TWI478670B - 抗微生物組成物類及相關使用方法 - Google Patents

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Description

抗微生物組成物類及相關使用方法
本發明關於抗微生物組成物類及相關使用方法。
用於控制不同黴菌、植物疾病及類似者之生物滅殺劑的鑑定及硏發已有長足進步。然而，目前使用之大部分市售的生物滅殺劑或殺蟲劑為被歸類為致癌物之化合物或對野生及其他非標的物種具有毒性。例如溴化甲烷廣泛被作為土壤薰蒸劑及用於微生物感染之採收後處理。人類毒性及有害環境之作用最終將造成溴化甲烷及許多不同之其他合成生物滅殺劑/殺蟲劑停用。因此，最近的努力朝向鑑定及硏發顯示出具有相當之抗微生物或殺蟲效果的天然或生物模擬組成物。
一種方法係與內生真菌(endophytes)及相關之揮發性副產物有關。本技藝中，內生真菌係定義為居住在活植物組織之間質性空間中，但一般並不被視為寄生性的微生物。尤其是，與雨林植物關聯之內生真菌因其揮發性副產物之抗生素特性而有相當之重要性。數種黏帚菌屬之成員(即白黏帚菌(M .albus )、紅斑黏帚菌(M .roseus) 及維生黏帚菌(M .vitigenus )已證實可製造顯示出抗生素或殺昆蟲特性之揮發性副產物中。然而，各菌種之個別副產物包括多種不同之萘及/或薁衍生物。這類化合物與其他副產物成分可能為有毒或不健康的，因而該對應之混合物對不同之終端用途應用而言是不被接受的。因此，本技藝中仍持續進行硏究來鑑定天然組成物及硏發無這類化合物存在，但可供人類安全使用，且顯示出有效之抗微生物性質的仿生組成物類。
鑑於前述內容，本發明的目的之一係提供具有抗微生物組成物之香料及/或彼等之使用方法，以藉此克服先前技藝之多處不足和缺點，包括上文中所概述者。熟習本技藝之人士可理解本發明之一或多種觀點可符合某些目的，而一或多種其他觀點可符合某些其他目的。在所有本發明之觀點中，各目的可能不會均等地適用於本發明之每一觀點。因此，本發明之任一觀點中可以另一種方式檢視下列目的。
本發明的目的之一為提供黏帚菌種及其揮發性副產物(無萘及薁(非GRAS化合物)相關化合物)，以及用於預防、抑制及/或根除微生物感染之方法。
本發明之另一目的係提供一種系統，其包含這類菌種或其菌株以及相關之揮發性副產物以及用於對抗微生物感染之外來基質或受質。
本發明之另一目的係提供一種使用(但不限於此)人類及動物食品、產品、植物、植物部分、種子、農作物及其他有機物質、包裝材料、建材、纖維、布料、衣物的這類系統及/或相關方法，以及藥學及/或醫學應用。
取代上述目的或除了上述目的外，本發明之另一目的係提供多種顯示出與這類黏帚菌種相當的抗微生物活性之仿生人造組成物。
本發明之另一目的係提供一或多種可食用或供人類安全使用或食用之這類成分的組成物。
本發明之另一目的係提供包含這類非天然、仿生組成物以及用於預防、抑制及/或根除微生物感染之基質或受質的系統、合成物及/或物件。本發明之另一目的係提供這類用於上述或此文他處所說明者之系統、合成物及/或物件。
本發明的目的之一亦為提供一種用於抗微生物及/或殺蟲治療之方法，其包含這類組成物，但不限於為基質、載體或受質。
本發明的其他目的、特性、優點及益處可從本摘要及下列某些較佳體系之說明顯明，且對於具有關於不同抗微生物組成物類及相關治療之知識的熟習本技藝之人士是很容易明白的。單獨考量伴隨之實例、數據、圖形以及從其中得到之所有合理推論，或者再加上考量此文所納入之參考資料將可從上文中清楚明白這類目的、特性、優點及益處。
本發明部分係針對包含至少一種捲曲黏帚菌(M.crispans )菌株、其揮發性副產物或這類揮發性副產物之蒸汽及外來基質或受質的系統。這類基質或受質可為如此處所描述者或如熟習本技藝之人士所理解者。無論如何，這類菌株可以生物上純培養之形式，並選擇性地加上適合基質/受質接觸或終端應用的載體成分來提供，這類培養足以製造揮發性副產物。根據本發明，捲曲黏帚菌菌株之副產物或副產物之變型，或對應於此之蒸汽在組成上與此文他處所描述者相同。
