KR20210053871A - 캄프토테신 접합체 - Google Patents

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KR20210053871A
KR20210053871A KR1020217000418A KR20217000418A KR20210053871A KR 20210053871 A KR20210053871 A KR 20210053871A KR 1020217000418 A KR1020217000418 A KR 1020217000418A KR 20217000418 A KR20217000418 A KR 20217000418A KR 20210053871 A KR20210053871 A KR 20210053871A
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KR
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camptothecin
alkyl
unit
group
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KR1020217000418A
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스콧 제프리
라이언 리스키
우랜드 라우
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씨젠 인크.
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Abstract

캄프토테신 화합물과의 항체 접합체, 이의 사용 및 제조 방법이 기술된다.

Description

캄프토테신 접합체
관련 출원의 교차 참조
본 출원은 2018년 6월 7일에 출원된 미국 임시 특허 출원 제62/681,847호 및 2018년 12월 10일에 출원된 제62/777,491호의 우선권 이익을 주장하며, 이 둘 모두는 모든 목적을 위해 그 전체 내용이 본원에 인용되어 포함된다.
항체(mAb)는 종양 세포로의 세포독성제의 표적 전달에 대해 조사되어 왔다. 항체에 의한 표적 전달에 대해 다양한 약물 부류가 평가되었지만, 항체 약물 접합체로서 충분히 활성이 있으면서 임상 개발을 보장하기에 적합한 독성 프로파일 및 기타 약리학적 특성을 갖는 것으로 입증된 약물 부류는 소수에 불과하다. 관심을 받고 있는 하나의 약물 부류는 캄프토테신이다.
전형적으로 링커를 통해 세포독성제를 항체에 부착시키는 항체 약물 접합체(ADC: Antibody Drug Conjugate)의 설계는 링커에 부착하기 위한 약물의 접합 핸들의 존재 및 조건부로 안정한 방식으로 항체에 약물을 부착하기 위한 링커 기술을 포함하여, 다양한 요인을 고려하는 것을 포함한다. 부류의 모 화합물에 대한 접합 핸들은 링커가 카보네이트 작용기를 통해 부착된 C20 히드록실 작용기이다(예컨대, 문헌[Walker, M.A. et al. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters (2002) 12(2): 217-219] 참조). 그러나, 카보네이트 작용기는 전형적으로 가수분해 불안정성을 겪고, 이로 인해 유리 약물이 전신 순환으로 조기 방출되어 ADC 효능을 감소시킬 수 있고 접합체의 면역 특이성이 불충분할 수 있으며 독성이 증가할 수 있다. 따라서, 원하는 작용 부위에 전달되는 약물의 양을 증가시키기 위해 안정성이 개선된 캄프토테신 접합체가 당업계에서 필요하다. 본 발명은 이들 및 다른 요구를 다룬다.
본 발명은 특히 캄프토테신 접합체, 캄프토테신-링커 화합물 및 캄프토테신 화합물의 제조 및 이를 이용하는 방법, 및 이의 중간체를 제공한다. 본 발명의 캄프토테신 접합체는 순환에서 안정적이면서도 종양 세포 주변 또는 종양 세포 내에서 유리 약물이 접합체로부터 방출되면 세포 사멸을 일으킬 수 있다.
하나의 주요 실시형태에서, 하기 화학식:
L-(Q-D)p
또는 이의 염을 갖는 캄프토테신 접합체가 제공되고, 상기 식에서
L은 리간드 단위이고;
아래첨자 p는 1 내지 16의 정수이고;
Q는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 갖는 링커 단위이고:
-Z-A-, -Z-A-RL-, -Z-A-RL-Y-, -Z-A-S*-RL-, -Z-A-S*-RL-Y-,
Z-A-S*-W-, -Z-A-S*-W-RL-, -Z-A-B(S*)-RL-, -Z-A-B(S*)-W-,
-Z-A-B(S*)-W-RL- 및 -Z-A-B(S*)-RL-Y-,
상기 식에서 Z는 스트레처 단위이고;
A는 결합 또는 커넥터 단위이고;
B는 병렬 커넥터 단위이고;
S*은 분획제(Partitioning Agent)이고;
RL은 방출가능한 링커이고;
W는 아미노산 단위이고;
Y는 스페이서 단위이고;
D는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택되는 약물 단위이다:
Figure pct00001
Figure pct00002
상기 식에서,
RB는 H, C1-C8 알킬, C1-C8 할로알킬, C3-C8 사이클로알킬, (C3-C8 사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, 페닐 및 페닐-C1-C4 알킬-로 이루어진 군으로부터 선택되는 구성원이고;
RC는 C1-C6 알킬 및 C3-C6 사이클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 구성원이고;
각각의 RF 및 RF'는 -H, C1-C8 알킬, C1-C8 히드록시알킬, C1-C8 아미노알킬, (C1-C4 알킬아미노)-C1-C8 알킬-, N,N-(C1-C4 히드록시알킬)(C1-C4 알킬)-아미노-C1-C8 알킬-, N,N-디(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N-C1-C4 히드록시알킬-C1-C8 아미노알킬-, C1-C8 알킬C(O)-, C1-C8 히드록시알킬-C(O)-, C1-C8 아미노알킬C(O)-, C3-C10 사이클로알킬, (C3-C10 사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, C3-C10 헤테로사이클로알킬, (C3-C10 헤테로사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, 페닐, 페닐-C1-C4 알킬-, 디페닐-C1-C4 알킬-, 헤테로아릴 및 헤테로아릴-C1-C4 알킬-로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 구성원이거나,
RF 및 RF'는 각각이 부착된 질소 원자와 결합하여 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2, -NHC1-C4 알킬 및 -N(C1-C4 알킬)2로부터 선택되는 0개 내지 3개의 치환체를 가진 5-원 고리, 6-원 고리 또는 7-원 고리를 형성하고;
여기서, RB, RC, RF 및 RF'의 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 페닐 및 헤테로아릴 모이어티는 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2,- NHC1-C4 알킬 및 -N(C1-C4 알킬)2로 이루어진 군으로부터 선택된 0개 내지 3개의 치환체로 치환되고;
여기서, Q가 -Z-A-RL-, -Z-A-RL-Y-, -Z-A-S*-RL-, -Z-A-B(S*)-RL-, -Z-A-S*-RL-Y- 또는 -Z-A-B(S*)-RL-Y-이고 여기서 RL이 본원에 개시된 임의의 하나의 방출가능한 링커인 경우, D가 Q에 부착되는 지점은 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, CPT6 또는 CPT7에 존재하는 임의의 하나의 히드록실 또는 1차 또는 2차 아민 작용기의 헤테로원자를 통해서이거나, 또는
여기서, Q가 -Z-A-, -Z-A-S*-W- 또는 -Z-A-B(S*)-W-이거나, Q가 -Z-A-S*-RL-, -Z-A-B(S*)-RL-, -Z-A -S*-W-RL-, 또는 -Z-A-B(S*)-W-RL-이고 여기서 RL이 글루쿠로나이드 단위 외의 방출가능한 단위인 경우, D가 Q에 부착되는 지점은 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, CPT6 또는 CPT7의 락톤 고리의 히드록실기 치환체의 산소 원자를 통해서이고;
부착 지점이 CPT6의 1차 또는 2차 아미노기의 질소 원자로인 경우 적어도 하나의 RF 및 RF'가 -H이고,
D가 이의 1차 아미노기의 질소 원자를 통해 부착된 CPT1인 경우, -Z-A-RL-, -Z-A-RL-Y-, -Z A-S*-RL-, -Z-A-B(S*)-RL-, -Z-A-S*-RL-Y- 및 -Z-A-B(S*)-RL-Y-의 -Z-A-는 선택적으로 가수분해된 형태의 숙신이미드 고리를 갖는, 숙신이미도- 카프로일-β-알라닐 이외의 것이다.
전술된 다른 주요 실시형태는 캄프토테신 접합체를 제조하기 위한 중간체로서 유용한 캄프토테신-링커 화합물이며, 여기서 캄프토테신-링커 화합물은 캄프토테신 및 링커 단위(Q)로 구성되며, 여기서 링커 단위는 리간드 단위를 제공하는 표적 리간드에 공유 결합을 형성할 수 있는 스트레처 단위 전구체(Z'), 및 Q가 아미노산 단위를 갖지 않는 일부 양태에서 글루쿠로나이드 단위인, 방출가능한 링커(RL)로 구성된다.
또 다른 양태에서, 본원에 기술된 캄프토테신 접합체를 이를 필요로 하는 대상에 투여하는 단계를 포함하는 암 치료 방법이 본원에서 제공된다.
또 다른 양태에서, 본원에 기술된 캄프토테신 접합체를 포함하는 키트가 본원에서 제공된다.
도 1a 내지 도 1b는 시험관 내 바이스탠더 활성 모델에서 다발성 골수종에서 글루쿠로나이드-기반 캄프토테신 ADC의 평가를 나타낸다. A. MM.1R (Ag5+) 세포주에 대한 항-Ag5 캄프토테신 DAR8 ADC(Ag5-(67)) 용량 반응 적정. CellTitre-GloTM에 의해 평가된 생존력. B. MM.1R 및 MM.1R Ag5 KO(crispr cas 녹아웃) luc+ 세포주의 3:1 공동배양 혼합물의 항-Ag5 캄프토테신 DAR8 ADC(Ag5-(67)) 용량 반응 적정. Bright-GloTM에 의해 평가된 생존력.
도 2는 마우스 혈장에서의 ADC 안정성 연구의 결과를 나타낸다. A. 캄프토테신 DAR8 ADC를 마우스 혈장(Balb C)에서 37℃에서 인큐베이션하였다. 혈장을 6시간, 24시간, 72시간, 및 7일차에 샘플링하였다. IgSelect로 혈장에서 ADC를 분리하고, PNGase로 탈당하고 디티오트레이톨로 환원시켰다. ADC 중쇄 및 경쇄 둘 모두를 PLRP-MS로 평가하여 각각의 시점에서 약물-로딩을 정량화하였다.
도 3은 항-Ag4 캄프토테신 DAR4 ADC((Ag4-(67))를 가진 786O 신장 세포 암종 피하 마우스 이종이식 모델에 대한 평균 종양 부피 그래프를 나타낸다. 동물에 786O 세포를 이식하였다. 7일차에, 동물을 100 mm3의 평균 종양 크기를 가진 군으로 분류한 다음, 3 mg/Kg 및 10 mg/Kg의 캄프토테신 ADC의 단일 투여량으로 처리하였다. 동물을 연구 과정 동안 종양 크기 및 생명 내 징후에 대해 평가하였다.
도 4는 항-Ag2 캄프토테신 DAR4 ADC(Ag2-(67))로 처리한 호지킨 림프종의 L540cy 피하 마우스 이종이식 모델에 대한 평균 종양 부피 그래프를 나타낸다. 동물에 L540cy 세포를 이식하였다. 7일 후에, 동물을 100 mm3의 평균 종양 크기를 가진 군으로 분류한 다음, 3 mg/Kg의 캄프토테신 ADC의 단일 투여량으로 처리하였다. 동물을 연구 과정 동안 종양 크기 및 생명 내 징후에 대해 평가하였다.
도 5는 캄프토테신 ADC로 처리한 Karpas 299/Karpas 299-BVR 역형성 대세포 림프종 바이스탠더 피하 이종이식 종양 모델 의 결과를 나타낸다. 그래프는 항-Ag2 캄프토테신 DAR4 ADC(Ag2-(67)), 및 비-결합 DAR4 ADC(h00-(67))에 대한 평균 종양 부피를 나타낸다. 동물에 Ag2(+) Karpas 299 및 Ag2(-) Karpas 299-브렌툭시맙 베도틴 내성(Karpas 299-BVR) 세포의 1:1 혼합물을 이식하였다. 8일 후에, 동물을 100 mm3의 평균 종양 크기를 가진 군으로 분류한 다음, 3 mg/Kg, 10 mg/Kg 및 30 mg/Kg의 캄프토테신 ADC의 단일 투여량으로 처리하였다. 비-결합 h00 캄프토테신 ADC를 30 mg/Kg로 투여하였다. 동물을 연구 과정 동안 종양 크기 및 생명 내 징후에 대해 평가하였다.
도 6은 글루쿠로나이드 캄프토테신 DAR4 ADC가 있는 caki-1 신장 세포 암종 피하 마우스 이종이식 모델의 평균 종양 부피를 나타낸다. 동물에 투관침(trocar)을 통해 고형 caki-1 종양을 이식하였다. 13일차에, 동물을 100 mm3의 평균 종양 크기를 가진 군으로 분류한 다음, 10 mg/Kg 및 30 mg/Kg의 캄프토테신 ADC의 단일 투여량으로 처리하였다. 동물을 연구 과정 동안 종양 크기 및 생명 내 징후에 대해 평가하였다.
도 7은 글루쿠로나이드 캄프토테신 DAR4 ADC가 있는 786O 신장 세포 암종 피하 마우스 이종이식 모델에 대한 평균 종양 부피를 나타낸다. 동물에 786O 세포를 이식하였다. 7일차에, 동물을 100 mm3의 평균 종양 크기를 가진 군으로 분류한 다음, 10 mg/Kg의 캄프토테신 ADC의 단일 투여량으로 처리하였다. 동물을 연구 과정 동안 종양 크기 및 생명 내 징후에 대해 평가하였다.
도 8은 항-Ag2 및 비-결합 h00 글루쿠로나이드 캄프토테신 ADC로 처리한 호지킨 림프종의 L540cy 피하 마우스 이종이식 모델에 대한 평균 종양 부피 그래프를 나타낸다. 동물에 L540cy 세포를 피하로 이식하였다. 7일 후에, 동물을 100 mm3의 평균 종양 크기를 가진 군으로 분류한 다음, 10 mg/Kg 및 30 mg/Kg의 Ag2-(58) 또는 Ag2-(61) DAR4 캄프토테신 ADC를 포함하는 q4dx3으로 처리하였다. 해당 비-결합 h00 ADC는 30 mg/Kg에서 q4dx3으로 투여하였다. 동물을 연구 과정 동안 종양 크기 및 생명 내 징후에 대해 평가하였다.
도 9는 Sprague-Dawley 랫트에서 h00 mAb, 및 h00-캄프토테신 ADC의 약물동력학 프로파일을 나타낸다. 랫트에 1 mg/kg의 모 비-결합 인간화 항체(h00) 또는 h00-(67) DAR8 카모토테신 ADC를 주입하였다. 예정된 혈액 채취의 샘플을 처리하고 비오틴-접합된 뮤린 항-인간 경쇄 카파 mAb 및 스트렙타비딘-코팅된 비드를 통해 혈장으로부터 h00 모 항체 및 ADC를 포획하였다. AF647-항-인간 카파 검출 시약을 사용하여 ELISA를 통해 h00 항체 및 ADC를 정량화하였다.
도 10은 Del-BVR(브렌툭시맙 베도틴 내성, MDR+) 이종이식 모델에서 글루쿠로나이드 캄프토테신 DAR8 ADC의 평균 종양 부피 그래프를 나타낸다. 동물에 Del-BVR 세포를 피하로 이식하였다. 4일후에, 동물을 100 mm3의 평균 종양 크기를 가진 군으로 분류한 다음, 캄프토테신 DAR8 ADC의 단일 투여량으로 처리하였다. 동물을 연구 과정 동안 종양 크기 및 생명 내 징후에 대해 평가하였다.
도 11은 DAR4 글루쿠로나이드 캄프토테신 ADC를 가진 Caki-1 신장 세포 암종 피하 마우스 이종이식 모델에 대한 평균 종양 부피 그래프를 나타낸다. 동물에 Caki-1 세포를 이식하였다. 11일차에, 동물을 100 mm3의 평균 종양 크기를 가진 군으로 분류한 다음, 10 mg/Kg의 캄프토테신 ADC의 단일 투여량으로 처리하였다. 동물을 연구 과정 동안 종양 크기 및 생명 내 징후에 대해 평가하였다.
도 12는 누드 마우스 RCC 이종이식 모델에서 선택된 캄프토테신 ADC의 활성을 나타내는 그래프이다.
도 13은 마우스 모델에서 선택된 캄프토테신 ADC의 혈장 안정성을 나타내는 그래프 및 표이다.
도 14는 캄프토테신 ADC로 처리한 Karpas 299 / Karpas 299-BVR 역형성 대세포 림프종 바이스탠더 피하 이종이식 종양 모델로부터의 추가 결과를 나타낸다.
도 15는 락톤 고리를 치환하는 C20 히드록시기를 통해 접합된 캄프토테신 접합체의 예기치 못한 안정성을 나타낸다.
정의
달리 언급되지 않는 한, 다음의 용어 및 문구는 다음의 의미를 갖는 것으로 의도된다. 본원에서 상표명이 사용되는 경우, 상표명은 문맥에 의해 달리 명시되지 않는 한, 제품 제형, 제네릭 약물, 및 상표명 제품의 활성 약학 성분(들)을 포함한다.
본원에서 사용된 용어 "항체"는 최광의로 사용되며 무손상 단일클론 항체, 다클론 항체, 단일특이적 항체, 다중특이적 항체(예컨대, 이중특이적 항체), 및 원하는 생물학적 활성을 나타내는 항체 단편을 구체적으로 포함한다. 항체의 천연 형태는 사량체이며, 두 개의 동일한 쌍의 면역글로불린 사슬로 구성되며, 각 쌍은 하나의 경쇄 및 하나의 중쇄를 갖는다. 각 쌍에서, 경쇄 및 중쇄 가변 영역(VL 및 VH)은 함께 주로 항원에 대한 결합을 담당한다. 경쇄 및 중쇄 가변 도메인은 "상보성 결정 영역" 또는 "CDR"로도 지칭되는 3개의 초가변 영역에 의해 중단된 프레임워크 영역으로 구성된다. 불변 영역은 면역계에 의해 인식되어 상호작용할 수 있다(예컨대, 문헌[Janeway et al., 2001, Immunol. Biology, 5th Ed., Garland Publishing, New York] 참조). 항체는 임의의 유형(예컨대, IgG, IgE, IgM, IgD, 및 IgA), 클래스(예컨대, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 및 IgA2) 또는 이의 하위 클래스일 수 있다. 항체는 임의의 적합한 종으로부터 유도될 수 있다. 일부 실시형태에서, 항체는 인간 또는 뮤린(murin) 기원이다. 항체는 예컨대 인간, 인간화, 또는 키메라일 수 있다.
본원에 사용된 바와 같은 용어 "단일클론 항체"는 실질적으로 동종인 항체의 집단으로부터 수득된 항체를 지칭하며, 즉, 집단을 구성하는 개별 항체가 소량으로 존재할 수 있는 가능한 자연 발생 돌연변이를 제외하고는 동일하다는 것을 의미한다. 단일클론 항체는 단일 항원 부위에 대해 고도로 특이적이다. 수식어 "단일클론"은 실질적으로 동종인 항체의 집단으로부터 수득된 바와 같은 항체의 특징을 나타내며, 임의의 특정한 방법에 의한 항체의 생산을 요구하는 것으로 해석되지 않아야 한다.
"무손상 항체"는 항원-결합 가변 영역뿐만 아니라 항체 클래스에 적절하다면 경쇄 불변 도메인(CL) 및 중쇄 불변 도메인 CH1, CH2, CH3 및 CH4를 포함하는 것이다. 불변 도메인은 천연 서열 불변 도메인(예를 들어, 인간 천연 서열 불변 도메인) 또는 그의 아미노산 서열 변이체일 수 있다.
"항체 단편"은 이의 항원-결합 또는 가변 영역을 포함하는 무손상 항체의 일부를 포함한다. 항체 단편의 예는 Fab, Fab', F(ab')2, 및 Fv 단편, 디아바디, 트리아바디, 테트라바디, 선형 항체, 단일-쇄 항체 분자, scFv, scFv-Fc, Fab 발현 라이브러리에 의해 생성된 단편인 항체 단편으로부터 형성된 다중특이적 항체 단편, 또는 표적 항원(예컨대, 암 세포 항원, 바이러스 항원 또는 미생물 항원)에 면역특이적으로 결합하는 상기 중 임의의 것의 에피토프-결합 단편을 포함한다.
"항원"은 항체가 특이적으로 결합하는 실체이다.
용어 "특이적 결합" 및 "특이적으로 결합한다"는 항체 또는 항체 유도체가 다수의 다른 항원이 아닌 표적 항원의 상응하는 에피토프에 고도로 선택적인 방식으로 결합할 것임을 의미한다. 전형적으로, 항체 또는 항체 유도체는 적어도 약 1x10-7 M, 바람직하게는 10-8 M 내지 10-9 M, 10-10 M, 10-11 M, 또는 10-12 M의 친화도로 결합하고 사전결정된 항원 또는 밀접하게 관련된 항원 이외에 비-특이적 항원(예컨대, BSA, 카제인)에 대한 결합에 대한 친화도보다 적어도 2배 더 큰 친화도로 사전결정된 항원에 결합한다.
용어 "억제하다" 또는 "억제"는 측정가능한 양으로 감소시키거나 또는 전적으로 방지하는 것을 의미한다.
용어 "치료 유효량"은, 포유동물에서 질환 또는 장애를 치료하는 데 유효한 접합체의 양을 지칭한다. 암의 경우, 접합체의 치료 유효량은 암 세포의 수를 감소시키는 것; 종양 크기를 감소시키는 것; 말초 기관으로의 암 세포 침윤을 억제하는 것(즉, 어느 정도까지 지연시키며, 바람직하게는 정지시킴), 종양 전이를 억제하는 것(즉, 어느 정도까지 지연시키며, 바람직하게는 정지시킴); 종양 성장을 어느 정도까지 억제하는 것; 및/또는 암과 연관된 증상 중 1종 이상을 어느 정도까지 경감시키는 것일 수 있다. 약물이 존재하는 암 세포의 성장을 억제하고/하거나 사멸시킬 수 있는 한, 이는 세포증식억제성 및/또는 세포독성일 수 있다. 암 요법의 경우, 효능은, 예를 들어, 질병 진행 시간(TTP: time to disease progression)을 평가 및/또는 반응률(RR: response rate) 결정에 의해 측정될 수 있다.
용어 "실질적인" 또는 "실질적으로"는 대다수, 즉 혼합물 또는 샘플 집단의 50% 초과, 바람직하게는 집단의 50% 초과, 55% 초과, 60% 초과, 65% 초과, 70% 초과, 75% 초과, 80% 초과, 85% 초과, 90% 초과, 91% 초과, 92% 초과, 93% 초과, 94% 초과, 95% 초과, 96% 초과, 97% 초과, 98% 초과 또는 99% 초과를 지칭한다.
용어 "세포독성 활성"은 약물 또는 캄프토테신 접합체 또는 캄프토테신 접합체의 세포 내 대사물의 세포-사멸 효과를 지칭한다. 세포독성 활성은 세포의 절반이 생존하는 단위 부피 당 농도(몰 또는 질량)인 IC50 값으로 표현될 수 있다.
용어 "세포증식억제 활성"은 약물 또는 캄프토테신 접합체 또는 캄프토테신 접합체의 세포 내 대사물의 항-증식 효과를 지칭한다.
본원에서 사용된 용어 "세포독성제"는 세포독성 활성이 있어서 세포의 파괴를 야기하는 물질을 지칭한다. 상기 용어는 화학치료제, 및 독소, 예컨대 해당 합성 유사체 및 이의 유도체를 포함한 세균, 진균, 식물 또는 동물 기원의 소형 분자 독소 또는 효소 활성 독소를 포함한다.
본원에서 사용된 용어 "세포증식억제제"는 세포 성장 및 증식을 포함하여 세포의 기능을 억제하는 물질을 지칭한다. 세포증식억제제는 단백질 억제제, 예컨대 효소 억제제와 같은 억제제를 포함한다. 세포증식억제제는 세포증식억제 활성이 있다.
용어 "암" 및 "암성"은 전형적으로 조절되지 않는 세포 성장을 특징으로 하는 포유동물에서의 생리학적 상태 또는 장애를 지칭 또는 기술한다. "종양"은 1종 이상의 암성 세포를 포함한다.
본원에서, "자가면역 질환"은 개체 자신의 조직 또는 단백질로부터 발생하고 그에 대하여 야기되는 질환 또는 장애이다.
본원에서 사용된 "환자"는 본 발명의 캄프토테신 접합체가 투여되는 대상체를 지칭한다. 환자는 인간, 랫트, 마우스, 기니 피그, 비-인간 영장류, 돼지, 염소, 소, 말, 개, 고양이, 새 및 가금이 포함되나, 이에 제한되는 것은 아니다. 전형적으로, 환자는 랫트, 마우스, 개, 인간 또는 비-인간 영장류, 보다 전형적으로 인간이다.
문맥상 다르게 지시되지 않는 한, "치료하다" 또는 "치료"라는 용어는 치료적 치료 및 예방적 치료를 지칭하는데, 그 목적은 암의 발병 또는 확산과 같은 원치 않는 생리학적 변화 또는 장애를 억제하거나 늦추는(경감하는) 것이다. 본 발명의 목적 상, 유익하거나 원하는 임상적 결과는 검출 가능한지 또는 검출 불가능한지에 관계없이, 증상의 완화, 질환 정도의 축소, 질환의 안정화된(즉, 악화되지 않는) 상태, 질환 진행의 지연 또는 늦춤, 질환 상태의 개선 또는 경감, 및 회복(부분적인지 또는 전체적인지에 관계없이)을 포함하나, 이에 제한되는 것은 아니다. "치료"는 또한 치료를 받지 않는 경우 예상되는 생존과 비교하였을 때의 생존 연장을 의미할 수도 있다. 치료를 필요로 하는 대상에는 이미 이상 또는 장애를 가지고 있는 대상은 물론, 이상 또는 장애를 가지기 쉬운 대상도 포함된다.
암의 맥락에서, "치료하는 것"이라는 용어에는 종양 세포 사멸; 종양 세포, 암 세포, 또는 종양의 성장 억제; 종양 세포 또는 암 세포의 복제 억제, 전반적인 종양 부담 경감 또는 암성 세포의 수 감소, 및 질환과 관련된 하나 이상의 증상 개선 중 임의의 것 또는 전체가 포함된다.
자가면역 질환의 맥락에서, "치료하는 것"이라는 용어에는 비제한적으로 자가면역 항체를 생성하는 세포를 포함하여 자가면역 질환 상태와 관련되어 있는 세포의 복제 억제, 자가면역-항체 부담 경감, 및 자가면역 질환의 하나 이상 증상 개선 중 임의의 것 또는 전체가 포함된다.
본원에서 사용된 용어 "화합물"은 구조로 명명되거나 표시되는 화학적 화합물 그 자체, 및 명시적으로든 묵시적으로든, 문맥 상 그러한 염 형태가 배제되어야 한다는 것이 명백하지 않는 한, 이들의 염 형태를 지칭하고 포함한다. 용어 "화합물"은 또한 화합물의 용매화된 형태를 포함하며, 여기서, 용매는 화합물의 카보닐기가 수화되어 젬-디올을 형성하는 경우와 같이, 화합물과 비공유결합되거나 화합물과 가역적으로 공유결합된다. 용매화물 형태는 화합물 자체 및 이의 염 형태의 것들을 포함하고 반용매화물, 단일용매화물, 수화물을 포함하는 용해물을 포함하며; 화합물이 둘 이상의 용매 분자와 결합될 수 있는 경우, 둘 이상의 용매 분자는 동일하거나 상이할 수 있다.
일부 예에서, 본 발명의 화합물은 하나 이상의 상기 형태, 예컨대, 화합물의 임의의 고체 형태를 의미하지 않는 염 및 용매화물에 대한 명시적인 지칭을 포함할 것이다; 그러나 이러한 지칭은 단지 강조를 위한 것이며, 상기 나열된 임의의 다른 형태를 배제하는 것으로 해석되어서는 안 된다. 또한, 화합물 또는 리간드 약물 접합체 조성물의 염 및/또는 용매화물 형태에 대한 명시적인 언급이 없는 경우, 그 생략은 문맥이 이러한 염 및/또는 용매화물 형태가 배제되어야 함을 명확히 하지 않는 한 화합물 또는 접합체의 염 및/또는 용매화물 형태를 배제하는 것으로 해석되어서는 안 된다.
본원에서 사용된 어구 "이의 염"은 화합물(예컨대, 약물, 약물 링커 화합물 또는 리간드 약물 접합체 화합물)의 염 형태를 지칭한다. 화합물의 염 형태는 하나 이상이 내부 염 형태이고/이거나 아세테이트 이온, 숙시네이트 이온 또는 다른 반대이온과 같은 다른 분자의 포함을 포함한다. 화합물의 염 형태의 반대 이온은 전형적으로 모 화합물 상의 전하를 안정화시키는 유기 또는 무기 모이어티이다. 화합물의 염 형태는 구조에 하나 이상의 하전된 원자를 갖는다. 다중 하전된 원자가 염 형태의 일부인 경우, 다중 반대 이온 및/또는 다중 하전된 반대 이온이 존재한다. 따라서, 화합물의 염 형태는 전형적으로 화합물의 비-염 형태 및 하나 이상의 반대 이온에 상응하는 하나 이상의 하전된 원자를 갖는다. 일부 양태에서, 화합물의 비-염 형태는 적어도 하나의 아미노기 또는 다른 염기성 모이어티를 함유하고, 따라서 산의 존재 하에 염기성 모이어티를 갖는 산 부가 염이 수득된다. 다른 양태에서, 화합물의 비-염 형태는 적어도 하나의 카복실산기 또는 다른 산성 모이어티를 함유하고, 따라서 염기의 존재 하에, 카복실레이트 또는 다른 음이온성 모이어티가 수득된다. 예시적인 염은 비제한적으로 설페이트, 트리플루오로아세테이트, 시트레이트, 아세테이트, 옥살레이트, 클로라이드, 브로마이드, 요오다이드, 니트레이트, 바이설페이트, 포스페이트, 산 포스페이트, 이소니코티네이트, 락테이트, 살리실레이트, 산 시트레이트, 타르트레이트, 올레이트, 탄네이트, 판토테네이트, 비타르트레이트, 아스코르베이트, 숙시네이트, 말리에이트, 젠티시네이트, 푸마레이트, 글루코네이트, 글루쿠로네이트, 사카레이트, 포르메이트, 벤조에이트, 글루타메이트, 메탄설포네이트, 에탄설포네이트, 벤젠설포네이트, p-톨루엔설포네이트, 및 파모에이트(즉, 1,1'-메틸렌-비스-(2-히드록시-3-나프토에이트)) 염을 포함한다.
약학적으로 허용되는 염은 본원에 기술된 바와 같이 대상체에 투여하기에 적합한 화합물의 염 형태이며 일부 양태에서 문헌[P. H. Stahl and C. G. Wermuth, editors, Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use, Weinheim/Zurich:Wiley-VCH/VHCA, 2002]에 의해 기술된 바와 같은 반대양이온 및 반대음이온을 포함한다.
링커 단위는 캄프토테신 접합체에서 캄프토테신을 리간드 단위에 연결하는 이작용성 모이어티이다. 본 발명의 링커 단위는 몇몇 성분(예컨대, 일부 실시형태에서 염기성 단위를 갖는 스트레처 단위; 존재 또는 존재하지 않을 수 있는 커넥터 단위; 역시 존재 또는 존재하지 않을 수 있는 병렬 커넥터 단위; 방출가능한 링커; 및 역시 존재 또는 존재하지 않을 수 있는 스페이서 단위)을 갖는다.
본원에 기술된 "PEG", "PEG 단위" 또는 "폴리에틸렌 글리콜"은 반복 에틸렌-옥시 서브유닛으로 구성된 유기 모이어티이며 다분산, 단분산 또는 이산(즉, 개별적인 수의 에틸렌-옥시 서브유닛을 가짐)일 수 있다. 다분산 PEG는 크기 및 분자량에 있어서 불균질 혼합물인 반면, 단분산 PEG는 전형적으로 불균질 혼합물로부터 정제되며, 따라서 단일 쇄 길이 및 분자량을 제공한다. 바람직한 PEG 단위는 중합 공정을 통하지 않고 단계적으로 합성되는 이산 PEG 화합물이다. 이산 PEG는 한정되고 특정한 사슬 길이를 갖는 단일 분자를 제공한다.
본원에서 제공되는 PEG 단위는 각각 서로 공유결합된, 각각, 하나 이상의 에틸렌옥시 서브유닛으로 구성된 하나 또는 다수의 폴리에틸렌 글리콜 사슬을 포함한다. 폴리에틸렌 글리콜 사슬은, 예를 들어 선형, 분지형 또는 별 모양 구성으로 함께 연결될 수 있다. 전형적으로, 캄프토테신 접합체에 혼입되기 전에 적어도 하나 이상의 폴리에틸렌 글리콜 사슬이 메틸렌 카바메이트 단위(즉, R의 경우를 나타냄)의 카바메이트 질소에 대한 공유 결합을 위해 친전자성기로 치환된 알킬 모이어티로 말단에서 유도체화된다. 전형적으로, 링커 단위의 나머지 부분에 대한 공유결합에 관여하지 않는 각각의 폴리에틸렌 글리콜 사슬의 말단 에틸렌옥시 서브유닛은, 전형적으로 선택적으로 알킬, 예컨대 -CH3, -CH2CH3 또는 -CH2CH2CO2H로 치환된 PEG 캡핑 단위로 변형된다. 바람직한 PEG 단위는 4 내지 24개의 -CH2CH2O- 서브유닛이 직렬로 공유결합되고 한쪽 말단에서 PEG 캡핑 단위로 종결되는 단일 폴리에틸렌 글리콜 사슬을 갖는다.
달리 지시되지 않는 한, 용어 "알킬"은 그 자체로 또는 다른 용어의 일부로서 표시된 수의 탄소 원자를 갖는 치환된 또는 비치환된 직쇄 또는 분지형, 포화 또는 불포화 탄화수소를 지칭한다(예컨대, "-C1-C8 알킬" 또는 "-C1-C10 " 알킬은 각각 1개 내지 8개 또는 1개 내지 10개의 탄소 원자를 갖는 알킬기를 지칭한다). 탄소 원자 수가 표시되지 않는 경우, 알킬기는 1개 내지 8개의 탄소 원자를 갖는다. 대표적인 직쇄 "-C1-C8 알킬"기는, 비제한적으로 -메틸, -에틸, -n-프로필, -n-부틸, -n-펜틸, -n-헥실, -n-헵틸 및 -n-옥틸을 포함하는 반면; 분지형 -C3-C8 알킬은 비제한적으로, -이소프로필, -sec-부틸, -이소부틸, -tert-부틸, -이소펜틸, 및 -2-메틸부틸을 포함하고; 불포화 -C2-C8 알킬은 비제한적으로, -비닐, -알릴, -1-부테닐, -2-부테닐, -이소부틸레닐, -1 펜테닐, -2 펜테닐, -3-메틸-1-부테닐, -2 메틸-2-부테닐, -2,3 디메틸-2-부테닐, -1-헥실, 2-헥실, -3-헥실, -아세틸레닐, -프로피닐, -1 부티닐, -2 부티닐, -1 펜티닐, -2 펜티닐 및 -3 메틸 1 부티닐을 포함한다. 일부 알킬기는 비치환된다. 알킬기는 하나 이상의 기로 치환될 수 있다. 다른 양태에서, 알킬기는 포화될 것이다.
달리 지시되지 않는 한, 용어 "알킬렌"은 그 자체로 또는 다른 용어의 일부로서, 언급된 수의 탄소 원자, 전형적으로 1개 내지 10개의 탄소 원자의 치환된 또는 비치환된 포화, 분지형 또는 직쇄 또는 환형 탄화수소 라디칼을 지칭하며, 모 알칸의 동일 또는 2개의 상이한 탄소 원자로부터 2개의 수소 원자를 제거함으로써 유도된 2개의 1가 라디칼 중심을 갖는다. 전형적인 알킬렌 라디칼은 비제한적으로 메틸렌(-CH2-), 1,2-에틸렌(-CH2CH2-), 1,3-프로필렌(-CH2CH2CH2-), 1,4-부틸렌(-CH2CH2CH2CH2-), 등을 포함한다. 바람직한 양태에서, 알킬렌은 분지형 또는 직쇄 탄화수소(즉, 환형 탄화수소가 아님)이다.
달리 지시되지 않는 한, 용어 "아릴"은 그 자체로 또는 다른 용어의 일부로서, 언급된 수의 탄소 원자, 전형적으로 6개 내지 20개의 탄소 원자의 치환된 또는 비치환된 1가 탄소환 방향족 탄화수소 라디칼을 의미하며, 모 방향족 고리 시스템의 단일 탄소 원자로부터 하나의 수소 원자를 제거함으로써 유도된다. 일부 아릴기는 예시 구조에서 "Ar"로 표현된다. 전형적인 아릴기는 비제한적으로 벤젠, 치환된 벤젠, 나프탈렌, 안트라센, 바이페닐 등으로부터 유도된 라디칼을 포함한다. 예시적인 아릴기는 페닐기이다.
달리 지시되지 않는 한, 용어 "아릴렌"은 그 자체로 또는 다른 용어의 일부로서, 2개의 공유결합(즉, 2가임)을 갖고 예시적인 기로서 페닐과 함께, 다음의 구조에 나타난 바와 같이 오쏘, 메타, 또는 파라 배향일 수 있는 상기 정의된 바와 같은 아릴기이다:
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.
달리 지시되지 않는 한, "C3-C8 헤테로사이클"은 그 자체로 또는 다른 용어의 일부로서, 3개 내지 8개의 탄소 원자(고리 구성원으로도 지칭됨) 및 N, O, P 또는 S로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 4개의 헤테로원자 고리 구성원을 갖는 1가 치환된 또는 비치환된 방향족 또는 비-방향족 1환 또는 2환 고리 시스템을 지칭하며, 모 고리 시스템의 고리 원자로부터 하나의 수소 원자를 제거함으로서 유도된다. 헤테로사이클 내의 하나 이상의 N, C 또는 S 원자는 산화될 수 있다. 헤테로원자를 포함하는 고리는 방향족 또는 비방향족이다. 모든 고리 원자가 방향족성에 관여하는 헤테로사이클은 헤테로아릴이라 하며 다르게는 헤테로카보사이클이라 한다.
달리 언급하지 않는 한, 헤테로사이클은 안정한 구조를 생성하는 임의의 헤테로원자 또는 탄소 원자에서 펜던트기에 부착된다. 이러한 헤테로아릴은 C-연결된 헤테로아릴이라 지칭되는 방향족 고리 시스템의 방향족 탄소를 통해, 또는 이의 방향족 고리 시스템에서 N-연결된 헤테로아릴이라 지칭되는 이중결합되지 않은 N 원자(즉, =N-이 아님)를 통해 결합될 수 있다. 따라서, 질소-함유 헤테로사이클은 C-연결 또는 N-연결될 수 있으며 피롤 모이어티, 예컨대 피롤-1-일(N-연결됨) 및 피롤-3-일(C-연결됨), 및 이미다졸 모이어티, 예컨대 이미다졸-1-일 및 이미다졸-3-일(둘 모두 N-연결됨), 및 이미다졸-2-일, 이미다졸-4-일 및 이미다졸-5-일 모이어티(모두 C-연결됨)를 포함할 수 있다.
달리 지시되지 않는 한, "C3-C8 헤테로아릴"은 방향족 C3-C8 헤테로사이클로서, 여기서 아래첨자는 헤테로사이클의 환형 고리 시스템의 탄소의 총 수 또는 헤테로아릴의 방향족 고리 시스템의 방향족 탄소의 총 수를 나타내며 고리 시스템의 크기 또는 고리 융합의 유무와 관련이 없다. C3-C8 헤테로사이클의 대표적인 예는 비제한적으로 피롤리디닐, 아제티디닐, 피페리디닐, 모폴리닐, 테트라히드로퓨라닐, 테트라히드로피라닐, 벤조퓨라닐, 벤조티오펜, 인돌릴, 벤조피라졸릴, 피롤릴, 티오페닐(티오펜), 퓨라닐, 티아졸릴, 이미다졸릴, 피라졸릴, 피리미디닐, 피리디닐, 피라지닐, 피리다지닐, 이소티아졸릴, 및 이속사졸릴을 포함한다.
명시적으로 주어진 경우, 헤테로사이클 또는 헤테로아릴의 고리 시스템의 크기는 고리의 원자의 총 수로 표시된다. 예컨대, 5- 또는 6-원 헤테로아릴로 지정하면 헤테로아릴의 헤테로방향족 고리 시스템의 총 수 또는 방향족 원자(즉, 5 또는 6)를 나타내지만 해당 고리 시스템의 방향족 헤테로원자 또는 방향족 탄소의 수를 의미하지 않는다. 융합된 헤테로아릴은 그 자체로 문맥에 의해 명시적으로 언급되거나 암시되며, 전형적으로 융합된 헤테로방향족 고리 시스템을 구성하기 위해 함께 융합되는 각 방향족 고리 내의 방향족 원자의 수로 표시된다. 예컨대, 5,6-원 헤테로아릴은 하나 또는 두 개의 고리가 방향족 헤테로원자를 갖거나 헤테로원자가 두 고리 사이에 공유되는 방향족 6-원 고리에 융합된 방향족 5-원 고리이다.
헤테로사이클이 비-방향족으로 유지되고 융합된 고리 시스템의 비-방향족 부분과의 부착을 통해 더 큰 구조의 일부가 되는 것과 같은 아릴 또는 헤테로아릴과 융합된 헤테로사이클은 헤테로사이클이 아릴 또는 헤테로아릴을 가진 고리 융합에 의해 치환된 선택적으로 치환된 헤테로사이클의 예이다. 마찬가지로, 융합된 고리 시스템의 방향족 일부와의 부착을 통해 더 큰 구조의 일부인 헤테로사이클 또는 카보사이클에 융합된 아릴 또는 헤테로사이클은 아릴 또는 헤테로사이클이 헤테로사이클 또는 카보사이클을 가진 고리 융합에 의해 치환된 선택적으로 치환된 아릴 또는 헤테로사이클의 예이다.
달리 지시되지 않는 한, "C3-C8 헤테로사이클로"는 그 자체로 또는 다른 용어의 일부로서, 헤테로사이클의 하나의 수소 원자가 결합으로 치환된(즉, 2가) 상기 정의된 C3-C8 헤테로사이클을 지칭한다. 달리 지시되지 않는 한, "C3-C8 헤테로아릴렌"은 그 자체로 또는 다른 용어의 일부로서, 헤테로아릴기의 수소 원자 중 하나가 결합으로 치환된(즉, 2가) 상기 정의된 C3-C8 헤테로아릴기를 지칭한다.
달리 지시되지 않는 한, "C3-C8 카보사이클"은 그 자체로 또는 다른 용어의 일부로서, 모 고리 시스템의 고리 원자로부터 하나의 수소 원자를 제거하여 유도된 3-, 4-, 5-, 6-, 7- 또는 8-원 1가, 치환된 또는 비치환된, 포화 또는 불포화 비-방향족 1환 또는 2환 탄소환 고리이다. 대표적인 -C3-C8 카보사이클은 비제한적으로 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로펜타디에닐, 사이클로헥실, 사이클로헥세닐, 1,3-사이클로헥사디에닐, 1,4-사이클로헥사디에닐, 사이클로헵틸, 1,3-사이클로헵타디에닐, 1,3,5-사이클로헵타트리에닐, 사이클로옥틸, 및 사이클로옥타디에닐을 포함한다.
달리 지시되지 않는 한, "C3-C8 카보사이클로"는 그 자체로 또는 다른 용어의 일부로서, 다른 하나의 카보사이클기의 수소 원자가 결합으로 치환된(즉, 2가) 상기 정의된 C3-C8 카보사이클기를 지칭한다.
달리 지시되지 않는 한, 용어 "헤테로알킬"은 그 자체로 또는 다른 용어와 조합되어, 달리 언급되지 않는 한, 완전히 포화되거나 1도 내지 3도의 불포화도를 함유하는 안정한 직쇄 또는 분지쇄 탄화수소 또는 이들의 조합을 의미하며, 언급된 탄소 원자의 수 및 O, N, Si 및 S로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 내지 10개, 바람직하게는 1개 내지 3개의 헤테로원자로 구성되며, 여기서 질소 및 황 원자는 선택적으로 산화될 수 있고 질소 헤테로원자는 선택적으로 4차화될 수 있다. 헤테로원자 O, N 및 S는 헤테로알킬기의 임의의 내부 위치 또는 알킬기가 분자의 나머지 부분에 부착되는 위치에 위치할 수 있다. 헤테로원자 Si는 알킬기가 분자의 나머지 부분에 부착되는 위치를 포함하여 헤테로알킬기의 임의의 위치에 배치될 수 있다.
예는 -CH2-CH2-O-CH3, -CH2-CH2-NH-CH3, -CH2-CH2-N(CH3)-CH3, -CH2-S-CH2-CH3, -CH2-CH2-S(O)-CH3, -NH-CH2-CH2-NH-C(O)-CH2-CH3, -CH2-CH2-S(O)2-CH3, -CH=CH-O-CH3, -Si(CH3)3, -CH2-CH=N-O-CH3, 및 -CH=CH-N(CH3)-CH3을 포함한다. 예를 들어 -CH2-NH-OCH3 및 -CH2-O-Si(CH3)3과 같이 최대 2개의 헤테로원자가 연속적일 수 있다. 전형적으로, C1 내지 C4 헤테로알킬 또는 헤테로알킬렌은 1개 내지 4개의 탄소 원자 및 1개 또는 2개의 헤테로원자를 갖고 C1 내지 C3 헤테로알킬 또는 헤테로알킬렌은 1개 내지 3개의 탄소 원자 및 1개 또는 2개의 헤테로원자를 갖는다. 일부 양태에서, 헤테로알킬 또는 헤테로알킬렌은 포화된다.
달리 지시되지 않는 한, 용어 "헤테로알킬렌"은 그 자체로 또는 다른 용어와 조합되어, -CH2-CH2-S-CH2-CH2- 및 -CH2-S-CH2-CH2-NH-CH2-로 예시되는, 헤테로알킬(전술된 바와 같음)로부터 유도된 2가 기를 의미한다. 헤테로알킬렌기의 경우, 헤테로원자는 또한 사슬 말단 중 하나 또는 둘 모두를 차지할 수 있다. 또한, 알킬렌 및 헤테로알킬렌 연결기의 경우, 연결기의 배향이 암시되지 않는다.
달리 지시되지 않는 한, "아미노알킬"은 그 자체로 또는 다른 용어와 조합되어 본원에 정의된 알킬 모이어티가 아미노, 알킬아미노, 디알킬아미노 또는 사이클로알킬아미노기로 치환된 헤테로알킬을 의미한다. 예시적인 비제한적인 아미노알킬은 -CH2NH2, -CH2CH2NH2, -CH2CH2NHCH3 및 -CH2CH2N(CH3)2이고, 추가로 분지형 종, 예컨대 (R)- 또는 (S)- 구성의 -CH(CH3)NH2 및 -C(CH3)CH2NH2를 포함한다. 대안적으로, 아미노알킬은 라디칼 탄소 이외의 sp3 탄소가 아미노 또는 알킬아미노 모이어티로 치환되고, 여기서 sp3 질소는 하나 이상의 sp3 탄소가 남아있는 경우 알킬의 sp3 탄소를 치환하는 본원에 정의된 바와 같은 알킬 모이어티, 기, 또는 치환체이다. 아미노알킬 모이어티를 더 큰 구조 또는 다른 모이어티에 대한 치환체로 언급하는 경우, 아미노알킬은 아미노알킬의 알킬 모이어티의 탄소 라디칼을 통해 구조 또는 모이어티에 공유결합된다.
달리 지시되지 않는 한 "알킬아미노" 및 "사이클로알킬아미노"는 그 자체로 또는 다른 용어와 조합되어 적어도 하나의 sp3 탄소가 남아있는 경우, 알킬 또는 사이클로알킬 라디칼의 라디칼 탄소가 질소 라디칼로 치환된, 본원에 정의된 바와 같은, 알킬 또는 사이클로알킬 라디칼을 의미한다. 알킬 아미노가 질소에서 다른 알킬 모이어티로 치환된 경우, 생성된 치환된 라디칼은 때때로 디알킬아미노 모이어티, 기 또는 치환체로 지칭되며, 여기서 질소를 대체하는 알킬 모이어티가 독립적으로 선택된다.
예시적인 및 비-제한적인 아미노, 알킬아미노 및 디알킬아미노 치환체는, -N(R')2의 구조를 갖는 것들을 포함하며, 여기서 이러한 예에서의 R'는 수소 또는 C1-6 알킬, 전형적으로 수소 또는 메틸로부터 독립적으로 선택되는 반면, 헤테로사이클로알킬에 포함된 사이클로알킬 아민에서, 둘 모두의 R'는 이들이 부착된 질소와 함께 헤테로사이클릭 고리를 정의한다. 둘 모두의 R'가 수소 또는 알킬인 경우, 모이어티는 때때로 각각 1차 아미노기 및 3차 아민기로 기술된다. 하나의 R'가 수소이고 다른 것이 알킬인 경우, 모이어티는 때때로 2차 아미노기로 기술된다. 1차 및 2차 알킬아미노 모이어티는 카보닐-함유 친전자성 중심에 대한 친핵체로서 더 반응성이 있는 반면 3차 아민은 더 염기성이다.
"치환된 알킬" 및 "치환된 아릴"은 각각 하나 이상의 수소 원자, 전형적으로 하나가 각각 독립적으로 치환체로 치환된 알킬 및 아릴을 의미한다. 전형적인 치환체는 비제한적으로 -X, -R', -OH, -OR', -SR', , -N(R')2, -N(R')3, =NR', -CX3, -CN, -NO2, -NR'C(=O)R', -C(=O)R', -C(=O)N(R')2, -S(=O)2R', -S(=O)2NR', -S(=O)R', -OP(=O)(OR')2, -P(=O)(OR')2, -PO3 =, PO3H2, -C(=O)R', -C(=S)R', -CO2R', -CO2 -, -C(=S)OR', -C(=O)SR', -C(=S)SR', -C(=O)N(R')2, -C(=S)N(R')2, 및 -C(=NR)N(R')2를 포함하며, 여기서 각각의 X는 독립적으로 할로겐 -F, -Cl, -Br, 및 -I로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되며; 각각의 R'는 -H, -C1-C20 알킬, -C6-C20 아릴, -C3-C14 헤테로사이클, 보호기, 및 전구약물 모이어티로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다.
보다 전형적인 치환체는 -X, -R', -OH, -OR', -SR', -N(R')2, -N(R')3, =NR', -NR'C(=O)R', -C(=O)R', -C(=O)N(R')2, -S(=O)2R', -S(=O)2NR', -S(=O)R', -C(=O)R', -C(=S)R', -C(=O)N(R')2, -C(=S)N(R')2, 및 -C(=NR)N(R')2로 이루어진 군으로부터 선택되며, 여기서 각각의 X는 독립적으로 -F 및 -Cl로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되거나, -X, -R', -OH, -OR', -N(R')2, -N(R')3, -NR'C(=O)R', -C(=O)N(R')2, -S(=O)2R', -S(=O)2NR', -S(=O)R', -C(=O)R', -C(=O)N(R')2, -C(=NR)N(R')2, 보호기, 및 전구약물 모이어티로 이루어진 군으로부터 선택되고, 여기서 각각의 X는 -F이고; 여기서 각각의 R'는 수소, -C1-C20 알킬, -C6-C20 아릴, -C3-C14 헤테로사이클, 보호기, 및 전구약물 모이어티로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다.
일부 양태에서, 알킬 치환체는 -N(R')2, -N(R')3 및 -C(=NR)N(R')2로 이루어진 군으로부터 선택되고, 여기서 R'는 수소 및 -C1-C20 알킬로 이루어진 군으로부터 선택된다. 다른 양태에서, 알킬은 PEG 단위를 정의하기 위해 일련의 에틸렌옥시 모이어티로 치환된다. 전술된 알킬렌, 카보사이클, 카보사이클로, 아릴렌, 헤테로알킬, 헤테로알킬렌, 헤테로사이클, 헤테로사이클로, 헤테로아릴, 및 헤테로아릴렌기가 또한 유사하게 치환될 수 있다.
본원에서 사용된 "보호기"는 원치 않는 반응에 참여하는 것을 방지하거나 연결된 원자 또는 작용기의 능력을 감소시키는 모이어티를 의미한다. 원자 또는 작용기에 대한 전형적인 보호기는 문헌[Greene (1999), "Protective Groups In Organic Synthesis, 3rd Ed.", Wiley Interscience]에 나타나 있다. 산소, 황 및 질소와 같은 헤테로원자에 대한 보호기는 친전자성 화합물과의 원치 않는 반응을 최소화하거나 방지하기 위해 일부 경우에 사용된다. 다른 경우에, 보호기는 비보호 헤테로원자의 친핵성 및/또는 염기성을 감소 또는 제거하기 위해 사용된다. 보호된 산소의 비제한적인 예는 -ORPR에 의해 제공되며, 여기서, RPR은 히드록실에 대한 보호기이기고, 여기서 히드록실은 전형적으로 에스터(예컨대, 아세테이트, 프로피오네이트 또는 벤조에이트)로서 보호된다. 히드록실에 대한 다른 보호기는 유기 금속 시약 또는 다른 매우 염기성인 시약의 친핵성을 방해하는 것을 방지하며, 여기서 히드록실은 전형적으로 알킬 또는 헤테로사이클로알킬 에터(예컨대, 메틸 또는 테트라히드로피라닐 에터), 알콕시메틸 에터(예컨대, 메톡시메틸 또는 에톡시메틸 에터), 선택적으로 치환된 아릴 에터, 및 실릴 에터(예컨대, 트리메틸실릴(TMS), 트리에틸실릴(TES), tert-부틸디페닐실릴(TBDPS), tert-부틸디메틸실릴(TBS/TBDMS), 트리이소프로필실릴(TIPS) 및 [2-(트리메틸실릴)에톡시]-메틸실릴(SEM))을 포함하여 에터로서 보호된다. 질소 보호기는 -NHRPR 또는 -N(RPR)2-에서와 같은 1차 또는 2차 아민에 대한 것들을 포함하며, 여기서 적어도 하나의 RPR은 질소 원자 보호기이거나 둘 모두의 RPR은 함께 보호기를 포함한다.
보호기는 분자의 다른 곳에서 원하는 화학적 변형을 수행하는 데 요구되는 반응 조건 하에서 그리고 원하는 경우 새로 형성된 분자의 정제 동안 원하지 않는 부반응 또는 보호기의 조기 손실을 방지하거나 피할 수 있는 경우 적합하며, 새로 형성된 분자의 구조 또는 입체화학적 완전성에 악영향을 미치지 않는 조건에서 제거될 수 있다. 제한이 아닌 예로서, 적합한 보호기는 작용기를 보호하기 위해 전술된 것들을 포함할 수 있다. 적합한 보호기는 때때로 펩티드 커플링 반응에서 사용되는 보호기이다.
"방향족 알코올" 그 자체 또는 더 큰 구조의 일부는 히드록실 작용기 -OH로 치환된 방향족 고리 시스템을 지칭한다. 따라서, 방향족 알코올은 이의 방향족 고리 시스템의 방향족 탄소에 결합된 히드록실 작용기를 갖는 본원에 기술된 임의의 아릴, 헤테로아릴, 아릴렌 및 헤테로아릴렌을 지칭한다. 방향족 알코올은 이의 방향족 고리 시스템이 이러한 모이어티의 치환기인 경우와 같이 더 큰 모이어티의 일부일 수 있거나, 고리 융합에 의해 더 큰 모이어티에 포함될 수 있고, 하나 이상의 다른 히드록실 치환체를 포함하여 본원에 기술된 모이어티로 선택적으로 치환될 수 있다. 페놀 알코올은 방향족 고리로서 페놀기를 갖는 방향족 알코올이다.
"지방족 알코올" 그 자체 또는 더 큰 구조의 일부는 히드록실 작용기 -OH에 결합된 비-방향족 탄소를 갖는 모이어티를 지칭한다. 히드록시-함유 탄소는 비치환될 수 있거나(즉, 메틸 알코올), 1, 2 또는 3개의 선택적으로 치환된 분지형 또는 비분지형 알킬 치환체를 가져서 선형 또는 환형 구조 내에서 1차 알코올, 또는 2차 또는 3차 지방족 알코올을 한정할 수 있다. 보다 큰 구조의 일부인 경우, 알코올은 히드록시 함유 탄소를 통해, 이러한 히드록실-함유 탄소에 대해 본원에 기술된 바와 같은 알킬 또는 다른 모이어티의 탄소를 통해 또는 이러한 알킬 또는 다른 모이어티의 치환체를 통해 결합함으로써 이러한 구조의 치환체일 수 있다. 지방족 알코올은 히드록시 작용기가 이의 환형 고리 시스템의 비-방향족 탄소에 결합된 비-방향족 환형 구조(즉, 카보사이클 및 헤테로카보사이클, 선택적으로 치환됨)를 고려한다.
본원에서 사용된 "아릴알킬" 또는 "헤테로아릴알킬"은 아릴 모이어티가 알킬 모이어티, 즉, 아릴-알킬-에 결합된 치환체, 모이어티 또는 기를 의미하며, 여기서 알킬 및 아릴기는 전술된 바와 같으며, 예컨대, C6H5-CH2- 또는 C6H5-CH(CH3)CH2-이다. 아릴알킬 또는 헤테로아릴알킬은 이의 알킬 모이어티의 sp3 탄소를 통해 더 큰 구조 또는 모이어티와 결합된다.
본원에 사용된 "전자 받개기(Electron withdrawing group)"는, 유도성 및/또는 공명 중 우세한 쪽을 통해(즉, 작용기 또는 원자는 유도적으로 전자를 끌어당길 수 있지만 전체적을 공명을 통해 전자를 제공할 수 있음) 결합되는 원자로부터 전자 밀도를 멀리 끌어당기는 작용기 또는 전기음성 원자를 의미하며, 음이온 또는 전자-풍부 모이어티를 안정화하는 경향이 있다. 전자 받기 효과는 일반적으로 전자 받개기(EWG)에 의해 전자가 부족하게된 결합된 원자에 부착된 다른 원자에 대해 감쇠된 형태이지만 유도적으로 전달되며, 따라서 더 멀리 떨어진 반응 중심의 친전자성에 영향을 미친다. 예시적인 전자 받개기는 비제한적으로 -C(=O), -CN, -NO2, -CX3, -X, -C(=O)OR', -C(=O)N(R')2, -C(=O)R', -C(=O)X, -S(=O)2R', -S(=O)2OR', -S(=O)2NHR', -S(=O)2N(R')2, -P(=O)(OR')2, -P(=O)(CH3)NHR', -NO, -N(R')3 +을 포함하며, 여기서 X는 -F, -Br, -Cl, 또는 -I이고 R'는 일부 양태에서 각각의 경우 수소 및 C1-6 알킬, 및 아실옥시와 같은 본원에 기술된 특정 O-연결된 모이어티로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다.
예시적인 EWG는 또한 치환체 및 특정 헤테로아릴기(예컨대, 피리딘)에 따라 아릴기(예컨대, 페닐)를 포함할 수 있다. 따라서, 용어 "전자 받개기"는 또한 전자 받개기로 추가로 치환된 아릴 또는 헤테로아릴을 포함한다. 전형적으로, 아릴 또는 헤테로아릴 상의 전자 받개기는 C(=O), -CN, -NO2, -CX3, 및 -X이며, 여기서 독립적으로 선택된 X는 할로겐, 전형적으로 -F 또는 -Cl이다. 이들의 치환체에 따라, 알킬 모이어티는 또한 전자 받개기일 수 있다.
"이탈기 능력"은 캄프토테신 접합체에서 캄프토테신에 상응하는 알코올-, 티올-, 아민- 또는 아미드-함유 화합물이 접합체 내에서 자기-희생적 사건의 활성화 후에 유리 약물로서 접합체로부터 방출되는 능력을 지칭한다. 이러한 방출은 캄프토테신이 부착된 메틸렌 카바메이트 단위의 이익 없이 변할 수 있다(즉, 캄프토테신이 자기-희생 모이어티에 직접 부착되고 중간에 메틸렌 카바메이트 단위가 없는 경우). 우수한 이탈기는 일반적으로 약한 염기이며 이러한 접합체에서 배출되는 작용기가 산성일수록 접합체 염기는 더 약하다. 따라서, 캄프토테신의 알코올-, 티올-, 아민- 또는 아미드-함유 유리 약물의 이탈기 능력은 경우에 따라 접합체에서 배출되는 약물의 작용기의 pKa와 관련이 있으며 여기서 메틸렌 카바메이트 단위(즉, 캄프토테신이 자기-희생 모이어티에 직접 부착된 것)는 사용되지 않는다. 따라서, 해당 작용기에 대한 낮은 pKa는 이탈기 능력을 증가시킬 것이다. 다른 인자가 메틸렌 카바메이트 단위의 이점을 갖지 않는 접합체로부터 유리 약물의 방출에 기여할 수 있지만, 일반적으로 더 낮은 pKa 값을 가진 작용기를 가진 약물은 전형적으로 더 높은 pKa 값을 가진 작용기를 통해 부착된 약물보다 더 우수한 이탈기일 것이다. 또 다른 고려사항은 pKa 값이 너무 낮은 작용기는 자발적 가수분해를 통한 캄프토테신의 조기 손실로 인해 허용되지 않는 활성 프로파일을 초래할 수 있다는 것이다. 메틸렌 카바메이트 단위를 사용하는 접합체의 경우, 캄프토테신의 허용되지 않는 손실을 겪지 않고 유리 약물의 효율적인 방출을 허용하는 pKa 값을 갖는 공통 작용기(즉, 카밤산)가 자기-희생 시 생성된다.
본원에서 사용된 "숙신이미드 모이어티"는 전형적으로 그 고리 시스템의 이미드 질소에 결합된 알킬렌-함유 모이어티로 추가로 구성되는 한 유형의 스트레처 단위(Z)에 존재하는 숙신 이미드 고리 시스템으로 구성된 유기 모이어티를 지칭한다. 숙신이미드 모이어티는 전형적으로 리간드 단위의 설프히드릴 기를 스트레처 단위 전구체(Z')의 말레이미드 고리 시스템에 마이클(Michael) 첨가한 결과이다. 따라서 숙신이미드 모이어티는 티오-치환된 숙신이미드 고리 시스템으로 구성되며, 캄프토테신 접합체에 존재하는 경우 캄프토테신 접합체의 링커 단위의 나머지 부분으로 치환된 이미드 질소를 가지며, Z'의 말레이미드 고리 시스템에 존재하는 치환체로 선택적으로 치환된다.
본원에서 사용된 "산-아미드 모이어티"는 가수분해에 의해 이의 카보닐-질소 결합 중 하나가 파괴된 숙신이미드 모이어티의 티오-치환된 숙신이미드 고리 시스템으로부터 생성되는 아미드 치환체를 갖는 숙신산을 지칭한다. 숙신산-아미드 모이어티를 생성하는 가수분해는 항체-티오 치환체의 제거를 통해 결합된 리간드 단위의 조기 손실을 겪을 가능성이 적은 링커 단위를 제공한다. 티오-치환된 숙신이미드 모이어티의 숙신이미드 고리 시스템의 가수분해는 스트레처 단위 전구체의 말레이미드 고리 시스템에 존재하는 임의의 치환체 및 표적 리간드에 의해 도입된 티오 치환체에 적어도 부분적으로 기여할 수 있는 숙신이미드 고리 시스템의 두 카보닐 탄소의 반응성의 차이로 인한 산-아미드 모이어티의 위치화학적 이성질체를 제공할 것으로 예상된다.
본원에서 사용된 용어 "전구약물"은 화학적 또는 생물학적 공정(즉, 화학적 반응 또는 효소적 생체변환)을 통해 체내에서 보다 생물학적으로 활성인 화합물로 변형되는 생물학적으로 덜 활성이거나 불활성 화합물을 지칭한다. 전형적으로, 생물학적으로 활성인 화합물은 화합물을 전구약물 모이어티로 화학적으로 변형시킴으로써 생물학적으로 덜 활성이 된다(즉, 전구약물로 전환됨). 일부 양태에서, 전구약물은 세포 외부, 예컨대, 소화액, 또는 신체 순환계, 예컨대, 혈액에서 생체활성화되는 유형 II 전구약물이다. 예시적인 전구약물은 에스터 및 β-D-글루코피라노시드이다.
다수의 경우, 본원에 기술된 접합체, 링커, 및 성분의 조립체는 반응기를 지칭할 것이다. "반응기" 또는 RG는 링커 단위(즉, A, W, Y) 또는 캄프토테신 D의 성분과 결합을 형성할 수 있는 반응성 부위(RS)를 함유하는 기이다. RS는 반응기(RG) 내의 반응성 부위이다. 반응기는 이황화 결합 또는 티오에터 결합을 형성하기 위한 설프히드릴기, 히드라존 결합을 형성하기 위한 알데히드, 케톤, 또는 히드라진기, 펩티드 결합을 형성하기 위한 카복실 또는 아미노기, 에스터 결합을 형성하기 위한 카복실 또는 히드록시기, 설폰아미드 결합을 형성하기 위한 설폰산, 카바메이트 결합을 형성하기 위한 알코올, 및 설폰아미드 결합 또는 카바메이트 결합을 형성하기 위한 아민을 포함한다.
다음의 표는 반응성 부위의 반응 후 형성될 수 있는 반응기, 반응 부위, 및 예시적인 작용기를 설명한다. 표는 제한적이지 않다. 당업자는 표에서 언급된 R' 및 R'' 부분이 사실상 임의의 유기 모이어티(예컨대, 알킬기, 아릴기, 헤테로아릴기, 또는 치환된 알킬, 아릴, 또는 헤테로아릴, 기)이며, 이는 RG를 예시적인 작용기 중 하나로 전환할 때 제공되는 결합 형성과 호환되는 것임을 이해할 것이다. 또한, 본 발명의 실시형태에 적용되는 바와 같이, R'는 경우에 따라, 자기-안정화 링커 또는 선택적인 2차 링커의 하나 이상의 성분을 나타낼 수 있고, R''는 경우에 따라 선택적인 2차 링커, 캄프토테신, 안정화 단위, 또는 검출 단위 중 하나 이상의 성분을 나타낼 수 있음을 인지할 것이다.
Figure pct00004
실시형태
본 발명의 다수의 실시형태가 아래 기술되며, 이는 임의의 방식으로 본 발명을 제한하려는 것이 아니며, 접합체를 구성하는 성분에 대한 보다 상세한 논의가 이어진다. 당업자는 확인된 접합체 각각 및 이의 선택된 실시형태 중 임의의 것이 각 성분 및 링커의 전체 범위를 포함하는 것을 의미한다는 것을 이해할 것이다.
캄프토테신 접합체
하나의 주요 실시형태에서, 본원에서 하기 화학식:
L-(Q-D)p
또는 이의 염을 가진 캄프토테신 접합체가 제공되고, 상기 식에서
L은 리간드 단위이고;
아래첨자 p는 1 내지 16의 정수이고;
Q는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 갖는 링커 단위이고:
-Z-A-, -Z-A-RL-; -Z-A-RL-Y-; Z-A-S*-W-; -Z-A-S*-RL-; -Z-A-B(S*)-RL-;
-Z-A-S*-W-RL-, -Z-A-S*-RL-Y-; 및 -Z-A-B(S*)-RL-Y-;
상기 식에서 Z는 스트레처 단위이고,
A는 결합 또는 커넥터 단위이고;
B는 병렬 커넥터 단위이고;
S*은 분획제이고;
W는 펩티드 단위이고;
RL은 방출가능한 단위이고;
Y는 스페이서 단위이고;
D는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택되는 약물 단위이다:
Figure pct00005
Figure pct00006
Figure pct00007
Figure pct00008
;
상기 식에서, RB는 H, C1-C8 알킬, C1-C8 할로알킬, C3-C8 사이클로알킬, (C3-C8 사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, 페닐 및 페닐-C1-C4 알킬-로 이루어진 군으로부터 선택되는 구성원이고;
RC는 C1-C6 알킬 및 C3-C6 사이클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 구성원이고;
각각의 RF 및 RF'는 -H, C1-C8 알킬, C1-C8 히드록시알킬, C1-C8 아미노알킬, (C1-C4 알킬아미노)-C1-C8 알킬-, N,N-(C1-C4 히드록시알킬)(C1-C4 알킬)-아미노-C1-C8 알킬-, N,N-디(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N-(C1-C4 히드록시알킬)-C1-C8 아미노알킬, C1-C8 알킬C(O)-, C1-C8 히드록시알킬-C(O)-, C1-C8 아미노알킬C(O)-, C3-C10 사이클로알킬, (C3-C10 사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, C3-C10 헤테로사이클로알킬, (C3-C10 헤테로사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, 페닐, 페닐-C1-C4 알킬-, 디페닐-C1-C4 알킬-, 헤테로아릴 및 헤테로아릴-C1-C4 알킬-로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 구성원이거나,
RF 및 RF'는 각각이 부착된 질소 원자와 결합하여 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2, -NHC1-C4 알킬 및 -N(C1-C4 알킬)2로 이루어진 군으로부터 선택되는 0개 내지 3개의 치환체를 가진 5-원 고리, 6-원 고리 또는 7-원 고리를 형성하고; 여기서, RB, RC, RF 및 RF'의 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 페닐 및 헤테로아릴 부분은 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2,- NHC1-C4 알킬 및 -N(C1-C4 알킬)2로 이루어진 군으로부터 선택된 0개 내지 3개 치환체로 치환되고;
여기서, Q가 -Z-A-RL-, -Z-A-RL-Y-, -Z-A-S*-RL-, -Z-A-B(S*)-RL-, -Z-A-S*-RL-Y- 또는 -Z-A-B(S*)-RL-Y-이고 여기서 RL이 본원에 개시된 임의의 하나의 방출가능한 링커인 경우, D가 Q에 부착되는 지점은 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, CPT6 또는 CPT7에 존재하는 임의의 하나의 히드록실 또는 1차 또는 2차 아민 작용기의 헤테로원자를 통해서이거나,
여기서, Q가 -Z-A-, -Z-A-S*-W- 또는 -Z-A-B(S*)-W-이거나, Q가 -Z-A-S*-RL-, -Z-A-B(S*)-RL-, -Z-A-S*-W-RL-, 또는 -Z-A-B(S*)-W-RL-이고 여기서 RL이 글루쿠로나이드 단위 외의 방출가능한 단위인 경우, D가 Q에 부착되는 지점은 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, CPT6 또는 CPT7의 락톤 고리의 히드록실기 치환체의 산소 원자를 통해서이고;
부착 지점이 CPT6의 아미노기의 질소 원자로인 경우, 적어도 하나의 RF 및 RF'가 -H이고,
D가 아미노기를 통해 부착된 CPT1인 경우, -Z-A-RL-, -Z-A-RL-Y-, -Z A-S*-RL-, -Z-A-B(S*)-RL-, -Z-A-S*-RL-Y- 및 -Z-A-B(S*)-RL-Y의 -Z-A-는, 선택적으로 가수분해된 형태의 숙신이미드 고리를 갖는, 숙신이미도-카프로일-β-알라닐 이외의 것이다.
일 군의 실시형태에서, D는 화학식 CPT5를 갖는다.
일 군의 실시형태에서, D는 화학식 CPT2를 갖는다.
일 군의 실시형태에서, D는 화학식 CPT3을 갖는다.
일 군의 실시형태에서, D는 화학식 CPT4를 갖는다.
일 군의 실시형태에서, D는 화학식 CPT1을 갖는다.
일 군의 실시형태에서, D는 화학식 CPT6을 갖는다.
일 군의 실시형태에서, D는 화학식 CPT7을 갖는다.
일 군의 실시형태에서, Q는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된 화학식을 갖고:
-Z-A-RL- 및 -Z-A-RL-Y-,
상기 식에서 RL은 글루쿠로나이드 단위인 방출가능한 링커이고, 기 Z, A, 및 Y는 상기 및 본원에서 구체적으로 언급된 임의의 실시형태에서 제공된 의미를 갖는다.
일 군의 실시형태에서, Q는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된 화학식을 갖고:
-Z-A-S*-RL- 및 -Z-A-S*-RL-Y-,
상기 식에서 RL은 글루쿠로나이드 단위인 방출가능한 링커이고, 기 Z, A, S* 및 Y는 상기 및 본원에서 구체적으로 언급된 임의의 실시형태에서 제공된 의미를 갖는다.
일 군의 실시형태에서, Q는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된 화학식을 갖고:
-Z-A-B(S*)-RL- 및 -Z-A-B(S*)-RL-Y-,
상기 식에서 RL은 글루쿠로나이드 단위인 방출가능한 링커이고, 기 Z, A, S*, B 및 Y는 상기 및 본원에서 구체적으로 언급된 임의의 실시형태에서 제공된 의미를 갖는다.
다른 군의 실시형태에서, Q는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된 화학식을 갖고:
-Z-A- 또는 -Z-A-RL-,
상기 식에서 RL은 글루쿠로나이드 단위 이외의 것인 방출가능한 링커이고, 기 Z 및 A는 상기 및 본원에서 구체적으로 언급된 임의의 실시형태에서 제공된 의미를 갖는다.
다른 군의 실시형태에서, Q는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된 화학식을 갖고:
-Z-A-S*-RL- 및 -Z-A-B(S*)-RL-,
상기 식에서 RL은 글루쿠로나이드 단위 이외의 것인 방출가능한 링커이고, 기 Z, A, S* 및 B는 상기 및 본원에서 구체적으로 언급된 임의의 실시형태에서 제공된 의미를 갖는다.
다른 군의 실시형태에서, Q는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된 화학식을 갖고:
-Z-A-S*-W- 및 -Z-A-B(S*)-W-,
상기 식에서 기 Z, A, S*, B 및 W는 상기 및 본원에서 구체적으로 언급된 임의의 실시형태에서 제공된 의미를 갖는다.
다른 군의 실시형태에서, Q는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된 화학식을 갖고:
-Z-A-S*-W-RL- 및 - Z-A-B(S*)-W-RL-,
상기 식에서 RL은 글루쿠로나이드 단위 이외의 것인 방출가능한 링커이고, 기 Z, A, S*, B 및 W는 상기 및 본원에서 구체적으로 언급된 임의의 실시형태에서 제공된 의미를 갖는다.
일 군의 실시형태에서, Q가 -Z-A-RL-, -Z-A-RL-Y-, -Z-A-S*-RL-, -Z-A-S*-RL-Y-, -Z-A-B(S*)-RL- 또는 -Z-A-B(S*)-RL-Y-의 화학식을 갖고 화학식 CPT1을 가진 약물 단위로 구성된 캄프토테신 접합체는 각각 다음의 화학식으로 표현된다:
Figure pct00009
Figure pct00010
Figure pct00011
Figure pct00012
Figure pct00013
Figure pct00014
상기 식에서 RL은 본원에 개시된 임의의 하나의 방출가능한 링커이고, 바람직하게는 RL은 글루쿠로나이드 단위이고, 화학식 CPT1iN, CPT1iiN, CPT1iiiN, CPT1ivN, CPT1vN 및 CPT1viN의 -Z-A-가 선택적으로 가수분해된 형태로 숙신이미드 고리를 갖는, 숙신이미도-카프로일- β-알라닐 이외의 것인 경우 기 L, Z, A, S*, B 및 Y는 상기 및 본원에서 구체적으로 언급된 임의의 하나의 실시형태에 제공된 의미를 갖는다.
다른 실시형태에서, Q가 -Z-A-, -Z-A-RL-, -Z-A-S*-W-, -Z-A-B(S*)-W-, -Z-A-S*-RL-, -Z-A-B(S*)-RL-, -Z-A-S*-W-RL- 및 -Z-A-B(S*)-W-RL-의 화학식을 갖고 화학식 CPT1을 가진 약물 단위로 구성되는 캄프토테신 접합체는 각각 다음의 화학식으로 표현된다:
Figure pct00015
Figure pct00016
Figure pct00017
Figure pct00018
상기 식에서 RL은 글루쿠로나이드 단위 이외의 방출가능한 링커이고, 기 L, Z, A, S*, B 및 W는 상기 및 본원에서 구체적으로 언급된 임의의 하나의 실시형태에 제공된 의미를 갖는다.
다른 군의 실시형태에서, Q가 -Z-A-RL-, -Z-A-RL-Y-, -Z-A-S*-RL-, -Z-A-S*-RL-Y-, -Z-A-B(S*)-RL- 또는 -Z-A-B(S*)-RL-Y-의 화학식을 갖고 화학식 CPT2를 갖는 약물 단위로 구성되는 캄프토테신 접합체는 각각 다음의 화학식으로 표현된다:
Figure pct00019
Figure pct00020
Figure pct00021
상기 식에서 RL은 본원에 개시된 임의의 하나의 방출가능한 링커이고, 바람직하게는 RL은 글루쿠로나이드 단위이고, 기 L, Z, A, S*, B 및 Y는 상기 및 본원에서 구체적으로 언급된 임의의 하나의 실시형태에 제공된 의미를 갖는다.
다른 실시형태에서, Q가 -Z-A-, -Z-A-RL-, -Z-A-S*-W-, -Z-A-B(S*)-W-, -Z-A-S*-RL-, -Z-A-B(S*)-RL-, -Z-A-S*-W-RL- 및 -Z-A-B(S*)-W-RL-의 화학식을 갖고 화학식 CPT2를 갖는 약물 단위로 구성되는 캄프토테신 접합체는 각각 다음의 화학식으로 표현된다:
Figure pct00022
Figure pct00023
상기 식에서 RL은 글루쿠로나이드 단위 이외의 방출가능한 링커이고 기 L, Z, A, S*, B 및 W는 상기 및 본원에서 구체적으로 언급된 임의의 하나의 실시형태에 제공된 의미를 갖는다.
일 군의 실시형태에서, 화학식 CPT2iOa, CPT2iiOa, CPT2iiiOa, CPT2ivOa, CPT2vOa, CPT2viOa, CPT2iOb, CPT2iiOb, CPT2iiiOb, CPT2ivOb, CPT2vOb, CPT2viOb, CPT2viiOb 또는 CPT2viiiOb의 RB는 -H, C1-C8 알킬 및 C1-C8 할로알킬로 이루어진 군으로부터 선택된 모이어티이다.
일 군의 실시형태에서, 화학식 CPT2iOa, CPT2iiOa, CPT2iiiOa, CPT2ivOa, CPT2vOa, CPT2viOa, CPT2iOb, CPT2iiOb, CPT2iiiOb, CPT2ivOb, CPT2vOb, CPT2viOb, CPT2viiOb 또는 CPT2viiiOb의 RB는 C3-C8 사이클로알킬, (C3-C8 사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, 페닐 및 페닐-C1-C4 알킬-로 이루어진 군으로부터 선택된 모이어티이고, 여기서 RB의 사이클로알킬 및 페닐 모이어티는 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2, -NHC1-C4 알킬 및 -N(C1-C4 알킬)2로 이루어진 군으로부터 선택된 0개 내지 3개 치환체로 치환된다.
다른 군의 실시형태에서, Q가 -Z-A-RL-, -Z-A-RL-Y-, -Z-A-S*-RL-, -Z-A-S*-RL-Y-, -Z-A-B(S*)-RL- 또는 -Z-A-B(S*)-RL-Y-의 화학식을 갖고 화학식 CPT3을 가진 약물 단위로 구성되는 캄프토테신 접합체는 각각 다음의 화학식으로 표현된다:
Figure pct00024
Figure pct00025
Figure pct00026
상기 식에서 RL은 본원에 개시된 임의의 하나의 방출가능한 링커이고, 바람직하게는 RL은 글루쿠로나이드 단위이고, 기 L, Z, A, S*, B 및 Y는 상기 및 본원에서 구체적으로 언급된 임의의 하나의 실시형태에 제공된 의미를 갖는다.
다른 실시형태에서, Q가 -Z-A-, -Z-A-RL-, -Z-A-S*-W-, -Z-A-B(S*)-W-, -Z-A-S*-RL-, -Z-A-B(S*)-RL-, -Z-A-S*-W-RL- 및 -Z-A-B(S*)-W-RL-의 화학식을 갖고 화학식 CPT3을 가진 약물 단위로 구성되는 캄프토테신 접합체는 각각 다음의 화학식으로 표현된다:
Figure pct00027
Figure pct00028
상기 식에서 RL은 글루쿠로나이드 단위 이외의 방출가능한 링커이고 기 L, Z, A, S*, B 및 W는 상기 및 본원에서 구체적으로 언급된 임의의 하나의 실시형태에 제공된 의미를 갖는다.
일 군의 실시형태에서, 화학식 CPT3iOa, CPT3iiOa, CPT3iiiOa, CPT3ivOa, CPT3vOa, CPT3viOa, CPT3iO'a, CPT3iiO'a, CPT3iiiO'a, CPT3ivO'a, CPT3vO'a, CPT3viO'a, CPT3iOb, CPT3iiOb, CPT3iiiOb, CPT3ivOb, CPT3vOb, CPT3viOb, CPT3viiOb 또는 CPT3viiiOb의 RC는 C1-C6 알킬이다.
일 군의 실시형태에서, 화학식 CPT3iOa, CPT3iiOa, CPT3iiiOa, CPT3ivOa, CPT3vOa, CPT3viOa, CPT3iO'a, CPT3iiO'a, CPT3iiiO'a, CPT3ivO'a, CPT3vO'a, CPT3viO'a, CPT3iOb, CPT3iiOb, CPT3iiiOb, CPT3ivOb, CPT3vOb, CPT3viOb, CPT3viiOb 또는 CPT3viiiOb의 RC는 C3-C6 사이클로알킬이다.
다른 군의 실시형태에서, Q가 -Z-A-RL-, -Z-A-RL-Y-, -Z-A-S*-RL-, -Z-A-S*-RL-Y-, -Z-A-B(S*)-RL- 또는 -Z-A-B(S*)-RL-Y-의 화학식을 갖고 화학식 CPT4를 갖는 약물 단위로 구성되는 캄프토테신 접합체는 각각 다음의 화학식으로 표현된다:
Figure pct00029
Figure pct00030
Figure pct00031
상기 식에서 RL은 본원에 개시된 임의의 하나의 방출가능한 링커이고, 바람직하게는 RL은 글루쿠로나이드 단위이고, 기 L, Z, A, S*, B 및 Y는 상기 및 본원에서 구체적으로 언급된 임의의 하나의 실시형태에 제공된 의미를 갖는다.
다른 실시형태에서, Q가 -Z-A-, -Z-A-RL-, -Z-A-S*-W-, -Z-A-B(S*)-W-, -Z-A-S*-RL-, -Z-A-B(S*)-RL-, -Z-A-S*-W-RL- 및 -Z-A-B(S*)-W-RL-의 화학식을 갖고 화학식 CPT4를 갖는 약물 단위로 구성되는 캄프토테신 접합체는 각각 다음의 화학식으로 표현된다:
Figure pct00032
Figure pct00033
Figure pct00034
,
상기 식에서 RL은 글루쿠로나이드 단위 이외의 방출가능한 링커이고 기 L, Z, A, S*, B 및 W는 상기 및 본원에서 구체적으로 언급된 임의의 하나의 실시형태에 제공된 의미를 갖는다.
다른 군의 실시형태에서, Q는 -Z-A-RL-, -Z-A-RL-Y-, -Z-A-S*-RL-, -Z-A-S*-RL-Y-, -Z-A-B(S*)-RL- 또는 -Z-A-B(S*)-RL-Y-의 화학식을 갖고 화학식 CPT5를 갖는 약물 단위로 구성되는 캄프토테신 접합체는 각각 다음의 화학식으로 표현된다:
Figure pct00035
Figure pct00036
Figure pct00037
Figure pct00038
Figure pct00039
상기 식에서 RL은 본원에 개시된 임의의 하나의 방출가능한 링커이고, 바람직하게는 RL은 글루쿠로나이드 단위이고, 기 L, Z, A, S*, B 및 Y는 상기 및 본원에서 구체적으로 언급된 임의의 하나의 실시형태에 제공된 의미를 갖는다.
다른 실시형태에서, Q가 -Z-A-, -Z-A-RL-, -Z-A-S*-W-, -Z-A-B(S*)-W-, -Z-A-S*-RL-, -Z-A-B(S*)-RL-, -Z-A-S*-W-RL- 및 -Z-A-B(S*)-W-RL-의 화학식을 갖고 화학식 CPT5를 갖는 약물 단위로 구성되는 캄프토테신 접합체는 각각 다음의 화학식으로 표현된다:
Figure pct00040
Figure pct00041
Figure pct00042
Figure pct00043
상기 식에서 RL은 글루쿠로나이드 단위 이외의 방출가능한 링커이고 기 L, Z, A, S*, B 및 W는 상기 및 본원에서 구체적으로 언급된 임의의 하나의 실시형태에 제공된 의미를 갖는다.
다른 군의 실시형태에서, Q가 -Z-A-RL-, -Z-A-RL-Y-, -Z-A-S*-RL-, -Z-A-S*-RL-Y-, -Z-A-B(S*)-RL- 또는 -Z-A-B(S*)-RL-Y-의 화학식을 갖고 화학식 CPT6을 갖는 약물 단위로 구성되는 캄프토테신 접합체는 각각 다음의 화학식으로 표현된다:
Figure pct00044
Figure pct00045
Figure pct00046
,
상기 식에서 RL은 본원에 개시된 임의의 하나의 방출가능한 링커이고, 바람직하게는 RL은 글루쿠로나이드 단위이고, 기 L, Z, A, S*, B 및 Y는 상기 및 본원에서 구체적으로 언급된 임의의 실시형태에 제공된 의미를 갖는다.
다른 실시형태에서 Q가 -Z-A-, -Z-A-RL-, -Z-A-S*-W-, -Z-A-B(S*)-W-, -Z-A-S*-RL-, -Z-A-B(S*)-RL-, -Z-A-S*-W-RL- 및 -Z-A-B(S*)-W-RL-의 화학식을 갖고 화학식 CPT6을 갖는 약물 단위로 구성되는 캄프토테신 접합체는 각각 다음의 화학식으로 표현된다:
Figure pct00047
Figure pct00048
Figure pct00049
Figure pct00050
상기 식에서 RL은 글루쿠로나이드 단위 이외의 방출가능한 링커이고 기 L, Z, A, S*, B 및 W는 상기 및 본원에서 구체적으로 언급된 임의의 하나의 실시형태에 제공된 의미를 갖는다.
일 군의 실시형태에서, 화학식 CPT6iN, CPT6iiN, CPT6iiiN, CPT6ivN, CPT6vN 또는 CPT6viN의 RF는 -H이다.
일 군의 실시형태에서, 화학식 CPT6iOa, CPT6iiOa, CPT6iiiOa, CPT6ivOa, CPT6vOa, CPT6viOa, CPT6iOb, CPT6iiOb, CPT6iiiOb, CPT6ivOb, CPT6vOb, CPT6viOb, CPT6viiOb 또는 CPT6viiiOb의 RF 및 RF' 둘 모두는 -H이다.
일 군의 실시형태에서, 화학식 CPT6iN, CPT6iiN, CPT6iiiN, CPT6ivN, CPT6vN 또는 CPT6viN의 RF는 C1-C8 알킬, C1-C8 히드록시알킬, C1-C8 아미노알킬, (C1-C4 알킬아미노)-C1-C8 알킬-, N,N-(C1-C4 히드록시알킬)(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N,N-디(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N-(C1-C4 히드록시알킬)-C1-C8 아미노알킬-, C1-C8 알킬-C(O)-, C1-C8 히드록시알킬-C(O)-, 및 C1-C8 아미노알킬C(O)-로 이루어진 군으로부터 선택되는 모이어티이다.
