KR20150006422A - 세포 배양용 자동화 장치 및 자동화 공정 - Google Patents

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Abstract

세포 배지용 저수조, 성장 인자용 저수조 및 배양될 세포용 저수조, 세포 배양 용기가 수용되는 자동 온도 조절 챔버(14)를 갖는 배양기(12) 및 제어 컴퓨터 시스템(24)을 포함하는, 세포 배양용 자동화 장치(10)에 있어서, 상기 장치는 챔버 내에 수용되는 배양 용기를 지지하고 교반하기 위한 장치(16)를 포함하는 것을 특징으로 하고, 배양 용기는 상기 언급된 저수조들에 연결된 하나 이상의 유입 오리피스(orifice) 및 배양 후 세포를 회수하고 저장하기 위한 수단(42)에 연결된 하나 이상의 출구 오리피스를 포함하는 파우치(pouch)로 이루어져 있으며, 이 저장 수단들 및 저수조들은 챔버 외부에 위치되어 있으며, 세포 확장 파우치와 함께 사전 조립된 모듈을 형성하고 챔버 벽 구성요소를 통과하는 파이프들을 통해 세포 확장 파우치의 오리피스들에 연결되어, 세포 확장 파우치에 배양 배지, 성장 인자 및 배양될 세포를 공급하는 것을 가능하게 하고, 챔버를 폐쇄한 채로, 저장 수단 내에서 세포 확장 파우치의 내용물을 수거하는 것을 가능하게 하는 것을 특징으로 한다.

Description

세포 배양용 자동화 장치 및 자동화 공정{AUTOMATED DEVICE AND AUTOMATED PROCESS FOR CELL CULTURE}
본 발명은 특히 줄기 세포(예를 들면, CD34 + 유형)의 배양을 위한 세포 배양 자동화 장치 및 상기 자동화 장치를 이용한 세포 배양의 방법에 관한 것이다.
세포 배양에 관련된 분야 중에서, 세포 요법은 산업화의 측면에서 가장 진보가 더딘 분야이다. 그러므로, 이 세포가 치료적 응용을 위해 이용되기 위해서는 최적의 조건에서 충분한 양으로 세포를 생산할 수 있는 기술을 찾으려는 현저한 요구가 있다.
일부 세포 요법 공정은 환자에게 재주사하기 전에 줄기 세포의 배양 또는 확장(expansion)을 필요로 하는데, 이는 채취한 표본들이 때때로 치료 효과를 제시하기에는 불충분하기 때문이다. 배양하는 동안에 세포의 치료적 특성의 완전성(integrity)을 확보하는 것은 필수적이다. 선행 기술에 있어서, 줄기 세포를 생체 외로 성장시키기 위한 해결책은 까다롭고(crafty), 경험적이며, 상당히 비효율적이다.
또한, 현재 기술로는 치료적 응용을 위하여 줄기 세포를 충분한 양으로 생산하지 못한다. 그러므로, 대량으로 세포를 성장하도록 하는 간결한 기하학적 구조를 갖는 생물반응기의 유형을 개발하려는 절실한 요구가 있다.
줄기 세포 배양용의 생물반응기를 이용하는 것이 제안되었다. 그러나, 증폭기(amplification phase)는 여전히 수동적인 단계이며, 세포 배양을 위한 환경적 조건(온도, CO2 등)은 고정밀로 모니터링되지 않는다.
막이 있는 관류 생물반응기, 중공사 생물반응기 및 O2, 영양 배지 및 성장 인자를 연속으로 주입하는 유동상의 마이크로생물반응기의 기존 예가 알려져 있다(특허 출원 번호 WO 00/73411호 참조).
미국 특허 출원 번호 US-A1-2008/0118977호는 경색이 일어난 이후에 환자의 심장을 재건하는 치료 프로토콜을 기재하고 있다. 상기 재건은 혈액 표본으로부터 단리되고, 생체 외에서 확장되며, 배양 이후에 정제된 특이적 줄기 세포(CD34 +)를 환자의 심장에 주사함으로써 달성된다.
본 발명은 그러한 세포의 배양, 증폭 또는 확장을 할 수 있는 기술을 제공하며, 또한, 선행 기술에서 대부분 수동으로 수행되는 조업의 표준화, 추적성(traceability) 및 제어의 면에서 현저한 개선을 가져다 주는 것을 목적으로 한다.
그러므로, 본 발명은 배양 배지, 성장 인자 및 배양될 세포의 탱크들, 세포 배양 또는 확장용 용기가 수용되는 자동 온도 조절 인클로저(enclosure)를 갖는 배양기 및 인클로저 내에서 배양 조건을 제어하고, 소정의 순서로 유체를 분배하기 위한 밸브를 관리하도록 의도된 데이터를 입력하고 기록하는 수단을 포함하는 제어 컴퓨터 시스템을 포함하는 세포 배양의 자동화 장치로서, 상기 자동화 장치는 상기 컴퓨터 시스템에 의하여 제어되고, 상기 인클로저 내에 수용되는 세포 배양 또는 확장 용기를 지지하고 교반하기 위한 장치를 포함하는 것을 특징으로 하고, 상기 용기는 상기 탱크들에 연결된 하나 이상의 유입 포트 및 배양 이후에 세포의 수거 및 저장 수단에 연결된 하나 이상의 유출 포트를 갖는 세포 확장 백(cell expansion bag)에 의해 형성되고, 이 수거 및 저장 수단 및 상기 탱크들은 인클로저의 외부에 위치하고, 상기 세포 확장 백과 함께 상기 인클로저 내에 배치된 사전 조립된 모듈을 형성하고, 세포 배양 백에 상기 배양 배지, 성장 인자 및 배양될 세포를 공급하며 인클로저를 폐쇄한 채 수거 및 저장 수단 내에서 상기 세포 확장 백의 내용물을 수거하도록 상기 인클로저의 벽을 통과하는 도관들(conduits)에 의해 상기 세포 확장 백의 상기 포트들에 연결되는 것을 특징으로 하는 자동화 장치를 제안한다.
본 발명에 따른 자동화 공정의 주된 기능은 생물학적 배양 프로토콜의 단계들을 자동화하고, 최적 수율의 세포 증폭을 생성하기 위하여 배양기 내에서 배양된 세포의 환경적 조건(온도 제어, CO2 수준 등)을 제어하는 것이다. 또한, 배양 배지, 성장 인자 및 성장하는 세포를 밸브 및 펌프와 같은 작동 수단을 통해 배양기 내에서 (상대적으로 큰 체적을 가질 수 있는) 세포 확장 백으로 분배하는 기능도 갖는다. 또한, 자동화 장치는 세포 확장 백의 교반, 및 배양 이후의 세포를 세포 확장 백에서 수거 및 저장 수단으로의 이송을 확보한다.
따라서, 본 발명에 따른 자동화 장치는 환자로부터 채취한 세포로부터 줄기 세포 등과 같은 세포를 대량으로 발생시키는데 이용될 수 있다. 세포 배양이 수행되는 백은 100 ㎖, 200 ㎖, 300 ㎖, 500 ㎖를 초과하며, 예를 들면, 대략 650 ㎖ 또는 그 이상(1 L, 2 L, 3 L 등)인 체적을 가질 수 있다. 이 유형의 백 내에서 줄기 세포 배양은 미국 특허 출원 번호 US-A1-2008/0118977에 기재된 생물학적 프로토콜에 따르면, 예를 들어, 중증 경색을 앓았던 환자와 같은 환자에서 세포 요법을 수행하는데 충분한 세포를 생성할 수 있다.
세포 확장 백은 바람직하게는 액밀하고 기체 투과성의 플렉서블(flexible) 벽을 포함한다. 세포 확장 백은 바람직하게는 산소 및 백을 개방하지 않으므로, 백의 내용물이 오염될 위험성 없이 백의 내용물을 양호하게 탄산가스 포화(aeration)하도록 하는 이산화탄소에 대하여 양호한 투과성을 갖는다. 백의 특별한 일 실시양태에 있어서, 백은 하기 투과성 특징들을 포함한다(37℃에서 일당 cc로 표기): O2(기체)
Figure pct00001
418, CO2(기체)
Figure pct00002
966, N2(기체)
Figure pct00003
157, 및 H2O(액체) 0.05.
세포 확장 백은 바람직하게는 화학 및 생물학적 생성물과, 특히 성장하는 세포와 친화성이 거의 없으며, 그러한 생성물을 흡수하지 않는다. 백은 예를 들면, FEP 공중합체(플루오로-에틸렌-프로필렌)의 박막으로 형성된다. 백은 상이한 유형의 포트들(변형가능한 계면들), 이들 중, 예를 들면, FEP 피팅들이 구비될 수 있다. 이들은 백에 조립되어 오염의 위험성을 최소화한다.
자동화 장치는 세포 배양을 수행하도록 설계되고, 작업자가 밸브를 조작하고, 백 또는 저수조들을 교체하는 등의 필요 없이 이 배양을 달성하는 모든 수단 및 자원을 포함한다. 작업자는 컴퓨터 시스템에 환자, 수집된 세포 및 상이한 저수조 또는 백들의 성질 및 기원을 식별하는 데이터를 공급할 수 있어서, 이 모든 데이터는 컴퓨터 시스템 내에 세이브되고 저장된다. 따라서, 본 발명은 매우 양호한 재현성이 있는 생물학적 프로토콜들을 구현하고, 프로토콜 및 이용된 수단의 추적성 및 정밀한 제어를 확보하도록 한다.
생물학적 프로토콜의 단계들의 제어 및 추적성은 예를 들면, 컴퓨터 시스템 및 적절한 그래픽 사용자 인터페이스(GUI)에 의하여 수행되어 하기와 같은 사항을 수행하도록 할 수 있다:
- 생물학적 배양 프로토콜의 특이적인 매개변수들은 변경될 수 없는 자동화 배양 방법을 정의하고,
- (21 CFR 파트 11 FDA 규정에 따라) 사용자 식별 및 패스워드에 대한 요구에 의하여 컴퓨터 시스템 데이터로의 접근을 제한함으로써 양호한 보안을 확보하고,
- 사건 및 상기 방법의 다양한 단계들을 기록하도록 하며,
- (예를 들면, 표본 수집의 시험 결과 및 그래프트의 특징들의 뒤이은 분석을 포함한) 보고들을 편집한다.
세포 확장 백은 인클로저 내에 수용되고, 배양기의 벽을 통과하는 덕트들(ducts) 또는 도관들에 연결되고, 저수조들 또는 탱크들에 연결되며, 인클로저의 외부에서 저장 수단에 연결되는 적어도 2 개의 포트들을 포함한다. 세포 확장 백 및 도관들은 작업자에 의하여 설치되고 용이하게 교체되는 사전 조립된 1회-사용(single-use) 모듈을 형성한다. 인클로저 밖에 위치한 탱크 내용물의 적어도 일부는 인클로저 내에 위치한 세포 확장 백 내에 분배되고, 백의 이 내용물은 배양 이후에 인클로저의 외부에서 수거 및 저장 수단으로 이송되도록 하는 것이 의도이며, 이 모든 유체 분배 작업은 배양기의 벽을 통과하는 상기 도관들로 인하여 배양기의 벽이 폐쇄한 채로 유지되면서 수행되어, 생물학적 프로토콜을 지속하는 동안에 최적의 환경적 조건을 확보하고, 인클로저 내에서 세포 배양 배지의 오염의 위험성을 감소시킨다.
유리하게는, 세포 확장 백은 도관에 의하여 인클로저의 외부에 위치한 표본 수집 수단에 연결된 하나 이상의 표본 수집 유출구를 포함하며, 상기 도관은 인클로저 벽을 통과하며, 상기 사전 조립된 모듈의 일부이다. 이 경우, 세포 확장 백은 상이한 기능들(공급, 수거 및 표본 수집)을 가지며, 상이한 도관들에 연결된 3 개의 포트들을 갖는다.