因此，本發明亦可針對使用這類系統及/或其揮發性真菌副產物來提供抗微生物效果。這類方法可包含提供外來受質或基質；將這類受質或基質與捲曲黏帚菌菌株之培養、其揮發性副產物及/或來自這類副產物之蒸汽接觸。於某些較佳體系中，這類接觸可包含在這類基質或受質上、靠近或接近這類基質或受質之菌株。於某些其他較佳體系中，可將捲曲黏帚菌菌株之揮發性副產物或副產物之改質體，或對應之蒸汽注入這類基質或受質中或與其接觸。
不欲限制任何這類系統或方法，這類受質可選自食品或生產品目、食品或其他易腐敗之品目的包裝成分、纖維、布料或服裝品目、建材或建築成分、植物、植物表面、土壤、垃圾或渣滓。這類接觸在微生物之存在及/或預防方面可為生物活性。
部分而言，本發明可針對非天然抗微生物組成物，無論其成分為天然衍生、化學合成或為彼等之組合。這類組成物類可包含選自仿生黏帚菌屬副產物組成物之醇、醛、酮、酸及酸酯成分的化合物，這類組成物可缺少稠合之芳香化合物、經取代之稠合的芳香化合物及這類化合物之水化合物。於某些非限制性較佳體系中，這類組成物可包含選自醋酸、異丁酸、丙酸或其組合之酸成分。
部分而言，本發明可針對包含選自下列之化合物的液態混合物的仿生、抗微生物組成物：C2 -約C5 醇、醛、酮、酸和酸酯，及彼等之組合，這類組成物並非自黏帚菌種分離出。如本文中他處所討論者，這類液態混合物在室溫及/或周圍溫度下可為揮發性。如熟習本技藝之人士所理解者，"約"一詞在這類組成物及其化合物方面可指碳及/或亞甲基同系物，其具有對應之分子量及/或僅受具有一或多種其他成分、化合物之混合物限制的構造異構性，且所產生之組成物在室溫及/或周圍溫度下可至少部分揮發。於某些非限制性較佳體系中，這類組成物可包含選自下述種類之仿生捲曲黏帚菌副產物組成物的成分之醇、醛、酮、酸及酸酯化合物。這類組成物可包含化學合成之化合物、自細菌醱酵物分離之化合物及這類化合物之組合。於某些這類較佳體系中，這類組成物可包含選自醋酸、異丁酸、丙酸或其組合之酸成分。
部分而言，本發明亦可針對包含選自下列化合物之非天然產生(無論其為天然衍生或合成)的抗微生物組成物：C2 -約C5 醇、醛、酮、酸及酸酯類和這類化合物之組合，這類選出之化合物通常被認為可供人類安全("GRAS")食用。於某些非限制性較佳體系中，這類化合物可為選自仿生捲曲黏帚菌副產物組成物之醇、醛、酮、酸或酸酯成分。於某些較佳體系中，微生物之活性/病死率輪廓與捲曲黏帚菌或白黏帚菌及其對應之合成副產物的組成物不同。無論如何，於某些這類較佳體系中，這類組成物可包含選自醋酸、異丁酸、丙酸或其組合之酸成分。
部分而言，本發明可包含一種包含下列物質之組成物：本發明之組成物；及界面活性劑成分，這類界面活性劑成分可單獨使用或可倂入載體成分中。於某些較佳體系中，這類界面活性劑成分可為選自單鼠李糖脂、二鼠李糖脂或其組合之鼠李糖脂成分。
部分而言，本發明亦可針對包含本發明組成物及受質或基質成分的系統或合成物。這類組成物可為如上述者或說明於本文他處者。不受限於此，受質可選自食品或生產品目、食品或其他易腐敗之品目的包裝成分(薄膜或包裝紙)、纖維、布料或服裝品目、建材或建築成分、人類組織、植物、植物表面、土壤或垃圾或渣滓。於某些較佳體系中，這類組成物(無論為液態或氣態)可倂入這類基質、受質或受質表面或與其接觸。
因此，本發明亦可針對治療、預防、抑制及/或根除微生物的方法。這類方法可包含提供本發明之組成物(包括，但不限於)一或多種此文所說明之組成物種類；及令微生物與這類組成物接觸。這類微生物(如：真菌、細菌或病毒)可在上述討論之基質種類中、受質表面上或受質表面附近。因此，這類接觸可為直接接觸及/或在這類組成物揮發時。無論如何，這類治療在微生物出現時可為進行中的及/或預防性的。如此文他處所說明者，治療可被視為微生物死亡及/或生長受抑制。
根據本發明之某些較佳體系，包含某些食品和風味化合物(FFCs)之組成物對某些農業、醫學或商業或工業相關的致病性真菌、細菌和其他微生物特別具有抑制性及/或致命性。這類組成物較先前任何含有生物衍生之化合物的混合物優越：例如，本組成物不包含任何萘或薁(非GRAS化合物)衍生之物質。相反地，這類組成物可包含各被視為(即，GRAS)食品或風味物質之有機化合物的混合物。
