KR20120129904A

KR20120129904A - 안내 혈관 신생 및/또는 안내 혈관 투과성 항진을 수반하는 질환의 예방 또는 치료를 위한 의약

Info

Publication number: KR20120129904A
Application number: KR1020127020695A
Authority: KR
Inventors: 유이치로 오구라; 미호 노자키; 아츠시 나카지마; 치히로 히비
Original assignee: 공립대학법인 나고야 시립대학; 가부시키가이샤산와카가쿠켄큐쇼
Priority date: 2010-01-14
Filing date: 2011-01-13
Publication date: 2012-11-28
Also published as: CA2785970A1; US20120301478A1; CN102711756A; EP2524693A1; JP2013049701A; MX2012007941A; PL2524693T3; RU2012134639A; AU2011206104A1; BR112012017071A2; ES2468827T3; EP2524693A4; JPWO2011087066A1; DK2524693T3; EP2524693B1; WO2011087066A1; JP5212849B2

Abstract

항VEGF약과, 하기 화학식 I로 표시되는 히단토인 유도체 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염의 조합으로 구성되는 안내 혈관 신생 및/또는 안내 혈관 투과성 항진을 수반하는 질환의 예방 또는 치료를 위한 의약.
<화학식 I>

(식 중, X는 할로겐 원자 또는 수소 원자를 나타내고, R¹ 및 R²는 동시에 또는 각각 수소 원자 또는 치환되어 있을 수도 있는 C₁ _- ₆알킬기를 나타냄)

Description

안내 혈관 신생 및/또는 안내 혈관 투과성 항진을 수반하는 질환의 예방 또는 치료를 위한 의약{PHARMACEUTICAL FOR PREVENTING OR TREATING DISORDERS ACCOMPANIED BY OCULAR ANGIOGENESIS AND/OR ELEVATED OCULAR VASCULAR PERMEABILITY}

본 발명은, 항VEGF약과, 특정한 히단토인 유도체의 조합으로 구성되는 안내 혈관 신생 및/또는 안내 혈관 투과성 항진을 수반하는 질환의 예방 또는 치료를 위한 의약에 관한 것이다.

혈관 신생에는 혈관 내피 증식 인자(Vascular Endothelial Growth Factor:VEGF)의 관여가 가장 크다. 항VEGF약으로서, 혈관 신생 인자인 VEGF에 관련된 수용체 길항약, 항VEGF 항체, VEGF 리간드 저해제, 및 핵산 의약 등을 들 수 있다. 구체적으로는, 베바시주맙 나트륨, 소라페닙, 수니티닙, 페갑타닙 나트륨, 라니비주맙, 아프리버셉트 및 VEGF-Trap EYE 등이 있으며, 이들은 안과 영역에서는 유리체 내 주사제로서 사용되고 있다. 이들 항VEGF약의 주된 약리 작용은, 혈관 신생 억제, 혈관 투과성 억제 및 혈관 내피 세포 증식 억제이다.

최근, VEGF가 그의 혈관 신생, 혈관 투과성 항진 및 혈관 내피 세포 증식 등의 생리 작용에 기초하여, 가령 황반 변성증(AMD)을 비롯한 다양한 안병변에 관여한다는 것이 분명해졌다. VEGF를 타겟으로 한 의약은, 이미 가령 황반 변성증(AMD), 망막 정맥 분지 폐색증(BRVO), 망막 중심 정맥 폐색증(CRVO), 당뇨병 황반증, 당뇨병 망막증 및 혈관 신생 녹내장 등의 안질환의 치료에 폭넓게 임상적으로 사용되고 있다.

(2S,4S)-6-플루오로-2',5'-디옥소스피로[크로만-4,4'-이미다졸리딘]-2-카르복사미드(피다레스타트(fidarestat))는, 알도오스 환원 효소(AR) 저해제이다. 해당 화합물에 대해서는, 당뇨병 합병증(특허문헌 1), 순환기계 질환(특허문헌 2), 메일라드 반응 저해제로서 노화에 따른 여러 질환(특허문헌 3), 당뇨병성 단순 망막증(특허문헌 4), 당뇨병성 각막증(특허문헌 5), 당뇨병 황반증(특허문헌 6), 중증 당뇨병 망막증(특허문헌 7), 허혈 또는 허혈 재관류에 의해 발생하는 심장 기능 장해 또는 심근 장해(특허문헌 8), 급성 신부전(특허문헌 9), 뇌졸중에서의 뇌허혈 또는 뇌허혈 재관류 장해(특허문헌 10), 망막 신경 또는 시신경의 보호제(특허문헌 11)로서의 용도가 각 문헌에 기재되어 있다. 또한, 스트렙토조토신(STZ) 당뇨병 래트에서 망막의 산화 스트레스 및 VEGF 발현을 억제하는 것이 기재되어 있는 (비특허문헌 1).

한편, 항VEGF약에 대해서는, 다른 의약과 병용하는 것이 알려져 있다(특허문헌 12, 13). 예를 들면, 종양 괴사 인자 알파(TNFα)와의 병용(특허문헌 14, 특허문헌 15), 수용체형 티로신 키나아제 저해제와의 병용(특허문헌 16), 강압제와의 병용(특허문헌 17), 광선 역학적 요법(PDT)에서 사용하는 감광성 약제와의 병용(특허문헌 18)이 보고되어 있다. 그러나, 항VEGF약과 알도오스 환원 효소 저해약의 병용에 대해서는 아직 보고되어 있지 않다.

