10).
BOC-Tyr.D.Met (0).Gly.Phe (N0). .ProNH-2 (0,81 r) суспендируют в анизоле (14 мл) и обрабатывают суспензию одномол рной смесью НС1 и уксусной кислоты (80 мл). После выдержки реакционной смеси в течение 45 мин при комнатной температуре ее упаривают досуха и остаток растирают с
Полученный продукт подверга- к,т очистке с помощью ионообменной
держит примесей,
Рассчитано,%: С 51,15; Н 6,00, N 13,05.
СзоН„Ы70 -СН5СО.
Найдено,%: С 50,83; Н 6,06 N 12,91,
Rf 0,53-, 0,13
MD- 6,3 (,2). Rf 0,32, 0,65 0,64.
Пример 2 (см. схема 2). BOC-Phe (N0j).Pro.NH7(11). BOC-Phe (NOa).Pro.ОМе (6) (22,9 г раствор 1гт в метаноле (250 мл) и охлаждают полученный раствор льдом, после чего пропускают через него га- зообразный аммиак до насьпцени . Затем колбу закрывают и оставл ют при комнатной температуре в течение 7 дней. После этого реакционную сме упаривают в вакууме и сырой продукт подвергают кристаллизации из этил- ацетата. По данным тонкослойной и высокоскоростной колоночной жидкостной хроматографии, полученный раствор не содержит примесей. Т,пл. 176-178,5°С.
UlV - 29,4° (, ). ,- 35,7 (, МеОН). Рассчитано,%: С 56,16, Н 6,40, N 13,79.
C,,H jN4vJt.
Найдена,%: С 55,60, Н 6,33,
N 14,04., .
H.Phe (NO,).Pro (12) BOC-Phe (N0). Pro.NH-2 (8,0 г) раствор ют в смеси метанола (20 мл) изопропанола (40 мл) и этилацетат (375 мл). Полученный раствор охлаждают льдом и пропускают через него в течение часа газообразный НС1 no держива  температуру-15 С.
После этого через реакционную смесь в течение 5 мин пропускают азот и разбавл ют ее сухим эфиром
Схема 2
Pro
ОМе
/5
(450 мл). Образующийс  продукт от- фильтровывают, тщательно промывают эфиром и высушивают в вакууме над смесью и NaOH. Выход 6,28 г (93% от -теоретич.). Т.пл. 156-15J О.
13,5 15,3
(, МеОН). (, МеОН).
5
0
JQ jj
5
BOC-Tyr.D-Met.Gly.Phe (NO).Pro. .NH-2 (13).
BOC-Tyr.D-Met (0).Gly (5) (1,0 г) раствор ют в диметилформамиде (20мл) и охлаждают полученный раствор до -25°С, после чего к нему добавл ют N-метилморфолин (0,21 г) и изобутил- хлорформиат (0,28 г) и интенсивно перемешивают смесь в течение 2 мин, поддержива  ее температуру равной -15°С. Затем к ней добавл ют предварительно охлажденный до -25°С раствор Phe (NO-2).Pro.NHa.HCl (0,71 г) и N-метилморфолина (0,33 г) и перемешивают при -15 С в течение 2,5 ч. После этого реакционную смесь перенос т в лед ную баню и обрабатывают 2М КНСОз (2,5 мл) в течение 30 мин. Растворители отгон ют в вакууме,, а остаток распредел ют между этилаце- татом (270 мл) и водой (40 мл). Органическую фазу отдел ют и промывают 5%-ным раствором лимонной кислоты ( мл), 5%-ным раствором NaHCOj (240 мл) и водой (2x40 мл). Экстракт высушивают и упаривают досуха. Носле растирани  остатка с эфиром получают 0,56 г продукта (35% от теоре- тич. выхода). Полученный продукт используют на следующей стадии без дополнительно й очистки.
H.Tyr.D-Met (O).Gly.Phe (N0).Pro
.NHjCU),
От BOC-Tyr.D-Met(O).Gly.Phe (NOj)
..Pro.NHa (0,56 r) отщепл ют защитную группу в мол рной смеси НС1 и уксусной кислоты (56 мл) в присутствии анизола (20 мл). После выдержки в течение 30 мин при температуре окружающей среды реагенты удал ют в вакууме и полученный сырой продукт путем растирани  остатков с эфиром, Полученный сырой продукт подвергают хроматографии на колонке 2,5 25 см, заполненной карбоксиметилцеллюлозой. Элюирование осуществл ют при линейном градиенте 0,005-0,2 М ацетата аммони  при рН 5,1, После такой предварительной очистки пептид снова возвращают в колонку 2, см, заполненную карбоксиметилцеллюлозой и осуществл ют элюирование ацетатом аммони  с линейно измен ющейс  концентрацией от 0,005 до 0,1 М при рН 5,1. После, удалени  летучего буфера с помощью проводимой несколько ра сублимационной сушки получают чистый пептид. Выход: 50 мг (91% от теоре- тич,). По данным тонкослойной (2,7,8 ;и высокоскоростной колоночной жидкостной хроматографии,, полученный продукт не содержит примесей.
Рассчитано,%: С 50,52, Н 6,05,; N 12,89.
СзсНэзМ ОэЗ-СНдСОгН 1,5 Найдено,%: С 50,59; Н 5,96;
N 12,97.
Пример 3. H-Tyr-DMet Gly- Phe(4NO Profflii получают согласно схеме, указанной выше. Продукт выдел ют в виде хлористоЕюдородной соли присоединени л а затем чист т на карбоксиметилцеллюлозе (CMC 52) градиентным элюированием буферньгми растворами уксуснокислого аммони  (0,001-М до 0,5 М), После лиофилиза ции из водного раствора получают уксуснокислую соль присоединени 
Rf: 0,52, 0,83 0„47«
. «8,1, (,2 МеОН).
Фармакологическа  актибность.
Пептиды указанных примеров испы- тывагш на следующие виды активности
5
0
5
0
с помощью стандартных фармакологических способов.
Анальгези  в мышах при испытании гор чей пластиной, причем пептид ввод т посредством инъекции внутрь мозгового желудочка.
Антидиарейна  активность в крысах . В этом способе крысы голодают в течение 24 ч, затем пептид ввод т подкожно или орально, после чего через 15 мин дают орально касторовое масло по 1 мл на крысу (EDjo - 0,02- 0,03 мг/кг).
Дл  протйвокашлевого испытани , морских свинок подвергли воздействию аэрозол , содержащего 20% лимонной кислоты, через 30 мин после введени  соединени  (орально или подкожно). Подсчитывали число кашлей в течение п тиминутной экспозиции и усредн ли значени  дл  шести животных в опыте (EDjo -10 мг/кг P.O.). .
Анальгези  в мышах в испытании с судорогой (модификаци  спо соба Гендерсона с сотр.) при оральном введении пептида.
Основное их назначение - лечение диареи.
При испытании на крысах дл  син- ,тезированных пептидов и морфина были получены следующие значени  EDjo (см. таблицу)5 характеризующие их анальгетическую активность.
Испытываемые пепти,цы малотоксичны - при введении их по отдельности перорально п ти мышам в количестве 500 мг/кг ни одна из мьшей не умерла.
Соединени  по изобретению малотоксичны , обладают высокой противо- диарейной, анальгетической и проти- вокашлевой активностью.

