KR20160040321A - 펩티드 데포르밀라제 억제제 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 특정 {2-(알킬)-3-[2-(5-플루오로-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}히드록시포름아미드 유도체, 이것을 함유하는 조성물, 및 박테리아 펩티드 데포르밀라제 (PDF) 활성의 억제 및 박테리아 감염의 치료에 있어서 상기 화합물의 용도에 관한 것이다. 구체적으로, 본 발명은 하기 화학식 I의 화합물 및 그의 제약상 허용가능한 염에 관한 것이다:
<화학식 I>
Figure pat00326

(여기서, R1, R2 및 R3은 본원에서 정의됨).
본 발명의 화합물은 박테리아 펩티드 데포르밀라제 억제제이고, 박테리아 감염의 치료에 유용할 수 있다.

Description

펩티드 데포르밀라제 억제제 {PEPTIDE DEFORMYLASE INHIBITORS}
본 발명은 특정 {2-(알킬)-3-[2-(5-플루오로-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}히드록시포름아미드 화합물, 이것을 함유하는 조성물, 및 박테리아 펩티드 데포르밀라제 (PDF) 활성의 억제 및 박테리아 감염의 치료에 있어서 상기 화합물의 용도에 관한 것이다.
박테리아 단백질 합성은 N-포르밀-메티오닐-tRNA (f-Met-tRNAi)로 시작되고, 이에 따라 모든 새로 합성된 폴리펩티드는 N-포르밀-메티오닌 말단부 (f-Met-pp)를 함유하게 된다 (반응식 I). 펩티드 데포르밀라제 (PDF)는 금속함유효소로, 폴리펩티드의 N-포르밀기가 신장 과정 동안에 리보솜으로부터 나타날 때 이것을 제거한다 ([Adams, J.M. (1968) J. Mol. Biol. 33, 571-589], [Livingston, D.M. and Leder, P. (1969) Biochemistry 8, 435-443], [Ball, L.A. and Kaesberg, P. (1973) J. Mol. Biol. 79, 531-537]). 폴리펩티드의 두번째 아미노산의 성질에 따라서 그 폴리펩티드는 메티오닌 아미노 펩티다제 (MAP)에 의해 추가로 프로세싱되어 성숙 단백질을 생성한다. 박테리아 성장에 필수적인 효소인 MAP는 N-차단된 펩티드를 가수분해할 수 없기 때문에, 탈포르밀화는 단백질 성숙에 있어서 매우 중요한 역할을 한다.
<반응식 I>
단백질 합성에 있어서 PDF의 역할
Figure pat00001
PDF는 박테리아에 편재해 있으며, 현재까지 서열분석된 모든 박테리아 게놈에는 1개 이상의 pdf 유전자가 존재한다.
PDF는 N-포르밀화를 수반하지 않는 진핵생물의 세포질 단백질 합성에서는 역할이 없지만, 엽록체/미토콘드리아 국소화 신호를 함유하는 핵-코딩 PDF 단백질이 기생충, 식물, 및 인간을 비롯한 포유동물에서 동정된 바 있다. 식물 및 기생충의 게놈은 활성을 위해서 탈포르밀화를 필요로 하는 수많은 단백질을 코딩하고 있기 때문에 PDF는 식물 및 기생충의 세포소기관에서는 필수적이지만, 이것이 동물에는 해당되지 않는다는 것을 시사하는 증거가 있다. 사실, 인간 미토콘드리아 PDF의 특징규명은 이것이 그의 박테리아 대응물보다 훨씬 덜 활성임을 보여주었다. 추가로, 인간 PDF 효소에 대하여 시험관내 활성인 PDF 억제제는 정상적인 인간 세포주의 성장에 영향을 미치지 않았다 [Nguyen, K.T., Hu, X., Colton, C., Chakrabarti, R., Zhu, M.X. and Pei, D. (2003) Biochemistry 42, 9952-9958].
따라서, PDF 억제제는 광범위한 스펙트럼의 병원체를 포괄하는 신규한 작용 방식을 갖는 항-박테리아제의 유망한 신규 부류를 대표한다.
PDF 억제제는 당업계에 기재되어 있다. 하기 화학식의 히드라진-3-옥소프로필 히드록시포름아미드 유도체에 관한 특허 명세서가 출원된 바 있으며, WO 03/101442 및 WO 2006/055663을 참조한다:
Figure pat00002
.
WO 03/101442 WO 2006/055663
[Adams, J.M. (1968) J. Mol. Biol. 33, 571-589] [Livingston, D.M. and Leder, P. (1969) Biochemistry 8, 435-443] [Ball, L.A. and Kaesberg, P. (1973) J. Mol. Biol. 79, 531-537] [Nguyen, K.T., Hu, X., Colton, C., Chakrabarti, R., Zhu, M.X. and Pei, D. (2003) Biochemistry 42, 9952-9958]
따라서, PDF 활성을 억제하는 화합물을 제조하기 위한 시도가 이루어져 왔고, 수많은 이러한 화합물들이 당업계에 개시되어 있다. 그러나, 박테리아 감염의 치료에 사용될 수 있는 PDF 억제제는 여전히 요구된다.
본 발명은 특정 {2-(알킬)-3-[2-(5-플루오로-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}히드록시포름아미드 유도체, 이것을 함유하는 조성물, 및 박테리아 펩티드 데포르밀라제 (PDF) 활성의 억제 및 박테리아 감염의 치료에 있어서 상기 화합물의 용도에 관한 것이다. 구체적으로, 본 발명은 하기 화학식 I의 화합물 및 그의 제약상 허용가능한 염에 관한 것이다:
<화학식 I>
Figure pat00003
(여기서, R1, R2 및 R3은 하기에서 정의됨).
본 발명의 화합물은 박테리아 펩티드 데포르밀라제 억제제이고, 박테리아 감염의 치료에 유용할 수 있다.
도 1은 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드의 다형질 형태 1의 FT-IR 스펙트럼을 제공한다. x-축은 cm-1의 단위이고, y-축은 흡광도이다.
도 2는 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드의 다형질 형태 2의 FT-IR 스펙트럼을 제공한다. x-축은 cm-1의 단위이고, y-축은 흡광도이다.
도 3은 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드의 다형질 형태 1의 FT-라만(Raman) 스펙트럼을 제공한다. x-축은 cm-1의 단위이고, y-축은 강도이다.
도 4는 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드의 다형질 형태 2의 FT-라만 스펙트럼을 제공한다. x-축은 cm-1의 단위이고, y-축은 강도이다.
도 5는 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드의 다형질 형태 3의 FT-라만 스펙트럼을 제공한다. x-축은 cm-1의 단위이고, y-축은 강도이다.
도 6은 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드의 다형질 형태 1의 X-선 분말 회절 패턴을 제공한다. x-축은 °2 쎄타 단위이고, y-축은 강도이다.
도 7은 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드의 다형질 형태 2의 X-선 분말 회절 패턴을 제공한다. x-축은 °2 쎄타 단위이고, y-축은 강도이다.
도 8은 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드의 다형질 형태 3의 X-선 분말 회절 패턴을 제공한다. x-축은 °2 쎄타 단위이고, y-축은 강도이다.
도 9는 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드의 다형질 형태 1의 시차 주사 열계량 (DSC) 열분석도를 제공한다. x-축은 온도 (℃)이고, y-축은 열 유동량 (와트/그램)이다. 132℃에서의 열 사건은 형태 1에서 형태 3으로의 발열 고체 상태 형태 전환에 상응한다.
도 10은 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드의 다형질 형태 2의 시차 주사 열계량 (DSC) 열분석도를 제공한다. x-축은 온도 (℃)이고, y-축은 열 유동량 (와트/그램)이다.
도 11은 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드의 다형질 형태 3의 시차 주사 열계량 (DSC) 열분석도를 제공한다. x-축은 온도 (℃)이고, y-축은 열 유동량 (와트/그램)이다.
도 12는 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드의 다형질 형태 1의 열중량 분석 (TGA) 추적도를 제공한다. x-축은 온도 (℃)이고, y-축은 중량 변화율(％)이다.
도 13은 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드의 다형질 형태 2의 열중량 분석 (TGA) 추적도를 제공한다. x-축은 온도 (℃)이고, y-축은 중량 변화율(％)이다.
도 14는 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드의 다형질 형태 3의 열중량 분석 (TGA) 추적도를 제공한다. x-축은 온도 (℃)이고, y-축은 중량 변화율(％)이다.
발명의 상세한 설명
본 발명을 기재함에 있어서, 화학적 원소는 원소 주기율표에 따라 나타냈다. 본원에서 사용된 약어 및 기호는 화학 및 생물학 분야의 숙련자가 이러한 약어 및 기호를 통상적으로 사용하는 방식에 따른 것이다. 구체적으로, 하기하는 약어가 실시예 및 명세서 전반에서 사용될 수 있다:
g (그램), mg (밀리그램),
kg (킬로그램), ㎍ (마이크로그램),
L (리터), mL (밀리리터),
㎕ (마이크로리터), psi (1 인치2 당 파운드),
M (몰), mM (밀리몰),
μM (마이크로몰), nM (나노몰),
pM (피코몰), nm (나노미터),
mm (밀리미터), wt (중량),
N (노르말), CFU (콜로니 형성 단위),
I.V. (정맥내), Hz (헤르츠),
MHz (메가헤르츠), mol (몰수)
mmol (밀리몰수), RT (실온),
min (분), h (시간),
b.p. (끓는점), TLC (박층 크로마토그래피),
Tr (체류 시간), RP (역상),
MeOH (메탄올), i-PrOH (이소프로판올),
TEA (트리에틸아민), TFA (트리플루오로아세트산),
TFAA (트리플루오로아세트산 무수물), THF (테트라히드로푸란),
DMSO (디메틸술폭시드), EtOAc (에틸 아세테이트),
DME (1,2-디메톡시에탄), DCM (디클로로메탄),
DCE (디클로로에탄), DMF (N,N-디메틸포름아미드),
DMPU (N,N'-디메틸프로필렌우레아), CDI (1,1-카르보닐디이미다졸),
IBCF (이소부틸 클로로포르메이트), AcOH (아세트산),
HOAt (1-히드록시-7-아자벤조트리아졸),
THP (테트라히드로피란), NMM (N-메틸모르폴린),
Pd/C (탄소상 팔라듐), MTBE (tert-부틸 메틸 에테르)
HOBT (1-히드록시벤조트리아졸), mCPBA (메타-클로로퍼벤조산),
EDC (1-[3-디메틸아미노)프로필]-3-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드),
Boc (tert-부틸옥시카르보닐), FMOC (9-플루오레닐메톡시카르보닐),
DCC (디시클로헥실카르보디이미드), CBZ (벤질옥시카르보닐),
Ac (아세틸), atm (대기압),
TMSE (2-(트리메틸실릴)에틸), TMS (트리메틸실릴),
TIPS (트리이소프로필실릴), TBS (t-부틸디메틸실릴),
DMAP (4-디메틸아미노피리딘), BSA (소 혈청 알부민),
NAD (니코틴아미드 아데닌 뉴클레오티드),
HPLC (고압 액체 크로마토그래피),
LC/MS (액체 크로마토그래피/질량 분석법),
BOP (비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스핀산 클로라이드),
TBAF (테트라-n-부틸암모늄 플루오라이드),
HBTU (O-벤조트리아졸-1-일-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄헥사플루오로 포스페이트),
HEPES (4-(2-히드록시에틸)-1-피페라진 에탄 술폰산),
DPPA (디페닐포스포릴 아지드), LAH (수소화리튬알루미늄),
fHNO3 (발연 HNO3), NaOMe (나트륨 메톡시드),
EDTA (에틸렌디아민테트라아세트산),
TMEDA (N,N,N',N'-테트라메틸-1,2-에탄디아민),
NBS (N-브로모숙신이미드), DIPEA (디이소프로필에틸아민),
dppf (1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센), 및
NIS (N-요오도숙신이미드).
에테르에 대한 모든 언급은 디에틸 에테르에 관한 것이고, 염수는 NaCl의 포화 수용액이다.
용어 및 정의
"알킬"은 명시한 수의 구성원 탄소 원자를 갖는 1가 포화 탄화수소 쇄를 지칭한다. 예를 들어, C1-C7 알킬은 1개 내지 7개의 구성원 탄소 원자를 갖는 알킬기를 지칭한다. 알킬기는 본원에서 정의한 바와 같은 1개 이상의 치환기로 임의로 치환될 수 있다. 알킬기는 선형 또는 분지형일 수 있다. 대표적인 분지형 알킬기는 1개, 2개 또는 3개의 분지를 갖는다. 알킬은 메틸, 에틸, 프로필 (n-프로필 및 이소프로필), 부틸 (n-부틸, 이소부틸 및 t-부틸), 펜틸 (n-펜틸, 이소펜틸 및 네오펜틸) 및 헥실을 포함한다.
"알케닐"은 명시한 수의 구성원 탄소 원자를 갖고 쇄 내에 1개 이상의 탄소-탄소 이중 결합을 갖는 불포화 탄화수소 쇄를 지칭한다. 예를 들어, C2-C6 알케닐은 2개 내지 6개의 구성원 탄소 원자를 갖는 알케닐기를 지칭한다. 특정 실시양태에서, 알케닐기는 쇄 내에 1개의 탄소-탄소 이중 결합을 갖는다. 다른 실시양태에서, 알케닐기는 쇄 내에 1개 초과의 탄소-탄소 이중 결합을 갖는다. 알케닐기는 본원에서 정의한 바와 같은 1개 이상의 치환기로 임의로 치환될 수 있다. 알케닐기는 선형 또는 분지형일 수 있다. 대표적인 분지형 알케닐기는 1개, 2개 또는 3개의 분지를 갖는다. 알케닐은 에틸레닐, 프로페닐, 부테닐, 펜테닐 및 헥세닐을 포함한다.
"알콕시"는 산소 브릿지를 통해 부착된 알킬 잔기를 지칭한다 (예를 들어, -O-C1-C6 알킬기 (여기서, C1-C6은 본원에서 정의됨). 이러한 기의 예는 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 부톡시, 펜톡시 및 헥속시를 포함한다.
"알키닐"은 명시한 수의 구성원 탄소 원자를 갖고 쇄 내에 1개 이상의 탄소-탄소 삼중 결합을 갖는 불포화 탄화수소 쇄를 지칭한다. 예를 들어, C2-C6 알키닐은 2개 내지 6개의 구성원 원자를 갖는 알키닐기를 지칭한다. 특정 실시양태에서, 알키닐기는 쇄 내에 1개의 탄소-탄소 삼중 결합을 갖는다. 다른 실시양태에서, 알키닐기는 쇄 내에 1개 초과의 탄소-탄소 삼중 결합을 갖는다. 명백히 하기 위해서, 쇄 내에 1개 이상의 탄소-탄소 삼중 결합을 갖고 쇄 내에 1개 이상의 탄소-탄소 이중 결합을 갖는 불포화 탄화수소 쇄는 알키닐기로 지칭된다. 알키닐기는 본원에서 정의한 바와 같은 1개 이상의 치환기로 임의로 치환될 수 있다. 대표적인 분지형 알키닐기는 1개, 2개 또는 3개의 분지를 갖는다. 알키닐은 에티닐, 프로피닐, 부티닐, 펜티닐 및 헥시닐을 포함한다.
"아릴"은 방향족 탄화수소 고리계를 지칭한다. 아릴기는 모노시클릭 고리계 또는 바이시클릭 고리계이다. 모노시클릭 아릴 고리는 페닐을 지칭한다. 바이시클릭 아릴 고리는 나프틸, 및 페닐이 5개, 6개 또는 7개의 구성원 탄소 원자를 갖는 시클로알킬 또는 시클로알케닐 고리에 융합된 고리를 지칭한다. 아릴기는 본원에서 정의한 바와 같은 1개 이상의 치환기로 임의로 치환될 수 있다.
"시클로알킬"은 명시한 수의 구성원 탄소 원자를 갖는 포화 탄화수소 고리를 지칭한다. 시클로알킬기는 모노시클릭 고리계이다. 예를 들어, C3-C6 시클로알킬은 3개 내지 6개의 구성원 원자를 갖는 시클로알킬기를 지칭한다. 시클로알킬기는 본원에서 정의한 바와 같은 1개 이상의 치환기로 임의로 치환될 수 있다. 시클로알킬은 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸 및 시클로헥실을 포함한다.
"시클로알케닐"은 명시한 수의 구성원 탄소 원자를 갖고 고리 내에 탄소-탄소 이중 결합을 갖는 불포화 탄화수소 고리를 지칭한다. 예를 들어, C3-C6 시클로알케닐은 3개 내지 6개의 구성원 탄소 원자를 갖는 시클로알케닐기를 지칭한다. 특정 실시양태에서, 시클로알케닐기는 고리 내에 1개의 탄소-탄소 이중 결합을 갖는다. 다른 실시양태에서, 시클로알케닐기는 고리 내에 1개 초과의 탄소-탄소 이중 결합을 갖는다. 시클로알케닐 고리는 방향족이 아니다. 시클로알케닐기는 모노시클릭 고리계이다. 시클로알케닐기는 본원에서 정의한 바와 같은 1개 이상의 치환기로 임의로 치환될 수 있다. 시클로알케닐은 시클로프로페닐, 시클로부테닐, 시클로펜테닐, 시클로헥세닐 및 시클로헥사디에닐을 포함한다.
"거울상이성질체 과량" 또는 "ee"는 1종의 거울상이성질체가 다른 거울상이성질체에 비해 과량임을 의미하며, 백분율로 표현된다. 따라서, 라세미체 혼합물에서는 2종의 거울상이성질체가 둘다 동일한 양으로 존재하기 때문에, 상기 경우의 거울상이성질체 과량은 0 (0％ ee)이다. 그러나, 1종의 거울상이성질체가 풍부하여 이것이 생성물의 95％를 구성하는 경우에는 상기 거울상이성질체 과량이 90％ ee (풍부한 거울상이성질체의 양 (95％) - 다른 거울상이성질체의 양 (5％))일 것이다.
"거울상이성질체적으로 풍부한"은 거울상이성질체 과량이 0을 초과하는 생성물을 지칭한다. 예를 들어, '거울상이성질체적으로 풍부한'은 거울상이성질체 과량이 50％ ee 초과, 75％ ee 초과 또는 90％ ee 초과인 생성물을 지칭한다.
"거울상이성질체적으로 순수한"은 거울상이성질체 과량이 99％ ee 이상인 생성물을 지칭한다.
"할로"는 할로겐 라디칼인 플루오로, 클로로, 브로모 및 요오도를 지칭한다.
"할로알킬"은 알킬기 내의 구성원 원자에 부착된 1개 이상의 수소 원자가 할로로 대체된 알킬기를 지칭한다. 할로 치환기의 수는 1개, 2개, 3개, 4개, 5개 또는 6개의 치환기를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 할로알킬은 모노플루오로메틸, 디플루오로에틸 및 트리플루오로메틸을 포함한다.
"헤테로아릴"은 1개 내지 5개, 적합하게는 1개 내지 4개, 더욱 적합하게는 1개 또는 2개의 헤테로원자를 고리 내의 구성원 원자로서 함유하는 방향족 고리를 지칭한다. 1개 초과의 헤테로원자를 함유하는 헤테로아릴기는 상이한 헤테로원자를 함유할 수 있다. 헤테로아릴기는 본원에서 정의한 바와 같은 1개 이상의 치환기로 임의로 치환될 수 있다. 헤테로아릴기는 모노시클릭 고리계이거나, 융합된 바이시클릭 고리계이다. 모노시클릭 헤테로아릴 고리는 5개 또는 6개의 구성원 원자를 갖는다. 바이시클릭 헤테로아릴 고리는 8개 내지 10개의 구성원 원자를 갖는다. 바이시클릭 헤테로아릴 고리는 1급 헤테로아릴 및 2급 모노시클릭 시클로알킬, 시클로알케닐, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴 고리가 부착되어 융합된 바이시클릭 고리계를 형성하는 고리를 포함한다. 특히, 헤테로아릴은 피롤릴, 피라졸릴, 이미다졸릴, 옥사졸릴, 이속사졸릴, 옥사디아졸릴, 티아졸릴, 이소티아졸릴, 티아디아졸릴, 푸라닐, 푸라자닐, 티에닐, 트리아졸릴, 피리디닐, 피리미디닐, 피리다지닐, 피라지닐, 트리아지닐, 테트라지닐, 테트라졸릴, 인돌릴, 이소인돌릴, 인돌리지닐, 인다졸릴, 퓨리닐, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 퀴녹살리닐, 퀴나졸리닐, 프테리디닐, 신놀리닐, 벤즈이미다졸릴, 벤조피라닐, 벤족사졸릴, 벤즈이속사졸릴, 벤조푸라닐, 이소벤조푸라닐, 벤조티아졸릴, 벤즈이소티아졸릴, 벤조티에닐, 푸로피리디닐, 나프티리디닐, 피라졸로피리딜, 피라졸로피리미디닐, 3H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-d]피리미디닐 및 3H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피리디닐을 포함한다.
"헤테로원자"는 질소, 황 또는 산소 원자를 지칭한다.
"헤테로시클로알킬"은 1개 내지 4개의 헤테로원자를 고리 내의 구성원 원자로서 함유하는 포화 또는 불포화 고리를 지칭한다. 헤테로시클로알킬 고리는 방향족이 아니다. 1개 초과의 헤테로원자를 함유하는 헤테로시클로알킬기는 상이한 헤테로원자를 함유할 수 있다. 헤테로시클로알킬기는 본원에서 정의한 바와 같은 1개 이상의 치환기로 임의로 치환될 수 있다. 헤테로시클로알킬기는 모노시클릭 고리계이거나, 또는 융합, 스피로 또는 브릿지 바이시클릭 고리계이다. 모노시클릭 헤테로시클로알킬 고리는 4개 내지 7개의 구성원 원자를 갖는다. 바이시클릭 헤테로시클로알킬 고리는 7개 내지 11개의 구성원 원자를 갖는다. 특정 실시양태에서, 헤테로시클로알킬은 포화된 것이다. 다른 실시양태에서, 헤테로시클로알킬은 불포화이지만 방향족은 아니다. 특히, 헤테로시클로알킬은 피롤리디닐, 테트라히드로푸라닐, 디히드로푸라닐, 피라닐, 테트라히드로피라닐, 디히드로피라닐, 테트라히드로티에닐, 피라졸리디닐, 옥사졸리디닐, 티아졸리디닐, 피페리디닐, 호모피페리디닐, 피페라지닐, 모르폴리닐, 티아모르폴리닐, 1-피라졸리디닐, 아제피닐, 1,3-디옥사닐, 1,4-디옥사닐, 1,3-옥사티올라닐, 1,3-디티아닐, 아제티디닐, 이속사졸리디닐, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥실, 아자바이시클로[3.2.1]옥틸, 아자바이시클로[3.3.1]노닐, 아자바이시클로[4.3.0]노닐, 2,5-디아자바이시클로[2.2.1]헵타닐, 옥타히드로피롤로[1,2-a]피라지닐, 옥타히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사지닐, 옥사바이시클로[2.2.1]헵틸, 헥사히드로-1H-아제피닐,2,3,4,7-테트라히드로-1H-아제피닐, 테트라히드로-5H-[1,3]디옥솔로[4,5-c]피롤릴, 테트라히드로-1H-푸로[3,4-c]피롤-(3H)-일, 헥사히드로피롤로[1,2-a]피라진-(1H)-일, 옥타히드로피라지노[1,2-a]아제핀-(1H)-일, 헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-(1H)-일, 헥사히드로피롤로[3,4-c]피롤-(1H)-일, 10-옥사-4-아자트리시클로[5.2.1.02,6]데실, 옥타히드로-1(2H)-퀴녹살리닐, 옥타히드로-1H-시클로펜타[b]피라지닐, 헥사히드로푸로[3,4-b]피라진-(2H)-일, 옥타히드로-6H-피롤로[3,4-b]피리디닐, 4,7-디아자스피로[2.5]옥틸 및 5-아자스피로[2.4]헵틸을 포함한다.
"구성원 원자"는 쇄 또는 고리를 형성하는 원자(들)을 지칭한다. 쇄 및 고리 내에 1개 초과의 구성원 원자가 존재하는 경우, 각각의 구성원 원자는 쇄 또는 고리 내의 인접한 구성원 원자에 공유 결합된다. 쇄 또는 고리에서의 치환기를 구성하는 원자는 쇄 또는 고리 내의 구성원 원자가 아니다.
"임의로 치환된"은 알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴, 시클로알킬, 시클로알케닐, 헤테로시클로알킬 또는 헤테로아릴과 같은 기가 치환되지 않을 수도 있고, 또는 상기 기가 본원에서 정의한 바와 같은 1개 이상의 치환기로 치환될 수도 있음을 나타낸다.
"제약상 허용가능한"은 분별있는 의학적 판단의 범위 내에서 과도한 독성, 자극, 또는 다른 문제 또는 합병증 없이 인간 또는 동물의 조직과 접촉시켜 사용하기에 적합하고 합리적인 유익/유해 비율을 충족시키는 화합물, 물질, 조성물 및 투여 형태를 지칭한다.
기와 관련하여 사용된 "치환된"은 해당 기 내의 구성원 원자에 부착된 1개 이상의 수소 원자가, 정의된 치환기의 군에서 선택된 치환기로 대체된 것을 나타낸다. 용어 "치환된"은 이러한 치환이 치환된 원자 및 치환기의 허용되는 원자가에 따르고 치환으로 인해서 안정적인 화합물 (즉, 예를 들어 가수분해, 재정렬, 고리화 또는 제거에 의해서 자발적으로 변환이 일어나지 않으며, 반응 혼합물로부터의 단리에 보존될 만큼 충분히 강건한 것)이 생성된다는 암시를 포함한다는 것을 이해해야 한다. 해당 기가 1개 이상의 치환기를 함유할 수 있다고 언급되는 경우, 그 기 내의 1개 이상 (적절한 경우)의 구성원 원자가 치환될 수 있다. 또한, 기 내의 단일 구성원 원자가 1개 초과의 치환기로 치환될 수 있다 (이러한 치환이 그 원자의 허용되는 원자가에 따르는 경우임). 적합한 치환기는 각각의 치환되거나 임의로 치환된 기에 대하여 본원에서 정의되어 있다.
"술파닐"은 황 브릿지를 통해 부착된 알킬 잔기를 지칭한다 (예를 들어, -S-C1-C6 알킬기 (여기서, C1-C6은 본원에서 정의한 바와 같음)). 술파닐기의 예는 티오메틸 및 티오에틸을 포함한다.
화합물
본 발명은 하기 화학식 I에 따른 화합물에 관한 것이다:
<화학식 I>
Figure pat00004
상기 식에서,
R1은 C2-C7 알킬 및 -(CH2)n-C3-C6 시클로알킬로 구성된 군에서 선택되고,
R2는 C1-C3 알킬, 시클로프로필, C1-C3 알콕시, C1-C3 할로알킬, C1-C3 술파닐, 5원 헤테로아릴, 5원 헤테로시클로알킬, 할로, 히드록시메틸 및 -NRaRb로 구성된 군에서 선택되고,
R3은 -NR4R5, 할로, 1개 내지 3개의 R6기로 임의로 치환된 페닐, 및 1개 내지 3개의 R6기로 임의로 치환된 헤테로아릴로 구성된 군에서 선택되고,
R4는 H, 1개 또는 2개의 R7기로 임의로 치환된 C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시, 1개 내지 3개의 R6기로 임의로 치환된 C3-C6 시클로알킬, 1개 내지 3개의 R6기로 임의로 치환된 헤테로시클로알킬, 1개 내지 3개의 R6기로 임의로 치환된 헤테로아릴, 및 1개 내지 3개의 R6기로 임의로 치환된 페닐로 구성된 군에서 선택되고,
R5는 H, 1개 또는 2개의 R7기로 임의로 치환된 C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시, 1개 내지 3개의 R6기로 임의로 치환된 C3-C6 시클로알킬, 1개 내지 3개의 R6기로 임의로 치환된 헤테로시클로알킬, 1개 내지 3개의 R6기로 임의로 치환된 헤테로아릴, 및 1개 내지 3개의 R6기로 임의로 치환된 페닐로부터 선택되거나, 또는
R4와 R5가 이것들이 부착된 N-원자와 함께 연결되어 1개 내지 3개의 R6기로 임의로 치환된 헤테로시클로알킬기를 형성하고,
각각의 R6은 1개 내지 3개의 R7기로 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 히드록시, C1-C3 알콕시, -C(O)NRaRb, -C(O)Rc, -C(O)ORc, 헤테로시클로알킬, 1개의 -NRaRb 또는 피롤리디닐로 임의로 치환된 C3-C6 시클로알킬, 옥소, 시아노, -NRaRb, 페닐, 헤테로아릴 및 할로로 구성된 군에서 독립적으로 선택되고,
각각의 R7은 히드록시, C1-C3 알콕시, 할로, 페닐, 시아노, -NRaRb, -C(O)NRaRb, -C(O)Rc, 1개의 히드록시 또는 헤테로시클로알킬 또는 -NRaRb의 기로 임의로 치환된 C3-C6 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 및 1개의 메틸 또는 -NRaRb 또는 히드록시로 임의로 치환된 헤테로아릴로 구성된 군에서 독립적으로 선택되고,
각각의 Ra는 H, 및 1개의 히드록시 또는 메톡시 또는 디메틸아민으로 임의로 치환된 C1-C3 알킬로 구성된 군에서 각각 독립적으로 선택되고,
각각의 Rb는 H 및 C1-C3 알킬로 구성된 군에서 독립적으로 선택되고,
각각의 Rc는 1개의 메톡시기로 임의로 치환된 C1-C3 알킬, 페닐, 헤테로시클로알킬 및 헤테로아릴로 구성된 군에서 독립적으로 선택되며,
n은 0 내지 2의 정수이다.
화학식 I에 따른 화합물은 1개 이상의 비대칭 중심 (또한, 키랄 중심이라 지칭되기도 함)을 함유할 수 있고, 이에 따라 개개의 거울상이성질체, 부분입체이성질체, 또는 다른 입체이성질체 형태, 또는 이들의 혼합물로 존재할 수 있다. 또한, 키랄 중심, 예컨대 키랄 탄소 원자가 알킬기와 같은 치환기에 존재할 수도 있다. 화학식 I, 또는 본원에서 예시한 임의의 화학 구조에 존재하는 키랄 중심의 입체화학이 명시되지 않는 경우, 상기 구조는 모든 개개의 입체이성질체 및 이것들의 모든 혼합물을 포함한다. 따라서, 1개 이상의 키랄 중심을 함유하는 화학식 I에 따른 화합물은 라세미체 혼합물, 부분입체이성질체 혼합물, 거울상이성질체적으로 풍부한 혼합물, 부분입체이성질체적으로 풍부한 혼합물, 또는 거울상이성질체적으로 및 부분입체이성질체적으로 순수한 개개의 입체이성질체로 사용될 수 있다.
1개 이상의 비대칭 중심을 함유하는 화학식 I에 따른 화합물의 개개의 입체이성질체는 당업자에게 공지된 방법으로 분할될 수 있다. 예를 들어, 이러한 분할은 (1) 부분입체이성질체 염, 착체 또는 다른 유도체의 형성, (2) 입체이성질체-특이적 시약과의 선택적인 반응, 예를 들어 효소적 산화 또는 환원, 또는 (3) 키랄 환경, 예를 들어 키랄 지지체, 예컨대 키랄 리간드가 결합되어 있는 실리카 또는 키랄 용매의 존재하에서의 기체-액체 또는 액체 크로마토그래피로 수행될 수 있다. 당업자는 원하는 입체이성질체가 부분입체이성질체 염, 착체 또는 유도체로 전환되는 경우에 원하는 형태를 유리시키기 위한 추가의 단계가 필요하다는 것을 알 것이다. 별법으로, 광학 활성 시약, 기질, 촉매 또는 용매를 사용하여 비대칭 합성하거나, 또는 한 거울상이성질체를 비대칭 변환에 의해 다른 거울상이성질체로 전환시켜서 특정 입체이성질체를 합성할 수도 있다.
화학식 I에 따른 화합물은 또한 이중 결합 또는 기하 비대칭의 다른 중심을 함유할 수도 있다. 화학식 I, 또는 본원에서 예시한 임의의 화학 구조에 존재하는 기하 비대칭 중심의 입체화학이 명시되지 않는 경우, 상기 구조는 트랜스 (E) 기하이성질체, 시스 (Z) 기하이성질체 및 이것들의 모든 혼합물을 포함한다. 마찬가지로, 모든 호변이성질체 형태 또한 그러한 호변이성질체가 평형으로 존재하든 한 형태가 우세하게 존재하든 간에 화학식 I에 포함된다.
특정 실시양태에서, 화학식 I에 따른 화합물은 산성 관능기를 함유할 수 있다. 특정 다른 실시양태에서, 화학식 I에 따른 화합물은 염기성 관능기를 함유할 수 있다. 따라서, 당업자는 화학식 I에 따른 화합물의 염이 제조될 수 있음을 알 것이다. 사실, 본 발명의 특정 실시양태에서, 화학식 I에 따른 화합물의 염은 각각의 유리 염기 또는 유리 산에 비해 바람직할 수 있는데, 이는 예를 들어 이러한 염이 분자에 더 높은 안정성 또는 용해도를 부과하여 투여 형태로의 제제화를 용이하게 할 수 있기 때문이다. 따라서, 추가로, 본 발명은 화학식 I에 따른 화합물의 제약상 허용가능한 염에 관한 것이다. 적합한 염에 관한 검토는 문헌 [Berge et al, J. Pharm. Sci., 1977, 66, 1-19]을 참조한다.
산 염: 적합한 부가염은 비-독성 염을 형성하는 산으로부터 형성되고, 이의 예는 히드로클로라이드, 히드로브로마이드, 히드로요오다이드, 술페이트, 바이술페이트, 니트레이트, 포스페이트, 히드로겐 포스페이트, 아세테이트, 말레에이트, 말레이트, 푸마레이트, 말로네이트, 락테이트, 타르트레이트, 시트레이트, 포르메이트, 글루코네이트, 숙시네이트, 피루베이트, 옥살레이트, 옥살로아세테이트, 트리플루오로아세테이트, 사카레이트, 벤조에이트, 메탄술포네이트, 에탄술포네이트, 벤젠술포네이트, p-톨루엔술포네이트, 메탄술폰산, 에탄술폰산, p-톨루엔술폰산, 및 이세티오네이트이다.
염기 염: 제약상 허용가능한 염기 염은 암모늄 염, 알칼리 금속 염, 예컨대 나트륨 및 칼륨의 염, 알칼리성 토금속 염, 예컨대 칼슘 및 마그네슘의 염, 및 유기 염기와의 염, 예를 들어 1급, 2급 및 3급 아민, 예컨대 이소프로필아민, 디에틸아민, 에탄올아민, 트리메틸아민, 디시클로헥실 아민 및 N-메틸-D-글루카민의 염을 포함한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "제약상 허용가능한 염"은 대상 화합물의 원하는 생물학적 활성을 보유하고 원치않는 독성 효과는 최소로 나타나는 염을 지칭한다. 이러한 제약상 허용가능한 염은 화합물의 최종 단리 및 정제 동안에 계내 제조될 수도 있고, 또는 적합한 염기 또는 산 각각을 사용하여 유리 산 또는 유리 염기 형태의 정제된 화합물을 따로 반응시켜 제조될 수도 있다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "본 발명의 화합물들"은 화학식 I에 따른 화합물 및 그의 염, 예를 들어 제약상 허용가능한 염 둘다를 의미한다. 본원에서는 용어 "본 발명의 화합물"도 사용되며, 이것은 화학식 I에 따른 화합물 및 그의 염, 예를 들어 제약상 허용가능한 염 둘다를 지칭한다.
본 발명의 화합물은 고체 또는 액체 형태로 존재할 수 있다. 고체 상태에서, 본 발명의 화합물은 결정질 또는 비-결정질 형태, 또는 이것들의 혼합물로 존재할 수 있다. 결정질 형태의 본 발명의 화합물의 경우에, 당업자는 결정화 동안에 용매 분자가 결정질 격자로 혼입된 경우에는 제약상 허용가능한 용매화물이 형성될 수 있다는 것을 알 것이다. 용매화물은 비-수성 용매, 예컨대 에탄올, 이소프로판올, DMSO, 아세트산, 에탄올아민 및 에틸 아세테이트를 포함할 수도 있고, 또는 이것이 결정질 격자로 혼입된 용매로서의 물을 포함할 수도 있다. 물이 결정질 격자로 혼입된 용매인 용매화물은 전형적으로 "수화물"이라 지칭된다. 수화물은 화학량적 수화물 및 또한 다양한 양의 물을 함유하는 조성물을 포함한다. 본 발명은 모든 이러한 용매화물을 포함한다.
추가로, 당업자는 다양한 용매화물을 포함하는 결정질 형태로 존재하는 본 발명의 특정 화합물이 다형성 (즉, 상이한 결정질 구조가 생성되는 능력)을 나타낼 수 있다는 것을 알 것이다. 이러한 상이한 결정질 형태는 전형적으로 "다형체"라고 공지되어 있다. 본 발명은 모든 이러한 다형체를 포함한다. 다형체는 화학적 조성은 동일하지만 패킹, 기하학적 배열, 및 결정질 고체 상태의 다른 기술적 특성에서 상이하다. 따라서, 다형체는 상이한 물성, 예컨대 형태, 밀도, 경도, 변형성, 안정성 및 용해도 특성을 가질 수 있다. 다형체는 전형적으로 상이한 융점, IR 스펙트럼 및 X-선 분말 회절 패턴을 나타내며, 이것을 식별에 사용할 수 있다. 당업자는 예를 들어 화합물 제조에 사용되는 반응 조건 또는 시약을 변화시키거나 조정하거나, 또는 상이한 단리 또는 정제 절차를 이용함으로써 여러가지 다형체가 생성될 수 있다는 것을 알 것이다. 예를 들어, 온도, 압력 또는 용매의 변화가 다형체를 생성할 수 있다. 또한, 1종의 다형체가 특정 조건하에서 자발적으로 또다른 다형체로 전환될 수도 있다.
본 발명의 한 실시양태에서, R1은 -(CH2)n-C3-C6 시클로알킬이다. 적합하게는, R1은 -(CH2)n-C3-C6 시클로알킬이고, 여기서의 n은 1이다. 적합하게는, R1은 -CH2-시클로펜틸이다.
본 발명의 또다른 실시양태에서, R2는 C1-C3 알킬, C1-C3 알콕시, C1-C3 할로알킬, C1-C3 술파닐 또는 할로이다. 적합하게는, R2는 메틸, 에틸, 티오메틸, 티오에틸, 플루오로메틸, 디플루오로메틸, 1-플루오로메틸, 클로로, 시클로프로필 또는 메톡시이다. 적합하게는, R2는 메틸, 에틸, 티오메틸 또는 클로로이다.
본 발명의 또다른 실시양태에서, R3은 -NR4R5, C1-C6 알콕시 또는 1개 내지 3개의 R6기로 임의로 치환된 헤테로아릴이다. 적합하게는, R3은 -NR4R5이고, 여기서의 R4는 1개 또는 2개의 R7기로 임의로 치환된 C1-C6 알킬 또는 1개 내지 3개의 R6기로 임의로 치환된 C3-C6 시클로알킬이고, R5는 H, C1-C6 알킬 또는 C1-C6 알콕시이다.
본 발명의 또다른 실시양태에서, R4는 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 테트라히드로-2H-피라닐, 2-옥소헥사히드로-1H-아제피닐, 2-옥소-2,3,4,7-테트라히드로-1H-아제피닐 또는 5-플루오로-피리디닐이거나, 또는 히드록실, 메톡시, 시아노, -C(O)NRaRb, -C(O)Rc, 모르폴리닐, 피리디닐, 1,3-티아졸릴, 2-아미노-1,3-티아졸릴, 티에닐, 푸라닐, 페닐 및 1-히드록시-1H-이미다졸릴로 구성된 군에서 선택된 1개의 R7기로 임의로 치환된 C1-C6 알킬이고, R5는 H, C1-C3 알킬, 시클로프로필, 또는 1개의 R6기로 임의로 치환된 피페라지닐이다.
또다른 실시양태에서, R4는 메틸이거나, 또는 히드록실, 메톡시 및 -NRaRb로 구성된 군에서 선택된 1개의 치환기로 임의로 치환된 에틸이거나, 또는 프로필, 이소프로필, 시클로프로필, 시클로부틸 및 시클로펜틸이다.
본 발명의 또다른 실시양태에서, R5는 H, C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시 및 C3-C6 시클로알킬로 구성된 군에서 선택된다. 적합하게는, R5는 H, 메틸 또는 메톡시이다. 적합하게는, R5는 H, C1-C3 알킬, 시클로프로필, 또는 1개의 R6기로 임의로 치환된 피페라지닐이다.
본 발명의 또다른 실시양태에서, R3은 -NR4R5이고, 여기서의 R4와 R5는 이것들이 부착된 N-원자와 함께 연결되어 1개 내지 3개의 R6기로 임의로 치환된 헤테로시클로알킬기를 형성한다. 적합하게는, R3은 -NR4R5이고, 여기서의 R4와 R5는 이것들이 부착된 N-원자와 함께 연결되어 아제티디닐, 피롤리디닐, 피페라지닐, 모르폴리닐, 2,5-디히드로-1H-피롤릴, 헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-(1H)-일, 이속사졸리디닐, 헥사히드로피롤로[1,2-a]피라진-(1H)-일 또는 2,5-디아자바이시클로[2.2.1]헵틸을 형성하고, 이것 각각은 1개 내지 3개의 R6기로 임의로 치환될 수 있다.
본 발명의 또다른 실시양태에서, R3은 -NR4R5이고, 여기서의 R4와 R5는 이것들이 부착된 N-원자와 함께 연결되어 1-피페리디닐, 4-티오모르폴리닐, 1-피라졸리디닐, 테트라히드로-5H-[1,3]디옥솔로[4,5-c]피롤릴, 테트라히드로-1H-푸로[3,4-c]피롤-(3H)-일, 헥사히드로피롤로[3,4-c]피롤-(1H)-일, 헥사히드로피롤로[1,2-a]피라진-(1H)-일, 헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-(1H)-일, 헥사히드로푸로[3,4-b]피라진-(2H)-일, 옥타히드로-2H-피리도[1,2-a]피라지닐, 옥타히드로피라지노[1,2-a]아제핀-(1H)-일, 옥타히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사지닐, 옥타히드로-1H-시클로펜타[b]피라지닐, 옥타히드로-1(2H)-퀴녹살리닐, 옥타히드로-6H-피롤로[3,4-b]피리디닐, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥실, 2,5-디아자바이시클로[2.2.1]헵틸, 4,7-디아자스피로[2.5]옥틸, 5-아자스피로[2.4]헵틸 또는 10-옥사-4-아자트리시클로[5.2.1.02,6]데실을 형성한다.
적합하게는, R3은 -NR4R5이고, 여기서의 R4와 R5는 이것들이 부착된 N-원자와 함께 연결되어 메틸, 에틸, 플루오로, 메톡시, 히드록실, 히드록시메틸, 시클로프로필, 디메틸아미노, 에틸메틸아미노, -CH2-디메틸아미노, 모르폴리닐, 피롤리디닐, -CH2-피롤리디닐 및 피리디닐로 구성된 군에서 각각 독립적으로 선택된 1개 또는 2개의 R6기로 임의로 치환된 아제티디닐을 형성한다.
적합하게는, R3은 -NR4R5이고, 여기서의 R4와 R5는 이것들이 부착된 N-원자와 함께 연결되어 메틸, 메톡시, -CH2-메톡시, 히드록실, 히드록시메틸, 히드록시에틸, 디메틸아미노, 에틸메틸아미노, -CH2-디메틸아미노, -CH2-피롤리디닐, -CH2-모르폴리닐, 피리디닐, 2-(디메틸아미노)-1,1-디메틸에틸, 플루오로메틸, -CH2-2-히드록시에틸메틸아미노, -CH2-2-메톡시에틸아미노, 시아노, -C(O)N(CH3)2, 1-(디메틸아미노)시클로프로필, -CH2-에틸메틸아미노, -CH2-디에틸아미노, -C(O)N(CH2CH3)2, -CH2-피페리디닐, -CH2-이소프로필메틸아미노, -CH2-프로필메틸아미노, -NHCOOCH3, -CH2-3H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-d]피리미딘-3-일 및 (시스)-10-옥사-4-아자트리시클로[5.2.1.02,6]데크-4-일로 구성된 군에서 각각 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 R6기로 임의로 치환된 피롤리디닐을 형성한다.
적합하게는, R3은 -NR4R5이고, 여기서의 R4와 R5는 이것들이 부착된 N-원자와 함께 연결되어 메틸, 에틸, 이소프로필, 히드록시메틸, 히드록시에틸, -CH2-O-CH3 및 -COOCH3으로 구성된 군에서 각각 독립적으로 선택된 1개 내지 3개의 R6기로 임의로 치환된 피페라지닐을 형성한다.
적합하게는, R3은 -NR4R5이고, 여기서의 R4와 R5는 이것들이 부착된 N-원자와 함께 연결되어 (9aS)-옥타히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사지닐을 형성한다.
본 발명의 또다른 실시양태에서, R6은 1개 내지 3개의 R7기로 임의로 치환된 C1-C3 알킬이거나, 또는 히드록시, C1-C3 알콕시, -C(O)NRaRb 또는 -NRaRb이다. 적합하게는, R6은 메틸, 에틸, 이소프로필, 메톡시, 히드록실, 디에틸아미노 또는 N,N-디메틸아세트아미도이다.
또다른 실시양태에서, R6은 헤테로아릴이다. 적합하게는, R6은 6원 헤테로아릴이다. 적합하게는, R6은 피리디닐이다.
본 발명의 또다른 실시양태에서, R7은 C1-C3 알콕시, 히드록실 또는 -NRaRb이다. 적합하게는, R7은 메톡시이다.
또다른 실시양태에서, R7은 헤테로시클로알킬이다. 적합하게는, R7은 6원 헤테로시클로알킬이다. 적합하게는, R7은 모르폴리닐이다.
또다른 실시양태에서, R7은 헤테로아릴이다. 적합하게는, R7은 피리디닐, 1,3-티아졸릴, 티에닐, 푸라닐, 이미다졸릴, 1H-벤즈아미다졸릴, 3H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-d]피리미딘-3-일 또는 3H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피리딘-3-일이다.
본 발명의 또다른 실시양태에서, Ra와 Rb는 둘다 메틸이다.
본 발명의 또다른 실시양태에서, Rc는 헤테로시클로알킬이다. 적합하게는, Rc는 피롤리디닐이다.
본 발명의 또다른 실시양태는
R1이 C2-C7 알킬 및 -(CH2)n-C3-C6 시클로알킬로 구성된 군에서 선택되고,
R2가 C1-C3 알킬, 시클로프로필, C1-C3 알콕시, C1-C3 할로알킬, C1-C3 술파닐, 5원 헤테로아릴, 5원 헤테로시클로알킬, 할로, 히드록시메틸 및 -NRaRb로 구성된 군에서 선택되고,
R3이 -NR4R5, 할로, 1개 내지 3개의 R6기로 임의로 치환된 페닐, 및 1개 내지 3개의 R6기로 임의로 치환된 헤테로아릴로 구성된 군에서 선택되고,
R4가 H, 1개 또는 2개의 R7기로 임의로 치환된 C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시, 1개 내지 3개의 R6기로 임의로 치환된 C3-C6 시클로알킬, 1개 내지 3개의 R6기로 임의로 치환된 헤테로시클로알킬, 1개 내지 3개의 R6기로 임의로 치환된 헤테로아릴, 및 1개 내지 3개의 R6기로 임의로 치환된 페닐로 구성된 군에서 선택되고,
R5가 H, 1개 또는 2개의 R7기로 임의로 치환된 C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시, 1개 내지 3개의 R6기로 임의로 치환된 C3-C6 시클로알킬, 1개 내지 3개의 R6기로 임의로 치환된 헤테로시클로알킬, 1개 내지 3개의 R6기로 임의로 치환된 헤테로아릴, 및 1개 내지 3개의 R6기로 임의로 치환된 페닐로 구성된 군에서 선택되거나, 또는
R4와 R5가 이것들이 부착된 N-원자와 함께 연결되어 1개 내지 3개의 R6기로 임의로 치환된 헤테로시클로알킬기를 형성하고,
각각의 R6이 1개 내지 3개의 R7기로 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 히드록시, C1-C3 알콕시, -C(O)NRaRb, -C(O)Rc, 헤테로시클로알킬, C3-C6 시클로알킬, 옥소, 시아노, -NRaRb, 페닐, 헤테로아릴 및 할로로 구성된 군에서 독립적으로 선택되고,
각각의 R7이 히드록시, C1-C3 알콕시, 할로, 페닐, 시아노, -NRaRb, -C(O)NRaRb, -C(O)Rc, 1개의 히드록시 또는 헤테로시클로알킬 또는 -NRaRb의 기로 임의로 치환된 C3-C6 시클로알킬, 헤테로시클로알킬 및 헤테로아릴로 구성된 군에서 독립적으로 선택되고,
각각의 Ra가 H 및 C1-C3 알킬로 구성된 군에서 독립적으로 선택되고,
각각의 Rb가 H 및 C1-C3 알킬로 구성된 군에서 독립적으로 선택되고,
각각의 Rc가 C1-C3 알킬, 페닐, 헤테로시클로알킬 및 헤테로아릴로 구성된 군에서 독립적으로 선택되며,
n이 0 내지 2의 정수인
화학식 I의 화합물이다.
본 발명의 또다른 실시양태는
R1이 -CH2-시클로펜틸이고,
R2가 메틸, 에틸, 티오메틸, 티오에틸, 플루오로메틸, 디플루오로메틸, 1-플루오로메틸, 클로로, 시클로프로필 또는 메톡시로 구성된 군에서 선택되고,
R3이 -NR4R5이고,
R4가 H, C1-C3 알킬, 시클로프로필, 및 1개의 R6기로 임의로 치환된 피페라지닐로 구성된 군에서 선택되고,
R5가 H, 1개 또는 2개의 R7기로 임의로 치환된 C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시, 1개 내지 3개의 R6기로 임의로 치환된 C3-C6 시클로알킬, 1개 내지 3개의 R6기로 임의로 치환된 헤테로시클로알킬, 1개 내지 3개의 R6기로 임의로 치환된 헤테로아릴, 및 1개 내지 3개의 R6기로 임의로 치환된 페닐로 구성된 군에서 선택되거나, 또는
R4와 R5가 이것들이 부착된 N-원자와 함께 연결되어 1개 내지 3개의 R6기로 임의로 치환된 헤테로시클로알킬기를 형성하고,
각각의 R6이 1개 내지 3개의 R7기로 임의로 치환된 C1-C6 알킬, 히드록시, C1-C3 알콕시, -C(O)NRaRb, -C(O)Rc, C(O)ORc, 헤테로시클로알킬, 1개의 -NRaRb 또는 피롤리디닐로 임의로 치환된 C3-C6 시클로알킬, 옥소, 시아노, -NRaRb, 페닐, 헤테로아릴 및 할로로 구성된 군에서 독립적으로 선택되고,
각각의 R7이 히드록시, C1-C3 알콕시, 할로, 페닐, 시아노, -NRaRb, -C(O)NRaRb, -C(O)Rc, 1개의 히드록시 또는 헤테로시클로알킬 또는 -NRaRb의 기로 임의로 치환된 C3-C6 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 및 1개의 메틸 또는 -NRaRb 또는 히드록시로 임의로 치환된 헤테로아릴로 구성된 군에서 독립적으로 선택되고,
각각의 Ra가 H, 및 1개의 히드록시, 메톡시기 또는 디메틸아민으로 임의로 치환된 임의로 치환된 C1-C3 알킬로부터 각각 독립적으로 선택되고,
각각의 Rb가 H 및 C1-C3 알킬로부터 독립적으로 선택되며,
각각의 Rc가 1개의 메톡시기로 임의로 치환된 C1-C3 알킬, 페닐, 헤테로시클로알킬, 및 헤테로아릴로부터 독립적으로 선택된
화학식 I의 화합물이다.
본 발명의 화합물의 구체적인 예는 하기 화합물 또는 그의 염을 포함한다:
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(1-피롤리디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드,
[(2R)-3-{2-[6-(1-아제티디닐)-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
[(2R)-3-{2-[6-(1-아제티디닐)-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(4-메틸-1-피페라지닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1-메틸에틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
[(2R)-3-{2-[6-(1-아제티디닐)-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(4-모르폴리닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드,
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[메틸(메틸옥시)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-(2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드,
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(1,3-티아졸리딘-3-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드,
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[3-(메틸옥시)-1-아제티디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(3R)-3-(메틸옥시)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(3S)-3-(메틸옥시)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(1-메틸에틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
{(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(5-플루오로-2-메틸-6-{메틸[2-(메틸옥시)에틸]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}히드록시포름아미드,
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[에틸(메틸)아미노]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(2S)-2-(히드록시메틸)-1-피롤리디닐]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
[(2R)-3-{2-[6-(시클로부틸아미노)-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
[(2R)-3-{2-[6-(시클로펜틸아미노)-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(3R)-3-(히드록시메틸)-1-피롤리디닐]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(3S)-3-(히드록시메틸)-1-피롤리디닐]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[2-에틸-5-플루오로-6-(4-메틸-1-피페라지닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드,
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[2-에틸-5-플루오로-6-(2-이속사졸리디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드,
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(3R)-3-(디메틸아미노)-1-피롤리디닐]-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드,
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(3S)-3-(디메틸아미노)-1-피롤리디닐]-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드,
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{2-에틸-5-플루오로-6-[(3S)-3-히드록시-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드,
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{2-에틸-5-플루오로-6-[(3R)-3-히드록시-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드,
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-(시클로프로필아미노)-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드,
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[2-에틸-6-(4-에틸-1-피페라지닐)-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드,
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{2-에틸-5-플루오로-6-[4-(2-히드록시에틸)-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드,
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[2-에틸-5-플루오로-6-(메틸아미노)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드,
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[2-에틸-6-(에틸아미노)-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드,
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{2-에틸-5-플루오로-6-[4-(1-메틸에틸)-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드,
1-(6-{2-[(2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(히드록시)아미노]메틸}프로파노일]히드라지노}-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐)-N,N-디메틸-L-프롤린아미드,
N-{(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(6-{[2-(디메틸아미노)에틸](메틸)아미노}-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}-N-히드록시포름아미드,
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(3S)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드,
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(3R)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드,
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-(4-메틸-1-피페라지닐)-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드,
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-(에틸아미노)-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드,
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-(메틸아미노)-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드,
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-[(3S)-3-히드록시-1-피롤리디닐]-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드,
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-(디메틸아미노)-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드,
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-(메틸티오)-6-(프로필아미노)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드,
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-{[2-(메틸옥시)에틸]아미노}-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드,
1-[6-[2-((2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(히드록시)아미노]메틸}프로파노일)히드라지노]-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]-N,N-디메틸-L-프롤린아미드,
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-[(3R)-3-히드록시-1-피롤리디닐]-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드,
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-[(3R)-3-(디메틸아미노)-1-피롤리디닐]-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드,
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-(4-에틸-1-피페라지닐)-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드,
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(4-모르폴리닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
[(2R)-3-{2-[6-(1-아제티디닐)-2-클로로-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
[(2R)-3-{2-[2-클로로-6-(4-에틸-1-피페라지닐)-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2-히드록시에틸)(메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[3-(메틸옥시)-1-아제티디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
[(2R)-3-[2-(2-클로로-5-플루오로-6-{메틸[2-(메틸옥시)에틸]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(8aS)-헥사히드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1S,4S)-5-메틸-2,5-디아자바이시클로[2.2.1]헵트-2-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
1-{6-클로로-2-[2-((2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(히드록시)아미노]메틸}프로파노일)히드라지노]-5-플루오로-4-피리미디닐}-N,N-디메틸-L-프롤린아미드,
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(프로필아미노)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(3S)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(3R)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(2S)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드, 및
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드.
본 발명의 한 실시양태는 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드인 화합물 또는 그의 염이다.
본 발명의 또다른 실시양태는 [(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드인 화합물 또는 그의 염이다.
본 발명의 또다른 실시양태는 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드인 화합물 또는 그의 염이다.
본 발명의 또다른 실시양태는 [(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(4-메틸-4,7-디아자스피로[2.5]옥트-7-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드인 화합물 또는 그의 염이다.
본 발명의 또다른 실시양태는 ((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(4-메틸-4,7-디아자스피로[2.5]옥트-7-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드인 화합물 또는 그의 염이다.
화합물 제조
화학식 I에 따른 화합물은 통상의 유기 합성법을 이용하여 제조된다. 적합한 합성 경로는 하기하는 반응식에 도시되어 있다.
당업자는 본원에 기재한 치환기가 본원에 기재한 합성 방법에 적합하지 않은 경우에는 그 치환기를 해당 반응 조건에 안정적인 적합한 보호기로 보호할 수 있다는 것을 알 것이다. 보호기는 반응 순서에 있어서의 적합한 시점에 제거되어 원하는 중간체 또는 표적 화합물을 제공할 수 있다. 적합한 보호기 및 이러한 적합한 보호기를 사용하여 여러가지 치환기를 보호 및 탈보호하는 방법은 당업자에게 공지되어 있고, 이의 예는 문헌 [T. Greene and P. Wuts, Protecting Groups in Chemical Synthesis (3rd ed.), John Wiley ＆ Sons, NY (1999)]에서 찾을 수 있다. 일부의 경우에, 치환기는 이용되는 반응 조건하에서 반응성이도록 특별히 선택될 수 있다. 이러한 상황하에서, 상기 반응 조건은 선택된 치환기를 중간체 화합물로서 유용하거나 표적 화합물 중의 원하는 치환기인 또다른 치환기로 전환시킨다.
<반응식 1>
Figure pat00005
반응식 1에 나타낸 바와 같이, (11)은 적절한 산 클로라이드 (2)를 키랄 작용제, 예컨대 (S)-(-)-4-벤질-2-옥사졸리디논 (에반스(Evans') 키랄 옥사졸리디논)과 염기, 예컨대 n-부틸 리튬의 존재하에 반응시켜서 키랄 중간체 (3)을 수득하여 제조될 수 있다. 화합물 (3)을 킬레이팅제, 예컨대 사염화티탄의 존재하에 용매, 예컨대 테트라히드로푸란 중에서 염기, 예컨대 디이소프로필에틸아민으로 처리한 후에 친전자체, 예컨대 벤질옥시메틸클로라이드를 첨가하면 화합물 (4)가 수득된다. 화합물 (4)를 상응하는 히드록시산 (7)으로 전환시키는 것은, 예를 들어 H2O2 및 수산화리튬을 사용한 키랄 옥사졸리디논의 산화적 절단을 포함하는 반응에 의해 각각의 중간체 (5)를 수득한 후, 이것을 가수소분해하여 중간체 (7)을 수득함으로써 달성될 수 있다. 화합물 (3)은 별법의 2-단계 절차에서 중간체 (7)로 전환될 수도 있다. 이러한 변환을 위해서는, (3)을 킬레이팅제, 예컨대 사염화티탄의 존재하에 용매, 예컨대 테트라히드로푸란 중에서 염기, 예컨대 디이소프로필에틸아민으로 처리한 후에 트리옥산 또는 적합한 별법의 포름알데히드 균등물을 첨가하여 화합물 (6)을 수득하고, 이후에 이것으로 예를 들어 H2O2 및 수산화리튬을 사용한 키랄 옥사졸리디논의 산화적 절단을 행하여 각각의 산 (7)을 수득할 수 있다.
산 (7)을 커플링제, 예컨대 EDC 및 DMAP의 존재하에 벤질옥시아민과 커플링하여 아미드 (8)을 수득한다. 이것은 미쯔노부(Mitsunobu) 조건을 이용하여 아제티딘-2-온 (9)로 고리화시킬 수 있다. 예를 들어 수산화리튬을 적절한 용매 중에서 사용하여 아제티딘-2-온 (9)를 가수분해하면 상응하는 산 (10)이 수득된다. 화합물 (10)을 생성물 (11)로 전환시키는 것은, 적절한 포르밀화제, 예컨대 포름산/아세트산 무수물 또는 메틸 포르메이트를 순수(neat) 시약 또는 적절한 용매, 예컨대 디클로로메탄 중에서 사용하여 달성될 수 있다.
<반응식 2>
Figure pat00006
반응식 2에 나타낸 바와 같이, THP-보호된 중간체 (15)는 촉매, 예컨대 10％ Pd/C를 사용하여 적절한 용매, 예컨대 에탄올 중에서 아제티딘-2-온 (9)를 수소화하여 (12)를 수득함으로써 제조될 수 있다. (12)를 산 촉매반응, 예컨대 피리디늄 p-톨루엔술포네이트하에서 적절한 용매, 예컨대 염화메틸렌 중에서 디히드로피란으로 처리하여 THP-보호된 아제티딘-2-온 (13)을 수득한다. 예를 들어 수산화리튬을 사용하여 적절한 용매 중에서 아제티딘-2-온 (13)을 가수분해하면 상응하는 산 (14)가 생성된다. 화합물 (14)를 생성물 (15)로 전환시키는 것은, 적절한 포르밀화제, 예컨대 포름산/아세트산 무수물 또는 메틸 포르메이트를 순수 시약 또는 적절한 용매, 예컨대 디클로로메탄 중에서 사용하여 달성될 수 있다. 또한, 화합물 (14)를 생성물 (15)로 전환시키는 것은 5-메틸-2-티옥소-[1,3,4]티아디아졸-3-카르브알데히드 [Yazawa, Hisatoyo; Goto, Shunsuke; Tetrahedron Lett. 26; 31; 1985; 3703-3706]를 포르밀화제로서 사용하여 적절한 용매, 예컨대 아세톤 중에서 달성될 수도 있다.
중간체 (15)는 또한 문헌 [Bracken, Bushell, Dean, Francavilla, Jain, Lee, Seepersaud, Shu, Sundram, Yuan; PCT 국제 출원 (2006), WO 2006127576 A2]의 절차에 따라 제조될 수도 있다.
<반응식 3>
Figure pat00007
반응식 3에 나타낸 바와 같이, 키랄 산 (11 또는 15)를 EDC-HOAt-NMM과 같은 조건하에서 피리미디닐 히드라진 (16, R2 = 알킬, 할로, H)과 커플링하여 히드라지드 (17 또는 18)을 수득한다. 최종 탈보호 (P가 Bn인 경우에는 촉매, 예컨대 10％ Pd/C를 사용하여 적절한 용매, 예컨대 에탄올 중에서 가수소분해하고, P가 THP인 경우에는 실온 또는 40℃에서 80％ 아세트산-물로 처리함)하여 원하는 최종 화합물 (1) (여기서, R2 = 알킬, 할로, H임)을 수득한다.
구조식 (16)의 히드라진은 당업자가 문헌의 방법에 따라 제조할 수 있다. 히드라진 (16)의 구체적인 구조 및 이의 제조에 이용되는 합성 방법에 관한 하기 예는 단지 예시하기 위한 것이지, 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 간주되어서는 안된다.
R2가 알킬이고 R3이 아미노기 (R4R5N)인 히드라진 (24)는 반응식 4에 나타낸 바와 같이 적절한 전구체로부터 제조될 수 있다.
<반응식 4>
Figure pat00008
반응식 4에 나타낸 바와 같이, R2가 수소 또는 알킬인 히드라진 (24)는 시판되는 플루오로말로네이트 (19) 및 적절한 아미딘 (20)룰 염기성 조건하에서 축합시켜 피리미디논 (21)을 수득함으로써 제조될 수 있다. 아미딘 (20)은 시판되는 것을 이용할 수도 있고, 또는 당업자가 문헌의 방법에 따라 제조할 수도 있다. 피리미디논 (21)을 POCl3으로 처리하여 디클로로피리미딘 (22)를 수득한다. 디클로로피리미딘 (22)를 실온에서 적절한 용매, 예컨대 메탄올 또는 DMSO 중에서 원하는 아민 R4R5NH로 처리한 후에 적절한 용매, 예컨대 DMSO 중에서 통상적으로는 가열하면서 히드라진 일수화물로 추가로 처리하면, R2가 수소 또는 알킬인 원하는 생성물 (24)가 수득된다.
화학식 (30)의 히드라진 [R2가 클로로인 (16)]은 반응식 5 또는 6에 나타낸 바와 같이 하여 제조될 수 있다.
<반응식 5>
Figure pat00009
시판되는 플루오로말로네이트 (19) 및 우레아를 염기성 조건하에서 축합하여 피리미디논 (25)를 수득한다. 피리미디논 (25)를 POCl3으로 처리하여 트리클로로피리미딘 (26)을 수득한다. 트리클로로피리미딘 (26)을 실온에서 적절한 용매, 예컨대 THF 중에서 Boc-보호된 히드라진 및 디이소프로필에틸아민으로 처리하여 중간체 (27)을 수득한다. 디이소프로필에틸아민 및 DMAP의 존재하에 적절한 용매, 예컨대 염화메틸렌 중에서 디-t-부틸디카르보네이트로 추가로 처리하면 원하는 트리-Boc-보호된 생성물 (28)이 수득된다. (28)을 적절한 용매, 예컨대 DMF 중에서 아민 R4R5NH로 처리하여 피리미딘 (29)를 수득하고, (29)를 산성 조건하에서 탈보호한 후에 염기성 후처리를 실시하면 원하는 히드라진 (30)이 수득된다.
별법으로, 화학식 (30)의 히드라진은 반응식 6에 나타낸 바와 같이 하여 제조될 수 있다.
<반응식 6>
Figure pat00010
트리클로로피리미딘 (26)을 실온에서 적절한 용매, 예컨대 DMSO 중에서 원하는 아민 R4R5NH로 처리한 후에 히드라진 일수화물로 추가로 처리하고 가열하면 원하는 생성물 (30) 및 또한 위치이성질체 생성물 (32)가 수득된다. 이들 2종의 위치이성질체는 통상적으로 크로마토그래피에 의해, 예컨대 HPLC에 의해 분리될 수 있다.
R2가 티오메틸 또는 메톡시인 최종 화합물 (1)은 반응식 7에 나타낸 바와 같이 하여 제조될 수 있다.
<반응식 7>
Figure pat00011
시판되는 플루오로말로네이트 (19)를 O-메틸이소우레아 헤미술페이트 또는 S-메틸이소티오우레아 헤미술페이트와 염기성 조건하에서 축합하면 R2가 각각 메톡시 또는 티오메틸인 피리미디논 (33)이 수득된다. 피리미디논 (33)을 POCl3으로 처리하면 디클로로피리미딘 (34)가 수득된다. 디클로로피리미딘 (34)를 적절한 용매, 예컨대 메탄올 중에서 히드라진 일수화물로 처리하면 피리미디닐히드라진 (35)가 수득되고, 이후에 이것을 EDC-HOAt-NMM과 같은 조건을 이용하여 산 (11) 또는 (15)와 커플링하여 중간체 (36)을 수득한다. R4R5NH를 중간체 (36)에 첨가하여 O-Bn-보호된 또는 O-THP-보호된 생성물 (37)을 수득한다. p가 Bn인 경우에는 촉매, 예컨대 10％ Pd/C를 사용하여 적절한 용매, 예컨대 에탄올 중에서 가수소분해하고, p가 THP인 경우에는 실온 또는 40℃에서 80％ 아세트산-물로 처리하여 최종 탈보호함으로써 R2가 각각 메톡시 또는 티오메틸인 원하는 최종 화합물 (1)을 수득한다.
아민 R4R5NH는 시판 공급업체로부터 구입할 수도 있고, 당업자가 문헌의 방법에 따라 제조할 수도 있으며, 또는 본원의 실시예에 개시된 바와 같이 하여 제조할 수도 있다.
사용 방법
본 발명의 화합물은 미생물 펩티드 데포르밀라제 (PDF)의 억제제이고, 따라서 박테리아 성장을 저해할 수 있다. 이들 화합물은 근본 병리가 (적어도 부분적으로는) 다양한 원핵 유기체로 인한 (즉, 그에 의해 야기되는) 감염성 질환의 치료에 잠재적으로 유용하다. 이의 예는 스트렙토콕쿠스(Streptococcus)속, 예를 들어 폐렴 연쇄상구균(S. pneumoniae) 및 화농성 연쇄상구균(S. pyogenes), 스타필로콕쿠스(Staphylococcus)속, 예를 들어 황색 포도상구균(S. aureus), 표피 포도상구균(S. epidermidis) 및 부생성 포도상구균(S. saprophyticus), 모락셀라(Moraxella)속, 예를 들어 카타르성 모락셀라(M. catarrhalis), 헤모필루스(Haemophilus)속, 예를 들어 헤모필루스 인플루엔자(H. influenzae), 나이세리아(Neisseria)속, 마이코플라스마(Mycoplasma)속, 예를 들어 폐렴 마이코플라스마(M. pneumoniae), 리지오넬라(Legionella)속, 예를 들어 리지오넬라 뉴모필라(L. pneumophila), 클라미디아(Chlamydia)속, 예를 들어 폐렴 클라미디아(C. pneumoniae), 박테로이드(Bacteroides)속, 클로스트리듐(Clostridium)속, 푸소박테륨(Fusobacterium)속, 프로피오니박테륨(Propionibacterium)속 및 펩토스트렙토콕쿠스(Peptostreptococcus)속의 그람(Gram) 양성 및 그람 음성 호기성 및 혐기성 박테리아를 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
적합하게는, 본 발명의 화합물은 스트렙토콕쿠스, 더욱 적합하게는 폐렴 연쇄상구균 또는 화농성 연쇄상구균에 의해 야기되는 박테리아 감염의 치료에 유용할 수 있다.
적합하게는, 본 발명의 화합물은 스타필로콕쿠스, 더욱 적합하게는 황색 포도상구균, 표피 포도상구균 또는 부생성 포도상구균에 의해 야기되는 박테리아 감염의 치료에 유용할 수 있다.
적합하게는, 본 발명의 화합물은 모락셀라, 더욱 적합하게는 카타르성 모락셀라에 의해 야기되는 박테리아 감염의 치료에 유용할 수 있다.
적합하게는, 본 발명의 화합물은 헤모필루스, 더욱 적합하게는 헤모필루스 인플루엔자에 의해 야기되는 박테리아 감염의 치료에 유용할 수 있다.
적합하게는, 본 발명의 화합물은 나이세리아에 의해 야기되는 박테리아 감염의 치료에 유용할 수 있다.
적합하게는, 본 발명의 화합물은 마이코플라스마, 더욱 적합하게는 폐렴 마이코플라스마에 의해 야기되는 박테리아 감염의 치료에 유용할 수 있다.
적합하게는, 본 발명의 화합물은 리지오넬라, 더욱 적합하게는 리지오넬라 뉴모필라에 의해 야기되는 박테리아 감염의 치료에 유용할 수 있다.
적합하게는, 본 발명의 화합물은 클라미디아, 더욱 적합하게는 폐렴 클라미디아에 의해 야기되는 박테리아 감염의 치료에 유용할 수 있다.
적합하게는, 본 발명의 화합물은 박테로이드에 의해 야기되는 박테리아 감염의 치료에 유용할 수 있다.
적합하게는, 본 발명의 화합물은 클로스트리듐에 의해 야기되는 박테리아 감염의 치료에 유용할 수 있다.
적합하게는, 본 발명의 화합물은 푸소박테륨에 의해 야기되는 박테리아 감염의 치료에 유용할 수 있다.
적합하게는, 본 발명의 화합물은 프로피오니박테륨에 의해 야기되는 박테리아 감염의 치료에 유용할 수 있다.
적합하게는, 본 발명의 화합물은 펩토스트렙토콕쿠스에 의해 야기되는 박테리아 감염의 치료에 유용할 수 있다.
본 발명의 화합물은 또한 β-락탐, 퀴놀론, 마크롤리드, 케톨리드, 당펩티드 및 옥사졸리디논 부류의 항생제에 내성이 있는 박테리아에 의해 야기되는 박테리아 감염의 치료에 유용할 수 있다. 이러한 약물 내성 박테리아 감염은 페니실린, 마크롤리드 또는 레보플록사신에 내성이 있는 폐렴 연쇄상구균, 메티실린 또는 마크롤리드에 내성이 있고 반코마이신에 부분 내성이 있는 황색 포도상구균, 메티실린에 내성이 있는 표피 포도상구균, 및 옥사졸리디논에 내성이 있는 황색 포도상구균을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 화합물은 포유동물, 특히 인간에서의 박테리아 감염을 치료하는데 사용될 수 있다. 이러한 감염은 귀 감염, 부비동염, 상기도 및 하기도 감염, 생식기 감염, 피부 및 연부 조직 감염, 및 박테리아성 심내막염을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 본 발명의 화합물은 포유동물, 특히 인간에서의 박테리아 감염, 예컨대 의료적 또는 치과상의 절차로 인한 것일 수 있는 박테리아 감염을 예방하는데 사용될 수도 있다.
적합하게는, 본 발명의 화합물은 귀 감염을 치료하는데 사용될 수 있다.
적합하게는, 본 발명의 화합물은 부비동염을 치료하는데 사용될 수 있다.
적합하게는, 본 발명의 화합물은 상기도 및 하기도 감염을 치료하는데 사용될 수 있다.
적합하게는, 본 발명의 화합물은 생식기 감염을 치료하는데 사용될 수 있다.
적합하게는, 본 발명의 화합물은 피부 및 연부 조직 감염을 치료하는데 사용될 수 있다.
적합하게는, 본 발명의 화합물은 박테리아성 심내막염을 치료하는데 사용될 수 있다.
본 발명의 치료 방법, 구체적으로는 박테리아 감염을 비롯한 감염성 질환의 치료 방법은 유효량의 화학식 I에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염을 그러한 치료가 필요한 환자에게 투여하는 것을 포함한다.
본 발명의 한 실시양태는 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 또는 그의 제약상 허용가능한 염을 박테리아 감염을 치료할 필요가 있는 인간에게 투여하는 것을 포함하는, 인간에서의 박테리아 감염을 치료하는 방법을 제공한다.
본 발명의 또다른 실시양태는 [(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 또는 그의 제약상 허용가능한 염을 박테리아 감염을 치료할 필요가 있는 인간에게 투여하는 것을 포함하는, 인간에서의 박테리아 감염을 치료하는 방법을 제공한다.
본 발명의 또다른 실시양태는 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 또는 그의 제약상 허용가능한 염을 박테리아 감염을 치료할 필요가 있는 인간에게 투여하는 것을 포함하는, 인간에서의 박테리아 감염을 치료하는 방법을 제공한다.
본 발명의 또다른 실시양태는 [(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(4-메틸-4,7-디아자스피로[2.5]옥트-7-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 또는 그의 제약상 허용가능한 염을 박테리아 감염을 치료할 필요가 있는 인간에게 투여하는 것을 포함하는, 인간에서의 박테리아 감염을 치료하는 방법을 제공한다.
본 발명의 또다른 실시양태는 ((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(4-메틸-4,7-디아자스피로[2.5]옥트-7-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드 또는 그의 제약상 허용가능한 염을 박테리아 감염을 치료할 필요가 있는 인간에게 투여하는 것을 포함하는, 인간에서의 박테리아 감염을 치료하는 방법을 제공한다.
본원에서 사용된 바와 같이, "감염성 질환"은 미생물 감염, 예컨대 박테리아 감염의 존재를 특징으로 하는 임의의 질환을 지칭한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 상태에 대해 언급되는 "치료"는 (1) 해당 상태 또는 상기 상태의 하나 이상의 생물학적 증상의 완화 또는 예방, (2) (a) 해당 상태를 유도하거나 그러한 상태를 야기하는 생물학적 캐스케이드 중 하나 이상의 지점 또는 (b) 해당 상태의 하나 이상의 생물학적 증상의 저해, (3) 해당 상태와 관련이 있는 하나 이상의 증상 또는 효과의 경감, 또는 (4) 해당 상태 또는 상기 상태의 하나 이상의 생물학적 증상 진행의 저속화를 의미한다.
상기 언급한 바와 같이, 상태의 "치료"는 상태의 예방을 포함한다. 당업자는 "예방"이 절대적인 용어가 아니라는 것을 알 것이다. 의약에 있어서, "예방"은 상태 또는 그의 생물학적 증상의 가능성 또는 중증도를 실질적으로 감쇠시키거나 그러한 상태 또는 그의 생물학적 증상의 발병을 지연시키는 약물의 예방적 투여를 지칭하는 것으로 이해된다.
본원에서 사용된 바와 같이, 본 발명의 화합물에 대해 언급되는 "유효량"은 분별있는 의학적 판단 범위 내에서 환자의 상태를 치료하기에 충분하지만 심각한 부작용을 피하기에 (합리적인 유익/유해 비율에서) 충분히 낮은 화합물의 양을 의미한다. 화합물의 유효량은 선택된 특정 화합물 (예를 들어, 화합물의 역가, 효능 및 반감기를 고려함), 선택된 투여 경로, 치료할 상태, 치료할 상태의 중증도, 치료받을 환자의 연령, 몸집, 체중 및 신체적 상태, 치료받을 환자의 의학적 병력, 치료 기간, 병행되는 요법의 특성, 원하는 치료 효과 및 기타 인자에 따라 달라질 것이고, 당업자가 통상적으로 결정할 수 있다.
본원에서 사용된 바와 같이, "환자"는 인간 또는 다른 포유동물을 지칭한다.
본 발명의 화합물은 전신 투여와 국소 투여 둘다를 포함하는 임의의 적합한 투여 경로로 투여될 수 있다. 전신 투여는 경구 투여, 비경구 투여, 경피 투여, 직장 투여 및 흡입에 의한 투여를 포함한다. 비경구 투여는 장내, 경피 또는 흡입에 의한 투여 이외의 투여 경로를 지칭하고, 전형적으로는 주사 또는 주입에 의해 이루어진다. 비경구 투여는 정맥내, 근육내 및 피하 주사 또는 주입을 포함한다. 흡입은 입을 통해 흡입되든 비도(鼻道)를 통해 흡입되든 간에 환자의 폐로 투여하는 것을 지칭한다. 국소 투여는 피부에의 적용 및 또한 안내(眼內), 질내 및 비강내 투여를 포함한다.
본 발명의 화합물은 1회 투여될 수도 있고, 또는 주어진 기간 동안에 다양한 시간 간격으로 여러회의 투여량이 투여되는 투약법에 따라 투여될 수도 있다. 예를 들어, 투여량은 1일 당 1회, 2회, 3회 또는 4회 투여될 수 있다. 투여량은 원하는 치료 효과가 달성될 때까지 투여될 수도 있고, 또는 원하는 치료 효과가 유지될 때까지 계속 투여될 수도 있다. 본 발명의 화합물에 대한 적합한 투약법은 화합물의 약력학 특성, 예컨대 흡수, 분포 및 반감기에 따라 달라지며, 이는 당업자가 결정할 수 있다. 또한, 이러한 용량이 투여되는 기간을 포함하는, 본 발명의 화합물에 대한 적합한 투약법은 당업자의 지식 및 전문지식 내에서 치료할 상태, 치료할 상태의 중증도, 치료받을 환자의 연령 및 신체적 상태, 치료받을 환자의 의학적 병력, 병행되는 요법의 특성, 원하는 치료 효과 및 기타 인자에 따라 달라진다. 추가로, 이러한 당업자는, 해당 투약법 또는 시간에 따른 개개의 환자의 반응에 있어서 개개의 환자마다 변화가 필요한 경우에는 적합한 투약법이 조정될 필요가 있을 수 있음을 이해할 것이다.
전형적인 1일 투여량은 선택된 특정 투여 경로에 따라 달라질 수 있다. 대략 70 kg 체중의 인간에게 경구 투여하는 경우에 있어서의 전형적인 1일 투여량은 1일 당 본 발명의 화합물 50 mg 내지 3 g, 적합하게는 100 mg 내지 2 g의 범위일 것이다.
추가로, 본 발명의 화합물은 전구약물로서 투여될 수 있다. 본원에서 사용된 바와 같이, 본 발명의 화합물의 "전구약물"은 환자에게 투여될 때 궁극적으로 본 발명의 화합물을 생체내 유리시키는, 해당 화합물의 기능적 유도체이다. 본 발명의 화합물을 전구약물로서 투여함으로써, 당업자는 다음 중 하나 이상을 실현할 수 있다: (a) 화합물의 생체내 대사의 변경, (b) 화합물의 생체내 작용 기간의 변경, (c) 화합물의 생체내 수송 또는 분포의 변경, (d) 화합물의 생체내 용해도의 변경, 및 (e) 화합물과 관련된 부작용 또는 다른 문제점의 극복. 전구약물 제조에 사용되는 전형적인 기능적 유도체는 화학적으로 또는 효소적으로 생체내 절단되는 화합물의 변형을 포함한다. 이러한 변형은 포스페이트, 아미드, 에스테르, 티오에스테르, 카르보네이트 및 카르바메이트의 제조를 포함하며, 이는 당업자에게 공지되어 있다.
본 발명은 또한 의학적 요법, 특히 박테리아 감염에 사용하기 위한 본 발명의 화합물을 제공한다. 따라서, 추가의 측면에서, 본 발명은 박테리아 감염을 치료하기 위한 의약의 제조에 있어서 화학식 I에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염의 용도에 관한 것이다.
상기 언급한 바와 같이, 화학식 I에 따른 화합물은 PDF 억제제이고, 박테리아 감염의 치료에 유용할 수 있다. 화학식 I에 따른 화합물의 생물학적 활성은, PDF의 효소 활성의 억제를 측정하는 검정법 및 화합물이 박테리아 성장을 시험관내 또는 감염의 동물 모델에서 억제하는 능력을 평가하는 검정법과 같은 적합한 검정법을 이용하여 결정할 수 있다.
본 발명의 특정 예는 WO 03/101442의 예에 비해 시험관내 항-박테리아 활성 (MIC 및/또는 MIC90) 및/또는 생체내 효능이 더 우수하다. 이러한 예는 다음을 포함하지만 이에 제한되지 않는다:
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(4-메틸-4,7-디아자스피로[2.5]옥트-7-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드, 및
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(4-메틸-4,7-디아자스피로[2.5]옥트-7-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드.
PDF IC50 검정
PDF의 효소 활성을 포르메이트 데히드로게나제 (FDH)-커플링 검정 [Lazennec and Meinnel (1997) Anal. Biochem. 244, 180-182]으로 결정하였다. 포르메이트가 PDF에 의해 메티오닌으로부터 일단 유리되면, 이것은 FDH에 의해 산화되어 NAD 1개 분자를 NADH로 환원시키고, 이로 인해 340 nm에서의 흡광도가 증가한다. PDF를 모든 다른 반응 성분을 함유하는 미량역가 플레이트에 첨가하여 반응을 개시하고, 20분 동안 25℃에서 연속적으로 모니터링하였다. 황색 포도상구균 PDF (SaPDF) 검정을 위한 최종 반응 조성물은 50 mM 인산칼륨, pH 7.6, 5 단위/mL FDH, 7 mM NAD, 5％ DMSO, 1 nM SaPDF 및 2.9 mM 포르밀-Met-Ala-Ser (총 부피 50 ㎕)이었다. 억제제의 계열 희석을 DMSO 중에서 수행하였다. 시약 및 검정 포맷은 헤모필루스 인플루엔자 PDF의 경우와 동일하였으나, 상기 경우에는 포르밀-Met-Ala-Ser이 최종적으로 6 mM이었다. 폐렴 연쇄상구균 PDF 검정에서는 반응 조건은 유사하지만 30 pM 효소, 2 mM NAD 및 4 mM 포르밀-Met-Ala-Ser을 함유하였다. 다양한 포르밀-Met-Ala-Ser 농도는 상이한 PDF 동위효소 사용시의 기질에 대한 KM 값을 반영한다. IC50은 하기 식에 핏팅하여 결정하였다: 억제율(％) = 100/1 +(IC50/[I])s (여기서, s는 경사 인자이고, I는 억제제 농도이며, IC50은 50％ 억제를 야기하는 화합물의 농도임).
결과
실시예 1 내지 281의 화합물은 황색 포도상구균, 헤모필루스 인플루엔자 및 폐렴 연쇄상구균 PDF 활성을 IC50 ≤ 100 nM로 억제하였다.
항-미생물 활성 검정
온전한 세포 항-미생물 활성을 클리니칼 앤드 래버러토리 스탠다즈 인스티튜트(CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute), 이전에는 NCCLS)의 권장 방법 [NCCLS Document M7-A6, "Methods for Dilution Susceptibility Tests for Bacteria that Grow Aerobically - Approved Standard Sixth Edition", 2003]을 이용한 브로쓰 미량희석법(broth microdilution)으로 결정하였다. 화합물을 64 내지 0.06 ㎍/mL 범위의 2배 계열 희석률로 시험하였다. 본 검정에서는 12종 균주의 패널을 평가하였다. 상기 패널은 다음과 같은 실험용 균주로 구성되었다: 황색 포도상구균 옥스포드(Oxford), 황색 포도상구균 WCUH29, 엔테로콕쿠스 패칼리스(Enterococcus faecalis) I, 엔테로콕쿠스 패칼리스 7, 헤모필루스 인플루엔자 Q1, 헤모필루스 인플루엔자 NEMC1, 카타르성 모락셀라 1502, 폐렴 연쇄상구균 1629, 폐렴 연쇄상구균 N1387, 폐렴 연쇄상구균 Ery2, 에쉐리히아 콜라이(Escherichia coli) 7623 (AcrABEFD+) 및 에쉐리히아 콜라이 120 (AcrAB-). 최소 억제 농도 (MIC)는 가시적 성장을 억제한 화합물의 최저 농도로 결정하였다. 미러 판독기(mirror reader)를 사용하여 MIC 종점의 결정을 도왔다.
결과
실시예 1 내지 281의 각각의 화합물은 상기한 1종 이상의 유기체에 대하여 최소 억제 농도 (MIC) ≤ 4 ㎍/mL를 나타냈다. 상기한 모든 유기체의 1종 이상의 균주에 대하여 하나 이상의 실시예 화합물은 엔테로콕쿠스 패칼리스 I 및 엔테로콕쿠스 패칼리스 7을 제외하고는 MIC ≤ 4 ㎍/mL였고, 이것들에 대해서는 대부분의 실시예 화합물이 MIC ≥ 16 ㎍/mL였다.
특정 실시예에 대한 항-미생물 활성 데이타 (㎍/mL 단위의 MIC)를 하기 표 2에 나타냈다:
[표 2]
Figure pat00012
감염의 동물 모델
모든 절차는 GSK 동물 실험 윤리 위원회(GSK Institutional Animal Care and Use Committee)의 승인을 받고 미국 실험 동물 인증 협회 (AAALAC (American Association for the Accreditation of Laboratory Animal Care), 미국 보건복지부(United States Department of Health and Human Services) 및 모든 지역 및 연방 동물 복지 법률의 기준을 충족시키거나 넘어서는 프로토콜에 따라 수행하였다.
헤모필루스 인플루엔자 또는 폐렴 연쇄상구균을 갖는 래트 기도 감염 ( RTI ) 모델
상기 모델에서, 마취시킨 래트 (수컷 스프라그 돌리(Sprague Dawley) (Cr1:CD [SD] 100 g) (찰스 리버(Charles River))를 래트 1 마리 당 한천 100 ㎕ 중 2×106 내지 3×106 박테리아 CFU의 기관지내 점적주입을 통해 폐에 직접 감염시켰다 [G. Smith (1991) Lab Animals vol 25, 46-49]. 동물 (군 당 n = 6)에게 감염 후 제1시간부터 출발하여 상이한 양의 화합물 (1 kg 당 37.5 내지 300 mg 범위의 2배 희석물)을 경구 위관영양법으로 1일 2회씩 4일 동안 투여하였다. 대조군 동물에게는 동일 스케쥴로 희석제를 투여하였다. 상기 래트를 감염후 제96시간에 안락사시키고, 폐를 무균 제거하여 스토마커(stomacher) 기계로 멸균 염수 1 mL 중에서 균질화하였다. 멸균 염수 중에 10배 계열 희석을 실시하여 살아있는 박테리아의 수를 세었다. 상기 래트 폐 감염 모델은 폐렴 연쇄상구균에 의해 야기되는 지역사회 획득 폐렴 (CAP (community-acquired pneumonia))에 있어서의 인간 효능을 예측할 수 있다는 것을 보여주었다 [Hoover J. L., C. Mininger, R. Page, R. Straub, S. Rittenhouse, and D. Payne. (2007). Abstract A-17. Proceedings of the 47th ICAAC, Chicago, Illinois].
피부 및 연부 조직 감염 ( SSTI )의 뮤린 ( murine ) 서혜부 황색 포도상구균 농양 모델
상기 모델에서, 마취시킨 마우스 (수컷 CD1, 20 g) (찰스 리버)를 반-고체 한천 중의 황색 포도상구균 (마우스 1 마리 당 1×106 CFU)을 서혜부 영역에 피하 주사하여 감염시켰다 [Jarvest, R.L., Berge, J.M., Berry, V., Boyd, H.F., Brown, M.J., Elder, J.S., Forrest, A.K., Fosberry, A.P., Gentry, D.R., Hibbs, M.J., Jaworski, D.D., O'Hanlon, P.J., Pope, A.J., Rittenhouse, S. Sheppard, R.J., Slater-Radosti, C. and Worby, A. (2002) J. Med Chem., 45, 1959-1962]. 동물 (군 당 n = 6)에게 감염 후 제1시간부터 출발하여 상이한 양의 화합물 (1 kg 당 37.5 내지 300 mg 범위의 2배 희석물)을 경구 위관영양법으로 1일 2회씩 투여하였다. 대조군 동물에게는 동일 스케쥴로 희석제를 투여하였다. 상기 마우스를 감염후 제96시간에 안락사시키고, 농양을 무균 제거하여 균질화하였다. 멸균 염수 중에 10배 계열 희석을 실시하여 살아있는 박테리아의 수를 세었다.
결과
본원에 기재한 일부 실시예 화합물은 폐 또는 농양으로부터 회수된 박테리아의 양을 미처치 대조군 동물에 비해 ≥ 3 log10 CFU/mL 만큼 감소시켜서 상기 감염의 동물 모델 중 하나 이상에서 경구 효능을 입증하였다.
조성물
본 발명의 화합물은 일반적으로 환자에게 투여하기 전에 제약 조성물로 제제화될 것이다 (반드시 그러한 것은 아님). 따라서, 또다른 측면에서, 본 발명은 본 발명의 화합물 및 1종 이상의 제약상 허용가능한 부형제를 포함하는 제약 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 제약 조성물은 안전하고 유효한 양의 본 발명의 화합물이 추출될 수 있는 벌크 형태로 제조 및 포장된 후에 산제 또는 시럽제 등으로 환자에게 투여될 수 있다. 별법으로, 본 발명의 제약 조성물은 단위 투여 형태로 제조 및 포장될 수도 있고, 이러한 경우에는 각각의 물리적으로 별개인 단위가 안전하고 유효한 양의 본 발명의 화합물을 함유한다. 단위 투여 형태로 제조되는 경우, 본 발명의 제약 조성물은 전형적으로 본 발명의 화합물을 25 mg 내지 1.5 g, 적합하게는 100 내지 500 mg 함유한다.
본 발명의 제약 조성물은 전형적으로 본 발명의 1종의 화합물을 함유한다. 그러나, 특정 실시양태에서는 본 발명의 제약 조성물이 본 발명의 1종 초과의 화합물을 함유할 수도 있다. 예를 들어, 특정 실시양태에서는 본 발명의 제약 조성물이 본 발명의 2종의 화합물을 함유할 수 있다. 또한, 본 발명의 제약 조성물은 1종 이상의 추가의 제약 활성 화합물을 임으로 추가로 포함할 수 있다.
본원에서 사용된 바와 같이, "제약상 허용가능한 부형제"는 예를 들어 제약 조성물에 형태 또는 점조도를 제공하는데 관여하는 제약상 허용가능한 물질, 조성물 또는 비히클을 의미한다. 각각의 부형제는 제약 조성물의 다른 성분들과 섞일 때 이것들과 상용가능해야 하며, 환자에게 투여시에 본 발명의 화합물의 효능을 실질적으로 감소시키는 상호작용 및 제약상 허용가능하지 않은 제약 조성물을 야기하는 상호작용은 피해야 한다. 또한, 각각의 부형제는 물론 이것이 제약상 허용가능할 만큼 충분히 높은 순도를 가져야 한다.
본 발명의 화합물 및 제약상 허용가능한 부형제(들)은 전형적으로 원하는 투여 경로에 의해 환자에게 투여되기에 적합한 투여 형태로 제제화될 것이다. 예를 들어, 투여 형태는 (1) 경구 투여에 적합한 형태, 예컨대 정제, 캡슐제, 캐플릿제, 환제, 트로케제, 산제, 시럽제, 엘릭시르제, 현탁액제, 용액제, 에멀젼제, 사셰제 및 카세제, (2) 비경구 투여에 적합한 형태, 예컨대 멸균 용액제, 현탁액제, 및 재구성되는 산제, (3) 경피 투여에 적합한 형태, 예컨대 경피 패치제, (4) 직장 투여에 적합한 형태, 예컨대 좌제, (5) 흡입 투여에 적합한 형태, 예컨대 건조 산제, 에어로졸제, 현탁액제 및 용액제, 및 (6) 국소 투여에 적합한 형태, 예컨대 크림제, 연고제, 로션제, 용액제, 페이스트제, 분무제, 발포제 및 겔제를 포함한다.
적합한 제약상 허용가능한 부형제는 선택된 특정 투여 형태에 따라 달라질 것이다. 또한, 적합한 제약상 허용가능한 부형제는 이것들이 조성물 중에서 작용할 수 있는 특정 기능 때문에 선택될 수도 있다. 예를 들어, 특정 제약상 허용가능한 부형제는 균일한 투여 형태의 생성을 용이하게 하는 능력 때문에 선택될 수 있다. 특정 제약상 허용가능한 부형제는 안정적인 투여 형태의 생성을 용이하게 하는 능력 때문에 선택될 수 있다. 특정 제약상 허용가능한 부형제는 본 발명의 화합물(들)이 일단 환자에게 투여된 후에 이것이 한 장기 또는 신체의 일부에서 또다른 장기 또는 신체의 또다른 일부로 운반되거나 수송되게 하는 것을 용이하게 하는 능력 때문에 선택될 수 있다. 특정 제약상 허용가능한 부형제는 환자 순응도를 증진시키는 능력 때문에 선택될 수 있다.
적합한 제약상 허용가능한 부형제는 하기 유형의 부형제를 포함한다: 희석제, 충전제, 결합제, 붕해제, 윤활제, 활택제, 과립화제, 코팅제, 습윤제, 용매, 보조 용매, 현탁화제, 유화제, 감미제, 향미제, 향 차폐제, 착색제, 고결방지제, 보습제, 킬레이팅제, 가소제, 점도 증가제, 항-산화제, 보존제, 안정화제, 계면활성제 및 완충제. 당업자는 특정 제약상 허용가능한 부형제가 1종 초과의 기능을 수행할 수 있고, 제제 중에 얼마나 많은 부형제가 존재하는지 및 제제 중에 존재하는 다른 성분이 무엇인지에 따라 또다른 기능을 수행할 수 있다는 것을 알 것이다.
당업자는 적합한 제약상 허용가능한 부형제를 본 발명에 사용하기에 적절한 양으로 선택할 수 있게 하는 당업계의 지식 및 기술을 갖고 있다. 또한, 제약상 허용가능한 부형제를 기재하고 적합한 제약상 허용가능한 부형제를 선택하는데 유용할 수 있는 수많은 자료가 당업자에게 이용가능하다. 이의 예는 문헌 [Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company), The Handbook of Pharmaceutical Additives (Gower Publishing Limited)] 및 [The Handbook of Pharmaceutical Excipients (the American Pharmaceutical Association and the Pharmaceutical Press)]을 포함한다.
본 발명의 제약 조성물은 당업자에게 공지된 기술 및 방법을 이용하여 제조된다. 당업계에서 통상적으로 이용되는 방법 중 일부가 문헌 [Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company)]에 기재되어 있다.
한 측면에서, 본 발명은 안전하고 유효한 양의 본 발명의 화합물 및 희석제 또는 충전제를 포함하는, 고체 경구 투여 형태, 예컨대 정제 또는 캡슐제에 관한 것이다. 적합한 희석제 및 충전제는 락토스, 수크로스, 덱스트로스, 만니톨, 소르비톨, 전분 (예를 들어 옥수수 전분, 감자 전분 및 전-젤라틴화(pre-gelatinized) 전분), 셀룰로스 및 그의 유도체 (예를 들어 미세결정질 셀룰로스), 황산칼슘, 및 이염기성 인산칼슘을 포함한다. 경구 고체 투여 형태는 결합제를 추가로 포함할 수 있다. 적합한 결합제는 전분 (예를 들어 옥수수 전분, 감자 전분 및 전-젤라틴화 전분), 젤라틴, 아카시아, 알긴산나트륨, 알긴산, 트라가칸트, 구아 고무, 포비돈, 및 셀룰로스 및 그의 유도체 (예를 들어 미세결정질 셀룰로스)를 포함한다. 경구 고체 투여 형태는 붕해제를 추가로 포함할 수 있다. 적합한 붕해제는 크로스포비돈, 나트륨 전분 글리콜레이트, 크로스카르멜로스, 알긴산 및 나트륨 카르복시메틸 셀룰로스를 포함한다. 경구 고체 투여 형태는 윤활제를 추가로 포함할 수 있다. 적합한 윤활제는 스테아르산, 스테아르산마그네슘, 스테아르산칼슘 및 활석을 포함한다.
적절하다면, 경구 투여를 위한 투여량 단위 제제는 미세캡슐화될 수 있다. 상기 조성물은 또한 예를 들어 코팅하거나 미립자 물질을 중합체, 왁스 등에 매립하여 방출이 연장되거나 지연되도록 제조될 수도 있다.
본 발명의 화합물은 또한 표적화가능한 약물 담체로서의 가용성 중합체와 커플링될 수도 있다. 이러한 중합체는 폴리비닐피롤리돈, 피란 공중합체, 폴리히드록시프로필메타크릴아미드-페놀, 폴리히드록시에틸아스파르트아미드페놀, 또는 팔미토일 잔기로 치환된 폴리에틸렌옥시드폴리라이신을 포함할 수 있다. 추가로, 본 발명의 화합물은 약물의 제어 방출 달성에 유용한 부류의 생분해성 중합체, 예를 들어 폴리락트산, 폴엡실론 카프롤락톤, 폴리히드록시 부티르산, 폴리오르토에스테르, 폴리아세탈, 폴리디히드로피란, 폴리시아노아크릴레이트, 및 히드로겔의 가교된 또는 양친매성 블록 공중합체와 커플링될 수 있다.
또다른 측면에서, 본 발명은 액체 경구 투여 형태에 관한 것이다. 경구 액제, 예컨대 용액제, 시럽제 및 엘릭시르제는 주어진 양이 소정량의 본 발명의 화합물을 함유하는 투여량 단위 형태로 제조될 수 있다. 시럽제는 본 발명의 화합물을 적합하게 향미가 가미된 수용액 중에 용해하여 제조될 수 있고, 엘릭시르제는 비-독성의 알콜계 비히클을 사용하여 제조된다. 현탁액제는 본 발명의 화합물을 비-독성 비히클 중에 분산시켜 제조될 수 있다. 가용화제 및 유화제, 예컨대 에톡실화 이소스테아릴 알콜 및 폴리옥시 에틸렌 소르비톨 에테르, 보존제, 향 첨가제, 예컨대 페퍼민트 오일 또는 천연 감미제 또는 사카린 또는 다른 인공 감미제 등도 첨가될 수 있다.
또다른 측면에서, 본 발명은 비경구 투여에 관한 것이다. 비경구 투여에 적합한 제약 조성물은 항-산화제, 완충제, 정균제, 및 제제가 의도된 수용자의 혈액과 등장성이 되게 하는 용질을 함유할 수 있는 수성 및 비-수성 멸균 주사 용액제, 및 현탁화제 및 증점제를 포함할 수 있는 수성 및 비-수성 멸균 현탁액제를 포함한다. 상기 조성물은 단위-투여 또는 다중 투여 용기, 예를 들어 밀폐된 앰플 및 바이알로 제공될 수 있고, 사용 직전에 멸균 액체 담체, 예를 들어 주사용수의 첨가만이 요구되는 냉동-건조 (동결건조) 상태로 보관될 수 있다. 즉각 투여용(extemporaneous) 주사 용액제 및 현탁액제는 멸균 산제, 과립제 및 정제로부터 제조될 수 있다.
또다른 측면에서, 본 발명은 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 또는 그의 제약상 허용가능한 염, 및 제약상 허용가능한 부형제를 포함하는 제약 조성물에 관한 것이다. 적합하게는, [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 또는 그의 제약상 허용가능한 염을 경구 투여용으로, 적합하게는 액제 또는 정제 형태로 제제화할 수도 있고, 또는 비경구 투여용으로 제제화할 수도 있다.
또다른 측면에서, 본 발명은 [(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 또는 그의 제약상 허용가능한 염, 및 제약상 허용가능한 부형제를 포함하는 제약 조성물에 관한 것이다. 적합하게는, [(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 또는 그의 제약상 허용가능한 염을 경구 투여용으로, 적합하게는 액제 또는 정제 형태로 제제화할 수도 있고, 또는 비경구 투여용으로 제제화할 수도 있다.
또다른 측면에서, 본 발명은 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 또는 그의 제약상 허용가능한 염, 및 제약상 허용가능한 부형제를 포함하는 제약 조성물에 관한 것이다. 적합하게는, [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 또는 그의 제약상 허용가능한 염을 경구 투여용으로, 적합하게는 액제 또는 정제 형태로 제제화할 수도 있고, 또는 비경구 투여용으로 제제화할 수도 있다.
또다른 측면에서, 본 발명은 [(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(4-메틸-4,7-디아자스피로[2.5]옥트-7-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 또는 그의 제약상 허용가능한 염, 및 제약상 허용가능한 부형제를 포함하는 제약 조성물에 관한 것이다. 적합하게는, [(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(4-메틸-4,7-디아자스피로[2.5]옥트-7-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 또는 그의 제약상 허용가능한 염을 경구 투여용으로, 적합하게는 액제 또는 정제 형태로 제제화할 수도 있고, 또는 비경구 투여용으로 제제화할 수도 있다.
또다른 측면에서, 본 발명은 ((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(4-메틸-4,7-디아자스피로[2.5]옥트-7-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드 또는 그의 제약상 허용가능한 염, 및 제약상 허용가능한 부형제를 포함하는 제약 조성물에 관한 것이다. 적합하게는, ((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(4-메틸-4,7-디아자스피로[2.5]옥트-7-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드 또는 그의 제약상 허용가능한 염을 경구 투여용으로, 적합하게는 액제 또는 정제 형태로 제제화할 수도 있고, 또는 비경구 투여용으로 제제화할 수도 있다.
다형질 형태
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드에는 특징적이고 재현가능한 3가지 다형질 고체 상태 형태가 존재한다. 이들 3가지 형태는 형태 1, 형태 2 및 형태 3이다.
형태 1은 에테르, 아세테이트, 케톤, 장쇄 알콜, 및 다른 용매 시스템 (예를 들어, 니트로메탄, 아세토니트릴, 2-부타논, 메틸 아세테이트, 에틸 아세테이트, 디에틸 에테르, 헵탄, 디메틸 카르보네이트, t-부틸 에틸 에테르, 1-메톡시-2-프로판올, 2-메톡시에틸 에테르, 클로로포름, 클로로벤젠, 테트라히드로푸란, 톨루엔, 시클로헥산 및 시클로헥사논) 중 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드의 슬러리로부터 생성될 수 있는 결정질 형태이다.
에틸 아세테이트 중 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드에 대한 용매화된 형태가 분석적으로 관찰된 바 있다. 에틸 아세테이트 용매화물의 탈용매화는 진공 여과에 의해 수행될 수 있고, 형태 1을 생성한다.
형태 2는 물 중 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드의 슬러리로부터 생성될 수 있는 결정질 형태이다.
형태 3은 소량의 순수 알콜 용매 시스템, 예컨대 메탄올, 1-프로판올 및 1-부탄올 중 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드의 슬러리로부터 생성될 수 있는 결정질 형태이다. 이러한 알콜은 물을 거의 함유하지 않거나 아예 함유하지 않아서 형태 2가 생성되지 않도록 해야 하지만, 정확한 물 함량 한계치는 수립되어 있지 않다. 형태 1을 132℃ 초과로 가열 (그러나, 화합물의 분해를 초래하는 약 185℃를 넘지는 않도록 가열함)하면, 형태 1에서 형태 3으로의 발열성 고체 상태 형태 전환이 일어난다.
본 발명은 실질적으로 순수한 형태의 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 형태 1, 형태 2 또는 형태 3을 제공한다. 추가로, 본 발명은 형태 1, 형태 2 및 형태 3 중 2종 이상을 포함하는, [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드의 혼합물을 제공한다. 한 실시양태에서, 상기 혼합물은 형태 1과 형태 2를 둘다 포함할 수 있다. 상기 조성물은 형태 1 또는 형태 2를 1％, 2％, 3％, 4％, 5％, 10％, 15％, 20％, 25％, 30％, 35％, 40％, 45％, 50％, 55％, 60％, 70％, 75％, 80％, 85％, 90％, 95％, 97％, 또는 약 99％ 초과로 포함할 수 있다. 또다른 실시양태에서, 상기 혼합물은 형태 2와 형태 3을 둘다 포함할 수 있다. 상기 조성물은 형태 2 또는 형태 3을 1％, 2％, 3％, 4％, 5％, 10％, 15％, 20％, 25％, 30％, 35％, 40％, 45％, 50％, 55％, 60％, 70％, 75％, 80％, 85％, 90％, 95％, 97％, 또는 약 99％ 초과로 포함할 수 있다. 또다른 실시양태에서, 상기 혼합물은 형태 1과 형태 3을 둘다 포함할 수 있다. 또다른 실시양태에서, 상기 혼합물은 형태 1 또는 형태 3을 1％, 2％, 3％, 4％, 5％, 10％, 15％, 20％, 25％, 30％, 35％, 40％, 45％, 50％, 55％, 60％, 70％, 75％, 80％, 85％, 90％, 95％, 97％, 또는 약 99％ 초과로 포함할 수 있다.
본 발명의 한 실시양태에서, 조성물은 형태 1, 형태 2 또는 형태 3인 개개의 다형질 형태를 1％, 2％, 3％, 4％, 5％, 10％, 15％, 20％, 25％, 30％, 35％, 40％, 45％, 50％, 55％, 60％, 70％, 75％, 80％, 85％, 90％, 95％, 97％, 또는 약 99％ 초과로 포함할 수 있다.
본 발명의 또다른 실시양태는 실질적으로 순수한 결정질 형태의 다형체 형태 1, 형태 2 또는 형태 3이다.
알고 있는 바와 같이, 화합물의 결정질 상태는 여러가지 결정학적 파라미터로 기재될 수 있다: 단위 셀 치수, 스페이스 기, 및 화합물 원래의 단위 셀에 대한 화합물 중 원자의 원자 위치. 이러한 파라미터는 결정 X-선 분석으로 실험적으로 결정된다. 화합물이 1종 초과 유형의 결정을 형성하는 것이 가능하다. 이러한 상이한 결정질 형태를 다형체라 부른다.
형태 1, 형태 2 및 형태 3은 본원에서 형태 1 내지 형태 3 각각에 대해 도 6 내지 도 8에 나타낸 바와 같이 고체 상태 형태의 X-선 분말 회절 (XRPD)로 차별화될 수 있다. 또한, 본원에서 나타내고 기재한 바와 같이, FT-IR, FT-라만, 시차 주사 열계량 (DSC) 및 열중량 분석 (TGA) 데이타를 사용하여 고체 상태 형태의 차별화를 도울 수 있다.
특징적인 분말 X-선 회절 패턴 피크 위치는 다형체에 대해 허용가능한 변동성, 일반적으로는 약 0.1±°2-쎄타 내에서 각의 위치 (2 쎄타)와 관련하여 보고된다. 전체 패턴, 또는 대부분의 패턴 피크는 보정값, 설정값, 및 기기마다 및 작동자마다의 기타 변수에 있어서의 차이로 인해 약 0.1±° 만큼 이동될 수도 있다.
본원에 기재한 XRPD 데이타는 본원에 기재한 바와 같은 방법을 이용하여 브루커(Bruker) AXS PXRD 제너럴 에리어 검출기 회절(General Area Detector Diffraction) 시스템에서 획득하였다. 특징적인 XRPD 각도 및 d-간격을 하기 표 1에서 보고하였다.
따라서, 다형질 형태 1은 임의의 1개, 임의의 2개, 임의의 3개, 임의의 4개 또는 임의의 5개 이상의 2-쎄타각 피크를 특징으로 할 수 있다.
따라서, 다형질 형태 2는 임의의 1개, 임의의 2개, 임의의 3개, 임의의 4개 또는 임의의 5개 이상의 2-쎄타각 피크를 특징으로 할 수 있다.
따라서, 다형질 형태 3은 임의의 1개, 임의의 2개, 임의의 3개, 임의의 4개 또는 임의의 5개 이상의 2-쎄타각 피크를 특징으로 할 수 있다.
또한, 임의의 1개, 임의의 2개, 임의의 3개, 임의의 4개 또는 임의의 5개 이상의 유사한 특징은 하기 표 1에 나타낸 바와 같은 d-간격/옹스트롬으로 인한 것일 수 있다.
[표 1]
Figure pat00013
고체 형태의 FT-IR 스펙트럼은 본원에 기재한 바와 같은 방법을 이용하여 써모 마그나(Thermo Magna) MidIR 시스템으로 기록하였다. 관찰된 피크에서의 약간의 변동은 사용된 특정 분광계 및 분석자의 샘플 제조 기술에 따른 것으로 예상된다. 하기 보고된 각각의 피크 배치에는 약간의 오차 한계가 존재한다. 피크 배치의 오차 한계는 대략 ±1 cm-1이다.
형태 1 IR 피크는 하기에서 관찰되었다:
Figure pat00014
적합하게는, 형태 1은 이러한 특징적인 피크 중 임의의 1개, 임의의 2개, 임의의 3개, 임의의 4개 또는 임의의 5개 이상의 피크를 나타낸다.
형태 2 IR 피크는 하기에서 관찰되었다:
Figure pat00015
적합하게는, 형태 2는 이러한 특징적인 피크 중 임의의 1개, 임의의 2개, 임의의 3개, 임의의 4개 또는 임의의 5개 이상의 피크를 나타낸다.
형태 1 및 2에 대한 IR 데이타는 도 1 및 도 2 각각에 예시되어 있다.
고체 형태의 FT-라만 스펙트럼은 본원에 기재한 바와 같은 방법을 이용하여 써모(Thermo) FT-라만 시스템 960 분광계로 기록하였다. 관찰된 피크에서의 약간의 변동은 사용된 특정 분광계 및 분석자의 샘플 제조 기술에 따른 것으로 예상된다. 하기 보고된 각각의 피크 배치에는 약간의 오차 한계가 존재한다. 피크 배치의 오차 한계는 대략 ±1 cm-1이다.
형태 1 라만 피크는 하기에서 관찰되었다:
Figure pat00016
적합하게는, 형태 1은 이러한 특징적인 피크 중 임의의 1개, 임의의 2개, 임의의 3개, 임의의 4개 또는 임의의 5개 이상의 피크를 나타낸다.
형태 2 라만 피크는 하기에서 관찰되었다:
Figure pat00017
적합하게는, 형태 2는 이러한 특징적인 피크 중 임의의 1개, 임의의 2개, 임의의 3개, 임의의 4개 또는 임의의 5개 이상의 피크를 나타낸다.
형태 3 라만 피크는 하기에서 관찰되었다:
Figure pat00018
적합하게는, 형태 3은 이러한 특징적인 피크 중 임의의 1개, 임의의 2개, 임의의 3개, 임의의 4개 또는 임의의 5개 이상의 피크를 나타낸다.
형태 1 내지 형태 3에 대한 라만 데이타는 도 3 내지 도 5 각각에 예시되어 있다.
상기 형태들의 DSC 열분석도는 본원에 기재한 바와 같은 방법을 이용하여 TA 인스트러먼츠 써멀 어낼러시스 시스템(TA Instruments Thermal Analysis System), 모델 DSC Q100에서 얻었다. 본원에서, 상기 데이타는 형태 1 내지 형태 3 각각에 대해 도 9 내지 도 11로 예시되어 있다.
형태 1, 형태 2 및 형태 3은 DSC로 측정한 용융 개시점이 각각 대략 187℃, 185℃ 및 19O℃였다. 형태 1과 관련하여 (도 9), 용융점은 132℃였고, 이것은 형태 1에서 형태 3으로의 발열성 고체 상태 형태 전환에 상응한다.
상기 형태들의 TGA 추적도는 본원에 기재한 방법을 이용하여 TA 인스트러먼츠 써멀 어낼러시스 시스템, 모델 TGA Q500에서 얻었다. 본원에서, 상기 데이타는 형태 1 내지 형태 3 각각에 대해 도 12 내지 도 14로 예시되어 있다.
본 발명의 한 실시양태는 실질적으로 도 6의 X-선 회절 패턴, 도 1의 FT-IR 스펙트럼, 도 3의 FT-라만 스펙트럼, 도 9의 DSC 열분석도, 및 도 12의 TGA 추적도에 나타낸 바와 같은 다형질 형태, 형태 1이다.
본 발명의 또다른 실시양태는 2 쎄타 각도의 단위로 표현할 때 4.1±0.1°, 6.1±0.1°, 6.9±0.1°, 8.1±0.1°, 9.5±0.1°, 11.2±0.1°, 12.9±0.1°, 13.8±0.1°, 15.6±0.1° 및 18.3±0.1°에서의 피크를 포함하는 X-선 회절 패턴을 특징으로 하는 다형체 형태 1이다. 적합하게는, 형태 1은 8.1±0.1°, 9.5±0.1°, 11.2±0.1°, 12.9±0.1°, 13.8±0.1° 및 15.6±0.1°에서의 피크를 포함하는 X-선 회절 패턴을 특징으로 한다.
본 발명의 또다른 실시양태는 2 쎄타 각도의 단위로 표현할 때
a. 4.1±0.1°에서의 피크를 포함하거나, 또는
b. 4.1±0.1° 및 6.1±0.1에서의 피크를 포함하거나, 또는
c. 4.1±0.1°, 6.1±0.1° 및 6.9±0.1°에서의 피크를 포함하거나, 또는
d. 4.1±0.1°, 6.1±0.1°, 6.9±0.1° 및 8.1±0.1°에서의 피크를 포함하거나, 또는
e. 4.1±0.1°, 6.1±0.1°, 6.9±0.1°, 8.1±0.1° 및 9.5±0.1°에서의 피크를 포함하거나, 또는
f. 4.1±0.1°, 6.1±0.1°, 6.9±0.1°, 8.1±0.1°, 9.5±0.1° 및 11.2±0.1°에서의 피크를 포함하거나, 또는
g. 4.1±0.1°, 6.1±0.1°, 6.9±0.1°, 8.1±0.1°, 9.5±0.1°, 11.2±0.1° 및 12.9±0.1°에서의 피크를 포함하거나, 또는
h. 4.1±0.1°, 6.1±0.1°, 6.9±0.1°, 8.1±0.1°, 9.5±0.1°, 11.2±0.1°, 12.9±0.1° 및 13.8±0.1°에서의 피크를 포함하거나, 또는
i. 4.1±0.1°, 6.1±0.1°, 6.9±0.1°, 8.1±0.1°, 9.5±0.1°, 11.2±0.1°, 12.9±0.1°, 13.8±0.1° 및 15.6±0.1°에서의 피크를 포함하거나, 또는
j. 4.1±0.1°, 6.1±0.1°, 6.9±0.1°, 8.1±0.1°, 9.5±0.1°, 11.2±0.1°, 12.9±0.1°, 13.8±0.1°, 15.6±0.1° 및 18.3±0.1°에서의 피크를 포함하는
X-선 회절 패턴을 특징으로 하는, [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드의 다형질 형태, 형태 1이다.
본 발명의 또다른 실시양태는 형태 1 및 제약상 허용가능한 부형제를 포함하는 제약 조성물이다.
본 발명의 또다른 실시양태는 실질적으로 도 7의 X-선 회절 패턴, 도 2의 FT-IR 스펙트럼, 도 4의 FT-라만 스펙트럼, 도 10의 DSC 열분석도, 및 도 13의 TGA 추적도에 나타낸 바와 같은 다형질 형태, 형태 2이다.
본 발명의 또다른 실시양태는 2 쎄타 각도의 단위로 표현할 때 7.8±0.1°, 9.5±0.1°, 12.3±0.1°, 13.2±0.1°, 15.6±0.1°, 18.3±0.1°, 19.0±0.1°, 20.6±0.1°, 21.4±0.1° 및 26.7±0.1°에서의 피크를 포함하는 X-선 회절 패턴을 특징으로 하는 다형체 형태 2이다. 적합하게는, 형태 2는 7.8±0.1°, 9.5±0.1°, 12.3±0.1°, 13.2±0.1°, 15.6±0.1°, 18.3±0.1° 및 19.0±0.1°에서의 피크를 포함하는 X-선 회절 패턴을 특징으로 한다.
본 발명의 또다른 실시양태는 2 쎄타 각도의 단위로 표현할 때
a. 7.8±0.1°에서의 피크를 포함하거나, 또는
b. 7.8±0.1° 및 9.5±0.1°에서의 피크를 포함하거나, 또는
c. 7.8±0.1°, 9.5±0.1° 및 12.3±0.1°에서의 피크를 포함하거나, 또는
d. 7.8±0.1°, 9.5±0.1°, 12.3±0.1° 및 13.2±0.1°에서의 피크를 포함하거나, 또는
e. 7.8±0.1°, 9.5±0.1°, 12.3±0.1°, 13.2±0.1° 및 15.6±0.1°에서의 피크를 포함하거나, 또는
f. 7.8±0.1°, 9.5±0.1°, 12.3±0.1°, 13.2±0.1°, 15.6±0.1° 및 18.3±0.1°에서의 피크를 포함하거나, 또는
g. 7.8±0.1°, 9.5±0.1°, 12.3±0.1°, 13.2±0.1°, 15.6±0.1°, 18.3±0.1° 및 19.0±0.1°에서의 피크를 포함하거나, 또는
h. 7.8±0.1°, 9.5±0.1°, 12.3±0.1°, 13.2±0.1°, 15.6±0.1°, 18.3±0.1°, 19.0±0.1° 및 20.6±0.1°에서의 피크를 포함하거나, 또는
i. 7.8±0.1°, 9.5±0.1°, 12.3±0.1°, 13.2±0.1°, 15.6±0.1°, 18.3±0.1°, 19.0±0.1°, 20.6±0.1° 및 21.4±0.1°에서의 피크를 포함하거나, 또는
j. 7.8±0.1°, 9.5±0.1°, 12.3±0.1°, 13.2±0.1°, 15.6±0.1°, 18.3±0.1°, 19.0±0.1°, 20.6±0.1°, 21.4±0.1° 및 26.7±0.1°에서의 피크를 포함하는
X-선 회절 패턴을 특징으로 하는, [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드의 다형질 형태, 형태 2이다.
본 발명의 또다른 실시양태는 형태 2 및 제약상 허용가능한 부형제를 포함하는 제약 조성물이다.
본 발명의 또다른 실시양태는 실질적으로 도 8의 X-선 회절 패턴, 도 5의 FT-라만 스펙트럼, 도 11의 DSC 열분석도, 및 도 14의 TGA 추적도에 나타낸 바와 같은 다형질 형태, 형태 3이다.
본 발명의 또다른 실시양태는 2 쎄타 각도의 단위로 표현할 때 6.1±0.1°, 7.5±0.1°, 8.2±0.1°, 9.1±0.1°, 12.0±0.1°, 12.8±0.1°, 13.4±0.1°, 16.0±0.1°, 23.3±0.1° 및 27.6±0.1°에서의 피크를 포함하는 X-선 회절 패턴을 특징으로 하는 다형체 형태 3이다. 적합하게는, 형태 3은 7.5±0.1°, 8.2±0.1°, 9.1±0.1°, 12.8±0.1°, 13.4±0.1° 및 16.0±0.1°에서의 피크를 포함하는 X-선 회절 패턴을 특징으로 한다.
본 발명의 또다른 실시양태는 2 쎄타 각도의 단위로 표현할 때
a. 6.1±0.1°에서의 피크를 포함하거나, 또는
b. 6.1±0.1° 및 7.5±0.1°에서의 피크를 포함하거나, 또는
c. 6.1±0.1°, 7.5±0.1° 및 8.2±0.1°에서의 피크를 포함하거나, 또는
d. 6.1±0.1°, 7.5±0.1°, 8.2±0.1° 및 9.1±0.1°에서의 피크를 포함하거나, 또는
e. 6.1±0.1°, 7.5±0.1°, 8.2±0.1°, 9.1±0.1° 및 12.0±0.1°에서의 피크를 포함하거나, 또는
f. 6.1±0.1°, 7.5±0.1°, 8.2±0.1°, 9.1±0.1°, 12.0±0.1° 및 12.8±0.1°에서의 피크를 포함하거나, 또는
g. 6.1±0.1°, 7.5±0.1°, 8.2±0.1°, 9.1±0.1°, 12.0±0.1°, 12.8±0.1° 및 13.4±0.1°에서의 피크를 포함하거나, 또는
h. 6.1±0.1°, 7.5±0.1°, 8.2±0.1°, 9.1±0.1°, 12.0±0.1°, 12.8±0.1°, 13.4±0.1° 및 16.0±0.1°에서의 피크를 포함하거나, 또는
i. 6.1±0.1°, 7.5±0.1°, 8.2±0.1°, 9.1±0.1°, 12.0±0.1°, 12.8±0.1°, 13.4±0.1°, 16.0±0.1° 및 23.3±0.1°에서의 피크를 포함하거나, 또는
j. 6.1±0.1°, 7.5±0.1°, 8.2±0.1°, 9.1±0.1°, 12.0±0.1°, 12.8±0.1°, 13.4±0.1°, 16.0±0.1°, 23.3±0.1° 및 27.6±0.1°에서의 피크를 포함하는
X-선 회절 패턴을 특징으로 하는, [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드의 다형질 형태, 형태 3이다.
본 발명의 또다른 실시양태는 형태 3 및 제약상 허용가능한 부형제를 포함하는 제약 조성물이다.
실시예
하기 실시예는 본 발명을 예시한다. 이들 실시예는 본 발명의 범위를 제한하려는 것이 아니라 당업자에게 본 발명의 화합물, 조성물 및 방법의 제조 및 사용에 관한 지침을 제공하기 위한 것이다. 본 발명의 특정 실시양태를 기재하지만, 당업자는 본 발명의 사상과 범위에서 벗어나지 않는 다양한 변화 및 변형이 가해질 수 있다는 것을 알 것이다.
본원에서 사용된 바와 같이, 이러한 방법, 반응식 및 실시예에서 사용된 기호 및 관례는 현대의 학술 문헌, 예를 들어 문헌 [Journal of the American Chemical Society] 또는 [Journal of Biological Chemistry]에서 사용되고 있는 것과 일치한다. 표준 1-문자 또는 3-문자 약어는 아미노산 잔기를 표현하는데 일반적으로 사용되는 것으로, 달리 언급하지 않는다면 L-형태로 간주된다. 달리 언급하지 않는다면, 모든 출발 물질은 시판 공급업체로부터 구입하였고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다.
에테르에 대한 모든 언급은 디에틸 에테르이고, 염수는 NaCl의 포화 수용액을 지칭한다. 달리 언급하지 않는 한, 모든 온도는 ℃ (섭씨 온도)로 표현하였다. 달리 언급하지 않는 한은 모든 반응이 불활성 대기하에 실온에서 수행되었고, 달리 언급하지 않는 한은 모든 용매가 이용가능한 가장 높은 순도였다.
1H NMR (이하, 또한 "NMR") 스펙트럼은 배리언(Varian) VXR-300, 배리언 유니티(Varian Unity)-300, 배리언 유니티-400 기기, 브룩커(Brucker) AVANCE-400, 제너럴 일렉트릭(General Electric) QE-300 또는 브루커 AM 400 분광계에서 기록되었다. 화학적 이동은 백만분율 (ppm, δ 단위)로 표현하였다. 커플링 상수는 헤르츠 (Hz) 단위이다. 분할 패턴은 겉보기 다중성을 기재하며, s (단일선), d (이중선), t (삼중선), q (사중선), quint (오중선), m (다중선), br (광폭선)을 표시한다.
질량 스펙트럼은 전자분무 이온화를 사용하는 개방형(open access) LC-MS 시스템에서 실시하였다. LC 조건: 3.0분 동안 10％→80％ CH3CN (0.018％ TFA), 1.25분 동안 유지, 및 0.5분 동안 재평형화; MS에 의한 검출, 214 nm의 UV, 및 광 산란 검출기 (ELS). 컬럼: 2.1×50 mm 조르박스(Zorbax) SB-C8.
정제용 (prep) HPLC의 경우에는 최종 생성물 약 100 mg을 MeOH, DMSO 또는 DMF 1000 ㎕ 중에서 선파이어 프렙(SunFire Prep) C18 OBD 5 ㎛ 30×75 mm 컬럼에 주입하였고, 이때 35 mL/분으로 H2O 중 5％ CH3CN→95％ CH3CN의 10분 구배를 사용한 후에 H2O 중 90％ CH3CN으로 1.9분 동안 유지하였다. 플래쉬(flash) 크로마토그래피는 머크 실리카겔(Merck Silica gel) 60 (230 내지 400 메쉬)에서 수행하거나, 또는 정상(normal phase)의 1회용 레디-세프(Redi-Sep) 플래쉬 컬럼을 사용한 텔레다인 이스코 콤비플래쉬 컴패니언(Teledyne Isco Combiflash Companion)을 사용하여 수행하였다.
중간체 A
(2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산
Figure pat00019
파트 A:
(4S)-벤질-3-(3-시클로펜틸프로파노일)옥사졸리딘-2-온
THF (350 mL) 중 (S)-(-)-4-벤질-2-옥사졸리디논 (25 g, 141 mmol)의 용액에 -78℃에서 n-BuLi (56.4 mL, 헥산 중 2.5 M 용액, 141 mmol)를 적가하였다. 60분 동안 동일한 온도에서 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 3-시클로펜틸프로피오닐 클로라이드 (21.6 mL, 141 mmol)로 0.25시간에 걸쳐 처리하였다. 상기 반응 혼합물이 실온으로 가온되도록 하고 밤새 교반하였다. 상기 반응물을 포화 수성 NH4Cl 용액 (320 mL)으로 켄칭(quenching)시켰다. 수성 층을 EtOAc (3×200 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 건조 (MgSO4)시키고 증발시켜서 (4S)-벤질-3-(3-시클로펜틸프로파노일)옥사졸리딘-2-온을 백색 고체로서 수득하였다 (42.4 g, 100％). LCMS: (M+H)+: 302.3.
파트 B:
(4S)-3-((2R)-3-시클로펜틸-2-{[(페닐메틸)옥시]메틸}프로파노일)-4-(페닐메틸)-1,3-옥사졸리딘-2-온
디클로로메탄 (500 mL) 중 (4S)-벤질-3-(3-시클로펜틸프로파노일)옥사졸리딘-2-온 (42.4 g, 141 mmol)의 용액에 0℃에서 질소하에 티타늄 (IV) 클로라이드 (DCM 중 1 M, 155 mL, 155 mmol)를 저속의 일정 유속으로 첨가하였다. 5분 후에, 디이소프로필에틸아민 (27 mL, 155 mmol)을 적가하였다. 0℃에서 1시간 동안 교반한 후, 상기 생성된 티타늄 에놀레이트에 벤질옥시메틸클로라이드 (티씨아이-아메리카(TCI-America)) (39 mL, 280 mmol)를 저속의 일정 유속으로 첨가하고, 상기 혼합물을 0℃에서 3.5시간 동안 유지하였다. 이어서, 상기 반응 혼합물을 물 (400 mL)로 켄칭시켰다. 수성 층을 디클로로메탄 (150 mL×2)으로 추출하였다. 유기 추출물을 포화 NaHCO3으로 세척하여 건조 (MgSO4)시키고 증발시켰다. 잔류물을 에테르 (2×)로 세척한 후에 헥산/에테르로 연화처리(trituration)하여 (4S)-3-((2R)-3-시클로펜틸-2-{[(페닐메틸)옥시]메틸}프로파노일)-4-(페닐메틸)-1,3-옥사졸리딘-2-온의 2개 수집물을 옅은 황색 고체로서 수득하였다 (42.7 g, 72％). LCMS: (M+H)+: 422.2.
파트 C:
(4S)-3-[(2R)-3-시클로펜틸-2-(히드록시메틸)프로파노일]-4-(페닐메틸)-1,3-옥사졸리딘-2-온
에탄올 (800 mL) 및 DMF (180 mL) 중 (4S)-3-((2R)-3-시클로펜틸-2-{[(페닐메틸)옥시]메틸}프로파노일)-4-(페닐메틸)-1,3-옥사졸리딘-2-온 (42.7 g, 0.1 mol)의 용액으로 10％ Pd/C (4 g) 및 수소 벌룬을 사용한 촉매적 수소화를 실시하였다. 상기 반응은 24시간 후에 LCMS에서 50％ 완료된 것으로 나타났다. 상기 반응물을 질소로 퍼징(purging)하고, 신선한 수소 벌룬을 도입하였다. 추가의 60시간 후에, 상기 반응물을 질소로 다시 퍼징하여 여과하고 여액 용매를 제거하여 (4S)-3-[(2R)-3-시클로펜틸-2-(히드록시메틸)프로파노일]-4-(페닐메틸)-1,3-옥사졸리딘-2-온을 수득하였다 (33.1 g, 100％). LCMS: (M+H)+: 332.3.
파트 D:
(2R)-3-시클로펜틸-2-(히드록시메틸)프로판산
(4S)-3-[(2R)-3-시클로펜틸-2-(히드록시메틸)프로파노일]-4-(페닐메틸)-1,3-옥사졸리딘-2-온 (33.1 g, 0.1 mol)을 THF (330 mL) 및 물 (55 mL)의 혼합물 중에서 교반하고 0℃로 냉각시켰다. 30％ 과산화수소 (96 mL, 1 mol)를 첨가한 후에 수산화리튬 일수화물 (8.4 g, 0.2 mol)을 첨가하였다. 상기 반응물이 실온으로 가온되도록 한 후에 밤새 교반하였다. THF를 회전 증발로 제거하였다. 수성 잔류물을 디클로로메탄 (3×100 mL)으로 세척하여 6 N HCl로 산성화하고 에틸 아세테이트 (4×100 mL)로 추출하였다. 유기 추출물을 건조 (MgSO4)시키고 증발시켜서 (2R)-3-시클로펜틸-2-(히드록시메틸)프로판산을 투명한 무색 오일로서 수득하였다 (18.5 g, >100％). LCMS: (M+H)+: 검출되지 않음.
Figure pat00020
파트 E:
(2R)-3-시클로펜틸-2-(히드록시메틸)-N-[(페닐메틸)옥시]프로판아미드
디클로로메탄 (110 mL) 중 (2R)-3-시클로펜틸-2-(히드록시메틸)프로판산 (18.3 g, 106 mmol), O-벤질 히드록시아민 히드로클로라이드 (18.62 g, 117 mmol) 및 4-(디메틸아미노)피리딘 (28.5 g, 233 mmol)의 혼합물에 0℃에서 1-[3-(디메틸아미노)프로필]-3-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드 (22.3 g, 117 mmol)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 0℃에서 3시간 동안 유지시켰다. 이 시간 후에, 차가운 1 N 수성 HCl 용액 500 mL를 첨가하고, 상기 혼합물을 30분 더 교반하였다. 생성된 백색 고체 침전물을 여과로 수집하였다. 상기 침전물을 1 N HCl, 물 및 차가운 DCM으로 세척하였다. 진공 데시케이터에서 밤새 건조시켜서 (2R)-3-시클로펜틸-2-(히드록시메틸)-N-[(페닐메틸)옥시]프로판아미드를 수득하였다 (19.1 g, 65％). LCMS: (M+H)+: 278.1.
파트 F:
(3R)-3-(시클로펜틸메틸)-1-[(페닐메틸)옥시]-2-아제티디논
THF (800 mL) 중 (2R)-3-시클로펜틸-2-(히드록시메틸)-N-[(페닐메틸)옥시]프로판아미드 (22.5 g, 81 mmol) 및 트리페닐포스핀 (22.5 g, 97 mmol)의 혼합물에 0℃에서 디이소프로필 아조디카르복실레이트 (18.9 mL, 97 mmol)를 적가하였다. 상기 반응 혼합물을 0℃에서 45분 동안 유지한 후에 증발시켰다. 헥산/EtOAc (95:5)의 용출 시스템을 사용한 실리카겔에서의 크로마토그래피로 정제하여 (3R)-3-(시클로펜틸메틸)-1-[(페닐메틸)옥시]-2-아제티디논을 수득하였다 (16.9 g, 81％). LCMS: (M+H)+: 260.1.
파트 G:
(2R)-3-시클로펜틸-2-({[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산
THF/물 (500 mL/170 mL) 중 (3R)-3-(시클로펜틸메틸)-1-[(페닐메틸)옥시]-2-아제티디논 (20 g, 77.1 mmol) 및 LiOH·H2O (32.4 g, 0.77 mol)의 혼합물을 실온에서 36시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물에 6 M HCl (130 mL)을 첨가한 후에 중성 pH가 될 때까지 1 N NaOH를 첨가하였다. 층들을 분리하고, 수성 층을 EtOAc로 1회 추출하였다. 합한 유기물을 건조 (MgSO4)시키고 농축시켜서 (2R)-3-시클로펜틸-2-({[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산을 투명한 무색 오일로서 수득하였다 (22.85 g, >100％). LCMS: (M+H)+: 277.9.
파트 H:
(2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산
질소 대기하에서 포름산 (192 mL, 5 mol)을 CH2Cl2 (450 mL) 중에 용해하고 0℃로 냉각시켰다. 이어서, 아세트산 무수물 (73 mL, 0.77 mol)을 첨가하고, 상기 반응 혼합물을 45분 동안 교반하였다. 이 시간 후에, CH2Cl2 (450 mL) 중 (2R)-3-시클로펜틸-2-({[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산 (22.85 g 조 물질, 77.1 mmol로 추정됨)의 용액을 첨가하고, 생성된 혼합물을 1.5시간 동안 0℃에서 교반하였다. 이어서, 휘발물질을 제거하여 조 잔류물을 EtOAc (500 mL) 중에 용해하고, 상기 혼합물을 염수 (4×100 mL)로 세척하였다. 유기물을 건조 (MgSO4)시키고 농축시켜서 (2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산을 농후한 시럽으로 수득하였다 (23.5 g, 100％). LCMS: (M+H)+: 306.1.
(2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산, 디이소프로필에틸아민 염, 이소프로판올 용매화물을 다음과 같은 방식으로 제조할 수 있다: 디에틸 에테르 (85 mL) 중 (2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산 (25.9 h, 85 mmol)의 용액에 디이소프로필에틸아민 (19.7 mL, 113 mmol)을 첨가하고, 상기 혼합물을 실온에서 대략 3시간 동안 교반하였다. 이어서, 상기 반응 혼합물을 추가의 디에틸 에테르 (85 mL) 및 물 (400 mL)로 희석하였다. 층들을 분리하고, 유기 층을 물/염수 혼합물로 2회 더 (물 250 mL 및 염수 30 mL를 첨가하고, 물 200 mL 및 염수 30 mL를 첨가함) 추출하였다. 이어서, 합한 수성 층을 클로로포름 중 40％ 이소프로판올 (3×300 mL)로 추출하였다. 합한 이소프로판올/클로로포름 층을 건조 (Na2SO4)시켜 여과하고 증발시켜서 2(R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산, 디이소프로필에틸아민 염, 이소프로판올 용매화물을 투명한 베이지색 오일로서 수득하였다 (30.29 g). LCMS: (M+H)+: 306.2.
중간체 B
(2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)아미노]메틸}프로판산
Figure pat00021
파트 A:
(3R)-3-(시클로펜틸메틸)-1-(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)-2-아제티디논
(3R)-3-(시클로펜틸메틸)-1-[(페닐메틸)옥시]-2-아제티디논 (100 g, 386 mmol)을 에탄올 (1.2 L) 중에 용해하고, 상기 용액을 탈기시켰다. Pd/C (10％, 건조, 8 g)를 첨가하고, 상기 현탁액을 수소로 퍼징하고 수소 대기 (벌룬)하에서 상기 반응이 LCMS에서 완료된 것으로 나타날 때까지 (대략 6시간) 교반하였다. 이어서, 상기 현탁액에 질소를 살포하여 셀라이트(Celite)를 통해 여과하고 건조될 때까지 증발시켰다. 생성된 고체를 CH2Cl2 (1 L) 중에 재용해하고 디히드로피란 (70 mL, 767 mmol)을 첨가한 후에 피리디늄 p-톨루엔술포네이트 (PPTS, 5％, 4.85 g)를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 3일 동안 실온에서 교반한 후에 농축시키고, 헥산 중 10％→20％ 에틸 아세테이트를 사용한 실리카겔에서의 크로마토그래피를 실시하여 (3R)-3-(시클로펜틸메틸)-1-(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)-2-아제티디논을 무색 액체로서 수득하였다 (100％).
파트 B:
(2R)-3-시클로펜틸-2-{[(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)아미노]메틸}프로판산
(3R)-3-(시클로펜틸메틸)-1-(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)-2-아제티디논 (68 g, 268 mmol)을 THF (1 L) 중에 용해하고, 내부 열전대, 환류 응축기 및 기계적 교반기가 장착된 3구 3 L 둥근 바닥 플라스크에 넣었다. H2O 400 mL 중 수산화리튬 일수화물 (56.3 g, 1.34 mol)의 용액을 제조하고, 격렬한 교반하에서 첨가 깔때기를 통해 적가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 36시간 동안 교반한 후에 H2O (350 mL)로 희석하고 헥산 (300 mL)으로 세척하였다. 유기 층을 H2O (100 mL)로 추출하고, 합한 수성 층을 0℃로 냉각시키고, 2 M 시트르산 (약 525 mL)을 90분의 기간에 걸쳐서 적가하여 조심스럽게 산성화시키면서 내부 온도는 10℃ 미만으로 유지하였다. 산성화된 물질을 에틸 아세테이트 (3×250 mL)로 추출하고, 합한 유기 층을 물 (2×)로 세척하여 MgSO4에서 건조시켜 여과하고 증발시켰다. 벤젠 (500 mL)을 첨가하여 증발시키고, 잔류물을 진공하에 건조시켜서 (2R)-3-시클로펜틸-2-{[(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)아미노]메틸}프로판산을 무색 액체로서 수득하였다 (70.9 g, 98％).
파트 C:
(2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)아미노]메틸}프로판산
아세톤 (1.1 L) 중 (2R)-3-시클로펜틸-2-{[(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)아미노]메틸}프로판산 (97.05 g, 358 mmol)의 용액에 실온에서 5-메틸-2-티옥소-[1,3,4]티아디아졸-3-카르브알데히드 (57.3 g, 358 mmol) [Tetrahedron Lett. 1985, 26, 3703-3706]를 첨가하였다. 반응이 완료된 것으로 판단되었을 때 아세톤을 진공하에 제거하였다. 잔류물을 헥산 (320 mL) 및 메틸-t-부틸 에테르 (180 mL)의 혼합물 중에 현탁한 후에 초음파처리하였다. 10분 후에, 백색 고체 (5-메틸-3H-[1,3,4]티아디아졸-2-티온이라 여겨짐)를 여과하고, 여액을 진공하에 증발시켜서 (2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)아미노]메틸}프로판산을 옅은 황색 고무로서 수득하였다 (124 g, >100％). NMR에서는 상기 생성물이 소량의 MTBE 및 5-메틸-3H-[1,3,4]티아디아졸-2-티온을 함유하는 것으로 나타났다.
(2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)아미노]메틸}프로판산은 또한 문헌 [Bracken, Bushell, Dean, Francavilla, Jain, Lee, Seepersaud, Shu, Sundram, Yuan; PCT 국제 출원 (2006), WO 2006127576 A2]의 절차에 따라 제조될 수도 있다.