일본 특허 공개 (소)61-200991호 공보 일본 특허 공개 (평)4-173791호 공보 일본 특허 공개 (평)6-135968호 공보 일본 특허 공개 (평)7-242547호 공보 일본 특허 공개 (평)8-231549호 공보 국제 공개 제2005/072066호 국제 공개 제2005/079792호 국제 공개 제2006/090699호 국제 공개 제2007/069727호 국제 공개 제2007/097301호 국제 공개 제2008/093691호 일본 특허 공표 제2007-505939호 공보 일본 특허 공표 제2007-505938호 공보 일본 특허 공개 제2009-256373호 공보 일본 특허 공표 제2004-529149호 공보 일본 특허 공개 제2009-102359호 공보 일본 특허 공표 제2008-537538호 공보 국제 공개 제2001/74389호

Diabetes, Vol.52864, 2003

상술한 바와 같이, 항VEGF약의 유리체 내 주사제는 폭넓게 임상적으로 사용되고 있는 치료약이지만, 치료 만족도가 낮은 환자에 대하여 투여량을 늘리면, 뇌졸중 등의 부작용을 야기하기 쉬워지는 경향이 있다. 또한, 투약의 횟수가 증가하면, 환자 및 진료측의 정신적 및 육체적 부담이 증가하여, 치료의 중단을 초래하는 경향이 있다. 예를 들면 대표적인 항VEGF약인 라니비주맙은 그의 반감기가 짧고, 인간의 유리체 내에 주사되었을 때의 소실 반감기는 9일로 보고되어 있다(라니비주맙의 첨부 문서). 이것이 라니비주맙의 투여 횟수의 증가로 이어지고 있으며, 환자 및 진료측에서의 정신적, 육체적 및 의료 경제적으로 큰 부담이 되었다. 이로부터, 항VEGF약의 임상 효과를 높이는 방책, 투여 횟수 또는 투여량을 경감하는 방책이 요구되고 있다. 따라서, 본 발명은, 항VEGF약의 용량 삭감, 투여 횟수의 경감 및 유효성의 향상을 목적으로 한다.

상기 과제를 감안하여 본 발명자들이 예의 연구를 거듭한 결과, 항VEGF약과, 알도오스 환원 효소 저해약으로서 알려져 있는 하기 화학식 I로 표시되는 히단토인 유도체, 그 중에서도 피다레스타트를 조합함으로써 이들 목적을 달성할 수 있다는 것을 발견하여, 해당 발명을 완성하였다. 즉, 본 발명의 주된 구성은 다음과 같다.

(1) 항VEGF약과, 하기 화학식 I로 표시되는 히단토인 유도체 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염의 조합으로 구성되는 안내 혈관 신생 및/또는 안내 혈관 투과성 항진을 수반하는 질환의 예방 또는 치료를 위한 의약.

<화학식 I>

(2) 화학식 I로 표시되는 히단토인 유도체 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염을 유효 성분으로서 포함하고, 항VEGF약과 조합하여 투여되는 안내 혈관 신생 및/또는 안내 혈관 투과성 항진을 수반하는 질환의 예방 또는 치료를 위한 의약.

(3) 상기 화학식 I로 표시되는 히단토인 유도체가 (2S,4S)-6-플루오로-2',5'-디옥소스피로[크로만-4,4'-이미다졸리딘]-2-카르복사미드인 (1) 또는 (2)에 기재된 의약.

(4) 상기 항VEGF약이 항VEGF 항체, VEGF 리간드 저해제, VEGF 수용체 길항약 및 VEGF에 관련된 핵산 의약으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 적어도 1종인 (1) 내지 (3) 중 어느 하나에 기재된 의약.

(5) 상기 안내 혈관 신생 및/또는 안내 혈관 투과성 항진을 수반하는 질환이 가령 황반 변성증(AMD), 망막 정맥 분지 폐색증(BRVO), 망막 중심 정맥 폐색증(CRVO), 당뇨병 황반증, 당뇨병 망막증 및 혈관 신생 녹내장으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 (1) 내지 (4) 중 어느 하나에 기재된 의약.

(6) (2)에 기재된 의약과, 해당 의약을 안내 혈관 신생 및/또는 안내 혈관 투과 항진을 수반하는 질환의 예방 또는 치료를 위해 항VEGF약과 조합하여 투여하기 위한 방법이 기재된 설명서를 포함하는 키트.

본 발명의 의약은, 과잉의 안내 혈관 신생 및/또는 안내 혈관 투과성 항진을 수반하는 질환의 예방 또는 치료에 유효하고, 항VEGF약의 저용량화, 약력학적 효과의 증강, 투여 간격의 연장 및 약효 지속성을 높일 수 있다.

[도 1] 레이저 조사 7일 후의 맥락막 혈관 신생(CNV) 용적을 나타내는 그래프이다. 도면 중의 「*」 및 「#」은 위험률 5 ％, 「**」는 위험률 1 ％에서 유의한 차가 있는 것을 나타낸다.
[도 2] 레이저 조사 7일 후의 플루오레세인 형광 안저 조영(FA)의 등급 3 병변수의 비율을 나타내는 그래프이다. 도면 중의 「***」는 위험률 0.1 ％에서 유의한 차가 있는 것을 나타낸다.

이하, 본 발명의 실시 형태를 더욱 상세히 설명한다. 단, 본 발명은 이하의 실시 형태로 한정되는 것은 아니다.