Claims (1)

  1. Формула изобрете.ни  Способ получени  пептидов формулы
    H-Tyr-X-Gly-Phe(4NO)Pro-NH, где X-DMet, DMet(O),
    131470199
    или их кислотно-аддитивных солей,  е Y NH20Me,
    отличающийс  тем, что « получаемый при этом пентапептид трипептид формулыформулы
    BOC-Tyr-X-Gly-Phe(4N05)-ProY,
    BOC-Tyr-X-GlyOH,5 g случае необходимости, если Y-OMe,
    где X-DMet или DMet(O) обработке аммиаком замен ют ОМе
    подвергают взаимодействию с дипепти- .группу на аминогруппу, затем отщеп- дом формулы «« защитную группу и целевой
    IQ продукт выдел ют в свободном виде H-Phe(4NO.j)ProY,ипц g виде кислотно-аддитивной сол .
SU782691552A 1977-11-24 1978-11-23 Способ получени пептидов или их кислотно-аддитивных солей SU1470199A3 (ru)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB48980/77A GB1604850A (en) 1977-11-24 1977-11-24 Biologically active peptides

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SU1470199A3 true SU1470199A3 (ru) 1989-03-30

Family

ID=10450679

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SU782691552A SU1470199A3 (ru) 1977-11-24 1978-11-23 Способ получени пептидов или их кислотно-аддитивных солей

Country Status (20)

Country Link
US (5) US4244944A (ru)
EP (1) EP0002236B1 (ru)
JP (1) JPS5492938A (ru)
KR (3) KR860000453B1 (ru)
AT (1) AT386211B (ru)
AU (1) AU530985B2 (ru)
CA (1) CA1197235A (ru)
DE (1) DE2862477D1 (ru)
DK (1) DK149612C (ru)
ES (1) ES475324A1 (ru)
FI (1) FI70415C (ru)
GB (1) GB1604850A (ru)
HU (1) HU186729B (ru)
IE (1) IE47517B1 (ru)
IL (1) IL56028A (ru)
IT (1) IT1106143B (ru)
MY (1) MY8500260A (ru)
PL (1) PL123797B1 (ru)
SU (1) SU1470199A3 (ru)
ZA (1) ZA786598B (ru)

