KR20190136319A - 다기능 리간드를 가지는 양자점 비드, 및 이를 이용한 타겟 항원 검출 방법 및 바이오 진단 장치 - Google Patents

다기능 리간드를 가지는 양자점 비드, 및 이를 이용한 타겟 항원 검출 방법 및 바이오 진단 장치 Download PDF

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Abstract

본 발명은 일측면에 있어서, 제1접합 물질을 가지는 다기능 리간드, 및 제2항체를 포함하는 양자점 비드; 및 제2접합 물질을 가지는 양자점을 다중 결합시키는 것을 포함하는 생체 시료 내의 타겟 항원에 대한 면역크로마토그래피 검출 방법에 관한 것이다. 또한 본 발명은 별도의 세척단계 없이 검출 강도를 현저하게 증폭하고 검출 민감도를 현저하게 개선하는 효과를 나타내어, 실제 제품에서도 매우 우수하게 생체 시료 내의 생리물질을 검출 및 진단할 수 있게 하고 가격 경쟁력이 우수한 제품을 제공할 수 있는 효과를 나타낸다.

Description

다기능 리간드를 가지는 양자점 비드, 및 이를 이용한 타겟 항원 검출 방법 및 바이오 진단 장치 {METHOD FOR DETECTING TARGENT ANTIGEN AND BIOLOGICAL DIAGNOSIS DEVICE BY USING QUANTOM-DOT AND QUANTOM-DOT BEAD COMPRISING MULTIFUNCTIONAL LIGAND}
본 발명은 다기능 리간드를 가지는 양자점 비드, 및 이를 이용한 타겟 항원 검출 방법 및 바이오 진단 장치에 관한 것이다.
현대사회에 들어 의료의 중심이 치료에서 진단으로, 중앙 집중된 병원 진단에서 현장 및 개인진단으로 트렌드가 변하면서 그 어느 때보다 간편하고, 현장에서 직접 진단할 수 있으며, 다양한 종류의 질병을 측정 할 수 있는 진단장치가 요구되고 있다. 이를 구현하기 위해서 가장 필요한 3대 요소는 진단 장치의 고 민감도, 가격, 그리고 다중 진단 여부를 들 수 있는데 이를 충족하기 위하여 다양한 진단 플랫폼들이 연구되고 있다.
현재 체외진단에서 가장 많은 비중을 차지하는 방법은 단백질 기반 어세이인 면역분석기술이나 핵산을 기반한 분자진단기술이며, 이들이 점차 그 시장을 잠식하고 있는 실정이다. 그 이유는 타겟 물질을 증폭 할 수 있어 민감도가 높고, 장비를 활용하여 다중 진단이 가능하기 때문이다. 그럼에도 불구하고 아직 현장진단에 적용하기에는 고가의 장비와 시약, 긴 반응 시간, 전문 오퍼레이터 필요 등의 문제점을 갖고 있는 실정이다.
따라서 현장에서 바로 적용하기에는 두 가지 기술 모두 한계를 가지고 있는데, 면역분석기술의 일환인 측면유동면역분석법은 간편하고, 낮은 가격으로 현장진단이 가능하나 민감도가 낮아 활용 가능한 타겟에 제한이 있고, 후자인 분자진단법은 민감도는 높으나 복잡한 장비와 전문인력의 투입이 필요해 대형 실험실에서만 가능한 방법이다.
그러므로 측면유동면역분석의 플랫폼을 사용하면서, 민감도는 분자진단 영역까지 높일 수 있으며 정량적 평가가 가능한 진단 플랫폼이 필요한 실정이다.
지금까지 측면유동면역분석법에서 일반적으로 사용되는 형광체는 금 나노입자이며, 이는 생리물질과 면역복합체를 형성하고 고유의 플라즈몬 현상으로 붉게 발색된다. 이러한 특성에 의해 실제 제품에서 간편하게 생리물질의 존재여부를 육안으로 검출 및 진단할 수 있는 장점을 가진다.
그러나 금 나노입자를 사용하는 경우 육안에 의한 평가에 의존하므로 민감도가 우수하지 않고, 분석 감도가 떨어지므로 주로 혈액 등에 과량으로 존재하는 생리물질에 적용된다. 따라서 혈액 등에 매우 적은 농도로 존재하는 생리물질을 검출 또는 측정할 수 없는 어려움이 있어 질병의 초기 진단에 한계가 있다. 또한 생리물질의 정량적인 분석이 어려운 문제점이 있다.
이에 낮은 농도의 생리물질도 검출할 수 있도록 측면유동면역분석법에서 사용되는 형광체의 검출 강도를 증폭시키는 노력들이 계속되고 있다. 그 중 하나로 국제공개공보 WO 2008-071345에서는 콜로이드성 금 나노입자에 상보적인 뉴클레오티드를 사용하여 금 나노입자들을 적층시켜 그 형광강도를 증폭시키고 있다.
그러나 위 기술은 서로 상보적인 뉴클레오티드를 가지는 금 나노입자들이 항원과 같은 생리물질과 결합하기 이전에 서로 결합할 수 있으며, 이들을 동시에 첨가하는 경우 금 나노입자가 서로 뭉치는 현상이 발생한다. 이 뭉침 현상은 측면유동면역분석법에서 생체 시료의 흐름을 방해하게 되어 타겟 생리물질의 검출을 어렵게 한다. 이를 방지하기 위해서는 서로 다른 뉴클레오티드를 가지는 금 나노입자를 주입하기 이전에 기존에 존재하는 나노입자를 제거하는 세척단계가 반드시 필요하게 된다. 따라서 실제 측면유동센서에 적용하기 위해서는 새로운 금 나노입자를 센서에 첨가하기 전에 세척단계를 거쳐야 하므로, 위 기술은 실제 센서에서 적용되기에는 한계를 가진다.
이에 금 나노 입자보다 효율이 높고, 다중진단이 가능한 형광체로 양자점이 가장 강력한 후보 물질로 대두되어 많은 연구가 이뤄지고 있다.
최근 Cheng et al(Anal Bioanal Chem, 409(1):133-141, 25 Oct 2016), Savin et al(Talanta. 2018 Feb 1;178:910-915), 및 Wu et al(Analytica Chimica Acta, Volume 1008, 30 May 2018, Pages 1-7)등의 논문처럼 광 효율을 높이기 위해서 양자점을 기존의 금 나노입자나 다른 형광체 대신 적용하여 효율을 높이는 연구가 진행 중이며, 제우스에서 출원한 대한민국 특허출원 제 10-2018-0046848호에서는 단일 형광체를 사용하지 않고 이를 복합체 형태로 만들어 신호를 증폭하거나, 형광체의 적층을 통해 검출 강도를 증폭시켜 더 높은 민감도를 달성하려는 연구들이 진행되고 있다.
또한 Zhang et al(Chemical Papers, 70 (8), 1031-1038, 2016)처럼 형광체의 적층을 비드복합체를 통한 광증폭이나, Park et al(ACSNANO, Vol7, No 10, 9416~9427, 2013)의 문헌처럼 양자점을 100 주기(cycle) 반응시켜 다층 구조(multilayer)를 형성하게 하여 민감도를 높이는 다양한 기술들이 개발되고 있다.
그러나 비드 복합체는 비드의 표면적을 넓히는 한계가 존재하고, 형광체의 적층을 통한 민감도 증가는 각 단계별로 별도의 세척 단계가 필요하여 현장진단 장비에는 적용이 어려운 실정이다.
그러나 측면유동분석법으로 분자진단 수준의 민감도를 나타내기 위해서는 형광체의 적층을 통한 신호증강이 반드시 필요하며, 이 기술구현이 현장진단 장치의 성공에 중요한 바로미터가 될 것이다.
이에 본 발명자는 형광강도를 높일 수 있는 양자점 및 양자점 비드의 적층 방법을 이용하면서도 별도의 세척단계 없이 측면유동면역분석법으로 검출 형광 강도를 안정하고 매우 우수하게 증폭시킬 수 있는 기술로서, 다기능 리간드와 양자점 비드를 이용한 검출 방법을 제공한다.
US 2010-0068727 A1 WO 2008-071345 A1
Cheng et al, Anal Bioanal Chem, 409(1):133-141, 25 Oct 2016 Savin et al, Talanta. 2018 Feb 1;178:910-915 Wu et al., Analytica Chimica Acta, Volume 1008, 30 May 2018, Pages 1-7 Zhang et al, Chemical Papers, 70 (8), 1031-1038, 2016 Park et al., ACSNANO, Vol7, No 10, 9416~9427, 2013
본 발명의 목적은 형광 신호의 증폭을 위해 순차적 적층을 이용하지 않고, 모체인 양자점 비드의 다기능 리간드에 상보적 결합이 가능한 양자점이 동시에 다중 결합함으로써 별도의 세척단계 없이, 100회 이상의 적층 사이클 효과를 낼 수 있으며, 그로 인해 간편한 면역크로마토그래피가 적용되고 저가의 진단 플랫폼을 제공하며 민감도는 분자진단 수준의 민감도가 나올 수 있는 광증폭 시스템을 적용한 검출 소재와 이를 이용한 진단방법 또는 측면유동면역 검출장치를 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 일 측면에 있어서 다량의 제1접합 물질을 가지는 다기능 리간드, 및 제2항체를 포함하는 양자점 비드; 및 제2접합 물질을 가지는 양자점을 다중 결합시키는 것을 포함하는 생체 시료 내의 타겟 항원에 대한 면역크로마토그래피 검출방법을 제공한다.
또한 본 발명의 일 측면에 있어서, 이러한 면역크로마토그래피 검출방법은 타겟 항원과 관련된 질병, 질환, 또는 상태의 진단 방법, 생리물질을 검출하기 위한 측면유동면역 검출장치, 및 바이오 진단 키트에 사용될 수 있다.
본 발명의 일 측면에 따른 면역크로마토그래피 검출 방법은 다기능 리간드를 가지는 양자점 비드와 그 리간드에 결합할 수 있는 양자점을 사용하여 별도의 항원 손실 없이, 간단한 방법으로 매우 우수하게 검출 강도를 증폭하고 검출 민감도를 현저하게 개선하는 효과를 나타낸다.
또한 본 발명의 일 측면에 따른 면역크로마토그래피 검출방법은 신호증강을 위한 형광체의 계속된 투입과 별도의 세척단계 없이 검출 강도를 현저하게 증폭하는 효과를 나타내어, 실제 제품화 시 생체 시료 내의 생리물질을 신속하고 간단하게 검출 및 진단할 수 있어서 가격 경쟁력 면에서도 유리하다.
도 1는 본 발명의 일 측면에 따른 면역크로마토그래피 검출 방법에서, 다기능 리간드를 가지는 양자점 비드와 그 리간드에 결합할 수 있는 양자점이 서로 결합하여 검출 강도가 증폭되는 상태를 보여주는 모식도이다. 도 1a는 양자점 비드 표면에 항원에 특이적인 제2항체가 존재하는 경우의 모식도이며, 도 1b는 양자점 비드에 존재하는 다기능 리간드 말단에 항체가 결합된 경우의 모식도이다.
도 2는 본 발명의 일 측면에 따른 면역크로마토그래피 검출 방법에서 사용되는 양자점과 양자점 비드의 제타전위를 나타내는 그래프이다.
도 3는 본 발명의 일 측면에 따른 면역크로마토그래피 검출 방법에서 사용될 수 있는 양자점과 양자점 비드의 양자 효율을 나타낸 그래프이다.
도 4는 본 발명의 일 측면에 따른 면역크로마토그래피 검출 방법에서 사용되는 양자점의 투과전자현미경사진(도 4a)과 양자점 비드의 주사현미경사진(도 4b)을 나타낸 것이다.
