KR100854058B1 - 스테로이드를 유효 성분으로 하는 망맥락막 질환 치료제 - Google Patents

Abstract

본 발명은 종래보다도 우수한 효과를 갖는 스테로이드를 유효 성분으로 하는 망맥락막 질환 치료제 및 스테로이드제를 간편히 투여할 수 있는 망맥락막 질환 치료용의 제형을 제공하는 것을 목적으로 한다.

본 발명은 베타메사존 및 하이드로콜티존을 유효 성분으로 하는 망막 질환 치료제 및 스테로이드를 유효 성분으로 하는 결막하 주사제이다.

Description

스테로이드를 유효 성분으로 하는 망맥락막 질환 치료제{REMEDIES FOR RETINA AND CHOROID DISEASES CONTAINING STEROIDS AS THE ACTIVE INGREDIENT}

본 발명은 특정한 스테로이드, 즉 베타메사존 또는 하이드로콜티존을 유효 성분으로 하는 망맥락막 질환 치료제 및 스테로이드를 유효 성분으로 하는 망맥락막 질환 치료용 결막하 주사제에 관한 것이다.

망맥락막 질환은 실명으로도 이어지는 난치성 질환이며, 그 중에서도 노인성 황반변성, 당뇨병성 망막증 및 증식성 유리체망막증은 주요한 망맥락막 질환이다.

노인성 황반변성(age-related macular degeneration; 이하 「AMD」라고 함)은 원인 불명의, 나이가 듦에 따라 황반부에 생기는 질환이다. 이것은 50세 이상의 고령자에 많으며, 최근 고령자의 시력 저하 및 실명의 주요 원인 질환으로서 주목받고 있다. AMD에는 황반부에 맥락막 유래의 신생 혈관이 신전(伸展)되어, 출혈이나 삼출을 일으키는 삼출형과, 맥락막 혈관 신생이 관여하지 않고, 망막 색소 상피 세포나 맥락막 모세관판의 위축을 초래하는 위축형이 있다. 삼출형은 고령자의 황반에 맥락막으로부터 망막 색소 상피 세포 또는 망막하에 신생 혈관이 신전되어, 출혈이나 삼출형 병변을 일으킨다.

당뇨병성 망막증(diabetic retinopathy ; 이하 「DR」라고 함)은 당뇨병의 눈 합병증으로, 최근 성인 실명의 제1위를 차지하는 질환이다. 인구의 고령화가 진행되고, 당뇨병에 걸린 환자가 장수하게 되어, DR의 발증 빈도는 증가하고 있다. DR는 망막혈관병으로, 모세관 레벨의 세소혈관증으로서 시작된다. 혈관증의 초기 병변인 것은 단순망막증이라 하고, 병변이 진행되어 모세혈관의 폐색이 진행되고 있는 상태는 전증식망막증이라 하며, 혈관증의 폐색이 확대되어 망막 허혈이 진행되어, 망막 유리체에 혈관 신생을 발증한 것은 증식망막증이라고 한다.

증식성 유리체망막증(proliferative vitreoretinopathy; 이하 「PVR」라고 함)은 열공원성(裂孔原性) 망막 박리에 속발되는 위중한 합병증이다. 증식성 유리체망막증의 빈도는 망막 박리의 5∼10%로 여겨지고 있지만, 최근 유리체 수술의 보급에 따라 증가 경향에 있다. 이 병태의 본질은 망막 색소 상피 세포, 망막 그리아 세포, 섬유아 세포 등의 비혈관 유래 세포가 증식하는 데 있으며, 박리 망막의 전면·후면 또는 그 유리체 내에 막 모양의 증식물이 형성되어, 망막에 대한 강한 견인이 일어나 전체 박리 상태로 빠진다.

