JPH08511557A

JPH08511557A - 生物学的活性を有するバソプレッシン類似体

Info

Publication number: JPH08511557A
Application number: JP7502710A
Authority: JP
Inventors: ニルソン，アンデルス; オルソン，ホカン; セデルベルグ‐アールム，クリスチーナ; トロイナル，ユェルジー
Original assignee: フェリング、ネムローゼ、フェンノートシャップ
Priority date: 1993-06-18
Filing date: 1994-06-16
Publication date: 1996-12-03
Also published as: CZ332295A3; EP0703924A1; NO955058L; HUT73674A; CN1125451A; IL110018A0; HU9503596D0; SE9302124D0; FI956050A0; US5698516A; FI956050A; WO1995000548A1; SE9302124L; NO955058D0; ZA944195B; AU7088394A; CA2163352A1; KR960702847A; PL312202A1; SE501677C2

Abstract

(57)【要約】式(I)のバソプレッシン類似体が開示されている。

Description

【発明の詳細な説明】生物学的活性を有するバソプレッシン類似体本発明は、生物学的活性を有するバソプレッシン類似体に関する。更に精確には、本発明は、特異的な抗利尿活性、およびデスモプレッシンまたはＤＤＡＶＰとしても知られている広汎に用いられている抗利尿化合物１−デスアミノ−８− Ｄ−アルギニンバソプレッシンと比較して大幅に改良された生物学的利用能を有するバソプレッシン類似体に関する。背景ＤＤＡＶＰは、最初は主として尿崩症の患者の治療に用いられていたが、ここ数年は遺尿症、特に夜間遺尿症の治療にも用いられる抗利尿活性を有する医薬製剤として約２０年間市販されている。これは、血友病Ａ型、フォン・ウィルブランド病、および原因不明の長時間の出血の治療にも良好に用いられている。ＤＤＡＶＰは、静脈内投与により化合物の最良の生物学的利用能が得られるが、家庭で用いるには不便である。それ故、ＤＤＡＶＰの投与の通常の方法は、鼻内経路によるものであった。しかしながら、この化合物の生物学的利用能は、約１０分の１に減少する。ＤＤＡＶＰは、欧州特許第０１６３７２３号明細書に開示されているように、経口投与を行なうこともできる。しかしながら、生物学的利用能の損失は、鼻粘膜を介する投与によるよりも大きい。改良されたＤＤＡＶＰ類似体に関して集中的に研究努力を行なってきた。多くのＤＤＡＶＰ誘導体を合成し、生物学的利用能について試験を行ない、特異的な抗利尿活性を有しおよび鼻粘膜を介する吸収および腸粘膜を介する吸収が改良された化合物の探索を行なってきた。発明の説明本発明は、下記の式を有する新規なバソプレッシン類似体を提供する。（式中、Ｘは（Ｓ）−２−アミノ−２−メチル−酪酸（ＣαＭｅＡｂｕ）またはバリン（Ｖａｌ）であり、Ｙはチエニルアラニン（Ｔｈｉ）またはメチオニン（Ｍｅｔ）であり、ＺはＤ−フェニルアラニン（Ｄ−Ｐｈｅ）、またはＤ−チエニルアラニン（Ｔｈｉ）、またはＤ−チロシン（Ｄ−Ｔｙｒ）であり、Ａｓｎはアスパラギンであり、Ｈｙｐは４−トランス−ヒドロキシプロリンであり、Ｄ−ＡｒｇはＤ−アルギニンであり、Ｇｌｙはグリシンである。）本明細書で後述の開示された生物学的活性の試験から明らかなように、本発明の新規化合物は、良好な抗利尿活性のほかに、ＤＤＡＶＰよりも約１２〜２５倍大きい値の胃腸吸収、および２〜５倍大きい値の鼻内吸収値を有する。本発明の化合物の血液凝固作用は未だ試験されていないが、ＤＤＡＶＰと同様に本発明の化合物は血友病Ａ型、フォンウィルブランド病、および原因不明の長時間の出血の治療にも有用であると確信される。本発明の他の態様は、本発明のバソプレッシン類似体を有効成分として含んでなる医薬製剤に関する。本発明のこの態様は、本発明のバソプレッシン類似体を有効成分として含む限り、任意の有用な医薬製剤を含むものを意図している。この医薬製剤は、錠剤またはカプセル等の経口製剤、鼻内スプレーまたは鼻内ドロップ等の経鼻製剤、または注射用溶液等の経静脈製剤の形態が好ましい。医薬製剤においては、有効成分は、薬学上許容可能な添加剤および／または希釈剤と組み合わせてある。好適な薬学上許容可能な希釈剤は、等張性の食塩溶液である。他の薬学上許容可能な添加剤および希釈剤については、例えば欧州または米国薬局方等の文献に記憶されており、これらの添加剤は特定の投与経路に対して製剤の特定の形態に従って選択される。本発明の他の態様は、医薬品としての使用を目的とする本発明のバソプレッシン類似体に関する。この医薬品は、抗利尿剤であるのが好ましい。本発明の他の態様は、尿崩症の治療を目的とする医薬品の製造をするため本発明のバソプレッシン類似体の使用に関する。本発明は、遺尿症、特に夜間遺尿症の治療用の医薬品の製造を目的とする本発明のバソプレッシン類似体の使用をも含む。本発明の更にもう一つの態様は、尿崩症または遺尿症患者の治療法であって、この患者に本発明のバソプレッシン類似体または本発明の医薬製剤の抗利尿的に有効な量を投与することを特徴とする方法に関する。合成の一般的説明本発明のバソプレッシン（ＶＰ）類似体は、ペプチドを合成する既知の方法に従って、すなわち段階的に、アミノ酸残基または修飾した残基の間にペプチド結合を形成し、最終的に環を閉じて合成を完了することによって製造することができる。