KR20150103658A - 해양 식물을 포함하는 화장품 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 눈 밑 피부의 외관을 개선시키기 위한 화장품 활성 성분에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 발명은 해양 조류인 푸쿠스 베시큘로수스(Fucus vesiculosus)의 추출물을 포함하는 화장품 활성 성분에 관한 것이다. 본 발명은 또한 눈 밑 피부의 다크 서클 출현을 감소시키기 위한 것으로서, 활성 성분으로서 해양 조류 푸쿠스 베시큘로수스의 추출물을 단독으로 또는 추가의 화장품 활성 성분과 조합으로 포함하는 국소용 화장품 조성물에 관한 것이다.

Description

해양 식물을 포함하는 화장품 조성물 {COSMETIC COMPOSITIONS COMPRISING MARINE PLANTS}

<관련출원 상호참조>

본 출원은 2012년 11월 15일 출원된 가출원 제61/726,722호의 우선권을 주장하며, 그의 명세서 및 도면은 모든 목적을 위해 본원에 참조로 포함된다.

<기술 분야>

본 발명은 눈 밑 피부의 헴 옥시게나제 유형 1의 활성을 증가시킴으로써 눈 밑의 다크 서클의 외관을 포함하여 눈 밑 피부의 외관을 개선시키기 위한 화장품 활성 성분에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 발명은 해양 조류인 푸쿠스 베시큘로수스(Fucus vesiculosus)의 추출물을 포함하는 화장품 활성 성분에 관한 것이다.

본 발명은 또한 눈 밑 피부의 다크 서클의 출현을 감소시키기 위해, 활성 성분으로서 해양 조류 푸쿠스 베시큘로수스의 추출물을 단독으로 또는 추가의 화장품 활성 성분과 조합으로 포함하는 국소용 화장품 조성물에 관한 것이다.

눈 밑 피부의 다크 서클은 피로 및/또는 노화의 전체 외관에 기여할 수 있으며, 보다 젊고 활기 넘치는 외양을 달성하기 위해 그와 같은 다크 서클의 출현을 감소시키는 것이 매우 바람직하다. 따라서, 시중에는 이러한 다크 서클의 출현을 감소시키는 것을 주장하는 다수의 화장품 또는 피부 관리 제품이 존재한다.

이러한 다크 서클은 여러가지 원인으로 생기지만, 주로 헴 분해 대사산물, 염증, 및 멜라닌 축적에 기인한다. 헴은 혈액의 주성분인 헤모글로빈과 같은 헴 단백질의 보결 분자단이다. 헴은 확장된 혈관에 의해 누출되어 유리 헴이 되며, 이는 유리 라디칼의 생성을 촉매하고 전-염증성 및 전-산화성이다. 헴 옥시게나제는 헴의 빌리베르딘으로의 분해를 촉매하는 속도 제한 효소로서, 빌리베르딘은 추후에 빌리루빈, 일산화탄소 및 철로 전환되며, 이는 페리틴에 저장될 것이고, 이들 모두는 잘 기술되어 있는 항산화 및 항염증 특성을 갖는다. 헴 옥시게나제 1 (HO-1)은 유도가능한 이소형이다. HO-1을 자극하면 다시금 헴의 스캐빈징을 자극함으로써 다크 서클의 출현을 감소시킨다. 따라서, 눈 밑 피부에서 HO-1의 생성을 자극할 수 있는 화장품 활성 성분을 갖는 것이 바람직하다.

또한, 다수의 다크 서클 관여 화장품 조성물은 "피곤한 눈" 외관을 더욱 감소시키기 위하여 눈 영역에 발생하는 추가의 피부 결함에 관여한다. 예를 들어, 다크 서클 관여 제품은 종종 눈 영역의 붓기 (즉, "아이 백(eye bag)"), 주름 및 건조 현상에 또한 관여한다. 그렇게 하기 위해서는, 제품은 일반적으로 각각이 특정 유형의 피부 결함 중 하나에 관련된 것인 다수의 화장품 활성 성분을 함유한다. 다수의 활성 성분을 사용하는 것은 이러한 제품의 제형화를 어렵게할 뿐만 아니라 원료 비용을 증가시킨다. 따라서, 눈 영역과 관련된 다수의 미용상 문제점에 관여할 수 있는 단일의 화장품 활성 성분을 갖는 것이 바람직하다.