(2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)아미노]메틸}프로판산, 디이소프로필에틸아민 염을 다음과 같은 방식으로 제조할 수 있다: 메틸 포르메이트 (300 mL) 및 디이소프로필에틸아민 (27.9 mL, 160 mmol) 중 (2R)-3-시클로펜틸-2-{[(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)아미노]메틸}프로판산 (39.45 g, 145 mmol)의 용액을 밀폐된 튜브에 넣고, 4일 동안 50℃로 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후에 메틸 포르메이트를 진공하에 제거하고, 남아있는 잔류물을 디에틸 에테르 중에 용해하였다. 에테르 용액을 물로 추출하고 층들을 분리하였다. 이어서, 수성 층을 클로로포름 중 40％ 이소프로판올의 용액 (2×)으로 역추출하였다. 이어서, 합한 이소프로판올/클로로포름 층을 진공하에 농축시켜서 (2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)아미노]메틸}프로판산을 디이소프로필에틸 아민 염으로서 수득하였다 (28 g, 잔류 양의 클로로포름 및 이소프로판올을 함유함).
중간체 C
4,6-디클로로-5-플루오로-2-메틸피리미딘
Figure pat00022
파트 A:
5-플루오로-4,6-디히드록시-2-메틸피리미딘
메탄올 (0.84 mol) 중 25 중량％ 나트륨 메톡시드 200 mL의 용액을 추가의 메탄올 200 mL로 희석하였다. 아세트아미딘-HCl (40 g, 0.42 mol)을 상기 나트륨 메톡시드 용액에 첨가 (백색 침전물이 형성되었음)한 후에 디메틸 플루오로말로네이트 (70 g, 0.46 mol)를 첨가하였다. 상기 내용물을 실온에서 밤새 교반한 후에 진공하에 건조될 때까지 농축시켰다. 생성된 잔류물을 고온의 물 (300 mL) 중에 재용해하였다. 상기 수용액을 실온으로 냉각시킨 후에 진한 HCl을 약 pH 5에서 결정 형성 (화인 화이트 프리즘)이 일어날 때까지 서서히 첨가하였다. pH 3이 될 때까지 진한 HCl을 적가한 후에 상기 내용물을 여과하였다. 단리된 결정을 1 M HCl로 세정하고 진공하에 건조시켜서 5-플루오로-4,6-디히드록시-2-메틸피리미딘을 수득하였다 (65.5 g, >100％). LCMS: (M+H)+: 145.
파트 B:
4,6-디클로로-5-플루오로-2-메틸피리미딘
5-플루오로-4,6-디히드록시-2-메틸피리미딘 (60 g으로 추정됨, 0.42 mol)을 POCl3 300 mL로 120℃에서 3시간 동안 처리하였다. 이어서, 상기 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 진공하에서 용매 제거 속도가 1초 당 1 방울 미만의 적하 속도로 저속화될 때까지 농축시켰다. 생성물은 약간 휘발성이고, 진공하의 과도한 농축은 수율을 감소시킬 것이다. 조 잔류물을 분쇄된 얼음에 붓고, 생성된 슬러리를 1시간 동안 교반하였고, 이 시간 동안에 상기 용액은 실온이 되었다. 황색 고체가 형성되었고, 이것을 여과하여 물로 세척하고 자유 유동시까지 잠시 공기 건조시켰다. 상기 고체를 수집하여 P2O5상의 데시케이터에 넣어 순수한 4,6-디클로로-5-플루오로-2-메틸피리미딘을 수득하였다 (59 g, 79％). LCMS: (M+H)+: 181/183.
중간체 D
4,6-디클로로-2-에틸-5-플루오로피리미딘
Figure pat00023
파트 A:
2-에틸-5-플루오로-6-히드록시-4(1H)-피리미디논
무수 메탄올 (400 mL) 중 프로피온아미드 히드로클로라이드 염 (30.0 g, 276.3 mmol) 및 디메틸 플루오로말로네이트 (41.4 g, 276.3 mmol)를 고체 NaOMe (45 g, 829 mmol)로 실온에서 적가 처리하였다. 첨가 후, 백색 현탁액을 85℃로 가열하고 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 용매를 건조될 때까지 증발시켰다. 잔류물에 6 N HCl 용액 70 mL를 격렬한 교반하에서 첨가하였다. 상기 현탁액을 잔류물이 완전히 중화될 때까지 10분 동안 교반하였다. 백색 침전물을 여과로 수집하고 진공하에 건조시켜서 2-에틸-5-플루오로-6-히드록시-4(1H)-피리미디논을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS: (M+H)+: 159.0; (M+Na)+: 181.1. 일부 경우, 상기 생성물은 동시 침전된 NaCl을 함유할 수 있고, 이로 인해 수율이 이론치를 초과할 수 있다. 이러한 경우에는 상기 생성물을 NaCl이 존재하는 채로 다음 단계에 사용하였다.
파트 B:
4,6-디클로로-2-에틸-5-플루오로피리미딘
POCl3 (58 mL, 633 mmol) 중 2-에틸-5-플루오로-6-히드록시-4(1H)-피리미디논 (20 g, 126.6 mmol)을 125℃ (오일조)에서 2시간 동안 가열하였다. 상기 고온의 용액에 신선한 POCl3을 68 mL 더 첨가하였다. 생성된 용액을 모든 출발 물질이 소모될 때까지 2시간 더 가열하였다. 잉여 POCl3을 진공하에 증류 (62℃ 내지 68℃)시켜 밝은 갈색 잔류물을 수득하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 잔류물을 CH2Cl2 50 mL로 희석한 후에 빙수 빙수 (200 mL)에 부었다. 상기 혼합물에 CH2Cl2 200 mL를 첨가하고, 생성된 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 2개의 층들을 분리한 후, 수성 층을 CH2Cl2 100 mL로 추가로 추출하였다. 합한 유기 층을 Na2SO4에서 건조시킨 후에 짧은 실리카겔 패드로 여과하였고, 이후에 이것을 CH2Cl2 중 1％ MeOH 150 mL로 세척하였다. 용매를 증발시켜 4,6-디클로로-2-에틸-5-플루오로피리미딘을 밝은 황색 액체로서 수득하였다 (21 g, 85％). LCMS: (M+H)+: 검출되지 않음.
중간체 E
[(2R)-3-{2-[6-클로로-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드
Figure pat00024
파트 A:
5-플루오로-6-히드록시-2-메틸티오-4(1H)-피리미디논
MeOH (600 mL) 중 2-메틸-2-티오슈도우레아 술페이트 (41.7 g, 0.15 mol) 및 디메틸 플루오로말로네이트 (45 g, 0.30 mol)의 교반된 용액에 0℃ (빙조)에서 NaOMe (48.6 g, 0.90 mol)를 조금씩 첨가하였다. 첨가 완료 후, 빙조를 치우고 상기 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. LCMS에서는 원하는 피리미디논 생성물이 형성된 것으로 나타났다. 상기 반응 혼합물을 거의 건조해질 때까지 진공하에서 농축시켜서 물 (50 mL)로 희석하고, 6 N HCl (약 150 mL)을 사용하여 약 pH 2로 산성화시켜서 생성물을 침전시켰다. 여과한 후에, 고체를 1 N HCl (2×10 mL)로 세척하고 진공하에 건조시켜서 5-플루오로-6-히드록시-2-메틸티오-4(1H)-피리미디논을 백색 고체로서 수득하였다 (35.7 g, 68％). LCMS: (M+H)+: 177.3.
파트 B:
4,6-디클로로-5-플루오로-2-(메틸티오)피리미딘
POCl3 (150 mL) 중 5-플루오로-6-히드록시-2-(메틸티오)-4(1H)-피리미디논 (35.7 g, 0.20 mol)의 혼합물을 115℃에서 3시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 상기 반응 혼합물을 얼음-물 혼합물 (1500 mL)에 서서히 붓고 20분 동안 교반하였다. 생성물을 에틸 아세테이트 (3×800 mL)로 추출하고, 합한 유기 추출물을 물 (2×1000 mL) 및 염수 (1000 mL)로 세척하고 건조 (Na2SO4)시켰다. 용매를 증발시켜 4,6-디클로로-5-플루오로-2-(메틸티오)피리미딘을 옅은 황색 고체로서 수득하였다 (37.8 g, 89％). LCMS: (M+H)+: 검출되지 않음.
파트 C:
4-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-2-(메틸티오)피리미딘
4,6-디클로로-5-플루오로-2-(메틸티오)피리미딘 (16.8 g, 78.85 mmol) 및 트리에틸아민 (16.49 mL, 118.3 mmol)을 DMSO (200 mL) 중에 용해하고 교반하였다. 상기 혼합물을 빙수조를 사용하여 약 5℃로 냉각시켰다. 상기 용액에 히드라진 일수화물 (4.59 mL, 94.62 mmol)을 서서히 첨가하였다. 첨가 완료 후, 상기 반응 혼합물을 실온까지 가온하고, 1시간 동안 계속 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 물 (500 mL)로 희석하고, 상기 수용액을 CH2Cl2 (3×300 mL)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 물 (3×250 mL) 및 염수 (250 mL)로 세척한 후에 건조 (Na2SO4)시키고 진공하에 농축시켜서 4-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-2-(메틸티오)피리미딘을 적색 발포성 고체로서 수득하였다 (9.70 g, 59％). LCMS: (M+H)+: 208.9.
파트 D:
[(2R)-3-{2-[6-클로로-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드
DMF (300 mL) 중 4-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-2-(메틸티오)피리미딘 (9.70 g, 46.5 mmol), (2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)아미노]메틸}프로판산 (19.9 g, 46.5 mmol), HOAt (6.96 g, 51.2 mmol), EDCI (9.82 g, 51.2 mmol) 및 N-메틸 모르폴린 (25.6 mL, 232.5 mmol)의 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 에틸 아세테이트/헥산 (3:2, 1 L)으로 희석하여 물 (3×500 mL)로 세척하고, 유기물을 건조 (Na2SO4)시키고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 길슨(Gilson) RP-HPLC (35％→95％ 아세토니트릴/물, 8분 구배 시간)로 정제하여 [(2R)-3-{2-[6-클로로-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드를 적색 유리로서 수득하였다 (12.89 g, 56.0％). LCMS: (M+H)+: 490.4.
중간체 F
2,4,6-트리클로로-5-플루오로피리미딘
Figure pat00025
파트 A:
5-플루오로-6-히드록시-2,4(1H,3H)-피리미딘디온
메탄올 (1 L) 중 우레아 (60.06 g, 1 mol) 및 디메틸 플루오로말로네이트 (150.11 g, 1 mol)의 기계적으로 교반된 용액을 메탄올 (약 4.6 M, 435 mL, 2 mol) 중 25 중량％ NaOMe로 처리하였다. 상기 혼합물을 3시간 동안 환류시킨 후에 실온으로 냉각되도록 하였다. 상기 혼합물을 여과하고, 습윤 케이크를 온수 (약 1.2 L) 중에 용해하고, 생성된 수용액을 1시간에 걸쳐 교반하면서 진한 수성 HCl (약 160 mL)로 pH = 2가 될 때까지 산성화시켰다. 상기 혼합물이 실온으로 냉각되도록 하고, 생성물을 여과하고 물로 철저하게 세척한 후에 진공하에 건조시켜서 5-플루오로-6-히드록시-2,4(1H,3H)-피리미딘디온을 백색 고체로서 수득하였다 (80 g, 55％). LCMS: (M+H)+: 147.0.
파트 B:
2,4,6-트리클로로-5-플루오로피리미딘
미분된 5-플루오로-6-히드록시-2,4(1H,3H)-피리미딘디온 (74 g, 0.507 mol)을 POCl3 (232 mL, 2.5 mol)에 교반하며 30분에 걸쳐 조금씩 첨가하였다 (발열). 첨가 완료 후, 상기 혼합물을 60℃에서 유지시키며 N,N-디메틸아닐린 (65 mL)을 시린지로 적가하였다. 적가 후에 상기 혼합물을 반응이 완료된 것으로 판단될 때까지 일반적으로는 4시간 내지 8시간 동안 100℃ 내지 110℃ (내부)로 가열하였다. 상기 혼합물을 냉각시키고, 벌크 잔류 POCl3을 80℃ 내지 90℃에서의 조심스러운 진공 증류로 제거하였다 (일부 생성물은 POCl3 증류액에서 검출될 수 있음). 남아있는 잔류물을 얼음 (약 1 L)에 붓고 30분 동안 교반한 후에 에테르 (1×400 mL, 2×150 mL)로 추출하였다. 합한 추출물을 물과 염수로 세척한 후에 건조 (MgSO4)시켰다. 여과 및 에테르의 대기압 증류를 실시하여 조 생성물을 수득하였고, 이것을 감압하에 증류시켜서 생성물을 저융점의 백색 결정질 고체 (b.p. 80℃ 내지 85℃, 12 mm)로서 수득하였다 (28.8 g, 28％). LCMS: (M+H)+: 검출되지 않음.
중간체 G
트리스(1,1-디메틸에틸) 2-(2,6-디클로로-5-플루오로-4-피리미디닐)-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트
Figure pat00026
파트 A:
1,1-디메틸에틸 2-(2,6-디클로로-5-플루오로-4-피리미디닐)히드라진카르복실레이트
2,4,6-트리클로로-5-플루오로피리미딘 (20.92 g, 104.1 mmol)을 THF (300 mL) 중에 실온에서 용해하고 교반하였다. 상기 교반 중인 용액에 t-부틸 카르바제이트 (13.74 g, 104.1 mmol)를 첨가한 후에 디이소프로필에틸아민 (19.0 mL, 109.3 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물은 밝은 황색으로 변하였고, 수분 후에는 침전물이 형성되었다. TLC (10％ EtOAc/Hex)로 모니터링할 때, 상기 반응은 1.5시간 후에 완료된 것으로 여겨졌다. 상기 반응 혼합물을 진공하에 농축시켜서 THF 대부분을 제거하고, 잔류물을 CH2Cl2 (약 400 mL) 중에 용해하였다. 상기 용액을 포화 수성 NH4Cl 약 400 mL로 세척하였다. 유기물을 건조시키고 농축시켜서 옅은 황색 고체를 수득하였다 (31.37 g). LCMS: (M+H+2Na-Boc)+: 241.
파트 B:
트리스(1,1-디메틸에틸) 2-(2,6-디클로로-5-플루오로-4-피리미디닐)-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트
1,1-디메틸에틸 2-(2,6-디클로로-5-플루오로-4-피리미디닐)히드라진카르복실레이트 (31.37 g, 104.1 mmol로 추정됨)를 CH2Cl2 (400 mL) 중에 현탁하였다. 디-t-부틸 디카르보네이트 (44.75 g, 205.0 mmol)를 상기 용액에 첨가한 후에 디이소프로필에틸아민 (36.3 mL, 208.2 mmol)을 첨가하였다. 거의 모두가 용해되었을 때, DMAP (1.27 g, 10.4 mmol)를 서서히 첨가하였다. 상기 반응 혼합물은 적색빛으로 변하였고, 약 5분 후에 경미한 버블링이 관찰되었다. 45분 후에 상기 반응이 LCMS에서 완료된 것으로 나타났고, 상기 혼합물은 밝은 오렌지색으로 변하였다. 상기 반응 혼합물을 포화 NH4Cl 약 300 mL로 세척하였고, 유기물이 침강되었다. CH2Cl2 중 플로르실(Florsil) 약 1800 mL로 슬러리를 제조하고, 이것을 대형 소결 깔때기에 부었다. 이어서, 전체 유기 용액을 플로르실 패드에 붓고 CH2Cl2 2 L로 세척하였다. 플로르실에 적색 띠가 남았고, TLC에서는 상기 패드로부터의 생성물 용출이 완료된 것으로 나타났다. 여액을 발포성 무색 오일로 농축시키고, 이것을 냉장고에서 밤새 결정화하였다 (37.87 g, 2,4,6-트리클로로-5-플루오로피리미딘으로부터 73％). LCMS: (M+3H+2Na-3Boc)+: 241.
중간체 H
4,6-디클로로-5-플루오로-2-(플루오로메틸)피리미딘
Figure pat00027
파트 A:
5-플루오로-2-(플루오로메틸)-6-히드록시-4(1H)-피리미디논
무수 메탄올 (300 mL) 중 2-플루오로-아세트아미딘 히드로클로라이드 염 (11.2 g, 100 mmol) 및 디메틸 플루오로말로네이트 (15 g, 100 mmol)를 고체 NaOMe (16.2 g, 300 mmol)로 처리하고, 교반하에 50℃로 가열하였다. LCMS에서 원하는 생성물이 형성된 것으로 나타났을 때 용매를 건조될 때까지 증발시키고 잔류물을 진한 HCl (20 mL)로 중화시켰다. 백색 침전물을 여과로 수집하여 5-플루오로-2-(플루오로메틸)-6-히드록시-4(1H)-피리미디논을 수득하였다 (100％ 수율). LCMS: (M+H)+: 163.1.
파트 B:
4,6-디클로로-5-플루오로-2-(플루오로메틸)피리미딘
5-플루오로-2-(플루오로메틸)-6-히드록시-4(1H)-피리미디논 (6 g, 37 mmol)을 POCl3 (20 mL, 222 mmol) 중에 현탁하고, 120℃에서 2시간 동안 교반하였다. 잉여 POCl3을 증발시킨 후, 잔류물을 얼음에 붓고 생성된 혼합물을 CH2Cl2로 추출하였다. CH2Cl2 용액을 실리카겔 패드에 통과시키고, 생성된 여액을 농축시켜서 순수한 4,6-디클로로-5-플루오로-2-(플루오로메틸)피리미딘을 무색 액체로서 수득하였다 (6 g, 81％). LCMS: (M+H)+: 검출되지 않음.
중간체 I
4,6-디클로로-2-(디플루오로메틸)-5-플루오로피리미딘
Figure pat00028
파트 A:
2,2-디플루오로에탄이미다미드.HCl
톨루엔 (150 mL) 중 염화암모늄 (5.1 g, 95 mmol)의 교반된 현탁액에 0℃에서 비등이 멈출 때까지 교반하면서 트리메틸 알루미늄 (46 mL, 2 M, 92 mmol)을 첨가하였다. 메틸 디플루오로아세테이트 (2.38 mL, 27 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 80℃에서 밤새 교반하였다. 0℃로 냉각시킨 후, 메탄올을 서서히 첨가하고, 생성된 용액을 90분 동안 감소된 온도에서 교반하여 고체가 형성되도록 하였다. 이것을 셀라이트를 통해 여과하여 제거하고 여액을 증발시켜서 2,2-디플루오로에탄이미다미드.HCl을 황색빛의 고체로서 수득하였다 (1.7 g, 48.5％).
파트 B:
2-(디플루오로메틸)-5-플루오로-6-히드록시-4(1H)-피리미디논
나트륨 금속 (0.91 g, 40 mmol)을 MeOH (100 mL) 중에 용해하여 나트륨 메톡시드를 형성하였다. 2,2-디플루오로에탄이미다미드.HCl (1.73 g, 13 mmol)을 첨가한 후에 디메틸 플루오로프로판디오에이트 (2.0 g, 13 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 80℃에서 3시간 동안 교반한 후에 실온으로 냉각시켰다. 수성 HCl (6 mL, 6 M, 36 mmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 잔류 고체를 냉수로 세척하고 여과하여 2-(디플루오로메틸)-5-플루오로-6-히드록시-4(1H)-피리미디논을 수득하였다 (1.43 g, 61％)
파트 C:
4,6-디클로로-2-(디플루오로메틸)-5-플루오로피리미딘
2-(디플루오로메틸)-5-플루오로-6-히드록시-4(1H)-피리미디논 (1.43 g, 8.0 mmol) 및 POCl3 (6 mL)의 혼합물을 110℃에서 2.5시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 상기 반응 혼합물을 얼음에 붓고 30분 동안 교반하였다. 생성물을 DCM으로 추출하고, 합한 유기물을 수성 포화 중탄산나트륨으로 1회 세척하였다. 합한 유기물을 황산나트륨에서 건조시키고 진공하에 농축시켰다. 이로써, 4,6-디클로로-2-(디플루오로메틸)-5-플루오로피리미딘을 황색 오일로서 수득하였다 (460 mg, 27％).
일반적인 절차 A
실시예 1
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(1-피롤리디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00029
파트 A:
5-플루오로-4-히드라지노-2-메틸-6-(1-피롤리디닐)피리미딘
4,6-디클로로-5-플루오로-2-메틸피리미딘 (100 mg, 0.55 mmol)을 DMSO 2 mL 중에 용해하고 실온에서 교반하였다. 피롤리딘 (50 ㎕, 0.61 mmol)을 첨가한 후에 DIPEA (210 ㎕, 1.21 mmol)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 2시간 동안 교반한 후에 히드라진 (1.0 mL)을 첨가하고, 상기 내용물을 1시간 동안 80℃로 가열하였다. 이어서, 상기 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 RP-HPLC로 정제하여 5-플루오로-4-히드라지노-2-메틸-6-(1-피롤리디닐)피리미딘을 수득하였다 (69 mg, 59％).
파트 B:
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(1-피롤리디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)[(페닐메틸)옥시]포름아미드
5-플루오로-4-히드라지노-2-메틸-6-(1-피롤리디닐)피리미딘 (69 mg, 0.33 mmol), (2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산 (110 mg, 0.36 mmol) 및 HOAt (49 mg, 0.36 mmol)를 DMF 2 mL 중에 용해하였다. NMM (0.18 mL, 1.65 mmol)을 첨가한 후에 EDC (69 mg, 0.36 mmol)를 첨가하였다. 밤새 실온에서 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여 ((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(1-피롤리디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)[(페닐메틸)옥시]포름아미드를 수득하였다 (90 mg, 55％).
파트 C:
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(1-피롤리디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(1-피롤리디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)[(페닐메틸)옥시]포름아미드 (90 mg, 0.18 mmol)를 MeOH 3 mL 중에 용해하여 탈기시키고 아르곤하에 두었다. 10％ Pd/C (18 mg)를 첨가하고, 상기 내용물을 철저하게 탈기시켜 수소 벌룬하에 대략 3시간 동안 두었다. 이어서, 상기 내용물을 탈기시켜 셀라이트를 통해 여과하고, 상기 셀라이트 패드를 DCM 및 MeOH로 세척하였다. 생성된 여액을 진공하에 농축시켜서 순수한 ((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(1-피롤리디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 수득하였다 (42 mg, 57％). LCMS: (M+H)+: 407.6.
일반적인 절차 B
실시예 2
[(2R)-3-{2-[6-(1-아제티디닐)-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00030
파트 A:
6-아제티디닐-2-에틸-5-플루오로-4-히드라지노피리미딘
4,6-디클로로-2-에틸-5-플루오로피리미딘 (195 mg, 1.0 mmol)을 MeOH 3 mL 중에 용해하고 실온에서 교반하였다. 아제티딘 (74 ㎕, 1.1 mmol)을 첨가한 후에 DIPEA (383 ㎕, 2.2 mmol)를 첨가하였다. LCMS로 모니터링할 때 1 염소의 아제티딘 대체가 완료될 때까지 생성된 반응 혼합물을 실온에서 교반하였다. 이어서, MeOH를 진공하에 제거하고, 남아있는 잔류물을 DMSO 2 mL 및 히드라진 1 mL의 혼합물 중에 용해하였다. 생성된 용액을 상기 반응이 LCMS에서 완료된 것으로 판단될 때까지 40℃에서 1시간 동안 가열하였다. 조 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여 4-(1-아제티디닐)-2-에틸-5-플루오로-6-히드라지노피리미딘을 수득하였다 (136 mg, 64％). LCMS: (M+H)+: 212.1.
파트 B:
[(2R)-3-{2-[6-(1-아제티디닐)-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드
4-(1-아제티디닐)-2-에틸-5-플루오로-6-히드라지노피리미딘 (88 mg, 0.42 mmol), (2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산 (140 mg, 0.46 mmol) 및 HOAt (56 mg, 0.42 mmol)를 DMF 3 mL 중에 용해하였다. 이어서, NMM (71 ㎕, 0.65 mmol)을 첨가한 후에 EDC (75 mg, 0.40 mmol)를 첨가하였다. 밤새 실온에서 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-3-{2-[6-(1-아제티디닐)-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드를 수득하였다 (160 mg, 76％). LCMS: (M+H)+: 499.4.
파트 C:
[(2R)-3-{2-[6-(1-아제티디닐)-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-{2-[6-(1-아제티디닐)-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 (160 mg, 0.32 mmol)를 MeOH 10 mL 중에 용해하고 탈기시켜 아르곤하에 두었다. 5％ Pd/C (40 mg)를 첨가하고, 상기 내용물을 철저하게 탈기시켜 상기 반응이 LCMS에서 완료된 것으로 판단될 때까지 수소 벌룬하에 교반하였다. 이어서, 상기 내용물을 탈기시켜 셀라이트를 통해 여과하고, 상기 셀라이트 패드를 DCM 및 MeOH로 세척하였다. 생성된 여액을 진공하에 농축시켜서 [(2R)-3-{2-[6-(1-아제티디닐)-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 수득하였다 (100 mg, 76％). LCMS: (M+H)+: 409.2.
일반적인 절차 C
실시예 3
[(2R)-3-{2-[6-(1-아제티디닐)-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00031
파트 A:
[(2R)-3-{2-[6-(1-아제티디닐)-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드
압력 튜브에 [(2R)-3-{2-[6-클로로-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드 (0.100 g, 0.204 mmol), 아제티딘 히드로클로라이드 (19.1 mg, 0.204 mmol), DIPEA (71.2 ㎕, 0.408 mmol) 및 DMSO (2 mL)를 첨가하였다. 상기 튜브를 밀폐시키고, 3일 동안 교반하면서 65℃ 내지 70℃로 가열하였다. 이어서, 상기 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-3-{2-[6-(1-아제티디닐)-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드를 수득하였다 (68 mg, 65％). LCMS: (M+H)+: 511.2.
파트 B:
[(2R)-3-{2-[6-(1-아제티디닐)-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-{2-[6-(1-아제티디닐)-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드 (68 mg, 0.13 mmol)를 AcOH/H2O (20 mL, 4:1)의 혼합물 중에 용해하고, LCMS에서 탈보호가 완료된 것으로 나타날 때까지 (밤새) 실온에서 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 진공하에서 건조될 때까지 농축시키고 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-3-{2-[6-(1-아제티디닐)-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 수득하였다 (25 mg, 44％). LCMS: (M+H)+: 427.2.
일반적인 절차 D
실시예 4
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(4-메틸-1-피페라지닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00032
파트 A:
2-클로로-5-플루오로-4-히드라지노-6-(4-메틸-1-피페라지닐)피리미딘
DMSO (3 mL) 중 2,4,6-트리클로로-5-플루오로피리미딘 (402 mg, 2.0 mmol)의 용액에 DIPEA (0.52 mL, 3.0 mmol)를 첨가한 후에 N-메틸피페라진 (0.24 mL, 2.2 mmol)을 첨가하였다. 상기 용액을 실온에서 교반하였다. 30분 후에, 무수 히드라진 (1.29 mL, 99 mmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 80℃에서 30분 동안 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 잉여 히드라진을 진공하에 제거하고, 잔류 용액을 RP-HPLC로 정제하여 2-클로로-5-플루오로-4-히드라지노-6-(4-메틸-1-피페라지닐)피리미딘으로 추정되는 화합물 (제1 용출물, 44 mg) 및 또한 6-클로로-5-플루오로-2-히드라지노-4-(4-메틸-1-피페라지닐)피리미딘으로 추정되는 화합물 (제2 용출물, 30 mg)을 수득하였다. LCMS: (M+H)+: 261.1.
파트 B:
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(4-메틸-1-피페라지닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드
DMF (2 mL) 중 2-클로로-5-플루오로-4-히드라지노-6-(4-메틸-1-피페라지닐)피리미딘 (31 mg, 0.12 mmol), (2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)아미노]메틸}프로판산 (36 mg, 0.12 mmol), HOAt (20 mg, 0.144 mmol), EDC (28 mg, 0.144 mmol) 및 NMM (26 ㎕, 0.144 mmol)의 혼합물을 반응 완료시까지 (2시간) 교반하였다. 이어서, 상기 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(4-메틸-1-피페라지닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드를 수득하였다 (30 mg, 46％). LCMS: (M+H)+: 542.3; (M+Na)+: 564.3.
파트 C:
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(4-메틸-1-피페라지닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
4:1 AcOH:물 (4 mL) 중 [(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(4-메틸-1-피페라지닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시) 포름아미드 (30 mg)의 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 진공하에 제거하고, 생성된 조 생성물을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(4-메틸-1-피페라지닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 수득하였다 (12 mg, 47％). LCMS: (M+H)+: 458.3.
일반적인 절차 E
실시예 5
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1-메틸에틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00033
파트 A:
트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1-메틸에틸)아미노]-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트
0℃에서 DMF (6 mL) 중 이소프로필 아민 (83 ㎕, 1.21 mmol)의 격렬하게 교반된 용액에 DIPEA (0.24 mL, 1.33 mmol)를 첨가한 직후에 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-(2,6-디클로로-5-플루오로-4-피리미디닐)-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트 (600 mg, 1.21 mmol)를 첨가하였다. LCMS에서 반응이 완료된 것으로 판단되었을 때 상기 반응 혼합물을 디에틸 에테르 (약 40 mL)로 희석하고, 물 (3×40 mL)로 세척하였다. 합한 3개의 수성 층을 디에틸 에테르로 1회 역추출한 후에 합한 유기물을 건조 (Na2SO4)시키고 진공하에 농축시켰다. 상기 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피 (콤비플래쉬(Combiflash), 5％→60％ 에틸 아세테이트/헥산, 1％ 트리에틸아민)로 정제하여 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1-메틸에틸)아미노]-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트를 수득하였다 (597 mg, 95％). LCMS: (M+H)+: 520.2.
파트 B:
2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-N-(1-메틸에틸)-4-피리미딘아민
MeOH (5 mL) 및 디옥산 중 4.0 M HCl (5 mL) 중 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1-메틸에틸)아미노]-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트 (597 mg, 1.15 mmol)의 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 침전물을 여과한 후에 용매를 진공하에 제거하여 조 2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-N-(1-메틸에틸)-4-피리미딘아민 (트리-HCl 염이라 여겨짐)을 수득하였다. LCMS: (M+H)+: 219.9.
파트 C:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1-메틸에틸)-아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드
DMF 중 (2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산 (268 mg, 0.88 mmol), 2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-N-(1-메틸에틸)-4-피리미딘아민 (253 mg의 유리 염기로 추정됨, 0.97 mmol), EDC (186 mg, 0.97 mmol), HOAt (132 mg, 0.97 mmol) 및 NMM (0.64 mL, 5.82 mmol)의 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 이어서, 상기 반응 혼합물을 역상 HPLC를 통해 정제하여 [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1-메틸에틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드를 수득하였다 (74 mg, 17％). LCMS: (M+H)+: 507.1.
파트 D:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1-메틸에틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1-메틸에틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 (74 mg, 0.15 mmol)를 MeOH 5 mL 중에 용해하였다. Pd(OH)2 (30 mg)를 첨가하고, 상기 내용물을 수소 벌룬하에 대략 90분 동안 교반하였다. 이어서, 상기 내용물을 여과하여 촉매를 제거하고, 여액을 진공하에 농축시켰다. 생성된 조 생성물을 역상 HPLC를 통해 정제하여 [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1-메틸에틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 수득하였다 (32 mg, 51％). LCMS: (M+H)+: 417.0.
일반적인 절차 F
실시예 6
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-(2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00034
파트 A:
4-(2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)-5-플루오로-6-히드라지노-2-메틸피리미딘
4,6-디클로로-5-플루오로-2-메틸피리미딘 (181 mg, 1.0 mmol)을 DMSO 4 mL 중에 용해하고 실온에서 교반하였다. 3-피롤린 (71 mg, 1.05 mmol)을 첨가한 후에 DIPEA (244 ㎕, 1.4 mmol)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 첫번째 클로라이드의 대체가 완료될 때까지 교반한 후에 히드라진 (350 ㎕) 및 MeOH (약 2 mL)를 상기 반응 혼합물에 첨가하였다. 이어서, 상기 내용물을 두번째 클로라이드의 대체가 완료될 때까지 약 2시간 동안 70℃로 가열하였다. 이어서, 상기 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 RP-HPLC로 정제하여 4-(2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)-5-플루오로-6-히드라지노-2-메틸피리미딘을 수득하였다 (142 mg, 68％).
파트 B:
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-(2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드
4-(2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)-5-플루오로-6-히드라지노-2-메틸피리미딘 (142 mg, 0.68 mmol), (2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)아미노]메틸}프로판산 (242 mg, 0.81 mmol) 및 HOAt (110 mg, 0.81 mmol)를 DMF 4 mL 중에 용해하였다. NMM (370 ㎕, 3.4 mmol)을 첨가한 후에 EDC (155 mg, 0.81 mmol)를 첨가하였다. 출발 물질이 소모되었을 때 상기 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여 ((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-(2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드를 수득하였다 (140 mg, 55％).
파트 C:
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-(2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
4:1 AcOH:물 (2 mL) 중 ((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-(2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드 (140 mg)의 용액을 탈보호가 완료될 때까지 실온에서 교반하였다. 용매를 진공하에 제거하고, 생성된 조 생성물을 RP-HPLC로 정제하여 ((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-(2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 수득하였다 (68 mg, 58％). LCMS: (M+H)+: 407.3.
일반적인 절차 G
실시예 7
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1S,4S)-5-메틸-2,5-디아자바이시클로[2.2.1]헵트-2-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00035
파트 A:
(1S,4S)-2-(2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)-5-메틸-2,5-디아자바이시클로[2.2.1]헵탄
2,4,6-트리클로로-5-플루오로피리미딘 (2.01 g, 10 mmol)을 DMSO 30 mL 중에 용해하고 실온에서 교반하였다. 시판되는 (1S,4S)-2-메틸-2,5-디아자바이시클로[2.2.1]헵탄 및 디히드로브로마이드 (2.74 g, 10 mmol)를 첨가한 후에 DIPEA (5.51 mL, 32 mmol)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 2.5시간 동안 교반한 후에 히드라진 (3.0 mL)을 첨가하고, 상기 내용물을 실온에서 밤새 교반하였다. 이어서, 상기 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여 (1S,4S)-2-(2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)-5-메틸-2,5-디아자바이시클로[2.2.1]헵탄으로 추정되는 화합물 (제1 용출물) 및 또한 4-클로로-5-플루오로-6-[(1S,4S)-5-메틸-2,5-디아자바이시클로[2.2.1]헵트-2-일]-2(1H)-피리미디논 히드라존으로 추정되는 화합물 (제2 용출물)을 수득하였다.
파트 B:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1S,4S)-5-메틸-2,5-디아자바이시클로[2.2.1]헵트-2-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드
(1S,4S)-2-(2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)-5-메틸-2,5-디아자바이시클로[2.2.1]헵탄 (170 mg, 0.62 mmol), (2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산 (190 mg, 0.62 mmol) 및 HOAt (93 mg, 0.68 mmol)를 DMF 4 mL 중에 용해하였다. NMM (0.27 mL, 2.5 mmol)을 첨가한 후에 EDC (131 mg, 0.36 mmol)를 첨가하였다. 밤새 실온에서 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1S,4S)-5-메틸-2,5-디아자바이시클로[2.2.1]헵트-2-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드를 수득하였다 (90 mg, 55％).
파트 C:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1S,4S)-5-메틸-2,5-디아자바이시클로[2.2.1]헵트-2-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1S,4S)-5-메틸-2,5-디아자바이시클로[2.2.1]헵트-2-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 (90 mg, 0.18 mmol)를 MeOH 3 mL 중에 용해하고 탈기시켜 아르곤하에 두었다. 10％ Pd/C (18 mg)를 첨가하고, 상기 내용물을 철저하게 탈기시켜 대략 3시간 동안 수소 벌룬하에 두었다. 이어서, 상기 내용물을 탈기시켜 셀라이트를 통해 여과하고, 상기 셀라이트 패드를 DCM 및 MeOH로 세척하였다. 생성된 여액을 진공하에 농축시켜서 순수한 [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1S,4S)-5-메틸-2,5-디아자바이시클로[2.2.1]헵트-2-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 수득하였다 (42 mg, 57％). LCMS: (M+H)+: 429.4.
실시예 7의 화합물을 또한 하기 방식으로도 제조하였다:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1S,4S)-5-메틸-2,5-디아자바이시클로[2.2.1]헵트-2-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 D에 따라 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 시판되는 (1S,4S)-2-메틸-2,5-디아자바이시클로[2.2.1]헵탄 디히드로브로마이드를 사용하고, 파트 A에서 DIPEA를 3 당량 사용하였다.
일반적인 절차 H
실시예 8
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[2-(디플루오로메틸)-5-플루오로-6-(4-메틸-1-피페라지닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00036
파트 A:
2-(디플루오로메틸)-5-플루오로-4-히드라지노-6-(4-메틸-1-피페라지닐)피리미딘
4,6-디클로로-2-(디플루오로메틸)-5-플루오로피리미딘 (200 mg, 0.92 mmol)을 DMSO (5 mL) 중에 용해하고 실온에서 교반하였다. N-메틸피페라진 (110 ㎕, 0.96 mmol)을 첨가한 후에 DIPEA (500 ㎕, 2.9 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 LCMS에서 1 염소의 N-메틸피페라진 대체가 완료된 것으로 결정될 때까지 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 히드라진 (1 mL, 31 mmol)을 첨가하고, 상기 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 조 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여 2-(디플루오로메틸)-5-플루오로-4-히드라지노-6-(4-메틸-1-피페라지닐)피리미딘을 수득하였다 (142 mg, 56％). LCMS: (M+H)+: 277.0.
파트 B:
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[2-(디플루오로메틸)-5-플루오로-6-(4-메틸-1-피페라지닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
2-(디플루오로메틸)-5-플루오로-4-히드라지노-6-(4-메틸-1-피페라지닐)피리미딘 (142 mg, 0.51 mmol)을 DMF (5 mL) 중 (2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산 (156 mg, 0.51 mmol)의 용액에 첨가하였다. 상기 혼합물에 HOAt (83 mg, 6.1 mmol), EDC (117 mg, 6.1 mmol) 및 NMM (0.28 mL, 2.6 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응물을 밤새 교반하고, 생성된 벤질 보호된 중간체를 RP-HPLC로 단리하였다. 이어서, 상기 물질을 탈기된 MeOH (5 mL) 중에 용해하고, 10％ Pd/C (중간체의 20％ w/w)를 첨가하였다. 생성된 현탁액을 수소 벌룬하에 3시간 동안 교반하고, 이 시간 후에 촉매를 여과로 제거하였다. 진공하에 농축시켜서 ((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[2-(디플루오로메틸)-5-플루오로-6-(4-메틸-1-피페라지닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 수득하였다 (78 mg, 32％). LCMS: (M+H)+: 474.1.
실시예 9
[(2R)-3-{2-[6-(1-아제티디닐)-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00037
파트 A:
4-아제티디노-6-히드라지노-5-플루오로-2-메틸피리미딘
4,6-디클로로-5-플루오로-2-메틸피리미딘 (6 g, 33 mmol)을 iPrOH 50 mL 중에 용해하고 실온에서 교반하였다. 아제티딘-HCl (3.25 g, 35 mmol)을 첨가한 후에 DIPEA 14.4 mL를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 3시간 동안 교반한 후에 히드라진 일수화물 (4.0 mL, 82.5 mmol)을 첨가하고, 상기 내용물을 밤새 80℃로 가열하였다. 이어서, 상기 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켰고 침전물이 형성되었다. 상기 침전물을 여과하여 iPrOH로 세척하고 건조시켰다. 잔류 여액을 물 250 mL에 붓고, EtOAc (5×100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 분획물을 물 (2×100 mL) 및 염수 (2×100 mL)로 세척하였다. 유기물을 황산나트륨에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 상기 조 생성물을 97.5/2.5/0.25 DCM/MeOH/NH4OH를 용출액으로서 사용한 실리카겔에서의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하였다. 4-아제티디노-6-히드라지노-5-플루오로-2-메틸피리미딘 (침전물 + 크로마토그래피를 실시한 생성물)의 전반적인 합산 수득량은 3.6 g (55％)이었다. LCMS: (M+H)+: 198.
파트 B:
[(2R)-3-{2-[6-(1-아제티디닐)-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드
4-아제티디노-6-히드라지노-5-플루오로-2-메틸피리미딘 (2.3 g, 11.6 mmol), (2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산 (3.54 g, 11.6 mmol) 및 HOAt (1.9 g, 13.9 mmol)를 DMF 25 mL 중에 용해하였다. DIPEA (6 mL, 34.8 mmol)를 첨가한 후에 EDC (2.75 g, 13.9 mmol)를 첨가하였다. 밤새 실온에서 교반한 후, 상기 내용물을 물 400 mL에 붓고 (침전물이 형성되었음) 에틸 아세테이트 (4×200 mL)로 추출하였다. 합한 유기 분획물을 물 (2×200 mL) 및 염수 (3×200 mL)로 세척한 후에 황산나트륨에서 건조시켜 여과하고 건조해질 때까지 농축시켰다. 조 물질을 3％ MeOH/DCM을 용출액으로 사용한 실리카겔에서의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 [(2R)-3-{2-[6-(1-아제티디닐)-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드를 수득하였다 (2.5 g, 44％). LCMS: (M+H)+: 485.
파트 C:
[(2R)-3-{2-[6-(1-아제티디닐)-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-{2-[6-(1-아제티디닐)-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 (3.9 g, 8.0 mmol)를 MeOH 50 mL 중에 용해하고, 아르곤으로 탈기시켰다. 10％ Pd/C (400 mg)를 첨가하고, 상기 내용물을 수소 벌룬하에 4.5시간 동안 두었다. 이어서, 상기 내용물을 아르곤으로 탈기시켜 셀라이트를 통해 여과하고, 상기 셀라이트 패드를 DCM 및 MeOH로 세척하였다. 생성된 여액을 진공하에 농축시켜서 순수한 [(2R)-3-{2-[6-(1-아제티디닐)-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 수득하였다 (3.1 g, 98％). LCMS: (M+H)+: 395.
실시예 10
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(4-모르폴리닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00038
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(4-모르폴리닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 시판되는 모르폴린을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 425.4.
실시예 11
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[메틸(메틸옥시)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00039
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[메틸(메틸옥시)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 시판되는 N,O-디메틸히드록실아민 히드로클로라이드를 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 399.2.
실시예 12
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(1,3-티아졸리딘-3-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00040
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(1,3-티아졸리딘-3-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 시판되는 티아졸리딘을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 427.4.
실시예 13
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[3-(메틸옥시)-1-아제티디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00041
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[3-(메틸옥시)-1-아제티디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 시판되는 3-메톡시아제티딘 히드로클로라이드를 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 425.2.
실시예 14
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(3R)-3-(메틸옥시)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00042
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(3R)-3-(메틸옥시)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 시판되는 (R)-3-히드록시피롤리딘 히드로클로라이드를 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 439.2.
실시예 15
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(3S)-3-(메틸옥시)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00043
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(3S)-3-(메틸옥시)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 시판되는 (S)-3-히드록시피롤리딘 히드로클로라이드를 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 439.2.
실시예 16
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(1-메틸에틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00044
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(1-메틸에틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 시판되는 이소프로필아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 397.4.
실시예 17
{(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(5-플루오로-2-메틸-6-{메틸[2-(메틸옥시)에틸]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}히드록시포름아미드
Figure pat00045
{(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(5-플루오로-2-메틸-6-{메틸[2-(메틸옥시)에틸]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 시판되는 N-(2-메톡시에틸)메틸아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 427.2.
실시예 18
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[에틸(메틸)아미노]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00046
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[에틸(메틸)아미노]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 시판되는 N-에틸메틸아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 397.4.
실시예 19
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(2S)-2-(히드록시메틸)-1-피롤리디닐]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00047
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(2S)-2-(히드록시메틸)-1-피롤리디닐]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 시판되는 (S)-(+)-2-(히드록시메틸)피롤리딘을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 440.2.
실시예 20
[(2R)-3-{2-[6-(시클로부틸아미노)-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00048
[(2R)-3-{2-[6-(시클로부틸아미노)-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 시판되는 시클로부틸아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 409.4.
실시예 21
[(2R)-3-{2-[6-(시클로펜틸아미노)-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00049
[(2R)-3-{2-[6-(시클로펜틸아미노)-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 시판되는 시클로펜틸아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 423.1.
실시예 22
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(3R)-3-(히드록시메틸)-1-피롤리디닐]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00050
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(3R)-3-(히드록시메틸)-1-피롤리디닐]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 3(R)-피롤리딘메탄올 [J. of Med. Chem. 1987, 30, 1711-1715]을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 439.2.
실시예 23
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(3S)-3-(히드록시메틸)-1-피롤리디닐]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00051
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(3S)-3-(히드록시메틸)-1-피롤리디닐]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 3(S)-피롤리딘메탄올 [J. of Med. Chem. 1987, 30, 1711-1715]을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 439.2.
실시예 24
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00052
파트 A:
N-(페닐메틸)-D-세린
WO 2005058245의 절차에 따라, MeOH (280 mL) 중 D-세린 메틸 에스테르 히드로클로라이드 (98.84 g, 635.3 mmol)의 혼합물을 10℃로 냉각시켰다. 상기 혼합물에 트리에틸아민 (88.5 mL, 635.0 mmol)을 서서히 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온으로 가온하고, 생성된 용액을 10℃로 냉각시켰다. 상기 용액에 벤즈알데히드 (64 mL, 630.2 mmol)를 첨가하고, 상기 용액을 30분 동안 교반하였다. 상기 용액에 수소화붕소나트륨 (24.03 g, 635.2 mmol)을 30분에 걸쳐 조금씩 첨가하고, 상기 혼합물을 30분 더 교반하였다. 별도의 플라스크에서, MeOH (114 mL)를 물 (170 mL)에 첨가하고, 상기 용액에 물 (155 mL) 중 NaOH (77.25 g, 1931 mmol)의 용액을 첨가하였다. 상기 용액을 15℃로 냉각하고, 상기 NaOH-물-MeOH 용액에 15분에 걸쳐 환원성 아미노화 혼합물을 서서히 첨가하였다. 상기 용액을 교반하고, 30분에 걸쳐 실온으로 가온하여 물 (170 mL)을 첨가한 후에 충분한 6 N 수성 HCl을 첨가하여 pH를 9.5로 조정하였다. 상기 용액을 EtOAc (2×60 mL)로 세척하고, 충분한 6 N 수성 HCl을 첨가하여 pH를 6.5로 조정하였다. 상기 혼합물을 0℃로 냉각시켜 밤새 유지시켰다. 생성된 고체를 진공 여과로 수집하고 물 (2×200 mL)로 세척한 후에 헵탄 (2×200 mL)으로 세척하였다. 백색 고체를 40℃에서 고진공하에 3일 동안 건조시켜 N-(페닐메틸)-D-세린을 수득하였다 (79.51 g, 64％). LCMS: (M+H)+: 196.1.
파트 B:
(3R)-5-옥소-4-(페닐메틸)-3-모르폴린카르복실산
WO 2005058245의 절차에 따라, THF (485 mL) 중 N-(페닐메틸)-D-세린 (79.51 g, 407.3 mmol)의 용액을 0℃로 냉각시키고, 물 (485 mL) 중 K2CO3 (168.87 g, 1222 mmol)의 미리 냉각시킨 0℃ 용액을 첨가하였다. 충분히 교반된 혼합물에 클로로아세틸 클로라이드 (45.4 mL, 570.0 mmol)를 서서히 첨가하면서 내부 온도는 5℃ 미만으로 유지하였다. 상기 혼합물을 0℃에서 30분 동안 격렬하게 교반한 후에 추가 분량의 클로로아세틸 클로라이드 (4.54 mL, 57.0 mmol)를 서서히 첨가하였다. 상기 혼합물을 30분 더 0℃에서 교반하였다. 상기 혼합물에 충분한 양의 미리 냉각시킨 0℃ 수성 NaOH (50％ w/w)를 첨가하여 pH > 13.5로 조정하면서 내부 온도는 5℃ 내지 10℃로 유지하였다. 상기 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반한 후에 20℃로 가온시켰다. 상기 혼합물을 헵탄 (165 mL)으로 세척한 후에 두번째 분량의 신선한 헵탄 (240 mL)으로 세척하였다. 수성 상을 0℃로 냉각시키고, 진한 수성 HCl을 사용하여 pH < 2로 조정하면서 내부 온도는 10℃ 미만으로 유지하였다. 상기 혼합물을 0℃ 냉동고에 밤새 넣어두고, 고체를 진공 여과로 수집하였다. 상기 고체를 물 (2×300 mL)로 세척하고 진공하에 42℃에서 밤새 건조시켰다. 생성된 (3R)-5-옥소-4-(페닐메틸)-3-모르폴린카르복실산 (72.20 g, 75％)을 백색 고체로서 단리하였다. LCMS: (M+H)+: 236.1.
파트 C:
(3R)-5-옥소-N,4-비스(페닐메틸)-3-모르폴린카르복스아미드
DCM (990 mL) 중 (3R)-5-옥소-4-(페닐메틸)-3-모르폴린카르복실산 (69.67 g, 296.2 mmol) 및 1-히드록시벤조트리아졸 (48.01 g, 355.4 mmol)의 혼합물을 0℃로 냉각시켰다. 상기 혼합물에 4-메틸모르폴린 (163 mL, 1483 mmol), 벤질 아민 (35.6 mL, 325.9 mmol) 및 EDC (62.46 g, 325.8 mmol)를 첨가하였다. 황색 용액을 실온에서 밤새 교반한 후에 물 (500 mL), 6 N 수성 HCl (300 mL) 및 물 (200 mL)로 세척하였다. 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켜서 조 (3R)-5-옥소-N,4-비스(페닐메틸)-3-모르폴린카르복스아미드를 황색 발포체로서 수득하였다 (97.05 g, >100％ 조 수율). LCMS: (M+H)+: 325.2.
파트 D:
1-페닐-N-{[(3S)-4-(페닐메틸)-3-모르폴리닐]메틸}메탄아민
PhMe (750 mL) 중 (3R)-5-옥소-N,4-비스(페닐메틸)-3-모르폴린카르복스아미드 (96.07 g으로 추정됨, 296.2 mmol)의 O℃ 용액에 Red-Al (PhMe 중 65％ w/w, 645 mL)를 첨가 깔때기를 통해 첨가하였다. Re-Al을 대략 50 mL 첨가한 후에 생성된 혼합물을 실온으로 가온시키고, 이후에는 나머지 Red-Al을 30분에 걸쳐 첨가하였다. 이어서, 상기 혼합물을 50℃에서 가열하고 밤새 교반하였다. 상기 용액을 0℃로 냉각시키고, 1 N 수성 NaOH (50 mL)를 서서히 적가하여 상기 반응물을 켄칭시켰다. 이어서, 추가 분량의 1 N 수성 NaOH (500 mL)를 첨가한 후에 Et2O (200 mL)를 첨가하였다. 상들을 분리하고, 유기 상을 신선한 1 N 수성 NaOH (400 mL)로 세척하였다. 합한 수성 상을 신선한 4:1 PhMe-Et2O (250 mL)로 추출하고, 합한 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켜서 1-페닐-N-{[(3S)-4-(페닐메틸)-3-모르폴리닐]메틸}메탄아민을 황색 오일로서 수득하였고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 297.1.
파트 E:
에틸옥소((페닐메틸){[(3S)-4-(페닐메틸)-3-모르폴리닐]메틸}아미노)아세테이트
THF (1000 mL) 중 1-페닐-N-{[(3S)-4-(페닐메틸)-3-모르폴리닐]메틸}메탄아민 (87.79 g으로 추정됨, 296.2 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (67.1 mL, 385.2 mmol)의 용액을 0℃로 냉각시켰다. 상기 용액에 에틸 클로로(옥소)아세테이트 (36.3 mL, 326.2 mmol)를 첨가 깔때기를 통해 적가하였다. 생성된 혼합물이 1시간 동안 교반되고 실온으로 가온되도록 하였다. 이어서, 용매를 진공하에 대략 20％ 부피로 제거하고, 잔류물을 EtOAc (600 mL), 물 (100 mL) 및 포화 수성 NaHCO3 (500 mL) 사이에 분배하였다. 수성 상을 신선한 분량의 EtOAc (200 mL)로 추출하고, 합한 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 이어서, 잔류물을 EtOH (100 mL)로 공비증류시켜서 에틸 옥소((페닐메틸){[(3S)-4-(페닐메틸)-3-모르폴리닐]메틸}아미노)아세테이트를 황색 오일로서 수득하였고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 397.2.
파트 F:
(9aS)-8-(페닐메틸)헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-6,7-디온
EtOH (1000 mL) 중 에틸 옥소((페닐메틸){[(3S)-4-(페닐메틸)-3-모르폴리닐]메틸}아미노)아세테이트 (117.43 g으로 추정됨, 296.2 mmol)의 용액에 10％ Pd/C (23 g)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 벌룬 압력하에서 5일 동안 수소화한 후에 유리 섬유 필터를 통해 EtOH 세척액을 사용하여 여과하였다. 이어서, 상기 용액을 진공하에 농축시키고 EtOH-EtOAc로부터 결정화하여 대략 15 g의 백색 고체를 수득하였다. 이어서, Pd/C 필터 케이크를 MeOH (600 mL)로 슬러리화하고, 상기 혼합물을 유리 섬유 필터를 통해 MeOH 세척액을 사용하여 여과하였다. 이어서, 상기 용액을 진공하에 농축시키고 EtOH-EtOAc로부터 결정화하여 백색 고체를 수득하였고, 이것을 처음 배치(batch)의 고체와 합하였다. 이어서, 합한 모액을 진공하에 농축시키고 EtOH-EtOAc로부터 결정화하여 백색 고체를 수득하였고, 이것을 첫번째 2개 배치의 고체와 합하여 (9aS)-8-(페닐메틸)헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-6,7-디온을 수득하였다 (39.97 g, 4개 단계 동안 52％ 수율). LCMS: (M+H)+: 261.1.
파트 G:
(9aS)-8-(페닐메틸)옥타히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진
Et2O (406 mL) 중 (9aS)-8-(페닐메틸)헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-6,7-디온의 2개의 합한 배치 (합한 총량 42.29 g, 162.5 mmol)의 0℃ 혼합물에 Et2O 중 1 M LiAlH4 (406 mL, 406 mmol)를 적하 깔때기를 통해 40분에 걸쳐 첨가하였다. 이어서, 상기 혼합물을 35℃로 가온하고 6일 동안 교반하였다. 이어서, 상기 혼합물을 0℃로 냉각시키고, EtOAc (100 mL)를 서서히 첨가한 후에 물 (20 mL), 15％ 수성 NaOH (20 mL) 및 물 (60 mL)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 1시간 동안 격렬하게 교반한 후에 EtOAc (500 mL)로 희석하였다. 상기 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 1 N 수성 NaOH (500 mL)로 희석하여 Et2O (2×200 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상 (여액 및 Et2O 추출액)을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시키고, MeOH (100 mL)로 공비증류하여 밤새 고진공하에 건조시켰다. 생성된 무색 오일을 (9aS)-8-(페닐메틸)헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-6,7-디온 (0.3047 g, 1.1 mmol)으로부터 동일한 방식으로 제조한 두번째 배치의 생성물과 합하여 조 (9aS)-8-(페닐메틸)옥타히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진을 수득하였다 (합한 총량 38.59 g, >100％ 조 수율). LCMS: (M+H)+: 233.1.
파트 H:
(9aS)-옥타히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진 디히드로클로라이드
MeOH (330 mL) 중 (9aS)-8-(페닐메틸)옥타히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진 (38.02 g으로 추정됨, 163.6 mmol)의 용액에 6 N 수성 HCl (55 mL, 330 mmol) 및 10％ Pd/C (3.80 g)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 밤새 수소화한 후에 유리 섬유 필터를 통해 여과하였다. 필터 케이크를 MeOH로 세척하고, 합한 용액을 진공하에 농축시키고, MeOH (4×150 mL)로 공비증류하여 (9aS)-옥타히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진 디히드로클로라이드를 적색 오일로서 수득하였고 (34.78 g, 2개 단계 동안 99％ 수율), 이것은 고진공하에 고화되었다. LCMS: (M+H)+: 142.9.
파트 I:
(9aS)-8-(6-클로로-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐)옥타히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진
DCM (360 mL) 중 (9aS)-옥타히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진 디히드로클로라이드 (23.28 g, 108.2 mmol)의 혼합물에 4,6-디클로로-5-플루오로-2-메틸피리미딘 (19.59 g, 108.2 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (68 mL, 390.4 mmol)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 2시간 동안 교반하고, 생성된 용액을 DCM (100 mL)으로 희석하고 포화 수성 NaHCO3 (200 mL)으로 세척하였다. 수성 상을 신선한 분량의 DCM (100 mL)으로 추출하고, 상기 유기 상을 포화 수성 NaHCO3 (50 mL)으로 세척하였다. 합한 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켜서 (9aS)-8-(6-클로로-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐)옥타히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진을 밝은 황색 오일로서 수득하였고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 287.1.
파트 J:
(9aS)-8-(5-플루오로-6-히드라지노-2-메틸-4-피리미디닐)옥타히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진
디옥산 (430 mL) 중 (9aS)-8-(6-클로로-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐)옥타히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진 (31.03 g으로 추정됨, 108.2 mmol)의 용액에 히드라진 일수화물 (31 mL)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 80℃에서 밤새 가열하며 교반한 후에 85℃에서 7시간 동안 가열하며 교반하였다. 상기 혼합물을 실온으로 냉각시키고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 DCM (500 mL) 중에 용해하고, 포화 수성 NaHCO3 (200 mL)으로 세척하였다. 수성 상을 신선한 분량의 DCM (100 mL)으로 추출하고, 상기 유기 상을 포화 수성 NaHCO3 (100 mL)으로 세척하였다. 합한 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시키고, 고진공하에 밤새 건조시켜서 (9aS)-8-(5-플루오로-6-히드라지노-2-메틸-4-피리미디닐)옥타히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진을 밝은 황색 고체로서 수득하였다 (27.98 g, 2개 단계 동안 92％ 수율). LCMS: (M+H)+: 283.3.
파트 K:
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드
DMF (230 mL) 중 (2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산, N,N-디이소프로필에틸아민 염, 이소프로판올 용매화물 (33.64 g, 68.0 mmol)의 용액에 (9aS)-8-(5-플루오로-6-히드라지노-2-메틸-4-피리미디닐)옥타히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진 (20.16 g, 71.4 mmol), N-메틸모르폴린 (30 mL, 273 mmol), 1-히드록시-7-아자벤조트리아졸 (11.10 g, 81.6 mmol) 및 EDC (15.64 g, 81.6 mmol)를 첨가하였다. 상기 용액을 밤새 교반한 후에 Et2O (500 mL)로 희석하였다. 상기 혼합물을 물 (2×200 mL)로 세척하고, 합한 수성 상을 신선한 분량의 Et2O (100 mL)로 추출하였다. 이어서, 상기 Et2O 상을 물 (50 mL)로 세척하였다. 이러한 추출-세척 절차를 6회 반복한 후에 전체 합한 유기 상을 DCM (250 mL)으로 희석하였다. 이어서, 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켜서 조 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드를 밝은 황색 발포체로서 수득하였다 (42.32 g, > 100％ 조 수율). LCMS: (M+H)+: 570.3.
파트 L:
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
메탄올 (225 mL) 중 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 (38.74 g으로 추정됨, 68.0 mmol)의 용액에 10％ Pd/C (5.81 g)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 벌룬 압력하에서 4시간 동안 수소화한 후에 유리 섬유 필터를 통해 MeOH 세척액을 사용하여 여과하였다. 생성된 용액을 진공하에 대략 10％ 부피로 농축시켜 EtOAc (400 mL)로 희석하고 진공하에 대략 30％ 부피로 농축시켰다. 생성된 고체를 진공 여과로 수집하고 EtOAc로 세척하였다. 모액 및 EtOAc 세척액을 진공하에 대략 10％ 부피로 농축시키고, 생성된 고체를 진공 여과로 수집하고 EtOAc로 세척하였다. 2개 수집물의 고체를 합하고 50℃에서 16시간 동안 고진공하에 건조시켜서 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 백색 고체로서 수득하였다 (25.48 g, 2개 단계 동안 78％ 수율). LCMS: (M+H)+: 480.1.
별법의 절차
MeOH (350 mL) 중 조 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 (39.73 g으로 추정됨, 69.74 mmol)의 용액에 10％ Pd/C (50％ 물, 7.9 g)를 첨가하였다. 상기 현탁액을 벌룬 압력하에서 3시간 동안 수소화한 후에 2개의 유리 섬유 필터를 통해 MeOH 세척액을 사용하여 여과하였다. 생성된 용액을 진공하에 대략 70 mL 부피로 농축시킨 후에 EtOAc (500 mL)로 희석하였다. 상기 용액을 진공하에 농축시켜서 대략 100 mL의 용매를 제거하였다. 생성된 고체를 진공 여과로 수집하고, EtOAc로 충분히 세척한 후에 헥산으로 충분히 세척하였다. 모액을 진공하에 농축시킨 후에 EtOAc (200 mL)로 희석하였다. 상기 혼합물을 진공하에 대략 50％ 부피로 농축시키고, 생성된 고체를 진공 여과로 수집하고 EtOAc로 충분히 세척한 후에 헥산으로 충분히 세척하였다. 2개 배치의 고체를 합하고 고진공하에 밤새 두었다. 이어서, 상기 물질에 유사한 방법으로 제조한 대략 466 mg의 물질을 첨가하고, 합한 배치를 50℃에서 고진공하에 밤새 가열하여 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 수득하였다 (28.27 g, 2개 단계 동안 83％ 수율). LC/MS: (M+H)+: 480.3. 생성된 고체를 분석적으로 특징규명하였고, 다형질 형태, 형태 1인 것으로 밝혀졌다.
실시예 25
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[2-에틸-5-플루오로-6-(4-메틸-1-피페라지닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00053
파트 A:
2-에틸-5-플루오로-4-히드라지노-6-(4-메틸-1-피페라지닐)피리미딘
1,4-디옥산 (10 mL) 및 MeOH (2 mL)의 빙냉 용액에 4,6-디클로로-2-에틸-5-플루오로피리미딘 (1.0 g, 5.13 mmol), N-메틸피페라진 (626 ㎕, 5.64 mmol) 및 DIPEA (1.97 mL, 12.4 mmol)를 순차적으로 첨가하였다. 이어서, 상기 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 완료 후, 무수 히드라진 (1.29 mL, 99 mmol)을 첨가하였다. 생성된 현탁액을 중간체가 소모될 때까지 90℃의 오일조에서 2시간 동안 가열하였다. 용매를 증발시켜 밝은 황색 고체를 수득하였다. 상기 고체를 CH2Cl2 (100 mL) 중에 용해하고, 1 N HCl로 세척하였다. 수성 상을 DCM (50 mL)으로 역추출하였다. 합한 유기 층을 무수 Na2SO4에서 건조시켰다. 용매를 증발시켜 밝은 황색 잔류물을 원하는 생성물로서 수득하였다 (890 mg, 69％).
파트 B:
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[2-에틸-5-플루오로-6-(4-메틸-1-피페라지닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)[(페닐메틸)옥시]포름아미드
DMF (120 mL) 중 (2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산 (12.4 g, 40.6 mmol)의 용액을 2-에틸-5-플루오로-4-히드라지노-6-(4-메틸-1-피페라지닐)피리미딘 (9.6 g, 37.8 mmol), HOAt (5.66 g, 41.58 mmol) 및 EDC (7.97 g, 41.58 mmol)의 혼합물에 첨가하였다. 생성된 용액을 NMM (9.1 mL, 83.2 mmol)으로 처리하고 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 완료 후, 물 200 mL를 첨가하고, 상기 용액을 에테르 200 mL로 3회 추출하였다. 합한 유기 층을 물 (200 mL) 및 염수 (100 mL)로 세척한 후에 무수 Na2SO4에서 건조시켰다. 용매를 증발시켜서 밝은 황색 유리질 고체를 순수한 생성물로서 수득하였다 (17.1 g, 84％).
파트 C:
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[2-에틸-5-플루오로-6-(4-메틸-1-피페라지닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
MeOH (400 mL) 중에 현탁시킨 ((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[2-에틸-5-플루오로-6-(4-메틸-1-피페라지닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)[(페닐메틸)옥시]포름아미드 (17.1 g, 31.61 mmol) 및 10％ Pd/C (4 g)의 혼합물을 H2 기체 벌룬하에 교반하였다. 2시간 후에 신선한 10％ Pd/C 2 g을 추가로 첨가하였다. 생성된 현탁액을 출발 물질이 소모될 때까지 1.5시간 더 수소 대기하에서 교반하였다. Pd/C를 셀라이트를 통한 여과로 제거하면서 MeOH 및 CH2Cl2로 세척하였다. 여액을 진공하에 농축시켰다. 증발이 진행됨에 따라, 생성물은 잔류 용액으로부터 결정화되었다. 액체가 약 50 mL만이 남을 때까지 계속 증발시켰다. 이어서, 상기 결정을 여과로 수집하여 생성물을 백색 고체로서 수득하였다 (10.0 g). 여액을 추가로 증발시켜서 두번째 수집물의 결정을 순수한 생성물로서 수득하였다 (1.5 g). 동일한 방법으로 세번째 수집물을 수집하였다. ((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[2-에틸-5-플루오로-6-(4-메틸-1-피페라지닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드의 합한 수율은 86％ (12.2 g)였다. LCMS: (M+H)+: 452.1.
실시예 26
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[2-에틸-5-플루오로-6-(2-이속사졸리디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
Figure pat00054
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[2-에틸-5-플루오로-6-(2-이속사졸리디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드를 일반적인 절차 B에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 대신에 시판되는 이속사졸리딘을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 425.2.
실시예 27
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(3R)-3-(디메틸아미노)-1-피롤리디닐]-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
Figure pat00055
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(3R)-3-(디메틸아미노)-1-피롤리디닐]-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드를 일반적인 절차 B에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 대신에 시판되는 (3R)-(+)-3-(디메틸아미노)피롤리딘을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 466.2.
실시예 28
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(3S)-3-(디메틸아미노)-1-피롤리디닐]-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
Figure pat00056
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(3S)-3-(디메틸아미노)-1-피롤리디닐]-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드를 일반적인 절차 B에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 대신에 시판되는 (3S)-(-)-3-(디메틸아미노)피롤리딘을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 466.2.
실시예 29
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{2-에틸-5-플루오로-6-[(3S)-3-히드록시-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
Figure pat00057
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{2-에틸-5-플루오로-6-[(3S)-3-히드록시-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드를 일반적인 절차 B에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 대신에 시판되는 (S)-3-히드록시피롤리딘을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 439.2.
실시예 30
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{2-에틸-5-플루오로-6-[(3R)-3-히드록시-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
Figure pat00058
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{2-에틸-5-플루오로-6-[(3R)-3-히드록시-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드를 일반적인 절차 B에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 대신에 시판되는 (R)-3-히드록시피롤리딘을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 439.0.
실시예 31
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-(시클로프로필아미노)-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
Figure pat00059
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-(시클로프로필아미노)-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드를 일반적인 절차 B에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 대신에 시판되는 시클로프로필아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 409.2.
실시예 32
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[2-에틸-6-(4-에틸-1-피페라지닐)-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
Figure pat00060
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[2-에틸-6-(4-에틸-1-피페라지닐)-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드를 일반적인 절차 B에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 대신에 시판되는 N-에틸피페라진을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 466.5.
실시예 33
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{2-에틸-5-플루오로-6-[4-(2-히드록시에틸)-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
Figure pat00061
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{2-에틸-5-플루오로-6-[4-(2-히드록시에틸)-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드를 일반적인 절차 B에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 대신에 시판되는 1-(2-히드록시에틸)피페라진을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 482.2.
실시예 34
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[2-에틸-5-플루오로-6-(메틸아미노)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
Figure pat00062
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[2-에틸-5-플루오로-6-(메틸아미노)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드를 일반적인 절차 B에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 대신에 시판되는 메틸아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 383.4.
실시예 35
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[2-에틸-6-(에틸아미노)-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
Figure pat00063
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[2-에틸-6-(에틸아미노)-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드를 일반적인 절차 B에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 대신에 시판되는 에틸아민을 사용하였다. LCMS:(M+H)+: 397.4.
실시예 36
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{2-에틸-5-플루오로-6-[4-(1-메틸에틸)-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
Figure pat00064
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{2-에틸-5-플루오로-6-[4-(1-메틸에틸)-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드를 일반적인 절차 B에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 대신에 시판되는 1-이소프로필피페라진을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 480.
실시예 37
1-(6-{2-[(2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(히드록시)아미노]메틸}프로파노일]히드라지노}-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐)-N,N-디메틸-L-프롤린아미드
Figure pat00065
1-(6-{2-[(2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(히드록시)아미노]메틸}프로파노일]히드라지노}-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐)-N,N-디메틸-L-프롤린아미드를 일반적인 절차 B에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 대신에 시판되는 N,N-디메틸-L-프롤린아미드를 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 494.2.
실시예 38
N-{(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(6-{[2-(디메틸아미노)에틸](메틸)아미노}-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}-N-히드록시포름아미드
Figure pat00066
N-{(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(6-{[2-(디메틸아미노)에틸](메틸)아미노}-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}-N-히드록시포름아미드를 일반적인 절차 B에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 대신에 시판되는 N,N,N'-트리메틸에틸렌디아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 454.2.
실시예 39
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(3R)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
Figure pat00067
파트 A:
(R)-1,2-디메틸피페라진, 디히드로클로라이드 염
시판되는 1,1-디메틸에틸 (3R)-3-메틸-1-피페라진카르복실레이트 (1.0 g, 5.0 mmol), 시아노수소화붕소나트륨 (1.57 g, 25 mmol) 및 포름알데히드 (H2O 중 37％, 2.25 mL, 30 mmol)를 MeOH (50 mL) 중에 용해하고 교반하였다. 아세트산 (1.75 mL, 30 mmol)을 적가하고, 생성된 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 이 시간 후에, 용매를 증발시키고 잔류물을 수성 NaHCO3 용액 중에 취하여 디에틸 에테르로 3회 추출하였다. 합한 에테르 층으로부터 용매를 제거한 후, 조 1,1-디메틸에틸 (3R)-3,4-디메틸-1-피페라진카르복실레이트를 에탄올 중에 용해하고 진한 HCl 2 mL로 처리하였다. 형성된 침전물을 여과한 후에 에탄올 및 물로부터 재결정화하여 (R)-1,2-디메틸피페라진, 디히드로클로라이드 염을 수득하였다 (1.27 g).
파트 B:
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(3R)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(3R)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드를 일반적인 절차 B에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 대신에 (R)-1,2-디메틸피페라진, 디히드로클로라이드 염을 사용하고 DIPEA를 3.5 당량 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 466.2.
실시예 40
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(3S)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
Figure pat00068
파트 A:
(S)-1,2-디메틸피페라진, 디히드로클로라이드 염
실시예 39에 기재한 바와 같이, (S)-1,2-디메틸피페라진 디히드로클로라이드는 (R)-1,2-디메틸피페라진 디히드로클로라이드와 유사한 방식으로 제조될 수 있다.
파트 B:
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(3S)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(3S)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드를 일반적인 절차 B에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 대신에 (S)-1,2-디메틸피페라진 디히드로클로라이드를 사용하고 DIPEA를 3.5 당량 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 466.2.
실시예 41
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-(4-메틸-1-피페라지닐)-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00069
파트 A:
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-(4-메틸-1-피페라지닐)-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드
밀폐된 튜브에서 {(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[4-클로로-5-플루오로-2-(메틸티오)-6-피리미디닐]히드라진}-3-옥소프로필}(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드 (11.60 g, 23.67 mmol), N-메틸 피페라진 (2.89 mL, 26.00 mmol, 1.1 당량) 및 N,N-디이소프로필 에틸아민 (4.95 mL, 28.40 mmol, 1.2 당량)을 무수 DMSO (100 mL) 중에 용해하고, 상기 혼합물을 68℃로 가열하며 3일 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물 (300 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트/헥산 (2:1, 2×300 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 용액을 물 (3×200 mL)로 세척하여 건조 (Na2SO4)시키고 농축시켜서 ((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-(4-메틸-1-피페라지닐)-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드를 적색 발포성 고체로서 수득하였다 (12.5 g, 95.4％).
파트 B:
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-(4-메틸-1-피페라지닐)-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-(4-메틸-1-피페라지닐)-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드 (2.5 g, 22.58 mmol)를 아세트산/물 (4:1, 1 L) 중에 용해하고, 실온에서 3일 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 건조될 때까지 농축시키고 톨루엔 (20 mL)으로 동시증발시킨 후에 메탄올 (50 mL)/트리에틸아민 (20 mL)으로 동시증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (120 mL) 및 트리에틸아민 (20 mL) 중에 용해하고 길슨 HPLC (10％→95％ 아세토니트릴/물, 8분 구배 시간)로 정제하여 ((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-(4-메틸-1-피페라지닐)-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 적색빛 발포성 고체로서 수득하였다 (6.90 g, 65.1％). LCMS: (M+H)+: 470.2.
실시예 42
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-(에틸아미노)-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00070
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-(에틸아미노)-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 일반적인 절차 C에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 히드로클로라이드 대신에 시판되는 에틸아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 415.2.
실시예 43
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-(메틸아미노)-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00071
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-(메틸아미노)-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 일반적인 절차 C에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 히드로클로라이드 대신에 시판되는 메틸아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 401.1.
실시예 44
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-[(3S)-3-히드록시-1-피롤리디닐]-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00072
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-[(3S)-3-히드록시-1-피롤리디닐]-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 일반적인 절차 C에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 히드로클로라이드 대신에 시판되는 (S)-3-히드록시피롤리딘을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 457.4.
실시예 45
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-(디메틸아미노)-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00073
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-(디메틸아미노)-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 일반적인 절차 C에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 히드로클로라이드 대신에 시판되는 디메틸아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 415.5.
실시예 46
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-(메틸티오)-6-(프로필아미노)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00074
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-(메틸티오)-6-(프로필아미노)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 일반적인 절차 C에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 히드로클로라이드 대신에 시판되는 N-프로필아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 429.3.
실시예 47
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-{[2-(메틸옥시)에틸]아미노}-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00075
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-{[2-(메틸옥시)에틸]아미노}-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 일반적인 절차 C에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 히드로클로라이드 대신에 시판되는 메톡시에틸아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 445.2.
실시예 48
1-[6-[2-((2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(히드록시)아미노]메틸}프로파노일)히드라지노]-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]-N,N-디메틸-L-프롤린아미드
Figure pat00076
1-[6-[2-((2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(히드록시)아미노]메틸}프로파노일)히드라지노]-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]-N,N-디메틸-L-프롤린아미드를 일반적인 절차 C에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 히드로클로라이드 대신에 시판되는 N,N-디메틸-L-프롤린아미드를 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 512.3.
실시예 49
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-[(3R)-3-히드록시-1-피롤리디닐]-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00077
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-[(3R)-3-히드록시-1-피롤리디닐]-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 일반적인 절차 C에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 히드로클로라이드 대신에 시판되는 (R)-3-히드록시피롤리딘을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 457.2.
실시예 50
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-[(3R)-3-(디메틸아미노)-1-피롤리디닐]-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00078
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-[(3R)-3-(디메틸아미노)-1-피롤리디닐]-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 일반적인 절차 C에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 히드로클로라이드 대신에 시판되는 (3R)-(+)-3-(디메틸아미노)피롤리딘을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 484.4.
실시예 51
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-(4-에틸-1-피페라지닐)-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00079
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-(4-에틸-1-피페라지닐)-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 일반적인 절차 C에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 히드로클로라이드 대신에 시판되는 N-에틸피페라진을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 484.2.
실시예 52
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(4-모르폴리닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00080
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(4-모르폴리닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 D에 따라 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 시판되는 모르폴린을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 445.2.
실시예 53
[(2R)-3-{2-[6-(1-아제티디닐)-2-클로로-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00081
[(2R)-3-{2-[6-(1-아제티디닐)-2-클로로-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 D에 따라 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 시판되는 아제티딘 히드로클로라이드를 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 415.2.
실시예 54
[(2R)-3-{2-[2-클로로-6-(4-에틸-1-피페라지닐)-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00082
[(2R)-3-{2-[2-클로로-6-(4-에틸-1-피페라지닐)-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 D에 따라 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 시판되는 N-에틸피페라진을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 472.2.
실시예 55
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2-히드록시에틸)(메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00083
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2-히드록시에틸)(메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 D에 따라 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 시판되는 N-2-히드록시에틸-N-메틸아민 을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 433.6.
실시예 56
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[3-(메틸옥시)-1-아제티디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00084
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[3-(메틸옥시)-1-아제티디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 D에 따라 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 시판되는 3-메톡시아제티딘 히드로클로라이드를 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 445.7.
실시예 57
[(2R)-3-[2-(2-클로로-5-플루오로-6-{메틸[2-(메틸옥시)에틸]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00085
[(2R)-3-[2-(2-클로로-5-플루오로-6-{메틸[2-(메틸옥시)에틸]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 D에 따라 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 시판되는 N-메틸-2-(메틸옥시)에탄아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 447.5.
실시예 58
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(8aS)-헥사히드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00086
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(8aS)-헥사히드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 D에 따라 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 시판되는 (8aS)-옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 484.4.
실시예 59
1-{6-클로로-2-[2-((2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(히드록시)아미노]메틸}프로파노일)히드라지노]-5-플루오로-4-피리미디닐}-N,N-디메틸-L-프롤린아미드
Figure pat00087
1-{6-클로로-2-[2-((2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(히드록시)아미노]메틸}프로파노일)히드라지노]-5-플루오로-4-피리미디닐}-N,N-디메틸-L-프롤린아미드를 일반적인 절차 D에 따라 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 시판되는 N,N-디메틸-L-프롤린아미드를 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 500.1.
실시예 60
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(프로필아미노)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00088
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(프로필아미노)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 D에 따라 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 프로필아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 417.1.
실시예 61
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(3S)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00089
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(3S)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 D에 따라 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 (S)-1,2-디메틸피페라진 디히드로클로라이드 (실시예 40)를 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 472.2.
실시예 62
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(3R)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00090
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(3R)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 D에 따라 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 (R)-1,2-디메틸피페라진 디히드로클로라이드 (실시예 39)를 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 472.2.
실시예 63
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00091
파트 A:
메틸 N-{[(페닐메틸)옥시]카르보닐}-D-알라닐-N-메틸글리시네이트
DCM (1100 mL) 중 N-{[(페닐메틸)옥시]카르보닐}-D-알라닌 (133.53 g, 598.2 mmol)의 혼합물에 분말화시킨 사르코신 메틸 에스테르 히드로클로라이드 (83.49 g, 598.2 mmol), 1-히드록시벤조트리아졸 (80.81 g, 598.1 mmol) 및 4-메틸모르폴린 (242 mL, 2201 mmol)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 10분 동안 교반한 후에 EDC (114.68 g, 598.2 mmol)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 밤새 교반한 후에 물 (500 mL), 1 N 수성 HCl (2×300 mL) 및 염수 (300 mL)로 세척하였다. 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켜서 조 메틸 N-{[(페닐메틸)옥시]카르보닐}-D-알라닐-N-메틸글리시네이트를 황색 오일로서 수득하였다 (162.35 g, 88％ 수율). LCMS: (M+H)+: 309.0.
파트 B:
(3R)-1,3-디메틸-2,5-피페라진디온
DCM (210 mL) 중 3개의 합한 배치의 메틸 N-{[(페닐메틸)옥시]카르보닐}-D-알라닐-N-메틸글리시네이트 (합한 총량 489.09 g, 1586 mmol)의 슬러리에 MeOH (1000 mL) 및 10％ Pd/C (50 g)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 50 psi에서 밤새 수소화한 후에 추가 분량의 10％ Pd/C (5 g)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 50 psi에서 6시간 더 수소화한 후에 여과하여 MeOH 및 DCM으로 세척하였다. 생성된 투명한 액체를 증발시켜서 투명한 오일을 수득하였고, 이것은 이후에 방시치에 고화되어 (3R)-1,3-디메틸-2,5-피페라진디온을 옅은 황색빛의 고체로서 생성하였다 (214.0 g, 95％ 수율). LCMS: (M+H)+: 143.0.
파트 C:
(3R)-1,3-디메틸피페라진 디히드로클로라이드
THF (660 mL) 중 (3R)-1,3-디메틸-2,5-피페라진디온 (93.74 g, 659.4 mmol)의 0℃ 현탁액에 LiAlH4 (75.1 g, 1979 mmol)를 1시간에 걸쳐 조금씩 첨가하였다. 이어서, 상기 혼합물을 65℃에서 가열하고 2.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 상기 혼합물을 0℃로 냉각시키고, Na2SO4·10 H2O (75 g)를 서서히 첨가한 후에 1 N 수성 NaOH (1000 mL)를 서서히 첨가하였다. 상기 혼합물을 CHCl3 (6×1000 mL)으로 추출하고, 합한 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시키고 여과하였다. 생성된 용액에 디옥산 중 4 N HCl (367 mL)을 첨가하고, 상기 혼합물을 밤새 교반하였다. 이어서, 상기 혼합물을 MeOH (2000 mL)로 희석하고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 MeOH (2×1000 mL)로 공비증류하고 고진공하에 밤새 두어 (3R)-1,3-디메틸피페라진 디히드로클로라이드를 갈색 고무로서 수득하였다 (102.22 g, 83％ 수율). LCMS: (M+H)+: 115.1.
파트 D:
트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-6-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트
(3R)-1,3-디메틸피페라진 디히드로클로라이드 (102.22 g, 546.3 mmol)에 DMF (900 mL) 중 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-(2,6-디클로로-5-플루오로-4-피리미디닐)-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트 (271.71 g, 546.3 mmol)의 용액을 첨가하였다. 상기 혼합물을 0℃로 냉각시키고, N,N-디이소프로필에틸아민 (295 mL, 1694 mmol)을 첨가하였다. 상기 용액을 교반하고 실온으로 밤새 가온시켰다. 이어서, 상기 용액을 Et2O (1000 mL)로 희석하고 물 (1000 mL)로 세척하였다. 수성 상을 신선한 분량의 Et2O (1000 mL)로 추출하고, 합한 유기 상을 물 (2×500 mL)로 세척하였다. 이어서, 유기 상을 DCM (1000 mL)으로 희석하고 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카겔 플러그 (헥산 중 30％ EtOAc; 1％ Et3N)를 통해 여과하였다. 이어서, 상기 용액을 진공하에 농축시키고, 잔류물을 MeOH로 공비증류시켰다. 잔류물을 MeOH (1000 mL)로 희석하고, 물을 첨가하여 결정화시켰다. 생성된 고체를 진공 여과로 수집하고 물 중 10％ MeOH로 세척하였다. 생성된 황색 고체를 50℃에서 고진공하에 건조시켜서 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-6-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트를 밝은 황색 고체로서 수득하였다 (257.34 g, 82％ 수율). LCMS: (M+H)+: 575.2.
파트 E:
2-클로로-4-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-6-히드라지노피리미딘 트리히드로클로라이드
DCM (1870 mL) 중 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-6-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트 (215.28 g, 374.3 mmol)의 용액에 Et2O 중 2 N HCl (1870 mL, 3740 mmol)을 첨가하였다. 상기 용액을 64시간 동안 기계적으로 교반하고, 생성된 현탁액이 침강되도록 하였다. 이어서, 용매 대부분을 경사분리하고, 잔류 고체를 DCM (1000 mL)으로 연화처리하고 진공 여과로 수집하였다. 상기 고체를 DCM으로 세척하고 고진공하에 건조시켜서 2-클로로-4-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-6-히드라지노피리미딘 (트리히드로클로라이드라고 추정됨)을 밝은 황색 분말로서 수득하였다 (138.22 g, 96％ 수율). LCMS: (M+H)+: 275.1.
파트 F:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드
DMF (630 mL) 중 2-클로로-4-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-6-히드라지노피리미딘 (트리히드로클로라이드로 추정됨) (126.70 g, 329.9 mmol) 및 (2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산, N,N-디이소프로필에틸아민 염, 이소프로판올 용매화물 (155.42 g, 314.1 mmol)의 0℃ 혼합물에 4-메틸모르폴린 (240 mL, 2183 mmol)을 첨가한 후에 1-히드록시-7-아자벤조트리아졸 (51.31 g, 377.0 mmol) 및 EDC (72.27 g, 377.0 mmol)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 밤새 교반하고, Et2O (1000 mL)로 희석하고 물 (1000 mL)로 세척하였다. 수성 상을 신선한 분량의 Et2O (1000 mL)로 추출하고, 합한 유기 상을 물 (3×300 mL)로 세척하였다. 합한 수성 상을 신선한 분량의 Et2O (300 mL)로 추출하고, 상기 Et2O 상을 물 (200 mL)로 세척하였다. 전체 합한 유기 상을 DCM (1000 mL)으로 희석하여 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켜서 조 [(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드를 짙은 적색 발포체로서 수득하였다 (193.65 g, >100％ 조 수율). LCMS: (M+H)+: 562.3.
파트 G:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
MeOH (800 mL) 중 조 [(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 (176.57 g으로 추정됨, 314.1 mmol)의 용액에 20％ Pd(OH)2/C (14.13 g)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 30분마다 모니터링하면서 반응이 완료된 것으로 판단될 때까지 (7시간) 벌룬 압력하에서 수소화하였다. 이어서, 상기 혼합물을 유리 섬유 필터를 통해 MeOH 세척액을 사용하여 여과하였다. 생성된 짙은 여액을 진공하에 농축시키고, 정제용 역상 크로마토그래피 (루나(Luna) C18 (2) 컬럼; 10 마이크로미터; 101.6 mm×250 mm; 250 nm UV 검출; 480 mL/분; 40 mg/mL 샘플 농도; 4 g 주입량; 이동상 A: 300 mmol 수성 포름산암모늄 (pH 4.0); 이동상 B: MeCN; 방법: 9분 동안 28％ B, 9분 동안 90％ B, 5분 동안 28％ B)로 정제하였다. 생성물 용액 분획물을 합하고, 수성 NH4OH를 사용하여 pH 6.8로 조정한 후에 다르코(Darco) (조 생성물을 기준으로 하여 50％ 중량의 하중)와 함께 30분 동안 실온에서 교반하였다. 이어서, 상기 용액을 셀라이트를 통해 여과하였다. 여액을 3.5 L 부피로 농축시키고 NH4OH를 사용하여 pH를 5.6에서 8.5로 조정하여 오렌지색 침전물을 수득하였다. 수성 상을 EtOAc로 3회 추출한 후에 합한 유기물을 물과 염수로 세척하였다. 유기물을 건조 (Na2SO4)시켜 여과하고 진공하에 1 L 부피로 농축시켜서 황갈색 침전물을 수득하였다. 동일 부피의 헵탄 (1 L)을 첨가하고, 상기 혼합물을 1시간 동안 0℃로 냉각시켰다. 이어서, 생성물을 헵탄으로 세척하며 여과하여 단리하고, 감압하에 50℃에서 20시간 동안 건조시켜서 [(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 백색 고체로서 수득하였다 (85.5 g, 2개 단계 동안 57％ 수율). LCMS: (M+H)+: 472.2.
실시예 64
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(2S)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00092
파트 A:
(3S)-1,3-디메틸피페라진, 디히드로클로라이드
(3S)-1,3-디메틸피페라진, 디히드로클로라이드를 (3R)-1,3-디메틸피페라진, 디히드로클로라이드 (실시예 63)와 유사한 방식을 이용하되, CBZ-D-알라닌 대신에 CBZ-L-알라닌을 사용하여 제조할 수 있다.
파트 B:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(2S)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 D에 따라 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 (S)-1,3-디메틸피페라진을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 472.2.
실시예 65
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00093
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 E에 따라 제조하되, 파트 A에서 이소프로필 아민 대신에 (9aS)-옥타히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진 디히드로클로라이드 (실시예 24의 파트 A 내지 H에 기재된 바와 같이 제조할 수 있음)를 사용하고, 파트 B에서 에테르 중 2 N HCl을 사용하고, 파트 C에서 HPLC 정제 대신에 추출 (에테르/물) 후처리를 수행하고, 파트 D에서 최종 생성물을 HPLC 대신에 EtOAc/에테르로부터의 재결정화로 정제하였다. LCMS: (M+H)+: 501.0.
실시예 66
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(2S)-2-(히드록시메틸)-1-아제티디닐]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
Figure pat00094
파트 A:
(2S)-2-아제티디닐메탄올, TFA 염
시판되는 (S)-1-(t-부톡시카르보닐)-2-아제티딘메탄올 (100 mg, 5.3 mmol)을 디클로로메탄 (2 mL) 중에 용해하여 교반하였다. 트리플루오로아세트산 (1 mL)을 적가하고, 생성된 반응 혼합물을 t-부톡시카르보닐기의 제거가 완료될 때까지 실온에서 교반하였다. 이어서, 용매를 증발시키고, 조 물질인 (2S)-2-아제티디닐메탄올의 TFA 염을 다음 단계에서 바로 사용하였다.
파트 B:
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(2S)-2-(히드록시메틸)-1-아제티디닐]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(2S)-2-(히드록시메틸)-1-아제티디닐]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 (2S)-2-아제티디닐메탄올, TFA 염을 사용하고 DIPEA를 3 당량 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 425.4.
실시예 67
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-(디메틸아미노)-5-플루오로-2-(플루오로메틸)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00095
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-(디메틸아미노)-5-플루오로-2-(플루오로메틸)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 디메틸아민을 사용하고 4,6-디클로로-5-플루오로-2-메틸피리미딘 대신에 4,6-디클로로-5-플루오로-2-(플루오로메틸)피리미딘을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 401.2.
실시예 68
[(2R)-3-{2-[6-(시클로부틸아미노)-5-플루오로-2-(플루오로메틸)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00096
[(2R)-3-{2-[6-(시클로부틸아미노)-5-플루오로-2-(플루오로메틸)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 시판되는 시클로부틸아민을 사용하고 4,6-디클로로-5-플루오로-2-메틸피리미딘 대신에 4,6-디클로로-5-플루오로-2-(플루오로메틸)피리미딘을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 427.2.
실시예 69
N-((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[(2-(5-플루오로-2-메틸-6-{[2-옥소-2-(1-피롤리디닐)에틸]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}-N-히드록시포름아미드
Figure pat00097
파트 A:
페닐메틸 [2-옥소-2-(1-피롤리디닐)에틸]카르바메이트
피롤리딘 (248 ㎕, 3 mmol), N-CBZ-글리신 (628 mg, 3 mmol) 및 HOAt (408 mg, 3 mmol)를 디클로로메탄 10 mL 중에 용해하였다. NMM (0.66 mL, 6 mmol)을 첨가한 후에 EDC (575 mg, 3 mmol)를 첨가하였다. 밤새 실온에서 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하여 물, 포화 수성 NaHCO3 용액 및 포화 수성 NH4Cl 용액으로 세척한 후에 건조 (Na2SO4)시키고 증발시켜서 페닐메틸 [2-옥소-2-(1-피롤리디닐)에틸]카르바메이트를 베이지색 고체로서 수득하였다 (782 mg, 100％). LCMS: (M+H)+: 263.1.
파트 B:
2-옥소-2-(1-피롤리디닐)에탄아민, 히드로클로라이드 염
페닐메틸 [2-옥소-2-(1-피롤리디닐)에틸]카르바메이트 (782 mg, 3 mmol)를 MeOH 30 mL 중에 용해하고 탈기시켜 아르곤하에 두었다. 10％ Pd/C (117 mg)를 첨가한 후에 6 N HCl 0.5 mL를 첨가하고, 상기 내용물을 철저하게 탈기시켜 대략 3시간 동안 수소 벌룬하에 두었다. 이어서, 상기 내용물을 탈기시켜 셀라이트를 통해 여과하고, 상기 셀라이트 패드를 DCM 및 MeOH로 세척하였다. 생성된 여액을 진공하에 농축시켜서 2-옥소-2-(1-피롤리디닐)에탄아민, 히드로클로라이드 염을 수득하였다 (491 mg, 100％). LCMS: (M+H)+: 129.1.
파트 C:
N-{(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(5-플루오로-2-메틸-6-{[2-옥소-2-(1-피롤리디닐)에틸]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}-N-히드록시포름아미드
N-{(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(5-플루오로-2-메틸-6-{[2-옥소-2-(1-피롤리디닐)에틸]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}-N-히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 2-옥소-2-(1-피롤리디닐)에탄아민, 히드로클로라이드 염을 사용하고 DIPEA를 2.3 당량 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 466.2.
실시예 70
N-{(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(2-에틸-5-플루오로-6-{[(1R)-1-메틸-2-옥소-2-(1-피롤리디닐)에틸]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}-N-히드록시포름아미드
Figure pat00098
파트 A:
페닐메틸 [(1R)-1-메틸-2-옥소-2-(1-피롤리디닐)에틸]카르바메이트
피롤리딘 (1668 ㎕, 2 mmol), N-CBZ-D-알라닌 (446 mg, 2 mmol) 및 HOAt (272 mg, 2 mmol)를 디클로로메탄 6 mL 중에 용해하였다. NMM (0.44 mL, 4 mmol)을 첨가한 후에 EDC (382 mg, 2 mmol)를 첨가하였다. 밤새 실온에서 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하여 물, 포화 수성 NaHCO3 용액 및 포화 수성 NH4Cl 용액으로 세척한 후에 건조 (Na2SO4)시키고 증발시켜서 페닐메틸 [(1R)-1-메틸-2-옥소-2-(1-피롤리디닐)에틸]카르바메이트를 백색 고체로서 수득하였다 (496 mg, 90％). LCMS: (M+H)+: 277.2.
파트 B:
(2R)-1-옥소-1-(1-피롤리디닐)-2-프로판아민
페닐메틸 [(1R)-1-메틸-2-옥소-2-(1-피롤리디닐)에틸]카르바메이트 (496 mg, 1.8 mmol)를 MeOH 20 mL 중에 용해하고 탈기시켜 아르곤하에 두었다. 10％ Pd/C (125 mg)를 첨가하고, 상기 내용물을 철저하게 탈기시켜 밤새 수소 벌룬하에 두었다. 이어서, 상기 내용물을 탈기시켜 셀라이트를 통해 여과하고, 상기 셀라이트 패드를 DCM 및 MeOH로 세척하였다. 생성된 여액을 진공하에 농축시켜서 (2R)-1-옥소-1-(1-피롤리디닐)-2-프로판아민을 수득하였다 (235 mg, 91％). LCMS: (M+H)+: 143.1.