본 발명에 관한 의약은, 화학식 I로 표시되는 히단토인 유도체 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염을 유효 성분으로서 포함한다. 이 의약은, 안내 혈관 신생 및/또는 안내 혈관 투과성 항진을 수반하는 질환의 예방 또는 치료를 위해 항VEGF약과 조합하여 투여된다. 바꾸어 말하면, 화학식 I로 표시되는 히단토인 유도체 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염을 유효 성분으로서 포함하는 의약은, 안내 혈관 신생 및/또는 안내 혈관 투과성 항진을 수반하는 질환의 항VEGF약에 의한 예방 또는 치료의 효과 증강제로서 사용된다.

본 발명에 관한 의약은 바꾸어 말하면, 항VEGF약과, 화학식 I로 표시되는 히단토인 유도체 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염의 조합으로 구성되는 의약이다. 이 의약도, 안내 혈관 신생 및/또는 안내 혈관 투과성 항진을 수반하는 질환의 예방 또는 치료를 위해 투여된다.

화학식 I의 히단토인 유도체 및 그의 염은, 알도오스 환원 효소 저해 활성을 갖는 화합물이고, 일본 특허 공개 (소)63-057588호 공보에 기재된 합성 방법에 준하여 제조할 수 있다.

화학식 I 중의 X는 할로겐 원자 또는 수소 원자를 나타내고, 바람직하게는 불소 원자 등의 할로겐 원자이다. 화학식 I 중의 R¹ 및 R²는, 동시에 또는 각각 수소 원자 또는 치환되어 있을 수도 있는 C₁ _- ₆알킬기를 나타내고, 바람직하게는 수소 원자 또는 C₁ _- ₃알킬기이고, 더욱 바람직하게는 수소 원자이다. 특히, X가 불소 원자이고, R¹ 및 R²가 수소 원자인 화합물인 피다레스타트는, 약효 및 안전성의 면에서 우수하다.

VEGF란, 혈관 내피 세포에 작용하는 증식 인자이다. VEGF가 혈관 내피 세포 증식 인자 수용체(VEGF 수용체)에 결합하면, 혈관 내피 세포가 활성화되고, 혈관 내피 세포가 유주(swarming)ㆍ증식되어, 신생 혈관이 형성된다. 또한, VEGF는 혈관 투과성을 항진시켜, 출혈, 혈액 중의 성분의 누출, 삼출물의 저류를 일으킨다.

항VEGF약은, 혈관 내피 증식 인자(VEGF)의 작용을 감약(減弱)시킴으로써 혈관 신생의 촉진을 억제하는 약제이다. 항VEGF약은, 이외에 혈관 투과성 억제, 혈관 내피 세포 증식 억제 등의 약리 작용을 나타내는 경우가 있다. 항VEGF약으로서는, 항VEGF 항체, VEGF 리간드 저해제, VEGF 수용체의 길항약 및 VEGF에 관련된 핵산 의약 등을 들 수 있다. VEGF 수용체의 길항약은, VEGF와 길항하여, VEGF가 VEGF 수용체에 결합하는 것을 저해한다. 항VEGF 항체, VEGF 리간드 저해제 및 VEGF에 관련된 핵산 의약의 일부는, VEGF와 복합체를 형성함으로써 VEGF와 VEGF 수용체가 결합하는 것을 저해한다. 기타 VEGF에 관련된 핵산 의약은, VEGF에 관련된 단백질 합성을 저해한다. 또한, 항VEGF 항체에는, 마우스 항VEGF 항체를 유전자 재조합에 의해 인간화한 항VEGF 항체, 그의 프래그먼트, 또는 이들의 아미노산 서열을 일부 개변한 것이 포함된다. VEGF 리간드 저해제에는, 인간형 VEGF 수용체 융합 단백질이 포함된다.

항VEGF 항체, VEGF 리간드 저해제, VEGF 수용체의 길항약, 및 VEGF에 관련된 핵산 의약 등은 전부 VEGF 시그널을 억제하는 작용을 갖는다는 점에서 공통되어 있다.

VEGF 리간드 저해제의 구체예로서는, 아프리버셉트(VEGF-Trap), 및 VEGF-Trap EYE가 있다. 항VEGF 항체의 구체예로서는, 베바시주맙 나트륨, 라니비주맙, 소라페닙 및 수니티닙이 있다. VEGF에 관련된 핵산 의약의 구체예로서는, 앱타머 의약인 페갑타닙 나트륨, 및 siRNA인 RTP801i-14 등이 있다. 또한, 베바시주맙 나트륨, 라니비주맙 및 VEGF-Trap EYE 등은, 비선택적으로 모든 VEGF에 폭넓게 결합함으로써 VEGF의 수용체로의 결합을 저해하는 것을 특징으로 한다. 이에 대하여, 페갑타닙 나트륨은 안내의 병적 신생 혈관에 가장 연관이 있는 VEGF165와 선택적으로 결합하는 것을 특징으로 한다.

