KR20210019996A - 파킨슨병의 치료를 위한 조성물 및 방법 - Google Patents
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Abstract
본 개시내용은 AADC를 코딩하는 폴리뉴클레오티드의 전달 및 치료적 투여를 위한 방법, 제제 및 장치에 관한 것이다. 본 개시내용은 AADC를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 AAV 벡터의 전달 및 치료적 투여를 위한 방법, 제제 및 장치에 관한 것이다. 본 개시내용은 파킨슨병을 포함한 신경계 질환, 장애 및 상태의 치료에서의 AADC를 코딩하는 폴리뉴클레오티드의 전달 및 치료적 투여를 위한 방법, 제제 및 장치에 관한 것이다.
Description
관련 출원에 대한 상호 참조
본 출원은 05/15/2018에 출원된 표제 [AADC POLYNUCLEOTIDES FOR THE TREATMENT OF PARKINSON'S DISEASE]의 미국 특허 가출원 번호 62/671,944, 및 06/07/2018에 출원된 표제 [COMPOSITIONS AND METHODS FOR THE TREATMENT OF PARKINSON'S DISEASE]의 미국 특허 가출원 번호 62/681,891, 및 06/13/2018에 출원된 표제 [COMPOSITIONS AND METHODS FOR THE TREATMENT OF PARKINSON'S DISEASE]의 미국 특허 가출원 번호 62/684,384, 및 06/29/2018에 출원된 표제 [COMPOSITIONS AND METHODS FOR THE TREATMENT OF PARKINSON'S DISEASE]의 미국 특허 가출원 번호 62/691,748, 및 07/16/2018에 출원된 표제 [COMPOSITIONS AND METHODS FOR THE TREATMENT OF PARKINSON'S DISEASE]의 미국 특허 가출원 번호 62/698,419, 및 07/25/2018에 출원된 표제 [COMPOSITIONS AND METHODS FOR THE TREATMENT OF PARKINSON'S DISEASE]의 미국 특허 가출원 번호 62/703,137, 및 10/04/2018에 출원된 표제 [COMPOSITIONS AND METHODS FOR THE TREATMENT OF PARKINSON'S DISEASE]의 미국 특허 가출원 번호 62/741,021, 및 10/19/2018에 출원된 표제 [COMPOSITIONS AND METHODS FOR THE TREATMENT OF PARKINSON'S DISEASE]의 미국 특허 가출원 번호 62/748,119, 및 11/07/2018에 출원된 표제 [COMPOSITIONS AND METHODS FOR THE TREATMENT OF PARKINSON'S DISEASE]의 미국 특허 가출원 번호 62/756,897, 및 01/08/2019에 출원된 표제 [COMPOSITIONS AND METHODS FOR THE TREATMENT OF PARKINSON'S DISEASE]의 미국 특허 가출원 번호 62/789,909, 및 04/09/2019에 출원된 표제 [COMPOSITIONS AND METHODS FOR THE TREATMENT OF PARKINSON'S DISEASE]의 미국 특허 가출원 번호 62/831,400의 이익을 주장하며, 그의 내용은 각각 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
서열 목록에 대한 참조
본 출원은 전자 포맷의 서열 목록과 함께 출원된다. 표제 20571025PCT_SEQLST의 서열 목록 파일이 2019년 5월 15일에 생성되었고, 이는 6,442,762 바이트 크기이다. 전자 포맷 서열 목록 내의 정보는 그의 전문이 본원에 참조로 포함된다.
개시내용의 분야
본 개시내용은 AADC를 코딩하는 폴리뉴클레오티드의 전달 및 치료적 투여를 위한 방법, 제제 및 장치에 관한 것이다. 본 개시내용은 AADC를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 AAV 벡터의 전달 및 치료적 투여를 위한 방법, 제제 및 장치에 관한 것이다. 본 개시내용은 파킨슨병을 포함한 신경계 질환, 장애 및 상태의 치료에서의 AADC를 코딩하는 폴리뉴클레오티드의 전달 및 치료적 투여를 위한 방법, 제제 및 장치에 관한 것이다.
방향족 L-아미노산 데카르복실라제 (AADC)는 도파민 및 세로토닌의 합성을 담당하는 동종이량체 피리독살 포스페이트-의존성 효소이다. 코딩된 단백질은 L-3,4-디히드록시페닐알라닌 (L-도파 또는 레보도파)에서 도파민; L-5-히드록시트립토판에서 세로토닌; 및 L-트립토판에서 트립타민으로의 탈카르복실화를 촉매한다. 이러한 유전자에서의 결함은, 중증의 운동 및 자율신경성 기능장애를 초래하는 조합된 세로토닌 및 카테콜아민 결핍으로 이어지는 신경전달물질 대사에서의 선천성 이상인, 방향족 L-아미노산 데카르복실라제 결핍 (AADCD)의 원인이 된다.
파킨슨병 (PD)은 감각 및 운동 증상을 일으키는 중추 신경계 (CNS)의 진행성 신경변성 질환이다. 도파민 대체 (즉 레보도파)는 PD에서의 운동 장애에 대한 표준 약물요법이었다. 그러나, 부분적으로는 도파민-발생 세포의 진행성 사멸 및 상응하는 AADC 활성 손실로 인해, 도파민 요법의 이점은 시간이 지남에 따라 덜 현저해진다. 또한, 고-용량 도파민의 전신 투여는 중변연계의 도파민성 자극으로 인해 야기되는 부작용, 예컨대 운동 수행에서의 변동, 이상운동증 및 환각에 의해 합병증을 발생시킨다. 도파민성 기능을 회복시키고 부작용을 최소화하는 하나의 전략은 AADC를 CNS의 표적화된 영역에 직접 전달하기 위한 유전자 요법을 사용하는 것이다.
아데노-연관 바이러스 (AAV)는 그의 장기간 유전자 발현, 헬퍼 바이러스 부재 하에서의 자율적 복제 불능, 분열 및 비-분열 세포를 형질도입하는 능력, 및 야생형 감염으로부터의 병원성 결핍으로 인해 유전자 요법을 위한 매력적인 벡터로서 등장하였다. (예를 들어, 문헌 [Hadaczek et al. Mol. Ther. 18(8), 1458-1461, Aug. 2010] 참조). AAV는 데펜도바이러스(Dependovirus) 속에 속하는 헬퍼-의존성 DNA 파르보바이러스이다.
본 개시내용은 파킨슨병의 치료에서 유전자 요법을 위해 전장 AADC 단백질을 코딩하는 도파 카르복실라제 ("DDC") 유전자 서열을 포함하는 AAV-유래 벡터와 함께 사용하기 위한, 이러한 개선된 핵산 구축물, 예를 들어 폴리뉴클레오티드의 전달 및 치료적 투여를 위한 방법, 제제 및 장치를 제공한다.
본원에 기재된 핵산 구축물은, 각각 또는 둘 다가 DDC 유전자 서열 주위에 위치한 AAV로부터 유래될 수 있는 적어도 5'-ITR 및 3'-ITR, 뿐만 아니라 유전자 발현 및 클론 선택을 위해 필요한 추가의 성분을 포함한다.
본 개시내용은 대상체에게 제약 조성물을 투여하는 방법을 제공한다. 특정 실시양태에서, 방법은 대상체에게 AAV2 캡시드 및 벡터 게놈을 포함하는 아데노-연관 바이러스 (AAV) 입자를 포함하는 제약 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 벡터 게놈은 서열식별번호(SEQ ID NO): 979에 대해 적어도 97% 동일성을 갖는 뉴클레오티드 서열을 포함한다. 특정 실시양태에서, 벡터 게놈은 서열식별번호: 979에 대해 적어도 99% 동일성을 갖는 뉴클레오티드 서열을 포함한다. 특정 실시양태에서, 벡터 게놈은 서열식별번호: 979를 포함한다.
특정 실시양태에서, 제약 조성물은 대상체의 적어도 1개의 피각 내로 후방 외과적 주입에 의해 대상체에게 투여되며; 여기서 후방 투여로부터의 평균 총 피각 커버리지는 적어도 50%이다. 특정 실시양태에서, 후방 투여로부터의 평균 총 피각 커버리지는 50-65%이다. 특정 실시양태에서, 후방 투여로부터의 평균 총 피각 커버리지는 50-60%이다. 특정 실시양태에서, 후방 투여로부터의 평균 총 피각 커버리지는 55-65%이다. 특정 실시양태에서, 제약 조성물의 후방 투여는 단일 절차 동안 대상체의 우측 피각 및 좌측 피각 둘 다에 대해 양측이다. 특정 실시양태에서, 수술 시간은 7-10시간 또는 7-9시간이다. 특정 실시양태에서, 주입 시간은 2.5-4.5시간, 2.5-5.0시간, 3.0-4.5시간, 3.0-5.0시간, 3.5-4.5시간 또는 3.5-5.0시간이다.
특정 실시양태에서, 제약 조성물은 대상체의 적어도 1개의 피각 내로 경전두 외과적 주입에 의해 대상체에게 투여되며; 여기서 후방 투여로부터의 평균 총 피각 커버리지는 30-50%이다. 특정 실시양태에서, 경전두 투여로부터의 평균 총 피각 커버리지는 35-50%이다. 특정 실시양태에서, 경전두 투여로부터의 평균 총 피각 커버리지는 40-50%이다. 특정 실시양태에서, 제약 조성물의 경전두 투여는 단일 절차 동안 대상체의 우측 피각 및 좌측 피각 둘 다에 대해 양측이다.
특정 실시양태에서, 제약 조성물은 2.0 x 1012개 vg/ml 내지 3.0 x 1012개 vg/ml의 AAV 농도를 포함한다. 특정 실시양태에서, 제약 조성물은 2.4 x 1012개 vg/ml 내지 2.8 x 1012개 vg/ml의 AAV 농도를 포함한다. 특정 실시양태에서, 제약 조성물은 약 2.6 x 1012개 vg/ml의 AAV 농도를 포함한다. 특정 실시양태에서, 제약 조성물은 2.6 x 1012개 vg/ml의 AAV 농도를 포함한다.
특정 실시양태에서, 제약 조성물은 피각당 최대 1800 μL의 부피로 투여된다. 특정 실시양태에서, 제약 조성물은 피각당 최대 1500 μL의 부피로 투여된다. 특정 실시양태에서, 제약 조성물은 피각당 최대 1200 μL의 부피로 투여된다. 특정 실시양태에서, 제약 조성물은 피각당 최대 900 μL의 부피로 투여된다. 특정 실시양태에서, 제약 조성물은 피각당 최대 450 μL의 부피로 투여된다.
특정 실시양태에서, 투여로부터의 총 바이러스 투여량은 2.0 x 1012개 vg/ml 내지 9.4 x 1012개 vg/ml이다. 특정 실시양태에서, 투여로부터의 총 바이러스 투여량은 3.5 x 1012개 vg/ml 내지 8.0 x 1012개 vg/ml이다.
특정 실시양태에서, 제약 조성물은 염화나트륨, 인산나트륨 및 플루론산 F-68을 포함하는 제제이며, 여기서 제제는 pH 7.0-7.5를 갖는다. 특정 실시양태에서, 제제는 150-200 mM 염화나트륨, 8-12 mM 인산나트륨 및 0.001-0.01% w/v 플루론산 F-68을 포함하며, pH 7.2-7.4이다. 특정 실시양태에서, 제제는 180mM 염화나트륨, 10mM 인산나트륨 및 0.001% w/v 플루론산 F-68을 포함하며, pH 7.3이다.
본 개시내용은 대상체에서 신경계 질환을 치료하는 방법을 제공한다. 특정 실시양태에서, 방법은 본 개시내용의 투여 방법에 따라 제약 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함한다. 특정 실시양태에서, 방법은 AAV2 캡시드 및 벡터 게놈을 포함하는 아데노-연관 바이러스 (AAV) 입자를 포함하는 제약 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함하며, 여기서 벡터 게놈은 서열식별번호: 979에 대해 적어도 97% 동일성을 갖는 뉴클레오티드 서열을 포함한다. 특정 실시양태에서, 벡터 게놈은 서열식별번호: 979에 대해 적어도 99% 동일성을 갖는 뉴클레오티드 서열을 포함한다. 특정 실시양태에서, 벡터 게놈은 서열식별번호: 979를 포함한다. 특정 실시양태에서, 신경계 질환은 파킨슨병이다.
특정 실시양태에서, 제약 조성물의 투여는 치료상 유효한 결과를 생성한다.
특정 실시양태에서, 치료상 유효한 결과는 투여 2-7개월 후 PET 18F-도파 분석에 의해 측정 시, 50% 초과의 기준선 대비 AADC 효소 활성의 증가를 포함한다. 특정 실시양태에서, 기준선 대비 AADC 효소 활성의 증가는 50%-85%이다. 특정 실시양태에서, 기준선 대비 AADC 효소 활성의 증가는 60%-85%이다. 특정 실시양태에서, 기준선 대비 AADC 효소 활성의 증가는 70%-85%이다.
특정 실시양태에서, 치료상 유효한 결과는 투여 6개월 후에 측정 시, 최대 20%의 기준선 대비 "온" 의약 상태에서의 감소된 UPDRS III 스코어를 포함한다. 특정 실시양태에서, 기준선 대비 "온" 의약 상태에서의 UPDRS III 스코어의 감소는 6개월에 15%-20%이다. 특정 실시양태에서, 치료상 유효한 결과는 투여 12개월 후에 측정 시, 최대 30%의 기준선 대비 "온" 의약 상태에서의 감소된 UPDRS III 스코어를 포함한다. 특정 실시양태에서, 기준선 대비 "온" 의약 상태에서의 UPDRS III 스코어의 감소는 12개월에 20%-30%이다. 특정 실시양태에서, 환자는 10 초과의 기준선 UPDRS III "온" 스코어를 갖는다. 특정 실시양태에서, 환자는 10 내지 14의 기준선 UPDRS III "온" 스코어를 갖는다. 특정 실시양태에서, 치료상 유효한 결과는 투여 6개월 후에 측정 시, 최대 26%의 기준선 대비 "오프" 의약 상태에서의 감소된 UPDRS III 스코어를 포함한다. 특정 실시양태에서, 기준선 대비 "오프" 의약 상태에서의 UPDRS III 스코어의 감소는 6개월에 20%-26%이다. 특정 실시양태에서, 치료상 유효한 결과는 투여 12개월 후에 측정 시, 최대 33%의 기준선 대비 "오프" 의약 상태에서의 감소된 UPDRS III 스코어를 포함한다. 특정 실시양태에서, 기준선 대비 "오프" 의약 상태에서의 UPDRS III 스코어의 감소는 12개월에 25%-33%이다. 특정 실시양태에서, 환자는 30 초과의 기준선 UPDRS III "오프" 스코어를 갖는다. 특정 실시양태에서, 환자는 30 내지 36.5의 기준선 UPDRS III "오프" 스코어를 갖는다.
특정 실시양태에서, 치료상 유효한 결과는 6개월에 하우저 운동 일지에 의해 측정 시, 기준선 대비 적어도 3.0시간의 문제되는 이상운동증이 없는 일지 온-시간의 증가를 포함한다. 특정 실시양태에서, 기준선 대비 문제되는 이상운동증이 없는 일지 온-시간의 증가는 6개월에 3.0시간 내지 3.9시간이다. 특정 실시양태에서, 치료상 유효한 결과는 12개월에 하우저 운동 일지에 의해 측정 시, 기준선 대비 적어도 2.5시간의 문제되는 이상운동증이 없는 일지 온-시간의 증가를 포함한다. 특정 실시양태에서, 기준선 대비 문제되는 이상운동증이 없는 일지 온-시간의 증가는 12개월에 2.5시간 내지 3.0시간이다. 특정 실시양태에서, 치료상 유효한 결과는 6개월에 하우저 운동 일지에 의해 측정 시, 기준선 대비 적어도 3.0시간의 일지 오프-시간의 감소를 포함한다. 특정 실시양태에서, 기준선 대비 일지 오프-시간의 감소는 6개월에 3.0시간 내지 3.9시간이다. 특정 실시양태에서, 치료상 유효한 결과는 12개월에 하우저 운동 일지에 의해 측정 시, 기준선 대비 적어도 2.5시간의 일지 오프-시간의 감소를 포함한다. 특정 실시양태에서, 기준선 대비 일지 오프-시간의 감소는 12개월에 2.5시간 내지 3.0시간이다.
상기 및 다른 목적, 특색 및 이점은 첨부 도면에 예시된 바와 같이, 개시내용의 특정한 실시양태의 하기 설명으로부터 분명해질 것이다. 도면은 반드시 일정한 척도로 되어 있지 않고, 대신에 개시내용의 다양한 실시양태의 원리를 예시하는 것에 중점을 둔다.
도 1은 본 개시내용의 바이러스 게놈의 한 실시양태의 개략도이다.
도 2는 본 개시내용의 특정 실시양태에 상응하는 피각의 퍼센트 커버리지를 보여주며, 이는 좌측 및 우측 피각의 평균 커버리지에 의해 부피 단위로 나타내어진다 (총 및 후방). 오차 막대는 표준 오차이다.
도 3은 중등도 PD 대조군 대상체 및 건강한 비-PD 대상체와 비교하여, 주입-후 2-7개월째의 대상체에 대한 본 개시내용의 특정 실시양태에 상응하는 18F-도파 흡수 비를 보여준다. 표준화된 흡수 값 비 (SOR) 값은 각각의 대상체에서 양측 평균 후두 시간-방사능 곡선 (kBq/mL) 관심 영역 값을 사용하여 계산된다.
도 4는 본 개시내용의 특정 실시양태에 상응하는, 피각에서의 AADC 발현 및 활성 (상부) 및 기준선과 비교한 백분율로서 6개월째의 레보도파 등가 용량 (LED) (하부)을 보여준다. 오차 막대는 표준 오차이다.
도 5는 본 개시내용의 특정 실시양태에 상응하는, 기준선과 비교하여 레보도파-등가 용량의 백분율 변화를 보여준다. 오차 막대는 표준 오차이다.
도 6은 본 개시내용의 특정 실시양태에 상응하는, 문제되는 이상운동증이 없는 일지 보고된 온-시간의 변화를 보여준다. 오차 막대는 표준 오차이다.
도 7은 본 개시내용의 특정 실시양태에 상응하는, 환자 "온" 투약 상태에서 통합 파킨슨병 등급화 척도 (UPDRS) 파트 III에서의 환자 스코어의 개선 (감소)을 보여준다. 오차 막대는 표준 오차이다.
도 8은 본 개시내용의 특정 실시양태에 상응하는, 환자 "오프" 투약 상태에서 통합 파킨슨병 등급화 척도 (UPDRS) 파트 III에서의 환자 스코어의 개선 (감소)을 보여준다. 오차 막대는 표준 오차이다.
도 9는 본 개시내용의 특정 실시양태에 상응하는, 기준선으로부터의 변형된 혼 앤 야(Modified Hoehn and Yahr) (mH&Y) 척도 하에서의 환자 병기의 개선 (감소)을 보여준다.
도 10은 본 개시내용의 특정 실시양태에 상응하는, 삶의 질 평가 (파킨슨병 설문지 (PDQ-39)) 상 환자 스코어의 개선 (감소)을 보여준다. 오차 막대는 표준 오차이다.
도 11a는 본 개시내용의 특정 실시양태에 상응하는, 임상 전반적 변화 인상 (CGI-C) 척도에 의해 평가된 바와 같은 환자 삶의 질의 개선을 보여준다.
도 11b는 본 개시내용의 특정 실시양태에 상응하는, 환자 전반적 변화 인상 (PGI-C) 척도에 의해 평가된 바와 같은 환자 삶의 질의 개선을 보여준다.
도 12a는 본 개시내용의 특정 실시양태에 상응하는, 최대 7.5 x 1011개 vg의 IV 레보도파 투여 후의 UPDRS III AUC 스코어를 보여준다.
도 12b는 본 개시내용의 특정 실시양태에 상응하는, 최대 1.5 x 1012개 vg의 IV 레보도파 투여 후의 UPDRS III AUC 스코어를 보여준다.
도 12c는 본 개시내용의 특정 실시양태에 상응하는, 최대 4.7 x 1012개 vg의 IV 레보도파 투여 후의 UPDRS III AUC 스코어를 보여준다.
도 13은 본 개시내용의 특정 실시양태에 상응하는, IV 레보도파 투여 후의 UPDRS III 반응 (투여전 수준으로부터 ≥30% 변화)까지의 시간 (분)을 보여준다.
도 14는 본 개시내용의 특정 실시양태에 상응하는, IV 레보도파 투여 후의 UPDRS III 반응 (투여전 수준으로부터 ≥30% 변화)의 지속기간 (분)을 보여준다.
도 15는 본 개시내용의 특정 실시양태에 상응하는, AAV2-hAADC의 전달에 대한 시간선을 보여준다.
도 16은 본 개시내용의 특정 실시양태에 상응하는, 18F-도파 흡수 및 환자의 피각의 상응하는 벡터 커버리지 사이의 상관관계를 보여준다.
도 1은 본 개시내용의 바이러스 게놈의 한 실시양태의 개략도이다.
도 2는 본 개시내용의 특정 실시양태에 상응하는 피각의 퍼센트 커버리지를 보여주며, 이는 좌측 및 우측 피각의 평균 커버리지에 의해 부피 단위로 나타내어진다 (총 및 후방). 오차 막대는 표준 오차이다.
도 3은 중등도 PD 대조군 대상체 및 건강한 비-PD 대상체와 비교하여, 주입-후 2-7개월째의 대상체에 대한 본 개시내용의 특정 실시양태에 상응하는 18F-도파 흡수 비를 보여준다. 표준화된 흡수 값 비 (SOR) 값은 각각의 대상체에서 양측 평균 후두 시간-방사능 곡선 (kBq/mL) 관심 영역 값을 사용하여 계산된다.
도 4는 본 개시내용의 특정 실시양태에 상응하는, 피각에서의 AADC 발현 및 활성 (상부) 및 기준선과 비교한 백분율로서 6개월째의 레보도파 등가 용량 (LED) (하부)을 보여준다. 오차 막대는 표준 오차이다.
도 5는 본 개시내용의 특정 실시양태에 상응하는, 기준선과 비교하여 레보도파-등가 용량의 백분율 변화를 보여준다. 오차 막대는 표준 오차이다.
도 6은 본 개시내용의 특정 실시양태에 상응하는, 문제되는 이상운동증이 없는 일지 보고된 온-시간의 변화를 보여준다. 오차 막대는 표준 오차이다.
도 7은 본 개시내용의 특정 실시양태에 상응하는, 환자 "온" 투약 상태에서 통합 파킨슨병 등급화 척도 (UPDRS) 파트 III에서의 환자 스코어의 개선 (감소)을 보여준다. 오차 막대는 표준 오차이다.
도 8은 본 개시내용의 특정 실시양태에 상응하는, 환자 "오프" 투약 상태에서 통합 파킨슨병 등급화 척도 (UPDRS) 파트 III에서의 환자 스코어의 개선 (감소)을 보여준다. 오차 막대는 표준 오차이다.
도 9는 본 개시내용의 특정 실시양태에 상응하는, 기준선으로부터의 변형된 혼 앤 야(Modified Hoehn and Yahr) (mH&Y) 척도 하에서의 환자 병기의 개선 (감소)을 보여준다.
도 10은 본 개시내용의 특정 실시양태에 상응하는, 삶의 질 평가 (파킨슨병 설문지 (PDQ-39)) 상 환자 스코어의 개선 (감소)을 보여준다. 오차 막대는 표준 오차이다.
도 11a는 본 개시내용의 특정 실시양태에 상응하는, 임상 전반적 변화 인상 (CGI-C) 척도에 의해 평가된 바와 같은 환자 삶의 질의 개선을 보여준다.
도 11b는 본 개시내용의 특정 실시양태에 상응하는, 환자 전반적 변화 인상 (PGI-C) 척도에 의해 평가된 바와 같은 환자 삶의 질의 개선을 보여준다.
도 12a는 본 개시내용의 특정 실시양태에 상응하는, 최대 7.5 x 1011개 vg의 IV 레보도파 투여 후의 UPDRS III AUC 스코어를 보여준다.
도 12b는 본 개시내용의 특정 실시양태에 상응하는, 최대 1.5 x 1012개 vg의 IV 레보도파 투여 후의 UPDRS III AUC 스코어를 보여준다.
도 12c는 본 개시내용의 특정 실시양태에 상응하는, 최대 4.7 x 1012개 vg의 IV 레보도파 투여 후의 UPDRS III AUC 스코어를 보여준다.
도 13은 본 개시내용의 특정 실시양태에 상응하는, IV 레보도파 투여 후의 UPDRS III 반응 (투여전 수준으로부터 ≥30% 변화)까지의 시간 (분)을 보여준다.
도 14는 본 개시내용의 특정 실시양태에 상응하는, IV 레보도파 투여 후의 UPDRS III 반응 (투여전 수준으로부터 ≥30% 변화)의 지속기간 (분)을 보여준다.
도 15는 본 개시내용의 특정 실시양태에 상응하는, AAV2-hAADC의 전달에 대한 시간선을 보여준다.
도 16은 본 개시내용의 특정 실시양태에 상응하는, 18F-도파 흡수 및 환자의 피각의 상응하는 벡터 커버리지 사이의 상관관계를 보여준다.
I. 개시내용의 조성물
아데노-연관 바이러스 (AAV) 및 AAV 입자
파르보비리다에(Parvoviridae) 패밀리의 바이러스는 단일 가닥 DNA 게놈을 특징으로 하는 소형 비-외피보유 이십면체 캡시드 바이러스이다. 파르보비리다에 패밀리 바이러스는 2가지 서브패밀리로 이루어진다: 척추동물을 감염시키는 파르보비리나에(Parvovirinae), 및 무척추동물을 감염시키는 덴소비리나에(Densovirinae). 그의 비교적 단순한 구조로 인해, 표준 분자 생물학 기술을 사용하여 쉽게 조작되고, 이러한 바이러스 패밀리는 생물학적 도구로서 유용하다. 바이러스의 게놈은 기능성 재조합 바이러스, 또는 바이러스 입자의 어셈블리를 위한 최소한의 성분을 함유하도록 변형될 수 있고, 이는 표적 세포, 조직, 기관 또는 유기체로 전달될 수 있는 목적하는 페이로드가 로딩되거나 또는 그를 발현 또는 전달하도록 조작된다.
파르보바이러스 및 파르보비리다에 패밀리의 다른 구성원은 일반적으로 문헌 [Kenneth I. Berns, "Parvoviridae: The Viruses and Their Replication," Chapter 69 in FIELDS VIROLOGY (3d Ed. 1996)]에 기재되어 있고, 그의 내용은 그의 전문이 참조로 포함된다.
파르보비리다에 패밀리는 인간, 영장류, 소, 개, 말, 및 양 종을 포함하나 이에 제한되지 않는, 척추동물 숙주에서 복제할 수 있는 아데노-연관 바이러스 (AAV)를 포함하는 데펜도바이러스 속을 포함한다.
벡터 게놈은 길이가 대략 5,000개 뉴클레오티드 (nt)인 선형 단일-가닥 DNA (ssDNA) 분자이다. AAV 바이러스 게놈은 페이로드 영역 및 적어도 하나의 역전된 말단 반복부 (ITR) 또는 ITR 영역을 포함할 수 있다. ITR은 전통적으로 (Rep 유전자에 의해 코딩되는) 비-구조 단백질에 대한 코딩 뉴클레오티드 서열 및 (캡시드 유전자 또는 Cap 유전자에 의해 코딩되는) 구조 단백질에 플랭킹된다. 이론에 얽매이는 것을 원하지는 않지만, AAV 바이러스 게놈은 전형적으로 2개의 ITR 서열을 포함한다. 개 벡터 게놈은 에너지적으로 안정한 이중 가닥 영역을 형성하는 ssDNA의 5' 및 3' 단부의 자기-상보적 말단 145 nt에 의해 규정되는 특징적인 T-형상의 헤어핀 구조를 포함한다. 이중 가닥 헤어핀 구조는 숙주 바이러스 복제 세포의 내인성 DNA 폴리머라제 복합체에 대한 프라이머로서 기능함으로써 DNA 복제 기원으로서 작용하는 것을 포함하나 이에 제한되지 않는 다수의 기능을 포함한다.
코딩된 이종 페이로드에 더하여, AAV 입자는 임의의 자연 발생 및/또는 재조합 AAV 혈청형 뉴클레오티드 서열 또는 변이체의 바이러스 게놈을 전체적으로 또는 부분적으로 포함할 수 있다. AAV 변이체는, 일반적으로 물리적 및 기능적 등가물인 구축물을 생산하고, 유사한 메카니즘에 의해 복제되고, 유사한 메카니즘에 의해 어셈블리되도록 핵산 (게놈 또는 캡시드) 및 아미노산 수준 (캡시드)에서 유의한 상동성의 서열을 가질 수 있다. 문헌 [Chiorini et al., J. Vir.71: 6823-33(1997); Srivastava et al., J. Vir.45:555-64 (1983); Chiorini et al., J. Vir.73:1309-1319 (1999); Rutledge et al., J. Vir.72:309-319 (1998); 및 Wu et al., J. Vir.74: 8635-47 (2000)]의 각각의 내용은 그의 전문이 본원에 참조로 포함된다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 그의 바이러스 게놈 내에 기능적 Rep 및 Cap 단백질을 코딩하는 서열이 결여된 복제 결손인 재조합 AAV 입자이다. 이들 결손 AAV 입자는 대부분 또는 모든 모 코딩 서열이 결여되어 있고, 본질적으로 단지 1 또는 2개의 AAV ITR 서열 및 세포, 조직, 기관 또는 유기체로의 전달을 위한 관심 핵산을 운반할 수 있다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자의 바이러스 게놈은 그 안에 코딩되는 코딩 서열의 복제, 전사 및 번역을 제공하는 적어도 하나의 제어 요소를 포함한다. 코딩 서열이 적절한 숙주 세포에서 복제, 전사 및/또는 번역될 수 있는 한, 모든 제어 요소가 항상 필요한 것은 아니다. 발현 제어 요소의 비제한적 예는 전사 개시 및/또는 종결을 위한 서열, 프로모터 및/또는 인핸서 서열, 효율적인 RNA 프로세싱 신호, 예컨대 스플라이싱 및 폴리아데닐화 신호, 세포질 mRNA를 안정화시키는 서열, 번역 효능을 증진시키는 서열 (예를 들어, 코작 컨센서스 서열), 단백질 안정성을 증진시키는 서열, 및/또는 단백질 프로세싱 및/또는 분비를 증진시키는 서열을 포함한다.
본 개시내용에 따르면, 치료제 및/또는 진단에 사용하기 위한 AAV 입자는 관심 핵산 페이로드 또는 카르고의 형질도입에 필요한 최소 성분으로 증류되거나 감소된 바이러스를 포함한다. 이러한 방식으로, AAV 입자는 야생형 바이러스에서 발견되는 유해한 복제 및/또는 통합 특색이 결여된, 특이적 전달을 위한 비히클로서 조작된다.
본 개시내용의 AAV 입자는 재조합적으로 생산될 수 있고, 아데노-연관 바이러스 (AAV) 모 또는 참조 서열을 기초로 할 수 있다. 본원에 사용된 "벡터"는 본원에 기재된 핵산과 같은 이종 분자를 수송하거나, 형질도입시키거나 또는 달리 운반체로서 작용하는 임의의 분자 또는 모이어티이다.
단일 가닥 AAV 입자 (예를 들어 ssAAV)에 더하여, 본 개시내용은 또한 자기-상보적 AAV (scAAV) 입자를 제공한다. scAAV 입자는 이중 가닥 DNA를 형성하도록 함께 어닐링되는 DNA 가닥을 함유한다. 제2 가닥 합성을 스킵함으로써, scAAV는 세포에서 신속한 발현을 허용한다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 scAAV이다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 ssAAV이다.
AAV 입자, 예컨대 유사형화 AAV 입자의 생산 및/또는 변형 방법은 관련 기술분야에 개시되어 있다 (PCT 특허 공개 번호 WO200028004; WO200123001; WO2004112727; WO 2005005610 및 WO 2005072364, 각각의 내용은 그의 전문이 본원에 참조로 포함됨).
AAV 입자는 전달 효율을 증진시키기 위해 변형될 수 있다. 이러한 변형된 AAV 입자는 효율적으로 패키징될 수 있고, 높은 빈도 및 최소 독성으로 표적 세포를 성공적으로 감염시키는데 사용될 수 있다. 일부 실시양태에서, AAV 입자의 캡시드는 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 공개 번호 US 20130195801에 기재된 방법에 따라 조작된다.
특정 실시양태에서, 개시내용의 폴리펩티드를 코딩하는 페이로드 영역을 포함하는 AAV 입자가 포유동물 세포 내로 도입될 수 있다.
AAV 혈청형
본 개시내용의 AAV 입자는 임의의 천연 또는 재조합 AAV 혈청형을 포함하거나 이로부터 유래될 수 있다. 본 개시내용에 따르면, AAV 입자는 하기 PHP.B, PHP.A, AAV1, AAV2, AAV2G9, AAV3, AAV3a, AAV3b, AAV3-3, AAV4, AAV4-4, AAV5, AAV6, AAV6.1, AAV6.2, AAV6.1.2, AAV7, AAV7.2, AAV8, AAV9, AAV9.11, AAV9.13, AAV9.16, AAV9.24, AAV9.45, AAV9.47, AAV9.61, AAV9.68, AAV9.84, AAV9.9, AAV10, AAV11, AAV12, AAV16.3, AAV24.1, AAV27.3, AAV42.12, AAV42-1b, AAV42-2, AAV42-3a, AAV42-3b, AAV42-4, AAV42-5a, AAV42-5b, AAV42-6b, AAV42-8, AAV42-10, AAV42-11, AAV42-12, AAV42-13, AAV42-15, AAV42-aa, AAV43-1, AAV43-12, AAV43-20, AAV43-21, AAV43-23, AAV43-25, AAV43-5, AAV44.1, AAV44.2, AAV44.5, AAV223.1, AAV223.2, AAV223.4, AAV223.5, AAV223.6, AAV223.7, AAV1-7/rh.48, AAV1-8/rh.49, AAV2-15/rh.62, AAV2-3/rh.61, AAV2-4/rh.50, AAV2-5/rh.51, AAV3.1/hu.6, AAV3.1/hu.9, AAV3-9/rh.52, AAV3-11/rh.53, AAV4-8/r11.64, AAV4-9/rh.54, AAV4-19/rh.55, AAV5-3/rh.57, AAV5-22/rh.58, AAV7.3/hu.7, AAV16.8/hu.10, AAV16.12/hu.11, AAV29.3/bb.1, AAV29.5/bb.2, AAV106.1/hu.37, AAV114.3/hu.40, AAV127.2/hu.41, AAV127.5/hu.42, AAV128.3/hu.44, AAV130.4/hu.48, AAV145.1/hu.53, AAV145.5/hu.54, AAV145.6/hu.55, AAV161.10/hu.60, AAV161.6/hu.61, AAV33.12/hu.17, AAV33.4/hu.15, AAV33.8/hu.16, AAV52/hu.19, AAV52.1/hu.20, AAV58.2/hu.25, AAVA3.3, AAVA3.4, AAVA3.5, AAVA3.7, AAVC1, AAVC2, AAVC5, AAV-DJ, AAV-DJ8, AAVF3, AAVF5, AAVH2, AAVrh.72, AAVhu.8, AAVrh.68, AAVrh.70, AAVpi.1, AAVpi.3, AAVpi.2, AAVrh.60, AAVrh.44, AAVrh.65, AAVrh.55, AAVrh.47, AAVrh.69, AAVrh.45, AAVrh.59, AAVhu.12, AAVH6, AAVLK03, AAVH-1/hu.1, AAVH-5/hu.3, AAVLG-10/rh.40, AAVLG-4/rh.38, AAVLG-9/hu.39, AAVN721-8/rh.43, AAVCh.5, AAVCh.5R1, AAVcy.2, AAVcy.3, AAVcy.4, AAVcy.5, AAVCy.5R1, AAVCy.5R2, AAVCy.5R3, AAVCy.5R4, AAVcy.6, AAVhu.1, AAVhu.2, AAVhu.3, AAVhu.4, AAVhu.5, AAVhu.6, AAVhu.7, AAVhu.9, AAVhu.10, AAVhu.11, AAVhu.13, AAVhu.15, AAVhu.16, AAVhu.17, AAVhu.18, AAVhu.20, AAVhu.21, AAVhu.22, AAVhu.23.2, AAVhu.24, AAVhu.25, AAVhu.27, AAVhu.28, AAVhu.29, AAVhu.29R, AAVhu.31, AAVhu.32, AAVhu.34, AAVhu.35, AAVhu.37, AAVhu.39, AAVhu.40, AAVhu.41, AAVhu.42, AAVhu.43, AAVhu.44, AAVhu.44R1, AAVhu.44R2, AAVhu.44R3, AAVhu.45, AAVhu.46, AAVhu.47, AAVhu.48, AAVhu.48R1, AAVhu.48R2, AAVhu.48R3, AAVhu.49, AAVhu.51, AAVhu.52, AAVhu.54, AAVhu.55, AAVhu.56, AAVhu.57, AAVhu.58, AAVhu.60, AAVhu.61, AAVhu.63, AAVhu.64, AAVhu.66, AAVhu.67, AAVhu.14/9, AAVhu.t19, AAVrh.2, AAVrh.2R, AAVrh.8, AAVrh.8R, AAVrh.10, AAVrh.12, AAVrh.13, AAVrh.13R, AAVrh.14, AAVrh.17, AAVrh.18, AAVrh.19, AAVrh.20, AAVrh.21, AAVrh.22, AAVrh.23, AAVrh.24, AAVrh.25, AAVrh.31, AAVrh.32, AAVrh.33, AAVrh.34, AAVrh.35, AAVrh.36, AAVrh.37, AAVrh.37R2, AAVrh.38, AAVrh.39, AAVrh.40, AAVrh.46, AAVrh.48, AAVrh.48.1, AAVrh.48.1.2, AAVrh.48.2, AAVrh.49, AAVrh.51, AAVrh.52, AAVrh.53, AAVrh.54, AAVrh.56, AAVrh.57, AAVrh.58, AAVrh.61, AAVrh.64, AAVrh.64R1, AAVrh.64R2, AAVrh.67, AAVrh.73, AAVrh.74, AAVrh8R, AAVrh8R A586R 돌연변이체, AAVrh8R R533A 돌연변이체, AAAV, BAAV, 염소 AAV, 소 AAV, 양 AAV, AAVhE1.1, AAVhEr1.5, AAVhER1.14, AAVhEr1.8, AAVhEr1.16, AAVhEr1.18, AAVhEr1.35, AAVhEr1.7, AAVhEr1.36, AAVhEr2.29, AAVhEr2.4, AAVhEr2.16, AAVhEr2.30, AAVhEr2.31, AAVhEr2.36, AAVhER1.23, AAVhEr3.1, AAV2.5T , AAV-PAEC, AAV-LK01, AAV-LK02, AAV-LK03, AAV-LK04, AAV-LK05, AAV-LK06, AAV-LK07, AAV-LK08, AAV-LK09, AAV-LK10, AAV-LK11, AAV-LK12, AAV-LK13, AAV-LK14, AAV-LK15, AAV-LK16, AAV-LK17, AAV-LK18, AAV-LK19, AAV-PAEC2, AAV-PAEC4, AAV-PAEC6, AAV-PAEC7, AAV-PAEC8, AAV-PAEC11, AAV-PAEC12, AAV-2-프리-miRNA-101 , AAV-8h, AAV-8b, AAV-h, AAV-b, AAV SM 10-2 , AAV 셔플 100-1 , AAV 셔플 100-3, AAV 셔플 100-7, AAV 셔플 10-2, AAV 셔플 10-6, AAV 셔플 10-8, AAV 셔플 100-2, AAV SM 10-1, AAV SM 10-8 , AAV SM 100-3, AAV SM 100-10, BNP61 AAV, BNP62 AAV, BNP63 AAV, AAVrh.50, AAVrh.43, AAVrh.62, AAVrh.48, AAVhu.19, AAVhu.11, AAVhu.53, AAV4-8/rh.64, AAVLG-9/hu.39, AAV54.5/hu.23, AAV54.2/hu.22, AAV54.7/hu.24, AAV54.1/hu.21, AAV54.4R/hu.27, AAV46.2/hu.28, AAV46.6/hu.29, AAV128.1/hu.43, 진성 유형 AAV (ttAAV), UPENN AAV 10, 일본 AAV 10 혈청형, AAV CBr-7.1, AAV CBr-7.10, AAV CBr-7.2, AAV CBr-7.3, AAV CBr-7.4, AAV CBr-7.5, AAV CBr-7.7, AAV CBr-7.8, AAV CBr-B7.3, AAV CBr-B7.4, AAV CBr-E1, AAV CBr-E2, AAV CBr-E3, AAV CBr-E4, AAV CBr-E5, AAV CBr-e5, AAV CBr-E6, AAV CBr-E7, AAV CBr-E8, AAV CHt-1, AAV CHt-2, AAV CHt-3, AAV CHt-6.1, AAV CHt-6.10, AAV CHt-6.5, AAV CHt-6.6, AAV CHt-6.7, AAV CHt-6.8, AAV CHt-P1, AAV CHt-P2, AAV CHt-P5, AAV CHt-P6, AAV CHt-P8, AAV CHt-P9, AAV CKd-1, AAV CKd-10, AAV CKd-2, AAV CKd-3, AAV CKd-4, AAV CKd-6, AAV CKd-7, AAV CKd-8, AAV CKd-B1, AAV CKd-B2, AAV CKd-B3, AAV CKd-B4, AAV CKd-B5, AAV CKd-B6, AAV CKd-B7, AAV CKd-B8, AAV CKd-H1, AAV CKd-H2, AAV CKd-H3, AAV CKd-H4, AAV CKd-H5, AAV CKd-H6, AAV CKd-N3, AAV CKd-N4, AAV CKd-N9, AAV CLg-F1, AAV CLg-F2, AAV CLg-F3, AAV CLg-F4, AAV CLg-F5, AAV CLg-F6, AAV CLg-F7, AAV CLg-F8, AAV CLv-1, AAV CLv1-1, AAV Clv1-10, AAV CLv1-2, AAV CLv-12, AAV CLv1-3, AAV CLv-13, AAV CLv1-4, AAV Clv1-7, AAV Clv1-8, AAV Clv1-9, AAV CLv-2, AAV CLv-3, AAV CLv-4, AAV CLv-6, AAV CLv-8, AAV CLv-D1, AAV CLv-D2, AAV CLv-D3, AAV CLv-D4, AAV CLv-D5, AAV CLv-D6, AAV CLv-D7, AAV CLv-D8, AAV CLv-E1, AAV CLv-K1, AAV CLv-K3, AAV CLv-K6, AAV CLv-L4, AAV CLv-L5, AAV CLv-L6, AAV CLv-M1, AAV CLv-M11, AAV CLv-M2, AAV CLv-M5, AAV CLv-M6, AAV CLv-M7, AAV CLv-M8, AAV CLv-M9, AAV CLv-R1, AAV CLv-R2, AAV CLv-R3, AAV CLv-R4, AAV CLv-R5, AAV CLv-R6, AAV CLv-R7, AAV CLv-R8, AAV CLv-R9, AAV CSp-1, AAV CSp-10, AAV CSp-11, AAV CSp-2, AAV CSp-3, AAV CSp-4, AAV CSp-6, AAV CSp-7, AAV CSp-8, AAV CSp-8.10, AAV CSp-8.2, AAV CSp-8.4, AAV CSp-8.5, AAV CSp-8.6, AAV CSp-8.7, AAV CSp-8.8, AAV CSp-8.9, AAV CSp-9, AAV.hu.48R3, AAV.VR-355, AAV3B, AAV4, AAV5, AAVF1/HSC1, AAVF11/HSC11, AAVF12/HSC12, AAVF13/HSC13, AAVF14/HSC14, AAVF15/HSC15, AAVF16/HSC16, AAVF17/HSC17, AAVF2/HSC2, AAVF3/HSC3, AAVF4/HSC4, AAVF5/HSC5, AAVF6/HSC6, AAVF7/HSC7, AAVF8/HSC8, AAVF9/HSC9, PHP.B (AAV-PHP.B), PHP.A (AAV.PHP.A), G2B-26, G2B-13, TH1.1-32, TH1.1-35, AAVPHP.B2, AAVPHP.B3, AAVPHP.N/PHP.B-DGT, AAVPHP.B-EST, AAVPHP.B-GGT, AAVPHP.B-ATP, AAVPHP.B-ATT-T, AAVPHP.B-DGT-T, AAVPHP.B-GGT-T, AAVPHP.B-SGS, AAVPHP.B-AQP, AAVPHP.B-QQP, AAVPHP.B-SNP(3), AAVPHP.B-SNP, AAVPHP.B-QGT, AAVPHP.B-NQT, AAVPHP.B-EGS, AAVPHP.B-SGN, AAVPHP.B-EGT, AAVPHP.B-DST, AAVPHP.B-DST, AAVPHP.B-STP, AAVPHP.B-PQP, AAVPHP.B-SQP, AAVPHP.B-QLP, AAVPHP.B-TMP, AAVPHP.B-TTP, AAVPHP.S/G2A12, AAVG2A15/G2A3, AAVG2B4, and/or AAVG2B5, 및 그의 변이체 중 임의의 것으로부터 선택된 혈청형을 사용할 수 있거나 또는 그를 기초로 할 수 있다.
일부 실시양태에서, AAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 공개 번호 US 20160361439에 기재된 바와 같은 변형, 예컨대 비제한적으로, 야생형 AAV1, AAV2, AAV3, AAV4, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9, AAV10, AAV11, AAV12, 및 그의 하이브리드의 Y252F, Y272F, Y444F, Y500F, Y700F, Y704F, Y730F, Y275F, Y281F, Y508F, Y576F, Y612G, Y673F, 및 Y720F일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다.
일부 실시양태에서, AAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 번호 US 9546112에 기재된 바와 같은 돌연변이, 예컨대 비제한적으로, AAV6 (US 9546112의 서열식별번호: 4), AAV1 (US 9546112의 서열식별번호: 6), AAV2, AAV3, AAV4, AAV5, AAV7, AAV9, AAV10 또는 AAV11 또는 그의 유도체의 서열에서 F129L, D418E, K531E, L584F, V598A 및 H642N 돌연변이 중 적어도 2개 그러나 모두는 아닌 것일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다. 또 다른 실시양태에서, AAV 혈청형은 K531E 돌연변이를 포함하는 AAV6 서열 (US 9546112의 서열식별번호: 5)일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다.
일부 실시양태에서, AAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 공개 번호 US 20130224836에 기재된 바와 같은 AAV1 서열에서의 돌연변이, 예컨대 비제한적으로, 바람직하게는 AAV1 (US 20130224836의 서열식별번호: 2)의 위치 252, 273, 445, 701, 705 및 731에서 또 다른 아미노산, 바람직하게는 페닐알라닌 잔기로 치환된, 표면-노출된 티로신 잔기 중 적어도 1개일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다. 특정 실시양태에서, AAV 혈청형은 AAV9 서열에서의 돌연변이, 예컨대 비제한적으로, 바람직하게는 AAV2 (US 20130224836의 서열식별번호: 4)의 위치 252, 272, 444, 500, 700, 704 및 730에서 또 다른 아미노산, 바람직하게는 페닐알라닌 잔기로 치환된, 표면-노출된 티로신 잔기 중 적어도 1개일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다. 특정 실시양태에서, AAV9 (US 20130224836의 서열식별번호: 6)의 위치 446의 티로신 잔기는 페닐알라닌 잔기로 치환된다.
일부 실시양태에서, 혈청형은 그의 전문이 본원에 참조로 포함되는 국제 공개 번호 WO2016130589에 기재된 바와 같은 AAV2 또는 그의 변이체일 수 있다. AAV2의 아미노산 서열은 N587A, E548A, 또는 N708A 돌연변이를 포함할 수 있다. 특정 실시양태에서, 임의의 AAV의 아미노산 서열은 V708K 돌연변이를 포함할 수 있다.
일부 실시양태에서, AAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 공개 번호 US20030138772에 기재된 바와 같은 서열, 예컨대 비제한적으로, AAV1 (US20030138772의 서열식별번호: 6 및 64), AAV2 (US20030138772의 서열식별번호: 7 및 70), AAV3 (US20030138772의 서열식별번호: 8 및 71), AAV4 (US20030138772의 서열식별번호: 63), AAV5 (US20030138772의 서열식별번호: 114), AAV6 (US20030138772의 서열식별번호: 65), AAV7 (US20030138772의 서열식별번호: 1-3), AAV8 (US20030138772의 서열식별번호: 4 및 95), AAV9 (US20030138772의 서열식별번호: 5 및 100), AAV10 (US20030138772의 서열식별번호: 117), AAV11 (US20030138772의 서열식별번호: 118), AAV12 (US20030138772의 서열식별번호: 119), AAVrh10 (US20030138772의 서열식별번호: 81의 아미노산 1 내지 738), AAV16.3 (US20030138772 서열식별번호: 10), AAV29.3/bb.1 (US20030138772 서열식별번호: 11), AAV29.4 (US20030138772 서열식별번호: 12), AAV29.5/bb.2 (US20030138772 서열식별번호: 13), AAV1.3 (US20030138772 서열식별번호: 14), AAV13.3 (US20030138772 서열식별번호: 15), AAV24.1 (US20030138772 서열식별번호: 16), AAV27.3 (US20030138772 서열식별번호: 17), AAV7.2 (US20030138772 서열식별번호: 18), AAVC1 (US20030138772 서열식별번호: 19), AAVC3 (US20030138772 서열식별번호: 20), AAVC5 (US20030138772 서열식별번호: 21), AAVF1 (US20030138772 서열식별번호: 22), AAVF3 (US20030138772 서열식별번호: 23), AAVF5 (US20030138772 서열식별번호: 24), AAVH6 (US20030138772 서열식별번호: 25), AAVH2 (US20030138772 서열식별번호: 26), AAV42-8 (US20030138772 서열식별번호: 27), AAV42-15 (US20030138772 서열식별번호: 28), AAV42-5b (US20030138772 서열식별번호: 29), AAV42-1b (US20030138772 서열식별번호: 30), AAV42-13 (US20030138772 서열식별번호: 31), AAV42-3a (US20030138772 서열식별번호: 32), AAV42-4 (US20030138772 서열식별번호: 33), AAV42-5a (US20030138772 서열식별번호: 34), AAV42-10 (US20030138772 서열식별번호: 35), AAV42-3b (US20030138772 서열식별번호: 36), AAV42-11 (US20030138772 서열식별번호: 37), AAV42-6b (US20030138772 서열식별번호: 38), AAV43-1 (US20030138772 서열식별번호: 39), AAV43-5 (US20030138772 서열식별번호: 40), AAV43-12 (US20030138772 서열식별번호: 41), AAV43-20 (US20030138772 서열식별번호: 42), AAV43-21 (US20030138772 서열식별번호: 43), AAV43-23 (US20030138772 서열식별번호: 44), AAV43-25 (US20030138772 서열식별번호: 45), AAV44.1 (US20030138772 서열식별번호: 46), AAV44.5 (US20030138772 서열식별번호: 47), AAV223.1 (US20030138772 서열식별번호: 48), AAV223.2 (US20030138772 서열식별번호: 49), AAV223.4 (US20030138772 서열식별번호: 50), AAV223.5 (US20030138772 서열식별번호: 51), AAV223.6 (US20030138772 서열식별번호: 52), AAV223.7 (US20030138772 서열식별번호: 53), AAVA3.4 (US20030138772 서열식별번호: 54), AAVA3.5 (US20030138772 서열식별번호: 55), AAVA3.7 (US20030138772 서열식별번호: 56), AAVA3.3 (US20030138772 서열식별번호: 57), AAV42.12 (US20030138772 서열식별번호: 58), AAV44.2 (US20030138772 서열식별번호: 59), AAV42-2 (US20030138772 서열식별번호: 9), 또는 그의 변이체일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다.
일부 실시양태에서, AAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 공개 번호 US20150159173에 기재된 바와 같은 서열, 예컨대 비제한적으로, AAV2 (US20150159173의 서열식별번호: 7 및 23), rh20 (US20150159173의 서열식별번호: 1), rh32/33 (US20150159173의 서열식별번호: 2), rh39 (US20150159173의 서열식별번호: 3, 20 및 36), rh46 (US20150159173의 서열식별번호: 4 및 22), rh73 (US20150159173의 서열식별번호: 5), rh74 (US20150159173의 서열식별번호: 6), AAV6.1 (US20150159173의 서열식별번호: 29), rh.8 (US20150159173의 서열식별번호: 41), rh.48.1 (US20150159173의 서열식별번호: 44), hu.44 (US20150159173의 서열식별번호: 45), hu.29 (US20150159173의 서열식별번호: 42), hu.48 (US20150159173의 서열식별번호: 38), rh54 (US20150159173의 서열식별번호: 49), AAV2 (US20150159173의 서열식별번호: 7), cy.5 (US20150159173의 서열식별번호: 8 및 24), rh.10 (US20150159173의 서열식별번호: 9 및 25), rh.13 (US20150159173의 서열식별번호: 10 및 26), AAV1 (US20150159173의 서열식별번호: 11 및 27), AAV3 (US20150159173의 서열식별번호: 12 및 28), AAV6 (US20150159173의 서열식별번호: 13 및 29), AAV7 (US20150159173의 서열식별번호: 14 및 30), AAV8 (US20150159173의 서열식별번호: 15 및 31), hu.13 (US20150159173의 서열식별번호: 16 및 32), hu.26 (US20150159173의 서열식별번호: 17 및 33), hu.37 (US20150159173의 서열식별번호: 18 및 34), hu.53 (US20150159173의 서열식별번호: 19 및 35), rh.43 (US20150159173의 서열식별번호: 21 및 37), rh2 (US20150159173의 서열식별번호: 39), rh.37 (US20150159173의 서열식별번호: 40), rh.64 (US20150159173의 서열식별번호: 43), rh.48 (US20150159173의 서열식별번호: 44), ch.5 (US20150159173의 서열식별번호: 46), rh.67 (US20150159173의 서열식별번호: 47), rh.58 (US20150159173의 서열식별번호: 48), 또는 Cy5R1, Cy5R2, Cy5R3, Cy5R4, rh.13R, rh.37R2, rh.2R, rh.8R, rh.48.1, rh.48.2, rh.48.1.2, hu.44R1, hu.44R2, hu.44R3, hu.29R, ch.5R1, rh64R1, rh64R2, AAV6.2, AAV6.1, AAV6.12, hu.48R1, hu.48R2, 및 hu.48R3을 포함하나 이에 제한되지는 않는 그의 변이체일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다.
일부 실시양태에서, AAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 번호 US 7198951에 기재된 바와 같은 서열, 예컨대 비제한적으로, AAV9 (US 7198951의 서열식별번호: 1-3), AAV2 (US 7198951의 서열식별번호: 4), AAV1 (US 7198951의 서열식별번호: 5), AAV3 (US 7198951의 서열식별번호: 6), 및 AAV8 (US7198951의 서열식별번호: 7)일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다.
일부 실시양태에서, AAV 혈청형은 문헌 [N Pulicherla et al.] (Molecular Therapy 19(6):1070-1078 (2011), 그의 전문은 본원에 참조로 포함됨)에 기재된 바와 같은 AAV9 서열에서의 돌연변이, 예컨대 비제한적으로, AAV9.9, AAV9.11, AAV9.13, AAV9.16, AAV9.24, AAV9.45, AAV9.47, AAV9.61, AAV9.68, AAV9.84일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다.
일부 실시양태에서, AAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 번호 US 6156303에 기재된 바와 같은 서열, 예컨대 비제한적으로, AAV3B (US 6156303의 서열식별번호: 1 및 10), AAV6 (US 6156303의 서열식별번호: 2, 7 및 11), AAV2 (US 6156303의 서열식별번호: 3 및 8), AAV3A (US 6156303의 서열식별번호: 4 및 9), 또는 그의 유도체일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다.
일부 실시양태에서, AAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 공개 번호 US20140359799에 기재된 바와 같은 서열, 예컨대 비제한적으로, AAV8 (US20140359799의 서열식별번호: 1), AAVDJ (US20140359799의 서열식별번호: 2 및 3), 또는 그의 변이체일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다.
일부 실시양태에서, 혈청형은 문헌 [Grimm et al. (Journal of Virology 82(12): 5887-5911 (2008), 그의 전문은 본원에 참조로 포함됨)] 기재된 바와 같은 AAVDJ 또는 그의 변이체, 예컨대 AAVDJ8 (또는 AAV-DJ8)일 수 있다. AAVDJ8의 아미노산 서열은 헤파린 결합 도메인 (HBD)을 제거하기 위해 2개 이상의 돌연변이를 포함할 수 있다. 특정 실시양태에서, 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 번호 7,588,772에서 서열식별번호: 1로 기재된 AAV-DJ 서열은 2개의 돌연변이: (1) 아미노산 587에서 아르기닌 (R; Arg)이 글루타민 (Q; Gln)으로 변화된 R587Q 및 (2) 아미노산 590에서 아르기닌 (R; Arg)이 트레오닌 (T; Thr)으로 변화된 R590T를 포함할 수 있다. 특정 실시양태에서, 3개의 돌연변이: (1) 아미노산 406에서 리신 (K; Lys)이 아르기닌 (R; Arg)으로 변화된 K406R, (2) 아미노산 587에서 아르기닌 (R; Arg)이 글루타민 (Q; Gln)으로 변화된 R587Q 및 (3) 아미노산 590에서 아르기닌 (R; Arg)이 트레오닌 (T; Thr)으로 변화된 R590T를 포함할 수 있다.
일부 실시양태에서, AAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 국제 공개 번호 WO1998011244에 기재된 바와 같은 AAV4의 서열, 예컨대 비제한적으로 AAV4 (WO1998011244의 서열식별번호: 1-20)일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다.
일부 실시양태에서, AAV 혈청형은 그의 전문이 본원에 참조로 포함되는 국제 공개 번호 WO2014144229에 기재된 바와 같은 AAV2G9를 생성하기 위한 AAV2 서열 내의 돌연변이일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다.
일부 실시양태에서, AAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 국제 공개 번호 WO2005033321에 기재된 바와 같은 서열, 예컨대 비제한적으로, AAV3-3 (WO2005033321의 서열식별번호: 217), AAV1 (WO2005033321의 서열식별번호: 219 및 202), AAV106.1/hu.37 (WO2005033321의 서열식별번호: 10), AAV114.3/hu.40 (WO2005033321의 서열식별번호: 11), AAV127.2/hu.41 (WO2005033321의 서열식별번호: 6 및 8), AAV128.3/hu.44 (WO2005033321의 서열식별번호: 81), AAV130.4/hu.48 (WO2005033321의 서열식별번호: 78), AAV145.1/hu.53 (WO2005033321의 서열식별번호: 176 및 177), AAV145.6/hu.56 (WO2005033321의 서열식별번호: 168 및 192), AAV16.12/hu.11 (WO2005033321의 서열식별번호: 153 및 57), AAV16.8/hu.10 (WO2005033321의 서열식별번호: 156 및 56), AAV161.10/hu.60 (WO2005033321의 서열식별번호: 170), AAV161.6/hu.61 (WO2005033321의 서열식별번호: 174), AAV1-7/rh.48 (WO2005033321의 서열식별번호: 32), AAV1-8/rh.49 (WO2005033321의 서열식별번호: 103 및 25), AAV2 (WO2005033321의 서열식별번호: 211 및 221), AAV2-15/rh.62 (WO2005033321의 서열식별번호: 33 및 114), AAV2-3/rh.61 (WO2005033321의 서열식별번호: 21), AAV2-4/rh.50 (WO2005033321의 서열식별번호: 23 및 108), AAV2-5/rh.51 (WO2005033321의 서열식별번호: 104 및 22), AAV3.1/hu.6 (WO2005033321의 서열식별번호: 5 및 84), AAV3.1/hu.9 (WO2005033321의 서열식별번호: 155 및 58), AAV3-11/rh.53 (WO2005033321의 서열식별번호: 186 및 176), AAV3-3 (WO2005033321의 서열식별번호: 200), AAV33.12/hu.17 (WO2005033321의 서열식별번호: 4), AAV33.4/hu.15 (WO2005033321의 서열식별번호: 50), AAV33.8/hu.16 (WO2005033321의 서열식별번호: 51), AAV3-9/rh.52 (WO2005033321의 서열식별번호: 96 및 18), AAV4-19/rh.55 (WO2005033321의 서열식별번호: 117), AAV4-4 (WO2005033321의 서열식별번호: 201 및 218), AAV4-9/rh.54 (WO2005033321의 서열식별번호: 116), AAV5 (WO2005033321의 서열식별번호: 199 및 216), AAV52.1/hu.20 (WO2005033321의 서열식별번호: 63), AAV52/hu.19 (WO2005033321의 서열식별번호: 133), AAV5-22/rh.58 (WO2005033321의 서열식별번호: 27), AAV5-3/rh.57 (WO2005033321의 서열식별번호: 105), AAV5-3/rh.57 (WO2005033321의 서열식별번호: 26), AAV58.2/hu.25 (WO2005033321의 서열식별번호: 49), AAV6 (WO2005033321의 서열식별번호: 203 및 220), AAV7 (WO2005033321의 서열식별번호: 222 및 213), AAV7.3/hu.7 (WO2005033321의 서열식별번호: 55), AAV8 (WO2005033321의 서열식별번호: 223 및 214), AAVH-1/hu.1 (WO2005033321의 서열식별번호: 46), AAVH-5/hu.3 (WO2005033321의 서열식별번호: 44), AAVhu.1 (WO2005033321의 서열식별번호: 144), AAVhu.10 (WO2005033321의 서열식별번호: 156), AAVhu.11 (WO2005033321의 서열식별번호: 153), AAVhu.12 (WO2005033321 서열식별번호: 59), AAVhu.13 (WO2005033321의 서열식별번호: 129), AAVhu.14/AAV9 (WO2005033321의 서열식별번호: 123 및 3), AAVhu.15 (WO2005033321의 서열식별번호: 147), AAVhu.16 (WO2005033321의 서열식별번호: 148), AAVhu.17 (WO2005033321의 서열식별번호: 83), AAVhu.18 (WO2005033321의 서열식별번호: 149), AAVhu.19 (WO2005033321의 서열식별번호: 133), AAVhu.2 (WO2005033321의 서열식별번호: 143), AAVhu.20 (WO2005033321의 서열식별번호: 134), AAVhu.21 (WO2005033321의 서열식별번호: 135), AAVhu.22 (WO2005033321의 서열식별번호: 138), AAVhu.23.2 (WO2005033321의 서열식별번호: 137), AAVhu.24 (WO2005033321의 서열식별번호: 136), AAVhu.25 (WO2005033321의 서열식별번호: 146), AAVhu.27 (WO2005033321의 서열식별번호: 140), AAVhu.29 (WO2005033321의 서열식별번호: 132), AAVhu.3 (WO2005033321의 서열식별번호: 145), AAVhu.31 (WO2005033321의 서열식별번호: 121), AAVhu.32 (WO2005033321의 서열식별번호: 122), AAVhu.34 (WO2005033321의 서열식별번호: 125), AAVhu.35 (WO2005033321의 서열식별번호: 164), AAVhu.37 (WO2005033321의 서열식별번호: 88), AAVhu.39 (WO2005033321의 서열식별번호: 102), AAVhu.4 (WO2005033321의 서열식별번호: 141), AAVhu.40 (WO2005033321의 서열식별번호: 87), AAVhu.41 (WO2005033321의 서열식별번호: 91), AAVhu.42 (WO2005033321의 서열식별번호: 85), AAVhu.43 (WO2005033321의 서열식별번호: 160), AAVhu.44 (WO2005033321의 서열식별번호: 144), AAVhu.45 (WO2005033321의 서열식별번호: 127), AAVhu.46 (WO2005033321의 서열식별번호: 159), AAVhu.47 (WO2005033321의 서열식별번호: 128), AAVhu.48 (WO2005033321의 서열식별번호: 157), AAVhu.49 (WO2005033321의 서열식별번호: 189), AAVhu.51 (WO2005033321의 서열식별번호: 190), AAVhu.52 (WO2005033321의 서열식별번호: 191), AAVhu.53 (WO2005033321의 서열식별번호: 186), AAVhu.54 (WO2005033321의 서열식별번호: 188), AAVhu.55 (WO2005033321의 서열식별번호: 187), AAVhu.56 (WO2005033321의 서열식별번호: 192), AAVhu.57 (WO2005033321의 서열식별번호: 193), AAVhu.58 (WO2005033321의 서열식별번호: 194), AAVhu.6 (WO2005033321의 서열식별번호: 84), AAVhu.60 (WO2005033321의 서열식별번호: 184), AAVhu.61 (WO2005033321의 서열식별번호: 185), AAVhu.63 (WO2005033321의 서열식별번호: 195), AAVhu.64 (WO2005033321의 서열식별번호: 196), AAVhu.66 (WO2005033321의 서열식별번호: 197), AAVhu.67 (WO2005033321의 서열식별번호: 198), AAVhu.7 (WO2005033321의 서열식별번호: 150), AAVhu.8 (WO2005033321 서열식별번호: 12), AAVhu.9 (WO2005033321의 서열식별번호: 155), AAVLG-10/rh.40 (WO2005033321의 서열식별번호: 14), AAVLG-4/rh.38 (WO2005033321의 서열식별번호: 86), AAVLG-4/rh.38 (WO2005033321의 서열식별번호: 7), AAVN721-8/rh.43 (WO2005033321의 서열식별번호: 163), AAVN721-8/rh.43 (WO2005033321의 서열식별번호: 43), AAVpi.1 (WO2005033321 서열식별번호: 28), AAVpi.2 (WO2005033321 서열식별번호: 30), AAVpi.3 (WO2005033321 서열식별번호: 29), AAVrh.38 (WO2005033321의 서열식별번호: 86), AAVrh.40 (WO2005033321의 서열식별번호: 92), AAVrh.43 (WO2005033321의 서열식별번호: 163), AAVrh.44 (WO2005033321 서열식별번호: 34), AAVrh.45 (WO2005033321 서열식별번호: 41), AAVrh.47 (WO2005033321 서열식별번호: 38), AAVrh.48 (WO2005033321의 서열식별번호: 115), AAVrh.49 (WO2005033321의 서열식별번호: 103), AAVrh.50 (WO2005033321의 서열식별번호: 108), AAVrh.51 (WO2005033321의 서열식별번호: 104), AAVrh.52 (WO2005033321의 서열식별번호: 96), AAVrh.53 (WO2005033321의 서열식별번호: 97), AAVrh.55 (WO2005033321 서열식별번호: 37), AAVrh.56 (WO2005033321의 서열식별번호: 152), AAVrh.57 (WO2005033321의 서열식별번호: 105), AAVrh.58 (WO2005033321의 서열식별번호: 106), AAVrh.59 (WO2005033321 서열식별번호: 42), AAVrh.60 (WO2005033321 서열식별번호: 31), AAVrh.61 (WO2005033321의 서열식별번호: 107), AAVrh.62 (WO2005033321의 서열식별번호: 114), AAVrh.64 (WO2005033321의 서열식별번호: 99), AAVrh.65 (WO2005033321 서열식별번호: 35), AAVrh.68 (WO2005033321 서열식별번호: 16), AAVrh.69 (WO2005033321 서열식별번호: 39), AAVrh.70 (WO2005033321 서열식별번호: 20), AAVrh.72 (WO2005033321 서열식별번호: 9), 또는 AAVcy.2, AAVcy.3, AAVcy.4, AAVcy.5, AAVcy.6, AAVrh.12, AAVrh.17, AAVrh.18, AAVrh.19, AAVrh.21, AAVrh.22, AAVrh.23, AAVrh.24, AAVrh.25, AAVrh.25/42 15, AAVrh.31, AAVrh.32, AAVrh.33, AAVrh.34, AAVrh.35, AAVrh.36, AAVrh.37, AAVrh14를 포함하나 이에 제한되지는 않는 그의 변이체일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다. 변이체의 비제한적 예는 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 WO2005033321의 서열식별번호: 13, 15, 17, 19, 24, 36, 40, 45, 47, 48, 51-54, 60-62, 64-77, 79, 80, 82, 89, 90, 93-95, 98, 100, 101, , 109-113, 118-120, 124, 126, 131, 139, 142, 151, 154, 158, 161, 162, 165-183, 202, 204-212, 215, 219, 224-236을 포함한다.
일부 실시양태에서, AAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 국제 공개 번호 WO2015168666에 기재된 바와 같은 서열, 예컨대 비제한적으로, AAVrh8R (WO2015168666의 서열식별번호: 9), AAVrh8R A586R 돌연변이체 (WO2015168666의 서열식별번호: 10), AAVrh8R R533A 돌연변이체 (WO2015168666의 서열식별번호: 11), 또는 그의 변이체일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다.
일부 실시양태에서, AAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 번호 US9233131에 기재된 바와 같은 서열, 예컨대 비제한적으로 AAVhE1.1 (US9233131의 서열식별번호: 44), AAVhEr1.5 (US9233131의 서열식별번호: 45), AAVhER1.14 (US9233131의 서열식별번호: 46), AAVhEr1.8 (US9233131의 서열식별번호: 47), AAVhEr1.16 (US9233131의 서열식별번호: 48), AAVhEr1.18 (US9233131의 서열식별번호: 49), AAVhEr1.35 (US9233131의 서열식별번호: 50), AAVhEr1.7 (US9233131의 서열식별번호: 51), AAVhEr1.36 (US9233131의 서열식별번호: 52), AAVhEr2.29 (US9233131의 서열식별번호: 53), AAVhEr2.4 (US9233131의 서열식별번호: 54), AAVhEr2.16 (US9233131의 서열식별번호: 55), AAVhEr2.30 (US9233131의 서열식별번호: 56), AAVhEr2.31 (US9233131의 서열식별번호: 58), AAVhEr2.36 (US9233131의 서열식별번호: 57), AAVhER1.23 (US9233131의 서열식별번호: 53), AAVhEr3.1 (US9233131의 서열식별번호: 59), AAV2.5T (US9233131의 서열식별번호: 42), 또는 그의 변이체일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다.
일부 실시양태에서, AAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 공개 번호 US20150376607에 기재된 바와 같은 서열, 예컨대 비제한적으로, AAV-PAEC (US20150376607의 서열식별번호: 1), AAV-LK01 (US20150376607의 서열식별번호: 2), AAV-LK02 (US20150376607의 서열식별번호: 3), AAV-LK03 (US20150376607의 서열식별번호: 4), AAV-LK04 (US20150376607의 서열식별번호: 5), AAV-LK05 (US20150376607의 서열식별번호: 6), AAV-LK06 (US20150376607의 서열식별번호: 7), AAV-LK07 (US20150376607의 서열식별번호: 8), AAV-LK08 (US20150376607의 서열식별번호: 9), AAV-LK09 (US20150376607의 서열식별번호: 10), AAV-LK10 (US20150376607의 서열식별번호: 11), AAV-LK11 (US20150376607의 서열식별번호: 12), AAV-LK12 (US20150376607의 서열식별번호: 13), AAV-LK13 (US20150376607의 서열식별번호: 14), AAV-LK14 (US20150376607의 서열식별번호: 15), AAV-LK15 (US20150376607의 서열식별번호: 16), AAV-LK16 (US20150376607의 서열식별번호: 17), AAV-LK17 (US20150376607의 서열식별번호: 18), AAV-LK18 (US20150376607의 서열식별번호: 19), AAV-LK19 (US20150376607의 서열식별번호: 20), AAV-PAEC2 (US20150376607의 서열식별번호: 21), AAV-PAEC4 (US20150376607의 서열식별번호: 22), AAV-PAEC6 (US20150376607의 서열식별번호: 23), AAV-PAEC7 (US20150376607의 서열식별번호: 24), AAV-PAEC8 (US20150376607의 서열식별번호: 25), AAV-PAEC11 (US20150376607의 서열식별번호: 26), AAV-PAEC12 (US20150376607의 서열식별번호: 27), 또는 그의 변이체일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다.
일부 실시양태에서, AAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 번호 US9163261에 기재된 바와 같은 서열, 예컨대 비제한적으로, AAV-2-프리-miRNA-101 (서열식별번호: 1 US9163261), 또는 그의 변이체일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다.
일부 실시양태에서, AAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 공개 번호 US20150376240에 기재된 바와 같은 서열, 예컨대 비제한적으로, AAV-8h (US20150376240의 서열식별번호: 6), AAV-8b (US20150376240의 서열식별번호: 5), AAV-h (US20150376240의 서열식별번호: 2), AAV-b (US20150376240의 서열식별번호: 1), 또는 그의 변이체일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다.
일부 실시양태에서, AAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 공개 번호 US20160017295에 기재된 바와 같은 서열, 예컨대 비제한적으로, AAV SM 10-2 (US20160017295의 서열식별번호: 22), AAV 셔플 100-1 (US20160017295의 서열식별번호: 23), AAV 셔플 100-3 (US20160017295의 서열식별번호: 24), AAV 셔플 100-7 (US20160017295의 서열식별번호: 25), AAV 셔플 10-2 (US20160017295의 서열식별번호: 34), AAV 셔플 10-6 (US20160017295의 서열식별번호: 35), AAV 셔플 10-8 (US20160017295의 서열식별번호: 36), AAV 셔플 100-2 (US20160017295의 서열식별번호: 37), AAV SM 10-1 (US20160017295의 서열식별번호: 38), AAV SM 10-8 (US20160017295의 서열식별번호: 39), AAV SM 100-3 (US20160017295의 서열식별번호: 40), AAV SM 100-10 (US20160017295의 서열식별번호: 41), 또는 그의 변이체일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다.
일부 실시양태에서, AAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 공개 번호 US20150238550에 기재된 바와 같은 서열, 예컨대 비제한적으로, BNP61 AAV (US20150238550의 서열식별번호: 1), BNP62 AAV (US20150238550의 서열식별번호: 3), BNP63 AAV (US20150238550의 서열식별번호: 4), 또는 그의 변이체일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다.
일부 실시양태에서, AAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 공개 번호 US20150315612에 기재된 바와 같은 서열, 예컨대 비제한적으로, AAVrh.50 (US20150315612의 서열식별번호: 108), AAVrh.43 (US20150315612의 서열식별번호: 163), AAVrh.62 (US20150315612의 서열식별번호: 114), AAVrh.48 (US20150315612의 서열식별번호: 115), AAVhu.19 (US20150315612의 서열식별번호: 133), AAVhu.11 (US20150315612의 서열식별번호: 153), AAVhu.53 (US20150315612의 서열식별번호: 186), AAV4-8/rh.64 (US20150315612의 서열식별번호: 15), AAVLG-9/hu.39 (US20150315612의 서열식별번호: 24), AAV54.5/hu.23 (US20150315612의 서열식별번호: 60), AAV54.2/hu.22 (US20150315612의 서열식별번호: 67), AAV54.7/hu.24 (US20150315612의 서열식별번호: 66), AAV54.1/hu.21 (US20150315612의 서열식별번호: 65), AAV54.4R/hu.27 (US20150315612의 서열식별번호: 64), AAV46.2/hu.28 (US20150315612의 서열식별번호: 68), AAV46.6/hu.29 (US20150315612의 서열식별번호: 69), AAV128.1/hu.43 (US20150315612의 서열식별번호: 80), 또는 그의 변이체일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다.
일부 실시양태에서, AAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 국제 공개 번호 WO2015121501에 기재된 바와 같은 서열, 예컨대 비제한적으로, 진성 유형 AAV (ttAAV) (WO2015121501의 서열식별번호: 2), "UPenn AAV10" (WO2015121501의 서열식별번호: 8), "일본 AAV10" (WO2015121501의 서열식별번호: 9), 또는 그의 변이체일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다.
본 개시내용에 따르면, AAV 캡시드 혈청형 선택 또는 사용은 다양한 종으로부터의 것일 수 있다. 특정 실시양태에서, AAV는 조류 AAV (AAAV)일 수 있다. AAAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 번호 US 9238800에 기재된 바와 같은 서열, 예컨대 비제한적으로, AAAV (US 9,238,800의 서열식별번호: 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12, 및 14), 또는 그의 변이체일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다.
특정 실시양태에서, AAV는 소 AAV (BAAV)일 수 있다. BAAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 번호 US 9,193,769에 기재된 바와 같은 서열, 예컨대 비제한적으로, BAAV (US 9193769의 서열식별번호: 1 및 6), 또는 그의 변이체일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다. BAAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 번호 US7427396에 기재된 바와 같은 서열, 예컨대 비제한적으로, BAAV (US7427396의 서열식별번호: 5 및 6), 또는 그의 변이체일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다.
특정 실시양태에서, AAV는 염소 AAV일 수 있다. 염소 AAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 번호 US7427396에 기재된 바와 같은 서열, 예컨대 비제한적으로, 염소 AAV (US7427396의 서열식별번호: 3), 또는 그의 변이체일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다.
다른 실시양태에서, AAV는 2개 이상의 모 혈청형으로부터의 하이브리드 AAV로서 조작될 수 있다. 특정 실시양태에서, AAV는 AAV2 및 AAV9로부터의 서열을 포함하는 AAV2G9일 수 있다. AAV2G9 AAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 공개 번호 US20160017005에 기재된 바와 같은 서열일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다.
특정 실시양태에서, AAV는 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 문헌 [Pulicherla et al. (Molecular Therapy 19(6):1070-1078 (2011))]에 기재된 바와 같은 아미노산 390-627 (VP1 넘버링)에서 돌연변이를 갖는 AAV9 캡시드 라이브러리에 의해 생성된 혈청형일 수 있다. 혈청형 및 상응하는 뉴클레오티드 및 아미노산 치환은 AAV9.1 (G1594C; D532H), AAV6.2 (T1418A 및 T1436X; V473D 및 I479K), AAV9.3 (T1238A; F413Y), AAV9.4 (T1250C 및 A1617T; F417S), AAV9.5 (A1235G, A1314T, A1642G, C1760T; Q412R, T548A, A587V), AAV9.6 (T1231A; F411I), AAV9.9 (G1203A, G1785T; W595C), AAV9.10 (A1500G, T1676C; M559T), AAV9.11 (A1425T, A1702C, A1769T; T568P, Q590L), AAV9.13 (A1369C, A1720T; N457H, T574S), AAV9.14 (T1340A, T1362C, T1560C, G1713A; L447H), AAV9.16 (A1775T; Q592L), AAV9.24 (T1507C, T1521G; W503R), AAV9.26 (A1337G, A1769C; Y446C, Q590P), AAV9.33 (A1667C; D556A), AAV9.34 (A1534G, C1794T; N512D), AAV9.35 (A1289T, T1450A, C1494T, A1515T, C1794A, G1816A; Q430L, Y484N, N98K, V606I), AAV9.40 (A1694T, E565V), AAV9.41 (A1348T, T1362C; T450S), AAV9.44 (A1684C, A1701T, A1737G; N562H, K567N), AAV9.45 (A1492T, C1804T; N498Y, L602F), AAV9.46 (G1441C, T1525C, T1549G; G481R, W509R, L517V), 9.47 (G1241A, G1358A, A1669G, C1745T; S414N, G453D, K557E, T582I), AAV9.48 (C1445T, A1736T; P482L, Q579L), AAV9.50 (A1638T, C1683T, T1805A; Q546H, L602H), AAV9.53 (G1301A, A1405C, C1664T, G1811T; R134Q, S469R, A555V, G604V), AAV9.54 (C1531A, T1609A; L511I, L537M), AAV9.55 (T1605A; F535L), AAV9.58 (C1475T, C1579A; T492I, H527N), AAV.59 (T1336C; Y446H), AAV9.61 (A1493T; N498I), AAV9.64 (C1531A, A1617T; L511I), AAV9.65 (C1335T, T1530C, C1568A; A523D), AAV9.68 (C1510A; P504T), AAV9.80 (G1441A,;G481R), AAV9.83 (C1402A, A1500T; P468T, E500D), AAV9.87 (T1464C, T1468C; S490P), AAV9.90 (A1196T; Y399F), AAV9.91 (T1316G, A1583T, C1782G, T1806C; L439R, K528I), AAV9.93 (A1273G, A1421G, A1638C, C1712T, G1732A, A1744T, A1832T; S425G, Q474R, Q546H, P571L, G578R, T582S, D611V), AAV9.94 (A1675T; M559L) 및 AAV9.95 (T1605A; F535L)일 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.
일부 실시양태에서, AAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 국제 공개 번호 WO2016049230에 기재된 바와 같은 서열, 예컨대 비제한적으로 AAVF1/HSC1 (WO2016049230의 서열식별번호: 2 및 20), AAVF2/HSC2 (WO2016049230의 서열식별번호: 3 및 21), AAVF3/HSC3 (WO2016049230의 서열식별번호: 5 및 22), AAVF4/HSC4 (WO2016049230의 서열식별번호: 6 및 23), AAVF5/HSC5 (WO2016049230의 서열식별번호: 11 및 25), AAVF6/HSC6 (WO2016049230의 서열식별번호: 7 및 24), AAVF7/HSC7 (WO2016049230의 서열식별번호: 8 및 27), AAVF8/HSC8 (WO2016049230의 서열식별번호: 9 및 28), AAVF9/HSC9 (WO2016049230의 서열식별번호: 10 및 29), AAVF11/HSC11 (WO2016049230의 서열식별번호: 4 및 26), AAVF12/HSC12 (WO2016049230의 서열식별번호: 12 및 30), AAVF13/HSC13 (WO2016049230의 서열식별번호: 14 및 31), AAVF14/HSC14 (WO2016049230의 서열식별번호: 15 및 32), AAVF15/HSC15 (WO2016049230의 서열식별번호: 16 및 33), AAVF16/HSC16 (WO2016049230의 서열식별번호: 17 및 34), AAVF17/HSC17 (WO2016049230의 서열식별번호: 13 및 35), 또는 그의 변이체 또는 유도체일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다.
일부 실시양태에서, AAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 번호 US 8734809에 기재된 바와 같은 서열, 예컨대 비제한적으로, AAV CBr-E1 (US8734809의 서열식별번호: 13 및 87), AAV CBr-E2 (US8734809의 서열식별번호: 14 및 88), AAV CBr-E3 (US8734809의 서열식별번호: 15 및 89), AAV CBr-E4 (US8734809의 서열식별번호: 16 및 90), AAV CBr-E5 (US8734809의 서열식별번호: 17 및 91), AAV CBr-e5 (US8734809의 서열식별번호: 18 및 92), AAV CBr-E6 (US8734809의 서열식별번호: 19 및 93), AAV CBr-E7 (US8734809의 서열식별번호: 20 및 94), AAV CBr-E8 (US8734809의 서열식별번호: 21 및 95), AAV CLv-D1 (US8734809의 서열식별번호: 22 및 96), AAV CLv-D2 (US8734809의 서열식별번호: 23 및 97), AAV CLv-D3 (US8734809의 서열식별번호: 24 및 98), AAV CLv-D4 (US8734809의 서열식별번호: 25 및 99), AAV CLv-D5 (US8734809의 서열식별번호: 26 및 100), AAV CLv-D6 (US8734809의 서열식별번호: 27 및 101), AAV CLv-D7 (US8734809의 서열식별번호: 28 및 102), AAV CLv-D8 (US8734809의 서열식별번호: 29 및 103), AAV CLv-E1 (US8734809의 서열식별번호: 13 및 87), AAV CLv-R1 (US8734809의 서열식별번호: 30 및 104), AAV CLv-R2 (US8734809의 서열식별번호: 31 및 105), AAV CLv-R3 (US8734809의 서열식별번호: 32 및 106), AAV CLv-R4 (US8734809의 서열식별번호: 33 및 107), AAV CLv-R5 (US8734809의 서열식별번호: 34 및 108), AAV CLv-R6 (US8734809의 서열식별번호: 35 및 109), AAV CLv-R7 (US8734809의 서열식별번호: 36 및 110), AAV CLv-R8 (US8734809의 서열식별번호: X 및 X), AAV CLv-R9 (US8734809의 서열식별번호: X 및 X), AAV CLg-F1 (US8734809의 서열식별번호: 39 및 113), AAV CLg-F2 (US8734809의 서열식별번호: 40 및 114), AAV CLg-F3 (US8734809의 서열식별번호: 41 및 115), AAV CLg-F4 (US8734809의 서열식별번호: 42 및 116), AAV CLg-F5 (US8734809의 서열식별번호: 43 및 117), AAV CLg-F6 (US8734809의 서열식별번호: 43 및 117), AAV CLg-F7 (US8734809의 서열식별번호: 44 및 118), AAV CLg-F8 (US8734809의 서열식별번호: 43 및 117), AAV CSp-1 (US8734809의 서열식별번호: 45 및 119), AAV CSp-10 (US8734809의 서열식별번호: 46 및 120), AAV CSp-11 (US8734809의 서열식별번호: 47 및 121), AAV CSp-2 (US8734809의 서열식별번호: 48 및 122), AAV CSp-3 (US8734809의 서열식별번호: 49 및 123), AAV CSp-4 (US8734809의 서열식별번호: 50 및 124), AAV CSp-6 (US8734809의 서열식별번호: 51 및 125), AAV CSp-7 (US8734809의 서열식별번호: 52 및 126), AAV CSp-8 (US8734809의 서열식별번호: 53 및 127), AAV CSp-9 (US8734809의 서열식별번호: 54 및 128), AAV CHt-2 (US8734809의 서열식별번호: 55 및 129), AAV CHt-3 (US8734809의 서열식별번호: 56 및 130), AAV CKd-1 (US8734809의 서열식별번호: 57 및 131), AAV CKd-10 (US8734809의 서열식별번호: 58 및 132), AAV CKd-2 (US8734809의 서열식별번호: 59 및 133), AAV CKd-3 (US8734809의 서열식별번호: 60 및 134), AAV CKd-4 (US8734809의 서열식별번호: 61 및 135), AAV CKd-6 (US8734809의 서열식별번호: 62 및 136), AAV CKd-7 (US8734809의 서열식별번호: 63 및 137), AAV CKd-8 (US8734809의 서열식별번호: 64 및 138), AAV CLv-1 (US8734809의 서열식별번호: 35 및 139), AAV CLv-12 (US8734809의 서열식별번호: 66 및 140), AAV CLv-13 (US8734809의 서열식별번호: 67 및 141), AAV CLv-2 (US8734809의 서열식별번호: 68 및 142), AAV CLv-3 (US8734809의 서열식별번호: 69 및 143), AAV CLv-4 (US8734809의 서열식별번호: 70 및 144), AAV CLv-6 (US8734809의 서열식별번호: 71 및 145), AAV CLv-8 (US8734809의 서열식별번호: 72 및 146), AAV CKd-B1 (US8734809의 서열식별번호: 73 및 147), AAV CKd-B2 (US8734809의 서열식별번호: 74 및 148), AAV CKd-B3 (US8734809의 서열식별번호: 75 및 149), AAV CKd-B4 (US8734809의 서열식별번호: 76 및 150), AAV CKd-B5 (US8734809의 서열식별번호: 77 및 151), AAV CKd-B6 (US8734809의 서열식별번호: 78 및 152), AAV CKd-B7 (US8734809의 서열식별번호: 79 및 153), AAV CKd-B8 (US8734809의 서열식별번호: 80 및 154), AAV CKd-H1 (US8734809의 서열식별번호: 81 및 155), AAV CKd-H2 (US8734809의 서열식별번호: 82 및 156), AAV CKd-H3 (US8734809의 서열식별번호: 83 및 157), AAV CKd-H4 (US8734809의 서열식별번호: 84 및 158), AAV CKd-H5 (US8734809의 서열식별번호: 85 및 159), AAV CKd-H6 (US8734809의 서열식별번호: 77 및 151), AAV CHt-1 (US8734809의 서열식별번호: 86 및 160), AAV CLv1-1 (US8734809의 서열식별번호: 171), AAV CLv1-2 (US8734809의 서열식별번호: 172), AAV CLv1-3 (US8734809의 서열식별번호: 173), AAV CLv1-4 (US8734809의 서열식별번호: 174), AAV Clv1-7 (US8734809의 서열식별번호: 175), AAV Clv1-8 (US8734809의 서열식별번호: 176), AAV Clv1-9 (US8734809의 서열식별번호: 177), AAV Clv1-10 (US8734809의 서열식별번호: 178), AAV.VR-355 (US8734809의 서열식별번호: 181), AAV.hu.48R3 (US8734809의 서열식별번호: 183), 또는 그의 변이체 또는 유도체일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다.
일부 실시양태에서, AAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 국제 공개 번호 WO2016065001에 기재된 바와 같은 서열, 예컨대 비제한적으로 AAV CHt-P2 (WO2016065001의 서열식별번호: 1 및 51), AAV CHt-P5 (WO2016065001의 서열식별번호: 2 및 52), AAV CHt-P9 (WO2016065001의 서열식별번호: 3 및 53), AAV CBr-7.1 (WO2016065001의 서열식별번호: 4 및 54), AAV CBr-7.2 (WO2016065001의 서열식별번호: 5 및 55), AAV CBr-7.3 (WO2016065001의 서열식별번호: 6 및 56), AAV CBr-7.4 (WO2016065001의 서열식별번호: 7 및 57), AAV CBr-7.5 (WO2016065001의 서열식별번호: 8 및 58), AAV CBr-7.7 (WO2016065001의 서열식별번호: 9 및 59), AAV CBr-7.8 (WO2016065001의 서열식별번호: 10 및 60), AAV CBr-7.10 (WO2016065001의 서열식별번호: 11 및 61), AAV CKd-N3 (WO2016065001의 서열식별번호: 12 및 62), AAV CKd-N4 (WO2016065001의 서열식별번호: 13 및 63), AAV CKd-N9 (WO2016065001의 서열식별번호: 14 및 64), AAV CLv-L4 (WO2016065001의 서열식별번호: 15 및 65), AAV CLv-L5 (WO2016065001의 서열식별번호: 16 및 66), AAV CLv-L6 (WO2016065001의 서열식별번호: 17 및 67), AAV CLv-K1 (WO2016065001의 서열식별번호: 18 및 68), AAV CLv-K3 (WO2016065001의 서열식별번호: 19 및 69), AAV CLv-K6 (WO2016065001의 서열식별번호: 20 및 70), AAV CLv-M1 (WO2016065001의 서열식별번호: 21 및 71), AAV CLv-M11 (WO2016065001의 서열식별번호: 22 및 72), AAV CLv-M2 (WO2016065001의 서열식별번호: 23 및 73), AAV CLv-M5 (WO2016065001의 서열식별번호: 24 및 74), AAV CLv-M6 (WO2016065001의 서열식별번호: 25 및 75), AAV CLv-M7 (WO2016065001의 서열식별번호: 26 및 76), AAV CLv-M8 (WO2016065001의 서열식별번호: 27 및 77), AAV CLv-M9 (WO2016065001의 서열식별번호: 28 및 78), AAV CHt-P1 (WO2016065001의 서열식별번호: 29 및 79), AAV CHt-P6 (WO2016065001의 서열식별번호: 30 및 80), AAV CHt-P8 (WO2016065001의 서열식별번호: 31 및 81), AAV CHt-6.1 (WO2016065001의 서열식별번호: 32 및 82), AAV CHt-6.10 (WO2016065001의 서열식별번호: 33 및 83), AAV CHt-6.5 (WO2016065001의 서열식별번호: 34 및 84), AAV CHt-6.6 (WO2016065001의 서열식별번호: 35 및 85), AAV CHt-6.7 (WO2016065001의 서열식별번호: 36 및 86), AAV CHt-6.8 (WO2016065001의 서열식별번호: 37 및 87), AAV CSp-8.10 (WO2016065001의 서열식별번호: 38 및 88), AAV CSp-8.2 (WO2016065001의 서열식별번호: 39 및 89), AAV CSp-8.4 (WO2016065001의 서열식별번호: 40 및 90), AAV CSp-8.5 (WO2016065001의 서열식별번호: 41 및 91), AAV CSp-8.6 (WO2016065001의 서열식별번호: 42 및 92), AAV CSp-8.7 (WO2016065001의 서열식별번호: 43 및 93), AAV CSp-8.8 (WO2016065001의 서열식별번호: 44 및 94), AAV CSp-8.9 (WO2016065001의 서열식별번호: 45 및 95), AAV CBr-B7.3 (WO2016065001의 서열식별번호: 46 및 96), AAV CBr-B7.4 (WO2016065001의 서열식별번호: 47 및 97), AAV3B (WO2016065001의 서열식별번호: 48 및 98), AAV4 (WO2016065001의 서열식별번호: 49 및 99), AAV5 (WO2016065001의 서열식별번호: 50 및 100), 또는 그의 변이체 또는 유도체일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다.
일부 실시양태에서, AAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 공개 번호 US 20160361439에 기재된 바와 같은 변형, 예컨대 비제한적으로, 야생형 AAV1, AAV2, AAV3, AAV4, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9, AAV10, AAV11, AAV12, 및 그의 하이브리드의 Y252F, Y272F, Y444F, Y500F, Y700F, Y704F, Y730F, Y275F, Y281F, Y508F, Y576F, Y612G, Y673F, 및 Y720F일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다.
일부 실시양태에서, AAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 번호 US 9546112에 기재된 바와 같은 돌연변이, 예컨대 비제한적으로, AAV6 (US 9546112의 서열식별번호: 4), AAV1 (US 9546112의 서열식별번호: 6), AAV2, AAV3, AAV4, AAV5, AAV7, AAV9, AAV10 또는 AAV11 또는 그의 유도체의 서열에서 F129L, D418E, K531E, L584F, V598A 및 H642N 돌연변이 중 적어도 2개 그러나 모두는 아닌 것일 수 있거나 이를 가질 수 있다. 또 다른 실시양태에서, AAV 혈청형은 K531E 돌연변이 (US 9546112의 서열식별번호: 5)를 포함하는 AAV6 서열일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다.
일부 실시양태에서, AAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 공개 번호 US 20130224836에 기재된 바와 같은 AAV1 서열에서의 돌연변이, 예컨대 비제한적으로, 바람직하게는 AAV1 (US 20130224836의 서열식별번호: 2)의 위치 252, 273, 445, 701, 705 및 731에서 또 다른 아미노산, 바람직하게는 페닐알라닌 잔기로 치환된, 표면-노출된 티로신 잔기 중 적어도 1개일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다. 특정 실시양태에서, AAV 혈청형은 AAV9 서열에서의 돌연변이, 예컨대 비제한적으로, 바람직하게는 AAV2 (US 20130224836의 서열식별번호: 4)의 위치 252, 272, 444, 500, 700, 704 및 730에서 또 다른 아미노산, 바람직하게는 페닐알라닌 잔기로 치환된, 표면-노출된 티로신 잔기 중 적어도 1개일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다. 특정 실시양태에서, AAV9 (US 20130224836의 서열식별번호: 6)의 위치 446의 티로신 잔기는 페닐알라닌 잔기로 치환된다.
일부 실시양태에서, 혈청형은 그의 전문이 본원에 참조로 포함되는 국제 공개 번호 WO2016130589에 기재된 바와 같은 AAV2 또는 그의 변이체일 수 있다. AAV2의 아미노산 서열은 N587A, E548A, 또는 N708A 돌연변이를 포함할 수 있다. 특정 실시양태에서, 임의의 AAV의 아미노산 서열은 V708K 돌연변이를 포함할 수 있다.
특정 실시양태에서, AAV는 표 1에서 발견되는 임의의 것으로부터 선택된 혈청형일 수 있다.
특정 실시양태에서, AAV는 표 1의 서열들의 서열, 그의 단편 또는 변이체를 포함할 수 있다.
특정 실시양태에서, AAV는 표 1에 기재된 서열, 단편 또는 변이체에 의해 코딩될 수 있다.
표 1. AAV 혈청형
본원에 언급되고/거나 기재된 DNA 및 RNA 서열 중 임의의 것에서, 단일 문자 기호는 하기 설명을 갖는다: A는 아데닌; C는 시토신; G는 구아닌; T는 티민; U는 우라실; W는 약한 염기, 예컨대 아데닌 또는 티민; S는 강한 뉴클레오티드, 예컨대 시토신 및 구아닌; M은 아미노 뉴클레오티드, 예컨대 아데닌 및 시토신; K는 케토 뉴클레오티드, 예컨대 구아닌 및 티민; R은 퓨린 아데닌 및 구아닌; Y는 피리미딘 시토신 및 티민; B는 A가 아닌 임의의 염기 (예를 들어, 시토신, 구아닌 및 티민); D는 C가 아닌 임의의 염기 (예를 들어, 아데닌, 구아닌 및 티민); H는 G가 아닌 임의의 염기 (예를 들어, 아데닌, 시토신 및 티민); V는 T가 아닌 임의의 염기 (예를 들어, 아데닌, 시토신 및 구아닌); N은 (갭이 아닌) 임의의 뉴클레오티드; 및 Z는 0.
본원에 언급되고/거나 기재된 아미노산 서열 중 임의의 것에서, 단일 문자 기호는 하기 설명을 갖는다: G (Gly)는 글리신; A (Ala)는 알라닌; L (Leu)은 류신; M (Met)은 메티오닌; F (Phe)는 페닐알라닌; W (Trp)는 트립토판; K (Lys)는 리신; Q (Gln)는 글루타민; E (Glu)는 글루탐산; S (Ser)는 세린; P (Pro)는 프롤린; V (Val)는 발린; I (Ile)는 이소류신; C (Cys)는 시스테인; Y (Tyr)는 티로신; H (His)는 히스티딘; R (Arg)은 아르기닌; N (Asn)은 아스파라긴; D (Asp)는 아스파르트산; T (Thr)는 트레오닌; B (Asx)는 아스파르트산 또는 아스파라긴; J (Xle)는 류신 또는 이소류신; O (Pyl)는 피롤리신; U (Sec)는 셀레노시스테인; X (Xaa)는 임의의 아미노산; 및 Z (Glx)는 글루타민 또는 글루탐산.
특정 실시양태에서, AAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 국제 특허 공개 WO2015038958에 기재된 바와 같은 서열, 예컨대 비제한적으로 AAV9 (WO2015038958의 서열식별번호: 2 및 11 또는 각각 본원의 서열식별번호: 132 및 131), PHP.B (WO2015038958의 서열식별번호: 8 및 9 또는 본원의 서열식별번호: 1 및 2), G2B-13 (WO2015038958의 서열식별번호: 12 또는 본원의 서열식별번호: 3), G2B-26 (WO2015038958의 서열식별번호: 13 또는 본원의 서열식별번호: 1), TH1.1-32 (WO2015038958의 서열식별번호: 14 또는 본원의 서열식별번호: 4), TH1.1-35 (WO2015038958의 서열식별번호: 15 또는 본원의 서열식별번호: 5) 또는 그의 변이체일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다. 추가로, WO2015038958에 기재된 표적화 펩티드 또는 아미노산 삽입물 중 임의의 것이 임의의 모 AAV 혈청형, 예컨대 비제한적으로, AAV9 (DNA 서열의 경우 서열식별번호: 131 및 아미노산 서열의 경우 서열식별번호: 132) 내로 삽입될 수 있다. 특정 실시양태에서, 아미노산 삽입물은 모 AAV (예를 들어, AAV9)의 아미노산 586-592 사이에 삽입된다. 또 다른 실시양태에서, 아미노산 삽입물은 모 AAV 서열의 아미노산 588-589 사이에 삽입된다. 아미노산 삽입물은 하기 아미노산 서열, TLAVPFK (WO2015038958의 서열식별번호: 1; 본원의 서열식별번호: 876), KFPVALT (WO2015038958의 서열식별번호: 3; 본원의 서열식별번호: 877), LAVPFK (WO2015038958의 서열식별번호: 31; 본원의 서열식별번호: 878), AVPFK (WO2015038958의 서열식별번호: 32; 본원의 서열식별번호: 879), VPFK (WO2015038958의 서열식별번호: 33; 본원의 서열식별번호: 880), TLAVPF (WO2015038958의 서열식별번호: 34; 본원의 서열식별번호: 881), TLAVP (WO2015038958의 서열식별번호: 35; 본원의 서열식별번호: 882), TLAV (WO2015038958의 서열식별번호: 36; 본원의 서열식별번호: 883), SVSKPFL (WO2015038958의 서열식별번호: 28; 본원의 서열식별번호: 884), FTLTTPK (WO2015038958의 서열식별번호: 29; 본원의 서열식별번호: 885), MNATKNV (WO2015038958의 서열식별번호: 30; 본원의 서열식별번호: 886), QSSQTPR (WO2015038958의 서열식별번호: 54; 본원의 서열식별번호: 887), ILGTGTS (WO2015038958의 서열식별번호: 55; 본원의 서열식별번호: 888), TRTNPEA (WO2015038958의 서열식별번호: 56; 본원의 서열식별번호: 889), NGGTSSS (WO2015038958의 서열식별번호: 58; 본원의 서열식별번호: 890), 또는 YTLSQGW (WO2015038958의 서열식별번호: 60; 본원의 서열식별번호: 891) 중 임의의 것일 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다. 아미노산 삽입물을 코딩할 수 있는 뉴클레오티드 서열의 비제한적 예는 하기 AAGTTTCCTGTGGCGTTGACT (WO2015038958의 서열식별번호: 3; 본원의 서열식별번호: 892), ACTTTGGCGGTGCCTTTTAAG (WO2015038958의 서열식별번호: 24 및 49; 본원의 서열식별번호: 893), AGTGTGAGTAAGCCTTTTTTG (WO2015038958의 서열식별번호: 25; 본원의 서열식별번호: 894), TTTACGTTGACGACGCCTAAG (WO2015038958의 서열식별번호: 26; 본원의 서열식별번호: 895), ATGAATGCTACGAAGAATGTG (WO2015038958의 서열식별번호: 27; 본원의 서열식별번호: 896), CAGTCGTCGCAGACGCCTAGG (WO2015038958의 서열식별번호: 48; 본원의 서열식별번호: 897), ATTCTGGGGACTGGTACTTCG (WO2015038958의 서열식별번호: 50 및 52; 본원의 서열식별번호: 898), ACGCGGACTAATCCTGAGGCT (WO2015038958의 서열식별번호: 51; 본원의 서열식별번호: 899), AATGGGGGGACTAGTAGTTCT (WO2015038958의 서열식별번호: 53; 본원의 서열식별번호: 900), 또는 TATACTTTGTCGCAGGGTTGG (WO2015038958의 서열식별번호: 59; 본원의 서열식별번호: 901)를 포함한다.
특정 실시양태에서, AAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 국제 특허 공개 WO2017100671에 기재된 바와 같은 서열, 예컨대 비제한적으로, AAV9 (WO2017100671의 서열식별번호: 45, 본원의 서열식별번호: 875), PHP.N (WO2017100671의 서열식별번호: 46, 본원의 서열식별번호: 873), PHP.S (WO2017100671의 서열식별번호: 47, 본원의 서열식별번호: 874), 또는 그의 변이체일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다. 추가로, WO2017100671에 기재된 표적화 펩티드 또는 아미노산 삽입물 중 임의의 것이 임의의 모 AAV 혈청형, 예컨대 비제한적으로, AAV9 (서열식별번호: 127 또는 서열식별번호: 875) 내로 삽입될 수 있다. 특정 실시양태에서, 아미노산 삽입물은 모 AAV (예를 들어, AAV9)의 아미노산 586-592 사이에 삽입된다. 또 다른 실시양태에서, 아미노산 삽입물은 모 AAV 서열의 아미노산 588-589 사이에 삽입된다. 아미노산 삽입물은 하기 아미노산 서열 AQTLAVPFKAQ (WO2017100671의 서열식별번호: 1; 본원의 서열식별번호: 902), AQSVSKPFLAQ (WO2017100671의 서열식별번호: 2; 본원의 서열식별번호: 903), AQFTLTTPKAQ (WO2017100671의 서열 목록에서 서열식별번호: 3; 본원의 서열식별번호: 904), DGTLAVPFKAQ (WO2017100671의 서열 목록에서 서열식별번호: 4; 본원의 서열식별번호: 905), ESTLAVPFKAQ (WO2017100671의 서열식별번호: 5; 본원의 서열식별번호: 906), GGTLAVPFKAQ (WO2017100671의 서열식별번호: 6; 본원의 서열식별번호: 907), AQTLATPFKAQ (WO2017100671의 서열식별번호: 7 및 33; 본원의 서열식별번호: 908), ATTLATPFKAQ (WO2017100671의 서열식별번호: 8; 본원의 서열식별번호: 909), DGTLATPFKAQ (WO2017100671의 서열식별번호: 9; 본원의 서열식별번호: 910), GGTLATPFKAQ (WO2017100671의 서열식별번호: 10; 본원의 서열식별번호: 911), SGSLAVPFKAQ (WO2017100671의 서열식별번호: 11; 본원의 서열식별번호: 912), AQTLAQPFKAQ (WO2017100671의 서열식별번호: 12; 본원의 서열식별번호: 913), AQTLQQPFKAQ (WO2017100671의 서열식별번호: 13; 본원의 서열식별번호: 914), AQTLSNPFKAQ (WO2017100671의 서열식별번호: 14; 본원의 서열식별번호: 915), AQTLAVPFSNP (WO2017100671의 서열식별번호: 15; 본원의 서열식별번호: 916), QGTLAVPFKAQ (WO2017100671의 서열식별번호: 16; 본원의 서열식별번호: 917), NQTLAVPFKAQ (WO2017100671의 서열식별번호: 17; 본원의 서열식별번호: 918), EGSLAVPFKAQ (WO2017100671의 서열식별번호: 18; 본원의 서열식별번호: 919), SGNLAVPFKAQ (WO2017100671의 서열식별번호: 19; 본원의 서열식별번호: 920), EGTLAVPFKAQ (WO2017100671의 서열식별번호: 20; 본원의 서열식별번호: 921), DSTLAVPFKAQ (WO2017100671의 표 1에서 서열식별번호: 21; 본원의 서열식별번호: 922), AVTLAVPFKAQ (WO2017100671의 서열식별번호: 22; 본원의 서열식별번호: 923), AQTLSTPFKAQ (WO2017100671의 서열식별번호: 23; 본원의 서열식별번호: 924), AQTLPQPFKAQ (WO2017100671의 서열식별번호: 24 및 32; 본원의 서열식별번호: 925), AQTLSQPFKAQ (WO2017100671의 서열식별번호: 25; 본원의 서열식별번호: 926), AQTLQLPFKAQ (WO2017100671의 서열식별번호: 26; 본원의 서열식별번호: 927), AQTLTMPFKAQ (WO2017100671의 서열식별번호: 27, 및 34 및 WO2017100671의 서열 목록에서 서열식별번호: 35; 본원의 서열식별번호: 928), AQTLTTPFKAQ (WO2017100671의 서열식별번호: 28; 본원의 서열식별번호: 929), AQYTLSQGWAQ (WO2017100671의 서열식별번호: 29; 본원의 서열식별번호: 930), AQMNATKNVAQ (WO2017100671의 서열식별번호: 30; 본원의 서열식별번호: 931), AQVSGGHHSAQ (WO2017100671의 서열식별번호: 31; 본원의 서열식별번호: 932), AQTLTAPFKAQ (WO2017100671의 표 1에서 서열식별번호: 35; 본원의 서열식별번호: 933), AQTLSKPFKAQ (WO2017100671의 서열식별번호: 36; 본원의 서열식별번호: 934), QAVRTSL (WO2017100671의 서열식별번호: 37; 본원의 서열식별번호: 935), YTLSQGW (WO2017100671의 서열식별번호: 38; 본원의 서열식별번호: 891), LAKERLS (WO2017100671의 서열식별번호: 39; 본원의 서열식별번호: 936), TLAVPFK (WO2017100671의 서열 목록에서 서열식별번호: 40; 본원의 서열식별번호: 876), SVSKPFL (WO2017100671의 서열식별번호: 41; 본원의 서열식별번호: 884), FTLTTPK (WO2017100671의 서열식별번호: 42; 본원의 서열식별번호: 885), MNSTKNV (WO2017100671의 서열식별번호: 43; 본원의 서열식별번호: 937), VSGGHHS (WO2017100671의 서열식별번호: 44; 본원의 서열식별번호: 938), SAQTLAVPFKAQAQ (WO2017100671의 서열식별번호: 48; 본원의 서열식별번호: 939), SXXXLAVPFKAQAQ (WO2017100671의 서열식별번호: 49, 여기서 X는 임의의 아미노산일 수 있음; 본원의 서열식별번호: 940), SAQXXXVPFKAQAQ (WO2017100671의 서열식별번호: 50, 여기서 X는 임의의 아미노산일 수 있음; 본원의 서열식별번호: 941), SAQTLXXXFKAQAQ (WO2017100671의 서열식별번호: 51, 여기서 X는 임의의 아미노산일 수 있음; 본원의 서열식별번호: 942), SAQTLAVXXXAQAQ (WO2017100671의 서열식별번호: 52, 여기서 X는 임의의 아미노산일 수 있음; 본원의 서열식별번호: 943), SAQTLAVPFXXXAQ (WO2017100671의 서열식별번호: 53, 여기서 X는 임의의 아미노산일 수 있음; 본원의 서열식별번호: 944), TNHQSAQ (WO2017100671의 서열식별번호: 65; 본원의 서열식별번호: 945), AQAQTGW (WO2017100671의 서열식별번호: 66; 본원의 서열식별번호: 946), DGTLATPFK (WO2017100671의 서열식별번호: 67; 본원의 서열식별번호: 947), DGTLATPFKXX (WO2017100671의 서열식별번호: 68, 여기서 X는 임의의 아미노산일 수 있음; 본원의 서열식별번호: 948), LAVPFKAQ (WO2017100671의 서열식별번호: 80; 본원의 서열식별번호: 949), VPFKAQ (WO2017100671의 서열식별번호: 81; 본원의 서열식별번호: 950), FKAQ (WO2017100671의 서열식별번호: 82; 본원의 서열식별번호: 951), AQTLAV (WO2017100671의 서열식별번호: 83; 본원의 서열식별번호: 952), AQTLAVPF (WO2017100671의 서열식별번호: 84; 본원의 서열식별번호: 953), QAVR (WO2017100671의 서열식별번호: 85; 본원의 서열식별번호: 954), AVRT (WO2017100671의 서열식별번호: 86; 본원의 서열식별번호: 955), VRTS (WO2017100671의 서열식별번호: 87; 본원의 서열식별번호: 956), RTSL (WO2017100671의 서열식별번호: 88; 본원의 서열식별번호: 957), QAVRT (WO2017100671의 서열식별번호: 89; 본원의 서열식별번호: 958), AVRTS (WO2017100671의 서열식별번호: 90; 본원의 서열식별번호: 959), VRTSL (WO2017100671의 서열식별번호: 91; 본원의 서열식별번호: 960), QAVRTS (WO2017100671의 서열식별번호: 92; 본원의 서열식별번호: 961), 또는 AVRTSL (WO2017100671의 서열식별번호: 93; 본원의 서열식별번호: 962) 중 임의의 것일 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.
아미노산 삽입물을 코딩할 수 있는 뉴클레오티드 서열의 비제한적 예는 하기 GATGGGACTTTGGCGGTGCCTTTTAAGGCACAG (WO2017100671의 서열식별번호: 54; 본원의 서열식별번호: 963), GATGGGACGTTGGCGGTGCCTTTTAAGGCACAG (WO2017100671의 서열식별번호: 55; 본원의 서열식별번호: 964), CAGGCGGTTAGGACGTCTTTG (WO2017100671의 서열식별번호: 56; 본원의 서열식별번호: 965), CAGGTCTTCACGGACTCAGACTATCAG (WO2017100671의 서열식별번호: 57 및 78; 본원의 서열식별번호: 966), CAAGTAAAACCTCTACAAATGTGGTAAAATCG (WO2017100671의 서열식별번호: 58; 본원의 서열식별번호: 967), ACTCATCGACCAATACTTGTACTATCTCTCTAGAAC (WO2017100671의 서열식별번호: 59; 본원의 서열식별번호: 968), GGAAGTATTCCTTGGTTTTGAACCCA (WO2017100671의 서열식별번호: 60; 본원의 서열식별번호: 969), GGTCGCGGTTCTTGTTTGTGGAT (WO2017100671의 서열식별번호: 61; 본원의 서열식별번호: 970), CGACCTTGAAGCGCATGAACTCCT (WO2017100671의 서열식별번호: 62; 본원의 서열식별번호: 971), GTATTCCTTGGTTTTGAACCCAACCGGTCTGCGCCTGTGCMNNMNNMNNMNNMNNMNNMNNTTGGGCACTCTGGTGGTTTGTC (WO2017100671의 서열식별번호: 63, 여기서 N은 A, C, T, 또는 G일 수 있음; 본원의 서열식별번호: 972), GTATTCCTTGGTTTTGAACCCAACCGGTCTGCGCMNNMNNMNNAAAAGGCACCGCCAAAGTTTG (WO2017100671의 서열식별번호: 69, 여기서 N은 A, C, T, 또는 G일 수 있음; 본원의 서열식별번호: 973), GTATTCCTTGGTTTTGAACCCAACCGGTCTGCGCCTGTGCMNNMNNMNNCACCGCCAAAGTTTGGGCACT (WO2017100671의 서열식별번호: 70, 여기서 N은 A, C, T, 또는 G일 수 있음; 본원의 서열식별번호: 974), GTATTCCTTGGTTTTGAACCCAACCGGTCTGCGCCTGTGCCTTAAAMNNMNNMNNCAAAGTTTGGGCACTCTGGTGG (WO2017100671의 서열식별번호: 71, 여기서 N은 A, C, T, 또는 G일 수 있음; 본원의 서열식별번호: 975), GTATTCCTTGGTTTTGAACCCAACCGGTCTGCGCCTGTGCCTTAAAAGGCACMNNMNNMNNTTGGGCACTCTGGTGGTTTGTG (WO2017100671의 서열식별번호: 72, 여기서 N은 A, C, T, 또는 G일 수 있음; 본원의 서열식별번호: 976), ACTTTGGCGGTGCCTTTTAAG (WO2017100671의 서열식별번호: 74; 본원의 서열식별번호: 893), AGTGTGAGTAAGCCTTTTTTG (WO2017100671의 서열식별번호: 75; 본원의 서열식별번호: 894), TTTACGTTGACGACGCCTAAG (WO2017100671의 서열식별번호: 76; 본원의 서열식별번호: 895), TATACTTTGTCGCAGGGTTGG (WO2017100671의 서열식별번호: 77; 본원의 서열식별번호: 901), 또는 CTTGCGAAGGAGCGGCTTTCG (WO2017100671의 서열식별번호: 79; 본원의 서열식별번호: 977)를 포함한다.