도 5은 본 발명의 일 측면에 따른 면역크로마토그래피 검출 방법에서 사용되는 양자점 비드의 입도 분석 결과를 나타낸 그래프이다.
도 6은 본 발명의 실험예에서 비교예인 양자점을 단독으로 사용한 경우와, 본원발명의 실시예를 대신하는 양자점 비드 다중 복합체를 사용했을 때 형광강도를 나타낸 그래프이다.
본 발명의 일 측면에 있어서, "양자점"은 반도체 나노입자이며 양자고립효과에 의하여 입자의 크기에 따라 다른 빛을 발광하는 특성을 가지는 것을 의미한다. 이러한 양자점은 대표적 형광체인 로다민(fluorescent rhodamine) 등의 형광체 색소에 비해 약 20 배 정도 밝고, 포토블리칭(photo-bleaching)에 대하여 100 배 정도 안정하며, 3 배 정도 좁은 폭의 스팩트럼선(spectral line width)을 가질 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, "양자점 비드"는 많은 수의 양자점을 포함하는 입자로서 양자점에 비하여 적게는 100 배 정도 밝은 특성을 나타내고 양자점 비드를 구성하는 코어의 종류를 불문하고 다수개의 양자점을 포함하도록 제조된 입자를 모두 지칭하는 광범위한 개념이다.
본 발명의 일 측면에 있어서, "리간드"는 제1접합 물질과 결합할 수 있는 작용기 또는 결합 부위를 가지는 사슬 구조의 물질을 의미할 수 있으며, 다기능 리간드를 의미할 수 있다. 리간드는 제1접합 물질을 통해 형광 검출 강도를 증폭하기 위해 사용되는 것이므로, 이를 구성하는 물질의 종류에는 특별한 제한이 없으며, 제1접합 물질 또는 항체와 결합할 수 있는 작용기 또는 결합 부위를 가지는 것이면 본 발명의 방법에 사용될 수 있다. 리간드는 양자점 비드 또는 제2항체와 결합하는 부분인 제1영역, 리간드의 뼈대를 구성하는 제2영역, 및 제1접합 물질과 결합하는 부분인 제3영역으로 구성될 수 있다. 리간드는 작용기 또는 결합 부위를 통해 제1접합 물질과 공유 결합할 수 있으며, 리간드는 하나 이상의 제1접합 물질을 가지는 것일 수 있다. 여기서 작용기는 수산화기, 아민기, 티올기, 카르보닐기, 또는 카르복시기일 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니며, 제1접합 물질과의 결합을 제공할 수 있는 것이면 어느 것이든 해당될 수 있다. 이러한 리간드 상의 제1접합 물질과 양자점 상의 제2접합 물질이 서로 반응 또는 결합하여 검출 강도를 현저하게 증폭시킬 수 있다. 리간드 상의 제1접합 물질의 개수가 많을수록 양자점이 리간드에 많이 결합할 수 있으며, 이에 따라 검출 강도가 더 증폭될 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, "중합체"는 반복 단위인 단량체의 중합반응에 의해 생성된 화합물을 의미할 수 있으며, 통상의 기술자가 일반적으로 이해하는 범위의 개념을 의미한다.
본 발명의 일 측면에 있어서, "뉴클레오티드 사슬"은 뉴클레오티드로 이루어진 긴 중합체 사슬을 의미할 수 있으며, 통상의 기술자가 일반적으로 이해하는 범위의 개념을 의미한다. 뉴클레오티드에 존재하는 염기는 아데닌, 구아닌, 티민, 시토신, 우라실, 또는 이들의 변이체일 수 있으나 이에 제한되지는 않는다.
본 발명의 일 측면에 있어서, "펩티드 사슬"은 아미노산으로 이루어진 긴 중합체 사슬을 의미할 수 있으며 통상의 기술자가 일반적으로 이해하는 범위의 개념을 의미한다.
본 발명의 일 측면에 있어서, "제1접합 물질"과 "제2접합 물질"은 서로 결합할 수 있는 특성을 가지는 것을 의미할 수 있다. 이러한 물질은 상온에서 자연적으로 서로 결합하는 것일 수 있다. 예를 들어, 항원-항체, 서로 상보적인 뉴클레오티드 사슬, 압타머와 그의 표적물질, 아비딘 또는 스트렙트아비딘과 비오틴 같이 서로 특이적으로 결합하는 물질; 또는 수소 결합, 이황화 결합, 반데르발스 힘 등에 의하여 서로 결합할 수 있는 펩티드 쌍을 의미하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 다중 결합은 하나의 리간드 상에 다수의 양자점이 존재하도록 결합하는 것을 의미할 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, "항원" 또는 "타겟 항원"은 생체시료 내에 존재하는 생리물질이며 다양한 질병 또는 피험체의 신체 상태와 관련되어 검출하고자 하는 대상인 모든 물질을 포함하는 광범위한 개념을 의미한다. 예를 들어 본 발명의 일 측면에 있어서 항원은 일반적으로 지칭되는 생체시료 내에서 면역반응을 유발하는 물질로서 미생물, 바이러스 등을 모두 포괄하는 개념을 의미한다.
본 발명의 일 측면에 있어서, "생체 시료"는 예를 들어 소변, 혈액, 혈청, 혈장, 및 타액 등과 같이 항원이 존재할 수 있는 생리학적 환경을 가지는 시료들을 모두 포괄하는 개념이다.
본 발명의 일 측면에 있어서, "항체"는 항원에 대하여 특이적으로 면역반응을 일으키고 항원과 결합하여 이를 검출 및 진단할 수 있게 하는 분자를 포괄하는 광범위한 개념이다. 또한 "제1항체"와 "제2항체"는 동일한 항원의 서로 다른 에피토프를 인식하는 것으로서, 항원을 검출함에 있어서 서로 쌍으로 존재할 수 있는 분자를 포괄하는 광범위한 개념이다. 예를 들어 제1항체는 진단 장치의 멤브레인에 고정되어 생체시료 내에 존재하는 항원을 포획할 수 있으며, 제2항체는 검출가능한 표지를 가지는 것으로서 제1항체에 의해 포획된 항원에 다시 결합하여, 생체시료 내에 항원이 존재함을 검출 및 진단하게 할 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, "직경"은 링커, 양자점 또는 양자점 비드의 중심을 지나는 선분 중 가장 긴 것의 길이를 의미하는 것일 수 있고, 평균 직경은 중심을 지나는 선분들 중 10개의 평균을 의미하는 것일 수 있으며, 양자점의 경우 코어-안정층-쉘층까지의 크기를 의미하는 것이거나 또는 코어-안정층-쉘-수용성 리간드층까지의 크기를 의미하는 것일 수 있다.
이하에서는 본 발명에 대하여 상세히 설명한다.
본 발명은 일 측면에 있어서, 양자점 비드; 및 양자점을 다중 결합시키는 것을 포함하는 생체 시료 내의 타겟 항원에 대한 면역크로마토그래피 검출 방법에 관한 것일 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 양자점 비드는 제1접합 물질을 가지는 다기능 리간드, 및 제2항체를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 양자점은 제2접합 물질을 가질 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 제1접합 물질과 제2접합 물질은 서로 반응하여 결합하는 것일 수 있다. 본 발명의 일측면에 있어서, 제1항체와 제2항체는 각각 타겟 항원에 대해 특이적인 것일 수 있으며, 이들은 타겟 항원의 서로 다른 부위, 즉 서로 다른 에피토프에 특이적인 것일 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 제1접합 물질과 제2접합 물질은 각각 리간드와 양자점에 존재하여, 양자점이 리간드에 다수 결합할 수 있도록 한다. 본 발명은 양자점 비드가 가지는 리간드에 다수의 양자점이 결합하여, 항원의 형광 검출 신호를 현저하게 증폭하는 효과를 나타낸다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 제1항체는 멤브레인에 부착 또는 고정화 된 것이고, 생체 시료 내에 존재하는 항원과 반응하여 이를 포획할 수 있다. 제2항체는 제1항체에 포획된 항원을 검출하기 위해 사용되는 것으로서 제1항체가 항원과 결합되는 부위가 아닌 다른 부위에 특이적인 항체를 의미할 수 있다. 제2항체는 양자점 비드와 결합된 것으로서 검출 표지로서 양자점 비드를 가지는 것이고, 이에 따라 양자점 비드가 포획된 항원을 검출할 수 있도록 한다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 검출 방법은 (a) 생체 시료 내의 타겟 항원과 양자점 비드를 결합시키는 단계; 및 (b) 제1접합 물질과 제2접합 물질의 결합으로, 양자점 비드와 양자점을 다중 결합시키는 단계를 포함할 수 있다. 본 발명의 일 측면에 있어서, 검출 방법은 (b) 단계 이후에 (c) 자외선을 조사하여 형광을 측정하는 단계를 더 포함할 수 있다.