일 군의 실시형태에서, 화학식 CPT6iN, CPT6iiN, CPT6iiiN, CPT6ivN, CPT6vN 또는 CPT6viN의 RF는 C3-C10 사이클로알킬, (C3-C10 사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, C3-C10 헤테로사이클로알킬, (C3-C10 헤테로사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, 페닐, 페닐-C1-C4 알킬-, 디페닐 C1-C4 알킬-, 헤테로아릴 및 헤테로아릴-C1-C4 알킬-로 이루어진 군으로부터 선택되는 모이어티이고, 여기서 RF의 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 페닐 및 헤테로아릴 모이어티는 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2, -NHC1-C4 알킬 및 -N(C1-C4 알킬)2로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 0개 내지 3개의 치환체로 치환된다.
일 군의 실시형태에서, 화학식 CPT6iN, CPT6iiN, CPT6iiiN, CPT6ivN, CPT6vN 또는 CPT6viN의 RF는 -H, C3-C10 사이클로알킬, (C3-C10 사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, C3-C10 헤테로사이클로알킬, (C3-C10 헤테로사이클로알킬)-C1-C4 알킬, 페닐, 페닐-C1-C4 알킬-, 디페닐 C1-C4 알킬, 헤테로아릴 및 헤테로아릴-C1-C4 알킬-로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 모이어티이고, 여기서 RF의 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 페닐 및 헤테로아릴 모이어티는 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2, -NHC1-C4 알킬 및 -N(C1-C4 알킬)2로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 0개 내지 3개의 치환체로 치환된다.
일 군의 실시형태에서, 화학식 CPT6iOa, CPT6iiOa, CPT6iiiOa, CPT6ivOa, CPT6vOa, CPT6viOa, CPT6iOb, CPT6iiOb, CPT6iiiOb, CPT6ivOb, CPT6vOb, CPT6viOb, CPT6viiOb 또는 CPT6viiiOb의 RF 및 RF'는 둘 모두 부착된 질소 원자와 조합되어 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2, -NHC1-C4 알킬 및 -N(C1-C4 알킬)2로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 0개 내지 3개의 치환체를 갖는 5-원 고리, 6-원 고리 또는 7-원 고리를 형성한다.
일 군의 실시형태에서, 화학식 CPT6iOa, CPT6iiOa, CPT6iiiOa, CPT6ivOa, CPT6vOa, CPT6viOa, CPT6iOb, CPT6iiOb, CPT6iiiOb, CPT6ivOb, CPT6vOb, CPT6viOb, CPT6viiOb 또는 CPT6viiiOb의 RF 및 RF' 중 적어도 하나는 C1-C8 알킬, C1-C8 히드록시알킬, C1-C8 아미노알킬, (C1-C4 알킬아미노)-C1-C8 알킬, N,N-(C1-C4 히드록시알킬)(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N,N-디(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N-(C1-C4 히드록시알킬)-C1-C8 아미노알킬-, C1-C8 알킬C(O)-, C1-C8 히드록시알킬-C(O)-, 및 C1-C8 아미노알킬-C(O)-로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 모이어티이고 다른 것은 -H, C1-C8 알킬, C1-C8 히드록시알킬, C1-C8 아미노알킬, (C1-C4 알킬아미노)-C1-C8 알킬-, N,N-(C1-C4 히드록시알킬)(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N,N-디(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N-(C1-C4 히드록시알킬)-C1-C8 아미노알킬-, C1-C8 알킬-C(O)-, C1-C8 히드록시알킬-C(O)-, 및 C1-C8 아미노알킬C(O)-로 이루어진 군으로부터 선택된 모이어티이다.
일 군의 실시형태에서, 화학식 CPT6iO, CPT6iiO, CPT6iiiO, CPT6ivO, CPT6vO 또는 CPT6viO의 RF 및 RF' 각각은 C1-C8 알킬, C1-C8 히드록시알킬, C1-C8 아미노알킬, (C1-C4 알킬아미노)-C1-C8 알킬-, N,N-(C1-C4 히드록시알킬)(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N,N-디(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N-(C1-C4 히드록시알킬)-C1-C8 아미노알킬, C1-C8 알킬-C(O)-, C1-C8 히드록시알킬-C(O)-, 및 C1-C8 아미노알킬-C(O)-로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 모이어티이다.
일 군의 실시형태에서, 화학식 CPT6iO, CPT6iiO, CPT6iiiO, CPT6ivO, CPT6vO 또는 CPT6viO의 RF 및 RF' 중 적어도 하나는 C3-C10 사이클로알킬, C3-C10 사이클로알킬-C1-C4 알킬-, C3-C10 헤테로사이클로알킬, (C3-C10 헤테로사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, 페닐, 페닐-C1-C4 알킬, 디페닐 C1-C4 알킬, 헤테로아릴 및 헤테로아릴-C1-C4 알킬-로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 모이어티이고, 여기서 RF 또는 RF'의 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 페닐 및 헤테로아릴 모이어티는 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2, -NHC1-C4 알킬 및 -N(C1-C4 알킬)2로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 0개 내지 3개 치환체로 치환되고, 다른 것은 -H, C1-C8 알킬, C1-C8 히드록시알킬, C1-C8 아미노알킬, (C1-C4 알킬아미노)-C1-C8 알킬-, N,N-(C1-C4 히드록시알킬)(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N,N-디(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N-(C1-C4 히드록시알킬)-C1-C8 아미노알킬-, C1-C8 알킬-C(O)-, C1-C8 히드록시알킬-C(O)-, 및 C1-C8 아미노알킬C(O)-)2로 이루어진 군으로부터 선택되는 모이어티이다.
일 군의 실시형태에서, 화학식 CPT6iO, CPT6iiO, CPT6iiiO, CPT6ivO, CPT6vO 또는 CPT6viO의 RF 및 RF' 중 적어도 하나는 C3-C10 사이클로알킬, C3-C10 사이클로알킬-C1-C4 알킬-, C3-C10 헤테로사이클로알킬, (C3-C10 헤테로사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, 페닐, 페닐-C1-C4 알킬, 디페닐 C1-C4 알킬, 헤테로아릴 및 헤테로아릴-C1-C4 알킬-로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 모이어티이고, 다른 것은 -H, C3-C10 사이클로알킬, (C3-C10 사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, C3-C10 헤테로사이클로알킬, (C3-C10 헤테로사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, 페닐, 페닐-C1-C4 알킬-, 디페닐 C1-C4 알킬-, 헤테로아릴 및 헤테로아릴-C1-C4 알킬-로 이루어진 군으로부터 선택되는 모이어티이고, 여기서 RF 또는 RF'의 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 페닐 및 헤테로아릴 모이어티는 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2, -NHC1-C4 알킬 및 -N(C1-C4 알킬)2로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 0개 내지 3개의 치환체로 독립적으로 치환된다.
일 군의 실시형태에서, 화학식 CPT6iO, CPT6iiO, CPT6iiiO, CPT6ivO, CPT6vO 또는 CPT6viO의 RF 및 RF' 각각은 -H, C3-C10 사이클로알킬, (C3-C10 사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, C3-C10 헤테로사이클로알킬, (C3-C10 헤테로사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, 페닐, 페닐-C1-C4 알킬-, 디페닐 C1-C4 알킬-, 헤테로아릴 및 헤테로아릴-C1-C4 알킬-로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 모이어티이고, 여기서 RF 및 RF'의 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 페닐 및 헤테로아릴 모이어티는 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2, -NHC1-C4 알킬 및 -N(C1-C4 알킬)2로 이루어진 군으로부터 선택된 0개 내지 3개의 치환체로 독립적으로 치환된다.
다른 군의 실시형태에서, Q가 -Z-A-RL-, -Z-A-RL-Y-, -Z-A-S*-RL-, -Z-A-S*-RL-Y-, -Z-A-B(S*)-RL- 또는 -Z-A-B(S*)-RL-Y-의 화학식을 갖고 화학식 CPT7을 갖는 약물 단위로 구성되는 캄프토테신 접합체는 각각 다음의 화학식으로 표현된다:
Figure pct00051
Figure pct00052
Figure pct00053
Figure pct00054
Figure pct00055
Figure pct00056
,
상기 식에서 RL은 본원에 개시된 임의의 하나의 방출가능한 링커이고, 바람직하게는 RL은 글루쿠로나이드 단위이고, 기 L, Z, A, S*, B 및 Y는 상기 및 본원에서 구체적으로 언급된 임의의 하나의 실시형태에 제공된 의미를 갖는다.
다른 실시형태에서, Q가 -Z-A-, -Z-A-RL-, -Z-A-S*-W-, -Z-A-B(S*)-W-, -Z-A-S*-RL-, -Z-A-B(S*)-RL-, -Z-A-S*-W-RL- 및 -Z-A-B(S*)-W-RL-의 화학식을 갖고 화학식 CPT5를 갖는 약물 단위로 구성되는 캄프토테신 접합체는 각각 다음의 화학식으로 표현된다:
Figure pct00057
Figure pct00058
Figure pct00059
,
상기 식에서 RL은 글루쿠로나이드 단위 이외의 방출가능한 링커이고 기 L, Z, A, S*, B 및 W는 상기 및 본원에서 구체적으로 언급된 임의의 하나의 실시형태에 제공된 의미를 갖는다.
캄프토테신-링커 화합물
일부 실시형태에서, 캄프토테신 접합체를 제조하는 경우, 표적화제에 접합하기 전에 전체 약물-링커 조합을 합성하는 것이 바람직할 것이다. 이러한 실시형태에서, 본원에 기술된 캄프토테신-링커 화합물은 중간체 화합물이다. 이러한 실시형태에서, 캄프토테신-링커 화합물의 스트레처 단위는 아직은 리간드 단위에 공유결합되지 않았고(즉, 스트레처 단위 전구체, Z'), 따라서 표적화 리간드에 대한 접합을 위한 작용기를 갖는다. 일 실시형태에서, 캄프토테신-링커 화합물은 캄프토테신 화합물(본원에서 화학식 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, CPT6 및 CPT7로 표현됨), 및 캄프토테신에 연결되는 리간드 단위를 통해 방출가능한 링커(RL)로서 글루쿠로나이드 단위를 포함하는 링커 단위(Q)로 구성된다.
다른 실시형태에서, 캄프토테신-링커 화합물은 화학식 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, CPT6 또는 CPT7의 캄프토테신 화합물, 및 접합된 캄프토테신 화합물에 연결된 리간드 단위를 통해 글루쿠로나이드 단위 이외의 것인 방출가능한 링커(RL)를 포함하는 링커 단위(Q)로 구성된다. 따라서, 어느 한 실시형태에서, 링커 단위는 RL 이외에 리간드 단위에 대한 전구체인 표적화제에 접합하기 위한 작용기를 포함하는 스트레처 단위 전구체(Z')를 포함하며 따라서 RL을 리간드 단위에 연결(직접 또는 간접적으로)할 수 있다. 일부 이러한 실시형태에서, 병렬 커넥터 단위(B)는 측쇄 부속물로서 분획제(S*)를 첨가하는 것이 바람직한 경우이다. 임의의 이러한 실시형태에서, 바람직한 경우, 커넥터 단위(A)가 스트레처 단위와 RL 사이에 더 많은 거리를 추가하기 위해 존재한다.
일 군의 실시형태에서, 캄프토테신-링커 화합물은 화학식 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, CPT6 또는 CPT7의 캄프토테신 화합물, 및 링커 단위(Q)로 구성되고, 여기서 Q는 직접적으로 스트레처 단위 전구체(Z')에 부착되거나 간접적으로 캄프토테신-링커 화합물의 링커 단위(즉, A, S* 및/또는 B(S*))의 개재 성분에 대한 부착을 통해 Z'에 부착된 글루쿠로나이드 단위인 방출가능한 링커(RL)를 포함하고, 여기서 Z'는 표적화제와 공유결합을 형성할 수 있는 작용기로 구성된다.
다른 군의 실시형태에서, 캄프토테신-링커 화합물은 화학식 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, CPT6 또는 CPT7의 캄프토테신, 및 링커 단위(Q)로 구성되며, 여기서 Q는 직접적으로 스트레처 단위 전구체(Z')에 부착되거나 간접적으로 캄프토테신-링커 화합물의 링커 단위(즉, A, S* 및/또는 B(S*))의 개재 성분에 대한 부착을 통해 Z'에 부착된 글루쿠로나이드 단위(RL) 이외의 방출가능한 링커(RL)를 포함하고, 여기서 Z'는 표적화제와 공유결합을 형성할 수 있는 작용기로 구성된다.
캄프토테신 접합체 및/또는 캄프토테신-링커 화합물의 맥락에서, 조립체는 성분 기의 측면에서 가장 잘 설명된다. 일부 절차가 본원에 또한 기술되어 있지만, 접합체 및 화합물을 제조하기 위한 조립 순서 및 일반적인 조건은 당업자에 의해 잘 이해될 것이다.
성분 기
리간드 단위:
본 발명의 일부 실시형태에서, 리간드 단위가 존재한다. 리간드 단위(L-)는 표적 모이어티에 특이적으로 부착하는 표적화제이다. 일 군의 실시형태에서, 리간드 단위는 세포 성분(세포 결합제) 또는 다른 관심 표적 분자에 특이적으로 및 선택적으로 부착한다. 리간드 단위는 특정 표적 세포 집단에 캄프토테신(CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, CPT6 또는 CPT7)을 표적화하고 제시하는 역할을 하며, 리간드 단위가 표적 성분 또는 분자의 존재로 인해 상호작용하고 표적 세포 내(즉, 세포 내) 또는 표적 세포의 주변 내(즉, 세포 외)에서 유리 약물의 후속 방출을 허용한다. 리간드 단위 L은 비제한적으로 단백질, 폴리펩티드 또는 펩티드를 포함한다. 예컨대, 적합한 리간드 단위는 항체, 예컨대, 전장 항체 및 이의 항원 결합 단편, 인터페론, 림포카인, 호르몬, 성장 인자 및 콜로니-자극 인자, 비타민, 영양-수송 분자(예컨대, 비제한적으로 트랜스페린), 또는 임의의 다른 세포 결합 분자 또는 물질을 포함한다. 일부 실시형태에서, 리간드 단위(L)는 항체 또는 비-항체 단백질 표적화제이다.
일 군의 실시형태에서 리간드 단위는 글루쿠로나이드 방출가능한 링커를 포함하는 Q(링커 단위)에 결합된다. 전술한 바와 같이, 또 다른 연결 성분이 본원에 기술된 접합체에 존재하여 캄프토테신 약물 화합물과 리간드 단위 사이에 추가의 공간을 제공하거나(예컨대, 스트레처 단위 및 선택적으로 커넥터 단위, A), 조성물의 용해도를 증가시키기 위한 기여를 제공하기 위한(예컨대, 분획제, S*) 목적을 충족할 수 있다. 일부 이러한 실시형태에서, 리간드 단위는 리간드 단위의 헤테로원자를 통해 링커 단위의 Z에 결합된다. 그 결합을 위해 리간드 단위에 존재할 수 있는 헤테로원자는, 선택적으로 치환된(일 실시형태에서, 표적화 리간드의 1차 또는 2차 아민 작용기로부터 또는 다른 실시형태에서 선택적으로 치환된 아미드 질소로부터), 황(일 실시형태에서, 표적화 리간드의 설프히드릴 기로부터), 산소(일 실시형태에서, 표적화 리간드의 카복실 또는 히드록실기로부터) 및 질소를 포함한다. 이러한 헤테로원자는 리간드의 자연 상태, 예컨대, 자연 발생 항체에서 표적 리간드에 존재할 수 있거나 화학적 변형 또는 생물학적 공학을 통해 표적 리간드에 도입될 수 있다.
일 실시형태에서, 리간드 단위의 전구체인 표적화제는 리간드 단위가 설프히드릴 작용기의 황 원자를 통해 링커 단위에 결합되도록 설프히드릴 작용기를 갖는다.
또 다른 실시형태에서, 리간드 단위에 대한 전구체인 표적화제는 캄프토테신-링커 화합물 중간체의 스트레처 단위 전구체의 활성화된 에스터(이러한 에스터는 비제한적으로 N-히드록시숙시미드, 펜타플루오로페닐, 및 p-니트로페닐 에스터를 포함한다)와 반응할 수 있는 하나 이상의 리신 잔기를 가지며 따라서 리간드 단위의 질소 원자 및 링커 단위의 스트레처 단위의 C=O 기로 구성된 아미드 결합을 제공한다.
또 다른 양태에서, 리간드 단위에 대한 전구체인 표적화제는 하나 이상의 설프히드릴기를 도입하기 위해 화학적 변형을 할 수 있는 하나 이상의 리신 잔기를 갖는다. 이러한 실시형태에서, 리간드 단위는 설프히드릴 작용기의 황 원자를 통해 링커 단위에 공유결합된다. 이러한 방식으로 리신을 변형하는 데 사용될 수 있는 시약은 비제한적으로 N-숙신이미딜 S-아세틸티오아세테이트(SATA) 및 2-이미노티올란 히드로클로라이드(Traut 시약)를 포함한다.
다른 실시형태에서, 리간드 단위에 대한 전구체인 표적화제는 하나 이상의 설프히드릴 작용기를 제공하기 위해 변형될 수 있는 하나 이상의 탄수화물기를 갖는다. 캄프토테신 접합체에서 화학적으로 변형된 리간드 단위는 설프히드릴 작용기의 황 원자를 통해 링커 단위 성분(예컨대, 스트레처 단위)에 결합된다.
또 다른 실시형태에서, 리간드 단위에 대한 전구체인 표적화제는 알데히드(-CHO) 작용기를 제공하기 위해 산화될 수 있는 하나 이상의 탄수화물기를 갖는다(예컨대, 문헌[Laguzza, et al., 1989, J. Med. Chem. 32(3):548-55] 참조). 이러한 실시형태에서, 상응하는 알데히드는 스트레처 단위 전구체 상의 반응성 부위와 상호작용하여 스트레처 단위와 리간드 단위 사이에 결합을 형성한다. 표적화 리간드 단위 상의 반응성 카보닐-함유 작용기와 상호작용할 수 있는 스트레처 단위 전구체 상의 반응성 부위는 비제한적으로 히드라진 및 히드록실아민을 포함한다. 링커 단위(Q) 또는 관련 종의 부착을 위한 단백질의 변형을 위한 다른 프로토콜이 문헌[Coligan et al., Current Protocols in Protein Science, vol. 2, John Wiley & Sons (2002) (본원에 인용되어 포함됨)]에 기술되어 있다.
일부 양태에서, 리간드 단위에 대한 전구체인 표적화제는 스트레처 단위 전구체(Z') 상의 반응성 작용기와의 상호작용에 의해 결합을 형성하여 표적화제에 대한 구조에 상응하는, 스트레처 단위(Z)와 리간드 단위 사이에 공유 결합을 형성할 수 있다. 표적화제와 상호작용하는 능력을 가진 Z'의 작용기는 리간드 단위의 구조에 상응하는 표적화제의 특성에 따라 달라질 것이다. 일부 실시형태에서, 반응성기는 리간드 단위(즉, 스트레처 단위 전구체의 말레이미드 모이어티)를 형성하기 위해 부착되기 전에 스트레처 단위 상에 존재하는 말레이미드이다. 스트레처 단위에 대한 리간드 단위의 공유결합은 Z'의 말레이미드 작용기와 상호작용하여 티오-치환된 숙신이미드를 형성하는 리간드 단위에 대한 전구체인 표적화제의 설프히드릴 작용기를 통해 달성된다. 설프히드릴 작용기는 표적화제의 자연 상태, 예컨대, 자연 발생 잔기로 표적화제에 존재할 수 있거나, 화학적 변형 또는 생물학적 공학을 통해 표적화제에 도입될 수 있다.
또 다른 실시형태에서, 리간드 단위는 항체로부터 유래되고 설프히드릴기는 항체의 사슬간 이황화물의 환원에 의해 생성된다. 따라서, 일부 실시형태에서, 링커 단위는 감소된 사슬간 이황화물로부터 시스테인 잔기에 접합된다.
또 다른 실시형태에서, 리간드 단위는 항체로부터 유래되고 설프히드릴 작용기는 예를 들어 시스테인 잔기의 도입에 의해 항체에 화학적으로 도입된다. 따라서, 일부 실시형태에서, 링커 단위(캄프토테신에 부착되거나 부착되지 않은)는 리간드 단위의 도입된 시스테인 잔기를 통해 리간드 단위에 접합된다.
약물 접합 부위가 접합 용이성, 약물-링커 안정성, 생성된 생체접합체의 생물물리적 특성에 대한 영향 및 시험관 내 세포 독성을 포함하여 다수의 파라미터에 영향을 미칠 수 있다는 것이 생체접합체에 대해 관찰되었다. 약물-링커 안정성과 관련하여, 약물-링커 모이어티와 리간드 단위의 접합 부위는 일부의 경우에 유리 약물의 조기 방출을 유발하는 제거 반응을 겪는 접합된 약물-링커 모이어티의 능력에 영향을 미칠 수 있다. 표적화제에 대한 접합 부위는, 예컨대 환원된 사슬간 이황화물 및 조작된 부위에서 선택된 시스테인 잔기를 포함한다. 일부 실시형태에서, 본원에 기술된 캄프토테신 접합체를 형성하기 위한 접합 방법은 환원된 이황화 결합 유래의 티올 잔기를 사용하는 접합 방법과 비교하여 제거 반응에 덜 민감한 유전자 조작 부위(예컨대, Kabat에 기술된 EU 지수에 따른 위치 239)에서 티올 잔기를 사용한다. 다른 실시형태에서, 본원에 기술된 캄프토테신 접합체를 형성하기 위한 접합 방법은 사슬간 이황화 결합 환원으로부터 생성된 티올 잔기를 사용한다.
일부 실시형태에서, 캄프토테신 접합체는 이의 리간드 단위로서 비-면역반응성 단백질, 폴리펩티드, 또는 펩티드를 포함한다. 따라서, 일부 실시형태에서, 리간드 단위는 비-면역반응성 단백질, 폴리펩티드, 또는 펩티드이다. 예는, 비제한적으로 트랜스페린, 상피세포 성장 인자("EGF"), 봄베신, 가스트린, 가스트린-방출 펩티드, 혈소판-유래 성장 인자, IL-2, IL-6, 형질전환 성장 인자("TGF"), 예컨대 TGF-α 및 TGF-β, 백신 성장 인자("VGF"), 인슐린 및 인슐린-유사 성장 인자 I 및 II, 소마토스타틴, 렉틴 및 저밀도 리포단백질 유래의 아포단백질을 포함한다.
특히 바람직한 리간드 단위는 항체 유래이다. 따라서, 본원에 기술된 임의의 하나의 실시형태에서, 리간드 단위는 항체 유래이다. 유용한 다클론 항체는 면역화된 동물의 혈청 유래의 항체 분자의 이종 집단이다. 유용한 단클론 항체는 특정 항원 결정인자(예컨대, 암 세포 항원, 바이러스 항원, 미생물 항원, 단백질, 펩티드, 탄수화물, 화학물질, 핵산, 또는 이의 단편)에 대한 항체의 동종 집단이다. 일부 실시형태에서 관심 항원에 대한 단클론 항체(mAb)는 당업계에 공지된 임의의 기법에 의해 제조되며, 이는 배양에서 연속적인 세포주에 의해 항체 분자의 생산을 제공한다.
유용한 단클론 항체는 비제한적으로 인간 단클론 항체, 인간화 단클론 항체, 또는 키메라 인간-마우스(또는 다른 종) 단클론 항체를 포함한다. 항체는 전장 항체 및 이의 항원 결합 단편을 포함한다. 인간 단클론 항체는 당업계에 공지된 임의의 다양한 기법에 의해 제조될 수 있다(예컨대, 문헌[Teng et al., 1983, Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 80:7308-7312]; 문헌[Kozbor et al., 1983, Immunology Today 4:72-79]; 및 문헌[Olsson et al., 1982, Meth. Enzymol. 92:3-16]).
본 발명을 수행하는 데 유용한 항체는 무손상 항체 또는 이의 기능적으로 활성인 항체의 단편, 유도체 또는 유사체이며, 여기서 항체 또는 이의 단편은 표적 세포(예컨대, 암세포 항원, 바이러스 항원, 또는 미생물 항원) 또는 종양 세포 또는 매트릭스에 결합하는 다른 항체의 면역특이적 결합을 할 수 있다. 이와 관련하여, "기능적으로 활성"은 단편, 유도체 또는 유사체가 표적 세포에 면역특이적으로 결합할 수 있음을 의미한다. 항원에 결합하는 CDR 서열을 결정하기 위해, 일부 실시형태의 CDR 서열을 함유하는 합성 펩티드가 당업계에 공지된 결합 분석 방법(예컨대, BIA 코어 분석법)에 의해 항원과의 결합 분석에 사용된다(예컨대, 문헌[Kabat et al., 1991, Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, National Institute of Health, Bethesda, Md; Kabat E et al., 1980, J. Immunology 125(3):961-969] 참조).
다른 유용한 항체는, 예컨대 비제한적으로 F(ab')2 단편, Fab 단편, Fvs, 단일쇄 항체, 디아바디, 트리아바디, 테트라바디, scFv, scFv-FV의 단편 또는 항체와 동일한 특이성을 가진 임의의 다른 분자를 포함한다.
추가로, 일부 실시형태에서 표준 재조합 DNA 기술을 사용하여 제조되는, 인간 및 비-인간 부분 둘 모두를 포함하는, 키메라 및 인간화 단클론 항체와 같은 재조합 항체가 유용한 항체이다. 키메라 항체는 예를 들어 뮤린 단클론 및 인간 면역글로불린 불변 영역으로부터 유래된 가변 영역을 갖는 것과 같은, 상이한 동물 종으로부터 상이한 부분이 유래된 분자이다. (예컨대, 미국특허 제4,816,567호 및 미국특허 제4,816,397호 참조, 이들은 그 전체가 인용되어 본원에 포함됨). 인간화 항체는 비-인간 종으로부터의 하나 이상의 상보성 결정 영역(CDR) 및 인간 면역글로불린 분자로부터의 프레임워크 영역을 갖는 비-인간 종 유래의 항체 분자이다. (예컨대, 미국특허 제5,585,089호 참조, 이는 그 전체가 인용되어 본원에 포함됨). 일부 실시형태에서 이러한 키메라 및 인간화 단클론 항체는 당업계에 공지된 재조합 DNA 기술에 의해 생성되며, 예컨대, 국제공개 WO 87/02671호; 유럽 특허출원공개 0 184 187호; 유럽 특허 공개 제0 171 496호; 유럽 특허출원공개 0 173 494호; 국제공개 WO 86/01533호; 미국 특허 제4,816,567호; 문헌[Berter et al., Science (1988) 240: 1041-1043]; 문헌[Liu et al., Proc. Nat'l. Acad. Sci. USA (1987) 84: 3439-3443]; 문헌[Liu et al., J. Immunol. (1987) 139: 3521-3526]; 문헌[Sun et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1987) 84: 214-218]; 문헌[Nishimura et al., Cancer. Res. (1987) 47: 999-1005]; 문헌[Wood et al., Nature (1985) 314: 446-449]; 문헌[Shaw et al., J. Natl. Cancer Inst. (1988) 80: 1553-1559]; 문헌[Morrison, Science (1985) 229: 1202-1207]; 문헌[Oi et al., BioTechniques (1986) 4: 214-221]; 미국 특허 제5,225,539호; 문헌[Jones et al., Nature (1986) 321: 552-525]; 문헌[Verhoeyan et al., Science (1988) 239: 1534-1536]; 및 문헌[Beidler et al., J. Immunol. (1988) 141: 4053-4060]에 기술된 방법을 사용하며, 각각은 그 전체가 인용되어 본원에 포함된다.
일부 경우(예컨대, 비-인간 또는 키메라 항체에 대한 면역원성이 발생할 수 있는 경우) 완전 인간 항체가 보다 바람직하고 일부 실시형태에서는 내인성 면역글로불린 중쇄 및 경쇄 유전자를 발현할 수 없지만, 인간 중쇄 및 경쇄 유전자를 발현할 수 있는 트랜스제닉 마우스를 사용하여 생성된다.
항체는 이러한 공유 부착이 항체가 항원 결합 면역특이성을 유지하도록 허용하는 한, 즉, 임의의 유형의 분자의 공유 부착에 의해 변형된 유사체 및 유도체를 포함한다. 예컨대, 비제한적으로, 항체의 유도체 및 유사체는 예컨대, 글리코실화, 아세틸화, PEG화, 인산화, 아미드화, 공지된 보호/차단기에 의한 유도체화, 단백질 분해 절단, 세포 항체 단위 또는 다른 단백질에 대한 결합 등에 의해 추가로 변형된 것들을 포함한다. 일부 실시형태에서, 이러한 다수의 화학적 변형 중 하나 이상은 비제한적으로 특정 화학 절단, 아세틸화, 포르밀화, 투니카마이신의 존재 하에서 대사 합성 등을 포함하는 공지된 기법에 의해 수행된다. 다른 실시형태에서, 항체의 유사체 또는 유도체는 하나 이상의 비천연 아미노산을 함유하며, 이는 때때로 전술된 화학적 변형 중 하나 이상과 조합된다.
일부 실시형태에서, 항체는 Fc 수용체와 상호작용하는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 변형(예컨대, 치환, 결실 또는 부가)을 갖는다. 이들은 항-Fc 도메인과 FcRn 수용체 사이의 상호작용에 관여하는 것으로 확인된 아미노산 잔기의 변형을 포함한다(예컨대, 국제공개 WO 97/34631호 참조, 이는 그 전체가 인용되어 본원에 포함됨).
일부 실시형태에서, 암 세포 항원에 대한 면역특이성 항체는 상업적으로 수득되거나 재조합 발현 기술과 같은 당업자에게 공지된 방법에 의해 생산된다. 암 세포 항원에 대한 면역특이적인 항체를 코딩하는 뉴클레오티드 서열은 때때로 예컨대 GenBank 데이터베이스 또는 이와 유사한 데이터베이스, 문헌 출판물, 또는 일상적인 클로닝 및 서열분석에 의해 수득된다.
특정 실시형태에서, 암 치료를 위한 항체가 사용된다.
다른 특정 실시형태에서, 자가면역 질환의 치료를 위한 항체가 본 발명의 조성물 및 방법에 따라 사용된다.
특정 실시형태에서, 유용한 항체는 활성화된 림프구에서 발현되는 수용체 또는 수용체 복합체에 결합한다. 일부 실시형태에서, 상기 수용체 또는 수용체 복합체는 면역글로불린 유전자 수퍼패밀리 구성원, TNF 수용체 수퍼패밀리 구성원, 인테그린, 사이토카인 수용체, 케모카인 수용체, 주요 조직적합성 단백질, 렉틴, 또는 보체 대조군 단백질이다.
일부 실시형태에서, 캄프토테신 접합체에 통합되는 항체는 CD19, CD30, CD33, CD70 또는 LIV-1에 특이적으로 결합할 것이다.
캄프토테신 화합물:
본원에 기술된 다양한 실시형태에서 사용되는 캄프토테신 화합물은 다음의 화학식으로 표현된다:
Figure pct00060
Figure pct00061
Figure pct00062
상기 식에서, RB는 -H, C1-C8 알킬, C1-C8 할로알킬, C3-C8 사이클로알킬, (C3-C8 사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, 페닐 및 페닐-C1-C4 알킬-로 이루어진 군으로부터 선택되는 모이어티고;
RC는 C1-C6 알킬 및 C3-C6 사이클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 모이어티이고;
각각의 RF 및 RF'는 -H, C1-C8 알킬, C1-C8 히드록시알킬, C1-C8 아미노알킬, (C1-C4 알킬아미노)-C1-C8 알킬-, N,N-(C1-C4 히드록시알킬)(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N,N-디(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬, N-(C1-C4 히드록시알킬)-C1-C8 아미노알킬-, C1-C8 알킬C(O)-, C1-C8 히드록시알킬-C(O)-, C1-C8 아미노알킬-C(O)-, C3-C10 사이클로알킬, (C3-C10 사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, C3-C10 헤테로사이클로알킬, (C3-C10 헤테로사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, 페닐, 페닐-C1-C4 알킬-, 디페닐 C1-C4 알킬, 헤테로아릴 및 헤테로아릴-C1-C4 알킬로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 모이어티이거나,
RF 및 RF'는 둘 모두 부착되어 질소 원자와 조합되어 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2, -NHC1-C4 알킬 및 N(C1-C4 알킬)2로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 0개 내지 3개의 치환체를 가진 5-원 고리, 6-원 고리 또는 7-원 고리를 형성하고,
여기서 RB, RC, RF 및 RF'의 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 페닐 및 헤테로아릴 모이어티는 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2, -NHC1-C4 알킬 및 -N(C1-C4 알킬)2로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 0개 내지 3개의 치환체로 치환된다.
캄프토테신 접합체 및 본원에 기술된 캄프토테신 링커 화합물의 맥락에서 유용한 또 다른 캄프토테신 화합물은 표 I의 캄프토테신 화합물 14a 내지 14z, 표 J의 화합물 18a 내지 18r, 및 화학식 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, CPT6, CPT7, 14a 내지 14z 및 18a 내지 18r로 제공된 이러한 구조에 대해 5개 고리 또는 6개 고리의 융합된 프레임워크 유사체를 갖는 캄프토테신 화합물이며, 일부 실시형태에서, 산소, 황 또는 선택적으로 치환된 질소 원자가 링커에 혼입될 수 있고 유리 약물로서 캄프토테신 접합체로부터 방출될 수 있는 히드록실, 티올, 아민 또는 아미드 작용기를 포함하나 이에 제한되지 않는 추가 기를 갖는다. 일부 실시형태에서, 작용기는 링커 단위(Q)에 부착하기 위해 이용가능한 캄프토테신 화합물 상의 유일한 부위를 제공한다. 캄프토테신 접합체의 생성된 약물-링커 모이어티는 세포독성, 세포증식억제 또는 면역억제 효과를 발휘하기 위해 리간드 단위에 의해 표적화된 부위에서 활성 유리 약물을 방출할 수 있는 것이다.
"유리 약물"은 약물-링커 모이어티에서 일단 방출되면 존재하는 약물을 의미한다. 일부 실시형태에서, 유리 약물은 방출가능한 링커 또는 스페이서 단위(Y) 기의 단편을 포함한다. 방출가능한 링커 또는 스페이서 단위(Y)의 단편을 포함하는 유리 약물은 방출가능한 링커의 절단을 통해 약물-링커 모이어티의 나머지 부분으로부터 방출되거나, 스페이서 단위(Y) 기에서 결합의 절단을 통해 방출되어 방출 후 생물학적으로 활성이다. 일부 실시형태에서, 유리 약물은 자기-희생 조립체 단위에 부착하기 위한 유리 약물의 작용기가 더 이상 캄프토테신 접합체(이전에 공유된 헤테로원자 제외)의 성분과 연관되지 않는다는 점에서 접합 약물과는 다르다. 예컨대, 알코올-함유 약물의 유리 히드록실 작용기는 D-O*H로 표시될 수 있는 반면 접합된 형태에서는 O*로 지정된 산소 헤테로원자가 자기-희생 단위의 메틸렌 카바메이트 단위에 통합된다. 자기-희생 모이어티가 활성화되고 유리 약물이 방출되면, O*에 대한 공유 결합이 수소 원자로 대체되어 O*로 지정된 산소 헤테로원자가 유리 약물에 -O-H로 존재한다.
링커 단위(Q)
전술된 바와 같이, 일부 실시형태에서, 링커 단위 Q는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된 화학식을 갖고:
-Z-A-RL-; -Z-A-RL-Y-; -Z-A-S*-RL-; -Z-A-B(S*)-RL-;
-Z-A-S*-RL-Y-; 및 -Z-A-B(S*)-RL-Y-;
상기 식에서 Z는 스트레처 단위이고; A는 결합 또는 커넥터 단위이고; B는 분지 단위이고; S*는 분획제고; RL은 글루쿠로나이드 단위인 방출가능한 링커이고; Y는 스페이서 단위이고;
상기 식에서, D의 Q에 대한 부착 지점은 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, CPT6 또는 CPT7 또는 표 I의 화합물 14a 내지 14z 및 표 J의 화합물 18a 내지 18r 중 임의의 하나에 존재하는 히드록실 및 1차 및 2차 아민의 헤테로원자 중 임의의 하나를 통해서이다.
다른 실시형태에서, 링커 단위 Q는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 갖고:
-Z-A-; -Z-A-RL-; -Z-A-S*-W-; -Z-A-B(S*)-W-; -Z-A-S*-RL-; -Z-A-B(S*)-RL-;
-Z-A- S*-W-RL-; 및 -Z-A-B(S*)-W-RL-;
상기 식에서, Z는 스트레처 단위이고, A는 결합 또는 커넥터 단위이고; B는 병렬 커넥터 단위이고; S*는 분획제이고; RL은 글루쿠로나이드 단위 이외의 방출가능한 링커이고; W는 아미노산 단위이고;
여기서 Q로의 부착 지점은 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, CPT6 또는 CPT7 또는 표 I의 화합물 14a 내지 14z 및 표 J의 화합물 18a 내지 18r 중 임의의 하나의 락톤 고리의 히드록실기 치환체를 통해서이다.
일 군의 실시형태에서, Q는 Z-A-S*-RL- 및 -Z-A-S*-RL-Y-로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 갖는다.
다른 군의 실시형태에서, Q는 -Z-A-B(S*)-RL- 및 -Z-A-B(S*)-RL-Y-로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 갖는다.
또 다른 군의 실시형태에서, Q는 -Z-A-RL- 및 -Z-A-RL-Y-로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 갖는다.
스트레처 단위 (Z) 또는 (Z'):
스트레처 단위(Z)는 리간드 단위를 접합체의 나머지 부분에 연결하는 역할을 하는 캄프토테신 접합체 또는 캄프토테신-링커 화합물 또는 다른 중간체의 성분이다. 스트레처 단위와 관련하여, 리간드 단위에 부착하기 전에(즉, 스트레처 단위 전구체, Z'), 표적 리간드의 작용기와 결합을 형성할 수 있는 작용기를 갖는다.
일부 실시형태에서, 스트레처 단위 전구체(Z')는 리간드 단위(예컨대, 항체)에 존재하는 반응성 친핵성기와 상호작용하여 리간드 단위와 링커 단위의 스트레처 단위 사이에 공유결합을 제공할 수 있는 친전자성기를 갖는다. 이러한 능력을 가진 항체 상의 친핵성기는 비제한적으로 설프히드릴, 히드록실 및 아미노 작용기를 포함한다. 항체의 친핵성기의 헤테로원자는 스트레처 단위 전구체의 친전자성기에 반응하며 리간드 단위와 링커 단위 또는 약물-링커 모이어티의 스트레처 단위 사이에 공유 결합을 제공한다. 이러한 목적에 유용한 친전자성기는 비제한적으로 말레이미드, 할로아세트아미드기, 및 NHS 에스터를 포함한다. 친전자성기는 캄프토테신 접합체 또는 리간드 단위-링커 중간체를 형성하기 위해 항체 부착을 위한 편리한 부위를 제공한다.
다른 실시형태에서, 스트레처 단위 전구체는 리간드 단위(예컨대, 항체)에 존재하는 친전자성기에 대해 반응성인 친핵성기를 가진 반응성 부위를 갖는다. 이러한 목적을 위한 항체에 유용한 친전자성기는 알데히드 및 케톤 카보닐기를 포함하지만 이에 제한되지는 않는다. 스트레처 단위 전구체의 친핵성기의 헤테로원자는 항체의 친전자성기과 반응하여 항체에 대한 공유결합을 형성할 수 있다. 이러한 목적을 위한 스트레처 단위 전구체 상의 유용한 친핵성기는 히드라지드, 히드록실 아민, 아미노, 히드라진, 티오세미카바존, 히드라진 카복실레이트 및 아릴히드라지드를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 항체의 친전자성기는 캄프토테신 접합체 또는 리간드 단위-링커 중간체를 형성하기 위해 항체 부착을 위한 편리한 부위를 제공한다.
일부 실시형태에서, 리간드 단위의 황 원자는 표적화 리간드의 티올 작용기와 상응하는 스트레처 단위 전구체의 말레이미드 모이어티의 반응에 의해 형성된 스트레처 단위의 숙신이미드 고리 시스템에 결합된다. 다른 실시형태에서, 리간드 단위의 티올 작용기는 알파 할로아세타미드 모이어티와 반응하여 할로겐 치환체의 친핵성 치환에 의해 황-결합 스트레처 단위를 제공한다.
이러한 실시형태의 대표적인 스트레처 단위는 다음의 구조를 갖는 것들을 포함한다:
Figure pct00063
및
Figure pct00064
상기 식에서, R17에 인접한 물결선은 병렬 커넥터 단위(B) 또는 B가 없는 경우 커넥터 단위(A)로, 또는 B가 없는 경우 분획제(S*)로의 부착을 나타내거나, 다른 물결선은 리간드 단위의 황 원자에 대한 공유결합을 나타내고, R17은 -C1-C10 알킬렌-, C1-C10 헤테로알킬렌-, -C3-C8 카보사이클로-, -O-(C1-C8 알킬렌)-, -아릴렌-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카보사이클로)-, -(C3-C8 카보사이클로)-C1-C10 알킬렌-, -C3-C8 헤테로사이클로-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-, -C1-C10 알킬렌-C(=O)-, C1-C10 헤테로알킬렌-C(=O)-, -C3-C8 카보사이클로-C(=O)-, -O-(C1-C8 알킬렌)-C(=O)-, -아릴렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-C(=O)-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카보사이클로)-C(=O)-, -(C3-C8 카보사이클로)-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C3-C8 헤테로사이클로-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-C(=O)-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-NH-, -C1-C10 헤테로알킬렌-NH-, -C3-C8 카보사이클로-NH-, -O-(C1-C8 알킬렌)-NH-, -아릴렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-NH-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카보사이클로)-NH-, -(C3-C8 카보사이클로)-C1-C10 알킬렌-NH-, -C3-C8 헤테로사이클로-NH-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-NH-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-S-, C1-C10 헤테로알킬렌-S -, -C3-C8 카보사이클로-S -, -O-(C1-C8 알킬렌)-S -, -아릴렌-S-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-S-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-S-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카보사이클로)-S-, -(C3-C8 카보사이클로)-C1-C10 알킬렌-S-, -C3-C8 헤테로사이클로-S-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-S-, 또는 -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-S-이다.
다른 실시형태에서, R17기는 선택적으로 염기성 단위(BU), 예컨대 아미노알킬 모이어티, 예컨대 -(CH2 )xNH2, -(CH2 )xNHRa, 및 -(CH2 )xNRa 2로 치환되고, 여기서 아래첨자 x는 1내지 4의 정수이고 각각의 Ra는 C1-6 알킬 및 C1-6 할로알킬로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되거나, 2개의 Ra기는 이들이 부착된 질소와 결합되어 아제티디닐, 피롤리디닐 또는 피페리디닐기를 형성한다.
예시적인 스트레처 단위는 R17이 -C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C1-C10 헤테로알킬렌-C(=O)-, -C3-C8 카보사이클로-C(=O)-, -O-(C1-C8 알킬렌)-C(=O)-, -아릴렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-C(=O)-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카보사이클로)-C(=O)-, -(C3-C8 카보사이클로)-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C3-C8 헤테로사이클로-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-C(=O)-, 또는 -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-C(=O)-인 화학식 Za 또는 Za-BU의 것이다.
따라서, 일부 바람직한 실시형태는 화학식 Za 및 Za-BU로 표현된다:
Figure pct00065
(Za)
Figure pct00066
(Za-BU)
상기 식에서, 카보닐 탄소 원자에 인접한 물결선은, A 및/또는 B의 존재 여부에 따라 상기 화학식에서 B, A, 또는 S*로의 부착을 나타내고, 다른 물결선은 숙신이미드 고리 탄소 원자의 리간드 단위의 황 원자로의 공유결합을 나타낸다. 합성 동안, 염기성 단위(BU)의 염기성 아미노 작용기는 보호기로 보호될 수 있다.
화학식 Za 및 Za-BU의 스트레처 단위의 보다 바람직한 실시형태는 아래와 같다:
Figure pct00067
Figure pct00068
Figure pct00069
상기 식에서, 카보닐 탄소 원자에 인접한 물결선은, A 및/또는 B의 존재 여부에 따라 상기 화학식에서 B, A, 또는 S*로의 부착을 나타내고, 다른 물결선은 숙신이미드 고리 탄소 원자의 리간드 단위의 황 원자로의 공유결합을 나타낸다.
리간드 단위-치환된 숙신이미드는 가수분해된 형태로 존재할 수 있음을 이해할 것이다. 이러한 형성은 Za 또는 Za-BU의 가수분해에 대해 하기 예시되며, 여기서 이러한 가수분해로부터의 위치이성질체를 나타내는 구조는 화학식 Zb 및 Zc 또는 Zb-BU 및 Zc-BU를 갖는다.
따라서, 다른 바람직한 실시형태에서, 스트레처 단위(Z)는 다음으로 표시된 숙신산-아미드 모이어티로 구성된다:
Figure pct00070
(Zb)
Figure pct00071
(Zc)
Figure pct00072
(Zb-BU)
Figure pct00073
(Zc-BU)
상기 식에서, R17에 결합된 카보닐 탄소 원자에 인접한 물결선 및 산-아미드 모이어티의 탄소 원자에 인접한 물결선은, A 및/또는 B의 존재 여부에 따라 Za 또는 Za-BU로 정의되고, R17은 -C1-C5 알킬렌-이고, Zb-BU 및 Zc-BU에서 알킬렌은 염기성 단위(BU)로 치환되고, 여기서 BU는 -(CH2 )xNH2, -(CH2)xNHRa, 또는 -(CH2)xN(Ra)2이고, 상기 식에서 아래첨자 x는 1내지 4의 정수이고 각각의 Ra는 C1-6 알킬 및 C1-6 할로알킬로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되거나, 양자의 Ra는 이들이 부착된 질소와 함께 아제티디닐, 피롤리디닐 또는 피페리디닐기를 정의한다.
보다 바람직한 실시형태에서, -Z-A-는 말레이미도-알카논산 모이어티 또는 mDPR 모이어티로부터 유도된 모이어티를 포함한다. 예컨대, 국제 공개 WO 2013/173337호를 참조한다. 일 군의 실시형태에서, Z-A-는 말레이미도-프로피오닐 모이어티로부터 유도된다.
따라서 일부 이러한 보다 바람직한 실시형태에서, 스트레처 단위(Z)는 아래와 같이 화학식 Zb', Zc', (R/S)-Zb'-BU, (S)-Zb'-BU, (R/S)-Zc'-BU 또는 (S)-Zc'-BU의 구조로 표시되는 숙신산-아미드 모이어티로 구성된다:
Figure pct00074
상기 식에서, 물결선은 Za 또는 Za-BU로 정의된다.
특히 보다 바람직한 실시형태에서, 스트레처 단위(Z)는 다음의 구조로 표시되는 숙신이미드 모이어티로 구성되거나:
Figure pct00075
다음의 구조로 표시되는 숙신산-아미드 모이어티로 구성된다:
Figure pct00076
또는
Figure pct00077
.
Za, Zb 또는 Zc의 -R17-이 -CH2- 또는 -CH2CH2-인 Za', Zb' 또는 Zc'로 구성되거나, Za-BU, Zb-BU 또는 Zc-BU의 -R17(BU)-가 -CH(CH2NH2)-인 Za'-BU, Zb'-BU 또는 Zc'-BU로 구성된 커넥터 단위(A)에 결합된 예시적인 스트레처 단위는 다음의 구조를 갖고:
Figure pct00078
Figure pct00079
상기 식에서, 물결선은 Za 또는 Za-BU로 정의된다.
리간드 단위(L) 및 커넥터 단위(A)에 결합된 다른 스트레처 단위는 상기 구조를 가지며, 여기서 임의의 하나의 상기 -Za-A-, -Za(BU)-A-, -Za'-A-, -Za'(BU)-A-, -Zb-A-, -Zb(BU)-A-, -Zb'-A-, -Zb'(BU)-, -Zc'-A- 및 Zc'(BU)-A- 구조의 A는 다음의 구조를 가진 병렬 커넥터 단위로 대체된다:
Figure pct00080
상기 식에서 아래첨자 n은 8 내지 24 범위이고; RPEG는 PEG 단위 캡핑기, 바람직하게는 -CH3 또는 -CH2CH2CO2H이고, 별표(*)는 화학식 Za, Za', Zb' 또는 Zc'에 대한 구조에서 상응하는 스트레처 단위로의 공유 결합을 나타내고 물결선은 방출가능한 링커(RL)로의 공유 결합을 나타낸다.
리간드 단위로의 접합 이전의(즉, 스트레처 단위 전구체) 예시적인 스트레처 단위는 말레이미드 모이어티로 구성되며 화학식 Z'a를 포함하는 구조로 표시된다:
Figure pct00081
(Z'a)
상기 식에서, 카보닐 탄소 원자에 인접한 물결선은, A 및/또는 B의 존재 여부에 따라 상기 화학식에서 B, A, 또는 S*로의 부착을 나타내고, R17은 선택적으로 치환된 아미노알킬, 예컨대, -(CH2 )xNH2, -(CH2 )xNHRa, 및 -(CH2 )xN(Ra) 2와 같이 선택적으로 염기성 단위로 치환된 -(CH2)1-5-이고, 상기 식에서 아래첨자 x는 1 내지 4의 정수이고 각각의 Ra는 C1-6 알킬 및 C1-6 할로알킬로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되거나, 2개의 Ra기는 이들이 부착된 질소와 결합되어 아제티디닐, 피롤리디닐 또는 피페리디닐기를 형성한다.
리간드 단위로의 접합 이전의(즉, 스트레처 단위 전구체) 다른 예시적인 스트레처 단위는 말레이미드 모이어티로 구성되며 화학식 Z'a-BU를 포함하는 구조로 표시된다.
Figure pct00082
(Z'a-BU)
상기 식에서, 카보닐 탄소 원자에 인접한 물결선은, A 및/또는 B의 존재 여부에 따라 상기 화학식에서 B, A, 또는 S*로의 부착을 나타내고, R17은 선택적으로 치환된 아미노알킬, 예컨대, -(CH2 )xNH2, -(CH2 )xNHRa, 및 -(CH2 )xN(Ra) 2와 같이 염기성 단위로 치환된 -(CH2)1-5-이고, 상기 식에서 아래첨자 x는 1내지 4의 정수이고 바람직하게는 R17은 CH2- 또는 -CH2CH2-이고 아래첨자 x는 1 또는 2이고, 각각의 Ra는 C1-6 알킬 및 C1-6 할로알킬로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되거나, 2개의 Ra기는 이들이 부착된 질소와 결합되어 아제티디닐, 피롤리디닐 또는 피페리디닐기를 형성한다.
화학식 Z'a의 일부 바람직한 실시형태에서, 스트레처 단위 전구체는 다음의 구조 중 하나로 표시된다:
Figure pct00083
Figure pct00084
또는
Figure pct00085
상기 식에서, 카보닐에 인접한 물결선은 Z'a 또는 Z'a-BU로 정의된다.
보다 바람직한 실시형태에서 스트레처 단위 전구체(Z')는 말레이미드 모이어티로 구성되며 다음의 구조로 표시된다:
Figure pct00086
,
상기 식에서, 카보닐에 인접한 물결선은 Z'a로 정의되며, 아미노기는 아미노 보호기에 의해 선택적으로 양성자화되거나 보호된다.
BU 모이어티를 가진 스트레처 단위에서, 상기 모이어티의 아미노 작용기는 전형적으로 합성 동안 아미노 보호기, 예컨대, 산 불안정한 보호기(예컨대, BOC)에 의해 보호된다.
-R17- 또는 -R17(BU)-가 -CH2-, -CH2CH2- 또는 -CH(CH2NH2)-인 Z'a 또는 Z'a-BU의 구조로 구성된 커넥터 단위에 공유 결합된 예시적인 스트레처 단위 전구체는 다음의 구조를 갖고:
Figure pct00087
Figure pct00088
상기 식에서, 카보닐에 인접한 물결선은 Z'a 또는 Z'a-BU로 정의된다.
커넥터 단위(A)에 결합된 다른 스트레처 단위 전구체는 상기 구조를 가지며 여기서 임의의 하나의 상기 Z'-A- 및 Z'(BU)-A- 구조의 A는 병렬 커넥터 단위 및 다음의 구조를 가진 분획제(-B(S*)-)로 대체된다:
Figure pct00089
상기 식에서 아래첨자 n은 8 내지 24 범위이고; RPEG는 PEG 단위 캡핑기, 바람직하게는 -CH3 또는 -CH2CH2CO2H이고, 별표(*)는 화학식 Za 또는 Za'에 대한 구조에서 상응하는 스트레처 단위 전구체로의 공유 결합을 나타내고 물결선은 RL로의 공유 결합을 나타낸다. 여기에 표시된 것과 같은 예에서, 표시된 PEG기는 서로 다른 길이의 PEG기 및 병렬 커넥터 단위에 대한 부착을 위해 직접 부착되거나 변형될 수 있는 다른 분획제를 포함하는 다양한 분획제의 예시를 의미한다.
다른 실시형태에서, 스트레처 단위는 리간드 단위의 황 원자와 스트레처 단위의 황 원자 사이의 이황화 결합을 통해 리간드 단위에 부착된다. 이러한 실시형태의 대표적인 스트레처 단위는 화학식 Zb의 대괄호 안에 표시된다:
Figure pct00090
(Zb)
상기 식에서, 물결선은 병렬 커넥터 단위(B) 또는 B가 없는 경우 커넥터 단위(A)로 또는 A 및 B가 없는 경우 분획제(S*)로의 부착을 나타내며, R17은 -C1-C10 알킬렌-, C1-C10 헤테로알킬렌-, -C3-C8 카보사이클로-, -O-(C1-C8 알킬렌)-, -아릴렌-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카보사이클로)-, -(C3-C8 카보사이클로)-C1-C10 알킬렌-, -C3-C8 헤테로사이클로-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-, -C1-C10 알킬렌-C(=O)-, C1-C10 헤테로알킬렌-C(=O)-, -C3-C8 카보사이클로-C(=O)-, -O-(C1-C8 알킬렌)-C(=O)-, -아릴렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-C(=O)-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카보사이클로)-C(=O)-,-(C3-C8 카보사이클로)-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C3-C8 헤테로사이클로-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-C(=O)-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-NH-, C1-C10 헤테로알킬렌-NH-, -C3-C8 카보사이클로-NH-, -O-(C1-C8 알킬렌)-NH-, -아릴렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-NH-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카보사이클로)-NH-, -(C3-C8 카보사이클로)-C1-C10 알킬렌-NH-, -C3-C8 헤테로사이클로-NH-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-NH-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-S-, C1-C10 헤테로알킬렌-S-, -C3-C8 카보사이클로-S-, -O-(C1-C8 알킬렌)-S-, -아릴렌-S-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-S-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-S-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카보사이클로)-S-, -(C3-C8 카보사이클로)-C1-C10 알킬렌-S-, -C3-C8 헤테로사이클로-S-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-S-, 또는 -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-S-이다.
또 다른 실시형태에서, 스트레처 단위 전구체의 반응성기는 리간드 단위의 1차 또는 2차 아미노기와 결합을 형성할 수 있는 반응성 부위를 함유한다. 이러한 반응성 부위의 예는 비제한적으로 활성화된 에스터, 예컨대 숙신이미드 에스터, 4-니트로페닐 에스터, 펜타플루오로페닐 에스터, 테트라플루오로페닐 에스터, 무수물, 산 클로라이드, 설포닐 클로라이드, 이소시아네이트 및 이소티오시아네이트를 포함한다. 이러한 실시형태의 대표적인 스트레처 단위는 화학식 Zci, Zcii 및 Zciii의 대괄호 안에 표시된다:
Figure pct00091
(Zci)
Figure pct00092
(Zcii)
Figure pct00093
(Zciii)
상기 식에서, 물결선은 병렬 커넥터 단위(B) 또는 B가 없는 경우 커넥터 단위(A)로 또는 A 및 B가 없는 경우 분획제(S*)로의 부착을 나타내며, R17은 -C1-C10 알킬렌-, C1-C10 헤테로알킬렌-, -C3-C8 카보사이클로-, -O-(C1-C8 알킬렌)-, -아릴렌-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카보사이클로)-, -(C3-C8 카보사이클로)-C1-C10 알킬렌-, -C3-C8 헤테로사이클로-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-, -C1-C10 알킬렌-C(=O)-, C1-C10 헤테로알킬렌-C(=O)-, -C3-C8 카보사이클로-C(=O)-, -O-(C1-C8 알킬렌)-C(=O)-, -아릴렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-C(=O)-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카보사이클로)-C(=O)-,-(C3-C8 카보사이클로)-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C3-C8 헤테로사이클로-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-C(=O)-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-NH-, C1-C10 헤테로알킬렌-NH-, -C3-C8 카보사이클로-NH-, -O-(C1-C8 알킬렌)-NH-, -아릴렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-NH-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카보사이클로)-NH-, -(C3-C8 카보사이클로)-C1-C10 알킬렌-NH-, -C3-C8 헤테로사이클로-NH-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-NH-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-S-, C1-C10 헤테로알킬렌-S-, -C3-C8 카보사이클로-S-, -O-(C1-C8 알킬렌)-S-, -아릴렌-S-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-S-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-S-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카보사이클로)-S-, -(C3-C8 카보사이클로)-C1-C10 알킬렌-S-, -C3-C8 헤테로사이클로-S-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-S-, 또는 -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-S-이다.
또 다른 실시형태에서, 스트레처 단위 전구체의 반응성기는 리간드 단위에 존재하거나 이에 도입되는 친전자체와 반응할 수 있는 반응성 친핵체를 함유한다. 예컨대, 표적화 리간드 상의 탄수화물 모이어티는 과요오드산 나트륨과 같은 시약을 사용하여 약하게 산화될 수 있으며 산화된 탄수화물의 생성된 친전자성 작용기(-CHO)는 반응성 친핵체, 예컨대 히드라지드, 옥심, 1차 또는 2차 아민, 히드라진, 티오세미카바존, 히드라진 카복실레이트, 또는 아릴히드라지드, 예컨대 문헌[Kaneko, T. et al. (1991) Bioconjugate Chem. 2:133-41]에 기술된 것들을 포함하는 스트레처 단위 전구체로 축합될 수 있다. 이러한 실시형태의 대표적인 스트레처 단위는 화학식 Zdi, Zdii, 및 Zdiii의 대괄호 안에 표시된다:
Figure pct00094
(Zdi)
Figure pct00095
(Zdii)
Figure pct00096
(Zdiii)
상기 식에서, 물결선은 병렬 커넥터 단위(B) 또는 커넥터 단위(A), 또는 A 및 B가 없는 경우 분획제(S*)로의 부착을 나타내며, R17은-C1-C10 알킬렌-, C1-C10 헤테로알킬렌-, -C3-C8 카보사이클로-, -O-(C1-C8 알킬렌)-, -아릴렌-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카보사이클로)-, -(C3-C8 카보사이클로)-C1-C10 알킬렌-, -C3-C8 헤테로사이클로-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-, -C1-C10 알킬렌-C(=O)-, C1-C10 헤테로알킬렌-C(=O)-, -C3-C8 카보사이클로-C(=O)-, -O-(C1-C8 알킬렌)-C(=O)-, -아릴렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-C(=O)-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카보사이클로)-C(=O)-, -(C3-C8 카보사이클로)-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C3-C8 헤테로사이클로-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-C(=O)-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-NH-, C1-C10 헤테로알킬렌-NH-, -C3-C8 카보사이클로-NH-, -O-(C1-C8 알킬렌)-NH-, -아릴렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-NH-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카보사이클로)-NH-, -(C3-C8 카보사이클로)-C1-C10 알킬렌-NH-, -C3-C8 헤테로사이클로-NH-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-NH-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-S-, C1-C10 헤테로알킬렌-S -, -C3-C8 카보사이클로-S -, -O-(C1-C8 알킬렌)-S -, -아릴렌-S-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-S-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-S-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카보사이클로)-S-, -(C3-C8 카보사이클로)-C1-C10 알킬렌-S-, -C3-C8 헤테로사이클로-S-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-S-, 또는 -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-S-이다.
본 발명의 일부 양태에서, 스트레처 단위는 약 1000 달톤 이하, 약 500 달톤 이하, 약 200 달톤 이하, 약 30 달톤, 50 달톤 또는 100 달톤 내지 약 1000 달톤, 약 30 달톤, 50 달톤 또는 100 달톤 내지 약 500 달톤, 또는 약 30 달톤, 50 달톤 또는 100 달톤 내지 약 200 달톤의 질량을 갖는다.
커넥터 단위(A)
일부 실시형태에서, 커넥터 단위(A)는 이것이 스트레쳐 단위(Z) 또는 이의 전구체(Z')와 방출가능한 링커 사이에 추가 거리를 추가하는 것이 바람직한 경우 캄프토테신 접합체 또는 캄프토테신-링커 화합물에 포함된다. 일부 실시형태에서, 추가 거리는 RL 내의 활성화를 도울 것이다. 따라서, 커넥터 단위(A)는 존재하는 경우 링커 단위의 프레임워크를 연장한다. 이와 관련하여, 커넥터 단위(A)는 하나의 말단에서 스트레처 단위(또는 이의 전구체)와 공유결합되고 이의 다른 말단에서 선택적인 병렬 커넥터 단위 또는 분획제(S*)에 공유결합된다.
당업자는 커넥터 단위가 링커 단위(Q)의 나머지 부분에 대한 방출가능한 링커의 부착을 제공하는 역할을 하는 임의의 기일 수 있음을 이해할 것이다. 커넥터 단위는, 예를 들어 하나 이상(예컨대, 1 내지 10, 바람직하게는 1, 2, 3 또는 4개)의 천연 또는 비-천연 아미노산, 아미노 알코올, 아미노 알데히드, 디아미노 잔기로 구성될 수 있다. 일부 실시형태에서, 커넥터 단위는 단일 천연 또는 비-천연 아미노산, 아미노 알코올, 아미노 알데히드, 또는 디아미노 잔기이다. 커넥터 단위로서 작용할 수 있는 예시적인 아미노산은 β-알라닌이다.
일부 이러한 실시형태에서, 커넥터 단위는 하기 명시된 화학식을 갖고:
Figure pct00097
Figure pct00098
또는
Figure pct00099
상기 식에서, 물결선은 캄프토테신 접합체 또는 캄프토테신 링커 화합물 내의 커넥터 단위의 부착을 나타내고; 상기 식에서 R111은 수소, p-히드록시벤질, 메틸, 이소프로필, 이소부틸, sec-부틸, -CH2OH, -CH(OH)CH3, -CH2CH2SCH3, -CH2CONH2, -CH2COOH, -CH2CH2CONH2, -CH2CH2COOH, -(CH2)3NHC(=NH)NH2, -(CH2)3NH2, -(CH2)3NHCOCH3, -(CH2)3NHCHO, -(CH2)4NHC(=NH)NH2, -(CH2)4NH2, -(CH2)4NHCOCH3, -(CH2)4NHCHO, -(CH2)3NHCONH2, -(CH2)4NHCONH2, -CH2CH2CH(OH)CH2NH2, 2-피리딜메틸-, 3-피리딜메틸-, 4-피리딜메틸-,
Figure pct00100
,
Figure pct00101
, 및
Figure pct00102
로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되고,
각각의 R100은 수소 또는 -C1-C3 알킬, 바람직하게는 수소 또는 CH3로부터 독립적으로 선택되고; 아래첨자 c는 1 내지 10, 바람직하게는 1 내지 3의 정수로부터 독립적으로 선택된다.
분획제(S*) 또는 -B(S*)-로의 부착을 위한 카보닐기를 가진 대표적인 커넥터 단위는 아래와 같다:
Figure pct00103
상기 식에서 각각의 경우 R13은 -C1-C6 알킬렌-, -C3-C8카보사이클로-, -아릴렌-, -C1-C10 헤테로알킬렌-, -C3-C8헤테로사이클로-, -C1-C10알킬렌-아릴렌-, -아릴렌-C1-C10알킬렌-, -C1-C10알킬렌-(C3-C8카보사이클로)-, -(C3-C8카보사이클로)-C1-C10알킬렌-, -C1-C10알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-, 및 -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되고, 아래첨자 c는 1 내지 4의 범위의 정수이다. 일부 실시형태에서 R13은 -C1-C6 알킬렌이고 c는 1이다.
분획제(S*) 또는 -B(S*)-로의 부착을 위한 카보닐기를 가진 또 다른 대표적인 커넥터 단위는 아래와 같다:
Figure pct00104
상기 식에서, R13은 -C1-C6 알킬렌-, -C3-C8카보사이클로-, -아릴렌-, -C1-C10 헤테로알킬렌-, -C3-C8헤테로사이클로-, -C1-C10알킬렌-아릴렌-, -아릴렌-C1-C10알킬렌-, -C1-C10알킬렌-(C3-C8카보사이클로)-, -(C3-C8카보사이클로)-C1-C10알킬렌-, -C1-C10알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-, 또는 -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-이다. 일부 실시형태에서 R13은 -C1-C6 알킬렌이다.
분획제(S*) 또는 -B(S*)-로의 부착을 위한 NH 모이어티를 가진 대표적인 커넥터 단위는 아래와 같다:
Figure pct00105
상기 식에서 각각의 경우 R13은 -C1-C6 알킬렌-, -C3-C8카보사이클로-, -아릴렌-, -C1-C10 헤테로알킬렌-, -C3-C8헤테로사이클로-, -C1-C10알킬렌-아릴렌-, -아릴렌-C1-C10알킬렌-, -C1-C10알킬렌-(C3-C8카보사이클로)-, -(C3-C8카보사이클로)-C1-C10알킬렌-, -C1-C10알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-, 및 -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되고, 아래첨자 c는 1 내지 14이다. 일부 실시형태에서 R13은 -C1-C6 알킬렌이고 아래첨자 c는 1이다.
분획제(S*) 또는 -B(S*)-로의 부착하는 NH 모이어티를 가진 또 다른 대표적인 커넥터 단위는 아래와 같다:
Figure pct00106
상기 식에서, R13은 -C1-C6 알킬렌-, -C3-C8카보사이클로-, -아릴렌-, -C1-C10 헤테로알킬렌-, -C3-C8헤테로사이클로-, -C1-C10알킬렌-아릴렌-, -아릴렌-C1-C10알킬렌-, -C1-C10알킬렌-(C3-C8카보사이클로)-, -(C3-C8카보사이클로)-C1-C10알킬렌-, -C1-C10알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-, -C(=O)C1-C6 알킬렌- 또는 -C1-C6 알킬렌-C(=O)-C1-C6 알킬렌이다.
커넥터 단위의 선택된 실시형태는 다음의 구조를 가진 것들을 포함한다:
Figure pct00107
또는
Figure pct00108
상기 식에서, 질소에 인접한 물결선은 스트레처 단위(Z) (또는 이의 전구체 Z')로의 공유 결합을 나타내고, 카보닐에 인접한 물결선은 분획제(S*) 또는 -B(S*)-로의 공유 결합을 나타내고; m은 1 내지 6, 바람직하게는 2 내지 6, 보다 바람직하게는 2 내지 4의 범위의 정수이다.
방출가능한 링커(RL)
글루쿠로나이드 단위는 링커 단위 내에서 자기-희생 캐스케이드의 활성화를 통해 리간드 단위 및 링커 단위의 다른 성분으로부터 캄프토테신을 분리하는 메커니즘을 제공한다. 이러한 실시형태에서, 자기-희생 캐스케이드는 글루쿠로나이드 단위의 탄수화물 모이어티 상의 글리코시다제의 작동에 의해 활성화된다. 다수의 당이 본원에서 기술된 실시형태에서 유용하다. 특정 탄수화물 모이어티는 갈락토스, 글루코스, 만노스, 자일로스, 아라비노스, 만노스-6-포스페이트, 푸코스, 람노스, 굴로스, 알로스, 6-디옥시-글루코스, 락토스, 말토스, 셀로비오스, 젠티비오스, 말토트리오스, GlcNAc, GalNAc 및 말토헥사오스의 것들을 포함한다.
글리코시드 단위는 전형적으로 산소 글리코시드 결합을 통해 자기-희생 스페이서에 연결된 당 모이어티(Su)를 포함한다. 산소 글리코시드 결합의 절단은 유리 약물의 방출을 초래하는 자기-희생 반응 순서를 개시한다. 일부 실시형태에서, 자기-희생 서열은 예시적인 글리코시드 단위인 글루쿠로나이드 단위의 β-글루쿠로니다제의 절단으로부터 활성화된다. 글루쿠로나이드 단위는 활성화 단위 및 자기-희생 스페이서 단위를 포함한다. 글루쿠로나이드 단위는 산소 글리코시드 결합을 통해 자기-희생 스페이서 단위에 연결된 당 모이어티(Su)를 포함한다.
일부 실시형태에서, 글루쿠로나이드 단위는 산소 글리코시드 결합(-O'-)을 통해 다음 화학식의 자기-희생 단위(SP)에 연결된 당 모이어티(Su)를 포함한다:
Figure pct00109
상기 식에서, 물결선은 화학식 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5 CPT6 및 CPT7 중 임의의 하나의 약물 단위로, 또는 약물 단위(캄프토테신 화합물) 및 스트레처 단위(Z) 또는 이의 전구체(Z')에 부착된 스페이서 단위로, 경우에 따라 직접 또는 커넥터 단위(A) 또는 병렬 커넥터 단위(B), 분획제(S*) 또는 커넥터 단위 및 병렬 커넥터 단위의 조합을 통해 간접적인 공유 결합을 나타낸다.
산소 글리코시드 결합(-O'-)은 전형적으로 β-글루쿠로니다제-절단 부위(즉, 글루쿠로나이드로부터의 Su), 예컨대 인간, 리소좀 β-글루쿠로니다제에 의해 절단가능한 글리코시드 결합이다.
일부 실시형태에서, 글루쿠로나이드 단위는 화학식 Ga 또는 화학식 Gb로 표시될 수 있다:
Figure pct00110
(Ga) 또는
Figure pct00111
(Gb);
상기 식에서, Su는 당 모이어티이고, -O'-는 산소 글리코시드 결합을 나타내고; R1S, R2S 및 R3S는 독립적으로 수소, 할로겐, -CN, -NO2, 또는 다른 전자 받개기(electron withdrawing group), 또는 전자 주개기(electron donating group)를 나타내고; 상기 식에서 물결선은 직접적 또는 간접적으로 커넥터 단위 또는 병렬 커넥터 단위 또는 커넥터 단위와 병렬 커넥터 단위를 통한 스트레처 단위(Z) (또는 이의 전구체(Z'))로의 부착을 나타내고; #은 캄프토테신 또는 스페이서로의 부착(직접적으로 또는 개입 작용기 또는 다른 모이어티를 통해 간접적으로)을 나타낸다.
바람직한 실시형태에서, R1S, R2S 및 R3S는 수소, 할로겐, -CN, 또는 -NO2.로부터 독립적으로 선택된다. 다른 바람직한 실시형태에서 R1S, R2S 및 R3S는 각각 수소이다. 다른 바람직한 실시형태에서 R2S는 전자 받개기, 바람직하게는 NO2이고, R1S 및 R3S는 각각 수소이다.
일부 이러한 양태에서, 자기-희생 반응 순서를 개시하기 위해 글리코시다제를 절단할 수 있는 활성화될 수 있는 자기-희생기는 화학식 Gc로 표현된다:
Figure pct00112
(Gc)
상기 식에서, R4S는 CH2OH 또는 -CO2H이고, 물결선은 직접적으로 또는 간접적으로 커넥터 단위 또는 병렬 커넥터 단위 또는 커넥터 단위와 병렬 커넥터 단위를 통한 스트레처 단위(Z) (또는 이의 전구체 Z')로의 공유 결합을 나타내고, 해시 마크(#)는 메틸렌 카바메이트 단위로의 공유 결합을 나타낸다.
활성화될 수 있는 자기-희생 모이어티가 글루쿠로나이드 단위로 구성되는 일부 실시형태에서, 이는 다음의 화학식 Gd로 표현된다:
Figure pct00113
(Gd)
상기 식에서, 물결선은 직접적으로 또는 간접적으로 커넥터 단위 또는 병렬 커넥터 단위 또는 커넥터 단위와 병렬 커넥터 단위를 통한 스트레처 단위(Z) (또는 이의 전구체 Z')로의 공유 결합을 나타내고, 해시 마크(#)는 스페이서의 벤질 탄소 또는 캄프토테신에 부착된 작용기로의 공유 결합을 나타낸다.
링커 단위 내에서 자기-희생 캐스케이드의 활성화를 통해 리간드 단위 및 링커 단위의 다른 성분으로부터 캄프토테신을 분리하는 메커니즘을 제공하는 다른 유형의 방출가능한 링커는 페닐렌 성분이 Jm으로 치환된 p-아미노벤질옥시카보닐(PAB) 모이어티로 구성되며, 여기서 치환체의 수를 나타내는 아래첨자 m은 0 내지 4의 범위의 정수이고, 각각의 J는 독립적으로 -C1-C8 알킬, -O-(C1-C8 알킬), -할로겐, -니트로 또는 시아노이다.
일부 실시형태에서, RL은 별도의 가수분해 단계 또는 후속 자기-희생적 사건을 필요로 하지 않고 -D를 방출할 수 있는 자기-희생기이다. 일부 실시형태에서, -RL-은 PAB기의 아미노 질소 원자를 통해 -W-의 카보닐에 연결되고, 카보네이트기를 통해 -D에 직접적으로 연결되는 PAB 모이어티이다. 관련 실시형태에서, -RL-은 PAB기의 아미노 질소 원자를 통해 -A-, -S*- 또는 -B-의 카보닐에 연결되고, 카보네이트기를 통해 -D에 직접적으로 연결되는 PAB 모이어티로 구성된다. 임의의 특정 이론 또는 메커니즘에 의해 구속되지 않고, RL이 카보네이트기를 통해 -D에 직접 부착되는 PAB 모이어티로 구성된 RL로부터의 가능한 약물 방출 메커니즘이 문헌[Toki et al. (2002) J Org. Chem. 67:1866-1872]에 제시되어 있다.
일부 실시형태에서, PAB 모이어티를 함유하는 RL 단위는 다음의 화학식으로 표현된다:
Figure pct00114
상기 식에서, 아래첨자 m은 0 내지 4의 범위의 정수이고, 각각의 J는 독립적으로 -C1-C8 알킬, -O-(C1-C8 알킬), -할로겐, -니트로 또는 -시아노이다.
