KR20220079606A - 캄프토테신 펩티드 접합체 - Google Patents

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KR20220079606A
KR20220079606A KR1020227015051A KR20227015051A KR20220079606A KR 20220079606 A KR20220079606 A KR 20220079606A KR 1020227015051 A KR1020227015051 A KR 1020227015051A KR 20227015051 A KR20227015051 A KR 20227015051A KR 20220079606 A KR20220079606 A KR 20220079606A
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스콧 씨. 제프리
라이언 리스키
줄리아 코크란
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씨젠 인크.
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Abstract

본 명세서에는 캄프토테신 접합체, 캄프토테신-링커 화합물, 캄프토테신 화합물, 이의 중간체 및 이의 제조 방법이 제공된다. 또한 본 명세서에는 본 명세서에 기재된 접합체를 사용하여 암 및 자가면역 질환을 치료하는 방법이 제공된다.

Description

캄프토테신 펩티드 접합체
관련 출원의 교차 참조
본 출원은 2019년 10월 4일자로 출원된 미국 임시 출원 제62/911,060호에 대한 우선권을 주장하며, 이의 내용 전체가 본원에 참조로서 통합된다.
ASCII 텍스트 파일로의 서열 목록의 제출
ASCII 텍스트 파일의 하기 제출의 내용은 이의 전문이 본원에 참조로서 통합된다: 서열 목록의 컴퓨터 판독 가능한 형식(CRF)(파일명: 761682002540SEQLIST.TXT, 작성일: 2019년 10월 2일, 크기: 13 KB).
종양 세포에 세포독성 작용제의 표적화된 전달을 위한 단클론성 항체(mAb: monoclonal antibody)의 사용은 대단히 큰 관심을 받아왔다. 다수의 상이한 약물 부류가 항체를 통한 전달에 대해 평가되었지만, 단지 몇 개의 약물 부류만 임상 개발을 보장하기에 적절한 독성 프로파일을 가지면서 항체 약물 접합체로서 충분히 활성이라고 증명되었다. 관심을 받는 한 부류는 캄프토테신이다.
전형적으로 링커를 통해 세포독성 작용제를 항체에 부착하는, 항체 약물 접합체(ADC: antibody drug conjugate)의 설계는 링커에 부착하기 위한 약물에 접합 핸들의 존재 및 조건부로 안정적인 방식으로 약물을 항체에 부착하기 위한 링커 기술을 포함한 다양한 인자를 고려하는 것을 포함한다. 적절한 접합 핸들이 부족하다고 생각되는 특정 약물 부류는 ADC로 사용하기에 부적합한 것으로 간주되었다. 접합 핸들을 포함하도록 이러한 약물을 변형하는 것이 가능할 수 있지만, 이러한 변형은 약물의 활성 프로파일을 부정적으로 방해할 수 있다.
에스테르 및 탄산염을 포함하는 링커가 또한 전형적으로 알코올-함유 약물의 접합에 사용되어 왔고, 이것은 가변적인 안정성 및 약물 방출 프로파일을 갖는 ADC를 초래한다. 비-최적 프로파일은 감소된 ADC 효력, 접합체의 불충분한 면역학적 특이성 및 접합체로부터 약물의 비-특이적 방출로 인한 증가된 독성을 초래할 수 있다.
따라서, 표적 치료에 유용한 신규한 링커 기술 및 접합체에 대한 요구가 존재한다. 본 발명은 이들 및 다른 요구를 다룬다.
발명의 개요
본 발명은 특히 캄프토테신 접합체, 캄프토테신-링커 화합물 및 캄프토테신 화합물, 이들의 제조 및 사용 방법 및 이들의 제조에 유용한 중간체를 제공한다. 본 발명의 캄프토테신 접합체는 순환 시에 안정적이지만, 유리 약물이 종양 세포 부근 또는 종양 세포 내에서 접합체로부터 방출되면 세포 사멸을 일으킬 수 있다.
주요 일 실시형태에서, 하기 화학식 (I)을 갖는 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염이 제공되며:
Figure pct00001
(I)
상기 식에서,
L은 리간드 단위이고;
Z는 스트레처 단위이고;
A는 결합 또는 연결기 단위이고;
S*는 결합 또는 분배제이고;
AA1은 아미노산이고;
AA2는 아미노산이고;
B는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp, D-Ala, Aib 및 pAbz로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산이고;
RF는 H 또는 C1-C6 알킬이고;
p는 1 내지 16이다.
화학식 (I)의 캄프토테신 접합체의 일부 실시형태에서, AA1은 Val이다. 일부 실시형태에서, AA1은 Ala 또는 D-Ala이다.
화학식 (I)의 캄프토테신 접합체의 일부 실시형태에서, AA2는 Lys이다. 일부 실시형태에서, AA2는 Ala 또는 D-Ala이다.
화학식 (I)의 캄프토테신 접합체의 일부 실시형태에서, B는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp 및 D-Ala로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산이다. 일부 실시형태에서, B는 D-Ala이다. 일부 실시형태에서, B는 Arg, Lys, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 실시형태에서, B는 Thr 또는 Gln이다. 일부 실시형태에서, B는 Phe, Val, Leu, Met 또는 Trp이다.
화학식 (I)의 캄프토테신 접합체의 일부 실시형태에서, RF는 H이다.
화학식 (I)의 캄프토테신 접합체의 일부 실시형태에서, S*는 PEG 단위이다. 일부 실시형태에서, PEG 단위는 하기 화학식을 갖는다:
Figure pct00002
Figure pct00003
또는
Figure pct00004
상기 식에서, 좌측의 물결선은 A에 대한 부착 부위를 나타내고, 우측의 물결선은 AA1에 대한 부착 부위를 나타내고, b는 2 내지 20의 정수 또는 2, 4, 8 또는 12이다. 일부 실시형태에서, PEG 단위는 화학식
Figure pct00005
을 갖고, 상기 식에서, 좌측의 물결선은 A에 대한 부착 부위를 나타내고, 우측의 물결선은 AA1에 대한 부착 부위를 나타내고, b는 2 내지 20의 정수 또는 2, 4, 8 또는 12이다.
화학식 (I)의 캄프토테신 접합체의 일부 실시형태에서, Z는 하기 화학식 Za를 갖는다:
Figure pct00006
(Za)
상기 식에서, 별표는 리간드 단위(L)의 부착 위치를 나타내고; 물결선은 연결기 단위(A)의 부착 위치를 나타내고; R17은 -C1-C10 알킬렌-, C1-C10 헤테로알킬렌-, -C3-C8 카르보사이클로-, -O-(C1-C8 알킬렌)-, -아릴렌-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-, -(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-, -C3-C8 헤테로사이클로-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-, -C1-C10 알킬렌-C(=O)-, C1-C10 헤테로알킬렌-C(=O)-, -C3-C8 카르보사이클로-C(=O)-, -O-(C1-C8 알킬렌)-C(=O)-, -아릴렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-C(=O)-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-C(=O)-,-(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C3-C8 헤테로사이클로-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-C(=O)-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-NH-, C1-C10 헤테로알킬렌-NH-, -C3-C8 카르보사이클로-NH-, -O-(C1-C8 알킬렌)-NH-, -아릴렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-NH-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-NH-, -(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-NH-, -C3-C8 헤테로사이클로-NH-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-NH-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-S-, C1-C10 헤테로알킬렌-S-, -C3-C8 카르보사이클로-S-, -O-(C1-C8 알킬렌)-S-, -아릴렌-S-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-S-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-S-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-S-, -(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-S-, -C3-C8 헤테로사이클로-S-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-S- 또는 -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-S-이고;
R17은 -(CH2)xNH2, -(CH2)xNHRa 또는 -(CH2)xNRa 2인 염기성 단위(BU)로 선택적으로 치환되고; x는 1 내지 4의 정수이고; 각각의 Ra는 C1-6 알킬 및 C1-6 할로알킬로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되거나, 2개의 Ra기는 이들이 부착된 질소와 결합되어 4 내지 6-원 헤테로사이클로알킬 고리, 또는 아제티디닐, 피롤리디닐 또는 피페리디닐기를 형성한다. 일부 실시형태에서, R17은 -(C1-C5)알킬렌-C(=O)-이고, R17의 알킬렌 부분은 염기성 단위(BU)로 선택적으로 치환된다. 일부 실시형태에서, Z는
Figure pct00007
;
Figure pct00008
; 또는
Figure pct00009
이다. 일부 실시형태에서, Z는
Figure pct00010
이다. 일부 실시형태에서, Z는
Figure pct00011
또는
Figure pct00012
이다.
화학식 (I)의 캄프토테신 접합체의 일부 실시형태에서, A는 결합이다.
또 다른 양태에서, 하기 화학식 (Ib)를 갖는 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염이 제공되며:
Figure pct00013
(Ib)
상기 식에서,
L은 리간드 단위이고;
AA1은 아미노산이고;
AA2는 아미노산이고;
B는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp, D-Ala, Aib 및 pAbz로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산이고;
RF는 수소 또는 C1-C6 알킬이고;
b는 2 내지 20의 정수이고;
y는 1 내지 8 또는 1 내지 4의 정수이거나; 또는 1 또는 4이고;
p는 1 내지 16이다.
화학식 (Ib)의 캄프토테신 접합체의 일부 실시형태에서, y는 1이다.
화학식 (Ib)의 캄프토테신 접합체의 일부 실시형태에서, b는 8이다.
화학식 (Ib)의 캄프토테신 접합체의 일부 실시형태에서, AA1-AA2는 Val-Lys이다.
화학식 (Ib)의 캄프토테신 접합체의 일부 실시형태에서, B는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp 및 D-Ala로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산이다.
화학식 (Ib)의 캄프토테신 접합체의 일부 실시형태에서, AA1-AA2-B는 Ala-Ala-D-Ala이다.
화학식 (Ib)의 캄프토테신 접합체의 일부 실시형태에서, RF는 H이다.
화학식 (I) 또는 화학식 (Ib)의 캄프토테신 접합체의 일부 실시형태에서, p는 1 내지 16이거나 2 내지 8이거나 2 또는 4이거나 8이다.
화학식 (I) 또는 화학식 (Ib)의 캄프토테신 접합체의 일부 실시형태에서, 리간드 단위는 항체 또는 이의 항원-결합 단편이다. 일부 실시형태에서, 항체는 단클론성 항체 또는 이의 항원-결합 단편이다. 일부 실시형태에서, 항체는 cAC10 항-CD30 항체 또는 이의 항원-결합 단편이다. 일부 실시형태에서, 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 각각 서열번호 1, 2, 3, 4, 5 및 6의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 서열번호 7의 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 8의 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 서열번호 7의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 8의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항체는 서열번호 9 또는 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호 11의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다.
또 다른 주요 실시형태에서, 하기 화학식 (II)을 갖는 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염이 제공되며:
Figure pct00014
(II)
상기 식에서,
Z'는 스트레처 단위 전구체이고;
A는 결합 또는 연결기 단위이고;
S*는 결합 또는 분배제이고;
AA1은 아미노산이고;
AA2는 아미노산이고;
B는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp, D-Ala, Aib 및 pAbz로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산이고;
RF는 H 또는 C1-C6 알킬이다.
화학식 (II)의 캄프토테신-링커 화합물의 일부 실시형태에서, AA1은 Val이다. 일부 실시형태에서, AA1은 Ala 또는 D-Ala이다.
화학식 (II)의 캄프토테신-링커 화합물의 일부 실시형태에서, AA2는 Lys이다. 일부 실시형태에서, AA2는 Ala 또는 D-Ala이다.
화학식 (II)의 캄프토테신-링커 화합물의 일부 실시형태에서, B는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp 및 D-Ala로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산이다. 일부 실시형태에서, B는 D-Ala이다. 일부 실시형태에서, B는 Arg, Lys, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 실시형태에서, B는 Thr 또는 Gln이다. 일부 실시형태에서, B는 Phe, Val, Leu, Met 또는 Trp이다.
화학식 (II)의 캄프토테신-링커 화합물의 일부 실시형태에서, RF는 H이다.
화학식 (II)의 캄프토테신-링커 화합물의 일부 실시형태에서, S*는 PEG 단위이다. 일부 실시형태에서, PEG 단위는 하기 화학식을 갖는다:
Figure pct00015
Figure pct00016
또는
Figure pct00017
상기 식에서, 좌측의 물결선은 A에 대한 부착 부위를 나타내고, 우측의 물결선은 AA1에 대한 부착 부위를 나타내고, b는 2 내지 20의 정수 또는 2, 4, 8 또는 12이다. 일부 실시형태에서, PEG 단위는 화학식
Figure pct00018
을 갖고, 상기 식에서, 좌측의 물결선은 A에 대한 부착 부위를 나타내고, 우측의 물결선은 AA1에 대한 부착 부위를 나타내고, b는 2 내지 20의 정수 또는 2, 4, 8 또는 12이다.
화학식 (II)의 캄프토테신-링커 화합물의 일부 실시형태에서, Z'는 하기 화학식 Z'b를 갖고:
Figure pct00019
(Z'b)
상기 식에서, R17은 -C1-C10 알킬렌-, C1-C10 헤테로알킬렌-, -C3-C8 카르보사이클로-, -O-(C1-C8 알킬렌)-, -아릴렌-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-, -(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-, -C3-C8 헤테로사이클로-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-, -C1-C10 알킬렌-C(=O)-, C1-C10 헤테로알킬렌-C(=O)-, -C3-C8 카르보사이클로-C(=O)-, -O-(C1-C8 알킬렌)-C(=O)-, -아릴렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-C(=O)-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-C(=O)-,-(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C3-C8 헤테로사이클로-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-C(=O)-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-NH-, C1-C10 헤테로알킬렌-NH-, -C3-C8 카르보사이클로-NH-, -O-(C1-C8 알킬렌)-NH-, -아릴렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-NH-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-NH-, -(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-NH-, -C3-C8 헤테로사이클로-NH-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-NH-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-S-, C1-C10 헤테로알킬렌-S-, -C3-C8 카르보사이클로-S-, -O-(C1-C8 알킬렌)-S-, -아릴렌-S-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-S-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-S-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-S-, -(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-S-, -C3-C8 헤테로사이클로-S-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-S- 또는 -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-S-이고; R17은 -(CH2)xNH2, -(CH2)xNHRa 또는 -(CH2)xNRa 2인 염기성 단위(BU)로 선택적으로 치환되고; x는 1 내지 4의 정수이고; 각각의 Ra는 C1-6 알킬 및 C1-6 할로알킬로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되거나, 2개의 Ra기는 이들이 부착된 질소와 결합되어 4 내지 6-원 헤테로사이클로알킬 고리, 또는 아제티디닐, 피롤리디닐 또는 피페리디닐기를 형성한다. 일부 실시형태에서, R17은 -(C1-C5)알킬렌-C(=O)-이고, R17의 알킬렌 부분은 염기성 단위(BU)로 선택적으로 치환된다. 일부 실시형태에서, Z'는
Figure pct00020
;
Figure pct00021
; 또는
Figure pct00022
이다. 일부 실시형태에서, Z'는
Figure pct00023
이다. 일부 실시형태에서, Z'는
Figure pct00024
또는
Figure pct00025
이다.
화학식 (II)의 캄프토테신-링커 화합물의 일부 실시형태에서, A는 결합이다.
또 다른 양태에서, 하기 화학식 (IIb)를 갖는 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염이 제공되며:
Figure pct00026
(IIb)
상기 식에서,
AA1은 아미노산이고;
AA2는 아미노산이고;
B는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp, D-Ala, Aib 및 pAbz로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산이고;
RF는 수소 또는 C1-C6 알킬이고;
b는 2 내지 20의 정수이고;
y는 1 내지 8 또는 1 내지 4의 정수이거나; 1 또는 4이다.
화학식 (IIb)의 캄프토테신 접합체의 일부 실시형태에서, y는 1이다.
화학식 (IIb)의 캄프토테신 접합체의 일부 실시형태에서, b는 8이다.
화학식 (IIb)의 캄프토테신 접합체의 일부 실시형태에서, AA1-AA2는 Val-Lys이다.
화학식 (IIb)의 캄프토테신 접합체의 일부 실시형태에서, B는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp 및 D-Ala로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산이다.
화학식 (IIb)의 캄프토테신 접합체의 일부 실시형태에서, AA1-AA2-B는 Ala-Ala-D-Ala이다.
화학식 (IIb)의 캄프토테신 접합체의 일부 실시형태에서, RF는 H이다.
또 다른 주요 실시형태에서, 하기 화학식 (III)을 갖는 캄프토테신 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염이 제공되며:
Figure pct00027
(III)
상기 식에서,
B'는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp, D-Ala, Aib 및 pAbz로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산이고;
RF는 H 또는 C1-C6 알킬이다.
일부 양태에서 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서 암을 치료하는 방법이 제공되며, 이 방법은 대상체에게 유효량의 화학식 (I)의 캄프토테신 접합체 또는 이의 임의의 변형 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 화학식 (III)의 캄프토테신 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시형태에서, 암은 림프종, 백혈병 또는 고형 종양이다. 일부 실시형태에서, 상기 방법은 대상체에게 유효량의 추가 치료제, 1종 이상의 화학치료제 또는 방사선 요법을 투여하는 단계를 포함한다.
일부 양태에서 자가면역 질환의 치료를 필요로 하는 대상체에서 자가면역 질환을 치료하는 방법이 제공되며, 이 방법은 대상체에게 유효량의 화학식 (I)의 캄프토테신 접합체 또는 이의 임의의 변형 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 화학식 (III)의 캄프토테신 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시형태에서, 자가면역 질환은 Th2 림프구 관련 장애, Th1 림프구-관련 장애 또는 활성화된 B 림프구-관련 장애이다.
일부 양태에서 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서 암을 치료하는 방법이 제공되며, 이 방법은 암 세포를 화학식 (III)의 캄프토테신 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염과 접촉시키는 단계를 포함한다. 일부 실시형태에서, 암은 림프종, 백혈병 또는 고형 종양이다.
일부 양태에서 화학식 (I)의 캄프토테신 접합체 또는 이의 임의의 변형 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염의 제조 방법이 제공되며, 이 방법은 항체 또는 이의 항원-결합 단편을 화학식 (II)의 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 임의의 변형 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염과 반응시키는 단계를 포함한다.
일부 양태에서 화학식 (I)의 캄프토테신 접합체 또는 이의 임의의 변형 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 및 약제학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 약제학적 조성물이 제공된다.
일부 양태에서 화학식 (I)의 캄프토테신 접합체 또는 이의 임의의 변형 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 포함하고, 선택적으로 추가 치료제를 포함하는 키트가 제공된다.
일부 양태에서 질환 또는 장애를 치료하기 위한, 화학식 (I)의 캄프토테신 접합체 또는 이의 임의의 변형 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 화학식 (III)의 캄프토테신 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염의 용도가 제공된다.
일부 양태에서 질환 또는 장애를 치료하기 위한 의약의 제조에서의, 화학식 (I)의 캄프토테신 접합체 또는 이의 임의의 변형 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 화학식 (III)의 캄프토테신 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 및 약제학적으로 허용 가능한 부형제, 담체 또는 희석제의 용도가 제공된다.
상기에 언급된 바와 같은 다른 주요 실시형태는 캄프토테신 접합체를 제조하기 위한 중간체로 유용한 캄프토테신-링커 화합물이고, 여기서 캄프토테신-링커 화합물은 리간드 단위 및 방출 가능한 링커(RL)(즉, -AA1-AA2-B-)를 제공하는 표적화 리간드에 대한 공유 결합을 형성할 수 있는 캄프토테신 스트레처 단위 전구체(Z')로 구성된다.
상기에 언급된 바와 같은 다른 주요 실시형태는 캄프토테신 접합체를 제조하기 위한 중간체로 유용한 캄프토테신-링커 화합물이고, 여기서 캄프토테신-링커 화합물은 캄프토테신 및 링커 단위 전구체(Q')로 구성되고, 여기서 링커 단위 전구체는 리간드 단위 및 방출 가능한 링커(RL)(즉, -AA1-AA2-B-)를 제공하는 표적화 리간드에 대한 공유 결합을 형성할 수 있는 스트레처 단위 전구체(Z')로 구성된다.
또 다른 양태에서, 본 명세서에는 암의 치료를 필요로 하는 대상체에게 본 명세서에 기재된 캄프토테신 접합체를 투여하는 단계를 포함하는 암의 치료 방법이 제공된다.
또 다른 양태에서, 본 명세서에는 본 명세서에 기재된 캄프토테신-링커 화합물 또는 캄프토테신을 사용하여 암을 치료하는 방법이 제공된다.
또 다른 양태에서, 본 명세서에는 본 명세서에 기재된 캄프토테신 접합체를 포함하는 키트가 제공된다.
도 1. 24시간에 Karpas 299 및 L540cy 세포에서 Ag1-8 ADC(DAR 8), Ag1-8k ADC(DAR8) 및 Ag1-8o ADC(DAR 8)로부터의 시험관내 약물 방출.
달리 언급되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 바와 같은 다음 용어 및 어구는 다음의 의미를 갖는 것으로 의도된다. 본 명세서에서 상품명이 사용될 때, 상품명은 문맥상 달리 명시되지 않는 한 상품명 제품의 제품 제형, 일반 약물 및 활성 약제학적 성분(들)을 포함한다.
본 명세서에 사용된 바와 같은 용어 "항체"는 가장 넓은 의미로 사용되고, 구체적으로 온전한 단클론성 항체, 다클론성 항체, 단일특이적 항체, 다중특이적 항체(예를 들어, 이중특이적 항체) 및 원하는 생물학적 활성을 나타내는 항체 단편을 포함한다. 항체의 천연 형태는 사량체이고, 2개의 동일한 면역글로불린 사슬의 쌍으로 이루어지고, 각각의 쌍은 하나의 경쇄와 하나의 중쇄를 갖는다. 각각의 쌍에서, 경쇄 가변 영역 및 중쇄 가변 영역(VL 및 VH)은 함께 주로 항원에 대한 결합을 담당한다. 경쇄 가변 도메인 및 중쇄 가변 도메인은 "상보성 결정 영역" 또는 "CDR"이라고도 지칭되는 3개의 초가변성 영역에 의해 중단된 프레임워크 영역으로 이루어진다. 불변 영역은 면역계에 의해 인식되어 상호작용할 수 있다. (예를 들어, 문헌[Janeway et al., 2001, Immunol. Biology, 5th Ed., Garland Publishing, New York] 참조). 항체는 임의의 유형(예를 들어, IgG, IgE, IgM, IgD 및 IgA), 부류(예를 들어, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 및 IgA2) 또는 하위부류일 수 있다. 항체는 임의의 적합한 종으로부터 유래될 수 있다. 일부 실시형태에서, 항체는 인간 또는 뮤린 기원이다. 항체는 예를 들어, 인간, 인간화되거나 또는 키메라일 수 있다.
본 명세서에 사용된 바와 같은 용어 "단클론성 항체"는 실질적으로 균질한 항체의 집단, 즉, 소량으로 존재할 수 있는 가능한 자연-발생 돌연변이를 제외하고는 동일한 집단을 포함하는 개별 항체로부터 얻은 항체를 지칭한다. 단클론성 항체는 고도로 특이적이어서, 단일 항원 부위에 대해 지향된다. 수식어 "단클론성"은 실질적으로 균질한 항체의 집단으로부터 얻어지는 것과 같은 항체의 특성을 나타내며, 임의의 특별한 방법에 의한 항체의 생산을 요구하는 것으로 해석되지 않아야 한다.
"온전한 항체"는, 항체 부류에 대해 적절한 경우 경쇄 불변 도메인(CL) 및 중쇄 불변 도메인, CH1, CH2, CH3 및 CH4뿐만 아니라 항원-결합 가변 영역을 포함하는 항체이다. 불변 도메인은 천연 서열 불변 도메인(예를 들어, 인간 천연 서열 불변 도메인) 또는 이들의 아미노산 서열 변이체일 수 있다.
"항체 단편"은 이의 항원-결합 또는 가변 영역을 포함하는 온전한 항체의 일부를 포함한다. 항체 단편의 예는 Fab, Fab', F(ab')2 및 Fv 단편, 디아바디, 트리아바디, 테트라바디, 선형 항체, 단일-사슬 항체 분자, scFv, scFv-Fc, 항체 단편(들)으로부터 형성된 다중특이적 항체 단편, Fab 발현 라이브러리에 의해 생산된 단편(들) 또는 표적 항원(예를 들어, 암 세포 항원, 바이러스 항원 또는 미생물 항원)에 면역특이적으로 결합하는 상기 중 임의의 것의 에피토프-결합 단편을 포함한다.
"항원"은 항체가 특이적으로 결합하는 실체이다.
용어 "특이적 결합" 및 "특이적으로 결합한다"는 항체 또는 항체 유도체가 다수의 다른 항원이 아닌 표적 항원의 상응하는 에피토프와 고도로 선택적인 방식으로 결합할 것임을 의미한다. 전형적으로, 항체 또는 항체 유도체는 적어도 약 1x10-7 M, 바람직하게는 10-8 M 내지 10-9 M, 10-10 M, 10-11 M 또는 10-12 M의 친화도로 결합하고, 미리 결정된 항원 또는 밀접하게-관련된 항원 이외의 비-특이적 항원(예를 들어, BSA, 카세인)에 대한 이의 결합 친화도보다 적어도 2배 더 큰 친화도로 미리 결정된 항원에 결합한다
용어 "저해한다" 또는 "~의 저해"는 측정 가능한 양만큼 감소시키거나 또는 완전히 예방하는 것을 의미한다.
용어 "치료적 유효량"은 포유동물에서 질환 또는 장애를 치료하는 데 효과적인 접합체의 양을 지칭한다. 암의 경우, 접합체의 치료적 유효량은 암 세포의 수를 감소시킬 수 있고/있거나; 종양 크기를 줄일 수 있고/있거나; 말초 기관으로의 암 세포 침윤을 저해(즉, 어느 정도 둔화시키고, 바람직하게는 중단)할 수 있고/있거나; 종양 전이를 저해(즉, 어느 정도 둔화시키고, 바람직하게는 중단)할 수 있고/있거나; 종양 성장을 어느 정도 저해할 수 있고/있거나; 암과 연관된 증상 중 하나 이상을 어느 정도 완화시킬 수 있다. 약물이 성장을 저해할 수 있고/있거나 기존 암 세포를 사멸할 수 있는 한, 그것은 세포증식억제 및/또는 세포독성일 수 있다. 암 요법의 경우, 효능은, 예를 들어 질환 진행까지의 시간(TTP: time to disease progression)을 평가하고/하거나 반응률(RR: response rate)을 결정함으로써 측정될 수 있다.
용어 "실질적인" 또는 "실질적으로"는 혼합물 또는 샘플의 대다수, 즉 집단의 50% 초과, 바람직하게는 집단의 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97 %, 98% 또는 99% 초과를 지칭한다.
용어 "세포독성 활성"은 약물 또는 캄프토테신 접합체 또는 캄프토테신 접합체의 세포내 대사산물의 세포-사멸 효과를 지칭한다. 세포독성 활성은 IC50 값으로 표현될 수 있는데, 이는 세포의 절반이 생존하는 단위 부피당 농도(몰 또는 질량)이다.
용어 "세포증식억제 활성"은 약물 또는 캄프토테신 접합체 또는 캄프토테신 접합체의 세포내 대사산물의 항-증식 효과를 지칭한다.
본 명세서에서 사용된 바와 같은 용어 "세포독성제"는 세포독성 활성을 갖고 세포의 파괴를 야기하는 물질을 지칭한다. 이 용어는 화학치료제 및 독소, 예컨대, 소분자 독소 또는 박테리아, 진균, 식물 또는 동물 기원의 효소적으로 활성인 독소를 포함하며, 이들의 합성 유사체 및 유도체를 포함하는 것으로 의도된다.
용어 "암" 및 "암성"은 전형적으로 조절되지 않는 세포 성장을 특징으로 하는 포유동물에서의 생리학적 병태 또는 장애를 지칭하거나 설명한다. "종양"은 하나 이상의 암성 세포를 포함한다.
본 명세서에 사용된 바와 같은 "자가면역 질환"은 개체 자신의 조직 또는 단백질로부터 발생하고 이에 대해 지향되는 질환 또는 장애를 지칭한다.
본 명세서에 사용된 바와 같은 "환자"는 본 발명의 캄프토테신 접합체가 투여된 대상체를 지칭한다. 환자는 인간, 래트, 마우스, 기니피그, 비-인간 영장류, 돼지, 염소, 소, 말, 개, 고양이, 새 및 가금류를 포함하지만 이들로 제한되지 않는다. 전형적으로, 환자는 래트, 마우스, 개, 인간 또는 비-인간 영장류, 보다 전형적으로 인간이다.
용어 "치료하다" 또는 "치료"는 문맥상 달리 명시되지 않는 한, 치료적 치료 및 예방을 지칭하며, 여기서 목적은 원치않는 생리학적 변화 또는 장애, 예컨대, 암의 발달 또는 확산을 저해하거나 둔화시키기(약화시키기) 위한 것이다. 본 발명의 목적을 위해, 유익하거나 바람직한 임상 결과는 검출 가능한지 검출 가능하지 않은지의 여부에 관계없이 증상의 완화, 질환 정도의 감소, 안정화된(즉, 악화되지 않은) 질환의 상태, 질환 진행의 지연 또는 둔화, 질환 상태의 개선 또는 완화 및 (부분적이든 전체적이든) 경감을 포함하지만 이들로 제한되지 않는다. "치료"는 또한 치료를 받지 않는 경우 예상되는 생존과 비교하여 생존을 연장하는 것을 의미할 수 있다. 치료를 필요로 하는 대상체는 이미 병태 또는 장애가 있는 대상체뿐만 아니라 병태 또는 장애를 가질 경향이 있는 대상체를 포함한다.
암의 맥락에서, 용어 "치료하는"은 종양 세포를 사멸시키는 것; 종양 세포, 암 세포 또는 종양의 성장 저해하는 것; 종양 세포 또는 암 세포의 복제를 저해하는 것, 전반적인 종양 부담을 약화시키거나 암 세포 수를 감소시키는 것 및 질환과 관련된 하나 이상의 증상을 개선하는 것 중 임의의 것 또는 모두를 포함한다.
자가면역 질환의 맥락에서, 용어 "치료하는"은 자가면역 항체를 생산하는 세포를 포함하지만 이들로 제한되지 않는 자가면역 질환 상태와 관련된 세포의 복제를 저해하는 것, 자가면역-항체 부담을 약화시키는 것 및 자가면역 질환의 하나 이상의 증상을 개선하는 것 중 임의의 것 또는 모두를 포함한다.
본 명세서에서 사용된 바와 같은 용어 "약제학적으로 허용 가능한 형태"는 이들의 약제학적으로 허용 가능한 염, 에스테르, 수화물, 용매화물, 다형체, 이성질체, 전구약물 및 동위원소 표지된 유도체를 포함하지만 이들로 제한되지 않는 개시된 화합물의 형태를 지칭한다. 일 실시형태에서 "약제학적으로 허용 가능한 형태"는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염, 에스테르, 전구약물 및 동위원소 표지된 유도체를 포함하지만 이들로 제한되지 않는다. 일부 실시형태에서 "약제학적으로 허용 가능한 형태"는 이들의 약제학적으로 허용 가능한 이성질체, 입체이성질체, 전구약물 및 동위원소 표지된 유도체를 포함하지만 이들로 제한되지 않는다.
특정 실시형태에서, 약제학적으로 허용 가능한 형태는 약제학적으로 허용 가능한 염이다. 본 명세서에 사용된 바와 같은 용어 "약제학적으로 허용 가능한 염"은 화합물의 약제학적으로 허용 가능한 유기 또는 무기 염(예를 들어, 약물, 약물-링커 또는 캄프토테신 접합체)을 지칭한다. 일부 양태에서, 화합물은 적어도 하나의 아미노기를 함유할 수 있고, 따라서 산 부가 염은 아미노기와 함께 형성될 수 있다. 예시적인 염은 설페이트, 트리플루오로아세테이트, 시트레이트, 아세테이트, 옥살레이트, 클로라이드, 브로마이드, 아이오다이드, 니트레이트, 비설페이트, 포스페이트, 산 포스페이트, 이소니코티네이트, 락테이트, 살리실레이트, 산 시트레이트, 타르트레이트, 올레에이트, 탄네이트, 판토테네이트, 비타르트레이트, 아스코르베이트, 석시네이트, 말레에이트, 젠티시네이트, 푸마레이트, 글루코네이트, 글루쿠로네이트, 사카레이트, 포르메이트, 벤조에이트, 글루타메이트, 메탄설포네이트, 에탄설포네이트, 벤젠설포네이트, p-톨루엔설포네이트 및 파모에이트(즉, 1,1'-메틸렌-비스-(2-히드록시-3-나프토에이트)) 염을 포함하지만 이들에 제한되지는 않는다. 약제학적으로 허용 가능한 염은 아세테이트 이온, 석시네이트 이온 또는 다른 반대 이온과 같은 또 다른 분자의 함입을 포함할 수 있다. 반대 이온은 모 화합물의 전하를 안정화시키는 임의의 유기 또는 무기 모이어티일 수 있다. 더욱이, 약제학적으로 허용 가능한 염은 그 구조에 하나 초과의 하전된 원자를 가질 수 있다. 다수의 하전된 원자가 약제학적으로 허용 가능한 염의 일부인 경우는 다수의 반대 이온을 가질 수 있다. 따라서, 약제학적으로 허용 가능한 염은 하나 이상의 하전된 원자 및/또는 하나 이상의 반대 이온을 가질 수 있다.