파트 C:
N-{(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(2-에틸-5-플루오로-6-{[(1R)-1-메틸-2-옥소-2-(1-피롤리디닐)에틸]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}-N-히드록시포름아미드
N-{(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(2-에틸-5-플루오로-6-{[(1R)-1-메틸-2-옥소-2-(1-피롤리디닐)에틸]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}-N-히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 (2R)-1-옥소-1-(1-피롤리디닐)-2-프로판아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 494.2.
실시예 71
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-(플루오로메틸)-6-[(3S)-3-(메틸옥시)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00099
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-(플루오로메틸)-6-[(3S)-3-(메틸옥시)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 시판되는 (S)-3-메톡실피롤리딘을 사용하고 4,6-디클로로-5-플루오로-2-메틸피리미딘 대신에 4,6-디클로로-5-플루오로-2-(플루오로메틸)피리미딘을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 457.2.
실시예 72
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(프로필아미노)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00100
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(프로필아미노)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 프로필아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 494.2.
실시예 73
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-(플루오로메틸)-6-(프로필아미노)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00101
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-(플루오로메틸)-6-(프로필아미노)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 시판되는 프로필아민을 사용하고 4,6-디클로로-5-플루오로-2-메틸피리미딘 대신에 4,6-디클로로-5-플루오로-2-(플루오로메틸)피리미딘을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 415.2.
실시예 74
N2-(6-{2-[(2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(히드록시)아미노]메틸}프로파노일]히드라지노}-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐)-N,N-디메틸-D-알라닌아미드
Figure pat00102
파트 A:
N1,N1-디메틸-D-알라닌아미드
N1,N1-디메틸-D-알라닌아미드, 히드로클로라이드 염을 실시예 69와 유사한 방식으로 제조하되, N-CBZ-글리신 대신에 N-CBZ-D-알라닌을 사용하고 피롤리딘 대신에 디메틸아민, 히드로클로라이드 염을 사용하고 NMM을 3 당량 사용하였다.
파트 B:
N2-(6-{2-[(2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(히드록시)아미노]메틸}프로파노일]히드라지노}-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐)-N,N-디메틸-D-알라닌아미드
N2-(6-{2-[(2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(히드록시)아미노]메틸}프로파노일]히드라지노}-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐)-N,N-디메틸-D-알라닌아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 N1,N1-디메틸-D-알라닌아미드, 히드로클로라이드 염을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 454.2.
실시예 75
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-(4-에틸-1-피페라지닐)-5-플루오로-2-(메틸옥시)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00103
파트 A:
[(2R)-3-{2-[6-클로로-5-플루오로-2-(메틸옥시)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드
[(2R)-3-{2-[6-클로로-5-플루오로-2-(메틸옥시)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드를 중간체 E와 유사한 방식을 이용하되, 파트 A에서 2-메틸-2-티오슈도우레아 술페이트 대신에 o-메틸이소우레아 술페이트를 사용하고, 파트 D에서 (2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)아미노]메틸}프로판산 대신에 (2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산을 사용하여 제조할 수 있다. LCMS: (M+H)+: 480.1.
파트 B:
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-(4-에틸-1-피페라지닐)-5-플루오로-2-(메틸옥시)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)[(페닐메틸)옥시]포름아미드
[(2R)-3-{2-[6-클로로-5-플루오로-2-(메틸옥시)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 (0.150 g, 0.31 mmol), 시판되는 1-에틸피페라진 (0.080 mL, 0.63 mmol) 및 디이소프로필에틸아민 (0.054 mL, 0.31 mmol)을 DMSO (2 mL) 중에서 밤새 65℃에서 교반하였다. 이어서, 상기 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여 ((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-(4-에틸-1-피페라지닐)-5-플루오로-2-(메틸옥시)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)[(페닐메틸)옥시]포름아미드를 적색 고체로서 수득하였다 (0.145 g, 83％). LCMS: (M+H)+ = 558.3.
파트 C:
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-(4-에틸-1-피페라지닐)-5-플루오로-2-(메틸옥시)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
MeOH (10 mL) 중 ((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-(4-에틸-1-피페라지닐)-5-플루오로-2-(메틸옥시)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)[(페닐메틸)옥시]포름아미드 (0.145 g, 0.26 mmol) 및 Pd(C) (0.030 g)의 용액을 일반적인 절차 A의 파트 C와 같은 표준 수소화 조건하에 적용시켜서 ((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-(4-에틸-1-피페라지닐)-5-플루오로-2-(메틸옥시)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 적색 고체로서 수득하였다 (0.119 g, 98％). LCMS: (M+H)+ = 468.4.
실시예 76
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{2-(디플루오로메틸)-6-[(3R)-3-(디메틸아미노)-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00104
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{2-(디플루오로메틸)-6-[(3R)-3-(디메틸아미노)-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 H에 따라 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 시판되는 (3R)-N,N-디메틸-3-피롤리딘아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 488.1.
실시예 77
N2-(6-{2-[(2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(히드록시)아미노]메틸}프로파노일]히드라지노}-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐)-N,N-디메틸-D-알라닌아미드
Figure pat00105
N2-(6-{2-[(2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(히드록시)아미노]메틸}프로파노일]히드라지노}-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐)-N,N-디메틸-D-알라닌아미드를 일반적인 절차 B에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 대신에 N1,N1-디메틸-D-알라닌아미드 (실시예 74)를 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 468.1.
실시예 78
N-[(2R)-3-{2-[6-(부틸아미노)-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
Figure pat00106
N-[(2R)-3-{2-[6-(부틸아미노)-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 시판되는 부틸아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 411.1.
실시예 79
{(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(5-플루오로-2-(메틸옥시)-6-{[(1S)-1-(1-피롤리디닐카르보닐)프로필]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}히드록시포름아미드
Figure pat00107
파트 A:
[(1S)-1-(1-피롤리디닐카르보닐)프로필]아민
페닐메틸 [(1S)-1-(1-피롤리디닐카르보닐)프로필]카르바메이트 [J. Med. Chem., 1991, 34, 3149-58]를 메탄올 (20 mL) 중에 용해하였다 (559 mg, 1.9 mmol). Pd(OH)2 (140 mg)를 첨가하고, 생성된 현탁액을 탈보호가 완료될 때까지 수소 벌룬하에 교반하였다. 촉매를 여과하고 용매를 증발시켜서 [(1S)-1-(1-피롤리디닐카르보닐)프로필]아민을 수득하였다 (291 mg, 97％).
파트 B:
[(2R)-3-{2-[6-클로로-5-플루오로-2-(메틸옥시)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드
[(2R)-3-{2-[6-클로로-5-플루오로-2-(메틸옥시)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드를 중간체 E와 유사한 방식을 이용하되, 파트 A에서 2-메틸-2-티오슈도우레아 술페이트 대신에 o-메틸이소우레아 술페이트를 사용하고, 파트 D에서 (2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)아미노]메틸}프로판산 대신에 (2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산을 사용하여 제조할 수 있다. LCMS: (M+H)+: 480.1.
파트 C:
{(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(5-플루오로-2-(메틸옥시)-6-{[(1S)-1-(1-피롤리디닐카르보닐)프로필]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}히드록시포름아미드
[(2R)-3-{2-[6-클로로-5-플루오로-2-(메틸옥시)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 (70 mg, 0.15 mmol)를 DMSO (2 mL) 중에 용해하고, [(1S)-1-(1-피롤리디닐카르보닐)프로필]아민 (46 mg, 0.29 mmol)을 첨가한 후에 DIPEA (26 ㎕, 0.15 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 6일 동안 교반하였다. 상기 반응물을 RP-HPLC로 직접 정제하여 벤질 보호된 중간체를 수득하였고, 이후에 이것을 탈기된 MeOH (7 mL) 중에 용해하였다. 상기 용액에 10％ Pd/C (6.3 mg)를 첨가하고, 합한 혼합물을 수소 벌룬하에 2시간 동안 교반하였다. 촉매를 여과하고 용매를 증발시켜 조 잔류물을 수득하였고, 이것을 RP-HPLC로 정제하였다. 이로써, {(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(5-플루오로-2-(메틸옥시)-6-{[(1S)-1-(1-피롤리디닐카르보닐)프로필]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}히드록시포름아미드를 수득하였다 (15 mg, 20％).
실시예 80
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-[(3R)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-(메틸옥시)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00108
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-[(3R)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-(메틸옥시)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 실시예 79에 따라 합성하되, 파트 C에서 [(1S)-1-(1-피롤리디닐카르보닐)프로필]아민 대신에 (2R)-1,2-디메틸피페라진 (실시예 39)을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 468.3.
실시예 81
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{2-(디플루오로메틸)-6-[(3S)-3-(디메틸아미노)-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00109
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{2-(디플루오로메틸)-6-[(3S)-3-(디메틸아미노)-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 H에 따라 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 시판되는 (3S)-N,N-디메틸-3-피롤리딘아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 488.3.
실시예 82
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-(시클로프로필아미노)-2-(디플루오로메틸)-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00110
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-(시클로프로필아미노)-2-(디플루오로메틸)-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 일반적인 절차 H에 따라 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 시클로프로필아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 431.3.
실시예 83
(2S)-2-[(6-{2-[(2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(히드록시)아미노]메틸}프로파노일]히드라지노}-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐)아미노]-N,N-디메틸부탄아미드
Figure pat00111
파트 A:
(2S)-2-아미노-N,N-디메틸부탄아미드, 히드로클로라이드 염
(2S)-2-아미노-N,N-디메틸부탄아미드, 히드로클로라이드 염을 2-옥소-2-(1-피롤리디닐)에탄아민, 히드로클로라이드 염 (실시예 69)과 유사한 방식으로 제조하되, 파트 A에서 N-CBZ-글리신 대신에 N-CBZ-L-2-아미노부티르산을 사용하고 피롤리딘 대신에 디메틸아민, 히드로클로라이드 염을 사용하고 NMM을 3 당량 사용하였다. (M+H)+: 130.9.
파트 B:
(2S)-2-[(6-{2-[(2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(히드록시)아미노]메틸}프로파노일]히드라지노}-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐)아미노]-N,N-디메틸부탄아미드
(2S)-2-[(6-{2-[(2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(히드록시)아미노]메틸}프로파노일]히드라지노}-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐)아미노]-N,N-디메틸부탄아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 (2S)-2-아미노-N,N-디메틸부탄아미드, 히드로클로라이드 염을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 468.1.
실시예 84
(2S)-2-[(6-{2-[(2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(히드록시)아미노]메틸}프로파노일]히드라지노}-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐)아미노]-N,N-디메틸부탄아미드
Figure pat00112
(2S)-2-[(6-{2-[(2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(히드록시)아미노]메틸}프로파노일]히드라지노}-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐)아미노]-N,N-디메틸부탄아미드를 일반적인 절차 B에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 대신에 (2S)-2-아미노-N,N-디메틸부탄아미드, 히드로클로라이드 염 (실시예 83)을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 482.1.
실시예 85
{(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(5-플루오로-2-메틸-6-{[(3S)-1-메틸-2-옥소헥사히드로-1H-아제핀-3-일]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}히드록시포름아미드
Figure pat00113
{(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(5-플루오로-2-메틸-6-{[(3S)-1-메틸-2-옥소헥사히드로-1H-아제핀-3-일]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 (3S)-3-아미노-1-메틸헥사히드로-2H-아제핀-2-온 (실시예 193)을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 480.3.
실시예 86
(2S)-2-{[6-[2-((2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(히드록시)아미노]메틸}프로파노일)히드라지노]-5-플루오로-2-(메틸옥시)-4-피리미디닐]아미노}-N,N-디메틸부탄아미드
Figure pat00114
파트 A:
[(2R)-3-{2-[6-클로로-5-플루오로-2-(메틸옥시)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드
[(2R)-3-{2-[6-클로로-5-플루오로-2-(메틸옥시)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드를 중간체 E에 따르되, 파트 A에서 2-메틸-2-티오슈도우레아 술페이트 대신에 o-메틸이소우레아 술페이트를 사용하고, 파트 D에서 (2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)아미노]메틸}프로판산 대신에 (2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산을 사용하여 제조할 수 있다. LCMS: (M+H)+: 480.1.
파트 B:
(2S)-2-{[6-{2-[(2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로파노일]히드라지노}-5-플루오로-2-(메틸옥시)-4-피리미디닐]아미노}-N,N-디메틸부탄아미드
[(2R)-3-{2-[6-클로로-5-플루오로-2-(메틸옥시)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 (0.133 g, 0.28 mmol), (2S)-2-아미노-N,N-디메틸부탄아미드, 히드로클로라이드 염 (실시예 83) (0.075 g, 0.45 mmol) 및 디이소프로필에틸아민 (0.1 mL, 0.62 mmol)을 DMSO (2 mL) 중에서 밤새 65℃에서 교반하였다. 이어서, 추가의 디이소프로필에틸아민 (0.2 mL)을 첨가하고, 상기 반응물을 7일 동안 80℃에서 교반하였다. RP-HPLC로 정제하여 (2S)-2-{[6-{2-[(2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로파노일]히드라지노}-5-플루오로-2-(메틸옥시)-4-피리미디닐]아미노}-N,N-디메틸부탄아미드를 수득하였다 (0.036 g, 23％). LCMS: (M+H)+ = 574.3.
파트 C:
(2S)-2-{[6-[2-((2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(히드록시)아미노]메틸}프로파노일)히드라지노]-5-플루오로-2-(메틸옥시)-4-피리미디닐]아미노}-N,N-디메틸부탄아미드
MeOH (10 mL) 중 (2S)-2-{[6-{2-[(2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로파노일]히드라지노}-5-플루오로-2-(메틸옥시)-4-피리미디닐]아미노}-N,N-디메틸부탄아미드 (0.036 g, 0.063 mmol) 및 Pd(C) (0.008 g)의 용액을 일반적인 절차 A의 파트 C와 같은 표준 수소화 조건하에 적용시켜서 (2S)-2-{[6-[2-((2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(히드록시)아미노]메틸}프로파노일)히드라지노]-5-플루오로-2-(메틸옥시)-4-피리미디닐]아미노}-N,N-디메틸부탄아미드를 오렌지색 고체로서 수득하였다 (0.019 g, 63％). LCMS: (M+H)+ = 484.4.
실시예 87
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(테트라히드로-5H-[1,3]디옥솔로[4,5-c]피롤-5-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00115
파트 A:
페닐메틸 (시스)-3,4-디히드록시-1-피롤리딘카르복실레이트
페닐메틸 2,5-디히드로-1H-피롤-1-카르복실레이트 (시판용) (5.07 g, 25 mmol)를 아세톤 (25 mL) 및 물 (10 mL)의 혼합물 중에 용해하였다. NMO (5.9 g, 50 mmol)를 첨가한 후에 촉매 OsO4를 첨가하였다. 상기 반응물을 19시간 동안 교반한 후에 Na2S2O3 수용액 첨가로 켄칭시켰다. 표준 후처리를 실시한 후에 실리카겔 크로마토그래피 (3:1 헥산:에틸 아세테이트 → 순수한 에틸 아세테이트 → 9:1 DCM:MeOH)를 실시하여 페닐메틸 (시스)-3,4-디히드록시-1-피롤리딘카르복실레이트를 투명한 오일로서 수득하였다 (0.872 g, 15％). LCMS: (M+H)+: 237.9.
파트 B:
(시스)-테트라히드로-3aH-[1,3]디옥솔로[4,5-c]피롤
DCM (4 mL) 중 페닐메틸 (3R,4S)-3,4-디히드록시-1-피롤리딘카르복실레이트 (0.872 g, 3.7 mmol) 및 디메톡시메탄 (10 mL)의 용액에 트리플루오로메탄술폰산 5 방울을 첨가하고, 생성된 용액을 상기 반응이 LCMS에서 완료된 것으로 판단될 때까지 교반하였다. 상기 반응물을 중탄산나트륨 포화 수용액으로 켄칭시킨 후에 표준 후처리를 실시하고, RP-HPLC로 정제하여 중간체 페닐메틸 (syn)-테트라히드로-5H-[1,3]디옥솔로[4,5-c]피롤-5-카르복실레이트를 수득하였다. 이것을 탈기된 MeOH (5 mL) 중에 즉시 용해하여 10％ Pd/C (25 mg)를 첨가하고, 상기 반응물을 LCMS에서 완료된 것으로 판단될 때까지 수소 벌룬하에 교반하였다. 여과하고 진공하에 농축시켜서 (시스)-테트라히드로-3aH-[1,3]디옥솔로[4,5-c]피롤을 수득하였다 (88 mg, 21％). LCMS: (M+H)+: 116.1.
파트 C:
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(테트라히드로-5H-[1,3]디옥솔로[4,5-c]피롤-5-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(테트라히드로-5H-[1,3]디옥솔로[4,5-c]피롤-5-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 (시스)-테트라히드로-3aH-[1,3]디옥솔로[4,5-c]피롤을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 453.3.
실시예 88
[(2R)-3-{2-[2-클로로-6-(디메틸아미노)-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00116
[(2R)-3-{2-[2-클로로-6-(디메틸아미노)-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 D에 따라 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 시판되는 디메틸아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 403.
실시예 89
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(트랜스)-3-(디메틸아미노)-4-메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 (부분입체이성질체들의 혼합물)
Figure pat00117
파트 A:
(트랜스)-N,N,4-트리메틸-3-피롤리딘아민
THF (20 mL) 중 시판되는 1,1-디메틸에틸(트랜스)-3-아미노-4-메틸-1-피롤리딘카르복실레이트 (1 g, 5 mmol) 및 포름알데히드 (0.69 mL, 25 mmol, 물 중 37％)의 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. NaBH(OAc)3 (7.4 g, 35 mmol)을 첨가하고, 상기 반응물을 밤새 교반하였다. 1 M NaOH (20 mL)를 첨가하고, 층들이 분리되도록 하였다. 수성 상을 에테르로 추출하고, 합한 유기물을 황산나트륨에서 건조시켜 여과하고 농축시켜서 조 잔류물을 수득하였다. 상기 물질을 디옥산 중 4 M HCl (24 mL) 중에 용해하고 3시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시켜서 (트랜스)-N,N,4-트리메틸-3-피롤리딘아민을 정량적인 수율로 수득하였다. LCMS: (M+H)+: 129.1.
파트 B:
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(트랜스)-3-(디메틸아미노)-4-메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(트랜스)-3-(디메틸아미노)-4-메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 부분입체이성질체들의 혼합물로서 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 트랜스-N,N,4-트리메틸-3-피롤리딘아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 466.4.
실시예 90
(트랜스)-1-{6-[2-((2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(히드록시)아미노]메틸}프로파노일)히드라지노]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}-N,N,4-트리메틸-3-피롤리딘카르복스아미드 (부분입체이성질체들의 혼합물)
Figure pat00118
파트 A:
(트랜스)-N,N,4-트리메틸-3-피롤리딘카르복스아미드
DCM (18 mL) 중 시판되는 페닐메틸 (트랜스)-3-[(디메틸아미노)카르보닐]-4-메틸-1-피롤리딘카르복실레이트 (1.06 g, 3.4 mmol), DMAP (0.63 g, 5.2 mmol) 및 EDC (1.0 g, 5.2 mmol)의 용액을 5분 동안 교반하고, 디메틸아민 (1.9 mL, 3.8 mmol, THF 중 2 M)을 첨가하였다. LCMS에서 완료된 것으로 판단될 때까지 상기 반응물이 교반되도록 하고, 1 M HCl로 켄칭시켰다. 표준 후처리를 실시하여 원하는 아미드 중간체를 수득하였다. 상기 물질을 탈기된 MeOH (20 mL) 중에 즉시 용해하고, 10％ Pd/C (120 mg)를 첨가하였다. LCMS에서 완전한 탈보호가 관찰될 때까지 상기 반응 혼합물이 수소 벌룬하에 교반되도록 하였다. 촉매를 여과로 제거하여 (트랜스)-N,N,4-트리메틸-3-피롤리딘카르복스아미드를 수득하였다. LCMS: (M+H)+: 157.2.
파트 B:
(트랜스)-1-{6-[2-((2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(히드록시)아미노]메틸}프로파노일)히드라지노]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}-N,N,4-트리메틸-3-피롤리딘카르복스아미드
(트랜스)-1-{6-[2-((2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(히드록시)아미노]메틸}프로파노일)히드라지노]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}-N,N,4-트리메틸-3-피롤리딘카르복스아미드를 일반적인 절차 A에 따라 부분입체이성질체들의 혼합물로서 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 (트랜스)-N,N,4-트리메틸-3-피롤리딘카르복스아미드를 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 494.4.
실시예 91
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{2-(디플루오로메틸)-6-[(트랜스)-3-(디메틸아미노)-4-메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 (부분입체이성질체들의 혼합물)
Figure pat00119
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{2-(디플루오로메틸)-6-[(3S,4R)-3-(디메틸아미노)-4-메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 H에 따라 부분입체이성질체들의 1:1 혼합물로서 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 트랜스-N,N,4-트리메틸-3-피롤리딘아민 (실시예 89)을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 502.4.
실시예 92
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(트랜스)-3-(디메틸아미노)-4-메틸-1-피롤리디닐]-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00120
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(트랜스)-3-(디메틸아미노)-4-메틸-1-피롤리디닐]-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 B에 따라 부분입체이성질체들의 1:1 혼합물로서 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 대신에 (트랜스)-N,N,4-트리메틸-3-피롤리딘아민 (실시예 89)을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 480.3.
실시예 93
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{2-(디플루오로메틸)-6-[(3R)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00121
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{2-(디플루오로메틸)-6-[(3R)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 H에 따라 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 (2R)-1,2-디메틸피페라진 디히드로클로라이드 염 (실시예 39)을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 488.7.
실시예 94
{(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(5-플루오로-2-메틸-6-{[(3S)-1-메틸-2-옥소-2,3,4,7-테트라히드로-1H-아제핀-3-일]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}히드록시포름아미드
Figure pat00122
파트 A:
(2S)-2-({[(1,1-디메틸에틸)옥시]카르보닐}아미노)-4-펜텐산
MeOH (60 mL) 및 물 (70 mL)의 혼합물에 L-2-아미노-4-펜탄산 (2.02 g, 17.5 mmol), K2CO3 (12.12 g, 88 mmol) 및 디-tert-부틸 디카르보네이트 (4.02 g, 18.4 mmol)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 12시간 동안 교반한 후에 0℃로 냉각시켜 1 M HCl로 pH 2가 될 때까지 산성화하였다. MeOH를 제거하여 수득한 수용액을 DCM으로 추출하였다. 합한 유기물을 황산나트륨에서 건조시키고 농축시켜서 (2S)-2-({[(1,1-디메틸에틸)옥시]카르보닐}아미노)-4-펜텐산을 수득하였다 (3.47 g, 92％). LCMS: (M+Na)+: 238.1.
파트 B:
1,1-디메틸에틸 {(1S)-1-[(2-프로펜-1-일아미노)카르보닐]-3-부텐-1-일}카르바메이트
(2S)-2-({[(1,1-디메틸에틸)옥시]카르보닐}아미노)-4-펜텐산 (2.82 g, 13 mmol), DMAP (1.9 g, 16 mmol) 및 EDC (3.1 g, 16 mmol)의 교반된 용액에 N-메틸알릴아민 (1.38 mL, 14 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응물을 72시간 동안 교반한 후에 1 M HCl (15 mL) 첨가로 켄칭시켰다. 생성된 2상 혼합물을 분리하고 수성 상을 DCM으로 1회 추출하였다. 합한 유기물을 황산나트륨에서 건조시키고 농축시켜서 1,1-디메틸에틸 {(1S)-1-[(2-프로펜-1-일아미노)카르보닐]-3-부텐-1-일}카르바메이트를 수득하였다 (0.94 g, 28％). LCMS: (M-tBut)+: 238.1.
파트 C:
1,1-디메틸에틸 [(3S)-1-메틸-2-옥소-2,3,4,7-테트라히드로-1H-아제핀-3-일]카르바메이트
1,1-디메틸에틸 {(1S)-1-[(2-프로펜-1-일아미노)카르보닐]-3-부텐-1-일}카르바메이트 (0.94 g, 3.9 mmol)를 DCM (350 mL) 중에 용해하고, 1,3-비스(2,4,6-트리메틸페닐)-2-이미다졸리디닐리덴)디클로로(페닐메틸렌)(트리시클로헥실포스핀)루테늄 (0.3 g, 3.5 mmol)을 첨가하였다. 생성된 용액을 40℃로 가열하고 12시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 증발시키고, 조 생성물을 RP-HPLC로 정제하여 1,1-디메틸에틸 [(3S)-1-메틸-2-옥소-2,3,4,7-테트라히드로-1H-아제핀-3-일]카르바메이트를 수득하였다 (0.6 g, 63％). LCMS: (M+H)+: 242.3.
파트 D:
(3S)-3-아미노-1-메틸-1,3,4,7-테트라히드로-2H-아제핀-2-온.HCl
DCM (4 mL) 중 1,1-디메틸에틸 [(3S)-1-메틸-2-옥소-2,3,4,7-테트라히드로-1H-아제핀-3-일]카르바메이트 (0.6 g, 2.5 mmol)의 용액에 HCl (6.2 mL, 25 mmol, 디옥산 중 4 M)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 12시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 제거하여 (3S)-3-아미노-1-메틸-1,3,4,7-테트라히드로-2H-아제핀-2-온.HCl을 수득하였다 (500 mg, 정량적). LCMS: (M+H)+: 검출되지 않음.
파트 E:
{(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(5-플루오로-2-메틸-6-{[(3S)-1-메틸-2-옥소-2,3,4,7-테트라히드로-1H-아제핀-3-일]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}히드록시포름아미드
{(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(5-플루오로-2-메틸-6-{[(3S)-1-메틸-2-옥소-2,3,4,7-테트라히드로-1H-아제핀-3-일]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}히드록시포름아미드를 실시예 105와 유사한 방식으로 제조하되, N-메틸-1-(4-피리미디닐)메탄아민 대신에 (3S)-3-아미노-1-메틸-1,3,4,7-테트라히드로-2H-아제핀-2-온.HCl을 사용하고 트리에틸아민 대신에 디이소프로필에틸아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 478.5.
실시예 95
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{2-(디플루오로메틸)-6-[(3S)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00123
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{2-(디플루오로메틸)-6-[(3S)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 H에 따라 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 (2S)-1,2-디메틸피페라진 디히드로클로라이드 염 (실시예 40)을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 488.6.
실시예 96
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{2-(디플루오로메틸)-6-[(2S)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00124
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{2-(디플루오로메틸)-6-[(2S)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 H에 따라 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 (3S)-1,3-디메틸피페라진 (실시예 64)을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 488.5.
실시예 97
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(3S)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00125
파트 A:
1,1-디메틸에틸 (3S)-3,4-디메틸-1-피페라진카르복실레이트
시판되는 1,1-디메틸에틸 (3S)-3-메틸-1-피페라진카르복실레이트 (3.05 g, 15.23 mmol), 포름알데히드 (물 중 37％) (2.13 mL), 트리아세톡시수소화붕소나트륨 (5.52 g, 26.04 mmol) 및 DCM (250 mL)을 밤새 교반하였다. 용매를 제거하고, 1 N NaOH를 잔류물에 첨가하였다. 상기 혼합물을 디클로로메탄으로 추출하고, 유기물을 건조 (Na2SO4)시키고 진공하에 농축시켜서 1,1-디메틸에틸 (3S)-3,4-디메틸-1-피페라진카르복실레이트를 투명한 오일로서 수득하였다 (3.15 g. 97％). LCMS: (M+H)+ = 215.3.
파트 B:
(2S)-1,2-디메틸피페라진 디히드로클로라이드
1 N HCl (40 mL) 중 1,1-디메틸에틸 (3S)-3,4-디메틸-1-피페라진카르복실레이트 (3.15 g, 14.7 mmol)를 밤새 교반하였다. 이어서, 1,4-디옥산 중 4 M HCl (25 mL)을 첨가하고, 상기 반응물이 밤새 교반되도록 하였다. 휘발물질을 진공하에 제거하여 (2S)-1,2-디메틸피페라진 디히드로클로라이드를 백색 고체로서 수득하였다 (2.88 g). LCMS: (M+H)+ = 115.1.
파트 C:
4-클로로-6-[(3S)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸피리미딘
THF (10 mL) 중 4,6-디클로로-5-플루오로-2-메틸피리미딘 (0.181 g, 1.0 mmol) 및 (2S)-1,2-디메틸피페라진 디히드로클로라이드 (0.189 g, 1.0 mmol)의 용액에 트리에틸아민 (0.42 mL, 3.0 mmol)을 실온에서 첨가하였다. MeOH (1 mL)를 첨가하여 용해도를 개선시켰다. 상기 반응 혼합물을 밤새 교반한 후에 용매를 진공하에 제거하였다. 생성된 잔류물에 에테르, THF 및 물을 첨가하였다. 유기물을 분리하여 건조 (Na2SO4)시키고 증발시켜서 4-클로로-6-[(3S)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸피리미딘을 황색 고체로서 수득하였다 (0.254 g, 98％). LCMS: (M+H)+ = 259.3.
파트 D:
4-[(3S)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-6-히드라지노-2-메틸피리미딘
DMSO (3 mL) 중 4-클로로-6-[(3S)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸피리미딘 (0.254 g, 0.98 mmol)에 히드라진 일수화물 (2 mL)을 첨가하였다. 상기 반응물을 실온에서 3일 동안 교반하였다. 휘발물질을 진공하에 제거하고, 잔류물을 RP-HPLC로 정제하여 4-[(3S)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-6-히드라지노-2-메틸피리미딘을 황색 고체로서 수득하였다 (0.161 g, 64％). LCMS: (M+H)+ = 255.6.
파트 E:
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(3S)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드
(2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산 (0.184 g, 0.60 mmol), 4-[(3S)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-6-히드라지노-2-메틸피리미딘 (0.161 g, 0.63 mmol), NMM (0.21 mL, 1.89 mmol), HOAt (0.086 g, 0.63 mmol) 및 EDC (0.121 g, 0.63 mmol)를 DMF (4 mL) 중에 용해하고, 상기 반응물을 밤새 교반하였다. RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(3S)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드를 수득하였다 (0.219 g, 64％). LCMS: (M+H)+ = 542.7.
파트 F:
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(3S)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
MeOH (10 mL) 중 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(3S)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 (0.219 g, 0.40 mmol) 및 Pd(C) (0.042 g)의 혼합물을 일반적인 절차 A의 파트 C와 같은 표준 수소화 조건하에 적용시켜서 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(3S)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 백색 고체로서 수득하였다 (0.172 g, 94％). LCMS: (M+H)+ = 452.3.
실시예 98
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(3R)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00126
파트 A:
1,1-디메틸에틸 (3R)-3,4-디메틸-1-피페라진카르복실레이트
시판되는 1,1-디메틸에틸 (3R)-3-메틸-1-피페라진카르복실레이트 (2.78 g, 13.88 mmol), 포름알데히드 (물 중 37％) (1.94 mL), 트리아세톡시수소화붕소나트륨 (5.03 g, 23.73 mmol) 및 DCM (200 mL)을 밤새 교반하였다. 용매를 제거하고, 1 N NaOH을 잔류물에 첨가하였다. 상기 혼합물을 디클로로메탄으로 추출하고, 유기물을 건조 (Na2SO4)시키고 진공하에 농축시켜서 1,1-디메틸에틸 (3R)-3,4-디메틸-1-피페라진카르복실레이트를 투명한 오일로서 수득하였다 (2.70 g, 91％). LCMS: (M+H)+ = 215.4.
파트 B:
(2R)-1,2-디메틸피페라진 디히드로클로라이드
1 N HCl (25 mL) 중 1,1-디메틸에틸 (3R)-3,4-디메틸-1-피페라진카르복실레이트 (2.70 g, 12.6 mmol)를 밤새 교반하였다. 이어서, 1,4-디옥산 중 4 M HCl (25 mL)을 첨가하고, 상기 반응물이 밤새 교반되도록 하였다. 휘발물질을 진공하에 제거하여 (2R)-1,2-디메틸피페라진 디히드로클로라이드를 백색 고체로서 수득하였다 (2.53 g). LCMS: (M+H)+ = 115.1.
파트 C:
4-클로로-6-[(3R)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸피리미딘
THF (10 mL) 중 4,6-디클로로-5-플루오로-2-메틸피리미딘 (0.181 g, 1.0 mmol) 및 (2R)-1,2-디메틸피페라진 디히드로클로라이드 (0.189 g, 1.0 mmol)의 용액에 트리에틸아민 (0.42 mL, 3.0 mmol)을 첨가하였다. MeOH (1 mL)를 첨가하여 용해도를 개선시켰다. 상기 반응물이 밤새 교반되도록 하였다. 용매를 진공하에 제거하여 생성된 잔류물에 THF 및 에테르를 첨가하고, 이것을 물로 세척하였다. 유기물을 건조 (Na2SO4)시키고 진공하에 농축시켜서 4-클로로-6-[(3R)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸피리미딘을 황색 오일로서 수득하였다 (0.242 g, 94％). LCMS: (M+H)+ = 259.3.
파트 D:
4-[(3R)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-6-히드라지노-2-메틸피리미딘
DMSO (3 mL) 중 4-클로로-6-[(3R)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸피리미딘 (0.242 g, 0.94 mmol)에 히드라진 일수화물 (2 mL)을 첨가하였다. 상기 반응물을 실온에서 3일 동안 교반하였다. 휘발물질을 진공하에 제거하고 RP-HPLC로 정제하여 4-[(3R)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-6-히드라지노-2-메틸피리미딘을 황색 고체로서 수득하였다 (0.079 g, 33％). LCMS: (M+H)+ = 255.3.
파트 E:
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(3R)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드
(2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산 (0.079 g, 0.30 mmol), 4-[(3R)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-6-히드라지노-2-메틸피리미딘 (0.079 g, 0.31 mmol), NMM (0.10 mL, 0.90 mmol), HOAt (0.042 g, 0.31 mmol) 및 EDC (0.059 g, 0.31 mmol)를 DMF (4 mL) 중에 용해하고, 일반적인 절차 A의 파트 B와 유사한 방식으로 처리하여 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(3R)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드를 수득하였다 (0.082 g, 49％). LCMS: (M+H)+ = 542.7.
파트 F:
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(3R)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
MeOH (10 mL) 중 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(3R)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 (0.082 g, 0.15 mmol) 및 Pd(C) (0.016 g)의 용액을 일반적인 절차 A의 파트 C와 같은 표준 수소화 조건하에 적용시켜서 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(3R)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 백색 고체로서 수득하였다 (0.067 g, 99％). LCMS: (M+H)+ = 452.4.
실시예 99
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(테트라히드로-1H-푸로[3,4-c]피롤-5(3H)-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00127
파트 A:
[(시스)-1-(페닐메틸)-3,4-피롤리딘디일]디메탄올
디메틸 (시스)-1-(페닐메틸)-3,4-피롤리딘디카르복실레이트 [Chem. Pharm. Bull. 1985 33; 896-898] (2.44 g, 8.8 mmol)를 THF (100 mL) 중에 용해하고 0℃로 냉각시켰다. LiAlH4 (1 g, 26 mmol)를 조금씩 첨가하고, 상기 반응물을 밤새 60℃에서 가열하였다. 0℃로 냉각시킨 후, 습윤 에테르를 첨가한 후에 물 (1 mL), 15 w/w NaOH (수성) (1 mL) 및 물 (3 mL)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 15분 동안 교반하고 셀라이트를 통해 여과하여 조 [(시스)-1-(페닐메틸)-3,4-피롤리딘디일]디메탄올 (2.5 g)을 수득하였고, 이것을 다음 반응에 바로 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 222.3.
파트 B:
(시스)-3,4-피롤리딘디일디메탄올
MeOH (50 mL) 중 조 [(시스)-1-(페닐메틸)-3,4-피롤리딘디일]디메탄올 (2.5 g)의 용액에 진한 HCl (0.2 mL)을 첨가한 후에 펄만스(Pearlmans) 촉매 (700 mg)를 첨가하였다. 생성된 현탁액을 48시간 동안 50 psi에서 파르(Parr) 진탕기에서 수소화하고, 이 시간 후에 촉매 700 mg을 추가로 첨가하였다. 50 psi에서 72시간 더 수소화하여 반응이 완료되었다. 촉매를 여과로 제거하고 용매를 감압하에 증발시켜 (시스)-3,4-피롤리딘디일디메탄올을 수득하였다 (970 mg, 7.4 mmol). LCMS: (M+H)+: 검출되지 않음.
파트 C:
페닐메틸 (시스)-3,4-비스(히드록시메틸)-1-피롤리딘카르복실레이트
(시스)-3,4-피롤리딘디일디메탄올 (970 mg, 7.4 mmol)을 MeOH (20 mL) 및 물 (7 mL)의 혼합물 중에 용해하고 0℃로 냉각시켰다. Na2CO3 (1.96 g, 19 mmol)을 첨가한 후에 벤질 클로로포르메이트 (1.15 mL, 8.1 mmol)를 첨가하고, 생성된 용액을 4시간 동안 교반하면서 온도는 0℃로 유지시켰다. 상기 반응물을 감압하에 농축시켜서 메탄올 대부분을 제거하고, 잔류 수용액을 EtOAc로 2회 추출하였다. 합한 유기물을 염수로 세척하고 황산나트륨에서 건조시킨 후에 진공하에 농축시켰다. RP-HPLC로 페닐메틸 (시스)-3,4-비스(히드록시메틸)-1-피롤리딘카르복실레이트를 수득하였다 (450 mg, 22％, 1.7 mmol). LCMS: (M+H)+: 266.1.
파트 D:
페닐메틸 테트라히드로-1H-푸로[3,4-c]피롤-5(3H)-카르복실레이트
DCM (3 mL) 및 피리딘 (3 mL)의 혼합물에 페닐메틸 (시스)-3,4-비스(히드록시메틸)-1-피롤리딘카르복실레이트 (250 mg, 0.94 mmol)를 첨가한 후에 토실-클로라이드 (540 mg, 2.8 mmol)를 첨가하고, 생성된 용액을 4시간 동안 환류시켰다. 용매를 증발시키고 잔류물을 헥산으로 1회 공비증류시킨 후에 RP-HPLC로 정제하였다. 이로써, 페닐메틸 테트라히드로-1H-푸로[3,4-c]피롤-5(3H)-카르복실레이트를 수득하였다 (170 mg, 73％). LCMS: (M+H)+: 248.4.
파트 E:
헥사히드로-1H-푸로[3,4-c]피롤
MeOH (5 mL)의 탈기된 용액에 페닐메틸 테트라히드로-1H-푸로[3,4-c]피롤-5(3H)-카르복실레이트 (170 mg, 0.68 mmol)를 첨가한 후에 Pd/C (40 mg)를 첨가하였다. 수소 벌룬하에 3시간 동안 교반한 후에 촉매를 여과하고 용매를 증발시켜서 헥사히드로-1H-푸로[3,4-c]피롤을 수득하였다 (70 mg, 91％). LCMS: (M+H)+: 검출되지 않음.
파트 F:
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(테트라히드로-1H-푸로[3,4-c]피롤-5(3H)-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(테트라히드로-1H-푸로[3,4-c]피롤-5(3H)-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 헥사히드로-1H-푸로[3,4-c]피롤을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 451.3.
실시예 100
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(3R,4S)-3-(디메틸아미노)-4-메틸-1-피롤리디닐]-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 (D1)
Figure pat00128
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(3R,4S)-3-(디메틸아미노)-4-메틸-1-피롤리디닐]-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 B에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 대신에 트랜스-N,N,4-트리메틸-3-피롤리딘아민 (실시예 89)을 사용하였다. 파트 B의 생성물로 키랄 크로마토그래피를 실시하여 단일 거울상이성질체를 수득하였고, 이것을 파트 C에 따라 탈보호하였다. 상기 화합물의 절대 입체화학은 알려지지 않았고, 상기 구조에서 피롤리딘 고리상에 임의로 배정하였다. LCMS: (M+H)+: 480.6.
실시예 101
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(3S,4R)-3-(디메틸아미노)-4-메틸-1-피롤리디닐]-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 (D2)
Figure pat00129
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(3S,4R)-3-(디메틸아미노)-4-메틸-1-피롤리디닐]-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 B에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 대신에 트랜스-N,N,4-트리메틸-3-피롤리딘아민 (실시예 89)을 사용하였다. 파트 B의 생성물로 키랄 크로마토그래피를 실시하여 단일 거울상이성질체를 수득하였고, 이것을 파트 C에 따라 탈보호하였다. 상기 화합물의 절대 입체화학은 알려지지 않았고, 상기 구조에서 피롤리딘 고리상에 임의로 배정하였다. LCMS: (M+H)+: 480.4.
실시예 102
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(트랜스)-3-(히드록시메틸)-4-메틸-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 (부분입체이성질체들의 혼합물)
Figure pat00130
파트 A:
메틸 rac-(트랜스)-4-메틸-1-(페닐메틸)-3-피롤리딘카르복실레이트
DCM (25 mL) 중 N-(메톡시메틸)-N-(트리메틸실릴메틸)벤질아민 (1.8 mL, 7 mmol) 및 메틸 크로토네이트 (0.62 mL, 5.8 mmol)의 용액에 0℃에서 DCM (1 mL) 중 트리플루오로아세트산 (0.045 mL, 0.58 mmol)의 용액을 적가하였다. 상기 반응물이 실온으로 가온되도록 하고 3시간 동안 교반하였다. 포화 중탄산나트륨 용액을 첨가하고 상들을 분리하였다. 수성 상을 DCM으로 2회 추출하고, 합한 유기물을 황산나트륨에서 건조시키고 진공하에 농축시켰다. 이로써, 조 메틸 rac-(트랜스)-4-메틸-1-(페닐메틸)-3-피롤리딘카르복실레이트를 수득하였고 (1.58 g), 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 234.3.
파트 B:
Rac-[(트랜스)-4-메틸-3-피롤리디닐]메탄올
[(트랜스)-4-메틸-3-피롤리디닐]메탄올을 실시예 99의 파트 A 및 B에 따라 합성하되, 파트 A에서 디메틸 (시스)-1-(페닐메틸)-3,4-피롤리딘디카르복실레이트 대신에 메틸 rac-(트랜스)-4-메틸-1-(페닐메틸)-3-피롤리딘카르복실레이트를 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 검출되지 않음.
파트 C:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(트랜스)-3-(히드록시메틸)-4-메틸-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(트랜스)-3-(히드록시메틸)-4-메틸-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 Rac-(트랜스)-[(3R,4R)-4-메틸-3-피롤리디닐]메탄올을 사용하였다. 생성물은 부분입체이성질체들의 혼합물이었다. LCMS: (M+H)+: 453.3.
실시예 103
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(2-피리디닐메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00131
파트 A:
6-클로로-5-플루오로-2-메틸-N-(2-피리디닐메틸)-4-피리미딘아민
4,6-디클로로-5-플루오로-2-메틸피리미딘 (0.2 g, 1.111 mmol)을 THF (1 mL) 중에 용해하였다. 상기 용액에 트리에틸아민 (0.17 mL, 1.22 mmol)을 첨가한 후에 시판되는 (2-피리디닐메틸)아민 (0.11 mL, 1.067 mmol)을 첨가하고, 이것을 THF (1 mL) 중에 용해하였다. 상기 반응물이 4시간 동안 교반되도록 하였다. 상기 반응 혼합물을 물로 희석하고 에테르로 추출하였다. 유기물을 건조 (MgSO4)시키고 농축시켜서 6-클로로-5-플루오로-2-메틸-N-(2-피리디닐메틸)-4-피리미딘아민을 황색 왁스로서 수득하였다 (0.2517 g, 90％). LCMS: (M+H)+ = 253.3.
파트 B:
5-플루오로-2-메틸-6-[(2-피리디닐메틸)아미노]-4(1H)-피리미디논 히드라존
6-클로로-5-플루오로-2-메틸-N-(2-피리디닐메틸)-4-피리미딘아민 (0.2517 g, 0.999 mmol)을 DMSO 2 mL 및 히드라진 일수화물 1 mL 중에 용해하였다. 생성된 반응 혼합물을 밤새 교반하였다. 이어서, 상기 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여 5-플루오로-2-메틸-6-[(2-피리디닐메틸)아미노]-4(1H)-피리미디논 히드라존을 베이지색 고체로서 수득하였다 (0.0954 g, 39％). LCMS: (M+H)+ = 249.3.
파트 C:
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(2-피리디닐메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드
5-플루오로-2-메틸-6-[(2-피리디닐메틸)아미노]-4(1H)-피리미디논 히드라존 (0.0954 g, 0.3846 mmol) 및 (2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산 (0.141 g, 0.4622 mmol)을 DMF (3 mL) 중에 용해하였다. NMM (0.13 mL, 1.1824 mmol)을 첨가한 후에 HOAt (0.063 g, 0.4632 mmol) 및 EDC (0.088 g, 0.459 mmol)를 첨가하였다. 밤새 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(2-피리디닐메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드를 백색 고체로서 수득하였다 (0.0999 g, 48％). LCMS: (M+H)+ = 536.3.
파트 D:
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(2-피리디닐메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(2-피리디닐메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 (0.0999 g, 0.1867 mmol)를 MeOH 10 mL 중에 용해하고 탈기시켜 질소하에 두었다. 이어서, 10％ Pd(C) (0.025 g)를 첨가하고, 상기 내용물을 탈기시키고 수소 벌룬하에 2.75시간 동안 교반하였다. 이어서, 상기 내용물을 탈기시키고 아크로디스크(Acrodisk) (CR PTFE 0.45 ㎛)를 통해 여과하였다. 생성된 여액을 농축시키고 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(2-피리디닐메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 베이지색 고체로서 수득하였다 (0.0231 g, 28％). LCMS: (M+H)+ = 446.5.
실시예 104
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{2-에틸-5-플루오로-6-[(8aS)-헥사히드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00132
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{2-에틸-5-플루오로-6-[(8aS)-헥사히드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 B에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 대신에 시판되는 (8aS)-옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진을 사용하고 MeOH 대신에 DMSO를 사용하였다.
실시예 105
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[메틸(4-피리디닐메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00133
파트 A:
5-플루오로-6-히드라지노-N,2-디메틸-N-(4-피리디닐메틸)-4-피리미딘아민
4,6-디클로로-5-플루오로-2-메틸피리미딘 (0.18 g, 0.99 mmol)을 DMSO (1 mL) 중에 용해하였다. 상기 용액에 트리에틸아민 (0.15 mL, 1.08 mmol)을 첨가한 후에 시판되는 N-메틸-1-(4-피리디닐)메탄아민 (0.122 g, 1.0 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응물이 3시간 동안 교반되도록 하였다. 이어서, 히드라진 일수화물을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 90분 동안 60℃로 가열하였다. 냉각시킨 후, 상기 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여 5-플루오로-6-히드라지노-N,2-디메틸-N-(4-피리디닐메틸)-4-피리미딘아민을 수득하였다 (0.130 g, 49％). LCMS: (M+H)+ = 263.0.
파트 B:
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[메틸(4-피리디닐메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드
5-플루오로-6-히드라지노-N,2-디메틸-N-(4-피리디닐메틸)-4-피리미딘아민 (0.130 g, 0.496 mmol) 및 (2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)아미노]메틸}프로판산, 디이소프로필아민 염 (0.238 g, 0.56 mmol)을 DMF (5 mL) 중에 용해하였다. NMM (0.272 mL, 2.4739 mmol)을 첨가한 후에 HOAt (0.081 g, 0.5955 mmol) 및 EDC (0.114 g, 0.5946 mmol)를 첨가하였다. 밤새 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[메틸(4-피리디닐메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드를 베이지색 고체로서 수득하였다 (0.0979 g, 36％). LCMS: (M+2H)+ = 545.6.
파트 C:
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[메틸(4-피리디닐메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[메틸(4-피리디닐메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드 (0.0979 g, 0.1802 mmol)를 아세트산 (8 mL) 및 물 (2 mL) 중에 용해하였다. 상기 반응물이 밤새 교반되도록 하였다. 휘발물질을 증발시키고, 생성된 물질을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[메틸(4-피리디닐메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 베이지색 고체로서 수득하였다 (0.0273 g, 33％). LCMS: (M+H)+ = 460.7.
실시예 106
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{2-(디플루오로메틸)-5-플루오로-6-[(8aS)-헥사히드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00134
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{2-(디플루오로메틸)-5-플루오로-6-[(8aS)-헥사히드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 H에 따라 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 시판되는 (8aS)-옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 500.3.
실시예 107
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
Figure pat00135
파트 A:
5-플루오로-4-히드라지노-2-메틸-6-[(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]피리미딘
4,6-디클로로-5-플루오로-2-메틸피리미딘 (180 mg, 1 mmol)을 DMSO 1 mL 중에 용해하고 실온에서 교반하였다. (1,3-티아졸-2-일메틸)아민 (124 mg, 1.1 mmol)을 첨가한 후에 트리에틸아민 (150 ㎕, 1.1 mmol)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 3시간 동안 교반한 후에 히드라진 (1.0 mL)을 첨가하고, 상기 내용물을 1.5시간 동안 60℃로 가열하였다. 이어서, 상기 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 RP-HPLC로 정제하여 5-플루오로-4-히드라지노-2-메틸-6-[(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]피리미딘을 수득하였다 (97 mg, 38％). LCMS: (M+H)+: 255.2.
파트 B:
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드
5-플루오로-4-히드라지노-2-메틸-6-[(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]피리미딘 (80 mg, 0.33 mmol), (2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)아미노]메틸}프로판산 (후니그(Hunigs) 염기 염, 140 mg, 0.33 mmol) 및 HOAt (45 mg, 0.33 mmol)를 DMF 3 mL 중에 용해하였다. NMM (0.1 mL, 0.9 mmol)을 첨가한 후에 EDC (65 mg, 0.33 mmol)를 첨가하였다. 밤새 실온에서 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드를 수득하였다 (72 mg, 45％). LCMS: (M+H)+: 536.2.
파트 C:
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
4:1 AcOH:물 (5 mL) 중 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드 (67 mg, 0.13 mmol)를 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 진공하에 제거하고, 생성된 조 생성물을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 수득하였다 (30 mg, 51％). LCMS: (M+H)+: 452.1.
실시예 108
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(2S)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00136
파트 A:
4-클로로-6-[(2S)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸피리미딘
THF (6.0 mL) 중 4,6-디클로로-5-플루오로-2-메틸피리미딘 (0.309 g, 1.71 mmol) 및 트리에틸아민 (0.83 mL, 5.98 mmol)에 (3S)-1,3-디메틸피페라진 디히드로클로라이드 (실시예 64) (0.320 g, 1.71 mmol)를 첨가하였다. MeOH (3 mL)를 첨가하여 용해도를 개선시키고, 상기 반응물을 4일 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 진공하에 제거하고, 생성된 잔류물에 에테르, THF 및 물을 첨가하였다. 유기물을 건조 (Na2SO4)시키고 진공하에 농축시켜서 4-클로로-6-[(2S)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸피리미딘을 오렌지색 고체로서 수득하였다 (0.277 g, 63％). LCMS: (M+H)+ = 259.3.
파트 B:
4-[(2S)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-6-히드라지노-2-메틸피리미딘
4-클로로-6-[(2S)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸피리미딘 (0.277 g, 1.07 mmol), 히드라진 일수화물 (0.5 mL) 및 DMSO (2.0 mL)를 실온에서 밤새 교반하였다. 이어서, 상기 반응물을 5O℃로 가열하고 7시간 동안 교반하였다. RP-HPLC로 정제하여 4-[(2S)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-6-히드라지노-2-메틸피리미딘을 오렌지색 고체로서 수득하였다 (0.118 g, 43％). LCMS: (M+H)+ = 255.3.
파트 C:
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(2S)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드
(2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산 (0.139 g, 0.45 mmol), 4-[(2S)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-6-히드라지노-2-메틸피리미딘 (0.118 g, 0.46 mmol), NMM (0.15 mL, 1.38 mmol), HOAt (0.063 g, 0.46 mmol) 및 EDC (0.088 g, 0.46 mmol)를 DMF (2 mL) 중에 용해하였다. 상기 반응물을 밤새 교반하였다. RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(2S)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드를 백색 고체로서 수득하였다 (0.118 g, 47％). LCMS: (M+H)+ = 542.7.
파트 D:
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(2S)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
MeOH (10 mL) 중 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(2S)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 (0.118 g, 0.22 mmol) 및 Pd(C) (0.018 g)의 용액을 일반적인 절차 A의 파트 C에서와 같이 처리하여 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(2S)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 백색 고체로서 수득하였다 (0.089 g, 91％). LCMS: (M+H)+ = 452.4.
실시예 109
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00137
파트 A:
4-클로로-6-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸피리미딘
디클로로메탄 (126 mL) 중 (3R)-1,3-디메틸피페라진 디히드로클로라이드 (실시예 63) (5.88 g, 31.4 mmol)의 용액에 N,N-디이소프로필에틸아민 (18.11 mL, 104 mmol) 및 4,6-디클로로-5-플루오로-2-메틸피리미딘 (5.69 g, 31.4 mmol)을 첨가하였다. 상기 용액을 35℃에서 가열하고 3일 동안 교반하였다. 상기 용액을 실온으로 냉각시켜 DCM (100 mL)으로 희석하고 포화 수성 NaHCO3 (100 mL)으로 세척하였다. 수성 상을 신선한 분량의 DCM (50 mL)으로 추출하고, 합한 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켜서 조 4-클로로-6-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸피리미딘을 갈색 오일로서 수득하였고 (9.60 g, >100％ 수율), 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 258.9.
파트 B:
4-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-6-히드라지노-2-메틸피리미딘
1,4-디옥산 (126 mL) 중 4-클로로-6-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸피리미딘 (9.6 g, 31.4 mmol로 추정됨)의 용액에 히드라진 일수화물 (8.5 mL, 175 mmol)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 85℃에서 가열하고 24시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 실온으로 냉각시킨 후에 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 DCM (200 mL)과 포화 수성 NaHCO3 (100 mL) 사이에 분배하였다. 수성 상을 신선한 분량의 DCM (50 mL)으로 추출하고, 합한 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켜서 조 4-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-6-히드라지노-2-메틸피리미딘을 짙은 오렌지색 오일로서 수득하였다 (8.04 g, >100％ 조 수율). LCMS: (M+H)+: 254.9.
파트 C:
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드
N,N-디메틸포름아미드 (125 mL) 중 4-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-6-히드라지노-2-메틸피리미딘 (8.04 g, 31.4 mmol로 추정됨)의 용액에 (2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산 디이소프로필에틸아민 염, 이소프로판올 용매화물 (15.48 g, 31.3 mmol), N-메틸모르폴린 (17.21 mL, 156 mmol), 1-히드록시-7-아자벤조트리아졸 (5.11 g, 37.6 mmol) 및 EDC (7.20 g, 37.6 mmol)를 첨가하였다. 상기 용액을 밤새 교반한 후에 Et2O (150 mL)로 희석하고 물 (2×100 mL)로 세척하였다. 합한 수성 상을 신선한 분량의 Et2O (150 mL)로 추출하고, 상기 유기 상을 물 (75 mL)로 세척하였다. 전체 합한 수성 상을 또다른 신선한 분량의 Et2O (150 mL)로 추출하고, 상기 유기 상을 물 (75 mL)로 세척하였다. 합한 유기 상을 DCM (100 mL)으로 희석하고 무수 Na2SO4에서 건조시켰다. 상기 혼합물을 여과하고 진공하에 농축시켜서 조 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드를 밝은 갈색 발포체로서 수득하였다 (15.60 g, 28.8 mmol, 92％ 수율). LCMS: (M+H)+: 541.7.
파트 D:
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
메탄올 (115 mL) 중 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 (15.60 g, 28.8 mmol)의 용액에 Pd/C (50％ 물, 3.1 g)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 벌룬 압력하에서 2시간 동안 수소화한 후에 유리 섬유 필터를 통해 여과하였다. 이어서, 상기 용액을 진공하에 농축시키고 EtOAc (100 mL)로 공비증류시켰다. 생성된 고체를 헥산 중 70％ EtOAc로 연화처리하고 진공 여과로 수집하였다. 상등액을 진공하에 농축시켜 EtOAc-헥산으로부터 결정화하고, 상기 고체를 첫번째 수집물의 물질과 합하였다. 합한 고체를 밤새 고진공하에 건조시켜서 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 백색 고체로서 수득하였다 (8.15 g, 18.05 mmol, 62.7％ 수율). LCMS: (M+H)+: 451.8.
실시예 110
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-[(3S,4R)-3-(디메틸아미노)-4-메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드 (부분입체이성질체들의 혼합물)
Figure pat00138
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-[(3S,4R)-3-(디메틸아미노)-4-메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 일반적인 절차 C에 따라 부분입체이성질체들의 1:1 혼합물로서 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 히드로클로라이드 대신에 (트랜스)-N,N,4-트리메틸-3-피롤리딘아민 (실시예 89)을 사용하였다. LCMS: (M+H)+ 498.5.
실시예 111
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-[(8aS)-헥사히드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일]-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00139
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-[(8aS)-헥사히드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일]-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 일반적인 절차 C에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 히드로클로라이드 대신에 시판되는 (8aS)-옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진을 사용하였다. LCMS: (M+H)+ 496.2.
실시예 112
N-[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(옥타히드로-2H-피리도[1,2-a]피라진-2-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드 (부분입체이성질체 혼합물)
Figure pat00140
N-[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(옥타히드로-2H-피리도[1,2-a]피라진-2-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드를 일반적인 절차 G에 따라 부분입체이성질체들의 혼합물로서 제조하되, 파트 A에서 (1S,4S)-2-메틸-2,5-디아자바이시클로[2.2.1]헵탄, 디히드로브로마이드 대신에 시판되는 (±)-1,4-디아자바이시클로[4.4.0]데칸을 사용하고 DIPEA를 1 당량 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 498.3.
실시예 113
[(2R)-3-(2-{6-[Syn-3,4-비스(디메틸아미노)-1-피롤리디닐]-2-클로로-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00141
파트 A:
페닐메틸 6-옥사-3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-카르복실레이트
DCM (250 mL) 중 페닐메틸 2,5-디히드로-1H-피롤-1-카르복실레이트 (10.30 g, 50.68 mmol)의 0℃ 용액에 m-CPBA (습윤, 약 75％; 17.49 g)를 첨가하였다. 상기 용액을 교반하고 실온으로 밤새 가온시켰다. 상기 용액을 DCM으로 희석하고, 10％ 수성 NaHCO3-1 N 수성 NaOH (1:1)로 2회 세척하였다. 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시키고, 실리카겔 크로마토그래피 (헥산 중 40％ EtOAc)로 정제하여 페닐메틸 6-옥사-3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-카르복실레이트를 밝은 황색 오일로서 수득하였다 (7.90 g, 71％ 수율).
파트 B:
페닐메틸 syn-3,4-비스(디메틸아미노)-1-피롤리딘카르복실레이트
MeOH (4.6 mL) 중 페닐메틸 6-옥사-3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-카르복실레이트 (1.0029 g, 4.574 mmol)의 용액에 디메틸아민 (THF 중 2.0 M, 4.6 mL, 9.2 mmol)을 첨가하였다. 상기 용액을 140℃에서 극초단파 조사하에 1시간 동안 가열한 후에 실온으로 냉각시켰다. 상기 용액을 진공하에 농축시켜 THF (40 mL)로 공비증류한 후에 THF (40 mL) 중에 용해하였다. 상기 용액에 DMAP (56 mg, 0.458 mmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (1.6 mL, 8.96 mmol) 및 MsCl (0.390 mL, 5.039 mmol)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 2시간 동안 교반한 후에 디메틸아민 (THF 중 2.0 M, 4.6 mL, 9.2 mmol)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 2일 동안 교반한 후에 DCM (100 mL)으로 희석하고 1 N 수성 NaOH (20 mL)로 세척하였다. 유기 상을 무수 MgSO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. MeOH (5 mL) 중 상기 잔류물의 용액에 디메틸아민 (THF 중 2.0 M, 4.6 mL, 9.2 mmol)을 첨가하고, 상기 용액을 140℃에서 30분 동안 극초단파 조사하에 가열하였다. 상기 용액을 진공하에 농축시키고, 길슨 RPLC로 직접 정제하여 라세미체 페닐메틸 syn-3,4-비스(디메틸아미노)-1-피롤리딘카르복실레이트를 밝은 황색 오일로서 수득하였다 (911.4 mg, 68％ 수율). LCMS: (M+H)+: 292.2.
파트 C:
N,N,N',N'-테트라메틸-syn-3,4-피롤리딘디아민
MeOH (30 mL) 중 페닐메틸 syn-3,4-비스(디메틸아미노)-1-피롤리딘카르복실레이트 (911.4 mg, 3.128 mmol)의 용액에 10％ Pd/C (50％ 물, 270 mg)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 벌룬 압력하에서 1시간 동안 수소화한 후에 여과하고, 생성된 용액을 진공하에 농축시켜서 조 라세미체 N,N,N',N'-테트라메틸-syn-3,4-피롤리딘디아민을 밝은 황색 오일로서 수득하였다 (516.0 mg, >100％ 조 수율). LCMS: (M+H)+: 158.1.
파트 D:
1-(2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)-N,N,N',N'-테트라메틸-syn-3,4-피롤리딘디아민
DCM (5 mL) 중 2,4,6-트리클로로-5-플루오로피리미딘 (330 mg, 1.638 mmol)의 용액에 N,N-디이소프로필에틸아민 (0.342 mL, 1.963 mmol) 및 N,N,N',N'-테트라메틸-syn-3,4-피롤리딘디아민 (257.4 mg, 1.637 mmol)을 첨가하였다. 상기 용액을 실온에서 4시간 동안 교반한 후에 진공하에 농축시켰다. MeOH (3 mL) 중 상기 잔류물의 용액에 히드라진 수화물 (0.5 mL)을 첨가하였다. 상기 용액을 교반하고 70℃에서 3시간 동안 가열한 후에 실온으로 냉각시켰다. 상기 용액을 길슨 RPLC (물 중 7％ MeCN → 30％ MeCN, 8분 구배)로 직접 정제하여 첫번째 라세미체 1-(2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)-N,N,N',N'-테트라메틸-syn-3,4-피롤리딘디아민 (118.3 mg)을 오렌지색 고체로서 수득한 후에 라세미체 4-[syn-3,4-비스(디메틸아미노)-1-피롤리디닐]-6-클로로-5-플루오로-2(1H)-피리미디논 히드라존 (194.6 mg, 2개 단계 동안 합산 60％ 수율)을 오렌지색 오일로서 수득하였다.
파트 E:
[(2R)-3-(2-{6-[Syn-3,4-비스(디메틸아미노)-1-피롤리디닐]-2-클로로-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드
DMF (3 mL) 중 라세미체 1-(2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)-N,N,N',N'-테트라메틸-syn-3,4-피롤리딘디아민 (116.3 mg, 0.366 mmol)의 용액에 (2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)아미노]메틸}프로판산, N,N-디이소프로필에틸아민 염 (121.2 mg, 0.283 mmol), N-메틸모르폴린 (0.160 mL, 1.455 mmol), 1-히드록시-7-아자벤조트리아졸 (46 mg, 0.337 mmol) 및 EDC (65 mg, 0.339 mmol)를 첨가하였다. 상기 용액을 밤새 교반한 후에 길슨 RPLC로 직접 정제하여 [(2R)-3-(2-{6-[syn-3,4-비스(디메틸아미노)-1-피롤리디닐]-2-클로로-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드를 황색 오일로서 수득하였다 (133.4 mg, 78％ 수율). LCMS: (M+H)+: 599.4.
파트 F:
[(2R)-3-(2-{6-[Syn-3,4-비스(디메틸아미노)-1-피롤리디닐]-2-클로로-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
4:1 HOAc-H2O (5 mL)중 [(2R)-3-(2-{6-[syn-3,4-비스(디메틸아미노)-1-피롤리디닐]-2-클로로-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드 (133.4 mg, 0.223 mmol)의 용액을 30℃에서 18시간 동안 교반하였다. 상기 용액을 진공하에 농축시키고 DCM (100 mL)으로 희석하였다. 상기 용액을 포화 수성 NaHCO3 (50 mL)으로 세척하고, 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 길슨 RPLC로 정제한 후에 EtOAc-헥산으로부터 결정화하여 [(2R)-3-(2-{6-[syn-3,4-비스(디메틸아미노)-1-피롤리디닐]-2-클로로-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 밝은 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: (M+H)+: 515.2.
실시예 114
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(시스)-3-히드록시-4-메틸-1-피롤리디닐]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 (미지의 단일 부분입체이성질체)
Figure pat00142
파트 A:
페닐메틸 (트랜스)-3-히드록시-4-메틸-1-피롤리딘카르복실레이트
에테르 (120 mL) 중 CuI (10.2 g, 54 mmol)의 교반된 현탁액에 -10℃에서 MeLi (73 mL, 109 mmol, 에테르 중 1.5 M)를 적가하면서 온도는 -5℃ 미만으로 유지되도록 하였다. 생성된 용액을 -10℃에서 20분 동안 교반하고, 에테르 (50 mL) 중 페닐메틸 6-옥사-3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-카르복실레이트 (실시예 113) (5 g, 23 mmol)의 용액을 첨가하면서 온도는 -2℃ 미만으로 유지시켰다. 상기 반응물을 -10℃에서 1시간 동안 교반하고, 이 시간 후에 이것을 물로 켄칭시키고 DCM으로 분배하였다. 표준 후처리를 실시하여 페닐메틸 (트랜스)-3-히드록시-4-메틸-1-피롤리딘카르복실레이트를 수득하였고, 이것을 정제하고 키랄 크로마토그래피를 실시하여 절대 입체화학이 결정되지 않은 2종의 거울상이성질체적으로 순수한 화합물을 수득하였다. (E1의 수득량 = 1.55 g, E2의 수득량 = 1.58 g).
파트 B:
페닐메틸 (시스)-3-메틸-4-{[(4-니트로페닐)카르보닐]옥시}-1-피롤리딘카르복실레이트
THF (21 mL) 중 거울상이성질체적으로 순수한 페닐메틸 (트랜스)-3-히드록시-4-메틸-1-피롤리딘카르복실레이트 (E1) (1 g, 4.25 mmol)의 용액에 4-니트로벤조산 (1.42 g, 8.5 mmol), 트리페닐포스핀 (2.23 g, 8.5 mmol) 및 DIAD (1.7 mL, 8.5 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 밤새 교반하였다. 용매를 감압하에 제거하여 조 생성물을 수득하였고, 이것을 RP-HPLC로 정제하여 페닐메틸 (시스)-3-메틸-4-{[(4-니트로페닐)카르보닐]옥시}-1-피롤리딘카르복실레이트를 수득하였다 (1.30 g, 79％). LCMS: (M+H)+: 385.0 (미지의 단일 거울상이성질체).
파트 C:
(시스)-4-메틸-3-피롤리디놀
1 M NaOH (수성) (13 mL)를 THF (13 mL) 중 페닐메틸 (시스)-3-메틸-4-{[(4-니트로페닐)카르보닐]옥시}-1-피롤리딘카르복실레이트 (1.30 g, 3.4 mmol)의 용액에 0℃에서 적가하고, 상기 반응물을 밤새 교반하면서 빙조를 치웠다. 반응물 부피의 대략 절반을 감압하에 제거하고 클로로포름을 첨가하였다. 상들을 분리하여 유기 상을 염수로 세척하고, 황산나트륨에서 건조시키고 농축시켜서 조 알콜을 수득하였다. 상기 물질을 탈기된 MeOH 중에 즉시 용해하고 Pd/C (100 mg)를 첨가하였다. 상기 반응물을 수소 벌룬하에 3.5시간 동안 교반하고, 촉매를 여과로 제거하고 용매를 감압하에 증발로 제거하여 (시스)-4-메틸-3-피롤리디놀을 수득하였다 (390 mg, 정량적인 수율). LCMS: (M+H)+: 102.2 (미지의 단일 거울상이성질체).
파트 D:
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(3S,4S)-3-히드록시-4-메틸-1-피롤리디닐]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(시스)-3-히드록시-4-메틸-1-피롤리디닐]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 단일 부분입체이성질체 (피롤리딘 고리 주위의 입체화학은 임의로 배정함)로서 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 (시스)-4-메틸-3-피롤리디놀을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 439.2.
실시예 115
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(4S)-4-히드록시-3,3-디메틸-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00143
(3S)-4,4-디메틸-3-피롤리디놀 히드로클로라이드
MeOH (38 mL) 중 (3S)-4,4-디메틸-1-(페닐메틸)-3-피롤리디놀 [J. Med. Chem. 1992, 35, 4205-4213] (0.7738 g, 3.769 mmol)의 용액에 1 N 수성 HCl (3.8 mL, 3.8 mmol) 및 10％ Pd/C (50％ 물, 230 mg)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 벌룬 압력하에서 18시간 동안 수소화한 후에 0.2 ㎛ 필터 팁 시린지로 여과하였다. 생성된 용액을 진공하에 농축시키고 MeOH (2×50 mL)로 공비증류하여 (3S)-4,4-디메틸-3-피롤리디놀 히드로클로라이드를 밝은 오렌지색 고체로서 수득하였다 (0.5267 g, 93％ 수율). LCMS: (M+H)+: 116.1.
파트 B:
(3S)-1-(2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)-4,4-디메틸-3-피롤리디놀
DCM (6 mL) 중 2,4,6-트리클로로-5-플루오로피리미딘 (0.3362 g, 1.669 mmol)의 용액에 (3S)-4,4-디메틸-3-피롤리디놀 히드로클로라이드 (0.2530 g, 1.691 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (0.640 mL, 3.674 mmol)을 첨가하였다. 상기 용액을 2시간 동안 교반한 후에 진공하에 농축시켰다. DMSO (4 mL) 중 상기 잔류물의 용액에 히드라진 수화물 (0.6 mL)을 첨가하고, 상기 용액을 밤새 교반하였다. 이어서, 상기 용액을 길슨 RPLC로 직접 정제하여 첫번째 (3S)-1-(2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)-4,4-디메틸-3-피롤리디놀 (0.1464 g, 32％ 수율) (LCMS: (M+H)+: 276.0)을 오렌지색 고체로서 수득한 후에 4-클로로-5-플루오로-6-[(4S)-4-히드록시-3,3-디메틸-1-피롤리디닐]-2(1H)-피리미디논 히드라존 (0.2149 g, 47％ 수율)을 밝은 분홍색 고체로서 수득하였다.
파트 C:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(4S)-4-히드록시-3,3-디메틸-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드
DMF (3 mL) 중 (3S)-1-(2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)-4,4-디메틸-3-피롤리디놀 (0.131 g, 0.475 mmol)의 용액에 (2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)아미노]메틸}프로판산 (0.1181 g, 0.395 mmol), N-메틸모르폴린 (0.220 mL, 2.001 mmol), 1-히드록시-7-아자벤조트리아졸 (64 mg, 0.470 mmol) 및 EDC (91 mg, 0.475 mmol)를 첨가하였다. 상기 용액을 밤새 교반한 후에 길슨 RPLC로 직접 정제하여 [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(4S)-4-히드록시-3,3-디메틸-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드를 오렌지색 오일로서 수득하였다 (0.1294 g, 59％ 수율). LCMS: (M+H)+: 557.3.
파트 D:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(4S)-4-히드록시-3,3-디메틸-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
4:1 HOAc-물 (5 mL) 중 [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(4S)-4-히드록시-3,3-디메틸-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드 (0.1294 g, 0.232 mmol)의 용액을 30℃에서 가열하고 밤새 교반하였다. 상기 용액을 실온으로 냉각시켜 진공하에 농축시키고, 길슨 RPLC로 직접 정제하여 [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(4S)-4-히드록시-3,3-디메틸-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 황색 고체로서 수득하였다 (69.1 mg, 63％ 수율). LCMS: (M+H)+: 473.2.
실시예 116
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(4S)-4-히드록시-3,3-디메틸-1-피롤리디닐]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00144
파트 A:
(3S)-1-(5-플루오로-6-히드라지노-2-메틸-4-피리미디닐)-4,4-디메틸-3-피롤리디놀
MeOH (3 mL) 중 (3S)-4,4-디메틸-3-피롤리디놀 히드로클로라이드 (실시예 115) (0.1370 g, 0.916 mmol)의 용액에 4,6-디클로로-5-플루오로-2-메틸피리미딘 (0.1646 g, 0.909 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (0.350 mL, 2.009 mmol)을 첨가하였다. 상기 용액을 120℃에서 극초단파 조사하에 30분 동안 가열한 후에 진공하에 농축시켰다. DMSO (3 mL) 중 상기 잔류물의 용액에 히드라진 수화물 (0.5 mL)을 첨가하고, 상기 용액을 50℃에서 가열하고 24시간 동안 교반하였다. 이어서, 상기 용액을 길슨 RPLC로 직접 정제하여 (3S)-1-(5-플루오로-6-히드라지노-2-메틸-4-피리미디닐)-4,4-디메틸-3-피롤리디놀을 밝은 황색 발포체로서 수득하였다 (0.1560 g, 67％ 수율). LCMS: (M+H)+: 256.2.
파트 B:
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(4S)-4-히드록시-3,3-디메틸-1-피롤리디닐]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드
DMF (3 mL) 중 (3S)-1-(5-플루오로-6-히드라지노-2-메틸-4-피리미디닐)-4,4-디메틸-3-피롤리디놀 (0.125 g, 0.490 mmol)의 용액에 (2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산 (0.1246 g, 0.408 mmol), N-메틸모르폴린 (0.225 mL, 2.046 mmol), 1-히드록시-7-아자벤조트리아졸 (67 mg, 0.492 mmol) 및 EDC (94 mg, 0.490 mmol)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 밤새 교반한 후에 길슨 RPLC로 직접 정제하여 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(4S)-4-히드록시-3,3-디메틸-1-피롤리디닐]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드를 자주색 오일로서 수득하였다 (0.1606 g, 73％ 수율). LCMS: (M+H)+: 543.3.
파트 C:
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(4S)-4-히드록시-3,3-디메틸-1-피롤리디닐]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
MeOH (5 mL) 중 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(4S)-4-히드록시-3,3-디메틸-1-피롤리디닐]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 (0.1606 g, 0.296 mmol)의 용액에 10％ Pd/C (50％ 물, 48 mg)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 벌룬 압력하에서 1시간 동안 수소화한 후에 여과하였다. 상기 용액을 진공하에 농축시키고 잔류물을 EtOAc-헥산으로부터 결정화하여 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(4S)-4-히드록시-3,3-디메틸-1-피롤리디닐]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 밝은 분홍색 고체로서 수득하였다 (0.1205 g, 90％ 수율). LCMS: (M+H)+: 453.3.
실시예 117
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-(플루오로메틸)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00145
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-(플루오로메틸)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 (3R)-1,3-디메틸피페라진, 디히드로클로라이드 (실시예 63)를 사용하고 4,6-디클로로-5-플루오로-2-메틸피리미딘 대신에 4,6-디클로로-5-플루오로-2-(플루오로메틸)피리미딘을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 470.2.
실시예 118
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(3R)-3-(디메틸아미노)-1-피페리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00146
파트 A:
(3R)-N,N-디메틸-3-피페리딘아민
a) 시판되는 (R)-tert-부틸 3-아미노피페리딘-1-카르복실레이트, 히드로클로라이드 염 (5.0 g, 21.1 mmol), 트리아세톡시수소화붕소나트륨 (11.2 g, 52.8 mmol) 및 포름알데히드 (H2O 중 37％, 0.5 mL, 63.4 mmol)를 CH2Cl2 중에 용해하여 0℃에서 교반하였다. 상기 반응 혼합물이 실온으로 가온되도록 하고 3시간 동안 교반하였다. 이 시간 후에, 상기 반응 혼합물을 추가의 CH2Cl2 (200 mL)로 희석하고 1 N NaOH (100 mL)로 세척하였다. 유기 층을 분리하여 건조 (Na2SO4)시키고 증발시켜서 1,1-디메틸에틸 (3R)-3-(디메틸아미노)-1-피페리딘카르복실레이트를 수득하였다 (5.0 g).
b) 1,1-디메틸에틸 (3R)-3-(디메틸아미노)-1-피페리딘카르복실레이트 (5.0 g 조 물질, 21.12 mmol로 추정됨)를 CH2Cl2 (10 mL) 및 디옥산 중 4 M HCl (21 mL, 4 당량)의 혼합물 중에 용해하여 교반하였다. 백색 침전물이 형성되었다. 상기 반응이 대략 70％ 완료시에 중단된 것으로 여겨져서, 디옥산 중 4 M HCl 21 mL를 추가로 상기 반응 혼합물에 첨가하였다. 실온에서 4시간이 지난 후에 용매를 증발시켜서 (3R)-N,N-디메틸-3-피페리딘아민, 디히드로클로라이드를 백색 고체로서 수득하였다 (3.5 g, 2개 단계 동안 89％).
파트 B:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(3R)-3-(디메틸아미노)-1-피페리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(3R)-3-(디메틸아미노)-1-피페리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 D에 따라 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 (3R)-N,N-디메틸-3-피페리딘아민, 디히드로클로라이드를 사용하고 DIPEA를 2 당량 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 486.3.
실시예 119
N-[(2R)-3-[2-(6-{[(2-아미노-1,3-티아졸-4-일)메틸](메틸)아미노}-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
Figure pat00147
파트 A:
4-[(메틸아미노)메틸]-1,3-티아졸-2-아민
4-(클로로메틸)-1,3-티아졸-2-아민 (490 mg, 2.65 mmol)을 40％ 수성 메틸아민 (25 mL) 중에서 밤새 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 증발시켰다. 잔류물을 95:5 디클로로메탄/메탄올 (25 mL)로 희석하여 황산나트륨에서 건조시키고, 여과하고 증발시켜서 4-[(메틸아미노)메틸]-1,3-티아졸-2-아민을 수득하였고, 이것을 정제 없이 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 144.0.
파트 B:
N-[(2-아미노-1,3-티아졸-4-일)메틸]-6-클로로-5-플루오로-2-메틸-4-피리미딘아민
4,6-디클로로-5-플루오로-2-메틸피리미딘 (480 mg, 2.65 mmol)을 THF 20 mL 중에 용해하고 실온에서 교반하였다. (4-[(메틸아미노)메틸]-1,3-티아졸-2-아민 (2.65 mmol, 이론치)을 첨가한 후에 트리에틸아민 (400 ㎕, 2.92 mmol)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 밤새 교반하고, 증발시켰다. 잔류물을 물 중에서 교반하고, 고체 침전물을 여과로 수집하고 진공하에 건조시켜서 N-[(2-아미노-1,3-티아졸-4-일)메틸]-6-클로로-5-플루오로-2-메틸-4-피리미딘아민을 수득하였고 (450 mg, 59％), 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 288.1.
파트 C:
6-{[(2-아미노-1,3-티아졸-4-일)메틸]아미노}-5-플루오로-4-히드라지노-2-메틸피리미딘
N-[(2-아미노-1,3-티아졸-4-일)메틸]-6-클로로-5-플루오로-2-메틸-4-피리미딘아민 (450 mg, 1.56 mmol)을 DMSO 5 mL 중에 용해하고, 히드라진 일수화물 5 mL를 첨가하였다. 상기 혼합물을 밤새 교반하고 RP-HPLC로 정제하여 6-{[(2-아미노-1,3-티아졸-4-일)메틸]아미노}-5-플루오로-4-히드라지노-2-메틸피리미딘을 수득하였다 (125 mg, 28％). LCMS: (M+H)+: 284.1.
파트 D:
[(2R)-3-[2-(6-{[(2-아미노-1,3-티아졸-4-일)메틸]아미노}-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드
6-{[(2-아미노-1,3-티아졸-4-일)메틸]아미노}-5-플루오로-4-히드라지노-2-메틸피리미딘 (125 mg, 0.44 mmol), (2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)아미노]메틸}프로판산 (130 mg, 0.44 mmol) 및 HOAt (65 mg, 0.48 mmol)를 DMF 4 mL 중에 용해하였다. NMM (0.15 mL, 1.32 mmol)을 첨가한 후에 EDC (96 mg, 0.48 mmol)를 첨가하였다. 밤새 실온에서 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-3-[2-(6-{[(2-아미노-1,3-티아졸-4-일)메틸]아미노}-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드를 수득하였다 (114 mg, 46％). LCMS: (M+H)+: 565.3.
파트 E:
[(2R)-3-[2-(6-{[(2-아미노-1,3-티아졸-4-일)메틸]아미노}-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
4:1 AcOH:물 (5 mL) 중 [(2R)-3-[2-(6-{[(2-아미노-1,3-티아졸-4-일)메틸]아미노}-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드 (114 mg, 0.2 mmol)를 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 진공하에 제거하고, 생성된 조 생성물을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-3-[2-(6-{[(2-아미노-1,3-티아졸-4-일)메틸]아미노}-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 수득하였다 (18 mg, 18％). LCMS: (M+H)+: 481.2.
실시예 120
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(시스)-3-(디메틸아미노)-4-메틸-1-피롤리디닐]-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 (미지의 단일 부분입체이성질체)
파트 A:
(트랜스)-4-메틸-3-피롤리디놀
페닐메틸 (트랜스)-3-히드록시-4-메틸-1-피롤리딘카르복실레이트 (E1, 실시예 114, 파트 A) (100 mg, 0.43 mmol) 및 10％ Pd/C (20 mg)를 메탄올 (7 mL) 중에 현탁하고, 수소 벌룬하에 19시간 동안 교반하였다. 촉매를 여과하고 용매를 증발시켜 (트랜스)-4-메틸-3-피롤리디놀 (미지의 단일 거울상이성질체)을 수득하였다.
파트 B:
1,1-디메틸에틸 (트랜스)-3-{[(4-클로로페닐)술포닐]옥시}-4-메틸-1-피롤리딘카르복실레이트
MeOH (10 mL), DCM (10 mL) 및 포화 수성 탄산칼륨 (20 mL)의 혼합물 중 (트랜스)-4-메틸-3-피롤리디놀 (미지의 단일 거울상이성질체) (707 mg, 7 mmol)의 용액에 디-tert-부틸-디카르보네이트 (1.84 g, 8.42 mmol)를 첨가하고, 생성된 용액을 밤새 교반하였다. 물을 첨가한 후에 클로로포름을 첨가하고 상들을 분리하였다. 유기 층을 염수로 세척하고, 황산나트륨에서 건조시켜 여과하고 진공하에 증발시켜서 조 Boc-보호된 알콜을 수득하였다 (1.37 g). 이것을 피리딘 (10 mL) 중에 즉시 용해하고 p-톨루엔술포닐 클로라이드 (2.1 g, 11 mmol)를 첨가하였다. 상기 반응물을 밤새 교반하고 0℃로 냉각시켜 1 M HCl을 첨가하였다. 감소된 온도에서 10분 동안 교반한 후에 클로로포름을 첨가하고 상들을 분리하였다. 수성 상을 클로로포름으로 2회 추출하고, 합한 유기물을 염수로 세척하고 황산나트륨에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 이로써, 1,1-디메틸에틸 (트랜스)-3-{[(4-클로로페닐)술포닐]옥시}-4-메틸-1-피롤리딘카르복실레이트를 수득하였다. LCMS: (M+Na)+: 378.1 (미지의 단일 거울상이성질체).
파트 C:
1,1-디메틸에틸 (시스)-3-아미노-4-메틸-1-피롤리딘카르복실레이트
DMF (23 mL) 중 1,1-디메틸에틸 (트랜스)-3-{[(4-클로로페닐)술포닐]옥시}-4-메틸-1-피롤리딘카르복실레이트 (2.3 g, 6.5 mmol)의 교반된 용액에 NaN3 (4.2 g, 65 mmol)을 첨가하였다. 생성된 용액을 LCMS에서 반응이 완료된 것으로 나타날 때까지 60℃에서 교반하였다. 실온으로 냉각시킨 후에 상기 반응물을 여과하여 불용성 침전물을 제거하고 용매를 진공하에 제거하였다. 잔류 물질을 EtOAc 중에 용해하여 물로 세척하고, 황산나트륨에서 건조시키고 진공하에 농축시켜서 조 중간체 1.26 g을 수득하였다. 상기 조 아지드를 탈기된 MeOH (20 mL) 중에 즉시 용해하고 10％ Pd/C (126 mg)를 첨가하였다. 생성된 현탁액을 수소 벌룬하에 밤새 교반하고, 이 시간 후에 촉매를 여과로 제거하고 용매를 감압하에 증발시켰다. 이로써, 1,1-디메틸에틸 (시스)-3-아미노-4-메틸-1-피롤리딘카르복실레이트 (1.02 g, 70％)를 수득하였다. LCMS: (M-tBut)+: 145.1 (미지의 단일 거울상이성질체).
파트 D:
(시스)-N,N,4-트리메틸-3-피롤리딘아민.HCl
1,1-디메틸에틸 (시스)-3-아미노-4-메틸-1-피롤리딘카르복실레이트 (1.0 g, 5.0 mmol)를 THF (25 mL) 중에 용해하고 포름알데히드 (4.1 mL, 50 mmol, 물 중 37％)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 40분 동안 교반하고, 트리아세톡시수소화붕소나트륨 (14.8 g, 50.0 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응물을 72시간 동안 교반한 후에 1 M NaOH (수성) 첨가로 켄칭시켰다. 에테르를 첨가하고 상들을 분리하였다. 합한 유기물을 황산나트륨에서 건조시켜 여과하고 증발시켜서 중간체 디메틸화된 아민을 수득하였다 (1.65 g). 이것을 HCl (10 mL, 40 mmol, 디옥산 중 4 M) 중에 용해하고 밤새 교반하였다. 용매 및 잉여 산을 증발시켜서 (시스)-N,N,4-트리메틸-3-피롤리딘아민.HCl을 수득하였다 (1.42 g) (미지의 단일 거울상이성질체).
파트 E:
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(3R,4R)-3-(디메틸아미노)-4-메틸-1-피롤리디닐]-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 B에 따라 미지의 단일 부분입체이성질체로서 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 대신에 (시스)-N,N,4-트리메틸-3-피롤리딘아민.HCl을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 480.3.
실시예 121
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-[(3S)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-[(3S)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 일반적인 절차 C에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 히드로클로라이드 대신에 (2S)-1,2-디메틸피페라진 (실시예 40)을 사용하였다. LCMS: (M+H)+ 484.4.
실시예 122
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(시스)-3-(디메틸아미노)-4-메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 (미지의 단일 부분입체이성질체)
Figure pat00150
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(시스)-3-(디메틸아미노)-4-메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 D에 따라 미지의 단일 부분입체이성질체로서 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 거울상이성질체적으로 순수한 (시스)-N,N,4-트리메틸-3-피롤리딘아민 (실시예 120)을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 486.1/483.3.
실시예 123
N-[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(옥타히드로-2H-피리도[1,2-a]피라진-2-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드 (미지의 단일 부분입체이성질체)
Figure pat00151
파트 A:
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(옥타히드로-2H-피리도[1,2-a]피라진-2-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 (부분입체이성질체 1)
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(옥타히드로-2H-피리도[1,2-a]피라진-2-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 (부분입체이성질체 혼합물)를 일반적인 절차 G의 파트 A 및 파트 B에 따라 제조하되, 파트 A에서 (1S,4S)-2-메틸-2,5-디아자바이시클로[2.2.1]헵탄, 디히드로브로마이드 대신에 시판되는 (±)-1,4-디아자바이시클로[4.4.0]데칸을 사용하였다. [(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(옥타히드로-2H-피리도[1,2-a]피라진-2-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 (부분입체이성질체 1)를 키랄 크로마토그래피 (키랄팩(Chiralpak) AD-H 21.2×250 mm)로 분리하였다. LCMS: (M+H)+ 588.3.
파트 B:
N-[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(옥타히드로-2H-피리도[1,2-a]피라진-2-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드 (미지의 단일 부분입체이성질체)
N-[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(옥타히드로-2H-피리도[1,2-a]피라진-2-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드 (미지의 단일 부분입체이성질체)를 일반적인 절차 G의 파트 C에 따라 제조하되, 파트 C에서 [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1S,4S)-5-메틸-2,5-디아자바이시클로[2.2.1]헵트-2-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 대신에 [(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(옥타히드로-2H-피리도[1,2-a]피라진-2-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 (부분입체이성질체 1)를 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 498.3.
실시예 124
N-[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(옥타히드로-2H-피리도[1,2-a]피라진-2-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드 (미지의 단일 부분입체이성질체)
Figure pat00152
파트 A:
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(옥타히드로-2H-피리도[1,2-a]피라진-2-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 (부분입체이성질체 2)
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(옥타히드로-2H-피리도[1,2-a]피라진-2-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 (부분입체이성질체 혼합물)를 일반적인 절차 G의 파트 A 및 파트 B에 따라 제조하되, 파트 A에서 (1S,4S)-2-메틸-2,5-디아자바이시클로[2.2.1]헵탄, 디히드로브로마이드 대신에 시판되는 (±)-1,4-디아자바이시클로[4.4.0]데칸을 사용하였다. [(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(옥타히드로-2H-피리도[1,2-a]피라진-2-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 (부분입체이성질체 2)를 키랄 크로마토그래피 (키랄팩 AD-H 21.2×250 mm)로 분리하였다. LCMS: (M+H)+: 588.3.
파트 B:
N-[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(옥타히드로-2H-피리도[1,2-a]피라진-2-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드 (미지의 단일 부분입체이성질체)
N-[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(옥타히드로-2H-피리도[1,2-a]피라진-2-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드 (미지의 단일 부분입체이성질체)를 일반적인 절차 G의 파트 C에 따라 제조하되, 파트 C에서 [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1S,4S)-5-메틸-2,5-디아자바이시클로[2.2.1]헵트-2-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 대신에 [(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(옥타히드로-2H-피리도[1,2-a]피라진-2-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 (부분입체이성질체 2)를 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 498.3.
실시예 125
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-[(3R)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00153
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-[(3R)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 일반적인 절차 C에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 히드로클로라이드 대신에 (2R)-1,2-디메틸피페라진 (실시예 39)을 사용하였다. LCMS: (M+H)+ 484.5.
실시예 126
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-[(2S)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-(플루오로메틸)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00154
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-[(2S)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-(플루오로메틸)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 (3S)-1,3-디메틸피페라진, 디히드로클로라이드 (실시예 40)를 사용하고 4,6-디클로로-5-플루오로-2-메틸피리미딘 대신에 4,6-디클로로-5-플루오로-2-(플루오로메틸)피리미딘을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 470.2.
실시예 127
[(2R)-3-{2-[2-클로로-6-(시클로프로필아미노)-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00155
[(2R)-3-{2-[2-클로로-6-(시클로프로필아미노)-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 D에 따라 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 시판되는 시클로프로필아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 415.2.
실시예 128
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-(7-히드록시-5-아자스피로[2.4]헵트-5-일)-2-메틸-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00156
파트 A:
에틸 1-아세틸시클로프로판카르복실레이트
DMF 150 mL 중 에틸 3-옥소부타노에이트 (10 mL, 78.45 mmol) 및 1,2-디브로모에탄 (6.5 mL, 78.45 mmol)의 교반된 용액에 탄산칼륨 (22.7 g, 164.74 mmol)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 실온에서 2일 동안 교반하였다. 상기 용액을 물 300 mL로 희석하였다. 생성물을 디에틸 에테르 (2×200 mL)로 추출하고, 합한 유기 추출물을 물 (1×1000 mL)로 세척하여 건조 (MgSO4)시켰다. 여과 및 에테르의 대기압 증류를 실시하여 조 생성물을 수득하였고, 이것을 감압하에 (10 mbar) 증류시켜서 에틸 1-아세틸시클로프로판카르복실레이트를 수득하였다 (6.4273 g, 52％). LCMS: (M+H)+: 검출되지 않음.
파트 B:
5-(페닐메틸)-5-아자스피로[2.4]헵탄-4,7-디온
에틸 1-아세틸시클로프로판카르복실레이트 (6.4273 g, 41.153 mmol)를 EtOH 46 mL 중에 용해하였다. 상기 용액에 브롬 (2.32 mL, 45.2683 mmol)을 서서히 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 2시간 동안 교반한 후에 진공하에 농축시켰다. 조 잔류물을 EtOH 46 mL 중에 용해하고, 상기 혼합물을 빙수조로 O℃로 냉각시켰다. 상기 용액에 벤질 아민 (11.2 mL, 102.8825 mmol)을 서서히 첨가하고, 상기 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 후에 진공하에 건조될 때까지 농축시켰다. 잔류물을 CH2Cl2 (200 mL) 및 1 N 수성 HCl (100 mL) 중에 용해하였다. 상들을 분리하여 수성 상을 CH2Cl2 (100 mL)로 추출하고, 합한 유기 상을 무수 MgSO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 헥산/EtOAc (60:40)의 용출 시스템을 사용한 실리카겔에서의 크로마토그래피로 정제하여 5-(페닐메틸)-5-아자스피로[2.4]헵탄-4,7-디온을 오렌지색 고체로서 수득하였다 (2.4283 g, 27％). LCMS: (M+H)+: 검출되지 않음.
파트 C:
5-(페닐메틸)-5-아자스피로[2.4]헵탄-7-올
5-(페닐메틸)-5-아자스피로[2.4]헵탄-4,7-디온 (997.4 mg, 4.63 mmol)을 THF 46 mL 중에 용해하고, LiAlH4 (997 mg)를 교반하에 조금씩 첨가하였다. 상기 혼합물을 5시간 동안 65℃로 가열한 후에 O℃로 냉각시켰다. 상기 반응물을 Na2SO4·H2O로 켄칭시켜 실온에서 밤새 교반하였다. 상기 내용물을 셀라이트를 통해 여과하고, 상기 셀라이트 패드를 EtOAc로 세척하였다. 셀라이트 필터 케이크를 EtOAc (200 mL) 중에 현탁하고 5분 동안 비등시켰다. 상기 현탁액을 여과한 후에 합한 유기 여액을 진공하에 농축시켜서 5-(페닐메틸)-5-아자스피로[2.4]헵탄-7-올을 수득하였다 (983 mg, >100％). LCMS: (M+H)+: 204.1
파트 D:
5-아자스피로[2.4]헵탄-7-올 히드로클로라이드
5-(페닐메틸)-5-아자스피로[2.4]헵탄-7-올 (941.9 mg으로 추정됨, 4.63 mmol)을 MeOH 40 mL 중 1 N 수성 HCl 4.6 mL의 용액 중에 용해하고 탈기시켜 아르곤하에 두었다. 10％ Pd/C (280 mg)를 첨가하고, 상기 내용물을 철저하게 탈기시켜 밤새 수소 벌룬하에 두었다. 이어서, 상기 내용물을 탈기시켜 셀라이트를 통해 여과하고, 상기 셀라이트 패드를 MeOH로 세척하였다. 생성된 여액을 진공하에 농축시키고 MeOH (3×40 mL)로 공비증류하여 순수한 5-아자스피로[2.4]헵탄-7-올 히드로클로라이드를 수득하였다 (685 mg, 99％). LCMS: (M+H)+: 검출되지 않음.
파트 E:
5-(5-플루오로-6-히드라지노-2-메틸-4-피리미디닐)-5-아자스피로[2.4]헵탄-7-올
4,6-디클로로-5-플루오로-2-메틸피리미딘 (110 mg, 0.636 mmol)을 MeOH 3 mL 중에 용해한 후, 5-아자스피로[2.4]헵탄-7-올 히드로클로라이드 (685 mg, 0.668 mmol)를 첨가한 후에 DIPEA (243 ㎕, 1.4 mmol)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 120℃에서 30분 동안 극초단파 처리하고, 휘발물질을 진공하에 농축시키고, 잔류물을 DMSO (4 mL) 및 MeOH (1 mL)의 혼합물 중에 용해하였다. 이어서, 히드라진 일수화물 (600 ㎕)을 첨가하고, 상기 내용물을 60℃로 밤새 가열하였다. 이어서, 상기 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 RP-HPLC로 정제하여 5-(5-플루오로-6-히드라지노-2-메틸-4-피리미디닐)-5-아자스피로[2.4]헵탄-7-올을 수득하였다 (82 mg, 51％). LCMS: (M+H)+: 254.
파트 F:
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-(7-히드록시-5-아자스피로[2.4]헵트-5-일)-2-메틸-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드
5-(5-플루오로-6-히드라지노-2-메틸-4-피리미디닐)-5-아자스피로[2.4]헵탄-7-올 (82 mg, 0.324 mmol), (2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)아미노]메틸}프로판산 (115 mg, 0.27 mmol) 및 HOAt (44 mg, 0.324 mmol)를 DMF 2 mL 중에 용해하였다. NMM (0.089 mL, 0.81 mmol)을 첨가한 후에 EDC (62 mg, 0.324 mmol)를 첨가하였다. 밤새 실온에서 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(7S)-7-히드록시-5-아자스피로[2.4]헵트-5-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드를 수득하였다 (91 mg, 63％). LCMS: (M+H)+: 535.3.
파트 G:
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-(7-히드록시-5-아자스피로[2.4]헵트-5-일)-2-메틸-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(7S)-7-히드록시-5-아자스피로[2.4]헵트-5-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드 (91 mg, 0.202 mmol)를 AcOH/H2O (10 mL, 4:1)의 혼합물 중에 용해하고, LCMS에서 탈보호가 완료된 것으로 나타날 때까지 (밤새) 실온에서 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 진공하에서 건조될 때까지 농축시키고 RP-HPLC로 정제하여 ((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-(7-히드록시-5-아자스피로[2.4]헵트-5-일)-2-메틸-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 수득하였다 (25 mg, 27％). LCMS: (M+H)+: 451.2.
실시예 129
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[4-(디메틸아미노)-3,3-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 (부분입체이성질체들의 혼합물)
Figure pat00157
파트 A:
(3R)-4,4-디메틸-3-피롤리디놀 히드로클로라이드
MeOH (45 mL) 중 (3R)-4,4-디메틸-1-(페닐메틸)-3-피롤리디놀 [J. Med. Chem. 1992, 35, 4205-4213] (1.8634 g, 9.076 mmol)의 용액에 1 N 수성 HCl (9.1 mL, 9.1 mmol) 및 10％ Pd/C (50％ 물, 375 mg)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 벌룬 압력하에서 2일 동안 수소화한 후에 여과하였다. 상기 용액을 진공하에 농축시키고 MeOH (4×20 mL)로 공비증류하여 (3R)-4,4-디메틸-3-피롤리디놀 히드로클로라이드를 호박색 고체로서 수득하였다 (1.2654 g, 93％ 수율). LCMS: (M+H)+: 116.1.
파트 B:
페닐메틸 (4R)-4-히드록시-3,3-디메틸-1-피롤리딘카르복실레이트
1:1 DCM-1 N 수성 NaOH (33 mL) 중 (3R)-4,4-디메틸-3-피롤리디놀 히드로클로라이드 (0.9920 g, 6.630 mmol)의 혼합물에 벤질 클로로포르메이트 (0.994 mL, 6.963 mmol)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 밤새 격렬하게 교반한 후에 DCM (100 mL)으로 희석하였다. 상들을 분배하고, 유기 상을 무수 MgSO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 이어서, 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피 (헥산 중 40％ EtOAc)로 정제하여 페닐메틸 (4R)-4-히드록시-3,3-디메틸-1-피롤리딘카르복실레이트를 무색 오일로서 수득하였다 (1.4654 g, 89％ 수율). LCMS: (M+H)+: 250.1.
파트 C:
페닐메틸 3,3-디메틸-4-옥소-1-피롤리딘카르복실레이트
MeCN (50 mL) 중 페닐메틸 (4R)-4-히드록시-3,3-디메틸-1-피롤리딘카르복실레이트 (1.4088 g, 5.651 mmol)의 용액에 N-메틸모르폴린-N-옥시드 (0.861 g, 7.350 mmol) 및 테트라-N-프로필암모늄 퍼루테네이트 (0.099 g, 0.282 mmol)를 첨가하였다. 상기 용액을 90분 동안 교반하여 진공하에 농축시키고, 실리카겔 크로마토그래피 (헥산 중 20％ EtOAc)로 직접 정제하여 페닐메틸 3,3-디메틸-4-옥소-1-피롤리딘카르복실레이트를 무색 오일로서 수득하였다 (1.1321 g, 79％). LCMS: (M+Na)+: 270.4.
파트 D:
페닐메틸 (4Z)-3,3-디메틸-4-[(메틸옥시)이미노]-1-피롤리딘카르복실레이트
