KR20150026579A - 생약 추출물을 유효성분으로 함유하는 알러지성 또는 비알러지성 피부 질환의 예방 및 치료용 약학 조성물 및 건강기능식품 - Google Patents

생약 추출물을 유효성분으로 함유하는 알러지성 또는 비알러지성 피부 질환의 예방 및 치료용 약학 조성물 및 건강기능식품 Download PDF

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최수임
최승민
최순정
권재원
김화진
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이진우
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Abstract

본 발명은 강황(Curcuma longa), 곰보배추(Salvia plebeia), 갯그령(Elymus mollis), 금괭이눈(Chrysosplenium pilosum var. valdepilosum), 방동사니대가리(Cyperus sanguinolentus), 산괭이눈(Chrysosplenium japonicum), 선괭이눈(Chrysosplenium trachyspernum), 및 애기괭이눈(Chrysosplenium flagelliferum)으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 생약 추출물로 조성된 생약 추출물은 가려움증 감소, 피부염증, 홍반, 부종 두께 증가와 같은 병리적 손상의 발생 억제를 확인함으로써 알러지성 또는 비알러지성 피부질환의 치료 및 예방에 유용한 조성물을 제공할 수 있다.

Description

생약 추출물을 유효성분으로 함유하는 알러지성 또는 비알러지성 피부 질환의 예방 및 치료용 약학 조성물 및 건강기능식품 {Pharmaceutical Composition and heath care food comprising the extract of complex herb an active ingredient for preventing and treating allergic or non-allergic skin disease}
본 발명은 생약 추출물을 유효성분으로 함유하는 알러지성 또는 비알러지성 피부 질환의 예방 및 치료용 약학 조성물 및 건강기능식품에 관한 것으로서, 구체적으로는 강황(Curcuma longa), 곰보배추(Salvia plebeia), 갯그령(Elymus mollis), 금괭이눈(Chrysosplenium pilosum var. valdepilosum), 방동사니대가리(Cyperus sanguinolentus), 산괭이눈(Chrysosplenium japonicum), 선괭이눈(Chrysosplenium trachyspernum), 및 애기괭이눈(Chrysosplenium flagelliferum)으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 생약 추출물을 유효성분으로 포함하는 알러지성 또는 비알러지성 피부 질환의 예방 및 치료용 약학조성물 및 건강기능식품에 관한 것이다.
[문헌 1] Incorvaria C et al., Allergy and the skin Clin Exp Immunol 153 suppl 1:27-29 (2008);
[문헌 2] Anna Paula Galli Snchez, Immunopathogenesis of psoriasis An Bras Dermatol 85(5):747-9 (2009);
[문헌 3] Werfel T, Wittmann M., T cell regulation in allergy, asthma and atopic skin disease Chem Immunol Allergy 94:101-11 (2008)).
[문헌 4] Asnis L.A et al., Cutaneous reaction to recombinant cytokine therapy J Am Acad Dermatol 24, 915-926, 1995)
[문헌 5] 정보섭 외 1인, 향약 대사전, 영림사, pp.257~258, 1998년
[문헌 6] 정보섭 외 1인, 향약 대사전, 영림사, pp.862~863, 1998년)
[참조] 식약처 식품원재료 조사 인용, http://fse.foodnara.go.kr
[참조] 국가생물종지식정보시스템, http://www.nature.go.kr
외부로부터의 자극과 항원에 대항하기 위하여 피부에는 다양한 면역세포가 존재하며 서로간의 복잡한 네트워크를 형성하며 항상성을 유지한다 (1). 상피조직은 주로 케라티노사이트로 구성되어있고 랑거한스 세포, T 세포와 대식 세포가 존재한다 (2). 대부분의 피부질환은 면역 세포에 의한 염증 반응을 특징으로 하며, 가려움, 부종, 홍반, 습진, 비늘화와 같은 임상 증상을 동반한다. 항원제시세포가 외부로부터 침입한 항원을 인지하면 화학유주인자가 분비되고 호산구와 비만세포가 유입되며, T 세포가 활성화되어 손상 조직으로 모여든다. 활성화된 T 세포로부터 분비되는 특정 사이토카인들이 과 발현되는 것은 피부염의 병리인자로서 작용한다는 것이 알려져 있다 (3). 이들은 가려움을 유발하고 염증세포의 유입을 증가시켜 아토피성 피부염, 접촉성 피부염뿐 만 아니라 건선과 같은 알러지성 혹은 비알러지성 피부 질환을 일으킨다(Incorvaria C et al., Allergy and the skin Clin Exp Immunol 153 suppl 1:27-29 (2008); Anna Paula Galli Snchez, Immunopathogenesis of psoriasis An Bras Dermatol 85(5):747-9 (2009); Werfel T, Wittmann M., T cell regulation in allergy, asthma and atopic skin disease Chem Immunol Allergy 94:101-11 (2008)).