자기-희생기의 다른 예는 비제한적으로 PAB 모이어티와 전자적으로 유사한 방향족 화합물, 예컨대 2-아미노이미다졸-5-메탄올 유도체(문헌[Hay et al. (1999) Bioorg. Med. Chem. Lett. 9:2237]) 및 오르토 또는 파라-아미노벤질아세탈을 포함한다. 다른 RL은, 치환 및 비치환 4-아미노부티르산 아미드(문헌[Rodrigues et al., Chemistry Biology, 1995, 2, 223]), 적절하게 치환된 바이사이클로[2.2.1] 및 바이사이클로[2.2.2] 고리 시스템(문헌[Storm, et al., J. Amer. Chem. Soc., 1972, 94, 5815]) 및 2-아미노페닐프로피온산 아미드(문헌[Amsberry, et al., J. Org. Chem., 1990, 55, 5867])와 같이, 아미드 결합 가수분해 시 환화를 겪는다.
일 실시형태에서, RL은 분지형 비스(히드록시메틸)스티렌(BHMS) 단위이다.
일부 실시형태에서, RL은 다음의 화학식을 갖고:
Figure pct00115
상기 식에서, **로 표시된 물결선은 D로의 부착 부위를 나타내고; *로 표시된 물결선은 Q의 추가 링커 성분으로의 부착 지점을 나타낸다.
일부 실시형태에서, RL은 약물에 결합된 화학식 I, II 또는 III의 헤테로환 "자기-희생 모이어티"를 포함하고, 세포 내 프로테아제에 의해 가수분해 시 궁극적으로 약물로부터 자기-희생 모이어티를 절단하는 반응을 개시하여 약물이 활성 형태인 접합체로부터 방출되도록 하는 아미드기를 포함한다. 링커 모이어티는 자기-희생 모이어티와 공유되는 아미드 결합에서 펩티드를 절단하는, 세포 내 효소에 대한 기질인 자기-희생 모이어티에 인접한 펩티드 서열, 예컨대 세포 내 프로테아제 예컨대 카텝신(예컨대, 카텝신 B)을 추가로 포함한다. 본원에 개시된 실시형태의 경우, PAB-함유 RL은 CPT1 내지 CPT7 각각, 표 I의 화합물 14 내지 14z 각각 또는 표 J의 화합물 18a 내지 18r 각각에 존재하는 락톤 고리의 3차 히드록실에 직접 부착된다.
일부 실시형태에서, 헤테로환 자기-희생기(RL)는 화학식 I, II 및 III으로부터 선택된다:
Figure pct00116
Figure pct00117
Figure pct00118
상기 식에서, 물결선은 세포-특이적 리간드 및 약물 모이어티에 대한 공유 결합 부위를 나타내고, 상기 식에서 U는 O, S 또는 NR6이고; Q는 CR4 또는 N이고; V1, V2 및 V3은 화학식 II 및 III에 대해 Q, V1 및 V2 중 적어도 하나가 N인 경우 독립적으로 CR4 또는 N이고; T는 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, CPT6 또는 CPT7로부터의 펜딩중인 O이고;
R1, R2, R3 및 R4는 H, F, Cl, Br, I, OH, -N(R5)2, -N(R5)3 +, C1-C8 알킬할라이드, 카복실레이트, 설페이트, 설파메이트, 설포네이트, -SO2R5, -S(=O)R5, -SR5, -SO2N(R5)2, -C(=O)R5, -CO2R5, -C(=O)N(R5)2, -CN, -N3, -NO2, C1-C8 알콕시, C1-C8 할로치환된 알킬, 폴리에틸렌옥시, 포스포네이트, 포스페이트, C1-C8 알킬, C1-C8 치환된 알킬, C2-C8 알케닐, C2-C8 치환된 알케닐, C2-C8 알키닐, C2-C8 치환된 알키닐, C6-C20 아릴, C6-C20 치환된 아릴, C1-C20 헤테로환, 및 C1-C20 치환된 헤테로환으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되거나; 함께 취하는 경우, R2 및 R3은 카보닐(=O), 또는 3 내지 7 탄소 원자의 스피로 카보사이클 고리를 형성하고;
R5 및 R6은 H, C1-C8 알킬, C1-C8 치환된 알킬, C2-C8 알케닐, C2-C8 치환된 알케닐, C2-C8 알키닐, C2-C8 치환된 알키닐, C6-C20 아릴, C6-C20 치환된 아릴, C1-C20 헤테로환, 및 C1-C20 치환된 헤테로환으로부터 독립적으로 선택되고;
상기 식에서, C1-C8 치환된 알킬, C2-C8 치환된 알케닐, C2-C8 치환된 알키닐, C6-C20 치환된 아릴, 및 C2-C20 치환된 헤테로환은 F, Cl, Br, I, OH, -N(R5)2, -N(R5)3 +, C1-C8 알킬할라이드, 카복실레이트, 설페이트, 설파메이트, 설포네이트, C1-C8 알킬설포네이트, C1-C8 알킬아미노, 4-디알킬아미노피리디늄, C1-C8 알킬히드록실, C1-C8 알킬티올, -SO2R5, -S(=O)R5, -SR5, -SO2N(R5)2, -C(=O)R5, -CO2R5, -C(=O)N(R5)2, -CN, -N3, -NO2, C1-C8 알콕시, C1-C8 트리플루오로알킬, C1-C8 알킬, C3-C12 카보사이클, C6-C20 아릴, C2-C20 헤테로환, 폴리에틸렌옥시, 포스포네이트, 및 포스페이트로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환체로 독립적으로 치환된다.
접합체는 세포 외, 또는 자기-희생 모이어티의 아미드 결합을 절단할 수 있는 효소의 부재 시 안정하다. 그러나, 세포에 들어가거나, 적합한 효소에 노출되면, 아미드 결합이 절단되어 자발적인 자기-희생적 반응을 개시하여 자기-희생 모이어티를 약물에 공유적으로 연결하는 결합의 절단을 초래하여, 약물이 약화되거나 약리학적으로 활성인 형태로 방출된다.
본 발명의 접합체에서 자기-희생 모이어티는 하나 이상의 헤테로원자를 포함하여 개선된 용해도를 제공하고, 절단 속도를 개선하고/하거나 접합체의 응집 성향을 감소시킨다. 비-헤테로환, PAB-유형 링커에 비해 본 발명의 헤테로환 자기-희생 링커 구축물의 이러한 개선은 일부 경우에 놀랍고도 예기치 못한 생물학적 특성, 예컨대 증가된 효능, 감소된 독성 및/또는 하나 이상의 바람직한 약물 동력학 및/또는 약동학적 특성의 개선을 초래한다.
화학식 I 내지 화학식 III에서 T는, CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, CPT6, CPT7 중 임의의 하나, 표 I의 화합물 14a 내지 14z, 및 표 J의 화합물 18a 내지 18r의 락톤 고리 부분에 있는 3차 히드록실(-OH)로부터 유도되기 때문에, O인 것으로 이해된다.
이론 또는 임의의 특정 메커니즘에 의해 제한되지 않고, 화학식 I, II 또는 III 링커의 헤테로환 고리 상의 전자-받개기의 존재는 때때로 절단 속도를 조절한다.
일 실시형태에서, 자기-희생 모이어티는 Q가 N이고 U가 O 또는 S인 화학식 I의 기이다. 이러한 기는 접합체의 용해도를 개선하는 비-선형 구조적 특징을 갖는다. 이러한 맥락에서 R은 때때로 H, 메틸, 니트로, 또는 CF3이다. 일 실시형태에서, Q는 N이고 U는 O이고 따라서 형성된 옥사졸 고리 및 R은 H이다. 다른 실시형태에서, Q는 N이고 U는 S이고 따라서 R에서 Me 또는 CF3기로 선택적으로 치환된 티아졸 고리를 형성한다.
다른 예시적인 실시형태에서, 자기-희생 모이어티는 Q가 N이고 V1 및 V2이 독립적으로 N 또는 CH인 화학식 II의 기이다. 다른 실시형태에서, Q, V1 및 V2는 각각 N이다. 다른 실시형태에서, Q 및 V1은 N인 반면 V2는 CH이다. 다른 실시형태에서, Q 및 V2는 N인 반면 V1은 CH이다. 다른 실시형태에서, Q 및 V1은 둘 모두 CH이고 V2는 N이다. 다른 실시형태에서, Q는 N인 반면 V1 및 V2는 둘 모두 CH이다.
다른 실시형태에서, 자기-희생 모이어티는 Q, V1, V2 및 V3이 독립적으로 N 또는 CH인 화학식 III의 기이다. 다른 실시형태에서, Q는 N인 반면 V1, V2 및 V3은 각각 N이다. 다른 실시형태에서, Q V1, 및 V2는 각각 CH인 반면 V3은 N이다. 다른 실시형태에서, Q, V2 및 V3은 각각 CH인 반면 V1은 N이다. 다른 실시형태에서, Q, V1 및 V3은 각각 CH인 반면 V2는 N이다. 다른 실시형태에서, Q 및 V2는 둘 모두 N인 반면 V1 및 V3은 둘 모두 CH이다. 다른 실시형태에서, Q 및 V2는 둘 모두 CH인 반면 V1 및 V3은 둘 모두 N이다. 다른 실시형태에서, Q 및 V3은 둘 모두 N인 반면 V1 및 V2는 둘 모두 CH이다.
이론에 의해 구속되지 않고, 반응식 1a는 유리 약물에서 아민 치환체의 질소 원자를 통해 부착된 캄프토테신 약물 단위에서 글루쿠로나이드 단위는 방출가능한 링커로의 유리 약물 방출 메커니즘을 도시한다.
반응식 1a:
Figure pct00119
분획제(S * ):
본원에 기술된 캄프토테신 접합체는 또한 분획제(S*)를 포함할 수 있다. 분획제 부분은, 예컨대 특정 캄프토테신 약물 단위 또는 링킹 단위 성분의 소수성을 마스킹하는 데 유용하다.
대표적인 분획제는 폴리에틸렌 글리콜(PEG) 단위, 사이클로덱스트린 단위, 폴리아미드, 친수성 펩티드, 폴리사카라이드 및 덴드리머를 포함한다.
폴리에틸렌 글리콜(PEG) 단위, 사이클로덱스트린 단위, 폴리아미드, 친수성 펩티드, 폴리사카라이드 또는 덴드리머가 Q에 포함되는 경우, 기는 "인 라인(in line)" 성분으로서 또는 측쇄 또는 분지형 성분으로서 존재할 수 있다. 분지형 버전이 존재하는 실시형태의 경우, 링커 단위는 전형적으로 링킹 단위의 나머지 부분에, 예컨대, PEG 단위의 간단한 작용성 접합을 제공하는 리신 잔기(또는 병렬 연결 단위, B)를 포함할 것이다.
폴리에틸렌 글리콜 단위(PEG)
다분산 PEG, 단분산 PEG 및 이산 PEG를 사용하여 본 발명의 화합물을 제조할 수 있다. 다분산 PEG는 크기 및 분자량에 있어서 불균질 혼합물인 반면, 단분산 PEG는 전형적으로 불균질 혼합물로부터 정제되며, 따라서 단일 쇄 길이 및 분자량을 제공한다. 바람직한 PEG 단위는 중합 공정을 통하지 않고 단계적으로 합성되는 이산 PEG 화합물이다. 이산 PEG는 한정되고 특정한 사슬 길이를 갖는 단일 분자를 제공한다.
본원에 제공된 PEG 단위는 하나 또는 다중 폴리에틸렌 글리콜 사슬을 포함한다. 일부 실시형태에서 폴리에틸렌 글리콜 사슬은, 예를 들어 선형, 분지형 또는 별 모양 구성으로 함께 연결된다. 전형적으로, 적어도 하나의 PEG 사슬은 링커 단위(예를 들어, B)의 성분 상의 적절한 부위에 대한 공유 결합을 위해 한쪽 말단에서 유도체화되거나 링커 단위 성분(예를 들어, Z-A-S*-RL-, Z-A-S*-RL-Y- ) 중 2개를 공유 결합하기 위해 내부에서 인-라인(예를 들어, 이작용성) 연결기로서 사용될 수 있다. 링커 단위 내의 예시적인 부착은 비-조건부 절단가능한 연결에 의해 또는 조건부 절단가능한 연결을 통해 이루어진다. 예시적인 부착은 아미드 연결, 에터 연결, 에스터 연결, 히드라존 연결, 옥심 연결, 이황화 연결, 펩티드 연결 또는 트리아졸 연결을 통해 이루어진다. 일부 실시형태에서, 링커 단위 내의 부착은 비-조건부 절단가능한 연결에 의해 이루어진다. 일부 실시형태에서, 링커 단위 내의 부착은 에스터 연결, 히드라존 연결, 옥심 연결, 또는 이황화 연결을 통해 이루어지지 않는다. 일부 실시형태에서, 링커 단위 내의 부착은 히드라존 연결을 통해 이루어지지 않는다.
조건부 절단가능한 연결은 혈장에서 순환하는 동안 절단에 실질적으로 민감하지 않지만 세포 내 또는 종양 내 환경에서 절단에 민감한 연결을 의미한다. 비-조건부 절단가능한 연결은 생물학적 환경에서 절단에 실질적으로 민감하지 않은 연결이다. 히드라존의 화학적 가수 분해, 이황화물의 환원, 및 펩티드 결합 또는 글리코시드 결합의 효소적 절단이 조건부 절단가능한 연결의 예이다.
일부 실시형태에서, PEG 단위는 병렬 커넥터 단위 B에 직접 부착될 것이다. PEG 단위의 다른 말단(또는 말단들)은 자유롭고 테더링되지 않으며 메톡시, 카복실산, 알코올 또는 다른 적절한 작용기의 형태를 취할 수 있다. 메톡시, 카복실산, 알코올 또는 기타 적절한 작용기는 PEG 단위의 말단 PEG 서브유닛에 대한 캡으로 작용한다. 테더링되지 않음이란, PEG 단위가 테더링되지 않은 부위에서 캄프토테신, 항체 또는 다른 연결 성분에 부착되지 않음을 의미한다. 당업자는 반복되는 폴리에틸렌 글리콜 서브유닛을 포함하는 것 외에도 PEG 단위가 비-PEG 물질을 함유할 수 있다는 것을 이해할 것이다(예를 들어, 서로에 대한 다중 PEG 사슬의 커플링을 용이하게 하기 위해). 비-PEG 물질은 반복되는 -CH2CH2O- 서브유닛의 일부가 아닌 PEG 단위의 원자를 지칭한다. 본원에 제공된 일부 실시형태에서, PEG 단위는 비-PEG 요소를 통해 서로 부착된 2개의 단량체 PEG 사슬을 포함한다. 본원에 제공된 다른 실시형태에서, PEG 단위는 중앙 코어 또는 병렬 커넥터 단위에 부착된 2개의 선형 PEG 사슬을 포함한다(즉, PEG 단위 자체가 분지형임).
당업자가 이용가능한 다수의 PEG 부착 방법이 있다[예컨대, 문헌[Goodson, et al. (1990) Bio/Technology 8:343] (부위-지시 돌연변이 유발 후 이의 글리코실화 부위에서 인터류킨-2의 PEG화); 유럽 특허 EP 0 401 384호(PEG의 G-CSF로의 커플링); 문헌[Malik, et al., (1992) Exp. Hematol. 20:1028-1035] (트레실 클로라이드를 사용하는 GM-CSF의 PEG화); PCT 공개번호 WO 90/12874호 (시스테인-특이적 mPEG 유도체를 사용하는 재조합적으로 도입된 시스테인 잔기를 함유하는 에리트로포이에틴의 PEG화); 미국 특허 제5,757,078호 (EPO 펩티드의 PEG화); 미국 특허 제5,672,662호 (폴리 (에틸렌 글리콜) 및 생명공학적 적용을 위한 프로피온산 또는 부타논산으로 일치환된 관련 중합체 또는 이들의 기능성 유도체); 미국 특허 제6,077,939호 (펩티드의 N-말단 .알파.-탄소의 PEG화); 문헌[Veronese et al., (1985) Appl. Biochem. Biotechnol 11:141-142] (PEG-니트로페닐카보네이트("PEG-NPC") 또는 PEG-트리클로로페닐카보네이트로 펩티드의 N-말단 α-탄소의 PEG화); 및 문헌[Veronese (2001) Biomaterials 22:405-417] (펩티드 및 단백질 PEG화에 대한 리뷰 논문) 참조].
예컨대, PEG는 반응성기를 통해 아미노산 잔기에 공유 결합될 수 있다. 반응성기는 활성화된 PEG 분자가 결합될 수 있는 기(예컨대, 유리 아미노 또는 카복실기)이다. 예컨대, N-말단 아미노산 잔기 및 리신(K) 잔기는 유리 아미노기를 갖고; C-말단 아미노산 잔기는 유리 카복실기를 갖는다. 티올기(예컨대, 시스테인 잔기에서 발견되는 것)가 또한 PEG 부착을 위한 반응성기로서 유용하다. 또한, 폴리펩티드의 C-말단에 활성화된 기(예컨대, 히드라지드, 알데히드, 및 방향족-아미노기)를 특이적으로 도입하기 위한 효소-보조 방법이 설명되어 있다(문헌[Schwarz, et al. (1990) Methods Enzymol. 184:160]; 문헌[Rose, et al. (1991) Bioconjugate Chem. 2:154]; 및 문헌[Gaertner, et al. (1994) J. Biol. Chem. 269:7224] 참조).
일부 실시형태에서, PEG 분자는 상이한 반응성 모이어티를 갖는 메톡실화 PEG("mPEG")를 사용하여 아미노기에 부착될 수 있다. 이러한 반응성 모이어티의 비-제한적인 예는 숙신이미딜 숙시네이트(SS), 숙신이미딜 카보네이트(SC), mPEG-이미데이트, 파라-니트로페닐카보네이트(NPC), 숙신이미딜 프로피오네이트(SPA), 및 시아누르 클로라이드를 포함한다. 이러한 mPEG의 비-제한적인 예는 mPEG-숙신이미딜 숙시네이트(mPEG-SS), mPEG2-숙신이미딜 숙시네이트(mPEG2-SS); mPEG-숙신이미딜 카보네이트(mPEG-SC), mPEG2-숙신이미딜 카보네이트(mPEG2-SC); mPEG-이미데이트, mPEG-파라-니트로페닐카보네이트(mPEG-NPC), mPEG-이미데이트; mPEG2-파라-니트로페닐카보네이트(mPEG2-NPC); mPEG-숙신이미딜 프로피오네이트(mPEG-SPA); mPEG2-숙신이미딜 프로피오네이트(mPEG2-SPA); mPEG-N-히드록시-숙신이미드(mPEG-NHS); mPEG2-N-히드록시-숙신이미드(mPEG2-NHS); mPEG-시아누르 클로라이드; mPEG2-시아누르 클로라이드; mPEG2-리시놀-NPC, 및 mPEG2-Lys-NHS를 포함한다.
일반적으로, PEG 단위를 구성하는 적어도 하나의 PEG 사슬은 다른 링커 단위 성분에 공유 결합할 수 있도록 기능화된다.
기능화는 예를 들어 아민, 티올, NHS 에스터, 말레이미드, 알킨, 아지드, 카보닐, 또는 일부 다른 작용기를 통한 것을 포함한다. 일부 실시형태에서, PEG 단위는 다른 링커 단위 성분에 커플링을 제공하거나 둘 이상의 PEG 사슬의 커플링을 용이하게 하는 비-PEG 물질(즉, -CH2CH2O-로 구성되지 않은 물질)을 추가로 포함한다.
링커 단위에서 PEG 단위(또는 다른 분획제)의 존재는 생성된 캄프토테신 접합체의 약동학에 두 가지 잠재적인 영향을 미칠 수 있다. 원하는 영향은 캄프토테신 접합체 또는 캄프토테신 자체의 노출된 소수성 요소에 의해 유도된 비-특이적 상호작용의 감소로 인해 발생하는 클리어런스의 감소(결과적으로 노출의 증가)이다. 두 번째 영향은 바람직하지 않으며 캄프토테신 접합체의 분자량 증가로 인해 때때로 발생하는 부피 및 분포 속도의 감소이다.
PEG 서브유닛의 수를 늘리면 접합체의 유체역학적 반경이 증가하여 일반적으로 확산성이 감소한다. 차례로, 감소된 확산성은 전형적으로 종양에 침투하는 캄프토테신 접합체의 능력을 감소시킨다(문헌[Schmidt and Wittrup, Mol Cancer Ther 2009;8:2861-2871]). 이러한 두 가지 경쟁하는 약동학적 효과 때문에, 캄프토테신 접합체 클리어런스를 감소시켜 혈장 노출을 증가시킬 만큼 충분히 크지만 확산성을 크게 감소시킬 만큼 크지는 않은 PEG를 사용하여 의도된 표적 세포 집단에 도달하는 캄프토테신 접합체의 능력을 방해하는 정도로 하는 것이 바람직하다. 특정 약물-링커에 대한 최적의 PEG 크기를 선택하기 위한 방법론에 대해, 본원에 인용되어 포함된 미국특허 US2016/0310612호의 실시예(예컨대, 실시예 1, 18, 및 21)를 참조한다.
일 군의 실시형태에서, PEG 단위는 각각 적어도 2개의 서브유닛, 적어도 3개의 서브유닛, 적어도 4개의 서브유닛, 적어도 5개의 서브유닛, 적어도 6개의 서브유닛, 적어도 7개의 서브유닛, 적어도 8개의 서브유닛, 적어도 9개의 서브유닛, 적어도 10개의 서브유닛, 적어도 11개의 서브유닛, 적어도 12개의 서브유닛, 적어도 13개의 서브유닛, 적어도 14개의 서브유닛, 적어도 15개의 서브유닛, 적어도 16개의 서브유닛, 적어도 17개의 서브유닛, 적어도 18개의 서브유닛, 적어도 19개의 서브유닛, 적어도 20개의 서브유닛, 적어도 21개의 서브유닛, 적어도 22개의 서브유닛, 적어도 23개의 서브유닛, 또는 적어도 24개의 서브유닛을 가진 하나 이상의 선형 PEG 사슬을 포함한다. 바람직한 실시형태에서, PEG 단위는 총 적어도 4개의 서브유닛, 적어도 6개의 서브유닛, 적어도 8개의 서브유닛, 적어도 10개의 서브유닛, 또는 적어도 12개의 서브유닛의 조합을 포함한다. 일부 이러한 실시형태에서, PEG 서브유닛은 총 약 72개의 서브유닛 이하의 조합, 바람직하게는 총 약 36개의 서브유닛 이하의 조합을 포함한다.
다른 군의 바람직한 실시형태에서, PEG 단위는 총 4 내지 72개, 4 내지 60개, 4 내지 48개, 4 내지 36개 또는 4 내지 24개의 서브유닛, 5 내지 72개, 5 내지 60개, 5 내지 48개, 5 내지 36개 또는 5 내지 24개의 서브유닛, 6 내지 72개, 6 내지 60개, 6 내지 48개, 6 내지 36개 또는 6 내지 24개의 서브유닛, 7 내지 72개, 7 내지 60개, 7 내지 48개, 7 내지 36개 또는 7 내지 24개의 서브유닛, 8 내지 72개, 8 내지 60개, 8 내지 48개, 8 내지 36개 또는 8 내지 24개의 서브유닛, 9 내지 72개, 9 내지 60개, 9 내지 48개, 9 내지 36개 또는 9 내지 24개의 서브유닛, 10 내지 72개, 10 내지 60개, 10 내지 48개, 10 내지 36개 또는 10 내지 24개의 서브유닛, 11 내지 72개, 11 내지 60개, 11 내지 48개, 11 내지 36개 또는 11 내지 24개의 서브유닛, 12 내지 72개, 12 내지 60개, 12 내지 48개, 12 내지 36개 또는 12 내지 24개의 서브유닛, 13 내지 72개, 13 내지 60개, 13 내지 48개, 13 내지 36개 또는 13 내지 24개의 서브유닛, 14 내지 72개, 14 내지 60개, 14 내지 48개, 14 내지 36개 또는 14 내지 24개의 서브유닛, 15 내지 72개, 15 내지 60개, 15 내지 48개, 15 내지 36개 또는 15 내지 24개의 서브유닛, 16 내지 72개, 16 내지 60개, 16 내지 48개, 16 내지 36개 또는 16 내지 24개의 서브유닛, 17 내지 72개, 17 내지 60개, 17 내지 48개, 17 내지 36개 또는 17 내지 24개의 서브유닛, 18 내지 72개, 18 내지 60개, 18 내지 48개, 18 내지 36개 또는 18 내지 24개의 서브유닛, 19 내지 72개, 19 내지 60개, 19 내지 48개, 19 내지 36개 또는 19 내지 24개의 서브유닛, 20 내지 72개, 20 내지 60개, 20 내지 48개, 20 내지 36개 또는 20 내지 24개의 서브유닛, 21 내지 72개, 21 내지 60개, 21 내지 48개, 21 내지 36개 또는 21 내지 24개의 서브유닛, 22 내지 72개, 22 내지 60개, 22 내지 48개, 22 내지 36개 또는 22 내지 24개의 서브유닛, 23 내지 72개, 23 내지 60개, 23 내지 48개, 23 내지 36개 또는 23 내지 24개의 서브유닛, 또는 24 내지 72개, 24 내지 60개, 24 내지 48개, 24 내지 36개 또는 24개의 서브유닛의 조합을 포함한다.
본원에서 제공된 임의의 실시형태에서 사용될 수 있는 예시적인 선형 PEG 단위는 다음과 같다:
Figure pct00120
상기 식에서, 물결선은 병렬 커넥터 단위(B)에 부착된 부위를 나타내고, 각각의 n은 4 내지 72, 6 내지 72, 8 내지 72, 10 내지 72, 12 내지 72, 6 내지 24, 또는 8 내지 24로부터 독립적으로 선택된다. 일부 실시형태에서, 아래첨자 b는 약 4, 약 8, 약 12, 또는 약 24이다.
본원에 기술된 바와 같이, PEG 단위는 생성된 캄프토테신 접합체의 클리어런스를 개선하지만 종양 내로 침투하는 캄프토테신 접합체의 능력에 크게 영향을 미치지 않도록 선택된다. 실시형태에서, 사용을 위해 선택될 PEG 단위는 바람직하게는 4개의 서브유닛 내지 약 24개의 서브유닛, 보다 바람직하게는 약 4개의 서브유닛 내지 약 12개의 서브유닛을 가질 것이다.
본 개시내용의 바람직한 실시형태에서, PEG 단위는 약 300 달톤 내지 약 5 킬로달톤; 약 300 달톤, 내지 약 4 킬로달톤; 약 300 달톤, 내지 약 3 킬로달톤; 약 300 달톤, 내지 약 2 킬로달톤; 또는 약 300 달톤, 내지 약 1 킬로달톤이다. 일부 이러한 양태에서, PEG 단위는 적어도 6개의 서브유닛 또는 적어도 8개의 서브유닛, 10개의 서브유닛 또는 12개의 서브유닛을 갖는다. 일부 이러한 양태에서, PEG 단위는 적어도 6개의 서브유닛 또는 적어도 8개, 10개 또는 12개의 서브유닛이지만 72개의 서브유닛 이하, 바람직하게는 36개의 서브유닛 이하를 갖는다.
PEG 서브유닛을 지칭할 때, 그리고 문맥에 따라, 서브유닛의 수는 평균 수를 나타낼 수 있음을 이해할 것이며, 예컨대, 다분산 PEG를 사용하는 캄프토테신 접합체 또는 캄프토테신-링커 화합물의 집단을 지칭할 때이다.
병렬 커넥터 단위(B):
일부 실시형태에서, 캄프토테신 접합체 및 캄프토테신 링커 화합물은 분획제(-B(S*)-와 같은 링커 단위로 표시됨)로의 부착 지점을 제공하기 위한 병렬 커넥터 단위를 포함할 것이다. 일반적인 실시형태에서, PEG 단위는 아래 제시된 바와 같이 리신과 같은 병렬 커넥터 단위에 부착될 수 있으며, 여기서 물결선 및 별표는 캄프토테신 접합체 또는 캄프토테신 링커 화합물의 링커 단위 내의 공유 결합을 나타낸다:
Figure pct00121
스페이서 단위(Y):
일부 실시형태에서, 본원에서 제공된 캄프토테신 접합체는 방출가능한 링커(RL)와 캄프토테신 사이에 스페이서(Y)를 가질 것이다. 스페이서 단위는 캄프토테신으로의 RL의 부착을 용이하게 하는 작용기일 수 있거나, 접합체의 나머지 부분(예컨대, 메틸렌 카바메이트 단위)으로부터 캄프토테신 단위의 방출을 추가로 용이하게 하는 추가 구조 성분을 제공할 수 있다.
유리 약물로서 캄프토테신 단위의 방출을 추가로 용이하게 하기 위한 이러한 실시형태에서 예시적인 스페이서 단위는 다음의 화학식으로 표시된다:
Figure pct00122
(a)
Figure pct00123
(a')
Figure pct00124
(a")
Figure pct00125
(b)
Figure pct00126
(b')
상기 식에서 EWG는 전자-받개기를 나타내고, R1은 -H 또는 C1-C4 알킬이고 아래첨자 n은 1 또는 2이다. 일부 실시형태에서, EWG는 -CN, -NO2, -CX3, -X, C(=O)OR', -C(=O)N(R')2, -C(=O)R', -C(=O)X, -S(=O)2R', -S(=O)2OR', -S(=O)2NHR', -S(=O)2N(R')2, -P(=O)(OR')2, -P(=O)(CH3)NHR', -NO, -N(R')3 +으로 이루어진 군으로부터 선택되고, 여기서 X는 -F, -Br, -Cl, 또는 -I이고 R'는 수소 및 C1-C6 알킬로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 화학식 (a), 화학식 (a'), 화학식 (a''), 화학식 (b) 및 화학식 (b') 각각의 질소 원자에 인접한 물결선은 RL과의 공유결합 지점이고 화학식 (b) 및 화학식 (b')의 카보닐 탄소 원자에 인접한 물결선은 히드록실 또는 화학식 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, CPT 6 또는 CPT7의, 또는 표 I의 14a 내지 14z 중 임의의 하나의 화합물의 또는 표 J의 18a 내지 18r 중 임의의 하나의 화합물의 캄프토테신 화합물의 1차 또는 2차 아민의 헤테로원자의 공유결합 지점이고, 여기서
화학식 (a), 화학식 (a') 및 화학식 (a")는 예시적인 메틸렌 카바메이트 단위를 나타내고, 여기서 T*은 히드록실 또는 화학식 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, CPT 6 또는 CPT7의, 또는 표 I의 14a 내지 14z 중 임의의 하나의 화합물의 또는 표 J의 18a 내지 18r 중 임의의 하나의 화합물의 캄프토테신 화합물의 1차 또는 2차 아민 작용기로부터의 헤테로원자이고, 여기서 T*에 인접한 물결선은 캄프토테신 화합물에 대한 구조에 상응하는 캄프토테신 약물 단위의 나머지 부분에 대한 공유결합 지점이다.
또 다른 실시형태에서, 메틸렌 카바메이트 단위인 스페이서 단위는 다음의 화학식으로 표현된다:
Figure pct00127
(a1)
Figure pct00128
(a1')
Figure pct00129
(b1),
상기 식에서, 각각의 R이 독립적으로 -H 또는 C1-C4 알킬인 화학식 (a1) 및 화학식 (a1')은 메틸렌 카바메이트 단위를 나타내고, 여기서 O*은 화학식 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, CPT 6 또는 CPT7의, 또는 표 I의 14a 내지 14z 중 임의의 하나의 화합물의 또는 표 J의 18a 내지 18r 중 임의의 하나의 화합물의 캄프토테신 화합물의 락톤 고리에 대한 히드록실 치환체, 또는 화학식 CPT5 또는 CPT7의 캄프토테신 화합물의 다른 히드록실 치환체 또는 CPT6의 RF 또는 RF'의 히드록실 치환체로부터의 산소 원자이고, 이는 RF 및 RF' 중 적어도 하나가 C1-C8 히드록시알킬 N,N-(C1-C4 히드록시알킬)(C1-C4 알킬)-아미노-C1-C8 알킬- 또는 N-C1-C4 히드록시알킬-C1-C8 아미노알킬-, C1-C8 알킬C(O)-인 경우이며,
화학식 (a1), 화학식 (a1') 및 화학식 (b1)의 물결선은 각각 화학식 (a), 화학식 (a') 및 화학식 (b)로부터의 이전의 의미를 갖는다. 화학식 (a1')에서, -CH2CH2N+(R)2 모이어티는 양성자화된 형태의 예시적인 염기성 단위를 나타낸다.
이론에 의해 구속되지 않고, 반응식 1b는 자기-희생 모이어티를 가진 캄프토테신 접합체에서 메틸렌 카바메이트 단위에 부착된 캄프토테신으로부터의 유리 약물 방출 메커니즘을 도시한다. 상기 반응식에서, T*은 히드록실 또는 메틸렌 카바메이트 단위에 포함된 캄프토테신 화합물의 1차 또는 2차 아민으로부터의 헤테로원자이다.
반응식 1b:
Figure pct00130
아래첨자 '"p"
본 발명의 일 군의 실시형태에서, 아래첨자 p는 개별적인 캄프토테신 접합체의 리간드 단위 상의 약물 링커 모이어티의 수를 나타내고 바람직하게는 1 내지 16, 1 내지 12, 1 내지 10, 또는 1 내지 8의 범위의 정수이다. 개별적인 캄프토테신 접합체는 캄프토테신 접합체 화합물로도 지칭될 수 있다. 상기 군의 실시형태에서, 개별적인 캄프토테신 접합체의 리간드 단위에 접합된 1개, 2개, 3개, 4개, 5개, 6개, 7개, 8개, 9개, 10개, 11개, 12개, 13개, 14개, 15개, 또는 16개의 약물 링커 모이어티가 존재한다. 본 발명의 다른 군의 실시형태에서, 캄프토테신 접합체는 각각의 리간드 단위에 결합된 캄프토테신 약물 링커 모이어티의 수를 제외하고 실질적으로 동일한 개별적인 캄프토테신 접합체 화합물의 집단(즉, 캄프토테신 접합체 조성물)을 기술하므로 아래첨자 p는 캄프토테신 접합체 조성물의 리간드 단위에 결합된 캄프토테신 약물 링커 모이어티의 평균 수를 나타낸다. 상기 군의 실시형태에서, 아래첨자 p는 1 내지 약 16, 1 내지 약 12, 1 내지 약 10, 또는 1 내지 약 8, 2 내지 약 16, 2 내지 약 12, 2 내지 약 10, 또는 2 내지 약 8의 범위의 수이다. 일부 실시형태에서, 아래첨자 p의 값은 평균 약물 로딩 및 조성물에서 우세한 ADC의 약물 로딩을 지칭한다.
일부 실시형태에서, 접합은 사슬 간 이황화물을 통해 이루어질 것이고 리간드 단위가 되는 표적화제에 접합된 1개 내지 약 8개의 캄프토테신 링커 화합물 분자가 있을 것이다. 일부 실시형태에서, 접합은 도입된 시스테인 잔기 및 사슬 간 이황화물을 통해 이루어질 것이며 리간드 단위에 접합된 1 내지 10 또는 1 내지 12 또는 1 내지 14 또는 1 내지 16개의 캄프토테신 링커 화합물 모이어티가 있을 것이다. 일부 실시형태에서, 접합은 도입된 시스테인 잔기를 통해 이루어질 것이며 리간드 단위에 접합된 2개 또는 4개 캄프토테신 링커 화합물 분자가 있을 것이다.
Figure pct00131
mDPR = 말레이미도-아미노프로피오닐:
Figure pct00132
mPR = 말레이미도-프로피오닐:
Figure pct00133
PropargOPr = -(C=O)CH2CH2OCH2C≡CH
Figure pct00134
Figure pct00135
캄프토테신 접합체 혼합물 및 조성물
본 발명은 본원에 기술된 임의의 캄프토테신 접합체를 포함하는 캄프토테신 접합체 혼합물 및 약학 조성물을 제공한다. 혼합물 및 약학 조성물은 다수의 접합체를 포함한다. 일부 실시형태에서, 혼합물 또는 조성물 중의 각각의 접합체는 동일하거나 실질적으로 동일하지만, 혼합물 또는 조성물 중의 리간드 상의 약물-링커의 분포는 약물 로딩 뿐만 아니라 다양할 수 있다. 예컨대, 일부 실시형태에서 표적화제로서 약물-링커를 항체에 접합시키는 데 사용되는 접합 기술은 혼합물 및/또는 조성물 내의 항체(리간드 단위) 상의 캄프토테신 링커 화합물의 분포와 관련하여 이질적인 조성물 또는 혼합물을 생성한다. 일부 이러한 실시형태에서, 이러한 분자의 혼합물 또는 조성물 중의 항체 분자 각각에 대한 캄프토테신 링커 혼합물의 로딩은 1 내지 16의 범위인 정수이다.
이러한 실시형태에서, 전체로서 조성물을 언급할 때, 약물-링커의 로딩은 1 내지 약 16 범위의 수이다. 조성물 또는 혼합물 내에서, 때때로 적은 비율의 비접합 항체가 존재한다. 혼합물 또는 조성물 중의 리간드 단위 당 약물-링커의 평균 수(즉, 평균 약물-로딩)는 표적 세포에 전달할 수 있는 약물의 최대 양과 관련이 있으므로 중요한 속성이다. 전형적으로, 평균 약물 로딩은 1, 2 또는 약 2, 3 또는 약 3, 4 또는 약 4, 5 또는 약 5, 6 또는 약 6, 7 또는 약 7, 8 또는 약 8, 9 또는 약 9, 10 또는 약 10, 11 또는 약 11, 12 또는 약 12, 13 또는 약 13, 14 또는 약 14, 15 또는 약 15, 16 또는 약 16이다.
일부 실시형태에서, 혼합물 및 약학 조성물은 다수의(즉, 집단) 접합체를 포함하지만, 접합체는 동일하거나 실질적으로 동일하고, 혼합물 및/또는 조성물 내의 리간드 분자 상의 약물-링커의 분포에 대해 및 혼합물 및/또는 조성물 내의 리간드 분자 상의 약물-링커의 로딩에 대해 실질적으로 균질하다. 일부 이러한 실시형태에서, 항체 리간드 단위 상의 약물-링커의 로딩은 2 또는 4이다. 조성물 또는 혼합물 내에서, 적은 비율의 비접합 항체가 또한 존재할 수 있다. 이러한 실시형태 상의 평균 약물 로딩은 약 2 또는 약 4이다. 전형적으로, 이러한 조성물 및 혼합물은 부위-특이적 접합 기술의 사용으로 발생하고 접합은 도입된 시스테인 잔기로 인한 것이다.
접합 반응으로부터의 제제에서 리간드 단위 당 캄프토테신 또는 캄프토테신-링커 화합물의 평균 수는 전형적으로 통상적인 수단, 예컨대 질량 분석법, ELISA 분석, HPLC(예컨대, HIC)로 분석한다. 이러한 경우, 아래첨자 p에 대한 캄프토테신 접합체의 정량적 분포가 일반적으로 결정된다. 다른 예에서, 균질한 캄프토테신 접합체의 분리, 정제, 및 특성 분석은 전형적으로 역상 HPLC 또는 전기영동과 같은 통상적인 수단으로 달성된다.
일부 실시형태에서, 조성물은 본원에 기술된 캄프토테신 접합체 및 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약학 조성물이다. 일부 이러한 실시형태에서, 약학 조성물은 액체 형태이다. 다른 이러한 실시형태에서, 약학 조성물은 동결건조된 분말이다.
약학 조성물을 포함하는 조성물은 정제된 형태로 제공될 수 있다. 본원에서 사용된 "정제된"은 단리될 때, 단리물이 단리물의 중량을 기준으로 적어도 95%, 다른 실시형태에서 적어도 98%의 접합체를 함유함을 의미한다.
사용 방법
암 치료
캄프토테신 접합체는 종양 세포 또는 암 세포의 증식을 억제하거나, 종양 또는 암 세포의 세포사멸을 유발하거나, 환자의 암 치료에 유용하다. 캄프토테신 접합체는 암 치료를 위한 다양한 환경에서 그에 따라 사용된다. 캄프토테신 접합체는 종양 세포 또는 암 세포에 약물을 전달하기 위해 의도된다. 이론에 의해 구속되지 않고, 일 실시형태에서, 캄프토테신 접합체의 리간드 단위는 암-세포 또는 종양-세포-관련 항원에 결합하거나 연관되고, 캄프토테신 접합체는 수용체-매개 세포 내 이입 또는 다른 내재화 메커니즘을 통해 종양 세포 또는 암 세포 내로 흡수(내재화)된다. 일부 실시형태에서, 항원은 종양 세포 또는 암 세포에 부착되거나 종양 세포 또는 암 세포와 관련된 세포 외 매트릭스 단백질이다. 일단 세포 내에서 활성화 단위의 활성화를 통해 약물이 세포 내로 방출된다. 대안적인 실시형태에서, 유리 약물은 종양 세포 또는 암 세포 외부의 캄프토테신 접합체로부터 방출되고, 유리 약물은 후속적으로 세포에 침투한다.
일 실시형태에서, 리간드 단위는 종양 세포 또는 암 세포와 결합한다.
다른 실시형태에서, 리간드 단위는 종양 세포 또는 암 세포의 표면 상인 종양 세포 또는 암 세포 항원과 결합한다.
다른 실시형태에서, 리간드 단위는 종양 세포 또는 암 세포와 관련된 세포 외 매트릭스 단백질인 종양 세포 또는 암 세포 항원과 결합한다.
특정 종양 세포 또는 암 세포에 대한 리간드 단위의 특이성은 가장 효과적으로 치료되는 종양 또는 암을 결정하는 데 중요한 고려사항이다. 예컨대, 조혈 암에 존재하는 암 세포 항원을 표적화하는 캄프토테신 접합체는 혈액 악성 종양을 치료하는 데 유용하다(예컨대, 항-CD30, 항-CD70, 항-CD19, 항-CD33 결합 리간드 단위(예컨대, 항체)는 혈액 악성 종양을 치료하는 데 유용함). 일부 실시형태에서 고형 종양에 존재하는 암 세포 항원을 표적화하는 캄프토테신 접합체는 이러한 고형 종양을 치료하는 데 유용하다.
캄프토테신 접합체로 치료되도록 의도되는 암은, 비제한적으로 조혈 암, 예컨대 림프종(호지킨 림프종 및 비-호지킨 림프종) 및 백혈병 및 고형 종양을 포함한다. 조혈 암의 예는 소포 림프종, 역형성 대세포 림프종, 맨틀 세포 림프종, 급성 골수모구 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 만성 림프구 백혈병, 광범위 거대 B 세포 림프종, 및 다발 골수종을 포함한다. 고형 종양의 예는 섬유육종, 점액육종, 지방육종, 연골육종, 골육종, 척삭종, 혈관육종, 내피육종, 림프혈관육종, 림프관내피육종, 활막종, 중피세포종, 유윙 종양, 평활근육종 횡문근육종, 대장암, 대장결장암, 신장암, 췌장암, 골암, 유방암, 난소암, 전립선암, 식도암, 위암, 구강암, 비강암, 인후암, 편평세포암종, 기저 세포 암종, 선암종, 땀샘 암종, 피지선 암종, 유두상 암종, 유두 선암종, 낭선종, 속질암종, 기관지암종, 신장 세포암종, 간암, 담도암, 융모암, 정상피종, 태생기암, 빌름스 종양, 자궁경부암, 자궁암, 고환암, 소세포 폐 암종, 방광 암종, 폐암, 상피암종, 신경교종, 교모세포종, 성상세포종, 수모세포종, 두개인두종, 뇌실막세포종, 송과체종, 혈관모세포종, 속귀신경집종, 희소돌기신경교종, 뇌수막종, 신경모세포종, 및 망막모세포종을 포함한다.
바람직한 실시형태에서, 치료되는 암은 상기 열거된 림프종 및 백혈병 중 임의의 하나이다.
암의 다중-양상 요법
비제한적으로 종양, 전이 또는 조절되지 않은 세포 성장을 특징으로 하는 다른 질병 또는 장애를 포함하는 암은 유효량의 캄프토테신 접합체의 투여에 의해 치료 또는 억제되도록 의도된다.
일 군의 실시형태에서, 유효량의 캄프토테신 접합체 및 화학요법제를 이를 필요로 하는 환자에 투여하는 것을 포함하는 암 치료 방법이 제공된다. 일 실시형태에서, 화학요법제는 암 치료가 그 제제에 대해 불응성인 것으로 확인되지 않은 것이다. 다른 실시형태에서, 화학요법제는 암 치료가 그 제제에 대해 불응성인 것으로 확인된 것이다.
다른 군의 실시형태에서, 캄프토테신 접합체는 암 치료로서 수술도 받은 환자에게 투여된다. 이러한 실시형태에서, 화학요법제는 전형적으로 일련의 세션에 걸쳐 투여되거나, 이러한 표준 치료 화학요법제의 하나 이상의 화학요법제의 조합이 투여된다.
두 군 중 하나의 실시형태에서, 환자는 또한 방사선요법과 같은 추가 치료를 받는다. 특정 실시형태에서, 캄프토테신 접합체는 화학요법제 또는 방사선 요법과 동시에 투여된다. 다른 특정 실시형태에서, 화학요법제 또는 방사선 치료는 캄프토테신 접합체의 투여 전 또는 후에 투여된다.
추가로, 화학요법제 또는 방사선 치료가 치료되는 대상에 대해, 예컨대 허용할 수 없거나 견딜 수 없는 부작용을 초래하는 것과 같이 너무 독성인 것으로 입증되었거나 입증할 수 있는 경우 화학요법 또는 방사선요법의 대안으로 캄프토테신 접합체를 사용하는 암 치료 방법이 제공된다. 치료받는 환자는 어떠한 치료가 허용 가능하고 견딜 수 있는지에 따라 수술, 방사선 치료 또는 화학요법과 같은 다른 암 치료법으로 선택적으로 치료된다.
자가면역 질환의 치료
캄프토테신 접합체는 자가면역 질환을 일으키는 세포의 원치 않는 복제를 사멸시키거나 억제하거나 자가면역 질환의 치료에 대해 유용하다.
이에 따라 캄프토테신 접합체는 환자에서 자가면역 질환의 치료를 위한 다양한 환경에서 사용된다. 캄프토테신 접합체는 전형적으로 캄프토테신 약물을 표적 세포에 전달하는 데 사용된다. 이론에 의해 구속되지 않고, 일 실시형태에서, 캄프토테신은 전염증성 또는 부적절하게 자극된 면역 세포의 표면 상의 항원과 결합하고, 이어서 캄프토테신 접합체는 수용체-매개 세포 내 이입을 통해 표적 세포 내부로 흡수된다. 일단 세포 내부에서, 링커 단위가 절단되어 캄프토테신 약물 단위가 유리 약물로서 방출된다. 캄프토테신 유리 약물은 이어서 세포질 내에서 이동하여 세포독성 또는 세포증식억제 활성을 유도할 수 있다. 대안적인 실시형태에서, 캄프토테신 약물 단위는 표적 세포 외부에서 캄프토테신 접합체로부터 절단되고, 그 방출로부터 생성된 캄프토테신 유리 약물은 후속적으로 세포에 침투한다.
일 실시형태에서, 리간드 단위는 자가면역 항원에 결합한다. 이러한 일 실시형태에서, 항원은 자가면역 병태와 관련된 세포의 표면 상에 있다.
일 실시형태에서, 리간드 단위는 자가면역 질환 상태와 관련된 활성화된 림프구에 결합한다.
추가의 실시형태에서, 캄프토테신 접합체는 특정 자가면역 질환과 관련된 자가면역 항체를 생산하는 세포의 증식을 사멸시키거나 억제한다.
캄프토테신 접합체로 치료되도록 의도되는 자가면역 질환의 특정 유형은 비제한적으로 Th2 림프구 관련 장애(예컨대, 아토피 피부염, 아토피 천식, 비결막염, 알러지성 비염, 오멘 증후군, 전신 경화증, 및 이식편 대 숙주 질환); Th1 림프구-관련 장애(예컨대, 류마티스 관절염, 다발성 경화증, 건선, 쇼그렌 증후군, 하시모토 갑상선염, 그레이브스 질환, 원발성 담즙성 간경변, 베게너 육아종증, 및 결핵); 및 활성화된 B 림프구 관련 장애(예컨대, 전신 홍반 루프스, 굿파스처 증후군, 류마티스 관절염, 및 I형 당뇨병)를 포함한다.
자가면역 질환의 다중-약물 요법
자가면역 질환을 치료하는 방법은 또한 이를 필요로 하는 환자에 유효량의 캄프토테신 접합체 및 자가면역 질환의 치료에 대해 공지된 다른 치료제를 투여하는 단계를 포함하는 것이 개시된다.
조성물 및 투여 방법
본 발명은 본원에 기술된 캄프토테신 접합체 및 적어도 하나의 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약학 조성물을 제공한다. 약학 조성물은 리간드 단위가 결합하는 항원의 발현과 관련된 장애의 치료를 위해 화합물이 환자에게 투여되도록 하는 임의의 형태이다. 예컨대, 접합체는 액체 또는 고체 형태이다. 바람직한 투여 경로는 비경구이다. 비경구 투여는 피하 주사, 정맥 내, 근육 내, 흉골 내 주사 또는 주입 기술을 포함한다. 일 실시형태에서, 약학 조성물은 비경구로 투여된다. 일 실시형태에서, 접합체는 정맥 내로 투여된다. 투여는 임의의 편리한 경로, 예컨대 주입 또는 볼루스 주사에 의한 것이다.
약학 조성물은 환자에게 조성물을 투여할 때 캄프토테신 접합체를 생체 이용할 수 있도록 제형화 된다. 조성물은 때때로 하나 이상의 투여 단위의 형태를 취한다.
약학 조성물을 제조하는 데 사용되는 물질은 바람직하게는 사용된 양에서 비-독성이다. 약학 조성물에서 활성 성분의 최적 투여량은 다양한 인자에 의존할 것이라는 것은 당업자에게 명백할 것이다. 관련 인자는 제한 없이 동물의 유형(예를 들어, 인간), 화합물의 특정 형태, 투여 방식 및 사용되는 조성물을 포함한다.
일부 실시형태에서 조성물은 액체 형태이다. 일부 이러한 실시형태에서 액체는 주사에 의한 전달에 유용하다. 일부 실시형태에서, 주사 투여용 조성물은 캄프토테신 접합체 외에, 계면활성제, 보존제, 습윤제, 분산제, 현탁제, 완충제, 안정화제 및 등장제로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 부형제를 함유한다.
액체 조성물은 용액, 현탁액 또는 기타 유사한 형태인지 여부에 관계없이, 다음 중 하나 이상을 포함한다: 멸균 희석제, 예컨대 주사용수, 식염수, 바람직하게는 생리 식염수, 링거 용액, 등장성 염화나트륨, 고정 오일, 예컨대 용매 또는 현탁 매질로 작용할 수 있는 합성 모노 또는 디글세라이드, 폴리에틸렌 글리콜, 글리세린, 시클로덱스트린, 프로필렌 글리콜 또는 다른 용매; 항균제, 예컨대 벤질 알코올 또는 메틸 파라벤; 항산화제, 예컨대 아스코르브산 또는 소듐 바이설파이트; 킬레이트제, 예컨대 에틸렌디아민테트라아세트산; 완충제, 예컨대 아미노산, 아세테이트, 시트레이트 또는 포스페이트; 세정제, 예컨대 비이온성 계면활성제, 폴리올; 및 강장 조절제, 예컨대 염화나트륨 또는 덱스트로스. 비경구 조성물은 때때로 앰플, 일회용 주사기 또는 유리, 플라스틱 또는 기타 재료로 만들어진 다회-용량 바이알로 동봉된다. 생리 식염수는 예시적인 보조제이다. 주사가능한 조성물은 바람직하게는 무균이다.
특정 장애 또는 병태의 치료에 효과적인 접합체의 양은 장애 또는 병태의 특성에 따라 달라지며, 일부 실시형태에서 표준 임상 기술에 의해 결정된다. 또한, 최적의 투여량 범위를 확인하기 위해 시험관 내 또는 생체 내 분석이 선택적으로 사용된다. 조성물에 따라 사용되는 정확한 용량은 투여 경로, 질환 또는 장애의 중증도, 및 의사 판단 및 각 환자의 상황에 따라 결정되어야 한다.
조성물은 적합한 투여량이 얻어지도록 유효량의 캄프토테신 접합체를 포함한다. 전형적으로, 상기 양은 조성물의 중량을 기준으로 적어도 약 0.01%의 화합물이다.
정맥 내 투여의 경우, 약학 조성물은 전형적으로 동물의 체중의 kg 당 약 0.01 mg 내지 약 100 mg의 캄프토테신 접합체를 포함한다. 일 실시형태에서, 조성물은 동물의 체중의 kg 당 약 1 mg 내지 약 100 mg의 캄프토테신 접합체를 포함한다. 다른 양태에서, 투여되는 양은 화합물의 체중의 kg 당 약 0.1 mg/kg 내지 약 25 mg/kg의 범위일 것이다. 사용되는 약물에 따라, 용량은 훨씬 더 낮을 수 있으며, 예컨대, 대상의 체중의 1.0 μg/kg 내지 5.0 mg/kg, 4.0 mg/kg, 3.0 mg/kg, 2.0 mg/kg 또는 1.0 mg/kg, 또는 1.0 μg/kg 내지 500.0 μg/kg이다.
일반적으로, 환자에 투여되는 접합체의 용량은 전형적으로 대상의 체중의 약 0.01 mg/kg 내지 약 100 mg/kg 또는 대상의 체중의 1.0 μg/kg 내지 5.0 mg/kg이다. 일부 실시형태에서, 환자에 투여되는 용량은 대상의 체중의 약 0.01 mg/kg 내지 약 15 mg/kg 사이이다. 일부 실시형태에서, 환자에 투여되는 용량은 대상의 체중의 약 0.1 mg/kg 내지 약 15 mg/kg 사이이다. 일부 실시형태에서, 환자에 투여되는 용량은 대상의 체중의 약 0.1 mg/kg 내지 약 20 mg/kg 사이이다. 일부 실시형태에서, 투여되는 용량은 대상의 체중의 약 0.1 mg/kg 내지 약 5 mg/kg 사이 또는 약 0.1 mg/kg 내지 약 10 mg/kg 사이이다. 일부 실시형태에서, 투여되는 용량은 대상의 체중의 약 1 mg/kg 내지 약 15 mg/kg 사이이다. 일부 실시형태에서, 투여되는 용량은 대상의 체중의 약 1 mg/kg 내지 약 10 mg/kg 사이이다. 일부 실시형태에서, 투여되는 용량은 치료주기에 걸쳐 대상의 체중의 약 0.1 mg/kg 내지 4 mg/kg 사이, 보다 더 바람직하게는 0.1 mg/kg 내지 3.2 mg/kg 사이, 또는 보다 더 바람직하게는 0.1 mg/kg 내지 2.7 mg/kg 사이이다.
용어 "담체"는 화합물과 함께 투여되는 희석제, 보조제 또는 부형제를 의미한다. 일부 실시형태에서 이러한 약학적 담체는 액체, 예컨대 물 및 석유, 동물, 식물 또는 합성 유래의 것, 예컨대 땅콩유, 대두유, 광유, 참기름을 포함하는 오일이다. 다른 담체는 식염수, 아카시아 검, 젤라틴, 전분 페이스트, 탈크, 케라틴, 콜로이드 실리카, 우레아를 포함한다. 또한 보조제, 안정화제, 농후제, 윤활제 및 착색제가 때때로 사용된다. 일 실시형태에서, 환자에게 투여될 때, 캄프토테신 접합체 또는 이의 조성물 및 약학적으로 허용되는 담체는 무균이다.
물은 화합물이 정맥 내로 투여될 때 대표적인 담체이다. 식염수 용액과 수성 덱스트로스 및 글리세롤 용액은 특히 주사용 용액의 경우 액체 담체로 종종 사용된다. 적합한 약학적 담체는 또한 부형제, 예컨대 전분, 글루코스, 락토스, 수크로스, 젤라틴, 맥아, 쌀, 밀가루, 쵸크, 실리카겔, 스테아르산 나트륨, 글리세롤 모노스테아레이트, 활석, 염화나트륨, 건조 탈지유, 글리세롤, 프로필렌, 글리콜, 물, 에탄올을 포함한다. 원하는 경우, 본 조성물은 또한 소량의 습윤제 또는 유화제, 또는 pH 완충제를 함유한다.
일 실시형태에서, 접합체는 동물, 특히 인간에 대한 정맥 내 투여에 적합한 약학 조성물로서 일상적인 절차에 따라 제형화된다. 전형적으로, 정맥 내 투여를 위한 담체 또는 비히클은 멸균 등장성 수성 완충 용액이다. 필요한 경우, 조성물은 가용화제를 포함한다. 정맥 내 투여용 조성물은 선택적으로 주사 부위의 통증을 완화하기 위해 리그노카인과 같은 국소 마취제를 포함한다. 일반적으로, 성분은 별도로 공급되거나, 예컨대 활성제의 양을 표시하는 앰플 또는 사쉐와 같은 완전 밀봉된 용기에 건조 동결 분말 또는 물이 없는 농축물과 같은 단위 투여 형태로 함께 혼합된다. 접합체가 주입에 의해 투여되는 경우, 전형적으로 예를 들어 멸균된 약학 등급의 물 또는 식염수가 들어있는 주입 병과 함께 분배된다. 접합체가 주사로 투여되는 경우, 때때로 투여 전에 성분을 혼합할 수 있도록 주사용 멸균수 또는 식염수 앰플이 제공된다.
약학 조성물은 일반적으로 미국 식품 의약국(FDA)의 모든 우수 제조 기준(GMP: Good Manufacturing Practice) 규정을 완전히 준수하여 멸균되고 실질적으로 등장성으로 제형화된다.
캄프토테신 접합체 제조 방법
본원에 기술된 캄프토테신 접합체는 항체, 링커, 및 약물 단위의 연속 구조로서, 또는 일부를 조립한 후 완성된 조립 단계에 의해 수렴하는 방식으로 제조된다. 쿠르티우스의 전위(Curtius rearrangement) 또는 클로라민 합성(Chloramine synthesis)은 본원에 기술된 접합체의 다수의 실시형태에 유용한 메틸렌 카바메이트 링커(스페이서)를 제공하기 위해 사용될 수 있다.
반응식 2: 화학식 Z'-A-RL-Y-D, Z'-A-S*-RL-Y-D 또는 Z'-A-B(S*)-RL-Y-D의 예시적인 캄프토테신 약물-링커 화합물의 제조, 여기서 Y는 쿠르티우스의 전위를 사용하는 화학식 (a')를 가짐:
Figure pct00136
반응식 2는 유리 약물의 아실 아지드 유도체의 쿠르티우스의 전위를 포함하는 합성 전략을 나타내며, 여기서 CPT는 히드록실 작용기 O*로 표시된 산소 원자가 전위 결과 형성된 메틸렌 카바메이트 단위로 혼입된 히드록실 작용기를 가진 캄프토테신 화합물에 대한 구조에 해당하는 캄프토테신 약물 단위이고, Z'는 스트레처 단위 전구체이고, RL은 방출가능한 링커이고, X는 -A-, -A-S*- 또는 -A-B(S*)-이고 여기서 A는 커넥터 단위이고, S*는 분획제이고 B는 병렬 커넥터 단위이다. 이러한 전략은 다음과 같은 아실 아지드를 형성하는 다수의 보완적인 알킬화 방법이 존재하기 때문에, 위치선택성을 획득하기 위한 수단으로, 여러 알코올, 또는 다른 헤테로원자를 함유하는 캄프토테신 약물에 적용될 수 있다: 할로 에스터 알킬화, 할로 산 알킬화 또는 에틸 또는 메틸 디아조아세테이트를 사용한 금속 카르벤 삽입, 문헌[Doyle, M. et al. Modern Catalytic Methods for Organic Synthesis with Diazo Compounds; Wiley: New York, 1998] 참조. 이어서 아실 아지드는 화학식 Z'-X-RL-OH의 적어도 화학량론적 양의 알코올-함유 링커 단위 중간체와 함께 가열된다.
반응식 3: 화학식 Z'-A-RL-Y-D, Z'-A-S*-RL-Y-D 또는 Z'-A-B(S*)-RL-Y-D의 예시적인 캄프토테신 약물-링커 화합물의 대안적인 제조, 여기서 스페이서 단위 Y는 N-클로로메틸아민 합성을 통한 화학식 (a) 또는 화학식 (a')의 메틸렌 카바메이트 단위임:
Figure pct00137
상기 식에서, R1은 수소 또는 C1-C4 알킬이고, R은 -H 또는 -CH2CH2SO2Me이고 기타 가변기는 반응식 2에서 이들의 의미를 갖는다.
N-클로로메틸아민 합성은 변형되지 않은 알코올 또는 다른 헤테로원자 함유 캄프토테신 화합물의 도입을 허용한다는 점에서 쿠르티우스의 전위의 대안이며, 그 사용은 반응식 2의 아실 아지드를 형성하는 데 필요한 조건과 양립할 수 없고, 반응성 N-클로로메틸아민과의 축합에 의해 진행된다. 상기 방법론은 또한 예를 들어 반응식 4에 표시된 특정 유형의 메틸렌 카바메이트 단위를 도입하는 데 보다 적합하다.
반응식 4는 화학식 Z'-A-RL-Y-D, Z'-A-S*-RL-Y-D 또는 Z'-A-B(S*)-RL-Y-D의 예시적인 캄프토테신-링커-화합물의 합성을 나타내며, 여기서 스페이서 단위(Y)는 화학식 (a")의 메틸렌 카바메이트 단위이다. p-니트로-페닐 카보네이트와 환형 아미놀의 반응은 카바메이트를 제공하며, 이는 이어서 유리 캄프토테신 약물의 티올, 히드록실, 아민 또는 아미드 작용기로부터의 친핵체와의 알킬화를 위해 클로로사이클로알킬아민으로 전환된다. 대안적으로, 카바메이트는 약물 모이어티의 존재 하에 산으로 처리하여 도시된 약물-링커 중간체를 조립할 수 있다. 알킬화 생성물은 탈보호된 후 생성된 유리 아민을 3-말레이미도프로피온산 N-히드록시순시이미드 에스터와 축합하며, 이는 커넥터 단위에 공유결합된 스트레처 단위 전구체를 도입하여 캄프토테신-링커 화합물을 제공한다. 생성된 캄프토테신-링커 화합물은 이어서 티올-함유 표적화제와 축합되어 자기-희생 모이어티 및 화학식 a''의 메틸렌 카바메이트 단위를 포함하는 스페이서 단위를 가진 캄프토테신 접합체를 제공한다.
반응식 4: 화학식 Z'-A-RL-Y-D의 예시적인 캄프토테신 약물-링커 화합물의 제조로서, 여기서 스페이서 단위 Y는 화학식 (a") 메틸렌 카바메이트 단위이다.
Figure pct00138
T*이 캄프토테신 화합물의 1차 또는 2차 아민 치환체로부터의 질소 원자인 메틸렌 카바메이트 단위를 가진 캄프토테신-링커 화합물 및 캄프토테신 접합체의 경우, 반응식 3 또는 반응식 4에 의해 제공된 일반화된 절차에 따른 클로로메틸아민을 사용하는 직접 알킬화는 유리 약물의 아민 작용기로부터 질소 헤테로원자의 과다 또는 원치 않은 과-알킬화로 인해 적합하지 않을 수 있다. 이러한 경우, 반응식 5에 의해 구현되는 방법이 사용될 수 있다.
반응식 5:
Figure pct00139
반응식 5에서, 화학식 (a1') 메틸렌 카바메이트 단위에 대한 R 치환체로서 염기성 단위(즉, 디메틸아미노에틸 모이어티)를 이미 가진 중간체 카바메이트가 제조된다. 상기 카바메이트의 질소는 포름알데히드와 축합되고 생성된 중간체는 지방족 아민-함유 캄프토테신 약물의 아민 작용기로 켄칭된다. N*은 해당 작용기로부터의 질소 원자를 나타낸다. 이러한 축합은 캄프토테신 약물 단위에 공유결합된 화학식 (a1')의 메틸렌 카바메이트를 형성하며, 여기서 R1은 수소이고 R은 디메틸아미노에틸이다. 이어서 페닐 니트로기는 커넥터 단위(A) 및 스트레처 단위 전구체(Z')의 순차적 도입을 위한 핸들을 제공하기 위해 아민으로 환원된다.
번호가 매겨진 실시형태
다음의 번호가 매겨진 실시형태는 본 발명의 다양한 비제한적 양태를 기술한다.
1. L-(Q-D)p의 화학식 또는 이의 염을 가진 캄프토테신 접합체로, 상기 식에서 L은 리간드 단위이고; 아래첨자 p는 1 내지 16의 범위의 정수이고; Q는 -Z-A-, -Z-A-RL, -Z-A-RL-Y-, -Z-A-S*-RL-, -Z-A-S*-RL-Y-, -Z-A-S*-W-, -Z-A-S*-W-RL-, -Z-A-B(S*)-RL-, -Z-A-B(S*)-W-, -Z-A-B(S*)-W-RL- 및 -Z-A-B(S*)-RL-Y-로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 갖는 링커 단위이고, 상기 식에서 Z는 스트레처 단위이고; A는 결합 또는 커넥터 단위이고; B는 병렬 커넥터 단위이고; S*은 분획제이고; RL은 방출가능한 링커이고; W는 아미노산 단위이고; Y는 스페이서 단위이고; D는 다음과 같은 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, CPT6 및 CPT7로 이루어진 군으로부터 선택되는 약물 단위이고:
Figure pct00140
Figure pct00141
Figure pct00142
Figure pct00143
;
상기 식에서 RB는 H, C1-C8 알킬, C1-C8 할로알킬, C3-C8 사이클로알킬, (C3-C8사이클로알킬)C1-C4 알킬-, 페닐 및 페닐-C1-C4 알킬-로 이루어진 군으로부터 선택되는 구성원이고; RC는 C1-C6 알킬 및 C3-C6 사이클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 구성원이고; 각각의 RF 및 RF'는 -H, C1-C8 알킬, C1-C8 히드록시알킬, C1-C8 아미노알킬, (C1-C4 알킬아미노)-C1-C8 알킬-, N,N-(C1-C4 히드록시알킬)(C1-C4 알킬)-아미노-C1-C8 알킬-, N,N-디(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N-(C1-C4 히드록시알킬)-C1-C8 아미노알킬-, C1-C8 알킬C(O)-, C1-C8 히독시알킬-C(O)-, C1-C8 아미노알킬C(O)-, C3-C10 사이클로알킬, (C3-C10 사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, C3-C10 헤테로사이클로알킬, (C3-C10 헤테로사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, 페닐, 페닐-C1-C4 알킬-, 디페닐-C1-C4 알킬-, 헤테로아릴 및 헤테로아릴-C1-C4 알킬-로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 구성원이거나, RF 및 RF'는 각각이 부착된 질소 원자와 결합하여 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2, -NHC1-C4 알킬 및 -N(C1-C4 알킬)2로부터 선택되는 0개 내지 3개의 치환체를 가진 5-원 고리, 6-원 고리 또는 7-원 고리를 형성하고; 여기서 RB, RC, RF 및 RF'의 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 페닐 및 헤테로아릴 모이어티는 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2,- NHC1-C4 알킬 및 -N(C1-C4 알킬)2로 이루어진 군으로부터 선택된 0개 내지 3개의 치환체로 치환되거나,
D는 표 H의 13a 내지 13c, 표 I의 14a 내지 14z 및 표 J의 18a 내지 18r로 이루어진 군으로부터 선택되는 약물 단위이고;
여기서 Q가 -Z-A-RL-, -Z-A-RL-Y-, -Z-A-S*-RL-, -Z-A-B(S*)-RL-, -Z-A-S*-RL-Y- 또는 -Z-A-B(S*)-RL-Y-인 경우, D의 공유결합 지점은 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, CPT6 및 CPT7 중 임의의 하나 또는 표 H의 13a 내지 13c, 표 I의 14a 내지 14z 및 표 J의 18a 내지 18r 중 임의의 하나의 히드록실 또는 지방족 1차 또는 2차 아미노 치환체 중 임의의 하나의 헤테로원자에 대해서이거나,
여기서 Q가 -Z-A-, -Z-A-S*-W- 또는 -Z-A- B(S*)-W-이거나, Q가 -Z-A-S*-RL-, -Z-A-B(S*)-RL-, -Z-A -S*-W-RL-, 또는 -Z-A-B(S*)-W-RL-이고 여기서 RL은 글루쿠로나이드 단위 이외의 방출가능한 단위인 경우, D의 공유결합 지점은 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, CPT6 및 CPT7 중 임의의 하나 또는 표 H의 13a 내지 13c, 표 I의 14a 내지 14z 및 표 J의 18a 내지 18r 중 임의의 하나의 락톤 고리 상의 히드록실 치환체로부터의 산소 원자에 대해서이고;
공유결합 지점이 CPT6의 1차 또는 2차 지방족 아미노 치환체의 질소 원자에 대한 경우 RF 및 RF' 중 적어도 하나가 -H이고; D가 아미노 치환체의 질소 원자를 통해 공유결합을 가진 화합물 CPT1인 경우, -Z-A-RL-, -Z-A-RL-Y-, -Z-A-S*-RL-, -Z-A-B(S*)-RL-, -Z-A-S*-RL-Y- 및 -Z-A-B(S*)-RL-Y-의 -Z-A-는 숙신이미도-카프로일-β-알라닐 모이어티가 아니고, 선택적으로 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해된 형태의 숙신이미드 고리를 가진다.
2. 실시형태 1의 캄프토테신 접합체에 있어서, Q가 -Z-A-RL-, -Z-A-RL-Y-, -Z-A-S*-RL-, -Z-A-B(S*)-RL-, -Z-A-S*-RL-Y- 및 -Z-A-B(S*)-RL-Y-로 이루어진 군으로부터 선택된 화학식을 가진 링커 단위이고, 여기서 A는 커넥터 단위이고 RL은 글루쿠로나이드 단위이다.
3. 실시형태 1 또는 실시형태 2의 캄프토테신 접합체에 있어서, D의 공유결합 지점은 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, CPT6 및 CPT7 중 임의의 하나의 락톤 고리 상의 히드록실 치환체의 산소 원자를 통해서이다.
4. 실시형태 1 또는 실시형태 2의 캄프토테신 접합체에 있어서, D의 공유결합 지점은 표 H의 13a 내지 13c, 표 I의 14a 내지 14z 또는 표 J의 18a 내지 18r 중 임의의 하나의 락톤 고리 상의 히드록실 치환체의 산소 원자를 통해서이다.
5. 실시형태 1 또는 실시형태 2의 캄프토테신 접합체에 있어서, RF 및 RF' 중 적어도 하나가 C1-C8 히드록시알킬 N,N-(C1-C4 히드록시알킬)(C1-C4 알킬)-아미노-C1-C8 알킬-, N-C1-C4 히드록시알킬-C1-C8 아미노알킬-, C1-C8 알킬C(O)-인 경우 D의 공유결합 지점은 CPT6의 RF 또는 RF'의 히드록실 치환체의 산소 원자를 통해서이다.
6. 실시형태 1 또는 실시형태 2의 캄프토테신 접합체에 있어서, RF 및 RF' 중 적어도 하나가 C1-C8 아미노알킬, (C1-C4 알킬아미노)-C1-C8 알킬-, N-(C1-C4 히드록시알킬)-C1-C8 아미노알킬- 또는 C1-C8 아미노알킬C(O)-인 경우 D의 공유결합 지점은 CPT6의 RF 또는 RF'의 아민 치환체의 질소 원자를 통해서이다.
7. 실시형태 1 또는 실시형태 2의 캄프토테신 접합체에 있어서, -Z-A-가 선택적으로 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해된 형태의 숙신이미드 고리를 갖는 숙신이미도-카프로일-β-알라닐 외의 것인 경우 D의 공유결합 지점은 CPT1의 아미노 치환체의 질소 원자를 통해서이다.
8. 실시형태 1 또는 실시형태 2의 캄프토테신 접합체에 있어서, D의 공유결합 지점은 CPT4 상의 아미노 치환체의 질소 원자에 대해서이다.
9. 실시형태 1 또는 실시형태 2의 캄프토테신 접합체에 있어서, RF 및 RF' 중 적어도 하나가 -H인 경우 공유결합 지점은 CPT6 상의 치환체의 질소 원자를 통해서이다.
10. 실시형태 1 내지 실시형태 9 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, Q는 -Z-A-RL- 및 -Z-A-RL-Y-로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 가진 링커 단위이다.
11. 실시형태 1 내지 실시형태 9 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, Q는 -Z-A-S*-RL- 및 -Z-A-S*-RL-Y-로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 가진 링커 단위이다.
12. 실시형태 1 내지 실시형태 9 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, Q는 -Z-A-B(S*)-RL- 및 -Z-A-B(S*)-RL-Y-로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 가진 링커 단위이다.
13. 실시형태 1 내지 실시형태 3 및 실시형태 7 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, D는 CPT1이다.
14. 실시형태 1 내지 실시형태 3 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, D는 CPT2이다.
15. 실시형태 1 내지 실시형태 3 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, D는 CPT3이다.
16. 실시형태 1 내지 실시형태 3 및 실시형태 8 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, D는 CPT4이다.
17. 실시형태 1 내지 실시형태 3 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, D는 CPT5이다.
18. 실시형태 1 내지 실시형태 3, 실시형태 5, 실시형태 6 및 실시형태 9 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, D는 CPT6이다.
18. 실시형태 1 내지 실시형태 3 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, D는 CPT7이다.
19. 실시형태 2 내지 실시형태 18 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, RL은 다음의 화학식을 가진 글루쿠로나이드 단위이다:
Figure pct00144
상기 식에서 Su는 모노사카라이드, 특히 글루쿠론산 또는 만노스 잔기의 육탄당 형태이고; O'는 글루코시다제에 의해 절단될 수 있는 글리코시드 결합의 산소 원자를 나타내고; 단일 별표(*)가 표시된 물결선은 RF 및 RF' 중 적어도 하나가 -H인 CPT1, CPT4, CPT6, 또는 표 H의 13b 및 13c, 표 I의 14a 내지 14f 및 14i 내지 14o, 14s 및 14u 내지 14z 및 표 J의 18q 및 18r 중 임의의 하나의 1차 또는 2차 지방족 아미노 치환체의 질소 원자로의, 또는 스페이서 단위(Y)로의 공유결합 부위를 나타내거나, CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, CPT6 또는 CPT7의, 또는 표 H의 13a 내지 13c 및 표 I의 14a 내지 14z 또는 표 J의 18a 내지 18r 중 임의의 하나의 락톤 고리 상의 히드록실 치환체의 산소 원자로의 공유결합 부위를 나타내고; 이중 별표(**)가 표시된 물결선은 Q의 나머지 부분에 대한 공유결합 부위를 나타낸다.
20. 실시형태 19의 캄프토테신 접합체에 있어서, Q는 -Z-A-RL-Y-, -Z-A -S*-RL-Y- 또는 -Z-A-B(S*)-RL-Y-의 화학식을 가진 링커 단위이고; 스페이서 단위(Y)가 다음의 화학식을 갖고:
Figure pct00145
또는
Figure pct00146
상기 식에서, EWG는 전자-받개기이고; O*은 D의 히드록시 치환체로부터의 산소 원자를 나타내고; 질소 원자에 인접한 물결선은 글루쿠로나이드 단위의 카보닐 탄소 원자로의 공유결합 부위를 나타내고; O*에 인접한 물결선은 D의 나머지 부분에 대한 공유결합 부위를 나타낸다.
21. 실시형태 19의 캄프토테신 접합체에 있어서, Q는 -Z-A-RL-Y-, -Z-A -S*-RL-Y- 또는 -Z-A-B(S*)-RL-Y-의 화학식을 가진 링커 단위이고; D는 각각 RF 및 RF'가 -H인 CPT1, CPT4 및 CPT6으로 이루어진 군으로부터 선택되고; 스페이서 단위(Y)가 다음의 화학식을 갖고:
Figure pct00147
또는
Figure pct00148
상기 식에서, EWG는 전자-받개기이고; 질소 원자에 인접한 물결선은 글루쿠로나이드 단위의 카보닐 탄소 원자로의 공유결합 부위를 나타내고; 카보닐 탄소 원자에 인접한 물결선은 RF 및 RF' 각각이 -H인 CPT1, CPT4 또는 CPT6의 아미노 치환체의 질소 원자로의 공유결합 부위를 나타낸다.
22. 실시형태 19의 캄프토테신 접합체에 있어서, Q는 -Z-A-RL-Y-, -Z-A -S*-RL-Y- 또는 -Z-A-B(S*)-RL-Y-의 화학식을 가진 링커 단위이고; D는 RF 및 RF' 각각이 -H인 CPT1, CPT4 및 CPT6으로 이루어진 군으로부터 선택되고; 스페이서 단위(Y)가 다음의 화학식을 갖고:
Figure pct00149
상기 식에서, EWG는 전자-받개기이고; 질소 원자에 인접한 물결선은 글루쿠로나이드 단위의 카보닐 탄소 원자로의 공유결합 부위를 나타내고; 카보닐 탄소 원자에 인접한 물결선은 RF 및 RF' 각각이 -H인 CPT1, CPT4 또는 CPT6의 아미노 치환체의 질소 원자로의 공유결합 부위를 나타낸다.
23. 실시형태 1 내지 실시형태 22 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, A가 커넥터 단위이고, 여기서 커넥터 단위가 트리아졸릴 모이어티로 구성되고, 여기서 트리아졸 모이어티는 약물 링커 화합물의 알키닐 모이어티에 대한 접합체의 리간드 단위의 전구체인 화학적으로 변형된 표적화제로부터 아지도 치환체의 1,3-이극성 환첨가로부터 선택적으로 형성된다.
24. 실시형태 1 내지 실시형태 22 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, -Z-A-는 각각 선택적으로 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해된 형태의 숙신이미드 고리를 갖는 숙신이미도-알카노일 모이어티 또는 숙신이미도 및 트리아졸일 모이어티, 또는 CPT1은 이의 아미노 치환체의 질소 원자를 통한 공유결합을 가질 때 -Z-A-가 선택적으로 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해 형태의 숙신이미드 고리를 갖는 숙신이미도 및 트리아졸일 모이어티, 또는 mDPR 모이어티로부터 유도가능한 숙신산 아미드 모이어티로 구성될 경우 캄프토테신-링커 화합물의 mDPR 모이어티로부터 유도가능한 숙신산 아미드 모이어티로 구성된다.
25. 실시형태 1 내지 실시형태 22 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, D가 CPT1일 때 D는 락톤 고리 상의 히드록실 치환체의 산소 원자에 대한 공유결합을 갖는 경우 -Z-A-는 선택적으로 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해 형태의 숙신이미드 고리를 갖는 숙신이미도-알카노일-β-알라닐 모이어티로 구성된다.
26. 실시형태 1 내지 실시형태 22 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, -Z-A-는 캄프토테신-링커 화합물의 mDPR 모이어티로부터 유도가능한 숙신산 아미드 모이어티로 구성된다.
27. 실시형태 26의 캄프토테신 접합체에 있어서, Q는 다음의 화학식:
Figure pct00150
또는 이의 염을 갖고, 상기 식에서, 숙신이미드 고리는 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해 형태이고; 단일 별표(*)가 표시된 물결선은 RF 및 RF'가 -H인 CPT1, CPT4 또는 CPT6의 질소 원자로의, 또는 스페이서 단위로의 공유결합 부위를 나타내고; 삼중 별표(***)가 표시된 물결선은 L의 황 원자로의 공유결합 지점을 나타낸다.
28. 실시형태 2 내지 실시형태 26 중 어느 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, RL은 다음의 화학식을 가진 글루쿠로나이드 단위이다:
Figure pct00151
상기 식에서, 단일 별표(*)가 표시된 물결선은 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, CPT6 또는 CPT7의 락톤 고리 상의 히드록실 치환체의 산소 원자로의, 또는 각각 RF 및 RF'가 -H인 CPT1 CPT 4 또는 CPT6의 아미노 치환체의 질소 원자로의, 또는 스페이서 단위(Y)로의 공유결합 지점을 나타내고; 이중 별표(**)가 표시된 물결선은 A, B, S* 또는 Z로의 공유결합 지점을 나타낸다.
29. 실시형태 28의 캄프토테신 접합체에 있어서, Q는 -Z-A-S*-RL-; -Z-A-B(S*)-RL-; -Z-A- S*-RL-Y-; 및 -Z-A-B(S*)-RL-Y-로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 가진 링커 단위이고, 여기서 -Z-A-는 숙신이미도-프로피오닐 모이어티로 구성된다.
30. 실시형태 29의 캄프토테신 접합체에 있어서, Q는 다음의 화학식을 가진 -Z-A-S*-RL-이다:
Figure pct00152
상기 식에서, 아래첨자 n은 1 내지 50의 범위의 정수이고; 단일 별표(*)가 표시된 물결선은 D로의, 또는 스페이서 단위(Y)로의 공유결합 부위를 나타내고; 삼중 별표(***)가 표시된 물결선은 L의 황 원자로의 공유결합 지점을 나타낸다.
31. 실시형태 30의 캄프토테신 접합체에 있어서, 아래첨자 n은 4이다.
32. 실시형태 2의 캄프토테신 접합체에 있어서, -Q-D는 다음의 구조:
Figure pct00153
또는
Figure pct00154
또는 이의 염을 갖고, 선택적으로 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해된 형태의 숙신이미드 고리를 가지며, 상기 식에서 물결선은 리간드 단위의 황 원자로의 공유결합을 나타낸다.
33. 실시형태 2의 캄프토테신 접합체에 있어서, -Q-D는 다음의 구조:
Figure pct00155
또는 이의 염을 갖고, 상기 식에서 물결선은 리간드 단위의 황 원자로의 공유결합을 나타내고 숙신이미드 고리는 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해된 형태이다.
34. 실시형태 2의 캄프토테신 접합체에 있어서, -Q-D는 다음의 구조:
Figure pct00156
또는
Figure pct00157
또는 이의 염을 갖고, 선택적으로 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해된 형태의 숙신이미드 고리를 가지며, 상기 식에서 물결선은 리간드 단위의 황 원자로의 공유결합을 나타낸다.
35. 실시형태 1 내지 실시형태 34 중 어느 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, L은 항체 유래이다.
36. 실시형태 35의 캄프토테신 접합체에 있어서, 항체는 CD19, CD30, CD33, CD70 및 LIV-1로 이루어진 군으로부터 선택되는 항원에 특이적으로 결합한다.
37. 실시형태 1의 캄프토테신 접합체에 있어서, Q는 -Z-A-, -Z-A-S*-W- 및 -Z-A- B(S*)-W-로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 가진 링커 단위이고, 여기서 A는 커넥터 단위이거나, Q는 -Z-A-RL-, -Z-A-S*-RL-, -Z-A-B(S*)-RL-, -Z-A-S*- W-RL-, 및-Z-A-B(S*)-W-RL로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 가진 링커 단위이고, 여기서 A는 커넥터 단위이고 RL은 글루쿠로나이드 단위 외의 방출가능한 링커이다.
38. 실시형태 37의 캄프토테신 접합체에 있어서, Q는 -Z-A-S*-W- 또는 -Z-A-S*-W-RL-의 화학식을 가진 링커 단위이다.
39. 실시형태 37의 캄프토테신 접합체에 있어서, Q는 -Z-A-RL- 또는 -Z-A-S*-RL-의 화학식을 가진 링커 단위이다.
40. 실시형태 37의 캄프토테신 접합체에 있어서, Q는 -Z-A-의 화학식을 가진 링커 단위이다.
41. 실시형태 37 내지 실시형태 40 중 어느 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, D는 CPT2이다.
42. 실시형태 37 내지 실시형태 40 중 어느 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, D는 CPT3이다.
43. 실시형태 37 내지 실시형태 40 중 어느 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, D는 CPT1이다.
44. 실시형태 37 내지 실시형태 40 중 어느 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, D는 CPT4이다.
45. 실시형태 37 내지 실시형태 40 중 어느 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, D는 CPT5이다.
46. 실시형태 37 내지 실시형태 40 중 어느 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, D는 CPT6이다.
47. 실시형태 37 내지 실시형태 40 중 어느 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, D는 CPT7이다.
48. 실시형태 37 내지 실시형태 47 중 어느 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, Q는 -Z-A-RL-, -Z-A-S*-RL- 및 -Z-A-S*-W-RL-로 이루어진 군으로부터 선택된 화학식을 가진 링커 단위이고, 여기서 RL은 다음의 화학식을 갖고:
Figure pct00158
상기 식에서, 이중 별표(**)로 표시된 물결선은 D로의 공유결합 부위를 나타내고; 단일 별표(*)로 표시된 물결선은 A, S* 또는 W로의 공유결합 지점을 나타낸다.
49. 실시형태 48의 캄프토테신 접합체에 있어서, -Q-D는 -Z-A-S*-W-RL-D의 화학식을 갖고, 여기서 D는 각각의 RF 및 RF'가 아민 치환체의 질소 원자로의 공유결합을 가진 -H인 CPT1, CPT4 또는 CPT6이고; W는 N-메틸-글리신(사코신), N-메틸-알라닌, N-메틸-β-알라닌, 발린, N-메틸-발린으로 이루어진 군으로부터 선택되는 아미노산 단위이거나, D는 락톤 고리 상의 히드록실 치환체의 산소 원자로의 공유결합을 가진 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, CPT6 또는 CPT7이고; W는 글루탐산 또는 리신으로 이루어진 군으로부터 선택되는 아미노산 단위이다.
