KR20120047847A - 항균성 조성물들 및 관련된 사용 방법 - Google Patents

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Abstract

하나 이상의 화합물의 성분들을 포함하는 항균성 조성물들은 일반적으로 사람이 소비하기에 안전하다고 승인되었고, 이러한 조성물들 및 방법들의 사용 방법과 관련되며, 농업, 산업, 건축, 약제학 및/또는 개인용 관리 제품들 및 적용물들의 폭 넓은 범위에서 적용될 수 있다.

Description

항균성 조성물들 및 관련된 사용 방법{ANTIMICROBIAL COMPOSITIONS AND RELATED METHODS OF USE}
본 출원은 2009년 4월 27일에 출원된 출원 번호 61/214,752; 2009년 11월 2일에 출원된 출원 번호 61/257,319; 및 2010년 3월 19일에 출원된 출원 번호 61/315,611의 우선적인 이익을 주장하며, 이는 본 명세서에서 이의 전문이 참고문헌으로 인용참조된다.
다양한 곰팡이(mold)들, 식물 병해들 및 이와 유사한 것들에 대한 살생물제들의 발견 및 발전에 대하여 많은 진전이 이뤄지고 있다. 그러나, 사용되는 대부분의 시판용 살생물제들 또는 살충제들은 발암물질들로 분류되거나, 야생생물 및 다른 비-표적 종들에게 유독한 화합물들이다. 예를 들어, 메틸 브로마이드는 토양 훈증제로서, 그리고 미생물 감염들에 대한 수확-전 처리에 널리 사용된다. 궁극적으로, 인체의 유독성 및 환경적으로 유해한 영향들로 인하여 메틸 브로마이드 및 다양한 여타의 합성 살생물제들/살충제들의 사용을 중단시킬 것이다. 결과적으로, 최근의 시도들은 비슷한 항균성 또는 살충 효과를 나타내는 천연 또는 생물모방성 조성물들의 발견 및 발전으로 유도되고 있다.
이러한 접근의 하나는 식물내생생물(endophyte)들 및 관련된 휘발성 부산물들에 관한 것이다. 식물내생생물들은 살아 있는 식물 조직의 사이의 공간들 내에 존재하는 미생물들로서 본 기술분야에서 정의되나, 일반적으로 기생하지 않는 것으로 여겨진다. 특히, 열대 우림 식물들과 관련하여 발견되는 식물내생생물들은 이들의 휘발성 부산물들의 항생작용(antibiotic) 성질과 관련된 이유로 상당한 관심을 불러 일으키고 있다. 무스코도르(Muscodor)속의 몇 가지[즉, 무스코도르 알부 스( albus ), 무스코도르 로제우스 ( roseus ) 및 무스코도르 비티제너스( vitigenus )]가 항생작용 또는 살충 성질을 나타내는 휘발성 부산물들을 생산하는 것으로 밝혀졌다. 그러나, 각 종들의 각각의 부산물은 다양한 나프탈렌 및/또는 아줄렌 유도체들을 포함한다. 여타 부산물의 성분들을 가지는 이러한 화합물들은 유독하거나, 그 밖에도 건강에 나쁠 수 있으며, 대응하는 혼합물들은 다양한 최종 용도(end use)로 적용하기에 받아들일 수 없는 것으로 여겨진다. 따라서, 사람에게 안전하고 효과적인 항균성 성질들을 나타내는 천연 조성물들을 발견하고, 이러한 화합물들로부터 존재하지 않는(absent) 생물모방성 조성물들을 개발하기 위한 본 기술분야에서의 진행중인 조사가 남아있다.
상기의 관점에서, 본원 발명의 목적은 항균성 조성물들을 가지는 향미료들 및/또는 이들의 사용 방법을 제공함으로써, 상기의 개요를 포함하여 이전 기술의 다양한 결함들 및 결점들을 극복하는 것이다. 본 발명의 하나 이상의 측면들에서 여하한 목표들을 충족할 수 있는 동시에, 하나 이상의 다른 측면들에서 다른 목표들을 충족할 수 있다는 것을 본 기술분야의 전문가들은 이해할 것이다. 각각의 목표는 이의 모든 사항들에서 본 발명의 모든 측면에 동일하게 적용되지 않을 수 있다. 이와 같이, 다음의 목적들은 본 발명의 여하한 일 측면에 관하여 대안적으로 간주될 수 있다.
미생물 감염의 예방, 억제 및/또는 근절에 대한 방법론과 관련하여, 무스코도르종들 및 이들의 휘발성 부산물, 나프탈렌 및 아줄렌(비-GRAS 화합물들)이 없는(absent) 관련된 화합물들을 제공하는 것이 본원 발명의 목적일 수 있다.
미생물 감염에 대하여 사용되는 비-고유(non-indigenous) 배지 또는 기질(substrate)과 관련하여, 상기의 종들 또는 이들의 균주 및 관련된 휘발성 부산물을 포함하는 시스템을 제공하는 것이 본원 발명의 또 다른 목적일 수 있다.
사람 및 동물의 식품, 수확물(produce), 식물들, 식물의 일부분들, 종자들, 농작물들 및 여타 유기 물질들, 포장재들, 건축재들, 섬유들, 직물, 의류 물품들, 그리고 약제학적 및/또는 약학적 적용의 맥락에서 사용되나, 이로 제한되지 않는 상기 시스템 및/또는 관련된 방법론을 제공하는 것이 본원 발명의 또 다른 목적일 수 있다.
상기의 목적과 관련하여 또는 대안적으로, 이러한 무스코도르종들과 비슷한 항균성의 활성을 나타내는 인공적인(man-made) 생물모방성 조성물들의 범위를 제공하는 것이 본원 발명의 또 다른 목적일 수 있다.
식용가능 하거나, 그 밖에도 사람에게 사용하고 섭취하는데 안전한 하나 이상의 이러한 조성물들을 제공하는 것이 본원 발명의 또 다른 목적일 수 있다.
미생물 감염의 예방, 억제 및/또는 근절을 위하여 배지 또는 기질과 관련된 이러한 비-천연, 생물모방성 조성물을 포함하는 시스템, 복합재(composite) 또는 물품을 제공하는 것이 본원 발명의 또 다른 목적일 수 있다. 상기에 설명되거나, 본 명세서에 다른 곳에서 도시되는 종류의 맥락에서 사용되는 이러한 시스템, 복합재 및/또는 물품을 제공하는 것이 본원 발명의 또 다른 목적일 수 있다.
배지, 운반체 또는 기질에 제한 없이, 이러한 조성물을 포함하는 항균 및/또는 살충 처리의 방법을 제공하는 것이 본원 발명의 목적일 수 있다.
본원 발명의 목적들, 특징들, 이익들 및 이점들은 발명의 내용 및 하기의 여하한 실시형태들의 설명에 의해 명백하게 될 것이고, 다양한 항균성 조성물들 및 관련되는 처리들에 대한 지식을 가지는 본 기술분야의 전문가들에게는 쉽게 명백하게 될 것이다. 이러한 목적들, 특징들, 이익들 및 이점들은 본 명세서에 인용참조되는 참고문헌들을 고려하거나 또는 단독으로, 이들로부터의 추론의 모든 합리적인 결과들, 도식들, 데이터 및 실시예들을 수반하는 것과 관련된 것을 취함으로써 상기로부터 명백하게 될 것이다.
일부분에서, 본원 발명은 하나 이상의 무스코도르 크리스판스(crispans)의 균주, 이의 휘발성 부산물 또는 이러한 휘발성 부산물의 발산물(vapor) 및 비-고유 배지 또는 기질을 포함하는 시스템에 관한 것일 수 있다. 이러한 배지 또는 기질들은 본 명세서에서 설명될 수 있거나, 그 밖에도 본 기술분야의 전문가들에 의해 이해될 수 있다. 여하튼, 이러한 균주는 휘발성 부산물의 생산에 대하여 충분히 실행 가능한 배양물(culture)과 같이, 선택적으로 배지/기질 접촉 또는 최종-용도로 적용하는데 적당한 운반체 성분과 함께 생물학적으로 순수한 배양물의 형태로 제공될 수 있다. 본 발명에 따라서, 무스코도르 크리스판스의 부산물의 변형물(modification) 또는 부산물, 또는 대응하는 발산물은 구성적으로 본 명세서에 다른 곳에서 설명된다.
따라서, 본원 발명은 또한 항균성 효과를 제공하기 위하여 이들의 휘발성 균류에 의한(fungal) 부산물들 및/또는 시스템을 사용하는 방법에 대한 것일 수 있다. 이러한 방법은 미생물의 활성화 또는 성장을 지지할 수 있는 비-고유 기질 또는 배지를 제공하는 단계; 및 이러한 기질 또는 배지를 무스코도르 크리스판스의 균주의 배양물, 이의 휘발성 부산물 및/또는 이러한 부산물로부터의 발산물을 접촉시키는 단계를 포함할 수 있다. 여하한의 실시형태에서, 이러한 접촉은 균주가 이러한 배지 또는 기질 상에, 근처에 또는 근접하게 위치되는 것을 포함할 수 있다. 여하한의 다른 실시형태에서, 무스코도르 크리스판스의 부산물의 변형물 또는 휘발성 부산물, 또는 대응하는 발산물은 이러한 배지 또는 기질에 주입(infuse)하거나, 그 밖에는 접촉될 수 있다.
이러한 시스템 또는 방법에 제한 없이, 이러한 기질은 식품 또는 생산품, 음식 또는 여타의 부패성(perishable) 물품의 포장 성분, 섬유, 직물 또는 의류 물품, 빌딩 또는 건축 성분, 식물, 식물의 표면, 토양, 쓰레기 또는 폐기물로부터 선택될 수 있다. 이러한 접촉은 미생물의 존재 및/또는 예방에 대하여 생물활성적(bioactive)일 수 있다.
일부분에서, 본원 발명은 이들의 성분들이 이들의 천연-유래 조합물(combination) 또는 화학적으로-합성되는 조합물이든지 간에, 비-자연적으로 발생되는 항균성 조성물에 관한 것일 수 있다. 이러한 조성물은 생물모방성 무스코도르종의 부산물의 조성물의 알코올, 알데히드, 케톤, 산 및/또는 산성 에스테르 성분들로부터 선택되는 화합물들을 포함할 수 있으며, 이러한 조성물은 이러한 화합물들의 하이드로 유도체들, 치환되어 융합된(fused) 방향족 화합물들 및 융합되지 않은(absent) 방향족 화합물들일 수 있다. 여하한의 비-제한적인 실시형태에서, 이러한 조성물은 아세트산, 이소부티르산, 피오피온산 및 이들의 조합물들로부터 선택되는 산 성분를 포함할 수 있다.
여하한 실시형태에서, 본원 발명은 무스코도르 크리스판스의 단리 배양물의 휘발성 부산물로부터 단리할 수 있는 C2-약 C5 산 성분; C2-약 C5 에스테르 성분; 및 2개 이상의 C2-약 C5 성분들을 포함하는 천연-유래 항균성 조성물에 관한 것일 수 있으며, 이러한 조성물은 단리, 배양되는 무스코도르 종, 이의 휘발성 부산물 및/또는 이러한 휘발성 부산물의 합성적인 혼합물의 병원체 활성 프로파일과는 상이한 병원체 활성 프로파일을 가질 수 있다. 이러한 산 성분들은 이소부티르산, 프로피온산 및 이들의 조합물들로부터 선택될 수 있다. 독립적으로, 이러한 에스테르 성분들은 C4 에스테르 아세테이트, C5 에스테르 아세테이트 및 이들의 조합물들로부터 선택될 수 있다.
여하한 실시형태들로의 제한 없이, 이러한 조성물은 그 밖에도 무스코도르 크리스판스의 휘발성 부산물로부터 단리될 수 있는 약 8 내지 약 10개의 성분들을 포함할 수 있다. 이러한 여하한의 실시형태에서, 이러한 조성물의 각각의 성분는 이러한 휘발성 부산물로부터 단리될 수 있다. 천연-유래될 수 있는 이러한 조성물과 같이, 이러한 각각의 성분은 발효 산물일 수 있으며, 발효는 박테리아, 효모 및/또는 균류에 의한 발효들로부터 선택될 수 있다. 여하튼, 이러한 조성물의 각각의 이러한 성분들은 일반적으로 미국연방 규정집의 21장 및 이의 대응하는 부분들 및/또는 조항들에 의해서 사람이 소비하기에 안전하다고 승인될 수 있다.
여하튼, 여하한의 비-제한적인 실시형태에서, 단리할 수 있는 성분들은 이소부티르산일 수 있다. 이러한 여하한의 실시형태에서, 이소부티르산은 적어도 부분적으로 프로피온산으로 대체될 수 있다. 이러한 또는 여타의 비-제한적인 실시형태에서, 단리할 수 있는 성분은 2-부탄온일 수 있다. 이러한 여하한의 실시형태에서, 2-부탄온은 적어도 부분적으로 아세트산, 프로피온산 또는 이들의 조합물로 대체될 수 있다. 이러한, 또는 또 다른 비-제한적인 실시형태에서, 단리할 수 있는 성분는 에탄올일 수 있다. 이러한 여하한의 실시형태에서, 에탄올은 적어도 부분적으로 아세트산으로 대체될 수 있다. 이러한 산 성분, 에스테르 성분 및/또는 단리할 수 있는 성분의 동일성 또는 양에 관계없이, 천연-유래 조성물은 계면활성 성분을 포함할 수 있다. 이러한 여하한의 실시형태에서, 생물계면활성 성분이 이들 내에 병합될 수 있다. 제한 없이, 생물계면활성 물질(biosurfactant)은 모노람노리피드, 디람노리피드 및 이들의 조합물들로부터 선택되는 람노리피드 성분일 수 있다.
대안적으로, 본원 발명은 합성적인 항균성 조성물, 비-천연 유래 항균성 조성물에 관한 것일 수 있다. 이러한 조성물은 무스코도르 크리스판스의 단리 배양물의 휘발성 부산물로부터 단리할 수 있는 C2-약 C5의 산 성분; 및 2개 이상의 C2-약 C5 성분들을 포함할 수 있으며, 이러한 조성물은 단리, 배양되는 무스코도르종, 또는 이의 휘발성 부산물의 병원체 활성 프로파일과는 상이한 병원체 활성 프로파일을 가질 수 있다. 이러한 산, 에스테르 및/또는 단리할 수 있는 성분들은 상기에 설명되거나 본 명세서에 다른 곳에서 도시될 수 있다. 여하튼, 이러한 항균성 조성물은 계면활성 성분을 포함할 수 있다. 이러한 여하한의 비-제한적 실시형태들에서, 계면활성 물질은 모노람노리피드, 디람노리피드 및 이들의 조합물들로부터 선택되는 람노리피드 성분일 수 있다.
일부분에서, 본원 발명은 C2 내지 C5의 알코올류, 알데히드류, 케톤류, 산류 및 산성 에스테르류, 그리고 이들의 조합물들 및 하위(sub) 조합물들로부터 선택되는 화합물들의 액체 혼합물을 포함하는 생물모방성, 항균성 조성물에 관한 것이고, 이러한 조성물은 무스코도르종으로부터 단리되지 않는다. 본 명세서에 다른 곳에서 논의되는 바와 같이, 이러한 액체 혼합물은 실온 및/또는 주위 온도에서 휘발성일 수 있다. 이러한 조성물 및 이의 화합물들에 대하여, "약"이라는 용어는 본 기술분야의 전문가들에 의해 이해될 수 있는 바와 같이, 하나 이상의 다른 성분들, 화합물들 및 실온/주위 온도 이상에서의 휘발에 의해 얻어지는(resulting) 조성물의 혼합물로만 제한되는 구조이성질체 현상(structural isomerism) 및/또는 대응하는 분자량을 가지는 탄소 및/또는 메틸렌 동족체(homolog)들을 의미할 수 있다. 여하한의 비-제한적인 실시형태에 관하여, 이러한 조성물은 하기에 설명되는 종류의 성분들 및 생물모방적인 무스코도르 크리스판스 부산물의 조성물의 성분들로부터 선택되는 알코올, 알데히드, 케톤, 산 및 산성 에스테르 화합물들을 포함할 수 있다. 이러한 조성물은 화학적으로 합성되는 화합물들, 박테리아성 발효로부터 단리되는 화합물들 및 이러한 화합물들의 조합물들을 포함할 수 있다. 이러한 여하한의 실시형태에서, 조성물은 아세트산, 이소부티르산, 프로피온산 및 이들의 조합물들로부터 선택되는 산 성분을 포함할 수 있다.
일부분에서, 본원 발명은 또한 천연-유래 및/또는 화학적으로 합성되든지 간에, C2 내지 약 C5의 알코올류, 알데히드류, 케톤류, 산류 및 산성 에스테르류, 그리고 이러한 화합물들의 조합물들 및 하위의 조합물들로부터 선택되는 화합물들을 포함하는 비-자연적으로-발생하는 항균성 조성물에 관한 것이고, 이러한 선택된 화합물들은 일반적으로 사람이 소비하기에 안전하다("GRAS")고 승인되며, 이러한 자격은 미국연방 규정집의 21장 및 이의 대응하는 부분들 및/또는 조항들에 의해 제공된다. 여하한의 비-제한적인 실시형태에서, 이러한 화합물들은 생물모방성 M. 크리스판스 부산물의 조성물의 알코올, 케톤, 산 및/또는 산성 에스테르 성분들로부터 선택될 수 있다. 여하한의 실시형태에서, 이들의 미생물 활성/이의 치사(mortality) 프로파일은 무스코도르 크리스판스 또는 무스코도르 알부스, 이들의 휘발성 부산물 및/또는 이들의 대응하는 합성 부산물의 조성물들과는 상이하다. 여하튼, 이러한 여하한의 실시형태들에서, 이러한 조성물은 아세트산, 이소부티르산, 프로피온산 및 이들의 조합물들로부터 선택되는 산 성분을 포함할 수 있다.
일부분에서, 본원 발명은 본 발명의 조성물; 및 계면활성 성분을 포함하는 조성물을 포함할 수 있으며, 이러한 계면활성 성분은 단독으로 존재하거나, 운반체 성분 내에 병합될 수 있다. 여하한의 실시형태들에서, 계면활성 물질은 생물계면활성 물질일 수 있으며, 이러한 생물계면활성 물질은 모노람노리피드, 디람노리피드 및 이들의 조합물들로부터 선택되는 람노리피드 성분일 수 있다.
일부분에서, 본원 발명은 또한 본 발명의 조성물, 및 기질 또는 배지 성분을 포함하는 복합재 또는 시스템에 관한 것일 수 있다. 이러한 조성물은 상기에 설명되거나 본 명세서에 다른 곳에서 도시될 수 있다. 제한 없이, 기질은 식품 또는 생산품, 음식 또는 여타의 부패성 물품의 포장 성분[예를 들어, 필름 또는 래퍼(wrapper)], 섬유, 직물 또는 의류 물품, 빌딩 또는 건축 성분, 사람의 조직, 식물, 식물의 표면, 토양, 및 쓰레기 또는 폐기물로부터 선택될 수 있다. 여하한의 실시형태들에서, 액체 또는 기체이든지 간에, 이러한 조성물은 배지, 기질 또는 기질의 표면과 병합되거나, 그 밖에도 접촉될 수 있다.
따라서, 본 발명은 또한 미생물 또는 곤충의 처리, 예방, 억제, 근절의 방법 및/또는 그 밖에도 미생물 또는 곤충 활성에 영향을 미치는 방법에 관한 것일 수 있다. 이러한 방법은 본 명세서에 도시되는 하나 이상의 종류의 조성물들을 포함하나 이로 제한되지 않는, 본 발명의 조성물을 제공하는 단계; 및 미생물 또는 곤충의 활성에 영향을 미치기에 적어도 부분적으로 충분한 양의 조성물과 미생물 또는 곤충의 활성을 지지할 수 있는 물품/기질 또는 곤충 또는 미생물을 접촉시키는 단계를 포함할 수 있다. 이러한 미생물(예를 들어, 균류, 박테리움 또는 바이러스) 또는 곤충은 상기에서 논의되는 종류의 기질의 표면상에 또는 주변에, 배지 내에 존재할 수 있다. 따라서, 이러한 접촉은 조성물의 휘발(volatilization) 상으로 및/또는 직접적으로 될 수 있다. 여하튼, 이러한 처리는 미생물 또는 곤충의 존재 및/또는 예방에 관하여 활성적일 수 있다. 본 명세서에 다른 곳에서 도시되는 바와 같이, 처리는 미생물 또는 곤충의 사멸, 및/또는 성장 또는 활성의 억제의 맥락에서 고려될 수 있다.
본 발명의 여하한 실시형태들에 따라서, 여하한의 식품 및 향미 화합물(food and flavor compound: FFC)들을 포함하는 조성물들은 특히 농업적, 약학적, 또는 상업적 또는 산업적인 관점에서의 여하한의 병원성 균류, 박테리아 및 여타의 미생물들에 대하여 억제적 및/또는 치명적이다. 이러한 조성물들은 생물학적으로 유래되는 화합물들을 함유하는 여하한의 이전 혼합물보다 우수할 수 있으며; 예를 들어, 본원 조성물들은 여하한의 나프탈렌 또는 아줄렌(비-GRAS 화합물들)에서 유래되는 물질들을 함유하지 않는다. 역으로, 이러한 조성물들은 유기 화합물들의 혼합물을 포함할 수 있으며, 그 밖에도, 이들의 각각은(즉, GRAS) 식품 및 향미 물질로 여겨진다.
본원 발명은 다양한 균류(곰팡이 및 여타 미생물들)에 의한 파괴를 예방하고 물품들의 완전한 상태(integrity)를 보존하기 위하여, 다양한 물품들(예를 들어, 식품, 섬유들, 도구들 및 건축물의 표면들이며 이로 제한하지 않음)에 대한 이러한 조성물들, 이들의 조제물 및 적용물(application)의 성질을 나타낸다. 또한, 이러한 조성물들은 이들의 보존을 위하여 건설되는 건축물들, 식물들의 부분 및 심지어 의류 물품들에 적용될 수 있다. 더욱더, 하기에 나타내는 바와 같이, 이러한 조성물은 그 밖에도 약물 저항성인 3개 이상의 균주들을 포함하는, 결핵(tuberculosis)을 야기하는 미생물인, 마이코박테리움 투베르쿨로시스에 부정적인 영향을 미칠 수 있다.
도 1은 2일 동안 노출된 후의 약물 저항성 마이코박테리움 투베르쿨로시스의 임상적인 배양물들에 대한 FFCs의 사멸 효과(killing effect)를 도시하는 사진들이다.
도 2는 FFCs를 적용하는 몇 가지 방법들에 의해 치즈 상에서의 균류의 성장(곰팡이)의 예방을 도시하는 일련의 사진들이다.
도 3은 2일 동안 0.2 ml의 FFC 조성물의 존재하에서 저장된 마(yam)들 상에서 FFCs의 보호 효과를 나타낸다. 상기 마들은 10일 후에 사진을 찍었다(시험구는 왼쪽이고, 대조구는 오른쪽이다).
도 4는 30 ℃로 유지하면서 10일간 쓰레기의 부패로부터 FFCs의 보호 효과를 나타낸다.
도 5는 토마토의 부패/시듦에 대한 효과를 나타내며, 왼쪽은 궤양병(C michiganense)의 대조구 플레이트이며, 오른쪽은 20 ㎕의 본 발명의 FFC 조성물로 처리된 플레이트이다.
도 6은 스킨 크림 제품 내에 병합된 본 발명의 FFC 조성물의 효과를 나타낸다.
