KR870002047B1

KR870002047B1 - 비루스 박멸용 조성물 및 제품

Info

Publication number: KR870002047B1
Application number: KR828203196A
Authority: KR
Inventors: 유. 호싸인 샤피; 아알. 스미스 켄너스
Original assignee: 케니스 에이. 키소우; 킴버얼리 클라아크 코오포레이션
Priority date: 1981-07-20
Filing date: 1982-07-19
Publication date: 1987-12-03
Also published as: AU8621082A; IT1212049B; SE8204372L; GB2103089A; FR2509577A1; FI822542A0; GR76879B; LU84282A1; CA1188225A; FR2509577B1; GB2103089B; KR840000243A; IT8248833A0; NL8202885A; DE3227126C2; PH21282A; AU554127B2; DK315482A; DE3227126A1; SE8204372D0

Abstract

내용 없음.

Description

비루스 박멸용 조성물 및 제품

본 발명은 리노비루스(rhinoviruses), 파라인플루엔자 비루스(parainfluenze viruses)및 아데노비루스(adenoviruses)와 같은 통상의 호흡기 비루스에 대하여 우수한 효과를 갖는 비루스 박멸 조성물 및 그 제품에 관한 것이다. 특히, 본 발명은 다양한 기질의 셀룰로오스 피륙, 부직구조 및 직물류 등의 기재나 지지체에 도포시킬 수 있는 신규한 비루스 박멸 조성물에 괸한 것이다. 또한, 본 발명의 비루스 박멸 조성물은 비강용 분무제, 안면크리임제, 핸드 로우션, 립스틱 및 이와 유사한 화장품 등에도 첨가시킬수도 있다. 본 발명의 조성물은 또한 주방 및 욕조 세정제(클렌제), 가구및 마루 광택제, 기타 가정용 제제의 성분으로서도 사용될 수 있다.

호흡기 비루스 분야에 정통한 비루스 학자들은 리노비루스, 인플루엔자 비루스 및 아데노비루스가 호흡기 질환을 일으키는 가장 중요한 병원군들이라는 것을 인정하고 있다. 특히, 리노비루스는 "보통 감기" 의 주된 병원군이라고 생각되고 있다.

감기 증상을 일으키는 리노비루스는 피코르나비루스과(picornavirus family)에 속한다. 이 비루스과는 외피가 없으므로, "무피 비루스"로 특정지어지는 수도 있다. 리노비루스의 서로 다른 100종 이상의 항원형이 알려져 있지만, 이들은 중요한 몇 가지 속성들을 나누어 가지고 있다. 예를 들면, 이들은 모두 에테르에 내성이 있는 캡시드(capsids)가 부여되고, 산에 불안정하며, 단일 가닥 DNA(약 2.6×10⁶달톤)를 포함하고 있다. 이들 모두는 사급 암모늄 화합물과 같은 통상의 살균제로는 비활성화시키기 어렵다.

아데노비루스에는 30개 이상의 항원형이 있다. 이들이 호흡기도에 침입하면, 조직에 염증을 일으켜서 인두염, 기관지염 등의 증상을 일으킨다. 한편, 대부분의 아데노비루스 감염은 유년기에 발생하지만, 성인의 감염도 없지 않다. 리노비루스와 같이, 아데노비루스도 외피가 없지만(즉, 무피), 리노핵과 달리 아데노핵은 이중가닥 DNA를 갖고 있으며, 산에 불안정한 것으로 특정지어지지는 않는다. 아데노비루스는 비활성화에 대해서 비범한 내성을 갖는다.

파라믹소비루스과(paramyxovirus family)에 속하는 파라인플루엔자비루스는 소아에 있어서 저위 호흡기 질환 그리고 성인에 있어서 상위 호흡기 질환을 발생시킴에 있어서 중요한 역할을 한다. 파라인플루엔자 비루스는 에테르 감수성이 있고, 뉴클레오캡시드를 둘러싸는 리포푸로테인 막을 갖는 RNA 함유 비루스이다. 이 비루스는 저농도의 카르복실산에 의한 비활성화에 내성을 가진다.

디크와 다른 사람들에 의한 최근의 연구 [디크. 이. 씨.(Dick, E.C) 및 체스니 피. 제이. (Chesney P. J.) 공저,"소아 질환 교본(Textbook of Pediatric Diseases)", 페이진 알. 디. (Feigin R.D.) 및 체리 제이. 디. (cherry J.D.)편, 제 II권, 제 1167페이지(1981), 펜실바니아주 필라델피아시에 소재하는 더블유. 비. 사운더스 피블리케이션 캄파니(W.B. Saunders Pub. Co.) 발행]는 리노비루스에 의해 발생되는 호흡기 질환의 전염 방식에 관해서 중점적으로 기재하였다. 비록 호흡기 질환의 정확한 전염 방식은 충분히 이해되지 않고 있지만, 상기 연구자들의 연구 결과, 보통의 감기와 같은 호흡기 질환의 실제적인 전염은 감염된 환자와 보균 잠재성 환자 사이에서 직접 또는 간접 접촉으로 이루어지는 것으로 입증되었다. (간접접촉이란 접촉표면, 예를 들면 테이블 표면, 도어 손잡이 등의 접촉으로 이루어진다.) 따라서, 비루스 감염환자의 코나 입에서 비루스가 나올 때에 이 비루스에 즉시 비루스 박멸제를 사용함으로써, 이 비루스를 비활성화시킬 수 있다면 연쇄적인 전염을 막고, 또 전염이 만연되는 것을 줄일 수 있을 것이다. 또한, 비루스가 감염된 환자로부터 나온뒤에도 감염된 환자의 얼굴이나 손 등에 잠복된 비루스는 감염된 환자의 신체부위 중 얼굴 표면이나 손 등의 표면에 비루스 박멸제를 신속하게 발라줌으로세 사멸시킬 수 있다.