본 명세서에서 사용된 바와 같은 "PEG 단위"는 반복되는 에틸렌-옥시 소단위(PEG 또는 PEG 소단위)로 구성된 유기 모이어티이고, 다분산성, 단분산성 또는 이산성(즉, 별개의 수의 에틸렌-옥시 소단위를 가짐)일 수 있다. 다분산성 PEG는 크기 및 분자량의 이종 혼합물인 반면, 단분산성 PEG는 전형적으로 이종 혼합물로부터 정제되고, 따라서 단일 사슬 길이 및 분자량을 제공한다. 바람직한 PEG 단위는 중합 공정을 통하지 않고 단계별 방식으로 합성되는 화합물인, 이산성 PEG를 포함한다. 이산성 PEG는 정의되고 명시된 사슬 길이를 갖는 단일 분자를 제공한다.
본 명세서에 제공된 PEG 단위는 하나 또는 다수의 폴리에틸렌 글리콜 사슬을 포함하고, 각각은 서로에 공유 부착된 하나 이상의 에틸렌옥시 소단위로 구성된다. 폴리에틸렌 글리콜 사슬은, 예를 들어, 선형, 분지형 또는 별 형상의 구성으로 함께 연결될 수 있다. 전형적으로, 캄프토테신 접합체 내로 도입 이전에 폴리에틸렌 글리콜 사슬 중 적어도 하나는 메틸렌 카르바메이트 단위의 카르바메이트 질소에 대한 공유 부착을 위해 친전자성 기로 치환된 알킬 모이어티로 하나의 단부에서 유도체화된다. 전형적으로, 링커 단위 또는 링커 단위 전구체의 잔여부에 대한 공유 부착에 관여하지 않는 각각의 폴리에틸렌 글리콜 사슬의 말단 에틸렌옥시 소단위는 PEG 캡핑 단위, 전형적으로 선택적으로 치환된 알킬, 예컨대, -CH3, CH2CH3 또는 CH2CH2CO2H로 변형된다. 바람직한 PEG 단위는 연속적으로 공유 부착되고 하나의 단부에서 PEG 캡핑 단위로 말단화된 2 내지 24개의 -CH2CH2O- 소단위를 갖는 단일 폴리에틸렌 글리콜 사슬을 갖는다.
달리 지시되지 않는 한, 용어 "알킬"은 그 자체로 또는 다른 용어의 일부로서 지시된 수의 탄소 원자를 갖는 치환된 또는 비치환된 직쇄형 또는 분지형, 포화 또는 불포화 탄화수소를 지칭한다(예를 들어, "-C1-C8 알킬" 또는 "-C1-C10" 알킬은 각각 1 내지 8개 또는 1 내지 10개의 탄소 원자를 갖는 알킬기를 지칭한다). 탄소 원자의 수가 지시되지 않은 경우, 알킬기는 1 내지 8개의 탄소 원자를 갖는다. 대표적인 직쇄 "-C1-C8 알킬"은 -메틸, -에틸, -n-프로필, -n-부틸, -n-펜틸, -n-헥실, -n-헵틸 및 -n-옥틸을 포함하지만 이들로 제한되지 않고; 반면에 분지형 -C3-C8 알킬은 -이소프로필, -sec-부틸, -이소부틸, -tert-부틸, -이소펜틸 및 -2-메틸부틸을 포함하지만 이들로 제한되지 않고; 불포화 -C2-C8 알킬은 -비닐, -알릴, -1-부테닐, -2-부테닐, -이소부틸레닐, -1-펜테닐, -2-펜테닐, -3-메틸-1-부테닐, -2-메틸-2-부테닐, -2,3 디메틸-2-부테닐, -1-헥실, 2-헥실, -3-헥실, -아세틸레닐, -프로피닐, -1 부티닐, -2 부티닐, -1 펜티닐, -2 펜티닐 및 -3 메틸 1 부티닐을 포함하지만 이들로 제한되지 않는다. 때로는 알킬기는 비치환된다. 알킬기는 하나 이상의 기로 치환될 수 있다. 다른 양태에서, 알킬기는 포화될 것이다.
달리 지시되지 않는 한, 용어 "알킬렌"은 그 자체로 또는 또 다른 용어의 일부로서 언급된 수의 탄소 원자, 전형적으로 1 내지 10개의 탄소 원자의 치환 또는 비치환된 포화된 분지형 또는 직쇄 또는 환식 탄화수소 라디칼을 지칭하고, 모 알칸의 동일하거나 2개의 상이한 탄소 원자로부터 2개의 수소 원자를 제거함으로써 유도된 2개의 1가 라디칼 중심을 갖는다. 전형적인 알킬렌 라디칼은 메틸렌(-CH2-), 1,2-에틸렌(-CH2CH2-), 1,3-프로필렌(-CH2CH2CH2-), 1,4-부틸렌(-CH2CH2CH2CH2-) 등을 포함하지만 이들로 제한되지 않는다. 바람직한 양태에서, 알킬렌은 분지쇄형 또는 직쇄형 탄화수소이다(즉, 이것은 환식 탄화수소가 아니다).
달리 지시되지 않는 한, 용어 "아릴"은 그 자체로 또는 또 다른 용어의 일부로서, 모 방향족 고리계의 단일 탄소 원자로부터 1개의 수소 원자를 제거함으로써 유도된, 언급된 수의 탄소 원자, 전형적으로 6 내지 20개의 탄소 원자의 치환된 또는 비치환된 1가 탄소환식 방향족 탄화수소 라디칼을 의미한다. 일부 아릴기는 예시적인 구조에서 "Ar"로 표시된다. 전형적인 아릴기는 벤젠, 치환된 벤젠, 나프탈렌, 안트라센, 비페닐 등으로부터 유도된 라디칼을 포함하지만 이들로 제한되지 않는다. 예시적인 아릴기는 페닐기이다.
달리 지시되지 않는 한, 용어 "아릴렌"은 그 자체로 또는 또 다른 용어의 일부로서 2개의 공유 결합(즉, 이것은 2가임)을 갖고, 예시적인 기로 페닐로서 다음 구조에서 나타난 바와 같이, 오르토, 메타 또는 파라 배향으로 존재할 수 있는 상기에 정의된 바와 같은 아릴기이다:
Figure pct00028
,
Figure pct00029
,
Figure pct00030
.
달리 지시되지 않는 한, 용어 "C3-C8 헤테로사이클"은 그 자체로 또는 또 다른 용어의 일부로서 3 내지 8개의 탄소 원자(또한 고리 구성원으로 지칭됨) 및 N, O, P 또는 S로부터 독립적으로 선택되고 모 고리계의 고리 원자로부터 하나의 수소 원자를 제거함으로써 유도된 1 내지 4개의 헤테로원자 고리 구성원을 갖는 1가 치환 또는 비치환 방향족 또는 비-방향족 단환식 또는 이환식 고리계를 지칭한다. 헤테로사이클에서 하나 이상의 N, C 또는 S 원자는 산화될 수 있다. 헤테로원자를 포함하는 고리는 방향족 또는 비방향족일 수 있다. 모든 고리 원자가 방향족성에 관여되는 헤테로사이클을 헤테로아릴로 지칭하고, 달리는 헤테로카르보사이클이라고 지칭된다. 달리 언급하지 않는 한, 헤테로사이클은 안정적인 구조를 생성하는 임의의 헤테로원자 또는 탄소 원자에서 이의 펜던트기에 부착된다. 이와 같이 헤테로아릴은, C-연결된 헤테로아릴로 지칭되는 이의 방향족 고리계의 방향족 탄소를 통해 또는 이의 방향족 고리계에서 이중-결합되지 않은 N 원자(즉, =N-이 아님)를 통해 결합될 수 있으며, 이는 N-연결된 헤테로아릴로 지칭된다. 따라서, 질소-함유 헤테로사이클은 C-연결 또는 N-연결될 수 있고, 피롤 모이어티, 예컨대, 피롤-1-일(N-연결) 및 피롤-3-일(C-연결) 및 이미다졸 모이어티, 예컨대, 이미다졸-1-일 및 이미다졸-3-일(둘 다 N-연결됨) 및 이미다졸-2-일, 이미다졸-4-일 및 이미다졸-5-일 모이어티(이들 모두는 C-연결됨)를 포함할 수 있다.
달리 지시되지 않는 한, "C3-C8 헤테로아릴"은 방향족 C3-C8 헤테로사이클이며, 여기서 아래 첨자는 헤테로사이클의 환식 고리계의 총 탄소 수 또는 헤테로아릴의 방향족 고리계의 총 방향족 탄소 수를 나타내고 고리계의 크기 또는 고리 융합의 존재 또는 부재와 관련이 없다. C3-C8 헤테로사이클의 대표적인 예는 피롤리디닐, 아제티디닐, 피페리디닐, 모르폴리닐, 테트라히드로푸라닐, 테트라히드로피라닐, 벤조푸라닐, 벤조티오펜, 인돌릴, 벤조 피라졸릴, 피롤릴, 티오페닐(티오펜), 푸라닐, 티아졸릴, 이미다졸릴, 피라졸릴, 피리미디닐, 피리디닐, 피라지닐, 피리다지닐, 이소티아졸릴 및 이속사졸릴을 포함하지만 이들로 제한되지는 않는다. 명시적으로 주어진 경우, 헤테로사이클 또는 헤테로아릴의 고리계의 크기는 고리에서의 총 원자 수로 표시된다. 예를 들어, 5 또는 6-원 헤테로아릴로의 지정은 헤테로아릴의 헤테로방향족 고리계에서 총 수 또는 방향족 원자(즉, 5 또는 6)를 나타내지만, 그 고리계의 방향족 헤테로원자 또는 방향족 탄소의 수를 의미하지는 않는다. 융합된 헤테로아릴은 그 자체로 문맥에 의해 명시적으로 언급되거나 암시되고, 전형적으로 융합된 헤테로방향족 고리계를 구성하기 위해 함께 융합되는 각각의 방향족 고리에서의 방향족 원자의 수에 의해 표시된다. 예를 들어, 5,6-원 헤테로아릴은 고리 중 하나 또는 둘 다가 방향족 헤테로원자(들)를 갖거나 헤테로원자가 2개의 고리 사이에 공유되는 방향족 6원 고리에 융합된 방향족 5원 고리이다.
헤테로사이클이 비-방향족을 유지하고 융합된 고리계의 비-방향족 부분과의 부착을 통해 더 큰 구조의 일부가 되도록 아릴 또는 헤테로아릴에 융합된 헤테로사이클은 헤테로사이클이 아릴 또는 헤테로아릴과의 고리 융합에 의해 치환된 선택적으로 치환된 헤테로사이클의 예이다. 마찬가지로, 융합 고리계의 방향족 부분과의 부착을 통한 더 큰 구조의 일부인 헤테로사이클 또는 카르보사이클에 융합된 아릴 또는 헤테로아릴은 아릴 또는 헤테로사이클이 헤테로사이클 또는 카르보사이클로 고리 융합에 의해 치환되는 선택적으로 치환된 아릴 또는 헤테로사이클의 예이다.
달리 지시되지 않는 한, "C3-C8 헤테로사이클로"는 그 자체로 또는 다른 용어의 일부로서 헤테로사이클의 수소 원자 중 하나가 결합으로 대체된(즉, 이것은 2가임) 상기에 정의된 C3-C8 헤테로사이클릭을 지칭한다. 달리 지시되지 않는 한, "C3-C8 헤테로아릴렌"은 그 자체로 또는 다른 용어의 일부로서 헤테로사이클기의 수소 원자 중 하나가 결합으로 대체된(즉, 이것은 2가임) 상기 정의된 C3-C8 헤테로아릴기를 지칭한다.
달리 지시되지 않는 한, 용어 "C3-C8 카르보사이클"은 그 자체로 또는 다른 용어의 일부로서 모 고리계의 고리 원자로부터 하나의 수소 원자의 제거에 의해 유도된 3-, 4-, 5-, 6-, 7- 또는 8-원 1가, 치환 또는 비치환, 포화 또는 불포화 비-방향족 단환식 또는 이환식 카르보사이클릭 고리이다. 대표적인 -C3-C8 카르보사이클은 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로펜타디에닐, 사이클로헥실, 사이클로헥세닐, 1,3-사이클로헥사디에닐, 1,4-사이클로헥사디에닐, 사이클로헵틸, 1,3-사이클로헵타디에닐, 1,3,5-사이클로헵타트리에닐, 사이클로옥틸 및 사이클로옥타디에닐을 포함하지만 이들로 제한되지 않는다.
달리 지시되지 않는 한, "C3-C8 카르보사이클로"는 그 자체로 또는 다른 용어의 일부로서 카르보사이클기의 수소 원 자 중 다른 하나가 결합으로 대체된(즉, 이것은 2가임) 상기 정의된 C3-C8 카르보사이클기를 지칭한다.
달리 지시되지 않는 한, 용어 "헤테로알킬"은 그 자체로 또는 다른 용어와 조합되어, 달리 언급되지 않는 한, 완전히 포화되거나 1 내지 3의 불포화도를 함유하고, 언급된 수의 탄소 원자 및 O, N, Si 및 S로 이루어진 군에서 선택된 1 내지 10개, 바람직하게는 1 내지 3개의 헤테로원자로 이루어지며, 여기서 질소 및 황 원자는 선택적으로 산화될 수 있고 질소 헤테로원자는 선택적으로 4차화될 수 있는, 안정적인 직쇄형 또는 분지쇄형 탄화수소 또는 이들의 조합을 의미한다. 헤테로원자(들) O, N 및 S는 헤테로알킬기의 임의의 내부 위치 또는 알킬기가 분자의 잔여부에 부착되는 위치에 위치될 수 있다. 헤테로원자 Si는 알킬기가 분자의 잔여부에 부착되는 위치를 포함하여 헤테로알킬기의 임의의 위치에 위치될 수 있다. 예는 -CH2-CH2-O-CH3, -CH2-CH2-NH-CH3, -CH2-CH2-N(CH3)-CH3, -CH2-S-CH2-CH3, -CH2-CH2-S(O)-CH3, -NH-CH2-CH2-NH-C(O)-CH2-CH3, -CH2-CH2-S(O)2-CH3, -CH=CH-O-CH3, -Si(CH3)3, -CH2-CH=N-O-CH3 및 -CH=CH-N(CH3)-CH3를 포함한다. 예를 들어, -CH2-NH-OCH3 및 -CH2-O-Si(CH3)3와 같이, 최대 2개의 헤테로원자가 연속적일 수 있다. 전형적으로, C1 내지 C4 헤테로알킬 또는 헤테로알킬렌은 1 내지 4개의 탄소 원자 및 1 또는 2개의 헤테로원자를 갖고, C1 내지 C3 헤테로알킬 또는 헤테로알킬렌은 1 내지 3개의 탄소 원자 및 1 또는 2개의 헤테로원자를 갖는다. 일부 양태에서, 헤테로알킬 또는 헤테로알킬렌은 포화된다.
달리 지시되지 않는 한, 용어 "헤테로알킬렌"은 그 자체로 또는 다른 용어와 조합하여 -CH2-CH2-S-CH2-CH2- 및 -CH2-S-CH2-CH2-NH-CH2-로 예시되는 바와 같이 헤테로알킬(상기 논의된 바와 같음)로부터 유도된 2가기를 의미한다. 헤테로알킬렌기의 경우, 헤테로원자는 또한 사슬 말단 중 하나 또는 둘 모두를 차지할 수 있다. 또 더욱이, 알킬렌 및 헤테로알킬렌 연결기의 경우, 연결기의 배향이 암시되지 않는다.
달리 지시되지 않는 한, "아미노알킬"은 그 자체로 또는 다른 용어와 조합하여 본 명세서에 정의된 바와 같은 알킬 모이어티가 아미노, 알킬아미노, 디알킬아미노 또는 사이클로알킬아미노기로 치환된 헤테로알킬을 의미한다. 예시적인 비제한적인 아미노알킬은-CH2NH2, -CH2CH2NH2, -CH2CH2NHCH3 및 -CH2CH2N(CH3)2이고, (R)- 또는 (S)- 배위인, -CH(CH3)NH2 및 -C(CH3)CH2NH2와 같은 분지형 종을 추가로 포함한다. 대안적으로, 아미노알킬은 라디칼 탄소 이외의 sp3 탄소가 아미노 또는 알킬아미노 모이어티로 대체된 본 명세서에 정의된 바와 같은 알킬 모이어티, 기 또는 치환기이며, 여기서 이의 sp3 질소는 적어도 하나의 sp3 탄소가 남아 있다면 알킬의 sp3 탄소를 대체한다. 아미노알킬 모이어티를 더 큰 구조 또는 다른 모이어티에 대한 치환기로서 언급할 때, 아미노알킬은 아미노알킬의 알킬 모이어티의 탄소 라디칼을 통해 구조 또는 모이어티에 공유 부착된다.
달리 지시되지 않는 한, "알킬아미노" 및 "사이클로알킬아미노"는 그 자체로 또는 다른 용어와 조합하여 본 명세서에 기재된 바와 같은 알킬 또는 사이클로알킬 라디칼을 의미하며, 여기서 알킬 또는 사이클로알킬 라디칼의 라디칼 탄소는 적어도 하나의 sp3 탄소가 남아 있다면, 질소 라디칼로 대체된다. 알킬아미노가 이의 질소에서 또 다른 알킬 모이어티로 치환된 경우에, 얻어진 치환된 라디칼은 때때로 디알킬아미노 모이어티, 기 또는 치환기로 지칭되며, 여기서 질소를 치환하는 알킬 모이어티가 독립적으로 선택된다. 예시적이고 비제한적인 아미노, 알킬 아미노 및 디알킬아미노 치환기는 -N(R')2의 구조를 갖는 것을 포함하며, 여기서 이들 예에서 R'는 수소 또는 C1-6 알킬, 전형적으로 수소 또는 메틸로부터 독립적으로 선택되는 반면, 헤테로사이클로알킬에 포함된 사이클로 알킬 아민의 경우 이들이 부착된 질소와 함께 두 R'는 헤테로사이클릭 고리를 정의한다. 두 R'가 수소 또는 알킬인 경우, 모이어티는 때때로 각각 1차 아미노기 및 3차 아민기라고 기재된다. 하나의 R'가 수소이고 다른 것이 알킬인 경우, 모이어티는 때때로 2차 아미노기라고 기재된다. 1차 및 2차 알킬아미노 모이어티는 카르보닐-함유 친전자성 중심에 대한 친핵체로서 더 반응성인 반면, 3차 아민은 더 염기성이다.
"치환된 알킬" 및 "치환된 아릴"은 각각 하나 이상의 수소 원자, 전형적으로 하나가 각각 독립적으로 치환기로 대체된 알킬 및 아릴을 의미한다. 전형적인 치환기는 -X, -R', -OH, -OR', -SR', , -N(R')2, -N(R')3, =NR', -CX3, -CN, -NO2, -NR'C(=O)R', -C(=O)R', -C(=O)N(R')2, -S(=O)2R', -S(=O)2NR', -S(=O)R', -OP(=O)(OR')2, -P(=O)(OR')2, -PO3 =, PO3H2, -C(=O)R', -C(=S)R', -CO2R', -CO2 -, -C(=S)OR', -C(=O)SR', -C(=S)SR', -C(=O)N(R')2, - C(=S)N(R')2 및 -C(=NR)N(R')2를 포함하지만 이들로 제한되지 않으며, 여기서 각각의 X는 할로겐: -F, -Cl, -Br 및 -I로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되고; 각각의 R'는 -H, -C1-C20 알킬, -C6-C20 아릴, -C3-C14 헤테로사이클, 보호기 및 전구 약물 모이어티로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다.
보다 전형적으로 치환기는 -X, -R', -OH, -OR', -SR', -N(R')2, -N(R')3, =NR', -NR'C(=O)R', -C(=O)R', -C(=O)N(R')2, -S(=O)2R', -S(=O)2NR', -S(=O)R', -C(=O)R', -C(=S)R', -C(=O)N(R')2, -C(=S)N(R')2 및 -C(=NR)N(R')2로 이루어진 군으로부터 선택되고, 각각의 X는 -F 및 -Cl로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되거나 -X, -R', -OH, -OR', -N(R')2, -N(R')3, -NR'C(=O)R', -C(=O)N(R')2, -S(=O)2R', -S(=O)2NR', -S(=O)R', -C(=O)R', -C(=O)N(R')2, -C(=NR)N(R')2, 보호기 및 전구약물 모이어티로 이루어진 군으로부터 선택되고, 각각의 X는 -F이고; 각각의 R'는 수소, -C1-C20 알킬, -C6-C20 아릴, -C3-C14 헤테로사이클, 보호기 및 전구약물 모이어티로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다. 일부 양태에서, 알킬 치환기는 -N(R')2, -N(R')3 및 -C(=NR)N(R')2로 이루어진 군으로부터 선택되고, 여기서 R'는 수소 및 -C1-C20 알킬로 이루어진 군으로부터 선택된다. 다른 양태에서, 알킬은 PEG 단위를 정의하기 위해 일련의 에틸렌옥시 모이어티로 치환된다. 알킬렌, 카르보사이클, 카르보사이클로, 아릴렌, 헤테로알킬, 헤테로알킬렌, 헤테로사이클, 헤테로사이클로, 헤테로아릴 및 헤테로아릴렌기는 또한 유사하게 치환될 수 있다.
본 명세서 사용된 바와 같은 "보호기"는 원치않는 반응에 참여하는 것을 방지하거나 그것이 연결된 원자 또는 작용기의 능력을 감소시키는 모이어티를 의미한다. 원자 또는 작용기에 대한 전형적인 보호기는 문헌[Greene (1999), "Protective Groups In Organic Synthesis, 3rd Ed.", Wiley Interscience]에 제공되어 있다. 친전자성 화합물과의 원치않는 반응을 최소화하거나 피하기 위해 일부 경우에 황 및 질소와 같은 헤테로원자에 대한 보호기가 사용된다. 다른 예에서, 보호기는 보호되지 않은 헤테로원자의 친핵성 및/또는 염기성을 감소시키거나 제거하기 위해 사용된다. 보호된 산소의 비제한적인 예는 -ORPR로 제공되며, 여기서 RPR은 히드록실에 대한 보호기이고, 여기서 히드록실은 전형적으로 에스테르(예를 들어, 아세테이트, 프로피오네이트 또는 벤조에이트)로 보호된다. 히드록실에 대한 다른 보호기는 유기금속성 시약 또는 다른 고 염기성 시약의 친핵성을 방해하는 것을 방지하며, 여기서 히드록실은 전형적으로 알킬 또는 헤테로사이클로알킬 에테르(예를 들어, 메틸 또는 테트라히드로피라닐 에테르), 알콕시메틸 에테르(예를 들어, 메톡시메틸 또는 에톡시메틸 에테르), 선택적으로 치환된 아릴 에테르 및 실릴 에테르(예를 들어, 트리메틸실릴(TMS), 트리에틸실릴(TES), tert-부틸디페닐실릴(TBDPS), tert-부틸디메틸실릴(TBS/TBDMS), 트리이소프로필실(TIPS) 및 [2-(트리메틸실릴)에톡시]-메틸실릴(SEM))를 포함하는 에테르로 보호된다. 질소 보호기는NHRPR 또는 -N(RPR)2-에서와 같은 1차 또는 2차 아민에 대한 것을 포함하며, 여기서 RPR 중 적어도 하나는 질소 원자 보호기이거나 두 RPR은 함께 보호기를 포함한다.
보호기는 분자에서의 다른 곳에서 원하는 화학적 변형을 효과적으로 하기 위해 필요한 반응 조건 하에서 그리고 원하는 경우 새로 형성된 분자의 정제 동안 원하지 않는 부반응 또는 보호기의 조기 손실을 예방하거나 피할 수 있는 경우에 적합하고, 새로 형성된 분자의 구조 또는 입체화학적 무결성에 악영향을 미치지 않는 조건 하에서 제거될 수 있다. 제한이 아닌 예로서, 적절한 보호기는 작용기를 보호하기 위해 이전에 기술된 것을 포함할 수 있다. 적합한 보호기는 때때로 펩티드 커플링 반응에 사용되는 보호기이다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이 "전자 끄는 기(Electron withdraw group; EWG)"는 어느 쪽이 더 우세하든, 어느 하나의 유도성 및/또는 공명을 통해 결합된 원자로부터 전자 밀도를 멀어지게 하고(즉, 작용기 또는 원자는 유도적으로 전자를 끌어당길 수 있지만 전반적으로 공명을 통해 전자를 제공할 수 있음), 음이온 또는 전자-풍부 모이어티를 안정화하는 경향이 있는 작용기 또는 전기음성 원자를 의미한다. 전자 끄는 효과는 전형적으로 전자 끄는 기(EWG)에 의해 전자가 결핍된 결합된 원자에 부착된 다른 원자에, 비록 감쇠된 형태이지만, 유도적으로 전달되어, 보다 먼 반응성 중심의 친전자성에 영향을 미친다. 예시적인 전자 끄는 기는 -C(=O), -CN, -NO2, -CX3, -X, -C(=O)OR', -C(=O)N(R')2, -C(=O)R', -C(=O)X, -S(=O)2R', -S(=O)2OR', -S(=O)2NHR', -S(=O)2N(R')2, -P(=O)(OR')2, -P(=O)(CH3)NHR', -NO, -N(R')3 +를 포함하지만 이들로 제한되지 않고, 여기서 X는 -F, -Br, -Cl, 또는 -I이고, R'는 일부 양태에서 각각의 경우에 수소 및 C1-6 알킬, 및 아실옥시와 같은 본 명세서에 기술된 바와 같은 특정 O-연결된 모이어티로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다.
예시적인 EWG는 또한 치환 및 어떤 헤테로아릴기(예를 들어, 피리딘)에 따라 아릴기(예를 들어, 페닐)를 포함할 수 있다. 따라서, 용어 "전자 끄는 기"는 또한 전자 끄는 기로 추가로 치환된 아릴 또는 헤테로아릴을 포함한다. 전형적으로, 아릴 또는 헤테로아릴 상의 전자 끄는 기는 -C(=O), -CN, -NO2, -CX3 및 -X이고, 여기서 독립적으로 선택된 X는 할로겐, 전형적으로 -F 또는 -Cl이다. 이들의 치환기에 따라, 알킬 모이어티는 또한 전자 끄는 기일 수 있다.
"이탈기 능력"은 캄프토테신 접합체에서 캄프토테신에 상응하는 알코올-, 티올-, 아민- 또는 아미드-함유 화합물의, 접합체 내의 자기-희생적 사건(self-immolative event)의 활성화에 이어 유리 약물로서 접합체로부터 방출되는 능력과 관련된다. 이러한 방출은, 캄프토테신이 부착된 메틸렌 카르바메이트 단위의 이점 없이(즉, 캄프토테신이 자가-희생적 모이어티에 직접 부착되고 개재하는 메틸렌 카르바메이트 단위를 갖지 않는 경우) 가변성일 수 있다. 양호한 이탈기는 통상적으로 약염기이며, 이러한 접합체로부터 배출되는 작용기가 보다 산성일수록 접합체 염기는 더 약해진다. 따라서 캄프토테신의 알코올-, 티올-, 아민- 또는 아미드-함유 유리 약물의 이탈기 능력은 메틸렌 카르바메이트 단위(즉, 캄프토테신이 자기-희생적 모이어티에 직접적으로 부착된 것)가 사용되지 않는 경우에 접합체로부터 방출되는 약물의 작용기의 pKa에 관련될 것이다. 따라서, 그 작용기에 대한 더 낮은 pKa는 그 이탈기 능력을 증가시킬 것이다. 다른 인자가 메틸렌 카르바메이트 단위의 이점을 갖지 않는 접합체로부터 유리 약물의 방출에 기여할 수 있지만, 일반적으로, 더 낮은 pKa 값을 갖는 작용기를 갖는 약물은 더 높은 pKa 값을 갖는 작용기를 통해 부착된 약물보다 전형적으로 더 양호한 이탈기일 것이다. 또 다른 고려사항은 pKa 값이 너무 낮은 작용기는 자발적 가수분해를 통한 캄프토테신의 조기 손실로 인해 허용되지 않는 활성 프로파일을 초래할 수 있다는 것이다. 메틸렌 카르바메이트 단위를 이용하는 접합체의 경우, 캄프토테신의 허용할 수 없는 손실을 겪지 않으면서 유리 약물의 효율적인 방출을 허용하는 pKa 값을 갖는 공통 작용기(즉, 카르밤산)가 자가-희생시에 생성된다.
본 명세서에서 사용된 바와 같은 "석신이미드 모이어티"는 석신이미드 고리계로 구성된 유기 모이어티를 지칭하며, 이것은 전형적으로 그 고리계의 이미드 질소에 결합된 알킬렌-함유 모이어티로 추가로 구성되는 하나의 유형의 스트레처 단위(Z)에 존재한다. 석신이미드 모이어티는 전형적으로 스트레처 단위 전구체(Z')의 말레이미드 고리계에 대한 리간드 단위의 설프히드릴기의 마이클 첨가로부터 생성된다. 따라서 석신이미드 모이어티는 티오-치환된 석신이미드 고리계로 구성되고, 캄프토테신 접합체에 존재할 때 그 이미드 질소는 캄프토테신 접합체의 링커 단위의 나머지로 치환되고, Z'의 말레이미드 고리계 상에 존재하는 치환기(들)로 선택적으로 치환된다.
본 명세서에서 사용된 바와 같은 "산-아미드 모이어티"는 가수분해에 의해 이의 카르보닐-질소 결합 중 하나가 파괴되는 석신이미드 모이어티의 티오-치환 석신이미드 고리계로부터 생성되는 아미드 치환기를 갖는 석신산을 지칭한다. 석신산-아미드 모이어티를 초래하는 가수분해는 항체-티오 치환기의 제거를 통해 결합되는 리간드 단위의 조기 손실을 겪을 가능성이 적은 링커 단위를 제공한다. 티오-치환된 석신이미드 모이어티의 석신이미드 고리계의 가수분해는, 스트레처 단위 전구체의 말레이미드 고리계에 존재하는 임의의 치환기 및 표적 리간드에 의해 도입된 티오 치환기에 적어도 부분적으로 기인할 수 있는 석신이미드 고리계의 두 카르보닐 탄소의 반응성 차이로 인해서 산-아미드 모이어티의 위치화학 이성질체를 제공한다고 예상된다.
본 명세서에서 사용된 바와 같은 용어 "전구약물"은 화학적 또는 생물학적 과정(즉, 화학적 반응 또는 효소적 생체변환(biotransformation))을 통해 체내에서 보다 생물학적으로 활성인 화합물로 변형되는 덜 생물학적으로 활성이거나 비활성인 화합물을 지칭한다. 전형적으로, 생물학적으로 활성인 화합물은 화합물을 전구약물 모이어티로 화학적으로 변형시킴으로써 생물학적으로 덜 활성이 된다(즉, 전구약물로 전환됨). 일부 양태에서 전구약물은 세포 외부, 예를 들어 소화액에서, 또는 신체의 순환계, 예를 들어, 혈액에서 생체활성화되는 유형 II 전구약물이다. 예시적인 전구약물은 에스테르 및 β-D-글루코피라노시드이다.
많은 경우에, 본 명세서에 기술된 접합체, 링커 및 성분의 조립은 반응성기(reactive group)를 지칭할 것이다. "반응성기" 또는 RG는 링커 단위 또는 링커 단위 전구체(예를 들어, A) 또는 캄프토테신 D의 성분과 결합을 형성할 수 있는 반응 부위(RS)를 함유하는 기이다. RS는 반응성기(RG) 내의 반응성 부위이다. 반응성기는 디설파이드 결합 또는 티오에테르 결합을 형성하는 설프히드릴기, 히드라존 결합을 형성하는 알데히드, 케톤 또는 히드라진기, 펩티드 결합을 형성하는 카르복실 또는 아미노기, 에스테르 결합을 형성하는 카르복시 또는 히드록시기, 설폰아미드 결합을 형성하는 설폰산, 카르바메이트 결합을 형성하는 알코올, 및 설폰아미드 결합 또는 카르바메이트 결합을 형성하는 아민을 포함한다. 다음 표는 반응성 부위의 반응 후에 형성될 수 있는 반응성기, 반응성 부위 및 예시적인 작용기를 예시한다. 표는 제한적이지 않다. 당업자는 표에서 언급된 R' 및 R'' 부분이 효과적으로 RG를 예시적인 작용기 중 하나로 전환할 때 제공되는 결합 형성과 양립할 수 있는 임의의 유기 모이어티(예를 들어, 알킬기, 아릴기, 헤테로아릴기 또는 치환된 알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기)임을 인지할 것이다. 본 발명의 실시형태에 적용되는 바와 같이, R'는 경우에 따라서 자가-안정화 링커 또는 선택적인 2차 링커의 하나 이상의 성분을 나타낼 수 있고, R''는 경우에 따라서 선택적인 2차 링커, 캄프토테신, 안정화 단위 또는 검출 단위 중 하나 이상의 성분을 나타낼 수 있다는 것이 또한 인지될 것이다.