도 7a 내지 도 7b 및 도 8은 본 발명의 여하한의 비-제한적인 실시형태들에 따른, 몇몇의 비-제한적인 각각의 모노람노리피드 및 디람노리피드 화합물들 구조들을 도시한다.
도 9는 각각의 모노람노리피드 및 디람노리피드 구조들에 대하여 R1 및 R2로 명시된 람노리피드 성분의 두 가지 실시형태들을 제공하며, 본 발명의 여하한 비-제한적인 실시형태들에 따라서 하기의 일련의 실시예들에 설명되는 바와 같이, 단독으로 사용되거나 다른 것들과 조합되어 사용될 수 있다.
몇몇의 비-제한적인 실시형태들에 의해 도시된 바와 같이, 본 발명은 다양한 배지 내로 병합되거나, 표면들에 적용되거나, 또는 대기, 공간 또는 부피에 도입되는 경우에, 결핵의 병원(causal agent) 및 식물 균류를 포함하는 그 밖에 흉한(unsightly), 해로운 및/또는 병원성 미생물들의 부피 또는 원하는 표면 배지의 오염을 야기하는, 무스코도르의 새로운 종들 및/또는 이들의 휘발성 부산물의 사용, 그리고 일반적인 식품 및 향미 화합물들을 포함하는 비-자연적, 실험적으로-제조되는 생물모방성 조성물들의 개발에 관한 것이다. 본 발명은 현대의 농업, 인류의 의학, 식품 과학 및 산업에 대단히 중요한 영향(implication) 및 적용성을 가진다. 본 발명의 상기 조성물들이 단일 요소가 아니라는 사실을 고려하면 항균성 성질들을 가지는 지에 대하여 명백하지 않으나, 그 자체로는 생물학적으로 활성적이다. 성분 요소들의 상승 작용적(synergistic) 조합물은 최대의 잠재적인 항균성 활성을 나타낸다.
이러한 무스코도르 종들, 이들의 휘발성 부산물 또는 FFCs를 포함하는 비-자연적으로-발생하는 생물모방성 조성물의 사용에 관련하여, 접촉은 이러한 종들, 생물모방성 조성물의 부산물과 관련되는 발산물로의 노출에 의해서 되거나 직접적으로 될 수 있다. 하기에 도시되는 바와 같이, 여하한의 실시형태들의 맥락에서, 발산물의 노출이 성장을 억제할 수 있을지라도, 직접적인 미생물 접촉이 박테리아 또는 균류 사멸을 위해 요구될 수 있다.
접촉의 양식에 관계없이, 본 발명의 조성물들은 화학적으로-합성되는 성분들, 천연-유래 성분들 또는 이러한 합성 및 천연 성분들의 조합물을 포함하여, 실적으로-만들어질 수 있다. 여하튼, 이러한 조성물들은 특정 박테리아 또는 균류 종들에 대한 무스코도르 부산물의 효과와 관련하여 생물모방적일 수 있다. 대안적으로, 여하한 이의 하나 이상의 FFC 성분의 상대적인 농도 또는 선택에 의해, 이러한 조성물은 무스코도르 균류 부산물과 비교하여, 다양하거나 변이되거나(varied) 강화된 항균성 활성을 나타낼 수 있다.
이러한 여하한의 실시형태들에서, 이러한 조성물들은 미생물을 성장시킬 수 있거나 미생물 성장을 지지할 수 있는 단백질 또는 셀룰오로스 성분을 포함하는 기질 또는 배지에 적용될 수 있거나, 기질 또는 배지 상에 존재할 수 있다. 제한 없이, 여하한의 실시형태들은 식물들, 식물 성분들[예를 들어, 뿌리, 줄기, 잎 또는 관엽(foliage), 수확물(produce) 및 이와 유사한 것들] 및 여하한 발아하는 새싹(originating shoot)들 및 종자들을 포함할 수 있다. 특히, 제한 없이, 이러한 조성물들은 수확-전 또는 후이든지 간에, 열매, 야채, 덩이줄기(tuber), 종자 또는 견과로 불리는, 여하한의 식물의 수확물일 수 있다. 이러한 여하한의 식물들 및/또는 이들로부터의 수확물은 농작물들로서, 본 기술분야에서 단독 또는 집합적으로 인식된다. 따라서, 여하한의 실시형태들에서, 본 발명의 조성물은 성장(development) 동안에, 수확-전 및/또는 수확-후의 어느 시점에서 이러한 농작물에 또는 농작물 상에 적용될 수 있다. 마찬가지로, 본 발명의 조성물은 미생물 성장을 시킬 수 있거나 지지할 수 있는 제조되는 물품 또는 (예를 들어, 사람, 애완동물 및/또는 동물의) 식료품 또는 음료 내로 병합되거나 적용될 수 있다.
본 발명의 여하한의 다른 실시형태들에서, 이러한 조성물은 미생물(예를 들어, 효모, 균류 및 박테리아 및/또는 바이러스) 성장의 지지체(supportive) 또는 표면 지지체(surface supporting) 또는 기질 상에 존재하거나 적용될 수 있다. 따라서, 이러한 기질 또는 표면은 미생물을 성장시킬 수 있거나 지지할 수 있는 여하한 재료를 포함할 수 있다. 이러한 기질들은 목재, 세라믹, 자기(porcelain), 돌, 플라스터(plaster), 석고판(drywall), 시멘트, 직물, 가죽, 플라스틱 및 이와 유사한 것들을 포함하며, 이로 제한되지 않는다.
여하한의 다른 실시형태들에서, 본 발명의 다양한 조성물들은 미생물 성장 또는 감염의 예방 또는 치료를 위한 위생적인 제형(hygiene formulation) 또는 개인용 관리(personal care) 제형 또는 약제학적인 제형의 맥락에서, 손톱, 털, 치아 또는 입, 피부 및 여타 세포질의 재료를 포함하는 이로 제한되지 않는 포유동물 또는 사람의 조직을 포함하는, 표면 또는 기질과 접촉하여 그 위에 존재할 수 있거나, 표면 또는 기질에 적용되거나 투여될 수 있다. 대표적인 조성물들이 하기의 하나 이상의 다른 실시형태들에 적용가능하게 일부분 이상의 견지에서 설명된다.
식물내생성 균류(endophytic fungus)는 볼리비아 아마존 내에서 성장하는 야생 파인애플 식물[아나나스 아나나스소이데스(Ananas ananassoides)]의 조직 내부에서 재생되었다. 궁극적으로, 항균성 활성들을 가지는 휘발성 화합물들의 혼합물을 생산하는 것을 나타낸다. 분자 기술들을 사용하여, 균류가 무스코도르속의 일부들(members)과 서열 유사성들을 가지는 것을 알아냈다. 이러한 균류는 사람 및 식물의 병원체들 모두에 대하여 효과적인 항-미생물들로 작용할 수 있는 휘발성 유기 화합물들을 생산하는 것으로 알려졌다. 무스코도르 종들의 일부들은 18S rDNA을 사용한 계통발생적 특징 맵핑(mapping)과 ITS-5.8S rDNA 서열 분석들과 같은 방법들을 이용하여 확인되었다. 상기 서열들은 GenBank 내에서 BLAST 조사된 여타의 무스코도르종 및 현존하는 균류에서 발견되었으며, 다른 균류와 비교하였다(Bruns et al., 1991; Reynolds and Taylor 1993; Mitchell et al., 1995; Guarro et al., 1999; Taylor et al., 1999). 궁극적으로, 이러한 단리체(isolate)들은 자일라리아(Xylaria)와 관련된다는 것을 결정하였다[Worapong et al., 2001a&b]. 무스코도 르에 속하는 단리된 모든 분류군(taxa)은 상대적으로 느린 성장, 펠트-형(felt-like) 균사체 소유, 생물학적으로 활성의 휘발성 화합물들을 생성, 그리고 식물들이 원래 살던 지점에서 무해한 것과 같은 유사한 특징들을 가진다. 마지막으로, 각각의 이들은 꽤 유사한 rDNA 서열들을 공유한다(Ezra et al., 2004).
본원의 균류가 상기에 언급된 모두 동일한 공통적인 특징들을 공유할지라도, 모든 여타의 무스코도르종 및 단리체들과 구별되는 분류군(taxon)과 몇 가지 상이한 측면들이 있었다. 하기의 실시예들에 더욱 충분하게 도시되는 바와 같이, 이러한 독특한 특징들은 새로운 종들로서 현존하는 균류의 입증(establishment)을 지지한다. 이런 신규한 식물내생성 균류에 대하여 제안된 명칭은 무스코도르 크리스판스이다.
GC/MS에 의해 분석함으로써, 단리된 균류는 감자 한천 배지(potato dextrose agar: PDA) 상에서 성장되는 경우에, 기체 상태(phase)으로의 알코올류, 에스테르류 및 적은 분자량의 산류를 생성하였다. 하기에 표 1에 나타낸 바와 같이, 이러한 화합물들은 프로피온산, 2-메틸; 1-부탄올, 3-메틸, 아세테이트; 1-부탄올 및 에탄올을 포함한다. PDA 상에서 성장되는 경우에, 상기 유기체에 의해 생성되는 것은 나프탈렌도 아줄렌 유도체들(비-GRAS 화합물들)도 아니었고, 이는 모든 여타의 무스코도르종과 구별되므로 더욱 연구되어야 한다. 균류에 의해 생성되는 냄새는 약 1주 후에 두드러지게 되고, 시간이 지남에 따라 증가하는 것 같으며, 최소한 3주를 포함한다. 하기에 도시되는 바와 같이, 이러한 균류의 휘발성 물질(volatile)들은 표준 생물검정(bioassay) 기술을 사용하여 다수의 식물 및 사람의 병원체들에 대하여 억제적인 및 치사적인 생물활성을 소유했다.
표 1
Figure pct00001
상기에서 논의된 바와 같이, 본원 발명은 항균성 효과를 위하여 비-고유 배지, 기질 및/또는 부피와 함께 무스코도르 크리스판스 및/또는 이의 휘발성 부산물의 사용을 포함한다. 이러한 사용 및/또는 적용들은 본 명세서에서 설명될 수 있거나 그 밖에도 본 기술분야의 전문가들에 의해 이해될 수 있으며, 미국 특허 제 6,911,338에 설명되는 종류의 사용 및 적용을 포함하나 이로 제한되지 않으며, 이는 본 명세서에서 이의 전문이 참고문헌으로 인용참조된다.
대안적으로, 광범위한 자연적인 및 합성적인 생물모방성 조성물들이 하나 이상의 실시형태들에 의해 입증되는 바와 같이, 균류 또는 이의 휘발성 부산물의 사용을 통하여 이용할 수 없는 경우를 위하여 이에 대하여 결과물(result)들을 제공하기 위 사용될 수 있거나, 비슷하거나 강화된 효과를 가지도록 사용될 수 있다. 이전의 기술 및 무스코도르 크리스판스의 부산물로부터의 발전으로서, 이러한 항균성 조성물들은 사람에게 사용하고 소비하는데 안전하다고 일반적으로 인식된 식품 및 향미 화합물들을 포함할 수 있다. 이들에 대응하는, 몇몇의 비-제한적인 생물모방성 조성물들이 하기의 표 2 내지 표 7에 제공된다. 다양한 다른 조성물들은 여하한 하나 이상의 표 2 내지 표 7로부터 선택되는 화합물들의 조합물들을 포함할 수 있다. 대안적으로, 여하한의 이러한 조성물은 휘발성을 강화시키거나 여하한의 다른 최종-용도 또는 작동 원리(performance property)를 변화시키기 위하여, 기재되는 여하한의 화합물에 대한 치환물로서, 또는 첨가되는 성분 화합물을 포함할 수 있다. 이러한 여하한의 조성물들에서, 이러한 치환물 또는 첨가 화합물은 GRAS 명칭을 가질 수 있거나 및/또는 이용되는 레벨들로 지정될 수 있다. 대안적으로, 이러한 조성물들은 무스코도르 크리스판스의 휘발성 부산물 내에서 발견되나 및/또는 또 다른 무스코도르종의 휘발성 부산물 내에서는 발견되지 않는다.
각각의 이러한 화합물은 효과적인 농도 또는 퍼센트 범위 내로 제공될 수 있으며, 시판되는 것을 사용하거나 본 기술분야의 전문가들에 의해 제조될 수 있다. 후자에 대하여, 발효 기술들은 이러한 화합물들을 자연적으로 제조하고 단리시키는데 사용될 수 있다. 대안적으로, 이러한 화합물들은 화학적으로 합성될 수 있다. 본 발명의 몇몇의 비-제한적인 실시형태들에 대하여, 표 2 내지 표 7의 각각의 화합물은 발효 생성물로서 얻어질 수 있으며, 이러한 생성물들 및 대응하는 조성물들은 위스콘신, 사우크빌의 Jeneil Biotech로부터 Flavorzon trademark에 의해서 사용가능하다.
표 2. 하기를 포함하는 본 발명의 생물모방성 조성물:
Figure pct00002
표 3. 하기를 포함하는 본 발명의 생물모방성 조성물:
Figure pct00003
표 4. 하기를 포함하는 본 발명의 생물모방성 조성물:
Figure pct00004
표 5. 하기를 포함하는 본 발명의 생물모방성 조성물:
Figure pct00005
표 6. 하기를 포함하는 본 발명의 생물모방성 조성물:
Figure pct00006
표 7. 다음의 화합물들을 포함하거나 화합물들로부터 선택되는 화합물들의 다양한 조합물들을 포함하는 본 발명의 생물모방성 조성물:
Figure pct00007
본 발명의 여하한의 FFC 조성물에 대하여, 표 1 내지 7 및 표 10에서의 여하한 성분 및 구조 이성질체들, 및/또는 이들의 탄소 및 메틸렌 동족체들과 같은, 본 명세서에서 암시되거나 참조되어 설명되는 여하한의 성분을 포함하는--이들의 여하한 성분이 개별적인 범위 또는 양으로 존재하며, 여하한의 다른 조성 성분과 구별된다. 따라서, 제한 없이, 각각의 이러한 화합물의 성분은 약 0.1 wt. %, (또는 더 적게) 약 0.2 wt. %, 약 0.3 wt. %, 또는 약 0.4 wt. %,... 또는 약 1.0 wt. %, 약 1.1 wt. %, 약 1.2 wt. %, 약 1.3 wt. % 또는 약 1.4 wt. % ...까지, 또는 약 2.0 wt. %, 약 2.1 wt. %, 약 2.2 wt. %, 약 2.3 wt. % 또는 약 2.4 wt. % ...까지 또는 약 3.0 wt. %, 약 3.1 wt. %, 약 3.2 wt. %, 약 3.3 wt. % 또는 약 3.4 wt. % ...까지, 또는 약 4.0 wt. %, 약 4.1 wt. %, 약 4.2 wt. %, 약 4.3 wt. % 또는 약 4.4 wt. % ...까지, 또는 5.0 wt. %, 약 5.1 wt. %, 약 5.2 wt. %, 약 5.3 wt. % 또는 약 5.4 wt. % ...까지, 또는 약 6.0 wt. %, 약 6.1 wt. %, 약 6.2 wt. %, 약 6.3 wt. % 또는 약 6.4 wt. % ...까지, 또는 약 7.0 wt. %, 약 7.1 wt. %, 약 7.2 wt. %, 약 7.3 wt. % 또는 약 7.4 wt. % ...까지, 또는 약 8.0 wt. %, 약 8.1 wt. %, 약 8.2 wt. %, 약 8.3 wt. % 또는 약 8.4 wt. % ...까지, 또는 약 9.0 wt. %, 약 9.1 wt. %, 약 9.2 wt. %, 약 9.3 wt. % 또는 약 9.4 wt. % ...까지, 또는 약 10.0 wt. %; 그리고 이러한 증가하는 변화량에 따라서, 또는 약 10.1 wt. % ...까지, 또는 약 20.0 wt. %까지; 이러한 증가하는 변화량에 따라서, 또는 약 20.1 wt. % ...까지, 또는 약 30.0 wt. %까지; 이러한 증가하는 변화량에 따라서, 또는 약 30.1 wt. % ...까지, 또는 약 40.0 wt. %까지; 이러한 증가하는 변화량에 따라서, 또는 약 40.1 wt. % ...까지, 또는 약 50.0 wt. %까지; 이러한 증가하는 변화량에 따라서, 또는 약 50.1 wt. % ...까지, 또는 약 60.0 wt. %까지; 이러한 증가하는 변화량에 따라서, 또는 약 60.1 wt. % ...까지, 또는 70.0 wt. %까지; 이러한 증가하는 변화량에 따라서, 또는 약 70.1 wt. % ...까지, 또는 약 80.0 wt. %까지; 이러한 증가하는 변화량에 따라서, 또는 80.1 wt. % ...까지, 또는 90.0 wt. %까지; 이러한 증가하는 변화량에 따라서, 또는 약 90.1 wt. % ...까지, 또는 약 99.9 wt. % (또는 그 이상)까지의 범위 또는 양으로 존재할 수 있다. 제한 없이, 마찬가지로, 어느 특정 화합물 성분 또는 조합물의 양 또는 동일성과 관계없이, 본 발명의 여하한의 조성물은 상기에 설명한 바와 같이, 이들 내에 병합되거나 적용되는 물품 또는 기질 상에 여하한 조성물 또는 배지의 0.1 wt. % 내지 99.9 wt. %(예를 들어, 약 0.1 wt. % 내지 약 1.0 wt. %, 약 2.0 wt. %, 약 4.0 wt. % 또는 약 10.0 wt. %까지의 여하한의 범위 내)의 증가하여 변화되는 wt. % 범위 또는 양(wt. %)으로 존재할 수 있다.
이와 달리 나타내지 않는다면, 본 명세서 및 청구항들에서 사용되는 양들 및 농도들을 나타내는 모든 숫자들, 또는 성분들 또는 요소들의 수량들, 분자량과 같은 성질들, 반응 조건들 등은 "약"이라는 용어로 모든 예시들에서 변형되는 것으로 이해된다. 따라서, 대조적으로 나타내지 않는다면, 본 명세서 및 첨부된 청구항들 전에 정해진 숫자로 표시된 파라미터들은 본원 발명에 의해 얻어지도록 시도되는 원하는 성질들에 따라 다양할 수 있는 근사치이다. 정확히 말하면, 청구항들의 범위에 상당하는 원칙으로 출원을 제한하려는 시도가 아니라, 각각의 숫자로 표시된 파라미터는 적어도 기록되는 유효 자릿수들의 관점 및 일반적인 반올림(rounding rounding) 기법을 적용하는 것으로 파악되어야 한다.
본 발명의 폭 넓은 범위의 이전에 설정된 숫자로 표시되는 범위들 및 파라미터들이 근사치임에도 불구하고, 이전에 설정된 숫자로 표시된 수치들 및 실시예들은 가능하면 정확하게 기록된다. 그러나, 여하한의 숫자로 표시된 수치는 본질적으로 각각의 시험 측정에서 발견되는 표준 편차로 인해 야기되는 여하한의 오차를 함유할 수 있다.
적당하게, 본 발명의 조성물들 및 방법들은 본 명세서에서 암시되거나, 참조되거나, 개시되는 여하한의 화합물의 성분 또는 이의 양/농도를 포함하거나, 구성되거나, 또는 필수적으로 구성될 수 있으며, 이들이 산-유래되는 및/또는 알코올-유래된 잔기(moiety)이든지 간에, 이러한 여하한의 알코올 성분, 알데히드 성분, 케톤 성분, 산 성분 및/또는 에스테르 성분의 탄소 및/또는 메틸렌 동족체들, 이들의 여하한의 구조이성질체들과 함께, 표 1 내지 7 및 표 10에서의 여하한의 화합물의 성분을 포함하며, 이로 제한되지 않는다. 양/농도에 상관없이, 각각의 이러한 화합물의 성분 또는 이의 잔기/치환기는 조성적으로 구별가능하고, 특징적으로 대조적이며, 개별적인 본원 조성물들 및 방법들과 관련되고, 또 다른 이러한 성분의 양/농도 또는 또 다른 화합물의 성분 (또는 잔기/치환기)의 양/농도와 구별하여 하용될 수 있다. 따라서, 본 명세서에 도시적으로 개시되는 바와 같이, 본 발명의 조성물들 및/또는 방법들은 여하한의 하나의 성분 화합물 (또는 이의 잔기 및/또는 치환기)이 없을 때의 양 또는 농도의 변화에 맞춰 행해지거나 이용될 수 있고, 이러한 화합물 (또는 이의 잔기 및/또는 치환기) 또는 이의 양/농도는 구체적으로본 명세서에 암시되거나, 참조되거나 또는 개시될 수 있거나 개시되지 않을 수 있으며, 이의 변화 또는 부재가 본 명세서에 암시되거나, 참조되거나 또는 개시될 수 있거나 개시되지 않을 수도 있다는 것을 이해해야만 한다.
바람직한 실시형태들에서, (액체 혼합물로 제조되는) 이러한 FFCs의 생물학적으로 효과적인 조성물은 실온에서 쉽게 증발되고, 이러한 해로운 미생물들로부터 자유롭기를 바라는 표면들 상에 원치 않는 오염된 균류(곰팡이)를 효과적으로 억제하거나 및/또는 죽이도록 둘러 막힌 공간 구석구석에 확산된다. 혼합물은 (예를 들어, 압력하에서 요소들을 포함할 수 있는) 스프레이로 적용될 수 있거나, 단순하게 용기 내에 위치될 수 있으며, 밀폐된 용기 또는 밀봉된 백(bag) 내에서 기화되도록 허락될 수 있다.
여하튼, 본 발명의 FFC 조성물들은 다양한 최종-용도의 조성물들 내로 병합될 수 있으며, 적용에 의해서만 제한된다. 이러한 조성물들은 사람/동물의 식품 또는 영양분, 개인용 위생용품(personal hygiene), 건강관리품(healthcare), 농업용, 산업용, 주거용, 약학용 및 소비자를 위한 적용물을 포함하나, 이로 제한되지 않는다. 여하한의 비-제한적인 실시형태들에서, FFC 조성물 및/또는 이의 성분(들)은 약 0.1 wt.% 또는 약 99.9 wt.% 미만으로 존재할 수 있으며, 또는 특정 최종-용도의 조성물인 경우 이 이상으로 존재할 수 있다. 이러한 병합되는 레벨은 원하는 항균성 효과 및/또는 제형의 고려만으로 제한된다.
효과적인 복용량 레벨들 하에서, 본원의 FFC 조성물들은 많은 식물 병원체들, 식품의 부패를 야기할 수 있는 균류, 사람의 주요한 질병들을 야기할 수 있는 미생물들, 그리고 조리대(work surface), 집 및 여타의 건물들을 오염시킬 수 있는 미생물들을 죽이는데 효과적이다. 이러한 응용들의 비-배타적인 리스트는 하기와 같다:
1. 표면들의 흉한 곰팡이 오염 및 결과적인 치즈 블럭(block)들의 부패를 제어하기 위하여 저장되거나 제조된 치즈의 처리.
2. 결론적으로, 식수(planting) 및 재-녹화(re-vegetation) 또는 농업 목적들을 위하여 또는 식품 제조를 위하여 사용될 수 있는 뿌리들, 덩이줄기들, 줄기들 및 여타의 기관(organ)들을 포함하는, 저장되는 다양한 식물 부분들의 처리.
3. 곰팡이 문제를 발전시킬 수 있는 부분에 횡행할 수 있거나 곰팡이 핀 표면들을 가질 수 있는 건물들을 소독하는 용도.
4. 하나의 항구에서 또 다른 항구로 긴 해양 운반 동안에 선적 내에 있는 동안 결국 에너지 관련된 생성물로 발효되는 쓰레기를 보존하기 위한 용도.