IL-31은 활성화된 T 세포 (Th2 세포에서 더 많이 발현됨)에서 생산되는데 IL-6 사이토카인 가족 (family)에 속한다. IL-31수용체는 gp-130수용체 (GPL, or IL-31RA) 와 oncostatin M receptor (OSMR)로 구성되며, 상피세포와 케라티노사이트에 상시 존재한다. 아토피 피부염 환자의 피부조직에서는 IL-31의 발현이 현저히 증가되어 있으며 IL-4 와 IL-13 같은 Th2 사이토카인 증가를 유도한다고 여겨진다. 이들 Th2 사이토카인은 B 세포에 작용하여 IgE의 생산을 증가 시킬 수 있으며, IgE는 비만세포에 존재하는 수용체에 결합하여 히스타민등의 유리를 매개 함으로서 염증 반응과 가려움증을 일으킨다. 더불어 아토피 피부염 환자의 상피와 케라티노사이트, 환자에서 분리된 대식세포에서 IL-31수용체의 발현이 증가한다고 알려졌다. 또한 IL-31을 생쥐의 피부에 주입하거나 IL-31을 계속 발현하는 transgenic 생쥐는 심한 가려움증을 나타내며 호산구, 비만 세포의 피부 조직으로의 현저한 유입이 관찰되는 바, 피부염을 심화시키는 주요 병리 인자임을 알 수 있다. 한편 T 세포로부터 분비되는 IL-2은 T 세포의 증식을 자극하고 활성화시킨다. IL-2로 치료 받는 암환자의 경우 심한 피부 소양증을 나타내며, 피부 조직의 부종, 홍반, 괴사, 두드러기, 수포등을 형성한다는 것이 알려져 있다 (Asnis L.A et al., Cutaneous reaction to recombinant cytokine therapy J Am Acad Dermatol 24, 915-926, 1995).
강황(Curcuma longa)은 열대 아시아 원산으로서, 중국 남부 등지에서 재배되는 다년생 숙근초본의 근경으로서, 근경에는 예로부터 뿌리줄기를 약용으로 사용해왔으며, 세스쿠이테르펜, 세스쿠이테르펜알코올, d-캠퍼, d-캄펜, 투루메론, 파라-토릴메틸카르비놀, 정유, 시스퀴털핀스, 투메론, ar-투메론, 진저베렌, 디아릴헵타노이드, 알파-피넨, 아줄렌, 베타-카로텐, 시남산, 쿠르쿠민, 유게놀, 1,8-시네올, 파라-쿠마릭산, 파라-시멘, 바닐린산, 칼슘, 철, 마그네슘, 인, 칼륨, 아연, 비타민 B1, B2, B3, C등을 함유하는 것으로 알려져 있다.(정보섭 외 1인, 향약 대사전, 영림사, pp.257~258, 1998년)
곰보배추(Salvia plebeia)는 배암차즈기라고도 지칭되며, 한국 각지에 분포하는 이년생 초본으로서, 전초에는 호모플란타기닌 (homoplantaginin), 히스피둘린(hispidulin), 유파폴린(eupafolin), 등의 플라보노이드 성분, 페놀성 성분, 사포닌성분, 강심배당체 성분 등이 알리져 있으며, 기침이나 천식, 감기, 기관지염 및 염증성 질환뿐만 아니라 폐결핵, 폐렴, 폐농양, 폐암등의 기관지성 질환과 부종, 신장염, 심장병, 생리통, 냉증등에도 효과가 좋은 것으로 알려져 있다.(정보섭 외 1인, 향약 대사전, 영림사, pp.862~863, 1998년)
갯그령(Elymus mollis)은, 꽃이삭에 달린 맥각을 약용으로 사용해 왔다고 알려져 있으며, 이 맥각에는 인돌계 알칼로이드인 아그로클라빈, 엘리모클라빈이 존재하는 것으로 알려져 있다.(식약처 식품원재료 조사 인용, http://fse.foodnara.go.kr)
방동사니대가리(Cyperus sanguinolentus)는 전국에 분포하는 일년초로서, 잎은 밑부분에 달리며 폭 2-3mm로서 밑부분이 통같고 화경(花莖)보다 짧으며 엽초는 녹색이 돌지만 밑부분의 것은 갈색이다. 꽃은 7-10월에 피고 포는 2-3개이며 잎같이 보이고 화서보다 길고 옆으로 퍼진다. 화서는 대가 짧은 3-10개의 소수가 산형으로 달려서 두상으로 되며 지름 1.5-3.5cm이다. 줄기는 때로 2~3개의 가지가 갈라지기도 한다. 소수는 편평한 긴 타원형 또는 피침형이고 길이 1-2cm, 폭 2.5-3mm로서 끝이 뾰족하며 15-30개의 꽃이 달린다. 포영은 넓은 난형이고 길이 2-2.5mm로서 끝이 둔하며 양쪽에 홈이 있다. 암술대는 수과보다 3배 정도 길고, 깊게 2개로 갈라진다. 수과는 길이 1mm정도로서 넓은 도란형이며 좌우로 편평하고 확대경으로 볼 수 있는 잔점이 있으며 암갈색이다. 총생하며 세모지고 높이 15~40cm로서 밑부분에서 비스듬히 선다.(국가생물종지식정보시스템, http://www.nature.go.kr)