本發明證明這類組成物之性質、其製備方法及將其施用於不同品項(如，但不限於：食品、纖維、用具及或建造物表面)上，以保存品項之完整性且防止被不同真菌(黴菌及其他微生物)破壞。這類組成物亦可施用於建築構造、植物部分，甚至是服裝品項來保存他們。再者，如下文中所示，這類組成物可負面影響結核分枝桿菌--引起結核病之微生物--包括至少三種具藥物抗性之菌株。
某些較佳體系之詳細描述
如藉由數個非限制性較佳體系所說明者，本發明關於新黏帚菌屬及/或其揮發性副產物之用途，以及包含一般食品和風味化合物之非天然、實驗室製備的仿生組成物之硏發，當被倂入不同基質、施用於表面、或引入大氣、空間或容積中時可使所需之表面基質或容積除去看不見的、有害的及/或致病微生物(包括植物真菌和結核病之病原菌)之污染。本發明對現代農業、人類醫藥、食品科學和工業有非常重要之意義和應用。本發明之組成物並不明確具有抗微生物性質，因其本身內並無一單獨成分為生物上活性。組成成分之協同組合顯示出充分之潛在抗微生物活性。
在類黏帚菌屬、其揮發性副產物或包含FFCs之非天然仿生組成物之用途方面，接觸可為直接接觸或暴露於與這類菌種、仿生組成物之副產物相關之蒸汽中。如下文中說明者，於某些較佳體系中，雖然暴露於蒸汽中可抑制生長，使細菌或真菌死亡可能需要直接接觸微生物。
無論接觸之模式，本發明之組成物可在實驗室中製作，其包含經化學方式合成之成分、天然衍生之成分或這類合成及天然成分之組合。無論如何，在黏帚菌副產物對特殊細菌或真菌種之作用方面，這類組成物可為仿生組成物。或者，與黏帚真菌副產物相較下，藉由相對濃度或任何一或多種FFC成分之選擇，其可顯現出不同或增強之抗微生物活性。
於某些這類較佳體系中，這類組成物可在包含蛋白質或纖維素成分(其可或確實支持微生物生長)之受質或基質上或可施用於其上。不限於此，某些較佳體系可包含植物、植物組成(如：根、莖、葉、農產品，等)及任何萌發之幼芽或籽。尤其是(不限於此)，這類組成物可在任何植物產物上，不論是果實、蔬菜、塊莖、花、籽或核果(不論是收成前或後)。某些這類植物及/或源自彼等之產物在本技藝中被單獨或總體視為農作物。因此，本組成物可在發育期之任何時間(收成前及/或收成後)置於或施用於這類農作物上。同樣地，本發明之組成物可施用在或納入可以或確實支持微生物生長之飲料、食品(如：人類、寵物及/或動物)產物或製造物品中。
於本發明之某些其他較佳體系中，這類組成物可在支持微生物(如：酵母菌及/或真菌細菌及/或病毒)生長之受質或表面上或施用於其上。因此，這類受質或表面可包含任何能或確實支持微生物生長之物質。這類受質包括，但不限於：木頭、陶器、磁器、石頭、灰泥、不塗泥灰的石牆、水泥、織布、皮革、塑膠，等。
於某些其他較佳體系中，在用於治療或預防微生物生長或感染之藥學或個人護理或衛生調製劑方面，本發明之不同組成物可在包含哺乳動物或人類組織之受質或表面上、與這類受質或表面接觸或施用或投服於此，這些哺乳動物或人類組織包括，但不限於：指甲、毛髮、牙齒或嘴巴、皮膚及其他細胞物質。代表性組成物描述於下，至少有部分適用於一或多個其他較佳體系中。
一種內生性真菌係從生長在玻利維亞亞馬遜之野生鳳梨植物(Ananas ananassoides )組織中取得。最後，其顯示出可製造具有抗微生物活性之揮發性化合物的混合物。使用分子技術可發現該真菌可擁有類似黏帚菌屬成員之序列。已知這些真菌可製造能作為抗微生物劑之揮發性有機化合物，該抗微生物劑可有效對抗人類及植物病原。黏帚菌屬之成員已利用諸如系統發育特徵映射(Phylogenetic Character mapping)之方法，使用18S rDNA加ITS-5.8S rDNA序列分析來鑑定。在GenBank中以BLAST搜尋找到本真菌及其他黏帚菌屬之序列，並與其他真菌比較(Bruns et al.,1991;Reynolds and Taylor 1993;Mitchell et al.,1995;Guarro et al.,1999;Taylor et al.,1999)。最後，測定出這些分離株與炭角菌(Xylaria )(Worapong et al.,2001a&b)有關。所有經分離出之屬於黏帚菌的類群具有類似特徵，諸如生長相當緩慢、擁有氈樣之菌絲體、製造生物活性之揮發性化合物且對其原始居住之植物無害。最後，其各共有非常類似之rDNA序列(Ezra et al.,2004)。