망맥락막 질환의 치료는 주로 외과 수술에 의해서 이루어지고 있다. 외안부 질환의 치료는 점안 등에 의한 약물 요법이 주되지만, 망막에는 약물이 매우 이행하기 어려워, 그것이 망맥락막 질환의 약물 요법을 곤란하게 하고 있다. 정맥 주사나 경구 투여에 의한 망맥락막 질환의 치료도 시도되고 있지만, 약물의 전신 작용이 강하게 나타나는 경우도 있어, 유리체 내에 직접 약물을 주입하는 방법 등이 연구되고 있다.

망맥락막 질환의 치료에 이용되는 약물으로서 스테로이드가 유용하다는 것이 이미 알려져 있으며, 특히 트리암시놀론에 대해서는 여러 가지 보고가 있다. 예컨대, 미국 특허 제5770589호에는 트리암시놀론을 유리체 내에 주입함에 의한 황반변성의 치료 방법이 개시되어 있다. 문헌(Am. J. Ophthal. 89 : 131-136, 1980)에는 트리암시놀론아세토니드를 유리체 내에 주입함으로써, 유리체에 이식한 섬유아 세포의 증식을 억제하여, PVR의 치료에 유용하다는 것이 보고되어 있다. 문헌(J. Ocul. Pharmacol. Ther. 15(5), 425-428, 1999)에는 트리암시놀론의 테논(Tenon)낭하 주사에 의해 맥락막의 혈관 신생의 억제에 효과가 있음이 보고되고 있다.

그러나, 스테로이드 중에서, 베타메사존 및 하이드로콜티존이 망맥락막 질환의 치료에 이용된 예는 알려져 있지 않다. 또한, 스테로이드의 투여법으로서 유리체내주사, 테논낭하 주사가 알려져 있지만, 망맥락막 질환 치료의 투여 방법에 있어서의 결막하 주사의 유용성은 보고되어 있지 않다.

상기한 바와 같이 트리암시놀론이 망맥락막 질환의 치료에 유용하다는 것이 알려져 있지만, 아직도 효과면에서 만족할 수 있는 것은 아니어서, 보다 우수한 효과를 보이는 스테로이드를 알아내는 것은 매우 흥미 있는 과제였다.

또한, 스테로이드가 망맥락막 질환에 유용하다는 것을 알 수 있더라도, 스테로이드를 어떻게 하여 효율적으로 망맥락막으로 이행시킬지가 큰 과제이며, 그 수단으로서 유리체내 주사나 테논낭하 주사가 제창되고 있지만, 이들 수단은 의사의 기량에 의하는 바가 많고, 또한, 눈 조직의 장해도 크기 때문에 환자에게 있어서도 상당한 고통 등을 수반한다. 따라서, 망막으로의 이행성, 투여의 간편성, 눈 조직의 장해성 등의 밸런스가 잡힌 투여제의 개발이 요구되고 있다.

그래서 본 발명자들은 예의 연구를 거듭한 결과, 베타메사존 및 하이드로콜티존이 우수한 맥락막 혈관 신생 저해 작용, 혈관 투과성 항진 억제 작용 및 망막 박리 억제 작용을 보이는 것을 알아내어, 이들 화합물이 망맥락막 질환, 특히 노인성 황반변성, 당뇨병성 망막증 및 증식성 유리체망막증의 치료제로서 유용하다는 것을 알아냈다. 또한, 스테로이드를 결막하 주사로 투여하면, 보다 간편하게 투여할 수 있고, 또한 효율적으로 스테로이드를 망맥락막으로 송달할 수 있음을 아울러 알아냈다. 종래부터 알려져 있는 유리체내 주사는 약물을 망막 조직에 접하는 유리체 내에 직접 주입하는 방법이며, 테논낭하 주사는 미세 조직인 테논낭 내에 주입하는 방법이다. 어느 투여 방법도 직접 눈으로 볼 수 없는 부위에 투여하는 것이기 때문에, 고도의 기술을 필요로 하며, 환자에게 주는 부담도 크고, 투여 횟수에는 당연히 제약이 있다. 또한, 주사 바늘이 내안부까지 달하기 때문에 안내 감염증을 유발할 가능성도 있다. 한편, 결막하 주사는 눈으로 볼 수 있는 부분에 주사하기 때문에, 비교적 주사할 때의 손 기술은 간편하고, 또한 환자에게 주는 부담도 적으며, 투여 횟수에 그다지 제약은 없다.