본 발명의 일측면에 있어서, 리간드는 양자점 비드 또는 제2항체와 결합하는 부분인 제1영역, 리간드의 뼈대를 구성하는 제2영역, 및 제1접합 물질과 결합하는 부분인 제3영역으로 구성될 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 제1접합 물질과 리간드는 서로 공유 결합되는 것일 수 있다. 본 발명의 일 측면에 있어서, 제1접합 물질과 리간드 간의 공유 결합은 에스테르 결합, 에폭시 결합, 에테르 결합, 이미드 결합, 이민 결합, 및 아미드 결합으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상일 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 리간드는 중합체; 뉴클레오티드 사슬; 및 펩티드 사슬로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상일 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 리간드는 수산화기, 아민기, 티올기, 카르보닐기, 카르복시기, 에폭시기, 에틸렌기, 아세틸렌기, 아미드기, 포스포네이트기(phosphonate group), 포스페이트기(phosphate group), 설포네이트기(sulfonate group), 설페이트기(sulfate group), 니트레이트기(nitrate group), 및 암모늄기(ammonium group)로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기를 가지는 것일 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 리간드의 제1영역은 수산화기, 아민기, 티올기, 카르복시기, 아미드기, 포스포네이트기, 포스페이트기, 설포네이트기, 및 설페이트기로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 리간드의 제3영역은 수산화기, 아민기, 티올기, 카르복시기, 설포네이트기, 니트레이트기, 포스포네이트기, 및 암모늄기로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 중합체는 폴리에틸렌이민, 폴리에틸렌글리콜, 폴리아크릴아미드, 폴리포스파젠, 폴리릭타이드, 폴리릭티드-코-글리콜라이드, 폴리카프로락톤, 폴리안하이드라이드, 폴리말릭산 및 이의 유도체, 폴리알킬시아노아크릴레이트, 폴리하이드로오시부틸레이트, 폴리카르보네이트, 폴리올소에스테르, 폴리에틸렌글리콜, 폴리-L-라이신, 폴리글리콜라이드, 폴리메틸메타아크릴레이트, 폴리비닐피롤리돈, 폴리아크릴아마이드, 폴리(비닐벤질 트리알킬 암모니움), 폴리(4-비닐-N-알킬-피리디늄), 폴리(아크릴로일-옥시알킬-트리알킬 암모니움), 폴리(아크릴아미도알킬-트리알킬 암모니움), 폴리(디알릴디메틸-암모니움), 폴리(스티렌술폰산), 폴리(비닐 술폰산), 폴리(이타콘산), 말레산-디알릴아민 공중합체, 및 고분지형 중합체(hyperbranched polymer)로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상일 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 뉴클레오티드 사슬은 10 개 내지 500 개의 뉴클레오티드로 이루어진 것일 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다. 구체적으로 본 발명의 일 측면에 있어서, 뉴클레오티드 사슬은 그 길이를 10 nm 내지 100 nm 범위로 하는 개수만큼의 뉴클레오티드로 이루어질 수 있으며, 예를 들어 10개 내지 1,000개의 뉴클레오티드로 이루어진 것일 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 펩티드 사슬은 10개 내지 500 개의 아미노산으로 이루어진 것일 수 있다. 구체적으로 본 발명의 일 측면에 있어서, 펩티드 사슬은 그 길이를 10 nm 내지 100 nm 범위로 하는 개수만큼의 아미노산으로 이루어질 수 있으며, 예를 들어 10개 내지 1,000개의 아미노산으로 이루어진 것일 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 리간드는 100 MW(g/mol)내지 1,000,000 MW 범위의 분자량을 가지는 것일 수 있다. 여기서 리간드의 분자량은 위 범위 내에 존재하는 모든 정수 값의 범위에 해당할 수 있다. 본 발명의 일 측면에 있어서, 리간드의 길이는 양자점 비드 평균 직경의 2배 내지 10배 일 수 있다. 구체적으로 본 발명의 일 측면에 있어서, 리간드의 분자량(MW)은 100 MW 이상, 500 MW 이상, 1,000 MW 이상, 5,000 MW 이상, 10,000 MW 이상, 30,000 MW 이상, 50,000 MW 이상, 70,000 MW 이상, 100,000 MW 이상, 300,000 MW 이상, 500,000 MW 이상, 또는 700,000 MW 이상이거나 1,000,000 MW 이하, 800,000 MW 이하, 600,000 MW 이하, 400,000 MW 이하, 200,000 MW 이하, 100,000 MW 이하, 80,000 MW 이하, 60,000 MW 이하, 40,000 MW 이하, 20,000 MW 이하, 10,000 MW 이하, 8,000 MW 이하, 4,000 MW 이하, 2,000 MW 이하, 800 MW 이하, 400 MW 이하, 또는 200 MW 이하일 수 있다. 리간드 길이가 1 μm를 초과하는 경우 측면유동면역 검출장치에서 장치의 멤브레인을 통과하기 어려워 문제가 될 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 제1접합 물질과 제2접합 물질은 타겟 항원이 아닌 항원-항체 쌍, 서로 상보적인 뉴클레오티드 사슬 쌍, 압타머와 표적 물질 쌍, 서로 결합하는 펩티드 쌍, 및 아비딘 또는 스트렙트아비딘과 비오틴 쌍으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상일 수 있다. 본 발명의 일 측면에 있어서, 제1접합 물질과 제2접합 물질은 아비딘 또는 스트렙트아비딘과 비오틴 쌍일 수 있다. 본 발명의 일 측면에 있어서, 제1접합 물질은 비오틴이고 제2접합 물질은 아비딘 또는 스트렙트아비딘일 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 펩티드 쌍은 수소결합, 이황화 결합, 또는 반데르발스 힘에 의해 서로 결합할 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 제2항체는 양자점 비드 표면에 존재하거나 또는 리간드와 결합하여 리간드 말단에 존재할 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 양자점은 코어-안정층-쉘-수용성 리간드층 구조를 가지는 것일 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 코어는 카드뮴(Cd) 및 셀레늄(Se) 중 하나 이상을 포함하고; 안정층은 카드뮴(Cd), 셀레늄(Se), 아연(Zn) 및 황(S) 중 하나 이상을 포함하고; 쉘은 카드뮴(Cd), 셀레늄(Se), 아연(Zn) 및 황(S) 중 하나 이상을 포함하는 것일 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 양자점은 12족-16족계 화합물, 13족-15족계 화합물 및 14족-16족계 화합물 중 하나 이상을 포함하는 것일 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 12족-16족계 화합물은 카드뮴설파이드(CdS), 카드뮴셀레나이드(CdSe), 카드뮴텔레나이드(CdTe), 징크설파이드(ZnS), 징크셀레나이드(ZnSe), 징크텔레나이드(ZnTe), 머큐리설파이드(HgS), 머큐리셀레나이드(HgSe), 머큐리텔레나이드(HgTe), 징크옥사이드(ZnO), 카드뮴옥사이드(CdO), 머큐리옥사이드(HgO), 카드뮴셀레늄설파이드(CdSeS), 카드뮴셀레늄텔레나이드(CdSeTe), 카드뮴설파이드텔레나이드(CdSTe), 카드뮴징크설파이드(CdZnS), 카드뮴징크셀레나이드(CdZnSe), 카드뮴설파이드셀레나이드(CdSSe), 카드뮴징크텔레나이드(CdZnTe), 카드뮴머큐리설파이드(CdHgS), 카드뮴머큐리셀레나이드(CdHgSe), 카드뮴머큐리텔레나이드(CdHgTe), 징크셀레늄설파이드(ZnSeS), 징크셀레늄텔레나이드(ZnSeTe), 징크설파이드텔레나이드(ZnSTe), 머큐리셀레늄설파이드(HgSeS), 머큐리셀레늄텔레나이드(HgSeTe), 머큐리설파이드텔레나이드(HgSTe), 머큐리징크설파이드(HgZnS), 머큐리징크셀레나이드(HgZnSe), 카드뮴징크옥사이드(CdZnO), 카드뮴머큐리옥사이드(CdHgO), 징크머큐리옥사이드(ZnHgO), 징크셀레늄옥사이드(ZnSeO), 징크텔레늄옥사이드(ZnTeO), 징크설파이드옥사이드(ZnSO), 카드뮴셀레늄옥사이드(CdSeO), 카드뮴텔레늄옥사이드(CdTeO), 카드뮴설파이드옥사이드(CdSO), 머큐리셀레늄옥사이드(HgSeO), 머큐리텔레늄옥사이드(HgTeO), 머큐리설파이드옥사이드(HgSO), 카드뮴징크셀레늄설파이드(CdZnSeS), 카드뮴징크셀레늄텔레나이드(CdZnSeTe), 카드뮴징크설파이드텔레나이드(CdZnSTe), 카드뮴머큐리셀레늄설파이드(CdHgSeS), 카드뮴머큐리셀레늄텔레나이드(CdHgSeTe), 카드뮴머큐리설파이드텔레나이드(CdHgSTe), 머큐리징크셀레늄설파이드(HgZnSeS), 머큐리징크셀레늄텔레나이드(HgZnSeTe), 머큐리징크설파이드텔레나이드(HgZnSTe), 카드뮴징크셀레늄옥사이드(CdZnSeO), 카드뮴징크텔레늄옥사이드(CdZnTeO), 카드뮴징크설파이드옥사이드(CdZnSO), 카드뮴머큐리셀레늄옥사이드(CdHgSeO), 카드뮴머큐리텔레늄옥사이드(CdHgTeO), 카드뮴머큐리설파이드옥사이드(CdHgSO), 징크머큐리셀레늄옥사이드(ZnHgSeO), 징크머큐리텔레늄옥사이드(ZnHgTeO) 및 징크머큐리설파이드옥사이드(ZnHgSO) 중 하나 이상을 포함하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 13족-15족계 화합물은 갈륨포스포러스(GaP), 갈륨아세나이드(GaAs), 갈륨안티모니(GaSb), 갈륨나이트라이드(GaN), 알루미늄포스포러스(AlP), 알루미늄아세나이드(AlAs), 알루미늄안티모니(AlSb), 알루미늄나이트라이드(AlN), 인듐포스포러스(InP), 인듐아세나이드(InAs), 인듐안티모니(InSb), 인듐나이트라이드(InN), 갈륨포스포러스아세나이드(GaPAs), 갈륨포스포러스안티모니(GaPSb), 갈륨포스포러스나이트라이드(GaPN), 갈륨아세나이드나이트라이드(GaAsN), 갈륨안티모니나이트라이드(GaSbN), 알루미늄포스포러스아세나이드(AlPAs), 알루미늄포스포러스안티모니(AlPSb), 알루미늄포스포러스나이트라이드(AlPN), 알루미늄아세나이드나이트라이드(AlAsN), 알루미늄안티모니나이트라이드(AlSbN), 인듐포스포러스아세나이드(InPAs), 인듐포스포러스안티모니(InPSb), 인듐포스포러스나이트라이드(InPN), 인듐아세나이드나이트라이드(InAsN), 인듐안티모니나이트라이드(InSbN), 알루미늄갈륨포스포러스(AlGaP), 알루미늄갈륨아세나이드(AlGaAs), 알루미늄갈륨안티모니(AlGaSb), 알루미늄갈륨나이트라이드(AlGaN), 알루미늄아세나이드나이트라이드(AlAsN), 알루미늄안티모니나이트라이드(AlSbN), 인듐갈륨포스포러스(InGaP), 인듐갈륨아세나이드(InGaAs), 인듐갈륨안티모니(InGaSb), 인듐갈륨나이트라이드(InGaN), 인듐아세나이드나이트라이드(InAsN), 인듐안티모니나이트라이드(InSbN), 알루미늄인듐포스포러스(AlInP), 알루미늄인듐아세나이드(AlInAs), 알루미늄인듐안티모니(AlInSb), 알루미늄인듐나이트라이드(AlInN), 알루미늄아세나이드나이트라이드(AlAsN), 알루미늄안티모니나이트라이드(AlSbN), 알루미늄포스포러스나이트라이드(AlPN), 갈륨알루미늄포스포러스아세나이드(GaAlPAs), 갈륨알루미늄포스포러스안티모니(GaAlPSb), 갈륨인듐포스포러스아세나이드(GaInPAs), 갈륨인듐알루미늄아세나이드(GaInAlAs), 갈륨알루미늄포스포러스나이트라이드(GaAlPN), 륨알루미늄아세나이드나이트라이드(GaAlAsN), 갈륨알루미늄안티모니나이트라이드(GaAlSbN), 갈륨인듐포스포러스나이트라이드(GaInPN), 갈륨인듐아세나이드나이트라이드(GaInAsN), 갈륨인듐알루미늄나이트라이드(GaInAlN), 갈륨안티모니포스포러스나이트라이드(GaSbPN), 갈륨아세나이드포스포러스나이트라이드(GaAsPN), 갈륨아세나이드안티모니나이트라이드(GaAsSbN), 갈륨인듐포스포러스안티모니(GaInPSb), 갈륨인듐포스포러스나이트라이드(GaInPN), 갈륨인듐안티모니나이트라이드(GaInSbN), 갈륨포스포러스안티모니나이트라이드(GaPSbN), 인듐알루미늄포스포러스아세나이드(InAlPAs), 인듐알루미늄포스포러스나이트라이드(InAlPN), 인듐포스포러스아세나이드나이트라이드(InPAsN), 인듐알루미늄안티모니나이트라이드(InAlSbN), 인듐포스포러스안티모니나이트라이드(InPSbN), 인듐아세나이드안티모니나이트라이드(InAsSbN) 및 