특정 실시양태에서, AAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 번호 US 9624274에 기재된 바와 같은 서열, 예컨대 비제한적으로, AAV1 (US9624274의 서열식별번호: 181), AAV6 (US9624274의 서열식별번호: 182), AAV2 (US9624274의 서열식별번호: 183), AAV3b (US9624274의 서열식별번호: 184), AAV7 (US9624274의 서열식별번호: 185), AAV8 (US9624274의 서열식별번호: 186), AAV10 (US9624274의 서열식별번호: 187), AAV4 (US9624274의 서열식별번호: 188), AAV11 (US9624274의 서열식별번호: 189), bAAV (US9624274의 서열식별번호: 190), AAV5 (US9624274의 서열식별번호: 191), GPV (US9624274의 서열식별번호: 192; 본원의 서열식별번호: 992), B19 (US9624274의 서열식별번호: 193; 본원의 서열식별번호: 993), MVM (US9624274의 서열식별번호: 194; 본원의 서열식별번호: 994), FPV (US9624274의 서열식별번호: 195; 본원의 서열식별번호: 995), CPV (US9624274의 서열식별번호: 196; 본원의 서열식별번호: 996) 또는 그의 변이체일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다. 추가로, US 9624274에 기재된 구조 단백질 삽입물 중 임의의 것은, 비제한적으로, 임의의 모 AAV 혈청형, 예컨대 비제한적으로, AAV2 (US9624274의 서열식별번호: 183)의 I-453 및 I-587 내로 삽입될 수 있다. 아미노산 삽입물은 하기 아미노산 서열 VNLTWSRASG (US9624274의 서열식별번호: 50; 본원의 서열식별번호: 1375), EFCINHRGYWVCGD (US9624274의 서열식별번호: 55; 본원의 서열식별번호: 1376), EDGQVMDVDLS (US9624274의 서열식별번호: 85; 본원의 서열식별번호: 1377), EKQRNGTLT (US9624274의 서열식별번호: 86; 본원의 서열식별번호: 1378), TYQCRVTHPHLPRALMR (US9624274의 서열식별번호: 87; 본원의 서열식별번호: 1379), RHSTTQPRKTKGSG (US9624274의 서열식별번호: 88; 본원의 서열식별번호: 1380), DSNPRGVSAYLSR (US9624274의 서열식별번호: 89; 본원의 서열식별번호: 1381), TITCLWDLAPSK (US9624274의 서열식별번호: 90; 본원의 서열식별번호: 1382), KTKGSGFFVF (US9624274의 서열식별번호: 91; 본원의 서열식별번호: 1383), THPHLPRALMRS (US9624274의 서열식별번호: 92; 본원의 서열식별번호: 1384), GETYQCRVTHPHLPRALMRSTTK (US9624274의 서열식별번호: 93; 본원의 서열식별번호: 1385), LPRALMRS (US9624274의 서열식별번호: 94; 본원의 서열식별번호: 1386), INHRGYWV (US9624274의 서열식별번호: 95; 본원의 서열식별번호: 1387), CDAGSVRTNAPD (US9624274의 서열식별번호: 60; 본원의 서열식별번호: 1388), AKAVSNLTESRSESLQS (US9624274의 서열식별번호: 96; 본원의 서열식별번호: 1389), SLTGDEFKKVLET (US9624274의 서열식별번호: 97; 본원의 서열식별번호: 1390), REAVAYRFEED (US9624274의 서열식별번호: 98; 본원의 서열식별번호: 1391), INPEIITLDG (US9624274의 서열식별번호: 99; 본원의 서열식별번호: 1392), DISVTGAPVITATYL (US9624274의 서열식별번호: 100; 본원의 서열식별번호: 1393), DISVTGAPVITA (US9624274의 서열식별번호: 101; 본원의 서열식별번호: 1394), PKTVSNLTESSSESVQS (US9624274의 서열식별번호: 102; 본원의 서열식별번호: 1395), SLMGDEFKAVLET (US9624274의 서열식별번호: 103; 본원의 서열식별번호: 1396), QHSVAYTFEED (US9624274의 서열식별번호: 104; 본원의 서열식별번호: 1397), INPEIITRDG (US9624274의 서열식별번호: 105; 본원의 서열식별번호: 1398), DISLTGDPVITASYL (US9624274의 서열식별번호: 106; 본원의 서열식별번호: 1399), DISLTGDPVITA (US9624274의 서열식별번호: 107; 본원의 서열식별번호: 1400), DQSIDFEIDSA (US9624274의 서열식별번호: 108; 본원의 서열식별번호: 1401), KNVSEDLPLPTFSPTLLGDS (US9624274의 서열식별번호: 109; 본원의 서열식별번호: 1402), KNVSEDLPLPT (US9624274의 서열식별번호: 110; 본원의 서열식별번호: 1403), CDSGRVRTDAPD (US9624274의 서열식별번호: 111; 본원의 서열식별번호: 1404), FPEHLLVDFLQSLS (US9624274의 서열식별번호: 112; 본원의 서열식별번호: 1405), DAEFRHDSG (US9624274의 서열식별번호: 65; 본원의 서열식별번호: 1406), HYAAAQWDFGNTMCQL (US9624274의 서열식별번호: 113; 본원의 서열식별번호: 1407), YAAQWDFGNTMCQ (US9624274의 서열식별번호: 114; 본원의 서열식별번호: 1408), RSQKEGLHYT (US9624274의 서열식별번호: 115; 본원의 서열식별번호: 1409), SSRTPSDKPVAHWANPQAE (US9624274의 서열식별번호: 116; 본원의 서열식별번호: 1410), SRTPSDKPVAHWANP (US9624274의 서열식별번호: 117; 본원의 서열식별번호: 1411), SSRTPSDKP (US9624274의 서열식별번호: 118; 본원의 서열식별번호: 1412), NADGNVDYHMNSVP (US9624274의 서열식별번호: 119; 본원의 서열식별번호: 1413), DGNVDYHMNSV (US9624274의 서열식별번호: 120; 본원의 서열식별번호: 1414), RSFKEFLQSSLRALRQ (US9624274의 서열식별번호: 121; 본원의 서열식별번호: 1415); FKEFLQSSLRA (US9624274의 서열식별번호: 122; 본원의 서열식별번호: 1416), 또는 QMWAPQWGPD (US9624274의 서열식별번호: 123; 본원의 서열식별번호: 1417) 중 임의의 것일 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.
특정 실시양태에서, AAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 번호 US 9475845에 기재된 바와 같은 서열, 예컨대 비제한적으로, 천연 AAV2 캡시드 단백질의 아미노산 위치 585 내지 590에서 1개 이상의 아미노산의 변형을 포함하는 AAV 캡시드 단백질일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다. 추가로, 변형은 아미노산 서열 RGNRQA (US9475845의 서열식별번호: 3; 본원의 서열식별번호: 1418), SSSTDP (US9475845의 서열식별번호: 4; 본원의 서열식별번호: 1419), SSNTAP (US9475845의 서열식별번호: 5; 본원의 서열식별번호: 1420), SNSNLP (US9475845의 서열식별번호: 6; 본원의 서열식별번호: 1421), SSTTAP (US9475845의 서열식별번호: 7; 본원의 서열식별번호: 1422), AANTAA (US9475845의 서열식별번호: 8; 본원의 서열식별번호: 1423), QQNTAP (US9475845의 서열식별번호: 9; 본원의 서열식별번호: 1424), SAQAQA (US9475845의 서열식별번호: 10; 본원의 서열식별번호: 1425), QANTGP (US9475845의 서열식별번호: 11; 본원의 서열식별번호: 1426), NATTAP (US9475845의 서열식별번호: 12; 본원의 서열식별번호: 1427), SSTAGP (US9475845의 서열식별번호: 13 및 20; 본원의 서열식별번호: 1428), QQNTAA (US9475845의 서열식별번호: 14; 본원의 서열식별번호: 1429), PSTAGP (US9475845의 서열식별번호: 15; 본원의 서열식별번호: 1430), NQNTAP (US9475845의 서열식별번호: 16; 본원의 서열식별번호: 1431), QAANAP (US9475845의 서열식별번호: 17; 본원의 서열식별번호: 1432), SIVGLP (US9475845의 서열식별번호: 18; 본원의 서열식별번호: 1433), AASTAA (US9475845의 서열식별번호: 19, 및 27; 본원의 서열식별번호: 1434), SQNTTA (US9475845의 서열식별번호: 21; 본원의 서열식별번호: 1435), QQDTAP (US9475845의 서열식별번호: 22; 본원의 서열식별번호: 1436), QTNTGP (US9475845의 서열식별번호: 23; 본원의 서열식별번호: 1437), QTNGAP (US9475845의 서열식별번호: 24; 본원의 서열식별번호: 1438), QQNAAP (US9475845의 서열식별번호: 25; 본원의 서열식별번호: 1439), 또는 AANTQA (US9475845의 서열식별번호: 26; 본원의 서열식별번호: 1440)를 생성할 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다. 특정 실시양태에서, 아미노산 변형은 천연 AAV2 캡시드 단백질의 아미노산 위치 262 내지 265 또는 표적화 서열을 갖는 또 다른 AAV의 캡시드 단백질의 상응하는 위치에서의 치환이다. 표적화 서열은 아미노산 서열, NGRAHA (US9475845의 서열식별번호: 38; 본원의 서열식별번호: 1441), QPEHSST (US9475845의 서열식별번호: 39 및 50; 본원의 서열식별번호: 1442), VNTANST (US9475845의 서열식별번호: 40; 본원의 서열식별번호: 1443), HGPMQKS (US9475845의 서열식별번호: 41; 본원의 서열식별번호: 1444), PHKPPLA (US9475845의 서열식별번호: 42; 본원의 서열식별번호: 1445), IKNNEMW (US9475845의 서열식별번호: 43; 본원의 서열식별번호: 1446), RNLDTPM (US9475845의 서열식별번호: 44; 본원의 서열식별번호: 1447), VDSHRQS (US9475845의 서열식별번호: 45; 본원의 서열식별번호: 1448), YDSKTKT (US9475845의 서열식별번호: 46; 본원의 서열식별번호: 1449), SQLPHQK (US9475845의 서열식별번호: 47; 본원의 서열식별번호: 1450), STMQQNT (US9475845의 서열식별번호: 48; 본원의 서열식별번호: 1451), TERYMTQ (US9475845의 서열식별번호: 49; 본원의 서열식별번호: 1452), DASLSTS (US9475845의 서열식별번호: 51; 본원의 서열식별번호: 1453), DLPNKKT (US9475845의 서열식별번호: 52; 본원의 서열식별번호: 1454), DLTAARL (US9475845의 서열식별번호: 53; 본원의 서열식별번호: 1455), EPHQFNY (US9475845의 서열식별번호: 54; 본원의 서열식별번호: 1456), EPQSNHT (US9475845의 서열식별번호: 55; 본원의 서열식별번호: 1457), MSSWPSQ (US9475845의 서열식별번호: 56; 본원의 서열식별번호: 1458), NPKHNAT (US9475845의 서열식별번호: 57; 본원의 서열식별번호: 1459), PDGMRTT (US9475845의 서열식별번호: 58; 본원의 서열식별번호: 1460), PNNNKTT (US9475845의 서열식별번호: 59; 본원의 서열식별번호: 1461), QSTTHDS (US9475845의 서열식별번호: 60; 본원의 서열식별번호: 1462), TGSKQKQ (US9475845의 서열식별번호: 61; 본원의 서열식별번호: 1463), SLKHQAL (US9475845의 서열식별번호: 62; 본원의 서열식별번호: 1464), SPIDGEQ (US9475845의 서열식별번호: 63; 본원의 서열식별번호: 1465), WIFPWIQL (US9475845의 서열식별번호: 64 및 112; 본원의 서열식별번호: 1466), CDCRGDCFC (US9475845의 서열식별번호: 65; 본원의 서열식별번호: 1467), CNGRC (US9475845의 서열식별번호: 66; 본원의 서열식별번호: 1468), CPRECES (US9475845의 서열식별번호: 67; 본원의 서열식별번호: 1469), CTTHWGFTLC (US9475845의 서열식별번호: 68 및 123; 본원의 서열식별번호: 1470), CGRRAGGSC (US9475845의 서열식별번호: 69; 본원의 서열식별번호: 1471), CKGGRAKDC (US9475845의 서열식별번호: 70; 본원의 서열식별번호: 1472), CVPELGHEC (US9475845의 서열식별번호: 71 및 115; 본원의 서열식별번호: 1473), CRRETAWAK (US9475845의 서열식별번호: 72; 본원의 서열식별번호: 1474), VSWFSHRYSPFAVS (US9475845의 서열식별번호: 73; 본원의 서열식별번호: 1475), GYRDGYAGPILYN (US9475845의 서열식별번호: 74; 본원의 서열식별번호: 1476), XXXYXXX (US9475845의 서열식별번호: 75; 본원의 서열식별번호: 1477), YXNW (US9475845의 서열식별번호: 76; 본원의 서열식별번호: 1478), RPLPPLP (US9475845의 서열식별번호: 77; 본원의 서열식별번호: 1479), APPLPPR (US9475845의 서열식별번호: 78; 본원의 서열식별번호: 1480), DVFYPYPYASGS (US9475845의 서열식별번호: 79; 본원의 서열식별번호: 1481), MYWYPY (US9475845의 서열식별번호: 80; 본원의 서열식별번호: 1482), DITWDQLWDLMK (US9475845의 서열식별번호: 81; 본원의 서열식별번호: 1483), CWDDXWLC (US9475845의 서열식별번호: 82; 본원의 서열식별번호: 1484), EWCEYLGGYLRCYA (US9475845의 서열식별번호: 83; 본원의 서열식별번호: 1485), YXCXXGPXTWXCXP (US9475845의 서열식별번호: 84; 본원의 서열식별번호: 1486), IEGPTLRQWLAARA (US9475845의 서열식별번호: 85; 본원의 서열식별번호: 1487), LWXXX (US9475845의 서열식별번호: 86; 본원의 서열식별번호: 1488), XFXXYLW (US9475845의 서열식별번호: 87; 본원의 서열식별번호: 1489), SSIISHFRWGLCD (US9475845의 서열식별번호: 88; 본원의 서열식별번호: 1490), MSRPACPPNDKYE (US9475845의 서열식별번호: 89; 본원의 서열식별번호: 1491), CLRSGRGC (US9475845의 서열식별번호: 90; 본원의 서열식별번호: 1492), CHWMFSPWC (US9475845의 서열식별번호: 91; 본원의 서열식별번호: 1493), WXXF (US9475845의 서열식별번호: 92; 본원의 서열식별번호: 1494), CSSRLDAC (US9475845의 서열식별번호: 93; 본원의 서열식별번호: 1495), CLPVASC (US9475845의 서열식별번호: 94; 본원의 서열식별번호: 1496), CGFECVRQCPERC (US9475845의 서열식별번호: 95; 본원의 서열식별번호: 1497), CVALCREACGEGC (US9475845의 서열식별번호: 96; 본원의 서열식별번호: 1498), SWCEPGWCR (US9475845의 서열식별번호: 97; 본원의 서열식별번호: 1499), YSGKWGW (US9475845의 서열식별번호: 98; 본원의 서열식별번호: 1500), GLSGGRS (US9475845의 서열식별번호: 99; 본원의 서열식별번호: 1501), LMLPRAD (US9475845의 서열식별번호: 100; 본원의 서열식별번호: 1502), CSCFRDVCC (US9475845의 서열식별번호: 101; 본원의 서열식별번호: 1503), CRDVVSVIC (US9475845의 서열식별번호: 102; 본원의 서열식별번호: 1504), MARSGL (US9475845의 서열식별번호: 103; 본원의 서열식별번호: 1505), MARAKE (US9475845의 서열식별번호: 104; 본원의 서열식별번호: 1506), MSRTMS (US9475845의 서열식별번호: 105; 본원의 서열식별번호: 1507), KCCYSL (US9475845의 서열식별번호: 106; 본원의 서열식별번호: 1508), MYWGDSHWLQYWYE (US9475845의 서열식별번호: 107; 본원의 서열식별번호: 1509), MQLPLAT (US9475845의 서열식별번호: 108; 본원의 서열식별번호: 1510), EWLS (US9475845의 서열식별번호: 109; 본원의 서열식별번호: 1511), SNEW (US9475845의 서열식별번호: 110; 본원의 서열식별번호: 1512), TNYL (US9475845의 서열식별번호: 111; 본원의 서열식별번호: 1513), WDLAWMFRLPVG (US9475845의 서열식별번호: 113; 본원의 서열식별번호: 1514), CTVALPGGYVRVC (US9475845의 서열식별번호: 114; 본원의 서열식별번호: 1515), CVAYCIEHHCWTC (US9475845의 서열식별번호: 116; 본원의 서열식별번호: 1516), CVFAHNYDYLVC (US9475845의 서열식별번호: 117; 본원의 서열식별번호: 1517), CVFTSNYAFC (US9475845의 서열식별번호: 118; 본원의 서열식별번호: 1518), VHSPNKK (US9475845의 서열식별번호: 119; 본원의 서열식별번호: 1519), CRGDGWC (US9475845의 서열식별번호: 120; 본원의 서열식별번호: 1520), XRGCDX (US9475845의 서열식별번호: 121; 본원의 서열식별번호: 1521), PXXX (US9475845의 서열식별번호: 122; 본원의 서열식별번호: 1522), SGKGPRQITAL (US9475845의 서열식별번호: 124; 본원의 서열식별번호: 1523), AAAAAAAAAXXXXX (US9475845의 서열식별번호: 125; 본원의 서열식별번호: 1524), VYMSPF (US9475845의 서열식별번호: 126; 본원의 서열식별번호: 1525), ATWLPPR (US9475845의 서열식별번호: 127; 본원의 서열식별번호: 1526), HTMYYHHYQHHL (US9475845의 서열식별번호: 128; 본원의 서열식별번호: 1527), SEVGCRAGPLQWLCEKYFG (US9475845의 서열식별번호: 129; 본원의 서열식별번호: 1528), CGLLPVGRPDRNVWRWLC (US9475845의 서열식별번호: 130; 본원의 서열식별번호: 1529), CKGQCDRFKGLPWEC (US9475845의 서열식별번호: 131; 본원의 서열식별번호: 1530), SGRSA (US9475845의 서열식별번호: 132; 본원의 서열식별번호: 1531), WGFP (US9475845의 서열식별번호: 133; 본원의 서열식별번호: 1532), AEPMPHSLNFSQYLWYT (US9475845의 서열식별번호: 134; 본원의 서열식별번호: 1533), WAYXSP (US9475845의 서열식별번호: 135; 본원의 서열식별번호: 1534), IELLQAR (US9475845의 서열식별번호: 136; 본원의 서열식별번호: 1535), AYTKCSRQWRTCMTTH (US9475845의 서열식별번호: 137; 본원의 서열식별번호: 1536), PQNSKIPGPTFLDPH (US9475845의 서열식별번호: 138; 본원의 서열식별번호: 1537), SMEPALPDWWWKMFK (US9475845의 서열식별번호: 139; 본원의 서열식별번호: 1538), ANTPCGPYTHDCPVKR (US9475845의 서열식별번호: 140; 본원의 서열식별번호: 1539), TACHQHVRMVRP (US9475845의 서열식별번호: 141; 본원의 서열식별번호: 1540), VPWMEPAYQRFL (US9475845의 서열식별번호: 142; 본원의 서열식별번호: 1541), DPRATPGS (US9475845의 서열식별번호: 143; 본원의 서열식별번호: 1542), FRPNRAQDYNTN (US9475845의 서열식별번호: 144; 본원의 서열식별번호: 1543), CTKNSYLMC (US9475845의 서열식별번호: 145; 본원의 서열식별번호: 1544), CXXTXXXGXGC (US9475845의 서열식별번호: 146; 본원의 서열식별번호: 1545), CPIEDRPMC (US9475845의 서열식별번호: 147; 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특정 실시양태에서, AAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 공개 번호 US 20160369298에 기재된 바와 같은 서열, 예컨대 비제한적으로, AAV2의 부위-특이적 돌연변이된 캡시드 단백질 (US 20160369298의 서열식별번호: 97; 본원의 서열식별번호: 1560) 또는 그의 변이체일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있고, 여기서 특이적 부위는 VP1 또는 그의 단편의 부위 R447, G453, S578, N587, N587+1, S662로부터 선택된 적어도 1개의 부위이다.
추가로, US 20160369298에 기재된 돌연변이된 서열 중 임의의 것은, 비제한적으로, 하기 서열 SDSGASN (US20160369298의 서열식별번호: 1 및 서열식별번호: 231; 본원의 서열식별번호: 1561), SPSGASN (US20160369298의 서열식별번호: 2; 본원의 서열식별번호: 1562), SHSGASN (US20160369298의 서열식별번호: 3; 본원의 서열식별번호: 1563), SRSGASN (US20160369298의 서열식별번호: 4; 본원의 서열식별번호: 1564), SKSGASN (US20160369298의 서열식별번호: 5; 본원의 서열식별번호: 1565), SNSGASN (US20160369298의 서열식별번호: 6; 본원의 서열식별번호: 1566), SGSGASN (US20160369298의 서열식별번호: 7; 본원의 서열식별번호: 1567), SASGASN (US20160369298의 서열식별번호: 8, 175, 및 221; 본원의 서열식별번호: 1568), SESGTSN (US20160369298의 서열식별번호: 9; 본원의 서열식별번호: 1569), STTGGSN (US20160369298의 서열식별번호: 10; 본원의 서열식별번호: 1570), SSAGSTN (US20160369298의 서열식별번호: 11; 본원의 서열식별번호: 1571), NNDSQA (US20160369298의 서열식별번호: 12; 본원의 서열식별번호: 1572), NNRNQA (US20160369298의 서열식별번호: 13; 본원의 서열식별번호: 1573), NNNKQA (US20160369298의 서열식별번호: 14; 본원의 서열식별번호: 1574), NAKRQA (US20160369298의 서열식별번호: 15; 본원의 서열식별번호: 1575), NDEHQA (US20160369298의 서열식별번호: 16; 본원의 서열식별번호: 1576), NTSQKA (US20160369298의 서열식별번호: 17; 본원의 서열식별번호: 1577), YYLSRTNTPSGTDTQSRLVFSQAGA (US20160369298의 서열식별번호: 18; 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본원의 서열식별번호: 1659), SASGASNYNTPSGTTTQSRLQFSTSADNNNSEFSWPGATTYH (US20160369298의 서열식별번호: 109; 본원의 서열식별번호: 1660), SQSGASNFNSEGGSLTQSSLGFSTDGENNNSDFSWTGATKYH (US20160369298의 서열식별번호: 110; 본원의 서열식별번호: 1661), SASGASNYNTPSGSLTQSSLGFSTDGENNNSDFSWTGATKYH (US20160369298의 서열식별번호: 111; 본원의 서열식별번호: 1662), SQSGASNYNTPSGTTTQSRLQFSTSADNNNSDFSWTGATKYH (US20160369298의 서열식별번호: 112; 본원의 서열식별번호: 1663), SGAGASNFNSEGGSLTQSSLGFSTDGENNNSDFSWTGATKYH (US20160369298의 서열식별번호: 113; 본원의 서열식별번호: 1664), SGAGASN (US20160369298의 서열식별번호: 176; 본원의 서열식별번호: 1665), NSEGGSLTQSSLGFS (US20160369298의 서열식별번호: 177, 185, 193 및 202; 본원의 서열식별번호: 1666), TDGENNNSDFS (US20160369298의 서열식별번호: 178; 본원의 서열식별번호: 1667), SEFSWPGATT (US20160369298의 서열식별번호: 179; 본원의 서열식별번호: 1668), TSADNNNSDFSWT (US20160369298의 서열식별번호: 180; 본원의 서열식별번호: 1669), SQSGASNY (US20160369298의 서열식별번호: 181, 187, 및 198; 본원의 서열식별번호: 1670), NTPSGTTTQSRLQFS (US20160369298의 서열식별번호: 182, 188, 191, 및 199; 본원의 서열식별번호: 1671), TSADNNNSEYSWTGATKYH (US20160369298의 서열식별번호: 183; 본원의 서열식별번호: 1672), SASGASNF (US20160369298의 서열식별번호: 184; 본원의 서열식별번호: 1673), TDGENNNSDFSWTGATKYH (US20160369298의 서열식별번호: 186, 189, 194, 197, 및 203; 본원의 서열식별번호: 1674), SASGASNY (US20160369298의 서열식별번호: 190 및 서열식별번호: 195; 본원의 서열식별번호: 1675), TSADNNNSEFSWPGATTYH (US20160369298의 서열식별번호: 192; 본원의 서열식별번호: 1676), NTPSGSLTQSSLGFS (US20160369298의 서열식별번호: 196; 본원의 서열식별번호: 1677), TSADNNNSDFSWTGATKYH (US20160369298의 서열식별번호: 200; 본원의 서열식별번호: 1678), SGAGASNF (US20160369298의 서열식별번호: 201; 본원의 서열식별번호: 1679), CTCCAGVVSVVSMRSRVCVNSGCAGCTDHCVVSRNSGTCVMSACACAA (US20160369298의 서열식별번호: 204; 본원의 서열식별번호: 1680), CTCCAGAGAGGCAACAGACAAGCAGCTACCGCAGATGTCAACACACAA (US20160369298의 서열식별번호: 205; 본원의 서열식별번호: 1681), SAAGASN (US20160369298의 서열식별번호: 206; 본원의 서열식별번호: 1682), YFLSRTNTESGSTTQSTLRFSQAG (US20160369298의 서열식별번호: 207; 본원의 서열식별번호: 1683), SKTSADNNNSDFS (US20160369298의 서열식별번호: 208, 228, 및 253; 본원의 서열식별번호: 1684), KQGSEKTDVDIDKV (US20160369298의 서열식별번호: 210; 본원의 서열식별번호: 1685), STAGASN (US20160369298의 서열식별번호: 211; 본원의 서열식별번호: 1686), YFLSRTNTTSGIETQSTLRFSQAG (US20160369298의 서열식별번호: 212 및 서열식별번호: 247; 본원의 서열식별번호: 1687), SKTDGENNNSDFS (US20160369298의 서열식별번호: 213 및 서열식별번호: 248; 본원의 서열식별번호: 1688), KQGAAADDVEIDGV (US20160369298의 서열식별번호: 215 및 서열식별번호: 250; 본원의 서열식별번호: 1689), SEAGASN (US20160369298의 서열식별번호: 216; 본원의 서열식별번호: 1690), YYLSRTNTPSGTTTQSRLQFSQAG (US20160369298의 서열식별번호: 217, 232 및 242; 본원의 서열식별번호: 1691), SKTSADNNNSEYS (US20160369298의 서열식별번호: 218, 233, 238, 및 243; 본원의 서열식별번호: 1692), KQGSEKTNVDIEKV (US20160369298의 서열식별번호: 220, 225 및 245; 본원의 서열식별번호: 1693), YFLSRTNDASGSDTKSTLLFSQAG (US20160369298의 서열식별번호: 222; 본원의 서열식별번호: 1694), STTPSENNNSEYS (US20160369298의 서열식별번호: 223; 본원의 서열식별번호: 1695), SAAGATN (US20160369298의 서열식별번호: 226 및 서열식별번호: 251; 본원의 서열식별번호: 1696), YFLSRTNGEAGSATLSELRFSQAG (US20160369298의 서열식별번호: 227; 본원의 서열식별번호: 1697), HGDDADRF (US20160369298의 서열식별번호: 229 및 서열식별번호: 254; 본원의 서열식별번호: 1698), KQGAEKSDVEVDRV (US20160369298의 서열식별번호: 230 및 서열식별번호: 255; 본원의 서열식별번호: 1699), KQDSGGDNIDIDQV (US20160369298의 서열식별번호: 235; 본원의 서열식별번호: 1700), SDAGASN (US20160369298의 서열식별번호: 236; 본원의 서열식별번호: 1701), YFLSRTNTEGGHDTQSTLRFSQAG (US20160369298의 서열식별번호: 237; 본원의 서열식별번호: 1702), KEDGGGSDVAIDEV (US20160369298의 서열식별번호: 240; 본원의 서열식별번호: 1703), SNAGASN (US20160369298의 서열식별번호: 246; 본원의 서열식별번호: 1704), 및 YFLSRTNGEAGSATLSELRFSQPG (US20160369298의 서열식별번호: 252; 본원의 서열식별번호: 1705) 중 임의의 것일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다. 아미노산 돌연변이된 부위를 코딩할 수 있는 뉴클레오티드 서열의 비제한적 예는 하기 AGCVVMDCAGGARSCASCAAC (US20160369298의 서열식별번호: 97; 본원의 서열식별번호: 1706), AACRACRRSMRSMAGGCA (US20160369298의 서열식별번호: 98; 본원의 서열식별번호: 1707), CACRRGGACRRCRMSRRSARSTTT (US20160369298의 서열식별번호: 99; 본원의 서열식별번호: 1708), TATTTCTTGAGCAGAACAAACRVCVVSRSCGGAMNCVHSACGMHSTCAVVSCTTVDSTTTTCTCAGSBCRGSGCG (US20160369298의 서열식별번호: 100; 본원의 서열식별번호: 1709), TCAAMAMMAVNSRVCSRSAACAACAACAGTRASTTCTCGTGGMMAGGA (US20160369298의 서열식별번호: 101; 본원의 서열식별번호: 1710), AAGSAARRCRSCRVSRVARVCRATRYCGMSNHCRVMVRSGTC (US20160369298의 서열식별번호: 102; 본원의 서열식별번호: 1711), CAGVVSVVSMRSRVCVNSGCAGCTDHCVVSRNSGTCVMSACA (US20160369298의 서열식별번호: 103; 본원의 서열식별번호: 1712), AACTWCRVSVASMVSVHSDDTGTGSWSTKSACT (US20160369298의 서열식별번호: 104; 본원의 서열식별번호: 1713), TTGTTGAACATCACCACGTGACGCACGTTC (US20160369298의 서열식별번호: 256; 본원의 서열식별번호: 1714), TCCCCGTGGTTCTACTACATAATGTGGCCG (US20160369298의 서열식별번호: 257; 본원의 서열식별번호: 1715), TTCCACACTCCGTTTTGGATAATGTTGAAC (US20160369298의 서열식별번호: 258; 본원의 서열식별번호: 1716), AGGGACATCCCCAGCTCCATGCTGTGGTCG (US20160369298의 서열식별번호: 259; 본원의 서열식별번호: 1717), AGGGACAACCCCTCCGACTCGCCCTAATCC (US20160369298의 서열식별번호: 260; 본원의 서열식별번호: 1718), TCCTAGTAGAAGACACCCTCTCACTGCCCG (US20160369298의 서열식별번호: 261; 본원의 서열식별번호: 1719), AGTACCATGTACACCCACTCTCCCAGTGCC (US20160369298의 서열식별번호: 262; 본원의 서열식별번호: 1720), ATATGGACGTTCATGCTGATCACCATACCG (US20160369298의 서열식별번호: 263; 본원의 서열식별번호: 1721), AGCAGGAGCTCCTTGGCCTCAGCGTGCGAG (US20160369298의 서열식별번호: 264; 본원의 서열식별번호: 1722), ACAAGCAGCTTCACTATGACAACCACTGAC (US20160369298의 서열식별번호: 265; 본원의 서열식별번호: 1723), CAGCCTAGGAACTGGCTTCCTGGACCCTGTTACCGCCAGCAGAGAGTCTCAAMAMMAVNSRVCSRSAACAACAACAGTRASTTCTCCTGGMMAGGAGCTACCAAGTACCACCTCAATGGCAGAGACTCTCTGGTGAATCCCGGACCAGCTATGGCAAGCCACRRGGACRRCRMSRRSARSTTTTTTCCTCAGAGCGGGGTTCTCATCTTTGGGAAGSAARRCRSCRVSRVARVCRATRYCGMSNHCRVMVRSGTCATGATTACAGACGAAGAGGAGATCTGGAC (US20160369298의 서열식별번호: 266; 본원의 서열식별번호: 1724), TGGGACAATGGCGGTCGTCTCTCAGAGTTKTKKT (US20160369298의 서열식별번호: 267; 본원의 서열식별번호: 1725), AGAGGACCKKTCCTCGATGGTTCATGGTGGAGTTA (US20160369298의 서열식별번호: 268; 본원의 서열식별번호: 1726), CCACTTAGGGCCTGGTCGATACCGTTCGGTG (US20160369298의 서열식별번호: 269; 본원의 서열식별번호: 1727), 및 TCTCGCCCCAAGAGTAGAAACCCTTCSTTYYG (US20160369298의 서열식별번호: 270; 본원의 서열식별번호: 1728)를 포함한다.
일부 실시양태에서, AAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 국제 특허 공개 WO2016134375에 기재된 바와 같은 안구 세포 표적화 펩티드, 예컨대 비제한적으로 WO2016134375의 서열식별번호: 9, 및 서열식별번호: 10을 포함할 수 있다. 추가로, WO2016134375에 기재된 안구 세포 표적화 펩티드 또는 아미노산 중 임의의 것은 임의의 모 AAV 혈청형, 예컨대 비제한적으로, AAV2 (WO2016134375의 서열식별번호: 8; 본원의 서열식별번호: 1729), 또는 AAV9 (WO2016134375의 서열식별번호: 11; 본원의 서열식별번호: 1730) 내로 삽입될 수 있다. 일부 실시양태에서, 변형, 예컨대 삽입은 AAV2 단백질 내의 P34-A35, T138-A139, A139-P140, G453-T454, N587-R588, 및/또는 R588-Q589에서 이루어진다. 특정 실시양태에서, 삽입은 AAV9의 D384, G385, 1560, T561, N562, E563, E564, E565, N704, 및/또는 Y705에서 이루어진다. 안구 세포 표적화 펩티드는 하기 아미노산 서열 GSTPPPM (WO2016134375의 서열식별번호: 1; 본원의 서열식별번호: 1731), 또는 GETRAPL (WO2016134375의 서열식별번호: 4; 본원의 서열식별번호: 1732) 중 임의의 것일 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.
일부 실시양태에서, AAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 공개 US 20170145405에 기재된 바와 같이 변형될 수 있다. AAV 혈청형은 변형된 AAV2 (예를 들어, Y444F, Y500F, Y730F 및/또는 S662V에서의 변형), 변형된 AAV3 (예를 들어, Y705F, Y731F 및/또는 T492V에서의 변형), 및 변형된 AAV6 (예를 들어, S663V 및/또는 T492V에서의 변형)을 포함할 수 있다.
일부 실시양태에서, AAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 국제 공개 WO2017083722에 기재된 바와 같이 변형될 수 있다. AAV 혈청형은 AAV1 (Y705+731F+T492V), AAV2 (Y444+500+730F+T491V), AAV3 (Y705+731F), AAV5, AAV5 (Y436+693+719F), AAV6 (VP3 변이체 Y705F/Y731F/T492V), AAV8 (Y733F), AAV9, AAV9 (VP3 변이체 Y731F), 및 AAV10 (Y733F)을 포함할 수 있다.
일부 실시양태에서, AAV 혈청형은 그의 전문이 본원에 참조로 포함되는 국제 특허 공개 WO2017015102에 기재된 바와 같이 아미노산 SPAKFA (WO2017015102의 서열식별번호: 24; 본원의 서열식별번호: 1733) 또는 NKDKLN (WO2017015102의 서열식별번호: 2; 본원의 서열식별번호: 1734)을 포함하는 조작된 에피토프를 포함할 수 있다. 에피토프는 AAV8 (WO2017015102의 서열식별번호: 3)의 VP1 캡시드의 넘버링에 기초하여 아미노산 665 내지 670 영역 및/또는 AAV3B (서열식별번호: 3)의 잔기 664 내지 668에 삽입될 수 있다.
특정 실시양태에서, AAV 혈청형은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 국제 특허 공개 WO2017058892에 기재된 바와 같은 서열, 예컨대 비제한적으로, AAV1의 임의로 조합된 아미노산 잔기 262-268, 370-379, 451-459, 472-473, 493-500, 528-534, 547-552, 588-597, 709-710, 716-722, 또는 AAV2, AAV3, AAV4, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9, AAV10, AAV11, AAV12, AAVrh8, AAVrh10, AAVrh32.33, 소 AAV 또는 조류 AAV에서의 동등한 아미노산 잔기 중 1개 이상 (예를 들어, 2, 3, 4, 5, 6, 또는 7개)에서 치환을 포함할 수 있는 캡시드 단백질을 갖는 AAV 변이체일 수 있거나 또는 이를 가질 수 있다. 아미노산 치환은 WO2017058892에 기재된 아미노산 서열 중 임의의 것일 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다. 특정 실시양태에서, AAV는 AAV1 (WO2017058892의 서열식별번호: l)의 임의로 조합된 잔기 256L, 258K, 259Q, 261S, 263A, 264S, 265T, 266G, 272H, 385S, 386Q, S472R, V473D, N500E 547S, 709A, 710N, 716D, 717N, 718N, 720L, A456T, Q457T, N458Q, K459S, T492S, K493A, S586R, S587G, S588N, T589R 및/또는 722T, AAV5 (WO2017058892의 서열식별번호: 5)의 임의로 조합된 244N, 246Q, 248R, 249E, 250I, 251K, 252S, 253G, 254S, 255V, 256D, 263Y, 377E, 378N, 453L, 456R, 532Q, 533P, 535N, 536P, 537G, 538T, 539T, 540A, 541T, 542Y, 543L, 546N, 653V, 654P, 656S, 697Q, 698F, 704D, 705S, 706T, 707G, 708E, 709Y 및/또는 710R, AAV5 (WO2017058892의 서열식별번호: 5)의 임의로 조합된 248R, 316V, 317Q, 318D, 319S, 443N, 530N, 531S, 532Q 533P, 534A, 535N, 540A, 541 T, 542Y, 543L, 545G, 546N, 697Q, 704D, 706T, 708E, 709Y 및/또는 710R, AAV6 (서열식별번호: 6 WO2017058892)의 임의로 조합된 264S, 266G, 269N, 272H, 457Q, 588S 및/또는 589I, AAV8 (서열식별번호: 8 WO2017058892)의 임의로 조합된 457T, 459N, 496G, 499N, 500N, 589Q, 590N 및/또는 592A, AAV9 (서열식별번호: 9 WO2017058892)의 임의로 조합된 451I, 452N, 453G, 454S, 455G, 456Q, 457N 및/또는 458Q에서의 아미노산 치환을 포함할 수 있다.
일부 실시양태에서, AAV는 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 국제 공개 번호 WO 2017066764에 기재된 바와 같은 VP1의 위치 155, 156 및 157 또는 VP2의 위치 17, 18, 19 및 20에서의 아미노산의 서열을 포함할 수 있다. 아미노산의 서열은 비제한적으로 N-S-S, S-X-S, S-S-Y, N-X-S, N-S-Y, S-X-Y 및 N-X-Y일 수 있고, 여기서 N, X 및 Y는 비제한적으로 독립적으로 비-세린, 또는 비-트레오닌 아미노산이고, AAV는 비제한적으로 AAV1, AAV2, AAV3, AAV4, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9, AAV10, AAV11 및 AAV12일 수 있다. 일부 실시양태에서, AAV는 VP1의 위치 156, 157 또는 158 또는 VP2의 위치 19, 20 또는 21에서 적어도 1개 아미노산의 결실을 포함할 수 있고, 여기서 AAV는 비제한적으로 AAV1, AAV2, AAV3, AAV4, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9, AAV10, AAV11 및 AAV12일 수 있다.
특정 실시양태에서, AAV 혈청형은 문헌 [Jackson et al. (Frontiers in Molecular Neuroscience 9:154 (2016))]에 기재된 것과 같을 수 있으며, 그의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다. 일부 실시양태에서, AAV 혈청형은 PHP.B 또는 AAV9이다. 일부 실시양태에서, AAV 혈청형은, 보다 편재성인 프로모터를 사용하는 경우와 비교하여 (즉, CBA 또는 CMV) 뉴런 형질도입을 증진시키기 위해 시냅신 프로모터와 쌍형성된다.
특정 실시양태에서, AAV는, 각각의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 문헌 [Deverman et al., (Nature Biotechnology 34(2):204-209 (2016)), Chan et al., (Nature Neuroscience 20(8):1172-1179 (2017))], 및 국제 특허 출원 공개 번호 WO2015038958 및 WO2017100671에 기재된 바와 같이, Cre-재조합-기반 AAV 표적화 진화 (CREATE)에 의해 혈청형 생성될 수 있다. 특정 실시양태에서, 이러한 방식으로 생성된 AAV 혈청형은 다른 AAV 혈청형과 비교하여 개선된 CNS 형질도입 및/또는 뉴런 및 성상세포 향성을 갖는다. 비제한적 예로서, AAV 혈청형은 비제한적으로 PHP.B, PHP.B2, PHP.B3, PHP.A, PHP.S, PHP.N, G2A12, G2A15, G2A3, G2B4, 및 G2B5와 같은 표적화 펩티드를 포함할 수 있다.
특정 실시양태에서, AAV 혈청형은 문헌 [Jackson et al. (Frontiers in Molecular Neuroscience 9:154 (2016))]에 기재된 것과 같을 수 있으며, 그의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
일부 실시양태에서, AAV 혈청형은 PHP.B이다. 일부 실시양태에서, AAV 혈청형은, 보다 편재성인 프로모터를 사용하는 경우와 비교하여 (즉, CBA 또는 CMV) 뉴런 형질도입을 증진시키기 위해 시냅신 프로모터와 쌍형성된다.
일부 실시양태에서, AAV 혈청형은 PHP.N이다. 특정 실시양태에서, AAV 혈청형은 AAVPHP.N (PHP.N) 펩티드, 또는 그의 변이체를 포함하는 혈청형이다. 특정 실시양태에서, AAV 혈청형은 AAVPHP.B (PHP.B) 펩티드, 또는 그의 변이체를 포함하는 혈청형이다. 특정 실시양태에서, AAV 혈청형은 AAVPHP.A (PHP.A) 펩티드, 또는 그의 변이체를 포함하는 혈청형이다. 특정 실시양태에서, AAV 혈청형은 PHP.S 펩티드, 또는 그의 변이체를 포함하는 혈청형이다. 특정 실시양태에서, AAV 혈청형은 PHP.B2 펩티드, 또는 그의 변이체를 포함하는 혈청형이다. 특정 실시양태에서, AAV 혈청형은 PHP.B3 펩티드, 또는 그의 변이체를 포함하는 혈청형이다. 특정 실시양태에서, AAV 혈청형은 G2B4 펩티드, 또는 그의 변이체를 포함하는 혈청형이다. 특정 실시양태에서, AAV 혈청형은 G2B5 펩티드, 또는 그의 변이체를 포함하는 혈청형이다. 특정 실시양태에서, AAV 캡시드는 정맥내 투여 후 혈액 뇌 장벽 투과를 가능하게 하는 것이다.
특정 실시양태에서, AAV 혈청형은 상기 기재된 것 중 임의의 것에 대해 50%, 51%, 52%, 53%, 54%, 55%, 56%, 57%, 58%, 59%, 60%, 61%, 62%, 63%, 64%, 65%, 66%, 67%, 68%, 69%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 100% 동일성을 갖는 캡시드 아미노산 서열을 포함할 수 있다.
특정 실시양태에서, AAV 혈청형은 상기 기재된 것 중 임의의 것에 대해 50%, 51%, 52%, 53%, 54%, 55%, 56%, 57%, 58%, 59%, 60%, 61%, 62%, 63%, 64%, 65%, 66%, 67%, 68%, 69%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 100% 동일성을 갖는 캡시드 핵산 서열을 포함할 수 있다.
특정 실시양태에서, AAV VP1 캡시드 단백질의 번역을 위한 개시 코돈은, 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 번호 US8163543에 기재된 바와 같이, CTG, TTG, 또는 GTG일 수 있다.
본 개시내용은 캡시드 (Cap) 유전자에 의해 코딩된 구조 캡시드 단백질 (VP1, VP2 및 VP3 포함)을 언급한다. 이들 캡시드 단백질은 바이러스 벡터 예컨대 AAV의 외부 단백질 구조 쉘 (즉 캡시드)을 형성한다. Cap 폴리뉴클레오티드로부터 합성된 VP 캡시드 단백질은 일반적으로 펩티드 서열에서 제1 아미노산으로서 메티오닌을 포함하며 (Met1), 이는 상응하는 Cap 뉴클레오티드 서열에서 개시 코돈 (AUG 또는 ATG)과 연관된다. 그러나, 제1-메티오닌 (Met1) 잔기 또는 일반적으로 임의의 제1 아미노산 (AA1)은 폴리펩티드 합성 후에 또는 그 동안 단백질 프로세싱 효소, 예컨대 Met-아미노펩티다제에 의해 절단되는 것이 통상적이다. 이러한 "Met/AA-클리핑" 과정은 종종 폴리펩티드 서열 내의 제2 아미노산 (예를 들어, 알라닌, 발린, 세린, 트레오닌 등)의 상응하는 아세틸화와 상관된다. Met-클리핑은 통상적으로 VP1 및 VP3 캡시드 단백질에서 발생하지만, 또한 VP2 캡시드 단백질에서도 발생할 수 있다.
Met/AA-클리핑이 불완전한 경우에, 바이러스 캡시드를 포함하는 1개 이상 (1, 2 또는 3개)의 VP 캡시드 단백질의 혼합물이 생산될 수 있고, 그 중 일부는 Met1/AA1 아미노산 (Met+/AA+)을 포함할 수 있고, 그 중 일부는 Met/AA-클리핑의 결과로서 Met1/AA1 아미노산이 결여될 수 있다 (Met-/AA-). 캡시드 단백질에서의 Met/AA-클리핑에 관한 추가의 논의에 대해서는, 문헌 [Jin, et al. Direct Liquid Chromatography/Mass Spectrometry Analysis for Complete Characterization of Recombinant Adeno-Associated Virus Capsid Proteins. Hum Gene Ther Methods. 2017 Oct. 28(5):255-267; Hwang, et al. N-Terminal Acetylation of Cellular Proteins Creates Specific Degradation Signals. Science. 2010 February 19. 327(5968): 973-977]을 참조하고; 그의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
본 발명에 따르면, 캡시드 단백질에 대한 언급은 클리핑된 것 (Met-/AA-) 또는 비클리핑된 것 (Met+/AA+)으로 제한되지 않고, 문맥상 본 개시내용의 캡시드 단백질을 코딩하거나, 설명하거나, 생산하거나 또는 발생시키는 독립적인 캡시드 단백질, 캡시드 단백질의 혼합물로 구성된 바이러스 캡시드, 및/또는 폴리뉴클레오티드 서열 (또는 그의 단편)을 지칭할 수 있다. "캡시드 단백질" 또는 "캡시드 폴리펩티드" (예컨대 VP1, VP2 또는 VP2)에 대한 직접 언급은 또한 Met1/AA1 아미노산을 포함하는 VP 캡시드 단백질 (Met+/AA+) 뿐만 아니라 Met/AA-클리핑의 결과로서 Met1/AA1 아미노산이 결여된 상응하는 VP 캡시드 단백질 (Met-/AA-)을 포함할 수 있다.
추가로, 본 개시내용에 따르면, Met1/AA1 아미노산을 포함하는 (Met+/AA+) 1개 이상의 캡시드 단백질을 각각 포함하거나 코딩하는 특정 서열식별번호 (단백질 또는 핵산)에 대한 언급은, 서열의 검토 시 단지 (Met1/AA1에 관계 없이) 첫번째로 열거된 아미노산이 결여된 임의의 서열임이 용이하게 명백하기 때문에, Met1/AA1 아미노산이 결여된 VP 캡시드 단백질을 교시하는 것임이 이해되어야 한다.
특정 실시양태에서, 736개 아미노산 길이이고 AUG/ATG 개시 코돈에 의해 코딩된 "Met1" 아미노산을 포함하는 (Met+) VP1 폴리펩티드 서열에 대한 언급은 735개 아미노산 길이이고 736개 아미노산 Met+ 서열의 "Met1" 아미노산을 포함하지 않는 (Met-) VP1 폴리펩티드 서열을 교시하는 것으로 이해될 수 있다. 제2의 비제한적 예로서, 736개 아미노산 길이이고 임의의 NNN 개시 코돈에 의해 코딩된 "AA1" 아미노산을 포함하는 (AA1+) VP1 폴리펩티드 서열에 대한 언급은 735개 아미노산 길이이고 736개 아미노산 AA1+ 서열의 "AA1" 아미노산을 포함하지 않는 (AA1-) VP1 폴리펩티드 서열을 교시하는 것으로 또한 이해될 수 있다.
VP 캡시드 단백질로부터 형성된 바이러스 캡시드에 대한 언급 (예컨대 특정 AAV 캡시드 혈청형에 대한 언급)은 Met1/AA1 아미노산을 포함하는 (Met+/AA1+) VP 캡시드 단백질, Met/AA1-클리핑의 결과로서 Met1/AA1 아미노산이 결여된 (Met-/AA1-) 상응하는 VP 캡시드 단백질, 및 그의 조합 (Met+/AA1+ 및 Met-/AA1-)을 포괄할 수 있다.
특정 실시양태에서, AAV 캡시드 혈청형은 VP1 (Met+/AA1+), VP1 (Met-/AA1-), 또는 VP1 (Met+/AA1+) 및 VP1 (Met-/AA1-)의 조합을 포함할 수 있다. AAV 캡시드 혈청형은 또한 VP3 (Met+/AA1+), VP3 (Met-/AA1-), 또는 VP3 (Met+/AA1+) 및 VP3 (Met-/AA1-)의 조합을 포함할 수 있고; 또한 VP2 (Met+/AA1) 및 VP2 (Met-/AA1-)의 유사한 임의적인 조합을 포함할 수 있다.
바이러스 게놈 성분: 역전된 말단 반복부 (ITR)
본 개시내용의 AAV 입자는 적어도 1개의 ITR 영역 및 페이로드 영역을 갖는 바이러스 게놈을 포함한다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 ITR을 갖는다. 이들 2개의 ITR은 5' 및 3' 단부에서 페이로드 영역에 플랭킹된다. ITR은 복제를 위한 인식 부위를 포함하는 복제 기점으로서 기능한다. ITR은 상보적이고 대칭적으로 배열될 수 있는 서열 영역을 포함한다. 개시내용의 바이러스 게놈 내로 혼입된 ITR은 자연 발생 폴리뉴클레오티드 서열 또는 재조합적으로 유래된 폴리뉴클레오티드 서열로 구성될 수 있다.
ITR은 표 1에 열거된 혈청형 중 임의의 것 또는 그의 유도체로부터 선택된 캡시드와 동일한 혈청형으로부터 유래될 수 있다. ITR은 캡시드와 상이한 혈청형일 수 있다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 1개 초과의 ITR을 갖는다. 비제한적 예에서, AAV 입자는 2개의 ITR을 포함하는 바이러스 게놈을 갖는다. 특정 실시양태에서, ITR은 서로 동일한 혈청형을 갖는다. 또 다른 실시양태에서, ITR은 상이한 혈청형을 갖는다. 비제한적 예는 캡시드와 동일한 혈청형을 갖는 0, 1개 또는 둘 다의 ITR을 포함한다. 특정 실시양태에서, AAV 입자의 바이러스 게놈의 둘 다의 ITR은 AAV2 ITR이다.
독립적으로, 각각의 ITR은 약 100 내지 약 150개 뉴클레오티드 길이일 수 있다. ITR은 약 100-105개 뉴클레오티드 길이, 106-110개 뉴클레오티드 길이, 111-115개 뉴클레오티드 길이, 116-120개 뉴클레오티드 길이, 121-125개 뉴클레오티드 길이, 126-130개 뉴클레오티드 길이, 131-135개 뉴클레오티드 길이, 136-140개 뉴클레오티드 길이, 141-145개 뉴클레오티드 길이 또는 146-150개 뉴클레오티드 길이일 수 있다. 특정 실시양태에서, ITR은 140-142개 뉴클레오티드 길이이다. ITR 길이의 비제한적 예는 102, 130, 140, 141, 142, 145개 뉴클레오티드 길이, 및 그에 대해 적어도 95% 동일성을 갖는 것이다.
바이러스 게놈 성분: 프로모터
특정 실시양태에서, 바이러스 게놈의 페이로드 영역은 트랜스진 표적 특이성 및 발현을 증진시키기 위한 적어도 하나의 요소를 포함한다 (예를 들어 문헌 [Powell et al. Viral Expression Cassette Elements to Enhance Transgene Target Specificity and Expression in Gene Therapy, 2015] 참조; 그의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함됨). 트랜스진 표적 특이성 및 발현을 증진시키기 위한 요소의 비제한적 예는 프로모터, 내인성 miRNA, 전사-후 조절 요소 (PRE), 폴리아데닐화 (폴리A) 신호 서열 및 상류 인핸서 (USE), CMV 인핸서 및 인트론을 포함한다.
관련 기술분야의 통상의 기술자는 표적 세포에서의 개시내용의 폴리펩티드의 발현이 종 특이적, 유도성, 조직-특이적, 또는 세포 주기-특이적인 프로모터를 포함하나 이에 제한되지는 않는 특이적 프로모터를 필요로 할 수 있다는 것을 인식할 수 있다 (Parr et al., Nat. Med.3:1145-9 (1997); 그의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함됨).
특정 실시양태에서, 프로모터는 AAV 입자의 바이러스 게놈의 페이로드 영역에 코딩된 폴리펩티드(들)의 발현을 구동할 때 효율적인 것으로 간주된다. 특정 실시양태에서, 폴리펩티드는 AADC이다.
특정 실시양태에서, 프로모터는 표적화된 세포에서 발현을 구동할 때 효율적인 것으로 간주되는 프로모터이다.
특정 실시양태에서, 프로모터는 표적화된 세포에 대해 향성을 갖는 프로모터이다.
특정 실시양태에서, 프로모터는 표적화된 조직에서 소정 기간 동안 페이로드의 발현을 구동한다. 프로모터에 의해 구동되는 발현은 1시간, 2시간, 3시간, 4시간, 5시간, 6시간, 7시간, 8시간, 9시간, 10시간, 11시간, 12시간, 13시간, 14시간, 15시간, 16시간, 17시간, 18시간, 19시간, 20시간, 21시간, 22시간, 23시간, 1일, 2일, 3일, 4일, 5일, 6일, 1주, 8일, 9일, 10일, 11일, 12일, 13일, 2주, 15일, 16일, 17일, 18일, 19일, 20일, 3주, 22일, 23일, 24일, 25일, 26일, 27일, 28일, 29일, 30일, 31일, 1개월, 2개월, 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월, 1년, 13개월, 14개월, 15개월, 16개월, 17개월, 18개월, 19개월, 20개월, 21개월, 22개월, 23개월, 2년, 3년, 4년, 5년, 6년, 7년, 8년, 9년, 10년 또는 10년 초과의 기간 동안일 수 있다. 발현은 1-5시간, 1-12시간, 1-2일, 1-5일, 1-2주, 1-3주, 1-4주, 1-2개월, 1-4개월, 1-6개월, 2-6개월, 3-6개월, 3-9개월, 4-8개월, 6-12개월, 1-2년, 1-5년, 2-5년, 3-6년, 3-8년, 4-8년 또는 5-10년 동안일 수 있다. 특정 실시양태에서, 프로모터는 신경 조직에서의 페이로드의 지속 발현을 위한 약한 프로모터이다.
특정 실시양태에서, 프로모터는 적어도 1개월, 2개월, 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월, 1년, 2년, 3년 4년, 5년, 6년, 7년, 8년, 9년, 10년, 11년, 12년, 13년, 14년, 15년, 16년, 17년, 18년, 19년, 20년, 21년, 22년, 23년, 24년, 25년, 26년, 27년, 28년, 29년, 30년, 31년, 32년, 33년, 34년, 35년, 36년, 37년, 38년, 39년, 40년, 41년, 42년, 43년, 44년, 45년, 46년, 47년, 48년, 49년, 50년, 55년, 60년, 65년, 또는 65년 초과 동안 개시내용의 폴리펩티드의 발현을 구동한다.
프로모터는 자연 발생 또는 비-자연 발생일 수 있다. 프로모터의 비제한적 예는 바이러스 프로모터, 식물 프로모터 및 포유동물 프로모터를 포함한다. 일부 실시양태에서, 프로모터는 인간 프로모터일 수 있다. 일부 실시양태에서, 프로모터는 말단절단될 수 있다.
대부분의 조직에서 발현을 구동 또는 촉진하는 프로모터는 인간 신장 인자 1α-서브유닛 (EF1α), 시토메갈로바이러스 (CMV) 극초기 인핸서 및/또는 프로모터, 닭 β-액틴 (CBA) 및 그의 유도체 CAG, β 글루쿠로니다제 (GUSB) 또는 유비퀴틴 C (UBC)를 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 조직-특이적 발현 요소, 예컨대 비제한적으로 근육 특이적 프로모터, B 세포 프로모터, 단핵구 프로모터, 백혈구 프로모터, 대식세포 프로모터, 췌장 선방 세포 프로모터, 내피 세포 프로모터, 폐 조직 프로모터, 성상세포 프로모터, 또는 뉴런, 성상세포, 또는 핍지교세포로의 발현을 제한하는데 사용될 수 있는 신경계 프로모터는 특정 세포 유형으로 발현을 제한하는데 사용될 수 있다.
근육-특이적 프로모터의 비제한적 예는 포유동물 근육 크레아틴 키나제 (MCK) 프로모터, 포유동물 데스민 (DES) 프로모터, 포유동물 트로포닌 I (TNNI2) 프로모터, 및 포유동물 골격 알파-액틴 (ASKA) 프로모터를 포함한다 (예를 들어 미국 특허 공개 US 20110212529 참조, 그의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함됨).
뉴런에 대한 조직-특이적 발현 요소의 비제한적 예는 뉴런-특이적 엔올라제 (NSE), 혈소판-유래 성장 인자 (PDGF), 혈소판-유래 성장 인자 B-쇄 (PDGF-β), 시냅신 (Syn), 메틸-CpG 결합 단백질 2 (MeCP2), Ca2+/칼모듈린-의존성 단백질 키나제 II (CaMKII), 대사성 글루타메이트 수용체 2 (mGluR2), 신경필라멘트 경쇄 (NFL) 또는 중쇄 (NFH), β-글로빈 미니진 nβ2, 프리프로엔케팔린 (PPE), 엔케팔린 (Enk) 및 흥분성 아미노산 수송체 2 (EAAT2) 프로모터를 포함한다. 성상세포에 대한 조직-특이적 발현 요소의 비제한적 예는 신경교세포 원섬유성 산성 단백질 (GFAP) 및 EAAT2 프로모터를 포함한다. 핍지교세포에 대한 조직-특이적 발현 요소의 비제한적 예는 미엘린 염기성 단백질 (MBP) 프로모터를 포함한다.
특정 실시양태에서, 프로모터는 1 kb 미만일 수 있다. 프로모터는 200, 210, 220, 230, 240, 250, 260, 270, 280, 290, 300, 310, 320, 330, 340, 350, 360, 370, 380, 390, 400, 410, 420, 430, 440, 450, 460, 470, 480, 490, 500, 510, 520, 530, 540, 550, 560, 570, 580, 590, 600, 610, 620, 630, 640, 650, 660, 670, 680, 690, 700, 710, 720, 730, 740, 750, 760, 770, 780, 790, 800 또는 800 초과의 뉴클레오티드 길이를 가질 수 있다. 프로모터는 200-300, 200-400, 200-500, 200-600, 200-700, 200-800, 300-400, 300-500, 300-600, 300-700, 300-800, 400-500, 400-600, 400-700, 400-800, 500-600, 500-700, 500-800, 600-700, 600-800 또는 700-800의 길이를 가질 수 있다.
특정 실시양태에서, 프로모터는 동일하거나 상이한 출발 또는 모 프로모터, 예컨대 비제한적으로 CMV 및 CBA의 2종 이상의 성분의 조합일 수 있다. 각각의 성분은 200, 210, 220, 230, 240, 250, 260, 270, 280, 290, 300, 310, 320, 330, 340, 350, 360, 370, 380, 381, 382, 383, 384, 385, 386, 387, 388, 389, 390, 400, 410, 420, 430, 440, 450, 460, 470, 480, 490, 500, 510, 520, 530, 540, 550, 560, 570, 580, 590, 600, 610, 620, 630, 640, 650, 660, 670, 680, 690, 700, 710, 720, 730, 740, 750, 760, 770, 780, 790, 800 또는 800 초과의 길이를 가질 수 있다. 각각의 성분은 200-300, 200-400, 200-500, 200-600, 200-700, 200-800, 300-400, 300-500, 300-600, 300-700, 300-800, 400-500, 400-600, 400-700, 400-800, 500-600, 500-700, 500-800, 600-700, 600-800 또는 700-800의 길이를 가질 수 있다. 특정 실시양태에서, 프로모터는 382개 뉴클레오티드 CMV-인핸서 서열 및 260개 뉴클레오티드 CBA-프로모터 서열의 조합이다.
특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 편재된 프로모터를 포함한다. 편재된 프로모터의 비제한적 예는 CMV, CBA (유도체 CAG, CBh 등 포함), EF-1α, PGK, UBC, GUSB (hGBp), 및 UCOE (HNRPA2B1-CBX3의 프로모터)를 포함한다.
유(Yu) 등은 (Molecular Pain 2011, 7:63; 그의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함됨) 래트 DRG 세포 및 1차 DRG 세포에서의 CAG, EFIα, PGK 및 UBC 프로모터 하의 eGFP의 발현을 렌티바이러스 벡터를 사용하여 평가하였고, UBC가 다른 3개의 프로모터보다 더 약한 발현을 나타내고, 단지 10-12%의 신경교 발현이 모든 프로모터에 대해 관찰된다는 것을 발견하였다. 소데르블룸(Soderblom) 등은 (E. Neuro 2015; 그의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함됨) 운동 피질에의 주사 후 AAV8에서 CMV 및 UBC 프로모터를 사용하여, 및 AAV2에서 CMV 프로모터를 사용하여 eGFP의 발현을 평가하였다. UBC 또는 EFIα 프로모터를 함유하는 플라스미드의 비강내 투여는 CMV 프로모터에 의한 발현을 초과하는 지속적인 기도 발현을 나타내었다 (예를 들어, 문헌 [Gill et al., Gene Therapy 2001, Vol. 8, 1539-1546] 참조; 그의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함됨). 후사인(Husain) 등은 (Gene Therapy 2009; 그의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함됨)은 HβH 구축물을 hGUSB 프로모터, HSV-1LAT 프로모터 및 NSE 프로모터를 사용하여 평가하였고, HβH 구축물이 마우스 뇌에서 NSE보다 더 약한 발현을 나타낸다는 것을 발견하였다. 파시니(Passini) 및 불페(Wolfe)는 (J. Virol. 2001, 12382-12392, 그의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함됨) 신생 마우스에서 뇌실내 주사 후 HβH 벡터의 장기간 효과를 평가하였고, 적어도 1년 동안 지속적인 발현이 존재한다는 것을 발견하였다. 수(Xu) 등은 (Gene Therapy 2001, 8, 1323-1332; 그의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함됨) NFL 및 NFH 프로모터가 사용된 경우, CMV-lacZ, CMV-luc, EF, GFAP, hENK, nAChR, PPE, PPE + wpre, NSE (0.3 kb), NSE (1.8 kb) 및 NSE (1.8 kb + wpre)와 비교하여 모든 뇌 영역에서 낮은 발현을 발견하였다. 수 등은 프로모터 활성이 내림차순으로 NSE (1.8 kb), EF, NSE (0.3 kb), GFAP, CMV, hENK, PPE, NFL 및 NFH라는 것을 발견하였다. NFL은 650개 뉴클레오티드 프로모터이고, NFH는 920개 뉴클레오티드 프로모터이며, 둘 다 간에 존재하지 않지만, NFH는 감각 고유수용성 뉴런, 뇌 및 척수에서 풍부하고 NFH는 심장에 존재한다. SCN8A는 해마 뉴런 및 소뇌 푸르킨예 세포, 피질, 시상 및 시상하부에서 관찰되는 특히 높은 발현을 갖는 DRG, 척수 및 뇌 전반에 걸쳐 발현되는 470개 뉴클레오티드 프로모터이다 (예를 들어, 문헌 [Drews et al. Identification of evolutionary conserved, functional noncoding elements in the promoter region of the sodium channel gene SCN8A, Mamm Genome (2007) 18:723-731; 및 Raymond et al. Expression of Alternatively Spliced Sodium Channel α-subunit genes, Journal of Biological Chemistry (2004) 279(44) 46234-46241] 참조; 이들 각각의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함됨).
상기 언급된 유, 소데르블룸, 길, 후사인, 파시니, 수, 드류스(Drews) 또는 레이몬드(Raymond)에 의해 교시된 프로모터 중 임의의 것이 본 개시내용에 사용될 수 있다.
특정 실시양태에서, 프로모터는 세포 특이적이지 않다.
특정 실시양태에서, 프로모터는 유비퀴틴 c (UBC) 프로모터이다. UBC 프로모터는 300-350개 뉴클레오티드의 크기를 가질 수 있다. 특정 실시양태에서, UBC 프로모터는 332개의 뉴클레오티드이다.
특정 실시양태에서, 프로모터는 β-글루쿠로니다제 (GUSB) 프로모터이다. GUSB 프로모터는 350-400개 뉴클레오티드의 크기를 가질 수 있다. 특정 실시양태에서, GUSB 프로모터는 378개 뉴클레오티드이다.
특정 실시양태에서, 프로모터는 신경필라멘트 경쇄 (NFL) 프로모터이다. NFL 프로모터는 600-700개 뉴클레오티드의 크기를 가질 수 있다. 특정 실시양태에서, NFL 프로모터는 650개 뉴클레오티드이다.
특정 실시양태에서, 프로모터는 신경필라멘트 중쇄 (NFH) 프로모터이다. NFH 프로모터는 900-950개 뉴클레오티드의 크기를 가질 수 있다. 특정 실시양태에서, NFH 프로모터는 920개 뉴클레오티드이다.
특정 실시양태에서, 프로모터는 SCN8A 프로모터이다. SCN8A 프로모터는 450-500개 뉴클레오티드의 크기를 가질 수 있다. 특정 실시양태에서, SCN8A 프로모터는 470개 뉴클레오티드이다.
특정 실시양태에서, 프로모터는 프라탁신 (FXN) 프로모터이다. FXN 프로모터는 또한 FRDA 프로모터로 지칭될 수 있다.
특정 실시양태에서, 프로모터는 포스포글리세레이트 키나제 1 (PGK) 프로모터이다.
특정 실시양태에서, 프로모터는 닭 β-액틴 (CBA) 프로모터이다.
특정 실시양태에서, 프로모터는 시토메갈로바이러스 (CMV) 프로모터이다.
특정 실시양태에서, 프로모터는 H1 프로모터이다.
특정 실시양태에서, 프로모터는 조작된 프로모터이다.
특정 실시양태에서, 프로모터는 간 또는 골격근 프로모터이다. 간 프로모터의 비제한적 예는 인간 α-1-항트립신 (hAAT) 및 티록신 결합 글로불린 (TBG)을 포함한다. 골격근 프로모터의 비제한적 예는 데스민, MCK 또는 합성 C5-12를 포함한다.
특정 실시양태에서, 프로모터는 RNA pol III 프로모터이다. 특정 실시양태에서, RNA pol III 프로모터는 U6이다. 특정 실시양태에서, RNA pol III 프로모터는 H1이다.
특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 프로모터를 포함한다. 특정 실시양태에서, 프로모터는 EF1α 프로모터 및 CMV 프로모터이다.
특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 인핸서 요소, 프로모터 및/또는 5'UTR 인트론을 포함한다. 본원에서 "인핸서"로도 지칭되는 인핸서 요소는 CMV 인핸서일 수 있으나 이에 제한되지 않고, 프로모터는 CMV, CBA, UBC, GUSB, NSE, 시냅신, MeCP2, 및 GFAP 프로모터일 수 있으나 이에 제한되지 않고, 5'UTR/인트론은 SV40, 및 CBA-MVM일 수 있으나 이에 제한되지는 않는다. 특정 실시양태에서, 조합되어 사용되는 인핸서, 프로모터 및/또는 인트론은 (1) CMV 인핸서, CMV 프로모터, SV40 5'UTR 인트론; (2) CMV 인핸서, CBA 프로모터, SV 40 5'UTR 인트론; (3) CMV 인핸서, CBA 프로모터, CBA-MVM 5'UTR 인트론; (4) UBC 프로모터; (5) GUSB 프로모터; (6) NSE 프로모터; (7) 시냅신 프로모터; (8) MeCP2 프로모터 및 (9) GFAP 프로모터일 수 있다.
특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 조작된 프로모터를 포함한다.
또 다른 실시양태에서, 바이러스 게놈은 자연 발현된 단백질로부터의 프로모터를 포함한다.
특정 실시양태에서, 프로모터에 의한 페이로드의 발현을 허용하기 위해 영역은 페이로드의 제1 엑손의 대략 ~5 kb 상류에 위치한다. (예를 들어, [Puspasari et al. Long Range Regulation of Human FXN Gene Expression, PLOS ONE, 2011] 참조; 그의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함됨; FRDA 프로모터에 의한 발현을 허용하기 위해, 프라탁신 유전자의 제1 엑손의 대략 4.9 kb 상류에 17 bp 영역이 위치함).
특정 실시양태에서, 벡터 게놈은 프로모터, 예컨대 비제한적으로 CMV 또는 U6을 포함할 수 있다. 특정 실시양태에서, 본 개시내용의 페이로드를 포함하는 AAV 입자에 대한 프로모터는 CMV 프로모터이다. 특정 실시양태에서, 본 개시내용의 페이로드를 포함하는 AAV 입자에 대한 프로모터는 U6 프로모터이다.
특정 실시양태에서, 벡터 게놈은 CMV 및 U6 프로모터를 포함할 수 있다.
특정 실시양태에서, 벡터 게놈은 CBA 프로모터를 포함할 수 있다.
바이러스 게놈 성분: 비번역 영역 (UTR)
정의에 의하면, 유전자의 야생형 비번역 영역 (UTR)은 전사되지만 번역되지는 않는다. 일반적으로, 5' UTR은 전사 개시 부위에서 개시되고 출발 코돈에서 종결되며, 3' UTR은 정지 코돈 바로 다음에 개시되고 전사에 대한 종결 신호까지 계속된다.
특이적 표적 기관의 풍부하게 발현된 유전자에서 전형적으로 발견되는 특색은 안정성 및 단백질 생산을 증진시키기 위해 UTR 내로 조작될 수 있다. 특정 실시양태에서, 간에서 정상적으로 발현되는 mRNA (예를 들어, 알부민, 혈청 아밀로이드 A, 아포지단백질 A/B/E, 트랜스페린, 알파 태아단백질, 에리트로포이에틴, 또는 인자 VIII)로부터의 5' UTR이 개시내용의 AAV 입자의 바이러스 게놈에서 사용되어 간 세포주 또는 간에서의 발현을 증진시킬 수 있다.
이론에 얽매이는 것을 원하지는 않지만, 야생형 5' 비번역 영역 (UTR)은 번역 개시에서 소정의 역할을 하는 특색을 포함한다. 리보솜이 많은 유전자의 번역을 개시하는 과정에 수반되는 것으로 통상적으로 공지된 코작 서열은 통상적으로 5' UTR에 포함된다. 코작 서열은 컨센서스 CCR(A/G)CCAUGG를 갖고, 여기서 R은 개시 코돈 (ATG)의 3개 염기 상류의 퓨린 (아데닌 또는 구아닌)이며, 또 다른 'G'가 이어진다.
특정 실시양태에서, 바이러스 게놈 내의 5'UTR은 코작 서열을 포함한다.
특정 실시양태에서, 바이러스 게놈 내의 5'UTR은 코작 서열을 포함하지 않는다.
이론에 얽매이는 것을 원하지는 않지만, 야생형 3' UTR은 그 안에 매립된 아데노신 및 우리딘의 스트레치를 갖는 것으로 공지되어 있다. 이들 AU 풍부 서명은 높은 전환율을 갖는 유전자에서 특히 보편적이다. 그의 서열 특색 및 기능적 특성에 기초하여, AU 풍부 요소 (ARE)는 3개 부류로 분리될 수 있다 (Chen et al., 1995, 그의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함됨): 부류 I ARE, 예컨대 비제한적으로 c-Myc 및 MyoD는 U-풍부 영역 내에 AUUUA 모티프의 여러 분산 카피를 함유한다. 부류 II ARE, 예컨대 비제한적으로 GM-CSF 및 TNF-a는 2개 이상의 중첩 UUAUUUA(U/A)(U/A) 구량체를 보유한다. 부류 III ARE, 예컨대 비제한적으로 c-Jun 및 미오게닌은 덜 규정되어 있다. 이들 U 풍부 영역은 AUUUA 모티프를 함유하지 않는다. ARE에 결합하는 대부분의 단백질은 메신저를 탈안정화하는 것으로 공지되어 있는 반면에, ELAV 패밀리의 구성원, 가장 주목되는 것으로 HuR은 mRNA의 안정성을 증가시키는 것으로 문서화되어 있다. HuR은 모든 3종의 부류의 ARE에 결합한다. HuR 특이적 결합 부위를 핵산 분자의 3' UTR 내로 조작하는 것은 HuR 결합 및 이에 따른 생체 내에서의 메시지의 안정화로 이어질 것이다.
3' UTR AU 풍부 요소 (ARE)의 도입, 제거 또는 변형을 사용하여 폴리뉴클레오티드의 안정성을 조정할 수 있다. 특정 폴리뉴클레오티드, 예를 들어 바이러스 게놈의 페이로드 영역을 조작하는 경우, 1개 이상의 카피의 ARE를 도입하여 폴리뉴클레오티드를 덜 안정하게 함으로써 번역을 단축시키고 생성되는 단백질의 생산을 감소시킬 수 있다. 마찬가지로, ARE를 확인하고 제거 또는 돌연변이시켜 세포내 안정성을 증가시키고 이에 따라 번역 및 생성되는 단백질의 생산을 증가시킬 수 있다.
특정 실시양태에서, 바이러스 게놈의 3' UTR은 폴리-A 테일의 주형화된 첨가를 위한 올리고(dT) 서열을 포함할 수 있다.
특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 적어도 1개의 miRNA 시드, 결합 부위 또는 전체 서열을 포함할 수 있다. 마이크로RNA (또는 miRNA 또는 miR)는 핵산 표적 부위에 결합하고 핵산 분자 안정성을 감소시키거나 번역을 억제함으로써 유전자 발현을 하향 조절하는 19-25개 뉴클레오티드 비코딩 RNA이다. 마이크로RNA 서열은 "시드" 영역, 즉 성숙 마이크로RNA의 위치 2-8의 영역 내의 서열을 포함하고, 상기 서열은 핵산의 miRNA 표적 서열에 대해 완벽한 왓슨-크릭 상보성을 갖는다.
특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 적어도 하나의 miRNA 결합 부위, 서열 또는 시드 영역을 포함하거나, 변경하거나 또는 제거하도록 조작될 수 있다.
관련 기술분야에 공지된 임의의 유전자로부터의 임의의 UTR이 AAV 입자의 바이러스 게놈 내로 혼입될 수 있다. 이들 UTR 또는 그의 부분은 선택된 유전자에서와 동일한 배향으로 배치될 수 있거나, 또는 배향 또는 위치가 변경될 수 있다. 특정 실시양태에서, AAV 입자의 바이러스 게놈에 사용되는 UTR은 역전, 단축, 연장, 관련 기술분야에 공지된 1개 이상의 다른 5' UTR 또는 3' UTR과 함께 제조될 수 있다. 본원에 사용된 용어 "변경된"은, UTR과 관련된 경우, UTR이 참조 서열과 관련하여 일부 방식으로 변화되었다는 것을 의미한다. 예를 들어, 3' 또는 5' UTR은 상기 교시된 바와 같이 배향 또는 위치에서의 변화에 의해 야생형 또는 천연 UTR에 비해 변경될 수 있거나 또는 추가의 뉴클레오티드의 포함, 뉴클레오티드의 결실, 뉴클레오티드의 스와핑 또는 전위에 의해 변경될 수 있다.
특정 실시양태에서, AAV 입자의 바이러스 게놈은 야생형 UTR의 변이체가 아닌 적어도 1개의 인공 UTR을 포함한다.
특정 실시양태에서, AAV 입자의 바이러스 게놈은 그의 단백질이 공통 기능, 구조, 특색 또는 특성을 공유하는 전사체 패밀리로부터 선택된 UTR을 포함한다.
바이러스 게놈 성분: 폴리아데닐화 서열
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자의 바이러스 게놈은 적어도 1개의 폴리아데닐화 서열을 포함한다. AAV 입자의 바이러스 게놈은 페이로드 코딩 서열의 3' 단부 및 3'ITR의 5' 단부 사이에 폴리아데닐화 서열을 포함할 수 있다.
특정 실시양태에서, 폴리아데닐화 서열 또는 "폴리A 서열"은 부재 내지는 약 500개 뉴클레오티드 길이의 범위일 수 있다. 폴리아데닐화 서열은 비제한적으로 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185, 186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199, 200, 201, 202, 203, 204, 205, 206, 207, 208, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 223, 224, 225, 226, 227, 228, 229, 230, 231, 232, 233, 234, 235, 236, 237, 238, 239, 240, 241, 242, 243, 244, 245, 246, 247, 248, 249, 250, 251, 252, 253, 254, 255, 256, 257, 258, 259, 260, 261, 262, 263, 264, 265, 266, 267, 268, 269, 270, 271, 272, 273, 274, 275, 276, 277, 278, 279, 280, 281, 282, 283, 284, 285, 286, 287, 288, 289, 290, 291, 292, 293, 294, 295, 296, 297, 298, 299, 300, 301, 302, 303, 304, 305, 306, 307, 308, 309, 310, 311, 312, 313, 314, 315, 316, 317, 318, 319, 320, 321, 322, 323, 324, 325, 326, 327, 328, 329, 330, 331, 332, 333, 334, 335, 336, 337, 338, 339, 340, 341, 342, 343, 344, 345, 346, 347, 348, 349, 350, 351, 352, 353, 354, 355, 356, 357, 358, 359, 360, 361, 362, 363, 364, 365, 366, 367, 368, 369, 370, 371, 372, 373, 374, 375, 376, 377, 378, 379, 380, 381, 382, 383, 384, 385, 386, 387, 388, 389, 390, 391, 392, 393, 394, 395, 396, 397, 398, 399, 400, 401, 402, 403, 404, 405, 406, 407, 408, 409, 410, 411, 412, 413, 414, 415, 416, 417, 418, 419, 420, 421, 422, 423, 424, 425, 426, 427, 428, 429, 430, 431, 432, 433, 434, 435, 436, 437, 438, 439, 440, 441, 442, 443, 444, 445, 446, 447, 448, 449, 450, 451, 452, 453, 454, 455, 456, 457, 458, 459, 460, 461, 462, 463, 464, 465, 466, 467, 468, 469, 470, 471, 472, 473, 474, 475, 476, 477, 478, 479, 480, 481, 482, 483, 484, 485, 486, 487, 488, 489, 490, 491, 492, 493, 494, 495, 496, 497, 498, 499, 및 500개 뉴클레오티드 길이일 수 있다.
특정 실시양태에서, 폴리아데닐화 서열은 50-100개 뉴클레오티드 길이이다.
특정 실시양태에서, 폴리아데닐화 서열은 50-150개 뉴클레오티드 길이이다.
특정 실시양태에서, 폴리아데닐화 서열은 50-160개 뉴클레오티드 길이이다.
특정 실시양태에서, 폴리아데닐화 서열은 50-200개 뉴클레오티드 길이이다.
특정 실시양태에서, 폴리아데닐화 서열은 60-100개 뉴클레오티드 길이이다.
특정 실시양태에서, 폴리아데닐화 서열은 60-150개 뉴클레오티드 길이이다.
특정 실시양태에서, 폴리아데닐화 서열은 60-160개 뉴클레오티드 길이이다.
특정 실시양태에서, 폴리아데닐화 서열은 60-200개 뉴클레오티드 길이이다.
특정 실시양태에서, 폴리아데닐화 서열은 70-100개 뉴클레오티드 길이이다.
특정 실시양태에서, 폴리아데닐화 서열은 70-150개 뉴클레오티드 길이이다.
특정 실시양태에서, 폴리아데닐화 서열은 70-160개 뉴클레오티드 길이이다.
특정 실시양태에서, 폴리아데닐화 서열은 70-200개 뉴클레오티드 길이이다.
특정 실시양태에서, 폴리아데닐화 서열은 80-100개 뉴클레오티드 길이이다.
특정 실시양태에서, 폴리아데닐화 서열은 80-150개 뉴클레오티드 길이이다.
특정 실시양태에서, 폴리아데닐화 서열은 80-160개 뉴클레오티드 길이이다.
특정 실시양태에서, 폴리아데닐화 서열은 80-200개 뉴클레오티드 길이이다.
특정 실시양태에서, 폴리아데닐화 서열은 90-100개 뉴클레오티드 길이이다.
특정 실시양태에서, 폴리아데닐화 서열은 90-150개 뉴클레오티드 길이이다.
특정 실시양태에서, 폴리아데닐화 서열은 90-160개 뉴클레오티드 길이이다.
특정 실시양태에서, 폴리아데닐화 서열은 90-200개 뉴클레오티드 길이이다.
바이러스 게놈 성분: 인트론
특정 실시양태에서, 페이로드 영역은 1개 이상의 인트론 또는 그의 부분과 같은 발현을 증진시키기 위한 적어도 1개의 요소를 포함한다. 인트론의 비제한적 예는 MVM (67-97 bps), F.IX 말단절단된 인트론 1 (300 bp), β-글로빈 SD/이뮤노글로불린 중쇄 스플라이스 수용자 (250 bp), 아데노바이러스 스플라이스 공여자/이뮤노글로빈 스플라이스 수용자 (500 bp), SV40 후기 스플라이스 공여자/스플라이스 수용자 (19S/16S) (180 bp) 및 하이브리드 아데노바이러스 스플라이스 공여자/IgG 스플라이스 수용자 (230 bp)를 포함한다.
특정 실시양태에서, 인트론 또는 인트론 부분은 100-500개 뉴클레오티드 길이일 수 있다. 인트론은 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 190, 200, 210, 220, 230, 240, 250, 260, 270, 280, 290, 300, 310, 320, 330, 340, 350, 360, 370, 380, 390, 400, 410, 420, 430, 440, 450, 460, 470, 480, 490 또는 500의 길이를 가질 수 있다. 인트론은 80-100, 80-120, 80-140, 80-160, 80-180, 80-200, 80-250, 80-300, 80-350, 80-400, 80-450, 80-500, 200-300, 200-400, 200-500, 300-400, 300-500, 또는 400-500의 길이를 가질 수 있다.
특정 실시양태에서, 벡터 게놈은 트랜스진 표적 특이성 및 발현을 증진시키기 위한 적어도 1종의 요소 (예를 들어, 문헌 [Powell et al. Viral Expression Cassette Elements to Enhance Transgene Target Specificity and Expression in Gene Therapy, 2015] 참조; 그의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함됨) 예컨대 인트론을 포함한다. 인트론의 비제한적 예는 MVM (67-97 bp), F.IX 말단절단된 인트론 1 (300 bp), β-글로빈 SD/이뮤노글로불린 중쇄 스플라이스 수용자 (250 bp), 아데노바이러스 스플라이스 공여자/이뮤노글로빈 스플라이스 수용자 (500 bp), SV40 후기 스플라이스 공여자/스플라이스 수용자 (19S/16S) (180 bp) 및 하이브리드 아데노바이러스 스플라이스 공여자/IgG 스플라이스 수용자 (230 bp)를 포함한다.
특정 실시양태에서, 인트론은 100-500개 뉴클레오티드 길이일 수 있다. 인트론은 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 190, 200, 210, 220, 230, 240, 250, 260, 270, 280, 290, 300, 310, 320, 330, 340, 350, 360, 370, 380, 390, 400, 410, 420, 430, 440, 450, 460, 470, 480, 490 또는 500의 길이를 가질 수 있다. 인트론은 80-100, 80-120, 80-140, 80-160, 80-180, 80-200, 80-250, 80-300, 80-350, 80-400, 80-450, 80-500, 200-300, 200-400, 200-500, 300-400, 300-500, 또는 400-500의 길이를 가질 수 있다.
바이러스 게놈 성분: 필러 서열
특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 1개 이상의 필러 서열을 포함한다.
특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 바이러스 게놈의 길이가 패키징을 위한 최적 크기가 되도록 1개 이상의 필러 서열을 포함한다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 바이러스 게놈의 길이가 약 2.3 kb이도록 적어도 1개의 필러 서열을 포함한다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 바이러스 게놈의 길이가 약 4.6 kb이도록 적어도 1개의 필러 서열을 포함한다.
특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 단일 가닥 (ss) 바이러스 게놈이고, 약 0.1 kb - 3.8 kb, 예컨대 비제한적으로 0.1 kb, 0.2 kb, 0.3 kb, 0.4 kb, 0.5 kb, 0.6 kb, 0.7 kb, 0.8 kb, 0.9 kb, 1 kb, 1.1 kb, 1.2 kb, 1.3 kb, 1.4 kb, 1.5 kb, 1.6 kb, 1.7 kb, 1.8 kb, 1.9 kb, 2 kb, 2.1 kb, 2.2 kb, 2.3 kb, 2.4 kb, 2.5 kb, 2.6 kb, 2.7 kb, 2.8 kb, 2.9 kb, 3 kb, 3.1 kb, 3.2 kb, 3.3 kb, 3.4 kb, 3.5 kb, 3.6 kb, 3.7 kb, 또는 3.8 kb의 길이를 갖는 1개 이상의 필러 서열을 포함한다. 특정 실시양태에서, 벡터 게놈 내의 총 길이 필러 서열은 3.1 kb이다. 특정 실시양태에서, 벡터 게놈 내의 총 길이 필러 서열은 2.7 kb이다. 특정 실시양태에서, 벡터 게놈 내의 총 길이 필러 서열은 0.8 kb이다. 특정 실시양태에서, 벡터 게놈 내의 총 길이 필러 서열은 0.4 kb이다. 특정 실시양태에서, 벡터 게놈 내의 각각의 필러 서열의 길이는 0.8 kb이다. 특정 실시양태에서, 벡터 게놈 내의 각각의 필러 서열의 길이는 0.4 kb이다.
특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 자기-상보성 (sc) 바이러스 게놈이고, 약 0.1 kb - 1.5 kb, 예컨대 비제한적으로 0.1 kb, 0.2 kb, 0.3 kb, 0.4 kb, 0.5 kb, 0.6 kb, 0.7 kb, 0.8 kb, 0.9 kb, 1 kb, 1.1 kb, 1.2 kb, 1.3 kb, 1.4 kb, 또는 1.5 kb의 길이를 갖는 1개 이상의 필러 서열을 포함한다. 특정 실시양태에서, 벡터 게놈 내의 총 길이 필러 서열은 0.8 kb이다. 특정 실시양태에서, 벡터 게놈 내의 총 길이 필러 서열은 0.4 kb이다. 특정 실시양태에서, 벡터 게놈 내의 각각의 필러 서열의 길이는 0.8 kb이다. 특정 실시양태에서, 벡터 게놈 내의 각각의 필러 서열의 길이는 0.4 kb이다.
특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 필러 서열의 임의의 부분을 포함한다. 바이러스 게놈은 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 또는 99%의 필러 서열을 포함할 수 있다.
특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 단일 가닥 (ss) 바이러스 게놈이고, 바이러스 게놈의 길이가 약 4.6 kb이도록 1개 이상의 필러 서열을 포함한다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 적어도 1개의 필러 서열을 포함하고, 필러 서열은 5' ITR 서열에 대해 3'에 위치한다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 적어도 1개의 필러 서열을 포함하고, 필러 서열은 프로모터 서열에 대해 5'에 위치한다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 적어도 1개의 필러 서열을 포함하고, 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열에 대해 3'에 위치한다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 적어도 1개의 필러 서열을 포함하고, 필러 서열은 3' ITR 서열에 대해 5'에 위치한다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 적어도 1개의 필러 서열을 포함하고, 필러 서열은 2개의 인트론 서열 사이에 위치한다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 적어도 1개의 필러 서열을 포함하고, 필러 서열은 인트론 서열 내에 위치한다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함하고, 제1 필러 서열은 5' ITR 서열에 대해 3'에 위치하고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열에 대해 3'에 위치한다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함하고, 제1 필러 서열은 프로모터 서열에 대해 5'에 위치하고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열에 대해 3'에 위치한다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함하고, 제1 필러 서열은 5' ITR 서열에 대해 3'에 위치하고, 제2 필러 서열은 5' ITR 서열에 대해 5'에 위치한다.
특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 자기-상보성 (sc) 바이러스 게놈이고, 바이러스 게놈의 길이가 약 2.3 kb이도록 1개 이상의 필러 서열을 포함한다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 적어도 1개의 필러 서열을 포함하고, 필러 서열은 5' ITR 서열에 대해 3'에 위치한다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 적어도 1개의 필러 서열을 포함하고, 필러 서열은 프로모터 서열에 대해 5'에 위치한다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 적어도 1개의 필러 서열을 포함하고, 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열에 대해 3'에 위치한다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 적어도 1개의 필러 서열을 포함하고, 필러 서열은 3' ITR 서열에 대해 5'에 위치한다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 적어도 1개의 필러 서열을 포함하고, 필러 서열은 2개의 인트론 서열 사이에 위치한다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 적어도 1개의 필러 서열을 포함하고, 필러 서열은 인트론 서열 내에 위치한다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함하고, 제1의 서열은 5' ITR 서열에 대해 3'에 위치하고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열에 대해 3'에 위치한다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함하고, 제1 필러 서열은 프로모터 서열에 대해 5'에 위치하고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열에 대해 3'에 위치한다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함하고, 제1 필러 서열은 5' ITR 서열에 대해 3'에 위치하고, 제2 필러 서열은 5' ITR 서열에 대해 5'에 위치한다.
특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 바이러스 게놈의 1개 이상의 영역 사이에 1개 이상의 필러 서열을 포함할 수 있다. 특정 실시양태에서, 필러 영역은 비제한적으로 페이로드 영역, 역전된 말단 반복부 (ITR), 프로모터 영역, 인트론 영역, 인핸서 영역, 폴리아데닐화 신호 서열 영역, 다중 클로닝 부위 (MCS) 영역, 및/또는 엑손 영역과 같은 영역의 전에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 필러 영역은 비제한적으로 페이로드 영역, 역전된 말단 반복부 (ITR), 프로모터 영역, 인트론 영역, 인핸서 영역, 폴리아데닐화 신호 서열 영역, 다중 클로닝 부위 (MCS) 영역, 및/또는 엑손 영역과 같은 영역의 후에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 필러 영역은 비제한적으로 페이로드 영역, 역전된 말단 반복부 (ITR), 프로모터 영역, 인트론 영역, 인핸서 영역, 폴리아데닐화 신호 서열 영역, 다중 클로닝 부위 (MCS) 영역, 및/또는 엑손 영역과 같은 영역의 전 및 후에 위치할 수 있다.
특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 바이러스 게놈의 적어도 1개의 영역을 분기시키는 1개 이상의 필러 서열을 포함할 수 있다. 바이러스 게놈의 분기화 영역은 필러 서열 영역의 5'에 대해 영역의 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 또는 99%를 포함할 수 있다. 특정 실시양태에서, 필러 서열은 적어도 1개의 영역을 분기시켜, 영역의 10%가 필러 서열에 대해 5'에 위치하고, 영역의 90%가 필러 서열에 대해 3'에 위치하도록 할 수 있다. 특정 실시양태에서, 필러 서열은 적어도 1개의 영역을 분기시켜, 영역의 20%가 필러 서열에 대해 5'에 위치하고, 영역의 80%가 필러 서열에 대해 3'에 위치하도록 할 수 있다. 특정 실시양태에서, 필러 서열은 적어도 1개의 영역을 분기시켜, 영역의 30%가 필러 서열에 대해 5'에 위치하고, 영역의 70%가 필러 서열에 대해 3'에 위치하도록 할 수 있다. 특정 실시양태에서, 필러 서열은 적어도 1개의 영역을 분기시켜, 영역의 40%가 필러 서열에 대해 5'에 위치하고, 영역의 60%가 필러 서열에 대해 3'에 위치하도록 할 수 있다. 특정 실시양태에서, 필러 서열은 적어도 1개의 영역을 분기시켜, 영역의 50%가 필러 서열에 대해 5'에 위치하고, 영역의 50%가 필러 서열에 대해 3'에 위치하도록 할 수 있다. 특정 실시양태에서, 필러 서열은 적어도 1개의 영역을 분기시켜, 영역의 60%가 필러 서열에 대해 5'에 위치하고, 영역의 40%가 필러 서열에 대해 3'에 위치하도록 할 수 있다. 특정 실시양태에서, 필러 서열은 적어도 1개의 영역을 분기시켜, 영역의 70%가 필러 서열에 대해 5'에 위치하고, 영역의 30%가 필러 서열에 대해 3'에 위치하도록 할 수 있다. 특정 실시양태에서, 필러 서열은 적어도 1개의 영역을 분기시켜, 영역의 80%가 필러 서열에 대해 5'에 위치하고, 영역의 20%가 필러 서열에 대해 3'에 위치하도록 할 수 있다. 특정 실시양태에서, 필러 서열은 적어도 1개의 영역을 분기시켜, 영역의 90%가 필러 서열에 대해 5'에 위치하고, 영역의 10%가 필러 서열에 대해 3'에 위치하도록 할 수 있다.
특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 5' ITR 후에 필러 서열을 포함한다.
특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 프로모터 영역 후에 필러 서열을 포함한다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 페이로드 영역 후에 필러 서열을 포함한다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 인트론 영역 후에 필러 서열을 포함한다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 인핸서 영역 후에 필러 서열을 포함한다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 폴리아데닐화 신호 서열 영역 후에 필러 서열을 포함한다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 MCS 영역 후에 필러 서열을 포함한다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 엑손 영역 후에 필러 서열을 포함한다.
특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 프로모터 영역 전에 필러 서열을 포함한다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 페이로드 영역 전에 필러 서열을 포함한다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 인트론 영역 전에 필러 서열을 포함한다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 인핸서 영역 전에 필러 서열을 포함한다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 폴리아데닐화 신호 서열 영역 전에 필러 서열을 포함한다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 MCS 영역 전에 필러 서열을 포함한다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 엑손 영역 전에 필러 서열을 포함한다.
특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 3' ITR 전에 필러 서열을 포함한다.
특정 실시양태에서, 필러 서열은 2개의 영역, 예컨대 비제한적으로 5' ITR과 프로모터 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 필러 서열은 2개의 영역, 예컨대 비제한적으로 5' ITR과 페이로드 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 필러 서열은 2개의 영역, 예컨대 비제한적으로 5' ITR과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 필러 서열은 2개의 영역, 예컨대 비제한적으로 5' ITR과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 필러 서열은 2개의 영역, 예컨대 비제한적으로 5' ITR과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 필러 서열은 2개의 영역, 예컨대 비제한적으로 5' ITR과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다.
특정 실시양태에서, 필러 서열은 2개의 영역, 예컨대 비제한적으로 5' ITR과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다.
특정 실시양태에서, 필러 서열은 2개의 영역, 예컨대 비제한적으로 프로모터 영역과 페이로드 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 필러 서열은 2개의 영역, 예컨대 비제한적으로 프로모터 영역과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 필러 서열은 2개의 영역, 예컨대 비제한적으로 프로모터 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 필러 서열은 2개의 영역, 예컨대 비제한적으로 프로모터 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 필러 서열은 2개의 영역, 예컨대 비제한적으로 프로모터 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 필러 서열은 2개의 영역, 예컨대 비제한적으로 프로모터 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 필러 서열은 2개의 영역, 예컨대 비제한적으로 프로모터 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다.
특정 실시양태에서, 필러 서열은 2개의 영역, 예컨대 비제한적으로 페이로드 영역과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 필러 서열은 2개의 영역, 예컨대 비제한적으로 페이로드 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 필러 서열은 2개의 영역, 예컨대 비제한적으로 페이로드 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 필러 서열은 2개의 영역, 예컨대 비제한적으로 페이로드 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 필러 서열은 2개의 영역, 예컨대 비제한적으로 페이로드 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다.
특정 실시양태에서, 필러 서열은 2개의 영역, 예컨대 비제한적으로 페이로드 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다.
특정 실시양태에서, 필러 서열은 2개의 영역, 예컨대 비제한적으로 인트론 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 필러 서열은 2개의 영역, 예컨대 비제한적으로 인트론 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 필러 서열은 2개의 영역, 예컨대 비제한적으로 인트론 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 필러 서열은 2개의 영역, 예컨대 비제한적으로 인트론 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 필러 서열은 2개의 영역, 예컨대 비제한적으로 인트론 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 필러 서열은 2개의 영역, 예컨대 비제한적으로 인핸서 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 필러 서열은 2개의 영역, 예컨대 비제한적으로 인핸서 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 필러 서열은 2개의 영역, 예컨대 비제한적으로 인핸서 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 필러 서열은 2개의 영역, 예컨대 비제한적으로 인핸서 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다.
특정 실시양태에서, 필러 서열은 2개의 영역, 예컨대 비제한적으로 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 필러 서열은 2개의 영역, 예컨대 비제한적으로 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 필러 서열은 2개의 영역, 예컨대 비제한적으로 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다.
특정 실시양태에서, 필러 서열은 2개의 영역, 예컨대 비제한적으로 MCS 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 필러 서열은 2개의 영역, 예컨대 비제한적으로 MCS 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다.
특정 실시양태에서, 필러 서열은 2개의 영역, 예컨대 비제한적으로 엑손 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다.
특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 프로모터 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 페이로드 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 프로모터 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 프로모터 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 프로모터 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 프로모터 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 프로모터 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 프로모터 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 프로모터 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 프로모터 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 프로모터 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 프로모터 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 프로모터 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 프로모터 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 프로모터 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 프로모터 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 프로모터 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 프로모터 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 프로모터 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 프로모터 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 프로모터 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 프로모터 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 프로모터 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 프로모터 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 프로모터 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 프로모터 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 프로모터 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 MCS 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 프로모터 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 MCS 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 프로모터 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 엑손 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다.
특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 페이로드 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 페이로드 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 페이로드 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 페이로드 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 페이로드 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 페이로드 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 페이로드 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 페이로드 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 페이로드 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 페이로드 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 페이로드 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 페이로드 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 가질 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 페이로드 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 페이로드 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 페이로드 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 페이로드 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 페이로드 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 페이로드 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 페이로드 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 페이로드 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 페이로드 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 가질 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 페이로드 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 페이로드 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 페이로드 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 페이로드 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 페이로드 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 페이로드 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 MCS 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 페이로드 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 MCS 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 페이로드 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 엑손 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다.
특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 페이로드 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 MCS 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 MCS 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 엑손 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다.
특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 페이로드 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 MCS 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 MCS 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 엑손 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다.
특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 페이로드 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 MCS 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 MCS 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 엑손 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다.
특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 페이로드 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 MCS 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 MCS 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 엑손 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다.
특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 페이로드 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 프로모터 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 MCS 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 MCS 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 5' ITR과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 엑손 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다.
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특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 MCS 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 MCS 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 엑손 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다.
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특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 인트론 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 페이로드 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 MCS 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 MCS 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 프로모터 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 엑손 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다.
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특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 페이로드 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 인핸서 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 페이로드 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 페이로드 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 페이로드 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 페이로드 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인트론 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 페이로드 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 페이로드 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 페이로드 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 페이로드 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 인핸서 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 페이로드 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 페이로드 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 페이로드 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 페이로드 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 MCS 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 페이로드 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 MCS 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 페이로드 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 엑손 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다.
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특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 인핸서 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 인핸서 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 인핸서 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 인핸서 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 MCS 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 인핸서 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 MCS 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 인핸서 영역과 폴리아데닐화 신호 서열 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 엑손 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다.
특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 인핸서 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 인핸서 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 인핸서 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 인핸서 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 MCS 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 인핸서 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 MCS 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 인핸서 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 엑손 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다.
특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 인핸서 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 인핸서 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 인핸서 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 인핸서 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 MCS 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 인핸서 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 MCS 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 인핸서 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 엑손 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다.
특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 인핸서 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 인핸서 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 인핸서 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 인핸서 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 MCS 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 인핸서 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 MCS 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 인핸서 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 엑손 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다.
특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 MCS 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 MCS 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 MCS 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 엑손 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다.
특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 MCS 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 MCS 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 엑손 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다.
특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 MCS 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 MCS 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다. 특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 폴리아데닐화 신호 서열 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 엑손 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다.
특정 실시양태에서, 바이러스 게놈은 2개의 필러 서열을 포함할 수 있고, 제1 필러 서열은 MCS 영역과 엑손 영역 사이에 위치할 수 있고, 제2 필러 서열은 엑손 영역과 3' ITR 사이에 위치할 수 있다.
AAV 생산
본 개시내용은, 바이러스 복제 세포에서 바이러스 게놈 복제에 의한, 파르보바이러스 입자, 예를 들어 AAV 입자의 생성 방법을 제공한다.
본 개시내용에 따르면, 페이로드 영역을 포함하는 바이러스 게놈이 바이러스 복제 세포에서 생산된 AAV 입자 내로 혼입될 것이다. AAV 입자의 제조 방법은 관련 기술분야에 널리 공지되어 있고, 예를 들어 미국 특허 번호 US6204059, US5756283, US6258595, US6261551, US6270996, US6281010, US6365394, US6475769, US6482634, US6485966, US6943019, US6953690, US7022519, US7238526, US7291498 및 US7491508, US5064764, US6194191, US6566118, US8137948; 또는 국제 공개 번호 WO1996039530, WO1998010088, WO1999014354, WO1999015685, WO1999047691, WO2000055342, WO2000075353 및 WO2001023597; 문헌 [Methods In Molecular Biology, ed. Richard, Humana Press, NJ (1995); O'Reilly et al., Baculovirus Expression Vectors, A Laboratory Manual, Oxford Univ. Press (1994); Samulski et al.,J. Vir.63:3822-8 (1989); Kajigaya et al., Proc. Nat'l. Acad. Sci. USA 88: 4646-50 (1991); Ruffing et al., J. Vir. 66:6922-30 (1992); Kimbauer et al., Vir., 219:37-44 (1996); Zhao et al., Vir.272:382-93 (2000)]에 기재되어 있고; 이들 각각의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 WO2015191508에 기재된 방법을 사용하여 제조되며, 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함된다.
재조합 AAV 입자의 생산에 통상적으로 사용되는 바이러스 복제 세포는 미국 특허 번호 US6156303, US5387484, US5741683, US5691176, 및 US5688676; 미국 특허 공개 번호 2002/0081721, 및 국제 특허 공개 번호 WO 00/47757, WO 00/24916, 및 WO 96/17947에 기재된 바와 같은 293 세포, COS 세포, HeLa 세포, KB 세포, 및 다른 포유동물 세포주를 포함하나 이에 제한되지는 않으며, 이들 각각의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용은 1) 적격 박테리아 세포를 바크미드 벡터 및 바이러스 구축물 벡터 및/또는 AAV 페이로드 구축물 벡터로 공동-형질감염시키는 단계, 2) 생성된 바이러스 구축물 발현 벡터 및 AAV 페이로드 구축물 발현 벡터를 단리하고, 바이러스 복제 세포를 개별적으로 형질감염시키는 단계, 3) 생성된 페이로드 및 바이러스 구축물 발현 벡터 또는 AAV 페이로드 구축물 발현 벡터를 포함하는 바이러스 구축물 입자를 단리하고 정제하는 단계, 및 4) 바이러스 복제 세포를 AAV 페이로드 및 바이러스 구축물 발현 벡터 또는 AAV 페이로드 구축물 발현 벡터를 포함하는 바이러스 구축물 입자 둘 다로 공동-감염시키는 단계, 및 5) 바이러스 게놈을 포함하는 AAV 입자를 수확하고 정제하는 단계를 포함하는 증진된 (증가된, 개선된) 형질도입 효율을 갖는 AAV 입자를 생산하는 방법을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용은 1) 포유동물 세포, 예컨대 비제한적으로 HEK293 세포를 페이로드 영역, rep 및 cap 유전자를 발현하는 구축물 및 헬퍼 구축물과 동시에 공동-형질감염시키는 단계, 2) 바이러스 게놈을 포함하는 AAV 입자를 수확 및 정제하는 단계를 포함하는, AAV 입자를 생산하는 방법을 제공한다. 일부 실시양태에서, AAV 입자는 3종 이상의 박테리아-생산 플라스미드를 사용한 부착 HEK293 세포주의 일시적 형질감염에 의해 생산된다. 일부 실시양태에서, 생성된 AAV 입자는 이온 교환 크로마토그래피, 초원심분리 또는 그의 조합에 의해 정제될 수 있다.
일부 실시양태에서, 개시내용의 AAV 입자의 바이러스 게놈은 임의로 선택 마커를 코딩한다. 선택 마커는 세포-표면 마커, 예컨대 세포의 표면 상에서 발현되는 임의의 단백질, 예컨대 비제한적으로 수용체, CD 마커, 렉틴, 인테그린, 또는 그의 말단절단된 버전을 포함할 수 있다.
일부 실시양태에서, 선택 마커 리포터 유전자는 국제 출원 번호 WO 96/23810; 문헌 [Heim et al., Current Biology 2:178-182 (1996); Heim et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1995); 또는 Heim et al., Science 373:663-664 (1995)]; WO 96/30540에 기재된 바와 같고, 이들 각각의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
게놈 크기
특정 실시양태에서, 본원에 기재된 페이로드를 포함하는 AAV 입자는 단일 가닥 또는 이중 가닥 벡터 게놈일 수 있다. 개 벡터 게놈의 크기는 소형, 중형, 대형, 또는 최대 크기일 수 있다. 추가적으로, 벡터 게놈은 프로모터 및 폴리A 테일을 포함할 수 있다.
특정 실시양태에서, 본원에 기재된 페이로드를 포함하는 벡터 게놈은 소형 단일 가닥 벡터 게놈일 수 있다. 소형 단일 가닥 벡터 게놈은 크기가 2.7 내지 3.5 kb, 예컨대 크기가 약 2.7, 2.8, 2.9, 3.0, 3.1, 3.2, 3.3, 3.4, 및 3.5 kb일 수 있다. 특정 실시양태에서, 소형 단일 가닥 벡터 게놈은 크기가 3.2 kb일 수 있다. 추가적으로, 벡터 게놈은 프로모터 및 폴리A 테일을 포함할 수 있다.
특정 실시양태에서, 본원에 기재된 페이로드를 포함하는 벡터 게놈은 소형 이중 가닥 벡터 게놈일 수 있다. 소형 이중 가닥 벡터 게놈은 크기가 1.3 내지 1.7 kb, 예컨대 크기가 약 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 및 1.7 kb일 수 있다. 특정 실시양태에서, 소형 이중 가닥 벡터 게놈은 크기가 1.6 kb일 수 있다. 추가적으로, 벡터 게놈은 프로모터 및 폴리A 테일을 포함할 수 있다.
특정 실시양태에서, 본원에 기재된 페이로드를 포함하는 벡터 게놈은 중형 단일 가닥 벡터 게놈일 수 있다. 중형 단일 가닥 벡터 게놈은 크기가 3.6 내지 4.3 kb, 예컨대 크기가 약 3.6, 3.7, 3.8, 3.9, 4.0, 4.1, 4.2 및 4.3 kb일 수 있다. 특정 실시양태에서, 중형 단일 가닥 벡터 게놈은 크기가 4.0 kb일 수 있다. 추가적으로, 벡터 게놈은 프로모터 및 폴리A 테일을 포함할 수 있다.
특정 실시양태에서, 본원에 기재된 페이로드를 포함하는 벡터 게놈은 중형 이중 가닥 벡터 게놈일 수 있다. 중형 이중 가닥 벡터 게놈은 크기가 1.8 내지 2.1 kb, 예컨대 크기가 약 1.8, 1.9, 2.0 및 2.1 kb일 수 있다. 특정 실시양태에서, 중형 이중 가닥 벡터 게놈은 크기가 2.0 kb일 수 있다. 추가적으로, 벡터 게놈은 프로모터 및 폴리A 테일을 포함할 수 있다.
특정 실시양태에서, 본원에 기재된 페이로드를 포함하는 벡터 게놈은 대형 단일 가닥 벡터 게놈일 수 있다. 대형 단일 가닥 벡터 게놈은 크기가 4.4 내지 6.0 kb, 예컨대 크기가 약 4.4, 4.5, 4.6, 4.7, 4.8, 4.9, 5.0, 5.1, 5.2, 5.3, 5.4, 5.5, 5.6, 5.7, 5.8, 5.9 및 6.0 kb일 수 있다. 특정 실시양태에서, 대형 단일 가닥 벡터 게놈은 크기가 4.7 kb일 수 있다. 특정 실시양태에서, 대형 단일 가닥 벡터 게놈은 크기가 4.8 kb일 수 있다. 또 다른 비-제한적인 예로서, 대형 단일 가닥 벡터 게놈은 크기가 6.0 kb일 수 있다. 추가적으로, 벡터 게놈은 프로모터 및 폴리A 테일을 포함할 수 있다.
특정 실시양태에서, 본원에 기재된 페이로드를 포함하는 벡터 게놈은 대형 이중 가닥 벡터 게놈일 수 있다. 대형 이중 가닥 벡터 게놈은 크기가 2.2 내지 3.0 kb, 예컨대 크기가 약 2.2, 2.3, 2.4, 2.5, 2.6, 2.7, 2.8, 2.9 및 3.0 kb일 수 있다. 특정 실시양태에서, 대형 이중 가닥 벡터 게놈은 크기가 2.4 kb일 수 있다. 추가적으로, 벡터 게놈은 프로모터 및 폴리A 테일을 포함할 수 있다.
개시내용의 페이로드
본 개시내용의 AAV 입자는 적어도 1개의 페이로드 영역을 포함한다. 본원에 사용된 "페이로드" 또는 "페이로드 영역"은 바이러스 게놈에 의해 또는 그 내에 코딩된 1종 이상의 폴리뉴클레오티드 또는 폴리뉴클레오티드 영역, 또는 이러한 폴리뉴클레오티드 또는 폴리뉴클레오티드 영역의 발현 산물, 예를 들어 트랜스진, 폴리펩티드 또는 다중-폴리펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드 또는 조정 핵산 또는 조절 핵산을 지칭한다. 본 개시내용의 페이로드는 전형적으로 폴리펩티드 또는 그의 단편 또는 변이체를 코딩한다.
페이로드 영역은 mRNA의 천연 조직화와 유사하거나 이를 미러링하는 영역을 반영하도록 구성될 수 있다.
페이로드 영역은 코딩 및 비-코딩 핵산 서열의 조합을 포함할 수 있다.
일부 실시양태에서, AAV 페이로드 영역은 코딩 또는 비-코딩 RNA를 코딩할 수 있다.
특정 실시양태에서, AAV 입자는 1개 초과의 관심 폴리펩티드를 코딩하는 핵산 서열을 포함하는 페이로드 영역을 갖는 바이러스 게놈을 포함한다. 이러한 실시양태에서, 1개 초과의 폴리펩티드를 코딩하는 바이러스 게놈이 복제되어 바이러스 입자 내로 패키징될 수 있다. 1개 초과의 폴리펩티드를 포함하는 바이러스 입자로 형질도입된 표적 세포는 단일 세포에서 각각의 폴리펩티드를 발현할 수 있다.
특정 실시양태에서, 페이로드 영역은 도 1에 제시된 바와 같은 성분 중 1종 이상을 포함할 수 있다. 페이로드 영역 (110)은 바이러스 게놈 (100) 내에 위치한다. 페이로드 영역 (110)의 5' 및/또는 3' 단부에, 적어도 1개의 역전된 말단 반복부 (ITR) (120)가 존재할 수 있다. 페이로드 영역 내에, 프로모터 영역 (130), 인트론 영역 (140) 및 코딩 영역 (150)이 존재한다.
AAV 입자 페이로드 영역이 폴리펩티드를 코딩하는 경우, 폴리펩티드는 펩티드 또는 단백질일 수 있다. 본원에 기재된 폴리펩티드를 코딩하는 바이러스 게놈은 인간 질환, 바이러스, 감염 수의학적 용도 및 다양한 생체내 및 시험관내 설정 분야에서 유용할 수 있다.
일부 실시양태에서, AAV 입자는 신경계 질환 및/또는 장애의 치료, 예방, 완화 또는 호전을 위한 의약 분야에 유용하다.
일부 실시양태에서, AAV 입자는 파킨슨병의 치료, 예방, 완화 또는 호전을 위한 의약 분야에 유용하다.
일부 실시양태에서, AAV 입자는 중추 신경계 질환의 치료, 예방, 완화 또는 호전을 위한 의약 분야에 유용하다.
폴리펩티드 및 변이체의 성질
개시내용의 바이러스 게놈의 페이로드 영역에 의해 코딩되는 아미노산 서열은 전체 폴리펩티드, 복수의 폴리펩티드 또는 폴리펩티드의 단편으로서 번역될 수 있고, 이는 독립적으로 1개 이상의 핵산, 핵산의 단편, 또는 상기 언급된 것 중 임의의 것의 변이체에 의해 코딩될 수 있다. 본원에 사용된 "폴리펩티드"는 가장 종종 펩티드 결합에 의해 함께 연결된 아미노산 잔기 중합체 (천연 또는 비천연)를 의미한다. 본원에 사용된 상기 용어는 임의의 크기, 구조 또는 기능의 단백질, 폴리펩티드, 및 펩티드를 지칭한다. 일부 예에서, 코딩된 폴리펩티드는 약 50개 미만의 아미노산이고, 이어서 폴리펩티드는 펩티드로 불린다. 폴리펩티드가 펩티드인 경우, 이는 적어도 약 2, 3, 4, 또는 적어도 5개의 아미노산 잔기 길이일 것이다. 따라서, 폴리펩티드는 유전자 산물, 자연 발생 폴리펩티드, 합성 폴리펩티드, 상동체, 오르토로그, 파라로그, 단편, 및 상기의 다른 등가물, 변이체 및 유사체를 포함한다. 폴리펩티드는 단일 분자일 수 있거나, 또는 이량체, 삼량체 또는 사량체와 같은 다중-분자 복합체일 수 있다. 이들은 또한 단일 쇄 또는 다중쇄 폴리펩티드를 포함할 수 있고, 회합 또는 연결될 수 있다. 용어 폴리펩티드는 또한 1개 이상의 아미노산 잔기가 상응하는 자연 발생 아미노산의 인공 화학적 유사체인 아미노산 중합체에 적용될 수 있다.
용어 "폴리펩티드 변이체"는 그의 아미노산 서열이 천연 또는 참조 서열과 상이한 분자를 지칭한다. 아미노산 서열 변이체는 천연 또는 참조 서열과 비교하여 아미노산 서열 내의 특정 위치에 치환, 결실 및/또는 삽입을 보유할 수 있다. 통상적으로, 변이체는 천연 또는 참조 서열에 대해 적어도 약 50% 동일성 (상동성)을 보유할 것이고, 바람직하게는, 이들은 천연 또는 참조 서열에 대해 적어도 약 80%, 보다 바람직하게는 적어도 약 90% 동일할 (상동성일) 것이다.
일부 실시양태에서, "변이체 모방체"가 제공된다. 본원에 사용된 용어 "변이체 모방체"는 활성화된 서열을 모방하는 1개 이상의 아미노산을 함유하는 것이다. 예를 들어, 글루타메이트는 포스포-트레오닌 및/또는 포스포로-세린에 대한 모방체로서 작용할 수 있다. 대안적으로, 변이체 모방체는 탈활성화 또는 모방체를 함유하는 불활성화된 생성물을 발생시킬 수 있고, 예를 들어 페닐알라닌은 티로신에 대한 불활성화 치환으로서 작용할 수 있거나; 또는 알라닌은 세린에 대한 불활성화 치환으로서 작용할 수 있다.
용어 "아미노산 서열 변이체"는 천연 또는 출발 서열과 비교하여 그의 아미노산 서열에서 일부 차이를 갖는 분자를 지칭한다. 아미노산 서열 변이체는 아미노산 서열 내의 특정 위치에서 치환, 결실 및/또는 삽입을 보유할 수 있다. "천연" 또는 "출발" 서열은 야생형 서열과 혼동되지 않아야 한다. 본원에 사용된 천연 또는 출발 서열은 비교가 이루어질 수 있는 원래의 분자를 지칭하는 상대적 용어이다. "천연" 또는 "출발" 서열 또는 분자는 야생형 (자연에서 발견되는 서열)을 나타낼 수 있지만 야생형 서열이어야 하는 것은 아니다.
통상적으로, 변이체는 천연 서열에 대해 적어도 약 70% 상동성을 보유할 것이고, 바람직하게는, 이들은 천연 서열에 대해 적어도 약 80%, 보다 바람직하게는 적어도 약 90% 상동성일 것이다. 아미노산 서열에 적용될 때 "상동성"은, 서열을 정렬하고 최대 백분율의 상동성을 달성하기 위해 필요한 경우 갭을 도입한 후, 제2 서열의 아미노산 서열 내의 잔기와 동일한 후보 아미노산 서열 내의 잔기의 백분율로 정의된다. 정렬을 위한 방법 및 컴퓨터 프로그램은 관련 기술분야에 널리 공지되어 있다. 상동성은 퍼센트 동일성의 계산에 의존하지만, 계산에 도입된 갭 및 페널티로 인해 값이 상이할 수 있는 것으로 이해된다.