본 발명에 있어서의 제1 발명은 약물, 즉 스테로이드의 종류에 특징이 있는 발명이다. 본 발명은 에스테르 또는 염의 형태로 되어 있더라도 좋은 베타메사존 또는 하이드로콜티존(이하 이들 스테로이드 화합물을 「본 화합물」이라고 함)을 유효 성분으로 하는 망맥락막 질환 치료제에 관한 것이다. 본 화합물에 있어서의 에스테르란 의약으로서 허용되는 에스테르라면 특별히 제한은 없고, 인산에스테르, 말레인산에스테르, 초산에스테르, 포름산에스테르 등을 들 수 있다.

본 화합물에 있어서의 염은 의약으로서 허용되는 염류라면 특별히 제한은 없으며, 나트륨염, 칼륨염 등을 들 수 있다. 본 화합물 중 특히 바람직한 예는 인산베타메사존나트륨 및 하이드로콜티존이다.

본 화합물의 망맥락막 질환 치료에 대한 유용성을 조사하기 위해, 맥락막 혈관 신생 저해 작용, 혈관 투과성 항진 억제 작용 및 망막 박리 억제 작용에 관해서 검토했다. 상세한 것은 후술하는 실시예 항목에서 설명한다.

본 화합물의 투여 형태로서는 결막하 주사가 바람직하지만, 의사의 기량이나 환자의 증상 등에 따라서 통상의 스테로이드의 투여 형태를 이용할 수도 있다. 즉, 제1 발명에서는, 베타메사존 또는 하이드로콜티존을 비경구로도 경구로도 투여할 수 있다. 비경구 투여 제형으로서는 주사제, 점안제 등을 들 수 있고, 또한 경구 투여 제형으로서는 정제, 캅셀제, 과립제, 산제 등을 들 수 있어, 범용되고 있는 기술을 이용하여 본 화합물을 제제화할 수 있다. 예컨대, 주사제의 경우는 염화나트륨 등의 침투압 조정제, 인산나트륨 등의 pH 조정제, 폴리솔베이트 80 등의 계면활성제, 메틸셀룰로오스 등의 증점제 등의 통상 이용되는 첨가제를 본 화합물에 가하여, 이들을 주사용 증류수에 용해하면 된다. 이 주사제는 결막하 주사로서는 물론 유리체내 주사나 테논낭하 주사에서도 이용할 수 있다.

본 화합물의 투여량은 증상, 연령 등에 따라 적절하게 선택할 수 있지만, 주사제라면, 통상 1회에 1 ㎍∼10 ㎎, 바람직하게는 10 ㎍∼1 ㎎을 투여하면 된다.

본 발명에 있어서의 제2 발명은, 전술한 본 화합물과 같은 스테로이드를 결 막하 주사로 투여하는 것에 의한 망맥락막 질환의 치료제에 관한 것이다. 본 발명은 투여 부위에 특징이 있는 발명으로, 사용하는 스테로이드의 종류에는 제약이 없다. 즉, 제2 발명은 본 화합물 외에, 트리암실론 등 망맥락막 질환에 유용한 스테로이드 전부에 적용할 수 있다. 제2 발명의 효과는 후술하는 약리 시험의 결과에서 분명히 나타난 바와 같이, 의사 및 환자 쌍방에 있어서 유익한 결막하 주사에 의해 스테로이드가 망맥락막 질환 부위에 도달하여 약효를 발휘할 수 있다는 데 있다. 제2 발명에 있어서 이용되는 주사제의 제조 방법, 투여량 등은 제1 발명에서의 설명과 마찬가지이다.

이하에서는 제제예 및 약리 시험 결과를 나타낸다.