인듐알루미늄포스포러스안티모니(InAlPSb) 중 하나 이상을 포함하는 것일 수 있으나, 이제 제한되지는 않는다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 14족-16족계 화합물은 틴옥사이드(SnO), 틴설파이드(SnS), 틴셀레나이드(SnSe), 틴텔레나이드(SnTe), 리드설파이드(PbS), 리드셀레나이드(PbSe), 리드텔레나이드(PbTe), 저마늄옥사이드(GeO), 저마늄설파이드(GeS), 저마늄셀레나이드(GeSe), 저마늄텔레나이드(GeTe), 틴셀레늄설파이드(SnSeS), 틴셀레늄텔레나이드(SnSeTe), 틴설파이드텔레나이드(SnSTe), 리드셀레늄설파이드(PbSeS), 리드셀레늄텔레나이드(PbSeTe), 리드설파이드텔레나이드(PbSTe), 틴리드설파이드(SnPbS), 틴리드셀레나이드(SnPbSe), 틴리드텔레나이드(SnPbTe), 틴옥사이드설파이드(SnOS), 틴옥사이드셀레나이드(SnOSe), 틴옥사이드텔레나이드(SnOTe), 저마늄옥사이드설파이드(GeOS), 저마늄옥사이드셀레나이드(GeOSe), 저마늄옥사이드텔레나이드(GeOTe), 틴리드설파이드셀레나이드(SnPbSSe), 틴리드셀레늄텔레나이드(SnPbSeTe) 및 틴리드설파이드텔레나이드(SnPbSTe) 중 하나 이상을 포함하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 수용성 리간드 층에 존재하는 수용성 리간드는 실리카, PEG(polyethylene glycol), 폴리에틸렌이민(polyethylenimine, PEI), 머캡토 프로피온산(MPA), 시스테아민(cysteamine), 메르캡토 아세트산(mercapto-acetic acid), 머캡토 운데카놀(mercapto-undecanol), 2-머캡토 에탄올(2-mercapto-ethanol), 1-티오-글리세롤(1-thio glycerol), 데옥시리보뉴클레익 에시드 (DNA), 머캡토 아세트산(mercapto acetic acid), 머캡토 운데카노산(mercapto-undecanoic acid), 1-머캡토-6-페닐 헥산 (1-mercapto-6-phenyl-hexane), 1,16-디머캡토-헥사데칸(1,16-dimecapto-hexadecane), 18-머캡토-옥타데실아민(18-mercapto-octadecyl amine), 트리옥틸포스핀(tri-octyl phosphine), 6-머캡토-헥산(6-mercapto-hexane), 6-머캡토-헥사노익 산(6-mercapto-hexanoic acid), 16-머캡토-헥사데카노익 산(16-mercapto-hexadecanoic acid), 18-머캡토-옥타데실아민(18-mercapto-octadecyl amine), 6-머캡토-헥실아민(6-mercapto-hexyl amine) 또는 8-히드록시-옥틸티올(8-hydroxy-octylthiol), 1-싸이오-글리세롤(1-thio-glycerol), 머캡토 아세트산(mercapto-acetic acid), 머캡토운데카노산(mercapto-undecanoic acid), 하이드록사메이트(hydroxamate), 하이드록사믹 산의 유도체 에틸렌디아민(ethylene diaminie), 글루타티온(Glutathione), N-아세틸시스테인(N-acetylcystein), 티옥산, 티오프로닌(tiopronin), 머캡토숙신산(mercaptosuccinic acid), 디티오트레이톨(dithiothreitol), 디히드로리포산(dihydrolipoic acid), 및 부실라민(Bucillamine)로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상일 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 양자점은 CdSe 및 ZnS로 이루어진 것일 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 양자점의 평균 직경은 1 내지 20 nm일 수 있으며, 구체적으로 1 내지 15 nm 또는 1 내지 10 nm일 수 있다. 여기서 양자점의 평균 직경은 위 범위 내에 존재하는 모든 정수 값의 범위에 해당할 수 있다. 구체적으로 양자점의 평균 직경은 1 nm 이상, 2 nm 이상, 3 nm 이상, 4 nm 이상, 5 nm 이상, 6 nm 이상, 7 nm 이상, 8 nm 이상, 9 nm 이상, 10 nm 이상, 15 nm 이상 이거나 20 nm 이하, 19 nm 이하, 18 nm 이하, 17 nm 이하, 16 nm 이하, 15 nm 이하, 14 nm 이하, 13 nm 이하, 12 nm 이하, 11 nm 이하, 또는 10 nm 이하일 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 양자점 비드의 평균 직경은 50 nm 내지 2 μm일 수 있다. 여기서 양자점 비드의 평균 직경은 위 범위 내에 존재하는 모든 정수 값의 범위에 해당할 수 있다. 구체적으로 양자점 비드의 평균 직경은 50 nm 이상, 100 nm 이상, 120 nm 이상, 140 nm 이상, 160 nm 이상, 180 nm 이상, 200 nm 이상, 250 nm 이상, 300 nm 이상, 400 nm 이상, 450 nm 이상, 500 nm 이상, 700 nm 이상, 900 nm 이상, 또는 1 μm 이상 일 수 있으며, 2 μm 이하, 1.5 μm 이하, 1 μm 이하, 900 nm 이하, 800 nm 이하, 750 nm 이하, 700 nm 이하, 650 nm 이하, 600 nm 이하, 550 nm 이하, 500 nm 이하, 450 nm 이하, 400 nm 이하, 350 nm 이하, 또는 300 nm 이하 일 수 있다. 양자점 비드의 평균 직경이 1 μm를 초과하는 경우에는 측면 유동센서에서 사용시 비드가 이동하기 힘들어 사용하기 부적절하다.
본 발명의 일측면에 있어서, 타겟 항원은 C 반응성 단백질(C-reactive protein; "CRP"), 인플루엔자(Influenza), 말라리아(Malaria), C형 간염 바이러스(Hepatitis C virus; "HCV"), 인간 면역 결핍 바이러스(human immunodeficiency virus; "HIV"), B형 간염 바이러스(Heptatitis B virus "HBV"), 크레아틴 키나아제 MB(Creatin kinase MB; "CK-MB"), 트로포닌 I(Troponin I), 미오글로빈(Myoglobin), 전립선 특이항원(prostate specific antigen; "PSA"), 알파태아단백(alpha-fetoprotein; "AFP"), 발암배아성항원(Carcinoembryonic antigen; "CEA"), 갑상선 자극 호르몬(thyroid stimulating hormone; "TSH"), 융모막 젖샘자극 호르몬(chorionic somatomammotropin hormone; "CSH"), 인간 융모성 고나도트로핀(Human chorionic gonadotropin; "hCG"), 코르티솔(Cortisol), 프로게스테론(Progesterone), 및 테스토스테론(Testosterone)으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상일 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, (a) 단계에서 생성된 항원-양자점 비드 복합체는 (b) 단계 이전에 테스트 영역에 고정된 제1항체와 결합할 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 제1항체는 단클론(monoclonal) 항-CRP 항체, 단클론 항-인플루엔자 항체, 단클론 항-말라리아 항체, 단클론 항-HCV 항체, 단클론 항-HIV 항체, 단클론 항-HBV 항체, 단클론 항-CK-MB 항체, 단클론 항-트로포닌 I 항체, 단클론 항-미오글로빈 항체, 단클론 항-PSA 항체, 단클론 항-AFP 항체, 단클론 항-CEA 항체, 단클론 항-TSH 항체, 단클론 항-CSH 항체, 단클론 항-hCG 항체, 단클론 항-코르티솔 항체, 단클론 항-프로게스테론 항체, 및 단클론 항-테스토스페론 항체로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상일 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 제2항체는 다클론(polyclonal) 항-CRP 항체, 다클론 항-인플루엔자 항체, 다클론 항-말라리아 항체, 다클론 항-HCV 항체, 다클론 항-HIV 항체, 다클론 항-HBV 항체, 다클론 항-CK-MB 항체, 다클론 항-트로포닌 I 항체, 다클론 항-미오글로빈 항체, 다클론 항-PSA 항체, 다클론 항-AFP 항체, 다클론 항-CEA 항체, 다클론 항-TSH 항체, 다클론 항-CSH 항체, 다클론 항-hCG 항체, 다클론 항-코르티솔 항체, 다클론 항-프로게스테론 항체, 및 다클론 항-테스토스페론 항체로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상일 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 생체 시료는 소변, 혈액, 혈청, 혈장, 및 타액으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상일 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.
본 발명은 일 측면에 있어서, (a) 제1주입구에 생체 시료를 주입하는 단계; (b) 주입된 생체 시료가 전개하면서 그 시료 내의 타겟 항원이 양자점 비드 패드를 통과하여, 비오틴을 가지는 다기능 리간드 및 제2항체를 포함하는 양자점 비드와 결합하는 단계; (c) 항원-양자점 비드 복합체가 테스트 영역에 고정화된 제1항체와 결합하는 단계; (d) 제2주입구에 아비딘을 가지는 양자점을 주입하는 단계; 및 (e) 양자점이 전개하면서 테스트 영역에 존재하는 항원-양자점 비드 복합체와 결합하는 단계를 포함하는 생체 시료 내의 타겟 항원에 대한 면역크로마토그래피 검출 방법에 관한 것일 수 있다.
본 발명은 일 측면에 있어서, (a) 제1주입구에 생체 시료를 주입하는 단계; (b) 주입된 생체 시료가 전개하면서 그 시료 내의 타겟 항원이 양자점 비드 패드를 통과하여, 스트렙트아비딘 또는 아비딘을 가지는 다기능 리간드 및 제2항체를 포함하는 양자점 비드와 결합하는 단계; (c) 항원-양자점 비드 복합체가 테스트 영역에 고정화된 제1항체와 결합하는 단계; (d) 제2주입구에 완충액을 주입하거나 또는 완충액을 포함하는 용기를 외력으로 파괴하여 완충액을 양자점 패드로 방출하는 단계; 및 (e) 완충액이 전개하면서 양자점 패드에 포함된, 비오틴을 가지는 양자점을 테스트 영역으로 이동시키고, 양자점이 테스트 영역에 존재하는 항원-양자점 비드 복합체의 리간드에 존재하는 비오틴과 결합하는 단계를 포함하는 생체 시료 내의 타겟 항원에 대한 면역크로마토그래피 검출 방법에 관한 것일 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 면역크로마토그래피 검출 방법은 (e) 단계 이후에 (f) 테스트 영역에 자외선을 조사하여 양자점 비드의 형광을 측정하는 단계를 더 포함할 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 완충액은 완충액 용기에 충전되어 있을 수 있고, 이러한 완충액 용기는 외력(예를 들어, 손가락에 의한 압력)에 의해 파괴되어 완충액을 양자점 패드로 방출하는 것일 수 있다. 여기서 외력은 예를 들어 손가락에 의한 압력이나 완충액 용기를 파괴하기 위한 구조 또는 수단에 의해 가해지는 모든 힘을 의미한다. 완충액 용기가 파괴되면 완충액은 완충액 용기로부터 흘러나와 양자점 패드로 이동하거나 전개될 수 있다. 이에 따라 양자점 패드에 존재하는 양자점이 테스트 영역으로 전개 또는 이동할 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 면역크로마토그래피 검출 방법은 (d) 단계 이전에 테스트 영역을 세척하는 단계를 더 포함할 수 있다. 이러한 세척 단계는 테스트 영역에서 반응하지 않은 물질(예를 들어, 항원, 및 항원-양자점 비드 복합체)을 세척하는 것일 수 있다.
본 발명은 일 측면에 있어서, 본 발명의 일 측면에 따른 면역크로마토그래피 검출 방법을 이용하고, 측정된 형광 검출 정보로부터 타겟 항원에 대한 환자의 상태를 결정하는 단계를 더 포함하는 타겟 항원과 관련된 질병, 질환 또는 상태의 진단 방법에 관한 것일 수 있다.
본 발명은 일 측면에 있어서, 생체 시료 내의 타겟 항원과 양자점 비드를 접촉시키고, 양자점 비드는 제1접합 물질을 가지는 다기능 리간드 및 제2항체를 포함하는 것인 단계; 상기 항원-양자점 비드 복합체에 제2접합 물질을 가지는 양자점을 접촉시키는 단계; 및 항원-양자점 비드-양자점 구조이되 양자점은 양자점 비드의 리간드와 다중 결합되어 리간드 상에 다수 존재하는 구조를 형성하는 단계를 포함하는 양자점 비드를 이용한 바이오 진단 장치의 형광 검출 강도 또는 민감도 증폭 방법에 관한 것일 수 있다.
본 발명은 일 측면에 있어서, 본 발명의 일 측면에 따른 면역크로마토그래피 검출 방법을 이용하는 측면유동면역 검출장치에 관한 것일 수 있다.