아미노산 서열에 적용될 때 "상동체"는 제2 종의 제2 서열에 대해 실질적인 동일성을 갖는 다른 종의 상응하는 서열을 의미한다.
"유사체"는 1개 이상의 아미노산 변경, 예를 들어 모 폴리펩티드의 특성을 여전히 유지하는 아미노산 잔기의 치환, 부가 또는 결실에 의해 상이해진 폴리펩티드 변이체를 포함하는 것으로 의도된다.
서열 태그 또는 아미노산, 예컨대 1개 이상의 리신이 개시내용의 펩티드 서열에 부가될 수 있다 (예를 들어, N-말단 또는 C-말단 단부에). 서열 태그는 펩티드 정제 또는 국재화에 사용될 수 있다. 리신은 펩티드 용해도를 증가시키거나 비오티닐화를 허용하기 위해 사용될 수 있다. 대안적으로, 펩티드 또는 단백질의 아미노산 서열의 카르복시 및 아미노 말단 영역에 위치하는 아미노산 잔기는 말단절단된 서열을 제공하기 위해 임의로 결실될 수 있다. 대안적으로, 특정 아미노산 (예를 들어, C-말단 또는 N-말단 잔기)은 서열의 사용에 의존하여, 예를 들어 가용성이거나 고체 지지체에 연결된 보다 큰 서열의 일부로서의 서열의 발현에 따라 결실될 수 있다.
단백질을 언급할 때 "치환 변이체"는 천연 또는 출발 서열 내에 적어도 1개의 아미노산 잔기가 제거되고 동일한 위치에서 그 자리에 상이한 아미노산이 삽입된 것이다. 치환은 분자 내의 오직 1개의 아미노산만이 치환된 경우 단일 치환일 수 있거나, 또는 동일한 분자 내에서 2개 이상의 아미노산이 치환된 경우 다중 치환일 수 있다.
본원에 사용된 용어 "보존적 아미노산 치환"은 통상적으로 서열 내에 유사한 크기, 전하, 또는 극성의 상이한 아미노산이 존재하는 아미노산의 치환을 지칭한다. 보존적 치환의 예는 비-극성 (소수성) 잔기, 예컨대 이소류신, 발린 및 류신의 또 다른 비-극성 잔기로의 치환을 포함한다. 마찬가지로, 보존적 치환의 예는 하나의 극성 (친수성) 잔기를 또 다른 것, 예컨대 아르기닌과 리신 사이, 글루타민과 아스파라긴 사이, 및 글리신과 세린 사이에서 치환하는 것을 포함한다. 추가적으로, 염기성 잔기, 예컨대 리신, 아르기닌 또는 히스티딘을 또 다른 것으로 치환하거나, 또는 하나의 산성 잔기, 예컨대 아스파르트산 또는 글루탐산을 또 다른 산성 잔기로 치환하는 것은 보존적 치환의 추가의 예이다. 비-보존적 치환의 예는 비-극성 (소수성) 아미노산 잔기, 예컨대 이소류신, 발린, 류신, 알라닌, 메티오닌의, 극성 (친수성) 잔기 예컨대 시스테인, 글루타민, 글루탐산 또는 리신으로의 치환 및/또는 극성 잔기의 비-극성 잔기로의 치환을 포함한다.
단백질을 언급할 때 "삽입 변이체"는 천연 또는 출발 서열 내의 특정한 위치에서 아미노산에 바로 인접하여 삽입된 1개 이상의 아미노산을 갖는 것이다. 아미노산에 "바로 인접한"은 아미노산의 알파-카르복시 또는 알파-아미노 관능기에 연결된 것을 의미한다.
단백질을 언급할 때 "결실 변이체"는 천연 또는 출발 아미노산 서열에서 1개 이상의 아미노산이 제거된 것이다. 통상적으로, 결실 변이체는 분자의 특정한 영역에서 1개 이상의 아미노산이 결실될 것이다.
본원에 사용된 용어 "유도체"는 용어 "변이체"와 동의어로 사용되고, 참조 분자 또는 출발 분자에 비해 임의의 방식으로 변형 또는 변화된 분자를 지칭한다. 일부 실시양태에서, 유도체는 유기 단백질성 또는 비-단백질성 유도체화제로 변형된 천연 또는 출발 단백질, 및 번역후 변형을 포함한다. 공유 변형은 전통적으로 단백질의 표적화된 아미노산 잔기를 선택된 측쇄 또는 말단 잔기와 반응할 수 있는 유기 유도체화제와 반응시킴으로써 또는 선택된 재조합 숙주 세포에서 기능하는 번역후 변형의 메카니즘을 이용함으로써 도입된다. 생성된 공유 유도체는 생물학적 활성, 면역검정, 또는 재조합 당단백질의 면역친화성 정제를 위한 항-단백질 항체의 제조에 중요한 잔기를 확인하는 것에 관한 프로그램에 유용하다. 이러한 변형은 관련 기술분야의 통상의 기술 내에 있고, 과도한 실험 없이 수행된다.
특정 번역후 변형은 발현된 폴리펩티드에 대한 재조합 숙주 세포의 작용의 결과이다. 글루타미닐 및 아스파라기닐 잔기가 상응하는 글루타밀 및 아스파르틸 잔기로 빈번하게 번역-후 탈아미드화된다. 대안적으로, 이들 잔기는 약산성 조건 하에 탈아미드화된다. 이들 잔기의 어느 하나의 형태가 본 개시내용에 따라 사용되는 단백질에 존재할 수 있다.
다른 번역-후 변형은 프롤린 및 리신의 히드록실화, 세릴 또는 트레오닐 잔기의 히드록실 기의 인산화, 리신, 아르기닌 및 히스티딘 측쇄의 알파-아미노 기의 메틸화를 포함한다 (T. E. Creighton, Proteins: Structure and Molecular Properties, W.H. Freeman & Co., San Francisco, pp. 79-86 (1983)).
단백질을 언급할 때 "특색"은 분자의 특유의 아미노산 서열-기반 성분으로 정의된다. 본 개시내용의 단백질의 특색은 표면 양상, 국부 입체형태적 형상, 폴드, 루프, 절반-루프, 도메인, 절반-도메인, 부위, 말단 또는 그의 임의의 조합을 포함한다.
단백질을 언급할 때 본원에 사용된 용어 "표면 양상"은 최외곽 표면 상에 나타나는 단백질의 폴리펩티드 기반 성분을 지칭한다.
단백질을 언급할 때 본원에 사용된 용어 "국부 입체형태적 형상"은 단백질의 규정가능한 공간 내에 위치하는 단백질의 폴리펩티드 기반 구조적 양상을 의미한다.
단백질을 언급할 때 본원에 사용된 용어 "폴드"는 에너지 최소화시 생성되는 아미노산 서열의 입체형태를 의미한다. 폴딩은 폴딩 프로세스의 2차 또는 3차 수준에서 일어날 수 있다. 2차 수준 폴드의 예는 베타 시트 및 알파 나선을 포함한다. 3차 폴드의 예는 동적인 힘의 병합 또는 분리로 인해 형성된 도메인 및 영역을 포함한다. 이러한 방식으로 형성된 영역은 소수성 및 친수성 포켓 등을 포함한다.
본원에 사용된 용어 "턴"은 단백질 입체형태와 관련하여, 펩티드 또는 폴리펩티드의 백본의 방향을 변경시키고 1, 2, 3개 또는 그 초과의 아미노산 잔기를 수반할 수 있는 굴곡부를 의미한다.
단백질을 언급할 때 본원에 사용된 용어 "루프"는 펩티드 또는 폴리펩티드의 백본의 방향을 역전시키고 4개 이상의 아미노산 잔기를 포함하는 펩티드 또는 폴리펩티드의 구조적 특색을 지칭한다. 올리바(Oliva) 등은 적어도 5개 부류의 단백질 루프를 확인하였다 (J. Mol Biol 266 (4): 814-830; 1997).
단백질을 언급할 때 본원에 사용된 용어 "절반-루프"는 그것이 유래된 루프의 아미노산 잔기의 수의 적어도 절반을 갖는 확인된 루프의 부분을 지칭한다. 루프는 항상 짝수의 아미노산 잔기를 함유할 수는 없는 것으로 이해된다. 따라서, 루프가 홀수의 아미노산을 함유하거나 포함하는 것으로 확인된 경우에, 홀수 루프의 절반-루프는 루프의 정수 부분 또는 다음 정수 부분 (루프의 아미노산의 수/2+/-0.5 아미노산)을 포함할 것이다. 예를 들어, 7개 아미노산 루프로서 확인된 루프는 3개의 아미노산 또는 4개의 아미노산의 절반-루프를 생성할 수 있다 (7/2=3.5+/-0.5는 3 또는 4임).
단백질을 언급할 때 본원에 사용된 용어 "도메인"은 1개 이상의 확인가능한 구조적 또는 기능적 특징 또는 특성 (예를 들어, 결합 능력, 단백질-단백질 상호작용에 대한 부위로서 작용함)을 갖는 폴리펩티드의 모티프를 지칭한다.
단백질을 언급할 때 본원에 사용된 용어 "절반-도메인"은 그것이 유래된 도메인의 아미노산 잔기의 수의 적어도 절반을 갖는 확인된 도메인의 부분을 의미한다. 도메인은 항상 짝수의 아미노산 잔기를 함유할 수는 없는 것으로 이해된다. 따라서, 도메인이 홀수의 아미노산을 함유하거나 포함하는 것으로 확인된 경우에, 홀수 도메인의 절반-도메인은 도메인의 정수 부분 또는 다음 정수 부분 (도메인의 아미노산의 수/2+/-0.5 아미노산)을 포함할 것이다. 예를 들어, 7개 아미노산 도메인으로 확인된 도메인은 3개 아미노산 또는 4개 아미노산의 절반-도메인을 생성할 수 있다 (7/2=3.5+/-0.5는 3 또는 4임). 또한, 도메인 또는 절반-도메인 내에서 서브-도메인이 확인될 수 있고, 이들 서브도메인은 이들이 유래된 도메인 또는 절반 도메인에서 확인된 구조적 또는 기능적 특성을 전부보다는 적게 보유하는 것으로 이해된다. 또한, 본원의 도메인 유형 중 임의의 것을 포함하는 아미노산이 폴리펩티드의 백본을 따라 인접할 필요는 없는 것으로 이해된다 (즉, 비인접 아미노산이 구조적으로 폴딩되어 도메인, 절반-도메인 또는 서브도메인을 생성할 수 있음).
단백질을 언급할 때 본원에 사용된 용어 "부위"는 아미노산 기반 실시양태와 관련하여 "아미노산 잔기" 및 "아미노산 측쇄"와 동의어로 사용된다. 부위는 본 개시내용의 폴리펩티드 기반 분자 내에서 변형, 조작, 변경, 유도체화 또는 변경될 수 있는 펩티드 또는 폴리펩티드 내의 위치를 나타낸다.
본원에 사용된 용어 "말단 또는 말단들"은 단백질을 지칭할 때 펩티드 또는 폴리펩티드의 맨끝을 지칭한다. 이러한 맨끝은 펩티드 또는 폴리펩티드의 최초 또는 최종 부위에만 제한되지 않고, 말단 영역의 추가의 아미노산을 포함할 수 있다. 본 개시내용의 폴리펩티드 기반 분자는 N-말단 (유리 아미노기 (NH2)를 갖는 아미노산에 의해 종결됨) 및 C-말단 (유리 카르복실기 (COOH)를 갖는 아미노산에 의해 종결됨) 둘 다를 갖는 것을 특징으로 할 수 있다. 개시내용의 단백질은 일부 경우에 디술피드 결합에 의해 또는 비-공유결합력에 의해 함께 생성된 다중 폴리펩티드 쇄 (다량체, 올리고머)로 이루어진다. 단백질의 이들 분류는 다중 N- 및 C-말단을 가질 것이다. 대안적으로, 폴리펩티드의 말단은 이들이 경우에 따라 유기 접합체와 같은 비-폴리펩티드 기반 모이어티로 시작 또는 종결되도록 변형될 수 있다.
특색 중 임의의 것이 개시내용의 분자의 성분으로서 확인되거나 정의되면, 이들 특색의 여러 조작 및/또는 변형 중 임의의 것을 이동, 스와핑, 역전, 결실, 무작위화 또는 복제에 의해 수행할 수 있다. 또한, 특색의 조작은 개시내용의 분자에 대한 변형과 동일한 결과를 초래할 수 있는 것으로 이해된다. 예를 들어, 도메인을 결실시키는 것을 수반하는 조작은 전장 미만의 분자를 코딩하기 위한 핵산의 변형과 마찬가지로 분자의 길이의 변경을 발생시킬 것이다.
변형 및 조작은 관련 기술분야에 공지된 방법, 예컨대 부위 지정 돌연변이유발에 의해 달성될 수 있다. 이어서, 생성된 변형된 분자를 시험관내 또는 생체내 검정, 예컨대 본원에 기재된 것, 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 다른 적합한 스크리닝 검정을 사용하여 활성에 대해 시험할 수 있다.
페이로드: AADC 폴리뉴클레오티드 구축물
본 개시내용에 따르면, 단독으로 또는 추가의 핵산 서열(들)과 함께 기능하여 AADC 단백질을 코딩하는 방향족 L-아미노산 데카르복실라제 (AADC; 도파 데카르복실라제 및 DDC로도 공지되어 있음) 폴리뉴클레오티드가 제공된다. 본원에 사용된 "AADC 폴리뉴클레오티드"는 AADC 단백질을 코딩하고, 벡터, 플라스미드 또는 번역가능한 구축물에 존재하는 경우 세포, 조직, 기관 또는 유기체에서 이러한 AADC 단백질을 발현하는 임의의 핵산 중합체이다.
AADC 폴리뉴클레오티드는 세포 내부에서 프로세싱되는 전구체 분자를 포함한다. AADC 폴리뉴클레오티드 또는 그의 프로세싱된 형태는 세포로의 전달을 위한 플라스미드, 벡터, 게놈 또는 다른 핵산 발현 벡터 내에 코딩될 수 있다.
일부 실시양태에서, AADC 폴리뉴클레오티드는 AAV 바이러스 게놈의 성분으로서 설계되고, 세포 내에서 프로세싱되어 야생형 AADC 단백질을 생산하는 AAV 입자 내에 패키징된다.
일부 실시양태에서, AADC 폴리뉴클레오티드는 AAV 입자의 페이로드일 수 있다.
본원에 사용된 야생형 AADC 단백질은 DDC 유전자로부터의 자연 발생 이소형 또는 변이체 중 임의의 것일 수 있다. AADC의 상이한 이소형을 코딩하는 다수의 대안적으로 스플라이싱된 전사체 변이체가 확인되었다. 구체적으로, DDC 유전자는 6개의 별개의 이소형을 코딩하는 7개의 전사체 변이체를 생산한다. DDC 전사체 변이체 1 및 2는 둘 다 AADC 이소형 1을 코딩한다. 일부 실시양태에서, AADC 폴리뉴클레오티드는 DDC 전사체 변이체 2를 코딩하고, 이에 의해 천연 AADC 이소형 1 (NCBI 참조 서열: NP_000781.1)을 코딩한다. 이러한 서열이 여기서 제공된다:
개시내용의 AADC 폴리뉴클레오티드는 AADC 폴리뉴클레오티드 구축물을 생성하기 위해 어셈블리되는 모듈 요소 및/또는 서열 모티프를 함유하도록 조작될 수 있다.
본 개시내용에 따르면, AADC 폴리뉴클레오티드가 제공된다. 이러한 폴리뉴클레오티드는 AADC 단백질의 1개 이상의 이소형 또는 변이체를 코딩하는 연결된 뉴클레오시드의 영역을 포함하는 핵산 중합체를 포함한다.
일부 실시양태에서, AADC 폴리뉴클레오티드는 AADC 단백질을 코딩하는 코돈 최적화된 전사체를 포함한다.
일부 실시양태에서, AADC 폴리뉴클레오티드는 AADC 단백질의 1개 이상의 야생형 이소형 또는 변이체를 코딩하는 서열 영역을 포함한다. 이러한 폴리뉴클레오티드는 또한 다음 중 어느 하나 이상을 코딩하는 서열 영역을 포함할 수 있다: 5' ITR, 시토메갈로바이러스 (CMV) 인핸서, CMV 프로모터, ie1 엑손 1, ie1 인트론1, hbB글로빈 인트론2, hB글로빈 엑손 3, 5' UTR, 3' UTR, hGH 폴리(A) 신호, 및/또는 3' ITR. 이러한 서열 영역은 본원에 교시되어 있거나, 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 것일 수 있다.
일부 실시양태에서, AADC 폴리뉴클레오티드는 서열식별번호: 979 또는 그의 단편 또는 변이체를 포함한다. 이러한 AADC 폴리뉴클레오티드 서열이 여기서 제공된다:
일부 실시양태에서, 서열식별번호: 979를 포함하는 AADC 폴리뉴클레오티드 또는 그의 단편 또는 변이체는 AAV2 캡시드 혈청형을 포함하는 AAV 입자의 부분이다.
특정 실시양태에서, AADC 폴리뉴클레오티드는 서열식별번호: 979의 리보뉴클레오티드 형태를 포함한다.
특정 실시양태에서, AADC 폴리뉴클레오티드는 서열식별번호: 979 또는 그의 단편 또는 변이체 중 임의의 것에 대해 퍼센트 동일성을 갖는 서열을 포함한다. AADC 폴리뉴클레오티드는 서열식별번호: 979 또는 그의 단편 또는 변이체 중 임의의 것에 대해 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 99% 또는 100%의 동일성을 가질 수 있다. AADC 폴리뉴클레오티드는 서열식별번호: 979 또는 그의 단편 또는 변이체 중 임의의 것에 대해 1-10%, 10-20%, 30-40%, 50-60%, 50-70%, 50-80%, 50-90%, 50-99%, 50-100%, 60-70%, 60-80%, 60-90%, 60-99%, 60-100%, 70-80%, 70-90%, 70-99%, 70-100%, 80-85%, 80-90%, 80-95%, 80-99%, 80-100%, 90-95%, 90-99%, 또는 90-100%를 가질 수 있다. 특정 실시양태에서, AADC 폴리뉴클레오티드는 서열식별번호: 979 또는 그의 단편 또는 변이체 중 임의의 것에 대해 80% 동일성으로서의 서열을 포함한다. 특정 실시양태에서, AADC 폴리뉴클레오티드는 서열식별번호: 979 또는 그의 단편 또는 변이체 중 임의의 것에 대해 85% 동일성으로서의 서열을 포함한다. 특정 실시양태에서, AADC 폴리뉴클레오티드는 서열식별번호: 979 또는 그의 단편 또는 변이체 중 임의의 것에 대해 90% 동일성으로서의 서열을 포함한다. 특정 실시양태에서, AADC 폴리뉴클레오티드는 서열식별번호: 979 또는 그의 단편 또는 변이체 중 임의의 것에 대해 95% 동일성으로서의 서열을 포함한다. 특정 실시양태에서, AADC 폴리뉴클레오티드는 서열식별번호: 979 또는 그의 단편 또는 변이체 중 임의의 것에 대해 99% 동일성으로서의 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, AADC 폴리뉴클레오티드의 코딩 영역은 1440개 뉴클레오티드 길이이다. 이러한 AADC 폴리뉴클레오티드는, 예를 들어, 폴리뉴클레오티드의 전부 또는 일부에 걸쳐 코돈 최적화될 수 있다.
일부 실시양태에서, AADC 폴리뉴클레오티드는 서열식별번호: 979 또는 그의 단편 또는 변이체 중 임의의 것을 포함하지만, 5' 및/또는 3' ITR이 결여되어 있다. 이러한 폴리뉴클레오티드는 플라스미드 또는 벡터 내로 혼입될 수 있고, 코딩된 AADC 단백질을 발현시키는데 사용될 수 있다.
특정 실시양태에서, AADC 폴리뉴클레오티드는 곤충 세포 (예를 들어, Sf9 세포)에서 생산될 수 있다.
특정 실시양태에서, AADC 폴리뉴클레오티드는 삼중 형질감염을 사용하여 생산될 수 있다.
특정 실시양태에서, AADC 폴리뉴클레오티드는 AADC mRNA의 오픈 리딩 프레임, 예를 들어, AADC mRNA의 코돈 최적화된 오픈 리딩 프레임, 적어도 1개의 5'ITR 및 적어도 1개의 3'ITR을 포함할 수 있고, 여기서 5'ITR 중 1개 이상은 프로모터 영역의 5'단부에 위치할 수 있고, 1개 이상의 3' ITR은 폴리(A) 신호의 3' 단부에 위치할 수 있다. AADC mRNA는 프로모터 영역, 5'비번역 영역 (UTR), 3'UTR 및 폴리(A) 신호를 포함할 수 있다. 프로모터 영역은 인핸서 요소, 프로모터 요소, 제1 엑손 영역, 제1 인트론 영역, 제2 인트론 영역 및 제2 엑손 영역을 포함할 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다. 특정 실시양태에서, 인핸서 요소 및 프로모터 요소는 CMV로부터 유래된다. 특정 실시양태에서, 제1 엑손 영역은 ie1 엑손 1 또는 그의 단편이고, 제1 인트론 영역은 ie1 인트론 1 또는 그의 단편이고, 제2 인트론 영역은 hbB글로빈 인트론 2 또는 그의 단편이고, 제2 엑손 영역은 hbB글로빈 엑손 3 또는 그의 단편이다. 또 다른 비제한적 예로서, 폴리(A) 신호는 인간 성장 호르몬으로부터 유래된다.
특정 실시양태에서, 적어도 1개의 요소가 트랜스진 표적 특이성 및 발현을 증진시키기 위해 본원에 기재된 AADC 폴리뉴클레오티드와 함께 사용될 수 있다 (예를 들어, 문헌 [Powell et al. Viral Expression Cassette Elements to Enhance Transgene Target Specificity and Expression in Gene Therapy, 2015] 참조; 그의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함됨). 트랜스진 표적 특이성 및 발현을 증진시키기 위한 요소의 비제한적 예는 프로모터, 내인성 miRNA, 전사-후 조절 요소 (PRE), 폴리아데닐화 (폴리A) 신호 서열 및 상류 인핸서 (USE), CMV 인핸서 및 인트론을 포함한다.
특정 실시양태에서, 적어도 1개의 요소, 예컨대 프로모터가 트랜스진 표적 특이성 및 발현을 증진시키기 위해 본원에 기재된 AADC 폴리뉴클레오티드와 함께 사용될 수 있다 (예를 들어, 문헌 [Powell et al. Viral Expression Cassette Elements to Enhance Transgene Target Specificity and Expression in Gene Therapy, 2015] 참조; 그의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함됨).
특정 실시양태에서, AADC 폴리뉴클레오티드는 아데노-연관 바이러스 (AAV)로부터 유래될 수 있는 플라스미드 또는 벡터 내에 코딩된다.
특정 실시양태에서, 개시내용의 AAV 입자는 인간 AADC를 코딩하는 바이러스 게놈을 갖는 재조합 AAV2를 포함한다.
특정 실시양태에서, 개시내용의 AAV 입자는 VY-AADC01이다.
특정 실시양태에서, 개시내용의 AAV 입자는 VY-AADC02이다.
특정 실시양태에서, 개시내용의 AAV 입자는 2226647-27-2의 CAS (화학 초록 서비스) 등록 번호를 갖는다.
II. 제제 및 전달
제약 조성물
본 개시내용에 따르면 AAV 입자는 제약 조성물 (예를 들어, 제제)로서 제조될 수 있다. 이러한 조성물은 필수적으로 1종 이상의 활성 성분, 및 가장 흔하게, 제약상 허용되는 부형제를 포함하는 것으로 이해될 것이다.
본 개시내용에 따른 제약 조성물 중 활성 성분 (예를 들어 AAV 입자), 제약상 허용되는 부형제 및/또는 임의의 추가의 성분의 상대량은 치료할 대상체의 아이덴티티, 크기 및/또는 상태에 따라, 및 추가로 조성물이 투여되는 경로에 따라 달라질 수 있다. 예를 들어, 조성물은 0.0001% 내지 99% (w/w)의 활성 성분을 포함할 수 있다. 예로서, 조성물은 0.0001% 내지 100%, 예를 들어, .5 내지 50%, 1-30%, 5-80%, 적어도 80% (w/w)의 활성 성분을 포함할 수 있다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 AAV 입자 제약 조성물은 적어도 1개의 페이로드를 포함할 수 있다. 특정 실시양태에서, 제약 조성물은 1, 2, 3, 4 또는 5개의 페이로드를 갖는 AAV 입자를 함유할 수 있다.
본원에 제공된 제약 조성물의 설명은 주로 인간에게 투여하기에 적합한 제약 조성물에 관한 것이지만, 통상의 기술자는 이러한 조성물이 일반적으로 임의의 다른 동물, 예를 들어 비-인간 동물, 예를 들어 비-인간 포유동물에게 투여하기에 적합하다는 것을 이해할 것이다. 인간에 대한 투여에 적합한 제약 조성물을 다양한 동물에게 투여하기에 적합하게 만들기 위한 변형은 널리 이해되며, 통상의 숙련된 수의학 약리학자는, 존재하는 경우, 단지 통상의 실험에 의해 이러한 변형을 설계하고/거나 수행할 수 있다. 제약 조성물의 투여가 고려되는 대상체는 인간 및/또는 다른 영장류; 상업적으로 관련된 포유동물 예컨대 소, 돼지, 말, 양, 고양이, 개, 마우스, 래트를 포함한 포유동물, 상업적으로 관련된 조류 예컨대 가금류, 닭, 오리, 거위 및/또는 칠면조를 포함한 조류를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.
일부 실시양태에서, 조성물은 인간, 인간 환자 또는 대상체에게 투여된다.
제제
본 개시내용의 제제는, 비제한적으로, 염수, 리포솜, 지질 나노입자, 중합체, 펩티드, 단백질, AAV 입자로 형질감염된 세포 (예를 들어, 대상체에의 전달 또는 이식용) 및 그의 조합을 포함할 수 있다.
본원에 기재된 제약 조성물의 제제는 약리학 기술분야에 공지되어 있거나 또는 이후에 개발된 임의의 방법에 의해 제조될 수 있다. 본원에 사용된 용어 "제약 조성물"은 적어도 1종의 활성 성분 및 임의로 1종 이상의 제약상 허용되는 부형제를 포함하는 조성물을 지칭한다.
일반적으로, 이러한 제조 방법은 활성 성분을 부형제 및/또는 1종 이상의 다른 보조 성분과 회합하는 단계를 포함한다. 본원에 사용된 어구 "활성 성분"은 일반적으로 개시내용의 폴리펩티드를 코딩하는 페이로드 영역을 운반하는 AAV 입자 또는 본원에 기재된 바와 같은 바이러스 게놈에 의해 또는 AAV 입자에 의해 코딩된 최종 생성물을 지칭한다.
본원에 기재된 AAV 입자 및 제약 조성물의 제제는 약리학 기술분야에 공지되어 있거나 또는 이후에 개발되는 임의의 방법에 의해 제조될 수 있다. 일반적으로, 이러한 제조 방법은 활성 성분을 부형제 및/또는 1종 이상의 다른 보조 성분과 회합하는 단계, 및 이어서, 필요한 경우 및/또는 바람직한 경우, 생성물을 목적하는 단일- 또는 다중-용량 단위로 나누고/거나, 성형하고/거나, 패키징하는 단계를 포함한다.
본 개시내용에 따른 제약 조성물은 벌크, 단일 단위 용량, 및/또는 복수의 단일 단위 용량으로 제조, 패키징, 및/또는 판매될 수 있다. 본원에 사용된 "단위 용량"은 미리 결정된 양의 활성 성분을 포함하는 제약 조성물의 개별 양을 지칭한다. 활성 성분의 양은 일반적으로 대상체에게 투여될 활성 성분의 투여량, 및/또는 이러한 투여량의 편리한 분획, 예컨대, 예를 들어, 이러한 투여량의 1/2 또는 1/3과 동등하다.
특정 실시양태에서, 개시내용의 AAV 입자는 PBS 중에서 에틸렌 옥시드/프로필렌 옥시드 공중합체 (플루로닉 또는 폴록사머로도 공지됨)와 조합되어 제제화될 수 있다.
특정 실시양태에서, 개시내용의 AAV 입자는 PBS 중에서 0.001% w/v 플루론산 (F-68) (폴록사머 188)과 함께 pH 약 7.0으로 제제화될 수 있다.
특정 실시양태에서, 개시내용의 AAV 입자는 PBS 중에서 0.001% w/v 플루론산 (F-68) (폴록사머 188)과 함께 pH 약 7.3으로 제제화될 수 있다.
특정 실시양태에서, 개시내용의 AAV 입자는 PBS 중에서 0.001% w/v 플루론산 (F-68) (폴록사머 188)과 함께 pH 약 7.4로 제제화될 수 있다.
특정 실시양태에서, 개시내용의 AAV 입자는 염화나트륨, 인산나트륨 및 에틸렌 옥시드/프로필렌 옥시드 공중합체를 포함하는 용액 중에서 제제화될 수 있다.
특정 실시양태에서, 개시내용의 AAV 입자는 염화나트륨, 이염기성 인산나트륨, 일염기성 인산나트륨 및 폴록사머 188/플루론산 (F-68)을 포함하는 용액 중에서 제제화될 수 있다.
특정 실시양태에서, 개시내용의 AAV 입자는 약 180mM 염화나트륨, 약 10mM 인산나트륨 및 약 0.001% w/v 폴록사머 188 (즉 플루론산 F-68)을 포함하는 용액 중에서 pH 약 7.3으로 제제화될 수 있다. 특정 실시양태에서, 개시내용의 AAV 입자는 약 180mM 염화나트륨, 약 10mM 인산나트륨 및 약 0.001% w/v 폴록사머 188을 포함하는 용액 중에서 ≥ 3.0 x 1012개 vg/mL의 표적 농도, pH 약 7.3으로 제제화될 수 있다. 특정 실시양태에서, 개시내용의 AAV 입자는 약 180mM 염화나트륨, 약 10mM 인산나트륨 및 약 0.001% w/v 폴록사머 188을 포함하는 용액 중에서 3.5-5.5 x 1012개 vg/mL의 표적 농도, pH 약 7.3으로 제제화될 수 있다. 특정 실시양태에서, 개시내용의 AAV 입자는 약 180mM 염화나트륨, 약 10mM 인산나트륨 및 약 0.001% w/v 폴록사머 188을 포함하는 용액 중에서 4.5-5.5 x 1012개 vg/mL의 표적 농도, pH 약 7.3으로 제제화될 수 있다. 특정 실시양태에서, 개시내용의 AAV 입자는 약 180mM 염화나트륨, 약 10mM 인산나트륨 및 약 0.001% w/v 폴록사머 188을 포함하는 용액 중에서 4.9 x 1012개 vg/mL의 표적 농도, pH 약 7.3으로 제제화될 수 있다. 특정 실시양태에서, 개시내용의 AAV 입자는 약 180mM 염화나트륨, 약 10mM 인산나트륨 및 약 0.001% w/v 폴록사머 188을 포함하는 용액 중에서 2.0-3.5 x 1012개 vg/mL의 표적 농도, pH 약 7.3으로 제제화될 수 있다. 특정 실시양태에서, 개시내용의 AAV 입자는 약 180mM 염화나트륨, 약 10mM 인산나트륨 및 약 0.001% w/v 폴록사머 188을 포함하는 용액 중에서 2.4-2.8 x 1012개 vg/mL의 표적 농도, pH 약 7.3으로 제제화될 수 있다. 특정 실시양태에서, 개시내용의 AAV 입자는 약 180mM 염화나트륨, 약 10mM 인산나트륨 및 약 0.001% w/v 폴록사머 188을 포함하는 용액 중에서 2.6 x 1012개 vg/mL의 표적 농도, pH 약 7.3으로 제제화될 수 있다.
특정 실시양태에서, 개시내용의 AAV 입자는 약 180mM 염화나트륨, 약 10mM 인산나트륨 및 약 0.001% w/v 폴록사머 188을 포함하는 용액 중에서 2.0-3.5 x 1012개 vg/mL의 표적 농도, pH 약 7.3으로 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, 개시내용의 AAV 입자는 약 180mM 염화나트륨, 약 10mM 인산나트륨 및 약 0.001% w/v 폴록사머 188을 포함하는 용액 중에서 2.4-2.8 x 1012개 vg/mL의 표적 농도, pH 약 7.3으로 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, 개시내용의 AAV 입자는 약 180mM 염화나트륨, 약 10mM 인산나트륨 및 약 0.001% w/v 폴록사머 188을 포함하는 용액 중에서 2.6 x 1012개 vg/mL의 표적 농도, pH 약 7.3으로 투여될 수 있다.
최종 용액 중 염화나트륨의 농도는 150mM-200mM일 수 있다. 비제한적 예로서, 최종 용액 중 염화나트륨의 농도는 150mM, 160mM, 170mM, 180mM, 190mM 또는 200mM일 수 있다. 최종 용액 중 인산나트륨의 농도는 1mM-50mM일 수 있다. 비제한적 예로서, 최종 용액 중 인산나트륨의 농도는 1mM, 2mM, 3mM, 4mM, 5mM, 6mM, 7mM, 8mM, 9mM, 10mM, 15mM, 20mM, 25mM, 30mM, 40mM, 또는 50mM일 수 있다. 폴록사머 188 (플루론산 (F-68))의 농도는 0.0001%-1%일 수 있다. 비제한적 예로서, 폴록사머 188 (플루론산 (F-68))의 농도는 0.0001%, 0.0005%, 0.001%, 0.005%, 0.01%, 0.05%, 0.1%, 0.5%, 또는 1% w/v일 수 있다. 최종 용액은 6.8-7.7의 pH를 가질 수 있다. 최종 용액의 pH에 대한 비제한적 예는 pH 6.8, 6.9, 7.0, 7.1, 7.2, 7.3, 7.4, 7.5, 7.6, 또는 7.7을 포함한다.
특정 실시양태에서, 개시내용의 AAV 입자는 약 1.05% 염화나트륨, 약 0.212% 이염기성 인산나트륨, 7수화물, 약 0.025% 일염기성 인산나트륨, 1수화물, 및 0.001% 폴록사머 188을 포함하는 용액 중에서 pH 약 7.4로 제제화될 수 있다. 특정 실시양태에서, 이러한 제제화된 용액 중의 AAV 입자의 농도는 약 0.001%일 수 있다. 최종 용액 중 염화나트륨의 농도는 0.1-2.0%일 수 있으며, 비제한적 예는 0.1%, 0.25%, 0.5%, 0.75%, 0.95%, 0.96%, 0.97%, 0.98%, 0.99%, 1.00%, 1.01%, 1.02%, 1.03%, 1.04%, 1.05%, 1.06%, 1.07%, 1.08%, 1.09%, 1.10%, 1.25%, 1.5%, 1.75%, 또는 2%이다. 최종 용액 중 이염기성 인산나트륨의 농도는 0.100-0.300%일 수 있으며, 비제한적 예는 0.100%, 0.125%, 0.150%, 0.175%, 0.200%, 0.210%, 0.211%, 0.212%, 0.213%, 0.214%, 0.215%, 0.225%, 0.250%, 0.275%, 0.300%를 포함한다. 최종 용액 중 일염기성 인산나트륨의 농도는 0.010-0.050%일 수 있으며, 비제한적 예는 0.010%, 0.015%, 0.020%, 0.021%, 0.022%, 0.023%, 0.024%, 0.025%, 0.026%, 0.027%, 0.028%, 0.029%, 0.030%, 0.035%, 0.040%, 0.045%, 또는 0.050%이다. 폴록사머 188 (플루론산 (F-68))의 농도는 0.0001%-1%일 수 있다. 비제한적 예로서, 폴록사머 188 (플루론산 (F-68))의 농도는0.0001%, 0.0005%, 0.001%, 0.005%, 0.01%, 0.05%, 0.1%, 0.5%, 또는 1%일 수 있다. 최종 용액은 6.8-7.7의 pH를 가질 수 있다. 최종 용액의 pH에 대한 비제한적 예는 pH 6.8, 6.9, 7.0, 7.1, 7.2, 7.3, 7.4, 7.5, 7.6, 또는 7.7을 포함한다.
특정 실시양태에서, 제제는 하기 CAS (화학 초록 서비스) 등록 번호, 7647-14-15 (염화나트륨), 7782-85-6 (이염기성 인산나트륨, 7수화물), 10049-21-5 (일염기성 인산나트륨, 1수화물), 9003-11-6 (폴록사머 188) 및 2226647-27-2 (재조합 아데노-연관 바이러스 2 벡터 VY-AADC02 인간 방향족 아미노산 데카르복실라제-명시)를 갖는 성분을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 AAV 제제는 적어도 1개의 발현된 기능적 페이로드의 발현을 위해 충분한 AAV 입자를 함유할 수 있다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 1, 2, 3, 4 또는 5개의 기능적 페이로드를 코딩하는 바이러스 게놈을 함유할 수 있다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 제제는 표적 농도의 AAV 벡터 (vg/mL)로 제제화될 수 있고, 상이한 표적 농도의 AAV 벡터로 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, AAV 제제는 표적 농도의 AAV 벡터 (vg/mL)로 제제화된 다음, 보다 높은 표적 농도의 AAV 벡터로 투여되도록 농축될 수 있다. 특정 실시양태에서, AAV 제제는 표적 농도의 AAV 벡터 (vg/mL)로 제제화된 다음, 보다 낮은 표적 농도의 AAV 벡터로 투여되도록 희석될 수 있다.
본 개시내용에 따르면, AAV 입자는 CNS 전달을 위해 제제화될 수 있다. 뇌 혈액 장벽을 가로지르는 작용제가 사용될 수 있다. 예를 들어, 분자를 뇌 혈액 장벽 내피로 표적화할 수 있는 일부 세포 관통 펩티드가 제제화에 사용될 수 있다 (예를 들어, 문헌 [Mathupala, Expert Opin Ther Pat., 2009, 19, 137-140]; 그의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함됨).
부형제 및 희석제
개시내용의 AAV 입자는 (1) 안정성을 증가시키고/거나; (2) 세포 형질감염 또는 형질도입을 증가시키고/거나; (3) 페이로드의 지속 또는 지연 방출을 가능하게 하고/거나; (4) 생체분포를 변경 (예를 들어, 바이러스 입자를 특정 조직 또는 세포 유형으로 표적화)하고/거나; (5) 코딩된 단백질의 번역을 증가시키고/거나; (6) 코딩된 단백질의 방출 프로파일을 변경하고/거나 (7) 개시내용의 페이로드의 조절가능한 발현을 가능하게 하기 위해 1종 이상의 부형제 또는 희석제를 사용하여 제제화될 수 있다.
일부 실시양태에서, 제약상 허용되는 부형제는 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100% 순수할 수 있다. 일부 실시양태에서, 부형제는 인간에서의 사용 및 수의학적 사용에 대해 승인된 것이다. 일부 실시양태에서, 부형제는 미국 식품 의약품국에 의해 승인된 것일 수 있다. 일부 실시양태에서, 부형제는 제약 등급을 가질 수 있다. 일부 실시양태에서, 부형제는 미국 약전 (USP), 유럽 약전 (EP), 영국 약전, 및/또는 국제 약전의 표준을 충족시킬 수 있다.
본원에 사용된 부형제는 목적하는 특정한 투여 형태에 적합한 임의의 모든 용매, 분산 매질, 희석제, 또는 다른 액체 비히클, 분산 또는 현탁 보조제, 표면 활성제, 등장화제, 증점제 또는 유화제, 보존제 등을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 제약 조성물을 제제화하기 위한 다양한 부형제 및 조성물을 제조하기 위한 기술은 관련 기술분야에 공지되어 있다 (문헌 [Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21st Edition, A. R. Gennaro, Lippincott, Williams & Wilkins, Baltimore, MD, 2006] 참조; 그의 전문은 본원에 참조로 포함됨). 임의의 통상적인 부형제 매질이 예컨대 임의의 바람직하지 않은 생물학적 효과를 생성하거나 또는 달리 제약 조성물의 임의의 다른 성분(들)과 유해한 방식으로 상호작용함으로써 물질 또는 그의 유도체와 비상용성일 수 있는 경우를 제외하고, 통상적인 부형제 매질의 사용은 본 개시내용의 범주 내에 있는 것으로 고려될 수 있다.
예시적인 희석제는 탄산칼슘, 탄산나트륨, 인산칼슘, 인산이칼슘, 황산칼슘, 인산수소칼슘, 인산나트륨 락토스, 수크로스, 셀룰로스, 미세결정질 셀룰로스, 카올린, 만니톨, 소르비톨, 이노시톨, 염화나트륨, 건조 전분, 옥수수 전분, 분말화 당 등, 및/또는 그의 조합을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.
특정 실시양태에서, AAV 입자는 투여 전 히드로겔 중에 제제화될 수 있다. 히드로겔은 그의 유의한 물 함량으로 인해 천연 조직과 유사한 가요성의 정도를 갖는다.
또 다른 실시양태에서, 히드로겔은 AAV 입자 제제의 투여전에 대상체에게 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, 히드로겔의 투여의 부위는 AAV 입자 제제의 투여 부위의 3 인치 내 (예를 들어, 2.9, 2.8, 2.7, 2.6, 2.5, 2.4, 2.3, 2.2., 2.1, 2.0, 1.9, 1.8, 1.7, 1.6, 1.5, 1.4, 1.3, 1.2, 1.1, 1.0, 0.9, 0.8, 0.7, 0.6, 0.5, 0.4, 0.3, 0.2, 0.1 또는 0.1 인치 미만 내)일 수 있다.
불활성 성분
일부 실시양태에서, AAV 입자 제제는 적어도 1종의 불활성 성분을 포함할 수 있다. 본원에 사용된 용어 "불활성 성분"은 제제에 포함된 제약 조성물의 활성 성분의 활성에 기여하지 않는 1종 이상의 작용제를 지칭한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 제제에 사용될 수 있는 불활성 성분은 미국 식품 의약품국 (FDA)에 의해 모두 승인받은 것일 수 있거나, 승인받지 않은 것일 수 있거나, 또는 일부가 승인받은 것일 수 있다.
특정 실시양태에서, AAV 입자 제약 조성물은 적어도 1종의 불활성 성분 예컨대 비제한적으로, 1,2,6-헥산트리올; 1,2-디미리스토일-Sn-글리세로-3-(포스포-S-(1-글리세롤)); 1,2-디미리스토일-Sn-글리세로-3-포스포콜린; 1,2-디올레오일-Sn-글리세로-3-포스포콜린; 1,2-디팔미토일-Sn-글리세로-3-(포스포-Rac-(1-글리세롤)); 1,2-디스테아로일-Sn-글리세로-3-(포스포-Rac-(1-글리세롤)); 1,2-디스테아로일-Sn-글리세로-3-포스포콜린; 1-O-톨릴비구아니드; 2-에틸-1,6-헥산디올; 아세트산; 아세트산, 빙초산; 아세트산 무수물; 아세톤; 아세톤 중아황산나트륨; 아세틸화 라놀린 알콜; 아세틸화 모노글리세리드; 아세틸시스테인; 아세틸트립토판, DL-; 아크릴레이트 공중합체; 아크릴산-이소옥틸 아크릴레이트 공중합체; 아크릴 접착제 788; 활성탄; 애드코트 72A103; 접착 테이프; 아디프산; 에어로텍스(Aerotex) 수지 3730; 알라닌; 응집된 알부민; 콜로이드성 알부민; 인간 알부민; 알콜; 탈수된 알콜; 변성된 알콜; 희석된 알콜; 알파덱스; 알긴산; 알킬 암모늄 술폰산 베타인; 알킬 아릴 술폰산나트륨; 알란토인; 알릴 .알파.-이오논; 아몬드 오일; 알파-테르피네올; 알파-토코페롤; 알파-토코페롤 아세테이트, Dl-; 알파-토코페롤, Dl-; 알루미늄 아세테이트; 알루미늄 클로르히드록시 알란토이네이트; 수산화알루미늄; 수산화알루미늄 - 수화된 수크로스; 수산화알루미늄 겔; 수산화알루미늄 겔 F 500; 수산화알루미늄 겔 F 5000; 알루미늄 모노스테아레이트; 산화알루미늄; 알루미늄 폴리에스테르; 규산알루미늄; 알루미늄 전분 옥테닐숙시네이트; 스테아르산알루미늄; 알루미늄 서브아세테이트; 황산알루미늄 무수; 아머콜 C; 아머콜-Cab; 아미노메틸프로판올; 암모니아; 암모니아 용액; 진한 암모니아 용액; 아세트산암모늄; 수산화암모늄; 암모늄 라우릴 술페이트; 암모늄 노녹시놀-4 술페이트; C-12-C-15 선형 1급 알콜 에톡실레이트의 암모늄 염; 황산암모늄; 암모닉스; 양쪽성-2; 양쪽성-9; 아네톨; 무수 시트르산; 무수 덱스트로스; 무수 락토스; 무수 시트르산삼나트륨; 아니시드 오일; 아녹시드 Sbn; 소포제; 안티피린; 아파플루란; 살구 커넬 오일 Peg-6 에스테르; 아쿠아포르; 아르기닌; 아를라셀; 아스코르브산; 아스코르빌 팔미테이트; 아스파르트산; 발삼 페루; 황산바륨; 밀랍; 밀랍, 합성; 베헤네트-10; 벤토나이트; 벤즈알코늄 클로라이드; 벤젠술폰산; 벤제토늄 클로라이드; 벤조도데시늄 브로마이드; 벤조산; 벤질 알콜; 벤질 벤조에이트; 벤질 클로라이드; 베타덱스; 비밥시티드; 비스무트 서브갈레이트; 붕산; 브로크리나트; 부탄; 부틸 알콜; 비닐 메틸 에테르/말레산 무수물 공중합체의 부틸 에스테르 (125000 Mw); 부틸 스테아레이트; 부틸화 히드록시아니솔; 부틸화 히드록시톨루엔; 부틸렌 글리콜; 부틸파라벤; 부티르산; C20-40 파레트-24; 카페인; 칼슘; 탄산칼슘; 염화칼슘; 글루셉트산칼슘; 수산화칼슘; 락트산칼슘; 칼코부트롤; 칼디아미드 소듐; 칼록세테이트 트리소듐; 칼테리돌 칼슘; 캐나다 발삼; 카프릴산/카프르산 트리글리세리드; 카프릴산/카프르산/스테아르산 트리글리세리드; 캅탄; 캅티솔; 카라멜; 카르보머 1342; 카르보머 1382; 카르보머 934; 카르보머 934p; 카르보머 940; 카르보머 941; 카르보머 980; 카르보머 981; 카르보머 단독중합체 유형 B (가교된 알릴 펜타에리트리톨); 카르보머 단독중합체 유형 C (가교된 알릴 펜타에리트리톨); 이산화탄소; 카르복시 비닐 공중합체; 카르복시메틸셀룰로스; 카르복시메틸셀룰로스 소듐; 카르복시폴리메틸렌; 카라기난; 카라기난 염; 피마자 오일; 시더잎 오일; 셀룰로스; 셀룰로스, 미세결정질; 세라신트-Se; 세레신; 세테아레트-12; 세테아레트-15; 세테아레트-30; 세테아릴 알콜/세테아레트-20; 세테아릴 에틸헥사노에이트; 세테트-10; 세테트-2; 세테트-20; 세테트-23; 세토스테아릴 알콜; 세트리모늄 클로라이드; 세틸 알콜; 세틸 에스테르 왁스; 세틸 팔미테이트; 세틸피리디늄 클로라이드; 클로로부탄올; 클로로부탄올 반수화물; 클로로부탄올, 무수; 클로로크레졸; 클로로크실레놀; 콜레스테롤; 콜레트; 콜레트-24; 시트레이트; 시트르산; 시트르산 1수화물; 시트르산, 함수; 코카미드 에테르 술페이트; 코카민 옥시드; 코코 베타인; 코코 디에탄올아미드; 코코 모노에탄올아미드; 코코아 버터; 코코-글리세리드; 코코넛 오일; 수소화 코코넛 오일; 수소화 코코넛 오일/팜핵 오일 글리세리드; 코코일 카프릴로카프레이트; 콜라 니티다 종자 추출물; 콜라겐; 착색제 현탁액; 옥수수 오일; 목화씨 오일; 크림 베이스; 크레아틴; 크레아티닌; 크레졸; 크로스카르멜로스 소듐; 크로스포비돈; 황산제2구리; 무수 황산제2구리; 시클로메티콘; 시클로메티콘/디메티콘 코폴리올; 시스테인; 시스테인 히드로클로라이드; 무수 시스테인 히드로클로라이드; 시스테인, Dl-; D&C 적색 No. 28; D&C 적색 No. 33; D&C 적색 No. 36; D&C 적색 No. 39; D&C 황색 No. 10; 달팜프리딘; 다우베르트 1-5 Pestr (매트) 164z; 데실 메틸 술폭시드; 데히다그 왁스 Sx; 데히드로아세트산; 데히물스 E; 데나토늄 벤조에이트; 데옥시콜산; 덱스트란; 덱스트란 40; 덱스트린; 덱스트로스; 덱스트로스 1수화물; 덱스트로스 용액; 디아트리조산; 디아졸리디닐 우레아; 디클로로벤질 알콜; 디클로로디플루오로메탄; 디클로로테트라플루오로에탄; 디에탄올아민; 디에틸 피로카르보네이트; 디에틸 세바케이트; 디에틸렌 글리콜 모노에틸 에테르; 디에틸헥실 프탈레이트; 디히드록시알루미늄 아미노아세테이트; 디이소프로판올아민; 디이소프로필 아디페이트; 디이소프로필 디리놀레에이트; 디메티콘 350; 디메티콘 코폴리올; 디메티콘 Mdx4-4210; 디메티콘 의료용 유체 360; 디메틸 이소소르비드; 디메틸 술폭시드; 디메틸아미노에틸 메타크릴레이트 - 부틸 메타크릴레이트 - 메틸 메타크릴레이트 공중합체; 디메틸디옥타데실암모늄 벤토나이트; 디메틸실록산/메틸비닐실록산 공중합체; 디노세브 암모늄 염; 디팔미토일포스파티딜글리세롤, Dl-; 디프로필렌 글리콜; 디소듐 코코암포디아세테이트; 디소듐 라우레트 술포숙시네이트; 디소듐 라우릴 술포숙시네이트; 디소듐 술포살리실레이트; 디소페닌; 디비닐벤젠 스티렌 공중합체; Dmdm 히단토인; 도코산올; 도큐세이트 소듐; 듀로-탁(Duro-Tak) 280-2516; 듀로-탁 387-2516; 듀로-탁 80-1196; 듀로-탁 87-2070; 듀로-탁 87-2194; 듀로-탁 87-2287; 듀로-탁 87-2296; 듀로-탁 87-2888; 듀로-탁 87-2979; 에데테이트 칼슘 디소듐; 에데테이트 디소듐; 무수 에데테이트 디소듐; 에데트산나트륨; 에데트산; 난 인지질; 엔트수폰; 엔트수폰 소듐; 에필락토스; 에피테트라시클린 히드로클로라이드; 에센스 부케 9200; 에탄올아민 히드로클로라이드; 에틸 아세테이트; 에틸 올레에이트; 에틸셀룰로스; 에틸렌 글리콜; 에틸렌 비닐 아세테이트 공중합체; 에틸렌디아민; 에틸렌디아민 디히드로클로라이드; 에틸렌-프로필렌 공중합체; 에틸렌-비닐 아세테이트 공중합체 (28% 비닐 아세테이트); 에틸렌-비닐 아세테이트 공중합체 (9% 비닐아세테이트); 에틸헥실 히드록시스테아레이트; 에틸파라벤; 유칼립톨; 엑사메타짐; 식용 지방; 경질 지방; 지방산 에스테르; 지방산 펜타에리트리올 에스테르; 지방산; 지방 알콜 시트레이트; 지방 알콜; Fd&C 청색 No. 1; Fd&C 녹색 No. 3; Fd&C 적색 No. 4; Fd&C 적색 No. 40; Fd&C 황색 No. 10 (Delisted); Fd&C 황색 No. 5; Fd&C 황색 No. 6; 염화제2철; 산화제2철; 향미제 89-186; 향미제 89-259; 향미제 Df-119; 향미제 Df-1530; 향미 증진제; 향미제 피그 827118; 향미제 라즈베리 Pfc-8407; 향미제 로디아 파마슈티칼 No. Rf 451; 플루오로클로로히드로카본; 포름알데히드; 포름알데히드 용액; 분별화 코코넛 오일; 향료 3949-5; 향료 520a; 향료 6.007; 향료 91-122; 향료 9128-Y; 향료 93498g; 향료 발삼 소나무 No. 5124; 향료 부케 10328; 향료 케모덤 6401-B; 향료 케모덤 6411; 향료 크림 No. 73457; 향료 Cs-28197; 향료 펠톤 066m; 향료 피르메니크 47373; 향료 지보단 Ess 9090/1c; 향료 H-6540; 향료 허브 10396; 향료 Nj-1085; 향료 P O Fl-147; 향료 Pa 52805; 향료 파라 덤 D; 향료 Rbd-9819; 향료 쇼 머지(Shaw Mudge) U-7776; 향료 Tf 044078; 향료 웅게러 허니서클 K 2771; 향료 웅게러 N5195; 프룩토스; 산화가돌리늄; 갈락토스; 감마 시클로덱스트린; 젤라틴; 가교된 젤라틴; 겔폼 스폰지; 겔란 검 (저 아실); 겔바 737; 겐티스산; 겐티스산 에탄올아미드; 글루셉테이트 소듐; 글루셉테이트 소듐 2수화물; 글루코노락톤; 글루쿠론산; 글루탐산, Dl-; 글루타티온; 글리세린; 수소화 로진의 글리세롤 에스테르; 글리세릴 시트레이트; 글리세릴 이소스테아레이트; 글리세릴 라우레이트; 글리세릴 모노스테아레이트; 글리세릴 올레에이트; 글리세릴 올레에이트/프로필렌 글리콜; 글리세릴 팔미테이트; 글리세릴 리시놀레에이트; 글리세릴 스테아레이트; 글리세릴 스테아레이트 - 라우레트-23; 글리세릴 스테아레이트/Peg 스테아레이트; 글리세릴 스테아레이트/Peg-100 스테아레이트; 글리세릴 스테아레이트/Peg-40 스테아레이트; 글리세릴 스테아레이트-스테아르아미도에틸 디에틸아민; 글리세릴 트리올레에이트; 글리신; 글리신 히드로클로라이드; 글리콜 디스테아레이트; 글리콜 스테아레이트; 구아니딘 히드로클로라이드; 구아 검; 헤어 컨디셔너 (18n195-1m); 헵탄; 헤타스타치; 헥실렌 글리콜; 고밀도 폴리에틸렌; 히스티딘; 인간 알부민 마이크로구체; 히알루로네이트 소듐; 탄화수소; 가소화된 탄화수소 겔; 염산; 희석된 염산; 히드로코르티손; 히드로겔 중합체; 과산화수소; 수소화 피마자 오일; 수소화 팜 오일; 수소화 팜/팜핵 오일 Peg-6 에스테르; 수소화 폴리부텐 635-690; 히드록시드 이온; 히드록시에틸 셀룰로스; 히드록시에틸피페라진 에탄 술폰산; 히드록시메틸 셀룰로스; 히드록시옥타코사닐 히드록시스테아레이트; 히드록시프로필 셀룰로스; 히드록시프로필 메틸셀룰로스 2906; 히드록시프로필-베타-시클로덱스트린; 히프로멜로스 2208 (15000 Mpa.S); 히프로멜로스 2910 (15000 Mpa.S); 히프로멜로스; 이미드우레아; 아이오딘; 아이오독사민산; 로페타민 히드로클로라이드; 아이리쉬 모스 추출물; 이소부탄; 이소세테트-20; 이소류신; 이소옥틸 아크릴레이트; 이소프로필 알콜; 이소프로필 이소스테아레이트; 이소프로필 미리스테이트; 이소프로필 미리스테이트 - 미리스틸 알콜; 이소프로필 팔미테이트; 이소프로필 스테아레이트; 이소스테아르산; 이소스테아릴 알콜; 등장성 염화나트륨 용액; 젤렌; 카올린; 카톤 Cg; 카톤 Cg II; 락테이트; 락트산; 락트산, Dl-; 락트산, L-; 락토비온산; 락토스; 락토스 1수화물; 함수 락토스; 라네트; 라놀린; 라놀린 알콜 - 미네랄 오일; 라놀린 알콜; 라놀린 무수; 라놀린 콜레스테롤; 라놀린 비이온성 유도체; 라놀린, 에톡실화; 수소화 라놀린; 라우르알코늄 클로라이드; 라우라민 옥시드; 라우디모늄 가수분해된 동물 콜라겐; 라우레트 술페이트; 라우레트-2; 라우레트-23; 라우레트-4; 라우르산 디에탄올아미드; 라우르산 미리스트산 디에탄올아미드; 라우로일 사르코신; 라우릴 락테이트; 라우릴 술페이트; 라반둘라 안구스티폴리아 플라워링 탑; 레시틴; 비표백 레시틴; 난 레시틴; 수소화 레시틴; 수소화 대두 레시틴; 대두 레시틴; 레몬 오일; 류신; 레불린산; 리도페닌; 경질 미네랄 오일; 경질 미네랄 오일 (85 Ssu); 리모넨, (+/-)-; 리포콜 Sc-15; 리신; 리신 아세테이트; 리신 1수화물; 규산알루미늄마그네슘; 규산알루미늄마그네슘 수화물; 염화마그네슘; 질산마그네슘; 스테아르산마그네슘; 말레산; 만니톨; 마프로픽스; 메브로페닌; 의료용 접착제 변형된 S-15; 의료용 안티폼 A-F 에멀젼; 메드로네이트 디소듐; 메드론산; 메글루민; 멘톨; 메타크레졸; 메타인산; 메탄술폰산; 메티오닌; 메틸 알콜; 메틸 글루세트-10; 메틸 글루세트-20; 메틸 글루세트-20 세스퀴스테아레이트; 메틸 글루코스 세스퀴스테아레이트; 메틸 라우레이트; 메틸 피롤리돈; 메틸 살리실레이트; 메틸 스테아레이트; 메틸보론산; 메틸셀룰로스 (4000 Mpa.S); 메틸셀룰로스; 메틸클로로이소티아졸리논; 메틸렌 블루; 메틸이소티아졸리논; 메틸파라벤; 미세결정질 왁스; 미네랄 오일; 모노 및 디글리세리드; 모노스테아릴 시트레이트; 모노티오글리세롤; 멀티스테롤 추출물; 미리스틸 알콜; 미리스틸 락테이트; 미리스틸-.감마.- 피콜리늄 클로라이드; N-(카르바모일-메톡시 Peg-40)-1,2-디스테아로일-세팔린 소듐; N,N-디메틸아세트아미드; 니아신아미드; 니옥심; 질산; 질소; 노녹시놀 아이오딘; 노녹시놀-15; 노녹시놀-9; 노르플루란; 오트밀; 옥타데센-1/말레산 공중합체; 옥탄산; 옥티살레이트; 옥톡시놀-1; 옥톡시놀-40; 옥톡시놀-9; 옥틸도데칸올; 옥틸페놀 폴리메틸렌; 올레산; 올레트-10/올레트-5; 올레트-2; 올레트-20; 올레일 알콜; 올레일 올레에이트; 올리브 오일; 옥시드로네이트 디소듐; 옥시퀴놀린; 팜핵 오일; 팔미타민 옥시드; 파라벤; 파라핀; 파라핀, 백색 연질; 파르퓸 크레메 45/3; 땅콩 오일; 정제된 땅콩 오일; 펙틴; Peg 6-32 스테아레이트/글리콜 스테아레이트; Peg 식물성 오일; Peg-100 스테아레이트; Peg-12 글리세릴 라우레이트; Peg-120 글리세릴 스테아레이트; Peg-120 메틸 글루코스 디올레에이트; Peg-15 코카민; Peg-150 디스테아레이트; Peg-2 스테아레이트; Peg-20 소르비탄 이소스테아레이트; Peg-22 메틸 에테르/도데실 글리콜 공중합체; Peg-25 프로필렌 글리콜 스테아레이트; Peg-4 디라우레이트; Peg-4 라우레이트; Peg-40 피마자 오일; Peg-40 소르비탄 디이소스테아레이트; Peg-45/도데실 글리콜 공중합체; Peg-5 올레에이트; Peg-50 스테아레이트; Peg-54 수소화 피마자 오일; Peg-6 이소스테아레이트; Peg-60 피마자 오일; Peg-60 수소화 피마자 오일; Peg-7 메틸 에테르; Peg-75 라놀린; Peg-8 라우레이트; Peg-8 스테아레이트; 페고솔 7 스테아레이트; 펜타데카락톤; 펜타에리트리톨 코코에이트; 펜타소듐 펜테테이트; 펜테테이트 칼슘 트리소듐; 펜테트산; 페퍼민트 오일; 퍼플루트렌; 퍼퓸 25677; 퍼퓸 부케; 퍼퓸 E-1991; 퍼퓸 Gd 5604; 퍼퓸 타나 90/42 Scba; 퍼퓸 W-1952-1; 페트롤라툼; 페트롤라툼, 백색; 석유 증류; 페놀; 액화된 페놀; 페노닙; 페녹시에탄올; 페닐알라닌; 페닐에틸 알콜; 아세트산페닐제2수은; 질산페닐제2수은; 난 포스파티딜 글리세롤; 인지질; 난 인지질; 포스포리폰 90g; 인산; 소나무 바늘 오일 (피누스 실베스트리스); 피페라진 6수화물; 플라스티베이스-50w; 폴라크릴린; 폴리드로늄 클로라이드; 폴록사머 124; 폴록사머 181; 폴록사머 182; 폴록사머 188; 폴록사머 237; 폴록사머 407; 폴리(비스(P-카르복시페녹시)프로판 무수물):세바스산; 폴리(디메틸실록산/메틸비닐실록산/메틸히드로겐실록산) 디메틸비닐 또는 디메틸히드록시 또는 트리메틸 말단차단된 것; 폴리(Dl-락트산-코-글리콜산), (50:50; 폴리(Dl-락트산-코-글리콜산), 에틸 에스테르 종결된 것, (50:50; 폴리아크릴산 (250000 Mw); 폴리부텐 (1400 Mw); 폴리카르보필; 폴리에스테르; 폴리에스테르 폴리아민 공중합체; 폴리에스테르 레이온; 폴리에틸렌 글리콜 1000; 폴리에틸렌 글리콜 1450; 폴리에틸렌 글리콜 1500; 폴리에틸렌 글리콜 1540; 폴리에틸렌 글리콜 200; 폴리에틸렌 글리콜 300; 폴리에틸렌 글리콜 300-1600; 폴리에틸렌 글리콜 3350; 폴리에틸렌 글리콜 400; 폴리에틸렌 글리콜 4000; 폴리에틸렌 글리콜 540; 폴리에틸렌 글리콜 600; 폴리에틸렌 글리콜 6000; 폴리에틸렌 글리콜 8000; 폴리에틸렌 글리콜 900; 흑색 산화제2철 (<1%) 함유 고밀도 폴리에틸렌; 황산바륨 (20-24%) 함유 저밀도 폴리에틸렌; 폴리에틸렌 T; 폴리에틸렌 테레프탈레이트; 폴리글락틴; 폴리글리세릴-3 올레에이트; 폴리글리세릴-4 올레에이트; 폴리히드록시에틸 메타크릴레이트; 폴리이소부틸렌; 폴리이소부틸렌 (1100000 Mw); 폴리이소부틸렌 (35000 Mw); 폴리이소부틸렌 178-236; 폴리이소부틸렌 241-294; 폴리이소부틸렌 35-39; 폴리이소부틸렌 저분자량; 폴리이소부틸렌 중분자량; 폴리이소부틸렌/폴리부텐 접착제; 폴리락티드; 폴리올; 폴리옥시에틸렌 - 폴리옥시프로필렌 1800; 폴리옥시에틸렌 알콜; 폴리옥시에틸렌 지방산 에스테르; 폴리옥시에틸렌 프로필렌; 폴리옥실 20 세토스테아릴 에테르; 폴리옥실 35 피마자 오일; 폴리옥실 40 수소화 피마자 오일; 폴리옥실 40 스테아레이트; 폴리옥실 400 스테아레이트; 폴리옥실 6 및 폴리옥실 32 팔미토스테아레이트; 폴리옥실 디스테아레이트; 폴리옥실 글리세릴 스테아레이트; 폴리옥실 라놀린; 폴리옥실 팔미테이트; 폴리옥실 스테아레이트; 폴리프로필렌; 폴리프로필렌 글리콜; 폴리쿼터늄-10; 폴리쿼터늄-7 (70/30 아크릴아미드/다드막; 폴리실록산; 폴리소르베이트 20; 폴리소르베이트 40; 폴리소르베이트 60; 폴리소르베이트 65; 폴리소르베이트 80; 폴리우레탄; 폴리비닐 아세테이트; 폴리비닐 알콜; 폴리비닐 클로라이드; 폴리비닐 클로라이드-폴리비닐 아세테이트 공중합체; 폴리비닐피리딘; 양귀비씨 오일; 칼리; 아세트산칼륨; 칼륨 명반; 중탄산칼륨; 중아황산칼륨; 염화칼륨; 시트르산칼륨; 수산화칼륨; 메타중아황산칼륨; 인산칼륨, 이염기성; 인산칼륨, 일염기성; 칼륨 비누; 소르브산칼륨; 포비돈 아크릴레이트 공중합체; 포비돈 히드로겔; 포비돈 K17; 포비돈 K25; 포비돈 K29/32; 포비돈 K30; 포비돈 K90; 포비돈 K90f; 포비돈/에이코센 공중합체; 포비돈; Ppg-12/Smdi 공중합체; Ppg-15 스테아릴 에테르; Ppg-20 메틸 글루코스 에테르 디스테아레이트; Ppg-26 올레에이트; 생성물 Wat; 프롤린; 프로뮬겐 D; 프로뮬겐 G; 프로판; 추진제 A-46; 프로필 갈레이트; 프로필렌 카르보네이트; 프로필렌 글리콜; 프로필렌 글리콜 디아세테이트; 프로필렌 글리콜 디카프릴레이트; 프로필렌 글리콜 모노라우레이트; 프로필렌 글리콜 모노팔미토스테아레이트; 프로필렌 글리콜 팔미토스테아레이트; 프로필렌 글리콜 리시놀레에이트; 프로필렌 글리콜/디아졸리디닐 우레아/메틸파라벤/프로필파라벤; 프로필파라벤; 프로타민 술페이트; 단백질 가수분해물; Pvm/Ma 공중합체; 쿼터늄-15; 쿼터늄-15 시스-형태; 쿼터늄-52; Ra-2397; Ra-3011; 사카린; 사카린 소듐; 사카린 소듐 무수; 홍화 오일; Sd 알콜 3a; Sd 알콜 40; Sd 알콜 40-2; Sd 알콜 40b; 세피네오 P 600; 세린; 참깨 오일; 시어 버터; 실라스틱 브랜드 의료용 등급 튜빙; 실라스틱 의료용 접착제,실리콘 유형 A; 실리카, 덴탈; 규소; 이산화규소; 이산화규소, 콜로이드성; 실리콘; 실리콘 접착제 4102; 실리콘 접착제 4502; 실리콘 접착제 바이오-Psa Q7-4201; 실리콘 접착제 바이오-Psa Q7-4301; 실리콘 에멀젼; 실리콘/폴리에스테르 필름 스트립; 시메티콘; 시메티콘 에멀젼; 시폰 Ls 20np; 소다 회분; 아세트산나트륨; 아세트산나트륨 무수; 소듐 알킬 술페이트; 아스코르브산나트륨; 벤조산나트륨; 중탄산나트륨; 중황산나트륨; 중아황산나트륨; 붕산나트륨; 붕산나트륨 10수화물; 탄산나트륨; 탄산나트륨 10수화물; 탄산나트륨 1수화물; 소듐 세토스테아릴 술페이트; 염소산나트륨; 염화나트륨; 염화나트륨 주사; 염화나트륨 주사, 정박테리아; 소듐 콜레스테릴 술페이트; 시트르산나트륨; 소듐 코코일 사르코시네이트; 소듐 데스옥시콜레이트; 아디티온산나트륨; 소듐 도데실벤젠술포네이트; 소듐 포름알데히드 술폭실레이트; 소듐 글루코네이트; 수산화나트륨; 차아염소산나트륨; 아이오딘화나트륨; 락트산나트륨; 락트산나트륨, L-; 소듐 라우레트-2 술페이트; 소듐 라우레트-3 술페이트; 소듐 라우레트-5 술페이트; 소듐 라우로일 사르코시네이트; 소듐 라우릴 술페이트; 소듐 라우릴 술포아세테이트; 메타중아황산나트륨; 질산나트륨; 인산나트륨; 인산나트륨 2수화물; 인산나트륨, 이염기성; 인산나트륨, 이염기성, 무수; 인산나트륨, 이염기성, 2수화물; 인산나트륨, 이염기성, 12수화물; 인산나트륨, 이염기성, 7수화물; 인산나트륨, 일염기성; 인산나트륨, 일염기성, 무수; 인산나트륨, 일염기성, 2수화물; 인산나트륨, 일염기성, 1수화물; 소듐 폴리아크릴레이트 (2500000 Mw); 피로인산나트륨; 소듐 피롤리돈 카르복실레이트; 소듐 스타치 글리콜레이트; 숙신산나트륨 6수화물; 황산나트륨; 황산나트륨 무수; 황산나트륨 10수화물; 아황산나트륨; 소듐 술포숙시네이트화 운데실레닉 모노알킬올아미드; 소듐 타르트레이트; 소듐 티오글리콜레이트; 소듐 티오말레이트; 티오황산나트륨; 티오황산나트륨 무수; 소듐 트리메타포스페이트; 소듐 크실렌술포네이트; 소마이 44; 소르브산; 소르비탄; 소르비탄 이소스테아레이트; 소르비탄 모노라우레이트; 소르비탄 모노올레에이트; 소르비탄 모노팔미테이트; 소르비탄 모노스테아레이트; 소르비탄 세스퀴올레에이트; 소르비탄 트리올레에이트; 소르비탄 트리스테아레이트; 소르비톨; 소르비톨 용액; 대두 가루; 대두 오일; 스피아민트 오일; 경랍; 스쿠알란; 안정화된 옥시클로로 착물; 주석 2-에틸헥사노에이트; 염화제1주석; 염화제1주석 무수; 주석 플루오라이드; 주석 타르트레이트; 전분; 예비젤라틴화된 전분 1500; 옥수수 전분; 스테아르알코늄 클로라이드; 스테아르알코늄 헥토라이트/프로필렌 카르보네이트; 스테아르아미도에틸 디에틸아민; 스테아레트-10; 스테아레트-100; 스테아레트-2; 스테아레트-20; 스테아레트-21; 스테아레트-40; 스테아르산; 스테아르산 디에탄올아미드; 스테아르옥시트리메틸실란; 스테아르트리모늄 가수분해된 동물 콜라겐; 스테아릴 알콜; 흡입용 멸균수; 스티렌/이소프렌/스티렌 블록 공중합체; 숙시머; 숙신산; 수크랄로스; 수크로스; 수크로스 디스테아레이트; 수크로스 폴리에스테르; 술프아세트아미드 소듐; 술포부틸에테르 .베타.-시클로덱스트린; 이산화황; 황산; 아황산; 술팍톨 Qs; 타가토스, D-; 활석; 톨 오일; 탈로우 글리세리드; 타르타르산; 타르타르산, Dl-; 테녹스; 테녹스-2; Tert-부틸 알콜; Tert-부틸 히드로퍼옥시드; Tert-부틸히드로퀴논; 테트라키스(2-메톡시이소부틸이소시아나이드)구리(I) 테트라플루오로보레이트; 테트라프로필 오르토실리케이트; 테트로포스민; 테오필린; 티메로살; 트레오닌; 티몰; 주석; 이산화티타늄; 토코페롤; 토코페르솔란; 총 비경구 영양, 지질 에멀젼; 트리아세틴; 트리카프릴린; 트리클로로모노플루오로메탄; 트리데세트-10; 트리에탄올아민 라우릴 술페이트; 트리플루오로아세트산; 중쇄 트리글리세리드; 트리히드록시스테아린; 트리라네트-4 포스페이트; 트리라우레트-4 포스페이트; 시트르산삼나트륨 2수화물; 트리소듐 헤드타; 트리톤 720; 트리톤 X-200; 트롤아민; 트로만타딘; 트로메타민 (트리스); 트립토판; 틸록사폴; 티로신; 운데실렌산; 유니온 76 암스코-레스 6038; 우레아; 발린; 식물성 오일; 수소화 식물성 오일 글리세리드; 수소화 식물성 오일; 베르세타미드; 비스카린; 비스코스/목화; 비타민 E; 유화 왁스; 웨코비 Fs; 백색 세레신 왁스; 백색 왁스; 크산탄 검; 아연; 아세트산아연; 탄산아연; 염화아연; 및 산화아연을 포함한다.
본원에 개시된 AAV 입자의 제약 조성물 제제는 양이온 또는 음이온을 포함할 수 있다. 특정 실시양태에서, 제제는 금속 양이온, 예컨대 비제한적으로, Zn2+, Ca2+, Cu2+, Mn2+, Mg+ 및 그의 조합을 포함한다. 특정 실시양태에서, 제제는 중합체 및 금속 양이온과의 착물을 포함할 수 있다 (예를 들어, 미국 특허 번호 6,265,389 및 6,555,525 참조, 각각은 그의 전문이 본원에 참조로 포함됨).
개시내용의 제제는 또한 1종 이상의 제약상 허용되는 염을 포함할 수 있다. 본원에 사용된 "제약상 허용되는 염"은, 기존 산 또는 염기 모이어티를 그의 염 형태로 전환시킴으로써 (예를 들어, 유리 염기 기를 적합한 유기 산과 반응시킴으로써) 모 화합물이 변형된 것인 개시된 화합물의 유도체를 지칭한다. 제약상 허용되는 염의 예는 염기성 잔기, 예컨대 아민의 무기 또는 유기 산 염; 산성 잔기, 예컨대 카르복실산의 알칼리 또는 유기 염 등을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 대표적인 산 부가염은 아세테이트, 아세트산, 아디페이트, 알기네이트, 아스코르베이트, 아스파르테이트, 벤젠술포네이트, 벤젠 술폰산, 벤조에이트, 비술페이트, 보레이트, 부티레이트, 캄포레이트, 캄포르술포네이트, 시트레이트, 시클로펜탄프로피오네이트, 디글루코네이트, 도데실술페이트, 에탄술포네이트, 푸마레이트, 글루코헵토네이트, 글리세로포스페이트, 헤미술페이트, 헵토네이트, 헥사노에이트, 히드로브로마이드, 히드로클로라이드, 히드로아이오다이드, 2-히드록시-에탄술포네이트, 락토비오네이트, 락테이트, 라우레이트, 라우릴 술페이트, 말레이트, 말레에이트, 말로네이트, 메탄술포네이트, 2-나프탈렌술포네이트, 니코티네이트, 니트레이트, 올레에이트, 옥살레이트, 팔미테이트, 파모에이트, 펙티네이트, 퍼술페이트, 3-페닐프로피오네이트, 포스페이트, 피크레이트, 피발레이트, 프로피오네이트, 스테아레이트, 숙시네이트, 술페이트, 타르트레이트, 티오시아네이트, 톨루엔술포네이트, 운데카노에이트, 발레레이트 염 등을 포함한다. 대표적인 알칼리 또는 알칼리 토금속 염은, 나트륨, 리튬, 칼륨, 칼슘 및 마그네슘 등, 뿐만 아니라, 암모늄, 테트라메틸암모늄, 테트라에틸암모늄, 메틸아민, 디메틸아민, 트리메틸아민, 트리에틸아민, 에틸아민 등을 포함하나 이에 제한되지는 않는 비독성 암모늄, 4급 암모늄 및 아민 양이온을 포함한다. 본 개시내용의 제약상 허용되는 염은, 예를 들어 비-독성 무기 또는 유기 산으로부터 형성된, 모 화합물의 통상적인 비-독성 염을 포함한다.
본 개시내용의 제약상 허용되는 염은 통상적인 화학적 방법에 의해 염기성 또는 산성 모이어티를 함유하는 모 화합물로부터 합성될 수 있다. 일반적으로, 이러한 염은 물 중에서 또는 유기 용매 중에서, 또는 둘의 혼합물 중에서 이들 화합물의 유리 산 또는 염기 형태를 화학량론적 양의 적절한 염기 또는 산과 반응시킴으로써 제조될 수 있으며; 일반적으로, 비수성 매질 예컨대 에테르, 에틸 아세테이트, 에탄올, 이소프로판올, 또는 아세토니트릴이 바람직하다. 적합한 염의 목록은 문헌 [Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1985, p. 1418, Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use, P.H. Stahl and C.G. Wermuth (eds.), Wiley-VCH, 2008, 및 Berge et al., Journal of Pharmaceutical Science, 66, 1-19 (1977)]에서 확인되며; 그의 각각의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
본원에 사용된 용어 "제약상 허용되는 용매화물"은 적합한 용매의 분자가 결정 격자에 혼입된 것인 개시내용의 화합물을 의미한다. 적합한 용매는 투여되는 투여량에서 생리학상 허용된다. 용매화물은 유기 용매, 물 또는 그의 혼합물을 포함하는 용액으로부터 결정화, 재결정화 또는 침전에 의해 제조될 수 있다. 적합한 용매의 예는 에탄올, 물 (예를 들어, 1-, 2-, 및 3-수화물), N-메틸피롤리디논 (NMP), 디메틸 술폭시드 (DMSO), N,N'-디메틸포름아미드 (DMF), N,N'-디메틸아세트아미드 (DMAC), 1,3-디메틸-2-이미다졸리디논 (DMEU), 1,3-디메틸-3,4,5,6-테트라히드로-2-(1H)-피리미디논 (DMPU), 아세토니트릴 (ACN), 프로필렌 글리콜, 에틸 아세테이트, 벤질 알콜, 2-피롤리돈, 벤질 벤조에이트 등이다. 물이 용매인 경우에, 용매화물은 "수화물"로 지칭된다.
III. 투여 및 투약
투여
특정 실시양태에서, AAV 입자는 (예를 들어, 공지된 평가 방법을 사용하여 결정된) 대상체의 중추 신경계의 질환 (예를 들어, 파킨슨병)의 증상을 감소시키기 위해 치료 유효량으로 대상체에 (예를 들어, 대상체의 CNS에) 투여될 수 있다.
본 개시내용의 AAV 입자는 치료상 유효한 결과를 발생시키는 임의의 전달 경로에 의해 투여될 수 있다. 이들은 경장 (장 내로), 위장, 경막외 (경막 내로), 경구 (구강에 의해), 경피, 뇌내 (대뇌 내로), 뇌실내 (뇌실 내로), 표피 (피부 상에 적용), 피내 (피부 자체 내로), 피하 (피부 아래), 비강 투여 (코를 통해), 정맥내 (정맥 내로), 정맥내 볼루스, 정맥내 점적, 동맥내 (동맥 내로), 근육내 (근육 내로), 심장내 (심장 내로), 골내 주입 (골수 내로), 척수강내 (척추관 내로), 실질내 (뇌 조직 내로), 복강내 (복막 내로의 주입 또는 주사), 방광내 주입, 유리체내 (눈을 통해), 강내 (병리학적 강 내로), 해면체내 주사 (음경의 기저 내로), 질내 투여, 자궁내, 양막외 투여, 경피 (전신 분포를 위한 무손상 피부를 통한 확산), 경점막 (점막을 통한 확산), 질경유, 취입 (코흡입), 설하, 구순하, 관장제, 점안제 (결막 상에), 점이제 (귀 안에 또는 귀를 거쳐), 협측 (협부를 향해), 결막, 피부, 치아 (치아 또는 치아들에), 전기삼투, 자궁경내, 부비동내, 기관내, 체외, 혈액투석, 침윤, 간질성, 복부내, 양막내, 관절내, 담관내, 기관지내, 활액낭내, 연골내 (연골 내에), 말총내 (말총 내에), 수조내 (소뇌숨뇌수조 거대 수조 내에), 각막내 (각막 내에), 치아 치관내, 관상동맥내 (관상 동맥 내에), 음경 해면체내 (음경의 해면체의 확장성 공간 내에), 층판내 (층판 내에), 관내 (선의 관 내에), 십이지장내 (십이지장 내에), 경막내 (경막 내에 또는 하에), 표피내 (표피에), 식도내 (식도에), 위내 (위 내에), 치은내 (치은 내에), 회장내 (소장의 원위 부분 내에), 병변내 (국부 병변 내에 또는 그로 직접 도입), 루멘내 (튜브의 루멘 내에), 림프내 (림프 내에), 수질내 (골의 골수강 내에), 수막내 (수막 내에), 심근내 (심근 내에), 안내 (눈 내에), 난소내 (난소 내에), 심막내 (심막 내에), 흉막내 (흉막 내에), 전립선내 (전립선 내에), 폐내 (폐 또는 그의 기관지 내에), 부비동 또는 안와주위동내 (부비동 또는 안와주위동 내에), 척수내 (척주 내에), 활막내 (관절의 활막 강 내에), 건내 (건 내에), 고환내 (고환 내에), 척수강내 (뇌척수 축의 임의의 수준에서의 뇌척수액 내에), 흉곽내 (흉곽 내에), 세관내 (기관의 세관 내에), 종양내 (종양 내에), 고실내 (중이 내에), 혈관내 (혈관 또는 혈관들 내에), 뇌실내 (뇌실 내에), 이온영동 (가용성 염의 이온이 신체의 조직 내로 이동하는 전류에 의함), 관개 (개방성 상처 또는 체강을 세척 또는 플러싱함), 후두 (직접적으로 후두 상에), 코위 (코를 통해 위 내로), 폐쇄 드레싱 기술 (이후에 면적을 폐쇄하는 드레싱에 의해 커버되는 국소 경로 투여), 안부 (외부 눈에), 구인두 (직접적으로 구강 및 인두에), 비경구, 경피, 관절주위, 경막주위, 신경주위, 치주, 직장, 호흡 (국부 또는 전신 효과를 위해 경구로 또는 비강으로 흡입하는 것에 의해 기도 내에), 안구후 (교뇌 뒤 또는 안구 뒤), 연부 조직, 지주막하, 결막하, 점막하, 국소, 경태반 (태반을 통해 또는 가로질러), 경기관 (기관의 벽을 통해), 경고실 (고실을 가로질러 또는 통해), 요관 (요관에), 요도 (요도에), 질, 미측 블록, 진단, 신경 블록, 담도 관류, 심장 관류, 광분리반출술 또는 척수를 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
일부 실시양태에서, 조성물은 이들이 혈액-뇌 장벽, 혈관 장벽, 또는 다른 상피 장벽을 가로지르게 하는 방식으로 투여될 수 있다. 본 개시내용의 AAV 입자는 액체 용액 또는 현탁액으로서, 액체 용액 또는 액체 용액 중 현탁액에 적합한 고체 형태로서, 임의의 적합한 형태로 투여될 수 있다. AAV 입자는 임의의 적절하고 제약상 허용되는 부형제와 함께 제제화될 수 있다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 단일 경로 투여를 통해 대상체에게 전달될 수 있다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 다중-부위 투여 경로를 통해 대상체에게 전달될 수 있다. 대상체에게 2, 3, 4, 5개 또는 5개 초과의 부위로 투여할 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 볼루스 주입을 사용하여 투여할 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 수분, 수시간 또는 수일의 기간에 걸친 지속 전달을 사용하여 투여할 수 있다. 특정 실시양태에서, 주입 속도는 1 내지 30 μL/분이다. 특정 실시양태에서, 주입 속도는 대상체, 분포, 제제 또는 또 다른 전달 파라미터에 따라 변화될 수 있다. 특정 실시양태에서, 주입 속도는 투여 지속기간에 걸쳐 증가한다. 특정 실시양태에서, 주입 속도는 투여 지속기간에 걸쳐 초기 주입 속도로부터 최종 주입 속도로 증가한다. 특정 실시양태에서, 초기 주입 속도는 1 내지 30 μL/분이다. 특정 실시양태에서, 최종 주입 속도는 1 내지 30 μL/분이다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 근육내 전달 경로에 의해 전달될 수 있다. (예를 들어, 미국 특허 번호 6506379 참조; 그의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함됨). 근육내 투여의 비제한적 예는 정맥내 주사 또는 피하 주사를 포함한다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 경구 투여에 의해 전달될 수 있다. 경구 투여의 비제한적 예는 소화관 투여 및 협측 투여를 포함한다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 안내 전달 경로에 의해 전달될 수 있다. 안내 투여의 비제한적 예는 유리체내 주사를 포함한다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 비강내 전달 경로에 의해 전달될 수 있다. 비강내 전달의 비제한적 예는 점비제 또는 비강 스프레이의 투여를 포함한다.
일부 실시양태에서, AAV 입자는 말초 주사에 의해 대상체에게 투여될 수 있다. 말초 주사의 비제한적 예는 복강내, 근육내, 정맥내, 결막 또는 관절 주사를 포함한다. AAV 입자의 말초 투여는 중추 신경계에, 예를 들어, 운동 뉴런에 수송될 수 있다는 것이 관련 기술분야에 개시되어 있다 (예를 들어, 미국 특허 공개 번호 20100240739; 및 20100130594; 그의 각각의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함됨).
특정 실시양태에서, AAV 입자는 주사에 의해 CSF 경로 내로 전달될 수 있다. CSF 경로로의 전달의 비제한적 예는 척수강내 및 뇌실내 투여를 포함한다.
특정 실시양태에서, AAV 입자는 전신 전달에 의해 전달될 수 있다. 특정 실시양태에서, 전신 전달은 혈관내 투여에 의할 수 있다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 두개내 전달에 의해 대상체에게 투여될 수 있다 (예를 들어, 미국 특허 번호 8,119,611 참조; 그의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함됨).
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 주사에 의해 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 주사에 의해 대상체에게 투여될 수 있다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 근육 주사에 의해 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 근육 투여에 의해 대상체에게 투여될 수 있다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 근육내 투여에 의해 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 근육내 투여에 의해 대상체에게 투여될 수 있다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 대상체에게 투여되고, 대상체의 근육을 변환시킨다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 근육내 투여에 의해 투여된다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 실질내 주사를 통해 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 실질내 투여에 의해 대상체에게 투여될 수 있다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 정맥내 투여에 의해 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 정맥내 투여에 의해 대상체에게 투여될 수 있다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 정맥내 전달을 통해 투여될 수 있다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 단일 용량 정맥내 전달을 통해 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, 단일 용량 정맥내 전달은 1-회 치료일 수 있다. 중추 신경계의 질환 (예를 들어, 파킨슨병)과 관련하여, 단일 용량 정맥내 전달은 중추 신경계 (예를 들어, 파킨슨병) 및/또는 관련 증상을 갖는 대상체에게 지속적인 완화를 발생시킬 수 있다. 완화는 수분, 예컨대 비제한적으로, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59분 또는 59분 초과; 수시간, 예컨대 비제한적으로, 1, 2, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48시간, 또는 48시간 초과; 수일, 예컨대 비제한적으로, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31일, 또는 31일 초과; 수주, 예컨대 비제한적으로, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16주, 또는 16주 초과; 수개월, 예컨대 비제한적으로, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24개월, 또는 24개월 초과; 수년, 예컨대 비제한적으로, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15년, 또는 15년 초과 동안 지속될 수 있다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 DRG 침해수용성 뉴런에 정맥내 전달을 통해 투여될 수 있다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 DRG 침해수용성 뉴런에 단일 용량 정맥내 전달을 통해 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, 단일 용량 정맥내 전달은 1-회 치료일 수 있다. 중추 신경계의 질환 (예를 들어, 파킨슨병)과 관련하여, 단일 용량 정맥내 전달은 중추 신경계의 질환 (예를 들어, 파킨슨병) 및/또는 관련 증상을 갖는 대상체에게 지속적인 완화를 발생시킬 수 있다. 완화는 수분, 예컨대 비제한적으로, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59분 또는 59분 초과; 수시간, 예컨대 비제한적으로, 1, 2, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48시간, 또는 48시간 초과; 수일, 예컨대 비제한적으로, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31일, 또는 31일 초과; 수주, 예컨대 비제한적으로, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16주, 또는 16주 초과; 수개월, 예컨대 비제한적으로, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24개월, 또는 24개월 초과; 수년, 예컨대 비제한적으로, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15년, 또는 15년 초과 동안 지속될 수 있다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 척수강내 주사에 의해 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 척수강내 주사에 의해 투여될 수 있다.
특정 실시양태에서, AAV 입자는 척수 운동 뉴런 및/또는 성상세포를 형질도입시키기 위해 치료 유효량으로 거대 수조에 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 척수강내로 투여될 수 있다.
특정 실시양태에서, AAV 입자는 척수 운동 뉴런 및/또는 성상세포를 형질도입시키기 위해 치료 유효량으로 척수강내 주입을 사용하여 투여될 수 있다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 단일 용량 척수강내 주사를 통해 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, 단일 용량 척수강내 주사는 1-회 치료일 수 있다. 중추 신경계의 질환 (예를 들어, 파킨슨병)과 관련하여, 단일 용량 척수강내 주사는 중추 신경계의 질환 (예를 들어, 파킨슨병) 및/또는 관련 증상을 갖는 대상체에게 지속적인 완화를 발생시킬 수 있다. 완화는 수분, 예컨대 비제한적으로, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59분 또는 59분 초과; 수시간, 예컨대 비제한적으로, 1, 2, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48시간, 또는 48시간 초과; 수일, 예컨대 비제한적으로, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31일, 또는 31일 초과; 수주, 예컨대 비제한적으로, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16주, 또는 16주 초과; 수개월, 예컨대 비제한적으로, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24개월, 또는 24개월 초과; 수년, 예컨대 비제한적으로, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15년, 또는 15년 초과 동안 지속될 수 있다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 척수강내 주사를 통해 DRG 침해수용성 뉴런에 투여될 수 있다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 단일 용량 척수강내 주사를 통해 DRG 침해수용성 뉴런에 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, 단일 용량 척수강내 주사는 1-회 치료일 수 있다. 중추 신경계의 질환 (예를 들어, 파킨슨병)과 관련하여, 단일 용량 척수강내 주사는 중추 신경계의 질환 (예를 들어, 파킨슨병) 및/또는 관련 증상을 갖는 대상체에게 지속적인 완화를 발생시킬 수 있다. 완화는 수분, 예컨대 비제한적으로, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59분 또는 59분 초과; 수시간, 예컨대 비제한적으로, 1, 2, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48시간, 또는 48시간 초과; 수일, 예컨대 비제한적으로, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31일, 또는 31일 초과; 수주, 예컨대 비제한적으로, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16주, 또는 16주 초과; 수개월, 예컨대 비제한적으로, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24개월, 또는 24개월 초과; 수년, 예컨대 비제한적으로, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15년, 또는 15년 초과 동안 지속될 수 있다.
특정 실시양태에서, 본원에 기재된 AAV 입자는 척수강내 (IT) 주입을 통해 C1에 투여된다. 주입은 1, 2, 3, 4, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15시간 또는 15시간 초과 동안 이루어질 수 있다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 실질내 주사에 의해 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 실질내 주사에 의해 대상체에게 투여될 수 있다.
특정 실시양태에서, AAV 입자는 척수 운동 뉴런 및/또는 성상세포를 형질도입시키기 위해 치료 유효량으로 거대 수조에 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 실질내 주사에 의해 투여할 수 있다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 실질내 주사 및 척수강내 주사에 의해 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 실질내 주사 및 척수강내 주사를 통해 투여될 수 있다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 피하 주사에 의해 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 피하 주사에 의해 대상체에게 투여될 수 있다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 국소로 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 국소로 대상체에게 투여될 수 있다.
특정 실시양태에서, AAV 입자는 뇌 내로의 직접 주사에 의해 전달될 수 있다. 특정 실시양태에서, 뇌 전달은 선조체내 투여에 의한 것일 수 있다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 선조체내 주사를 통해 투여될 수 있다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 선조체내 주사 및 본원에 기재된 또 다른 투여 경로를 통해 투여될 수 있다.
특정 실시양태에서, AAV 입자는 1개 초과의 투여 경로에 의해 전달될 수 있다. 조합 투여의 비제한적 예로서, AAV 입자는 척수강내 및 뇌실내, 또는 정맥내 및 실질내 투여에 의해 전달될 수 있다.
특정 실시양태에서, AAV 입자는 중추 신경계의 질환 (예를 들어, 파킨슨병)을 갖는 대상체의 기능 및/또는 생존을 개선시키기 위해 치료 유효량으로 CNS에 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, 벡터는 선조체 내로의 직접 주입에 의해 투여될 수 있다.
AAV 입자는 "치료상 유효한" 양, 즉 질환과 연관된 적어도 하나의 증상을 완화 및/또는 예방하기에 충분한 양, 또는 대상체의 상태에서의 개선을 제공하기에 충분한 양으로 투여될 수 있다.
비경구 및 주사가능한 투여
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 제약 조성물, AAV 입자는 비경구로 투여될 수 있다. 경구 및 비경구 투여를 위한 액체 투여 형태는 제약상 허용되는 에멀젼, 마이크로에멀젼, 용액, 현탁액, 시럽 및/또는 엘릭시르를 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 활성 성분에 추가로, 액체 투여 형태는 관련 기술분야에서 통상적으로 사용되는 불활성 희석제, 예컨대, 예를 들어 물 또는 다른 용매, 가용화제 및 유화제, 예컨대 에틸 알콜, 이소프로필 알콜, 에틸 카르보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알콜, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸렌 글리콜, 디메틸포름아미드, 오일 (특히, 목화씨, 땅콩, 옥수수, 배아, 올리브, 피마자 및 참깨 오일), 글리세롤, 테트라히드로푸르푸릴 알콜, 폴리에틸렌 글리콜 및 소르비탄의 지방산 에스테르, 및 그의 혼합물을 포함할 수 있다. 불활성 희석제 이외에, 경구 조성물은 아주반트, 예컨대 습윤제, 유화제 및 현탁화제, 감미제, 향미제 및/또는 퍼퓸제를 포함할 수 있다. 비경구 투여에 대한 특정 실시양태에서, 조성물은 가용화제, 예컨대 크레모포르(CREMOPHOR)®, 알콜, 오일, 변형된 오일, 글리콜, 폴리소르베이트, 시클로덱스트린, 중합체 및/또는 그의 조합과 혼합된다. 다른 실시양태에서, 계면활성제, 예컨대 히드록시프로필셀룰로스가 포함된다.
주사가능한 제제, 예를 들어 멸균 주사가능한 수성 또는 유질 현탁액은 공지된 기술분야에 따라 적합한 분산제, 습윤제 및/또는 현탁화제를 사용하여 제제화될 수 있다. 멸균 주사가능한 제제는, 예를 들어 1,3-부탄디올 중 용액과 같이 비독성 비경구로 허용되는 희석제 및/또는 용매 중 멸균 주사가능한 용액, 현탁액 및/또는 에멀젼일 수 있다. 사용될 수 있는 허용되는 비히클 및 용매 중에는 물, 링거액, U.S.P., 및 등장성 염화나트륨 용액이 있다. 멸균 고정 오일이 통상적으로 용매 또는 현탁 매질로서 사용된다. 이러한 목적을 위해, 합성 모노- 또는 디글리세리드를 포함한 임의의 무자극 고정 오일이 사용될 수 있다. 지방산, 예컨대 올레산이 주사제의 제조에 사용될 수 있다.
주사가능한 제제는, 예를 들어 박테리아-보유 필터를 통한 여과에 의해, 또는 사용 전에 멸균수 또는 다른 멸균 주사가능한 매질 중에 용해 또는 분산시킬 수 있는 멸균 고체 조성물 형태의 멸균제를 혼입시킴으로써 멸균될 수 있다.
활성 성분의 효과를 연장시키기 위해서는, 피하 또는 근육내 주사로부터의 활성 성분의 흡수를 늦추는 것이 종종 바람직하다. 이는 불량한 수용해도를 갖는 결정질 또는 무정형 물질의 액체 현탁액의 사용에 의해 달성될 수 있다. 이어서, 활성 성분의 흡수 속도는 용해 속도에 좌우되며, 이는 또한 결정 크기 및 결정질 형태에 좌우될 수 있다. 대안적으로, 비경구 투여되는 약물 형태의 지연된 흡수는 오일 비히클 중에 약물을 용해 또는 현탁시킴으로써 달성된다. 주사가능한 데포 형태는 생분해성 중합체, 예컨대 폴리락티드-폴리글리콜리드 중에 약물의 마이크로캡슐화 매트릭스를 형성함으로써 제조된다. 약물 대 중합체의 비 및 사용되는 특정한 중합체의 성질에 따라, 약물 방출 속도는 제어될 수 있다. 다른 생분해성 중합체의 예는 폴리(오르토에스테르) 및 폴리(무수물)을 포함한다. 데포 주사가능한 제제는 신체 조직과 상용성인 리포솜 또는 마이크로에멀젼 중에 약물을 포획함으로서 제조된다.
데포 투여
본원에 기재된 바와 같이, 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 제약 조성물, AAV 입자는 연장 방출을 위한 데포로 제제화된다. 일반적으로, 특정 기관 또는 조직 ("표적 조직")이 투여를 위해 표적화된다.
개시내용의 일부 측면에서, 본 개시내용의 제약 조성물, AAV 입자는 표적 조직 내에 또는 그에 근접하여 공간상 보유된다. 표적 조직 (1개 이상의 표적 세포를 포함함)을 제약 조성물, AAV 입자와, 이들이 표적 조직 내에 실질적으로 보유되도록 하는 (이는 조성물의 적어도 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99.9, 99.99 또는 99.99% 초과가 표적 조직 내에 보유되도록 한다는 것을 의미함) 조건 하에 접촉시킴으로써 제약 조성물, AAV 입자를 포유동물 대상체의 표적 조직에 제공하는 방법이 제공된다. 유리하게는, 체류는 1개 이상의 표적 세포에 진입한 제약 조성물, AAV 입자의 양을 측정함으로써 결정된다. 예를 들어, 대상체에 투여된 적어도 1%, 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 99.9%, 99.99% 또는 99.99% 초과의 제약 조성물, AAV 입자가 투여 이후의 기간에 세포 내에 존재한다. 예를 들어, 포유동물 대상체에 대한 근육내 주사는 본 개시내용의 제약 조성물, AAV 입자 및 1종 이상의 형질감염 시약을 포함하는 수성 조성물을 사용하여 수행될 수 있고, 체류는 근육 세포 내에 존재하는 제약 조성물, AAV 입자의 양을 측정함으로써 결정된다.
개시내용의 특정 측면은, 표적 조직 (1개 이상의 표적 세포를 포함함)을 제약 조성물, AAV 입자와, 이들이 이러한 표적 조직 내에 실질적으로 보유되도록 하는 조건 하에 접촉시킴으로써 본 개시내용의 제약 조성물, AAV 입자를 포유동물 대상체의 표적 조직에 제공하는 방법에 관한 것이다. 제약 조성물, AAV 입자는 적어도 1개의 표적 세포에서 관심 효과가 생성되도록 하는데 충분한 활성 성분을 포함한다. 일부 실시양태에서, 제약 조성물, AAV 입자는 일반적으로 1종 이상의 세포 침투제를 포함하지만, 제약상 허용되는 담체의 존재 또는 부재 하의 "네이키드" 제제 (예컨대 세포 침투제 또는 다른 작용제 부재)도 또한 고려된다.
중추 신경계에 대한 전달
특정 실시양태에서, AAV 입자를 포함하는 제약 조성물을 중추 신경계 (예를 들어, 실질)의 세포에 전달하는 것은 최대 1 mL의 주입을 포함한다. 특정 실시양태에서, AAV 입자를 포함하는 제약 조성물을 중추 신경계 (예를 들어, 실질)의 세포에 전달하는 것은 0.001, 0.002, 0.003, 0.004, 0.005, 0.010, 0.015, 0.020, 0.025, 0.030, 0.040, 0.050, 0.060, 0.070, 0.080, 0.090, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 또는 0.9 mL의 주입을 포함할 수 있다.
특정 실시양태에서, AAV 입자를 포함하는 제약 조성물을 중추 신경계 (예를 들어, 실질)의 세포에 전달하는 것은 약 1 mL 내지 약 120 mL의 주입을 포함한다. 특정 실시양태에서, AAV 입자를 포함하는 제약 조성물을 중추 신경계 (예를 들어, 실질)의 세포에 전달하는 것은 0.1, 1, 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 또는 120 mL의 주입을 포함할 수 있다. 특정 실시양태에서, AAV 입자를 중추 신경계 (예를 들어, 실질)의 세포에 전달하는 것은 적어도 3 mL의 주입을 포함한다. 특정 실시양태에서, AAV 입자를 중추 신경계 (예를 들어, 실질)의 세포에 전달하는 것은 3 mL의 주입으로 이루어진다. 특정 실시양태에서, AAV 입자를 중추 신경계 (예를 들어, 실질)의 세포에 전달하는 것은 적어도 10 mL의 주입을 포함한다. 특정 실시양태에서, AAV 입자를 중추 신경계 (예를 들어, 실질)의 세포에 전달하는 것은 10 mL의 주입으로 이루어진다.
특정 실시양태에서, 대상체의 중추 신경계 (예를 들어, 실질)의 세포에 전달되는 AAV 입자를 포함하는 제약 조성물의 부피는 50 μL, 100 μL, 200 μL, 300 μL, 400 μL, 500 μL, 600 μL, 700 μL, 800 μL, 900 μL, 1000 μL, 1100 μL, 1200 μL, 1300 μL, 1400 μL, 1500 μL, 1600 μL, 1700 μL, 1800 μL, 1900 μL, 2000 μL 또는 2000 μL 초과이다.
특정 실시양태에서, 대상체 뇌의 양쪽 반구 내의 영역에 전달되는 AAV 입자를 포함하는 제약 조성물의 부피는 50 μL, 100 μL, 200 μL, 300 μL, 400 μL, 500 μL, 600 μL, 700 μL, 800 μL, 900 μL, 1000 μL, 1100 μL, 1200 μL, 1300 μL, 1400 μL, 1500 μL, 1600 μL, 1700 μL, 1800 μL, 1900 μL, 2000 μL 또는 2000 μL 초과이다. 특정 실시양태에서, 양쪽 반구 내의 영역에 전달되는 부피는 200 μL이다. 특정 실시양태에서, 양쪽 반구 내의 영역에 전달되는 부피는 900 μL이다. 또 다른 비제한적 예로서, 양쪽 반구 내의 영역에 전달되는 부피는 1800 μL이다.
특정 실시양태에서, 대상체 뇌의 각각의 반구에 전달되는 부피는 최대 100 μL, 125 μL., 150 μL, 175 μL, 180 μL, 200 μL, 210 μL, 220 μL, 225 μL, 250 μL, 275 μL, 300 μL, 325 μL, 350 μL, 375, 400 μL, 425 μL, 450 μL, 475 μL, 500 μL, 525 μL, 550 μL, 575 μL, 600 μL., 625 μL, 650 μL, 675 μL, 700 μL, 725 μL, 750 μL, 775 μL, 800 μL, 825 μL, 850 μL, 875 μL, 900 μL, 925 μL, 950 μL, 975 μL, 또는 1000 μL이다.
특정 실시양태에서, 대상체에게 전달되는 총 부피는 1개 이상의 투여 부위, 예를 들어 1, 2, 3, 4, 5개 또는 5개 초과의 부위 사이에서 분할될 수 있다. 특정 실시양태에서, 총 부피는 좌측 및 우측 피각에 대한 투여 사이에서 분할된다. 특정 실시양태에서, 총 부피는 좌측 및 우측 피각 각각에 대한 2개의 투여 부위 사이에서 분할된다.
특정 실시양태에서, AAV 입자를 포함하는 제약 조성물은 천공 바늘을 사용하여 투여된다. 천공 바늘의 비제한적 예는 미국 특허 번호 88,333,734, 7,135,010, 7,575,572, 7,699,852, 4,411,657, 6,890,319, 6,613,026, 6,726,659, 6,565,572, 6,520,949, 6,382,212, 5,848,996, 5,759,179, 5 674,267, 5,588,960, 5,484,401, 5,199,441, 5,012,818, 4,474,569, 3,766,907, 3,552,394에 기재되어 있고, 각각의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
특정 실시양태에서, 조성물은 본원에 기재된 적어도 1개의 페이로드를 포함하고, 페이로드는 AAV 입자에 패키징된 바이러스 게놈의 성분이다. 조성물 중 페이로드를 포함하는 AAV 입자 대 페이로드가 없는 AAV 입자 (본원에서 중공 캡시드로도 지칭됨)의 퍼센트 (%) 비는 0:100, 1:99, 0: 90, 15:85, 25:75, 30:70, 50:50, 70:30, 85:15, 90:10, 99:1 또는 100:0일 수 있다. 특정 실시양태에서, 페이로드를 포함하는 AAV 입자 대 중공 캡시드의 퍼센트 비는 50:50이다. 특정 실시양태에서, 페이로드를 포함하는 AAV 입자 대 중공 캡시드의 퍼센트 비는 70:30이다. 특정 실시양태에서, 페이로드를 포함하는 AAV 입자 대 중공 캡시드의 퍼센트 비는 85:15이다. 특정 실시양태에서, 페이로드를 포함하는 AAV 입자 대 중공 캡시드의 퍼센트 비는 100:0이다.
특정 실시양태에서, 본원에 기재된 조성물은 적어도 1, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99 또는 99% 초과의 페이로드를 포함하는 AAV 입자를 포함한다. 특정 실시양태에서, 조성물은 적어도 50%의 페이로드를 포함하는 AAV 입자를 포함한다. 특정 실시양태에서, 조성물은 적어도 52%의 페이로드를 포함하는 AAV 입자를 포함한다. 특정 실시양태에서, 조성물은 적어도 58%의 페이로드를 포함하는 AAV 입자를 포함한다. 특정 실시양태에서, 조성물은 적어도 70%의 페이로드를 포함하는 AAV 입자를 포함한다. 특정 실시양태에서, 조성물은 적어도 83%의 페이로드를 포함하는 AAV 입자를 포함한다. 특정 실시양태에서, 조성물은 적어도 85%의 페이로드를 포함하는 AAV 입자를 포함한다. 특정 실시양태에서, 조성물은 적어도 99%의 페이로드를 포함하는 AAV 입자를 포함한다. 특정 실시양태에서, 조성물은 100%의 페이로드를 포함하는 AAV 입자를 포함한다.
특정 실시양태에서, 본원에 기재된 조성물은 1-10%, 10-20%, 30-40%, 50-60%, 50-70%, 50-80%, 50-90%, 50-99%, 50-100%, 60-70%, 60-80%, 60-90%, 60-99%, 60-100%, 70-80%, 70-90%, 70-99%, 70-100%, 80-85%, 80-90%, 80-95%, 80-99%, 80-100%, 90-95%, 90-99%, 또는 90-100%의 페이로드를 포함하는 AAV 입자를 포함한다. 특정 실시양태에서, 본원에 기재된 조성물은 50-100%의 페이로드를 포함하는 AAV 입자를 포함한다. 특정 실시양태에서, 본원에 기재된 조성물은 50-60%의 페이로드를 포함하는 AAV 입자를 포함한다. 특정 실시양태에서, 본원에 기재된 조성물은 80-99%의 페이로드를 포함하는 AAV 입자를 포함한다. 특정 실시양태에서, 본원에 기재된 조성물은 80-90%의 페이로드를 포함하는 AAV 입자를 포함한다. 특정 실시양태에서, 본원에 기재된 조성물은 80-95%의 페이로드를 포함하는 AAV 입자를 포함한다. 특정 실시양태에서, 본원에 기재된 조성물은 80-85%의 페이로드를 포함하는 AAV 입자를 포함한다.
특정 실시양태에서, 본원에 기재된 조성물은 1, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99 또는 100%의 중공 입자를 포함한다. 특정 실시양태에서, 조성물은 50% 미만의 중공 입자를 포함한다. 특정 실시양태에서, 조성물은 45% 미만의 중공 입자를 포함한다. 특정 실시양태에서, 조성물은 40% 미만의 중공 입자를 포함한다. 특정 실시양태에서, 조성물은 35% 미만의 중공 입자를 포함한다. 특정 실시양태에서, 조성물은 30% 미만의 중공 입자를 포함한다. 특정 실시양태에서, 조성물은 25% 미만의 중공 입자를 포함한다. 특정 실시양태에서, 조성물은 20% 미만의 중공 입자를 포함한다. 특정 실시양태에서, 조성물은 15% 미만의 중공 입자를 포함한다. 특정 실시양태에서, 조성물은 10% 미만의 중공 입자를 포함한다. 특정 실시양태에서, 조성물은 5% 미만의 중공 입자를 포함한다. 특정 실시양태에서, 조성물은 1% 미만의 중공 입자를 포함한다.
본원에 기재된 조성물에서, 1-10%, 10-20%, 30-40%, 50-60%, 50-70%, 50-80%, 50-90%, 50-99%, 50-100%, 60-70%, 60-80%, 60-90%, 60-99%, 60-100%, 70-80%, 70-90%, 70-99%, 70-100%, 80-85%, 80-90%, 80-95%, 80-99%, 80-100%, 90-95%, 90-99%, 또는 90-100%의 중공 입자를 포함한다. 특정 실시양태에서, 본원에 기재된 조성물은 30-40%의 중공 입자를 포함한다. 특정 실시양태에서, 본원에 기재된 조성물은 30-50%의 중공 입자를 포함한다. 특정 실시양태에서, 본원에 기재된 조성물은 30-60%의 중공 입자를 포함한다. 특정 실시양태에서, 본원에 기재된 조성물은 30-70%의 중공 입자를 포함한다. 특정 실시양태에서, 본원에 기재된 조성물은 30-80%의 중공 입자를 포함한다. 특정 실시양태에서, 본원에 기재된 조성물은 30-90%의 중공 입자를 포함한다.
특정 실시양태에서, 대상체의 구역의 주입 부피에 대한 대상체의 구역의 실질 내 분포 부피의 비는 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9, 1.0, 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 2.0, 2.1, 2.2, 2.3, 2.4, 2.5, 2.6, 2.7, 2.8, 2.9, 3.0, 3.1, 3.2, 3.3, 3.4, 3.5, 3.6, 3.7, 3.8, 3.9, 4.0, 4.1, 4.2, 4.3, 4.4, 4.5, 4.6, 4.7, 4.8, 4.9, 5.0, 5.1, 5.2, 5.3, 5.4, 5.5, 5.6, 5.7, 5.8, 5.9, 6.0 또는 6.0 초과일 수 있다. 특정 실시양태에서, 주입 부피에 대한 실질 내 분포 부피의 비는 미상핵에서 1.6이었다. 특정 실시양태에서, 주입 부피에 대한 실질 내 분포 부피의 비는 피각에서 3.1이었다. 특정 실시양태에서, 피각에서 AAV 입자의 분포는 주입된 부피의 2-3배일 수 있다.
특정 실시양태에서, 용량, 투여 경로 및/또는 투여 부피의 유효성은 본원에 기재된 다양한 방법, 예컨대 비제한적으로 PET 영상화, L-도파 챌린지 시험 (예를 들어, 문헌 [Forsayeth et al. 2006, Mol. Ther. 14(4): 571-577] 참조), UPDRS 스코어 및 환자 일지 (예를 들어, 하우저 일지(Hauser diary))를 사용하여 평가될 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체는 AAV 입자를 포함하는 제약 조성물의 투여 후 감소된 이상운동증 또는 감소된 이상운동증의 기간을 가질 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체는 제한된 이동성 및 이상운동증을 비롯한 파킨슨병 관련 증상의 감소를 가질 수 있다. 또 다른 비제한적 예로서, 대상체는 오프 시간 및 운동 변동에서 개선을 나타낼 수 있다. 개선은 적어도 10%, 적어도 20%, 적어도 30%, 적어도 40%, 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90% 또는 90% 초과일 수 있다. 개선은 수분 (예를 들어 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55분 또는 55분 초과), 수시간 (예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23시간 또는 24시간 초과), 수일 (예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5, 6일 또는 7일 초과), 수주 (1, 2, 3, 4, 5, 6, 7주 또는 7주 초과), 수개월 (1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11개월 또는 11개월 초과) 또는 수년 (예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9년 또는 9년 초과) 동안 지속될 수 있다.
특정 실시양태에서, 본원에 기재된 AAV 입자의 투여에 대한 대상체의 선택 및/또는 용량, 투여 경로 및/또는 투여 부피의 유효성은 또한 비르효-로빈(Virchow-Robin) 공간으로도 공지되어 있는 혈관주위 공간 (PVS)의 영상화를 사용하여 평가될 수 있다. 세동맥 및 세정맥이 뇌 실질을 관통하고, 뇌척수액 (CSF)/간질액으로 채워짐에 따라 PVS는 이를 둘러싼다. PVS는 중뇌, BG 및 난형 중심에서 통상적이다. 이론에 얽매이는 것을 원하지는 않지만, PVS는 대사물의 정상적인 클리어런스에서 역할을 할 수 있고, 인지 악화 및 파킨슨병을 비롯한 여러 질환 상태와 연관되어 왔다. PVS는 통상적으로는 크기가 정상이지만, 이들은 다수의 질환 상태에서 크기가 증가할 수 있다. 문헌 [Potter et al. (Cerebrovasc Dis. 2015 Jan; 39(4): 224-231; 그의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함됨)]은 PVS의 전체 범위를 연구하고 기저핵, 난형 중심 및 중뇌 PVS의 등급을 매기는 등급화 방법을 개발하였다. 이는 문헌 [Mac and Lullich et al. (J Neurol Neurosurg Psychiatry. 2004 Nov;75(11):1519-23; 그의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함됨)]에 사용된 PVS의 빈도 및 범위를 사용하였고, 포터(Potter) 등은 기저 신경절 및 난형 중심 PVS에 5개의 등급화: 0 (없음), 1 (1-10), 2 (11-20), 3 (21-40) 및 4 (>40) 및 중뇌 PVS에 2개의 등급화: 0 (가시적이지 않음) 또는 1 (가시적)을 부여하였다. 포터 등에 의한 등급화 시스템에 대한 사용자 가이드는 www.sbirc.ed.ac.uk/documents/epvs-rating-scale-user-guide.pdf에서 찾아볼 수 있다.
특정 실시양태에서, 본원에 기재된 AAV 입자의 투여에 대한 대상체의 선택 및/또는 용량, 투여 경로 및/또는 투여 부피의 유효성은 뇌영상 바이오마커, 예컨대 비제한적으로 [18F]F도파의 양전자 방출 단층촬영 (PET) 측정을 사용하여 평가할 수 있다. 뇌영상 바이오마커, 예컨대 [18F]F도파는 이환 개체를 확인하는데 사용될 수 있고/거나 임상 징후의 개시 전 흑질선조체 결함을 검출하는데 사용될 수 있다. 추가로, PET-기반 기준을 사용하여 흑질선조체 뉴런 완전성 (예를 들어, 비정상, 정상 또는 불확실 흑질선조체 뉴런 완전성)을 기초로 대상체를 카테고리화할 수 있다 (Rachette et al. Am J Med Genet B Neuropsychiatr Genet. 2006 Apr 5; 141B(3): 245-249; 그의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함됨).
특정 실시양태에서, 본원에 기재된 AAV 입자의 용량이 투여될 수 있는 대상체는 진행성 PD를 가질 수 있고, 레보도파 요법에 여전히 반응하지만, 대상체는 또한 의학적 불응성 운동 합병증 (예를 들어, 의약의 조정 및 최적화에도 불구하고 레보도파 및 다른 도파민성 요법 동안 발생한 중증 운동 변동 및/또는 이상운동증)을 겪는다. 대상체는 관련 기술분야에 공지된 방법에 의해 결정될 수 있는 신경외과 절차를 받기에 충분히 건강할 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체는 뇌 심부 자극 (DBS)에 대한 선택 기준을 충족시킬 수 있다. 대상체는 특발성 PD를 가질 수 있고/거나, 69세 미만일 수 있고/거나, 레보도파에 대한 현저한 반응을 가질 수 있고/거나, 의약-불응성 증상 (예를 들어, 운동 변동 및/또는 이상운동증)을 가질 수 있고/거나, 인지 기능장애가 거의 또는 전혀 없을 수 있다.