본 발명의 일 실시형태에 있어서, 배양기는 개구부 및 밀폐 도어를 갖는 캐비닛을 포함하고, 상기 도관들의 통로 수단은 개구부의 주변 가장자리 상에 장착되고 도관들과 평행하고 도관들이 맞물리는 홈들을 가지며, 이 홈들은 폐쇄된 위치에 있는 경우 도어에 의하여 덮히도록 의도된다. 도관들은 도어가 개방된 경우, 홈들의 세로축들에 수직한 방향으로 도관들을 병렬 이동함으로써 작업자에 의하여 이 홈들에 용이하게 맞물리고 (이들로부터 인출되어) 소모품들의 조립을 용이하게 한다.
성장 인자 및 배양될 세포의 탱크는 바람직하게는 세포 확장 백의 유입 포트 상에 위치한 백들에 의하여 형성되어, 성장 인자의 백 및 배양될 세포의 백의 각각의 내용물이 중력에 의하여 세포 확장 백으로 유동할 수 있다. 이는 세포 확장 백으로 세포 및 성장 인자를 이송하는 동안에 세포 및 성장 인자의 완전성을 보장한다. 도관들 내에서 세포 및 성장 인자의 순환을 보조하기 위하여 펌프 또는 임의의 기계적 수단을 이용하면 이들을 손상시킬 수 있다.
저장 수단은 세포 확장 백의 유출 포트 아래에 적어도 부분적으로 위치한 하나 또는 두 개의 백들을 포함할 수 있어서, 배양이 끝난 후에, 세포 확장 백의 내용물은 중력에 의하여 저장 수단의 백들로 유동할 수 있다. 또한, 이는 수거하는 경우, 배양 후의 세포의 완전성을 확보한다.
자동화 장치는 배양 배지의 세포 확장 백으로의 공급 및 이 탱크들을 린스하기 위하여 성장 인자 및 배양될 세포의 탱크 양쪽 모두에의 공급을 제어하기 위한 연동 펌프를 포함할 수 있다. 연동 펌프는 배양 배지와 직접 접촉되지 않아서, 이 배지의 오염의 위험성을 회피하는 장점을 갖는다.
자동화 장치는 공기 트랩을 형성하는 2 개의 백들을 더 포함할 수 있으며, 이들 중 하나는 성장 인자 및 배양될 세포의 탱크에 연결되고, 다른 하나는 세포 확장 백에 연결되며, 공기 트랩 백들은 도관들, 세포 확장 백 및/또는 탱크들 내에 함유된 공기를 채집 및 저장하도록 의도된다.
유리하게는, 도관들은 플렉서블 튜브들에 의하여 형성되며, 이들 중 일부는 폐쇄된 위치에서 튜브들을 조이도록 의도되는 밸브들을 통과한다. 각각의 튜브는 예를 들면, 작업자에 의하여 단순하게, 예컨대, 튜브의 세로축에 약간 수직한 방향으로 병렬 이동함으로써 밸브의 홈에 맞물리도록 하는 의도이다.
지지 및 교반 장치는 제1 회전축 주위로 회전하여 장착되고, 세포 배양을 위해 약간 수평인 위치 및 배양 후 세포의 수거를 위해 약간 수직인 위치 사이에서 상기 축 주위로 이동가능한 세포 확장 백을 지지하는 지지판 또는 트레이를 포함할 수 있다. 이 위치는 배양 후 세포의 수거를 용이하게 하여, 이 세포는 상기 언급된 저장 수단으로 중력에 의하여 직접 유동한다.
트레이는 제2 수평축 주위로 회전하여 장착될 수 있으며, 수평축 주위에서 트레이는 세포 확장 백의 내용물의 교반 및 균질화를 위해 진동하도록 의도된다. 판의 제1 및 제2 회전축은 바람직하게는 평행이다.
바람직하게는, 트레이는 세포 확장 백의 공급, 세포 확장 백의 내용물의 수거 및 이 백의 표본 수집 제어용 밸브들을 가질 것이다.
지지 및 교반 장치는 장치의 상단에서 세포 확장 백에 연결된 공기 트랩을 형성하는 백을 부착하는 수단을 갖는 수직 암(arm)을 더 포함할 수 있다.
수거 및 저장 수단은 유리하게는 수평축 주위로 회전하여 장착되고, 약간 수직인 위치 및 약간 수평인 위치 사이에서 상기 축 주위로 이동가능하며, 여기서 이 수단은 완전히 세포 확장 백 아래에 위치한다. 이로 인하여 세포 확장 백의 전체 내용물이 중력에 의하여 저장 수단으로 이송되도록 한다.
예를 들면, CD34 + 줄기 세포의 배양의 특별한 경우에 있어서, CD34 + 세포의 완전 조건화 연쇄(full conditioning chain)에서 요구되는 무균 상태(sterility)는 단회 사용 세포 배양 키트의 형태로 소모품들을 사용하고 설치할 것을 요한다.
또한, 본 발명은 하나 이상의 세포 확장 백 및 이 백을 다른 백들 또는 탱크들에 연결하는 플렉서블들을 포함하는 세포 배양 자동화 장치를 위한 바람직하게는 단회 사용(1회용) 및 무균의 세포 배양 키트에 관한 것이며, 튜브들 및 세포 확장 백은 사전 조립되고, 세포 확장 백은 유입 포트, 유출 포트 및 선택적으로는 표본 수집 유출 포트를 포함한다.
키트는 튜브들을 서로 연결하고 튜블들을 백들 및/또는 탱크들에 연결할 뿐만 아니라, 세포 확장 백의 제3 포트에 연결되어 세포 수집을 수행하도록 하는 수단에 연결하는데 요구되는 모든 필요한 연결 장치들을 더 포함할 수 있다. 이 모든 구성요소들은 상기 언급된 사전 조립된 모듈의 일부일 수 있다.
유리하게는, 세포 확장 백의 유입 포트는 튜브들에 의하여 성장 인자의 백의 유입 및 유출 포트들에 연결되며, 배양될 세포의 백의 유입 및 유출 포트들에 연결된다. 또한, 세포 확장 백의 유입 포트는 배양 배지 백의 유출 포트에 연결되도록 의도된다.
키트는 공기 트랩을 형성하는 2 개의 백들을 포함할 수 있으며, 이들 중 하나는 성장 인자의 백 및 배양될 세포의 백의 유출 포트들에 연결되며, 나머지 하나는 세포 확장 백의 유입 포트에 연결된다.
또한, 키트는 튜브들에 의하여 세포 확장 백의 유출 포트에 연결되는, 배양 후 세포의 하나 또는 두 개의 수거 백들을 포함할 수 있다.
본 발명의 실시형태의 일례로서, 성장 인자 및 배양될 세포의 백들 및 공기 트랩을 형성하는 백들은 약 150 ㎖의 내부 체적을 가지고, 세포 확장 백은 약 3000 ㎖의 이론적인 체적을 가지며, 2 개의 수거 백들은 각각 600 ㎖의 체적을 갖는다. 배양 배지의 분배 백은 1000 ㎖의 체적을 가질 수 있다.
유리하게는, 키트는 세포 배양을 위해 일단 설치되면, 임의의 생성물의 첨가 또는 작업자 개입을 필요로 하지 않으면서, 이 배양에 요구되는 모든 자원들을 포함하는 폐쇄 회로를 형성한다. 이로 인하여 키트 및 배양 배지의 오염의 위험성을 제한한다.
또한, 본 발명은 세포 확장 백을 지지하기 위한 지지판 또는 트레이로서, 이 트레이는 3 개의 밸브들을 가지며 트레이를 약간 수평인 위치로부터 약간 수직인 위치로 기울이기 위한 제1 수평축 및 트레이가 세포 확장 백의 내용물을 교반하고 균질화하기 위하여 진동하도록 의도되는 제2 수평축 주위로 회전하며 장착되는 지지판 또는 트레이를 포함하는 세포 배양 자동화 장치용 지지 및 교반 장치에 관한 것으로서, 또한, 장치는 상기 수평축들 주위로 트레이를 기울이기 위한 모니터링되는 수단을 포함한다.
장치는 장치의 상단에서 공기 트랩을 형성하는 백을 부착하는 수단을 갖는 수직 암을 포함할 수 있다.
또한, 본 발명은 하기 단계들을 포함하는, 상기 기재된 자동화 장치에 의한 세포 배양의 자동화 방법에 관한 것이다:
a) 배양기의 벽을 폐쇄한 채로, 세포 확장 백에 세포 배양 배지, 성장 인자, 이후 배양될 세포를 공급하는 단계;
b) 세포 확장 백의 내용물을 균질화하기 위하여 세포 확장 백을 교반하는 단계;
c) 세포 확장 백을 예를 들면, 며칠 간의 기간 동안 배양 조건에서 유지하는 단계; 및
d) 인클로저의 벽을 폐쇄한 채로, 수거 및 저장 수단에서 세포 확장 백의 내용물을 수거하는 단계.
본 발명에 따른 방법은 하기 단계들 중 하나 이상을 포함할 수 있다:
- 단계 a) 이전에, 지지 및 교반 장치 상에 세포 확장 백을 맞추고, 배양기의 통로 수단 내 및 밸브들로 도관들을 장착하며, 이 도관들을 탱크들 또는 백들에 연결함으로써 사전 조립된 모듈을 설치하는 단계,
- 단계 a) 이전에, 탱크로부터 공기 트랩 백들로 배양 배지가 통과함으로써 도관들 내에 함유된 공기를 배출하는 단계;
- 단계 a)에서 세포 확장 백에 성장 인자를 공급한 이후에, 배양 배지를 성장 인자 탱크 내로 이송하거나 유동시키고, 이후 탱크의 내용물을 세포 확장 백으로 쏟아 내거나 배출함으로써 성장 인자 탱크를 린스하는 단계;
- 단계 a)에서 세포 확장 백에 배양될 세포를 공급한 이후에, 배양 배지를 배양될 세포의 탱크 내로 유동시키고, 이후 탱크 내용물을 세포 확장 백으로 배출함으로써 배양될 세포의 탱크를 린스하는 단계;
- 단계 c) 동안에, 지지 트레이를 배양을 위한 수평 위치로부터 표본 수집 포트가 백의 최저점인 경사진 위치 상으로 기울이는 단계가 각각 선행하는 세포 확장 백의 내용물을 표본 수집하는 하나 이상의 단계들;
- 단계 c) 이전에, 이 탱크들을 세포 확장 백의 유입 포트로 연결하는 도관 또는 튜브를 절단 및 용접하거나 죔으로써 배양 배지 백, 성장 인자 백 및 배양될 세포를 함유하는 백을 빼내는 단계; 및
- 세포 확장 백의 유출 포트가 백의 최저점을 나타내도록 단계 d) 이전 또는 단계 d) 동안에, 트레이를 약간 수직인 위치에서 기울이는 단계.
또한, 본 발명은 상기 기재된 자동화 장치, 키트 또는 장치의 CD34 + 줄기 세포 또는 예를 들면, 림프구 등과 같은 혈액 단핵 세포의 배양을 위한 용도를 제공한다. 줄기 세포는 제대혈, 골수 및 전혈 등과 같은 하나 이상의 세포원(source)으로부터 유래될 수 있다.
예로서 주어진 하기 비한정적 설명을 독해하고 이의 첨부된 도면들을 참조하여, 본 발명은 더 양호하게 이해될 것이며, 본 발명의 다른 상세사항, 장점 및 특징이 명백해 질 것이다.