5. 잠재적인 식물 병원체들인 미생물들이 살 수 있는 토양의 오염제거.
6. 결핵 및 여타의 마이코박테리움 감염들에 의한 환자들의 치료.
7. 비강의 감염들을 제어하고, 비강의 통로들을 세척하기 위한 처리.
8. 장기간 안전하게 보호하기 위하여 음식물, 섬유 및 여타 물품들을 포함하는 재료들을 포장하고 그래서 보존할 수 있는, 구체적으로 디자인된 중합체들로의 조합.
좀 더 일반적으로, 본 발명의 조성물들은 균류, 박테리움, 미생물로 구성되는 그룹으로부터 선택되는 유기체 및 다른 범위의 미생물들 또는 해충들의 성장을 억제하거나 죽이는데 사용될 수 있다. 본 기술분야의 전문가들에 잘 알려진 방법들을 사용하려면, 이러한 조성물은 유기체의 성장을 억제하거나 죽이기 위하여 적어도 부분적으로 효과적인 양으로 유기체와 접촉된다. 대안적으로, 이는 예를 들어 폐수의 성분과 같은 사람 또는 동물의 부산물의 처리, 또는 토양의 관리 또는 처리를 위하여 사용될 수 있다. 또한, 이러한 조성물들은 사람 및 동물의 부산물의 정화, 예를 들어 박테리아 및 균류의 오염을 줄이거나 제거하는데 유용할 수 있다. 또한 더욱이, 이러한 조성물은 이의 효과적인 양 또는 이들로부터의 발산물들로 건물재들 사이의 공간들, 건물재들 또는 건물에 접촉되어 건물 내 및 건물재들 상의 곰팡이를 예방하거나 처리하는데 사용될 수 있다. 설명의 목적만으로, 건물 전체가 훈증 소독(fumigation)되는 동안, 이러한 조성물의 효과적인 양은 단독으로 사용되거나, 대안적으로 실내에서 다른 훈증 소독제들 또는 활성제들과 조합되어 사용될 수 있다.
농업적 응용물들로 사용되는 경우, 본 발명은 본 명세서에서 설명된 종류의 하나 이상의 조성물들의 효과적인 양과 미생물을 접촉시킴으로써, 균류 또는 박테리움과 같은 유기체에 의한 횡행(infestation)으로부터 식물들 주변의 토양, 식물들, 종자들 또는 과실을 보호하고 처리하는 방법을 제공한다.
상기에서 논의된 바와 같이, 본원 발명은 박테리아, 균류, 바이러스 및/또는 여타의 미생물 감염을 예방, 치료, 억제 및 죽이는 방법 제공한다. 이러한 방법은 단독으로 또는 조성물 또는 제형 내로 병합될 수 있는 본 발명의 조성물의 효과적인 양으로, 이러한 감염을 가지거나 이러한 감염 또는 성장을 지지할 수 있는 물품, 동물/포유동물 또는 식물성 기질에 투여하는 단계를 포함할 수 있다. 따라서, 본원 발명은 약제학적인, (예를 들어, 화장품으로 제한되지 않는) 개인적인, 산업적인 및/또는 농업적인 용도로 하나 이상의 조성물들을 제공한다.
미생물 처리는 본 발명의 조성물의 유효한 양과 박테리움, 균류, 바이러스 및/또는 여타의 미생물을 접촉시킴으로써 성취될 수 있다. 접촉은 생체 외에서 또는 생체 내에서 행해질 수 있다. "접촉"은 본 발명의 이러한 조성물 및 이러한 미생물이 미생물 감염 및/또는 성장을 예방, 억제 및/또는 제거하는데 충분한 방식으로 접촉되는 것을 의미한다. 이러한 처리를 하는데 효과적인 이러한 조성물의 양들은 경험적으로 결정될 수 있으며, 이러한 결정들을 하는 것은 본 기술분야의 기술 내에 존재한다. 억제는 미생물 성장/활성의 반응 및 제거 모두를 포함한다.
본 발명의 조성물들은, 원칙적으로 분말, 과립, 액체, 스프레이, 연고, 로션 또는 크림으로서, 경구 또는 비강(예를 들어, 약제학적 또는 개인용 관리 적용물들로) 경로를 포함하나 이로 제한되지 않는, 여하한의 적당한 경로에 의해 사람, 동물 또는 식물, 또는 물품, 기질의 표면에 투여되거나 접촉될 수 있다. 따라서, 본 발명의 조성물들은 하나 이상의 수용가능한 운반체들, 및 선택적으로 하나 이상의 여타 화합물들 또는 여타 물질들과 혼화된 각각의 성분 화합물들을 포함할 수 있다. 이러한 운반체는 제형의 다른 성분들/요소들과 상용적이라는 의미에서 "수용가능"해야만 하고, 원하는 효과 또는 적용에 유해하지 않아야 한다.
선택되는 전달, 처리 또는 투여의 경로와 관계없이, 본 발명의 조성물들은 본 기술분야의 전문가들에게 알려진 통상적인 방법들에 의해 수용가능한 농도들 또는 투여량 형태들로 제공되도록 제제화(formulated)될 수 있다. 운반체를 포함하거나 포함하지 않는, 이러한 조성물 또는 이의 성분의 양 또는 농도는 처리되는 표적 미생물/기질/물품에 따라서 다양할 것이며, 특정 양식의 투여/전달 및 모든 여타 요인들은 상기에 설명된다. 일반적으로, 운반체 물질과 조합되는 양은 원하는 항균성 효과를 생성하는데 효과적인 가장 적거나 최소의 농도를 제공하는 이러한 조성물의 양일 것이다.
본원 발명의 조성물들 내에 또 다른 선택적인 성분 및 FFC 조성물의 상대적인 양들 또는 농도들은 하기의 실시예들에서 설명되는 바와 같이, 효과적인 범위들 내에서 폭 넓게 다양할 수 있다. 바람직하게, 이용되는 농도들 및/또는 복용량은 이전 기술분야에서의 각각의 단독 성분들보다 강화되거나 증가된 활성을 달성하거나 및/또는 가장 적은 유효 성분의 농도(들)로 조성물의 활성을 최대화하기 위해서 선택된다. 따라서, 이러한 강화된 활성을 산출하는 중량비들 및/또는 퍼센트 농도들은 이용되는 특정한 FCC 조성물뿐만 아니라, 처리되거나 및/또는 특정 미생물에 잠재적으로 노출되는 미생물 숙주, 물품, 기질의 성질, 토양의 조성물, 기후를 포함하나 이로 제한되지 않는, 조성물의 특정한 최종-용도의 적용에 의존한다.
제형들 또는 조성물들의 제조 방법들은 본 발명의 조성물 또는 하나 이상의 성분 화합물들을 관련되는 운반체 및 선택적으로 하나 이상의 부속 요소들 내로 도입하는 단계를 포함한다. 일반적으로, 상기 제형들은 이러한 조성물/성분을 관련되는 운반체(예를 들어, 액체 또는 정교하게 나눠진 고체 운반체들) 내로 도입되며, 원한다면, 생성물을 성형함으로써 제조된다.
본 발명의 조성물 또는 이러한 조성물을 병합하여 제조되는 여하한의 물품이든지 간에, 본 발명에 관련된 제형들은 캡슐, 카셰(cachet), 알약, 정제, 분말, 과립, 페이스트(paste) 또는 용액, 또는 수성이나 비수성 액체 내의 현탁액, 또는 수중 유형(oil-in-water) 또는 유중 수형(water-in-oil) 액체 에멀젼, 또는 엘릭시르(elixir) 또는 시럽, 또는 [젤라틴, 글리세린 또는 수크로오스 및 아카시아와 같은 불활성 베이스(base)를 사용하는] 선향(pastille) 및/또는 세정제(예를 들어, 미스트, 스프레이 또는 구강 세정제) 및 이와 유사한 것들과 같은 형태일 수 있으며, 이들 각각은 본 발명의 조성물 또는 이의 성분들의 미리 결정된 양을 함유한다.
여타의 고체로 된 제형들(예를 들어, 캡슐, 정제, 알약, 당의정, 분말, 과립 및 이와 유사한 것들)에서, 본 발명의 조성물은 소듐 시트레이트 또는 디칼슘 포스페이트 및/또는 (１) 녹말, 락토오스, 수크로오스, 글루코오스, 만니톨 및/또는 살리실산과 같은 충전제들 또는 증량제(extender)들; (２) 예를 들어, 카르복시메틸-셀룰로오스, 알지네이트, 젤라틴, 폴리비닐 피롤리돈, 수크로오스 및/또는 아카시아와 같은 접합제(binder)들; (３) 글리세롤과 같은 보수제들; (４) 한천(agar-agar), 칼슘 카르보네이트, 감자 또는 타피오카 전분, 알긴산, 여하한의 실리케이트 및 소듐 카보네이트와 같은 붕해제들; (５) 파라핀과 같은 용액 지연제들; (６) 4차 암모늄 화합물들과 같은 흡수 촉진제들; (７) 예를 들어, 세틸 알코올 및 글리세롤 모노스테아레이트와 같은 습윤제들; (８) 카올린 및 벤토나이트 클레이와 같은 흡수제들; (９) 탈크, 칼슘 스테아레이트, 마그네슘 스테아레이트, 고체 폴리에틸렌 글리콜, 소듐 라우릴 설페이트 및 이의 혼합물들과 같은 윤활제들; 및 (１０) 착색제들 중의 여하한 것과 같이, 하나 이상의 다른 활성 요소들 및/또는 수용가능한 운반체들과 혼합될 수 있다. 캡슐, 정제 및 알약의 경우에, 상기 조성물들은 또한 완충제들을 포함할 수 있다. 또한, 유사한 유형의 고체 조성물들은 고분자량의 폴리에틸렌 글리콜들 및 이와 유사한 것들에 더하여, 락토오스 또는 유당과 같은 이러한 첨가체들을 사용하는 연질 및 경질의 젤라틴-충전된 캡슐들 내에서 충전제들로 적용될 수 있다.
정제는 선택적으로 하나 이상의 부속 요소들과 압축되거나 몰딩(molding)함으로써 만들어질 수 있다. 압축되는 정제들은 접합제(예를 들어, 젤라틴 또는 하이드록시프로필메틸 셀룰로오스), 윤활제, 불활성 희석제, 방부제, 붕해제[예를 들어, 소듐 스타치 글루코레이트 또는 가교-결합된(cross-linked) 소듐 카르복시메틸 셀룰로오스], 계면활성제 또는 분산제를 사용하여 제조될 수 있다. 몰딩된 정제들은 불활성 액체 희석제로 적셔지는 분말형 활성 요소(들)의 혼합물을 적당한 기계로 몰딩함으로써 만들어질 수 있다.
선택적으로, 당의정, 캡슐, 알약 및 과립과 같은, 이러한 조성물들을 병합한 물품들 또는 이러한 조성물들의 다른 고체 형태들 및 정제들은 제형 기술분야에 잘 알려진 장용성 코팅(enteric coating) 및 다른 코팅들과 같은 외피(shell)들 및 코팅들로 제조되거나 얻어질 수 있다. 또한, 이들은 예를 들어, 원하는 방출 프로파일을 제공하기 위하여 비율이 다양한 하이드록시프로필메틸 셀룰로오스, 여타의 중합체 매트릭스들, 리포솜들 및/또는 마이크로스피어들을 사용하여, 이들 안에 활성 요소(들)의 늦춰지거나 제어된 방출을 제공하도록 제제화될 수 있다. 또한, 이러한 조성물들은 혼탁제(opacifying agent)들을 선택적으로 함유할 수 있으며, 이들이 선택적으로 지연되는 방식으로, 우선적으로 위장관(gastrointestinal tract)의 어느 부분에서 또는 활성 요소(들)만을 방출하는 조성물을 가질 수 있다. 사용될 수 있는 끼워 넣어지는(embedding) 조성물들의 예시들은 중합성 물질들 및 왁스들을 포함한다. 또한, 활성 요소(들)은 마이클로캡슐 형태일 수 있다.
본 발명의 투여 또는 사용을 위한 액체 형태들은 약제학적으로- 또는 그 밖에-수용가능한 에멀젼, 혼합물, 마이크로에멀젼, (증류수 또는 정제수 내에 존재하는 것을 포함하는) 용액, 현탁액, 미스트, 시럽 및 엘릭시르를 포함한다. 본 발명의 조성물 또는 이의 화합물 성분(들)에 추가적으로, 액체 형태는 예를 들어, 물 또는 여타의 용매들과 같은 본 기술분야에서 일반적으로 사용되는 불활성 또는 여타의 희석제들, 가용화제들 및 유화제들, 이를 테면 에틸 알코올, 이소프로필 알코올, 에틸 카르보네이트, 에틸 아세테이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸렌 글리콜, 오일(특히, 목화씨유, 땅콩유, 옥수수유, 발아유, 올리브유, 피마자유 및 참기름), 글리세롤, 테트라하이드록시푸릴 알코올, 폴리에틸렌 글리콜 및 소르비탄의 지방산 에스테르, 그리고 이들의 혼합물들을 함유할 수 있다.
불활성 희석제들에 더하여, 이러한 조성물들 및/또는 관련되는 물품들은 습윤제들, 유화제들 및 현탁제들[예를 들어, 농업적으로 적용하기 위한 부착제(sticker) 및 전착제(spreader agent)], 착색제들, 항료제(perfuming agent)들 및 하나 이상의 여타의 방부제들과 보조제들을 포함할 수 있으나 이로 제한되지 않는다. 예를 들어, 현탁액들은 에톡실레이트화된 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 및 소르비탄 에스테르, 미정질 셀룰로오스, 알루미늄 메타하이드록사이드, 벤토나이트, 한천(agar) 및 트래거캔스(tragacanth), 그리고 이들의 혼합물들과 같은 현탁제들을 포함할 수 있다.
(예를 들어, 개인용 관리 용품 또는 위생 용품의 맥락에서) 본 발명의 국소적인 투여/전달 또는 기질에 대하여 이러한 본 발명의 조성물들을 병합한 생성물들 또는 물품들 및/또는 본 발명의 조성물들의 제형들은 분말, 스프레이, 연고, 페이스트, 크림, 로션, 젤, 용액, 패치 및 흡입제을 포함한다. 이러한 연고, 페이스트, 크림 및 젤은 본 발명의 조성물에 더하여 첨가제들, 이를 테면 동물성 및 식물성 지방, 오일, 왁스, 파라핀, 전분, 트래거캔스 및 여타의 검(gum), 셀룰로오스 유도체들, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리산, 탈크 및 산화 아연, 또는 이들의 혼합물들을 함유할 수 있다. 마찬가지로, 분말 및 스프레이는 첨가제들, 이를 테면 락토오스, 탈크, 실리산, 알루미늄 하이드록사이드, 칼슘 실리케이트 및 폴리아미드 분말, 또는 이러한 물질들의 혼합물들을 함유할 수 있다. 추가적으로, 스프레이는 부탄 및 프로판과 같은 휘발성의 비치환된 탄화수소류와 같은 통상적인 추진제를 함유할 수 있거나, 양압(positive air pressure)에 의해서 전달될 수 있다.
본 발명의 조성물들에 적용될 수 있는 적당한 수성 및 비수성 운반체들의 예시들은 물, 에탄올, (글리세롤, 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 및 이와 유사한 것들과 같은) 폴리올 및 이들의 적당한 혼합물들, 올리브유와 같은 식물유, 에틸 올레에이트와 같은 유기 에스테르를 포함한다. 예를 들어, 적절한 유동성은 레시틴과 같은 코팅재들을 사용함으로써, 분산되는 경우에는 요구되는 입자 크기를 유지함으로써, 그리고 계면활성제를 사용함으로써 유지될 수 있다.
본 발명의 조성물을 병합하는 제품들 또는 물품들의 저장 형태들은 폴리락타이드-폴리글리콜리드와 같은 생분해성 중합체들 내의 활성 요소(들)의 마이크로캡슐 매트릭스들을 형성함으로써 만들어질 수 있다. 적용되는 특정한 중합체의 특징 및 중합체에 대한 활성 요소(들)의 비율에 따라서, 활성 요소(들)의 방출 비율이 제어될 수 있다. 여타의 생분해성 중합체들의 예들은 폴리(오르쏘에스테르) 및 폴리(앤하이드라이드)를 포함한다. 또한, 주사용 저장 제형들은 신체 조직과 상용되는 마이크로에멀젼들 또는 리포솜들 내에 활성 요소(들)을 포괄(entrapping)시킴으로써 제조된다.
더욱더, 본원 발명의 조성물들 및/또는 이러한 조성물을 병합한 물품들 또는 제품들은 본 기술분야의 전문가들에게 잘 알려져 있을, 유사 및/또는 상이한 작용의 양식의 추가적인 화학작용제 및/또는 생물작용제, 다중-부위(multi-site) 및/또는 단일 부위의 항곰팡이제 또는 항진균제, 항세균제 및 항균제를 포함할 수 있다. 이러한 약제들은 식물들, 여타의 기질들, 동물 및/또는 사람에 있어서 효모 또는 균류, 박테리아, 바이러스 및/또는 여타의 미생물 감염들을 예방하거나 치료하는데 적당한 본 기술분야의 전문가들에게 알려진, 포타슘 디카르보네이트, 실리카, 구리 또는 황-기반 화합물들 및/또는 식물성 오일[예를 들어, 님 오일(neem oil)]을 포함할 수 있으나, 이로 제한되지 않는다. 더욱더, 이러한 약제들은 아졸류; 암포테리신 B 및 나이스타틴과 같은 폴리엔류; 플루사이토신와 같은 푸린 또는 피리미딘 뉴클레오티드 억제제들; 닉코마이신과 같은 폴리옥신류; 여타 키틴 억제제들, 연장 인자 억제제들, 이를 테면 소르다린 및 이의 동족체들; 미토콘드리아성 호흡의 억제제들, 스테롤 생합성의 억제제들 및/또는 여타의 살균성 조성물 또는 살생물성(biocidal) 조성물을 포함할 수 있으나, 이로 제한되지 않으며, 또한 제조되는 여느 물품 상에서 또는 내에서 발견될 수 있다.
여하한의 실시형태들에서, 본원 발명의 조성물들을 병합한 물품들 또는 제품들은 또한 소르빈산 또는 벤조산; 벤조산, 소르빈산, 하이드록시메틸 글리신산 및 프로피온산의 나트륨, 칼륨, 칼슘 및 암모늄 염들; 그리고 메틸, 에틸, 프로필 및 부틸 파라벤 및 이들의 조합물들 포함하나 이로 제한되지 않는, 본 기술분야의 알려진 하나 이상의 방부제 성분들을 포함할 수 있다.
본 발명의 조성물들은 산성 또는 염기성 작용기를 포함하는 화합물을 함유할 수 있으며, 따라서 약제학적으로- 또는 그 밖에-수용가능한 산들 및 염기들을 가지는 약제학적으로- 또는 그 밖에-수용가능한 염들을 형성할 수 있다. "약제학적으로-수용가능한 염들"이라는 용어는 이러한 화합물들의 상대적으로 비-독성, 무기 및 유기의 산 및 염기 첨가 염들을 지칭한다. 여하튼, 이러한 염들은 적당한 산 또는 염기와 이러한 화합물을 반응시킴으로써 제조될 수 있다. 적당한 염기들은 이러한 수용가능한 금속 양이온 또는 이러한 수용가능한 유기성 1차, 2차 또는 3차 아민의 하이드록사이드, 카르보네이트 또는 비카르보네이트를 포함한다. 대표적인 알칼리 또는 알칼리 토금속 염들은 리튬, 소듐, 포타슘, 칼슘, 마그네슘 및 알루미늄 염들 및 이와 유사한 것들을 포함한다. 염기 첨가 염들의 형성에 유용한 대표적인 유기 아민들은 에틸아민, 디에틸아민, 에틸렌디아민, 에탄올아민, 디에탄올아민, 피페라진 및 이와 유사한 것들을 포함한다. 대표적인 산 첨가 염들은 하이드로브로마이드, 하이드로클로라이드, 설페이트, 포스페이트, 나이트레이트, 아세테이트, 발레레이트, 올레에이트, 팔미테이트, 스테아레이트, 라우레이트, 벤조에이트, 락테이트, 포스페이트, 토실레이트, 시트레이트, 말레에이트, 푸마레이트, 숙시네이트, 타르트레이트, 나프탈레이트, 메실레이트, 글루코펩토네이트, 락토비오네이트 및 라우릴설포네이트 염들 그리고 이와 유사한 것들을 포함한다.
본 발명의 조성물들은 수성 분산액 또는 에멀젼으로 사용될 수 있으며, (계면활성제가 있거나 또는 없는) FFC 조성물을 고 비율로 함유하는 농축물의 형태로 사용할 수 있으며, 사용 전에 (예를 들어, 물 또는 또 다른 유체 성분으로) 희석될 수 있다. 유화될 수 있는 농축물들 또는 에멀젼들은 습윤제 또는 유화제를 선택적으로 함유하는 용매 내에서 여타의 어느 원하는 활성 요소와 함께 본원 발명의 조성물을 용해시키고, 그 후에 습윤제 또는 유화제를 또한 함유할 수 있는 물에 혼합물을 첨가시킴으로써 제조될 수 있다. 적당한 유기 용매들은 알코올류 및 글리콜 에테르류를 포함한다. 바람직하게, 이러한 농축물들은 장기간 동안의 저장에 견딜 수 있어야 하며, 이러한 저장물은 나중에 이들이 통상적인 스프레이 장치에 의해 적용될 수 있도록 충분한 시간 동안 균질성을 유지하는 수성 제조물을 형성하기 위하여 물로 희석될 수 있다.
최종-용도 적용의 형식에 따라서, 본원 발명의 조성물들이 병합된 물품들 또는 제품들은 또한 적용을 용이하게 하기 위한 고체 또는 액체 운반체들, 생물계면활성제를 포함하는 계면활성제들, 보호 콜로이드들, 접착제들, 점증제들, 요변제(thixotropic agent)들, 침투제(penetrating agent)들, 안정제들, 격리제(sequestrant)들, 감촉제(texturing agent), (예를 들어, 추수-후 또는 가공된 식품/음료 적용에 대한) 향미제들, 당류, 착색제들 등을 포함하나 이로 제한되지 않는 여하한의 여타 요구되는 성분들을 포함할 수 있으며, 이들은 본 기술분야의 전문가들에게 잘 알려져 있을 것이다.
예를 들어, 이러한 조성물들 및/또는 관련된 물품들 또는 제품들은 농업적인 목적들을 위하여 사용될 수 있으며, 이러한 운반체 또는 희석제로 제제화될 수 있다. 조성물들은 식물의 관엽에, 종자에, 또는 성장하고 있거나 심어진 식물들 내에 여타 매질(medium)에 직접적으로 적용, 제제화 또는 제제화되지 않을 수 있거나, 이들이 크림 또는 페이스트 제형으로 적용되거나 뿌려지거나, 분무될 수 있거나, 또는 이들이 발산물 또는 느리게 방출되는 과립으로 적용될 수 있다. 관엽, 줄기, 가지 또는 뿌리를 포함하는 식물의 여하한 부분에 또는 인접하여 적용될 수 있고, 또는 (수확-전후의) 뿌리, 과실 또는 채소의 주변 토양에 적용될 수 있으며, 또는 심어지기 전의 종자에 적용될 수 있고, 또는 일반적으로 토양에 적용될 수 있으며, 관개 용수 또는 수경 재배 시스템에 대한 토양에 적용될 수 있다. 또한, 본 발명의 조성물들은 적은 부피 또는 압력 또는 전기역학적 분무 기술들, 또는 본 기술분야나 산업분야에 알려진 여하한의 다른 방법을 사용하여, 식물들 내로 주입될 수 있거나 (과실 및 야채를 포함한) 초목 상으로 분무될 수 있다.