以下に示す例で製造した総てのＶＰ類似体は、固相法によって合成した（J.M. Stewart，J.D．Young，Solid Phase Peptide Synthesis，Pierce Chemical Comp any，1984；およびE．Antherton，R.C．Sheppard，Solid Phase Peptide ２ynthesis，1989）。ペプチドは、アセトニトリル／水／０．１％ＴＦＡからなる移動相を用いる逆相クロマトグラフィによって精製した。次に、純粋なペプチドをそれらの酢酸塩に変換した。ペプチドの純度および構造は、ＨＰＬＣ、アミノ酸分析およびＦＡＢ−ＭＳによって確認した。下記の省略を用いた。Ｂｏｃ＝ブ−ブチルオキシカルボニル、Ｆｍｏｃ＝フルオレニルメチルオキシカルボニル、Ｈ−ＣαＭｅＡｂｕ−ＯＨ＝（Ｓ）−２−アミノ−２−メチル−酪酸、Ｈｙｐ＝４−トランス−ヒドロキシプロリン、Ｔｈｉ＝２−チエニルアラニン、ＴＢＴＵ＝２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）− １，１，３，３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート、ＤＭＦ＝ジメチルホルムアミド、ＴＦＡ＝トリフルオロ酢酸。アミノ酸誘導体は、Janssen Chimicaから入手した（Ｓ）−２−アミノ−２− メチル−酪酸（Ｈ−ＣαＭｅＡｂｕ−ＯＨ）（製品番号、２９．００５．０２）を除き、Bachem AG、スイス国、から入手した。Ｆｍｏｃ−基は標準的方法によって導入し（P.B.W．Ten Kortenaarら、Int．J．Peptide Protein Res.，27，19 86，398）、ＮαＦｍｏｃ−Ｓ−（３−ｔ−ブチルオキシカルボニルプロピル） − 5によって公表された方法に従って合成した。参考化合物ＤＤＡＶＰは、Ferring AB，Malmoe，スウェーデン国によって既知の方法で合成し、例３の参考化合物もFerring AB，Malmoe，スウェーデン国によって合成した。最後に述べた化合物は、M．Zaoralら、「Peptides」、１９８６年、４６８頁、第２表に開示されている（1987 Walter de Gruyter & Co.，ベルリン、ニューヨーク）。例１ペプチドは、固相法によって合成した。Ｎα−Ｂｏｃ−アミノ酸（Ｂｏｃ−Ｄ −Ｐｈｅ−ＯＨ）を誘導体として用いた２位（Ｄ−Ｐｈｅ）を除き、Ｆｍｏｃ／ｔＢｕ−法を用いた。ＴｅｎｔａＧｅｌ−ＳＲＡＭ−樹脂（１ｇ、０．２ミリモル／ｇ；ＲＡＰＰＰｏｌｙｍｅｒｅＳ３００２３）を、固相として用いた。ペプチドを樹脂から切断し、ＴＦＡ／エタンジチオール／アニソール９５：２．５：２．５を用いて脱保護した（１．５時間、室温）。液体のほとんどを蒸発させ、ペプチドをジエチルエーテルで沈澱させた後、水から凍結乾燥した。１位および２位の間の環化は、ＴＢＴＵ（１〜２当量(eqv)）およびＮ−メチル −モルホリン（１５〜２０当量）を含む乾燥ＤＭＦ中で行なった。ペプチドの濃度は１ｍｇ／ｍｌであった。反応時間は、室温で４時間であった。溶媒を蒸発させ、ペプチドをジエチルエーテルで沈澱さぜた。精製は、逆相カラム上で、アセトニトリル／水／０．１％ＴＦＡを溶出剤として用いて行なった。許容可能な純度の画分を蒸発させ、残渣は逆相カラムに着いた。カラムを０．２Ｍ酢酸アンモニウムおよび水で洗浄した。ペプチドを、アセトニトリル／水／１％酢酸の混合物で溶出した。許容可能な純度の画分を蒸発させ、凍結乾燥した。ペプチドの構造は、ＨＰＬＣ、アミノ酸分析およびＦＡＢ−ＭＳ分析によって確認した。収量３６ｍｇ、純度９９％。例２ペプチドは、例１と同じ方法を用いて合成して、精製した。収量７７ｍｇ、純度９９％。例３（参考）ペプチドは、例１と同じ方法を用いて合成して、精製した。収量２３ｍｇ、純度９９％。例４ペプチドは、例１と同じ方法を用いて合成して、精製した。収量３０ｍｇ、純度９９％。例５ペプチドは、例１と同じ方法を用いて合成して、精製した。収量３４ｍｇ、純度９９％。例６ペプチドは、例１と同じ方法を用いて合成して、精製した。収量５７ｍｇ、純度９９％。生物学的活性化合物を、下記の特性についてイン・ビボで検討した。ａ）抗利尿活性（ＡＤ_iv）ペプチドの抗利尿活性を、十分に確立されたラットモデルで、ペプチドを静脈内投与した後にラットによって産生される尿の導電率を連続的に測定することに基づいて測定した（J．Medicinal Chem.，(1978)，21，352-356）。ｂ）ペプチドの胃腸吸収［（Ｆ_AD）_v］外科的に導入したプラスチック管（幽門の末端１０ｃｍ）を通して腸に投与したペプチドの吸収を、腸内投与後の抗利尿効果（曲線の下の面積）を静脈内投与後の抗利尿効果と比較することによって決定した。抗利尿効果は、文献記載の方法に従った（J．Medicinal Chem.，(1978)，21，352-356）。ｃ）ペプチドの鼻内吸収（Ｆ_AD）_in Hamilton製シリンジ（外科手術なしで導入１０ｍｍ）に取り付けたＰＥ２０カニューレを通して鼻腔内に３０μｌの容積で投与したペプチドの吸収を、鼻腔内投与後の抗利尿効果（曲線の下の面積）を静脈内投与後の抗利尿効果と比較することによって決定した。抗利尿効果は、文献記載の方法に従った（J．Medicinal Chem.，(1978)，21，352-356）。結果参考化合物ＤＤＡＶＰおよび例３の参考化合物は、本発明の化合物（例１、例２、例４、例５および例６）よりも生物学的利用能が遥かに低いことは明らかである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者トロイナル，ユェルジースエーデン国バンケフロストランド、ステネレガタン、36