본 발명은 에스테르 또는 염의 형태로 되어 있더라도 좋은 베타메사존 또는 하이드로콜티존 유효량을 환자에게 투여함으로써 이루어지는 망맥락막 질환의 치료 방법을 포함한다.

또한, 본 발명은 스테로이드 유효량을 환자에게 결막하 투여함으로써 이루어지는 망맥락막 질환의 치료 방법을 포함한다.

발명을 실시하기 위한 가장 바람직한 양태

[제제예]

본 화합물 주사제의 일반적인 제제예를 이하에 나타낸다.

1) 주사제(처방 100 mL)

인산베타메사존 20 ㎎

염화나트륨 900 ㎎

주사용 증류수 적량

[약리 시험]

본 화합물의 AMD 및 DR에 대한 효과를 조사하기 위해서, 맥락막 혈관 신생 저해 시험 및 망막 혈관 투과성 억제 시험을 실시했다. 또한, PVR에 대한 효과를 조사하기 위해서 망막 박리 억제 시험을 했다.

1. 인산베타메사존나트륨의 맥락막 혈관 신생 저해 시험

(레이저 유발 래트 맥락막 혈관 신생 모델의 제작)

래트에 5% 염산케타민 주사액 및 2% 염산키시라진 주사액의 혼합액(7:1) 1 mL/㎏을 근육내 투여함으로써 래트를 전신 마취시키고, 0.5% 트로피카미드-0.5% 염산페닐프린 점안액을 점안하여 눈동자에 산동시킨 후, 크립톤 레이저 광응고 장치에 의해 광응고를 실시했다. 광응고는 안저 후국부에 있어서, 굵은 망막 혈관을 피하여, 초점을 망막 심층에 맞춰 눈 하나에 8곳 산재형으로 실시했다(응고 조건: 스폿 사이즈 100 ㎛, 출력 100 ㎽, 응고 시간 0.1초). 광응고후, 안저 촬영을 하여, 레이저 조사 부위를 확인했다.

(약물의 투여 방법)

인산베타메사존나트륨을 인산 완충액에 0.2 및 2 ㎎/mL이 되도록 용해하여, 레이저 조사일로부터 7일간 결막하에 50 μL 투여했다. 비교군으로서 트리암시놀론을 0.2 및 2 ㎎/mL이 되도록 인산 완충액에 현탁하여, 같은 식으로 투여했다. 기제 투여군으로서, 인산 완충액을 마찬가지로 투여했다.

(평가 방법)

광응고후 7일째에 10% 플루오레세인 0.1 mL을 경정맥으로부터 주입하여, 형광 안저 조영을 실시했다. 형광 안저 조영에서, 형광 누출이 보이지 않은 스폿을 음성, 형광 누출이 보인 스폿을 양성으로 하여 판정했다. 레이저 조사 8곳의 스폿에 대한 양성 스폿수로부터 신생 혈관 발현율을 산정하여, 하기 수학식에 따라서, 맥락막 혈관 신생 저해율을 산출했다.

맥락막 혈관 신생 저해율(%) = (Ao-Ax)/Ao ×100

Ao : 기제 투여군의 신생 혈관 발현율

Ax : 약물 투여군의 신생 혈관 발현율

(결과)

상기 시험 결과를 표 1에 나타내었다. 투여량 10 ㎍/eye(1 눈)/day(1 일) 및 100 ㎍/eye/day 모두 인산베타메사존나트륨은 트리암시놀론보다 높은 맥락막 혈관 신생 저해율을 보이고, 10 ㎍/eye/day에서는 트리암시놀론의 약 3배쯤의 강한 저해 효과를 갖는 것이 판명되었다.

	신생 혈관 발현율 (%, 8 눈의 평균치)	맥락막 혈관 신생 저해율(%)
기제 투여군	54.2	--
인산베타메사존나트륨 투여군 10 ㎍/eye/day 100 ㎍/eye/day	34.4 11.1	36.3 79.4
트리암시놀론 투여군 10 ㎍/eye/day 100 ㎍/eye/day	46.9 22.3	13.1 58.8

2. 하이드로콜티존의 맥락막 혈관 신생 저해 시험

(레이저 유발 래트 맥락막 혈관 신생 모델의 제작)

전술한 인산베타메사존나트륨의 시험과 같은 식으로 레이저 유발 래트 맥락막 혈관 신생 모델을 제작했다.