푸쿠스 베시큘로수스는 또한 일반적으로는 블래더랙(bladderwrack) 또는 록 위드(rock weed)로도 알려져 있으며, 대서양의 해안을 따라 연안/낮은 조간대에서 자연적으로 발견되는 온대성 조류의 일종이다. 이는 또한 태평양 일부 지역 뿐만 아니라 북해 및 발트해에서도 발견될 수 있다.

해양 식물인 푸쿠스 베시큘로수스의 추출물이 피부에서 HO-1의 발현을 자극함으로써 눈 밑의 다크 서클의 원인인 것으로 알려진 헴 분해 대사산물의 제거를 돕는다는 것이 예상외로 밝혀졌다. 또한, 이러한 추출물이 혈관의 확장을 감소시키고 헴의 누출을 감소시킬 수 있는 항염증 특성과, 아이 백 및 주름의 외관을 더욱 개선시키는 항산화 특성이라는 추가의 이점을 갖는다는 것이 또한 예상외로 밝혀졌다. 이러한 추출물은 또한 콜라겐 생성을 자극함으로써 눈 영역 밑 및 주위의 피부에 잔주름 및 주름의 출현을 감소시킨다.

따라서, 푸쿠스 추출물을 포함하는 조성물을 국소 도포함으로써 눈 영역과 관련된 다수의 미용상의 문제점에 관여하고, 눈에 보다 젊고 활기 넘치는 외관을 제공할 수 있다.

본 발명의 다른 측면 및 목적은 하기 상세한 설명, 실시예 및 청구범위로부터 명백해질 것이다.

도 1a는 다양한 농도에서 푸쿠스 베시큘로수스 수성 추출물에 의한 HO1 유전자 발현의 자극을 나타내는 그래프이다.
도 1b는 다양한 농도에서 푸쿠스 베시큘로수스 PEG 추출물에 의한 HO1 유전자 발현의 자극을 나타내는 그래프이다.
도 2a는 각질세포 내의 푸쿠스 베시큘로수스 추출물에 의한 HO1 단백질 발현의 자극을 나타내는 그래프이다.
도 2b는 섬유모세포 내의 푸쿠스 베시큘로수스 추출물에 의한 HO1 단백질 발현의 자극을 나타내는 그래프이다.
도 3은 푸쿠스 베시큘로수스 추출물에 의한 항산화 효능을 나타내는 또 다른 그래프이다.
도 4는 푸쿠스 베시큘로수스 추출물에 의한 항염증 효능을 나타내는 그래프이다.
도 5는 푸쿠스 베시큘로수스 추출물에 의한 콜라겐 자극 효능을 나타내는 그래프이다.

본 발명의 푸쿠스 베시큘로수스는 천연 발생 (즉, "야생")이거나 양식된 것일 수 있다.

푸쿠스 베시큘로수스의 추출물은 관련 기술분야 통상의 기술자에게 공지된 추출법에 의해 얻어질 수 있다. 추출물은 수성 추출이나 알콜 또는 물/알콜 혼합물을 사용한 추출로 얻어질 수 있으며, 여기서 상기 알콜은 이소프로판올, 에탄올 또는 메탄올일 수 있다. 바람직하게는, 추출물은 수성 추출로부터의 것이다.

본 발명의 푸쿠스 추출물은 화장품 활성 성분으로서 총 조성물의 중량을 기준으로 약 0.1% 내지 약 10%, 바람직하게는 약 0.5% 내지 약 5%, 보다 바람직하게는 약 0.5% 내지 약 2%의 농도로 사용될 수 있다. 1% 농도에서, 각질세포 내의 HO-1 발현은 (매질 대조군에 비하여) 4배 유도되며, IL-8 생성은 (대조군에 비하여) 60% 억제된다. 2% 농도에서, 각질세포 내의 HO-1 발현은 (매질 대조군에 비하여) 8배 넘게 유도된다.