Figure pct00031
동위원소-표지된 화합물은 또한 본 개시내용의 범위 내에 있다. 본 명세서에서 사용된 바와 같이, "동위원소-표지된 화합물" 또는 "동위원소 유도체"는, 하나 이상의 원자가 일반적으로 자연에서 발견되는 원자 질량 또는 질량수와 상이한 원자 질량 또는 질량수를 갖는 원자에 의해 대체된 각각 본 명세서에 기술된 바와 같은 이들의 약제학적 염 및 전구약물을 포함하는 현재 개시된 화합물을 지칭한다. 본 명세서에 개시된 화합물에 혼입될 수 있는 동위원소의 예는 각각 수소, 탄소, 질소, 산소, 인, 불소 및 염소의 동위원소, 예컨대, 2H, 3H, 13C, 14C, 15N, 18O, 17O, 31P, 32P, 35S, 18F 및 36Cl을 포함한다.
현재 개시된 화합물을 동위원소-표지함으로써, 화합물은 약물 및/또는 기질 조직 분포 검정에 유용할 수 있다. 삼중수소화(3H) 및 탄소-14(14C) 표지된 화합물이 제조의 용이성 및 검출 가능성 때문에 특히 바람직하다. 또한, 중수소(2H)와 같은 더 무거운 동위원소로의 치환은 더 큰 대사 안정성으로 인한 특정 치료적 이점, 예를 들어, 증가된 생체내 반감기 또는 감소된 투여량 요구를 제공할 수 있고, 따라서 일부 상황에서 바람직할 수 있다. 이들의 약제학적 염, 에스테르 및 전구약물을 포함하여 본 명세서에 개시된 동위원소 표지된 화합물은 당업계에 공지된 임의의 수단에 의해 제조될 수 있다. 정상적으로 풍부한 12C를 13C로 대체하여 이익을 얻을 수도 있다. (국제특허 WO 2007/005643, WO 2007/005644, WO 2007/016361 및 WO 2007/016431 참조)
예를 들어, 중수소(2H)는 주요 동역학적 동위원소 효과의 방식에 의해 화합물의 산화적 대사를 조절하기 위한 목적으로 본 명세서에 개시된 화합물에 혼입될 수 있다. 1차 동역학적 동위원소 효과는 동위원소 핵의 교환으로 인한 화학 반응에 대한 속도의 변화이며, 이는 그 다음 이 동위원소 교환 후 공유결합 형성에 필요한 기저 상태 에너지의 변화에 의해 야기된다. 더 무거운 동위원소의 교환은 일반적으로 화학 결합에 대한 기저 상태 에너지를 낮추고 따라서 속도-제한 결합 파괴에서의 속도의 감소를 야기한다. 결합 파괴가 다중-생성물 반응의 좌표를 따라 새들-포인트 영역 또는 그 부근에서 발생하면, 생성물 분포 비율이 실질적으로 변경될 수 있다. 설명을 위해, 중수소가 교환 가능하지 않은 위치에서 탄소 원자에 결합된 경우, kM/kD = 2 내지 7의 속도 차이가 전형적이다. 이 속도 차이가 산화에 민감한 본 명세서에 개시된 화합물에 성공적으로 적용된다면, 이 화합물의 생체내 프로필은 현저하게 변형되어 개선된 약동학적 특성을 초래할 수 있다.
치료제를 발견하고 개발할 때, 당업자는 바람직한 시험관내 특성을 유지하면서 약동학적 매개변수를 최적화할 수 있다. 불량한 약동학적 프로파일을 갖는 많은 화합물이 산화적 대사에 민감할 수 있다는 것을 가정하는 것이 합리적이다. 현재 이용 가능한 시험관내 간 미세염색체 검정은 이러한 유형의 산화적 대사의 과정에 대한 귀중한 정보를 제공하며, 이는 그 다음 이러한 산화적 대사에 대한 내성을 통해 개선된 안정성으로 본 명세서에 개시된 것의 중수소화 화합물의 합리적인 설계를 가능하게 한다. 본 명세서에 개시된 화합물의 약동학적 프로파일에서 현저한 개선이 얻어지고, 생체내 반감기(t/2), 최대 치료 효과에서의 농도(Cmax), 용량 반응 곡선 하 면적(AUC) 및 F에서의 증가와 관련하여; 그리고 감소된 제거, 용량 및 물질 비용과 관련하여 정량적으로 표현될 수 있다.
다음은 상기를 설명하는 의도이다: 예를 들어, 벤질의 수소 원자 및 질소 원자에 결합된 수소 원자와 같이, 산화적 대사를 위한 다수의 잠재적 공격 부위를 갖는 화합물은 수소 원자의 다양한 조합이 중수소 원자로 대체된 일련의 유사체로 제조되어, 이들 수소 원자의 일부, 대부분 또는 전부가 중수소 원자로 대체되었다. 반감기 결정은 산화적 대사에 대한 내성에서의 개선이 개선된 정도의 정도를 유리하고 정확하게 측정할 수 있게 한다. 이러한 방식으로, 모 화합물의 반감기가 이러한 유형의 중수소-수소 교환의 결과로 최대 100%까지 연장될 수 있다고 결정된다.
본 명세서에 개시된 화합물에서 중수소-수소 교환은 또한 바람직하지 않는 독성 대사산물을 감소 또는 제거하기 위해 출발 화합물의 대사산물 스펙트럼의 유리한 변형을 달성하는 데 사용될 수 있다. 예를 들어, 독성 대사산물이 산화적 탄소-수소(C-H) 결합 절단을 통해 발생하는 경우, 특정 산화가 속도-결정 단계가 아닌 경우라도 중수소화 유사체가 원치 않는 대사산물의 생성을 크게 감소시키거나 제거할 것이다는 것이 합리적으로 가정될 수 있다. 중수소-수소 교환에 관한 최신 기술에 대한 추가 정보는 예를 들어 문헌[Hanzlik et al., J. Org. Chem. 55, 3992-3997, 1990], 문헌[Reider et al., J. Org. Chem. 52, 3326-3334, 1987], 문헌[Foster, Adv. Drug Res. 14, 1-40, 1985], 문헌[Gillette et al, Biochemistry 33(10) 2927-2937, 1994] 및 문헌[Jarman et al. Carcinogenesis 16(4), 683-688, 1993]에서 찾아볼 수 있다.
본 발명에 의해 구상되는 치환기 및 변수의 조합은 단지 안정한 화합물의 형성을 초래하는 것이다. 본 명세서에서 사용된 바와 같은 용어 "안정적인"은 제조를 허용하기에 충분한 안정성을 보유하고 본 명세서에 상세히 설명된 목적(예를 들어, 대상체에 대한 치료적 또는 예방적 투여)에 유용하기에 충분한 기간 동안 화합물의 완전성을 유지하는 화합물을 지칭한다.
본 발명의 화합물은, 이들의 제조에 이어서, 바람직하게는 분리 및 정제되어 95 중량% 이상의 양을 함유하는 ("실질적으로 순수한") 조성물을 수득하고, 그 다음 본 명세서에서 기술된 바와 같이 사용되거나 제형화된다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 화합물은 99% 초과만큼 순수하다.
본 발명의 다수의 실시형태가 하기에 기술되어 있으며, 이는 어떤 식으로든 본 발명을 제한하는 것을 의미하지 않고, 접합체를 구성하는 성분에 대한 보다 상세한 논의가 이어진다. 당업자는 확인된 각각의 접합체 및 이들의 임의의 선택된 실시형태의 각각이 각 성분 및 링커의 전체 범위를 포함하는 것을 의미한다는 것을 이해할 것이다.
캄프토테신 접합체
일 양태에서, 본 명세서에는 화학식 (I)을 갖는 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염이 제공되고:
Figure pct00032
(I)
상기 식에서,
L은 리간드 단위이고;
Z는 스트레처 단위이고;
A는 결합 또는 연결기 단위이고;
S*는 결합 또는 분배제이고;
AA1은 아미노산이고;
AA2는 아미노산이고;
B는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp, D-Ala, Aib 및 pAbz로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산이고;
RF는 H 또는 C1-C6 알킬이고;
p는 1 내지 16이다.
이러한 실시형태의 일부 양태에서, p는 1 내지 16이다. 이러한 실시형태의 일부 양태에서, p는 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10이다. 일부 양태에서, p는 1 내지 16이거나, 2 내지 8이거나, 2이거나, 4이거나, 8이다. 이러한 실시형태의 일부 양태에서, p는 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10이다. 일부 양태에서, p는 2, 4 또는 8이다. 일부 양태에서, p는 8이다.
실시형태의 하나의 군에서, RF는 H이다.
실시형태의 하나의 군에서, RF는 C1-C6 알킬이다. 일부 실시형태에서, RF는 C1-C3 알킬, 예컨대, 메틸, 에틸, n-프로필 또는 이소프로필이다. 일부 실시형태에서, RF는 -CH3이다.
일부 실시형태에서, 캄프토테신 접합체는 화학식 (Ib):
Figure pct00033
(Ib)
또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 갖고, 상기 식에서,
L은 리간드 단위이고;
AA1은 아미노산이고;
AA2는 아미노산이고;
B는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp, D-Ala, Aib 및 pAbz로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산이고;
RF는 수소 또는 C1-C6 알킬이고;
b는 2 내지 20의 정수이고;
y는 1 내지 8 또는 1 내지 4의 정수이거나; 또는 1 또는 4이고;
p는 1 내지 16이다.
이러한 실시형태의 일부 양태에서, y는 1 내지 8 또는 1 내지 4의 정수이거나; 1 또는 4이다. 이러한 실시형태의 일부 양태에서, y는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8이다.
일부 실시형태에서, 캄프토테신 접합체는 화학식 (Ia):
Figure pct00034
(Ia)
또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 갖고, 상기 식에서,
L은 리간드 단위이고;
AA1은 아미노산이고;
AA2는 아미노산이고;
B는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp, D-Ala, Aib 및 pAbz로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산이고;
RF는 수소 또는 C1-C6 알킬이고;
b는 2 내지 20의 정수이고;
p는 1 내지 16이다.
이러한 실시형태의 일부 양태에서, b는 2 내지 20의 정수이다. 이러한 실시형태의 일부 양태에서, b는 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20이다. 이러한 실시형태의 일부 양태에서, b는 2 내지 20 또는 2 내지 12 또는 4 내지 12이다. 이러한 실시형태의 일부 양태에서, b는 2, 4, 6, 8, 10 또는 12이다. 이러한 실시형태의 일부 양태에서, b는 8이다.
이러한 실시형태의 일부 양태에서, p는 1 내지 16이다. 이러한 실시형태의 일부 양태에서, p는 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10이다. 일부 양태에서, p는 1 내지 16이거나, 2 내지 8이거나, 2이거나, 4이거나, 8이다. 이러한 실시형태의 일부 양태에서, p는 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10이다. 일부 양태에서, p는 2, 4 또는 8이다. 일부 양태에서, p는 8이다.
일부 실시형태에서, 캄프토테신 접합체는 화학식:
Figure pct00035
또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 갖고;
상기 식에서, AA1, AA2, B 및 RF는 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같고; b는 2 내지 20의 정수이고; y는 1 내지 8 또는 1 내지 4의 정수이거나; 1 또는 4이고; p는 2, 4 또는 8이다. 일부 실시형태에서, p는 8이다.
일부 실시형태에서, 캄프토테신 접합체는 화학식:
Figure pct00036
또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 갖고;
상기 식에서, AA1, AA2, B 및 RF는 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같고; y는 1 내지 8 또는 1 내지 4의 정수이거나; 1 또는 4이고; p는 2, 4 또는 8이다. 일부 실시형태에서, p는 8이다.
일부 실시형태에서, 캄프토테신 접합체는 화학식:
Figure pct00037
또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 갖고;
상기 식에서, AA1, AA2, B 및 RF는 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같고; y는 1 내지 8 또는 1 내지 4의 정수이거나; 1 또는 4이고; p는 2, 4 또는 8이다. 일부 실시형태에서, p는 8이다.
일부 실시형태에서, 캄프토테신 접합체는 화학식:
Figure pct00038
또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 갖고;
상기 식에서, AA1, AA2, B 및 RF는 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같고; b는 2 내지 20의 정수이고; p는 2, 4 또는 8이다. 일부 실시형태에서, p는 8이다.
일부 실시형태에서, 캄프토테신 접합체는 화학식:
Figure pct00039
또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 갖고;
상기 식에서, AA1, AA2, B 및 RF는 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같고; p는 2, 4 또는 8이다. 일부 실시형태에서, p는 8이다.
일부 실시형태에서, 캄프토테신 접합체는 화학식:
Figure pct00040
또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 갖고;
상기 식에서, AA1, AA2, B 및 RF는 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같고; p는 2, 4 또는 8이다. 일부 실시형태에서, p는 8이다.
캄프토테신-링커 화합물
일부 양태에서, 캄프토테신 접합체를 제조하는 경우, 표적 리간드에 접합하기 이전에 전체 약물-링커 조합 또는 링커의 일부와 조합된 약물을 합성하는 것이 바람직할 것이다. 이러한 실시형태에서, 본 명세서에 기술된 바와 같은 캄프토테신-링커 화합물은 중간체 화합물이다. 이들 실시형태에서, 캄프토테신-링커 화합물에서 스트레처 단위는 아직 리간드 단위에 공유 부착되지 않고, 따라서 표적 리간드에 접합하기 위한 작용기를 갖는다(즉, 스트레처 단위 전구체, Z'이다). 일 양태에서, 캄프토테신-링커 화합물은 캄프토테신 및 리간드 단위가 이를 통해 캄프토테신에 연결되는 펩티드 방출 가능한 링커(RL)를 포함하는 링커 단위 전구체(Q')를 포함한다. 일 양태에서, 캄프토테신-링커 화합물은 캄프토테신, B, AA2, AA1, S*, A 및 Z'를 포함한다. 따라서, 링커 단위 전구체는 (펩티드 링커인) RL에 부가하여, 리간드 단위에 접합하기 위한 작용기를 포함하고 리간드 단위에 RL을 (직접적으로 또는 간접적으로) 연결할 수 있는 스트레처 단위 전구체(Z')를 포함한다. 일부 실시형태에서, 스트레처 단위 또는 스트레처 단위 전구체와 RL 사이에 더 많은 거리를 부가하는 것이 바람직한 경우 연결기 단위(A)가 존재한다.
일 양태에서, 본 명세서에는 하기 화학식 (II)의 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염이 제공되고:
Figure pct00041
(II)
상기 식에서,
Z'는 스트레처 단위 전구체이고;
A는 결합 또는 연결기 단위이고;
S*는 결합 또는 분배제이고;
AA1은 아미노산이고;
AA2는 아미노산이고;
B는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp, D-Ala, Aib 및 pAbz로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산이고;
RF는 H 또는 C1-C6 알킬이다.
실시형태의 하나의 군에서, RF는 H이다.
실시형태의 하나의 군에서, RF는 C1-C6 알킬이다. 일부 실시형태에서, RF는 C1-C3 알킬, 예컨대, 메틸, 에틸, n-프로필 또는 이소프로필이다. 일부 실시형태에서, RF는 -CH3이다.
일부 실시형태에서, 캄프토테신-링커 화합물은 하기 화학식 (IIb):
Figure pct00042
(IIb)
또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 갖고, 상기 식에서,
AA1은 아미노산이고;
AA2는 아미노산이고;
B는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp, D-Ala, Aib 및 pAbz로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산이고;
RF는 수소 또는 C1-C6 알킬이고;
b는 2 내지 20의 정수이고;
y는 1 내지 8 또는 1 내지 4의 정수이거나; 1 또는 4이다.
이러한 실시형태의 일부 양태에서, y는 1 내지 8 또는 1 내지 4의 정수이거나; 1 또는 4이다. 이러한 실시형태의 일부 양태에서, y는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8이다.
일부 실시형태에서, 캄프토테신-링커 화합물은 하기 화학식 (IIa):
Figure pct00043
(IIa)
또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 갖고, 상기 식에서,
AA1은 아미노산이고;
AA2는 아미노산이고;
B는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp, D-Ala, Aib 및 pAbz로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산이고;
RF는 수소 또는 C1-C6 알킬이고;
b는 2 내지 20의 정수이다.
이러한 실시형태의 일부 양태에서, b는 2 내지 20의 정수이다. 이러한 실시형태의 일부 양태에서, b는 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20이다. 이러한 실시형태의 일부 양태에서, b는 2 내지 20 또는 2 내지 12 또는 4 내지 12이다. 이러한 실시형태의 일부 양태에서, b는 2, 4, 6, 8, 10 또는 12이다. 이러한 실시형태의 일부 양태에서, b는 8이다.
일부 실시형태에서, 캄프토테신-링커 화합물은 화학식:
Figure pct00044
또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 갖고;
상기 식에서, AA1, AA2, B 및 RF는 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같다.
일부 실시형태에서, 캄프토테신-링커 화합물은 화학식:
Figure pct00045
또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 갖고;
상기 식에서, AA1, AA2, B 및 RF는 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같다.
캄프토테신 접합체 및/또는 캄프토테신-링커 화합물과 관련하여, 조립은 이의 성분 군과 관련하여 가장 잘 기재되어 있다. 일부 절차가 본 명세서에 또한 기술되어 있지만, 접합체 및 화합물을 제조하기 위한 조립의 순서 및 일반적인 조건은 당업자에 의해 잘 이해될 것이다.
캄프토테신 화합물
일 양태에서, 본 명세서에는 하기 화학식 (III)을 갖는 캄프토테신 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염이 제공되고:
Figure pct00046
(III)
상기 식에서,
B'는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp, D-Ala, Aib 및 pAbz로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산이고;
RF는 H 또는 C1-C6 알킬이다.
성분 군
리간드 단위:
본 발명의 일부 실시형태에서, 리간드 단위가 존재한다. 리간드 단위(L-)은 표적 모이어티에 특이적으로 결합하는 표적화 작용제이다. 실시형태의 하나의 군에서, 리간드 단위는 세포 성분(세포 결합제) 또는 다른 관심 표적 분자에 특이적이고 선택적으로 결합한다. 리간드 단위는 캄프토테신 또는 캄프토테신을 함유하는 약물 성분을, 그것의 표적화된 성분 또는 분자의 존재로 인해 리간드 단위와 상호작용하는 특정 표적 세포 집단에 표적화하고 제공하는 역할을 하고, 표적 세포 내(즉, 세포내) 또는 그 부근 내(즉, 세포외)에서 유리 약물의 후속하는 방출을 허용한다. 리간드 단위인 L은 단백질, 폴리펩티드 및 펩티드를 포함하지만 이들로 제한되지는 않는다. 적합한 리간드 단위는 예를 들어, 항체, 예를 들어, 전장 항체 및 이의 항원 결합 단편, 인터페론, 림포카인, 호르몬, 성장 인자 및 집락-자극 인자, 비타민, 영양-수송 분자(예컨대, 비제한적으로 트랜스페린) 또는 임의의 다른 세포 결합 분자 또는 물질을 포함한다. 일부 실시형태에서, 리간드 단위(L)는 항체 또는 비-항체 단백질 표적화 작용제이다.
실시형태의 하나의 군에서 리간드 단위는 펩티드 방출 가능한 링커를 포함하는 Q(링커 단위)에 결합된다. 상기에 언급된 바와 같이, 캄프토테신 약물 화합물과 리간드 단위(예를 들어, 스트레처 단위 및 선택적으로 연결기 단위, A) 사이에 추가의 공간을 제공하거나 조성물에 용해도를 증가시키기 위한 속성(예를 들어, 분배제, S*)을 제공하는 목적으로 작용하기 위해 본 명세서에 기재된 접합체에 여전히 다른 연결 성분이 존재할 수 있다. 이들 실시형태 중 일부에서, 리간드 단위는 리간드 단위의 헤테로원자를 통해 링커 단위의 Z에 결합된다. 그 결합을 위해 리간드 단위 상에 존재할 수 있는 헤테로원자는 (일 실시형태에서, 표적 리간드의 설프히드릴기로부터) 황, (일 실시형태에서, 표적 리간드의 카르복실 또는 히드록실기로부터) 산소, 및 (일 실시형태에서, 표적 리간드의 1차 또는 2차 아민 작용기로부터 또는 또 다른 실시형태에서 선택적으로 치환된 아미드 질소로부터) 선택적으로 치환된 질소를 포함한다. 이들 헤테로원자는 리간드의 자연 상태, 예를 들어, 자연-발생 항체에서 표적 리간드 상에 존재할 수 있거나, 화학적 변형 또는 생물학적 조작을 통해 표적 리간드에 도입될 수 있다.
일 실시형태에서, 리간드 단위는 설프히드릴 작용기를 갖고 있어서, 리간드 단위는 설프히드릴 작용기의 황 원자를 통해 링커 단위에 결합된다.
또 다른 실시형태에서, 리간드 단위는 캄프토테신-링커 화합물 중간체의 스트레처 단위 전구체의 활성화된 에스테르(이러한 에스테르는 N-히드록시석시미드, 펜타플루오로페닐 및 p-니트로페닐 에스테르를 포함하지만 이들로 제한되지 않음)와 반응할 수 있는 하나 이상의 라이신 잔기를 갖고, 따라서 리간드 단위의 질소 원자 및 링커 단위의 스트레처 단위의 C=O기로 이루어진 아미드 결합을 제공한다.
또 다른 양태에서, 리간드 단위는 하나 이상의 설프히드릴기를 도입하기 위해 화학적 변형이 가능한 하나 이상의 라이신 잔기를 갖는다. 이들 실시형태에서, 리간드 단위는 설프히드릴 작용기의 황 원자를 통해 링커 단위에 공유 부착된다. 이러한 방식으로 라이신을 변형시키는 데 사용될 수 있는 시약은 N-석신이미딜 S-아세틸티오아세테이트(SATA) 및 2-이미노티올란 히드로클로라이드(Traut's Reagent)를 포함하지만 이들로 제한되지 않는다.
또 다른 실시형태에서, 리간드 단위는 하나 이상의 설프히드릴 작용기를 제공하도록 변형이 가능한 하나 이상의 탄수화물기를 갖는다. 캄프토테신 접합체에서 화학적으로 변형된 리간드 단위는 설프히드릴 작용기의 황 원자를 통해 링커 단위 성분(예를 들어, 스트레처 단위)에 결합된다.
또 다른 실시형태에서, 리간드 단위는 산화되어 알데히드(-CHO) 작용기를 제공할 수 있는 하나 이상의 탄수화물 기를 갖는다(예를 들어, 문헌[Laguzza, et al., 1989, J. Med. Chem. 32(3):548-55] 참조). 이들 실시형태에서, 상응하는 알데히드는 스트레처 단위 전구체 상의 반응성 부위와 상호작용하여 스트레처 단위와 리간드 단위 사이에 결합을 형성한다. 표적 리간드 단위 상의 반응성 카르보닐-함유 작용기와 상호작용이 가능한 스트레처 단위 전구체 상의 반응성 부위는 히드라진 및 히드록실아민을 포함하지만 이들로 제한되지 않는다. 링커 단위(Q) 또는 관련 종의 부착을 위한 단백질의 변형을 위한 다른 프로토콜은 문헌[Coligan et al., Current Protocols in Protein Science, vol. 2, John Wiley & Sons (2002)](본 명세서에 참조에 의해 포함됨)에 기재되어 있다.
일부 양태에서, 리간드 단위는 스트레처 단위 전구체(Z') 상의 반응성 작용기와 상호작용함으로써 결합을 형성할 수 있어 표적 리간드에 상응하는 리간드 단위와 스트레처 단위(Z) 사이에 공유 결합을 형성할 수 있다. 표적 리간드와 상호작용하는 그 능력을 갖는 Z'의 작용기는 리간드 단위의 특성에 의존할 것이다. 일부 실시형태에서, 반응성 기는 리간드 단위(즉, 스트레처 단위 전구체의 말레이미드 모이어티)를 형성하기 위한 그것의 부착 이전에 스트레처 단위 상에 존재하는 말레이미드이다. 스트레처 단위에 대한 리간드 단위의 공유 부착은 티오-치환된 석신이미드를 형성하기 위해 Z'의 말레이미드 작용기와 상호작용하는 리간드 단위의 설프히드릴 작용기를 통해 달성된다. 설프히드릴 작용기는 리간드 단위의 자연 상태, 예를 들어, 자연-발생 잔기에서 리간드 단위 상에 존재할 수 있거나, 화학적 변형 또는 생물학적 조작을 통해 리간드 단위에 도입될 수 있다.
또 다른 실시형태에서, 리간드 단위는 항체이고, 설프히드릴기는 항체의 사슬간 디설파이드의 환원에 의해 생성된다. 따라서, 일부 실시형태에서, 링커 단위는 환원된 사슬간 디설파이드(들)로부터의 시스테인 잔기에 접합된다.
또 다른 실시형태에서, 리간드 단위는 항체이고, 설프히드릴 작용기는 예를 들어, 시스테인 잔기의 도입에 의해 항체 내에 화학적으로 도입된다. 따라서, 일부 실시형태에서, (부착된 캄프토테신이 있거나 없는) 링커 단위는 리간드 단위의 도입된 시스테인 잔기를 통해 리간드 단위에 접합된다.
약물 접합의 부위가 접합의 용이성, 약물-링커 안정성, 생성된 생체접합체의 생물물리적 특성에 대한 영향 및 시험관내 세포독성을 포함하여 다수의 매개변수에 영향을 미칠 수 있다는 것이 생체접합체에 대해 관찰되었다. 약물-링커 안정성과 관련하여, 리간드 단위에 대한 약물-링커 모이어티의 접합의 부위는 일부 경우에 유리 약물의 조기 방출을 유발하는 제거 반응을 겪는 접합된 약물-링커 모이어티의 능력에 영향을 미칠 수 있다. 표적 리간드 상의 접합을 위한 부위는, 예를 들어, 환원된 사슬간 디설파이드뿐만 아니라 조작된 부위에서 선택된 시스테인 잔기를 포함한다. 일부 실시형태에서, 본 명세서에 기재된 바와 같은 캄프토테신 접합체를 형성하기 위한 접합 방법은, 환원된 디설파이드 결합으로부터의 티올 잔기를 사용하는 접합 방법과 비교하여 제거 반응에 덜 민감한 유전자 조작된 부위에서 티올 잔기를 사용한다(예를 들어, Kabat에 제시된 바와 같은 EU 지수에 따른 위치 239). 다른 실시형태에서, 본 명세서에 기술된 바와 같은 캄프토테신 접합체를 형성하기 위한 접합 방법은 (예를 들어, 사슬간 디설파이드 환원으로 인한) 제거 반응에 더 민감한 부위에서 티올 잔기를 사용한다.
일부 실시형태에서, 캄프토테신 접합체는 그것의 리간드 단위로서 비-면역반응성 단백질, 폴리펩티드 또는 펩티드를 포함한다. 따라서, 일부 실시형태에서, 리간드 단위는 비-면역반응성 단백질, 폴리펩티드 또는 펩티드이다. 예는 트랜스페린, 표피 성장 인자("EGF": epidermal growth factor), 봄베신, 가스트린, 가스트린-방출 펩티드, 혈소판-유래 성장 인자, IL-2, IL-6, 형질전환 성장 인자("TGF"), 예컨대 TGF-α 및 TGF-β, 우두 성장 인자("VGF"), 인슐린 및 인슐린-유사 성장 인자 I 및 II, 소마토스타틴, 렉틴 및 저밀도 지방단백질으로부터의 아포단백질을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다.
특히 바람직한 리간드 단위는 항체에서 유래한다. 실제로, 본 명세서에 기술된 임의의 실시형태에서, 리간드 단위는 항체로부터 유래될 수 있다. 유용한 다클론성 항체는 면역화된 동물의 혈청에서 유래된 항체 분자의 이종 집단이다. 유용한 단클론성 항체는 특정 항원 결정인자(예를 들어, 암 세포 항원, 바이러스 항원, 미생물 항원, 단백질, 펩티드, 탄수화물, 화학물질, 핵산 또는 이들의 단편)에 대한 항체의 동종 집단이다. 관심 항원에 대한 단클론성 항체(mAb)는 당업계에 공지된 임의의 기술을 사용하여 제조될 수 있으며, 이는 배양에서 연속적인 세포주에 의한 항체 분자의 생산을 제공한다.
유용한 단클론성 항체는 인간 단클론성 항체, 인간화된 단클론성 항체 또는 키메라 인간-마우스(또는 다른 종) 단클론성 항체를 포함하지만 이들로 제한되지 않는다. 항체는 전장 항체 및 이의 항원 결합 단편을 포함한다. 인간 단클론성 항체는 당업계에 공지된 수많은 기술 중 임의의 것에 의해 제조될 수 있다(예를 들어, 문헌[Teng et al., 1983, Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 80:7308-7312; Kozbor et al., 1983, Immunology Today 4:72-79]; 및 문헌[Olsson et al., 1982, Meth. Enzymol. 92:3-16] 참조).
항체는 표적 세포(예를 들어, 암 세포 항원, 바이러스 항원 또는 미생물 항원) 또는 종양 세포 또는 매트릭스에 결합된 다른 항체에 면역특이적으로 결합하는 항체의 기능적으로 활성인 단편, 유도체 또는 유사체일 수 있다. 이와 관련하여, "기능적으로 활성"은 단편, 유도체 또는 유사체가 표적 세포에 면역특이적으로 결합할 수 있음을 의미한다. 항원에 결합하는 CDR 서열을 결정하기 위해, CDR 서열을 함유하는 합성 펩티드는 당업계에 공지된 임의의 결합 분석 방법(예를 들어, BIA 코어 분석)에 의해 항원과의 결합 분석에서 사용될 수 있다(예를 들어, 문헌[Kabat et al., 1991, Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, National Institute of Health, Bethesda, Md]; 문헌[Kabat E et al., 1980, J. Immunology 125(3):961-969]).
다른 유용한 항체는 F(ab')2 단편, Fab 단편, Fv, 단일 사슬 항체, 디아바디, 트리아바디, 테트라바디, scFv, scFv-FV, 또는 항체와 동일한 특이성을 갖는 임의의 다른 분자와 같은 항체의 단편을 포함하지만 이들로 제한되지 않는다.
추가적으로, 표준 재조합 DNA 기술을 사용하여 만들 수 있는 인간 및 비-인간 부분 둘 모두를 포함하는, 키메라 및 인간화된 단클론성 항체와 같은 재조합 항체가 유용한 항체이다. 키메라 항체는 예를 들어, 뮤린 단클론성 및 인간 면역글로불린 불변 영역으로부터 유래된 가변 영역을 갖는 것과 같이 상이한 동물 종으로부터 상이한 부분이 유래된 분자이다. (예를 들어, 미국 특허 제4,816,567호; 및 미국 특허 제4,816,397호를 참고하고, 이는 그 전체 내용이 본 명세서에 참고로 포함된다.) 인간화된 항체는 비-인간 종으로부터의 하나 이상의 상보성 결정 영역(CDR) 및 인간 면역글로불린 분자로부터의 프레임워크 영역을 갖는 비-인간 종으로부터의 항체 분자이다. (예를 들어, 전체 내용이 본 명세서에 참고로 포함된 미국 특허 제5,585,089호 참조). 이러한 키메라 및 인간화된 단클론성 항체는 예를 들어 국제 공개 WO 87/02671; 유럽 특허 공개 제0 184 187호; 유럽 특허 공개 제0 171 496호; 유럽 특허 공개 제0 173 494호; 국제 공개 WO 86/01533; 미국 특허 제4,816,567호; 유럽 특허 공개 제012 023호; 문헌[Berter et al., 1988, Science 240:1041-1043]; 문헌[Liu et al., 1987, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 84:3439-3443]; 문헌[Liu et al., 1987, J. Immunol. 139:3521-3526]; 문헌[Sun et al., 1987, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 84:214-218]; 문헌[Nishimura et al., 1987, Cancer. Res. 47:999-1005]; 문헌[Wood et al., 1985, Nature 314:446-449]; 및 문헌[Shaw et al., 1988, J. Natl. Cancer Inst. 80:1553-1559]; 문헌[Morrison, 1985, Science 229:1202-1207]; 문헌[Oi et al., 1986, BioTechniques 4:214]; 미국 특허 제5,225,539호; 문헌[Jones et al., 1986, Nature 321:552-525]; 문헌[Verhoeyan et al., 1988, Science 239:1534]; 및 문헌[Beidler et al., 1988, J. Immunol. 141:4053-4060]에 기재된 방법을 사용하여 당업계에 공지된 재조합 DNA 기술에 의해 생산될 수 있으며, 이들 각각은 전문이 본 명세서에 참조에 의해 포함된다.
일부 경우(예를 들어, 비-인간 또는 키메라성 항체에 대한 면역원성이 발생할 수 있는 경우) 완전하게 인간 항 체가 더 바람직할 수 있고 내인성 면역글로불린 중쇄 및 경쇄 유전자를 발현할 수 없지만, 인간의 중쇄 및 경쇄 유전자를 발현할 수 있는, 형질전환 마우스를 사용하여 생산될 수 있다.
항체는 어느 하나의 변형된, 즉 이러한 공유 부착이 항체가 그 항원 결합 면역특이성을 유지하도록 허용하는 한 임의의 유형의 분자의 공유 부착에 의해 변형된 유사체 및 유도체를 포함한다. 예를 들어, 비제한적으로 항체의 유도체 및 유사체는 예를 들어 글리코실화, 아세틸화, 페길화, 인산화, 아미드화, 공지된 보호/차단기에 의한 유도체화, 단백질분해 절단, 세포 항체 단위 또는 기타 단백질에 대한 링키지 등에 의해 추가로 변형된 것을 포함한다. 수 많은 화학적 변형 중 어떤 것은 특정 화학적 절단, 아세틸화, 포밀화, 투니카마이신의 존재에서 대사 적합성 등을 포함하지만 이들로 제한되지 않는 공지된 기술에 의해 수행될 수 있다. 추가적으로, 유사체 또는 유도체는 하나 이상의 비자연 아미노산을 함유할 수 있다.