신속하게 작용하고 효과적인 비루스 박멸제로 처리한 세안지(洗顔紙)는 전술한 과제들을 간단하게 성취시켜 주다.

보통의 호흡기 비루스에 대해서 효과적이며, 안전하고 값싼 비루스 박멸제가 장기간 요망되어 왔다. 간단한 가정용 살균제는 리노비루스와 아데노비루스에 대한 효과가 없다.

리치터(Richter)의 미합중국 특허 제 4,045,364호에는 살균성이 있고 외과용 소독 작업시 예비 세척제로서 유용한 요오도 포르(iodophor) (즉, 요오드와 캐리어)로 침지시킨 일회용 종이제품에 관하여 기재되어 있다. 이 특허에는 요오도포르의 안정성은 낮은 pH에서 증대되고, 글산이나 초산 등의 약한 유기산을 소량 첨가함으로써 pH를 조절할 수 있다고 기재되어 있다. 드라치(Drach) 등의 미합중국 특허 제3,881,210호에는 살균제를 함유시킬 수 있는 미리 습윤시킨 위행용 와이퍼(wiper)가 기재되어 있다. 브리얀트(Bryant)등의 미합중국 특허 제3,654,165호에는 살균효과를 제공하는 요오드가 함유된 세척용 세정제 (cleaner) /위생제 (sanitizer)가 기재되어 있다. 쉐퍼드(Shepherd) 등의 미합중국 특허 제3,567,118호에는 살균제 자체가 함유된 친수성 아크릴레이트 또는 메타크릴레이트 피막이 피복된 세정용 섬유질 재료가 기재되어 있다.

종래의 기술은 요오드 조성물 및 제품들이 광범위 스펙트럼 비루스 박멸 효과를 갖는 것으로 기재하고 있으나, 리노비루스 또는 인플루엔자 비루스와 같은 비루스의 만연을 성공적으로 막을 수 있는 저렴한 비루스 박멸제는 상업적으로 아직 개발되지 못한 상태에 있다. 요오드와 관련한 문제점들은 예컨대 그의 독성과 동물 조직에 자극적이라는 사실에 연유한다. 요오드의 작용은 세균 단백질과 포유류 단백질간의 작용과 같이 비선택적이며, 이것을 피부에 무절제로 사용하면 심한 자극을 유발한다. 나아가 요오드의 활성은 혈청과 같은 생체액의 작용에 의해서 감소되거나 또는 중화될 수 있다. 이와같은 결점들을 회피하기 위하여 요오드를 완화시키기 위한 노력은 완전히 성공에 이르지 못한 설정에 있다.

구연산과 같은 산류의 살균 작용에 관한 참고 문헌이 있다. [예컨대, 제임스 디. 레이드(Reid, James D.)의 유기산의 살균 작용(The Disinfectant Acton of Certain Organic Acids)", 아메리칸 저널 오브 하이진(American Journal of Hygiene), 제16권, 제540-556페이지(1932년 출판)〕. 그러나, 비루스와 박테리아는 서로 다른 특성을 갖는 상이한 미생물을 나타낸다는 점에서 비루스 박멸 작용은 살균작용과 근본적으로 다르다. 예를들면, 비루스는 숙주 세포의 외부에서 복제되지 않지만 박테리아는 숙주 세포 외부에서 복제되는 차이점이 있다. 염화벤즈알코늄과 같은 사급 암모늄 화합물은 박테리아에 대해서 흔히 효과적이지만, 각종 리노비루스와 같은 비루스에 대해서는 효과가 없다.

리노비루스는 낮은 pH 조건하에서 산의 수용액에 대하여 불안정한 것으로 알려져 있지만[예컨대, 비. 디. 데이비스(Davis, B.D.)의 공저, "미생물학(Microbiology)" 제1303페이지, 이. 로우 하아퍼(Haper,E.Row) (출판사) 뉴욕, 1973년 및 알. 알. 뤼커어트(Rueckert. R.R.)의 저서, "피코나비랄 아키텍취(Picornaviral Architecture)" 컴파라티브 바이럴러지-아카데믹프레스(Compaarative Virology-Academic Press), 뉴욕, (1971년 출판), 제194-306페이지 참조〕, 알려져 있는 문헌에서는 리노비루스로 유발되는 연쇄전염의 방지와 같은 역학적(疾學的)인 면에서의 이 개념의 이용을 언급하지 않고 있다. 현재까지 가장 잘 알려진 바로는, 일반인이 입수할 수 있는 문헌에서 찾아볼 수 있는 유기산류(구연산, 말산 등)의 비루스 박열효과의 체계적인 연구는 폴리(Poli), 비온디(Biondi), 우베르티(Uberti), 폰티(Ponti), 발사리(Balsari), 및 칸토니(Cantoni)에 의하여 행하여 진 바 있다. [지. 폴리 등의 "유기산류의 비루스 박멸 작용(Vircidal Activity of Organic Acids) " Food Chem. (영국) 4(4)251-8(1979)참조〕. 이들 연구자들은 유기산 중에서도 구연산, 말산, 피루빈산 및 호박산이 허피스비루스(herpesvirus), 오르토믹소비루스(orthomyxovirus) 및 라브도비루스(rhsdovirus) (라비스비루스)에 대해서 효과가 있다는 사실을 알아내었다. 이들은 실험을 순수한 산의 수용액을 사용하여서 실온에서 행하였다. 이 실험에서 기재나 지지체는 전혀 사용하지 않았다. 이들이 연구의 목적으로 선택한 3가지 비루스는 모두"유피" 비루스이었는데, 이들은 비루스가 외피를 갖는다는 점에 있어서 파라인플루엔자 3과 유사하다. 폴리와 그의 공동 연구자들은 이들은 유기산들은 "무피" 비루스로 불리우게 될 아데노비루스에 대해서는 효과가 없다는 사실도 알아내었다. 이러한 사실에 터 잡아, 이들 연구자들은 이들 유기산들은 "유피" 비루스에 대해서 효과가 있지만, "무피" 비루스에 대해서는 효과 없다는 결론에 도달하였다.

