KR20170082494A

KR20170082494A - 결정 형태의 글루타미나아제 억제제

Info

Publication number: KR20170082494A
Application number: KR1020177006199A
Authority: KR
Inventors: 티모시 에프 스탠턴; 제임스 제이 스프링거; 재클린 엔 윌리암스
Original assignee: 칼리테라 바이오사이언시즈, 인코포레이티드
Priority date: 2014-08-07
Filing date: 2015-08-07
Publication date: 2017-07-14
Also published as: IL250391B; EP3193876A1; SG11201700816YA; JP2020037588A; AU2015300825B2; BR112017002403A2; CA2957225A1; US20170226101A1; AU2019284149A1; US10316030B2; MX2017001620A; US10676472B2; JP6889101B2; CN106999490A; US20190359607A1; JP2021165286A; WO2016022969A1; EP3193876B1; EA201790337A1; EA037738B1

Abstract

본 발명은 화학식 (I)의 구조를 갖는 화합물의 결정성 염, 이의 제조 방법 및 이의 관련 약학적 제제에 관한 것이다. 본 발명은 또한 본 발명의 결정성 염을 투여하는 것을 포함하는 암 또는 면역학적 또는 신경학적 질환을 치료 또는 예방하는 방법에 관한 것이다.

Description

결정 형태의 글루타미나아제 억제제{CRYSTAL FORMS OF GLUTAMINASE INHIBITORS}

본 발명은 결정 형태의 글루타미나아제 억제제에 관한 것이다.

관련 출원

본 출원은 2014년 8월 7일자로 출원된 미국 가출원 제 62/034,547 호에 대한 우선권의 이점을 주장하며, 이의 내용을 본원에 참고로 인용한다.

글루타민은 대사 및 비-대사 기작을 통해 암세포의 세포 생존, 성장 및 증식을 지원한다. 능동적으로 증식하는 세포에서, 글루타민의 대사는 세포를 구성하는 빌딩 블록과 에너지의 주요한 공급원이다. 암세포가 성장하는 배지에서 글루타민이 제거되면, 세포의 성장이 멈추거나 죽는 경우가 빈번하다. 암세포에서 글루타민의 많은 부분이 세포에 흡수되어 글루타미나제 효소의 작용을 통해 글루타메이트로 전환된다. 따라서, 글루타미나제를 통해 글루타민을 글루타메이트로 전환시키는 것은 글루타민 대사의 조절 포인트이다.

복수(ascites) 종양 세포가 산소 존재하에서 글루코스 소비 및 락테이트 분비의 높은 비율을 보인 바르부르크(Warburg)의 관찰 이후, 연구자들은 암세포가 어떻게 대사 경로를 활용하여 능동적으로 증식할 수 있는지를 조사해왔다. 글루타민 대사가 세포가 복제할 수 있는 거대분자 합성을 어떻게 지원하는지 여러 보고서가 증명했다.

따라서, 글루타미제가 암과 같이 능동적으로 증식하는 세포를 특징으로 하는 질환의 치료를 위한 잠재적인 치료 표적이 되도록 이론화되어왔다. 양호한 약학적 성질을 갖는 적합한 글루타미나제 억제제의 부족은 임상 용도로 글루타미나제 억제제를 개발하는 것을 어렵게 하였다. 따라서, 생체 내 사용을 위해 특이적으로 제형화할 수 있는 글루타미나제 억제제의 생성은 새로운 종류의 치료법으로 이어질 수 있다. 구체적으로, 글루타미나제 억제제를 제조하고 제형화하기 위한 개선된 조성물 및 방법이 필요하다.

본 발명의 한 양태는 하기 화학식 (I)의 구조를 갖는 화합물의 결정성 화합물 또는 결정성 염에 관한 것이다:

(I).

본 발명의 다른 양태는 화학식 (I)의 결정성 화합물 및 결정성 염의 제조 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 화학식 (I)의 화합물의 결정성 화합물 또는 결정성 염 및 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는, 인간 환자에서의 사용에 적합한 약학적 제제를 제공한다. 특정 실시양태에서, 약학적 제제는 본원에 기재된 바와 같은 상태 또는 질환의 치료 또는 예방에 사용하기 위한 것일 수 있다. 특정 실시양태에서, 약학적 제제는 인간 환자에서의 정맥 내 사용에 적합하도록 발열원(pyrogen) 활성이 충분히 낮다.

본 발명은 또한 본 발명의 결정성 화합물 또는 결정성 염을 투여하는 것을 포함하는, 본원에 기재된 암, 면역학적 또는 신경학적 질환을 치료 또는 예방하는 방법을 제공한다.

도 1은 CB-839 HCl, 형태 I의 X-선 회절(XRD) 패턴이다.
도 2는 CB-839 HCl, 형태 II의 XRD 패턴이다.
도 3은 CB-839 TsOH의 XRD 패턴이다.
도 4는 CB-839 MsOH의 XRD 패턴이다.
도 5는 CB-839 HBr의 XRD 패턴이다.
도 6은 CB-839, 유리 염기, 형태 B의 XRD 패턴이다.
도 7은 CB-839, 유리 염기, 형태 A의 XRD 패턴이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 하기 화학식 (I)의 구조를 갖는 결정성 화합물 또는 하기 화학식 (I)의 구조를 갖는 화합물의 결정성 염을 제공한다:

(I).

특정 실시양태에서, 본 발명은 화학식 (I)의 화합물의 결정성 화합물 또는 결정성 염 및 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는 약학적 제제를 제공한다. 특정 실시양태에서, 약학적 제제는 본원에 기재된 바와 같은 상태 또는 질환의 치료 또는 예방에 사용하기 위한 것일 수 있다. 특정 실시양태에서, 약학적 제제는 인간 환자에서의 정맥 내 사용에 적합하도록 발열원 활성이 충분히 낮다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 화학식 (I)의 화합물의 결정성 화합물 또는 결정성 염을 투여하는 것을 포함하는, 암 또는 면역학적 또는 신경학적 질환의 치료 또는 예방 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 화학식 (I)의 구조를 갖는 화합물의 결정성 염을 제조하는 방법에 관한 것으로, a) 제 1 유기 용매 중에 화학식 (I)의 화합물의 유리 염기 슬러리를 제공하는 단계; b) 화학식 (I)의 화합물의 염을 포함하는 혼합물을 형성하기에 충분한 조건하에 산 및 임의로 제 2 유기 용매를 포함하는 시약 용액과 유리 염기 슬러리를 접촉시키는 단계; 및 c) 화학식 (I)의 화합물의 염을 포함하는 혼합물로부터 화학식 (I)의 화합물의 염을 결정화하는 단계를 포함한다.

본원에 기재된 임의의 결정성 화합물 또는 이의 결정성 염은 본원에 개시된 임의의 질환 또는 상태의 치료를 위한 약제의 제조에 사용될 수 있다.

특정 실시양태에서, 결정성 염은 하이드로클로라이드 염, 톨루엔설포네이트 염, 니트레이트 염, 메탄설포네이트 염 또는 하이드로브로마이드 염이다. 특정 실시양태에서, 결정성 염은 하이드로클로라이드 염이다.

특정 실시양태에서, 본 발명의 염은 하나 이상의 결정 형태로 조립될 수 있다. 예시적인 실시양태에서, 화학식 (I)의 구조를 갖는 화합물의 결정성 하이드로클로라이드 염은 하기에 상세히 기술된 바와 같이 "형태 I" 및 "형태 II"로서 존재한다.

특정 실시양태에서, 결정성 염의 다형체는 분말 X-선 회절(XRD)에 의해 특성화된다. θ는 도 단위로 측정된 회절 각을 나타낸다. 특정 실시양태에서, XRD에 사용된 회절계는 회절 각 θ의 2배로서 회절 각을 측정한다. 따라서, 특정 실시양태에서, 본원에 기술된 회절 패턴은 각도 2θ에 대해 측정된 X-선 세기를 나타낸다.

특정 실시양태에서, 결정성 HCl 염의 형태 I은 2θ 값 16.70; 17.26; 21.09; 및 22.69를 갖는다. 추가의 실시양태에서, 형태 I는 2θ 값 16.70; 17.26; 18.18; 21.09; 22.69; 23.46; 25.22; 25.49; 및 26.72를 갖는다. 또 하나의 실시양태에서, 형태 I는 2θ 값 9.53; 11.63; 16.70; 17.26; 18.18; 19.10; 19.80; 21.09; 22.16; 22.69; 23.46; 24.63; 25.22; 25.49; 25.91; 26.72; 28.45; 29.38; 31.39; 31.82; 및 34.91을 갖는다. 또 하나의 실시양태에서, 형태 I는 2θ 값 8.62; 9.53; 11.63; 15.89; 16.70; 17.26; 18.18; 19.10; 19.80; 21.09; 22.16; 22.69; 23.46; 24.63; 25.22; 25.49; 25.91; 26.72; 28.45; 29.38; 31.39; 31.82; 32.76; 33.61; 33.74; 34.27; 34.91; 35.53; 39.36; 및 39.73을 갖는다.

특정 실시양태에서, 화학식 (I)의 화합물의 결정성 HCl 염의 형태 I은 실질적으로 도 1에 도시된 바와 같은 XRD 패턴을 갖는다.

특정 실시양태에서, 결정성 HCl의 형태 II는 2θ 값 8.34; 18.83; 및 21.10을 갖는다. 추가의 실시양태에서, 현태 II는 2θ 값 6.26; 8.34; 15.82; 18.83; 21.10; 23.42; 24.10; 24.45; 25.25; 및 25.74를 갖는다. 또 하나의 실시양태에서, 형태 II는 2θ 값 6.26; 8.34; 11.02; 12.58; 14.80; 15.61; 15.82; 17.58; 18.20; 18.83; 19.81; 20.00; 21.10; 22.58; 23.42; 24.10; 24.45; 25.25; 25.74; 26.36; 27.83; 28.70; 29.84; 30.46; 31.81; 및 32.38을 갖는다. 또 하나의 실시양태에서, 형태 II는 2θ 값 3.10; 6.26; 8.34; 9.04; 9.96; 11.02; 12.58; 13.47; 14.80; 15.61; 15.82; 16.15; 17.58; 18.20; 18.83; 19.81; 20.00; 21.10; 22.02; 22.58; 23.42; 24.10; 24.45; 25.25; 25.74; 26.36; 27.22; 27.83; 28.70; 29.84; 30.46; 31.81; 32.38; 33.23; 35.68; 36.57; 37.40; 39.36; 및 41.79를 갖는다.

특정 실시양태에서, 화학식 (I)의 화합물의 결정성 HCl 염의 형태 II는 실질적으로 도 2에 도시된 바와 같은 XRD 패턴을 갖는다.

특정 실시양태에서, 화학식 (I)의 화합물의 염은 다이(하이드로클로라이드) 염이다. 이러한 특정 실시양태에서, 상기 염은 무정형이다.

특정 실시양태에서, 본 발명의 유리 염기는 하나 이상의 결정 형태로 조립될 수 있다. 예시적인 실시양태에서, 화학식 (I)의 구조를 갖는 화합물의 결정성 유리 염기는 하기에 상세히 기술되는 바와 같이 "형태 A", "형태 B" 또는 이의 혼합물로서 존재한다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 화학식 (I)의 유리 염기 결정성 화합물에 관한 것이다. 특정 실시양태에서, 결정성 유리 염기의 형태 B는 2θ 값 18.39; 19.10; 21.37; 24.65를 갖는다. 추가의 실시양태에서, 결정성 유리 염기의 형태 B는 2θ 값 7.92; 18.39; 19.10; 20.12; 21.37; 24.10; 24.65; 25.14를 갖는다. 또 다른 실시양태에서, 결정성 유리 염기의 형태 B는 2θ 값 7.32; 7.92; 11.98; 15.54; 15.87; 18.06; 18.39; 19.10; 20.06; 20.12; 21.37; 22.41; 22.74; 24.10; 24.65; 25.14; 25.78; 27.32를 갖는다. 추가의 실시양태에서, 결정성 유리 염기의 형태 B는 2θ 값 3.64; 7.32; 7.92; 8.53; 9.30; 9.38; 11.02; 11.98; 14.70; 15.54; 15.87; 16.50; 16.59; 18.06; 18.39; 19.10; 20.06; 20.12; 20.61; 21.37; 21.89; 22.41; 22.74; 23.72; 24.10; 24.65; 25.14; 25.78; 26.49; 27.32; 27.55; 28.26; 29.88; 31.20; 31.80; 31.52; 32.80; 34.30; 35.20; 36.41; 38.53; 40.08; 40.94; 및 43.86을 갖는다. 다른 실시양태에서, 결정성 유리 염기의 형태 B는 실질적으로 도 6에 도시된 바와 같은 XRD 패턴을 갖는다.

특정 실시양태에서, 결정성 유리 염기의 형태 A는 2θ 값 7.57; 18.50; 18.69를 갖는다. 특정 실시양태에서, 결정성 유리 염기의 형태 A는 2θ 값 7.57; 9.67; 11.00; 12.93; 15.20; 18.50; 18.69; 23.33; 24.87을 갖는다. 특정 실시양태에서, 결정성 유리 경우의 형태 A는 2θ 값 5.47; 7.57; 9.67; 11.00; 12.93; 14.14; 15.20; 17.74; 18.50; 18.69; 19.40; 20.54; 21.13; 23.33; 24.37; 24.87; 25.52를 갖는다. 추가의 실시양태에서, 결정성 유리 염기의 형태 A는 2θ 값 5.47; 6.01; 7.57; 9.20; 9.67; 10.15; 11.00; 12.93; 14.14; 15.20; 15.81; 16.56; 17.74; 18.50; 18.69; 19.40; 19.94; 20.54; 20.59; 21.13; 22.00; 22.60; 23.33; 23.98; 24.37; 24.87; 25.52; 26.27; 26.62; 27.79; 29.59; 30.64; 33.30; 35.01; 37.93; 38.72를 갖는다. 다른 실시양태에서, 결정성 유리 염기의 형태 A는 실질적으로 도 7에 도시된 바와 같은 XRD 패턴을 갖는다.

특정 실시양태에서, 화학식 (I)의 결정성 화합물은 용매화되지 않는다(예를 들어, 결정 격자는 용매 분자를 포함하지 않는다). 특정의 다른 실시양태에서, 화학식 (I)의 결정성 화합물은 용매화된다.

특정 실시양태에서, 본 발명의 결정성 염 화합물은 화학식 (I)의 화합물의 전구약물의 염일 수 있으며, 예를 들어, 여기서 모 화합물 중의 C(O)-NH 잔기는 유도체화되어 아미드의 수소 원자를 가수분해되거나 그렇지 않으면 분해되어 상기 C(O)-NH 잔기를 복원할 수 있는 기로 대체한다. 이러한 특정 실시양태에서, 전구약물은 생체 내에서 활성 모 화합물로 대사된다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 화학식 (I)의 화합물의 결정성 화합물 또는 결정성 염 및 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다. 특정 실시양태에서, 약학 조성물은 정제, 캡슐 및 현탁액으로부터 선택된다.

본원에 사용된 "실질적으로 순수한"이란 용어는 90% 이상의 순수한 결정성 다형체를 지칭하는데, 이는 상응하는 무정형 화합물 또는 결정성 염의 다른 다형체를 포함하는 임의의 다른 화합물을 10% 미만으로 함유하는 것을 의미한다. 바람직하게는, 결정성 다형체는 95% 초과, 또는 심지어 98% 초과 순수한 것이다.

용어 "전구약물"은 생리학적 조건하에서 본 발명의 치료 활성제(예를 들어, 화학식 I의 화합물)로 전환되는 화합물을 포함하는 것으로 의도된다. 전구약물을 제조하는 통상적인 방법은 생리학적 조건하에서 가수분해되어 목적하는 분자를 나타내는 하나 이상의 선택된 잔기를 포함하는 것이다. 다른 실시양태에서, 전구약물은 숙주 동물의 효소적 활성에 의해 전환된다.

결정성 염의 제조 방법

특정 실시양태에서, 본 발명은 하기 화학식 (I)의 구조를 갖는 화합물의 결정성 염의 제조 방법에 관한 것으로, a) 제 1 유기 용매 중에 화학식 (I)의 화합물의 유리 염기 혼합물을 제공하는 단계; b) 화학식 (I)의 화합물의 염을 포함하는 혼합물을 형성하기에 충분한 조건하에 산 및 임의로 제 2 유기 용매를 포함하는 시약 용액과 상기 유리 염기 혼합물을 접촉시키는 단계; 및 c) 화학식 (I)의 화합물의 염을 포함하는 혼합물로부터 화학식 (I)의 화합물의 염을 결정화하는 단계를 포함한다.

특정 실시양태에서, 단계 b)에서 형성된 화학식 (I)의 화합물의 염을 포함하는 혼합물은 용액이다. 특정 실시양태에서, 단계 b)에서 형성된 혼합물은 슬러리 또는 현탁액이다.

특정 실시양태에서, 화학식 (I)의 화합물의 염을 포함하는 혼합물은 용액이고, 혼합물로부터 염을 결정화시키는 단계는 용액을 과포화시켜 화학식 (I)의 화합물의 염을 용액으로부터 침전시키는 것을 포함한다.

특정 실시양태에서, 화학식 (I)의 화합물의 염을 포함하는 혼합물을 과포화시키는 것은 헵탄, 헥산, 에탄올 또는 유기 용매와 혼화될 수 있는 다른 극성 또는 비극성 액체와 같은 항-용매(anti-solvent)를 서서히 첨가하거나, 용액을 (용액을 시딩(seeding)하거나 또는 시딩하지 않고) 냉각시키거나, 용액의 부피를 감소시키거나, 또는 이들의 임의의 조합을 포함한다. 특정 실시양태에서, 화학식 (I)의 화합물의 염을 포함하는 혼합물을 과포화시키는 것은 항-용매를 첨가하고, 용액을 주위 온도 이하로 냉각시키고, (예를 들어 용액으로부터 용매를 증발시킴으로써) 용액의 부피를 감소시키는 것을 포함한다. 특정 실시양태에서, 용액을 냉각시키는 것은 수동적(예를 들어, 용액을 주위 온도로 방치시키는 것) 또는 능동적(예를 들어, 얼음 욕 또는 냉동기에서 용액을 냉각시키는 것)일 수 있다.

특정 실시양태에서, 제조 방법은 예를 들어 염 결정을 여과하거나, 결정체로부터 유체를 디캔팅(decanting)하거나, 또는 임의의 다른 적절한 분리 기법에 의해, 염 결정을 단리시키는 것을 추가로 포함한다. 추가의 실시양태에서, 제조 방법은 결정을 세척하는 단계를 추가로 포함한다.

특정 실시양태에서, 제조 방법은 결정화를 유도하는 단계를 추가로 포함한다. 상기 방법은 또한 결정을 예를 들어 감압하에 건조시키는 것을 포함할 수 있다. 특정 실시양태에서, 침전 또는 결정화를 유도하는 것은 핵 생성이 시드(seed) 결정 또는 환경과의 상호작용(결정화기 벽, 교반 임펠러, 초음파 처리 등)에서 발생하는 2차 핵 형성을 포함한다.