장미목 범의귀과 여러해살이풀로는 금괭이눈(Chrysosplenium pilosum var. valdepilosum), 산괭이눈(Chrysosplenium japonicum), 선괭이눈(Chrysosplenium trachyspernum), 및 애기괭이눈(Chrysosplenium flagelliferum)이 알려져 있다.
본 연구자는 본 발명의 생약 추출물이 염증 및 알레르기 반응에 관여한다고 알려진 RBL-2H3 비만세포에서 베타-헥소사미니데이즈(β-hexosaminidase)의 방출을 효과적으로 억제하고, 이들 중, 곰보배추와 방동사니대가리 추출물의 경우는, 염증이나 면역에 관여하는 류코트리엔(Leukotrien) 혹은 프로스타글란딘(Prostaglandin)을 합성하는 리폭시게나아제(Lipoxygenase)의 활성 또한 억제함으로써 다양한 피부 질환 치료제로 응용할 수 있다.
이에 본 발명자는 강황(Curcuma longa), 곰보배추(Salvia plebeia), 갯그령(Elymus mollis), 금괭이눈(Chrysosplenium pilosum var. valdepilosum), 방동사니대가리(Cyperus sanguinolentus), 산괭이눈(Chrysosplenium japonicum), 선괭이눈(Chrysosplenium trachyspernum), 및 애기괭이눈(Chrysosplenium flagelliferum)으로 조성된 생약 추출물으로 조성된 생약 추출물을 가려움증 감소, 피부염증, 홍반, 부종 두께 증가와 같은 병리적 손상의 발생 억제를 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 생약 추출물을 유효성분으로 함유하는 알러지성 또는 비알러지성 피부 질환의 예방 및 치료용 약학 조성물 및 건강기능식품에 관한 것으로서, 구체적으로는 강황(Curcuma longa), 곰보배추(Salvia plebeia), 갯그령(Elymus mollis), 금괭이눈(Chrysosplenium pilosum var. valdepilosum), 방동사니대가리(Cyperus sanguinolentus), 산괭이눈(Chrysosplenium japonicum), 선괭이눈(Chrysosplenium trachyspernum), 및 애기괭이눈(Chrysosplenium flagelliferum)으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 생약 추출물을 유효성분으로 포함하는 알러지성 또는 비알러지성 피부 질환의 예방 및 치료용 약학조성물 및 건강기능식품을 제공한다.
본 발명에서 정의되는 생약은 강황(Curcuma longa), 곰보배추(Salvia plebeia), 갯그령(Elymus mollis), 금괭이눈(Chrysosplenium pilosum var. valdepilosum), 방동사니대가리(Cyperus sanguinolentus), 산괭이눈(Chrysosplenium japonicum), 선괭이눈(Chrysosplenium trachyspernum), 애기괭이눈(Chrysosplenium flagelliferum)의 뿌리, 잎, 줄기, 열매 각각의 부위, 또는 이들을 포함하는 전초 추출물로 정의한다.
본원에서 정의되는 추출물은 정제수를 포함한 물, 주정, 탄소수 1 내지 4의 저급 알콜, 아세톤, 클로로포름, 메틸렌클로리드, 헥산 또는 이들의 혼합용매, 바람직하게는 물 및 에탄올 혼합용매, 보다 바람직하게는 60-90% 에탄올 혼합용매에 가용한 추출물을 포함한다.