(약물의 투여 방법)

하이드로콜티존을 인산 완충액에 2 ㎎/mL 및 20 ㎎/mL이 되도록 용해하여, 레이저 조사 직후에 1회 결막하에 50 μL 투여했다. 기제 투여군으로서, 인산 완충액을 마찬가지로 투여했다.

(평가 방법)

전술한 인산베타메사존나트륨의 시험과 같은 식으로 평가했다.

(결과)

상기 시험 결과를 표 2에 나타내었다. 투여량 100 ㎍/eye/day 및 1000 ㎍/eye/day 모두 하이드로콜티존은 맥락막 혈관 신생 저해 효과를 갖는 것이 판명되었다.

	신생 혈관 발현율 (%, 8 눈의 평균치)	맥락막 혈관 신생 저해율(%)
기제 투여군	67.2	--
하이드로콜티손 투여군 100 ㎍/eye/day 1000 ㎍/eye/day	45.3 19.6	32.6 70.8

3. 인산베타메사존의 망막 혈관 투과성 억제 시험

(트롬빈 유발 래트 망막 혈관 투과성 항진 모델의 제작)

래트에 5% 염산케타민 주사액 및 2% 염산키시라진 주사액의 혼합액(7:1)을 1 mL/㎏ 근육내 투여함으로써 래트를 전신 마취한 후, 0.5% 트로피카미드-0.5% 염산페닐프린 점안액을 점안하여 왼쪽 눈의 눈동자에 산동시켰다. 약물 투여군 및 대조군의 래트에게는 수술용 현미경으로 관찰하면서 수정체 및 망막을 상처를 입히지 않도록 33 G 바늘을 사용하여, 유리체내(왼쪽 눈)에 트롬빈(500 U/mL)을 2.5 μL 주입했다. 정상군의 래트에게는 트롬빈 대신에 기제(둘베코 개변 인산 완충 생리식염액)을 투여했다.

(약물의 투여 방법)

인산베타메사존나트륨을 2 ㎎/mL 또는 20 ㎎/mL이 되도록 생리식염액에 용해했다. 트롬빈 또는 기제(둘베코 개변 인산 완충 생리식염액)의 투여 1시간 전 및 23시간 후, 래트 왼쪽 눈에 0.4% 옥시부프로카인 점안액을 점안한 후, 약물 투여군의 래트에게는 2 ㎎/mL 또는 20 ㎎/mL 인산베타메사존을 결막하 주사했다. 정상군 및 대조군의 래트에게는 생리식염액을 결막하 주사했다.

(평가 방법)

트롬빈 유리체내 투여 48시간 후, 래트에게 0.5% 트로피카미드-0.5% 염산페닐프린 점안액을 점안하여 산동시키고, 5% 염산케타민 주사액 및 2% 염산키시라진 주사액의 혼합액(7:1)을 1 mL/㎏ 근육내 투여하여 래트를 전신 마취한 후, 1% 플루오레세인 용액(1 mL/㎏)을 음경 정맥내 투여했다. 플루오레세인 투여 약 40분 후 혈액을 심장에서 채취한 후 즉시, 플루오로트론 마스터로 안내 형광 색소 농도를 측정했다. 채혈한 혈액은 15,000 rpm×5분으로 원심분리한 후, 그 상청(혈장)을 인산 완충 생리식염액으로 51배 희석하여, 플루오로트론 마스터로 혈장중 형광 색소 농도를 측정했다. 플루오로트론 마스터에 의해 얻어진 플루오레세인 투여 약 45분후의 안내 형광 색소 농도를 혈장중 형광 색소 농도로 나눠 망막 혈관 투과성을 산출했다.