- 도 1 및 도 2는 본 발명에 따른 세포 배양 자동화 장치의 개략적인 사시도들로서, 이 자동화 장치는 도 1에서는 폐쇄되어 있고 도 2에서는 개방된 인클로저를 정의하는 캐비닛을 포함한다;
- 도 3은 컴퓨터 시스템 없는 도 1 및 도 2의 자동화 장치의 매우 개략적인 도면이다;
- 도 4는 도 1 및 도 2의 자동화 장치의 교반 장치가 갖는 성분들의 매우 개략적인 도면이다;
- 도 5는 본 발명에 따른 세포 배양 키트의 개략도이다;
- 도 6은 도 1 및 도 2의 자동화 장치의 흐르는 유체 도관을 위한 통과 수단의 개략적인 사시도이다;
- 도 7은 본 발명의 교반 장치의 개략적인 사시도이다;
- 도 8 및 도 9는 도 7의 장치의 개략적인 사시도이며, 장치의 트레이의 2 개의 상이한 경사 위치들을 나타낸다;
- 도 10은 장치의 카울링(cowling)을 부분적으로 비스듬히 재단한 도 7의 교반 장치의 다른 개략적인 사시도이다;
- 도 11은 아래에서 부터 관찰된, 도 7의 장치의 트레이를 기울이기 위한 트레이 및 제어 수단의 개략적인 사시도이다;
- 도 12 및 도 13은 도 7에 도시된 장치의 트레이의 회전의 제어된 잠금 시스템의 개략적인 사시도들로서, 잠금 시스템은 도 11에서는 활성화되고, 도 12에서는 비활성화되어 있다;
- 도 14는 본 발명에 따른 세포 배양 방법의 단계들을 보여주는 순서도이다, 및
- 도 15 내지 도 24는 도 3에 해당하고 본 발명에 따른 방법의 단계들을 나타내는 도면이다.
본 발명에 따른 세포 배양 자동화 장치(10)의 일 실시형태를 보여주는 도 1 및 도 2를 우선 참조하면, 이 자동화 장치는 예를 들면, 그 내용이 본원에 참조로 포함된 출원에 기재된 생물학적 프로토콜 US-A1-2008/0118977에 따라 줄기 세포의 배양을 위해 특별하지만 배타적이지는 않게 설계되어 있다.
도시된 예에서, 자동화 장치(10)는 다음의 3 가지 구성요소들을 필수적으로 포함한다:
- 세포 확장 백(미도시)의 지지 및 교반 장치(16)를 수용하는 자동 온도 조절 인클로저(14)를 구비한 배양기(12),
- 세포를 배양하는데 요구되는 배지를 함유하는 백들(미도시)을 지지하는 프레임(18) 및 백들 사이에서 유체 흐름의 분배 및 조절의 베어링 수단들(밸브들(20), 펌프(22) 등), 및
- 배양기(12) 및 이를 모니터링하고 제어하고, 데이터를 입력하고 기록하며, 생물학적 프로토콜을 관리하기 위한 수단들(20 및 22)에 연결된 컴퓨터 시스템(24).
도시된 예에서, 배양기(12), 프레임(18) 및 컴퓨터 시스템(24)은 휠들 상에 장착된 지지대(26) 상에서 서로 측면에 배치되어 있고, 프레임(18)은 컴퓨터 시스템(24) 및 배양기(12) 사이에 위치되어 있다.
통상적으로, 컴퓨터 시스템(24)은 입력 및 기록 데이터, 데이터 처리 수단, 디스플레이 수단, 및 배양기(12)와 프레임의 수단들(20 및 22)의 제어 및 모니터링을 위한 신호를 전송하는 수단을 포함한다. 바람직하게는, 컴퓨터 시스템(24)은 터치 스크린 디스플레이 및 데이터 입력 설비를 포함한다.
컴퓨터 시스템(24)의 사전 기록된 데이터로의 접근을 제한하기 위하여, 다중 수준의 보안이 구현될 수 있다. 자동화 장치의 제작자는 컴퓨터 시스템(24) 내에서 저장된 모든 정보에 접근하기 위하여 하나의 특정한 패스워드를 이용하여 접근권을 최대 수준으로 갖는 반면에, 관리자 및 더 낮은 접근 수준이 있는 작업자는 일정한 정보에 대해서만 특정한 패스워드들을 통해 접근 할 것이다.
컴퓨터 시스템(24)은 예를 들면, 이터넷 연결 또는 와이 파이(Wi-Fi)를 통해 컴퓨터 네트워크에 바람직하게 연결되어, 컴퓨터 시스템(24)의 정보가 오토메이트(automate, 10)로부터 원격인 네트워크 상의 워크스테이션으로부터 접근될 수 있으며, 아마도 상기 워크스테이션으로부터 행동이 요구되고 제어될 수 있다.
컴퓨터 시스템(24)은 예를 들면, 온/오프 타입인 밸브들(20)의 개폐, 펌프(22)의 유량의 셋팅, (예를 들면, 약 37℃의 온도에서) 배양기(12)의 인클로저(14)의 가열 제어, 및 인클로저에 (예를 들면, 약 5%의 비율로) CO2 등과 같은 기체의 공급을 제어한다. 시스템(24)은 필요하다면 인클로저(14) 내에서 세포 배양을 위한 최적의 환경적 조건을 정의하는 다른 매개변수들의 조절을 확보할 수 있다.
더 명료하게는, 컴퓨터 시스템(24)의 수단들(18 및 20)로의 연결 수단, 기체 가열 및 기체의 배양기(12)로의 공급 수단 및 전원 공급 수단은 도면들에서 도시되어 있지 않다.
프레임(18)은 평행 육면체와 유사한 모양을 가지며, 백의 형태인 생물학적 배지 탱크들의 위치를 나타내는 개략적으로 작도된 직사각형들(32)뿐만 아니라 백들 사이에서 유체(들)의 위치를 나타내는 선들(32)이 있는 수직 정면(28)을 포함한다.
수직 정면(28)의 상부는 작도된 4 개의 직사각형들(30)을 포함하는데, 이는 작업자에게 이 직사형들에 위치될 백들의 각각의 성질에 대하여 알려주며, 이 백들은 아래에서 더 상세히 기재될 소모품들의 키트에 속한다.
대형 제1 직사각형은 프레임(18)의 정면(28)의 좌측 구석 상단에 작도되어 있고, 배양 배지를 함유하는 백(도 3에서 34로 참조된 백)의 위치를 나타낸다. 더 작은 치수의 3 개의 직사각형들(30)은 정면(28)의 우측 구석 상단에 작도되어 있으면, 각각 성장 인자 백, 배양될 세포를 포함하는 백 및 공기 트랩을 형성하는 백의 위치를 나타낸다(도 3에서 각각 36, 38 및 40으로 참조됨).
프레임(18)의 정면(28)의 중간 부분은 상기 밸브들(20) 및 펌프(22)의 장착 구멍들을 포함하며, 이들 구성요소들(밸브들 및 펌프)의 각각은 소모품 키트의 플렉서블 튜브에 의하여 형성된 유체 도관을 나타내는 선(32) 상에 위치한다.
정면(28)의 하부는 서로 측면에 위치한 2 개의 공평면(coplanar) 플레이트들(42)을 갖는다. 이 플레이트들(42)은 정면(28)에 평행으로 연장한 공통의 수평축 주위로 이들의 하단에 회전하면서(pivotally) 장착된다. 플레이트들(42)은 이들이 정면(28)으로부터 짧은 거리로 평행하게 연장하는 수직 위치(도 1 및 도 2에 도시) 및 이들이 지지대(26) 상에서 가질 수 있는 수평 위치 사이의 이 축 주위로 회전하여 이동 가능하다.
직사각형들(44)은 수직 위치에 있는 경우 플레이트들(42)의 정면 상에 작도되어 있다. 이 직사각형들(44)은 작업자에게 플레이트들(42)이 가질 백들의 성질에 대하여 알려준다. 배양 후 세포의 수거 및 저장의 백들(도 3에서 46으로 참조됨)은 플레이트들(42)이 갖는 것으로 설계된다.
소모품 키트의 백들(34, 36, 38, 40 및 46)은 적당한 수단(미도시)에 의하여 프레임(18)의 정면(28) 상 및 플레이트들(42) 상에 부착되거나 고정되도록 의도된다.
배양기(12)는 인클로저(14)를 정의하고 2 개의 도어들(48 및 50)에 의하여 봉입될 수 있는 개구부를 가지되, 이들은 개구부의 일측, 예를 들면, 우측 상에 회전하면서 장착된 캐비닛을 포함한다.
내부 도어(48)는 폐쇄 위치에서 캐비닛의 개구부의 주변장치 씰(52) 상에서 지탱하는 유리 도어이며, 이 씰(52)은 도 6에서 볼 수 있다. 외부 도어(50)는 절연되며, 캐비닛의 개구부의 주변 가장자리 상에 지탱하기 위한 주변장치 씰을 갖는다.
컴퓨터 시스템(24)는 각각의 도어(48 및 50)의 위치(개방 또는 폐쇄)를 검출하는 센서들에 연결될 수 있으며, 특히 배양 및 세포 배양 단계 동안에 도어들의 잠금을 제어할 수 있다.
배양기(12)의 인클로저(14)는 약 200 L의 내부 체적을 갖는다.
도 3 내지 도 5에 도시된 예에서, 소모품 키트는 세포 배양용의 단회 사용을 위한 것이고, 백들(34, 36, 38, 40 및 46), 상기 언급된 튜브들, 세포 확장 백(54) 및 공기를 트랩하는 제2 백(56)을 포함하며, 이 백들(54 및 56)은 도 7 내지 도 13을 참조하여 더 상세히 기재될 교반 장치(16)가 갖는다.
세포 확장 백(54)은 도 4 및 도 5에서 최상으로 관찰되며, 500 ㎖ 초과 및 예를 들면, 650 ㎖의 내부 체적을 가질 수 있다. 이는 튜브(60)에 의하여 표본 수집 수단(62)에 연결된 표본 수집 유출 포트(58), 배양 후 세포를 수거하기 위한 백(46)에 튜브(66)에 의해 연결된 유출 포트(64) 및 튜브들에 의해 백들(34, 36, 38 및 56)에 연결된 유입 포트(68)인 3 개의 포트들을 포함한다.
세포 확장 백(54)의 유입 포트(68)는 튜브에 의하여 세포 배지의 백(34)의 유입 포트에 연결된다. 성장 인자 및 배양될 세포의 백들(36 및 38)은 각각 튜브(72)의 일 말단에 연결되고, 이의 타 말단은 튜브(70)에 연결된 유입 포트, 및 튜브(74)의 일 말단에 연결되고, 이의 타 말단은 튜브(70)에 연결된(튜브(72)의 연결점(들)로부터 튜브(70)로 흐름을 따름) 유출 포트를 포함한다. 백(40)은 튜브들(76)에 의하여 튜브들(74)에 연결된 2 개의 포트들을 포함하며, 공기 트랩을 형성하는 백(56)은 백(54)의 유입 포트(68)의 부근에서 튜브(78)에 의하여 튜브(70)에 연결된 포트를 포함한다(도 4 및 도 5).
세포 확장 백(54) 및 튜브들(60, 66, 70, 72, 74, 76 및 78)은 바람직하게는 사전 조립되고, 무균 상태로 공급된다. 백들(34, 36, 38, 40, 46 및 56)도 무균 상태로 공급된다. 백들(40, 46 및 56)은 속이 빈 상태로 공급되며, 세포 확장 백(54)과 사전 조립되어 상기 언급된 튜브들에 연결될 수 있다. 성장하는 세포의 백(38)도 속이 빈 상태로 공급되며, 자동화 장치에 키트를 설치하는 동안에 튜브들과 사전 조립되거나 튜브들에 연결될 수 있다. 백(38)은 자동화 장치에 키트를 설치하기 전 또는 후에 배양될 세포를 함유하는 배지로 충진될 수 있다. 백들(34 및 36)은 바람직하게는 충분히 각각 배양 배지 및 성장 인자가 구비된다.