MeOH (37 mL) 중 페닐메틸 3,3-디메틸-4-옥소-1-피롤리딘카르복실레이트 (0.9135 g, 3.694 mmol)의 용액에 아세트산나트륨 (0.606 g, 7.387 mmol) 및 O-메틸히드록실아민 히드로클로라이드 (0.620 g, 7.397 mmol)를 첨가하였다. 상기 용액을 3시간 동안 교반한 후에 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 DCM (100 mL), 물 (5 mL) 및 포화 수성 NaHCO3 (30 mL) 사이에 분배하였다. 유기 상을 무수 MgSO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켜서 페닐메틸 (4Z)-3,3-디메틸-4-[(메틸옥시)이미노]-1-피롤리딘카르복실레이트를 옅은 황색 오일로서 수득하였다 (0.9124 g, 89％ 수율). LCMS: (M+H)+: 277.0.
파트 E:
페닐메틸 4-아미노-3,3-디메틸-1-피롤리딘카르복실레이트
THF (26 mL) 중 페닐메틸 (4Z)-3,3-디메틸-4-[(메틸옥시)이미노]-1-피롤리딘카르복실레이트 (0.7126 g, 2.579 mmol)의 용액에 보란-THF 착체 (THF 중 1.0 M, 5.2 mL, 5.2 mmol)를 첨가하였다. 상기 용액을 50℃에서 가열하고 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 상기 용액을 실온으로 냉각시키고 6 N 수성 NaOH (2 mL) 첨가로 켄칭시켰다. 상기 혼합물을 염수로 희석하고 Et2O (3×100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 무수 MgSO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. MeOH (20 mL) 중 상기 잔류물의 용액에 50％ 수성 NH2OH (5 mL)를 첨가하고, 상기 용액을 60℃에서 가열하고 밤새 교반하였다. 이어서, 상기 용액을 실온으로 냉각시키고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 DCM (200 mL)과 1 N 수성 NaOH (50 mL) 사이에 분배하고, 유기 상을 무수 MgSO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켜서 라세미체 페닐메틸 4-아미노-3,3-디메틸-1-피롤리딘카르복실레이트를 무색 오일로서 수득하였다 (0.5899 g, 92％ 수율). LCMS: (M+H)+: 249.1.
파트 F:
페닐메틸 4-(디메틸아미노)-3,3-디메틸-1-피롤리딘카르복실레이트
포름산 (5 mL) 및 포르말린 (5 mL) 중 라세미체 페닐메틸 4-아미노-3,3-디메틸-1-피롤리딘카르복실레이트 (0.5899 g, 2.376 mmol)의 용액을 100℃에서 가열하고 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 상기 용액을 실온으로 냉각시키고 6 N 수성 NaOH를 사용하여 pH 14로 조정하였다. 이어서, 상기 혼합물을 Et2O (2×100 mL)로 추출하고, 합한 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 2개의 상이 존재하는 것으로 관찰되었고, MeOH 가용성 부분을 수집하고 진공하에 농축시켜서 조 물질인 라세미체 페닐메틸 4-(디메틸아미노)-3,3-디메틸-1-피롤리딘카르복실레이트를 무색 오일로서 수득하였다 (0.6862 g, >100％ 조 수율). LCMS: (M+H)+: 277.2.
파트 G:
N,N,4,4-테트라메틸-3-피롤리딘아민
MeOH 중 라세미체 페닐메틸 4-(디메틸아미노)-3,3-디메틸-1-피롤리딘카르복실레이트 (0.6565 g으로 추정됨, 2.376 mmol)의 용액에 10％ Pd/C (50％ 물, 195 mg)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 벌룬 압력하에서 1시간 동안 수소화한 후에 여과하였다. 상기 용액을 진공하에 농축시켜서 라세미체 N,N,4,4-테트라메틸-3-피롤리딘아민을 거의 무색의 오일로서 수득하였다 (0.3479 g, 정량적인 수율). LCMS: (M+H)+: 143.1.
파트 H:
1-(5-플루오로-6-히드라지노-2-메틸-4-피리미디닐)-N,N,4,4-테트라메틸-3-피롤리딘아민
MeOH (3 mL) 중 N,N,4,4-테트라메틸-3-피롤리딘아민 (0.0918 g, 0.645 mmol)의 용액에 4,6-디클로로-5-플루오로-2-메틸피리미딘 (0.1088 g, 0.601 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (0.130 mL, 0.746 mmol)을 첨가하였다. 상기 용액을 120℃에서 극초단파 조사하에 가열하고 30분 동안 교반하였다. 이어서, 상기 용액을 실온으로 냉각시키고 진공하에 농축시켰다. 4:1 DMSO-MeOH (5 mL) 중 상기 잔류물의 용액에 히드라진 수화물 (0.5 mL)을 첨가하였다. 상기 용액을 65℃에서 가열하고 밤새 교반하였다. 이어서, 상기 용액을 실온으로 냉각시키고 DCM (50 mL)으로 희석하였다. 상기 혼합물을 포화 수성 NaHCO3 (20 mL)으로 세척하고, 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 길슨 RPLC로 정제하여 라세미체 1-(5-플루오로-6-히드라지노-2-메틸-4-피리미디닐)-N,N,4,4-테트라메틸-3-피롤리딘아민을 밝은 황색 고체로서 수득하였다 (0.0617 g, 36％). LCMS: (M+H)+: 283.2.
파트 I:
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[4-(디메틸아미노)-3,3-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드
DMF (3 mL) 중 라세미체 1-(5-플루오로-6-히드라지노-2-메틸-4-피리미디닐)-N,N,4,4-테트라메틸-3-피롤리딘아민 (0.0617 g, 0.219 mmol)의 용액에 (2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산 (0.0637 g, 0.209 mmol), N-메틸모르폴린 (0.120 mL, 1.091 mmol), 1-히드록시-7-아자벤조트리아졸 (34 mg, 0.250 mmol) 및 EDC (48 mg, 0.250 mmol)를 첨가하였다. 상기 용액을 밤새 교반한 후에 길슨 RPLC로 직접 정제하여 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[4-(디메틸아미노)-3,3-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드를 옅은 황색 오일로서 수득하였다 (0.0775 g, 65％ 수율, 부분입체이성질체들의 혼합물). LCMS: (M+H)+: 570.3.
파트 J:
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[4-(디메틸아미노)-3,3-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
MeOH (5 mL) 중 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[4-(디메틸아미노)-3,3-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 (0.0775 g, 0.136 mmol)의 용액에 10％ Pd/C (50％ 물, 23 mg)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 벌룬 압력하에서 1시간 동안 수소화한 후에 여과하였다. 상기 용액을 진공하에 농축시키고, 잔류물을 EtOAc-헥산으로부터 결정화하여 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[4-(디메틸아미노)-3,3-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 회백색 고체로서 수득하였다 (0.0566 g, 87％ 수율, 부분입체이성질체들의 혼합물). LCMS: (M+H)+: 480.1.
실시예 130
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(7-히드록시-5-아자스피로[2.4]헵트-5-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 (부분입체이성질체들의 혼합물)
Figure pat00158
파트 A:
5-(2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)-5-아자스피로[2.4]헵탄-7-올
DCM (5 mL) 중 2,4,6-트리클로로-5-플루오로피리미딘 (611 mg, 3.036 mmol)의 용액에 DIPEA (1.163 mL, 6.679 mmol)를 첨가한 후에 5-아자스피로[2.4]헵탄-7-올 히드로클로라이드 (실시예 128) (477 mg, 3.188 mmol)를 첨가하였다. 상기 용액을 실온에서 교반하였다. 1시간 후, 휘발물질을 진공하에 농축시키고 잔류물을 DMSO (4 mL) 및 MeOH (1 mL)의 혼합물 중에 용해하였다. 히드라진 일수화물 (3.055 mL)을 첨가하고, 상기 내용물을 실온에서 밤새 교반하였다. 잉여 히드라진을 진공하에 제거하고, 잔류 용액을 RP-HPLC로 정제하여 5-(2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)-5-아자스피로[2.4]헵탄-7-올로 추정되는 화합물 (제1 용출물, 167 mg) 및 또한 6-클로로-5-플루오로-2-히드라지노-4-(4-메틸-1-피페라지닐)피리미딘으로 추정되는 화합물 (제2 용출물, 312 mg)을 수득하였다. LCMS: (M+H)+: 274.0.
파트 B:
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(7-히드록시-5-아자스피로[2.4]헵트-5-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드
5-(2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)-5-아자스피로[2.4]헵탄-7-올 (167 mg 0.610 mmol), (2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)아미노]메틸}프로판산 (217 mg, 0.508 mmol) 및 HOAt (83 mg, 0.610 mmol)를 DMF 5 mL 중에 용해하였다. NMM (0.167 mL, 1.525 mmol)을 첨가한 후에 EDC (117 mg, 0.6101 mmol)를 첨가하였다. 밤새 실온에서 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(7S)-7-히드록시-5-아자스피로[2.4]헵트-5-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드를 수득하였다 (223 mg, 79％). LCMS: (M+H)+: 555.3.
파트 C:
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(7-히드록시-5-아자스피로[2.4]헵트-5-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(7S)-7-히드록시-5-아자스피로[2.4]헵트-5-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드 (223 mg, 0.401 mmol)를 AcOH/H2O (20 mL, 4:1)의 혼합물 중에 용해하고, LCMS에서 탈보호가 완료된 것으로 나타날 때까지 (밤새) 실온에서 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 진공하에서 건조될 때까지 농축시키고, RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(7-히드록시-5-아자스피로[2.4]헵트-5-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 수득하였다 (14 mg, 7％). LCMS: (M+H)+: 471.1.
실시예 131
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-[(2S)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00159
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-[(2S)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 일반적인 절차 C에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 히드로클로라이드 대신에 (3S)-1,3-디메틸피페라진 (실시예 64)을 사용하였다. LCMS: (M+H)+ 484.4.
실시예 132
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-[(3R)-3-(디메틸아미노)-1-피페리디닐]-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00160
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-[(3R)-3-(디메틸아미노)-1-피페리디닐]-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 일반적인 절차 C에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 히드로클로라이드 대신에 (3R)-N,N-디메틸-3-피페리딘아민 (실시예 118)을 사용하였다. LCMS: (M+H)+ 498.5.
실시예 133
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[4-(디메틸아미노)-3,3-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 (부분입체이성질체들의 혼합물)
Figure pat00161
파트 A:
1-(2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)-N.N,4,4-테트라메틸-3-피롤리딘아민
DCM (4 mL) 중 라세미체 N,N,4,4-테트라메틸-3-피롤리딘아민 (0.1629 g, 1.145 mmol, 실시예 129에 따라 제조함)의 용액에 2,4,6-트리클로로-5-플루오로피리미딘 (0.2219 g, 1.102 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (0.230 mL, 1.320 mmol)을 첨가하였다. 상기 용액을 실온에서 3시간 동안 교반한 후에 진공하에 농축시켰다. 4:1 DMSO-MeOH (5 mL) 중 상기 잔류물의 용액에 히드라진 수화물 (0.5 mL)을 첨가하고, 상기 용액을 밤새 교반하였다. 상기 용액을 DCM (50 mL)으로 희석하고 포화 수성 NaHCO3 (20 mL)으로 세척하였다. 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 길슨 RPLC로 정제하여 첫번째 라세미체 1-(2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)-N,N,4,4-테트라메틸-3-피롤리딘아민 (0.0546 g, 16％ 수율) (LCMS: (M+H)+: 303.1)을 황색/오렌지색 오일로서 수득한 후에 라세미체 4-클로로-6-[4-(디메틸아미노)-3,3-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-2(1H)-피리미디논 히드라존 (0.0859 g, 26％ 수율)을 황색/오렌지색 오일로서 수득하였다.
파트 B:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[4-(디메틸아미노)-3,3-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드
DMF (3 mL) 중 라세미체 1-(2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)-N,N,4,4-테트라메틸-3-피롤리딘아민 (0.0546 g, 0.180 mmol)의 용액에 (2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)아미노]메틸}프로판산, N,N-디이소프로필에틸아민 염 (71.1 mg, 0.166 mmol), N-메틸모르폴린 (0.100 mL, 0.910 mmol), 1-히드록시-7-아자벤조트리아졸 (27 mg, 0.198 mmol) 및 EDC (38 mg, 0.198 mmol)를 첨가하였다. 상기 용액을 밤새 교반한 후에 길슨 RPLC로 직접 정제하여 [(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[4-(디메틸아미노)-3,3-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드를 밝은 황색 오일로서 수득하였다 (0.0681 g, 70％ 수율, 부분입체이성질체들의 혼합물). LCMS: (M+H)+: 584.4.
파트 C:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[4-(디메틸아미노)-3,3-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
4:1 HOAc-물 (5 mL) 중 [(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[4-(디메틸아미노)-3,3-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드 (0.0681 g, 0.117 mmol)의 용액을 56시간 동안 교반한 후에 진공하에 농축시켰다. DCM (100 mL) 중 상기 잔류물의 용액을 포화 수성 NaHCO3 (30 mL)으로 세척하고, 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 길슨 RPLC로 정제하고 EtOAc-헥산으로부터 결정화하여 [(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[4-(디메틸아미노)-3,3-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 백색 고체로서 수득하였다 (0.0300 g, 51％ 수율, 부분입체이성질체들의 혼합물). LCMS: (M+H)+: 500.3.
실시예 134
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-(메틸티오)-6-(옥타히드로-2(1H)-이소퀴놀리닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드 (부분입체이성질체들의 혼합물)
Figure pat00162
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-(메틸티오)-6-(옥타히드로-2(1H)-이소퀴놀리닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 일반적인 절차 C에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 히드로클로라이드 대신에 시판되는 데카히드로이소퀴놀린을 사용하였다. LCMS: (M+H)+ 510.5.
실시예 135
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[7-(디메틸아미노)-5-아자스피로[2.4]헵트-5-일]-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 (부분입체이성질체들의 혼합물)
Figure pat00163
파트 A:
5-(2-에틸-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)-N,N-디메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-7-아민
MeOH (3 mL) 중 라세미체 N,N-디메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-7-아민 디히드로클로라이드 (0.163 g, 0.765 mmol, 실시예 136의 절차에 따라 제조함)의 용액에 4,6-디클로로-2-에틸-5-플루오로피리미딘 (0.1358 g, 0.696 mmol)을 첨가하였다. 상기 용액을 120℃에서 극초단파 조사하에 30분 동안 가열한 후에 진공하에 농축시켰다. 3:1 DMSO-MeOH (4 mL) 중 상기 잔류물의 용액에 히드라진 수화물 (0.5 mL)을 첨가하였다. 상기 용액을 50℃에서 가열하고 3일 동안 교반하였다. 이어서, 상기 용액을 실온으로 냉각시키고 DCM (100 mL)으로 희석하였다. 상기 혼합물을 포화 수성 NaHCO3 (20 mL)으로 세척하고, 수성 상을 신선한 분량의 DCM (50 mL)으로 역추출하였다. 합한 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 길슨 RPLC로 정제하여 라세미체 5-(2-에틸-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)-N,N-디메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-7-아민을 밝은 황색 오일로서 수득하였다 (0.0818 g, 40％ 수율). LCMS: (M+H)+: 295.2.
파트 B:
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[7-(디메틸아미노)-5-아자스피로[2.4]헵트-5-일]-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드
DMF (3 mL) 중 라세미체 5-(2-에틸-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)-N,N-디메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-7-아민 (0.0818 g, 0.278 mmol)의 용액에 (2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산 (0.0778 g, 0.255 mmol), N-메틸모르폴린 (0.140 mL, 1.273 mmol), 1-히드록시-7-아자벤조트리아졸 (42 mg, 0.309 mmol) 및 EDC (59 mg, 0.308 mmol)를 첨가하였다. 상기 용액을 밤새 교반한 후에 길슨 RPLC로 직접 정제하여 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[7-(디메틸아미노)-5-아자스피로[2.4]헵트-5-일]-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드를 황색 오일로서 수득하였다 (0.1058 g, 71％ 수율, 부분입체이성질체들의 혼합물). LCMS: (M+H)+: 582.3.
파트 C:
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[7-(디메틸아미노)-5-아자스피로[2.4]헵트-5-일]-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
MeOH (5 mL) 중 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[7-(디메틸아미노)-5-아자스피로[2.4]헵트-5-일]-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 (0.1058 g, 0.182 mmol)의 용액에 10％ Pd/C (50％ 물, 32 mg)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 벌룬 압력하에서 1시간 동안 수소화한 후에 여과하였다. 상기 용액을 진공하에 농축시키고, 잔류물을 EtOAc로 공비증류하고 EtOAc-헥산으로부터 결정화하여 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[7-(디메틸아미노)-5-아자스피로[2.4]헵트-5-일]-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 백색 고체로서 수득하였다 (0.0795 g, 89％ 수율, 부분입체이성질체들의 혼합물). LCMS: (M+H)+: 492.3.
실시예 136
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[7-(디메틸아미노)-5-아자스피로[2.4]헵트-5-일]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 (부분입체이성질체들의 혼합물)
Figure pat00164
파트 A:
에틸 1-아세틸시클로프로판카르복실레이트
DMF (150 mL) 중 에틸 3-옥소부타노에이트 (10.0 g, 76.84 mmol)의 용액에 탄산칼륨 (22.30 g, 161.3 mmol) 및 1,2-디브로모에탄 (6.62 mL, 76.82 mmol)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 2일 동안 교반한 후에 여과하였다. 상기 용액을 물 (300 mL)로 희석하고 Et2O (2×200 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 신선한 분량의 물 (100 mL)로 세척하여 무수 MgSO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 약 10 mbar에서 진공 증류시키고, 100℃에서 비등하는 분획물을 수집하여 에틸 1-아세틸시클로프로판카르복실레이트를 무색 오일로서 수득하였다 (7.6482 g, 64％).
파트 B:
5-(페닐메틸)-5-아자스피로[2.4]헵탄-4,7-디온
EtOH (54 mL) 중 에틸 1-아세틸시클로프로판카르복실레이트 (7.6482 g, 48.97 mmol)의 용액에 브롬 (2.76 mL, 53.87 mmol)을 시린지를 통해 서서히 첨가하였다. 오렌지색 용액을 2시간 동안 교반한 후에 진공하에 농축시켰다. EtOH (54 mL) 중 상기 잔류물의 0℃ 용액에 벤질아민 (13.4 mL, 122.7 mmol)을 시린지를 통해 서서히 첨가하고, 상기 혼합물을 교반하고 실온으로 밤새 가온시켰다. 상기 혼합물을 진공하에 농축시키고, DCM (200 mL)과 1 N 수성 HCl (100 mL) 사이에 분배하였다. 수성 상을 신선한 분량의 DCM (100 mL)으로 추출하고, 합한 유기 상을 무수 MgSO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피 (헥산 중 40％ EtOAc)로 정제하여 5-(페닐메틸)-5-아자스피로[2.4]헵탄-4,7-디온을 황색 고체로서 수득하였다 (2.7842 g, 26％). LCMS: (M+H)+: 216.1.
파트 C:
(7Z)-5-(페닐메틸)-5-아자스피로[2.4]헵탄-4,7-디온 7-(O-메틸옥심)
MeOH (65 mL) 중 5-(페닐메틸)-5-아자스피로[2.4]헵탄-4,7-디온 (2.7802 g, 12.92 mmol)의 용액에 아세트산나트륨 (2.12 g, 25.8 mmol) 및 O-메틸히드록실아민 히드로클로라이드 (2.16 g, 25.9 mmol)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 밤새 교반한 후에 DCM (100 mL)으로 희석하였다. 상기 혼합물을 포화 수성 NaHCO3으로 세척하고, 유기 상을 무수 MgSO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켜서 조 (7Z)-5-(페닐메틸)-5-아자스피로[2.4]헵탄-4,7-디온 7-(O-메틸옥심)을 황색 오일로서 수득하였다 (3.4094 g, >100％ 조 수율). LCMS: (M+H)+: 245.1.
파트 D:
5-(페닐메틸)-5-아자스피로[2.4]헵탄-7-아민
THF (130 mL) 중 (7Z)-5-(페닐메틸)-5-아자스피로[2.4]헵탄-4,7-디온 7-(O-메틸옥심) (3.1553 g으로 추정됨, 12.92 mmol)의 용액에 수소화리튬알루미늄 (1.58 g, 41.63 mmol)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 65℃에서 가열하고 3시간 동안 교반하였다. 이어서, 상기 혼합물을 0℃로 냉각시키고, Na2SO4·10 H2O를 첨가하였다. 상기 혼합물을 밤새 교반한 후에 1 N 수성 NaOH (6 mL)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 30분 동안 격렬하게 교반한 후에 DCM (3×50 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 상을 무수 MgSO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켜서 라세미체 조 5-(페닐메틸)-5-아자스피로[2.4]헵탄-7-아민을 밝은 황색 오일로서 수득하였다 (2.5355 g, 2개 단계 동안 97％). LCMS: (M+H)+: 203.1.
파트 E:
N,N-디메틸-5-(페닐메틸)-5-아자스피로[2.4]헵탄-7-아민
포름산 (20 mL) 및 포르말린 (20 mL) 중 라세미체 5-(페닐메틸)-5-아자스피로[2.4]헵탄-7-아민 (2.5355 g, 12.53 mmol)의 용액을 100℃에서 가열하고 3시간 동안 교반하였다. 이어서, 상기 용액을 0℃로 냉각시키고, 6 N 수성 NaOH를 사용하여 pH 14로 조정하였다. 생성된 현탁액을 Et2O (2×200 mL)로 추출하고, 합한 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켰다. 상기 혼합물을 여과하고, 용액을 진공하에 농축시켰다. 이어서, MeOH 가용성 부분을 길슨 RPLC로 정제하여 라세미체 N,N-디메틸-5-(페닐메틸)-5-아자스피로[2.4]헵탄-7-아민을 오렌지색 오일로서 수득하였다 (1.7643 g, 61％). LCMS: (M+H)+: 231.1.
파트 F:
N,N-디메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-7-아민 디히드로클로라이드
MeOH (18 mL) 중 라세미체 N,N-디메틸-5-(페닐메틸)-5-아자스피로[2.4]헵탄-7-아민 (0.8015 g, 3.479 mmol)의 용액에 1 N 수성 HCl (6.96 mL, 6.96 mmol) 및 10％ Pd/C (50％ 물, 160 mg)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 벌룬 압력하에서 밤새 수소화한 후에 여과하였다. 상기 용액을 진공하에 농축시켜서 조 라세미체 N,N-디메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-7-아민 디히드로클로라이드를 수득하였다 (0.8060 g, >100％ 조 수율). LCMS: (M+H)+: 141.1.
파트 G:
5-(2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)-N,N-디메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-7-아민
DCM (8 mL) 중 라세미체 N,N-디메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-7-아민 디히드로클로라이드 (0.4585 g, 2.151 mmol)의 혼합물에 2,4,6-트리클로로-5-플루오로피리미딘 (0.3234 g, 1.606 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (1.25 mL, 7.18 mmol)을 첨가하였다. 상기 용액을 3시간 동안 교반한 후에 진공하에 농축시켰다. 3:1 DMSO-MeOH 중 상기 잔류물의 용액에 히드라진 수화물 (1 mL)을 첨가하고, 상기 용액을 3일 동안 교반한 후에 DCM (100 mL)으로 희석하였다. 상기 혼합물을 포화 수성 NaHCO3 (20 mL)으로 세척하고, 수성 상을 신선한 분량의 DCM (50 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시키고 여과하였다. 상기 용액을 진공하에 농축시키고 잔류물을 길슨 RPLC로 정제하여 첫번째 라세미체 5-(2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)-N,N-디메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-7-아민 (0.0968 g, 20％ 수율) (LCMS: (M+H)+: 301.1)을 오렌지색 오일로서 수득한 후에 라세미체 4-클로로-6-[7-(디메틸아미노)-5-아자스피로[2.4]헵트-5-일]-5-플루오로-2(1H)-피리미디논 히드라존 (0.1990 g, 41％)을 오렌지색 발포체로서 수득하였다.
파트 H:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[7-(디메틸아미노)-5-아자스피로[2.4]헵트-5-일]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드
DMF (3 mL) 중 라세미체 5-(2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)-N,N-디메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-7-아민 (0.0968 g, 0.322 mmol)의 용액에 (2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)아미노]메틸}프로판산, N,N-디이소프로필에틸아민 염 (122.1 mg, 0.285 mmol), N-메틸모르폴린 (0.160 mL, 1.455 mmol), 1-히드록시-7-아자벤조트리아졸 (47 mg, 0.345 mmol) 및 EDC (66 mg, 0.344 mmol)를 첨가하였다. 상기 용액을 밤새 교반한 후에 길슨 RPLC로 직접 정제하여 [(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[7-(디메틸아미노)-5-아자스피로[2.4]헵트-5-일]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드를 밝은 자주색 오일로서 수득하였다 (0.0961 g, 58％, 부분입체이성질체들의 혼합물). LCMS: (M+H)+: 582.3.
파트 I:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[7-(디메틸아미노)-5-아자스피로[2.4]헵트-5-일]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
4:1 HOAc-물 (5 mL) 중 [(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[7-(디메틸아미노)-5-아자스피로[2.4]헵트-5-일]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드 (0.0961 g, 0.165 mmol)의 용액을 3일 동안 교반하였다. 상기 용액을 진공하에 농축시키고 DCM (100 mL)으로 희석하였다. 상기 용액을 포화 수성 NaHCO3 (25 mL)으로 세척하고, 유기 상을 무수 MgSO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 길슨 RPLC로 정제하여 원하는 분획물을 진공하에 농축시키고, MeOH으로 먼저 공비증류시킨 후에 EtOAc로 공비증류시켰다. 잔류물을 EtOAc-헥산으로부터 결정화하여 [(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[7-(디메틸아미노)-5-아자스피로[2.4]헵트-5-일]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 백색 고체로서 수득하였다 (0.0469 g, 57％, 부분입체이성질체들의 혼합물). LCMS: (M+H)+: 498.1.
실시예 137
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[메틸(4-피리디닐메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00165
파트 A:
2,6-디클로로-5-플루오로-N-메틸-N-(4-피리디닐메틸)-4-피리미딘아민
시판되는 N-메틸-1-(4-피리디닐)메탄아민 (0.305 g, 2.5 mmol)을 THF (5 mL) 중에 용해하였다. 상기 용액에 트리에틸아민 (0.38 mL, 2.73 mmol)을 첨가한 후에 2,4,6-트리클로로-5-플루오로피리미딘 (0.5 g, 2.5 mmol)을 첨가하고, 이것을 THF (5 mL) 중에 용해하였다. 상기 반응물이 2.5시간 동안 교반되도록 하였다. 상기 반응 혼합물을 물로 희석한 후에 에테르로 추출하였다. 유기물을 건조 (MgSO4)시키고 농축시켰다. 생성된 물질을 이동상으로서 95％ DCM 중 5％ MeOH의 용매 혼합물을 사용하여 실리카겔에서 여과함으로써 정제하여 2,6-디클로로-5-플루오로-N-메틸-N-(4-피리디닐메틸)-4-피리미딘아민을 갈색 오일상 고체로서 수득하였다 (0.3516 g, 49％). LCMS: (M+H)+ = 287.0.
파트 B:
2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-N-메틸-N-(4-피리디닐메틸)-4-피리미딘아민
2,6-디클로로-5-플루오로-N-메틸-N-(4-피리디닐메틸)-4-피리미딘아민 (0.3516 g, 1.23 mmol)을 DMSO 5 mL 및 히드라진 일수화물 (0.36 mL, 7.4229 mmol) 중에 용해하였다. 반응 용기를 압력 밀폐시키고 2.5시간 동안 5O℃로 가열하였다. 이어서, 상기 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여 2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-N-메틸-N-(4-피리디닐메틸)-4-피리미딘아민을 와인 색상의 고체로서 수득하였다 (0.0803 g, 23％). LCMS: (M+H)+ = 283.0.
파트 C:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[메틸(4-피리디닐메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드
2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-N-메틸-N-(4-피리디닐메틸)-4-피리미딘아민 (0.0803 g, 0.2847 mmol) 및 (2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)아미노]메틸}프로판산, 디이소프로필아민 염 형태 (0.146 g, 0.3406 mmol)를 DMF (4 mL) 중에 용해하였다. NMM (0.16 mL, 1.4552 mmol)을 첨가한 후에 HOAt (0.046 g, 0.3382 mmol) 및 EDC (0.065 g, 0.339 mmol)를 첨가하였다. 밤새 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[메틸(4-피리디닐메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드를 베이지색 고체로서 수득하였다 (0.0958 g, 60％). LCMS: (M+H)+ = 564.3.
파트 D:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[메틸(4-피리디닐메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[메틸(4-피리디닐메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드 (0.0958 g, 0.1701 mmol)를 아세트산 (8 mL) 및 물 (2 mL) 중에 용해하였다. 상기 반응 혼합물이 밤새 교반되도록 하였다. 휘발물질을 증발시키고, 생성된 물질을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[메틸(4-피리디닐메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 베이지색 고체로서 수득하였다 (0.0249 g, 31％). LCMS: (M+H)+ = 480.1.
실시예 138
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(트랜스)-3-(디메틸아미노)-4-메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00166
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(트랜스)-3-(디메틸아미노)-4-메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 D에 따라 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 (트랜스)-N,N,4-트리메틸-3-피롤리딘아민 (실시예 89)을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 486.6.
실시예 139
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(2S,3R)-3-히드록시-2-메틸-1-피롤리디닐]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00167
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(2S,3R)-3-히드록시-2-메틸-1-피롤리디닐]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 (2S,3R)-2-메틸-3-피롤리디놀 [Tetrahedron, 1998, 54, 12547-12560]을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 439.2.
실시예 140
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(3-히드록시-3-메틸-1-피롤리디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 (부분입체이성질체들의 혼합물)
Figure pat00168
파트 A:
3-메틸-1-(페닐메틸)-3-피롤리디놀
THF (30 mL) 및 에테르 (30 mL) 중 시판되는 1-(페닐메틸)-3-피롤리디논 (1.0 g, 5.71 mmol)의 용액에 0℃에서 MeMgBr (톨루엔:THF (3:1) 중 1.4 M 용액) (6.1 mL, 8.65 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응물을 0℃에서 1.5시간 동안 교반한 후에 물로 켄칭시키고 추출하였다. 유기 용매를 진공하에 제거하고 에테르로 다시 추출하고, 유기물을 건조 (Na2SO4)시키고 용매를 진공하에 제거하였다. RP-HPLC로 정제하여 라세미체 3-메틸-1-(페닐메틸)-3-피롤리디놀을 황색 오일로서 수득하였다 (0.501 g, 46％). LCMS: (M+H)+ = 192.3.
파트 B:
3-메틸-3-피롤리디놀
MeOH (30 mL) 중 3-메틸-1-(페닐메틸)-3-피롤리디놀 (0.501 g, 2.62 mmol) 및 Pd(C)의 용액을 일반적인 절차 A의 파트 C와 같은 표준 수소화 조건하에 3일 동안 처리하여 3-메틸-3-피롤리디놀을 오렌지색 오일로서 수득하였다 (0.239 g, 90％). LCMS: (M+H)+ = 102.1.
파트 C:
1-(2,6-디클로로-5-플루오로-4-피리미디닐)-3-메틸-3-피롤리디놀
THF 중 2,4,6-트리클로로-5-플루오로피리미딘 (0.476 g, 2.36 mmol) 및 트리에틸아민 (0.36 mL, 2.60 mmol)의 용액에 THF 및 MeOH (2 mL) 중 3-메틸-3-피롤리디놀 (0.239 g, 2.36 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응물을 실온에서 2.5시간 동안 교반한 후에 용매를 진공하에 제거하였다. 잔류물에 물을 첨가하고, 상기 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기물을 건조 (Na2SO4)시키고 증발시켜서 1-(2,6-디클로로-5-플루오로-4-피리미디닐)-3-메틸-3-피롤리디놀을 오렌지색 고체로서 수득하였다 (0.486 g, 77％). LCMS: (M+H)+ = 266.1.
파트 D:
1-(2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)-3-메틸-3-피롤리디놀
DMSO (5 mL) 중 1-(2,6-디클로로-5-플루오로-4-피리미디닐)-3-메틸-3-피롤리디놀 (0.486 g, 1.83 mmol) 및 히드라진 일수화물 (0.53 mL, 10.96 mmol)을 반응이 완료된 것으로 판단될 때까지 50℃에서 가열하였다. RP-HPLC로 정제하여 1-(2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)-3-메틸-3-피롤리디놀을 갈색 고체로서 수득하였다 (0.104 g, 21％). LCMS: (M+H)+ = 262.1.
파트 E:
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(3-히드록시-3-메틸-1-피롤리디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드
(2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산 (0.122 g, 0.4 mmol), 라세미체 1-(2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)-3-메틸-3-피롤리디놀 (0.104 g, 0.4 mmol), NMM (0.13 mL, 1.2 mmol), HOAt (0.054 g, 0.4 mmol), EDC (0.077 g, 0.4 mmol) 및 DMF (2 mL)를 합하였다. 반응이 완료되었을 때, 상기 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(3-히드록시-3-메틸-1-피롤리디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드를 부분입체이성질체들의 혼합물로서 수득하였다 (0.035 g, 16％). LCMS: (M+H)+ = 549.5.
파트 F:
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(3-히드록시-3-메틸-1-피롤리디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
MeOH (10 mL) 중 [(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(3-히드록시-3-메틸-1-피롤리디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 (0.035 g, 0.064 mmol) 및 Pd(C) (0.005 g)의 용액을 일반적인 절차 A의 파트 C와 같은 표준 수소화 조건하에 처리하였다. RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(3-히드록시-3-메틸-1-피롤리디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 (부분입체이성질체들의 혼합물)를 백색 고체로서 수득하였다 (0.010 g, 34％). LCMS: (M+H)+ = 459.4.
실시예 141
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-[(3S)-3-(히드록시메틸)-4-모르폴리닐]-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00169
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-[(3S)-3-(히드록시메틸)-4-모르폴리닐]-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 일반적인 절차 C에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 히드로클로라이드 대신에 시판되는 (3S)-3-모르폴리닐메탄올을 사용하였다. LCMS: (M+H)+ 487.5.
실시예 142
N-[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(옥타히드로피라지노[1,2-a]아제핀-2(1H)-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
Figure pat00170
N-[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(옥타히드로피라지노[1,2-a]아제핀-2(1H)-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드를 일반적인 절차 G에 따라 제조하되, 파트 A에서 (1S,4S)-2-메틸-2,5-디아자바이시클로[2.2.1]헵탄, 디히드로브로마이드 대신에 시판되는 데카히드로피라지노[1,2-A]아제핀을 사용하고 DIPEA를 1 당량 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 602.4.
실시예 143
[(2R)-3-[2-(2-클로로-5-플루오로-6-{[2-(4-모르폴리닐)에틸]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00171
[(2R)-3-[2-(2-클로로-5-플루오로-6-{[2-(4-모르폴리닐)에틸]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 D에 따라 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 시판되는 4-(2-아미노에틸)모르폴린을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 488.3.
실시예 144
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(2R)-2-(히드록시메틸)-4-메틸-1-피페라지닐]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00172
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(2R)-2-(히드록시메틸)-4-메틸-1-피페라지닐]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 [(2R)-4-메틸-2-피페라지닐]메탄올 [Tetrahedron: Asymmetry, 1993, 4, 2389-2398]을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 468.3.
실시예 145
N-[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(3R,5S)-3,4,5-트리메틸-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
Figure pat00173
파트 A:
1,1-디메틸에틸 (3R,5S)-3,5-디메틸-1-피페라진카르복실레이트
디클로로메탄 (25 mL) 중 시스-2,6-디메틸피페라진 (1.142 g, 10 mmol)의 용액에 0℃에서 디클로로메탄 (6 mL) 중 비스(1,1-디메틸에틸)디카르보네이트 (2.161 g, 9.9 mmol)를 적가하였다. 상기 반응 혼합물이 실온으로 가온되도록 하고 밤새 교반한 후에, 디클로로메탄으로 희석하고 포화 Na2CO3 수용액으로 세척하였다. 수성 층을 디클로로메탄으로 1회 역추출하였다. 합한 유기 층을 염수로 세척하여 건조 (MgSO4)시키고 증발시켜서 1,1-디메틸에틸 (3R,5S)-3,5-디메틸-1-피페라진카르복실레이트를 수득하였다 (2.04 g, 95％). LCMS: (M+H)+: 215.1.
파트 B:
1,1-디메틸에틸 (3R,5S)-3,4,5-트리메틸-1-피페라진카르복실레이트
디클로로메탄 (25 mL) 중 1,1-디메틸에틸 (3R,5S)-3,5-디메틸-1-피페라진카르복실레이트 (2.04 g, 9.5 mmol)의 용액에 0℃에서 포름알데히드 (1.075 mL, 37％ 수용액, 14.3 mmol)을 첨가한 후에 트리아세톡시수소화붕소나트륨 (2.628 g, 12.4 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물이 실온으로 가온되도록 하고 2시간 동안 교반한 후에, 디클로로메탄으로 희석하고 1 N NaOH 용액으로 세척하였다. 이어서, 유기물을 염수로 세척하여 건조 (MgSO4)시키고 증발시켜서 1,1-디메틸에틸 (3R,5S)-3,4,5-트리메틸-1-피페라진카르복실레이트를 수득하였다 (2.06 g, 95％). LCMS: (M+H)+: 229.2.
파트 C:
(2R,6S)-1,2,6-트리메틸피페라진, TFA 염
1,1-디메틸에틸 (3R,5S)-3,4,5-트리메틸-1-피페라진카르복실레이트 (253 mg, 1.1 mmol)를 디클로로메탄 (3 mL) 중에 용해하여 교반하였다. 트리플루오로아세트산 (1.2 mL)을 적가하고, 생성된 반응 혼합물을 실온에서 2.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 용매를 증발시키고, 조 물질인 (2R,6S)-1,2,6-트리메틸피페라진의 TFA 염을 다음 단계에 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 129.1.
파트 D:
N-[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(3R,5S)-3,4,5-트리메틸-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
N-[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(3R,5S)-3,4,5-트리메틸-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드를 일반적인 절차 G에 따라 제조하되, 파트 A에서 (1S,4S)-2-메틸-2,5-디아자바이시클로[2.2.1]헵탄, 디히드로브로마이드 대신에 (2R,6S)-1,2,6-트리메틸피페라진, TFA 염을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 486.3.
실시예 146
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(2R,3R)-3-(디메틸아미노)-2-메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00174
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(2R,3R)-3-(디메틸아미노)-2-메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 (2R,3R)-N,N,2-트리메틸-3-피롤리딘아민 [Tetrahedron, 1998, 54, 12547-12560]을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 466.4.
실시예 147
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(2,2,4-트리메틸-1-피페라지닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00175
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(2,2,4-트리메틸-1-피페라지닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 D에 따라 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 1,3,3-트리메틸-피페라진 (시판용)을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 486.3.
실시예 148
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(3,3,4-트리메틸-1-피페라지닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00176
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(3,3,4-트리메틸-1-피페라지닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 D에 따라 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 1,2,2-트리메틸-피페라진 (시판용)을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 486.3.
실시예 149
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(3R,5S)-3,4,5-트리메틸-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
Figure pat00177
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(3R,5S)-3,4,5-트리메틸-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 (2R,6S)-1,2,6-트리메틸피페라진, TFA 염 (실시예 145)을 사용하고 DIPEA를 3 당량 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 466.4.
실시예 150
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[7-(디메틸아미노)-5-아자스피로[2.4]헵트-5-일]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 (미지의 단일 부분입체이성질체)
Figure pat00178
파트 A:
(7Z)-5-(페닐메틸)-5-아자스피로[2.4]헵탄-4,7-디온 7-(O-메틸옥심)
5-(페닐메틸)-5-아자스피로[2.4]헵탄-4,7-디온 (실시예 128) (2.8619 g, 13.29 mmol), 나트륨 아세테이트 (2.23 g, 26.59 mmol) 및 O-메틸히드록실아민 히드로클로라이드 (2.22 g, 26.59)를 MeOH 65 mL 중에 용해하였다. 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 후에, DCM 300 mL로 희석하였다. 상기 혼합물을 포화 수성 NaHCO3 (200 mL)으로 세척하고, 유기물을 무수 MgSO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켜서 (7Z)-5-(페닐메틸)-5-아자스피로[2.4]헵탄-4,7-디온 7-(O-메틸옥심)을 수득하였다 (3.0864 g, 95％). LCMS: (M+H)+: 245.1.
파트 B:
7-아미노-5-(페닐메틸)-5-아자스피로[2.4]헵탄-4-온
7-아미노-5-(페닐메틸)-5-아자스피로[2.4]헵탄-4-온을 실시예 130의 파트 C에 따라 제조하되, 5-(페닐메틸)-5-아자스피로[2.4]헵탄-4,7-디온 대신에 (7Z)-5-(페닐메틸)-5-아자스피로[2.4]헵탄-4,7-디온 7-(O-메틸옥심)을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 203.1.
파트 C:
N,N-디메틸-5-(페닐메틸)-5-아자스피로[2.4]헵탄-7-아민
7-아미노-5-(페닐메틸)-5-아자스피로[2.4]헵탄-4-온 (2.535 g, 12.28 mmol)을 AcOH (20 mL) 및 수성 HCHO (20 mL)의 혼합물 중에 용해하고, 상기 내용물을 3시간 동안 100℃로 가열한 후에 0℃로 냉각시켰다. 상기 용액을 6 N 수성 NaOH를 사용하여 pH 14로 조정한 후에 Et2O (2×200 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시키고, RP-HPLC로 정제하여 N,N-디메틸-5-(페닐메틸)-5-아자스피로[2.4]헵탄-7-아민을 수득하였다 (2.6062 g, 92.5％). 거울상이성질체 혼합물을 키랄 LC로 분리하였다. E1 (1.4 g) LCMS: (M+H)+: 231. E2 (1.5 g) LCMS: (M+H)+: 231.
파트 E:
N,N-디메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-7-아민
N,N-디메틸-5-(페닐메틸)-5-아자스피로[2.4]헵탄-7-아민 (E1) (1.4 g, 0.18 mmol)을 MeOH 30 mL 중 1 N 수성 HCl 12 mL의 혼합물 중에 용해하고 탈기시켜 아르곤하에 두었다. 10％ Pd/C (280 mg)를 첨가하고, 상기 내용물을 철저하게 탈기시켜 밤새 수소 벌룬하에 두었다. 이어서, 상기 내용물을 탈기시켜 0.2 ㎛ 필터 팁 시린지를 통해 여과하였다. 생성된 여액을 진공하에 농축시키고, 잔류물을 1 N 수성 NaOH를 사용하여 pH 14로 조정하였다. 수성 상을 CH2Cl2 (2×100 mL)로 추출하고, 합한 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고, 진공하에 농축시켜서 순수한 N,N-디메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-7-아민을 수득하였다 (718 mg, 84％). LCMS: (M+H)+: 검출되지 않음.
파트 F:
2-클로로-5-플루오로-4,6-비스(페닐티오)피리미딘
DCM (250 mL) 중 2,4,6-트리클로로-5-플루오로피리미딘 (10.0635 g, 49.96 mmol)의 용액에 -30℃에서 페닐 히드로술파이드 (10.26 mL, 99.93 mmol)를 첨가하였다. 상기 용액에 DIEA (21.8 mL, 124.9 mmol)를 격렬한 교반하에서 첨가 깔때기를 통해 적가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반한 후에, 휘발성 물질을 진공하에 농축시키고, 잔류물을 MeOH (100 mL) 및 물 (200 mL) 중에 용해하였다. 생성된 옅은 황색 고체 침전물을 여과로 수집하였다. 침전물을 물 (2×100 mL)로 세척하고, 생성된 고체를 진공하에 건조시켜서 2-클로로-5-플루오로-4,6-비스(페닐티오)피리미딘을 수득하였다 (17.4080 g, 99％). LCMS: (M+H)+: 349.0.
파트 G:
2-클로로-5-플루오로-4,6-비스(페닐술포닐)피리미딘
2-클로로-5-플루오로-4,6-비스(페닐티오)피리미딘 (3.0185 g, 8.652 mmol)을 ACN (43 mL) 및 물 (86 mL)의 혼합물 중에 용해하였다. 상기 용액에 나트륨 퍼요오데이트 (11.10 g, 51.916 mmol)를 첨가한 후에, 루테늄(III) 클로라이드 (36 mg, 0.173 mmol)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 격렬하게 3.5시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 CH2Cl2 (2×100 mL)로 추출하고, 합한 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고, 진공하에 농축시켜서 순수한 2-클로로-5-플루오로-4,6-비스(페닐술포닐)피리미딘을 수득하였다 (2.51 g, 70％). LCMS: (M+H)+: 413.0.
파트 H:
5-(2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)-N,N-디메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-7-아민
N,N-디메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-7-아민 (464 mg, 3.31 mmol) 및 DIEA (580 ㎕, 3.31 mmol)를 DCM (43 mL) 중에 용해하고 0℃로 냉각시켰다. DCM 30 mL 중 2-클로로-5-플루오로-4,6-비스(페닐술포닐)피리미딘 (1.2427 g, 3.01 mmol)의 용액을 격렬한 교반하에서 적가하였다. 상기 혼합물을 30분 동안 교반한 후에 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 MeOH (30 mL) 중에 용해하여 히드라진 일수화물 (1.4 mL)을 첨가하고, 상기 내용물을 실온에서 밤새 교반한 후에 진공하에 농축시켰다. 조 잔류물을 CH2Cl2 (100 mL) 중에 용해하고, 상기 혼합물을 NaHCO3 (1×50 mL)으로 세척하였다. 수성 상을 CH2Cl2 (1×100 mL)로 추출하고, 합한 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 생성된 조 생성물을 RP-HPLC로 정제하여 5-(2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)-N,N-디메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-7-아민을 수득하였다 (465.5 mg, 53％). LCMS: (M+H)+: 301.2.
파트 I:
[(2R)-3-(2-{5-클로로-3-[7-(디메틸아미노)-5-아자스피로[2.4]헵트-5-일]-2-플루오로페닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드
[(2R)-3-(2-{5-클로로-3-[7-(디메틸아미노)-5-아자스피로[2.4]헵트-5-일]-2-플루오로페닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드를 일반적인 절차 E의 파트 C에 따라 제조하되, (5-클로로-2-플루오로-3-히드라지노페닐)(1-메틸에틸)아민 대신에 5-(2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)-N,N-디메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-7-아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+ : 588.3.
파트 J:
[(2R)-3-(2-{5-클로로-3-[7-(디메틸아미노)-5-아자스피로[2.4]헵트-5-일]-2-플루오로페닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-(2-{5-클로로-3-[7-(디메틸아미노)-5-아자스피로[2.4]헵트-5-일]-2-플루오로페닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 (300 mg, 0.51 mmol)를 MeOH 5 mL 중에 용해하였다. 알루미나 상 5％ 로듐 (240 mg)을 첨가하고, 상기 내용물을 수소 벌룬하에 밤새 교반하였다. 이어서, 상기 내용물을 여과하여 촉매를 제거하고, 여액을 진공하에 농축시켰다. 생성된 조 생성물을 역상 HPLC를 통해 정제하여 [(2R)-3-(2-{5-클로로-3-[7-(디메틸아미노)-5-아자스피로[2.4]헵트-5-일]-2-플루오로페닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 (미지의 단일 부분입체이성질체)를 수득하였다 (142 mg, 56％). LCMS: (M+H)+: 498.3.
실시예 151
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[7-(디메틸아미노)-5-아자스피로[2.4]헵트-5-일]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 (미지의 단일 부분입체이성질체)
Figure pat00179
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[7-(디메틸아미노)-5-아자스피로[2.4]헵트-5-일]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 (미지의 단일 부분입체이성질체)를 실시예 150에 따라 제조하되, 파트 E에서 E1 거울상이성질체 대신에 E2 거울상이성질체를 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 498.3.
실시예 152
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[3-(디메틸아미노)-2,2-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 (부분입체이성질체들의 혼합물)
Figure pat00180
파트 A:
메틸 2-메틸-N-[3-(메틸옥시)-3-옥소프로필]알라니네이트
1.25 M 메탄올계 HCl (460 mL) 중 N-(2-시아노에틸)-2-메틸알라닌 [J. Am. Chem. Soc. 1950, 72, 2599] (22.58 g)의 용액을 75℃에서 가열하고, 밤새 교반하였다. 이어서, 상기 용액을 진공하에 농축시키고 CHCl3 (200 mL)으로 희석하였다. 상기 혼합물을 여과하고, 용액을 포화 수성 NaHCO3으로 세척하였다. 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켜서 메틸 2-메틸-N-[3-(메틸옥시)-3-옥소프로필]알라니네이트를 무색 오일로서 수득하였다 (11.71 g, 40％ 수율). LCMS: (M+H)+: 204.1.
파트 B:
메틸 2-메틸-N-[3-(메틸옥시)-3-옥소프로필]-N-(페닐카르보닐)알라니네이트
1:1 DCM-물 (300 mL) 중 메틸 2-메틸-N-[3-(메틸옥시)-3-옥소프로필]알라니네이트 (11.71 g, 57.62 mmol)의 혼합물에 NaHCO3 (9.68 g, 115.2 mmol)을 첨가한 후에, 염화벤조일 (7.02 mL, 60.48 mmol)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 격렬하게 밤새 교반한 후, 상들을 분리하였다. 유기 상을 무수 MgSO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피 (헥산 중 35％ EtOAc)로 정제하여 메틸 2-메틸-N-[3-(메틸옥시)-3-옥소프로필]-N-(페닐카르보닐)알라니네이트를 무색 오일로서 수득하였다 (3.6787 g, 21％ 수율). LCMS: (M+H)+: 308.1.
파트 C:
메틸 5,5-디메틸-4-옥소-1-(페닐카르보닐)-3-피롤리딘카르복실레이트
톨루엔 (115 mL) 중 메틸 2-메틸-N-[3-(메틸옥시)-3-옥소프로필]-N-(페닐카르보닐)알라니네이트 (3.5589 g, 11.58 mmol)의 용액에 MeOH (0.94 mL, 23.21 mmol) 및 NaOMe (1.25 g, 23.14 mmol)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 60℃에서 가열하고 2시간 동안 교반하였다. 추가 분량의 MeOH (10 mL)를 첨가하고, 혼합물을 60℃에서 2시간 더 교반하였다. 이어서, 상기 혼합물을 진공하에 농축시키고, 잔류물을 DCM (200 mL) 및 1 N 수성 HCl (100 mL) 사이에 분배하였다. 유기 상을 무수 MgSO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켜서 조 메틸 5,5-디메틸-4-옥소-1-(페닐카르보닐)-3-피롤리딘카르복실레이트를 무색 오일로서 수득하였다 (2.746 g, 86％ 수율). LCMS: (M+H)+: 276.1.
파트 D:
2,2-디메틸-1-(페닐카르보닐)-3-피롤리디논
10:1 HOAc-물 (50 mL) 중 메틸 5,5-디메틸-4-옥소-1-(페닐카르보닐)-3-피롤리딘카르복실레이트 (2.5781 g, 9.364 mmol)의 용액을 100℃에서 가열하고, 42시간 동안 교반하였다. 상기 용액을 실온으로 냉각시키고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 DCM (200 mL) 중에 용해하고 포화 수성 NaHCO3으로 세척하였다. 유기 상을 무수 MgSO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켜서 조 2,2-디메틸-1-(페닐카르보닐)-3-피롤리디논을 밝은 황색 오일로서 수득하였다. LCMS: (M+H)+: 218.1.
파트 E:
(3E)-2,2-디메틸-1-(페닐카르보닐)-3-피롤리디논 O-메틸옥심
MeOH (50 mL) 중 2,2-디메틸-1-(페닐카르보닐)-3-피롤리디논 (2.0602 g, 9.482 mmol)의 용액에 나트륨 아세테이트 (0.956 g, 11.38 mmol) 및 메톡시아민 히드로클로라이드 (0.950 g, 11.37 mmol)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 밤새 교반한 후에 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 DCM (200 mL) 중에 용해하고, 포화 수성 NaHCO3 (50 mL), 물 (50 mL) 및 염수 (50 mL)로 세척하였다. 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켜서 (3E)-2,2-디메틸-1-(페닐카르보닐)-3-피롤리디논 O-메틸옥심을 밝은 황색 오일로서 수득하였고 (1.9567 g, 84％ 수율), 이것을 고진공하에 고화시켰다. LCMS: (M+H)+: 247.2.
파트 F:
2,2-디메틸-1-(페닐메틸)-3-피롤리딘아민
THF (80 mL) 중 (3E)-2,2-디메틸-1-(페닐카르보닐)-3-피롤리디논 O-메틸옥심 (1.9492 g, 7.914 mmol)의 용액에 수소화리튬알루미늄 (0.900 g, 23.72 mmol)을 첨가하고, 상기 혼합물을 65℃에서 가열하고 5시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 0℃로 냉각시키고, Na2SO4·10 H2O (2 g)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 30분 동안 교반한 후에, 1 N 수성 NaOH (100 mL)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 Et2O (3×150 mL)로 추출하고, 합한 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켜서 조 라세미체 2,2-디메틸-1-(페닐메틸)-3-피롤리딘아민을 밝은 황색 오일로서 수득하였다 (1.8247 g, >100％ 조 수율). LCMS: (M+H)+: 205.2.
파트 G:
N,N,2,2-테트라메틸-1-(페닐메틸)-3-피롤리딘아민
포름산 (15 mL) 및 포르말린 (15 mL) 중 라세미체 2,2-디메틸-1-(페닐메틸)-3-피롤리딘아민 (1.6169 g으로 추정됨, 7.914 mmol)의 용액을 100℃에서 가열하고 3시간 동안 교반하였다. 이어서, 상기 용액을 0℃로 냉각시키고, 6 N 수성 NaOH를 사용하여 pH 14로 조정하였다. 상기 혼합물을 Et2O (3×100 mL)로 추출하고, 합한 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 길슨 RPLC로 정제하여 라세미체 N,N,2,2-테트라메틸-1-(페닐메틸)-3-피롤리딘아민을 오렌지색 오일로서 수득하였다 (0.5637 g, 2개 단계 동안 31％ 수율). LCMS: (M+H)+: 233.3.
파트 H:
N,N,2,2-테트라메틸-3-피롤리딘아민
MeOH (24 mL) 중 라세미체 N,N,2,2-테트라메틸-1-(페닐메틸)-3-피롤리딘아민 (0.5637 g, 2.426 mmol)의 용액에 1 N 수성 HCl (4.9 mL) 및 10％ Pd/C (50％ 물, 113 mg)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 밤새 수소화한 후에 0.2 ㎛ 막을 통해 여과하였다. 생성된 용액을 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 1 N 수성 NaOH (20 mL)로 희석하고, DCM (2×100 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켜서 조 라세미체 N,N,2,2-테트라메틸-3-피롤리딘아민을 옅은 황색 오일로서 수득하였다 (0.2930 g, 85％ 수율). LCMS: (M+H)+: 143.1.
파트 I:
트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-6-[3-(디메틸아미노)-2,2-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트
DMF (6 mL) 중 라세미체 N,N,2,2-테트라메틸-3-피롤리딘아민 (0.1466 g, 1.031 mmol)의 용액에 N,N-디이소프로필에틸아민 (0.220 mL, 1.263 mmol) 및 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-(2,6-디클로로-5-플루오로-4-피리미디닐)-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트 (0.513 g, 1.031 mmol)를 첨가하고, 상기 용액을 밤새 교반하였다. 상기 용액을 Et2O (100 mL) 및 물 (20 mL) 사이에 분배하고, 유기 상을 신선한 분량의 물 (20 mL)로 세척하였다. 합한 수성 상을 신선한 분량의 Et2O (50 mL)로 추출하고, 합한 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 구배 실리카겔 크로마토그래피 (헥산 중 0％→100％ EtOAc)로 정제하여 라세미체 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-6-[3-(디메틸아미노)-2,2-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트를 백색 발포체로서 수득하였다 (0.4647 g, 75％ 수율). LCMS: (M+H)+: 603.3.
파트 J:
1-(2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)-N,N,2,2-테트라메틸-3-피롤리딘아민 펜타히드로클로라이드
MeOH (5 mL) 중 라세미체 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-6-[3-(디메틸아미노)-2,2-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트 (0.4618 g, 0.766 mmol)의 용액에 디옥산 중 4 N HCl (5 mL)을 첨가하였다. 상기 용액을 3일 동안 교반한 후에 진공하에 농축시켜서 라세미체 1-(2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)-N,N,2,2-테트라메틸-3-피롤리딘아민 펜타히드로클로라이드를 오렌지색 오일로서 수득하였고 (0.3673 g, 99％ 수율), 이것을 진공하에서 결정화하였다. LCMS: (M+H)+: 303.1.
파트 K:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[3-(디메틸아미노)-2,2-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드
DMF (5 mL) 중 라세미체 1-(2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)-N,N,2,2-테트라메틸-3-피롤리딘아민 펜타히드로클로라이드 (0.3649 g, 0.752 mmol)의 용액에 (2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산 (0.2140 g, 0.701 mmol), N-메틸모르폴린 (0.770 mL, 7.00 mmol), 1-히드록시-7-아자벤조트리아졸 (114 mg, 0.838 mmol) 및 EDC (161 mg, 0.840 mmol)를 첨가하였다. 상기 용액을 밤새 교반하고, 길슨 RPLC로 직접 정제하여 [(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[3-(디메틸아미노)-2,2-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드를 갈색 오일로서 수득하였다 (0.1755 g, 42％ 수율, 부분입체이성질체들의 혼합물). LCMS: (M+H)+: 590.4.
파트 L:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[3-(디메틸아미노)-2,2-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
MeOH (10 mL) 중 [(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[3-(디메틸아미노)-2,2-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 (0.1737 g, 0.294 mmol)의 용액에 5％ Rh/C (175 mg)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 50 psi에서 밤새 수소화한 후에 0.2 ㎛ 막을 통해 여과하고 진공하에 농축시켰다. MeOH 중 상기 잔류물의 용액 (4 mL)에 20％ Pd(OH)2/C (50％ 물, 5 mg)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 벌룬 압력하에서 50분 동안 수소화하였다. 이어서, 상기 혼합물을 0.2 ㎛ 막을 통해 여과하고, 용액을 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 길슨 RPLC로 정제하여 [(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[3-(디메틸아미노)-2,2-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 백색 고체로서 수득하였고 (0.0670 g, 46％ 수율, 부분입체이성질체들의 혼합물), 그 후 EtOAc-헥산으로부터 결정화하였다. LCMS: (M+H)+: 500.3.
실시예 153
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[3-(3-피리디닐)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 (부분입체이성질체들의 혼합물)
Figure pat00181
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[3-(3-피리디닐)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 시판되는 3-(3-피롤리디닐)피리딘을 사용하였다 (부분입체이성질체들의 혼합물). LCMS: (M+H)+ 486.3.
실시예 154
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-[2-(히드록시메틸)-4-모르폴리닐]-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00182
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-[2-(히드록시메틸)-4-모르폴리닐]-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 일반적인 절차 C에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 히드로클로라이드 대신에 시판되는 2-모르폴리닐메탄올을 사용하였다 (부분입체이성질체들의 혼합물). LCMS: (M+H)+ 487.5.
실시예 155
N-[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-(트랜스-2,4,5-트리메틸-1-피페라지닐)-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드 (D1, 미지의 단일 부분입체이성질체)
Figure pat00183
파트 A:
페닐메틸 (트랜스)-2,5-디메틸-1-피페라진카르복실레이트 (거울상이성질체 혼합물)
디클로로메탄 (25 mL) 중 (2R,5S)-2,5-디메틸피페라진 (시판용)(3.495 g, 30 mmol)의 용액에 0℃에서 트리에틸아민 (3.76 mL, 27 mmol)을 첨가한 후에, 벤질 클로로포르메이트 (4.0 mL, 27 mmol)를 적가하였다. 상기 반응 혼합물이 실온으로 가온되도록 하고 밤새 교반하였다. 이어서, 용매를 건조될 때까지 증발시켰다. 잔류물을 수성 1 N HCl 용액 중에 녹이고, EtOAc로 세척하였다. 유기 층을 1 N HCl 용액으로 2회 추출하고, 합한 수성 층을 6 N NaOH를 사용하여 약 pH 11로 염기성화시켰다. 생성된 염기성 수용액을 EtOAc로 3회 추출하였다. 합한 유기 층을 염수로 세척하여 건조 (MgSO4)시키고 증발시켜서 페닐메틸 트랜스-2,5-디메틸-1-피페라진카르복실레이트 (거울상이성질체 혼합물)를 수득하였다 (1.35 g, 18％). LCMS: (M+H)+: 249.1.
파트 B:
페닐메틸 트랜스-2,4,5-트리메틸-1-피페라진카르복실레이트 (거울상이성질체 1)
디클로로메탄 (40 mL) 중 페닐메틸 트랜스-2,5-디메틸-1-피페라진카르복실레이트 (거울상이성질체 혼합물) (1.35 g, 5.43 mmol)의 용액에 0℃에서 포름알데히드 (0.817 mL, 37％ 수용액, 10.87 mmol)를 첨가한 후에, 트리아세톡시수소화붕소나트륨 (1.726 g, 8.14 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물이 실온으로 가온되도록 하고 2시간 동안 교반한 후에 디클로로메탄으로 희석하고 1 N NaOH 용액으로 세척하였다. 유기물을 염수로 세척하여 건조 (MgSO4)시키고 증발시켜서 페닐메틸 트랜스-2,4,5-트리메틸-1-피페라진카르복실레이트 (거울상이성질체 혼합물)를 수득하였다 (1.42 g, 100％). 페닐메틸 트랜스-2,4,5-트리메틸-1-피페라진카르복실레이트 (거울상이성질체 1) (480 mg) 및 페닐메틸 트랜스-2,4,5-트리메틸-1-피페라진카르복실레이트 (거울상이성질체 2) (400 mg)를 키랄 크로마토그래피로 분리하였다. LCMS: (M+H)+: 263.3.
파트 C:
트랜스-1,2,5-트리메틸피페라진, 히드로클로라이드 염 (거울상이성질체 1)
페닐메틸 트랜스-2,4,5-트리메틸-1-피페라진카르복실레이트 (거울상이성질체 1) (480 mg, 1.83 mmol)를 MeOH 30 mL 중에 용해하고 탈기시켜 아르곤하에 두었다. 10％ Pd/C (96 mg)를 첨가하고, 상기 내용물을 철저하게 탈기시켜 대략 3시간 동안 수소 벌룬하에 두었다. 이어서, 상기 내용물을 탈기시켜 셀라이트를 통해 여과하고, 상기 셀라이트 패드를 DCM 및 MeOH로 세척하였다. 1 N HCl (3.8 mL)을 생성된 여액에 첨가하고, 이것을 진공하에 농축시켜서 트랜스-1,2,5-트리메틸피페라진, 히드로클로라이드 염 (거울상이성질체 1)을 수득하였다 (370 mg, 100％). LCMS: (M+H)+: 129.1.
파트 D:
N-[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-(트랜스-2,4,5-트리메틸-1-피페라지닐)-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드 (D1, 미지의 단일 부분입체이성질체)
N-[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-(트랜스-2,4,5-트리메틸-1-피페라지닐)-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드를 일반적인 절차 G에 따라 제조하되, 파트 A에서 (1S,4S)-2-메틸-2,5-디아자바이시클로[2.2.1]헵탄, 디히드로브로마이드 대신에 트랜스-1,2,5-트리메틸피페라진, 히드로클로라이드 염 (거울상이성질체 1)을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 486.1.
실시예 156
{(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(6-{(3R)-3-[(디메틸아미노)메틸]-4-모르폴리닐}-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}히드록시포름아미드
Figure pat00184
파트 A:
(3S)-N,N-디메틸-5-옥소-4-(페닐메틸)-3-모르폴린카르복스아미드
THF (50 mL) 중 (3S)-5-옥소-4-(페닐메틸)-3-모르폴린카르복실산 (1.5 g, 6.4 mmol) [J. Chem. Soc, Perkin Trans. 1, 1985, 2577-2580]의 용액에 디메틸아민 (3.8 mL, 7.6 mmol, THF 중 2 M), EDC (1.46 g, 7.7 mmol), HOAt (1.06 g, 7.7 mmol) 및 NMM (3.5 mL, 30 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 밤새 교반하고, THF를 EtOAc로 대체하면서 증발시켰다. 1 M HCl을 첨가하고, 상들을 분리하였다. 수성 층을 EtOAc로 2회 추출하고, 합한 유기물을 황산나트륨에서 건조시켰다. 진공하에 농축시켜서 (3S)-N,N-디메틸-5-옥소-4-(페닐메틸)-3-모르폴린카르복스아미드를 수득하였고, 이것을 RP-HPLC로 정제하였다. LCMS: (M+H)+: 263.1.
파트 B:
디메틸{[(3R)-4-(페닐메틸)-3-모르폴리닐]메틸}아민
(3S)-N,N-디메틸-5-옥소-4-(페닐메틸)-3-모르폴린카르복스아미드 (390 mg, 1.5 mmol)를 THF (20 mL) 중에 용해하고, 용액을 0℃로 냉각시켰다. LiAlH4 (225 mg, 5.9 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 밤새 환류시켰다. 0℃로 냉각시킨 후, 물 (1.4 mL)을 첨가한 후에, 15％ (w/w) NaOH (수성) (1.4 mL) 및 최종적으로 또다른 분량의 물 (4.2 mL)을 첨가하였다. 30분 동안 교반한 후 여과하고 진공하에 농축하여 조 혼합물을 수득하였고, 이것을 RP-HPLC로 정제하여 디메틸{[(3R)-4-(페닐메틸)-3-모르폴리닐]메틸}아민을 수득하였다 (510 mg, 41％). LCMS: (M+H)+: 235.2.
파트 C:
디메틸[(3R)-3-모르폴리닐메틸]아민.HCl
탈기된 MeOH 및 4방울의 진한 HCl 중 디메틸{[(3R)-4-(페닐메틸)-3-모르폴리닐]메틸}아민 (510 mg)의 용액에 10％ (Pd/C) (100 mg)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 50 psi에서 파르 진탕기 상에서 3시간 동안 수소화시킨 후에 여과하고 진공하에 농축시켰다. 이로써, 디메틸[(3R)-3-모르폴리닐메틸]아민을 히드로클로라이드 염으로써 수득하였다. LCMS: (M+H)+: 145.2.
파트 D:
{(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(6-{(3R)-3-[(디메틸아미노)메틸]-4-모르폴리닐}-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}히드록시포름아미드
{(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(6-{(3R)-3-[(디메틸아미노)메틸]-4-모르폴리닐}-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}히드록시포름아미드를 일반적인 절차 E에 따라 제조하되, 파트 A에서 이소프로필 아민 대신에 디메틸[(3R)-3-모르폴리닐메틸]아민 히드로클로라이드를 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 502.2.
실시예 157
[(2R)-3-[2-(2-클로로-5-플루오로-6-{[2-메틸-2-(4-모르폴리닐)프로필]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00185
파트 A:
트리스(1,1-디메틸에틸) 2-(2-클로로-5-플루오로-6-{[2-메틸-2-(4-모르폴리닐)프로필]아미노}-4-피리미디닐)-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트
DMF (10 mL) 중 시판되는 [2-메틸-2-(4-모르폴리닐)프로필]아민 (0.158 g, 1.00 mmol)의 교반된 용액에 질소 대기하에 0℃에서 디이소프로필에틸아민 (0.19 mL, 1.1 mmol)을 첨가한 직후에 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-(2,6-디클로로-5-플루오로-4-피리미디닐)-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트 (0.497 g, 1.00 mmol)를 첨가하였다. 상기 반응물이 실온으로 가온되도록 하고 밤새 교반하였다. 이어서, 에테르를 첨가하고, 혼합물을 물로 세척하였다. 수성 층을 에테르로 역추출하고, 합한 유기물을 건조 (Na2SO4)시키고 진공하에 농축시켰다. 생성된 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피 (헥산 중 5％→60％ 에틸 아세테이트, 1％ 트리에틸아민)로 정제하여 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-(2-클로로-5-플루오로-6-{[2-메틸-2-(4-모르폴리닐)프로필]아미노}-4-피리미디닐)-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트를 투명한 오일로서 수득하였다 (0.578 g, 94％). LCMS: (M+H)+ = 619.4.
파트 B:
2-클로로-5-플루오로-6-{[2-메틸-2-(4-모르폴리닐)프로필]아미노}-4(1H)-피리미디논 히드라존
MeOH (8 mL) 중 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-(2-클로로-5-플루오로-6-{[2-메틸-2-(4-모르폴리닐)프로필]아미노}-4-피리미디닐)-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트 (0.578 g, 0.94 mmol)의 현탁액에 1,4-디옥산 중 4 M HCl (8 mL)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 진공하에 제거하고, 조 잔류물을 수성 K2CO3 추출 후처리로 처리하여 2-클로로-5-플루오로-6-{[2-메틸-2-(4-모르폴리닐)프로필]아미노}-4(1H)-피리미디논 히드라존을 갈색 오일로서 수득하였다 (0.249 g). LCMS: (M+H)+ = 319.2.
파트 C:
[(2R)-3-[2-(2-클로로-5-플루오로-6-{[2-메틸-2-(4-모르폴리닐)프로필]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드
(2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산 (0.238 g, 0.78 mmol), 2-클로로-5-플루오로-6-{[2-메틸-2-(4-모르폴리닐)프로필]아미노}-4(1H)-피리미디논 히드라존 (0.249 g), NMM (0.26 mL, 2.35 mmol), HOAt (0.106 g, 0.78 mmol), EDC (0.150 g, 0.78 mmol) 및 DMF (4 mL)를 합하고, 용액을 밤새 교반하였다. RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-3-[2-(2-클로로-5-플루오로-6-{[2-메틸-2-(4-모르폴리닐)프로필]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드를 갈색 오일로서 수득하였다 (0.169 g). LCMS: (M+H)+ = 606.3.
파트 D:
[(2R)-3-[2-(2-클로로-5-플루오로-6-{[2-메틸-2-(4-모르폴리닐)프로필]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-[2-(2-클로로-5-플루오로-6-{[2-메틸-2-(4-모르폴리닐)프로필]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 (0.169 g, 0.28 mmol) 및 Pd(OH)2 (0.017 g)를 일반적인 절차 E의 파트 D에 기재된 바에 따라 처리하여 [(2R)-3-[2-(2-클로로-5-플루오로-6-{[2-메틸-2-(4-모르폴리닐)프로필]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 백색 고체로서 수득하였다 (0.070 g, 49％). LCMS: (M+H)+ = 516.3.
실시예 158
N-[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-(트랜스-2,4,5-트리메틸-1-피페라지닐)-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드 (D2, 미지의 단일 부분입체이성질체)
Figure pat00186
파트 A:
트랜스-1,2,5-트리메틸피페라진, 히드로클로라이드 염 (거울상이성질체 2)
페닐메틸 트랜스-2,4,5-트리메틸-1-피페라진카르복실레이트 (거울상이성질체 2) (실시예 155, 파트 B) (400 mg, 1.52 mmol)를 MeOH 30 mL 중에 용해하고 탈기시켜 아르곤하에 두었다. 10％ Pd/C (80 mg)를 첨가하고, 상기 내용물을 철저하게 탈기시켜 대략 3시간 동안 수소 벌룬하에 두었다. 이어서, 상기 내용물을 탈기시켜 셀라이트를 통해 여과하고, 상기 셀라이트 패드를 DCM 및 MeOH로 세척하였다. 1 N HCl (3.2 mL)을 생성된 여액에 첨가하고, 이것을 진공하에 농축시켜서 트랜스-1,2,5-트리메틸피페라진, 히드로클로라이드 염 (거울상이성질체 2)을 수득하였다 (370 mg, 100％). LCMS: (M+H)+: 129.1.
파트 B:
N-[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-(트랜스-2,4,5-트리메틸-1-피페라지닐)-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드 (D2, 미지의 단일 부분입체이성질체)
N-[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-(트랜스-2,4,5-트리메틸-1-피페라지닐)-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드를 일반적인 절차 G에 따라 제조하되, 파트 A에서 (1S,4S)-2-메틸-2,5-디아자바이시클로[2.2.1]헵탄, 디히드로브로마이드 대신에 트랜스-1,2,5-트리메틸피페라진, 히드로클로라이드 염 (거울상이성질체 2)을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 486.1.
실시예 159
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[4-(디메틸아미노)-3,3-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 (D1, 미지의 단일 부분입체이성질체)
Figure pat00187
파트 A:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[4-(디메틸아미노)-3,3-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드
DMF (77 mL) 중 라세미체 1-(2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)-N,N,4,4-테트라메틸-3-피롤리딘아민 (7.37 g, 24.34 mmol, 실시예 133의 절차에 따라 제조함)의 용액에 (2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산 (7.08 g, 23.18 mmol), N-메틸모르폴린 (12.75 mL, 116.0 mmol), 1-히드록시-7-아자벤조트리아졸 (3.79 g, 27.85 mmol) 및 EDC (5.33 g, 27.80 mmol)를 첨가하였다. 상기 용액을 밤새 교반한 후에 Et2O (100 mL)로 희석하고 물 (3×100 mL)로 세척하였다. 합한 수성 상을 신선한 분량의 Et2O (100 mL)로 추출하고, 상기 유기 상을 신선한 분량의 물 (50 mL)로 세척하였다. 합한 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc (200 mL)로 희석하고, 생성된 용액을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켜서 조 [(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[4-(디메틸아미노)-3,3-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드를 수득하였다 (12.52 g, 92％ 수율, 부분입체이성질체들의 혼합물). LCMS: (M+H)+: 590.2.
부분입체이성질체 혼합물을 키랄 정제용 초임계 유체 크로마토그래피 (키랄셀(Chiralcel) OJ-H 21.2×250 mm, 15％ MeOH (0.5％ 이소프로필아민) 85％ CO2, 70 mL/분, 35℃, 280 nm 검출, 주기 당 16 mg 주입)로 정제 및 분리하여 거울상이성질체 둘다를 순수한 형태로 수득하였다.
파트 B:
[(2R)-3-(2-{3-클로로-6-[4-(디메틸아미노)-3,3-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 (D1, 미지의 단일 부분입체이성질체)
MeOH (66 mL) 중 [(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[4-(디메틸아미노)-3,3-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드의 제1 용출 거울상이성질체 (3.90 g, 6.61 mmol)의 용액에 20％ Pd(OH)2/C (50％ 물, 390 mg)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 30분 동안 벌룬 압력하에서 수소화한 후에 0.2 ㎛ 막을 통해 여과하였다. 상기 용액을 진공하에 농축시키고, 잔류물을 길슨 RPLC로 정제하였다. 원하는 분획물을 합하여 진공하에 농축시키고 MeOH로 공비증류하였다. 잔류물을 EtOAc-헥산으로부터 결정화하여 [(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[4-(디메틸아미노)-3,3-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드를 밝은 핑크색 고체로서 수득하였다 (1.6820 g, 51％ 수율, 단일 거울상이성질체, 미지의 상대 배열). LCMS: (M+H)+: 500.3.
실시예 160
[(2R)-3-(2-{3-클로로-6-[4-(디메틸아미노)-3,3-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 (D2, 미지의 단일 부분입체이성질체)
Figure pat00188
MeOH (50 mL) 중 [(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[4-(디메틸아미노)-3,3-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드의 제2 용출 거울상이성질체 (3.1 g, 5.25 mmol, 실시예 159에 따름)의 용액에 20％ Pd(OH)2/C (50％ 물, 310 mg)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 30분 동안 벌룬 압력하에서 수소화한 후에 여과하였다. 상기 용액을 진공하에 농축시키고, 잔류물을 길슨 RPLC로 정제하였다. 원하는 분획물을 합하여 진공하에 농축시키고 MeOH로 공비증류한 후에 EtOAc로 공비증류하였다. 잔류물을 EtOAc-헥산으로부터 결정화하여 [(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[4-(디메틸아미노)-3,3-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드를 밝은 핑크색 고체로서 수득하였다 (1.0294 g, 39％ 수율, 단일 거울상이성질체, 미지의 상대 배열). LCMS: (M+H)+: 500.3.
실시예 161
[(2R)-3-(2-{3-클로로-6-[1-(디메틸아미노)-3-아자바이시클로[3.1.0]헥스-3-일]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 (부분입체이성질체들의 혼합물)
Figure pat00189
파트 A:
N,N-디메틸-3-(페닐메틸)-3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-1-아민
포름산 (6 mL) 및 모르말린 (6 mL) 중 라세미체 3-(페닐메틸)-3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-1-아민 [Tetrahedron Lett. 2003, 44, 2485] (0.5930 g, 3.150 mmol)의 용액을 100℃에서 가열하고 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 상기 용액을 실온으로 냉각시키고, 6 N 수성 NaOH를 사용하여 pH 14로 조정하였다. 상기 혼합물을 Et2O (2×100 mL)로 추출하고, 합한 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피 (DCM 중 4％ MeOH, 1％ Et3N)로 정제하여 라세미체 N,N-디메틸-3-(페닐메틸)-3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-1-아민을 황색 오일로서 수득하였다 (0.5806 g, 85％). LCMS: (M+H)+: 217.2.
파트 B:
N,N-디메틸-3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-1-아민 디히드로클로라이드
MeOH (13 mL) 중 라세미체 N,N-디메틸-3-(페닐메틸)-3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-1-아민 (0.5800 g, 2.681 mmol)의 용액에 1 N 수성 HCl (5.4 mL, 5.4 mmol) 및 10％ Pd/C (50％ 물, 120 mg)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 벌룬 압력하에서 밤새 수소화한 후에 여과하였다. 상기 용액을 진공하에 농축시키고 MeOH (4×50 mL)로 공비증류하여 조 물질인, 라세미체 N,N-디메틸-3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-1-아민 디히드로클로라이드를 밝은 황색 발포체로서 수득하였다 (0.5453 g, >100％ 조 수율). LCMS: (M+H)+: 127.2.
파트 C:
트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-6-[1-(디메틸아미노)-3-아자바이시클로[3.1.0]헥스-3-일]-5-플루오로-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트
DMF (13 mL) 중 라세미체 N,N-디메틸-3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-1-아민 디히드로클로라이드 (0.5339 g으로 추정됨, 2.681 mmol)의 용액에 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-(2,6-디클로로-5-플루오로-4-피리미디닐)-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트 (1.33 g, 2.674 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (1.87 mL, 10.74 mmol)을 첨가하였다. 상기 용액을 밤새 교반한 후에 Et2O (100 mL)로 희석하였다. 상기 혼합물을 물 (2×50 mL)로 세척하고, 합한 수성 상을 신선한 분량의 Et2O (50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 구배 실리카겔 크로마토그래피 (헥산 중 0％→100％ EtOAc; 1％ Et3N)로 정제하여 라세미체 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-6-[1-(디메틸아미노)-3-아자바이시클로[3.1.0]헥스-3-일]-5-플루오로-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트를 백색 발포체로서 수득하였다 (1.3261 g, 84％). LCMS: (M+H)+: 587.3.
파트 D:
3-(2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)-N,N-디메틸-3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-1-아민
MeOH (13 mL) 중 라세미체 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-6-[1-(디메틸아미노)-3-아자바이시클로[3.1.0]헥스-3-일]-5-플루오로-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트 (1.3231 g, 2.254 mmol)의 용액에 디옥산 중 4 N HCl (13 mL)을 첨가하였다. 상기 용액을 3일 동안 교반한 후에 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 10％ 수성 K2CO3 및 DCM 사이에 분배하고, 수성 상을 신선한 분량의 DCM으로 추출하였다. 합한 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켜서 라세미체 3-(2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)-N,N-디메틸-3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-1-아민을 갈색 고체로서 수득하였다 (0.3415 g, 53％). LCMS: (M+H)+: 287.1.
파트 E:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[1-(디메틸아미노)-3-아자바이시클로[3.1.0]헥스-3-일]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드
DMF (10 mL) 중 라세미체 3-(2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)-N,N-디메틸-3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-1-아민 (0.3374 g, 1.177 mmol)의 용액에 (2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산 (0.3257 g, 1.067 mmol), N-메틸모르폴린 (0.590 mL, 5.366 mmol), 1-히드록시-7-아자벤조트리아졸 (0.174 g, 1.278 mmol) 및 EDC (0.245 g, 1.278 mmol)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 밤새 교반한 후에 Et2O (100 mL)로 희석하였다. 상기 혼합물을 물 (2×50 mL)로 세척하고, 합한 수성 상을 신선한 분량의 Et2O (50 mL)로 추출하였다. 상기 유기 상을 신선한 분량의 물 (50 mL)로 세척하고, 합한 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 DCM (200 mL)으로 희석하고 무수 Na2SO4에서 건조시켰다. 상기 혼합물을 여과하고 진공하에 농축시켜서 조 [(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[1-(디메틸아미노)-3-아자바이시클로[3.1.0]헥스-3-일]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드를 오렌지색 오일로서 수득하였다 (0.6428 g, >100％ 조 수율, 부분입체이성질체들의 혼합물). LCMS: (M+H)+: 574.2.
파트 F:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[1-(디메틸아미노)-3-아자바이시클로[3.1.0]헥스-3-일]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
MeOH (10 mL) 중 [(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[1-(디메틸아미노)-3-아자바이시클로[3.1.0]헥스-3-일]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 (0.6123 g으로 추정됨, 1.067 mmol)의 용액에 20％ Pd(OH)2/C (50％ 물, 61 mg)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 6.5시간 동안 수소화한 후에 여과하였다. 여액을 진공하에 농축시키고, 길슨 RPLC로 정제하여 [(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[1-(디메틸아미노)-3-아자바이시클로[3.1.0]헥스-3-일]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 밝은 핑크색 고체로서 수득하였다 (0.2537 g, 2개 단계 동안 49％ 수율, 부분입체이성질체들의 혼합물). LCMS: (M+H)+: 484.2.
실시예 162
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(트랜스-2,4,5-트리메틸-1-피페라지닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드 (미지의 단일 부분입체이성질체)
Figure pat00190
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(트랜스-2,4,5-트리메틸-1-피페라지닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드 (미지의 단일 부분입체이성질체)를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 트랜스-1,2,5-트리메틸피페라진, 히드로클로라이드 염 (거울상이성질체 2) (실시예 158)을 사용하고 DIPEA를 3 당량 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 466.2.
실시예 163
[(2R)-3-{2-[2-클로로-6-(시클로펜틸아미노)-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00191
[(2R)-3-{2-[2-클로로-6-(시클로펜틸아미노)-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 E에 따라 제조하되, 파트 A에서 이소프로필 아민 대신에 시클로펜틸아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 443.2/445.4.
실시예 164
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[3-메틸-3-(4-모르폴리닐)-1-아제티디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00192
파트 A:
4-[1-(디페닐메틸)-3-메틸-3-아제티디닐]모르폴린
1-(디페닐메틸)-3-메틸-3-아제티디닐 메탄술포네이트를 보고된 절차 [J. Med. Chem., 1993, 36, 801-810]에 따라 제조하였다. 이소프로판올 (20 mL) 중 상기 화합물 (1.50 g, 4.53 mmol) 및 모르폴린 (3.90 g, 45.3 mmol)의 혼합물을 밤새 70℃로 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 혼합물을 진공하에 건조될 때까지 농축시켰다. 물 (100 mL)을 첨가하고, 혼합물을 디클로로메탄 (2×100 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (60 mL)로 세척하여 건조 (Na2SO4)시키고 농축시켰다. 잔류물을 RP-HPLC로 정제하여 4-[1-(디페닐메틸)-3-메틸-3-아제티디닐]모르폴린을 수득하였다 (1.05 g, 71.9％). LCMS: (M+H)+ 323.3.
파트 B:
4-(3-메틸-3-아제티디닐)모르폴린 디히드로클로라이드
에탄올 (30 mL) 및 1 N HCl (7 mL) 중 4-[1-(디페닐메틸)-3-메틸-3-아제티디닐]모르폴린 (1.05 g, 3.26 mmol), 10％ Pd(OH)2 (0.12 g)의 혼합물을 60 psi에서 H2로 밤새 처리하였다. 촉매를 여과로 제거하고, 용매를 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 벤젠 (3×5 mL)으로 세척하고 고진공하에 건조시켜서 4-(3-메틸-3-아제티디닐)모르폴린 디히드로클로라이드를 수득하였다 (0.52 g, 74.9％). LCMS: (M+H)+ 156.9.
파트 C:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[3-메틸-3-(4-모르폴리닐)-1-아제티디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[3-메틸-3-(4-모르폴리닐)-1-아제티디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 D에 따라 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 4-(3-메틸-3-아제티디닐)모르폴린 디히드로클로라이드를 사용하였다. LCMS: (M+H)+ 514.4.
실시예 165
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[3-(4-피리디닐)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00193
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[3-(4-피리디닐)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 실시예 182와 유사한 방식으로 제조하되, 파트 A에서 1-(3-메틸-3-아제티디닐)피롤리딘 디히드로클로라이드 대신에 4-(3-피롤리디닐)피리딘을 사용하였다. LCMS: (M+H)+ 486.2.
실시예 166
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[3-(디메틸아미노)-2,2-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 (D1, 미지의 단일 부분입체이성질체)
Figure pat00194
파트 A:
2,2-디메틸-1-(페닐메틸)-3-피롤리딘아민
라세미체 2,2-디메틸-1-(페닐메틸)-3-피롤리딘아민을 실시예 152에 기재된 절차에 따라 제조하였다. 거울상이성질체를 정제용 LC (키랄팩 AD 20 μ 100×250 mm 컬럼, 75:25:0.1 MeCN-MeOH-iPrNH2, 400 mL/분, 254 nm 검출)로 분리하여 2,2-디메틸-1-(페닐메틸)-3-피롤리딘아민의 (+)- 및 (-)-거울상이성질체를 수득하였다.
파트 B:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[3-(디메틸아미노)-2,2-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
2,2-디메틸-1-(페닐메틸)-3-피롤리딘아민의 (+)-거울상이성질체를 사용하여 실시예 152의 절차에 따라 [(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[3-(디메틸아미노)-2,2-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 미지의 상대 배열을 갖는 단일 부분입체이성질체로서 제조하였다. LCMS: (M+H)+: 500.3.
실시예 167
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[3-(디메틸아미노)-2,2-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 (D2, 미지의 단일 부분입체이성질체)
Figure pat00195
실시예 166의 절차에 따라 제조된 2,2-디메틸-1-(페닐메틸)-3-피롤리딘아민의 (-)-거울상이성질체를 사용하여 실시예 152에 따라 [(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[3-(디메틸아미노)-2,2-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 미지의 상대 배열을 갖는 단일 부분입체이성질체로서 제조하였다. LCMS: (M+H)+: 500.3.
실시예 168
[(2R)-3-{2-[2-클로로-6-(시클로부틸아미노)-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00196
파트 A:
트리스(1,1-디메틸에틸) 2-[2-클로로-6-(시클로부틸아미노)-5-플루오로-4-피리미디닐]-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트
DMF (5 mL) 중 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-(2,6-디클로로-5-플루오로-4-피리미디닐)-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트 (0.497 g, 1.0 mmol)의 용액에 실온에서 디이소프로필에틸아민 (0.19 mL, 1.10 mmol)을 첨가한 직후에 시판되는 시클로부틸아민 (0.085 mL, 1.0 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응물을 4일 동안 교반한 후에, 에테르를 첨가하고, 혼합물을 물로 세척하고, 수성 층을 역추출하였다. 합한 유기물을 건조 (Na2SO4)시켜 진공하에 농축시키고 MeOH로 1회 공비증류하여 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-[2-클로로-6-(시클로부틸아미노)-5-플루오로-4-피리미디닐]-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트를 백색 고체로서 수득하였다.
파트 B:
2-클로로-6-(시클로부틸아미노)-5-플루오로-4(1H)-피리미디논 히드라존
MeOH (10 mL) 중 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-[2-클로로-6-(시클로부틸아미노)-5-플루오로-4-피리미디닐]-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트 (0.495 g, 0.96 mmol)의 용액에 1,4-디옥산 중 4 M HCl (10 mL)을 첨가하였다. 상기 반응물을 실온에서 밤새 교반한 후에 용매를 증발시키고, 잔류물을 표준 K2CO3 수성 후처리로 처리하여 2-클로로-6-(시클로부틸아미노)-5-플루오로-4(1H)-피리미디논 히드라존을 적색빛 갈색 오일로서 수득하였다 (0.225 g). LCMS: (M+H)+ = 232.0.
파트 C:
[(2R)-3-{2-[2-클로로-6-(시클로부틸아미노)-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드
DMF (5 mL) 중 (2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산 (0.282 g, 0.92 mmol), 2-클로로-6-(시클로부틸아미노)-5-플루오로-4(1H)-피리미디논 히드라존 (0.225 g), HOAt (0.132 g, 0.97 mmol) 및 NMM (0.53 mL, 4.85 mmol)의 교반된 용액에 EDC (0.186 g, 0.97 mmol)를 첨가하고, 반응물을 밤새 교반하였다. 상기 혼합물을 에테르로 희석하여 물로 세척하고, 수성 층을 에테르로 역추출하였다. 유기물을 건조 (Na2SO4)시키고 진공하에 농축시켰다. 생성된 잔류물을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-3-{2-[2-클로로-6-(시클로부틸아미노)-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드를 갈색 오일로서 수득하였다 (0.055 g). LCMS: (M+H)+ = 519.2.
파트 D:
[(2R)-3-{2-[2-클로로-6-(시클로부틸아미노)-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-{2-[2-클로로-6-(시클로부틸아미노)-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 (0.055 g, 0.106 mmol)를 MeOH (5 mL) 중에 실온에서 용해하였다. Pd(OH)2 (0.006 g)를 첨가하고, 상기 내용물을 수소 벌룬하에 4시간 동안 교반하였다. 상기 내용물을 여과하여 촉매를 제거하고, 여액을 진공하에 농축시켰다. 상기 절차를 3회 더 반복하였다. 2배의 Pd(OH)2 (0.010 g)를 사용하고, 3배의 Pd(OH)2 (0.015 g)를 사용하였고, 반응물을 5.5시간 동안 교반하였다. 상기 내용물을 여과하여 촉매를 제거하고, 여액을 진공하에 농축시켰다. 생성된 조 생성물을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-3-{2-[2-클로로-6-(시클로부틸아미노)-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 황갈색 고체로서 수득하였다 (0.005 g, 11％). LCMS: (M+H)+ = 428.9.
실시예 169
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(9aR)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00197
파트 A:
(3S)-5-옥소-4-(페닐메틸)-3-모르폴린카르복실산
2 N 수성 NaOH (100 mL) 중 N-벤질세린 (19.15 g, 105.7 mmol)의 0℃ 용액에 클로로아세틸 클로라이드 (10.2 mL, 126.4 mmol)를 적가하고, 용액을 45분 동안 교반하였다. 상기 용액에 30％ 수성 NaOH (40 mL)를 적가하고, 반응물을 1시간 동안 교반한 후에 교반하고 72시간 동안 실온으로 가온시켰다. 상기 반응물을 pH 1로 조정하고, 3회 분량의 EtOAc로 추출하였다. 합한 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc/헥산으로 세척하여 (3S)-5-옥소-4-(페닐메틸)-3-모르폴린카르복실산을 수득하였다 (4.61 g, 19％ 수율).
파트 B:
(3S)-5-옥소-N,4-비스(페닐메틸)-3-모르폴린카르복스아미드
DCM (65 mL) 중 (3S)-5-옥소-4-(페닐메틸)-3-모르폴린카르복실산 (4.611 g, 19.60 mmol)의 용액에 벤질아민 (2.6 mL, 23.80 mmol), N-메틸모르폴린 (11 mL, 100.0 mmol), 1-히드록시-7-아자벤조트리아졸 (3.20 g, 23.51 mmol) 및 EDC (4.51 g, 23.53 mmol)를 첨가하였다. 상기 용액을 밤새 교반한 후에 DCM (100 mL)으로 희석하였다. 상기 용액을 6 N 수성 HCl (2×100 mL)로 세척하고, 유기 상을 무수 MgSO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켜서 조 (3S)-5-옥소-N,4-비스(페닐메틸)-3-모르폴린카르복스아미드를 옅은 황색 발포체로서 수득하였다 (6.454 g, >100％ 조 수율). LCMS: (M+H)+: 325.2.
파트 C:
1-페닐-N-{[(3R)-4-(페닐메틸)-3-모르폴리닐]메틸}메탄아민
1,2-디메톡시에탄 (100 mL) 중 (3S)-5-옥소-N,4-비스(페닐메틸)-3-모르폴린카르복스아미드 (6.3109 g, 19.45 mmol)의 용액에 LiAlH4 (2.6 g, 68.51 mmol)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 100℃에서 가열하고, 6 시간 동안 교반한 후에 60℃로 냉각시키고 밤새 교반하였다. 상기 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 1 N 수성 NaOH (100 mL)를 서서히 첨가하여 켄칭하였다. 상기 혼합물을 Et2O (2×150 mL)로 추출하고, 합한 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 구배 실리카겔 크로마토그래피 (DCM 중 1％→5％ MeOH)로 정제하여 1-페닐-N-{[(3R)-4-(페닐메틸)-3-모르폴리닐]메틸}메탄아민을 밝은 황색 오일로서 수득하였다 (3.8342 g, 66％). LCMS: (M+H)+: 297.1.
파트 D:
메틸 옥소((페닐메틸){[(3R)-4-(페닐메틸)-3-모르폴리닐]메틸}아미노)아세테이트
THF (114 mL) 중 1-페닐-N-{[(3R)-4-(페닐메틸)-3-모르폴리닐]메틸}메탄아민 (3.3777 g, 11.40 mmol)의 용액에 N,N-디이소프로필에틸아민 (3 mL, 17.22 mmol)을 첨가하였다. 상기 용액에 메틸 클로로(옥소)아세테이트 (1.15 mL, 12.50 mmol)를 시린지를 통해 적가하고, 상기 혼합물을 3시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 제거하고, 잔류물을 EtOAc (200 mL) 중에 용해하고, 포화 수성 NaHCO3으로 세척한 후에 물로 세척하였다. 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켜서 조 메틸 옥소((페닐메틸){[(3R)-4-(페닐메틸)-3-모르폴리닐]메틸}아미노)아세테이트를 황색 오일로서 수득하였다 (4.6881 g, >100％ 조 수율). LCMS: (M+H)+: 383.1.
파트 E:
(9aR)-8-(페닐메틸)헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-6,7-디온
MeOH (114 mL) 중 조 메틸 옥소((페닐메틸){[(3R)-4-(페닐메틸)-3-모르폴리닐]메틸}아미노)아세테이트 (4.3583 g으로 추정됨, 11.40 mmol)의 용액에 10％ Pd/C (50％ 물, 870 mg)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 벌룬 압력하에서 16시간 동안 수소화한 후에 0.2 ㎛ 막을 통해 여과하였다. 상기 용액을 진공하에 농축시키고, 잔류물을 20％ EtOAc-헥산으로 연화처리하였다. 생성된 고체를 진공 여과로 수집하고, 헥산으로 세척하여 (9aR)-8-(페닐메틸)헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-6,7-디온을 밝은 황색 고체로서 수득하였다 (2.5610 g, 2개 단계 동안 86％). LCMS: (M+H)+: 261.1.
파트 F:
(9aR)-8-(페닐메틸)옥타히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진
THF (100 mL) 중 (9aR)-8-(페닐메틸)헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-6,7-디온 (2.5610 g, 9.84 mmol)의 0℃ 용액에 LiAlH4 (1.12 g, 29.51 mmol)를 조금씩 첨가하였다. 상기 혼합물을 70℃에서 가열하고, 1주일 동안 교반하였다. 이어서, 상기 혼합물을 0℃로 냉각시키고, Na2SO4·10 H2O (2 g)를 첨가한 후에 1 N 수성 NaOH (100 mL)를 첨가하여 켄칭하였다. 상기 혼합물을 Et2O (2×150 mL)로 추출하고, 합한 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 DCM (200 mL) 중에 용해하여 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 구배 실리카겔 크로마토그래피 (헥산 중 0％→100％ EtOAc; 1％ Et3N)로 정제하여 (9aR)-8-(페닐메틸)옥타히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진을 무색 오일로서 수득하였다 (1.8147 g, 79％). LCMS: (M+H)+: 233.1.
파트 G:
(9aR)-옥타히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진 디히드로클로라이드
MeOH (80 mL) 중 (9aR)-8-(페닐메틸)옥타히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진 (1.8055 g, 7.77 mmol)의 용액에 1 N 수성 HCl (15.5 mL, 15.5 mmol) 및 10％ Pd/C (50％ 물, 360 mg)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 벌룬 압력하에서 밤새 수소화한 후에 0.2 ㎛ PTFE 막을 통해 여과하였다. 상기 용액을 진공하에 농축시키고, 잔류물을 MeOH (3×50 mL)로 공비증류하여 조 (9aR)-옥타히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진 디히드로클로라이드를 오렌지색 고체로서 수득하였다 (1.7185 g, >100％ 조 수율). LCMS: (M+H)+: 142.9.
파트 H:
트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(9aR)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트
DMF (40 mL) 중 조 (9aR)-옥타히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진 디히드로클로라이드 (1.7185 g, 7.99 mmol)의 용액에 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-(2,6-디클로로-5-플루오로-4-피리미디닐)-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트 (3.97 g, 7.98 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (4.60 mL, 26.41 mmol)을 첨가하였다. 상기 용액을 밤새 교반한 후에 Et2O (200 mL)로 희석하였다. 상기 혼합물을 물 (2×100 mL)로 세척하고, 합한 수성 상을 신선한 분량의 Et2O (100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 신선한 분량의 물 (50 mL)로 세척한 후에 무수 Na2SO4에서 건조시켰다. 상기 혼합물을 여과하여 진공하에 농축시키고, 잔류물을 DCM (200 mL) 중에 용해하여 무수 Na2SO4에서 건조시켰다. 상기 혼합물을 여과하고, 용액을 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 구배 실리카겔 크로마토그래피 (헥산 중 0％→100％ EtOAc; 1％ Et3N)로 정제하여 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(9aR)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트를 백색 발포체로서 수득하였다 (4.34 g, 90％). LCMS: (M+H)+: 603.3.
파트 I:
(9aR)-8-(2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)옥타히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진
MeOH (18 mL) 중 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(9aR)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트 (4.34 g, 7.20 mmol)의 용액에 디옥산 중 4 N HCl (18 mL, 72 mmol)을 첨가하였다. 상기 용액을 3일 동안 교반한 후에 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 물 (50 mL) 중에 용해하고, 용액을 20％ 수성 K2CO3을 사용하여 pH 10으로 조정하였다. 상기 혼합물을 DCM (2×100 mL)으로 추출하고, 합한 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켜서 (9aR)-8-(2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)옥타히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진을 오렌지색 고체로서 수득하였다 (1.41 g, 65％). LCMS: (M+H)+: 303.1.
파트 J:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(9aR)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드
DMF (45 mL) 중 (9aR)-8-(2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)옥타히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진 (1.41 g, 4.66 mmol)의 용액에 (2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산 (1.36 g, 4.45 mmol), N-메틸모르폴린 (2.45 mL, 22.3 mmol), 1-히드록시-7-아자벤조트리아졸 (0.730 g, 5.364 mmol) 및 EDC (1.02 g, 5.32 mmol)를 첨가하였다. 상기 용액을 밤새 교반한 후에 Et2O (200 mL)로 희석하였다. 상기 혼합물을 물 (2×100 mL)로 세척하고, 합한 수성 상을 신선한 분량의 Et2O (100 mL)로 추출하였다. 상기 Et2O 층을 신선한 분량의 물 (50 mL)로 세척하고, 합한 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 DCM (200 mL) 중에 용해하여 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 MeOH (50 mL)로 공비증류하여 [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(9aR)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드를 적색/오렌지색 오일로서 수득하였다 (2.4027 g, 91％ 조 수율). LCMS: (M+H)+: 590.2.
파트 K:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(9aR)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
MeOH (40 mL) 중 [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(9aR)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 (2.3947 g, 4.058 mmol)의 용액에 20％ Pd(OH)2/C (50％ 물, 240 mg)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 벌룬 압력하에서 2.5시간 동안 수소화한 후에 0.2 ㎛ 막을 통해 여과하였다. 상기 용액을 진공하에 농축시키고, 잔류물을 길슨 RPLC (물 중 10％ MeCN→물 중 65％ MeCN; 8분 구배)로 정제하였다. 원하는 분획물을 합하고, MeCN을 진공하에 제거하였다. 생성된 혼합물을 EtOAc (2×150 mL)로 추출하고, 합한 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 이어서, 잔류물을 EtOAc-헥산으로부터 결정화하여 [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(9aR)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 옅은 핑크색 고체로서 수득하였다 (1.2759 g, 63％). LCMS: (M+H)+: 500.1.
실시예 170
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(3S)-4-메틸-3-(1-메틸에틸)-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00198
(2S)-1-메틸-2-(1-메틸에틸)피페라진, 디히드로클로라이드
a) 시판되는 (S)-N4-벤질-2-이소프로필피페라진 (2.0 g, 9.2 mmol), 트리아세톡시수소화붕소나트륨 (2.9 g, 13.8 mmol) 및 포름알데히드 (H2O 중 37％, 1.12 mL, 13.8 mmol)를 1시간 동안 실온에서 CH2Cl2 (40 mL) 중에 용해하여 교반하였다. 이 시간 후에, 상기 반응 혼합물을 추가의 CH2Cl2로 희석하고 1 N NaOH (2×) 및 염수 (1×)로 세척하였다. 합한 유기 추출물을 건조 (Na2SO4)시키고 진공하에 농축시켜서 (2S)-1-메틸-2-(1-메틸에틸)-4-(페닐메틸)피페라진을 무색 오일로서 수득하였다 (2.14 g).