특정 실시양태에서, 제 1 유기 용매 중의 화학식 (I)의 화합물의 유리 염기 혼합물은 슬러리이다. 특정 실시양태에서, 제 1 유기 용매 중의 화학식 (I)의 화합물의 유리 염기 혼합물은 용액이다.

특정 실시양태에서, 제 1 유기 용매 및, 존재하는 경우, 제 2 유기 용매는 아세토니트릴, N,N-다이메틸아세트아미드(DMA), 다이메틸폼아미드(DMF), 다이메틸설폭사이드(DMSO), 에탄올, 에틸 아세테이트, 헵탄, 헥산, 이소프로필 아세테이트, 메탄올, 메틸에틸 케톤, N-메틸-2-피롤리돈(NMP), 테트라하이드로푸란, 톨루엔, 2-프로판올, 1-부탄올, 물 또는 이들의 임의의 조합을 포함한다. 특정의 바람직한 실시양태에서, 유기 용매는 에탄올, 톨루엔, 테트라하이드로푸란 또는 아세토니트릴이다. 예시적인 실시양태에서, 제 1 유기 용매 및 제 2 유기 용매는 각각 독립적으로 에탄올 또는 아세토니트릴을 포함한다. 다른 실시양태에서, 제 1 유기 용매 및 제 2 유기 용매는 각각 독립적으로 다이메틸설폭사이드 또는 에탄올을 포함한다. 다른 실시양태에서, 제 1 유기 용매 및 제 2 유기 용매는 각각 독립적으로 N-메틸-2-피롤리돈 또는 에탄올을 포함한다.

특정 실시양태에서, 제 1 유기 용매 및, 존재하는 경우, 제 2 유기 용매는 동일하다. 대안적인 실시양태에서, 제 1 유기 용매 및, 존재하는 경우, 제 2 유기 용매는 상이하다.

특정 실시양태에서, 결정의 세척은 항-용매, 아세토니트릴, 에탄올, 헵탄, 헥산, 메탄올, 테트라하이드로푸란, 톨루엔, 물 또는 이들의 조합으로부터 선택된 액체로 세척하는 것을 포함한다. 본원에 사용된 "항-용매"는 염 결정이 불용성, 최소 가용성 또는 부분 용해성인 용매를 의미한다. 실제로, 염 결정이 용해된 용액에 항-용매를 첨가하면 용액 내 염 결정의 용해도가 감소되어 염의 침전을 촉진시킬 수 있다. 특정 실시양태에서, 결정은 항-용매와 유기 용매의 조합으로 세척된다. 특정 실시양태에서, 항-용매는 물이고, 다른 실시양태에서는 헥산 또는 펜탄과 같은 알칸 용매, 또는 벤젠, 톨루엔 또는 자일렌과 같은 방향족 탄화수소 용매이다. 특정 실시양태에서, 항-용매는 에탄올이다.

특정 실시양태에서, 결정을 세정하는 것은 화학식 (I)의 결정성 화합물을 용매 또는 전술한 하나 이상의 용매의 혼합물로 세척하는 것을 포함한다. 특정 실시양태에서, 용매 또는 용매 혼합물은 세척 전에 냉각된다.

특정 실시양태에서, 산은 염산, p-톨루엔설폰산, 메탄설폰산, 질산 또는 브롬화수소산이다. 본 방법의 특정 실시양태에서, 유리 염기 슬러리 및 시약 용액이 서로 접촉하는 반응 용기에서, 시약 용액의 산은 유리 염기 슬러리 중의 화학식 (I)의 화합물의 몰량의 약 1.0 내지 약 1.5배의 몰 비이다.

효소 억제제의 용도

글루타민은 질소, 탄소 및 에너지의 운반체로서 중요한 역할을 한다. 글루타민은 간의 우레아 합성에, 신장의 암모니아 생성(ammoniagenesis)에, 글루코스 생성(glucogenesis)에, 및 많은 세포에서 호흡기 연료로서 사용된다. 글루타민의 글루타메이트로의 전환은 미토콘드리아 효소인 글루타미나제("GLS")에 의해 개시된다. 상기 효소의 2가지 주요 형태, K-형 및 L-형이 존재하며, 이들은 글루타민에 대한 그의 Km 값 및 글루타메이트에 대한 반응에 의해 구별되며, 이때 Km 값 또는 미카엘리스 상수(Michaelis constant)는 최대 속도의 절반에 도달하는 데 필요한 기질의 농도이다. "간-형(liver-type)" 또는 GLS2로도 알려져 있는 L-형은 글루타민에 대한 높은 Km을 가지며, 글루타메이트 저항성이다. "신장-형(kidney-type)" 또는 GLS1으로도 알려져 있는 K-형은 글루타민에 대한 낮은 Km을 가지며, 글루타메이트에 의해 억제된다. 글루타미나제 C 또는 "GAC"로 지칭되는 GLS1의 대안적인 스플라이스 형태가 최근에 확인되었으며, GLS1의 유사한 활성 특성을 갖는다. 특정 실시양태에서, 상기 화합물은 GLS1, GLS2 및 GAC를 선택적으로 저해할 수 있다. 바람직한 실시양태에서, 상기 화합물은 GLS1 및 GAC를 선택적으로 저해한다.

단백질 합성의 기본 빌딩 블록으로 작용하는 것 이외에, 아미노산은 세포를 성장시키고 분열시키는 데 중요한 많은 과정에 기여하는 것으로 밝혀졌으며, 이것은 암세포에 대해 특히 그러하다. 암의 거의 모든 정의는 조절이상(dysregulated) 증식에 관한 언급을 포함한다. 암에서 글루타민 대사에 관한 많은 연구들은 많은 종양이 활성적인 글루타민 소비체임을 시사하고 있다

특정 실시양태에서, 본 발명은 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I)의 화합물의 결정성 화합물 또는 결정성 염을 사용하여 암 또는 면역학적 또는 신경학적 질환을 치료 또는 예방하는 방법이다.

본원에 사용된 장애 또는 상태를 "예방하는" 치료제는 통계적 샘플에서 치료되지 않은 대조군 샘플에 대해 치료된 샘플의 장애 또는 상태의 발생 또는 빈도를 감소시키는 화합물을 의미하거나, 또는 치료되지 않은 대조 샘플에 대해 장애 또는 상태의 하나 이상의 증상의 발병을 지연시키거나 중증도를 감소시키는 화합물을 의미한다. 따라서, 암의 예방은 예를 들어 통계적 및/또는 임상적으로 유의한 양으로 예를 들어 치료되지 않은 대조군에 비해 예방적 치료를 받는 환자군에서의 검출 가능한 암 성장의 수를 감소시키고/시키거나 치료되지 않은 대조군에 비해 치료된 집단에서 검출 가능한 암 성장의 출현을 지연시키는 것을 포함한다. 감염의 예방은 예를 들어 치료되지 않은 대조군에 대해 치료군에서의 감염의 진단 수를 감소시키고/시키거나 치료되지 않은 대조군에 대해 치료군에서의 감염 증상의 발병을 지연시키는 것을 포함한다. 통증의 예방은 예를 들어 치료되지 않은 대조군에 대해 치료군에서의 피험자가 경험하는 통증 감각의 크기를 감소시키거나 또는 대안으로 지연시키는 것을 포함한다.

용어 "치료하는"은 예방 및/또는 치료적 처치를 포함한다. 용어 "예방적 또는 치료적" 처치는 당해 분야에 공지되어 있으며, 하나 이상의 대상 조성물의 숙주에게의 투여를 포함한다. 원치않는 상태(예를 들면, 숙주 동물의 질환 또는 다른 원치않는 상태)의 임상적 징후 전에 투여되는 경우, 상기 처치는 예방적(즉, 원치않는 상태의 발생에 대해 숙주를 보호하는 것)인 반면, 원치않는 상태의 징후 이후에 투여되는 경우, 상기 처치는 치료적(즉, 기존의 원치않는 상태 또는 이의 부작용을 경감시키거나 개선하거나 또는 안정화시키기 위한 것)이다.

특정 실시양태에서, 암은 급성 림프모구성 백혈병(ALL), 급성 골수성 백혈병(AML), 부신피질 암종, 항문암, 충수암, 비정형 기형양/횡문근양 종양, 기저 세포 암종, 담관암, 방광암, 골암, 뇌종양, 성상세포종, 뇌 및 척수 종양, 뇌간 신경아교종, 중추신경계 비정형 기형양/횡문근양 종양, 중추신경계 배아 종양, 유방암, 기관지 종양, 버킷 림프종, 카르시노이드 종양, 비공지된 원발성 암종, 중추신경계 암, 자궁경부암, 소아암, 척삭종, 만성 림프구성 백혈병(CLL), 만성 골수성 백혈병(CML), 만성 골수증식성 장애, 결장암, 대장암, 두개인두종, 피부 T-세포 림프종, 유관 상피내 암종(DCIS), 배아 종양, 자궁내막암, 뇌실상의아세포종, 상의세포종, 식도암, 감각신경모세포종, 유잉 육종, 두개외 생식 세포 종양, 고환외 생식 세포 종양, 간외 담관암, 안암, 골의 섬유성 조직구종, 담낭암, 위암, 위장 카르시노이드 종양, 위장 간질 종양(GIST), 생식 세포 종양, 두개외 생식 세포 종양, 외배엽 생식 세포 종양, 난소 생식 세포 종양, 임신 영양막 종양, 신경아교종, 모발 세포 백혈병, 두경부암, 심장암, 간세포암, 조직구증, 랑게르한스 세포암, 호지킨 림프종, 하인두암, 안내 흑색종, 소도 세포 종양, 카포시 육종, 신장암, 랑게르한스 세포 조직구증, 후두암, 백혈병, 입술 및 구강 암, 간암, 소엽성 상피내 암종(LCIS), 폐암, 림프종, AIDS-관련 림프종, 마크로글로불린혈증, 남성 유방암, 수모세포종, 수질상피종, 흑색종, 메르켈 세포 암종, 악성 중피종, 잠복 원발성 전이성 편평 경부암, NUT 유전자를 수반하는 중간선관(Midline Tract) 암종, 입암, 다발성 내분비 신생물 증후군, 다발성 골수종/형질 세포 신생물, 균상식육종, 골수형성이상 증후군, 골수형성이상/골수증식성 신생물, 만성 골수성 백혈병(CML), 급성 골수성 백혈병(AML), 골수종, 다발성 골수종, 만성 골수증식성 장애, 비강암, 부비동암, 비인두암, 신경모세포종, 비-호지킨 림프종, 비-소세포 폐암, 구암, 구강암, 입술암, 구인두암, 골육종, 난소암, 췌장암, 유두종증, 부신경절종, 부비동암, 비강암, 부갑상선암, 음경암, 인두암, 크롬친화세포종, 중간 분화의 송과체 실질 종양, 송과체모세포종, 뇌하수체 종양, 형질 세포 신생물, 흉막폐 모세포종, 유방암, 원발성 중추신경계(CNS) 림프종, 전립선암, 직장암, 신장 세포암, 신우암, 요관암, 이행 세포암, 망막모세포종, 횡문근육종, 침샘암, 육종, 세자리 증후군, 피부암, 소세포 폐암, 소장암, 연조직 육종, 편평 세포 암종, 잠복 원발성 편평 경부암, 전이성, 위암, 천막상 원시 신경외배엽 종양, T-세포 림프종, 고환암, 인후암, 흉선종, 흉선 암종, 갑상선암, 신우 및 요관의 이행 세포암, 비공지된 원발성 임신 영양막 종양, 소아의 희귀암, 요도암, 자궁암, 자궁 육종, 발덴스트룀 마크로글로불린혈증 또는 윌름스 종양 중 하나 또는 변이체일 수 있다.

일부 경우에서, 종양유발 돌연변이는 글루타민 대사를 촉진한다. 종양유발 K-Ras를 발현하는 세포는 증가된 글루타민 사용을 나타낸다. 특정 실시양태에서, 암세포는 돌연변이된 K-Ras 유전자를 갖는다. 특정 실시양태에서, 암은 방광, 골수, 유방, 결장, 신장, 간, 폐, 난소, 췌장, 전립선, 피부 또는 갑상선의 조직과 연관된다. c-Myc 유전자는 많은 암에서 변형되는 것으로 알려져 있다. 증가된 Myc 단백질 발현은 글루타미나제의 증가된 발현과 상관되어, 글루타민 대사의 상향조절을 야기하였다. 특정 실시양태에서, 암세포는 종양유발 c-Myc 유전자 또는 증대된 Myc 단백질 발현을 갖는다. 일부 실시양태에서, 상기 암은 방광, 뼈, 장, 유방, 중추 신경계(예를 들면, 뇌), 결장, 소화기계(예를 들면, 위 및 장), 간, 폐, 난소, 전립선, 근육 및 피부의 조직과 연관된다.

신장 세포 암종(RCC), 투명 세포 유형(ccRCC)의 가장 일반적인 유형은 본 히펠-린단(von Hippel-Lindau)(VHL) 유전자 변이와 밀접하게 관련되어 있다. VHL-결핍 세포주는 글루코스로부터 지방산을 생성하는 능력의 손실로 인해 글루타민에 대한 요구가 증가하는 것으로 나타났다(문헌[Metallo et al, Nature 2013]). 글루타민에 대한 이러한 의존성은 세포가 글루타미나제 억제제에 대해 민감하게 한다(문헌[Gmeiro et al., Cell Metab. 2013]). 본 발명의 특정 실시양태는 VHL-결핍 암 치료를 위한 본원에 기재된 화합물의 용도에 관한 것이다. 특정 실시양태에서, 암은 RCC이다. 특정 실시양태에서, 암은 ccRCC이다.

글루타미나제 억제는 푸마레이트 하이드라타제(FH), 숙시네이트 탈수소효소(SDH) 또는 이소시트레이트 탈수소효소(IDH)를 비롯한 TCA 사이클 효소의 돌연변이 또는 결실을 갖는 특정 희귀 암에서 효과적일 수 있다. 글루타메이트는 이러한 돌연변이 또는 결실이 발생하는 곳의 TCA 사이클 상류로 공급된다. 연구 결과에 따르면 글루타민 대사는 푸마레이트와 석시네이트 합성에 중요하다. FH와 SDH 외에도 글루타민이 효소 이소시트레이트 탈수소효소에서 돌연변이를 일으키는 종양 환자에게 축적되는 또 다른 종양 형성의 원인인 2-하이드록시글루타트레이트의 생성에 기여한다는 증거가 있다. 따라서 글루타미나제의 억제제는 상류 출발 물질의 이용 가능성을 제한함으로써 이러한 돌연변이 또는 결실의 영향을 차단할 수 있다. FH의 희귀 돌연변이는 유전성 평활근종증 및 신장 세포 암(HLRCC)의 발달로 이어지고, 여기서 환자는 피부, 자궁 또는 신장의 종양을 분비할 수 있다. 일부 위장관 간질 종양(GIST)은 SDH의 발현 부족으로 인해 그리고 종종 유전성으로 인해 발생한다. 부신경절종으로 알려진 희귀한 두경부암, 갈색 세포종으로 알려진 희귀 부신 또는 추가 부신 암, 및 희귀 하위집합의 투명 세포 RCC를 지닌 환자에서 다른 SDH-기능 상실 돌연변이가 발견된다. 뇌암, 연골육종, 희귀 골암, 담관암, 희귀 담도 종양, AML, 고위험 골수이형성증/골수증식성 질환, 혈액 장애군 형태의 신경 교종을 가진 일부 환자는 IDH1 또는 IDH2 유발 돌연변이(driver mutation)를 갖는다. 본 발명의 특정 실시양태에서, 본원에 기술된 화합물은 FH, SDH 또는 IDH(1 및 2) 돌연변이로 동정된 질환의 치료에 사용될 수 있다. 특정 실시양태에서, 상기 질환은 유전성 평활근종증 또는 신장 세포암(HLRCC)이다. 특정 실시양태에서, 질환은 GIST, 부신경절종, 갈색세포종 또는 투명 세포 RCC이다. 특정 실시양태에서, 질환은 신경교종, 연골육종, 담관암, AML, 또는 골수이형성증/골수증식성 장애이다.

많은 암세포가 생존을 위해 외인성 글루타민에 의존하지만, 종양 세포 아형 중에서 글루타민 의존성 정도는 세포 집단을 글루타민의 감소에 더 민감하게 만들 수 있다. 한 예로서, 유방암의 유전자 발현 분석은 5개의 고유한 아형(루미날 A, 루미날 B, 기저세포, HER2+ 및 정상-유사 세포)을 확인하였다. 글루타민 결핍이 세포 성장 및 생존력에 영향을 미치긴 하지만, 기저-형(basal-like) 세포는 외인성 글루타민의 감소에 더 민감성일 것으로 생각된다. 이것은 글루타민이 기저양 유방암 세포주에서 매우 중요한 에너지원이라는 개념을 뒷받침하며, 글루타미나제 효소의 억제가 기저양 세포로 이루어진 유방암의 치료에 유리할 것임을 시사한다. 삼중-음성 유방암(TNBC)은 에스트로겐 수용체, 프로게스테론 수용체 및 인간 상피세포 성장인자 수용체 2 발현의 결여를 특징으로 한다. 상기 유방암은 화학치료후 더 높은 재발률, 및 다른 유방암 아형보다 불량한 예후를 갖는다. 흥미롭게, TNBC 세포와 기저양 유방암 세포 사이의 대사 프로파일링에 상당한 유사성이 존재하는 것으로 보인다(미공개 데이터). 따라서, 본 발명의 특정 실시양태는 TNBC 및 기저-형 유방암의 치료를 위한 본원에 기재된 화합물의 용도에 관한 것이다.

근육량의 대량 소실인 악액질은 종종 암 환자의 불량한 전신 활동도(performance status) 및 높은 사망률과 연관된다. 상기 과정을 뒷받침하는 이론은 종양이 식사에 의해 정상적으로 공급되는 것보다 많은 글루타민을 요하므로, 글루타민의 주 공급원인 근육이 종양에 충분한 영양분을 공급하기 위해 파괴되기 시작한다는 것이다. 따라서, 글루타미나제의 억제는 근육을 파괴할 필요를 감소시킬 수 있다. 특정 실시양태에서, 본 발명은 악액질을 예방하거나, 억제하거나 또는 감소시키기 위한 본 발명 화합물의 용도에 관한 것이다.