본 발명은 일 측면에 있어서, 제1접합 물질을 가지는 다기능 리간드, 및 제2항체를 포함하는 양자점 비드를 포함하는 양자점 비드 패드; 제2접합 물질을 가지는 양자점을 포함하는 양자점 패드; 제1항체가 고정화된 테스트 영역을 포함하는 테스트 패드; 및 테스트 패드와 연결된 흡착 패드를 포함하는 생리물질 검출을 위한 바이오 진단 장치에 관한 것일 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 바이오 진단 장치는 측면유동면역 검출장치일 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 흡착 패드는 유체(예를 들어, 시료 및 완충액)를 전개시키는 모세관힘을 부여하는 것일 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 유체는 압력에 의해 흡착 패드로 이동하는 것일 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 바이오 진단 장치는 테스트 영역에 빛을 조사하는 광 조사 유닛을 더 포함할 수 있다. 본 발명의 일 측면에 있어서, 광 조사 유닛은 자외선을 방출하는 것일 수 있다. 이러한 광 조사 유닛은 테스트 영역에서의 항원-항체 반응을 쉽게 확인할 수 있게 할 수 있으며, 또한 테스트 영역에서 양자점 비드의 형광을 유발한다. 이에 따라 타겟 항원의 존재 여부를 측정/검출할 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 바이오 진단 장치는 완충액 용기를 더 포함할 수 있으며, 완충액 용기는 진단 장치 내부에 별도로 존재할 수 있다. 완충액 용기는 외력에 의해 파괴되어 완충액을 방출할 수 있으며, 파괴된 경우 양자점 패드 또는 완충액 패드에 완충액이 전개될 수 있다.
이하, 실시예 및 시험예를 들어 본 명세서의 구성 및 효과를 보다 구체적으로 설명한다. 그러나 이들 실시예 및 시험예는 본 명세서에 대한 이해를 돕기 위해 예시의 목적으로만 제공된 것일 뿐 본 명세서의 범주 및 범위가 하기 예에 의해 제한되는 것은 아니다.
[제조예 1] 표면상에 비오틴을 갖는 양자점의 제조
(1) 지용성 양자점의 제조
3구 플라스크에, 아세트산아연(Zn(Ac)2) 1.0 g, 산화카드뮴(CdO) 0.441 g, 올레산 20 ml, 및 옥타데센(octadecene; ODE) 75 ml를 혼합하고, 150 ℃에서 1 시간 동안 질소 분위기(Nitrogen Atmosphere) 하에서 수분을 제거하였다. 그런 뒤 300 ℃로 승온 한 후 트리옥틸포스핀(Trioctylphosphine; TOP) 1 ml와 셀레늄(Se) 0.045 g을 주입한 후 3분간 가열하여 양자점 코어를 형성하였다.
이후 도데칸티올(Dodecanethiol) 0.5 ml을 상기 3구 플라스크에 첨가하고, 10 분간 반응시켰다. 그런 뒤 TOP 1 ml와 황(S) 0.025 g 이 포함된 용액을 상기 3구 플라스크의 반응구에 투입하여 20분 반응을 시켜 쉘(shell)을 형성하였다. 이후 에탄올과 톨루엔 혼합 용액으로 정제한 후 유기 용매에 녹여 1차 양자점을 수득하였다.
이렇게 수득된 1차 양자점 0.5 g, 아세트산아연 1 g, 산화카드뮴 0.21 g, 올레산 10 ml, 옥타데센 35 ml를 별도의 3구 플라스크에 넣고 300 ℃에서 30 분간 반응시켰다. 그런 뒤 옥탄티올(Octanethiol) 0.5 ml을 첨가하여 10분 동안 교반한 후, TOP 1 ml과 황 0.025 g이 포함된 용액을 3구 플라스크의 반응구에 투입하여 20분간 반응시켰다. 이후 에탄올과 톨루엔 혼합 용액으로 정제한 후 유기용매에 녹여 2차 양자점을 수득하였다. 이러한 양자점은 코어-안정층-쉘-지용성 리간드층의 구조를 가진다.
(2) 카르복실기-치환 수용성 양자점의 제조
1 ml 메르캅토프로피온산(MPA)이 포함되어 있는 반응조에 상기 2차 양자점 20 mg을 첨가하여, 60℃에서 60분 동안 반응시켜 수용성 리간드(카르복실기)를 포함하는 최종 양자점을 수득하였다.
(3) PEI-치환 수용성 양자점의 제조
PEI와 테트라히드로푸란(Tetrahydrofuran; "THF")를 혼합하여 80 mg/ml 농도의 PEI 용액을 제조하였다.
10 mg/ml의 농도인 상기 제조예 1-(1)의 2차 양자점 0.25 ul와 THF 400 ul를 혼합한 뒤, 상기 PEI-THF 용액 500 ul를 천천히 첨가한 후 상온에서 하룻밤 동안 반응시켰다. 그 후 THF를 이용하여 정제하고 증류수에 녹여 아민기를 포함하는 양자점(PEI-양자점)을 제조하였다.
(4) 비오틴을 갖는 양자점의 제조
양자점의 10배 농도(몰수 대비) 비오틴과 EDC(1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide), NHS(N-hydroxysuccinimide)를 섞어준 후 2시간 동안 상온에서 반응시켰다. 반응이 종료되면 이를 원심 분리하여 3차 증류수로 3회 세척하고, 제조예 1-(3) 양자점과 1시간 동안 상온에서 반응시켰다. 반응이 종료되면 이를 원심 분리하여 3차 증류수로 3회 세척하고 소혈청알부민(BSA)을 첨가하고 1시간 동안 상온에서 반응시켰다.
반응이 종료되면 이를 원심 분리하여 3차 증류수로 3회 세척 후 1 M 트리스-완충액(pH 8), 0.1%의 소혈청알부민(BSA)을 포함하는 용액 중에 분산시켜 보관하였다.
[제조예 2] 아비딘과 결합된 다기능 리간드를 가지는 양자점 비드의 제조
(1) 실리카 입자 지지체의 합성 및 표면개질
실리카 기반 나노입자는 스퇴버방법에 따라 합성하며 삼각 플라스크에 먼저 NH4OH, EtOH, H2O를 3:60:1 ml의 비율로 교반 한 후, 상기 반응물에 TEOS(tetraethylorthosilicate)를 2 ml 첨가하고, 50 ℃에서 교반하면서 18시간 이상 반응시켰다. 이때 원하는 크기에 따라서 반응시간과 혼합 비율을 조절할 수 있다. 그런 뒤 에탄올을 이용하여 원심분리기를 통해 최종 시료를 얻었다. 여기서 대략 200 nm의 실리카 비드를 얻을 수 있었다.
그런 뒤 표면과 양자점의 반응을 위해 반응성 작용기인 3-머캅토프로필트리메톡시실란(3-mercaptopropyltrimethoxysilane, MPTS), NH4OH를 각각 180ul 투입하고 12시간에서 24시간 동안 반응시켰다. 그런 뒤 에탄올을 이용하여 원심분리기를 통해 정제하여 표면이 개질된 실리카 입자 지지체를 수득하였다.
(2) 지지체에 양자점 결합
제조예 1-(1) 양자점과 표면개질된 실리카 지지체 비율을 50:100mg 비율로 하고, 클로로포름의 부피를 이 혼합물에 대해 2배 첨가한 다음, 교반 후 30분 동안 반응시켰다. 반응 후 양자점 비드를 수득하였다.
(3) 양자점 비드의 표면 개질
제조예 2-(2)에서 합성한 CdSe/ZnS 양자점 비드와 MPA를(50mg: 20ul), 클로로포름과 에탄올을 혼합하여 (2ml : 2ml) 믹싱을 통해 10시간 동안 반응시켜 최종 양자점 비드의 바깥 표면에 수용성 리간드인 카르복실 관능기를 부착, 개질한 다음, 에탄올과 원심분리기를 이용하여 정제하였다.
(4) 항체를 갖는 양자점 비드의 제조
제조예 2-(3)에서 합성한 양자점 비드(-COOH) 0.1 nmol, EDC, NHS 각각을 넣고 2시간 동안 와동기(vortex)에서 반응시켰다.
반응이 끝나면 원심 분리하여, 양자점 비드(-COOH)를 스핀다운(spin down) 시킨 다음 PBS에 분산시켰다. 이후 다클론 항-CRP 항체(인비트로젠사)를 양자점 비드(-COOH) 대비 10배 농도(몰 수 대비)가 되도록 넣은 후 1시간 동안 반응시켰다.
반응이 끝나면 TPBS(Tween20 Phosphate buffered saliane)으로 2회, PBS(pH7.4)로 1회 세척하였다. 이후 5% BSA 1ml에 분산시킨 후 1시간 동안 와동기 에서 반응시켰다. 반응이 끝나면 TPBS로 2회, PBS(pH7.4)로 1회 세척하였다.
(5) 리간드 합성(HBP: Hyperbranched polymer)
3구 플라스크에, p-phenylenediamine(PD) 0.25g, Trimesic acid(TMA) 0.52g, Pyridine(Py) 2ml, N-mehylpyrrolidione(NMP) 20ml을 넣고 질소 기류하에서 섞어주었다. 그런 뒤 Triphenylphosphine(TPP) 4ml을 천천히 첨가하여 80℃에서 3시간 동안 반응시켰다. 이후 메탄올을 이용하여 정제한 후 HBP를 수득하였다.
(6) 스트렙트아비딘과 결합된 다기능성 리간드의 제조
제조예 2-(5)에서 제조한 긴 리간드(-COOH)에 EDC, NHS를 각각 넣고 2시간 동안 와동기(vortex)에서 반응시켰다. 반응이 끝나면 증류수(D,W)로 3회 세척 시킨 다음 PBS(pH7.4)에 분산시킨다. 이후 스트렙트아비딘을 리간드(-COOH) 대비 100배 농도(몰 수 대비)가 되도록 넣은 후 1시간 동안 반응시켰다. 반응이 끝나면 증류수(D.W)로 3회 세척시킨 다음 10% 에탄올아민을 넣고 1시간 동안 반응 시켰다. 반응이 끝나면 증류수(D.W)로 3회 세척시킨 다음 PBS(pH7.4)에 분산시킨 후 보관하였다.
(7) 스트렙트아비딘과 결합된 다기능 리간드, 및 항체를 가지는 양자점 비드의 제조
제조예 2-(4)에서 제조한 항체를 갖는 양자점 비드(-COOH)와 제조예 2-(6)에서 제조한 스트렙트아비딘과 결합된 다기능성 리간드(-SH)를 섞고 1시간 동안 와동기(vortex)에서 반응시켰다. 반응이 끝나면 양자점 비드를 원심 분리하여, 증류수로 3회 세척한 후 PBS(pH7.4)에 분산시켜 보관하였다.
[시험예 1] 양자점 및 양자점 비드의 특성 확인
(1) 양자점의 제타전위, 및 양자점과 양자점 비드의 양자효율
제조예 1-(2)의 양자점과 2-(3)의 양자점 비드에 대하여 제타전위를 오츠카사의 ELS-100ZS를 이용하여 측정하고 그 결과를 도 2에 나타내었다.
제조예 1-(2)의 양자점과 제조예 2-(3)의 양자점 비드의 양자효율을 오츠카사의 QE 2000 이용하여 측정하고 그 결과를 도 3에 나타내었다. 이 결과에 따르면 본원발명의 일측면에 따른 양자점, 양자점 비드인 제조예 1-(2), 제조예 2-(3)은 모두 각각 92±3 %와 83±3 %의 양자효율을 나타내었으며, 양자효율이 80%가 넘는 것으로서 우수한 효과를 나타낸다.