본원에서 정의되는 알러지성 또는 비알러지성 피부 질환의 예로는 알러지성 피부질환으로는 과민증, 알러지성 비염, 천식, 알러지성 결막염, 알러지성 피부염, 아토피성 피부염, 알러지성 접촉성 피부염, 두드러기, 곤충 알러지, 식품알러지 또는 약품 알러지, 바람직하게는 알러지성 비염, 천식, 알러지성 피부염, 아토피성 피부염, 알러지성 접촉성 피부염, 두드러기, 식품 알러지 또는 약품 알러지, 보다 바람직하게는 아토피성 피부염 또는 접촉성 피부염을 들 수 있으며; 비알러지성 피부질환으로는 비알러지성 습진 (자극성 피부염, 지루성 피부염, 화폐성 습진, 울체성 피부염, 만성 단순성 태선, 한포진, 노인성 습진), 원발성 단순 접촉성 피부염, 완선, 건선 등, 바람직하게는 자극성 피부염 또는 지루성 피부염을 포함한다.
이하 본 발명을 상세히 설명한다.
예를 들어, 건조상태의 강황(Curcuma longa), 곰보배추(Salvia plebeia), 갯그령(Elymus mollis), 금괭이눈(Chrysosplenium pilosum var. valdepilosum), 방동사니대가리(Cyperus sanguinolentus), 산괭이눈(Chrysosplenium japonicum), 선괭이눈(Chrysosplenium trachyspernum), 및 애기괭이눈(Chrysosplenium flagelliferum)으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 생약 추출물 약제를 일정한 건조 중량 배합비(W/W)가 1~10:1~10:1~10, 바람직하게는 1~5:1~5:1~5, 더 바람직하게는 1~3:1~3:1~3 비율로 혼합하는 제 1단계; 이 중량의 약 1 내지 30배, 바람직하게는 5 내지 15배 부피의(w/v%) 정제수를 포함한 물, 주정, 탄소수 1 내지 4의 저급 알콜, 아세톤, 클로로포름, 메틸렌클로리드, 헥산 또는 이들의 혼합용매, 바람직하게는 물 및 에탄올 혼합용매, 보다 바람직하게는 60-90% 에탄올 혼합용매로, 약 0 내지 100, 바람직하게는 20 내지 60 온도에서 약 1 내지 48시간, 바람직하게는 12시간 내지 36시간 동안 추출하는 제 2단계; 제 2단계를 약 1 내지 10회, 바람직하게는 2 내지 7회 반복하는 제 3단계; 이를 여과농축 및 동결 건조시키는 제 4단계를 포함하는 제조방법을 통해 본 발명의 생약 추출물을 수득할 수 있다.
본 발명은 상기의 제조방법으로 얻어진 복합 생약 추출물을 유효성분으로 함유하는 알러지성 또는 비알러지성 피부 질환의 예방 및 치료용 약학조성물을 제공한다.
본 발명의 강황(Curcuma longa), 곰보배추(Salvia plebeia), 갯그령(Elymus mollis), 금괭이눈(Chrysosplenium pilosum var. valdepilosum), 방동사니대가리(Cyperus sanguinolentus), 산괭이눈(Chrysosplenium japonicum), 선괭이눈(Chrysosplenium trachyspernum), 및 애기괭이눈(Chrysosplenium flagelliferum)으로 조성된 생약 추출물은 염증 및 알레르기 반응에 관여한다고 알려진 RBL-2H3 비만세포에서 베타-헥소사미니데이즈(β-hexosaminidase)의 방출을 효과적으로 억제하고, 이들 중, 곰보배추와 방동사니대가리 추출물의 경우는, 염증이나 면역에 관여하는 류코트리엔(Leukotrien) 혹은 프로스타글란딘(Prostaglandin)을 합성하는 리폭시게나아제(Lipoxygenase)의 활성 또한 억제함으로써 다양한 피부 질환 치료제로 유용함을 확인하였다.
또한, 본 발명은 상기의 제조방법으로 얻어진 복합 생약 추출물을 유효성분으로 함유하는 알러지성 또는 비알러지성 피부 질환의 예방 및 개선용 건강기능식품을 제공한다.
본 발명의 복합 생약 추출물을 함유하는 알러지성 또는 비알러지성 피부 질환의 예방 및 치료를 위한 약학조성물은, 조성물 총 중량에 대하여 상기 복합 생약 추출물을 0.1 내지 50 중% 포함한다.