가장 일반적인 신경전달물질은 글루타미나제에 의해 글루타민의 효소적 전환으로부터 유도된 글루타메이트이다. 높은 수준의 글루타메이트는 신경독성인 것으로 밝혀졌다. 뉴런 세포에 외상성 손상 후에, 신경전달물질, 특히 글루타메이트 방출에 증가가 일어난다. 따라서, 글루타미나제의 억제는 뇌졸중과 같은 허혈성 손상 후의 치료 수단으로서 가설화되었다(뉴콤(Newcomb), PCT WO 99/09825). 헌팅턴병(Huntington's disease)은 점진적인 치명적 신경학적 질병이다. 헌팅턴병의 유전자 마우스 모델에서, 상기 질환의 초기 징후가 조절이상 글루타메이트 방출과 상관됨이 관찰되었다. HIV-연관 치매에서, HIV 감염된 대식세포는 상향조절된 글루타미나제 활성 및 증가된 글루타메이트 방출을 나타내어, 신경 손상을 유발한다. 유사하게, 또 다른 신경학적 질환에서, 레트 증후군(Rett Syndrome)에서 활성화된 미세아교세포(microglia)는 글루타메이트를 방출시켜 신경 손상을 야기한다. 과량의 글루타메이트 방출은 글루타미나제의 상향조절과 관련되었다. 감소된 글루타미나제 수준을 갖도록 사육된 마우스에서, 암페타민과 같은 정신병-자극 약물에 대한 민감성이 현저하게 감소되어, 글루타미나제 억제가 정신분열증의 치료에 유리할 수 있음을 시사하였다. 조울증(Bipolar disorder)은 조증과 우울증의 반복적 증상발현을 특징으로 하는 매우 파괴적인 병이다. 상기 질환은 리튬 및 발프로에이트와 같은 기분 안정제로 치료되지만; 상기 약물들의 만성적 사용은 글루타메이트 수용체의 풍부함을 증가시켜, 시간 경과에 따라 약물 효과의 감소를 야기할 수 있다. 따라서, 대안적 치료는 글루타미나제를 억제함으로써 글루타메이트의 양을 감소시키는 것일 수 있다. 이것은 기분 안정제와 병용되거나 병용되지않을 수 있다. N-메틸-D-아스파테이트 수용체(NMDAR)의 부분적 길항물질인 메만틴(memantine)은 알츠하이머병(Alzheimer's disease)의 치료에 승인된 치료제이다. 현재, 메만틴을 혈관성 치매 및 파킨슨병(Parkinson's disease)을 치료하는 수단으로 검토하는 연구가 수행되고 있다. 메만틴은 NMDA 글루타메이트 수용체를 또한 부분적으로 차단하는 것으로 밝혀졌기 때문에, 글루타미나제를 억제함으로써 글루타메이트 수준을 감소시키는 것이 또한 알츠하이머병, 혈관성 치매 및 파킨슨병을 치료할 수 있다고 추측하는 것이 지나치지 않다. 알츠하이머병, 조울증, HIV-연관 치매, 헌팅턴병, 허혈성 손상, 파킨슨병, 정신분열증, 뇌졸중, 외상성 손상 및 혈관성 치매는 글루타메이트의 증가된 수준과 상관된 신경학적 질환들 중 극히 일부이다. 따라서, 본원에 기술된 화합물로 글루타미나제를 억제하는 것은 신경학적 질환을 경감시키거나 예방할 수 있다. 그러므로, 특정 실시양태에서, 상기 화합물은 신경학적 질환의 치료 또는 예방에 사용될 수 있다.

T-림프구의 활성화는 세포 성장, 증식 및 사이토카인 생성을 유도함으로써, 세포에 에너지 및 생합성을 요구하게 된다. 글루타민은 뉴클레오티드 합성에 아민 기 공여체로서 작용하며, 글루타민 대사에서 첫 번째 성분인 글루타메이트는 아미노산 및 글루타티온 합성에서 직접적인 역할을 할 뿐 아니라, 에너지 생성을 위한 크렙스 회로(Krebs cycle)에 참여할 수 있다. 미토겐-유도성 T 세포 증식 및 사이토카인 생성은 높은 수준의 글루타민 대사를 요하므로, 글루타미나제를 억제하는 것은 면역 조절의 수단으로 작용할 수 있다. 염증성 자가면역 질환인 다발성 경화증에서, 활성화된 미세아교세포는 상향조절된 글루타미나제를 나타내며, 증가된 수준의 세포외 글루타메이트를 방출한다. 글루타민 수준은 패혈증, 부상, 화상, 수술 및 지구력 운동에 의해 저하된다. 상기 상황들은 개인들을 면역억제 위험에 처하게 한다. 사실상, 일반적으로, 글루타미나제 유전자 발현 및 효소 활성은 둘 다 T 세포 활성시에 증가된다. 골수 이식후 글루타민이 투여된 환자는 보다 낮은 수준의 감염을 야기하였으며 이식편 대 숙주 질환이 경감되었다. T 세포 증식 및 활성화는 많은 면역학적 질환, 예를 들면, 염증성 장 질환, 크론병(Crohn's disease), 패혈증, 건선, 관절염(류마티스성 관절염 포함), 다발성 경화증, 이식편 대 숙주 질환, 감염, 루푸스 및 당뇨병에 수반된다. 본 발명의 특정 실시양태에서, 본원에 기술된 화합물을 면역학적 질환을 치료 또는 예방하기 위해 사용할 수 있다.

간성 뇌병증(hepatic encephalopathy, HE)은 간 질환 또는 문맥대정맥 단락증(portosystemic shunting)을 갖는 환자에서 일련의 일시적이고 가역적인 신경학적 및 정신의학적 기능장애를 나타낸다. HE는 단일한 임상적 단위가 아니며, 가역적인 대사성 뇌병증, 뇌위축, 뇌부종 또는 이들 요인들의 조합을 반영할 수 있으나; 현재의 가설은 주로 장으로부터 유래된 암모니아의 축적이 병리생리학에서 핵심 역할을 한다는 것이다. 소장, 신장 및 근육 합성에서 글루타민의 탈아민화는 모두 암모니아 생성에 기여한다. 간세포 청소 또는 문맥대정맥 단락증에 의해 야기된 손상된 간 청소율은 암모니아의 증가된 축적을 야기한다. 암모니아 독성은, 암모니아를 대사시켜 증가된 글루타민을 생성하는 글루타민 합성효소에 의해 뇌에서 성상교세포(astrocyte)에 영향을 미친다. 이어서, 글루타민은 성상교세포 내로 물을 유인하여, 미토콘드리아의 팽윤 및 산화성 기능장애를 야기한다. 야기된 뇌부종은 HE에서 보인 신경학적 기능장애에 기여하는 것으로 생각된다. 본 발명의 특정 실시양태에서, 본원에 기술된 화합물은 HE를 치료 또는 예방하기 위해 사용될 수 있다.

후근신경절(dorsal root ganglion)에서 1차 감각 뉴런은 염증후에 그의 글루타미나제 효소 활성을 상승시키는 것으로 밝혀졌다. 야기된 증가된 글루타메이트 생성은 통증으로 확인되는 중추 및 말초 감각 둘 다에 원인이 되는 것으로 생각된다. 본 발명의 한 양태는 통증의 치료 또는 감소를 위한 본 발명 화합물의 용도이다. 특정 실시양태에서, 통증은 신경병증성 통증, 화학치료-유도성 통증 또는 염증성 통증일 수 있다.

고혈당 수준, 고인슐린 수준 및 인슐린 저항성은 당뇨병을 발생시키는 데 있어 위험 인자이다. 유사하게, 고혈압은 심혈관 질환을 발생시키는 위험 인자이다. 대규모 인간 코호트(cohort) 연구로부터의 최근의 보고에서, 상기 4가지 위험 인자들은 혈류에서 글루타민-대-글루타메이트 비와 역상관되었다. 또한, 혈장 글루타민-대-글루타메이트 비는 12년 동안 당뇨병의 최종 발생률과 역상관되었다. 동물 모델에 의한 실험은 상기 결과와 일치하였다. 글루타민-풍부 먹이를 공급받은 마우스는 6시간의 금식 후에 당부하 검사에서 더 낮은 혈당 수준을 나타내었으며, 마우스내로의 글루타민의 복강내 주사는 그의 혈압을 신속히 저하시켰다. 그러므로, 증가된 글루타민 수준을 야기하고 글루타메이트 수준을 감소시키는 글루타미나제 억제제가 당뇨병 및 심혈관 질환의 발생률을 감소시킬 것임은 타당하다. 특히, 간 및 소장은 당뇨병 동물에서 글루타민 활용의 주요 부위이고, 글루타미나제 활성은 스트렙토조토신-유도성 당뇨병 래트에서 상기 장기들에서 정상보다 높다(문헌[Watford et al., Biochem J (1984)]; [Mithieux et al., Am J Physiol Endrocrinol Metab (2004)]). 본 발명의 특정 실시양태에서, 본원에 기술된 화합물은 당뇨병을 치료하기 위해 사용될 수 있다. 본 발명의 다른 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 고혈압을 감소시키기 위해 사용될 수 있다.

특정 실시양태에서, 암 또는 면역학적 또는 신경학적 질환을 치료 또는 예방하는 방법은 화학치료제와 함께 본원에 기재된 화학식 (I)의 결정성 화합물 또는 이의 염을 투여하는 단계를 포함할 수 있다. 본 발명의 화합물과 함게 투여될 수 있는 화학치료제는 다음을 포함한다: 아미노글루테티미드(aminoglutethimide), 암사크린(amsacrine), 아나스트로졸(anastrozole), 아스파라기나제(asparaginase), 바실루스 칼메트-게링 백신(bcg), 바이칼루타미드(bicalutamide), 블레오마이신(bleomycin), 부세렐린(buserelin), 부설판(busulfan), 캄포테신(campothecin), 카페시타빈(capecitabine), 카보플라틴(carboplatin), 카르무스틴(carmustine), 클로람부실(chlorambucil), 클로로퀸(chloroquine), 시스플라틴(cisplatin), 클라드리빈(cladribine), 클로드로네이트(clodronate), 콜히친(colchicine), 사이클로포스파미드(cyclophosphamide), 시프로테론(cyproterone), 시타라빈(cytarabine), 다카바진(dacarbazine), 닥티노마이신(dactinomycin), 다우노루비신(daunorubicin), 데메톡시비리딘(demethoxyviridin), 다이클로로아세테이트(dichloroacetate), 디에네스트롤(dienestrol), 다이에틸스틸베스트롤(diethylstilbestrol), 도세탁셀(docetaxel), 독소루비신(doxorubicin), 에피루비신(epirubicin), 에스트라디올(estradiol), 에스트라무스틴(estramustine), 에토포시드(etoposide), 에베롤리무스(everolimus), 엑스메스탄(exemestane), 필그라스팀(filgrastim), 플루다라빈(fludarabine), 플루드로코르티손(fludrocortisone), 플루오로우라실(fluorouracil), 플루옥시메스테론(fluoxymesterone), 플루타미드(flutamide), 겜시타빈(gemcitabine), 제니스테인(genistein), 고세렐린(goserelin), 하이드록시우레아(hydroxyurea), 이다루비신(idarubicin), 이포스파미드(ifosfamide), 이마티닙(imatinib), 인터페론(interferon), 이리노테칸(irinotecan), 레트로졸(letrozole), 류코보린(leucovorin), 류프롤리드(leuprolide), 레바미솔(levamisole), 로무스틴(lomustine), 로니다민(lonidamine), 메클로레타민(mechlorethamine), 메드록시프로게스테론(medroxyprogesterone), 메게스트롤(megestrol), 멜팔란(melphalan), 머캅토푸린(mercaptopurine), 메스나(mesna), 메트포민(metformin), 메토트렉세이트(methotrexate), 미토마이신(mitomycin), 미토테인(mitotane), 미토잔트론(mitoxantrone), 닐루타미드(nilutamide), 노코다졸(nocodazole), 옥트레오티드(octreotide), 옥살리플라틴(oxaliplatin), 파클리탁셀(paclitaxel), 파미드로네이트(pamidronate), 펜토스타틴(pentostatin), 페리포신(perifosine), 플리카마이신(plicamycin), 포르피머(porfimer), 프로카바진(procarbazine), 랄티트렉세드(raltitrexed), 리툭시맙(rituximab), 소라페닙(sorafenib), 스트렙토조신(streptozocin), 수니티닙(sunitinib), 슈라민(suramin), 타목시펜(tamoxifen), 테모졸로미드(temosolomide), 템시롤리무스(temsirolimus), 테니포시드(teniposide), 테스토스테론(testosterone), 티오구아닌(thioguanine), 티오테파(thiotepa), 티타노센 다이클로라이드(titanocene dichloride), 토포테칸(topotecan), 트라스투주맙(trastuzumab), 트레티노인(tretinoin), 빈블라스틴(vinblastine), 빈크리스틴(vincristine), 빈데신(vindesine) 또는 비노렐빈(vinorelbine).

많은 병용 요법이 암 치료를 위해 개발되었다. 특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 병용 요법과 함께 투여될 수 있다. 본 발명의 화합물과 함께 투여될 수 있는 병용 요법의 예가 표 1에 포함되어 있다.

[표 1]

암 치료를 위한 예시적 병용 요법

특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 면역 조절제와 함께 투여될 수 있다. 본 발명의 화합물이 병용 요법으로 투여될 수 있는 면역 조절제의 예는 과립구 콜로니-자극 인자(G-CSF), 인터페론, 이미키모드, IL-2, IL-7, IL-12, 다양한 케모카인, 합성 시토신 포스페이트-구아노신(CpG) 올리고데옥시뉴클레오타이드, 글루칸, 및 합성 소분자 예를 들어 아프레밀라스트, CC-122, CC-11006, CC-10015, 레날리도미드, 포말리도미드 및 탈리도미드를 포함한다. 특정 실시양태에서, 면역 조절제는 탈리도마이드 유사체 예를 들어 WO 1999/46258, WO 2008/033567, WO 2010/093434, WO 2010/093605, WO 2011/100380, 및 WO 2012/097116에 개시된 것들이다.

특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 효소 억제제(예를 들어, 키나아제 억제제), 유사분열 억제제, DNA-개질제 및 시티딘 유사체로부터 선택되는 항암제와 함께 투여될 수 있다. 본 발명의 화합물이 병용 요법으로 투여될 수 있는 항암제의 예는 미세소관 어셈블리 억제제, AKT 억제제, mTOR 억제제, MEK 억제제, RTK 억제제, ATM 억제제, ATR 억제제, PI3K 억제제, EGFR 억제제, B-Raf 억제제, C-키트 억제제, DNA 가교제, DNA 인터칼레이트제 및 시티딘 유사체를 포함한다. 특정 실시양태에서, 항암제는 빈크리스틴, 카보플라틴, 시스플라틴, 겜시타빈, MK2206, 에베롤리무스, 트라메티닙, 수니티닙, 소라페닙, BEZ235, 파클리탁셀, 도세탁셀, 에로티닙, 셀루메티닙, 시롤리무스, 트라메티닙, 템시롤리무스, 파조파닙 또는 GSK1120212를 포함한다.

암세포의 증식은 지질 합성을 요한다. 정상적으로, 지질 합성에 사용되는 아세틸-coA는 당분해(glycolysis)로부터 유도되는 피루베이트의 미토콘드리아 풀로부터 생성된다. 하지만, 종양 환경에서 통상적으로 발견되는 바와 같은 저산소 조건하에서, 미토콘드리아내에서 피루베이트의 아세틸-coA로의 전환은 하향조절된다. 최근의 연구는 상기 저산소 조건하에서 세포는 대신 지질 합성을 위해 아세틸-coA를 제조하기 위해 알파-케토글루타레이트의 환원성 카복시화를 포함하는 경로를 이용하는 것으로 주로 전환됨을 밝혔다. 상기 경로에서 제 1 단계는 글루타미나제 효소에 의해 글루타민을 글루타메이트로 전환시키는 것을 포함한다. 이어서, 글루타메이트는 알파-케토글루타레이트로 전환되고, 생성된 알파-케토글루타레이트는 이소시트레이트 데하이드로게나제 효소에 의해 매개되는 환원성 카복시화 단계에서 이소시트레이트로 전환된다. 상기 환원성 카복시화 경로로의 전환은 또한 손상된 미토콘드리아, 또는 당분해성 피루베이트를 아세틸 coA로 전환시키는 효소의 유도를 위한 손상된 신호를 함유하는 일부 신장암 세포주에서도 일어난다. 유사한 전환이 메트포민, 로테논 및 안티마이신과 같은 미토콘드리아 호흡 연쇄 억제제에 노출된 세포에서도 일어난다. 그러므로, 본 발명의 일부 실시양태에서, 지질 합성을 위한 글루타미나제-의존성 경로에 대한 암세포의 의존성을 증가시키는 동시에 상기 경로를 억제하기 위해 미토콘드리아 호흡 연쇄 억제제 및 글루타미나제 억제제의 조합을 이용하는 것을 제안한다.

종양 세포에서 당분해에 대한 증가된 의존성은 저산소성 종양 환경이 미토콘드리아 호흡을 손상시키기 때문인듯 하다. 또한, 글루코스의 고갈은 MYC 발암유전자로 형질전환된 세포에서 세포자멸(apoptosis)을 유도한다. 상기 결과들은 당분해를 억제하는 것이 암세포 증식을 방지하는 데 치료 가치를 가질 것임을 시사한다. 현재 많은 입증된 당분해 억제제들이 있다. 그러나, 자오(Zhao) 등(2012)이 지적한 바와 같이, "이용가능한 당분해 억제제는 일반적으로 별로 유효하지 않으며, 고용량이 필요하여, 고수준의 전신 독성을 야기할 수 있다". 암세포는 전형적으로 정상 세포보다 높은 수준으로 글루코스 및 글루타민을 둘 다 이용하여, 상기 대사물 각각의 사용을 손상시키는 것이 상승 효과를 가질듯 하다. 그러므로, 본 발명의 일부 실시양태에서, 당분해 경로 억제제 및 글루타미나제 억제제의 조합을 사용하는 것을 제안한다. 상기 당분해 억제제로는 2-데옥시글루코스, 로니다민, 3-브로모피루베이트, 이마티닙, 옥시티아민, 라파마이신 및 그의 약리학적 등가물이 포함된다. 당분해는 폴리(ADP-리보스) 폴리머라제에 의해 활성화된 경로를 통해 DNA 알킬화제에 의해 유도된 DNA 손상에 의해 NAD+를 고갈시킴으로써 간접적으로 억제될 수 있다. 그러므로, 본 발명의 특정 실시양태에서, DNA 알킬화제와 글루타미나제 억제제의 조합을 사용하는 것을 제안한다. 암세포는 당분해 경로와 함께 펜토스 포스페이트 경로를 이용하여 글루코스로부터 유도된 대사 중간체를 생성한다. 그러므로, 본 발명의 또 다른 실시양태에서, 본 발명자들은 글루타미나제 억제제와 함께 6-아미노니코틴아미드와 같은 펜토스 포스페이트 억제제의 조합을 사용하는 것을 제안한다.

특정 실시양태에서, 본 발명의 결정성 화합물 또는 염은 비-화학적 암 치료 방법과 함께 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 방사선 치료와 함께 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 수술과 함께, 열소작(thermoablation)과 함께, 집속 초음파 치료와 함께, 냉동요법(cryotherapy)과 함께, 또는 이들의 임의의 조합과 함께 투여될 수 있다.