튜브의 모든 연결점들 및 백들에 연결된 튜브들뿐만 아니라 표본 수집의 수단들도 바람직하게는 도 5에 개략적으로 도시된 사전 조립된 모듈의 일부이고, 반드시 이 모듈의 일부는 아닌 백들(34, 36 및 38)은 점선들로 표시된다.
백들(36, 38, 40 및 56)은 약 150 ㎖의 체적을 가지고, 백들(46)은 약 600 ㎖의 체적을 가지며, 배양 배지의 백(34)은 약 1000 ㎖의 체적을 갖는다.
자동화 장치(10)는 CD34 + 줄기 세포를 성장시키는데 이용되는 경우, 백(38)은 환자의 표본으로부터 유래하고 결국 단리되고 정제되는 그러한 세포를 포함하며, 백(36)의 성장 인자는 시토카인이다.
세포 확장 백(54) 및 공기 트랩을 형성하는 백(56)은 교반 장치(16)가 가지며, 배양기(12)의 인클로저(14) 내에 수용된다(도 3). 다른 백들(34, 36, 38, 40 및 46) 및 표본 수집 수단(62)은 인클로저(14)의 외부에 위치한다.
인클로저(14) 외부에 위치한 구성요소들에 세포 확장 백(54)을 연결하는 튜브들(60, 66 및 70)은 인클로저(14)를 봉입하도록 하는 배양기의 성분을 통과하며, 이 성분은 도 3 및 도 6에 표시되어 있다.
이 성분은 배양기(12)의 캐비닛의 개구부의 주변 가장자리 상에 고정되고 상기 언급된 튜브들 60, 66 및 70을 위한 3 개의 통과 홈들(82)을 포함하는 물질(예컨대, 플라스틱 물질)의 블록(80)에 의해 형성된 벽 구성요소이다. 이 홈들(82)은 약간 직선이며, 서로 이격되어 있다. 블록(80)은 약간 평면 형태를 가지며 수직 평면 내에서 연장한다. 이는 캐비닛의 개구부의 주변 가장자리에 대하여 지탱하는 후면 및 약간 수평 배향을 가지며 블록의 전체 가로 치수에 걸쳐서 연장하는 홈들(82)이 형성되어 있는 정면을 포함한다.
홈들(82)은 약간 원형인 단면을 가지며, 튜브들(60, 66 및 70)의 내부 직경보다 약간 초과하는 내부 직경을 갖는다. 이 튜브들은 이 홈들에 완전히 맞물리며, 선택적으로는 캐비닛의 개구부의 말단의 주변장치 씰(52)의 컷-아웃(84)를 통과하도록 의도된다.
인클로저(14)의 폐쇄 위치에서, 내부 도어(48)의 주변 가장자리는 씰(52) 상에 지탱하고, 씰(52)의 컷-아웃(84) 내에서 연장하는 튜브들(60, 66 및 70)의 부분들을 덮도록 의도되며, 외부 도어(50)의 주변장치 씰은 블록의 정면 상에 지탱하고, 홈들(82) 및 홈들 내에서 연장하는 튜브들(60, 66 및 70)의 부분들을 덮도록 하는 의도이다.
도시된 예에서, 블록(80)의 하부 홈은 세포 확장 백(54)을 수거 백들(46)에 연결하는 튜브(66)의 통로를 형성하고, 중간 홈은 백(54)을 표본 수집 수단(62)에 연결하는 튜브(60)용 통로를 형성하며, 상부 홈은 백(54)을 백들(34, 36, 38 및 40)에 연결하는 튜브(70)용 통로를 형성한다.
도 3에 도시된 바와 같이, 튜브(70)는 배양 배지의 백(34)의 부근에서 펌프(22)에 맞물리며, 이 펌프는 배양 배지의 오염을 회피하는 연동 펌프이다.
상기 언급된 밸브들(20)은 도시된 예에서 개수가 12 개이며, 도 3에서 86 내지 108로 참조되어 있다.
튜브들(66, 60, 70 및 78)은 교반 장치(16)가 갖는 4 개 밸브들(86, 88, 90 및 92)에 각각 맞물린다(도 3 및 도 4).
인클로저(14)의 외부에 위치한 튜브(70)의 부분은 서로 이격되어 있는 2 개 밸브들(94 및 96)에 맞물리며, 이 중에 하나(94)는 배양 배지 백(34)에 인접하여 위치되어 있다. 다른 밸브(96)는 밸브(70)의 연결부로부터 튜브(72)로 흐름을 따라서 그리고 튜브(70)의 연결부로부터 튜브(74)로 흐름을 거슬러 올라 위치되어 있다.
백들(36 및 38)의 유입 포트들에 연결된 튜브들(72)은 각각 밸브들(98 및 100)에 맞물리며, 튜브들(74)은 백들(36 및 38)의 유출 포트들에 연결되고, 밸브들(102 및 104)에 각각 맞물린다.
공기 트랩을 형성하는 백(40)에 연결된 튜브들(76)은 각각 밸브(106 및 108)에 맞물린다.
펌프(22) 및 밸브들은 바람직하게는 튜브 또는 홈의 세로축에 수직한 방향으로 병렬 이동에 의하여 튜브를 장착하기 위한 가로 홈을 포함한다.
도 3에 개략적으로 도시되어 있고, 도 2에서 볼 수 있는 바와 같이, 백들(34, 36, 38, 40 및 56) 및 이 백들을 세포 확장 백(54)에 연결하는 튜브들(40, 72, 74, 76 및 78)은 세포 확장 백(54)이 수평으로 놓이게 경우 이 백(54) 상에 모두 위치한다. 백들(46), 표본 수집 수단(62) 및 이 구성요소들을 세포 확장 백(54)에 연결하는 튜브들(60 및 66)은 세포 확장 백(54)이 수평으로 놓이게 되는 경우 상기 백(54) 아래에 모두 위치한다.
백들(36, 38 및 56)은 백들(34 및 40)이 위치한 수평면 아래에 위치한 동일한 수평면 내에 실질적으로 위치한다.
소모품 키트는 하기 방식에 따라 자동화 장치 내에 설치될 수 있다. 배양기(12)의 도어들(48 및 50)은 개방되어 있다. 백들(34, 36, 38, 40 및 46)은 프레임에 고정되고, 백(56)은 교반 장치(16)의 팔에 고정된다. 백(54)은 교반 장치 상으로 편평한 위치에 배치된다. 튜브(70)는 밸브들(94 및 96)에 맞물리고 펌프(22)에도 맞물리며, 튜브들(72)은 밸브들(98 및 100)에 맞물리며, 튜브들(74)은 밸브들(102 및 104)에 맞물리며, 튜브들(76)은 밸브들(16 및 108)에 맞물린다. 튜브들(66, 66, 70 및 78)은 장치(16)가 갖는 밸브들(86, 88, 90 및 92)에 각각 맞물린 후에, 튜브들(66, 60 및 70)은 각각 블록(80)의 홈들(82)에 맞물린다. 튜브들은 튜브들에 이미 사전 조립되지 않은 백들에 연결되며, 이후 배양기(12)의 도어들(48 및 50)은 폐쇄된다.
이제 본 발명에 따른 교반 장치의 일 실시형태를 도시하는 도 7 내지 도 13을 하기에서 참조한다.
교반 장치(16)는 세포 확장 백(54)(도 7 내지 도 13에서는 미도시)을 지지하기 위한 플레이트 또는 트레이(110)를 포함하며, 이 트레이는 트레이를 도 7 및 도 11에 도시된 제1의 실질적으로 수평인 위치로부터 도 8 및 도 10에 도시된 실질적으로 수직인 위치로 이동시키기 위해 제1 수평축 A 주위(트레이(110)는 트레이가 수평면에 대하여 약 45° 경사진 도 9에 도시된 위치와 같이 이 극한의 위치들 사이에서 임의의 위치를 채용하는데 적합하다) 및 플레이트 또는 트레이(110) 가 세포 확장 백의 내용물을 교반하고 균질화하기 위하여 (+ / - 8°의 대략적인 각 범위에 걸쳐서) 진동하도록 설계되어 있는 제2 수평축 B 주위로 회전하면서 이동 가능하도록 장착된다.
트레이(110)는 직사각형 모양을 가지며, 그 치수는 트레이 상에서 편평하게 위치되도록 의도된 세포 확장 백(54)(길이가 약 40 ㎝ 및 폭 22 ㎝)의 치수보다 약간 더 크다. 트레이(110)는 백의 주변 유지 가장자리들(peripheral retaining edges: 112)을 포함하며, 천공되어 플레이트에 대해 압박된 백(54)의 면이 적어도 부분적으로는 배양기(12)의 인클로저(14) 내에서 지배적인 환경적인 조건에 직접적으로 노출될 수 있다.
트레이(110)는 트레이의 짧은 변들 중 하나에 해당하는 트레이의 말단들 중 하나에 세포 확장 백(54)을 고정시키는 갈고리(114)를 포함하며, 상기 갈고리는 트레이가 직립 또는 수직 위치에 있는 경우 장치(16)의 최고점을 나타내고자 하는 의도이다. 트레이(110)는 갈고리(114)의 반대편 말단에 상기 언급된 밸브들(86, 88 및 90)을 장착시키기 위한 3 개의 구멍들을 포함한다.
장치(16)는 U-자형 부분(116)을 포함하며, 이의 2 개의 측면 가지들의 자유 말단들은 밸브들(86, 88 및 90)을 갖는 트레이(110)의 말단의 측 말단들에 고정된 피봇들(118) 상에 관절로 이어져 있다(articulated). 이 피봇들(118)은 정렬되며, 상기 언급된 트레이(110)의 제1 회전축을 정의한다.
U-자형 부분(116)의 가지들은 이들의 중간 정도에 장치(16)의 프레임(122) 상에 관절로 이어져 있는 피봇들(120)을 가지며, 이 피봇들(120)은 정렬되어 있으며, 플레이트(110)의 상기 언급된 제2 회전축 B을 정의한다.
트레이(110)가 약간 수평인 위치에 있는 경우(도 7), U-자형 부분(116)은 트레이의 3 개 변들을 따라(2 개변들은 길이가 더 길고, 갈고리(114)와의 변은 길이가 짧다) 연장한다.
축 A 주위로 트레이(110)의 변이는 U-자형 부분(116)의 팔들 사이에 장착된 잭(124)에 의해 제공되고, 잭 실린더는 이 부분(116)의 중간 부분에 부착되며, 잭 피스톤 봉은 밸브들(86, 88 및 90)을 갖는 트레이의 말단에 고정된다.
도 10 및 도 11에서 볼 수 있는 바와 같이, 잭(124)의 피스톤 봉은 밸브들을 갖는 트레이(110)의 말단 상에 고정된 클레비스(121)가 갖는 축 상에 경첩으로 달려 있으며, 이 축은 약간 수평이다. 잭(124)의 실린더는 제2 클레비스(125)가 갖는 약간 수평인 축 상에서 관절 연결된 제1 클레비스(123)가 갖는 약간 수직인 축 상에서 관절 연결되며, 제2 클레비스(125)는 실질적으로 중간 부분에서 부분(116)의 중간 부분에 고정된다.
잭(124)의 피스톤 봉이 연장된 위치에 있는 경우, 트레이(110)는 도 7 및 도 11에 도시된 약간 수평인 위치에 있다. 잭(124)의 피스톤 봉이 완전히 수축된 위치에 있는 경우, 트레이(110)는 도 8 및 도 10에 도시된 약간 수직인 위치에 있다. 도 9의 경우에 있어서, 잭(124)의 피스톤 봉은 부분적으로 수축되어 있거나 아웃풋(output)되어 있다.