특정 실시양태에서, 본원에 기재된 AAV 입자의 용량이 투여될 수 있는 대상체는 또한 치매 또는 인지 장애를 앓을 수 있다.
특정 실시양태에서, 본원에 기재된 AAV 입자의 용량이 투여될 수 있는 대상체는 이전에 동일하거나 유사한 치료제로 치료받았을 수 있다. 또 다른 실시양태에서, 대상체는 파킨슨병의 증상을 감소시키는 것으로 제시된 치료제로 치료받았을 수 있다.
특정 실시양태에서, 본원에 기재된 AAV 입자의 용량이 투여될 수 있는 대상체는 표준 의료 요법으로부터 적절한 이익을 유도하는데 실패했을 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체는 치료에 반응하지 않을 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체는 치료에도 불구하고 잔류 장애를 가질 수 있다.
특정 실시양태에서, 본원에 기재된 AAV 입자의 용량이 투여될 수 있는 대상체는 신경전달물질 분석물의 수준을 평가하여 용량의 유효성을 결정하기 위한 시험을 거칠 수 있다. 특정 실시양태에서, CSF 신경전달물질, 혈장 AADC 활성 및/또는 소변 VLA가 분석될 수 있다.
특정 실시양태에서, 본원에 기재된 AAV 입자의 용량이 투여될 수 있는 대상체는 치료 과정 동안 대상체의 진행을 모니터링하기 위해 비디오테이프 녹화 또는 기록될 수 있다.
피각에 대한 전달
특정 실시양태에서, AAV 입자는 우측 피각, 좌측 피각, 또는 우측 피각 및 좌측 피각 둘 다의 조합에 투여될 수 있다. 투여는 피각에서의 1개 이상의 부위, 예컨대 비제한적으로, 2개 부위, 3개 부위, 4개 부위 또는 4개 초과의 부위에 대해 이루어질 수 있다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 좌측 피각의 2개의 부위 및 우측 피각의 2개의 부위로 전달된다.
특정 실시양태에서, 투여는 경전두 (예를 들어, 머리의 위) 외과적 전달 접근법에 의해 피각에 대해 이루어진다. 특정 실시양태에서, 평균 총 피각 커버리지는 후방 전달에 의하면 50% 미만이고, 수술 시간은 10시간 초과이다. 특정 실시양태에서, 경전두 접근법을 사용한 평균 총 피각 커버리지는 20-45%이다. 특정 실시양태에서, 경전두 접근법을 사용한 평균 총 피각 커버리지는 30-45%이다.
특정 실시양태에서, 투여는 후방 (예를 들어, 머리의 뒤) 외과적 전달 접근법에 의해 피각에 대해 이루어진다. 특정 실시양태에서, 평균 총 피각 커버리지는 후방 전달에 의하면 적어도 50%이다. 특정 실시양태에서, 평균 총 피각 커버리지는 후방 전달에 의하면 40-65%, 45-60%, 45-65%, 50-60% 50-65%, 55-60%, 55-65%, 또는 60-65%이다. 특정 실시양태에서, 평균 후방 피각 커버리지는 후방 전달에 의하면 50-80%, 50-90%, 60-80%, 60-90%, 65-80%, 65-90%, 70-80%, 70-85%, 70-90%, 75-80%, 75-85%, 75-90%, 또는 80-90%이다.
특정 실시양태에서, 평균 총 피각 커버리지는 후방 전달에 의하면 적어도 50%이고, 수술 시간은 10시간 미만이다. 특정 실시양태에서, 평균 피각 커버리지는 후방 전달에 의하면 50%-65%이고, 수술 시간은 9시간 미만이다. 특정 실시양태에서, 평균 총 피각 커버리지는 후방 전달에 의하면 50%-65%이고, 수술 시간은 8시간 미만이다. 특정 실시양태에서, 평균 총 피각 커버리지는 후방 전달에 의하면 50%-65%이고, 수술 시간은 7시간 미만이다. 특정 실시양태에서, 평균 총 피각 커버리지는 후방 전달에 의하면 50%-65%이고, 수술 시간은 6시간 미만이다. 특정 실시양태에서, 평균 총 피각 커버리지는 후방 전달에 의하면 50%-65%이고, 수술 시간은 5시간 미만이다. 특정 실시양태에서, 평균 총 피각 커버리지는 후방 전달에 의하면 50%-65%이고, 수술 시간은 4시간 미만이다. 특정 실시양태에서, 평균 총 피각 커버리지는 후방 전달에 의하면 50%-65%이고, 수술 시간은 7 내지 10시간이다.
특정 실시양태에서, 평균 총 피각 커버리지는 후방 전달에 의하면 적어도 50%이고, 수술 시간은 7 내지 10시간이고, 대상체는 50-60세, 55-60세, 또는 57-59세이다. 특정 실시양태에서, 평균 총 피각 커버리지는 후방 전달에 의하면 50-65%이고, 수술 시간은 7 내지 10시간이고, 대상체는 50-60세, 55-60세, 또는 57-59세이다. 특정 실시양태에서, 평균 총 피각 커버리지는 후방 전달에 의하면 50-60%이고, 수술 시간은 7 내지 10시간이고, 대상체는 50-60세, 55-60세, 또는 57-59세이다.
특정 실시양태에서, 대상체에 대한 AAV 입자의 제제의 투여는 대상체의 피각 (예를 들어, 좌측 및/또는 우측 피각)의 커버리지를 제공한다. 한 측면에서, AAV 입자의 투여는 대상체의 좌측 및/또는 우측 피각에 적어도 8%, 9%, 10%, 13%, 14%, 15%, 19%, 20%, 21%, 22%, 23%, 24%, 25%, 26%, 27%, 28%, 29%, 30%, 31%, 32%, 33%, 34%, 35%, 36%, 37%, 38%, 39%, 40%, 41%, 42%, 43%, 44%, 45%, 46%, 47%, 48%, 49%, 50%, 51%, 52%, 53%, 54%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 또는 95% 초과의 커버리지를 제공할 수 있다. 특정 실시양태에서, 커버리지는 적어도 20%이다. 특정 실시양태에서, 커버리지는 적어도 30%이다. 특정 실시양태에서, 커버리지는 적어도 40%이다. 특정 실시양태에서, 커버리지는 적어도 50%이다. 또 다른 측면에서, AAV 입자의 투여는 대상체의 좌측 및/또는 우측 피각의 표면적의 적어도 8%, 9%, 10%, 13%, 14%, 15%, 19%, 20%, 21%, 22%, 23%, 24%, 25%, 26%, 27%, 28%, 29%, 30%, 31%, 32%, 33%, 34%, 35%, 36%, 37%, 38%, 39%, 40%, 41%, 42%, 43%, 44%, 45%, 46%, 47%, 48%, 49%, 50%, 51%, 52%, 53%, 54%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 또는 95% 초과의 커버리지를 제공할 수 있다. 특정 실시양태에서, 총 커버리지는 적어도 20%이다. 특정 실시양태에서, 총 커버리지는 적어도 30%이다. 특정 실시양태에서, 총 커버리지는 적어도 40%이다. 특정 실시양태에서, 총 커버리지는 적어도 50%이다. 또 다른 측면에서, AAV 입자의 투여는 대상체의 좌측 및/또는 우측 피각에 대해 또는 대상체의 좌측 및/또는 우측 피각의 총 표면적에 대해 10-40%, 20-40%, 20-30%, 20-35%, 20-50%, 30-40%, 35-40%, 30-60%, 30-70%, 30-80%, 30-90%, 40-70%, 50-55%, 50-60%, 50-65%, 50-70%, 50-75%, 50-80% 또는 60-90% 커버리지를 제공할 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체에 대한 AAV 입자의 제제의 투여는 대상체의 후방 피각 (예를 들어, 좌측 및/또는 우측 후방 피각)의 커버리지를 제공한다. 한 측면에서, AAV 입자의 투여는 대상체의 좌측 및/또는 우측 후방 피각에 적어도 10%, 15%, 20%, 21%, 22%, 23%, 24%, 25%, 26%, 27%, 28%, 29%, 30%, 31%, 32%, 33%, 34%, 35%, 36%, 37%, 38%, 39%, 40%, 41%, 42%, 43%, 44%, 45%, 46%, 47%, 48%, 49%, 50%, 51%, 52%, 53%, 54%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 또는 95% 초과를 제공할 수 있다. 특정 실시양태에서, 커버리지는 적어도 20%이다. 특정 실시양태에서, 커버리지는 적어도 30%이다. 특정 실시양태에서, 커버리지는 적어도 40%이다. 특정 실시양태에서, 커버리지는 적어도 50%이다. 또 다른 측면에서, AAV 입자의 투여는 대상체의 좌측 및/또는 우측 후방 피각의 표면적의 적어도 10%, 15%, 20%, 21%, 22%, 23%, 24%, 25%, 26%, 27%, 28%, 29%, 30%, 31%, 32%, 33%, 34%, 35%, 36%, 37%, 38%, 39%, 40%, 41%, 42%, 43%, 44%, 45%, 46%, 47%, 48%, 49%, 50%, 51%, 52%, 53%, 54%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 또는 95% 초과의 커버리지를 제공할 수 있다. 특정 실시양태에서, 총 커버리지는 적어도 20%이다. 특정 실시양태에서, 총 커버리지는 적어도 30%이다. 특정 실시양태에서, 총 커버리지는 적어도 40%이다. 특정 실시양태에서, 총 커버리지는 적어도 50%이다. 또 다른 측면에서, AAV 입자의 투여는 대상체의 좌측 및/또는 우측 후방 피각에 대해 또는 대상체의 좌측 및/또는 우측 피각의 총 표면적에 대해 10-40%, 20-50%, 30-60%, 30-70%, 30-80%, 30-90%, 40-70%, 50-55%, 50-60%, 50-65%, 50-70%, 50-75%, 50-80%, 60-65%, 60-70%, 60-75%, 60-80%, 60-85% 또는 60-90% 커버리지를 제공할 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체 뇌의 양쪽 반구 내의 피각에 전달되는 AAV 입자를 포함하는 제약 조성물의 부피는 50 μL, 100 μL, 200 μL, 300 μL, 400 μL, 450 μL, 500 μL, 600 μL, 700 μL, 800 μL, 900 μL, 1000 μL, 1100 μL, 1200 μL, 1300 μL, 1400 μL, 1500 μL, 1600 μL, 1700 μL, 1800 μL, 1900 μL, 2000 μL 또는 2000 μL 초과이다. 특정 실시양태에서, 양쪽 반구 내의 피각에 전달되는 부피는 100 μL이다. 특정 실시양태에서, 양쪽 반구 내의 피각에 전달되는 부피는 200 μL이다. 특정 실시양태에서, 양쪽 반구 내의 피각에 전달되는 부피는 300 μL이다. 특정 실시양태에서, 양쪽 반구 내의 피각에 전달되는 부피는 450 μL이다. 특정 실시양태에서, 양쪽 반구 내의 피각에 전달되는 부피는 900 μL이다. 또 다른 비제한적 예로서, 양쪽 반구 내의 피각에 전달되는 부피는 1800 μL이다.
특정 실시양태에서, 각각의 반구의 피각에 전달되는 부피는 최대 100 μL, 125 μL, 150 μL, 175 μL, 180 μL, 200 μL, 210 μL, 220 μL, 225 μL, 250 μL, 275 μL, 300 μL, 325 μL, 350 μL, 375, 400 μL, 425 μL, 450 μL, 475 μL, 500 μL, 525 μL, 550 μL, 575 μL, 600 μL, 625 μL, 650 μL, 675 μL, 700 μL, 725 μL, 750 μL, 775 μL, 800 μL, 825 μL, 850 μL, 875 μL, 900 μL, 925 μL, 950 μL, 975 μL, 또는 1000 μL이다.
특정 실시양태에서, 대상체에게 전달되는 AAV 입자를 포함하는 제약 조성물의 부피는 각각의 피각에 대해 3600 μL이다. 특정 실시양태에서, 대상체에게 전달되는 AAV 입자를 포함하는 제약 조성물의 부피는 각각의 피각에 대해 최대 3600 μL이다.
특정 실시양태에서, 대상체에게 전달되는 AAV 입자를 포함하는 제약 조성물의 부피는 각각의 피각에 대해 1800 μL이다. 특정 실시양태에서, 대상체에게 전달되는 AAV 입자를 포함하는 제약 조성물의 부피는 각각의 피각에 대해 최대 1800 μL이다.
특정 실시양태에서, 대상체에게 전달되는 AAV 입자를 포함하는 제약 조성물의 부피는 각각의 피각에 대해 1500 μL이다. 특정 실시양태에서, 대상체에게 전달되는 AAV 입자를 포함하는 제약 조성물의 부피는 각각의 피각에 대해 최대 1500 μL이다.
특정 실시양태에서, 대상체에게 전달되는 AAV 입자를 포함하는 제약 조성물의 부피는 각각의 피각에 대해 900 μL이다. 특정 실시양태에서, 대상체에게 전달되는 AAV 입자를 포함하는 제약 조성물의 부피는 각각의 피각에 대해 최대 900 μL이다.
특정 실시양태에서, 대상체에게 전달되는 AAV 입자를 포함하는 제약 조성물의 부피는 각각의 피각에 대해 450 μL이다. 특정 실시양태에서, 대상체에게 전달되는 AAV 입자를 포함하는 제약 조성물의 부피는 각각의 피각에 대해 최대 450 μL이다.
특정 실시양태에서, 본원에 기재된 AAV 입자는 각각의 피각 내로 카테터의 급성 양측 배치를 사용하여 투여될 수 있다. 배치는 관련 기술분야에 공지되거나 본원에 기재된 자기 공명 영상 (MRI)-안내 정위 신경외과 기술을 사용할 수 있다. 추가적으로, 제제의 분포를 모니터링하고 확인하기 위해 조영제, 예컨대 비제한적으로 가돌리늄 조영제 (예를 들어, 프로한스(PROHANCE)®)가 제제에 사용될 수 있다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 주입 부피 및 기술의 변화를 초래하는 실질내 분포의 실시간 및 사후 평가에 기초한 환자-특이적 주입 전략을 사용하여 투여된다.
특정 실시양태에서, 대상체에게 피각 (예를 들어, 후측 교련 피각) 내로 양측 정위 CED-보조 단계 주입으로 AAV 입자를 투여할 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 2.3 x 1012개의 벡터 게놈의 용량으로 피각당 450 μL의 부피로 투여할 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 2.3 x 1012개 벡터 게놈의 용량으로 피각당 최대 450 μL의 부피로 투여할 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 2.3 x 1012개의 벡터 게놈의 용량으로 피각당 900 μL의 부피로 투여할 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 2.3 x 1012개 벡터 게놈의 용량으로 피각당 최대 900 μL의 부피로 투여할 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 ml당 2.6 x 1012개 벡터 게놈 (vg/ml)의 용량으로 피각당 900 μL의 부피로 투여할 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 ml당 2.6 x 1012개 벡터 게놈 (vg/ml)의 용량으로 피각당 최대 900 μL의 부피로 투여할 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 ml당 2.6 x 1012개 벡터 게놈 (vg/ml)의 용량으로 피각당 1500 μL의 부피로 투여할 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 ml당 2.6 x 1012개 벡터 게놈 (vg/ml)의 용량으로 피각당 최대 1500 μL의 부피로 투여할 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 ml당 2.6 x 1012개 벡터 게놈 (vg/ml)의 용량으로 피각당 1800ul의 부피로 투여할 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 ml당 2.6 x 1012개 벡터 게놈 (vg/ml)의 용량으로 피각당 최대 1800 μL의 부피로 투여할 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 ml당 2.6 x 1012개 벡터 게놈 (vg/ml)의 용량으로 피각당 3600 μL의 부피로 투여할 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 ml당 2.6 x 1012개 벡터 게놈 (vg/ml)의 용량으로 피각당 최대 3600 μL의 부피로 투여할 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 4.5 x 1012개의 벡터 게놈의 용량으로 피각당 900 μL의 부피로 투여할 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 4.5 x 1012개 벡터 게놈의 용량으로 피각당 최대 900 μL의 부피로 투여할 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 4.6 x 1012개의 벡터 게놈의 용량으로 피각당 900 μL의 부피로 투여할 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 4.6 x 1012개 벡터 게놈의 용량으로 피각당 최대 900 μL의 부피로 투여할 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 4.7 x 1012개의 벡터 게놈의 용량으로 피각당 900 μL의 부피로 투여할 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 4.7 x 1012개 벡터 게놈의 용량으로 피각당 최대 900 μL의 부피로 투여할 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 1.5 x 1012개의 벡터 게놈의 용량으로 피각당 900 μL의 부피로 투여할 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 1.5 x 1012개 벡터 게놈의 용량으로 피각당 최대 900 μL의 부피로 투여할 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 7.5 x 1011개의 벡터 게놈의 용량으로 피각당 450 μL의 부피로 투여할 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 7.5 x 1011개 벡터 게놈의 용량으로 피각당 최대 450 μL의 부피로 투여할 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 8.8 x 1012개의 벡터 게놈의 용량으로 피각당 900 μL의 부피로 투여할 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 8.8 x 1012개 벡터 게놈의 용량으로 피각당 최대 900 μL의 부피로 투여할 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 9.4 x 1012개의 벡터 게놈의 용량으로 피각당 900 μL의 부피로 투여할 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 9.4 x 1012개 벡터 게놈의 용량으로 피각당 최대 900 μL의 부피로 투여할 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 9.4 x 1012개의 벡터 게놈의 용량으로 피각당 1200 μL의 부피로 투여할 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 9.4 x 1012개 벡터 게놈의 용량으로 피각당 최대 1200 μL의 부피로 투여할 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 9.4 x 1012개의 벡터 게놈의 용량으로 피각당 1500 μL의 부피로 투여할 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 9.4 x 1012개 벡터 게놈의 용량으로 피각당 최대 1500 μL의 부피로 투여할 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 9.4 x 1012개의 벡터 게놈의 용량으로 피각당 1800 μL의 부피로 투여할 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 9.4 x 1012개 벡터 게놈의 용량으로 피각당 최대 1800 μL의 부피로 투여할 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 9.4 x 1012개의 벡터 게놈의 용량으로 피각당 3600 μL의 부피로 투여할 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 9.4 x 1012개 벡터 게놈의 용량으로 피각당 최대 3600 μL의 부피로 투여할 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 3.72 x 1012개의 벡터 게놈의 용량으로 피각당 715 μL의 부피로 투여할 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 3.72 x 1012개의 벡터 게놈의 용량으로 피각당 최대 900 μL, 피각당 최대 1200 μL, 피각당 최대 1500 μL, 또는 피각당 최대 1800 μL의 부피로 투여할 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 8.3 x 1011개의 벡터 게놈의 용량으로 피각당 500 μL의 부피로 투여할 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 8.3 x 1011개의 벡터 게놈의 용량으로 피각당 최대 900 μL, 피각당 최대 1200 μL, 피각당 최대 1500 μL, 또는 피각당 최대 1800 μL의 부피로 투여할 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 5.95 x 1012개의 벡터 게놈의 용량으로 피각당 1144 μL의 부피로 투여할 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 5.95 x 1012개의 벡터 게놈의 용량으로 피각당 최대 900 μL, 피각당 최대 1200 μL, 피각당 최대 1500 μL, 또는 피각당 최대 1800 μL의 부피로 투여할 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 6.58 x 1012개의 벡터 게놈의 용량으로 피각당 1265 μL의 부피로 투여할 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 6.58 x 1012개의 벡터 게놈의 용량으로 피각당 최대 900 μL, 피각당 최대 1200 μL, 피각당 최대 1500 μL, 또는 피각당 최대 1800 μL의 부피로 투여할 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 4.31 x 1012개의 벡터 게놈의 용량으로 피각당 829 μL의 부피로 투여할 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 4.31 x 1012개의 벡터 게놈의 용량으로 피각당 최대 900 μL, 피각당 최대 1200 μL, 피각당 최대 1500 μL, 또는 피각당 최대 1800 μL의 부피로 투여할 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 6.45 x 1012개의 벡터 게놈의 용량으로 피각당 1240 μL의 부피로 투여할 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 6.45 x 1012개의 벡터 게놈의 용량으로 피각당 최대 900 μL, 피각당 최대 1200 μL, 피각당 최대 1500 μL, 또는 피각당 최대 1800 μL의 부피로 투여할 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 7.80 x 1012개의 벡터 게놈의 용량으로 피각당 1500 μL의 부피로 투여할 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자를 7.80 x 1012개의 벡터 게놈의 용량으로 피각당 최대 900 μL, 피각당 최대 1200 μL, 피각당 최대 1500 μL, 또는 피각당 최대 1800 μL의 부피로 투여할 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체에게 후방 (즉, 머리의 뒤) 외과적 전달 접근법을 사용하여 양측 외과적 주입으로 AAV 입자를 적어도 1개의 피각 내로 투여할 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체에게 후방 꼬리를 통해 피각의 장축을 따라 경두정-후두 접근법을 사용하여 AAV 입자를 투여할 수 있다. 후방 양측 외과적 주입의 횟수는 1회 이상, 예컨대 비제한적으로 1회 주입, 2회 주입, 3회 주입, 4회 주입, 또는 4회 초과 주입일 수 있다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 1회의 후방 양측 외과적 주입으로 좌측 피각에 전달된다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 1회의 후방 양측 외과적 주입으로 우측 피각에 전달된다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 2회의 후방 양측 외과적 주입으로 좌측 피각에 전달된다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 2회의 후방 양측 외과적 주입으로 우측 피각에 전달된다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 2회의 후방 양측 외과적 주입으로 우측 및 좌측 피각에 전달된다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 3회의 후방 양측 외과적 주입으로 좌측 피각에 전달된다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 3회의 후방 양측 외과적 주입으로 우측 피각에 전달된다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 3회의 후방 양측 외과적 주입으로 우측 및 좌측 피각에 전달된다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 4회의 후방 양측 외과적 주입으로 좌측 피각에 전달된다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 4회의 후방 양측 외과적 주입으로 우측 피각에 전달된다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 4회의 후방 양측 외과적 주입으로 우측 및 좌측 피각에 전달된다.
특정 실시양태에서, 대상체에게 경전두 (예를 들어, 머리의 위) 외과적 전달 접근법을 사용하여 양측 외과적 주입으로 AAV 입자를 적어도 1개의 피각 내로 투여할 수 있다. 양측 외과적 주입의 횟수는 2회 이상, 예컨대 비제한적으로 2회 주입, 3회 주입, 4회 주입, 또는 4회 초과 주입일 수 있다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 2회의 후방 양측 외과적 주입으로 좌측 피각에 전달된다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 2회의 후방 양측 외과적 주입으로 우측 피각에 전달된다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 2회의 후방 양측 외과적 주입으로 좌측 및 우측 피각에 전달된다.
SNpc 및 VTA 또는 STN에 대한 전달
특정 실시양태에서, 대상체에게 본 개시내용의 AAV 입자가 양측 주입을 통해 흑색질 치밀부 (SNpc) 및 복측 피개 영역 (VTA)으로 안전하게 전달되거나, 또는 대안적으로, 선조체내로 (미상핵 및 피각 내로), 또는 시상하핵 (STN) 내로 안전하게 전달되도록 투여될 수 있다.
전달, 용량 및 요법
본 개시내용은 개시내용에 따른 AAV 입자를 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 방법을 제공한다. 본 개시내용의 제약, 진단 또는 예방 AAV 입자 및 조성물은 질환, 장애 및/또는 상태를 예방, 치료, 관리 또는 진단하기 위해 효과적인 임의의 양 및 임의의 투여 경로를 사용하여 대상체에게 투여될 수 있다. 필요한 정확한 양은 대상체의 종, 연령 및 전반적 상태, 질환의 중증도, 특정한 조성물, 그의 투여 방식, 그의 활성 방식 등에 따라 대상체마다 달라질 것이다. 대상체는 인간, 포유동물, 또는 동물일 수 있다. 개시내용에 따른 조성물은 전형적으로 투여의 용이성 및 투여량의 균일성을 위해 단위 투여 형태로 제제화된다. 그러나, 본 개시내용의 조성물의 총 1일 용법은 타당한 의학적 판단의 범주 내에서 담당 의사에 의해 결정될 수 있는 것으로 이해될 것이다. 임의의 특정한 개체에 대한 구체적인 치료상 유효한, 예방상 유효한, 또는 적절한 진단 용량 수준은 치료될 장애 및 장애의 중증도; 사용되는 특정 페이로드의 활성; 사용되는 특정 조성물; 환자의 연령, 체중, 전반적 건강, 성별 및 식이; 투여 시간, 투여 경로, 및 사용되는 특정 AAV 입자의 배출 속도; 치료 기간; 사용되는 특정 AAV 입자와 조합되어 또는 동시에 사용되는 약물; 및 의학 기술분야에 널리 공지된 기타 인자를 비롯한 다양한 인자에 따라 달라질 것이다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자의 전달은 AAV 입자의 전달의 결과로서 최소한의 심각한 유해 사건 (SAE)을 발생시킨다.
특정 실시양태에서, AAV 입자는 다중-용량 요법으로 전달될 수 있다. 다중-용량 요법은 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 또는 10회 초과의 용량일 수 있다.
특정 실시양태에서, AAV 입자는 다중-부위 투여 경로를 통해 대상체에게 전달될 수 있다. 대상체에게 2, 3, 4, 5 또는 5개 초과의 부위에서 AAV 입자를 투여할 수 있다.
투여량 수준
특정 실시양태에서, 본 개시내용에 따른 AAV 입자 제약 조성물은 목적하는 치료, 진단, 또는 예방 효과를 수득하기 위해, 1일에, 1일 1회 이상 대상체의 체중의 약 0.0001 mg/kg 내지 약 100 mg/kg, 약 0.001 mg/kg 내지 약 0.05 mg/kg, 약 0.005 mg/kg 내지 약 0.05 mg/kg, 약 0.001 mg/kg 내지 약 0.005 mg/kg, 약 0.05 mg/kg 내지 약 0.5 mg/kg, 약 0.01 mg/kg 내지 약 50 mg/kg, 약 0.1 mg/kg 내지 약 40 mg/kg, 약 0.5 mg/kg 내지 약 30 mg/kg, 약 0.01 mg/kg 내지 약 10 mg/kg, 약 0.1 mg/kg 내지 약 10 mg/kg, 또는 약 1 mg/kg 내지 약 25 mg/kg을 전달하는데 충분한 투여량 수준으로 투여될 수 있다. 상기 투여 농도는 kg당 vg 또는 바이러스 게놈 또는 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 투여되는 총 바이러스 게놈으로 전환될 수 있음이 이해될 것이다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용에 따른 AAV 입자 제약 조성물은 약 10 내지 약 1100 μl/부위, 약 50 내지 약 500 μl/부위, 50 내지 약 800 μl/부위, 50 내지 약 800 μl/부위, 약 100 내지 약 400 μl/부위, 약 100 내지 약 500 μl/부위, 약 100 내지 약 700 μl/부위, 약 120 내지 약 300 μl/부위, 약 120 내지 약 600 μl/부위, 약 140 내지 약 200 μl/부위, 약 140 내지 약 500 μl/부위, 약 160 내지 약 500 μl/부위, 약 160 내지 약 450 μl/부위, 약 180 내지 약 400 μl/부위, 약 200 내지 약 350 μl/부위, 약 250 내지 약 300 μl/부위, 약 250 내지 약 500 μl/부위, 약 300 내지 약 900 μl/부위, 약 450 내지 약 900 μl/부위, 약 400 내지 약 900 μl/부위, 약 400 내지 약 600 μl/부위, 약 400 내지 약 500 μl/부위, 약 600 내지 약 900 μl/부위, 약 600 내지 약 1000 μl/부위, 약 700 내지 약 900 μl/부위, 약 700 내지 약 1000 μl/부위, 약 800 내지 약 900 μl/부위, 약 800 내지 약 1000 μl/부위, 약 850 내지 약 950 μl/부위, 약 850 내지 약 900 μl/부위, 약 500 내지 약 1800 μl/부위, 약 700 내지 약 1800 μl/부위, 약 900 내지 약 1800 μl/부위, 약 1100 내지 약 1800 μl/부위, 약 1200 내지 약 1800 μl/부위, 약 1500 내지 약 1800 μl/부위, 약 500 내지 약 1500 μl/부위, 약 700 내지 약 1500 μl/부위, 약 900 내지 약 1500 μl/부위, 약 1100 내지 약 1500 μl/부위, 약 1200 내지 약 1500 μl/부위, 약 500 내지 약 1200 μl/부위, 약 700 내지 약 1200 μl/부위, 및 약 900 내지 약 1200 μl/부위로 투여될 수 있다. 비제한적 예로서, AAV 입자는 50 μl/부위 및/또는 150 μl/부위로 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 약 400 μl/부위로 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 약 450 μl/부위로 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 약 500 μl/부위로 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 약 700 μl/부위로 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 약 750 μl/부위로 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 약 800 μl/부위로 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 약 850 μl/부위로 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 약 900 μl/부위로 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 약 1000 μl/부위로 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 약 1100 μl/부위로 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 약 1200 μl/부위로 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 약 1300 μl/부위로 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 약 1400 μl/부위로 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 약 1500 μl/부위로 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 약 1600 μl/부위로 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 약 1700 μl/부위로 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 약 1800 μl/부위로 투여될 수 있다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용에 따른 조성물의 세포에의 전달은 [VG/시간 = mL/시간 * VG/mL]로 정의되는 전달 속도를 포함하며, 여기서 VG는 바이러스 게놈이고, VG/mL은 조성물 농도이고, mL/시간은 장기간 전달 속도이다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용에 따른 조성물의 세포에의 전달은 약 1x106개 VG 내지 약 1x1016개 VG의 대상체당 총 농도를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 전달은 약 1x106, 2x106, 3x106, 4x106, 5x106, 6x106, 7x106, 8x106, 9x106, 1x107, 2x107, 3x107, 4x107, 5x107, 6x107, 7x107, 8x107, 9x107, 1x108, 2x108, 3x108, 4x108, 5x108, 6x108, 7x108, 8x108, 9x108, 1x109, 2x109, 3x109, 4x109, 5x109, 6x109, 7x109, 8x109, 9x109, 1x1010, 2x1010, 3x1010, 4x1010, 5x1010, 6x1010, 7x1010, 8x1010, 9x1010, 1x1011, 2x1011, 2.1x1011, 2.2x1011, 2.3x1011, 2.4x1011, 2.5x1011, 2.6x1011, 2.7x1011, 2.8x1011, 2.9x1011, 3x1011, 4x1011, 5x1011, 6x1011, 7x1011, 7.1x1011, 7.2x1011, 7.3x1011, 7.4x1011, 7.5x1011, 7.6x1011, 7.7x1011, 7.8x1011, 7.9x1011, 8x1011, 9x1011, 1x1012, 1.1 x1012, 1.2x1012, 1.3x1012, 1.4x1012, 1.5x1012, 1.6x1012, 1.7x1012, 1.8x1012, 1.9x1012, 2x1012, 2.1 x1012, 2.2x1012, 2.3x1012, 2.4x1012, 2.5x1012, 2.6x1012, 2.7x1012, 2.8x1012, 2.9x1012, 3x1012, 3.1 x1012, 3.2x1012, 3.3x1012, 3.4x1012, 3.5x1012, 3.6x1012, 3.7x1012, 3.8x1012, 3.9x1012, 4x1012, 4.1x1012, 4.2x1012, 4.3x1012, 4.4x1012, 4.5x1012,4.6x1012, 4.7x1012, 4.8x1012, 4.9x1012, 5x1012, 5.1 x1012, 5.2x1012, 5.3x1012, 5.4x1012, 5.5x1012, 5.6x1012, 5.7x1012, 5.8x1012, 5.9x1012, 6x1012, 6.1 x1012, 6.2x1012, 6.3x1012, 6.4x1012, 6.5x1012, 6.6x1012, 6.7x1012, 6.8x1012, 6.9x1012, 7x1012, 7.1 x1012, 7.2x1012, 7.3x1012, 7.4x1012, 7.5x1012, 7.6x1012, 7.7x1012, 7.8x1012, 7.9x1012, 8x1012, 8.1x1012, 8.2x1012, 8.3x1012, 8.4x1012, 8.5x1012, 8.6x1012, 8.7x1012, 8.8 x1012, 8.9x1012, 9x1012, 9.1 x1012, 9.2x1012, 9.3x1012, 9.4x1012, 9.5x1012, 9.6x1012, 9.7x1012, 9.8x1012, 9.9x1012, 1x1013, 2x1013, 3x1013, 4x1013, 5x1013, 6x1013, 6.7x1013, 7x1013, 8x1013, 9x1013, 1x1014, 2x1014, 3x1014, 4x1014, 5x1014, 6x1014, 7x1014, 8x1014, 9x1014, 1x1015, 2x1015, 3x1015, 4x1015, 5x1015, 6x1015, 7x1015, 8x1015, 9x1015, 또는 1x1016개 VG/대상체의 조성물 농도를 포함할 수 있다. 특정 실시양태에서, 조성물 중 AAV 입자의 농도는 1x1013개 VG/대상체이다. 특정 실시양태에서, 조성물 중 AAV 입자의 농도는 3x1012개 VG/대상체이다. 특정 실시양태에서, 대상체에게 투여되는 조성물은 약 2.3x1011개 VG/대상체의 농도를 갖는다. 특정 실시양태에서, 조성물 중 AAV 입자의 농도는 3x1011개 VG/대상체이다. 특정 실시양태에서, 조성물 중 AAV 입자의 농도는 7.2x1011개 VG/대상체이다. 특정 실시양태에서, 조성물 중 AAV 입자의 농도는 7.5x1011개 VG/대상체이다. 특정 실시양태에서, 대상체에게 투여되는 조성물은 약 9x1011개 VG/대상체의 농도를 갖는다. 특정 실시양태에서, 조성물 중 AAV 입자의 농도는 1.4x1012개 VG/대상체이다. 특정 실시양태에서, 조성물 중 AAV 입자의 농도는 1.5x1012개 VG/대상체이다. 특정 실시양태에서, 조성물 중 AAV 입자의 농도는 2.3x1012개 VG/대상체이다. 특정 실시양태에서, 조성물 중 AAV 입자의 농도는 4.5x1012개 VG/대상체이다. 특정 실시양태에서, 조성물 중 AAV 입자의 농도는 4.6x1012개 VG/대상체이다. 특정 실시양태에서, 조성물 중 AAV 입자의 농도는 4.7x1012개 VG/대상체이다. 특정 실시양태에서, 조성물 중 AAV 입자의 농도는 4.8x1012개 VG/대상체이다. 특정 실시양태에서, 조성물 중 AAV 입자의 농도는 4.9x1012개 VG/대상체이다. 특정 실시양태에서, 조성물 중 AAV 입자의 농도는 5x1012개 VG/대상체이다. 특정 실시양태에서, 조성물 중 AAV 입자의 농도는 8.8x1012개 VG/대상체이다. 특정 실시양태에서, 조성물 중 AAV 입자의 농도는 9.4x1012개 VG/대상체이다. 특정 실시양태에서, 조성물 중 AAV 입자의 농도는 3.72x1012개 VG/대상체이다. 특정 실시양태에서, 조성물 중 AAV 입자의 농도는 8.3x1011개 VG/대상체이다. 특정 실시양태에서, 조성물 중 AAV 입자의 농도는 5.95x1012개 VG/대상체이다. 특정 실시양태에서, 조성물 중 AAV 입자의 농도는 6.58x1012개 VG/대상체이다. 특정 실시양태에서, 조성물 중 AAV 입자의 농도는 4.31x1012개 VG/대상체이다. 특정 실시양태에서, 조성물 중 AAV 입자의 농도는 6.45x1012개 VG/대상체이다. 특정 실시양태에서, 조성물 중 AAV 입자의 농도는 7.80x1012개 VG/대상체이다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용에 따른 조성물의 세포에의 전달은 대상체당 약 1x106개 VG/kg 내지 약 1x1016개 VG/kg의 총 농도를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 전달은 약 1x106, 2x106, 3x106, 4x106, 5x106, 6x106, 7x106, 8x106, 9x106, 1x107, 2x107, 3x107, 4x107, 5x107, 6x107, 7x107, 8x107, 9x107, 1x108, 2x108, 3x108, 4x108, 5x108, 6x108, 7x108, 8x108, 9x108, 1x109, 2x109, 3x109, 4x109, 5x109, 6x109, 7x109, 8x109, 9x109, 1x1010, 2x1010, 3x1010, 4x1010, 5x1010, 6x1010, 7x1010, 8x1010, 8.1x1011, 8.2x1011, 8.3x1011, 8.4x1011, 8.5x1011, 8.6x1011, 8.7x1011, 8.8x1011, 8.9x1011, 9x1010, 1x1011, 2x1011, 2.1x1011, 2.2x1011, 2.3x1011, 2.4x1011, 2.5x1011, 2.6x1011, 2.7x1011, 2.8x1011, 2.9x1011, 3x1011, 4x1011, 5x1011, 6x1011, 7x1011, 7.1x1011, 7.2x1011, 7.3x1011, 7.4x1011, 7.5x1011, 7.6x1011, 7.7x1011, 7.8x1011, 7.9x1011, 8x1011, 9x1011, 1x1012, 1.1 x1012, 1.2x1012, 1.3x1012, 1.4x1012, 1.5x1012, 1.6x1012, 1.7x1012, 1.8x1012, 1.9x1012, 2x1012, 2.1x1012, 2.2x1012, 2.3x1012, 2.4x1012, 2.5x1012, 2.6x1012, 2.7x1012, 2.8x1012, 2.9x1012, 3x1012, 4x1012, 4.1x1012, 4.2x1012, 4.3x1012, 4.4x1012, 4.5x1012,4.6x1012, 4.7x1012, 4.8x1012, 4.9x1012, 5x1012, 6x1012, 7x1012, 8x1012, 8.1x1012, 8.2x1012, 8.3x1012, 8.4x1012, 8.5x1012, 8.6x1012, 8.7x1012, 8.8 x1012, 8.9x1012, 9x1012, 1x1013, 2x1013, 3x1013, 4x1013, 5x1013, 6x1013, 6.7x1013, 7x1013, 8x1013, 9x1013, 1x1014, 2x1014, 3x1014, 4x1014, 5x1014, 6x1014, 7x1014, 8x1014, 9x1014, 1x1015, 2x1015, 3x1015, 4x1015, 5x1015, 6x1015, 7x1015, 8x1015, 9x1015, 또는 1x1016개 VG/kg의 조성물 농도를 포함할 수 있다.
특정 실시양태에서, AAV 입자의 중추 신경계 (예를 들어, 실질)의 세포에의 전달은 약 1x106개 VG 내지 약 1x1016개 VG의 총 용량을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 전달은 약 1x106, 2x106, 3x106, 4x106, 5x106, 6x106, 7x106, 8x106, 9x106, 1x107, 2x107, 3x107, 4x107, 5x107, 6x107, 7x107, 8x107, 9x107, 1x108, 2x108, 3x108, 4x108, 5x108, 6x108, 7x108, 8x108, 9x108, 1x109, 2x109, 3x109, 4x109, 5x109, 6x109, 7x109, 8x109, 9x109, 1x1010, 1.9x1010, 2x1010, 3x1010, 3.73x1010, 4x1010, 5x1010, 6x1010, 7x1010, 8x1010, 9x1010, 1x1011, 2x1011, 2.5x1011, 3x1011, 4x1011, 5x1011, 6x1011, 7x1011, 7.1x1011, 7.2x1011, 7.3x1011, 7.4x1011, 7.5x1011, 7.6x1011, 7.7x1011, 7.8x1011, 7.9x1011, 8x1011, 9x1011, 1x1012, 1.1 x1012, 1.2x1012, 1.3x1012, 1.4x1012, 1.5x1012, 1.6x1012, 1.7x1012, 1.8x1012, 1.9x1012, 2x1012, 2.1 x1012, 2.2x1012, 2.3x1012, 2.4x1012, 2.5x1012, 2.6x1012, 2.7x1012, 2.8x1012, 2.9x1012, 3x1012, 3.1 x1012, 3.2x1012, 3.3x1012, 3.4x1012, 3.5x1012, 3.6x1012, 3.7x1012, 3.8x1012, 3.9x1012, 4x1012, 4.1x1012, 4.2x1012, 4.3x1012, 4.4x1012, 4.5x1012,4.6x1012, 4.7x1012, 4.8x1012, 4.9x1012, 5x1012, 5.1 x1012, 5.2x1012, 5.3x1012, 5.4x1012, 5.5x1012, 5.6x1012, 5.7x1012, 5.8x1012, 5.9x1012, 6x1012, 6.1 x1012, 6.2x1012, 6.3x1012, 6.4x1012, 6.5x1012, 6.6x1012, 6.7x1012, 6.8x1012, 6.9x1012, 7x1012, 7.1 x1012, 7.2x1012, 7.3x1012, 7.4x1012, 7.5x1012, 7.6x1012, 7.7x1012, 7.8x1012, 7.9x1012, 8x1012, 8.1x1012, 8.2x1012, 8.3x1012, 8.4x1012, 8.5x1012, 8.6x1012, 8.7x1012, 8.8 x1012, 8.9x1012, 9x1012, 9.1 x1012, 9.2x1012, 9.3x1012, 9.4x1012, 9.5x1012, 9.6x1012, 9.7x1012, 9.8x1012, 9.9x1012, 1x1013, 2x1013, 3x1013, 4x1013, 5x1013, 6x1013, 7x1013, 8x1013, 9x1013, 1x1014, 2x1014, 3x1014, 4x1014, 5x1014, 6x1014, 7x1014, 8x1014, 9x1014, 1x1015, 2x1015, 3x1015, 4x1015, 5x1015, 6x1015, 7x1015, 8x1015, 9x1015, 또는 1x1016개 VG의 총 용량을 포함할 수 있다. 특정 실시양태에서, 총 용량은 1x1013개 VG이다. 특정 실시양태에서, 총 용량은 2.1x1012개 VG이다. 특정 실시양태에서, 총 용량은 7.2x1011개 VG이다. 특정 실시양태에서, 총 용량은 7.5x1011개 VG이다. 특정 실시양태에서, 총 용량은 9x1011개 VG이다. 특정 실시양태에서, 총 용량은 1.4x1012개 VG이다. 특정 실시양태에서, 총 용량은 1.5x1012개 VG이다. 특정 실시양태에서, 총 용량은 2.3x1012개 VG이다. 특정 실시양태에서, 총 용량은 4.5x1012개 VG이다. 특정 실시양태에서, 총 용량은 4.6x1012개 VG이다. 특정 실시양태에서, 총 용량은 4.7x1012개 VG이다. 특정 실시양태에서, 총 용량은 4.8x1012개 VG이다. 특정 실시양태에서, 총 용량은 4.9x1012개 VG이다. 특정 실시양태에서, 총 용량은 5x1012개 VG이다. 특정 실시양태에서, 총 용량은 8.8x1012개 VG이다. 특정 실시양태에서, 총 용량은 9.4x1012개 VG이다. 특정 실시양태에서, 총 용량은 3.72x1012개 VG이다. 특정 실시양태에서, 조성물 중 AAV 입자의 농도는 8.3x1011개 VG/대상체이다. 특정 실시양태에서, 총 용량은 5.95x1012개 VG이다. 특정 실시양태에서, 총 용량은 6.58x1012개 VG이다. 특정 실시양태에서, 총 용량은 4.31x1012개 VG이다. 특정 실시양태에서, 총 용량은 6.45x1012개 VG이다. 특정 실시양태에서, 총 용량은 7.80x1012개 VG이다.
특정 실시양태에서, 약 105 내지 106개 바이러스 게놈 (단위)이 용량당 투여될 수 있다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용에 따른 조성물의 세포에의 전달은 약 1x106개 VG/mL 내지 약 1x1016개 VG/mL의 총 농도를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 전달은 약 1x106, 2x106, 3x106, 4x106, 5x106, 6x106, 7x106, 8x106, 9x106, 1x107, 2x107, 3x107, 4x107, 5x107, 6x107, 7x107, 8x107, 9x107, 1x108, 2x108, 3x108, 4x108, 5x108, 6x108, 7x108, 8x108, 9x108, 1x109, 2x109, 3x109, 4x109, 5x109, 6x109, 7x109, 8x109, 9x109, 1x1010, 2x1010, 3x1010, 4x1010, 5x1010, 6x1010, 7x1010, 8x1010, 9x1010, 1x1011, 2x1011, 3x1011, 3.1x1011, 3.2x1011, 3.3x1011, 3.4x1011, 3.5x1011, 3.6x1011, 3.7x1011, 3.8x1011, 3.9x1011, 4x1011, 5x1011, 6x1011, 7x1011, 8x1011, 8.1x1011, 8.2x1011, 8.3x1011, 8.4x1011, 8.5x1011, 8.6x1011, 8.7x1011, 8.8x1011, 8.9x1011, 9x1011, 1x1012, 1.1x1012, 1.2x1012, 1.3x1012, 1.4x1012, 1.5x1012, 1.6x1012, 1.7x1012, 1.8x1012, 1.9x1012, 2x1012, 2.1x1012, 2.2x1012, 2.3x1012, 2.4x1012, 2.5x1012, 2.6x1012, 2.7x1012, 2.8x1012, 2.9x1012, 3x1012, 3.1x1012, 3.2x1012, 3.3x1012, 3.4x1012, 3.5x1012, 3.6x1012, 3.7x1012, 3.8x1012, 3.9x1012, 4x1012, 4.1x1012, 4.2x1012, 4.3x1012, 4.4x1012, 4.5x1012, 4.6x1012, 4.7x1012, 4.8x1012, 4.9x1012, 5x1012, 6x1012, 7x1012, 8x1012, 9x1012, 1x1013, 2x1013, 3x1013, 4x1013, 5x1013, 6x1013, 6.7x1013, 7x1013, 8x1013, 9x1013, 1x1014, 2x1014, 3x1014, 4x1014, 5x1014, 6x1014, 7x1014, 8x1014, 9x1014, 1x1015, 2x1015, 3x1015, 4x1015, 5x1015, 6x1015, 7x1015, 8x1015, 9x1015, 또는 1x1016개 VG/mL의 조성물 농도를 포함할 수 있다. 특정 실시양태에서, 조성물 중 AAV 입자의 농도는 7.0x1011개 VG/mL이다. 특정 실시양태에서, 조성물 중 AAV 입자의 농도는 3.3x1011개 VG/mL이다. 특정 실시양태에서, 조성물 중 AAV 입자의 농도는 1x1013개 VG/mL이다. 특정 실시양태에서, 조성물 중 AAV 입자의 농도는 3x1012개 VG/mL이다. 특정 실시양태에서, 조성물 중 AAV 입자의 농도는 1.1x1012개 VG/mL이다. 특정 실시양태에서, 조성물 중 AAV 입자의 농도는 1.7x1012개 VG/mL이다. 특정 실시양태에서, 조성물 중 AAV 입자의 농도는 3.7x1012개 VG/mL이다. 특정 실시양태에서, 조성물 중 AAV 입자의 농도는 8x1011개 VG/mL이다. 특정 실시양태에서, 조성물 중 AAV 입자의 농도는 2.5x1012개 VG/mL이다. 특정 실시양태에서, 조성물 중 AAV 입자의 농도는 2.6x1012개 VG/mL이다. 특정 실시양태에서, 조성물 중 AAV 입자의 농도는 4.9x1012개 VG/mL이다. 특정 실시양태에서, 조성물 중 AAV 입자의 농도는 0.8x1012개 VG/mL이다. 특정 실시양태에서, 조성물 중 AAV 입자의 농도는 0.83x1012개 VG/mL이다. 특정 실시양태에서, 조성물 내의 AAV 입자의 농도는 바이알 내에 함유될 수 있는 최대 최종 용량이다.
특정 실시양태에서, AAV 입자의 중추 신경계 (예를 들어, 실질)의 세포에의 전달은 약 1x106개 VG/mL 내지 약 1x1016개 VG/mL의 조성물 농도를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 전달은 약 1x106, 2x106, 3x106, 4x106, 5x106, 6x106, 7x106, 8x106, 9x106, 1x107, 2x107, 3x107, 4x107, 5x107, 6x107, 7x107, 8x107, 9x107, 1x108, 2x108, 3x108, 4x108, 5x108, 6x108, 7x108, 8x108, 9x108, 1x109, 2x109, 3x109, 4x109, 5x109, 6x109, 7x109, 8x109, 9x109, 1x1010, 2x1010, 3x1010, 4x1010, 5x1010, 6x1010, 7x1010, 8x1010, 9x1010, 1x1011, 2x1011, 3x1011, 4x1011, 5x1011, 6x1011, 7x1011, 8x1011, 8.1x1011, 8.2x1011, 8.3x1011, 8.4x1011, 8.5x1011, 8.6x1011, 8.7x1011, 8.8x1011, 8.9x1011, 9x1011, 1x1012, 2x1012, 2.1x1012, 2.2x1012, 2.3x1012, 2.4x1012, 2.5x1012, 2.6x1012, 2.7x1012, 2.8x1012, 2.9x1012, 3x1012, 3.1 x1012, 3.2x1012, 3.3x1012, 3.4x1012, 3.5x1012, 3.6x1012, 3.7x1012, 3.8x1012, 3.9x1012, 4x1012, 4.1x1012, 4.2x1012, 4.3x1012, 4.4x1012, 4.5x1012,4.6x1012, 4.7x1012, 4.8x1012, 4.9x1012, 5x1012, 5.1 x1012, 5.2x1012, 5.3x1012, 5.4x1012, 5.5x1012, 5.6x1012, 5.7x1012, 5.8x1012, 5.9x1012, 6x1012, 6.1 x1012, 6.2x1012, 6.3x1012, 6.4x1012, 6.5x1012, 6.6x1012, 6.7x1012, 6.8x1012, 6.9x1012, 7x1012, 7.1 x1012, 7.2x1012, 7.3x1012, 7.4x1012, 7.5x1012, 7.6x1012, 7.7x1012, 7.8x1012, 7.9x1012, 8x1012, 9x1012, 1x1013, 2x1013, 3x1013, 4x1013, 5x1013, 6x1013, 7x1013, 8x1013, 9x1013, 1x1014, 2x1014, 3x1014, 4x1014, 5x1014, 6x1014, 7x1014, 8x1014, 9x1014, 1x1015, 2x1015, 3x1015, 4x1015, 5x1015, 6x1015, 7x1015, 8x1015, 9x1015, 또는 1x1016개 VG/mL의 조성물 농도를 포함할 수 있다. 특정 실시양태에서, 전달은 7.0x1011개 VG/mL의 조성물 농도를 포함한다. 특정 실시양태에서, 전달은 3.3x1011개 VG/mL의 조성물 농도를 포함한다. 특정 실시양태에서, 전달은 1x1013개 VG/mL의 조성물 농도를 포함한다. 특정 실시양태에서, 전달은 1.7x1012개 VG/mL의 조성물 농도를 포함한다. 특정 실시양태에서, 전달은 8.3x1011개 VG/mL의 조성물 농도를 포함한다. 특정 실시양태에서, 전달은 2.1x1012개 VG/mL의 조성물 농도를 포함한다. 특정 실시양태에서, 전달은 2.5x1012개 VG/mL의 조성물 농도를 포함한다. 특정 실시양태에서, 전달은 2.6x1012개 VG/mL의 최대 조성물 농도를 포함한다.
요법
본 개시내용의 AAV 입자의 목적하는 투여량은 단지 1회, 1일 3회, 1일 2회, 1일 1회, 격일, 3일마다, 매주, 2주마다, 3주마다 또는 4주마다 전달될 수 있다. 특정 실시양태에서, AAV 입자는 단일 용량으로 투여된다. 특정 실시양태에서, 목적하는 투여량은 다중 투여 (예를 들어, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14회 또는 그 초과의 투여)를 사용하여 전달될 수 있다. 다중 투여가 사용되는 경우, 본원에 기재된 것과 같은 분할 투여 요법이 사용될 수 있다. 본원에 사용된 "분할 용량"은 "단일 단위 용량" 또는 총 1일 용량의 2회 이상의 용량으로의 분배, 예를 들어, "단일 단위 용량"의 2회 이상의 투여이다. 본원에 사용된 "단일 단위 용량"은 1회 용량/한 번에/단일 경로/단일 접촉 지점, 즉 단일 투여 사건으로 투여되는 임의의 치료제의 용량이다.
본 개시내용의 AAV 입자의 목적하는 투여량은 "펄스 용량"으로서 또는 "연속 유동"으로서 투여될 수 있다. 본원에 사용된 "펄스 용량"은 소정의 기간에 걸쳐 설정 빈도로 투여되는 임의의 치료제의 일련의 단일 단위 용량이다. 본원에 사용된 "연속 유동"은 단일 경로/단일 접촉 지점, 즉 연속 투여 사건으로 소정의 기간 동안 연속적으로 투여되는 치료제의 용량이다. 24시간 기간 내에 제공되거나 처방되는 양인 총 1일 용량은 임의의 이들 방법에 의해, 또는 이들 방법의 조합으로서, 또는 제약 투여에 적합한 임의의 다른 방법에 의해 투여될 수 있다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자를 대상체에게 전달하는 것은 대상체에서 AADC의 조절 활성을 제공한다. 조절 활성은 대상체에서의 AADC 생산의 증가일 수 있다. 조절 활성은 적어도 1개월, 2개월, 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월, 1년, 13개월, 14개월, 15개월, 16개월, 17개월, 18개월, 19개월, 20개월, 20개월, 21개월, 22개월, 23개월, 2년, 3년, 4년, 5년, 6년, 7년, 8년, 9년, 10년 또는 10년 초과 동안 있을 수 있다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 단일 용량, 1-회 치료를 사용하여 대상체에게 투여될 수 있다. 1-회 치료의 용량은 관련 기술분야에 공지되고/거나 본원에 기재된 임의의 방법에 의해 투여될 수 있다. 본원에 사용된 "1-회 치료"는 1회만 투여되는 조성물을 지칭한다. 필요한 경우, 적절한 효능에 도달하도록 대상체에게 부스터 용량을 투여할 수 있다. 부스터는 1-회 치료의 1개월, 2개월, 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월, 12개월, 1년, 13개월, 14개월, 15개월, 16개월, 17개월, 18개월, 19개월, 20개월, 21개월, 22개월, 23개월, 24개월, 2년, 3년, 4년, 5년, 6년, 7년, 8년, 9년, 10년, 또는 10년 초과 후에 투여될 수 있다.
전달 방법
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자 또는 제약 조성물은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 번호 8,999,948, 또는 국제 공개 번호 WO2014178863에 기재된 질환의 치료 방법을 사용하여 투여 또는 전달될 수 있다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자 또는 제약 조성물은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 출원 번호 20150126590에 기재된 바와 같은 알츠하이머병 또는 다른 신경변성 상태에서 유전자 요법을 전달하는 방법을 사용하여 투여 또는 전달될 수 있다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자 또는 제약 조성물은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 번호 6,436,708, 및 8,946,152, 및 국제 공개 번호 WO2015168666에 기재된 바와 같은 CNS 유전자 요법을 전달하는 방법을 사용하여 투여 또는 전달될 수 있다.
특정 실시양태에서, AADC 폴리뉴클레오티드를 포함하는 AAV 입자는 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 유럽 특허 출원 번호 EP1857552에 기재된 AAV 비리온의 전달 방법을 사용하여 투여 또는 전달될 수 있다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자 또는 제약 조성물은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 유럽 특허 출원 번호 EP2678433에 기재된 AAV 입자를 사용하여 단백질을 전달하는 방법을 사용하여 투여 또는 전달될 수 있다.
특정 실시양태에서, AADC 폴리뉴클레오티드를 포함하는 AAV 입자는 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 번호 US 5,858,351에 기재된 AAV 입자를 사용하여 DNA 분자를 전달하는 방법을 사용하여 투여 또는 전달될 수 있다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자 또는 제약 조성물은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 번호 US 6,211,163에 기재된 혈류에 DNA를 전달하는 방법을 사용하여 투여 또는 전달될 수 있다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자 또는 제약 조성물은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 번호 US 7,588,757에 기재된 중추 신경계에 페이로드를 전달하는 방법을 사용하여 투여 또는 전달될 수 있다.
특정 실시양태에서, AAV 입자는 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 번호 US 6,325,998에 기재된 AAV 비리온의 전달 방법을 사용하여 투여 또는 전달될 수 있다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자 또는 제약 조성물은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 번호 US 8,283,151에 기재된 페이로드를 전달하는 방법을 사용하여 투여 또는 전달될 수 있다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자 또는 제약 조성물은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 국제 특허 공개 번호 WO2001089583에 기재된 글루탐산 데카르복실라제 (GAD) 전달 벡터를 사용하여 페이로드를 전달하는 방법을 사용하여 투여 또는 전달될 수 있다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자 또는 제약 조성물은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 국제 특허 공개 번호 WO2012057363에 기재된 신경 세포에 페이로드를 전달하는 방법을 사용하여 투여 또는 전달될 수 있다.
세포에 대한 전달
본 개시내용은 세포 또는 조직을 상기 AAV 입자와 접촉시키거나, 또는 세포 또는 조직을 상기 AAV 입자를 포함하는 제제와 접촉시키거나, 또는 세포 또는 조직을 제약 조성물을 포함한 기재된 조성물 중 임의의 것과 접촉시키는 것을 포함하는, 세포 또는 조직에 상기-기재된 AAV 입자 중 임의의 것을 전달하는 방법을 제공한다. AAV 입자를 세포 또는 조직에 전달하는 방법은 시험관내, 생체외, 또는 생체내에서 달성될 수 있다.
대상체에 대한 전달
본 개시내용은 추가적으로 포유동물 대상체를 포함한 대상체에게 상기 AAV 입자를 투여하거나, 대상체에게 상기 AAV 입자를 포함하는 제제를 투여하거나, 또는 대상체에게 제약 조성물을 포함한 기재된 조성물 중 임의의 것을 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에게 상기-기재된 AAV 입자 중 임의의 것을 전달하는 방법을 제공한다.
조합
AAV 입자는 1종 이상의 다른 치료적, 예방적, 연구 또는 진단 작용제와 조합되어 사용될 수 있다. "와 조합하여"는, 이들 전달 방법이 본 개시내용의 범주 내에 있긴 하지만, 작용제가 동시에 투여되어야 하고/거나 함께 전달되도록 제제화되어야 한다는 것을 의미하는 것으로 의도되지 않는다. 조성물은 1종 이상의 다른 목적하는 치료제 또는 의료적 절차와 공동으로, 그 전에, 또는 그에 후속하여 투여될 수 있다. 일반적으로, 각각의 작용제는 그러한 작용제에 대해 결정된 용량 및/또는 시간 스케쥴로 투여될 것이다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용은 그의 생체이용률을 개선시키고/거나, 그의 대사를 감소 및/또는 변형시키고/거나, 그의 배설을 억제하고/거나, 신체 내 그의 분포를 변형시킬 수 있는 작용제와 조합된 제약, 예방, 연구 또는 진단 조성물의 전달을 포괄한다.
특정 실시양태에서, 본원에 기재된 AAV 입자는 레보도파 요법을 받고 있는 대상체에게 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체는 레보도파 요법에 대해 양성 반응을 가질 수 있고, PD의 적어도 1개의 증상이 감소된다. 특정 실시양태에서, 대상체는 대상체가 경험하는 PD의 증상이 안정한, 레보도파 요법에 대한 반응을 가질 수 있다. 또 다른 비제한적 예로서, 대상체는 대상체가 경험하는 PD의 증상이 증가하는, 레보도파 요법에 대한 음성 반응을 가질 수 있다.
특정 실시양태에서, AAV 물품 전에 대상체에게 투여되는 레보도파의 용량은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 또는 25 mg/kg 초과이다. 특정 실시양태에서, 용량은 3 mg/kg이다. 특정 실시양태에서, 용량은 10 mg/kg이다. 또 다른 비제한적 예로서, 용량은 20 mg/kg이다. 레보도파에 대한 대상체의 반응 (예를 들어, 행동 반응)은 AAV 입자의 투여 전에 평가될 수 있다. 추가적으로, 대상체는 AADC 폴리뉴클레오티드의 투여 후 (예를 들어, AAV 입자의 투여의 1주, 2주, 3주, 1개월, 2개월, 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월, 1년 또는 1년 초과 후)에 다시 레보도파가 투여될 수 있다. 행동 반응은 재-평가될 수 있고, AAV 입자의 효과를 결정하기 위해 초기 반응과 비교될 수 있다. 대상체는 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 99% 또는 100% 행동 개선을 가질 수 있다.
특정 실시양태에서, 레보도파는 AAV 입자의 투여 후 다수회 투여될 수 있다. 레보도파는 반복 스케쥴 (예를 들어, 5일마다, 매주, 10일마다, 15일마다, 30일마다, 매월, 격월, 3개월마다, 4개월마다, 5개월마다, 6개월마다, 7개월마다, 8개월마다, 9개월마다, 10개월마다, 11개월마다 또는 매년)로 투여될 수 있거나, 또는 증상 발생에 따라 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, AADC 폴리뉴클레오티드의 투여의 3년 후에, 대상체는 피각의 주입된 영역 내에 AADC-면역반응성인 1-10%, 5-15%, 10-20%, 15-30%, 20-40%, 25-50%, 30-50%, 40-50%, 40-60%, 50-70%, 50-80%, 60-70%, 60-75%, 60-80%, 60-90%, 70-80%, 70-90%, 75-90%, 80-90%, 90-100%의 선조체 뉴런을 가질 수 있다. 특정 실시양태에서, AAV 입자의 투여의 6년 후에, 대상체는 피각의 주입된 영역 내에 AADC-면역반응성인 1-10%, 5-15%, 10-20%, 15-30%, 20-40%, 25-50%, 30-50%, 40-50%, 40-60%, 50-70%, 50-80%, 60-70%, 60-75%, 60-80%, 60-90%, 70-80%, 70-90%, 75-90%, 80-90%, 90-100%의 선조체 뉴런을 가질 수 있다. 특정 실시양태에서, AADC 폴리뉴클레오티드의 투여의 9년 후에, 대상체는 피각의 주입된 영역 내에 AADC-면역반응성인 1-10%, 5-15%, 10-20%, 15-30%, 20-40%, 25-50%, 30-50%, 40-50%, 40-60%, 50-70%, 50-80%, 60-70%, 60-75%, 60-80%, 60-90%, 70-80%, 70-90%, 75-90%, 80-90%, 90-100%의 선조체 뉴런을 가질 수 있다.
특정 실시양태에서, 본원에 기재된 AAV 입자가 투여될 수 있는 대상체는 레보도파 요법에 대해 문서화된 반응을 갖지만, 의학적으로 불응성인 변동을 갖고, 우수 수술 후보로 간주된다. 대상체가 우수 수술 후보인지 결정하는 것은 PD에 대해 대상체를 치료하는 의사에 의해 또는 AAV 입자를 투여하는 의사에 의해, 환자에 대해 AAV 입자의 전달을 필요로 하는 외과적 개입에 대한 전체 위험 대 이익 비를 고려하여, 이루어질 수 있다.
발현의 측정
바이러스 게놈으로부터의 페이로드의 발현은 관련 기술분야에 공지된 다양한 방법, 예컨대 비제한적으로 면역화학 (IHC), 계내 혼성화 (ISH), 효소-연결된 면역흡착 검정 (ELISA), 친화도 ELISA, ELISPOT, 유동 세포측정법, 면역세포학, 표면 플라즈몬 공명 분석, 동역학적 배제 검정, 액체 크로마토그래피-질량 분광측정법 (LCMS), 고성능 액체 크로마토그래피 (HPLC), BCA 검정, 면역전기영동, 웨스턴 블롯, SDS-PAGE, 단백질 면역침전, 및/또는 PCR을 사용하여 결정될 수 있다.
본원에 기재된 AAV 입자의 제약 조성물은 생체이용률, 치료 범위 및/또는 분포 부피 중 하나 이상에 의해 특징화될 수 있다.
생체이용률
AAV 입자는, 본원에 기재된 바와 같은 전달제와 함께 조성물로 제제화된 경우, 본원에 기재된 바와 같은 전달제가 결여된 조성물과 비교하여 생체이용률의 증가를 나타낼 수 있다. 본원에 사용된 용어 "생체이용률"은 주어진 양의 AAV 입자 또는 포유동물에게 투여된 발현된 페이로드의 전신 이용가능성을 지칭한다. 생체이용률은 다음과 같은 조성물의 곡선하 면적 (AUC) 또는 최대 혈청 또는 혈장 농도 (Cmax)를 측정함으로써 평가될 수 있다. AUC는 가로좌표 (X-축)를 따른 시간에 대한 세로좌표 (Y-축)를 따른 화합물 (예를 들어, AAV 입자 또는 발현된 페이로드)의 혈청 또는 혈장 농도를 플롯팅한 곡선하 면적의 결정이다. 일반적으로, 특정한 화합물에 대한 AUC는 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지되고 문헌 [G. S. Banker, Modern Pharmaceutics, Drugs and the Pharmaceutical Sciences, v. 72, Marcel Dekker, New York, Inc., 1996]에 기재된 바와 같은 방법을 사용하여 계산될 수 있으며, 그의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
Cmax 값은 포유동물에게 AAV 입자를 투여한 후 포유동물의 혈청 또는 혈장에서 달성된 AAV 입자 또는 발현된 페이로드의 최대 농도이다. Cmax 값은 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 방법을 사용하여 측정될 수 있다. 본원에 사용된 어구 "생체이용률의 증가" 또는 "약동학의 개선"은 포유동물에서 AUC, Cmax 또는 Cmin으로 측정된, 제1 AAV 입자 또는 발현된 페이로드의 전신 이용가능성이 본원에 기재된 바와 같은 전달제와 공동-투여된 경우에 이러한 공동-투여가 일어나지 않은 경우보다 더 큰 것을 의미한다. 일부 실시양태에서, 생체이용률은 적어도 약 2%, 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 또는 약 100% 증가할 수 있다.
치료 범위
본원에 사용된 "치료 범위"는 치료 효과를 도출할 확률이 높은, 혈장 농도의 범위 또는 작용 부위에서의 치료 활성 물질의 수준의 범위를 지칭한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 바와 같은 AAV 입자의 치료 범위는 적어도 약 2%, 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 또는 약 100% 증가할 수 있다.
분포 부피
본원에 사용된 용어 "분포 부피"는 혈액 또는 혈장에서와 동일한 농도로 신체에서 약물의 총량을 함유하기 위해 요구되는 유체 부피를 지칭하고: Vdist는 신체에서의 약물의 양/혈액 또는 혈장에서의 약물의 농도와 동일하다. 예를 들어, 10 mg 용량 및 10 mg/L의 혈장 농도의 경우, 분포 부피는 1 리터일 것이다. 분포 부피는 약물이 혈관외 조직에 존재하는 정도를 반영한다. 큰 부피의 분포는 혈장 단백질 결합과 비교하여 화합물이 조직 성분에 결합하는 경향을 반영한다. 임상 세팅에서, Vdist를 사용하여 정상 상태 농도를 달성하기 위한 부하 용량을 결정할 수 있다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 바와 같은 AAV 입자의 분포 부피는 적어도 약 2%, 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70% 감소할 수 있다.
생물학적 효과
특정 실시양태에서, 동물에게 전달되는 AAV 입자의 생물학적 효과는 동물에서 페이로드 발현을 분석함으로써 카테고리화될 수 있다. 페이로드 발현은 본 개시내용의 AAV 입자가 투여된 포유동물로부터 수집된 생물학적 샘플을 분석하는 것으로부터 결정될 수 있다. 예를 들어, 포유동물에게 전달된 AAV 입자에 의해 코딩된 단백질에 대해 50-200 pg/ml의 단백질 발현이 포유동물에서의 단백질의 치료 유효량으로서 확인될 수 있다.
IV. 개시내용의 조성물의 방법 및 용도
CNS 질환
본 개시내용의 폴리뉴클레오티드는 이상 표적 발현 또는 목적하지 않은 표적 발현을 특징으로 하는 임의의 질환 또는 장애의 치료, 예방 또는 개선에 사용될 수 있다. 특정 실시양태에서, 개시내용은 파킨슨병의 치료에 사용하기 위한 AAV 입자에 관한 것이다.
일부 실시양태에서, AAV 입자는 이상 표적 발현 또는 목적하지 않은 표적 발현을 특징으로 하는 임의의 질환 또는 장애의 치료, 예방 또는 개선에 사용될 수 있으며, 여기서 페이로드, 즉 AADC는 대안적 페이로드로 스와핑된다.
본 개시내용은 인간 대상체를 포함한 포유동물 대상체에게 본원에 기재된 AAV 입자를 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 질환, 장애 및/또는 상태를 치료하는 방법을 제공한다.
특정 실시양태에서, 질환, 장애 및/또는 상태는 신경계 질환, 장애 및/또는 상태이다. CNS 질환은 뇌의 임의의 성분 (대뇌 반구, 간뇌, 뇌간 및 소뇌 포함) 또는 척수에 영향을 미치는 질환일 수 있다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 바이러스 입자는, CNS에서 유전자 생성물의 수준 또는 기능을 조정할 수 있는 치료 생성물인 기능적 페이로드의 전달을 통해, 신경변성 질환 및/또는 신경변성을 특징으로 하는 질환 또는 장애, 신경근육 질환, 리소솜 질환, 외상, 골수 손상, 통증 (신경병증성 통증 포함), 신경계의 암, 탈수초성 질환, 신경계의 자가면역 질환, 신경독성 증후군, 수면 장애, 유전적 뇌 장애 및 발생상 CNS 장애를 치료하는데 사용될 수 있다. 기능적 페이로드는 그를 필요로 하는 대상체에서 유전자 생성물의 비정상적 수준 및/또는 기능 (예를 들어, 단백질의 부재 또는 결함)으로부터 야기되는 증상을 완화 또는 감소시킬 수 있거나, 또는 달리 그를 필요로 하는 대상체에서 CNS 장애에 대한 이익을 부여할 수 있다.
비제한적 예로서, 본 개시내용의 AAV 입자에 의해 전달되는 치료 생성물은 성장 및 영양 인자, 시토카인, 호르몬, 신경전달물질, 효소, 항아폽토시스 인자, 혈관신생 인자, 및 병리학적 장애에서 돌연변이되는 것으로 공지된 임의의 단백질, 예컨대 "운동 뉴런 생존" 단백질 (SMN); 본원에 논의된 CNS 질환 중 임의의 것에서 치료적 관심사인 단백질을 코딩하는 메신저 RNA를 표적화하는 안티센스 RNA 또는 RNAi; 또는 CNS에서의 유전자 침묵 및 유전자 발현의 전사후 조절에서 기능하는 마이크로RNA (예를 들어, 뇌 특이적 Mir-128a, 문헌 [Adlakha and Saini, Molecular cancer, 2014, 13:33] 참조)를 포함할 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다. 예를 들어, 슈퍼옥시드 디스뮤타제 효소를 표적화하는 RNAi는 ALS의 치료를 위해 본 개시내용의 바이러스 입자에 의해 패키징될 수 있다.
성장 및 영양 인자는 뇌 유래 성장 인자 (BDNF), 표피 성장 인자 (EGF), 염기성 섬유모세포 성장 인자 (bFGF), 섬모 신경영양 인자 (CNTF), 코르티코트로핀-방출 인자 (CRF), 신경교 세포주 유래 성장 인자 (GDNF), 인슐린-유사 성장 인자-1 (IGF-1), 신경 성장 인자 (NGF), 뉴로트로핀-3 (NT-3), 뉴로트로핀-4 (NT-4), 및 혈관 내피 성장 인자 (VEGF)를 포함할 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다. 시토카인은 인터류킨-10 (IL-10), 인터류킨-6, 인터류킨-8, 케모카인 CXCL12 (SDF-1), TGF-베타, 및 성장 및 분화 인자 (GDF-1/10)를 포함할 수 있다.
일부 실시양태에서, 신경계 장애는 알츠하이머병 (AD); 근위축성 측삭 경화증 (ALS); 크로이츠펠트-야콥 질환 (CJD); 헌팅틴 질환 (HD); 프리드라이히 운동실조 (FA); 파킨슨병 (PD); 다계통 위축 (MSA); 척수성 근육 위축 (SMA), 다발성 경화증 (MS); 원발성 진행성 실어증; 진행성 핵상 마비 (PSP); 치매; 뇌암, 변성 신경 질환, 뇌염, 간질, 신경변성을 유발하는 유전적 뇌 장애, 색소성 망막염 (RP), 머리 및 뇌 기형, 수두증, 졸중, 프리온 질환, 영아 신경 세로이드 리포푸신증 (INCL) (리소솜 효소 팔미토일 단백질 티오에스테라제-1 (PPT1)의 결핍에 의해 유발되는 소아의 신경변성 질환) 및 기타를 포함하나 이에 제한되지는 않는 신경변성 장애일 수 있다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 바이러스 입자는 CNS의 성장 및 발달의 손상과 연관된 질환, 즉, 신경발달 장애를 치료하는데 사용될 수 있다. 일부 측면에서, 이러한 신경발달 장애는 유약 X 증후군 (FMR1 유전자에서의 돌연변이에 의해 유발됨), 다운 증후군 (염색체 21의 삼염색체에 의해 유발됨), 레트 증후군, 윌리암스 증후군, 안젤만 증후근, 스미스-마제니스 증후군, ATR-X 증후군, 바르트 증후군, 영아기 동안의 면역 기능장애 및/또는 감염성 질환, 예컨대 시데남 무도병, 정신분열증 선천성 톡소플라스마증, 선천성 풍진 증후군, 대사 장애 예컨대 당뇨병 및 페닐케톤뇨; 영양 결함 및/또는 뇌 외상, 자폐증 및 자폐 스펙트럼을 포함하나 이에 제한되지는 않은 유전자 돌연변이에 의해 유발될 수 있다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 바이러스 입자는 청신경종, 성상세포종 (등급 I, II, III 및 IV), 척삭종, CNS 림프종, 두개인두종, 신경교종 (예를 들어, 뇌간 신경교종, 상의세포종, 시신경 신경교종, 상의하세포종), 수모세포종, 수막종, 전이성 뇌 종양, 핍지교종, 뇌하수체 종양, 원시 신경외배엽 (PNET), 및 슈반세포종을 포함하나 이에 제한되지는 않는 CNS에서의 종양을 치료하는데 사용될 수 있다.
일부 실시양태에서, 신경계 장애는 신경학상 기원이 CNS인 운동 및/또는 감각 증상을 갖는 기능적 신경계 장애일 수 있다. 비제한적 예로서, 기능적 신경계 장애는 만성 통증, 발작, 언어 문제, 불수의 운동 및 수면 장애일 수 있다.
일부 실시양태에서, 신경계 장애는 백질 장애 (CNS 내의 신경 섬유에 영향을 미치는 일군의 질환)일 수 있고, 펠리제우스-메르츠바허 질환, 기저 신경절 및 소뇌 위축 동반 저수포형성증, 에카르디-구티에레스 증후군, 피질하 낭 동반 거대뇌성 백질뇌병증, 선천성 근육 이영양증, 근긴장성 이영양증, 윌슨병, 로웨 증후군, 쇼그렌-라르손 증후군, PIBD 또는 테이 증후군, 코케인병, 뇌건성 황색종증, 젤베거 증후군, 신생아 부신백질이영양증, 영아 레프숨병, 젤베거-유사 증후군, 슈도-젤베거 증후군, 슈도-신생아 부신백질이영양증, 이중기능적 단백질 결핍, X-연관 부신백질이영양증 및 부신척수신경병증 및 레프숨병을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
일부 실시양태에서, 신경계 장애는 CNS 내의 세포가 대사 최종 생성물을 파괴하지 못함으로 인해 유발되는 리소솜 축적 장애 (LSD)일 수 있고, 니만-픽병 (산 스핑고미엘리나제 (ASM)에서의 유전적 결핍으로 인한 LSD); 이염성 백질이영양증 (MLD) (아릴술파타제 A (ARSA)의 유전적 결핍의 결과, 신경교 세포 및 뉴런 내 술파티드의 축적을 특징으로 하는 LSD); 구상-세포 백질이영양증 (GLD) (갈락토실세라미다제에서의 돌연변이에 의해 유발된 LSD); 파브리병 (알파-갈락토시다제 A (GLA) 유전자에서의 돌연변이에 의해 유발된 LSD); 고셔병 (베타-글루코세레브로시다제 (GBA) 유전자에서의 돌연변이에 의해 유발됨); GM1/GM2 강글리오시드증; 뮤코폴리사카라이드증 장애; 폼페병; 및 신경 세로이드 리포푸신증을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
또 다른 실시양태에서, 신경계 질환, 장애 및/또는 상태는 프리드라이히 운동실조이다. 특정 실시양태에서, 프리드라이히 운동실조를 치료하는데 사용되는 AAV 입자는 핵산 서열, 예컨대 비제한적으로 서열식별번호: 979 또는 그의 단편 또는 변이체를 포함하며, 여기서 페이로드는 프리드라이히 운동실조를 치료하기 위해 관련 기술분야에 공지된 프라탁신 또는 임의의 다른 페이로드에 의해 대체된다.
또 다른 실시양태에서, 신경계 질환, 장애 및/또는 상태는 근위축성 측삭 경화증 (ALS)이다. 특정 실시양태에서, ALS를 치료하는데 사용되는 AAV 입자는 핵산 서열, 예컨대 비제한적으로 서열식별번호: 979 또는 그의 단편 또는 변이체를 포함하며, 여기서 페이로드는 shRNA, miRNA, siRNA, SOD1에 대한 RNAi 또는 ALS를 치료하기 위해 관련 기술분야에 공지된 임의의 다른 페이로드에 의해 대체된다.
또 다른 실시양태에서, 신경계 질환, 장애 및/또는 상태는 헌팅턴병이다. 특정 실시양태에서, 헌팅턴병을 치료하는데 사용되는 AAV 입자는 핵산 서열, 예컨대 비제한적으로 서열식별번호: 979 또는 그의 단편 또는 변이체를 포함하며, 여기서 페이로드는 shRNA, miRNA, siRNA, Htt에 대한 RNAi 또는 헌팅턴병을 치료하기 위해 관련 기술분야에 공지된 임의의 다른 페이로드에 의해 대체된다.
또 다른 실시양태에서, 신경계 질환, 장애 또는 상태는 척수성 근육 위축 (SMA)이다. 또 다른 실시양태에서, 신경계 질환, 장애 및/또는 상태는 프리드라이히 운동실조이다. 특정 실시양태에서, SMN을 치료하는데 사용되는 AAV 입자는 핵산 서열, 예컨대 비제한적으로 서열식별번호: 979 또는 그의 단편 또는 변이체를 포함하며, 여기서 페이로드는 프라탁신 또는 SMA를 치료하기 위해 관련 기술분야에 공지된 임의의 다른 페이로드에 의해 대체된다.
파킨슨병
특정 실시양태에서, 신경계 질환, 장애 및/또는 상태는 파킨슨병이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병을 치료하는데 사용되는 AAV 입자는 페이로드, 예컨대 비제한적으로 서열식별번호: 979 또는 그의 단편 또는 변이체를 포함한다.
특정 실시양태에서, 대상체는 통합 파킨슨병 등급화 척도에서 최소 운동 스코어 약 30 내지 최대 스코어 약 100, 약 10 내지 최대 스코어 약 100, 약 20 내지 최대 스코어 약 100을 갖는 인간 환자이다.
특정 실시양태에서, 대상체는 본원에 기재된 조성물에 의한 치료 전 과거 5년 내에 파킨슨병으로 진단되었다. 특정 실시양태에서, 대상체는 본원에 기재된 조성물에 의한 치료 전 1주, 2주, 3주, 4주, 5주, 6주, 7주, 8주, 1개월, 2개월, 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월, 12개월, 13개월, 14개월, 15개월, 16개월, 17개월, 18개월, 1년, 2년, 3년, 4년 또는 5년 미만 내에 파킨슨병으로 진단되었다.
특정 실시양태에서, 대상체는 본원에 기재된 조성물에 의한 치료의 5 내지 10년 전에 파킨슨병으로 진단되었다. 특정 실시양태에서, 대상체는 본원에 기재된 조성물에 의한 치료의 5, 5.5., 6, 6.5, 7, 7.5, 8, 8.5, 9, 9.5 또는 10년 전에 파킨슨병으로 진단되었을 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체는 본원에 기재된 조성물에 의한 치료의 10년 초과 전에 파킨슨병으로 진단되었다. 특정 실시양태에서, 대상체는 본원에 기재된 조성물에 의한 치료의 10.5, 11, 11.5, 12, 12.5, 13, 13.5, 14, 14.5, 15, 15.5, 16, 16.5, 17, 17.5, 18, 18.5, 19, 19.5, 20, 20.5, 21, 21.5, 22, 22.5, 23, 23.5, 24 또는 24년 초과 전에 파킨슨병으로 진단되었을 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체는 50-65세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 또는 65세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 50세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 51세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 52세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 53세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 54세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 55세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 56세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 57세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 58세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 59세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 60세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 61세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 62세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 63세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 64세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 65세이다.
특정 실시양태에서, 대상체는 30 내지 50세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 30세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 31세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 32세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 33세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 34세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 35세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 36세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 37세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 38세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 39세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 40세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 41세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 42세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 43세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 44세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 45세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 46세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 47세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 48세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 49세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 50세이다.
특정 실시양태에서, 대상체는 65 내지 85세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 65세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 66세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 67세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 68세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 69세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 70세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 71세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 72세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 73세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 74세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 75세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 76세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 77세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 78세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 79세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 80세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 81세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 82세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 83세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 84세이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 85세이다.
특정 실시양태에서, 대상체는 본원에 기재된 조성물의 투여 전에 운동 증상, 예컨대 진전 및 움직임의 변화를 보인다. 진전의 비제한적 예는 일측 또는 양측 경도 진전, 양측 또는 정중선 중등도 진전 또는 난치성 진전을 포함한다. 움직임의 비제한적 예는 경도 운동완만, 중등도 운동완만, 중증 운동완만 및 오전 무운동증을 포함한다.
특정 실시양태에서, 대상체는 균형에서의 변화, 예컨대 비제한적으로, 균형 장애, 정위 반사 장애, 유의한 균형 장애 또는 넘어짐이 있을 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체는 감소된 삶의 질을 가질 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체는 일상 생활 활동에 일부 제한을 경험하는 것과 같은 삶의 질에 대한 중간정도의 영향을 받을 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체는 질병에 의해 감소된 삶의 질을 가질 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체는 본원에 기재된 조성물의 투여 전에 비-운동 증상의 변화를 보인다. 특정 실시양태에서, 대상체는 본원에 기재된 조성물의 투여 전에 경도 내지 중등도의 인지 장애를 가질 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체는 환각과 같은 행동 장애를 또한 포함할 수 있는 치매와 같은 유의한 인지 장애를 가질 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체는 본원에 기재된 조성물의 투여 전에 1종 이상의 도파민성 의약에 대해 제한된 변동 하에 만족스러운 반응을 가질 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체는 본원에 기재된 조성물의 투여 전에 1종 이상의 도파민성 의약에 대해 경도 내지 중등도의 장애를 유발하는 운동 변동을 가질 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체는 본원에 기재된 조성물의 투여 전에 유의한 장애를 유발하는 "약효 소진" 및/또는 레보도파-유도된 이상운동증으로 이루어진 의학적 불응성 운동 변동을 가질 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체는 파킨슨병과 연관된 경도 증상, 예컨대 비제한적으로, 인지 장애 부재 (과거 5년 내에 진단됨), 1종 이상의 도파민성 의약에 대한 제한된 변동 하의 만족스러운 반응, 일측 또는 양측 경도 진전, 거의 내지 전혀 없는 삶의 질에 대한 영향, 및/또는 균형 장애 부재를 가질 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체는 파킨슨병과 연관된 중등도 증상, 예컨대 비제한적으로, 경도 내지 중등도 인지 장애, 균형 장애 및 정위 반사의 최초 징후, 1종 이상의 도파민성 의약에 대해 경도 내지 중등도의 장애를 유발하는 운동 변동 (과거 5 내지 10년 내에 진단됨), 양측 또는 정중선 중등도 진전, 중등도 운동완만 및/또는 일상 생활 활동에 일부 제한을 경험을 가질 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체는 파킨슨병과 연관된 진행성 증상, 예컨대 비제한적으로, 10년 초과 전의 파킨슨병과 연관된, 유의한 장애를 유발하는 약효 소진 및/또는 레보도파-유도된 이상운동증으로 이루어진 중간 불응성 운동 변동, 난치성 진전, 유의한 균형 장애 및/또는 넘어짐, 유의한 인지 장애 (예컨대 행동 장애의 존재 또는 부재 하의 치매), 중증 운동완만, 질병에 의해 현저하게 감소된 삶의 질 및/또는 오전 무운동증을 가질 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체는 운동 장애 전문의 (MDS)에게 문의되었지만, 뇌 심부 자극은 받지 않았다.
특정 실시양태에서, 대상체는 듀오파(DUOPA)™를 본원에 기재된 조성물과 조합하여 사용하고 있다. 특정 실시양태에서, 대상체는 듀오파™를 단독으로 사용하여 성공할 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체는 듀오파™를 단독으로 사용하여 어떠한 성공도 이룰 수 없거나 또는 제한된 성공을 가질 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체는 뇌 심부 자극을 포함하나 이에 제한되지는 않는 외과적 개입을 위한 후보이다. 특정 실시양태에서, 최적의 항파킨슨병 의약을 사용한 치료에도 불구하고 장애초래 운동 합병증으로 인해 뇌 심부 자극이 제안되었다.
치료 결과
환자 일지
특정 실시양태에서, 대상체는 대상체 일지에 기초하여 7.5-14시간의 평균 온-시간을 갖는다. 특정 실시양태에서, 평균 온-시간은 7.5, 7.6, 7.7, 7.8, 7.9, 8, 8.1, 8.2, 8.3, 8.4, 8.5, 8.6, 8.7, 8.8, 8.9, 9, 9.1, 9.2, 9.3, 9.4, 9.5, 9.6, 9.7, 9.8, 9.9, 10, 10.1, 10.2, 10.3, 10.4, 10.5, 10.6, 10.7, 10.8, 10.9, 11, 11.1, 11.2, 11.3, 11.4, 11.5, 11.6, 11.7, 11.8, 11.9, 12, 12.1, 12.2, 12.3, 12.4, 12.5, 12.6, 12.7, 12.8, 12.9, 13, 13.1, 13.2, 13.3, 13.4, 13.5, 13.6, 13.7, 13.8, 13.9, 또는 14시간이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 대상체 일지에 기초하여 10.5시간의 평균 온-시간을 갖는다.
특정 실시양태에서, 대상체는 본 개시내용의 투여 6개월 후에 기준선과 비교하여 약 1.5시간 초과의 일지 온-시간을 경험한다 (문제되는 이상운동증 없음). 특정 실시양태에서, 대상체는 피각당 최대 900 μL의 용량 부피 및 4.7 x 1012개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 6개월 후에 약 1.5시간 초과의 일지 온-시간을 경험한다.
특정 실시양태에서, 대상체는 본 개시내용의 투여 6개월 후에 기준선과 비교하여 약 2.2시간 초과의 일지 온-시간을 경험한다 (문제되는 이상운동증 없음). 특정 실시양태에서, 대상체는 피각당 최대 900 μL의 용량 부피 및 1.5 x 1012개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 6개월 후에 약 2.2시간 초과의 일지 온-시간을 경험한다.
특정 실시양태에서, 대상체는 본 개시내용의 투여 6개월 후에 기준선과 비교하여 약 4시간 초과의 일지 온-시간을 경험한다 (문제되는 이상운동증 없음). 특정 실시양태에서, 대상체는 피각당 최대 900 μL의 용량 부피 및 1.5 x 1012개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 6개월 후에 약 4시간 초과의 일지 온-시간을 경험한다.
특정 실시양태에서, 대상체는 본 개시내용의 투여 12개월 후에 기준선과 비교하여 약 1.6시간 초과의 일지 온-시간을 경험한다 (문제되는 이상운동증 없음). 특정 실시양태에서, 대상체는 피각당 최대 450 μL의 용량 부피 및 7.5 x 1011개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 12개월 후에 약 1.6시간 초과의 일지 온-시간을 경험한다.
특정 실시양태에서, 대상체는 본 개시내용의 투여 12개월 후에 기준선과 비교하여 약 1.5시간 초과의 일지 온-시간을 경험한다 (문제되는 이상운동증 없음). 특정 실시양태에서, 대상체는 피각당 최대 900 μL의 용량 부피 및 4.7 x 1012개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 12개월 후에 약 1.5시간 초과의 일지 온-시간을 경험한다.
특정 실시양태에서, 대상체는 본 개시내용의 투여 12개월 후에 기준선과 비교하여 약 3.3시간 초과의 일지 온-시간을 경험한다 (문제되는 이상운동증 없음). 특정 실시양태에서, 대상체는 피각당 최대 900 μL의 용량 부피 및 1.5 x 1012개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 12개월 후에 약 3.3시간 초과의 일지 온-시간을 경험한다.
특정 실시양태에서, 대상체는 본 개시내용의 투여 12개월 후에 기준선과 비교하여 약 4시간 초과의 일지 온-시간을 경험한다 (문제되는 이상운동증 없음). 특정 실시양태에서, 대상체는 피각당 최대 900 μL의 용량 부피 및 1.5 x 1012개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 12개월 후에 약 4시간 초과의 일지 온-시간을 경험한다.
특정 실시양태에서, 대상체는 본 개시내용의 투여 24개월 후에 기준선과 비교하여 약 2.3시간 초과의 일지 온-시간을 경험한다 (문제되는 이상운동증 없음). 특정 실시양태에서, 대상체는 피각당 최대 450 μL의 용량 부피 및 7.5 x 1011개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 24개월 후에 약 2.3시간 초과의 일지 온-시간을 경험한다.
특정 실시양태에서, 대상체는 본 개시내용의 투여 36개월 후에 기준선과 비교하여 약 2.1시간 초과의 일지 온-시간을 경험한다 (문제되는 이상운동증 없음). 특정 실시양태에서, 대상체는 피각당 최대 450 μL의 용량 부피 및 7.5 x 1011개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 36개월 후에 약 2.1시간 초과의 일지 온-시간을 경험한다.
특정 실시양태에서, 대상체는 대상체 일지에 기초하여 2-7시간의 평균 오프-시간을 갖는다. 특정 실시양태에서, 평균 오프-시간은 2, 2.1, 2.2, 2.3, 2.4, 2.5, 2.6, 2.7, 2.8, 2.9, 3, 3.1, 3.2, 3.3, 3.4, 3.5, 3.6, 3.7, 3.8, 3.9, 4, 4.1, 4.2, 4.3, 4.4, 4.5, 4.6, 4.7, 4.8, 4.9, 5, 5.1, 5.2, 5.3, 5.4, 5.5, 5.6, 5.7, 5.8, 5.9, 6, 6.1, 6.2, 6.3, 6.4, 6.5, 6.6, 6.7, 6.8, 6.9, 또는 7이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 대상체 일지에 기초하여 4.6시간의 평균 오프-시간을 갖는다.
특정 실시양태에서, 대상체는 본 개시내용의 투여 6개월 후에 기준선과 비교하여 약 1.3시간 미만의 일지 오프-시간을 경험한다. 특정 실시양태에서, 대상체는 피각당 최대 900 μL의 용량 부피 및 4.7 x 1012개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 6개월 후에 약 1.3시간 미만의 일지 오프-시간을 경험한다.
특정 실시양태에서, 대상체는 본 개시내용의 투여 6개월 후에 기준선과 비교하여 약 1.1시간 미만의 일지 오프-시간을 경험한다. 특정 실시양태에서, 대상체는 피각당 최대 900 μL의 용량 부피 및 1.5 x 1012개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 6개월 후에 약 1.1시간 미만의 일지 오프-시간을 경험한다.
특정 실시양태에서, 대상체는 본 개시내용의 투여 6개월 후에 기준선과 비교하여 약 0.8시간 미만의 일지 오프-시간을 경험한다. 특정 실시양태에서, 대상체는 피각당 최대 450 μL의 용량 부피 및 7.5 x 1011개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 6개월 후에 약 0.8시간 미만의 일지 오프-시간을 경험한다.
특정 실시양태에서, 대상체는 본 개시내용의 투여 12개월 후에 기준선과 비교하여 약 2.2시간 미만의 일지 오프-시간을 경험한다. 특정 실시양태에서, 대상체는 피각당 최대 900 μL의 용량 부피 및 1.5 x 1012개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 12개월 후에 약 2.2시간 미만의 일지 오프-시간을 경험한다.
특정 실시양태에서, 대상체는 본 개시내용의 투여 12개월 후에 기준선과 비교하여 약 1.3시간 미만의 일지 오프-시간을 경험한다. 특정 실시양태에서, 대상체는 피각당 최대 450 μL의 용량 부피 및 7.5 x 1011개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 12개월 후에 약 1.3시간 미만의 일지 오프-시간을 경험한다.
특정 실시양태에서, 대상체는 본 개시내용의 투여 24개월 후에 기준선과 비교하여 약 1.8시간 미만의 일지 오프-시간을 경험한다. 특정 실시양태에서, 대상체는 피각당 최대 450 μL의 용량 부피 및 7.5 x 1011개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 24개월 후에 약 1.8시간 미만의 일지 오프-시간을 경험한다.
특정 실시양태에서, 대상체는 본 개시내용의 투여 6개월 후에 10% 미만의 일지 오프-시간을 경험한다. 특정 실시양태에서, 대상체는 본 개시내용의 투여 12개월 후에 10% 미만의 일지 오프-시간을 경험한다.
특정 실시양태에서, 대상체는 본 개시내용의 투여 6개월 후에 20% 미만의 일지 오프-시간을 경험한다. 특정 실시양태에서, 대상체는 본 개시내용의 투여 12개월 후에 20% 미만의 일지 오프-시간을 경험한다.
특정 실시양태에서, 대상체는 본 개시내용의 투여 6개월 후에 30% 미만의 일지 오프-시간을 경험한다. 특정 실시양태에서, 대상체는 본 개시내용의 투여 12개월 후에 30% 미만의 일지 오프-시간을 경험한다.
특정 실시양태에서, 대상체는 본 개시내용의 투여 6개월 후에 40% 미만의 일지 오프-시간을 경험한다. 특정 실시양태에서, 대상체는 본 개시내용의 투여 12개월 후에 40% 미만의 일지 오프-시간을 경험한다.
특정 실시양태에서, 대상체는 본 개시내용의 투여 6개월 후에 50% 미만의 일지 오프-시간을 경험한다. 특정 실시양태에서, 대상체는 본 개시내용의 투여 12개월 후에 50% 미만의 일지 오프-시간을 경험한다.
특정 실시양태에서, 대상체는 본 개시내용의 투여 6개월 후에 60% 미만의 일지 오프-시간을 경험한다. 특정 실시양태에서, 대상체는 본 개시내용의 투여 12개월 후에 60% 미만의 일지 오프-시간을 경험한다.
특정 실시양태에서, 대상체는 본 개시내용의 투여 6개월 후에 70% 미만의 일지 오프-시간을 경험한다. 특정 실시양태에서, 대상체는 본 개시내용의 투여 12개월 후에 70% 미만의 일지 오프-시간을 경험한다.
특정 실시양태에서, 대상체는 본 개시내용의 투여 6개월 후에 80% 미만의 일지 오프-시간을 경험한다. 특정 실시양태에서, 대상체는 본 개시내용의 투여 12개월 후에 80% 미만의 일지 오프-시간을 경험한다.
특정 실시양태에서, 대상체는 본 개시내용의 투여 6개월 후에 90% 미만의 일지 오프-시간을 경험한다. 특정 실시양태에서, 대상체는 본 개시내용의 투여 12개월 후에 90% 미만의 일지 오프-시간을 경험한다.
특정 실시양태에서, 대상체는 본 개시내용의 투여 6개월 후에 95% 미만의 일지 오프-시간을 경험한다. 특정 실시양태에서, 대상체는 본 개시내용의 투여 12개월 후에 95% 미만의 일지 오프-시간을 경험한다.
UPDRS 및 운동 기능
특정 실시양태에서, 대상체의 UPDRS-3 (또는 UPDRS-III) 의약 스코어는 본 개시내용의 투여 전에 평가된다. 특정 실시양태에서, 본 개시내용의 투여 전의 대상체의 UPDRS-3 (또는 UPDRS-III) 의약 스코어는 1-40, 1-10, 1-15, 1-20, 1-25, 1-30, 1-35, 1-40, 5-10, 5-15, 5-20, 5-25, 5-30, 5-35, 5-40, 10-15, 10-20, 10-25, 10-30, 10-35, 10-40, 15-20, 15-25, 15-30, 15-35, 15-40, 20-25, 20-30, 20-35, 20-40, 25-30, 25-35, 25-40, 30-35, 30-40, 또는 35-40이다. 특정 실시양태에서, 본 개시내용의 투여 전의 대상체의 UPDRS-3 (또는 UPDRS-III) 의약 스코어는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 또는 40이다. 특정 실시양태에서, 본 개시내용의 투여 전의 대상체의 UPDRS-3 (또는 UPDRS-III) 의약 스코어는 10.1, 10.2, 10.3, 10.4, 10.5, 10.6, 10.7, 10.8, 10.9, 11, 11.1, 11.2, 11.3, 11.4, 11.5, 11.6, 11.7, 11.8, 11.9, 12, 12.1, 12.2, 12.3, 12.4, 12.5, 12.6, 12.7, 12.8, 12.9, 13, 13.1, 13.2, 13.3, 13.4, 13.5, 13.6, 13.7, 13.8, 13.9, 14, 14.1, 14.2, 14.3, 14.4, 14.5, 14.6, 14.7, 14.8, 14.9, 또는 15이다. 특정 실시양태에서, 본 개시내용의 투여 전의 대상체의 UPDRS-3 의약 스코어는 13.5이다.
특정 실시양태에서, 대상체의 UPDRS-3 (또는 UPDRS-III) 의약 스코어는 본 개시내용의 투여 후에 감소된다.
대상체의 UPDRS-3 (또는 UPDRS-III) 의약 스코어는 백분율, 예컨대 비제한적으로 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 또는 95% 초과만큼 감소될 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체의 UPDRS-3 스코어는 본 개시내용의 투여 후에 10% 감소된다. 특정 실시양태에서, 대상체의 UPDRS-3 스코어는 본 개시내용의 투여 후에 20% 감소된다. 특정 실시양태에서, 대상체의 UPDRS-3 스코어가 본 개시내용의 투여 후에 30% 감소된다. 특정 실시양태에서, 대상체의 UPDRS-3 스코어가 본 개시내용의 투여 후에 40% 감소된다. 특정 실시양태에서, 대상체의 UPDRS-3 스코어는 본 개시내용의 투여 후에 50% 감소된다. 특정 실시양태에서, 대상체의 UPDRS-3 스코어는 본 개시내용의 투여 후에 60% 감소된다. 특정 실시양태에서, 대상체의 UPDRS-3 스코어가 본 개시내용의 투여 후에 70% 감소된다. 특정 실시양태에서, 대상체의 UPDRS-3 스코어는 본 개시내용의 투여 후에 80% 감소된다. 특정 실시양태에서, 대상체의 UPDRS-3 스코어는 본 개시내용의 투여 후에 90% 감소된다.
대상체의 UPDRS-3 (또는 UPDRS-III) 의약 스코어는 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9, 1, 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 2, 2.1, 2.2, 2.3, 2.4, 2.5, 2.6, 2.7, 2.8, 2.9, 3, 3.1, 3.2, 3.3, 3.4, 3.5, 3.6, 3.7, 3.8, 3.9, 4, 4.1, 4.2, 4.3, 4.4, 4.5, 4.6, 4.7, 4.8, 4.9, 5, 5.1, 5.2, 5.3, 5.4, 5.5, 5.6, 5.7, 5.8, 5.9, 6, 6.1, 6.2, 6.3, 6.4, 6.5, 6.6, 6.7, 6.8, 6.9, 7, 7.1, 7.2, 7.3, 7.4, 7.5, 7.6, 7.7, 7.8, 7.9, 8, 8.1, 8.2, 8.3, 8.4, 8.5, 8.6, 8.7, 8.8, 8.9, 9, 9.1, 9.2, 9.3, 9.4, 9.5, 9.6, 9.7, 9.8, 9.9, 10, 10.1, 10.2, 10.3, 10.4, 10.5, 10.6, 10.7, 10.8, 10.9, 11, 11.1, 11.2, 11.3, 11.4, 11.5, 11.6, 11.7, 11.8, 11.9, 12, 12.1, 12.2, 12.3, 12.4, 12.5, 12.6, 12.7, 12.8, 12.9, 13, 13.1, 13.2, 13.3, 13.4, 13.5, 13.6, 13.7, 13.8, 13.9, 14, 14.1, 14.2, 14.3, 14.4, 14.5, 14.6, 14.7, 14.8, 14.9, 또는 15점만큼 변할 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체의 UPDRS-3 스코어는 0.4점만큼 변한다. 특정 실시양태에서, 대상체의 UPDRS-3 스코어는 1.6점만큼 변한다. 특정 실시양태에서, 대상체의 UPDRS-3 스코어는 1.8점만큼 변한다. 특정 실시양태에서, 대상체의 UPDRS-3 스코어는 8.6점만큼 변한다. 특정 실시양태에서, 대상체의 UPDRS-3 스코어는 9.6점만큼 변한다.
대상체의 UPDRS-3 (또는 UPDRS-III) 의약 스코어는 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9, 1, 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 2, 2.1, 2.2, 2.3, 2.4, 2.5, 2.6, 2.7, 2.8, 2.9, 3, 3.1, 3.2, 3.3, 3.4, 3.5, 3.6, 3.7, 3.8, 3.9, 4, 4.1, 4.2, 4.3, 4.4, 4.5, 4.6, 4.7, 4.8, 4.9, 5, 5.1, 5.2, 5.3, 5.4, 5.5, 5.6, 5.7, 5.8, 5.9, 6, 6.1, 6.2, 6.3, 6.4, 6.5, 6.6, 6.7, 6.8, 6.9, 7, 7.1, 7.2, 7.3, 7.4, 7.5, 7.6, 7.7, 7.8, 7.9, 8, 8.1, 8.2, 8.3, 8.4, 8.5, 8.6, 8.7, 8.8, 8.9, 9, 9.1, 9.2, 9.3, 9.4, 9.5, 9.6, 9.7, 9.8, 9.9, 10, 10.1, 10.2, 10.3, 10.4, 10.5, 10.6, 10.7, 10.8, 10.9, 11, 11.1, 11.2, 11.3, 11.4, 11.5, 11.6, 11.7, 11.8, 11.9, 12, 12.1, 12.2, 12.3, 12.4, 12.5, 12.6, 12.7, 12.8, 12.9, 13, 13.1, 13.2, 13.3, 13.4, 13.5, 13.6, 13.7, 13.8, 13.9, 14, 14.1, 14.2, 14.3, 14.4, 14.5, 14.6, 14.7, 14.8, 14.9, 또는 15점만큼 증가할 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체의 UPDRS-3 스코어는 0.4점만큼 증가된다. 특정 실시양태에서, 대상체의 UPDRS-3 스코어는 1.6점만큼 증가된다. 특정 실시양태에서, 대상체의 UPDRS-3 스코어는 1.8점만큼 증가된다. 특정 실시양태에서, 대상체의 UPDRS-3 스코어는 8.6점만큼 증가된다. 특정 실시양태에서, 대상체의 UPDRS-3 스코어는 9.6점만큼 증가된다.
대상체의 UPDRS-3 (또는 UPDRS-III) 의약 스코어는 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9, 1, 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 2, 2.1, 2.2, 2.3, 2.4, 2.5, 2.6, 2.7, 2.8, 2.9, 3, 3.1, 3.2, 3.3, 3.4, 3.5, 3.6, 3.7, 3.8, 3.9, 4, 4.1, 4.2, 4.3, 4.4, 4.5, 4.6, 4.7, 4.8, 4.9, 5, 5.1, 5.2, 5.3, 5.4, 5.5, 5.6, 5.7, 5.8, 5.9, 6, 6.1, 6.2, 6.3, 6.4, 6.5, 6.6, 6.7, 6.8, 6.9, 7, 7.1, 7.2, 7.3, 7.4, 7.5, 7.6, 7.7, 7.8, 7.9, 8, 8.1, 8.2, 8.3, 8.4, 8.5, 8.6, 8.7, 8.8, 8.9, 9, 9.1, 9.2, 9.3, 9.4, 9.5, 9.6, 9.7, 9.8, 9.9, 10, 10.1, 10.2, 10.3, 10.4, 10.5, 10.6, 10.7, 10.8, 10.9, 11, 11.1, 11.2, 11.3, 11.4, 11.5, 11.6, 11.7, 11.8, 11.9, 12, 12.1, 12.2, 12.3, 12.4, 12.5, 12.6, 12.7, 12.8, 12.9, 13, 13.1, 13.2, 13.3, 13.4, 13.5, 13.6, 13.7, 13.8, 13.9, 14, 14.1, 14.2, 14.3, 14.4, 14.5, 14.6, 14.7, 14.8, 14.9, 또는 15점만큼 감소할 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체의 UPDRS-3 스코어는 0.4점만큼 감소된다. 특정 실시양태에서, 대상체의 UPDRS-3 스코어는 1.6점만큼 감소된다. 특정 실시양태에서, 대상체의 UPDRS-3 스코어는 1.8점만큼 감소된다. 특정 실시양태에서, 대상체의 UPDRS-3 스코어는 8.6점만큼 감소된다. 특정 실시양태에서, 대상체의 UPDRS-3 스코어는 9.6점만큼 감소된다.
특정 실시양태에서, 대상체의 UPDRS-3 (또는 UPDRS-III) 의약 스코어는 피각당 최대 900 μL의 용량 부피 및 4.7x 1012개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 6개월 후에 8.6만큼 감소된다.
특정 실시양태에서, 대상체의 UPDRS-3 (또는 UPDRS-III) 의약 스코어는 피각당 최대 900 μL의 용량 부피 및 1.5 x 1012개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 6개월 후에 9.6만큼 감소된다.
특정 실시양태에서, 대상체의 UPDRS-3 (또는 UPDRS-III) 의약 스코어는 피각당 최대 900 μL의 용량 부피 및 4.7 x 1012개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 12개월 후에 6.8만큼 감소된다.
특정 실시양태에서, 대상체의 UPDRS-3 (또는 UPDRS-III) 의약 스코어는 피각당 최대 900 μL의 용량 부피 및 1.5 x 1012개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 12개월 후에 9.6만큼 감소된다.
특정 실시양태에서, 1회 이상의 IV-레보도파 투여에 대한 대상체의 반응은 본 개시내용의 AADC 유전자 요법의 치료적 투여 후에 개선된다. 특정 실시양태에서, IV 레보도파의 주입의 농도는 0.6 mg/mL (즉, 저용량) 또는 1.2 mg/mL (즉, 역치상)이다. 특정 실시양태에서, IV 레보도파 주입의 부피는 1 mL/kg이다. 특정 실시양태에서, IV 레보도파 주입 속도는 1 mL/kg/hr이다. 특정 실시양태에서, IV-레보도파 투여에 반응한 대상체의 UPDRS-3 (또는 UPDRS-III) 의약 스코어는 본 개시내용의 AADC 유전자 요법의 치료적 투여 후에 감소된다. 특정 실시양태에서, IV-레보도파 투여에 반응한 대상체의 UPDRS-3 (또는 UPDRS-III) 의약 스코어는 본 개시내용의 AADC 유전자 요법의 치료적 투여 후에 적어도 30%만큼 감소된다.
특정 실시양태에서, IV 레보도파 투여 (IVL-TOR 또는 TOR)에 대한 대상체의 반응 개시까지의 시간은 본 개시내용의 AADC 유전자 요법의 치료적 투여 후에 감소된다. 대상체의 IVL-TOR은 기준선 (즉, AADC 유전자 요법의 투여-전 기준선) 대비 UPDRS-III의 적어도 30% 감소를 달성하는데 요구되는 시간으로서 정의된다. 특정 실시양태에서, 대상체의 IVL-TOR은 본 개시내용의 AADC 유전자 요법의 치료적 투여 후에 10-160분, 5분, 10분, 15분, 20분, 25분, 30분, 35분, 40분, 45분, 50분, 55분, 60분, 65분, 70분, 75분, 80분, 85분, 90분, 95분, 100분, 105분, 110분, 115분, 120분, 125분, 130분, 135분, 140분, 145분, 150분, 155분, 또는 160분만큼 감소된다.
특정 실시양태에서, IV 레보도파 투여 (IVL-DOR 또는 DOR)에 대한 대상체의 반응 지속기간은 본 개시내용의 AADC 유전자 요법의 치료적 투여 후에 증가된다. 대상체의 IVL-DOR은 대상체가 기준선 (즉, AADC 유전자 요법의 투여-전 기준선) 대비 UPDRS-III에서 적어도 30% 감소를 유지하는 시간으로서 정의된다. 특정 실시양태에서, 대상체의 IVL-DOR은 본 개시내용의 AADC 유전자 요법의 치료적 투여 후에 10-160분, 5분, 10분, 15분, 20분, 25분, 30분, 35분, 40분, 45분, 50분, 55분, 60분, 65분, 70분, 75분, 80분, 85분, 90분, 95분, 100분, 105분, 110분, 115분, 120분, 125분, 130분, 135분, 140분, 145분, 150분, 155분, 또는 160분만큼 증가된다.
특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약의 대상체의 평균 양은 본 개시내용의 투여 전 1일에 약 1500 mg이었다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약은 레보도파이다.
특정 실시양태에서, 대상체의 UPDRS-II 스코어는 본 개시내용의 투여 전에 평가된다. 본 개시내용의 투여 전 대상체의 UPDRS-II 스코어는 20 내지 50, 예컨대 비제한적으로 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 및 50이다.
대상체의 UPDRS-2 (또는 UPDRS-II) 스코어는 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9, 1, 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 2, 2.1, 2.2, 2.3, 2.4, 2.5, 2.6, 2.7, 2.8, 2.9, 3, 3.1, 3.2, 3.3, 3.4, 3.5, 3.6, 3.7, 3.8, 3.9, 4, 4.1, 4.2, 4.3, 4.4, 4.5, 4.6, 4.7, 4.8, 4.9, 5, 5.1, 5.2, 5.3, 5.4, 5.5, 5.6, 5.7, 5.8, 5.9, 6, 6.1, 6.2, 6.3, 6.4, 6.5, 6.6, 6.7, 6.8, 6.9, 7, 7.1, 7.2, 7.3, 7.4, 7.5, 7.6, 7.7, 7.8, 7.9, 8, 8.1, 8.2, 8.3, 8.4, 8.5, 8.6, 8.7, 8.8, 8.9, 9, 9.1, 9.2, 9.3, 9.4, 9.5, 9.6, 9.7, 9.8, 9.9, 10, 10.1, 10.2, 10.3, 10.4, 10.5, 10.6, 10.7, 10.8, 10.9, 11, 11.1, 11.2, 11.3, 11.4, 11.5, 11.6, 11.7, 11.8, 11.9, 12, 12.1, 12.2, 12.3, 12.4, 12.5, 12.6, 12.7, 12.8, 12.9, 13, 13.1, 13.2, 13.3, 13.4, 13.5, 13.6, 13.7, 13.8, 13.9, 14, 14.1, 14.2, 14.3, 14.4, 14.5, 14.6, 14.7, 14.8, 14.9, 또는 15점만큼 변할 수 있다.
대상체의 UPDRS-2 (또는 UPDRS-II) 스코어는 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9, 1, 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 2, 2.1, 2.2, 2.3, 2.4, 2.5, 2.6, 2.7, 2.8, 2.9, 3, 3.1, 3.2, 3.3, 3.4, 3.5, 3.6, 3.7, 3.8, 3.9, 4, 4.1, 4.2, 4.3, 4.4, 4.5, 4.6, 4.7, 4.8, 4.9, 5, 5.1, 5.2, 5.3, 5.4, 5.5, 5.6, 5.7, 5.8, 5.9, 6, 6.1, 6.2, 6.3, 6.4, 6.5, 6.6, 6.7, 6.8, 6.9, 7, 7.1, 7.2, 7.3, 7.4, 7.5, 7.6, 7.7, 7.8, 7.9, 8, 8.1, 8.2, 8.3, 8.4, 8.5, 8.6, 8.7, 8.8, 8.9, 9, 9.1, 9.2, 9.3, 9.4, 9.5, 9.6, 9.7, 9.8, 9.9, 10, 10.1, 10.2, 10.3, 10.4, 10.5, 10.6, 10.7, 10.8, 10.9, 11, 11.1, 11.2, 11.3, 11.4, 11.5, 11.6, 11.7, 11.8, 11.9, 12, 12.1, 12.2, 12.3, 12.4, 12.5, 12.6, 12.7, 12.8, 12.9, 13, 13.1, 13.2, 13.3, 13.4, 13.5, 13.6, 13.7, 13.8, 13.9, 14, 14.1, 14.2, 14.3, 14.4, 14.5, 14.6, 14.7, 14.8, 14.9, 또는 15점만큼 증가할 수 있다.
대상체의 UPDRS-2 (또는 UPDRS-II) 스코어는 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9, 1, 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 2, 2.1, 2.2, 2.3, 2.4, 2.5, 2.6, 2.7, 2.8, 2.9, 3, 3.1, 3.2, 3.3, 3.4, 3.5, 3.6, 3.7, 3.8, 3.9, 4, 4.1, 4.2, 4.3, 4.4, 4.5, 4.6, 4.7, 4.8, 4.9, 5, 5.1, 5.2, 5.3, 5.4, 5.5, 5.6, 5.7, 5.8, 5.9, 6, 6.1, 6.2, 6.3, 6.4, 6.5, 6.6, 6.7, 6.8, 6.9, 7, 7.1, 7.2, 7.3, 7.4, 7.5, 7.6, 7.7, 7.8, 7.9, 8, 8.1, 8.2, 8.3, 8.4, 8.5, 8.6, 8.7, 8.8, 8.9, 9, 9.1, 9.2, 9.3, 9.4, 9.5, 9.6, 9.7, 9.8, 9.9, 10, 10.1, 10.2, 10.3, 10.4, 10.5, 10.6, 10.7, 10.8, 10.9, 11, 11.1, 11.2, 11.3, 11.4, 11.5, 11.6, 11.7, 11.8, 11.9, 12, 12.1, 12.2, 12.3, 12.4, 12.5, 12.6, 12.7, 12.8, 12.9, 13, 13.1, 13.2, 13.3, 13.4, 13.5, 13.6, 13.7, 13.8, 13.9, 14, 14.1, 14.2, 14.3, 14.4, 14.5, 14.6, 14.7, 14.8, 14.9, 또는 15점만큼 감소할 수 있다. 특정 실시양태에서, 본 개시내용의 투여 12개월 후에 3.6점 감소가 관찰된다. 특정 실시양태에서, 본 개시내용의 투여 6개월 후에 3.6점 감소가 관찰된다.
특정 실시양태에서, 대상체의 UPDRS-II 스코어는 투여 전의 UPDRS-II 스코어와 비교하여 본 개시내용의 투여 후에 2 내지 4점만큼 감소된다.
특정 실시양태에서, 대상체의 UPDRS-II 스코어는 투여 전의 UPDRS-II 의약 스코어와 비교하여, 피각당 최대 900 μL의 용량 부피 및 1.5 x 1012개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 6개월 후에 2 내지 3점만큼 감소된다.
특정 실시양태에서, 대상체의 UPDRS-II 스코어는 투여 전의 UPDRS-II 의약 스코어와 비교하여, 피각당 최대 900 μL의 용량 부피 및 1.5 x 1012개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 12개월 후에 2 내지 3점만큼 감소된다.