Families Citing this family (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DK28377A (da) 1976-02-02 1977-08-03 Sandoz Ag Fremgangsmade til fremstilling af polypeptidderivater
GB1604850A (en) * 1977-11-24 1981-12-16 Wellcome Found Biologically active peptides
DE3163199D1 (en) * 1980-07-17 1984-05-24 Sandoz Ag Novel pentapeptides, processes for their production, pharmaceutical compositions comprising said pentapeptides and their use
EP0076557B1 (en) * 1981-06-22 1985-11-13 Imperial Chemical Industries Plc Peptides and pseudopeptides in which the n terminus bears two substituents
US4380535A (en) * 1981-09-23 1983-04-19 American Home Products Corporation Enkephalin degrading enzyme inhibitors
US4492779A (en) * 1981-12-07 1985-01-08 Thiokol Corporation Aramid polymer and powder filler reinforced elastomeric composition for use as a rocket motor insulation
DE3369327D1 (en) * 1982-02-05 1987-02-26 Wellcome Found Pharmaceutical compounds, preparation, use and intermediates therefor and their preparation
ATE37552T1 (de) * 1982-10-18 1988-10-15 Ici Plc Peptid- und pseudopeptid-derivate.
JPH0680079B2 (ja) * 1984-11-09 1994-10-12 エーザイ株式会社 ポリペプチド
GB8608818D0 (en) * 1986-04-11 1986-05-14 Reckitt & Colmann Prod Ltd Pharmaceutical compositions
GB8616741D0 (en) * 1986-07-09 1986-08-13 Wellcome Found Pharmacologically active compounds
US5688519A (en) * 1987-04-06 1997-11-18 Leonard; Robert J. Flash-flow fused medicinal implants
US5156787A (en) * 1991-01-29 1992-10-20 Booher Benjamin V Pultrusion method of making brake linings
USRE37548E1 (en) 1991-08-12 2002-02-19 Bill J. Hays Clutch design and manufacture
US5482772A (en) 1992-12-28 1996-01-09 Kimberly-Clark Corporation Polymeric strands including a propylene polymer composition and nonwoven fabric and articles made therewith
US6488649B1 (en) 1998-11-24 2002-12-03 Edward M. Lichten Implant device
IL165365A0 (en) 2004-11-24 2006-01-15 Q Core Ltd Finger-type peristaltic pump
KR20080110841A (ko) * 2006-04-21 2008-12-19 루크 라멜렌 운트 쿠프룽스바우 베타일리궁스 카게 다층, 특히 2층 클러치 라이닝 및 그 제조 방법
US8005603B2 (en) 2007-09-27 2011-08-23 Continental Controls Corporation Fuel control system and method for gas engines

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB1577115A (en) * 1976-07-27 1980-10-22 Reckitt & Colmann Prod Ltd Container closure units
NZ183712A (en) * 1976-04-08 1979-10-25 Ici Ltd Polypeptide analogues of enkephalins, and pharmaceutical compositions
US4028319A (en) * 1976-05-07 1977-06-07 G. D. Searle & Co. 2 and 3-substituted enkephalins
US4123523A (en) * 1976-06-21 1978-10-31 Imperial Chemical Industries Limited Analgesic and sedative polypeptides
FR2359817A1 (fr) * 1976-07-27 1978-02-24 Reckitt & Colmann Prod Ltd Nouveaux peptides, leur procede de preparation et composition therapeutique les contenant
US4092304A (en) * 1976-08-09 1978-05-30 G. D. Searle & Co. 4-Substituted enkephalin derivatives
PT66982B (en) * 1976-09-01 1979-02-13 Coy David Howard Process for preparing novel methionine enkephalin derivatives
HU178001B (en) * 1976-09-16 1982-02-28 Gyogyszekutato Intezet Process for preparing new pentapeptides with morphine-like activity and derivatives thereof
US4128541A (en) * 1976-12-27 1978-12-05 American Home Products Corporation Pentapeptide with morphine- like activity
DE2819277A1 (de) * 1977-05-16 1978-11-23 Sandoz Ag Neue polypeptidderivate, ihre herstellung und verwendung
US4127532A (en) * 1977-06-16 1978-11-28 Coy David Howard Novel heptapeptides, intermediates therefor, and compositions and methods employing said heptapeptides
US4127523A (en) * 1977-06-16 1978-11-28 Coy David Howard Novel undecapeptides, intermediates therefor, and compositions and methods employing said undecapeptides
US4127533A (en) * 1977-06-16 1978-11-28 Coy David Howard Novel octapeptides, intermediates therefor, and compositions and methods employing said octapeptides
US4127531A (en) * 1977-06-16 1978-11-28 Coy David Howard Novel hexapeptides, intermediates therefor, and compositions and methods employing said hexapeptides
GB1604850A (en) * 1977-11-24 1981-12-16 Wellcome Found Biologically active peptides
US4103005A (en) * 1977-10-20 1978-07-25 Hoffmann-La Roche Inc. Novel-enkephalin analogs