화학식 I의 히단토인 유도체 또는 그의 염 및 항VEGF약을 조합하여 투여함으로써 발휘되는 약효는, 항VEGF약 단독의 투여에 의해 발휘되는 약효와 실질적으로 동일한 범위이다. 본 발명에 관한 의약의 한 실시 형태는, 과잉의 혈관 신생을 수반하는 안질환, 즉 안내 혈관 신생성 질환에 대하여 유효한 의약이다. 안내 혈관 신생성 질환으로서는, (삼출형) 가령 황반 변성증(삼출형-AMD), 망막 정맥 분지 폐색증(BRVO), 망막 중심 정맥 폐색증(CRVO), 당뇨병 망막증, 혈관 신생 녹내장, 근시성 맥락막 신생 혈관증, 망막 색소 변성증, 미숙아 망막증 및 광 응고 유발성 맥락막 신생 혈관 등의 안내 혈관 신생성 질환을 들 수 있다. 본 발명에 관한 의약의 별도의 한 실시 형태는, 안내 혈관 투과성 항진을 수반하는 질환에 대해서도 유효한 의약이다. 안내 혈관 투과성 항진을 수반하는 질환으로서는, 삼출형 가령 황반 변성증(삼출형-AMD), 망막 정맥 분지 폐색증(BRVO), 망막 중심 정맥 폐색증(CRVO), 당뇨병 황반증, 망막 색소 변성증, 당뇨병 망막증 및 망막 광 응고법(범망막 광 응고, 격자상 광 응고, 그리드 패턴 응고)에 의한 부종을 들 수 있다. 안내 혈관 신생성 질환 및 안내 혈관 투과성 항진을 수반하는 질환은, 이것으로 한정되는 것은 아니다. 본 발명에 관한 의약은, 이들 항VEGF약의 투여가 유효하다고 생각되는 안내 혈관 신생성 질환 및 안내 혈관 투과성 항진을 수반하는 질환에 대하여 상승적인 약효를 나타낸다.

가령 황반 변성증이란, 황반의 가령에 따른 변화에 의해 일어나는 질환이며, 맥락막으로부터 발생하는 신생 혈관(맥락막 신생 혈관)의 유무에 의해 「삼출형」과 「위축형」으로 분류된다. 본 발명은 특히 삼출형 가령 황반 변성증에 유효하다.

삼출형은 황반부를 중심으로 한 부위에 비정상적인 신생 혈관(CNV)이 발생함으로써 발생한다. 이들 신생 혈관은, 출혈이나 삼출을 발생시켜(혈관 투과성 항진) 시력에 관계된 황반부의 조직 변성을 초래하고, 기능 부전이 되어, 조직을 반흔화(瘢痕化)시키는 경우가 있다. VEGF는 안내 신생 혈관으로의 관여가 강하다고 알려져 있다.

당뇨병 황반증이란, 혈관 투과성 항진에 의한 황반 부종에 의해 발생하는 황반부 장해, 모세 혈관의 폐색 또는 색소 상피 세포의 장해에 의한 황반부 장해를 총칭한다. 주병변은 황반 부종이다. 황반 부종을 갖는 환자에게서는 안내의 VEGF 양이 높은 값이고, 또한 VEGF가 매우 강한 혈관 투과성 항진 작용을 갖기 때문에, VEGF는 당뇨병 황반증의 부종으로의 관여가 강하다고 알려져 있다.

본 발명에 관한 의약의 유효 성분으로서 사용되는 화학식 I의 히단토인 유도체 및 항VEGF약은, 각각 다른 복수의 제제에 포함되어 있을 수도 있고, 1개의 제제로서 동일한 제제에 포함되어 있을 수도 있다. 「조합으로 구성되는 의약(조합으로 이루어지는 의약)」이란, 복수의 의약 또는 그의 유효 성분을 조합하여 투여되는 의약, 바꾸어 말하면, 병용으로 투여되는 의약이다. 투여하는 복수의 유효 성분이 각각의 복수의 제제에 포함되는 경우에는, 반드시 이들 복수의 제제가 동시에 환자에게 투여되는 경우로만 한정되지 않는다. 이러한 병용 투여에 따르면, 한쪽 의약(그의 유효 성분)이 혈중 유효 농도 또는 조직 내 유효 농도를 유지하지 않아도 병용 효과를 충분히 유도할 수 있기 때문에, 각각의 약물이 혈중 유효 농도 또는 조직 내 유효 농도를 유지하고 있는 기간이 중복되는 투여 방법이 아닐 수도 있다. 통상, 각각의 제제는 각각의 본래의 투여 방법에 따라 투여되기 때문에, 이들의 투여는 동일 횟수가 되는 경우도 있고, 상이한 횟수가 되는 경우도 있다.

상기 의약의 투여 형태를 예시하면,

(1) 항VEGF약과 화학식 I로 표시되는 히단토인 유도체를 모두 포함하는 단일제제의 투여,

(2) 항VEGF약과 화학식 I로 표시되는 히단토인 유도체를 각각 제제화하여 얻어지는 2종의 제제의 동일 투여 경로에서의 동시 투여,

(3) 항VEGF약과 화학식 I로 표시되는 히단토인 유도체를 각각 제제화하여 얻어지는 2종의 제제의 동일 투여 경로에서의 시간차를 둔 투여,

(4) 항VEGF약과 화학식 I로 표시되는 히단토인 유도체를 각각 제제화하여 얻어지는 2종의 제제의 상이한 투여 경로에서의 동시 투여,

(5) 항VEGF약과 화학식 I로 표시되는 히단토인 유도체를 각각 제제화하여 얻어지는 2종의 제제의 상이한 투여 경로에서의 시간차를 둔 투여,

(6) 항VEGF약과 화학식 I로 표시되는 히단토인 유도체를 각각 제제화하여 얻어지는 2종의 제제의 동일 투여 경로에서의 상이한 투여 간격에서의 투여, 및,

(7) 항VEGF약과 화학식 I로 표시되는 히단토인 유도체를 각각 제제화하여 얻어지는 2종의 제제의 상이한 투여 경로에서의 상이한 투여 간격에 있어서의 투여를 들 수 있다. 또한, (5)의 투여 형태로서는, 우선 항VEGF약을 투여하고, 일정 시간 경과 후, 이어서 피다레스타트 등의 화학식 I로 표시되는 히단토인 유도체를 투여한다는 순서로의 투여, 또는 그 반대 순서로의 투여를 예시할 수 있다. (6) 또는 (7)의 투여 형태로서는, 우선 항VEGF약을 투여하고, 이어서 항VEGF약을 투여할 때까지의 사이, 화학식 I로 표시되는 히단토인 유도체를 매일 투여한다는 투여 간격으로의 투여, 또는 우선 화학식 I로 표시되는 히단토인 유도체를 매일 투여하고, 이어서 항VEGF약을 투여하고, 그 후 이어서 상기 히단토인 유도체를 매일 투여한다는 투여 간격으로의 투여를 예시할 수 있다.