특정 실시양태에서, 대상체의 UPDRS-II 스코어는 투여 전의 UPDRS-II 의약 스코어와 비교하여, 피각당 최대 900 μL의 용량 부피 및 4.5 x 1012개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 6개월 후에 3 내지 4점만큼 감소된다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용은 대상체의 운동 기능을 개선시키는데 사용된다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용은 대상체의 운동 기능을 제어하고 그의 삶의 질을 개선시키는데 사용된다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용은 대상체의 운동 기능을 개선시키기 위해 대상체가 복용할 필요가 있는 파킨슨병 의약의 투여량을 감소시키는데 사용된다.
특정 실시양태에서, 대상체의 피각으로의 본 개시내용의 단일 투여는 치료 전의 운동 기능과 비교하여 개선된 운동 기능을 제공한다.
특정 실시양태에서, 대상체의 피각으로의 본 개시내용의 단일 투여는 개선된 운동 기능, 및 증상을 관리하기 위해 대상체가 필요로 하는 레보도파의 양의 감소를 제공한다.
특정 실시양태에서, 대상체의 피각으로의 본 개시내용의 단일 투여는 개선된 운동 기능, 및 증상을 관리하기 위해 대상체가 필요로 하는 도파민성 의약의 양의 감소를 제공한다.
LED 및 의약
특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 1일 용량의 양은 본 개시내용의 투여 후 10-50%만큼 감소된다. 특정 실시양태에서, 감소는 본 개시내용의 투여의 6개월 후에 관찰된다. 특정 실시양태에서, 감소는 본 개시내용의 투여의 12개월 후에 관찰된다.
특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 1일 용량의 양은 본 개시내용의 투여 후 10-20%만큼 감소된다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 10%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 11%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 12%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 13%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 14%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 15%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 16%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 17%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 18%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 19%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 20%이다.
특정 실시양태에서, 증상을 관리하기 위해 대상체가 필요로 하는 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 1일 용량의 양의 14% 감소는 피각당 최대 450 μL의 용량 부피 및 7.5 x 1011개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 6개월 후에 일어난다.
특정 실시양태에서, 증상을 관리하기 위해 대상체가 필요로 하는 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 1일 용량의 양의 10% 감소는 피각당 최대 450 μL의 용량 부피 및 7.5 x 1011개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 12개월 후에 일어난다.
특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 1일 용량의 양은 본 개시내용의 투여 후 20-30%만큼 감소된다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 20%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 21%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 22%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 23%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 24%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 25%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 26%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 27%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 28%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 29%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 30%이다.
특정 실시양태에서, 증상을 관리하기 위해 대상체가 필요로 하는 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 1일 용량의 양의 27% 감소는 피각당 최대 900 μL의 용량 부피 및 1.5 x 1012개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 12개월 후에 일어난다.
특정 실시양태에서, 증상을 관리하기 위해 대상체가 필요로 하는 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 1일 용량의 양의 28% 감소는 피각당 최대 900 μL의 용량 부피 및 1.5 x 1012개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 12개월 후에 일어난다.
특정 실시양태에서, 증상을 관리하기 위해 대상체가 필요로 하는 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 1일 용량의 양의 29% 감소는 피각당 최대 900 μL의 용량 부피 및 1.5 x 1012개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 12개월 후에 일어난다.
특정 실시양태에서, 증상을 관리하기 위해 대상체가 필요로 하는 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 1일 용량의 양의 31% 감소는 피각당 최대 900 μL의 용량 부피 및 1.5 x 1012개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 12개월 후에 일어난다.
특정 실시양태에서, 증상을 관리하기 위해 대상체가 필요로 하는 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 1일 용량의 양의 32% 감소는 피각당 최대 900 μL의 용량 부피 및 1.5 x 1012개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 12개월 후에 일어난다.
특정 실시양태에서, 증상을 관리하기 위해 대상체가 필요로 하는 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 1일 용량의 양의 33% 감소는 피각당 최대 900 μL의 용량 부피 및 1.5 x 1012개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 12개월 후에 일어난다.
특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 1일 용량의 양은 본 개시내용의 투여 후 30-40%만큼 감소된다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 30%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 31%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 32%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 33%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 34%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 35%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 36%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 37%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 38%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 39%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 40%이다.
특정 실시양태에서, 증상을 관리하기 위해 대상체가 필요로 하는 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 1일 용량의 양의 34% 감소는 피각당 최대 900 μL의 용량 부피 및 1.5 x 1012개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 6개월 후에 일어난다.
특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 1일 용량의 양은 본 개시내용의 투여 후 40-50%만큼 감소된다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 40%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 41%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 42%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 43%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 44%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 45%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 46%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 47%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 48%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 49%이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 50%이다.
특정 실시양태에서, 증상을 관리하기 위해 대상체가 필요로 하는 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 1일 용량의 양의 42% 감소는 피각당 최대 900 μL의 용량 부피 및 4.5 x 1012개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 6개월 후에 일어난다.
특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 1일 용량의 양은 본 개시내용의 투여 후 108-641 mg만큼 감소된다. 특정 실시양태에서, 감소는 본 개시내용의 투여의 6개월 후에 관찰된다. 특정 실시양태에서, 감소는 본 개시내용의 투여의 12개월 후에 관찰된다.
특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 1일 용량의 양은 본 개시내용의 투여 후 108-339 mg만큼 감소된다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 108 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 134 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 159 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 154 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 208 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 231 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 254 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 276 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 298 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 319 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 339 mg이다.
특정 실시양태에서, 증상을 관리하기 위해 대상체가 필요로 하는 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 1일 용량의 양의 208 mg 감소는 피각당 최대 450 μL의 용량 부피 및 7.5 x 1011개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 6개월 후에 일어난다.
특정 실시양태에서, 증상을 관리하기 위해 대상체가 필요로 하는 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 1일 용량의 양의 108 mg 감소는 피각당 최대 450 μL의 용량 부피 및 7.5 x 1011개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 12개월 후에 일어난다.
특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 1일 용량의 양은 본 개시내용의 투여 후 339-505 mg만큼 감소된다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 339 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 358 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 377 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 396 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 413 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 430 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 446 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 462 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 477 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 491 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 505 mg이다.
특정 실시양태에서, 증상을 관리하기 위해 대상체가 필요로 하는 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 1일 용량의 양의 462 mg 감소는 피각당 최대 900 μL의 용량 부피 및 1.5 x 1012개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 12개월 후에 일어난다.
특정 실시양태에서, 증상을 관리하기 위해 대상체가 필요로 하는 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 1일 용량의 양의 477 mg 감소는 피각당 최대 900 μL의 용량 부피 및 1.5 x 1012개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 12개월 후에 일어난다.
특정 실시양태에서, 증상을 관리하기 위해 대상체가 필요로 하는 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 1일 용량의 양의 491 mg 감소는 피각당 최대 900 μL의 용량 부피 및 1.5 x 1012개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 12개월 후에 일어난다.
특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 1일 용량의 양은 본 개시내용의 투여 후 505-606 mg만큼 감소된다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 505 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 518 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 530 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 542 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 553 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 563 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 573 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 582 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 591 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 599 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 606 mg이다.
특정 실시양태에서, 증상을 관리하기 위해 대상체가 필요로 하는 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 1일 용량의 양의 553 mg 감소는 피각당 최대 900 μL의 용량 부피 및 1.5 x 1012개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 6개월 후에 일어난다.
특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 1일 용량의 양은 본 개시내용의 투여 후 606-641 mg만큼 감소된다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 606 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 612 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 618 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 623 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 628 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 632 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 635 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 637 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 639 mg이다. 특정 실시양태에서, 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 감소는 641 mg이다.
특정 실시양태에서, 증상을 관리하기 위해 대상체가 필요로 하는 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 1일 용량의 양의 553 mg 감소는 피각당 최대 900 μL의 용량 부피 및 4.5 x 1012개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 6개월 후에 일어난다.
특정 실시양태에서, 증상을 관리하기 위해 대상체가 필요로 하는 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 1일 용량의 양의 553 mg 감소는 피각당 최대 900 μL의 용량 부피 및 4.6 x 1012개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 6개월 후에 일어난다.
특정 실시양태에서, 증상을 관리하기 위해 대상체가 필요로 하는 파킨슨병 의약 (예를 들어, 레보도파)의 1일 용량의 양의 553 mg 감소는 피각당 최대 900 μL의 용량 부피 및 4.7 x 1012개 벡터 게놈의 총 용량으로 본 개시내용을 투여하고 6개월 후에 일어난다.
AADC 효소 활성
특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성은 본 개시내용에 의한 투여 후에 대상체에서 증가된다. 특정 실시양태에서, 증가는 기준선 대비 적어도 6개월 동안 관찰된다. AADC 발현 및 효소 활성의 평가는 레보도파를 도파민으로 전환시키는 AADC0의 능력을 반영하는 [18F] 플루오로-L-디히드록시페닐알라닌 (또는 18F-도파)을 사용하는 양전자 방출 단층촬영 (PET)을 사용하여 결정될 수 있다. 달리 언급되지 않는 한, 피각 AADC 효소 활성은 AADC 유전자 요법의 주입 전 기준선과 대비하여 측정된다.
특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성은 본 개시내용의 투여 후 대상체에서 10-20%만큼 증가된다. 특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성의 증가는 약 10%이다. 특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성의 증가는 약 11%이다. 특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성의 증가는 약 12%이다. 특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성의 증가는 약 13%이다. 특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성의 증가는 약 14%이다. 특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성의 증가는 약 15%이다. 특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성의 증가는 약 16%이다. 특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성의 증가는 약 17%이다. 특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성의 증가는 약 18%이다. 특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성의 증가는 약 19%이다. 특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성의 증가는 약 20%이다.
특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성은 피각당 최대 450 μL의 용량 부피 및 7.5 x 1011개 벡터 게놈의 총 용량으로의 본 개시내용의 투여 후 대상체에서 약 13% 증가된다.
특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성은 본 개시내용의 투여 후 대상체에서 50-60%만큼 증가된다. 특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성의 증가는 약 50%이다. 특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성의 증가는 약 51%이다. 특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성의 증가는 약 52%이다. 특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성의 증가는 약 53%이다. 특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성의 증가는 약 54%이다. 특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성의 증가는 약 55%이다. 특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성의 증가는 약 56%이다. 특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성의 증가는 약 57%이다. 특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성의 증가는 약 58%이다. 특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성의 증가는 약 59%이다. 특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성의 증가는 약 60%이다.
특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성은 피각당 최대 900 μL의 용량 부피 및 1.5 x 1012개 벡터 게놈의 총 용량으로의 본 개시내용의 투여 후 대상체에서 약 56% 증가된다.
특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성은 본 개시내용의 투여 후 대상체에서 70-85%만큼 증가된다. 특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성의 증가는 약 70%이다. 특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성의 증가는 약 71%이다. 특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성의 증가는 약 72%이다. 특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성의 증가는 약 73%이다. 특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성의 증가는 약 74%이다. 특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성의 증가는 약 75%이다. 특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성의 증가는 약 76%이다. 특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성의 증가는 약 77%이다. 특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성의 증가는 약 78%이다. 특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성의 증가는 약 79%이다. 특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성의 증가는 약 80%이다. 특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성의 증가는 약 81%이다. 특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성의 증가는 약 82%이다. 특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성의 증가는 약 83%이다. 특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성의 증가는 약 84%이다. 특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성의 증가는 약 85%이다.
특정 실시양태에서, 피각 AADC 효소 활성은 피각당 최대 900 μL의 용량 부피 및 4.5 x 1012개 벡터 게놈의 총 용량으로의 본 개시내용의 투여 후 대상체에서 약 79% 증가된다.
특정 실시양태에서, 대상체의 도파민 수준은 본 개시내용의 투여 후에 증가된다. 특정 실시양태에서, 도파민의 양은 10-20%, 15-25%, 20-30%, 25-35%, 30-40%, 35-45%, 40-50%, 45-55%, 50-60%, 55-65%, 60-70%, 65-75%, 70-80%, 75-85%, 80-90%, 85-95%, 90-100%, 또는 95-100%만큼 증가된다.
mH&Y
변형된 혼 앤 야 척도의 경우: 1기는 일측 질환이고; 2.0기는 균형이 손상되지 않은 양측 질환이고 (전이까지 20개월 중앙값 시간); 2.5기는 풀 테스트 시 회복이 존재하는 경도의 양측 질환이고 (전이까지 62개월 중앙값 시간); 3.0기는 약간의 자세 불안정성 및 신체적 독립성이 존재하는 경도 내지 중등도의 양측 질환이고 (전이까지 25개월 중앙값 시간); 4.0기는 여전히 비보조 기립 또는 보행이 가능한 중증 장애이고 (전이까지 24개월 중앙값 시간); 5.0기는 휠체어에 속박되거나 도움이 없으면 누워만 있는 상태이다. 특정 실시양태에서, 미충족 의료 필요는 개별 환자에 대한 mH&Y 병기의 개선, 또는 환자군에 대한 평균 mH&Y 병기의 개선을 포함한다. 특정 실시양태에서, 본 개시내용의 제약 조성물의 투여 후의 mHY 병기는 제약 조성물의 투여 전의 mHY 기준선 병기에 비해 감소된다. 특정 실시양태에서, mHY 병기는 본 개시내용의 제약 조성물의 투여 6개월, 12개월, 18개월, 24개월, 30개월, 36개월, 42개월 또는 48개월 후에 감소된다. 특정 실시양태에서, mH&Y 병기의 개선은 5.0기에서 4.0기, 5.0기에서 3.0기, 5.0기에서 2.5기, 5.0기에서 2.0기, 4.0기에서 3.0기, 4.0기에서 2.5기, 4.0기에서 2.0기, 4.0기에서 1.5기, 3.0기에서 2.5기, 3.0기에서 2.0기, 3.0기에서 1.5기, 3.0기에서 1.0기, 2.5기에서 2.0기, 2.5기에서 1.5기, 2.5기에서 1.0기, 2.0기에서 1.5기, 2.0기에서 1.0기, 또는 1.5기에서 1.0기이다. 특정 실시양태에서, 개선은 mH&Y 척도 하에 질환 진행에서의 20개월, 49개월, 82개월, 87개월, 107개월, 111개월, 131개월, 또는 이들 사이의 임의의 값의 개선과 관련된다.
UDysRS 및 Misc
특정 실시양태에서, 미충족 의료 필요는 통합 이상운동증 등급화 척도 (UDysRS) 또는 하우저 운동 일지를 사용하여 평가된 바와 같은 이상운동증의 개선을 포함한다. 특정 실시양태에서, 미충족 의료 필요는 레보도파 및 레보도파 등가 용량으로 측정된, 다른 PD 의약의 요구되는 투여량에서의 개선을 포함한다. 특정 실시양태에서, 미충족 의료 필요는 레보도파를 포함한 다른 PD 의약의 투여량에 대한 환자 반응의 개선을 포함한다. 특정 실시양태에서, 미충족 의료 필요는 유전자 전달 절차 후에 IV 레보도파 평가에 대한 반응의 개선을 포함한다. 특정 실시양태에서, 미충족 의료 필요는 BDI-II를 사용하여 평가된 바와 같은 기분의 개선을 포함한다. 특정 실시양태에서, 미충족 의료 필요는 몬트리올 인지 평가 (MoCA) 및 MDRS-2를 사용하여 평가된 바와 같은 인지 기능의 개선을 포함한다. 특정 실시양태에서, 미충족 의료 필요는 파킨슨병에서의 충동-강박 장애에 대한 설문지-등급화 척도 (QUIP-RS)를 사용하여 평가된 바와 같은 강박 행동의 개선을 포함한다. 특정 실시양태에서, 미충족 의료 필요는 파킨슨병 수면 척도 2 (PDSS-2)를 사용하여 평가된 바와 같은 수면 질 및 장애의 개선을 포함한다.
특정 실시양태에서, 미충족 의료 필요는 파킨슨병 설문지 (PDQ39), 슈밥 앤 잉글랜드 척도, 임상 전반적 인상 (CGI), 또는 환자 전반적 인상 (PGI)을 사용하여 평가된 바와 같은 삶의 질 개선을 포함한다. 특정 실시양태에서, 미충족 의료 필요는 강직 및/또는 안정시 진전의 개선을 포함한다. 특정 실시양태에서, 미충족 의료 필요는 장애초래 운동 합병증의 개선을 포함한다. 특정 실시양태에서, 미충족 의료 필요는 투여 시 피각 커버리지의 개선, 예컨대 50% 초과의 피각 커버리지를 포함한다. 특정 실시양태에서, 미충족 의료 필요는 [18F] 플루오로-L-디히드록시페닐알라닌 (18F-도파)을 사용한 양전자 방출 단층촬영 (PET)을 사용하여 결정된 바와 같이, 피각에서의 개선된 AADC 발현 및 활성을 포함한다. 특정 실시양태에서, 미충족 의료 필요는 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 파킨슨병 환자에 대한 다른 개선을 포함한다.
일주기 리듬 및 수면-각성 사이클
일주기 리듬은 24시간 사이클을 따르는 경향이 있는 물리적, 정신적 및 행동적 변화이다. 일주기 리듬은 수면-각성 사이클, 호르몬 방출, 체온 및 다른 신체 기능에 영향을 미칠 수 있다. 일주기 리듬의 변화는 상태 및/또는 장애, 예컨대 비제한적으로 수면 장애 (예를 들어 불면증), 우울증, 양극성 장애, 계절성 정동 장애, 비만 및 당뇨병을 유발할 수 있다.
특정 실시양태에서, 본원에 기재된 AAV 입자는 불면증을 치료하는데 사용될 수 있다.
수면-각성 사이클은 수면 기간 및 각성 기간을 포함한다. 일반적으로, 24시간 기간에서 총 수면 시간은 총 각성 시간 미만이다. 특정 실시양태에서, 수면-각성 사이클은 7-9시간의 수면 및 15-17시간의 각성을 포함한다. 특정 실시양태에서, 수면-각성 사이클은 8시간의 수면 및 16시간의 각성을 포함한다. 특정 실시양태에서, 수면-각성 사이클은 8-10시간의 수면 및 14-16시간의 각성을 포함한다.
특정 실시양태에서, 대상체의 수면-각성 사이클은 대상체에게 본원에 기재된 AAV 입자를 투여함으로써 개선된다.
특정 실시양태에서, 대상체의 수면-각성 사이클은 대상체에게 본원에 기재된 AAV 입자를 투여함으로써 조절된다. 특정 실시양태에서, 조절은 밤에 발생하는 더 긴 기간의 수면 및 발생하는 더 짧은 기간의 수면의 교정일 수 있다.
특정 실시양태에서, 본원에 기재된 AAV 입자가 투여된 대상체의 수면-각성 사이클은 AAV 입자의 투여 전의 대상체의 수면-각성 사이클과 비교하여 개선된다. 특정 실시양태에서, 대상체는 증가된 수면 기간 및 감소된 각성 기간을 갖는다. 특정 실시양태에서, 대상체는 감소된 수면 기간 및 증가된 각성 기간을 갖는다.
특정 실시양태에서, 본원에 기재된 AAV 입자가 투여된 대상체의 수면-각성 사이클은 AAV 입자의 투여 전의 대상체의 수면-각성 사이클과 비교하여 조절된다. 특정 실시양태에서, 수면 기간 및 각성 기간의 길이는 적어도 2일 동안 거의 동일할 수 있다 (예를 들어, +/-1시간). 특정 실시양태에서, 24시간 기간 중 수면 기간 및 각성 기간의 길이는 이전 24시간 기간 중 10분, 15분, 20분, 25분, 30분, 35분, 40분, 45분, 50분, 55분, 1시간, 1.5시간, 또는 2시간 이내일 수 있다.
특정 실시양태에서, 대상체가 24시간 기간 내에 경험하는 급속 안구 운동 (REM) 수면의 양은 대상체에 본원에 기재된 AAV 입자가 투여된 후 변경된다. REM 수면은 일반적으로 뇌파가 빠르고 탈동기화되는 강렬한 뇌 활동에 의해 표시되는 수면의 활동 기간으로 간주된다. 평균적으로, 성인은 REM 수면에서 그의 총 1일 수면 기간의 약 20-25%를 소비한다. 특정 실시양태에서, REM 수면의 양은 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 11%, 12%, 13%, 14%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65% 또는 65% 초과만큼 감소된다. 특정 실시양태에서, REM 수면의 양은 1-10%, 5-10%, 5-15%, 10-15%, 15-20%, 15-25%, 20-25%, 20-30%, 25-30%, 25-35%, 30-35%, 30-40%, 35-40%, 40-50% 또는 40-60%만큼 감소된다. 특정 실시양태에서, REM 수면의 양은 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 11%, 12%, 13%, 14%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65% 또는 65% 초과만큼 증가된다. 특정 실시양태에서, REM 수면의 양은 1-5%, 1-10%, 5-10%, 5-15%, 10-15%, 15-20%, 15-25%, 20-25%, 20-30%, 25-30%, 25-35%, 30-35%, 30-40%, 35-40%, 40-50% 또는 40-60%만큼 증가된다.
특정 실시양태에서, 대상체가 24시간 기간 내에 경험하는 비-REM (NREM) 수면의 양은 대상체에 본원에 기재된 AAV 입자가 투여된 후 변경된다. NREM 수면은 일반적으로, EEG에 의해 측정되는 뇌파가 느려지고 보다 큰 진폭을 가짐에 따라, 생리학적 활성의 감소를 특징으로 한다. NREM은 4개의 단계를 갖는다: 단계 1은 각성 상태로부터 뇌파 및 근육 활동이 느려지기 시작하는 잠이 들기까지의 졸음 또는 전이 시간이고; 단계 2는 안구 운동이 멈추고 뇌파가 때때로 빠른 파동의 버스트 (때때로 수면 방추파로 불림)의 존재 하에 보다 느려지게 되는 얕은 수면 기간이고; 단계 3 및 단계 4 (종합하여 서파 수면으로 지칭됨)는 안구 운동이 없는 보다 작고 보다 빠른 파동이 산재된 느린 뇌파 (델타파)의 존재를 특징으로 한다. 평균적으로, 성인은 NREM 수면에서 그의 총 1일 수면 기간의 약 75-80%를 소비하고, NREM 단계 2 수면에서 그의 총 1일 수면 시간의 약 절반을 소비한다.
특정 실시양태에서, 대상체가 경험하는 NREM 수면의 양은 대상체에 본원에 기재된 AAV 입자가 투여된 후 변경된다. 특정 실시양태에서, NREM 수면의 양은 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 11%, 12%, 13%, 14%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65% 또는 65% 초과만큼 감소된다. 특정 실시양태에서, NREM 수면의 양은 1-10%, 5-10%, 5-15%, 10-15%, 15-20%, 15-25%, 20-25%, 20-30%, 25-30%, 25-35%, 30-35%, 30-40%, 35-40%, 40-50% 또는 40-60%만큼 감소된다. 특정 실시양태에서, NREM 수면의 양은 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 11%, 12%, 13%, 14%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65% 또는 65% 초과만큼 증가된다. 특정 실시양태에서, NREM 수면의 양은 1-5%, 1-10%, 5-10%, 5-15%, 10-15%, 15-20%, 15-25%, 20-25%, 20-30%, 25-30%, 25-35%, 30-35%, 30-40%, 35-40%, 40-50% 또는 40-60%만큼 증가된다.
특정 실시양태에서, 대상체가 경험하는 NREM 단계 1 수면의 양은 대상체에 본원에 기재된 AAV 입자가 투여된 후 변경된다. 특정 실시양태에서, NREM 단계 1 수면의 양은 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 11%, 12%, 13%, 14%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65% 또는 65% 초과만큼 감소된다. 특정 실시양태에서, NREM 단계 1 수면의 양은 1-10%, 5-10%, 5-15%, 10-15%, 15-20%, 15-25%, 20-25%, 20-30%, 25-30%, 25-35%, 30-35%, 30-40%, 35-40%, 40-50% 또는 40-60%만큼 감소된다. 특정 실시양태에서, NREM 단계 1 수면의 양은 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 11%, 12%, 13%, 14%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65% 또는 65% 초과만큼 증가된다. 특정 실시양태에서, NREM 단계 1 수면의 양은 1-5%, 1-10%, 5-10%, 5-15%, 10-15%, 15-20%, 15-25%, 20-25%, 20-30%, 25-30%, 25-35%, 30-35%, 30-40%, 35-40%, 40-50% 또는 40-60%만큼 증가된다.
특정 실시양태에서, 대상체가 경험하는 NREM 단계 2 수면의 양은 대상체에 본원에 기재된 AAV 입자가 투여된 후 변경된다. 특정 실시양태에서, NREM 단계 2 수면의 양은 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 11%, 12%, 13%, 14%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65% 또는 65% 초과만큼 감소된다. 특정 실시양태에서, NREM 단계 2 수면의 양은 1-10%, 5-10%, 5-15%, 10-15%, 15-20%, 15-25%, 20-25%, 20-30%, 25-30%, 25-35%, 30-35%, 30-40%, 35-40%, 40-50% 또는 40-60%만큼 감소된다. 특정 실시양태에서, NREM 단계 2 수면의 양은 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 11%, 12%, 13%, 14%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65% 또는 65% 초과만큼 증가된다. 특정 실시양태에서, NREM 단계 2 수면의 양은 1-5%, 1-10%, 5-10%, 5-15%, 10-15%, 15-20%, 15-25%, 20-25%, 20-30%, 25-30%, 25-35%, 30-35%, 30-40%, 35-40%, 40-50% 또는 40-60%만큼 증가된다.
특정 실시양태에서, 대상체가 경험하는 NREM 단계 3 및 4 수면의 양은 대상체에 본원에 기재된 AAV 입자가 투여된 후 변경된다. 특정 실시양태에서, NREM 단계 3 및 4 수면의 양은 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 11%, 12%, 13%, 14%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65% 또는 65% 초과만큼 감소된다. 특정 실시양태에서, NREM 단계 3 및 4 수면의 양은 1-10%, 5-10%, 5-15%, 10-15%, 15-20%, 15-25%, 20-25%, 20-30%, 25-30%, 25-35%, 30-35%, 30-40%, 35-40%, 40-50% 또는 40-60%만큼 감소된다. 특정 실시양태에서, NREM 단계 3 및 4 수면의 양은 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 11%, 12%, 13%, 14%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65% 또는 65% 초과만큼 증가된다. 특정 실시양태에서, NREM 단계 3 및 4 수면의 양은 1-5%, 1-10%, 5-10%, 5-15%, 10-15%, 15-20%, 15-25%, 20-25%, 20-30%, 25-30%, 25-35%, 30-35%, 30-40%, 35-40%, 40-50% 또는 40-60%만큼 증가된다.
특정 실시양태에서, NREM 및 REM 사이클의 기간은 대상체에 본원에 기재된 AAV 입자가 투여된 후 대상체에서 더욱 일관된다. 일반적으로 NREM 및 REM 사이클은 밤에 90 내지 110분마다 4 내지 6회 교대된다.
RMAT
특정 실시양태에서, 개시내용은 재생 의학 요법 (RMAT)인 치료제 및 치료를 제공한다. 재생 의학 요법은 심각한 또는 생명을 위협하는 질환 또는 상태를 치료, 변형, 역전 또는 치유하기 위해 의도되고, (예비 임상 증거에 의해 지지되는 바와 같이) 이러한 질환 또는 상태에 대한 미충족 의료 필요를 다루는 잠재력을 갖는 재생 요법이다. 특정 실시양태에서, 심각한 또는 생명을 위협하는 질환 또는 상태는 CNS 질환이다. 특정 실시양태에서, 심각한 또는 생명을 위협하는 질환 또는 상태는 파킨슨병이다. 특정 실시양태에서, 미충족 의료 필요는 질환 또는 상태를 치료, 변형, 역전 또는 치유하는 AADC를 코딩하는 폴리뉴클레오티드의 1-회 투여를 포함한다. 특정 실시양태에서, 미충족 의료 필요는 AADC를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 환자에게 9시간 미만, 8시간 미만, 7시간 미만, 6시간 미만, 5시간 미만, 또는 4시간 미만이 소요되는 단일 절차로 1-회 투여하는 것을 포함한다. 특정 실시양태에서, 미충족 의료 필요는 벡터-관련 심각한 유해 사건 (SAE) 없이 잘 허용되는, AADC를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 환자에게 1-회 투여하는 것을 포함한다. 특정 실시양태에서, 미충족 의료 필요는 치료받은 환자에서 운동 기능의 강건하고 지속적인 개선을 포함한다. 특정 실시양태에서, 미충족 의료 필요는 1일 경구 레보도파 및 다른 파킨슨병 의약의 사용의 실질적인 감소를 포함한다. 특정 실시양태에서, 미충족 의료 필요는 IV 레보도파 및 다른 파킨슨병 의약에 대한 반응의 실질적인 개선을 포함한다. 특정 실시양태에서, 미충족 의료 필요는 기립-보행-착석 시험, 변형된 혼 앤 야 (mH&Y) 척도 (오프 의약 상태 단독), UPDRS, 또는 객관적 파킨슨병 측정 (OPDM) 기민도를 사용하여 평가된 바와 같이, 오프 및 온 의약 상태 둘 다에서 운동 기능의 개선을 포함한다.
V. 키트 및 장치
키트
특정 실시양태에서, 개시내용은 본 개시내용의 방법을 편리하게 및/또는 효과적으로 수행하기 위한 다양한 키트를 제공한다. 전형적으로 키트는 사용자가 대상체(들)의 다중 치료를 수행하고/거나 다중 실험을 수행하도록 하기에 충분한 양 및/또는 수의 성분을 포함할 것이다.
본 개시내용의 AAV 입자 중 임의의 것이 키트에 포함될 수 있다. 일부 실시양태에서, 키트는 본 개시내용의 화합물 및/또는 조성물을 생성 및/또는 합성하기 위한 시약 및/또는 지침서를 추가로 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 키트는 또한 1종 이상의 완충제를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 개시내용의 키트는 단백질 또는 핵산 어레이 또는 라이브러리를 제조하기 위한 성분을 포함할 수 있고, 따라서, 예를 들어 고체 지지체를 포함할 수 있다.
일부 실시양태에서, 키트 성분은 수성 매질 또는 동결건조 형태로 패키징될 수 있다. 키트의 용기 수단은 일반적으로 적어도 1개의 바이알, 시험 튜브, 플라스크, 병, 시린지 또는 다른 용기 수단을 포함할 것이고, 그 안에 성분이 배치될 수 있고, 바람직하게는 적합하게 분취될 수 있다. 1개 초과의 키트 성분이 존재하는 경우에 (표지화 시약 및 표지는 함께 패키징될 수 있음), 키트는 또한 일반적으로 추가의 성분이 별도로 배치될 수 있는 제2, 제3 또는 다른 추가의 용기를 함유할 수 있다. 일부 실시양태에서, 키트는 또한 멸균, 제약상 허용되는 완충제 및/또는 다른 희석제를 함유하는 제2 용기 수단을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 성분의 다양한 조합이 1개 이상의 바이알에 포함될 수 있다. 본 개시내용의 키트는 또한 전형적으로 상업적 판매를 위해 근접 국한된 본 개시내용의 화합물 및/또는 조성물을 함유하는 수단, 예를 들어 단백질, 핵산, 및 임의의 다른 시약 용기를 포함할 수 있다. 이러한 용기는 목적하는 바이알이 보유되는 사출 또는 블로우-성형 플라스틱 용기를 포함할 수 있다.
일부 실시양태에서, 키트 성분은 하나 및/또는 그 초과의 액체 용액으로 제공된다. 일부 실시양태에서, 액체 용액은 수용액이고, 멸균 수용액이 특히 바람직하다. 일부 실시양태에서, 키트 성분은 건조된 분말(들)로서 제공될 수 있다. 시약 및/또는 성분이 건조 분말로서 제공되는 경우, 이러한 분말은 적합한 부피의 용매를 첨가하는 것에 의해 재구성될 수 있다. 일부 실시양태에서, 용매는 또한 또 다른 용기 수단에 제공될 수 있는 것으로 생각된다. 일부 실시양태에서, 표지 염료가 건조 분말로서 제공된다. 일부 실시양태에서, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 120, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000 마이크로그램 또는 적어도 또는 많아야 그러한 양의 건조된 염료가 개시내용의 키트에 제공된다. 이러한 실시양태에서, 염료는 이어서 임의의 적합한 용매, 예컨대 DMSO 중에 재현탁될 수 있다.
일부 실시양태에서, 키트는 키트 성분을 사용하는 것에 대한 지침서, 또한 키트에 포함되지 않은 임의의 다른 시약의 사용에 대한 지침서를 포함할 수 있다. 지침서는 구현가능한 변동을 포함할 수 있다.
장치
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 장치와 조합되거나, 장치 상에 코팅되거나, 또는 그에 내장될 수 있다. 장치는 스텐트, 펌프 및/또는 다른 이식가능한 치료 장치를 포함할 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다. 추가적으로, 대상체가 압축 장치, 예컨대 비제한적으로, 대상체에서 심부 정맥 혈전증 (DVT) 가능성을 감소시키기 위한 압축 장치를 사용하는 동안 대상체에게 AAV 입자가 전달될 수 있다.
본 개시내용은 AAV 입자를 포함할 수 있는 장치를 제공한다. 이들 장치는 안정한 제제 중에 AAV 입자를 함유하고, 이는 그를 필요로 하는 대상체, 예컨대 인간 환자에게 즉시 전달될 수 있다.
투여를 위한 장치는 본원에 교시된 단일, 다중- 또는 분할-투여 요법에 따라 본 개시내용의 AAV 입자를 전달하기 위해 사용될 수 있다.
세포, 기관 및 조직에의 다중-투여를 위한 관련 기술분야에 공지된 방법 및 장치는 본 개시내용의 실시양태로서 본원에 개시된 방법 및 조성물과 함께 사용하기 위해 고려된다. 이들은, 예를 들어 그러한 방법 및 다중 바늘을 갖는 장치, 예를 들어 루멘 또는 카테터를 사용하는 하이브리드 장치, 뿐만 아니라 열, 전류 또는 방사선 유도 메카니즘을 이용하는 장치를 포함한다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 장치, 예컨대 비제한적으로, 스텐트, 튜브, 카테터, 파이프, 스트로우, 바늘 및/또는 덕트를 사용하여 전달될 수 있다. 이들 장치의 사용 방법은 본원에 기재되어 있고, 관련 기술분야에 공지되어 있다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 영상 유도 요법을 통합하고 영상화를 통합한 전달 시스템, 예컨대 비제한적으로, 레이저, MRgFUS, 내시경 및 로봇 수술 장치를 사용하여 대상체에게 투여될 수 있다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 MRI 인터벤션스, 인크.(MRI Interventions, Inc.)의 클리어포인트(CLEARPOINT)® 신경 개입 시스템을 사용하여 대상체에게 투여될 수 있다. 클리어포인트® 신경 개입 시스템은 단독으로 또는 본원에 기재된 다른 투여 방법 및 장치 중 임의의 것과 조합되어 사용될 수 있다. 클리어포인트® 신경 개입 시스템은 신경계 절차의 계획 및 작업 동안 기기 또는 장치의 배치 및 작동에서 정위 지침을 제공하는 것을 돕는다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 레니쇼 피엘씨(Renishaw PLC)의 뉴로메이트(NEUROMATE)® 정위 로봇 시스템을 사용하여 대상체에게 투여될 수 있다. 뉴로메이트® 시스템은 단독으로 또는 본원에 기재된 다른 투여 방법 및 장치 중 임의의 것과 조합되어 사용될 수 있다. 특정 실시양태에서, 뉴로메이트® 시스템은 헤드 홀더, CT 영상 로컬라이저, 프레임 부착기, 원격 제어기 및 소프트웨어와 함께 사용될 수 있다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 엘렉타 AB(Elekta AB)의 엘렉타 마이크로드라이브(Elekta MICRODRIVE)™ 장치를 사용하여 대상체에게 투여될 수 있다. 마이크로드라이브™ 장치는 단독으로 또는 본원에 기재된 다른 투여 방법 및 장치 중 임의의 것과 조합되어 사용될 수 있다. 특정 실시양태에서, 마이크로드라이브™ 장치는 전극 배치 (예를 들어, 마이크로 전극 기록 (MER), 거대 자극 및 뇌 심부 자극 (DBS) 전극 이식의 경우), 위치 확인을 위해 십자형 및 A-P 홀더를 사용한 카테터, 튜브 또는 DBS 전극의 이식, 생검, 주사 및 흡인, 뇌 병변형성, 내시경 안내 및 감마 나이프(GAMMA KNIFE)® 방사선수술에 사용될 수 있다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 몬테리스(MONTERIS)® 메디칼, 인크.(Medical, Inc.)의 AXIIIS® 정위 미니프레임을 사용하여 대상체에게 투여될 수 있다. AXIIIS® 정위 미니프레임은 단독으로 또는 본원에 기재된 다른 투여 방법 및 장치 중 임의의 것과 조합되어 사용될 수 있다. AXIIIS® 정위 미니 프레임은 레이저 응고, 생검, 카테터 배치, 전극 이식, 내시경검사, 및 응괴 배출에 사용될 수 있는 궤적 정렬 장치이다. 미니프레임은 360도 인터페이스를 허용하고, 간단한 조정으로 다중 두개내 표적에 대한 접근을 제공한다. 또한, 미니프레임은 MRI와 상용성이다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 인테그라 라이프사이언시스 코포레이션(Integra LifeSciences Corporation)의 인테그라(INTEGRA)™ CRW® 시스템을 사용하여 대상체에게 투여될 수 있다. 인테그라™ CRW® 시스템은 단독으로 또는 본원에 기재된 다른 투여 방법 및 장치 중 임의의 것과 조합되어 사용될 수 있다. CRW® 시스템은 다양한 용도, 예컨대 비제한적으로, 정위 수술, 미세수술, 카테터삽입 및 생검에 사용될 수 있다. CRW® 시스템은 시스템을 사용하는 것에 정확도를 제공하도록 설계된다 (예를 들어, 섬 락 스크류(thumb lock screw), 버니어 스케일링, 이중 볼트 고정, 및 고체 프레임).
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 니오베(NIOBE)® ES 자기 탐색 시스템, 브이드라이브(VDRIVE)® 로봇 탐색 시스템 및/또는 오디세이(ODYSSEY)® 정보 솔루션 (모두 스테레오탁시스, 인크.(Stereotaxis, Inc.))을 포함할 수 있는, 스테레오탁시스, 인크.의 에포크(EPOCH)® 솔루션 시스템을 사용하여 대상체에게 투여될 수 있다. 에포크® 솔루션 시스템은 단독으로 또는 본원에 기재된 다른 투여 방법 및 장치 중 임의의 것과 조합되어 사용될 수 있다. 특정 실시양태에서, 니오베® ES 자기 탐색 시스템이 대상체와 정확하게 접촉하는데 사용될 수 있다. 특정 실시양태에서, 니오베® ES 자기 시스템은 정확한 움직임 및 안정성을 제공하기 위해 브이드라이브® 로봇 탐색 시스템과 함께 사용될 수 있다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 무프레임 정위 방법을 사용하여 적용, 예컨대 비제한적으로, 수술 계획, 생검, 개두술, 내시경검사, 수술중 초음파 및 방사선 요법에 대한 영상-안내를 제공하는 뉴로스테이션(NeuroStation) 워크스테이션을 사용하여 대상체에게 투여될 수 있다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 로봇 정위 시스템, 예컨대 비제한적으로, 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 번호 5,078,140에 기재된 장치를 사용하여 대상체에게 투여될 수 있다. 장치의 로봇 팔은 절차를 수행하는데 사용되는 수술 도구 또는 다른 기구를 정확하게 배향시키는데 사용될 수 있다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 자동 전달 시스템 예컨대 비제한적으로 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 번호 5,865,744에 기재된 장치를 사용하여 대상체에게 투여될 수 있다. 전달 시스템에 의해 수집된 영상에 기초하여, 컴퓨터는 특정한 대상체에 대해 바늘의 투여를 적절한 깊이로 조정한다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 AAV 입자는 대상체에게 투여될 수 있고, 압축 장치, 예컨대 비제한적으로, 대상체에서 심부 정맥 혈전증 (DVT) 가능성을 감소시키는 압축 장치가 투여 동안 동시에 사용되고/거나 투여 전 및/또는 후의 기간 동안 사용된다. 압축 장치는 대상체에게 AAV 입자가 투여되기 적어도 5분, 15분, 30분, 45분, 1시간, 2시간, 3시간, 4시간, 5시간, 6시간, 7시간, 8시간, 또는 8시간 초과 전에 사용될 수 있다. 압축 장치는 AAV 입자가 투여되고 적어도 5분, 15분, 30분, 45분, 1시간, 2시간, 3시간, 4시간, 5시간, 6시간, 7시간, 8시간, 9시간, 10시간, 11시간, 12시간, 13시간, 14시간, 15시간, 16시간, 17시간, 18시간, 19시간, 20시간, 21시간, 22시간, 23시간, 1일, 2일, 3일, 4일, 5일, 6일, 1주, 2주, 3주 또는 1개월 후에 사용될 수 있다. 특정 실시양태에서, 압축 장치는 AAV 입자의 전달 절차 동안 동시에 사용된다. 특정 실시양태에서, 압축 장치는 AAV 입자의 투여 전에 사용된다. 특정 실시양태에서, 압축 장치는 AAV 입자의 투여 후에 사용된다. 특정 실시양태에서, 압축 장치는 AAV 입자의 투여 전, 투여 동안 및 투여 후에 사용된다.
압축 장치의 비제한적 예는 액티브케어(ActiveCare) +S.F.T. 간헐적 압축 장치, 액티브케어 +S.F.T 공압 압축 장치, DVT라이트(DVTlite)의 베노웨이브(Venowave), KCI 시스템 압축 펌프, 에어캐스트 베나플로우(Aircast VenaFlow) 시스템, SCD 익스프레스 압축 시스템 또는 바이오 콤프레션 시스템, 인크.(Bio Compression Systems, Inc.) 공압 압축 요법 장비 (예를 들어, 펌프는 모델 SC-2004, 모델 SC-2004-FC, 모델 SC-3004, 모델 SC-3004-FC, 모델 SC-2008, 모델 SC-2008-DL, 모델 SC-3008-T, 바이오크리오 시스템(BioCryo system), 모델 IC-BAP-DL 또는 멀티-플로 DVT 콤보 IC_1545-DL로부터 선택될 수 있고, 펌프에 사용되는 가먼트는 4 챔버, 8 챔버, 바이오크리오, 멀티-플로 또는 바이오알테리얼(BioArterial) 가먼트일 수 있음)를 포함한다.
특정 실시양태에서, AAV 입자는 AAV 입자를 전달하기 위한 장치 및 헤드 고정 어셈블리를 사용하여 대상체에게 전달될 수 있다. 헤드 고정 어셈블리는 MRI 인터벤션스에 의해 판매되는 헤드 고정 어셈블리 중 임의의 것일 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다. 특정 실시양태에서, 헤드 고정 어셈블리는 그의 각각의 내용의 전문이 참조로 포함되는 미국 특허 번호 8,099,150, 8,548,569 및 9,031,636 및 국제 특허 공개 번호 WO201108495 및 WO2014014585에 기재된 어셈블리 중 임의의 것일 수 있다. 헤드 고정 어셈블리는 MRI 상용성 드릴, 예컨대 비제한적으로 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 국제 특허 공개 번호 WO2013181008 및 미국 특허 공개 번호 US20130325012에 기재된 MRI 상용성 드릴과 조합되어 사용될 수 있다.
특정 실시양태에서, AAV 입자는 AAV 입자를 전달하기 위해 대상체 상의 표적 지점에 장치를 배치하기 위한 방법, 시스템 및/또는 컴퓨터 프로그램을 사용하여 전달될 수 있다. 특정 실시양태에서, 방법, 시스템 및/또는 컴퓨터 프로그램은 그의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 번호 8, 340,743에 기재된 방법, 시스템 및/또는 컴퓨터 프로그램일 수 있다. 상기 방법은: 신체 표적 지점 및 참고 지점을 결정하는 단계이며, 여기서 표적 지점 및 참고 지점은 각각을 통해 연장되는 계획된 궤적 라인 (PTL)을 규정하는 것인 단계; 시각화 평면을 결정하는 단계이며, 여기서 PTL은 관찰 지점에서 시각화 평면과 교차하는 것이 단계; 가이드 장치가 PTL과 관련하여 이동되도록 신체에 마운팅하는 단계이며, 여기서 가이드 장치는 시각화 평면과 교차하지 않는 것인 단계; 가이드 축과 시각화 평면 사이의 교차점 (GPP)을 결정하는 단계; GPP를 시각화 평면 내의 관찰 지점과 정렬시키는 단계를 포함할 수 있다.
특정 실시양태에서, AAV 입자는 대류-증진 전달 장치를 사용하여 대상체에게 전달될 수 있다. 대류를 사용한 약물의 표적화된 전달의 비제한적 예는 미국 특허 공개 번호 US20100217228, US20130035574 및 US20130035660 및 국제 특허 공개 번호 WO2013019830 및 WO2008144585에 기재되어 있으며, 이들 각각의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
특정 실시양태에서, 대상체는 AAV 입자의 전달 전에, 전달 동안 및/또는 전달 후에 영상화될 수 있다. 영상화 방법은 관련 기술분야에 공지되어 있고/거나 본원에 기재된 방법, 예컨대 비제한적으로 자기 공명 영상화 (MRI)일 수 있다. 영상은 MP-RAGE 및 dcMPRAGE를 사용하여 포착하고 분석할 수 있다. 특정 실시양태에서, 영상화를 사용하여 치료 효과를 평가할 수 있다. 특정 실시양태에서, 영상화는 AAV 입자의 보조 전달을 위해 사용될 수 있다.
특정 실시양태에서, AAV 입자는 MRI-안내 장치를 사용하여 전달될 수 있다. MRI-안내 장치의 비제한적 예는 미국 특허 번호 9,055,884, 9,042,958, 8,886,288, 8,768,433, 8,396,532, 8,369,930, 8,374,677 및 8,175,677 및 미국 특허 출원 번호 US20140024927에 기재되어 있고, 이들 각각의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다. 특정 실시양태에서, MRI-안내 장치는 미국 특허 번호 8,886,288 및 8,768,433에 기재된 바와 같이 실시간으로 데이터를 제공할 수 있고, 이들 각각의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다. 특정 실시양태에서, MRI-안내 장치 또는 시스템은 표적화 캐뉼라, 예컨대 미국 특허 번호 8,175,677 및 8,374,677에 기재된 시스템과 함께 사용될 수 있으며, 이들 각각의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다. 또 다른 비제한적 예로서, MRI-안내 장치는, 예를 들어 그의 각각의 내용의 전문이 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 번호 9,055,884 및 미국 특허 출원 번호 US20140024927에 기재된 바와 같이 중재 장치를 안내하기 위한 궤적 안내 프레임을 포함한다.
특정 실시양태에서, AAV 입자는 MRI-상용성 팁 어셈블리를 사용하여 전달될 수 있다. MRI-상용성 팁 어셈블리체의 비제한적 예는 미국 특허 공개 번호 US20140275980에 기재되어 있고, 그의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
특정 실시양태에서, AAV 입자는 MRI-상용성인 캐뉼라를 사용하여 전달될 수 있다. MRI-상용성 캐뉼라의 비제한적 예는 국제 특허 공개 번호 WO2011130107에 교시된 것을 포함하며, 그의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
특정 실시양태에서, AAV 입자는 MRI-상용성인 카테터를 사용하여 전달될 수 있다. MRI-상용성 카테터의 비제한적 예는 국제 특허 공개 번호 WO2012116265, 미국 특허 공개 번호 8,825,133 및 미국 특허 공개 번호 US20140024909에 교시된 것을 포함하며, 이들 각각의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
특정 실시양태에서, AAV 입자는 미국 특허 공개 번호 US20140276582 및 US20140276614에 기재된 바와 같은 신장된 세관 본체 및 격막을 갖는 장치를 사용하여 전달될 수 있고, 이들 각각의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
특정 실시양태에서, AAV 입자는 MRI 상용성 국재화 및/또는 안내 시스템, 예컨대 비제한적으로 미국 특허 공개 번호 US20150223905 및 US20150230871에 기재된 것을 사용하여 전달될 수 있고, 이들 각각의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다. 특정 실시양태에서, MRI 상용성 국재화 및/또는 안내 시스템은 환자에의 고정을 위해 적합화된 마운트, 적어도 3차원으로 제어가능하게 해석할 수 있도록 마운트에 부착되도록 구성된 루멘을 갖는 표적화 캐뉼라, 및 표적화 캐뉼라 루멘 내에서 슬라이드 및 후퇴를 통해 편안하게 진행하도록 구성된, 자극 또는 기록 전극 중 적어도 하나를 포함하는 연장 프로브를 포함할 수 있다.
특정 실시양태에서, AAV 입자는 미국 특허 공개 번호 US20150031982 및 US20140066750 및 국제 특허 공개 번호 WO2015057807 및 WO2014039481에 기재된 바와 같은 궤적 프레임을 사용하여 대상체에게 전달될 수 있고, 이들 각각의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
특정 실시양태에서, AAV 입자는 유전자 총을 사용하여 대상체에게 전달될 수 있다.
VI. 정의
본 명세서의 다양한 위치에서, 본 개시내용의 화합물의 치환기가 군 또는 범위로 개시된다. 구체적으로, 본 개시내용은 이러한 군 및 범위의 구성원의 각각의 및 모든 개별적인 하위조합을 포함하는 것으로 의도된다.
약: 본원에 사용된 용어 "약"은 언급된 값의 +/-10%를 의미한다.
활성: 본원에 사용된 용어 "활성"은 어떠한 것이 일어나거나 또는 행해지는 상태를 지칭한다. 본원에 기재된 조성물은 활성을 가질 수 있고, 이러한 활성은 1종 이상의 생물학적 사건을 수반할 수 있다.
아데노-연관 바이러스: 본원에 사용된 용어 "아데노-연관 바이러스" 또는 "AAV"는 임의의 입자, 서열, 유전자, 단백질, 또는 그로부터 유래된 성분을 포함한 데펜도바이러스 속의 구성원을 지칭한다. 본원에 사용된 용어 "AAV 입자"는 캡시드 및 폴리뉴클레오티드를 포함한다. AAV 입자는 본원에 기재되거나 관련 기술분야에 공지되어 있는, 혈청형의 조합 (즉, "유사형화" AAV)을 포함한, 임의의 혈청형으로부터 유래될 수 있거나 또는 다양한 게놈 (예를 들어, 단일 가닥 또는 자기-상보성)으로부터 유래될 수 있다. 또한, AAV 입자는 복제 결함이 있을 수 있고/거나 표적화될 수 있다.
조합하여 투여되는: 본원에 사용된 용어는 "조합하여 투여되는" 또는 "조합 투여"는, 환자에 대한 각각의 작용제의 효과의 중첩이 존재할 수 있도록 및/또는 대상체가 둘 다에 동시에 노출되는 일부 시점이 존재하도록, 2종 이상의 작용제 (예를 들어, AAV)가 대상체에게 동시에 또는 소정 간격 이내에 투여되는 것을 의미한다. 일부 실시양태에서, 이들은 서로 약 60, 30, 15, 10, 5, 또는 1분 이내에 또는 1종 이상의 다른 작용제의 적어도 1개의 용량의 약 24시간, 12시간, 6시간, 3시간 내에 투여된다. 일부 실시양태에서, 투여는 중첩 투여 요법으로 이루어진다. 본원에 사용된 용어 "투여 요법"은 시간상 이격된 복수의 용량을 지칭한다. 이러한 용량은 규칙적 간격으로 이루어질 수 있거나 또는 투여에 1회 이상의 틈을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 작용제의 투여는 조합 (예를 들어, 상승작용적) 효과가 달성되도록 함께 충분히 근접하게 간격을 둔다.
호전: 본원에 사용된 용어 "호전" 또는 "호전시키는"은 상태 또는 질환의 적어도 하나의 적응증의 중증도를 감소시키는 것을 지칭한다. 예를 들어, 신경변성 장애와 관련하여, 호전은 뉴런 손실의 감소를 포함한다.
동물: 본원에 사용된 용어 "동물"은 동물계의 임의의 구성원을 지칭한다. 일부 실시양태에서, "동물"은 임의의 발달 단계에 있는 인간을 지칭한다. 일부 실시양태에서, "동물"은 임의의 발달 단계에 있는 비-인간 동물을 지칭한다. 특정 실시양태에서, 비-인간 동물은 포유동물 (예를 들어, 설치류, 마우스, 래트, 토끼, 원숭이, 개, 고양이, 양, 소, 영장류 또는 돼지)이다. 일부 실시양태에서, 동물은 포유동물, 조류, 파충류, 양서류, 어류 및 충류를 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 일부 실시양태에서, 동물은 트랜스제닉 동물, 유전자 조작된 동물 또는 클론이다.
안티센스 가닥: 본원에 사용된 용어, siRNA 분자의 "안티센스 가닥" 또는 "제1 가닥" 또는 "가이드 가닥"은 침묵시키기 위해 표적화된 유전자의 mRNA의 약 10-50개 뉴클레오티드, 예를 들어, 약 15-30, 16-25, 18-23 또는 19-22개 뉴클레오티드의 섹션에 실질적으로 상보적인 가닥을 지칭한다. 안티센스 가닥 또는 제1 가닥은 표적-특이적 침묵을 지시하기 위해 목적하는 표적 mRNA 서열에 충분히 상보적인 서열, 예를 들어 RNAi 기구 또는 프로세스에 의해 목적하는 표적 mRNA의 파괴를 촉발하기에 충분한 상보성을 갖는다.
대략: 1개 이상의 관심 값에 적용되는 경우, 본원에 사용된 용어 "대략" 또는 "약"은 언급된 참조 값과 유사한 값을 지칭한다. 특정 실시양태에서, 용어 "대략" 또는 "약"은 달리 언급되지 않거나 또는 문맥으로부터 달리 명백하지 않는 한, 언급된 참조 값의 어느 한 방향 (그보다 크거나 그보다 작은 방향)으로 25%, 20%, 19%, 18%, 17%, 16%, 15%, 14%, 13%, 12%, 11%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1% 또는 그 미만 내에 속하는 값의 범위를 지칭한다 (이러한 수가 가능한 값의 100%를 초과하는 경우는 제외함).
와 회합된: 본원에 사용된 용어 "와 회합된", "접합된", "연결된", "부착된" 및 "테더링된"은 2개 이상의 모이어티에 관하여 사용되는 경우에, 모이어티들이 직접적으로 또는 연결 작용제로서의 역할을 하는 1개 이상의 추가의 모이어티를 통해 서로 물리적으로 회합 또는 연결되어, 모이어티들이 구조가 사용되는 조건, 예를 들어 생리학적 조건 하에 물리적으로 회합된 채로 남아있도록 충분히 안정한 구조를 형성하는 것을 의미한다. "회합"은 엄격하게 직접 공유 화학 결합을 통해 이루어질 필요는 없다. 그것은 또한 이온 또는 수소 결합, 또는 "회합된" 엔티티가 물리적으로 회합된 채로 남아있도록 충분히 안정한 혼성화 기반 연결성을 제안할 수 있다.
이중기능적: 본원에 사용된 용어 "이중기능적"은 임의의 물질, 분자 또는 모이어티가 적어도 2가지 기능을 할 수 있거나 유지하는 것을 지칭한다. 기능은 동일한 결과 또는 상이한 결과에 영향을 미칠 수 있다. 기능을 생성하는 구조는 동일하거나 상이할 수 있다.
생물학적 활성: 본원에 사용된 어구 "생물학적으로 활성"은 생물계 및/또는 유기체에서 활성을 갖는 임의의 물질 (예를 들어, AAV)의 특징을 지칭한다. 예를 들어, 유기체에게 투여되는 경우에, 그 유기체에 대해 생물학적 효과를 갖는 물질은 생물학적 활성인 것으로 간주된다. 특정한 실시양태에서, 본 개시내용의 폴리뉴클레오티드는, 폴리뉴클레오티드의 일부분이라도 생물학적으로 활성이거나 또는 생물학적으로 관련된 것으로 간주되는 활성을 모방하는 경우에 생물학적으로 활성인 것으로 간주될 수 있다.
생물계: 본원에 사용된 용어 "생물계"는 세포 막, 세포 구획, 세포, 조직, 기관, 기관계, 다세포 유기체, 또는 임의의 생물학적 엔티티 내에서 특정 생물학적 과제를 수행하기 위해 함께 기능하는 기관, 조직, 세포, 세포내 성분, 단백질, 핵산, 분자 (생체분자를 포함하나 이에 제한되지는 않음)의 군을 지칭한다. 일부 실시양태에서, 생물계는 세포내 및/또는 세포외 세포 신호전달 생체분자를 포함하는 세포 신호전달 경로이다. 일부 실시양태에서, 생물계는 세포외/세포 매트릭스 및/또는 세포 함요 내의 성장 인자 신호전달 사건을 포함한다.
생체분자: 본원에 사용된 용어 "생체분자"는 아미노산-기반, 핵산-기반, 탄수화물-기반 또는 지질-기반 등인 임의의 천연 분자이다.
상보적 및 실질적으로 상보적: 본원에 사용된 용어 "상보적"은 폴리뉴클레오티드가 서로 염기 쌍을 형성하는 능력을 지칭한다. 염기 쌍은 전형적으로 역평행 폴리뉴클레오티드 가닥 내의 뉴클레오티드 단위 사이의 수소 결합에 의해 형성된다. 상보적 폴리뉴클레오티드 가닥은 왓슨-크릭 방식으로 (예를 들어, A 대 T, A 대 U, C 대 G), 또는 듀플렉스의 형성을 허용하는 임의의 다른 방식으로 염기 쌍을 형성할 수 있다. 관련 기술분야의 통상의 기술자가 알고 있는 바와 같이, DNA와 대조적으로 RNA를 사용할 때, 티민이 아닌 우라실이 아데노신에 상보적인 것으로 간주되는 염기이다. 그러나, U가 본 개시내용의 문맥에서 표시된 경우에, 달리 언급되지 않는 한, T를 대체하는 능력이 암시된다. 완전한 상보성 또는 100% 상보성은 하나의 폴리뉴클레오티드 가닥의 각각의 뉴클레오티드 단위가 제2 폴리뉴클레오티드 가닥의 뉴클레오티드 단위와 수소 결합을 형성할 수 있는 상황을 지칭한다. 완전한 상보성 미만은 2개의 가닥의 일부 뉴클레오티드 단위가 서로 수소 결합을 형성할 수 있지만, 모두는 그러하지 않은 상황을 지칭한다. 예를 들어, 2개의 20-량체의 경우, 각각의 가닥 상의 단지 2개의 염기 쌍만이 서로 수소 결합을 형성할 수 있다면, 폴리뉴클레오티드 가닥은 10% 상보성을 나타낸다. 동일한 예에서, 각각의 가닥 상의 18 염기 쌍이 서로 수소 결합을 형성할 수 있는 경우, 폴리뉴클레오티드 가닥은 90% 상보성을 나타낸다. 본원에 사용된 용어 "실질적으로 상보적"은 siRNA가 목적하는 표적 mRNA에 결합하여 표적 mRNA의 RNA 침묵을 촉발하기에 충분한 서열을 (예를 들어, 안티센스 가닥에서) 갖는 것을 의미한다.
화합물: 본원에 사용된 용어 "화합물"은 별개의 화학 엔티티를 지칭한다. 일부 실시양태에서, 특정한 화합물은 하나 이상의 이성질체 또는 동위원소 형태 (입체이성질체, 기하 이성질체 및 동위원소를 포함하나 이에 제한되지는 않음)로 존재할 수 있다. 일부 실시양태에서, 화합물은 단지 단일의 이러한 형태로 제공되거나 사용된다. 일부 실시양태에서, 화합물은 2종 이상의 이러한 형태의 혼합물 (입체이성질체의 라세미 혼합물을 포함하나 이에 제한되지는 않음)로서 제공되거나 사용된다. 관련 기술분야의 통상의 기술자는 일부 화합물이 상이한 이러한 형태로 존재하고, 상이한 특성 및/또는 활성 (생물학적 활성을 포함하나 이에 제한되지 않음)을 나타낸다는 것을 인지한다. 이러한 경우, 본 개시내용에 따른 사용을 위해 화합물의 특정한 형태를 선택하거나 회피하는 것은 관련 기술분야의 통상의 기술자의 통상의 기술 내에 있다. 예를 들어, 비대칭적으로 치환된 탄소 원자를 함유하는 화합물은 광학 활성 또는 라세미 형태로 단리될 수 있다. 광학 활성 출발 물질로부터 광학 활성 형태를 제조하는 방법, 예컨대 라세미 혼합물의 분할 또는 입체선택적 합성에 의하는 방법은 관련 기술분야에 공지되어 있다. 또한 올레핀, C=N 이중 결합 등의 많은 기하 이성질체가 본원에 기재된 화합물에 존재할 수 있고, 모든 이러한 안정한 이성질체가 본 개시내용에서 고려된다. 본 개시내용의 화합물의 시스 및 트랜스 기하 이성질체가 기재되어 있고, 이는 이성질체의 혼합물 또는 분리된 이성질체 형태로서 단리될 수 있다.
본 개시내용의 화합물은 또한 호변이성질체 형태를 포함한다. 호변이성질체 형태는 단일 결합과 인접 이중 결합의 스와핑 및 양성자의 병행 이동으로부터 생성된다. 호변이성질체 형태는 동일한 실험식 및 총 전하를 갖는 이성질체 양성자화 상태인 양성자성 호변이성질체를 포함한다.
본 개시내용의 화합물은 또한 중간체 또는 최종 화합물에서 발생하는 원자의 모든 동위원소를 포함한다. "동위원소"는 동일한 원자 번호를 갖지만 핵 내 상이한 중성자 수로 인하여 상이한 질량수를 갖는 원자를 지칭한다. 예를 들어, 수소의 동위원소는 삼중수소 및 중수소를 포함한다.
본 개시내용의 화합물 및 염은 상용 방법에 의해 용매화물 및 수화물을 형성하기 위해 용매 또는 물 분자와 조합되어 제조될 수 있다.
보존된: 본원에 사용된 용어 "보존된"은 각각 폴리뉴클레오티드 서열 또는 폴리펩티드 서열의 뉴클레오티드 또는 아미노산 잔기가 비교되는 2개 이상의 서열의 동일한 위치에서 변경되지 않은 채 발생한 것을 지칭한다. 비교적 보존된 뉴클레오티드 또는 아미노산은 서열 내 다른 곳에 나타나는 뉴클레오티드 또는 아미노산보다 더 관련된 서열 중에서 보존된 것이다.
일부 실시양태에서, 2개 이상의 서열은 이들이 서로 100% 동일한 경우에 "완전히 보존된" 것으로 언급된다. 일부 실시양태에서, 2개 이상의 서열은 이들이 서로 적어도 70% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 90% 동일한, 또는 적어도 95% 동일한 경우에 "고도로 보존된" 것으로 언급된다. 일부 실시양태에서, 2개 이상의 서열은 이들이 서로 약 70% 동일한, 약 80% 동일한, 약 90% 동일한, 약 95%, 약 98% 또는 약 99% 동일한 경우에 "고도로 보존된" 것으로 언급된다. 일부 실시양태에서, 2개 이상의 서열은 이들이 서로 적어도 30% 동일한, 적어도 40% 동일한, 적어도 50% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 90% 동일한, 또는 적어도 95% 동일한 경우에 "보존된" 것으로 언급된다. 일부 실시양태에서, 2개 이상의 서열은 이들이 서로 약 30% 동일한, 약 40% 동일한, 약 50% 동일한, 약 60% 동일한, 약 70% 동일한, 약 80% 동일한, 약 90% 동일한, 약 95% 동일한, 약 98% 동일한, 또는 약 99% 동일한 경우에 "보존된" 것으로 언급된다. 서열의 보존은 올리고뉴클레오티드, 폴리뉴클레오티드 또는 폴리펩티드의 전체 길이에 적용될 수 있거나 또는 그의 부분, 영역 또는 특색에 적용될 수 있다.
특정 실시양태에서, 보존된 서열은 인접하지 않는다. 관련 기술분야의 통상의 기술자는 인접한 정렬에서 갭이 서열 사이에 존재할 때 정렬을 달성하는 방법, 및 삽입 또는 결실이 존재하는 것을 견디지 못하는 상응하는 잔기를 정렬하는 방법을 인지할 수 있다.
특정 실시양태에서, 보존된 서열은 인접하지 않는다. 관련 기술분야의 통상의 기술자는 인접한 정렬에서 갭이 서열 사이에 존재할 때 정렬을 달성하는 방법, 및 삽입 또는 결실이 존재하는 것을 견디지 못하는 상응하는 잔기를 정렬하는 방법을 인지할 수 있다.
전달: 본원에 사용된 "전달"은 화합물, 예컨대 파르보바이러스, 예를 들어 AAV 및/또는 AAV 화합물, 물질, 엔티티, 모이어티, 화물 또는 페이로드를 표적으로 전달하는 행위 또는 방식을 지칭한다. 이러한 표적은 세포, 조직, 기관, 유기체 또는 시스템 (생물학적이든 또는 생산이든)일 수 있다.
전달 작용제: 본원에 사용된 "전달 작용제"는, 적어도 부분적으로, 표적화된 세포에 대한 폴리뉴클레오티드 및/또는 1종 이상의 물질 (본 개시내용의 화합물 및/또는 조성물, 예를 들어, 바이러스 입자 또는 발현 벡터를 포함하나 이제 제한되지는 않음)의 생체내 및/또는 시험관내 전달을 용이하게 하는 임의의 작용제 또는 물질을 지칭한다.
탈안정화된: 본원에 사용된 용어 "탈안정한", "탈안정화시키다" 또는 "탈안정화 영역"은 영역 또는 분자의 출발, 참조, 야생형 또는 천연 형태보다 덜 안정한 그 영역 또는 분자를 의미한다.
검출가능한 표지: 본원에 사용된 "검출가능한 표지"는 방사선촬영, 형광, 화학발광, 효소적 활성, 흡광도 면역학적 검출 등을 포함한 관련 기술분야에 공지된 방법에 의해 용이하게 검출되는 또 다른 엔티티와 부착, 혼입 또는 회합된 1종 이상의 마커, 신호 또는 모이어티를 지칭한다. 검출가능한 표지는 방사성동위원소, 형광단, 발색단, 효소, 염료, 금속 이온, 리간드, 예컨대 비오틴, 아비딘, 스트렙타비딘 및 합텐, 양자점 등을 포함할 수 있다. 검출가능한 표지는 부착, 혼입 또는 회합되는 엔티티 내의 임의의 위치에 위치할 수 있다. 예를 들어, 펩티드 또는 단백질과 부착, 혼입 또는 회합되는 경우에, 이들은 아미노산, 펩티드 또는 단백질 내에 있을 수 있거나 또는 N- 또는 C- 말단에 위치할 수 있다.
투여 요법: 본원에 사용된 "투여 요법"은 투여의 스케줄, 또는 치료, 예방 또는 완화적 치유의 의사 결정된 요법이다.
유효량: 본원에 사용된 용어 작용제의 "유효량"은, 예를 들어 대상체 세포에의 단일 또는 다중 용량 투여 시, 장애의 1종 이상의 증상, 임상 결과의 치유, 완화, 경감 또는 개선에서 유익하거나 목적하는 결과를 가져오기에 충분한 양이고, 이에 따라, "유효량"은 그것이 적용되는 상황에 좌우된다. 예를 들어, 파킨슨병을 치료하는 작용제를 투여하는 상황에서, 작용제의 유효량은, 예를 들어 작용제의 투여 없이 수득되는 반응과 비교하여 파킨슨병의 본원에 정의된 바와 같은 치료를 달성하기에 충분한 양이다.
캡슐화하다: 본원에 사용된 용어 "캡슐화하다"는 봉입, 포위 또는 포장하는 것을 의미한다.
조작된: 본원에 사용된 바와 같이, 본 개시내용의 실시양태는, 구조적이든지 화학적이든지 간에 출발점, 야생형 또는 천연 분자로부터 달라지는 특색 또는 특성을 갖도록 설계되는 경우에 "조작된" 것이다. 따라서, 조작된 작용제 또는 엔티티는 그의 설계 및/또는 생산이 인간의 손의 작용을 포함하는 것이다.
에피토프: 본원에 사용된 "에피토프"는 생체분자와 상호작용할 수 있는 분자 상의 표면 또는 영역을 지칭한다. 예를 들어, 단백질은 항체, 예를 들어 생체분자와 상호작용하는 1개 이상의 아미노산, 예를 들어 에피토프를 함유할 수 있다. 일부 실시양태에서, 단백질 또는 단백질 모듈을 지칭하는 경우에, 에피토프는 아미노산의 선형 스트레치 또는 폴딩된 아미노산 쇄에 의해 형성된 3차원 구조를 포함할 수 있다.
발현: 본원에 사용된, 핵산 서열의 "발현"은 하기 사건 중 1개 이상을 지칭한다: (1) DNA 서열로부터 RNA 주형의 생산 (예를 들어, 전사에 의해); (2) RNA 전사체의 프로세싱 (예를 들어, 스플라이싱, 편집, 5' 캡 형성 및/또는 3' 말단 프로세싱); (3) RNA의 폴리펩티드 또는 단백질로의 번역; 및 (4) 폴리펩티드 또는 단백질의 폴딩; 및 (5) 폴리펩티드 또는 단백질의 번역후 변형.
특색: 본원에 사용된 "특색"은 특징, 특성 또는 특유의 요소를 지칭한다.
제제: 본원에 사용된 "제제"는 본 개시내용의 적어도 1종의 폴리뉴클레오티드 및/또는 화합물 및/또는 조성물 (예를 들어, 벡터, AAV 입자 등) 및 전달 작용제를 포함한다.
단편: 본원에 사용된 "단편"은 전체 중 인접한 부분을 지칭한다. 예를 들어, 단백질의 단편은 배양된 세포로부터 단리된 전장 단백질을 소화시켜 수득된 폴리펩티드를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 단백질의 단편은 적어도 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 150, 200, 250개 또는 그 초과의 아미노산을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체의 단편은 효소적 소화에 적용되었거나 그렇게 합성된 항체의 일부를 포함한다.
기능적: 본원에 사용된 "기능적" 생물학적 분자는 그것이 특징으로 하는 특성 및/또는 활성을 나타내는 구조를 갖거나 그러한 형태의 생물학적 분자 및/또는 엔티티이다.
유전자 발현: 용어 "유전자 발현"은 핵산 서열이 성공적인 전사를 거치고, 대부분의 경우에 번역을 거쳐 단백질 또는 펩티드를 생산하는 프로세스를 지칭한다. 명확성을 위해, "유전자 발현"의 측정을 언급하는 경우, 이는 측정이 전사의 핵산 생성물, 예를 들어 RNA 또는 mRNA, 또는 번역의 아미노산 생성물, 예를 들어 폴리펩티드 또는 펩티드에 대한 것일 수 있음을 의미하는 것으로 이해되어야 한다. RNA, mRNA, 폴리펩티드 및 펩티드의 양 또는 수준을 측정하는 방법은 관련 기술분야에 널리 공지되어 있다.
상동성: 본원에 사용된 용어 "상동성"은 중합체 분자 사이, 예를 들어 핵산 분자 (예를 들어, DNA 분자 및/또는 RNA 분자) 사이 및/또는 폴리펩티드 분자 사이의 전체 관련성을 지칭한다.
일부 실시양태에서, 중합체 분자는 그의 서열이 적어도 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 또는 99% 동일하거나 유사하면 서로 "상동"인 것으로 간주된다. 용어 "상동"은 반드시 적어도 2개의 서열 (폴리뉴클레오티드 또는 폴리펩티드 서열) 사이의 비교를 지칭한다. 개시내용에 따르면, 2개의 폴리뉴클레오티드 서열은 이들이 코딩하는 폴리펩티드가 적어도 약 20개의 아미노산의 적어도 1개의 스트레치에 대해 적어도 약 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 또는 심지어 99%인 경우 상동성인 것으로 간주된다. 일부 실시양태에서, 상동성 폴리뉴클레오티드 서열은 적어도 4-5개의 고유하게 명시된 아미노산의 스트레치를 코딩하는 능력을 특징으로 한다. 길이가 60개 미만의 뉴클레오티드인 폴리뉴클레오티드 서열의 경우, 상동성은 전형적으로 적어도 4-5개의 고유하게 명시된 아미노산의 스트레치를 코딩하는 능력에 의해 결정된다. 개시내용에 따르면, 단백질이 적어도 약 20개의 아미노산의 적어도 1개의 스트레치에 대해 적어도 약 50%, 60%, 70%, 80%, 또는 90% 동일한 경우, 2개의 단백질 서열은 상동성인 것으로 간주된다. 많은 실시양태에서, 상동성 단백질은 적어도 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50개 또는 그 초과의 아미노산의 적어도 1개의 짧은 스트레치에 걸쳐 큰 전반적인 상동성 정도 및 높은 상동성 정도를 나타낼 수 있다. 많은 실시양태에서, 상동 단백질은 1개 이상의 특징적 서열 요소를 공유한다. 본원에 사용된 용어 "특징적 서열 요소"는 관련 단백질에 존재하는 모티프를 지칭한다. 일부 실시양태에서, 이러한 모티프의 존재는 특정한 활성 (예컨대 생물학적 활성)과 상관된다.
동일성: 본원에 사용된 용어 "동일성"은 중합체 분자, 예를 들어 올리고뉴클레오티드 및/또는 폴리뉴클레오티드 분자 (예를 들어, DNA 분자 및/또는 RNA 분자) 및/또는 폴리펩티드 분자 사이의 전체 관련성을 지칭한다. 2개 폴리뉴클레오티드 서열의 퍼센트 동일성의 계산은, 예를 들어 최적 비교 목적을 위해 2개 서열을 정렬함으로써 수행될 수 있다 (예를 들어, 최적 정렬을 위해 갭을 제1 및 제2 핵산 서열 중 하나 또는 둘 다에 도입하고, 비교 목적을 위해 비-동일한 서열은 무시할 수 있음). 특정 실시양태에서, 비교 목적을 위해 정렬시킨 서열의 길이는 참조 서열의 길이의 적어도 30%, 적어도 40%, 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 적어도 95% 또는 100%이다. 이어서, 상응하는 뉴클레오티드 위치에서의 뉴클레오티드를 비교한다. 제1 서열에서의 위치가 제2 서열에서의 상응하는 위치와 동일한 뉴클레오티드에 의해 점유되어 있는 경우에, 분자는 그 위치에서 동일하다. 2개 서열 사이의 퍼센트 동일성은 2개 서열의 최적 정렬을 위해 도입될 필요가 있는 갭의 수 및 각각의 갭의 길이를 고려한, 서열에 의해 공유되는 동일한 위치의 수의 함수이다. 2개 서열 사이의 서열의 비교 및 퍼센트 동일성의 결정은 수학적 알고리즘을 사용하여 달성될 수 있다. 예를 들어, 2개의 뉴클레오티드 서열 사이의 퍼센트 동일성은 문헌 [Computational Molecular Biology, Lesk, A. M., ed., Oxford University Press, New York, 1988; Biocomputing: Informatics and Genome Projects, Smith, D. W., ed., Academic Press, New York, 1993; Sequence Analysis in Molecular Biology, von Heinje, G., Academic Press, 1987; Computer Analysis of Sequence Data, Part I, Griffin, A. M., and Griffin, H. G., eds., Humana Press, New Jersey, 1994; 및 Sequence Analysis Primer, Gribskov, M. and Devereux, J., eds., M Stockton Press, New York, 1991]에 기재된 것과 같은 방법을 사용하여 결정될 수 있고; 이들 각각은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다. 예를 들어, 2개의 뉴클레오티드 서열 사이의 퍼센트 동일성은, 예를 들어 PAM120 가중치 잔기 표, 갭 길이 페널티 12 및 갭 페널티 4를 사용하여 ALIGN 프로그램 (버전 2.0) 내로 혼입된 문헌 [Meyers and Miller (CABIOS, 1989, 4:11-17)]의 알고리즘을 사용하여 결정될 수 있다. 대안적으로, 2개의 뉴클레오티드 서열 사이의 퍼센트 동일성은 NWSgapdna.CMP 매트릭스를 사용하여 GCG 소프트웨어 패키지의 GAP 프로그램을 사용하여 결정될 수 있다. 서열 사이의 퍼센트 동일성을 결정하기 위해 통상적으로 사용되는 방법은 문헌 [Carillo, H., and Lipman, D., SIAM J Applied Math., 48:1073 (1988)]에 개시된 것을 포함하나 이에 제한되지는 않으며; 그의 전문은 본원에 참조로 포함된다. 동일성을 결정하는 기술은 공개적으로 이용가능한 컴퓨터 프로그램에 코드화되어 있다. 2개의 서열 사이의 상동성을 결정하기 위한 예시적인 컴퓨터 소프트웨어는 GCG 프로그램 패키지, 문헌 [Devereux, J., et al., Nucleic Acids Research, 12(1), 387 (1984)], BLASTP, BLASTN, 및 FASTA 문헌 [Altschul, S. F. et al., J. Molec. Biol., 215, 403 (1990)]을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.
유전자의 발현을 억제하다: 본원에 사용된 어구 "유전자의 발현을 억제하다"는 유전자의 발현 생성물의 양의 감소를 유발하는 것을 의미한다. 발현 생성물은 유전자로부터 전사된 RNA (mRNA) 또는 유전자로부터 전사된 mRNA로부터 번역된 폴리펩티드일 수 있다. 전형적으로 mRNA 수준의 감소는 그로부터 번역되는 폴리펩티드의 수준의 감소를 발생시킨다. 발현의 수준은 mRNA 또는 단백질을 측정하는 표준 기술을 사용하여 결정될 수 있다.
시험관내: 본원에 사용된 용어 "시험관내"는 유기체 (예를 들어, 동물, 식물 또는 미생물) 내에서가 아니라, 인공 환경에서, 예를 들어 시험 튜브 또는 반응 용기 내에서, 세포 배양물 내에서, 페트리 디쉬 등 내에서 발생하는 사건을 지칭한다.
생체내: 본원에 사용된 용어 "생체내"는 유기체 (예를 들어, 동물, 식물 또는 미생물, 또는 그의 세포 또는 조직) 내에서 발생하는 사건을 지칭한다.
단리된: 본원에 사용된 용어 "단리된"은 "분리된"과 동의어이지만, 인간의 손에 의해 수행되는 추론 분리가 그와 함께 이루어진다. 특정 실시양태에서, 단리된 물질 또는 엔티티는 이전에 회합된 성분 중 적어도 일부로부터 (자연에서이든지 실험 상황에서이든지 간에) 분리된 것이다. 단리된 물질은 이들이 회합되었던 물질에 관하여 다양한 순도 수준을 가질 수 있다. 단리된 물질 및/또는 엔티티는 이들이 처음에 회합되어 있던 다른 성분들 중 적어도 약 10%, 약 20%, 약 30%, 약 40%, 약 50%, 약 60%, 약 70%, 약 80%, 약 90% 또는 그 초과로부터 분리될 수 있다. 일부 실시양태에서, 단리된 작용제는 약 80%, 약 85%, 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98%, 약 99% 초과 또는 약 99% 초과로 순수하다. 본원에 사용된 바와 같이, 물질은 다른 성분이 실질적으로 없는 경우에 "순수"하다.
실질적으로 단리된: "실질적으로 단리된"은 화합물이 그것이 형성되거나 검출된 환경으로부터 실질적으로 분리된다는 것을 의미한다. 부분적 분리는, 예를 들어 본 개시내용의 화합물이 풍부화된 조성물을 포함할 수 있다. 실질적 분리는 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 97% 또는 적어도 약 99% (중량 기준)의 본 개시내용의 화합물 또는 그의 염을 함유하는 조성물을 포함할 수 있다. 화합물 및 그의 염을 단리하는 방법은 관련 기술분야에서 상용적이다. 일부 실시양태에서, 물질 또는 엔티티의 단리는 화학적 회합 및/또는 결합의 파괴를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단리는 단리된 물질 또는 엔티티가 이전에 조합되었던 성분들로부터의 분리만을 포함하고 이러한 파괴는 포함하지 않는다.
변형된: 본원에 사용된 용어 "변형된"은 모 또는 참조 분자 또는 엔티티와 비교하여 개시내용의 분자 또는 엔티티의 변화된 상태 또는 구조를 지칭한다. 분자는 많은 방식으로, 예컨대 화학적으로, 구조적으로 및 기능적으로 변형될 수 있다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 화합물 및/또는 조성물은 비-천연 아미노산, 또는 비-천연 뉴클레오티드의 도입에 의해 변형된다.
돌연변이: 본원에 사용된 용어 "돌연변이"는 변화 및/또는 변경을 지칭한다. 일부 실시양태에서, 돌연변이는 단백질 (펩티드 및 폴리펩티드 포함) 및/또는 핵산 (폴리핵산 포함)에 대한 변화 및/또는 변경일 수 있다. 일부 실시양태에서, 돌연변이는 단백질 및/또는 핵산 서열에 대한 변화 및/또는 변경을 포함한다. 이러한 변화 및/또는 변경은 1개 이상의 아미노산 (단백질 및/또는 펩티드의 경우) 및/또는 뉴클레오티드 (핵산 및/또는 폴리핵산의 경우)의 부가, 치환 및/또는 결실을 포함할 수 있다. 돌연변이가 아미노산 및/또는 뉴클레오티드의 부가 및/또는 치환을 포함하는 실시양태에서, 이러한 부가 및/또는 치환은 1개 이상의 아미노산 및/또는 뉴클레오티드 잔기를 포함할 수 있고, 변형된 아미노산 및/또는 뉴클레오티드를 포함할 수 있다.
자연 발생: 본원에 사용된 "자연 발생"은 인공 보조 또는 인간의 손의 관여 없이 자연에 존재하는 것을 의미한다.
비-인간 척추동물: 본원에 사용된 "비-인간 척추동물"은 야생 및 사육 종을 포함한, 호모 사피엔스를 제외한 모든 척추동물을 포함한다. 비-인간 척추동물의 예는 포유동물, 예컨대 알파카, 반텡, 들소, 낙타, 고양이, 소, 사슴, 개, 당나귀, 가얄, 염소, 기니 피그, 말, 라마, 노새, 돼지, 토끼, 순록, 양, 물소 및 야크를 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
핵산: 본원에 사용된 용어 "핵산", "폴리뉴클레오티드" 및 "올리고뉴클레오티드"는 폴리데옥시리보뉴클레오티드 (2-데옥시-D-리보스 함유), 또는 폴리리보뉴클레오티드 (D-리보스 함유), 또는 퓨린 또는 피리미딘 염기의 N 글리코시드이거나, 또는 변형된 퓨린 또는 피리미딘 염기인 임의의 다른 유형의 폴리뉴클레오티드로 구성된 임의의 핵산 중합체를 지칭한다. 용어 "핵산", "폴리뉴클레오티드" 및 "올리고뉴클레오티드" 사이에는 길이상 어떠한 의도되는 구분이 없고, 이들 용어는 상호교환가능하게 사용될 것이다. 이들 용어는 오직 분자의 1차 구조만을 지칭한다. 따라서, 이들 용어는 이중- 및 단일-가닥 DNA, 뿐만 아니라 이중- 및 단일 가닥 RNA를 포함한다.
오프-타겟: 본원에 사용된 "오프 타겟"은 표적, 유전자 및/또는 세포 전사체 중 어느 1종 이상에 대한 임의의 의도되지 않은 효과를 지칭한다.
오픈 리딩 프레임: 본원에 사용된 "오픈 리딩 프레임" 또는 "ORF"는 주어진 리딩 프레임에 정지 코돈을 함유하지 않는 서열을 지칭한다.
작동가능하게 연결된: 본원에 사용된 어구 "작동가능하게 연결된"은 2개 이상의 분자, 구축물, 전사체, 엔티티, 모이어티 등 사이의 기능적 연결을 지칭한다.
입자: 본원에 사용된 "입자"는 적어도 2개의 성분, 단백질 캡시드 및 캡시드 내에 봉입된 폴리뉴클레오티드 서열로 구성된 바이러스이다.
환자: 본원에 사용된 "환자"는 치료를 구하거나 필요로 할 수 있거나, 치료를 요구하거나, 치료를 받고 있거나, 치료를 받을 대상체, 또는 특정한 질환 또는 상태, 예컨대 예를 들어 파킨슨병에 대해 훈련된 전문가에 의한 관리 하에 있는 대상체를 지칭한다.
페이로드: 본원에 사용된 "페이로드"는 바이러스 게놈에 의해 코딩되거나 또는 바이러스 게놈 내의 1종 이상의 폴리뉴클레오티드 또는 폴리뉴클레오티드 영역 또는 이러한 폴리뉴클레오티드 또는 폴리뉴클레오티드 영역, 예를 들어 트랜스진, 폴리펩티드 또는 다중-폴리펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드 또는 조정 핵산 또는 조절 핵산의 발현 산물을 지칭한다.
페이로드 구축물: 본원에 사용된 "페이로드 구축물"은 역전된 말단 반복부 (ITR) 서열에 의해 한쪽 또는 양쪽 측면에 플랭킹된 페이로드를 코딩하거나 이를 포함하는 1종 이상의 폴리뉴클레오티드 영역이다. 페이로드 구축물은 바이러스 게놈을 생산하기 위해 바이러스 생산 세포에서 복제되는 주형이다.
페이로드 구축물 벡터: 본원에 사용된 "페이로드 구축물 벡터"는 페이로드 구축물, 및 박테리아 세포에서의 복제 및 발현을 위한 조절 영역을 코딩하거나 이를 포함하는 벡터이다.
페이로드 구축물 발현 벡터: 본원에 사용된 "페이로드 구축물 발현 벡터"는 페이로드 구축물을 코딩하거나 이를 포함하는 벡터이고, 이는 추가로 바이러스 복제 세포에서의 바이러스 발현을 위한 성분을 코딩하거나 포함하는 1개 이상의 폴리뉴클레오티드 영역을 포함한다.
펩티드: 본원에 사용된 "펩티드"는 길이가 50개 이하의 아미노산, 예를 들어, 길이가 약 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 또는 50개의 아미노산이다.
제약상 허용되는: 어구 "제약상 허용되는"은 타당한 의학적 판단의 범주 내에서, 합리적인 이익/위험 비에 상응하는, 과도한 독성, 자극, 알레르기 반응, 또는 다른 문제 또는 합병증 없이 인간 및 동물의 조직과 접촉시켜 사용하기에 적합한 그러한 화합물, 물질, 조성물 및/또는 투여 형태를 지칭하는 것으로 본원에 사용된다.
제약상 허용되는 부형제: 본원에 사용된 어구 "제약상 허용되는 부형제"는 제약 조성물에 존재하는 화합물 및/또는 활성제 (예를 들어 본원에 기재된 바와 같음) 이외의 것으로 대상체 예컨대 환자에서 실질적으로 비독성이고 비염증성인 특성을 갖는 임의의 성분을 지칭한다. 일부 실시양태에서, 제약상 허용되는 부형제는 활성제를 현탁 및/또는 용해시킬 수 있는 비히클이다. 부형제는, 예를 들어 다음을 포함할 수 있다: 항접착제, 항산화제, 결합제, 코팅제, 압축 보조제, 붕해제, 염료 (착색제), 연화제, 유화제, 충전제 (희석제), 필름 형성제 또는 코팅제, 향미제, 향료, 활택제 (유동 증진제), 윤활제, 보존제, 인쇄 잉크, 흡수제, 현탁 또는 분산제, 감미제, 및 수화 물. 예시적인 부형제는 다음을 포함하나 이에 제한되지는 않는다: 부틸화 히드록시톨루엔 (BHT), 탄산칼슘, 인산칼슘 (이염기성), 스테아르산칼슘, 크로스카르멜로스, 가교된 폴리비닐 피롤리돈, 시트르산, 크로스포비돈, 시스테인, 에틸셀룰로스, 젤라틴, 히드록시프로필 셀룰로스, 히드록시프로필 메틸셀룰로스, 락토스, 스테아르산마그네슘, 말티톨, 만니톨, 메티오닌, 메틸셀룰로스, 메틸 파라벤, 미세결정질 셀룰로스, 폴리에틸렌 글리콜, 폴리비닐 피롤리돈, 포비돈, 예비젤라틴화 전분, 프로필 파라벤, 레티닐 팔미테이트, 쉘락, 이산화규소, 소듐 카르복시메틸 셀룰로스, 시트르산나트륨, 소듐 스타치 글리콜레이트, 소르비톨, 전분 (옥수수), 스테아르산, 수크로스, 활석, 이산화티타늄, 비타민 A, 비타민 E, 비타민 C, 및 크실리톨.
제약상 허용되는 염: 본원에 기재된 화합물의 제약상 허용되는 염. 본원에 사용된 "제약상 허용되는 염"은, 기존 산 또는 염기 모이어티를 그의 염 형태로 전환시킴으로써 (예를 들어, 유리 염기 기를 적합한 유기 산과 반응시킴으로써 생성되는 바와 같이) 모 화합물이 변형된 것인 개시된 화합물의 유도체 또는 형태를 지칭한다. 제약상 허용되는 염의 예는 염기성 잔기, 예컨대 아민의 무기 또는 유기 산 염; 산성 잔기, 예컨대 카르복실산의 알칼리 또는 유기 염 등을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 대표적인 산 부가염은 아세테이트, 아세트산, 아디페이트, 알기네이트, 아스코르베이트, 아스파르테이트, 벤젠술포네이트, 벤젠 술폰산, 벤조에이트, 비술페이트, 보레이트, 부티레이트, 캄포레이트, 캄포르술포네이트, 시트레이트, 시클로펜탄프로피오네이트, 디글루코네이트, 도데실술페이트, 에탄술포네이트, 푸마레이트, 글루코헵토네이트, 글리세로포스페이트, 헤미술페이트, 헵토네이트, 헥사노에이트, 히드로브로마이드, 히드로클로라이드, 히드로아이오다이드, 2-히드록시-에탄술포네이트, 락토비오네이트, 락테이트, 라우레이트, 라우릴 술페이트, 말레이트, 말레에이트, 말로네이트, 메탄술포네이트, 2-나프탈렌술포네이트, 니코티네이트, 니트레이트, 올레에이트, 옥살레이트, 팔미테이트, 파모에이트, 펙티네이트, 퍼술페이트, 3-페닐프로피오네이트, 포스페이트, 피크레이트, 피발레이트, 프로피오네이트, 스테아레이트, 숙시네이트, 술페이트, 타르트레이트, 티오시아네이트, 톨루엔술포네이트, 운데카노에이트, 발레레이트 염 등을 포함한다. 대표적인 알칼리 또는 알칼리 토금속 염은 나트륨, 리튬, 칼륨, 칼슘, 마그네슘 등, 뿐만 아니라 암모늄, 테트라메틸암모늄, 테트라에틸암모늄, 메틸아민, 디메틸아민, 트리메틸아민, 트리에틸아민, 에틸아민 등을 포함하나 이에 제한되지는 않는 비독성 암모늄, 4급 암모늄 및 아민 양이온을 포함한다. 본 개시내용의 제약상 허용되는 염은, 예를 들어 비-독성 무기 또는 유기 산으로부터 형성된, 모 화합물의 통상적인 비-독성 염을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 제약상 허용되는 염은 통상적인 화학적 방법에 의해 염기성 또는 산성 모이어티를 함유하는 모 화합물로부터 제조된 합성 염일 수 있다. 일반적으로, 이러한 염은 이들 화합물의 유리 산 또는 염기 형태를 물 또는 유기 용매, 또는 그 둘의 혼합물 중에서 화학량론적 양의 적절한 염기 또는 산과 반응시킴으로써 제조할 수 있고, 일반적으로 에테르, 에틸 아세테이트, 에탄올, 이소프로판올 또는 아세토니트릴과 같은 비수성 매질이 바람직하다. 적합한 염의 목록은 문헌 [Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1985, p. 1418, Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use, P.H. Stahl and C.G. Wermuth (eds.), Wiley-VCH, 2008, 및 Berge et al., Journal of Pharmaceutical Science, 66, 1-19 (1977)]에서 확인되며, 이들 각각은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
제약상 허용되는 용매화물: 본원에 사용된 용어 "제약상 허용되는 용매화물"은 적합한 용매의 분자가 결정 격자에 혼입된 것인 개시내용의 화합물의 결정질 형태를 지칭한다. 적합한 용매는 투여되는 투여량에서 생리학상 허용된다. 예를 들어, 용매화물은 유기 용매, 물 또는 그의 혼합물을 포함하는 용액으로부터 결정화, 재결정화 또는 침전에 의해 제조될 수 있다. 적합한 용매의 예는 에탄올, 물 (예를 들어, 1수화물, 2수화물, 및 3수화물), N-메틸피롤리디논 (NMP), 디메틸 술폭시드 (DMSO), N,N'-디메틸포름아미드 (DMF), N,N'-디메틸아세트아미드 (DMAC), 1,3-디메틸-2-이미다졸리디논 (DMEU), 1,3-디메틸-3,4,5,6-테트라히드로-2-(1H)-피리미디논 (DMPU), 아세토니트릴 (ACN), 프로필렌 글리콜, 에틸 아세테이트, 벤질 알콜, 2-피롤리돈, 벤질 벤조에이트 등이다. 물이 용매인 경우에, 용매화물은 "수화물"로 지칭된다. 일부 실시양태에서, 용매화물에 혼입된 용매는 (예를 들어, 제약 조성물의 단위 투여 형태로) 용매화물이 투여되는 유기체에 대해 생리학상 허용되는 유형 또는 수준의 것이다.
약동학: 본원에 사용된 "약동학"은 살아있는 유기체에게 투여된 물질의 운명의 결정에 관련된 분자 또는 화합물의 어느 1종 이상의 특성을 지칭한다. 약동학은 흡수, 분포, 대사 및 배출의 정도 및 속도를 포함한 여러 영역으로 나뉘어진다. 이것은 통상적으로 ADME로 지칭되며, 여기서: (A) 흡수는 혈액 순환에 들어가는 물질의 과정이고; (D) 분포는 신체의 유체 및 조직 전체에 걸친 물질의 분산 또는 전파이고; (M) 대사 (또는 생체변환)은 모 화합물에서 딸 대사물로의 비가역적 변환이고; (E) 배출 (또는 제거)은 신체로부터의 물질의 제거를 지칭한다. 드문 경우에, 일부 약물은 신체 조직에 비가역적으로 축적된다.
물리화학적: 본원에 사용된 "물리화학적"은 물리적 및/또는 화학적 특성을 의미하거나 이와 관련된다.
예방하는: 본원에 사용된 용어 "예방하는"은 감염, 질환, 장애 및/또는 상태의 발병을 부분적으로 또는 완전히 지연시키고/거나; 특정한 감염, 질환, 장애 및/또는 상태의 1종 이상의 증상, 특색 또는 임상 징후의 발병을 부분적으로 또는 완전히 지연시키고/거나; 특정한 감염, 질환, 장애 및/또는 상태의 1종 이상의 증상, 특색 또는 징후의 발병을 부분적으로 또는 완전히 지연시키고/거나; 감염, 특정한 질환, 장애 및/또는 상태로부터의 진행을 부분적으로 또는 완전히 지연시키고/거나; 감염, 질환, 장애 및/또는 상태, 예컨대 예를 들어 파킨슨병과 연관된 병리상태의 발생 위험을 감소시키는 것을 지칭한다.
전구약물: 본 개시내용은 또한 본원에 기재된 화합물의 전구약물을 포함한다. 본원에 사용된 "전구약물"은 임의의 물질, 분자 또는 엔티티가 화학적 또는 물리적 변경시에 치료제로서 작용할 것으로 예측되는 형태인 그러한 물질, 분자 또는 엔티티를 지칭한다. 전구약물은 일부 방식으로 공유 결합 또는 격리될 수 있고, 포유동물 대상체에게 투여되기 전에, 투여될 때 또는 투여된 후에 활성 약물 모이어티로 전환된다. 전구약물의 제조 및 용도는 문헌 [T. Higuchi and V. Stella, "Pro-drugs as Novel Delivery Systems," Vol. 14 of the A.C.S. Symposium Series, and Bioreversible Carriers in Drug Design, ed. Edward B. Roche, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987]에 논의되어 있으며, 이들 둘 다는 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
증식하다: 본원에 사용된 용어 "증식하다"는 성장, 확장, 복제 또는 증가하거나, 또는 성장, 확장 또는 증가하도록 유발하는 것을 의미한다. "증식성"은 증식하는 능력을 갖는 것을 의미한다. "항증식"은 증식성 특성을 상쇄시키거나 그에 반대되는 특성을 갖는 것을 의미한다.
예방적: 본원에 사용된 "예방적"은 질환의 확산을 방지하는데 사용된 치료제 또는 작용 과정을 지칭한다.
예방: 본원에 사용된 "예방"은 건강을 유지하고 질환의 확산을 방지하기 위해 취해진 조치를 지칭한다.
관심 단백질: 본원에 사용된 용어 "관심 단백질" 또는 "목적하는 단백질"은 본원에 제공된 것 및 그의 단편, 돌연변이체, 변이체 및 변경을 포함한다.
정제된: 본원에 사용된 "정제하다", "정제된", "정제"는 원치않는 성분, 물질 오염, 혼합물 또는 결함으로부터 실질적으로 순수하거나 정화되게 만드는 것을 의미한다. "정제된"은 순수한 상태를 지칭한다. "정제"는 순수하게 만드는 공정을 지칭한다. 일부 실시양태에서, 샘플은 이온 교환 크로마토그래피, 초원심분리, 또는 그의 조합을 사용하여 정제될 수 있다.
영역: 본원에 사용된 용어 "영역"은 구역 또는 일반적 부분을 지칭한다. 일부 실시양태에서, 단백질 또는 단백질 모듈을 지칭하는 경우에, 영역은 단백질 또는 단백질 모듈을 따라 아미노산의 선형 서열을 포함할 수 있거나, 3차원 부분, 에피토프 및/또는 에피토프의 클러스터를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 영역은 말단 영역을 포함한다. 본원에 사용된 용어 "말단 영역"은 주어진 작용제의 단부 또는 말단에 위치하는 영역을 지칭한다. 단백질을 지칭하는 경우, 말단 영역은 N- 및/또는 C-말단을 포함할 수 있다. N-말단은 유리 아미노기를 갖는 아미노산을 포함하는 단백질의 단부를 지칭한다. C-말단은 유리 카르복실기를 갖는 아미노산을 포함하는 단백질의 단부를 지칭한다. 따라서 N- 및/또는 C-말단 영역은 N- 및/또는 C-말단 뿐만 아니라 주변 아미노산을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, N- 및/또는 C-말단 영역은 약 3개 아미노산 내지 약 30개 아미노산, 약 5개 아미노산 내지 약 40개 아미노산, 약 10개 아미노산 내지 약 50개 아미노산, 약 20개 아미노산 내지 약 100개 아미노산 및/또는 적어도 100개 아미노산을 포함한다. 일부 실시양태에서, N-말단 영역은 N-말단을 포함하나 C-말단은 포함하지 않는 임의의 길이의 아미노산을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, C-말단 영역은 C-말단을 포함하나 N-말단은 포함하지 않는 임의의 길이의 아미노산을 포함할 수 있다.
일부 실시양태에서, 폴리뉴클레오티드를 지칭하는 경우에, 영역은 폴리뉴클레오티드를 따라 핵산의 선형 서열을 포함할 수 있거나, 3차원 부분, 2차 구조, 또는 3차 구조를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 영역은 말단 영역을 포함한다. 본원에 사용된 용어 "말단 영역"은 주어진 작용제의 단부 또는 말단에 위치하는 영역을 지칭한다. 폴리뉴클레오티드를 지칭하는 경우, 말단 영역은 5' 및 3' 말단을 포함할 수 있다. 5' 말단은 유리 포스페이트 기를 갖는 핵산을 포함하는 폴리뉴클레오티드의 단부를 지칭한다. 3' 말단은 유리 히드록실 기를 갖는 핵산을 포함하는 폴리뉴클레오티드의 단부를 지칭한다. 따라서 5'및 3' 영역은 5' 및 3' 말단 뿐만 아니라 주변 핵산을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 5' 및 3' 말단 영역은 약 9개 핵산 내지 약 90개 핵산, 약 15개 핵산 내지 약 120개 핵산, 약 30개 핵산 내지 약 150개 핵산, 약 60개 핵산 내지 약 300개 핵산 및/또는 적어도 300개 핵산을 포함한다. 일부 실시양태에서, 5' 영역은 5' 말단을 포함하나 3' 말단은 포함하지 않는 임의의 길이의 핵산을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 3' 영역은 3' 말단을 포함하나 5' 말단은 포함하지 않는 임의의 길이의 핵산을 포함할 수 있다.
RNA 또는 RNA 분자: 본원에 사용된 용어 "RNA" 또는 "RNA 분자" 또는 "리보핵산 분자"는 리보뉴클레오티드의 중합체를 지칭하고; 용어 "DNA" 또는 "DNA 분자" 또는 "데옥시리보핵산 분자"는 데옥시리보뉴클레오티드의 중합체를 지칭한다. DNA 및 RNA는 천연적으로, 예를 들어 각각 DNA 복제 및 DNA의 전사에 의해 합성될 수 있거나; 또는 화학적으로 합성될 수 있다. DNA 및 RNA는 단일 가닥 (즉, 각각 ssRNA 또는 ssDNA) 또는 다중 가닥 (예를 들어, 이중 가닥, 즉, 각각 dsRNA 및 dsDNA)일 수 있다. 본원에 사용된 용어 "mRNA" 또는 "메신저 RNA"는 1개 이상의 폴리펩티드 쇄의 아미노산 서열을 코딩하는 단일 가닥 RNA를 지칭한다.
RNA 간섭: 본원에 사용된 용어 "RNA 간섭" 또는 "RNAi"는 상응하는 단백질-코딩 유전자의 발현을 억제 또는 간섭 또는 "침묵"시키는 RNA 분자에 의해 매개되는 서열 특이적 조절 메카니즘을 지칭한다.
샘플: 본원에 사용된 용어 "샘플"은 공급원으로부터 채취되고/거나 분석 또는 가공을 위해 제공된 분취물, 하위세트 또는 부분을 지칭한다. 일부 실시양태에서, 샘플은 생물학적 공급원, 예컨대 조직, 세포 또는 성분 부분 (예들 들어 혈액, 점액, 림프액, 활액, 뇌척수액, 타액, 양수, 양막 제대혈, 소변, 질액 및 정액을 포함하나 이에 제한되지는 않는 체액)으로부터의 것이다. 일부 실시양태에서, 샘플은, 예를 들어 혈장, 혈청, 척수액, 림프액, 피부의 외부 절편, 호흡기도, 장관 및 비뇨생식관, 눈물, 타액, 모유, 혈액 세포, 종양 또는 기관을 포함하나 이에 제한되지는 않는, 전체 유기체 또는 그의 조직, 세포 또는 성분 부분의 하위세트, 또는 그의 분획 또는 부분으로부터의 균질물, 용해물 또는 추출물일 수 있거나 또는 이를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 샘플은 세포 성분, 예컨대 단백질 또는 핵산 분자를 함유할 수 있는 배지, 예컨대 영양 브로쓰 또는 겔이거나 또는 이를 포함한다. 일부 실시양태에서, "1차" 샘플은 공급원의 분취물이다. 일부 실시양태에서, 1차 샘플은 분석 또는 다른 용도를 위한 샘플을 제조하기 위해 1개 이상의 가공 (예를 들어, 분리, 정제 등) 단계에 적용된다.
자기-상보적 바이러스 입자: 본원에 사용된 "자기-상보적 바이러스 입자"는 적어도 2개의 성분, 단백질 캡시드 및 캡시드 내에 봉입된 자기-상보적 게놈을 코딩하는 폴리뉴클레오티드 서열로 구성된 입자이다.
센스 가닥: 본원에 사용된 용어 siRNA 분자의 "센스 가닥" 또는 "제2 가닥" 또는 "패신저 가닥"은 안티센스 가닥 또는 제1 가닥에 상보적인 가닥을 지칭한다. siRNA 분자의 안티센스 및 센스 가닥은 혼성화되어 듀플렉스 구조를 형성한다. 본원에 사용된 "siRNA 듀플렉스"는 침묵시키기 위해 표적화된 유전자의 mRNA의 약 10-50개 뉴클레오티드의 절편에 충분한 상보성을 갖는 siRNA 가닥, 및 siRNA 가닥과 듀플렉스를 형성하기에 충분한 상보성을 갖는 siRNA 가닥을 포함한다.
신호 서열: 본원에 사용된 어구 "신호 서열"은 수송 또는 국재화를 지시할 수 있는 서열을 지칭한다.
단일 단위 용량: 본원에 사용된 "단일 단위 용량"은 1회 용량/한 번에/단일 경로/단일 접촉 지점, 즉, 단일 투여 사건으로 투여되는 임의의 치료제의 용량이다. 일부 실시양태에서, 단일 단위 용량은 개별 투여 형태 (예를 들어, 정제, 캡슐, 패치, 로딩된 시린지, 바이알 등)로 제공된다.
유사성: 본원에 사용된 용어 "유사성"은 중합체 분자, 예를 들어 폴리뉴클레오티드 분자 (예를 들어, DNA 분자 및/또는 RNA 분자), 및/또는 폴리펩티드 분자 사이의 전체 관련성을 지칭한다. 중합체 분자의 서로에 대한 퍼센트 유사성의 계산은 관련 기술분야에서 이해되는 바와 같이 보존적 치환을 고려한 퍼센트 유사성의 계산을 제외하고는, 퍼센트 동일성의 계산과 동일한 방식으로 수행될 수 있다.
작은/짧은 간섭 RNA: 본원에 사용된 용어 "작은/짧은 간섭 RNA" 또는 "siRNA"는 RNAi를 지시 또는 매개할 수 있는 약 5-60개 뉴클레오티드 (또는 뉴클레오티드 유사체)를 포함하는 RNA 분자 (또는 RNA 유사체)를 지칭한다. 바람직하게는, siRNA 분자는 약 15-30개의 뉴클레오티드 또는 뉴클레오티드 유사체, 보다 바람직하게는 약 16-25개의 뉴클레오티드 (또는 뉴클레오티드 유사체), 보다 더 바람직하게는 약 18-23개의 뉴클레오티드 (또는 뉴클레오티드 유사체), 보다 더 바람직하게는 약 19-22개의 뉴클레오티드 (또는 뉴클레오티드 유사체) (예를 들어, 19, 20, 21 또는 22개의 뉴클레오티드 또는 뉴클레오티드 유사체)를 포함한다. 용어 "짧은" siRNA는 5-23개의 뉴클레오티드, 바람직하게는 21개의 뉴클레오티드 (또는 뉴클레오티드 유사체), 예를 들어 19, 20, 21 또는 22개의 뉴클레오티드를 포함하는 siRNA를 지칭한다. 용어 "긴" siRNA는 24-60개의 뉴클레오티드, 바람직하게는 약 24-25개의 뉴클레오티드, 예를 들어, 23, 24, 25 또는 26개의 뉴클레오티드를 포함하는 siRNA를 지칭한다. 짧은 siRNA는, 일부 경우에, 보다 짧은 siRNA가 RNAi를 매개하는 능력을 보유하는 한, 19개 미만의 뉴클레오티드, 예를 들어, 16, 17 또는 18개의 뉴클레오티드, 또는 5개만큼 적은 뉴클레오티드를 포함할 수 있다. 마찬가지로, 긴 siRNA는, 일부 경우에, 보다 긴 siRNA가 짧은 siRNA로의 추가의 프로세싱, 예를 들어 효소적 프로세싱의 부재 하에 RNAi 또는 번역 억제를 매개하는 능력을 보유하는 한, 26개 초과의 뉴클레오티드, 예를 들어, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 또는 심지어 60개의 뉴클레오티드를 포함할 수 있다. siRNA는 단일 가닥 RNA 분자 (ss-siRNA), 또는 혼성화되어 siRNA 듀플렉스로 불리는 듀플렉스 구조를 형성하는 센스 가닥 및 안티센스 가닥을 포함하는 이중 가닥 RNA 분자 (ds-siRNA)일 수 있다.
분할 용량: 본원에 사용된 "분할 용량"은 단일 단위 용량 또는 총 1일 용량의 2개 이상의 용량으로의 분할이다.
안정한: 본원에 사용된 "안정한"은 반응 혼합물로부터 유용한 정도의 순도로의 단리에서 살아남기에 충분히 강건하고, 바람직하게는 효과적인 치료제로 제제화될 수 있는 화합물 또는 엔티티를 지칭한다.
안정화된: 본원에 사용된 용어 "안정화하다", "안정화된", "안정화 영역"은 안정하게 만들거나 안정하게 되는 것을 의미한다. 일부 실시양태에서, 안정성은 절대값에 대비하여 측정된다. 일부 실시양태에서, 안정성은 참조 화합물 또는 엔티티에 대비하여 측정된다.
대상체: 본원에 사용된 용어 "대상체" 또는 "환자"는 개시내용에 따른 조성물이 예를 들어 실험적, 진단적, 예방적 및/또는 치료적 목적을 위해 투여될 수 있는 임의의 유기체를 지칭한다. 전형적 대상체는 동물 (예를 들어, 포유동물, 예컨대 마우스, 래트, 토끼, 비-인간 영장류, 및 인간) 및/또는 식물을 포함한다. 일부 실시양태에서, 대상체는 영아, 신생아, 또는 12세 연령 미만의 소아일 수 있다. 일부 실시양태에서, 대상체는 자궁 내에 있을 수 있다.
실질적으로: 본원에 사용된 용어 "실질적으로"는 관심 특징 또는 특성의 전체 또는 거의 전체 범위 또는 정도를 나타내는 정성적 상태를 지칭한다. 생물학 기술분야의 통상의 기술자는 생물학적 및 화학적 현상이 설사 그렇다해도 드물게 완결되고/거나 완결까지 진행되거나, 또는 절대적 결과를 달성하거나 회피함을 이해할 것이다. 따라서, 용어 "실질적으로"는 많은 생물학적 및 화학적 현상에 내재하는 잠재적 완전성 결여를 포착하기 위해 본원에 사용된다.
실질적으로 동일한: 본원에 사용된 바와 같이 그것이 용량 사이의 시간차에 관한 것일 때, 용어는 플러스/마이너스 2%를 의미한다.
실질적으로 동시: 본원에 사용된 바와 같이 그것이 복수의 용량에 관한 것일 때, 용어는 전형적으로 약 2초 이내를 의미한다.
를 앓는: 질환, 장애 및/또는 상태"를 앓는" 개체는 질환, 장애 및/또는 상태 예컨대 예를 들어 파킨슨병으로 진단되었거나 또는 그의 1종 이상의 증상을 나타낸다.
걸리기 쉬운: 질환, 장애 및/또는 상태에 "걸리기 쉬운" 개체는 질환, 장애 및/또는 상태로 진단되지 않았고/거나 그의 증상을 나타내지 않을 수 있지만, 질환 또는 그의 증상이 발생할 성향을 보유한다. 일부 실시양태에서, 질환, 장애 및/또는 상태 (예를 들어, 암)에 걸리기 쉬운 개체는 하기 중 하나 이상을 특징으로 할 수 있다: (1) 질환, 장애 및/또는 상태의 발생과 연관된 유전자 돌연변이; (2) 질환, 장애 및/또는 상태의 발생과 연관된 유전자 다형성; (3) 질환, 장애 및/또는 상태와 연관된 단백질 및/또는 핵산의 증가 및/또는 감소된 발현 및/또는 활성; (4) 질환, 장애 및/또는 상태의 발생과 연관된 습관 및/또는 생활방식; (5) 질환, 장애 및/또는 상태의 가족력; 및 (6) 질환, 장애 및/또는 상태의 발생과 연관된 미생물에 대한 노출 및/또는 그에 의한 감염. 일부 실시양태에서, 질환, 장애 및/또는 상태에 걸리기 쉬운 개체는 질환, 장애 및/또는 상태가 발생할 것이다. 일부 실시양태에서, 질환, 장애 및/또는 상태에 걸리기 쉬운 개체는 질환, 장애 및/또는 상태가 발생하지 않을 것이다.
지속 방출: 본원에 사용된 용어 "지속 방출"은 특정 기간에 걸친 방출 속도에 따르는 제약 조성물 또는 화합물 방출 프로파일을 지칭한다.
합성: 용어 "합성"은 인간의 손에 의해 생산, 제조 및/또는 제작되는 것을 의미한다. 본 개시내용의 폴리뉴클레오티드 또는 폴리펩티드 또는 다른 분자의 합성은 화학적 또는 효소적일 수 있다.
표적화: 본원에 사용된 "표적화"는 표적 핵산에 혼성화하고 목적하는 효과를 유도할 핵산 서열의 설계 및 선택 과정을 의미한다.
표적화 세포: 본원에 사용된 "표적화 세포"는 어느 1종 이상의 관심 세포를 지칭한다. 세포는 시험관내, 생체내, 계내 또는 유기체의 조직 또는 기관에서 발견될 수 있다. 유기체는 동물, 바람직하게는 포유동물, 보다 바람직하게는 인간 및 가장 바람직하게는 환자일 수 있다.
치료제: 용어 "치료제"는 대상체에게 투여되는 경우에 치료, 진단 및/또는 예방 효과를 갖고/거나 목적하는 생물학적 및/또는 약리학적 효과를 도출하는 임의의 작용제를 지칭한다.
치료 유효량: 본원에 사용된 용어 "치료 유효량"은 감염, 질환, 장애 및/또는 상태, 예컨대 예를 들어 파킨슨병을 앓고 있거나 그에 걸리기 쉬운 대상체에게 투여되는 경우에, 감염, 질환, 장애 및/또는 상태를 치료하고/거나, 그의 증상을 개선시키고/거나, 그를 예방하고/거나, 그의 발병을 지연시키기에 충분한, 전달될 작용제 (예를 들어, 핵산, 약물, 치료제, 진단제, 예방제 등)의 양을 의미한다. 일부 실시양태에서, 치료 유효량은 단일 용량으로 제공된다. 일부 실시양태에서, 치료 유효량은 복수의 용량을 포함하는 투여 요법으로 투여된다. 관련 기술분야의 통상의 기술자는 일부 실시양태에서, 투여 요법의 일부로서 투여되는 경우에 효과적인 양을 포함한다면 단위 투여 형태는 특정한 작용제 또는 엔티티를 치료 유효량으로 포함하는 것으로 간주될 수 있다는 것을 이해할 것이다.
치료상 유효한 결과: 본원에 사용된 용어 "치료상 유효한 결과"는 감염, 질환, 장애 및/또는 상태를 앓고 있거나 그에 걸리기 쉬운 대상체에서 감염, 질환, 장애 및/또는 상태를 치료하고/거나, 그의 증상을 개선시키고/거나, 그를 예방하고/거나, 그의 발병을 지연시키기에 충분한 결과를 의미한다.
총 1일 용량: 본원에 사용된 "총 1일 용량"은 24시간 기간에 주어지거나 처방되는 양이다. 이는 단일 단위 용량 또는 분할 용량으로서 투여될 수 있다.
형질감염: 본원에 사용된 용어 "형질감염"은 외인성 핵산을 세포 내로 도입하는 방법을 지칭한다. 형질감염 방법은 화학적 방법, 물리적 처리 및 양이온성 지질 또는 혼합물을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
치료하는: 본원에 사용된 용어 "치료하는"은 특정한 감염, 질환, 장애, 및/또는 상태의 1종 이상의 증상 또는 특색을 부분적으로 또는 완전히 완화시키고/거나, 호전시키고/거나, 개선시키고/거나, 경감시키고/거나, 그의 발병을 지연시키고/거나, 그의 진행을 억제하고/거나, 그의 중증도를 감소시키고/거나, 그의 발생률을 감소시키는 것을 지칭한다. 예를 들어, 암을 "치료하는" 것은 종양의 생존, 성장, 및/또는 확산을 억제하는 것을 지칭할 수 있다. 치료는 질환, 장애 및/또는 상태, 예컨대 예를 들어 파킨슨병과 연관된 병리상태 발생의 위험을 감소시키기 위한 목적으로 질환, 장애 및/또는 상태의 징후를 나타내지 않는 대상체 및/또는 질환, 장애 및/또는 상태의 단지 초기 징후만을 나타내는 대상체에게 투여될 수 있다.