특정 실시양태에서, 본 발명의 상이한 화합물들은 하나 이상의 본 발명의 다른 화합물들과 함께 투여될 수 있다. 또한, 상기 조합들은 암, 면역학적 또는 신경학적 질환의 치료에 적합한 다른 약제, 예를 들면, 상기에 확인된 약제들과 같은 다른 치료제와 함께 투여될 수 있다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 a) 하나 이상의 단일 투여형의 본 발명의 결정성 화합물 또는 염; b) 하나 이상의 단일 투여형의 전술한 바와 같은 화학치료제; 및 c) 본 발명의 결정성 화합물 또는 염 및 화학치료제의 투여를 위한 설명서를 포함하는 키트를 제공한다.

본 발명은 다음을 포함하는 키트를 제공한다:

a) 본 발명의 결정성 화합물 또는 염을 포함하는 약학 제형(예를 들면, 하나 이상의 단일 투여형); 및

b) 예를 들면, 상기 논의한 임의의 질병을 치료 또는 예방하기 위한 약학 제형의 투여를 위한 설명서.

특정 실시양태에서, 상기 키트는 또한 상기 언급한 바와 같은 화학치료제와 함께 본 발명의 결정성 화합물 또는 염을 포함하는 약학 제형의 투여를 위한 설명서를 포함한다. 특정 실시양태에서, 상기 키트는 또한 상기 언급한 바와 같은 화학치료제를 포함하는 제 2의 약학 제형(예를 들면, 하나 이상의 단일 투여형으로서)을 포함한다.

약학 조성물

특정 실시양태에서, 본 발명은 화학식 I의 화합물의 결정성 화합물 또는 염 및 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다.

예시적인 약학적으로 허용가능한 부형제는 본원에 제시되며, 예를 들어 결합제, 붕해제, 윤활제, 정화제, 가용화제, 현탁 보조제, 유화제, 코팅제, 시클로덱스트린 및/또는 완충제를 포함한다. 투여량은 증상, 환자의 연령 및 체중, 치료되거나 예방될 장애의 성질 및 중증도, 투여 경로 및 약물의 형태에 따라 다르지만, 일반적으로, 0.01 내지 3000 mg의 화합물의 일일 투여량이 성인 인간 환자에게 권장되고, 이것은 단일 용량 또는 분할 용량으로 투여될 수 있다. 단일 투여 형태를 제조하기 위해 담체 물질과 조합될 수 있는 활성 성분의 양은 일반적으로 치료 효과를 생성하는 화합물의 양일 것이다.

주어진 환자에서의 치료 효능 측면에서 가장 효과적인 결과를 산출할 정확한 투여 시간 및/또는 조성물의 양은 특정 화합물의 활성, 약동학 및 생체이용률, 환자의 생리적 조건(예컨대, 성별, 병 유형 및 단계, 일반적인 신체 상태, 주어진 투여량에 대한 반응성, 약물의 종류 등), 투여 경로 등에 의존할 것이다. 그러나 상기 지침은 치료의 미세 조정을 위한 기초로서 사용될 수 있으며, 예를 들어, 최적의 시간 및/또는 투여량을 결정하는 것이 사용될 수 있는데, 이는 피험자를 모니터링하고 투여량 및/또는 타이밍을 조정하는 것으로 구성되는 일상적인 실험을 필요로 하지 않을 것이다.

특정 실시양태에서, 조성물이 투여되는 개체는 인간 또는 비-인간 포유동물과 같은 포유동물이다. 동물, 예를 들면, 인간에게 투여될 때, 조성물 또는 화합물은 바람직하게는, 예를 들면, 본 발명의 화합물 및 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학 조성물로서 투여된다. 약학적으로 허용가능한 담체는 당분야에 공지되어 있으며, 예를 들면, 물 또는 생리학적 완충 식염수 또는 다른 용매 또는 비히클, 예를 들면, 글리콜, 글리세롤, 올리브유와 같은 오일, 또는 주사가능한 유기 에스테르를 포함한다. 바람직한 실시양태에서, 상기 약학 조성물이 인간 투여용, 특히 침습성 투여 경로(즉, 상피 장벽을 통한 이동 또는 확산을 배제하는 주사 또는 피하주입과 같은 경로)용인 경우, 수용액은 피로겐을 함유하지 않거나, 또는 실질적으로 피로겐을 함유하지 않는다. 부형제는, 예를 들면, 약제의 지연된 방출을 수행하도록, 또는 하나 이상의 세포, 조직 또는 장기를 선택적으로 표적화하도록 선택될 수 있다. 약학 조성물은 정제, 캡슐(스프링클 캡슐 및 젤라틴 캡슐 포함), 과립, 재구성용 동결건조물, 분말, 용액, 시럽, 좌약, 주사 등과 같은 단위 투여형일 수 있다. 조성물은 또한 경피 전달 시스템, 예를 들면, 피부 패치로 존재할 수 있다. 조성물은 안 점막 투여를 통해 점안제와 같은 국소 투여에 적합한 용액으로 존재할 수 있다.

약학적으로 허용가능한 담체는, 예를 들면, 본 발명의 화합물과 같은 화합물을 안정화시키거나, 용해도를 증가시키거나 또는 그 흡수를 증가시키도록 작용하는 생리학적으로 허용되는 약제를 함유할 수 있다. 상기 생리학적으로 허용되는 약제로는, 예를 들면, 탄수화물, 예를 들어, 글루코스, 슈크로스 또는 덱스트란, 산화방지제, 예를 들어, 아스콜브산 또는 글루타티온, 킬레이트화제, 저분자량 단백질 또는 기타 안정화제 또는 부형제가 포함된다. 생리학적으로 허용되는 약제를 포함하여 약학적으로 허용가능한 담체의 선택은, 예를 들면, 조성물의 투여 경로에 따라 달라진다. 제제 또는 약학 조성물은 자가유화 약물 전달 시스템 또는 자가미세유화 약물 전달 시스템일 수 있다. 약학 조성물(제제)는 또한 그 안에, 예를 들면, 본 발명의 화합물이 혼입될 수 있는 리포솜 또는 다른 중합체 매트릭스일 수 있다. 예를 들면, 인지질 또는 다른 지질을 포함하는 리포솜은 제조 및 투여하기에 비교적 간단한, 무독성이고 생리학적으로 허용되며 대사가능한 담체이다.

"약학적으로 허용가능한"이란 어구는 본원에서, 타당한 의학적 판단의 범위내에서, 과도한 독성, 자극, 알레르기 반응, 또는 다른 문제 또는 합병증 없이, 적정한 이익/위험비에 상응하여, 인간 및 동물의 조직과 접촉하여 사용하기에 적합한 화합물, 물질, 조성물 및/또는 투여형을 지칭하기 위해 사용된다.

본원에서 사용된 바와 같은 "약학적으로 허용가능한 담체"란 어구는 액체 또는 고체 충전제, 희석제, 부형제, 용매 또는 캡슐화 물질과 같은 약학적으로 허용가능한 물질, 조성물 또는 비히클을 의미한다. 각각의 담체는 제형의 다른 성분들과 상용가능하고 환자에게 해롭지 않은 면에서 "허용가능"해야 한다. 약학적으로 허용가능한 담체로 사용될 수 있는 물질의 몇몇 예로는 다음이 포함된다: (1) 당, 예를 들면, 락토스, 글루코스 및 슈크로스; (2) 전분, 예를 들면, 옥수수 전분 및 감자 전분; (3) 셀룰로스 및 그의 유도체, 예를 들면, 나트륨 카복시메틸 셀룰로스, 에틸 셀룰로스 및 셀룰로스 아세테이트; (4) 분말화 트라가칸트; (5) 맥아; (6) 젤라틴; (7) 활석; (8) 부형제, 예를 들면, 코코아 버터 및 좌약용 왁스; (9) 오일, 예를 들면, 낙화생유, 면실유, 홍화유, 호마유, 올리브유, 옥수수유 및 대두유; (10) 글리콜, 예를 들면, 프로필렌 글리콜; (11) 폴리올, 예를 들면, 글리세린, 솔비톨, 만니톨 및 폴리에틸렌 글리콜; (12) 에스테르, 예를 들면, 에틸 올리에이트 및 에틸 라우레이트; (13) 한천; (14) 완충제, 예를 들면, 수산화마그네슘 및 수산화알루미늄; (15) 알긴산; (16) 피로겐-비함유수; (17) 등장성 식염수; (18) 링거액; (19) 에틸 알콜; (20) 포스페이트 완충액; 및 (21) 약학 제형에 사용되는 기타 무독성 상용성 물질. 특정 실시양태에서, 본 발명의 약학 조성물은 비-열원성, 즉 환자에게 투여될 때 상당한 온도 상승을 유발하지 않는다.

용어 "약학적으로 허용가능한 염"은 화합물의 비교적 비-독성인 무기 및 유기 산 부가염을 지칭한다. 이들 염은 화합물의 최종 단리 및 정제 중에 동일 반응계내(in-situ)에서 제조될 수 있거나, 또는 유리 염기 형태의 정제된 화합물을 적합한 유기 또는 무기산과 개별적으로 반응시키고, 형성된 염을 단리함으로써 제조될 수 있다. 대표적인 염은 하이드로브로마이드, 하이드로클로라이드, 설페이트, 바이설페이트, 포스페이트, 니트레이트, 아세테이트, 발러레이트, 올리에이트, 팔미테이트, 스테아레이트, 라우레이트, 벤조에이트, 락테이트, 포스페이트, 토실레이트, 시트레이트, 말리에이트, 푸마레이트, 석시네이트, 타르트레이트, 나프틸레이트, 메실레이트, 글루코헵토네이트, 락토바이오네이트, 라우릴설포네이트 염 및 아미노산염 등을 포함한다. 결정성 염의 제조는 하기 실시예에서 상세히 기술된다(예를 들어, 문헌[Berge et al. (1977) "Pharmaceutical Salts", J. Pharm. Sci. 66: 1-19] 참조).

다른 경우, 본 발명의 방법에 유용한 화합물은 하나 이상의 산성 작용기를 함유할 수 있으며, 따라서 약학적으로 허용가능한 염기와 약학적으로 허용가능한 염을 형성할 수 있다. 이 경우 "약학적으로 허용가능한 염"이라는 용어는 화합물의 비교적 독성이 없는 무기 및 유기 염기 부가염을 가리킨다. 이들 염은 마찬가지로 화합물의 최종 단리 및 정제 중에 동일 반응계 내에서 제조될 수 있거나, 유리산 형태의 정제된 화합물을 약학적으로 허용가능한 금속 양이온의 수산화물, 탄산염 또는 중탄산염과 같은 적합한 염기와 별도로 반응시키고 암모니아, 또는 약학적으로 허용가능한 유기 1차, 2차 또는 3차 아민과 반응시킴으로써 제조될 수 있다. 대표적인 알칼리 또는 알칼리토 염은 리튬, 나트륨, 칼륨, 칼슘, 마그네슘 및 알루미늄 염 등을 포함한다. 염기 부가 염의 형성에 유용한 대표적인 유기 아민은 에틸아민, 다이에틸아민, 에틸렌다이아민, 에탄올아민, 다이에탄올아민, 피페라진 등을 포함한다(예를 들어 상기 문헌[Berge et al.] 참조).

약학 조성물(제제)은, 예를 들면, 경구(예를 들어, 수성 또는 비-수성 용액 또는 현탁액으로서의 물약(drench), 정제, 캡슐(스프링클 캡슐 및 젤라틴 캡슐 포함), 볼루스(bolus), 분말, 과립, 혀에 적용하기 위한 페이스트); 구강 점막을 통한 흡수(예를 들면, 설하로); 항문, 직장 또는 질내(예를 들면, 페서리(pessary), 크림 또는 포움(foam)으로서); 비경구(예를 들면, 멸균 용액 또는 현탁액으로서 근육내, 정맥내, 피하 또는 척추강내 포함); 코내; 복강내; 피하; 경피(예를 들면, 피부에 적용되는 패치로서); 및 국소(예를 들면, 피부에 적용되는 크림, 연고 또는 스프레이로서, 또는 점안제로서)를 포함한 많은 투여 경로 중 임의의 경로에 의해 대상에게 투여될 수 있다. 화합물은 또한 흡입용으로 제형화될 수 있다. 특정 실시양태에서, 화합물은 멸균수에 단순히 용해 또는 현탁될 수 있다. 적절한 투여 경로 및 그에 적합한 조성물에 대한 세부사항은, 예를 들면, 미국 특허 제 6,110,973 호, 제 5,763,493 호, 제 5,731,000 호, 제 5,541,231 호, 제 5,427,798 호, 제 5,358,970 호 및 제 4,172,896 호, 및 그에 인용된 특허들에서 확인할 수 있다.

제형은 편리하게는 단위 투여형으로 제공될 수 있으며, 약학 분야에 공지된 임의의 방법에 의해 제조될 수 있다. 단일 투여형을 생성하기 위해 담체 물질과 혼합될 수 있는 활성 성분의 양은 치료되는 숙주, 특정한 투여 방식에 따라 달라질 것이다. 단일 투여형을 생성하기 위해 담체 물질과 혼합될 수 있는 활성 성분의 양은 일반적으로 치료 효과를 제공하는 화합물의 양일 것이다. 일반적으로, 100% 중에서, 상기 양은 약 1 내지 약 99%의 활성 성분, 바람직하게는 약 5 내지 약 70%, 가장 바람직하게는 약 10 내지 약 30%의 범위일 것이다.

상기 제형 또는 조성물의 제조 방법은 활성 화합물, 예를 들면, 본 발명의 화합물을 담체, 및 선택적으로, 하나 이상의 보조 성분들과 배합시키는 단계를 포함한다. 일반적으로, 제형은 본 발명의 화합물을 액체 담체 또는 미분된 고체 담체, 또는 둘 다와 균일하고 균질하게 배합한 후, 필요에 따라, 생성물을 성형함으로써 제조된다.

경구 투여에 적합한 본 발명의 제형은, 각각 활성 성분으로서 미리결정된 양의 본 발명의 화합물을 함유하는 캡슐(스프링클 캡슐 및 젤라틴 캡슐 포함), 카세제(cachet), 환제(pill), 정제, 로젠지(lozenge)(착향된 주성분, 통상적으로 슈크로스 및 아카시아 또는 트라가칸트 사용), 동결건조물, 분말, 과립의 형태로, 또는 수성 또는 비-수성 액체 중의 용액 또는 현탁액으로서, 또는 수중유적형 또는 유중수적형 액체 유화액으로서, 또는 엘릭시르제(elixir) 또는 시럽으로서, 또는 향정(pastille)(불활성 베이스, 예를 들면, 젤라틴 및 글리세린, 또는 슈크로스 및 아카시아 사용)으로서, 및/또는 구강청정제 등으로 존재할 수 있다. 조성물 또는 화합물은 또한 볼루스, 연약(electuary) 또는 페이스트로서 투여될 수 있다.

경구 투여용 고체 투여형[캡슐(스프링클 캡슐 및 젤라틴 캡슐 포함), 정제, 환제, 당의정(dragee), 분말, 과립 등]을 제조하기 위해, 활성 성분을 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 담체, 예를 들면, 나트륨 시트레이트 또는 인산 이칼슘, 및/또는 다음중 임의 성분과 혼합한다: (1) 충전제 또는 증량제, 예를 들면, 전분, 락토스, 슈크로스, 글루코스, 만니톨 및/또는 실릭산; (2) 결합제, 예를 들면, 카복시메틸셀룰로스, 알기네이트, 젤라틴, 폴리비닐 피롤리돈, 슈크로스 및/또는 아카시아; (3) 보습제, 예를 들면, 글리세롤; (4) 붕해제, 예를 들면, 한천, 탄산칼슘, 감자 또는 타피오카 전분, 알긴산, 특정 실리케이트 및 탄산나트륨; (5) 용액 완염제, 예를 들면, 파라핀; (6) 흡수 촉진제, 예를 들면, 4급 암모늄 화합물; (7) 습윤제, 예를 들면, 세틸 알콜 및 글리세롤 모노스테아레이트; (8) 흡수제, 예를 들면, 카올린 및 벤토나이트 점토; (9) 윤활제, 예를 들면, 활석, 칼슘 스테아레이트, 마그네슘 스테아레이트, 고체 폴리에틸렌 글리콜, 나트륨 라우릴 설페이트 및 그의 혼합물; (10) 착화제, 예를 들면, 개질 및 비개질 사이클로덱스트린; 및 (11) 착색제. 캡슐(스프링클 캡슐 및 젤라틴 캡슐 포함), 정제 및 환제의 경우, 약학 조성물은 또한 완충제를 포함할 수 있다. 유사한 유형의 고체 조성물도 또한 락토스 또는 유당 뿐 아니라 고분자량 폴리에틸렌 글리콜 등과 같은 부형제를 사용하여 연질 및 경질-충전 젤라틴 캡슐에 충전제로서 사용될 수 있다.

정제는, 선택적으로 하나 이상의 보조 성분과 함께, 압축 또는 주형(molding)에 의해 제조될 수 있다. 압축 정제는 결합제(예를 들면, 젤라틴 또는 하이드록시프로필메틸 셀룰로스), 윤활제, 불활성 희석제, 방부제, 붕해제(예를 들면, 나트륨 전분 글리콜레이트 또는 가교결합된 나트륨 카복시메틸 셀룰로스), 표면-활성 또는 분산제를 사용하여 제조될 수 있다. 주형정(molded tablet)은 적당한 기계에서 불활성 액체 희석제로 습윤된 분말화 화합물의 혼합물을 주형시킴으로써 제조될 수 있다.

정제, 및 약학 조성물의 기타 고체 투여형, 예를 들면, 당의정, 캡슐(스프링클 캡슐 및 젤라틴 캡슐 포함), 환제 및 과립은 선택적으로 코팅 및 쉘, 예를 들면, 약학-제형 분야에 공지된 장용 코팅 및 기타 코팅을 사용하여 수득되거나 제조될 수 있다. 이들은 또한, 예를 들면, 목적하는 방출 프로필을 제공하기 위한 다양한 비율의 하이드록시프로필메틸 셀룰로스, 다른 중합체 매트릭스, 리포솜 및/또는 미세구를 사용하여 그 안에 활성 성분의 지연되거나 조절된 방출을 제공하도록 제형화될 수 있다. 이들은, 예를 들면, 세균-고정 필터를 통한 여과에 의해, 또는 멸균수 또는 일부 다른 멸균 주사가능한 매질에 사용 직전에 용해될 수 있는 멸균 고체 조성물의 형태로 살균제를 혼입함으로써 멸균될 수 있다. 상기 조성물들은 또한 선택적으로 불투명화제를 함유할 수 있으며, 위장관의 특정 부위에서, 선택적으로, 지연된 방식으로, 활성 성분만을, 또는 이들을 우선적으로 방출하는 조성물일 수 있다. 사용될 수 있는 포매 조성물의 예는 중합체 물질 및 왁스를 포함한다. 활성 성분은 또한 경우에 따라 하나 이상의 전술한 부형제와 함께 미세-캡슐화 형태로 존재할 수 있다.