b) (2S)-1-메틸-2-(1-메틸에틸)-4-(페닐메틸)피페라진 (2.14 g 조 물질, 9.2 mmol로 추정됨)을 MeOH 20 mL 중에 용해하였다. 5％ Pd/C (500 mg)를 첨가하고, 상기 내용물을 철저하게 탈기시켜 수소 벌룬하에 두었다. 생성된 반응 혼합물을 밤새 교반한 후에, 상기 내용물을 탈기시켜 여과하였다. 디옥산 중 4 N HCl (4.6 mL)을 여액에 첨가하고, 여액을 진공하에 농축시켜서 (2S)-1-메틸-2-(1-메틸에틸)피페라진, 디히드로클로라이드 염을 수득하였다.
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(3S)-4-메틸-3-(1-메틸에틸)-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(3S)-4-메틸-3-(1-메틸에틸)-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 D에 따라 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 (2S)-1-메틸-2-(1-메틸에틸)피페라진, 디히드로클로라이드 및 DIPEA를 2 당량 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 500.3.
실시예 171
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2S)-4-메틸-2-(1-메틸에틸)-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00199
(3S)-1-메틸-3-(1-메틸에틸)피페라진, 디히드로클로라이드
a) 시판되는 (S)-N-1-Boc-2-이소프로필피페라진 (2.0 g, 8.76 mmol), 트리아세톡시수소화붕소나트륨 (2.76 g, 13 mmol) 및 포름알데히드 (H2O 중 37％, 1.06 mL, 13 mmol)를 밤새 실온에서 CH2Cl2 (40 mL) 중에 용해하여 교반하였다. 이 시간 후에, 상기 반응 혼합물을 추가의 CH2Cl2로 희석하고, 1 N NaOH 및 염수로 세척하였다. 합한 유기 추출물을 건조 (Na2SO4)시키고 진공하에 농축시켜서 1,1-디메틸에틸 (2S)-4-메틸-2-(1-메틸에틸)-1-피페라진카르복실레이트를 무색 오일로서 수득하였다 (2.18 g).
b) 1,1-디메틸에틸 (2S)-4-메틸-2-(1-메틸에틸)-1-피페라진카르복실레이트 (2.18 g 조 물질, 8.76 mmol로 추정됨)를 MeOH (5 mL), CH2Cl2 (5 mL) 및 디옥산 중 4 N HCl (8 mL)의 혼합물 중에 용해하였다. 밤새 실온에서 교반한 후, 디옥산 중 4 N HCl 추가 8 mL 및 MeOH 8 mL를 첨가하고, 이로써 형성되어진 백색 침전물을 용해시켜 반응의 완료를 촉진하였다. 용매를 진공하에 증발시켜서 (3S)-1-메틸-3-(1-메틸에틸)피페라진, 디히드로클로라이드를 백색 고체로서 수득하였다 (1.97 g).
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2S)-4-메틸-2-(1-메틸에틸)-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2S)-4-메틸-2-(1-메틸에틸)-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 D에 따라 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 ((3S)-1-메틸-3-(1-메틸에틸)피페라진, 디히드로클로라이드를 사용하고 DIPEA를 2 당량 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 500.3.
실시예 172
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(4-메틸-4,7-디아자스피로[2.5]옥트-7-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00200
파트 A:
메틸 1-아미노시클로프로판카르복실레이트
1-아미노시클로프로판카르복실산 (13.1 g, 129.57 mmol)을 MeOH (200 mL) 중에 용해하고, 생성된 혼합물을 30분 동안 0℃로 냉각시켰다. 이어서, 티오닐 클로라이드 (11.84 mL, 161.97 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 80℃로 4시간 동안 가열하였다. 상기 혼합물을 실온으로 밤새 냉각시켰다. 휘발성 물질을 진공하에 농축시키고, 잔류물을 Et2O (200 mL) 중에 용해하고 격렬하게 30분 동안 교반하였다. 생성된 백색 고체 침전물을 여과로 수집하여 메틸 1-아미노시클로프로판카르복실레이트를 수득하였다 (15.83 g, 80％). LCMS: (M+H)+: 116.1.
파트 B:
메틸 1-({[(페닐메틸)옥시]카르보닐}아미노)시클로프로판카르복실레이트
메틸 1-아미노시클로프로판카르복실레이트 (15.83 g, 104.43 mmol)를 CH2Cl2 (150 mL) 및 물 (150 mL)의 혼합물 중에 용해하였다. 상기 혼합물에 NaHCO3 (35.09 g, 417.72 mmol)을 첨가한 후에, 벤질 클로로포르메이트 (15.43 mL, 109.64 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 격렬하게 2시간 동안 교반하고, 2개의 층들을 분리한 후에, 수성 층을 CH2Cl2 100 mL로 추출하였다. 합한 유기 층을 MgSO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켜서 메틸 1-({[(페닐메틸)옥시]카르보닐}아미노)시클로프로판카르복실레이트를 수득하였다 (12.0 g, 46％). LCMS: (M+H)+: 206.1.
파트 C:
메틸 1-(메틸{[(페닐메틸)옥시]카르보닐}아미노)시클로프로판카르복실레이트
수소화나트륨 (995 mg, 41.466 mmol)을 DMF (50 mL) 중에 녹이고, 30분 동안 0℃로 냉각시켰다. 이어서, DMF (25 mL) 중 메틸 1-({[(페닐메틸)옥시]카르보닐}아미노)시클로프로판카르복실레이트 (6.46 g, 25.916 mmol)의 혼합물을 10분에 걸쳐 서서히 첨가하였다. 생성된 혼합물이 45분 동안 교반되도록 한 후에, 요오도메탄 (4.84 mL, 77.74 mmol)을 첨가하고, 반응물이 밤새 실온으로 가온되도록 하였다. 이어서, 상기 혼합물을 조심스럽게 물 (10 mL)로 희석하고, 수성 층을 Et2O (5×50 mL)로 추출하였다. 유기 추출물을 물 (5×50 mL)로 세척한 후에 Na2SO4에서 건조시키고 진공하에 농축시켰다. 조 잔류물을 0％→50 EtOAc/Hex 구배를 사용하는 콤비플래쉬를 통해 정제하여 메틸 1-(메틸{[(페닐메틸)옥시]카르보닐}아미노)시클로프로판카르복실레이트를 수득하였다 (16.9 g, >100％). LCMS: (M+H)+: 264.1.
파트 D:
메틸 1-(메틸아미노)시클로프로판카르복실레이트
메틸 1-(메틸{[(페닐메틸)옥시]카르보닐}아미노)시클로프로판카르복실레이트 (6.8 g으로 추정됨, 25.91 mmol, 100％ 이론상 수율)를 MeOH 30 mL 중에 용해하고 탈기시켜 아르곤하에 두었다. 10％ Pd/C (2.04 g)를 첨가하고, 상기 내용물을 철저하게 탈기시켜 밤새 수소 벌룬하에 두었다. 이어서, 상기 내용물을 탈기시켜 Pd/C를 셀라이트를 통해 여과하여 제거하면서 MeOH로 세척하였다. 여액을 진공하에 농축시켜서 순수한 메틸 1-(메틸아미노)시클로프로판카르복실레이트를 수득하였다 (1.53 g, 2개 단계에 걸쳐 45％). LCMS: (M+H)+: 130.1.
파트 E:
메틸 1-[메틸(N-{[(페닐메틸)옥시]카르보닐}글리실)아미노]시클로프로판카르복실레이트
CH2Cl2 (30 mL) 중 메틸 1-(메틸아미노)시클로프로판카르복실레이트 (1.53 g, 11.85 mmol) 및 HOBt (1.920 g, 14.21 mmol)의 용액에 4-메틸모르폴린 (5.2 mL, 47.40 mmol), N-{[(페닐메틸)옥시]카르보닐}글리신 (2.48 g, 11.85 mmol) 및 EDCl (2.73 g, 14.21 mmol)을 첨가하였다. 밤새 교반한 후, 용액을 6 N 수성 HCl (100 mL) 및 물 (100 mL)로 세척하였다. 수성 층을 CH2Cl2 (1×100 mL)로 추출하고, 합한 유기 층을 물 (100 mL) 및 염수 (100 mL)로 세척한 후에 무수 MgSO4에서 건조시키고 진공하에 농축시켜서 순수한 메틸 1-[메틸(N-{[(페닐메틸)옥시]카르보닐}글리실)아미노]시클로프로판카르복실레이트를 수득하였다 (3.66 g, 97％). LCMS: (M+H)+: 321.1.
파트 F:
4-메틸-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-5,8-디온
메틸 1-[메틸(N-{[(페닐메틸)옥시]카르보닐}글리실)아미노]시클로프로판카르복실레이트 (3.66 g, 11.42 mmol)를 MeOH 50 mL 중에 용해하고 탈기시켜 아르곤하에 두었다. 10％ Pd/C (2.04 g)를 첨가하고, 상기 내용물을 철저하게 탈기시켜 수소 벌룬하에 2시간 동안 두었다. 이어서, 상기 내용물을 탈기시키고, Pd/C를 셀라이트를 통해 여과하여 제거하면서 MeOH로 세척하였다. 여액을 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 MeOH (100 mL) 중에 용해하고, 60℃로 가열하면서 4시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 제거하여 순수한 4-메틸-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-5,8-디온을 수득하였다 (1.76 g, 99％). LCMS: (M+H)+: 155.1.
파트 G:
4-메틸-7-(페닐메틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-5,8-디온
수소화나트륨 (302 mg, 12.62 mmol)을 DMF (10 mL) 중에 녹이고 30분 동안 0℃로 냉각시켰다. 이어서, DMF (5 mL) 중 4-메틸-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-5,8-디온 (1.769 g, 11.47 mmol)의 혼합물을 10분에 걸쳐 서서히 첨가하였다. 상기 혼합물이 45분 동안 교반되도록 한 다음, 브롬화벤질 (4.08 mL, 34.41 mmol)을 첨가하고, 반응물을 45분 동안 더 교반하였다. 상기 혼합물을 조심스럽게 물 (10 mL)로 희석하여 진공하에 농축시켰다. 생성된 조 생성물을 역상 HPLC를 통해 정제하여 4-메틸-7-(페닐메틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-5,8-디온을 수득하였다 (1.535 g, 54％). LCMS: (M+H)+: 245.1.
파트 H;
4-메틸-7-(페닐메틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄
4-메틸-7-(페닐메틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-5,8-디온 (1.535 g, 6.284 mmol)을 THF (100 mL) 중에 용해하고, 혼합물을 0℃로 냉각시켰다. 보란-THF 착체 (25.13 mL, 25.13 mmol)를 10분에 걸쳐 조금씩 첨가하였다. 혼합물을 4시간 동안 60℃로 가열한 후에 LCMS로 체크하였다. 15％ 초과의 출발 물질이 남아있는 경우, 추가 분량의 보란-THF 착체 (12.56 mL, 12.56 mmol)를 서서히 첨가하고, 반응물이 추가의 45분 동안 교반되도록 하였다. LCMS에 의해 측정되는 바와 같이 반응이 완료되었을 때, 상기 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 1 N HCl (25 mL)을 첨가하고, 혼합물을 1시간 동안 80℃로 가열하였다. 이어서, 상기 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 6 N 수성 NaOH를 첨가하여 pH를 14로 조정하였다. 상기 혼합물을 CH2Cl2 (3×50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 생성된 조 생성물을 역상 HPLC를 통해 정제하여 4-메틸-7-(페닐메틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄을 수득하였다 (1.43 g, 94％). LCMS: (M+H)+: 217.2.
파트 I:
4-메틸-4-아자-7-아조니아스피로[2.5]옥탄, 디히드로클로라이드
4-메틸-7-(페닐메틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄 (1.43 g, 6.624 mmol)을 MeOH 10 mL 중에 용해하고 탈기시켜 아르곤하에 두었다. Pd(OH)2 (140 mg)를 첨가하고, 상기 내용물을 4시간 동안 50 psi 하에서 수소화시켰다. 이어서, 상기 내용물을 여과하여 촉매를 제거하고, 1 N HCl (14.57 mL, 14.57 mmol)을 여액에 첨가하고, 상기 여액을 진공하에 농축시켜서 순수한 4-메틸-4-아자-7-아조니아스피로[2.5]옥탄, 디히드로클로라이드를 수득하였다 (0.8 g, 60％). LCMS: (M+H)+: 127.2.
파트 J:
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(4-메틸-4,7-디아자스피로[2.5]옥트-7-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(4-메틸-4,7-디아자스피로[2.5]옥트-7-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 E에 따라 제조하되, 파트 A에서 이소프로필 아민 대신에 4-메틸-4-아자-7-아조니아스피로[2.5]옥탄, 디히드로클로라이드를 사용하고 DIEA를 3.5 당량 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 484.2.
실시예 173
N-[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2R,3S)-2,3,4-트리메틸-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
Figure pat00201
파트 A:
(2S,3R)-1,2,3-트리메틸피페라진, 히드로클로라이드 염
페닐메틸 (2R,3S)-2,3,4-트리메틸-1-피페라진카르복실레이트 (실시예 175) (770 mg, 2.94 mmol)를 MeOH 40 mL 중에 용해하고 탈기시켜 아르곤하에 두었다. 10％ Pd/C (125 mg)를 첨가하고, 상기 내용물을 철저하게 탈기시켜 대략 3시간 동안 수소 벌룬하에 두었다. 이어서, 상기 내용물을 탈기시켜 셀라이트를 통해 여과하고, 상기 셀라이트 패드를 DCM 및 MeOH로 세척하였다. 1 N HCl 6.2 mL를 첨가하고, 생성된 여액을 진공하에 농축시켜서 (2S,3R)-1,2,3-트리메틸피페라진의 디히드로클로라이드 염을 수득하였다. LCMS: (M+H)+: 129.1.
파트 B:
N-[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2R,3S)-2,3,4-트리메틸-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
N-[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2R,3S)-2,3,4-트리메틸-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드를 일반적인 절차 G에 따라 제조하되, 파트 A에서 (1S,4S)-2-메틸-2,5-디아자바이시클로[2.2.1]헵탄, 디히드로브로마이드 대신에 (2S,3R)-1,2,3-트리메틸피페라진, 디히드로클로라이드 염을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 486.1.
실시예 174
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(8aR)-헥사히드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00202
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(8aR)-헥사히드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 D에 따라 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 (8aR)-옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진 [J. Med. Chem. 1993, 36, 2311-20] (디-HCl 염으로서 사용됨)을 사용하고, 파트 A에서 DIPEA를 3 당량 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 484.2.
실시예 175
N-[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2S,3R)-2,3,4-트리메틸-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
Figure pat00203
파트 A:
페닐메틸 시스-2,3-디메틸-1-피페라진카르복실레이트 (거울상이성질체 혼합물)
100 mL 3-목 둥근-바닥 플라스크를 시스-2,3-디메틸피페라진 [Helvetica Chimica Acta, 1994, 77, 1057-64] (1.781 g, 15.6 mmol)으로 충전시켰다. 플라스크를 빙조에서 냉각시키고, 물 1.4 mL 중 메탄술폰산 (2.02 mL, 31.2 mmol)의 용액을 서서히 첨가하면서 온도를 40℃ 미만으로 유지하였다. 상기 용액을 20℃로 냉각시키고, 에탄올 2 mL를 첨가하였다. pH를 60％ 수성 칼륨 아세테이트를 사용하여 4로 조정한 후에, 반응 용액을 pH 4에서 유지되도록 하는 속도로 조정하면서 벤질 클로로포르메이트 (2.08 mL, THF 1 mL 중 14.8 mmol) 및 칼륨 아세테이트 용액을 동시에 적가하면서, 온도가 25℃에서 유지되도록 냉각시켰다. 혼합물을 추가의 1시간 동안 교반한 후에, 유기 용매를 제거하고, 잔류 수용액을 에틸 아세테이트로 세척하였다. 에틸 아세테이트를 1 M HCl로 2회 추출하여 원하는 생성물을 회수하였다. 산 추출물을 최초의 수용액과 합하고, 6 N NaOH를 첨가함으로써 pH를 11로 조정하면서, 온도가 40℃ 미만으로 유지되도록 냉각시켰다. 상기 수용액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 합한 추출물을 황산마그네슘에서 건조시키고 진공하에 농축시켜서 페닐메틸 시스-2,3-디메틸-1-피페라진카르복실레이트 (거울상이성질체 혼합물)를 황색 오일로서 수득하였다 (1.77 g, 46％). LCMS: (M+H)+: 249.1.
파트 B:
페닐메틸 (2S,3R)-2,3,4-트리메틸-1-피페라진카르복실레이트 및 페닐메틸 (2R,3S)-2,3,4-트리메틸-1-피페라진카르복실레이트
디클로로메탄 (50 mL) 중 페닐메틸 시스-2,5-디메틸-1-피페라진카르복실레이트 (거울상이성질체 혼합물) (1.77 g, 7.1 mmol)의 용액에 0℃에서 포름알데히드 (0.803 mL, 37％ 수용액, 10.7 mmol)를 첨가한 후에, 트리아세톡시수소화붕소나트륨 (1.964 g, 9.2 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물이 실온으로 가온되도록 하고 2시간 동안 교반한 후에, 디클로로메탄으로 희석하고 1 N NaOH 용액으로 세척하였다. 유기물을 염수로 세척하여 건조 (MgSO4)시키고 증발시켜서 페닐메틸 시스-2,3,4-트리메틸-1-피페라진카르복실레이트 (거울상이성질체 혼합물)를 수득하였다 (1.72 g, 92％). 페닐메틸 (2S,3R)-2,3,4-트리메틸-1-피페라진카르복실레이트 (950 mg) 및 페닐메틸 (2R,3S)-2,3,4-트리메틸-1-피페라진카르복실레이트 (770 mg)를 키랄 크로마토그래피로 분리하였다. 절대 배열은 최초부터의(Ab Initio) 진동 원형 이색성을 사용하여 지정되었다. LCMS: (M+H)+: 263.3.
파트 C:
(2R,3S)-1,2,3-트리메틸피페라진, 디히드로클로라이드 염
페닐메틸 (2S,3R)-2,3,4-트리메틸-1-피페라진카르복실레이트 (950 mg, 3.62 mmol)를 MeOH 60 mL 중에 용해하고 탈기시켜 아르곤하에 두었다. 10％ Pd/C (160 mg)를 첨가하고, 상기 내용물을 철저하게 탈기시켜 대략 3시간 동안 수소 벌룬하에 두었다. 이어서, 상기 내용물을 탈기시켜 셀라이트를 통해 여과하고, 상기 셀라이트 패드를 DCM 및 MeOH로 세척하였다. 1 N HCl 7.6 mL를 첨가한 후에, 생성된 여액을 진공하에 농축시켜서 (2R,3S)-1,2,3-트리메틸피페라진의 디히드로클로라이드 염 (740 mg)을 수득하였다. LCMS: (M+H)+: 129.1.
파트 D:
N-[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2S,3R)-2,3,4-트리메틸-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
N-[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2S,3R)-2,3,4-트리메틸-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드를 일반적인 절차 G에 따라 제조하되, 파트 A에서 (1S,4S)-2-메틸-2,5-디아자바이시클로[2.2.1]헵탄, 디히드로브로마이드 대신에 (2R,3S)-1,2,3-트리메틸피페라진, 디히드로클로라이드 염을 수득하였다. LCMS: (M+H)+: 486.1.
실시예 176
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[3-메틸-3-(1-피롤리디닐)-1-아제티디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00204
파트 A:
1-[1-(디페닐메틸)-3-메틸-3-아제티디닐]피롤리딘
이소프로판올 (15 mL) 중 1-(디페닐메틸)-3-메틸-3-아제티디닐 메탄술포네이트 (1.55 g, 4.68 mmol) [J. Med. Chem. 1993, 36, 801-810] 및 피롤리딘 (3.86 mL, 46.68 mmol)의 혼합물을 70℃로 밤새 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 혼합물을 진공하에 건조될 때까지 농축시켰다. 물 (100 mL)을 첨가하고, 혼합물을 디클로로메탄 (2×100 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (60 mL)로 세척하여 건조 (Na2SO4)시키고 농축시켰다. 잔류물을 RP-HPLC로 정제하여 1-[1-(디페닐메틸)-3-메틸-3-아제티디닐]피롤리딘을 수득하였다 (0.94 g, 65％). LCMS: (M+H)+: 307.2.
파트 B:
1-(3-메틸-3-아제티디닐)피롤리딘 디히드로클로라이드
에탄올 (30 mL) 및 1 N HCl (7 mL) 중 1-[1-(디페닐메틸)-3-메틸-3-아제티디닐]피롤리딘 (0.94 g, 3.07 mmol) 및 20％ Pd(OH)2 (0.11 g)의 혼합물을 60 psi에서 밤새 H2로 처리하였다. 촉매를 여과로 제거하고, 여액을 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 벤젠 (3×5 mL)으로 세척하고, 고진공하에 건조시켜서 1-(3-메틸-3-아제티디닐)피롤리딘 디히드로클로라이드를 수득하였다 (0.76 g, 86％ 순도로 추정됨). LCMS: (M+H)+: 141.0.
파트 C:
트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-5-플루오로-6-[3-메틸-3-(1-피롤리디닐)-1-아제티디닐]-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트
DMF (8 mL) 중 1-(3-메틸-3-아제티디닐)피롤리딘 디히드로클로라이드 (0.128 g, 86％ 순도, 0.52 mmol)의 교반된 용액에 0℃에서 DIPEA (0.34 mL, 1.94 mmol)를 첨가한 직후에 트리스(1,1-디메틸에틸)-2-(2,6-디클로로-5-플루오로-4-피리미디닐)-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트 (0.24, 0.49 mmol)를 첨가하였다. 상기 반응물을 실온까지 가온하고 밤새 교반하였다. 상기 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-5-플루오로-6-[3-메틸-3-(1-피롤리디닐)-1-아제티디닐]-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트를 수득하였다 (0.225 g, 77％). LCMS: (M+H)+: 601.2.
파트 D:
2-클로로-5-플루오로-4-히드라지노-6-[3-메틸-3-(1-피롤리디닐)-1-아제티디닐]피리미딘
MeOH (6 mL) 및 디옥산 중 4.0 M HCl (4 mL) 중 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-5-플루오로-6-[3-메틸-3-(1-피롤리디닐)-1-아제티디닐]-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트 (0.225 g, 0.37 mmol)의 용액을 실온에서 3일 동안 교반하였다. 이어서, 용매를 진공하에 제거하여 조 2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-N-(1-메틸에틸)-4-피리미딘아민 (트리-HCl 염이라 여겨짐)을 수득하였다. LCMS: (M+H)+: 301.0.
파트 E:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[3-메틸-3-(1-피롤리디닐)-1-아제티디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드
DMF (5 mL) 중 (2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)아미노]메틸}프로판산 (112 mg, 0.374 mmol), 2-클로로-5-플루오로-4-히드라지노-6-[3-메틸-3-(1-피롤리디닐)-1-아제티디닐]피리미딘 (112 mg의 유리 염기로 추정됨, 0.374 mmol), EDC (86 mg, 0.449 mmol), HOAt (56 mg, 0.411 mmol) 및 NMM (0.25 mL, 2.24 mmol)의 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 이어서, 상기 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[3-메틸-3-(1-피롤리디닐)-1-아제티디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드를 수득하였다 (145 mg, 66％). LCMS: (M+H)+: 582.5.
파트 F:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[3-메틸-3-(1-피롤리디닐)-1-아제티디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
4:1 AcOH:물 (20 mL) 중 [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[3-메틸-3-(1-피롤리디닐)-1-아제티디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드 (145 mg)의 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. LCMS는 탈보호가 약 45％ 완료되었음을 나타냈다. 또다른 분량의 혼합 용매 (4:1 AcOH:물, 20 mL)를 첨가하고, 밤새 계속 교반하였다. 이어서, 용매를 진공하에 제거하고, 생성된 조 생성물을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[3-메틸-3-(1-피롤리디닐)-1-아제티디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 수득하였다 (45 mg, 36％). LCMS: (M+H)+: 498.2.
실시예 177
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(8aR)-헥사히드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00205
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(8aR)-헥사히드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 (8aR)-옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진 [J. Med. Chem. 1993, 36, 2311-20] (디-HCl 염으로서 사용됨)을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 464.2.
실시예 178
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{2-에틸-5-플루오로-6-[(8aR)-헥사히드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00206
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{2-에틸-5-플루오로-6-[(8aR)-헥사히드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 B에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 (8aR)-옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진 [J. Med. Chem. 1993, 36, 2311-20] (디-HCl 염으로서 사용됨)을 사용하고 DIPEA를 4 당량 사용하고 순수한 MeOH 또는 순수한 DMSO 대신 1:1 MeOH:DMSO의 혼합 용매 시스템을 사용하였다.
실시예 179
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일아미노)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00207
파트 A:
트리스(1,1-디메틸에틸) 2-[2-클로로-5-플루오로-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일아미노)-4-피리미디닐]-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트
DMF (6 mL) 중 시판되는 테트라히드로-2H-피란-4-아민 (0.122 g, 1.21 mmol)의 용액을 0℃로 냉각시켰다. 이어서, 디이소프로필에틸아민 (0.24 mL, 1.33 mmol) 및 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-(2,6-디클로로-5-플루오로-4-피리미디닐)-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트 (0.600 g, 1.21 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액이 실온에 도달하도록 두고 밤새 교반하였다. 상기 혼합물을 에테르로 추출하고 물로 세척하고, 생성된 수성 층을 에테르로 1회 추출하였다. 합한 에테르 층을 건조 (Na2SO4)시키고 진공하에 농축시켰다. 생성된 물질을 (헥산 중 5％→60％ 에틸 아세테이트, 1％ 트리에틸아민)을 사용하는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-[2-클로로-5-플루오로-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일아미노)-4-피리미디닐]-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트를 백색 고체로서 수득하였다 (0.602 g, 89％). LCMS: (M+H-2Boc)+ = 362.1.
파트 B:
2-클로로-5-플루오로-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일아미노)-4(1H)-피리미디논 히드라존
MeOH (20 mL) 중 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-[2-클로로-5-플루오로-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일아미노)-4-피리미디닐]-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트 (0.602 g, 1.071 mmol)의 용액에 1,4-디옥산 중 4 M HCl (20 mL)을 첨가하였다. 실온에서 2일 동안 교반한 후에, 용매를 증발시키고 포화 NaHCO3을 첨가하였다. 수성 층을 추출하고, 유기물을 건조 (Na2SO4)시키고 진공하에 농축시켜서 2-클로로-5-플루오로-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일아미노)-4(1H)-피리미디논 히드라존을 적색 고체로서 수득하였다 (0.199 g). LCMS: (M+H)+ = 261.8.
파트 C:
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일아미노)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드
(2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산 (0.220 g, 0.72 mmol), 2-클로로-5-플루오로-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일아미노)-4(1H)-피리미디논 히드라존 (0.199 g), NMM (0.42 mL, 3.80 mmol), HOAt (0.103 g, 0.76 mmol), EDC (0.146 g, 0.76 mmol)를 DMF (5 mL) 중에 용해하였다. 상기 반응물이 밤새 교반되도록 하였다. 에테르를 첨가하고 물로 세척하고, 수성 층을 에테르로 역추출하여 건조 (Na2SO4)시키고 진공하에 농축시켜서 [(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일아미노)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드를 짙은 갈색 고체로서 수득하였다 (0.321 g). LCMS: (M+H)+ = 549.2.
파트 D:
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일아미노)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일아미노)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 (0.321 g, 0.58 mmol), Pd(OH)2 (0.064 g) 및 MeOH (10 mL)를 합하고, 일반적인 절차 E의 파트 D에 기재된 바와 같이 4시간 동안 처리하였다. 상기 반응은 완료되지 않았고, 이에 따라 상기 내용물을 여과하여 촉매를 제거하고, 여액을 진공하에 농축시켰다. 생성된 잔류물을 MeOH (10 mL) 중에 재용해하고, Pd(OH)2 (0.080 g)를 첨가하고, 상기 내용물을 일반적인 절차 E의 파트 D에 기재된 바와 같이 2.5시간 동안 수소화 조건하에서 다시 교반하였다. 이어서, 상기 내용물을 여과하여 촉매를 제거하고, 여액을 진공하에 농축시켰다. 생성된 조 생성물을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일아미노)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 회백색 고체로서 수득하였다 (0.024 g, 9％). LCMS: (M+H)+ = 459.5.
실시예 180
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(2S,3R)-2,3,4-트리메틸-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
Figure pat00208
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(2S,3R)-2,3,4-트리메틸-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 (2R,3S)-1,2,3-트리메틸피페라진, 디히드로클로라이드 염 (실시예 175)을 사용하고 DIPEA를 3 당량 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 466.2.
실시예 181
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(2R,3S)-2,3,4-트리메틸-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
Figure pat00209
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(2R,3S)-2,3,4-트리메틸-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 (2S,3R)-1,2,3-트리메틸피페라진, 디히드로클로라이드 염 (실시예 173)을 사용하고 DIPEA를 3 당량 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 466.2.
실시예 182
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[3-메틸-3-(1-피롤리디닐)-1-아제티디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00210
파트 A:
5-플루오로-4-히드라지노-2-메틸-6-[3-메틸-3-(1-피롤리디닐)-1-아제티디닐]피리미딘
DMSO 5 mL 중 4,6-디클로로-5-플루오로-2-메틸피리미딘 (90 mg, 0.50 mmol), 1-(3-메틸-3-아제티디닐)피롤리딘 디히드로클로라이드 (실시예 176) (131 mg, 86％ 순도로 추정됨, 0.53 mmol)의 혼합물에 DIPEA (0.345 mL, 1.98 mmol)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 후에 히드라진 일수화물 (0.5 mL)을 첨가하고, 상기 내용물을 4시간 동안 80℃로 가열하였다. 이어서, 상기 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 RP-HPLC로 정제하여 5-플루오로-4-히드라지노-2-메틸-6-[3-메틸-3-(1-피롤리디닐)-1-아제티디닐]피리미딘을 수득하였다 (100 mg, 71％). LCMS: (M+H)+: 281.0.
파트 B:
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[3-메틸-3-(1-피롤리디닐)-1-아제티디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드
DMF (5 mL) 중 (2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)아미노]메틸}프로판산 (107 mg, 0.357 mmol), 5-플루오로-4-히드라지노-2-메틸-6-[3-메틸-3-(1-피롤리디닐)-1-아제티디닐]피리미딘 (100 mg, 0.357 mmol), EDC (82 mg, 0.428 mmol), HOAt (53 mg, 0.393 mmol) 및 NMM (0.20 mL, 1.79 mmol)의 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 이어서, 상기 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[3-메틸-3-(1-피롤리디닐)-1-아제티디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드를 수득하였다 (118 mg, 58％). LCMS: (M+H)+: 562.2.
파트 C:
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[3-메틸-3-(1-피롤리디닐)-1-아제티디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
4:1 AcOH:물 (20 mL) 중 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[3-메틸-3-(1-피롤리디닐)-1-아제티디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드 (118 mg)의 용액을 실온에서 3일 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 제거하고, 생성된 조 생성물을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[3-메틸-3-(1-피롤리디닐)-1-아제티디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 수득하였다 (65 mg, 64％). LCMS: (M+H)+: 478.1.
실시예 183
{(2R)-2-[(2-{2-클로로-6-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)카르보닐]헥실}히드록시포름아미드
Figure pat00211
{(2R)-2-[(2-{2-클로로-6-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)카르보닐]헥실}히드록시포름아미드를 일반적인 절차 E에 따라 제조하되, 파트 A에서 이소프로필 아민 대신에 (R)-1,3-디메틸피페라진 디히드로클로라이드 (실시예 39)를 사용하고, 파트 B에서 DCM을 함유한 에테르 중 2.0 M HCl을 용매로서 사용하고, 파트 C에서 [(2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산 대신에 (2R)-2-{[포르밀(히드록시)아미노]메틸}헥산산 (실시예 201)을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 446.1/448.2.
실시예 184
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(4,4,5-트리메틸헥사히드로피롤로[3,4-c]피롤-2(1H)-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 (부분입체이성질체들의 혼합물)
Figure pat00212
파트 A:
(Rac)-시스-1,1,2-트리메틸-5-(페닐메틸)옥타히드로피롤로[3,4-c]피롤
4,4,5-트리메틸-2-(페닐메틸)테트라히드로피롤로[3,4-c]피롤-1,3(2H,3aH)-디온 (5.39 g, 20 mmol) [Bull. Chem. Soc. Jpn., 1987, 60, 4079-4089]을 THF (50 mL) 중에 용해하고 0℃로 냉각시켰다. LiAlH4 (2.25 g, 59 mmol)를 조금씩 첨가하고, 생성된 혼합물을 밤새 환류시켰다. 0℃로 냉각시킨 후, 물 (2.25 mL)을 첨가한 후에, 15％ (w/w) NaOH (수성) (2.25 mL) 및 또다른 분량의 물 (6.75 mL)을 첨가함으로써 반응물을 켄칭하였다. 켄칭된 반응물을 교반한 후에 셀라이트를 통해 여과하고, 그 후에 감압하에 농축시켰다. RP-HPLC로 정제하여 (rac)-시스-1,1,2-트리메틸-5-(페닐메틸)옥타히드로피롤로[3,4-c]피롤을 수득하였다 (1.44 g, 30％). LCMS: (M+H)+: 245.2.
파트 B:
(Rac)-시스-1,1,2-트리메틸옥타히드로피롤로[3,4-c]피롤
MeOH (30 mL) 중 (rac)-시스-1,1,2-트리메틸-5-(페닐메틸)옥타히드로피롤로[3,4-c]피롤 (1.44 g, 6 mmol)의 탈기된 용액에 1 M HCl (12.3 mL, 12 mmol)을 첨가한 후에, 10％ Pd/C (220 mg)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 수소 벌룬하에 밤새 교반하였다. 촉매를 여과하고 용매를 진공하에 증발시켜서 정량적인 수율의 (rac)-시스-1,1,2-트리메틸옥타히드로피롤로[3,4-c]피롤을 히드로클로라이드 염으로서 수득하였다. LCMS: (M+H)+: 155.1.
파트 C:
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(4,4,5-트리메틸헥사히드로피롤로[3,4-c]피롤-2(1H)-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(4,4,5-트리메틸헥사히드로피롤로[3,4-c]피롤-2(1H)-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 E에 따라 제조하되, 파트 A에서 이소프로필 아민 대신에 rac-(시스)-1,1,2-트리메틸옥타히드로피롤로[3,4-c]피롤을 사용하였다. 생성물은 부분입체이성질체들의 혼합물이었다. LCMS: (M+H)+: 512.3/514.2.
실시예 185
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-[3-(디메틸아미노)-3-메틸-1-아제티디닐]-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00213
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-[3-(디메틸아미노)-3-메틸-1-아제티디닐]-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 일반적인 절차 C에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 히드로클로라이드 대신에 N,N,3-트리메틸-3-아제티딘아민 [J. Med. Chem. 1993, 36, 801-810]을 사용하였다. LCMS: (M+H)+ 484.1.
실시예 186
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(시스)-10-옥사-4-아자트리시클로[5.2.1.02,6]데크-4-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00214
파트 A:
(시스)-4-(페닐메틸)-10-옥사-4-아자트리시클로[5.2.1.02,6]데크-8-엔-3,5-디온
푸란 (6 mL, 83 mmol)을 밀폐된 튜브에서 에테르 (30 mL) 중 N-벤질말레이미드 (3 g, 16 mmol)의 용액에 첨가하고, 반응물을 밤새 90℃로 가열하였다. 용매를 증발시켜서 잔류물을 수득하고, 이것을 저온 MeOH로 연화처리하여 (시스)-4-(페닐메틸)-10-옥사-4-아자트리시클로[5.2.1.02,6]데크-8-엔-3,5-디온을 회백색 고체로서 수득하였다 (2.72 g, 67％). LCMS: (M+Na)+: 278.1.
파트 B:
(시스)-4-(페닐메틸)-10-옥사-4-아자트리시클로[5.2.1.02,6]데칸-3,5-디온
1,2 DME (50 mL) 중 (시스)-4-(페닐메틸)-10-옥사-4-아자트리시클로[5.2.1.02,6]데크-8-엔-3,5-디온 (2.72 g, 10.1 mmol)의 탈기된 용액에 10％ Pd/C (540 mg, 20％ w/w)를 첨가하였다. 생성된 현탁액을 수소 벌룬하에 1시간 동안 교반하였다. 촉매를 여과로 제거하고, 여액을 진공하에 농축하여 (시스)-4-(페닐메틸)-10-옥사-4-아자트리시클로[5.2.1.02,6]데칸-3,5-디온을 정량적인 수율로 수득하였다. LCMS: (M+H)+: 258.1.
파트 C:
(시스)-4-(페닐메틸)-10-옥사-4-아자트리시클로[5.2.1.02,6]데칸
THF (93 mL) 중 (시스)-4-(페닐메틸)-10-옥사-4-아자트리시클로[5.2.1.02,6]데칸-3,5-디온 (2.39 g, 9.2 mmol)의 용액에 0℃에서 LiAlH4를 첨가하고, 생성된 용액을 65℃로 가열하였다. 상기 반응물이 상기 온도에서 72시간 동안 교반되도록 하고, 그 후에 0℃로 냉각시키고, 1 M NaOH로 켄칭하였다. 이어서, 켄칭된 반응물을 에테르로 추출하고, 합한 유기물을 황산나트륨에서 건조시키고, 용매를 진공하에 제거하였다. 잔류 물질을 DCM 중에 용해하고, 황산나트륨에서 건조시키고, 농축시켜 구배 실리카겔 크로마토그래피 (헥산 중 0→100％ EtOAc, 1％ Et3N)로 정제하여 (시스)-4-(페닐메틸)-10-옥사-4-아자트리시클로[5.2.1.02,6]데칸을 황색 오일로서 수득하였다 (1.72 g, 67％). LCMS: (M+H)+: 230.1.
파트 D:
(시스)-10-옥사-4-아자트리시클로[5.2.1.02,6]데칸
MeOH (40 mL) 중 (시스)-4-(페닐메틸)-10-옥사-4-아자트리시클로[5.2.1.02,6]데칸 (1.72 g, 7.5 mmol)의 탈기된 용액에 1 M HCl (7.5 mL)을 첨가한 후에, 10％ Pd/C (344 mg, 20％ w/w)를 첨가하였다. 수소 벌룬하에 72시간 동안 교반한 후에 여과하고 진공하에 농축하여 (시스)-10-옥사-4-아자트리시클로[5.2.1.02,6]데칸의 히드로클로라이드를 황색 발포체로서 수득하였다 (1.26 g, 96％). LCMS: (M+H)+: 140.1.
파트 E:
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(시스)-10-옥사-4-아자트리시클로[5.2.1.02,6]데크-4-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(시스)-10-옥사-4-아자트리시클로[5.2.1.02,6]데스-4-일]-4--피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 (시스)-10-옥사-4-아자트리시클로[5.2.1.02,6]데칸을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 477.3.
실시예 187
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(시스)-10-옥사-4-아자트리시클로[5.2.1.02,6]데크-4-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00215
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(시스)-10-옥사-4-아자트리시클로[5.2.1.02,6]데크-4-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 E에 따라 제조하되, 파트 A에서 이소프로필 아민 대신에 (시스)-10-옥사-4-아자트리시클로[5.2.1.02,6]데칸 (실시예 186)을 사용하고, 파트 B에서 DCM을 함유한 에테르 중 2.0 M HCl을 용매로서 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 497.1/499.2.
실시예 188
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(9aR)-옥타히드로-2H-피리도[1,2-a]피라진-2-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00216
파트 A:
메틸 (2R)-1-(N-{[(페닐메틸)옥시]카르보닐}글리실)-2-피페리딘카르복실레이트
CH2Cl2 (20 mL) 중 메틸 (2R)-2-피페리딘카르복실레이트 히드로클로라이드 (1.0 g, 5.56 mmol) 및 HOBt (0.90 g, 6.67 mmol)의 용액에 4-메틸모르폴린 (2.44 mL, 22.24 mmol), N-{[(페닐메틸)옥시]카르보닐}글리신 (1.16 g, 5.56 mmol) 및 EDCl (1.28 g, 6.67 mmol)을 첨가하였다. 밤새 교반한 후, 용액을 6 N 수성 HCl (100 mL) 및 물 (100 mL)로 세척하였다. 수성 층을 CH2Cl2 (3×50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 물 (50 mL) 및 염수 (50 mL)로 세척한 후에 무수 MgSO4에서 건조시키고 진공하에 농축시켜서 메틸 (2R)-1-(N-{[(페닐메틸)옥시]카르보닐}글리실)-2-피페리딘카르복실레이트를 수득하였다 (2.029 g, 99％). LCMS: (M+H)+: 335.1.
파트 B:
(9aR)-테트라히드로-2H-피리도[1,2-a]피라진-1,4(3H,6H)-디온
메틸 (2R)-1-(N-{[(페닐메틸)옥시]카르보닐}글리실)-2-피페리딘카르복실레이트 (2.029 g, 6.068 mmol)를 MeOH (30 mL) 중에 용해하고 탈기시켜 아르곤하에 두었다. 10％ Pd/C (610 mg)를 첨가하고, 상기 내용물을 철저하게 탈기시켜 3시간 동안 수소 벌룬하에 두었다. 이어서, 상기 내용물을 탈기시키고, Pd/C를 셀라이트를 통해 여과하여 제거하면서 MeOH로 세척하였다. 여액을 진공하에 농축시켜서 순수한 (9aR)-테트라히드로-2H-피리도[1,2-a]피라진-1,4(3H,6H)-디온을 수득하였다 (779 mg, 76％). LCMS: (M+H)+: 169.1.
파트 C:
페닐메틸 (9aR)-옥타히드로-2H-피리도[1,2-a]피라진-2-카르복실레이트
(9aR)-테트라히드로-2H-피리도[1,2-a]피라진-1,4(3H,6H)-디온 (779 mg, 4.63 mmol)을 THF 46 mL 중에 용해하고 0℃로 냉각시켰다. 이어서, LiAlH4 (352 mg, 9.57 mmol)를 조금씩 첨가하였다. 상기 혼합물을 2시간 동안 85℃로 가열한 후에 0℃로 냉각시켰다. 반응물을 나트륨 술페이트 10수화물 (704 mg, 9.27 mmol)로 켄칭하고 0℃에서 30분 동안 교반하였다. 상기 용액에 1 N 수성 NaOH (5 mL)를 첨가하고, 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하였다. 이어서, Et2O (20 mL)를 첨가한 후에 벤질 클로로포르메이트 (0.783 mL, 5.563 mmol)를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 격렬하게 0℃에서 2시간 동안 교반하고, 상들을 분리하고, 수성 상을 Et2O (3×50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 무수 MgSO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 생성된 조 생성물을 RP-HPLC로 정제하여 페닐메틸 (9aR)-옥타히드로-2H-피리도[1,2-a]피라진-2-카르복실레이트를 수득하였다 (688 mg, 55％). LCMS: (M+H)+: 275.1.
파트 D:
(9aR)-옥타히드로-2H-피리도[1,2-a]피라진
페닐메틸 (9aR)-옥타히드로-2H-피리도[1,2-a]피라진-2-카르복실레이트 (688 mg, 2.50 mmol)를 MeOH (15 mL) 중에 용해하고 탈기시켜 아르곤하에 두었다. 10％ Pd/C (206 mg)를 첨가하고, 상기 내용물을 철저하게 탈기시켜 2시간 동안 수소 벌룬하에 두었다. 이어서, 상기 내용물을 탈기시키고, Pd/C를 셀라이트를 통해 여과하여 제거하면서 MeOH로 세척하였다. 여액을 진공하에 농축시켜서 순수한 (9aR)-옥타히드로-2H-피리도[1,2-a]피라진을 수득하였다 (364 mg, 99％). LCMS: (M+H)+: 141.1.
파트 E:
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(9aR)-옥타히드로-2H-피리도[1,2-a]피라진-2-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(9aR)-옥타히드로-2H-피리도[1,2-a]피라진-2-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 실시예 210의 파트 E 및 F와 유사한 방식으로 제조하되, 파트 E에서 1-{1-[(2S)-2-피롤리디닐]시클로프로필}피롤리딘 히드로클로라이드 대신에 (9aR)-옥타히드로-2H-피리도[1,2-a]피라진을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 478.4.
실시예 189
[(2R)-3-[2-(2-클로로-6-{(2S)-2-[1-(디메틸아미노)시클로프로필]-1-피롤리디닐}-5-플루오로-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00217
파트 A:
N,N-디메틸-1-[(2S)-2-피롤리디닐]시클로프로판아민
N,N-디메틸-1-[(2S)-2-피롤리디닐]시클로프로판아민을 실시예 210의 파트 A부터 파트 D에 따라 제조하되, 파트 B에서 피롤리딘 대신에 시판되는 디메틸 아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 검출되지 않음.
파트 B:
[(2R)-3-[2-(2-클로로-6-{(2S)-2-[1-(디메틸아미노)시클로프로필]-1-피롤리디닐}-5-플루오로-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 E에 따라 제조하되, 파트 A에서 이소프로필 아민 대신에 N,N-디메틸-1-[(2S)-2-피롤리디닐]시클로프로판아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 512.3.
실시예 190
N-{(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(5-플루오로-2-메틸-6-{메틸[2-(4-피리디닐)에틸]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}-N-히드록시포름아미드
Figure pat00218
파트 A:
6-클로로-5-플루오로-N,2-디메틸-N-[2-(4-피리디닐)에틸]-4-피리미딘아민
4,6-디클로로-5-플루오로-2-메틸피리미딘 (280 mg, 1.54 mmol)을 THF 5 mL 중에 용해하고 실온에서 교반하였다. 메틸[2-(4-피리디닐)에틸]아민 (210 mg, 1.54 mmol)을 첨가한 후에 트리에틸아민 (240 ㎕, 1.69 mmol)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 밤새 교반하였다. 상기 반응물을 EtOAc로 희석하고 염수로 세척하고 건조 (황산나트륨)시키고 증발시켜서 6-클로로-5-플루오로-N,2-디메틸-N-[2-(4-피리디닐)에틸]-4-피리미딘아민을 수득하였고 (350 mg, 81％), 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 281.1.
파트 B:
5-플루오로-6-히드라지노-N,2-디메틸-N-[2-(4-피리디닐)에틸]-4-피리미딘아민
6-클로로-5-플루오로-N,2-디메틸-N-[2-(4-피리디닐)에틸]-4-피리미딘아민 (350 mg, 1.25 mmol)을 DMSO 4 mL 중에 용해하고, 히드라진 일수화물 4 mL를 첨가하였다. 상기 혼합물을 밤새 교반하고 RP-HPLC로 정제하여 5-플루오로-6-히드라지노-N,2-디메틸-N-[2-(4-피리디닐)에틸]-4-피리미딘아민을 수득하였다 (220 mg, 63％). LCMS: (M+H)+: 277.2.
파트 C:
{(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(5-플루오로-2-메틸-6-{메틸[2-(4-피리디닐)에틸]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}[(페닐메틸)옥시]포름아미드
DMF 5 mL 중 (2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산 (230 mg, 0.76 mmol), 5-플루오로-6-히드라지노-N,2-디메틸-N-[2-(4-피리디닐)에틸]-4-피리미딘아민 (210 mg, 0.76 mmol), EDC (180 mg, 0.91 mmol), HOAt (120 mg, 0.91 mmol) 및 NMM (0.25 mL, 2.28 mmol)의 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 이어서, 상기 반응 혼합물을 역상 HPLC를 통해 정제하여 {(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(5-플루오로-2-메틸-6-{메틸[2-(4-피리디닐)에틸]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}[(페닐메틸)옥시]포름아미드를 수득하였다 (290 mg, 67％). LCMS: (M+H)+: 564.3.
파트 D:
N-{(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(5-플루오로-2-메틸-6-{메틸[2-(4-피리디닐)에틸]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}-N-히드록시포름아미드
{(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(5-플루오로-2-메틸-6-{메틸[2-(4-피리디닐)에틸]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}[(페닐메틸)옥시]포름아미드 (290 mg, 0.51 mmol)를 MeOH 10 mL 중에 용해하였다. 10％ Pd/탄소 (60 mg)를 첨가하고, 상기 내용물을 대략 5시간 동안 수소 벌룬하에 교반하였다. 이어서, 상기 내용물을 여과하여 촉매를 제거하고, 여액을 진공하에 농축시켜서 {(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(5-플루오로-2-메틸-6-{메틸[2-(4-피리디닐)에틸]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}히드록시포름아미드를 수득하였다 (230 mg, 96％). LCMS: (M+H)+: 474.3.
실시예 191
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00219
파트 A:
트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트
트리스(1,1-디메틸에틸) 2-(2,6-디클로로-5-플루오로-4-피리미디닐)-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트 (0.988 g, 1.992 mmol)를 THF (10 mL) 중에 용해하였다. 상기 용액에 트리에틸아민 (0.61 mL, 4.3765 mmol)을 첨가한 후에, 시판되는 2-아미노메틸 티아졸 히드로클로라이드 (0.30 g, 1.992 mmol)를 첨가하고, 이것을 THF (12 mL) 중에 현탁시켰다. 상기 반응물이 2일 동안 교반되도록 두고, 이 시간 동안에 THF 추가 10 mL 및 2-아미노메틸 티아졸 히드로클로라이드 (0.061 g, 0.4049 mmol)를 반응 혼합물에 첨가하였다. 추가의 3일 후에, 상기 반응 혼합물을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기물을 건조 (Na2SO4)시키고 농축시켰다. 생성된 조 물질을 실리카겔 크로마토그래피 (헥산 중 0→100％ 에틸 아세테이트)로 정제하여 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트를 황색 오일로서 수득하였다 (0.5826, 51％). LCMS: (M+H-3 Boc)+ = 375.0.
파트 B:
2-클로로-5-플루오로-6-[(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4(1H)-피리미디논 히드라존 디히드로클로라이드
트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트 (0.5826, 1.015 mmol)를 실온에서 MeOH (10 mL) 및 HCl (1,4-디옥산 중 4 M) (10 mL)을 중에 용해하고 밤새 교반하였다. 용매를 진공하에 제거하여 2-클로로-5-플루오로-6-[(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4(1H)-피리미디논 히드라존 (디히드로클로라이드로 추정됨)을 베이지색 고체로서 수득하였다 (0.3507, 100％). LCMS: (M+H)+ = 274.8.
파트 C:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드
2-클로로-5-플루오로-6-[(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4(1H)-피리미디논 히드라존 디히드로클로라이드 (0.3052 g, 0.882 mmol) 및 (2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)아미노]메틸}프로판산 (0.457 g, 1.059 mmol)을 DMF (8 mL) 중에 용해하였다. NMM (0.58 mL, 5.2753 mmol)을 첨가한 후에 HOAt (0.144 g, 1.059 mmol) 및 EDC (0.203 g, 1.059 mmol)를 첨가하였다. 밤새 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드를 베이지색 고체로서 수득하였다 (0.3031 g, 62％). LCMS: (M+H)+ = 556.2.
파트 D:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드 (0.3031 g, 0.5461 mmol)를 아세트산 (8 mL) 및 물 (2 mL) 중에 용해하였다. 상기 반응 혼합물을 밤새 교반하였다. 휘발성 물질을 증발시키고, 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 백색 고체로서 수득하였다 (0.1484 g, 58％). LCMS: (M+H)+ = 472.0.
실시예 192
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[메틸(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00220
파트 A:
N-메틸-1-(1,3-티아졸-2-일)메탄아민
시판되는 2-티아졸 카르복스알데히드 (3.61 g, 31.91 mmol)를 이소프로판올 (90 mL) 중에 용해하고, 체 (3.65 g)를 반응 용기에 첨가하였다. 이어서, 메틸아민 히드로클로라이드 (17.28 g, 256 mmol), 나트륨 아세테이트 (7.85 g, 96 mmol) 및 시아노수소화붕소나트륨 (3.07 g, 48.9 mmol)을 반응 혼합물에 첨가하였다. 상기 혼합물을 아르곤하에 두고 3일 동안 교반하였다. 상기 체를 여과로 제거하고 이소프로판올로 세정하였다. 여액을 증발시키고, 생성된 잔류물을 에틸 아세테이트 중에 용해하였다. 유기물을 포화 수성 NaHCO3 및 염수로 세척하였다. 합한 수성 층을 클로로포름 중 10％ MeOH 용매 혼합물 1 L로 추출하고, 합한 유기물을 건조 (Na2SO4)시키고 증발시켰다. 조 생성물을 실리카겔 크로마토그래피 (디클로로메탄 중 0→5％ MeOH)로 정제하여 N-메틸-1-(1,3-티아졸-2-일)메탄아민을 황색 오일로서 수득하였다 (0.930 g, 23％). LCMS: (M+H)+ = 129.0.
파트 B:
트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-5-플루오로-6-[메틸(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트
트리스(1,1-디메틸에틸) 2-(2,6-디클로로-5-플루오로-4-피리미디닐)-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트 (1.16 g, 2.339 mmol)를 THF (5 mL) 중에 용해하였다. 상기 용액에 트리에틸아민 (0.39 mL, 2.8 mmol)을 첨가한 후에, THF (2 mL) 중 N-메틸-1-(1,3-티아졸-2-일)메탄아민 (0.30 g, 2.3437 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응물이 밤새 교반되도록 두었다. 이어서, 반응 혼합물을 물로 희석하고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기물을 건조 (Na2SO4)시키고 농축시켜서 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-5-플루오로-6-[메틸(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트를 백색 고체로서 수득하였다 (1.51 g). LCMS: (M+H-Boc)+ = 489.1.
파트 C:
2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-N-메틸-N-(1,3-티아졸-2-일메틸)-4-피리미딘아민 디히드로클로라이드
트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-5-플루오로-6-[메틸(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트 (1.51 g, 2.57 mmol)를 실온에서 MeOH (25 mL) 및 HCl (1,4-디옥산 중 4 M) (25 mL) 중에 용해하였다. 상기 반응 혼합물이 4일에 걸쳐 교반되도록 두고, 이 후에 증발시켜서 2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-N-메틸-N-(1,3-티아졸-2-일메틸)-4-피리미딘아민 (디히드로클로라이드로 추정됨)을 베이지색 고체로서 수득하였다 (0.9034 g, 98％). LCMS: (M+H-2HCl)+ = 289.0.
파트 D:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[메틸(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드
2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-N-메틸-N-(1,3-티아졸-2-일메틸)-4-피리미딘아민 (디히드로클로라이드으로 추정됨) (0.9034 g, 2.509 mmol) 및 (2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)아미노]메틸}프로판산 (1.299 g, 3.01 mmol)을 DMF (13 mL) 중에 용해하였다. NMM (1.655 mL, 15.05 mmol)을 첨가한 후에 HOAt (0.4095 g, 3.01 mmol) 및 EDC (0.577 g, 3.01 mmol)를 첨가하였다. 밤새 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[메틸(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드를 적색 점성 물질로서 수득하였다. LCMS: (M+H)+ = 570.2.
파트 E:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[메틸(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[메틸(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드를 아세트산 (8 mL) 및 물 (2 mL) 중에 용해하였다. 상기 반응 혼합물이 2일 교반되도록 두었다. 휘발성 물질을 증발시키고, 생성된 잔류물을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[메틸(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 베이지색 고체로서 수득하였다 (0.3469 g). LCMS: (M+H)+ = 486.1.
실시예 193
[(2R)-3-[2-(2-클로로-5-플루오로-6-{[(3S)-1-메틸-2-옥소헥사히드로-1H-아제핀-3-일]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00221
파트 A:
1,1-디메틸에틸 [(3S)-1-메틸-2-옥소헥사히드로-1H-아제핀-3-일]카르바메이트
MeOH (20 mL) 중 1,1-디메틸에틸 [(3S)-1-메틸-2-옥소-2,3,4,7-테트라히드로-1H-아제핀-3-일]카르바메이트 (실시예 94) (680 mg, 2.8 mmol)의 탈기된 용액에 10％ Pd/C (100 mg)를 첨가하고, 생성된 현탁액을 밤새 수소 벌룬하에 교반하였다. 촉매를 여과하고, 여액을 감압하에 농축하여 1,1-디메틸에틸 [(3S)-1-메틸-2-옥소헥사히드로-1H-아제핀-3-일]카르바메이트를 수득하였다 (470 mg, 88％). LCMS: (M-tBut)+: 186.2.
파트 B:
(3S)-3-아미노-1-메틸헥사히드로-2H-아제핀-2-온
디옥산 (5 mL) 중 1,1-디메틸에틸 [(3S)-1-메틸-2-옥소헥사히드로-1H-아제핀-3-일]카르바메이트 (470 mg, 1.9 mmol)의 용액에 HCl (4.8 mL, 19 mmol, 디옥산 중 4 M)을 첨가하고, 반응물을 밤새 교반하였다. 용매를 증발시켜 정량적인 수율의 (3S)-3-아미노-1-메틸헥사히드로-2H-아제핀-2-온을 수득하였다. LCMS: (M+H)+: 143.1 .
파트 C:
[(2R)-3-[2-(2-클로로-5-플루오로-6-{[(3S)-1-메틸-2-옥소헥사히드로-1H-아제핀-3-일]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-[2-(2-클로로-5-플루오로-6-{[(3S)-1-메틸-2-옥소헥사히드로-1H-아제핀-3-일]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 E에 따라 제조하되, 파트 A에서 이소프로필 아민 대신에 (3S)-3-아미노-1-메틸헥사히드로-2H-아제핀-2-온을 사용하고, 파트 B에서 DCM을 함유한 에테르 중 2.0 M HCl을 용매로서 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 500.1/502.2.
실시예 194
[(2R)-3-[2-(2-클로로-5-플루오로-6-{(2R)-2-[(메틸옥시)메틸]-1-피롤리디닐}-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00222
[(2R)-3-[2-(2-클로로-5-플루오로-6-{(2R)-2-[(메틸옥시)메틸]-1-피롤리디닐}-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 E에 따라 제조하되, 파트 A에서 이소프로필 아민 대신에 시판되는 (S)-(+)-2-(메톡시메틸)피롤리딘을 사용하고, 파트 B에서 DCM을 함유한 에테르 중 2.0 M HCl을 용매로서 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 473.2/475.2.
실시예 195
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[4-(디메틸아미노)-2,2-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 (D1, 미지의 단일 부분입체이성질체)
Figure pat00223
파트 A:
메틸 3-메틸-3-[(페닐메틸)아미노]부타노에이트
95％ MeOH-물 (180 mL) 중 벤질아민 (10.0 mL, 91.6 mmol)의 용액에 메틸 3-메틸-2-부테노에이트 (12.3 mL, 100.8 mmol)를 첨가하였다. 상기 용액을 55℃에서 가열하고 2주 동안 교반하였다. 이어서, 상기 용액을 실온으로 냉각시키고 진공하에 농축시키고, 잔류물을 구배 실리카겔 크로마토그래피 (헥산 중 0％→100％ EtOAc; 1％ Et3N)로 정제하여 메틸 3-메틸-3-[(페닐메틸)아미노]부타노에이트를 옅은 황색 오일로서 수득하였다 (5.5893 g, 28％). LCMS: (M+H)+: 222.1.
파트 B:
메틸 3-메틸-3-[[(메틸옥시)(옥소)아세틸](페닐메틸)아미노]부타노에이트
THF (125 mL) 중 메틸 3-메틸-3-[(페닐메틸)아미노]부타노에이트 (5.5853 g, 25.24 mmol)의 용액에 N,N-디이소프로필에틸아민 (6.6 mL, 37.89 mmol)을 첨가하였다. 상기 용액을 0℃로 냉각시키고, 메틸 클로로(옥소)아세테이트 (2.55 mL, 27.73 mmol)를 적가하였다. 이어서, 혼합물이 교반되도록 하고, 밤새 실온으로 가온시켰다. 상기 혼합물을 EtOAc (200 mL)로 희석하고, 1 N 수성 HCl (100 mL)로 세척한 후에 포화 수성 NaHCO3 (100 mL)으로 세척하였다. 유기 상을 무수 MgSO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc-헥산으로부터 결정화하여 백색 고체를 수득하였고, 이것을 진공 여과로 수집하여 헥산으로 세척하였다. 생성된 메틸 3-메틸-3-[[(메틸옥시)(옥소)아세틸](페닐메틸)아미노]부타노에이트를 백색 고체로서 수득하였다 (7.0709 g, 91％). LCMS: (M+H)+: 308.1.
파트 C:
메틸 2,2-디메틸-4,5-디옥소-1-(페닐메틸)-3-피롤리딘카르복실레이트
톨루엔 (110 mL) 중 메틸 3-메틸-3-[[(메틸옥시)(옥소)아세틸](페닐메틸)아미노]부타노에이트 (6.9702 g, 22.68 mmol)의 혼합물에 MeOH 중 25％ w/w NaOMe (14 mL)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 80℃에서 가열하고 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 상기 용액을 실온으로 냉각시키고 진공하에 약 1/2 부피로 농축시켰다. 잔류물을 DCM (200 mL) 및 1 N 수성 HCl (200 mL) 사이에 분배하였다. 수성 상을 신선한 분량의 DCM (100 mL)으로 추출하고, 합한 유기 상을 무수 MgSO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 생성된 백색 고체를 헥산으로 연화처리하고, 진공 여과로 수집하여 메틸 2,2-디메틸-4,5-디옥소-1-(페닐메틸)-3-피롤리딘카르복실레이트를 백색 고체로서 수득하였다 (5.5965 g, 88％). LCMS: (M+H)+: 276.1.
파트 D:
5,5-디메틸-1-(페닐메틸)-2,3-피롤리딘디온
10:1 HOAc-물 (100 mL) 중 메틸 2,2-디메틸-4,5-디옥소-1-(페닐메틸)-3-피롤리딘카르복실레이트 (5.6429 g, 20.50 mmol)의 용액을 100℃에서 가열하고 2일 동안 교반하였다. 상기 용액을 실온으로 냉각시키고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 DCM (200 mL) 및 포화 수성 NaHCO3 (100 mL) 사이에 분배하였다. 수성 상을 신선한 분량의 DCM (50 mL)으로 추출하고, 합한 유기 상을 무수 MgSO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켜서 조 5,5-디메틸-1-(페닐메틸)-2,3-피롤리딘디온을 밝은 오렌지색 고체로서 수득하였다 (3.9096 g, 88％ 조 수율). LCMS: (M+H)+: 218.1.
파트 E:
(3E)-5,5-디메틸-1-(페닐메틸)-2,3-피롤리딘디온 3-(O-메틸옥심)
MeOH (90 mL) 중 5,5-디메틸-1-(페닐메틸)-2,3-피롤리딘디온 (3.9036 g, 17.97 mmol)의 용액에 나트륨 아세테이트 (1.81 g, 21.54 mmol) 및 메톡시아민 히드로클로라이드 (1.80 g, 21.55 mmol)를 첨가하였다. 상기 용액을 밤새 교반한 후에, 용매를 진공하에 제거하였다. 잔류물을 DCM (200 mL), 포화 수성 NaHCO3 및 물 사이에 분배하였다. 수성 상을 신선한 분량의 DCM (50 mL)으로 추출하고, 합한 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켜서 조 (3E)-5,5-디메틸-1-(페닐메틸)-2,3-피롤리딘디온 3-(O-메틸옥심)을 황색/오렌지색 오일로서 수득하였다 (4.5282 g, >100％ 조 수율). LCMS: (M+H)+: 247.1.
파트 F:
5,5-디메틸-1-(페닐메틸)-3-피롤리딘아민
THF (90 mL) 중 (3E)-5,5-디메틸-1-(페닐메틸)-2,3-피롤리딘디온 3-(O-메틸옥심) (4.2872 g, 17.41 mmol)의 0℃ 용액에 LiAlH4 (2.64 g, 69.57 mmol)를 조금씩 첨가하였다. 상기 혼합물을 70℃에서 가열하고 6.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 상기 혼합물을 실온으로 냉각시키고, Na2SO4·10 H2O (3 g)를 첨가한 후에 1 N 수성 NaOH (100 mL)를 첨가하여 켄칭하였다. 상기 혼합물을 Et2O (2×150 mL)로 추출하고, 합한 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 DCM (200 mL)으로 희석하고, 상기 혼합물을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켜서 조 물질인 라세미체 5,5-디메틸-1-(페닐메틸)-3-피롤리딘아민을 밝은 황색 오일로서 수득하였다 (3.2293 g, 86％). LCMS: (M+H)+: 205.2.
파트 G:
N,N,5,5-테트라메틸-1-(페닐메틸)-3-피롤리딘아민
포름산 (20 mL) 및 모르말린 (20 mL) 중 라세미체 5,5-디메틸-1-(페닐메틸)-3-피롤리딘아민 (3.2293 g, 15.81 mmol)의 용액을 100℃에서 가열하고 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 상기 용액을 0℃로 냉각시키고, 6 N 수성 NaOH를 사용하여 pH 14로 조정하였다. 상기 혼합물을 Et2O (2×150 mL)로 추출하고, 합한 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 DCM (200 mL)으로 희석하고, 용액을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 구배 실리카겔 크로마토그래피 (헥산 중 0％→100％ EtOAc; 1％ Et3N)로 정제하여 라세미체 N,N,5,5-테트라메틸-1-(페닐메틸)-3-피롤리딘아민을 오렌지색 오일로서 수득하였다 (2.8158 g, 77％). LCMS: (M+H)+: 232.9. 상기 물질을 정제용 키랄 초임계 유체 크로마토그래피 (키랄팩 AD-H 20×250 mm; 6％ MeOH (0.1％ Et2 NH), 94％ CO2; 50 mL/분; 230 nm 검출; 50 mg 주입/주기)로 그의 2개의 구조 거울상이성질체로 분리하였다.
파트 H:
N,N,5,5-테트라메틸-3-피롤리딘아민 디히드로클로라이드
MeOH (40 mL) 중 N,N,5,5-테트라메틸-1-(페닐메틸)-3-피롤리딘아민의 제1 용출 거울상이성질체 (1.0607 g, 4.569 mmol)의 용액에 1 N 수성 HCl (9.1 mL, 9.1 mmol) 및 10％ Pd/C (50％ 물, 265 mg)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 밤새 수소화한 후에, 0.2 ㎛ PTFE 막을 통해 여과하였다. 상기 용액을 진공하에 농축시키고, 잔류물을 MeOH (5×50 mL)로 공비증류하여 조 N,N,5,5-테트라메틸-3-피롤리딘아민 디히드로클로라이드를 백색 발포체로서 수득하였다 (1.0206 g, >100％ 조 수율). LCMS: (M+H)+: 143.1.
파트 I:
트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-6-[4-(디메틸아미노)-2,2-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트
DMF (23 mL) 중 N,N,5,5-테트라메틸-3-피롤리딘아민 디히드로클로라이드 (0.9831 g으로 추정됨, 4.569 mmol)의 용액에 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-(2,6-디클로로-5-플루오로-4-피리미디닐)-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트 (2.27 g, 4.564 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (2.63 mL, 15.10 mmol)을 첨가하였다. 상기 용액을 밤새 교반한 후에 Et2O (100 mL)로 희석하였다. 상기 혼합물을 물 (2×50 mL)로 세척하고, 합한 수성 상을 신선한 분량의 Et2O (50 mL)로 추출하였다. 상기 유기 상을 신선한 분량의 물 (20 mL)로 세척하고, 합한 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 구배 실리카겔 크로마토그래피 (헥산 중 0％→100％ EtOAc; 1％ Et3N)로 정제하여 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-6-[4-(디메틸아미노)-2,2-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트를 밝은 황색 발포체로서 수득하였다 (2.2034 g, 80％). LCMS: (M+H)+: 603.3.
파트 J:
1-(2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)-N,N,5,5-테트라메틸-3-피롤리딘아민
MeOH (22 mL) 중 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-6-[4-(디메틸아미노)-2,2-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트 (2.2004 g, 3.648 mmol)의 용액에 디옥산 중 4 N HCl (22 mL)을 첨가하였다. 상기 용액을 3일 동안 교반한 후에 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 MeOH (50 mL)로 공비증류한 후에, DCM (100 mL) 및 포화 수성 NaHCO3 (100 mL) 사이에 분배하였다. 수성 상을 신선한 DCM (2×50 mL)으로 추출하고, 합한 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켜서 1-(2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)-N,N,5,5-테트라메틸-3-피롤리딘아민을 오렌지색 발포체로서 수득하였다 (1.0552 g, 96％). LCMS: (M+H)+: 303.1.
파트 K:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[4-(디메틸아미노)-2,2-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드
DMF (16 mL) 중 1-(2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-4-피리미디닐)-N,N,5,5-테트라메틸-3-피롤리딘아민 (1.0502 g, 3.469 mmol)의 용액에 (2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산 (1.0075 g, 3.299 mmol), N-메틸모르폴린 (1.8 mL, 16.37 mmol), 1-히드록시-7-아자벤조트리아졸 (0.540 g, 3.968 mmol) 및 EDC (0.760 g, 3.964 mmol)를 첨가하였다. 상기 용액을 밤새 교반한 후에 Et2O (100 mL)로 희석하였다. 상기 혼합물을 물 (3×50 mL)로 세척하고, 합한 수성 상을 신선한 분량의 Et2O (50 mL)로 추출하였다. 이 유기 상을 신선한 분량의 물 (25 mL)로 세척하고, 합한 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 DCM (150 mL) 중에 용해하고, 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켜서 조 [(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[4-(디메틸아미노)-2,2-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드를 짙은 적색 발포체로서 수득하였다 (1.6539 g, 85％ 조 수율). LCMS: (M+H)+: 590.2.
파트 L:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[4-(디메틸아미노)-2,2-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
MeOH (28 mL) 중 [(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[4-(디메틸아미노)-2,2-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 (1.6493 g, 2.795 mmol)의 용액에 20％ Pd(OH)2/C (50％ 물, 165 mg)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 3.5시간 동안 수소화한 후에 여과하였다. 상기 용액을 진공하에 농축시키고, 잔류물을 길슨 RPLC로 정제하여 [(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[4-(디메틸아미노)-2,2-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 EtOAc-헥산으로부터의 결정화 후에 핑크색 고체로서 수득하였다 (0.7580 g, 54％, 미지의 단일 부분입체이성질체). LCMS: (M+H)+: 500.3.
실시예 196
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[4-(디메틸아미노)-2,2-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 (D2, 미지의 단일 부분입체이성질체)
Figure pat00224
N,N,5,5-테트라메틸-1-(페닐메틸)-3-피롤리딘아민의 제2 용출 거울상이성질체를 사용하여 실시예 195의 절차에 따라 [(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[4-(디메틸아미노)-2,2-디메틸-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 제조하였다. LCMS: (M+H)+: 500.3.
실시예 197
[(2R)-3-[2-(2-클로로-6-{3-[2-(디메틸아미노)-1,1-디메틸에틸]-1-피롤리디닐}-5-플루오로-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 (부분입체이성질체들의 혼합물)
Figure pat00225
파트 A:
{1-메틸-1-[1-(페닐메틸)-3-피롤리디닐]에틸}아민
{1-메틸-1-[1-(페닐메틸)-3-피롤리디닐]에틸}아민을 문헌 [J. Org. Chem. 2000, 65, 1016-1021]의 절차에 따라 제조할 수 있다. LCMS: (M+H)+: 219.1.
파트 B:
N,N-디메틸-2-[1-(페닐메틸)-3-피롤리디닐]-2-프로판아민
{1-메틸-1-[1-(페닐메틸)-3-피롤리디닐]에틸}아민 (1.0726 mg, 4.912 mmol)을 포름알데히드 (30 mL) 및 포름산 (30 mL)의 혼합물 중에 용해한 후에 2시간 동안 100℃로 가열하였다. 0℃로 냉각시킨 후, 6 N 수성 NaOH를 첨가하여 pH를 14로 조정하였다. 이어서, 수성 층을 Et2O (3×50 mL)로 추출하고, 합한 유기 상을 무수 MgSO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켜서 N,N-디메틸-2-[1-(페닐메틸)-3-피롤리디닐]-2-프로판아민을 수득하였다 (1.85 g, 99％). LCMS: (M+H)+: 247.2.
파트 C:
N,N-디메틸-2-(3-피롤리디닐)-2-프로판아민 히드로클로라이드
N,N-디메틸-2-[1-(페닐메틸)-3-피롤리디닐]-2-프로판아민 (2.089 g, 8.47 mmol)을 MeOH (50 mL) 및 1 N HCl (18.65 mL, 18.65 mmol)의 혼합물 중에 용해하고 탈기시켜 아르곤하에 두었다. 10％ Pd/C (625 mg)를 첨가하고, 상기 내용물을 철저하게 탈기시켜 수소 벌룬하에 2시간 동안 두었다. 이어서, 상기 내용물을 탈기시키고, Pd/C를 섬유유리 필터를 통해 여과하여 제거하면서 MeOH로 세척하였다. 여액을 진공하에 농축시켜서 순수한 N,N-디메틸-2-(3-피롤리디닐)-2-프로판아민 히드로클로라이드를 수득하였다 (1.245 g, 76％). LCMS: (M+H)+: 157.2.
파트 D:
[(2R)-3-[2-(2-클로로-6-{3-[2-(디메틸아미노)-1,1-디메틸에틸]-1-피롤리디닐}-5-플루오로-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-[2-(2-클로로-6-{3-[2-(디메틸아미노)-1,1-디메틸에틸]-1-피롤리디닐}-5-플루오로-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 E에 따라 부분입체이성질체들의 혼합물로서 제조하되, 파트 A에서 이소프로필 아민 대신에 N,N-디메틸-2-(3-피롤리디닐)-2-프로판아민 히드로클로라이드를 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 514.2.
실시예 198
N-[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2R,3R)-2,3,4-트리메틸-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
Figure pat00226
파트 A:
페닐메틸 2,3-디메틸-1-피페라진카르복실레이트
100 mL 3-목 둥근-바닥 플라스크를 트랜스-2,3-디메틸피페라진 및 시스-2,3-디메틸피페라진의 혼합물 [Yakugaku Zasshi, 1958, 78, 229-232] (3.571 g, 31.1 mmol)로 충전시켰다. 상기 플라스크를 빙조에서 냉각시키고, 물 2.7 mL 중 메탄술폰산 (3.95 mL, 60.9 mmol)의 용액을 서서히 첨가하면서 온도를 40℃ 미만으로 유지하였다. 상기 용액을 20℃로 냉각시키고, 에탄올 4 mL를 첨가하였다. 60％ 수성 칼륨 아세테이트를 사용하여 pH를 4로 조정한 후에, 벤질 클로로포르메이트 (3.86 mL, THF 2 mL 중 27.4 mol) 및 칼륨 아세테이트 용액을 반응 용액이 pH 4에서 유지되도록 하는 속도로 조정하면서 동시에 적가하면서, 온도가 25℃에서 유지되도록 냉각시켰다. 혼합물을 추가의 1시간 동안 교반한 후에, 유기 용매를 제거하고, 잔류 수용액을 에틸 아세테이트로 세척하였다. 에틸 아세테이트 세척액을 1 M HCl로 2회 추출하여 원하는 생성물을 회수하였다. 산 추출물을 원래 수용액과 합하고, 6 N NaOH를 첨가하여 pH를 11로 조정하면서, 온도가 40℃ 미만으로 유지되도록 냉각시켰다. 이어서, 수용액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 에틸 아세테이트 추출물을 황산마그네슘에서 건조시켰다. 용매를 여과 및 제거하여 페닐메틸 2,3-디메틸-1-피페라진카르복실레이트의 모든 4개의 입체이성질체를 짙은 갈색 오일로서 수득하였다 (3.11 g, 41％). LCMS: (M+H)+: 249.1.
파트 B:
페닐메틸 (2R,3R)-2,3,4-트리메틸-1-피페라진카르복실레이트 및 페닐메틸 (2S,3S)-2,3,4-트리메틸-1-피페라진카르복실레이트
디클로로메탄 (90 mL) 중 페닐메틸 2,3-디메틸-1-피페라진카르복실레이트 (4가지 입체이성질체들의 혼합물) (3.105 g, 12.5 mmol)의 용액에 0℃에서 포름알데히드 (1.409 mL, 37％ 수용액, 18.75 mmol)를 첨가한 후에 트리아세톡시수소화붕소나트륨 (3.445 g, 16.26 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물이 실온으로 가온되도록 하고 2시간 동안 교반한 후에 디클로로메탄으로 희석하고 1 N NaOH 용액으로 세척하였다. 유기물을 염수로 세척하여 건조 (MgSO4)시키고 증발시켜서 페닐메틸 2,3,4-트리메틸-1-피페라진카르복실레이트 (모든 4가지 입체이성질체의 혼합물)를 수득하였다 (3.04 g, 93％). 페닐메틸 (2R,3R)-2,3,4-트리메틸-1-피페라진카르복실레이트 (365 mg) 및 페닐메틸 (2S,3S)-2,3,4-트리메틸-1-피페라진카르복실레이트 (420 mg)를 정제용 및 키랄 크로마토그래피의 조합으로 분리하였다. 절대 배열은 최초부터의 진동 원형 이색성으로부터 지정되었다. LCMS: (M+H)+: 263.3.
파트 C:
(2R,3R)-1,2,3-트리메틸피페라진, 히드로클로라이드 염
페닐메틸 (2R,3R)-2,3,4-트리메틸-1-피페라진카르복실레이트 (328 mg, 1.25 mmol)을 MeOH 20 mL 중에 용해하고 탈기시켜 아르곤하에 두었다. 10％ Pd/C (81 mg)를 첨가하고, 상기 내용물을 철저하게 탈기시켜 대략 3시간 동안 수소 벌룬하에 두었다. 이어서, 상기 내용물을 탈기시켜 셀라이트를 통해 여과하고, 상기 셀라이트 패드를 DCM 및 MeOH로 세척하였다. 1 N HCl 2.75 mL를 첨가한 후에, 생성된 여액을 진공하에 농축시켜서 (2R,3R)-1,2,3-트리메틸피페라진의 히드로클로라이드 염을 수득하였다 (251 mg, 100％). LCMS: (M+H)+: 129.1.
파트 D:
N-[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2R,3R)-2,3,4-트리메틸-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
N-[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2S,3R)-2,3,4-트리메틸-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드를 일반적인 절차 E에 따라 제조하되, 파트 A에서 이소프로필 아민 대신에 (2R,3R)-1,2,3-트리메틸피페라진, 히드로클로라이드 염을 사용하고 DIPEA를 3 당량 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 486.1.
실시예 199
[(2R)-3-{2-[2-클로로-6-(3-에틸-3-히드록시-1-아제티디닐)-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00227
파트 A:
3-에틸-3-아제티디놀 히드로클로라이드
에탄올 (30 mL) 및 1 N HCl (5 mL) 중 1-(디페닐메틸)-3-에틸-3-아제티디놀 (0.200 g, 0.75 mmol) [J. Med. Chem. 1993, 36, 801-810] 및 20％ Pd(OH)2 (200 mg)의 혼합물을 55 psi에서 밤새 H2로 처리하였다. 표준 후처리로 3-에틸-3-아제티디놀 히드로클로라이드를 수득하였다. LCMS: (M+H)+ 102.2.
파트 B:
[(2R)-3-{2-[2-클로로-6-(3-에틸-3-히드록시-1-아제티디닐)-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-{2-[2-클로로-6-(3-에틸-3-히드록시-1-아제티디닐)-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 D에 따라 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 3-에틸-3-아제티디놀 히드로클로라이드를 사용하였다. LCMS: (M+H)+ 459.1.
실시예 200
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(테트라히드로-1H-푸로[3,4-c]피롤-5(3H)-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00228
([(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(테트라히드로-1H-푸로[3,4-c]피롤-5(3H)-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 E에 따라 제조하되, 파트 A에서 이소프로필 아민 대신에 헥사히드로-1H-푸로[3,4-c]피롤 (실시예 99)을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 471.1/473.1.
실시예 201
{(2R)-2-[(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(9aR)-옥타히드로-2H-피리도[1,2-a]피라진-2-일]-4-피리미디닐}히드라지노)카르보닐]헥실}히드록시포름아미드
Figure pat00229
파트 A:
(2R)-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)헥산산
(2R)-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)헥산산을 중간체 A와 유사한 방식으로 제조하되, 파트 A에서 3-시클로펜틸프로피오닐 클로라이드 대신에 헥사노일 클로라이드를 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 280.2.
파트 B:
{(2R)-2-[(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(9aR)-옥타히드로-2H-피리도[1,2-a]피라진-2-일]-4-피리미디닐}히드라지노)카르보닐]헥실}히드록시포름아미드
{(2R)-2-[(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(9aR)-옥타히드로-2H-피리도[1,2-a]피라진-2-일]-4-피리미디닐}히드라지노)카르보닐]헥실}히드록시포름아미드를 일반적인 절차 E에 따라 제조하되, 파트 A에서 이소프로필 아민 대신에 (9aR)-옥타히드로-2H-피리도[1,2-a]피라진 [J. Med. Chem. 1993, 36, 2311-2320]을 사용하고, 파트 B에서 DCM을 함유한 에테르 중 2.0 M HCl을 용매로서 사용하고, 파트 C에서 (2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산 대신에 (2R)-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)헥산산을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 472.2/474.1.
실시예 202
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(2S,3S)-2,3,4-트리메틸-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
Figure pat00230
파트 A:
(2S,3S)-1,2,3-트리메틸피페라진, 히드로클로라이드 염
페닐메틸 (2S,3S)-2,3,4-트리메틸-1-피페라진카르복실레이트 (323 mg, 1.23 mmol) (실시예 198)를 MeOH 20 mL 중에 용해하고 탈기시켜 아르곤하에 두었다. 10％ Pd/C (81 mg)를 첨가하고, 상기 내용물을 철저하게 탈기시켜 대략 3시간 동안 수소 벌룬하에 두었다. 이어서, 상기 내용물을 탈기시켜 셀라이트를 통해 여과하고, 상기 셀라이트 패드를 DCM 및 MeOH로 세척하였다. 1 N HCl 2.70 mL를 첨가한 후에, 생성된 여액을 진공하에 농축시켜서 (2S,3S)-1,2,3-트리메틸피페라진의 히드로클로라이드 염을 수득하였다 (246 mg, 100％). LCMS: (M+H)+: 129.1.
파트 B:
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(2S,3S)-2,3,4-트리메틸-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(2S,3S)-2,3,4-트리메틸-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 (2S,3S)-1,2,3-트리메틸피페라진, 히드로클로라이드 염을 사용하고 DIPEA를 3 당량 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 466.2.
실시예 203
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(2R,3R)-2,3,4-트리메틸-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
Figure pat00231
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(2R,3R)-2,3,4-트리메틸-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 (2R,3R)-1,2,3-트리메틸피페라진, 히드로클로라이드 염 (실시예 198)을 사용하고 DIPEA를 3 당량 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 466.2.
실시예 204
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(3-티에닐메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00232
트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(3-티에닐메틸)아미노]-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트
트리스(1,1-디메틸에틸) 2-(2,6-디클로로-5-플루오로-4-피리미디닐)-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트 (1.413 g, 2.85 mmol)를 THF (5 mL) 중에 용해하였다. 상기 용액에 트리에틸아민 (0.48 mL, 3.4438 mmol)을 첨가한 후에, 시판되는 (3-티에닐메틸)아민 (0.322 g, 2.85 mmol)을 첨가하고, 이것을 THF (1 mL) 중에 용해하였다. 교반 후에, 상기 반응 혼합물을 물로 희석하고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기물을 건조 (Na2SO4)시키고 농축시켜서 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(3-티에닐메틸)아미노]-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트를 백색 고체로서 수득하였다 (1.6214 g, 99％). LCMS: (M+H-3Boc)+ = 374.1.
2-클로로-5-플루오로-6-[(3-티에닐메틸)아미노]-4(1H)-피리미디논 히드라존 디히드로클로라이드
트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(3-티에닐메틸)아미노]-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트 (1.6214 g, 2.83 mmol)를 MeOH (28 mL) 및 HCl (1,4-디옥산 중 4 M) (28 mL) 중에 용해하였다. 상기 반응 혼합물이 밤새 교반되도록 한 후에 증발시켜서 2-클로로-5-플루오로-6-[(3-티에닐메틸)아미노]-4(1H)-피리미디논 히드라존 (디히드로클로라이드로 추정됨)을 와인색 고체로서 수득하였다 (1.0828 g). LCMS: (M+H-2HCl)+ = 273.9.
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(3-티에닐메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드
2-클로로-5-플루오로-6-[(3-티에닐메틸)아미노]-4(1H)-피리미디논 히드라존 디히드로클로라이드 (1.0828 g) 및 (2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)아미노]메틸}프로판산 디이소프로필 아민 염 형태 (1.63 g, 3.8 mmol)를 DMF (9 mL) 중에 용해하였다. NMM (2.1 mL, 19.1 mmol)을 첨가한 후에 HOAt (0.512 g, 3.76 mmol) 및 EDC (0.722 g, 3.77 mmol)를 첨가하였다. 밤새 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(3-티에닐메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드를 적색빛 갈색 고체로서 수득하였다 (0.7045 g). LCMS: (M+H-THP)+ = 471.1.
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(3-티에닐메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(3-티에닐메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드 (0.7045 g, 1.272 mmol)를 아세트산 (8 mL) 및 물 (2 mL) 중에 용해하였다. 상기 반응 혼합물을 밤새 교반하였다. 휘발성 물질을 증발시키고, 생성된 잔류물을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(3-티에닐메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 베이지색 고체로서 수득하였다 (0.2284 g, 38％). LCMS: (M+H)+ = 471.0.
실시예 205
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-[메틸(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00233
파트 A:
N-메틸-1-(1,3-티아졸-2-일)메탄아민
시판되는 2-티아졸 카르복스알데히드 (3.61 g, 31.91 mmol)를 이소프로판올 (90 mL) 중에 용해하고, 체 (3.65 g)를 반응 용기에 첨가하였다. 이어서, 메틸아민 히드로클로라이드 (17.28 g, 256 mmol), 나트륨 아세테이트 (7.85 g, 96 mmol) 및 시아노수소화붕소나트륨 (3.07 g, 48.9 mmol)을 반응 혼합물에 첨가하였다. 상기 혼합물을 아르곤하에 두고 3일 동안 교반하였다. 상기 체를 여과 제거하고, 이소프로판올로 세정하였다. 여액을 증발시키고, 생성된 잔류물을 에틸 아세테이트 중에 용해하였다. 유기물을 포화 수성 NaHCO3 및 염수로 세척하였다. 합한 수성 층을 클로로포름 중 10％ MeOH 용매 혼합물 1 L로 추출하고, 합한 유기물을 건조 (Na2SO4)시키고 증발시켰다. 조 생성물을 실리카겔 크로마토그래피 (디클로로메탄 중 0→5％ MeOH)로 정제하여 N-메틸-1-(1,3-티아졸-2-일)메탄아민을 황색 오일로서 수득하였다 (0.930 g, 23％). LCMS: (M+H)+ = 129.0.
파트 B:
6-클로로-5-플루오로-N-메틸-2-(메틸티오)-N-(1,3-티아졸-2-일메틸)-4-피리미딘아민
4,6-디클로로-5-플루오로-2-(메틸티오)피리미딘 (중간체 E 참조) (0.3313 g, 1.563 mmol), N-메틸-1-(1,3-티아졸-2-일)메탄아민 (0.200 g, 1.5625 mmol) 및 트리에틸아민 (0.26 mL, 1.8654 mmol)을 THF (5 mL) 중에 용해하고 밤새 교반되도록 두었다. 이어서, 반응 혼합물을 물로 희석하고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기물을 건조 (Na2SO4)시키고 농축시켜서 6-클로로-5-플루오로-N-메틸-2-(메틸티오)-N-(1,3-티아졸-2-일메틸)-4-피리미딘아민을 황색 오일로서 수득하였다 (0.4928 g). LCMS: (M+H)+ = 305.0.
파트 C:
5-플루오로-6-히드라지노-N-메틸-2-(메틸티오)-N-(1,3-티아졸-2-일메틸)-4-피리미딘아민
6-클로로-5-플루오로-N-메틸-2-(메틸티오)-N-(1,3-티아졸-2-일메틸)-4-피리미딘아민 (0.4928 g, 1.621 mmol)을 DMSO 5 mL 및 히드라진 일수화물 (0.63 mL, 12.96 mmol) 중에 용해하였다. 반응 용기를 압력 밀폐시키고, 2시간 동안 80℃로 가열하였다. 상기 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여 5-플루오로-6-히드라지노-N-메틸-2-(메틸티오)-N-(1,3-티아졸-2-일메틸)-4-피리미딘아민을 베이지색 고체로서 수득하였다 (0.2112 g, 43％). LCMS: (M+H)+ = 301.0.
파트 D:
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-[메틸(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라진}-3-옥소프로필)(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드
5-플루오로-6-히드라지노-N-메틸-2-(메틸티오)-N-(1,3-티아졸-2-일메틸)-4-피리미딘아민 (0.2112 g, 0.704 mmol) 및 (2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)아미노]메틸}프로판산 (0.365 g, 0.846 mmol)을 DMF (5 mL) 중에 용해였다. NMM (0.31 mL, 2.8195 mmol)을 첨가한 후에 HOAt (0.115 g, 0.846 mmol) 및 EDC (0.162 g, 0.845 mmol)를 첨가하였다. 밤새 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여 ((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-[메틸(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라진}-3-옥소프로필)(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드를 베이지색-오렌지색 고체로서 수득하였다 (0.2601 g, 63％). LCMS: (M+H)+ = 582.2.
파트 E:
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-[메틸(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라진}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-[메틸(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라진}-3-옥소프로필)(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드 (0.2601 g, 0.448 mmol)를 아세트산 (8 mL) 및 물 (2 mL) 중에 용해하였다. 이 반응 혼합물을 3일 동안 교반하였다. 휘발성 물질을 증발시키고, 생성된 잔류물을 RP-HPLC로 정제하여 ((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-[메틸(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라진}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 베이지색 고체로서 수득하였다 (0.1396 g, 63％). LCMS: (M+H)+ = 498.1.
실시예 206
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-(메틸티오)-6-[(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00234
파트 A:
6-클로로-5-플루오로-2-(메틸티오)-N-(1,3-티아졸-2-일메틸)-4-피리미딘아민
4,6-디클로로-5-플루오로-2-(메틸티오)피리미딘 (중간체 E 참조) (0.422 g, 1.991 mmol), 시판되는 (1,3-티아졸-2-일메틸)아민 히드로클로라이드 (0.300 g, 1.992 mmol) 및 트리에틸아민 (0.61 mL, 4.3765 mmol)을 THF (3 mL) 중에 용해하고, 4일 동안 교반되도록 두었다. 상기 반응 혼합물을 물로 희석하고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기물을 건조 (MgSO4)시키고 농축시켜서 6-클로로-5-플루오로-2-(메틸티오)-N-(1,3-티아졸-2-일메틸)-4-피리미딘아민을 황색-오렌지색 고체로서 수득하였다 (0.6773 g). LCMS: (M+H)+ = 291.0.
파트 B:
5-플루오로-2-(메틸티오)-6-[(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4(1H)-피리미디논 히드라존
6-클로로-5-플루오로-2-(메틸티오)-N-(1,3-티아졸-2-일메틸)-4-피리미딘아민 (0.6773 g, 2.336 mmol)을 DMSO (7 mL) 및 히드라진 일수화물 (0.91 mL, 18.72 mmol) 중에 용해하였다. 반응 용기를 압력 밀폐시키고 2시간 동안 80℃로 가열하였다. 상기 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여 5-플루오로-2-(메틸티오)-6-[(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4(1H)-피리미디논 히드라존을 오렌지색 고체로서 수득하였다 (0.1958 g, 29％). LCMS: (M+H)+ = 287.1.
파트 C:
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-(메틸티오)-6-[(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드
5-플루오로-2-(메틸티오)-6-[(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4(1H)-피리미디논 히드라존 (0.1958 g, 0.685 mmol) 및 (2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)아미노]메틸}프로판산 (0.355 g, 0.823 mmol)을 DMF (5 mL) 중에 용해였다. NMM (0.30 mL, 2.7286 mmol)을 첨가한 후에 HOAt (0.112 g, 0.824 mmol) 및 EDC (0.157 g, 0.819 mmol)를 첨가하였다. 밤새 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-(메틸티오)-6-[(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드를 오렌지색 고체로서 수득하였다 (0.2197 g, 57％). LCMS: (M+H)+ = 568.2.
파트 D:
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-(메틸티오)-6-[(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-(메틸티오)-6-[(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드 (0.2197 g, 0.387 mmol)를 아세트산 (8 mL) 및 물 (2 mL) 중에 용해하였다. 이 반응 혼합물이 3일 동안 교반되도록 두었다. 휘발성 물질을 증발시키고, 생성된 잔류물을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-(메틸티오)-6-[(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 베이지색 고체로서 수득하였다 (0.0878 g, 47％). LCMS: (M+H)+ = 484.2.
실시예 207
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2-푸라닐메틸)(메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00235
파트 A:
트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2-푸라닐메틸)(메틸)아미노]-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트
트리스(1,1-디메틸에틸) 2-(2,6-디클로로-5-플루오로-4-피리미디닐)-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트 (6.22 g, 12.54 mmol)를 THF (15 mL) 중에 용해하였다. 상기 용액에 트리에틸아민 (2.1 mL, 15.0667 mmol)을 첨가한 후에 시판되는 (2-푸라닐메틸)메틸아민 (1.394 g, 12.32 mmol)을 첨가하고, 이것을 THF (3 mL) 중에 용해하였다. 상기 반응물이 밤새 교반되도록 두었다. 이어서, 반응 혼합물을 물로 희석하고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기물을 건조 (Na2SO4)시키고 농축시켜서 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2-푸라닐메틸)(메틸)아미노]-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트를 베이지색 고체로서 수득하였다 (7.1439 g). LCMS: (M+H)+ = 572.3.
파트 B:
2-클로로-5-플루오로-N-(2-푸라닐메틸)-6-히드라지노-N-메틸-4-피리미딘아민
트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2-푸라닐메틸)(메틸)아미노]-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트 (7.1439g, 12.51 mmol)를 MeOH (65 mL) 및 HCl (1,4-디옥산 중 4 M) (65 mL) 중에 용해하였다. 상기 반응 혼합물을 5시간 동안 교반하도록 두어 증발시키고 RP-HPLC로 정제하여 2-클로로-5-플루오로-N-(2-푸라닐메틸)-6-히드라지노-N-메틸-4-피리미딘아민을 오렌지색 고체로서 수득하였다 (0.8561 g). LCMS: (M+H)+ = 272.1.
파트 C:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2-푸라닐메틸)(메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드
2-클로로-5-플루오로-N-(2-푸라닐메틸)-6-히드라지노-N-메틸-4-피리미딘아민 (0.400 g) 및 (2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)아미노]메틸}프로판산 (0.764 g, 1.770 mmol)을 DMF 중에 용해하였다. NMM (0.65 mL, 5.912 mmol)을 첨가한 후에 HOAt (0.241 g, 1.772 mmol) 및 EDC (0.3396 g, 1.771 mmol)를 첨가하였다. 밤새 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2-푸라닐메틸)(메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드를 오렌지색 고체로서 수득하였다 (0.6318 g). LCMS: (M+H)+ = 553.2.
파트 D:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2-푸라닐메틸)(메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2-푸라닐메틸)(메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드 (0.6318 g, 1.145 mmol)를 아세트산 (8 mL) 및 물 (2 mL) 중에 용해하였다. 이 반응 혼합물이 밤새 교반되도록 두었다. 휘발성 물질을 증발시키고, 생성된 잔류물을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2-푸라닐메틸)(메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 베이지색 고체로서 수득하였다 (0.3182 g, 59％). LCMS: (M+H)+ = 469.2.
실시예 208
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[4-(2-히드록시에틸)-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00236
파트 A:
페닐메틸 (2S)-2-메틸-4-{2-[(페닐메틸)옥시]에틸}-1-피페라진카르복실레이트
DCM (50 mL) 중 페닐메틸 (2S)-2-메틸-1-피페라진카르복실레이트 (시판용)(1 g, 4.3 mmol) 및 벤질옥시아세트알데히드 (0.9 mL, 6.4 mmol)의 용액을 30분 동안 교반한 후에 NaBH(OAc)3 (1.36 g, 6.4 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응물을 밤새 교반한 후에 1 M NaOH로 켄칭하였다. 상들을 분리하고, 수성 층을 DCM으로 추출하였다. 합한 유기물을 염수로 세척하고 황산나트륨에서 건조시키고 조 잔류물로 농축시키고, 이것을 실리카겔 크로마토그래피 (헥산 중 5→95％ EtOAc)로 정제하여 페닐메틸 (2S)-2-메틸-4-{2-[(페닐메틸)옥시]에틸}-1-피페라진카르복실레이트를 수득하였다 (0.93 g, 58％). LCMS: (M+H)+: 369.1
파트 B:
2-[(3S)-3-메틸-1-피페라지닐]에탄올
MeOH (30 mL) 중 페닐메틸 (2S)-2-메틸-4-{2-[(페닐메틸)옥시]에틸}-1-피페라진카르복실레이트 (0.93 g, 2.5 mmol)의 탈기된 용액에 Pd/C (200 mg)를 첨가하였다. 생성된 현탁액을 수소 벌룬 하에서 밤새 교반하였지만, LCMS는 단지 CBZ-기의 손실만을 나타냈다. 촉매를 여과로 제거하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 남아있는 잔류물을 MeOH 중에 용해하고, 또다른 200 mg의 Pd/C를 첨가하고, 또한 진한 HCl 5방울을 첨가하였다. 상기 혼합물을 50 psi에서 파르 진탕기 상에서 96시간 동안 수소화시키고, 이 시간 후에 촉매를 여과로 제거하였다. 여액을 감압하에 농축하여 2-[(3S)-3-메틸-1-피페라지닐]에탄올 히드로클로라이드를 정량적인 수율로 수득하였다. LCMS: (M+H)+: 145.1.
파트 C:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[4-(2-히드록시에틸)-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[4-(2-히드록시에틸)-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 E에 따라 제조하되, 파트 A에서 이소프로필 아민 대신에 2-[(3S)-3-메틸-1-피페라지닐]에탄올 히드로클로라이드를 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 502.2.
실시예 209
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2R)-4-(2-히드록시에틸)-2-메틸-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00237
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2R)-4-(2-히드록시에틸)-2-메틸-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 E에 따라 제조하되, 파트 A에서 이소프로필 아민 대신에 2-[(R)-3-메틸-1-피페라지닐]에탄올 히드로클로라이드 (실시예 208의 파트 A 및 B에 따라 제조하되, 페닐메틸 (2S)-2-메틸-1-피페라진카르복실레이트 대신에 페닐메틸 (2R)-2-메틸-1-피페라진카르복실레이트를 사용함)를 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 502.1
실시예 210
{(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(5-플루오로-2-메틸-6-{(2S)-2-[1-(1-피롤리디닐)시클로프로필]-1-피롤리디닐}-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}히드록시포름아미드
Figure pat00238
파트 A:
1-(페닐메틸)-L-프롤린 히드로클로라이드
에틸 1-(페닐메틸)-L-프롤리네이트 (13.20 g, 56.57 mmol)를 THF (40 mL), EtOH (40 mL) 및 H2O (16 mL)의 혼합물 중에 용해하였다. 상기 용액에 고체 수산화나트륨 (6.789 g, 169.73 mmol)을 첨가하고, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 상기 용액을 1 N 수성 HCl을 사용하여 pH 2로 조정한 후에 CH2Cl2 (3×50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시키고, 이로써 생성된 조 생성물은 1-(페닐메틸)-L-프롤린 히드로클로라이드 (0.8 g)였다. 수성 층을 진공하에 농축시키고, 잔류물을 MeOH 중에 현탁시키고, 생성된 고체 침전물을 여과로 수집하여 유기 추출물로부터의 생성물과 합하여 1-(페닐메틸)-L-프롤린 히드로클로라이드를 수득하였다 (13.30 g, 97％). LCMS: (M+H)+: 206.1
파트 B:
(2S)-1-(페닐메틸)-2-(1-피롤리디닐카르보닐)피롤리딘
1-(페닐메틸)-L-프롤린 히드로클로라이드 (2.0 g, 8.247 mmol) 및 HOBt (1.34 g, 9.928 mmol)를 CH2Cl2 (50 mL) 중에 용해하고, 4-메틸모르폴린 (3.63 mL, 33.09 mmol), 피롤리딘 (0.760 mL, 9.101 mmol) 및 EDCl (1.906 g, 9.928 mmol)을 첨가하였다. 상기 용액을 밤새 교반한 후에 물 (50 mL)로 세척하였다. 수성 층을 CH2Cl2 (3×50 mL)로 추출하고, 합한 유기 층을 무수 MgSO4에서 건조시키고 진공하에 농축시켰다. 상기 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피 (콤비플래쉬, 0→100％ 에틸 아세테이트/헥산, 1％ 트리에틸아민)로 정제하여 (2S)-1-(페닐메틸)-2-(1-피롤리디닐카르보닐)피롤리딘을 수득하였다 (1.619 g, 76％). LCMS: (M+H)+: 259.2
파트 C:
(2S)-1-(페닐메틸)-2-[1-(1-피롤리디닐)시클로프로필]피롤리딘
-78℃로 냉각된 THF (50 mL)의 교반된 용액에 에틸 마그네슘 브로마이드 (11.6 mL, 34.8 mmol)를 첨가한 후에 티타늄(IV) 이소프로폭시드 (2.042 mL, 6.96 mmol) 및 이어서 (2S)-1-(페닐메틸)-2-(1-피롤리디닐카르보닐)피롤리딘 (1.619 g, 6.96 mmol)을 첨가하였다. 혼합물이 실온으로 가온되도록 하고 2시간 동안 교반한 다음, LCMS로 체크하였다. 40％ 초과의 출발 물질이 남아있고, 따라서 혼합물을 밤새 교반한 후에 LCMS로 다시 체크하였다. 20％ 초과의 출발 물질이 남아있고, 따라서 추가 분량의 에틸 마그네슘 브로마이드 (5.8 mL, 17.4 mmol)를 첨가하고, 혼합물이 2시간 동안 교반되도록 하고, LCMS로 다시 체크하였다. 5％ 초과의 출발 물질이 남아있고, 추가 분량의 에틸 마그네슘 브로마이드 (2.32 mL, 6.96 mmol)를 첨가하고, 혼합물이 2시간 동안 교반되도록 하였다. LCMS에 의해 측정된 바와 같이 반응이 완료되었을 때, 상기 반응 혼합물을 포화 수성 NH4Cl (150 mL) 및 물 (50 mL)로 희석하고, 생성된 백색 고체 침전물을 여과해 냈다. 여액의 pH를 6 N 수성 NaOH를 사용하여 >12로 조정하였다. 상기 수용액을 Et2O (3×100 mL)로 추출하고, 합한 유기 층을 MgSO4에서 건조시키고 진공하에 농축시켰다. 상기 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피 (콤비플래쉬, 0→100％ 에틸 아세테이트/헥산, 1％ 트리에틸아민)로 정제하여 (2S)-1-(페닐메틸)-2-[1-(1-피롤리디닐)시클로프로필]피롤리딘을 수득하였다 (1.0837 g, 57％). LCMS: (M+H)+: 271.2.
파트 D:
1-{1-[(2S)-2-피롤리디닐]시클로프로필}피롤리딘 히드로클로라이드
(2S)-1-(페닐메틸)-2-[1-(1-피롤리디닐)시클로프로필]피롤리딘 (1.083 g, 4.00 mmol)을 MeOH (30 mL) 및 1 N HCl (8.8 mL)의 혼합물 중에 용해하고 탈기시켜 아르곤하에 두었다. 10％ Pd/C (325 mg)를 첨가하고, 상기 내용물을 철저하게 탈기시켜 2시간 동안 수소 벌룬하에 두었다. 이어서, 상기 내용물을 탈기시키고, Pd/C를 섬유유리 필터를 통해 여과하여 제거하면서 MeOH로 세척하였다. 여액을 진공하에 농축시켜서 순수한 1-{1-[(2S)-2-피롤리디닐]시클로프로필}피롤리딘 히드로클로라이드를 수득하였다 (0.978 g, >99％). LCMS: (M+H)+: 181.2.
파트 E:
5-플루오로-4-히드라지노-2-메틸-6-{(2S)-2-[1-(1-피롤리디닐)시클로프로필]-1-피롤리디닐}피리미딘
4,6-디클로로-5-플루오로-2-메틸피리미딘 (428 mg, 2.368 mmol)을 MeOH 3 mL 중에 용해한 다음, 1-{1-[(2S)-2-피롤리디닐]시클로프로필}피롤리딘 히드로클로라이드 (489 mg, 2.256 mmol)를 첨가한 후에 DIPEA (1.572 mL, 9.024 mmol)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 120℃에서 30분 동안 극초단파 처리하고, 휘발성 물질을 진공하에 농축시키고, 잔류물을 DMSO (4 mL) 및 MeOH (1 mL)의 혼합물 중에 용해하였다. 히드라진 일수화물 (2.44 mL)을 첨가하고, 상기 내용물을 밤새 60℃로 가열하였다. 이어서, 상기 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, RP-HPLC로 정제하여 5-플루오로-4-히드라지노-2-메틸-6-{(2S)-2-[1-(1-피롤리디닐)시클로프로필]-1-피롤리디닐}피리미딘을 수득하였다 (69 mg, 10％). LCMS: (M+H)+: 321.2.
파트 F:
{(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(5-플루오로-2-메틸-6-{(2S)-2-[1-(1-피롤리디닐)시클로프로필]-1-피롤리디닐}-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}히드록시포름아미드
{(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(5-플루오로-2-메틸-6-{(2S)-2-[1-(1-피롤리디닐)시클로프로필]-1-피롤리디닐}-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A의 파트 B 및 C에 따라 제조하되, 파트 B에서 5-플루오로-4-히드라지노-2-메틸-6-(1-피롤리디닐)피리미딘 대신에 5-플루오로-4-히드라지노-2-메틸-6-{(2S)-2-[1-(1-피롤리디닐)시클로프로필]-1-피롤리디닐}피리미딘을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 518.4.
실시예 211
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[3-(디메틸아미노)-3-에틸-1-아제티디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00239
파트 A:
1-(디페닐메틸)-3-에틸-N,N-디메틸-3-아제티딘아민
이소프로판올 중 1-(디페닐메틸)-3-에틸-3-아제티디닐 메탄술포네이트 (1.00 g, 2.89 mmol) [Ellsworth, Edmund Lee; Hoyer, Denton Wade; Hutchings, Kim Marie; Kendall, Jackie Diane; Murphy, Sean Timothy; Starr, Jeremy Tyson; Tran, Tuan Phong. WO 2005049605], 디메틸아민 (THF 중 2 M, 14.45 mL, 28.9 mmol) 및 TEA (0.80 mL, 5.78 mmol)의 혼합물을 밤새 70℃로 가열하였다. 표준 후처리 후에 RP-HPLC하여 1-(디페닐메틸)-3-에틸-N,N-디메틸-3-아제티딘아민을 수득하였다 (0.215 g, 25.3％). LCMS: (M+H)+ 295.2.
파트 B:
3-에틸-N,N-디메틸-3-아제티딘아민 디히드로클로라이드
1 N HCl (5 mL) 및 에탄올 (30 mL) 중 1-(디페닐메틸)-3-에틸-N,N-디메틸-3-아제티딘아민 (0.215 g, 0.73 mmol)을 탄소 상의 Pd(OH)2 (100 mg)의 존재하에 60 psi에서 H2로 처리하였다. 표준 후처리로 3-에틸-N,N-디메틸-3-아제티딘아민 디히드로클로라이드를 수득하였다 (0.165 g, 112.2％). LCMS: (M+H)+ 129.1.
파트 C:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[3-(디메틸아미노)-3-에틸-1-아제티디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[3-(디메틸아미노)-3-에틸-1-아제티디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 실시예 176에 따라 제조하되, 파트 C에서 1-(3-메틸-3-아제티디닐)피롤리딘 디히드로클로라이드 대신에 3-에틸-N,N-디메틸-3-아제티딘아민 디히드로클로라이드를 사용하였다. LCMS: (M+H)+ 486.2.
실시예 212
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-[3-(디메틸아미노)-3-에틸-1-아제티디닐]-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00240
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-[3-(디메틸아미노)-3-에틸-1-아제티디닐]-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 일반적인 절차 C에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 히드로클로라이드 대신에 3-에틸-N,N-디메틸-3-아제티딘아민 히드로클로라이드 (실시예 211)를 사용하였다. LCMS: (M+H)+ 498.3.
실시예 213
[(2R)-3-{2-[2-클로로-6-(3-시클로프로필-3-히드록시-1-아제티디닐)-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00241
[(2R)-3-{2-[2-클로로-6-(3-시클로프로필-3-히드록시-1-아제티디닐)-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 D에 따라 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 3-시클로프로필-3-아제티디놀 히드로클로라이드 [Ellsworth, Edmund Lee; Hutchings, Kim Marie; Murphy, Sean Timothy; Powell, Sharon Anne; Sciotti, Richard John; Tran, Tuan Phong. WO 2005026146]를 사용하였다. LCMS: (M+H)+ 471.0.
실시예 214
N-[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2R,5R)-2,4,5-트리메틸-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
Figure pat00242
파트 A:
(2R,5R)-1,2,5-트리메틸-4-(페닐메틸)피페라진
디클로로메탄 (25 mL) 중 (2R,5R)-2,5-디메틸-1-(페닐메틸)피페라진 (문헌 [J. Med. Chem. 2006, 49, 716-726]에 따라 제조하되, N-Boc-L-알라닌 대신에 N-Boc-D-알라닌을 사용함) (667 mg, 3.26 mmol)의 용액에 0℃에서 포름알데히드 (0.367 mL, 37％ 수용액, 4.89 mmol)를 첨가한 후에 트리아세톡시수소화붕소나트륨 (900 mg, 4.24 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물이 실온으로 가온되도록 하고 2시간 동안 교반한 후에, 디클로로메탄으로 희석하고 1 N NaOH 용액으로 세척하였다. 유기물을 염수로 세척하여 건조 (MgSO4)시키고 증발시켜서 (2R,5R)-1,2,5-트리메틸-4-(페닐메틸)피페라진을 수득하였다 (680 mg, 96％). LCMS: (M+H)+: 219.1.
파트 B:
(2R,5R)-1,2,3-트리메틸피페라진, 히드로클로라이드 염