비변형: 본원에 사용된 "비변형"은 임의의 방식으로 변화되기 전의 임의의 물질, 화합물 또는 분자를 지칭한다. 비변형은 생체분자 또는 엔티티의 야생형 또는 천연 형태를 지칭할 수 있지만, 항상 그러한 것은 아니다. 분자 또는 엔티티는 일련의 변형을 겪을 수 있으며, 이에 의해 각각의 변형된 물질, 화합물, 분자 또는 엔티티는 후속 변형을 위한 "비변형" 출발 분자로서의 역할을 할 수 있다.
벡터: 본원에 사용된 "벡터"는 이종 분자를 수송, 형질도입하거나, 또는 달리 그의 운반체로서 작용하는 임의의 분자 또는 모이어티이다. 본 개시내용의 벡터는 재조합적으로 생산될 수 있고, 아데노-연관 바이러스 (AAV) 모 또는 참조 서열에 기초할 수 있고/거나 이를 포함할 수 있다. 이러한 모 또는 참조 AAV 서열은 벡터를 조작하기 위한 원래의, 제2, 제3 또는 후속 서열로서 작용할 수 있다. 비제한적 예에서, 이러한 모 또는 참조 AAV 서열은 하기 서열 중 어느 하나 이상을 포함할 수 있다: 폴리펩티드 또는 다중-폴리펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드 서열 (서열은 야생형이거나 야생형으로부터 변형될 수 있고, 서열은 단백질, 단백질 도메인, 또는 단백질의 하나 이상의 서브유닛의 전장 또는 부분 서열을 코딩할 수 있음); 조정 또는 조절 핵산을 포함하는 폴리뉴클레오티드 (서열은 야생형이거나 야생형으로부터 변형될 수 있음); 및 야생형 서열로부터 변형될 수 있거나 변형되지 않을 수 있는 트랜스진. 이들 AAV 서열은 1개 이상의 코돈 (핵산 수준) 또는 아미노산 (폴리펩티드 수준)의 "공여자" 서열 또는 1개 이상의 코돈 (핵산 수준) 또는 아미노산 (폴리펩티드 수준)의 "수용자" 서열로서의 역할을 할 수 있다.
바이러스 구축물 벡터: 본원에 사용된 "바이러스 구축물 벡터"는 Rep 및/또는 Cap 단백질을 코딩하거나 이를 포함하는 1개 이상의 폴리뉴클레오티드 영역을 포함하는 벡터이다.
바이러스 구축물 발현 벡터: 본원에 사용된 "바이러스 구축물 발현 벡터"는 바이러스 복제 세포에서 바이러스 발현을 위한 성분을 코딩하거나 포함하는 1개 이상의 폴리뉴클레오티드 영역을 추가로 포함하는, Rep 및/또는 Cap을 코딩하거나 포함하는 1개 이상의 폴리뉴클레오티드 영역을 포함하는 벡터이다.
바이러스 게놈: 본원에 사용된 "바이러스 게놈"은 적어도 1개의 역전된 말단 반복부 (ITR), 적어도 1개의 조절 서열, 및 적어도 1개의 페이로드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드이다. 바이러스 게놈은 페이로드 구축물 발현 벡터로부터 페이로드 구축물의 복제에 의해 유래된다. 바이러스 게놈은 페이로드 구축물의 적어도 1개의 카피를 코딩한다.
VII. 등가물 및 범주
관련 기술분야의 통상의 기술자는 상용을 넘는 실험을 사용하지 않으면서도 본원에 기재된 개시내용에 따른 구체적 실시양태에 대한 많은 등가물을 인식하거나 확인할 수 있을 것이다.
청구범위에서, 단수 용어는 달리 나타내지 않거나 또는 문맥으로부터 달리 명백하지 않는 한, 하나 또는 하나 초과를 의미할 수 있다. 군의 하나 이상의 구성원들 사이에 "또는"을 포함하는 청구범위 또는 설명은 달리 나타내지 않거나 또는 문맥으로부터 달리 명백하지 않는 한, 군 구성원 중 하나, 하나 초과, 또는 모두가 주어진 생성물 또는 방법에 존재하거나, 그에 사용되거나, 또는 달리 관련되는 경우에 충족된 것으로 간주된다. 개시내용은 군의 정확히 하나의 구성원이 주어진 생성물 또는 방법에 존재하거나, 그에 사용되거나, 또는 달리 관련되는 실시양태를 포함한다. 개시내용은, 군 구성원 중 하나 초과, 또는 모두가 주어진 생성물 또는 방법에 존재하거나, 그에 사용되거나, 또는 달리 관련되는 실시양태를 포함한다.
또한, 용어 "포함하는" 및 "포함한"은 개방형이도록 의도되며, 추가의 요소 또는 단계를 허용하지만 그를 요구하지는 않는다는 것을 주목한다. 용어 "포함하는"이 본원에 사용되는 경우에, 용어 "로 이루어진"은 그에 따라 또한 포괄되고 개시된다.
달리 정의되지 않는 한, 본원에 사용된 모든 기술 과학 용어는 본 개시내용이 속하는 기술분야의 통상의 기술자가 통상적으로 이해하는 것과 동일한 의미를 갖는다. 본 개시내용에서 사용하기 위한 방법 및 물질은 본원에 기재되어 있으며; 관련 기술분야에 공지된 다른 적합한 방법 및 물질이 또한 사용될 수 있다.
범위가 주어진 경우, 종점들이 포함된다 (범위가 종점 값들 "사이"인 것으로 언급된 개시내용 포함). 추가로, 달리 나타내지 않는 한 또는 달리 문맥 및 관련 기술분야의 통상의 기술자의 이해로부터 명백하지 않는 한, 범위로서 표현된 값은 개시내용의 상이한 실시양태에서 언급된 범위 내의 임의의 구체적 값 또는 하위범위를, 문맥이 달리 명백하게 지시하지 않는 한 범위의 하한치 단위의 1/10까지 가정할 수 있다.
추가로, 선행 기술에 포함되는 본 개시내용의 임의의 특정한 실시양태는 청구항 중 어느 한 항 이상으로부터 명백하게 배제될 수 있다는 것이 이해되어야 한다. 이러한 실시양태는 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 것으로 여겨지기 때문에, 배제가 본원에 명백하게 제시되지 않은 경우에도 배제될 수 있다. 개시내용의 조성물의 임의의 특정한 실시양태 (예를 들어, 임의의 핵산 또는 그에 의해 코딩되는 단백질; 임의의 제조 방법; 임의의 사용 방법 등)는 선행 기술의 존재와 관련되어 있든지 아니든지 간에, 임의의 이유로 어느 한 항 이상의 청구항으로부터 배제될 수 있다.
모든 인용된 공급원, 예를 들어 본원에 인용된 참고문헌, 공개문헌, 데이터베이스, 데이터베이스 엔트리 및 기술은 인용에서 명백하게 언급되지 않았을지라도 본 개시내용에 참조로 포함된다. 인용된 공급원 및 본 개시내용의 언급이 상충되는 경우에, 본 개시내용의 언급이 우선할 것이다.
섹션 및 표 제목은 제한되는 것으로 의도되지 않는다. 또한, 본원에 제시된 물질, 방법, 및 실시예는 단지 특정 실시양태를 예시하는 것이며, 제한하는 것으로 의도되지 않는다.
본 개시내용은 여러 기재된 실시양태와 관련하여 약간 길고 약간 상세하게 기재되었지만, 이는 임의의 이러한 상세사항 또는 실시양태 또는 임의의 특정한 실시양태로 제한되어야 하는 것으로 의도되지 않으며, 첨부된 청구범위를 참조하여 선행 기술을 고려하여 이러한 청구범위의 가능한 가장 넓은 해석을 제공하고, 따라서 개시내용의 의도된 범주를 효과적으로 포괄하도록 해석되어야 한다.
실시예
실시예 1. 페이로드의 설계: AADC 폴리뉴클레오티드
AADC 폴리뉴클레오티드는 AADC 단백질을 코딩하는 최소한의 핵산 서열을 포함하도록 설계된다.
설계되면, 서열을 조작 또는 합성하거나 또는 플라스미드 또는 벡터 내에 삽입하고, 세포 또는 유기체에 투여한다. 적합한 플라스미드 또는 벡터는 표적 세포를 형질도입 또는 형질감염시키는 임의의 것이다.
아데노-연관 바이러스 (AAV) 입자를 사용할 수 있다.
투여는 AADC 폴리뉴클레오티드가 프로세싱되어, 질환, 본 경우에는 파킨슨병의 병인을 변경시키는 AADC 단백질을 생성하게 한다.
하나의 비제한적 예에서, 개시내용의 AADC 폴리뉴클레오티드를 함유하는 플라스미드는 CMV 프로모터를 갖고, AADC를 코딩한다. 일부 실시양태에서, AADC 단백질 mRNA의 오픈 리딩 프레임은 코돈 최적화된다.
AAV 입자에 사용하기에 적합한 ITR에서 ITR로 나열된 AADC 폴리뉴클레오티드는 표 2의 것을 포함한다.
표 2. ITR에서 ITR로의 AADC 폴리뉴클레오티드
주어진 바와 같은 AADC 폴리뉴클레오티드의 다양한 영역의 개시 및 종결 위치는 표 2에 기재된 ITR에서 ITR로의 AADC 폴리뉴클레오티드에 관한 것이다. 표 3에서, ITR은 역전된 말단 반복부이고, MCS는 다중 클로닝 부위이고, CMV는 시토메갈로바이러스이고, Ie1은 극초기 1이고, hB글로빈은 인간 베타-글로빈이고, AADC는 AADC 폴리펩티드를 코딩하는 영역이고, 폴리(A)는 폴리아데닐화 신호이다.
표 3. AADC 폴리뉴클레오티드의 성분 영역
실시예 2. 파킨슨병을 치료하기 위한 AADC 폴리뉴클레오티드의 설계
AADC 폴리뉴클레오티드는 AADC 단백질을 코딩하는 최소한의 핵산 서열을 포함하도록 설계된다.
설계되면, 서열을 조작 또는 합성하거나 또는 플라스미드 또는 벡터 내에 삽입하고, 세포 또는 유기체에 투여한다. 적합한 플라스미드 또는 벡터는 표적 세포를 형질도입 또는 형질감염시키는 임의의 것이다.
아데노-연관 바이러스 (AAV) 입자를 사용할 수 있다.
투여는 AADC 폴리뉴클레오티드가 프로세싱되어, 질환, 본 경우에는 파킨슨병의 병인을 변경시키는 AADC 단백질을 생성하게 한다.
실시예 3. AAV 입자의 투여
AAV 입자는 관련 기술분야에 공지된 방법에 따라 치료에 적합한 것으로 확인된, 파킨슨병을 갖는 환자의 흑색질, 특히 흑색질 치밀부 (SNpc) 및 복측 피개 영역 (VTA)에 주입된다.
본원에 기재된 방법에서 사용하기 위해 고려되는 하나의 투여 방법은, 가도테리돌 (자기 공명 (MR) 조영제) 및 T1 또는 T2 자기 공명 영상화 (MRI)의 공동-주입에 의한 AAV 입자 조성물의 실시간 대류-증진 전달 (RCD)이며, 이는 이후 AADC 유전자 발현 구역을 예측할 수 있다. 문헌 [Richardson, et al., 2011]에 기재된 바와 같이, 캐뉼라 배치 및 초기 주입물 분포의 정확도는 염수 주입에 의해 추적제의 후속 분포를 유의하게 변경시키지 않으면서 안전하게 결정될 수 있다 (Richardson, et al., 2011, Neurosurgery, 69(1):154-163). T2 RCD는 손상되지 않은 뇌에서 실질내 대류-증진 전달의 검출을 제공하고, AAV 입자 주입 후 트랜스진의 후속 분포를 예측할 수 있다. 대상체는 염수 주입/T2 획득을 거치고, 즉시 가도테리돌 주입/피각 및 뇌간 내 T1 획득이 이어진다. 분포 부피 및 공간 패턴을 분석하였다. 가도테리돌 및 AAV-코딩 AADC는 시상에서 교대 T2/T1 획득 하에 공동-주입되고, 과다집중 구역은 후속 트랜스진 발현 구역과 비교된다. 분포 부피 대 주입 부피의 비는 염수와 가도테리돌 RCD 사이에서 유사할 것으로 예상된다. 공간 중첩은 T2 및 T1 영상 사이에서 잘 상관될 것이다. 제2 주입물은 제1의 것과 유사한 시공적 패턴을 따를 것이고, 표적-외 분포의 발생 전에 표적 구역을 채울 것이다. AADC 발현 구역은 RCD 동안 관찰된 T1 및 T2 과다집중 둘 다의 구역과 잘 상관될 것이다 (Richardson, et al., 2011, Neurosurgery, 69(1):154-163).
거대분자의 직접적인 뇌 실질 내로의 대류-증진 전달 (CED)은 20년 넘게 공지되어 왔다. CED는, 표적화된 구조 내에 직접 배치된 캐뉼라를 통해 용액을 주입함으로써 구동되는 뇌 실질 내에서의 벌크 흐름, 즉 간질액 내의 거대분자의 대류를 생성하기 위한 압력 구배의 사용을 나타내는 용어이다. 이러한 방법은 혈액 뇌 장벽을 우회하고 단순 확산을 능가함으로써 치료제가 큰 부피의 뇌 조직을 통해 균질하게 분포되도록 한다 (Richardson, et al., 2011, Stereotact. Funct. Neurosurg. 89:141-151).
살레지오(Salegio) 등은 최근 설치류 및 NHP의 CNS 내에서 미셀 (~15 nm 크기), AAV (~20-25 nm) 및 리포솜 (~65 nm)을 포함한 상이한 크기의 나노입자의 분포를 입증하였다 (Salegio et al., 2014, Frontiers in Neuroanatomy, vol. 8, article 9: pp. 1-8). 단순 주사는 혈관주위계와 결속될 수 없고, 특수 주입 캐뉼라가 요구되며, 이는 간질성 유체정역학적 압력이 초과되고 주입액이 조직 내로 유동될 수 있도록 캐뉼라의 팁에 일정한 압력을 가할 수 있다. 단순 바늘은 유의한 환류를 발생시키고; 따라서, 이러한 경향에 대응하도록 환류-저항성 캐뉼라가 개발되었다. MRI-안내 대류-증진 주입을 위한 플랫폼의 출현은 혈관주위 유동의 역학에 대한 이해를 추가로 정밀화하였고, 리포솜의 혈관주위 분포가 시간에 대해 선형이고, 곡선의 기울기가 수초화 영역에서 증가되고, 주입의 중지는 분포 부피의 추가의 팽창을 방지한다는 것을 입증하였다 (Richardson, et al., 2011, Stereotact. Funct. Neurosurg. 89:141-151; Salegio et al., 2014, Frontiers in Neuroanatomy, vol. 8, article 9: pp. 1-8).
실질내 rAAV 주사는 강건하지만 비교적 국부의 형질도입을 발생시키는 것으로 공지되어 있다. 이러한 국부 전달 방법은, 파킨슨병의 경우와 같이 특정 해부학적 영역 또는 해부학적 회로에 국재화된 신경병리상태로 인한 신경계 장애에 대한 유전자 요법을 시도할 때 유리하다. 그러나, 보다 널리 확산된 CNS 형질도입을 필요로 하는 치료에서, 실질내 주사는 비실용적이다. 대사 및/또는 단일-유전자 결함의 선천적 이상에 기인하는 신경계 장애, 또는 척수의 운동 뉴런에 영향을 미치는 신경계 장애의 치료는 각각 뇌 또는 척수의 큰 비율의 형질도입을 필요로 할 수 있다. 벡터를 위한 덜 침습적인 트랜스-BBB 전달 방법의 개발은 매우 중요한 시도이다. 다양한 능동 수송 메카니즘 (아마도 수용체-매개)과 상호작용하여 BBB를 가로질러 단백질을 수송하는 것으로 공지된 분자를 사용하기 위한 다수의 시도가 다양한 결과와 함께 보고되었다. 이용가능한 다수의 AAV 혈청형을 고려하면, 하나 이상의 혈청형은 BBB를 가로질러 AAV 캡시드를 수송할 수 있는 세포-진입 수용체에 결합할 수 있다 (Manfredsson, et al., 2009, "AAV9: a potential blood-brain barrier buster." Molecular Therapy 17(3):403-405).
벡터 및 정위 주입
정위 접근법은 AADC 폴리뉴클레오티드를 외과적으로 전달하는데 사용될 수 있다. AADC 결핍을 갖는 개체는 에피네프린 및 노르에피네프린이 결여되어 있지만, 이들 환자는 수술 동안 안정한 혈압 및 심박수를 유지해야 한다. 수술후 컴퓨터 단층촬영 (CT) 또는 MRI 스캔에서 현저한 뇌내 출혈이 존재해서는 안된다. MRI 스캔에 제시된 바와 같이, 바늘관은 흑색질 치밀부 (SNpc) 및 복측 피개 영역 (VTA) 내로의 정확한 주사를 제시하여야 한다. 환자는 수술 약 1주 후에 병원에서 퇴원할 것이다 (Hwu, W.L., et al., 2012. Gene therapy for aromatic L-amino acid decarboxylase deficiency. Sci. Transl. Med. Vol. 4, 134ra61).
치료 대상체는, 예를 들어 임의로, 임상 적용을 위해 특이적으로 설계된 (단계식 설계 포함) FDA-승인된 스마트플로우(SMARTFLOW)® 신경심실 캐뉼라 (서지비젼, 인크.(SurgiVision, Inc.))를 사용하여, 치료 신경외과의(들)가 뇌내 치료제의 전달을 표적화하고 관찰하는 것을 돕는 클리어포인트(CLEARPOINT)® 시스템의 보조 하에, 또는 그의 부재 하에, 양측 주입을 통해 흑색질 치밀부 (SNpc) 및 복측 피개 영역 (VTA)으로, 또는 대안적으로, 선조체내로 (미상핵 및 피각 내로), 또는 시상하핵 (STN) 내로 안전하게 전달된 AAV-벡터 조성물 벡터를 제공받는다 (예를 들어, 문헌 [San Sebastian, et al., 2014, Mol. Ther. Methods Clin. Dev. 3: 14049] 참조; 예를 들어, 문헌 [Feng and Maguire-Zeiss, 2010, CNS Drugs 24(3):177-192] 참조).
예를 들어, 수술 동안, 배외측 방향에서 서로 충분히 분리되어 있고 자기 공명 영상에서 확인되는 흑색질 치밀부 (SNpc) 및 복측 피개 영역 (VTA) 내의 2개의 표적 지점을 결정한다. 두개골의 각 측면에 1개의 천두공을 천공하고, 2-트랙 삽입 경로를 통해 2개의 표적 지점 내로 벡터를 주입한다. AAV-벡터-함유 용액을 1.5 x 1012개 벡터 게놈/ml의 농도로 제조하고, 지점당 50 μL의 용액을 1 μL/분으로 주입하고; 각각의 환자에게 AAV-벡터 구축물의 3 x 1011개 벡터 게놈을 제공한다.
AAV2에 대한 중화 항체 역가는, 혈청의 다양한 희석액에서 β-갈락토시다제를 발현하는 AAV2 벡터의 5 x 103개 벡터 게놈/세포로 형질도입된 HEK293 세포에서 β-갈락토시다제의 활성을 측정함으로써 결정한다.
PET
흑색질에서의 AADC 발현 수준은 수술 6일 전 및 유전자 전달 1- 및 6-개월 후에 FMT를 사용한 PET 영상화로 평가된다. 모든 환자는 PET 18시간 전에 도파민성 의약 복용을 중지하고, FMT 주사 1시간 전에 2.5mg/kg 카르비도파를 경구로 복용한다. 이어서, 염수 중 0.12mCi/kg의 FMT를 전주 정맥 내로 주입하고, 90-분 동적 획득 순서를 수득한다. PET 및 자기 공명 영상화 데이터를 융합 프로세싱 프로그램 (신테그라(Syntegra); 필립스(Philips), 네덜란드 암스테르담)을 사용하여 공동-기록하여 융합 영상을 생성한다. 흑질선조체 경로에서 채취된 관심 부피 내의 방사능을 추적자 주사 후 80 내지 90분 사이에 계산한다. 기준선으로부터 24주까지의 흑질선조체 경로 FMT 흡수에서의 변화를 방사능의 흑색질 대 선조체 비를 사용하여 평가한다.
통계적 분석
기준선에서의 값 및 유전자 전달 6개월 후에서의 값을 스튜던트 t-검정 (대응표본 분석)을 사용하여 비교한다. 양측 P 값 <0.05를 유의한 차이를 나타내는 것으로 한다. 레보도파에 대한 단기간 반응에 이원 분산 분석 및 P 값의 본페로니 보정을 사용하였다 (예를 들어, 문헌 [Muramatsu, et al., 2010, "A phase I study of aromatic L-amino acid decarboxylase gene therapy for Parkinson's disease." Mol. Ther. 18:1731-1735] 참조).
파킨슨병 대상체의 뇌 내로의 실시간 영상-안내 주입을 사용한 AAV-벡터 조성물의 양측 투여의 안전성 및 내약성을 수술 후 최대 9개월 동안 또는 그 후에 모니터링할 수 있다. 표적화된 구역 (흑색질 치밀부 (SNpc) 및 복측 피개 영역 (VTA))의 넓은 커버리지 및 선조체에서의 광범위한 AADC 단백질 분포가 어떠한 유해 효과를 유도하지 않으면서 달성되어야 한다.
성장 및 운동 기능에서의 변화
환자는 유전자 전달 후, 치료 후 1년 내에 체중이 증가해야 하고, 그의 운동 스코어에서 개선을 나타내어야 한다. 체중은 유전자 전달 후 3 내지 6개월째에 측정될 것이다. 모든 환자는 초기에 알버타 영아 운동 척도(Alberta Infant Motor Scale) (AIMS)에서 원점수 0 및 피바디 발달 운동 척도(Peabody Developmental Motor Scale), 2판 (PDMS-II)에서 매우 낮은 원점수를 가질 것이다. 유전자 전달 후에, 모든 환자는 이들 2가지의 척도에서 그의 원점수의 계속적인 증가를 나타낼 것이고, 이는 그의 운동 기능이 개선되었음을 나타낸다. 영유아에 대한 포괄적 발달 검사(Comprehensive Developmental Inventory for Infants and Toddlers) (CDIIT)는 인지 및 운동 발달 둘 다를 포괄한다. 모든 환자는 유전자 전달 전에 낮은 CDIIT 원점수를 나타낼 것이고, 후속적인 스코어의 증가는 운동 및 인지 기능 둘 다에서의 개선을 입증한다.
유전자 전달 후의 주관적 개선
정량화하기가 보다 어려운 증상을 문서화하기 위해, 환자의 배우자, 후견인 또는 보호자에게 연구 종료시에 설문지를 채우도록 요청하였다. 안구운동 발작 증상은 완화될 것이고, 예를 들어 안구 치우침 및 수면 붕괴는 유전자 요법 후에 남아있을 수 있는 안구운동 발작의 일부 경도 증상이다. 대상체는 증가된 정서적 안정성, 및/또는 발한 및 고체온 (고온의 날씨에서의 체온 불안정성의 흔한 징후)에서 약간의 개선을 경험할 수 있다. 유전자 전달 전 또는 후 24-시간 홀터 모니터링에 의해 평가되는 바와 같이, 심박수 변동성에서 어떠한 검출가능한 이상도 없을 것이다. 유전자 요법 전에, 일어나지 못하고 자발적인 움직임을 거의 나타내지 않는 환자는 유전자 전달의 1 내지 2주 후에 덜 중증의 안검하수증 (상안검의 처짐)을 나타낼 수 있다. 이전의 연구에 따르면, 이상운동증이 유전자 전달 1개월 후에 일어날 수 있지만, 이상운동증의 감소가 관찰되면, 운동 발달이 시작될 것이다 (Hwu, W.L., et al., 2012. Gene therapy for aromatic L-amino acid decarboxylase deficiency. Sci. Transl. Med. Vol. 4, 134ra61). 대상체는 예를 들어 유전자 전달 3개월 후에 증가된 머리 제어, 6 내지 9개월 후에 지지체를 사용한 앉기, 13개월 후에 엎드린 자세로부터 앉기, 및 16개월 후에 장난감 잡기 및 지지체를 사용한 서기를 나타낼 수 있다. 항-AAV2 항체는 유전자 요법 전에 환자에서 음성일 것이고, 역가는 유전자 전달 후 약간 증가할 수 있다.
PET 스캔 및 CSF 분석
PET 스캔 및 CSF 분석을 치료된 환자에 대해 완료한다. 유전자 전달 6개월 후, PET 스캔은 6-[18F] 플루오로도파 (F도파)의 흡수가 조합 (우측 및 좌측) 치료 부위에서 기준선으로부터 증가한다는 것을 나타낼 것이다. CSF 분석은 호모바닐린산 (HVA, 도파민의 대사물) 및 5-히드록시인돌아세트산 (HIAA, 세로토닌의 대사물)의 수준의 증가를 나타낼 것이다. 그러나, L-도파 및 3-O-메틸도파의 수준은 상승되어 유지될 수 있다 (Hwu, W.L., et al., 2012. Gene therapy for aromatic L-amino acid decarboxylase deficiency. Sci. Transl. Med. Vol. 4, 134ra61).
실시예 4. AADC 폴리뉴클레오티드의 투여
AAV 입자 조성물은 실시예 3에 기재된 투여 방법을 사용하여 파킨슨병을 앓는 환자의 피각 내로 주입된다. 용량, 환자의 수 및 부피를 표 4에 요약한다.
표 4. 연구 설계
연구 과정 동안, 파킨슨병으로 진단된 인간 환자에서 AADC 폴리뉴클레오티드 (서열식별번호: 979)-함유 재조합 아데노-연관 바이러스 (AAV) 벡터 조성물의 주입의 안전성 및 내약성을 평가한다. 글로벌 이상긴장증 척도 (GDS) (문헌 [Comella, et al., 2003, Movement Disorders, 18(3):303-312] 참조), L-도파 챌린지 시험, UPDRS 스코어, 운동 상태 일지, 및 실험실 시험을 포함한 다중 측정을 사용하여, 환자를 수술전 및 수술후 매월 6개월 동안 평가한다. 하루를 절반-시간 분절로 나눈 일지를 사용하여, 환자 보호자는 입원 전 4일 동안 및 입원 후 6개월째에 추가의 4일 동안 그의 이동성을 연구 사이트에 기록할 것이다. 환자 보호자는 환자의 상태를 수면, 부동, 문제되는 이상운동증이 없는 이동, 또는 문제되는 이상운동증이 있는 이동으로 평가하도록 훈련받는다. 이들 카테고리 각각에서 소비된 총 시간을 계산하고, 기준선 및 6-개월 스코어 사이의 차이를 군들 사이에서 비교한다. 레보도파에 대한 단기간 반응을 기준선 및 유전자 전달 6개월 후에 평가하고; 대상체에게 도파민성 의약의 부재 하에서의 20시간 후에 25mg 벤세라지드와 함께 경구로 100 mg의 레보도파를 투여한다. GDS 및 혈장 레보도파 농도에 기초한 운동 증상을 기준선, 및 레보도파 복용 30분, 1, 2, 3 및 4시간 후에 평가한다 (예를 들어, 문헌 [Muramatsu, et al., 2010, "A phase I study of aromatic L-amino acid decarboxylase gene therapy for Parkinson's disease." Mol. Ther. 18:1731-1735] 참조).
실시예 5. 파킨슨병에 대한 AAV2-hAADC의 높은 투여량의 투여
진행성 파킨슨병 및 장애초래 운동 변동을 갖는 15명의 환자에게 AAV2-hAADC (AAV2 혈청형 캡시드 내에 서열식별번호: 979를 포함하는 벡터 게놈)의 단일 투여를 투여하였다. 본 연구의 목적은 AAV2-hAADC의 안전성 및 내약성의 결정 및 준최적 레보도파 반응을 갖는 파킨슨병 환자에서 피각에 전달되는 AAV2-hAADC의 상승 용량 수준의 분포를 시험하는 것을 포함하였다.
AAV2-hAADC는 실시예 1에 기재된 바와 같이 시토메갈로바이러스 극초기 프로모터의 제어 하에 인간 AADC 유전자의 상보적 데옥시리보핵산을 보유하는 재조합 AAV2로 구성된다. 연구 약물을 0.001% 플루론산 (F-68)을 갖는 포스페이트 완충 염수의 멸균 제제로, 4.9 x 1012개 vg/mL의 초기 농도 (최종 투여량 농도로의 희석을 위한 부형제 함유)의 0.5 mL 분취물로 제공하였다.
환자군은 파킨슨병을 갖고 치료에 적격인 것으로 확인된 환자로 구성되었다. 연구 참여에 대한 적격성을 결정하는 기준은 하기를 포함하였다: 영어가 유창한 40 내지 70세 (포함)의 남성 및 여성; 운동완만, 강직, 및/또는 안정시 진전을 갖는 특발성 PD로 진단된 자. 도파민성 의약에 대한 강건한 반응, 반응성을 보장하기 위한 레보도파 요법의 충분한 지속기간, 및 비정형 파킨슨증을 시사하는 징후의 부재; ≥5년의 질환 지속기간; 오프 상태에서 적어도 2.5의 변형된 혼 앤 야 병기결정; 최적 항파킨슨병 의약 요법에도 불구하고, 통합 파킨슨병 등급화 척도 (UPDRS), 파트 IV B 스코어 3 (최소) - 7 (최대)에 의해 규정되는 바와 같은, 장애초래 운동 합병증으로 인한 외과적 개입 후보; 및 참여자에 따른 스크리닝 방문의 7일 내의 각성 시간 동안 1일에 ≥2 누적 시간의 오프 시간; 임상적으로 규정된 오프 상태에서 ≥ 25 및 최대 60의 UPDRS 파트 III (총 운동) 스코어; 파킨슨병 의약의 밤샘 중단 후에 결정된 바와 같은, 온 및 오프 상태 사이에 UPDRS III (운동 스코어)의 30% 이상의 개선을 포함한 도파민성 요법에 대한 명백한 반응성; 스크리닝 검사 전 적어도 4주 동안 파킨슨병 의약의 안정한 요법; 스크리닝 검사 전 적어도 4주 동안 안정한 파킨슨병 특색 및 증상; 하기와 같은 수술 전 실험실 값: 혈소판 >100 x 109/L (수혈 비의존), 정상 범위 및 국제 정규화 비 (INR) ≤1.3 내의 프로트롬빈 시간 (PT)/부분 트롬보플라스틴 시간 (PTT), 절대 호중구 수 >1.5 x 109/L, 헤모글로빈 >10.0 g/dL, 아스파르테이트 아미노트랜스퍼라제 또는 알라닌 아미노트랜스퍼라제 <2.5 x 정상의 상한치, 총 빌리루빈 <2.5 mg/dL, 혈청 크레아티닌 ≤1.5 mg/dL, 중화 아데노-연관 바이러스, 혈청형 2 (AAV2) 항체 역가 ≤1:1200, 적혈구용적률 >34%; 백혈구 계수 <12 x 109/L, 및 추정 사구체 여과 속도 ≥30 mL/분의 문서.
하기 기준 중 임의의 것을 충족시키는 성인은 연구 진입에 적격이지 않다: 외상, 뇌 종양, 감염, 뇌혈관 질환, 다른 신경계 질환, 또는 약물, 화학물질, 또는 독소로 인한 것으로 여겨지는 증상을 포함하나 이에 제한되지는 않는 비정형 또는 속발성 파킨슨증; 스크리닝 시 130 미만의 매티스(Mattis) 치매 등급화 척도 -제2판 (MDRS-2) 스코어에 의해 규정되는 바와 같은 치매의 존재; 정신병의 존재 또는 병력, 파킨슨병 의약과 관련이 있는 것으로 여겨지는 경도, 양성 환각은 제외; 스크리닝 검사 5년 내 베크 우울증 검사 II (BDI-II) >28에 의해 측정된 바와 같은 중증 우울증의 존재 또는 주요 정동 장애의 이력; 스크리닝 검사 5년 내 적극적 자살 관념 (콜럼비아-자살 중증도 등급화 척도 (C-SSRS) 유형 4 또는 5) 또는 자살 시도; 스크리닝 검사 2년 내 물질 남용의 이력; 수술 위험성을 실질적으로 증가시킬 선조체 또는 다른 영역의 뇌 영상화 이상; 자기 공명 영상화 (MRI) 및/또는 가돌리늄 (예를 들어, 프로한세 (가도테리돌))에 대한 금기; 응고병증 또는 수술기주위 기간 동안 적어도 2주 동안 임의의 항응고 또는 항혈소판 요법을 일시적으로 정지시키지 못함; 병변형성 절차, 심부 뇌 자극, 주입 요법 또는 연구 절차를 복잡하게 하고/거나 연구 평가에 부정적인 영향을 미칠 수 있는 임의의 다른 선행 뇌 수술을 포함한 선행 정위 뇌 수술; 참여자 인터뷰로부터 결정된 바와 같은 선행 유전자 전달; 졸중, 불량하게 제어되거나 유의한 심혈관 질환, 당뇨병 또는 연구 절차의 위험을 비합리적으로 증가시킬 임의의 다른 급성 또는 만성 의학적 상태의 병력; 스크리닝 평가 3년 내의, 치료받은 상피내 암종 이외의 악성종양의 병력; 스크리닝 시간 또는 기준선 평가 시 또는 수술 직전에 임상적으로 분명하거나 실험실-검출된 감염 (급성 또는 만성 두피 감염 포함); 스크리닝 평가 2개월 내의 임의의 임상시험용 작용제에 의한 선행 또는 현행 치료; 하우저 일지의 완결을 포함하여 프로토콜 절차의 준수 불능; 만성 스테로이드, 면역요법, 세포독성 요법, 및 화학요법을 포함한 만성 면역억제 요법; 연구 절차의 위험을 실질적으로 증가시킬 신체 검사 또는 실험실 조사에서의 임의의 심각한 의학적 상태 또는 비정상적 소견; 연구 과정 동안 장애로 이어질 수 있고 연구 평가를 방해하거나 혼동시킬 수 있는 임의의 의학적 상태 (정형외과적 상태, 척수 장애, 신경병증, 척수병증, 중증 폐 또는 심장 질환, 인지 저하, 및 영양 상태 손상을 포함하나 이에 제한되지는 않음); 임신 및 젖분비 여성; 수술 후 6개월, 및 각각의 정맥내 (IV) 레보도파 주입 후 2개월 동안 장벽 피임의 사용 의향이 없는 생식 능력을 갖는 남성 또는 여성; 수술 30일 내에 임의의 백신접종을 받을 것이 계획된 참여자; 지리적 접근불가능을 포함하여, 참여자가 연구 프로토콜을 따르지 못하게 할 수 있는 임의의 의학적 또는 사회적 인자; 신경이완제 의약, 아포모르핀, 또는 레보도파 주입 요법 (듀오파(Duopa)®)을 포함하여, 연구 결과의 해석을 방해할 수 있는 진행 중인 치료; 수술 후 12개월 내에 임의의 다른 치료적 개입 연구에 참여할 참여자 계획.
파킨슨병 집단의 진행 병기를 대표하도록 3개의 환자군을 어셈블리하였다. 군 1, 군 2 및 군 3에 대한 기준선 특징을 표 5에 제시한다 (전체 환자군에 대한 평균 값).
표 5. 군 1-3에 대한 기준선 특징
모든 참여자는 제0일에 AAV2-hAADC 벡터의 다중-궤적 투여를 제공받았다. 머리 고정 및 다중채널 플렉스 코일을 사용하여, 앙와위 또는 복와위 자세의 참여자에게 투여를 완료하였다. 중재적 MRI를 사용하여 두개내 주입 절차를 실시간으로 모니터링하여 AAV2-hAADC의 표적화된 전달을 달성하였다. 뇌 내 주입의 MRI 시각화를 증진시키기 위해, 투여 직전에 소량의 가도테리돌 (1-2 mM)을 AAV2-hAADC 투여 용액에 첨가하였다. AAV2-hAADC 벡터를 경전두 (머리의 위)로 피각 내로 (1회 후방 주사 및 1회 전방 주사) 단일 외과적 설정으로 전달하였다. 전달은 클리어포인트® 신경-탐색 시스템을 갖춘 두개골 장착 스마트프레임스(SmartFrames)® (MRI 인터벤션즈, 인크.(MRI Interventions, Inc.), 캘리포니아주 어바인)를 사용하여 안내되는, 메드퓨전 3500(Medfusion 3500) 주입 펌프에 연결된 단계식 스마트플로우™ 신경-심실 주사 및 흡인 캐뉼라를 통해 완료하였다. 표적 내의 벡터의 분포를 최대화하기 위해 스태킹 전달 및 증가식 주입 속도 (1-30 μL/분)로 대류-증진 전달 (CED)을 사용하였다. 모든 참여자는 주입된 총 부피와 관계 없이 연구에 남아있었다. 의도된 용량 미만의 AAV2-hAADC를 제공받은 참여자의 존재 및 부재 하에 데이터를 분석하였다. 환자를 수술 후에 입원환자 기준으로 최소 밤새 관찰하였다.
각각의 환자군에 대한 농도 및 투여량 수준을 표 6에 요약한다.
표 6. 군 1-3 투여량 수준
환자를 상승 용량 수준의 AAV2-hAADC로 치료하였고; 군 1에는 가장 낮은 총량을 투여하였고, 군 3에는 가장 높은 총량의 벡터 게놈을 투여하였다. AAV2-hAADC는 벡터-관련 심각한 유해 사건 없이 잘 허용되었다. 피각에서의 벡터 분포의 결정, AADC 발현 및 활성의 측정, 파킨슨병 의약 (레보도파 등가 용량)의 변화, 환자-보고 일지, 및 삶의 질 설문지를 포함한 다양한 방법에 의해 치료의 결과를 평가하였다.
AAV2-hAADC에 가도테리돌을 공동-주입하여 벡터의 분포가 가시화되도록 하였다. 대류-증진 전달 절차 동안 획득한 MR 영상 (T1W MR; MP-RAGE; 3분 획득 시간)으로 피각 커버리지를 측정하였다. 가도테리돌 분포의 총 부피, 가도테리돌에 의해 커버된 피각의 백분율, 및 피각 내에 함유된 가도테리돌 분포의 백분율을 계산하였다 (아이플란 플로우(iPlan Flow) 소프트웨어; 브라인랍 아게(Brainlab AG), 독일 뮌헨). 도 2는 군 1이 가장 낮은 백분율의 커버리지를 갖고, 피각의 20.7%가 벡터에 의해 커버됨을 보여준다. 보다 높은 부피 투여는 피각을 더 많이 커버하였고, 군 2는 평균 33.5% 피각 커버리지, 및 군 3은 평균 42.3% 피각 커버리지를 가졌다.
피각에서의 AADC 발현 및 활성의 평가는 레보도파를 도파민으로 전환시키는 능력을 반영하는 [18F] 플루오로-L-디히드록시페닐알라닌 (또는 18F-도파)을 사용하는 양전자 방출 단층촬영 (PET)을 사용하여 결정하였다. 스캔은 주입 전 (기준선) 및 주입 약 6개월 후에 획득하였다. 18F-도파 투여 60-90분 전에 카르비도파, 2.5 mg/kg (최대 용량 200 mg)을 경구로 섭취하였다. 18F-도파 (~3 mCi)를 전주 정맥에 볼루스로서 주사하였다. 18F-도파 투여의 65-75분 후에 포획한 획득 프레임을 분석하였다. 데이터 분석으로 피각-대-후두-피질-표준화된-흡수-값-비를 산출하고, 결과를 기준선으로부터의 백분율 변화로서 표현하였다. (도 3) 모든 환자군은 6개월째에 AADC 효소 활성의 증가를 경험하였다 (도 4). 군 1은 AADC 효소 활성의 13.2% 증가를 경험한 한편, 군 2 및 군 3은 각각 56.1% 및 79.3% 증가를 경험하였다. 18F-도파 신호에서의 군 관련 증가는 AAV2-hAADC (가도테리돌) 커버리지와 상관되었고 (r=0.84, p=0.0002), 이는 피각의 해부학적 커버리지가 AADC 활성의 관찰된 증가와 상관된다는 것을 시사한다.
시험 동안, 모든 환자군의 환자는 중증 이상운동증에 대응하여 최적 운동 제어를 달성하기 위한 그의 경구 레보도파 및 관련 의약의 1일 용량, 또는 레보도파 등가 용량 (LED)을 감소시킬 수 있었다 (도 4 및 도 5). 이들 변화를 표 7에 요약한다 (전체 환자군에 대한 평균 값).
군 1의 환자는 그의 파킨슨병 LED가 기준선으로부터 6개월에 평균 15%, 12개월에 10%, 및 18개월에 12%만큼 감소되었다. 군 2는 그의 파킨슨병 LED가 6개월 및 12개월에 33%, 18개월에 24.5%, 및 24개월에 21.2%만큼 감소되었다. 군 3은 그의 파킨슨병 LED가 6개월에 42%, 12개월에 39.5%, 및 18개월에 42.5%만큼 감소되었다. 백분율 계산은 개별 기준선에 대한 개별 환자 변화의 평균을 기초로 하였다.
표 7. 환자군별 레보도파 등가 용량 (LED)의 기준선으로부터의 변화
기준선 (BL) LED는 환자군에 걸쳐 유사하였다. 모든 환자를 모든 시점에 카르비도파/레보도파 (C/L)로 치료하였다. BL에서, 환자는 도파민 효능제, 아만타딘, 모노아민 옥시다제 B (MAO-B) 억제제, 및 카테콜-O-메틸 트랜스퍼라제 (COMT) 억제제를 포함한 추가의 0 (n=2), 1 (n=5), 2 (n=6), 또는 3 (n=2)종의 항파킨슨병 의약을 복용하고 있었다. AAV2-hAADC 투여 6개월 후에, 9명의 환자는 동일한 의약 조합을 제공받고 있었다. 항파킨슨병 의약의 조합에서 의약이 변화된 나머지 6명의 환자에서 (각각의 환자군에서 2명), 2명은 아만타딘을 단독으로 부가하고, 1명은 DA 효능제를 제거하고, 1명은 COMT 억제제를 제거하고, 1명은 아만타딘 및 MAO-B 억제제를 제거하고, 1명은 DA 효능제를 제거하고, 아만타딘 및 MAO-B 억제제를 부가하였다. 12개월째에 1명의 환자에 아만타딘 및 MAO-B 억제제를 재부가하고, 6개월째 변화가 없는 1명에서 MAO-B 억제제를 제거하였다. 모든 다른 환자는 의약의 안정한 조합을 유지하였다. 12개월째에 LED의 백분율 변화는 의약 조합에서 변화가 없는 환자에서 -24%였고, 조합이 변화된 환자에서 -33%였다. LED에서의 전체 변화는 12개월째의 의약에 대한 UPDRS III과 유의하게 상관되었다 (r=0.695, p=0.004). 벡터-관련 심각한 유해 사건 (SAE)은 보고되지 않았다.
대상체를 기준선 및 AAV2-hAADC 주입 3, 6, 12, 24, 및 36개월 후에 임상적으로 평가하였다. 대상체에 대해 연속 2일 또는 3일 동안 하우저 운동 일지를 완료하였다. 통합 파킨슨병 등급화 척도 (UPDRS)를 기준선 및 추적 방문에서, 기능적으로 규정된 오프-상태에서, 도파민성 의약(들)의 마지막 용량의 12시간 이상 후에, 및 완전 온-상태 (제1 오전 용량의 1시간 후에 환자 및 조사자에 의해 판단되는 바와 같음)에서 측정하였다. 대상체 및 조사자에 의해 판단된 바와 같이 대상체가 완전히 "온" 상태가 아닌 경우에, 추가의 1/2 내지 1개 카르비도파/레보도파 25/100 정제를 투여하였다.
환자에 대해 1일 온-시간 및 오프-시간을 일지에 기록하였다. 환자의 온-시간 동안, 그의 의약은 환자에게 작용하는 것으로 간주되었고, 환자는 항상 우수하게 제어되는 것은 아니지만 움직임을 가졌다. 오프-시간 동안, 환자의 의약은 환자에게 잘 작용하지 않는 것으로 간주되었고, 환자는 경직, 완전 동결, 또는 불수의 떨림의 느낌을 경험하였다. 이상운동증은 환자의 팔, 다리, 몸통, 또는 전신에 영향을 미칠 수 있고, 제어되지 않는 갑작스러운 움직임과 같이 느껴지고 나타난다. 이상운동증은 온-시간의 기간 동안 발생할 수 있기 때문에, 환자를 그의 일지상 문제되는 이상운동증이 있는 온-시간, 비-문제되는 이상운동증이 있는 온-시간, 및 이상운동증이 없는 온-시간으로 구별하였다.
AAV2-hAADC를 사용한 치료는 일지 기록된 오프-시간 및 문제되는 이상운동증이 있는 일지 기록된 온-시간 둘 다의 개선을 생성하였다. 치료는 또한 일지-보고된 "우수 온-시간" (이상운동증이 없는 일지 기록된 온-시간 및 비-문제되는 이상운동증이 있는 일지 기록된 온-시간을 합한 것인, 문제되는 이상운동증이 없는 온-시간)의 주목할 만한 증가를 발생시켰다. 이들 결과를 표 8에 요약한다.
기준선에서, 평균 우수 온 시간은 10.5시간이었고 평균 오프 시간은 4.6시간이었다. 기준선에서 파킨슨병 의약의 평균 양은 1일에 1,526 mg의 경구 레보도파 당량이었다.
AAV2-hAADC의 투여 후, 군 1-3의 환자는 그의 일지-보고된 우수 온-시간 (문제되는 이상운동증이 없는 온-시간)에서 꾸준한 증가를 경험하였다 (도 6). 군 1은 투여-후 12개월에 기록된 기준선 대비 평균 1.6-시간 (15%) 개선, 24개월에 2.3-시간 (22%) 개선, 및 36개월에 2.0-시간 (19%) 개선을 경험하였다. 군 2는 6개월에 2.2-시간 (20.5%) 개선, 12개월에 3.2-시간 (30%) 개선, 18개월에 3.5-시간 (33%) 개선, 및 24개월에 2.7-시간 (25%) 개선을 경험하였다. 군 3은 6개월 및 12개월에 1.5-시간 (14.5%) 개선, 및 18개월에 1.8-시간 (17.5%) 개선을 경험하였다.
2개의 가장 높은-용량 환자군 (군 2 및 3, n=10)으로부터의 결과가 유리하였다. 기준선에서, 평균 우수 온-시간은 10.5시간이었고, 평균 오프 시간은 4.5시간이었다. 군 2 및 3은 6개월에 우수 온-시간에서 1.85-시간 (17.5%) 개선, 12개월에 2.4-시간 (22%) 개선, 및 18개월에 2.7-시간 (25%) 개선을 경험하였다. 군 2 및 3으로부터의 7명 환자의 보다 작은 군 (기준선에서의 이상운동증의 중증도 및 최소 오프 시간에 의해 제한됨)은 10.1시간의 평균 기준선 우수 온-시간을 가졌고, 6개월에 1.7-시간 (17%) 개선, 12개월에 2.8-시간 (27%) 개선 및 18개월에 2.5-시간 (24.5%) 개선을 가졌다.
일지-오프 시간과 관련하여, 군 1은 36개월에 일지-오프 시간에서 기준선으로부터 1.7-시간 (35%) 감소를 가졌다. 군 2는 18개월에 일지-오프 시간에서 기준선으로부터 2.7-시간 (64%) 감소, 및 24개월에 2.2-시간 (52%) 감소를 가졌다. 군 3은 12개월에 일지-오프 시간에서 기준선으로부터 0.6-시간 (13%) 감소, 및 18개월에 일지-오프 시간에서 기준선으로부터 1.4-시간 (30%) 감소를 가졌다. 2개의 가장 높은-용량 환자군 (군 2 및 3, n=10)으로부터의 결과는 4.5시간의 평균 기준선 오프-시간으로부터 6개월에 1.2-시간 (27%)의 오프-시간의 감소, 12개월에 1.4-시간 (31.5%) 감소, 및 18개월에 2.0시간 (46%) 감소를 포함하였다.
2개의 가장 높은-용량 환자군 (군 2 및 3, n=10)으로부터의 결과는 합산된 일지-오프 시간 및 문제되는 이상운동증이 있는 온-시간과 관련하여 유리하였다. 기준선에서, 평균 합산된 일지-오프 시간 및 문제되는 이상운동증이 있는 온-시간은 5.5시간이었다. 군 2 및 3은 6개월에 1.9-시간 (35%) 감소, 12개월에 2.4-시간 (46%) 감소 및 18개월에 2.6-시간 (47%) 감소를 경험하였다. 군 2 및 3으로부터의 7명의 환자의 보다 작은 군 (기준선에서 이상운동증의 중증도 및 최소 오프 시간에 의해 제한됨)은 평균 기준선 5.9시간을 가졌고, 6개월에 1.7-시간 (29%) 감소, 12개월에 2.8-시간 (46%) 감소 및 18개월에 2.5-시간 (39%) 감소를 가졌다.
백분율 계산은 개별 기준선에 대한 개별 환자 변화의 평균을 기초로 하였다.
표 8: 16-시간 각성일당 일지 기록된 온- 및 오프-시간
환자 운동 반응을 기준선에서 및 6개월마다 통합 파킨슨병 등급화 척도 (UPDRS) 파트 II (일상 생활 경험의 운동 측면) 및 UPDRS 파트 III (운동 검사)에 의해 임상적으로 평가하였다 (도 7 및 도 8).
UPDRS II의 경우, 평균±SE UPDRS II 오프 의약 스코어는 12개월째에 군 2에서 3.4±1.2점만큼 및 군 3에서 4.4±1.4점만큼 감소하였다.
"온" 의약 상태에서의 UPDRS III 스코어와 관련하여 (도 7), 기준선 값은 하기와 같았다: 군 1 (7.6), 군 2 (17.0), 및 군 3 (16.0). 군 1의 경우, UPDRS III 온 스코어는 기준선으로부터 6개월에 1.6, 12개월에 1.8, 24개월에 0.4, 및 36개월에 0.8만큼 증가하였다. 군 2의 경우, UPDRS III 온 스코어는 기준선으로부터 6개월 및 12개월에 9.6, 및 24개월에 12.0만큼 개선되었다 (감소되었다). 군 3의 경우, UPDRS III 온 스코어는 기준선으로부터 6개월에 8.6, 및 12개월에 6.8만큼 개선되었다 (감소되었다).
"오프" 의약 상태에서의 UPDRS III 스코어와 관련하여 (도 8), 기준선 값은 하기와 같았다: 군 1 (37.2), 군 2 (35.8), 및 군 3 (38.2). 군 1의 경우, UPDRS III 오프 스코어는 기준선으로부터 6개월에 15.6, 12개월에 16.4, 24개월에 15.6, 및 36개월에 17.3만큼 (이상치 결과를 제외할 때 36개월에서의 값은 19.0이었음) 개선되었다 (감소되었다). 군 2의 경우, UPDRS III 오프 스코어는 기준선으로부터 6개월에 17.8, 12개월에 17.0, 및 24개월에 14.4만큼 개선되었다 (감소되었다). 군 3의 경우, UPDRS III 온 스코어는 기준선으로부터 6개월에 13.6 및 12개월에 12.0만큼 개선되었다 (감소되었다). 2개의 최고 용량 환자군 (군 2 및 3, n=10)의 경우 평균 기준선 값은 37.0이었고, 스코어는 기준선으로부터 6개월에 15.7 및 12개월에 14.5만큼 개선되었다 (감소되었다). 군 2 및 3으로부터의 7명의 환자의 보다 작은 군 (기준선에서 이상운동증의 중증도 및 최소 오프 시간에 의해 제한됨)의 경우, 평균 기준선 값은 34.1이었고, 스코어는 기준선으로부터 6개월에 15.3 및 12개월에 13.7만큼 개선되었다 (감소되었다).
변형된 혼 앤 야 (mH&Y) 척도 하에서의 환자 개선을 12개월째에, 기준선 값과 비교하여 평가하였다 (도 9). 기준선에서, 13명의 환자는 3기였고 2명의 환자는 4기여서, 평균 mH&Y 병기는 3.13이 되었다. AAV2-hAADC의 투여 후 12개월째에, 1명의 환자는 1기였고, 11명의 환자는 2기였고, 3명의 환자는 2.5기여서, 평균 mH&Y 병기는 2.03이 되었다. 3.13기로부터 2.03기로의 평균 mH&Y 병기의 이러한 감소는 12개월 후 AAV2-hAADC 치료받은 환자에서의 질환 진행에서의 약 87개월 (7.25년) 개선과 상관되었다.
파킨슨병 환자에서 건강 관련 삶의 질을 측정하기 위한 39-항목 설문지인 환자-보고 39-항목 파킨슨병 설문지 (PDQ-39)를 사용하여 환자 삶의 질을 평가하였다. AAV2-hAADC의 투여는 환자의 PDQ-39 스코어를 기준선으로부터 12개월째에 군 2 및 3의 경우 각각 8.4 및 9.1의 평균 변화만큼 개선시켰다 (감소시켰다) (도 10). 군 1의 경우 PDQ-39 스코어의 평균 개선은 6개월에 2.9, 12개월에 1.9, 24개월에 0.8 및 36개월에 0.9였다.
2개의 최고 용량 환자군 (군 2 및 3, n=10)의 경우, 평균 PDQ-39 스코어는 6개월에 4.8 및 12개월에 8.8만큼 개선되었다 (감소되었다). 군 2 및 3으로부터의 7명의 환자의 보다 작은 군 (기준선에서 이상운동증의 중증도 및 최소 오프 시간에 의해 제한됨)의 경우, 평균 PDQ-39 스코어는 6개월에 2.5 및 12개월에 8.8만큼 개선되었다 (감소되었다).
PDQ-39 평가는 AAV2-hAADC 치료가 환자 삶의 질을 용량-의존적 및 임상적으로 의미있는 방식으로 개선시켰음을 나타내었다.
환자의 삶의 질은 임상 전반적 변화 인상 (CGI-C) 척도 및 환자 전반적 변화 인상 (PGI-C) 척도를 사용하여 평가하였다. CGI-C 결과를 도 11a에 제시하고; PGI-C 결과는 도 11b에 제시한다.
종합하면, 이들 데이터는 AAV2-hAADC의 허용가능하게 높은 투여량 농도 및 부피로의 단일 투여에 의해 AADC 효소 활성이 증가되고 임상적으로 의미있는 개선이 수득된다는 것을 보여준다.
이론에 얽매이지는 않지만, AADC 치료는 남아있는 도파민성 흑질선조체 축삭에서 내인성 레보도파의 개선된 전환을 가능하게 할 수 있다. 또한, AADC 치료는 아마도 피각에서 도파민으로의 보다 효율적이고 균일한 전환을 허용함으로써 레보도파의 장기간 반응을 증가시킬 수 있다.
실시예 6. 운동 반응 변동을 갖는 환자에서의 정맥내 레보도파에 대한 반응의 증진
13명의 참여자에게 AAV2-hAADC (AAV2 혈청형 캡시드 내에 서열식별번호: 979를 포함하는 벡터 게놈)를 투여하였고; 군 1: 5명의 대상체에게 약 7.5x1011개 벡터 게놈 (vg)의 평균 총 AADC 유전자 요법 용량을 제공하였고; 군 2: 5명의 대상체에게 약 1.5x1012개 vg의 평균 총 AADC 유전자 요법 용량을 제공하였고; 군 3 (n=3): 3명의 대상체에게 약 4.7x1012개 vg의 평균 총 AADC 유전자 요법 용량을 제공하였다. 실질적으로 규정된 오프 상태의 환자에게 또한 AAV2-hAADC의 투여 전 및 투여의 대략 6개월 후 둘 다에 IV 레보도파의 주입을 제공하였다.
순차적인 날에, 환자에게 2시간 동안 1 mL/kg/hr로 투여되는 IV 레보도파의 역치 (0.6 mg/mL; 저-용량) 또는 역치상 (1.2 mg/mL; 고-용량) 주입을 제공하였다. IV 레보도파 투여의 순서 및 역치를 무작위화하고, 이중-맹검화하였다 (LHLH, LHHL, HLHL,HLLH). 각각의 참여자 군에 대한 투여량 수준 및 순서를 표 9에 요약한다.
표 9: IV 레보도파 투여량 수준
경구 카르비도파 (25 mg)를 주입 1-2시간 전, 주입 동안, 및 주입 1-2시간 후에 투여하였다. 참여자의 운동 반응을 UPDRS III (30% 변화까지의 시간 및 30% 반응의 지속기간)에 의해 측정하였고; 운동완만은 손가락 두드림 속도에 의해 측정하였고; 이상운동증은 비정상적 불수의 운동 척도 (AIMS) 스코어링에 의해 측정하였다. 약동학을 IV 레보도파의 투여 후 30분마다 평가하였다.
3개의 환자군에 걸쳐, UPDRS III 상의 IV 레보도파에 반응한 변화의 지속기간 및 크기를 기준선으로부터 최대 6.5시간까지의 AUC를 사용하여 분석하였다. 군 1에 대한 결과를 도 12a에 제시하고; 군 2에 대한 결과를 도 12b에 제시하고; 군 3에 대한 결과를 도 12c에 제시한다.
저용량 IV 레보도파 (역치)의 경우에, AUC는 AAV2-hAADC 투여 전으로부터 투여 후 6개월까지 168%만큼 증가되었다. 고용량 레보도파 (역치상)의 경우에, AUC는 67%만큼 증가되었다. 결과를 표 10에 요약한다 (데이터는 대상체에 걸친 평균 (표준 오차) 곡선하 면적이며, 음수는 UPDRS 스코어의 개선을 나타냄).
표 10. 기준선 및 AAV2-hAADC의 투여의 6개월 후에 정맥내 레보도파의 역치 및 역치상 주입에 대한 UPDRS III AUC 분석
투여전으로부터 ≥30% 변화로서 정의되는, IV 레보도파에 대한 반응의 개시까지의 시간 (TOR)을 측정하였다. 결과를 표 11에 요약하고 도 13에 제시한다. TOR은 군 2 및 3 둘 다에서 둘 다의 IV 레보도파 용량에서 실질적으로 감소되었다. 군 2의 저용량 군에서, 레보도파에 대한 반응 개시까지의 시간은 59분인 한편, 투여전 반응을 위한 시간은 109분이었다. 유사하게, 군 2의 고용량 군에서, 레보도파에 대한 반응 개시까지의 시간은 투여전 104분으로부터 30분으로 감소되었다. 유사한 감소가 군 3, 및 군 1의 저용량 군에서 관찰되었다.
표 11. 레보도파 용량 및 군별 반응까지의 시간 (분) (투여전으로부터 >30% UPDRS 변화) (평균)
투여전으로부터 ≥30% 변화를 유지하는 것으로 정의되는, IV 레보도파에 대한 반응 지속기간 (DOR)을 측정하였다. 결과를 도 14에 제시한다.
운동완만은 손가락 두드림 속도에 의해 측정하였다. 결과를 표 12에 요약한다.
표 12: IV 레보도파 후의 손가락 두드림 속도
이상운동증은 비정상적 불수의 운동 척도 (AIMS) 스코어링에 의해 측정하였다. 결과를 표 13에 요약한다.
표 13: IV 레보도파 후의 손가락 두드림 속도
AADC 주입 후에 증가된 AUC의 유사한 패턴이 운동완만 및 이상운동증의 측정에서 관찰되었다. 이들 데이터는 AADC로 치료받은 환자가 효과의 보다 빠른 개시 및 보다 긴 지속기간을 포함하여, 운동 반응의 3가지 측정에 걸쳐 AADC 투여 후 IV 레보도파에 대한 반응에서 현저한 변경을 나타내었음을 시사한다. IV 레보도파에 대한 반응에 대해 AADC의 용량 관련 효과가 또한 관찰된다.
실시예 7. 파킨슨병에 대한 AAV2-hAADC의 후방 투여
AAV2-hAADC (AAV2 혈청형 캡시드 내에 서열식별번호: 979를 포함하는 벡터 게놈)의 단일 투여를 진행성 파킨슨병 및 장애초래 운동 변동 (질환 지속기간 ≥5년)을 갖는 환자군 4의 8명의 환자에게 투여하였다. AAV2-hAADC는 실시예 1에 기재된 바와 같이 시토메갈로바이러스 극초기 프로모터의 제어 하에 인간 AADC 유전자의 상보적 데옥시리보핵산을 보유하는 재조합 AAV2로 구성된다. 연구 약물을 0.001% 플루론산 (F-68)을 갖는 포스페이트 완충 염수의 멸균 제제로, 4.9 x 1012개 vg/mL의 초기 농도 (최종 투여량 농도로의 희석을 위한 부형제 함유)의 0.5 mL 분취물로 제공하였다. 연구 참여에 대한 적격성을 결정하는 기준 (배제 기준 포함)은 실시예 5에 제시된 연구와 유사하다. 군 4 및 군 4*에 대한 기준선 특징 (n=4, UDysRS ≤30, 충동 조절 장애 없음)을 표 14에 제시한다 (평균 값).
표 14. 군 4에 대한 기준선 특징
7명의 참여자에게 제0일에 2.6 x 1012개 vg/ml의 농도의 피각당 최대 1800 μL의 표적 부피 (최대 9.4 x 1012개 vg의 표적 총 용량)로 AAV2-hAADC 벡터의 단일 투여를 제공하였다. 환자군 4에 대한 임상 농도 및 투여량 수준을 표 15에 요약한다:
표 15. 군 4 투여량 수준
표 15에 제시된 바와 같이, 참여자 100.202는 다른 참여자보다 더 낮은 벡터 게놈 농도를 제공받았다. 이는 계획된 절차와 일치하였고, 안전성의 이유로 인한 것은 아니었다. 참여자 100.202에 대한 데이터는 일반적으로 산출된 평균에 포함되었고, 참여자 100.202를 배제하기에 적절한 경우에 "감수성 분석"이 또한 계산되었다.
중재적 MRI를 사용하여 두개내 주입 절차를 실시간으로 모니터링하여 AAV2-hAADC의 표적화된 전달을 달성하였다. 뇌 내 주입의 MRI 시각화를 증진시키기 위해, 투여 직전에 소량의 가도테리돌 (1-2 mM)을 AAV2-hAADC 투여 용액에 첨가하였다. AAV2-hAADC 벡터를 (후방 꼬리를 통해) 피각의 장축을 따라 둘 다의 피각에 후방으로 (경두정-후두 접근법) 단일 외과적 설정으로 전달하였다. 전달은 클리어포인트® 신경-탐색 시스템을 갖춘 두개골 장착 스마트프레임스® (MRI 인터벤션즈, 인크., 캘리포니아주 어바인)를 사용하여 안내되는, 메드퓨전 3500 주입 펌프에 연결된 단계식 스마트플로우™ 신경-심실 주사 및 흡인 캐뉼라를 통해 완료하였다. 표적 내의 벡터의 분포를 최대화하기 위해 점진적 움직임 및 증가식 주입 속도 (1-30 μL/분)로 대류-증진 전달 (CED)을 사용하였고, CED 주입 전반에 걸쳐 캐뉼라 팁의 점진적 진전을 사용하였다. 전달 절차 (마취 & 환자 준비로부터 회복을 위한 환자 이송까지)를 위한 평균 총 시간은 약 10시간 (min - 8:28; max - 11:27)이었다. 전달 절차에서 각각의 단계에 대한 평균 시간은 다음과 같다 (시간:분): 마취 & 환자 준비 (1:04); iMRI 탐색 (3:37); 절개 및 캐뉼라 배치 (1:15); AAV2-hAADC 전달 (3:01); 절개 봉합 (0:25); 및 회복을 위한 이송 (0:39). 각각의 환자의 전달 절차에 대한 시간선을 도 15에 제시한다. 실시예 7에서 군 4의 평균 주입 시간은 실시예 5에서 군 1-3의 평균 주입 시간보다 약 2시간 더 짧았다.
AAV2-hAADC는 벡터-관련 심각한 유해 사건 없이 잘 허용되었다. 피각에서의 벡터 분포의 결정, AADC 발현 및 활성의 측정, 파킨슨병 의약 (레보도파 등가 용량)의 변화, 환자-보고 일지, 및 삶의 질 설문지를 포함한 다양한 방법에 의해 치료의 결과를 평가하였다.
AAV2-hAADC에 가도테리돌을 공동-주입하여 벡터의 분포가 가시화되도록 하였다. 대류-증진 전달 절차 동안 획득된 MR 영상 (MP-RAGE; 3분 획득 시간)으로 피각 커버리지를 측정하였다. 가도테리돌 분포의 총 부피, 가도테리돌에 의해 커버된 피각의 백분율, 및 피각 내에 함유된 가도테리돌 분포의 백분율을 계산하였다 (아이플란 플로우 소프트웨어; 브라인랍 아게, 독일 뮌헨). 피각 커버리지 수준을 표 16에 요약하였다:
표 16. 피각 커버리지 수준
도 2에 제시된 바와 같이, 참여자 군 4에 대한 평균 총 피각 커버리지는 53.5% (max: 62.3%)였고; 평균 후방 피각 커버리지는 76.0% (max: 84.9%)였다. 평균 전방 피각 커버리지는 약 30%였다.
피각에서의 AADC 발현 및 활성의 평가는 레보도파를 도파민으로 전환시키는 능력을 반영하는 [18F] 플루오로-L-디히드록시페닐알라닌 (또는 18F-도파)을 사용하는 양전자 방출 단층촬영 (PET)을 사용하여 결정하였다. 주입 전 (기준선) 및 주입의 약 2-7개월 후에 스캔을 획득하였고, 18F-도파의 투여의 65-75분 후에 영상화 프레임을 포착하였다.
기준선에서의 18F-도파 PET 중앙 표준화된 흡수 값 비 (SOR-1)는 0.93 (0.6 내지 1.0 범위)이었고, AAV2-hAADC 투여 후 (2-7개월)에 1.6 (1.0 내지 2.1)으로 증가하였고, 이는 건강한 성인의 F-도파 흡수와 유사하였다. 이는 기준선 18F-도파 흡수로부터의 77% 평균 증가를 나타내며, 항파킨슨병 의약에 대한 필요의 33% 감소로 반영된다. 참여자 400.202로부터의 데이터는 움직임에 기인한 스캔 분석의 문제로 인해 스캔 동안의 움직임에 기인한 PET 인공물 (24.1% 변화)을 포함하는 것으로 나타났다. 군 4의 나머지 참여자는 기준선 18F-도파 흡수로부터의 85% 증가 및 항파킨슨병 의약에 대한 필요의 27.8% 감소를 가졌다 (12개월 내내 지속됨).
항파킨슨병 의약의 변화는 증가된 이상운동증, 도파민성 의약의 다른 부작용, 또는 의약에 대한 감소된 필요에 반응하여 허용되었다. 항파킨슨병 의약을 레보도파-등가 용량 (LED)에 대해 표준화하였다. 후방 궤적 접근법을 사용한 환자 운동 기능의 개선은, 실시예 5의 군 2 및 3으로부터 관찰된 결과와 유사하게, 환자 경구 레보도파 및 등가의 의약의 극적인 감소로 관찰되었다.
결과를 표 17에 요약한다 (전체 환자군에 대한 평균 값).
표 17. 환자군별 레보도파 등가 용량 (LED)의 기준선으로부터의 변화
AAV2-hAADC를 사용한 치료는 또한, 환자 자기-보고 일지, 온- 및 오프-시간 및 문제되는 이상운동증이 없는 하우저 운동 일지 온-시간 둘 다, 통합 파킨슨병 등급화 척도, 및 삶의 질 측정을 포함한 임상적으로 의미있는 방식으로의 다중 평가에 걸쳐 6개월째에 환자 운동 기능의 개선을 나타내었다. 결과는 실시예 5의 군 2 및 3으로부터의 결과와 일치하였다.
AAV2-hAADC의 투여 후, 군 4의 환자 (n=8)는 기준선 9.05로부터 그의 일지-보고된 우수 온-시간 (문제되는 이상운동증이 없는 온-시간)의 증가를 경험하였다 (도 6). 군 4는 우수 온-시간에서 기준선 대비 투여후 3개월에 2.19시간, 6개월에 1.82시간, 9개월에 2.34시간, 및 12개월에 1.74시간의 평균 개선 (증가)을 경험하였다. 군 4* (n=4)는 우수 온-시간에서 기준선 (8.74시간) 대비 투여후 3개월에 3.53시간, 6개월에 3.86시간, 9개월에 4.49시간, 및 12개월에 3.19시간의 평균 개선 (증가)을 경험하였다.
일지-오프 시간과 관련하여, 군 4의 환자 (n=8)는 기준선 6.82시간으로부터 그의 일지-보고된 오프-시간의 감소를 경험하였다. 군 4는 오프 시간에서 기준선 대비 투여후 3개월에 2.52시간, 6개월에 2.56시간, 9개월에 3.01시간, 및 12개월에 2.17시간의 평균 개선 (감소)을 경험하였다. 군 4* (n=4)는 오프 시간에서 기준선 (7.26) 대비 투여후 3개월에 3.76, 6개월에 3.90시간, 9개월에 4.72, 및 12개월에 3.19시간의 평균 개선 (감소)을 경험하였다.
"온" 의약 상태 (n=8)의 UPDRS II 스코어와 관련하여, 군 4는 3.5의 기준선 값을 가졌고, 스코어는 기준선으로부터 투여후 3개월에 0.9, 6개월에 0.0, 9개월에 1.4 및 12개월에 1.0만큼 개선되었다 (감소되었다). 군 4* (n=4)는 3.0의 기준선 값을 가졌고, 스코어는 기준선으로부터 투여후 3개월에 1.5, 6개월에 1.0, 9개월에 1.8 및 12개월에 0.8만큼 개선되었다 (감소되었다).
"오프" 의약 상태 (n=8)의 UPDRS II 스코어와 관련하여, 군 4는 15.3의 기준선 값을 가졌고, 스코어는 기준선으로부터 투여후 3개월에 3.6, 6개월에 3.8, 9개월에 3.3 및 12개월에 3.3만큼 개선되었다 (감소되었다). 군 4* (n=4)는 15.0의 기준선 값을 가졌고, 스코어는 기준선으로부터 투여후 3개월에 3.0, 6개월에 4.5, 9개월에 3.3 및 12개월에 3.5만큼 개선되었다 (감소되었다).
"온" 의약 상태 (도 7, n=8)의 UPDRS III 스코어와 관련하여, 군 4는 11.4의 기준선 값을 가졌고, 스코어는 기준선으로부터 투여후 3개월에 1.5, 6개월에 0.5, 9개월에 0.6 및 12개월에 1.3만큼 개선되었다 (감소되었다). 군 4* (n=4)는 13.8의 기준선 값을 가졌고, 스코어는 기준선으로부터 투여후 3개월에 4.0, 6개월에 2.5, 9개월에 0.5 및 12개월에 1.5만큼 개선되었다 (감소되었다).
"오프" 의약 상태 (도 8, n=8)의 UPDRS III 스코어와 관련하여, 군 4는 34.9의 기준선 값을 가졌고, 스코어는 기준선으로부터 투여후 3개월에 8.2, 6개월에 9.6, 9개월에 9.5 및 12개월에 9.4만큼 개선되었다 (감소되었다). 군 4* (n=4)는 36.3의 기준선 값을 가졌고, 스코어는 기준선으로부터 투여후 3개월에 5.5, 6개월에 9.5, 9개월에 9.5 및 12개월에 10.8만큼 개선되었다 (감소되었다).
파킨슨병 환자에서 건강 관련 삶의 질을 측정하기 위한 39-항목 설문지인 환자-보고 39-항목 파킨슨병 설문지 (PDQ-39)를 사용하여 환자 삶의 질을 평가하였다. AAV2-hAADC의 투여는 환자의 PDQ-39 스코어를 기준선 (28.5)으로부터 투여후 6개월에 14.1, 9개월에 9.6 및 12개월에 7.6의 평균 변화만큼 개선시켰다 (감소시켰다). 군 4* (n=4)의 경우, AAV2-hAADC의 투여는 환자의 PDQ-39 스코어를 기준선 (25.8)으로부터 투여후 6개월에 14.3, 9개월에 13.4 및 12개월에 12.6의 평균 변화만큼 개선시켰다 (감소시켰다).
환자의 삶의 질은 임상 전반적 변화 인상 (CGI-C) 척도를 사용하여 평가하였다. 초기 CGI-C 결과를 도 11a에 제시한다. 3개월째에, 3명의 환자는 "매우 많이 개선되었고", 4명의 환자는 "많이 개선되었고", 1명의 환자는 "최소로 악화되었다". 6개월째에, 3명의 환자는 "매우 많이 개선되었고", 4명의 환자는 "많이 개선되었고", 1명의 환자는 "최소로 개선되었다". 9개월째에, 3명의 환자는 "매우 많이 개선되었고", 3명의 환자는 "많이 개선되었고", 1명의 환자는 최소로 개선되었고, 1명의 환자는 "변화 없었다". 12개월째에, 3명의 환자는 "매우 많이 개선되었고", 3명의 환자는 "많이 개선되었고", 1명의 환자는 "변화 없었고", 1명의 환자는 "최소로 악화되었다".
환자의 삶의 질은 환자 전반적 변화 인상 (PGI-C) 척도를 사용하여 평가하였다. 초기 PGI-C 결과를 도 11b에 제시한다. 3개월째에, 5명의 환자는 "많이 개선되었고", 2명의 환자는 "최소로 개선되었고", 1명의 환자는 "변화 없었다". 6개월째에, 1명의 환자는 "매우 많이 개선되었고", 6명의 환자는 "많이 개선되었고", 1명의 환자는 "최소로 개선되었다". 9개월째에, 1명의 환자는 "매우 많이 개선되었고", 7명의 환자는 "많이 개선되었다". 12개월째에, 7명의 환자는 "많이 개선되었고", 1명의 환자는 "최소로 개선되었다".
변형된 혼 앤 야 (mH&Y) 척도 하에서의 환자 개선을 3, 6, 9 및 12개월째에, 기준선 값과 비교하여 평가하였다 (표 14). 기준선에서 군 4 (n=8)의 경우 4명의 환자는 3기였고, 4명의 환자는 2.5기였다. 3개월째에, 7명의 환자는 2기였고, 1명의 환자는 3기였다. 6개월째에, 6명의 환자는 2기였고, 2명의 환자는 2.5기였다. 9개월째에, 7명의 환자는 2기였고, 1명의 환자는 2.5기였다. 12개월째에, 4명의 환자는 2기였고, 3명의 환자는 2.5기였고, 1명의 환자는 3기였다. 기준선에서 군 4* (n=4)의 경우 4명의 환자는 3기였다. 3개월째에, 3명의 환자는 2기였고, 1명의 환자는 3기였다. 6개월째에, 2명의 환자는 2기였고, 2명의 환자는 2.5기였다. 9개월째에, 3명의 환자는 2기였고, 1명의 환자는 2.5기였다. 12개월째에, 1명의 환자는 2기였고, 2명의 환자는 2.5기였고, 1명의 환자는 3기였다.
종합하면, 이들 데이터는 피각의 장축을 따라 점진적 CED를 사용하는 후방 투여와 조합된 iMRI-모니터링된 수술은 유전자 요법을 위한 AADC의 신경외과적 전달의 신속한 진화를 가능하게 하여, 감소된 수술 시간 및 증가된 표적 커버리지를 발생시킨다는 것을 시사한다. 이러한 외과적 접근법은 피각의 비교적 얇은 후-교련 영역 내에 상당히 보다 큰 분포, 및 혈관주위 누출 경로를 넘어 캐뉼라의 팁을 점진적으로 전진시키는 능력을 발생시켰다.
실시예 8: 증가된 벡터 커버리지와 증가된 18F-도파 흡수 사이의 상관관계
군 1-4에 대한 18F-도파 PET 중앙 표준화된 흡수 값은 군 1-4의 환자의 피각의 상응하는 벡터 커버리지와 상관되었다. 결과를 도 16에 제시한다. 결과는 증가된 벡터 커버리지와 증가된 18F-도파 흡수 사이의 강한 상관관계를 보여준다.
SEQUENCE LISTING
<110> VOYAGER THERAPEUTICS, INC.
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polypeptide"
<400> 1
Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser
1 5 10 15
Glu Gly Ile Arg Glu Trp Trp Ala Leu Lys Pro Gly Ala Pro Gln Pro
20 25 30
Lys Ala Asn Gln Gln His Gln Asp Asn Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro
35 40 45
Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro
50 55 60
Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp
65 70 75 80
Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala
85 90 95
Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Lys Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly
100 105 110
Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Leu Leu Glu Pro
115 120 125
Leu Gly Leu Val Glu Glu Ala Ala Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg
130 135 140
Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly
145 150 155 160
Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr
165 170 175
Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro
180 185 190
Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly
195 200 205
Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser
210 215 220
Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile
225 230 235 240
Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu
245 250 255
Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn
260 265 270
Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg
275 280 285
Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn
290 295 300
Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile
305 310 315 320
Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn
325 330 335
Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu
340 345 350
Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro
355 360 365
Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp
370 375 380
Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe
385 390 395 400
Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu
405 410 415
Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu
420 425 430
Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser
435 440 445
Arg Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser
450 455 460
Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro
465 470 475 480
Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn
485 490 495
Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn
500 505 510
Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro Ala Met Ala Ser His Lys
515 520 525
Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly
530 535 540
Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp Ala Asp Lys Val Met Ile
545 550 555 560
Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser
565 570 575
Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser Ala Gln Thr Leu Ala Val
580 585 590
Pro Phe Lys Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile
595 600 605
Leu Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro
610 615 620
Ile Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro
625 630 635 640
Leu Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile
645 650 655
Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp
660 665 670
Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val
675 680 685
Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro
690 695 700
Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe
705 710 715 720
Ala Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr
725 730 735
Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu
740
<210> 2
<211> 2232
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
polynucleotide"
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atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca accttagtga aggaattcgc 60
gagtggtggg ctttgaaacc tggagcccct caacccaagg caaatcaaca acatcaagac 120
aacgctcgag gtcttgtgct tccgggttac aaataccttg gacccggcaa cggactcgac 180
aagggggagc cggtcaacgc agcagacgcg gcggccctcg agcacgacaa ggcctacgac 240
cagcagctca aggccggaga caacccgtac ctcaagtaca accacgccga cgccgagttc 300
caggagcggc tcaaagaaga tacgtctttt gggggcaacc tcgggcgagc agtcttccag 360
gccaaaaaga ggcttcttga acctcttggt ctggttgagg aagcggctaa gacggctcct 420
ggaaagaaga ggcctgtaga gcagtctcct caggaaccgg actcctccgc gggtattggc 480
aaatcgggtg cacagcccgc taaaaagaga ctcaatttcg gtcagactgg cgacacagag 540
tcagtcccag accctcaacc aatcggagaa cctcccgcag ccccctcagg tgtgggatct 600
cttacaatgg cttcaggtgg tggcgcacca gtggcagaca ataacgaagg tgccgatgga 660
gtgggtagtt cctcgggaaa ttggcattgc gattcccaat ggctggggga cagagtcatc 720
accaccagca cccgaacctg ggccctgccc acctacaaca atcacctcta caagcaaatc 780
tccaacagca catctggagg atcttcaaat gacaacgcct acttcggcta cagcaccccc 840
tgggggtatt ttgacttcaa cagattccac tgccacttct caccacgtga ctggcagcga 900
ctcatcaaca acaactgggg attccggcct aagcgactca acttcaagct cttcaacatt 960
caggtcaaag aggttacgga caacaatgga gtcaagacca tcgccaataa ccttaccagc 1020
acggtccagg tcttcacgga ctcagactat cagctcccgt acgtgctcgg gtcggctcac 1080
gagggctgcc tcccgccgtt cccagcggac gttttcatga ttcctcagta cgggtatctg 1140
acgcttaatg atggaagcca ggccgtgggt cgttcgtcct tttactgcct ggaatatttc 1200
ccgtcgcaaa tgctaagaac gggtaacaac ttccagttca gctacgagtt tgagaacgta 1260
cctttccata gcagctacgc tcacagccaa agcctggacc gactaatgaa tccactcatc 1320
gaccaatact tgtactatct ctctagaact attaacggtt ctggacagaa tcaacaaacg 1380
ctaaaattca gtgtggccgg acccagcaac atggctgtcc agggaagaaa ctacatacct 1440
ggacccagct accgacaaca acgtgtctca accactgtga ctcaaaacaa caacagcgaa 1500
tttgcttggc ctggagcttc ttcttgggct ctcaatggac gtaatagctt gatgaatcct 1560
ggacctgcta tggccagcca caaagaagga gaggaccgtt tctttccttt gtctggatct 1620
ttaatttttg gcaaacaagg taccggcaga gacaacgtgg atgcggacaa agtcatgata 1680
accaacgaag aagaaattaa aactactaac ccggtagcaa cggagtccta tggacaagtg 1740
gccacaaacc accagagtgc ccaaactttg gcggtgcctt ttaaggcaca ggcgcagacc 1800
ggttgggttc aaaaccaagg aatacttccg ggtatggttt ggcaggacag agatgtgtac 1860
ctgcaaggac ccatttgggc caaaattcct cacacggacg gcaactttca cccttctccg 1920
ctgatgggag ggtttggaat gaagcacccg cctcctcaga tcctcatcaa aaacacacct 1980
gtacctgcgg atcctccaac ggccttcaac aaggacaagc tgaactcttt catcacccag 2040
tattctactg gccaagtcag cgtggagatc gagtgggagc tgcagaagga aaacagcaag 2100
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gctgttaata ctgaaggtgt atatagtgaa ccccgcccca ttggcaccag atacctgact 2220
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polypeptide"
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Glu Gly Ile Arg Glu Trp Trp Ala Leu Lys Pro Gly Ala Pro Gln Pro
20 25 30
Lys Ala Asn Gln Gln His Gln Asp Asn Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro
35 40 45
Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro
50 55 60
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65 70 75 80
Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala
85 90 95
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100 105 110
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115 120 125
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530 535 540
Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp Ala Asp Lys Val Met Ile
545 550 555 560
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Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val
675 680 685
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690 695 700
Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe
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Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu
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<210> 6
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<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
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<400> 6
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caggagcgtc tgcaagaaga tacgtctttt gggggcaacc tcgggcgagc agtcttccag 360
gccaagaagc gggttctcga acctctcggt ctggttgagg aaggcgctaa gacggctcct 420
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aagacaggcc agcagcccgc taaaaagaga ctcaattttg gtcagactgg cgactcagag 540
tcagtccccg atccacaacc tctcggagaa cctccagcaa cccccgctgc tgtgggacct 600
actacaatgg cttcaggcgg tggcgcacca atggcagaca ataacgaagg cgccgacgga 660
gtgggtaatg cctcaggaaa ttggcattgc gattccacat ggctgggcga cagagtcatc 720
accaccagca cccgcacctg ggccttgccc acctacaata accacctcta caagcaaatc 780
tccagtgctt caacgggggc cagcaacgac aaccactact tcggctacag caccccctgg 840
gggtattttg atttcaacag attccactgc cacttttcac cacgtgactg gcagcgactc 900
atcaacaaca attggggatt ccggcccaag agactcaact tcaaactctt caacatccaa 960
gtcaaggagg tcacgacgaa tgatggcgtc acaaccatcg ctaataacct taccagcacg 1020
gttcaagtct tctcggactc ggagtaccag cttccgtacg tcctcggctc tgcgcaccag 1080
ggctgcctcc ctccgttccc ggcggacgtg ttcatgattc cgcaatacgg ctacctgacg 1140
ctcaacaatg gcagccaagc cgtgggacgt tcatcctttt actgcctgga atatttccct 1200
tctcagatgc tgagaacggg caacaacttt accttcagct acacctttga ggaagtgcct 1260
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caatacctgt attacctgaa cagaactcaa aatcagtccg gaagtgccca aaacaaggac 1380
ttgctgttta gccgtgggtc tccagctggc atgtctgttc agcccaaaaa ctggctacct 1440
ggaccctgtt atcggcagca gcgcgtttct aaaacaaaaa cagacaacaa caacagcaat 1500
tttacctgga ctggtgcttc aaaatataac ctcaatgggc gtgaatccat catcaaccct 1560
ggcactgcta tggcctcaca caaagacgac gaagacaagt tctttcccat gagcggtgtc 1620
atgatttttg gaaaagagag cgccggagct tcaaacactg cattggacaa tgtcatgatt 1680
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aagaacccgc ctcctcagat cctcatcaaa aacacgcctg ttcctgcgaa tcctccggcg 1980
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tacacatcca attatgcaaa atctgccaac gttgatttta ctgtggacaa caatggactt 2160
tatactgagc ctcgccccat tggcacccgt taccttaccc gtcccctgta a 2211
<210> 7
<211> 736
<212> PRT
<213> Adeno-associated virus 1
<400> 7
Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser
1 5 10 15
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145 150 155 160
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180 185 190
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225 230 235 240
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245 250 255
Tyr Lys Gln Ile Ser Ser Ala Ser Thr Gly Ala Ser Asn Asp Asn His
260 265 270
Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe
275 280 285
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290 295 300
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325 330 335
Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Ser Asp Ser Glu Tyr Gln Leu Pro
340 345 350
Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Gln Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala
355 360 365
Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asn Gly
370 375 380
Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro
385 390 395 400
Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Thr Phe Ser Tyr Thr Phe
405 410 415
Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu Asp
420 425 430
Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Asn Arg
435 440 445
Thr Gln Asn Gln Ser Gly Ser Ala Gln Asn Lys Asp Leu Leu Phe Ser
450 455 460
Arg Gly Ser Pro Ala Gly Met Ser Val Gln Pro Lys Asn Trp Leu Pro
465 470 475 480
Gly Pro Cys Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Lys Thr Lys Thr Asp Asn
485 490 495
Asn Asn Ser Asn Phe Thr Trp Thr Gly Ala Ser Lys Tyr Asn Leu Asn
500 505 510
Gly Arg Glu Ser Ile Ile Asn Pro Gly Thr Ala Met Ala Ser His Lys
515 520 525
Asp Asp Glu Asp Lys Phe Phe Pro Met Ser Gly Val Met Ile Phe Gly
530 535 540
Lys Glu Ser Ala Gly Ala Ser Asn Thr Ala Leu Asp Asn Val Met Ile
545 550 555 560
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565 570 575
Phe Gly Thr Val Ala Val Asn Phe Gln Ser Ser Ser Thr Asp Pro Ala
580 585 590
Thr Gly Asp Val His Ala Met Gly Ala Leu Pro Gly Met Val Trp Gln
595 600 605
Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro His
610 615 620
Thr Asp Gly His Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe Gly Leu
625 630 635 640
Lys Asn Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala
645 650 655
Asn Pro Pro Ala Glu Phe Ser Ala Thr Lys Phe Ala Ser Phe Ile Thr
660 665 670
Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln
675 680 685
Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Val Gln Tyr Thr Ser Asn
690 695 700
Tyr Ala Lys Ser Ala Asn Val Asp Phe Thr Val Asp Asn Asn Gly Leu
705 710 715 720
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<210> 8
<211> 4718
<212> DNA
<213> Adeno-associated virus serotype 1
<400> 8
ttgcccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcggtgggg cctgcggacc aaaggtccgc 60
agacggcaga gctctgctct gccggcccca ccgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
ggcaactcca tcactagggg taatcgcgaa gcgcctccca cgctgccgcg tcagcgctga 180
cgtaaattac gtcatagggg agtggtcctg tattagctgt cacgtgagtg cttttgcgac 240
attttgcgac accacgtggc catttagggt atatatggcc gagtgagcga gcaggatctc 300
cattttgacc gcgaaatttg aacgagcagc agccatgccg ggcttctacg agatcgtgat 360
caaggtgccg agcgacctgg acgagcacct gccgggcatt tctgactcgt ttgtgagctg 420
ggtggccgag aaggaatggg agctgccccc ggattctgac atggatctga atctgattga 480
gcaggcaccc ctgaccgtgg ccgagaagct gcagcgcgac ttcctggtcc aatggcgccg 540
cgtgagtaag gccccggagg ccctcttctt tgttcagttc gagaagggcg agtcctactt 600
ccacctccat attctggtgg agaccacggg ggtcaaatcc atggtgctgg gccgcttcct 660
gagtcagatt agggacaagc tggtgcagac catctaccgc gggatcgagc cgaccctgcc 720
caactggttc gcggtgacca agacgcgtaa tggcgccgga ggggggaaca aggtggtgga 780
cgagtgctac atccccaact acctcctgcc caagactcag cccgagctgc agtgggcgtg 840
gactaacatg gaggagtata taagcgcctg tttgaacctg gccgagcgca aacggctcgt 900
ggcgcagcac ctgacccacg tcagccagac ccaggagcag aacaaggaga atctgaaccc 960
caattctgac gcgcctgtca tccggtcaaa aacctccgcg cgctacatgg agctggtcgg 1020
gtggctggtg gaccggggca tcacctccga gaagcagtgg atccaggagg accaggcctc 1080
gtacatctcc ttcaacgccg cttccaactc gcggtcccag atcaaggccg ctctggacaa 1140
tgccggcaag atcatggcgc tgaccaaatc cgcgcccgac tacctggtag gccccgctcc 1200
gcccgcggac attaaaacca accgcatcta ccgcatcctg gagctgaacg gctacgaacc 1260
tgcctacgcc ggctccgtct ttctcggctg ggcccagaaa aggttcggga agcgcaacac 1320
catctggctg tttgggccgg ccaccacggg caagaccaac atcgcggaag ccatcgccca 1380
cgccgtgccc ttctacggct gcgtcaactg gaccaatgag aactttccct tcaatgattg 1440
cgtcgacaag atggtgatct ggtgggagga gggcaagatg acggccaagg tcgtggagtc 1500
cgccaaggcc attctcggcg gcagcaaggt gcgcgtggac caaaagtgca agtcgtccgc 1560
ccagatcgac cccacccccg tgatcgtcac ctccaacacc aacatgtgcg ccgtgattga 1620
cgggaacagc accaccttcg agcaccagca gccgttgcag gaccggatgt tcaaatttga 1680
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cttccgctgg gcgcaggatc acgtgaccga ggtggcgcat gagttctacg tcagaaaggg 1800
tggagccaac aaaagacccg cccccgatga cgcggataaa agcgagccca agcgggcctg 1860
cccctcagtc gcggatccat cgacgtcaga cgcggaagga gctccggtgg actttgccga 1920
caggtaccaa aacaaatgtt ctcgtcacgc gggcatgctt cagatgctgt ttccctgcaa 1980
gacatgcgag agaatgaatc agaatttcaa catttgcttc acgcacggga cgagagactg 2040
ttcagagtgc ttccccggcg tgtcagaatc tcaaccggtc gtcagaaaga ggacgtatcg 2100
gaaactctgt gccattcatc atctgctggg gcgggctccc gagattgctt gctcggcctg 2160
cgatctggtc aacgtggacc tggatgactg tgtttctgag caataaatga cttaaaccag 2220
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gcgagtggtg ggacttgaaa cctggagccc cgaagcccaa agccaaccag caaaagcagg 2340
acgacggccg gggtctggtg cttcctggct acaagtacct cggacccttc aacggactcg 2400
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accagcagct caaagcgggt gacaatccgt acctgcggta taaccacgcc gacgccgagt 2520
ttcaggagcg tctgcaagaa gatacgtctt ttgggggcaa cctcgggcga gcagtcttcc 2580
aggccaagaa gcgggttctc gaacctctcg gtctggttga ggaaggcgct aagacggctc 2640
ctggaaagaa acgtccggta gagcagtcgc cacaagagcc agactcctcc tcgggcatcg 2700
gcaagacagg ccagcagccc gctaaaaaga gactcaattt tggtcagact ggcgactcag 2760
agtcagtccc cgatccacaa cctctcggag aacctccagc aacccccgct gctgtgggac 2820
ctactacaat ggcttcaggc ggtggcgcac caatggcaga caataacgaa ggcgccgacg 2880
gagtgggtaa tgcctcagga aattggcatt gcgattccac atggctgggc gacagagtca 2940
tcaccaccag cacccgcacc tgggccttgc ccacctacaa taaccacctc tacaagcaaa 3000
tctccagtgc ttcaacgggg gccagcaacg acaaccacta cttcggctac agcaccccct 3060
gggggtattt tgatttcaac agattccact gccacttttc accacgtgac tggcagcgac 3120
tcatcaacaa caattgggga ttccggccca agagactcaa cttcaaactc ttcaacatcc 3180
aagtcaagga ggtcacgacg aatgatggcg tcacaaccat cgctaataac cttaccagca 3240
cggttcaagt cttctcggac tcggagtacc agcttccgta cgtcctcggc tctgcgcacc 3300
agggctgcct ccctccgttc ccggcggacg tgttcatgat tccgcaatac ggctacctga 3360
cgctcaacaa tggcagccaa gccgtgggac gttcatcctt ttactgcctg gaatatttcc 3420
cttctcagat gctgagaacg ggcaacaact ttaccttcag ctacaccttt gaggaagtgc 3480
ctttccacag cagctacgcg cacagccaga gcctggaccg gctgatgaat cctctcatcg 3540
accaatacct gtattacctg aacagaactc aaaatcagtc cggaagtgcc caaaacaagg 3600
acttgctgtt tagccgtggg tctccagctg gcatgtctgt tcagcccaaa aactggctac 3660
ctggaccctg ttatcggcag cagcgcgttt ctaaaacaaa aacagacaac aacaacagca 3720
attttacctg gactggtgct tcaaaatata acctcaatgg gcgtgaatcc atcatcaacc 3780
ctggcactgc tatggcctca cacaaagacg acgaagacaa gttctttccc atgagcggtg 3840
tcatgatttt tggaaaagag agcgccggag cttcaaacac tgcattggac aatgtcatga 3900
ttacagacga agaggaaatt aaagccacta accctgtggc caccgaaaga tttgggaccg 3960
tggcagtcaa tttccagagc agcagcacag accctgcgac cggagatgtg catgctatgg 4020
gagcattacc tggcatggtg tggcaagata gagacgtgta cctgcagggt cccatttggg 4080
ccaaaattcc tcacacagat ggacactttc acccgtctcc tcttatgggc ggctttggac 4140
tcaagaaccc gcctcctcag atcctcatca aaaacacgcc tgttcctgcg aatcctccgg 4200
cggagttttc agctacaaag tttgcttcat tcatcaccca atactccaca ggacaagtga 4260
gtgtggaaat tgaatgggag ctgcagaaag aaaacagcaa gcgctggaat cccgaagtgc 4320
agtacacatc caattatgca aaatctgcca acgttgattt tactgtggac aacaatggac 4380
tttatactga gcctcgcccc attggcaccc gttaccttac ccgtcccctg taattacgtg 4440
ttaatcaata aaccggttga ttcgtttcag ttgaactttg gtctcctgtc cttcttatct 4500
tatcggttac catggttata gcttacacat taactgcttg gttgcgcttc gcgataaaag 4560
acttacgtca tcgggttacc cctagtgatg gagttgccca ctccctctct gcgcgctcgc 4620
tcgctcggtg gggcctgcgg accaaaggtc cgcagacggc agagctctgc tctgccggcc 4680
ccaccgagcg agcgagcgcg cagagaggga gtgggcaa 4718
<210> 9
<211> 3131
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
polynucleotide"
<400> 9
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attgcgtcga caagatggtg atctggtggg aggagggcaa gatgacggcc aaggtcgtgg 120
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ccgcccagat cgaccccacc cccgtgatcg tcacctccaa caccaacatg tgcgccgtga 240
ttgacgggaa cagcaccacc ttcgagcacc agcagcctct ccaggaccgg atgtttaagt 300
tcgaactcac ccgccgtctg gagcacgact ttggcaaggt gacaaagcag gaagtcaaag 360
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agggcggagc cagcaaaaga cccgcccccg atgacgcgga taaaagcgag cccaagcggg 480
cctgcccctc agtcgcggat ccatcgacgt cagacgcgga aggagctccg gtggactttg 540
ccgacaggta ccaaaacaaa tgttctcgtc acgcgggcat gcttcagatg ctgtttccct 600
gcaaaacgtg cgagagaatg aatcggaatt tcaacatttg cttcacacac ggggtcagag 660
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attcgcgagt ggtgggcgct gaaacctgga gccccgaagc ccaaagccaa ccagcaaaag 960
caggacgacg gccggggtct ggtgcttcct ggctacaagt acctcggacc cttcaacgga 1020
ctcgacaagg gggagcccgt caacgcggcg gacgcagcgg ccctcgagca cgacaaggct 1080
tacgaccagc agctgcaggc gggtgacaat ccgtacctgc ggtataacca cgccgacgcc 1140
gagtttcagg agcgtctgca agaagatacg tcttttgggg gcaacctcgg gcgagcagtc 1200
ttccaggcca agaagcgggt tctcgaacct ctcggtctgg ttgaggaagg cgctaagacg 1260
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agagtcatca ccaccagcac ccgaacctgg gccctgccca cctacaacaa ccacctctac 1620
aagcaaatct ccaacgggac atcgggagga gccaccaacg acaacaccta cttcggctac 1680
agcaccccct gggggtattt tgactttaac agattccact gccacctttc accacgtgac 1740
tggcagcgac tcatcaacaa caactgggga ttccgaccca agagactcag cttcaagctc 1800
ttcaacatcc aggtcaagga ggtcacgcag aatgaaggca ccaagaccat cgccaataac 1860
ctcaccagca ccatccaggt gtttacggac tcggagtacc agctgccgta cgttctcggc 1920
tctgtccacc agggctgcct gcctccgttc ccggcggacg tgttcatgat tccccagtac 1980
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<211> 255
<212> DNA
<213> Adeno-associated virus serotype 10
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<210> 11
<211> 738
<212> PRT
<213> Adeno-associated virus 10
<400> 11
Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser
1 5 10 15
Glu Gly Ile Arg Glu Trp Trp Asp Leu Lys Pro Gly Ala Pro Lys Pro
20 25 30
Lys Ala Asn Gln Gln Lys Gln Asp Asp Gly Arg Gly Leu Val Leu Pro
35 40 45
Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Phe Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro
50 55 60
Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp
65 70 75 80
Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Arg Tyr Asn His Ala
85 90 95
Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Gln Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly
100 105 110
Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro
115 120 125
Leu Gly Leu Val Glu Glu Ala Ala Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg
130 135 140
Pro Val Glu Pro Ser Pro Gln Arg Ser Pro Asp Ser Ser Thr Gly Ile
145 150 155 160
Gly Lys Lys Gly Gln Gln Pro Ala Lys Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln
165 170 175
Thr Gly Glu Ser Glu Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Ile Gly Glu Pro
180 185 190
Pro Ala Gly Pro Ser Gly Leu Gly Ser Gly Thr Met Ala Ala Gly Gly
195 200 205
Gly Ala Pro Met Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Ser
210 215 220
Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Leu Gly Asp Arg Val
225 230 235 240
Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His
245 250 255
Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Gly Thr Ser Gly Gly Ser Thr Asn Asp
260 265 270
Asn Thr Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn
275 280 285
Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn
290 295 300
Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Ser Phe Lys Leu Phe Asn
305 310 315 320
Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Gln Asn Glu Gly Thr Lys Thr Ile Ala
325 330 335
Asn Asn Leu Thr Ser Thr Ile Gln Val Phe Thr Asp Ser Glu Tyr Gln
340 345 350
Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Gln Gly Cys Leu Pro Pro Phe
355 360 365
Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn
370 375 380
Asn Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr
385 390 395 400
Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Ser Tyr
405 410 415
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420 425 430
Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu
435 440 445
Ser Arg Thr Gln Ser Thr Gly Gly Thr Gln Gly Thr Gln Gln Leu Leu
450 455 460
Phe Ser Gln Ala Gly Pro Ala Asn Met Ser Ala Gln Ala Lys Asn Trp
465 470 475 480
Leu Pro Gly Pro Cys Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Thr Thr Leu Ser
485 490 495
Gln Asn Asn Asn Ser Asn Phe Ala Trp Thr Gly Ala Thr Lys Tyr His
500 505 510
Leu Asn Gly Arg Asp Ser Leu Val Asn Pro Gly Val Ala Met Ala Thr
515 520 525
His Lys Asp Asp Glu Glu Arg Phe Phe Pro Ser Ser Gly Val Leu Met
530 535 540
Phe Gly Lys Gln Gly Ala Gly Arg Asp Asn Val Asp Tyr Ser Ser Val
545 550 555 560
Met Leu Thr Ser Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr
565 570 575
Glu Gln Tyr Gly Val Val Ala Asp Asn Leu Gln Gln Ala Asn Thr Gly
580 585 590
Pro Ile Val Gly Asn Val Asn Ser Gln Gly Ala Leu Pro Gly Met Val
595 600 605
Trp Gln Asn Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile
610 615 620
Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe
625 630 635 640
Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val
645 650 655
Pro Ala Asp Pro Pro Thr Thr Phe Ser Gln Ala Lys Leu Ala Ser Phe
660 665 670
Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu
675 680 685
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690 695 700
Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Thr Asn Val Asp Phe Ala Val Asn Thr Glu
705 710 715 720
Gly Thr Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg
725 730 735
Asn Leu
<210> 12
<211> 738
<212> PRT
<213> Adeno-associated virus 10
<400> 12
Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser
1 5 10 15
Glu Gly Ile Arg Glu Trp Trp Asp Leu Lys Pro Gly Ala Pro Lys Pro
20 25 30
Lys Ala Asn Gln Gln Lys Gln Asp Asp Gly Arg Gly Leu Val Leu Pro
35 40 45
Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Phe Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro
50 55 60
Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp
65 70 75 80
Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Arg Tyr Asn His Ala
85 90 95
Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Gln Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly
100 105 110
Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro
115 120 125
Leu Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg
130 135 140
Pro Val Glu Pro Ser Pro Gln Arg Ser Pro Asp Ser Ser Thr Gly Ile
145 150 155 160
Gly Lys Lys Gly Gln Gln Pro Ala Lys Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln
165 170 175
Thr Gly Asp Ser Glu Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Ile Gly Glu Pro
180 185 190
Pro Ala Gly Pro Ser Gly Leu Gly Ser Gly Thr Met Ala Ala Gly Gly
195 200 205
Gly Ala Pro Met Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Ser
210 215 220
Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Leu Gly Asp Arg Val
225 230 235 240
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245 250 255
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260 265 270
Asn Thr Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn
275 280 285
Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn
290 295 300
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305 310 315 320
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325 330 335
Asn Asn Leu Thr Ser Thr Ile Gln Val Phe Thr Asp Ser Glu Tyr Gln
340 345 350
Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Gln Gly Cys Leu Pro Pro Phe
355 360 365
Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn
370 375 380
Asn Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr
385 390 395 400
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405 410 415
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450 455 460
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465 470 475 480
Leu Pro Gly Pro Cys Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Thr Thr Leu Ser
485 490 495
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500 505 510
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580 585 590
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595 600 605
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<210> 14
<211> 255
<212> DNA
<213> Adeno-associated virus serotype 12
<400> 14
ggtaattcct ccggaaattg gcattgcgat tccacatggc tgggcgaccg agtcattacc 60
accagcaccc ggacttgggc cctgcccacc tacaacaacc acctctacaa gcaaatctcc 120
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<213> Adeno-associated virus serotype 2
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cggcagctcg acagcggaga caacccgtac ctcaagtaca accacgccga cgcggagttt 300
caggagcgcc ttaaagaaga tacgtctttt gggggcaacc tcggacgagc agtcttccag 360
gcgaaaaaga gggttcttga acctctgggc ctggttgagg aacctgttaa gacggctccg 420
ggaaaaaaga ggccggtaga gcactctcct gtggagccag actcctcctc gggaaccgga 480
aaggcgggcc agcagcctgc aagaaaaaga ttgaattttg gtcagactgg agacgcagac 540
tcagtacctg acccccagcc tctcggacag ccaccagcag ccccctctgg tctgggaact 600
aatacgatgg ctacaggcag tggcgcacca atggcagaca ataacgaggg cgccgacgga 660
gtgggtaatt cctcgggaaa ttggcattgc gattccacat ggatgggcga cagagtcatc 720
accaccagca cccgaacctg ggccctgccc acctacaaca accacctcta caaacaaatt 780
tccagccaat caggagcctc gaacgacaat cactactttg gctacagcac cccttggggg 840
tattttgact tcaacagatt ccactgccac ttttcaccac gtgactggca aagactcatc 900
aacaacaact ggggattccg acccaagaga ctcaacttca agctctttaa cattcaagtc 960
aaagaggtca cgcagaatga cggtacgacg acgattgcca ataaccttac cagcacggtt 1020
caggtgttta ctgactcgga gtaccagctc ccgtacgtcc tcggctcggc gcatcaagga 1080
tgcctcccgc cgttcccagc agacgtcttc atggtgccac agtatggata cctcaccctg 1140
aacaacggga gtcaggcagt aggacgctct tcattttact gcctggagta ctttccttct 1200
cagatgctgc gtaccggaaa caactttacc ttcagctaca cttttgagga cgttcctttc 1260
cacagcagct acgctcacag ccagagtctg gaccgtctca tgaatcctct catcgaccag 1320
tacctgtatt acttgagcag aacaaacact ccaagtggaa ccaccacgca gtcaaggctt 1380
cagttttctc aggccggagc gagtgacatt cgggaccagt ctaggaactg gcttcctgga 1440
ccctgttacc gccagcagcg agtatcaaag acatctgcgg ataacaacaa cagtgaatac 1500
tcgtggactg gagctaccaa gtaccacctc aatggcagag actctctggt gaatccgggc 1560
ccggccatgg caagccacaa ggacgatgaa gaaaagtttt ttcctcagag cggggttctc 1620
atctttggga agcaaggctc agagaaaaca aatgtggaca ttgaaaaggt catgattaca 1680
gacgaagagg aaatcaggac aaccaatccc gtggctacgg agcagtatgg ttctgtatct 1740
accaacctcc agagaggcaa cagacaagca gctaccgcag atgtcaacac acaaggcgtt 1800
cttccaggca tggtctggca ggacagagat gtgtaccttc aggggcccat ctgggcaaag 1860
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caccctcctc cacagattct catcaagaac accccggtac ctgcgaatcc ttcgaccacc 1980
ttcagtgcgg caaagtttgc ttccttcatc acacagtact ccacgggaca ggtcagcgtg 2040
gagatcgagt gggagctgca gaaggaaaac agcaaacgct ggaatcccga aattcagtac 2100
acttccaact acaacaagtc tgttaatgtg gactttactg tggacactaa tggcgtgtat 2160
tcagagcctc gccccattgg caccagatac ctgactcgta atctgtaa 2208
<210> 16
<211> 735
<212> PRT
<213> Adeno-associated virus 2
<400> 16
Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Thr Leu Ser
1 5 10 15
Glu Gly Ile Arg Gln Trp Trp Lys Leu Lys Pro Gly Pro Pro Pro Pro
20 25 30
Lys Pro Ala Glu Arg His Lys Asp Asp Ser Arg Gly Leu Val Leu Pro
35 40 45
Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Phe Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro
50 55 60
Val Asn Glu Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp
65 70 75 80
Arg Gln Leu Asp Ser Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala
85 90 95
Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Lys Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly
100 105 110
Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro
115 120 125
Leu Gly Leu Val Glu Glu Pro Val Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg
130 135 140
Pro Val Glu His Ser Pro Val Glu Pro Asp Ser Ser Ser Gly Thr Gly
145 150 155 160
Lys Ala Gly Gln Gln Pro Ala Arg Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr
165 170 175
Gly Asp Ala Asp Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Leu Gly Gln Pro Pro
180 185 190
Ala Ala Pro Ser Gly Leu Gly Thr Asn Thr Met Ala Thr Gly Ser Gly
195 200 205
Ala Pro Met Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ser
210 215 220
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225 230 235 240
Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu
245 250 255
Tyr Lys Gln Ile Ser Ser Gln Ser Gly Ala Ser Asn Asp Asn His Tyr
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Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His
275 280 285
Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp
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Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val
305 310 315 320
Lys Glu Val Thr Gln Asn Asp Gly Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu
325 330 335
Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Ser Glu Tyr Gln Leu Pro Tyr
340 345 350
Val Leu Gly Ser Ala His Gln Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp
355 360 365
Val Phe Met Val Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asn Gly Ser
370 375 380
Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser
385 390 395 400
Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Thr Phe Ser Tyr Thr Phe Glu
405 410 415
Asp Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg
420 425 430
Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Arg Thr
435 440 445
Asn Thr Pro Ser Gly Thr Thr Thr Gln Ser Arg Leu Gln Phe Ser Gln
450 455 460
Ala Gly Ala Ser Asp Ile Arg Asp Gln Ser Arg Asn Trp Leu Pro Gly
465 470 475 480
Pro Cys Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Lys Thr Ser Ala Asp Asn Asn
485 490 495
Asn Ser Glu Tyr Ser Trp Thr Gly Ala Thr Lys Tyr His Leu Asn Gly
500 505 510
Arg Asp Ser Leu Val Asn Pro Gly Pro Ala Met Ala Ser His Lys Asp
515 520 525
Asp Glu Glu Lys Phe Phe Pro Gln Ser Gly Val Leu Ile Phe Gly Lys
530 535 540
Gln Gly Ser Glu Lys Thr Asn Val Asp Ile Glu Lys Val Met Ile Thr
545 550 555 560
Asp Glu Glu Glu Ile Arg Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu Gln Tyr
565 570 575
Gly Ser Val Ser Thr Asn Leu Gln Arg Gly Asn Arg Gln Ala Ala Thr
580 585 590
Ala Asp Val Asn Thr Gln Gly Val Leu Pro Gly Met Val Trp Gln Asp
595 600 605
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<210> 17
<211> 621
<212> PRT
<213> Adeno-associated virus 2
<400> 17
Met Pro Gly Phe Tyr Glu Ile Val Ile Lys Val Pro Ser Asp Leu Asp
1 5 10 15
Gly His Leu Pro Gly Ile Ser Asp Ser Phe Val Asn Trp Val Ala Glu
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Lys Glu Trp Glu Leu Pro Pro Asp Ser Asp Met Asp Leu Asn Leu Ile
35 40 45
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50 55 60
Thr Glu Trp Arg Arg Val Ser Lys Ala Pro Glu Ala Leu Phe Phe Val
65 70 75 80
Gln Phe Glu Lys Gly Glu Ser Tyr Phe His Met His Val Leu Val Glu
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Thr Thr Gly Val Lys Ser Met Val Leu Gly Arg Phe Leu Ser Gln Ile
100 105 110
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115 120 125
Pro Asn Trp Phe Ala Val Thr Lys Thr Arg Asn Gly Ala Gly Gly Gly
130 135 140
Asn Lys Val Val Asp Glu Cys Tyr Ile Pro Asn Tyr Leu Leu Pro Lys
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165 170 175
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180 185 190
Leu Thr His Val Ser Gln Thr Gln Glu Gln Asn Lys Glu Asn Gln Asn
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Met Glu Leu Val Gly Trp Leu Val Asp Lys Gly Ile Thr Ser Glu Lys
225 230 235 240
Gln Trp Ile Gln Glu Asp Gln Ala Ser Tyr Ile Ser Phe Asn Ala Ala
245 250 255
Ser Asn Ser Arg Ser Gln Ile Lys Ala Ala Leu Asp Asn Ala Gly Lys
260 265 270
Ile Met Ser Leu Thr Lys Thr Ala Pro Asp Tyr Leu Val Gly Gln Gln
275 280 285
Pro Val Glu Asp Ile Ser Ser Asn Arg Ile Tyr Lys Ile Leu Glu Leu
290 295 300
Asn Gly Tyr Asp Pro Gln Tyr Ala Ala Ser Val Phe Leu Gly Trp Ala
305 310 315 320
Thr Lys Lys Phe Gly Lys Arg Asn Thr Ile Trp Leu Phe Gly Pro Ala
325 330 335
Thr Thr Gly Lys Thr Asn Ile Ala Glu Ala Ile Ala His Thr Val Pro
340 345 350
Phe Tyr Gly Cys Val Asn Trp Thr Asn Glu Asn Phe Pro Phe Asn Asp
355 360 365
Cys Val Asp Lys Met Val Ile Trp Trp Glu Glu Gly Lys Met Thr Ala
370 375 380
Lys Val Val Glu Ser Ala Lys Ala Ile Leu Gly Gly Ser Lys Val Arg
385 390 395 400
Val Asp Gln Lys Cys Lys Ser Ser Ala Gln Ile Asp Pro Thr Pro Val
405 410 415
Ile Val Thr Ser Asn Thr Asn Met Cys Ala Val Ile Asp Gly Asn Ser
420 425 430
Thr Thr Phe Glu His Gln Gln Pro Leu Gln Asp Arg Met Phe Lys Phe
435 440 445
Glu Leu Thr Arg Arg Leu Asp His Asp Phe Gly Lys Val Thr Lys Gln
450 455 460
Glu Val Lys Asp Phe Phe Arg Trp Ala Lys Asp His Val Val Glu Val
465 470 475 480
Glu His Glu Phe Tyr Val Lys Lys Gly Gly Ala Lys Lys Arg Pro Ala
485 490 495
Pro Ser Asp Ala Asp Ile Ser Glu Pro Lys Arg Val Arg Glu Ser Val
500 505 510
Ala Gln Pro Ser Thr Ser Asp Ala Glu Ala Ser Ile Asn Tyr Ala Asp
515 520 525
Arg Tyr Gln Asn Lys Cys Ser Arg His Val Gly Met Asn Leu Met Leu
530 535 540
Phe Pro Cys Arg Gln Cys Glu Arg Met Asn Gln Asn Ser Asn Ile Cys
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Phe Thr His Gly Gln Lys Asp Cys Leu Glu Cys Phe Pro Val Ser Glu
565 570 575
Ser Gln Pro Val Ser Val Val Lys Lys Ala Tyr Gln Lys Leu Cys Tyr
580 585 590
Ile His His Ile Met Gly Lys Val Pro Asp Ala Cys Thr Ala Cys Asp
595 600 605
Leu Val Asn Val Asp Leu Asp Asp Cys Ile Phe Glu Gln
610 615 620
<210> 18
<211> 4675
<212> DNA
<213> Adeno-associated virus serotype 2
<400> 18
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgggcgacc aaaggtcgcc 60
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accttgacgg gcatctgccc ggcatttctg acagctttgt gaactgggtg gccgagaagg 420
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ccaattactt gctccccaaa acccagcctg agctccagtg ggcgtggact aatatggaac 840
agtatttaag cgcctgtttg aatctcacgg agcgtaaacg gttggtggcg cagcatctga 900
cgcacgtgtc gcagacgcag gagcagaaca aagagaatca gaatcccaat tctgatgcgc 960
cggtgatcag atcaaaaact tcagccaggt acatggagct ggtcgggtgg ctcgtggaca 1020
aggggattac ctcggagaag cagtggatcc aggaggacca ggcctcatac atctccttca 1080
atgcggcctc caactcgcgg tcccaaatca aggctgcctt ggacaatgcg ggaaagatta 1140
tgagcctgac taaaaccgcc cccgactacc tggtgggcca gcagcccgtg gaggacattt 1200
ccagcaatcg gatttataaa attttggaac taaacgggta cgatccccaa tatgcggctt 1260
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atcagaattc aaatatctgc ttcactcacg gacagaaaga ctgtttagag tgctttcccg 2040
tgtcagaatc tcaacccgtt tctgtcgtca aaaaggcgta tcagaaactg tgctacattc 2100
atcatatcat gggaaaggtg ccagacgctt gcactgcctg cgatctggtc aatgtggatt 2160
tggatgactg catctttgaa caataaatga tttaaatcag gtatggctgc cgatggttat 2220
cttccagatt ggctcgagga cactctctct gaaggaataa gacagtggtg gaagctcaaa 2280
cctggcccac caccaccaaa gcccgcagag cggcataagg acgacagcag gggtcttgtg 2340
cttcctgggt acaagtacct cggacccttc aacggactcg acaagggaga gccggtcaac 2400
gaggcagacg ccgcggccct cgagcacgta caaagcctac gaccggcagc tcgacagcgg 2460
agacaacccg tacctcaagt acaaccacgc cgacgcggag tttcaggagc gccttaaaga 2520
agatacgtct tttgggggca acctcggacg agcagtcttc caggcgaaaa agagggttct 2580
tgaacctctg ggcctggttg aggaacctgt taagacggct ccgggaaaaa agaggccggt 2640
agagcactct cctgtggagc cagactcctc ctcgggaacc ggaaaggcgg gccagcagcc 2700
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gcctctcgga cagccaccag cagccccctc tggtctggga actaatacga tggctacagg 2820
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ctcgaacgac aatcactact ttggctacag caccccttgg gggtattttg acttcaacag 3060
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ccgacccaag agactcaact tcaagctctt taacattcaa gtcaaagagg tcacgcagaa 3180
tgacggtacg acgacgattg ccaataacct taccagcacg gttcaggtgt ttactgactc 3240
ggagtaccag ctcccgtacg tcctcggctc ggcgcatcaa ggatgcctcc cgccgttccc 3300
agcagacgtc ttcatggtgc cacagtatgg atacctcacc ctgaacaacg ggagtcaggc 3360
agtaggacgc tcttcatttt actgcctgga gtactttcct tctcagatgc tgcgtaccgg 3420
aaacaacttt accttcagct acacttttga ggacgttcct ttccacagca gctacgctca 3480
cagccagagt ctggaccgtc tcatgaatcc tctcatcgac cagtacctgt attacttgag 3540
cagaacaaac actccaagtg gaaccaccac gcagtcaagg cttcagtttt ctcaggccgg 3600
agcgagtgac attcgggacc agtctaggaa ctggcttcct ggaccctgtt accgccagca 3660
gcgagtatca aagacatctg cggataacaa caacagtgaa tactcgtgga ctggagctac 3720
caagtaccac ctcaatggca gagactctct ggtgaatccg gccatggcaa gccacaagga 3780
cgatgaagaa aagttttttc ctcagagcgg ggttctcatc tttgggaagc aaggctcaga 3840
gaaaacaaat gtgaacattg aaaaggtcat gattacagac gaagaggaaa tcggaacaac 3900
caatcccgtg gctacggagc agtatggttc tgtatctacc aacctccaga gaggcaacag 3960
acaagcagct accgcagatg tcaacacaca aggcgttctt ccaggcatgg tctggcagga 4020
cagagatgtg taccttcagg ggcccatctg ggcaaagatt ccacacacgg acggacattt 4080
tcacccctct cccctcatgg gtggattcgg acttaaacac cctcctccac agattctcat 4140
caagaacacc ccggtacctg cgaatccttc gaccaccttc agtgcggcaa agtttgcttc 4200
cttcatcaca cagtactcca cgggacacgg tcagcgtgga gatcgagtgg gagctgcaga 4260
aggaaaacag caaacgctgg aatcccgaaa ttcagtacac ttccaactac aacaagtctg 4320
ttaatcgtgg acttaccgtg gatactaatg gcgtgtattc agagcctcgc cccattggca 4380
ccagatacct gactcgtaat ctgtaattgc ttgttaatca ataaaccgtt taattcgttt 4440
cagttgaact ttggtctctg cgtatttctt tcttatctag tttccatggc tacgtagata 4500
agtagcatgg cgggttaatc attaactaca aggaacccct agtgatggag ttggccactc 4560
cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgggcgacc aaaggtcgcc cgacgcccgg 4620
gctttgcccg ggcggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg gccaa 4675
<210> 19
<211> 4679
<212> DNA
<213> Adeno-associated virus 2
<400> 19
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgggcgacc aaaggtcgcc 60
cgacgcccgg gctttgcccg ggcggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctggagg ggtggagtcg tgacgtgaat tacgtcatag 180
ggttagggag gtcctgtatt agaggtcacg tgagtgtttt gcgacatttt gcgacaccat 240
gtggtcacgc tgggtattta agcccgagtg agcacgcagg gtctccattt tgaagcggga 300
ggtttgaacg cgcagccgcc atgccggggt tttacgagat tgtgattaag gtccccagcg 360
accttgacgg gcatctgccc ggcatttctg acagctttgt gaactgggtg gccgagaagg 420
aatgggagtt gccgccagat tctgacatgg atctgaatct gattgagcag gcacccctga 480
ccgtggccga gaagctgcag cgcgactttc tgacggaatg gcgccgtgtg agtaaggccc 540
cggaggccct tttctttgtg caatttgaga agggagagag ctacttccac atgcacgtgc 600
tcgtggaaac caccggggtg aaatccatgg ttttgggacg tttcctgagt cagattcgcg 660
aaaaactgat tcagagaatt taccgcggga tcgagccgac tttgccaaac tggttcgcgg 720
tcacaaagac cagaaatggc gccggaggcg ggaacaaggt ggtggatgag tgctacatcc 780
ccaattactt gctccccaaa acccagcctg agctccagtg ggcgtggact aatatggaac 840
agtatttaag cgcctgtttg aatctcacgg agcgtaaacg gttggtggcg cagcatctga 900
cgcacgtgtc gcagacgcag gagcagaaca aagagaatca gaatcccaat tctgatgcgc 960
cggtgatcag atcaaaaact tcagccaggt acatggagct ggtcgggtgg ctcgtggaca 1020
aggggattac ctcggagaag cagtggatcc aggaggacca ggcctcatac atctccttca 1080
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tgagcctgac taaaaccgcc cccgactacc tggtgggcca gcagcccgtg gaggacattt 1200
ccagcaatcg gatttataaa attttggaac taaacgggta cgatccccaa tatgcggctt 1260
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tgatctggtg ggaggagggg aagatgaccg ccaaggtcgt ggagtcggcc aaagccattc 1500
tcggaggaag caaggtgcgc gtggaccaga aatgcaagtc ctcggcccag atagacccga 1560
ctcccgtgat cgtcacctcc aacaccaaca tgtgcgccgt gattgacggg aactcaacga 1620
ccttcgaaca ccagcagccg ttgcaagacc ggatgttcaa atttgaactc acccgccgtc 1680
tggatcatga ctttgggaag gtcaccaagc aggaagtcaa agactttttc cggtgggcaa 1740
aggatcacgt ggttgaggtg gagcatgaat tctacgtcaa aaagggtgga gccaagaaaa 1800
gacccgcccc cagtgacgca gatataagtg agcccaaacg ggtgcgcgag tcagttgcgc 1860
agccatcgac gtcagacgcg gaagcttcga tcaactacgc agacaggtac caaaacaaat 1920
gttctcgtca cgtgggcatg aatctgatgc tgtttccctg cagacaatgc gagagaatga 1980
atcagaattc aaatatctgc ttcactcacg gacagaaaga ctgtttagag tgctttcccg 2040
tgtcagaatc tcaacccgtt tctgtcgtca aaaaggcgta tcagaaactg tgctacattc 2100
atcatatcat gggaaaggtg ccagacgctt gcactgcctg cgatctggtc aatgtggatt 2160
tggatgactg catctttgaa caataaatga tttaaatcag gtatggctgc cgatggttat 2220
cttccagatt ggctcgagga cactctctct gaaggaataa gacagtggtg gaagctcaaa 2280
cctggcccac caccaccaaa gcccgcagag cggcataagg acgacagcag gggtcttgtg 2340
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gcaagaaaaa gattgaattt tggtcagact ggagacgcag actcagtacc tgacccccag 2760
cctctcggac agccaccagc agccccctct ggtctgggaa ctaatacgat ggctacaggc 2820
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aattggcatt gcgattccac atggatgggc gacagagtca tcaccaccag cacccgaacc 2940
tgggccctgc ccacctacaa caaccacctc tacaaacaaa tttccagcca atcaggagcc 3000
tcgaacgaca atcactactt tggctacagc accccttggg ggtattttga cttcaacaga 3060
ttccactgcc acttttcacc acgtgactgg caaagactca tcaacaacaa ctggggattc 3120
cgacccaaga gactcaactt caagctcttt aacattcaag tcaaagaggt cacgcagaat 3180
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<210> 20
<211> 725
<212> PRT
<213> Adeno-associated virus 5
<400> 20
Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Thr Leu Ser
1 5 10 15
Glu Gly Ile Arg Gln Trp Trp Lys Leu Lys Pro Gly Pro Pro Pro Pro
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Lys Pro Ala Glu Arg His Lys Asp Asp Ser Arg Gly Leu Val Leu Pro
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50 55 60
Val Asn Glu Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp
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Arg Gln Leu Asp Ser Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala
85 90 95
Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Lys Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly
100 105 110
Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro
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Phe Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg
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Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp
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Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser
165 170 175
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195 200 205
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Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu
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<212> PRT
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<213> Adeno-associated virus 3B
<400> 46
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ggccctcttt tttgtccagt tcgaaaaggg ggagacctac ttccacctgc acgtgctgat 600
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atcttcacct ctgaggagga gctggcagcc accaacgcca ccgatacgga catgtggggc 1140
aacctacctg gcggtgacca gagcaacagc aacctgccga ccgtggacag actgacagcc 1200
ttgggagccg tgcctggaat ggtctggcaa aacagagaca tttactacca gggtcccatt 1260
tgggccaaga ttcctcatac cgatggacac tttcacccct caccgctgat tggtgggttt 1320
gggctgaaac acccgcctcc tcaaattttt atcaagaaca ccccggtacc tgcgaatcct 1380
gcaacgacct tcagctctac tccggtaaac tccttcatta ctcagtacag cactggccag 1440
gtgtcggtgc agattgactg ggagatccag aaggagcggt ccaaacgctg gaaccccgag 1500
gtccagttta cctccaacta cggacagcaa aactctctgt tgtgggctcc cgatgcggct 1560
gggaaataca ctgagcctag ggctatcggt acccgctacc tcacccacca cctgtaa 1617
<210> 53
<211> 939
<212> DNA
<213> Adeno-associated virus 4
<400> 53
atggagctgg tcgggtggct ggtggaccgc gggatcacgt cagaaaagca atggatccag 60
gaggaccagg cgtcctacat ctccttcaac gccgcctcca actcgcggtc acaaatcaag 120
gccgcgctgg acaatgcctc caaaatcatg agcctgacaa agacggctcc ggactacctg 180
gtgggccaga acccgccgga ggacatttcc agcaaccgca tctaccgaat cctcgagatg 240
aacgggtacg atccgcagta cgcggcctcc gtcttcctgg gctgggcgca aaagaagttc 300
gggaagagga acaccatctg gctctttggg ccggccacga cgggtaaaac caacatcgcg 360
gaagccatcg cccacgccgt gcccttctac ggctgcgtga actggaccaa tgagaacttt 420
ccgttcaacg attgcgtcga caagatggtg atctggtggg aggagggcaa gatgacggcc 480
aaggtcgtag agagcgccaa ggccatcctg ggcggaagca aggtgcgcgt ggaccaaaag 540
tgcaagtcat cggcccagat cgacccaact cccgtgatcg tcacctccaa caccaacatg 600
tgcgcggtca tcgacggaaa ctcgaccacc ttcgagcacc aacaaccact ccaggaccgg 660
atgttcaagt tcgagctcac caagcgcctg gagcacgact ttggcaaggt caccaagcag 720
gaagtcaaag actttttccg gtgggcgtca gatcacgtga ccgaggtgac tcacgagttt 780
tacgtcagaa agggtggagc tagaaagagg cccgccccca atgacgcaga tataagtgag 840
cccaagcggg cctgtccgtc agttgcgcag ccatcgacgt cagacgcgga agctccggtg 900
gactacgcgg acagattggc tagaggacaa cctctctga 939
<210> 54
<211> 1197
<212> DNA
<213> Adeno-associated virus 4
<400> 54
atggagctgg tcgggtggct ggtggaccgc gggatcacgt cagaaaagca atggatccag 60
gaggaccagg cgtcctacat ctccttcaac gccgcctcca actcgcggtc acaaatcaag 120
gccgcgctgg acaatgcctc caaaatcatg agcctgacaa agacggctcc ggactacctg 180
gtgggccaga acccgccgga ggacatttcc agcaaccgca tctaccgaat cctcgagatg 240
aacgggtacg atccgcagta cgcggcctcc gtcttcctgg gctgggcgca aaagaagttc 300
gggaagagga acaccatctg gctctttggg ccggccacga cgggtaaaac caacatcgcg 360
gaagccatcg cccacgccgt gcccttctac ggctgcgtga actggaccaa tgagaacttt 420
ccgttcaacg attgcgtcga caagatggtg atctggtggg aggagggcaa gatgacggcc 480
aaggtcgtag agagcgccaa ggccatcctg ggcggaagca aggtgcgcgt ggaccaaaag 540
tgcaagtcat cggcccagat cgacccaact cccgtgatcg tcacctccaa caccaacatg 600
tgcgcggtca tcgacggaaa ctcgaccacc ttcgagcacc aacaaccact ccaggaccgg 660
atgttcaagt tcgagctcac caagcgcctg gagcacgact ttggcaaggt caccaagcag 720
gaagtcaaag actttttccg gtgggcgtca gatcacgtga ccgaggtgac tcacgagttt 780
tacgtcagaa agggtggagc tagaaagagg cccgccccca atgacgcaga tataagtgag 840
cccaagcggg cctgtccgtc agttgcgcag ccatcgacgt cagacgcgga agctccggtg 900
gactacgcgg acaggtacca aaacaaatgt tctcgtcacg tgggtatgaa tctgatgctt 960
tttccctgcc ggcaatgcga gagaatgaat cagaatgtgg acatttgctt cacgcacggg 1020
gtcatggact gtgccgagtg cttccccgtg tcagaatctc aacccgtgtc tgtcgtcaga 1080
aagcggacgt atcagaaact gtgtccgatt catcacatca tggggagggc gcccgaggtg 1140
gcctgctcgg cctgcgaact ggccaatgtg gacttggatg actgtgacat ggaacaa 1197
<210> 55
<211> 245
<212> DNA
<213> Adeno-associated virus 4
<400> 55
ctccatcatc taggtttgcc cactgacgtc aatgtgacgt cctagggtta gggaggtccc 60
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gcagc 245
<210> 56
<211> 313
<212> PRT
<213> Adeno-associated virus 4
<220>
<221> MOD_RES
<222> (313)..(313)
<223> Any amino acid
<400> 56
Met Glu Leu Val Gly Trp Leu Val Asp Arg Gly Ile Thr Ser Glu Lys
1 5 10 15
Gln Trp Ile Gln Glu Asp Gln Ala Ser Tyr Ile Ser Phe Asn Ala Ala
20 25 30
Ser Asn Ser Arg Ser Gln Ile Lys Ala Ala Leu Asp Asn Ala Ser Lys
35 40 45
Ile Met Ser Leu Thr Lys Thr Ala Pro Asp Tyr Leu Val Gly Gln Asn
50 55 60
Pro Pro Glu Asp Ile Ser Ser Asn Arg Ile Tyr Arg Ile Leu Glu Met
65 70 75 80
Asn Gly Tyr Asp Pro Gln Tyr Ala Ala Ser Val Phe Leu Gly Trp Ala
85 90 95
Gln Lys Lys Phe Gly Lys Arg Asn Thr Ile Trp Leu Phe Gly Pro Ala
100 105 110
Thr Thr Gly Lys Thr Asn Ile Ala Glu Ala Ile Ala His Ala Val Pro
115 120 125
Phe Tyr Gly Cys Val Asn Trp Thr Asn Glu Asn Phe Pro Phe Asn Asp
130 135 140
Cys Val Asp Lys Met Val Ile Trp Trp Glu Glu Gly Lys Met Thr Ala
145 150 155 160
Lys Val Val Glu Ser Ala Lys Ala Ile Leu Gly Gly Ser Lys Val Arg
165 170 175
Val Asp Gln Lys Cys Lys Ser Ser Ala Gln Ile Asp Pro Thr Pro Val
180 185 190
Ile Val Thr Ser Asn Thr Asn Met Cys Ala Val Ile Asp Gly Asn Ser
195 200 205
Thr Thr Phe Glu His Gln Gln Pro Leu Gln Asp Arg Met Phe Lys Phe
210 215 220
Glu Leu Thr Lys Arg Leu Glu His Asp Phe Gly Lys Val Thr Lys Gln
225 230 235 240
Glu Val Lys Asp Phe Phe Arg Trp Ala Ser Asp His Val Thr Glu Val
245 250 255
Thr His Glu Phe Tyr Val Arg Lys Gly Gly Ala Arg Lys Arg Pro Ala
260 265 270
Pro Asn Asp Ala Asp Ile Ser Glu Pro Lys Arg Ala Cys Pro Ser Val
275 280 285
Ala Gln Pro Ser Thr Ser Asp Ala Glu Ala Pro Val Asp Tyr Ala Asp
290 295 300
Arg Leu Ala Arg Gly Gln Pro Leu Xaa
305 310
<210> 57
<211> 399
<212> PRT
<213> Adeno-associated virus 4
<400> 57
Met Glu Leu Val Gly Trp Leu Val Asp Arg Gly Ile Thr Ser Glu Lys
1 5 10 15
Gln Trp Ile Gln Glu Asp Gln Ala Ser Tyr Ile Ser Phe Asn Ala Ala
20 25 30
Ser Asn Ser Arg Ser Gln Ile Lys Ala Ala Leu Asp Asn Ala Ser Lys
35 40 45
Ile Met Ser Leu Thr Lys Thr Ala Pro Asp Tyr Leu Val Gly Gln Asn
50 55 60
Pro Pro Glu Asp Ile Ser Ser Asn Arg Ile Tyr Arg Ile Leu Glu Met
65 70 75 80
Asn Gly Tyr Asp Pro Gln Tyr Ala Ala Ser Val Phe Leu Gly Trp Ala
85 90 95
Gln Lys Lys Phe Gly Lys Arg Asn Thr Ile Trp Leu Phe Gly Pro Ala
100 105 110
Thr Thr Gly Lys Thr Asn Ile Ala Glu Ala Ile Ala His Ala Val Pro
115 120 125
Phe Tyr Gly Cys Val Asn Trp Thr Asn Glu Asn Phe Pro Phe Asn Asp
130 135 140
Cys Val Asp Lys Met Val Ile Trp Trp Glu Glu Gly Lys Met Thr Ala
145 150 155 160
Lys Val Val Glu Ser Ala Lys Ala Ile Leu Gly Gly Ser Lys Val Arg
165 170 175
Val Asp Gln Lys Cys Lys Ser Ser Ala Gln Ile Asp Pro Thr Pro Val
180 185 190
Ile Val Thr Ser Asn Thr Asn Met Cys Ala Val Ile Asp Gly Asn Ser
195 200 205
Thr Thr Phe Glu His Gln Gln Pro Leu Gln Asp Arg Met Phe Lys Phe
210 215 220
Glu Leu Thr Lys Arg Leu Glu His Asp Phe Gly Lys Val Thr Lys Gln
225 230 235 240
Glu Val Lys Asp Phe Phe Arg Trp Ala Ser Asp His Val Thr Glu Val
245 250 255
Thr His Glu Phe Tyr Val Arg Lys Gly Gly Ala Arg Lys Arg Pro Ala
260 265 270
Pro Asn Asp Ala Asp Ile Ser Glu Pro Lys Arg Ala Cys Pro Ser Val
275 280 285
Ala Gln Pro Ser Thr Ser Asp Ala Glu Ala Pro Val Asp Tyr Ala Asp
290 295 300
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305 310 315 320
Phe Pro Cys Arg Gln Cys Glu Arg Met Asn Gln Asn Val Asp Ile Cys
325 330 335
Phe Thr His Gly Val Met Asp Cys Ala Glu Cys Phe Pro Val Ser Glu
340 345 350
Ser Gln Pro Val Ser Val Val Arg Lys Arg Thr Tyr Gln Lys Leu Cys
355 360 365
Pro Ile His His Ile Met Gly Arg Ala Pro Glu Val Ala Cys Ser Ala
370 375 380
Cys Glu Leu Ala Asn Val Asp Leu Asp Asp Cys Asp Met Glu Gln
385 390 395
<210> 58
<211> 623
<212> PRT
<213> Adeno-associated virus 4
<400> 58
Met Pro Gly Phe Tyr Glu Ile Val Leu Lys Val Pro Ser Asp Leu Asp
1 5 10 15
Glu His Leu Pro Gly Ile Ser Asp Ser Phe Val Ser Trp Val Ala Glu
20 25 30
Lys Glu Trp Glu Leu Pro Pro Asp Ser Asp Met Asp Leu Asn Leu Ile
35 40 45
Glu Gln Ala Pro Leu Thr Val Ala Glu Lys Leu Gln Arg Glu Phe Leu
50 55 60
Val Glu Trp Arg Arg Val Ser Lys Ala Pro Glu Ala Leu Phe Phe Val
65 70 75 80
Gln Phe Glu Lys Gly Asp Ser Tyr Phe His Leu His Ile Leu Val Glu
85 90 95
Thr Val Gly Val Lys Ser Met Val Val Gly Arg Tyr Val Ser Gln Ile
100 105 110
Lys Glu Lys Leu Val Thr Arg Ile Tyr Arg Gly Val Glu Pro Gln Leu
115 120 125
Pro Asn Trp Phe Ala Val Thr Lys Thr Arg Asn Gly Ala Gly Gly Gly
130 135 140
Asn Lys Val Val Asp Asp Cys Tyr Ile Pro Asn Tyr Leu Leu Pro Lys
145 150 155 160
Thr Gln Pro Glu Leu Gln Trp Ala Trp Thr Asn Met Asp Gln Tyr Ile
165 170 175
Ser Ala Cys Leu Asn Leu Ala Glu Arg Lys Arg Leu Val Ala Gln His
180 185 190
Leu Thr His Val Ser Gln Thr Gln Glu Gln Asn Lys Glu Asn Gln Asn
195 200 205
Pro Asn Ser Asp Ala Pro Val Ile Arg Ser Lys Thr Ser Ala Arg Tyr
210 215 220
Met Glu Leu Val Gly Trp Leu Val Asp Arg Gly Ile Thr Ser Glu Lys
225 230 235 240
Gln Trp Ile Gln Glu Asp Gln Ala Ser Tyr Ile Ser Phe Asn Ala Ala
245 250 255
Ser Asn Ser Arg Ser Gln Ile Lys Ala Ala Leu Asp Asn Ala Ser Lys
260 265 270
Ile Met Ser Leu Thr Lys Thr Ala Pro Asp Tyr Leu Val Gly Gln Asn
275 280 285
Pro Pro Glu Asp Ile Ser Ser Asn Arg Ile Tyr Arg Ile Leu Glu Met
290 295 300
Asn Gly Tyr Asp Pro Gln Tyr Ala Ala Ser Val Phe Leu Gly Trp Ala
305 310 315 320
Gln Lys Lys Phe Gly Lys Arg Asn Thr Ile Trp Leu Phe Gly Pro Ala
325 330 335
Thr Thr Gly Lys Thr Asn Ile Ala Glu Ala Ile Ala His Ala Val Pro
340 345 350
Phe Tyr Gly Cys Val Asn Trp Thr Asn Glu Asn Phe Pro Phe Asn Asp
355 360 365
Cys Val Asp Lys Met Val Ile Trp Trp Glu Glu Gly Lys Met Thr Ala
370 375 380
Lys Val Val Glu Ser Ala Lys Ala Ile Leu Gly Gly Ser Lys Val Arg
385 390 395 400
Val Asp Gln Lys Cys Lys Ser Ser Ala Gln Ile Asp Pro Thr Pro Val
405 410 415
Ile Val Thr Ser Asn Thr Asn Met Cys Ala Val Ile Asp Gly Asn Ser
420 425 430
Thr Thr Phe Glu His Gln Gln Pro Leu Gln Asp Arg Met Phe Lys Phe
435 440 445
Glu Leu Thr Lys Arg Leu Glu His Asp Phe Gly Lys Val Thr Lys Gln
450 455 460
Glu Val Lys Asp Phe Phe Arg Trp Ala Ser Asp His Val Thr Glu Val
465 470 475 480
Thr His Glu Phe Tyr Val Arg Lys Gly Gly Ala Arg Lys Arg Pro Ala
485 490 495
Pro Asn Asp Ala Asp Ile Ser Glu Pro Lys Arg Ala Cys Pro Ser Val
500 505 510
Ala Gln Pro Ser Thr Ser Asp Ala Glu Ala Pro Val Asp Tyr Ala Asp
515 520 525
Arg Tyr Gln Asn Lys Cys Ser Arg His Val Gly Met Asn Leu Met Leu
530 535 540
Phe Pro Cys Arg Gln Cys Glu Arg Met Asn Gln Asn Val Asp Ile Cys
545 550 555 560
Phe Thr His Gly Val Met Asp Cys Ala Glu Cys Phe Pro Val Ser Glu
565 570 575
Ser Gln Pro Val Ser Val Val Arg Lys Arg Thr Tyr Gln Lys Leu Cys
580 585 590
Pro Ile His His Ile Met Gly Arg Ala Pro Glu Val Ala Cys Ser Ala
595 600 605
Cys Glu Leu Ala Asn Val Asp Leu Asp Asp Cys Asp Met Glu Gln
610 615 620
<210> 59
<211> 537
<212> PRT
<213> Adeno-associated virus 4
<220>
<221> MOD_RES
<222> (537)..(537)
<223> Any amino acid
<400> 59
Met Pro Gly Phe Tyr Glu Ile Val Leu Lys Val Pro Ser Asp Leu Asp
1 5 10 15
Glu His Leu Pro Gly Ile Ser Asp Ser Phe Val Ser Trp Val Ala Glu
20 25 30
Lys Glu Trp Glu Leu Pro Pro Asp Ser Asp Met Asp Leu Asn Leu Ile
35 40 45
Glu Gln Ala Pro Leu Thr Val Ala Glu Lys Leu Gln Arg Glu Phe Leu
50 55 60
Val Glu Trp Arg Arg Val Ser Lys Ala Pro Glu Ala Leu Phe Phe Val
65 70 75 80
Gln Phe Glu Lys Gly Asp Ser Tyr Phe His Leu His Ile Leu Val Glu
85 90 95
Thr Val Gly Val Lys Ser Met Val Val Gly Arg Tyr Val Ser Gln Ile
100 105 110
Lys Glu Lys Leu Val Thr Arg Ile Tyr Arg Gly Val Glu Pro Gln Leu
115 120 125
Pro Asn Trp Phe Ala Val Thr Lys Thr Arg Asn Gly Ala Gly Gly Gly
130 135 140
Asn Lys Val Val Asp Asp Cys Tyr Ile Pro Asn Tyr Leu Leu Pro Lys
145 150 155 160
Thr Gln Pro Glu Leu Gln Trp Ala Trp Thr Asn Met Asp Gln Tyr Ile
165 170 175
Ser Ala Cys Leu Asn Leu Ala Glu Arg Lys Arg Leu Val Ala Gln His
180 185 190
Leu Thr His Val Ser Gln Thr Gln Glu Gln Asn Lys Glu Asn Gln Asn
195 200 205
Pro Asn Ser Asp Ala Pro Val Ile Arg Ser Lys Thr Ser Ala Arg Tyr
210 215 220
Met Glu Leu Val Gly Trp Leu Val Asp Arg Gly Ile Thr Ser Glu Lys
225 230 235 240
Gln Trp Ile Gln Glu Asp Gln Ala Ser Tyr Ile Ser Phe Asn Ala Ala
245 250 255
Ser Asn Ser Arg Ser Gln Ile Lys Ala Ala Leu Asp Asn Ala Ser Lys
260 265 270
Ile Met Ser Leu Thr Lys Thr Ala Pro Asp Tyr Leu Val Gly Gln Asn
275 280 285
Pro Pro Glu Asp Ile Ser Ser Asn Arg Ile Tyr Arg Ile Leu Glu Met
290 295 300
Asn Gly Tyr Asp Pro Gln Tyr Ala Ala Ser Val Phe Leu Gly Trp Ala
305 310 315 320
Gln Lys Lys Phe Gly Lys Arg Asn Thr Ile Trp Leu Phe Gly Pro Ala
325 330 335
Thr Thr Gly Lys Thr Asn Ile Ala Glu Ala Ile Ala His Ala Val Pro
340 345 350
Phe Tyr Gly Cys Val Asn Trp Thr Asn Glu Asn Phe Pro Phe Asn Asp
355 360 365
Cys Val Asp Lys Met Val Ile Trp Trp Glu Glu Gly Lys Met Thr Ala
370 375 380
Lys Val Val Glu Ser Ala Lys Ala Ile Leu Gly Gly Ser Lys Val Arg
385 390 395 400
Val Asp Gln Lys Cys Lys Ser Ser Ala Gln Ile Asp Pro Thr Pro Val
405 410 415
Ile Val Thr Ser Asn Thr Asn Met Cys Ala Val Ile Asp Gly Asn Ser
420 425 430
Thr Thr Phe Glu His Gln Gln Pro Leu Gln Asp Arg Met Phe Lys Phe
435 440 445
Glu Leu Thr Lys Arg Leu Glu His Asp Phe Gly Lys Val Thr Lys Gln
450 455 460
Glu Val Lys Asp Phe Phe Arg Trp Ala Ser Asp His Val Thr Glu Val
465 470 475 480
Thr His Glu Phe Tyr Val Arg Lys Gly Gly Ala Arg Lys Arg Pro Ala
485 490 495
Pro Asn Asp Ala Asp Ile Ser Glu Pro Lys Arg Ala Cys Pro Ser Val
500 505 510
Ala Gln Pro Ser Thr Ser Asp Ala Glu Ala Pro Val Asp Tyr Ala Asp
515 520 525
Arg Leu Ala Arg Gly Gln Pro Leu Xaa
530 535
<210> 60
<211> 623
<212> PRT
<213> Adeno-associated virus 4
<400> 60
Met Pro Gly Phe Tyr Glu Ile Val Leu Lys Val Pro Ser Asp Leu Asp
1 5 10 15
Glu His Leu Pro Gly Ile Ser Asp Ser Phe Val Ser Trp Val Ala Glu
20 25 30
Lys Glu Trp Glu Leu Pro Pro Asp Ser Asp Met Asp Leu Asn Leu Ile
35 40 45
Glu Gln Ala Pro Leu Thr Val Ala Glu Lys Leu Gln Arg Glu Phe Leu
50 55 60
Val Glu Trp Arg Arg Val Ser Lys Ala Pro Glu Ala Leu Phe Phe Val
65 70 75 80
Gln Phe Glu Lys Gly Asp Ser Tyr Phe His Leu His Ile Leu Val Glu
85 90 95
Thr Val Gly Val Lys Ser Met Val Val Gly Arg Tyr Val Ser Gln Ile
100 105 110
Lys Glu Lys Leu Val Thr Arg Ile Tyr Arg Gly Val Glu Pro Gln Leu
115 120 125
Pro Asn Trp Phe Ala Val Thr Lys Thr Arg Asn Gly Ala Gly Gly Gly
130 135 140
Asn Lys Val Val Asp Asp Cys Tyr Ile Pro Asn Tyr Leu Leu Pro Lys
145 150 155 160
Thr Gln Pro Glu Leu Gln Trp Ala Trp Thr Asn Met Asp Gln Tyr Ile
165 170 175
Ser Ala Cys Leu Asn Leu Ala Glu Arg Lys Arg Leu Val Ala Gln His
180 185 190
Leu Thr His Val Ser Gln Thr Gln Glu Gln Asn Lys Glu Asn Gln Asn
195 200 205
Pro Asn Ser Asp Ala Pro Val Ile Arg Ser Lys Thr Ser Ala Arg Tyr
210 215 220
Met Glu Leu Val Gly Trp Leu Val Asp Arg Gly Ile Thr Ser Glu Lys
225 230 235 240
Gln Trp Ile Gln Glu Asp Gln Ala Ser Tyr Ile Ser Phe Asn Ala Ala
245 250 255
Ser Asn Ser Arg Ser Gln Ile Lys Ala Ala Leu Asp Asn Ala Ser Lys
260 265 270
Ile Met Ser Leu Thr Lys Thr Ala Pro Asp Tyr Leu Val Gly Gln Asn
275 280 285
Pro Pro Glu Asp Ile Ser Ser Asn Arg Ile Tyr Arg Ile Leu Glu Met
290 295 300
Asn Gly Tyr Asp Pro Gln Tyr Ala Ala Ser Val Phe Leu Gly Trp Ala
305 310 315 320
Gln Lys Lys Phe Gly Lys Arg Asn Thr Ile Trp Leu Phe Gly Pro Ala
325 330 335
Thr Thr Gly Lys Thr Asn Ile Ala Glu Ala Ile Ala His Ala Val Pro
340 345 350
Phe Tyr Gly Cys Val Asn Trp Thr Asn Glu Asn Phe Pro Phe Asn Asp
355 360 365
Cys Val Asp Lys Met Val Ile Trp Trp Glu Glu Gly Lys Met Thr Ala
370 375 380
Lys Val Val Glu Ser Ala Lys Ala Ile Leu Gly Gly Ser Lys Val Arg
385 390 395 400
Val Asp Gln Lys Cys Lys Ser Ser Ala Gln Ile Asp Pro Thr Pro Val
405 410 415
Ile Val Thr Ser Asn Thr Asn Met Cys Ala Val Ile Asp Gly Asn Ser
420 425 430
Thr Thr Phe Glu His Gln Gln Pro Leu Gln Asp Arg Met Phe Lys Phe
435 440 445
Glu Leu Thr Lys Arg Leu Glu His Asp Phe Gly Lys Val Thr Lys Gln
450 455 460
Glu Val Lys Asp Phe Phe Arg Trp Ala Ser Asp His Val Thr Glu Val
465 470 475 480
Thr His Glu Phe Tyr Val Arg Lys Gly Gly Ala Arg Lys Arg Pro Ala
485 490 495
Pro Asn Asp Ala Asp Ile Ser Glu Pro Lys Arg Ala Cys Pro Ser Val
500 505 510
Ala Gln Pro Ser Thr Ser Asp Ala Glu Ala Pro Val Asp Tyr Ala Asp
515 520 525
Arg Tyr Gln Asn Lys Cys Ser Arg His Val Gly Met Asn Leu Met Leu
530 535 540
Phe Pro Cys Arg Gln Cys Glu Arg Met Asn Gln Asn Val Asp Ile Cys
545 550 555 560
Phe Thr His Gly Val Met Asp Cys Ala Glu Cys Phe Pro Val Ser Glu
565 570 575
Ser Gln Pro Val Ser Val Val Arg Lys Arg Thr Tyr Gln Lys Leu Cys
580 585 590
Pro Ile His His Ile Met Gly Arg Ala Pro Glu Val Ala Cys Ser Ala
595 600 605
Cys Glu Leu Ala Asn Val Asp Leu Asp Asp Cys Asp Met Glu Gln
610 615 620
<210> 61
<211> 544
<212> PRT
<213> Adeno-associated virus 4
<400> 61
Met Ser Asp Asp Ser Glu Met Arg Ala Ala Ala Gly Gly Ala Ala Val
1 5 10 15
Glu Gly Gly Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp
20 25 30
His Cys Asp Ser Thr Trp Ser Glu Gly His Val Thr Thr Thr Ser Thr
35 40 45
Arg Thr Trp Val Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Arg Leu
50 55 60
Gly Glu Ser Leu Gln Ser Asn Thr Tyr Asn Gly Phe Ser Thr Pro Trp
65 70 75 80
Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp
85 90 95
Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Met Arg Pro Lys Ala Met
100 105 110
Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Thr Ser Asn
115 120 125
Gly Glu Thr Thr Val Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Ile Phe
130 135 140
Ala Asp Ser Ser Tyr Glu Leu Pro Tyr Val Met Asp Ala Gly Gln Glu
145 150 155 160
Gly Ser Leu Pro Pro Phe Pro Asn Asp Val Phe Met Val Pro Gln Tyr
165 170 175
Gly Tyr Cys Gly Leu Val Thr Gly Asn Thr Ser Gln Gln Gln Thr Asp
180 185 190
Arg Asn Ala Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg
195 200 205
Thr Gly Asn Asn Phe Glu Ile Thr Tyr Ser Phe Glu Lys Val Pro Phe
210 215 220
His Ser Met Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro
225 230 235 240
Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Trp Gly Leu Gln Ser Thr Thr Thr Gly Thr
245 250 255
Thr Leu Asn Ala Gly Thr Ala Thr Thr Asn Phe Thr Lys Leu Arg Pro
260 265 270
Thr Asn Phe Ser Asn Phe Lys Lys Asn Trp Leu Pro Gly Pro Ser Ile
275 280 285
Lys Gln Gln Gly Phe Ser Lys Thr Ala Asn Gln Asn Tyr Lys Ile Pro
290 295 300
Ala Thr Gly Ser Asp Ser Leu Ile Lys Tyr Glu Thr His Ser Thr Leu
305 310 315 320