여하한의 실시형태들에서, 농업적 또는 식품 가공과 관련되거나 관련되지 않더라도, 조성물들 및/또는 본 발명의 조성물들이 병합된 물품들 또는 제품들은 고체 희석제 또는 운반체, 예를 들어 충전제들(또한, 이를 테면 동물 또는 고양이용 깔개), 카올린, 벤토나이트, 키셀굴(kieselguhr), 돌로마이트, 칼슘 카르보네이트, 탈크, 분말형 마그네시아, 풀러 토(fuller's earth), 석고, 규조토(diatomaceous earth) 및 자토(china clay)를 포함하는 분진화 할 수 있는(dustable) 분말들 또는 과립들의 형태일 수 있다. 이러한 과립들은 추가적인 처리 없이 적용하기에 적당한 과립들을 미리 형성할 수 있다. 이러한 과립들은 본 발명의 조성물 또는 또 다른 활성 요소들로 충전제의 펠릿(pellet)들을 충만시키거나, 활성 요소 및 분말형 충전제의 혼합물을 펠릿화(pelleting)함으로써 만들어질 수 있다. 예를 들어, 종자를 처치하기 위한 조성물들은 종자에 조성물을 접착되도록 돕는 약제(예를 들어, 광유)를 포함할 수 있으며, 대안적으로, 활성 요소는 유기 용매를 사용하여 종자를 처치하기 위한 목적으로 제제화될 수 있다. 또한, 조성물들은 액체들 내에서 분산을 용이하게 하기 위하여 습윤제 또는 분산제들을 포함하는 습윤성 분말들 또는 수화제(water dispersible granule)들의 형태일 수 있다. 또한, 분말들 및 과립들은 충전제들 및 현탁제들을 함유할 수 있다. 대안적으로, 조성물들은 마이크로캡슐 형태 내에서 사용될 수 있다. 또한, 이들은 활성 물질의 느리고, 제어된 방출을 얻기 위하여 생분해성 중합성 제형들 내로 제제화될 수 있다.
여하튼, 이러한 본 발명의 조성물을 포함하는 이러한 고체 제형들은 실린더, 막대, 블럭, 캡슐, 정제, 알약, 펠릿(예를 들어, 또한 애완동물 사료), 스트립(strip), 스파이크(spike) 및 이와 유사한 것들을 포함하나 이로 제한되지 않는, 다양한 형태, 모양 또는 몰딩으로 된 제품들 또는 물품들의 범위로 제공될 수 있다. 대안적으로, 과립화되거나 분말화된 재료가 정제들 내로 압착될 수 있거나, 캡슐들 또는 외피들의 범위를 충진하는데 사용될 수 있다. 상기에서 논의된 바와 같이, 본 발명의 이러한 여하한의 조성물은 제제화되던지 제제화가 되지 않던지 간에, 단독으로 사용될 있거나, 기질 상에 적용될 수 있거나, 약제학적용, 개인용, 산업용 및 농업용 조성물들 및 관련된 사용 방법들을 포함하나 이로 제한되지 않는 광범위한 최종-용도로 적용하기 위하여 제조되는 제품 또는 물품에 병합될 수 있다.
본 발명의 실시예들
하기의 비-제한적인 실시예들 및 데이터는 본 명세서에서 설명되는 다양한 성분 화합물들을 포함하는 항균성 조성물들의 사용 및 제조를 포함한, 본원 발명의 조성물들 및/또는 방법들에 관련된 다양한 측면들 및 특징들을 설명한다. 이전 기술분야와 비교하여, 본원 조성물들 및 방법들은 이와 대조적이고 예상지 못한, 그리고 놀랄만한 결과들과 데이터를 제공한다. 본 발명의 유용성이 몇몇의 조성물들 및 이들과 함께 사용될 수 있는 성분 화합물들의 사용을 통하여 도시될지라도, 본 기술분야의 전문가들에 의해서 본 발명의 범위에 대응하는 다양한 여타의 조성물들 및 성분 화합물들에 의해 비슷한 결과들이 얻어질 수 있다는 것을 이해할 것이다.
실시예 1a
균류의 단리. 아나나스 아나나스소이데스의 몇몇의 작은 줄기들이 2007년 3월에 볼리비아 아마존에서 자라고 있는 식물에서부터 가져왔다. 이들은 12°40'07" S 및 68°41'58" W에 위치한 열대우림에 인접한 사바나 지역에서 수집되었으며, 분석하기 위하여 즉시 운반되었다. 줄기들로부터 몇몇의 작은 조각들(2 내지 5 인치)로 잘려 졌으며, 라미나 플로우 후드(laminar flow hood) 하에서 30초 동안 70 %의 에탄올 내로 위치되었다. 한 쌍의 멸균된 핀셋은 개별적으로 과잉된 알코올을 제거하기 위하여 불길 속에서 줄기들을 유지하는데 사용되었다. 그 후에, [수피(bark) 아래의] 내부 조직의 작은 조각들이 절개되었으며, 플레이트에서 제거되는 중앙 웰(well)을 가지는 플레이트의 한쪽 면에서 무스코도르 알부스 단리체 620이 활발히 자라고 있는 감자 한천 배지(PDA) 상으로 배치되었다. 효과적으로, 이 기술은 무스코도르의 다른 단리체들을 선택하는데 사용될 수 있다(Worapong et al., 2001a&b). 2주의 배양 기간 동안, 페트리(Petri) 플레이트들은 여하한의 균류 성장에 대하여 정기적으로 조사되었다. 일단 균사가 관찰되면, 균사의 끝들이 무균적으로 한천에서 절취 되었으며, 새로운 PDA 상에 위치되었다. 단리체는 이런 방식으로 발견되었다. 몇몇의 페트리 플레이드들(PDA)이 균류들이 휘발성 항생작용들을 생성하였는지 결정하기 위하여 사용되었다. 이러한 절차는 플레이트의 가운데에서 한천을 1 인치 정도의 조각(section)으로 제거하는 단계, 단리체의 플러그(plug)를 한쪽 면에 평판 배양시키는(plating) 단계, 이것을 며칠 동안 성장시키도록 내버려 두는 단계, 그리고 이후에 갭(gap)의 다른 한쪽 면에 시험 유기체들을 평판 배양시키는 단계를 포함한다.
실시예 1b
균류의 분류. 자연적인 균류는 아나나스 아나나스소이데스와 관련되며, 균사형 불완전균류에 속하는 불완전균류(deuteromycete)이다. 직사 일광의 밖에 있었던 경우에, 균류 콜로니(Fungal colony)들은 시험되는 모든 배지 상에서 희끄무레하였다. 직사 일광 내에서 놓아두었던 경우에, 균류 콜로니들은 시험되는 모든 배지 상에서 연분홍색을 띠었다. 포자들 또는 다른 자실체(fruiting body)들은 여하한 조건들 하에서는 관찰되지 않았다. 일반적으로 분지(branching)에 의해 성장하고, 때때로 완벽한 코일(약 40 μm)을 형성하며, 콜리플라워형 몸체들(3.5-14 μm)을 가지는 균사(0.6 내지 2.7 μm)는 이들과 관련된다. 시험되는 모든 배지와 관련된 모든 조건들 하에서 관찰되는 경우에, 새롭게 발육되는 균사는 물결 모양의 패턴으로 성장하였다. PDA 상의 균사체는 3 내지 4주 내에 플레이트를 덮게 되고, 과일향을 생성한다.
정기준 표본(Holotype): 아나나스 아나나스소이데스에 대한 식물내생성. 헤아트강(Heath River) 부근의 볼리비아 아마존에서 수집되었다. 정기준 표본은 아나나스 아나나스소이데스에서만 공급되었고, 헤아트강 지방에서 수집되었다. 살아있는 배양물(culture)은 무스코도르 크리스판스로서 몬나타주 대학의 살아있는 진균학적 수집에 수탁(acquisition) 번호 2347(2/29/2008)로 수탁되었다. 무스코도르 크리스판스(B-23)의 18S rDNA 및 ITS 서열들 모두는 GenBank에 할당된 시리얼 번호-EU195297로 기탁되었다.
테로모프(Telomorph): 이 균류의 테로모프는 자일라리아세아(Xylariaceae)에서 발견될 수 있으며, GenBank 데이터베이스 내의 무스코도르 크리스판스와 자일라리아세아 족 사이의 18S rDNA 유전자 서열 데이터의 유사성을 기반으로 할 수 있다(Bruns et al., 1991; Reynolds and Taylor 1993; Mitchell et al., 1995; Guarro et al., 1999; Taylor et al., 1999). 무스코도르 크리스판스의 18S rDNA 유전자 서열들로부터의 분자 데이터는 무스코도르 알부스 단리체 620과 100 %의 상동성을 나타낸다.
어원: 속 명인 무스코도르는 곰팡내 나는 것을(musty) 의미하는 라틴어에서 받아들여졌다. 이는 상기 속의 첫번째 3개의 단리체들에 의해 생성되는 냄새의 본질과 일치한다. 종 명은 크리스판스이며, "똘똘 말린(curly), 물결치는(wavy)"이라는 의미의 라틴어에서 나왔다. 상기 균사는 일반적으로 물결 모양의 패턴으로 성장되었다.
실시예 2a
전자 주사 현미경. 전자 주사 현미경은 Castillo et al. (2005)에 의해 설명된 절차들 후에, 실시예 1의 단리체 상에서 실시되었다. 균류의 성장을 지지하는 한천 조각들 및 숙주 식물 조각들이 거름 종이통(packet) 내에 놓여졌고, 트리톤(Triton) X 100, 습윤제를 가지는 0.1 M 소듐 카코딜레이드 완충용액(pH 7.2 내지 7.4) 내의 2 % 글루테르알데히드 내에 놓여졌으며, 5분간 흡입되었고, 하룻밤 동안 놓아두었다. 다음날, 상기 조각들은 물:완충용액을 1:1로 바꾼 후 6×15-분간, 뒤이어 10 % 에탄올로 바꾼 후 15분간, 30 % 에탄올로 바꾼 후 15-분간, 50 % 에탄올로 바꾼 후 15-분간, 70 % 에탄올로 바꾼 후 5×15분간 세척되었으며, 이후에 70 % 에탄올 내에서 하룻밤 또는 더 길게 놓아두었다. 그 후에, 이들은 95 % 에탄올 내에서 15분간 6번, 그 후에 100 % 에탄올로 바꾼 후 15-분간 3번, 뒤이어 아세톤으로 바꾼 후 15-분간 3번 세척되었다. 미생물 물질은 임계점(critically point)에서 죽었고, 금이 스퍼터 코팅(sputter coated)되었으며, 이미지들은 Everhart-Thornley 검출기를 사용하여 고 진공 모드에서 XL30 ESEM FEG로 기록되었다. 균사는 온라인에서 사용가능한 Image J software를 사용하여 측정되었다.
실시예 2b
균류의 생물사 ( Biology ). 균류는 물을 기반으로 한 배지 상에서 흰색 균사체를 생성하였다. 여하한의 실험실 조건들 하에서는 여하한 종류의 자실체 구조(fruiting structure)들 또는 포자들은 발견되지 않았다. 균사는 서로 얽히면서 코일을 형성하는 경향이 있다. 무스코도르의 다른 종들도 이런 경향을 가지고 있다(Worapong et al., 2001a). 새롭게 개발되는 균사는 전형적인 직선 패턴보다는 오히려 물결 모양의 구조(fashion)로 성장하는 경향이 있으며, 일반적으로 서로 얽히면서 로프(rope)형 구조들을 만든다. 이러한 성장 패턴은 생체 내에서의 접종 연구들에서 이러한 유기체의 식별은 진단 도구로서 유용함을 입증할 수 있다. 또한, 균류는 작은 가닥(strand)들에 의해 연결되는 것 같은 콜리플라워형 구조들을 생성한다. 이러한 구조체(body)들은 여하한 조건들 하에서는 발아하지 않으며, 따라서 포자들은 생기지 않는다. 이러한 관찰은 무스코도르종에서만 유일한 것으로 보이며, 일반적인 여하한의 다른 균류 종들에서는 존재한다고 보고되지 않았다.
실시예 3a
균류의 성장 및 저장. 몇몇의 카네이션 잎들의 조각이 포자 생산을 촉진시키기 위하여 활발히 성장하는 단리체의 상부에 위치되는 경우에, 단리체는 포자들 또는 여하한의 다른 자실체들을 생성하지 않았음이 결정되었으며, 이러한 구조체들은 23 ℃에서 일주일 동안 배양된 후에도 관찰되지 않았다. 또한, 균류는 포자 생성이 나타났는지를 결정하기 위하여 셀룰로오스 한천(CA), 맥아 한천(MA) 및 콘밀 한천(Corn Meal Agar: CMA)을 포함하는 몇몇의 상이한 배지 상에 위치되었다. 일부의 배지 상에서 성장 비율이 느린 것을 제외하고, 균류의 다른 특징이 다르게 나타나지 않았으며, 자실체들 또는 포자들이 관찰되지 않았다.
몇 가지 방법들은 순수한 배양물로 단리된 균류를 저장하기 위하여 사용되었으며, 이들 중의 하나는 여과 기술(filter paper technique)이었다. 또한, 균류는 PDA 상에서 성장하도록 하였고, 그 후에 작은 정사각형들로 잘렸으며, 15 % 글리세롤을 함유하는 바이알(vial)들 내에 위치되었으며, -70 ℃로 저장되었다. 또한, 균류는 글리세롤보다는 증류수를 사용하여, 유사한 방법에 의해 4 ℃로 저장되었다. 그러나, 가장 효과적인 저장 방법은 -70 ℃에서 가득채운(infested) 멸균된 맥류 종자(barley seed)상에서 였다.
실시예 3b
이외에, 단리된 무스코도르 크리스판스의 좀 더 전형적인 특징들이 또한 조사되었고, 시험되는 모든 배지 상에서 느리게 성장하는 밀집한 흰색의 균사체를 생성하는 무스코도르 알부스 , 무스코도르 크리스판스와 비교되었으며, 만약 직사 일광에 위치된다면, 균사체가 밝은 분홍색을 띠게 된다. 이는 모든 시험되는 조건들 및 비교할 수 있는 매질 상에 희끄무레한 균사체를 생산하는 무스코도르 알부스와 대조된다(Worapong et al., 2001a). 또한, 어린 균사는 무스코도르 알부스에서 일반적으로 관찰되는 것과 같은 특징적인 직선 케이블(cable)형 구조보다는 물결 모양의 구조로 성장하였다(Strobel et al., 2001). 숙주 식물 물질 또는 카네이션 잎들을 함유하는 것을 포함하는 여하한의 배지 상에서는 포자들이 형성되지 않았다. 균사의 직경은 다양하였고(0.8 내지 3.6 μm), 자주 서로 얽히게 되어 좀 더 복잡한 구도들 및 심지어 균사 코일들을 만들었다(도 1 내지 도 3). 일반적으로, 이러한 균사는 무스코도르 알부스의 균사들보다 더 컸다(Worapong et al., 2001a).
실시예 4
휘발성 물질( Volatile )들의 정성 분석. 이 방법은 무스코도르 알부스 균주 cz-620의 본래의 단리체와 비교될 수 있는 페트리 플레이트들 내에서 성장하는 균사체의 10-일이 지난 배양물보다 위쪽 공간의 공기 내에 기체들을 분석하는데 사용된다(Strobel et al., 2001). 먼저, 안정한 신축성 있는 섬유 상에서 폴리디메틸실록산 상의 50/30의 디비닐벤젠/카르부렌(carburen)으로 구성된 구워진 "고체상미량추출(Solid Phase Micro Extraction)" 주입기가 균류 성장에 돌연변이를 일으킨(sporting) 페트리 플레이트의 면에 뚫려진 작은 구멍을 통과해 위치되었다. 상기 섬유는 45분간 균류의 증기상에 노출되었다. 그 후에, 주입기는 30 m×0.25 mm LD를 함유하는 Hewlett Packard 6890 가스크로마토그래피의 스플릿이 없는(splitless) 주입 포트 내로 주입되었다. ZB 왁스 모세관 컬럼(Wax capillary column)은 0.50 mm의 두께의 필름을 갖는다. 상기 컬럼은: 2분간 30 ℃, 뒤이어 5 ℃/분으로 220 ℃까지로 온도가 프로그램되었다. 운반 기체는 고 순도(ultra high purity) 헬륨(국소적 배포)이었고, 초기의 컬럼 선단(head) 압력은 50 kPa이었다. 휘발성 물질들을 끌어들이기 전에, 상기 섬유는 헬륨 가스의 흐름 하에서 20분간 240 ℃을 조건으로 하였다. 샘플 섬유를 GC 내로 도입하기 위하여 30초의 주입 시간을 사용하였다. 가스크로마토그래피는 단위 분해능(unit resolution)으로 작동하는 Hewlett Packard 5973 질량 선택 검출기(질량 분광계)와 연결되었다. 데이터 획득 및 데이터 처리는 Hewlett Packard ChemStation software 시스템 상에서 실시되었다. 균류에 의해 생성된 휘발성 혼합물들 내의 화합물들의 초기 식별은 NIST 데이터베이스를 사용하여 라이브러리(library) 비교를 통하여 이루어졌다.
실시예 5a
균류 DNA 단리 및 ITS -5.8S rDNA 서열 정보의 획득. PDA 상에서 자라는 본원 균류의 10일이 지난 배양물은 빠른 균질화기(Rapid Homogenization): 식물 잎 DNA 증폭 키트(Plant leaf DNA Amplification Kit)[Cartagen; Washington, USA]를 사용하여 25 ℃에서 배양한 후에 DNA의 소스(source)로서 사용되었다. 사용되는 기술들의 일부는 오스트레일리아로부터 온 여타의 무스코도르 알부스 단리체들의 유전적인 특징을 밝히기 위하여 사용되는 것들과 비교될 수 있다(Ezra et al., 2004). 일주일이 지난 배양물에서 배양된 균사(mycelia)를 정사각형으로(0.5 cm) 잘라냈다. 가능한 많은 한천을 제외시키기 위하여 상기 조각들의 하부에서 한천을 닦아내었다. 조각들은 1.5 ml의 Eppendorf 바이알들 내로 위치되었으며, -80 ℃에서 약 10분간 배양되었다. 그 후에, 키트 제작사의 설명서에 따라서 DNA가 추출되었다. 추출된 DNA는 생물학적 합리 살충제으로-증류된 멸균수로 희석되었으며(1:9), 1 μl의 샘플들을 PCR 증폭하기 위하여 사용되었다. ITS1, 5.8S ITS2 rDNA 서열은 프라이머(primer)들 ITS1(TCCGTAGGTGAACCTGCGGG) 및 ITS4(TCCTCCGCTTATTGATATGC)를 사용하여 중합효소 연쇄 반응에 의해 증폭되었다. PCR 과정은 균류 배양물(1:9 희석)로부터 추출된 1 μl의 DNA, 0.5 μl의 프라이머 ITS1 및 0.5 μl의 프라이머 ITS4, 1.5 mM의 MgCl2를 가지는 7 μl의 RedMixTM plus PCR 혼합물(GeneChoice, Inc., Maryland, USA) 그리고 5 μl의 ddH2O PCR 그레이드(grade)[Fisher Scientific, Wembley, Western Australia, Australia]를 함유하는 14 μl의 반응 혼합물 내에서 수행되었다. PCR 증폭은 Biometra personal cycler(Goettingen, Germany): 5분간 95 ℃ 뒤이어 45초간 95 ℃에서의 35 사이클(cycle), 45초간 50 ℃ 및 45초간 72 ℃ 뒤이어 5분간 72 ℃에서의 사이클로 실행되었다. PCR 생성물들은 TAE 완충용액과 100 V에서 30분간 1.3 %의 아가로스겔[Labnet International, Inc.,(Woodbridge, NJ, USA)로부터의 GelXLUltra V-2 또는 Wealtec Inc.,(Georgia, USA)로부터의 Wealtec GES cell system] 상에서, 겔 전기영동을 사용하여 조사되었다. 겔들은 5분간 0.5 μg ml-1 에티듐 브로마이드 용액에 담궈졌으며, 그 후에 5분간 증류수로 세척되었다. 겔 이미징은 Bio-Imaging System (model 202D; DNR-Imaging Systems, Kiryat Anavim, Israel) 내의 UV광에 의해 실행되었다. ~500 bp PCR 생성물은 UltraClean PCR Clean Up DNA 정제 키트(MO BIO Laboratories, Inc., California, USA)를 사용하여 정제되었다. 정제된 생성물들은 직접 PCR 시퀀싱(sequencing)을 위하여 보내졌다. 시퀀싱은 ITS1 및 ITS4 프라이머들을 사용하여 PCR 생성물의 가닥들 모두에 대하여 실행되었다. 시퀀싱은 MegaBACETMlOOO 분석 시스템(Danyel Biotech Ltd., Rehovot, Israel) 상에서 DYEnamic ET 종결부위(terminator)들을 사용하여 실행되었다. 서열들은 NCBI 웹 사이트 상의 GenBank에 기탁되었다. 본 연구에서 얻어진 서열들은 NCBI 웹 사이트 상의 BLAST software를 사용하여 GenBank 데이터베이스와 비교되었다.
실시예 5b
무스코도르 크리스판스 의 분자생물학. 18S rDNA, ITS1, 5.8S 및 ITS2의 부분 서열들이 DNA의 매우 보존된 부위들의 증거가 되었으며, 따라서, 유기체들의 분류에 매우 유용하다(Mitchell et al., 1995). 이러한 무스코도르 크리스판스의 분자적으로 분류하는 부분적인 서열들이 얻어졌으며, GenBank 내의 데이터와 비교되었다. 18S rDNA 서열들을 조사한 후에, 무스코도르 크리스판스의 525bp가 상세한 BLAST 검색에 제출되었다. 결과들은 무스코도르 알부스(AF324337)의 525 bp와 100 % 동일하게 나왔다. 무스코도르 크리스판스의 부분적인 ITS 1&2 및 5.8S rDNA 서열들의 비교 분석은 각각 95, 95, 90, 90 및 91 %의 동일성으로 무스코도르 알부스(AF324336), 무스코도르 로제우스(AY034664), 자일라리아 엔테로레우카 CBS 651.89(AF163033), 자일라리아 아르부스쿨라 CBS 452.63(AF163029) 및 하이폭실론 프라지폼(Hypoxylon fragiform)[HFR246218]의 ITS 1 및 2와 들어맞았다.
실시예 5c
부분적으로, 본 발명이 단리되는 신규한 균류와 관련되어 설명될지라도, 본 기술분야에서 이해되는 바와 같이, 이러한 균류의 변이체들 및 돌연변이체들도 본원 발명의 맥락에서 고찰된다는 것이 이해될 것이다. "변이체" 및 "돌연변이체"라는 용어는 미국 특허 제 6,911,338에 제공되는 바와 같이 정의되며, 이는 본 명세서에서 이의 전문이 참고문헌으로 인용참조된다. 따라서, 본 발명은 무스코도르 크리스판스의 변이체 또는 돌연변이체 균주들 및 이들의 대응하는 조성물들에 관한 것 일 수 있다.