실시예 및 도면에 추가로 나타나있는 바와 같이, 본 발명의 화장품 활성 성분은 눈 밑의 피부에 도포될 때 다수의 미용상의 이점을 제공한다. 보다 구체적으로, 본 발명의 화장품 활성 성분은 피부 세포에서 HO-1을 자극하며, 매우 우수한 항산화 효능 및 항염증 효능을 제공한다. 본 발명의 푸쿠스 추출물은 콜라겐을 자극하여 선 및 주름의 외관에 대한 이로운 효과를 갖는 것으로 나타났다. 다수의 미용상 이점으로 인해, 본 발명의 추출물은 화장품 제형물에서 단독 화장품 활성 성분으로 사용될 수 있으나, 일부 실시양태에서는 이러한 추출물을 1종 이상의 추가의 화장품 활성 성분과 조합으로 사용하는 것이 여전히 바람직하다. 유리한 추가의 화장품 활성 성분의 예는 피부 화이트닝 또는 피부 라이트닝 화장품 성분이다.

또 다른 바람직한 화장품 조성물은 추가적 및/또는 보충적 피부 유익 효과를 갖는, 1종 이상의 추가의 해양-유래 국소용 피부 관리 성분을 포함할 수 있다. 예를 들어, 그와 같은 국소용 조성물에 사용되는 적합한 추가의 해양-유래 국소용 피부 관리 성분은, 모두가 본원에 참조로 포함되는 US 2010-0047219 (세콜리(Ceccoli) 등), US 2010-0316720 (스타츠(Statz) 등), US 2009-0142370 (시이(Shih) 등), US 7128914 (르클러크(Leclerc) 등) 및 US 7220517 (니자드(Nizard) 등)에 기재된 성분, 및 콘두루스 크리스푸스(Chondrus crispus) 추출물을 포함할 수 있다. 피부의 건강 및 물리적 외관을 개선하기 위한 다른 많은 화장품 활성 성분이 관련 기술분야 통상의 기술자에 공지되어 있다. 통상의 기술자는 원하는 효과를 최적화하기 위하여 화장품 또는 피부과용 조성물을 제형화하는 방법을 알고 있을 것이다.

본 발명의 추출물을 포함하는 화장품 조성물은 관련 기술분야 통상의 기술자에 공지된 화장품용으로 또는 피부과용으로 허용되는 성분, 예컨대, 예를 들어, 보존제, 유연제, 유화제, 계면활성제, 보습제, 증점제, 컨디셔닝제, 필름-형성제, 안정화제, 항산화제, 텍스쳐화제, 광택제, 매트화제, 가용화제, 안료, 염료, 향료 및 선스크린으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 성분을 포함할 수 있다. 문헌 [CTFA Cosmetic Ingredient Handbook, Second Edition (1992)]에는 화장품 및 제약 산업에 통상적으로 사용되는 것으로서, 특히 국소용으로 적합하고 본 발명의 활성 성분과 조합으로 사용될 수 있는 각종 화장품 및 제약 성분을 기재하고 있다. 본원에 사용되는 "화장품용으로 또는 피부과용으로 허용되는"이란 용어는 과도한 독성, 부적합성, 불안정성, 자극, 알레르기성 반응 등이 없이, 피부와 접촉시켜 사용하기에 적합하고, 합리적인 위험 대비 유익 비를 갖는 것을 의미한다.

유리하게는, 상기 언급된 조성물은 수성 또는 오일성 용액, 크림, 포트 또는 튜브 내의 수성 또는 오일성 젤, 특히 샤워 젤, 샴푸; 밀크; 에멀젼, 마이크로에멀젼 또는 나노에멀젼, 특히 수중유 또는 유중수 또는 다중화 또는 실리콘화된 것; 특히 유리 또는 플라스틱 병 또는 분배용 병 내의 로션 또는 에어로졸; 앰풀; 액체 비누; 피부과용 케이크; 연고; 포옴; 무수 제품, 바람직하게는 액체, 페이스트 또는 예컨대 스틱 형태의 고체; 및 분말로 이루어진 군으로부터 선택되는 형태로 제형화된다.