Asp Gly Arg Trp Ser Ala Leu Thr Pro Gly Pro Pro Met Ala Thr Ala
325 330 335
Gly Pro Ala Asp Ser Lys Phe Ser Asn Ser Gln Leu Ile Phe Ala Gly
340 345 350
Pro Lys Gln Asn Gly Asn Thr Ala Thr Val Pro Gly Thr Leu Ile Phe
355 360 365
Thr Ser Glu Glu Glu Leu Ala Ala Thr Asn Ala Thr Asp Thr Asp Met
370 375 380
Trp Gly Asn Leu Pro Gly Gly Asp Gln Ser Asn Ser Asn Leu Pro Thr
385 390 395 400
Val Asp Arg Leu Thr Ala Leu Gly Ala Val Pro Gly Met Val Trp Gln
405 410 415
Asn Arg Asp Ile Tyr Tyr Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro His
420 425 430
Thr Asp Gly His Phe His Pro Ser Pro Leu Ile Gly Gly Phe Gly Leu
435 440 445
Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Phe Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala
450 455 460
Asn Pro Ala Thr Thr Phe Ser Ser Thr Pro Val Asn Ser Phe Ile Thr
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Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Gln Ile Asp Trp Glu Ile Gln
485 490 495
Lys Glu Arg Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Val Gln Phe Thr Ser Asn
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Tyr Gly Gln Gln Asn Ser Leu Leu Trp Ala Pro Asp Ala Ala Gly Lys
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Tyr Thr Glu Pro Arg Ala Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr His His Leu
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<213> Adeno-associated virus 4
<400> 62
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Gly Val Arg Glu Trp Trp Ala Leu Gln Pro Gly Ala Pro Lys Pro Lys
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Ala Asn Gln Gln His Gln Asp Asn Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly
35 40 45
Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro Val
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Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp Gln
65 70 75 80
Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp
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100 105 110
Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Leu
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Leu Ile Glu Ser Pro Gln Gln Pro Asp Ser Ser Thr Gly Ile Gly Lys
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Lys Gly Lys Gln Pro Ala Lys Lys Lys Leu Val Phe Glu Asp Glu Thr
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Ser Ser Tyr Glu Leu Pro Tyr Val Met Asp Ala Gly Gln Glu Gly Ser
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435 440 445
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465 470 475 480
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515 520 525
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<212> PRT
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<213> Adeno-associated virus 4
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<212> DNA
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<221> modified_base
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<210> 67
<211> 3098
<212> DNA
<213> Adeno-associated virus
<400> 67
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<211> 728
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
polypeptide"
<400> 68
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1 5 10 15
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Lys Ala Asn Gln Gln Lys Gln Asp Asp Gly Arg Gly Leu Val Leu Pro
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Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala
645 650 655
Asp Pro Pro Leu Thr Phe Asn Gln Ala Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr
660 665 670
Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln
675 680 685
Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn
690 695 700
Tyr Tyr Lys Ser Thr Asn Val Asp Phe Ala Val Asn Thr Glu Gly Val
705 710 715 720
Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu
725 730 735
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<213> Artificial Sequence
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c 3121
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Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Phe Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro
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Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Arg Tyr Asn His Ala
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645 650 655
Asp Pro Pro Leu Thr Phe Asn Gln Ala Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr
660 665 670
Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln
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Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn
690 695 700
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polynucleotide"
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polynucleotide"
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Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu
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Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr
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Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Thr Asn Val Asp Phe Ala Val Asn Thr Asp
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<213> Adeno-associated virus 5
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20 25 30
Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly
35 40 45
Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val
50 55 60
Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu
65 70 75 80
Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp
85 90 95
Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn
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Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe
115 120 125
Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile
130 135 140
Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser
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Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln
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435 440 445
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<212> DNA
<213> Adeno-associated virus 5
<400> 99
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ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480
aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540
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<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
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<212> PRT
<213> Adeno-associated virus 6
<400> 101
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Lys Ala Asn Gln Gln Lys Gln Asp Asp Gly Arg Gly Leu Val Leu Pro
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Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Arg Tyr Asn His Ala
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<212> PRT
<213> Adeno-associated virus 6
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Ile Val Thr Ser Asn Thr Asn Met Cys Ala Val Ile Asp Gly Asn Ser
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<213> Adeno-associated virus 6
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Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu
245 250 255
Tyr Lys Gln Ile Ser Ser Ala Ser Thr Gly Ala Ser Asn Asp Asn His
260 265 270
Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe
275 280 285
His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn
290 295 300
Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln
305 310 315 320
Val Lys Glu Val Thr Thr Asn Asp Gly Val Thr Thr Ile Ala Asn Asn
325 330 335
Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Ser Asp Ser Glu Tyr Gln Leu Pro
340 345 350
Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Gln Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala
355 360 365
Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asn Gly
370 375 380
Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro
385 390 395 400
Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Thr Phe Ser Tyr Thr Phe
405 410 415
Glu Asp Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu Asp
420 425 430
Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Asn Arg
435 440 445
Thr Gln Asn Gln Ser Gly Ser Ala Gln Asn Lys Asp Leu Leu Phe Ser
450 455 460
Arg Gly Ser Pro Ala Gly Met Ser Val Gln Pro Lys Asn Trp Leu Pro
465 470 475 480
Gly Pro Cys Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Lys Thr Lys Thr Asp Asn
485 490 495
Asn Asn Ser Asn Phe Thr Trp Thr Gly Ala Ser Lys Tyr Asn Leu Asn
500 505 510
Gly Arg Glu Ser Ile Ile Asn Pro Gly Thr Ala Met Ala Ser His Lys
515 520 525
Asp Asp Lys Asp Lys Phe Phe Pro Met Ser Gly Val Met Ile Phe Gly
530 535 540
Lys Glu Ser Ala Gly Ala Ser Asn Thr Ala Leu Asp Asn Val Met Ile
545 550 555 560
Thr Asp Glu Glu Glu Ile Lys Ala Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu Arg
565 570 575
Phe Gly Thr Val Ala Val Asn Leu Gln Ser Ser Ser Thr Asp Pro Ala
580 585 590
Thr Gly Asp Val His Val Met Gly Ala Leu Pro Gly Met Val Trp Gln
595 600 605
Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro His
610 615 620
Thr Asp Gly His Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe Gly Leu
625 630 635 640
Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala
645 650 655
Asn Pro Pro Ala Glu Phe Ser Ala Thr Lys Phe Ala Ser Phe Ile Thr
660 665 670
Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln
675 680 685
Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Val Gln Tyr Thr Ser Asn
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Tyr Ala Lys Ser Ala Asn Val Asp Phe Thr Val Asp Asn Asn Gly Leu
705 710 715 720
Tyr Thr Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu
725 730 735
<210> 109
<211> 2214
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
polynucleotide"
<400> 109
atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca acctctctga gggcattcgc 60
gagtggtggg acctgaaacc tggagccccg aaacccaaag ccaaccagca aaagcaggac 120
aacggccggg gtctggtgct tcctggctac aagtacctcg gacccttcaa cggactcgac 180
aagggggagc ccgtcaacgc ggcggacgca gcggccctcg agcacgacaa ggcctacgac 240
cagcagctca aagcgggtga caatccgtac ctgcggtata accacgccga cgccgagttt 300
caggagcgtc tgcaagaaga tacgtcattt gggggcaacc tcgggcgagc agtcttccag 360
gccaagaagc gggttctcga acctctcggt ctggttgagg aaggcgctaa gacggctcct 420
gcaaagaaga gaccggtaga gccgtcacct cagcgttccc ccgactcctc cacgggcatc 480
ggcaagaaag gccagcagcc cgccagaaag agactcaatt tcggtcagac tggcgactca 540
gagtcagtcc ccgaccctca acctctcgga gaacctccag cagcgccctc tagtgtggga 600
tctggtacag tggctgcagg cggtggcgca ccaatggcag acaataacga aggtgccgac 660
ggagtgggta atgcctcagg aaattggcat tgcgattcca catggctggg cgacagagtc 720
attaccacca gcacccgaac ctgggccctg cccacctaca acaaccacct ctacaagcaa 780
atctccagtg aaactgcagg tagtaccaac gacaacacct acttcggcta cagcaccccc 840
tgggggtatt ttgactttaa cagattccac tgccacttct caccacgtga ctggcagcga 900
ctcatcaaca acaactgggg attccggccc aagaagctgc ggttcaagct cttcaacatc 960
caggtcaagg aggtcacgac gaatgacggc gttacgacca tcgctaataa ccttaccagc 1020
acgattcagg tattctcgga ctcggaatac cagctgccgt acgtcctcgg ctctgcgcac 1080
cagggctgcc tgcctccgtt cccggcggac gtcttcatga ttcctcagta cggctacctg 1140
actctcaaca atggcagtca gtctgtggga cgttcctcct tctactgcct ggagtacttc 1200
ccctctcaga tgctgagaac gggcaacaac tttgagttca gctacagctt cgaggacgtg 1260
cctttccaca gcagctacgc acacagccag agcctggacc ggctgatgaa tcccctcatc 1320
gaccagtact tgtactacct ggccagaaca cagagtaacc caggaggcac agctggcaat 1380
cgggaactgc agttttacca gggcgggcct tcaactatgg ccgaacaagc caagaattgg 1440
ttacctggac cttgcttccg gcaacaaaga gtctccaaaa cgctggatca aaacaacaac 1500
agcaactttg cttggactgg tgccaccaaa tatcacctga acggcagaaa ctcgttggtt 1560
aatcccggcg tcgccatggc aactcacaag gacgacgagg accgcttttt cccatccagc 1620
ggagtcctga tttttggaaa aactggagca actaacaaaa ctacattgga aaatgtgtta 1680
atgacaaatg aagaagaaat tcgtcctact aatcctgtag ccacggaaga atacgggata 1740
gtcagcagca acttacaagc ggctaatact gcagcccaga cacaagttgt caacaaccag 1800
ggagccttac ctggcatggt ctggcagaac cgggacgtgt acctgcaggg tcccatctgg 1860
gccaagattc ctcacacgga tggcaacttt cacccgtctc ctttgatggg cggctttgga 1920
cttaaacatc cgcctcctca gatcctgatc aagaacactc ccgttcccgc taatcctccg 1980
gaggtgttta ctcctgccaa gtttgcttcg ttcatcacac agtacagcac cggacaagtc 2040
agcgtggaaa tcgagtggga gctgcagaag gaaaacagca agcgctggaa cccggagatt 2100
cagtacacct ccaactttga aaagcagact ggtgtggact ttgccgttga cagccagggt 2160
gtttactctg agcctcgccc tattggcact cgttacctca cccgtaatct gtaa 2214
<210> 110
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
polypeptide"
<400> 110
Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser
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Glu Gly Ile Arg Glu Trp Trp Ala Leu Lys Pro Gly Ala Pro Lys Pro
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Lys Ala Asn Gln Gln Lys Gln Asp Asp Gly Arg Gly Leu Val Leu Pro
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Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Phe Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro
50 55 60
Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp
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Gln Gln Leu Gln Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Arg Tyr Asn His Ala
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Gly Lys Lys Gly Gln Gln Pro Ala Arg Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln
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Pro Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Pro Asn Thr Met Ala Ala Gly Gly
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Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Leu Gly Asp Arg Val
225 230 235 240
Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His
245 250 255
Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Gly Thr Ser Gly Gly Ala Thr Asn Asp
260 265 270
Asn Thr Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn
275 280 285
Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn
290 295 300
Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Ser Phe Lys Leu Phe Asn
305 310 315 320
Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Gln Asn Glu Gly Thr Lys Thr Ile Ala
325 330 335
Asn Asn Leu Thr Ser Thr Ile Gln Val Phe Thr Asp Ser Glu Tyr Gln
340 345 350
Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Gln Gly Cys Leu Pro Pro Phe
355 360 365
Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn
370 375 380
Asn Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr
385 390 395 400
Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Gln Phe Thr Tyr
405 410 415
Thr Phe Glu Asp Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser
420 425 430
Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu
435 440 445
Ser Arg Thr Gln Thr Thr Gly Gly Thr Ala Asn Thr Gln Thr Leu Gly
450 455 460
Phe Ser Gln Gly Gly Pro Asn Thr Met Ala Asn Gln Ala Lys Asn Trp
465 470 475 480
Leu Pro Gly Pro Cys Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Thr Thr Thr Gly
485 490 495
Gln Asn Asn Asn Ser Asn Phe Ala Trp Thr Ala Gly Thr Lys Tyr His
500 505 510
Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Ala Asn Pro Gly Ile Ala Met Ala Thr
515 520 525
His Lys Asp Asp Glu Glu Arg Phe Phe Pro Ser Asn Gly Ile Leu Ile
530 535 540
Phe Gly Lys Gln Asn Ala Ala Arg Asp Asn Ala Asp Tyr Ser Asp Val
545 550 555 560
Met Leu Thr Ser Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr
565 570 575
Glu Glu Tyr Gly Ile Val Ala Asp Asn Leu Gln Gln Gln Asn Thr Ala
580 585 590
Pro Gln Ile Gly Thr Val Asn Ser Gln Gly Ala Leu Pro Gly Met Val
595 600 605
Trp Gln Asn Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile
610 615 620
Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe
625 630 635 640
Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val
645 650 655
Pro Ala Asp Pro Pro Thr Thr Phe Asn Gln Ser Lys Leu Asn Ser Phe
660 665 670
Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu
675 680 685
Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr
690 695 700
Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Thr Ser Val Asp Phe Ala Val Asn Thr Glu
705 710 715 720
Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg
725 730 735
Asn Leu
<210> 111
<211> 737
<212> PRT
<213> Adeno-associated virus 7
<400> 111
Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser
1 5 10 15
Glu Gly Ile Arg Glu Trp Trp Asp Leu Lys Pro Gly Ala Pro Lys Pro
20 25 30
Lys Ala Asn Gln Gln Lys Gln Asp Asn Gly Arg Gly Leu Val Leu Pro
35 40 45
Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Phe Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro
50 55 60
Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp
65 70 75 80
Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Arg Tyr Asn His Ala
85 90 95
Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Gln Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly
100 105 110
Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro
115 120 125
Leu Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Ala Lys Lys Arg
130 135 140
Pro Val Glu Pro Ser Pro Gln Arg Ser Pro Asp Ser Ser Thr Gly Ile
145 150 155 160
Gly Lys Lys Gly Gln Gln Pro Ala Arg Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln
165 170 175
Thr Gly Asp Ser Glu Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Leu Gly Glu Pro
180 185 190
Pro Ala Ala Pro Ser Ser Val Gly Ser Gly Thr Val Ala Ala Gly Gly
195 200 205
Gly Ala Pro Met Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn
210 215 220
Ala Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Leu Gly Asp Arg Val
225 230 235 240
Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His
245 250 255
Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Ser Glu Thr Ala Gly Ser Thr Asn Asp Asn
260 265 270
Thr Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg
275 280 285
Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn
290 295 300
Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Lys Leu Arg Phe Lys Leu Phe Asn Ile
305 310 315 320
Gln Val Lys Glu Val Thr Thr Asn Asp Gly Val Thr Thr Ile Ala Asn
325 330 335
Asn Leu Thr Ser Thr Ile Gln Val Phe Ser Asp Ser Glu Tyr Gln Leu
340 345 350
Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Gln Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro
355 360 365
Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asn
370 375 380
Gly Ser Gln Ser Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe
385 390 395 400
Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Ser Tyr Ser
405 410 415
Phe Glu Asp Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu
420 425 430
Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ala
435 440 445
Arg Thr Gln Ser Asn Pro Gly Gly Thr Ala Gly Asn Arg Glu Leu Gln
450 455 460
Phe Tyr Gln Gly Gly Pro Ser Thr Met Ala Glu Gln Ala Lys Asn Trp
465 470 475 480
Leu Pro Gly Pro Cys Phe Arg Gln Gln Arg Val Ser Lys Thr Leu Asp
485 490 495
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500 505 510
Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Val Asn Pro Gly Val Ala Met Ala Thr
515 520 525
His Lys Asp Asp Glu Asp Arg Phe Phe Pro Ser Ser Gly Val Leu Ile
530 535 540
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545 550 555 560
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565 570 575
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580 585 590
Gln Thr Gln Val Val Asn Asn Gln Gly Ala Leu Pro Gly Met Val Trp
595 600 605
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625 630 635 640
Leu Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro
645 650 655
Ala Asn Pro Pro Glu Val Phe Thr Pro Ala Lys Phe Ala Ser Phe Ile
660 665 670
Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu Leu
675 680 685
Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Ser
690 695 700
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Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Asn
725 730 735
Leu
<210> 112
<211> 623
<212> PRT
<213> Adeno-associated virus 7
<400> 112
Met Pro Gly Phe Tyr Glu Ile Val Ile Lys Val Pro Ser Asp Leu Asp
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20 25 30
Lys Glu Trp Glu Leu Pro Pro Asp Ser Asp Met Asp Leu Asn Leu Ile
35 40 45
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50 55 60
Val Gln Trp Arg Arg Val Ser Lys Ala Pro Glu Ala Leu Phe Phe Val
65 70 75 80
Gln Phe Glu Lys Gly Glu Ser Tyr Phe His Leu His Val Leu Val Glu
85 90 95
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100 105 110
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115 120 125
Pro Asn Trp Phe Ala Val Thr Lys Thr Arg Asn Gly Ala Gly Gly Gly
130 135 140
Asn Lys Val Val Asp Glu Cys Tyr Ile Pro Asn Tyr Leu Leu Pro Lys
145 150 155 160
Thr Gln Pro Glu Leu Gln Trp Ala Trp Thr Asn Met Glu Glu Tyr Ile
165 170 175
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180 185 190
Leu Thr His Val Ser Gln Thr Gln Glu Gln Asn Lys Glu Asn Leu Asn
195 200 205
Pro Asn Ser Asp Ala Pro Val Ile Arg Ser Lys Thr Ser Ala Arg Tyr
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Met Glu Leu Val Gly Trp Leu Val Asp Arg Gly Ile Thr Ser Glu Lys
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Gln Trp Ile Gln Glu Asp Gln Ala Ser Tyr Ile Ser Phe Asn Ala Ala
245 250 255
Ser Asn Ser Arg Ser Gln Ile Lys Ala Ala Leu Asp Asn Ala Gly Lys
260 265 270
Ile Met Ala Leu Thr Lys Ser Ala Pro Asp Tyr Leu Val Gly Pro Ser
275 280 285
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Asn Gly Tyr Asp Pro Ala Tyr Ala Gly Ser Val Phe Leu Gly Trp Ala
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325 330 335
Thr Thr Gly Lys Thr Asn Ile Ala Glu Ala Ile Ala His Ala Val Pro
340 345 350
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355 360 365
Cys Val Asp Lys Met Val Ile Trp Trp Glu Glu Gly Lys Met Thr Ala
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Lys Val Val Glu Ser Ala Lys Ala Ile Leu Gly Gly Ser Lys Val Arg
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Val Asp Gln Lys Cys Lys Ser Ser Ala Gln Ile Asp Pro Thr Pro Val
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Ile Val Thr Ser Asn Thr Asn Met Cys Ala Val Ile Asp Gly Asn Ser
420 425 430
Thr Thr Phe Glu His Gln Gln Pro Leu Gln Asp Arg Met Phe Lys Phe
435 440 445
Glu Leu Thr Arg Arg Leu Glu His Asp Phe Gly Lys Val Thr Lys Gln
450 455 460
Glu Val Lys Glu Phe Phe Arg Trp Ala Ser Asp His Val Thr Glu Val
465 470 475 480
Ala His Glu Phe Tyr Val Arg Lys Gly Gly Ala Ser Lys Arg Pro Ala
485 490 495
Pro Asp Asp Ala Asp Ile Ser Glu Pro Lys Arg Ala Cys Pro Ser Val
500 505 510
Ala Asp Pro Ser Thr Ser Asp Ala Glu Gly Ala Pro Val Asp Phe Ala
515 520 525
Asp Arg Tyr Gln Asn Lys Cys Ser Arg His Ala Gly Met Ile Gln Met
530 535 540
Leu Phe Pro Cys Lys Thr Cys Glu Arg Met Asn Gln Asn Phe Asn Ile
545 550 555 560
Cys Phe Thr His Gly Val Arg Asp Cys Leu Glu Cys Phe Pro Gly Val
565 570 575
Ser Glu Ser Gln Pro Val Val Arg Lys Lys Thr Tyr Arg Lys Leu Cys
580 585 590
Ala Ile His His Leu Leu Gly Arg Ala Pro Glu Ile Ala Cys Ser Ala
595 600 605
Cys Asp Leu Val Asn Val Asp Leu Asp Asp Cys Val Ser Glu Gln
610 615 620
<210> 113
<211> 4721
<212> DNA
<213> Adeno-associated virus 7
<400> 113
ttggccactc cctctatgcg cgctcgctcg ctcggtgggg cctgcggacc aaaggtccgc 60
agacggcaga gctctgctct gccggcccca ccgagcgagc gagcgcgcat agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg taccgcgaag cgcctcccac gctgccgcgt cagcgctgac 180
gtaaatcacg tcatagggga gtggtcctgt attagctgtc acgtgagtgc ttttgcgaca 240
ttttgcgaca ccacgtggcc atttgaggta tatatggccg agtgagcgag caggatctcc 300
attttgaccg cgaaatttga acgagcagca gccatgccgg gtttctacga gatcgtgatc 360
aaggtgccga gcgacctgga cgagcacctg ccgggcattt ctgactcgtt tgtgaactgg 420
gtggccgaga aggaatggga gctgcccccg gattctgaca tggatctgaa tctgatcgag 480
caggcacccc tgaccgtggc cgagaagctg cagcgcgact tcctggtcca atggcgccgc 540
gtgagtaagg ccccggaggc cctgttcttt gttcagttcg agaagggcga gagctacttc 600
caccttcacg ttctggtgga gaccacgggg gtcaagtcca tggtgctagg ccgcttcctg 660
agtcagattc gggagaagct ggtccagacc atctaccgcg gggtcgagcc cacgctgccc 720
aactggttcg cggtgaccaa gacgcgtaat ggcgccggcg gggggaacaa ggtggtggac 780
gagtgctaca tccccaacta cctcctgccc aagacccagc ccgagctgca gtgggcgtgg 840
actaacatgg aggagtatat aagcgcgtgt ttgaacctgg ccgaacgcaa acggctcgtg 900
gcgcagcacc tgacccacgt cagccagacg caggagcaga acaaggagaa tctgaacccc 960
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tggctggtgg accggggcat cacctccgag aagcagtgga tccaggagga ccaggcctcg 1080
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gcctacgccg gctccgtctt tctcggctgg gcccagaaaa agttcgggaa gcgcaacacc 1320
atctggctgt ttgggcccgc caccaccggc aagaccaaca ttgcggaagc catcgcccac 1380
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ctcacccgcc gtctggagca cgactttggc aaggtgacga agcaggaagt caaagagttc 1740
ttccgctggg ccagtgatca cgtgaccgag gtggcgcatg agttctacgt cagaaagggc 1800
ggagccagca aaagacccgc ccccgatgac gcggatataa gcgagcccaa gcgggcctgc 1860
ccctcagtcg cggatccatc gacgtcagac gcggaaggag ctccggtgga ctttgccgac 1920
aggtaccaaa acaaatgttc tcgtcacgcg ggcatgattc agatgctgtt tccctgcaaa 1980
acgtgcgaga gaatgaatca gaatttcaac atttgcttca cacacggggt cagagactgt 2040
ttagagtgtt tccccggcgt gtcagaatct caaccggtcg tcagaaaaaa gacgtatcgg 2100
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gacctggtca acgtggacct ggacgactgc gtttctgagc aataaatgac ttaaaccagg 2220
tatggctgcc gatggttatc ttccagattg gctcgaggac aacctctctg agggcattcg 2280
cgagtggtgg gacctgaaac ctggagcccc gaaacccaaa gccaaccagc aaaagcagga 2340
caacggccgg ggtctggtgc ttcctggcta caagtacctc ggacccttca acggactcga 2400
caagggggag cccgtcaacg cggcggacgc agcggccctc gagcacgaca aggcctacga 2460
ccagcagctc aaagcgggtg acaatccgta cctgcggtat aaccacgccg acgccgagtt 2520
tcaggagcgt ctgcaagaag atacgtcatt tgggggcaac ctcgggcgag cagtcttcca 2580
ggccaagaag cgggttctcg aacctctcgg tctggttgag gaaggcgcta agacggctcc 2640
tgcaaagaag agaccggtag agccgtcacc tcagcgttcc cccgactcct ccacgggcat 2700
cggcaagaaa ggccagcagc ccgccagaaa gagactcaat ttcggtcaga ctggcgactc 2760
agagtcagtc cccgaccctc aacctctcgg agaacctcca gcagcgccct ctagtgtggg 2820
atctggtaca gtggctgcag gcggtggcgc accaatggca gacaataacg aaggtgccga 2880
cggagtgggt aatgcctcag gaaattggca ttgcgattcc acatggctgg gcgacagagt 2940
cattaccacc agcacccgaa cctgggccct gcccacctac aacaaccacc tctacaagca 3000
aatctccagt gaaactgcag gtagtaccaa cgacaacacc tacttcggct acagcacccc 3060
ctgggggtat tttgacttta acagattcca ctgccacttc tcaccacgtg actggcagcg 3120
actcatcaac aacaactggg gattccggcc caagaagctg cggttcaagc tcttcaacat 3180
ccaggtcaag gaggtcacga cgaatgacgg cgttacgacc atcgctaata accttaccag 3240
cacgattcag gtattctcgg actcggaata ccagctgccg tacgtcctcg gctctgcgca 3300
ccagggctgc ctgcctccgt tcccggcgga cgtcttcatg attcctcagt acggctacct 3360
gactctcaac aatggcagtc agtctgtggg acgttcctcc ttctactgcc tggagtactt 3420
cccctctcag atgctgagaa cgggcaacaa ctttgagttc agctacagct tcgaggacgt 3480
gcctttccac agcagctacg cacacagcca gagcctggac cggctgatga atcccctcat 3540
cgaccagtac ttgtactacc tggccagaac acagagtaac ccaggaggca cagctggcaa 3600
tcgggaactg cagttttacc agggcgggcc ttcaactatg gccgaacaag ccaagaattg 3660
gttacctgga ccttgcttcc ggcaacaaag agtctccaaa acgctggatc aaaacaacaa 3720
cagcaacttt gcttggactg gtgccaccaa atatcacctg aacggcagaa actcgttggt 3780
taatcccggc gtcgccatgg caactcacaa ggacgacgag gaccgctttt tcccatccag 3840
cggagtcctg atttttggaa aaactggagc aactaacaaa actacattgg aaaatgtgtt 3900
aatgacaaat gaagaagaaa ttcgtcctac taatcctgta gccacggaag aatacgggat 3960
agtcagcagc aacttacaag cggctaatac tgcagcccag acacaagttg tcaacaacca 4020
gggagcctta cctggcatgg tctggcagaa ccgggacgtg tacctgcagg gtcccatctg 4080
ggccaagatt cctcacacgg atggcaactt tcacccgtct cctttgatgg gcggctttgg 4140
acttaaacat ccgcctcctc agatcctgat caagaacact cccgttcccg ctaatcctcc 4200
ggaggtgttt actcctgcca agtttgcttc gttcatcaca cagtacagca ccggacaagt 4260
cagcgtggaa atcgagtggg agctgcagaa ggaaaacagc aagcgctgga acccggagat 4320
tcagtacacc tccaactttg aaaagcagac tggtgtggac tttgccgttg acagccaggg 4380
tgtttactct gagcctcgcc ctattggcac tcgttacctc acccgtaatc tgtaattgca 4440
tgttaatcaa taaaccggtt gattcgtttc agttgaactt tggtctcctg tgcttcttat 4500
cttatcggtt tccatagcaa ctggttacac attaactgct tgggtgcgct tcacgataag 4560
aacactgacg tcaccgcggt acccctagtg atggagttgg ccactccctc tatgcgcgct 4620
cgctcgctcg gtggggcctg cggaccaaag gtccgcagac ggcagagctc tgctctgccg 4680
gccccaccga gcgagcgagc gcgcatagag ggagtggcca a 4721
<210> 114
<211> 2214
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
polynucleotide"
<400> 114
atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca acctctctga gggcattcgc 60
gagtggtggg acctgaaacc tggagccccg aaacccaaag ccaaccagca aaagcaggac 120
aacggccggg gtctggtgct tcctggctac aagtacctcg gacccttcaa cggactcgac 180
aagggggagc ccgtcaacgc ggcggacgca gcggccctcg agcacgacaa ggcctacgac 240
cagcagctca aagcgggtga caatccgtac ctgcggtata accacgccga cgccgagttt 300
caggagcgtc tgcaagaaga tacgtcattt gggggcaacc tcgggcgagc agtcttccag 360
gccaagaagc gggttctcga acctctcggt ctggttgagg aaggcgctaa gacggctcct 420
gcaaagaaga gaccggtaga gccgtcacct cagcgttccc ccgactcctc cacgggcatc 480
ggcaagaaag gccagcagcc cgccagaaag agactcaatt tcggtcagac tggcgactca 540
gagtcagtcc ccgaccctca acctctcgga gaacctccag cagcgccctc tagtgtggga 600
tctggtacag tggctgcagg cggtggcgca ccaatggcag acaataacga aggtgccgac 660
ggagtgggta atgcctcagg aaattggcat tgcgattcca catggctggg cgacagagtc 720
attaccacca gcacccgaac ctgggccctg cccacctaca acaaccacct ctacaagcaa 780
atctccagtg aaactgcagg tagtaccaac gacaacacct acttcggcta cagcaccccc 840
tgggggtatt ttgactttaa cagattccac tgccacttct caccacgtga ctggcagcga 900
ctcatcaaca acaactgggg attccggccc aagaagctgc ggttcaagct cttcaacatc 960
caggtcaagg aggtcacgac gaatgacggc gttacgacca tcgctaataa ccttaccagc 1020
acgattcagg tattctcgga ctcggaatac cagctgccgt acgtcctcgg ctctgcgcac 1080
cagggctgcc tgcctccgtt cccggcggac gtcttcatga ttcctcagta cggctacctg 1140
actctcaaca atggcagtca gtctgtggga cgttcctcct tctactgcct ggagtacttc 1200
ccctctcaga tgctgagaac gggcaacaac tttgagttca gctacagctt cgaggacgtg 1260
cctttccaca gcagctacgc acacagccag agcctggacc ggctgatgaa tcccctcatc 1320
gaccagtact tgtactacct ggccagaaca cagagtaacc caggaggcac agctggcaat 1380
cgggaactgc agttttacca gggcgggcct tcaactatgg ccgaacaagc caagaattgg 1440
ttacctggac cttgcttccg gcaacaaaga gtctccaaaa cgctggatca aaacaacaac 1500
agcaactttg cttggactgg tgccaccaaa tatcacctga acggcagaaa ctcgttggtt 1560
aatcccggcg tcgccatggc aactcacaag gacgacgagg accgcttttt cccatccagc 1620
ggagtcctga tttttggaaa aactggagca actaacaaaa ctacattgga aaatgtgtta 1680
atgacaaatg aagaagaaat tcgtcctact aatcctgtag ccacggaaga atacgggata 1740
gtcagcagca acttacaagc ggctaatact gcagcccaga cacaagttgt caacaaccag 1800
ggagccttac ctggcatggt ctggcagaac cgggacgtgt acctgcaggg tcccatctgg 1860
gccaagattc ctcacacgga tggcaacttt cacccgtctc ctttgatggg cggctttgga 1920
cttaaacatc cgcctcctca gatcctgatc aagaacactc ccgttcccgc taatcctccg 1980
gaggtgttta ctcctgccaa gtttgcttcg ttcatcacac agtacagcac cggacaagtc 2040
agcgtggaaa tcgagtggga gctgcagaag gaaaacagca agcgctggaa cccggagatt 2100
cagtacacct ccaactttga aaagcagact ggtgtggact ttgccgttga cagccagggt 2160
gtttactctg agcctcgccc tattggcact cgttacctca cccgtaatct gtaa 2214
<210> 115
<211> 737
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
polypeptide"
<400> 115
Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser
1 5 10 15
Glu Gly Ile Arg Glu Trp Trp Asp Leu Lys Pro Gly Ala Pro Lys Pro
20 25 30
Lys Ala Asn Gln Gln Lys Gln Asp Asn Gly Arg Gly Leu Val Leu Pro
35 40 45
Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Phe Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro
50 55 60
Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp
65 70 75 80
Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Arg Tyr Asn His Ala
85 90 95
Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Gln Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly
100 105 110
Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro
115 120 125
Leu Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Ala Lys Lys Arg
130 135 140
Pro Val Glu Pro Ser Pro Gln Arg Ser Pro Asp Ser Ser Thr Gly Ile
145 150 155 160
Gly Lys Lys Gly Gln Gln Pro Ala Arg Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln
165 170 175
Thr Gly Asp Ser Glu Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Leu Gly Glu Pro
180 185 190
Pro Ala Ala Pro Ser Ser Val Gly Ser Gly Thr Val Ala Ala Gly Gly
195 200 205
Gly Ala Pro Met Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn
210 215 220
Ala Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Leu Gly Asp Arg Val
225 230 235 240
Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His
245 250 255
Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Ser Glu Thr Ala Gly Ser Thr Asn Asp Asn
260 265 270
Thr Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg
275 280 285
Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn
290 295 300
Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Lys Leu Arg Phe Lys Leu Phe Asn Ile
305 310 315 320
Gln Val Lys Glu Val Thr Thr Asn Asp Gly Val Thr Thr Ile Ala Asn
325 330 335
Asn Leu Thr Ser Thr Ile Gln Val Phe Ser Asp Ser Glu Tyr Gln Leu
340 345 350
Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Gln Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro
355 360 365
Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asn
370 375 380
Gly Ser Gln Ser Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe
385 390 395 400
Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Ser Tyr Ser
405 410 415
Phe Glu Asp Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu
420 425 430
Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ala
435 440 445
Arg Thr Gln Ser Asn Pro Gly Gly Thr Ala Gly Asn Arg Glu Leu Gln
450 455 460
Phe Tyr Gln Gly Gly Pro Ser Thr Met Ala Glu Gln Ala Lys Asn Trp
465 470 475 480
Leu Pro Gly Pro Cys Phe Arg Gln Gln Arg Val Ser Lys Thr Leu Asp
485 490 495
Gln Asn Asn Asn Ser Asn Phe Ala Trp Thr Gly Ala Thr Lys Tyr His
500 505 510
Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Val Asn Pro Gly Val Ala Met Ala Thr
515 520 525
His Lys Asp Asp Glu Asp Arg Phe Phe Pro Ser Ser Gly Val Leu Ile
530 535 540
Phe Gly Lys Thr Gly Ala Thr Asn Lys Thr Thr Leu Glu Asn Val Leu
545 550 555 560
Met Thr Asn Glu Glu Glu Ile Arg Pro Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu
565 570 575
Glu Tyr Gly Ile Val Ser Ser Asn Leu Gln Ala Ala Asn Thr Ala Ala
580 585 590
Gln Thr Gln Val Val Asn Asn Gln Gly Ala Leu Pro Gly Met Val Trp
595 600 605
Gln Asn Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro
610 615 620
His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe Gly
625 630 635 640
Leu Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro
645 650 655
Ala Asn Pro Pro Glu Val Phe Thr Pro Ala Lys Phe Ala Ser Phe Ile
660 665 670
Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu Leu
675 680 685
Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Ser
690 695 700
Asn Phe Glu Lys Gln Thr Gly Val Asp Phe Ala Val Asp Ser Gln Gly
705 710 715 720
Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Asn
725 730 735
Leu
<210> 116
<211> 2217
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
polynucleotide"
<400> 116
atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca acctctctga gggcattcgc 60
gagtggtggg cgctgaaacc tggagccccg aagcccaaag ccaaccagca aaagcaggac 120
gacggccggg gtctggtgct tcctggctac aagtacctcg gacccttcaa cggactcgac 180
aagggggagc ccgtcaacgc ggcggacgca gcggccctcg agcacgacaa ggcctacgac 240
cagcagctgc aggcgggtga caatccgtac ctgcggtata accacgccga cgccgagttt 300
caggagcgtc tgcaagaaga tacgtctttt gggggcaacc tcgggcgagc agtcttccag 360
gccaagaagc gggttctcga acctctcggt ctggttgagg aaggcgctaa gacggctcct 420
ggaaagaaga gaccggtaga gccatcaccc cagcgttctc cagactcctc tacgggcatc 480
ggcaagaaag gccaacagcc cgccagaaaa agactcaatt ttggtcagac tggcgactca 540
gagtcagttc cagaccctca acctctcgga gaacctccag cagcgccctc tggtgtggga 600
cctaatacaa tggctgcagg cggtggcgca ccaatggcag acaataacga aggcgccgac 660
ggagtgggta gttcctcggg aaattggcat tgcgattcca catggctggg cgacagagtc 720
atcaccacca gcacccgaac ctgggccctg cccacctaca acaaccacct ctacaagcaa 780
atctccaacg ggacatcggg aggagccacc aacgacaaca cctacttcgg ctacagcacc 840
ccctgggggt attttgactt taacagattc cactgccact tttcaccacg tgactggcag 900
cgactcatca acaacaactg gggattccgg cccaagagac tcagcttcaa gctcttcaac 960
atccaggtca aggaggtcac gcagaatgaa ggcaccaaga ccatcgccaa taacctcacc 1020
agcaccatcc aggtgtttac ggactcggag taccagctgc cgtacgttct cggctctgcc 1080
caccagggct gcctgcctcc gttcccggcg gacgtgttca tgattcccca gtacggctac 1140
ctaacactca acaacggtag tcaggccgtg ggacgctcct ccttctactg cctggaatac 1200
tttccttcgc agatgctgag aaccggcaac aacttccagt ttacttacac cttcgaggac 1260
gtgcctttcc acagcagcta cgcccacagc cagagcttgg accggctgat gaatcctctg 1320
attgaccagt acctgtacta cttgtctcgg actcaaacaa caggaggcac ggcaaatacg 1380
cagactctgg gcttcagcca aggtgggcct aatacaatgg ccaatcaggc aaagaactgg 1440
ctgccaggac cctgttaccg ccaacaacgc gtctcaacga caaccgggca aaacaacaat 1500
agcaactttg cctggactgc tgggaccaaa taccatctga atggaagaaa ttcattggct 1560
aatcctggca tcgctatggc aacacacaaa gacgacgagg agcgtttttt tcccagtaac 1620
gggatcctga tttttggcaa acaaaatgct gccagagaca atgcggatta cagcgatgtc 1680
atgctcacca gcgaggaaga aatcaaaacc actaaccctg tggctacaga ggaatacggt 1740
atcgtggcag ataacttgca gcagcaaaac acggctcctc aaattggaac tgtcaacagc 1800
cagggggcct tacccggtat ggtctggcag aaccgggacg tgtacctgca gggtcccatc 1860
tgggccaaga ttcctcacac ggacggcaac ttccacccgt ctccgctgat gggcggcttt 1920
ggcctgaaac atcctccgcc tcagatcctg atcaagaaca cgcctgtacc tgcggatcct 1980
ccgaccacct tcaaccagtc aaagctgaac tctttcatca cgcaatacag caccggacag 2040
gtcagcgtgg aaattgaatg ggagctgcag aaggaaaaca gcaagcgctg gaaccccgag 2100
atccagtaca cctccaacta ctacaaatct acaagtgtgg actttgctgt taatacagaa 2160
ggcgtgtact ctgaaccccg ccccattggc acccgttacc tcacccgtaa tctgtaa 2217
<210> 117
<211> 2213
<212> DNA
<213> Adeno-associated virus 8
<400> 117
atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca acctctctga gggcattcgc 60
gagtggtggg cgctgaaacc tggagccccg aagcccaaag ccaaccagca aaagcaggac 120
gacggccggg gtctggtgct tcctggctac aagtacctcg gacccttcaa cggactcgac 180
aagggggagc ccgtcaacgc ggcggacgca gcggccctcg agcacgacaa ggcctacgac 240
cagcagctgc aggcgggtga caatccgtac ctgcggtata accacgccga cgccgagttt 300
caggagcgtc tgcaagaaga tacgtctttt gggggcaacc tcgggcgagc agtcttccag 360
gccaagaagc gggttctcga acctctcggt ctggttgagg aaggcgctaa gacggctcct 420
ggaaagaaga gaccggtaga gccatcaccc cagcgttctc cagactcctc tacgggcatc 480
ggcaagaaag gccaacagcc cgccagaaaa agactcaatt ttggtcagac tggcgactca 540
gagtcagttc cagaccctca acctctcgga gaacctccag cagcgccctc tggtgtggga 600
cctaatacaa tggctgcagg cggtggcgca ccaatggcag acaataacga aggcgccgac 660
ggagtgggta gttcctcggg aaattggcat tgcgattcca catggctggg cgacagagtc 720
atcaccacca gcacccgaac ctgggccctg cccacctaca acaaccacct ctacaagcaa 780
atctccaacg ggacatcggg aggagccacc aacgacaaca cctacttcgg ctacagcacc 840
ccctgggggt attttgactt taacagattc cactgccact tttcaccacg tgactggcag 900
cgactcatca acaacaactg gggattccgg cccaagagac tcagcttcaa gctcttcaac 960
atccaggtca aggaggtcac gcagaatgaa ggcaccaaga ccatcgccaa taacctcacc 1020
agcaccatcc aggtgtttac ggactcggag taccagctgc cgtacgttct cggctctgcc 1080
caccagggct gcctgcctcc gttcccggcg gacgtgttca tgattcccca gtacggctac 1140
ctaacactca acaacggtag tcaggccgtg ggacgctcct ccttctactg cctggaatac 1200
tttccttcgc agatgctgag aaccggcaac aacttccagt ttacttacac cttcgaggac 1260
gtgcctttcc acagcagcta cgcccacagc cagagcttgg accggctgat gaatcctctg 1320
attgaccagt acctgtacta cttgtctcgg actcaaacaa caggaggcac ggcaaatacg 1380
cagactctgg gcttcagcca aggtgggcct aatacaatgg ccaatcaggc aaagaactgg 1440
ctgccaggac cctgttaccg ccaacaacgc gtctcaacga caaccgggca aaacaacaat 1500
agcaactttg cctggactgc tgggaccaaa taccatctga atggaagaaa ttcattggct 1560
aatcctggca tcgctatggc aacacacaaa gacgacgagg agcgtttttt tcccagtaac 1620
gggatcctga tttttggcaa acaaaatgct gccagagaca atgcggatta cagcgatgtc 1680
atgctcacca gcgaggaaga aatcaaaacc actaaccctg tggctacaga ggaatacggt 1740
atcgtggcag ataacttgca gcagcaaaac acggctcctc aaattggaac tgtcaacagc 1800
cagggggcct tacccggtat ggtctggcag aaccgggacg tgtacctgca gggtcccatc 1860
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ggcctgaaac atcctccgcc tcagatcctg atcaagaaca cgcctgtacc tgcggatcct 1980
ccgaccacct tcaaccagtc aaagctgaac tctttcatca cgcaatacag caccggacag 2040
gtcagcgtgg aaattgaatg ggagctgcag aaggaaaaca gcaagcgctg gaaccccgag 2100
atccagtaca cctccaacta ctacaaatct acaagtgtgg actttgctgt aatacagaag 2160
gcgtgtactc tgaaccccgc cccattggca cccgttacct cacccgtaat ctg 2213
<210> 118
<211> 4393
<212> DNA
<213> Adeno-associated virus 8
<400> 118
cagagaggga gtggccaact ccatcactag gggtagcgcg aagcgcctcc cacgctgccg 60
cgtcagcgct gacgtaaatt acgtcatagg ggagtggtcc tgtattagct gtcacgtgag 120
tgcttttgcg gcattttgcg acaccacgtg gccatttgag gtatatatgg ccgagtgagc 180
gagcaggatc tccattttga ccgcgaaatt tgaacgagca gcagccatgc cgggcttcta 240
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gaatctgatc gagcaggcac ccctgaccgt ggccgagaag ctgcagcgcg acttcctggt 420
ccaatggcgc cgcgtgagta aggccccgga ggccctcttc tttgttcagt tcgagaaggg 480
cgagagctac tttcacctgc acgttctggt cgagaccacg ggggtcaagt ccatggtgct 540
aggccgcttc ctgagtcaga ttcgggaaaa gcttggtcca gaccatctac ccgcggggtc 600
gagccccacc ttgcccaact ggttcgcggt gaccaaagac gcggtaatgg cgccggcggg 660
ggggaacaag gtggtggacg agtgctacat ccccaactac ctcctgccca agactcagcc 720
cgagctgcag tgggcgtgga ctaacatgga ggagtatata agcgcgtgct tgaacctggc 780
cgagcgcaaa cggctcgtgg cgcagcacct gacccacgtc agccagacgc aggagcagaa 840
caaggagaat ctgaacccca attctgacgc gcccgtgatc aggtcaaaaa cctccgcgcg 900
ctatatggag ctggtcgggt ggctggtgga ccggggcatc acctccgaga agcagtggat 960
ccaggaggac caggcctcgt acatctcctt caacgccgcc tccaactcgc ggtcccagat 1020
caaggccgcg ctggacaatg ccggcaagat catggcgctg accaaatccg cgcccgacta 1080
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tctcaacggc tacgaccctg cctacgccgg ctccgtcttt ctcggctggg ctcagaaaaa 1200
gttcgggaaa cgcaacacca tctggctgtt tggacccgcc accaccggca agaccaacat 1260
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ggccaaggtc gtggagtccg ccaaggccat tctcggcggc agcaaggtgc gcgtggacca 1440
aaagtgcaag tcgtccgccc agatcgaccc cacccccgtg atcgtcacct ccaacaccaa 1500
catgtgcgcc gtgattgacg ggaacagcac caccttcgag caccagcagc ctctccagga 1560
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gcaggaagtc aaagagttct tccgctgggc cagtgatcac gtgaccgagg tggcgcatga 1680
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cgagcccaag cgggcctgcc cctcagtcgc ggatccatcg acgtcagacg cggaaggagc 1800
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435 440 445
Ser Arg Thr Gln Thr Thr Gly Gly Thr Ala Asn Thr Gln Thr Leu Gly
450 455 460
Phe Ser Gln Gly Gly Pro Asn Thr Met Ala Asn Gln Ala Lys Asn Trp
465 470 475 480
Leu Pro Gly Pro Cys Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Thr Thr Thr Gly
485 490 495
Gln Asn Asn Asn Ser Asn Phe Ala Trp Thr Ala Gly Thr Lys Tyr His
500 505 510
Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Ala Asn Pro Gly Ile Ala Met Ala Thr
515 520 525
His Lys Asp Asp Glu Glu Arg Phe Phe Pro Ser Asn Gly Ile Leu Ile
530 535 540
Phe Gly Lys Gln Asn Ala Ala Arg Asp Asn Ala Asp Tyr Ser Asp Val
545 550 555 560
Met Leu Thr Ser Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr
565 570 575
Glu Glu Tyr Gly Ile Val Ala Asp Asn Leu Pro Glu Arg Thr Ala Met
580 585 590
Ser Leu Pro Gly Thr Val Asn Ser Gln Gly Ala Leu Pro Gly Met Val
595 600 605
Trp Gln Asn Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile
610 615 620
Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe
625 630 635 640
Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val
645 650 655
Pro Ala Asp Pro Pro Thr Thr Phe Asn Gln Ser Lys Leu Asn Ser Phe
660 665 670
Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu
675 680 685
Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr
690 695 700
Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Thr Ser Val Asp Phe Ala Val Asn Thr Glu
705 710 715 720
Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg
725 730 735
Asn Leu
<210> 124
<211> 2214
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
polynucleotide"
<400> 124
atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca acctctctga gggcattcgc 60
gagtggtggg cgctgaaacc tggagccccg aagcccaaag ccaaccagca aaagcaggac 120
gacggccggg gtctggtgct tcctggctac aagtacctcg gacccttcaa cggactcgac 180
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cagcagctgc aggcgggtga caatccgtac ctgcggtata accacgccga cgccgagttt 300
caggagcgtc tgcaagaaga tacgtctttt gggggcaacc tcgggcgagc agtcttccag 360
gccaagaagc gggttctcga acctctcggt ctggttgagg aaggcgctaa gacggctcct 420
ggaaagaaga gaccggtaga gccatcaccc cagcgttctc cagactcctc tacgggcatc 480
ggcaagaaag gccaacagcc cgccagaaaa agactcaatt ttggtcagac tggcgactca 540
gagtcagttc cagaccctca acctctcgga gaacctccag cagcgccctc tggtgtggga 600
cctaatacaa tggctgcagg cggtggcgca ccaatggcag acaataacga aggcgccgac 660
ggagtgggta gttcctcggg aaattggcat tgcgattcca catggctggg cgacagagtc 720
atcaccacca gcacccgaac ctgggccctg cccacctaca acaaccacct ctacaagcaa 780
atctccaacg ggacatcggg aggagccacc aacgacaaca cctacttcgg ctacagcacc 840
ccctgggggt attttgactt taacagattc cactgccact tttcaccacg tgactggcag 900
cgactcatca acaacaactg gggattccgg cccaagagac tcagcttcaa gctcttcaac 960
atccaggtca aggaggtcac gcagaatgaa ggcaccaaga ccatcgccaa taacctcacc 1020
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caccagggct gcctgcctcc gttcccggcg gacgtgttca tgattcccca gtacggctac 1140
ctaacactca acaacggtag tcaggccgtg ggacgctcct ccttctactg cctggaatac 1200
tttccttcgc agatgctgag aaccggcaac aacttccagt ttacttacac cttcgaggac 1260
gtgcctttcc acagcagcta cgcccacagc cagagcttgg accggctgat gaatcctctg 1320
attgaccagt acctgtacta cttgtctcgg actcaaacaa caggaggcac ggcaaatacg 1380
cagactctgg gcttcagcca aggtgggcct aatacaatgg ccaatcaggc aaagaactgg 1440
ctgccaggac cctgttaccg ccaacaacgc gtctcaacga caaccgggca aaacaacaat 1500
agcaactttg cctggactgc tgggaccaaa taccatctga atggaagaaa ttcattggct 1560
aatcctggca tcgctatggc aacacacaaa gacgacgagg agcgtttttt tcccagtaac 1620
gggatcctga tttttggcaa acaaaatgct gccagagaca atgcggatta cagcgatgtc 1680
atgctcacca gcgaggaaga aatcaaaacc actaaccctg tggctacaga ggaatacggt 1740
atcgtggcag ataacttgag ttttagtcgt gcggttcttt gtgatggaac tgtcaacagc 1800
cagggggcct tacccggtat ggtctggcag aaccgggacg tgtacctgca gggtcccatc 1860
tgggccaaga ttcctcacac ggacggcaac ttccacccgt ctccgctgat gggcggcttt 1920
ggcctgaaac atcctccgcc tcagatcctg atcaagaaca cgcctgtacc tgcggatcct 1980
ccgaccacct tcaaccagtc aaagctgaac tctttcatca cgcaatacag caccggacag 2040
gtcagcgtgg aaattgaatg ggagctgcag aaggaaaaca gcaagcgctg gaaccccgag 2100
atccagtaca cctccaacta ctacaaatct acaagtgtgg actttgctgt taatacagaa 2160
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
polypeptide"
<400> 125
Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser
1 5 10 15
Glu Gly Ile Arg Glu Trp Trp Ala Leu Lys Pro Gly Ala Pro Lys Pro
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Lys Ala Asn Gln Gln Lys Gln Asp Asp Gly Arg Gly Leu Val Leu Pro
35 40 45
Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Phe Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro
50 55 60
Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp
65 70 75 80
Gln Gln Leu Gln Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Arg Tyr Asn His Ala
85 90 95
Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Gln Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly
100 105 110
Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro
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Leu Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg
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Pro Val Glu Pro Ser Pro Gln Arg Ser Pro Asp Ser Ser Thr Gly Ile
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Gly Lys Lys Gly Gln Gln Pro Ala Arg Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln
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Pro Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Pro Asn Thr Met Ala Ala Gly Gly
195 200 205
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245 250 255
Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Gly Thr Ser Gly Gly Ala Thr Asn Asp
260 265 270
Asn Thr Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn
275 280 285
Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn
290 295 300
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Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Gln Asn Glu Gly Thr Lys Thr Ile Ala
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Asn Asn Leu Thr Ser Thr Ile Gln Val Phe Thr Asp Ser Glu Tyr Gln
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Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Gln Gly Cys Leu Pro Pro Phe
355 360 365
Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn
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Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Gln Phe Thr Tyr
405 410 415
Thr Phe Glu Asp Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser
420 425 430
Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu
435 440 445
Ser Arg Thr Gln Thr Thr Gly Gly Thr Ala Asn Thr Gln Thr Leu Gly
450 455 460
Phe Ser Gln Gly Gly Pro Asn Thr Met Ala Asn Gln Ala Lys Asn Trp
465 470 475 480
Leu Pro Gly Pro Cys Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Thr Thr Thr Gly
485 490 495
Gln Asn Asn Asn Ser Asn Phe Ala Trp Thr Ala Gly Thr Lys Tyr His
500 505 510
Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Ala Asn Pro Gly Ile Ala Met Ala Thr
515 520 525
His Lys Asp Asp Glu Glu Arg Phe Phe Pro Ser Asn Gly Ile Leu Ile
530 535 540
Phe Gly Lys Gln Asn Ala Ala Arg Asp Asn Ala Asp Tyr Ser Asp Val
545 550 555 560
Met Leu Thr Ser Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr
565 570 575
Glu Glu Tyr Gly Ile Val Ala Asp Asn Leu Ser Phe Ser Arg Ala Val
580 585 590
Leu Cys Asp Gly Thr Val Asn Ser Gln Gly Ala Leu Pro Gly Met Val
595 600 605
Trp Gln Asn Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile
610 615 620
Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe
625 630 635 640
Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val
645 650 655
Pro Ala Asp Pro Pro Thr Thr Phe Asn Gln Ser Lys Leu Asn Ser Phe
660 665 670
Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu
675 680 685
Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr
690 695 700
Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Thr Ser Val Asp Phe Ala Val Asn Thr Glu
705 710 715 720
Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg
725 730 735
Asn Leu
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<211> 4385
<212> DNA
<213> Adeno-associated virus 9
<400> 126
cagagaggga gtggccaact ccatcactag gggtaatcgc gaagcgcctc ccacgctgcc 60
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<211> 4382
<212> DNA
<213> Adeno-associated virus 9
<400> 127
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gaaggcgccg acggagtggg taattcctcg ggaaattggc attgcgattc cacatggctg 2820
ggggacagag tcatcaccac cagcacccga acctgggcat tgcccaccta caacaaccac 2880
ctctacaagc aaatctccaa tggaacatcg ggaggaagca ccaacgacaa cacctacttt 2940
ggctacagca ccccctgggg gtattttgac ttcaacagat tccactgcca cttctcacca 3000
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tgtctggaat acttcccttc tcagatgctg agaaccggca acaactttca gttcagctac 3360
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cgatgagggg attcatcagc cggtccaggc tctggctgtg cgcatagctg ctgtggaaag 1020
gcacttcctc aaaggtgtag ctgaattcaa agttatcgcc cgttctcagc atctgagaag 1080
gaaagtactc caggcagtag aaggaggaac gtcccacaga ctgactgccg ttgtttagag 1140
tcagatatcc gtactgagga atcatgaaca cgtccgcagg gaacggaggg aggcagccct 1200
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tggaagactg ctcgtccgag gttgccccca aaagacgtat cttctttaag gcgctcctga 2040
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<213> Adeno-associated virus 2
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<213> Adeno-associated virus 2
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cgcggagttt caggagcgcc ttaaagaaga tacgtctttt gggggcaacc tcggacgagc 1200
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ctttccttct cagatgcttc gtaccggaaa caactttacc ttcagctaca cctttgagga 2100
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catcgaccag tacctgtatt acttgagcag aacaaacact ccaagcggaa ccaccacgca 2220
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cggggttctc atctttggga agcaaggctc agagaaaaca aatgtggaca ttgaaaaggt 2520
catgattaca gacgaagagg aaatcagaac caccaatccc gtggccacgg agcagtatgg 2580
ttctgtatct accaacctcc agagcggcaa cacacaagca gctactgcag atgtcaacac 2640
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ctgggcaaag attccacaca cggacggaca ttttcacccc tctcccctca tgggcggatt 2760
tggacttaaa caccctcctc cacagattct catcaagaac accccggtac ctgcaaatcc 2820
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gatccagtac acttccaact acaacaaatc tgttaatgtg gactttactg tggacactaa 3000
tggtgtgtat tcagagcctc gccccattgg caccagatac ctgactcgta atctgtaatt 3060
gcttgttaat caataaaccg tttaattcgt ttcagttgaa ctttggtctc tgcgaagggc 3120
gaattcgttt aaaccctgca ggactagtcc ctttagtgag g 3161
<210> 195
<211> 3162
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
polynucleotide"
<400> 195
gaattgaatt tagcggccgc gaattcgccc ttcgcagaga ccaaagttca actgaaacga 60
attaaacggt ttattgatta acaagcaatt acagattacg agtcaggtat ctggtgccaa 120
tggggcgagg ctctgaatac acgccattag tgtccacagt aaagtccaca ttaacagact 180
tgttgtagtt ggaagtgtac tgaatttcgg gattccagcg tttgctgttt tccttctgca 240
gctcccactc gatctccacg ctgacctgtc ccgtggagta ctgtgtgatg aaggaagcaa 300
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<210> 196
<211> 3164
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
polynucleotide"
<400> 196
gcgaattgaa tttagcggcc gcgaattcgc ccttcgcaga gaccaaagtt caactgaaac 60
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<211> 3163
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
polynucleotide"
<400> 197
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<211> 735
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
polypeptide"
<400> 198
Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Thr Leu Ser
1 5 10 15
Glu Gly Ile Arg Gln Trp Trp Lys Leu Lys Pro Gly Pro Pro Pro Pro
20 25 30
Lys Pro Ala Glu Arg His Lys Asp Asp Ser Arg Gly Leu Val Leu Pro
35 40 45
Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Phe Asn Gly Leu Tyr Lys Gly Glu Pro
50 55 60
Val Asp Glu Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp
65 70 75 80
Arg Gln Leu Asp Ser Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala
85 90 95
Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Lys Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly
100 105 110
Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro
115 120 125
Leu Gly Leu Val Gly Glu Pro Val Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg
130 135 140
Pro Val Glu His Ser Pro Val Glu Pro Asp Ser Ser Ser Gly Thr Gly
145 150 155 160
Lys Ala Gly Asn Gln Pro Ala Arg Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr
165 170 175
Gly Asp Ala Asp Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Leu Gly Gln Pro Pro
180 185 190
Ala Ala Pro Ser Gly Leu Gly Ser Thr Thr Met Ala Thr Gly Ser Gly
195 200 205
Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ser
210 215 220
Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile
225 230 235 240
Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu
245 250 255
Tyr Lys Gln Ile Ser Ser Gln Ser Gly Ala Ser Asn Asp Asn His Tyr
260 265 270
Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His
275 280 285
Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Arg Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp
290 295 300
Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val
305 310 315 320
Lys Glu Val Thr Gln Asn Asp Gly Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu
325 330 335
Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Ser Gly Tyr Gln Leu Pro Tyr
340 345 350
Val Leu Gly Leu Ala His Gln Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp
355 360 365
Val Phe Met Val Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asn Gly Ser
370 375 380
Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser
385 390 395 400
Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Thr Phe Glu
405 410 415
Asp Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg
420 425 430
Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Asn Lys Thr
435 440 445
Gln Ser Asn Ser Gly Thr Leu Gln Gln Ser Arg Leu Leu Phe Ser Gln
450 455 460
Ala Gly Pro Thr Ser Met Ser Leu Gln Ala Lys Asn Trp Leu Pro Gly
465 470 475 480
Pro Cys Tyr Arg Gln Gln Arg Leu Ser Lys Gln Ala Asn Asp Asn Asn
485 490 495
Asn Ser Asn Phe Pro Trp Thr Ala Ala Thr Lys Tyr His Leu Asn Gly
500 505 510
Arg Asp Ser Leu Val Asn Pro Gly Pro Ala Met Ala Ser His Lys Asp
515 520 525
Asp Glu Glu Lys Phe Phe Pro Met His Gly Thr Leu Ile Phe Gly Lys
530 535 540
Gln Gly Thr Asn Ala Asn Asp Ala Asp Leu Asp Asn Val Met Ile Thr
545 550 555 560
Asp Glu Glu Glu Ile Arg Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu Gln Tyr
565 570 575
Gly Tyr Val Ser Asn Asn Leu Gln Asn Ser Asn Thr Gly Pro Thr Thr
580 585 590
Gly Thr Val Asn His Gln Gly Ala Leu Pro Gly Met Val Trp Gln Asp
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Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro His Thr
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Asp Gly His Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys
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His Pro Pro Pro Gln Ile Met Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala Asn
645 650 655
Pro Pro Thr Asn Phe Ser Ser Ala Lys Phe Ala Ser Phe Ile Thr Gln
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Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys
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Glu Asp Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr
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<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
polynucleotide"
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<221> source
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polynucleotide"
<400> 206
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<400> 207
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Gly Tyr Val Ser Asn Asn Leu Gln Asn Ser Asn Thr Gly Pro Thr Thr
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Gly Thr Val Asn His Gln Gly Ala Leu Pro Gly Met Val Trp Gln Asp
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Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro His Thr
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His Pro Pro Pro Gln Ile Met Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala Asn
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Pro Pro Thr Asn Phe Ser Ser Ala Lys Phe Ala Ser Phe Ile Thr Gln
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Ser Ser Gln Ser Gly Ala Thr Asn Asp Asn His Phe Phe Gly Tyr Ser
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Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Arg Gly Phe Arg Pro
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Arg Lys Leu Arg Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr
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Pro Ala Asp Pro Pro Thr Thr Phe Ser Gln Ala Lys Leu Ala Ser Phe
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Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu
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Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr
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Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Thr Asn Val Asp Phe Ala Val Asn Thr Glu
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<400> 427
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ctgttgttgt taaagtccaa gttctttgac agtctctgtt gcctatagca gggtccaggc 840
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ccagtctgac caaaattgag cttcttttta gcgggctgct ggcctttttt gccgatgccc 1800
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tcctcgagcc aatctggaag ataaccatcg gcagccatac ctggtttaag tcatttattg 2280
ctcagaaaca cagtcgtcca ggtccacgtt gaccaggtcg caggccgagc aagcaatctc 2340
gggtgcccgc cccagcagat gatgaatcgc acacagcttc cgatacgtct tttttctgac 2400
gaccggttga gattctgaca cgccggggaa acattctaaa cagtctctga ccccgtgcgt 2460
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tatatccgcg tcatcggggg cgggtctttt gctggctccg ccctttctga cgtagaactc 2700
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tgtcaccttg ccaaagtcgt gttccagacg gcgggtgagt tcaaatttga acatccggtc 2820
ctgcaacggt tgctggtgct cgaaggtggt gctgttcccg tcgatcacgg cgcacatgtt 2880
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Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys
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Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Val Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr
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Asn Lys Ser Val Asn Val Asp Phe Thr Val Asp Thr Asn Gly Val Tyr
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Thr Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu
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Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu
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cttccaggca tggtctggca ggacagagat gtgtaccttc aggggcccat ctgggcaaag 1860
attccacaca cggacggaca ttttcacccc tctcccctca tgggtggatt cggacttaaa 1920
caccctcctc cacagattct catcaagaac accccggtac ctgcgaatcc ttcgaccacc 1980
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Pro Cys Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Lys Thr Ser Ala Asp Asn Asn
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Asn Ser Glu Tyr Ser Trp Thr Gly Ala Thr Lys Tyr His Leu Asn Gly
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Asp Glu Glu Glu Ile Arg Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu Gln Tyr
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Gly Ser Val Ser Thr Asn Leu Gln Arg Gly Asn Arg Gln Ala Ala Thr
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Ala Asp Val Asn Thr Gln Gly Val Leu Pro Gly Met Val Trp Gln Asp
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His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala Asn
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Pro Ser Thr Thr Phe Ser Ala Ala Lys Phe Ala Ser Phe Ile Thr Gln
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Ala Gln Tyr Thr Leu Ser Gln Gly Trp Ala Gln
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<213> Artificial Sequence
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Ala Gln Met Asn Ala Thr Lys Asn Val Ala Gln
1 5 10
<210> 932
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<213> Artificial Sequence
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Ala Gln Val Ser Gly Gly His His Ser Ala Gln
1 5 10
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<211> 11
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<213> Artificial Sequence
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Ser Ala Gln Thr Leu Xaa Xaa Xaa Phe Lys Ala Gln Ala Gln
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Ser Ala Gln Thr Leu Ala Val Xaa Xaa Xaa Ala Gln Ala Gln
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Thr Asn His Gln Ser Ala Gln
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Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp
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Asp Gly Thr Leu Ala Thr Pro Phe Lys
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Asp Gly Thr Leu Ala Thr Pro Phe Lys Xaa Xaa
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Leu Ala Val Pro Phe Lys Ala Gln
1 5
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Val Pro Phe Lys Ala Gln
1 5
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Phe Lys Ala Gln
1
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Ala Gln Thr Leu Ala Val
1 5
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<211> 8
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Ala Gln Thr Leu Ala Val Pro Phe
1 5
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Gln Ala Val Arg
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Ala Val Arg Thr
1
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Val Arg Thr Ser
1
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Arg Thr Ser Leu
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Gln Ala Val Arg Thr
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Ala Val Arg Thr Ser
1 5
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Val Arg Thr Ser Leu
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Gln Ala Val Arg Thr Ser
1 5
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Ala Val Arg Thr Ser Leu
1 5
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gatgggactt tggcggtgcc ttttaaggca cag 33
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<211> 33
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
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gatgggacgt tggcggtgcc ttttaaggca cag 33
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caggcggtta ggacgtcttt g 21
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caggtcttca cggactcaga ctatcag 27
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caagtaaaac ctctacaaat gtggtaaaat cg 32
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<213> Artificial Sequence
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actcatcgac caatacttgt actatctctc tagaac 36
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<213> Artificial Sequence
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oligonucleotide"
<400> 969
ggaagtattc cttggttttg aaccca 26
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<212> DNA
<213> Artificial Sequence
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<400> 970
ggtcgcggtt cttgtttgtg gat 23
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<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
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oligonucleotide"
<400> 971
cgaccttgaa gcgcatgaac tcct 24
<210> 972
<211> 83
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
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oligonucleotide"
<220>
<221> modified_base
<222> (42)..(43)
<223> a, c, t, or g
<220>
<221> modified_base
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<223> a, c, t, or g
<220>
<221> modified_base
<222> (48)..(49)
<223> a, c, t, or g
<220>
<221> modified_base
<222> (51)..(52)
<223> a, c, t, or g
<220>
<221> modified_base
<222> (54)..(55)
<223> a, c, t, or g
<220>
<221> modified_base
<222> (57)..(58)
<223> a, c, t, or g
<220>
<221> modified_base
<222> (60)..(61)
<223> a, c, t, or g
<400> 972
gtattccttg gttttgaacc caaccggtct gcgcctgtgc mnnmnnmnnm nnmnnmnnmn 60
nttgggcact ctggtggttt gtc 83
<210> 973
<211> 64
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
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<220>
<221> modified_base
<222> (36)..(37)
<223> a, c, t, or g
<220>
<221> modified_base
<222> (39)..(40)
<223> a, c, t, or g
<220>
<221> modified_base
<222> (42)..(43)
<223> a, c, t, or g
<400> 973
gtattccttg gttttgaacc caaccggtct gcgcmnnmnn mnnaaaaggc accgccaaag 60
tttg 64
<210> 974
<211> 70
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
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oligonucleotide"
<220>
<221> modified_base
<222> (42)..(43)
<223> a, c, t, or g
<220>
<221> modified_base
<222> (45)..(46)
<223> a, c, t, or g
<220>
<221> modified_base
<222> (48)..(49)
<223> a, c, t, or g
<400> 974
gtattccttg gttttgaacc caaccggtct gcgcctgtgc mnnmnnmnnc accgccaaag 60
tttgggcact 70
<210> 975
<211> 77
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
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oligonucleotide"
<220>
<221> modified_base
<222> (48)..(49)
<223> a, c, t, or g
<220>
<221> modified_base
<222> (51)..(52)
<223> a, c, t, or g
<220>
<221> modified_base
<222> (54)..(55)
<223> a, c, t, or g
<400> 975
gtattccttg gttttgaacc caaccggtct gcgcctgtgc cttaaamnnm nnmnncaaag 60
tttgggcact ctggtgg 77
<210> 976
<211> 83
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
oligonucleotide"
<220>
<221> modified_base
<222> (54)..(55)
<223> a, c, t, or g
<220>
<221> modified_base
<222> (57)..(58)
<223> a, c, t, or g
<220>
<221> modified_base
<222> (60)..(61)
<223> a, c, t, or g
<400> 976
gtattccttg gttttgaacc caaccggtct gcgcctgtgc cttaaaaggc acmnnmnnmn 60
nttgggcact ctggtggttt gtg 83
<210> 977
<211> 21
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
oligonucleotide"
<400> 977
cttgcgaagg agcggctttc g 21
<210> 978
<211> 480
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 978
Met Asn Ala Ser Glu Phe Arg Arg Arg Gly Lys Glu Met Val Asp Tyr
1 5 10 15
Val Ala Asn Tyr Met Glu Gly Ile Glu Gly Arg Gln Val Tyr Pro Asp
20 25 30
Val Glu Pro Gly Tyr Leu Arg Pro Leu Ile Pro Ala Ala Ala Pro Gln
35 40 45
Glu Pro Asp Thr Phe Glu Asp Ile Ile Asn Asp Val Glu Lys Ile Ile
50 55 60
Met Pro Gly Val Thr His Trp His Ser Pro Tyr Phe Phe Ala Tyr Phe
65 70 75 80
Pro Thr Ala Ser Ser Tyr Pro Ala Met Leu Ala Asp Met Leu Cys Gly
85 90 95
Ala Ile Gly Cys Ile Gly Phe Ser Trp Ala Ala Ser Pro Ala Cys Thr
100 105 110
Glu Leu Glu Thr Val Met Met Asp Trp Leu Gly Lys Met Leu Glu Leu
115 120 125
Pro Lys Ala Phe Leu Asn Glu Lys Ala Gly Glu Gly Gly Gly Val Ile
130 135 140
Gln Gly Ser Ala Ser Glu Ala Thr Leu Val Ala Leu Leu Ala Ala Arg
145 150 155 160
Thr Lys Val Ile His Arg Leu Gln Ala Ala Ser Pro Glu Leu Thr Gln
165 170 175
Ala Ala Ile Met Glu Lys Leu Val Ala Tyr Ser Ser Asp Gln Ala His
180 185 190
Ser Ser Val Glu Arg Ala Gly Leu Ile Gly Gly Val Lys Leu Lys Ala
195 200 205
Ile Pro Ser Asp Gly Asn Phe Ala Met Arg Ala Ser Ala Leu Gln Glu
210 215 220
Ala Leu Glu Arg Asp Lys Ala Ala Gly Leu Ile Pro Phe Phe Met Val
225 230 235 240
Ala Thr Leu Gly Thr Thr Thr Cys Cys Ser Phe Asp Asn Leu Leu Glu
245 250 255
Val Gly Pro Ile Cys Asn Lys Glu Asp Ile Trp Leu His Val Asp Ala
260 265 270
Ala Tyr Ala Gly Ser Ala Phe Ile Cys Pro Glu Phe Arg His Leu Leu
275 280 285
Asn Gly Val Glu Phe Ala Asp Ser Phe Asn Phe Asn Pro His Lys Trp
290 295 300
Leu Leu Val Asn Phe Asp Cys Ser Ala Met Trp Val Lys Lys Arg Thr
305 310 315 320
Asp Leu Thr Gly Ala Phe Arg Leu Asp Pro Thr Tyr Leu Lys His Ser
325 330 335
His Gln Asp Ser Gly Leu Ile Thr Asp Tyr Arg His Trp Gln Ile Pro
340 345 350
Leu Gly Arg Arg Phe Arg Ser Leu Lys Met Trp Phe Val Phe Arg Met
355 360 365
Tyr Gly Val Lys Gly Leu Gln Ala Tyr Ile Arg Lys His Val Gln Leu
370 375 380
Ser His Glu Phe Glu Ser Leu Val Arg Gln Asp Pro Arg Phe Glu Ile
385 390 395 400
Cys Val Glu Val Ile Leu Gly Leu Val Cys Phe Arg Leu Lys Gly Ser
405 410 415
Asn Lys Val Asn Glu Ala Leu Leu Gln Arg Ile Asn Ser Ala Lys Lys
420 425 430
Ile His Leu Val Pro Cys His Leu Arg Asp Lys Phe Val Leu Arg Phe
435 440 445
Ala Ile Cys Ser Arg Thr Val Glu Ser Ala His Val Gln Arg Ala Trp
450 455 460
Glu His Ile Lys Glu Leu Ala Ala Asp Val Leu Arg Ala Glu Arg Glu
465 470 475 480
<210> 979
<211> 3526
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
polynucleotide"
<400> 979
cctgcaggca gctgcgcgct cgctcgctca ctgaggccgc ccgggcaaag cccgggcgtc 60
gggcgacctt tggtcgcccg gcctcagtga gcgagcgagc gcgcagagag ggagtggcca 120
actccatcac taggggttcc ttgtagttaa tgattaaccc gccatgctac ttatctacgt 180
agccatgcgt cgacataacg cgtatatcta gacgttacat aacttacggt aaatggcccg 240
cctggctgac cgcccaacga cccccgccca ttgacgtcaa taatgacgta tgttcccata 300
gtaacgccaa tagggacttt ccattgacgt caatgggtgg agtatttacg gtaaactgcc 360
cacttggcag tacatcaagt gtatcatatg ccaagtacgc cccctattga cgtcaatgac 420
ggtaaatggc ccgcctggca ttatgcccag tacatgacct tatgggactt tcctacttgg 480
cagtacatct agtattagtc atcgctatta ccatggtgat gcggttttgg cagtacatca 540
atgggcgtgg atagcggttt gactcacggg gatttccaag tctccacccc attgacgtca 600
atgggagttt gttttggcac caaaatcaac gggactttcc aaaatgtcgt aacaactccg 660
ccccattgac gcaaatgggc ggtaggcgtg tacggtggga ggtctatata agcagagctc 720
gtttagtgaa ccgtcagatc gcctggagac gccatccacg ctgttttgac ctccatagaa 780
gacaccggga ccgatccagc ctccgcggat tcgaatcccg gccgggaacg gtgcattgga 840
acgcggattc cccgtgccaa gagtgacgta agtaccgcct atagagtcta taggcccaca 900
aaaaatgctt tcttctttta atatactttt ttgtttatct tatttctaat actttcccta 960
atctctttct ttcagggcaa taatgataca atgtatcatg cctctttgca ccattctaaa 1020
gaataacagt gataatttct gggttaaggc aatagcaata tttctgcata taaatatttc 1080
tgcatataaa ttgtaactga tgtaagaggt ttcatattgc taatagcagc tacaatccag 1140
ctaccattct gcttttattt tatggttggg ataaggctgg attattctga gtccaagcta 1200
ggcccttttg ctaatcatgt tcatacctct tatcttcctc ccacagctcc tgggcaacgt 1260
gctggtctgt gtgctggccc atcactttgg caaagaattg ggattcgaac atcgattgaa 1320
ttccccgggg atccaccatg aacgcaagtg aattccgaag gagagggaag gagatggtgg 1380
attacgtggc caactacatg gaaggcattg agggacgcca ggtctaccct gacgtggagc 1440
ccgggtacct gcggccgctg atccctgccg ctgcccctca ggagccagac acgtttgagg 1500
acatcatcaa cgacgttgag aagataatca tgcctggggt gacgcactgg cacagcccct 1560
acttcttcgc ctacttcccc actgccagct cgtacccggc catgcttgcg gacatgctgt 1620
gcggggccat tggctgcatc ggcttctcct gggcggcaag cccagcatgc acagagctgg 1680
agactgtgat gatggactgg ctcgggaaga tgctggaact accaaaggca tttttgaatg 1740
agaaagctgg agaaggggga ggagtgatcc agggaagtgc cagtgaagcc accctggtgg 1800
ccctgctggc cgctcggacc aaagtgatcc atcggctgca ggcagcgtcc ccagagctca 1860
cacaggccgc tatcatggag aagctggtgg cttactcatc cgatcaggca cactcctcag 1920
tggaaagagc tgggttaatt ggtggagtga aattaaaagc catcccctca gatggcaact 1980
tcgccatgcg tgcgtctgcc ctgcaggaag ccctggagag agacaaagcg gctggcctga 2040
ttcctttctt tatggttgcc accctgggga ccacaacatg ctgctccttt gacaatctct 2100
tagaagtcgg tcctatctgc aacaaggaag acatatggct gcacgttgat gcagcctacg 2160
caggcagtgc attcatctgc cctgagttcc ggcaccttct gaatggagtg gagtttgcag 2220
attcattcaa ctttaatccc cacaaatggc tattggtgaa ttttgactgt tctgccatgt 2280
gggtgaaaaa gagaacagac ttaacgggag cctttagact ggaccccact tacctgaagc 2340
acagccatca ggattcaggg cttatcactg actaccggca ttggcagata ccactgggca 2400
gaagatttcg ctctttgaaa atgtggtttg tatttaggat gtatggagtc aaaggactgc 2460
aggcttatat ccgcaagcat gtccagctgt cccatgagtt tgagtcactg gtgcgccagg 2520
atccccgctt tgaaatctgt gtggaagtca ttctggggct tgtctgcttt cggctaaagg 2580
gttccaacaa agtgaatgaa gctcttctgc aaagaataaa cagtgccaaa aaaatccact 2640
tggttccatg tcacctcagg gacaagtttg tcctgcgctt tgccatctgt tctcgcacgg 2700
tggaatctgc ccatgtgcag cgggcctggg aacacatcaa agagctggcg gccgacgtgc 2760
tgcgagcaga gagggagtag gagtgaagcc aggacctgca gaagcttgcc tcgagcagcg 2820
ctgctcgaga gatctacggg tggcatccct gtgacccctc cccagtgcct ctcctggccc 2880
tggaagttgc cactccagtg cccaccagcc ttgtcctaat aaaattaagt tgcatcattt 2940
tgtctgacta ggtgtccttc tataatatta tggggtggag gggggtggta tggagcaagg 3000
ggcaagttgg gaagacaacc tgtagggcct gcggggtcta ttgggaacca agctggagtg 3060
cagtggcaca atcttggctc actgcaatct ccgcctcctg ggttcaagcg attctcctgc 3120
ctcagcctcc cgagttgttg ggattccagg catgcatgac caggctcagc taatttttgt 3180
ttttttggta gagacggggt ttcaccatat tggccaggct ggtctccaac tcctaatctc 3240
aggtgatcta cccaccttgg cctcccaaat tgctgggatt acaggcgtga accactgctc 3300
ccttccctgt ccttactaga tttaaatatg tcgtgcatcg atgctacgta gataagtagc 3360
atggcgggtt aatcattaac tacagaggaa cccctagtga tggagttggc cactccctct 3420
ctgcgcgctc gctcgctcac tgaggccggg cgaccaaagg tcgcccgacg cccgggcttt 3480
gcccgggcgg cctcagtgag cgagcgagcg cgcagctgcc tgcagg 3526
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cctgcaggca gctgcgcgct cgctcgctca ctgaggccgc ccgggcaaag cccgggcgtc 60
gggcgacctt tggtcgcccg gcctcagtga gcgagcgagc gcgcagagag ggagtggcca 120
actccatcac taggggttcc t 141
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<212> DNA
<213> Artificial Sequence
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gtcgacataa cgcgtata 18
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polynucleotide"
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cgttacataa cttacggtaa atggcccgcc tggctgaccg cccaacgacc cccgcccatt 60
gacgtcaata atgacgtatg ttcccatagt aacgccaata gggactttcc attgacgtca 120
atgggtggag tatttacggt aaactgccca cttggcagta catcaagtgt atcatatgcc 180
aagtacgccc cctattgacg tcaatgacgg taaatggccc gcctggcatt atgcccagta 240
catgacctta tgggactttc ctacttggca gtacatctag tattagtcat cgctattacc 300
atg 303
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polynucleotide"
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gtgatgcggt tttggcagta catcaatggg cgtggatagc ggtttgactc acggggattt 60
ccaagtctcc accccattga cgtcaatggg agtttgtttt ggcaccaaaa tcaacgggac 120
tttccaaaat gtcgtaacaa ctccgcccca ttgacgcaaa tgggcggtag gcgtgtacgg 180
tgggaggtct atataagcag agct 204
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tcagatcgcc tggagacgcc atccacgctg ttttgacctc catagaagac accgggaccg 60
atccagcctc cgcggattcg aatcccggcc gggaacggtg cattggaacg cggattcccc 120
gtgccaagag tgac 134
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gtaagtaccg cctatagagt ctataggccc ac 32
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aaaaaatgct ttcttctttt aatatacttt tttgtttatc ttatttctaa tactttccct 60
aatctctttc tttcagggca ataatgatac aatgtatcat gcctctttgc accattctaa 120
agaataacag tgataatttc tgggttaagg caatagcaat atttctgcat ataaatattt 180
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aggccctttt gctaatcatg ttcatacctc ttatcttcct cccacag 347
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ctcctgggca acgtgctggt ctgtgtgctg gcccatcact ttggcaaaga att 53
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atgaacgcaa gtgaattccg aaggagaggg aaggagatgg tggattacgt ggccaactac 60
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gagaagataa tcatgcctgg ggtgacgcac tggcacagcc cctacttctt cgcctacttc 240
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tgcaacaagg aagacatatg gctgcacgtt gatgcagcct acgcaggcag tgcattcatc 840
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gggcttatca ctgactaccg gcattggcag ataccactgg gcagaagatt tcgctctttg 1080
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tgtgtggaag tcattctggg gcttgtctgc tttcggctaa agggttccaa caaagtgaat 1260
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cagcgggcct gggaacacat caaagagctg gcggccgacg tgctgcgagc agagagggag 1440
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gctgctcgag agatctac 18
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gggtggcatc cctgtgaccc ctccccagtg cctctcctgg ccctggaagt tgccactcca 60
gtgcccacca gccttgtcct aataaaatta agttgcatca ttttgtctga ctaggtgtcc 120
ttctataata ttatggggtg gaggggggtg gtatggagca aggggcaagt tgggaagaca 180
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ctcactgcaa tctccgcctc ctgggttcaa gcgattctcc tgcctcagcc tcccgagttg 300
ttgggattcc aggcatgcat gaccaggctc agctaatttt tgtttttttg gtagagacgg 360
ggtttcacca tattggccag gctggtctcc aactcctaat ctcaggtgat ctacccacct 420
tggcctccca aattgctggg attacaggcg tgaaccactg ctcccttccc tgtcctt 477
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aggaacccct agtgatggag ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg 60
ccgggcgacc aaaggtcgcc cgacgcccgg gctttgcccg ggcggcctca gtgagcgagc 120
gagcgcgcag ctgcctgcag g 141
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Met Ala Glu Gly Gly Gly Gly Ala Met Gly Asp Ser Ser Gly Gly Ala
1 5 10 15
Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp
20 25 30
Met Gly Asn Thr Val Ile Thr Lys Thr Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro
35 40 45
Ser Tyr Asn Asn His Ile Tyr Lys Ala Ile Thr Ser Gly Thr Ser Gln
50 55 60
Asp Ala Asn Val Gln Tyr Ala Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe
65 70 75 80
Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg
85 90 95
Leu Ile Asn Asn His Trp Gly Ile Arg Pro Lys Ser Leu Lys Phe Lys
100 105 110
Ile Phe Asn Val Gln Val Lys Glu Val Thr Thr Gln Asp Gln Thr Lys
115 120 125
Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Ile Gln Val Phe Thr Asp Asp
130 135 140
Glu His Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala Thr Glu Gly Thr Met
145 150 155 160
Pro Pro Phe Pro Ser Asp Val Tyr Ala Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Cys
165 170 175
Thr Met His Thr Asn Gln Asn Gly Ala Arg Phe Asn Asp Arg Ser Ala
180 185 190
Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn
195 200 205
Asn Phe Glu Phe Thr Phe Asp Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Met
210 215 220
Phe Ala His Ser Gln Asp Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Val Asp
225 230 235 240
Gln Tyr Leu Trp Asn Phe Asn Glu Val Asp Ser Ser Arg Asn Ala Gln
245 250 255
Phe Lys Lys Ala Val Lys Gly Ala Tyr Gly Thr Met Gly Arg Asn Trp
260 265 270
Leu Pro Gly Pro Lys Phe Leu Asp Gln Arg Val Arg Ala Tyr Thr Gly
275 280 285
Gly Thr Asp Asn Tyr Ala Asn Trp Asn Ile Trp Ser Asn Gly Asn Lys
290 295 300
Val Asn Leu Lys Asp Arg Gln Tyr Leu Leu Gln Pro Gly Pro Val Ser
305 310 315 320
Ala Thr Tyr Thr Glu Gly Glu Ala Ser Ser Leu Pro Ala Gln Asn Ile
325 330 335
Leu Gly Ile Ala Lys Asp Pro Tyr Arg Ser Gly Ser Thr Thr Ala Gly
340 345 350
Ile Ser Asp Ile Met Val Thr Glu Glu Gln Glu Val Ala Pro Thr Asn
355 360 365
Gly Val Gly Trp Lys Pro Tyr Gly Arg Thr Val Thr Asn Glu Gln Asn
370 375 380
Thr Thr Thr Ala Pro Thr Ser Ser Asp Leu Asp Val Leu Gly Ala Leu
385 390 395 400
Pro Gly Met Val Trp Gln Asn Arg Asp Ile Tyr Leu Gln Gly Pro Ile
405 410 415
Gly Ala Lys Ile Pro Lys Thr Asp Gly Lys Phe His Pro Ser Pro Asn
420 425 430
Leu Gly Gly Phe Gly Leu His Asn Pro Pro Pro Gln Val Phe Ile Lys
435 440 445
Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Val Glu Tyr Val His Gln Lys
450 455 460
Trp Asn Ser Tyr Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Cys Thr Val Glu
465 470 475 480
Met Val Trp Glu Leu Arg Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu
485 490 495
Ile Gln Phe Thr Ser Asn Phe Ser Asn Arg Thr Ser Ile Met Phe Ala
500 505 510
Pro Asn Glu Thr Gly Gly Tyr Val Glu Asp Arg Leu Ile Gly Thr Arg
515 520 525
Tyr Leu Thr Gln Asn Leu
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Met Thr Ser Val Asn Ser Ala Glu Ala Ser Thr Gly Ala Gly Gly Gly
1 5 10 15
Gly Ser Asn Pro Val Lys Ser Met Trp Ser Glu Gly Ala Thr Phe Ser
20 25 30
Ala Asn Ser Val Thr Cys Thr Phe Ser Arg Gln Phe Leu Ile Pro Tyr
35 40 45
Asp Pro Glu His His Tyr Lys Val Phe Ser Pro Ala Ala Ser Ser Cys
50 55 60
His Asn Ala Ser Gly Lys Glu Ala Lys Val Cys Thr Ile Ser Pro Ile
65 70 75 80
Met Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Arg Tyr Leu Asp Phe Asn Ala Leu Asn
85 90 95
Leu Phe Phe Ser Pro Leu Glu Phe Gln His Leu Ile Glu Asn Tyr Gly
100 105 110
Ser Ile Ala Pro Asp Ala Leu Thr Val Thr Ile Ser Glu Ile Ala Val
115 120 125
Lys Asp Val Thr Asp Lys Thr Gly Gly Gly Val Gln Val Thr Asp Ser
130 135 140
Thr Thr Gly Arg Leu Cys Met Leu Val Asp His Glu Tyr Lys Tyr Pro
145 150 155 160
Tyr Val Leu Gly Gln Gly Gln Asp Thr Leu Ala Pro Glu Leu Pro Ile
165 170 175
Trp Val Tyr Phe Pro Pro Gln Tyr Ala Tyr Leu Thr Val Gly Asp Val
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Asn Thr Gln Gly Ile Ser Gly Asp Ser Lys Lys Leu Ala Ser Glu Glu
195 200 205
Ser Ala Phe Tyr Val Leu Glu His Ser Ser Phe Gln Leu Leu Gly Thr
210 215 220
Gly Gly Thr Ala Thr Met Ser Tyr Lys Phe Pro Pro Val Pro Pro Glu
225 230 235 240
Asn Leu Glu Gly Cys Ser Gln His Phe Tyr Glu Met Tyr Asn Pro Leu
245 250 255
Tyr Gly Ser Arg Leu Gly Val Pro Asp Thr Leu Gly Gly Asp Pro Lys
260 265 270
Phe Arg Ser Leu Thr His Glu Asp His Ala Ile Gln Pro Gln Asn Phe
275 280 285
Met Pro Gly Pro Leu Val Asn Ser Val Ser Thr Lys Glu Gly Asp Ser
290 295 300
Phe Asn Thr Gly Ala Gly Lys Ala Leu Thr Gly Leu Ser Thr Gly Thr
305 310 315 320
Ser Gln Asn Thr Arg Ile Ser Leu Arg Pro Gly Pro Val Ser Gln Pro
325 330 335
Tyr His His Trp Asp Thr Asp Lys Tyr Val Thr Gly Ile Asn Ala Ile
340 345 350
Ser His Gly Gln Thr Thr Tyr Gly Asn Ala Glu Asp Lys Glu Tyr Gln
355 360 365
Gln Gly Val Gly Arg Phe Pro Asn Glu Lys Glu Gln Leu Lys Gln Leu
370 375 380
Gln Gly Leu Asn Met His Thr Tyr Phe Pro Asn Lys Gly Thr Gln Gln
385 390 395 400
Tyr Thr Asp Gln Ile Glu Arg Pro Leu Met Val Gly Ser Val Trp Asn
405 410 415
Arg Arg Ala Leu His Tyr Glu Ser Gln Leu Trp Ser Lys Ile Pro Asn
420 425 430
Leu Asp Asp Ser Phe Lys Thr Gln Phe Ala Ala Leu Gly Gly Trp Gly
435 440 445
Leu His Gln Pro Pro Pro Gln Ile Phe Leu Lys Ile Leu Pro Gln Ser
450 455 460
Gly Pro Ile Gly Gly Ile Lys Ser Met Gly Ile Thr Thr Leu Val Gln
465 470 475 480
Tyr Ala Val Gly Ile Met Thr Val Thr Met Thr Phe Lys Leu Gly Pro
485 490 495
Arg Lys Ala Thr Gly Arg Trp Asn Pro Gln Pro Gly Val Tyr Pro Pro
500 505 510
His Ala Ala Gly His Leu Pro Tyr Val Leu Tyr Asp Pro Thr Ala Thr
515 520 525
Asp Ala Lys Gln His His Arg His Gly Tyr Glu Lys Pro Glu Glu Leu
530 535 540
Trp Thr Ala Lys Ser Arg Val His Pro Leu
545 550
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<400> 994
Met Ser Asp Gly Thr Ser Gln Pro Asp Gly Gly Asn Ala Val His Ser
1 5 10 15
Ala Ala Arg Val Glu Arg Ala Ala Asp Gly Pro Gly Gly Ser Gly Gly
20 25 30
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Val Gly Val Ser Thr Gly Ser Tyr Asp
35 40 45
Asn Gln Thr His Tyr Arg Phe Leu Gly Asp Gly Trp Val Glu Ile Thr
50 55 60
Ala Leu Ala Thr Arg Leu Val His Leu Asn Met Pro Lys Ser Glu Asn
65 70 75 80
Tyr Cys Arg Ile Arg Val His Asn Thr Thr Asp Thr Ser Val Lys Gly
85 90 95
Asn Met Ala Lys Asp Asp Ala His Glu Gln Ile Trp Thr Pro Trp Ser
100 105 110
Leu Val Asp Ala Asn Ala Trp Gly Val Trp Leu Gln Pro Ser Asp Trp
115 120 125
Gln Tyr Ile Cys Asn Thr Met Ser Gln Leu Asn Leu Val Ser Leu Asp
130 135 140
Gln Glu Ile Phe Asn Val Val Leu Lys Thr Val Thr Glu Gln Asp Ser
145 150 155 160
Gly Gly Gln Ala Ile Lys Ile Tyr Asn Asn Asp Leu Thr Ala Cys Met
165 170 175
Met Val Ala Val Asp Ser Asn Asn Ile Leu Pro Tyr Thr Pro Ala Ala
180 185 190
Asn Ser Met Glu Thr Leu Gly Phe Tyr Pro Trp Lys Pro Thr Ile Ala
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Ser Pro Tyr Arg Tyr Tyr Phe Cys Val Asp Arg Asp Leu Ser Val Thr
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Tyr Glu Asn Gln Glu Gly Thr Ile Glu His Asn Val Met Gly Thr Pro
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Lys Gly Met Asn Ser Gln Phe Phe Thr Ile Glu Asn Thr Gln Gln Ile
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Asp Thr Asn Pro Val Lys Leu Thr His Thr Trp Gln Thr Asn Arg Gln
275 280 285
Leu Gly Gln Pro Pro Leu Leu Ser Thr Phe Pro Glu Ala Asp Thr Asp
290 295 300
Ala Gly Thr Leu Thr Ala Gln Gly Ser Arg His Gly Ala Thr Gln Met
305 310 315 320
Glu Val Asn Trp Val Ser Glu Ala Ile Arg Thr Arg Pro Ala Gln Val
325 330 335
Gly Phe Cys Gln Pro His Asn Asp Phe Glu Ala Ser Arg Ala Gly Pro
340 345 350
Phe Ala Ala Pro Lys Val Pro Ala Asp Val Thr Gln Gly Met Asp Arg
355 360 365
Glu Ala Asn Gly Ser Val Arg Tyr Ser Tyr Gly Lys Gln His Gly Glu
370 375 380
Asn Trp Ala Ala His Gly Pro Ala Pro Glu Arg Tyr Thr Trp Asp Glu
385 390 395 400
Thr Asn Phe Gly Ser Gly Arg Asp Thr Arg Asp Gly Phe Ile Gln Ser
405 410 415
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420 425 430
Asn Pro Ile Gly Thr Lys Asn Asp Ile His Phe Ser Asn Val Phe Asn
435 440 445
Ser Tyr Gly Pro Leu Thr Thr Phe Ser His Pro Ser Pro Val Tyr Pro
450 455 460
Gln Gly Gln Ile Trp Asp Lys Glu Leu Asp Leu Glu His Lys Pro Arg
465 470 475 480
Leu His Ile Thr Ala Pro Phe Val Cys Lys Asn Asn Ala Pro Gly Gln
485 490 495
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500 505 510
Gly Ala Thr Leu Ser Arg Ile Val Thr Tyr Gly Thr Phe Phe Trp Lys
515 520 525
Gly Lys Leu Thr Met Arg Ala Lys Leu Arg Ala Asn Thr Thr Trp Asn
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Pro Val Tyr Gln Val Ser Val Glu Asp Asn Gly Asn Ser Tyr Met Ser
545 550 555 560
Val Thr Lys Trp Leu Pro Thr Ala Thr Gly Asn Met Gln Ser Val Pro
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Leu Ile Thr Arg Pro Val Ala Arg Asn Thr Tyr
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Met Ser Asp Gly Ala Val Gln Pro Asp Gly Gly Gln Pro Ala Val Arg
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Asn Glu Arg Ala Thr Gly Ser Gly Asn Gly Ser Gly Gly Gly Gly Gly
20 25 30
Gly Gly Ser Gly Gly Val Gly Ile Ser Thr Gly Thr Phe Asn Asn Gln
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Ser Ser Arg Leu Val His Leu Asn Met Pro Glu Ser Glu Asn Tyr Lys
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Arg Val Val Val Asn Asn Met Asp Lys Thr Ala Val Lys Gly Asn Met
85 90 95
Ala Leu Asp Asp Ile His Val Glu Ile Val Thr Pro Trp Ser Leu Val
100 105 110
Asp Ala Asn Ala Trp Gly Val Trp Phe Asn Pro Gly Asp Trp Gln Leu
115 120 125
Ile Val Asn Thr Met Ser Glu Leu His Leu Val Ser Phe Glu Gln Glu
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Ile Phe Asn Val Val Leu Lys Thr Val Ser Glu Ser Ala Thr Gln Pro
145 150 155 160
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cccggtccct gctaccggca gcaacgcgtc tccacgacac tgtcgcagaa caacaacagc 3600
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tgggccaaga ttcctcatac ggacggcaac tttcatccct cgccgctgat gggaggcttt 1920
ggactgaagc atccgcctcc tcagatcctg attaaaaaca cacctgttcc cgcggatcct 1980
ccgaccacct tcaatcaggc caggctggct tctttcatca cgcagtacag taccggccag 2040
gtcagcgtgg agatcgagtg ggagctgcag aaggagaaca gcaaacgctg gaacccagag 2100
attcagtaca cttccaacta ctacaaatct acaaatgtgg actttgctgt caatactgag 2160
ggtacttatt ccgagcctcg ccccattggc acccgttacc tcacccgtaa tctgtaa 2217
<210> 1022
<211> 2217
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
polynucleotide"
<400> 1022
atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca acctctctga gggcattcgc 60
gagtggtggg acctgaaacc tggagccccg aaacccaaag ccaaccagca aaggcaggac 120
aacggccggg gtctggtgct tcctggctac aggtacctcg gacccttcaa cggactcgac 180
aagggggagc ccgtcaacgc ggcggacgca gcggccctcg agcacgacag ggcctacgac 240
cagcagctcc aagcgggtga caatccgtac ctgcggtata atcacgccga cgccgagttt 300
caggagcgtc tgcaagaaga tacgtctttt gggggcaacc tcgggcgcgc agtcttccag 360
gccaaaaagc gggttctcga acctctgggc ctggttgaat cgccggttag gacggctcct 420
ggaaagaaga gaccggtaga gccatcaccc cagcgctctc cagactcctc tacgggcatc 480
ggcaagaaag gccagcagcc cgcaaaaaag agactcaatt ttgggcagac tggcgactca 540
gagtcagtcc ccgaccctca accaatcgga gaaccaccag cagccccctc tggtgtggga 600
cctaatacaa tggctgcagg cggtggcgct ccaatggcag acaataacga aggcgccgac 660
ggagtgggta gttcctcagg aaattggcat tgcgattcca catggctggg cgacagagtc 720
atcaccacca gcacccgcac ctgggccctg cccacctaca acaaccacct ctacaggcaa 780
atctccaacg ggacctcggg aggaagcacc aacgacaaca cctacttcgg ctacagcacc 840
ccctgggggt attttgactt caacagattc cactgccact tttcaccacg tgactggcag 900
cgactcatca acaacaactg gggattccgg cccaagaggc tcaacttcaa gctcttcaac 960
atccaagtca aggaggtcac gcagaatgaa ggcaccagga ccatcgccaa taaccttacc 1020
agcacgattc aggtctttac ggactcggaa taccagctcc cgtacgtgct cggctcggcg 1080
caccagggct gcctgcctcc gttcccggcg gacgtcttca tgattcctca gtacgggtac 1140
ctgactctga acaatggcag tcaggctgtg ggccggtcgt ccttctactg cctggagtac 1200
tttccttctc aaatgctgag aacgggcaac aactttgaat tcagctacaa cttcgaggac 1260
gtgcccttcc acagcagcta cgcgcacagc cagagcctgg accggctgat gaaccctctc 1320
atcgaccagt acttgtacta cctgtcccgg actcaaagca cgggcggtac tgcaggaact 1380
cagcagttgc tattttctca ggccgggcct aacaacatgt cggctcaggc caagaactgg 1440
ctacccggtc cctgctaccg gcagcaacgc gtctccacga cactgtcgca gaacaacaac 1500
agcaactttg cctggacggg tgccaccaag tatcatctga atggcagaga ctctctggtg 1560
aatcctggcg ttgccatggc tacccacagg gacgacgaag agcgattttt tccatccagc 1620
ggagtcttaa tgtttgggag acagggagct ggaagagaca acgtggacta tagcagcgtg 1680
atgctaacca gcgaggaaga aataaggacc accaacccag tggccacaga acagtacggc 1740
gtggtggccg ataacctgca acagcaaaac gccgctccta ttgtaggggc cgtcaatagt 1800
caaggagcct tacctggcat ggtgtggcag aaccgggacg tgtacctgca gggtcccatc 1860
tgggccaaga ttcctcatac ggacggcaac tttcatccct cgccgctgat gggaggcttt 1920
ggactgaagc atccgcctcc tcagatcctg attaaaaaca cacctgttcc cgcggatcct 1980
ccgaccacct tcaatcaggc caggctggct tctttcatca cgcagtacag taccggccag 2040
gtcagcgtgg agatcgagtg ggagctgcag aaggagaaca gcaaacgctg gaacccagag 2100
attcagtaca cttccaacta ctacaaatct acaaatgtgg actttgctgt caatactgag 2160
ggtacttatt ccgagcctcg ccccattggc acccgttacc tcacccgtaa tctgtaa 2217
<210> 1023
<211> 744
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
polypeptide"
<400> 1023
Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Thr Leu Ser
1 5 10 15
Glu Gly Ile Arg Gln Trp Trp Lys Leu Lys Pro Gly Pro Pro Pro Pro
20 25 30
Lys Pro Ala Glu Arg His Lys Asp Asp Ser Arg Gly Leu Val Leu Pro
35 40 45
Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Phe Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro
50 55 60
Val Asn Glu Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp
65 70 75 80
Arg Gln Leu Asp Ser Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala
85 90 95
Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Lys Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly
100 105 110
Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro
115 120 125
Leu Gly Leu Val Glu Glu Pro Val Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg
130 135 140
Pro Val Glu His Ser Pro Val Glu Pro Asp Ser Ser Ser Gly Thr Gly
145 150 155 160
Lys Ala Gly Gln Gln Pro Ala Arg Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr
165 170 175
Gly Asp Ala Asp Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Leu Gly Gln Pro Pro
180 185 190
Ala Ala Pro Ser Gly Leu Gly Thr Asn Thr Met Ala Thr Gly Ser Gly
195 200 205
Ala Pro Met Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ser
210 215 220
Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Ile
225 230 235 240
Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu
245 250 255
Tyr Lys Gln Ile Ser Ser Gln Ser Gly Ala Ser Asn Asp Asn His Tyr
260 265 270
Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His
275 280 285
Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp
290 295 300
Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val
305 310 315 320
Lys Glu Val Thr Gln Asn Asp Gly Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu
325 330 335
Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Ser Glu Tyr Gln Leu Pro Tyr
340 345 350
Val Leu Gly Ser Ala His Gln Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp
355 360 365
Val Phe Met Val Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asn Gly Ser
370 375 380
Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser
385 390 395 400
Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Thr Phe Ser Tyr Thr Phe Glu
405 410 415
Asp Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg
420 425 430
Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Arg Thr
435 440 445
Asn Thr Pro Ser Gly Thr Thr Thr Gln Ser Arg Leu Gln Phe Ser Gln
450 455 460
Ala Gly Ala Ser Asp Ile Arg Asp Gln Ser Arg Asn Trp Leu Pro Gly
465 470 475 480
Pro Cys Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Lys Thr Ser Ala Asp Asn Asn
485 490 495
Asn Ser Glu Tyr Ser Trp Thr Gly Ala Thr Lys Tyr His Leu Asn Gly
500 505 510
Arg Asp Ser Leu Val Asn Pro Gly Pro Ala Met Ala Ser His Lys Asp
515 520 525
Asp Glu Glu Lys Phe Phe Pro Gln Ser Gly Val Leu Ile Phe Gly Lys
530 535 540
Gln Gly Ser Glu Lys Thr Asn Val Asp Ile Glu Lys Val Met Ile Thr
545 550 555 560
Asp Glu Glu Glu Ile Arg Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu Gln Tyr
565 570 575
Gly Ser Val Ser Thr Asn Leu Gln Arg Gly Gln Arg Gly Glu Ser Gly
580 585 590
His Gly Tyr Phe Ala Gln Ala Ala Thr Ala Asp Val Asn Thr Gln Gly
595 600 605
Val Leu Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly
610 615 620
Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly His Phe His Pro Ser
625 630 635 640
Pro Leu Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu
645 650 655
Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala Asn Pro Ser Thr Thr Phe Ser Ala
660 665 670
Ala Lys Phe Ala Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser
675 680 685
Val Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn
690 695 700
Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Asn Lys Ser Val Asn Val Asp
705 710 715 720
Phe Thr Val Asp Thr Asn Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly
725 730 735
Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu
740
<210> 1024
<211> 8359
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
polynucleotide"
<400> 1024
catcatcaat aatatacctt attttggatt gaagccaata tgataatgag ggggtggagt 60
ttgtgacgtg gcgcggggcg tgggaacggg gcgggtgacg tagtagctct agaggtcctg 120
tattagaggt cacgtgagtg ttttgcgaca ttttgcgaca ccatgtggtc acgctgggta 180
tttaagcccg agtgagcacg cagggtctcc attttgaagc gggaggtttg aacgcgcagc 240
cgccatgccg gggttttacg agattgtgat taaggtcccc agcgaccttg acgagcatct 300
gcccggcatt tctgacagct ttgtgaactg ggtggccgag aaggaatggg agttgccgcc 360
agattctgac atggatctga atctgattga gcaggcaccc ctgaccgtgg ccgagaagct 420
gcagcgcgac tttctgacgg aatggcgccg tgtgagtaag gcaccggagg cccttttctt 480
tgtgcaattt gagaagggag agagctactt ccacatgcac gtgctcgtgg aaaccaccgg 540
ggtgaaatcc atggttttgg gacgtttcct gagtcagatt cgcgaaaaac tgattcagag 600
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caaaacccag cctgagctcc agtgggcgtg gactaatatg gaacagtatt taagcgcctg 780
tttgaatctc acggagcgta aacggttggt ggcgcagcat ctgacgcacg tgtcgcagac 840
gcaggagcag aacaaagaga atcagaatcc caattctgat gcgccggtga tcagatcaaa 900
aacttcagcc aggtacatgg agctggtcgg gtggctcgtg gacaagggga ttacctcgga 960
gaagcagtgg atccaggagg accaggcctc atacatctcc ttcaatgcgg cctccaactc 1020
gcggtcccaa atcaaggctg ccttggacaa tgcgggaaag attatgagcc tgactaaaac 1080
cgcccccgac tacctggtgg gccagcagcc cgtggaggac atttccagca atcggattta 1140
taaaattttg gaactaaacg ggtacgatcc ccaatatgcg gcttccgtct ttctgggatg 1200
ggccacgaaa aagttcggca agaggaacac catctggctg tttgggcctg caactaccgg 1260
gaagaccaac atcgcggagg ccatagccca cactgtgccc ttctacgggt gcgtaaactg 1320
gaccaatgag aactttccct tcaacgactg tgtcgacaag atggtgatct ggtgggagga 1380
ggggaagatg accgccaagg tcgtggagtc ggccaaagcc attctcggag gaagcaaggt 1440
gcgcgtggac cagaaatgca agtcctcggc ccagatagac ccgactcccg tgatcgtcac 1500
ctccaacacc aacatgtgcg ccgtgattga cgggaactca acgaccttcg aacaccagca 1560
gccgttgcaa gaccggatgt tcaaatttga actcacccgc cgtctggatc atgactttgg 1620
gaaggtcacc aagcaggaag tcaaagactt tttccggtgg gcaaaggatc acgtggttga 1680
ggtggagcat gaattctacg tcaaaaaggg tggagccaag aaaagacccg cccccagtga 1740
cgcagatata agtgagccca aacgggtgcg cgagtcagtt gcgcagccat cgacgtcaga 1800
cgcggaagct tcgatcaact acgcagacag gtaccaaaac aaatgttctc gtcacgtggg 1860
catgaatctg atgctgtttc cctgcagaca atgcgagaga atgaatcaga attcaaatat 1920
ctgcttcact cacggacaga aagactgttt agagtgcttt cccgtgtcag aatctcaacc 1980
cgtttctgtc gtcaaaaagg cgtatcagaa actgtgctac attcatcata tcatgggaaa 2040
ggtgccagac gcttgcactg cctgcgatct ggtcaatgtg gatttggatg actgcatctt 2100
tgaacaataa atgatttaaa tcaggtatgg ctgccgatgg ttatcttcca gattggctcg 2160
aggacactct ctctgaagga ataagacagt ggtggaagct caaacctggc ccaccaccac 2220
caaagcccgc agagcggcat aaggacgaca gcaggggtct tgtgcttcct gggtacaagt 2280
acctcggacc cttcaacgga ctcgacaagg gagagccggt caacgaggca gacgccgcgg 2340
ccctcgagca cgacaaagcc tacgaccggc agctcgacag cggagacaac ccgtacctca 2400
agtacaacca cgccgacgcg gagtttcagg agcgccttaa agaagatacg tcttttgggg 2460
gcaacctcgg acgagcagtc ttccaggcga aaaagagggt tcttgaacct ctgggcctgg 2520
ttgaggaacc tgttaagacg gctccgggaa aaaagaggcc ggtagagcac tctcctgtgg 2580
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attttggtca gactggagac gcagactcag tacctgaccc ccagcctctc ggacagccac 2700
cagcagcccc ctctggtctg ggaactaata cgatggctac aggcagtggc gcaccaatgg 2760
cagacaataa cgagggcgcc gacggagtgg gtaattcctc gggaaattgg cattgcgatt 2820
ccacatggat gggcgacaga gtcatcacca ccagcacccg aacctgggcc ctgcccacct 2880
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actttggcta cagcacccct tgggggtatt ttgacttcaa cagattccac tgccactttt 3000
caccacgtga ctggcaaaga ctcatcaaca acaactgggg attccgaccc aagagactca 3060
acttcaagct ctttaacatt caagtcaaag aggtcacgca gaatgacggt acgacgacga 3120
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acgtcctcgg ctcggcgcat caaggatgcc tcccgccgtt cccagcagac gtcttcatgg 3240
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tttactgcct ggagtacttt ccttctcaga tgctgcgtac cggaaacaac tttaccttca 3360
gctacacttt tgaggacgtt cctttccaca gcagctacgc tcacagccag agtctggacc 3420
gtctcatgaa tcctctcatc gaccagtacc tgtattactt gagcagaaca aacactccaa 3480
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gcagagactc tctggtgaat ccgggcccgg ccatggcaag ccacaaggac gatgaagaaa 3720
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gtcatggtta ttttgcccag gcggccaccg cagatgtcaa cacacaaggc gttcttccag 3960
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acacggacgg acattttcac ccctctcccc tcatgggtgg attcggactt aaacaccctc 4080
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actacaacaa gtctgttaat gtggacttta ctgtggacac taatggcgtg tattcagagc 4320
ctcgccccat tggcaccaga tacctgactc gtaatctgta attgcttgtt aatcaataaa 4380
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tgtggtcacg ctgggtattt aagcccgagt gagcacgcag ggtctccatt ttgaagcggg 4560
aggtttgaac gcgcagccac cacggcgggg ttttacgaga ttgtgattaa ggtccccagc 4620
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tattgttctg gatattacca gcaaggccga tagtttgagt tcttctactc aggcaagtga 4920
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tttactcggt ggcctcactg attataaaaa cacttctcag gattctggcg taccgttcct 5040
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ccgtctccgg gagctgcatg tgtcagaggt tttcaccgtc atcaccgaaa cgcgcgagac 6300
gaaagggcct cgtgatacgc ctatttttat aggttaatgt catgataata atggtttctt 6360
agacgtcagg tggcactttt cggggaaatg tgcgcggaac ccctatttgt ttatttttct 6420
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attgaaaaag gaagagtatg agtattcaac atttccgtgt cgcccttatt cccttttttg 6540
cggcattttg ccttcctgtt tttgctcacc cagaaacgct ggtgaaagta aaagatgctg 6600
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gtggcgcggt attatcccgt attgacgccg ggcaagagca actcggtcgc cgcatacact 6780
attctcagaa tgacttggtt gagtactcac cagtcacaga aaagcatctt acggatggca 6840
tgacagtaag agaattatgc agtgctgcca taaccatgag tgataacact gcggccaact 6900
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caggaccact tctgcgctcg gcccttccgg ctggctggtt tattgctgat aaatctggag 7200
ccggtgagcg tgggtctcgc ggtatcattg cagcactggg gccagatggt aagccctccc 7260
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accccgtaga aaagatcaaa ggatcttctt gagatccttt ttttctgcgc gtaatctgct 7560
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
polypeptide"
<400> 1025
Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser
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<213> Artificial Sequence
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polypeptide"
<400> 1063
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1 5 10 15
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Lys Ala Asn Gln Gln Lys Gln Asp Asp Gly Arg Gly Leu Val Leu Pro
35 40 45
Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Phe Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro
50 55 60
Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp
65 70 75 80
Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Arg Tyr Asn His Ala
85 90 95
Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Gln Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly
100 105 110
Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro
115 120 125
Phe Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg
130 135 140
Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro Asp Ser Ser Ser Gly Ile Gly
145 150 155 160
Lys Thr Gly Gln Gln Pro Ala Lys Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr
165 170 175
Gly Asp Ser Glu Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Leu Gly Glu Pro Pro
180 185 190
Ala Thr Pro Ala Ala Val Gly Pro Thr Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly
195 200 205
Ala Pro Met Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala
210 215 220
Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile
225 230 235 240
Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu
245 250 255
Tyr Lys Gln Ile Ser Ser Ala Ser Thr Gly Ala Ser Asn Asp Asn His
260 265 270
Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe
275 280 285
His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn
290 295 300
Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln
305 310 315 320
Val Lys Glu Val Thr Thr Ser Asp Gly Val Thr Thr Ile Ala Asn Asn
325 330 335
Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Ser Asp Ser Glu Tyr Gln Leu Pro
340 345 350
Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Gln Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala
355 360 365
Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asn Gly
370 375 380
Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro
385 390 395 400
Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Thr Phe Ser Tyr Thr Phe
405 410 415
Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu Asp
420 425 430
Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Asn Arg
435 440 445
Thr Gln Asn Gln Ser Gly Ser Ala Gln Asn Lys Asp Leu Leu Phe Ser
450 455 460
Arg Gly Ser Pro Ala Gly Met Ser Val Gln Pro Lys Asn Trp Leu Pro
465 470 475 480
Gly Pro Cys Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Lys Thr Lys Thr Gly Asn
485 490 495
Asn Asn Ser Asn Phe Thr Trp Thr Gly Ala Ser Lys Tyr Asn Leu Asn
500 505 510
Gly His Glu Ser Ile Ile Asn Pro Gly Thr Ala Met Ala Ser His Lys
515 520 525
Asp Asp Glu Asp Lys Phe Phe Pro Met Ser Gly Val Met Ile Phe Gly
530 535 540
Lys Glu Ser Ala Gly Ala Ser Asn Thr Ala Leu Asp Asn Val Met Ile
545 550 555 560
Thr Asp Glu Glu Glu Ile Lys Ala Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu Arg
565 570 575
Phe Gly Thr Val Ala Val Asn Phe Gln Ser Ser Ser Thr His Pro Ala
580 585 590
Thr Gly Asp Val His Val Met Gly Ala Leu Pro Gly Met Val Trp Gln
595 600 605
Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro His
610 615 620
Thr Asp Gly His Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe Gly Leu
625 630 635 640
Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala
645 650 655
Asn Pro Pro Ala Glu Phe Ser Ala Thr Lys Phe Ala Ser Phe Ile Thr
660 665 670
Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln
675 680 685
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ctggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca accttagtga aggaattcgc 60
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cagcagctca aggccggaga caacccgtac ctcaagtaca accacgccga cgccgagttc 300
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gccaaaaaga ggcttcttga acctcttggt ctggttgagg aagcggctaa gatgaacaac 420
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agcgaatttg cttggcctgg agcttcttct tgggctctca atggacgtaa tagcttgatg 1620
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<211> 2313
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
polynucleotide"
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polypeptide"
<400> 1084
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35 40 45
Val Ser Arg Ile Thr Trp Gly Gly Asp Asn Thr Phe Tyr Ser Asn Ser
50 55 60
Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val
65 70 75 80
Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Asp Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Ala Gly Ser Thr Ser Thr Ala Thr Pro Leu Arg Val Asp Tyr
100 105 110
Trp Gly Lys Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser
115 120 125
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130 135 140
Ser Ser Ser Gly Ile Gly Lys Thr Gly Gln Gln Pro Ala Lys Lys Arg
145 150 155 160
Leu Asn Phe Gly Gln Thr Gly Asp Ser Glu Ser Val Pro Asp Pro Gln
165 170 175
Pro Leu Gly Glu Pro Pro Ala Ala Pro Ser Gly Leu Gly Pro Asn Thr
180 185 190
Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Met Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala
195 200 205
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210 215 220
Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro
225 230 235 240
Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Gly Thr Ser Gly
245 250 255
Gly Ser Thr Asn Asp Asn Thr Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly
260 265 270
Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp
275 280 285
Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn
290 295 300
Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Thr Asn Glu Gly
305 310 315 320
Thr Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr
325 330 335
Asp Ser Glu Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Gln Gly
340 345 350
Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Val Pro Gln Tyr Gly
355 360 365
Tyr Leu Thr Leu Asn Asn Gly Ser Gln Ala Leu Gly Arg Ser Ser Phe
370 375 380
Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn
385 390 395 400
Phe Gln Phe Ser Tyr Thr Phe Glu Asp Val Pro Phe His Ser Ser Tyr
405 410 415
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420 425 430
Tyr Leu Tyr Tyr Leu Val Arg Thr Gln Thr Thr Gly Thr Gly Gly Thr
435 440 445
Gln Thr Leu Ala Phe Ser Gln Ala Gly Pro Ser Ser Met Ala Asn Gln
450 455 460
Ala Arg Asn Trp Val Pro Gly Pro Cys Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser
465 470 475 480
Thr Thr Thr Asn Gln Asn Asn Asn Ser Asn Phe Ala Trp Thr Gly Ala
485 490 495
Ala Lys Phe Lys Leu Asn Gly Arg Asp Ser Leu Met Asn Pro Gly Val
500 505 510
Ala Met Ala Ser His Lys Asp Asp Asp Asp Arg Phe Phe Pro Ser Ser
515 520 525
Gly Val Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Ala Gly Asn Asp Gly Val Asp
530 535 540
Tyr Ser Gln Val Leu Ile Thr Asp Glu Glu Glu Ile Lys Ala Thr Asn
545 550 555 560
Pro Val Ala Thr Glu Glu Tyr Gly Ala Val Ala Ile Asn Asn Gln Ala
565 570 575
Ala Asn Thr Gln Ala Gln Thr Gly Leu Val His Asn Gln Gly Val Ile
580 585 590
Pro Gly Met Val Trp Gln Asn Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile
595 600 605
Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu
610 615 620
Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys
625 630 635 640
Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Leu Thr Phe Asn Gln Ala Lys
645 650 655
Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu
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Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu
675 680 685
Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Thr Asn Val Asp Phe Ala
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Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg
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Tyr Ala Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe
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Cys Ala Ala Thr Trp Ala Tyr Asp Thr Val Gly Ala Leu Thr Ser Gly
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Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Gly
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260 265 270
Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro
275 280 285
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His Gln Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Val Pro
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Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr
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Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Val Arg Thr Gln Thr Thr Gly Thr
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450 455 460
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500 505 510
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Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys
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Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp Ala Asp Glu Val Met Ile Thr
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Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr
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Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro His Thr
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gaccagtacc tgtactacct ggtcagaacg caaacgactg gaactggagg gacgcagact 1380
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<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
polynucleotide"
<220>
<221> modified_base
<222> (335)..(335)
<223> a, c, t, or g
<400> 1103
atgactgacg gttaccttcc agattggcta gaggacaacc tctctgaagg cgttcgagag 60
tggtgggcgc tgcaacctgg agccccgaag cccaaagcca accagcaaaa gcaggacgac 120
ggccggggtc tggtgcttcc tggctacaag tacctcggac ccttcaacgg actcgacaag 180
ggggagcccg tcaacgcggc ggacgcagcg gccctcgagc acgacaaggc ctacgaccag 240
cagctcaaag cgggtgacaa tccgtacctg cggtataacc acgccgacgc cgagtttcag 300
gagcgtctgc aagaagatac gtcttttggg ggcancctcg ggcgagcagt cttccaggcc 360
aagaagcggg ttctcgaacc tctcggtctg gttgaggaag gcgctaagac ggctcctgga 420
aagaaacgtc cggtagagcc atcaccccag cgttctccag actcctctac gggcatcggc 480
aagaaaggcc aacagcccgc cagaaaaaga ctcaattttg gtcagactgg cgactcagag 540
tcagttccag accctcaacc tctcggagaa cctccagcag cgccctcagg tgtgggatct 600
cttacaatgg cttcaggtgg tggcgcacca gtggcagaca ataacgaagg tgccgatgga 660
gtgggtagtt cctcgggaaa ttggcattgc gattcccaat ggctggggga cagagtcatc 720
accaccagca cccgaacctg ggccctgccc acctacaaca atcacctcta caagcaaatc 780
tccaacagca catctggagg atcttcaaat gacaacgcct acttcggcta cagcaccccc 840
tgggggtatt ttgacttcaa cagattccac tgccacttct caccacgtga ctggcagcga 900
ctcatcaaca acaactgggg attccggccc aagagactca gcttcaagct cttcaacatc 960
caggtcaagg aggtcacgca gaatgaaggc accaagacca tcgccaataa cctcaccagc 1020
accatccagg tgtttacgga ctcggagtac cagctgccgt acgttctcgg ctctgcccac 1080
cagggctgcc tgcctccgtt cccggcggac gtgttcatga ttccccagta cggctaccta 1140
acactcaaca acggtagtca ggccgtggga cgctcctcct tctactgcct ggaatacttt 1200
ccttcgcaga tgctgagaac cggcaacaac ttccagttta cttacacctt cgaggacgtg 1260
cctttccaca gcagctacgc ccacagccag agcttggacc ggctgatgaa tcctctgatt 1320
gaccagtacc tgtactactt gtctcggact caaacaacag gaggcacggc aaatacgcag 1380
actctgggct tcagccaagg tgggcctaat acaatggcca atcaggcaaa gaactggctg 1440
ccaggaccct gttaccgcca acaacgcgtc tcaacgacaa ccgggcaaaa caacaatagc 1500
aactttgcct ggactgctgg gaccaaatac catctgaatg gaagaaattc attggctaat 1560
cctggcatcg ctatggcaac acacaaagac gacgaggagc gtttttttcc cagtaacggg 1620
atcctgattt ttggcaaaca aaatgctgcc agagacaatg cggattacag cgatgtcatg 1680
ctcaccagcg aggaagaaat caaaaccact aaccctgtgg ctacagagga atacggtatc 1740
gtggcagata acttgcagca gcaaaacacg gctcctcaaa ttggaactgt caacagccag 1800
ggggccttac ccggtatggt ctggcagaac cgggacgtgt acctgcaggg tcccatctgg 1860
gccaagattc ctcacacgga cggcaacttc cacccgtctc cgctgatggg cggctttggc 1920
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agcgtggaaa ttgaatggga gctgcagaag gaaaacagca agcgctggaa cccagagatt 2100
cagtacactt caaactacta caaatctaca aatgtggact ttgctgtcaa tacagaggga 2160
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<210> 1104
<211> 2211
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
polynucleotide"
<220>
<221> modified_base
<222> (338)..(338)
<223> a, c, t, or g
<400> 1104
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gacagcaggg gtcttgtgct tcctgggtac aagtacctcg gccccttcaa cggactcgac 180
aagggggagc ccgtcaacgc ggcggacgca gcggccctcg agcacgacaa ggcctacgac 240
cagcagctcg aagcgggtga caatccgtac ctgcggtata accacgccga cgccgagttt 300
caggagcgtc tgcaagaaga tacgtctttt gggggcancc tcgggcgagc agtcttccag 360
gccaagaagc gggttctcga acctctcggt ctggttgagg aaggcgctaa gacggctcct 420
ggaaagaaga gaccagtaga gcagtcaccc caagaaccag actcctcctc gggcatcggc 480
aggaaaggcc aacagcccgc cagaaaaaga ctcaattttg gccagactgg cgactcagag 540
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gtgggtaatg cctcaggaaa ttggcattgc gattccacat ggctgggcga cagagtcatc 720
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gggtattttg atttcaacag attccactgc cacttttcac cacgtgactg gcagcgactc 900
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attcaggtat ttacggactc ggaataccag ctgccgtacg tcctcggctc cgcgcaccag 1080
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ctgaacaatg gaagtcaagc cgtaggccgt tcctccttct actgcctgga atattttcca 1200
tctcaaatgc tgcgaactgg caacaacttc cagtttacct acaccttcga ggacgtgcct 1260
ttccacagca gctacgccca cagccagagc ttggaccggc tgatgaatcc tctgattgac 1320
cagtacctgt actacttgtc tcggactcag tccacaggag gaactcaagg tacccagcaa 1380
ttgttatttt ctcaagctgg gcctgcaaac atgtcggctc aggctaagaa ctggctacct 1440
ggaccttgct accggcagca gcgagtctct acgacactgt cgcaaaacaa caacagcaac 1500
tttgcttgga ctggtgccac caaatatcac ctgaacggaa gagactcttt ggtaaatccc 1560
ggtgtcgcca tggcaaccca caaggacgac gaggaacgct tcttcccgtc gagtggagtc 1620
ctgatgtttg gaaaacaggg tgctggaaga gacaatgtgg actacagcag cgttatgcta 1680
accagcgaag aagaaattaa aaccactaac cctgtagcca cagaacaata cggtgtggtg 1740
gttgataact tgcagcaaac caatacgggg cctattgtgg gaaatgtcaa cagccaagga 1800
gccttacctg gtatggtctg gcagaaccgg gacgtgtacc tgcagggtcc catctgggcc 1860
aagattcctc acacggacgg caacttccac ccgtctccgc tgatgggcgg ctttggcctg 1920
aaacatcctc cgcctcagat cctcatcaaa aacacacctg tacctgcgga tcctccaacg 1980
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gtggagatcg agtgggagct gcagaaggaa aacagcaagc gctggaaccc ggagatccag 2100
tacacttcca actattacaa gtctaataat gttgaatttg ctgttaatac tgaaggtgta 2160
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<210> 1105
<211> 735
<212> PRT
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polypeptide"
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Lys Ala Asn Gln Gln Lys Gln Asp Asp Gly Arg Gly Leu Val Leu Pro
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Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Phe Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro
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Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro Asp Ser Ser Ser Gly Ile Gly
145 150 155 160
Lys Thr Gly Gln Gln Pro Ala Lys Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr
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195 200 205
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485 490 495
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500 505 510
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545 550 555 560
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565 570 575
Gly Ala Val Ala Ile Asn Asn Gln Ala Ala Asn Thr Gln Ala Gln Thr
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<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
polypeptide"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (113)..(113)
<223> Any naturally occurring amino acid
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Lys Pro Ala Glu Arg His Lys Asp Asp Ser Arg Gly Leu Val Leu Pro
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Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Phe Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro
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65 70 75 80
Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Arg Tyr Asn His Ala
85 90 95
Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Gln Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly
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Xaa Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro
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Leu Gly Leu Val Glu Glu Ala Ala Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg
130 135 140
Pro Val Glu Pro Ser Pro Gln Arg Ser Pro Asp Ser Ser Thr Gly Ile
145 150 155 160
Gly Lys Lys Gly Gln Gln Pro Ala Arg Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln
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Thr Gly Asp Ser Glu Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Leu Gly Glu Pro
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245 250 255
Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Ser Ala Ser Thr Gly Ala Ser Asn Asp Asn
260 265 270
His Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg
275 280 285
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Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile
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Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Ser Asp Ser Asp Tyr Gln Leu
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Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Val
435 440 445
Arg Thr Gln Thr Thr Gly Thr Gly Gly Thr Gln Thr Leu Ala Phe Ser
450 455 460
Gln Ala Gly Pro Ser Ser Met Ala Asn Gln Ala Arg Asn Trp Val Pro
465 470 475 480
Gly Pro Cys Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Thr Thr Thr Asn Gln Asn
485 490 495
Asn Asn Ser Asn Phe Ala Trp Thr Gly Ala Ala Lys Phe Lys Leu Asn
500 505 510
Gly Arg Asp Ser Leu Met Asn Pro Gly Val Ala Met Ala Ser His Lys
515 520 525
Asp Asp Asp Asp Arg Phe Phe Pro Ser Ser Gly Val Leu Ile Phe Gly
530 535 540
Lys Gln Gly Ala Gly Asn Asp Gly Val Asp Tyr Ser Gln Val Leu Ile
545 550 555 560
Thr Asp Glu Glu Glu Ile Lys Ala Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu Glu
565 570 575
Tyr Gly Ala Val Ala Ile Asn Asn Gln Ala Ala Asn Thr Gln Ala Gln
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595 600 605
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
polypeptide"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (112)..(112)
<223> Any naturally occurring amino acid
<400> 1107
Met Thr Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser Glu
1 5 10 15
Gly Val Arg Glu Trp Trp Ala Leu Gln Pro Gly Ala Pro Lys Pro Lys
20 25 30
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35 40 45
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65 70 75 80
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130 135 140
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145 150 155 160
Lys Lys Gly Gln Gln Pro Ala Arg Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr
165 170 175
Gly Asp Ser Glu Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Leu Gly Glu Pro Pro
180 185 190
Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly
195 200 205
Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser
210 215 220
Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile
225 230 235 240
Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu
245 250 255
Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn
260 265 270
Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg
275 280 285
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290 295 300
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340 345 350
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355 360 365
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385 390 395 400
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405 410 415
Phe Glu Asp Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu
420 425 430
Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser
435 440 445
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Leu
<210> 1108
<211> 736
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
polypeptide"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (113)..(113)
<223> Any naturally occurring amino acid
<400> 1108
Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Thr Leu Ser
1 5 10 15
Glu Gly Ile Arg Gln Trp Trp Lys Leu Lys Pro Gly Pro Pro Pro Pro
20 25 30
Lys Pro Ala Glu Arg His Lys Asp Asp Ser Arg Gly Leu Val Leu Pro
35 40 45
Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Phe Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro
50 55 60
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65 70 75 80
Gln Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Arg Tyr Asn His Ala
85 90 95
Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Gln Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly
100 105 110
Xaa Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro
115 120 125
Leu Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg
130 135 140
Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro Asp Ser Ser Ser Gly Ile Gly
145 150 155 160
Arg Lys Gly Gln Gln Pro Ala Arg Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr
165 170 175
Gly Asp Ser Glu Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Leu Gly Glu Pro Pro
180 185 190
Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Pro Asn Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly
195 200 205
Ala Pro Met Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala
210 215 220
Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile
225 230 235 240
Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu
245 250 255
Tyr Lys Gln Ile Ser Ser Ala Ser Thr Gly Ala Ser Asn Asp Asn His
260 265 270
Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe
275 280 285
His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn
290 295 300
Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln
305 310 315 320
Val Lys Glu Val Thr Gln Asn Glu Gly Thr Lys Thr Ile Ala Asn Asn
325 330 335
Leu Thr Ser Thr Ile Gln Val Phe Thr Asp Ser Glu Tyr Gln Leu Pro
340 345 350
Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Gln Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala
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Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asn Gly
370 375 380
Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro
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Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Arg
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Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu
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50 55 60
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65 70 75 80
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<223> Any naturally occurring amino acid
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accaccagca cccgaacctg ggccctcccc acctacaaca accacctcta caagcaaatc 780
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tttgcctgga ccggtgccac caagtatcat ctgaatggca gagactctct ggtaaatccc 1560
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ttaatatttg ggaaacaggg agctggaaat agcaacgtgg accttgacaa cgttatgata 1680
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<221> MOD_RES
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<223> Any naturally occurring amino acid
<220>
<221> MOD_RES
<222> (412)..(412)
<223> Any naturally occurring amino acid
<220>
<221> MOD_RES
<222> (460)..(461)
<223> Any naturally occurring amino acid
<220>
<221> MOD_RES
<222> (552)..(552)
<223> Any naturally occurring amino acid
<220>
<221> MOD_RES
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<223> Any naturally occurring amino acid
<220>
<221> MOD_RES
<222> (563)..(563)
<223> Any naturally occurring amino acid
<220>
<221> MOD_RES
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<223> Any naturally occurring amino acid
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<223> Any naturally occurring amino acid
<220>
<221> MOD_RES
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<223> Any naturally occurring amino acid
<400> 1319
Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser
1 5 10 15
Glu Gly Ile Arg Glu Trp Trp Asp Leu Lys Pro Gly Ala Pro Lys Pro
20 25 30
Lys Ala Asn Gln Gln Lys Gln Asp Asp Gly Arg Gly Leu Val Leu Pro
35 40 45
Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Phe Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro
50 55 60
Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp
65 70 75 80
Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Arg Tyr Asn His Ala
85 90 95
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100 105 110
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115 120 125
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Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro Asp Ser Ser Xaa Gly Ile Gly
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165 170 175
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195 200 205
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225 230 235 240
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245 250 255
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260 265 270
Thr Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg
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Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn
290 295 300
Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Xaa Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile
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Gln Val Lys Glu Val Thr Thr Asn Asp Gly Thr Thr Thr Ile Ala Asn
325 330 335
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340 345 350
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355 360 365
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370 375 380
Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe
385 390 395 400
Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Xaa Phe Ser Tyr Thr
405 410 415
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420 425 430
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435 440 445
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450 455 460
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Pro Gly Pro Cys Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Lys Thr Thr Asn Gln
485 490 495
Asn Asn Asn Ser Asn Phe Ala Trp Thr Gly Ala Thr Lys Tyr His Leu
500 505 510
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515 520 525
Lys Asp Asp Glu Asp Arg Phe Phe Pro Ser Ser Gly Val Leu Ile Phe
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610 615 620
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Leu Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro
645 650 655
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660 665 670
Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu Leu
675 680 685
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690 695 700
Asn Tyr Asn Lys Ser Thr Asn Val Asp Phe Ala Val Asp Thr Glu Gly
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Leu
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polynucleotide"
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cccggtgtcg ctatggcaac ccacaaggac gacgaagacc gattttttcc gtccagcgga 1620
gtcttaatat ttgggaaaca gggagctgga aatnnnaacg tggacnnnnn naacgttatg 1680
ataaccnnng aggaagaaat taaaaccacc aacccagtgg ccacagaaga gtacggcnnn 1740
gtggccacta acctgcaatc gnnnaacacc gctcctcaaa cagggaccgt caacagtcaa 1800
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gccaagattc ctcacacgga cggaaacttt catccctcgc cgctgatggg aggctttgga 1920
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<223> Any naturally occurring amino acid
<220>
<221> MOD_RES
<222> (169)..(169)
<223> Any naturally occurring amino acid
<220>
<221> MOD_RES
<222> (564)..(564)
<223> Any naturally occurring amino acid
<400> 1321
Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser
1 5 10 15
Glu Gly Ile Arg Glu Trp Trp Asp Leu Lys Pro Gly Ala Pro Lys Pro
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Lys Ala Asn Gln Gln Lys Gln Asp Asp Gly Arg Gly Leu Val Leu Pro
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Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Phe Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro
50 55 60
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Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Arg Tyr Asn His Ala
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195 200 205
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Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Leu Gly Asp Arg Val
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Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His
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Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Gly Thr Ser Gly Gly Ser Thr Asn Asp
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Asn Thr Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn
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Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn
290 295 300
Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn
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355 360 365
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Asn Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr
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Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu
435 440 445
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450 455 460
Phe Ser Gln Ala Gly Pro Ser Ser Met Ala Asn Gln Ala Lys Asn Trp
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Leu Pro Gly Pro Cys Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Thr Thr Thr Asn
485 490 495
Gln Asn Asn Asn Ser Asn Phe Ala Trp Thr Gly Ala Thr Lys Tyr His
500 505 510
Leu Asn Gly Arg Asp Ser Leu Val Asn Pro Gly Val Ala Met Ala Thr
515 520 525
His Lys Asp Asp Glu Asp Arg Phe Phe Pro Ser Ser Gly Val Leu Ile
530 535 540
Phe Gly Lys Gln Gly Ala Gly Asn Asp Asn Val Asp Tyr Ser Asn Val
545 550 555 560
Met Ile Thr Xaa Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr
565 570 575
Glu Glu Tyr Gly Val Val Ala Thr Asn Leu Gln Ser Ala Asn Thr Ala
580 585 590
Pro Gln Thr Gly Thr Val Asn Ser Gln Gly Ala Leu Pro Gly Met Val
595 600 605
Trp Gln Asn Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile
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Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe
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Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val
645 650 655
Pro Ala Asp Pro Pro Thr Thr Phe Asn Gln Ala Lys Leu Asn Ser Phe
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Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu
675 680 685
Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr
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Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Thr Asn Val Asp Phe Ala Val Asn Thr Glu
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Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg
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<211> 738
<212> PRT
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<221> source
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polypeptide"
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<221> MOD_RES
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<223> Any naturally occurring amino acid
<220>
<221> MOD_RES
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<223> Any naturally occurring amino acid
<220>
<221> MOD_RES
<222> (413)..(413)
<223> Any naturally occurring amino acid
<220>
<221> MOD_RES
<222> (472)..(472)
<223> Any naturally occurring amino acid
<220>
<221> MOD_RES
<222> (534)..(534)
<223> Any naturally occurring amino acid
<220>
<221> MOD_RES
<222> (542)..(542)
<223> Any naturally occurring amino acid
<220>
<221> MOD_RES
<222> (595)..(595)
<223> Any naturally occurring amino acid
<400> 1323
Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser
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Glu Gly Ile Arg Glu Trp Trp Asp Leu Lys Pro Gly Ala Pro Lys Pro
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Gly Lys Lys Gly Gln Gln Pro Ala Xaa Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln
165 170 175
Thr Gly Asp Ser Glu Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Leu Gly Glu Pro
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245 250 255
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Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Gln Gly Cys Leu Pro Pro Phe
355 360 365
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370 375 380
Asn Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr
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Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu
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<223> Any naturally occurring amino acid
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<223> Any naturally occurring amino acid
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atggctgctg acggttatct tccagattgg ctcgaggaca acctttctga aggcattcgt 60
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ttcagcccgg ccaagtttgc ttcatttatc actcagtact ccactggaca ggtcagcgtg 2040
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ctcggagaag cagtggatcc aggaggacca ggcctcatac atctccttca atgcggcctc 1020
caactcgcgg tcccaaatca aggctgcctt ggacaatgcg ggaaagatta tgagcctgac 1080
taaaaccgcc cccgactacc tggtgggcca gcagcccgtg gaggacattt ccagcaatcg 1140
gatttataaa attttggaac taaacgggta cgatccccaa tatgcggctt ccgtctttct 1200
gggatgggcc acgaaaaagt tcggcaagag gaacaccatc tggctgtttg ggcctgcaac 1260
taccgggaag accaacatcg cggaggccat agcccacact gtgcccttct acgggtgcgt 1320
aaactggacc aatgagaact ttcccttcaa cgactgtgtc gacaagatgg tgatctggtg 1380
ggaggagggg aagatgaccg ccaaggtcgt ggagtcggcc aaagccattc tcggaggaag 1440
caaggtgcgc gtggaccaga aatgcaagtc ctcggcccag atagacccga ctcccgtgat 1500
cgtcacctcc aacaccaaca tgtgcgccgt gattgacggg aactcaacga ccttcgaaca 1560
ccagcagccg ttgcaagacc ggatgttcaa atttgaactc acccgccgtc tggatcatga 1620
ctttgggaag gtcaccaagc aggaagtcaa agactttttc cggtgggcaa aggatcacgt 1680
ggttgaggtg gagcatgaat tctacgtcaa aaagggtgga gccaagaaaa gacccgcccc 1740
cagtgacgca gatataagtg agcccaaacg ggtgcgcgag tcagttgcgc agccatcgac 1800
gtcagacgcg gaagcttcga tcaactacgc agacaggtac caaaacaaat gttctcgtca 1860
cgtgggcatg aatctgatgc tgtttccctg cagacaatgc gagagaatga atcagaattc 1920
aaatatctgc ttcactcacg gacagaaaga ctgtttagag tgctttcccg tgtcagaatc 1980
tcaacccgtt tctgtcgtca aaaaggcgta tcagaaactg tgctacattc atcatatcat 2040
gggaaaggtg ccagacgctt gcactgcctg cgatctggtc aatgtggatt tggatgactg 2100
catctttgaa caataaatga tttaaatcag gtatggctgc cgatggttat cttccagatt 2160
ggctcgagga cactctctct gaaggaataa gacagtggtg gaagctcaaa cctggcccac 2220
caccaccaaa gcccgcagag cggcataagg acgacagcag gggtcttgtg cttcctgggt 2280
acaagtacct cggacccttc aacggactcg acaagggaga gccggtcaac gaggcagacg 2340
ccgcggccct cgagcacgac aaagcctacg accggcagct cgacagcgga gacaacccgt 2400
acctcaagta caaccacgcc gacgcggagt ttcaggagcg ccttaaagaa gatacgtctt 2460
ttgggggcaa cctcggacga gcagtcttcc aggcgaaaaa gagggttctt gaacctctgg 2520
gcctggttga ggaacctgtt aagacggctc cgggaaaaaa gaggccggta gagcactctc 2580
ctgtggagcc agactcctcc tcgggaaccg gaaaggcggg ccagcagcct gcaagaaaaa 2640
gattgaattt tggtcagact ggagacgcag actcagtacc tgacccccag cctctcggac 2700
agccaccagc agccccctct ggtctgggaa ctaatacgat ggctacaggc agtggcgcac 2760
caatggcaga caataacgag ggcgccgacg gagtgggtaa ttcctcggga aattggcatt 2820
gcgattccac atggatgggc gacagagtca tcaccaccag cacccgaacc tgggccctgc 2880
ccacctacaa caaccacctc tacaaacaaa tttccagcca atcaggagcc tcgaacgaca 2940
atcactactt tggctacagc accccttggg ggtattttga cttcaacaga ttccactgcc 3000
acttttcacc acgtgactgg caaagactca tcaacaacaa ctggggattc cgacccaaga 3060
gactcaactt caagctcttt aacattcaag tcaaagaggt cacgcagaat gacggtacga 3120
cgacgattgc caataacctt accagcacgg ttcaggtgtt tactgactcg gagtaccagc 3180
tcccgtacgt cctcggctcg gcgcatcaag gatgcctccc gccgttccca gcagacgtct 3240
tcatggtgcc acagtatgga tacctcaccc tgaacaacgg gagtcaggca gtaggacgct 3300
cttcatttta ctgcctggag tactttcctt ctcagatgct gcgtaccgga aacaacttta 3360
ccttcagcta cacttttgag gacgttcctt tccacagcag ctacgctcac agccagagtc 3420
tggaccgtct catgaatcct ctcatcgacc agtacctgta ttacttgagc agaacaaaca 3480
ctccaagtgg aaccaccacg cagtcaaggc ttcagttttc tcaggccgga gcgagtgaca 3540
ttcgggacca gtctaggaac tggcttcctg gaccctgtta ccgccagcag cgagtatcaa 3600
agacatctgc ggataacaac aacagtgaat actcgtggac tggagctacc aagtaccacc 3660
tcaatggcag agactctctg gtgaatccgg gcccggccat ggcaagccac aaggacgatg 3720
aagaaaagtt ttttcctcag agcggggttc tcatctttgg gaagcaaggc tcagagaaaa 3780
caaatgtgga cattgaaaag gtcatgatta cagacgaaga ggaaatcagg acaaccaatc 3840
ccgtggctac ggagcagtat ggttctgtat ctaccaacct ccagagaggc aacagacaag 3900
cagctaccgc agatgtcaac acacaaggcg ttcttccagg catggtctgg caggacagag 3960
atgtgtacct tcaggggccc atctgggcaa agattccaca cacggacgga cattttcacc 4020
cctctcccct catgggtgga ttcggactta aacaccctcc tccacagatt ctcatcaaga 4080
acaccccggt acctgcgaat ccttcgacca ccttcagtgc ggcaaagttt gcttccttca 4140
tcacacagta ctccacggga caggtcagcg tggagatcga gtgggagctg cagaaggaaa 4200
acagcaaacg ctggaatccc gaaattcagt acacttccaa ctacaacaag tctgttaatg 4260
tggactttac tgtggacact aatggcgtgt attcagagcc tcgccccatt ggcaccagat 4320
acctgactcg taatctgtaa ttgcttgtta atcaataaac cgtttaattc gtttcagttg 4380
aactttggtc tctgcgtatt tctttcttat ctagtttcca tgctctagag tcctgtatta 4440
gaggtcacgt gagtgttttg cgacattttg cgacaccatg tggtcacgct gggtatttaa 4500
gcccgagtga gcacgcaggg tctccatttt gaagcgggag gtttgaacgc gcagccacca 4560
cggcggggtt ttacgagatt gtgattaagg tccccagcga ccttgacggg catctgcccg 4620
gcatttctga cagctttgtg aactgggtgg ccgagaagga atgggagttg ccgccagatt 4680
ctgacatgga tctgaatctg attgagcagg cacccctgac cgtggccgag aagctgcatc 4740
gctggcgtaa tagcgaagag gcccgcaccg atcgcccttc ccaacagttg cgcagcctga 4800
atggcgaatg gaattccaga cgattgagcg tcaaaatgta ggtatttcca tgagcgtttt 4860
tcctgttgca atggctggcg gtaatattgt tctggatatt accagcaagg ccgatagttt 4920
gagttcttct actcaggcaa gtgatgttat tactaatcaa agaagtattg cgacaacggt 4980
taatttgcgt gatggacaga ctcttttact cggtggcctc actgattata aaaacacttc 5040
tcaggattct ggcgtaccgt tcctgtctaa aatcccttta atcggcctcc tgtttagctc 5100
ccgctctgat tctaacgagg aaagcacgtt atacgtgctc gtcaaagcaa ccatagtacg 5160
cgccctgtag cggcgcatta agcgcggcgg gtgtggtggt tacgcgcagc gtgaccgcta 5220
cacttgccag cgccctagcg cccgctcctt tcgctttctt cccttccttt ctcgccacgt 5280
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ctttacggca cctcgacccc aaaaaacttg attagggtga tggttcacgt agtgggccat 5400
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catccgctta cagacaagct gtgaccgtct ccgggagctg catgtgtcag aggttttcac 6300
cgtcatcacc gaaacgcgcg agacgaaagg gcctcgtgat acgcctattt ttataggtta 6360
atgtcatgat aataatggtt tcttagacgt caggtggcac ttttcgggga aatgtgcgcg 6420
gaacccctat ttgtttattt ttctaaatac attcaaatat gtatccgctc atgagacaat 6480
aaccctgata aatgcttcaa taatattgaa aaaggaagag tatgagtatt caacatttcc 6540
gtgtcgccct tattcccttt tttgcggcat tttgccttcc tgtttttgct cacccagaaa 6600
cgctggtgaa agtaaaagat gctgaagatc agttgggtgc acgagtgggt tacatcgaac 6660
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agcaactcgg tcgccgcata cactattctc agaatgactt ggttgagtac tcaccagtca 6840
cagaaaagca tcttacggat ggcatgacag taagagaatt atgcagtgct gccataacca 6900
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ccgctttttt gcacaacatg ggggatcatg taactcgcct tgatcgttgg gaaccggagc 7020
tgaatgaagc cataccaaac gacgagcgtg acaccacgat gcctgtagca atggcaacaa 7080
cgttgcgcaa actattaact ggcgaactac ttactctagc ttcccggcaa caattaatag 7140
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ggtttattgc tgataaatct ggagccggtg agcgtgggtc tcgcggtatc attgcagcac 7260
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ctatggatga acgaaataga cagatcgctg agataggtgc ctcactgatt aagcattggt 7380
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ggtcgggctg aacggggggt tcgtgcacac agcccagctt ggagcgaacg acctacaccg 7920
aactgagata cctacagcgt gagctatgag aaagcgccac gcttcccgaa gggagaaagg 7980
cggacaggta tccggtaagc ggcagggtcg gaacaggaga gcgcacgagg gagcttccag 8040
ggggaaacgc ctggtatctt tatagtcctg tcgggtttcg ccacctctga cttgagcgtc 8100
gatttttgtg atgctcgtca ggggggcgga gcctatggaa aaacgccagc aacgcggcct 8160
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ctgattctgt ggataaccgt attaccgcct ttgagtgagc tgataccgct cgccgcagcc 8280
gaacgaccga gcgcagcgag tcagtgagcg aggaagcgga agagcgccca atacgcaaac 8340
cgcctctccc cgcgcgttgg ccgattcatt aatgca 8376
<210> 1353
<211> 1085
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
polynucleotide"
<220>
<221> modified_base
<222> (611)..(611)
<223> a, c, t, or g
<220>
<221> modified_base
<222> (640)..(640)
<223> a, c, t, or g
<220>
<221> modified_base
<222> (1039)..(1039)
<223> a, c, t, or g
<400> 1353
tgcccactta caacaaccat ctctacaagc aaatctccag cvvmdcagga gctascaacg 60
acaaccacta ctttggctac agcacccctt gggggtattt tgactttaac agattccact 120
gccacttctc accacgtgac tggcagcgac tcattaacaa caactgggga ttccggccca 180
agaaactcag cttcaagctc ttcaacatcc aagttagagg ggtcacgcag aacgatggca 240
cgacgactat tgccaataac cttaccagca cggttcaagt gtttacggac tcggagtatc 300
agctcccgta cgtgctcggg tcggcgcacc aaggctgtct cccgccgttt ccagcggacg 360
tcttcatggt ccctcagtat ggatacctca ccctgaacaa cggaagtcaa gcggtgggac 420
gctcatcctt ttactgcctg gagtacttcc cttcgcagat gctaaggact ggaaataact 480
tccaattcag ctataccttc gaggatgtac cttttcacag cagctacgct cacagccaga 540
gtttggatcg cttgatgaat cctcttattg atcagtatct gtactacctg aacagaacgc 600
aargcamcvc nrgcggaaca rccrvcmhsm rsvvsctgvn gtttagccag gctgggcctc 660
agtctatgtc tttgcaggcc agaaattggc tacctgggcc ctgctaccgg caacagagac 720
tttcaamary cbmcrvcsrs aacaacaaca gtrastttcc ttggmcagcg gccagcamat 780
atcatctcaa tggccgcgac tcgctggtga atccaggacc agctatggcc agtcacrrgg 840
acgatrmsgr saratttttc cctatgcacg gcaatctaat atttggcaaa saarrcrscr 900
vsrvarvcra trycgmsdwc grsvrsgtaa tgattacgga tgaagaagag attcgtacca 960
ccaatcctgt ggcaacagag cagtatggaa ctgtggcaaa taacttgcag rvsvvsmrsr 1020
vcvvscccac gdhtvvsrns gtcvmscatc agggggcctt acctggcatg gtgtggcaag 1080
atcgt 1085
<210> 1354
<211> 620
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
polypeptide"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (263)..(264)
<223> Any naturally occurring amino acid
<220>
<221> MOD_RES
<222> (267)..(267)
<223> Any naturally occurring amino acid
<220>
<221> MOD_RES
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<223> Any naturally occurring amino acid
<220>
<221> MOD_RES
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<223> Any naturally occurring amino acid
<220>
<221> MOD_RES
<222> (462)..(462)
<223> Any naturally occurring amino acid
<220>
<221> MOD_RES
<222> (491)..(495)
<223> Any naturally occurring amino acid
<220>
<221> MOD_RES
<222> (500)..(500)
<223> Any naturally occurring amino acid
<220>
<221> MOD_RES
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<223> Any naturally occurring amino acid
<220>
<221> MOD_RES
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<223> Any naturally occurring amino acid
<220>
<221> MOD_RES
<222> (528)..(528)
<223> Any naturally occurring amino acid
<220>
<221> MOD_RES
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<223> Any naturally occurring amino acid
<220>
<221> MOD_RES
<222> (546)..(557)
<223> Any naturally occurring amino acid
<220>
<221> MOD_RES
<222> (586)..(590)
<223> Any naturally occurring amino acid
<220>
<221> MOD_RES
<222> (593)..(595)
<223> Any naturally occurring amino acid
<220>
<221> MOD_RES
<222> (597)..(597)
<223> Any naturally occurring amino acid
<400> 1354
Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser
1 5 10 15
Glu Gly Ile Arg Glu Trp Trp Ala Leu Lys Pro Gly Val Pro Gln Pro
20 25 30
Lys Ala Asn Gln Gln His Gln Asp Asn Arg Arg Gly Leu Val Leu Pro
35 40 45
Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro
50 55 60
Val Asn Glu Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp
65 70 75 80
Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala
85 90 95
Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Gln Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly
100 105 110
Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Ile Leu Glu Pro
115 120 125
Leu Gly Leu Val Glu Glu Ala Ala Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Gly
130 135 140
Ala Val Asp Gln Ser Pro Gln Glu Pro Asp Ser Ser Ser Gly Val Gly
145 150 155 160
Lys Ser Gly Lys Gln Pro Ala Arg Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr
165 170 175
Gly Asp Ser Glu Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Leu Gly Glu Pro Pro
180 185 190
Ala Ala Pro Thr Ser Leu Gly Ser Asn Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly
195 200 205
Ala Pro Met Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ser
210 215 220
Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile
225 230 235 240
Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu
245 250 255
Tyr Lys Gln Ile Ser Ser Xaa Xaa Gly Ala Xaa Asn Asp Asn His Tyr
260 265 270
Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His
275 280 285
Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp
290 295 300
Gly Phe Arg Pro Lys Lys Leu Ser Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val
305 310 315 320
Arg Gly Val Thr Gln Asn Asp Gly Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu
325 330 335
Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Ser Glu Tyr Gln Leu Pro Tyr
340 345 350
Val Leu Gly Ser Ala His Gln Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp
355 360 365
Val Phe Met Val Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asn Gly Ser
370 375 380
Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser
385 390 395 400
Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Thr Phe Glu
405 410 415
Asp Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg
420 425 430
Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Asn Arg Thr
435 440 445
Gln Xaa Xaa Xaa Xaa Gly Thr Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Leu Xaa Phe Ser
450 455 460
Gln Ala Gly Pro Gln Ser Met Ser Leu Gln Ala Arg Asn Trp Leu Pro
465 470 475 480
Gly Pro Cys Tyr Arg Gln Gln Arg Leu Ser Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Asn
485 490 495
Asn Asn Ser Xaa Phe Pro Trp Xaa Ala Ala Ser Xaa Tyr His Leu Asn
500 505 510
Gly Arg Asp Ser Leu Val Asn Pro Gly Pro Ala Met Ala Ser His Xaa
515 520 525
Asp Asp Xaa Xaa Xaa Phe Phe Pro Met His Gly Asn Leu Ile Phe Gly
530 535 540
Lys Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Val Met Ile
545 550 555 560
Thr Asp Glu Glu Glu Ile Arg Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu Gln
565 570 575
Tyr Gly Thr Val Ala Asn Asn Leu Gln Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Pro Thr
580 585 590
Xaa Xaa Xaa Val Xaa His Gln Gly Ala Leu Pro Gly Met Val Trp Gln
595 600 605
Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala
610 615 620
<210> 1355
<211> 1491
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
polynucleotide"
<400> 1355
accaccagca ccagaacctg ggccctgccc acttacaaca accatctcta caagcaaatc 60
tccagccaat caggagcttc aaacgacaac cactactttg gctacagcac cccttggggg 120
tattttgact ttaacagatt ccactgccac ttctcaccac gtgactggca gcgactcatt 180
aacaacaact ggggattccg gcccaagaaa ctcagcttca agctcttcaa catccaagtt 240
agaggggtca cgcagaacga tggcacgacg actattgcca ataaccttac cagcacggtt 300
caagtgttta cggactcgga gtatcagctc ccgtacgtgc tcgggtcggc gcaccaaggc 360
tgtctcccgc cgtttccagc ggacgtcttc atggtccctc agtatggata cctcaccctg 420
aacaacggaa gtcaagcggt gggacgctca tccttttact gcctggagta cttcccttcg 480
cagatgctaa ggactggaaa taacttccaa ttcagctata ccttcgagga tgtacctttt 540
cacagcagct acgctcacag ccagagtttg gatcgcttga tgaatcctct tattgatcag 600
tatctgtact acctgaacag aacgcaagga acaacctctg gaacaaccaa ccaatcacgg 660
ctgcttttta gccaggctgg gcctcagtct atgtctttgc aggccagaaa ttggctacct 720
gggccctgct accggcaaca gagactttca aagactgcta acgacaacaa caacagtaac 780
tttccttgga cagcggccag caaatatcat ctcaatggcc gcgactcgct ggtgaatcca 840
ggaccagcta tggccagtca caaggacgat gaagaaaaat ttttccctat gcacggcaat 900
ctaatatttg gcaaagaagg gacaacggca agtaacgcag aattagataa tgtaatgatt 960
acggatgaag aagagattcg taccaccaat cctgtggcaa cagagcagta tggaactgtg 1020
gcaaataact tgcagagctc aaatacagct cccacgactg gaactgtcaa tcatcagggg 1080
gccttacctg gcatggtgtg gcaagatcgt gacgtctacc ttcaaggacc tatctgggca 1140
aagattcctc acacggatgg acactttcat ccttctcctc tgatgggagg ctttggactg 1200
aaacatccgc ctcctcaaat catgatcaaa aatactccgg taccggcaaa tcctccgacg 1260
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tatagtgaac ctcgccctat tggaacccgg tatctcacac gaaacttgtg a 1491
<210> 1356
<211> 482
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
polypeptide"
<400> 1356
Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu
1 5 10 15
Tyr Lys Gln Ile Ser Ser Gln Ser Gly Ala Ser Asn Asp Asn His Tyr
20 25 30
Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys
35 40 45
His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Asn Asn Asn Trp Gly Phe
50 55 60
Arg Pro Lys Lys Leu Ser Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Arg Gly Val
65 70 75 80
Thr Gln Asn Asp Gly Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr
85 90 95
Gln Val Phe Thr Asp Ser Glu Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser
100 105 110
Ala His Gln Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Val Pro
115 120 125
Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Asn Asn Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser
130 135 140
Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn
145 150 155 160
Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Thr Phe Glu Asp Val Pro His Ser Ser Tyr
165 170 175
Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Tyr
180 185 190
Leu Tyr Tyr Leu Asn Arg Thr Gln Gly Thr Thr Ser Gly Thr Thr Asn
195 200 205
Gln Ser Leu Leu Phe Ser Gln Ala Gly Pro Gln Ser Met Ser Leu Gln
210 215 220
Ala Arg Asn Trp Leu Gly Pro Cys Tyr Arg Gln Gln Arg Leu Ser Lys
225 230 235 240
Thr Ala Asn Asp Asn Asn Asn Ser Phe Pro Trp Thr Ala Ala Ser Lys
245 250 255
Tyr His Leu Asn Gly Arg Asp Ser Leu Val Asn Gly Pro Ala Met Ala
260 265 270
Ser His Lys Asp Asp Glu Glu Lys Phe Phe Pro Met His Gly Leu Ile
275 280 285
Phe Gly Lys Glu Gly Thr Thr Ala Ser Asn Ala Glu Leu Asp Asn Val
290 295 300
Met Ile Thr Asp Glu Glu Glu Ile Arg Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr
305 310 315 320
Glu Gln Tyr Gly Thr Val Ala Asn Asn Leu Gln Ser Ser Asn Thr Ala
325 330 335
Pro Thr Thr Gly Thr Val Asn His Gln Gly Ala Leu Pro Gly Met Val
340 345 350
Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile
355 360 365
Pro His Thr Asp Gly His Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe
370 375 380
Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Met Ile Lys Asn Thr Pro Val
385 390 395 400
Pro Ala Asn Pro Pro Thr Thr Phe Ser Pro Ala Lys Phe Ala Ser Phe
405 410 415
Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu
420 425 430
Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr
435 440 445
Ser Asn Tyr Asn Lys Ser Val Asn Val Asp Phe Thr Val Asp Thr Asn
450 455 460
Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg
465 470 475 480
Asn Leu
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<212> DNA
<213> Artificial Sequence
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<221> modified_base
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<223> a, c, t, or g
<400> 1357
accaccagca ccagaacctg ggccctgccc acttacaaca accatctcta caagcaaatc 60
tccagcvvmd caggagctas caacgacaac cactactttg gctacagcac cccttggggg 120
tattttgact ttaacagatt ccactgccac ttctcaccac gtgactggca gcgactcatt 180
aacaacaact ggggattccg gcccaagaaa ctcagcttca agctcttcaa catccaagtt 240
agaggggtca cgcagaacga tggcacgacg actattgcca ataaccttac cagcacggtt 300
caagtgttta cggactcgga gtatcagctc ccgtacgtgc tcgggtcggc gcaccaaggc 360
tgtctcccgc cgtttccagc ggacgtcttc atggtccctc agtatggata cctcaccctg 420
aacaacggaa gtcaagcggt gggacgctca tccttttact gcctggagta cttcccttcg 480
cagatgctaa ggactggaaa taacttccaa ttcagctata ccttcgagga tgtacctttt 540
cacagcagct acgctcacag ccagagtttg gatcgcttga tgaatcctct tattgatcag 600
tatctgtact acctgaacag aacgcaargc amcvcnrgcg gaacarccrv cmhsmrsvvs 660
ctgvngttta gccaggctgg gcctcagtct atgtctttgc aggccagaaa ttggctacct 720
gggccctgct accggcaaca gagactttca amarycbmcr vcsrsaacaa caacagtras 780
tttccttggm cagcggccag camatatcat ctcaatggcc gcgactcgct ggtgaatcca 840
ggaccagcta tggccagtca crrggacgat rmsgrsarat ttttccctat gcacggcaat 900
ctaatatttg gcaaasaarr crscrvsrva rvcratrycg msdwcgrsvr sgtaatgatt 960
acggatgaag aagagattcg taccaccaat cctgtggcaa cagagcagta tggaactgtg 1020
gcaaataact tgcagrvsvv smrsrvcvvs cccacgdhtv vsrnsgtcvm scatcagggg 1080
gccttacctg gcatggtgtg gcaagatcgt gacgtctacc ttcaaggacc tatctgggca 1140
<210> 1358
<211> 620
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
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polypeptide"
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<221> MOD_RES
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<223> Any naturally occurring amino acid
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<223> Any naturally occurring amino acid
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<223> Any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Any naturally occurring amino acid
<220>
<221> MOD_RES
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<223> Any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Any naturally occurring amino acid
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<223> Any naturally occurring amino acid
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<223> Any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Any naturally occurring amino acid
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<223> Any naturally occurring amino acid
<220>
<221> MOD_RES
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<223> Any naturally occurring amino acid
<220>
<221> MOD_RES
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<223> Any naturally occurring amino acid
<220>
<221> MOD_RES
<222> (597)..(597)
<223> Any naturally occurring amino acid
<400> 1358
Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser
1 5 10 15
Glu Gly Ile Arg Glu Trp Trp Ala Leu Lys Pro Gly Val Pro Gln Pro
20 25 30
Lys Ala Asn Gln Gln His Gln Asp Asn Arg Arg Gly Leu Val Leu Pro
35 40 45
Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro
50 55 60
Val Asn Glu Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp
65 70 75 80
Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala
85 90 95
Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Gln Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly
100 105 110
Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Ile Leu Glu Pro
115 120 125
Leu Gly Leu Val Glu Glu Ala Ala Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Gly
130 135 140
Ala Val Asp Gln Ser Pro Gln Glu Pro Asp Ser Ser Ser Gly Val Gly
145 150 155 160
Lys Ser Gly Lys Gln Pro Ala Arg Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr
165 170 175
Gly Asp Ser Glu Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Leu Gly Glu Pro Pro
180 185 190
Ala Ala Pro Thr Ser Leu Gly Ser Asn Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly
195 200 205
Ala Pro Met Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ser
210 215 220
Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile
225 230 235 240
Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu
245 250 255
Tyr Lys Gln Ile Ser Ser Xaa Xaa Gly Ala Xaa Asn Asp Asn His Tyr
260 265 270
Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His
275 280 285
Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp
290 295 300
Gly Phe Arg Pro Lys Lys Leu Ser Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val
305 310 315 320
Arg Gly Val Thr Gln Asn Asp Gly Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu
325 330 335
Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Ser Glu Tyr Gln Leu Pro Tyr
340 345 350
Val Leu Gly Ser Ala His Gln Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp
355 360 365
Val Phe Met Val Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asn Gly Ser
370 375 380
Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser
385 390 395 400
Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Thr Phe Glu
405 410 415
Asp Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg
420 425 430
Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Asn Arg Thr
435 440 445
Gln Xaa Xaa Xaa Xaa Gly Thr Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Leu Xaa Phe Ser
450 455 460
Gln Ala Gly Pro Gln Ser Met Ser Leu Gln Ala Arg Asn Trp Leu Pro
465 470 475 480
Gly Pro Cys Tyr Arg Gln Gln Arg Leu Ser Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Asn
485 490 495
Asn Asn Ser Xaa Phe Pro Trp Xaa Ala Ala Ser Xaa Tyr His Leu Asn
500 505 510
Gly Arg Asp Ser Leu Val Asn Pro Gly Pro Ala Met Ala Ser His Xaa
515 520 525
Asp Asp Xaa Xaa Xaa Phe Phe Pro Met His Gly Asn Leu Ile Phe Gly
530 535 540
Lys Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Val Met Ile
545 550 555 560
Thr Asp Glu Glu Glu Ile Arg Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu Gln
565 570 575
Tyr Gly Thr Val Ala Asn Asn Leu Gln Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Pro Thr
580 585 590
Xaa Xaa Xaa Val Xaa His Gln Gly Ala Leu Pro Gly Met Val Trp Gln
595 600 605
Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala
610 615 620
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
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polypeptide"
<400> 1359
Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser
1 5 10 15
Glu Gly Ile Arg Glu Trp Trp Asp Leu Lys Pro Gly Ala Pro Lys Pro
20 25 30
Lys Ala Asn Gln Gln Lys Gln Asp Asp Gly Arg Gly Leu Val Leu Pro
35 40 45
Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Phe Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro
50 55 60
Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp
65 70 75 80
Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Arg Tyr Asn His Ala
85 90 95
Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Gln Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly
100 105 110
Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro
115 120 125
Leu Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg
130 135 140
Pro Val Glu Pro Ser Pro Gln Arg Ser Pro Asp Ser Ser Thr Gly Ile
145 150 155 160
Gly Lys Lys Gly Gln Gln Pro Ala Lys Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln
165 170 175
Thr Gly Asp Ser Glu Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Ile Gly Glu Pro
180 185 190
Pro Ala Gly Pro Ser Gly Leu Gly Ser Gly Thr Met Ala Ala Gly Gly
195 200 205
Gly Ala Pro Met Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Ser
210 215 220
Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Leu Gly Asp Arg Val
225 230 235 240
Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His
245 250 255
Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Gly Thr Ser Gly Gly Ser Thr Asn Asp
260 265 270
Asn Thr Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn
275 280 285
Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn
290 295 300
Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn
305 310 315 320
Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Gln Asn Glu Gly Thr Lys Thr Ile Ala
325 330 335
Asn Asn Leu Thr Ser Thr Ile Gln Val Phe Thr Asp Ser Glu Tyr Gln
340 345 350
Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Gln Gly Cys Leu Pro Pro Phe
355 360 365
Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn
370 375 380
Asn Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr
385 390 395 400
Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Ser Tyr
405 410 415
Gln Phe Glu Asp Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser
420 425 430
Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu
435 440 445
Ser Arg Thr Gln Ser Thr Gly Gly Thr Ala Gly Thr Gln Gln Leu Leu
450 455 460
Phe Ser Gln Ala Gly Pro Asn Asn Met Ser Ala Gln Ala Lys Asn Trp
465 470 475 480
Leu Pro Gly Pro Cys Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Thr Thr Leu Ser
485 490 495
Gln Asn Asn Asn Ser Asn Phe Ala Trp Thr Gly Ala Thr Lys Tyr His
500 505 510
Leu Asn Gly Arg Asp Ser Leu Val Asn Pro Gly Val Ala Met Ala Thr
515 520 525
His Lys Asp Asp Glu Glu Arg Phe Phe Pro Ser Ser Gly Val Leu Met
530 535 540
Phe Gly Lys Gln Gly Ala Gly Lys Asp Asn Val Asp Tyr Ser Ser Val
545 550 555 560
Met Leu Thr Ser Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr
565 570 575
Glu Gln Tyr Gly Val Val Ala Asp Asn Leu Gln Gln Gln Asn Ala Ala
580 585 590
Pro Ile Val Gly Ala Val Asn Ser Gln Gly Ala Leu Pro Gly Met Val
595 600 605
Trp Gln Asn Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile
610 615 620
Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe
625 630 635 640
Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val
645 650 655
Pro Ala Asp Pro Pro Thr Thr Phe Ser Gln Ala Lys Leu Ala Ser Phe
660 665 670
Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu
675 680 685
Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr
690 695 700
Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Thr Asn Val Asp Phe Ala Val Asn Thr Asp
705 710 715 720
Gly Thr Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg
725 730 735
Asn Leu
<210> 1360
<211> 2258
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
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polynucleotide"
<400> 1360
tcgaggacaa cctctctgag ggcattcgcg agtggtggga cttgaaacct ggagccccga 60
aacccaaagc caaccagcaa aagcaggacg acggccgggg tctggtgctt cctggctaca 120
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cggccctcga gcacgacaag gcctacgacc agcagctcaa agcgggtgac aatccgtacc 240
tgcggtataa ccacgccgac gccgagtttc aggagcgtct gcaagaagat acgtcttttg 300
ggggcaacct cgggcgagca gtcttccagg ccaagaagcg ggttctcgaa cctctcggtc 360
tggttgagga aggcgctaag acggctcctg gaaagaagag accggtagag ccatcacccc 420
agcgttctcc agactcctct acgggcatcg gcaagaaagg ccagcagccc gcgaaaaaga 480
gactcaactt tgggcagact ggcgactcag agtcagtgcc cgaccctcaa ccaatcggag 540
aaccccccgc aggcccctct ggtctgggat ctggtacaat ggctgcaggc ggtggcgctc 600
caatggcaga caataacgaa ggcgccgacg gagtgggtag ttcctcagga aattggcatt 660
gcgattccac atggctgggc gacagagtca tcaccaccag cacccgaacc tgggccctcc 720
ccacctacaa caaccacctc tacaagcaaa tctccaacgg gacttcggga ggaagcacca 780
acgacaacac ctacttcggc tacagcaccc cctgggggta ttttgacttt aacagattcc 840
actgccactt ctcaccacgt gactggcagc gactcatcaa caacaactgg ggattccggc 900
ccaagagact caacttcaag ctcttcaaca tccaggtcaa ggaggtcacg cagaatgaag 960
gcaccaagac catcgccaat aaccttacca gcacgattca ggtctttacg gactcggaat 1020
accagctccc gtacgtcctc ggctctgcgc accagggctg cctgcctccg ttcccggcgg 1080
acgtcttcat gattcctcag tacgggtacc tgactctgaa caatggcagt caggccgtgg 1140
gccgttcctc cttctactgc ctggagtact ttccttctca aatgctgaga acgggcaaca 1200
actttgagtt cagctaccag tttgaggacg tgccttttca cagcagctac gcgcacagcc 1260
aaagcctgga ccggctgatg aaccccctca tcgaccagta cctgtactac ctgtctcgga 1320
ctcagtccac gggaggtacc gcaggaactc agcagttgct attttctcag gccgggccta 1380
ataacatgtc ggctcaggcc aaaaactggc tacccgggcc ctgctaccgg cagcaacgcg 1440
tctccacgac actgtcgcaa aataacaaca gcaactttgc ctggaccggt gccaccaagt 1500
atcatctgaa tggcagagac tctctggtaa atcccggtgt cgctatggca acccacaagg 1560
acgacgaaga gcgatttttt ccgtccagcg gagtcttaat gtttgggaaa cagggagctg 1620
gaaaagacaa cgtggactat agcagcgtta tgctaaccag tgaggaagaa attaaaacca 1680
ccaacccagt ggccacagaa cagtacggcg tggtggccga taacctgcaa cagcaaaacg 1740
ccgctcctat tgtaggggcc gtcaacagtc aaggagcctt acctggcatg gtctggcaga 1800
accgggacgt gtacctgcag ggtcctatct gggccaagat tcctcacacg gacggaaact 1860
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ttaagaatac acctgttccc gcggatcctc caactacctt cagtcaagct aagctggcgt 1980
cgttcatcac gcagtacagc accggacagg tcagcgtgga aattgaatgg gagctgcaga 2040
aagaaaacag caaacgctgg aacccagaga ttcaatacac ttccaactac tacaaatcta 2100
caaatgtgga ctttgctgtt aacacagatg gcacttattc tgagcctcgc cccatcggca 2160
cccgttacct cacccgtaat ctgtaattgc ttgttaatca ataaaccggt tgattcgttt 2220
cagttgaact ttggtctctg cgaagggcga attcgttt 2258
<210> 1361
<211> 2208
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
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polynucleotide"
<400> 1361
atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca ctctctctga aggaataaga 60
cagtggtgga agctcaaacc tggcccacca ccaccaaagc ccgcagagcg gcataaggac 120
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aagggagagc cggtcaacga ggcagacgcc gcggccctcg agcacgacaa agcctacgac 240
cggcagctcg acagcggaga caacccgtac ctcaagtaca accacgccga cgcggagttt 300
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tattttgact tcaacagatt ccactgccac ttttcaccac gtgactggca aagactcatc 900
aacaacaact ggggattccg acccaagaga ctcaacttca agctctttaa cattcaagtc 960
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caggtgttta ctgactcgga gtaccagctc ccgtacgtcc tcggctcggc gcatcaagga 1080
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ccggccatgg caagccacaa ggacgatgaa gaaaagtttt ttcctcagag cggggttctc 1620
atctttggga agcaaggctc agagaaaaca aatgtggaca ttgaaaaggt catgattaca 1680
gacgaagagg aaatcaggac aaccaatccc gtggctacgg agcagtatgg ttctgtatct 1740
accaacctcc agagaggcaa cagacaagca gctaccgcag atgtcaacac acaaggcgtt 1800
cttccaggca tggtctggca ggacagagat gtgtaccttc aggggcccat ctgggcaaag 1860
attccacaca cggacggaca ttttcacccc tctcccctca tgggtggatt cggacttaaa 1920
caccctcctc cacagattct catcaagaac accccggtac ctgcgaatcc ttcgaccacc 1980
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gagatcgagt gggagctgca gaaggaaaac agcaaacgct ggaatcccga aattcagtac 2100
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Lys Ala Asn Gln Gln Lys Gln Asp Asn Gly Arg Gly Leu Val Leu Pro
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Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Phe Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro
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Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp
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Gln Gln Leu Gln Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Arg Tyr Asn His Ala
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Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Gln Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly
100 105 110
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Asn Asn Leu Thr Ser Thr Ile Gln Val Phe Thr Asp Ser Glu Tyr Gln
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420 425 430
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485 490 495
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500 505 510
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Leu
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Tyr Xaa Cys Xaa Xaa Gly Pro Xaa Thr Trp Xaa Cys Xaa Pro
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<221> VARIANT
<222> (5)..(5)
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<221> SITE
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<223> /note="Variant residues given in the sequence have no
preference with respect to those in the annotations
for variant positions"
<400> 1488
Leu Trp Xaa Xaa Tyr
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<221> MOD_RES
<222> (3)..(4)
<223> Any naturally occurring amino acid
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Xaa Phe Xaa Xaa Tyr Leu Trp
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Ser Ser Ile Ile Ser His Phe Arg Trp Gly Leu Cys Asp
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<213> Artificial Sequence
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Met Ser Arg Pro Ala Cys Pro Pro Asn Asp Lys Tyr Glu
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<213> Artificial Sequence
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Cys Leu Arg Ser Gly Arg Gly Cys
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Cys His Trp Met Phe Ser Pro Trp Cys
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<213> Artificial Sequence
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<220>
<221> MOD_RES
<222> (2)..(3)
<223> Any naturally occurring amino acid
<400> 1494
Trp Xaa Xaa Phe
1
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<213> Artificial Sequence
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Cys Ser Ser Arg Leu Asp Ala Cys
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Cys Leu Pro Val Ala Ser Cys
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Cys Gly Phe Glu Cys Val Arg Gln Cys Pro Glu Arg Cys
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Pro Xaa Xaa Xaa
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Ser Gly Lys Gly Pro Arg Gln Ile Thr Ala Leu
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Thr Ala Cys His Gln His Val Arg Met Val Arg Pro
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Val Pro Trp Met Glu Pro Ala Tyr Gln Arg Phe Leu
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Cys Pro Ile Glu Asp Arg Pro Met Cys
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Met Cys Pro Lys His Pro Leu Gly Cys
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<211> 15
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Arg Met Trp Pro Ser Ser Thr Val Asn Leu Ser Ala Gly Arg Arg
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Ser Ala Lys Thr Ala Val Ser Gln Arg Val Trp Leu Pro Ser His Arg
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Gly Gly Glu Pro
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<211> 20
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Lys Ser Arg Glu His Val Asn Asn Ser Ala Cys Pro Ser Lys Arg Ile
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Thr Ala Ala Leu
20
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Glu Gly Phe Arg
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Ala Gly Leu Gly Val Arg
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<213> Artificial Sequence
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<400> 1554
Gly Thr Arg Gln Gly His Thr Met Arg Leu Gly Val Ser Asp Gly
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<210> 1555
<211> 15
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
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Ile Ala Gly Leu Ala Thr Pro Gly Trp Ser His Trp Leu Ala Leu
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<213> Artificial Sequence
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Ser Met Ser Ile Ala Arg Leu
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Asn Thr Ser Leu Lys Arg Ile Ser Asn Lys Arg Ile Arg Arg Lys
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Leu Arg Ile Lys Arg Lys Arg Arg Lys Arg Lys Lys Thr Arg Lys
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<210> 1560
<211> 21
<212> DNA
<213> Adeno-associated virus 2
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agcvvmdcag garscascaa c 21
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<211> 7
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<213> Artificial Sequence
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Ser Asp Ser Gly Ala Ser Asn
1 5
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<211> 7
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<213> Artificial Sequence
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Ser Pro Ser Gly Ala Ser Asn
1 5
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<213> Artificial Sequence
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Ser His Ser Gly Ala Ser Asn
1 5
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<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
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Ser Arg Ser Gly Ala Ser Asn
1 5
<210> 1565
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
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Ser Lys Ser Gly Ala Ser Asn
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Ser Asn Ser Gly Ala Ser Asn
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<221> modified_base
<222> (35)..(35)
<223> a, c, t, or g
<400> 1709
tatttcttga gcagaacaaa crvcvvsrsc ggamncvhsa cgmhstcavv scttvdsttt 60
tctcagsbcr gsgcg 75
<210> 1710
<211> 48
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
oligonucleotide"
<220>
<221> modified_base
<222> (11)..(11)
<223> a, c, t, or g
<400> 1710
tcaamammav nsrvcsrsaa caacaacagt rasttctcgt ggmmagga 48
<210> 1711
<211> 42
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
oligonucleotide"
<220>
<221> modified_base
<222> (31)..(31)
<223> a, c, t, or g
<400> 1711
aagsaarrcr scrvsrvarv cratrycgms nhcrvmvrsg tc 42
<210> 1712
<211> 42
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
oligonucleotide"
<220>
<221> modified_base
<222> (17)..(17)
<223> a, c, t, or g
<220>
<221> modified_base
<222> (32)..(32)
<223> a, c, t, or g
<400> 1712
cagvvsvvsm rsrvcvnsgc agctdhcvvs rnsgtcvmsa ca 42
<210> 1713
<211> 33
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
oligonucleotide"
<400> 1713
aactwcrvsv asmvsvhsdd tgtgswstks act 33
<210> 1714
<211> 30
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
oligonucleotide"
<400> 1714
ttgttgaaca tcaccacgtg acgcacgttc 30
<210> 1715
<211> 30
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
oligonucleotide"
<400> 1715
tccccgtggt tctactacat aatgtggccg 30
<210> 1716
<211> 30
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
oligonucleotide"
<400> 1716
ttccacactc cgttttggat aatgttgaac 30
<210> 1717
<211> 30
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
oligonucleotide"
<400> 1717
agggacatcc ccagctccat gctgtggtcg 30
<210> 1718
<211> 30
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
oligonucleotide"
<400> 1718
agggacaacc cctccgactc gccctaatcc 30
<210> 1719
<211> 30
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
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<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
oligonucleotide"
<400> 1719
tcctagtaga agacaccctc tcactgcccg 30
<210> 1720
<211> 30
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
oligonucleotide"
<400> 1720
agtaccatgt acacccactc tcccagtgcc 30
<210> 1721
<211> 30
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
oligonucleotide"
<400> 1721
atatggacgt tcatgctgat caccataccg 30
<210> 1722
<211> 30
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
oligonucleotide"
<400> 1722
agcaggagct ccttggcctc agcgtgcgag 30
<210> 1723
<211> 30
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
oligonucleotide"
<400> 1723
acaagcagct tcactatgac aaccactgac 30
<210> 1724
<211> 284
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
polynucleotide"
<220>
<221> modified_base
<222> (59)..(59)
<223> a, c, t, or g
<220>
<221> modified_base
<222> (244)..(244)
<223> a, c, t, or g
<400> 1724
cagcctagga actggcttcc tggaccctgt taccgccagc agagagtctc aamammavns 60
rvcsrsaaca acaacagtra sttctcctgg mmaggagcta ccaagtacca cctcaatggc 120
agagactctc tggtgaatcc cggaccagct atggcaagcc acrrggacrr crmsrrsars 180
ttttttcctc agagcggggt tctcatcttt gggaagsaar rcrscrvsrv arvcratryc 240
gmsnhcrvmv rsgtcatgat tacagacgaa gaggagatct ggac 284
<210> 1725
<211> 34
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
oligonucleotide"
<400> 1725
tgggacaatg gcggtcgtct ctcagagttk tkkt 34
<210> 1726
<211> 35
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
oligonucleotide"
<400> 1726
agaggacckk tcctcgatgg ttcatggtgg agtta 35
<210> 1727
<211> 31
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
oligonucleotide"
<400> 1727
ccacttaggg cctggtcgat accgttcggt g 31
<210> 1728
<211> 32
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
oligonucleotide"
<400> 1728
tctcgcccca agagtagaaa cccttcstty yg 32
<210> 1729
<211> 735
<212> PRT
<213> Adeno-associated virus 2
<400> 1729
Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Thr Leu Ser
1 5 10 15
Glu Gly Ile Arg Gln Trp Trp Lys Leu Lys Pro Gly Pro Pro Pro Pro
20 25 30
Lys Pro Ala Glu Arg His Lys Asp Asp Ser Arg Gly Leu Val Leu Pro
35 40 45
Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Phe Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro
50 55 60
Val Asn Glu Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp
65 70 75 80
Arg Gln Leu Asp Ser Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala
85 90 95
Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Lys Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly
100 105 110
Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro
115 120 125
Leu Gly Leu Val Glu Glu Pro Val Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg
130 135 140
Pro Val Glu His Ser Pro Val Glu Pro Asp Ser Ser Ser Gly Thr Gly
145 150 155 160
Lys Ala Gly Gln Gln Pro Ala Arg Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr
165 170 175
Gly Asp Ala Asp Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Leu Gly Gln Pro Pro
180 185 190
Ala Ala Pro Ser Gly Leu Gly Thr Asn Thr Met Ala Thr Gly Ser Gly
195 200 205
Ala Pro Met Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ser
210 215 220
Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Ile
225 230 235 240
Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu
245 250 255
Tyr Lys Gln Ile Ser Ser Gln Ser Gly Ala Ser Asn Asp Asn His Tyr
260 265 270
Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His
275 280 285
Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp
290 295 300
Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val
305 310 315 320
Lys Glu Val Thr Gln Asn Asp Gly Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu
325 330 335
Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Ser Glu Tyr Gln Leu Pro Tyr
340 345 350
Val Leu Gly Ser Ala His Gln Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp
355 360 365
Val Phe Met Val Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asn Gly Ser
370 375 380
Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser
385 390 395 400
Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Thr Phe Ser Tyr Thr Phe Glu
405 410 415
Asp Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg
420 425 430
Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Arg Thr
435 440 445
Asn Thr Pro Ser Gly Thr Thr Thr Gln Ser Arg Leu Gln Phe Ser Gln
450 455 460
Ala Gly Ala Ser Asp Ile Arg Asp Gln Ser Arg Asn Trp Leu Pro Gly
465 470 475 480
Pro Cys Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Lys Thr Ser Ala Asp Asn Asn
485 490 495
Asn Ser Glu Tyr Ser Trp Thr Gly Ala Thr Lys Tyr His Leu Asn Gly
500 505 510
Arg Asp Ser Leu Val Asn Pro Gly Pro Ala Met Ala Ser His Lys Asp
515 520 525
Asp Glu Glu Lys Phe Phe Pro Gln Ser Gly Val Leu Ile Phe Gly Lys
530 535 540
Gln Gly Ser Glu Lys Thr Asn Val Asp Ile Glu Lys Val Met Ile Thr
545 550 555 560
Asp Glu Glu Glu Ile Arg Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu Gln Tyr
565 570 575
Gly Ser Val Ser Thr Asn Leu Gln Arg Gly Asn Arg Gln Ala Ala Thr
580 585 590
Ala Asp Val Asn Thr Gln Gly Val Leu Pro Gly Met Val Trp Gln Asp
595 600 605
Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro His Thr
610 615 620
Asp Gly His Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys
625 630 635 640
His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala Asn
645 650 655
Pro Ser Thr Thr Phe Ser Ala Ala Lys Phe Ala Ser Phe Ile Thr Gln
660 665 670
Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys
675 680 685
Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr
690 695 700
Asn Lys Ser Val Asn Val Asp Phe Thr Val Asp Thr Asn Gly Val Tyr
705 710 715 720
Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu
725 730 735
<210> 1730
<211> 736
<212> PRT
<213> Adeno-associated virus 9
<400> 1730
Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser
1 5 10 15
Glu Gly Ile Arg Glu Trp Trp Ala Leu Lys Pro Gly Ala Pro Gln Pro
20 25 30
Lys Ala Asn Gln Gln His Gln Asp Asn Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro
35 40 45
Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro
50 55 60
Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp
65 70 75 80
Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala
85 90 95
Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Lys Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly
100 105 110
Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Leu Leu Glu Pro
115 120 125
Leu Gly Leu Val Glu Glu Ala Ala Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg
130 135 140
Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly
145 150 155 160
Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr
165 170 175
Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro
180 185 190
Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly
195 200 205
Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser
210 215 220
Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile
225 230 235 240
Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu
245 250 255
Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn
260 265 270
Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg
275 280 285
Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn
290 295 300
Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile
305 310 315 320
Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn
325 330 335
Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu
340 345 350
Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro
355 360 365
Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp
370 375 380
Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe
385 390 395 400
Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu
405 410 415
Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu
420 425 430
Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser
435 440 445
Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser
450 455 460
Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro
465 470 475 480
Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn
485 490 495
Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn
500 505 510
Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro Ala Met Ala Ser His Lys
515 520 525
Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly
530 535 540
Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp Ala Asp Lys Val Met Ile
545 550 555 560
Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser
565 570 575
Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln
580 585 590
Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu Pro Gly Met Val Trp Gln
595 600 605
Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro His
610 615 620
Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe Gly Met
625 630 635 640
Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala
645 650 655
Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr
660 665 670
Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln
675 680 685
Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn
690 695 700
Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala Val Asn Thr Glu Gly Val
705 710 715 720
Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu
725 730 735
<210> 1731
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
peptide"
<400> 1731
Gly Ser Thr Pro Pro Pro Met
1 5
<210> 1732
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
peptide"
<400> 1732
Gly Glu Thr Arg Ala Pro Leu
1 5
<210> 1733
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
peptide"
<400> 1733
Ser Pro Ala Lys Phe Ala
1 5
<210> 1734
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic
peptide"
<400> 1734
Asn Lys Asp Lys Leu Asn
1 5
Claims (51)
- 아데노-연관 바이러스 (AAV)2 캡시드 및 벡터 게놈을 포함하는 AAV 입자를 포함하는 제약 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 제약 조성물을 대상체에게 투여하는 방법이며, 여기서 벡터 게놈은 서열식별번호: 979에 대해 적어도 97% 동일성을 갖는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 것인 방법.
- 제1항에 있어서, 벡터 게놈이 서열식별번호: 979를 포함하는 것인 방법.
- 제1항에 있어서, 벡터 게놈이 서열식별번호: 979로 이루어진 것인 방법.
- 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 제약 조성물이 대상체의 적어도 1개의 피각 내로 후방 외과적 주입에 의해 대상체에게 투여되며; 여기서 후방 투여로부터의 평균 총 피각 커버리지는 적어도 50%인 방법.
- 제4항에 있어서, 제약 조성물의 후방 투여가 단일 절차 동안 대상체의 우측 피각 및 좌측 피각 둘 다에 대해 양측인 방법.
- 제5항에 있어서, 후방 투여로부터의 평균 총 피각 커버리지가 50-65%인 방법.
- 제5항에 있어서, 후방 투여로부터의 평균 총 피각 커버리지가 50-60%인 방법.
- 제5항에 있어서, 후방 투여로부터의 평균 총 피각 커버리지가 55-65%인 방법.
- 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 수술 시간이 7-10시간인 방법.
- 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 주입 시간이 2.5-4.5시간인 방법.
- 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 제약 조성물이 대상체의 적어도 1개의 피각 내로 경전두 외과적 주입에 의해 대상체에게 투여되며; 여기서 후방 투여로부터의 평균 총 피각 커버리지는 30-50%인 방법.
- 제11항에 있어서, 제약 조성물의 경전두 투여가 단일 절차 동안 대상체의 우측 피각 및 좌측 피각 둘 다에 대해 양측인 방법.
- 제12항에 있어서, 경전두 투여로부터의 평균 총 피각 커버리지가 35-50%인 방법.
- 제12항에 있어서, 경전두 투여로부터의 평균 총 피각 커버리지가 40-50%인 방법.
- 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, 제약 조성물이 2.0 x 1012개 vg/ml 내지 3.0 x 1012개 vg/ml의 AAV 농도를 포함하는 것인 방법.
- 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, 제약 조성물이 2.4 x 1012개 vg/ml 내지 2.8 x 1012개 vg/ml의 AAV 농도를 포함하는 것인 방법.
- 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, 제약 조성물이 약 2.6 x 1012개 vg/ml의 AAV 농도를 포함하는 것인 방법.
- 제1항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, 제약 조성물이 피각당 최대 1800 μL의 부피로 투여되는 것인 방법.
- 제1항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, 제약 조성물이 피각당 최대 1500 μL의 부피로 투여되는 것인 방법.
- 제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 투여로부터의 총 바이러스 투여량이 2.0 x 1012개 vg/ml 내지 9.4 x 1012개 vg/ml인 방법.
- 제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 투여로부터의 총 바이러스 투여량이 3.5 x 1012개 vg/ml 내지 8.0 x 1012개 vg/ml인 방법.
- 제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 제약 조성물이 염화나트륨, 인산나트륨 및 플루론산 F-68을 포함하는 제제이고, 여기서 제제가 pH 7.0-7.5를 갖는 것인 방법.
- 제22항에 있어서, 제제가 150-200 mM 염화나트륨, 8-12 mM 인산나트륨 및 0.001-0.01% w/v 플루론산 F-68을 포함하며, pH 7.2-7.4인 방법.
- 제22항에 있어서, 제제가 180 mM 염화나트륨, 10 mM 인산나트륨 및 0.001% w/v 플루론산 F-68을 포함하며, pH 7.3인 방법.
- 제1항 내지 제24항 중 어느 한 항의 방법에 따라 제약 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 신경계 질환을 치료하는 방법.
- 제25항에 있어서, 신경계 질환이 파킨슨병인 방법.
- 제25항 또는 제26항에 있어서, 제약 조성물의 투여가 치료상 유효한 결과를 생성하는 것인 방법.
- 제27항에 있어서, 치료상 유효한 결과가 투여 2-7개월 후 PET 18F-도파 분석에 의해 측정 시, 50% 초과의 기준선 대비 AADC 효소 활성의 증가를 포함하는 것인 방법.
- 제28항에 있어서, 기준선 대비 AADC 효소 활성의 증가가 50%-85%인 방법.
- 제28항에 있어서, 기준선 대비 AADC 효소 활성의 증가가 60%-85%인 방법.
- 제28항에 있어서, 기준선 대비 AADC 효소 활성의 증가가 70%-85%인 방법.
- 제27항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서, 치료상 유효한 결과가 투여 6개월 후에 측정 시, 최대 20%의 기준선 대비 "온" 의약 상태에서의 감소된 UPDRS III 스코어를 포함하는 것인 방법.
- 제32항에 있어서, 기준선 대비 "온" 의약 상태에서의 UPDRS III 스코어의 감소가 6개월에 15%-20%인 방법.
- 제27항 내지 제33항 중 어느 한 항에 있어서, 치료상 유효한 결과가 투여 12개월 후에 측정 시, 최대 30%의 기준선 대비 "온" 의약 상태에서의 감소된 UPDRS III 스코어를 포함하는 것인 방법.
- 제34항에 있어서, 기준선 대비 "온" 의약 상태에서의 UPDRS III 스코어의 감소가 12개월에 20%-30%인 방법.
- 제34항 또는 제35항에 있어서, 환자가 10 초과의 기준선 UPDRS III "온" 스코어를 갖는 것인 방법.
- 제34항 또는 제35항에 있어서, 환자가 10 내지 14의 기준선 UPDRS III "온" 스코어를 갖는 것인 방법.
- 제27항 내지 제37항 중 어느 한 항에 있어서, 치료상 유효한 결과가 투여 6개월 후에 측정 시, 최대 26%의 기준선 대비 "오프" 의약 상태에서의 감소된 UPDRS III 스코어를 포함하는 것인 방법.
- 제38항에 있어서, 기준선 대비 "오프" 의약 상태에서의 UPDRS III 스코어의 감소가 6개월에 20%-26%인 방법.
- 제27항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, 치료상 유효한 결과가 투여 12개월 후에 측정 시, 최대 33%의 기준선 대비 "오프" 의약 상태에서의 감소된 UPDRS III 스코어를 포함하는 것인 방법.
- 제40항에 있어서, 기준선 대비 "오프" 의약 상태에서의 UPDRS III 스코어의 감소가 12개월에 25%-33%인 방법.
- 제40항 또는 제41항에 있어서, 환자가 30 초과의 기준선 UPDRS III "오프" 스코어를 갖는 것인 방법.
- 제40항 또는 제41항에 있어서, 환자가 30 내지 36.5의 기준선 UPDRS III "오프" 스코어를 갖는 것인 방법.
- 제27항 내지 제43항 중 어느 한 항에 있어서, 치료상 유효한 결과가 6개월에 하우저 운동 일지에 의해 측정 시, 기준선 대비 적어도 3.0시간의 문제되는 이상운동증이 없는 일지 온-시간의 증가를 포함하는 것인 방법.
- 제44항에 있어서, 기준선 대비 문제되는 이상운동증이 없는 일지 온-시간의 증가가 6개월에 3.0시간 내지 3.9시간인 방법.
- 제27항 내지 제45항 중 어느 한 항에 있어서, 치료상 유효한 결과가 12개월에 하우저 운동 일지에 의해 측정 시, 기준선 대비 적어도 2.5시간의 문제되는 이상운동증이 없는 일지 온-시간의 증가를 포함하는 것인 방법.
- 제46항에 있어서, 기준선 대비 문제되는 이상운동증이 없는 일지 온-시간의 증가가 12개월에 2.5시간 내지 3.0시간인 방법.
- 제27항 내지 제47항 중 어느 한 항에 있어서, 치료상 유효한 결과가 6개월에 하우저 운동 일지에 의해 측정 시, 기준선 대비 적어도 3.0시간의 일지 오프-시간의 감소를 포함하는 것인 방법.
- 제48항에 있어서, 기준선 대비 일지 오프-시간의 감소가 6개월에 3.0시간 내지 3.9시간인 방법.
- 제27항 내지 제49항 중 어느 한 항에 있어서, 치료상 유효한 결과가 12개월에 하우저 운동 일지에 의해 측정 시, 기준선 대비 적어도 2.5시간의 일지 오프-시간의 감소를 포함하는 것인 방법.
- 제50항에 있어서, 기준선 대비 일지 오프-시간의 감소가 12개월에 2.5시간 내지 3.0시간인 방법.
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