본 발명에 관한 의약은, 복수의 유효 성분이 각각의 복수의 제제에 포함되는 것이어도, 1개의 제제로서 동일한 제제에 포함되는 것이어도, 통상의 제제 기술에 의해 예를 들면 정제, 캡슐제, 산제, 과립제, 액제 또는 시럽제로서 제제화된다. 제제화된 의약은 경구적으로, 또는 주사제 또는 점안제 등으로서 비경구적으로 투여할 수 있다.

고형제의 경우에는, 제제화에 있어서 약리학적으로 용인할 수 있는 부형제, 예를 들면 전분, 젖당, 정제 백당, 글루코오스, 결정 셀룰로오스, 카르복시 셀룰로오스, 카르복시메틸 셀룰로오스, 카르복시에틸 셀룰로오스, 인산칼슘, 스테아르산마그네슘 및 아라비아 고무 등을 사용할 수 있으며, 필요하면 활택제, 결합제, 붕괴제, 피복제 및 착색제 등을 배합할 수 있다. 또한, 액제의 경우에는, 안정제, 용해 보조제, 현탁화제, 유화제, 완충제 및 보존제 등을 사용할 수 있다.

본 발명에 관한 의약의 투여량은, 항VEGF약 또는 화학식 I로 표시되는 히단토인 유도체의 통상의 투여량에 준하여 투여 대상, 투여 루트, 대상 질환, 제형 등에 따라 적절하게 선택할 수 있다.

화학식 I로 표시되는 히단토인 유도체, 특히 피다레스타트는, 증상, 연령, 투여법, 제형 등에 따라 상이하지만, 성인 환자 1인당 통상 0.1 mg/일 내지 450 mg/일, 바람직하게는 1 mg/일 내지 300 mg/일을 1회 또는 수회로 나누어 연일 투여한다. 경구 투여하는 경우의 투여량은, 성인 환자 1인당 통상 0.1 mg/일 내지 450 mg/일, 바람직하게는 1 mg/일 내지 400 mg/일, 더욱 바람직하게는 1 mg/일 내지 200 mg/일이다.

항VEGF약의 투여량은 약물에 따라 상이하다. 베바시주맙 나트륨의 투여량은, 성인 환자 1인당 0.1 mg/회 내지 2.5 mg/회의 유리체 내 투여이다. 페갑타닙의 투여량은, 성인 환자 1인당 통상 0.1 mg/회 내지 3 mg/회, 바람직하게는 0.3 mg/회의 유리체 내 투여이다. 라니비주맙의 투여량은, 성인 환자 1인당 통상 0.1 mg/회 내지 0.5 mg/회, 바람직하게는 0.5 mg/회의 유리체 내 투여이다. VEGF-TRAP EYE의 투여량은, 성인 환자 1인당 통상 0.1 mg/회 내지 4 mg/회의 유리체 내 투여이다. 또한, 항VEGF약의 투여는, 유리체 내 투여의 경우에는 1회/월 내지 1회/2 내지 3개월의 투여를 기본으로 한다. 또는, 병변이 악화 또는 재연된 경우에는 필요에 따라 투여한다. 항VEGF약을 화학식 I의 히단토인 유도체와 조합하여 투여함으로써, 항VEGF약을 단독으로 투여하는 경우와 비교하여 항VEGF약의 용량 삭감 및 투여 횟수의 경감이 가능하다.

본 발명의 의약은, 화학식 I의 히단토인 유도체 등을 포함하는 의약과, 상기 의약을 안내 혈관 신생 및/또는 안내 혈관 투과성 항진을 수반하는 질환의 예방 또는 치료를 위해 항VEGF약과 조합하여 투여하기 위한 방법이 기재된 설명서로 키트를 구성할 수도 있다. 키트의 설명서에는, 화학식 I의 히단토인 유도체 등을 포함하는 의약을 항VEGF약과 조합하여 투여하는 경우의 용법 및 용량 등에 관한 설명문이 기재된다. 또한, 그의 용법 및 용량은 상술한 바와 같다.

[실시예]

본 발명은, 이하의 실험예에 의해 더욱 상세히 설명된다. 단, 이들은 본 발명을 한정하는 것은 아니며, 본 발명의 취지를 일탈하지 않는 범위에서 변화시킬 수도 있다.