일부 실시양태에서, 본 발명의 화장품 조성물은, 특히 "노화된" 피부 (즉, 연령 40세 이상의 개인의 피부)에 도포하기 위한 주름방지제 또는 노화방지제로 알려진 유형의 것이다. 다른 실시양태에서, 화장품 조성물은 파운데이션 또는 컨실러와 같은 얼굴 피부 화장용 제품 또는 UV 손상으로부터 피부를 보호하기 위한, 대표적으로는 선스크린 또는 일광노출후 관리 제품이다.

미용상 피부 관리 방법이 또한 개시되어 있으며, 이러한 방법은 눈 밑 피부에 다크 서클의 출현을 감소시키기 위하여 이를 필요로 하는 개인의 피부에 안전하고 유효한 양의 푸쿠스 베시큘로수스 추출물을 국소적으로 도포하는 것을 포함한다. 이 방법은 특히 다크 서클과 아이 백 뿐만 아니라 잔주름 및 주름이 있을 수 있는 노화된 피부를 처리하는데 특히 유용하다.

본원에 사용되는, "안전하고 유효한 양"이란 용어는 처리될 상태를 변경하거나 원하는 피부 관리 유익 효과를 전달하기에는 충분히 높지만, 심각한 부작용을 피하기 위해 충분히 낮은, 건전한 의학적 판단 범위 내에서 합리적인 위험 대비 유익 비의 활성 성분의 양을 의미한다. 성분의 "안전하고 유효한 양"은 특정의 성분, 성분이 피부를 침투하는 능력, 사용자의 피부 상태, 관련 기술분야 통상의 기술자에 알려진 기타 유사한 인자에 따라 달라질 것이다.

눈 밑 피부의 외관을 개선시키는데 필요한 지속기간은 특정 화장품 조성물의 전체 효능 및 그 안에 함유된 푸쿠스 추출물의 양에 따라 달라질 것이지만, 한 바람직한 실시양태에서, 눈 밑 피부에서 다크 서클의 출현을 감소시키는 방법은 상기 피부에 푸쿠스 베시큘로수스 추출물을 포함하는 안전하고 유효한 양의 화장품 조성물을 1일 1회 이상 도포하는 것을 포함하며, 여기서 화장품 조성물은 약 0.1% 내지 10%의 푸쿠스 추출물을 포함한다.

<실시예>

본 발명은 하기 실시예를 통해 더욱 입증되며, 실시예는 본 발명을 제한하는 것으로 간주되어서는 안된다. 달리 언급이 없는 한, 실시예에 주어진 비율은 중량 백분율로 나타내어지는 것이다. 온도는 섭씨 온도이고, 압력은 대기압이다.

추출물

푸쿠스 베시큘로수스 바이오매스는 상용 공급자로부터 수득하였으며, 이러한 바이오매스의 각종 추출은 다음과 같이 이루어졌다.

수성 추출

1.5%의 조분쇄된 푸쿠스 베시큘로수스 바이오매스를 95%의 탈이온수에 가하고, 실온에서 밤새 프롭(prop) 혼합하였다. 생성된 혼합물을 필터 삭스(filter socks)를 통해 굵게 여과한 다음, 규조토로 된 적층-디스크 필터를 통해 미세 여과한 후, 0.22 마이크론의 최종 기공 크기로 캐니스터 필터로 여과하였다.

폴리에틸렌 글리콜 (PEG) 추출

10%의 조분쇄 푸쿠스 베시큘로수스 바이오매스를 90%의 15% PEG 용액에 가하고, 실온에서 밤새 프롭 혼합하였다. 생성된 혼합물을 필터 삭스를 통해 굵게 여과한 다음, 규조토로 된 적층-디스크 필터를 통해 미세 여과한 후, 0.22 마이크론의 최종 기공 크기로 캐니스터 필터로 여과하였다.