그러나 상기와 같은 조성은 반드시 이에 한정되는 것은 아니고, 환자의 상태 및 질환의 종류 및 진행 정도에 따라 변할 수 있다.
본 발명의 복합생약추출물을 함유하는 약학조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 복합생약추출물을 함유하는 약학조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 본 발명의 추출물을 함유하는 조성물에 함유될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토오즈(lactose), 덱스트로즈, 수크로스(sucrose), 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스 또는 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 복합 생약 추출물의 사용량은 환자의 나이, 성별, 체중에 따라 달라질 수 있으나, 0.1 내지 100mg/kg으로, 바람직하게는 1 내지 10mg/kg을 일일 1회 내지 수회 투여할 수 있다. 또한 그 투여량은 투여경로, 질병의 정도, 성별, 체중, 나이 등에 따라서 증감될 수 있다. 따라서 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
상기 약학조성물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁 내 경막 또는 뇌혈관 내 주사에 의해 투여될 수 있다.
본 발명은 강황(Curcuma longa), 곰보배추(Salvia plebeia), 갯그령(Elymus mollis), 금괭이눈(Chrysosplenium pilosum var. valdepilosum), 방동사니대가리(Cyperus sanguinolentus), 산괭이눈(Chrysosplenium japonicum), 선괭이눈(Chrysosplenium trachyspernum), 및 애기괭이눈(Chrysosplenium flagelliferum)으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 생약 추출물을 유효성분으로 함유하는 알러지성 또는 비알러지성 피부 질환의 예방 및 개선용 건강기능식품을 제공한다. 이를 첨가할 수 있는 식품으로는, 각종 식품류, 분말, 과립, 정제, 캡슐, 시럽제, 음료, 껌, 차 비타민 복합제, 건강기능성 식품류 등이 있다.
본 발명의 상기 추출물 자체는 독성 및 부작용은 거의 없으므로 예방 목적으로 장기간 복용 시에도 안심하고 사용할 수 있는 약제이다.
본 발명의 상기 추출물은 알러지성 또는 비알러지성 피부 질환의 예방 및 개선을 목적으로 식품 또는 음료에 첨가될 수 있다. 이 때, 식품 또는 음료 중의 복합 생약 추출물의 양은 전체 식품 중량의 0.01 내지 15 중량%로 가할 수 있으며, 건강 기능성 음료 조성물은 100를 기준으로 0.02 내지 10g, 바람직하게는 0.3 내지 1g의 비율로 가할 수 있다.
본 발명의 건강 기능성 음료 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 추출물을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며, 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100당 일반적으로 약 1 내지 20g, 바람직하게는 약 5 내지 12g이다.
상기 외에 본 발명의 복합 생약 추출물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 추출물들은 천연 과일 쥬스 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하지는 않지만 본 발명의 추출물 100 중량부 당 0 내지 약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
그러나 상기와 같은 조성은 반드시 이에 한정되는 것은 아니고, 환자의 상태 및 진행 정도에 따라 변할 수 있다.
본 발명의 강황(Curcuma longa), 곰보배추(Salvia plebeia), 갯그령(Elymus mollis), 금괭이눈(Chrysosplenium pilosum var. valdepilosum), 방동사니대가리(Cyperus sanguinolentus), 산괭이눈(Chrysosplenium japonicum), 선괭이눈(Chrysosplenium trachyspernum), 및 애기괭이눈(Chrysosplenium flagelliferum)으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 생약 추출물은 가려움증 감소, 피부염증, 홍반, 부종 두께 증가와 같은 병리적 손상의 발생 억제를 확인함으로써 알러지성 또는 비알러지성 피부 질환의 치료 및 예방에 유용한 조성물을 제공할 수 있다.
도 1은 각각의 추출물별 베타-헥소사미니다아제 실험 결과를 나타낸 도이며;
도 2은 각각의 추출물별 리폭시게나아제 억제 효과를 나타낸 도이며;
도 2은 각각의 추출물별 RBL-2H3 비만세포에서 각각의 추출물의 독성을 확인한 도이다.
이하, 본 발명을 하기의 실시예 및 실험예에 의해 상세히 설명한다.
단, 하기 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예 및 실험예에 의해 한정되는 것은 아니다.