실시예 6a
식물 병원체들에 대한 무스코도르 크리스판스의 생물정량 시험(bioassay test). 무스코도르 크리스판스의 휘발성 부산물의 발산물은 이전의 문헌에 설명된 바와 같이 비교적 간단한 시험을 사용하여 미생물의 억제 활성에 대하여 테스트하였다(Strobel, et al., 2001). 표준 PDA 페트리 디쉬 내의 한천 스트립(2 cm의 폭)이 제거되었으며, 무스코도르 크리스판스는 약 일주일 동안 플레이트의 한쪽 면 상에서 배양되었고 성장되도록 하였다. 그 후에, 시험 균류 또는 박테리움은 균류용 한천의 작은 플러그들을 사용하여, 페트리 디쉬의 다른쪽 면 상에서 배양되었다. 박테리아 및 효모는 한천 상에 줄무늬 모양으로 배열되었다(1.5 cm의 길이). 그 후에, 플레이트는 파라필름의 한 조각으로 덮어 싸여졌으며, 48시간 동안 23 ℃에서 배양되었다. 시험 유기체들의 성장에 대한 무스코도르 크리스판스의 효과는 먼저 배양되는 곳에서의 성장의 존재 또는 부재를 입증함으로써 결정되었다. 만약 성장이 관찰되면, 균류의 균사의 두 위치들의 직경을 측정하였다. 박테리아 및 효모의 발산물의 생물학적 활성은 이들의 성장이 대조구 플레이트 상에서의 성장에 영향을 미치는 정도를 퍼센트의 단위(degree)로 평가함으로써 산정되었다(Strobel et al., 2001). 만약 성장이 관찰되지 않는다면, 시험 유기체는 시험 플레이트에서 무균적으로 제거되며, 시험 유기체의 생존 능력을 확정하기 위하여 발산물에 노출시킨 후에, 어떤 시점에서 새로운 PDA 플레이트 상에 배양되었다.
앞선 방법론을 이용하여, 무스코도르 크리스판스가 PDA 상에서 23 ℃로 7 내지 10일간 성장되는 경우, 균류의 휘발성 부산물은 몇몇의 균류 및 박테리아에 치명적임이 증명된다. 효모 및 각각의 균류의 주요한 종류들뿐만 아니라 그람-음성 및 그람-양성 박테리아가 시험 유기체들로서 이용된다. 대부분의 시험 유기체들은 무스코도르 크리스판스의 부산물에 2일간 노출된 후에 100 % 억제되거나 사멸되었다(표 8 참조). 시험 유기체들의 일부는 2일간의 노출 후에 무스코도르 크리스판스의 휘발성 물질들에 의해 죽었으나, 이들의 성장은 휘발성 부산물에 의해 상당희 억제되었으며, 4일간의 노출 후에는 사멸되었다. 이러한 유기체들은 그 중에서도 페니실리움 카멤베르티, 바이폴라리스 소로키니아나, 스타고노스포라종 및 푸사비움 옥시스포룸을 포함한다.
표 8. 식물의 많은 균류 병원체들 및 일부 구별된 박테리아 상에서의 무스코도르 크리스판스의 휘발성 부산물의 효과들. 억제 수치들은 시험 유기체의 처리되지 않은 대조구와 비교함으로써 성장 억제의 %로 계산되었다. 시험들은 비교할 수 있는 결과들을 갖도록 3번 이상 반복되었다. 시험 유기체들의 억제는 균류 및 휘발성 균류 부산물의 발산물에 노출된 후 48시간에 기록되었다.
Figure pct00008

Figure pct00009
*는 이러한 유기체들은 시험 플레이트 상에 줄무늬 모양으로 배열되었으며, 콜로니의 발달이 결국에 발생하는지 어떤지에 대하여 성장의 표시를 나타낸다. 무스코도르 크리스판스의 휘발성 부산물에 적절하게 노출한 후에, 줄무늬로 배열된 부분은 대조구 플레이트 상에서의 성장과 비교되었으며, % 억제에 대하여 평가하였다. 최종적으로, 각각의 유기체는 생존 능력에 대한 시험을 하기 위하여 PDA 플레이트에 다시 줄무늬로 배열되었다.
실시예 6b
표 8을 참조하여, 보트리티스 상에서의 무스코도르 크리스판스의 휘발성 부산물의 발산물의 효과는 매우 두드러졌으며, 특히 다양한 식물들에서의 회색 곰팡이를 야기하는 B. 시네레아 상에서 두드러졌다. 또한, 억제 및 사멸 효과는 양파의 양파잿빛썩음병(gray mold neck rot)을 야기하는 보트리티스 알리이에 적용할 수 있다. 제한 없이, 이러한 결과들은 본원 발명이 곰팡이 및 관련되는 문제점들을 예방하기 위하여 수확-후 저장고 대기 또는 생성물 표면을 변화시키는데 효과적으로 사용될 수 있다는 것을 시사한다. 마찬가지로, 이러한 결과들은 균류의 성장을 예방하거나 제어하기 위하여 양파[예를 들어, 비달리아(Vidalia) 양파], 샬롯(shallot) 및 마늘 생산을 처리하는데 본 발명의 FFC 조성물을 사용하는 것을 입증한다.
실시예 6c
또한, 무스코도르 크리스판스의 휘발성 물질에서의 발산물은 낟알(예를 들어, 옥수수, 밀, 보리, 쌀 등) 상에 균류 성장 및 부패를 야기하는 많은 균류에 대하여 효과적이며, 이러한 곡물, 과실 또는 야채가 수확 전후, 저장 또는 선적(shipment)되어 있든지 간에 본 발명은 다양한 과실 및 야채, 이를 테면 감자, 사탕무, 당근, 고구마와 관련하여 사용될 수 있다. 따라서, 본 발명의 조성물들 및 방법들은 농업 및 식품 가공 분야에서 일부 주요한 균류-관련된 문제들에 적용될 수 있으며, 알터나리아, 클라도스포리움, 아스페르길루스, 페니실리움, 디프로디아, 푸사리움 및 지베렐라를 포함하나 이로 제한되지 않는 표적 유기체들에 사용될 수 있다(예를 들어, 표 8 참조).
실시예 6d
무스코도르 크리스판스의 부산물로부터의 발산물은 마이코스파렐라 피지엔시스 균류에 대하여 효과적이었다(표 8 참조). 따라서, 본 발명은 바나나 및 플랜테인(plantain)의 균류-관련된 블랙 시가토카(Black Sigatoka) 질병에 대한 처치로서 사용될 수 있다.
실시예 6e
감귤 궤양병(Citrus canker disease)은 미국의 감귤 산업의 존재에 매우 위협적이다. 표 8에 나타낸 바와 같이, 무스코도르 크리스판스의 부산물로부터의 발산물은 궤양-원인 병원체인, 잔토모나스 아소니포디스 p.v. 시트리를 효과적으로 죽인다. 이러한 결과들은 본원 발명의 FFC 조성물들 및 관련된 방법들이 궤양병을 예방, 억제 또는 제어하기 위하여 종자, 실생 식물(seedling), 과실수(orchard), (예를 들어, 작업 장비 및 작업복을 포함하는) 장비 또는 도구, 및/또는 수확된 과실을 처리하는데 효과적으로 사용될 수 있음을 시사한다.
실시예 7
잇따른 시험들 및 실시예 6의 결과들과 같이, 무스코도르 크리스판스의 휘발성 부산물의 발산물에 관한 생물정량 시험들은 다양한 여타의 식물 및 사람의 병원성 균류 및 박테리아에 대하여 실시되었다(하기의 표 9 참조). 4분할된 PDA를 가지는 X-플레이트들 상에서 성장되었으며, 하나 이상의 시험 유기체들로 접종되기 전에 실온에서 3 내지 5일간 배양되었다. 대조구 플레이트들이 접종과 동시에 만들어졌으며, 개별적인 시험 유기체들에 대하여 최적인 동일한 배지에서 성장되었다. 시험 유기체들, 황색포도상구균(Staphylococcus aureus) 6538, 살모넬라 콜레라수이스(Salmonella cholerasuis) 10708, 대장균 11229, 황색포도상구균 ATCC 43300(MRSA) 및 비브리오 콜레라(Vibrio cholerae) ATCC 14035는 4분할된 X 플레이트에 남아있는 3면에 트립티카아제 소이 한천 배지(Trypticase Soy Agar: TSA) 상에서 성장되었다. 적절한 대조구들을 가지는 각각의 유기체의 3개의 플레이트들은 실온에서 대략 2, 4 및 6일 동안 균류의 부산물의 발산물에 노출되었다. 시험 미생물의 생존 능력에 대하여 조사하기 위하여, 그 후에 균류가 물리적으로 제거되고, 마이코박테리움종을 제외하고 최소한 3 내지 4일간 35±1 ℃에서 대조구 및 시험 플레이트들이 배양되었으며, 추가적으로 대략 1달간 배양되었다. 이는 부산물의 발산물이 시험 유기체를 억제하거나 죽였는지에 대하여 확인하기 위하여 실시되었으며, 유기체의 생존 능력이 평가되었다. 노출 시간이 3 내지 5일로 바꾼 것을 제외하고는, 이와 동일한 프로토콜이 에르시니아 페스티스(Yersinia pestis) 및 바실루스 안트라시스(Bacillus anthracis)에 대해서도 뒤이어 수행되었으며, 에르시니아 페스티스는 균류에 노출된 후에 5 %의 CO2 내에서 28±1 ℃로 배양되었다. 마이코박테리움 마리눔(mycobacterium marinum) ATCC 927은 이전에 언급된 프로토콜을 사용하여, 4분할 중 남아있는 3면에서 7H11 한천(Difco Co) 상에서 성장되었으며, 33±1 ℃에서 배양되었다. 각각의 유기체로 시험된 세가지 모든 반복실험(replicate)들에서 동일하게 행동하였다.
모든 마이코박테리움 투베르쿨로시스 균주들에 대하여, 또한 7H11 상에서 성장되었고, 한천 부분이 플레이트에서 제거되었으며, (PDA 상에서의) B-23 균류가 삽입되었다. 그 후에, 플레이트들은 브로스(broth) 배양물로부터 접종되었다. 균류가 존재하지 않는 대조구 플레이틀도 접종되었다. 각각 지정된 시간 간격으로, 한천 부분이 플레이트들에서 제거되었고, 떨어진 빈 플레이트로 옮겨졌으며, 미생물의 생존 능력을 결정하기 위하여 35±1 ℃로 배양기에 위치되었다. 상기 플레이트들은 건조되는 것을 예방하기 위해 적신 종이 타월을 가지는 플라스틱 백(bag) 내에 위치되었다.
슈도모나스 에루지노사(Pseudomonas aeruginosa) 15442 및 버크홀데리아 타일란덴시스(Burkholderia thailandensis) 70038이 모두 TSA 한천 상에서 성장되었다. 유기체에 대하여 적절한 성장 시간 동안 실온에 놓여졌고, 그 후에 35±1 ℃의 배양기로 옮겨졌으며, 관찰되었다. 사람의 병원체들을 사용한 모든 시험들은 엄격하고 연방정부에서 승인된 생물학적으로 안전한 조건들 하에서 실시되었음에 주의된다. 사람의 병원체들 상에서의 모든 시험들은 2번 이상 반복되었다.
표 9. 다양한 그람+ 및 그람- 박테리아 종들 상에서 무스코도르 크리스판스의 휘발성 부산물의 효과들. 특히 흥미있는 유기체에 따라서 노출 시간들을 다양화하였고, 시험 유기체의 생존 능력이 상기 기간 후에 결정되었다(성장 또는 무성장으로 기입함).
Figure pct00010
표 9에 나타낸 바와 같이, 항-산성 박테리아(마이코박테리움 투베르쿨로시스 균주들)는 활발히 성장하는 무스코도르 크리스판스(6 내지 10일 지난 배양물)에 노출된 2, 4, 7 및 14일 후에 사멸하였다. 무스코도르 크리스판스에 노출된 2일 이상 후에 사멸된 다른 박테리아는: 황색포도상구균 6538, 마이코박테리움 마리눔, 에르시니아 페스티스 및 살모넬라 콜레라수이스이었다. 무스코도르 크리스판스에 노출됨으로써 상대적으로 약간 또는 완전하게 영향을 받지 않은 것은: 슈도모나스 에루지노사, 버크홀데리아 타일란덴시스, 황색포도상구균(MRSA), 대장균, 비브리오 콜레라 및 바실루스 안트라시스이었다. 그러나, 황색포도상구균의 성장만이 여하한 별개의 콜로이드들보다도 점액질의 막(slimy film)이었으며, 따라서 무스코도르 크리스판스의 VOCs에 의해 영향을 받았다. 이에 더하여, 바실루스 안트라시스 플레이트만 노출된 플레이트 상에 어느 정도의(a few) 콜로니들을 가졌으나, 무스코도르 크리스판스의 제거 및 직후의 배양 후에 더 많은 콜로니들이 성장하였다. 그러므로, 부산물의 무스코도르 크리스판스 부산물은 포자들이 아니라 오직 바실루스 안트라시스의 영양 세포들에 대하여 영향을 받는 것으로 추측되었다. 마지막 관찰 시간(14일) 후의 한달 후, 균류에 노출된 여하한 플레이트들 상에서 성장은 관찰되지 않았으며, 모든 대조구 플레이트들 상에서는 성장이 관찰되었다.
하기의 실시예들의 실험들은 본 발명의 조성물들의 다양한 실시형태들 및 이들의 이용을 설명한다. 성분의 양, 농도 또는 비율이 제한되지 않는 하나의 대표적인 조성물은 표 10에 제공된다. 여하한의 실시형태에서, 이소부티르산의 양은 같은 양(level) 또는 대략적인 양으로 프로피온산으로 대체될 수 있다. 여하한의 이러한 실시형태들 또는 다른 실시형태들에서, 에탄올은 아세트산으로 대체될 수 있거나 및/또는 2-부탄온은 아세트산 또는 프로피온산으로 대체될 수 있다. 또한, 다양한 에스테르들은 기입된 에스테르들의 이성질체들 또는 동족체들(예를 들어, 제한 없이 프로피온산에 대하여, 3-메틸부틸 에스테르, 2-메틸부틸 에스테르)로 대체될 수 있다. 하기의 실시예들에서 관찰되는 결과들은 표 10에 기입된 화합물들의 조성물로 얻어졌다. 이와 일치하여, 다양한 다른 조성물들이 비슷한 효과들을 가져 함께 사용될 수 있다.
표 10. 해로운 미생물들의 제어에 유용한 식품 및 향미 화합물들의 조성물.
Figure pct00011
*각각의 이러한 화합물들은 실온에서 액체로 존재하며, 실온 또는 그 밖에도 증발을 가능케 하는 온도들 및 압력들에서 이미 증발한 액체 조성물로 대개(one with another) 제공되어 사용될 수 있다.
식물 병해 제어에 사용되는 FFC 조성물.
실시예 8a
시험 유기체를 억제하고 죽이는 FFCs의 상대적인 능력이 측정되었다. 시험 용액들은 표 10에 주어진 상대적인 비율들로, 바이알들 내에 화합물들을 위치시킴으로써 제조되었다. 시험 화합물(20 ㎕)은 PDA를 함유하는 페트리 플레이트의 중앙에 놓여진 사전멸균된 마이크로컵(microcup)[4×6 mm] 내에 위치된다. 사용되지 않는 경우에, 혼합물은 0 ℃에서 저장되었다. (시험 균류 당 3개 이상의 한천 블럭들의) 3 mm3 한천 블럭들 상에서 새롭게 성장하고 절제되는 (표 9에 언급된 바와 같이) 시험 유기체들은 마이크로컵에서 2 내지 3 cm에 위치되었으며, 파라필름의 2겹으로 덮어 싸여진다. 측정들은 주어진 시한 후에 한천 블럭들의 가장자리에서 균사체의 성장에 대해서 이뤄졌다. 그러나, 게오트리쿰 칸디둠의 경우에, 이들은 줄무늬로 배열되었으며, 접종된 한천 플레이트의 본래 부분에서 다시 줄무늬로 배열함으로써 새로운 눈에 띄는 성장 및 생존 능력에 대하여 조사되었다. 또한, 시험 용액이 없이 설정된(set up) 적당한 대조구들은 마이크로컵 내로 위치되었다. 20 μl의 FFC 혼합물 상에서의 시험은 비교할 수 있는 결과들을 위해 2번 이상 이뤄졌다.
실시예 8b
시험 미생물들의 생존 능력은 무균적으로 작은 한천 블럭을 제거하고, 이것을 PDA 플레이트 상에 위치되었으며, 1 내지 3일 후의 성장을 관찰함으로써, 또는 새로운 PDA 플레이트 상에 게오트리쿰 칸디둠을 다시-줄무늬로 배열함으로써 이뤄졌다. 이런 방식으로, 미생물들의 생존 능력이 평가될 수 있었다. 표 11a에 나타낸 결과들은 하기에 기입된 유기체들이 특정 FFC 조성물에 의해 모두 억제되며, 대부분의 경우에는 이들에 노출시킴으로써 사멸되는 것을 나타낸다. 이들은 아스페 르질루스 니게르, 치즈 상의 페니실리움종, 세르코스포라 베티코라, 베르티실룸 다알리아, 피시움 울티멈, 피토프토라 팔미보라, 마이코파라엘라 피지엔시스, T 라이 족토니아 솔라니, 아스페르질루스 푸미가투 스, 게오트리쿰 칸디둠, 트리코더마 비리디, 영지버섯종, 커불래리아(Curvularia)종 및 보트리티스 알리(Botrytis alii)를 포함한다. 따라서, 적당하게 적용된 경우, FFC 조성물은 이러한 병원성 미생물들을 제어할 수 있는 능력을 가진다. 이러한 결과들은 많은 여타의 병원성 미생물들이 이러한 혼합물에 의해 억제되거나 사멸될 수 있음을 나타낸다.
표 11a. 파라필름으로 봉해진 페트리 플레이트 내의 감자 한천 배지(PDA) 상에서 23 ℃로 2일간 20 ㎕의 혼합물에 노출되는, 본 발명의 대표적인 FFC 조성물에 대한 식물의 병원성 미생물들의 감수성 및 다양한 식물의 병원성 미생물들의 간략한 표. 최종적으로, 시험 미생물이 더해진 한천 플러그들은 PDA의 일반적인 페트리 플레이트 상에서 제거 및 배치 후에 생존 능력에 대하여 시험되었다.
Figure pct00012
실시예 8c
표 11a의 데이터를 참조하여, 몇 가지 예시들에서 이용되는 FFC 조성물의 활성 프로파일은 무스코도르 크리스판스 및 이의 휘발성 부산물의 발산물들과 비교하여 상이하고 및/또는 강화된 항균성 효과를 나타냈다.
실시예 8d
비교할 수 있는 기술들 및 절차들을 사용하고, 이전의 실시예를 참조하여, 동일한 병원체들이 프로피온산 증기로 처리되었다. A 및 B란에 재현된 표 11a의 데이터로 하기의 표 11b에 비교적인 결과들을 나타내며, 단독으로 관찰된 프로피온산의 효과들을 C란(% 억제)에 제공되었다. 20 μl의 프로피온산의 양은 본 발명의 여하한 실시형태들에서 프로피온산의 레벨과 비교할 수 있다. 프로피온산은 여하한 항균성 효과를 가지는 것으로 알려진 이전 기술분야의 다양한 단독의 화합물들의 대표이다. 그러나, 표 11b의 비교적인 데이터에 의해 증명된 바와 같이, 본원 조성물들은 본 발명의 맥락 밖의 이전 기술분야의 단독 성분과는 관계없이 기대되는 이상 및 능가하는 새롭고 상승작용적인 결과들을 제공하였다. 본 명세서에 나타낸 바와 같이, 이전 기술분야는 잘해야 그저 억제할 뿐이었지만, 본 발명의 조성물들은 시험된 많은 병원체들을 제거(즉, 사멸)하였다. 유사한 결과들이 여타의 이러한 이전 기술분야의 단독 화합물들/조성물들과 비교함으로써 얻어질 수 있다.
표 11b. 프로피온산에 대한 향상된 항균성 활성을 나타내는 비교적인 결과들.
Figure pct00013
* 100 % 억제, 생존 능력은 결정되지 않음(ND).
처리되는 투베르쿨로시스 및 여타의 사람의 병원체들에 대한 FFC 조성물들의 사용
실시예 9a
마이코박테리움 투베르쿨로시스 단리체들의 4가지 임상적인 약물 저항성 균주들(5901867, 50001106, 59501228 및 3081)은 FFC 조성물에 노출되었다. 각각의 단리체에 대하여, 10 μL의 배양물이 7H11 한천 플레이트의 중간에 놓여졌으며, 그 후에 멸균된 플라스틱 루프(loop)를 가지는 플레이트의 전체 표면에 접촉되도록 균등하게 퍼지게 하였다. 0.65 ml의 미량 원심분리기(microcentrifuge) 튜브들[마이크로 캡들(micro caps)]에서의 뚜껑들이 잘려지고, 나사형 뚜껑(screw-cap lid)을 가지는 압열 멸균될 수 있는(autoclavable) 튜브 내부에서 5분간 121 ℃에서 압열 멸균되었다. 멸균된 겸자가 마이크로 캡을 제거하는데 사용되었고, 접종된 플레이트의 중심에 위치되었다. (각각의 단리체 중의 하나의) 대조구 플레이트들은 마이크로 캡을 제공하지 않았다. 각각의 단리체의 3개의 플레이트들이 만들어졌으며, 5, 10 또는 20 μL의 FFCs가 각기의 플레이트들의 각각의 3개의 마이크로 캡들 내에 위치되었다. 그 후에, 플레이트들은 적신 종이 타원을 가지는 집록식의(zip-lock) 밀봉되는 플라스틱 백 내에 위치되었으며, 대략 28일간 36±1 ℃에서 배양되었다. 대략 48 시간의 노출 후에, 마이크로 캡이 제거되고 처분되었으며, 플레이트들이 배양기로 되돌아갔다. 종이 타월들은 자주 체크되었으며, 배지의 탈수를 방지하기 위하여 다시-적셔졌다. 모든 대조구 플레이트들에서 성장이 있었다. 5 및 10 μL의 휘발성 물질들에 노출된 모든 플레이트들은 성장이 있었다. 20 μL의 휘발성 물질들에 노출된 오직 하나의 단리체(50001106)만 성장이 있었다. 마이코박테리움 투베르쿨로시스의 각각의 단리체가 이 유기체의 임상적인 약물 저항성 균주임을 주목된다. 모든 실험들은 미국 정부의 승인된 생물학적으로 안전한 실험 조건들로 실행되었다.
대조구 플레이트들 및 상기 플레이트들이 2008년 4월 14일에 위치된 5 및 10 μL의 휘발성 물질들에 노출되었다. 20 μL의 휘발성 물질들에 노출된 플레이트들은 2008년 4월 22일에 위치되었다. 모든 플레이트들이 여러번 체크되었다. 마지막 체크는 2008년 5월 19일에 실시되었으며, 살아남지 않은 이러한 유기체들은 표 12에서 "--"로 나타내었다.
표 12. 약물 저항성 마이코박테리움 투베르쿨로시스의 성장에 있어서 FFCs의 억제 효과들
Figure pct00014
또 다른 TB의 균주에 대한 본 발명의 FFC 조성물의 실제적인 효과들은 도 1에 나타내었다: 마이코박테리움 투베르쿨로시스의 균주(110107)에 대한 FFCs의 사멸 효과. 왼쪽의 플레이트는 48시간 동안 20 ㎕의 FFCs로 처리되지 않은 대조구 플레이트이며, 반면에 오른쪽의 플레이트는 48시간 동안 처리되었으며, 두 플레이트들 모두 이후에 36 ℃에서 28일간 배양되었다. 이러한 실험들에서, FFCs는 마이코박테리움 투베르쿨로시스의 ¾의 약물 저항성 단리체들을 죽일 수 있음이 명백하다. 현재, 결핵의 치료에 있어서 동물 및 결국에는 사람에게 이러한 FFC 조성물들을 사용하는 시도들이 존재할 가능성이 있다.