축 B 주위로 트레이의 변위는 아웃풋 샤프트가 벨트(127)를 통해 구동하는 전기 모터(126)에 의하여 제공되며, 휠은 U-자형 부분(116)이 갖는 피봇들(120) 중 하나를 구동시키고자 하는 의도이다(도 10). 모터(126)는 적절한 수단에 의하여 장치의 몸체(122)에 고정된다.
도 12 및 도 13에 도시된 바와 같이, 교반 장치(16)의 몸체(122)는 축 B 주위로 트레이(110)의 회전을 잠금하기 위한 시스템(129)을 가지며, 시스템(129)은 트레이를 차단하는 U-자형 부분(116)이 갖는 구성요소(133)와 협력하는 수축 가능한 핑거(131)를 포함한다.
핑거(131)는 도 12에 도시된 연장된 위치로부터 도 13에 도시된 수축된 위치로 이동 가능하며, 이 핑거의 변위는 컴퓨터 시스템(24)에 의하여 제어된다.
U-자형 부분(116)이 갖는 구성요소(133)는 길게 늘어진 형상을 가지며, 피봇들(120) 중 하나에 체결된 제1 말단 및 핑거(131)가 축 B 주위로 트레이(110)의 회전을 차단하기 위하여 맞물리도록 의도된 노치(notch)가 있는 제2 말단을 포함한다. 핑거(131)가 배치되는 경우(도 12), 구성요소(133)의 노치의 측면들은 핑거 상에 맞물려서, 트레이가 축 B 주위로 임의로 회전하는 것을 방지할 수 있다. 핑거가 수축된 위치에 있는 경우(도 13), U-자형 부분(116) 및 트레이(110)는 축 B 주위로 회전하며 이동될 수 있다.
축 B 주위로 트레이(110)의 회전을 차단하는 것은 세포 확장 백(54)의 세포를 표본 수집 또는 수거할 목적으로 트레이가 축 A 주위에서 경사지거나 수직인 위치로 이동되는 경우 컴퓨터 시스템(24)에 의하여 활성화되어 세포 확장 백의 중량에 의하여 트레이의 일 측 상에 가해진 힘으로 인하여 트레이를 축 B 주위로 이동하는 것을 방지할 수 있다.
또한, 교반 장치(16)는 상기 언급된 밸브(92)를 고정하고, 공기 트랩을 형성하는 백(56)을 부착하기 위한 수직 암(128)을 포함한다. 밸브(92)는 팔(128)의 중간 높이 쯤에 위치되며, 팔의 상단은 백(56)을 거는 갈고리(130)를 포함한다(도 7-9).
장치(16)는 몸체(122)가 갖는 축들 A 및/또는 B 주위로 플레이트(110)의 위치의 센서들(132)을 더 포함한다.
도 14는 본 발명에 따른 방법의 단계들을 보여주는 순서도이다.
방법의 제1 단계(130)는 컴퓨터 시스템(24)을 이용하여 생물학적 프로토콜에 특이적인 배양 매개변수들을 기록하고 입력하는 것이다. 입력은 작업자에 의하여 수행되며, 입력된 매개변수들은 예를 들면, 환자 식별, 소모품 키트의 식별, 세포 확장 백(54)의 체적 등이다. 이 매개 변수들의 입력을 용이하게 하기 위하여, 컴퓨터 시스템(24)은 바코드 판독기를 구비할 수 있으며, 소모품 키트는 컴퓨터 시스템(24)에 키트의 개수 및 성질뿐만 아니라 각각의 백의 체적을 직접적으로 알려주는 바코드를 포함할 수 있다.
방법은 앞에서 기재된 바와 같이, 자동화 장치(10)에 소모품 키트의 제2 설치 단계(132)를 포함한다. 이 설치는 컴퓨터 시스템(24)에 의하여 안내되고 지시될 수 있다. 설치는 몇 개의 하부-단계들로 수행될 수 있으며, 컴퓨터 시스템(24)은 하부 단계의 생성 및 다음 하부 단계로의 전환을 인가하거나 비인가하도록 지시함으로써 작업자에게 설치 지시사항을 보여준다. 이 하부 단계들은 예를 들면, 다음과 같다:
- 상이한 백들을 프레임(18) 상 및 배양기(12)의 인클로저(14) 속에 놓는 단계,
- 배양 배지의 백(34)의 튜브들(70)을 밸브들(94 및 96) 내에 놓는 단계(컴퓨터 시스템(24)은 작업자가 이 하부 단계를 인가한 경우에 폐쇄되는 밸브들(94 및 96)의 개방을 제어한다)
- 성장 인자의 백(36) 및 공기 트랩을 형성하는 백(40)의 튜브들(72, 74 및 76)을 밸브들(98, 102 및 106) 내에 놓는 단계(컴퓨터 시스템(24)은 작업자가 이 하부 단계를 인가한 경우에 폐쇄되는 이 밸브들의 개방을 제어한다)
- 성장하는 세포의 백(38) 및 공기 트랩을 형성하는 백(40)의 튜브들(72, 74 및 76)을 밸브들(100, 104 및 108) 내에 놓는 단계(컴퓨터 시스템(24)은 작업자가 이 하부 단계를 인가한 경우에 폐쇄되는 이 밸브들의 개방을 제어한다)
- 공기 트랩을 형성하는 백(56)의 튜브(78)를 밸브(92) 내에 놓는 단계(컴퓨터 시스템(24)은 작업자가 이 하부 단계를 인가한 경우에 폐쇄되는 이 밸브의 개방을 제어한다)
- 튜브들(70, 60 및 66)을 차례로 밸브들(90, 88 및 86) 내에 놓는 단계(컴퓨터 시스템(24)은 작업자가 각각의 하부 단계를 인가한 경우에 폐쇄되는 이 밸브들 서로 서로의 개방을 제어한다).
본 발명의 방법은 컴퓨터 시스템(24)이 밸브들 및 교반 장치(16)의 트레이(110)를 기울이기 위한 수단들(잭(124) 및 모터(226))의 적당한 기능을 제어하는 "자가-테스트"라고 하는 테스테의 제3 단계(134)를 포함한다. 배양기(12)의 조업은 예를 들면, 인클로저(14) 내의 온도 및 CO2 수준이 배양 설정점들에서 안정화되면 개시될 수 있는 생물학적 프로토콜의 시작에서 암묵적으로 제어될 수 있다.
본 발명에 따른 방법은 도 15 내지 도 19에서 다이어그램들에 도시된 몇 개의 하부 단계들을 포함하는 유체들의 분배의 추가적인 단계(136)를 포함한다.
분배 단계(136)의 제1 하부 단계는 도 15에 도시되어 있으며, 튜브들(70, 72 및 74) 내에 함유된 공기를 배출하는 단계로 구성되어 있다. 이를 위하여, 밸브들(94, 96, 106 및 108)은 개방되며, 펌프(22)는 컴퓨터 시스템(24)에 의하여 작동되어 배양 배지가 튜브들(70, 72 및 74) 내의 백(34)으로부터 공기 트랩을 형성하는 백(40)으로 유동한다. 이후, 튜브들(70, 72 및 74)은 배양 배지로 충진되며, 백(40)은 배양 배지로 적어도 부분적으로 충진된다. 펌프(22)는 소정의 유량으로 설정되며, 소정의 시간 동안 작동하는데, 종료 시에 펌프는 정지되며, 밸브들(94, 96, 106 및 108)은 폐쇄된다.
분배 단계(136)의 제2 하부 단계는 도 16에 도시되어 있으며, 튜브들(70 및 78) 내에 함유된 공기를 배출하는 단계로 구성되어 있다. 이를 위하여, 밸브들(94, 96 및 92)은 개방되며, 펌프(22)는 컴퓨터 시스템(24)에 의하여 작동되어 배양 배지가 튜브들(70 및 78) 내의 백(34)으로부터 공기 트랩을 형성하는 백(56)으로 유동한다. 이후, 튜브(78)는 배양 배지로 충진되며, 백(56)은 배양 배지로 적어도 부분적으로 충진된다. 펌프(22)는 소정의 유량으로 설정되며, 소정의 시간 동안 작동하는데, 종료 시에 펌프는 정지되며, 밸브들(94, 96및 92)은 폐쇄된다.
분배 단계(136)의 제3 하부 단계는 도 17에 도시되어 있으며, 세포 확장 백(54)에 배양 배지를 공급하는 단계로 구성되어 있다. 밸브들(94, 96 및 90)은 개방되며, 펌프(22)는 컴퓨터 시스템(24)에 의하여 작동되어 배양 배지가 백(34)으로부터 백(54)으로 유동한다. 이후, 백(54)은 배양 배지로 충진된다. 펌프(22)는 소정의 유량으로 설정되며, 백(54)으로의 분배를 위한 배양 배지의 체적뿐만 아니라 펌프의 공급 유량을 특정하는 생물학적 프로토콜의 매개변수들 내에서 소정의 시간 동안 작동한다. 이후, 펌프(22)는 정지되며, 밸브들(94, 96 및 90)은 폐쇄된다.
분배 단계(136)의 제4 하부 단계는 도 18에 도시되어 있으며, 세포 확장 백(54)에 성장 인자를 공급하고, 이후 성장 인자의 백(36)을 배양 배지로 린스하며, 백(36)의 내용물을 세포 확장 백(54)으로 유동시키는 단계로 구성되어 있다. 제1 단계에서, 밸브들(104 및 90)은 성장 인자를 함유하는 배지가 튜브들(74 및 70) 내에서 순환에 의하여(화살표들(138)) 백(36)으로부터 백(54)으로 중력에 의하여 유동하도록 개방되어 있다. 백(54)은 성장 인자로 충진된다. 밸브들(104 및 90)은 백(54)에 분배될 성장 인자를 함유하는 배지의 체적에 따라 소정의 시간 동안 개방된다. 이 기간 이후에, 밸브들(104 및 90)은 폐쇄된다. 이후, 밸브들(94 및 100)은 개방되며, 펌프는 (소정의 유량 및 지속기간에) 작동되어 백(36)에 린스를 목적으로 배양 배지를 공급한다. 밸브들(94 및 100)은 폐쇄되고, 밸브들(104 및 90)은 다시 개방되어 백(36) 내에 함유된 린스 생성물이 중력에 의하여 세포 확장 백(54)으로 유동하도록 한다. 밸브들(104 및 90)은 백(54)에 분배될 린스 생성물의 체적에 따라 소정의 시간 동안 개방된다. 이 기간 후에, 밸브들(104 및 90)은 폐쇄된다. 백(36)을 린스하고 린스 생성물을 세포 확장 백(54)으로 배출하는 이 단계들은 생물학적 프로토콜의 매개변수들에 따라 1 회 이상 반복될 수 있어서, 예를 들면, 백(36) 내에 원래 함유된 성장 인자의 총량이 백(54)에 분배된다.
분배 단계(136)의 제5 하부 단계는 도 19에 도시되어 있으며, 제4 하부 단계에서 수행되는 것과 유사하게, 세포 확장 백(54)에 배양될 세포를 공급한 이후에 세포를 함유하는 백(38)을 배양 배지로 린스하며, 백(38)의 내용물을 세포 확장 백(54)으로 배출하는 단계로 구성되어 있다. 제1 단계에서, 밸브들(102 및 90)은 개방되어, 배양될 세포를 함유하는 배지는 중력에 의하여 백(38)으로부터 튜브들(74 및 70) 내에서 순환하는(화살표들(140)) 백(54)으로 유동한다. 백(54)은 성장하는 세포로 충진된다. 이후, 밸브들(102 및 90)은 폐쇄되고, 밸브들(94 및 98)은 개방되며, 펌프(22)는 (소정의 유량 및 지속기간에) 작동되어 백(38)에 이를 린스하기 위한 배양 배지를 공급한다. 밸브들(94 및 98)은 폐쇄되고, 밸브들(102 및 90)은 다시 개방되어 백(38) 내에 함유된 린스 생성물이 중력에 의하여 세포 확장 백(54)으로 유동하도록 한다. 이후, 밸브들(102 및 90)은 폐쇄된다. 백(38)을 린스하고 린스 생성물을 세포 확장 백(54)으로 배출하는 이 단계들은 예를 들면, 백(36) 내에 원래 함유된 배양될 세포 모두가 백(54)에 분배되기 위하여, 생물학적 프로토콜의 매개변수들에 따라 1 회 이상 반복될 수 있다.