실시예 1. 생약추출물의 제조
한국생명공학연구원 천연물의약연구센터에서 구입한 건조상태의 강황, 곰보배추, 갯그령, 금괭이눈, 방동사니대가리, 산괭이눈, 선괭이눈, 애기괭이눈 시료를 각각 300 g 을 구입하여 세절한 후 다시한번 완전히 건조시킨 후에 15배 부피(v/v)의 90% 메탄올을 가하여 24시간 3반복, 상온에서 침지하여 추출하였으며, 얻어진 추출물을 여과지로 여과한 후에, 이 여액을 진공회전농축기(Eyela, model N-1000, Japan)로 감압 농축하고 이를 약 -50℃ 온도에서 동결건조기(일신, FD8508, 한국)로 동결건조 하여 각각 40 - 42 g을 수득하여(수득율 평균: 14%) 20℃에 보관하였고 하기 실험에 사용하였다.
실험예 1. 생약추출물의 비만세포에 대한 알레르기 유발물질 분비 억제 효과
상기 실시 예에서 수득한 강황, 곰보배추, 갯그령, 금괭이눈, 방동사니대가리, 산괭이눈, 선괭이눈, 애기괭이눈 추출물의, 비만세포로부터의 알레르기성 질병 유발 물질의 분비 억제 효과를 확인하기 위하여, RBL-2H3 비만세포는 글루타민, 항생제와 10% 우혈청이 추가된 배지에서 배양하였으며, 베타-헥소사미니데이즈를 측정하기 위해서, 세포는 트립신에 의해 수거 후 24웰 배양기에서 웰 당 180,000개의 세포를 40ng/㎖ DNP-특이적 IgE와 같이 배양하였다.
다음 날 세포를 PIPES 완충액(25mM PIPES, pH 7.2, 159mM NaCl, 5mM KCl, 0.4mM MgCl2, 1mM CaCl2, 5.6mM 글루코오스 및 0.1% BSA)으로 세척한 후 항원이 가해지기 전에 30분 동안, 각각의 추출물로 전처리하였다. 전처리 후, 50ng/㎖ DNP-BSA(항원)로 10분 동안 세포를 자극시킨 후 5분간 얼음에 두어 반응을 정지시킨 다음, 상층액을 E-튜브에 옮기고, 튜브에 남아있는 세포는 0.1% 트립톤 X-100로 용해시켰다. 상층액과 용해된 세포는 96웰 플레이트에 1mM p-니트로페닐-N-아세틸-β-D-글루코사미니드(p-nitrophenyl-acetyl-β-D-glucosaminide)와 각각 30 ㎕씩 혼합하여 37℃ 이산화탄소 배양기에서 1시간 동안 배양시킨 후, 0.1 M 탄산염 완충액(Carbonate buffer)을 첨가하여 405 ㎚ 파장에서 흡광도를 측정하였다.
그 결과를 나타낸 표 1과 도 1에서 보는 바와 같이, 항원에 의하여 자극된 RBL-2H3 비만세포로부터의 알레르기 유발물질 분비가 강황, 곰보배추, 갯그령, 금괭이눈, 방동사니대가리, 산괭이눈, 선괭이눈, 애기괭이눈 추출물에 의해 저농도(IC50: 약 25 ㎍/㎖)에서 유의하게 억제됨을 확인할 수 있었으며, 50 ㎍/㎖에서는 알레르기 유발물질의 분비가 약 50~80% 이상, 100μg/ml에서는 80% 이상 억제되었다.
자생식물추출물 및 생약추출물의 베타-헥소사미니데이즈의 억제효과
국명 학명 사용부위 탈과립 억제 (%)
50μg/ml 100μg/ml
강황 Curcuma longa 뿌리 59.615 81.349
곰보배추 Salvia plebeia 전초 79.573 92.014
갯그령 Elymus mollis 전초 70.047 94.225
금괭이눈 Chrysosplenium pilosum var. valdepilosum 전초 68.545 96.221
방동사니대가리 Cyperus sanguinolentus 전초 53.276 82.543
산괭이눈 Chrysosplenium japonicum 전초 72.201 97.423
선괭이눈 Chrysosplenium trachyspernum 전초 84.506 95.505
애기괭이눈 Chrysosplenium flagelliferum 전초 75.273 98.016
실험예 2. 자생식물추출물 및 생약추출물의 염증성 물질을 생성하는 리폭시게나아제의 활성 억제 효과
상기 실시 예에서 수득한 강황, 곰보배추, 갯그령, 금괭이눈, 방동사니대가리, 산괭이눈, 선괭이눈, 애기괭이눈 추출물이, 류코트리엔 및 프로스타글란딘등의 염증성 인자를 활성화 시키는 효소인 리폭시게나아제의 활성을 억제하는지 확인하기 위하여, 리폭시게나아제 억제 선별 실험을 진행하였다.