실시예 9b
이전 실시예의 데이터와 동일하게, 본 발명의 폭 넓은 측면들이 증명될 수 있다. 생육할 수 있는 배양물들 및 적당한 배지는 본 기술분야의 전문가들에게 잘-알려진 물질들 및 기술들을 사용하여 준비된다. 예를 들어, (예를 들어, 액체 조성물의 직접적인 접촉 또는 이들로부터의 발산물들에 의한) 본 발명의 FFC 조성물로의 노출은 다음의 대장균류(coliform bacteria)의 성장 억제 또는 사멸에 기인할 수 있다[그람 염색 및 형태학]: 대장균[그람 음성, 막대형(rod)], 살모넬라 엔트라이디스(그람 음성, 막대형), 슈도모나스 에루지노사(그람 음성, 막대형), 황색포도상구균[그람 양성, 구형(cocci)] 및 리스테리아 모노사이토제니스(Listeria monocytogenes)[그람 양성, 막대형].
마찬가지로, 이러한 결과들은 또한 바실러스 세레우스(그람 양성, 막대형) 및 클로스트리디움 보툴리눔(그람 양성, 막대형)을 포함하나 이로 제한되지 않는 다양한 여타의 그람-음성 및/또는 그람-양성 박테리아에 의해 얻어질 수 있거나 증명될 수 있다.
실시예 10
IC50은 무스코도르 크리스판스의 휘발성 부산물을 모방한 인공적인 조성물에 대하여 시험되는 일부의 시험 유기체들로 계산되었다(표 1 참조). 표 12를 참조하여, 모든 시험 유기체들은 15 μL의 인공 혼합물의 이용으로 100 % 억제되었으며, 이들 중의 몇 가지는 가능한 적은 양의 10 μL에 의해 사멸되었다. 버티실리움 다알리아, 보트리티스 시네레아 및 아스페르질루스 푸미가투스는 심지어 혼합물의 최대 부피(30 μL)에 의해서 사멸되지 않았으나, 3개 모두는 10 또는 15 μL의 시험 화합물에 의해 100 % 억제되었다. 가장 민감한 유기체는 피시움 울티멈이었고, 이는 10 μL에서는 사멸되었으며 2.5 μL에서는 100 % 억제되었고, 따라서, 피시움 울티뭄 및 보트리티스 시네레아는 사실상 동일한 IC50들을 소유하나 하나는 사멸되고 다른 하나는 사멸되지 않으므로, IC50 수치는 반드시 휘발성 물질들의 사멸 능력을 반영하지 않는 경우이다(표 13).
표 13. 다양한 식물 병원체들 상에서의 무스코도르 크리스판스의 휘발성 부산물의 성분들의 인공적인 혼합물의 IC50들. 1 μL 내지 30 μL의 범위의 혼합물의 양이 시험 플레이트의 중앙에 있는 멸균 플라스틱 웰(well)에 첨가되었고, 병원성 유기체들이 플레이트 가장자리 주변에 위치되었다. 생존 능력은 48시간 후에 평가되었으며, 혼합물이 첨가되지 않았으나 멸균 웰에 위치된 대조구 플레이트와 비교되었다. 상기 기간 후의 성장을 나타내지 않는 여하한 유기체들은 100 % 억제된 것으로 결정되었으며, 48시간 후에 성장을 나타내지 않으며, PDA 상으로 단리한 후에 뒤이어 48시간 후에 성장을 나타내지 않은 것은 사멸된 것으로 평가하였다. IC50의 산출은 페트리 디쉬의 전체 공기 부피(50 mL)로 50 % 억제를 야기하도록 요구되는 인공 혼합물의 양(μL 단위)을 나눔으로써 결정되었다.
Figure pct00015

미생물의 부패를 제어하기 위한 쓰레기의 처리에 대한 FFC 조성물의 사용.
실시예 11
일반적으로 쓰레기로 간주되는 물품들의 인공적인 혼합물은 2개의 애모 카트리지(ammo cartridge) 상자들 내로 모아졌다. 이러한 물품들은 곡류 찌꺼기들(waste cereal items), 꽃의 부분들, 육류 찌꺼기, 신문지 섬유 및 여타의 다양한 찌꺼기들로 구성되었다. 하나의 박스 내에는 0.2 ml의 상기에 언급된 FFC 조성물을 함유하는 작은 비커가 놓여졌다. 다른 박스 내에는 FFCs가 없는 비커가 놓여졌다. 박스 모두는 80 ℉에서 10일간 배양되었다. 상기 시간이 끝나고, 박스가 열려졌으며 조사되었다. FFCs가 있던 박스에서는 부패가 일어나지 않았음이 명백하였다. 반면에, 대조구 박스에서는 완전히 대량의 부패가 일어났다. 쓰레기 처리에 FFC 조성물의 사용은 효소(ferment)가 쓰레기를 메탄와 같은 에너지 관련 생성물로 바꾸는 전세계의 설비에 운송되는 동안, 부패로부터 온전한 쓰레기로 지키는 기회이다. 도 4는 이런 실험의 조건들 하에서 FFC 조성물이 미생물 부패로부터 쓰레기를 보호하는 것을 도시한다.
균류의 부패를 제어하기 위한 치즈의 처리를 위한 FFC 조성물의 사용
실시예 12
10 ml의 상기에 언급된 FFC 조성물을 함유하는 바이알이 10×10 인치의 깨끗한 플라스틸 사란(Saran)® 랩의 조각을 적시는데 사용되거나 및/또는 이와 함께 또는 내에 병합되었다. 플라스틱 랩이 6일 동안 FFC 조성물로 적셔졌으며, 흠뻑 젖어 건조하고, 그 후에 페니실리움종의 균류로 완전히 접종된 치즈 중의 치즈 조각을 덮는 래퍼(wrapper)로서 사용되었다. 또 다른 실험에서, 치즈 조각은 균주로 접종되었고, 그 후에 일반적인 사란® 랩으로 둘러싸여 졌으며, 그 후에 10 ㎕의 FFCs가 주입되었다. 적절한 대조구들은 페니실리움종 단독, 래퍼로만 처리, FFCs 단독 및 대조구(무처리)로 도면 상에 나타내었다. 실험용 치즈 조각들은 실온에서 1주일 동안 배양되었으며, 그 후에 각각의 치즈의 부분들이 실험실 사람들에 의해 시식-시험되었다. 냉장고 내에 저장된 치즈의 새롭게 잘려진 신선한 조각과 비교할 경우, 시험용 치즈의 부패(prostitution)에 관하여 이 방식의 저장은 부작용이 없음이 주목된다. 전체적으로 균류가 만연한 치즈 조각을 먹지 않았다. 도 2에서, 래퍼 하에서 또는 래퍼로 처리된 FFC 조성물이 페니실리움종에 의해 치즈의 콜로니화(colonization) 및 부패로부터 치즈 조각을 완전히 보호를 야기하였다는 것이 명백하였다. 이는 래퍼로 처리하고, 평범한 사란 랩핑된(wrapped) 치즈 단독하에서는 10 ㎕의 FFCs를 주입하는 것이 옳다.
균류의 부패를 제어하기 위한 식품 및 식물 부분들(예를 들어, 식물의 생성물)에 대한 FFC 조성물의 사용
실시예 13a
몇몇의 마들이 이러한 실험들을 위하여 보급되었다. 미생물들로 오염되어 결국에 부패를 일으키는 표면은 접종원(inoculum)이 충분히 풍부할 것이라고 생각되었다. 그래서, 2개의 마 조각들이 0.2 ml의 FFCs를 함유하는 작은 비커가 존재하는 뚜껑으로 밀봉된 플라스틱 박스에 위치되었다. 대조구 박스는 FFCs를 포함하지 않는 비커를 함유하였다. 그 후에, 밀봉된 박스들은 10일간 실온에서 유지되었고, 그 후에 조사되었다. 처리된 마 조각들에서는 표면 및 더 심한(deeper) 오염으로 발전되지 않았으며, 대조구 마들은 도 3에 도시된 바와 같이 다양한 부분들의 표면 손상 및 무지한(insipient) 부패로 발전하였음이 명백하였다: 처리되지 않은 마는 왼쪽, 오른쪽은 FFCs로 처리됨. 왼쪽의 마의 상부 끝에 균류 부패의 큰 부분을 주목.
실시예 13b
관련되는 최종-용도의 적용에 따라서, FFC 조성물 및/또는 이의 성분은 수확된 과실 또는 채소 생성물에 이들 상의 여하한의 자연적 광택(waxy) 또는 보호 코팅의 제거를 보충하기 위하여 적용될 수 있다. 예를 들어, 줄기들을 자름으로써 수확된 눌려 찌그러진 그리고 이와 유사한 생성물이 미생물의 성장을 제어/억제하고, 상품성(marketability)을 향상시키며, 유통기한을 연장시키기 위하여 FFC 조성물로 처리(예를 들어, 스프레이 적용)될 수 있다.
실시예 14
표 2 내지 7 및 표 10에 설명된 종류의 조성물들에 따라서, 본 발명의 합성적인 FFC 조성물은 피시움 울티멈, 라이족토니아 솔라니 AG 2-2 및 아파노미케스 코클리오이데스(Aphanomyces cochlioides)에 의해 야기되는 사탕무의 실생식물의 질병들, 및 근류선충병(root knot nematode)의 제어를 위한 살아있는 무스코도르 알부스, 토마토[라이코펄시콘 에스쿨렌튬(Lycopersicon esculentum)]에 대한 멜로이도기네 인코그니타(Meloidogyne incognita)의 사용에 대하여 순조롭게 비교되었다. 합성적인 조성물은 3가지의 모든 사탕무 병원체들에 대한 살아있는 균류의 녹말-기반 제형물과 동일한 모잘록병(damping-off)의 대조구를 제공하였으며, 토마토 뿌리들에 대한 근류-선충혹병(root-knot galls)의 횟수를 상당히 감소시켰다. 이용되는 FFC 조성물에 관한 최근 연구들은 토양 운반체/매질 성분의 2 μl/cm3 내지 0.75 μl/ cm3의 농도들이 사탕무에 대하여 각각 라이족토니아 및 피시움 모잘록병에 대해 좋은 제어를 제공하는 것을 나타낸다. 5 μl/ cm3 농도의 모래는 멜로이도 기네 인코그니타에 대하여 24시간 내에 100 % 치사율을 제공한다. 대조적으로, 생체 외에서의 연구들을 사용하여, 제공되는 생물학적 합리 살충제(biorational)의 이러한 동일한 비율은 모래의 5 g/l로 적용되는 보리 제형 주변에 만연한 무스코도르 알부스보다 근류-선충혹병이 더 적다.
실시예 15
코리네박테리움 미치가네세(Corynebacterium michiganese)는 조직이 시들고 부패에 의하여 심각한 토마토 손실을 야기한다. 이런 박테리아의 본래의(authentic) 배양물은 영양성 육즙 한천(nutirnet broth agar) 상에 줄무늬로 배열되었으며, 작은 캡이 플레이트의 중간에 위치되었다. 캡 내로 20 ㎕의 인공적인, 실험실-제조된 본 발명의 FFC 조성물이 위치되었다. 대조구 플레이트는 FFC 조성물을 함유하지 않았다. 플레이트들은 24시간 동안 배양되었으며, 그 후에 조사되었다. FFC-처리된 플레이트 상에서 박테리아의 성장은 없었다(도 5 참조). 이처럼, 본 발명의 FFC 조성물은 토마토 종자, 식물 또는 생성물을 처리하는데 사용될 수 있으며, 이로 제한되지 않는다. 대안적으로, FFC 조성물은 미리-제공되는(pre-bed) 토양관주(soil drench)로서 물과 혼합될 수 있다.
실시예 16
이전의 실시예들을 참조하고, 몇몇의 상기의 실시예들과 동일하게, 본 발명의 FFC 조성물의 범위는 그 중에서도 사탕무, 토마토, 양파, 곡류, 바나나 및 플랜테인 및 감귤류에 영향을 미치는 질병들을 포함하나 이로 제한되지 않는 이러한 질병의 활성적인 질병 상태들을 치료하거나 예방하는데 사용될 수 있다.
좀 더 일반적으로, 본원 조성물들 및 방법들은 생활 주기 단계(예를 들어, 유주자 등), 감염의 발전, 성장 또는 면적에 관계없이, 균류 또는 박테리아 미생물들의 존재하에서 예방적이든 아니든 간에, 종자, 식물, 생성물 및/또는 관련되는 식료품의 향상된 생존 능력 및 처리에 관한 것일 수 있다. 따라서, 본 기술분야의 전문가들에 의해 이해되는 바와 같이, 이러한 조성물들은 형태의 개의치 않고(예를 들어, 분말, 과립, 액체, 미스트, 현탁액, 발산물, 페이스트, 젤, 코팅 등), 종자, 실생식물 또는 식물(예를 들어, 뿌리, 줄기, 잎 등)과 접촉하거나 또는 표면 상에, 또는 (예를 들어, 수확 전 또는 후의) 이들의 생성물에 적용될 수 있거나 및/또는 포함될 수 있다.
실시예 17
FFC 조성물들 및/또는 이들의 성분들은 단독 또는 여타의 다양한 조성물들 내에 병합되어, 가금류, 생성물 및 관련되는 식품-가공 산업들에서 다양한 최종-용도의 적용들에 따라 사용될 수 있다. 이러한 몇몇의 비-제한적인 응용들은 하기의 실시예들에 제공된다.
실시예 17a
표 2 내지 7 및 표 10에 설명된 종류의 조성물들에 따라서, 본 발명의 FFC 조성물은 난제품(egg product)들과 같은 종류의 것들을 처리하는데 사용되며, 스크램블 에그(scrambled egg) 믹스 및 스크램블 에스 믹스액, 콜레스테롤이 저감된 난제품 및 난액 제품 및 이들의 혼합물, 그리고 약 10 % 미만의 계란 고형분을 함유하는 관련된 제품, 알껍질 및 탈콜레스테롤화 된 계란 성분을 포함하나 이로 제한되지 않는 계란 성분과 함께, 액체이든지 아니든지 간에, 설탕, 시럽용 고체, 시럽, 덱스트로스 및 덱스트린 및/또는 검(gum) 및 점증제를 포함하는 전란 및 전란액, 강화된 전란 및 강화된 전란액, 염분 처리된(salt) 전란 및 염분 처리된 전란액, 당 처리된(sugar) 전란 및 당 처리된 전란액, 그리고 이러한 제품들의 혼합물들을 포함하나 이로 제한되지 않는다. 이러한 용어들은 본 기술분야의 전문가들에 의해 이해될 것이며, 수용되는 산업 및 규정된 사용량에 따라서 일반적인 의미를 갖는다.
실시예 17b
마찬가지로, 이소부티르산에 대하여 적어도 부분적으로 치환된 프로피온산을 이용하나 이로 제한되지 않는, 본 발명의 다양한 FFC 조성물들은 연장된 유효기간(ESL)의 액체 난제품의 제조 및/또는 포장에 사용될 수 있으며, 전란, 스크램블 믹스, 난황 및 달걀 흰자액 제품들을 포함하나 이로 제한되지 않는다.
실시예 17c
마찬가지로, 본 발명의 다양한 FFC 조성물들이 깨진, 빈 달걀 껍질의 가공에 사용될 수 있다. 본 기술분야에서 이해되는 바와 같이, 사용가능한 기술들 및 가공 설비를 사용하여, 단독으로 또는 또 다른 조성물의 일부분에 병합되는, FFC 조성물 및/또는 이의 성분이 추가적인 가공, 예를 들어 건강식품 내로 가공되기 전에 빈 쉘(shell)들에 적용(예를 들어, 스프레이)될 수 있다. 마찬가지로, 본 발명의 하나 이상의 조성물들은 본 기술분야에 알려진 장치들 및 기술들을 사용하여, 가금류 도체(poultry carcass), 고기 또는 관련되는 고기 제품에 적용되거나, 병합되거나, 또는 그 밖에 사용될 수 있다. 연장선으로, 또한 본 기술분야의 전문가는 본원 발명이 또한 하나 이상의 하기의 실시예들에서 도시되는 바와 같이, 다른 유형의 동물의 도체, 고기, 가공된 고기 제품들 및 여타의 모든 신선한 동물의 형태들(예를 들어, 포유동물, 조류, 어류, 달팽이, 대합조개, 갑각류, 해산물 및 다른 식용가능한 종들)에 이용될 수 있음을 이해할 것이다.
실시예 17d
이전의 실시예의 연장으로서, 이러한 FFC 조성물은 박테리아/균류의 성장을 억제하기 위하여 가공되는 건강식품(예를 들어, 약용 및 항료 캡슐들 또는 정제들) 내로 병합될 수 있다.
실시예 17e
이전 실시예들이 다양한 후속적인 가공의 적용들을 도시하였으나, 본원 발명은 계란 및 가금류 생산물의 맥락에서 좀 더 폭 넓게 이용될 수 있다. 제한 없이, 본 발명의 FFC 조성물들 또는 관련되는 성분들은 여하한의 가금류 또는 계란 생산 설비에 도입될 수 있거나 및/또는 여하한 장비 또는 이들과 관련되는 기계에 적용될 수 있다. 예를 들어, 우리(coop) 또는 재배/산란 설비의 대기 또는 표면 처리는 공기로 운반되는 및 표면-퇴적된 오염 물질들, 그리고 이들 상에서의 후속적인 미생물의 성장을 제어, 감소 및/또는 억제시킬 수 있다.
실시예 18
FFC 조성물 또는 이의 하나 이상의 성분들 다양한 여타의 가공되는 식료품들 내로 병합될 수 있으며, 그 밖의 미생물 성장을 지지하는 수분 활성(water activity)을 가지는 식료품들을 포함한다. 예를 들어, 이러한 조성물 또는 성분은 부식물(humus), 땅콩 버터 및 여타의 이러한 스프레드(spread), 디프(dip) 및 혼합물 내로 병합될 수 있다. 땅콩 재배 및 가공업에 관련하여, 본 발명의 조성물들 및 관련되는 성분들은 껍질들을 까지 전후, 처음에 땅콩이 세척된 후의 땅콩 및 관련되는 가공 제품(예를 들어, 땅콩 버터) 및/또는 포장 설비 및 포장재들에 적용될 수 있다.
실시예 19
마찬가지로, 본 발명의 FFC 조성물/성분(예를 들어, 상기의 표 2 내지 7 및 표 10의 하나 이상의 조성물들, 또는 본 명세서에서 설명되는 종류의 변이체들)은 제형(예를 들어, 로션, 연고, 크림 등)에 관계없이 다양한 스킨 케어 또는 트리트먼트 제품들 내로 병합되거나 사용될 수 있다.
실시예 19a
예를 들어, 여드름은 일반적으로 피부의 모낭들을 침입하는 하나 이상의 박테리아 종들에 의해 야기된다. 본 발명의 추가적인 사용을 나타내자면, 본 발명의 프로피온산-치환된 FFC 조성물의 수성 제형이 제조되며, 청소년기의 남성에 존재하는 연령-관련 여드름을 치료하는데 사용된다. 3주간 3일마다 적용하였더니 시각적으로 관찰했을 때, 여드름용 로션의 횟수 및 세기가 상당히 감소되었다.
실시예 19b
소비자 및/또는 건강 관리 제품의 맥락에서 본 발명의 또 다른 사용을 나타내자면, 본 발명의 FFC 조성물은 한 쪽의(counter) 스킨 크림 제조물에 대하여 대표물 내에 (중량으로 대략 2 %로) 병합된다. 도 6을 참조하여, PDA 플레이트가 제조되며, 왼쪽 상단에 (FFC 성분 또는 조성물이 없는) 대조구 크림; 오른쪽 상단에 박테리아 세포들로 오염된 대조구 크림; 왼쪽 하단에 FFC 조성물로 "처리된" 크림; 및 오른쪽 하단에 박테리아 오염물로 처리된 크림이 하루 동안 배양되었다. 나타낸 바와 같이, 이러한 스킨 크림 제품 내의 성장은 본 발명의 FFC 조성물의 적당한 농도를 병합시킴으로써 예방된다.
실시예 20
마찬가지로, 본 발명은 구강 위생, 관리 및 처치 제품들과 같은 종류의 것들과 관련하여 이용될 수 있다. 제한 없이, 하기의 실시예들은 상기에 설명된 종류의 프로피온산-치환된 FFC 조성물의 이러한 사용을 나타낸다. 대안적으로, 상기의 표 2 내지 7 및 표 10의 조성물 또는 본 명세서 다른 곳에서 설명되는 바와 같은 이의 변이체들에 따라서 사용될 수 있다.
실시예 20a
예를 들어, 이러한 하나의 구강 관리/위생 제품을 도시하자면, 구강 세정제/양치액(mouthwash/rinse) 제품은 1 %의 이러한 FFC 조성물을 사용하여 제제화된다. 이러한 제품은 이러한 FFC 조성물을 시판용으로-사용가능한, 기성품인(off-the-shelf) 구강 세정제/양치액 제품 내로 병합시킴으로써 제조된다. 농도 또는 용량(dose level)에 관계없이, 본 발명의 FFC 조성물들은 또한 치약/겔 또는 관련되는 잇몸, 입, 구강 또는 치아 관리 제품 내로 병합될 수 있다.
실시예 20b
편평태선(Lichen planus: LP)은 구강 내부 또는 여타의 점막들 상에서 나타날 수 있는 피부의 자가면역 질환이다. 점막(membrane)들이 불안정하므로, 박테리아 또는 균류가 이러한 부위들에 자리 잡을 수 있고, 조직들의 팽창, 출혈, 감염, 홍조 및 통증을 야기한다. 이런 질병에 있어서 박테리아의 외부와 연관되는 원인을 감소시키기 위하여, 구강 세정제품은 이러한 FFC 조성물의 1 % 수성 용액을 함유하여 제조된다. 환자의 입이 3 내지 4분간 매일 2번 내지 3번 세정되었으며, 그 후에 뱉었다. 처치들이 적용되기 전에, 그리고 3주간의 처치 후에 사진들을 찍었다. 3주 후에, 결과들은 잇몸의 색 및 다른 점막의 색이 거의 정상으로 돌아왔을뿐만 아니라 입과 잇몸의 통증이 거의 전체적인 감소를 동반하였으며, 거의 전체적인 잇몸 홍조로 감소하였음을 나타내었다. 환자는 이전 경험과 비교하여, 거의-전체적인 통증/출혈의 중단 및 LP에 대한 대부분의 경감을 보고하였다.
실시예 20c
기성품인 양치액 내의 1 %의 상기에 언급된 FFC 조성물의 용액은 치태(dental plaque)를 감소시키고, 구강 문제들과 관련된 박테리아로부터 야기되는 다른 문제들을 치료하는데 사용된다. 2개월간 3 내지 4번 양치액/일로 매일 사용하여 치태의 발생(build-up)이 거의 없거나 생기지 않았다. (실질적으로는 치과의사에 의해 적혀진 기록으로부터) 처음에는 붉고, 팽창되며, 그리고 쉽게 피가 난다고 기록된 잇몸이 현재 색이 정상으로 나타나며, "검진(explorer)" 기구로의 조사에 의해 피가 나지 않았다.