아데노 비루스가 내산성을 갖는다는 것은 기 기술분야의 숙련자들에게 공지되어 있다.

아르히프 휘어 리벤스미텔히기네(Archiv fur Libensmittelhygiene) 제29권, 제81-120페이지(1978년)에는 수용액 중에서의 일정의 살균성 계면 활성제에 감수성인 아데노 비루스 군주를 보고하고 있다. 그러나 그러한 살균성 계면 활성제와 유기산 또는 기재나 지지체와의 배합에 관한 제안은 없다.

본 발명은 광범위한 비루스에 걸쳐 효과가 크며 안전하게 생산 및 사용될 수 있는 비루스 박멸 조성물 및 그 제품을 제공한다. 본 발명자들은 호흡기 비루스의 적어도 1종 이상의 종(種)이 구조식 R-COOH카르복실산(뒤에 구체적으로 설명됨)으로 조성되는 비루스 박멸용 조성물의 유효량과 접촉시키면, 비루스가 실질적으로 비활성화되어서 비루스의 만연을 억제하고 예방시켜 준다는 사실을 알게 되었다. 아래에서 논의하는 바와같이, 계면 활성제와의 조성물 형태로 사용할 수 있는 카르복실산류는 일정의 호흡기 비루스, 즉 유피 비루스(예컨대, 파라인플루엔자)와 무피 비루스(예컨대, 리노비루스 및 아데노 비루스)를 비활성화시킨다. 상기 비루스 박멸 조성물로 처리한 세안지나 부직포와 같은 적당한 지지체나 기재는 비루스의 만연 예방에 특히 유용하다. 일반적으로, 이 비루스 박멸용 조성물과 그 제품들은 손쉽게 취급할 수 있으며, 본 발명의 방법에 따라서 사용하였을 때에 유해한 효과를 주지 않는다. 이 조성물은 기재나 지지체의 색상, 냄새, 강도 또는 기타 중요한 성상들에 있어서 저해효과가 거의 없거나 또는 전혀 없었다. 예를들면, 본 발며의 비루스 박멸용 제품은 건식 와이프나 함습 와이프 또는 습식 와이프로 사용될 수도 있다.

이하 본 발명을 실시예에 의하여 구체적으로 설명한다.

본 발명은 더 상세히 논하겠지만 적당한 농도로 사용된 구연산, 말산, 호박산, 벤조산 등의 유기산이 리노비루스 16,1A 및 86에 대해서 극히 효과적인 예기치 못했던 발견에 기인한 것이다. 상기 산들은 황산 도데실나트륨과 같은 계면 활성제 존재하에서도 역시 파라인플루엔자 3 및 아데노비루스 5에 대해서 유효하다는 사실을 알아내었다. 일반적으로, 본 발명에 의해 사용될 수 있는 카르복실산류는 다음과 같은 구조식을 가진다.

R-COOH

위식에서, R는 저급 알킬, 치환된 저급 알킬, 히드록시 저급 알킬(예, HOCH₂-), 카르복시 저급 알킬(예, HOOCH-CH₂-CH₂-), 카르복시 히드록시 저급 알킬(예, HOOCCH₂CHOH-), 카르복시 할로 저급 알킬(예, HOOCCH₂CHBr-), 카르복시 디히드록시 저급 알킬(예, HOOC-CHOH-CHOH-), 디카르복시 히드록시 저급 알킬 (예,

),저급 알케닐, 카르복시 저급 알케닐(예,HOOCCH＝CH-), 디카르복시 저급 알케닐 (예,

), 페닐 (예, C₆H₅-), 치환된 페닐(예, 히드록시페닐 HO-C₆H₄-)이다. 그밖의 산으로서는 히드록시 저급 알킬(예, 유산), 카르복시 히드록시 저급알킬(예, 2-메틸 말산), 카르복시 할로 저급 알킬(예, 2-클로로-3-메틸 호박산), 카르복시 디히드록시 저급 알킬(예, 2-메틸 주석산), 디카르복시 히드록시 저급 알킬(예, 2-메틸 구연산) 및 카르복시 저급 알케닐(예, 푸마르산)이 있다.

상기 정의는 예시적인 것이지 한정적 의미를 갖는 것은 아니다

상기 "저급"이란 표현은 R가 1내지 6개의 탄소원자를 갖는 산류을 의미한다. 또한, "치환된"이란 표현은 1개 이상의 수소 원자가 할로겐 원자(F,Ci,Br,I), 히드록실기, 아미노기, 티올기, 니트로기, 시아노기 등으로 치환된 것을 의미한다.