분배 방법의 단계(136) 이후에 세포 확장 백(54)의 내용물의 균질화가 있을 수 있는데, 이는 도 20에 개략적으로 도시되어 있다. 이 단계 이후에, 컴퓨터 시스템(24)은 교반 장치(16)를 제어하여 트레이(110)가 앞에서 설명된 바와 같이, 축 B 주위에서 진동한다(화살표들(142)). 이 진동들의 진폭, 진동수, 지속시간 및 타이밍(휴지, 교반, 휴지 등)은 생물학적 프로토콜의 매개변수들에 의하여 결정된다.
이후, 본 발명의 방법은 며칠간, 예를 들면, 10 일간 지속할 수 있는 배양 단계(144)를 포함한다. 주기적으로, 프로토콜 매개변수들에 따라, 세포 확장 백(54)의 내용물은 상기에 설명된 바와 같이 균질화되고, 축 B 주위에서 트레이의 회전에 의하여 이동될 수 있다. 이 균질화(주기, 진동수 및 진폭)는 분배 단계(136) 이후에 균질화 단계에 상관 없이 프로토콜 매개변수들에 의하여 결정된다.
배양 단계(144) 동안에, 작업자는 세포 확장 백(54)으로부터 1회 이상의 표본 수집(146)을 수행할 수 있다(도 14 및 도 22). 이 표본들 중 일부는 컴퓨터 시스템에 의하여 부가될 수 있다. 예를 들면, 3 개 표본들이 필요할 수 있으며, 분배 단계, 배양 단계(144)의 시작 이후 3 일 및 이 단계(144)의 시작 이후에 7 일 이후 즉시 수행될 수 있다. 다른 표본 수집들은 수요에 따라 작업자에 의하여 이루어질 수 있으며, 컴퓨터 시스템은 작업자가 이 자발적인 표본들을 수행하도록 제안할 수 있다.
작업자가 컴퓨터 시스템(24)에 작업자가 표본을 채취할 준비가 되어 있다는 것을 확인시키는 경우, 컴퓨터 시스템은 잭(124)을 작동시켜 교반 장치(16)의 트레이(110)가 도 9 및 도 22에 개략적으로 도시된 바와 같이, 축 A의 주위로 수평면에 대하여 예를 들면, 45°의 경사진 위치로 회전하게 된다. 이후, 컴퓨터 시스템(24)은 장치(16)의 센서들을 통해 트레이(110)의 정확한 위치를 검출할 수 있다.
컴퓨터 시스템(24)은 밸브(88)의 개방을 제어하여, 세포 확장 백(54)의 내용물의 일부가 중력에 의하여 튜브(60) 내의 백(54)으로부터 배양기(12)의 인클로저(14)의 외부에 위치한 표본 수집 수단(62)으로 유동한다. 작업자는 표본 수집 수단(62)에 맞물리는 "루어 록(Luer Lock)" 유형의 연결이 구비된 주사기(148)를 이용하여 세포 확장 백(54)으로부터 표본을 채취할 수 있다. 표본 수집 이후에, 밸브(88)는 폐쇄되며, 교반 장치(16)의 트레이(110)는 약간 수평인 위치로 복귀된다.
이후, 작업자는 표본의 분석을 수행할 수 있으며, 이 분석의 결과(148)는 작업자에 의하여 컴퓨터 시스템(24) 내에 입력되고 저장될 수 있다.
배양 단계(144) 동안에, 또한, 작업자는 소모품 키트의 일부를 제거할 수 있다(소모품의 제1 인출 단계(150) - 도 14 및 도 21). 제거될 수 있는 소모품 키트의 성분들은 모든 백들(34, 36, 38 및 40) 및 튜브(70)에 연결된 튜브들(72, 74 및 76)이다. 이를 위하여, 세포 확장 백의 오염을 회피하기 위하여, 작업자는 튜브(70)를 상기 언급된 블록(80)의 교차점의 흐름을 거슬러 올라 절단하여야 하며, 동시에 배양기(12)의 챔버(14) 내에 남아있는 튜브(70)의 자유단을 용접하거나 죄어야 한다. 이 작업은 절단하는 동안에 튜브의 말단을 봉입하는 적절한 절단용 플라이어 또는 클리퍼를 이용하여 작업자에 의하여 수행될 수 있다. 이후, 밸브들(94 내지 108)은 개방되어 작업자에 의하여 튜브들(70, 72, 74 및 76)을 이 밸브들뿐만 아니라 펌프(22)로부터 제거할 수 있도록 한다(도 21). 작업자가 컴퓨터 시스템(24)에 이 구성요소들의 제거를 일단 확인시키면, 컴퓨터 시스템은 밸브들(94 내지 108)의 폐쇄를 제어한다.
본 발명에 따른 방법은 세포 배양 후에 수거 단계(152)를 더 포함한다(도 14, 23 및 24). 배양 단계(144)의 종결 후에 작업자의 요청에 따라, 컴퓨터 시스템(24)은 트레이(110)가 축 B 주위로 회전하는 것을 차단하고 잭(124)를 제어하여 교반 장치(16)의 트레이(110)가 축 A 주위에서 도 8, 23 및 24에 도시된 약간 수직인 위치로 이동한다. 이후, 컴퓨터 시스템(24)은 장치(16)의 센서들을 통해 트레이(110)의 정확한 위치를 검출할 수 있다.
이어서, 컴퓨터 시스템(24)은 밸브(86)의 개방을 제어하여, 세포 확장 백(54)의 내용물이 중력에 의하여 튜브(66)를 통해 2 개의 수거 백들(46)로 유동한다(도 23).
수거 백들(46)이 달려있는 프레임(18)이 갖는 플레이트들(42)은 작업자에 의하여 수동으로 또는 컴퓨터 시스템(24)에 의하여 제어된 변위 장치의 수단 중 어느 하나에 의하여 도 2 및 도 23에 도시된 플레이트들의 수직 위치로부터 도 24에 개략적으로 도시된 플레이트들의 수평 위치로 변위될 수 있다. 플레이트들(46)의 기울임으로 인하여 백들(46)이 백(54) 및 튜브(66)의 적어도 일부의 완전히 아래에 위치되도록 하여, 세포 확장 백(54)의 내용물이 가능하다면 수거 백들(46)로 충분히 이송된다. 작업자가 컴퓨터 시스템(24)에 수거 단계가 완료되었다는 것을 확인시키는 경우, 시스템은 밸브(86)의 폐쇄 및 잭의 배치를 명령하여, 트레이(110)가 약간 수평인 위치로 복귀하게 된다.
이후, 백들(46)은 예를 들면, 세포의 처리 및 세포 요법을 위해 환자의 신체 내에 이 세포를 재주사할 수 있기 때문에 자동화 장치(10)로부터 제거된다. 이를 위하여, 튜브(66)는 상기 클리퍼에 의하여 절단 및 용접될 수 있거나, 백들(46)은 튜브(66)로부터 분리된다.
방법의 최종 단계는 자동화 장치(10)로부터 소모품의 인출(154)의 제2 단계로 구성되며, 백들(54 및 56) 및 남아있는 튜브들(66, 60, 70 및 78)은 제거된다. 이를 위하여, 컴퓨터 시스템(24)은 밸브들(86, 88, 90 및 92)의 개방을 제어하여 작업자에 의하여 튜브들(66, 60, 70 및 78)의 인출을 인가하게 된다. 작업자가 컴퓨터 시스템(24)에 이 구성요소들의 제거를 일단 확인시키면, 컴퓨터 시스템은 밸브들(86, 88, 90 및 92)의 폐쇄를 제어한다.
생물학적 프로토콜이 완료되는 경우, 컴퓨터 시스템은 배양 보고를 편집할 수 있으며, 이 보고는 양호한 추적성 프로토콜을 확보하는 하기 정보를 포함할 수 있다: 제작자-특이적 정보(오토메이트의 식별 번호, 운영 시스템 소프트웨어 버전, 생물학적 모니터링 프로토콜 소프트웨어 버전), 이들 매개변수들의 하나 이상이 디폴트가 아닌 경우 일련의 프로토콜 매개변수들, 작업자에 의하여 수행되는 행동(년월일시분초 양식의 각각의 행동의 일자 포함), 연결 식별자를 통한 이 행동의 장본인(author), 식별 코딩 또는 모호한 용어 "시스템" 이벤트들(이벤트 양식 년월일시분초의 일자 포함)을 통한 행동의 성격, 코딩 셋 또는 모호한 용어 시스템을 통한 이벤트의 성격(알람, 사용자 알람, 고장 검출 등), 표본 분석의 결과(각각의 표본 수집의 일자, 표본 수집의 장본인, 표본 수집의 분석 결과 등을 포함) 및 (배양 후 수거된 세포의 분석으로부터) 그래프트의 정보. 이 배양 보고는 상기 언급된 네트워크 워크스테이션에 의하여 접근될 수 있다.

Claims (24)

  1. 배양 배지, 성장 인자 및 배양될 세포의 탱크들, 세포 배양 또는 확장용 용기가 수용되는 자동 온도 조절 인클로저(enclosure)를 갖는 배양기 및 상기 인클로저 내에서 배양 조건을 제어하고, 소정의 순서로 유체를 분배하기 위한 밸브를 관리하도록 의도된 데이터를 입력하고 기록하는 수단을 포함하는 제어 컴퓨터 시스템을 포함하는 세포 배양의 자동화 장치로서, 상기 컴퓨터 시스템에 의하여 제어되고, 상기 인클로저 내에 수용되는 세포 배양 또는 확장 용기를 지지하고 교반하기 위한 장치를 포함하는 것을 특징으로 하고, 상기 용기는 상기 탱크들에 연결된 하나 이상의 유입 포트 및 배양 이후에 세포의 수거 및 저장 수단에 연결된 하나 이상의 유출 포트를 갖는 백(bag)에 의해 형성되고, 이 수거 및 저장 수단 및 상기 탱크들은 상기 인클로저의 외부에 위치하고, 상기 세포 확장 백과 함께 상기 인클로저 내에 배치된 사전 조립된 모듈을 형성하고, 상기 세포 배양 백에 상기 배양 배지, 성장 인자 및 배양될 세포를 공급하며 상기 인클로저를 폐쇄한 채로 상기 수거 및 저장 수단 내에서 상기 세포 확장 백의 내용물을 수거하도록 상기 인클로저의 벽을 통과하는 도관들(conduits)에 의해 상기 세포 확장 백의 상기 포트들에 연결되는 것을 특징으로 하는 자동화 장치.
  2. 제1항에 있어서, 상기 세포 확장 백은 상기 인클로저의 외부에 위치한 표본 수집 수단으로의 도관에 의하여 연결된 표본 수집 유출구를 더 포함하되, 상기 도관은 상기 배양기의 상기 벽을 통과하고 상기 사전 조립된 모듈의 일부인 것을 특징으로 하는 자동화 장치.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 배양기는 개구부를 가지며 밀폐 도어(sealed closure door)가 구비된 캐비닛을 포함하되, 상기 도관들의 통로 수단은 상기 개구부의 주변 가장자리 상에 장착되고 상기 도관들과 약간 평행하고 상기 도관들이 맞물리는 홈들을 가지며, 상기 홈들은 폐쇄된 위치에 있는 경우 상기 밀폐 도어에 의하여 덮히도록 의도되는 것을 특징으로 하는 자동화 장치.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 성장 인자 및 배양될 세포의 탱크는, 성장인자의 백 및 배양될 세포의 백의 각각의 내용물이 중력에 의하여 상기 세포 확장 백으로 유동할 수 있도록 상기 세포 확장 백의 유입 포트 상에 위치하는 백들에 의하여 형성되는 것을 특징으로 하는 자동화 장치.