실시예 2 Od
이러한 FFC 조성물의 효과성을 확인하기 위하여, 이전 실시예로부터 기인한 침(mouth spittle)이 영양 한천 플레이트의 한쪽 면에 위치되었으며, 비-FFC의 시판용 양치액에서의 침은 동일한 플레이트의 다른쪽 면에 위치되었으며, 비-세정된 침이 또 다른쪽 면에 위치되었다. 그 후에, 침들은 2일간 배양되었다. 비교하자면: 비-세정된 침은 높은 박테리아 부하(bacterial load)를 가졌고; 예상한 바와 같이, 비-FFC로 세정된 침은 감소된 박테리아 부하를 가졌으나; FFC-세정된 침은 박테리아가 검출되지 않았다.
실시예 2 Oe
또 다른 실시예에서, 구강 외과 의사는 구강 수술 전에 FFC 조성물(예를 들어, 1 %의 시판용 양치액/구강 세정제품)을 시험하였다. 환자에게 한천 플레이트(영양 한천) 상의 비-처리된 침을 건넸으며, FFC-세정된 용액으로 세정하였고, 또 다른 한천 플레이트 상의 침을 건넸다. 2 내지 3일의 배양 후에, FCC-세정되어 처리된 플레이트 상에서는 박테리아 콜로니들이 없었으며, 치아 또는 다른 경구 감염들을 억제하거나 치료하기 위한 경구 수술 전후에 사용됨을 나타냈다.
실시예 21
젖소들의 유방염은 젖꼭지(utter)와 관련되는 박테리아의 복합체에 의해 야기된다. 본 발명의 다양한 비-제한적인 실시형태들에 따라서, 하기에 설명되는 종류의 FFC 조성물 또는 람노리피드 변형 FFC 조성물이 박테리아 감염 및 유제품의 오염의 가능성을 감소시키기 위하여 젖을 짤 때에 젖꼭지(utter)에 적용될 수 있다.
실시예 22
본 발명의 다양한 FFC 조성물들이 산업적/약학적으로 중요한 생물막(biofilm)들에 대한 미생물 부하를 감소시키기 위하여 사용될 수 있다. 후자에 관하여, 치과용 보철에서부터 인공 관절까지의 물품들이 수술적으로 삽입되기 전에 본 발명의 FFC 조성물로 처리될 수 있다.
실시예 23
본 발명의 FFC 조성물들은 특히 습한 환경에 노출되는 의류 물품들[즉, 가죽제품, 신발, 부츠, 가죽끈(strap), 타이, 벨트]의 균류 및 박테리아의 부패를 제어하는데 사용될 수 있다. 예를 들어, 상기에 설명된 종류의 0.2 ml의 1 % FFC 조성물이 전체적으로 젖은 부츠에 적용된다. 상기 부츠는 몇 시간 동안 생기는 증기를 유지하기 위하여 봉해졌으며, 그 후에 공기로 건조되었다. 결과들은 부패를 나타내지 않았으며, 부츠는 남아있는 곰팡이 냄새 없이 건조되었다.
실시예 24
본원 발명의 조성물들은 다양한 FFC 성분들을 포함할 수 있으며, 본 발명에 정통한 본 기술분야의 전문가들에 의해 이해된 것처럼 제제화될 수 있다. 제한 없이, 최종-용도의 적용 또는 처리의 관계없이, 하나 이상의 본원 FFC 성분들 및/또는 관련되는 조성물들은 다양한 항세균성 또는 항진균성 조성물들 내로 병합될 수 있다. 제한 없이, 이러한 조성물은 본 기술분야에 알려진 종류의 항세균성 및/또는 항진균성 성분들과 함께 또는 단독적인 람노리피드 계면활성 성분을 포함할 수 있다. 후자에 관하여, 이러한 조성물들은 시린고마이신(syringomycin) 및/또는 슈도마이신(pseudomycin) 성분을 포함할 수 있다.
좀 더 상세하게, 본 기술분야의 전문가들에 의해 이해되는 바와 같이, 람노리피드 성분은 미국 특허 제 5,455,232 및 제 5,767,090에 설명된 종류의 하나 이상의 화합물들을 포함할 수 있으며, 이는 본 명세서에서 이의 전문이 참고문헌으로 인용참조된다. 현재 본 기술분야에 알려져 있거나, 또는 장래에 단리되거나 및/또는 특성이 밝혀지든 간에, 이러한 람노리피드 화합물은 본 명세서에 개시되는 구조를 가지거나 다양할 수 있으며, 또한 본 기술분야의 전문가들에 의해 이해될 것이다. 예를 들어, 제한 없이, 산 형태 또는 대응하는 산 염에서 (예를 들어, 슈도모나스 종들 또는 이들의 균주로부터) 합성적으로-유래되거나 자연적으로 발생하든지 간에, 이러한 화합물은 하나 이상의 사카라이드 하이드록시 위치들에서 알킬- 및/또는 아실-치환될 수 있다[예를 들어, 각각 메틸 및/또는 아세틸, 그리고 이들의 분자량이 높은(higher) 동족체들]. 마찬가지로, 모노- 및/또는 디람노 형태든지 간에, 이러한 여하한의 화합물은 소수성 잔기에 의해 다양화될 수 있다. 비-제한적이 예시로서, 도 7a 및 7b를 참조하여, 잔기가 포화, 단일불포화 또는 다중불포화되든지 간에, 소수성 잔기가 양성자화, 여하한 반대 이온(counter ion)의 짝염기로서 또는 그 밖에 유도체화(derivatized)되어 존재하든지 간에, m 및 n은 독립적으로 약 4 내지 약 20의 범위일 수 있다. 본 발명의 폭 넓은 측면들과 일치하는, 이러한 조성물들에 있어서 유용한 람노리피드는 본 발명의 FFC 조성물과 관련하여 얻어지는(resulting) 표면 활성 기능 및/또는 항균성 효과에 의해서 구조적으로만 제한된다. 따라서, 국제 출원 WO 99/43334에 설명된 종류의 구조적 변이체들도 본 발명의 맥락에서 고려되며, 이 출원은 본 명세서에서 이의 전문이 참고문헌으로 인용참조된다. 또한, 도 8 내지 도 9의 비-제한적인 람노리피드 성분들/구조들을 참조한다.
살균제(antimicrobial) 또는 람노리피드의 고유성과 상관없이, 본 발명의 운반체 성분은 물, 알코올, 오일, 가스 및 이들의 조합물들로부터 선택되는 유체를 포함할 수 있으나, 이로 제한되지 않는다. 예를 들어, 이러한 조성물들은 살균제의 양 또는 농도(예를 들어, wt. %) 또는 람노리피드의 양에 관하여 제한되지 않는 동시에, 물 및/또는 알코올을 포함하는 운반체는 효과적인 농도 및 얻어지는 활성뿐만 아니라 원하는 제형, 선적(shipping), 저장 및/또는 적용 성질들을 용이하게 하는데 사용될 수 있다.
이러한 람노리피드 계면활성 성분들, 항진균성 성분들 및/또는 관련되는 조성물들은 특히 실시예 9 내지 15에 있어서 동시-계속 출원 번호(co-pending application serial) 제 11/351,572에 설명된 것들을 포함하나 이로 제한되지 않으며, 2006년 2월 10일에 제출된 출원은 본 명세서에서 이의 전문이 참고문헌으로 인용참조된다. 이러한 람노리피드 계면활성 성분들, 항진균성 성분들 및/또는 관련되는 조성물들은 본원 발명의 하나 이상의 FFC 성분들 및/또는 FFC 조성물들과 함께 사용되거나 병합될 수 있다. 이러한 항세균성 및/또는 항진균성 성분들은 본 기술분야 및 시판용으로 사용가능한 것으로 전문가들에게 알려져 있다. 다양한 람노리피드 성분들 및 관련되는 계면활성 조성물들은 Zonix trademark에 의한 제네일(Jeneil) 생물계면활성제, LLC로부터 사용가능하다.
실시예 25
예를 들어, 이러한 람노리피드-관련된 변이체들을 설명하자면, 조성물들과 같은 종류들은 폭 넓은 범위의 과실들 및 채소들의 수확-후 세척 또는 처리에 관련되거나 사용하기 위하여, 본 발명의 하나 이상의 람노리피드 성분들 및 하나 이상의 FFC 조성물들(이들의 하나 이상의 FFC 성분들)로 제조될 수 있다. 제한 없이, 이러한 조성물에 있어서, (예를 들어, 상기에 언급된 '572 출원에 설명된 바와 같이) 람노리피드 성분은 약 0.1 wt.% 내지 약 99.9 wt.%의 범위의 양으로 존재할 수 있으며, FFC 조성물/성분(예를 들어, 상기의 표 2 내지 7 및 표 10의 조성물들)은 약 99.9 wt.% 내지 0.1 wt.%의 범위의 양으로 존재할 수 있다. 받아들일 수 있는 EPA 규제를 참조하여, 상기에 언급된 Zonix 람노리피드 계면활성제들에 대한 내성 한계(tolerance limit)는 없다. 마찬가지로, 본 발명의 FFC 조성물들/성분들에 대한 내성 한계는 없다. 따라서, 이러한 람노리피드/FFC 조성물들로 처리된 식품은 추가적인 세척없이 소비될 수 있다.
실시예 25a
상기에 따라서, 람노리피드/FFC 조성물은 감귤류 과실을 세척하는데 사용될 수 있다. 이러한 세척/입욕(bath) 조성물 중의 하나는 (물 내의) 8.5 % 람노리피드 용액 및 5 % FFC 용액(예를 들어, 물 내의 표 10의 조성물)을 사용하여 제조된다. 1 갤런(gallon)의 95:5(v/v) 혼합물이 425 갤런으로 희석된다. 본 산업분야에 알려진 또는 그 밖의 수용가능한 주 또는 연방 규정들에 의해 요구되는 절차상의 프로토콜들을 사용하여, 조성물이 표면 및 내부의 박테리아 및 균류를 죽이기 위해--감귤 껍질을 세정하고 스며들게 하는데 효과적으로 사용된다. 효과적인 결과들이 감귤류 과실에 대하여 나타내는 동시에, 본 발명 및 관련되는 람노리피드FFC 조성물들은 여하한의 과실 또는 채소[예를 들어, 제한 없이 블루베리, 토마토, 포도, 양파, 사탕무, 고구마, 사과, 배, 파인애플, 그리고 노니(noni) 및 아카이(acai) 과실과 같은 여타의 열대지방의 생산물 등]의 수확-후 세척 또는 처리에 관하여 동등하게 사용될 수 있다. 본 실시예의 FFC 조성물들로 세척되거나 처리된 과실/아채는 사람이 소비하기에 안전하고 위생적이라고 인정되었다.
실시예 25b
병합되는 람노리피드 성분을 가지든 갖지 않든 간에, 본 발명의 다양한 FFC 조성물들이 박테리아/균류 부하를 감소시키기 위하여 포장 또는 통조림이 되기 전 또는 도중에 다양한 과실 및 채소(예를 들어, 제한 없이, 배, 복숭아, 사과, 토마토, 살구, 망고 등)를 처리하는데 사용될 수 있다.
실시예 26
FFC 성분 화합물들의 원료 공급( Sourcing ). 본 발명의 조성물들에 사용하기 위한 성분 화합물들은 잘-알려지거나 그 밖에 문헌에 설명된 종류의 합성 기술들을 사용하여 제조하거나 시판용품으로부터 얻을 수 있다(예를 들어, 미국 특허 제6,911,338를 참조하고, 이는 본 명세서에서 이의 전문이 참고문헌으로 인용참조됨).
대안적으로, 동물 및 사람의 식품 및 음료 물품들, 개인용 관리 제품들 및 화장품들, 그리고 관련되는 가공 및 제조 기술들을 포함하나 이로 제한되지 않는--여하한의 실시형태들과 관련하여 바람직할 수 있는 것처럼, 본 발명의 GRAS 성분 화합물들 및 관련되는 FFC 조성물들은 발효 기술들을 통하여 자연적으로 유도될 수 있으며, 위스콘신, 사우크빌의 Jeneil Biotech로부터 Flavorzon trademark에 의해 사용될 수 있다. 따라서, 최종-용도 또는 적용에 따라서, 본 발명의 다양한 조성물들은 박테리아성 발효로부터 유래되는 화합물들, 화학적으로 합성되는 화합물들, 그리고 발효 및 합성적으로 유래된 화합물들의 다양한 혼합물들을 포함할 수 있다.
이전을 참조하여, 하기의 실시예들은 본 발명의 하나 이상의 조성물들의 비-제한적인 사용 또는 병합을 설명하고, 이러한 사용 또는 병합은 본 발명에 정통한 본 기술분야의 전문가들에 의해 이해될 것이며, 몇 가지의 이전 특허들의 맥락에서 설명되고, 이들의 각각은 본 기술분야의 전문가들을 본 발명의 이러한 사용 도는 병합을 이해시키고자 설명의 목적으로 본 명세서에 참고문헌으로 인용참조된다.
실시예 27
여타의 실시예들을 설명한 바와 같이, 본 발명의 다양한 조성물들은 인용참조되는 미국 특허 제 6,566,349에 설명된 것과 같은, 과실 음료에 첨가물(additive)로서 사용하기 위하여 제제화될 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 조성물들은 플라보노이드(flavonoid) 화합물 및/또는 산화 방지제(antioxidant)에 대한 대체물로서 또는 조합되어 주스에 첨가될 수 있으며, 또는 제품의 유통 기한을 증가시키기 위하여 가공 전에 과실 및 채소에 미리-적용될 수 있다. 본 발명의 전문가들에 의해 이해되는 바와 같이, 상기 '349 특허의 조성물들은 불필요한 실험 없이 직접적인 방식으로, 결정될 수 있는 여하한의 최종-용도로 적용에 대한 양으로 하나 이상의 본원 발명의 조성물들을 포함하도록 변형될 수 있다.
실시예 28
또한, 본원 발명의 조성물들은 인용참조되는 미국 특허 제 5,866,182에 설명되는 것과 같이, 차(tea) 및 차/과실 혼합 음료들을 보존하는데 사용할 수 있도록 제제화 될 수 있다. 예를 들어, 본원 발명의 조성물들은 K-소프베이트 및/ Na-벤조에이트, 아스코르브산 및 디메틸 디카르보네이트에 대한 대체물로서 또는 조합되어 사용될 수 있다. 본 기술분야의 전문가들에 의해 이해되는 바와 같이, 상기 '182 특허의 음료들(예를 들어, 이의 실시예 1)은 불필요한 실험 없이 직접적인 방식으로 정해질 수 있는 하나 이상의 본원 발명의 조성물을 포함하도록 변형될 수 있다.
실시예 29
또한, 본원 발명의 조성물들은 인용참조되는 미국 특허 제 5,176,903에 설명되는 바와 같이, 발한 억제제 및 데오도란트의 항균성 효과를 보존 및/또는 강화시키는데 사용하기 위하여 제제화될 수 있다. 예를 들어, 본원 발명의 조성물들은 파라벤, 이미다졸리디닐 우레아, 쿼터늄-15, 벤질 알코올, 페녹시에탄올 및 다양한 여타의 적합한 방부제들(예를 들어, 이의 실시예 1 내지 3에 설명되는 것들)에 대한 대체물로서 또는 조합되어 사용될 수 있고, 본 기술분야의 일반적인 기술을 가지는 사람들에 의한 불필요한 실험 없이 직접적으로 결정될 수 있는 양으로 하나 이상의 이러한 조성물을 감성(degradation)에 대한 보호, 유통 기한의 연장 및/또는 효과의 강화를 위하여 이러한 발한 억제제/데오도란트에 첨가할 수 있다.
실시예 30
또한, 본원 발명의 조성물들은 인용참조되는 미국 특허 제 4,548,808에 설명되는 바와 같이, 발한 억제제에 사용하기 위하여 제제화될 수 있다. 예를 들어, 본원 발명의 하나 이상의 조성물들은 유통 기한을 연장시키고 항균성 효과를 강화시키기 위하여, 본 기술분야의 일반적인 기술을 가지는 사람들에 의한 불필요한 실험 없이 손쉽게 결정되는 효과적인 양으로 상기 '808 특허에 설명된 무수 비-알코올성 발한 억제제 제품들(예를 들어, 이의 실시예 1 내지 6)에 실질적으로 첨가될 수 있다.
실시예 31
또한, 본원 발명의 조성물들은 인용참조되는 미국 특허 제 3,119,691에 설명된 바와 같이, 동물/애완동물용 사료, 예를 들어 개사료에 사용하기 위하여 제제화될 수 있다. 본 기술분야의 일반적인 기술을 가지는 사람들은 하나 이상의 본원 조성물들이 불필요한 실험 없이 손쉽게 결정되는 양의 조성물(들)로, 상기 '691 특허에 개시된 제품들의 유통 기한을 연장하기 위하여 저 수화(low hydration) 개사료, 고수(high moisture) 개사료 및 환원될 수 있는(rehydratable) 개사료(예를 들어, 본 명세서에 설명되는 제품 제형)에 첨가될 수 있음을 인식할 것이다.
실시예 32
또한, 본원 발명의 조성물들은 인용참조되는 미국 특허 제 5,060,598 및 4,721,059에 설명되는 바와 같은, 고양이 배설용 상자에 까는 점토(cat litter)에 사용하기 위하여 제제화될 수 있다. 예를 들어, 점토, 알파파, 우드 칩(wood chip) 및 톱밥을 포함하는 다양한 흡수성 물질들, 그리고 점토-형 충전제('O59 특허) 및 이탄(peat)['598 특허]을 포함하는 증가된 흡습성 물질들은 요소를 흡수하고 냄새를 제어하는데 사용된다. 본원 발명의 하나 이상의 조성물들은 불필요한 실험 없이 손쉽게 결정되는 양의 조성물(들)로, 상기 점토(litter)의 사용 후에 미생물 활성을 감소시키거나 제거하고, 냄새를 제어하기 위하여 이러한 물질들과 결합하여 사용될 수 있다(예를 들어, 이들 상으로 분무되거나, 그 밖에 이들 내로 병합함).
실시예 33
또한, 본원 발명의 조성물들은 인용참조되는 미국 특허 제 6,250,511에 설명되는 바와 같이, 스프레이형 소독제 적용에 사용하기 위하여 제제화될 수 있다. 상기 '511 특허는 약 25 % 내지 75 %의 하나 이상의 글리콜 화합물, 0.2 % 내지 60 %의 항균성 성분, 약 5 % 내지 45 %의 계면활성제, 및 선택적으로 방향제들, 염료들 및 여타의 첨가물들(이의 문단 3)의 효과적인 양을 포함하는 스프레이 병 내에 처리 용액을 포함하는 단계를 설명한다. 예를 들어, 본원 발명의 하나 이상의 조성물들은 불필요한 실험 없이 본 기술분야의 전문가에 의해 손쉽게 결정되는 야의 이러한 조성물(들)로 항균성 성분에 대한 대체물 또는 이에 대한 첨가물로서 상기 '511 특허의 소독제와 결합하여 사용될 수 있다.
실시예 34
또한, 본원 발명의 조성물들은 인용참조되는 미국 특허 제 RE 40,050에 설명되는 바와 같이, 식품 및 음료 처리 설비를 세정 및/또는 세척하기 위해 제제화될 수 있다. 상기 '050 재발행 특허(Reissue)는 할로겐 디옥사이드 조성물을 교시하는 동시에, 이러한 제형은 본원 발명의 하나 이상의 조성물들을 대체하기 위하여 본 기술분야의 전문가에 의해 변형될 수 있고, 이러한 조성물(들)은 불필요한 실험 없이 손쉽게 양이 정해지며, 상기 'O50 재발행 특허에 설명된(예를 들어, 이의 문단 3 내지 4에 설명된 바와 같은) 종류의 장치들 및 기술들을 사용하여 이러한 가공 설비에 접촉되거나 적용된다.
실시예 35
또한, 본원 발명의 조성물들은 인용참조되는 미국 특허 제 4,988,576에 설명되는 바와 같이, 목재 보존(preserving wood)에 사용하기 위하여, (그리고 인용참조되는 미국 특허 제 7,449,130에 설명되는 리그노셀루로즈-기반 복합재들에 사용하기 위하여) 제제화될 수 있다. 상기 '576 특허는 리그노설포네이트, 하이드록시 벤질 알코올 및 금속 염 또는 금속 염들의 혼합물의 그래프트 혼성중합체(graft copolymer), 또는 대안적으로 리그노설포네이트의 그래프트 혼성중합체의 하나 이상의 금속 염을 포함하는 방부제 조성물의 용액으로 목재를 침지(impregnating)시키는 단계를 교시하며, 상기 혼성중합체는 리그노설포네이트와 아크릴계 모노머들의 반응 생성물이다. 예를 들어, 본원 발명의 하나 이상의 조성물들은 목재를 침지시키고 보조시키기 위하여, 불필요한 실험 없이 본 기술분야의 일반적인 기술을 가지는 사람들에 의해 손쉽게 결정되는 이러한 조성물(들)의 양으로, 상기 '576 특허 (또는 상기 '130 특허)에서의 각각의 실시예 1 내지 4 및 1 내지 2에서 설명되는 바에 의해서 교시되는 이러한 방부제들과 조합되거나 단독으로 사용될 수 있다.
실시예 36
또한, 본원 발명의 조성물들은 소독제로 부분적으로 포화된 패드(pad)[예를 들어, 특허의 문단 2]를 교시하는, 인용참조되는 미국 특허 제 4,575,891에 설명되는 바와 같이 와이프(wipe)를 위생처리(sanitizing) 및/또는 소독하는데 사용하기 위하여 제제화될 수 있다. 상기 '891 특허는 알코올성 용액들 및 여타의 소독된 용액들로서의 적당한 소독제들을 설명한다. 예를 들어, 본원 발명의 하나 이상의 조성물들은 불필요한 실험 없이 본 기술분야의 전문가에 의해 손쉽게 결정되고 병합되는 이러한 조성물(들)의 양으로, 이러한 소독제들과 조합되거나 단독으로 사용될 수 있고, 이러한 와이프 재료 내에 병합될 수 있다.
실시예 37
또한, 본원 발명의 조성물들은 인용참조되는 미국 특허 제 6,187,327에 설명되는 바와 같이, 손 소독 로션에 사용하기 위하여 제제화될 수 있다. 예를 들어, 본원 발명의 하나 이상의 조성물들은 상기 '327 특허의 로션과 결합되어 첨가되도록 그리고 작용하도록, 또는 항균성 효과를 향상시키기 위하여 여하한 로션의 활성 효소를 대체하도록 제제화될 수 있다. 또한, 상기 '327 특허는 다양한 여타의 알려진 손 살균제들[예를 들어, 양쪽성-양이온 계면활성제, 양이온 계면활성제, 습윤제 및 비이온성 퇴행제(regressing agent)]을 개시한다. 여하튼, 본원 발명의 조성물은 불필요한 실험 없이 손쉽게 결정되는 이러한 조성물(들)의 양으로, 여하한의 이러한 손 살균제 내의 여하한 활성 요소들과 결합하여 사용하기 위하여, 또는 대체물로서 병합될 수 있다.
실시예 38
또한, 본원 발명의 조성물들은 증기 내에 분산된 소르베이트를 가지는 증기(steam)로 종자에 접촉시키는 단계(예를 들어, 이의 문단 2 내지 5)를 교시하는, 인용참조되는 미국 특허 제 4,581,238에 설명되는 바와 같이, 식용가능하거나 작물 종자들을 처리하는데 사용하기 위하여 처리될 수 있다. 예를 들어, 본 명세서에 개시되는 기술들 및 장치들을 사용하여, 본원 발명의 하나 이상의 조성물들은 불필요한 실험 없이 본 기술분야의 일반적인 기술을 가지는 사람들에 의해 손쉽게 결정되는 이러한 조성물(들)의 양으로, 증발되거나, 그 밖에 이러한 종자들에 적용될 수 있다.