계면 활성제로서는, 비이온계 [예, 폴리옥시에틸렌화 알킬 페놀류(예, TRITON X-100

, 롬 앤드 하즈(Rohm and Haas) 제품, 폴리옥시에틸렌화 소르비톨 에스테르류(예, TWEEN 40

), 아이씨아이 유나이티드 스테이츠, 인코포레이팃드(ICI United States, Inc.) 제품], 양이온계 [예, 염화세틸 피리디늄(C₆H₅N+(CH₂)₁₅CH₃Cl-), 염화메틸벤젠토늄(Me₃CCH₂C(Me)₂C₆H₃(Me)-OCH₂CH₂OCH₂CH₂+N(Me)₂CH₂C₆H₅Cl-)], 음이온계 [예, 황산도데실나트륨(CH₃(CH₂)₁₀-CH₂OSO₃-Na), 1,4-비스(2-에틸헥실) 에스테르, 술포호박산의 나트륨염(상명, AEROSOL OT), 아메리칸 사이아나이드 캄파니(American Cyanamid Company)제품]를 사용할 수 있다. 음이온계 계면활성제로서 적합한 것은 다음과 같은 구조식으로 나타낼 수 있다.

1. (ROSO₃)_XM⁺또는 (RSO₃)_XM⁺

위식에서, M^＋는 1가, 2가 또 3가의 금속 양이온, 암모늄 또는 치환된 암모늄이온이고, x는 정수이며, R는 알킬기이다.

2. M⁺

위 식에서, M^＋및 x는 앞에서 정의한 바와 같으며, R₁및 R₂는 서로 동일하거나 또는 상이한 것으로서, 직쇄 또는 측쇄 지방족기이다.

상기 음이온계 계면활성제는 한정적인 의미보다는 오히려 예시적 의미를 갖는다. 일반적으로, 계면 활성제는 리노비루스와 같은 무피 비루스에 대한 비루스 박멸 효과가 없다.

비록 본 발명은 비루스 박멸제의 기재 또는 지지체로서 셀룰로오스 직물(예, 세안지, 욕조 티슈, 세면 실용 수건 및 기타 용품 등)의 사용에 한정시키는 것은 아니지만, 이상의 것들 중에서 본 발명의 신규한 비루스 박멸용 조성물로 함침 처리한 세안지가 본 발명의 기본 원리를 충분히 설명해주며, 또한 이것이 본발명의 간단하고도 유용한 실시예이다. 이와같은 이유로서, 이하에 기술하는 실험은 기재로서 세안지를 사용하여서 행한 것이다. 부직포 기재로 적합한 것들은 수술용 멸균천, 가운, 침대 시이트, 베갯잇 등의 일회용 병원용품에 흔히 사용되는 습식 크레프 처리된 수건(wet-creped hand towels), 방사(紡사) 접합및 용융 취입(吹入)하여 얻은 중합체 직물과 같은 습식 와이프 재료이다. 부직포의 기타 예로서는 와류(渦流) 혼합시켜 부직포형으로 제조한 천연 및 (또는 ) 합성 섬유의 합성품들이 있다. 다른 재료들로 이루어진 적층 구조물(라미네이트)를 비롯한 모든 종류의 직물 재료들이 적당한 기재로 사용될 수 있다. 예를 들면 호흡기 질병이 걸린 사람들이 사용하는 위생 안면 마스크는 본 발병을 이용하기 위한 훌륭한 수단을 제공한다. 다른 본질적으로 불활성인 지지체, 즉 로숀제, 분무제, 크리임제, 광택제 등에 응용하기 위한 보통의 사용 조건하에서 인체 및 동물 조직에 본질적으로 비독성이고 비자극성인 지지체들은 당업계 숙련된 사람들에게 명백해질 것이다.

일반적인 조건에서, 아래 실시예에서 시료를 제조하는 실험과정은 단순하고 직선적이다. 세겹 KLEENEX

세안지(27.94cm×30.48cm, 기본 중량 : 약 26파운드/2880ft², 모두 세겹으로 결합됨)를 구연산, 말산, 호박산 및 벤조산의 수용액에 간단히 담가서 함침시켰다. 이 산류는 AEROSOL-OT-[호박산의 1,4-비스(2-에틸헥실) 에스테르의 나트륨염, 아메리칸 사이아나미드 제품], 황산도데실나트륨과 같은 소량의 계면 활성제와의 혼합물 형태로 함유해도 사용한다. 경우에 따라서는, 티슈의 유연성을 증대시키기 위하여 소량의 글리세롤이 사용된다. 포화시킨 티슈는 로울러 사이에서 압착시켜서 잉여량의 포화제를 짜내어 포화의 균일성을 확보한다. 이 티슈를 칭량하여 건조시킨 다음 포화도 (즉, 포화제의 구성비)를 측정하였다. 다음에, 이 티슈를 비루스 박멸 효과 시험용으로 준비하였다.

비루스 박멸 효과 시험에 채용한 방법은 셀룰로오스 기재존재에 의하여 필요로 하다 간단한 변형을 행하는 표준 비루스학적 평가법(TCID₅₀)에 따른 것이다.

[비루스 박멸 평가법]

[I. 재료]

A.용액

3. 행크스 평형 염 용액

g/ℓ(2회 증류 시킨 물)

NaCl 8.0 KH₂PO₄(무스) 0.06

KCl 0.4 글루코스 1.0

MgSO₄.7H₂O 0.2 페놀레드 0.005

CaCl₂(무수) 0.14 NaHCO₃0.35

Na₂HPO₄.2H₂O 0.06

(주) 상기 용액들은 비루스 박멸 작용이 없다.