항체는 Fc 수용체와 상호작용하는 아미노산 잔기에 변형(예를 들어, 치환, 결실 또는 추가)을 가질 수 있다. 특히, 항체는 항-Fc 도메인과 FcRn 수용체 사이의 상호작용에 관여하는 것으로 확인된 아미노산 잔기에 변형을 가질 수 있다(예를 들어, 전문이 본 명세서에 참고로 포함되는, 국제 공개 WO 97/34631 참조).
일부 실시형태에서, 본 개시내용의 항체는 이들이 포함하는 특정 CDR과 관련하여 기재되거나 명시될 수 있다. 주어진 CDR 또는 FR의 정확한 아미노산 서열 경계는 문헌[Kabat et al. (1991), "Sequences of Proteins of Immunological Interest," 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD ("Kabat" 넘버링 체계)]; 문헌[Al-Lazikani et al., (1997) JMB 273,927-948 ("Chothia" 넘버링 체계)]; 문헌[MacCallum et al., J. Mol. Biol. 262:732-745 (1996), "Antibody-antigen interactions: Contact analysis and binding site topography," J. Mol. Biol. 262, 732-745."("Contact" 넘버링 체계)]; 문헌[Lefranc MP et al., "IMGT unique numbering for immunoglobulin and T cell receptor variable domains and Ig superfamily V-like domains," Dev Comp Immunol, 2003 Jan;27(1):55-77("IMGT" 넘버링 체계)]; 문헌[Honegger A and Pluckthun A, "Yet another numbering scheme for immunoglobulin variable domains: an automatic modeling and analysis tool," J Mol Biol, 2001 Jun 8;309(3):657-70("Aho" 넘버링 체계)]; 및 문헌[Martin et al., "Modeling antibody hypervariable loops: a combined algorithm," PNAS, 1989, 86(23):9268-9272("AbM" 넘버링 체계)]에 기재된 것을 비롯하여 다수의 널리 공지된 도식 중 임의의 것을 사용하여 쉽게 결정될 수 있다. 주어진 CDR의 경계는 식별에 사용된 도식에 따라 달라질 수 있다. 일부 실시형태에서, 주어진 항체 또는 이의 영역(예를 들어, 이의 가변 영역)의 "CDR" 또는 "상보성 결정 영역" 또는 개개의 명시된 CDR(예를 들어, CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3)은 상기에 언급된 도식 중 임의의 것에 의해서 정의된 바와 같은 (또는 특이적) CDR을 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 예를 들어, 특정 CDR(예를 들어, CDR-H3)이 주어진 VH 또는 VL 영역 아미노산 서열에서 상응하는 CDR의 아미노산 서열을 함유하는 것으로 언급되는 경우, 이러한 CDR은 상기에 언급된 도식 중 임의의 것에 의해서 정의된 바와 같은 가변 영역 내의 상응하는 CDR(예를 들어, CDR-H3)의 서열을 갖는다는 것이 이해된다. 특정 CDR 또는 CDR의 식별을 위한 도식, 예컨대, Kabat, Chothia, AbM 또는 IMGT 방법에 의해서 정의된 바와 같은 CDR이 명시될 수 있다.
암세포 항원에 대해 면역특이적인 항체는 상업적으로 수득될 수 있거나 재조합 발현 기술과 같은 당업자에게 공지된 임의의 방법에 의해 생산될 수 있다. 암 세포 항원에 대해 면역특이적인 항체를 암호화하는 뉴클레오티드 서열은 예를 들어 GenBank 데이터베이스 또는 이와 유사한 데이터베이스, 문헌 간행물로부터, 또는 일상적인 클로닝 및 시퀀싱에 의해 얻어질 수 있다.
구체적인 실시형태에서, 공지된 암 치료용 항체가 사용될 수 있다.
또 다른 구체적인 실시형태에서, 자가면역 질환의 치료용 항체가 본 발명의 조성물 및 방법에 따라 사용된다.
특정 실시형태에서, 유용한 항체는 활성화된 림프구에서 발현되는 수용체 또는 수용체 복합체에 결합할 수 있다. 수용체 또는 수용체 복합체는 면역글로불린 유전자 슈퍼패밀리 구성원, TNF 수용체 슈퍼패밀리 구성원, 인테그린, 사이토카인 수용체, 케모카인 수용체, 주요 조직적합성 단백질, 렉틴 또는 보체 조절 단백질을 포함할 수 있다.
일부 양태에서, 캄프토테신 접합체에 혼입된 항체는 CD19, CD30, CD33, CD70 또는 LIV-1에 특이적으로 결합할 것이다.
일부 양태에서, 캄프토테신 접합체에 혼입된 항체는 CD30에 특이적으로 결합한다. 또 다른 양태에서, 캄프토테신 접합체에 혼입된 항체는 국제 특허 공개 WO 02/43661에 기술된 cAC10 항-CD30 항체이다. 일부 실시형태에서, 항-CD30 항체는 cAC10이고, 이것은 국제 특허 공개 WO 02/43661에 기재되어 있다. cAC10은 브렌툭시맙이라고도 공지되어 있다. 일부 실시형태에서, 항-CD30 항체는 cAC10의 CDR을 포함한다. 일부 실시형태에서, CDR은 Kabat 넘버링 체계에 의해서 정의된 바와 같다. 일부 실시형태에서, CDR은 Chothia 넘버링 체계에 의해서 정의된 바와 같다. 일부 실시형태에서, CDR은 IMGT 넘버링 체계에 의해서 정의된 바와 같다. 일부 실시형태에서, CDR은 AbM 넘버링 체계에 의해서 정의된 바와 같다. 일부 실시형태에서, 항-CD30 항체는 각각 서열번호 1, 2, 3, 4, 5 및 6의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항-CD30 항체는 서열번호 7의 아미노산 서열과 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 8의 아미노산 서열과 적어도 95% 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항-CD30 항체는 서열번호 9 또는 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호 11의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다.
일부 양태에서, 캄프토테신 접합체에 혼입된 항체는 CD70에 특이적으로 결합한다. 또 다른 양태에서, 캄프토테신 접합체에 혼입된 항체는 국제 특허 공개 WO 2006/113909에 기술된 h1F6 항-CD70 항체이다. 일부 실시형태에서, 항-CD70 항체는 h1F6의 CDR을 포함한다. 일부 실시형태에서, CDR은 Kabat 넘버링 체계에 의해서 정의된 바와 같다. 일부 실시형태에서, CDR은 Chothia 넘버링 체계에 의해서 정의된 바와 같다. 일부 실시형태에서, CDR은 IMGT 넘버링 체계에 의해서 정의된 바와 같다. 일부 실시형태에서, CDR은 AbM 넘버링 체계에 의해서 정의된 바와 같다. 일부 양태에서, 캄프토테신 접합체에 혼입된 항체는 CD48에 특이적으로 결합한다. 또 다른 양태에서, 캄프토테신 접합체에 혼입된 항체는 국제 특허 공개 WO 2016/149535에 기술된 hMEM102 항-CD48 항체이다. 일부 실시형태에서, 항-CD48 항체는 hMEM102의 CDR을 포함한다. 일부 실시형태에서, CDR은 Kabat 넘버링 체계에 의해서 정의된 바와 같다. 일부 실시형태에서, CDR은 Chothia 넘버링 체계에 의해서 정의된 바와 같다. 일부 실시형태에서, CDR은 IMGT 넘버링 체계에 의해서 정의된 바와 같다. 일부 실시형태에서, CDR은 AbM 넘버링 체계에 의해서 정의된 바와 같다. 일부 양태에서, 캄프토테신 접합체에 혼입된 항체는 NTB-A에 특이적으로 결합한다. 또 다른 양태에서, 캄프토테신 접합체에 혼입된 항체는 국제 특허 공개 WO 2017/004330에 기술된 h20F3 항-NTB-A 항체이다. 일부 실시형태에서, 항-NTB-A 항체는 h20F3의 CDR을 포함한다. 일부 실시형태에서, CDR은 Kabat 넘버링 체계에 의해서 정의된 바와 같다. 일부 실시형태에서, CDR은 Chothia 넘버링 체계에 의해서 정의된 바와 같다. 일부 실시형태에서, CDR은 IMGT 넘버링 체계에 의해서 정의된 바와 같다. 일부 실시형태에서, CDR은 AbM 넘버링 체계에 의해서 정의된 바와 같다.
캄프토테신:
본 명세서에 기재된 다양한 양태 및 실시형태에서 사용되는 캄프토테신은 하기 화학식으로 표현된다:
Figure pct00047
상기 식에서, 물결선은 B 또는 B'에 대한 부착을 나타내고, RF는 H 또는 C1-C6 알킬이다.
구체적인 실시형태에서, 캄프토테신은 하기로 이루어진 군으로부터 선택된다:
Figure pct00048
,
Figure pct00049
,
Figure pct00050
,
Figure pct00051
,
Figure pct00052
,
Figure pct00053
,
Figure pct00054
,
Figure pct00055
, 및
Figure pct00056
.
캄프토테신은 유리 약물로서 접합체로부터 방출될 수 있다. 생성된 약물-링커 모이어티는 세포독성, 세포증식억제 또는 면역억제 효과를 발휘하기 위해 이의 리간드 단위에 의해 표적화된 부위에 그 모이어티를 갖는 캄프토테신 접합체로부터 활성인 유리 약물을 방출할 수 있는 것이다.
"유리 약물"은 약물-링커 모이어티로부터 일단 방출되면 그 자체로 존재하는 약물을 지칭한다. 일부 실시형태에서, 유리 약물은 펩티드 방출 가능한 링커(RL)의 단편을 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩티드 방출 가능한 링커 기의 단편을 포함하는 유리 약물은 생물학적으로 활성이다. 펩티드 방출 가능한 링커의 단편을 포함하는 유리 약물은 방출 가능한 링커의 절단을 통해 약물-링커 모이어티의 나머지로부터 방출되고 방출 후 활성화된다. 일부 실시형태에서, 유리 약물은 자기-희생 조립 단위에 대한 부착을 위한 약물의 작용기가 더 이상 캄프토테신 접합체의 성분(이전에 공유된 헤테로원자 제외)과 회합되지 않는다는 점에서 접합된 약물과 상이하다.
일부 실시형태에서, 캄프토테신은 생물학적으로 활성이다. 일부 실시형태에서, 이러한 캄프토테신은 토포이소머라제를 저해하는 방법, 종양 세포를 사멸시키는 방법; 종양 세포, 암 세포 또는 종양의 성장 저해하는 방법; 종양 세포 또는 암 세포의 복제를 저해하는 방법, 전반적인 종양 부담을 약화시키거나 암 세포 수를 감소시키는 방법 또는 암 또는 자가면역 질환과 관련된 하나 이상의 증상을 개선하는 방법에 유용하다. 이러한 방법은 예를 들어, 암 세포를 캄프토테신 화합물과 접촉시키는 단계를 포함한다.
링커 단위(Q) 또는 링커 단위 전구체(Q')
상기에 언급된 바와 같이, 일부 실시형태에서, 링커 단위(Q)는 화학식 -Z-A-S*-RL-을 갖고, 상기 식에서, Z는 스트레처 단위이고, A는 결합 또는 연결기 단위이고, S*는 결합 또는 분배제이고, RL은 펩티드 방출 가능한 링커(예를 들어, -AA1-AA2-B-)이다. 일부 실시형태에서, 링커 단위 전구체(Q')는 화학식 -Z'-A-S*-RL-을 갖고, 상기 식에서, Z'는 스트레처 단위 전구체이고, A는 결합 또는 연결기 단위이고, S*는 결합 또는 분배제이고, RL은 펩티드 방출 가능한 링커(예를 들어, -AA1-AA2-B-)이다.
스트레처 단위(Z) 또는 스트레처 단위 전구체(Z'):
스트레처 단위(Z)는 접합체의 나머지에 리간드 단위를 연결하는 작용을 하는 캄프토테신 접합체 또는 다른 중간체의 성분이다. 이와 관련하여, 리간드 단위에 대한 부착 전에 스트레처 단위(즉, 스트레처 단위 전구체, Z')는 표적 리간드의 작용기와 결합을 형성할 수 있는 작용기를 갖는다.
일부 양태에서, 스트레처 단위 전구체(Z')는 리간드 단위(예를 들어, 항체) 상에 존재하는 반응성 친핵성 기와 상호작용하여 리간드 단위와 스트레처 단위 사이에 공유 결합을 제공할 수 있는 친전자성 기를 갖는다. 그러한 능력을 갖는 항체 상의 친핵성 기는 설프히드릴, 히드록실 및 아미노 작용기를 포함하지만 이들로 제한되지 않는다. 항체의 친핵성 기의 헤테로원자는 스트레처 단위 전구체 상의 친전자성 기에 반응성이고, 리간드 단위와 스트레처 단위 사이에 공유 결합을 제공한다. 이러한 목적에 유용한 친전자성 기는 말레이미드, 할로아세트아미드기 및 NHS 에스테르를 포함하지만 이들로 제한되지 않는다. 친전자성 기는 항체 부착을 위한 편리한 부위를 제공하여 캄프토테신 접합체 또는 리간드 단위-링커 중간체를 형성한다.
또 다른 실시형태에서, 스트레처 단위 전구체는 리간드 단위(예를 들어, 항체) 상에 존재하는 친전자성 기에 반응성인 친핵성 기를 갖는 반응성 부위를 갖는다. 그 목적에 유용한 항체 상의 친전자성 기는 알데히드 및 케톤 카르보닐기를 포함하지만 이들로 제한되지 않는다. 스트레처 단위 전구체의 친핵성 기의 헤테로원자는 항체 상의 친전자성 기와 반응할 수 있고 항체에 대한 공유 결합을 형성할 수 있다. 그 목적을 위해 스트레처 단위 전구체 상의 유용한 친핵성 기는 히드라지드, 히드록실아민, 아미노, 히드라진, 티오세미카바존, 히드라진 카르복실레이트 및 아릴히드라지드를 포함하지만 이들로 제한되지 않는다. 항체 상의 친전자성 기는 항체 부착을 위한 편리한 부위를 제공하여 캄프토테신 접합체 또는 리간드 단위-링커 중간체를 형성한다.
일부 실시형태에서, 리간드 단위의 황 원자는 표적 리간드의 티올 작용기와 상응하는 스트레처 단위 전구체의 말레이미드 모이어티의 반응에 의해 형성된 스트레처 단위의 석신이미드 고리계에 결합된다. 다른 실시형태에서, 리간드 단위의 티올 작용기는 알파 할로아세트아미드 모이어티와 반응하여 그것의 할로겐 치환기의 친핵성 치환에 의해 황-결합 스트레처 단위를 제공한다.
이들 실시형태의 대표적인 스트레처 단위는 화학식 Za 및 Zb의 대괄호 내의 것을 포함한다:
Figure pct00057
(Za)
Figure pct00058
(Zb)
상기 식에서, 별표는 리간드 단위(L)에 대한 부착 위치를 나타내고;
물결선은 A에 대한 부착을 나타내고;
R17은 -C1-C10 알킬렌-, C1-C10 헤테로알킬렌-, -C3-C8 카르보사이클로-, -O-(C1-C8 알킬렌)-, -아릴렌-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-, -(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-, -C3-C8 헤테로사이클로-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-, -C1-C10 알킬렌-C(=O)-, C1-C10 헤테로알킬렌-C(=O)-, -C3-C8 카르보사이클로-C(=O)-, -O-(C1-C8 알킬렌)-C(=O)-, -아릴렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-C(=O)-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-C(=O)-,-(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C3-C8 헤테로사이클로-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-C(=O)-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-NH-, C1-C10 헤테로알킬렌-NH-, -C3-C8 카르보사이클로-NH-, -O-(C1-C8 알킬렌)-NH-, -아릴렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-NH-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-NH-, -(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-NH-, -C3-C8 헤테로사이클로-NH-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-NH-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-S-, C1-C10 헤테로알킬렌-S-, -C3-C8 카르보사이클로-S-, -O-(C1-C8 알킬렌)-S-, -아릴렌-S-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-S-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-S-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-S-, -(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-S-, -C3-C8 헤테로사이클로-S-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-S- 또는 -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-S-이다.
일부 양태에서, 화학식 Za의 R17기는 염기성 단위(BU), 예컨대, 아미노알킬 모이어티, 예를 들어, -(CH2)xNH2, -(CH2)xNHRa 및 -(CH2)xNRa 2에 의해서 선택적으로 치환되고, 상기 식에서, x는 1 내지 4의 정수이고; 각각의 Ra는 C1-6 알킬 및 C1-6 할로알킬로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되거나, 2개의 Ra기는 이들이 부착된 질소와 결합되어 아제티디닐, 피롤리디닐 또는 피페리디닐기를 형성한다.
예시적인 스트레처 단위는 화학식 Za 또는 Zb의 것이고, 식에서, R17은 -C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C1-C10 헤테로알킬렌-C(=O)-, -C3-C8 카르보사이클로-C(=O)-, -O-(C1-C8 알킬렌)-C(=O)-, -아릴렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-C(=O)-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-C(=O)-,-(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C3-C8 헤테로사이클로-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-C(=O)- 또는 -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-C(=O)-이다.
또 다른 예시적인 스트레처 단위는 화학식 Za의 것이고, 식에서, R17은 -C1-C5 알킬렌-C(=O)-이고, 알킬렌은 염기성 단위(BU)로 선택적으로 치환되고, 예컨대, 선택적으로 치환된 아미노알킬, 예를 들어, -(CH2)xNH2, -(CH2)xNHRa 및 -(CH2)xN(Ra)2이고, 상기 식에서, x는 1 내지 4의 정수이고; 각각의 Ra는 C1-6 알킬 및 C1-6 할로알킬로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되거나, 2개의 Ra기는 이들이 부착된 질소와 결합되어 아제티디닐, 피롤리디닐 또는 피페리디닐기를 형성한다. 합성 동안, 염기성 단위의 염기성 아미노 작용기는 보호기에 의해 보호될 수 있다.
스트레처 단위 Z는 하기와 같고:
Figure pct00059
Figure pct00060
Figure pct00061
Figure pct00062
Figure pct00063
상기 식에서, 별표는 리간드 단위(L)에 대한 부착 위치를 나타내고; 물결선은 A에 대한 부착을 나타낸다.
화학식 (I)의 캄프토테신 접합체의 일부 실시형태에서, Z는
Figure pct00064
,
Figure pct00065
또는
Figure pct00066
이다. 일부 실시형태에서, Z는
Figure pct00067
이다. 일부 실시형태에서, Z는
Figure pct00068
또는
Figure pct00069
이다.
일부 바람직한 실시형태에서 스트레처 단위(Z)는 L에 결합될 때 화학식 Za'의 구조로 표시되는 석신이미드 모이어티로 구성된다:
Figure pct00070
(Za')
상기 식에서 카르보닐에 인접한 물결선은 A에 대한 부착을 나타내고; R17은 -C1-C5 알킬렌-이고, 알킬렌은 염기성 단위(BU)에 의해서 치환되고, BU는 -(CH2)xNH2, -(CH2)xNHRa 또는 -(CH2)xN(Ra)2이고, x는 1 내지 4의 정수이고, 각각의 Ra는 C1-6 알킬 및 C1-6 할로알킬로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되거나, 두 Ra는 이들이 부착된 질소와 함께 아제티디닐, 피롤리디닐 또는 피페리디닐기를 정의한다.
리간드 단위-치환된 석신이미드는 가수분해된 형태(들)로 존재할 수 있음을 이해할 것이다. 이들 형태는 L에 결합된 Za'의 가수분해에 대해 아래에 예시되며, 여기서 그 가수분해로부터의 위치이성질체를 나타내는 구조는 구조식 Zb' 및 Zc'이다. 따라서, 다른 바람직한 실시형태에서, 스트레처 단위(Z)는 L에 결합될 때 하기로 표현되는 산-아미드 모이어티로 구성된다:
Figure pct00071
(Zb')
Figure pct00072
(Zc')
R17에 결합된 카르보닐에 인접한 물결선은 Za'에 대해서 정의된 바와 같고; R17은 -C1-C5 알킬렌-이고, 알킬렌은 염기성 단위(BU)에 의해서 치환되고, BU는 -(CH2)xNH2, -(CH2)xNHRa 또는 -(CH2)xN(Ra)2이고, x는 1 내지 4의 정수이고, 각각의 Ra는 C1-6 알킬 및 C1-6 할로알킬로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되거나, 두 Ra는 이들이 부착된 질소와 함께 아제티디닐, 피롤리디닐 또는 피페리디닐기를 정의한다.
일부 실시형태에서, 스트레처 단위(Z)는 L에 결합될 때 화학식 Zd' 또는 Ze'의 구조로 표현되는 산-아미드 모이어티로 구성되고:
Figure pct00073
상기 식에서 카르보닐에 인접한 물결선은 Za'에 대해서 정의된 바와 같다.
바람직한 실시형태에서 스트레처 단위(Z)는 L에 결합될 때 하기의 구조로 표시되는 석신이미드 모이어티로 구성된다:
Figure pct00074
.
이것은 말레이미도-아미노-프로피오닐(mDPR) 유사체(3-아미노-2-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)프로판산 유도체)로부터 생성되거나, 또는 L에 결합될 때 하기의 구조로 표시되는 산-아미드 모이어티로 구성된다:
Figure pct00075
또는
Figure pct00076
.
리간드 단위(L) 및 A에 결합된 예시적인 스트레처 단위는 하기 구조식을 가지며, 이것은 Za, Za', Zb' 또는 Zc'로부터의 구조로 구성되고, 식에서 -R17- 또는 -R17(BU)-는 -CH2-, -CH2CH2- 또는 -CH(CH2NH2)-이고:
Figure pct00077
,
Figure pct00078
,
Figure pct00079
,
Figure pct00080
,
Figure pct00081
,
Figure pct00082
,
Figure pct00083
,
Figure pct00084
,
Figure pct00085
,
상기 식에서, 카르보닐에 인접한 물결선은 S*에 대한 부착을 나타낸다.
실시형태의 하나의 군에서, Z-A-는 말레이미도-알칸산 성분 또는 mDPR 성분을 포함한다. 예를 들어, WO 2013/173337 참조한다. 실시형태의 하나의 군에서, Z-A-는 말레이미도프로피오닐 성분이다.
리간드 단위(즉, 스트레처 단위 전구체)에 대한 접합 이전의 예시적인 스트레처 단위는 말레이미드 모이어티로 구성되고, 하기 화학식 Z'a의 것을 포함하는 구조로 표현되며:
Figure pct00086
(Z'a)
상기 식에서, 카르보닐에 인접한 물결선은 A에 대한 부착을 나타내고; R17은 염기성 단위로 선택적으로 치환된 -(CH2)1-5-, 예컨대, 선택적으로 치환된 아미노알킬, 예를 들어, -(CH2)xNH2, -(CH2)xNHRa 및 -(CH2)xN(Ra)2이고, x는 1 내지 4의 정수이고; 각각의 Ra는 C1-6 알킬 및 C1-6 할로알킬로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되거나, 2개의 Ra기는 이들이 부착된 질소와 결합되어 아제티디닐, 피롤리디닐 또는 피페리디닐기를 형성한다.
화학식 Z'a의 일부 바람직한 실시형태에서, 스트레처 단위 전구체(Z')는 하기 구조 중 하나로 표현된다:
Figure pct00087
,
Figure pct00088
,
Figure pct00089
, 또는
Figure pct00090
상기 식에서, 카르보닐에 인접한 물결선은 A에 대한 부착을 나타낸다.
다른 바람직한 실시형태에서, 스트레처 단위 전구체(Z')는 말레이미드 모이어티로 구성되고, 하기 화학식 Z'b의 구조로 표현되며:
Figure pct00091
(Z'b)
상기 식에서, 물결선은 A에 대한 부착을 나타내고;
R17은 -C1-C10 알킬렌-, C1-C10 헤테로알킬렌-, -C3-C8 카르보사이클로-, -O-(C1-C8 알킬렌)-, -아릴렌-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-, -(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-, -C3-C8 헤테로사이클로-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-, -C1-C10 알킬렌-C(=O)-, C1-C10 헤테로알킬렌-C(=O)-, -C3-C8 카르보사이클로-C(=O)-, -O-(C1-C8 알킬렌)-C(=O)-, -아릴렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-C(=O)-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-C(=O)-,-(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C3-C8 헤테로사이클로-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-C(=O)-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-NH-, C1-C10 헤테로알킬렌-NH-, -C3-C8 카르보사이클로-NH-, -O-(C1-C8 알킬렌)-NH-, -아릴렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-NH-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-NH-, -(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-NH-, -C3-C8 헤테로사이클로-NH-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-NH-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-S-, C1-C10 헤테로알킬렌-S-, -C3-C8 카르보사이클로-S-, -O-(C1-C8 알킬렌)-S-, -아릴렌-S-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-S-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-S-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-S-, -(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-S-, -C3-C8 헤테로사이클로-S-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-S- 또는 -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-S-이고;
R17은 -(CH2)xNH2, -(CH2)xNHRa 또는 -(CH2)xNRa 2인 염기성 단위(BU)로 선택적으로 치환되고;
x는 1 내지 4의 정수이고;
각각의 Ra는 C1-6 알킬 및 C1-6 할로알킬로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되거나, 2개의 Ra기는 이들이 부착된 질소와 결합되어 4 내지 6원의 헤테로시클로알킬 고리 또는 아제티디닐, 피롤리디닐 또는 피페리디닐기를 형성한다.
다른 바람직한 실시형태에서, 스트레처 단위 전구체(Z')는 말레이미드 모이어티로 구성되고, 하기 화학식 Z'a'의 구조로 표현되며:
Figure pct00092
(Z'a')
R17에 결합된 카르보닐에 인접한 물결선은 A에 대한 부착을 나타내고; R17은 -C1-C5 알킬렌-이고, 알킬렌은 염기성 단위(BU)에 의해서 치환되고, BU는 -(CH2)xNH2, -(CH2)xNHRa 또는 -(CH2)xN(Ra)2이고, x는 1 내지 4의 정수이고, 각각의 Ra는 C1-6 알킬 및 C1-6 할로알킬로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되거나, 두 Ra는 이들이 부착된 질소와 함께 아제티디닐, 피롤리디닐 또는 피페리디닐기를 정의한다.
보다 바람직한 실시형태에서, 스트레처 단위 전구체(Z')는 말레이미드 모이어티로 구성되고, 하기의 구조로 표현되며:
Figure pct00093
,
상기 식에서, 카르보닐에 인접한 물결선은 A에 대한 부착을 나타낸다.
BU 모이어티를 갖는 스트레처 단위에서, 그 모이어티의 아미노 작용기는 합성 동안 아미노 보호기, 예를 들어, 산 불안정한 보호기(예를 들어, BOC)에 의해 보호될 수 있음을 이해할 것이다.
A에 공유 부착된 예시적인 스트레처 단위 전구체는 Z'a로부터의 구조로 구성되며, 식에서, -R17- 또는 -R17(BU)-는 -CH2-, -CH2CH2- 또는 -CH(CH2NH2)-는 하기 구조를 갖고:
Figure pct00094
Figure pct00095
Figure pct00096
상기 식에서, 카르보닐에 인접한 물결선은 S*에 대한 부착을 나타낸다.
또 다른 실시형태에서, 스트레처 단위는 리간드 단위의 황 원자와 스트레처 단위의 황 원자 사이의 디설파이드 결합을 통해 리간드 단위에 부착된다. 이 실시형태의 대표적인 스트레처 단위는 화학식 Zb의 대괄호 안에 묘사되고:
Figure pct00097
(Zb)
상기 식에서, 물결선은 A에 대한 부착을 나타내고, R17은 -C1-C10 알킬렌-, C1-C10 헤테로알킬렌-, -C3-C8 카르보사이클로-, -O-(C1-C8 알킬렌)-, -아릴렌-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-, -(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-, -C3-C8 헤테로사이클로-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-, -C1-C10 알킬렌-C(=O)-, C1-C10 헤테로알킬렌-C(=O)-, -C3-C8 카르보사이클로-C(=O)-, -O-(C1-C8 알킬렌)-C(=O)-, -아릴렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-C(=O)-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-C(=O)-,-(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C3-C8 헤테로사이클로-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-C(=O)-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-NH-, C1-C10 헤테로알킬렌-NH-, -C3-C8 카르보사이클로-NH-, -O-(C1-C8 알킬렌)-NH-, -아릴렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-NH-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-NH-, -(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-NH-, -C3-C8 헤테로사이클로-NH-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-NH-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-S-, C1-C10 헤테로알킬렌-S-, -C3-C8 카르보사이클로-S-, -O-(C1-C8 알킬렌)-S-, -아릴렌-S-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-S-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-S-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-S-, -(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-S-, -C3-C8 헤테로사이클로-S-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-S- 또는 -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-S-이다.
추가의 또 다른 실시형태에서, 스트레처 단위 전구체의 반응성 기는 리간드의 1차 또는 2차 아미노기와 결합을 형성할 수 있는 반응성 부위를 함유한다. 이들 반응성 부위의 예는 활성화된 에스테르, 예컨대, 석신이미드 에스테르, 4-니트로페닐 에스테르, 펜타플루오로페닐 에스테르, 테트라플루오로페닐 에스테르, 무수물, 산 클로라이드, 설포닐 클로라이드, 이소시아네이트 및 이소티오시아네이트를 포함하지만 이들로 제한되지 않는다. 이 실시형태의 대표적인 스트레처 단위는 식 Zci, Zcii 및 Zciii의 대괄호 안에 묘사되며:
Figure pct00098
(Zci)
Figure pct00099
(Zcii)
Figure pct00100
(Zciii)
상기 식에서, 물결선은 A에 대한 부착을 나타내고, R17은 -C1-C10 알킬렌-, C1-C10 헤테로알킬렌-, -C3-C8 카르보사이클로-, -O-(C1-C8 알킬렌)-, -아릴렌-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-, -(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-, -C3-C8 헤테로사이클로-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-, -C1-C10 알킬렌-C(=O)-, C1-C10 헤테로알킬렌-C(=O)-, -C3-C8 카르보사이클로-C(=O)-, -O-(C1-C8 알킬렌)-C(=O)-, -아릴렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-C(=O)-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-C(=O)-,-(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C3-C8 헤테로사이클로-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-C(=O)-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-NH-, C1-C10 헤테로알킬렌-NH-, -C3-C8 카르보사이클로-NH-, -O-(C1-C8 알킬렌)-NH-, -아릴렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-NH-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-NH-, -(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-NH-, -C3-C8 헤테로사이클로-NH-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-NH-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-S-, C1-C10 헤테로알킬렌-S-, -C3-C8 카르보사이클로-S-, -O-(C1-C8 알킬렌)-S-, -아릴렌-S-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-S-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-S-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-S-, -(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-S-, -C3-C8 헤테로사이클로-S-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-S- 또는 -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-S-이다.
추가의 또 다른 양태에서, 스트레처 단위 전구체의 반응성 기는 리간드 단위 상에 존재하거나 이에 도입된 친전자체와 반응할 수 있는 반응성 친핵체를 함유한다. 예를 들어, 표적 리간드 상의 탄수화물 모이어티는 과아이오딘산 나트륨과 같은 시약을 사용하여 약하게 산화될 수 있고, 산화된 탄수화물의 생성된 친전자성 작용기(-CHO)는 반응성 친핵체, 예컨대, 히드라지드, 옥심, 1차 또는 2차 아민, 히드라진, 티오세미카바존, 히드라진 카르복실레이트 또는 아릴히드라지드, 예컨대, 문헌[ Kaneko, T. et al. (1991) Bioconjugate Chem. 2:133-41]에 기재된 것을 함유하는 스트레처 단위 전구체와 축합될 수 있다. 이 실시형태의 대표적인 스트레처 단위는 식 Zdi, Zdii, 및 Zdiii의 대괄호 안에 묘사되며:
Figure pct00101
(Zdi)
Figure pct00102
(Zdii)
Figure pct00103
(Zdiii)
상기 식에서, 물결선은 A에 대한 부착을 나타내고, R17은 -C1-C10 알킬렌-, C1-C10 헤테로알킬렌-, -C3-C8 카르보사이클로-, -O-(C1-C8 알킬렌)-, -아릴렌-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-, -(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-, -C3-C8 헤테로사이클로-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-, -C1-C10 알킬렌-C(=O)-, C1-C10 헤테로알킬렌-C(=O)-, -C3-C8 카르보사이클로-C(=O)-, -O-(C1-C8 알킬렌)-C(=O)-, -아릴렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-C(=O)-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-C(=O)-,-(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C3-C8 헤테로사이클로-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-C(=O)-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-NH-, C1-C10 헤테로알킬렌-NH-, -C3-C8 카르보사이클로-NH-, -O-(C1-C8 알킬렌)-NH-, -아릴렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-NH-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-NH-, -(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-NH-, -C3-C8 헤테로사이클로-NH-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-NH-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-S-, C1-C10 헤테로알킬렌-S-, -C3-C8 카르보사이클로-S-, -O-(C1-C8 알킬렌)-S-, -아릴렌-S-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-S-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-S-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-S-, -(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-S-, -C3-C8 헤테로사이클로-S-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-S- 또는 -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-S-이다.
본 발명의 일부 양태에서, 스트레처 단위는 약 1000 달톤 이하, 약 500 달톤 이하, 약 200 달톤 이하, 약 30, 50 또는 100 달톤 내지 약 1000 달톤, 약 30, 50 또는 100 달톤 내지 약 500 달톤 또는 약 30, 50 또는 100 달톤 내지 약 200 달톤의 질량을 갖는다.