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 수거 및 저장 수단은, 배양 후, 상기 세포 확장 백의 내용물이 중력에 의하여 상기 수거 및 저장 수단의 하나 또는 두 개의 백들로 유동할 수 있도록 상기 세포 확장 백의 유출 포트 아래에 적어도 부분적으로 위치하는 하나 또는 두 개의 백들을 포함하는 것을 특징으로 하는 자동화 장치.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 세포 확장 백은 플렉서블 액밀하고 기체 투과성 벽, 특히 CO2 투과성 벽이며, 바람직하게는 배양될 세포가 상기 백의 벽과 부착하는 것을 최대한으로 제한하는 특성을 갖는 것을 특징으로 자동화 장치.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 배양 배지의 상기 세포 확장 백으로의 공급 및 상기 탱크들을 린스하기 위하여 상기 성장 인자 및 배양될 세포의 탱크에의 공급을 제어하기 위한 연동 펌프를 포함하는 것을 특징으로 하는 자동화 장치.
  8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 공기 트랩을 형성하는 2 개의 백들을 포함하되, 이들 중 하나는 성장 인자 및 배양될 세포의 탱크에 연결되고, 다른 하나는 상기 세포 확장 백에 연결되며, 상기 2 개의 백들은 상기 도관들, 상기 세포 확장 백 및/또는 상기 탱크들 내에 함유된 공기를 채집 및 저장하도록 의도되는 것을 특징으로 하는 자동화 장치.
  9. 제1항 내지 제8항 중 어느 하나에 있어서, 상기 도관들은 플렉서블 튜브들에 의하여 형성되며, 이들 중 일부는 폐쇄된 위치에서 상기 튜브들을 조이도록 의도되는 밸브들을 통과하는 것을 특징으로 하는 자동화 장치.
  10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 지지 및 교반 장치는 제1 회전축 주위로 회전하여 장착되고, 세포 배양을 위해 약간 수평인 위치 및 배양 후 상기 세포의 수거를 위해 약간 수직인 위치 사이에서 상기 축 주위로 이동가능한 상기 세포 확장 백을 지지하는 트레이를 포함하는 것을 특징으로 하는 자동화 장치.
  11. 제10항에 있어서, 상기 트레이는, 상기 트레이가 상기 세포 확장 백의 내용물의 교반 및 균질화를 위해 진동하도록 의도되는 제2 수평축 주위로 회전하여 장착되는 것을 특징으로 하는 자동화 장치.
  12. 제10항 또는 제11항에 있어서, 상기 트레이는 상기 세포 확장 백의 공급, 상기 백의 내용물의 수거 및 상기 백의 표본 수집 제어용 밸브들을 갖는 것을 특징으로 하는 자동화 장치.
  13. 제10항 내지 제12항 중 어느 하나에 있어서, 상기 지지 및 교반 장치는 장치의 상단에서 상기 세포 확장 백에 연결된 공기 트랩을 형성하는 백을 부착하는 수단을 갖는 수직 암(arm)을 포함하는 것을 특징으로 하는 자동화 장치.
  14. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 수거 및 저장 수단은 수평축 주위로 회전하여 장착되고, 약간 수직인 위치 및 약간 수평인 위치 사이에서 상기 축 주위로 이동가능하며, 여기서 상기 수거 및 저장 수단은 완전히 상기 세포 확장 백 아래에 위치되는 것을 특징으로 하는 자동화 장치.
  15. 세포 배양 자동화 장치용 무균 및 1회용 세포 배양 키트로서, 하나 이상의 세포 확장 백 및 상기 하나 이상의 세포 확장 백을 다른 백들 또는 탱크들에 연결하는 플렉서블 튜브들을 포함하되, 상기 튜브들 및 상기 세포 확장 백은 사전 조립되고 상기 세포 확장 백은 유입 포트 및 유출 포트 및 결국 표본 수집 유출 포트를 포함하는 것을 특징으로 하는 세포 배양 키트.
  16. 제15항에 있어서, 상기 세포 확장 백의 유입 포트는 튜브들에 의하여 성장 인자의 백의 유입 및 유출 포트들에 연결되며, 배양될 세포를 함유하는 백의 유입 및 유출 포트들에 연결되는 것을 특징으로 하는 세포 배양 키트.
  17. 제16항에 있어서, 공기 트랩을 형성하는 2 개의 백들을 더 포함하되, 이들 중 하나는 상기 성장 인자 및 성장하는 세포의 백의 상기 유출 포트들에 연결되며, 나머지 하나는 상기 세포 확장 백의 상기 유입 포트에 연결되는 것을 특징으로 하는 세포 배양 키트.
  18. 제15항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, 튜브들에 의하여 상기 세포 확장 백의 상기 유출 포트에 연결되는, 배양 후 세포를 수거하기 위한 하나 또는 두 개의 백들을 포함하는 것을 특징으로 하는 세포 배양 키트.
  19. 세포 배양 자동화 장치용 지지 및 교반 장치로서, 세포 확장 백을 지지하기 위한 트레이를 포함하되, 이 트레이는 3 개의 밸브들을 가지며 상기 트레이를 약간 수평인 위치로부터 약간 수직인 위치로 기울이기 위한 제1 수평축 및 상기 트레이가 상기 세포 확장 백의 내용물을 교반하고 균질화하기 위하여 진동하도록 의도되는 제2 수평축 주위로 회전하여 장착되며, 상기 언급된 수평축들 주위로 트레이를 기울이기 위한 제어 수단을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 지지 및 교반 장치.
  20. 제19항에 있어서, 상기 장치는 장치의 상단에서 공기 트랩을 형성하는 백을 부착하는 수단을 갖는 수직 암을 포함하는 것을 특징으로 하는 장치.
  21. 제 1항 내지 제14항 중 어느 한 항의 자동화 장치에 의한 세포 배양의 자동화 방법으로서,
    a) 상기 배양기의 상기 인클로저를 폐쇄한 채로, 상기 세포 확장 백에 상기 세포 배양 배지, 상기 성장 인자, 이후 상기 배양될 세포를 공급하는 단계;
    b) 상기 세포 확장 백의 내용물을 균질화하기 위하여 상기 세포 확장 백을 교반하는 단계;
    c) 상기 세포 확장 백을 소정의 기간 동안 배양 조건에서 유지하는 단계; 및
    d) 상기 인클로저를 폐쇄한 채로, 상기 수거 및 저장 수단에서 상기 세포 확장 백의 내용물을 수거하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 자동화 방법.
  22. 제21항에 있어서,
    - 단계 a) 이전에, 상기 지지 및 교반 장치 상에 상기 세포 확장 백을 맞추고, 상기 배양기의 통로 수단 내 및 상기 밸브들로 상기 도관들을 장착하며, 상기 도관들을 탱크들 또는 백들에 연결함으로써 상기 사전 조립된 모듈을 설치하는 단계, 및/또는
    - 단계 a) 이전에, 상기 배양 배지 탱크로부터 상기 공기 트랩을 형성하는 백들로 배양 배지가 통과함으로써 상기 도관들 내에 함유된 공기를 배출하는 단계, 및/또는
    - 단계 a)에서 상기 세포 확장 백에 성장 인자를 공급한 이후에, 배양 배지를 상기 성장 인자 탱크 내로 유동시키고, 이후 탱크의 내용물을 상기 세포 확장 백으로 배출함으로써 상기 성장 인자 탱크를 린스하는 단계, 및/또는
    - 단계 a)에서 상기 세포 확장 백에 배양될 세포를 공급한 이후에, 배양 배지를 배양될 세포의 상기 탱크 내로 유동시키고, 이후 탱크 내용물을 상기 세포 확장 백으로 배출함으로써 상기 배양될 세포를 함유하는 탱크를 린스하는 단계, 및/또는
    - 단계 c) 동안에, 상기 트레이를 배양의 수평 위치로부터 상기 세포 확장 백의 표본 수집 유출구가 이 백의 최저점인 경사진 위치로 기울이는 단계가 각각 선행하는 상기 세포 확장 백의 내용물을 표본 수집하는 하나 이상의 단계들, 및/또는
    - 단계 c) 이전에, 이 탱크들을 상기 세포 확장 백의 유입 포트로 연결하는 도관 또는 튜브를 절단 및 용접하거나 죔으로써 배양 배지, 성장 인자 및 배양될 세포의 탱크를 빼내는 단계, 및/또는
    - 상기 세포 확장 백의 유출 포트가 이 백의 최저점을 나타내도록, 단계 d) 이전 또는 단계 d) 동안에, 상기 트레이를 약간 수직인 위치에서 기울이는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 자동화 방법.
  23. 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항의 자동화 장치, 제15항 내지 제18항 중 어느 한 항의 세포 배양 키트 또는 제19항 또는 제20항의 지지 및 교반 장치의, CD34 + 형의 줄기 세포 또는 예를 들면, 림프구와 같은 혈액 단핵 세포의 배양을 위한 용도.
  24. 제23항에 있어서, 상기 줄기 세포는 특히, 제대혈, 골수 및 전혈과 같은 하나 이상의 세포원(source)으로부터 유래되는 것을 특징으로 하는 용도.