雖然本真菌共有上述之相同共通特性，此類群有多種不同面向可將其與所有其他黏帚菌屬及分離物區分。如下列實例中之更完整說明，這些獨特特性支持將本真菌確立為新菌種。此新穎之內生性真菌的建議名稱為捲曲黏帚菌。
如GC/MS之分析，當生長在馬鈴薯右旋糖瓊脂(PDA)上時，該分離出之真菌製造醇、酯及氣相之小分子量酸。如下列表1中所示，這類化合物包括丙酸，2-甲基；1-丁醇，3-甲基，醋酸酯；1-丁醇及乙醇。硏究迄今，當生長在PDA上時，本有機體既不製造萘也不製造薁衍生物(非GRAS化合物)，如此可將其與所有其他黏帚菌屬區分。約1週後，由此真菌產生之氣味變得明顯且至少三週以內隨時間倍增。如下列之說明，利用標準生物分析技術，此真菌之揮發物擁有對抗多種植物及人類病原之抑制性及致命性生物活性(Strobel et al.,2001)。
表1.
如上述所討論者，本發明包括捲曲黏帚菌及/或其揮發性副產物加上外來基質、受質及/或體積於抗微生物作用之用途。這類用途及/或應用可如此處所述或可為熟習本技藝之人士所理解，包括，但不限於：美國專利案編號6,911,338號(其全文納為本文之參考資料)中所描述之用途及應用種類。
或者，由一或多種較佳體系證明，多種天然及合成之仿生組成物使用時具有彼此相當或增強之作用，以提供目前為止透過使用真菌或其揮發性副產物時無法取得之結果。與先前技藝及捲曲黏帚菌之副產物不同，這類抗微生物組成物類可包含一般被認為可供人類安全使用及食用之食物和風味化合物。數種其代表性非限制性仿生組成物提供於下列表2-7中。多種其他組成物可包含選自表2-7之任何一或多種化合物之組合。或者，任何這類組成物可包含不為所列之任何化合物或作為替代之組成化合物，以增加揮發性或修改任何其他終端用途或使用效能。於某些這類組成物中，這類替代或額外之化合物可具有GRAS命名及/或為使用層級之命名。
所提供之各這類化合物可在有效濃度或百分比範圍內且可從市面上購得或可由熟習本技藝之人士製備。關於後者，可使用醱酵技術來自然製備及分離這類化合物。或者，這類化合物可以化學方式合成。關於本發明之數種非限制性較佳體系，表2-7之各化合物可以醱酵產物之形式取得，這類產物及對應之組成物可自Jeneil Biotech,Inc.of Saukville,Wisconsin取得。
表2.本發明之仿生組成物包含：
表3.本發明之仿生組成物包含：
表4.本發明之仿生組成物包含：
表5.本發明之仿生組成物包含：
表6.本發明之仿生組成物包含：
表7.本發明之仿生組成物包含選自下列之化合物的不同組合或包含下列化合物：
在本發明之任何FFC組成物方面，吾人考量其任何化合物成分--包括此處所參考或提及之任何化合物成分，諸如，但不限於表1-7及10a-b中之任何成分及其構造異構物及/或碳和伸甲基同系物--可以下列之量或範圍存在(扣除任何其他組成成分)。因此(不限於此)，各這類化合物成分可以下列範圍之量存在：約0.1重量%、(或少於)約0.2重量%、約0.3重量%、或約0.4重量%、......或/至約1.0重量%、約1.1重量%、約1.2重量%、約1.3重量%、或約1.4重量%、……或/至約2.0重量%、約2.1重量%、約2.2重量%、約2.3重量%、或約2.4重量%、......或/至約3.0重量%、約3.1重量%、約3.2重量%、約3.3重量%、或約3.4重量%、……或/至約4.0重量%、約4.1重量%、約4.2重量%、約4.3重量%、或約4.4重量%、……或/至5.0重量%、約5.1重量%、約5.2重量%、約5.3重量%、或約5.4重量%、……或/至約6.0重量%、約6.1重量%、約6.2重量%、約6.3重量%、或約6.4重量%、……或/至約7.0重量%、約7.1重量%、約7.2重量%、約7.3重量%、或約7.4重量%、……或/至約8.0重量%、約8.1重量%、約8.2重量%、約8.3重量%、或約8.4重量%、……或/至約9.0重量%、約9.1重量%、約9.2重量%、約9.3重量%、或約9.4重量%、......