HO-1 자극, 항산화 효과 및 항염증 효과의 평가

푸쿠스 추출물을 제조하여 헴 옥시게나제 1 자극, 항산화 효능 및 항염증 효능에 대하여 스크리닝하였다. 시험 프로토콜은 하기와 같다.

푸쿠스 추출물에 의한 HO-1 유전자 발현의 자극 (RT-PCR)

정상 인간 상피 각질세포 및 정상 인간 피부 섬유모세포를 수성 푸쿠스 추출물 (0.5%, 1% 및 2% 농도)로 24시간 동안 처리하고, 세포를 PBS로 1회 세척한 다음, 세포로부터 전체 RNA를 추출하여 헴 옥시게나제 1 유전자에 특이적인 프라이머 세트를 사용하는 RT-PCR 반응에서 템플레이트로 사용하였다. 결과는 하우스 키핑 유전자에 의해 표준화하였으며, 비처리 대조군과 비교하여 밑이 2인 log로 나타냈다. 결과의 그래프는 도 1a에 나타나 있다. 푸쿠스 PEG 추출물 (0.1%, 0.3% 및 1% 농도)에 대하여도 동일한 검정을 수행하였다. 결과의 그래프는 도 1b에 나타나 있다.

각질세포 및 섬유모세포 내의 푸쿠스 추출물에 의한 HO-1 단백질 발현의 자극 (웨스턴 블롯)

정상 인간 상피 각질세포 (NHEK) 및 정상 인간 섬유모세포를 수성 푸쿠스 추출물 (1% 및 2% 농도)로 각각 3일 동안 처리하였다. 세포를 프로테아제 억제제의 칵테일을 함유하는 RIPA 완충액 중에서 용해시켜 웨스턴 블롯을 위해 처리하였다. 용해물을 15초 동안 음파처리하고, 12,000 g에서 10분 동안 원심분리한 다음, 상청액을 단백질 함량에 대해 BCA 검정으로 정량하였다. 이어서, 헴 옥시게나제 1 단백질 수준을, 4-20% 아크릴아미드 구배 겔 중에서 전기영동하고, 니트로셀룰로오스 막으로 전사한 다음, 마우스 항-인간 헴 옥시게나제 1 항체 및 마우스 항-베타 액틴 항체로 90분 동안 블롯팅 (단백질 로딩을 표준화하기 위해)함으로써 분석하였다. 세척 후, 막을 HRP-결합 항-마우스 항체로 60분 동안 블롯팅하였다. 헴 옥시게나제 1 및 베타-액틴 밴드를 분할하고, 코닥 이미지 스테이션(Kodak Image Station) 4000R 상에서 화학발광으로 정량하였다. 결과는 도 2a (각질세포에 대하여) 및 도 2b (섬유모세포에 대하여)에 헴 옥시게나제 1 밴드의 표준화 강도로서 나타나 있다.

항산화 검정 (DPPH 검정)

검정은 DPPH 방법으로 수행되었다. 100 μL의 샘플 또는 표준 (트롤록스(Trolox)-비타민 E)을 96 웰 플레이트 중에서 100 μl의 100 μM DPPH 용액과 혼합하여, 실온에서 20분 동안 혼합한 다음, 510 nm에서 흡광도를 판독하였다. 결과는 트롤록스 당량으로서 표시되었다. 수성 푸쿠스 추출물의 0.5%, 1 %, 2% 및 5% 농도에서의 효능의 그래프가 도 3에 나타나 있다.

항염증 검정 (IL-8 검정)

정상 인간 상피 각질세포를 푸쿠스 추출물로 처리하고, 동시에 IL-1b로 밤새 자극하였다. 상청액 중의 IL-8 수준을 ELISA 키트 (알앤디 시스템(R&D system), 미국 미네소타주 55413 미니애폴리스)로 측정하였다. 결과는 비처리된 대조군 (푸쿠스 추출물로 처리되지는 않았으나 IL-1b로 자극됨)의 백분율로 표시되었다. 수성 푸쿠스 추출물의 0.5%, 1 % 및 2% 농도에서의 효능의 그래프가 도 4에 나타나 있다.