경구 투여에 유용한 액체 투여형으로는 약학적으로 허용가능한 유화액, 재구성되기 위한 동결건조물, 미세유화액, 용액, 현탁액, 시럽 및 엘릭시르제가 포함된다. 활성 성분 이외에, 액체 투여형은 당분야에 통상적으로 사용되는 불활성 희석제, 예를 들면, 물 또는 다른 용매, 사이클로덱스트린 및 그의 유도체, 가용화제 및 유화제, 예를 들면, 에틸 알콜, 이소프로필 알콜, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알콜, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸렌 글리콜, 오일(특히, 면실유, 낙화생유, 옥수수유, 배아유, 올르비유, 피마자유 및 호마유), 글리세롤, 테트라하이드로푸릴 알콜, 폴리에틸렌 글리콜 및 솔비탄의 지방산 에스테르, 및 그의 혼합물을 함유할 수 있다.

불활성 희석제 외에도, 본 발명의 조성물은 습윤제, 윤활제, 유화 및 현탁제 예컨대 나트륨 라우릴 설페이트 및 마그네슘 스테아레이트, 또는 감미제, 향미제, 착색제, 향료, 방부제 또는 항산화제와 같은 보조제를 포함할 수 있다.

현탁액은 활성 화합물 이외에 현탁제, 예를 들면, 에톡실화 이소스테아릴 알콜, 폴리옥시에틸렌 솔비톨 및 솔비탄 에스테르, 미세결정성 셀룰로스, 알루미늄 메타하이드록시드, 벤토나이트, 한천 및 트라가칸트, 및 그의 혼합물을 함유할 수 있다.

직장, 질 또는 요도 투여용의 약학 조성물 제형은 좌약으로 제공될 수 있으며, 상기 좌약은 하나 이상의 활성 화합물을, 예를 들면, 코코아 버터, 폴리에틸렌 글리콜, 좌약 왁스 또는 살리실레이트를 포함하는 하나 이상의 적당한 비자극성 부형제 또는 담체와 혼합하여 제조할 수 있으며, 실온에서 고체이지만 체온에서는 액체이므로 직장 또는 질강에서 용융되어 활성 화합물을 방출한다.

구강에 투여하기 위한 약학 조성물의 제형은 구강청정제, 또는 구강 스프레이, 또는 구강 연고로서 제공될 수 있다.

대안적으로 또는 추가적으로, 조성물은 카테터, 스텐트, 와이어 또는 다른 관강내(intraluminal) 장치를 통해 전달하기 위해 제형화될 수 있다. 상기 장치를 통한 전달은 방광, 요도, 수뇨관, 직장 또는 장으로의 전달에 특히 유용할 수 있다.

질내 투여에 적합한 제형은 또한 당분야에서 적절한 것으로 알려져 있는 바와 같은 담체를 함유하는 페서리, 탐폰, 크림, 겔, 페이스트, 포움 또는 스프레이 제형을 포함한다.

국소 또는 경피 투여를 위한 투여형은 분말, 스프레이, 연고, 페이스트, 크림, 로션, 겔, 용액, 패치 및 흡입제를 포함한다. 활성 화합물은 멸균 조건하에서 약학적으로 허용가능한 담체와, 및 필요할 수 있는 임의의 방부제, 완충제 또는 추진제와 혼합될 수 있다.

연고, 페이스트, 크림 및 겔은, 활성 화합물 이외에, 부형제, 예를 들면, 동물 및 식물성 지방, 오일, 왁스, 파라핀, 전분, 트라가칸트, 셀룰로스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실릭산, 활석 및 산화 아연 또는 그의 혼합물을 함유할 수 있다.

분말 및 스프레이는, 활성 화합물 이외에, 부형제, 예를 들면, 락토스, 활성, 실릭산, 수산화알루미늄, 칼슘 실리케이트 및 폴리아미드 분말 또는 상기 물질들의 혼합물을 함유할 수 있다. 스프레이는 또한 통상적인 추진제, 예를 들면, 클로로플루오로하이드로카본 및 휘발성 비치환된 탄화수소, 예를 들면, 부탄 및 프로판을 함유할 수 있다.

본원에 기재된 화합물은 다르게는 에어로졸에 의해 투여될 수 있다. 이는 수성 에어로졸, 리포솜 제제 또는 조성물-함유 고체 입자를 제조함으로써 달성된다. 비-수성(예컨대, 플루오로카본 추진제) 현탁액이 사용될 수 있다. 초음파 분무기는 약제를 전단시키는 것을 최소화하여 화합물의 분해를 초래할 수 있기 때문에 바람직하다.

통상적으로, 수성 에어로졸은 통상적인 약학적으로 허용가능한 담체 및 안정화제와 함께 약제의 수용액 또는 현탁액을 제형화하여 제조된다. 담체 및 안정화제는 특정 조성물의 요건에 따라 다르지만, 전형적으로 비이온성 계면활성제(트윈스(Tweens), 플루로닉스(Pluronics), 소르비탄 에스터, 레시틴, 크레모포스(Cremophors)), 약학적으로 허용가능한 보조 용매 예컨대 폴리에틸렌 글리콜, 무해한 단백질 예컨대 혈청 알부민, 올레산, 아미노산 예컨대 글리신, 완충액, 염, 당 또는 당 알콜을 포함한다. 에어로졸은 일반적으로 등장성 용액으로부터 제조된다.

경피용 패치는 신체에 본 발명 화합물의 조절된 전달을 제공하는 부가 이점을 갖는다. 상기 투여형은 활성 화합물을 적절한 매질에 용해 또는 분산시킴으로써 제조될 수 있다. 흡수 개선제도 또한 피부를 거쳐 화합물의 플럭스를 증가시키기 위해 사용될 수 있다. 상기 플럭스의 속도는 속도 조절 막을 제공하거나 또는 중합체 매트릭스 또는 겔에 화합물을 분산시킴으로써 제어될 수 있다.

안과용 제형, 안 연고, 분말, 용액 등도 또한 본 발명의 범위내에 속하는 것으로 고려된다. 예시적인 안과용 제형은 미국 공개공보 2005/0080056 호, 2005/0059744 호, 2005/0031697 호 및 2005/004074 호 및 미국 특허 제 6,583,124 호에 기술되어 있으며, 그 내용은 본원에 참고로 인용된다. 필요한 경우, 액체 안과 제형은 누액(lacrimal fluid), 방수(aqueous humor) 또는 유리액(vitreous humor)과 유사한 성질을 가지거나, 또는 상기 유체들과 상용가능하다. 바람직한 투여 경로는 국소 투여(예를 들면, 점안제와 같은 국소 투여, 또는 주입물을 통한 투여)이다.

본원에서 사용된 바와 같이 "비경구 투여" 및 "비경구적으로 투여되는"이란 어구는 통상적으로 주사에 의한, 장 및 국소 투여 이외의 다른 투여 방식을 의미하며, 제한하지 않고, 정맥내, 근육내, 동맥내, 척수강내, 피막내(intracapsular), 안와내(intraorbital), 심장내, 피내, 복강내, 경기관(transtracheal), 피하, 각피하(subcuticular), 관절내, 피막하(subcapsular), 지주막하, 척수내 및 흉골내 주사 및 주입을 포함한다. 비경구 투여에 적합한 약학 조성물은, 산화방지제, 완충제, 세균발육억제제(bacteriostat), 제형을 의도한 수용자의 혈액과 등장성이 되게 하는 용질, 또는 현탁 또는 증점제를 함유할 수 있는 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 멸균 등장성 수성 또는 비수성 용액, 분산액, 현탁액 또는 유화액, 또는 사용 직전에 멸균 주사가능한 용액 또는 분산액으로 재구성될 수 있는 멸균 분말과 함께, 하나 이상의 활성 화합물을 포함한다.

본원에 사용된 "전신 투여" 및 "말초 투여"라는 문구는 중추 신경계에 직접적으로가 아닌 리간드, 약물 또는 다른 물질의 투여를 의미하며, 환자의 전신으로 들어가, 따라서 대사 및 기타 유사한 과정 예를 들어 피하투여를 수행한다.

본 발명의 약학 조성물에 사용될 수 있는 적합한 수성 및 비수성 담체의 예로는 물, 에탄올, 폴리올(예를 들면, 글리세롤, 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜 등) 및 그의 적합한 혼합물, 식물성 오일, 예를 들면, 올리브유, 및 주사가능한 유기 에스테르, 예를 들면, 에틸 올리에이트가 포함된다. 적절한 유동성은, 예를 들면, 레시틴과 같은 코팅 물질의 사용에 의해, 분산액의 경우 필요한 입자 크기의 유지에 의해서, 및 계면활성제의 사용에 의해 유지될 수 있다.

또한, 상기 조성물들은 보조제, 예를 들면, 방부제, 습윤제, 유화제 및 분산제를 함유할 수 있다. 미생물 작용의 방지는 다양한 항균제 및 항진균제, 예를 들면, 파라벤, 클로로부탄올, 페놀 솔브산 등의 혼입에 의해 보장될 수 있다. 등장화제, 예를 들면, 당, 염화나트륨 등을 조성물에 포함시키는 것이 또한 바람직할 수 있다. 또한, 주사가능한 약학 형태의 연장된 흡수는 알루미늄 모노스테아레이트 및 젤라틴과 같은 흡수를 지연시키는 약제의 혼입에 의해 달성될 수 있다.

일부 경우에서, 약물의 효과를 연장시키기 위해, 피하 또는 근육내 주사로부터 약물의 흡수를 지연시키는 것이 바람직하다. 이것은 불량한 수용해도를 갖는 결정성 또는 무정형 물질의 액체 현탁액을 사용하여 달성될 수 있다. 이어서, 약물의 흡수 속도는 그의 해리 속도에 따라 달라지고, 상기 해리 속도는 결정 크기 및 결정형에 따라 달라질 수 있다. 또는, 비경구 투여된 약물 형태의 지연된 흡수는 약물을 오일 비히클에 용해 또는 현탁시킴으로써 달성된다.

주사가능한 데포(depot) 형태는 폴리락티드-폴리글리콜라이드와 같은 생분해성 중합체 중에 대상 화합물의 미세캡슐화 매트릭스를 형성함으로써 제조된다. 약물 대 중합체의 비 및 사용된 특정 중합체의 성질에 따라서, 약물 방출 속도가 제어될 수 있다. 다른 생분해성 중합체의 예로는 폴리(오쏘에테르) 및 폴리(무수물)이 포함된다. 주사가능한 데포 제형은 또한 신체 조직과 상용성인 리포솜 또는 미세유화액에 약물을 봉입시킴으로써 제조된다.

약제의 제제는 경구, 비경구, 국소 또는 직장으로 투여될 수 있다. 이들은 물론 각 투여 경로에 적합한 형태로 주어진다. 예를 들어, 이들은 정제 또는 캡슐 형태, 주사, 흡입, 눈 로션, 연고, 좌약, 주입에 의해 투여되고; 로션 또는 연고에 의해 국소적으로; 및 좌약에 의해 직장으로 투여된다. 경구 투여가 바람직하다.

본 발명의 방법에 사용하기 위해, 활성 화합물은 그 자체로, 또는 약학적으로 허용가능한 담체와 함께, 예를 들면, 0.1 내지 99.5%(보다 바람직하게는 0.5 내지 90%)의 활성 성분을 함유하는 약학 조성물로서 제공될 수 있다.

도입 방법은 또한 재충전가능하거나 생분해성 장치에 의해 제공될 수 있다. 단백질성 생물약제를 포함하여 약물의 제어된 전달을 위해 최근 수년간 다양한 서방형 중합체 장치가 개발되고 생체내에서 시험되었다. 특정 표적 부위에서 화합물의 지속적 방출을 위한 주입물을 제조하기 위해 생분해성 및 비-분해성 중합체를 둘 다 포함하여, 다양한 생체적합성 중합체(하이드로겔 포함)를 사용할 수 있다.

이들 화합물은 예를 들어 경구, 비강(예컨대 분무에 의해), 직장, 질내, 비경구, 대조내 및 국소적으로(예컨대 분말, 연고 및 적하에 의해) 예를 들어 협측 및 설하를 비롯한 임의의 적합한 투여 경로에 의해 치료를 위한 인간 및 사람에게 투여될 수 있다.

선택된 투여 경로에 관계없이, 적절한 수화된 형태로 사용될 수 있는 화합물 및/또는 본 발명의 약학 조성물은 당업자에게 공지된 통상적인 방법에 의해 약학적으로 허용가능한 투여 형태로 제형화된다.

약학 조성물중 활성 성분의 실제 투여량 수준은, 환자에게 독성이 없으면서, 특정 환자, 조성물 및 투여 방식에 목적하는 치료 반응을 달성하기에 효과적인 활성 성분의 양을 수득하기 위해 달라질 수 있다.

선택된 투여량 수준은 특정 화합물 또는 사용된 화합물들의 혼합물, 또는 그의 에스테르, 염 또는 아미드의 활성, 투여 경로, 투여 시간, 사용되는 특정 화합물의 분비 속도, 치료 기간, 사용되는 특정 화합물과 함께 사용되는 다른 약물, 화합물 및/또는 물질, 치료되는 환자의 연령, 성별, 체중, 질병, 일반적인 건강 및 이전 병력, 및 의료 분야에 공지되어 있는 유사 요인들을 포함하여 다양한 요인들에 따라 달라질 것이다. 일반적으로, 본 발명의 조성물은 비경구 투여를 위해 다른 물질 중에서도 약 0.1 내지 10% w/v의 본원에 개시된 화합물을 함유하는 수용액으로 제공될 수 있다. 전형적인 투여량 범위는 하루에 약 0.01 내지 약 50 mg/kg 체중으로 1회 단일 투여량 또는 2 내지 4회 분할된 투여량으로 주어진다. 각각의 분할된 투여량은 본 발명의 동일하거나 상이한 화합물을 함유할 수 있다.

당해 분야에 통상의 기술을 가진 의사 또는 수의사는 필요한 약학 조성물의 치료 효과량을 용이하게 결정하고 처방할 수 있다. 예를 들면, 의사 또는 수의사는 목적하는 치료 효과를 달성하고 목적하는 효과가 달성될 때까지 투여량을 점진적으로 증가시키기 위해 필요한 것보다 낮은 수준에서 약학 조성물 또는 화합물의 용량을 출발할 수 있다. 본 발명의 치료 방법에 대한 화합물의 "치료 효과량"은 원하는 투여량 요법(포유동물, 바람직하게는 인간에게)의 일부로서 투여될 때 예를 들어 임의의 의학적 치료에 적용가능한 합당한 이익/위험 비율에서 치료될 장애 또는 상태 또는 미용 목적에 대해 임상적으로 허용가능한 표준에 따라 증상을 경감시키거나 상태를 완화시키거나 질환 상태의 발병을 지연시키는 제제 내의 화합물(들)의 양을 의미한다. 일반적으로, 화합물의 효과량은 대상의 체중, 성별, 연령 및 병력에 따라 달라질 것으로 이해된다. 효과량에 영향을 미치는 다른 요인들로는 환자 질병의 중증도, 치료되는 질환, 화합물의 안정성, 및 경우에 따라, 본 발명의 화합물과 함께 투여되는 또 다른 유형의 치료제가 포함될 수 있으나, 이에 한정되지는 않는다. 약제의 다중 투여에 의해 더 많은 전체 용량이 전달될 수 있다. 효능 및 투여량을 결정하는 방법은 당분야에 숙련된 자에게 공지되어 있다(본원에 참고로 인용된 문헌[Isselbacher et al., Harrison's Principles of Internal Medicine 13 ed., 1814-1882 (1996)] 참조).

일반적으로, 본 발명의 조성물 및 방법에 사용되는 활성 화합물의 적합한 일일 용량은 치료 효과를 제공하는 데 효과적인 최저 용량인 화합물의 양일 것이다. 상기 효과적인 용량은 일반적으로 전술한 요인들에 따라 달라질 것이다.

필요한 경우, 활성 화합물의 효과적인 일일 용량은 선택적으로 단위 투여형으로, 하루 전체에 걸쳐 적절한 간격으로 별도로 투여되는 1회, 2회, 3회, 4회, 5회, 6회 이상의 분할-용량으로서 투여될 수 있다. 본 발명의 특정 실시양태에서, 활성 화합물은 하루에 2회 또는 3회 투여될 수 있다. 바람직한 실시양태에서, 활성 화합물은 하루에 1회 투여될 수 있다.

상기 치료를 받은 환자는 영장류, 특히 인간, 및 기타 포유동물, 예를 들면, 말, 소, 돼지 및 양; 및 일반적으로 가금류 및 애완동물을 포함하여, 어려움에 처한 임의의 동물이다.

특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 단독으로 사용되거나 또는 또 다른 유형의 치료제와 함께 투여될 수 있다. 본원에서 사용된 바와 같이, "공동 투여"란 어구는 미리 투여된 치료 화합물이 신체에서 여전히 효과적인 동안 두번째 화합물이 투여되는 2개 이상의 상이한 치료 화합물들의 임의의 투여 형태를 말한다(예를 들면, 두 화합물은 환자에서 동시에 효과적이며, 이것은 두 화합물의 상승 효과를 포함할 수 있다). 예를 들면, 상이한 치료 화합물이 동일 제형으로 또는 별도의 제형으로 동시에 또는 순차적으로 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, 상이한 치료 화합물들은 서로 1시간, 12시간, 24시간, 36시간, 48시간, 72시간 또는 1 주일 이내에 투여될 수 있다. 따라서, 상기 치료를 받는 개체는 상이한 치료 화합물들의 복합적 효과로부터 이익을 얻을 수 있다.

본 발명은 본 발명의 조성물 및 방법에서 본 발명 화합물의 약학적으로 허용가능한 염의 용도를 포함한다. 특정 실시양태에서, 본 발명의 고려되는 염으로는 알킬, 다이알킬, 트라이알킬 또는 테트라-알킬 암모늄 염이 포함되나, 이에 한정되지는 않는다. 특정 실시양태에서, 본 발명의 고려되는 염으로는 L-아르기닌, 베넨타민, 벤자틴, 베타인, 수산화칼슘, 콜린, 데놀(deanol), 다이에탄올아민, 다이에틸아민, 2-(다이에틸아미노)에탄올, 에탄올아민, 에틸렌다이아민, N-메틸글루카민, 하이드라바민, 1H-이미다졸, 리튬, L-라이신, 마그네슘, 4-(2-하이드록시에틸)모폴린, 피페라진, 칼륨, 1-(2-하이드록시에틸)피롤리딘, 나트륨, 트라이에탄올아민, 트로메타민 및 아연 염이 포함되나, 이에 한정되지는 않는다. 특정 실시양태에서, 본 발명의 고려되는 염으로는 Na, Ca, K, Mg, Zn 또는 기타 금속염이 포함되나, 이에 한정되지는 않는다.