(2R,5R)-1,2,5-트리메틸-4-(페닐메틸)피페라진 (680 mg, 3.11 mmol)을 MeOH 50 mL 중에 용해하고 탈기시켜 아르곤하에 두었다. 10％ Pd/C (170 mg)를 첨가하고, 상기 내용물을 철저하게 탈기시켜 대략 3시간 동안 수소 벌룬하에 두었다. 이어서, 상기 내용물을 탈기시켜 셀라이트를 통해 여과하고, 상기 셀라이트 패드를 DCM 및 MeOH로 세척하였다. 1 N HCl 6.5 mL를 첨가한 후에, 생성된 여액을 진공하에 농축시켜서 (2R,5R)-1,2,5-트리메틸피페라진의 히드로클로라이드 염을 수득하였다 (251 mg, 100％). LCMS: (M+H)+: 129.1.
파트 C:
N-[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2R,5R)-2,4,5-트리메틸-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
N-[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2R,5R)-2,4,5-트리메틸-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드를 일반적인 절차 G에 따라 제조하되, 파트 A에서 (1S,4S)-2-메틸-2,5-디아자바이시클로[2.2.1]헵탄, 디히드로브로마이드 대신에 (2R,5R)-1,2,5-트리메틸피페라진, 히드로클로라이드 염을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 486.1.
실시예 215
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(2R,5R)-2,4,5-트리메틸-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
Figure pat00243
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(2R,5R)-2,4,5-트리메틸-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 (2R,5R)-1,2,5-트리메틸피페라진, 히드로클로라이드 염 (실시예 214)을 사용하고 DIPEA를 3 당량 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 466.4.
실시예 216
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-(플루오로메틸)-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00244
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-(플루오로메틸)-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 (9aS)-옥타히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진 디히드로클로라이드 (실시예 22)를 사용하고 4,6-디클로로-5-플루오로-2-메틸피리미딘 대신에 4,6-디클로로-5-플루오로-2-(플루오로메틸)피리미딘을 사용하고 DIPEA를 3 당량 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 498.3.
실시예 217
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-(3-시클로프로필-3-히드록시-1-아제티디닐)-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00245
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-(3-시클로프로필-3-히드록시-1-아제티디닐)-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 일반적인 절차 C에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 히드로클로라이드 대신에 3-시클로프로필-3-아제티디놀 히드로클로라이드 [Ellsworth, Edmund Lee; Hutchings, Kim Marie; Murphy, Sean Timothy; Powell, Sharon Anne; Sciotti, Richard John; Tran, Tuan Phong. WO 2005026146]를 사용하였다. LCMS: (M+H)+ 483.1.
실시예 218
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-[3-에틸-3-(1-피롤리디닐)-1-아제티디닐]-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00246
파트 A:
1-(3-에틸-3-아제티디닐)피롤리딘 디히드로클로라이드
1-(3-에틸-3-아제티디닐)피롤리딘 디히드로클로라이드를 3-에틸-N,N-디메틸-3-아제티딘아민 디히드로클로라이드의 제조에 대해 기재한 절차 (실시예 211)에 따라 제조하되, 파트 A에서 디메틸아민 대신에 피롤리딘을 사용하였다. LCMS: (M+H)+ 155.1.
파트 B:
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-[3-에틸-3-(1-피롤리디닐)-1-아제티디닐]-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-[3-에틸-3-(1-피롤리디닐)-1-아제티디닐]-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 일반적인 절차 C에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 히드로클로라이드 대신에 1-(3-에틸-3-아제티디닐)피롤리딘 디히드로클로라이드를 사용하였다. LCMS: (M+H)+ 524.3.
실시예 219
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(시클로프로필메틸)아미노]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00247
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(시클로프로필메틸)아미노]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 실시예 176과 유사한 방식으로 제조하되, 파트 C에서 1-(3-메틸-3-아제티디닐)피롤리딘 디히드로클로라이드 대신에 1-시클로프로필메탄아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+ 429.1.
실시예 220
[(2R)-3-[2-(2-클로로-5-플루오로-6-{[2-(3-티에닐)에틸]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00248
파트 A:
2-(3-티에닐)아세트아미드
시판되는 3-티오펜 아세트산 (2.0 g, 14.07 mmol)을 질소하에 DCM (45 mL) 중에 용해하였다. 이어서, 옥살릴 클로라이드 (1.35 mL, 15.48 mmol)를 첨가하고, 반응물을 밤새 교반하였다. 이어서, 수산화암모늄 (NH3 용액으로서 30％) (8.22 mL)을 적가하면서 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 증발시켜서 2-(3-티에닐)아세트아미드를 베이지색 고체로서 수득하였다 (3.2082 g). LCMS: (M+H)+ = 142.1.
파트 B:
[2-(3-티에닐)에틸]아민
수소화리튬알루미늄을 0℃에서 아르곤하에 빙조에서 THF (10 mL) 중에 넣었다. 이어서, 2-(3-티에닐)아세트아미드 (0.9828 g, 6.97 mmol)를 THF 중의 현탁액 (30 mL)으로서 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 65℃에서 밤새 가열한 다음, 주위 온도로 냉각시키고, 빙조에 넣었다. 상기 반응물을 물 (10 mL), 3 N NaOH (10 mL) 및 추가의 물 (10 mL)로 켄칭하였다. 상기 혼합물을 셀라이트에서 여과하고, 여액을 포화 NaCl 용액으로 세척하여 건조 (MgSO4)시키고 증발시켜서 [2-(3-티에닐)에틸]아민을 황색 오일로서 수득하였다 (0.470 g, 53％). LCMS: (M+H)+ = 128.1.
파트 C:
트리스(1,1-디메틸에틸) 2-(2-클로로-5-플루오로-6-{[2-(3-티에닐)에틸]아미노}-4-피리미디닐)-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트
트리스(1,1-디메틸에틸) 2-(2,6-디클로로-5-플루오로-4-피리미디닐)-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트 (1.84 g, 3.71 mmol)를 THF (5 mL) 중에 용해하였다. 상기 용액에 트리에틸아민 (0.62 mL, 4.4482 mmol)을 첨가한 후에 [2-(3-티에닐)에틸]아민 (0.470 g, 3.70 mmol)을 첨가하고, 이것을 THF (15 mL) 중 반-현탁시켰다. 상기 반응물이 밤새 교반되도록 두고, 그 후 물 및 포화 NaCl로 희석하였다. 수성 층을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기물을 건조 (MgSO4)시키고 농축시켜서 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-(2-클로로-5-플루오로-6-{[2-(3-티에닐)에틸]아미노}-4-피리미디닐)-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트를 오렌지색 오일로서 수득하였다 (2.389 g). LCMS: (M+H)+ = 588.3.
파트 D:
2-클로로-5-플루오로-6-{[2-(3-티에닐)에틸]아미노}-4(1H)-피리미디논 히드라존
트리스(1,1-디메틸에틸) 2-(2-클로로-5-플루오로-6-{[2-(3-티에닐)에틸]아미노}-4-피리미디닐)-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트 (2.389 g, 4.07 mmol)를 실온에서 MeOH (25 mL) 및 HCl (1,4-디옥산 중 4 M) (25 mL) 중에 용해하였다. 상기 반응 혼합물이 3일에 걸쳐 교반되도록 두고 증발시키고 RP-HPLC로 정제하여 2-클로로-5-플루오로-6-{[2-(3-티에닐)에틸]아미노}-4(1H)-피리미디논 히드라존을 갈색 점성 고체로서 수득하였다 (0.1401 g). LCMS: (M+H)+ = 288.0.
파트 E:
[(2R)-3-[2-(2-클로로-5-플루오로-6-{[2-(3-티에닐)에틸]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드
갈색 점성 고체로서의 2-클로로-5-플루오로-6-{[2-(3-티에닐)에틸]아미노}-4(1H)-피리미디논 히드라존 (0.1401 g) 및 (2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)아미노]메틸}프로판산 (0.253 g, 0.586 mmol)을 DMF (7 mL) 중에 용해하였다. NMM (0.27 mL, 2.90 mmol)을 첨가한 후에 HOAt (0.080 g, 0.588 mmol) 및 EDC (0.112 g, 0.584 mmol)를 첨가하였다. 밤새 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-3-[2-(2-클로로-5-플루오로-6-{[2-(3-티에닐)에틸]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드를 오렌지색 고체로서 수득하였다 (0.1677 g). LCMS: (M+H)+ = 569.3.
파트 F:
[(2R)-3-[2-(2-클로로-5-플루오로-6-{[2-(3-티에닐)에틸]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-[2-(2-클로로-5-플루오로-6-{[2-(3-티에닐)에틸]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드 (0.1677, 0.295 mmol)를 아세트산 (8 mL) 및 물 (2 mL) 중에 용해하였다. 이 반응 혼합물이 밤새 교반되도록 두었다. 휘발성 물질을 증발시키고, 생성된 잔류물을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-3-[2-(2-클로로-5-플루오로-6-{[2-(3-티에닐)에틸]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 베이지색 고체로서 수득하였다 (0.0715 g, 50％). LCMS: (M+H)+ = 485.1.
실시예 221
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(4-메틸옥타히드로-1(2H)-퀴녹살리닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00249
파트 A:
(4aR,8aS)-옥타히드로-2,3-퀴녹살린디온
디메톡시 에틸렌 (100 mL) 중 시스-1,2-디아미노시클로헥산 (4.8 g, 42 mmol)의 용액에 디에틸 옥살레이트 (28.5 mL, 210 mmol)를 서서히 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하고, 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 현탁액을 실온으로 냉각시킨 후에, 생성된 백색 고체 침전물을 여과로 수집하였다. 침전물을 디에틸 에테르로 세척하고 건조시켜서 (4aR,8aS)-옥타히드로-2,3-퀴녹살린디온을 수득하였다 (4.6 g, 66％). LCMS: (M+H)+: 169.1.
파트 B:
(4aR,8aS)-데카히드로퀴녹살린
(4aR,8aS)-옥타히드로-2,3-퀴녹살린디온 (4.67 g, 27.8 mmol)을 디에틸 에테르 (30 mL) 중 1 M LAH (111 mL, 111 mmol)에 조금씩 첨가하였다. 상기 반응물이 환류로 가열되도록 하고, 환류하에서 4시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응물을 H2O (4.2 mL), 15％ NaOH (4.2 mL) 및 H2O (12.6 mL)를 순차적으로 첨가하여 켄칭하였다. 상기 혼합물을 0.5시간 동안 교반하고, 고체를 여과하고, 과량의 EtOAc로 세척하였다. 합한 여액을 감압하에 농축시켜서 (4aR,8aS)-데카히드로퀴녹살린을 백색 고체로서 수득하였다 (3.6 g, 92％). LCMS: (M+H)+: 141.1.
파트 C:
페닐메틸 옥타히드로-1(2H)-퀴녹살린카르복실레이트 (거울상이성질체 혼합물, 시스)
디클로로메탄 (50 mL) 중 (4aR,8aS)-데카히드로퀴녹살린 (1.4 g, 10 mmol)에 트리에틸아민 (1.7 mL, 12 mmol)을 첨가한 후에 벤질 클로로포르메이트 (1.71 g, 10 mmol)를 적가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반한 후에 디클로로메탄으로 희석하고, 1 N NaOH로 세척한 후에 포화 수성 NH4Cl로 세척하였다. 합한 유기 층을 염수로 세척하여 건조 (MgSO4)시키고 농축시켜서 조 생성물을 수득하였고, 이것을 콤비플래쉬를 통해 정제하여 페닐메틸 옥타히드로-1(2H)-퀴녹살린카르복실레이트 (거울상이성질체 혼합물, 시스)를 수득하였다 (2.32 g, 85％). LCMS: (M+H)+: 275.1.
파트 D:
페닐메틸 (4aS,8aR)-4-메틸옥타히드로-1(2H)-퀴녹살린카르복실레이트, 페닐메틸 (4aR,8aS)-4-메틸옥타히드로-1(2H)-퀴녹살린카르복실레이트
디클로로메탄 (80 mL) 중 페닐메틸 옥타히드로-1(2H)-퀴녹살린카르복실레이트 (거울상이성질체 혼합물) (2.32 g, 8.5 mmol)의 용액에 0℃에서 포름알데히드 (0.76 mL, 37％ 수용액, 10.2 mmol)를 첨가한 후에 트리아세톡시수소화붕소나트륨 (2.7 g, 12.75 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물이 실온으로 가온되도록 하고, 1시간 동안 교반한 후에 디클로로메탄으로 희석하고, 1 N NaOH 용액으로 세척하였다. 유기물을 염수로 세척하여 건조 (Na2SO4)시키고 증발시켜서 페닐메틸 4-메틸옥타히드로-1(2H)-퀴녹살린카르복실레이트 (거울상이성질체 혼합물, 시스) 2.3 g (2.3 g)을 수득하였고, 이것을 키랄 LC로 분리하여 페닐메틸 (4aS,8aR)-4-메틸옥타히드로-1(2H)-퀴녹살린카르복실레이트 및 페닐메틸 (4aR,8aS)-4-메틸옥타히드로-1(2H)-퀴녹살린카르복실레이트를 수득하였다. 절대 배열은 최초부터의 진동 원형 이색성을 사용하여 지정되었다. LCMS: (M+H)+: 289.2.
파트 E:
(4aR,8aS)-1-메틸데카히드로퀴녹살린, 히드로클로라이드 염
페닐메틸 (4aS,8aR)-4-메틸옥타히드로-1(2H)-퀴녹살린카르복실레이트 (2.7 g, 9.4 mmol)를 MeOH 140 mL 중에 용해하고 탈기시켜 아르곤하에 두었다. 10％ Pd/C (400 mg)를 첨가하고, 상기 내용물을 철저하게 탈기시켜 수소 벌룬하에 대략 2시간 동안 두었다. 이어서, 상기 내용물을 탈기시켜 셀라이트를 통해 여과하고, 상기 셀라이트 패드를 DCM 및 MeOH로 세척하였다. 1 N HCl 19.6 mL를 첨가한 후에, 생성된 여액을 진공하에 농축시켜서 (4aR,8aS)-1-메틸데카히드로퀴녹살린의 히드로클로라이드 염을 수득하였다 (2.1 g, 100％). LCMS: (M+H)+: 155.1.
파트 F:
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(4-메틸옥타히드로-1(2H)-퀴녹살리닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(4-메틸옥타히드로-1(2H)-퀴녹살리닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 G에 따라 제조하되, 파트 A에서 (1S,4S)-2-메틸-2,5-디아자바이시클로[2.2.1]헵탄, 디히드로브로마이드 대신에 (4aR,8aS)-1-메틸데카히드로퀴녹살린, 히드로클로라이드 염을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 512.3.
실시예 222
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(4-메틸옥타히드로-1(2H)-퀴녹살리닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00250
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(4-메틸옥타히드로-1(2H)-퀴녹살리닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 (4aR,8aS)-1-메틸데카히드로퀴녹살린 (실시예 221을 참조하여 제조)을 사용하고 DIPEA를 3 당량 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 492.3.
실시예 223
N-[(2R)-3-[2-(6-{[(2-아미노-1,3-티아졸-4-일)메틸](메틸)아미노}-2-클로로-5-플루오로-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
Figure pat00251
파트 A:
4-[(메틸아미노)메틸]-1,3-티아졸-2-아민
4-(클로로메틸)-1,3-티아졸-2-아민 (490 mg, 2.65 mmol)을 밤새 40％ 수성 메틸아민 (25 mL) 중에서 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 증발시켰다. 이어서, 잔류물을 역상 HPLC를 통해 정제하여 4-[(메틸아미노)메틸]-1,3-티아졸-2-아민을 수득하였다 (55 mg, 15％). LCMS: (M+H)+: 144.0.
파트 B:
트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{6-[[(2-아미노-1,3-티아졸-4-일)메틸](메틸)아미노]-2-클로로-5-플루오로-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트
4-[(메틸아미노)메틸]-1,3-티아졸-2-아민 (55 mg, 0.38 mmol)을 THF (3 mL) 중에 용해하였다. 트리에틸아민 (0.06 mL, 0.42 mmol)을 첨가한 직후에 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-(2,6-디클로로-5-플루오로-4-피리미디닐)-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트 (180 mg, 0.38 mmol)를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 밤새 교반하고 EtOAc로 희석하고 건조 (황산나트륨)시키고 증발시켜서 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{6-[[(2-아미노-1,3-티아졸-4-일)메틸](메틸)아미노]-2-클로로-5-플루오로-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트를 수득하였다 (230 mg, 100％). LCMS: (M+H)+: 604.2.
파트 C:
6-[[(2-아미노-1,3-티아졸-4-일)메틸](메틸)아미노]-2-클로로-5-플루오로-4(1H)-피리미디논 히드라존 트리히드로클로라이드
트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{6-[[(2-아미노-1,3-티아졸-4-일)메틸](메틸)아미노]-2-클로로-5-플루오로-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트 (220 mg, 0.36 mmol)를 메탄올 1O mL 중에 용해하고 교반하였다. 상기 용액에, 디옥산 중 4 M HCl 5 mL를 서서히 첨가하였다. 상기 혼합물을 3일 동안 교반하고 증발시켜서 6-[[(2-아미노-1,3-티아졸-4-일)메틸](메틸)아미노]-2-클로로-5-플루오로-4(1H)-피리미디논 히드라존 트리히드로클로라이드를 수득하였다 (150 mg, 83％). LCMS: (M+H)+: 303.9.
파트 D:
[(2R)-3-(2-{6-[[(2-아미노-1,3-티아졸-4-일)메틸](메틸)아미노]-2-클로로-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드
6-[[(2-아미노-1,3-티아졸-4-일)메틸](메틸)아미노]-2-클로로-5-플루오로-4(1H)-피리미디논 히드라존 트리히드로클로라이드 (150 mg, 0.29 mmol), (2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)아미노]메틸}프로판산 (120 mg, 0.4 mmol) 및 HOAt (59 mg, 0.43 mmol)를 DMF 10 mL 중에 용해하였다. NMM (0.2 mL, 1.8 mmol)을 첨가한 후에 EDC (85 mg, 0.43 mmol)를 첨가하였다. 밤새 실온에서 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-3-(2-{6-[[(2-아미노-1,3-티아졸-4-일)메틸](메틸)아미노]-2-클로로-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드를 수득하였다 (110 mg, 52％). LCMS: (M+H)+: 585.2.
파트 E:
N-[(2R)-3-[2-(6-{[(2-아미노-1,3-티아졸-4-일)메틸](메틸)아미노}-2-클로로-5-플루오로-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
4:1 AcOH:물 (5 mL) 중 [(2R)-3-(2-{6-[[(2-아미노-1,3-티아졸-4-일)메틸](메틸)아미노]-2-클로로-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드 (110 mg, 0.19 mmol)를 실온에서 2일 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 제거하고, 생성된 조 생성물을 RP-HPLC로 정제하여 N-[(2R)-3-[2-(6-{[(2-아미노-1,3-티아졸-4-일)메틸](메틸)아미노}-2-클로로-5-플루오로-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드를 수득하였다 (20 mg, 21％). LCMS: (M+H)+: 501.1.
실시예 224
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2S)-2-(1-피롤리디닐메틸)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00252
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2S)-2-(1-피롤리디닐메틸)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 E에 따라 제조하되, 파트 A에서 이소프로필 아민 대신에 시판되는 1-[(2S)-2-피롤리디닐메틸]피롤리딘을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 512.3
실시예 225
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(페닐아미노)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00253
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(페닐아미노)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 아닐린을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 451.2.
실시예 226
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(4-메틸옥타히드로-1(2H)-퀴녹살리닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00254
파트 A:
(4aS,8aR)-1-메틸데카히드로퀴녹살린, 히드로클로라이드 염
페닐메틸 (4aR,8aS)-4-메틸옥타히드로-1(2H)-퀴녹살린카르복실레이트 (실시예 221) (2.58 g, 9.0 mmol)를 MeOH 120 mL 중에 용해하고 탈기시켜 아르곤하에 두었다. 10％ Pd/C (380 mg)를 첨가하고, 상기 내용물을 철저하게 탈기시켜 수소 벌룬하에 대략 2시간 동안 두었다. 이어서, 상기 내용물을 탈기시켜 셀라이트를 통해 여과하고, 상기 셀라이트 패드를 DCM 및 MeOH로 세척하였다. 1 N HCl 19.0 mL를 첨가한 후에, 생성된 여액을 진공하에 농축시켜서 (4aS,8aR)-1-메틸데카히드로퀴녹살린의 히드로클로라이드 염을 수득하였다 (2.0 g, 100％). LCMS: (M+H)+: 155.1.
파트 B:
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(4-메틸옥타히드로-1(2H)-퀴녹살리닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(4-메틸옥타히드로-1(2H)-퀴녹살리닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 G에 따라 제조하되, 파트 A에서 (1S,4S)-2-메틸-2,5-디아자바이시클로[2.2.1]헵탄, 디히드로브로마이드 대신에 (4aS,8aR)-1-메틸데카히드로퀴녹살린, 히드로클로라이드 염을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 512.3.
실시예 227
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(4-메틸옥타히드로-1(2H)-퀴녹살리닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00255
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(4-메틸옥타히드로-1(2H)-퀴녹살리닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 (4aS,8aR)-1-메틸데카히드로퀴녹살린, 히드로클로라이드 염 (실시예 226)을 사용하고 DIPEA를 3 당량 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 492.3.
실시예 228
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2S,3R)-2,3,4-트리메틸-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00256
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2S,3R)-2,3,4-트리메틸-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 E에 따라 제조하되, 파트 A에서 이소프로필 아민 대신에 (2R,3S)-1,2,3-트리메틸피페라진 디히드로클로라이드 (실시예 175)를 사용하고, 파트 B에서 용매로서 DCM을 함유한 에테르 중 2.0 M HCl를 사용하고, 파트 C에서 [(2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산 대신에 (2R)-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)헥산산 (실시예 201)을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 460.2/462.1.
실시예 229
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2R)-2-(4-모르폴리닐메틸)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00257
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2R)-2-(4-모르폴리닐메틸)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 E에 따라 제조하되, 파트 A에서 이소프로필 아민 대신에 (S)-2-(모르폴린-4-일메틸)-피롤리딘 [Bull. Chem. Soc. 1990, 63, 721-727]을 사용하고, 파트 B에서 DCM을 함유한 에테르 중 2.0 M HCl을 용매로서 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 528.2/530.2.
실시예 230
[(2R)-3-[2-(2-클로로-6-{3-에틸-3-[에틸(메틸)아미노]-1-아제티디닐}-5-플루오로-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00258
파트 A:
N,3-디에틸-N-메틸-3-아제티딘아민 디히드로클로라이드
N,3-디에틸-N-메틸-3-아제티딘아민 디히드로클로라이드를 3-에틸-N,N-디메틸-3-아제티딘아민 디히드로클로라이드의 제조에 대해 기재한 절차 (실시예 211)에 따라 제조하되, 파트 A에서 디메틸아민 대신에 N-메틸에탄아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+ 144.1.
파트 B:
[(2R)-3-[2-(2-클로로-6-{3-에틸-3-[에틸(메틸)아미노]-1-아제티디닐}-5-플루오로-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-[2-(2-클로로-6-{3-에틸-3-[에틸(메틸)아미노]-1-아제티디닐}-5-플루오로-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 실시예 176과 유사한 방식으로 제조하되, 파트 C에서 1-(3-메틸-3-아제티디닐)피롤리딘 디히드로클로라이드 대신에 N,3-디에틸-N-메틸-3-아제티딘아민 디히드로클로라이드를 사용하였다. LCMS: (M+H)+ 500.3.
실시예 231
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00259
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 일반적인 절차 C에 따라 제조하되, 파트 A에서 아제티딘 히드로클로라이드 대신에 (9aS)-옥타히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진 디히드로클로라이드 (실시예 22)를 사용하였다. LCMS: (M+H)+ 512.2.
실시예 232
[(2R)-3-[2-(2-클로로-6-{(2S)-2-[(디메틸아미노)메틸]-1-피롤리디닐}-5-플루오로-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00260
파트 A:
N,N-디메틸-1-(페닐카르보닐)-L-프롤린아미드
N,N-디메틸-L-프롤린아미드 (2.50 g, 17.58 mmol)를 CH2Cl2 (50 mL) 및 물 (50 mL)의 혼합물 중에 용해한 다음, 고체 중탄산나트륨 (2.95 g, 35.16 mmol)을 첨가한 후에 염화벤조일 (2.1 mL, 18.45 mmol)을 첨가하였다. 밤새 교반한 후, 상들을 분리하고, 수성 상을 CH2Cl2 (3×50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켜서 N,N-디메틸-1-(페닐카르보닐)-L-프롤린아미드를 수득하였다 (4.502 g, >99％). LCMS: (M+H)+: 247.2.
파트 B:
N,N-디메틸-1-[(2S)-1-(페닐메틸)-2-피롤리디닐]메탄아민
N,N-디메틸-1-(페닐카르보닐)-L-프롤린아미드 (4.50 g, 18.269 mmol)를 THF 100 mL 중에 용해하고 0℃로 냉각시킨 후에, LiAlH4 (1.386 mg, 36.54 mmol)를 조금씩 첨가하였다. 상기 혼합물을 2시간 동안 80℃로 가열한 후에, 실온으로 냉각되도록 하였다. 상기 반응물을 H2O (1.5 mL), 15％ 수성 NaOH (1.5 mL) 및 H2O (4.5 mL)로 순차적으로 켄칭시키고, 실온에서 밤새 교반하였다. 상기 내용물을 여과하고, 여액을 진공하에 농축시켜서 N,N-디메틸-1-[(2S)-1-(페닐메틸)-2-피롤리디닐]메탄아민을 수득하였다 (3.7305 g, 94％). LCMS: (M+H)+: 219.1.
파트 C:
N,N-디메틸-1-[(2S)-2-피롤리디닐]메탄아민 히드로클로라이드
N,N-디메틸-1-[(2S)-1-(페닐메틸)-2-피롤리디닐]메탄아민 (3.730 g, 17.08 mmol)을 MeOH (100 mL) 및 1 N HCl (35 mL, 34.16 mmol)의 혼합물 중에 용해하고 탈기시켜 아르곤하에 두었다. 10％ Pd/C (1.119 g)를 첨가하고, 상기 내용물을 철저하게 탈기시켜 수소 벌룬하에 2시간 동안 두었다. 이어서, 상기 내용물을 탈기시키고, Pd/C를 섬유유리 필터를 통해 여과하여 제거하면서 MeOH로 세척하였다. 여액을 진공하에 농축시켜서 순수한 N,N-디메틸-1-[(2S)-2-피롤리디닐]메탄아민 히드로클로라이드를 수득하였다 (3.3701 g, >99％). LCMS: (M+H)+: 129.1.
파트 D:
[(2R)-3-[2-(2-클로로-6-{(2S)-2-[(디메틸아미노)메틸]-1-피롤리디닐}-5-플루오로-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-[2-(2-클로로-6-{(2S)-2-[(디메틸아미노)메틸]-1-피롤리디닐}-5-플루오로-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 E에 따라 제조하되, 파트 A에서 이소프로필 아민 대신에 N,N-디메틸-1-[(2S)-2-피롤리디닐]메탄아민 히드로클로라이드를 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 486.0.
실시예 233
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1,3-티아졸-4-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00261
파트 A:
2-(3-브로모-2-옥소프로필)-1H-이소인돌-1,3(2H)-디온
시판되는 프탈이미도아세톤 (2.0 g, 9.8522 mmol)을 질소 대기하에 디에틸렌 글리콜 (13 mL) 중에 녹이고, 빙조에서 0℃로 냉각시켰다. 브롬 (0.51 mL, 9.9242 mmol)을 적가하였다. 상기 반응물을 빛으로부터 차폐시키고, 주위 온도에 도달하게 하고, 밤새 교반하였다. LCMS: (M+H)+ = 282.0.
파트 B:
2-(1,3-티아졸-4-일메틸)-1H-이소인돌-1,3(2H)-디온
에테르 (7.5 mL)를 상기 2-(3-브로모-2-옥소프로필)-1H-이소인돌-1,3(2H)-디온의 용액에 첨가하고, 얼음/NaCl 염 조에서 0℃로 냉각시켰다. 이어서, EtOH (8 mL) 중 티오포름아미드 [European Journal of Medicinal Chemistry, 2004, 39, 867-872.] (1.20 g)를 첨가하고, 반응물을 밤새 교반하였다. 용매를 증발시키고, 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여 2-(1,3-티아졸-4-일메틸)-1H-이소인돌-1,3(2H)-디온을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS: (M+H)+ = 245.1.
파트 C:
(1,3-티아졸-4-일메틸)아민
2-(1,3-티아졸-4-일메틸)-1H-이소인돌-1,3(2H)-디온 (0.6556 g, 2.69 mmol)을 EtOH (15 mL) 중에 용해하고, 히드라진 일수화물 (0.145 mL, 2.98 mmol)을 밀폐된 둥근 바닥 플라스크에 넣고 2.5시간 동안 70℃로 가열한 후에 주위 온도에서 밤새 교반하였다. EtOH로 희석한 후에, 고체를 여과하고 EtOH로 세척하고, 여액을 증발시켜서 (1,3-티아졸-4-일메틸)아민을 베이지색 고체로서 수득하였다 (0.1491 g, 49％). LCMS: (M+H)+ = 115.1.
파트 D:
트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1,3-티아졸-4-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트
THF (1O mL) 중 (1,3-티아졸-4-일메틸)아민 (0.1491 g, 1.308 mmol)의 현탁액에 THF (2 mL) 중 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-(2,6-디클로로-5-플루오로-4-피리미디닐)-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트 (0.649 g, 1.308 mmol) 및 트리에틸아민 (0.22 mL, 1.5784 mmol)의 용액을 첨가하였다. 추가의 THF (3 mL)를 첨가하고, 반응물을 밤새 교반하였다. 이어서, 반응 혼합물을 물로 희석하고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기물을 건조 (Na2SO4)시키고 농축시켰다. 생성된 조 물질을 실리카겔 크로마토그래피 (헥산 중 0→100％ 에틸 아세테이트)로 정제하여 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1,3-티아졸-4-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트를 황색 오일로서 수득하였다 (0.51 g, 68％). LCMS: (M-2Boc) = 375.0.
파트 E:
2-클로로-5-플루오로-6-[(1,3-티아졸-4-일메틸)아미노]-4(1H)-피리미디논 히드라존
트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1,3-티아졸-4-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트 (0.51 g, 0.8868 mmol)룰 MeOH (5 mL) 및 HCl (1,4-디옥산 중 4 M) (5 mL) 중에 용해하였다. 상기 반응 혼합물이 밤새 교반되도록 두어 그 후에 증발시키고 RP-HPLC로 정제하여 2-클로로-5-플루오로-6-[(1,3-티아졸-4-일메틸)아미노]-4(1H)-피리미디논 히드라존을 오렌지색 오일로서 수득하였다 (0.105 g). LCMS: (M+H)+ = 275.0.
파트 F:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1,3-티아졸-4-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드
2-클로로-5-플루오로-6-[(1,3-티아졸-4-일메틸)아미노]-4(1H)-피리미디논 히드라존 (0.105 g) 및 (2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)아미노]메틸}프로판산 (0.182 g, 0.422 mmol)을 DMF (5 mL) 중에 용해하였다. NMM (0.21 mL, 1.91 mmol)을 첨가한 후에 HOAt (0.063 g, 0.463 mmol) 및 EDC (0.088 g, 0.459 mmol)를 첨가하였다. 2일 동안 교반한 후에, 상기 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1,3-티아졸-4-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드를 적갈색 고체로서 수득하였다 (0.1133 g). LCMS: (M+H)+ = 556.0.
파트 G:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1,3-티아졸-4-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1,3-티아졸-4-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드 (0.1133 g, 0.204 mmol)를 아세트산 (8 mL) 및 물 (2 mL) 중에 용해하였다. 이 반응 혼합물이 밤새 교반되도록 두었다. 휘발성 물질을 증발시키고, 생성된 잔류물을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1,3-티아졸-4-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 수득하였다 (0.0497 g, 52％). LCMS: (M+H)+ = 472.1.
실시예 234
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2R)-2-(플루오로메틸)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00262
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2R)-2-(플루오로메틸)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 E에 따라 제조하되, 파트 A에서 이소프로필 아민 대신에 (2R)-플루오로메틸피롤리딘 [Bioorg. Med. Chem. Lett. 2007, 17, 1443-1446]을 사용하고, 파트 B에서 DCM을 함유한 에테르 중 2.0 M HCl을 용매로서 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 461.1/463.0.
실시예 235
{(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(6-{(2S)-2-[(디메틸아미노)메틸]-1-피롤리디닐}-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}히드록시포름아미드
Figure pat00263
{(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(6-{(2S)-2-[(디메틸아미노)메틸]-1-피롤리디닐}-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 N,N-디메틸-1-[(2S)-2-피롤리디닐]메탄아민 히드로클로라이드를 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 466.2.
실시예 236
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(3R)-3-메틸-4-모르폴리닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00264
(2R)-2-아미노-1-프로판올을 사용하여 실시예 241의 절차에 따라 [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(3R)-3-메틸-4-모르폴리닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 제조하였다.
실시예 237
N-[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2S,5S)-2,4,5-트리메틸-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
Figure pat00265
파트 A:
(2S,5S)-1,2,5-트리메틸-4-(페닐메틸)피페라진
디클로로메탄 (25 mL) 중 (2S,5S)-2,5-디메틸-1-(페닐메틸)피페라진 [J. Med. Chem. 2006, 49, 716-726] (770 mg, 3..77 mmol)의 용액에 0℃에서 포름알데히드 (0.396 mL, 37％ 수용액, 5.28 mmol)를 첨가한 후에 트리아세톡시수소화붕소나트륨 (959 mg, 4.52 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물이 실온으로 가온되도록 하고 2시간 동안 교반한 후에, 디클로로메탄으로 희석하고 1 N NaOH 용액으로 세척하였다. 유기물을 염수로 세척하여 건조 (MgSO4)시키고 증발시켜서 (2S,5S)-1,2,5-트리메틸-4-(페닐메틸)피페라진을 수득하였다 (782 mg, 95％). LCMS: (M+H)+: 219.1.
파트 B:
(2S,5S)-1,2,3-트리메틸피페라진, 히드로클로라이드 염
(2S,5S)-1,2,5-트리메틸-4-(페닐메틸)피페라진 (782 mg, 3.58 mmol)을 MeOH 50 mL 중에 용해하고 탈기시켜 아르곤하에 두었다. 10％ Pd/C (200 mg)를 첨가하고, 상기 내용물을 철저하게 탈기시켜 대략 3시간 동안 수소 벌룬하에 두었다. 이어서, 상기 내용물을 탈기시켜 셀라이트를 통해 여과하고, 상기 셀라이트 패드를 DCM 및 MeOH로 세척하였다. 1 N HCl 7.5 mL를 첨가한 후에, 생성된 여액을 진공하에 농축시켜서 (2S,5S)-1,2,5-트리메틸피페라진의 히드로클로라이드 염을 수득하였다 (715 mg, 100％). LCMS: (M+H)+: 129.1.
파트 C:
N-[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2S,5S)-2,4,5-트리메틸-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
N-[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2S,5S)-2,4,5-트리메틸-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드를 일반적인 절차 G에 따라 제조하되, 파트 A에서 (1S,4S)-2-메틸-2,5-디아자바이시클로[2.2.1]헵탄, 디히드로브로마이드 대신에 (2S,5S)-1,2,5-트리메틸피페라진, 히드로클로라이드 염을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 486.1.
실시예 238
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(5-플루오로-2-피리디닐)아미노]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00266
파트 A:
5-플루오로-6-[(5-플루오로-2-피리디닐)아미노]-2-메틸-4(1H)-피리미디논 히드라존
THF (5 mL) 중 2-아미노-5-플루오로피리미딘 (110 mg, 1 mmol)의 용액을 0℃로 냉각시키고, NaH (60％ 유분산액) (72 mg, 1.8 mmol)를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 감소된 온도에서 10분 동안 교반하고 실온에서 20분 동안 교반한 후에, 다시 한번 0℃로 냉각시켰다. 4,6-디클로로-5-플루오로-2-메틸피리미딘 (180 mg, 1 mmol)을 첨가하고, 반응물을 실온으로 가온하고, 1.5시간 동안 교반하였다. 이 후, 물을 첨가하고, 용액을 EtOAc로 추출하였다. 합한 유기물을 황산나트륨에서 건조시키고 농축시키고, 조 물질을 수득하였다. 이것을 DMSO (4 mL) 중에 용해하고, 히드라진 (1 mL)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60℃로 가열하고, 5시간 동안 교반하였다. 냉각시킴에 따라, 5-플루오로-6-[(5-플루오로-2-피리디닐)아미노]-2-메틸-4(1H)-피리미디논 히드라존 (63 mg, 25％)이 침전되었고, 이것을 여과에 의해 단리하였다. LCMS: (M+H)+: 253.1.
파트 B:
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(5-플루오로-2-피리디닐)아미노]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(5-플루오로-2-피리디닐)아미노]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A의 파트 B 및 C에 따라 제조하되, 파트 B에서 5-플루오로-4-히드라지노-2-메틸-6-(1-피롤리디닐)피리미딘 대신에 5-플루오로-6-[(5-플루오로-2-피리디닐)아미노]-2-메틸-4(1H)-피리미디논 히드라존을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 450.1.
실시예 239
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(2-시아노에틸)(시클로프로필)아미노]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00267
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(2-시아노에틸)(시클로프로필)아미노]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 D에 따라 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 시판되는 3-(시클로프로필아미노)프로판니트릴을 사용하였다. LCMS: (M+H)+ 468.1.
실시예 240
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(3S)-3-메틸-4-모르폴리닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00268
파트 A:
(3S)-4-(5-플루오로-6-히드라지노-2-메틸-4-피리미디닐)-3-메틸모르폴린
MeOH (3 mL) 중 (3S)-3-메틸모르폴린 히드로클로라이드 (0.1591 g, 1.156 mmol, 실시예 241의 절차에 따라 제조함)의 용액에 N,N-디가소프로필에틸아민 (0.440 mL, 2.526 mmol) 및 4,6-디클로로-5-플루오로-2-메틸피리미딘 (0.2085 g, 1.152 mmol)을 첨가하였다. 상기 용액을 140℃에서 극초단파 조사하에 30분 동안 가열한 다음, 진공하에 농축시켰다. 생성된 고체를 물로 연화처리하고, 진공 여과로 수집하고, 물로 세척하였다. 디옥산 (11 mL) 중 생성된 고체의 용액에 히드라진 수화물 (0.210 mL)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 가열하고 80℃에서 밤새 교반한 다음, 실온으로 냉각시키고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 DCM (100 mL) 및 포화 수성 NaHCO3 (30 mL) 사이에 분배하였다. 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켜서 (3S)-4-(5-플루오로-6-히드라지노-2-메틸-4-피리미디닐)-3-메틸모르폴린을 황색 오일로서 수득하였다 (0.2148 g, 77％ 수율). LCMS: (M+H)+: 242.1.
파트 B:
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(3S)-3-메틸-4-모르폴리닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
DMF (4 mL) 중 (3S)-4-(5-플루오로-6-히드라지노-2-메틸-4-피리미디닐)-3-메틸모르폴린 (0.2123 g, 0.880 mmol)의 용액에 (2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산, N,N-디이소프로필에틸아민 염, 이소프로판올 용매화물 (327.1 mg, 0.661 mmol), N-메틸모르폴린 (0.290 mL, 2.64 mmol), 1-히드록시-7-아자벤조트리아졸 (0.108 g, 0.794 mmol) 및 EDC (0.152 g, 0.793 mmol)를 첨가하였다. 상기 용액을 밤새 교반한 후에 길슨 RPLC로 직접 정제하였다. MeOH (7 mL) 중 상기 잔류물의 용액에 10％ Pd/C (50％ 물, 88 mg)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 벌룬 압력하에서 1시간 동안 수소화한 후에 PTFE 막을 통해 여과하였다. 생성된 용액을 진공하에 농축시키고 EtOAc에 용해하고 진공하에 농축시켰다. 상기 고체를 진공 여과로 수집하고, 헥산으로 세척하여 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(3S)-3-메틸-4-모르폴리닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 백색 고체로서 수득하였다 (0.2326 g, 80％ 수율). LCMS: (M+H)+: 439.2.
실시예 241
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(3S)-3-메틸-4-모르폴리닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00269
파트 A:
(2S)-2-[(페닐메틸)아미노]-1-프로판올
톨루엔 (130 mL) 중 (2S)-2-아미노-1-프로판올 (5.01 g, 66.70 mmol)의 용액에 벤즈알데히드 (7.08 mL, 70.05 mmol)를 첨가하였다. 플라스크에 딘-스타르크(Dean-Stark) 트랩을 장착하고, 상기 용액을 150℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 상기 용액을 실온으로 냉각시키고 진공하에 농축시켰다. EtOH (130 mL) 중 잔류물의 0℃ 용액에 NaBH4 (6.31 g, 166.8 mmol)를 첨가하고, 충분한 디옥산 중 4 N HCl을 사용하여 pH를 약 2로 조정하였다. 상기 혼합물을 밤새 교반한 후에 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 1 N 수성 HCl (200 mL) 및 DCM (100 mL) 사이에 분배하였다. 수성 상을 신선한 분량의 DCM (100 mL)으로 세척한 후에, 6 N 수성 NaOH를 사용하여 pH >13으로 조정하였다. 수성 상을 DCM (2×150 mL)으로 추출하고, 합한 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켜서 (2S)-2-[(페닐메틸)아미노]-1-프로판올을 무색 오일로서 수득하였다 (10.52 g, 95％). LCMS: (M+H)+: 166.1.
파트 B:
(5S)-5-메틸-4-(페닐메틸)-3-모르폴리논
THF (65 mL) 중 (2S)-2-[(페닐메틸)아미노]-1-프로판올 (10.52 g, 63.67 mmol)의 용액에 물 (65 mL) 중 K2CO3 (26.40 g, 191.0 mmol)의 용액을 첨가하였다. 격렬하게 교반된 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 클로로아세틸 클로라이드 (7.10 mL, 89.14 mmol)를 20분에 걸쳐 적가하였다. 혼합물을 1시간 동안 교반한 후에 추가 분량의 클로로아세틸 클로라이드 (0.500 mL, 6.278 mmol)를 적가하였다. 상기 혼합물을 1시간 동안 교반한 후에, 혼합물을 50％ 수성 NaOH (약 20 mL)를 사용하여 pH > 13으로 조정하였다. 상기 혼합물을 교반하고 밤새 실온으로 가온시킨 후에, DCM (250 mL)으로 추출하였다. 유기 상을 1 N 수성 HCl로 세척한 후에 물로 세척하였다. 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켜서 (5S)-5-메틸-4-(페닐메틸)-3-모르폴리논을 무색 오일로서 수득하였다 (12.74 g, 97％). LCMS: (M+H)+: 206.1.
파트 C:
(3S)-3-메틸-4-(페닐메틸)모르폴린
톨루엔 (150 mL) 중 (5S)-5-메틸-4-(페닐메틸)-3-모르폴리논 (12.74 g, 62.07 mmol)의 0℃ 용액에 Red-Al (PhMe 중 65％ w/w, 38 mL)을 첨가 깔때기를 통해 적가하였다. 생성된 용액을 60℃에서 가열하고 4시간 동안 교반한 후에, 40℃로 냉각시키고 밤새 교반하였다. 이어서, 상기 용액을 0℃로 냉각시키고, 1 N 수성 NaOH (15 mL)를 적가함으로써 켄칭하였다. 상기 혼합물을 Et2O (100 mL)로 희석하고, 1 N 수성 NaOH (100 mL)로 세척한 후에 염수 (50 mL)로 세척하였다. 유기 상을 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고, 진공하에 농축시켜 MeOH (50 mL)로 공비증류하여 (3S)-3-메틸-4-(페닐메틸)모르폴린을 희미한 핑크색 오일로서 수득하였다 (11.33 g, 95％). LCMS: (M+H)+: 192.2.
파트 D:
(3S)-3-메틸모르폴린 히드로클로라이드
MeOH (150 mL) 중 (3S)-3-메틸-4-(페닐메틸)모르폴린 (11.33 g, 59.24 mmol)의 용액에 6 N 수성 HCl (9.9 mL, 59.4 mmol) 및 10％ Pd/C (50％ 물, 1.13 g)를 첨가하였다. 현탁액을 벌룬 압력하에서 밤새 수소화한 후에, 유리 섬유 필터를 통해 여과하였다. 생성된 황색 용액을 진공하에 농축시키고 MeOH (4×150 mL)로 공비증류하여 (3S)-3-메틸모르폴린 히드로클로라이드를 황색 오일로서 수득하고 (8.17 g, 정량적인 수율), 이것을 고진공하에 고화시켰다. LCMS: (M+H)+: 102.2.
파트 E:
트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(3S)-3-메틸-4-모르폴리닐]-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트
DMF (7.5 mL) 중 (3S)-3-메틸모르폴린 히드로클로라이드 (0.2059 g, 1.496 mmol)의 용액에 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-(2,6-디클로로-5-플루오로-4-피리미디닐)-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트 (0.7451 g, 1.498 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (0.575 mL, 3.301 mmol)을 첨가하였다. 상기 용액을 밤새 교반한 후에 Et2O (150 mL)로 희석하였다. 상기 혼합물을 물 (2×50 mL)로 세척하고, 합한 수성 상을 신선한 분량의 Et2O (50 mL)로 추출하였다. 상기 Et2O 층을 신선한 분량의 물 (50 mL)로 세척하고, 합한 유기 상을 DCM (50 mL)으로 희석하고, 무수 Na2SO4에서 건조시켜 여과하고, 진공하에 농축시키고, EtOAc로 공비증류하였다. 상기 고체를 진공 여과로 수집하고 헥산으로 세척하였다. 상등액을 진공하에 농축시키고, 구배 실리카겔 크로마토그래피 (헥산 중 0％→100％ EtOAc; 1％ Et3N)로 정제하였다. 원하는 분획물을 진공하에 농축시키고, 생성된 고체를 진공 여과로 수집하고, 헥산으로 세척하고, 고체의 제1 수집물과 합하여 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(3S)-3-메틸-4-모르폴리닐]-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트를 백색 고체로서 수득하였다 (0.6610 g, 79％). LCMS: (M+H)+: 562.2.
파트 F:
(3S)-4-(5-플루오로-6-히드라지노-2-메틸-4-피리미디닐)-3-메틸모르폴린 디히드로클로라이드
DCM (12 mL) 중 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(3S)-3-메틸-4-모르폴리닐]-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트 (0.6552 g, 1.166 mmol)의 용액에 Et2O 중 2 N HCl (12 mL, 24 mmol)을 첨가하였다. 상기 용액을 2일 동안 교반하고, 생성된 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 상기 고체를 Et2O로 연화처리하고, 진공 여과로 수집하여 (3S)-4-(5-플루오로-6-히드라지노-2-메틸-4-피리미디닐)-3-메틸모르폴린 디히드로클로라이드를 황색 고체로서 수득하였다 (0.2543 g, 65％). LCMS: (M+H)+: 262.0.
파트 G:
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(3S)-3-메틸-4-모르폴리닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드
DMF (6 mL) 중 (3S)-4-(5-플루오로-6-히드라지노-2-메틸-4-피리미디닐)-3-메틸모르폴린 디히드로클로라이드 (251.5 mg, 0.752 mmol)의 용액에 (2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산, N,N-디이소프로필에틸아민 염, 이소프로판올 용매화물 (306.1 mg, 0.619 mmol), N-메틸모르폴린 (0.410 mL, 3.73 mmol), 1-히드록시-7-아자벤조트리아졸 (0.101 g, 0.742 mmol) 및 EDC (0.142 g, 0.741 mmol)를 첨가하였다. 용액이 밤새 교반되도록 한 후에, 길슨 RPLC로 직접 정제하여 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(3S)-3-메틸-4-모르폴리닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드를 오렌지색 발포체로서 수득하였다 (314.6 mg, 93％). LCMS: (M+H)+: 549.2.
파트 H:
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(3S)-3-메틸-4-모르폴리닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
메탄올 (6 mL) 중 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(3S)-3-메틸-4-모르폴리닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 (309.1 mg, 0.563 mmol)의 용액에 20％ Pd(OH)2/C (50％ 물, 62 mg)를 첨가하였다. 현탁액을 1시간 동안 수소화시킨 후에, PTFE 막을 통해 여과하였다. 생성된 용액을 진공하에 농축시키고, 길슨 RPLC로 정제하여 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(3S)-3-메틸-4-모르폴리닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 백색 고체로서 수득한 (94.0 mg, 36％) 후에, EtOAc-Et2O로부터 결정화하였다. LCMS: (M+H)+: 459.1.
실시예 242
N-[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(3S,5S)-3,4,5-트리메틸-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
Figure pat00270
파트 A:
(3S,5S)-3,5-디메틸-2-피페라지논
메틸 N-{(1S)-2-[비스(페닐메틸)아미노]-1-메틸에틸}-L-알라니네이트 [J. Org. Chem. 1995, 60, 4177-4183] (2.156 g, 6.33 mmol), 진한 염산 37％ (0.805 mL), 5％ 탄소상 팔라듐 (0.863 g) 및 EtOH (40 mL)의 혼합물을 수소 벌룬하에 48시간 동안 수소화시켰다. 상기 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 고체를 MeOH 및 CH2Cl2로 세척하였다. 여액을 합하고 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 EtOH (55 mL) 중에 재용해하고, p-톨루엔술폰산 (0.344 g)을 첨가하고, 혼합물을 환류에서 16시간 동안 가열하였다. 상기 혼합물을 감압하에 농축시키고, CH2Cl2 및 NaHCO3 사이에 분배하였다. 수성 층을 CH2Cl2로 역추출하고, 합한 유기 층을 건조 (MgSO4)시켜 여과하고 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (9:1, CH2Cl2:Me0H)로 정제하여 메틸 N-{(1S)-1-메틸-2-[(페닐메틸)아미노]에틸}-L-알라니네이트를 수득하였다 (685 mg, 50％). LCMS: (M+H)+: 129.1. 나머지 수성 층을 CHCl3 중 40％ 이소프로판올로 2회 더 추출하고, 합한 유기 층을 건조 (Na2SO4)시켜 여과하고 농축시켜서 (3S,5S)-3,5-디메틸-2-피페라지논을 수득하였다 (306 mg, 38％). LCMS: (M+H)+: 129.1.
파트 B:
(3S,5S)-3,4,5-트리메틸-2-피페라지논
메탄올 (12 mL) 중 (3S,5S)-3,5-디메틸-2-피페라지논의 용액에 실온에서 포름알데히드 (0.345 mL, 37％ 수용액, 4.6 mmol)를 첨가한 후에 수소화붕소나트륨 (261 mg, 6.9 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 2시간 동안 교반한 후에 디클로로메탄으로 희석하고, 1 N NaOH 용액으로 세척하였다. 수성 층을 CH2Cl2로 3회 역추출하고, 합한 유기 층을 염수로 세척하여 건조 (MgSO4)시키고 증발시켜서 (3S,5S)-3,4,5-트리메틸-2-피페라지논을 수득하였다 (128 mg, 39％). LCMS: (M+H)+: 143.1.
파트 C:
(2S,6S)-1,2,6-트리메틸피페라진, 히드로클로라이드 염
THF 중 1 M LAH (3 mL, 3 mmol)를 (3S,5S)-3,4,5-트리메틸-2-피페라지논 (123 mg, 0.86 mmol)에 적가하였다. 상기 반응물이 실온으로 가온되도록 한 후에, 실온에서 40분 동안 교반하고, 환류에서 추가의 5시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응물을 H2O (0.114 mL), 15％ NaOH (0.114 mL) 및 H2O (0.342 mL)를 순차적으로 첨가하여 켄칭하였다. 상기 혼합물을 0.5시간 동안 교반하고, 고체를 여과해 내고, 과량의 THF로 세척하였다. 합한 여액에 1 N HCl 1.8 mL를 첨가한 후에 감압하에 농축하여 (2S,6S)-1,2,6-트리메틸피페라진의 히드로클로라이드 염을 수득하였다 (162 mg, 93％). LCMS: (M+H)+: 129.1.
파트 D:
N-[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(3S,5S)-3,4,5-트리메틸-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
N-[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(3S,5S)-3,4,5-트리메틸-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드를 일반적인 절차 G에 따라 제조하되, 파트 A에서 (1S,4S)-2-메틸-2,5-디아자바이시클로[2.2.1]헵탄, 디히드로브로마이드 대신에 (2S,6S)-1,2,6-트리메틸피페라진, 히드로클로라이드 염을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 486.1.
실시예 243
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(2S)-2-(4-모르폴리닐메틸)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00271
파트 A:
4-[(2S)-2-피롤리디닐메틸]모르폴린 히드로클로라이드
4-[(2S)-2-피롤리디닐메틸]모르폴린 히드로클로라이드를 실시예 264의 파트 A 내지 파트 C에 따라 제조하되, 파트 A에서 피페리딘 대신에 시판되는 모르폴린을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 171.1.
파트 B:
4-{[(2S)-1-(5-플루오로-6-히드라지노-2-메틸-4-피리미디닐)-2-피롤리디닐]메틸}모르폴린
4-{[(2S)-1-(5-플루오로-6-히드라지노-2-메틸-4-피리미디닐)-2-피롤리디닐]메틸}모르폴린을 실시예 210의 파트 E 및 파트 F와 유사한 방식으로 제조하되, 파트 E에서 1-{1-[(2S)-2-피롤리디닐]시클로프로필}피롤리딘 히드로클로라이드 대신에 4-[(2S)-2-피롤리디닐메틸]모르폴린 히드로클로라이드를 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 508.2.
실시예 244
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(3-플루오로-1-아제티디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00272
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(3-플루오로-1-아제티디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 D에 따라 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 3-플루오로아제티딘 히드로클로라이드 [Hulin, Bernard; Piotrowski, David W. US 2005256310]를 사용하였다. LCMS: (M+H)+ 433.0.
실시예 245
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2S)-2-(히드록시메틸)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00273
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2S)-2-(히드록시메틸)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 E에 따라 제조하되, 파트 A에서 이소프로필 아민 대신에 시판되는 (2S)-2-피롤리디닐메탄올을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 459.1.
실시예 246
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(2-메틸-1-피라졸리디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00274
파트 A:
1,1-디메틸에틸 3-옥소-1-피라졸리딘카르복실레이트
물 (50 mL) 및 디옥산 (10 mL) 중 3-피라졸리디논 히드로클로라이드 (3.84 g, 31.33 mmol)의 혼합물에 탄산나트륨 (6.64 g, 62.66 mmol)을 서서히 첨가한 후에, 디옥산 (20 mL) 중 비스(1,1-디메틸에틸)디카르보네이트의 용액을 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 물 (50 mL)을 첨가하고, 혼합물을 디클로로메탄 (2×150 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 용액을 물 (2×50 mL)로 세척하여 건조 (Na2SO4)시키고 농축시켜서 1,1-디메틸에틸 3-옥소-1-피라졸리딘카르복실레이트를 수득하였다 (4.00 g, 68.6％). LCMS: (M+H)+ 186.9.
파트 B:
1,1-디메틸에틸 2-메틸-3-옥소-1-피라졸리딘카르복실레이트
DMF (10 mL) 중 1,1-디메틸에틸 3-옥소-1-피라졸리딘카르복실레이트 (1.00 g, 5.37 mmol) 및 탄산칼륨 (0.89 g, 6.44 mmol)의 혼합물에 요오도메탄 (MTBE 중 2 M, 3.22 mL, 6.44 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응의 완료를 나타냈다. 상기 혼합물을 에틸 아세테이트/헥산 (1:1, 150 mL)으로 희석하고, 물 (5×50 mL) 및 염수 (50 mL)로 세척하고, 건조 (Na2SO4)시키고 농축시켜서 1,1-디메틸에틸 2-메틸-3-옥소-1-피라졸리딘카르복실레이트를 수득하였다 (0.57 g, 53.0％). LCMS: (M+H)+ 201.0.
파트 C:
1,1-디메틸에틸 2-메틸-1-피라졸리딘카르복실레이트
무수 디클로로메탄 중 1,1-디메틸에틸 2-메틸-3-옥소-1-피라졸리딘카르복실레이트 (0.98 g, 4.89 mmol)의 용액에 보란 디메틸 황화물 착체 (1.16 mL, 12.24 mmol)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. LCMS는 약 40％의 출발 물질이 남아있음을 나타냈다. 또다른 분량의 보란 디메틸 황화물 착체 (0.5 mL, 5.28 mmol)를 첨가하고, 밤새 계속 교반하였다. 버블링이 그칠 때까지 메탄올을 반응 혼합물에 적가하였다. 이 후, 물 (1 mL)을 첨가하고, 혼합물을 1시간 동안 환류시켰다. 실온으로 냉각시킨 후, 혼합물을 진공하에서 건조될 때까지 농축시켰다. 잔류물을 물 (30 mL) 및 디클로로메탄 (45 mL) 중에 녹이고, 유기 층을 분리하고, 수성 층을 디클로로메탄 (45 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 용액을 건조 (Na2SO4)시켜 여과하고 농축시켜서 1,1-디메틸에틸 2-메틸-1-피라졸리딘카르복실레이트를 수득하였다 (0.48 g, 52.7％). LCMS: (2M+H)+ 372.9.
파트 D:
1-메틸피라졸리딘 히드로클로라이드
디옥산 중 4 N HCl (5 mL) 중 1,1-디메틸에틸 2-메틸-1-피라졸리딘카르복실레이트 (0.48 g, 2.58 mmol)의 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. LCMS는 반응의 완료를 나타냈다. 휘발성 물질을 진공하에서 제거하여 1-메틸피라졸리딘 히드로클로라이드를 백색 고체로서 수득하였다 (0.41 g, 77％ 순도로 추정됨).
파트 E:
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(2-메틸-1-피라졸리디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(2-메틸-1-피라졸리디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 실시예 176과 유사한 방식으로 제조하되, 파트 C에서 1-(3-메틸-3-아제티디닐)피롤리딘 디히드로클로라이드 대신에 1-메틸피라졸리딘 히드로클로라이드를 사용하였다. LCMS: (M+H)+ 444.1.
실시예 247
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(2S)-2-(2-히드록시에틸)-1-피롤리디닐]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00275
파트 A:
2-[(2S)-2-피롤리디닐]에탄올
2-[(2S)-2-피롤리디닐]에탄올을 문헌의 절차 (WO 9748681, 1997)에 따라 제조하되, (R)-2-피롤리딘 메탄올 대신에 (S) 거울상이성질체를 사용하였다.
파트 B:
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(2S)-2-(2-히드록시에틸)-1-피롤리디닐]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(2S)-2-(2-히드록시에틸)-1-피롤리디닐]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 2-[(2S)-2-피롤리디닐]에탄올을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 453.1.
실시예 248
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2S)-2-(2-히드록시에틸)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00276
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2S)-2-(2-히드록시에틸)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 E에 따라 제조하되, 파트 A에서 이소프로필 아민 대신에 2-[(2S)-2-피롤리디닐]에탄올 (실시예 247)을 사용하고, 파트 B에서 DCM을 함유한 에테르 중 2.0 M HCl을 용매로서 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 473.1/475.2.
실시예 249
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-((2S)-2-{[(2-히드록시에틸)(메틸)아미노]메틸}-1-피롤리디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00277
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-((2S)-2-{[(2-히드록시에틸)(메틸)아미노]메틸}-1-피롤리디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 실시예 264와 유사한 방식으로 제조하되, 파트 A에서 피페리딘 대신에 시판되는 2-(메틸아미노)에탄올을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 517.0.
실시예 250
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2S)-2-({메틸[2-(메틸옥시)에틸]아미노}메틸)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00278
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2S)-2-({메틸[2-(메틸옥시)에틸]아미노}메틸)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 실시예 264와 유사한 방식으로 제조하되, 파트 A에서 피페리딘 대신에 시판되는 N-메틸-2-(메틸옥시)에탄아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 530.1.
실시예 251
[(2R)-3-{2-[2-클로로-6-(3,3-디플루오로-1-아제티디닐)-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00279
[(2R)-3-{2-[2-클로로-6-(3,3-디플루오로-1-아제티디닐)-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 실시예 176과 유사한 방식으로 제조하되, 파트 C에서 1-(3-메틸-3-아제티디닐)피롤리딘 디히드로클로라이드 대신에 3,3-디플루오로아제티딘 히드로클로라이드 [Carling, William Robert; Mitchinson, Andrew; Russell, Michael Geoffrey Neil; Street, Leslie Joseph. WO 2000047582]를 사용하였다. LCMS: (M+H)+ 450.9.
실시예 252
[(2R)-3-(2-{6-[(2S)-2-시아노-1-피롤리디닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00280
[(2R)-3-(2-{6-[(2S)-2-시아노-1-피롤리디닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 F에 따라 제조하되, 파트 A에서 3-피롤린 대신에 시판되는 (2S)-2-피롤리딘카르보니트릴 히드로클로라이드를 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 434.1.
실시예 253
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-((2S)-2-{[에틸(메틸)아미노]메틸}-1-피롤리디닐)-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00281
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-((2S)-2-{[에틸(메틸)아미노]메틸}-1-피롤리디닐)-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 실시예 243과 유사한 방식으로 제조하되, 파트 A에서 모르폴린 대신에 시판되는 에틸(메틸)아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 480.3.
실시예 254
{(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(6-{(2S)-2-[(디에틸아미노)메틸]-1-피롤리디닐}-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}히드록시포름아미드
Figure pat00282
{(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(6-{(2S)-2-[(디에틸아미노)메틸]-1-피롤리디닐}-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}히드록시포름아미드를 실시예 243과 유사한 방식으로 제조하되, 파트 A에서 모르폴린 대신에 시판되는 디에틸아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 494.4.
실시예 255
[(2R)-3-{2-[2-클로로-6-((2S)-2-{[에틸(메틸)아미노]메틸}-1-피롤리디닐)-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00283
[(2R)-3-{2-[2-클로로-6-((2S)-2-{[에틸(메틸)아미노]메틸}-1-피롤리디닐)-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 실시예 197과 유사한 방식으로 제조하되, 파트 A에서 피페리딘 대신에 시판되는 에틸(메틸)아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 500.1.
실시예 256
[(2R)-3-[2-(2-클로로-6-{(2S)-2-[(디에틸아미노)메틸]-1-피롤리디닐}-5-플루오로-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00284
[(2R)-3-[2-(2-클로로-6-{(2S)-2-[(디에틸아미노)메틸]-1-피롤리디닐}-5-플루오로-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 실시예 264와 유사한 방식으로 제조하되, 파트 A에서 피페리딘 대신에 시판되는 디에틸아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 514.0.
실시예 257
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(2S)-2-시아노-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00285
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(2S)-2-시아노-1-피롤리디닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 D에 따라 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 시판되는 (2S)-2-피롤리딘카르보니트릴 히드로클로라이드를 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 454.0.
실시예 258
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(2S)-2-(히드록시메틸)-1-피페리디닐]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00286
파트 A:
페닐메틸 (2S)-2-(히드록시메틸)-1-피페리딘카르복실레이트
THF (5 mL) 중 (2S)-1-{[(페닐메틸)옥시]카르보닐}-2-피페리딘카르복실산 (1.0 g, 3.798 mmol)을 -18℃로 냉각시키고, 보란-THF 착체 (3.798 mL, 3.798 mmol)를 10분에 걸쳐 첨가하였다. 혼합물이 실온으로 가온되도록 하면서 밤새 교반한 후에, 0℃로 냉각시키고, 물 (4 mL)을 첨가한 후에 K2CO3 (1.4 g)을 첨가하였다. 상들을 분리하고, 수성 상을 Et2O (3×25 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 염수 (1×25 mL)로 세척하고, 무수 MgSO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켜서 페닐메틸 (2S)-2-(히드록시메틸)-1-피페리딘카르복실레이트를 수득하였다 (815 mg, 86％). LCMS: (M+H)+: 250.2.
파트 B:
(2S)-2-피페리딘카르복실산 히드로클로라이드
페닐메틸 (2S)-2-(히드록시메틸)-1-피페리딘카르복실레이트 (815 mg, 3.26 mmol)를 MeOH (30 mL) 및 1 N HCl (7.19 mL, 7.19 mmol)의 혼합물 중에 용해하고 탈기시켜 아르곤하에 두었다. 10％ Pd/C (225 mg)를 첨가하고, 상기 내용물을 철저하게 탈기시켜 수소 벌룬하에 2시간 동안 두었다. 이어서, 상기 내용물을 탈기시키고, Pd/C를 섬유유리 필터를 통해 여과하여 제거하면서 MeOH로 세척하였다. 여액을 진공하에 농축시켜서 순수한 N,N-디메틸-2-(3-피롤리디닐)-2-프로판아민 히드로클로라이드를 수득하였다 (492 mg, 99％). LCMS: (M+H)+: 116.1
파트 C:
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(2S)-2-(히드록시메틸)-1-피페리디닐]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(2S)-2-(히드록시메틸)-1-피페리디닐]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 실시예 210의 파트 E 및 파트 F와 유사한 방식으로 제조하되, 파트 E에서 1-{1-[(2S)-2-피롤리디닐]시클로프로필}피롤리딘 히드로클로라이드 대신에 N,N-디메틸-2-(3-피롤리디닐)-2-프로판아민 히드로클로라이드를 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 453.3.
실시예 259
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(2-에틸-1-피라졸리디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00287
파트 A:
1-에틸피라졸리딘 히드로클로라이드
1-에틸피라졸리딘 히드로클로라이드를 1-메틸피라졸리딘 히드로클로라이드의 제조에 대해 기재한 절차 (실시예 246)에 따라 제조하되, 파트 B에서 요오도메탄 대신에 요오도에탄을 사용하였다. LCMS: (M+H)+ 102.2.
파트 B:
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(2-에틸-1-피라졸리디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(2-에틸-1-피라졸리디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 실시예 176과 유사한 방식으로 제조하되, 파트 C에서 1-(3-메틸-3-아제티디닐)피롤리딘 디히드로클로라이드 대신에 1-에틸피라졸리딘 히드로클로라이드를 사용하였다. LCMS: (M+H)+ 458.3.
실시예 260
1-{2-클로로-6-[2-((2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(히드록시)아미노]메틸}프로파노일)히드라지노]-5-플루오로-4-피리미디닐}-N,N-디메틸-L-프롤린아미드
Figure pat00288
파트 A:
N,N-디에틸-1-(페닐메틸)-L-프롤린아미드
N,N-디에틸-1-(페닐메틸)-L-프롤린아미드를 실시예 210의 파트 A 내지 파트 B와 유사한 방식으로 제조하되, 파트 B에서 피롤리딘 대신에 시판되는 디메틸 아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 261.1.
파트 B:
N,N-디에틸-L-프롤린아미드 히드로클로라이드
N,N-디에틸-1-(페닐메틸)-L-프롤린아미드 (1.603 g, 6.156 mmol)를 MeOH (50 mL) 및 1 N HCl (14 mL, 14 mmol)의 혼합물 중에 용해하고 탈기시켜 아르곤하에 두었다. 10％ Pd/C (480 mg)를 첨가하고, 상기 내용물을 철저하게 탈기시켜 수소 벌룬하에 2시간 동안 두었다. 이어서, 상기 내용물을 탈기시키고, Pd/C를 섬유유리 필터를 통해 여과하여 제거하면서 MeOH로 세척하였다. 여액을 진공하에 농축시켜서 순수한 N,N-디에틸-L-프롤린아미드 히드로클로라이드를 수득하였다 (1.658 g, >99％). LCMS: (M+H)+: 171.1.
파트 C:
1-{2-클로로-6-[2-((2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(히드록시)아미노]메틸}프로파노일)히드라지노]-5-플루오로-4-피리미디닐}-N,N-디메틸-L-프롤린아미드
1-{2-클로로-6-[2-((2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(히드록시)아미노]메틸}프로파노일)히드라지노]-5-플루오로-4-피리미디닐}-N,N-디메틸-L-프롤린아미드를 일반적인 절차 E에 따라 제조하되, 파트 A에서 이소프로필 아민 대신에 N,N-디에틸-L-프롤린아미드 히드로클로라이드를 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 528.3.
실시예 261
N-[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(2R,5R)-5-에틸-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
Figure pat00289
파트 A:
(2R,5R)-2-에틸-1,5-디메틸-4-(페닐메틸)피페라진
디클로로메탄 (25 mL) 중 (2R,5R)-5-에틸-2-메틸-1-(페닐메틸)피페라진 (문헌 [J. Med. Chem. 2006, 49, 716-726]에서의 절차에 따라 제조하되, N-Boc-L-알라닌 대신 Boc-D-2-아미노부티르산을 사용함) (902 mg, 4.13 mmol)의 용액에 0℃에서 포름알데히드 (0.435 mL, 37％ 수용액, 5.78 mmol)를 첨가한 후에 트리아세톡시수소화붕소나트륨 (1050 mg, 4.96 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물이 실온으로 가온되도록 하고 2시간 동안 교반한 후에, 디클로로메탄으로 희석하고 1 N NaOH 용액으로 세척하였다. 유기물을 염수로 세척하여 건조 (MgSO4)시키고 증발시켜서 (2R,5R)-2-에틸-1,5-디메틸-4-(페닐메틸)피페라진을 수득하였다 (875 mg, 91％). LCMS: (M+H)+: 233.3.
파트 B:
(2R,5R)-2-에틸-1,5-디메틸피페라진, 히드로클로라이드 염
(2R,5R)-2-에틸-1,5-디메틸-4-(페닐메틸)피페라진 (873 mg, 3.76 mmol)을 MeOH 50 mL 중에 용해하고 탈기시켜 아르곤하에 두었다. 10％ Pd/C (175 mg)를 첨가하고, 상기 내용물을 철저하게 탈기시켜 대략 3시간 동안 수소 벌룬하에 두었다. 이어서, 상기 내용물을 탈기시켜 셀라이트를 통해 여과하고, 상기 셀라이트 패드를 DCM 및 MeOH로 세척하였다. 1 N HCl 7.9 mL를 첨가한 후에, 생성된 여액을 진공하에 농축시켜서 (2R,5R)-2-에틸-1,5-디메틸피페라진의 히드로클로라이드 염을 수득하였다 (800 mg, 100％). LCMS: (M+H)+: 143.1.
파트 C:
N-[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(2R,5R)-5-에틸-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
N-[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(2R,5R)-5-에틸-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드를 일반적인 절차 G에 따라 제조하되, 파트 A에서 (1S,4S)-2-메틸-2,5-디아자바이시클로[2.2.1]헵탄, 디히드로브로마이드 대신에 (2R,5R)-2-에틸-1,5-디메틸피페라진, 히드로클로라이드 염을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 500.3.
실시예 262
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(2R,5R)-5-에틸-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드
Figure pat00290
N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(2R,5R)-5-에틸-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드를 일반적인 절차 A에 따라 제조하되, 파트 A에서 피롤리딘 대신에 (2R,5R)-2-에틸-1,5-디메틸피페라진, 히드로클로라이드 염 (실시예 261)을 사용하고 DIPEA를 3 당량 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 480.1.
실시예 263
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(3-메틸-1-아제티디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00291
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(3-메틸-1-아제티디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 실시예 182와 유사한 방식으로 제조하되, 파트 A에서 1-(3-메틸-3-아제티디닐)피롤리딘 디히드로클로라이드 대신에 3-메틸아제티딘 히드로클로라이드 [Journal of Heterocyclic Chemistry, 1971, 8, 961-6]를 사용하였다. LCMS: (M+H)+ 409.1.
실시예 264
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2S)-2-(1-피페리디닐메틸)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00292
파트 A:
(2S)-1-(페닐메틸)-2-(1-피롤리디닐카르보닐)피롤리딘
1-(페닐메틸)-L-프롤린 히드로클로라이드 (2.0 g, 8.247 mmol) 및 HOBt (1.34 g, 9.928 mmol)를 CH2Cl2 (50 mL) 중에 용해하고, 4-메틸모르폴린 (2.72 mL, 24.822 mmol), 피페리딘 (0.981 mL, 9.929 mmol) 및 EDCl (1.906 g, 9.928 mmol)을 상기 용액에 첨가하였다. 밤새 교반한 후, 용액을 물 (50 mL)로 세척하고, 수성 층을 CH2Cl2 (3×50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 MgSO4에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜서 (2S)-1-(페닐메틸)-2-(1-피롤리디닐카르보닐)피페리딘을 수득하였다 (0.901 g, 40％). LCMS: (M+H)+: 273.1.
파트 B:
1-{[(2S)-1-(페닐메틸)-2-피롤리디닐]메틸}피페리딘
(2S)-1-(페닐메틸)-2-(1-피롤리디닐카르보닐)피페리딘 (901 mg, 3.307 mmol)을 THF 20 mL 중에 용해하고 0℃로 냉각시킨 다음, LiAlH4 (251 mg, 6.615 mmol)를 조금씩 첨가하였다. 상기 혼합물을 2시간 동안 80℃로 가열한 다음, 실온으로 냉각되도록 하였다. 반응물을 H2O (0.300 mL), 15％ 수성 NaOH (0.300 mL) 및 H2O (0.900 mL)로 순차적으로 켄칭하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 상기 내용물을 여과하고, 여액을 진공하에 농축시켜서 1-{[(2S)-1-(페닐메틸)-2-피롤리디닐]메틸}피페리딘을 수득하였다 (710 mg, 83％).
파트 C:
1-[(2S)-2-피롤리디닐메틸]피페리딘 히드로클로라이드
1-{[(2S)-1-(페닐메틸)-2-피롤리디닐]메틸}피페리딘 (710 mg, 2.747 mmol)을 MeOH (20 mL) 및 1 N HCl (6 mL, 6.044 mmol)의 혼합물 중에 용해하고 탈기시켜 아르곤하에 두었다. 10％ Pd/C (213 mg)를 첨가하고, 상기 내용물을 철저하게 탈기시켜 수소 벌룬하에 2시간 동안 두었다. 이어서, 상기 내용물을 탈기시키고, Pd/C를 섬유유리 필터를 통해 여과하여 제거하면서 MeOH로 세척하였다. 여액을 진공하에 농축시켜서 순수한 1-[(2S)-2-피롤리디닐메틸]피페리딘 히드로클로라이드를 수득하였다 (692 mg, >99％). LCMS: (M+H)+: 169.2.
파트 D:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2S)-2-(1-피페리디닐메틸)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2S)-2-(1-피페리디닐메틸)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 E에 따라 제조하되, 파트 A에서 이소프로필 아민 대신에 1-[(2S)-2-피롤리디닐메틸]피페리딘 히드로클로라이드를 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 581.4.
실시예 265
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(2-메틸-1-아제티디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드 (부분입체이성질체들의 혼합물)
Figure pat00293
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(2-메틸-1-아제티디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 실시예 182와 유사한 방식으로 부분입체이성질체들의 혼합물로서 제조하되, 파트 A에서 1-(3-메틸-3-아제티디닐)피롤리딘 디히드로클로라이드 대신에 2-메틸아제티딘 히드로클로라이드 [J. Org. Chem. 1961, 26, 138-144]를 사용하였다. LCMS: (M+H)+ 409.2.
실시예 266
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(2-메틸-1-아제티디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 (부분입체이성질체들의 혼합물)
Figure pat00294
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(2-메틸-1-아제티디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 D에 따라 부분입체이성질체들의 혼합물로서 제조하되, 파트 A에서 N-메틸피페라진 대신에 2-메틸아제티딘 히드로클로라이드 [J. Org. Chem. 1961, 26, 138-144]를 사용하였다. LCMS: (M+H)+ 429.1.
실시예 267
[(2R)-3-[2-(2-클로로-6-{(2S)-2-[(디메틸아미노)메틸]-1-피페리디닐}-5-플루오로-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00295
파트 A:
페닐메틸 (2S)-2-[(디메틸아미노)카르보닐]-1-피페리딘카르복실레이트
(2S)-1-{[(페닐메틸)옥시]카르보닐}-2-피페리딘카르복실산 (2.0 g, 7.595 mmol) 및 HOBt (1.231 g, 9.114 mmol)를 CH2Cl2 (40 mL) 중에 용해하고, 4-메틸모르폴린 (2.5 mL, 22.78 mmol), THF 중 디메틸 아민의 2.0 M 용액 (4.55 mL, 9.114 mmol) 및 EDCl (1.750 g, 9.114 mmol)을 첨가하였다. 이 용액을 밤새 교반한 후에 1 N HCl (25 mL)로 세척하고, 수성 층을 CH2Cl2 (3×25 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 MgSO4에서 건조시켜 진공하에 농축시켰다. 상기 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피 (콤비플래쉬, 0→100％ 에틸 아세테이트/헥산)로 정제하여 페닐메틸 (2S)-2-[(디메틸아미노)카르보닐]-1-피페리딘카르복실레이트를 수득하였다 (1.919 g, 87％). LCMS: (M+H)+: 291.1.
파트 B:
(2S)-N,N-디메틸-2-피페리딘카르복스아미드 히드로클로라이드
페닐메틸 (2S)-2-[(디메틸아미노)카르보닐]-1-피페리딘카르복실레이트 (1.918 g, 6.609 mmol)를 MeOH (40 mL) 및 1 N HCl (14.53 mL, 14.53 mmol)의 혼합물 중에 용해하고 탈기시켜 아르곤하에 두었다. 10％ Pd/C (575 mg)를 첨가하고, 상기 내용물을 철저하게 탈기시켜 수소 벌룬하에 2시간 동안 두었다. 이어서, 상기 내용물을 탈기시키고, Pd/C를 섬유유리 필터를 통해 여과하여 제거하면서 MeOH로 세척하였다. 여액을 진공하에 농축시켜서 순수한 (2S)-N,N-디메틸-2-피페리딘카르복스아미드 히드로클로라이드를 수득하였다 (1.483 g, >99％). LCMS: (M+H)+: 157.2.
파트 C:
(2S)-N,N-디메틸-1-(페닐카르보닐)-2-피페리딘카르복스아미드
(2S)-N,N-디메틸-2-피페리딘카르복스아미드 히드로클로라이드 (880 mg, 4.567 mmol)를 CH2Cl2 (15 mL) 및 물 (15 mL)의 혼합물 중에 용해한 다음, 고체 중탄산나트륨 (1.534 g, 18.268 mmol)을 첨가한 후에 염화벤조일 (0.556 mL, 4.795 mmol)을 첨가하였다. 밤새 교반한 후, 상들을 분리하고, 수성 상을 CH2Cl2 (3×50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 무수 MgSO4에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 이 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피 (콤비플래쉬, 0→10％ 메탄올/디클로로메탄)로 정제하여 (2S)-N,N-디메틸-1-(페닐카르보닐)-2-피페리딘카르복스아미드를 수득하였다 (883 mg, 74％). LCMS: (M+H)+: 검출되지 않음.
파트 D:
N,N-디메틸-1-[(2S)-1-(페닐메틸)-2-피페리디닐]메탄아민
(2S)-N,N-디메틸-1-(페닐카르보닐)-2-피페리딘카르복스아미드 (883 mg, 3.396 mmol)를 THF 20 mL 중에 용해하고 0℃로 냉각시킨 다음, LiAlH4 (1.386 mg, 36.54 mmol)를 조금씩 첨가하였다. 상기 혼합물을 2시간 동안 80℃로 가열한 후에 실온으로 냉각되도록 하였다. 상기 반응물을 H2O (1.0 mL), 15％ 수성 NaOH (1.0 mL) 및 H2O (3.0 mL)로 순차적으로 켄칭하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 상기 내용물을 여과하고, 여액을 진공하에 농축시켜서 N,N-디메틸-1-[(2S)-1-(페닐메틸)-2-피페리디닐]메탄아민을 수득하였다 (590 mg, 75％). LCMS: (M+H)+: 233.1.
파트 E:
N,N-디메틸-1-[(2S)-2-피페리디닐]메탄아민 히드로클로라이드
N,N-디메틸-1-[(2S)-1-(페닐메틸)-2-피페리디닐]메탄아민 (590 mg, 2.539 mmol)을 MeOH (20 mL) 및 1 N HCl (5.5 mL, 5.5 mmol)의 혼합물 중에 용해하고 탈기시켜 아르곤하에 두었다. 10％ Pd/C (117 mg)를 첨가하고, 상기 내용물을 철저하게 탈기시켜 수소 벌룬하에 2시간 동안 두었다. 이어서, 상기 내용물을 탈기시키고, Pd/C를 섬유유리 필터를 통해 여과하여 제거하면서 MeOH로 세척하였다. 여액을 진공하에 농축시켜서 순수한 N,N-디메틸-1-[(2S)-2-피페리디닐]메탄아민 히드로클로라이드를 수득하였다 (425 mg, 78％). LCMS: (M+H)+: 검출되지 않음.
파트 F:
[(2R)-3-[2-(2-클로로-6-{(2S)-2-[(디메틸아미노)메틸]-1-피페리디닐}-5-플루오로-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-[2-(2-클로로-6-{(2S)-2-[(디메틸아미노)메틸]-1-피페리디닐}-5-플루오로-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 E에 따라 제조하되, 파트 A에서 이소프로필 아민 대신에 N,N-디메틸-1-[(2S)-2-피페리디닐]메탄아민 히드로클로라이드를 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 501.1.
실시예 268
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2S)-2-페닐-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00296
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2S)-2-페닐-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 E에 따라 제조하되, 파트 A에서 이소프로필 아민 대신에 (S)-노르니코틴 [J. Org. Chem. 2001, 66, 6305-6312]을 사용하고, 파트 B에서 DCM을 함유한 에테르 중 2.0 M HCl을 용매로서 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 506.2/508.2.
실시예 269
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-((2S)-2-{[메틸(1-메틸에틸)아미노]메틸}-1-피롤리디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00297
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-((2S)-2-{[메틸(1-메틸에틸)아미노]메틸}-1-피롤리디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 실시예 264와 유사한 방식으로 제조하되, 파트 A에서 피페리딘 대신에 시판되는 메틸(1-메틸에틸)아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 514.3.
실시예 270
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-((2S)-2-{[메틸(1-메틸에틸)아미노]메틸}-1-피롤리디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00298
{(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(6-{(2S)-2-[(디메틸아미노)메틸]-1-피롤리디닐}-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}히드록시포름아미드를 실시예 243과 유사한 방식으로 제조하되, 파트 A에서 모르폴린 대신에 시판되는 메틸(1-메틸에틸)아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 494.2.
실시예 271
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-((2S)-2-{[메틸(프로필)아미노]메틸}-1-피롤리디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00299
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-((2S)-2-{[메틸(프로필)아미노]메틸}-1-피롤리디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 실시예 243과 유사한 방식으로 제조하되, 파트 A에서 모르폴린 대신에 시판되는 N-메틸-1-프로판아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 494.4.
실시예 272
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-((2S)-2-{[메틸(프로필)아미노]메틸}-1-피롤리디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00300
[(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-((2S)-2-{[메틸(프로필)아미노]메틸}-1-피롤리디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 실시예 264와 유사한 방식으로 제조하되, 파트 A에서 피페리딘 대신에 시판되는 N-메틸-1-프로판아민을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 514.3.
실시예 273
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(4-메틸-1-피페라지닐)(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00301
파트 A:
4-메틸-N-(1,3-티아졸-2-일메틸)-1-피페라진아민
시판되는 1,3-티아졸-2-카르브알데히드 (0.388 mL, 4.42 mmol) 및 시판되는 4-메틸-1-피페라진아민 (0.532 mL, 4.42 mmol)을 MeOH (20 mL) 중에 용해하고 0℃로 냉각시켰다. 이어서, 메틸 오렌지 지시제 및 충분량의 디옥산 중 4 M HCl을 첨가하여 반응 혼합물을 산성 및 밝은 핑크빛 색상으로 유지하였다. 이어서, 시아노수소화붕소나트륨 (0.555 g, 8.84 mmol)을 첨가하고, 반응물이 교반되도록 두었다. 상기 반응 혼합물을 증발시켜서 조 4-메틸-N-(1,3-티아졸-2-일메틸)-1-피페라진아민을 베이지색-황색 고체로서 수득하였다 (2.2168 g). LCMS: (M+H)+ = 213.0.
파트 B:
트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(4-메틸-1-피페라지닐)(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트
4-메틸-N-(1,3-티아졸-2-일메틸)-1-피페라진아민 (2.2169 g, 10.44 mmol)을 THF (30 mL) 및 트리에틸아민 (4.37 mL, 31.3 mmol) 중에 용해하였다. 이어서, 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-(2,6-디클로로-5-플루오로-4-피리미디닐)-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트 (3.89 g, 7.83 mmol) 및 DMSO (5 mL)를 첨가하였다. 상기 반응물이 밤새 교반되도록 두었다. THF를 증발 제거하고, 상기 혼합물을 물로 희석하였다. 수성 층을 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기물을 건조 (Na2SO4)시키고 증발시켰다. 실리카겔 크로마토그래피 및 RP-HPLC로 정제하여 트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(4-메틸-1-피페라지닐)(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트를 수득하였다 (0.2014 g, 3％). LCMS: (M+H)+ = 674.6.
파트 C:
2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-N-(4-메틸-1-피페라지닐)-N-(1,3-티아졸-2-일메틸)-4-피리미딘아민
트리스(1,1-디메틸에틸) 2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(4-메틸-1-피페라지닐)(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}-1,1,2-히드라진트리카르복실레이트 (0.2014 g, 0.299 mmol)를 질소 대기하에 DCM (20 mL) 중에 용해하였다. 이어서, 2 M HCl (2.99 mL, 5.98 mmol)을 첨가하고, 반응물을 밤새 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 증발시켜서 조 2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-N-(4-메틸-1-피페라지닐)-N-(1,3-티아졸-2-일메틸)-4-피리미딘아민을 황색 고체로서 수득하였다 (0.1683 g). LCMS: (M+H)+ = 373.0.
파트 D:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(4-메틸-1-피페라지닐)(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드
(2R)-4-에틸-2-{[포르밀(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)아미노]메틸}헵탄산 (0.3764 g, 1.257 mmol), 2-클로로-5-플루오로-6-히드라지노-N-(4-메틸-1-피페라지닐)-N-(1,3-티아졸-2-일메틸)-4-피리미딘아민 (0.1683 g), NMM (0.298 mL, 2.71 mmol), HOAt (0.074 g, 0.542 mmol) 및 EDC (0.104 g, 0.542 mmol)를 DMF (10 mL) 중에 용해하였다. 상기 반응물이 밤새 교반되도록 두었다. RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(4-메틸-1-피페라지닐)(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드를 갈색 오일성 고체로서 수득하였다 (0.1688 g). LCMS: (M+H)+ = 655.4.
파트 E:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(4-메틸-1-피페라지닐)(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(4-메틸-1-피페라지닐)(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필](테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)포름아미드 (0.1688 g, 0.258 mmol)를 물 (2 mL) 및 아세트산 (8 mL) 중에 녹였다. 상기 반응물이 밤새 교반되도록 두었다. RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(4-메틸-1-피페라지닐)(1,3-티아졸-2-일메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 베이지색 고체로서 수득하였다 (0.0483 g, 25％). LCMS: (M+H)+ = 571.2.
실시예 274
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2S)-2-(3H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-d]피리미딘-3-일메틸)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00302
파트 A:
1,1-디메틸에틸 (2S)-2-({[2-클로로-5-(디히드록시아미노)-4-피리미디닐]아미노}메틸)-1-피롤리딘카르복실레이트
2,4-디클로로-5-(디히드록시아미노)피리미딘 (2.5 g, 12.75 mmol), 1,1-디메틸에틸 (2S)-2-(아미노메틸)-1-피롤리딘카르복실레이트 (1.277 g, 6.38 mmol) 및 DIEA (1.114 mL, 6.38 mmol)를 DCM (75 mL) 중에 용해하였다. 상기 혼합물을 1시간 동안 교반한 후, 반응이 LCMS로 측정된 바와 같이 완료되었을 때, 용액을 진공하에 농축시켰다. 상기 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피 (콤비플래쉬, 0→100％ 에틸 아세테이트/헥산)로 정제하여 1,1-디메틸에틸 (2S)-2-({[2-클로로-5-(디히드록시아미노)-4-피리미디닐]아미노}메틸)-1-피롤리딘카르복실레이트를 수득하였다 (1.6362 g, 71％). LCMS: (M+H)+: 357.8.
파트 B:
1,1-디메틸에틸 (2S)-2-{[(5-아미노-4-피리미디닐)아미노]메틸}-1-피롤리딘카르복실레이트
1,1-디메틸에틸 (2S)-2-({[2-클로로-5-(디히드록시아미노)-4-피리미디닐]아미노}메틸)-1-피롤리딘카르복실레이트 (2.064 g, 5.74 mmol)를 MeOH (40 mL) 중에 용해하고 탈기시켜 아르곤하에 두었다. 10％ Pd/C (619 mg)를 첨가하고, 상기 내용물을 철저하게 탈기시켜 수소 벌룬하에 2시간 동안 두었다. 이어서, 상기 내용물을 탈기시키고, Pd/C를 섬유유리 필터를 통해 여과하여 제거하면서 MeOH로 세척하였다. 여액을 진공하에 농축시켜서 순수한 1,1-디메틸에틸 (2S)-2-{[(5-아미노-4-피리미디닐)아미노]메틸}-1-피롤리딘카르복실레이트를 수득하였다 (1.589 g, 94％). LCMS: (M+H)+: 294.1.
파트 C:
1,1-디메틸에틸 (2S)-2-(3H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-d]피리미딘-3-일메틸)-1-피롤리딘카르복실레이트
1,1-디메틸에틸 (2S)-2-{[(5-아미노-4-피리미디닐)아미노]메틸}-1-피롤리딘카르복실레이트 (1.6633 g, 5.67 mmol) 및 아질산나트륨 (469 mg, 6.80 mmol)을 아세트산 (5 mL) 및 물 (8 mL)의 혼합물 중에 용해하고, 혼합물을 1시간 동안 격렬히 교반하였다. 상기 용액을 진공하에 농축시켜서 1,1-디메틸에틸 (2S)-2-(3H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-d]피리미딘-3-일메틸)-1-피롤리딘카르복실레이트를 수득하였다 (1.98 g, >99％). LCMS: (M+H)+: 305.2.
파트 D:
3-[(2S)-2-피롤리디닐메틸]-3H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-d]피리미딘
1,1-디메틸에틸 (2S)-2-(3H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-d]피리미딘-3-일메틸)-1-피롤리딘카르복실레이트 (1.98 g, 6.54 mmol)를 CH2Cl2 (10 mL) 및 TFA (2.5 mL)의 혼합물 중에 용해하고, 실온에서 밤새 교반되도록 하였다. 반응이 LCMS로 측정되는 바와 같이 완료되었을 때, 용액을 진공하에 농축시키고, 잔류물을 CH2Cl2 (5 mL) 중에 용해하고, 1 N 수성 NaOH (30 mL)로 세척하였다. 수성 층을 CH2Cl2 (3×20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 MgSO4에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜서 3-[(2S)-2-피롤리디닐메틸]-3H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-d]피리미딘을 수득하였다 (758 mg, 57％). LCMS: (M+H)+: 205.1.
파트 E:
2,4-디클로로-5-플루오로-6-히드라지노피리미딘
MeOH (15 mL) 중 히드라진 일수화물 (289 ㎕, 5.96 mmol) 및 트리에틸아민 (830 ㎕, 5.96 mmol)에 MeOH (15 mL) 중 2,4,6-트리클로로-5-플루오로피리미딘 (1.0 g, 4.96 mmol)의 용액을 첨가하고, 상기 혼합물을 밤새 교반하였다. 반응이 LCMS로 측정되는 바와 같이 완료되었을 때, 용액을 진공하에 농축시키고, 생성된 조 생성물을 RP-HPLC로 정제하여 2,4-디클로로-5-플루오로-6-히드라지노피리미딘을 수득하였다 (358 mg, 32％). LCMS: (M+H)+: 196.9.
파트 F:
{(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(2,6-디클로로-5-플루오로-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}[(페닐메틸)옥시]포름아미드
2,4-디클로로-5-플루오로-6-히드라지노피리미딘 (358 mg 1.817 mmol), (2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산 (746 mg, 1.508 mmol) 및 HOAt (247 mg, 1.817 mmol)를 DMF 15 mL 중에 용해하였다. NMM (0.798 mL, 7.27 mmol)을 첨가한 후에 EDC (348 mg, 1.817 mmol)를 첨가하였다. 밤새 실온에서 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여 {(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(2,6-디클로로-5-플루오로-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}[(페닐메틸)옥시]포름아미드를 수득하였다 (442 mg, 50％). LCMS: (M+H)+: 483.6.
파트 G:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2S)-2-(3H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-d]피리미딘-3-일메틸)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드
{(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(2,6-디클로로-5-플루오로-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}[(페닐메틸)옥시]포름아미드 (136 mg, 0.278 mmol) 및 3-[(2S)-2-피롤리디닐메틸]-3H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-d]피리미딘 (63 mg, 0.308 mmol)을 DMSO (5 mL) 중에 용해한 후에, DIEA (59 ㎕, 0.308 mmol)를 첨가하고, 용액을 65℃에서 밤새 가열하였다. 반응이 LCMS로 측정되는 바와 같이 완료되었을 때, 용액을 진공하에 농축시키고, 생성된 조 생성물을 RP-HPLC로 정제하여 [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2S)-2-(3H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-d]피리미딘-3-일메틸)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드를 수득하였다 (43 mg, 21％). LCMS: (M+H)+: 651.6.
파트 H:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2S)-2-(3H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-d]피리미딘-3-일메틸)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2S)-2-(3H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-d]피리미딘-3-일메틸)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 E의 파트 D에 따라 제조하되, 파트 D의 [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1-메틸에틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드 대신에 [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2S)-2-(3H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-d]피리미딘-3-일메틸)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필][(페닐메틸)옥시]포름아미드를 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 562.2.
실시예 275
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(4-메틸-4,7-디아자스피로[2.5]옥트-7-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드
Figure pat00303
((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(4-메틸-4,7-디아자스피로[2.5]옥트-7-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드를 실시예 210의 파트 E 및 파트 F와 유사한 방식으로 제조하되, 파트 E에서 1-{1-[(2S)-2-피롤리디닐]시클로프로필}피롤리딘 히드로클로라이드 대신에 4-메틸-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄 디히드로클로라이드 (실시예 172)를 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 463.8.
실시예 276
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로부틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00304
파트 A:
(2R)-3-시클로부틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산
(2R)-3-시클로부틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산을 중간체 A와 유사한 방식으로 제조할 수 있되, 파트 A에서 3-시클로펜틸프로피오닐 클로라이드 대신에 브로모메틸 시클로부탄을 사용하였다.
파트 B:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로부틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로부틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 실시예 63과 유사한 방식으로 제조하되, 파트 F에서 (2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산 대신에 (2R)-3-시클로부틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 457.6.
실시예 277
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로부틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00305
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로부틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 실시예 64와 유사한 방식으로 제조하되, 파트 F에서 (2R)-3-시클로펜틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산 대신에 (2R)-3-시클로부틸-2-({포르밀[(페닐메틸)옥시]아미노}메틸)프로판산 (실시예 281)을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 465.8.
실시예 278
메틸 ((3S)-1-{2-클로로-6-[2-((2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(히드록시)아미노]메틸}프로파노일)히드라지노]-5-플루오로-4-피리미디닐}-3-피롤리디닐)카르바메이트
Figure pat00306
파트 A:
페닐메틸 (3S)-3-{[(메틸옥시)카르보닐]아미노}-1-피롤리딘카르복실레이트
중탄산나트륨 (2.073 g, 24.68 mmol)을 물 (20.00 mL) 및 DCM (20 mL)의 혼합물 중에 용해하고, 페닐메틸 (3S)-3-아미노-1-피롤리딘카르복실레이트 (2.88 g, 11.22 mmol)를 첨가한 후에 메틸클로로포르메이트 (0.953 mL, 12.34 mmol)를 사용하였다. 상기 혼합물을 6 시간 동안 교반하였다. 이어서, 2상 혼합물을 분리하고, 수성 상을 DCM으로 1회 추출하였다. 합한 유기물을 황산나트륨에서 건조시켜 여과하고 증발시켰다. 이어서, 잔류 물질을 실리카겔 크로마토그래피 (헥산 중 0→100％ EtoAc)를 통해 정제하여 페닐메틸 (3S)-3-{[(메틸옥시)카르보닐]아미노}-1-피롤리딘카르복실레이트를 투명한 오일로서 수득하였다 (2 g, 64％). LCMS: (M+H)+: 278.9.
파트 B:
메틸 (3S)-3-피롤리디닐카르바메이트
페닐메틸 (3S)-3-{[(메틸옥시)카르보닐]아미노}-1-피롤리딘카르복실레이트 (2.00 g, 7.19 mmol)를 탈기된 메탄올 (20 mL) 중에 용해하고, Pd/C (0.4 g, 0.376 mmol)를 첨가하였다. 반응 용기를 배기시키고, 벌룬을 통해 수소로 재-충전시켰다. 상기 반응물을 2시간 동안 교반하고, 이 시간 후에 촉매를 셀라이트를 통해 여과하여 제거하였다. 용매를 증발시켜 메틸 (3S)-3-피롤리디닐카르바메이트를 투명한 오일로서 수득하였다 (0.99 g, 76％).
파트 C:
메틸 ((3S)-1-{2-클로로-6-[2-((2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(히드록시)아미노]메틸}프로파노일)히드라지노]-5-플루오로-4-피리미디닐}-3-피롤리디닐)카르바메이트
메틸 ((3S)-1-{2-클로로-6-[2-((2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(히드록시)아미노]메틸}프로파노일)히드라지노]-5-플루오로-4-피리미디닐}-3-피롤리디닐)카르바메이트를 일반적인 절차 E에 따라 제조하되, 파트 A에서 이소프로필 아민 대신에 메틸 (3S)-3-피롤리디닐카르바메이트를 사용하고, 파트 B에서 DCM을 함유한 에테르 중 2.0 M HCl을 용매로서 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 502.2/504.1.
실시예 279
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2S)-2-(3H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피리딘-3-일메틸)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00307
파트 A:
3-[(2S)-2-피롤리디닐메틸]-3H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피리딘
3-[(2S)-2-피롤리디닐메틸]-3H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-6]피리딘을 실시예 279의 파트 A 내지 파트 D와 유사한 방식으로 제조하되, 파트 A에서 2,4-디클로로-5-(디히드록시아미노)피리미딘 대신에 시판되는 2-클로로-3-(디히드록시아미노)피리딘을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 204.1.
파트 B:
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2S)-2-(3H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피리딘-3-일메틸)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
[(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2S)-2-(3H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피리딘-3-일메틸)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 E에 따라 제조하되, 파트 A에서 이소프로필 아민 대신에 3-[(2S)-2-피롤리디닐메틸]-3H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-6]피리딘을 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 561.2.
실시예 280
[(2R)-3-[2-(2-클로로-5-플루오로-6-{[2-(2-푸라닐)에틸]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00308
[(2R)-3-[2-(2-클로로-5-플루오로-6-{[2-(2-푸라닐)에틸]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 E에 따라 제조하되, 파트 A에서 이소프로필 아민 대신에 [2-(2-푸라닐)에틸]아민 (WO 9611210, 1996)을 사용하고, 파트 B에서 DCM을 함유한 에테르 중 2.0 M HCl을 용매로서 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 469.2/471.1.
실시예 281
[(2R)-3-[2-(2-클로로-5-플루오로-6-{[2-(3-푸라닐)에틸]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
Figure pat00309
[(2R)-3-[2-(2-클로로-5-플루오로-6-{[2-(3-푸라닐)에틸]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드를 일반적인 절차 E에 따라 제조하되, 파트 A에서 이소프로필 아민 대신에 [2-(3-푸라닐)에틸]아민 (WO 9611210, 1996)을 사용하고, 파트 B에서 DCM을 함유한 에테르 중 2.0 M HCl을 용매로서 사용하였다. LCMS: (M+H)+: 469.2/471.1.
다형체 실시예
실시예 1P
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드의 다형질 형태 1.
상기 형태 1을 실시예 24의 파트 L의 일반적인 절차에 대한 별법의 절차에 따라 제조하였다.
별법의 절차
에틸 아세테이트 (0.5 mL)를 결정질 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 (형태 1, 30.8 mg)에 첨가하였다. 생성된 슬러리를 약 48시간에 걸쳐 0에서 40℃의 온도-주기에 16회 적용하였다. 이 시점에서 슬러리 중의 고체는 에틸 아세테이트 용매화물이었다. 생성된 고체 및 상등액을 실온에서 여과로 분리하였다. 상기 고체를 주변 실험실 조건하에서 1시간 동안 진공 건조시키고, 용매화물을 형태 1로 탈용매화시켰다.
실시예 2P
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드의 다형질 형태 2.
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 (형태 1) 5.3 mg을 물 500 ㎕ 중에 슬러리화시켰다. 샘플을 힛건(heat gun)으로 약간 가열하여 용해도를 증가시켰지만, 고체는 결코 완전히 용해되지 않았다. 상기 고체를 주변 실험실 조건하에서 진공 건조시키고, 생성된 고체를 분석적으로 특징규명하였고, 형태 2인 것으로 밝혀졌다.
별법의 절차
반응기를 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 (형태 1, 1.0 당량) 및 물 (20 부피)로 충전시켰다. 현탁액을 T = 20℃에서 약 60시간에 걸쳐 교반하였다. 현탁액을 여과하고, 물 2.5 부피로 2회 세척하였다. 물질을 감압하에 T = 60℃에서 건조시키고, 이것을 분쇄하였다 (콰드로 코밀(Quadro Comil), 스텐레스 스틸, 메쉬 크기: 1 mm). [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 형태 2를 백색 고체로서 수득하였다.
실시예 3P
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드의 다형질 형태 3
1-프로판올 (0.5 mL)을 결정질 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 (형태 1, 30.8 mg)에 첨가하였다. 생성된 슬러리를 약 48시간에 걸쳐 0에서 40℃의 온도-주기에 16회 적용하였다. 생성된 고체 및 상등액을 실온에서 여과로 분리하였다. 상기 고체를 주변 실험실 조건하에서 1시간 동안 진공 건조시켰다. 생성된 고체를 분석적으로 특징규명하였고, 형태 3인 것으로 밝혀졌다.
[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드의 다형질 형태의 분석
형태 1 및 형태 2는 FT-IR, FT-라만, XRPD, DSC 및 TGA로 분석하였다. 형태 3은 FT-라만, XRPD, DSC 및 TGA로 분석하였다. 분석에 사용된 샘플은 당업계의 표준 방법에 의해 주변 조건하에서 준비하였다. 일반적으로 1 내지 5 mg의 무수 형태 1, 형태 2 또는 형태 3을 기기/샘플 홀더 위에 놓았다. 다음의 기기 및 파라미터를 사용하였다.
FT-IR
기기: 써모 마그나 MidIR 시스템
주요 작동 파라미터:
샘플 스캔 횟수: 64
해상도: 4.000 cm-1
제로 충진도: 2
아포다이제이션(Apodization): 하프-겐젤(Happ-Genzel)
위상차 보정: 메르쯔(Mertz)
백그라운드 스캔 횟수: 64
검출기: DTGS
광선분할기: KBr
샘플링 보조기: 써모 스마트 듀라스코프(Thermo Smart DuraScope) ATR, 다이아몬드(diamond) ATR 요소
FT-라만
기기: 써모 FT-라만 시스템 960 분광계
주요 작동 파라미터:
검출기: 액체 질소-냉각 게르마늄
광선분할기: CaF2
샘플 스캔 횟수: 64
해상도: 4.0 cm-1
제로 충진도: 2
아포다이제이션: 하프-겐젤
위상차 보정: 파워 스펙트럼
라만 레이저 주파수: 9393.6416 cm-1
XRPD
기기: 브루커 AXS PXRD 제너럴 에리어 검출기 회절 시스템
주요 작동 파라미터:
스캔 범위: 3-42도 2-쎄타
발전기 전원: 40 kV, 40 mA
조사 광원: Cu Ka
스캔 유형: 커플링된 스캔
프레임 수: 3개 프레임
프레임 당 시간: 5분
샘플 진동: 샘플 크기에 따라 0.1 내지 0.5 mm 진동
검출기 거리: 25 cm
필터/분광기: 단일 괴벨 미러(Goebel Mirror)
검출기 유형: 제너럴 에리어 검출기 회절
열 분석
기기: TA 인스트러먼츠 써멀 어낼러시스 시스템, 모델 DSC Q100
주요 작동 파라미터:
모듈-DSC 표준 셀 FC
방법-경사법
팬: 밀폐된 알루미늄
퍼징 기체: N2, 40 mL/분
셀# FC-00615
방법 1: 30.00℃에서 평형화
2: 350.00℃까지 15.00℃/분씩 경사 증가
기기: TA 인스트러먼츠 써멀 어낼러시스 시스템, 모델 TGA Q500
주요 작동 파라미터:
방법-경사법
퍼징 기체: N2, 40 mL/분
바탕 기체: N2, 40 mL/분
방법 1: 300.00℃까지 15.00℃/분씩 경사 증가