(2) 양자점과 양자점 비드의 크기 및 모양 확인
제조예 1-(1)의 양자점과 제조예 2-(2)의 양자점 비드의 크기와 모양을 파악하기 위해 JEOL사(社) JEM-2100F과, 히타치사의 FE-SEM을 이용하였으며 양자점의 투과전자현미경사진을 도 4a에 나타내고, 양자점 비드의 주사현미경사진을 도 4b에 나타내었다. 이러한 결과에 따르면 본원발명 일측면에 따른 양자점, 양자점 비드는 모두 균질한 크기를 가지는 구형 모양을 나타냄을 확인할 수 있다.
(3) 양자점 비드의 입도 분석(particle size analysis)
제조예 2-(2)의 양자점 비드의 입도 분석을 오츠카사의 ELS100를 이용하여 수행하고, 그 결과를 도 5에 나타내었다. 그 결과 본 발명에서 사용할 수 있는 양자점 비드는 높은 다분산성을 나타내는 것을 확인할 수 있었다. 나노 형광체는 서로 뭉쳐있으면 효율이 저하될 수 있고 비특이적 노이즈 발생의 문제를 나타낼 수 있어, 원래 크기를 유지하는지 여부가 형광체로서 사용함에 있어서 중요한 요소이다. 본 발명에서 사용할 수 있는 양자점 비드는 높은 다분산성을 나타내므로 위와 같은 문제점을 나타내지 않을 것이다.
[시험예 2] 측면유동 면역센서에서 형광 반응성 확인 실험
<비교예 1, 비교예 2>
다클론 항-CRP 항체(인비트로젠사) 3 pmol(1 μl)을 바이오센서의 니트로셀룰로오스 멤브레인 시험(NC membrane test) 영역에 주입하고 건조시킨다. 비교예 1에서는 제조예 1-(4)의 양자점 제조 시, 비오틴이 아니라 다클론 항-CRP 항체와 반응시킨 양자점, 비교예 2에서는 다클론 항-CRP 항체와 결합된 제조예 2-(4)의 양자점 비드를 컨쥬게이트 패드(conjugate pad)에 주입하고 건조시킨다.
CRP 항원(0.001 ng/ml, 0.1 ng/ml, 10 ng/ml)(인비트로젠사)를 제1주입구에 넣고 5분간 전개 시킨다. 전개가 끝난 후 바이오센서의 형광 강도를 QD-J7 형광 분석기(Fluorescent analyzer)를 이용하여 측정한다.
<실시예>
단클론 항-CRP 항체(인비트로젠사) 3 pmol(1 μl)을 바이오센서의 니트로셀룰로오스 멤브레인 시험(NC membrane test) 영역에 주입하고 건조시킨다.
제조예 2-(7)의 양자점 비드를 컨쥬게이트 패드(conjugate pad)에 주입하고 건조시킨다. CRP 항원(0.001 ng/ml, 0.1 ng/ml, 10 ng/ml)(인비트로젠사)를 제1주입구에 넣고 5분간 전개 시킨 후 제조예 1-(4)의 양자점을 제2주입구에 넣고 10분간 용액을 전개시킨다. 전개가 끝난 후 바이오센서의 형광 강도를 QD-J7 형광 분석기를 이용하여 측정한다.
<결과>
본원발명 일측면에 따른 스트렙트아비딘과 결합된 다기능 리간드 및 항체를 가지는 양자점 비드와 비오틴을 가지는 양자점을 함께 사용한 검출 방법은 항원을 검출하는 민감성, 감도 또는 형광강도가 모든 항원 농도 범위에서, 단순히 항체만 결합한 양자점 또는 양자점 비드를 각각 사용한 경우에 비하여 적어도 10배의 우수한 형광 강도를 나타낼 것이다.
비교예 2의 양자점 비드는 비교예 1의 양자점에 비하여 양자점 수가 최소 200배에서 많게는 500배 더 많은 양자점을 포함하므로 이에 상응하도록 형광 검출 강도 또는 검출 민감도가 증가해야 하나, 실제로는 비교예 1의 양자점을 사용한 것과 유사하다. 그 이유는 하나의 양자점 비드에 결합하는 제2항체(예를 들어 다클론 항-CRP 항체)가 양자점 수가 증가하는 만큼 유사하게 증가하여 결과적으로 검출되는 항원의 수를 감소시키는 현상으로 나타나, 검출강도가 줄어들기 때문이다. 이와 달리 본 발명의 방법에 따르면 다수의 스트렙트아비딘을 가질 수 있는 다기능 리간드를 양자점 비드에 결합시키고, 여기에 스트렙트아비딘과 특이적으로 결합하는 비오틴을 가지는 양자점을 결합시켜 검출 강도를 매우 현저하게 증폭시킬 수 있을 것이다. 본 발명의 방법은 별도의 세척 단계 없이 간단한 방법으로 검출 강도를 매우 현저하게 증폭시킬 수 있다.
[시험예 3] 본원발명의 형광 강도 증폭에 대한 시뮬레이션
본원발명의 형광 강도 증폭 정도를 확인하기 위하여 추가 실험을 수행하였다. 비교예 1에서 사용한 양자점과, 위 실시예와 유사한 형광 강도 증폭을 나타낼 것으로 예상되는 양자점 비드 다중 복합체를 이용하였다.
구체적으로 양자점 비드 다중 복합체는 제조예 2-(3)과 같이 제조한 양자점 비드로서, 1 μm이상인 큰 양자점 비드에 100 내지 300 nm의 작은 양자점 비드를 수 개 결합시켜 제조하였고, 여기에 다클론 항-CRP 항체를 결합시켰다. 이렇게 제조된 양자점 비드 다중 복합체와 비교예 1의 양자점을 웰 플레이트 각각의 웰에 넣고, CRP 항원(0.001 ng/ml, 0.01 ng/ml, 0.1 ng/ml, 1 ng/ml, 10 ng/ml)(인비트로젠사)을 각각의 웰에 첨가하였다. 그런 뒤 형광 강도를 형광 광도계(FS-2, SCINCO사(社))로 측정하고, 그 결과를 도 6에 나타내었다.
도 6에 따르면 양자점만을 사용한 비교예 1에 비하여, 본원발명의 실시예를 대신하는 양자점 비드 다중 복합체의 형광강도가 매우 현저하게 증폭되고 우수한 것을 확인할 수 있다. 구체적으로 10 ng/mL의 CRP 농도에서 양자점 비드 다중 복합체는 비교예 1의 양자점에 비하여 약 500배 우수한 형광강도를 나타내었으며, 이는 본원발명을 이용하여 타겟 항원을 검출할 경우 비교예 1에 비해 500배 우수한 민감도로 타겟 항원을 검출할 수 있음을 의미한다.
이상으로 본 명세서의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일 뿐이며, 이에 본 명세서의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서, 본 명세서의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims (38)

  1. 제1접합 물질을 가지는 다기능 리간드, 및 제2항체를 포함하는 양자점 비드; 및
    제2접합 물질을 가지는 양자점을 다중 결합시키는 것을 포함하고,
    제1접합 물질과 제2접합 물질은 서로 반응하여 결합하는 것이고, 상기 제2항체는 타겟 항원에 대해 특이적인 것인,
    생체 시료 내의 타겟 항원에 대한 면역크로마토그래피 검출 방법.
  2. 제1항에 있어서,
    (a) 생체 시료 내의 타겟 항원과 양자점 비드를 결합시키는 단계; 및
    (b) 제1접합 물질과 제2접합 물질의 결합으로, 양자점 비드와 양자점을 다중 결합시키는 단계를 포함하는 면역크로마토그래피 검출 방법.
  3. 제2항에 있어서,
    (b) 단계 이후에 (c) 자외선을 조사하여 형광을 측정하는 단계를 더 포함하는 면역크로마토그래피 검출 방법.
  4. 제1항에 있어서, 제1접합 물질과 다기능 리간드는 서로 공유 결합된 것인 면역크로마토그래피 검출 방법.
  5. 제1항에 있어서, 다기능 리간드는 중합체; 뉴클레오티드 사슬; 또는 펩티드 사슬인 면역크로마토그래피 검출 방법.
  6. 제5항에 있어서, 다기능 리간드는 수산화기, 아민기, 티올기, 카르보닐기, 카르복시기, 에폭시기, 에틸렌기, 아세틸렌기, 아미드기, 포스포네이트기, 포스페이트기, 설포네이트기, 설페이트기, 니트레이트기, 및 암모늄기로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기를 가지는 것인 면역크로마토그래피 검출 방법.
  7. 제5항에 있어서, 다기능 리간드는 양자점 비드와 결합된 제1영역 및 제1접합 물질과 결합된 제3영역을 포함하며,
    제1영역은 수산화기, 아민기, 티올기, 카르복시기, 아미드기, 포스포네이트기, 포스페이트기, 설포네이트기, 및 설페이트기로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기를 포함하고,
    제3영역은 수산화기, 아민기, 티올기, 카르복시기, 설포네이트기, 니트레이트기, 포스포네이트기, 및 암모늄기로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기를 포함하는 것인 면역크로마토그래피 검출 방법.
  8. 제5항에 있어서, 다기능 리간드는 중합체이고, 중합체는 폴리에틸렌이민, 폴리에틸렌글리콜, 폴리아크릴아미드, 폴리포스파젠, 폴리릭타이드, 폴리릭티드-코-글리콜라이드, 폴리카프로락톤, 폴리안하이드라이드, 폴리말릭산 및 이의 유도체, 폴리알킬시아노아크릴레이트, 폴리하이드로오시부틸레이트, 폴리카르보네이트, 폴리올소에스테르, 폴리에틸렌글리콜, 폴리-L-라이신, 폴리글리콜라이드, 폴리메틸메타아크릴레이트, 폴리비닐피롤리돈, 폴리아크릴아마이드, 폴리(비닐벤질 트리알킬 암모니움), 폴리(4-비닐-N-알킬-피리디늄), 폴리(아크릴로일-옥시알킬-트리알킬 암모니움), 폴리(아크릴아미도알킬-트리알킬 암모니움), 폴리(디알릴디메틸-암모니움), 폴리(스티렌술폰산), 폴리(비닐 술폰산), 폴리(이타콘산), 말레산-디알릴아민 공중합체, 및 고분지형 중합체(hyperbranched polymer)로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상인 것인, 면역크로마토그래피 검출 방법.
  9. 제5항에 있어서, 다기능 리간드는 뉴클레오티드 사슬이고, 뉴클레오티드 사슬은 10 개 내지 500 개의 뉴클레오티드로 이루어진 것인 면역크로마토그래피 검출 방법.
  10. 제5항에 있어서, 다기능 리간드는 펩티드 사슬이고, 펩티드 사슬은 10개 내지 500 개의 아미노산으로 이루어진 것인 면역크로마토그래피 검출 방법.
  11. 제1항에 있어서, 다기능 리간드는 100 MW(g/mol) 내지 1,000,000 MW(g/mol)범위의 분자량을 가지는 것인 면역크로마토그래피 검출 방법.
  12. 제1항에 있어서, 제1접합 물질과 제2접합 물질은 타겟 항원이 아닌 항원-항체 쌍, 서로 상보적인 뉴클레오티드 사슬 쌍, 압타머와 표적 물질 쌍, 서로 결합하는 펩티드 쌍, 및 아비딘 또는 스트렙트아비딘과 비오틴 쌍으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상인 면역크로마토그래피 검출 방법.
  13. 제12항에 있어서, 제1접합 물질과 제2접합 물질은 아비딘 또는 스트렙트아비딘과 비오틴 쌍인 면역크로마토그래피 검출 방법.