약학적으로 허용가능한 산부가염은 또한 다양한 용매화물, 예를 들면, 물, 메탄올, 에탄올, 다이메틸포름아미드 등과의 용매화물로 존재할 수 있다. 상기 용매화물의 혼합물도 또한 제조할 수 있다. 상기 용매화물의 공급원은 결정화 용매로부터 수득되거나, 제조 또는 결정화 용매에 내재하거나, 또는 상기 용매에 외부적으로 부가될 수 있다.

습윤제, 유화제 및 윤활제, 예를 들면, 나트륨 라우릴 설페이트 및 마그네슘 스테아레이트 뿐 아니라, 착색제, 방출제, 코팅제, 감미제, 향미제 및 향료, 방부제 및 산화방지제도 또한 조성물에 존재할 수 있다.

약학적으로 허용가능한 산화방지제의 예로는 다음이 포함된다: (1) 수용해성 산화방지제, 예를 들면, 아스콜브산, 시스테인 하이드로클로라이드, 중황산 나트륨, 메타중아황산 나트륨, 아황산나트륨 등; (2) 유용성 산화방지제, 예를 들면, 아스코빌 팔미테이트, 부틸화 하이드록시아니솔(BHA), 부틸화 하이드록시톨루엔(BHT), 레시틴, 프로필 갈레이트, 알파-토코페롤 등; 및 (3) 금속-킬레이트화제, 예를 들면, 시트르산, 에틸렌다이아민 테트라아세트산(EDTA), 솔비톨, 타르타르산, 인산 등.

이제 본 발명을 일반적으로 설명하지만, 본 발명의 특정 양태 및 실시양태를 설명하기 위한 목적으로만 포함되며 본 발명을 제한하고자 하는 것은 아닌 다음의 실시예를 참조하여 본 발명을 보다 용이하게 이해할 것이다.

실시예

물질 및 방법

X-선 회절

대부분의 X-선 분말 회절 패턴은 옵틱스(Optix)의 길고 미세한 초점원을 사용하여 생성된 Cu 복사선의 입사 빔을 사용하여 파날리티컬 엑스퍼트(PANalytical X'Pert) PRO MPD 회절계로 수집하였다. 타원형 등급화된 다층 거울을 사용하여 시편을 통과하여 검출기 상으로 Cu Kα X-선을 집속시켰다. 분석에 앞서 규소 시편(NIST SRM 640d)을 분석하여 Si 111 피크의 관측 위치가 NIST-인증 위치와 일치하는지 확인했다. 샘플 시편을 두께가 3 μm인 필름들 사이에 끼우고 투과 형상으로 분석했다. 빔-정지, 짧은 항-산란 연장 및 항-산란 나이프 가장자리를 공기에 의해 생성된 배경을 최소화하는 데 사용하였다. 입사 및 회절 빔에 대한 솔라 슬릿을 사용하여 축 방향 발산으로 인한 확장을 최소화하였다. 회절 패턴은 시편으로부터 240 mm 떨어진 스캐닝 위치-감지형 검출기(엑셀러레이터(X'Celerator)) 및 데이터 수집기 소프트웨어 2.2b를 사용하여 수집하였다.

하나의 XRPD 패턴은 길고 미세한-초첨원 및 니켈 필터를 사용하여 생성된 Cu Kα 복사선의 입사 빔을 사용하는 파날리티칼 엑스퍼트(PANalytical X'Pert) PRO MPD 회절계로 수집하였다. 회절계는 대칭 브라그-브렌타노(Bragg-Brentano) 형상을 사용하여 구성되었다. 분석에 앞서 규소 시편(NIST SRM 640d)을 분석하여 Si 111 피크의 관측 위치가 NIST-인증 위치와 일치하는지 확인했다. 샘플의 시편은 규소 제로-배경 기판상에 중심을 둔 얇은 원형 층으로서 제조하였다. 항-산란 슬릿(SS)을 사용하여 공기에 의해 생성된 배경을 최소화하였다. 입사 및 회절 빔에 대한 솔라 슬릿을 사용하여 축 방향 발산으로 인한 확장을 최소화하였다. 회절 패턴은 시편으로부터 240 mm 떨어진 스캐닝 위치-감지형 검출기(엑셀러레이터) 및 데이터 수집기 소프트웨어 2.2b를 사용하여 수집하였다.

시차 주사 열량 측정법

DSC는 TA 인스트루먼츠(Instruments) Q2000 시차 주사 열량계를 사용하여 수행하였다. 온도 보정은 NIST-추적가능한 인듐 금속을 사용하여 수행하였다. 샘플을 알루미늄 DSC 팬에 넣고 뚜껑을 덮고 중량을 정확히 기록했다. 샘플 팬으로 구성된 무게가 나가는 알루미늄 팬을 셀의 기준면에 놓았다. 사용된 팬은 체로(Tzero) 주름 팬이었으며, 열분석도의 설명 필드에 "T₀C"로 약기되어 있다. 샘플을 -30℃에서 250℃까지 10℃/분으로 가열하였다(열분석도의 방법 필드에서 "(-30)-250-10"으로 약기되어 있다).

열중량 분석

TG 분석은 TA 인스트루먼츠 2050 열중량 분석기를 사용하여 수행하였다. 온도 보정은 니켈과 알루멜(Alumel™)을 사용하여 수행하였다. 샘플을 백금 팬에 놓고 TG 로에 넣었다. 로를 질소 퍼지 하에 가열하였다. 샘플을 25℃에서 300℃까지 10℃/분으로 가열하였다(열분석도의 방법 필드에서 "00-300-10"으로 약기되어 있다).

실시예 1: 화합물 CB-839 의 합성 프로토콜

참고: 화합물 670은 달리 CB-839라고 한다.

3리터 반응 용기에 2-(3-(트라이플루오로메톡시)페닐)아세트산(93.34 g, 0.43 mol, 1.0 당량), 6-클로로피리다진-3-아민(55.51 g, 0.43 mol, 1.0 당량), 에틸 아세테이트(1.42 L, 15 vol. 대 산), N,N-다이이소프로필에틸아민(60.92 g, 0.47 mol, 1.1 당량)을 가한 다음 교반봉 및 온도계를 장착하였다. 반응 용기의 내용물을 아르곤(g) 분위기하에 놓고 15분 동안 교반하고, 이때 혼합물은 반응 용기의 바닥에 고형물로 탁해졌다. 교반된 혼합물에 20.3℃ 내지 28.1℃의 온도 증가와 함께 40분에 걸쳐 압력 균등화 첨가 깔때기를 통해 프로필포스폰산 무수물(T3P; 에틸 아세테이트 중의 50% 용액 300 mL, 0.47 mmol, 1.1 당량)을 가했다. 첨가 도중에 혼합물의 색이 적색/오렌지색으로 변하고 혼탁함이 없어졌다. 반응은 TLC(6:4 헥산/에틸 아세테이트)에 의해 전형적으로 4 내지 6시간의 실행 시간으로 모니터링하였다. 반응이 완료된 것으로 판단되면, 물(1.5 L)을 첨가하고 혼합물을 추가로 15분 동안 교반하였다. 혼합물을 분별 깔때기로 옮기고 층들을 분리하였다. 유기층을 물(1.5 L)로 세척하고, 층들을 분리하고, 유기층을 10% 염화나트륨 용액(500 mL)으로 세척하였다. 층들을 분리하고, 유기층을 환저 플라스크에 옮기고, 휘발성 물질을 감압하에 제거하여 회백색의 황색 고체를 수득하였다. 플라스크에 헥산(500 mL)을 첨가하고 내용물을 15분 동안 격렬하게 교반한 후 여과하였다. 고형물을 헥산(500 mL)으로 다시 세척하고 일정 중량으로 공기 건조시켜 N-(6-클로로피리다진-3-일)-2-(3-(트라이플루오로메톡시)페닐)아세트아미드(112824)를 수득하였다: 수율 121.1 g(85%). ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 11.63 (s, 1H), 8.38(d, J=9.4 Hz, 1H), 7.88(d, J=9.4 Hz, 1H), 7.52 - 7.27(m, 4H), 3.90(s, 2H).

5리터 반응 용기를 4-시아노부틸아연 브로마이드(2 L, THF 중 0.5 M, 1000 mmol, 112824에 대해 3.0 당량), 이어서 다이클로로(1,3-비스(다이페닐포스피노)프로판)니켈(27.10 g, 0.05 mol, 0.15 당량), 2-메틸테트라하이드로푸란(400 mL, 3.6 vol. 대 112824)을 첨가한 다음 교반봉 및 온도계를 장착하였다. 반응 용기의 내용물을 아르곤 분위기하에 두고, 112824(110.56 g, 0.33 mol, 1.0 당량, 900 mL)의 2-메틸테트라하이드로푸란 용액을 24.8℃ 내지 32.9℃의 온도 증가와 함께 압력 균등화 첨가 깔대기를 통해 45분에 걸쳐 첨가하였다(T = 15분에 25분 휴식을 삽입하고, 400ml를 첨가하여 혼합물을 32.6℃에서 28.8℃로 냉각시킴). 반응은 TLC(1:1 헥산/에틸 아세테이트)에 의해 전형적으로 4 내지 6시간의 실행 시간으로 모니터링하였다. 반응이 완결된 것으로 판단되면, 0.5 M HCl(1.5 L)을 첨가하고 1시간 동안 교반하였고, 이때 상 분리가 보이고 하부 상이 투명하고 청색이 되었다. 혼합물을 분별 깔때기로 옮기고 층들을 분리하였다. 유기층을 포화 에틸렌다이아민테트라아세트산 수용액(1 L), 1 x 물(1 L), 1 x 10% 염화나트륨 용액(500 mL)으로 2회 세척하고, 유기층을 분리하고, 3L 환저 플라스크에 옮기고, 휘발성 물질을 감압하에 제거하여 무겁고 진한 적색 오일을 수득하였다. 오일을 에틸 아세테이트(300 mL)로 희석하고 휘발성 물질을 감압하에 제거하였다(2회 첨가 횟수 반복). 이어서, 오일을 헥산(300 mL)과 혼합하고 휘발성 물질을 감압하에 제거하여 황토색의 왁스성 고체를 수득하였다. 이어서, 고체를 헥산(500 mL)과 교반하고, 여과하고, 일정 중량으로 공기 건조시켜 N-(6-(4-시아노부틸)피리다진-3-일)-2-(3-(트라이플루오로메톡시)페닐)아세트아미드(112825)를 수득했다: 105.7g(84%)의 수율. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 11.41 (s, 1H), 8.28(d, J=9.2 Hz, 1H), 7.65(d, J=9.2 Hz, 1H), 7.52 - 7.27(m, 4H), 3.89(s, 2H), 2.92(t, J=7.5 Hz, 2H), 2.56(t, J=7.0 Hz, 2H), 1.80 (m, 2H), 1.61 (m, 2H).

3000 mL 3구 환저 플라스크에서 112825(92.3 g, 0.24 mol, 1.0 당량)를 트라이플루오로톨루엔(923 mL, 10.0 vol. 대 112825)에 용해시켰다. 티오세미카바지드(26.7 g, 0.29 mol, 1.2 당량)를 반응 용액에 채웠다. 트라이플루오로아세트산(369 mL, 4 vol.)을 교반하면서 반응 용기에 천천히 첨가하였다. 반응 슬러리를 개방 상부 환류 응축기가 있는 65℃의 욕에서 가열하였다. 반응은 보통 5시간 후에 완료되었다(LC/MS에 의해 측정됨). 반응 용액을 4000 mL 삼각 플라스크로 옮기고 0℃의 욕에서 냉각시켰다. pH를 2.5N 수산화나트륨(aq)(1800 mL, 약 20 vol.)로 pH 약 8로 조정하였다. pH가 중성이 됨에 따라 침전이 일어났다. 슬러리를 30분 동안 교반한 후 pH를 재확인하였다. 필요한 경우 더 많은 2.5N 수산화나트륨(aq) 또는 1M HCl로 pH를 6.5 내지 7.5 범위로 재조정했다. 침전물을 부흐너 깔대기로 여과하고, 에틸 아세테이트(2 x 185 mL, 2 vol)로 2회 세정하였다. 여과된 물질을 고 진공 하에서 일정 중량으로 건조시켜 N-(6-(4-(5-아미노-1,3,4-티아다이아졸-2-일)부틸)피리다진-3-일)-2-(3-(트라이플루오로메톡시)페닐)아세트아미드(110826)를 수득했다; 수율 94.2 g(87%). ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 11.33 (s, 1H), 8.21(d, J=9.2 Hz, 1H), 7.58(d, J=9.2 Hz, 1H), 7.51 - 7.26(m, 4H), 6.99(s, 2H), 3.88(s, 2H), 2.87(m, 4H), 1.71 (m, 4H).

250 mL 3구 환저 플라스크에서 N,N-다이메틸아세트아미드(44 mL, 8.0 vol. 대 110826) 중의 110826(5.5 g, 12.3 mmol, 1.0 당량)의 용액에 2-피리딜아세트산(2.56 g, 14.8 mmol, 1.2 당량)을 첨가했다. 프로필포스폰산 무수물(에틸 아세테이트 중의 50% 용액 11.0g, 17.3 mmol, 1.41 당량)을 25 mL 첨가 깔때기에 충전하고, 반응 용액에 5 mL/분의 속도로 적가하였다. 첨가하는 동안 내부 온도는 20.1℃에서 26.1℃로 증가했다. 반응은 보통 4시간 후에 완료되었다(LC/MS에 의해 측정됨). 이어서, 반응 용액을 0℃ 욕에서 냉각시키고 메틸 에틸 케톤(50 mL)으로 희석시켰다. 교반된 반응 용액에 H₂O(50 mL)를 첨가하였다. pH를 2.5 N 수산화나트륨(aq)(28 mL)로 pH 약 6으로 조정하였다. 황색 침전물을 흡입 여과에 의해 수집하고 이소프로필 알코올 및 물(1:1, 50 mL)로 세정하였다. 이어서, 공기 건조된 고체를 100 mL 환저 플라스크로 옮기고 이소프로필 알코올 및 물(9:1, 50 mL) 중에서 슬러리화하였다. 슬러리를 내부 온도 65.1℃로 8시간 동안 가열하고 16시간에 걸쳐 주위 온도로 냉각시켰다. 회백색 침전물을 흡입 여과에 의해 수집하고 1 x 이소프로필 알코올(10 mL)로 세정하였다. 잔사를 고 진공 하에서 일정 중량이 되도록 건조시켜 2-(피리딘-2-일)-N-(5-(4-(6-(2-(3-(트라이플루오로메톡시)페닐)아세트아미도)피리다진-3-일)부틸)-1,3,4-티아다이아졸-2-일)아세트아미드(CB-839)를 수득했다; 수율 5.27 g(76%). ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 12.67 (s, 1H), 11.32 (s, 1H), 8.53-8.49 (m, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 9.12 Hz, 1H), 7.78-7.76 (t, 1H), 7.58-7.26 (m, 7H), 4.01 (s, 2H), 3.87 (s, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).

CB-839 결정성 유리 염기, 형태 B의 XRD 패턴을 도 6에 나타내었다. CB-839 유리 염기, 형태 B는 다음과 같은 2θ 값을 갖는다: 3.64; 7.32; 7.92; 8.53; 9.30; 9.38; 11.02; 11.98; 14.70; 15.54; 15.87; 16.50; 16.59; 18.06; 18.39; 19.10; 20.06; 20.12; 20.61; 21.37; 21.89; 22.41; 22.74; 23.72; 24.10; 24.65; 25.14; 25.78; 26.49; 27.32; 27.55; 28.26; 29.88; 31.20; 31.80; 31.52; 32.80; 34.30; 35.20; 36.41; 38.53; 40.08; 40.94; 및 43.86.

CB-839 결정성 유리 염기, 형태 A는 다음과 같이 제조되었다:

자기 교반봉, 반구형 가열 맨틀 및 내부 온도계가 있는 150 mL 3구 환저 플라스크에서 CB-839 유리 염기, 형태 B(2.02 g, 3.53 mmol)를 이소프로판올:톨루엔:물(36.8 mL:24.6 mL:3.2 mL, 32 vol)의 혼합물에 현탁시켰다. 담황색 슬러리를 90분에 걸쳐 내부 온도 70℃로 가열하였다. 가열 맨틀을 제거하여 황색 용액을 주위 온도로 냉각시켰다. 반응 슬러리를 18시간 동안 교반한 후, 흡입 여과에 의해 수집하였다. 여과 케이크를 70℃ 오븐에서 진공하에 일정 중량으로 건조시켜 결정성 2-(피리딘-2-일)-N-(5-(4-(6-(2-(3-(트라이플루오로메톡시)페닐)아세트아미도)피리다진-3-일)부틸)-1,3,4-티아다이아졸-2-일)아세트아미드(CB-839)를 수득하였다, 유리 염기, 형태 A; 수율 1.60 g(79%). ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 12.65 (s, 1H), 11.29 (s, 1H), 8.50-8.48 (m, 1H), 8.20-8.17 (d, J = 9.11 Hz, 1H), 7.77-7.75 (t, 1H), 7.57-7.54 (m, 1H), 7.47-7.40 (m, 1H), 7.40-7.35 (m, 3H), 7.26-7.24 (m, 2H), 4.00 (s, 2H), 3.85 (s, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.89 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).

CB-839 결정성 유리 염기, 형태 A의 XRD 패턴을 도 7에 나타내었다. CB-839 유리 염기, 형태 A는 다음과 같은 2θ 값을 갖는다: 5.47; 6.01; 7.57; 9.20; 9.67; 10.15; 11.00; 12.93; 14.14; 15.20; 15.81; 16.56; 17.74; 18.50; 18.69; 19.40; 19.94; 20.54; 20.59; 21.13; 22.00; 22.60; 23.33; 23.98; 24.37; 24.87; 25.52; 26.27; 26.62; 27.79; 29.59; 30.64; 33.30; 35.01; 37.93; 및 38.72.

DSC 데이터는 결정성 무수물 CB-839 형태 A가 약 189℃에서 용융되는 것을 보여주었다.