B. 비루스 및 조직 배양 세포주(Cell Lines)

1. 리노비루스 타입 16, 타입 1A 및 타입 86

리노비루스 타입 16, 타입 1A 및 타입 86(RV16, 1A 및 16 각각)은 오하이오주 헬라(0-Hela) 조직 배양 세포 중에서 증식시키고 사용전까지 -15.6℃(-60℉)에서 저장한다. 리노비루스에 관련되는 비루스 박멸 시험은 33℃에서 로울러 드럼 장치 상에서 배양시킨 0-헬라 조직 배양 시험관을 사용하여 행한다.

2. 파라인플루엔자 타입 3

파라인플루엔자 타입 3(파라 3)를 리이서스 원숭이(rhesus monkey) 신장 조직 배양 세포 중에서 증식 시키고, 이것을 사용전까지 -15.6℃(-60℉)에서 저장한다. 파라 3 비루스와 관련된 비루스 박멸 시험은 33℃의 고정 위치에서 배양시킨 0-헬라 조직 배양 시험관을 사용하여 행한다.

3. 아테노비루스 타입 5

아데노 비루스 타입 5(아데노 5)를 HEP-2 조직 배양 세포 중에서 증식시키고 사용 전까지-15.6℃(-60℉)에서 저장했다. 아데노 5 비루스가 관련된 비루스 박멸 시험은 37℃의 고정 위치에서 배양시킨휴맨 에피텔릴 카르시노마(Human Epitheleal Carcinoma)-2(HEP-2) 조직 배양 시험관을 사용하여 행한다.

[II. 방법]

A. 비루스 박멸 시험

비루스와 타액의 1 : 1(용적비) 혼합물을 마련한다. 약품 처리한 KLEENEX

티슈(킴벌리-클라크 회사 제품)를 1평방 인치의 크기로 절단해서 이것을 플라스틱제 페트리 접시 위에 놓는다(여기서, 약품 처리한 티슈는 시험 중인 비루스 박멸제로 함침시킨 티슈를 의미한다.) 비루스-타액 혼합물(0,1㎖)을 피펫으로 상기 KLEENEX 시료에 직접 옮겨서 1분동안 반응시킨다. 상기 혼합물은 2배로 희석시킨 비루스 희석액이다. 1분 동안 반응시킨 후에, 페트리 플레이트에 있는 시료에 중화액 5㎖를 피펫으로 옮기고, 3초 동안 진탕시킨다. 이것은 100배 비루스 희석액이다. 이어서, 중화액-비루스-타액 혼합물을 페트리플레이트로 부터 피펫으로 옮기고, 이것을 행크스-맥킬베인염 용액 5㎖를 넣은 시험관에 첨가한다. 플레이트를 기울여서 피펫의 끝을 사용하여 그 시험관에 시료를 밀어 넣음으로써 시료를 시험관에 넣는다. 용액 10㎖와 시료가 들어 있는 시험관을 30초 동안 와동시켰다. 이 시험관에는 10￣^2.3또는 1 : 200의 비루스 희석액이 들어 있다. 상기 희석액 0.3㎖를 취하여 이것을 행크스-맥킬베인염 용액 2.7㎖에 첨가함으로써 10￣^2.3희석액으로부터 일련의 10배 희석액(매 희석시마다 새로운 피펫을 사용함)을 마련한다. 이 희석액 0.1ml를 각 조직 배양 시험관 내에서 접종시킨다. 일반적으로, 각 희석액 마다 2개의 시험관을 접종시킨다.

각 실험에 대하여 2개조의 대조물을 사용한다. 제 1조는 타액 또는 티슈 기재 없이 비루스 현탁액 자체의 효능을 검토하기 위하여 계획된 "비루스 대조물"이다. 비루스 현택액은 HMSS 중에서 순차적으로 10배로 희석시킨다. 특정 희석액 0.1ml를 조직 배양 세포 시험관마다 접종시킨다. 이 대조물로부터 얻은 정보는 -15.6℃(-60℉)에서 저장한 비루스액 중에 있는 감염성 비루스 단위의 수효를 제공해주며, 또 이 실험에서 사용한 비루스액의 분취량은 동결, 저장 또는 해동과정 도중에 감염성을 상실하지 않았다는 것을 확실히 해준다.

제 2 대조물, 즉 "티슈 대조물" 은 미처리 KLEENEX

티슈 1평방 인치를 사용하여 비루스 박멸 실험을 수행하는 것이다. 이 대조물로부터 얻은 정보는 비루스 박멸 시험법에 따라 미처리의 1평방 인치의 와이프로부터 회수될 수 있는 감염성 비루스 단위의 수효를 제공해준다. 접종시킨 조직 배양 시험관들은 7일간 비루스 감염의 증명을 위한 시험을 행한다.

주어진 와이프에 대한 비루스 박멸 시험의 종말점은 실제로 감염되거나 또는 2개의 접종시킨 시험관 중 1개만을 감염시키는 데 계산되는 비루스의 희석 배수이다. 이 수치는 조직 배양 전염성 투여량 또는 TCID₅₀이라 정의한다. 주어진 와이프의 비루스 박멸 활성의 결과는 일반적으로 미처리 시료의 TCID₅₀값의 상용 대수로부터 처리 시료의 TCID₅₀값의 상용 대수를 뺀 "대수차"로 나타낸다.

시료의 비루스 박멸 효능은 다음과 같은 식으로 계산된 "대수차"로부터 유도될 수 있다.

비루스 박멸 효능 =

위 식에서,

X는 대조물로서 사용한 미처리 시료의 비루스의 초기 농도(감염 단위/0.1ml)이고,

Y는 처리 시료의 비루스의 최종 농도(감염 단위/0.1ml)이다.