Claims (16)

  1. 하기 화학식 I에 따른 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용가능한 염:
    <화학식 I>
    Figure pat00310

    상기 식에서,
    R1은 -(CH2)n-C3-C6 시클로알킬이고,
    R2는 C1-C3 알킬, 시클로프로필, C1-C3 알콕시, C1-C3 할로알킬, C1-C3 알킬술파닐, 5원 헤테로아릴, 5원 헤테로시클로알킬, 할로, 히드록시메틸 및 -NRaRb로 구성된 군에서 선택되고,
    R3은 -NR4R5, 할로, 1개 내지 3개의 R6기로 치환되거나 치환되지 않은 페닐, 및 1개 내지 3개의 R6기로 치환되거나 치환되지 않은 헤테로아릴로 구성된 군에서 선택되고,
    R4는 H, 1개 또는 2개의 R7기로 치환되거나 치환되지 않은 C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시, 1개 내지 3개의 R6기로 치환되거나 치환되지 않은 C3-C6 시클로알킬, 1개 내지 3개의 R6기로 치환되거나 치환되지 않은 헤테로시클로알킬, 1개 내지 3개의 R6기로 치환되거나 치환되지 않은 헤테로아릴, 및 1개 내지 3개의 R6기로 치환되거나 치환되지 않은 페닐로 구성된 군에서 선택되고,
    R5는 H, 1개 또는 2개의 R7기로 치환되거나 치환되지 않은 C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시, 1개 내지 3개의 R6기로 치환되거나 치환되지 않은 C3-C6 시클로알킬, 1개 내지 3개의 R6기로 치환되거나 치환되지 않은 헤테로시클로알킬, 1개 내지 3개의 R6기로 치환되거나 치환되지 않은 헤테로아릴, 및 1개 내지 3개의 R6기로 치환되거나 치환되지 않은 페닐로부터 선택되거나, 또는
    R4와 R5가 이것들이 부착된 N-원자와 함께 연결되어 1개 내지 3개의 R6기로 치환되거나 치환되지 않은 헤테로시클로알킬기를 형성하고,
    여기에서, 각각의 헤테로시클로알킬기는 1개 내지 4개의 헤테로원자를 고리 내의 구성원 원자로서 함유하는 비방향족 포화 또는 불포화 모노시클릭 고리계 또는 비방향족 포화 또는 불포화 융합, 스피로 또는 브릿지 바이시클릭 고리계이고,
    이 중, 모노시클릭 헤테로시클로알킬 고리는 4개 내지 7개의 구성원 원자를 갖고, 바이시클릭 헤테로시클로알킬 고리는 7개 내지 11개의 구성원 원자를 갖고,
    여기에서, 각각의 헤테로아릴은 각각 1개 내지 5개의 상이한 헤테로원자를 고리 내의 구성원 원자로서 함유하는 방향족 모노시클릭 또는 방향족 융합된 바이시클릭 헤테로아릴 고리이고,
    이 중, 모노시클릭 헤테로아릴 고리는 5개 또는 6개의 구성원 원자를 갖고, 바이시클릭 헤테로아릴 고리는 8개 내지 10개의 구성원 원자를 갖고,
    상기 헤테로아릴 또는 헤테로시클로알킬에서 정의된 헤테로원자는 질소 원자, 황 원자, 또는 산소 원자이고;
    상기 헤테로아릴 또는 헤테로시클로알킬에서 정의된 구성원 원자는 쇄 또는 고리를 형성하는 원자이고,
    각각의 R6은 1개 내지 3개의 R7기로 치환되거나 치환되지 않은 C1-C6 알킬, 히드록시, C1-C3 알콕시, -C(O)NRaRb, -C(O)Rc, -C(O)ORc, 헤테로시클로알킬, 1개의 -NRaRb 또는 피롤리디닐로 치환되거나 치환되지 않은 C3-C6 시클로알킬, 옥소, 시아노, -NRaRb, 페닐, 헤테로아릴 및 할로로 구성된 군에서 독립적으로 선택되고,
    각각의 R7은 히드록시, C1-C3 알콕시, 할로, 페닐, 시아노, -NRaRb, -C(O)NRaRb, -C(O)Rc, 1개의 히드록시 또는 헤테로시클로알킬 또는 -NRaRb 기로 치환되거나 치환되지 않은 C3-C6 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 및 1개의 메틸 또는 NRaRb 또는 히드록시로 치환되거나 치환되지 않은 헤테로아릴로 구성된 군에서 독립적으로 선택되고,
    각각의 Ra는 H, 및 1개의 히드록시 또는 메톡시 또는 디메틸아민으로 치환되거나 치환되지 않은 C1-C3 알킬로 구성된 군에서 각각 독립적으로 선택되고,
    각각의 Rb는 H 및 C1-C3 알킬로 구성된 군에서 독립적으로 선택되고,
    각각의 Rc는 1개의 메톡시로 치환되거나 치환되지 않은 C1-C3 알킬, 페닐, 헤테로시클로알킬 및 헤테로아릴로 구성된 군에서 독립적으로 선택되며,
    n은 0 내지 2의 정수이다.
  2. 제1항에 있어서, R2가 C1-C3 알킬, C1-C3 알콕시, C1-C3 할로알킬, C1-C3 알킬술파닐 또는 할로인 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용가능한 염.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, R3이 -NR4R5인 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용가능한 염.
  4. 제3항에 있어서, R3이 -NR4R5이고, R4와 R5가 이것들이 부착된 N-원자와 함께 연결되어 1개 내지 3개의 R6기로 치환되거나 치환되지 않은 헤테로시클로알킬기를 형성하는 것인 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용가능한 염.
  5. 제4항에 있어서, R3이 -NR4R5이고, R4와 R5가 이것들이 부착된 N-원자와 함께 연결되어 아제티디닐, 피롤리디닐, 피페라지닐, 모르폴리닐, 2,5-디히드로-1H-피롤릴, 헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-(1H)-일, 이속사졸리디닐, 헥사히드로피롤로[1,2-a]피라진-(1H)-일 또는 2,5-디아자바이시클로[2.2.1]헵틸을 형성하고, 이것 각각은 1개 내지 3개의 R6기로 치환되거나 치환되지 않은 것인 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용가능한 염.
  6. ((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(1-피롤리디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드,
    [(2R)-3-{2-[6-(1-아제티디닐)-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
    [(2R)-3-{2-[6-(1-아제티디닐)-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
    [(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(4-메틸-1-피페라지닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
    [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1-메틸에틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
    [(2R)-3-{2-[6-(1-아제티디닐)-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
    ((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(4-모르폴리닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드,
    [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[메틸(메틸옥시)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
    ((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-(2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드,
    ((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-메틸-6-(1,3-티아졸리딘-3-일)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드,
    [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[3-(메틸옥시)-1-아제티디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
    [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(3R)-3-(메틸옥시)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
    [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(3S)-3-(메틸옥시)-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
    [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-2-메틸-6-[(1-메틸에틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
    {(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(5-플루오로-2-메틸-6-{메틸[2-(메틸옥시)에틸]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}히드록시포름아미드,
    [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[에틸(메틸)아미노]-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
    [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(2S)-2-(히드록시메틸)-1-피롤리디닐]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
    [(2R)-3-{2-[6-(시클로부틸아미노)-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
    [(2R)-3-{2-[6-(시클로펜틸아미노)-5-플루오로-2-메틸-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
    [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(3R)-3-(히드록시메틸)-1-피롤리디닐]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
    [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(3S)-3-(히드록시메틸)-1-피롤리디닐]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
    [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
    ((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[2-에틸-5-플루오로-6-(4-메틸-1-피페라지닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드,
    N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[2-에틸-5-플루오로-6-(2-이속사졸리디닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드,
    N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(3R)-3-(디메틸아미노)-1-피롤리디닐]-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드,
    N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(3S)-3-(디메틸아미노)-1-피롤리디닐]-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드,
    N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{2-에틸-5-플루오로-6-[(3S)-3-히드록시-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드,
    N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{2-에틸-5-플루오로-6-[(3R)-3-히드록시-1-피롤리디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드,
    N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-(시클로프로필아미노)-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드,
    N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[2-에틸-6-(4-에틸-1-피페라지닐)-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드,
    N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{2-에틸-5-플루오로-6-[4-(2-히드록시에틸)-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드,
    N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[2-에틸-5-플루오로-6-(메틸아미노)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드,
    N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[2-에틸-6-(에틸아미노)-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드,
    N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{2-에틸-5-플루오로-6-[4-(1-메틸에틸)-1-피페라지닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드,
    1-(6-{2-[(2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(히드록시)아미노]메틸}프로파노일]히드라지노}-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐)-N,N-디메틸-L-프롤린아미드,
    N-{(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-[2-(6-{[2-(디메틸아미노)에틸](메틸)아미노}-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐)히드라지노]-3-옥소프로필}-N-히드록시포름아미드,
    N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(3S)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드,
    N-[(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{6-[(3R)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-2-에틸-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]-N-히드록시포름아미드,
    ((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-(4-메틸-1-피페라지닐)-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드,
    ((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-(에틸아미노)-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드,
    ((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-(메틸아미노)-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드,
    ((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-[(3S)-3-히드록시-1-피롤리디닐]-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드,
    ((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-(디메틸아미노)-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드,
    ((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-2-(메틸티오)-6-(프로필아미노)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드,
    ((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-{[2-(메틸옥시)에틸]아미노}-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드,
    1-[6-[2-((2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(히드록시)아미노]메틸}프로파노일)히드라지노]-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]-N,N-디메틸-L-프롤린아미드,
    ((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[5-플루오로-6-[(3R)-3-히드록시-1-피롤리디닐]-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드,
    ((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-[(3R)-3-(디메틸아미노)-1-피롤리디닐]-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드,
    ((2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-{2-[6-(4-에틸-1-피페라지닐)-5-플루오로-2-(메틸티오)-4-피리미디닐]히드라지노}-3-옥소프로필)히드록시포름아미드,
    [(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(4-모르폴리닐)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
    [(2R)-3-{2-[6-(1-아제티디닐)-2-클로로-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
    [(2R)-3-{2-[2-클로로-6-(4-에틸-1-피페라지닐)-5-플루오로-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
    [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(2-히드록시에틸)(메틸)아미노]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
    [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[3-(메틸옥시)-1-아제티디닐]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
    [(2R)-3-[2-(2-클로로-5-플루오로-6-{메틸[2-(메틸옥시)에틸]아미노}-4-피리미디닐)히드라지노]-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
    [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(8aS)-헥사히드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
    [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(1S,4S)-5-메틸-2,5-디아자바이시클로[2.2.1]헵트-2-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
    1-{6-클로로-2-[2-((2R)-3-시클로펜틸-2-{[포르밀(히드록시)아미노]메틸}프로파노일)히드라지노]-5-플루오로-4-피리미디닐}-N,N-디메틸-L-프롤린아미드,
    [(2R)-3-{2-[2-클로로-5-플루오로-6-(프로필아미노)-4-피리미디닐]히드라지노}-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
    [(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(3S)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
    [(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(3R)-3,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
    [(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(2S)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드,
    [(2R)-3-(2-{2-클로로-6-[(2R)-2,4-디메틸-1-피페라지닐]-5-플루오로-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드, 및
    [(2R)-3-(2-{2-클로로-5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-4-피리미디닐}히드라지노)-2-(시클로펜틸메틸)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드
    인 화합물 또는 제약학적으로 허용가능한 그의 염.
  7. 화학식
    Figure pat00311
    의 [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드 또는 그의 제약학적으로 허용가능한 염.
  8. 다음 중 하나 이상에 나타낸, [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드의 다형질 형태, 형태 1.
    도 1의 FT-IR 스펙트럼
    Figure pat00312