50. 실시형태 37 내지 실시형태 49 중 어느 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, -Z-A-는 각각 선택적으로 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해된 형태의 숙신이미드 고리를 가진 숙신이미도-알카노일 모이어티 또는 숙신이미도 및 트리아졸 모이어티, 또는 캄프토테신-링커 화합물의 mDPR로부터 유도가능한 숙신산 아미드 모이어티로 구성된다.
51. 실시형태 37 내지 실시형태 49 중 어느 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, -Z-A-는 선택적으로 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해된 형태의 숙신이미드 고리를 가진 숙신이미도-알카노일 모이어티로 구성된다.
52. 실시형태 37 내지 실시형태 49 중 어느 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, -Z-A-는 캄프토테신-링커 화합물의 mDPR 모이어티로부터 유도가능한 숙신산 아미드 모이어티로 구성된다.
53. 실시형태 37 내지 실시형태 49 중 어느 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, Q는 -Z-A-S*-RL- 및 -Z-A-S*-W-RL-로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 가진 링커 단위이고, 여기서 -Z-A-는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 갖고:
Figure pct00159
및
Figure pct00160
,
선택적으로 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해된 형태의 숙신이미드 고리를 가지며, 상기 식에서, 이중 별표(**)가 표시된 물결선은 S*로의 공유결합 부위를 나타내고; 삼중 별표(***)가 표시된 물결선은 L의 황 원자로의 공유결합 지점을 나타낸다.
54. 실시형태 37 내지 실시형태 49 중 어느 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, Q는 -Z-A-S*-RL- 및 -Z-A-S*-W-RL-로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 가진 링커 단위이고, 여기서 S*는 다음의 화학식을 갖고:
Figure pct00161
상기 식에서 아래첨자 n은 2 내지 36의 범위의 정수이다.
55. 실시형태 37 내지 실시형태 49 중 어느 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, -Z A-는 다음의 화학식을 갖고:
Figure pct00162
선택적으로 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해된 형태의 숙신이미드 고리를 가지며, 상기 식에서, 이중 별표(**)가 표시된 물결선은 S*로의 공유결합 부위를 나타내고; 삼중 별표(***)가 표시된 물결선은 L의 황 원자로의 공유결합 지점을 나타낸다.
56. 실시형태 37 내지 실시형태 49 중 어느 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, Q는 화학식 -Z-A-S*-W- 또는 -Z-A-S-W-RL-의 링커 단위이고, 여기서 RL은 글루쿠로나이드 단위 이외의 것이고, 여기서 각각의 화학식의 -Z-A-S*-W-는 다음의 화학식을 갖고:
Figure pct00163
선택적으로 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해된 형태의 숙신이미드 고리를 가지며, 상기 식에서, 아래첨자 n은 2 내지 10의 범위의 정수이고; 이중 별표(**)가 표시된 물결선은 D 또는 RL로의 공유결합 부위를 나타내고; 삼중 별표(***)가 표시된 물결선은 L의 황 원자로의 공유결합 지점을 나타낸다.
57. 실시형태 56의 캄프토테신 접합체에 있어서, 아래첨자 n은 2 내지 4의 범위의 정수이다.
58. 실시형태 49의 캄프토테신 접합체에 있어서, -Q-D는 다음의 구조:
Figure pct00164
또는 이의 염을 갖고, 선택적으로 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해된 형태의 숙신이미드 고리를 가지며, 상기 식에서, 물결선은 리간드 단위의 황 원자로의 공유결합 지점을 나타낸다.
59. 실시형태 49의 캄프토테신 접합체에 있어서, -Q-D는 다음의 구조:
Figure pct00165
또는 이의 염을 갖고, 선택적으로 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해된 형태의 숙신이미드 고리를 가지며, 상기 식에서, 물결선은 리간드 단위의 황 원자로의 공유결합 지점을 나타낸다.
60. 실시형태 37 내지 실시형태 59의 캄프토테신 접합체에 있어서, L은 항체의 것이다.
61. 실시형태 60의 캄프토테신 접합체에 있어서, 항체는 CD19, CD30, CD33, CD70 및 LIV-1로 이루어진 군으로부터 선택되는 항원에 특이적으로 결합한다.
62. Z'-A-RL-D (i), Z'-A-RL-Y-D (ii), Z'-A-S*-RL-D (iii), -Z'-A-S*-RL- Y-D (iv), Z'-A-B(S*)-RL-D (v), Z'-A-B(S*)-RL-Y-D (vi), Z'-A-D (vii), Z'-A-S*-W-D (viii), Z'-A-B(S*)-W-D (ix), Z'-A-S*-W-RL-D (x) 및 Z'-A-B(S*)-W-RL-D (xi)로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 가진 캄프토테신-링커 화합물로서, 여기서 화학식 Z' 각각은 스트레처 단위 전구체이고; A는 결합 또는 커넥터 단위이고; B는 병렬 커넥터 단위이고; S*는 분획제이고; RL은 방출가능한 링커이고; Y는 스페이서 단위이고; D는 아래와 같이 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, CPT6 및 CPT7로 이루어진 군으로부터 선택되는 캄프토테신 화합물이고:
Figure pct00166
Figure pct00167
Figure pct00168
;
상기 식에서, RB는 -H, C1-C8 알킬, C1-C8 할로알킬, C3-C8 사이클로알킬, (C3-C8사이클로알킬)C1-C4 알킬-, 페닐 및 페닐-C1-C4 알킬-로 이루어진 군으로부터 선택되는 구성원이고; RC는 C1-C6 알킬 및 C3-C6 사이클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 모이어티이고; RF 및 RF' 각각은 -H, C1-C8 알킬, C1-C8 히드록시알킬, C1-C8 아미노알킬, (C1-C4 알킬아미노)-C1-C8 알킬-, N,N-(C1-C4 히드록시알킬)(C1-C4 알킬)-아미노-C1-C8 알킬-, N,N-디(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N-C1-C4 히드록시알킬-C1-C8 아미노알킬-, C1-C8 알킬C(O)-, C1-C8 히드록시알킬-C(O)-, C1-C8 아미노알킬C(O)-, C3-C10 사이클로알킬, (C3-C10 사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, C3-C10 헤테로사이클로알킬, (C3-C10 헤테로사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, 페닐, 페닐-C1-C4 알킬-, 디페닐-C1-C4 알킬-, 헤테로아릴 및 헤테로아릴-C1-C4 알킬-로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 모이어티이거나, RF 및 RF'은 각각이 부착된 질소 원자와 결합하여 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2, -NHC1-C4 알킬 및 -N(C1-C4 알킬)2로부터 선택되는 0개 내지 3개 치환체를 가진 5-원 고리, 6-원 고리 또는 7-원 고리를 형성하고; 여기서 RB, RC, RF 및 RF'의 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 페닐 및 헤테로아릴 모이어티는 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2, -NHC1-C4 알킬 및 -N(C1-C4 알킬)2로 이루어진 군으로부터 선택된 0개 내지 3개 치환체로 치환되거나,
D는 표 H의 13a 내지 13c, 표 I의 14a 내지 14z 및 표 J의 18a 내지 18r로 이루어진 군으로부터 선택되는 약물 단위이고;
여기서 Q가 -Z-A-RL-, -Z-A-RL-Y-, -Z-A-S*-RL-, -Z-A-B(S*)-RL-, -Z-A-S*-RL-Y- 또는 -Z-A-B(S*)-RL-Y-인 경우, D의 공유결합 지점은 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, CPT6 및 CPT7 중 임의의 하나 또는 표 H의 13a 내지 13c, 표 I의 14a 내지 14z 및 표 J의 18a 내지 18r 중 임의의 하나의 히드록실 또는 지방족 1차 또는 2차 아미노 치환체 중 임의의 하나의 헤테로원자에 대해서이거나,
여기서 Q가 RL이 글루쿠로나이드 단위 이외의 방출가능한 단위인 -Z-A-S*-RL-, -Z-A-B(S*)-RL-, -Z-A -S*-W-RL-, 또는 -Z-A-B(S*)-W-RL-인 경우 D의 공유결합 지점은 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, CPT6 및 CPT7 중 임의의 하나 또는 표 H의 13a 내지 13c, 표 I의 14a 내지 14z 및 표 J의 18a 내지 18r 중 임의의 하나의 락톤 고리 상의 히드록실 치환체의 산소 원자에 대해서이고 여기서 Q는 -Z-A-, -Z-A-S*-W- 또는 -Z-A- B(S*)-W-이고;
여기서 공유결합 지점이 CPT6 상의 아미노 치환체의 질소 원자에 대해서인 경우 RF 및 RF' 중 적어도 하나는 -H이고; D가 이의 아미노 치환체의 질소 원자를 통한 공유결합을 가진 CPT1인 경우 화학식 (i), 화학식 (ii), 화학식 (iii), 화학식 (iv), 화학식 (v), 및 화학식 (vi)의 캄프토테신-링커 화합물의 Z'-A-는 말레이미도-카프로일-β-알라닐 모이어티 이외의 것이다.
63. 화학식 (i), 화학식 (ii); 화학식 (iii), 화학식 (iv), 화학식 (v) 및 화학식 (vi)로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 가진 실시형태 62의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, A는 커넥터 단위이고 RL은 글루쿠로나이드 단위이다.
64. 실시형태 62또는 실시형태 63의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, D의 공유결합 지점은 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, CPT6 또는 CPT7의 락톤 고리 상의 히드록실 치환체의 산소 원자를 통한 것이다.
65. 실시형태 62 또는 실시형태 63의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, D의 공유결합 지점은 표 H의 13a 내지 13c, 표 I의 14a 내지 14z 및 표 J의 18a 내지 18n 중 임의의 하나의 락톤 고리 상의 히드록실 치환체의 산소 원자를 통한 것이다.
66. 실시형태 62 또는 실시형태 63의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, RF 및 RF' 적어도 하나가 C1-C8 히드록시알킬 N,N-(C1-C4 히드록시알킬)(C1-C4 알킬)-아미노-C1-C8 알킬-, N-C1-C4 히드록시알킬-C1-C8 아미노알킬-, C1-C8 알킬C(O)-인 경우 D의 공유결합 지점은 CPT6의 RF 또는 RF'의 히드록실 치환체의 산소 원자를 통해서이다.
67. 실시형태 62 또는 실시형태 63의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, RF 및 RF' 중 적어도 하나가 C1-C8 아미노알킬, (C1-C4 알킬아미노)-C1-C8 알킬-, N-(C1-C4 히드록시알킬)-C1-C8 아미노알킬- 또는 C1-C8 아미노알킬C(O)-인 경우 D의 공유결합 지점은 CPT6의 RF 또는 RF'의 아민 치환체의 질소 원자를 통해서이다.
68. 실시형태 62 또는 실시형태 63의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, Z'-A-가 말레이미도-카프로일-β-알라닐 이외의 것인 경우 D의 부착 지점은 CPT1의 아미노 치환체의 질소 원자를 통해서이다.
69. 실시형태 62 또는 실시형태 63의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, D의 부착 지점은 CPT4의 아미노 치환체의 질소 원자를 통한 것이다.
70. 실시형태 62 또는 실시형태 63의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, RF 및 RF' 중 적어도 하나가 -H인 경우 D의 부착 지점은 CPT6의 치환체의 질소 원자를 통한 것이다.
71. 화학식 (i) 또는 화학식 (ii)를 가진 실시형태 62 내지 실시형태 70 중 어느 하나의 캄프토테신-링커 화합물.
72. 화학식 (iii) 또는 화학식 (iv)를 가진 실시형태 62 내지 실시형태 70 중 어느 하나의 캄프토테신-링커 화합물.
73. 화학식 (v) 또는 화학식 (vi)를 가진 실시형태 62 내지 실시형태 70 중 어느 하나의 캄프토테신-링커 화합물.
74. 화학식 (i)를 가진 실시형태 62 내지 실시형태 70 중 어느 하나의 캄프토테신-링커 화합물.
75. 화학식 (ii)를 가진 실시형태 62 내지 실시형태 70 중 어느 하나의 캄프토테신-링커 화합물.
76. 실시형태 62 내지 실시형태 64, 실시형태 66, 실시형태 67 및 실시형태 70 내지 실시형태 75 중 어느 하나의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, D는 CPT6이다.
77. 실시형태 62 내지 실시형태 64, 실시형태 69 및 실시형태 71 내지 실시형태 75 중 어느 하나의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, D는 CPT4이다.
78. 실시형태 62 내지 실시형태 64, 및 실시형태 71 내지 실시형태 75 중 어느 하나의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, D는 CPT1, CPT2, CPT3 및 CPT5로 이루어진 군으로부터 선택된다.
79. 실시형태 62 내지 실시형태 78 중 어느 하나의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, Z'는 말레이미도 모이어티이다.
80. 실시형태 62 내지 실시형태 78 중 어느 하나의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, D가 아미노 치환체의 질소 원자를 통한 공유결합을 가진 CPT1일 때 Z'-A-는 말레이미도-카프로일-β-알라닐 모이어티 이외의 것인 경우, Z'-A-는 말레이미도프로피오닐, 말레이미도프로피오닐-β-알라닐 또는 mDPR이고, 이의 염기성 질소는 선택적으로 양성자화되거나 산-불안정한 보호기로 보호된다.
81. 화학식 (iii), 화학식 (iv), 화학식 (v) 및 화학식 (vi)를 가진 실시형태 62 내지 실시형태 70 중 어느 하나의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, S*는 PEG기이다.
82. 실시형태 63 내지 실시형태 81 중 어느 하나의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, RL은 다음의 구조를 가진 글루쿠로나이드 단위이다:
Figure pct00169
상기 식에서 단일 별표(*)로 표시된 물결선은 D로의 또는 스페이서 단위(Y)로의 공유결합 부위를 나타내고; 이중 별표(**)로 표시된 물결선은 A, B 또는 S*로의 공유결합 지점을 나타낸다.
83. 화학식 (ii), 화학식 (iv) 또는 화학식 (vi)를 가진 실시형태 82의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, 스페이서 단위(Y)가 다음의 화학식을 갖고:
Figure pct00170
또는
Figure pct00171
상기 식에서, EWG는 전자-받개기이고; O*은 D의 히드록시 치환체로부터의 산소 원자를 나타내고; 질소 원자에 인접한 물결선은 글루쿠로나이드 단위의 카보닐 탄소 원자로의 공유결합 부위를 나타내고; O*에 인접한 물결선은 D의 나머지 부분에 대한 공유결합 부위를 나타낸다.
84. 화학식 (ii), 화학식 (iv) 또는 화학식 (vi)를 가진 실시형태 82의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, D는 RF 및 RF'가 각각 -H인 CPT1, CPT4 및 CPT6으로 이루어진 군으로부터 선택되고; 스페이서 단위(Y)가 다음의 화학식을 갖고:
Figure pct00172
또는
Figure pct00173
상기 식에서, EWG는 전자-받개기이고; 질소 원자에 인접한 물결선은 글루쿠로나이드 단위의 카보닐 탄소 원자로의 공유결합 부위를 나타내고; 카보닐 탄소 원자에 인접한 물결선은 RF 및 RF' 각각이 -H인 CPT1, CPT4 또는 CPT6의 아미노 치환체의 질소 원자로의 공유결합 부위를 나타낸다.
85. 화학식 (ii), 화학식 (iv) 또는 화학식 (vi)를 가진 실시형태 82의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, D는 RF 및 RF'가 각각 -H인 CPT1, CPT4 및 CPT6으로 이루어진 군으로부터 선택되고; 스페이서 단위(Y)가 다음의 화학식을 갖고:
Figure pct00174
상기 식에서, EWG는 전자-받개기이고; 질소 원자에 인접한 물결선은 글루쿠로나이드 단위의 카보닐 탄소 원자로의 공유결합 부위를 나타내고; 카보닐 탄소 원자에 인접한 물결선은 RF 및 RF' 각각이 -H인 CPT1, CPT4 또는 CPT6의 아미노 치환체의 질소 원자로의 공유결합 부위를 나타낸다.
86. 실시형태 62 내지 실시형태 85 중 임의의 하나의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, A는 트리아졸일 모이어티로 구성된 커넥터 단위를 가진 접합체를 제공하기 위해 캄프토테신 접합체의 리간드 단위에 대해 전구체인 화학적으로 변형된 표적화제로부터 아지도 치환체로 1,3-이극성 환화를 겪을 수 있는 알키닐 모이어티로 구성된다.
87. 실시형태 62 내지 실시형태 85 중 임의의 하나의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, CPT1이 이의 아미노 치환체의 질소 원자를 통한 공유결합을 가질 때 Z'-A-는 말레이미도 및 트리아졸일 모이어티로 구성될 경우, Z'-A-는 말레이미도-알카노일 모이어티 또는 말레이미도 및 트리아졸일 모이어티로 구성된다.
88. 실시형태 62 내지 실시형태 85 중 임의의 하나의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, D가 CPT1일 때 D는 락톤 고리 상의 히드록실 치환체의 산소 원자에 대한 공유결합을 가지는 경우, Z'-A-는 말레이미도-알카노일-β-알라닐 모이어티로 구성된다.
89. 실시형태 58 내지 실시형태 79 중 임의의 하나의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, Z'-A-가 mDPR로 구성되고, 이의 염기성 질소 원자는 선택적으로 양성자화되거나 산-불안정한 보호기로 보호된다.
90. 화학식 (vii), 화학식 (viii) 또는 화학식 (ix)를 가진 실시형태 62의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, A가 커넥터 단위이거나, 화학식 (i), 화학식 (iii), 화학식 (x) 또는 화학식 (xi)를 가진 실시형태 62의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, A는 커넥터 단위이고 RL은 글루쿠로나이드 단위 이외의 방출가능한 링커이다.
91. 화학식 (viii) 또는 화학식 (x)를 가진 실시형태 62 또는 실시형태 90의 캄프토테신-링커 화합물.
92. 화학식 (i) 또는 화학식 (iii)을 가진 실시형태 62 또는 실시형태 90의 캄프토테신-링커 화합물.
93. 화학식 (vii)을 가진 실시형태 62 또는 실시형태 90의 캄프토테신-링커 화합물.
94. 실시형태 62 및 실시형태 90 내지 실시형태 93 중 임의의 하나의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, D는 화학식 CPT2를 갖는다.
95. 실시형태 62 및 실시형태 90 내지 실시형태 93 중 임의의 하나의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, D는 화학식 CPT3을 갖는다.
96. 실시형태 62 및 실시형태 90 내지 실시형태 93 중 임의의 하나의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, D는 화학식 CPT1을 갖는다.
97. 실시형태 62 및 실시형태 90 내지 실시형태 93 중 임의의 하나의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, D는 화학식 CPT4를 갖는다.
98. 실시형태 62 및 실시형태 90 내지 실시형태 93 중 임의의 하나의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, D는 화학식 CPT5를 갖는다.
99. 실시형태 62 및 실시형태 90 내지 실시형태 93 중 임의의 하나의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, D는 화학식 CPT6을 갖는다.
100. 화학식 (i), 화학식 (iii) 또는 화학식 (x)를 가진 실시형태 62 및 실시형태 90 내지 실시형태 99 중 임의의 하나의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, RL은 다음의 화학식을 갖고:
Figure pct00175
상기 식에서, 이중 별표(**)로 표시된 물결선은 D로의 공유결합 부위를 나타내고; 단일 별표(*)로 표시된 물결선은 A, S* 또는 W로의 공유결합 지점을 나타낸다.
101. 화학식 (x)를 가진 실시형태 100의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, W는 N-메틸-글리신(사코신), N-메틸-알라닌, N-메틸-β-알라닌, 발린 및 N-메틸-발린으로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 단위이다.
102. 실시형태 62 내지 실시형태 101 중 임의의 하나의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, Z'-A-는 말레이미도-알카노일 모이어티, 말레이미드 및 트리아졸 모이어티, 또는 mDPR로 구성되고, 이의 염기성 질소 원자는 선택적으로 양성자화되거나 산-불안정한 보호기로 보호된다.
102. 실시형태 62 내지 실시형태 101 중 임의의 하나의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, Z'-A-는 말레이미도-알카노일 모이어티로 구성된다.
103. 실시형태 62 내지 실시형태 101 중 임의의 하나의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, Z'-A-는 mDPR로 구성된다.
104. 화학식 (iii) 또는 화학식 (x)를 가진 실시형태 62 내지 실시형태 70의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, Z'-A-는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다:
Figure pct00176
및
Figure pct00177
,
상기 식에서, 이중 별표(**)로 표시된 물결선은 S*로의 공유결합 부위를 나타낸다.
105. 화학식 (iii) 또는 화학식 (x)를 가진 실시형태 62 내지 실시형태 70 및 실시형태 94 내지 실시형태 104 중 임의의 하나의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, S*는 다음의 화학식을 갖고:
Figure pct00178
,
상기 식에서 아래첨자 n은 2 내지 36의 범위의 정수이다.
106. 실시형태 62 내지 실시형태 70 및 실시형태 94 내지 실시형태 105 중 임의의 하나의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, Z'-A-는 다음의 화학식을 갖고:
Figure pct00179
,
상기 식에서, 이중 별표(**)로 표시된 물결선은 S*로의 공유결합 부위를 나타낸다.
107. 화학식 (viii) 또는 화학식 (x)를 가진 실시형태 62 내지 실시형태 70 및 실시형태 94 내지 실시형태 105 중 임의의 하나의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, Z'-A-S*-W-는 다음의 화학식을 갖고:
Figure pct00180
,
상기 식에서 아래첨자 n은 2 내지 10 범위의 정수이고; 이중 별표(**)로 표시된 물결선은 D 또는 RL로의 공유결합 부위를 나타내고; 삼중 별표(***)를 가진 물결선은 L의 황 원자로의 공유결합 지점을 나타낸다.
108. 실시형태 107의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, 아래첨자 n은 2내지 4의 범위의 정수이다.
109. 62의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, 상기 캄프토테신-링커 화합물은 다음의 화학식:
Figure pct00181
또는
Figure pct00182
,
또는 이의 염을 갖는다.
110. 62의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, 상기 캄프토테신-링커 화합물은 다음의 구조:
Figure pct00183
,
또는 이의 염을 갖는다.
111. 62의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, 상기 캄프토테신-링커 화합물은 다음의 구조:
Figure pct00184
또는
Figure pct00185
,
또는 이의 염을 갖는다.
112. 62의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, 상기 캄프토테신-링커 화합물은 다음의 구조:
Figure pct00186
또는 이의 염을 갖는다.
113. 62의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, 상기 캄프토테신-링커 화합물은 다음의 구조:
Figure pct00187
,
또는 이의 염을 갖는다.
114. 대상에서 암의 치료를 위한 약제의 제조에서 캄프토테신 접합체의 용도로서, 여기서 캄프토테신 접합체는 실시형태 1 내지 실시형태 113 중 임의의 하나의 화학식을 갖는다.
115. 실시형태 114에 따른 용도에 있어서, 상기 암은 림프종, 백혈병, 및 고형 종양으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
116. 실시형태 114에 따른 용도에 있어서, 상기 암은 림프종 또는 백혈병이다.
117. 대상에서 자가면역 질환의 치료를 위한 약제의 제조에서 캄프토테신 접합체의 용도로서, 여기서 캄프토테신 접합체는 실시형태 1 내지 실시형태 113 중 임의의 하나의 화학식을 갖고, 자가면역 질환은 Th2 림프구 관련 장애, Th1 림프구-관련 장애, 및 활성화된 B 림프구-관련 장애로 이루어진 군으로부터 선택된다.
118. 실시형태 1 내지 실시형태 61 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체의 제조 방법으로서, 상기 방법은 실시형태 62 내지 실시형태 113 중 임의의 하나의 캄프토테신-링커 화합물의 Z'에 대해 반응성인 작용기를 가진 항체를 접촉하는 단계를 포함한다.
1a. 화학식 L-(Q-D)p 또는 이의 염을 가진 캄프토테신 접합체로, 상기 식에서 L은 리간드 단위이고; Q는 -Z-A-RL-, -Z-A-RL-Y-, -Z-A-S*-RL-, -Z-A-B(S*)-RL-, -Z-A-S*-RL- Y- 및 -Z-A-B(S*)-RL-Y-로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 갖는 링커 단위이고, 상기 식에서 Z는 스트레처 단위이고, A는 결합 또는 커넥터 단위이고; B는 병렬 커넥터 단위이고; S*은 분획제이고; RL은 글루쿠로나이드 단위이고; Y는 스페이서 단위이고; D는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택되는 약물 단위이고:
Figure pct00188
상기 식에서, RB는 H, C1-C8 알킬, C1-C8 할로알킬, C3-C8 사이클로알킬, C3-C8사이클로알킬C1-C4 알킬, 페닐 및 페닐C1-C4 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 구성원이고; RC는 C1-C6 알킬 및 C3-C6 사이클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 구성원이고; 각각의 RF 및 RF'는 H, C1-C8 알킬, C1-C8 히드록시알킬, C1-C8 아미노알킬, C1-C4 알킬아미노C1-C8 알킬, (C1-C4 히드록시알킬)(C1-C4 알킬)아미노C1-C8 알킬, 디(C1-C4 알킬)아미노C1-C8 알킬, C1-C4 히드록시알킬C1-C8 아미노알킬, C1-C8 알킬C(O)-, C1-C8 히드록시알킬C(O)-, C1-C8 아미노알킬C(O)-, C3-C10 사이클로알킬, C3-C10사이클로알킬C1-C4 알킬, C3-C10 헤테로사이클로알킬, C3-C10 헤테로사이클로알킬C1-C4 알킬, 페닐, 페닐C1-C4 알킬, 디페닐C1-C4 알킬, 헤테로아릴 및 헤테로아릴C1-C4 알킬로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 구성원이거나; RF 및 RF'는 각각이 부착된 질소 원자와 결합하여 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2, -NHC1-C4 알킬 및 -N(C1-C4 알킬)2로부터 선택된 0개 내지 3개의 치환체를 가진 5-원 고리, 6-원 고리 또는 7-원 고리를 형성하고; 여기서 RB, RC, RF 및 RF'의 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 페닐 및 헤테로아릴 부분은 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2, -NHC1-C4 알킬 및 -N(C1-C4 알킬)2로부터 선택된 0개 내지 3개 치환체로 치환되고; 아래첨자 p는 1 내지 16의 정수이고;
상기 식에서 Q는 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, 또는 CPT6 상에 존재하는 임의의 히드록실 및 아민기를 통해 부착되고, 여기서 D가 CPT1의 아미노기를 통한 부착을 가진 CPT1인 경우, -Z-A-는 말레이미도-카프로일-β-알라닐 이외의 것이다.
2a. 실시형태 1a의 캄프토테신 접합체에 있어서, Q는 -Z-A-RL- 및 -Z-A-RL-Y-로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 갖는 링커 단위이다.
3a. 실시형태 1a의 캄프토테신 접합체에 있어서, Q는 -Z-A-S*-RL- 및 -Z-A-S*-RL-Y-로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 갖는 링커 단위이다.
4a. 실시형태 1a의 캄프토테신 접합체에 있어서, Q는 -Z-A-B(S*)-RL- 및 -Z-A-B(S*)-RL-Y-로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 갖는 링커 단위이다.
5a. 실시형태 1a 내지 4a 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, D는 화학식 CPT1을 갖는다.
6a. 실시형태 1a 내지 4a 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, D는 화학식 CPT2를 갖는다.
7a. 실시형태 1a 내지 4a 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, D는 화학식 CPT3을 갖는다.
8a. 실시형태 1a 내지 4a 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, D는 화학식 CPT4를 갖는다.
9a. 실시형태 1a 내지 4a 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, D는 화학식 CPT5를 갖는다.
10a. 실시형태 1a 내지 4a 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, D는 화학식 CPT6을 갖는다.
11a. 실시형태 1a 내지 4a 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, L은 항체이다.
12a. 실시형태 1a의 캄프토테신 접합체에 있어서, Q는 다음의 화학식을 가진 글루쿠로나이드 단위(RL)를 포함한다:
Figure pct00189
상기 식에서, 당은 천연 또는 비-천연 모노사카라이드의 육탄당 형태이고, 여기서 RL은 임의의 CPT1, CPT4 또는 CPT6의 1차 아민에 부착되고, 여기서 단일 *로 표시된 물결선은 CPT1, CPT4 또는 CPT6의 1차 아민으로의, 또는 스페이서 단위(Y)로의 공유결합 부위를 나타내고; **로 표시된 물결선은 Q의 추가 링커 성분에 대한 부착 지점을 나타낸다.
13a. 실시형태 12a의 캄프토테신 접합체에 있어서, 스페이서 단위(Y)가 존재하고 다음을 포함한다:
Figure pct00190
상기 식에서 EWG는 전자-받개기이다.
14a. 실시형태 12a의 캄프토테신 접합체에 있어서, A는 클릭 화학의 사용 하에 알킨 및 아지드로부터 형성된 트리아졸을 포함한다.
15a. 실시형태 12a의 캄프토테신 접합체에 있어서, -Z-A-는 말레이미도-알카논산 성분, 말레이미도 및 트리아졸 성분, 또는 mDPR 성분을 포함한다.
16a. 실시형태 12a의 캄프토테신 접합체에 있어서, -Z-A-는 말레이미도-알카노일-β-알라닐 성분을 포함한다.
17a. 실시형태 12a의 캄프토테신 접합체에 있어서, -Z-A-는 mDPR 성분을 포함한다.
18a. 실시형태 12a의 캄프토테신 접합체에 있어서, Q는 다음의 화학식을 갖고:
Figure pct00191
상기 식에서 단일 *로 표시된 물결선은 CPT1, CPT4 또는 CPT6의 1차 아민으로의, 또는 스페이서 단위로의 공유결합 부위를 나타내고; **로 표시된 물결선은 L의 황 원자에 대한 부착 지점을 나타낸다.
19a. 실시형태 1a의 캄프토테신 접합체에 있어서, 글루쿠로나이드 단위는 다음의 화학식을 갖고:
Figure pct00192
상기 식에서 단일 *로 표시된 물결선은 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5 또는 CPT6의 히드록실로의, 또는 스페이서 단위(Y)로의 공유결합 지점을 나타내고; **로 표시된 물결선은 A, B, S* 또는 Z에 대한 부착 지점을 나타낸다.
20a. 실시형태 19a의 캄프토테신 접합체에 있어서, 스페이서 단위가 존재하고 다음을 포함한다:
Figure pct00193
상기 식에서 EWG는 전자-받개기이다.
21a. 실시형태 19a의 캄프토테신 접합체에 있어서, 스페이서 단위가 존재하고 다음을 포함한다:
Figure pct00194
.
22a. 실시형태 19a의 캄프토테신 접합체에 있어서, A는 클릭 화학의 사용 하에 알킨 및 아지드로부터 형성된 트리아졸을 포함한다.
23a. 실시형태 19a의 캄프토테신 접합체에 있어서, -Z-A-는 말레이미도-알카논산 성분, 말레이미도 및 트리아졸 성분, 또는 mDPR 성분을 포함한다.
24a. 실시형태 19a의 캄프토테신 접합체에 있어서, -Z-A-는 말레이미도-알카노일-β-알라닐 성분을 포함한다.
25a. 실시형태 19a의 캄프토테신 접합체에 있어서, -Z-A-는 mDPR 성분을 포함한다.
26a. 실시형태 19a의 캄프토테신 접합체에 있어서, -Z-A-는 말레이미도프로피오닐 성분을 포함하고 분획제(S*)는 상기 링커 단위에 존재한다.
27a. 실시형태 19a의 캄프토테신 접합체에 있어서, Q는 다음의 화학식을 갖고:
Figure pct00195
상기 식에서 n은 1 내지 50의 정수이고; 단일 *로 표시된 물결선은 D로의 또는 스페이서 단위(Y)로의 공유결합 부위를 나타내고; ***로 표시된 물결선은 L의 황 원자로의 부착 지점을 나타낸다.
28a. 실시형태 27a의 캄프토테신 접합체에 있어서, n은 4이다.
29a. 실시형태 1a 내지 실시형태 28a 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, L은 CD19, CD30, CD33, CD70 및 LIV-1로 이루어진 군으로부터 선택되는 항원에 특이적으로 결합하는 항체이다.
30a. Z'-A-RL-D (i), Z'-A-RL-Y-D (ii), Z'-A-S*-RL-D (iii), Z'-A-S*-RL-Y-D (iv), Z'-A-B(S*)-RL-D (v) 및 Z'-A-B(S*)-RL-Y-D (vi)로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 가진 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, Z'는 스트레처 단위이고, A는 결합 또는 커넥터 단위이고; B는 병렬 커넥터 단위이고; S*은 분획제이고; RL은 글루쿠로나이드 단위이고; Y는 스페이서 단위이고; D는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택되는 캄프토테신 화합물이이고:
Figure pct00196
Figure pct00197
;
RB는 H, C1-C8 알킬, C1-C8 할로알킬, C3-C8 사이클로알킬, C3-C8사이클로알킬C1-C4 알킬, 페닐 및 페닐C1-C4 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 구성원이고; RC는 C1-C6 알킬 및 C3-C6 사이클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 구성원이고; 각각의 RF 및 RF'는 -H, C1-C8 알킬, C1-C8 히드록시알킬, C1-C8 아미노알킬, C1-C4 알킬아미노C1-C8 알킬, (C1-C4 히드록시알킬)(C1-C4 알킬)아미노C1-C8 알킬, 디(C1-C4 알킬)아미노C1-C8 알킬, C1-C4 히드록시알킬C1-C8 아미노알킬, C1-C8 알킬C(O)-, C1-C8 히드록시알킬-C(O)-, C1-C8 아미노알킬C(O)-, C3-C10 사이클로알킬, C3-C10사이클로알킬C1-C4 알킬, C3-C10 헤테로사이클로알킬, C3-C10 헤테로사이클로알킬C1-C4 알킬, 페닐, 페닐C1-C4 알킬, 디페닐C1-C4 알킬, 헤테로아릴 및 헤테로아릴C1-C4 알킬로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 구성원이거나; RF 및 RF'는 각각이 부착된 질소 원자와 결합하여 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2, NHC1-C4 알킬 및 N(C1-C4 알킬)2로부터 선택되는 0개 내지 3개의 치환체를 가진 5-원 고리, 6-원 고리 또는 7-원 고리를 형성하고; 여기서 RB, RC, RF 및 RF'의 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 페닐 및 헤테로아릴 부분은 할로겐, C1-C4 알킬, OH, OC1-C4 알킬, NH2, NHC1-C4 알킬 및 N(C1-C4 알킬)2로부터 선택되는 0개 내지 3개의 치환체로 치환되고;
아래첨자 p는 1 내지 16의 정수이고; 여기서 Q는 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, 또는 CPT6 상에 존재하는 임의의 히드록실 및 아민기를 통한 부착이고; 여기서 D가 CPT1의 아미노기를 통한 부착을 가진 CPT1인 경우, -Z-A-는 말레이미도-카프로일-β-알라닐 외의 것이다.
31a. 화학식 (i) 또는 화학식 (ii)를 가진 실시형태 30a의 캄프토테신-링커 화합물.
32a. 화학식 (iii) 또는 화학식 (iv)를 가진 실시형태 30a의 캄프토테신-링커 화합물.
33a. 화학식 (v) 또는 화학식 (vi)를 가진 실시형태 30a의 캄프토테신-링커 화합물.
34a. 화학식 (i)를 가진 실시형태 30a의 캄프토테신-링커 화합물.
35a. 화학식 (ii)를 가진 실시형태 30a의 캄프토테신-링커 화합물.
36a. 실시형태 30a 내지 실시형태 34a 중 임의의 하나의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, D는 CPT6이다.
37a. 실시형태 30a 내지 실시형태 34a 중 임의의 하나의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, D는 CPT4이다.
38a. 실시형태 30a 내지 실시형태 34a 중 임의의 하나의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, D는 CPT1, CPT2, CPT3 및 CPT5로 이루어진 군으로부터 선택된다.
39a. 실시형태 30a 내지 실시형태 34a 중 임의의 하나의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, Z'는 말레이미도기이다.
40a. 실시형태 30a 내지 실시형태34a 중 임의의 하나의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, Z'-A-는 말레이미도프로피오닐, mDPR 또는 말레이미도프로피오닐-β-알라닐이다.
41a. 실시형태 30a 및 실시형태 32 a 내지 실시형태 34a 중 임의의 하나의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, S*는 PEG기이다.
42a. 실시형태 30a의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, 상기 글루쿠로나이드 단위는 다음의 화학식을 갖고:
Figure pct00198
상기 식에서 단일 *로 표시된 물결선은 D로의 또는 스페이서 단위(Y)로의 부착 부위를 나타내고; **로 표시된 물결선은 캄프토테신-링커 화합물의 추가 링커 성분, A, B, S* 또는 Z'로의 부착 지점을 나타낸다.
42a. 실시형태 30a의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, 스페이서 단위가 존재하고 다음을 포함한다:
Figure pct00199
상기 식에서 EWG는 전자-받개기이다.
43a. 실시형태 42a의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, 스페이서 단위가 존재하고 다음을 포함한다:
Figure pct00200
.
44a. 실시형태 42a의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, A는 클릭 화학의 사용 하에 알킨 및 아지드로부터 형성된 트리아졸을 포함한다.
45a. 실시형태 42a의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, Z'-A-는 말레이미도-알카논산 성분, 말레이미도 및 트리아졸 성분, 또는 mDPR 성분을 포함한다.
46a. 실시형태 42a의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, Z'-A-는 말레이미도-알카노일-β-알라닐 성분을 포함한다.
47a. 실시형태 42a의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, Z'-A-는 mDPR 성분을 포함한다.
48a. 실시형태 42a의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, Z'-A-는 말레이미도프로피오닐 성분을 포함하고 분획제(S*)는 상기 링커 단위에 존재한다.
49a. 실시형태 30a의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, 화학식 (i) 및 화학식 (ii)는 다음의 화학식을 포함한다:
Figure pct00201
상기 식에서, 단일 *로 표시된 물결선은 CPT1, CPT4 또는 CPT6의 1차 아민으로의 또는 스페이서 단위로의 부착 부위를 나타낸다.
50a. 이를 필요로 하는 대상에서 암을 치료하는 방법으로서, 상기 방법은 실시형태 1a 내지 실시형태 29a 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체를 대상에 투여하는 단계를 포함한다.
51a. 실시형태 50a의 방법에 있어서, 상기 암은 림프종, 백혈병, 및 고형 종양으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
52a. 실시형태 50a의 방법에 있어서, 상기 암은 림프종 또는 백혈병이다.
53a. 실시형태 50a내지 실시형태 53a 중 임의의 하나의 방법에 있어서, 추가 치료제를 추가로 포함한다.
54a. 실시형태 53a의 방법에 있어서, 상기 추가 치료제는 하나 이상의 화학요법제 또는 방사선 요법이다.
55a. 이를 필요로 하는 대상에서 자가면역 질환을 치료하는 방법으로서, 상기 방법은 실시형태 1a 내지 실시형태 29a 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체를 대상에 투여하는 단계를 포함한다.
56a. 실시형태 55a의 방법에 있어서, 상기 자가면역 질환은 Th2 림프구 관련 장애, Th1 림프구-관련 장애, 및 활성화된 B 림프구-관련 장애로 이루어진 군으로부터 선택된다.
57a. 실시형태 1a 내지 실시형태 29a 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체의 제조 방법으로서, 상기 방법은 항체를 실시형태 30a 내지 실시형태 49a 중 임의의 하나의 캄프토테신-링커 화합물과 반응시키는 단계를 포함한다.
58a. 실시형태 1a 내지 실시형태 29a 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체를 포함하는 키트.
59a. 실시형태 58a의 키트에 있어서, 추가 치료제를 추가로 포함한다.
1b. 화학식 L-(Q-D)p 또는 이의 염을 가진 캄프토테신 접합체로, 상기 식에서 L은 리간드 단위이고; Q는 -Z-A-, -Z-A-RL-, -Z-A-S*-W-, -Z-A-B(S*)-W-, -Z-A-S*-RL-, -Z-A- B(S*)-RL-, -Z-A-S*-W-RL- 및 -Z-A-B(S*)-W-RL-로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 갖는 링커 단위이고, 상기 식에서 Z는 스트레처 단위이고, A는 결합 또는 커넥터 단위이고; B는 병렬 커넥터 단위이고; S*은 분획제이고; RL은 방출가능한 링커이고; W는 아미노산 단위이고; D는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택되는 약물 단위이고:
Figure pct00202
Figure pct00203
;
상기 식에서 RB는 H, C1-C8 알킬, C1-C8 할로알킬, C3-C8 사이클로알킬, C3-C8사이클로알킬C1-C4 알킬, 페닐 및 페닐C1-C4 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 구성원이고; RC는 C1-C6 알킬 및 C3-C6 사이클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 구성원이고; 각각의 RF 및 RF'는 -H, C1-C8 알킬, C1-C8 히드록시알킬, C1-C8 아미노알킬, C1-C4 알킬아미노C1-C8 알킬, (C1-C4 히드록시알킬)(C1-C4 알킬)아미노C1-C8 알킬, 디(C1-C4 알킬)아미노C1-C8 알킬, C1-C4 히드록시알킬C1-C8 아미노알킬, C1-C8 알킬C(O)-, C1-C8 히드록시알킬C(O)-, C1-C8 아미노알킬C(O)-, C3-C10 사이클로알킬, C3-C10사이클로알킬C1-C4 알킬, C3-C10 헤테로사이클로알킬, C3-C10 헤테로사이클로알킬C1-C4 알킬, 페닐, 페닐C1-C4 알킬, 디페닐C1-C4 알킬, 헤테로아릴 및 헤테로아릴C1-C4 알킬로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 구성원이거나; RF 및 RF'는 각각이 부착된 질소 원자와 결합하여 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2, NHC1-C4 알킬 및 N(C1-C4 알킬)2로부터 선택되는 0개 내지 3개의 치환체를 가진 5-원 고리, 6-원 고리 또는 7-원 고리를 형성하고; 여기서 RB, RC, RF 및 RF'의 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 페닐 및 헤테로아릴 부분은 할로겐, C1-C4 알킬, OH, OC1-C4 알킬, NH2, NHC1-C4 알킬 및 N(C1-C4 알킬)2로부터 선택되는 0개 내지 3개 치환체로 치환되고;
여기서, D의 Q에 대한 부착 지점은 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, 또는 CPT6의 락톤 고리 상의 히드록실 치환체의 산소 원자를 통해서이다.
2b. 실시형태 1b의 캄프토테신 접합체에 있어서, Q는 화학식 -Z-A-S*-W-를 가진 링커 단위이다.
3b. 실시형태 1b의 캄프토테신 접합체에 있어서, Q는 화학식 -Z-A-S*-W-RL-를 가진 링커 단위이다.
4b. 실시형태 1b의 캄프토테신 접합체에 있어서, Q는 화학식 -Z-A-를 가진 링커 단위이다.
5b. 실시형태 1b 내지 실시형태 4b 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, D는 화학식 CPT2를 갖는다.
6b. 실시형태 1b 내지 실시형태 4b 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, D는 화학식 CPT3을 갖는다.
7b. 실시형태 1b 내지 실시형태 4b 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, D는 화학식 CPT1을 갖는다.
8b. 실시형태 1b 내지 실시형태 4b 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, D는 화학식 CPT4를 갖는다.
9b. 실시형태 1b 내지 실시형태 4b 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, D는 화학식 CPT5를 갖는다.
10b. 실시형태 1b 내지 실시형태 4b 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, D는 화학식 CPT6을 갖는다.
11b. 실시형태 1b 내지 실시형태 4b 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, L은 항체이다.
12b. 실시형태 3b의 캄프토테신 접합체에 있어서, RL은 다음의 화학식을 갖고:
Figure pct00204
상기 식에서 **로 표시된 물결선은 D에 대한 부착 부위를 나타내고; *로 표시된 물결선은 Q의 다른 링커 성분에 대한 부착 지점을 나타낸다.
13b. 실시형태 12b의 캄프토테신 접합체에 있어서, W는 N-메틸 글리신, N-메틸 알라닌, N-메틸 β-알라닌, 발린 및 N-메틸 발린으로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 단위이다.
14b. 실시형태 12b의 캄프토테신 접합체에 있어서, -Z-A-는 말레이미도-알카노일 모이어티, 또는 말레이미도 및 트리아졸 모이어티, 또는 mDPR 모이어티를 포함한다.
15b. 실시형태 12b의 캄프토테신 접합체에 있어서, -Z-A-는 말레이미도-알카노일 모이어티이다.
16b. 실시형태 12b의 캄프토테신 접합체에 있어서, -Z-A-는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 갖고:
Figure pct00205
및
Figure pct00206
,
상기 식에서, **로 표시된 물결선은 S*로의 부착 부위를 나타내고; ***로 표시된 물결선은 L의 황 원자로의 부착 지점을 나타낸다.
17b. 실시형태 12b의 캄프토테신 접합체에 있어서, S*는 다음의 화학식을 갖고:
Figure pct00207
아래첨자 n은 2 내지 36의 정수이다.
18b. 실시형태 2b의 캄프토테신 접합체에 있어서, W는 N-메틸 글리신, N-메틸 알라닌, N-메틸 β-알라닌, 발린 및 N-메틸 발린으로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 단위이다.
19b. 실시형태 12b의 캄프토테신 접합체에 있어서, -Z-A-는 말레이미도-알카노일 모이어티, 또는 말레이미도 및 트리아졸 모이어티, 또는 mDPR 모이어티를 포함한다.
20b. 실시형태 2b의 캄프토테신 접합체에 있어서, -Z-A-는 말레이미도-알카노일 모이어티를 포함한다.
21b. 실시형태 2b의 캄프토테신 접합체에 있어서, -Z-A-는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 갖고:
Figure pct00208
및
Figure pct00209
,
상기 식에서, **로 표시된 물결선은 S*로의 부착 부위를 나타내고; ***로 표시된 물결선은 L의 황 원자로의 부착 지점을 나타낸다.
22b. 실시형태 2b의 캄프토테신 접합체에 있어서, S*는 다음의 화학식을 갖는다:
Figure pct00210
.
23b. 실시형태 18b의 캄프토테신 접합체에 있어서, -Z-A-는 다음과 같고:
Figure pct00211
,
상기 식에서, **로 표시된 물결선은 S*로의 부착 부위를 나타내고; ***로 표시된 물결선은 L의 황 원자로의 부착 지점을 나타낸다.
24b. 실시형태 18b의 캄프토테신 접합체에 있어서, Q는 다음의 화학식을 갖고:
Figure pct00212
상기 식에서 n은 2 내지 10의 정수이고; **로 표시된 물결선은 D로의 부착 부위를 나타내고; ***로 표시된 물결선은 L의 황 원자로의 부착 지점을 나타낸다.
25b. 실시형태 27b의 캄프토테신 접합체에 있어서, n은 2 내지 4이다.
26b. 실시형태 1b 내지 실시형태 25b 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체에 있어서, L은 CD19, CD30, CD33, CD70 및 LIV-1로 이루어진 군으로부터 선택되는 항원에 선택적으로 결합하는 항체이다.
27b. Z'-A-D (i), Z'-A-RL-D (ii), Z'-A-S*-W-D (iii), Z'-A-S*-W-RL-D (iv), Z'-A-B(S*)-RL-D (v) 및 Z'-A-B(S*)-W-RL-D로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 가진 캄프토테신-링커 화합물로, 상기 식에서 Z'는 스트레처 단위이고, A는 결합 또는 커넥터 단위이고; B는 병렬 커넥터 단위이고; S*은 분획제이고; RL은 방출가능한 링커 단위이고; D는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택되는 약물 단위이고:
Figure pct00213
Figure pct00214
;
상기 식에서, RB 는 H, C1-C8 알킬, C1-C8 할로알킬, C3-C8 사이클로알킬, C3-C8사이클로알킬C1-C4 알킬, 페닐 및 페닐C1-C4 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 구성원이고; RC는 C1-C6 알킬 및 C3-C6 사이클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 구성원이고; 각각의 RF 및 RF'는 -H, C1-C8 알킬, C1-C8 히드록시알킬, C1-C8 아미노알킬, C1-C4 알킬아미노C1-C8 알킬, (C1-C4 히드록시알킬)(C1-C4 알킬)아미노C1-C8 알킬, 디(C1-C4 알킬)아미노C1-C8 알킬, C1-C4 히드록시알킬C1-C8 아미노알킬, C1-C8 알킬C(O)-, C1-C8 히드록시알킬-C(O)-, C1-C8 아미노알킬C(O)-, C3-C10 사이클로알킬, C3-C10사이클로알킬C1-C4 알킬, C3-C10 헤테로사이클로알킬, C3-C10 헤테로사이클로알킬C1-C4 알킬, 페닐, 페닐C1-C4 알킬, 디페닐C1-C4 알킬, 헤테로아릴 및 헤테로아릴C1-C4 알킬로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 구성원이거나,
RF 및 RF'는 각각이 부착된 질소 원자와 결합하여 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2, NHC1-C4 알킬 및 N(C1-C4 알킬)2로부터 선택된 0개 내지 3개의 치환체를 가진 5-원 고리, 6-원 고리 또는 7-원 고리를 형성하고; 여기서 RB, RC, RF 및 RF'의 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 페닐 및 헤테로아릴 모이어티는 할로겐, C1-C4 알킬, OH, OC1-C4 알킬, NH2, NHC1-C4 알킬 및 N(C1-C4 알킬)2로부터 선택된 0개 내지 3개의 치환체로 치환되고; 여기서 RB, RC, RF 및 RF'의 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 페닐 및 헤테로아릴 모이어티는 할로겐, C1-C4 알킬, OH, OC1-C4 알킬, NH2, NHC1-C4 알킬 및 N(C1-C4 알킬)2로 이루어진 군으로부터 선택된 0개 내지 3개의 치환체로 치환되고;
여기서, D의 Q에 대한 부착 지점은 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, 또는 CPT6의 락톤 고리 상의 히드록실 치환체의 산소 원자를 통해서이다.
28b. 화학식 (i) 또는 화학식 (ii)를 가진 실시형태 27b의 캄프토테신-링커 화합물.
29b. 화학식 (iii) 또는 화학식 (iv)를 가진 실시형태 27b의 캄프토테신-링커 화합물.
30b. 화학식 (v) 또는 화학식 (vi)를 가진 실시형태 27b의 캄프토테신-링커 화합물.
31b. 화학식 (i)를 가진 실시형태 27b의 캄프토테신-링커 화합물.
32b. 화학식 (ii)를 가진 실시형태 27b의 캄프토테신-링커 화합물.
33b. 실시형태 27b 내지 실시형태 31b 중 임의의 하나의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서 D는 CPT2이다.
34b. 실시형태 27b 내지 실시형태 31b 중 임의의 하나의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서 D는 CPT3이다.
35b. 실시형태 27b 내지 실시형태 31b 중 임의의 하나의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, D는 CPT1, CPT4, CPT5 및 CPT6으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
36b. 실시형태 27b 내지 실시형태 31b 중 임의의 하나의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, Z'는 말레이미도기이다.
37b. 실시형태 27b 내지 실시형태 31b 중 임의의 하나의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, Z'-A-는 말레이미도프로피오닐, mDPR 또는 말레이미도프로피오닐-β-알라닐이다.
38b. 실시형태 27b 및 실시형태 29b 내지 실시형태 31b 중 임의의 하나의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, S*는 PEG기이다.
39b. 실시형태 27b의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, RL은 다음의 화학식을 갖고:
Figure pct00215
상기 식에서 **로 표시된 물결선은 D에 대한 부착 부위를 나타내고; *로 표시된 물결선은 Q의 다른 링커 성분에 대한 부착 지점을 나타낸다.
40b. 실시형태 39b의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, Z'-A-는 말레이미도-알카논산 모이어티, 또는 말레이미도 및 트리아졸 모이어티, 또는 mDPR 모이어티를 포함한다.
41b. 실시형태 39b의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, Z'-A-는 말레이미도-알카노일-β-알라닐 성분을 포함한다
42b. 실시형태 39b의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, Z'-A-는 mDPR 모이어티를 포함한다.
43b. 실시형태 39b의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, Z'-A-는 말레이미도프로피오닐 모이어티를 포함하고 여기서 분획제(S*)가 존재한다.
44b. 다음의 화학식을 가진 실시형태 39b의 캄프토테신-링커 화합물:
Figure pct00216
.
45b. 다음의 화학식을 가진 실시형태 39b의 캄프토테신-링커 화합물:
Figure pct00217
.
46b. 이를 필요로 하는 대상에서 암을 치료하는 방법으로서, 상기 방법은 실시형태 1b 내지 실시형태 29b 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체를 대상에 투여하는 단계를 포함한다.
47b. 실시형태 46b의 방법에 있어서, 상기 암은 림프종, 백혈병, 및 고형 종양으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
48b. 실시형태 46b의 방법에 있어서, 상기 암은 림프종 또는 백혈병이다.
49b. 실시형태 46b 내지 실시형태 48b 중 임의의 하나의 방법에 있어서, 추가 치료제를 투여하는 단계를 추가로 포함한다.
50b. 실시형태 39b의 방법에 있어서, 상기 추가 치료제는 하나 이상의 화학요법제 또는 방사선 요법이다.
51b. 이를 필요로 하는 대상에서 자가면역 질환을 치료하는 방법으로서, 상기 방법은 실시형태 1b 내지 실시형태 26b 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체를 대상에 투여하는 단계를 포함한다.
52b. 실시형태 51b의 방법에 있어서, 상기 자가면역 질환은 Th2 림프구 관련 장애, Th1 림프구-관련 장애, 및 활성화된 B 림프구-관련 장애로 이루어진 군으로부터 선택된다.
53b. 실시형태 1b 내지 실시형태 26b 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체를 제조하는 방법으로서, 상기 방법은 유리 티올을 가진 항체를 실시형태 27b 내지 실시형태 43b 중 임의의 하나의 캄프토테신-링커 화합물과 반응시키는 단계를 포함한다.
54b. 실시형태 1b 내지 실시형태 26b 중 임의의 하나의 캄프토테신 접합체를 포함하는 키트.
55b. 실시형태 54b의 키트에 있어서, 추가 치료제를 추가로 포함한다.
1c. 다음의 화학식:
L-(Q-D)p
또는 이의 염을 가즌 캄프토테신 접합체로로, 상기 식에서 L은 표적화제, 특히 암 세포 항원에 선택적으로 결합하는 항체 유래의 리간드 단위이고; 아래첨자 p는 1 내지 16의 범위의 정수이고; Q는 -Z-A-, -Z-A-RL-, -Z-A-RL-Y-, -Z-A-S*-RL-, -Z-A-S*-RL-Y-, -Z-A-S*-W-, -Z-A-S*-W-RL-, -Z-A-B(S*)-RL-, -Z-A-B(S*)-W-, 및 -Z-A-B(S*)-W-RL- 및 -Z-A-B(S*)-RL-Y-으로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 갖는 링커 단위이고, 여기서
Z는 스트레처 단위이고; A는 결합 또는 커넥터 단위이고; B는 병렬 커넥터 단위이고; S*은 분획제이고; RL은 방출가능한 링커이고; W는 아미노산 단위이고; Y는 스페이서 단위이고; D는 다음과 같이 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, CPT6 및 CPT7로 이루어진 군으로부터 선택되는 약물 단위이다:
Figure pct00218
Figure pct00219
Figure pct00220
Figure pct00221
;
상기 식에서, RB는 H, C1-C8 알킬, C1-C8 할로알킬, C3-C8 사이클로알킬, (C3-C8 사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, 페닐 및 페닐-C1-C4 알킬-로 이루어진 군으로부터 선택되는 구성원이고; RC는 C1-C6 알킬 및 C3-C6 사이클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 구성원이고; 각각의 RF 및 RF'는 -H, C1-C8 알킬, C1-C8 히드록시알킬, C1-C8 아미노알킬, (C1-C4 알킬아미노)-C1-C8 알킬-, N,N-(C1-C4 히드록시알킬)(C1-C4 알킬)-아미노-C1-C8 알킬-, N,N-디(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N-C1-C4 히드록시알킬-C1-C8 아미노알킬-, C1-C8 알킬C(O)-, C1-C8 히드록시알킬-C(O)-, C1-C8 아미노알킬C(O)-, C3-C10 사이클로알킬, (C3-C10 사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, C3-C10 헤테로사이클로알킬, (C3-C10 헤테로사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, 페닐, 페닐-C1-C4 알킬-, 디페닐-C1-C4 알킬-, 헤테로아릴 및 헤테로아릴-C1-C4 알킬-로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 구성원이거나, RF 및 RF'는 각각이 부착된 질소 원자와 결합하여 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2, -NHC1-C4 알킬 및 -N(C1-C4 알킬)2로부터 선택되는 0개 내지 3개의 치환체를 가진 5-원 고리, 6-원 고리 또는 7-원 고리를 형성하고; 여기서 RB, RC, RF 및 RF'의 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 페닐 및 헤테로아릴 모이어티는 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2,- NHC1-C4 알킬 및 -N(C1-C4 알킬)2로 이루어진 군으로부터 선택되는 0개 내지 3개의 치환체로 치환되거나, 여기서 D는 표 H의 13a 내지 13c, 표 I의 14a 내지 14a 및 표 J의 18a 내지 18r 중 임의의 하나의 캄프토테신 화합물이고;
상기 식에서 Q가 -Z-A-RL-, -Z-A-RL-Y-, -Z-A-S*-RL-, -Z-A-B(S*)-RL-, -Z-A-S*-RL-Y- 또는 -Z-A-B(S*)-RL-Y-인 경우 D로의 공유결합 지점은 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, CPT6 또는 CPT7 또는 표 H의 13a 내지 13c, 표 I의 14a 내지 14a 및 표 J의 18a 내지 18r 중 임의의 하나에 대한 히드록실 또는 아미노 치환체 중 임의의 하나의 헤테로원자에 대해서이거나, Q는 -Z-A-, -Z-A-S*-W- 또는 -Z-A-B(S*)-W-이거나, Q는 RL이 글루쿠로나이드 단위 이외의 방출가능한 단위인 -Z-A-S*-RL-, -Z-A-B(S*)-RL-, -Z-A-S*-W-RL-, 또는 -Z-A-B(S*)-W-RL-인 경우 D의 공유결합 지점은 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, CPT6 또는 CPT7 또는 표 H의 13a 내지 13c, 표 I의 14a 내지 14a 및 표 J의 18a 내지 18r 중 임의의 하나의 락톤 고리 상의 히드록실 치환체의 산소 원자에 대한 것이고;
여기서 공유결합 지점이 CPT6 상의 아미노 치환체의 질소 원자에 대해서인 경우 RF 및 RF' 중 적어도 하나가 -H이고; 여기서 D는 이의 아미노 치환체의 질소 원자를 통한 공유결합을 가진 CPT1인 경우 -Z-A-RL-, -Z-A-RL-Y-, -Z-A-S*-RL-, -Z-A-B(S*)-RL-, -Z-A-S*-RL-Y- 및 -Z-A-B(S*)-RL-Y-의 -Z-A-는 선택적으로 가수분해된 형태의 숙신이미드 고리를 가진, 숙신이미도-카프로일-β-알라닐 모이어티 이외의 것이다.
2c. 실시형태 1c의 캄프토테신 접합체에 있어서, Q는 -Z-A-RL-; -Z-A- RL-Y-; -Z-A-S*-RL-; -Z-A-B(S*)-RL-; -Z-A-S*-RL-Y-; 및 -Z-A-B(S*)-RL-Y-로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 가진 링커 단위이고; 여기서 A는 커넥터 단위이고 RL은 글루쿠로나이드 단위이다.
3c. 실시형태 2c의 캄프토테신 접합체에 있어서, D의 공유결합 지점은 CPT1 내지 CPT7 중 임의의 하나의 락톤 고리 상의 히드록실 치환체의 산소 원자를 통해서이다.
4c. 실시형태 2c의 캄프토테신 접합체에 있어서, -Z-A-가 선택적으로 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해된 형태의 숙신이미드 고리를 가진, 숙신이미도-카프로일-β-알라닐 이외의 것인 경우 D는 CPT1, CPT4, CPT6 또는 CPT7이고, 여기서 CPT1에 대한 공유결합 지점은 이의 아민 작용기의 질소 원자를 통해서이고,
여기서 CPT4에 대한 공유결합 지점은 이의 아민 작용기의 질소 원자를 통해서이고, RF 및 RF' 중 적어도 하나가 -H인 경우 여기서 CPT6에 대한 공유결합 지점은 이의 아민 작용기의 질소 원자를 통해서이고, 여기서 CPT7에 대한 공유결합 지점은 이의 1차 히드록실 작용기의 산소 원자를 통해서이다.
5c. 실시형태 2c, 실시형태 3c 또는 실시형태 4c의 캄프토테신 접합체에 있어서, 글루쿠로나이드 단위는 다음의 화학식을 갖고:
Figure pct00222
상기 식에서 Su는 모노사카라이드의 육탄당 형태이고; O'는 글루코시다제에 의해 절단될 수 있는 글리코시드 결합의 산소 원자를 나타내고; 단일 별표(*)가 표시된 물결선은 적어도 하나의 RF 및 RF'가 -H인 CPT1, CPT4 또는 CPT6 상의 아미노 치환체의 질소 원자로의, 또는 스페이서 단위(Y)로의 공유결합 부위를 나타내거나; CPT1 내지 CPT7 중 임의의 하나의 락톤 고리 상의 히드록실 치환체의 산소 원자에 대한 공유결합 부위를 나타내고; 이중 별표(**)로 표시된 물결선은 Q의 나머지 부분에 대한 공유결합 부위를 나타내고,
특히 글루쿠로나이드 단위는 다음의 화학식을 갖는다:
Figure pct00223
.
6c. 실시형태 5c의 캄프토테신 접합체에 있어서, Q는 -Z-A-RL-Y-, -Z-A -S*-RL-Y- 또는 -Z-A-B(S*)-RL-Y-의 화학식을 가진 링커 단위이고; 스페이서 단위(Y)가 다음의 화학식을 갖고:
Figure pct00224
또는
Figure pct00225
상기 식에서, EWG는 전자-받개기이고; O*은 D의 히드록시 치환체로부터의 산소 원자를 나타내고; 질소 원자에 인접한 물결선은 글루쿠로나이드 단위의 카보닐 탄소 원자로의 공유결합 부위를 나타내고; O*에 인접한 물결선은 D의 나머지 부분에 대한 공유결합 부위를 나타내거나,
스페이서 단위(Y)가 다음의 화학식을 갖고:
Figure pct00226
Figure pct00227
또는
Figure pct00228
상기 식에서 D는 RF 및 RF' 각각이 -H인 CPT1, CPT4 또는 CPT6이고; 상기 EWG는 전자-받개기이고; 질소 원자에 인접한 물결선은 글루쿠로나이드 단위의 카보닐 탄소 원자로의 공유결합 부위를 나타내고; 카보닐 탄소 원자에 인접한 물결선은 CPT1, CPT4 또는 CPT6의 아미노 치환체의 질소 원자로의 공유결합 부위를 나타낸다.
7c. 실시형태 5c의 캄프토테신 접합체에 있어서, -Z-A-는 각각 선택적으로 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해된 형태의 숙신이미드 고리를 갖는 숙신이미도-알카노일 모이어티 또는 숙신이미도 및 트리아졸일 모이어티로 구성되며, 여기서 트리아졸 모이어티는 약물 링커 화합물의 알키닐 모이어티에 대한 화학적으로 변형된 표적화제로부터 아지도 치환체의 1,3-이극성 환첨가로부터 선택적으로 형성되고, 여기서 표적화제는 접합체의 리간드 단위에 대한 전구체이거나,
-Z-A-는 캄프토테신-링커 화합물의 mDPR 모이어티로부터 유도가능한 숙신산 아미드 모이어티로 구성되거나, 선택적으로 가수분해된 형태의 숙신이미드 고리를 갖는 숙신이미도-프로피오닐 모이어티로 구성되고,
여기서 D는 이의 아미노 치환체의 질소 원자를 통한 공유결합을 갖고 -Z-A-는 각각 선택적으로 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해된 형태의 숙신이미드 고리를 갖는 숙신이미도 및 트리아졸일 모이어티로 구성되거나, D가 CPT1인 경우 mDPR 모이어티로부터 유도가능한 숙신산 아미드 모이어티로 구성되고, D가 CPT1인 경우 D가 락톤 고리 상의 히드록실 치환체로의 산소 원자에 대한 공유결합을 가질 경우 -Z-A-는 선택적으로 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해된 형태의 숙신이미드 고리를 갖는 숙신이미도-알카노일-β-알라닐 모이어티로 구성된다.
8c. 실시형태 7c의 캄프토테신 접합체에 있어서, Q는 다음의 화학식:
Figure pct00229
또는 이의 염을 갖고, 상기 식에서 -Z-A-는 바람직하게는 이의 숙신이미드 고리가 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해된 형태인 숙신이미도-알카노일-β-알라닐 모이어티이며, 여기서 숙신이미드 고리는 캄프토테신-링커 화합물의 mDPR 모이어티로부터 유도가능하고; 단일 별표(*)가 표시된 물결선은 CPT1 내지 CPT7 중 임의의 하나의 락톤 고리를 치환하는 히드록실 작용기의 산소 원자로의, RF 및 RF'가 -H인 CPT1, CPT4 또는 CPT6 상의 아미노 작용기의 질소 원자로의, 또는 스페이서 단위로의 공유결합 부위를 나타내고; 삼중 별표(***)가 표시된 물결선은 L의 황 원자로의 공유결합 지점을 나타내거나,
Q는 다음의 화학식을 갖고:
Figure pct00230
,
선택적으로 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해된 형태의 숙신이미드 고리를 가지며, 상기 식에서 Q는 -Z-A-S*-RL이고 아래첨자 n은 1 내지 50 범위의 정수, 바람직하게는 4이고; 단일 별표(*)가 표시된 물결선은 CPT1 내지 CPT7 중 임의의 하나의 히드록시 또는 아민 작용기의 헤테로원자로의, 또는 스페이서 단위(Y)로의 공유결합 부위를 나타내고; 삼중 별표(***)가 표시된 물결선은 L의 황 원자로의 공유결합 지점을 나타낸다.
9c. 실시형태 6c의 캄프토테신 접합체에 있어서, -Q-D는 다음의 구조:
Figure pct00231
또는
Figure pct00232
,
또는 이의 염을 갖고, 선택적으로 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해된 형태의 숙신이미드 고리를 가지며, 상기 식에서 물결선은 리간드 단위의 황 원자에 대한 숙신이미드 고리의 공유결합 부위를 나타내거나 또는
-Q-D는 다음의 구조:
Figure pct00233
또는 이의 염을 갖고, 또는 -Q-D는 다음의 구조:
Figure pct00234
또는
Figure pct00235
또는 이의 염을 갖고, 상기 식에서 물결선은 리간드 단위의 황 원자에 대한 숙신이미드 고리의 공유결합 부위를 나타내고 숙신이미드 고리는 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해된 형태이다.
10c. 실시형태 1c의 캄프토테신 접합체에 있어서, Q는 -Z-A-; -Z-A-S*-W- 및 -Z-A-B(S*)-W-로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 갖는 링커 단위이고, 여기서 A는 커넥터 단위이거나, Q는 -Z-A-RL-, -Z-A-S*-RL-; -Z-A-B(S*)-RL-, -Z-A-S*-W-RL-, 및 -Z-A-B(S*)-W-RL-로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 가진 링커 단위이고, 여기서 A는 커넥터 단위이고 RL은 글루쿠로나이드 단위 외의 방출가능한 링커이다.
11c. 실시형태 10c의 캄프토테신 접합체에 있어서, Q는 -Z-A-RL-, -Z-A-S*-RL- 및 -Z-A-S*-W-RL-로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 가진 링커 단위이고, 여기서 RL은 다음의 화학식을 갖고:
Figure pct00236