다음에는 계산 방법을 설명한 것이다(이 실험에서, 최종 비루스 농도는 항상 10^2.3감염 단위/0.1ml미만이거나 또는 동등치 이였다). 대부분의 결과에서, 최종 비루스 농도는 10^2.3미만이었다. 초기 비루스 농도가 10^6.3인 경우, 이 것은 "대수차"가 4이상인 것을 의미하며, 99.99% 이상의 멸균률을 나타낸다.

상기 개략적인 방법은 표준 미생물학 검정법에 따른 것이다. 이 방법은 생물학적 실험과 연관된 변화의 범위내에서 신뢰성 있고 재현성있는 결과를 제공해 준다.

[결과]

실험 결과를 하기 표 Ⅰ,Ⅱ 및 Ⅲ에 기재되어 있다. 표 Ⅰ에 기재한 데이타는 적당한 농도로 세안지에 사용한 단일 유기 카르복실산류, 예를들면 구연산, 말산, 주석산, 호박산 및 그의 치환 유도체(예, 2-브로모-호박산) 및 벤조산과 그의 치환 유도체(살리실산)가 리노비루스 16 및 파라인플루엔자 3에 대해서 비루스 박멸 효과가 극히 높다는 것을 나타낸다. 또한, 표 Ⅰ에 기재된 데이타는 Aerosol OT 또는 황산도데실나트륨과 같은 계면 활성제와 혼합해서 사용할 때에, 세안지에 있어서 비루스 박멸 효능을 저하시키는 일이 없이 산의 농도를 줄일 수 있다는 것을 나타내고 있다.

표 Ⅱ에는 구연산, 벤조산, 호박산 및 말산 중에서 선택된 산 혼합물을 사용한 실험 결과가 기재되어 있다. 이 데이타는 산 혼합물로 처리한 세안지는 리노비루스 16 및 파라인플루엔자 3에 대해서 비루스 박멸능이 있다는 것을 나타내고 있다. 표 Ⅱ의 데이타는 또한 구연산과 말산과 같은 혼합산계와 SDS와 같은 적당한 계면 활성제로 함침시킨 세안지가 리노비루스 타입 16,1A 및 86과 아데노비루스 5에 유효하다는 것을 나타내고 있다. 이들 실시예는 본 발명에 있어서, 구연산/말산/호박산과 같은 단일 유기산류를 SDS와 같은 적당한 계면 활성제와 혼합해서 사용할 때에 보통 호흡기 비루스에 대해서 비루스 박멸 효과가 극히 높다는 것을 증명하는 것이다. 호흡기 비루스 중 대표적인 것으로는 리노비루스 타입 16,1A 및 86과 파라인플루엔자 3 및 아데노비루스 5가 있다. 그 밖에, 상기한 비루스 박멸 조성물의 전개 수단으로서 세안지를 사용하는 제품도 지극히 효과적이다.

본 발명의 특징은 본 발명이 호흡기 비루스가 일으키는 연쇄적인 전염을 막는 기초를 제공하고 있다는 사실에 있다. 비루스는 숙주 세포의 외부에서 복제되지 않으므로, 실험에서 입증된 비활성화도는 호흡기비루스로 감염된 사람 근처에서 비루스 농도를 간단하게 그리고 실제적으로 줄일 수 있는 수단을 제공해 준다. 이것은 전염이 만연되는 잠재성을 현저하게 감소시켜 준다.

[표 Ⅰ]

리노비루스 16 및 파라인플루엔자 3 비루스에 대한 단일산류의 비루스 박멸 효능(노출 시간 : 1분)

a : 괄호 안의 숫자는 세안지의 중량에 기준하여 사용된 화학 약품의 백분률.

b : AEROSOL OT

,술포호박산 1,4-비스(2-에틸헥실) 에스테르의 나트륨염.

c : 황산도데실나트륨.

[표 Ⅱ]

a : 괄호안의 숫자는 세안지의 중량에 기준하여 사용된 화학 약품의 백분률.

b : AEROSOL OT

c : ARITON X-100

d : 황산도데실나트륨.

* : 이 숫자는 세안지의 중량에 기준하여 사용된 화학 약품의 백분률.

[표 Ⅲ]

리노비루스 16, 리노비루스 1A, 리노비루스 86 및 아데노비루스 5에 대한 혼합산류와 SDS의 비루스 박멸 효능(노출 시간 : 1분)

a : 이 숫자는 세안지 중량에 기준하여 사용된 화학 약품의 백분률.

b : 황산도데실나트륨.

본 발명에 의하여 달성되는 개선된 효과를 더욱 구체적으로 설명하기 위하여, 선택된 산 조성물의 농도를 변화시키고, 1분 및 5분마다 비루스 박멸 활성을 측정하는 추가 실시예를 수행하였다. 이 결과들은 다음 표Ⅳ에 요약되어 있다. 일반적으로, 본 발명의 범위 내에 속하는 산 조성물은 고도의 비루스 박멸 효과가 있으며, 리노비루스 또는 파라인플루엔자의 경우에 이들은 1분 이내에 2 또는 그 이상의 비활성화의 대수 감소를 나타낸다. 아데노비루스의 경우에, 이 시간은 5분 이내가 될 것이다. 일반적으로, 비활성화도는 기대했던 바와같이 1분후 보다는 5분후에 더 커진다. 오차의 한계와 시험 방법의 특성 때문에 시험결과에 있어서 약간의 미소한 오차가 나타난다. 당업계의 숙련자들은 비루스 박멸 효과는 비루스와 접촉에 쓰이는 조성물의 양에 우선 좌우되고 다음에 기재 또는 지지체의 특성에 의해 영향을 받는다는 것을 인식하게 될 것이다. 예를 들면, 아래의 표 Ⅳ에 나타낸 바와같이, 모직물과 같이 큰 공극을 갖는 비교적 두꺼운 기재 또는 지지체는 다량의 조성물로 처리시키지 않으면 비루스 박멸 효과가 없다. 한편, 티슈나 부직재료와 같이 비교적 밀집된 구조의 가벼운 지지체는 보다 적은 양의 조성물을 필요로 한다. 그러나 기재된 시험에 기초하여 조성물과 지지체로 구성된 일정의 혼합물의 효과가 결정될 수 있다. 예를 들면, 표 Ⅳ에 나타낸 바와 같이, 첨가된 구연산은 5-10%의 시험 농도에서 효과가 있다. 사용된 절차는 이하에 기재한다.