    도 3의 FT-라만(Raman) 스펙트럼
    Figure pat00313

    도 6의 X-선 분말 회절 패턴
    Figure pat00314

    도 9의 DSC 열분석도
    Figure pat00315

    도 12의 TGA 추적도
    Figure pat00316
  9. 2 쎄타 각도의 단위로 표현할 때 4.1±0.1°, 6.1±0.1°, 6.9±0.1°, 8.1±0.1°, 9.5±0.1°, 11.2±0.1°, 12.9±0.1°, 13.8±0.1°, 15.6±0.1° 및 18.3±0.1°로 구성된 군에서 선택된 4개 이상의 위치에서의 피크를 포함하는 X-선 회절 패턴을 특징으로 하는, [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드의 다형질 형태, 형태 1.
  10. 다음 중 하나 이상에 나타낸, [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드의 다형질 형태, 형태 2.
    도 2의 FT-IR 스펙트럼
    Figure pat00317

    도 4의 FT-라만 스펙트럼
    Figure pat00318

    도 7의 X-선 분말 회절 패턴
    Figure pat00319

    도 10의 DSC 열분석도
    Figure pat00320

    도 13의 TGA 추적도
    Figure pat00321
  11. 2 쎄타 각도의 단위로 표현할 때 7.8±0.1°, 9.5±0.1°, 12.3±0.1°, 13.2±0.1°, 15.6±0.1°, 18.3±0.1°, 19.0±0.1°, 20.6±0.1°, 21.4±0.1° 및 26.7±0.1°로 구성된 군에서 선택된 4개 이상의 위치에서의 피크를 포함하는 X-선 회절 패턴을 특징으로 하는, [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드의 다형질 형태, 형태 2.
  12. 다음 중 하나 이상에 나타낸, [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드의 다형질 형태, 형태 3.
    도 5의 FT-라만 스펙트럼
    Figure pat00322

    도 8의 X-선 분말 회절 패턴
    Figure pat00323

    도 11의 DSC 열분석도
    Figure pat00324

    도 14의 TGA 추적도
    Figure pat00325
  13. 2 쎄타 각도의 단위로 표현할 때 6.1±0.1 °, 7.5±0.1 °, 8.2±0.1 °, 9.1±0.1 °, 12.0±0.1 °, 12.8±0.1 °, 13.4±0.1 °, 16.0±0.1 °, 23.3±0.1 ° 및 27.6±0.1 °로 구성된 군에서 선택된 4개 이상의 위치에서의 피크를 포함하는 X-선 회절 패턴을 특징으로 하는, [(2R)-2-(시클로펜틸메틸)-3-(2-{5-플루오로-6-[(9aS)-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]옥사진-8(1H)-일]-2-메틸-4-피리미디닐}히드라지노)-3-옥소프로필]히드록시포름아미드의 다형질 형태, 형태 3.
  14. 유효량의 제1항 또는 제2항의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염을 포함하는 인간에서 박테리아 감염을 치료하기 위한 제약학적 조성물.
  15. 제14항에 있어서, 박테리아 감염이 스트렙토콕쿠스(Streptococcus), 스타필로콕쿠스(Staphylococcus), 모락셀라(Moraxella), 헤모필루스(Haemophilus), 나이세리아(Neisseria), 마이코플라스마(Mycoplasma), 리지오넬라(Legionella), 클라미디아(Chlamydia), 박테로이드(Bacteroides), 클로스트리듐(Clostridium), 푸소박테륨(Fusobacterium), 프로피오니박테륨(Propionibacterium) 또는 펩토스트렙토콕쿠스(Peptostreptococcus)인, 인간에서 박테리아 감염을 치료하기 위한 제약학적 조성물.
  16. 제14항에 있어서, 박테리아 감염이 귀 감염, 부비동염, 상기도 감염, 하기도 감염, 생식기 감염, 피부 및 연부 조직 감염 또는 박테리아성 심내막염인, 인간에서 박테리아 감염을 치료하기 위한 제약학적 조성물.
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