1. 실험 1: 혈관 신생 및 혈관 투과성 항진 억제에 관한 예방적 효과

-항마우스 VEGF 항체와 피다레스타트의 병용 효과-

레이저 조사에 의해 실험적으로 맥락막 혈관 신생(이하「CNV」라 함)을 유도하는 마우스 모델(CNV 모델)을 이용하여, CNV의 용적에 대한 유효성을 평가하였다. CNV 모델은, 레이저 조사에 의한 염증의 야기에 의해 마크로파지가 유주된다. 그 결과로서 VEGF가 생산되어, 신생 혈관이 발생하고, 혈관 투과성 항진이 관찰되기 때문에, CNV 모델은 VEGF를 생산시키는 모델 중 하나이다. 바꾸어 말하면, CNV 모델은, VEGF를 통한 안내 혈관 신생 및/또는 안내 혈관 투과성 항진을 수반하는 질환에 대한 유효성을 나타내는 실험 모델이다.

방법

체중 약 20 g(6주령)의 웅성 C57BL/6J 마우스의 양안에 레이저를 조사(1안 당 4 내지 6 스폿 조사)하여 실험적으로 CNV를 유도하였다. 약물은, 후술하는 바와 같이 항VEGF 항체 및/또는 피다레스타트를 투여하였다. 피다레스타트의 용량은 32 mg/kg/일이며, 피다레스타트는 이 용량에서 최대 약효를 나타낸다. 항VEGF 항체는, R&D 시스템즈(Systems)사로부터 구입한 항마우스 VEGF 항체를 사용하였다. 예의 수는 1군당 3마리 내지 4마리로 하여, 이하의 4군을 설정하였다.

(1) 무처치군

(2) 피다레스타트 투여군: 피다레스타트 32 mg/kg/일을 함유하는 분말 사료를 자유 섭취

(3) 혈관 내피 증식 인자(VEGF) 중화 항체 투여군: 항VEGF 항체 1 ng을 유리체 내에 투여

(4) 병용군: 「(2) 피다레스타트 투여군」과 동일한 피다레스타트 섭취+항VEGF 항체 1 ng의 유리체 내로의 투여

피다레스타트의 투여는 레이저 조사의 2일 전부터 조사 7일 후까지 행하고, 항VEGF 항체는 레이저 조사 직후에 유리체 내에 투여하였다. 레이저 조사 종료 후, 통상 사육을 7일간 행하고, 그 후 안구를 적출하여 맥락막 중에 발현한 CNV의 용적을 측정하였다. 또한, CNV의 유도 및 평가 방법은 이하와 같다.

[레이저 조사에 의한 실험적 CNV의 유도]

트리브로모에탄올 0.30 mL를 마우스의 복강 내에 투여하여 마취한 후, 산동약과 국소 마취약을 점안하였다. 그 후 마우스의 양안에 레이저광 응고 장치(Lumenis)를 사용하여 레이저(파장 532 nm, 출력 200 mW, 조사 시간 100 ms, 스폿 크기 100 ㎛)를 한쪽 눈에 대하여 4 내지 6발 조사하였다. 레이저 조사에 의해 CNV가 발현하고, 그 후 CNV의 용적이 증대되었다.

[CNV 용적의 평가]

레이저 조사 7일 후에 트리브로모에탄올 마취하에 안락사시킨 후, 마우스의 좌우 안구를 적출하였다. 적출한 안구를 이용하여, 통상법에 따라 플랫 마운트를 제작하였다. CNV의 염색은 FITC-그리포니아 심플리시폴리아 이소렉틴-B4(FITC-Griffonia simplicifolia isolectin-B4)를 사용하여 행하였다. CNV의 용적은, CNV 근방의 화상을 공초점 레이저 현미경(차이스 LSM5 파스칼;Zeiss LSM5 Pascal) 내에 넣고, 화상 해석 소프트(NIH 이미지 J;NIH Image J)를 이용하여 측정하였다. 용적은 ㎛³로 나타내었다.

결과

레이저 조사 7일 후의 맥락막 혈관 신생(CNV) 용적을 도 1에 나타낸다. 항VEGF 항체 1 ng 투여군에서는, 무처치군과 비교하여 CNV에 대한 유의한 억제 효과는 볼 수 없었다. 피다레스타트 투여군에서는, 무처치군과 비교하여 CNV에 대한 유의한 억제 효과를 볼 수 있었다(p<0.05). 한편, 피다레스타트 및 항VEGF 항체 1 ng의 병용군에서는, 무처치군과 비교하여 CNV에 대한 현저한 억제 효과를 볼 수 있었다(p<0.01).

항VEGF 항체가 최대 약효를 나타내는 용량인 10 ng으로부터 1/10로 감한 1 ng의 용량에 피다레스타트를 병용하면, 그 효과는 유의하게 증강되어, 저용량으로도 CNV에 대한 현저한 억제 효과를 볼 수 있었다.

고찰

이번 성적은, 단독으로는 CNV에 대한 유효성을 볼 수 없는 저용량의 항VEGF약에 피다레스타트를 병용하면, 각각 단독 투여의 경우에 비교하여 매우 현저한 병용 효과가 보인다는 것을 나타내는 것이다. 항VEGF 항체의 최대 약효를 나타내는 용량은 10 ng이기 때문에, 이 병용에 의해 항VEGF약의 투여량을 1/10로 줄이는 것이 가능해져, 항VEGF약의 부작용의 경감으로 이어지는 것이 기대된다.