실시예 2: 화합물 CB-839 의 염의 제조

2-(피리딘-2-일)-N-(5-(4-(6-(2-(3-(트라이플루오로메톡시)페닐)아세트아미도)피리다진-3-일)부틸)-1,3,4-티아다이아졸-2-일)아세트아미드 하이드로클로라이드, 형태 I(CB-839 HCl, 형태 I). 화합물 670 또는 CB-839 유리 염기(4.57 g, 8.00 mmol)를 내부 온도계, 50 mL 첨가 깔때기 및 자석 교반기가 구비된 250 mL 3구 환저 플라스크에서 무수 에탄올(69 mL) 중에서 슬러리화하였다. 반구형 직물 맨틀은 슬러리를 70℃의 내부 온도로 가열하도록 설정하고 이 목적 온도에서 90분 동안 유지하였다. 밀폐된 50 mL 환저 플라스크에서 무수 에탄올(23 mL)을 5분 동안 아세틸 클로라이드(0.682 mL, 9.59 mmol)와 함께 교반한 다음 첨가 깔대기에 넣었다. 에탄올계 HCl을 15 mL/분의 속도로 첨가하였다. 이 첨가 동안 반응의 내부 온도는 60.3℃로 떨어졌다. 슬러리를 용액에 넣고 5분 동안 투명해졌으며, 이때 침전물이 보였다. 생성된 슬러리를 습식 얼음 욕으로 5분 안에 15℃로 냉각시켰다. 욕을 제거하고 슬러리를 주위 온도에서 4시간 동안 교반하였다. 회백색 고체를 흡입 여과에 의해 수집하고 잔사를 75℃ 진공 오븐에서 밤새 건조시켜 2-(피리딘-2-일)-N-(5-(4-(6-(2-(3-(트라이플루오로메톡시)페닐)아세트아미도)피리다진-3-일)부틸)-1,3,4-티아다이아졸-2-일)아세트아미드 하이드로클로라이드 형태 I(CB-839 HCl, 3.98g)을 수득했다. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 12.80 (s, 1H), 11.37 (s, 1H), 8.73 (d, J=5.31 Hz, 1H), 8.23 (m, 2H), 7.75 (d, J=7.93 Hz, 1H), 7.68 (t, J=6.32 Hz, 1H), 7.62 (d, J=9.19 Hz, 1H), 7.47 (t, J=8.09 Hz, 1H), 7.36 (m, 2H), 7.24 (d, J=7.90 Hz, 1H), 4.25 (s, 2H), 3.86 (s, 2H), 3.03 (s, 2H), 2.89 (s, 2H), 1.73(s, 4H).

XRD 패턴을 도 1에 도시하였다. CB-839 HCl, 형태 I은 다음과 같은 2θ 값을 갖는다: 8.62; 9.53; 11.63; 15.89; 16.70; 17.26; 18.18; 19.10; 19.80; 21.09; 22.16; 22.69; 23.46; 24.63; 25.22; 25.49; 25.91; 26.72; 28.45; 29.38; 31.39; 31.82; 32.76; 33.61; 33.74; 34.27; 34.91; 35.53; 39.36; 및 39.73.

2-(피리딘-2-일)-N-(5-(4-(6-(2-(3-(트라이플루오로메톡시)페닐)아세트아미도)피리다진-3-일)부틸)-1,3,4-티아다이아졸-2-일)아세트아미드 하이드로클로라이드 형태 II(CB-839 HCl, 형태 II). 화합물 670 또는 CB-839 유리 염기(129.5 g, 227 mmol)를 내부 온도계, 1000 mL 첨가 깔때기 및 기계 교반기가 구비된 5000 mL 3구 환저 플라스크에서 무수 에탄올(2590 mL) 중에서 슬러리화하였다. 반구형 직물 맨틀은 슬러리를 60℃의 내부 온도로 가열하도록 설정되었고 이 목적 온도에서 60분 동안 유지되었다. 밀폐된 1000 mL 환저 플라스크에서 무수 에탄올(648 mL)을 아세틸 클로라이드(23.1 g, 295 mmol)와 함께 10분 동안 교반한 다음 첨가 깔대기에 넣었다. 에탄올계 HCl을 34 mL/분의 속도로 첨가하였다. 첨가 깔때기를 무수 에탄올(130 mL)로 세정하였다. 생성된 슬러리를 15시간에 걸쳐 19℃로 냉각시켰다. 회백색 고체를 흡입 여과에 의해 수집하고 잔사를 75℃ 진공 오븐에서 밤새 건조시켜 2-(피리딘-2-일)-N-(5-(4-(6-(2-(3-(트라이플루오로메톡시)페닐)아세트아미도)피리다진-3-일)부틸)-1,3,4-티아다이아졸-2-일)아세트아미드 하이드로클로라이드 형태 II(CB-839 HCl, 117.2 g)을 수득했다. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 12.76 (s, 1H), 11.32 (s, 1H), 8.67 (d, J=4.56 Hz, 1H), 8.21 (d, J=9.16 Hz, 1H), 8.12 (t, J=7.33 Hz, 1H), 7.67 (d, J=7.78 Hz, 1H), 7.59 (d, J=9.19 Hz, 2H), 7.44 (t, J=7.84 Hz, 1H), 7.35 (m, 2H), 7.24 (d, J=7.90 Hz, 1H), 4.18 (s, 2H), 3.85 (s, 2H), 3.00 (s, 2H), 2.89 (s, 2H), 1.73(s, 4H).

XRD 패턴을 도 2에 도시하였다. CB-839 HCl, 형태 II는 다음과 같은 2θ 값을 갖는다: 3.10; 6.26; 8.34; 9.04; 9.96; 11.02; 12.58; 13.47; 14.80; 15.61; 15.82; 16.15; 17.58; 18.20; 18.83; 19.81; 20.00; 21.10; 22.02; 22.58; 23.42; 24.10; 24.45; 25.25; 25.74; 26.36; 27.22; 27.83; 28.70; 29.84; 30.46; 31.81; 32.38; 33.23; 35.68; 36.57; 37.40; 39.36; 및 41.79.

2-(피리딘-2-일)-N-(5-(4-(6-(2-(3-(트라이플루오로메톡시)페닐)아세트아미도)피리다진-3-일)부틸)-1,3,4-티아다이아졸-2-일)아세트아미드 하이드로클로라이드 형태 I(CB-839 HCl, 형태 I). CB-839 HCl 형태 II(2.35g, 3.89mmol)을 내부 온도계 및 자기 교반기가 장착된 250mL 3구 환저 플라스크에서 무수 에탄올(71mL) 중에서 슬러리화하였다. 반구형 직물 맨틀은 슬러리를 65℃의 내부 온도로 가열하도록 설정하고 이 목적 온도에서 60분 동안 유지하였다. 슬러리에 2% CB-839 HCl 형태 I 결정(47 mg)을 시딩하고 7.5시간 동안 온도를 유지하였다. 이어서, 슬러리를 18시간에 걸쳐 주위 온도로 냉각시키고, 회백색 고체를 흡입 여과에 의해 수집하고 잔사를 50℃의 진공 오븐에서 건조시켜 2-(피리딘-2-일)-N-(5-4-(6-(2-(3-(트라이플루오로메톡시)페닐)아세트아미도)피리다진-3-일)부틸)-1,3,4-티아다이아졸-2-일)아세트아미드 하이드로클로라이드 형태 I(CB-839 HCl, 2.13 g)을 수득했다.

2-(피리딘-2-일)-N-(5-(4-(6-(2-(3-(트라이플루오로메톡시)페닐)아세트아미도)피리다진-3-일)부틸)-1,3,4-티아다이아졸(CB-839 2xHCl). 화합물 670 또는 CB-839 유리 염기(1.05 g, 1.84 mmol)를 내부 온도계, 25 mL 첨가 깔때기 및 자기 교반봉이 장착된 100 mL 3구 환저 플라스크에서 무수 에탄올(21 mL) 중에서 슬러리화하였다. 반구형 직물 맨틀은 슬러리를 65℃의 내부 온도로 가열하도록 설정하고 이 목적 온도에서 60분 동안 유지하였다. 밀폐된 25 mL 환저 플라스크에서 무수 에탄올(5.3 mL)을 5분 동안 아세틸 클로라이드(640 μL, 9.19 mmol)와 함께 교반한 다음 첨가 깔대기에 넣었다. 에탄올계 HCl을 2분에 걸쳐 첨가하고, 반응 혼합물을 황색 용액에 용해시키고, 이때 가열 맨틀을 제거하였다. 침전은 내부 온도 38℃에서 20분 후에 관찰되었다. 반응물을 18시간에 걸쳐 19℃로 추가 냉각시켰다. 약간 황색 고체를 흡입 여과에 의해 수집하고 잔사를 60℃ 진공 오븐에서 밤새 건조시켜 2-(피리딘-2-일)-N-(5-(4-(6-(2-(3-(트라이플루오로메톡시)페닐)아세트아미도)피리 다진-3-일)부틸)-1,3,4-티아다이아졸-2-일)아세트아미드 다이하이드로클로라이드(CB-839 2xHCl, 754 mg)를 수득했다. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 13.05 (s, 1H), 11.55 (s, 1H), 8.87 (d, J=4.74 Hz, 1H), 8.47 (m, 1H), 8.38 (d, J=9.22 Hz, 1H), 7.96 (d, J=7.99 Hz, 1H), 7.90 (t, J=6.72 Hz, 2H), 7.78 (d, J=9.22 Hz, 1H), 7.49 (t, J=8.09 Hz, 1H), 7.39 (m, 2H), 7.28 (d, J=8.50 Hz, 1H), 4.42 (s, 2H), 3.90 (s, 2H), 2.89 (m, 4H), 1.77 (s, 4H).

CB-839 2xHCl 염은 무정형이다.

2-(피리딘-2-일)-N-(5-(4-(6-(2-(3-(트라이플루오로메톡시)페닐)아세트아미도)피리다진-3-일)부틸)-1,3,4-티아다이아졸(CB-839 TsOH). 화합물 670 또는 CB-839 유리 염기(8.20 g, 14.3 mmol)를 내부 온도계, 50 mL 첨가 깔때기 및 자기 교반봉이 장착된 500 mL 3구 환저 플라스크에서 무수 에탄올(205 mL) 중에서 슬러리화하였다. 반구형 직물 맨틀은 슬러리를 65℃의 내부 온도로 가열하도록 설정하고 이 목적 온도에서 120분 동안 유지하였다. 밀폐된 50 mL 환저 플라스크에서 무수 에탄올(41 mL)을 p-톨루엔설폰산(3.27 g, 17.2 mmol)과 함께 10분 동안 교반한 다음 첨가 깔대기에 넣었다. 에탄올계 p-톨루엔설폰산을 14 mL/분의 속도로 첨가하였다. 슬러리를 잠시 용액으로 옮겨 4시간에 걸쳐 19℃로 냉각시켰다. 백색 고체를 흡입 여과에 의해 수집하고 잔사를 60℃ 진공 오븐에서 밤새 건조시켜 2-(피리딘-2-일)-N-(5-(4-(6-(2-(3-(트라이플루오로메톡시)페닐)아세트아미드)피리다진-3-일)부틸)-1,3,4-티아다이아졸-2-일)아세트아미드 4-메틸벤젠설포네이트(CB-839 TsOH, 4.44g)를 수득했다. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 12.77 (s, 1H), 11.32 (s, 1H), 8.70 (t, J=4.65 Hz, 1H), 8.22 (d, J=9.16 Hz, 1H), 8.15 (t, J=7.40 Hz, 1H), 7.65 (d, J=18.70 Hz, 1H), 7.61 (m, 2H), 7.45 (m, 3H), 7.36 (m, 2H), 7.25 (d, J=8.38 Hz, 1H), 7.10 (d, J=7.87 Hz, 2H), 4.18 (s, 2H), 3.85 (s, 2H), 3.02 (s, 2H), 2.89 (s, 2H), 2.28 (s, 3H), 1.74 (s, 4H).

CB-839 TsOH의 XRD 패턴을 도 3에 도시하였다. CB-839 TsOH는 다음과 같은 2θ 값을 갖는다: 5.66; 6.84; 7.97; 11.34; 11.55; 12.04; 13.78; 14.42; 15.44; 15.99; 16.58; 17.09; 18.10; 18.66; 19.69; 20.23; 21.11; 22.03; 22.16; 22.50; 22.84; 23.48; 24.05; 25.59; 25.89; 27.80; 29.35; 30.46; 31.10; 33.82; 35.65; 36.67; 38.93; 39.99; 42.65; 및 43.68.

2-(피리딘-2-일)-N-(5-(4-(6-(2-(3-(트라이플루오로메톡시)페닐)아세트아미도)피리다진-3-일)부틸)-1,3,4-티아다이아졸(CB-839 HNO ₃ ). 화합물 570 또는 CB-839 유리 염기(498 mg, 0.87 mmol)를 내부 온도계 및 자기 교반봉이 장착된 25 mL 3구 환저 플라스크에서 테트라하이드로푸란(2 mL) 및 아세토니트릴(3.5 mL) 중에서 슬러리화하였다. 반구형 직물 맨틀은 슬러리를 60℃의 내부 온도로 가열하도록 설정하고 이 목적 온도에서 60분 동안 유지하였다. 바이알에 아세토니트릴(200 μL)을 질산(100 μL, 1.13 mmol)과 함께 5분 동안 교반한 다음 슬러리에 첨가하였다. 생성된 용액을 6시간에 걸쳐 19℃로 냉각시켰다. 황갈색 고체를 흡입 여과에 의해 수집하고 잔사를 60℃ 진공 오븐에서 밤새 건조시켜 2-(피리딘-2-일)-N-(5-(4-(6-(2-(3-(트라이플루오로메톡시)페닐)아세트아미도)피리다진-3-일)부틸)-1,3,4-티아다이아졸-2-일)아세트아미드 니트레이트(CB-839 HNO₃, 150mg)를 수득했다. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 12.85 (s, 1H), 11.36 (s, 1H), 8.76 (d, J=5.16 Hz, 1H), 8.27 (m, 2H), 7.78 (d, J=7.93 Hz, 1H), 7.71 (m, 1H), 7.63 (d, J=9.37 Hz, 1H), 7.49 (t, J=7.917 Hz, 1H), 7.39 (m, 2H), 7.28 (d, J=8.17 Hz, 1H), 4.24 (s, 2H), 3.88 (s, 2H), 3.04 (s, 2H), 2.92 (s, 2H), 1.76 (s, 4H).

2-(피리딘-2-일)-N-(5-(4-(6-(2-(3-(트라이플루오로메톡시)페닐)아세트아미도)피리다진-3-일)부틸)-1,3,4-티아다이아졸-2-일)아세트아미드 메탄설포네이트(CB-839 MSA). 화합물 670 또는 CB-839 유리 염기(1.55 g, 2.71 mmol)를 내부 온도계 및 자기 교반봉이 구비된 50 mL 3구 환저 플라스크에서 무수 에탄올(23 mL) 중에서 슬러리화하였다. 반구형 직물 맨틀은 슬러리를 65℃의 내부 온도로 가열하도록 설정하고, 이 목적 온도에서 30분 동안 유지하였다. 이어서 메탄설폰산(2.71 mmol, 180 μL)을 반응 슬러리에 첨가하였다. 슬러리를 잠깐 용액으로 옮겨 5시간에 걸쳐 19℃로 냉각시켰다. 회백색 고체를 흡입 여과에 의해 수집하고 잔사를 60℃ 진공 오븐에서 밤새 건조시켜 2-(피리딘-2-일)-N-(5-(4-(6-(2-(3-(트라이플루오로메톡시)페닐)아세트아미도)피리다진-3-일)부틸)-1,3,4-티아다이아졸-2-일)아세트아미드 메탄설포네이트(CB-839 MSA, 960 mg)를 수득했다. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 12.87 (s, 1H), 11.38 (s, 1H), 8.79 (t, J=5.40 Hz, 1H), 8.29 (m, 2H), 7.82 (d, J=7.68 Hz, 1H), 7.76 (m, 1H), 7.64 (d, J=9.10 Hz, 1H), 7.49 (t, J=8.08 Hz, 1H), 7.38 (m, 2H), 7.28 (d, J=8.47 Hz, 1H), 4.27 (s, 2H), 3.88 (s, 2H), 3.05 (s, 2H), 2.92 (s, 2H), 2.35 (s, 3H), 1.76 (s, 4H).

CB-839 MSA의 XRD 패턴을 도 4에 도시하였다. CB-839 MSA는 다음과 같은 2θ 값을 갖는다: 5.86; 7.00; 8.00; 9.37; 10.04; 11.13; 11.76; 13.20; 14.82; 14.42; 15.30; 15.98; 16.50; 17.26; 17.98; 18.88; 19.55; 19.96; 20.25; 21.08; 21.53; 22.07; 22.17; 22.50; 23.09; 23.12; 23.80; 24.05; 24.66; 25.22; 25.73; 26.02; 26.66; 27.13; 27.58; 29.16; 29.53; 30.35; 31.07; 31.87; 32.98; 33.87; 34.34; 36.76; 37.48; 39.35; 40.05; 40.10; 및 41.77.

2-(피리딘-2-일)-N-(5-(4-(6-(2-(3-(트라이플루오로메톡시)페닐)아세트아미도)피리다진-3-일)부틸)-1,3,4-티아다이아졸(CB-839 HBr).

화합물 670 또는 CB-839 유리 염기(1.07 g, 1.87 mmol)를 내부 온도계 및 자기 교반봉이 장착된 50 mL 3구 환저 플라스크에서 무수 에탄올(27 mL) 중에서 슬러리화하였다. 반구형 직물 맨틀은 슬러리를 65℃의 내부 온도로 가열하도록 설정하고, 이 목적 온도에서 60분 동안 유지하였다. 20 mL 섬광 바이알에서, 무수 에탄올(5 mL)을 아세틸 브로마이드(0.166 mL, 2.25 mmol)와 5분 동안 교반한 다음, 2분에 걸쳐 반응 슬러리에 충전시켰다. 슬러리는 엷어지고 색이 약간 어두워졌다. 슬러리를 주위 온도로 냉각시키고 6.5시간 동안 교반하였다. 회백색 고체를 흡입 여과에 의해 수집하고 잔사를 50℃ 진공 오븐에서 밤새 건조시켜 2-(피리딘-2-일)-N-(5-(4-(6-(2-(3-(트라이플루오로메톡시)페닐)아세트아미도)피리다진-3-일)부틸)-1,3,4-티아다이아졸-2-일)아세트아미드 하이드로브로마이드 형태 I(CB-839 HBr, 1.02g)을 수득했다. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 12.80 (s, 1H), 11.33 (s, 1H), 8.73 (d, J = 4.47 Hz, 1H), 8.21 (d, J = 8.76 Hz, 2H), 7.75 (d, J = 7.86 Hz, 1H), 7.68 (m, 1H), 7.60 (d, J = 8.89 Hz, 1H), 7.45 (t, J = 7.42 Hz, 1H), 7.35 (m, 2H), 7.24 (d, J = 7.87 Hz, 1H), 4.21(s, 2H), 3.84(s, 2H), 3.00 (s, 2H), 2.88 (s, 2H), 1.72 (s, 4H).

XRD 패턴을 도 5에 도시하였다. CB-839 HBr는 다음과 같은 2θ 값을 갖는다: 5.08; 6.58; 10.20; 10.83; 12.52; 12.89; 15.19; 15.98; 16.32; 17.28; 18.60; 19.36; 19.96; 20.54; 21.13; 21.76; 22.34; 22.92; 24.44; 25.77; 25.84; 26.43; 26.49; 및 30.27.

실시예 3: 화합물 분석

화합물 670은 생체 내 생화학적 분석 및 세포 증식 분석 모두에서 분석되었다. 실험 프로토콜 및 분석 결과는 미국 특허 제 8,604,016 호 또는 다르게는 미국 특허 출원 공개 제 2014/0050699 A1 호에서 확인된다.