콜라겐 자극

콜라겐 I을 본원에 참조로 포함되는, 2012년 6월 20일 출원된, "Immunoassay method for in vitro measurements"이라는 명칭의 미국 특허 출원 제13/528087호에 기재된 방법을 이용하여 검정하였다. 본 발명의 수성 푸쿠스 추출물로 처리한 후, 세포를 전용 용해 용액으로 파괴하고, 침착된 콜라겐 I을 1차 항체 인간 항-콜라겐 I (인터킴(Interchim), 프랑스 몽뤼송)에 의해 및 DELFIA 유로퓸 (퍼킨 엘머(Perkin Elmer), 프랑스 코르타뵈) 프로브에 커플링된 2차 항체 항-IgG로 검출하였다. 침착된 콜라겐의 양에 비례하는 유로퓸-관련 형광을 측정하였다. 결과는 PBS 대조군의 콜라겐 백분율로 표시되었다. 결과는 도 5에 나타나 있다.

화장품 조성물

본 발명의 화장품 활성 성분을 포함하는 예시적인 크림 화장품 제품은 다음과 같다:

액상 투명 크림

프롭 혼합기가 있는 보다 큰 비이커 중에서 하기 표 1에 기재된 상 A를 합하였다. 검이 팽윤될 때까지 혼합하였다. 75℃로 가열하였다. 부 비이커 내에서 하기 표 1에 기재된 상 B를 프롭 믹서 하에 혼합하였다. 균질해 질 때까지 수조 중에서 80℃로 가열하였다. 상 B를 상 A에 가하고, 실버슨(Silverson) 균질화기 (2000 - 4000 rpm)를 사용하여 균질해질 때까지 혼합하였다. 스위프 믹스(sweep mix) (50 rpm)로 옮기고, 냉각을 개시하였다. 40℃ 미만에서, 상 C를 상 AB에 합하여 균질해질 때까지 균질화기 (3000 - 5000 rpm)로 혼합하였다. 스위프로 다시 옮기고, 30℃로 강하시켰다.

Claims (12)

1. 푸쿠스 베시큘로수스(Fucus vesiculosus)의 추출물을 포함하는 화장품 활성 성분.
2. 제1항에 있어서, 추출물이 수성 추출물인 화장품 활성 성분.
3. 제1항의 화장품 활성 성분을 포함하는 국소용 조성물.
4. 제3항에 있어서, 화장품 활성 성분이 조성물 내로 국소용 조성물 총 중량을 기준으로 하여 약 0.01 중량% 내지 약 10 중량%의 농도로 혼입되는 것인 국소용 조성물.
5. 제3항에 있어서, 크림, 젤 또는 로션 유형 제품인 국소용 조성물.
6. 인간 피부에서 헴 옥시게나제 유형 1의 활성을 증가시키는 것을 필요로 하는 개인의 피부에 안전하고 유효한 양의 제1항의 화장품 활성 성분을 국소 도포하는 것을 포함하는, 인간 피부에서 헴 옥시게나제 유형 1의 활성을 증가시키는 방법.
7. 눈 밑 피부에 제3항의 국소용 조성물을 1일 1회 이상 도포하는 것을 포함하는, 눈 밑 피부의 다크 서클의 출현을 감소시키는 방법.
8. 제2항의 화장품 활성 성분을 포함하는 국소용 조성물.
9. 제4항에 있어서, 크림, 젤 또는 로션 유형 제품인 국소용 조성물.
10. 제3항에 있어서, 화장품 활성 성분이 조성물 내로 국소용 조성물 총 중량을 기준으로 하여 약 1 중량% 내지 약 5 중량%의 농도로 혼입되는 것인 국소용 조성물.
11. 제3항에 있어서, 화장품 활성 성분이 조성물 내로 국소용 조성물 총 중량을 기준으로 하여 약 2 중량%의 농도로 혼입되는 것인 국소용 조성물.
12. 제11항에 있어서, 크림, 젤 또는 로션 유형 제품인 국소용 조성물.

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