또한, 이번 성적은, 항VEGF 항체의 혈중 농도 또는 조직 내 농도의 저하에 의해 임상 효과가 감약 또는 소실된 상태에서 피다레스타트를 병용하여도, 효과가 증강된다는 것을 나타내는 것이다. 그 결과는, 항VEGF약의 유리체 내 농도가 10분의 1 이하까지 저하되어도, 피다레스타트를 병용함으로써 효과의 감약이 일어나지 않는 것을 의미하는 것이다. 이러한 병용에 의한 효과의 증강에 따르면, 항VEGF약의 효과의 지속성, 및 효과 감약 및 재연에 의한 재투여까지의 간격이 연장되기 때문에, 항VEGF약의 유리체 내로의 주사 횟수를 줄이는 것으로 이어진다. 즉, 이번 병용군에 있어서의 성적은, 임상적으로 치료 효과가 인정된 환자의 유효성을 더욱 높이고, 그 결과로서 항VEGF약의 재투여까지의 간격의 연장, 즉 효과의 지속을 초래한다. 또한, 현행의 항VEGF약의 치료로 효과가 불충분한 환자에 대해서도, 병용에 의해 우수한 혈관 신생의 억제 효과를 기대할 수 있다. 또는, 항VEGF약의 투여량을 줄여도 충분한 치료 효과를 초래하는 것을 기대할 수 있다.

또한, 이번 실험에 사용한 항마우스 VEGF 항체는, 모든 VEGF 아이소폼을 저해한다는 점에서 임상적으로 사용되고 있는 항VEGF 항체와 공통된다. 따라서, 항마우스 VEGF 항체의 효과는, 인간에게 사용하는 경우에는 인간형의 항VEGF 항체의 효과로 바꾸어 읽을 수 있다.

2. 실험 2: 혈관 투과성 항진에 대한 치료적 효과

-항마우스 VEGF 항체와 피다레스타트의 병용 효과-

방법

실험 1과 마찬가지로 CNV를 유도하는 처치를 한 마우스에게 항VEGF 항체 및/또는 피다레스타트를 투여하였다. 항VEGF 항체 10 ng은 최대 약효를 나타내는 용량이다. 예의 수는 1군당 3마리 내지 4마리로 하여, 이하의 5군을 설정하였다.

(1) 무처치군

(2) 피다레스타트 투여군: 피다레스타트 16 mg/kg을 1일 2회 강제 경구 투여(32 mg/kg/일)

(3) 항VEGF 항체 2 ng 투여군: 항VEGF 항체 2 ng을 유리체 내에 투여

(4) 항VEGF 항체 10 ng 투여군: 항VEGF 항체 10 ng을 유리체 내에 투여

(5) 병용군: 항VEGF 항체 2 ng을 유리체 내에 투여+피다레스타트 투여(16 mg/kg을 1일 2회 강제 경구 투여(32 mg/kg/일)

피다레스타트 투여는 레이저 조사일(조사 후 20 내지 30분)로부터 조사 7일 후까지 행하고, 항VEGF 항체는 레이저 조사 직후에 유리체 내에 투여하였다. 레이저 조사 종료 후, 통상 사육을 7일간 행하고, 플루오레세인 형광 안저 조영(FA)을 촬영하였다. 또한, 플루오레세인 형광 안저 조영의 방법은 이하와 같다.

[플루오레세인 형광 안저 조영]

레이저 조사 7일 후에 트리브로모에탄올 마취하에 1 ％ 플루오레세인을 0.1 mL 복강 내 투여하였다. 안저 카메라로 양안을 촬영하고, 얻어진 안저 사진을 이하의 기준에 따라 맹검적(盲檢的)으로 평가하였다.

등급 0: 혈관으로부터의 누출 없음 (nonleaky)

등급 1: 약한 누출 있음 (questionable leakage)

등급 2: 누출 있음 (leaky)

등급 3: 광범위하고 선명한 누출 있음 (pathologically significant leakage)

각각의 눈에 있어서의 FA 등급 3의 병변수의 비율(％)을 산출하고, 산출된 비율의 각 군에 있어서의 평균값을 구하였다. 형광 색소(플루오레세인) 투여 후, 안저 사진을 촬영하여 혈관망을 선명히 관찰할 수 있다. 정상의 경우, 혈관으로부터의 혈액 성분의 누출(leakage)은 볼 수 없지만, 혈관에 이상이 있으면 혈관 외로의 누출을 볼 수 있다.

결과

플루오레세인 형광 안저 조영에서의 FA 등급 3 병변수의 비율(％)을 도 2에 나타낸다. 항VEGF 항체 투여군에서는, 용량 의존적으로 병변수의 비율의 유의한 감소를 볼 수 있었다(p<0.001). 항VEGF 항체 10 ng 투여군에서는, 병변수의 비율은 6 ％였다. 이로부터, 본 모델에서의 혈관 투과성은 VEGF가 기여하는 모델이라는 것을 알 수 있다. 한편, 항VEGF 항체 2 ng 투여군에서는, 그의 비율은 26 ％였다. 피다레스타트 투여군에서도 유의한 감소를 볼 수 있지만, 항VEGF 항체 2 ng 투여군과 거의 동일한 정도의 비율을 나타내었다. 항VEGF 항체 2 ng+피다레스타트 병용군에서는 그의 효과가 3배 이상 증강되어, 항VEGF 항체 10 ng 투여군과 동일한 정도의 억제 효과를 볼 수 있었다.