연결기 단위:
일부 실시형태에서, A는 결합 또는 연결기 단위이다. A는 스트레처 단위(Z) 또는 스트레처 단위 전구체(Z')를 분배제(S*)에 결합하는 역할을 한다. 일부 실시형태에서, A는 성분을 직접 연결하는 결합이다. 일부 실시형태에서, A는 캄프토테신 접합체 또는 캄프토테신-링커 화합물에 포함되어 스트레처 단위(Z) 또는 이의 전구체(Z')와 펩티드 방출 가능한 링커(RL) 사이에 추가 거리를 부가한다. 일부 양태에서, 추가 거리는 RL 내의 활성화에 도움이 될 것이다. 따라서, 연결기 단위(A)는, 존재하는 경우 링커 단위 또는 링커 단위 전구체의 프레임워크를 확장한다. 이와 관련하여 연결기 단위는 하나의 말단에서 스트레처 단위(또는 이의 전구체)와 공유 결합되고, 이의 다른 말단에서 분배제에 공유 결합된다. 분배제가 존재하지 않는 경우(즉, S*가 결합임), 연결기 단위는 하나의 말단에서 스트레처 단위(또는 이의 전구체)와 공유 결합되고, 이의 다른 말단에서 AA1에 공유 결합된다.
당업자는 연결기 단위가 스트레처 단위 또는 스트레처 단위 전구체에 대한 S*의 부착을 제공하는 기능을 하는 임의의 기일 수 있다는 것을 인식할 것이다. 연결기 단위는, 예를 들어, 하나 이상의(예를 들어, 1 내지 10개, 바람직하게는 1, 2, 3 또는 4개) 자연 또는 비-자연 아미노산, 아미노 알코올, 아미노 알데히드, 디아미노 잔기로 구성될 수 있다. 일부 양태에서, 연결기 단위는 단일 자연 또는 비-자연 아미노산, 아미노 알코올, 아미노 알데히드 또는 디아미노 잔기이다. 연결기 단위로 작용할 수 있는 예시적인 아미노산은 β-알라닌이다.
일부 양태에서, 연결기 단위는 하기에 나타낸 화학식을 갖고:
Figure pct00104
Figure pct00105
또는
Figure pct00106
상기 식에서, 물결선은 캄프토테신 접합체 또는 캄프토테신 링커 화합물 내의 연결기 단위의 부착을 나타내고; R111은 수소, p-히드록시벤질, 메틸, 이소프로필, 이소부틸, sec-부틸, -CH2OH, -CH(OH)CH3, -CH2CH2SCH3, -CH2CONH2, -CH2COOH, -CH2CH2CONH2, -CH2CH2COOH, -(CH2)3NHC(=NH)NH2, -(CH2)3NH2, -(CH2)3NHCOCH3, -(CH2)3NHCHO, -(CH2)4NHC(=NH)NH2, -(CH2)4NH2, -(CH2)4NHCOCH3, -(CH2)4NHCHO, -(CH2)3NHCONH2, -(CH2)4NHCONH2, -CH2CH2CH(OH)CH2NH2, 2-피리딜메틸-, 3-피리딜메틸-, 4-피리딜메틸-,
Figure pct00107
,
Figure pct00108
, 및
Figure pct00109
로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되고,
각각의 R100은 수소 및 -C1-C3 알킬, 바람직하게는 수소 또는 CH3로부터 독립적으로 선택되고; 아래 첨자 c는 1 내지 10, 바람직하게는 1 내지 3의 정수로부터 독립적으로 선택된다.
S*에 대한 부착을 위한 카르보닐기를 갖는 대표적인 연결기 단위는 하기와 같다:
Figure pct00110
상기 식에서, 각각의 예에서 R13은 -C1-C6 알킬렌-, -C3-C8카르보사이클로-, -아릴렌-, -C1-C10 헤테로알킬렌-, -C3-C8헤테로사이클로-, -C1-C10알킬렌-아릴렌-, -아릴렌-C1-C10알킬렌-, -C1-C10알킬렌-(C3-C8카르보사이클로)-, -(C3-C8카르보사이클로)-C1-C10알킬렌-, -C1-C10알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)- 및 -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되고, 아래 첨자는 1 내지 4 범위의 정수이다. 일부 실시형태에서 R13은 -C1-C6 알킬렌이고, c는 1이다.
S*에 대한 부착을 위한 카르보닐기를 갖는 또 다른 대표적인 연결기 단위는 하기와 같다:
Figure pct00111
상기 식에서, R13은 -C1-C6 알킬렌-, -C3-C8카르보사이클로-, -아릴렌-, -C1-C10 헤테로알킬렌-, -C3-C8헤테로사이클로-, -C1-C10알킬렌-아릴렌-, -아릴렌-C1-C10알킬렌-, -C1-C10알킬렌-(C3-C8카르보사이클로)-, -(C3-C8카르보사이클로)-C1-C10알킬렌-, -C1-C10알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)- 또는 -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-이다. 일부 실시형태에서 R13은 -C1-C6 알킬렌이다.
S*에 부착하는 NH 모이어티를 갖는 대표적인 연결기 단위는 하기와 같고:
Figure pct00112
상기 식에서, 각각의 예에서 R13은 -C1-C6 알킬렌-, -C3-C8카르보사이클로-, -아릴렌-, -C1-C10 헤테로알킬렌-, -C3-C8헤테로사이클로-, -C1-C10알킬렌-아릴렌-, -아릴렌-C1-C10알킬렌-, -C1-C10알킬렌-(C3-C8카르보사이클로)-, -(C3-C8카르보사이클로)-C1-C10알킬렌-, -C1-C10알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)- 및 -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되고, 아래 첨자는 1 내지 14이다. 일부 실시형태에서 R13은 -C1-C6 알킬렌이고, 아래 첨자 c는 1이다.
S*에 부착하는 NH 모이어티를 갖는 또 다른 대표적인 연결기 단위는 하기와 같고:
Figure pct00113
상기 식에서, R13은 -C1-C6 알킬렌-, -C3-C8카르보사이클로-, -아릴렌-, -C1-C10 헤테로알킬렌-, -C3-C8헤테로사이클로-, -C1-C10알킬렌-아릴렌-, -아릴렌-C1-C10알킬렌-, -C1-C10알킬렌-(C3-C8카르보사이클로)-, -(C3-C8카르보사이클로)-C1-C10알킬렌-, -C1-C10알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-, -C(=O)C1-C6 알킬렌- 또는 -C1-C6 알킬렌-C(=O)-C1-C6 알킬렌이다.
연결기 단위의 선택된 실시형태는 하기 구조를 갖는 것을 포함하고:
Figure pct00114
또는
Figure pct00115
,
상기 식에서, 질소에 인접한 물결선은 스트레처 단위(Z)(또는 이의 전구체 Z')의 공유 부착을 나타내고, 카르보닐에 인접한 물결선은 S*에 대한 부착을 나타내고; d는 1 내지 6, 바람직하게는 2 내지 6, 보다 바람직하게는 2 내지 4 범위의 정수이다.
펩티드 방출 가능한 링커(RL):
펩티드 방출 가능한 링커(RL)는 -AA1-AA2-B-이다. 일부 양태에서, 효소(예를 들어, 종양-연관 프로테아제)의 존재 하에서, AA1과 AA2 사이 또는 AA2와 B 사이의 아미드 링키지가 절단되고, 이것은 궁극적으로 유리 약물의 방출로 이어진다.
각각의 AA1 및 AA2는 자연 또는 비자연 아미노산 및/또는 이의 D- 또는 L-이성질체일 수 있다.
아미노산은 본 명세서에서 이의 전체 명칭(예를 들어, 알라닌), 3문자 코드(예를 들어, Ala), 또는 1문자 코드(예를 들어, A)에 의해서 지칭될 수 있다.
일부 실시형태에서, 각각의 AA1 및 AA2는 알라닌, 아르기닌, 아스파르트산, 아스파라긴, 히스티딘, 글리신, 글루탐산, 글루타민, 페닐알라닌, 라이신, 류신, 세린, 티로신, 트레오닌, 이소류신, 프롤린, 트립토판, 발린, 시스테인, 메티오닌, 셀레노시스테인, 오르니틴, 페니실라민, β-알라닌, 아미노알칸산, 아미노알키노산, 아미노알칸디오산, 아미노벤조산, 아미노-헤테로사이클로-알칸산, 헤테로사이클로-카르복실산, 시트룰린, 스타틴, 디아미노알칸산 및 이들의 유도체로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다. 일부 실시형태에서, 각각의 AA1 및 AA2는 알라닌, 아르기닌, 아스파르트산, 아스파라긴, 히스티딘, 글리신, 글루탐산, 글루타민, 페닐알라닌, 라이신, 류신, 세린, 티로신, 트레오닌, 이소류신, 프롤린, 트립토판, 발린, 시스테인, 메티오닌 및 셀레노시스테인으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다. 일부 실시형태에서, 각각의 AA1 및 AA2는 알라닌, 아르기닌, 아스파르트산, 아스파라긴, 히스티딘, 글리신, 글루탐산, 글루타민, 페닐알라닌, 라이신, 류신, 세린, 티로신, 트레오닌, 이소류신, 프롤린, 트립토판 및 발린으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다. 일부 실시형태에서, 각각의 AA1 및 AA2는 단백질생성 또는 비-단백질생성 아미노산으로부터 선택된다.
또 다른 실시형태에서, 각각의 AA1 및 AA2는 하기 L-(자연) 아미노산: 알라닌, 아르기닌, 아스파르트산, 아스파라긴, 히스티딘, 글리신, 글루탐산, 글루타민, 페닐알라닌, 라이신, 류신, 세린, 티로신, 트레오닌, 이소류신, 트립토판 및 발린으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다.
또 다른 실시형태에서, 각각의 AA1 및 AA2는 하기 이러한 자연 아미노산의 D-이성질체: 알라닌, 아르기닌, 아스파르트산, 아스파라긴, 히스티딘, 글리신, 글루탐산, 글루타민, 페닐알라닌, 라이신, 류신, 세린, 티로신, 트레오닌, 이소류신, 트립토판 및 발린으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다.
특정 실시형태에서, AA1은 자연 아미노산이다. 특정 실시형태에서, AA1은 비-자연 아미노산이다. 특정 실시형태에서, AA1은 자연 아미노산의 D-이성질체이다.
일부 실시형태에서, AA1은 알라닌, 아르기닌, 아스파르트산, 아스파라긴, 히스티딘, 글리신, 글루탐산, 글루타민, 페닐알라닌, 라이신, 류신, 세린, 티로신, 트레오닌, 이소류신, 프롤린, 트립토판, 발린, 시스테인, 메티오닌, 셀레노시스테인, 오르니틴, 페니실라민, β-알라닌, 아미노알칸산, 아미노알키노산, 아미노알칸디오산, 아미노벤조산, 아미노-헤테로사이클로-알칸산, 헤테로사이클로-카르복실산, 시트룰린, 스타틴, 디아미노알칸산 및 이들의 유도체로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시형태에서, AA1은 알라닌, 아르기닌, 아스파르트산, 아스파라긴, 히스티딘, 글리신, 글루탐산, 글루타민, 페닐알라닌, 라이신, 류신, 세린, 티로신, 트레오닌, 이소류신, 프롤린, 트립토판, 발린, 시스테인, 메티오닌 및 셀레노시스테인으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시형태에서, AA1은 알라닌, 아르기닌, 아스파르트산, 아스파라긴, 히스티딘, 글리신, 글루탐산, 글루타민, 페닐알라닌, 라이신, 류신, 세린, 티로신, 트레오닌, 이소류신, 프롤린, 트립토판 및 발린으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시형태에서, AA1은 단백질생성 및 비-단백질생성 아미노산으로부터 선택된다. 일부 실시형태에서, AA1은 Val이다. 일부 실시형태에서, AA1은 Ala 또는 D-Ala이다.
특정 실시형태에서, AA2는 자연 아미노산이다. 특정 실시형태에서, AA2는 비-자연 아미노산이다. 특정 실시형태에서, AA2는 자연 아미노산의 D-이성질체이다.
일부 실시형태에서, AA2는 알라닌, 아르기닌, 아스파르트산, 아스파라긴, 히스티딘, 글리신, 글루탐산, 글루타민, 페닐알라닌, 라이신, 류신, 세린, 티로신, 트레오닌, 이소류신, 프롤린, 트립토판, 발린, 시스테인, 메티오닌, 셀레노시스테인, 오르니틴, 페니실라민, β-알라닌, 아미노알칸산, 아미노알키노산, 아미노알칸디오산, 아미노벤조산, 아미노-헤테로사이클로-알칸산, 헤테로사이클로-카르복실산, 시트룰린, 스타틴, 디아미노알칸산 및 이들의 유도체로 이루어진 군으로부터 택된다. 일부 실시형태에서, AA2는 알라닌, 아르기닌, 아스파르트산, 아스파라긴, 히스티딘, 글리신, 글루탐산, 글루타민, 페닐알라닌, 라이신, 류신, 세린, 티로신, 트레오닌, 이소류신, 프롤린, 트립토판, 발린, 시스테인, 메티오닌 및 셀레노시스테인으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시형태에서, AA2는 알라닌, 아르기닌, 아스파르트산, 아스파라긴, 히스티딘, 글리신, 글루탐산, 글루타민, 페닐알라닌, 라이신, 류신, 세린, 티로신, 트레오닌, 이소류신, 프롤린, 트립토판 및 발린으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시형태에서, 각각의 AA2는 단백질생성 및 비-단백질생성 아미노산으로부터 선택된다. 일부 실시형태에서, AA2는 Lys이다. 일부 실시형태에서, AA2는 Ala 또는 D-Ala이다.
특정 실시형태에서, B는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp, D-Ala, Aib 및 pAbz로 이루어진 군으로부터 선택된다. "Aib"는 아미노이소부티르산이다. "pAbz"는 4-아미노벤조산이다. 특정 실시형태에서, B는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp 및 D-Ala으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시형태에서, B는 D-Ala, Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Phe, Val, Leu, Met, 및 Trp로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시형태에서, B는 Ala이다. 일부 실시형태에서, B는 D-Ala이다. 일부 실시형태에서, B는 Arg, Lys, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 실시형태에서, B는 Thr 또는 Gln이다. 일부 실시형태에서, B는 Phe, Val, Leu, Met 또는 Trp이다. 일부 실시형태에서, B는 Ala, Phe, Val, Leu, Met 또는 Trp이다. 일부 실시형태에서, B는 D-Ala 또는 Aib이다.
특정 실시형태에서, B'는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp, D-Ala, Aib 및 pAbz로 이루어진 군으로부터 선택된다. 특정 실시형태에서, B'는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp 및 D-Ala으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시형태에서, B'는 D-Ala, Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Phe, Val, Leu, Met, 및 Trp로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시형태에서, B'는 Ala이다. 일부 실시형태에서, B'는 D-Ala이다. 일부 실시형태에서, B'는 Arg, Lys, His, Asp 또는 Glu이다. 일부 실시형태에서, B'는 Thr 또는 Gln이다. 일부 실시형태에서, B'는 Phe, Val, Leu, Met 또는 Trp이다. 일부 실시형태에서, B'는 Ala, Phe, Val, Leu, Met 또는 Trp이다. 일부 실시형태에서, B'는 D-Ala 또는 Aib이다.
유용한 펩티드 방출 가능한 링커는 특정 효소, 예를 들어, 종양-연관 프로테아제에 의한 효소적 절단을 위한 이들의 선택성에서 설계되고 최적화될 수 있다. 일부 실시형태에서, 링키지의 절단은 카텝신 B, C 또는 D, 또는 플라스민 프로테아제에 의해 촉매된다.
일부 실시형태에서, AA1은 하기에 제시된 화학식을 가지며:
Figure pct00116
상기 식에서, R19는 수소, 메틸, 이소프로필, 이소부틸, sec-부틸, 벤질, p-히드록시벤질, -CH2OH, -CH(OH)CH3, -CH2CH2SCH3, -CH2CONH2, -CH2COOH, -CH2CH2CONH2, -CH2CH2COOH, -(CH2)3NHC(=NH)NH2, -(CH2)3NH2, -(CH2)3NHCOCH3, -(CH2)3NHCHO, -(CH2)4NHC(=NH)NH2, -(CH2)4NH2, -(CH2)4NHCOCH3, -(CH2)4NHCHO, -(CH2)3NHCONH2, -(CH2)4NHCONH2, -CH2CH2CH(OH)CH2NH2, 2-피리딜메틸-, 3-피리딜메틸-, 4-피리딜메틸-, 페닐, 사이클로헥실,
Figure pct00117
,
Figure pct00118
,
Figure pct00119
,
Figure pct00120
,
Figure pct00121
,
Figure pct00122
,
Figure pct00123
,
Figure pct00124
, 및
Figure pct00125
로 이루어진 군으로부터 선택된다.
일부 양태에서, R19는 수소, 메틸, 이소프로필, 이소부틸, sec-부틸, -(CH2)3NH2 또는 -(CH2)4NH2이다. 일부 양태에서, R19는 수소, 메틸, 이소프로필 또는 -(CH2)4NH2이다.
일부 실시형태에서, AA2는 하기에 제시된 화학식을 가지며:
Figure pct00126
상기 식에서, R19a는 수소, 메틸, 이소프로필, 이소부틸, sec-부틸, 벤질, p-히드록시벤질, -CH2OH, -CH(OH)CH3, -CH2CH2SCH3, -CH2CONH2, -CH2COOH, -CH2CH2CONH2, -CH2CH2COOH, -(CH2)3NHC(=NH)NH2, -(CH2)3NH2, -(CH2)3NHCOCH3, -(CH2)3NHCHO, -(CH2)4NHC(=NH)NH2, -(CH2)4NH2, -(CH2)4NHCOCH3, -(CH2)4NHCHO, -(CH2)3NHCONH2, -(CH2)4NHCONH2, -CH2CH2CH(OH)CH2NH2, 2-피리딜메틸-, 3-피리딜메틸-, 4-피리딜메틸-, 페닐, 사이클로헥실,
Figure pct00127
,
Figure pct00128
,
Figure pct00129
,
Figure pct00130
,
Figure pct00131
,
Figure pct00132
,
Figure pct00133
,
Figure pct00134
, 및
Figure pct00135
로 이루어진 군으로부터 선택된다.
일부 양태에서, R19a는 수소, 메틸, 이소프로필, 이소부틸, sec-부틸, -(CH2)3NH2 또는 -(CH2)4NH2이다. 일부 양태에서, R19a는 수소, 메틸, 이소프로필 또는 -(CH2)4NH2이다.
특정 실시형태에서, AA1 및 AA2 둘 다는 자연 아미노산이다. 다른 실시형태에서, AA1 및 AA2 둘 다는 비- 자연 아미노산이다. 일부 실시형태에서, AA1은 자연 아미노산이고, AA2는 비-자연 아미노산이다. 일부 실시형태에서, AA2는 자연 아미노산이고, AA1은 비-자연 아미노산이다. 일부 실시형태에서, AA1은 자연 아미노산이고, AA2는 자연 아미노산의 D-이성질체이다. 일부 실시형태에서, AA2는 자연 아미노산이고, AA1은 자연 아미노산의 D-이성질체이다.
또 다른 실시형태에서, AA1 및 AA2는 Ala, D-Ala, Lys 및 Val으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다. 또 다른 실시형태에서, -AA1-AA2-는 -Ala-Ala-, -Ala-D-Ala-, -Ala-Lys-, -Ala-Val, -D-Ala-Ala-, -D-Ala-D-Ala-, -D-Ala-Lys-, -D-Ala-Val, -Lys-Ala-, -Lys-D-Ala-, -Lys-Lys-, -Lys-Val, -Val-Ala-, -Val-D-Ala-, -Val-Lys- 또는 -Val-Val-이다. 추가의 또 다른 실시형태에서, -AA1-AA2-는 -Ala-Ala-, -Ala-D-Ala-, -D-Ala-Ala-, -Val-Ala- 또는 -Val-Lys-이다. 추가의 또 다른 실시형태에서, -AA1-AA2-는 -Ala-Ala-, -Ala-D-Ala-, -D-Ala-Ala- 또는 -Val-Lys-이다.
또 다른 실시형태에서, AA1, AA2 및 B는 Ala 및 D-Ala으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다. 일부 실시형태에서, -AA1-AA2-B-는 -Ala-Ala-Ala-, -D-Ala-Ala-Ala-, -Ala-D-Ala-Ala-, -Ala-Ala-D-Ala, -D-Ala-D-Ala-Ala-, -Ala-D-Ala-D-Ala-, -D-Ala-Ala-D-Ala- 또는 -D-Ala-D-Ala-D-Ala-이다. 일부 실시형태에서, -AA1-AA2-B-는 -Ala-Ala-Ala-, -D-Ala-Ala-Ala-, -Ala-D-Ala-Ala- 또는 -Ala-Ala-D-Ala-이다.
또 다른 실시형태에서, AA1은 Val이고, AA2는 Lys이고, B는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp, D-Ala, Aib 및 pAbz로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시형태에서, -AA1-AA2-B-는 -Val-Lys-Arg-, -Val-Lys-Lys-, -Val-Lys-His-, -Val-Lys-Asp-, -Val-Lys-Glu-, -Val-Lys-Thr-, -Val-Lys-Gln-, -Val-Lys-Ala-, -Val-Lys-Phe-, -Val-Lys-Val-, -Val-Lys-Leu-, -Val-Lys-Met-, -Val-Lys-Trp-, -Val-Lys-D-Ala-, -Val-Lys-Aib- 또는 -Val-Lys-pAbz-이다. 또 다른 실시형태에서, AA1은 Val, AA2는 Lys이고, B는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp 및 D-Ala로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시형태에서, -AA1-AA2-B-는 -Val-Lys-Arg-, -Val-Lys-Lys-, -Val-Lys-His-, -Val-Lys-Asp-, -Val-Lys-Glu-, -Val-Lys-Thr-, -Val-Lys-Gln-, -Val-Lys-Ala-, -Val-Lys-Phe-, -Val-Lys-Val-, -Val-Lys-Leu-, -Val-Lys-Met-, -Val-Lys-Trp- 또는 -Val-Lys-D-Ala-이다.
분배제:
일부 실시형태에서, S*는 결합 또는 분배제이다. 본 명세서에 기술된 캄프토테신 접합체 또는 캄프토테신-링커 화합물은 또한 분배제를 포함할 수 있다. 분배제 부분은, 예를 들어, 특정 캄프토테신 또는 기타 링커 단위(또는 링커 단위 전구체) 성분의 소수성을 마스킹하는 데 유용하다.
대표적인 분배제는 폴리에틸렌 글리콜(PEG) 단위, 사이클로덱스트린 단위, 폴리아미드, 친수성 펩티드, 다당류 및 덴드리머를 포함한다.
폴리에틸렌 글리콜(PEG) 단위, 사이클로덱스트린 단위, 폴리아미드, 친수성 펩티드, 다당류 또는 덴드리머가 S*에 포함되는 경우, 기는 '인 라인' 성분으로 또는 측쇄 또는 분지된 성분으로 존재할 수 있다.
폴리에틸렌 글리콜(PEG) 단위
다분산성 PEG, 단분산성 PEG 및 이산성 PEG는 본 발명의 화합물에서 분배제의 일부로 사용될 수 있다. 다분산성 PEG는 크기 및 분자량의 이종 혼합물인 반면, 단분산성 PEG는 전형적으로 이종 혼합물로부터 정제되고, 따라서 단일 사슬 길이 및 분자량을 제공한다. 바람직한 PEG는 중합 공정을 통하지 않고 단계별 방식으로 합성되는 화합물인, 이산성 PEG이다. 이산성 PEG는 정의되고 명시된 사슬 길이를 갖는 단일 분자를 제공한다.
본 명세서에 제공된 PEG는 하나 또는 다수의 폴리에틸렌 글리콜 사슬을 포함한다. 폴리에틸렌 글리콜 사슬은 적어도 2개의 에틸렌 옥시드(CH2CH2O) 소단위로 구성된다. 폴리에틸렌 글리콜 사슬은, 예를 들어, 선형, 분지형 또는 별 형상의 구성으로 함께 연결될 수 있다. 전형적으로, 적어도 하나의 PEG 사슬은 링커 단위 또는 링커 단위 전구체의 잔여부 상의 적절한 위치에 대한 공유 부착을 위해서 하나의 단부 또는 양 단부에서 유도체화된다. 링커 단위 또는 링커 단위 전구체 내의 예시적인 부착은 비-조건부로 절단 가능한 링키지에 의해 또는 조건부로 절단 가능한 링키지에 의해서 이루어진다. 예시적인 부착은 아미드 링키지, 에테르 링키지, 에스테르 링키지, 히드라존 링키지, 옥심 링키지, 디설파이드 링키지, 펩티드 링키지 또는 트리아졸 링키지를 통해서 이루어진다. 일부 양태에서, 링커 단위 또는 링커 단위 전구체 내의 부착은 비-조건부로 절단 가능한 링키지에 의해 이루어진다. 일부 양태에서, 링커 단위 내 또는 링커 단위 전구체 내의 부착은 에스테르 링키지, 히드라존 링키지, 옥심 링키지 또는 디설파이드 링키지를 통해서 이루어지지 않는다. 일부 양태에서, 링커 단위 또는 링커 단위 전구체 내의 부착은 히드라존 링키지를 통해서 이루어지지 않는다.
조건부로 절단 가능한 링키지는 혈장에서 순환하는 동안 절단에 실질적으로 민감하지 않지만 세포내 또는 종양내 환경에서 절단에 민감한 링키지를 지칭한다. 비-조건부로 절단 가능한 링키지는 임의의 생물학적 환경에서 절단에 실질적으로 민감하지 않은 링키지이다. 히드라존의 화학적 가수분해, 디설파이드의 환원, 펩티드 결합 또는 글리코시드 링키지의 효소적 절단은 조건부로 절단 가능한 링키지의 예이다.
당업자에게 이용 가능한 다수의 PEG 부착 방법이 있다[예를 들어, 문헌[Goodson, et al. (1990) Bio/Technology 8:343](부위-지향 돌연변이생성 후 이의 글리코실화 부위에서 인터류킨-2의 페길화); EP 0 401 384(G-CSF에 대한 PEG 커플링); 문헌[Malik, et al., (1992) Exp. Hematol. 20:1028-1035](트레실 클로라이드를 사용한 GM-CSF의 페길화); ACT 공개 WO 90/12874(시스테인 -특이적 mPEG 유도체를 사용한 재조합 방식으로 도입된 시스테인 잔기를 함유하는 에리트로포이에틴의 페길화); 미국 특허 제5,757,078호(EPO 펩티드의 페길화); 미국 특허 5,672,662(생명공학 적용을 위한 프로피온산 및 부탄산 및 이의 작용성 유도체로 일치환된 폴리(에틸렌 글리콜) 및 관련 중합체); 미국 특허 6,077,939(N-말단 .알파.-펩티드 탄소의 페길화); 문헌[Veronese et al., (1985) Appl. Biochem. Bioechnol 11:141-142](PEG-니트로페닐카르보네이트("PEG-NPC") 또는 PEG-트리클로로페닐카르보네이트를 사용한 N-말단 α-탄소의 페길화); 및 문헌[Veronese (2001) Biomaterials 22:405-417](펩티드 및 단백질 페길화에 대한 리뷰 문헌) 참고].
예를 들어, PEG는 반응성 기를 통해 아미노산 잔기에 공유적으로 결합될 수 있다. 반응성 기는 활성화된 PEG 분자가 결합될 수 있는 기(예를 들어, 유리 아미노 또는 카르복실기)이다. 예를 들어, N-말단 아미노산 잔기 및 라이신(K) 잔기는 유리 아미노기를 갖고; C-말단 아미노산 잔기는 유리 카르복실기를 갖는다. 티올기(예를 들어, 시스테인 잔기상에서 발견됨)는 또한 PEG를 부착하기 위한 반응성 기로 유용하다. 또한, 폴리펩티드의 C-말단에 활성화된 기(예를 들어, 히드라지드, 알데히드 및 방향족-아미노기)를 특이적으로 도입하기 위한 효소-보조 방법이 설명되어 있다(문헌[Schwarz, et al. (1990) Methods Enzymol. 184:160; Rose, et al. (1991) Bioconjugate Chem. 2:154]; 및 문헌[Gaertner, et al. (1994) J. Biol. Chem. 269:7224].
일부 실시형태에서, PEG 분자는 상이한 반응성 모이어티를 갖는 메톡시화 PEG("mPEG")를 사용하여 아미노기에 부착될 수 있다. 이러한 반응성 모이어티의 비-제한적인 예는 석신이미딜 석시네이트(SS), 석신이미딜 카르보네이트(SC), mPEG-이미데이트, 파라-니트로페닐카르보네이트(NPC), 석신이미딜 프로피오네이트(SPA) 및 시아누르 클로라이드를 포함한다. 이러한 mPEG의 비제한적인 예는 mPEG-석신이미딜 석시네이트(mPEG-SS), mPEG2-석신이미딜 석시네이트(mPEG2-SS); mPEG-석신이미딜 카르보네이트(mPEG-SC), mPEG2-석신이미딜 카르보네이트(mPEG2-SC); mPEG- 이미데이트, mPEG-파라-니트로페닐카르보네이트(mPEG-NPC), mPEG-이미데이트; mPEG2-파라-니트로페닐카르보네이트(mPEG2-NPC); mPEG-석신이미딜 프로피오네이트(mPEG-SPA); mPEG2-석신이미딜 프로피오네이트(mPEG, --SPA); mPEG-N-히드록시-석신이미드(mPEG-NHS); mPEG2-N-히드록시-석신이미드(mPEG2--NHS); mPEG-시아누르 클로라이드; mPEG2-시아누르 클로라이드; mPEG2-Lysinol-NPC 및 mPEG2-Lys-NHS를 포함한다.
일반적으로, PEG 단위를 구성하는 적어도 하나의 PEG 사슬은 작용화되어 다른 링커 단위(또는 링커 단위 전구체) 성분에 공유 부착할 수 있다.
작용화는, 예를 들어 아민, 티올, NHS 에스테르, 말레이미드, 알킨, 아지드, 카르보닐 또는 다른 작용기를 통한 것을 포함한다. 일부 실시형태에서, PEG 단위는 다른 링커 단위 성분에 커플링을 제공하거나 둘 이상의 PEG 사슬의 커플링을 용이하게 하는 비-PEG 물질(즉, -CH2CH2O-로 구성되지 않은 물질)을 추가로 포함한다.
링커 단위에서 PEG 단위(또는 다른 분배제)의 존재는 생성된 캄프토테신 접합체의 약동학에 두 가지 잠재적인 영향을 미칠 수 있다. 바람직한 영향은 캄프토테신 접합체의 노출된 소수성 요소 또는 캄프토테신 자체에 의해 유도된 비-특이적 상호작용의 감소로 인해 발생하는 제거율에서의 감소(결과적으로 노출에서의 증가)이다. 두 번째 영향은 바람직하지 않고 캄프토테신 접합체의 분자량에서의 증가로 인해 때때로 발생하는 부피 및 분포 속도의 감소이다. PEG 소단위의 수를 증가시키면 접합체의 유체역학적 반경이 증가하여, 전형적으로 감소된 확산성을 초래한다. 이어서, 감소된 확산성은 전형적으로 종양 안으로 침투하는 캄프토테신 접합체의 능력을 감소시킨다(문헌[Schmidt and Wittrup, Mol Cancer Ther 2009;8:2861-2871]). 이들 2개의 경쟁하는 약동학적 효과 때문에, 캄프토테신 접합체 제거율을 감소시키고 따라서 혈장 노출을 증가시킬 만큼 충분히 크지만, 의도된 표적 세포 모 집단에 도달하는 캄프토테신 접합체의 능력을 방해하는 정도로 그것의 확산성을 크게 감소시킬 만큼 크지는 않은 PEG를 사용하는 것이 바람직하다. 특정 약물-링커에 대한 최적의 PEG 크기를 선택하기 위한 방법론에 대해, 본 명세서에 참고로 포함된 실시예(예를 들어, US2016/0310612의 실시예 1, 18 및 21)를 참조한다.
일 그룹의 실시형태에서, PEG 단위는 적어도 2개의 소단위, 적어도 3개의 소단위, 적어도 4개의 소단위, 적어도 5개의 소단위, 적어도 6개의 소단위, 적어도 7개의 소단위, 적어도 8개의 소단위, 적어도 9개의 소단위, 적어도 10개의 소단위, 적어도 11개의 소단위, 적어도 12개의 소단위, 적어도 13개의 소단위, 적어도 14개의 소단위, 적어도 15개의 소단위, 적어도 16개의 소단위, 적어도 17개의 소단위, 적어도 18개의 소단위, 적어도 19개의 소단위, 적어도 20개의 소단위, 적어도 21개의 소단위, 적어도 22개의 소단위, 적어도 23개의 소단위, 또는 적어도 24개의 소단위를 각각 갖는 하나 이상의 선형 PEG 사슬을 포함한다. 바람직한 실시형태에서, PEG 단위는 모두 합해 적어도 4개의 소단위, 적어도 6개의 소단위, 적어도 8개의 소단위, 적어도 10개의 소단위, 또는 적어도 12개의 소단위를 포함한다. 일부 이러한 실시형태에서, PEG 단위는 모두 합해 약 72개 이하의 소단위, 바람직하게는 모두 합해 약 36개 이하의 소단위를 포함한다.