  14. 제13항에 있어서, 제1접합 물질은 비오틴이고 제2접합 물질은 아비딘 또는 스트렙트아비딘인 면역크로마토그래피 검출 방법.
  15. 제12항에 있어서, 펩티드 쌍은 수소결합, 이황화 결합, 또는 반데르발스 힘에 의해 서로 결합하는 것인 면역크로마토그래피 검출 방법.
  16. 제1항에 있어서, 제2항체는 양자점 비드 표면에 존재하거나 또는 다기능 리간드 말단에 존재하는 것인 면역크로마토그래피 검출 방법.
  17. 제1항에 있어서, 양자점은 코어-안정층-쉘-수용성 리간드층 구조를 가지는 것인 면역크로마토그래피 검출 방법.
  18. 제17항에 있어서, 상기 코어는 카드뮴(Cd) 및 셀레늄(Se) 중 하나 이상을 포함하고,
    상기 안정층은 카드뮴(Cd), 셀레늄(Se), 아연(Zn) 및 황(S) 중 하나 이상을 포함하고,
    상기 쉘은 카드뮴(Cd), 셀레늄(Se), 아연(Zn) 및 황(S) 중 하나 이상을 포함하는 것인, 면역크로마토그래피 검출 방법.
  19. 제1항에 있어서, 양자점은 12족-16족계 화합물, 13족-15족계 화합물 및 14족-16족계 화합물 중 하나 이상을 포함하는 것인 면역크로마토그래피 검출 방법.
  20. 제19항에 있어서, 상기 12족-16족계 화합물은 카드뮴설파이드(CdS), 카드뮴셀레나이드(CdSe), 카드뮴텔레나이드(CdTe), 징크설파이드(ZnS), 징크셀레나이드(ZnSe), 징크텔레나이드(ZnTe), 머큐리설파이드(HgS), 머큐리셀레나이드(HgSe), 머큐리텔레나이드(HgTe), 징크옥사이드(ZnO), 카드뮴옥사이드(CdO), 머큐리옥사이드(HgO), 카드뮴셀레늄설파이드(CdSeS), 카드뮴셀레늄텔레나이드(CdSeTe), 카드뮴설파이드텔레나이드(CdSTe), 카드뮴징크설파이드(CdZnS), 카드뮴징크셀레나이드(CdZnSe), 카드뮴설파이드셀레나이드(CdSSe), 카드뮴징크텔레나이드(CdZnTe), 카드뮴머큐리설파이드(CdHgS), 카드뮴머큐리셀레나이드(CdHgSe), 카드뮴머큐리텔레나이드(CdHgTe), 징크셀레늄설파이드(ZnSeS), 징크셀레늄텔레나이드(ZnSeTe), 징크설파이드텔레나이드(ZnSTe), 머큐리셀레늄설파이드(HgSeS), 머큐리셀레늄텔레나이드(HgSeTe), 머큐리설파이드텔레나이드(HgSTe), 머큐리징크설파이드(HgZnS), 머큐리징크셀레나이드(HgZnSe), 카드뮴징크옥사이드(CdZnO), 카드뮴머큐리옥사이드(CdHgO), 징크머큐리옥사이드(ZnHgO), 징크셀레늄옥사이드(ZnSeO), 징크텔레늄옥사이드(ZnTeO), 징크설파이드옥사이드(ZnSO), 카드뮴셀레늄옥사이드(CdSeO), 카드뮴텔레늄옥사이드(CdTeO), 카드뮴설파이드옥사이드(CdSO), 머큐리셀레늄옥사이드(HgSeO), 머큐리텔레늄옥사이드(HgTeO), 머큐리설파이드옥사이드(HgSO), 카드뮴징크셀레늄설파이드(CdZnSeS), 카드뮴징크셀레늄텔레나이드(CdZnSeTe), 카드뮴징크설파이드텔레나이드(CdZnSTe), 카드뮴머큐리셀레늄설파이드(CdHgSeS), 카드뮴머큐리셀레늄텔레나이드(CdHgSeTe), 카드뮴머큐리설파이드텔레나이드(CdHgSTe), 머큐리징크셀레늄설파이드(HgZnSeS), 머큐리징크셀레늄텔레나이드(HgZnSeTe), 머큐리징크설파이드텔레나이드(HgZnSTe), 카드뮴징크셀레늄옥사이드(CdZnSeO), 카드뮴징크텔레늄옥사이드(CdZnTeO), 카드뮴징크설파이드옥사이드(CdZnSO), 카드뮴머큐리셀레늄옥사이드(CdHgSeO), 카드뮴머큐리텔레늄옥사이드(CdHgTeO), 카드뮴머큐리설파이드옥사이드(CdHgSO), 징크머큐리셀레늄옥사이드(ZnHgSeO), 징크머큐리텔레늄옥사이드(ZnHgTeO) 및 징크머큐리설파이드옥사이드(ZnHgSO) 중 하나 이상을 포함하는 것인 면역크로마토그래피 검출 방법.
  21. 제19항에 있어서, 상기 13족-15족계 화합물은 갈륨포스포러스(GaP), 갈륨아세나이드(GaAs), 갈륨안티모니(GaSb), 갈륨나이트라이드(GaN), 알루미늄포스포러스(AlP), 알루미늄아세나이드(AlAs), 알루미늄안티모니(AlSb), 알루미늄나이트라이드(AlN), 인듐포스포러스(InP), 인듐아세나이드(InAs), 인듐안티모니(InSb), 인듐나이트라이드(InN), 갈륨포스포러스아세나이드(GaPAs), 갈륨포스포러스안티모니(GaPSb), 갈륨포스포러스나이트라이드(GaPN), 갈륨아세나이드나이트라이드(GaAsN), 갈륨안티모니나이트라이드(GaSbN), 알루미늄포스포러스아세나이드(AlPAs), 알루미늄포스포러스안티모니(AlPSb), 알루미늄포스포러스나이트라이드(AlPN), 알루미늄아세나이드나이트라이드(AlAsN), 알루미늄안티모니나이트라이드(AlSbN), 인듐포스포러스아세나이드(InPAs), 인듐포스포러스안티모니(InPSb), 인듐포스포러스나이트라이드(InPN), 인듐아세나이드나이트라이드(InAsN), 인듐안티모니나이트라이드(InSbN), 알루미늄갈륨포스포러스(AlGaP), 알루미늄갈륨아세나이드(AlGaAs), 알루미늄갈륨안티모니(AlGaSb), 알루미늄갈륨나이트라이드(AlGaN), 알루미늄아세나이드나이트라이드(AlAsN), 알루미늄안티모니나이트라이드(AlSbN), 인듐갈륨포스포러스(InGaP), 인듐갈륨아세나이드(InGaAs), 인듐갈륨안티모니(InGaSb), 인듐갈륨나이트라이드(InGaN), 인듐아세나이드나이트라이드(InAsN), 인듐안티모니나이트라이드(InSbN), 알루미늄인듐포스포러스(AlInP), 알루미늄인듐아세나이드(AlInAs), 알루미늄인듐안티모니(AlInSb), 알루미늄인듐나이트라이드(AlInN), 알루미늄아세나이드나이트라이드(AlAsN), 알루미늄안티모니나이트라이드(AlSbN), 알루미늄포스포러스나이트라이드(AlPN), 갈륨알루미늄포스포러스아세나이드(GaAlPAs), 갈륨알루미늄포스포러스안티모니(GaAlPSb), 갈륨인듐포스포러스아세나이드(GaInPAs), 갈륨인듐알루미늄아세나이드(GaInAlAs), 갈륨알루미늄포스포러스나이트라이드(GaAlPN), 륨알루미늄아세나이드나이트라이드(GaAlAsN), 갈륨알루미늄안티모니나이트라이드(GaAlSbN), 갈륨인듐포스포러스나이트라이드(GaInPN), 갈륨인듐아세나이드나이트라이드(GaInAsN), 갈륨인듐알루미늄나이트라이드(GaInAlN), 갈륨안티모니포스포러스나이트라이드(GaSbPN), 갈륨아세나이드포스포러스나이트라이드(GaAsPN), 갈륨아세나이드안티모니나이트라이드(GaAsSbN), 갈륨인듐포스포러스안티모니(GaInPSb), 갈륨인듐포스포러스나이트라이드(GaInPN), 갈륨인듐안티모니나이트라이드(GaInSbN), 갈륨포스포러스안티모니나이트라이드(GaPSbN), 인듐알루미늄포스포러스아세나이드(InAlPAs), 인듐알루미늄포스포러스나이트라이드(InAlPN), 인듐포스포러스아세나이드나이트라이드(InPAsN), 인듐알루미늄안티모니나이트라이드(InAlSbN), 인듐포스포러스안티모니나이트라이드(InPSbN), 인듐아세나이드안티모니나이트라이드(InAsSbN) 및 인듐알루미늄포스포러스안티모니(InAlPSb) 중 하나 이상을 포함하는 것인 면역크로마토그래피 검출 방법.
  22. 제19항에 있어서, 상기 14족-16족계 화합물은 틴옥사이드(SnO), 틴설파이드(SnS), 틴셀레나이드(SnSe), 틴텔레나이드(SnTe), 리드설파이드(PbS), 리드셀레나이드(PbSe), 리드텔레나이드(PbTe), 저마늄옥사이드(GeO), 저마늄설파이드(GeS), 저마늄셀레나이드(GeSe), 저마늄텔레나이드(GeTe), 틴셀레늄설파이드(SnSeS), 틴셀레늄텔레나이드(SnSeTe), 틴설파이드텔레나이드(SnSTe), 리드셀레늄설파이드(PbSeS), 리드셀레늄텔레나이드(PbSeTe), 리드설파이드텔레나이드(PbSTe), 틴리드설파이드(SnPbS), 틴리드셀레나이드(SnPbSe), 틴리드텔레나이드(SnPbTe), 틴옥사이드설파이드(SnOS), 틴옥사이드셀레나이드(SnOSe), 틴옥사이드텔레나이드(SnOTe), 저마늄옥사이드설파이드(GeOS), 저마늄옥사이드셀레나이드(GeOSe), 저마늄옥사이드텔레나이드(GeOTe), 틴리드설파이드셀레나이드(SnPbSSe), 틴리드셀레늄텔레나이드(SnPbSeTe) 및 틴리드설파이드텔레나이드(SnPbSTe) 중 하나 이상을 포함하는 것인 면역크로마토그래피 검출 방법.
  23. 제20항에 있어서, 양자점은 CdSe 및 ZnS로 이루어진 것인 면역크로마토그래피 검출 방법.
  24. 제1항에 있어서, 상기 양자점 비드의 평균 직경은 50 nm 내지 2 μm인 면역크로마토그래피 검출 방법.
  25. 제24항에 있어서, 상기 양자점 비드의 평균 직경은 50 nm 내지 1 μm인 면역크로마토그래피 검출 방법.
  26. 제1항에 있어서, 상기 양자점의 평균 직경은 1 내지 20 nm인 면역크로마토그래피 검출 방법.
  27. 제1항에 있어서, 타겟 항원은 C 반응성 단백질(C-reactive protein; "CRP"), 인플루엔자(Influenza), 말라리아(Malaria), C형 간염 바이러스(Hepatitis C virus; "HCV"), 인간 면역 결핍 바이러스(human immunodeficiency virus; "HIV"), B형 간염 바이러스(Heptatitis B virus "HBV"), 크레아틴 키나아제 MB(Creatin kinase MB; "CK-MB"), 트로포닌 I(Troponin I), 미오글로빈(Myoglobin), 전립선 특이항원(prostate specific antigen; "PSA"), 알파태아단백(alpha-fetoprotein; "AFP"), 발암배아성항원(Carcinoembryonic antigen; "CEA"), 갑상선 자극 호르몬(thyroid stimulating hormone; "TSH"), 융모막 젖샘자극 호르몬(chorionic somatomammotropin hormone; "CSH"), 인간 융모성 고나도트로핀(Human chorionic gonadotropin; "hCG"), 코르티솔(Cortisol), 프로게스테론(Progesterone), 및 테스토스테론(Testosterone)으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상인 면역크로마토그래피 검출 방법.