상기 식에서, 이중 별표(**)로 표시된 물결선은 D로의 공유결합 부위를 나타내고; 단일 별표(*)로 표시된 물결선은 A, S* 또는 W로의 공유결합 지점을 나타낸다.
12c. 실시형태 10c 또는 실시형태 11c의 캄프토테신 접합체에 있어서, -Q-D는 -Z-A-S*-W-RL-D의 화학식을 갖고, 여기서 D는 각각이 아민 작용기의 질소 원자로의 공유결합을 가진, RF 및 RF' 각각이 -H인 CPT1, CPT4 또는 CPT6이고; W는 N-메틸-글리신(사코신), N-메틸-알라닌, N-메틸-β-알라닌, 발린, N-메틸-발린으로 이루어진 군으로부터 선택되는 아미노산 단위이거나
D는 락톤 고리 상의 히드록실 치환체의 산소 원자에 대한 공유결합을 가진 CPT1 내지 CPT7 중 임의의 하나이고; W는 글루탐산 또는 리신으로 이루어진 군으로부터 선택되는 아미노산 단위이다.
13c. 실시형태 12c의 캄프토테신 접합체에 있어서, -Z-A-는 각각 선택적으로 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해된 형태의 숙신이미드 고리를 갖는 숙신이미도-알카노일 모이어티 또는 숙신이미도 및 트리아졸 모이어티, 또는 캄프토테신-링커 화합물의 mDPR로부터 유도가능한 숙신산 아미드 모이어티로 구성되거나, -Z-A-는 다음의 화학식을 갖고:
Figure pct00237
또는
Figure pct00238
,
선택적으로 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해된 형태의 숙신이미드 고리를 가지며, 상기 식에서, 이중 별표(**)가 표시된 물결선은 S*로의 공유결합 부위를 나타내고; 삼중 별표(***)가 표시된 물결선은 L의 황 원자로의 공유결합 지점을 나타낸다.
14c. 실시형태 11c의 캄프토테신 접합체에 있어서, Q는 -Z-A-S*-RL- 및 -Z-A-S*-W-RL-로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 가진 링커 단위이고, 여기서 S*은 다음의 화학식을 갖고:
Figure pct00239
,
상기 식에서 아래첨자 n은 2 내지 36의 범위의 정수이고, 질소 원자에 인접한 물결선은 A의 카보닐 탄소 원자로의 공유결합 부위를 나타내고, 카보닐 탄소 원자에 인접한 물결선은 -Z A-, -Z-A-S*-RL-의 RL 또는 -Z-A-S*-W-RL-, 특히 -Z A-의 W의 아민 작용기의 질소 원자로의 공유결합 지점을 나타내고, 양 화학식의 Q는 다음의 화학식을 가지며:
Figure pct00240
,
상기 식에서, 이중 별표(**)가 표시된 물결선은 S*의 아민 작용기의 질소 원자로의 공유결합 부위를 나타내고; 삼중 별표(***)가 표시된 물결선은 L의 황 원자로의 공유결합 지점을 나타낸다.
15c. 실시형태 11c의 캄프토테신 접합체에 있어서, Q는 화학식 -Z-A-S*-W- 또는 -Z-A-S-W-RL-의 링커 단위이고, 양 화학식의 -Z-A-S*-W-는 다음의 화학식을 갖고:
Figure pct00241
선택적으로, 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해된 형태의 숙신이미드 고리를 갖고, 상기 식에서 아래첨자 n은 2 내지 10의 범위의 정수이고, 바람직하게는 2 내지 4의 정수이고, 이중 별표(**)로 표시된 물결선은 D 또는 RL에 대한 공유결합 부위를 나타내고, 삼중 별표(***)로 표시된 물결선은 L의 황 원자로의 공유결합 지점을 나타낸다.
16c. 실시형태 10c의 캄프토테신 접합체에 있어서, -Q-D는 다음의 구조:
Figure pct00242
또는
Figure pct00243
,
또는 이의 염을 갖고, 상기 식에서 물결선은 선택적으로 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해된 형태인 숙신이미드 고리의 리간드 단위의 황 원자로의 공유결합 지점을 나타낸다.
17c. 다음으로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 가진 캄프토테신-링커 화합물:
(i) Z'-A-RL-D;
(ii) Z'-A-RL-Y-D;
(iii) Z'-A-S*-RL-D;
(iv) Z'-A-S*-RL-Y-D;
(v) Z'-A-B(S*)-RL-D;
(vi) Z'-A-B(S*)-RL-Y-D;
(vii) Z'-A-D
(viii) Z'-A-S*-W-D
(ix) Z'-A-B(S*)-W-D
(x) Z'-A-S*-W-RL-D; 및
(xi) Z'-A-B(S*)-W-RL-D
상기 식에서 Z'은 스트레처 단위 전구체이고; A는 결합 또는 커넥터 단위이고; B는 병렬 커넥터 단위이고; S*는 분획제이고; RL은 방출가능한 링커이고; Y는 스페이서 단위이고; D는 아래와 같이 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, CPT6 및 CPT7로 이루어진 군으로부터 선택되는 캄프토테신 화합물이고:
Figure pct00244
Figure pct00245
Figure pct00246
;
RB는 -H, C1-C8 알킬, C1-C8 할로알킬, C3-C8 사이클로알킬, (C3-C8 사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, 페닐 및 페닐-C1-C4 알킬-로 이루어진 군으로부터 선택되는 모이어티이고; RC는 C1-C6 알킬 및 C3-C6 사이클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 모이어티이고; 각각의 RF 및 RF'는 -H, C1-C8 알킬, C1-C8 히드록시알킬, C1-C8 아미노알킬, (C1-C4 알킬아미노)-C1-C8 알킬-, N,N-(C1-C4 히드록시알킬)(C1-C4 알킬)-아미노-C1-C8 알킬-, N,N-디(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N-C1-C4 히드록시알킬-C1-C8 아미노알킬-, C1-C8 알킬C(O)-, C1-C8 히드록시알킬-C(O)-, C1-C8 아미노알킬C(O)-, C3-C10 사이클로알킬, (C3-C10 사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, C3-C10 헤테로사이클로알킬, (C3-C10 헤테로사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, 페닐, 페닐-C1-C4 알킬-, 디페닐-C1-C4 알킬-, 헤테로아릴 및 헤테로아릴-C1-C4 알킬-로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 구성원이거나, RF 및 RF'은 각각이 부착된 질소 원자와 결합하여 할로겐, C1-C알킬4 , -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2, -NHC1-C4 알킬 및 -N(C1-C4 알킬)2로부터 선택되는 0개 내지 3개 치환체를 가진 5-원 고리, 6-원 고리 또는 7-원 고리를 형성하고; 여기서 RB, RC, RF 및 RF'의 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 페닐 및 헤테로아릴 모이어티는 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2,- NHC1-C4 알킬 및 -N(C1-C4 알킬)2로 이루어진 군으로부터 선택된 0개 내지 3개 치환체로 치환되고;
여기서 캄프토테신-링커 화합물이 화학식 (i), 화학식 (ii), 화학식 (iii), 화학식 (iv), 화학식 (v), 또는 화학식 (vi)인 경우 D의 공유결합 지점은 CPT1 내지 CPT7 중 임의의 하나 상의 히드록실 또는 아미노 치환체 중 임의의 하나의 헤테로원자에 대해서이거나, 캄프토테신-링커 화합물은 화학식 (vii), 화학식 (viii) 또는 화학식 (ix)이거나, 이때 캄프토테신-링커 화합물은 RL이 글루쿠로나이드 단위 이외의 방출가능한 단위인 화학식 (iii), 화학식 (iv), 화학식 (x), 또는 화학식 (xi)인 경우 D의 공유결합 지점은 CPT1 내지 CPT7 중 임의의 하나의 락톤 고리 상의 히드록실 치환체의 산소 원자에 대해서이고;
여기서 공유결합 지점은 CPT6 상의 아미노 치환체의 질소 원자에 대해서인 경우 RF 및 RF' 중 적어도 하나가 -H이고; 여기서 D가 이의 아미노 치환체의 질소 원자를 통한 공유결합을 가진 CPT1인 경우 화학식 (i), 화학식 (ii), 화학식 (iii), 화학식 (iv), 화학식 (v), 및 화학식 (vi)의 캄프토테신-링커 화합물의 Z'-A-는 말레이미도-카프로일-β-알라닐 모이어티 이외의 것이다.
18c. 화학식 (i), 화학식 (ii); 화학식 (iii), 화학식 (iv), 화학식 (v) 및 화학식 (vi)로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 가진 실시형태 17c의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, A는 커넥터 단위이고 RL은 특히 다음의 구조를 가진 글루쿠로나이드 단위이고:
Figure pct00247
상기 식에서 단일 별표(*)로 표시된 물결선은 D로의 또는 스페이서 단위(Y)로의 공유결합 부위를 나타내고; 이중 별표(**)로 표시된 물결선은 A, B 또는 S*로의 공유결합 지점을 나타낸다.
19c. 실시형태 18c의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, D의 공유결합 지점은 CPT1 내지 CPT7 중 임의의 하나의 락톤 고리 상의 히드록실 치환체의 산소 원자를 통해서이다.
20c. 실시형태 18c의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, D는 CPT1, CPT4, 또는 CPT6이고, Z'-A-는 말레이미도-카프로일-β-알라닐 이외의 것인 경우 CPT1의 부착 지점은 이의 아민 작용기의 질소 원자를 통해서이고, CPT4의 부착 지점은 이의 아민 작용기의 질소 원자를 통해서이고, RF 및 RF' 중 적어도 하나가 -H인 경우 CPT6의 부착 지점은 이의 아민 작용기의 질소 원자를 통해서이다.
21c. 화학식 (iii), 화학식 (iv), 화학식 (v) 및 화학식 (vi)를 가진 실시형태 17c의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, S*는 PEG기이다.
22c. 화학식 (ii), 화학식 (iv) 또는 화학식 (vi)을 가진 실시형태 18c의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, D는 CPT1 내지 CPT7 중 임의의 하나이고; 스페이서 단위(Y)가 다음의 화학식을 갖고:
Figure pct00248
또는
Figure pct00249
상기 식에서, EWG는 전자-받개기이고; O*은 D의 히드록시 작용기로부터의 산소 원자를 나타내고; 질소 원자에 인접한 물결선은 글루쿠로나이드 단위의 카보닐 탄소 원자로의 공유결합 부위를 나타내고; O*에 인접한 물결선은 D의 나머지 부분에 대한 공유결합 부위를 나타내거나, D는 RF 및 RF' 각각이 -H인 CPT1, CPT4 및 CPT6으로 이루어진 군으로부터 선택되고; 스페이서 단위(Y)가 다음의 화학식을 갖고:
Figure pct00250
Figure pct00251
또는
Figure pct00252
상기 식에서, EWG는 전자-받개기이고; 질소 원자에 인접한 물결선은 글루쿠로나이드 단위의 카보닐 탄소 원자로의 공유결합 부위를 나타내고; 카보닐 탄소 원자에 인접한 물결선은 RF 및 RF' 각각이 -H인 CPT1, CPT4 또는 CPT6의 아민 작용기의 질소 원자로의 공유결합 부위를 나타낸다.
23c. 실시형태 17c 내지 실시형태 22c 중 임의의 하나의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, A는 트리아졸일 모이어티로 구성된 커넥터 단위를 가진 접합체를 제공하기 위해 캄프토테신 접합체의 리간드 단위에 대해 전구체인 화학적으로 변형된 표적화제로부터 아지도 치환체로 1,3-이극성 환화를 겪을 수 있는 알키닐 모이어티로 구성된다.
23c. 실시형태 17c 내지 실시형태 22c 중 임의의 하나의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, D가 이의 아미노 치환체의 질소 원자를 통한 공유결합을 가진 CPT1일 때 Z'-A-는 mDPR로 구성된 경우 Z'-A-는 말레이미도-알카노일 모이어티 또는 mDPR로 구성되고, 이의 염기성 질소 원자는 선택적으로 양성자화되거나 산-불안정한 보호기로 보호되며, 특히 D가 CPT1일 때 D는 이의 락톤 고리 상의 히드록실 치환체의 산소 원자에 대한 공유결합을 갖는 경우 Z'-A-는 mDPR 또는 말레이미도-알카노일-β-알라닐 모이어티로 구성된다.
24c. 화학식 (vii), 화학식 (viii) 또는 화학식 (ix)를 가진 실시형태 17c의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, A는 커넥터 단위이거나, 화학식 (i), 화학식 (iii), 화학식 (x) 또는 화학식 (xi)를 가진 실시형태 17c의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, A는 커넥터 단위이고 RL은 글루쿠로나이드 단위 외의 방출가능한 링커이다.
25c. 화학식 (i), 화학식 (iii) 또는 화학식 (x)를 가진 실시형태 24c의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, RL은 다음의 화학식을 갖고:
Figure pct00253
상기 식에서, 이중 별표(**)로 표시된 물결선은 D로의 공유결합 부위를 나타내고; 단일 별표(*)로 표시된 물결선은 A, S* 또는 W로의 공유결합 지점을 나타낸다.
26c. 화학식 (x)를 가진 실시형태 25c의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, W는 N-메틸-글리신(사코신), N-메틸-알라닌, N-메틸-β-알라닌, 발린 및 N-메틸-발린으로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 단위이다.
27c. 실시형태 24c, 실시형태 25c 또는 실시형태 26c의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, Z'-A-는 말레이미도-알카노일 모이어티 또는 mDPR로 구성되며, 이의 염기성 질소 원자는 선택적으로 양성자화되거나 산-불안정한 보호기로 보호된다.
28c. 화학식 (iii) 또는 화학식 (x)를 가진 실시형태 24c, 실시형태 25c 또는 실시형태 26c의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, Z'-A-는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된 화학식을 갖고:
Figure pct00254
및
Figure pct00255
상기 식에서, 이중 별표(**)로 표시된 물결선은 S*로의 공유결합 부위를 나타낸다.
29c. 화학식 (iii) 또는 화학식 (x)를 가진 실시형태 24c, 실시형태 25c 또는 실시형태 26c의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, S*는 다음의 화학식을 갖고:
Figure pct00256
,
상기 식에서 아래첨자 n은 2 내지 36의 범위의 정수이다.
30c. 화학식 (viii) 또는 화학식 (x)의 실시형태 24c 또는 실시형태 25c의 캄프토테신-링커 화합물에 있어서, Z'-A-S*-W-는 다음의 화학식을 갖고:
Figure pct00257
,
상기 식에서, 아래첨자 n은 2 내지 10의 범위의 정수이고, 바람직하게는 2 내지 4의 정수이고, 이중 별표(**)로 표시된 물결선은 D 또는 RL로의 공유결합 부위를 나타낸다.
31c. 실시형태 17c의 캄프토테신-링커 화합물로서, 상기 캄프토테신-링커 화합물은 다음의 구조:
Figure pct00258
,
Figure pct00259
,
Figure pct00260
Figure pct00261
또는
Figure pct00262
또는 이의 염을 갖는다.
32c. 대상에서 암의 치료를 위한 약제의 제조에서 캄프토테신 접합체의 용도에 있어서, 캄프토테신 접합체는 실시형태 1c의 화학식을 갖고, 특히, 상기 암은 림프종, 백혈병, 및 고형 종양으로 이루어진 군으로부터 선택되고, 바람직하게는 림프종 또는 백혈병이다.
33c. 실시형태 1c의 캄프토테신 접합체 및 적어도 하나의 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약학적으로 허용되는 조성물.
34c. 이를 필요로 하는 대상에서 암을 치료하기 위한 조성물로서, 상기 조성물은 유효량의 실시형태 1c의 캄프토테신 접합체로 구성되며, 특히 상기 암은 림프종, 백혈병, 및 고형 종양으로 이루어진 군으로부터 선택되고, 바람직하게는 림프종 또는 백혈병이다.
35c. 실시형태 1의 캄프토테신 접합체의 제조 방법으로서, 상기 방법은 제17항의 캄프토테신-링커 화합물의 Z'에 대해 반응성인 작용기를 가진 표적화제를 접촉시켜 각각 구조에서 표적화제 및 Z'에 해당하는 캄프토테신 접합체의 리간드 단위와 스트레처 단위(Z) 사이에 공유결합을 형성하는 단계를 포함하며, 특히
상기 표적화제는 반응성 작용기가 티올인 적어도 하나의 시스테인 잔기를 가진 항체이고 Z'는 말레이미드 모이어티로 구성되거나, 또는 상기 표적화제는 반응성 작용기로서 아지드-함유 잔기를 갖도록 변형된 항체이고 Z'는 알킨 작용기로 구성되고, 여기서 상기 아지드 및 알킨 작용기는 1,3-이극성 환첨가를 통해 트리아졸 고리 시스템을 형성할 수 있다.
실시예
재료 및 방법
다음의 재료 및 방법은 달리 명시되지 않는 한 본 섹션에 설명된 합성 절차에 적용된다. 시판되는 모든 무수 용매는 추가 정제 없이 사용하였다. 출발 물질, 시약 및 용매는 상업적 공급업체(SigmaAldrich 및 Fischer)에서 구입하였다. Biotage Isolera OneTM 플래시 정제 시스템(노스캐롤라이나주, 샬럿 소재)을 사용하여 플래시 컬럼 크로마토그래피로 생성물을 정제하였다. UPLC-MS는 표 A 내지 표 F에 제시된 UPLC 방법을 사용하여 Waters AcquityTM UPLC 시스템에 인터페이스된 Waters 단일 쿼드 검출기 질량분석기에서 수행하였다. 분취용 HPLC를 Wasters 2998 PDA 검출기가 장착된 Waters 2454 Binary Gradient Module 용매 전달 시스템 상에서 수행하였다. 생성물은 달리 명시되지 않는 한 물 중의 0.05% 트리플루오로아세트산 및 아세토니트릴 중의 0.05% 트리플루오로아세트산으로 용리하는 적절한 직경의 Phenomenex Max-RP 4 μm SynergiTM 80 Å 250 mm 역상 컬럼으로 정제하였다.
표 A: 컬럼 - Waters Acuity UPLC BEH C18 2.1 x 50 mm, 1.7 μm, 역상 컬럼, 용매 A - 0.1% 수성 포름산, 용매 B - 0.1% 포름산을 가진 아세토니트릴(방법 A).
Figure pct00263
표 B: 컬럼 - Waters Acuity UPLC BEH C18 2.1 x 50 mm, 1.7 μm, 역상 컬럼, 용매 A - 0.1% 수성 포름산, 용매 B - 0.1% 포름산 포함하는 아세토니트릴(방법 B).
Figure pct00264
표 C: 컬럼 - Kinetex F5 1.7 μm 100 Å, 2.1 x 50 mm, 역상 컬럼, 용매 A - 0.1% 수성 포름산, 용매 B - 0.1% 포름산 포함 아세토니트릴(방법 C).
Figure pct00265
표 D: 컬럼 - Waters CORTECS C18 1.6 μm, 2.1 x 50 mm, 역상 컬럼, 용매 A - 0.1% 수성 포름산, 용매 B - 0.1% 포름산 포함 아세토니트릴(방법 D).
Figure pct00266
표 E: 컬럼 - Waters CORTECS C18 1.6 μm, 2.1 x 50 mm, 역상 컬럼, 용매 A - 0.1% 수성 포름산, 용매 B - 0.1% 포름산 포함 아세토니트릴(방법 E).
Figure pct00267
표 F: 컬럼 - Waters CORTECS C8 1.6 μm, 2.1 x 50 mm, 역상 컬럼, 용매 A - 0.1% 수성 포름산, 용매 B - 0.1% 포름산 포함 아세토니트릴(방법 F).
Figure pct00268
Figure pct00269
캄프토테신 화합물 제조
다음의 실시예에 제공된 캄프토테신 화합물은 캄프토테신-링커 화합물 및 본원에 기술된 캄프토테신 접합체를 제조하는 데 사용될 수 있다.
실시예 1
Figure pct00270
MedChemExpress에서 구입한 SN-38(화합물 1, 160.0 mg, 0.4077 mmol)을 무수 DCM(2 mL)에 현탁하였다. DIPEA(0.22 mL, 1.3 mmol)를 첨가한 후 TBSCl(154 mg, 1.02 mmol)를 첨가하였다. 화합물 1이 용해되고 UPLC-MS에 의해 완전한 전환이 관찰될 때까지 반응을 30분 동안 교반하였다. 반응을 MeOH로 급랭시키고, 실리카 플러그에 통과시켜 여과하고 진공에서 농축하였다. 수득된 무색 오일을 Hex로 분쇄하였다. 생성물을 용액에서 침전시켰다. 침전물을 여과하여 수집하고 Hex로 헹구어 회백색 고체로서 화합물 2(TBS-SN-38)를 수득하였다(200 mg, 0.395 mmol, 97%). LC-MS (방법 B): t R = 1.86분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C28H35N2O5Si 507.23, 실측치 506.96.
실시예 2
Figure pct00271
문헌[Bioconjugate Chem. 2009, 20, 1242-1250]에 기술된 절차에 따라 화합물 3을 합성하였다. 화합물 3(50 mg, 0.108 mmol)을 DCM(1 mL)에 용해하였다. DMAP(13 mg, 0.11 mmol)을 반응물에 첨가한 후 Boc2O(24 mg, 0.11 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 5분 동안 교반하였고 이 때 원하는 생성물로의 완전한 전환이 관찰되었다. 보호된 생성물을 컬럼 크로마토그래피 10G Biotage Ultra DCM 중의 0% 내지 5% MeOH로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 진공에서 농축하여 황색 고체로서 화합물 4를 수득하였다(49 mg, 0.087 mmol, 80%). LC-MS (방법 A): t R = 2.24분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C30H34N3O8 564.23, 실측치 564.10.
화합물 4(49 mg, 0.087 mmol)를 무수 DCM(2 mL)에 용해하였다. DMAP(37 mg, 0.304 mmol)를 첨가하고 반응을 0℃로 냉각하였다. DCM 중의 10 mg/mL에 용해된 트리포스겐(12 mg, 0.039 mmol)을 15분에 걸쳐 반응물에 적하방식으로 첨가하였다. 2 μL 분취량을 98 μL MeOH 희석액에서 급랭하고 UPLC-MS에 주입하였다. MeOH 부가물로의 완전한 전환을 UPLC-MS로 관찰하였다. 반응 혼합물(화합물 5)은 적합한 링커와 함께 커플링 단계에서 직접 사용될 수 있다. LC-MS (방법 A): t R = 2.09분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C32H36N3O10 622.24, 실측치 622.02.
실시예 3
Figure pct00272
문헌[Bioconjugate Chem. (2009) 20: 1242-1250]에 기술된 절차에 따라 합성한 화합물 6(150 mg, 0.334 mmol)을 무수 DCM(2 mL)에 용해하였다. DMAP(143 mg, 1.17 mmol)를 첨가하였다. 무수 DCM(50 mg/mL)에 용해된 트리포스겐(45 mg, 0.15 mmol)을 5분에 걸쳐 적하 방식으로 첨가하였다. 반응을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 2 μL 분취량의 반응 혼합물을 98 μL MeOH 희석액에서 급랭하였다. MeOH 카보네이트로의 거의 완전한 전환을 관찰하였으며 이는 클로로포르메이트 형성을 나타낸다. 이와 같이 수득된 화합물 7을 추가 정제 없이 적합한 링커와 함께 커플링 단계에서 사용한다. LC-MS (방법 A): t R = 1.55분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C27H27N2O8 507.18, 실측치 507.06.
실시예 4
Figure pct00273
TCI Research Chemicals(Cat. No. A1356)로부터 수득한 6-아미노-3,4-(메틸렌디옥시)-아세토페논(8, 5.00 g, 27.9 mmol)을 DCM(100 mL)에 용해하였다. 반응을 0℃로 냉각하고 DIPEA(7.29 mL, 41.9 mmol)를 첨가한 후 아세틸 클로라이드(2.49 mL, 34.9 mL)를 천천히 첨가하였다. 반응을 실온으로 가온하고 30분 동안 교반하였다. 완전한 전환을 UPLC-MS로 관찰하였다. 반응을 MeOH(5 mL)로 급랭시키고 반응을 진공에서 농축하여 백색 고체로서 화합물 9를 수득하고 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. LC-MS (방법 A): t R = 1.37; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C11H12NO4 222.08, 실측치 222.11.
화합물 9(27.9 mmol)를 AcOH(100 mL)에 용해하였다. AcOH(9.78 mL, 55.8 mmol) 중의 HBr 33% w/w를 천천히 첨가하였다. 브로민(1.44 mL, 27.9 mmol)을 15분에 걸쳐 적하 방식으로 첨가하였다. 반응을 30분 동안 교반하였고 이때 원하는 생성물로의 전환이 관찰되었다. 반응을 빙수에 부었고 침전물을 여과하여 수집하고 물로 세척하였다. 여과물을 건조시켜 황색 분말을 수득하였고 이는 출발 물질 및 디브롬화 생성물 불순물을 포함한 원하는 생성물 화합물 10의 혼합물이었고 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다(7.2 g, 24 mmol, 86%). LC-MS (방법 A): t R = 1.58분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C11H11BrNO4 299.99, 실측치 299.90.
화합물 10(7.2 g, 24 mmol)을 EtOH(100 mL)에 용해하였다. 농축된 HBr(5 mL)을 첨가하고 반응을 가열하여 60분 동안 환류하였다. 탈보호된 생성물로의 거의 완전한 전환을 관찰하였다. 반응을 진공에서 농축하고, DCM(200 mL) 및 H2O(200) mL로 희석하였다. 수성 상을 DCM(3 x 200 mL)으로 추출하고, 수집된 유기 상을 MgSO4로 건조시키고, 진공에서 여과 농축하였다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피 DCM 중의 0% 내지 10% MeOH로 정제하였다. 미량의 불순물이 있는 원하는 생성물을 함유하는 분획을 농축하여 황색 분말로서 화합물 11을 수득하였다(4.05 g, 15.7 mmol, 65%). LC-MS (방법 A): t R = 1.57분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C9H9BrNO3 257.98, 실측치 257.71.
실시예 5
Figure pct00274
화합물 11(1.00 g, 3.87 mmol), p-TSA(667 mg, 3.87 mmol), 및 4-에틸-4-히드록시-7,8-디히드로-1H-피라노[3,4-f]인돌리진-3,6,10(4H)-트리온(1.02 g, 3.87 mmol, Avra Laboratories Pvt. Ltd.에서 수득)을 플라스크에 충진하였다. DCM(5 mL)을 첨가하여 고체를 균질화한 후 질소 하에 증발시켰다. 이어서 순수 고체를 고 진공(1 mbar) 하에 60분 동안 120℃로 가열하였다. 반응을 실온으로 냉각시키고, 조 생성물을 H2O로 침전시키고, 여과하고 H2O로 세척하였다. 침전물을 컬럼 크로마토그래피 DCM 중의 0% 내지 10% MeOH로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 진공에서 농축하여 갈색 고체로서 화합물 12를 수득하였다(989 mg, 2.04 mmol, 53%). LC-MS (방법 A): t R = 1.62분 (일반 방법 UPLC); MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C22H17BrN2O6 485.03, 실측치 484.95.
실시예 6
Figure pct00275
화합물 12(188 mg, 0.387 mmol)를 EtOH(5 mL)에 용해하였다. 헥사메틸렌테트라민(163 mg, 1.16 mmol)을 첨가하고 반응을 교반하며 90분 동안 환류하였다. 반응을 냉각시키고 수성 농축 HCl(0.1 mL)을 첨가하였다. 반응을 농축하고 prep-HPLC로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 동결건조하여 백색 고체로서 화합물 13을 수득하였다(109 mg, 0.259 mmol, 67%). LC-MS (방법 A): t R = 0.89; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C22H20N3O6 422.14, 실측치 422.16.
표 H: 화합물 13(7-MAD-MDCPT)으로부터 제조된 캄프토테신 화합물
Figure pct00276
표 H의 캄프토테신 화합물은 Q-D가 화학식 -Z-A-S*-W-D 또는 -Z-A-B(S*)-W-D인 캄프토테신의 캄프토테신 접합체에 혼입되거나, 각각 1차 히드록시 또는 아민 작용기의 산소 원자 또는 질소 원자 대한 공유결합을 통해 화학식 Z'-A-S*-W-D 또는 Z'-A-B(S*)-W-D의 약물 링커 화합물에 혼입된 화학식 W-CPT의 예시적인 화합물이다.
실시예 7
Figure pct00277
실시예 4의 화합물 12(10.0 mg, 20.6 μmol)를 무수 DMF(0.25 mL)에 용해하였다. 메틸아민(2M in THF, 0.031 mL, 62 μmol)을 첨가하였다. 반응을 30분 동안 교반한 다음 AcOH(20 μL)로 급랭하였다. 반응을 prep-HPLC로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획(14)을 동결건조하여 황색 고체를 수득하였다(3.27 mg, 7.51 μmol, 36%). LC-MS (방법 D): t R = 1.57분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C9H9BrNO3 257.98, 실측치 257.71. t R = 0.93분 (방법 A); MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C23H22N3O6 436.15, 실측치 435.78.
표 I: 실시예 7에 따라 제조된 다른 캄프토테신 화합물.
Figure pct00278
Figure pct00279
Figure pct00280
Figure pct00281
Figure pct00282
Figure pct00283
실시예 8
Figure pct00284
문헌[Heterocycles, (2007) 71: 39-48]에 기술된 바와 같이, 6-니트로-1,3-벤조디옥솔-5-카보니트릴(화합물 15, 2.00 g, 10.4 mmol)을 EtOH(50 mL)에 용해하였다. 반응을 질소 대기 하에 두었다. Pd/C(2.22 g, 10% w/w, 2.08 mmol)를 반응에 첨가하고, 이를 수소 대기 하에 두었다. 반응을 2시간 동안 교반하였다. 반응을 셀라이트 층을 통해 여과한 다음, MeOH로 헹구었다. 용리물을 진공에서 농축하고 플래시 크로마토그래피 MeOH 중의 0% 내지 10% DCM으로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 농축하여 적색 고체로서 화합물 16을 수득하였다(1.46 g, 9.00 mmol, 87%). LC-MS (방법 D): t R = 1.14분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C8H7N2O2 163.05, 실측치 162.37.
실시예 9
Figure pct00285
6-아미노-1,3-벤조디옥솔-5-카보니트릴(화합물 16, 50 mg, 0.31 mmol)을 질소 대기 하에 두고 무수 THF(1 mL)에 용해하였다. CuBr(1.5 mg, 0.010 mmol)을 첨가한 다음 THF(1.23 mL) 중의 4-플루오로페닐마그네슘 브로마이드 1M을 첨가하였다. 반응을 30분 동안 60℃로 가열하고 이어서 실온으로 냉각하였다. 15% H2SO4 용액을 반응에 천천히 첨가한 다음 30분 동안 교반하였다. 반응을 포화 NaHCO3(50 mL)에 붓고 이어서 EtOAc(3 x 50 mL)로 추출하였다. 유기물을 MgSO4로 건조시키고, 진공에서 여과 농축하였다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피 10G Biotage Ultra Hex 중의 0% 내지 10% EtOAc로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 진공에서 농축하여 적색 고체로서 화합물 17을 수득하였다(46.2 mg, 0.178 mmol, 58%). LC-MS (방법 D): t R = 1.81분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C14H11FNO3 260.07, 실측치 259.46.
실시예 10
Figure pct00286
화합물 17(46.2 mg, 0.178 mmol), p-TSA(30.7 mg, 0.178 mmol), 및 4-에틸-4-히드록시-7,8-디히드로-1H-피라노[3,4-f]인돌리진-3,6,10(4H)-트리온(46.9 mg, 0.178 mmol, Avra Laboratories Pvt. Ltd.에서 수득)을 신틸레이션 바이알에 충진하였다. DCM(1 mL)을 첨가하여 고체를 균질화하였다. 용매를 질소 하에 농축하였다. 순수 고체를 높은 진공(1 mbar) 하에 60분 동안 120℃로 가열하였다. 반응을 DCM(50 mL) 중에 재구성하고, H2O로 세척하고, 유기 상을 MgSO4로 세척 건조시키고, 진공에서 여과 농축하였다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피 10G Biotage Ultra DCM 중의 0% 내지 10% MeOH로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획(18)을 진공에서 농축하여 적색 고체를 수득하였다(32.9 mg, 0.0676 mmol, 38%). LC-MS (방법 D): t R = 1.81분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C27H20FN2O6 487.13, 실측치 487.19.
표 J: 실시예 9 및 실시예 10의 절차에 따라 제조된 다른 캄프토테신 화합물.
Figure pct00287
Figure pct00288
Figure pct00289
실시예 11
Figure pct00290
MedChemExpress로부터 수득한 SN-38(화합물 1, 76.0 mg, 0.19 mmol)을 디클로로메탄에 용해하고, 트리에틸아민(128 μL, 0.92 mmol) 및 DMAP(2.60 mg, 0.02 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 빙욕에서 0℃로 냉각시키고, 아세틸 클로라이드(15.9 μL, 0.22 mmol)를 적하 방식으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응을 디클로로메탄으로 희석하고, 포화 NH4Cl, 물, 및 염수로 세척하였다. 이어서 유기 상을 MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축하고 Biotage 플래시 컬럼 크로마토그래피(CH2Cl2/MeOH 0% 내지 15%)를 통해 실리카 상에서 정제하여 아세틸화된 SN-38(19)을 수득하였다. MS (m/z) 예측치 435.15 (M+H)+, 실측치 435.07.
표 K: 본원에 기술된 대로 제조된 캄프토테신 화합물:
Figure pct00291
실시예 12
Figure pct00292
MedChemExpress Cat. No.: HY-13631A로부터 수득한 엑사테칸 메실레이트(화합물 21a) 20.0 mg, 0.0376 mmol를 무수 DCM(1 mL)에 현탁하였다. DIPEA(20.0 μL, 0.0146 mmol)를 첨가하고 아세톡시아세틸 클로라이드(5.0 μL, 0.046 mmol)를 첨가하였다. 반응을 30분 동안 교반한 다음, MeOH로 급랭하고, 진공에서 농축하였다. 반응 혼합물을 MeOH(1 mL)에서 재용해하였다. LiOH(20 mg)를 첨가하였다. 아세테이트의 완전한 탈보호를 관찰하였다. AcOH를 급랭하였다. H2O 0.05% TFA 중의 Prep-HPLC 10mm 10% 내지 95% MeCN로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 진공에서 농축하여 황색 고체로서 화합물 21b를 수득하였다(15.3 mg, 0.0310 mmol, 82%). LC-MS (방법 A): t R = 1.46분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C26H25N3O6 494.17, 실측치 494.05.
실시예 13
Figure pct00293
엑사테칸 메실레이트(화합물 21a, 20.0 mg, 0.0376 mol)를 MeCN(1 mL) 및 H2O 중의 NaHCO3 0.75M에 용해하였다. Fmoc-OSu(19.0 mg, 0.0564 mmol)를 첨가하고 반응을 2시간 30분 동안 교반하였다. 반응을 H2O(50 mL)로 희석하고, pH를 중성으로 조절하고 DCM(3 x 50 mL)으로 추출하였다. 유기상을 MgSO4로 건조하고, 진공에서 여과 농축하였다. 조 생성물을 DCM 중의 prep-TLC 0% 내지 5% MeOH로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 밴드를 스크래핑하고, DCM 중의 10% MeOH로 여과 세척하고, 용리물을 진공에서 농축하여 오렌지색 고체로서 화합물 22를 수득하였다(19.1 mg, 0.0290 mmol, 77%). LC-MS (방법 A): t R = 2.23분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C39H33FN3O6 658.24, 실측치 658.09.
실시예 14
Figure pct00294
실시예 1에 따라 제조한 화합물 2(132 mg, 0.260 mmol)를 2 mL 무수 DCM에 용해하였다. DMAP(111 mg, 0.911 mmol)을 첨가하였다. 트리포스겐(34.8 mg, 0.117 mmol)을 무수 DCM 중의 50 mg/mL에 용해하고, 상기 용액을 교반된 반응 용액에 5분에 걸쳐 적하 방식으로 첨가하였다. 2 μL 분취량의 반응 용액을 98 μL MeOH 희석액으로 급랭하였다. Me-카보네이트로의 거의 완전한 전환을 15분 후에 UPLC-MS로 관찰하였다. 화합물 24를 함유하는 반응 혼합물을 본원에 기술된 커플링 반응에 즉시 사용하였다.
캄프토테신 약물 링커 화합물 제조
실시예 15
Figure pct00295
엑사테칸 메실레이트(화합물 21a, 5.00 mg, 9.41 μmol)을 무수 DCM에 용해하였다. DIPEA(5.0 μL, 28 μmol)를 첨가하고 문헌[Bioconjugate Chem. (2006) 17: 831-840]에 의해 이전에 기술된 화합물 25(17.2 mg, 18.8 μmol)를 첨가하였다. 반응을 40℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응을 MeOH로 급랭하고 진공에서 농축하였다. 조 반응 혼합물을 다음 단계에서 사용하였다. LC-MS (방법 A): t R = 2.32분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C63H61FN5O19 1210.39, 실측치 1210.08.
이전 단계의 조 화합물26(9.41 μmol)을 THF(1 mL), 및 MeOH(1 mL) 중의 1M LiOH에 용해하였다. 반응을 5분 동안 교반한 다음, H2O를 첨가하고 추가 5분 동안 교반하였다. 반응을 AcOH(100 μL)로 급랭하고, 진공에서 농축하고, H2O 0.05% TFA 중의 prep-HPLC 21 mm 5-60-95% MeCN으로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 동결건조하여 황색 분말로서 화합물 27을 수득하였다(1.1 mg, 1.3 μmol). LC-MS (방법 A): t R = 1.29분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C41H43FN5O14 848.28, 실측치 848.03.
실시예 16
Figure pct00296
화합물 27(1.1 mg, 1.3 μmol)을 무수 DMF(0.5 mL) 중에 용해하였다. DIPEA(1 μL)를 첨가하고 TCI(CAS: 55750-62-4)로부터 구입한 N-숙신이미딜 3-말레이미도프로피오네이트(28, 0.63 mg, 2.4 μmol)를 첨가하였다. 반응을 5분 동안 교반하였다. 완전한 전환을 UPLC-MS로 관찰하였다. 반응을 AcOH(10 μL)로 급랭한 다음, H2O 0.05% TFA 중의 prep-HPLC 10 mm 5-60-95% MeCN으로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 동결건조하여 황색 분말로서 화합물 29를 수득하였다(1.21 mg, 1.21 μmol, 93%). LC-MS (방법 A): t R = 1.52분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C48H48FN6O17 999.31, 실측치 999.07.
실시예 17
Figure pct00297
실시예 21 및 실시예 22에 기술된 바와 같이 제조한 화합물 30(210 mg, 0.234 mmol)을 벤치 DCM(3 mL)에 용해하였다. 파라포름알데히드(300 mg 내지600 mg)를 첨가하였다. 격하게 교반하며, TMSBr(0.1 mL)을 첨가하였다. 반응을 10분 동안 교반하였으며 이 때 완전한 전환을 UPLC-MS로 관찰하였다. 반응 혼합물을 시린지 필터를 통해 여과하고, DCM(2 x 3 mL)으로 헹구고, 톨루엔(3 mL)을 공비혼합물에 첨가하여 최종 혼합물을 수득하였다. 진공에서 농축하여 백색 고체를 수득하였다. 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. MeOH 희석액을 사용하여 UPLC-MS로 MeOH 급랭 부가물을 관찰하였다. LC-MS (방법 A): t R = 2.19분; MS (m/z) [M + Na]+ 예상치 C44H51N3NaO18S 964.28, 실측치 965.17.
실시예 18
Figure pct00298
7-BAD-MDCPT로 지칭되는 화합물 20c(20 mg, 0.047 mmol)를 톨루엔으로 3회 공비혼합하고 사용 전에 높은 진공 하에 건조하였다. 실시예 16의 조 화합물 31(231 mg, 0.234 mmol)을 무수 DCM에 용해하고, 1,2,2,6,6-펜타메틸피페리딘(PMP, 51.4 μL, 0.284 mmol)을 첨가하였다. 용액 중의 화합물 31의 최소 가수분해를 염기를 첨가한 후 UPLC-MS로 관찰하였다. 화합물 31의 용액을 약물 반응 용기에 직접 첨가한 다음 가열하여 환류하였다. 화합물 20c는 DCM 중에 단지 약간 가용성이다. 반응을 완전함에 대해 UPLC-MS로 모니터링하였으며, 이는 3일 동안의 환류에서의 가열을 필요로 한다. 그 후, 반응을 MeOH로 급랭하고, 진공에서 농축하고, DCM에서 FCC Biotage 10G Ultra 0% 내지 10% MeOH로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획(화합물 32)을 농축하여 황색 고체(50 mg, 약 50% w/w, 0.019 mmol, 40%) 를 수득하였으며 이는 대략 50% w/w의 이량체화된 가수분해된 링커를 포함하는 혼합물이었다. t R = 1.46분(일반 방법 UPLC); MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C65H66N5O24S 1332.38, 실측치 1332.54.
실시예 19
Figure pct00299
화합물 32(50 mg, 50% w/w, 0.019 mmol)를 MeOH:THF 1:1(1 mL) 중에 용해하였다. LiOH(20 mg, 0.84 mmol)을 첨가하고 60분 동안 교반하였다. 물(0.5 mL)을 첨가하였다. 완전한 전환을 UPLC-MS로 관찰하였다. 반응을 AcOH로 급랭하고, 진공에서 농축하고, Prep-HPLC로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 동결건조하여 원하는 생성물인 화합물 33을 황색 고체로서 수득하였다(5 mg, 0.005 mmol, 27%). LC-MS (방법 A): t R = 0.84분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C43H48N5O19S 970.27, 실측치 969.92.
실시예 20
Figure pct00300
화합물 33(5 mg, 0.005 mmol)을 DMF(0.5 mL)에 용해하였다. DIPEA(10 μL)를 첨가하고 3-(말레이미도)-프로피온산 N-히드록시숙신이미드 에스터(28, 4.1 mg, 0.016 mmol)를 첨가하고 45분 동안 교반하였으며 이 시점에 완전한 전환을 UPLC-MS로 관찰하였다. 반응을 AcOH(20 μL)로 급랭하고 H2O 중의 Prep-HPLC 10 mm Max-RP C12 5-60-95% MeCN으로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획 화합물 34를 동결건조하여 황색 분말을 수득하였다(2.33 mg, 2.08 μmol, 40.3%). LC-MS (방법 A): t R = 1.35분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C50H53N6O22S 1121.29, 실측치 1121.25.
실시예 21
Figure pct00301
문헌[Bioconjugate Chem. (2006) 17: 831-840]의 절차에 따라 제조한 화합물 35(2.00 g, 4.12 mmol)를 무수 DCM(20 mL)에 용해하였다. DIPEA(3.59 mL, 20.60 mmol)를 첨가하고 1,1′-카보닐-디-(1,2,4-트리아졸) (744 mg, 4.53 mmol)을 첨가하였다. 반응을 5분 동안 교반하고, 화합물 36을 함유하는 반응 혼합물을 다음 단계에서 사용하였다.
화합물 36(4.12 mmol) 을 함유하는 반응 혼합물에 2-(메틸설포닐)-에탄아민(0.61 mL, 6.2 mmol)을 첨가하였다. 반응을 5분 동안 교반하고 이 시기에 완전한 전환을 UPLC-MS로 관찰하였다. 반응을 진공에서 농축하고 컬럼 크로마토그래피 KP-Sil 100G Hex 중의 10% 내지 100% EtOAc로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 진공에서 농축하여 무색 고체로서 화합물 37을 수득하였다(2.40 g, 3.78 mmol, 92%). LC-MS (방법 A): t R = 1.71분; MS (m/z) [M + Na]+ 예상치 C24H30N2NaO16S 657.12, 실측치 656.93.
실시예 22
Figure pct00302
화합물 37(2.40 g, 3.78 mmol)을 MeOH(20 mL)에 용해하였다. AcOH(10 mL)를 반응에 첨가하고 아연 가루(7.42 g, 113 mmol)를 첨가하였다. 반응을 20분 동안 교반하였으며 이 시점에 완전한 전환을 UPLC-MS로 관찰하였다. 반응을 DCM 중의 20% MeOH로 용리하는 실리카를 통해 여과하였다. 용리물을 농축하고 다음 단계에서 사용하였다.
조 화합물38(3.78 mmol)을 무수 DCM(10 ml) 중에 용해하였다. DIPEA(3.30 mL, 18.9 mmol)를 첨가하고 Fmoc-Sar-Cl(2.50 g, 7.58 mmol)를 첨가하였다. 반응을 5분 동안 교반하고 이 시점에 완전한 전환을 UPLC-MS로 관찰하였다. 반응을 MeOH로 급랭하고, 진공에서 농축하고 컬럼 크로마토그래피 KP-Sil 100G Hex 중의 10% 내지 100% EtOAc로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 진공에서 농축하여 무색 고체로서 화합물 30을 수득하였다. LC-MS (방법 A): t R = 2.17분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C42H48N3O17S 898.27, 실측치 898.09.
실시예 23
Figure pct00303
화합물 30(200 mg, 0.223 mmol)을 DCM(2 mL)에 용해하였다. 파라포름알데히드(200 mg, 6.68 mmol)를 첨가하고, TMSCl(1 mL)를 첨가하였다. 반응을 15분 동안 교반하고, 이어서 여과하고, DCM(2 x 2 mL)으로 헹구고, 톨루엔(2 mL)을 공비혼합물에 첨가하여 최종 혼합물을 수득하였다. 용리물을 농축하여 백색 고체를 수득하였다. 조 화합물 39를 다음 단계에서 즉시 사용하였다.
조 화합물 39(0.223 mmol)을 무수 DCM(1 mL) 중에 용해하였다. DIPEA(0.047 mL, 0.27 mmol)를 반응에 첨가하였다. 반응 용액을 고체 화합물 21-b(22 mg, 0.045 mmol)에 직접 첨가하였다. 반응을 120분 동안 교반하였다. 반응을 MeOH로 급랭하고, 진공에서 농축하고 컬럼 크로마토그래피 DCM 중의 0% 내지 10% MeOH로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획 및 미량의 불순물을 진공에서 농축하여 백색 고체로서 화합물 40을 수득하였다(30 mg, 80% w/w, 0.021 mmol, 48%). LC-MS (방법 A): t R = 2.25분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C69H72FN6O23S 1403.44, 실측치 1404.03.
실시예 24
Figure pct00304
화합물 40(30 mg, 0.021 mmol)을 MeOH(1 mL)에 용해하였다. LiOH(25 mg, 1.1 mmol)를 반응에 첨가하고, 용해를 돕기 위해 반응을 초음파처리하였다. 반응을 10분 동안 교반한 다음 H2O(1 mL)를 첨가하였다. 반응을 추가 20분 동안 교반한 다음 AcOH로 급랭하였다. 반응을 진공에서 농축하고 prep-HPLC 21 mm H2O 0.05% TFA 중의 5-60-95% MeCN으로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 정제하여 백색 고체로서 화합물 41을 수득하였다(14.5 mg, 0.0139 mmol, 65%). LC-MS (방법 A): t R = 1.29분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C47H54FN6O18S 1041.32, 실측치 1041.24.
실시예 25
Figure pct00305
화합물 41(14.5 mg, 0.0139 mmol)을 무수 DMF(0.5 mL)에 용해하였다. DIPEA(15 μL, 0.084 mmol)를 첨가한 다음 3-(말레이미도)-프로피온산 N-히드록시숙신이미드 에스터(28, 11 mg, 0.042 mmol)를 첨가하였다. 반응을 실온에서 80분 동안 교반하였다. 반응을 AcOH로 급랭하고 prep-HPLC 10 mm H2O 0.05% TFA 중의 5-60-95% MeCN로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 동결건조하여 황색 고체로서 화합물 42를 수득하였다(2.24 mg, 1.88 μmol, 13%). LC-MS (방법 A): t R = 1.49분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C54H59FN7O21S 1192.35, 실측치 1192.31.
실시예 26
Figure pct00306
문헌[Bioconjugate Chem. (2006) 17: 831-840]의 절차에 따라 제조된 화합물 43(200 mg, 0.267 mmol)을 DCM(1mL) 중에 용해하였다. 카보닐 디트리아졸(44, 131.52 mg, 0.801 mmol)을 첨가하고 반응을 30분 동안 교반하였다. 완전한 전환을 UPLC-MS로 관찰하였다. 반응을 EtOAc(50 mL)로 희석하고, H2O(3 x 50 mL)로 세척하였다. 유기물을 MgSO4로 건조하고, 진공에서 여과 농축하여 백색 고체로서 화합물 45를 수득하였다(209 mg, 0.248 mmol, 93%). LC-MS (방법 D): t R = 2.07분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C41H42N5O15 844.27, 실측치 844.02. 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다.
H-Gly-7-MAD-MDCPT로 지칭되는 화합물 45(100 mg, 0.119 mmol) 및 화합물 13b(18 mg, 0.039 mmol)를 DMF(0.5 mL)에 용해하였다. DIPEA(0.1 mL)를 첨가하고 반응을 실온에서 교반하였다. 원하는 생성물 화합물 46으로의 약 50%의 전환이 관찰되었고, 화합물 45의 가수분해가 15분 후에 관찰되었다. 주의: 화합물 46 및 가수분해 생성물은 UPLC-MS에 의한 동일한 보유 시간을 가졌다. 반응을 AcOH로 급랭하고 진공에서 농축하고, 컬럼 크로마토그래피 DCM 중의 0% 내지 5% MeOH로 정제하였다. 50% 화합물 13b 불순물과 함께 화합물 46을 함유하는 분획을 농축하여 백색 고체를 수득하였다(46 mg, 50% w/w, 0.018 mmol, 46%). LC-MS (방법 E): t R = 1.32분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C63H61N6O22 1253.38, 실측치 1253.47.
실시예 27
Figure pct00307
화합물 46(0.018 mmol)을 MeOH(0.5 mL) 및 THF(0.5 mL) 중에 용해하였다. LiOH(25 mg, 1.0 mmol)를 첨가하였다. 반응을 초음파처리하여 LiOH를 용해하고 교반하였다. 10분 후에 물을 첨가하였다(0.5 mL). 100분 후에 완전한 전환을 UPLC-MS로 관찰하였다. 반응을 AcOH(0.2 mL)로 급랭하였다. 반응을 농축하고, H2O 0.05% TFA 구배 중의 5-60-95 MeCN를 포함한 10 mm Max-RP를 사용하여 Prep-HPLC로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획 화합물 47을 진공에서 농축하여 황색 고체를 수득하였다(8.4 mg, 9.4 μmol, 51%). LC-MS (방법 D): t R = 0.92분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C41H43N6O17 891.27, 실측치 891.06.
실시예 28
Figure pct00308
화합물 47(8.4 mg, 9.4 μmol)을 DMF(0.2 mL)에 용해하였다. 3-(말레이미도)프로피온산 N-히드록시숙신이미드 에스터(28, 7.5 mg, 0.028 mmol)를 첨가하였다. DIPEA(9 μL, 0.05 mmol)를 첨가하였다. 반응을 5분 동안 교반하고 이 시점에 완전한 전환을 UPLC-MS로 관찰하였다. 반응을 AcOH(0.05 mL)로 급랭하고, Prep-HPLC 10 mm Max RP C12로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 동결건조하여 10% 불순물이 있는 황색 분말을 수득하였다. 조 동결건조된 생성물을 Prep-HPLC 10 mm Max-RP C12로 재정제하고 원하는 생성물을 함유하는 분획을 동결건조하여 황색 고체로서 화합물 48을 수득하였다(1.33 mg, 1.28 μmol, 13.5%). LC-MS (방법 D): t R = 1.08분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C48H48N7O20 1042.30, 실측치 1042.19.
실시예 29
Figure pct00309
불꽃 건조 플라스크에 화합물 3(30 mg, 65 μmol)을 충진하고 N2로 플러싱하였다. 무수 DCM(3.25 mL)을 첨가하고 포스겐(톨루엔 중의 20%, 1.2 mL)을 첨가하였다. 반응을 캡핑하고 24시간 동안 교반하였다. 이소시아네이트 형성을 MeOH로의 스파이크 반응 혼합물 및 메틸 카바메이트 부가물의 관찰로 확인하였다. LC-MS (방법 A): t R = 1.58분, MS m/z (ES+) 실측치 522.32. 반응을 교반하여 N2 스트림 하에 건조시키고, 높은 진공 하에 1시간 동안 두어 화합물 64를 제공하고, 이는 추가 정제 없이 다음에서 수행되었다.
문헌[Bioconjugate Chem. (2006) 17: 831-840]의 절차에 따라 제조된 화합물 43(103 mg, 138 μmol)을 무수 DMF(1.5 mL)에 용해시키고 화합물 64(32 mg, 65 μmol)로 충진된 플라스크에 첨가하였다. 반응을 N2 하에 24시간 동안 교반한 다음 진공에서 농축하여 건조하였다. 조 혼합물을 1 mM 크로마토트론 플레이트에 로딩하고 DCM/MeOH(1%, 2%, 3% MeOH 구배)로 용리하여 화합물 49를 수득하였다(25 mg, 31%). LC-MS (방법 A): t R = 2.23분; MS (m/z) 예상치 1238.22 (M+H)+, 실측치 1238.40.
실시예 30
Figure pct00310
화합물 49(3, 41 mg, 33 μmol)를 MeOH(1.1 mL) 및THF(1.1 mL)에 용해한 다음 0℃로 냉각하였다. LiOH 모노히드레이트(14 mg, 333 μmol)를 H2O(1.1 mL)에 취한 다음 교반하며 반응에 적하 방식으로 첨가하였다. 반응을 실온으로 가온하고 4.5시간 후에 중단하였다. MeOH 및 THF를 진공에서 제거하고, DMSO를 첨가하여 용해시킨 다음, 반응을 분취용 HPLC로 정제하여 화합물 50을 수득하였다(9 mg, 31%). LC-MS (방법 A): t R = 1.16분; MS m/z (ES+) 실측치 876.23.
실시예 31
Figure pct00311
3-(말레이미도)프로피온산 N-히드록시숙신이미드 에스터(28)를 무수 DMF에 용해하고 화합물 50에 첨가하여 30 mM의 최종 농도가 되게 하고 DIPEA를 첨가하였다. 반응을 LC-MS로 모니터링하였다. 완료되면, 용액을 아세트산으로 중화하고, 농축한 다음 분취용 HPLC로 정제하여 화합물 51을 수득하였다. LC-MS (방법 A): t R = 1.36분, MS (m/z) 예상치 1026.96 (M+H)+, 실측치 1027.21.
실시예 32
Figure pct00312
오븐 건조된 플라스크에서, 실시예 21에 기술된 바와 같이 제조한 화합물 30(162 mg, 180 μmol)을 무수 디클로로메탄(1 mL)에 용해하고, 파라포름알데히드(10.8 mg, 0.36 mmol) 및 TMSBr(250 μL, 1.40 mmol)을 첨가하였다. 용액을 실온에서 10분 동안 교반하고 메탄올로 급랭하여 모니터링하고 LC-MS로 메탄올 부가물의 형성을 관찰하였다. 반응을 여과하고, 무수 톨루엔 및 디클로로메탄으로 세척하고, 진공에서 3회 건조하여 조 생성물을 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 후속 반응에서 사용하였다. 조 화합물을 무수 디클로로메탄에 재용해하고 문헌[Bioconjugate Chem. (2009) 20: 1242-1250]의 절차에 따라 제조한 18r(32.3 mg, 72 μmol)에 첨가하고 1,2,2,6,6-펜타메틸피페리딘(PMP, 200 μL, 0.96 mmol)을 첨가하였다. 반응을 캡핑하고, 80℃에서 2시간 동안 마이크로파 처리하고 LC-MS로 모니터링하였다. 완료된 후, 용매를 제거하고 분취용 HPLC로 정제하여 원하는 생성물인 화합물 53을 수득하였다. MS (m/z) 추정치 1358.39 (M+H)+, 실측치 1358.03.
조 화합물 53을 MeOH 및 THF 중에 용해하고, 0℃로 냉각하였다. H2O 중의 LiOH를 반응 플라스크에 천천히 첨가하여 10 mM의 최종 농도가 되게 하였다. 반응을 실온으로 가온하고, LC-MS로 모니터링하였다. 완료된 후, 용액을 아세트산으로 중화하고, 농축한 다음, 분취용 HPLC로 정제하여 화합물 54를 수득하였다. MS (m/z) 추정치 996.01 (M+H)+, 실측치 996.36.
실시예 33
Figure pct00313
3-(말레이미도)프로피온산 N-히드록시숙신이미드 에스터(28)를 무수 DMF에 용해하고 화합물 54에 첨가하여 30 mM의 최종 농도가 되게 한 다음, DIPEA를 첨가하였다. 반응을 LC-MS로 모니터링하였다. 완료된 후, 용액을 아세트산으로 중화하고 농축한 다음, 분취용 HPLC로 정제하여 화합물 55를 수득하였다. LC-MS (방법 A): t R = 1.75분, MS (m/z) 추정치 1147.13 (M+H)+, 실측치 1147.02.
실시예 34
Figure pct00314
오븐 건조된 플라스크에서 실시예 21에 기술된 바와 같이 제조한 화합물 30(1235 mg, 1.38 mmol)을 무수 디클로로메탄(5 mL)에 용해하고 파라포름알데히드(13.8 mg, 0.46 mmol) 및 TMSCl(1.0 mL, 7.88 mmol)를 첨가하였다. 용액을 실온에서 30분 동안 교반하며 메탄올로 급랭하여 모니터링하고 LC-MS로 메탄올 부가물의 형성을 관찰하였다. 메탄올 부가물에 대한 MS (m/z) 추정치 942.29 (M+H)+, 실측치 942.28. 반응을 여과하고, 무수 톨루엔 및 디클로로메탄으로 세척하고, 진공에서 3회 건조하였다. 조 생성물을 무수 디클로로메탄(6 mL) 및 DIPEA(359 μL, 2.06 mmol)에 용해하고, SN-38(화합물 1, 90 mg, 0.23 mmol)을 함유하는 플라스크에 첨가하였다. 반응을 캡핑하고 40℃에서 18시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 Biotage 플래시 컬럼 크로마토그래피(CH2Cl2/MeOH, 0% 내지 10%)를 통해 실리카 상에서 정제하여 화합물 56을 수득하였다. MS (m/z) 추정치 1302.40 (M+H)+, 실측치 1302.36.
실시예 35
Figure pct00315
화합물 56(282.6 mg, 0.22 mmol)을 THF 및 MeOH에 용해하고 빙욕에서 0℃로 냉각하였다. LiOH(91.1 mg, 2.17 mmol)를 H2O에 용해하고 적하 방식으로 첨가하였다. 반응을 실온에서 교반하고 45분 이내로 완료하였다. 반응을 아세트산으로 중화하고, 농축하고, 분취용 HPLC로 직접 정제하여 화합물 57을 수득하였다.
실시예 36
Figure pct00316
3-(말레이미도)프로피온산 N-히드록시숙신이미드 에스터(28)를 DMF 및 DIPEA에 용해하고, 화합물 57에 첨가하였다. LC-MS로 모니터링하여 완료될 때까지 반응을 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 아세트산으로 중화하고, 분취용 HPLC로 직접 정제하여 화합물 58을 수득하였다. LC-MS (방법 A): t R = 1.40분; MS (m/z) 예상치 1091.31 (M+H)+, 실측치 1091.47.
실시예 37
Figure pct00317
SN-38(1, 76.0 mg, 0.19 mmol, MedChemExpress에서 구입)을 디클로로메탄에 용해하고 트리에틸아민(128 μL, 0.92 mmol) 및 DMAP(2.60 mg, 0.02 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 빙욕에서 0℃로 냉각하고, 아세틸 클로라이드(15.9 μL, 0.22 mmol)를 적하 방식으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응을 디클로로메탄으로 희석하고, 포화 NH4Cl, 물, 및 염수로 세척하였다. 이어서 유기 상을 MgSO4에서 건조하고 여과하고, 농축하고 Biotage 플래시 컬럼 크로마토그래피(CH2Cl2/MeOH 0% 내지 15%)를 통해 실리카 상에서 정제하여 화합물 19(Ac-SN-38)를 수득하였다. MS (m/z) 예측치 435.15 (M+H)+, 실측치 435.07.
실시예 38
Figure pct00318
오븐 건조된 플라스크에서, 화합물 30(1.12 g, 1.24 mmol)을 무수 디클로로메탄(5 mL)에 용해하고 파라포름알데히드(12.4 mg, 0.41 mmol) 및 TMSBr(300 μL, 1.68 mmol)을 첨가하였다. 용액을 실온에서 10분 동안 교반하고 메탄올로 급랭하여 모니터링하고 LC-MS로 메탄올 부가물의 형성을 관찰하였다. 반응을 여과하고, 무수 톨루엔 및 디클로로메탄으로 세척하고, 진공에서 3회 건조하였다. 조 생성물을 무수 디클로로메탄에 용해하고 화합물 19(90.0 mg, 0.21 mmol)에 첨가하고, 이어서 1,2,2,6,6-펜타메틸피페리딘(3.90 mL, 1.86 mmol)에 첨가하였다. 반응을 캡핑하고 40℃에서 18시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 Biotage 플래시 컬럼 크로마토그래피(CH2Cl2/MeOH, 0% 내지 10%)를 통해 실리카 상에서 정제하여 화합물 59를 수득하였다. MS (m/z) 예상치 1344.41 (M+H)+, 실측치 1344.46.
실시예 39
Figure pct00319
화합물 59(290.0 mg, 0.22 mmol)를 THF 및 MeOH에 용해하고 빙욕에서 0℃로 냉각하였다. LiOH(90.5 mg, 2.16 mmol)를 H2O에 용해하고 적하 방식으로 첨가하였다. 반응을 실온에서 교반하고 45분 이내로 완료하였다. 반응을 아세트산으로 중화하고, 농축하고, 분취용 HPLC로 직접 정제하여 탈보호된 중간체 화합물 60을 수득하였다.
Figure pct00320
MP-OSu로 지칭되는 3-(말레이미도)프로피온산 N-히드록시숙신이미드 에스터(28)를 DMF 및 DIPEA에 용해하고, 화합물 60에 첨가하였다. LC-MS로 모니터링하여 완료될 때까지 반응을 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 아세트산으로 중화하고, 분취용 HPLC로 직접 정제하여 화합물 61을 수득하였다. LC-MS (방법 A): t R = 1.42분, MS (m/z) 예상치 1091.31 (M+H)+, 실측치 1091.31.
실시예 40
Figure pct00321
Click Chemistry Tools(CAS:1174157-65-3)에서 구입한 화합물 75(3 당량)을 DMF 및 DIPEA에 용해하고, 화합물 57에 첨가하였다. LC-MS로 모니터링하여 완료될 때까지 반응을 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 아세트산으로 중화하고, 분취용 HPLC로 직접 정제하여 화합물 62를 수득하였다. LC-MS (방법 A): t R = 1.43분, MS (m/z) 예상치 1050.06 (M+H)+, 실측치 1050.07.
실시예 41
Figure pct00322
화합물 63을 실시예 37의 절차에 따라 제조하였다. LC-MS (방법 A); t R = 1.44분; MS (m/z) 예상치 1050.06 (M+H)+, 실측치 1050.
실시예 42
Figure pct00323
문헌[Nature Biotechnology (2014) 32: 1059-1065]의 절차에 따라 제조한 mDPR(Boc)-OSu로 지칭되는 화합물 65(6 mg, 16 μmol)를 무수 DMF(0.25 mL)에 용해하고, 실시예 30의 절차에 따라 제조한 화합물 50(9 mg, 10 μmol)이 있는 플라스크에 첨가하였다. DIPEA(9 μL)를 첨가하며 반응을 교반하고, 반응을 1.5시간 내에 완료하였다. 이어서 반응을 AcOH(9 μL)로 급랭하고, DMSO 중에서 희석하고, 분취용 HPLC로 정제하여 화합물 66(7 mg, 61%)을 수득하였다. LC-MS (방법 A): t R = 1.57분; MS m/z (ES+) 실측치 1143.51.
실시예 43
Figure pct00324
화합물 66(7 mg, 6 μmol)을 무수 DCM(0.54 mL) 중에서 0℃에서 교반하고 TFA(0.06 mL)를 적하 방식으로 첨가하였다. 반응을 2.5시간 이내에 완료하였다. 반응을 DMSO 중에서 희석하고, DCM을 진공에서 제거한 다음, 분취용 HPLC로 정제하여 화합물 67(4 mg, 64%)을 수득하였다. LC-MS (방법 A): t R = 1.18분; MS m/z (ES+) 실측치 1041.22.
실시예 44
Figure pct00325
Fmoc-Lys(PEG24)-OSu로 지칭되고 국제공개 WO2017165851호의 절차에 따라 제조한 화합물 68(86 mg, 56 μmol)을 무수 DMF(0.93 mL) 내로 취하고 실시예 30의 절차에 따라 제조한 화합물 50(32 mg, 37 μmol )으로 충진된 플라스크에 첨가하였다. DIPEA(32 μL)를 첨가하고, 반응을 1시간 동안 교반하고, DMSO 중에서 희석하고 분취용 HPLC로 정제하여 화합물 69(25 mg, 29%)를 수득하였다. LC-MS (방법 A): t R = 1.68분; MS m/z (ES+) 실측치 1163.50 (½ mass).
실시예 45
Figure pct00326
화합물 69(10, 25 mg, 11 μmol)를 DMF(0.55 mL) 중의 20% 피페리딘 중에 취하고 1시간 동안 교반하였다. 이어서 반응을 DMSO 중에서 희석하고 분취용 HPLC로 정제하여 화합물 70(22 mg, 95%)을 수득하였다. LC-MS (방법 A): t R = 1.31분, MS m/z (ES+) 실측치 1052.41 (½ 질량).
실시예 46
Figure pct00327
mDPr(Boc)-OSu로 지칭되는 화합물 65(8 mg, 21 μmol)을 DMF(0.2 mL) 중에 용해한 다음 화합물 70(11, 22 mg, 10 μmol)이 있는 플라스크에 옮긴 다음 DIPEA(9 μL)를 첨가하였다. 반응을 3시간 동안 교반하고, AcOH(9 μL)로 급랭하고, DMSO 중에 희석하고, 분취용 HPLC로 정제하여 화합물 71(12 mg, 51%)을 수득하였다. LC-MS (방법 A): t R = 1.58분; MS m/z (ES+) 실측치 1185.52 (½ mass).
실시예 47
Figure pct00328
화합물 71을 무수 DCM(0.45 mL) 중에 용해하고 0℃로 냉각하였다. TFA(0.05 mL)를 첨가하고 반응을 3시간 동안 교반하였다. 이어서 반응을 DMSO로 희석하고, DCM을 진공에서 제거한 다음 분취용 HPLC로 정제하여 화합물 72(10 mg, 88%)를 수득하였다. LC-MS (방법 A): t R = 1.32분; MS m/z (ES+) 실측치 1135.85 (½ 질량).
실시예 48
Figure pct00329
문헌[Bioconjugate Chem. (2006) 17: 831-840]의 절차에 따라 제조한 화합물 35(660 mg, 1.36 mmol)를 DCM(5 mL)에 용해하였다. DIPEA(0.71 mL, 4.1 mmol)를 첨가한 다음 TBSOTf(0.34 mL, 1.5 mmol)를 천천히 첨가하였다. 반응을 5분 동안 교반하고, MeOH로 급랭하고 진공에서 농축하였다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피 25G KP-Sil Hex 중의 10% 내지 80% EtOAc로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 진공에서 농축하여 무색 고체로서 화합물 73을 수득하였다(731 mg, 1.22 mmol, 90%). LC-MS (방법 A): t R = 2.44분; MS (m/z) [M + Na]+ 예상치 C26H37NNaO13Si 622.19, 실측치 622.10.
실시예 49
Figure pct00330
화합물 73(731 mg, 1.22 mmol)을 5:1 MeOH:AcOH(10 mL) 중에 용해하였다. 아연 가루(2.39 g, 36.6 mmol) 를 반응에 첨가하였다. 반응을 10분 동안 교반하고 이들을 셀라이트 층을 통해 여과하고 MeOH로 헹구었다. 용리물을 농축하고 컬럼 크로마토그래피 25G KP-Sil Hex 중의 10% 내지 100% EtOAc로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 농축하여 무색 고체로서 화합물 74를 수득하였다(693 mg, 1.22 mmol, 99%). LC-MS (방법 A): t R = 2.40분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C26H40NO11Si 570.24, 실측치 571.08.
실시예 50
Figure pct00331
PropargOPr로 지칭되고 Click Chemistry Tools(CAS:1174157-65-3)에서 수득한 화합물 75(1.05 g, 4.66 mmol)를 DMF(10 mL) 중에 용해하였다. N-메틸 글리신인 H-Sar-OH(831 mg, 9.33 mmol) 및 DIPEA(2.4 mL, 14 mmol)를 첨가하였다. 반응을 45분 동안 교반하고, AcOH로 급랭하고, prep-HPLC로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 농축하여 무색 고체로서 화합물 76을 수득하였다(821.3 mg, 4.12 mmol, 88%). LC-MS (방법 A): t R = 0.81분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C9H14NO4 200.09, 실측치 199.72.
Figure pct00332
실시예 51
실시예 49의 화합물 74(636 mg, 1.22 mmol)를 DMF(5 mL) 중에 용해하였다. DIPEA(1.06 mL, 6.08 mmol), 실시예 50의 화합물 76(727 mg, 3.65 mmol) 및 HATU(1.38g, 3.65 mmol)를 반응에 첨가하였다. 반응을 90분 동안 교반한 다음 EtOAc(200 mL) 중에 희석하고, 포화 NaHCO3(200 mL) 및 H2O(2 x 200 mL)로 세척하였다. 유기 부분을 MgSO4로 건조하고, 여과하고 진공에서 농축하였다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피 Hex 중의 10% 내지 80% EtOAc로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 농축하여 무색 고체로서 화합물 77을 수득하였다(823 mg, 1.10 mmol, 90%). LC-MS (방법 A): t R = 2.34분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C35H51N2O14Si 751.31, 실측치 751.22.
실시예 52
Figure pct00333
화합물 77(823 mg, 1.10 mmol)을 1:1:1 THF:H2O:AcOH에 용해하고 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 반응을 진공에서 농축하고, EtOAc(200 mL)로 희석하고, 포화 NaHCO3(3 x 200 mL)로 세척하고 MgSO4에서 건조하고, 진공에서 여과 농축하여 무색 고체로서 화합물 78을 수득하였다(601 mg, 0.944 mmol, 86%). LC-MS (방법 A): t R = 1.55분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C29H37N2O14 637.22, 실측치 637.04.
실시예 53
Figure pct00334
화합물 78(300 mg, 0.47 mmol)을 DCM(2 mL) 중에 용해하였다. 1,1′-카보닐-디-(1,2,4-트리아졸)(232 mg, 1.41 mmol)을 첨가하였다. 반응을 30분 동안 계속한 다음 EtOAc(50 mL) 내로 희석하고, H2O(3 x 50 mL)로 세척하고, MgSO4로 건조하고, 진공에서 여과 농축하여 무색 고체로서 화합물 79를 수득하고(340 mg, 0.465 mmol, 99%), 이를 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. LC-MS (방법 A): t R = 1.68분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C32H38N5O15 732.24, 실측치 732.11.
실시예 54
Figure pct00335
화합물 79(200 mg, 0.273 mmol) 를 DCM(2 mL) 중에 용해하였다. Enamine에서 구입한 2-(메틸설포닐)-에탄아민(54 μL, 0.547 mmol) 및 DIPEA(0.14 mL, 0.82 mmol)를 반응에 첨가하였다. 반응을 10분 동안 교반한 다음 EtOAc(50 mL) 내로 희석하고, 1M HCl(3 x 50 mL), H2O(50 mL)로 세척하고, MgSO4로 건조하고, 여과하고, 진공에서 농축하여 무색 고체로서 화합물 80을 수득하였다(210 mg, 0.267 mmol, 98%). LC-MS (방법 A); t R = 1.64분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C33H44N3O17S 786.24, 실측치 786.14.
실시예 55
Figure pct00336
엑사테칸 메실레이트(21a, 10.0 mg, 0.0188 mmol)를 무수 DMF(0.5 mL) 중에 용해하였다. DIPEA(16 μL, 0.094 mmol) 및 화합물 79(41.3 mg, 0.0.564 mmol)를 반응에 첨가하였다. 반응을 60℃에서 5시간 동안 가열하였다. 반응을 AcOH로 급랭하고 prep-HPLC로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 동결건조하여 황색 분말로서 화합물 81을 수득하였다(1.4 mg, 1.3 μmol, 6.8%). LC-MS (방법 A): t R = 2.10분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C54H57N5FO19 1098.36, 실측치 1098.51.