고찰

피다레스타트 투여군에서의 FA 등급 3 병변수의 비율은, 항VEGF 항체 2 ng 투여군과 거의 동일한 정도임에도 불구하고, 이들을 병용하면 항VEGF 항체 2 ng 투여군의 1/3 이하로 저하된다는 것이 나타났다. 이 병용에 의한 FA 등급 3 병변수의 비율의 저하 효과는, 항VEGF 항체의 최대 효과에 필적하는 거의 완전한 혈관 투과성 억제 효과였다. 통상, 동일한 정도의 저하 효과를 나타내는 용량으로 2종류의 항VEGF약을 병용하여도, 1 종류의 항VEGF약을 투여했을 때와 비교하여 FA 등급 3 병변수의 비율은 1/2밖에 저하되지 않을 것으로 예상되지만, 이번 결과는 그 예상을 초과하는 비율까지 저하되어 있었다. 또한, 항VEGF 항체의 용량을 1/5로 감소시켜도, 피다레스타트와 병용함으로써 항VEGF 항체의 최대 약효와 동일한 정도의 효과가 얻어지는 것을 나타낸다는 것은 놀라운 사실이다.

이번 성적은, 항VEGF약과 피다레스타트를 병용함으로써, 혈관 신생 뿐만 아니라 혈관외 누출에 대해서도 우수한 억제 효과가 얻어지는 것을 나타낸다는 것이다. 혈관외 누출, 즉 혈관 투과성 항진은 부종의 발현을 의미하고, 이것을 억제하는 것은 부종 병변에 대한 유효성을 강하게 시사하는 것이다. 특히, 항VEGF약은 유리체 내의 약물 소실 반감기가 짧기 때문에 임상 효과의 지속성에 문제가 있고, 빈번한 횟수의 유리체 주사가 필요하다. 피다레스타트를 병용함으로써, 혈관 투과성 항진에 기초한 부종 병변에 대한 효과를 지속시키고, 그 결과로서 항VEGF약의 유리체 주사의 재투여까지의 간격을 연장한다는, 즉 재투여의 횟수를 감소시킨다는 것이 시사되었다.

정리

항VEGF약의 효과는, 비정상적인 VEGF 생산이 완전히 억제되었을 때, 또는 VEGF 시그널이 완전히 억제되었을 때에 최대가 된다. 즉, 생산계 및 시그널계 중 한쪽을 완전히 억제하면 효과는 최대가 되지만, 이 때에 또 다른 한쪽을 억제했다고 해도 더욱 효과의 증강은 기대할 수 없다고 생각된다.

항VEGF 항체 10 ng은 VEGF 시그널을 억제했을 때의 최대 약효를 나타내는 용량이라고 생각된다. 또한, 피다레스타트 32 mg/kg도 비정상적인 VEGF 생산을 억제했을 때의 최대 약효를 나타내는 용량이라고 생각된다. 따라서, 예를 들면 피다레스타트 32 mg/kg에 대하여 항VEGF 항체를 추가했다고 해도, 그 효과는 증강되지 않는 것으로 당업자라면 예측할 수 있다.

그런데, 이러한 예측에 반하여, 실험 1 및 2에서는 단독으로 최대 약효를 나타내는 용량의 피다레스타트 투여군과 비교하여, 피다레스타트와 항VEGF 항체의 병용에 의해 더욱 강한 효과가 인정되었다. 이들 결과는, 단독의 약의 용량을 늘리는 것만으로는 달성할 수 없는 효과를, 병용에 의해 달성할 수 있다는 것을 나타내고 있다.

이러한 효과가 발휘되는 것은, VEGF를 억제하는 효과만으로는 설명할 수 없다. VEGF와는 상이한 어떠한 혈관 신생 및/또는 혈관 투과성 항진의 메카니즘을 억제하는 작용이 기능하고 있다고 생각된다. 이러한 VEGF에 대한 최대 약효 이상의 작용은, 비당뇨병 및 당뇨병 중 어느 것에서도 당업자의 예측을 초과한 것이다.

Claims

항VEGF약과,
하기 화학식 I로 표시되는 히단토인 유도체 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염
의 조합으로부터 구성되는 안내 혈관 신생 및/또는 안내 혈관 투과성 항진을 수반하는 질환의 예방 또는 치료를 위한 의약.
<화학식 I>

(식 중, X는 할로겐 원자 또는 수소 원자를 나타내고, R¹ 및 R²는 동시에 또는 각각 수소 원자 또는 치환되어 있을 수도 있는 C₁ _- ₆알킬기를 나타냄)
하기 화학식 I로 표시되는 히단토인 유도체 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염을 유효 성분으로서 포함하고, 항VEGF약과 조합하여 투여되는 안내 혈관 신생 및/또는 안내 혈관 투과성 항진을 수반하는 질환의 예방 또는 치료를 위한 의약.
<화학식 I>

(식 중, X는 할로겐 원자 또는 수소 원자를 나타내고, R¹ 및 R²는 동시에 또는 각각 수소 원자 또는 치환되어 있을 수도 있는 C₁ _- ₆알킬기를 나타냄)
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 화학식 I로 표시되는 히단토인 유도체가 (2S,4S)-6-플루오로-2',5'-디옥소스피로[크로만-4,4'-이미다졸리딘]-2-카르복사미드인 의약.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항VEGF약이 항VEGF 항체, VEGF 리간드 저해제, VEGF 수용체 길항약 및 VEGF에 관련된 핵산 의약으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 적어도 1종인 의약.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 안내 혈관 신생 및/또는 안내 혈관 투과성 항진을 수반하는 질환이 가령 황반 변성증, 망막 정맥 분지 폐색증, 망막 중심 정맥 폐색증, 당뇨병 황반증, 당뇨병 망막증 및 혈관 신생 녹내장으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 의약.
제2항에 기재된 의약과,
해당 의약을 안내 혈관 신생 및/또는 안내 혈관 투과 항진을 수반하는 질환의 예방 또는 치료를 위해 항VEGF약과 조합하여 투여하기 위한 방법이 기재된 설명서
를 포함하는 키트.