  28. 제1항에 있어서, 제2항체는 다클론 항-CRP 항체, 다클론 항-인플루엔자 항체, 다클론 항-말라리아 항체, 다클론 항-HCV 항체, 다클론 항-HIV 항체, 다클론 항-HBV 항체, 다클론 항-CK-MB 항체, 다클론 항-트로포닌 I 항체, 다클론 항-미오글로빈 항체, 다클론 항-PSA 항체, 다클론 항-AFP 항체, 다클론 항-CEA 항체, 다클론 항-TSH 항체, 다클론 항-CSH 항체, 다클론 항-hCG 항체, 다클론 항-코르티솔 항체, 다클론 항-프로게스테론 항체, 및 다클론 항-테스토스페론 항체로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상인 면역크로마토그래피 검출 방법.
  29. 제2항에 있어서, (a) 단계에서 생성된 항원-양자점 비드 복합체는 (b) 단계 이전에 테스트 영역에 고정된 제1항체와 결합하고, 여기서 제1항체는 단클론 항-CRP 항체, 단클론 항-인플루엔자 항체, 단클론 항-말라리아 항체, 단클론 항-HCV 항체, 단클론 항-HIV 항체, 단클론 항-HBV 항체, 단클론 항-CK-MB 항체, 단클론 항-트로포닌 I 항체, 단클론 항-미오글로빈 항체, 단클론 항-PSA 항체, 단클론 항-AFP 항체, 단클론 항-CEA 항체, 단클론 항-TSH 항체, 단클론 항-CSH 항체, 단클론 항-hCG 항체, 단클론 항-코르티솔 항체, 단클론 항-프로게스테론 항체, 및 단클론 항-테스토스페론 항체로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상인 면역크로마토그래피 검출 방법.
  30. 제1항에 있어서, 생체 시료는 소변, 혈액, 혈청, 혈장, 및 타액으로 이루어진 군으로부터 선택된 것인 면역크로마토그래피 검출 방법.
  31. (a) 제1주입구에 생체 시료를 주입하는 단계;
    (b) 주입된 생체 시료가 전개하면서 그 시료 내의 타겟 항원이 양자점 비드 패드를 통과하여, 스트렙트아비딘 또는 아비딘을 가지는 다기능 리간드 및 제2항체를 포함하는 양자점 비드와 결합하는 단계;
    (c) 항원-양자점 비드 복합체가 테스트 영역에 고정화된 제1항체와 결합하는 단계;
    (d) 제2주입구에 비오틴을 가지는 양자점을 주입하는 단계; 및
    (e) 양자점이 전개하면서 테스트 영역에 존재하는 항원-양자점 비드 복합체와 결합하는 단계를 포함하고,
    상기 제1항체와 제2항체는 상기 타겟 항원의 서로 다른 부위에 특이적인 것인,
    생체 시료 내의 타겟 항원에 대한 면역크로마토그래피 검출 방법.
  32. 제31항에 있어서, (e)단계 이후에 (f) 테스트 영역에 자외선을 조사하여 양자점 비드의 형광을 측정하는 단계를 더 포함하는 면역크로마토그래피 검출 방법.
  33. (a) 제1주입구에 생체 시료를 주입하는 단계;
    (b) 주입된 생체 시료가 전개하면서 그 시료 내의 타겟 항원이 양자점 비드 패드를 통과하여,스트렙트아비딘 또는 아비딘을 가지는 다기능 리간드 및 제2항체를 포함하는 양자점 비드와 결합하는 단계;
    (c) 항원-양자점 비드 복합체가 테스트 영역에 고정화된 제1항체와 결합하는 단계;
    (d) 제2주입구에 완충액을 주입하거나 또는 완충액을 포함하는 용기를 외력으로 파괴하여 완충액을 양자점 패드로 방출하는 단계; 및
    (e) 완충액이 전개하면서 양자점 패드에 포함된, 비오틴을 가지는 양자점을 테스트 영역으로 이동시키고, 양자점이 테스트 영역에 존재하는 항원-양자점 비드 복합체의 리간드에 존재하는 스트렙트아비딘 또는 아비딘과 결합하는 단계를 포함하고,
    상기 제1항체와 제2항체는 상기 타겟 항원의 서로 다른 부위에 특이적인 것인,
    생체 시료 내의 타겟 항원에 대한 면역크로마토그래피 검출 방법.
  34. 제33항에 있어서, (e)단계 이후에 (f) 테스트 영역에 자외선을 조사하여 양자점 비드의 형광을 측정하는 단계를 더 포함하는 면역크로마토그래피 검출 방법.
  35. 제1항 내지 제34항의 검출 방법을 이용하고,
    측정된 형광 검출 정보로부터 타겟 항원에 대한 환자의 상태를 결정하는 단계를 더 포함하는,
    타겟 항원과 관련된 질병, 질환 또는 상태의 진단 방법.
  36. 제1항 내지 제34항의 검출 방법을 이용하는 측면유동면역 검출장치.
  37. 생체 시료 내의 타겟 항원과 양자점 비드를 접촉시키고, 양자점 비드는 제1접합 물질을 가지는 다기능 리간드 및 제2항체를 포함하는 것인 단계;
    상기 항원-양자점 비드 복합체에 제2접합 물질을 가지는 양자점을 접촉시키는 단계; 및
    항원-양자점 비드-양자점 구조이되 양자점은 양자점 비드의 리간드와 다중 결합되어 리간드 상에 다수 존재하는 구조를 형성하는 단계를 포함하고,
    상기 제2항체는 상기 타겟 항원에 특이적인 것인,
    양자점 비드를 이용한 바이오 진단 장치의 형광 검출 강도 또는 민감도를 증폭시키는 방법.
  38. 제1접합 물질을 가지는 다기능 리간드, 및 제2항체를 포함하는 양자점 비드를 포함하는 양자점 비드 패드,
    제2접합 물질을 가지는 양자점을 포함하는 양자점 패드,
    제1항체가 고정화된 테스트 영역을 포함하는 테스트 패드, 및
    테스트 패드와 연결된 흡착 패드를 포함하는
    생리물질 검출을 위한 바이오 진단 장치.
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20210124566A (ko) * 2020-04-03 2021-10-15 삼성전자주식회사 앱타머를 이용한 프탈레이트계 물질 검출용 키트 및 이를 이용한 프탈레이트계 물질 검출 방법
CN118409098A (zh) * 2024-06-27 2024-07-30 星童医疗技术(苏州)有限公司 基于量子点微球的hs-TnI检测方法

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111505298B (zh) * 2020-03-25 2021-08-17 山东大学 一种铜离子标记的用于检测内毒素的胶体金试纸条及其制备和检测方法
CN113456809B (zh) * 2021-06-30 2024-02-23 澳门大学 一种量子点改性蛋白疫苗及其制备方法和应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008071345A1 (en) 2006-12-11 2008-06-19 The Jordanian Pharmaceutical Manufacturing Co. Rapid immune chromatographic detection by amplification of the colloidal gold signal
US20100068727A1 (en) 2006-12-11 2010-03-18 The Jordanian Pharmaceutical Manufacturing Co. Rapid immunochromatographic detection by amplification of the colloidal gold signal

Family Cites Families (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6406862B1 (en) * 1998-10-06 2002-06-18 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army Dip-stick assay for C-reactive protein
CN1515909A (zh) * 2003-08-27 2004-07-28 魏景艳 量子点标记的夹心免疫检测法及其诊断试剂盒
US20070004046A1 (en) * 2005-07-01 2007-01-04 Platypus Technologies, Llc Detection of analytes
TWI384032B (zh) * 2005-12-21 2013-02-01 Dendritic Nanotechnologies Inc 具有增強的放大率及內部官能度的樹枝狀聚合物
CN101526523A (zh) * 2009-03-27 2009-09-09 东南大学 锑化镉量子点免疫标记物的制备及电化学夹心免疫检测方法
US20120269721A1 (en) * 2009-10-12 2012-10-25 The Regents Of The University Of California Targeted nanoclusters and methods of their use
CA2802049C (en) * 2010-06-07 2018-07-10 Firefly Bioworks, Inc. Scanning multifunctional particles
WO2013160836A1 (en) * 2012-04-24 2013-10-31 The University Of North Carolina At Greensboro Enhancing surface plasmon resonance imaging signal
CN104749365A (zh) * 2013-12-31 2015-07-01 中国科学院上海微系统与信息技术研究所 双功能复合纳米球及快速检测食源性致病菌的方法
KR101580844B1 (ko) * 2014-05-08 2015-12-30 한국수력원자력(주) 발전소 가열 및 냉각 운전 과도사건의 피로평가에서 보정계수 산출방법
CN105319359B (zh) * 2014-08-18 2017-02-08 董俊 人肺炎链球菌量子点免疫层析检测卡及其制备方法和应用
CN104316684A (zh) * 2014-10-14 2015-01-28 南昌大学 一种用于检测宫颈癌的量子点免疫荧光试剂盒
CN105259350B (zh) * 2015-11-20 2017-05-31 北京科技大学 基于量子点多级检测标记物传感器及其制备方法
KR102306678B1 (ko) * 2015-12-28 2021-10-01 주식회사 제우스 양자점 및 이의 제조방법
CN105785019B (zh) * 2016-03-18 2017-11-21 南昌大学 一种针对前列腺特异抗原的检测方法
KR101844949B1 (ko) * 2016-07-01 2018-04-03 원광대학교산학협력단 양자점 나노입자-라텍스 비드 복합체 및 자성 입자를 이용하는 표적 물질의 검출방법
CN106680496B (zh) * 2016-12-21 2018-08-21 武汉大学 一种比色荧光双信号纳米球的制备及其在免疫层析定量检测中的应用
KR102498799B1 (ko) * 2018-04-23 2023-02-13 주식회사 제우스 링커 물질 및 양자점 비드를 포함하는 바이오센서 및 이를 이용한 타겟 항원 검출 방법

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008071345A1 (en) 2006-12-11 2008-06-19 The Jordanian Pharmaceutical Manufacturing Co. Rapid immune chromatographic detection by amplification of the colloidal gold signal
US20100068727A1 (en) 2006-12-11 2010-03-18 The Jordanian Pharmaceutical Manufacturing Co. Rapid immunochromatographic detection by amplification of the colloidal gold signal

Non-Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Cheng et al, Anal Bioanal Chem, 409(1):133-141, 25 Oct 2016
P.Zhang et al., Theranostics, Vol. 4, No. 3, 2014, pp. 307-315. *
Park et al., ACSNANO, Vol7, No 10, 9416~9427, 2013
Savin et al, Talanta. 2018 Feb 1;178:910-915
Vashist et al., AZojono(Journal of Nanotechnology Online), Vol. 2, 2006. *
Wu et al., Analytica Chimica Acta, Volume 1008, 30 May 2018, Pages 1-7
X.Li et al., ACS Applied Materials & Interfaces, Vol. 6, 2014, pp. 6406-6414. *
Zhang et al, Chemical Papers, 70 (8), 1031-1038, 2016

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20210124566A (ko) * 2020-04-03 2021-10-15 삼성전자주식회사 앱타머를 이용한 프탈레이트계 물질 검출용 키트 및 이를 이용한 프탈레이트계 물질 검출 방법
CN118409098A (zh) * 2024-06-27 2024-07-30 星童医疗技术(苏州)有限公司 基于量子点微球的hs-TnI检测方法

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