실시예 56
Figure pct00337
화합물 81(1.4 mg, 1.3 μmol)을 MeOH(0.5 mL)에 용해하였다. LiOH(5 mg, 0.209 mmol)를 첨가하고 용해를 돕기 위해 반응을 초음파처리 하고 5분 동안 교반하였다. H2O(0.5 mL)를 반응에 첨가하고 5분 동안 교반한 다음, AcOH로 급랭하고 진공에서 농축하였다. 반응을 H2O 중의 5% 내지 95% MeCN prep-HPLC 10 mm로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 동결건조하여 황색 분말로서 화합물 82를 수득하였다(0.7 mg, 0.7 μmol, 57%). LC-MS (방법 A): t R = 1.62분 MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C47H49FN5O16 958.32, 실측치 958.62.
실시예 57
Figure pct00338
화합물 80(50.0 mg, 0.0636 mmol)을 DCM(1 mL) 중에 용해하였다. 파라포름알데히드(100 mg, 3.3 mmol)를 반응에 첨가하고 TMSBr(21 μL, 0.16 mmol)을 첨가하였다. 반응을 15분 동안 교반하였다. 분취량을 MeOH에서 급랭하고 MeOH 부가물로의 완전한 전환을 UPLC-MS로 관찰하였다. 반응을 0.45 μm PTFE 필터를 통해 여과하고 DCM(2 x 2 mL)으로 헹구고, 톨루엔(2 mL)을 공비혼합물에 첨가하여 최종 혼합물을 수득하였다. 용리물을 농축하여 무색 고체로서 화합물 83을 수득하고 이를 다음 단계에서 즉시 사용하였다.
화합물 83(0.0636 mmol)을 무수 DCM(0.5 mL)에 용해하였다. 1,2,2,6,6-펜타메틸피페리딘(21 μL, 0.11 mmol)을 반응에 첨가하고, 반응 용액을 화합물 22 고체(12.0 mg, 0.0183 mmol)에 직접 첨가하였다. 반응을 실온에서 3.5시간 동안 교반하고 이 때 완전한 전환을 UPLC-MS로 관찰하였다. 반응을 AcOH로 급랭하고, 농축하고 prep-HPLC 21 mm H2O 중의 10% 내지 95% MeCN으로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 농축하여 황색 고체로서 화합물 84를 수득하였다(5.4 mg, 3.7 μmol, 20%). LC-MS (방법 A): t R = 2.30분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C73H76FN6O23S 1455.47, 실측치 1455.43. 엑사테칸 FMOC 보호된 아민의 에피머화로 추정되는 관찰된 생성물을 함유하는 분획을 진공에서 농축하여 황색 고체로서 화합물 85를 수득하였다(2.1 mg, 1.4 μmol, 8%). LC-MS (방법 A): t R = 2.33분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C73H76FN6O23S 1455.47, 실측치 1455.63.
Figure pct00339
화합물 84(5.4 mg, 3.7 μmol)를 MeOH(1 ml) 중에 용해하였다. LiOH(25 mg)를 첨가하고 용해를 돕기 위해 반응을 초음파처리하였다. 반응을 10분 동안 교반하고 H2O(1 mL)를 첨가하고 추가 20분 동안 교반하였다. 반응을 AcOH로 급랭하고, 농축하고, prep-HPLC 10 mm H2O 0.05% TFA 중의 5-60-95% MeCN으로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 동결건조하여 황색 분말로서 화합물 86을 수득하였다(1.96 mg, 1.79 μmol, 48%). LC-MS (방법 A): t R = 1.22분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C51H58FN6O18S 1093.35, 실측치 1093.56.
실시예 58
Figure pct00340
실시예 57의 화합물 85(2.1 mg, 1.4 μmol)를 MeOH(1 mL)에 용해하였다. LiOH(25 mg)를 첨가하고 용해를 돕기 위해 반응을 초음파처리하였다. 반응을 10분 동안 교반하고 H2O(1 mL)를 첨가하고 추가 20분 동안 교반하였다. 반응을 AcOH로 급랭하고, 농축하고, prep-HPLC 10 mm H2O 0.05% TFA 중의 5-60-95% MeCN으로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 동결건조하여 황색 분말로서 화합물 87을 수득하였다(0.98 mg, 0.90 μmol, 62%). LC-MS (방법 A): t R = 1.40분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C51H58FN6O18S 1093.35, 실측치 1093.18.
실시예 59
Figure pct00341
사코신 메틸 에스터 HCl(88, 5.00 g, 35.8 mmol)를 무수 DCM(100 mL)에 현탁하였다. DIPEA(18.7 mL, 107.5 mmol)를 첨가하고 반응을 초음파처리하고 격렬하게 교반하여 H-Sar-OMe를 용해하였다. 용액은 약간 탁하였다. CO2를 반응을 통해 30분 동안 발포하였다. Gelest, Inc.로부터 구입한 디-t-부틸이소부틸실릴 트리플루오로메탄설포네이트(BIBSOTf, 20 mL, 72 mmol)를 반응에 첨가하고 1시간 동안 교반하였다. 건조 아이스의 펠릿을 반응 혼합물에 첨가하였다. 발포를 중단한 후, 반응을 농축하고 Hex(200 mL)로 희석하고, 1M 수성 HCl(3 x 200 mL)로 세척하고, MgSO4로 건조하고, 진공에서 여과 농축하였다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피 Hex 중의 0% 내지 10% EtOAc로 정제하였다. Rf = 9:1 Hex:EtOAc 스테인 KMnO4 중의 0.25. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 진공에서 농축하여 무색 오일로서 화합물 89를 수득하였다(10.38 mg, 30.03 mmol, 84%). LC-MS (방법 C): t R = 1.67분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C17H36NO4Si 346.24, 실측치 346.99.
실시예 60
Figure pct00342
화합물 89를 1:1:1 THF:MeOH:H2O(60 mL) 중에 용해하였다. LiOH(1.80 g, 75.1 mmol)를 첨가하고 반응을 10분 동안 교반하였으며 이 시점에 완전한 전환을 UPLC-MS로 관찰하였다. 반응을 AcOH로 급랭하고, 진공에서 농축하고 컬럼 크로마토그래피 DCM 중의 0% 내지 10% MeOH로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 진공에서 농축하여 무색 고체로서 화합물 90을 수득하였다(8.79 mg, 26.5 mmol, 88%). LC-MS (방법 C): t R = 1.50분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C16H34NO4Si 332.23, 실측치 331.86.
실시예 61
Figure pct00343
문헌[Bioconjugate Chem. (2006) 17: 831-840]의 방법에 따라 제조한 화합물 91(4.00 g, 8.78 mmol)을 DCM(10 mL)에 용해하였다. 실시예 60의 BIBS-Sar-OH(90, 5.82 g, 17.6 mmol)를 첨가한 다음 EEDQ(6.52 g, 26.4 mmol)를 첨가하였다. 반응을 90분 동안 교반하였다. 반응을 EtOAc(200 mL)로 희석하고, 1M 수성 HCL(3 x 200 mL), 포화 NaHCO3(3 x 200 mL), 물(200 mL)로 세척하고 MgSO4로 건조하고, 진공에서 여과 농축하였다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피 Hex 중의 0% 내지 60% EtOAc로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 진공에서 농축하여 무색 고체로서 화합물 92를 수득하였다(5.16, 6.71 mmol, 76%). LC-MS: t R = 1.58분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C36H57N2O14Si 769.36, 실측치 769.29.
실시예 62
Figure pct00344
화합물 92(2.70 g, 3.51 mmol)를 무수 피리딘(10 mL)에 용해하였다. LiI(2.82 g, 21.1 mmol)를 첨가하고 반응을 밀봉하여 115℃에서 밤새(약 16시간) 가열하였다. 반응을 EtOAc(200 mL)로 희석하고, 1M 수성 HCl(3 x 200 mL)로 세척하고, H2O로 세척하고, MgSO4로 건조하고, 진공에서 여과 농축하였다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피 Hex 중의 0% 내지 60% EtOAc로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 진공에서 농축하여 무색 고체로서 화합물 93을 수득하였다(2.06 g, 2.73 mmol, 78%). LC-MS (방법 C): t R = 1.50분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C35H55N2O14Si 755.34, 실측치 755.32.
실시예 63
Figure pct00345
화합물 93(700 mg, 0.927 mmol)을 피리딘(2 mL) 중에 용해하였다. Gelest Inc.로부터 구입한 BIBSOTf(0.78 mL, 2.78 mmol)를 첨가하였다. 반응을 30분 동안 교반하고, EtOAc(50 mL)로 희석하고, 1M HCl(3 x 50 mL)로 세척하고, MgSO4로 건조하고, 진공에서 여과 농축하였다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피 Hex 중의 0% 내지 60% EtOAc로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 진공에서 농축하여 무색 고체로서 화합물 94를 수득하였다(723 mg, 0.758 mmol, 82%). LC-MS (방법 C): t R = 1.85분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C47H81N2O14Si2 953.52, 실측치 953.34.
실시예 64
Figure pct00346
화합물 94(723 mg, 0.758 mmol)를 DCM(2 mL) 중에 용해하였다. CDT(373 mg, 2.28 mmol)를 첨가하고 반응을 30분 동안 교반하였다. 반응을 EtOAc(50 mL)로 희석하고, H2O(3 x 50 mL)로 세척하고 MgSO4로 건조하고, 진공에서 여과 농축하여 무색 고체로서 화합물 95를 수득하고(790 mg, 0.753 mmol, 99%), 이를 다음 단계에서 추가 정제 없이 사용하였다. LC-MS (방법 C): t R = 1.86분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C50H82N5O15Si2 1048.53, 실측치 1049.29
화합물 95(395 mg, 0.376 mmol)를 0.5 mL 무수 DMF 중에 용해하고 엑사테칸 메실레이트(21-a, 25 mg, 0.047 mmol) 고체에 직접 첨가한 다음 DIPEA(0.081 mL, 0.47 mmol)를 첨가하였다. 반응을 밤새(약 15시간) 교반하였다. 완전한 전환을 UPLC-MS로 관찰하였다. 반응을 EtOAc(20 mL)로 희석하고, 포화 NH4Cl(3 x 20 mL)로 세척하고 MgSO4로 건조하고, 진공에서 여과 농축하여 조 생성물로서 화합물 96을 수득하고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. LC-MS (방법 C): t R = 1.89분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C72H101N5O19Si2 1414.66, 실측치 1414.71.
조 화합물96(0.047 mmol)을 1 mL 무수 DMF 중에 용해하였다. AcOH(200 μL)를 첨가하였다. THF(0.28 mL) 중의 TBAF 1 M을 반응에 첨가하였다. 45분 후에 완전한 전환을 관찰하고 실리카(100 mg)를 첨가하여 플루오라이드를 급랭하였다. 반응을 여과하고 Prep-HPLC 21 mm H2O 0.05% TFA 중의 10% 내지 95% MeCN으로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 동결건조하여 황색 분말로서 화합물 97을 수득하였다(45 mg, 0.046 mmol, 98%). LC-MS (방법 A): t R = 1.53분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C47H49N5O17 974.31, 실측치 974.10.
실시예 65
Figure pct00347
화합물 97(45 mg, 0.046 mmol)을 희석하여 10 mM DMSO 용액(4.6 mL)을 형성하였다. PBS 7.4(10x, 4.6 mL)를 첨가하여 5 mM 용액을 제조하였다. 아세틸 에스터라제 800 Units/mL 용액을 첨가하여 2.5 mM 약물 링커 용액(9.2 mL)을 형성하였다. 반응을 40℃에서 밤새(약 15시간) 교반하였다. 완전한 전환이 관찰되었다. 반응을 200 mL 차가운 MeOH 내에서 희석하고, 원심분리하고, 상청액을 수집하고, 농축하고, Prep-HPLC 21mm H2O 0.05% TFA 중의 10% 내지 95% MeCN으로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 동결건조하여 황색 분말로서 화합물 98을 수득하였다(30 mg, 0.035 mmol). LC-MS (방법 A): tR = 1.30분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C41H43N5O14 848.28, 실측치 847.97.
실시예 66
Figure pct00348
문헌[Nature Biotechnology (2014) 32: 1059-1062]의 절차에 따라 제조한 말레이미도-Dpr(Boc)-OH(65, 26.6 mg, 0.0936 mmol)를 0℃로 냉각한 0.5 mL 무수 DMF 중에 용해하였다. 루티딘(0.022 mL, 0.19 mmol)을 첨가한 후 COMU(38.7 mg, 0.0905 mmol)를 첨가하였다. 반응을 30분 동안 교반하였다. 활성화된 말레이미도-DPr(Boc)-OH 용액을 화합물 98(30 mg, 0.035 mmol) 고체에 직접 첨가하였다. 반응을 60분 동안 교반하였으며 이 시점에 완전한 전환이 관찰되었다. 반응을 AcOH로 급랭하고 Prep-HPLC 21mm H2O 중의 10% 내지 95% MeCN로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 동결건조하여 황색 고체로서 화합물 99를 수득하였다(4.5 mg, 4.0 μmol, 13%). LC-MS (방법 A): t R = 1.72분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C53H57N7O19 1114.37, 실측치 1114.69.
실시예 67
Figure pct00349
화합물 99(4.5 mg, 4.0 μmol)를 DCM 중의 20% TFA 중에 용해하였다. 화합물 100으로의 완전한 전환을 25분 후에 UPLC-MS로 관찰하였다. 반응을 진공에서 농축하고 prep-HPLC 10mm H2O 0.05% TFA 중의 10% 내지 95% MeCN으로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 동결건조하여 백색 분말로서 화합물 100을 수득하였다(3.91 mg, 3.86 μmol, 96%). LC-MS (방법 A): t R = 1.31분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C48H50N7O17 1014.32, 실측치 1014.07.
실시예 68
Figure pct00350
실시예 26의 절차에 따라 제조한 화합물 45(82 mg, 0.097 mmol) 및 7-MAD-MDCPT로 지칭되는 화합물 13(14 mg, 0.033 mmol)을 DCM(2 mL) 및 이어서 DMF(0.5 mL) 중에 용해하였다. DCM을 증발시켜 DMF 중으로 반응 혼합물을 농축하였다. 30분 후 관찰되는 생성물로의 전환은 없었으며, 추가로 화합물 45의 가수분해는 관찰되지 않았다. DIPEA(0.1 mL)를 반응 혼합물에 첨가하였고 이 때 맑은 적색 반응 혼합물이 혼탁해졌다. 반응을 밤새(약 15시간) 실온에서 교반하였다. 약물의 원하는 약물 링커 생성물로의 약 50% 전환이 관찰되었으며, 활성화된 CDT 링커의 약 10% 가수분해가 남아있었다. [주의: UPLC-MS 분석의 경우 MeOH 희석액을 사용하여, 링커-CDT는 t = 30분에 관찰되었고(반응 중성), 링커-OCOMe는 t=15시간에 관찰되었다(염기 첨가 후)]. 반응을 60분 동안 진공 하에 45℃에서 천천히 농축하였다. 완전한 전환이 UPLC-MS로 관찰될 때까지 반응 혼합물을 60℃에서 4시간 동안 가열하였다. 반응을 진공에서 농축한 다음 컬럼 크로마토그래피 DCM 중의 0% 내지 5% MeOH로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 농축하여 백색 고체로서 화합물 101을 수득하였다(28 mg, 0.023 mmol, 70%). LC-MS (방법 A): t R = 2.17분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C61H58N5O21 1196.36, 실측치 1196.19.
실시예 69
Figure pct00351
화합물 101, 28 mg, 0.023 mmol)을 MeOH(0.5 mL) 및 THF(0.5 mL) 중에 용해하였다. LiOH(25 mg, 1.0 mmol)를 첨가하였다. 반응을 초음파처리하여 LiOH를 용해한 다음 교반하였다. 10분 후에 물을 첨가하였다(0.5 mL). 탈보호된 글루쿠로나이드로의 완전한 전환을 90분 후에 UPLC-MS로 관찰하였다. 피페리딘(0.05 mL)을 첨가하였다. Fmoc의 완전한 탈보호를 추가 60분 후에 관찰하였다. 반응을 AcOH(0.2 mL)로 급랭하였다. 반응을 농축하고, H2O 0.05% TFA 구배 중의 5-60-95 MeCN를 포함한 10 mm Max-RP를 사용하여 Prep-HPLC로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 진공에서 농축하여 황색 고체로서 화합물 102를 수득하였다(10.1 mg, 0.0121 mmol, 51.8%). LC-MS (방법 A): t R = 1.05분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C39H40N5O16 834.25, 실측치 833.71.
실시예 70
Figure pct00352
화합물 102(10.1 mg, 0.0121 mmol)를 DMF(0.2 mL) 중에 용해하였다. 3-(말레이미도)프로피온산 N-히드록시숙신이미드 에스터(9.7 mg, 0.036 mmol)를 첨가하였다. DIPEA(13 μL, 0.073 mmol)를 첨가하였다. 반응을 15분 동안 교반하고 이 시점에 완전한 전환을 UPLC-MS로 관찰하였다. 반응을 AcOH(0.05 mL)로 급랭한 다음, Prep-HPLC 10 mm Max RP C12 H2O 0.05% TFA 중의 5-60-95% MeCN으로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 동결건조하여 황색 분말로서 화합물 103을 수득하였다(5.53 mg, 0.00561 mmol, 46.4%). LC-MS (방법 A) t R = 1.24분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C46H45N6O19 985.27, 실측치 985.45.
실시예 71
Figure pct00353
실시예 60의 절차에 따라 제조한 화합물 92(500 mg, 0.65 mmol)를 MeOH(10mL) 중에 용해하였다. LiOH(500 mg, 21 mmol)를 첨가하였다. 반응을 초음파처리하고, 5분 동안 교반하고, H2O를 첨가하고, 5분 동안 교반하였다. 완전한 전환이 관찰되었다. 반응을 AcOH로 급랭하고, 진공에서 농축하고 Prep-HPLC로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 진공에서 농축하여 무색 고체로서 화합물 104를 수득하였다(295 mg, 0.469 mmol, 72%). LC-MS (방법 C): t R = 1.23분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C29H49N2O11Si 629.31, 실측치 629.01.
실시예 72
Figure pct00354
화합물 104(295 mg, 0.469 mmol)를 무수 피리딘(5 mL)에 용해하고 0℃로 냉각하였다. BIBSOTf(0.392 mL, 1.41 mmol)를 15분에 걸쳐 적하 방식으로 첨가하며 각각의 화학량론적 당량을 첨가한 후 완료에 대해 UPLC-MS로 확인하였다. 반응을 EtOAc(100 mL)로 희석하고, 1M HCl(3 x 100 mL)로 세척하고, MgSO4로 건조하고, 진공에서 여과 농축하였다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피 50G KP-Sil, Hex 중의 10% 내지 100% EtOAc로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 농축하여 무색 고체로서 화합물 105를 수득하였다(301 mg, 0.363 mmol, 77%). LC-MS (방법 C): t R = 1.65분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C41H75N2O11Si2 827.49, 실측치 827.31.
실시예 73
Figure pct00355
화합물 105(218 mg, 0.264 mmol)를 무수 DCM(1 mL)에 용해하고 0℃로 냉각하였다. 실시예 2의 화합물 5(0.087 mmol) 반응 용액을 DCM 반응 용액에 직접 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간에 걸쳐 실온으로 가온하였다. 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응을 MeOH로 급랭하고, 플래시 크로마토그래피 50G KP-Sil DCM 중의 0% 내지 10% MeOH로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 진공에서 농축하여 황색 고체로서 화합물 106을 수득하였다(66.1 mg, 0.0467 mmol, 53%). LC-MS (방법 C): t R = 1.76분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C72H106N5O20Si2 1416.70, 실측치 1416.74.
실시예 74
Figure pct00356
화합물 106(66.1 mg, 0.0467 mmol)을 DCM(2 mL)에 용해하였다. TFA(0.4 mL)를 첨가하였다. 반응을 20분 동안 교반하였다. 완전한 전환을 UPLC-MS로 관찰하였다. 반응을 진공에서 농축하여 황색 고체로서 화합물 107을 수득하고 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. LC-MS (방법 A): tR = 1.68분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C67H98N5O18Si2 1316.64, 실측치 1316.80.
조 화합물 107(0.0467 mmol)을 무수 DMF(1 mL) 중에 용해하였다. AcOH(200 μL)을 첨가한 다음 THF(200 uL) 중의 TBAF 1 M을 첨가하였다. 반응을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 완전한 전환을 UPLC-MS로 관찰하였다. 실리카(약 100 mg)를 첨가하여 플루오라이드 음이온을 급랭하였다. 반응 혼합물을 시린지 필터를 통해 여과하고 2 x 1 mL 2:1 DMA:H2O 10% AcOH로 헹구고 prep-HPLC 30 mm H2O 0.05% TFA 중의 10% 내지 95% MeCN으로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 동결건조하여 황색 분말로서 화합물 108을 수득하였다(33.5 mg, 0.0383 mmol, 82%). LC-MS (방법 A): t R = 1.16; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C42H45N5O16 875.29, 실측치 875.82.
실시예 75
Figure pct00357
화합물 108(33.5 mg, 0.0383 mmol)을 DMF 중에 용해하였다. DIPEA(0.040 mL, 0.23 mmol)를 반응에 첨가한 후 3-(말레이미도)프로피온산 N-히드록시숙신이미드 에스터(28, 30.6 mg, 115 mmol)를 첨가하였다. 반응을 90분 동안 교반하였다. 완전한 전환을 UPLC-MS로 관찰하였다. 반응을 AcOH로 급랭하고 Prep-HPLC- 21 mm로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 동결건조하여 황색 분말로서 화합물 109a를 수득하였다(26.2 mg, 0.0255 mmol, 67%). LC-MS (방법 A): t R = 1.39분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C49H51N6O19 1027.32, 실측치 1026.88.
유사한 절차를 사용하여 실시예 10의 임의의 화합물 18a 내지 화합물 18p로 일반 화학식 109의 약물 링커 화합물을 제조하였다.
Figure pct00358
상기 식에서, R은, R이 화합물18q에서 출발한 n-펜틸(화합물 109b)인, 합성된 화합물을 포함하여 실시예 10의 임의의 화합물 18a 내지 화합물 18p의 R기 중 임의의 하나이다.
실시예 76
다음의 반응식에 따라 화합물 113을 제조하였다.
Figure pct00359
유사한 절차를 사용하여 실시예 10의 임의의 화합물 18a 내지 화합물 18p로 일반 화학식 114의 약물 링커 화합물을 제조하였다:
Figure pct00360
상기 식에서, R은, R이 화합물18h에서 출발한 n-펜틸(화합물 114a)이고 R이 화합물 6에서 출발한 n-부틸(화합물 114b)인 합성된 화합물을 포함하여 실시예 10의 화합물 18a 내지 화합물 18p의 R기 중 임의의 하나이다.
실시예 77
실시예 76 및 실시예 44 및 실시예 45의 반응식에 따라 화학식 115의 화합물을 제조하였다:
Figure pct00361
상기 식에서 아래첨자 n은 4 내지 24의 정수이고 R은 실시예 10의 화합물 18a 내지 화합물 18p의 R기 중 임의의 하나이다.
실시예 78
실시예 26 내지 실시예 28의 절차에 따라, 화학식 116의 화합물을 제조하였다:
Figure pct00362
상기 식에서 R은 R 치환체에 반응성 친핵성 기가 존재하지 않는 한 화합물 45의 커플링 반응과 호환될 수 있는 실시예 7의 캄프토테신 화합물 14a 내지 화합물 14z의 임의의 기이다.
실시예 78
실시예 14 및 실시예 73 내지 실시예 75의 절차에 따라, 화학식 117의 화합물을 제조하였다:
Figure pct00363
실시예 79
Figure pct00364
문헌[Bioconjugate Chem. (2009) 20: 1242-1250]의 절차에 따라 제조한 화합물 6(19.0 mg, 0.0424 mmol)을 무수 DCM(0.5 mL) 중에 용해하였다. DMAP(15.4 mg, 0.127 mmol), Sc(OTf)3(12.5 mg, 0.0254 mmol), Boc-Sar-OH(24.1 mg, 127 mmol) 및 DIC(21 μL, 136 mmol)를 반응에 첨가하였다. 반응을 90분 동안 교반하였다. 반응을 컬럼 크로마토그래피 DCM 중의 0% 내지 5% MeOH로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 진공에서 농축하여 황색 고체로서 화합물 2를 수득하였다. LC-MS (방법 A): tR = 1.52분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C33H38N3O9 620.26, 실측치 619.96.
실시예 80
Figure pct00365
화합물 118(25.2 mg, 0.0407 mmol)을 DCM(2 mL) 중의 20% TFA에 용해하였다. 반응을 15분 동안 교반하고 이 시점에 완전한 전환을 UPLC-MS로 관찰하였다. 반응을 진공에서 농축하여 황색 고체로서 화합물 119를 수득하고 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. LC-MS (방법 A): t R = 0.93분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C28H30N3O7 520.21, 실측치 519.87.
조 생성물 119(0.0407 mmol)을 무수 DMF(0.5 mL) 중에 용해하였다. DIPEA(35 μL, 0.203 mmol)를 첨가한 후 Broadpharm(CAS: 955094-26-5)로부터 수득한 Mal-아미도-PEG2-NHS(52 mg, 0.122 mmol)를 첨가하였다. 반응을 90분 동안 교반하고 AcOH(50 μL)로 급랭하고 Prep-HPLC로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 동결건조하여 황색 분말로서 화합물 120을 수득하였다(18.9 mg, 0.0228 mmol, 56%). LC-MS (방법 A): tR = 1.16분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C42H48N5O13 830.32, 실측치 829.86. 화합물 120은 일반 화학식 Z'-A-S*-W-CPT2의 예시적인 약물 링커 화합물이다.
실시예 81
Figure pct00366
N-(3-히드록시프로필)말레이미드(455mg, 2.93 mmol)를 무수 DCM(4 mL) 중에 용해하였다. 톨루엔 중의 포스겐 20% w/w을 첨가하고 반응을 60분 동안 교반한 다음 질소 흐름 하에 농축하고, 진공 하에 농축하여 조 화합물 122를 수득하고, 이를 DCM 중의 50 mg/mL 중에서 재구성하여 다음 단계에서 직접 사용하였다.
문헌[Bioconjugate Chem. (2009) 20: 1242-1250]의 절차에 따라 제조한 화합물 6(10 mg, 0.022 mmol)을 무수 DCM(0.5 mL) 중에 용해하였다. DMAP(3 mg, 0.02 mmol)를 반응에 첨가하였다. 이전 단계에서 제조한 화합물 64 클로로포르메이트 용액(1 mL)을 반응에 첨가하였다. 반응을 90분 동안 교반하였다. 원하는 생성물로의 약 50%의 전환을 관찰하였다. 반응을 FCC 10G Biotage Ultra DCM 중의 0% 내지 5% MeOH로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 진공에서 농축하여 황색 고체로서 화합물 65를 수득하였다(7.5 mg, 0.012 mmol, 53%). LC-MS (방법 A): t R = 2.17분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C33H32N3O10 630.21, 실측치 629.98. 화합물 122는 일반 화학식 Z'-A-CPT2의 예시적인 약물 링커 화합물이다.
실시예 82
Figure pct00367
실시예 1의 절차에 따라 제조한 화합물 2(45 mg, 0.088 mmol)를 무수 DCM(0.5 mL) 중에 용해하였다. DIPEA(0.05 mL) 및 DMAP(11 mg, 0.09 mmol)를 반응에 첨가하였다. 이전에 기술된 화합물 64 클로로포르메이트 용액(1.1 mL)을 용액에 첨가하고 반응을 60분 동안 교반하였다. 원하는 생성물로의 약 70%의 전환을 관찰하였다. 반응을 MeOH로 급랭한 다음 DCM 중의 실리카 10% MeOH를 통해 여과하였다. 용리물을 농축하여 백색 고체(0.088 mmol)로서 화합물 123을 수득하고 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. LC-MS (방법 B): tR = 1.91분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C36H42N3O9Si 688.27, 실측치 687.99.
조 화합물 123(0.088 mmol)을 DMF(2 mL) 중에 용해하였다. AcOH(0.5 mL)를 반응 혼합물에 첨가한 다음 THF(0.440 mL, 0.444 mmol) 중의 TBAF 1M을 첨가하였다. 반응을 30분 동안 교반한 다음 Prep-HPLC 21 mm H2O 0.05% TFA 중의 5% 내지 95% MeCN으로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 동결건조하여 황색 분말로서 화합물 124를 수득하였다(10.24, 0.01785 mmol, 20%). LC-MS (방법 A): tR = 1.24분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C30H28N3O9 574.18, 실측치 573.90. 화합물 124는 일반 화학식 Z'-A-CPT3의 예시적인 약물 링커 화합물이다.
실시예 83
Figure pct00368
실시예 14에 따라 제조한 화합물 24 클로로포르메이트 반응 혼합물에 문헌[Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters (2002) 12: 217-219]의 절차에 따라 제조한 고체 화합물 125(291 mg, 0.390 mmol)를 첨가하였다. 생성물로의 전환을 UPLC-MS로 10분 후에 관찰하였다. 반응을 MeOH로 급랭하고, 진공에서 농축한 다음 컬럼 크로마토그래피 DCM 중의 0% 내지 10% MeOH로 대략 정제하였다. 불순물(유리 약물, 링커)이 포함된 원하는 생성물을 함유하는 분획을 농축하여 미황색 고체로서 화합물 126을 수득하고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. LC-MS (방법 C): t R = 1.85분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C77H80N5O11Si 1278.56, 실측치 1278.09.
조 화합물 126을 DCM 중의 50% Et2NH에 용해하였다. 반응을 30분 동안 교반하였으며 이 시점에 완전한 Fmoc 탈보호를 UPLC-MS로 관찰하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하였다. 증발 후에 TBS 보호기의 완전한 탈보호를 관찰하였다. 반응을 컬럼 크로마토그래피 DCM 중의 0% 내지 10% MeOH로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획 및 미량의 불순물을 진공에서 농축하여 회백색 고체로서 화합물 127을 수득하였고(100 mg, 0.10 mmol, 41%) 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. Rt = 1.03분 소수성 방법 UPLC. MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C56H56N5O9 942.41, 실측치 942.18.
조 화합물 127(100 mg, 0.10 mmol)을 무수 DMF(2 mL) 중에 용해하였다. DIPEA(0.037 mL, 0.212 mmol)를 첨가한 후 MP-PEG8-OSu(81 mg, 117 mmol)를 첨가하였다. 5분 후에 완전한 전환을 UPLC-MS로 관찰하였다. 반응을 MeOH 및 AcOH로 급랭하고, 진공에서 농축하여 조 화합물 128을 수득하였으며 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다.
조 화합물 128을 DCM 중의 20% TFA 중에 용해하고 1시간 동안 교반하였다. 반응을 진공에서 농축하고 prep-HPLC로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 동결건조하여 회백색으로서 화합물 129를 수득하였다(31.0 mg, 0.0249 mmol, 23%). LC-MS (방법 A): t R = 1.37분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C62H82N7O20 1244.56, 실측치 1243.93. 화합물 129는 일반 화학식 Z'-A-S*-W-RL-CPT3의 예시적인 약물 링커 화합물이다.
실시예 84
Figure pct00369
실시예 3의 화합물 7 클로로포르메이트 용액(0.334 mmol)에 문헌[Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters (2002) 12: 217-219]의 절차에 따라 제조한 화합물 125(372 mg, 0.499 mmol)를 첨가하였다. 반응을 45분 동안 교반하였다. 이전에 기술된 샘플 제조를 사용하여 클로로포르메이트의 원하는 생성물로의 거의 완전한 전환을 관찰하였다. 반응을 MeOH로 급랭하고 진공에서 농축하고 단계 구배를 사용하여 FCC 50G KP-Sil DCM 중의 0% 내지 5% MeOH로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획 및 불순물 혼합물을 진공에서 농축하여 황색 고체로서 화합물 130을 수득하였으며(450 mg, 약 80% w/w, 0.294 mmol), 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. LC-MS (방법 A): t R = 1.61분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C74H70N5O12 1220.50, 실측치 1220.16.
조 화합물 130(0.294 mmol)을 DCM 중의 10 mL 50% Et2HN에 용해하였다. 반응을 30분 동안 교반하였으며 이 때 거의 완전한 전환을 UPLC-MS로 관찰하였다. 반응을 진공에서 농축하여 황색 고체로서 화합물 131을 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. LC-MS (방법 A): t R = 1.20분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C59H60N5O10 998.43, 실측치 998.26.
이전 단계의 조 화합물 131(0.294 mmol)을 무수 DCM(5 mL) 중에 용해하였다. DMF(250 mg/mL) 중에 용해된 MP-Peg8-OSu(483 mg, 0.701 mmol)를 첨가하였다. DIPEA(0.3 mL)를 첨가하고 반응을 30분 동안 교반하였으며 이 때 화합물 132로의 완전한 전환을 UPLC-MS로 관찰하였다. 화합물 132를 함유하는 반응 혼합물을 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. LC-MS (방법 A): t R = 1.37분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C85H102N7O22 1572.71, 실측치 1571.90.
조 화합물 132를 함유하는 반응 혼합물(화합물 57, 0.294 mmol)을 급랭하고 TFA(1 mL)로 산성화하였다. 반응을 실온에서 20분 동안 교반하고 이때 완전한 전환이 관찰되었다. 반응을 진공에서 농축하고 Prep-HPLC 30 mm C18 H2O 0.05% TFA 중의 10% 내지 95% MeCN으로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 동결건조하여 황색 고체로서 화합물 133을 수득하였다(107 mg, 0.0823 mmol, 28%). LC-MS (방법 A): t R = 1.17분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C65H86N7O21 1300.59, 실측치 1300.69. 화합물 133은 일반 화학식 Z'-A-S*-W-RL-CPT2의 예시적인 약물 링커 화합물이다.
실시예 85
Figure pct00370
문헌[Bioconjugate Chem. (2006) 17: 831-840]의 절차에 따라 제조한 화합물 43(143.4 mg, 0.1916 mmol)을 무수 DMF(0.5 mL) 중에 용해하였다. DIPEA(0.0334 mL, 0.192 mmol). DMF 용액에 비스-(펜타플루오로페닐) 카보네이트(75.5 mg, 0.192 mmol, TCI America 제품번호 B3604로부터 입수)를 첨가하였다. 반응을 30분 동안 교반한 후 0.5 mL 무수 DMF 중의 실시예 7의 화합물 14a(28.7 mg, 0.0639 mg)를 첨가하였다. 반응을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 완전한 전환을 UPLC-MS로 관찰하였다. 반응을 AcOH로 급랭하고(0.035 mL) 이어서 H2O 0.05% TFA 중의 30% 내지 95% MeCN의 구배를 사용하여 21.2 x 250 mm Max-RP 컬럼 상에서 분취용 HPLC로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 진공에서 농축하여 황색 고체로서 화합물 133을 수득하였다(76.6 mg, 0.0623 mmol, 98%). LC-MS (방법 F): t R = 1.68분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C63H62N5O21 1224.39, 실측치 1224.46.
실시예 86
Figure pct00371
화합물 133(76.6 mg, 0.0623 mmol)을 THF:MeOH 1:1(2 mL)에 용해하였다. 반응을 빙/수 욕에서 냉각하였다. LiOH(45 mg, 1.9 mmol)를 첨가하고 반응을 30분 동안 교반하였다. 아세테이트 탈보호된 생성물로의 전환을 UPLC-MS로 관찰하였다. H2O(1 mL)를 반응 혼합물에 첨가하였다. 반응을 60분 동안 교반하였다. 완전한 전환을 UPLC-MS로 관찰하였다. 반응을 AcOH(0.2 mL)로 급랭하고, 진공에서 농축하고 H2O 0.05% TFA 중의 5-40-95% MeCN의 구배를 사용하여 용리된 21.2 x 250 mm Max-RP 컬럼을 사용하여 분취용 HPLC로 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 진공에서 농축하여 황색 고체로서 화합물 134를 수득하였다(33.3 mg, 0.0386 mmol, 62%). LC-MS (방법 D): t R = 1.09분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C41H44N5O16 862.28, 실측치 862.16.
실시예 87
Figure pct00372
무수 DMF(0.5 mL) 및 DIPEA(0.020 mL, 0.116 mmol) 중에 용해된 화합물 134(33.3 mg, 0.0386 mmol)에 TCI America(제품 번호 S0427)로부터 구입한 3-(말레이미도)프로피온산 N-히드록시숙신이미드 에스터(28, 15.4 mg, 0.0580 mmol)를 첨가하였다. 반응을 30분 동안 교반하였다. UPLC-MS로 5분 후에 완전한 전환을 관찰하였다. 반응을 AcOH로 급랭하고(0.020 mL) 21.2 x 250 mm Max-RP 상에서 H2O 0.05% TFA 중의 5-40-95% MeCN로 용리하는 분취용 HPLC로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 동결건조하여 황색 분말로서 화합물 135를 수득하였다(21.85 mg, 0.02157 mmol, 55.8%). LC-MS (방법 D): t R = 1.27분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C48H49N6O19 1013.30, 실측치 1013.38.
실시예 88
Figure pct00373
실시예 10의 화합물 18q(100.0 mg, 0.2094 mmol)를 무수 DCM(4 mL) 중에 용해하였다. 톨루엔(2 mL, 3.51 mmol) 중의 포스겐 20% w/w을 반응에 첨가하였다. 반응을 2시간 동안 교반하고 이 시점에 활성화된 이소시아네이트 중간체로의 완전한 전환이 반응 98 μL MeOH의 2 μL 분취량을 급랭하여 관찰되었으며 UPLC-MS로 형성된 MeOH 부가물을 관찰하였다. 반응을 질소 스트림 하에 농축하고 이어서 높은 진공 하에 추가로 건조하였다. 화합물 43(239.6 mg, 0.3141 mmol)을 무수 DMF(1 mL) 중에 용해하고 활성화된 이소시아네이트 고체에 직접 첨가하였다. DIPEA(0.11 mL, 0.63 mmol)를 첨가하고 반응을 교반하여 모든 성분이 완전히 용해되게 하였다. 반응을 30분 동안 교반하였으며 이 시점에 완전한 전환이 관찰되었다. 반응을 MeOH로 급랭하고, 진공에서 농축하고, 25G KP-Sil 컬럼 상에서 DCM 중의 0% 내지 6% MeOH로 용리하는 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획 및 약물 관련 불순물을 농축하여 황색 고체로서 화합물 113을 수득하였다(186.6 mg, 0.1474 mmol, 70%). 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. LC-MS (방법 D): t R = 2.14분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C66H68N5O21 1266.44, 실측치 1266.57.
실시예 89
Figure pct00374
화합물 136(186.6 mg, 0.1474 mmol)을 DMF(2 mL) 중의 20% 디에틸아민에 용해하였다. 반응을 50분 동안 교반하고 이 시점에 Fmoc 보호기로의 거의 완전한 탈보호가 관찰되었다. 반응을 진공에서 농축하고 MeOH(2 mL) 중에 재용해하였다. NaOMe(0.5 M in MeOH, 1.77 mL, 0.884 mmol)를 첨가하고 반응을 실온에서 20분 동안 교반하였다. 20분 후에 완전한 전환을 UPLC-MS로 관찰하였다. 반응을 AcOH로 중화하고, 진공에서 농축하고 21.2 x 250 mm Max-RP 컬럼 상에서 H2O 0.05% TFA 중의 5-40-95% MeCN으로 용리하는 분취용 HPLC로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 진공에서 농축하여 황색 고체로서 화합물 137을 수득하였다(22.5 mg, 0.0257 mmol, 17%). LC-MS (방법 D): t R = 1.13분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C43H50N5O15 876.33, 실측치 876.22.
실시예 90
Figure pct00375
화합물 137(22.5 mg, 0.0257 mmol)을 무수 DMF(0.5 mL)에 용해하였다. DIPEA(0.027 mL, 0.15 mmol)를 반응에 첨가한 후 3-(말레이미도)프로피온산 N-히드록시숙신이미드 에스터(28, 20.5 mg, 0.0771 mmol, TCI America 제품번호 S0427로부터 구입)를 첨가하였다. 반응을 5분 동안 교반하였다. 완전한 전환을 UPLC-MS로 관찰하였다. 반응을 AcOH로 급랭하고(0.030 mL) 21.2 x 250 mm MaxRP 컬럼 상에서 H2O 0.05% TFA 중의 5-40-95% MeCN으로 용리하는 분취용 HPLC로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 동결건조하여 황색 분말로서 화합물 138a를 수득하였다(11.36 mg, 0.01106 mmol, 43.1%). LC-MS (방법 D): t R = 1.33분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C50H55N6O18 1027.36, 실측치 1027.15.
실시예 91
실시예 88 내지 실시예 90의 절차에 따라 일반 화학식 138의 약물 링커 화합물을 제조하였다:
Figure pct00376
상기 식에서 R은 만노스 잔기 모이어티가 글루쿠론산으로 치환된 것을 제외하고, R이 화합물 18r로부터 출발한 사이클로프로필(화합물 138b)인 합성된 약물 링커 화합물을 포함하여, 실시예 10의 화합물 18a 내지 화합물 18p의 R기 중 임의의 하나이다.
실시예 92
Figure pct00377
실시예 21 및 실시예 22에 기술된 바와 같이 제조한 화합물 30(623 mg, 0.694 mmol)을 무수 DCM(4 ml)에 용해하였다. 파라포름알데히드(208 mg, 6.94 mmol)를 반응에 첨가하고 TMSBr(0.12 mL, 0.925 mmol)을 첨가하였다. 반응을 실온에서 30분 동안 교반하였으며 이 시점에 활성화된 클로로메틸 중간체로의 완전한 전환이 UPLC-MS로 관찰되었다. 반응을 시린지 필터를 통해 여과하고, DCM 2 mL으로 헹구고, 톨루엔(2 ml)을 공비혼합에 첨가하여 최종 혼합물을 제조하였다. 용리물을 진공에서 농축하여 무색 고체를 수득하였다. 실시예 10의 화합물 18m(100.0 mg, 0.2313 mmol)을 톨루엔과 함께 공비혼합하였다. 클로로메틸 중간체를 무수 CHCl3(6 mL)에 용해하고 화합물 18m을 직접 첨가한 후 1,2,2,6,6-펜타메틸피페리딘(PMP, 0.17 mL, 0.93 mmol)을 첨가하였다. 반응을 실온에서 15시간 동안 교반하고, MeOH로 급랭하고, 진공에서 농축하였다. 화합물 139를 함유하는 조 반응 혼합물을 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다.
조 화합물 139(0.2313 mmol)을 1:1 MeOH:THF(4 mL)에 용해하였다. LiOH(55.4 mg, 2.31 mmol)를 첨가하고 반응을 30분 동안 교반하였다. H2O(2 mL)를 첨가하고 반응을 30분 동안 교반하였다. 반응을 AcOH로 급랭하고(0.1 mL) 진공에서 농축하고 H2O 0.1% 포름산 중의 5-30-95% MeCN의 구배로 용리하는 Biotage Ultra C18 60G 컬럼을 사용하여 역상 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획 및 불순물을 농축하고 H2O 0.1% 포름산 중의 5-30-95% MeCN의 구배로 21.2 x 250 mm Max-RP 컬럼을 사용하여 분취용 HPLC로 재정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 진공에서 농축하여 황색 고체로서 화합물 140을 수득하였다(40.9 mg, 0.0417 mmol, 18%). LC-MS (방법 D): t R = 1.23분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C45H50N5O18S 980.29, 실측치 980.20.
실시예 93
Figure pct00378
화합물 140(40.9 mg, 0.0417 mmol)을 무수 DMF(1 mL)에 용해하였다. DIPEA(43 μL, 0.25 mmol)를 첨가하고 TCI America 제품 번호 S0427)로부터 구매한 3-(말레이미도)프로피온산 N-히드록시숙신이미드 에스터(28, 33.3 mg, 0.125 mmol)를 첨가하였다. 반응을 30분 동안 교반하였다. 완전한 전환을 UPLC-MS로 관찰하였다. 반응을 AcOH로 급랭하고(5 μL) 21.2 x 250 mm MaxRP 컬럼 상의 H2O 0.1% 포름산 중의 5-40-95% MeCN으로 용리하는 분취용 HPLC로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 동결건조하여 황색 분말로서 화합물 141을 수득하였다(8.94 mg, 7.90 μmol, 19%). LC-MS (방법 D): t R = 1.47분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C52H55N6O21S 1131.31, 실측치 1131.43.
실시예 94
Figure pct00379
실시예 54에서 제조한 화합물 80(200 mg, 0.262 mmol)을 DCM(4 mL) 중에 용해하였다. 파라포름알데히드(250 mg)를 첨가하고 TMSCl(2 mL)를 첨가하였다. 반응을 20분 동안 교반하고 이 시점에 활성화된 클로로메틸 중간체로의 완전한 전환을 98 μL의 MeOH 내로 2 μL 분취량을 급랭하여 관찰되었으며 UPLC-MS로 상응하는 MeOH 부가물을 관찰하였다. 반응을 시린지 필터를 통해 여과하고, DCM(2 mL)으로 헹구고, 톨루엔(2 mL)을 첨가하였다. 용매를 진공에서 증발시키고 최종 생성물을 사용 전까지 높은 진공 하에 두었다. Fmoc-트리스(히드록시메틸)아미노메탄(THAM)을 국제공개 WO 2006/006196호에 기술된 바와 같이 제조하였다. Fmoc-THAM(270 mg, 0.786 mmol)를 DCM(2 mL) 중에 용해하고 활성화된 중간체에 직접 첨가하였다. DIPEA(0.136 mL, 0.786 mmol)를 첨가하고 반응을 1시간 동안 교반하였다. 완전한 전환을 UPLC-MS로 관찰하였다. 반응을 MeOH로 급랭하고, 진공에서 농축하고, Hex 구배 중의 20% 내지 100% EtOAc로 50G KP-Sil 컬럼을 사용하여 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 진공에서 농축하여 무색 고체로서 화합물 142를 수득하였다(242.3 mg, 0.2264 mmol, 86%). LC-MS (방법 D): t R = 2.04분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C50H60N3O21S 1070.34, 실측치 1070.42.
실시예 95
Figure pct00380
화합물 142(242.3 mg, 0.2264 mmol)를 MeOH:THF 1:1(4 mL) 중에 용해하고 빙/수 욕으로 냉각하였다. LiOH(54 mg, 2.6 mmol)를 반응에 첨가하고 30분 동안 교반하였다. H2O(2 mL)를 반응에 첨가하고 실온으로 가온하고 30분 동안 교반하였다. 탈보호된 생성물로의 완전한 전환을 관찰하였다. 반응을 AcOH로 중화하고, 진공에서 농축하고, H2O 0.1% 포름산 중의 5-20-95% MeCN의 구배로 용리하는 Biotage C18 Ultra 30G 컬럼을 사용하여 역상 플래시 크로마토그래피로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 진공에서 농축하여 무색 고체로서 화합물 143을 수득하였다(88.3 mg, 0.125 mmol, 55%). LC-MS (방법 D): t R = 0.60분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C28H42N3O16S 708.23, 실측치 707.84.
실시예 96
Figure pct00381
화합물 143(88.3 mg, 0.125 mmol)을 무수 DMF(0.5 mL) 중에 용해하였다. 화합물 20b(30.0 mg, 0.0618 mmol)를 반응에 첨가한 후 DIPEA(0.032 mL, 0.024 mmol)를 첨가하였다. 반응을 30분 동안 교반한 후, 이 시점에 생성물로의 완전한 전환이 관찰되었다. 반응을 AcOH(0.050 mL)로 급랭한 다음 H2O 0.1% 포름산 중의 5-40-95% MeCN의 구배로 용리하는 21.2 x 250 mm Max-RP 컬럼을 사용하여 분취용 HPLC로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 진공에서 농축하여 황색 고체로서 화합물 144를 수득하였다(1.69 mg, 0.00104 mmol, 1.7%). LC-MS (방법 D): t R = 1.03분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C50H58N5O22S 1112.33, 실측치 1112.42.
실시예 97
Figure pct00382
트리스(히드록시메틸)아미노메탄 히드로클로라이드(2.00 g, 4.72 mmol)를 3:1 물:에탄올(8 mL)에 용해하였다. 2,2,2-트리클로로에틸 클로로포르메이트(1.32 mL, 4.72 mmol)를 반응 혼합물에 첨가하였다. 반응을 60분 동안 60℃에서 교반하였다. 반응을 실온으로 냉각하고, EtOAc(100 mL)로 희석하고, 1M HCl(3 x 100 mL)로 세척하고, 포화 NaCl(50 mL)로 세척하고, MgSO4로 건조하고 진공에서 여과 농축하여 무색 고체로서 화합물 145를 수득하였다(1.64 g, 5.52 mmol, 58%). LC-MS (방법 D): t R = 1.06분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C7H13Cl3NO5 295.99, 실측치 296.12.
실시예 98
Figure pct00383
화합물 80(300 mg, 0.334 mmol)을 DCM(2 mL) 중에 용해하였다. 파라포름알데히드(300 mg, 10.0 mmol) 및 이어서 TMSCl(1 mL)를 첨가하였다. 반응을 10분 동안 교반하였으며 이 시점에 98 μL의 MeOH로 2 μL 분취량을 희석하여 완전한 전환을 관찰하였고 UPLC-MS로 MeOH 부가물을 관찰하였다. 반응을 시린지 필터로 여과하고, DCM(1 mL)으로 세척하고, 톨루엔(2 mL)을 공비혼합물에 첨가하여 농축하여 최종 혼합물을 수득하였다. 용리물을 진공에서 농축하여 무색 고체를 수득하였다. 화합물 145를 사용 전에 톨루엔과 공비혼합하였다. 활성화된 클로로메틸 화합물을 무수 DCM(1 mL, Mol Sieves 상에서 추가 건조)에 용해하였다. DIPEA(0.23 mL, 1.3 mmol) 및 이어서 화합물 145를 첨가하였다. 반응을 30분 동안 교반하였으며 이 시점에 완전한 전환이 관찰되었다. 반응을 MeOH(0.1 mL)로 급랭하고 진공에서 농축하여 무색 고체로서 화합물 146을 수득하였으며 이를 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. LC-MS (방법 D): t R = 2.16분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C50H60Cl3N4O22S 1205.25, 실측치 1205.16.
조 화합물 146(0.334 mmol)을 1:1:1 MeOH:THF:AcOH(3 mL) 중에 용해하였다. 아연 가루(218 mg, 3.34 mmol)를 첨가하고 반응을 10분 동안 교반하였다. 탈보호 생성물로의 완전한 전환을 UPLC-MS로 관찰하였다. 반응을 여과하고 용리물을 농축하였다. 조 생성물을 30 x 250 mm Max-RP 컬럼을 사용하여 H2O 0.1% 포름산 중의 분취용 HPLC 5-30-50-95% MeCN으로 정제하였다. 부피가 반으로 감소할 때까지 원하는 생성물을 함유하는 분획을 진공에서 농축하였다. NaHCO3으로 수성을 염기성으로 만들고, CHCl3(3 x 50 mL), 및 EtOAc(3 x 50 mL)로 추출하였다. 유기물을 합하고 MgSO4로 건조하였다. 진공에서 여과 농축하여 백색 고체로서 화합물 147을 수득하였다(103.4 mg, 0.1003 mmol, 30%). LC-MS (방법 D): t R = 1.65분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C47H59N4O20S 1031.34, 실측치 1031.42.
실시예 99
Figure pct00384
화합물 147(103.4 mg, 0.1003 mmol)을 무수 DMF(0.5 mL)에 용해하였다. 1,2,2,6,6-펜타메틸피페리딘(PMP, 0.036 mL, 0.20 mmol)을 첨가하고 이어서 화합물 20b(97.3 mg, 0.201 mmol)를 첨가하였다. 반응을 60분 동안 교반하였으며 이 시점에 완전한 전환을 UPLC-MS로 관찰하였다. 반응을 AcOH로 급랭하고(0.030 mL), 이어서 5-60-95% MeCN IN H2O 0.1% 포름산의 구배로 용리하는 50G Biotage C18 울트라 컬럼을 사용하여 역상 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 농축하여 회백색 고체로서 화합물 148을 수득하였다(18.7 mg, 0.0130 mmol, 13%). LC-MS (방법 D): t R = 1.79분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C69H75N6O26S 1435.44, 실측치 1435.27.
실시예 100
Figure pct00385
화합물 148(18.7 mg, 0.0130 mmol)을 MeOH(1 mL) 중에 용해하였다. NaOMe(MeOH 중의 0.5 M, 0.026 mL, 0.013 mmol)를 첨가하고 반응을 30분 동안 교반하였다. H2O(1 mL) 및 이어서 LiOH(1.5 mg, 0.065 mmol)를 첨가하고 반응을 30분 동안 교반하였다. 탈보호된 생성물로의 완전한 전환을 UPLC-MS로 관찰하였다. 반응을 AcOH로 중화하고, 농축하고 H2O 0.1% 포름산 중의 5-25-95% MeCN의 구배로 용리하는 10 x 250 mm 컬럼을 사용하여 분취용 HPLC로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 진공에서 농축하여 황색 고체로서 화합물 149를 수득하였다(3.9 mg, 0.0036 mmol, 28%). LC-MS (방법 D): t R = 0.92분; MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C47H57N6O21S 1073.33, 실측치 1073.81.
실시예 101
Figure pct00386
화합물 149(3.9 mg, 0.0036 mmol)를 무수 DMF(0.2 mL)에 용해하였다. DIPEA(1.3 μL, 0.0073 mmol)를 첨가하고 N-숙신이미딜 3-말레이미도프로피오네이트(1.1 mg, 0.0040 mmol, TCI America 제품 번호 S0427로부터 구입)를 첨가하였다. 반응을 30분 동안 교반하였다. 완전한 전환을 UPLC-MS로 관찰하였다. 반응을 AcOH로 급랭하고(5 μL) 10 x 250 mm MaxRP 컬럼 상의 H2O 0.1% 포름산 중의 5-30-95% MeCN으로 용리하는 분취용 HPLC로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 동결건조하여 황색 분말로서 화합물 126을 수득하였다(0.23 mg, 0.19 μmol, 5%). Rt = 1.06분 CORTECS C18 일반 방법 UPLC. MS (m/z) [M + H]+ 예상치 C54H62N7O24S 1224.36, 실측치 1224.46.
생물학적 실시예
시험관 내 소분자 및 ADC 평가
여러 암 세포주에서 시험관 내 효능을 평가하였다. 모든 세포주는 IDEXX Bioresearch에서 STR 프로파일링에 의해 인증되었고 소생 후 2개월 이하 동안 배양하였다. 대수기(log-phase) 성장으로 배양한 세포를 20% FBS가 보충된 150 μl RPMI 1640를 함유하는 96-웰 플레이트에 24시간 동안 씨딩하였다. 세포 배양 배지 중의 항체-약물 접합체의 연속 희석물을 4x 작동 농도로 제조하고, 50 μl의 각각의 희석물을 96-웰 플레이트에 첨가하였다. 시험 물질을 첨가한 후, 세포를 37℃에서 4일 동안 시험 물질과 함께 인큐베이션 하였다. 96시간 후에, 성장 억제를 CellTiter-Glo®(Promega, Madison, WI)로 평가하고 발광을 플레이트 판독기 상에서 측정하였다. 본원에서 3회 중복으로 측정한 EC50 값은 처리하지 않은 대조군에 비해 세포 성장이 50%로 감소하는 농도로 정의한다.
캄프토테신 접합 방법
하나 이상의 사슬 간 이황화 결합이 시스테인 잔기로 전환된 완전히 또는 부분적으로 환원된 ADC를 50% 프로필렌 글리콜(PG) 1X PBS 혼합물에서 제조하였다. PG의 절반을 환원된 mAb에 첨가하고, 절반의 PG를 말레이미드 모이어티로 구성된 Z' 성분을 포함하는 캄프토테신 약물 링커 화합물의 1 mM DMSO 저장 용액에 첨가하였다. PG/약물-링커 혼합물을 25% 부분 중의 환원된 mAb에 첨가하였다. 캄프토테신 약물 링커 화합물의 첨가를 완료한 후, 과량의 화합물을 활성탄(1 mg의 숯 내지 1 mg의 mAb)으로 처리하여 제거하였다. 이어서 숯을 여과하여 제거하고, 생성된 ADC를 NAP5 또는 PD10 컬럼을 사용하여 1 X PBS pH 7.4 중의 5% 트레할로스 내로 완충액 교환하였다.
Z'가 알킨 모이어티로 구성된 캄프토테신 약물 링커 화합물의 경우, 환원된 항체를 N6-디아조-N2-(3-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)프로판오일)-L-리신의 말레이미드-함유 화합물과 동일한 방식으로 처리하여 아지도-표지된 항체를 수득하고 여기에 100 mol% 과량의 알킨-함유 캄프토테신 약물-링커 화합물을 첨가하였다. 생성된 혼합물에 100 mM CuSO4 및 100 mM 트리스-히드록시프로필트리아졸일메틸아민(THPTA)의 1:5 혼합물로부터 제조된 용액을 첨가하여 CuSO4의 최종 농도가 0.5 mM이 되게 한 후, 100 mM 양의 아미노구아니딘 용액을 첨가하여 용액 중의 아미노구아니딘의 최종 농도가 5 mM이 되게 하고 소듐 아스코르베이트의 100 mM 양의 용액을 첨가하여 소듐 아스코르베이트의 최종 농도가 또한 5 mM이 되게 하였다. 추가 캄프토테신 약물 링커를 원래의 농도를 유지하기 위해 충분한 양의 1:5 CuSO4:THPTA 및 소듐 아스코르베이트 용액과 함께 접합을 완료하기 위해 필요에 따라 첨가하였다. 아지드와 알킨 작용기 사이의 반응은 트리아졸 고리 시스템으로 구성된 약물 링커 모이어티를 가진 캄프토테신 ADC를 생성한다.
생체 내 모델 방법
모든 실험은 실험 동물 관리 평가 및 인증 협회가 완전히 승인한 시설에서 동물 관리 및 사용위원회와 일치하도록 수행하였다. 효능 실험은 786-0, L540cy, BXPC3, Colo205 및 Caki-1 모델에서 수행하였다. 세포 현탁액으로서 종양 세포를 면역-손상된 SCID 또는 누드 마우스에 피하 이식하였다. 종양 생착 시, 평균 종양 부피가 약 100 mm3에 도달했을 때 마우스를 연구군(군 당 5마리 마우스)으로 무작위화 하였다. ADC 또는 대조군을 복강 내 주사를 통해 1회 투여하였다. 시간 함수로서 종양 부피를 수학식(L x W2)/2를 사용하여 결정하였다. 종양 부피가 750 mm3에 도달하면 동물을 안락사시켰다. 내구성 회귀를 보이는 마우스는 이식 후 10주 내지 12주 후에 종료하였다.
ADC 혈장 안정성 측정
모든 ADC 저장액을 2.5 mg/mL로 정규화하였다. 2.5 mL 단일 사용 분취량의 시트레이트 마우스(Balb C)를 사용 전에 -80℃에 저장하였다. 마우스 혈장 중의 ADC 중의 저장 용액을 다음과 같이 제조하였다. 최종 PBS 농도가 13.85인 200 μL 혈장(시간 당, 0.25 mg/mL)에서 ADC(50 μg). 혈장 샘플을 6시간, 1일, 3일, 및 7일의 시점 동안 37℃에서 인큐베이션 하고 이중으로 샘플링하였다. 각 시점 후에, 샘플을 이들이 분석을 위해 처리될 때까지 -80℃에 저장하였다. 1 X PBS 중의 IgSelect의 50% 슬러리를 제조하였다. 각각의 시점의 샘플에 대해, 50 μL의 IgSelect 슬러리를 3 μM 필터 플레이트에 첨가하고, 진공을 적용하여 상청액을 제거하였다. 수지를 세척하고(2 X 1mL 1 X PBS), 각 세척 후 진공을 적용하였다. 샘플(180 μL)을 도포하고, 필터 플레이트를 진탕하였다(4℃에서 1시간 동안 1200 rpm). 이어서 진공을 가하여 혈장을 제거하였다. 1 mL PBS + 50 mM NaCl, 1 mL PBS, 및 1 mL 물로 수지를 세척하고 각 세척 후에 진공을 가하였다. 이어서 샘플 플레이트를 Waters 350 μL 수집 플레이트 상에서 2분 동안 500xg에서 원심분리하였다. 50 μL Gly pH 3(2x50uL)로 처리하여 수지로부터 ADC를 용리하고, 4℃에서 2분 동안 500 rpm에서 혼합하고, 3분 동안 500xg에서350 μL 96웰 플레이트에 원심분리하였으며, 각각의 웰은 10 μL의 1M 트리스 pH7.4 완충액을 함유하였다. UV-Vis 플레이트 판독기를 사용하여 ADC 농도를 결정하였다. 샘플을 샘플 당 1 μL PNGase를 사용하여 탈당하고 37℃에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 각각의 ADC는 12 μL 100 mM DTT를 첨가하고 37℃에서 15분 동안 배양하여 환원시켰다. 마지막으로, 샘플(10 μL 또는 50 μL 주입)을 15분 PLRP-MS 방법을 사용하여 분석하여 경쇄 및 중쇄 조성을 평가하였다.
ADC PK 분석 실험 방법
본 절차는 설치류 K2EDTA 혈장에서 총 인간 IgG의 정량화 방법을 설명한다.
이 방법은 포획제로서 비오틴-접합된 쥐 항-인간 경쇄 카파 mAb(SDIX) 및 검출 시약으로서 Alexafluor-647에 접합된 동일한 항체를 사용하여 인간 항체 및/또는 항체-약물 접합체 시험 물질을 설치류 K2EDTA 혈장에서 총 항체(Tab)로서 정량화한다. 이 분석은 리간드-결합 분석이 수행되는 나노리터 규모 스트렙타비딘-코팅된 비드 컬럼이 있는 미세유체 구조를 함유하는 디스크를 사용하는 GyroLab xPloreTM 플랫폼을 사용하여 수행하였다. 간단하게, 연구 샘플을 필요에 따라 나이브 풀링된 설치류 K2EDTA 혈장으로 희석한 다음, 96-웰 샘플 플레이트로 로딩하기 전에 교정기, 대조군, 및 혈장 블랭크와 함께, 1:10의 최소 요구 희석(MRD: Minimal Required Dilution)에서 Rexxip-HX 완충액으로 희석하였다. Tween-20(PBS-T)과 함께 인산 완충 식염수 pH 7.4 중의 1 ug/mL의 비오틴-항-인간 카파 포획 시약, Rexxip F 중의 25 nM의 AF647-항-인간 카파 검출 시약, 및 PBS-T 세척 완충액을 96-웰 시약 플레이트에 첨가하고, 둘 모두의 플레이트를 밀봉하고 기기에 넣었다. GyroLab Control 소프트웨어에 실행 파일을 설정하고 샘플 지정 및 희석 계수를 입력할 수 있도록 샘플 템플릿을 Excel로 내보냈다. 이러한 템플릿은 실행을 시작하기 전에 GyroLab Control 내로 다시 가져왔다. 분석은 순차적이었다: 비오티닐화된 포획제를 BioAffy1000 CD에 먼저 적용하고, 디스크를 PBS-T로 헹구고, 이어서 희석된 혈장 블랭크, 표준, 대조군, 및 샘플을 추가하였다. 후속 PBS-T 헹굼 후, AF647-접합된 검출 시약을 적용하였다. 최종 PBS-T 헹굼 후, 디스크의 각각의 컬럼을 레이저-유도 형광 검출로 판독하였다(여기 파장: 635 nm). 1% PMT에서 검출된 반응을 샘플에 존재하는 ng/mL 총 항체로의 형광 반응을 변환하기 위해 GyroLab Evaluator 소프트웨어를 사용하여 5-파라미터 로지스틱 회귀분석(5-parameter logistic regression, 5-PL)을 수행하였다.
설치류 K2EDTA 혈장 중의 총 인간 IgG의 정량을 위한 분석 범위는 비접합 항체 시험 물질의 경우 22.9 ng/mL(LLOQ) 내지 50,000 ng/mL(ULOQ)였고 ADC의 경우 22.9 ng/mL(LLOQ) 내지 100,000 ng/mL(ULOQ)였다. 품질 관리 수준은 80.0 ng/mL(LQC), 800 ng/mL(MQC), 및 8,000 ng/mL(HQC2) 및 40,000 ng/mL(HQC1)로 설정하였다.
상기 시험 방법은 비-GLP 비-임상 연구를 지원하기 위해 설치류 K2EDTA 혈장 중의 총 인간 IgG의 정량적 측정에 적용된다. 이러한 방법은 cGMP- 또는 GLP-준수 방식으로 사용하기 위해 Seattle Genetics에서 자격이 부여되거나 검증되지 않았다.
결과:
다음 표에서 ADC 및 CPT 유리 약물에 대한 IC50 값은 각각 ng/mL 및 mmol/mL 농도로 제공되며, 괄호 값은 비처리된 세포에 비해 시험된 최고 농도(달리 지시되지 않는 한 ADC의 경우 1000 ng/mL 및 CPT 유리 화합물의 경우 1 μM) 에서 남아있는 세포 퍼센트를 나타낸다. 세포 생존력은 ADC에 96시간 노출된 후 CellTiter-Glo 염색에 의해 결정하였다. ND = 결정되지 않음. Ag1은 암 세포에서 편재하고 쉽게 내재화가능한 항원을 표적으로 하는 항체를 지칭하고, h00은 비결합 대조군 항체이고, Ag2는 cAC10을 지칭하고, 이는 CD30 항원을 표적화하며, Ag3은 T-림프구 상의 푸코실화된 말초 혈액 항원 실측치를 표적으로 하는 항체를 지칭하고; Ag4는 활성화된 T 및 B 림프구 상의 표면 항원을 표적으로 하는 항체를 지칭하고; Ag5는 말초 혈액 림프구에 공통적인 표면 항원을 표적으로 하는 항체를 지칭한다.
캄프토테신 접합체가 시험된 하나 이상의 세포주에서 시험관 내 활성인 것으로 확인된 경우, 생체 내 데이터는 다음의 표에서 시험관 내 데이터와 상관관계가 있는 것으로 확인되었다. 예기치 않게, 시험관 내에서 활성이 좋지 않은 일부 화합물은 생체 내에서 우수한 활성을 나타냈다.
h00 접합체는 일반적으로 캄프토테신 접합체가 면역특이성을 갖는지 확인하는 데 사용된다. 그러나, 시험된 접합체 중 일부는 일단 접합체가 표적 항원에 결합하면 내재화를 요구하지 않고 표적 세포 근처에서 유리 약물을 방출할 수 있도록 약간의 불안정성을 갖도록 설계하였다. 따라서, 캄프토테신 약물 단위의 일부 손실은 이러한 접합체에 대한 항원 결합이 없을 때 예상된다.
표 1. 글루쿠로나이드-기반 캄프토테신 DAR 8 ADC의 시험관 내 세포독성. 회색 셀의 값은 IC50(ng/mL) 농도에 해당한다. 투명한 셀의 값은 비처리 세포에 비해 시험된 최고 농도(1000 ng/mL)에서 남아있는 세포 퍼센트를 나타낸다. 세포 생존력을 ADC에 96시간 노출한 후 CellTiter-Glo 염색으로 결정하였다.
Figure pct00387
Figure pct00388
표 2. 비-글루쿠로나이드-기반 캄프토테신 DAR 8 ADC의 시험관 내 세포독성. 회색 셀의 값은 IC50(ng/mL) 농도에 해당한다. 투명한 셀의 값은 비처리 세포에 비해 시험된 최고 농도(1000 ng/mL)에서 남아있는 세포 퍼센트를 나타낸다. 세포 생존력을 ADC에 96시간 노출한 후 CellTiter-Glo 염색으로 결정하였다.
Figure pct00389
표 3. 글루쿠로나이드 캄프토테신 DAR 8 Ag2 및 Ag3 ADC의 시험관 내 세포독성 역가. 농도는 IC50(ng/mL) 값에 해당한다. 괄호 안의 값은 비처리 대조군에 비해 시험된 가장 높은 농도(10000 ng/mL)에서 남아있는 세포 퍼센트를 나타낸다. 세포 생존력을 ADC에 96시간 노출한 후 CellTiter-Glo 염색으로 결정하였다.
Figure pct00390
표 4a 내지 표 4c. 글루쿠로나이드 캄프토테신 DAR 8 ADC의 시험관 내 세포독성 역가. A. 항-Ag2 ADC, B. 항-Ag4 ADC 및 C. 항-Ag5 ADC. 잿빛 셀의 농도는 IC50 값(ng/mL) 값에 해당한다. 투명한 셀의 값은 비처리 대조군에 비해 시험된 최고 농도(10000 ng/mL)에서 남아있는 세포 퍼센트를 나타낸다. 세포 생존력을 ADC에 96시간 노출한 후 CellTiter-Glo 염색으로 결정하였다.
Figure pct00391
표 5. 다양한 Ag2 발현으로 Ag2+ 종양 주에 대해 선택된 항-Ag2 글루쿠로나이드 기반 DAR8 캄프토테신 ADC의 시험관 내 세포독성 역가. 회색 셀의 값은 IC50(ng/mL) 농도에 해당한다. 투명한 셀의 값은 비처리 세포에 비해 시험된 최고 농도(1000 ng/mL)에서 남아있는 세포 퍼센트를 나타낸다. 세포 생존력을 ADC에 96시간 노출한 후 CellTiter-Glo 염색으로 결정하였다. 각각의 괄호 안의 값은 암 세포에 대해 표적화된 항원의 평균 카피 수이다.
Figure pct00392
표 6. Ag2(+) 모 DEL 및 Ag2(+), MDR(+), DEL-BVR 세포주에 대한 글루쿠로나이드 캄프토테신 ADC Ag2-(67)의 세포독성 활성. 모 DEL 림프종 세포주를 브렌툭시맙 베도틴의 존재 하에 배양하여 MDR 표현형의 과발현을 유도하여, DEL 브렌툭시맙 베도틴 내성 주(DEL-BVR)를 생성하였다. IC50 값(회색 셀, ng/mL)을 모(DEL) 및 MDR+ (DEL-BVR) 주에 대해 결정하였다. 브렌툭시맙 베도틴(Ag2-vcMMAE (8)) ADC를 대조군으로서 포함시켰다. 투명 셀의 값은 비처리 세포에 비해 시험된 최고 투여량(1000 ng/mL)에서 남아있는 세포 퍼센트를 나타낸다. 세포 생존력을 ADC에 96시간 노출한 후 CellTiter-Glo 염색으로 결정하였다.
Figure pct00393
표 7. MM.1R(Ag5-양성)(CellTitre-Glo로 생존력 평가), MM.1R과 MM.1R Ag5 KO luc+ 세포의 3:1 공동배양, 및 MM.1R Ag5 KO luc+ 세포(Bright-Glo로 생존력 평가) 생존력에 대한 Ag5(항-Ag5) 글루쿠로나이드 캄프토테신 ADC에 대한 IC50 값(ng/mL)의 표. 회색 셀의 농도는 IC50 값(ng/mL) 값에 해당한다. 투명한 셀의 값은 비처리 대조군에 비해 시험된 최고 농도(10000 ng/mL)에서 남아있는 세포 퍼센트를 나타낸다.
Figure pct00394
표 8. Ag5-(67) 처리한 MM.1R, 3:1 공동 배양 및 MM.1R Ag5 KO luc+, 및 MM.1R Ag5 KO luc+ 세포의 IC50 값(ng/mL). 회색 셀의 농도는 IC50 값(ng/mL) 값에 해당한다. 투명 셀의 값은 비처리 대조군에 비해 시험된 최고 농도(10000 ng/mL)에서 남아있는 세포 퍼센트를 나타낸다(도 1 참조).
Figure pct00395
표 9. 약물-로딩을 정량화하기 위해 PLRP-MS로 측정된 마우스 혈장에서 37℃로 인큐베이션된 캄프토테신 DAR8 ADC의 안정성(도 2 및 도 13 참조).
Figure pct00396