Lipoxygenase Inhibitor Screening Assay Kit checked protocol (abcam, ab133087) 도구를 이용하여, 15-LO 효소를 96웰 플레이트에 90μl 분주한 뒤, 강황, 곰보배추, 갯그령, 금괭이눈, 방동사니대가리, 산괭이눈, 선괭이눈, 애기괭이눈 추출물을 각각 100μg/ml 농도로 처리하였다. 그리고 기질인 리놀레익산(Linoleic Acid) 10μl로 자극한 뒤에 차광하여 37℃ 이산화탄소 배양기에서 30분간 배양하였다. 그리고 흡광도 490nm 파장에서 측정한 결과, 도 2에서 보는 바와 같이, 곰보배추 추출물과 방동사니대가리 추출물에서 리폭시게나아제 활성이 억제되는 것을 확인할 수 있었다. 그 외의 추출물은 리폭시게나아제 활성을 억제하는 효과는 함유하지 않았다.
실험예 3. RBL -2 H3 비만세포에서 자생식물추출물 및 생약추출물의 세포 독성 확인
상기 실시 예에서 수득한 강황, 곰보배추, 갯그령, 금괭이눈, 방동사니대가리, 산괭이눈, 선괭이눈, 애기괭이눈 추출물이, RBL-2H3 비만세포에서 독성을 가지는지 확인하기 위하여, CellTiter 96 AQueous One Solution Cell Proliferation (Promega, Part# TB245) 도구를 이용하여 MTS 시험을 진행하였다.
RBL-2H3 비만세포는 글루타민, 항생제와 10% 우혈청이 추가된 배지에서 배양하였으며, MTS 시험을 위하여, 세포는 트립신에 의해 수거 후 96웰 플레이트에서 웰 당 20,000개의 세포를 최소배양배지로 배양하였다.
다음날, 강황, 곰보배추, 갯그령, 금괭이눈, 방동사니대가리, 산괭이눈, 선괭이눈, 애기괭이눈 추출물은 100μg/ml로 각각 2웰씩 10ul로 처리되었다. 추출물이 처리되고 각각 1시간, 2시간째에서 MTS 시약을 20ul씩 분주하여 37℃ 이산화탄소 배양기에서 2시간동안 배양한 뒤에, 490nm 파장 흡광도에서 측정되었다.
표 2 및 도 3에서 보면, 선괭이눈을 제외한 강황, 곰보배추, 갯그령, 금괭이눈, 방동사니대가리, 산괭이눈, 애기괭이눈 추출물은 RBL-2H3 비만세포에 있어 세포 독성을 보이지 않았음을 확인할 수 있다. 이때 세포 생존율은 다음과 같은 수학식 1로 계산하여 나타내었다.
[수학식 1]
세포 생존율(cell viability)(%)
= 100 - {(대조군의 흡광도 - 시료처리군의 흡광도)/대조군의 흡광도)×100}
자생식물추출물 및 생약추출물의 세포독성
국명 학명 사용부위 세포생존율 (%)
1시간 2시간
강황 Curcuma longa 뿌리 95.946 100.071
곰보배추 Salvia plebeia 전초 106.881 114.556
갯그령 Elymus mollis 전초 107.348 108.676
금괭이눈 Chrysosplenium pilosum var. valdepilosum 전초 99.951 106.337
방동사니대가리 Cyperus sanguinolentus 전초 96.063 101.296
산괭이눈 Chrysosplenium japonicum 전초 99.184 104.521
선괭이눈 Chrysosplenium trachyspernum 전초 26.398 16.229
애기괭이눈 Chrysosplenium flagelliferum 전초 84.554 86.122
본 발명의 추출물을 포함하는 조성물의 제제예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
제제예 1. 산제의 제조
생약 추출물 ---------------------------------------------- 20 mg
유당 ---------------------------------------------------- 100 mg
탈크 ----------------------------------------------------- 10 mg
상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.
제제예 2. 정제의 제조
생약 추출물 ---------------------------------------------- 10 mg
옥수수전분 ---------------------------------------------- 100 mg
유당 ---------------------------------------------------- 100 mg
스테아린산 마그네슘 --------------------------------------- 2 mg
상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.
제제예 3. 캅셀제의 제조
생약 추출물 ---------------------------------------------- 10 mg
결정성 셀룰로오스 ----------------------------------------- 3 mg
락토오스 ----------------------------------------------- 14.8 mg
마그네슘 스테아레이트 ----------------------------------- 0.2 mg
통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조한다.