실시예 39
또한, 본원 발명의 조성물들은 케토헥사노익산의 효과적인 성장 억제양과 식품을 접촉시기는 단계(특허의 문단 2 내지 3)를 교시하는, 인용참조되는 미국 특허 제 4,356,204에 설명되는 바와 같이, 부패성 유기체들의 성장을 예방하거나 억제하는데 사용하기 위하여 제제화될 수 있다. 본원 발명의 하나 이상의 조성물들은 부패성 유기체들을 추가적으로 억제 및/또는 죽이기기 위하여 이러한 케토헥사노익 산과 함께 또는 단독으로 사용될 수 있다. 마찬가지로, 인용참조되는 미국 특허 제 2,711,976는 부패성 유기체들 및 포도상구균 종들에 대하여 커스타드(custard) 식품들의 저항성을 증가시키기 위하여 아미노산류의 사용을 제안하였다. 게다가, 본원 발명의 하나 이상의 조성물들은 이러한 아미노산류의 대한 대체물로서 조합되거나 단독으로 사용될 수 있다. 마찬가지로, 인용참조되는 미국 특허 제 2,866,819는 식품 내의 방부제로서 소르빈산의 사용을 제안하였다. 게다가, 본원 발명의 하나 이상의 조성물들은 소르빈산의 대체물로서 조합되거나 단독으로 사용될 수 있다. 마찬가지로, 인용참조되는 미국 특허 제 2,910,368은 채소의 유통 기한을 증가시키기 위하여 소르빈산과 EDTA의 사용을 개시하였다. 게다가, 본원 발명의 하나 이상의 조성물들은 EDTA 및/또는 소르빈산의 조합으로 또는 단독으로 사용될 수 있다. 각각의 예시에서, 본원 발명의 이러한 조성물(들)은 불필요한 실험 없이 본 기술분야의 전문가에 의해 손쉽게 결정되는 양으로 사용될 수 있다.
실시예 40
또한, 본원 발명의 조성물들은 용기 내를 처리하기 위하여 여하한의 물품들을 위치시키고, 그 후에 이산화탄소 및 암모니아를 도입시키는 단계를 교시하는, 인용참조되는 미국 특허 제 5,273,769에 설명되는 바와 같이, 과실, 종사, 곡류 및 협과(legume)를 처리하는데 사용하기 위하여 제제화될 수 있다. 예를 들어, 본 명세서에 설명되는 장치들 및 기술들(예를 들어, 실시예 1 내지 4)을 사용하여, 본언 발명의 하나 이상의 조성물들은 불필요한 실험 없이 본 기술분야에서 이해되는 바와 같이 효과적으로 이용될 수 있다.
실시예 41
또한, 본원 발명의 조성물들은 치과용 및 의료용 물품들/장치들 및 임플란트들을 처리하는데 사용하기 위하여 제제화될 수 있으며, 후자는 이식될 수 있는 의료 장비의 외부 표면에 적용되는 항균성 중합체 막을 교시하는, 인용참조되는 미국 특허 제 6,812,217에 좀 더 상세하게 설명된다. 예를 들어, 본 명세서에서 설명되는 종류의 기술들을 사용하여, 본원 발명의 하나 이상의 조성물들은 불필요한 실험 없이 본 기술분야의 일반적인 기술을 가지는 사람들에 의해 손쉽게 결정되는 이러한 조성물(들)의 양으로, 항균성 효과를 제공하기 위하여 (의료용 또는 치과용이든 간에) 이러한 장치 또는 물품 또는 이들 상의 중합체 막(예를 들어, 문단 5 내지 6에 설명됨)에 침적되거나, 그 밖에 병합될 수 있다.
실시예 42
또한, 본원 발명의 조성물들은 확산 또는 함침(impregnation)에 의해 직물 섬유(textile fiber) 또는 직물(fabric)에 트리클로산 에스테르의 적용을 교시하는, 인용참조되는 미국 특허 제 5,968,207과 같이, 직물의 처리에 사용되는 제제화될 수 있다. 예를 들어, 본원 발명의 하나 이상의 조성물들은 불필요한 실험 없이 본 기술분야의 일반적인 기술을 가지는 사람들에 의해 손쉽게 결정되는 이러한 조성물(들)의 양으로, 인공적이든 천연적이든지 간에, (예를 들어, '207 특허의 문단 2 내지 3에 설명되는) 혼방(blend), 또는 이의 직물 또는 섬유의 항균성 성질들을 개선시키기 위하여 이러한 화합물과 조합되거나 단독으로 사용하기 위하여 제제화될 수 있다.
실시예 43
본원 발명의 조성물들은 인용참조되는 미국 특허 제 7,575,744에 설명되는 바와 같이, 식품 가공 설비, 관련된 장비 및 식량의 표면들의 처리를 위하여 제제화될 수 있다. 예를 들어, 본 명세서에서 설명되는 종류의 기술들 및 장치들을 사용하여, 본원 발명의 하나 이상의 조성물들은 미생물 활성을 감소시키거나 제거하기 위하여 폭 넓은 범위의 식품 가공 설비에 있어서 장비 및 식량 표면 상에 배치되고, 제제화될 수 있으며, 이러한 설비/장비는 스낵(snack), 가금류, 감귤류, 땅콩 및 관련되는 식품 가공 설비/장비를 포함하나 이로 제한되지 않음(예를 들어, 문단 20 참조). 이러한 조성물(들)은 불필요한 실험 없이 본 기술분야의 전문가에 의해 손쉽게 결정되는 양으로 적용될 수 있다.
실시예 44
또한, 본원 발명의 조성물들은 클로브 싹(clove bud)유, 유칼리유, 라벤더유, 티트리 및 오렌지유를 포함하는 조성물 및 조성물의 적용을 교시하는, 인용참조되는 미국 특허 제 7,192,575에 설명되는 바와 같이, 작물, 식물, 곡류 및 여타의 식량들 상에서의 미생물 성장을 억제하기 위하여, 가축용 동물(farm animal) 및 가축에서 미생물-관련된 질병들[즉, 유선염, 구제역(hoof & mouth) 등]의 치료에 사용하기 위하여 제제화될 수 있다. 예를 들어, 본원 발명의 하나 이상의 조성물들은 불필요한 실험 없이 본 기술분야의 일반적인 기술을 가지는 사람들에 의해 손쉽게 결정되는 이러한 조성물(들)의 양으로, 상기 '575 특허의 것들(예를 들어, 이의 실시예 1 내지 2)과 조합되거나 단독으로 사용하기 위하여 제제화될 수 있다.
실시예 45
또한, 본원 발명의 조성물들은 항균성 성분들의 조합물을 교시하는, 인용참조되는 미국 특허 제 6,156,362에 설명되는 바와 같이, 미생물 부패로부터 드레싱(dressing), 소스, 마리네이드(marinade), 조미료, 스프레드, 버터, 마가린, 유제품(dairy based food) 및 이와 유사한 것들과 같은 식량들을 보존하는데 사용하기 위하여 제제화될 수 있다. 본원 발명의 하나 이상의 조성물들은 불필요한 실험 없이 본 기술분야에서 일반적인 기술을 가지는 사람들에 의해 손쉽게 결정되는 이러한 조성물(들)의 양으로, 상기 '362 특허의 하나 이상의 성분들(예를 들어, 이의 실시예 1 내지 4)과 조합되거나 단독으로 사용하기 위하여 제제화될 수 있다.
실시예 46
본원 발명의 조성물들은 인용참조되는 미국 특허 제 7,659,326에서 설명되는 것들 및 여기에 상술되는 권한들(예를 들어, Kirk-Othmer-Paint; pp. 1046-1049, Vol. 17; 1996, by Arthur A. Leman, 또한 이의 설명은 본 명세서에서 이의 전문이 참고문헌으로 인용참조됨)과 같이, 폭 넓은 범위의 수성 및 유기계 페인트, 착색제(stain) 및 관련되는 표면 피복(surface coating)과 병합하기 위하여 제제화될 수 있다. 예를 들어, 본원 발명의 하나 이상의 조성물들은 불필요한 실험 없이 본 기술분야의 전문가에 의해 손쉽게 결정되는 이러한 조성물(들)의 양으로, 상기 '326 특허의 실시예 1 내지 3 및 상세한 설명에 설명되는 또 다른 항균성 성분과 조합되거나 단독으로 사용하기 위하여 제제화될 수 있다.
실시예 47
또한, 본원 발명의 조성물들은 인용참조되는 미국 특허 제 6,231,845에 설명되는 것들과 같이, 애프터-셰이브(after-shave) 제품들 내로 병합 또는 사용하기 위하여 제제화될 수 있다. 예를 들어, 본원 발명의 하나 이상의 조성물들은 이전의 기술 분야의 이러한 애프터-셰이브 제품들에 대하여 항균성 효과를 제공하기 위하여, 상기 '845 특허의 실시예 1 내지 6에 설명되는 종류의 성분들과 결합하여 사용할 수 있다. 이러한 조성물은 불필요한 실험 없이 본 기술분야의 전문가에 의해서 손쉽게 결정되는 양으로 존재할 수 있다.
실시예 48
또한, 본원 발명의 조성물들은 인용참조되는 미국 특허 제 7,507,429에 설명되는 바와 같이, (예를 들어, 포유동물, 조류, 어류, 대합 조개, 갑각류 및/또는 다른 형태의 해산물, 및 여타의 식용가능한 종들의) 육류 제품, 육류 및 도체의 처리를 위하여 제품 내에 병합 또는 사용하기 위하여 제제화될 수 있다. 예를 들어, 본원 발명의 하나 이상의 조성물들은 상기 '429 특허에 설명되는 종류의 제품 내에 병합하기 위하여, 또 다른 항균성 성분과 조합되거나 단독으로 사용하기 위해 제제화될 수 있다. 이러한 조성물(들)은 불필요한 실험 없이 본 기술분야의 전문가에 의해 손쉽게 결정되는 양으로 존재할 수 있으며, 대응하는 제품(들)은 상기 '429 특허에 설명되거나, 그 밖에 본 발명에 정통한 본 기술분야의 전문가들에 의해 이해되는 바와 같은 기술들 및 장치들로 적용되거나, 그 밖에 이용될 수 있다(예를 들어, 상기 '429 특허의 상세한 설명의 조성물 및 성분 부분, 그리고 육류 가공, 분무, 침지 및 처리를 참조).
실시예 49
또한, 본원 발명의 조성물들은 식료품에 대한 재료(예를 들어, 코팅 또는 여타의 병합을 위한 재료) 내로 병합 또는 사용하기 위하여 제제화될 수 있고, 이러한 제품들은 간식용 식품(snack food), 시리얼 식품 및 여타 식품 성분들을 포함하는 이로 제한되지 않으며, 이러한 종류의 간식용 식품 및 시리얼 식품 및 재료들은 인용참조되는 미국 특허 제 7,163,708에 설명된다. 적용될 수 있는 이러한 재료들의 제한 없이, 본원 발명의 하나 이상의 조성물들은 상기 '708 특허의 식료품 및 코팅 재료에 대한 상세한 설명에 설명되는 바와 같이, 이러한 재료들의 하나 이상의 항균성 또는 방부제 성분들과 결합되거나 단독으로 사용될 수 있다. 따라서, 본 기술분야의 전문가에 의해 이해되는 바와 같이, 이러한 조성물은 불필요한 실험 없이 손쉽게 결정되는 양으로 존재할 수 있다.
실시예 50
본원 발명의 조성물들은 인용참조되는 미국 특허 제 7,498,050에 설명되는 바와 같은, 땅콩 버터 조성물들을 포함하나 이로 제한되지 않는 다양한 식용가능한 스프레드 조성물들과 병합하기 위하여 제제화될 수 있다. 예를 들어, 본 기술분야의 전문가에 의해 이해되는 바와 같이, 본원 발명의 하나 이상의 조성물들은 상기 '050 특허의 실시예 1 내지 2에 설명되는 바와 같이, 항균성 효과를 제공하거나, 그 밖에 항균성 효과를 강화시키기 위하여 이러한 스프레드 제품들과 결합하여 사용될 수 있으며, 이러한 조성물(들)은 불필요한 실험 없이 손쉽게 결정되는 양으로 존재할 수 있다.
실시예 51
본원 발명의 조성물들은 인용참조되는 미국 특허 제 6,720,450(예를 들어, 이의 상세한 설명의 2 내지 3부분에서)에 설명되는 바와 같이(예를 들어, 이의 상세한 설명의 2 내지 3부분에서), 폭 넓은 범위의 병충해 방제(pest control) 조성물들과 병합하기 위하여 제제화될 수 있다. 예를 들어, 본원 발명의 하나 이상의 조성물들은 상기 '450 특허에 설명되는 바와 같은, 또 다른 항살충성(antipesticidal) 성분과 조합되거나 단독으로 사용하기 위하여 제제화될 수 있다. 마찬가지로, 본 발명의 하나 이상의 조성물들은 다양한 타입의 모기를 포함하나 이로 제한되지 않는 다양한 흡혈 곤충 및 농작물의 해충에 대하여 사용하기 위한 적당한 운반체 성분과 본 명세서에서 설명되는 바와 같이 제제화될 수 있다. 본원 조성물들은 모기의 유충, 번데기 및/또는 성충 형태를 포함하는 모기들의 직접적인 접촉, 억제 및/또는 제거를 위하여 본 명세서에서 설명되는 바와 같이 사용될 수 있다. 대안적으로, 본원 조성물들은 방충 작용을 위하여 사용 및/또는 제제화될 수 있다. 여하튼, 이러한 조성물(들)은 불필요한 실험 없이 본 기술분야의 전문가에 의해 손쉽게 결정되는 양으로 존재할 수 있으며, 선택적으로 계면활성 성분을 포함할 수 있다. 이러한 계면활성제는 생물계면활성제일 수 있다. 제한 없이, 이러한 생물계면활성제는 모노람노리피드들, 디람노리피드들 및 이들의 조합물들로부터 선택될 수 있다.

Claims (50)

  1. 무스코도르 크리스판스(Muscodor crispans)의 단리 배양물(isolated culture)의 휘발성 부산물로부터 단리할 수 있는 C2-약 C5 산 성분; C2-약 C5 에스테르 성분; 2개 이상의 C2-약 C5 성분들을 포함하는 천연-유래 항균성 조성물에 있어서, 상기 조성물이 단리, 배양되는 무스코도르종, 이의 휘발성 부산물 또는 상기 휘발성 부산물의 합성적인 혼합물과는 상이한 병원체 활성 프로파일을 가지는 조성물.
  2. 제 1항에 있어서,
    상기의 산 성분은 이소부티르산, 프로피온산 및 이들의 조합물들로부터 선택되는 조성물.
  3. 제 1항에 있어서,
    상기의 에스테르 성분이 C4 에스테르 아세테이트, C5 에스테르 아세테이트 및 이들의 조합물들로부터 선택되는 조성물.
  4. 제 1항에 있어서,
    무스코도르 크리스판스의 휘발성 부산물로부터 단리할 수 있는 약 8 내지 약 10개의 상기 성분들을 포함하는 조성물.
  5. 제 4항에 있어서,
    상기 조성물의 각각의 상기 성분이 무스코도르 크리스판스의 휘발성 부산물로부터 단리될 수 있는 조성물.
  6. 제 5항에 있어서,
    각각의 상기 성분이 발효 생성물이고, 상기의 발효는 박테리아, 효모 및 균류에 의한 발효로부터 선택되는 조성물.
  7. 제 6항에 있어서,
    상기 조성물의 각각의 상기 성분이 일반적으로 미국연방 규정집의 21장에 의해서 사람이 소비하기에 안전하다고 승인되는 조성물.
  8. 제 1항에 있어서,
    람노리피드 성분을 포함하는 조성물.
  9. C2-약 C5 알코올류, C2-약 C5 케톤류, C2-약 C5 알데히드류, C2-약 C5 산류 및 C2-약 C5 산성 에르테르류로부터 선택되는 약 8 내지 약 10 성분들을 포함하는 천연-유래 항균성 조성물에 있어서, 각각의 상기 성분이 무스코도르 크리스판스의 단리배양물로부터 단리될 수 있고, 상기 조성물이 단리, 배양되는 무스코도르종, 이의 휘발성 부산물 또는 상기 휘발성 부산물의 합성적인 혼합물의 병원체 활성 프로파일과는 상이한 병원체 활성 프로파일을 가지며, 상기 조성물의 각각의 상기 성분이 일반적으로 미국연방 규정집의 21장에 의해서 사람이 소비하기에 안전하다고 승인되는 조성물.
  10. 제 9항에 있어서,
    상기의 단리할 수 있는 성분이 이소부티르산인 조성물.
  11. 제 10항에 있어서,
    상기의 이소부티르산의 일부분 이상이 프로피온산으로 대체되는 조성물.
  12. 제 9항에 있어서,
    상기의 단리할 수 있는 성분이 2-부탄온인 조성물.
  13. 제 12항에 있어서,
    상기 부탄온의 일부분 이상이 아세트산, 프로피온산 또는 이들의 조합물로 대체되는 조성물.
  14. 제 9항에 있어서,
    상기의 단리할 수 있는 성분이 에탄올인 조성물.
  15. 제 14항에 있어서,
    상기 에탄올의 일부분 이상이 아세트산으로 대체되는 조성물.
  16. 제 9항에 있어서,
    람노리피드 성분을 포함하는 조성물.
  17. 제 9항에 있어서,
    제조되는 물품과 병합되는 조성물.
  18. 제 17항에 있어서,
    상기 물품이 식료품, 동물의 사료품(animal food product), 음료 제품, 포장 제품 및 개인용 관리 제품으로부터 선택되는 조성물.
  19. 제 9항에 있어서,
    식물 기질에 적용되는 조성물.
  20. 제 19항에 있어서,
    상기 기질이 종자, 식물 표면 성분, 과실 및 채소로부터 선택되는 조성물.
  21. 제 20항에 있어서,
    상기 기질이 수확-전 과실들 및 채소들, 그리고 수확-후의 과실들 및 채소들로부터 선택되는 조성물.
  22. 미생물 활성에 영향을 미치는 방법에 있어서, 상기 방법이 제 9항의 조성물을 제공하는 단계; 그리고 미생물 활성에 영향을 미치기에 적어도 부분적으로 충분한 양의 상기 조성물과 하나 이상의 미생물 및 미생물 활성을 지지할 수 있는 기질을 접촉시키는 단계를 포함하는 방법.
  23. 제 22항에 있어서,
    상기 기질이 식물 표면 성분들, 동물성 기질들 및 제조되는 물품들의 기질들로부터 선택되는 방법.
  24. 제 22항에 있어서,
    상기의 접촉이 상기 조성물과 직접적인 접촉, 및 상기 조성물의 적어도 부분적인 기화에 의한 접촉으로부터 선택되는 방법.
  25. 제 24항에 있어서,
    상기 접촉이 상기 미생물과의 직접적인 접촉인 방법.
  26. 제 25항에 있어서,
    상기 미생물 활성이 제거되는 방법.
  27. 하나의 물품 배지(medium) 및 물품 기질 성분; 및 제 1항의 병합되는 조성물을 포함하여 제조되는 물품에 있어서, 상기 병합물(incorporation)은 상기 배지 내의 병합물, 상기 기질 성분의 표면의 적용물, 상기 기질 성분 내의 병합물 및 이들의 조합물들로부터 선택되고, 상기 조성물은 미생물 활성에 영향을 미치기에 적어도 부분적으로 충분한 양인 물품.
  28. 제 27항에 있어서,
    식료품, 동물 사료품, 음료 제품, 포장 제품, 개인용 관리 제품, 제품 가공 용구, 의학용 기구 및 치과용 기구로부터 선택되는 물품.
  29. 제 28항에 있어서,
    상기 식료품이 육류 및 육류 제품으로부터 선택되고, 상기 조성물이 상기 기질 성분의 표면에 적용되는 물품.
  30. 제 28항에 있어서,
    상기 동물 사료품이 애완동물 사료이고, 상기 조성물이 상기 기질 성분의 표면에 적용되는 물품.
  31. 제 28항에 있어서,
    상기 음료 제품이 과실 음료이고 상기 조성물이 상기 음료의 매질 내에 병합되는 물품.
  32. 제 28항에 있어서,
    상기 포장 제품이 필름(film)이고, 하나 이상의 상기 조성물이 상기 기질 성분의 표면에 적용되며, 상기 기질 성분 내에 병합되는 물품.
  33. 제 28항에 있어서,
    상기 개인용 관리 제품이 스킨 로션이고, 상기 조성물이 상기 로션 매질 내에 병합되는 물품.
  34. 제 28항에 있어서,
    상기 가공 용구가 식료품을 가공하기 위한 용구이고, 상기 조성물이 상기 기질 성분의 표면에 적용되는 물품.
  35. 제 28항에 있어서,
    상기 기구가 의학용 및 치과용 도구들, 그리고 의학용 및 치과용 임플란트들로부터 선택되고, 상기 조성물이 상기 기질 성분의 표면에 적용되는 물품.
  36. 제 1항에 있어서,
    상기 조성물이 식물 기질에 적용되는 조성물.
  37. 제 36항에 있어서,
    상기 기질이 농작물들에 대한 종자들로부터 선택되는 조성물.
  38. 제 36항에서 상기 기질이 식물 줄기 및 관엽으로부터 선택되는 방법.
  39. 제 36항에 있어서,
    상기 기질이 수확-전의 과실류, 채소류 및 견과류, 그리고 수확-후의 과실류, 채소류 및 견과류로부터 선택되는 조성물.
  40. 제 39항에 있어서,
    상기 기질이 감귤류(citrus fruits), 감자류 및 땅콩류(peanuts)로부터 선택되는 조성물.
  41. 무스코도르 크리스판스의 단리 배양물의 휘발성 부산물로부터 단리할 수 있는 C2-약 C5 산 성분; C2-약 C5 에스테르 성분; 및 2개 이상의 C2-약 C5 성분들을 포함하는 합성적, 비-천연-유래 항균성 조성물에 있어서, 상기 조성물은 단리, 배양되는 무스코도르종 또는 이의 휘발성 부산물과 상이한 병원체 활성 프로파일을 가지는 조성물.
  42. 제 41항에 있어서,
    상기 산 성분이 이소부티르산, 프로피온산 및 이들의 조합물들로부터 선택되는 조성물.
  43. 제 41항에 있어서,
    상기 에스테르 성분이 C4 에스테르 아세테이트, C5 에스테르 아세테이트 및 이들의 조합물들로부터 선택되는 조성물.
  44. 제 41항에 있어서,
    무스코도르 크리스판스의 휘발성 부산물로부터 단리될 수 있는 약 8 내지 약 10개의 상기의 성분들을 포함하는 조성물.
  45. 제 44항에 있어서,
    상기 조성물의 상기 성분이 무스코도르 크리스판스의 휘발성 부산물로부터 단리될 수 있는 조성물.
  46. 제 41항에 있어서,
    상기 조성물의 각각의 상기 성분들은 일반적으로 미국연방 규정집의 21장에 의해서 사람이 소비하기에 안전하다고 승인되는 조성물.
  47. 제 41항에 있어서,
    람노리피드 성분을 포함하는 조성물.
  48. 무스코도르 크리스판스의 균주의 생물학적으로-순수한 배양물.
  49. 무스코도르 크리스판스의 균주의 생물학적으로-순수한 배양물, 상기 균주의 휘발성 부산물 및 이들의 조합물; 그리고 운반체 성분을 포함하는 조성물.
  50. 제 49항에 있어서,
    미생물 활성을 지지할 수 있는 기질 또는 배지와 접촉되는 조성물.
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