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ZA (1) ZA201407287B (ko)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110643509A (zh) * 2018-06-26 2020-01-03 深圳市北科生物科技有限公司 一种高适应性全自动细胞培养系统及其方法
KR20200042870A (ko) * 2018-10-16 2020-04-24 (주)세포바이오 배지 제조장치
WO2023113186A1 (ko) * 2021-12-15 2023-06-22 (주)로봇앤드디자인 대상물 공급 장치
KR20230091770A (ko) * 2021-12-15 2023-06-23 (주)로봇앤드디자인 대상물 공급 장치

Families Citing this family (55)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2997703B1 (fr) * 2012-11-07 2016-12-30 Biomerieux Sa Procede de traitement d'au moins un echantillon biologique
US10676707B2 (en) 2013-09-12 2020-06-09 Universal Bio Research Co., Ltd. Culture system and culture method
US11773364B2 (en) 2014-04-28 2023-10-03 Vivabiocell S.P.A. Automated cell culturing and harvesting device
JP6444619B2 (ja) * 2014-05-30 2018-12-26 オリンパス株式会社 培地交換システム
WO2015191429A1 (en) * 2014-06-09 2015-12-17 Abbvie, Inc. Incubator flask assembly for cell culture
EP2975111B1 (de) * 2014-07-14 2018-05-16 Sartorius Stedim Biotech GmbH Mischvorrichtung zum Mischen eines Inhalts eines Behälters
CN106715676A (zh) * 2014-09-26 2017-05-24 泰尔茂比司特公司 按计划供养
CN104403944B (zh) * 2014-11-06 2016-11-30 广州蓝日生物科技有限公司 用于卵细胞体外受精和卵裂培养的自动化装置及方法
US10731122B2 (en) 2015-01-30 2020-08-04 Toyo Seikan Group Holdings, Ltd. Cell culture method and cell culture apparatus
US20180030398A1 (en) * 2015-02-09 2018-02-01 Univercells Nv System, apparatus and method for the production of cells and/or cell products
US9714405B2 (en) * 2015-04-14 2017-07-25 Pall Corporation Bioprocessing container tube system and method of use
JP6008013B1 (ja) * 2015-04-27 2016-10-19 東洋製罐グループホールディングス株式会社 細胞培養装置
JP6828681B2 (ja) 2015-05-25 2021-02-10 ニプロ株式会社 濃縮装置及び細胞懸濁液の濃縮方法
US10975345B2 (en) 2015-05-25 2021-04-13 Nipro Corporation Culturing device
US10883078B2 (en) * 2015-05-25 2021-01-05 Nipro Corporation Culturing device
EP3341466A1 (en) 2015-08-25 2018-07-04 General Electric Company Improvements in and relating to biomanufacturing apparatus
EP3341467A1 (en) * 2015-08-25 2018-07-04 General Electric Company Improvements in and relating to biomanufacturing apparatus
JP6884137B2 (ja) * 2015-08-25 2021-06-09 グローバル・ライフ・サイエンシズ・ソリューションズ・ユーエスエー・エルエルシー バイオマニュファクチャリング装置における、およびバイオマニュファクチャリング装置に関連する改良
US20180250666A1 (en) * 2015-08-25 2018-09-06 General Electric Company Improvements in and Relating to Biomanufacturing Apparatus
US11034929B2 (en) * 2015-11-18 2021-06-15 Thrive Bioscience, Inc. Instrument resource scheduling
FR3053051B1 (fr) * 2016-06-24 2022-11-11 Cellprothera Cassette et automate de culture cellulaire
JP6724649B2 (ja) * 2016-08-16 2020-07-15 東洋製罐グループホールディングス株式会社 細胞培養装置
US20190185808A1 (en) * 2016-08-26 2019-06-20 Ihi Corporation Cell culture system, culture unit, automatic cell culture device, and cell culture device for transport
CN106497784B (zh) * 2016-09-01 2019-03-22 奥凯（苏州）生物技术有限公司 一种实现培养液和废液交换的压力控制系统及其压力控制方法
CN106497783B (zh) * 2016-09-01 2019-03-22 奥凯（苏州）生物技术有限公司 一种动态循环细胞培养器及细胞培养方法
CN109890952A (zh) * 2016-09-12 2019-06-14 朱诺治疗学股份有限公司 灌注生物反应器袋装配
CN110121646B (zh) * 2016-12-28 2023-06-20 思拓凡瑞典有限公司 磁性免疫球蛋白-结合粒子
US20190345430A1 (en) * 2017-01-08 2019-11-14 Cesca Therapeteutics, Inc. Devices and methods for bio-processing cellular samples
US11559811B2 (en) 2017-02-10 2023-01-24 Lonza Ltd. Cell culture system and method
RU2645455C1 (ru) * 2017-04-27 2018-02-21 Рубен Вагеевич Оганесян Биореактор для выращивания тканеинженерных конструкций
CN107904166B (zh) * 2017-11-15 2023-06-06 中国航天员科研训练中心 能实现能实时地线监测和远程监控的细胞培养系统
CN107904167B (zh) * 2017-11-15 2023-06-06 中国航天员科研训练中心 细胞自动扩增培养设备
RU2673312C1 (ru) * 2017-12-11 2018-11-23 Закрытое акционерное общество "Дидактические Системы" Комплект учебного оборудования для монтажа, наладки и эксплуатации автоматических линий и мехатронных систем; способ сборки такого комплекта
CN108142212A (zh) * 2018-01-03 2018-06-12 河南天蚕生物科技有限公司 一种高效虫草菌扩培装置
JP2021520847A (ja) * 2018-04-07 2021-08-26 ルマサイト リミティド ライアビリティ カンパニー 流体オートサンプラ及び培養器
US10775395B2 (en) * 2018-10-18 2020-09-15 Arctoris Limited System and method of performing a biological experiment with adaptive cybernetic control of procedural conditions
CN113302500A (zh) * 2018-11-16 2021-08-24 爱新诺有限公司 用于处理生物材料的包括多个统一设计的存储模块的系统
RU190367U1 (ru) * 2018-11-19 2019-06-28 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Амурская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения Российской Федерации Устройство для культивирования клеток млекопитающих на тканеинженерных конструкциях
CN109401970A (zh) * 2018-12-19 2019-03-01 南京比瑞生物科技有限公司 一种多功能t瓶全自动、全封闭干细胞扩增、诱导分化系统
JP7481608B2 (ja) * 2019-06-20 2024-05-13 シンフォニアテクノロジー株式会社 細胞培養装置
CN110540937A (zh) * 2019-09-09 2019-12-06 英诺维尔智能科技（苏州）有限公司 一种适用于gmp合规自动化生产的多隔舱单元培养系统
CN110989458B (zh) * 2019-12-23 2022-01-28 深圳赛动生物自动化有限公司 干细胞自动化制备控制系统及其控制方法
CN113832028A (zh) * 2020-06-24 2021-12-24 上海医药集团生物治疗技术有限公司 一种全自动细胞培养系统及培养方法
CN111893042B (zh) * 2020-07-29 2021-11-30 吉林大学 一种医学实验专用恒温细胞培养箱
CN111944681A (zh) * 2020-08-12 2020-11-17 德州职业技术学院（德州市技师学院） 一种微生物样本储存装置
US11299700B1 (en) 2021-02-19 2022-04-12 Acequia Biotechnology, Llc Bioreactor containers and methods of growing hairy roots using the same
CN113136314B (zh) * 2021-05-14 2022-02-25 唐山师范学院 一种微生物培养一体化设备
CN113640502A (zh) * 2021-06-18 2021-11-12 浙江理工大学 一种提高草木染色牢度的实验方法
CN113549542B (zh) * 2021-07-19 2022-08-23 华北理工大学 一种微生物菌种的扩培装置及方法
CN113736629A (zh) * 2021-09-09 2021-12-03 侯孟信 一种生物治疗细胞分子监测系统
CN114085776A (zh) * 2021-11-24 2022-02-25 湖南开启时代生物科技有限责任公司 一种贴壁细胞培养系统
WO2023098791A1 (zh) * 2021-12-01 2023-06-08 南京金斯瑞生物科技有限公司 一种用于细胞治疗的控制系统及其控制方法
CN114987842A (zh) * 2022-06-08 2022-09-02 深圳市爱康生物科技股份有限公司 血袋托盘及其驱动装置
CN115504046A (zh) * 2022-08-17 2022-12-23 上海人工智能研究院有限公司 脱袋装置的脱袋方法、控制系统以及电子设备
WO2024105262A1 (en) 2022-11-18 2024-05-23 Cellprothera Sas Potency assay for cd34+ cells

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4829002A (en) * 1986-05-12 1989-05-09 Baxter International Inc. System for metering nutrient media to cell culture containers and method

Family Cites Families (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3163404A (en) * 1962-10-09 1964-12-29 Scientific Industries Rotary apparatus for agitating fluids
EP0258795B1 (en) * 1986-08-27 1993-11-03 Kawasumi Laboratories, Inc. A method for cultivating cells and an instrument therefor
US5763266A (en) * 1989-06-15 1998-06-09 The Regents Of The University Of Michigan Methods, compositions and devices for maintaining and growing human stem and/or hematopoietics cells
RU2005778C1 (ru) * 1990-11-15 1994-01-15 Головное конструкторское бюро научно-производственного объединения "Энергия" им.акад.С.П.Королева Установка для культивирования клеток или микроорганизмов
JPH07509153A (ja) * 1992-07-13 1995-10-12 ポール・コーポレーション 生物学的流体を処理するための自動化されたシステムおよび方法
US5424209A (en) * 1993-03-19 1995-06-13 Kearney; George P. Automated cell culture and testing system
US5352213A (en) 1993-11-16 1994-10-04 Woodard Robert W Intravenous fluid flow monitor
FR2794130B1 (fr) 1999-05-26 2003-01-03 Bertin Technologies Sa Procede et dispositif de culture de cellules a applications multiples
NL1017973C2 (nl) * 2000-05-10 2002-11-08 Tristem Trading Cyprus Ltd Inrichting.
CN101386839A (zh) * 2000-05-10 2009-03-18 特里施泰姆贸易(塞浦路斯)有限公司 一种设备
US20040110274A1 (en) 2002-12-02 2004-06-10 Ilya Feygin Apparatus for stacking, repositioning, agitating and knocking
WO2005059091A1 (ja) * 2003-12-18 2005-06-30 Hitachi Medical Corporation 細胞培養装置
JP2008505650A (ja) * 2004-07-12 2008-02-28 ソリン・グループ・イタリア・ソシエタ・ア・レスポンサビリタ・リミタータ ヒト細胞を増殖させるための装置及び方法
CN101300340A (zh) * 2005-11-01 2008-11-05 迈世耐特股份公司 细胞培养装置、细胞培养方法、细胞培养程序及细胞培养系统
KR20080072006A (ko) * 2005-11-01 2008-08-05 가부시키가이샤 메디넷 세포배양용 진탕장치 및 세포배양방법으로서의진탕배양방법
US20100317102A1 (en) * 2006-01-17 2010-12-16 Tsutomu Suzuki Cell Culture Method and Automatic Culture System Using the Method
DE102006022652B4 (de) * 2006-05-12 2008-06-12 Sartorius Stedim Biotech Gmbh Inkubator und Verfahren zur geregelten Befeuchtung und Temperierung
US20080118977A1 (en) 2006-11-22 2008-05-22 Institut De Recherche En Hematologie Et Transplantation Process to cary out a cellular cardiomyoplasty
JP4403169B2 (ja) 2006-12-15 2010-01-20 株式会社日立製作所 細胞培養装置及びその制御方法
JP2010519937A (ja) * 2007-03-05 2010-06-10 カリディアンビーシーティー、インコーポレーテッド 細胞増殖システムおよび使用方法
KR101489014B1 (ko) * 2007-04-27 2015-02-02 도요세이칸 그룹 홀딩스 가부시키가이샤 세포배양장치, 세포배양시스템 및 세포배양방법
WO2010070663A1 (en) * 2008-11-18 2010-06-24 Ravindranath Gandlur Disposable bioreactor system
CN102482633A (zh) * 2009-07-06 2012-05-30 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 真核细胞的培养方法
ES2336637B1 (es) * 2009-11-02 2011-01-21 Banc De Sang I Teixits Procedimiento parala expansion indiferenciada u orientada a linaje mieloide de celulas madre hematopoyeticas procedentes de sangre de cordonumbilical, sangre periferica movilizada o medula osea.
JP5997708B2 (ja) * 2011-02-23 2016-09-28 ジーイー・ヘルスケア・バイオサイエンス・アクチボラグ 揺動装置を含むバイオリアクター

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4829002A (en) * 1986-05-12 1989-05-09 Baxter International Inc. System for metering nutrient media to cell culture containers and method

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110643509A (zh) * 2018-06-26 2020-01-03 深圳市北科生物科技有限公司 一种高适应性全自动细胞培养系统及其方法
KR20200042870A (ko) * 2018-10-16 2020-04-24 (주)세포바이오 배지 제조장치
WO2023113186A1 (ko) * 2021-12-15 2023-06-22 (주)로봇앤드디자인 대상물 공급 장치
KR20230091770A (ko) * 2021-12-15 2023-06-23 (주)로봇앤드디자인 대상물 공급 장치

Also Published As

Publication number Publication date
US20130244322A1 (en) 2013-09-19
WO2013135817A1 (fr) 2013-09-19
EP2639294A1 (fr) 2013-09-18
RU2014137564A (ru) 2016-05-10
US10676705B2 (en) 2020-06-09
SG11201405632PA (en) 2014-10-30
CN113832029A (zh) 2021-12-24
ZA201407287B (en) 2016-05-25
CN104302757A (zh) 2015-01-21
CA2780722C (en) 2022-08-30
JP2015513347A (ja) 2015-05-11
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