Claims (35)

  1. 캄프토테신 접합체로서,
    상기 캄프토테신 접합체는 다음의 화학식:
    L-(Q-D)p
    또는 이의 염을 갖고,
    상기 식에서, L은 표적화제, 특히 암 세포 항원에 선택적으로 결합하는 항체로부터의 리간드 단위이고;
    아래첨자 p는 1 내지 16의 범위의 정수이고;
    Q는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 갖는 링커 단위이고:
    -Z-A-, -Z-A-RL-, -Z-A-RL-Y-, -Z-A-S*-RL-, -Z-A-S*-RL-Y-,
    -Z-A-S*-W-, -Z-A-S*-W-RL-, -Z-A-B(S*)-RL-, -Z-A-B(S*)-W-,
    -Z-A-B(S*)-W-RL- 및 -Z-A-B(S*)-RL-Y-,
    상기 식에서 Z는 스트레처 단위이고;
    A는 결합 또는 커넥터 단위이고;
    B는 병렬 커넥터 단위이고;
    S*은 분획제이고;
    RL은 방출가능한 링커이고;
    W는 아미노산 단위이고;
    Y는 스페이서 단위이고;
    D는 다음과 같이 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, CPT6 및 CPT7로 이루어진 군으로부터 선택되는 약물 단위이고:
    Figure pct00397