다른 그룹의 실시형태에서, PEG 단위는 모두 합해 4 내지 72개, 4 내지 60개, 4 내지 48개, 4 내지 36개 또는 4 내지 24개의 소단위, 5 내지 72개, 5 내지 60개, 5 내지 48개, 5 내지 36개 또는 5 내지 24개의 소단위, 6 내지 72개, 6 내지 60개, 6 내지 48개, 6 내지 36개 또는 6 내지 24개의 소단위, 7 내지 72개, 7 내지 60개, 7 내지 48 개, 7 내지 36개 또는 7 내지 24개의 소단위, 8 내지 72개, 8 내지 60개, 8 내지 48개, 8 내지 36개 또는 8 내지 24개의 소단위, 9 내지 72개, 9 내지 60개, 9 내지 48개, 9 내지 36개 또는 9 내지 24개의 소단위, 10 내지 72개, 10 내지 60개, 10 내지 48개, 10 내지 36개 또는 10 내지 24개의 소단위, 11 내지 72개, 11 내지 60개, 11 내지 48개, 11 내지 36개 또는 11 내지 24개의 소단위, 12 내지 72개, 12 내지 60개, 12 내지 48개, 12 내지 36개 또는 12 내지 24개의 소단위, 13 내지 72개, 13 내지 60개, 13 내지 48개, 13 내지 36개 또는 13 내지 24개의 소단위, 14 내지 72개, 14 내지 60개, 14 내지 48개, 14 내지 36개 또는 14 내지 24개 의 소단위, 15 내지 72개, 15 내지 60개, 15 내지 48개, 15 내지 36개 또는 15 내지 24개의 소단위, 16 내 지 72개, 16 내지 60개, 16 내지 48개, 16 내지 36개 또는 16 내지 24개의 소단위, 17 내지 72개, 17 내지 60개, 17 내지 48개, 17 내지 36개 또는 17 내지 24개의 소단위, 18 내지 72개, 18 내지 60개, 18 내지 48개, 18 내지 36개 또는 18 내지 24개의 소단위, 19 내지 72개, 19 내지 60개, 19 내지 48개, 19 내지 36개 또는 19 내지 24개의 소단위, 20 내지 72개, 20 내지 60개, 20 내지 48개, 20 내지 36개 또는 20 내지 24개 의 소단위, 21 내지 72개, 21 내지 60개, 21 내지 48개, 21 내지 36개 또는 21 내지 24개의 소단위, 22 내 지 72개, 22 내지 60개, 22 내지 48개, 22 내지 36개 또는 22 내지 24개의 소단위, 23 내지 72개, 23 내지 60개, 23 내지 48개, 23 내지 36개 또는 23 내지 24개의 소단위, 또는 24 내지 72개, 24 내지 60개, 24 내지 48개, 24 내지 36개 또는 24개의 소단위를 포함한다.
일부 실시형태에서, 분배제는 2 내지 20개, 또는 2 내지 12개, 또는 4 내지 12개, 또는 4, 8 또는 12개의 -CH2CH2O-소단위를 포함하는 선형 PEG 단위이다. 일부 실시형태에서, 선형 PEG 단위는 PEG 단위의 하나의 단부에서 AA1 단위에 연결되고, PEG 단위의 다른 단부에서 A에 연결된다. 일부 실시형태에서, PEG 단위는 A와 아미드 결합을 형성하는 -NH-기(예를 들어, -A-NH-(CH2CH2O)n-)를 통해 A 단위에 연결되고, AA1(예를 들어, -(CH2CH2O)n-CH2CH2C(O)-AA1)와 아미드 결합을 형성하는 -CH2CH2C(O)-기를 통해 AA1에 연결된다.
RL 및 A에 연결된 PEG 단위에 대한 예시적인 실시형태는 아래 도시되어 있고:
Figure pct00136
,
특정 실시형태에서, PEG 단위는 다음과 같으며:
Figure pct00137
,
상기 식에서, 좌측의 물결선은 A에 대한 부착의 부위를 나타내고, 우측의 물결선은 RL에 대한 부착의 부위를 나타내고, 각각의 b는 독립적으로 2 내지 72, 4 내지 72, 6 내지 72, 8 내지 72, 10 내지 72, 12 내지 72, 2 내지 24, 4 내지 24, 6 내지 24, 또는 8 내지 24, 2 내지 12, 4 내지 12, 6 내지 12, 및 8 내지 12로부터 독립적으로 선택된다. 일부 실시형태에서, 아래 첨자 b는 2, 4, 8, 12 또는 24이다. 일부 실시형태에서, 아래 첨자 b는 2이다. 일부 실시형태에서, 아래 첨자 b는 4이다. 일부 실시형태에서, 아래 첨자 b는 8이다. 일부 실시형태에서, 아래 첨자 b는 12이다.
본 명세서에 사용된 바와 같이, 용어 "PEG2", "PEG4", "PEG8" 및 "PEG12"는 다수의 PEG 소단위(즉, 다수의 아래 첨자 "b")를 포함하는 PEG 단위의 특정 실시형태를 지칭한다. 예를 들어, "PEG2"는 2개의 PEG 소단위를 포함하는 PEG 단위의 실시형태를 지칭하고, "PEG4"는 4개의 PEG 소단위를 포함하는 PEG 단위의 실시형태를 지칭하고, "PEG8"은 8개의 PEG 소단위를 포함하는 PEG 단위의 실시형태를 지칭하고, "PEG12"는 12개의 PEG 소단위를 포함하는 PEG 단위의 실시형태를 지칭한다.
본 명세서에 기재된 바와 같이, PEG 소단위의 수는 생성된 캄프토테신 접합체의 제거율을 향상시키지만 접합체가 종양 내로 침투하는 능력에 유의하게 영향을 미치지 않도록 선택된다. 실시형태에서, 사용을 위해 선택되는 PEG 소단위의 수는 바람직하게는 2개의 소단위 내지 약 24개의 소단위, 4개의 소단위 내지 약 24개의 소단위, 보다 바람직하게는 약 4개의 소단위 내지 약 12개의 소단위를 가질 것이다.
본 개시내용의 바람직한 실시형태에서, PEG 단위는 약 300 달톤 내지 약 5 킬로달톤; 약 300 달톤 내지 약 4 킬로달톤; 약 300 달톤 내지 약 3 킬로달톤; 약 300 달톤 내지 약 2 킬로달톤; 또는 약 300 달톤 내지 약 1 킬로달톤이다. 일부 이러한 양태에서, PEG 단위는 적어도 6개의 소단위 또는 적어도 8개의, 10개의 또는 12개의 소단위를 갖는다. 일부 이러한 양태에서, PEG 단위는 적어도 6개의 소단위 또는 적어도 8개의, 10개의 또는 12개의 소단위이지만 72개의 이하 소단위, 바람직하게는 36개의 이하 소단위를 갖는다.
PEG 소단위를 언급할 때 및 문맥에 따라 소단위의 수가, 예를 들어 캄프토테신 접합체 또는 캄프토테신-링커 화합물의 집단을 언급하고 다분산성 PEG를 사용하는 경우 평균 수를 나타낼 수 있다는 것을 이해할 것이다.
아래 첨자 "p"
아래 첨자 p는 개별 캄프토테신 접합체의 리간드 단위 상의 캄프토테신-링커 모이어티의 수를 나타내고, 바람직하게는 1 내지 16, 1 내지 12, 1 내지 10, 또는 1 내지 8 범위인 정수이다. 본 명세서의 임의의 실시형태에서, 개별 캄프토테신 접합체의 리간드 단위에 접합된 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 또는 16개의 약물 링커 모이어티가 존재할 수 있다. 본 발명의 또 다른 양태에서, 실시형태의 하나의 군은, 각각의 리간드 단위(즉, 캄프토테신 접합체 조성물)에 결합된 캄프토테신 링커 화합물 모이어티의 수를 제외하고, 실질적으로 동일한 개별 캄프토테신 접합체의 집단을 기술한다. 집단은 캄프토테신 접합체의 리간드 단위에 결합된 캄프토테신 링커 화합물 모이어티의 평균 수(예를 들어, 약물-항체 비율("DAR": Drug-Antibody Ratio))에 의해서 기재될 수 있다. 실시형태의 이러한 군에서, 평균은 1 내지 약 16, 1 내지 약 12, 1 내지 약 10 또는 1 내지 약 8, 2 내지 약 16, 2 내지 약 12, 2 내지 약 10 또는 2 내지 약 8의 범위의 수이다. 일부 양태에서, 평균은 약 2이다. 일부 양태에서, 평균은 약 4이다. 일부 양태에서, 평균은 약 8이다. 일부 양태에서, 평균은 약 16이다. 일부 양태에서, 평균은 2이다. 일부 양태에서, 평균은 4이다. 일부 양태에서, 평균은 8이다. 일부 양태에서, 평균은 16이다. 일부 양태에서, 집단은 조성물에서 우세한 ADC의 약물 로딩에 의해서 기재될 수 있다.
일부 양태에서, 접합은 사슬간 디설파이드를 통해 이루어질 것이고, 리간드 분자에 접합된 1 내지 약 8개의 캄프토테신 링커 화합물 분자가 존재할 것이다. 일부 양태에서, 접합은 사슬간 디설파이드뿐만 아니라 도입된 시스테인 잔기를 통해 이루어질 것이고, 리간드 분자에 접합된 1 내지 10개 또는 1 내지 12개 또는 1 내지 14개 또는 1 내지 약 16개의 캄프토테신 링커 화합물 분자가 존재할 것이다. 일부 양태에서, 접합은 도입된 시스테인 잔기를 통해 이루어질 것이고, 리간드 분자에 접합된 2 또는 4개의 캄프토테신 링커 화합물 분자가 존재할 것이다.
부분적으로 방출된 유리 약물
일부 실시형태에서 접합체의 RL 단위가 절단되어, 하나의 아미노산 잔기가 부착된 약물 모이어티를 남기는 화합물이 존재한다. 일부 실시형태에서, 부분적으로 방출된 유리 약물은 하기 화학식 (III)의 화합물:
Figure pct00138
(III)
또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염이고, 상기 식에서, B'는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp, D-Ala, Aib 및 pAbz로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산이고; RF는 H 또는 C1-C6 알킬이다.
일부 실시형태에서, 화학식 (III)의 화합물은 생물학적으로 활성인 화합물이다. 일부 실시형태에서, 이러한 화합물은 토포이소머라제를 저해하는 방법, 종양 세포를 사멸시키는 방법; 종양 세포, 암 세포 또는 종양의 성장 저해하는 방법; 종양 세포 또는 암 세포의 복제를 저해하는 방법, 전반적인 종양 부담을 약화시키거나 암 세포 수를 감소시키는 방법 또는 암 또는 자가면역 질환과 관련된 하나 이상의 증상을 개선하는 방법에 유용하다. 이러한 방법은 예를 들어, 암 세포를 화학식 (III)의 화합물과 접촉시키는 단계를 포함한다.
캄프토테신 접합체 혼합물들 및 조성물
본 발명은 본 명세서에 기술된 임의의 캄프토테신 접합체를 포함하는 캄프토테신 접합체 혼합물 및 약제학적 조성물을 제공한다. 혼합물 및 약제학적 조성물은 복수의 접합체를 포함한다. 일부 양태에서, 혼합물 또는 조성물에서 각각의 접합체는 동일하거나 실질적으로 동일하지만, 혼합물 또는 조성물에서 리간드 상의 약물-링커의 분포뿐만 아니라 약물 로딩은 달라질 수 있다. 예를 들어, 표적 리간드로서 약물-링커를 항체에 접합시키는 데 사용되는 접합 기술은 혼합물 및/또는 조성물 내의 항체(리간드 단위) 상의 캄프토테신 링커 화합물의 분포와 관련하여 불균질한 조성물 또는 혼합물을 초래할 수 있다. 일부 양태에서, 이러한 분자의 혼합물 또는 조성물에서 항체 분자 각각에 대한 캄프토테신 링커 화합물의 로딩은 1 내지 14의 범위인 정수이다.
이들 양태에서, 조성물을 전체로 언급할 때 약물-링커의 로딩은 1 내지 약 14 범위의 수이다. 조성물 또는 혼합물 내에, 또한 작은 백분율의 비접합된 항체가 존재할 수 있다. 혼합물 또는 조성물에서 리간드 단위당 평균 약물-링커의 수(즉, 평균 약물-로딩)는 그것이 표적 세포에 전달될 수 있는 약물의 최대 양을 결정하기 때문에 중요한 속성이다. 평균 약물 로딩은 1, 2 또는 약 2, 3 또는 약 3, 4 또는 약 4, 5 또는 약 5, 6 또는 약 6, 7 또는 약 7, 8 또는 약 8, 9 또는 약 9, 10 또는 약 10, 11 또는 약 11, 12 또는 약 12, 13 또는 약 13, 14 또는 약 14, 15 또는 약 15, 16 또는 약 16일 수 있다.
일부 양태에서, 혼합물 및 약제학적 조성물은 복수(즉, 집단)의 접합체를 포함하지만, 접합체는 동일하거나 실질적으로 동일하고 혼합물 및/또는 조성물 내의 리간드 분자 상의 약물-링커의 분포에 대해 그리고 혼합물 및/또는 조성물 내의 리간드 분자 상의 약물-링커의 로딩에 대해 실질적으로 균질하다. 이러한 일부 양태에서, 항체 리간드 단위에 대한 약물-링커의 로딩은 2 또는 4이다. 조성물 또는 혼합물 내에, 또한 작은 백분율의 비접합된 항체가 존재할 수 있다. 이러한 실시형태에서 평균 약물 로딩은 약 2 또는 약 4이다. 전형적으로, 이러한 조성물 및 혼합물은 부위-특이적 접합 기술의 사용으로부터 발생하고 접합은 도입된 시스테인 잔기로 인한 것이다.
접합 반응으로부터의 제제에서 리간드 단위당 캄프토테신 또는 캄프토테신-링커 화합물의 평균 수(예를 들어, 약물-항체 비율("DAR"))는 종래의 수단, 예컨대, 질량 분석법, ELISA 검정, HPLC(예를 들어, HIC)에 의해 특징규명될 수 있다. p의 관점에서 캄프토테신 접합체의 정량적 분포가 또한 결정될 수 있다. 일부 예에서, 균질한 캄프토테신 접합체의 분리, 정제 및 특징규명은 역상 HPLC 또는 전기영동과 같은 수단에 의해 달성될 수 있다.
일부 양태에서, 조성물은 본 명세서에 기술된 캄프토테신 접합체 및 약제학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 약제학적 조성물이다. 일부 양태에서, 약제학적 조성물은 액체 형태이다. 일부 양태에서, 약제학적 조성물은 고체이다. 일부 양태에서, 약제학적 조성물은 동결건조된 분말이다.
약제학적 조성물을 포함하는 조성물은 정제된 형태로 제공될 수 있다. 본 명세서에 사용된 바와 같이, "정제된"은 단리될 때 단리물이 단리물의 중량을 기준으로 적어도 95%, 또 다른 양태에서는 적어도 98%의 접합체를 함유한다는 것을 의미한다.
사용 방법
암 치료
본 명세서에 기술된 캄프토테신 접합체는 종양 세포 또는 암 세포의 증식을 저해하고, 종양 또는 암 세포에서 세포사멸을 유발하거나, 또는 환자에서 암을 치료하는 데 유용하다. 따라서, 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서 암을 치료하는 방법이 본 명세서에서 제공되며, 이 방법은 대상체에게 본 명세서에 기술된 하나 이상의 캄프토테신 접합체를 투여하는 단계를 포함한다.
캄프토테신 접합체는 따라서 암의 치료를 위해 다양한 환경에서 사용될 수 있다. 캄프토테신 접합체는 종양 세포 또는 암 세포로 약물을 전달하기 위해 사용될 수 있다. 이론에 얽매이고자 함은 아니지만, 일 실시형태에서, 캄프토테신 접합체의 리간드 단위는 암-세포 또는 종양-세포-연관 항원에 결합하거나 회합하고, 캄프토테신 접합체는 수용체-매개된 엔도시토시스 또는 기타 내재화 메커니즘을 통해 종양 세포 또는 암 세포 내부에서 흡수(내재화)될 수 있다. 항원은 종양 세포 또는 암 세포에 부착될 수 있거나 종양 세포 또는 암 세포와 관련된 세포외 기질 단백질일 수 있다. 세포 내부에 있으면, 약물은 세포 내에서 펩티드 절단을 통해 방출된다. 대안적인 실시형태에서, 유리 약물은 종양 세포 또는 암 세포 외부에서 캄프토테신 접합체로부터 방출되고, 유리 약물은 후속적으로 세포에 침투한다.
일 실시형태에서, 리간드 단위는 종양 세포 또는 암 세포에 결합한다.
또 다른 실시형태에서, 리간드 단위는 종양 세포 또는 암 세포의 표면 상에 있는 종양 세포 또는 암 세포 항원에 결합한다.
또 다른 실시형태에서, 리간드 단위는 종양 세포 또는 암 세포와 관련된 세포외 기질 단백질인 종양 세포 또는 암 세포 항원에 결합한다.
특정 종양 세포 또는 암 세포에 대한 리간드 단위의 특이성은 가장 효과적으로 치료되는 종양 또는 암을 결정하는 데 중요할 수 있다. 예를 들어, 조혈암에 존재하는 암 세포 항원을 표적으로 하는 캄프토테신 접합체는 혈액 악성종양을 치료하는 데 유용할 수 있다(예를 들어, 항-CD30, 항-CD70, 항-CD19, 항-CD33 결합 리간드 단위(예를 들어, 항체)는 혈액 악성종양을 치료하는 데 유용할 수 있다). 고형 종양 상에 존재하는 암 세포 항원을 표적으로 하는 캄프토테신 접합체는 이러한 고형 종양을 치료하는 데 유용할 수 있다.
캄프토테신 접합체로 치료될 수 있는 암은 예를 들어 림프종(호지킨 림프종 및 비-호지킨 림프종) 및 백혈병 및 고형 종양과 같은 조혈암을 포함하지만 이들로 제한되지는 않는다. 조혈암의 예는 여포성 림프종, 역형성 큰세포 림프종, 외투 세포 림프종, 급성 골수모세포성 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 만성 림프구성 백혈병, 미만성 거대 B 세포 림프종 및 다발성 골수종을 포함한다. 고형 종양의 예는 섬유육종, 점액육종, 지방육종, 연골육종, 골원성 육종, 척색종, 혈관육종, 내피육종, 림프관육종, 림프관내피육종, 활액종, 중피종, 유잉 종양, 평활근육종, 횡문근육종, 결장암, 대장암, 신장암, 췌장암, 골암, 유방암, 난소암, 전립선암, 식도암, 위암, 구강암, 코암, 인후암, 편평 세포 암종, 기저 세포 암종, 선암종, 땀샘 암종, 피지선 암종, 유두 암종, 유두선암, 낭선암, 수질암, 기관지암, 신 세포 암종, 간암, 담관 암종, 융모암종, 고환의 종양, 배아 암종, 윌름스 종양, 자궁 경부암, 자궁암, 고환암, 소세포 폐암, 방광 암종, 폐암, 상피암, 신경아 교종, 다형성 교모세포종, 성상세포종, 수모세포종, 두개인두종, 뇌실막세포종, 송과선종, 혈관모세포종, 청신경종양, 희소돌기교종, 수막종, 피부암, 흑색종, 신경모세포종 및 망막모세포종을 포함한다.
바람직한 실시형태에서, 치료되는 암은 상기 나열된 림프종 및 백혈병 중 임의의 하나이다.
암에 대한 다중-양상 요법
종양, 전이, 또는 조절되지 않는 세포 성장을 특징으로 하는 다른 질환 또는 장애를 포함하지만 이들로 제한되지 않는 암은 캄프토테신 접합체의 투여에 의해 치료되거나 저해될 수 있다.
다른 실시형태에서, 유효량의 캄프토테신 접합체 및 화학치료제를 암 치료를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는 암을 치료하기 위한 방법이 제공된다. 일 실시형태에서, 화학치료제는 암의 치료가 불응성인 것으로 밝혀지지 않은 것이다. 다른 실시형태에서, 화학치료제는 암의 치료가 불응성인 것으로 밝혀진 것이다. 캄프토테신 접합체는 암의 치료로 수술을 또한 받은 환자에게 투여될 수 있다.
일부 실시형태에서, 환자는 또한 방사선 요법과 같은 추가의 치료를 받는다. 특정 실시형태에서, 캄프토테신 접합체는 화학치료제 또는 방사선 요법과 동시에 투여된다. 또 다른 특정 실시형태에서, 화학치료제 또는 방사선 요법은 캄프토테신 접합체의 투여 전 또는 후에 투여된다.
화학치료제는 일련의 기간에 걸쳐 투여될 수 있다. 표준 치료 화학치료제(들)와 같은 화학치료제 중 임의의 하나 또는 조합이 투여될 수 있다.
추가적으로, 화학요법 또는 방사선 요법이 너무 독성인 것으로 입증되었거나 입증될 수 있는, 예를 들어, 치료될 대상체에게 용인할 수 없거나 견딜 수 없는 부작용을 초래할 수 있는 화학요법 또는 방사선 요법의 대안으로 캄프토테신 접합체를 사용하여 암을 치료하는 방법이 제공된다. 치료될 환자는 선택적으로 어떤 치료가 용인 가능하거나 견딜 수 있는 것으로 밝혀진 것에 따라 수술, 방사선 요법 또는 화학요법과 같은 다른 암 치료로 치료될 수 있다.
자가면역 질환의 치료
캄프토테신 접합체는 자가면역 질환을 생성하는 세포의 원치 않는 복제를 사멸하거나 저해하는 데 또는 자가면역 질환을 치료하는 데 유용하다.
캄프토테신 접합체는 따라서 환자에서 자가면역 질환의 치료를 위해 다양한 환경에서 사용될 수 있다. 캄프토테신 접합체는 표적 세포로 약물을 전달하기 위해 사용될 수 있다. 이론에 얽매이고자 함은 아니지만, 일 실시형태에서, 캄프토테신 접합체는 전염증성 또는 부적절하게 자극된 면역 세포의 표면 상의 항원과 결합하고, 캄프토테신 접합체는 그 다음 수용체-매개된 엔도시토시스를 통해 표적 세포 내부로 흡수된다. 일단 세포 내부에 들어가면, 링커 단위는 절단되어 캄프토테신의 방출을 초래한다. 방출된 캄프토테신은 그 다음 세포질 내에서 자유롭게 이동하고 세포독성 또는 세포증식억제 활성을 유도한다. 대안적인 실시형태에서, 약물은 표적 세포 외부에서 캄프토테신 접합체로부터 단리되고, 캄프토테신은 후속적으로 세포에 침투한다.
일 실시형태에서, 리간드 단위는 자가면역 항원에 결합한다. 일 양태에서, 항원은 자가면역 병태에 관여하는 세포의 표면 상에 존재한다.
일 실시형태에서, 리간드 단위는 자가면역 질환 상태와 관련된 활성화된 림프구에 결합한다.
추가 실시형태에서, 캄프토테신 접합체는 특정 자가면역 질환과 관련된 자가면역 항체를 생산하는 세포의 증식을 사멸시키거나 저해한다.
캄프토테신 접합체로 치료될 수 있는 특정 유형의 자가면역 질환은 Th2 림프구 관련 장애(예를 들어, 아토피 피부염, 아토피 천식, 비결막염, 알레르기성 비염, 오멘 증후군, 전신 경화증 및 이식편대숙주병); Th1 림프구- 관련 장애(예를 들어, 류마티스 관절염, 다발성 경화증, 건선, 쇼그렌 증후군, 하시모토 갑상선염, 그레이브 병, 원발성 담즙성 간경변, 베게너 육아종증 및 결핵); 및 활성화된 B 림프구-관련 장애(예를 들어, 전신성 홍반성 루푸스, 항사구체기저막 증후군, 류마티스 관절염 및 I 형 당뇨병)를 포함하지만 이들로 제한되지 않는다.
자가면역 질환의 다중-약물 요법
유효량의 캄프토테신 접합체 및 자가면역 질환의 치료를 위해 공지된 다른 치료제를 자가면역 치료를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는 자가면역 질환을 치료하기 위한 방법이 제공된다.
조성물 및 투여 방법
본 발명은 본 명세서에 기술된 캄프토테신 접합체 및 약제학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다. 캄프토테신 접합체는 리간드 단위가 결합하는 항원의 발현과 관련된 장애의 치료를 위해 화합물이 환자에게 투여되도록 하는 임의의 형태일 수 있다. 예를 들어, 접합체는 액체 또는 고체의 형태일 수 있다. 바람직한 투여 경로는 비경구이다. 비경구 투여는 피하 주사, 정맥내, 근육내, 흉골내 주사 또는 주입 기술을 포함한다. 일 양태에서, 조성물은 비경구로 투여된다. 일 양태에서, 접합체는 정맥내로 투여된다. 투여는 임의의 편리한 경로, 예를 들어, 주입 또는 볼러스 주사에 의해 될 수 있다.
약제학적 조성물은 화합물이 환자에게 조성물의 투여에 의해 생체이용 가능하도록 제형화될 수 있다. 조성물은 하나 이상의 복용량 단위의 형태를 가질 수 있다.
약제학적 조성물을 제조하는 데 사용되는 물질은 사용된 양에서 무독성일 수 있다. 약제학적 조성물에서 활성성분(들)의 최적 복용량은 다양한 인자에 의존할 것이라는 것이 당업자에게 명백할 것이다. 관련 인자는 제한없이 동물의 유형(예를 들어, 인간), 화합물의 특정 형태, 투여 방식 및 사용된 조성물을 포함한다.
조성물은 예를 들어 액체의 형태일 수 있다. 액체는 주사에 의한 전달에 유용할 수 있다. 주사에 의한 투여를 위한 조성물에서, 계면활성제, 방부제, 습윤제, 분산제, 현탁제, 완충제, 안정제 및 등장제 중 하나 이상이 또한 포함될 수 있다.
액체 조성물은 용액, 현탁액 또는 기타 유사한 형태인지 여부에 무관하게 다음 중 하나 이상을 또한 포함할 수 있다: 멸균 희석제. 예컨대 주사용수, 식염수 용액, 바람직하게는 생리 식염수, 링거 용액, 등장성 염화나트륨, 고정 오일, 예컨대, 용매 또는 현탁 매질로 작용할 수 있는 합성 모노 또는 디글리세리드, 폴리에틸렌 글리콜, 글리세린, 사이클로덱스트린, 프로필렌 글리콜 또는 기타 용매; 항균제, 예컨대, 벤질 알코올 또는 메틸 파라벤; 항산화제, 예컨대 아스코르브산 또는 소듐 비설파이트; 킬레이트제, 예컨대 에틸렌디아민테트라아세트산; 완충액, 예컨대, 아미노산, 아세테이트, 시트레이트 또는 포스페이트; 세제, 예컨대 비이온성 계면활성제, 폴리올; 및 강장 조절제, 예컨대, 염화나트륨 또는 덱스트로스. 비경구용 조성물은 앰플, 일회용 주사기 또는 유리, 플라스틱 또는 기타 재료로 만들어진 다회 용량 바이알에 동봉될 수 있다. 생리 식염수는 대표적인 보조제이다. 주사 가능한 조성물은 바람직하게는 멸균이다.
특정 장애 또는 병태의 치료에 효과적인 접합체의 양은 장애 또는 병태의 특성에 좌우될 것이고 표준 임상 기술에 의해 결정될 수 있다. 또한, 최적의 복용량 범위를 확인하는 데 도움이 되도록 시험관내 또는 생체내 검정이 선택적으로 사용될 수 있다. 조성물에 사용되는 정확한 용량은 또한 투여의 경로, 질병 또는 장애의 심각성에 좌우될 것이고, 의사의 판단과 각각의 환자의 상황에 따라 결정되어야 한다.
조성물은 적합한 투여량이 얻어지도록 유효량의 화합물을 포함한다. 전형적으로, 이 양은 조성물의 적어도 약 0.01 중량%의 화합물이다.
정맥내 투여를 위해, 조성물은 동물의 체중 kg당 약 0.01 내지 약 100 mg의 캄프토테신 접합체를 포함할 수 있다. 일 양태에서, 조성물은 동물의 체중 kg당 약 1 내지 약 100 mg의 캄프토테신 접합체를 포함할 수 있다. 또 다른 양태에서, 투여된 양은 화합물의 약 0.1 내지 약 25mg/체중 kg의 범위일 것이다. 사용된 약물에 따라, 투여량은 훨씬 더 낮을 수 있으며, 예를 들어, 1.0 μg/대상체의 체중 kg 내지 5.0 mg/kg, 4.0 mg/kg, 3.0 mg/kg, 2.0 mg/kg 또는 1.0 mg/kg, 또는 1.0 μg/kg 내지 500.0 μg/kg일 수 있다.
일반적으로, 환자에게 투여된 접합체의 투여량은 전형적으로 약 0.01 mg/대상체의 체중 kg 내지 약 100 mg/kg 또는 1.0 μg/대상체의 체중 kg 내지 5.0 mg/kg이다. 일부 실시형태에서, 환자에게 투여된 투여량은 약 0.01 mg/대상체의 체중 kg 내지 약 15 mg/kg이다. 일부 실시형태에서, 환자에게 투여된 투여량은 약 0.1 mg/대상체의 체중 kg 내지 약 15 mg/kg이다. 일부 실시형태에서, 환자에게 투여된 투여량은 약 0.1 mg/대상체의 체중 kg 내지 약 20 mg/kg이다. 일부 실시형태에서, 투여량은 약 0.1 mg/kg 내지 약 5 mg/kg 또는 약 0.1 mg/kg 내지 약 10 mg/대상체의 체중 kg이다. 일부 실시형태에서, 투여된 투여량은 약 1 mg/대상체의 체중 kg 내지 약 15 mg/kg이다. 일부 실시형태에서, 투여된 투여량은 약 1 mg/대상체의 체중 kg 내지 약 10 mg/kg이다. 일부 실시형태에서, 투여된 투여량은 치료 주기에 걸쳐 약 0.1 내지 4 mg/대상체의 체중 kg, 보다 더 바람직하게는 0.1 내지 3.2 mg/kg 또는 보다 더 바람직하게는 0.1 내지 2.7 mg/kg이다.
용어 "담체"는 화합물이 투여되는 희석제, 보조제 또는 부형제를 지칭한다. 이러한 약제학적 담체는 물 및 석유, 동물, 식물성 또는 합성 유래의 것, 예컨대, 땅콩 오일, 대두유, 광유, 참기름을 포함하는 오일과 같은 액체일 수 있다. 담체는 식염수, 아카시아 검, 젤라틴, 전분 페이스트, 활석, 케라틴, 콜로이드 실리카, 우레아일 수 있다. 또한 보조제, 안정화제, 농축제, 윤활제 및 착색제가 사용될 수 있다. 일 실시형태에서, 환자에게 투여될 때, 화합물 또는 조성물 및 약제학적으로 허용 가능한 담체는 멸균이다.
물은 화합물이 정맥내로 투여될 때 예시적인 담체이다. 식염수 용액과 수성 덱스트로스 및 글리세롤 용액은 특히 주사가능 용액의 경우 액체 담체로 또한 이용될 수 있다. 적합한 약제학적 담체는 또한 전분, 글루코스, 락토스, 수크로스, 젤라틴, 맥아, 쌀, 밀가루, 쵸크, 실리카 겔, 스테아르산 나트륨, 글리세롤 모노스테아레이트, 활석, 염화나트륨, 건조 탈지유, 글리세롤, 프로필렌, 글리콜, 물, 에탄올과 같은 부형제를 포함한다. 원하는 경우, 본 조성물은 또한 소량의 습윤제 또는 유화제, 또는 pH 완충제를 함유할 수 있다.
일 실시형태에서, 접합체는 동물, 특히 인간에 대한 정맥내 투여에 적합한 약제학적 조성물로서 일상적인 절차에 따라 제형화된다. 전형적으로, 정맥내 투여를 위한 담체 또는 비히클은 멸균 등장성 수성 완충 용액이다. 필요한 경우, 조성물은 또한 가용화제를 포함할 수 있다. 정맥내 투여용 조성물은 주사 부위에서의 통증을 완화하기 위해 리그노카인과 같은 국소 마취제를 선택적으로 포함할 수 있다. 일반적으로, 성분은, 예를 들어, 활성제의 양을 나타내는 앰플 또는 사쉐(sachet)와 같은 기밀하게 밀봉된 용기에 건조 동결건조된 분말 또는 물이 없는 농축물과 같이 단위 투여량 형태로 별도로 공급되거나 함께 혼합된다. 접합체가 주입에 의해 투여되는 경우, 이것은 예를 들어 멸균 약제학적 등급의 물 또는 식염수를 함유하는 주입 병으로 분배될 수 있다. 접합체가 주사로 투여되는 경우, 주사용 멸균수 또는 식염수의 앰플을 제공하여 투여 이전에 성분을 혼합할 수 있다.
약제학적 조성물은 일반적으로 미국 식품의약국의 모든 우수 의약품 제조관리 기준(GMP: Good Manufacturing Practice) 규정을 완전히 준수하여 멸균되고 실질적으로 등장성으로 제형화된다.
캄프토테신 접합체의 제조 방법
본 명세서에 기술된 캄프토테신 접합체는 항체, 링커 및 약물 단위의 일련의 구조로 또는 부분을 조립한 후 완성된 조립 단계에 의한 수렴하는 방식으로 제조될 수 있다.