(결과)

결과를 표 3에 나타내었다. 정상군과 대조군을 비교하면 알 수 있는 것과 같이, 대조군에서는 트롬빈에 의해 망막의 혈관 투과성 항진이 보였다. 그러나, 트롬빈과 함께 인산베타메사존나트륨을 투여하면, 트롬빈에 의한 망막의 혈관 투과성 항진이 억제되는 것이 나타났다.

	망막 혈관 투과성
정상군(기제 + 생리식염액 투여)	1.72
대조군(트롬빈 + 생리식염액 투여)	3.31
트롬빈 + 인산베타메사존나트륨 투여군(2 mg/mL) 트롬빈 + 인산베타메사존나트륨 투여군(20 mg/mL)	1.85 1.54

4. 베타메사존의 망막 박리 억제 시험

(디스파아제 유발 토끼 PVR 모델의 제작)

토끼에게 0.5% 트로피카미드-0.5% 염산페닐프린 점안액을 점안하여 산동시키고, 5% 염산케타민 주사액 및 2% 염산키시라진 주사액의 혼합액(7:1) 1 mL/㎏을 근육내 투여함으로써 토끼를 전신 마취했다. 0.4% 옥시부프로카인을 점안하여 전체 안부를 마취한 후, 생리식염액으로 0.05 U/100 μL으로 조제한 디스파아제 용액 100 μL을 유리체 내에 주입했다. 디스파아제 용액 주입후 6주째 및 10주째에 디스파아제에 의해 유발된 PVR를 안저 관찰에 의해 확인했다.

(약물의 투여)

베타메사존을 0.1 g/mL이 되도록 인산 완충액에 용해하여, 디스파아제 주입 직후에 결막하에 100 μL 투여했다. 기제 투여군으로서, 인산 완충액을 마찬가지로 투여했다.

(평가 방법)

디스파아제 유발후 56일째에 안저 관찰을 하여 PVR를 스코어에 의해 판정했다. 판정 기준을 이하에 나타낸다. 스코어 3 이상을 PVR의 발현이라 정의하여, 각 군에 있어서의 PVR의 발증율(망막 박리의 발증율)을 하기 수학식에 따라서 산출했다.

0 : 정상 망막

1 : 유리체막이 보임

2 : 망막의 견인·혈관 이상·충혈이 보임

3 : 국소적인 박리가 보임

4 : 광범위한 박리가 보임

5 : 전체 박리가 보임

PVR의 발증율(%) = PVR 발현 눈의 수/시험한 눈의 수 ×100

(결과)

결과를 표 4에 나타내었다. 표에 나타낸 바와 같이, 기제 투여군 및 베타메 사존 투여군에 있어서의 PVR의 발증율은 각각 66.7% 및 37.5%이며, 베타메사존이 PVR를 억제하는 것을 알 수 있었다.

	6주간 후	10주간 후
기제 투여군	66.7%	66.7%
베타메사존 투여군 10 mg/eye	45.5%	37.5%

본 발명의 베타메사존 또는 하이드로콜티존은 우수한 맥락막 혈관 신생 저해 작용, 혈관 투과성 항진 억제 작용 및 PVR 억제 작용을 갖기 때문에, 노인성 황반변성 치료제 및 증식성 유리체망막증 치료제 등의 망맥락막 질환 치료제로서 유용하다. 또한, 본 발명의 스테로이드를 함유하는 주사제를 결막하에 주사하여 사용하면, 망맥락막 질환을 간편히 치료할 수 있다.

Claims (10)

1. 에스테르 또는 염의 형태로 되어 있더라도 좋은 베타메사존 또는 하이드로콜티존을 유효 성분으로 하는 망맥락막 질환 치료제.
2. 스테로이드를 유효 성분으로 하는 망맥락막 질환 치료용 결막하 주사제.
3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 망맥락막 질환이 노인성 황반변성, 당뇨병성 망막증 또는 증식성 유리체망막증인 망맥락막 질환 치료제.
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