    Figure pct00398

    Figure pct00399

    Figure pct00400
    ;
    상기 식에서,
    RB는 H, C1-C8 알킬, C1-C8 할로알킬, C3-C8 사이클로알킬, (C3-C8 사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, 페닐 및 페닐-C1-C4 알킬-로 이루어진 군으로부터 선택되는 구성원이고;
    RC는 C1-C6 알킬 및 C3-C6 사이클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 구성원이고;
    각각의 RF 및 RF'는 -H, C1-C8 알킬, C1-C8 히드록시알킬, C1-C8 아미노알킬, (C1-C4 알킬아미노)-C1-C8 알킬-, N,N-(C1-C4 히드록시알킬)(C1-C4 알킬)-아미노-C1-C8 알킬-, N,N-디(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N-C1-C4 히드록시알킬-C1-C8 아미노알킬-, C1-C8 알킬C(O)-, C1-C8 히드록시알킬-C(O)-, C1-C8 아미노알킬C(O)-, C3-C10 사이클로알킬, (C3-C10 사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, C3-C10 헤테로사이클로알킬, (C3-C10 헤테로사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, 페닐, 페닐-C1-C4 알킬-, 디페닐-C1-C4 알킬-, 헤테로아릴 및 헤테로아릴-C1-C4 알킬-로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 구성원이거나,
    RF 및 RF'는 각각이 부착된 질소 원자와 결합하여 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2, -NHC1-C4 알킬 및 -N(C1-C4 알킬)2로부터 선택되는 0개 내지 3개의 치환체를 가진 5-원 고리, 6-원 고리 또는 7-원 고리를 형성하고;
    여기서, RB, RC, RF 및 RF'의 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 페닐 및 헤테로아릴 모이어티는 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2,- NHC1-C4 알킬 및 -N(C1-C4 알킬)2로 이루어진 군으로부터 선택된 0개 내지 3개의 치환체로 치환되고;
    여기서, D의 공유결합 지점은 Q가 -Z-A-RL-, -Z-A-RL-Y-, -Z-A-S*-RL-, -Z-A-B(S*)-RL-, -Z-A-S*-RL-Y- 또는 -Z-A-B(S*)-RL-Y-인 경우 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, 또는 CPT6 상의 히드록실 또는 아미노 치환체 중 임의의 하나의 헤테로원자에 대해서이거나, 또는
    D의 공유결합 지점은 Q가 -Z-A-, -Z-A-S*-W- 또는 -Z-A-B(S*)-W-이거나, Q가 -Z-A-S*-RL-, -Z-A-B(S*)-RL-, -Z-A-S*-W-RL-, 또는 -Z-A-B(S*)-W-RL-이고 여기서 RL이 글루쿠로나이드 단위 이외의 방출가능한 단위인 경우 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, 또는 CPT6의 락톤 고리 상의 히드록실 치환체의 산소 원자에 대해서이고;
    여기서 공유결합 지점이 CPT6 상의 아미노 치환체의 질소 원자에 대해서인 경우 RF 및 RF' 중 적어도 하나가 -H이고;
    여기서 D가 이의 아미노 치환체의 질소 원자를 통한 공유결합을 가진 CPT1인 경우 -Z-A-RL-, -Z-A-RL-Y-, -Z-A-S*-RL-, -Z-A-B(S*)-RL-, -Z-A-S*-RL-Y- 및 -Z-A-B(S*)-RL-Y-의 -Z-A-는 선택적으로 가수분해된 형태의 숙신이미드 고리를 가진, 숙신이미도-카프로일-β-알라닐 모이어티 이외의 것인, 캄프토테신 접합체.
  2. 제1항에 있어서, 상기 Q가 다음으로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 가진 링커 단위이며:
    -Z-A-RL-; -Z-A-RL-Y-; -Z-A-S*-RL-; -Z-A-B(S*)-RL-;
    -Z-A-S*-RL-Y-; 및 -Z-A-B(S*)-RL-Y-,
    상기 식에서, A는 커넥터 단위이고 RL은 글루쿠로나이드 단위인, 캄프토테신 접합체.
  3. 제2항에 있어서, D의 공유결합 지점이 CPT1 내지 CPT7 중 임의의 하나의 락톤 고리 상의 히드록실 치환체의 산소 원자를 통한 것인, 캄프토테신 접합체.
  4. 제2항에 있어서, 상기 D가 CPT1, CPT4, CPT6 또는 CPT7이고,
    여기서 CPT1의 공유결합 지점은 -Z-A-가, 선택적으로 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해된 형태의 숙신이미드 고리를 갖는, 숙신이미도-카프로일-β-알라닐 이외의 것인 경우 이의 아민 작용기의 질소 원자를 통해서이고,
    CPT4의 공유결합 지점은 이의 아민 작용기의 질소 원자를 통해서이고,
    CPT6의 공유결합 지점은 RF 및 RF' 중 적어도 하나가 -H인 경우 이의 아민 작용기의 질소 원자를 통해서이고,
    CPT7의 공유결합 지점은 이의 1차 히드록실 작용기 중 하나의 산소 원자를 통해서인 것인, 캄프토테신 접합체.
  5. 제2항, 제3항 또는 제4항에 있어서, 상기 글루쿠로나이드 단위가 다음의 화학식을 가지며:
    Figure pct00401

    상기 식에서,
    Su는 모노사카라이드의 육탄당 형태이고;
    O'은 글리코시다제에 의해 절단가능한 글리코시드 결합의 산소 원자를 나타내고;
    단일 별표(*)가 표시된 물결선은 RF 및 RF' 중 적어도 하나가 -H인 CPT1, CPT4 또는 CPT6 상의 아미노 치환체의 질소 원자에 대한, 또는 스페이서 단위(Y)에 대한 공유결합 부위를 나타내거나, CPT1 내지 CPT7 중 임의의 하나의 락톤 고리 상의 히드록실 치환체의 산소 원자에 대한 공유결합 부위를 나타내고;
    이중 별표(**)로 표시된 물결선은 Q의 나머지 부분에 대한 공유결합 부위를 나타내고,
    특히 글루쿠로나이드 단위는 다음의 화학식을 갖는:
    Figure pct00402
    캄프토테신 접합체.
  6. 제5항에 있어서,
    Q는 -Z-A-RL-Y-, -Z-A-S*-RL-Y- 또는 -Z-A-B(S*)-RL-Y-의 화학식을 갖는 링커 단위이고;
    스페이서 단위(Y)는 다음의 화학식을 가지며:
    Figure pct00403
    또는
    Figure pct00404

    상기 식에서, EWG는 전자-받개기이고;
    O*은 D의 히드록시 치환체의 산소 원자를 나타내고;
    질소 원자에 인접한 물결선은 글루쿠로나이드 단위의 카보닐 탄소 원자에 대한 공유결합 부위를 나타내고;
    O*에 인접한 물결선은 D의 나머지 부분에 대한 공유결합 부위를 나타내거나, 또는
    D가 RF 및 RF' 각각이 -H인 CPT1, CPT4 또는 CPT6인 경우 스페이서 단위(Y)가 다음의 화학식을 가지며:
    Figure pct00405
    Figure pct00406
    또는
    Figure pct00407
    ;
    상기 식에서,
    EWG는 전자-받개기이고;
    질소 원자에 인접한 물결선은 글루쿠로나이드 단위의 카보닐 탄소 원자에 대한 공유결합 부위를 나타내고;
    카보닐 탄소 원자에 인접한 물결선은 CPT1, CPT4 또는 CPT6의 아미노 치환체의 질소 원자에 대한 공유결합 부위를 나타내는, 캄프토테신 접합체.
  7. 제5항에 있어서, -Z-A-는 각각 선택적으로 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해된 형태의 숙신이미드 고리를 갖는, 숙신이미도-알카노일 모이어티 또는 숙신이미도 및 트리아졸일 모이어티로 구성되고, 여기서, 트리아졸 모이어티는 약물 링커 화합물의 알키닐 모이어티에 대해 화학적으로 변형된 표적화제로부터의 아지도 치환체의 1,3-이극성 환첨가로부터 선택적으로 형성되고, 여기서 표적화제는 접합체의 리간드 단위에 대한 전구체이거나, 또는
    -Z-A-는 캄프토테신-링커 화합물의 mDPR 모이어티로부터 유도가능한 숙신산 아미드 모이어티로 구성되거나, 선택적으로 가수분해된 형태의 숙신이미드 고리를 갖는 숙신이미도-프로피오닐 모이어티로 구성되고,
    여기서 D는 이의 아미노 치환체의 질소 원자를 통한 공유결합을 갖고 -Z-A-는, 선택적으로 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해된 형태의 숙신이미드 고리를 가진, 숙신이미도 및 트리아졸일 모이어티로 구성되거나, D가 CPT1인 경우 mDPR 모이어티로부터 유도가능한 숙신산 아미드 모이어티로 구성되거나, 또는
    여기서 D는 이의 락톤 고리 상의 히드록실 치환체의 산소 원자에 대한 공유결합을 갖고, -Z-A-는, D가 CPT1인 경우 선택적으로 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해된 형태의 숙신이미드 고리를 가진 숙신이미도-알카노일-β-알라닐 모이어티로 구성되는, 캄프토테신 접합체.
  8. 제7항에 있어서, Q가 다음의 화학식:
    Figure pct00408

    또는 이의 염을 갖고, 여기서 -Z-A-는 바람직하게는 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해된 형태의 숙신이미드 고리를 가진 숙신이미도-알카노일-β-알라닐 모이어티이고, 여기서 숙신이미드 고리는 캄프토테신-링커 화합물의 mDPR 모이어티로부터 유도가능하고;
    단일 별표(*)로 표시된 물결선은 CPT1 내지 CPT7 중 임의의 하나의 락톤 고리를 치환하는 히드록실 작용기의 산소 원자로의, RF 및 RF'가 -H인 CPT1, CPT4 또는 CPT6의 아민 작용기의 질소 원자로의, 또는 스페이서 단위로의 공유결합 부위를 나타내고;
    삼중 별표(***)로 표시된 물결선은 L의 황 원자로의 공유결합 지점을 나타내거나, 또는
    Q가 다음의 화학식을 가지며:
    Figure pct00409
    ,
    선택적으로 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해된 형태의 숙신이미드 고리를 가지고, Q가 -Z-A-S*-RL일 때, 상기 식에서
    아래첨자 n은 1 내지 50의 범위의 정수이고, 바람직하게는 4이고;
    단일 별표(*)로 표시된 물결선은 CPT1 내지 CPT7 중 임의의 하나의 히드록시 또는 아민 작용기의 헤테로원자로의, 또는 스페이서 단위(Y)로의 공유결합 부위를 나타내고;
    삼중 별표(***)로 표시된 물결선은 L의 황 원자로의 공유결합 지점을 나타내는, 캄프토테신 접합체.
  9. 제6항에 있어서, -Q-D가 다음의 구조:
    Figure pct00410
    또는
    Figure pct00411
    ,
    또는 이의 염을 갖고, 상기 구조는 선택적으로 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해된 형태의 숙신이미드 고리를 가지고, 상기 식에서 물결선은 리간드 단위의 황 원자에 대한 숙신이미드 고리의 공유결합 부위를 나타내거나, 또는
    -Q-D는 다음의 구조:
    Figure pct00412

    또는 이의 염을 갖거나, 또는
    -Q-D는 다음의 구조:
    Figure pct00413
    또는
    Figure pct00414

    또는 이의 염을 갖고,
    상기 식에서, 물결선은 리간드 단위의 황 원자에 대한 숙신이미드 고리의 공유결합 부위를 나타내고 상기 숙신이미드 고리는 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해된 형태인, 캄프토테신 접합체.
  10. 제1항에 있어서,
    Q는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 갖는 링커 단위이고:
    -Z-A-; -Z-A-S*-W- 및 -Z-A-B(S*)-W-,
    상기 식에서 A는 커넥터 단위이거나, 또는
    Q는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 갖는 링커 단위이고:
    -Z-A-RL-, -Z-A-S*-RL-;
    -Z-A-B(S*)-RL-, -Z-A-S*-W-RL-, 및 -Z-A-B(S*)-W-RL-,
    상기 식에서 A는 커넥터 단위이고 RL은 글루쿠로나이드 단위 이외의 방출가능한 링커인, 캄프토테신 접합체.
  11. 제10항에 있어서,
    Q가 -Z-A-RL-, -Z-A-S*-RL- 및 -Z-A-S*-W-RL-로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 가진 링커 단위이고, 상기 식에서
    RL은 다음의 화학식을 갖고:
    Figure pct00415

    상기 식에서,
    이중 별표(**)로 표시된 물결선은 D로의 공유결합 부위를 나타내고;
    단일 별표(*)로 표시된 물결선은 A, S* 또는 W로의 공유결합 지점을 나타내는, 캄프토테신 접합체.
  12. 제10항 또는 제11항에 있어서,
    -Q-D가 -Z-A-S*-W-RL-D의 화학식을 갖고, 상기 식에서
    D는 각각의 RF 및 RF'가 -H인 CPT1, CPT4 또는 CPT6이고, 각각은 아민 작용기의 질소 원자에 대한 공유결합을 갖고;
    W는 N-메틸-글리신(사코신), N-메틸-알라닌, N-메틸-β-알라닌, 발린, N-메틸-발린으로 이루어진 군으로부터 선택되는 아미노산 단위이거나, 또는
    D는 락톤 고리 상의 히드록실 치환체의 산소 원자에 대한 공유결합을 갖는 CPT1 내지 CPT7 중 임의의 하나이고;
    W는 글루탐산 또는 리신으로 이루어진 군으로부터 선택되는 아미노산 단위인, 캄프토테신 접합체.
  13. 제12항에 있어서, -Z-A-는 각각 선택적으로 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해된 형태의 숙신이미드 고리를 가진 숙신이미도-알카노일 모이어티 또는 숙신이미도 및 트리아졸 모이어티, 또는 캄프토테신-링커 화합물의 mDPR로부터 유도가능한 숙신산 아미드 모이어티로 구성되거나, 또는
    -Z-A-가 다음의 화학식을 갖고:
    Figure pct00416
    또는
    Figure pct00417
    ,
    선택적으로 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해된 형태의 숙신이미드 고리를 가지고, 상기 식에서, 이중 별표(**)가 표시된 물결선은 S*로의 공유결합 부위를 나타내고; 삼중 별표(***)가 표시된 물결선은 L의 황 원자로의 공유결합 지점을 나타내는, 캄프토테신 접합체.
  14. 제11항에 있어서,
    Q가 -Z-A-S*-RL- 및 -Z-A-S*-W-RL-로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 가진 링커 단위이고, 여기서
    S*가 다음의 화학식을 갖고:
    Figure pct00418

    상기 식에서 아래첨자 n은 2 내지 36의 범위의 정수이고,
    질소 원자에 인접한 물결선은 A의 카보닐 탄소 원자에 대한 공유결합 부위를 나타내고, 카보닐 탄소 원자에 인접한 물결선은 -Z-A-S*-RL-의 RL 또는 -Z-A-S*-W-RL-의 W의 아민 작용기의 질소 원자에 대한 공유결합 부위를 나타내고,
    특히 Q의 각각의 화학식의 -Z A-는 다음의 화학식을 갖고:
    Figure pct00419
    ,
    상기 식에서 이중 별표(**)로 표시된 물결선은 S*의 아민 작용기의 질소 원자에 대한 공유결합 부위를 나타내고; 삼중 별표(***)로 표시된 물결선은 L의 황 원자로의 공유결합 지점을 나타내는, 캄프토테신 접합체.
  15. 제11항에 있어서, Q가 화학식 -Z-A-S*-W- 또는 -Z-A-S-W-RL-의 링커 단위이고, 여기서 양 화학식의 -Z-A-S*-W-가 다음의 화학식을 갖고:
    Figure pct00420

    선택적으로, 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해된 형태의 숙신이미드 고리를 갖고, 상기 식에서 아래첨자 n은 2 내지 10의 범위의 정수이고, 바람직하게는 2 내지 4의 정수이고; 이중 별표(**)로 표시된 물결선은 D 또는 RL에 대한 공유결합 부위를 나타내고, 삼중 별표(***)로 표시된 물결선은 L의 황 원자로의 공유결합 지점을 나타내는, 캄프토테신 접합체.
  16. 제10항에 있어서, -Q-D가 다음의 구조:
    Figure pct00421
    또는
    Figure pct00422
    ,
    또는 이의 염을 갖고, 상기 식에서 물결선은, 선택적으로 숙신산 아미드 모이어티로서 가수분해된 형태인, 숙신이미드 고리의 리간드 단위의 황 원자로의 공유결합 지점을 나타내는, 캄프토테신 접합체.
  17. 다음으로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 가진 캄프토테신-링커 화합물로서,
    (vii) Z'-A-RL-D;
    (viii) Z'-A-RL-Y-D;
    (ix) Z'-A-S*-RL-D;
    (x) Z'-A-S*-RL-Y-D;
    (xi) Z'-A-B(S*)-RL-D;
    (xii) Z'-A-B(S*)-RL-Y-D;
    (vii) Z'-A-D
    (viii) Z'-A-S*-W-D
    (ix) Z'-A-B(S*)-W-D
    (x) Z'-A-S*-W-RL-D; 및
    (xi) Z'-A-B(S*)-W-RL-D
    상기 식에서,
    Z'는 스트레처 단위 전구체이고;
    A는 결합 또는 커넥터 단위이고;
    B는 병렬 커넥터 단위이고;
    S*은 분획제이고;
    RL은 방출가능한 링커이고;
    Y는 스페이서 단위이고;
    D는 다음과 같이 CPT1, CPT2, CPT3, CPT4, CPT5, CPT6 및 CPT7로 이루어진 군으로부터 선택되는 캄프토테신 화합물이고:
    Figure pct00423

    Figure pct00424

    Figure pct00425
    ;
    RB는 -H, C1-C8 알킬, C1-C8 할로알킬, C3-C8 사이클로알킬, (C3-C8 사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, 페닐 및 페닐-C1-C4 알킬-로 이루어진 군으로부터 선택되는 모이어티이고;
    RC는 C1-C6 알킬 및 C3-C6 사이클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 모이어티이고;
    각각의 RF 및 RF'는 -H, C1-C8 알킬, C1-C8 히드록시알킬, C1-C8 아미노알킬, (C1-C4 알킬아미노)-C1-C8 알킬-, N,N-(C1-C4 히드록시알킬)(C1-C4 알킬)-아미노-C1-C8 알킬-, N,N-디(C1-C4 알킬)아미노-C1-C8 알킬-, N-C1-C4 히드록시알킬-C1-C8 아미노알킬-, C1-C8 알킬C(O)-, C1-C8 히드록시알킬-C(O)-, C1-C8 아미노알킬C(O)-, C3-C10 사이클로알킬, (C3-C10 사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, C3-C10 헤테로사이클로알킬, (C3-C10 헤테로사이클로알킬)-C1-C4 알킬-, 페닐, 페닐-C1-C4 알킬-, 디페닐-C1-C4 알킬-, 헤테로아릴 및 헤테로아릴-C1-C4 알킬-로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 구성원이거나, 또는
    RF 및 RF'는 각각이 부착된 질소 원자와 결합하여 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2, -NHC1-C4 알킬 및 -N(C1-C4 알킬)2로부터 선택되는 0개 내지 3개의 치환체를 가진 5-원 고리, 6-원 고리 또는 7-원 고리를 형성하고;
    여기서, RB, RC, RF 및 RF'의 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 페닐 및 헤테로아릴 모이어티는 할로겐, C1-C4 알킬, -OH, -OC1-C4 알킬, -NH2,- NHC1-C4 알킬 및 -N(C1-C4 알킬)2로 이루어진 군으로부터 선택된 0개 내지 3개의 치환체로 치환되고;
    여기서 캄프토테신-링커 화합물이 화학식 (i), 화학식 (ii), 화학식 (iii), 화학식 (iv), 화학식 (v), 또는 화학식 (vi)의 화합물인 경우 D의 공유결합 지점은 CPT1 내지 CPT7 중 임의의 하나 상의 히드록실 또는 아미노 치환체 중 임의의 하나의 헤테로원자에 대해서이거나, 또는
    여기서 캄프토테신-링커 화합물이 화학식 (vii), 화학식 (viii) 또는 화학식 (ix)의 화합물이거나, 캄프토테신-링커 화합물이 RL이 글루쿠로나이드 단위 외의 방출가능한 단위인 화학식 (iii), 화학식 (iv), 화학식 (x), 또는 화학식 (xi)인 경우 D의 공유결합 지점은 CPT1 내지 CPT7 중 임의의 하나의 락톤 고리 상의 히드록실 치환체의 산소 원자에 대해서이고;
    여기서 공유결합 지점은 CPT6 상의 아미노 치환체의 질소 원자에 대해서인 경우 RF 및 RF' 중 적어도 하나가 -H이고;
    여기서 D가 이의 아미노 치환체의 질소 원자를 통한 공유결합을 가진 CPT1인 경우 화학식 (i), 화학식 (ii), 화학식 (iii), 화학식 (iv), 화학식 (v), 및 화학식 (vi)의 캄프토테신-링커 화합물의 Z'-A-는 말레이미도-카프로일-β-알라닐 모이어티 이외의 것인, 캄프토테신-링커 화합물.
  18. 제17항에 있어서, 상기 캄프토테신-링커 화합물은 화학식 (i), 화학식 (ii); 화학식 (iii), 화학식 (iv), 화학식 (v) 및 화학식 (vi)로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 갖고, 여기서 A는 커넥터 단위이고; RL은 글루쿠로나이드 단위이고, 특히 다음의 구조를 갖고:
    Figure pct00426

    상기 식에서 단일 별표(*)로 표시된 물결선은 D로의 또는 스페이서 단위(Y)로의 공유결합 부위를 나타내고; 이중 별표(**)로 표시된 물결선은 A, B 또는 S*로의 공유결합 지점을 나타내는, 캄프토테신-링커 화합물.
  19. 제18항에 있어서, D의 공유결합 지점이 CPT1 내지 CPT7 중 임의의 하나의 락톤 고리 상의 히드록실 치환체의 산소 원자를 통한 것인, 캄프토테신-링커 화합물.
  20. 제18항에 있어서, 상기 D가 CPT1, CPT4, 또는 CPT6이고, 여기서
    Z'-A-는 말레이미도-카프로일-β-알라닐 이외의 것인 경우 CPT1의 결합 지점은 이의 아민 작용기의 질소 원자를 통해서이고,
    CPT4의 결합 지점은 이의 아민 작용기의 질소 원자에 대해서이고,
    CPT6의 결합 지점은 RF 및 RF' 중 적어도 하나가 -H인 경우 이의 아민 작용기의 질소 원자를 통해서인, 캄프토테신-링커 화합물.
  21. 제17항에 있어서, 상기 캄프토테신-링커 화합물은 화학식 (iii), 화학식 (iv), 화학식 (v) 및 화학식 (vi)를 갖고, 여기서 S*는 PEG기인, 캄프토테신-링커 화합물.
  22. 제18항에 있어서, 상기 캄프토테신-링커 화합물은 화학식 (ii), 화학식 (iv) 또는 화학식 (vi)를 갖고, 여기서 D가 CPT1 내지 CPT7 중 임의의 하나이고;
    스페이서 단위(Y)가 다음의 화학식을 가지며:
    Figure pct00427
    또는
    Figure pct00428

    상기 식에서, EWG는 전자-받개기이고;
    O*가 D의 히드록시 작용기의 산소 원자를 나타내고;
    질소 원자에 인접한 물결선은 글루쿠로나이드 단위의 카보닐 탄소 원자에 대한 공유결합 부위를 나타내고;
    O*에 인접한 물결선은 D의 나머지 부분에 대한 공유결합 부위를 나타내거나, 또는
    D는 RF 및 RF' 각각이 -H인 CPT1, CPT4 및 CPT6으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    스페이서 단위(Y)가 다음의 화학식을 가지며:
    Figure pct00429
    Figure pct00430
    또는
    Figure pct00431

    상기 식에서,
    EWG는 전자-받개기이고;
    질소 원자에 인접한 물결선은 글루쿠로나이드 단위의 카보닐 탄소 원자에 대한 공유결합 부위를 나타내고;
    카보닐 탄소 원자에 인접한 물결선은 RF 및 RF' 각각이 -H인 CPT1, CPT4 또는 CPT6의 아민 작용기의 질소 원자로의 공유결합 부위를 나타내는, 캄프토테신-링커 화합물.
  23. 제17항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 A가 캄프토테신 접합체의 리간드 단위에 대한 전구체인 화학적으로 변형된 표적화제로부터 아지도 치환체로 1,3-이극성 환첨가를 겪을 수 있는 알키닐 모이어티로 구성되어 트리아졸일 모이어티로 구성된 커넥터 단위를 가진 접합체를 제공하는, 캄프토테신-링커 화합물.
    [청구항 23]
    제17항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 Z'-A-가 염기성 질소 원자가 선택적으로 양성자화되거나 산-불안정한 보호기로 보호되는 말레이미도-알카노일 모이어티 또는 mDPR로 구성되고,
    여기서, D가 이의 아미노 치환체의 질소 원자를 통한 공유결합을 가진 CPT1인 경우 Z'-A-는 mDPR로 구성되고, 특히,
    D가 CPT1인 경우 D는 이의 락톤 고리 상의 히드록실 치환체의 산소 원자에 대한 공유결합을 갖는 경우 Z'-A-는 mDPR 또는 말레이미도-알카노일-β-알라닐 모이어티로 구성되는, 캄프토테신-링커 화합물.
  24. 제17항에 있어서, 상기 캄프토테신-링커 화합물은 A가 커넥터 단위인 화학식 (vii), 화학식 (viii) 또는 화학식 (ix)를 갖거나, 또는 A가 커넥터 단위이고 RL은 글루쿠로나이드 단위 외의 방출가능한 링커인 화학식 (i), 화학식 (iii), 화학식 (x) 또는 화학식 (xi)를 갖는, 캄프토테신-링커 화합물.
  25. 제24항에 있어서, 상기 캄프토테신-링커 화합물은 화학식 (i), 화학식 (iii) 또는 화학식 (x)를 갖고, 상기 식에서
    RL은 다음의 화학식을 갖고:
    Figure pct00432

    상기 식에서,
    이중 별표(**)로 표시된 물결선은 D로의 공유결합 부위를 나타내고;
    단일 별표(*)로 표시된 물결선은 A, S* 또는 W로의 공유결합 지점을 나타내는, 캄프토테신-링커 화합물.
  26. 제25항에 있어서, 상기 캄프토테신-링커 화합물은 W가 N-메틸-글리신(사코신), N-메틸-알라닌, N-메틸-β-알라닌, 발린 및 N-메틸-발린으로 이루어진 군으로부터 선택되는 아미노산 단위인 화학식 (x)를 갖는, 캄프토테신-링커 화합물.
  27. 제24항, 제25항 또는 제26항에 있어서, 상기 Z'-A-가 염기성 질소 원자가 선택적으로 양성자화되거나 산-불안정한 보호기로 보호되는 말레이미도-알카노일 모이어티 또는 mDPR로 구성된, 캄프토테신-링커 화합물.
  28. 제24항, 제25항 또는 제26항에 있어서, 상기 캄프토테신-링커 화합물은 화학식 (iii) 또는 화학식 (x)를 갖고, 상기 식에서
    Z'-A가 다음으로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 갖고:
    Figure pct00433
    및
    Figure pct00434
    ,
    상기 식에서 이중 별표(**)로 표시된 물결선은 S*로의 공유결합 부위를 나타내는, 캄프토테신-링커 화합물.
  29. 제24항, 제25항 또는 제26항에 있어서, 상기 캄프토테신-링커 화합물은 화학식 (iii) 또는 화학식 (x)를 갖고, 상기 식에서
    S*가 다음의 화학식을 갖고:
    Figure pct00435
    ,
    상기 식에서 아래첨자 n은 2 내지 36의 범위의 정수인, 캄프토테신-링커 화합물.
  30. 제24항 또는 제25항에 있어서, 상기 캄프토테신-링커 화합물은 Z'-A-S*-W-가 다음의 화학식을 갖는 화학식 (viii) 또는 화학식 (x)의 캄프토테신-링커 화합물이고:
    Figure pct00436
    ,
    상기 식에서, 아래첨자 n은 2 내지 10의 범위의 정수이고, 바람직하게는 2 내지 4의 정수이고, 이중 별표(**)로 표시된 물결선은 D 또는 RL로의 공유결합 부위를 나타내는, 캄프토테신-링커 화합물.
  31. 제17항에 있어서, 상키 캄프토테신-링커 화합물은 다음의 구조:
    Figure pct00437
    ,
    Figure pct00438

    Figure pct00439

    Figure pct00440
    또는
    Figure pct00441
    ,
    또는 이의 염을 갖는, 캄프토테신-링커 화합물.
  32. 대상에서 암을 치료하기 위한 약제의 제조에서 캄프토테신 접합체의 용도로서, 상기 캄프토테신 접합체는 제1항의 화학식을 갖고, 특히 상기 암은 림프종, 백혈병, 및 고형 종양으로 이루어진 군으로부터 선택되고 바람직하게는 림프종 또는 백혈병인, 용도.
  33. 제1항의 캄프토테신 접합체 및 적어도 하나의 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약학적으로 허용되는 조성물.
  34. 필요로 하는 대상에서 암을 치료하기 위한 조성물로서, 상기 조성물은 유효량의 제1항의 캄프토테신 접합체로 구성되고, 특히, 상기 암은 림프종, 백혈병, 및 고형 종양으로 이루어진 군으로부터 선택되고 바람직하게는 림프종 또는 백혈병인, 조성물.
  35. 제1항의 캄프토테신 접합체를 제조하는 방법으로서, 상기 방법은 제17항의 캄프토테신-링커 화합물의 Z'에 대해 반응성인 작용기를 가진 표적화제와 접촉하여, 각각 구조에서 표적화제 및 Z'에 해당하는 캄프토테신 접합체의 리간드 단위와 스트레처 단위(Z) 사이에 공유결합을 형성하는 단계를 포함하며, 특히
    표적화제는 반응성 작용기가 티올인 적어도 하나의 시스테인 잔기를 가진 항체이고 Z'는 말레이미드 모이어티로 구성되거나, 또는
    표적화제는 반응성 작용기로서 아지드-함유 잔기를 갖도록 변형된 항체이고 Z'는 알킨 작용기로 구성되고, 여기서 상기 아지드 및 알킨 작용기는 1,3-이극성 환첨가를 통해 트리아졸 고리 시스템을 형성할 수 있는 것인, 방법.
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2023204631A1 (ko) * 2022-04-20 2023-10-26 주식회사 피노바이오 Ddx5 단백질에 결합하는 캄토테신 유도체 및 이의 프로드럭

Families Citing this family (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20190343828A1 (en) * 2018-04-06 2019-11-14 Seattle Genetics, Inc. Camptothecin peptide conjugates
JP2022541747A (ja) 2019-07-10 2022-09-27 サイブレクサ ３，インコーポレイテッド 治療薬としての微小管標的化剤のペプチドコンジュゲート
KR20220052918A (ko) 2019-07-10 2022-04-28 싸이브렉사 2, 인크. 치료제로서의 사이토톡신의 펩티드 접합체
WO2021052402A1 (zh) * 2019-09-18 2021-03-25 四川百利药业有限责任公司 一种喜树碱衍生物及其偶联物
WO2021067820A1 (en) * 2019-10-04 2021-04-08 Seagen Inc. Formulation of antibody-drug conjugate
CA3152316A1 (en) * 2019-10-04 2021-04-08 Scott C. Jeffrey Camptothecin peptide conjugates
WO2021231568A1 (en) * 2020-05-13 2021-11-18 Seagen Inc. Methods of treating cancer using a combination of anti-cd30 antibody-drug conjugates
US11806405B1 (en) 2021-07-19 2023-11-07 Zeno Management, Inc. Immunoconjugates and methods
AU2022330892A1 (en) * 2021-08-19 2024-03-21 Hainan Simcere Zaiming Pharmaceutical Co., Ltd. Camptothecin derivative, and pharmaceutical composition and use thereof
CA3237379A1 (en) 2021-11-09 2023-05-19 Marc-Andre Kasper Conjugates comprising a phosphorus (v) and a camptothecin moiety
AU2022385379A1 (en) 2021-11-09 2024-06-20 Forschungsverbund Berlin E.V. Conjugates comprising a phosphorus (v) and a drug moiety
WO2023125530A1 (en) * 2021-12-28 2023-07-06 Beigene, Ltd. Antibody drug conjugates
WO2023172968A1 (en) * 2022-03-09 2023-09-14 Merck Patent Gmbh Anti-gd2 antibodies, immunoconjugates and therapeutic uses thereof
TW202400137A (zh) * 2022-03-17 2024-01-01 美商思進公司 喜樹鹼偶聯物
WO2023180490A1 (en) 2022-03-23 2023-09-28 Synaffix B.V. Antibody-conjugates for targeting of tumours expressing nectin-4
WO2023180485A1 (en) 2022-03-23 2023-09-28 Synaffix B.V. Antibody-conjugates for targeting of tumours expressing trop-2
WO2023180489A1 (en) 2022-03-23 2023-09-28 Synaffix B.V. Antibody-conjugates for targeting of tumours expressing carcinoembyronic antigen
WO2023180484A1 (en) 2022-03-23 2023-09-28 Synaffix B.V. Antibody-conjugates for targeting of tumours expressing ptk7
WO2023217227A1 (zh) * 2022-05-12 2023-11-16 先声再明医药有限公司 喜树碱类衍生物及配体-药物偶联物
US20240091365A1 (en) * 2022-06-27 2024-03-21 Sutro Biopharma, Inc. Beta-glucuronide linker-payloads, protein conjugates thereof, and methods thereof
WO2024059236A1 (en) * 2022-09-15 2024-03-21 Adcentrx Therapeutics Inc. Novel camptothecin analogs and immunoconjugates thereof
US20240190958A1 (en) 2022-10-18 2024-06-13 Tubulis Gmbh Novel antibody drug conjugates with novel napi2b antibodies, therapeutic methods and uses thereof
WO2024083953A1 (en) 2022-10-18 2024-04-25 Tubulis Gmbh Novel anti-tpbg antibody and antibody-drug-conjugates based thereon, therapeutic methods and uses thereof
WO2024108053A1 (en) * 2022-11-17 2024-05-23 Sanofi Ceacam5 antibody-drug conjugates and methods of use thereof
WO2024129756A1 (en) 2022-12-13 2024-06-20 Seagen Inc. Site-specific engineered cysteine antibody drug conjugates

Family Cites Families (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB8308235D0 (en) 1983-03-25 1983-05-05 Celltech Ltd Polypeptides
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
JPS6147500A (ja) 1984-08-15 1986-03-07 Res Dev Corp Of Japan キメラモノクロ−ナル抗体及びその製造法
EP0173494A3 (en) 1984-08-27 1987-11-25 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Chimeric receptors by dna splicing and expression
GB8422238D0 (en) 1984-09-03 1984-10-10 Neuberger M S Chimeric proteins
JPS61134325A (ja) 1984-12-04 1986-06-21 Teijin Ltd ハイブリツド抗体遺伝子の発現方法
DE3689123T2 (de) 1985-11-01 1994-03-03 Xoma Corp Modulare einheit von antikörpergenen, daraus hergestellte antikörper und verwendung.
US5225539A (en) 1986-03-27 1993-07-06 Medical Research Council Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies
ATE135370T1 (de) 1988-12-22 1996-03-15 Kirin Amgen Inc Chemisch modifizierte granulocytenkolonie erregender faktor
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
US5166322A (en) 1989-04-21 1992-11-24 Genetics Institute Cysteine added variants of interleukin-3 and chemical modifications thereof
JP2763020B2 (ja) 1995-04-27 1998-06-11 日本電気株式会社 半導体パッケージ及び半導体装置
US5672662A (en) 1995-07-07 1997-09-30 Shearwater Polymers, Inc. Poly(ethylene glycol) and related polymers monosubstituted with propionic or butanoic acids and functional derivatives thereof for biotechnical applications
WO1997034631A1 (en) 1996-03-18 1997-09-25 Board Of Regents, The University Of Texas System Immunoglobin-like domains with increased half lives
WO1998005363A2 (en) 1996-08-02 1998-02-12 Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. Polypeptides having a single covalently bound n-terminal water-soluble polymer
ITMI20041427A1 (it) 2004-07-15 2004-10-15 Univ Degli Studi Milano Sintesi di molecole organometalliche utilizzabili come marcatori di sostanze organiche
JP6423340B2 (ja) 2012-05-15 2018-11-14 シアトル ジェネティクス，インコーポレイティド 自己安定化リンカー結合体
CA2921707C (en) 2013-10-15 2023-03-28 Seattle Genetics, Inc. Pegylated drug-linkers for improved ligand-drug conjugate pharmacokinetics
IL290330B2 (en) * 2013-12-19 2023-09-01 Seagen Inc Methylene carbamate binders for use with drug-targeting conjugates
US10550190B2 (en) * 2014-04-04 2020-02-04 Merck Sharp & Dohme Corp. Phosphate based linkers for intracellular delivery of drug conjugates
CN111620862A (zh) * 2014-12-09 2020-09-04 艾伯维公司 Bcl-xl抑制性化合物和包括其的抗体药物缀合物
CN107249643A (zh) * 2014-12-09 2017-10-13 艾伯维公司 具有细胞渗透性的bcl‑xl抑制剂的抗体药物缀合物
SG11201807827VA (en) 2016-03-25 2018-10-30 Seattle Genetics Inc Process for the preparation of pegylated drug-linkers and intermediates thereof
JP7244987B2 (ja) * 2016-12-14 2023-03-23 シージェン インコーポレイテッド 多剤抗体薬物コンジュゲート
TW202400137A (zh) * 2022-03-17 2024-01-01 美商思進公司 喜樹鹼偶聯物

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2023204631A1 (ko) * 2022-04-20 2023-10-26 주식회사 피노바이오 Ddx5 단백질에 결합하는 캄토테신 유도체 및 이의 프로드럭

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