제제예 4. 주사제의 제조
생약 추출물 ---------------------------------------------- 10 mg
만니톨 -------------------------------------------------- 180 mg
주사용 멸균 증류수 ------------------------------------- 2974 mg
Na2HPO4 ,12H2O --------------------------------------------- 26 mg
통상의 주사제의 제조방법에 따라 1 앰플당(2㎖) 상기의 성분 함량으로 제조한다.
제제예 5. 액제의 제조
생약 추출물 ---------------------------------------------- 20 mg
이성화당 -------------------------------------------------- 10 g
만니톨 ----------------------------------------------------- 5 g
정제수 ---------------------------------------------------- 적량
통상의 액제의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합한 다음 정제수를 가하여 전체를 정제수를 가하여 전체 100㎖로 조절한 후 갈색병에 충진하여 멸균시켜 액제를 제조한다.
제제예 6. 건강 식품의 제조
생약 추출물 -------------------------------------------- 1000 ㎎
비타민 혼합물 --------------------------------------------- 적량
비타민 A 아세테이트 -------------------------------------- 70 ㎍
비타민 E ------------------------------------------------ 1.0 ㎎
비타민 B1 ---------------------------------------------- 0.13 ㎎
비타민 B2 ---------------------------------------------- 0.15 ㎎
비타민 B6 ----------------------------------------------- 0.5 ㎎
비타민 B12 ---------------------------------------------- 0.2 ㎍
비타민 C ------------------------------------------------- 10 ㎎
비오틴 --------------------------------------------------- 10 ㎍
니코틴산아미드 ------------------------------------------ 1.7 ㎎
엽산 ----------------------------------------------------- 50 ㎍
판토텐산 칼슘 ------------------------------------------- 0.5 ㎎
무기질 혼합물 --------------------------------------------- 적량
황산제1철 ---------------------------------------------- 1.75 ㎎
산화아연 ----------------------------------------------- 0.82 ㎎
탄산마그네슘 ------------------------------------------- 25.3 ㎎
제1인산칼륨 ---------------------------------------------- 15 ㎎
제2인산칼슘 ---------------------------------------------- 55 ㎎
구연산칼륨 ----------------------------------------------- 90 ㎎
탄산칼슘 ------------------------------------------------ 100 ㎎

Claims (5)

  1. 강황(Curcuma longa), 곰보배추(Salvia plebeia), 갯그령(Elymus mollis), 금괭이눈(Chrysosplenium pilosum var. valdepilosum), 방동사니대가리(Cyperus sanguinolentus), 산괭이눈(Chrysosplenium japonicum), 선괭이눈(Chrysosplenium trachyspernum), 및 애기괭이눈(Chrysosplenium flagelliferum)으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 생약 추출물을 유효성분으로 함유하는 알러지성 피부 질환의 예방 및 치료용 약학조성물.
  2. 제 1항에 있어서,
    상기 추출물은 정제수를 포함한 물, 주정, 탄소수 1 내지 4의 저급 알콜, 아세톤, 클로로포름, 메틸렌클로리드, 헥산 또는 이들의 혼합용매에 가용한 추출물임을 특징으로 하는 약학조성물.
  3. 제 1항에 있어서
    상기 알러지성 피부질환으로는 과민증, 알러지성 비염, 천식, 알러지성 결막염, 알러지성 피부염, 아토피성 피부염, 알러지성 접촉성 피부염, 두드러기, 곤충 알러지, 식품알러지 또는 약품 알러지이며; 비알러지성 피부질환은 자극성 피부염, 지루성 피부염, 화폐성 습진, 울체성 피부염, 만성 단순성 태선, 한포진 및 노인성 습진으로부터 선택된 비알러지성 습진, 원발성 단순 접촉성 피부염, 완선, 또는 건선인 약학조성물.
  4. 강황(Curcuma longa), 곰보배추(Salvia plebeia), 갯그령(Elymus mollis), 금괭이눈(Chrysosplenium pilosum var. valdepilosum), 방동사니대가리(Cyperus sanguinolentus), 산괭이눈(Chrysosplenium japonicum), 선괭이눈(Chrysosplenium trachyspernum), 및 애기괭이눈(Chrysosplenium flagelliferum)으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 생약 추출물을 유효성분으로 함유하는 알러지 질환의 예방 및 개선용 건강기능식품.
  5. 제 4항에 있어서
    상기 건강기능식품은 식품류, 분말, 과립, 정제, 캡슐, 시럽제, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강기능성 식품류 형태인 건강기능식품.
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