이들 실시예에 관하여 TCID₅₀값들은 증식력을 보장하기 위하여 초기에 적어도 일회 통과시킨 로우 패시지(low passage)의 WI-38 세포[플로우 라보라토리즈, 인코포레이팃드(Flow Laboratories, Inc.)제품]를 사용하여 얻었다. 이어서 병들을 1: 2로 분할시키고, 넓적바닥 증식 면적이 0.32㎠인 96-웰 클러스터 조직 배양판[엠 에이 바이오프로덕츠(M A Bioproducts) 제품] 내에서 접종시켰다. 이 세포들은 5% CO₂중에서 37℃로 배양되고, 24시간 후에 통상 80-90%가 도말되며, 검정 전의 외양은 정상이었다. 세포의 희석과 유지용으로 사용한 배지(2% MM)는 어얼스(Earles) BSS(글루타민, 겐타마이신 설페이트 및 2% 태아 송아지 혈청이 첨가된 것)를 갖는 MEM이글스(Eagles)이었다. 리노비루스 1A는 매릴랜드주 베데스다에 소재하는 내쇼날 인스티튜트 오브 앨러지 앤드 인펙셔스 디시이즈스(National Institute of Allergy and Infectious Diseasea)에서 얻었다. 이 비루스를 넣은 1개의 바이알을 WI-38 세포에서 증식시키고 후접종 2일 후에 4⁺세포 발병 효과(cytopathogenic effect, CPE)가 나타난 후에 수확하였다. 이 비루스를 수확 및 분취하여 70℃에서 동결시킨 후, 96-웰클러스터 플레이트 내의 WI-38 세포 중에서 역가를 측정하였다.

효능을 위해서, 플레이트와 뚜껑 사이에 멸균처리한 가제를 놓고, 이 플레이트를 뒤집어서 플레이트로부터 배지를 제거시켰다. 사용한 6개의 웰은 모두 2% MM 0.1㎖씩 받았다. 세포 대조물로서 사용했던 웰에 2% MM 0.1㎖를 더 첨가하였다. 세포에 화합물들을 첨가하고, 재료의 적당한 희석액 0.1㎖를 6개의 웰에 각각 첨가하였다. 초기 희석용의 저장 비루스를 2%MM과 1 : 1로 혼합하였다. 이어서, 이 비루스 희석액 100μml를 페트리 접시 내의 처리된 디스크에 첨가하였다. 이 비루스를 마이크로리터 주사기를 사용하여 티슈 디스크에 균일하게 도포하였다. 이 비루스를 디스크 상에서 1분 또는 5분 동안 방치시킨 다음에, 페트리 접시 내의 디스크에 2%MM5㎖를 첨가하고, 이어서 이 디스크를 약간 진탕시켰다. 이 디스크와 용액을 분리시켜서 멸균 처리한 시험관 내에 넣고, 30초 동안 격렬하게 진탕시켰다. 이것을 제 1 희석액으로 한다. 최초의 시험관으로부터 20배로 희석시킨 3개의 희석액을 얻고, 모두 4개의 희석액 0.1㎖씩을 단층 WI-38세포에 첨가하였다. 각 희석액마다 6개의 웰을 사용하였다. 미처리 대조물을 비루스존재 및 부재하에 1분 및 5분 경에 시험하고, 각각의 검정법으로 비루스 역가를 검정하였다. 이 플레이트를 그 시험 기간 동안에 5% CO₂중에서 37℃로 재차 배양시켰다.

셀파민산과 인산 등의 산류도 역시 비루스 박멸작용이 있는 것으로 밝혀졌다. 그러나, 이 산들은 티슈와 같은 기재 또는 지지체를 손상시킨다는 사실을 알게 되었다.

[표 Ⅳ]

[표Ⅴ]

일부의 산은 물에 가용성이기 때문에, 이 산들은 침지, 코우팅, 또는 분무, 그라비야 인쇄와 같은 기타 종래의 방법들에 의해서 편리하게 수용액 형태로 여러가지 기재 또는 지지체에 사용할 수 있다. 본 발명의 조성물은 전술한 바와 같이, 비루스 박멸 효과를 제공하기에 충분한 양으로 기재에 도포된다. 가용성 산이라 함은, 그 산이 충분히 가용성이어서 비루스 박멸 효과를 제공하는 것을 의미한다. 상기 실시예에서 알 수 있는 바와같이, 용해도는 고용해도(예, 실시예 39-41에서 사용한 글리콜산)로부터 저용해도(예, 실시예 11,12 및 42-45에서 사용한 살시실산)에 이른다. 산류에 대한 저급 유효 한계치는 정밀하게 측정하지 아니하였으나, 일반적으로, 약 10.4-14.1kg/267.6㎡의 기본 중량을 갖는 세안지(3겹)와 같은 기재에 있어서, 건조 중량으로 구연산과 같은 산의 경우에는 적어도 약 2%이상, 바람직하게는 약 5%를 취해야 한다.