일 그룹의 실시형태에서, 본 명세서에 제공된 바와 같은 캄프토테신-링커 화합물은 적합한 리간드 단위와 조합되어 리간드 단위에 대한 캄프토테신-링커 화합물의 공유 부착을 용이하게 한다. 일부 실시형태에서, 리간드 단위는 감소하는 사슬간 디설파이드 링키지의 결과로서 링커 화합물의 부착에 이용가능한 적어도 2개, 적어도 4개, 적어도 6개 또는 8개의 티올을 갖는 항체이다. 일부 실시형태에서, 캄프토테신-링커 화합물은 항체 상에 도입된 시스테인 모이어티를 통해 리간드 단위에 부착된다.
치료 용도를 위한 키트
일부 양태에서, 암 치료 및 자가면역 질환의 치료에 사용하기 위한 키트가 제공된다. 이러한 키트는 본 명세서에 기술된 캄프토테신 접합체를 포함하는 약제학적 조성물을 포함할 수 있다.
일부 실시형태에서, 키트는 본 명세서에 기술된 임의의 치료적 방법에 사용하기 위한 지침을 포함할 수 있다. 포함된 지침은 대상체에서 의도된 활성, 예를 들어 암과 같은 질환 또는 병태의 치료를 달성하기 위해 대상체에게 약제학적 조성물의 투여에 대한 설명을 제공할 수 있다. 일부 실시형태에서, 본 명세서에 기술된 약제학적 조성물의 사용과 관련된 지침은 의도된 치료를 위한 투여량, 투여 일정 및 투여 경로에 관한 정보를 포함할 수 있다. 용기는 단위 용량, 벌크 포장(예를 들어, 다중-용량 포장) 또는 하위-단위 용량일 수 있다. 본 개시내용의 키트에 제공된 지침은 전형적으로 라벨 또는 포장 삽입물에 기록된 지침이다. 라벨 또는 포장 삽입물은 약제학적 조성물이 대상체에서 질환 또는 장애를 치료하고/하거나 발병 지연시키고/시키거나 완화하는 데 사용된다는 것을 나타낸다.
일부 실시형태에서, 본 명세서에 제공된 키트는 적합한 포장으로 된다. 적합한 포장은 바이알, 병, 단지, 가요성 포장 등을 포함하지만 이들로 제한되지 않는다. 또한 흡입기, 비강 투여 장치 또는 주입 장치와 같은 특정 장치와 조합하여 사용하기 위한 포장이 고려된다. 일부 실시형태에서, 키트는 멸균 접근 포트를 가질 수 있다(예를 들어, 용기는 정맥내 용액 백 또는 피하 주사 바늘로 뚫을 수 있는 마개가 있는 바이알일 수 있다).
일부 실시형태에서, 본 명세서에 제공된 키트는 본 명세서에 기술된 바와 같은 자가면역 질환의 암을 치료하는 데 유용한 추가 치료제를 포함한다.
일반적인 합성 방법
본 개시내용의 화합물은 하기에 일반적으로 기재되고, 하기 실시예(예컨대, 하기 실시예에 제공된 반응식)에 보다 구체적으로 기재된 바와 같은 다수의 공정에 의해서 그리고 당업계에 공지된 방법에 의해서 제조될 수 있다. 예시적인 방법은 국제 특허 출원 PCT/US19/25968에 기재되어 있다. 하기 공정 설명에서, 도시된 화학식에서 사용되는 경우 기호는 본 명세서에의 화학식과 관련하여 상기에 기재된 기를 표현하는 것으로 이해되어야 한다.
하기 제조에 기재된 중간체는 다수의 질소, 히드록실 및 산 보호기, 예컨대, 에스테르를 함유할 수 있다. 다양한 보호기는 수행될 특정 반응 조건 및 특정 변형에 따라서 각각의 경우에 상이하거나 동일할 수 있다. 보호 조건 및 탈보호 조건은 당업자에게 널리 공지되어 있고, 문헌에 기재되어 있다. 예를 들어, 문헌[Greene and Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, (T. Greene and P. Wuts, eds., 2d ed. 1991)]을 참조한다.
특정 입체화학적 중심은 명시되지 않은 채로 남겨두었고, 특정 치환기는 명확성을 위해 하기 반응식에서 제거되었고, 어떤 식으로든 반응식의 교시를 제한하려는 의도가 아니다. 추가로, 개별 이성질체, 거울상이성질체 및 부분입체이성질체는 본 발명의 화합물의 합성의 임의의 편리한 시점에 선택적인 결정화 기술 또는 키랄 크로마토그래피와 같은 방법에 의해서 당업자에 의해서 분리되거나 분할될 수 있다(예를 들어, 문헌[J. Jacques, et al., "Enantiomers, Racemates, and Resolutions", John Wiley and Sons, Inc., 1981] 및 문헌[E.L. Eliel and S.H. Wilen," Stereochemistry of Organic Compounds", Wiley-Interscience, 1994] 참조).
본 발명의 화합물 또는 이의 염은 당업계에 공지된 다양한 절차에 의해서 제조될 수 있고, 이들 중 일부를 하기 실시예에 기재한다. 기재된 경로 각각에 대한 구체적인 합성 단계를 임의의 방식으로 조합하여 본 발명의 화합물 또는 이의 염을 제조할 수 있다. 각각의 단계의 생성물은 추출, 증발, 침전, 크로마토그래피, 여과, 분쇄(trituration) 및 결정화를 포함하는 당업계에 널리 공지된 종래의 방법에 의해서 회수될 수 있다. 시약 및 출발 물질은 당업자에게 쉽게 입수 가능하다. 다른 것들은 공지된 구조적으로 유사한 화합물의 합성과 유사한 유기 및 헤테로사이클릭 화학의 표준 기술 및 임의의 신규 절차를 포함하는 하기 실시예에 기재된 절차에 의해 제조될 수 있다.
화학식 (IIIa)의 화합물은 반응식 1에 따라서 제조될 수 있고, 식에서 RF는 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같거나 또는 본 명세서에 상술된 임의의 적용 변형이고; PG3은 아미노 보호기(예를 들어, Boc)이고, Rx3은 아미노산 측쇄이다.
반응식 1
Figure pct00139
일반 화학식 1A의 아민과 일반 화학식 1B의 카르복실산의 커플링은 일반 화학식 1C의 아미드를 생성하고, 이것을 탈보호하여 화학식 (IIIa)의 화합물을 생성할 수 있다.일부 실시형태에서, Rx3은 보호기(예를 들어, Boc-보호된 Lys)이고, 여기서 보호기는 일반 화학식 1C의 화합물의 형성 후에 제거된다.
화학식 (IIc)의 화합물은 반응식 2에 따라서 제조될 수 있고, 식에서, RF, b 및 y는 화학식 (Ib)에 대해서 정의된 바와 같거나 또는 본 명세서에 상술된 임의의 적용 변형이고; Rx1, Rx2 및 Rx3은 아미노산 측쇄이다.
반응식 2
Figure pct00140
일반 화학식 1A의 아민과 일반 화학식 2A의 카르복실산의 커플링은 화학식 (IIc)의 캄프토테신-링커 화합물을 생성한다. 일부 실시형태에서, Rx1, Rx2 및 Rx3은 각각 선택적으로 보호기를 함유하고, 이것은 동일하거나 상이할 수 있고, 화학식 (IIc)의 캄프토테신-링커 화합물의 형성 후에 제거된다.
화학식 3G의 화합물은 반응식 3에 따라서 제조될 수 있고, 식에서, Rx1, Rx2 및 Rx3은 아미노산 측쇄이고; PG1 및 PG2는 아미노 보호기(예를 들어, Fmoc)이다.
반응식 3
Figure pct00141
일반 화학식 3A의 아미노산과 일반 화학식 3B의 보호된 아미노산의 커플링은 일반 화학식 3C의 화합물을 생성하고, 이것을 탈보호하여 일반 화학식 3D의 디펩티드를 생성한다. 일반 화학식 3D의 아미노산과 일반 화학식 3E의 보호된 아미노산의 커플링은 일반 화학식 3F의 화합물을 생성하고, 이것을 탈보호하여 일반 화학식 3G의 트리펩티드를 생성한다. 일부 실시형태에서, Rx1, Rx2 및 Rx3은 각각 선택적으로 보호기를 함유하고, 이것은 동일하거나 상이할 수 있고, 이것은 아민과 카르복실산의 커플링 후에 제거된다.
예시적인 실시형태
실시형태 1: 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염으로서 상기 캄프토테신 접합체는 하기 화학식 (I)을 갖고:
Figure pct00142
(I)
상기 식에서,
L은 리간드 단위이고;
Z는 스트레처 단위이고;
A는 결합 또는 연결기 단위이고;
S*는 결합 또는 분배제이고;
AA1은 아미노산이고;
AA2는 아미노산이고;
B는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp, D-Ala, Aib 및 pAbz로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산이고;
RF는 H 또는 C1-C6 알킬이고;
p는 1 내지 16인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
실시형태 2: 실시형태 1에 있어서, AA1은 Val인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 3: 실시형태 1에 있어서, AA1은 Ala 또는 D-Ala인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 4: 실시형태 1 내지 3 중 어느 하나에 있어서, AA2는 Lys인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 5: 실시형태 1 내지 3 중 어느 하나에 있어서, AA2는 Ala 또는 D-Ala인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 6: 실시형태 1 내지 5 중 어느 하나에 있어서, B는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp 및 D-Ala로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 7: 실시형태 1 내지 6 중 어느 하나에 있어서, B는 D-Ala인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 8: 실시형태 1 내지 6 중 어느 하나에 있어서, B는 Arg, Lys, His, Asp 또는 Glu인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 9: 실시형태 1 내지 6 중 어느 하나에 있어서, B는 Thr 또는 Gln인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 10: 실시형태 1 내지 6 중 어느 하나에 있어서, B는 Phe, Val, Leu, Met 또는 Trp인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 11: 실시형태 1 내지 10 중 어느 하나에 있어서, RF는 H인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 12: 실시형태 1 내지 11 중 어느 하나에 있어서, S*는 PEG 단위인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 13: 실시형태 12에 있어서, PEG 단위는 하기 화학식을 갖고:
Figure pct00143
Figure pct00144
또는
Figure pct00145
상기 식에서, 좌측의 물결선은 A에 대한 부착 부위를 나타내고, 우측의 물결선은 AA1에 대한 부착 부위를 나타내고, b는 2 내지 20의 정수 또는 2, 4, 8 또는 12인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 14: 실시형태 13에 있어서, PEG 단위는 화학식
Figure pct00146
을 갖고: 상기 식에서, 좌측의 물결선은 A에 대한 부착 부위를 나타내고, 우측의 물결선은 AA1에 대한 부착 부위를 나타내고, b는 2 내지 20의 정수 또는 2, 4, 8 또는 12인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 15: 실시형태 1 내지 14 중 어느 하나에 있어서, Z는 하기 화학식 Za를 갖고:
Figure pct00147
(Za)
상기 식에서, 별표는 리간드 단위(L)에 대한 부착 위치를 나타내고; 물결선은 연결기 단위(A)에 대한 부착 위치를 나타내고; R17은 -C1-C10 알킬렌-, C1-C10 헤테로알킬렌-, -C3-C8 카르보사이클로-, -O-(C1-C8 알킬렌)-, -아릴렌-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-, -(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-, -C3-C8 헤테로사이클로-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-, -C1-C10 알킬렌-C(=O)-, C1-C10 헤테로알킬렌-C(=O)-, -C3-C8 카르보사이클로-C(=O)-, -O-(C1-C8 알킬렌)-C(=O)-, -아릴렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-C(=O)-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-C(=O)-,-(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C3-C8 헤테로사이클로-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-C(=O)-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-NH-, C1-C10 헤테로알킬렌-NH-, -C3-C8 카르보사이클로-NH-, -O-(C1-C8 알킬렌)-NH-, -아릴렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-NH-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-NH-, -(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-NH-, -C3-C8 헤테로사이클로-NH-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-NH-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-S-, C1-C10 헤테로알킬렌-S-, -C3-C8 카르보사이클로-S-, -O-(C1-C8 알킬렌)-S-, -아릴렌-S-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-S-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-S-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-S-, -(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-S-, -C3-C8 헤테로사이클로-S-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-S- 또는 -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-S-이고; R17은 -(CH2)xNH2, -(CH2)xNHRa 또는 -(CH2)xNRa 2인 염기성 단위(BU)로 선택적으로 치환되고; x는 1 내지 4의 정수이고; 각각의 Ra는 C1-6 알킬 및 C1-6 할로알킬로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되거나, 2개의 Ra기는 이들이 부착된 질소와 결합되어 4 내지 6-원 헤테로사이클로알킬 고리, 또는 아제티디닐, 피롤리디닐 또는 피페리디닐기를 형성하는, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 16: 실시형태 15에 있어서, R17은 -(C1-C5)알킬렌-C(=O)-이고, R17의 알킬렌 부분은 염기성 단위(BU)로 선택적으로 치환되는, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 17: 실시형태 15 또는 실시형태 16에 있어서, Z는 하기 화학식인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염:
Figure pct00148
;
Figure pct00149
; 또는
Figure pct00150
. 실시형태 18: 실시형태 17에 있어서, Z는
Figure pct00151
인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 19: 실시형태 17에 있어서, Z는
Figure pct00152
또는
Figure pct00153
인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 20: 실시형태 1 내지 19 중 어느 하나에 있어서, A는 결합인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 21: 실시형태 1에 있어서, 화학식 (Ib):
Figure pct00154
(Ib)
또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 갖고, 상기 식에서 L은 리간드 단위이고; AA1은 아미노산이고; AA2는 아미노산이고; B는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp, D-Ala, Aib 및 pAbz로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산이고; RF는 수소 또는 C1-C6 알킬이고; b는 2 내지 20의 정수이고; y는 1 내지 8 또는 1 내지 4의 정수이거나; 또는 1 또는 4이고; p는 1 내지 16인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 22: 실시형태 21에 있어서, y는 1인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 23: 실시형태 21 또는 22에 있어서, b는 8인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 24: 실시형태 21 내지 23 중 어느 하나에 있어서, AA1-AA2는 Val-Lys인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 25: 실시형태 21 내지 24 중 어느 하나에 있어서, B는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp 및 D-Ala로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 26: 실시형태 21 내지 23 중 어느 하나에 있어서, AA1-AA2-B는 Ala-Ala-D-Ala인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 27: 실시형태 21 내지 26 중 어느 하나에 있어서, RF는 H인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 28: 실시형태 1 내지 27 중 어느 하나에 있어서, p는 1 내지 16이거나, 2 내지 8이거나, 2이거나, 4이거나, 8인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 29: 실시형태 1 내지 28 중 어느 한 하나에 있어서, 리간드 단위는 항체 또는 이의 항원-결합 단편인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 30: 실시형태 29에 있어서, 항체는 단클론성 항체 또는 이의 항원-결합 단편인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 31: 실시형태 29 또는 실시형태 30에 있어서, 항체는 cAC10 항-CD30 항체 또는 이의 항원-결합 단편인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 32: 실시형태 29 내지 제31항 중 어느 하나에 있어서, 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 각각 서열번호 1, 2, 3, 4, 5 및 6의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함하는, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 33: 실시형태 31에 있어서, 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 서열번호 7의 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 8의 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 34: 실시형태 31에 있어서, 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 서열번호 7의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 8의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 35: 실시형태 31에 있어서, 항체는 서열번호 9 또는 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호 11의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 36: 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염으로서, 상기 캄프토테신-링커 화합물은 하기 화학식 (II)를 갖고:
Figure pct00155
(II)
상기 식에서, Z'는 스트레처 단위 전구체이고; A는 결합 또는 연결기 단위이고; S*는 결합 또는 분배제이고; AA1은 아미노산이고; AA2는 아미노산이고; B는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp, D-Ala, Aib 및 pAbz로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산이고; RF는 H 또는 C1-C6 알킬인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 37: 실시형태 36에 있어서, AA1은 Val인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 38: 실시형태 36에 있어서, AA1은 Ala 또는 D-Ala인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 39: 실시형태 36 내지 38 중 어느 하나에 있어서, AA2는 Lys인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 40: 실시형태 36 내지 38항 중 어느 하나에 있어서, AA2는 Ala 또는 D-Ala인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 41: 실시형태 36 내지 40 중 어느 하나에 있어서, B는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp 및 D-Ala로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 42: 실시형태 36 내지 41 중 어느 하나에 있어서, B는 D-Ala인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 43: 실시형태 36 내지 41 중 어느 하나에 있어서, B는 Arg, Lys, His, Asp 또는 Glu인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 44: 실시형태 36 내지 41중 어느 하나에 있어서, B는 Thr 또는 Gln인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 45: 실시형태 36 내지 41 중 어느 하나에 있어서, B는 Phe, Val, Leu, Met 또는 Trp인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 46: 실시형태 36 내지 45 중 어느 하나에 있어서, RF는 H인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 47: 실시형태 36항 내지 46 중 어느 하나에 있어서, S*는 PEG 단위인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 48: 실시형태 47에 있어서, PEG 단위는 하기 화학식을 갖고:
Figure pct00156
Figure pct00157
또는
Figure pct00158
상기 식에서, 좌측의 물결선은 A에 대한 부착 부위를 나타내고, 우측의 물결선은 AA1에 대한 부착 부위를 나타내고, b는 2 내지 20의 정수 또는 2, 4, 8 또는 12인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 49: 실시형태 48에 있어서, PEG 단위는 화학식
Figure pct00159
을 갖고, 상기 식에서, 좌측의 물결선은 A에 대한 부착 부위를 나타내고, 우측의 물결선은 AA1에 대한 부착 부위를 나타내고, b는 2 내지 20의 정수 또는 2, 4, 8 또는 12인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 50: 실시형태 36 내지 49 중 어느 하나에 있어서, Z'는 하기 화학식 Z'b를 갖고:
Figure pct00160
(Z'b)
상기 식에서,
R17은 -C1-C10 알킬렌-, C1-C10 헤테로알킬렌-, -C3-C8 카르보사이클로-, -O-(C1-C8 알킬렌)-, -아릴렌-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-, -(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-, -C3-C8 헤테로사이클로-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-, -C1-C10 알킬렌-C(=O)-, C1-C10 헤테로알킬렌-C(=O)-, -C3-C8 카르보사이클로-C(=O)-, -O-(C1-C8 알킬렌)-C(=O)-, -아릴렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-C(=O)-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-C(=O)-,-(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C3-C8 헤테로사이클로-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-C(=O)-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-NH-, C1-C10 헤테로알킬렌-NH-, -C3-C8 카르보사이클로-NH-, -O-(C1-C8 알킬렌)-NH-, -아릴렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-NH-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-NH-, -(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-NH-, -C3-C8 헤테로사이클로-NH-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-NH-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-S-, C1-C10 헤테로알킬렌-S-, -C3-C8 카르보사이클로-S-, -O-(C1-C8 알킬렌)-S-, -아릴렌-S-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-S-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-S-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-S-, -(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-S-, -C3-C8 헤테로사이클로-S-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-S- 또는 -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-S-이고; R17은 -(CH2)xNH2, -(CH2)xNHRa 또는 -(CH2)xNRa 2인 염기성 단위(BU)로 선택적으로 치환되고; x는 1 내지 4의 정수이고; 각각의 Ra는 C1-6 알킬 및 C1-6 할로알킬로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되거나, 2개의 Ra기는 이들이 부착된 질소와 결합되어 4 내지 6-원 헤테로사이클로알킬 고리, 또는 아제티디닐, 피롤리디닐 또는 피페리디닐기를 형성하는, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 51: 실시형태 50에 있어서, R17은 -(C1-C5)알킬렌-C(=O)-이고, R17의 알킬렌 부분은 염기성 단위(BU)로 선택적으로 치환되는, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 52: 실시형태 50 또는 실시형태 51에 있어서, Z'는 하기 화학식인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
Figure pct00161
;
Figure pct00162
; 또는
Figure pct00163
. 실시형태 53: 실시형태 52에 있어서, Z'는
Figure pct00164
인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 54: 실시형태 52에 있어서, Z'는
Figure pct00165
또는
Figure pct00166
인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 55: 실시형태 36 내지 54 중 어느 하나에 있어서, A는 결합인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 56: 실시형태 36에 있어서, 하기 화학식 (IIb)를 갖는 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염으로서:
Figure pct00167
(IIb)
상기 식에서, AA1은 아미노산이고; AA2는 아미노산이고; B는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp, D-Ala, Aib 및 pAbz로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산이고; RF는 수소 또는 C1-C6 알킬이고; b는 2 내지 20의 정수이고; y는 1 내지 8 또는 1 내지 4의 정수이거나; 1 또는 4인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 57: 실시형태 56에 있어서, y는 1인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염: 실시형태 58: 실시형태 56 또는 57에 있어서, b는 8인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 59: 실시형태 56 내지 58 중 어느 하나에 있어서, AA1-AA2는 Val-Lys인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 60: 실시형태 56 내지 59 중 어느 하나에 있어서, B는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp 및 D-Ala로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 61: 실시형태 56 내지 58 중 어느 하나에 있어서, AA1-AA2-B는 Ala-Ala-D-Ala인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 62: 실시형태 56 내지 61 중 어느 하나에 있어서, RF는 H인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 63: 캄프토테신 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염으로서, 상기 캄프토테신 화합물은 하기 화학식 (III)를 갖고:
Figure pct00168
(III)
상기 식에서, B'는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp, D-Ala, Aib 및 pAbz로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산이고; RF는 H 또는 C1-C6 알킬인, 캄프토테신 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염. 실시형태 64: 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서 암을 치료하는 방법으로서, 대상체에게 유효량의 실시형태 1 내지 35 중 어느 하나의 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 화학식 실시형태 63의 캄프토테신 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 투여하는 단계를 포함하는, 방법. 실시형태 65: 실시형태 64에 있어서, 암은 림프종, 백혈병 또는 고형 종양인, 방법. 실시형태 66: 실시형태 64 또는 실시형태 65 중 어느 하나에 있어서, 상기 방법은 대상체에게 유효량의 추가 치료제, 1종 이상의 화학치료제 또는 방사선 요법을 투여하는 단계를 포함하는, 방법. 실시형태 67: 자가면역 질환의 치료를 필요로 하는 대상체에서 자가면역 질환을 치료하는 방법으로서, 대상체에게 유효량의 실시형태 1 내지 35 중 어느 하나의 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 화학식 실시형태 63의 캄프토테신 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 투여하는 단계를 포함하는, 방법. 실시형태 68: 실시형태 67에 있어서, 자가면역 질환은 Th2 림프구 관련 장애, Th1 림프구-관련 장애 또는 활성화된 B 림프구-관련 장애인, 방법. 실시형태 69: 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서 암을 치료하는 방법으로서, 암 세포를 실시형태 63의 캄프토테신 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염과 접촉시키는 단계를 포함하는, 방법. 실시형태 70: 실시형태 69에 있어서, 암은 림프종, 백혈병 또는 고형 종양인, 방법. 실시형태 71: 실시형태 1 내지 35 중 어느 하나의 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염의 제조 방법으로서, 항체 또는 이의 항원-결합 단편을 실시형태 36 내지 62 중 어느 하나의 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염과 반응시키는 단계를 포함하는, 방법. 실시형태 72: 실시형태 1 내지 35 중 어느 하나의 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 및 약제학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는, 약제학적 조성물. 실시형태 73: 실시형태 1 내지 35 중 어느 하나의 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 포함하고, 선택적으로 추가 치료제를 포함하는, 키트. 실시형태 74: 질환 또는 장애를 치료하기 위한, 실시형태 1 내지 35 중 어느 하나의 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 실시형태 63의 캄프토테신 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염의 용도. 실시형태 75: 질환 또는 장애를 치료하기 위한 의약의 제조에서의 실시형태 1 내지 35 중 어느 하나의 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 실시형태 63의 캄프토테신 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 및 약제학적으로 허용 가능한 부형제, 담체 또는 희석제의 용도.
실시예
실험 절차
Figure pct00169
물질 및 방법
달리 명시되지 않는 한 이 부분에 기재된 합성 절차에 하기 물질 및 방법을 적용할 수 있다. 모든 상업적으로 입수 가능한 무수 용매는 추가 정제 없이 사용하였다. 출발 물질, 시약 및 용매는 상업적 공급업체(SigmaAldrich 및 Fischer)에서 구입하였다. 생성물은 Biotage Isolera One 플래시 정제 시스템(미국 노스캐롤라이나주 샬롯 소재)을 사용하는 플래시 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. UPLC-MS는 Waters Acuity UPLC 시스템에 접속된 Waters 단일 쿼드 검출기 질량 분석기 상에서 수행하였다. UPLC 방법은 하기에 기재되어 있다. 분취용 HPLC는 Wasters 2998 PDA 검출기로 구성된 Waters 2454 Binary Gradient Module 용매 전달 시스템 상에서 수행하였다. 달리 명시되지 않는 한 수 중의 0.05% 트리플루오로아세트산 및 아세토니트릴 중의 0.05% 트리플루오로아세트산으로 용리하는 Phenomenex Max-RP 4 μm Synergi 80 Å 250 mm 역상 컬럼의 적절한 직경의 컬럼으로 생성물을 정제하였다.
일반적인 방법:
컬럼 - Waters CORTECS C18 1.6 μm, 2.1 x 50 mm, 역상 컬럼
용매 A - 0.1% 수성 포름산
용매 B - 0.1% 포름산 함유 아세토니트릴
Figure pct00170
캄프토테신 화합물 제조
다음 실시예에서 제공된 캄프토테신 화합물은 본 명세서에 기술된 캄프토테신-링커 화합물뿐만 아니라 캄프토테신 접합체를 제조하는 데 사용될 수 있다.
실시예 S1
Figure pct00171
무수 DMF(44 μl) 중에 용해된 Boc-Leu-OH(4.44 mg, 0.0178 mmol)에 무수 DMF(68 μL) 중에 용해된 HATU(6.77 mg, 0.0178 mmol)를 첨가하였다. DIPEA(5.8 μL, 0.036 mmol)를 첨가하고, 반응을 20분 동안 실온에서 교반하였다. 무수 DMF(50 μL) 중에 용해된 화합물 1(MAD-MDCPT)(5.00 mg, 0.0119 mmol)를 첨가하고, 반응을 30분 동안 교반하고, 그 시점에 완전한 전환이 관찰되었다. 반응을 AcOH(5 μL)로 켄칭하고, 농축시켰다. 조 반응 혼합물을 정제용 HPLC 10 x 250 mm Synergi Max-RP H2O 0.1% 포름산 중의 5-60-95% MeCN으로 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획을 진공 하에서 농축시켜 화합물 2를 황색 고체(3.48 mg, 0.00548 mmol, 46%)로서 제공하였다. Rt = 1.87분 일반적인 방법 UPLC. MS (m/z) [M + H]+ C33H39N4O9에 대한 계산치 635.27, 실측치 635.49.
Figure pct00172
화합물 2(3.48 mg, 0.00548 mmol)를 DCM 중의 20% TFA(1 mL)에 용해시켰다. 반응을 20분 동안 실온에서 교반하였고, 그 시점에 UPLC-MS에 의해서 완전한 전환이 관찰되었다. 반응 생성물을 진공에서 농축시키고, 정제용 HPLC 10 x 250 mm Synergi Max-RP H2O 0.1% 포름산 중의 5-60-95% MeCN으로 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획을 진공건조에 의해서 농축시켜 화합물 3을 무색 고체(1.92 mg, 3.59 μmol, 66%)로서 제공하였다. Rt = 1.13분 일반적인 방법 UPLC. MS (m/z) [M + H]+ C28H31N4O7에 대한 계산치 535.22, 실측치 535.55.
표 S1. 화합물 3의 제조와 유사한 절차를 사용하여 화합물 3a-n을 제조하였다.
Figure pct00173
Figure pct00174
Figure pct00175
Figure pct00176
실시예 S2
MP-PEG8-Ala-Ala-Ala-OH의 고체상 펩티드 합성:
2-클로로트리틸 수지 상의 보호되지 않은 알라닌 사전 로딩된 0.7 mmol/g을 Millipore Sigma에서 구입하였다. 수지(0.357 그램, 0.25 mmol)를 반응 용기에 첨가하였다. 수지를 DMF로 3회 세척하고, 완전히 배수시켰다. 수지를 DMF 중에서 30분 동안 진탕하면서 팽윤하고, 배수시켰다. 일반적인 커플링 절차를 사용하여 Fmoc-Ala-OH를 수지에 커플링하였다. Fmoc를 일반적인 탈보호 절차를 사용하여 탈보호하였다. 일반적인 커플링 절차를 사용하여 Fmoc-Ala-OH를 수지에 커플링하고, 그 다음 일반적인 탈보호 절차를 따랐다. MP-PEG8-OH(3-말레이미도프로피오닐-NH-(CH2CH2O)8-CH2CH2C(O)-OH)를 일반적인 커플링 절차를 사용하여 커플링하였다. 그 다음 수지를 DCM으로 3회, 그 다음 Et2O로 3회 세척하고, 고진공 하에 밤새 두었다. 수지를 3 mL의 헥사플루오로이소프로판올 및 7 mL DCM의 용액에서 1시간 동안 스월링함으로써 수지로부터 펩티드를 절단하였다. 이어서 수지를 여과하고, DCM으로 3회 헹구고, 그 다음 용액을 진공에서 농축시켜 조 화합물 4를 무색의 비정질 고체(212.3 mg, 0.2634 mmol, 105%)로서 제공하였다. Rt = 0.93분 일반적인 방법 UPLC. MS (m/z) [M + H]+ C35H60N5O16에 대한 계산치 806.89, 실측치 806.87.
일반적인 Fmoc 탈보호 절차
DMF(5 mL) 중의 20% 피페리딘의 용액을 수지에 첨가하고, 1분 동안 진탕하고, 배수시켰다. 또 다른 DMF 중의 20% 피페리딘 5 mL를 수지에 첨가하고, 30분 동안 진탕하고, 배수시켰다. 수지를 DMF로 4회 세척하고, 완전히 배수시켰다.
일반적인 커플링 절차
Fmoc 아미노산 (0.75 mmol), HATU (0.75 mmol), DIPEA(1.5 mmol)의 DMF(5 mL)에서 용액을 제조하였다. 용액을 수지에 첨가하고, 60분 동안 진탕하였다. 반응 용기를 배수시키고, DMF로 4회 세척하였다.
Figure pct00177
화합물 4(38.3 mg, 0.0475 mmol)를 무수 DMF(0.38 mL)에 용해시켰다. DMF(0.15 mL) 중의 COMU(15.2 mg, 0.0356 mmol), 그 다음 2,6-루티딘(8.25 μL, 0.0712 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 10분 동안 교반하여 산을 NHS 에스테르로 완전화 활성화시켰다. DMF(0.050 mL) 중의 화합물 1(5.0 mg, 0.0119 mmol)을 반응물에 첨가하였다. 5분 후에 완전한 전환이 관찰되었다. 반응을 AcOH(25 μL)로 켄칭하고, H2O 0.1% 포름산 중의 prep-HPLC 5-60-95% MeCN으로 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획을 진공 하에서 농축시켜 화합물 5를 황색 고체(12.3 mg, 0.00740 mmol, 31%)로서 제공하였다. Rt = 1.24분 일반적인 방법 UPLC. MS (m/z) [M + H]+ C57H77N8O21에 대한 계산치 1209.52, 실측치 1209.83.
표 S2. 알라닌 펩티드 서열을 변경시키면서 화합물 5와 유사한 절차를 사용하여 화합물 5a 내지 5c를 제조하였다. PEG 8은 -NH-(CH2CH2O)8-CH2CH2C(O)-이다.
Figure pct00178
실시예 S3
MP-PEG8-Val-Lys-D-Ala-OH의 고체상 펩티드 합성:
2-클로로트리틸 수지 상의 보호되지 않은 D-알라닌 사전 로딩된 0.75 mmol/g을 Iris Biotech에서 구입하였다. 수지(0.333 그램, 0.25 mmol)를 반응 용기에 첨가하였다. 수지를 DMF로 3회 세척하고, 완전히 배수시켰다. 수지를 DMF 중에서 30분 동안 진탕하면서 팽윤하고, 배수시켰다. 일반적인 커플링 절차를 사용하여 Fmoc-Lys(Boc)-OH를 수지에 커플링하였다. Fmoc를 일반적인 탈보호 절차를 사용하여 탈보호하였다. 일반적인 커플링 절차를 사용하여 Fmoc-Val-OH를 수지에 커플링하고, 그 다음 일반적인 탈보호 절차를 따랐다. MP-PEG8-OH를 일반적인 커플링 절차를 사용하여 커플링하였다. 그 다음 수지를 DCM으로 3회, 그 다음 Et2O로 3회 세척하고, 고진공 하에 밤새 두었다. 수지를 3 mL의 헥사플루오로이소프로판올 및 7 mL DCM의 용액에서 1시간 동안 스월링함으로써 수지로부터 펩티드를 절단하였다. 이어서 수지를 여과하고, DCM으로 3회 헹구고, 그 다음 용액을 진공에서 농축시켜 조 화합물 6을 무색의 비정질 고체(215.7 mg, 0.2176 mmol, 87%)로서 제공하였다. Rt = 1.31분 일반적인 방법 UPLC. MS (m/z) [M + H]+ C45H79N6O18에 대한 계산치 991.54, 실측치 992.15.
일반적인 Fmoc 탈보호 절차
DMF(5 mL) 중의 20% 피페리딘의 용액을 수지에 첨가하고, 1분 동안 진탕하고, 배수시켰다. 또 다른 DMF 중의 20% 피페리딘 5 mL를 수지에 첨가하고, 30분 동안 진탕하고, 배수시켰다. 수지를 DMF로 4회 세척하고, 완전히 배수시켰다.