Claims

【特許請求の範囲】１．下記の式を有するバソプレッシン類似体。（式中、Ｘは（Ｓ）−２−アミノ−２−メチル−酪酸（ＣαＭｅＡｂｕ）またはバリン（Ｖａｌ）であり、Ｙはチエニルアラニン（Ｔｈｉ）またはメチオニン（Ｎｅｔ）であり、ＺはＤ−フェニルアラニン（Ｄ−Ｐｈｅ）、またはＤ−チエニルアラニン（Ｔｈｉ）、またはＤ−チロシン（Ｄ−Ｔｙｒ）であり、Ａｓｎはアスパラギンであり、Ｈｙｐは４−トランス−ヒドロキシプロリンであり、Ｄ−ＡｒｇはＤ−アルギニンであり、Ｇｌｙはグリシンである。）２．請求の範囲第１項に記載のバソプレッシン類似体を有効成分として含んでなる、医薬製剤。３．経口製剤の形態である、請求の範囲第２項に記載の医薬製剤。４．経鼻製剤の形態である、請求の範囲第２項に記載の医薬製剤。５．経静脈製剤の形態である、請求の範囲第２項に記載の医薬製剤。６．医薬品としての使用のための、請求の範囲第１項に記載のバソプレッシン類似体。７．医薬品が抗利尿剤である、請求の範囲第６項に記載のバソプレッシン類似体。８．尿崩症の治療用の医薬品の製造のための、請求の範囲第１項に記載のバソプレッシン類似体の使用。９．遺尿症の治療用の医薬品の製造のための、請求の範囲第１項に記載のバソプレッシン類似体の使用。１０．尿崩症または遺尿症患者の治療法であって、この患者に請求の範囲第１項に記載のバソプレッシン類似体または請求の範囲第２〜５項に記載の医薬製剤を抗利尿的に有効な量で投与することを特徴とする、方法。