다른 기재 또는 지지체에 관해서는, 보습성이 높은 것이 바람직하다. 표에 나타낸 바와같이, 모직물과 같은 기재에 있어서, 비루스 박멸효과가 낮은 이유는 비루스 박멸용 조성물이 기질을 투과할 수 없기 때문이다.

혼합산을 사용할 때에, 이 혼합산은 어떠한 비율로든지 사용할 수 있으나, 각 산은 기재의 건조 중량에 대하여 적어도 약 0.2-10% 함유시키는 것이 적합하다. 계면 활성제는 음이온계계면 활성제 중에서 선택되며 기재의 건조 중량에 대하여 약 0.05-5%의 양으로 함유시키는 것이 적합하다. 인체 또는 동물 조직과 접촉시 실질적으로 비독성이거나 비자극성인 바람직한 부재인 로숀제, 구강 세척제, 크림제, 분무제, 광택제 등의 다른 기재 또는 지지체에 본 발명에서 정의한 비루스 박멸 활성을 가진 유기산들을 적용함에 있어서, 비루스 박멸 유효량은 본 발명에 기재된 방법의 적용시에 용이하게 결정될 수 있다. 예를 들면, 2 이상의 대수치 감소는 숙주 비루스의 99% 이상이 비활성화된다는 것을 의미한다.

따라서, 본 발명에 의하면, 보통의 사용 조건하에서 전술한 본 발명의 목적과 작용ㆍ효과들을 충분히 충족시키는 비루스 박멸용품이 제공될다.

Claims

다음 구조식(1)의 산의 1종 이상과, 폴리옥시 에틸렌화 알킬 페놀, 폴리옥시에틸렌화 소트비톨 에스테르, 사급 암모늄염 또는 다음 구조식(2)-(4)의 황산 에스테르염과 술포숙식산 에스테르염 중에서 선택된 계면 활성제로 조성된 것이 특징인 비루스 박멸용 조성물.

위 각 식에서,

R는 저급 알킬, 치환된 저급 알킬, 카르복시 저급 알킬, 카르복시 히드록시 저급 알킬, 카르복시 할로 저급 알킬, 카르복시 디히드록시 저급 알킬, 디카르복시 히드록시 저급 알킬, 저급 알케닐, 카르복시 저급 알케닐, 디카르복시 저급 알케닐, 페닐 또는 치환된 페닐 중에서 선택된 기이고, M^＋은 1가, 2가 또는 3가 금속 양이온, 또는 암모늄 또는 치환된 암모늄 이온이며, x는 정수이고, R₁및 R₂는 동일 또는 상이한 것으로서, 직쇄 또는 측쇄 지방족기이다.
제 1 항에 있어서, 계면 활성제가 알킬술폰산염 및 알킬 황산염 중에서 선택되는 음이온계 계면 활성제인 조성물.
제 1 항에 있어서, 비루스가 아데노비루스를 포함하고, 비루스 박멸 조성물이 상기 산과 알킬 술폰산염 및 알킬 황산염으로 되는 군 중에서 선택된 음이온계 계면 활성제로 조성되는 조성물.
제 3 항에 있어서, 계면 활성제를 술포호박산의 1,4-비스(2-에틸헥실) 에스테르의 나트륨염 및 황산도데실 나트륨 중에서 선택되는 조성물.
제 1항에 있어서, R가 1-6개의 탄소 원자를 갖는 기인 조성물.
제 1항에 또는 제 3항에 있어서, 산이 구연산, 말산, 호박산, 벤조산 및 그의 치환 유도체와 이들 산의 2종 이상의 혼합산 중에서 선택되는 조성물.
사용할 기재 또는 지지체의 건중량에 대하여 0.05-5 중량%의 음이온계 계면 활성제와 적어도 2 중량%의 다음 구조식(1)의 산의 1종 이상으로 이루어진 조성물을 전체 셀룰로스질 또는 부분 셀룰로스질 웨브, 전체 합성 중합체 부직웨브 및 직물 중에서 선정된 건식 직물 기질 또는 지지체에 합침시킨 것이 특징인 비루스 박멸용제품.

R-COOH (1)

위 식에서, R는 제 1항에서 정의한 바와 같다.
제 7항에 있어서, 음이온계 계면 활성제가 다음과 같은 구조식을 갖는 황산에스테르염 및 술포호박산 에스테르염 중에서 선택되는 것이 특징인 제품.

(RSO₃)M⁺, (ROSO₄)M⁺, 또는

위 식에서, M⁺는 1가, 2가, 또는 3가의 금속 양이온, 암모늄 또는 치환된 암모늄 이온이고, x는 정수이며 R는 알칼기이고, R₁및 R₂는 서로 동일하거나 또는 상이한 것으로서 직쇄 또는 측쇄 지방족이다.
제 7항에 있어서, 계면 활성제가 알킬술폰산염 및 알킬황산염 중에서 선택되는 음이온계 계면 활성제인 것이 특징인 제품.
제 8항에 있어서, 계면활성제가 술포호박산의 1,4-비스(2-에틸헥실) 에스테르의 나트륨염 및 황산도데실 나트륨 중에서 선택되는 것이 특징인 제품.
제 7항에 있어서, R가 1-6개의 탄소 원자를 갖는 기인 제품.
제 7항에 있어서, 산이 구연산, 말산, 호박산, 벤조산 및 그의 치환된 산 유도체와 이들 산의 2종 이상의 혼합산 중에서 선택되는 것이 특징인 제품.
제 7항에 있어서, 웨브가 셀룰로오스질 세안지인 것이 특징인 제품.