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Шредер Э, Любке К. Пептиды. М.: Мир, 1967, ч. I, с. 116. *

Also Published As

Publication number Publication date
HU186729B (en) 1985-09-30
FI70415C (fi) 1986-09-19
FI783589A (fi) 1979-05-25
US4363800A (en) 1982-12-14
KR880002609B1 (ko) 1988-12-04
US4343795A (en) 1982-08-10
FI70415B (fi) 1986-03-27
ATA836278A (de) 1987-12-15
PL211164A1 (pl) 1979-12-17
AU530985B2 (en) 1983-08-04
IT7852041A0 (it) 1978-11-23
EP0002236B1 (en) 1986-02-05
MY8500260A (en) 1985-12-31
EP0002236A1 (en) 1979-06-13
KR860000453B1 (ko) 1986-04-26
IT1106143B (it) 1985-11-11
IL56028A (en) 1984-03-30
GB1604850A (en) 1981-12-16
DK149612B (da) 1986-08-11
DE2862477D1 (en) 1986-03-20
KR830000214A (ko) 1983-03-30
DK149612C (da) 1987-01-26
DK523078A (da) 1979-05-25
KR830000215A (ko) 1983-03-30
IL56028A0 (en) 1979-01-31
ZA786598B (en) 1980-06-25
ES475324A1 (es) 1979-12-01
JPS5492938A (en) 1979-07-23
IE782317L (en) 1979-05-24
KR880002608B1 (ko) 1988-12-04
AU4186578A (en) 1979-05-31
US4346083A (en) 1982-08-24
KR830000683A (ko) 1983-04-18
AT386211B (de) 1988-07-25
PL123797B1 (en) 1982-11-30
CA1197235A (en) 1985-11-26
US4362717A (en) 1982-12-07
IE47517B1 (en) 1984-04-04
US4244944A (en) 1981-01-13
JPS6318600B2 (ru) 1988-04-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SU1470199A3 (ru) Способ получени пептидов или их кислотно-аддитивных солей
US4086219A (en) Nonapeptides and methods for their production
US4242329A (en) Bradykinin-inhibiting tripeptide derivatives
US4178371A (en) Tetrapeptide derivatives
FI73224C (fi) Foerfarande foer framstaellning av nya, pao den centrala nervsystemet inverkande tripeptider.
EP0026464A2 (de) Peptide, deren Herstellung, deren Verwendung und pharmazeutische Präparate
US3705140A (en) Peptides related to the c-terminal sequence of cck-pz and caerulein
US5013723A (en) New thymopentin retro-inverso analogs and fragments thereof, a process of preparation of the new compounds and the intermediates obtained therein
CH636598A5 (de) Verfahren zur herstellung neuer psychopharmakologisch aktiver peptide.
US4124703A (en) Luliberin analogs
US4320051A (en) Analgesic tripeptide amides
CA1059994A (en) Histidine derivatives
FR2557114A1 (fr) Nouveaux derives de la gonadoliberine, procede pour leur preparation et compositions pharmaceutiques les contenant
US4111923A (en) Octapeptides and methods for their production
DE2324239C3 (de) Verfahren zur Herstellung von Asparaginylgruppen enthaltenden biologisch aktiven Polypeptiden
SE461042B (sv) Peptider med tillvaextbefraemjande aktivitet jaemte veterinaera kompositioner innehaallande naemnda peptider
US4093713A (en) Dipeptide derivatives with central nervous system activity and preparation thereof
Stewart Peptide synthesis with 1-Aminocyclopropane-1-carboxylic acid
DE2342862C3 (de) An beiden Kettenenden Reste von a -Aminooxycarbonsäuren aufweisende Peptide mit ACTH-Wirkung, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Peptide enthaltende Arzneimittel
US4579841A (en) Dipeptide derivatives having opiate activity
US3873510A (en) Peptides of ACTH activity containing {60 -aminooxy carboxylic acid on the N-terminal moiety, and a process for the preparation thereof
Poojary et al. Synthesis, characterization and biological evaluation of cyclic peptides: viscumamide, yunnanin A and evolidine
Sofuku et al. Amino Acids and Peptides. I. Syntheses of p-Methoxybenzyl p-Nitrophenyl Carbonate, p-Methoxybenzyl Carbazate, and p-Methoxybenzyloxycarbonyl Amino Acids with p-Methoxybenzyl Chloroformate
US3948971A (en) N-protected-α-amino acid compounds
US4271152A (en) Psycho-pharmacological peptides