일반적인 커플링 절차
Fmoc 아미노산 (0.75 mmol), HATU (0.75 mmol), DIPEA(1.5 mmol)의 DMF(5 mL)에서 용액을 제조하였다. 용액을 수지에 첨가하고, 60분 동안 진탕하였다. 반응 용기를 배수시키고, DMF로 4회 세척하였다.
Figure pct00179
화합물 6(47.04 mg, 0.0475 mmol)를 무수 DMF(0.47 mL)에 용해시켰다. DMF(0.15 mL) 중의 COMU(15.2 mg, 0.0356 mmol), 그 다음 2,6-루티딘(8.25 μL, 0.0712 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 10분 동안 교반하여 산을 NHS 에스테르로 완전화 활성화시켰다. DMF(0.050 mL) 중의 화합물 1(5.0 mg, 0.0119 mmol)을 반응물에 첨가하였다. 10분 후에 완전한 전환이 관찰되었다. 반응을 AcOH(25 μL)로 켄칭하고, H2O 0.1% 포름산 중의 prep-HPLC 5-60-95% MeCN으로 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획을 진공 하에서 농축시켜 화합물 7을 황색 고체(1.9 mg, 0.00136 mmol, 12%)로서 제공하였다. Rt = 1.53분 일반적인 방법 UPLC. MS (m/z) [M + H]+ C67H96N9O23에 대한 계산치 1394.66, 실측치 1395.11.
Figure pct00180
화합물 7을 DCM 중의 20% TFA에 용해시켰다. 완결에 대해서 반응을 UPLC-MS로 모니터링하였다. 10분 후에 완전한 전환이 관찰되었다. 반응물을 진공에서 농축시키고, H2O 0.1% 포름산 중의 20% MeCN에 재구성하고, prep-HPLC 10 x 250 mm Synergi Max-RP H2O 0.1% 포름산 중의 5-35-95% MeCN으로 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획을 동결건조시켜 화합물 8을 황색 고체(1.66 mg, 0.00128 mmol, 91%)로서 제공하였다. Rt = 1.27분 일반적인 방법 UPLC. MS (m/z) [M + H]+ C62H88N9O21에 대한 계산치 1294.61, 실측치 1294.81.
표 S3. B에서 아미노산을 변경하여 화합물 8의 제조와 유사한 절차를 사용하여 화합물 8a 내지 8o를 제조하였다. 화합물 8o는 -NH-(CH2CH2O)4-CH2CH2C(O)-인 PEG 4를 함유한다.
Figure pct00181
캄프토테신 접합 방법
완전히 또는 부분적으로 환원된 ADC를 50% 프로필렌 글리콜(PG) 1X PBS 혼합물에서 제조하였다. PG의 절반을 환원된 mAb에 첨가하고, 절반의 PG를 1 mM DMSO 캄프토테신 약물-링커 스톡에 첨가하였다. PG/약물-링커 혼합물을 25% 부분으로 환원된 mAb에 첨가하였다. 약물-링커의 첨가가 완료된 후, 활성탄(1 mg의 mAb에 1 mg의 목탄)으로 처리함으로써 과량의 약물-링커를 제거하였다. 그 다음 목탄을 여과를 통해 제거하고, 생성된 ADC를 NAP5 또는 PD10 컬럼을 사용하여 1X PBS pH 7.4에서 5% 트레할로스로 완충액 교환시켰다. 이 방법에 따라서 제조된 ADC 및 이들의 약물-항체 비율을 표 S4에 제공한다.
표 S4. 항체에 부착된 약물-링커의 평균 수를 약물-항체 비율(DAR) 수라고 지칭한다.
Figure pct00182
생물학적 실시예
실시예 B1: 시험관내 소분자 및 ADC 평가
다수의 암 세포주에 대해 시험관내 효능을 평가하였다. 모든 세포주를 IDEXX Bioresearch에서 STR 프로파일링에 의해 인증하였고, 소생 후 2개월 이하 동안 배양하였다. 대수기(log-phase) 성장으로 배양된 세포를 20% FBS가 보충된 150 μl RPMI 1640을 함유하는 96-웰 플레이트에 24시간 동안 시딩하였다. 세포 배양 배지에서 항체-약물 접합체의 연속 희석물을 4x 작업 농도로 준비하고, 각각의 희석물의 50 μl를 96-웰 플레이트에 첨가하였다. 시험품의 첨가 후, 세포를 37℃에서 4일 동안 시험품과 함께 인큐베이션시켰다. 96시간 후, CellTiter-Glo®(Promega, 미국 위스콘신주 메디슨 소재)로 성장 저해를 평가하고, 플레이트 리더에서 발광을 측정하였다. 삼중으로 결정된 IC50 값은 미처리 대조군에 비해 세포 성장에서 50% 감소를 초래하는 농도로 본 명세서에 정의된다.
다음 표에서 ADC 및 캄프토테신 유리 약물에 대한 IC50 값을 각각 ng/mL 및 mmol/mL 단위의 농도로 제공한다. ADC에 96시간 노출 후 CellTiter-Glo 염색에 의해 세포 생존율을 결정하였다. ND = 결정되지 않음. Ag1은 암 세포 상에 편재하고, 쉽게 내재화할 수 있는 항원을 표적으로 하는 항체이다.
표 1A 및 표 1B. 캄프토테신 ADC 및 유리 약물로서의 캄프토테신 화합물의 시험관내 효력(IC50 값).
표 1A. 신장암 암종 세포(786-O), 췌장암 세포(BxPC3), MDR(-) 및 MDR(+) 급성 전골수성 백혈병 세포(각각 HL-60 및 HL60/RV), 호지킨 림프종 세포(L540cy), 다발성 골수종 세포(MM.1R), 급성 골수성 백혈병 세포(MOLM13), 흑색종 세포(SK-MEL-5) 및 B-림프구 암 세포(SU-DHL-4 및 U266)를 표적으로 하는 Ag1 ADC. 화합물 8p는 MP-PEG4-Val-Glu-Glu-MAD-MDCPT이다.
Figure pct00183
Figure pct00184
표 1B. 신장암 암종 세포(786-O), 췌장암 세포(BxPC3), MDR(-) 및 MDR(+) 급성 전골수성 백혈병 세포(각각 HL-60 및 HL60/RV), 호지킨 림프종 세포(L540cy), 다발성 골수종 세포(MM.1R), 급성 골수성 백혈병 세포(MOLM13), 버킷 림프종 세포(Ramos), 흑색종 세포(SK-MEL-5) 및 B-림프구 암 세포(SU-DHL-4 및 U266)를 표적으로 하는 캄프토테신 유리 약물.
Figure pct00185
Figure pct00186
실시예 B2: 응집 수준
표 2. 펩티드-기반 캄프토테신 약물-링커에 대한 ADC 응집 수준. ADC 응집을 크기 배제 크로마토그래피(SEC)에 의해 결정하였다. 친수성 펩티드 서열 및/또는 PEG4 단위가 펩티드-기반 캄프토테신 약물-링커 작제물에 포함되었을 때 더 낮은 수준의 응집이 관찰되었다.
Figure pct00187
실시예 B3: 약물 방출 연구
24시간에 ALCL 주 Karpas 299 및 HL 세포주 L540cy에서 Ag1-8 ADC(DAR 8), Ag1-8k ADC(DAR8) 및 Ag1-8o ADC(DAR 8)로부터 시험관내 약물 방출을 연구하였다. Karpas 299(CD30 양성, T-세포 림프종) 및 L540cy(CD30 양성, 호지킨 림프종) 세포를 신선한 배지(각각, RPMI+10% FBS, RPMI+20% FBS)에 5E6개 세포/mL(총 5E6개 세포)로 플레이팅하였다. 플레이팅 시, 세포에 배양물의 100 ng/mL에서 Ag1-8 ADC(DAR 8), Ag1-8k ADC(DAR8) 또는 Ag1-8o ADC(DAR 8)를 투여하였다. 처리된 세포를 37℃에서 인큐베이션시키고, 투여-후 24시간에 수거하였다. 수거 시, 세포를 펠릿화하고 PBS로 세정하고 소량의 부피의 PBS에서 동결시켰다. 분석용 질량 분석기(LC-MS/MS) 샘플 준비를 위해, 세포를 내부 표준물질을 함유하는 차가운 메탄올에서 추출하고, 얼음 상에서 인큐베이션시켰다. 인큐베이션 후, 샘플을 원심분리하고, 상청액(추출된 소분자를 함유함)을 제거하고 질소 하에서 건조시켰다. 건조된 샘플을 0.1% 포름산을 함유한 90% 물에 재구성하고, Sciex 6500+ Triple Quadrupole 질량 분석기에 연결된 Supelco Discovery C18 (3 μm, 2.1x50 mm) 컬럼에 주입하였다.
도 1에 도시된 바와 같이, Karpas299 및 L540cy 세포에서 Ag1-8(DAR8)로의 처리 24시간 후, 화합물 3c는 존재하였지만, 화합물 1은 검정에 대한 검출 한계 미만이었다. 유리 약물 화합물 1(3개의 샘플 중 2개에서 관찰 가능함) 및 화합물 3a는 Ag1-8k ADC(DAR8)로의 처리 24시간 후에 Karpas299 세포에 존재하였다. Ag1-8k(DAR8)로의 처리 24시간 후 L540cy 세포에서, 화합물 3a는 존재하였고, 화합물 1은 검정에 대한 검출 한계 미만이었다. 유리 약물 화합물 1 및 화합물 3k는 Ag1-8o(DAR8)로의 처리 24시간 후에 Karpas299 세포에 존재하였다. Ag1-8o(DAR8)로의 처리 24시간 후 L540cy 세포에서, 화합물 3k는 존재하였고, 화합물 1은 검정에 대한 검출 한계 미만이었다.
CD30+ 모체 DEL 및 CD30/MDR+ DEL-BVR 세포주에 대한 차등 활성
CD30+ 모체 DEL 및 CD30/MDR+ DEL-BVR 세포주에 대한 캄프토테신 접합체의 차등 활성. 모체 DEL 림프종 세포주를 브렌툭시맙 베도틴의 존재 하에서 배양하여 MDR 표현형의 과발현을 유도하여, DEL 브렌툭시맙 베도틴 내성 주를 생성한다(DEL-BVR).
생체내 모델 방법
모든 실험은 실험 동물 관리의 평가 및 인증 협회(Association for Assessment and Accreditation of Laboratory Animal Care)에 의해 완전히 인증된 시설에서 동물 관리 및 사용위원회에 따라 수행하였다. 효능 실험은 786-O, L540cy 및 Karpas/Karpas-BVR, DelBVR, Karpas 299, L428, DEL-15 및 L82 이종이식 모델에서 수행하였다. 세포 현탁액으로서 종양 세포를 면역-손상 SCID 또는 누드 마우스에 피하 이식하였다. 종양 생착시, 평균 종양 부피가 약 100 mm3에 도달했을 때 마우스를 연구군(군당 5마리 마우스)으로 무작위 배정하였다. ADC 또는 대조군을 복강내 주사를 통해 1회 투여하였다. 시간의 함수로서의 종양 부피를 공식 (L x W2)/2를 사용하여 결정하였다. 종양 부피가 750 mm3에 도달할 때 동물을 안락사시켰다. 지속적인 퇴행을 나타낸 마우스는 이식 후 10 내지 12주 후에 종료되었다.
L540cy 세포를 동물에게 이식하였다. 7일 후, 동물을 평균 종양 크기가 100 mm3인 군으로 분류하고, 그 다음 3 또는 10 mg/kg에서 단일 용량의 캄프토테신 ADC cAC로 처리하였다. 또 다른 실험에서, 1 또는 3 mg/kg의 캄프토테신 ADC의 단일 용량으로 처리하였다. 동물을 연구 과정 동안 종양 크기 및 생명 징후에 대해 평가하였다.
786-O 세포를 동물에게 이식하였다. 10일 후, 동물을 평균 종양 크기가 100 mm3인 군으로 분류하고, 그 다음 10 mg/kg에서 단일 용량의 캄프토테신 ADC cAC로 처리하였다. 동물을 연구 과정 동안 종양 크기 및 생명 징후에 대해 평가하였다.
동물에게 CD30+ Karpas299 및 CD30- Karpas299-브렌툭시맙 베도틴 내성(Karpas299-BVR) 세포의 1:1 혼합물을 이식하였다. 8일 후, 동물을 평균 종양 크기가 100 mm3인 군으로 분류하고, 그 다음 10 mg/kg에서 단일 용량의 캄프토테신 ADC cAC로 처리하였다. 또 다른 실험에서, 3 또는 10 mg/kg의 캄프토테신 ADC의 단일 용량으로 처리하였다. 동물을 연구 과정 동안 종양 크기 및 생명 징후에 대해 평가하였다.
DelBVR 세포를 동물에게 이식하였다. 7일 후, 동물을 평균 종양 크기가 100 mm3인 군으로 분류하고, 그 다음 0.3 또는 1 mg/kg에서 단일 용량의 캄프토테신 ADC cAC로 처리하였다. 동물을 연구 과정 동안 종양 크기 및 생명 징후에 대해 평가하였다.
DelBVR 세포를 동물에게 이식하였다. 7일 후, 동물을 평균 종양 크기가 100 mm3인 군으로 분류하고, 그 다음 1 또는 2 mg/kg에서 단일 용량의 캄프토테신 ADC으로 또는 0.6 또는 1 mg/kg에서 단일 용량의 캄프토테신 ADC로 처리하였다. 동물을 연구 과정 동안 종양 크기 및 생명 징후에 대해 평가하였다.
Karpas299 세포를 동물에게 이식하였다. 7일 후, 동물을 평균 종양 크기가 100 mm3인 군으로 분류하고, 그 다음 h00을 사용한 비-결합 대조군 단일 용량 또는 1, 3 또는 10 mg/kg에서 단일 또는 다중 용량의 캄프토테신 ADC cAC로 처리하였다. 동물을 연구 과정 동안 종양 크기 및 생명 징후에 대해 평가하였다.
L428 세포를 동물에게 이식하였다. 7일 후, 동물을 평균 종양 크기가 100 mm3인 군으로 분류하고, 그 다음 1, 3 또는 10 mg/kg에서 단일 또는 다중 용량의 캄프토테신 ADC cAC로 처리하였다. 동물을 연구 과정 동안 종양 크기 및 생명 징후에 대해 평가하였다.
DEL-15 세포를 동물에게 이식하였다. 7일 후, 동물을 평균 종양 크기가 100 mm3인 군으로 분류하고, 그 다음 0.1, 0.3 또는 1 mg/kg에서 단일 용량의 캄프토테신 ADC cAC로 처리하였다. 동물을 연구 과정 동안 종양 크기 및 생명 징후에 대해 평가하였다.
L82 세포를 동물에게 이식하였다. 7일 후, 동물을 평균 종양 크기가 100 mm3인 군으로 분류하고, 그 다음 1 mg/kg에서 단일 용량의 캄프토테신 ADC cAC로 처리하였다. 동물을 연구 과정 동안 종양 크기 및 생명 징후에 대해 평가하였다.
본 연구의 결과는 시험된 ADC가 이러한 동물 모델에서 활성이라는 것을 나타낸다.
Figure pct00188
<110> Seattle Genetics, Inc. <120> CAMPTOTHECIN PEPTIDE CONJUGATES <130> 761682002540 <140> PCT/US2020/054137 <141> 2020-10-02 <160> 11 <170> FastSEQ for Windows Version 4.0 <210> 1 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 1 Asp Tyr Tyr Ile Thr 1 5 <210> 2 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 2 Trp Ile Tyr Pro Gly Ser Gly Asn Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe Lys 1 5 10 15 Gly <210> 3 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 3 Tyr Gly Asn Tyr Trp Phe Ala Tyr 1 5 <210> 4 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 4 Lys Ala Ser Gln Ser Val Asp Phe Asp Gly Asp Ser Tyr Met Asn 1 5 10 15 <210> 5 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 5 Ala Ala Ser Asn Leu Glu Ser 1 5 <210> 6 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 6 Gln Gln Ser Asn Glu Asp Pro Trp Thr 1 5 <210> 7 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 7 Gln Ile Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Val Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Tyr Ile Thr Trp Val Lys Gln Lys Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Trp Ile Tyr Pro Gly Ser Gly Asn Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Phe 65 70 75 80 Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Asn Tyr Gly Asn Tyr Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln 100 105 110 Val Thr Val Ser Ala 115 <210> 8 <211> 111 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 8 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gln Ser Val Asp Phe Asp 20 25 30 Gly Asp Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Lys Val Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Ile Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Asn Ile His 65 70 75 80 Pro Val Glu Glu Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Asn 85 90 95 Glu Asp Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 9 <211> 447 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 9 Gln Ile Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Val Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Tyr Ile Thr Trp Val Lys Gln Lys Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Trp Ile Tyr Pro Gly Ser Gly Asn Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Phe 65 70 75 80 Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Asn Tyr Gly Asn Tyr Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln 100 105 110 Val Thr Val Ser Ala Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu 115 120 125 Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys 130 135 140 Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser 145 150 155 160 Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser 165 170 175 Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser 180 185 190 Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn 195 200 205 Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His 210 215 220 Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val 225 230 235 240 Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr 245 250 255 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu 260 265 270 Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 275 280 285 Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 290 295 300 Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 305 310 315 320 Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile 325 330 335 Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 340 345 350 Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu 355 360 365 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 370 375 380 Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 385 390 395 400 Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 405 410 415 Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 420 425 430 His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 435 440 445 <210> 10 <211> 446 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 10 Gln Ile Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Val Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Tyr Ile Thr Trp Val Lys Gln Lys Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Trp Ile Tyr Pro Gly Ser Gly Asn Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Phe 65 70 75 80 Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Asn Tyr Gly Asn Tyr Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln 100 105 110 Val Thr Val Ser Ala Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu 115 120 125 Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys 130 135 140 Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser 145 150 155 160 Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser 165 170 175 Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser 180 185 190 Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn 195 200 205 Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His 210 215 220 Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val 225 230 235 240 Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr 245 250 255 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu 260 265 270 Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 275 280 285 Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 290 295 300 Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 305 310 315 320 Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile 325 330 335 Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 340 345 350 Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu 355 360 365 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 370 375 380 Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 385 390 395 400 Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 405 410 415 Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 420 425 430 His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 435 440 445 <210> 11 <211> 218 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 11 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gln Ser Val Asp Phe Asp 20 25 30 Gly Asp Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Lys Val Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Ile Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Asn Ile His 65 70 75 80 Pro Val Glu Glu Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Asn 85 90 95 Glu Asp Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg 100 105 110 Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln 115 120 125 Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr 130 135 140 Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser 145 150 155 160 Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr 165 170 175 Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys 180 185 190 His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro 195 200 205 Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215

Claims (75)

  1. 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염으로서,
    상기 캄프토테신 접합체는 하기 화학식 (I)을 갖고:
    Figure pct00189
    (I)
    상기 식에서,
    L은 리간드 단위이고;
    Z는 스트레처 단위이고;
    A는 결합 또는 연결기 단위이고;
    S*는 결합 또는 분배제이고;
    AA1은 아미노산이고;
    AA2는 아미노산이고;
    B는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp, D-Ala, Aib 및 pAbz로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산이고;
    RF는 H 또는 C1-C6 알킬이고;
    p는 1 내지 16인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  2. 제1항에 있어서, AA1은 Val인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  3. 제1항에 있어서, AA1은 Ala 또는 D-Ala인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, AA2는 Lys인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  5. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, AA2는 Ala 또는 D-Ala인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, B는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp 및 D-Ala로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, B는 D-Ala인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  8. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, B는 Arg, Lys, His, Asp 또는 Glu인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  9. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, B는 Thr 또는 Gln인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  10. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, B는 Phe, Val, Leu, Met 또는 Trp인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  11. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, RF는 H인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  12. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, S*는 PEG 단위인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  13. 제12항에 있어서, PEG 단위는 하기 화학식을 갖고:
    Figure pct00190

    Figure pct00191
    또는
    Figure pct00192

    상기 식에서, 좌측의 물결선은 A에 대한 부착 부위를 나타내고, 우측의 물결선은 AA1에 대한 부착 부위를 나타내고, b는 2 내지 20의 정수 또는 2, 4, 8 또는 12인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  14. 제13항에 있어서, PEG 단위는 하기 화학식을 갖고:
    Figure pct00193
    ,
    상기 식에서, 좌측의 물결선은 A에 대한 부착 부위를 나타내고, 우측의 물결선은 AA1에 대한 부착 부위를 나타내고, b는 2 내지 20의 정수 또는 2, 4, 8 또는 12인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  15. 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, Z는 하기 화학식 Za를 갖고:
    Figure pct00194

    (Za)
    상기 식에서, 별표는 리간드 단위(L)에 대한 부착 위치를 나타내고;
    물결선은 연결기 단위(A)에 대한 부착 위치를 나타내고;
    R17은 -C1-C10 알킬렌-, C1-C10 헤테로알킬렌-, -C3-C8 카르보사이클로-, -O-(C1-C8 알킬렌)-, -아릴렌-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-, -(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-, -C3-C8 헤테로사이클로-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-, -C1-C10 알킬렌-C(=O)-, C1-C10 헤테로알킬렌-C(=O)-, -C3-C8 카르보사이클로-C(=O)-, -O-(C1-C8 알킬렌)-C(=O)-, -아릴렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-C(=O)-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-C(=O)-,-(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C3-C8 헤테로사이클로-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-C(=O)-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-NH-, C1-C10 헤테로알킬렌-NH-, -C3-C8 카르보사이클로-NH-, -O-(C1-C8 알킬렌)-NH-, -아릴렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-NH-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-NH-, -(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-NH-, -C3-C8 헤테로사이클로-NH-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-NH-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-S-, C1-C10 헤테로알킬렌-S-, -C3-C8 카르보사이클로-S-, -O-(C1-C8 알킬렌)-S-, -아릴렌-S-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-S-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-S-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-S-, -(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-S-, -C3-C8 헤테로사이클로-S-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-S- 또는 -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-S-이고;
    R17은 -(CH2)xNH2, -(CH2)xNHRa 또는 -(CH2)xNRa 2인 염기성 단위(BU)로 선택적으로 치환되고;
    x는 1 내지 4의 정수이고;
    각각의 Ra는 C1-6 알킬 및 C1-6 할로알킬로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되거나, 2개의 Ra기는 이들이 부착된 질소와 결합되어 4 내지 6원의 헤테로시클로알킬 고리, 또는 아제티디닐, 피롤리디닐 또는 피페리디닐기를 형성하는, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  16. 제15항에 있어서, R17은 -(C1-C5)알킬렌-C(=O)-이고, R17의 알킬렌 부분은 염기성 단위(BU)로 선택적으로 치환되는, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  17. 제15항 또는 제16항에 있어서,
    Z는
    Figure pct00195
    ;
    Figure pct00196
    ; 또는
    Figure pct00197
    인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  18. 제17항에 있어서, Z는
    Figure pct00198
    인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  19. 제17항에 있어서, Z는
    Figure pct00199
    또는
    Figure pct00200
    인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  20. 제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, A는 결합인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  21. 제1항에 있어서, 상기 캄프토테신 접합체 하기 화학식 (Ib)를 갖고:
    Figure pct00201
    (Ib)
    상기 식에서,
    L은 리간드 단위이고;
    AA1은 아미노산이고;
    AA2는 아미노산이고;
    B는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp, D-Ala, Aib 및 pAbz로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산이고;
    RF는 수소 또는 C1-C6 알킬이고;
    b는 2 내지 20의 정수이고;
    y는 1 내지 8 또는 1 내지 4의 정수이거나; 또는 1 또는 4이고;
    p는 1 내지 16인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  22. 제21항에 있어서, y는 1인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  23. 제21항 또는 제22항에 있어서, b는 8인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  24. 제21항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, AA1-AA2는 Val-Lys인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  25. 제21항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서, B는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp 및 D-Ala로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  26. 제21항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, AA1-AA2-B는 Ala-Ala-D-Ala인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  27. 제21항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, RF는 H인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  28. 제1항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, p는 1 내지 16이거나, 또는 2 내지 8이거나, 또는 2이거나, 또는 4이거나, 또는 8인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  29. 제1항 내지 제28항 중 어느 한 항에 있어서, 리간드 단위는 항체 또는 이의 항원-결합 단편인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  30. 제29항에 있어서, 항체는 단클론성 항체 또는 이의 항원-결합 단편인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  31. 제29항 또는 제30항에 있어서, 항체는 cAC10 항-CD30 항체 또는 이의 항원-결합 단편인, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  32. 제29항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서, 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 각각 서열번호 1, 2, 3, 4, 5 및 6의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함하는, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  33. 제31항 중 어느 한 항에 있어서, 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 서열번호 7의 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 8의 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  34. 제31항에 있어서, 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 서열번호 7의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 8의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  35. 제31항에 있어서, 항체는 서열번호 9 또는 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호 11의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는, 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  36. 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염으로서,
    상기 캄프토테신-링커 화합물은 하기 화학식 (II)를 갖고:
    Figure pct00202
    (II)
    상기 식에서,
    Z'는 스트레처 단위 전구체이고;
    A는 결합 또는 연결기 단위이고;
    S*는 결합 또는 분배제이고;
    AA1은 아미노산이고;
    AA2는 아미노산이고;
    B는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp, D-Ala, Aib 및 pAbz로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산이고;
    RF는 H 또는 C1-C6 알킬인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  37. 제36항에 있어서, AA1은 Val인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  38. 제36항에 있어서, AA1은 Ala 또는 D-Ala인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  39. 제36항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서, AA2는 Lys인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  40. 제36항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서, AA2는 Ala 또는 D-Ala인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  41. 제36항 내지 제40항 중 어느 한 항에 있어서, B는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp 및 D-Ala로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  42. 제36항 내지 제41항 중 어느 한 항에 있어서, B는 D-Ala인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  43. 제36항 내지 제41항 중 어느 한 항에 있어서, B는 Arg, Lys, His, Asp 또는 Glu인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  44. 제36항 내지 제41항 중 어느 한 항에 있어서, B는 Thr 또는 Gln인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  45. 제36항 내지 제41항 중 어느 한 항에 있어서, B는 Phe, Val, Leu, Met 또는 Trp인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  46. 제36항 내지 제45항 중 어느 한 항에 있어서, RF는 H인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  47. 제36항 내지 제46항 중 어느 한 항에 있어서, S*는 PEG 단위인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  48. 제47항에 있어서, PEG 단위는 하기 화학식을 갖고:
    Figure pct00203

    Figure pct00204
    또는
    Figure pct00205

    상기 식에서, 좌측의 물결선은 A에 대한 부착 부위를 나타내고, 우측의 물결선은 AA1에 대한 부착 부위를 나타내고, b는 2 내지 20의 정수 또는 2, 4, 8 또는 12인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  49. 제48항에 있어서, PEG 단위는 하기 화학식을 갖고:
    Figure pct00206
    ,
    상기 식에서, 좌측의 물결선은 A에 대한 부착 부위를 나타내고, 우측의 물결선은 AA1에 대한 부착 부위를 나타내고, b는 2 내지 20의 정수 또는 2, 4, 8 또는 12인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  50. 제36항 내지 제49항 중 어느 한 항에 있어서, Z'는 하기 화학식 Z'b를 갖고:
    Figure pct00207

    (Z'b)
    상기 식에서,
    R17은 -C1-C10 알킬렌-, C1-C10 헤테로알킬렌-, -C3-C8 카르보사이클로-, -O-(C1-C8 알킬렌)-, -아릴렌-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-, -(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-, -C3-C8 헤테로사이클로-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-, -C1-C10 알킬렌-C(=O)-, C1-C10 헤테로알킬렌-C(=O)-, -C3-C8 카르보사이클로-C(=O)-, -O-(C1-C8 알킬렌)-C(=O)-, -아릴렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-C(=O)-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-C(=O)-,-(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C3-C8 헤테로사이클로-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-C(=O)-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-C(=O)-, -C1-C10 알킬렌-NH-, C1-C10 헤테로알킬렌-NH-, -C3-C8 카르보사이클로-NH-, -O-(C1-C8 알킬렌)-NH-, -아릴렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-NH-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-NH-, -(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-NH-, -C3-C8 헤테로사이클로-NH-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-NH-, -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-NH-, -C1-C10 알킬렌-S-, C1-C10 헤테로알킬렌-S-, -C3-C8 카르보사이클로-S-, -O-(C1-C8 알킬렌)-S-, -아릴렌-S-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-S-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-S-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 카르보사이클로)-S-, -(C3-C8 카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-S-, -C3-C8 헤테로사이클로-S-, -C1-C10 알킬렌-(C3-C8 헤테로사이클로)-S- 또는 -(C3-C8 헤테로사이클로)-C1-C10 알킬렌-S-이고;
    R17은 -(CH2)xNH2, -(CH2)xNHRa 또는 -(CH2)xNRa 2인 염기성 단위(BU)로 선택적으로 치환되고;
    x는 1 내지 4의 정수이고;
    각각의 Ra는 C1-6 알킬 및 C1-6 할로알킬로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되거나, 2개의 Ra기는 이들이 부착된 질소와 결합되어 4 내지 6원의 헤테로시클로알킬 고리 또는 아제티디닐, 피롤리디닐 또는 피페리디닐기를 형성하는, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  51. 제50항에 있어서, R17은 -(C1-C5)알킬렌-C(=O)-이고, R17의 알킬렌 부분은 염기성 단위(BU)로 선택적으로 치환되는, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  52. 제50항 또는 제51항에 있어서,
    Z'는
    Figure pct00208
    ;
    Figure pct00209
    ; 또는
    Figure pct00210
    .인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  53. 제52항에 있어서, Z'는
    Figure pct00211
    인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  54. 제52항에 있어서, Z'는
    Figure pct00212
    또는
    Figure pct00213
    인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  55. 제36항 내지 제54항 중 어느 한 항에 있어서, A는 결합인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  56. 제36항에 있어서,
    상기 캄프토테신-링커 화합물은 하기 화학식 (IIb)를 갖고:
    Figure pct00214
    (IIb)
    상기 식에서,
    AA1은 아미노산이고;
    AA2는 아미노산이고;
    B는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp, D-Ala, Aib 및 pAbz로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산이고;
    RF는 수소 또는 C1-C6 알킬이고;
    b는 2 내지 20의 정수이고;
    y는 1 내지 8 또는 1 내지 4의 정수이거나; 1 또는 4인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  57. 제56항에 있어서, y는 1인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  58. 제56항 또는 제57항에 있어서, b는 8인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  59. 제56항 내지 제58항 중 어느 한 항에 있어서, AA1-AA2는 Val-Lys인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  60. 제56항 내지 제59항 중 어느 한 항에 있어서, B는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp 및 D-Ala로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  61. 제56항 내지 제58항 중 어느 한 항에 있어서, AA1-AA2-B는 Ala-Ala-D-Ala인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  62. 제56항 내지 제61항 중 어느 한 항에 있어서, RF는 H인, 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  63. 캄프토테신 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염으로서,
    상기 캄프토테신 화합물은 하기 화학식 (III)를 갖고:
    Figure pct00215
    (III)
    상기 식에서,
    B'는 Arg, Lys, His, Asp, Glu, Thr, Gln, Ala, Phe, Val, Leu, Met, Trp, D-Ala, Aib 및 pAbz로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산이고;
    RF는 H 또는 C1-C6 알킬인, 캄프토테신 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  64. 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서 암을 치료하는 방법으로서, 상기 방법은 대상체에게 유효량의 제1항 내지 제35항 중 어느 한 항의 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 화학식 제63항의 캄프토테신 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  65. 제64항에 있어서, 상기 암은 림프종, 백혈병 또는 고형 종양인, 방법.
  66. 제64항 또는 제65항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 방법은 대상체에게 유효량의 추가 치료제, 1종 이상의 화학치료제 또는 방사선 요법을 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  67. 자가면역 질환의 치료를 필요로 하는 대상체에서 자가면역 질환을 치료하는 방법으로서, 상기 방법은 대상체에게 유효량의 제1항 내지 제35항 중 어느 한 항의 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 화학식 제63항의 캄프토테신 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  68. 제67항에 있어서, 상기 자가면역 질환은 Th2 림프구 관련 장애, Th1 림프구-관련 장애 또는 활성화된 B 림프구-관련 장애인, 방법.
  69. 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서 암을 치료하는 방법으로서, 상기 방법은 암 세포를 제63항의 캄프토테신 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염과 접촉시키는 단계를 포함하는, 방법.
  70. 제69항에 있어서, 상기 암은 림프종, 백혈병 또는 고형 종양인, 방법.
  71. 제1항 내지 제35항 중 어느 한 항의 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염의 제조 방법으로서, 상기 방법은 항체 또는 이의 항원-결합 단편을 제36항 내지 제62항 중 어느 한 항의 캄프토테신-링커 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염과 반응시키는 단계를 포함하는, 방법.
  72. 제1항 내지 제35항 중 어느 한 항의 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 및 약제학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는, 약제학적 조성물.
  73. 제1항 내지 제35항 중 어느 한 항의 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 포함하고, 선택적으로 추가 치료제를 포함하는, 키트.
  74. 질환 또는 장애를 치료하기 위한, 제1항 내지 제35항 중 어느 한 항의 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 제63항의 캄프토테신 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염의 용도.
  75. 질환 또는 장애를 치료하기 위한 의약의 제조에서의 제1항 내지 제35항 중 어느 한 항의 캄프토테신 접합체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 제63항의 캄프토테신 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 및 약제학적으로 허용 가능한 부형제, 담체 또는 희석제의 용도.
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