참조 문헌 인용

본원에 언급된 모든 간행물 및 특허는, 각각의 개별적 간행물 또는 특허가 참고로 인용된 것으로 특별히 개별적으로 기재된 바와 같이, 그 전체가 본원에 참고로 인용된다. 상충되는 경우, 본원에 정의된 임의의 내용을 포함하여 본원이 우선한다.

균등물

본 발명의 특정 태양들을 논의하였지만, 상기 명세서는 예시적이며 제한적인 것이 아니다. 상기 명세서 및 하기의 특허청구범위를 검토할 때 본 발명의 많은 변형이 당업자에게 명백해질 것이다. 본 발명의 전체 범위는 특허청구범위(균등물의 전체 범위와 함께) 및 명세서(상기 변형들과 함께)를 참조하여 결정되어야 한다.

Claims

하기 화학식 (I)의 구조를 갖는 화합물의 결정성 염:

(I).
제 1 항에 있어서,
상기 염이 하이드로클로라이드 염, 톨루엔설포네이트 염, 니트레이트 염, 메탄설포네이트 염 또는 하이드로브로마이드 염인, 결정성 염.
제 2 항에 있어서,
상기 염이 하이드로클로라이드 염인, 결정성 염.
제 3 항에 있어서,
2θ 값이 16.70; 17.26; 21.09; 22.69인, 결정성 염.
제 4 항에 있어서,
2θ 값이 16.70; 17.26; 18.18; 21.09; 22.69; 23.46; 25.22; 25.49; 26.72인, 결정성 염.
제 5 항에 있어서,
2θ 값이 9.53; 11.63; 16.70; 17.26; 18.18; 19.10; 19.80; 21.09; 22.16; 22.69; 23.46; 24.63; 25.22; 25.49; 25.91; 26.72; 28.45; 29.38; 31.39; 31.82; 34.91인, 결정성 염.
제 6 항에 있어서,
2θ 값이 8.62; 9.53; 11.63; 15.89; 16.70; 17.26; 18.18; 19.10; 19.80; 21.09; 22.16; 22.69; 23.46; 24.63; 25.22; 25.49; 25.91; 26.72; 28.45; 29.38; 31.39; 31.82; 32.76; 33.61; 33.74; 34.27; 34.91; 35.53; 39.36; 39.73인, 결정성 염.
제 7 항에 있어서,
실질적으로 도 1에 도시된 바와 같은 XRD 패턴을 갖는 결정성 염.
제 3 항에 있어서,
2θ 값이 8.34; 18.83; 21.10인, 결정성 염.
제 9 항에 있어서,
2θ 값이 6.26; 8.34; 15.82; 18.83; 21.10; 23.42; 24.10; 24.45; 25.25; 25.74인, 결정성 염.
제 10 항에 있어서,
2θ 값이 6.26; 8.34; 11.02; 12.58; 14.80; 15.61; 15.82; 17.58; 18.20; 18.83; 19.81; 20.00; 21.10; 22.58; 23.42; 24.10; 24.45; 25.25; 25.74; 26.36; 27.83; 28.70; 29.84; 30.46; 31.81; 32.38인, 결정성 염.
제 11 항에 있어서,
2θ 값이 3.10; 6.26; 8.34; 9.04; 9.96; 11.02; 12.58; 13.47; 14.80; 15.61; 15.82; 16.15; 17.58; 18.20; 18.83; 19.81; 20.00; 21.10; 22.02; 22.58; 23.42; 24.10; 24.45; 25.25; 25.74; 26.36; 27.22; 27.83; 28.70; 29.84; 30.46; 31.81; 32.38; 33.23; 35.68; 36.57; 37.40; 39.36; 41.79인, 결정성 염.
제 12 항에 있어서,
실질적으로 도 2에 도시된 바와 같은 XRD 패턴을 갖는 결정성 염.
하기 화학식 (I)의 구조를 갖는 화합물의 염으로서, 다이(하이드로클로라이드) 염인, 염:

(I).
제 1 항 내지 제 14 항 중 어느 한 항의 염 및 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는 약학 조성물.
제 1 항 내지 제 14 항 중 어느 한 항의 염 또는 제 15 항의 약학 조성물을 투여하는 것을 포함하는 암 또는 면역학적 또는 신경학적 질환의 치료 또는 예방 방법.
제 16 항에 있어서,
상기 암이, 급성 림프모구성 백혈병(ALL), 급성 골수성 백혈병(AML), 부신피질 암종, 항문암, 충수암, 비정형 기형양/횡문근양 종양, 기저 세포 암종, 담관암, 방광암, 골암, 뇌종양, 성상세포종, 뇌 및 척수 종양, 뇌간 신경아교종, 중추신경계 비정형 기형양/횡문근양 종양, 중추신경계 배아 종양, 유방암, 기관지 종양, 버킷 림프종, 카르시노이드 종양, 비공지된 원발성 암종, 중추신경계 암, 자궁경부암, 소아암, 척삭종, 만성 림프구성 백혈병(CLL), 만성 골수성 백혈병(CML), 만성 골수증식성 장애, 결장암, 대장암, 두개인두종, 피부 T-세포 림프종, 유관 상피내 암종(DCIS), 배아 종양, 자궁내막암, 뇌실상의아세포종, 상의세포종, 식도암, 감각신경모세포종, 유잉(Ewing) 육종, 두개외 생식 세포 종양, 고환외 생식 세포 종양, 간외 담관암, 안암, 골의 섬유성 조직구종, 담낭암, 위암, 위장 카르시노이드 종양, 위장 간질 종양(GIST), 생식 세포 종양, 난소 생식 세포 종양, 임신 영양막 종양, 신경아교종, 모발 세포 백혈병, 두경부암, 심장암, 간세포암, 조직구증, 랑게르한스(Langerhans) 세포암, 호지킨 림프종, 하인두암, 안내 흑색종, 소도 세포 종양, 카포시(Kaposi) 육종, 신장암, 랑게르한스 세포 조직구증, 후두암, 백혈병, 입술 및 구강 암, 간암, 소엽성 상피내 암종(LCIS), 폐암, 림프종, AIDS-관련 림프종, 마크로글로불린혈증, 남성 유방암, 수모세포종, 수질상피종, 흑색종, 메르켈(Merkel) 세포 암종, 악성 중피종, 잠복 원발성 전이성 편평 경부암, NUT 유전자를 수반하는 중간선관(Midline Tract) 암종, 입암, 다발성 내분비 신생물 증후군, 다발성 골수종/형질 세포 신생물, 균상식육종, 골수형성이상 증후군, 골수형성이상/골수증식성 신생물, 골수종, 다발성 골수종, 비강암, 부비동암, 비인두암, 신경모세포종, 비-호지킨 림프종, 비-소세포 폐암, 구암, 구강암, 입술암, 구인두암, 골육종, 난소암, 췌장암, 유두종증, 부신경절종, 부갑상선암, 음경암, 인두암, 크롬친화세포종, 중간 분화의 송과체 실질 종양, 송과체모세포종, 뇌하수체 종양, 형질 세포 신생물, 흉막폐 모세포종, 원발성 중추신경계(CNS) 림프종, 전립선암, 직장암, 신장 세포암, 신우암, 요관암, 이행 세포암, 망막모세포종, 횡문근육종, 침샘암, 육종, 세자리(Sezary) 증후군, 피부암, 소세포 폐암, 소장암, 연조직 육종, 편평 세포 암종, 잠복 원발성 편평 경부암, 전이성, 위암, 천막상 원시 신경외배엽 종양, T-세포 림프종, 고환암, 인후암, 흉선종, 흉선 암종, 갑상선암, 신우 및 요관의 이행 세포암, 비공지된 원발성 임신 영양막 종양, 소아의 희귀암, 요도암, 자궁암, 자궁 육종, 발덴스트룀(Waldenstrom) 마크로글로불린혈증 또는 윌름스(Wilms) 종양을 포함하는, 방법.
제 16 항 또는 제 17 항에 있어서,
상기 방법은 하나 이상의 화학요법제를 함께 투여하는 것을 추가로 포함하는, 방법.
제 18 항에 있어서,
하나 이상의 화학요법제가 아미노글루테티미드(aminoglutethimide), 암사크린(amsacrine), 아나스트로졸(anastrozole), 아스파라기나제(asparaginase), 바실러스 칼메트-구에린(Bacillus Calmette-Guerin) 백신(bcg), 바이칼루타미드(bicalutamide), 블레오마이신(bleomycin), 보르테조밉(bortezomib), 부세렐린(buserelin), 부설판(busulfan), 캄포테신(campothecin), 카페시타빈(capecitabine), 카보플라틴(carboplatin), 카필조밉(carfilzomib), 카무스틴(carmustine), 클로람부실(chlorambucil), 클로로퀸(chloroquine), 시스플라틴(cisplatin), 클라드리빈(cladribine), 클로드로네이트(clodronate), 콜히친(colchicine), 사이클로포스파미드(cyclophosphamide), 사이프로테론(cyproterone), 사이타라빈(cytarabine), 다카바진(dacarbazine), 닥티노마이신(dactinomycin), 다우노루비신(daunorubicin), 데메톡시비리딘(demethoxyviridin), 덱사메타손(dexamethasone), 다이클로로아세테이트(dichloroacetate), 다이에네스트롤(dienestrol), 다이에틸스틸베스트롤(diethylstilbestrol), 도세탁셀(docetaxel), 독소루비신(doxorubicin), 에피루비신(epirubicin), 에스트라디올(estradiol), 에스트라무스틴(estramustine), 에토포사이드(etoposide), 에베롤리무스(everolimus), 엑스메스탄(exemestane), 필그라스팀(filgrastim), 플루다라빈(fludarabine), 플루드로코르티손(fludrocortisone), 플루오로우라실(fluorouracil), 플루옥시메스테론(fluoxymesterone), 플루타미드(flutamide), 겜시타빈(gemcitabine), 제니스테인(genistein), 고세렐린(goserelin), 하이드록시우레아(hydroxyurea), 이다루비신(idarubicin), 이포스파미드(ifosfamide), 이마티닙(imatinib), 인터페론(interferon), 이리노테칸(irinotecan), 레트로졸(letrozole), 류코보린(leucovorin), 류프롤라이드(leuprolide), 레바미솔(levamisole), 로무스틴(lomustine), 로니다민(lonidamine), 메클로레타민(mechlorethamine), 메드록시프로게스테론(medroxyprogesterone), 메게스트롤(megestrol), 멜팔란(melphalan), 머캡토푸린(mercaptopurine), 메스나(mesna), 메트포민(metformin), 메토트렉세이트(methotrexate), 미토마이신(mitomycin), 미토탄(mitotane), 미톡산트론(mitoxantrone), 닐루타미드(nilutamide), 노코다졸(nocodazole), 옥트레오타이드(octreotide), 옥살리플라틴(oxaliplatin), 파클리탁셀(paclitaxel), 파미드로네이트(pamidronate), 펜토스타틴(pentostatin), 페리포신(perifosine), 플리카마이신(plicamycin), 포르피머(porfimer), 프로카바진(procarbazine), 랄티트렉세드(raltitrexed), 리툭시맙(rituximab), 소라페닙(sorafenib), 스트렙토조신(streptozocin), 수니티닙(sunitinib), 슈라민(suramin), 타목시펜(tamoxifen), 테모졸로마이드(temosolomide), 템시롤리무스(temsirolimus), 테니포사이드(teniposide), 테스토스테론(testosterone), 티오구아닌(thioguanine), 티오테파(thiotepa), 티타노센 다이클로라이드(titanocene dichloride), 토포테칸(topotecan), 트라스투주맙(trastuzumab), 트레티노인(tretinoin), 빈블라스틴(vinblastine), 빈크리스틴(vincristine), 빈데신(vindesine), 비노렐빈(vinorelbine), MK2206, 트라메티닙(trametinib), BEZ235, 에를로티닙(erlotinib), 셀루메티닙(selumetinib), 시롤리무스(sirolimus), 트라메티닙(trametinib), 파조파닙(pazopanib), 또는 GSK1120212를 포함하는, 방법.
제 16 항 내지 제 19 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 방법이 암 치료의 하나 이상의 비-화학적 방법을 투여하는 것을 추가로 포함하는, 방법.
제 20 항에 있어서,
상기 하나 이상의 비-화학적 방법은 방사선 요법을 포함하는, 방법.
제 20 항에 있어서,
상기 하나 이상의 비-화학적 방법은 수술, 열절제(thermoablation), 집속(focused) 초음파 요법, 냉동 요법 또는 이들의 임의의 조합을 포함하는, 방법.
제 16 항 내지 제 22 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 방법은 하나 이상의 면역 조절제를 함께 투여하는 것을 추가로 포함하는, 방법.
제 23 항에 있어서,
상기 면역 조절제가 과립구 콜로니-자극 인자(G-CSF), 인터페론, 이미퀴모드, IL-2, IL-7, IL-12, 케모카인, 합성 시토신 포스페이트-구아노신(CpG) 올리고데옥시뉴클레오티드, 글루칸, 아프레밀라스트, CC-122, CC-11006, CC-10015, 레날리도미드, 포말리도미드 및 탈리도미드 또는 탈리도미드 유사체인, 방법.
하기 화학식 (I)의 구조를 갖는 화합물의 결정성 염의 제조 방법으로서:

(I)
a) 제 1 유기 용매 중에 화학식 (I)의 화합물의 유리 염기 혼합물을 제공하는 단계;
b) 화학식 (I)의 화합물의 염을 포함하는 혼합물을 형성하기에 충분한 조건하에, 상기 유리 염기 혼합물을 시약 용액과 접촉시키는 단계로서, 이때 상기 시약 용액은 산 및 임의로 제 2 유기 용매를 포함하는, 단계; 및
c) 화학식 (I)의 화합물의 염을 포함하는 혼합물로부터 화학식 (I)의 화합물의 염을 결정화하는 단계
를 포함하는 방법.
제 25 항에 있어서,
상기 결정성 염이 하이드로클로라이드 염, 톨루엔설포네이트 염, 니트레이트 염, 메탄설포네이트 염 또는 하이드로브로마이드 염인, 방법.
제 25 항에 있어서,
제 1 유기 용매 및, 존재하는 경우, 제 2 유기 용매는 동일한, 방법.
제 25 항에 있어서,
제 1 유기 용매 및, 존재하는 경우, 제 2 유기 용매는 상이한, 방법.
제 25 항 내지 제 28 항 중 어느 한 항에 있어서,
제 1 유기 용매 및 제 2 유기 용매는 각각 독립적으로 에탄올 및/또는 아세토니트릴을 포함하는, 방법.
제 25 항 내지 제 29 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 산은 염산, p-톨루엔설폰산, 메탄설폰산, 질산 또는 브롬화수소산인, 방법.
제 25 항 내지 제 30 항 중 어느 한 항에 있어서,
단계 b)의 산은, 유리 염기 혼합물 중의 화학식 (I)의 화합물의 양의 약 1.0 내지 약 1.5배인 몰량으로 시약 용액 중에 존재하는, 방법.
제 25 항 내지 제 31 항 중 어느 한 항에 있어서,
화학식 (I)의 화합물의 염을 포함하는 혼합물은 용액이고, 화학식 (I)의 화합물의 염을 혼합물로부터 결정화하는 단계는, 상기 용액을 과포화시켜 화학식 (I)의 화합물의 염을 용액으로부터 침전시키는 것을 포함하는, 방법.
제 32 항에 있어서,
상기 용액을 과포화시키는 단계는, 항-용매(anti-solvent)를 서서히 첨가하거나, 상기 용액을 냉각시키거나, 상기 용액의 부피를 감소시키거나 또는 이들의 임의의 조합을 포함하는, 방법.
제 32 항에 있어서,
상기 용액을 과포화시키는 단계는, 상기 용액을 주위 온도 이하로 냉각시키는 것을 포함하는, 방법.
제 25 항 내지 제 34 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 결정성 염을 단리하는 단계를 추가로 포함하는 방법.
제 35 항에 있어서,
상기 결정성 염을 단리하는 단계는 혼합물로부터 결정화된 염을 여과하는 것을 포함하는, 방법.
제 35 항 또는 제 36 항에 있어서,
상기 결정성 염을 감압하에 건조시키는 단계를 추가로 포함하는 방법.
제 25 항 내지 제 37 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 결정성 염은 제 1 항 내지 제 19 항 중 어느 한 항의 결정성 염인, 방법.
하기 화학식 (I)의 구조를 갖는 결정성 화합물:

(I).
제 39 항에 있어서,
2θ 값이 18.39; 19.10; 21.37; 24.65인, 결정성 화합물.
제 40 항에 있어서,
2θ 값이 7.92; 18.39; 19.10; 20.12; 21.37; 24.10; 24.65; 25.14인, 결정성 화합물.
제 41 항에 있어서,
2θ 값이 7.32; 7.92; 11.98; 15.54; 15.87; 18.06; 18.39; 19.10; 20.06; 20.12; 21.37; 22.41; 22.74; 24.10; 24.65; 25.14; 25.78; 27.32인, 결정성 화합물.
제 42 항에 있어서,
2θ 값이 3.64; 7.32; 7.92; 8.53; 9.30; 9.38; 11.02; 11.98; 14.70; 15.54; 15.87; 16.50; 16.59; 18.06; 18.39; 19.10; 20.06; 20.12; 20.61; 21.37; 21.89; 22.41; 22.74; 23.72; 24.10; 24.65; 25.14; 25.78; 26.49; 27.32; 27.55; 28.26; 29.88; 31.20; 31.80; 31.52; 32.80; 34.30; 35.20; 36.41; 38.53; 40.08; 40.94; 및 43.86인, 결정성 화합물.
제 43 항에 있어서,
실질적으로 도 6에 도시된 바와 같은 XRD 패턴을 갖는 결정성 화합물.
제 39 항에 있어서,
2θ 값이 7.57; 18.50; 18.69인, 결정성 화합물.
제 45 항에 있어서,
2θ 값이 7.57; 9.67; 11.00; 12.93; 15.20; 18.50; 18.69; 23.33; 24.87인, 결정성 화합물.
제 46 항에 있어서,
2θ 값이 5.47; 7.57; 9.67; 11.00; 12.93; 14.14; 15.20; 17.74; 18.50; 18.69; 19.40; 20.54; 21.13; 23.33; 24.37; 24.87; 25.52인,결정성 화합물.
제 47 항에 있어서,
2θ 값이 5.47; 6.01; 7.57; 9.20; 9.67; 10.15; 11.00; 12.93; 14.14; 15.20; 15.81; 16.56; 17.74; 18.50; 18.69; 19.40; 19.94; 20.54; 20.59; 21.13; 22.00; 22.60; 23.33; 23.98; 24.37; 24.87; 25.52; 26.27; 26.62; 27.79; 29.59; 30.64; 33.30; 35.01; 37.93; 38.72인, 결정성 화합물.
제 48 항에 있어서,
실질적으로 도 7에 도시된 바와 같은 XRD 패턴을 갖는 결정성 화합물.