或/至約10.0重量%；及或/至約10.1重量%、……或/至約20.0重量%(根據這類增量變化)；或/至約20.1重量%、……或/至約30.0重量%(根據這類增量變化)；或/至約30.1重量%、......或/至約40.0重量%(根據這類增量變化)；或/至約40.1重量%、......或/至約50.0重量%(根據這類增量變化)；或/至約50.1重量%、......或/至約60.0重量%(根據這類增量變化)；或/至約60.1重量%、......或/至約70.0重量%(根據這類增量變化)；或/至約70.1重量%、......或/至約80.0重量%(根據這類增量變化)；或/至約80.1重量%、......或/至約90.0重量%(根據這類增量變化)；或/至約90.1重量%、......或/至約99.9重量%(或更多)(根據這類增量變化)。同樣地(不限於此)，本發明之任何組成物(不論任何特殊化合物成分或組合之特性或量)可以逐步變化之量(重量%)或重量%範圍存在(如上所述，任何倂入.其中之組成物或施用於其上之受質的0.1重量%至99.9重量%)。
除非另外指明，需理解，在所有情況中，所有表示組成分或成分、性質(諸如本專利說明書及申請專利範圍中所使用之分子量、反應條件，等)之量、濃度或數量之數字可被"約"一詞修改。因此，除非表示相反之意思，本專利說明書中及所附之申請專利範圍中列出之數值參數為可根據本發明所尋求取得之所需性質改變的約略值。至少(但非企圖限制將等效信條應用於申請專利範圍)，各數值參數應至少鑑於報告的有效數字之數目及運用一般四捨五入技術來解釋。
儘管列出本發明之大範圍的數字範圍和參數為約略值，所列出之數值及實例的報告儘可能精確。然而，任何數值本質上可能包含某些由各別測試測量中發現之標準差產生的誤差。
本發明之組成物及方法可適當地包含此文中所揭示、參考或提及之任何化合物成分或其量/濃度、由這些所組成或大體上由這些所組成---包括，但不限於表1-7及10a-b中之任何化合物成分與其任何構造異構物、任何這類醇成分、醛成分、酮成分、酸成分及/或酯成分之碳及/或伸甲基同系物，不論是否為其經酸衍生及/或經醇衍生之部分。無論量/濃度，各這類化合物成分或其部分/取代物為組成上可區分的、特性上對比的且可與除了這類成分量/濃度之外的本發明組成物及方法，或另一種化合物成分(或部分/取代物)或量/濃度一起使用。因此，需理解，本發明之組成物及/或方法(如此處所例證揭示者)在缺乏任何一種成分化合物(或其部分及/或取代物)下可經由改變量或濃度來執行或使用，此文中可能或可能未明確揭示、參考或提及這類化合物(或其部分/取代基)或其量/濃度，此文中可能或可能未明確揭示、參考或提及這類化合物之改變或缺乏。
於較佳體系中，這類FFCs之生物上有效的組成物(製備成液態混合物)在室溫下可輕易揮發並擴散在整個封閉空間中以有效抑制及/或殺死在不欲有這類有害微生物之表面上的污染真菌(黴菌)。該混合物可以噴霧形式施用(如：可具有在壓力下之原料)或僅置於容器中並令其可在密閉容器或密封袋中蒸發。
無論如何，本發明之FFC組成物可倂入多種終端用途之組成物中，僅受施用法限制。這類組成物包括，但不限於那些針對人類/動物食物或營養、個人衛生、健康護理、農業、工業、住宅、醫療及消費者應用的組成物。於某些非限制性之較佳體系中，FFC組成物及/或其成分之存在量可為特殊之終端用途組成物的0.1重量%或更少至約99.9重量%或更多。這類倂入量僅受所需之抗微生物效果及/或調製劑考量限制。
本FFC組成物在有效劑量水準下可有效殺死許多值物病原、可造成食物敗壞之真菌、可引起人類重大疾病之微生物以及可沾污工作表面、家裡和其他建築物之微生物。這類應用之非排他性列表如下：
1.用於處理貯存或製備中之乳酪，以控制表面上難看之黴菌污染和最終乳酪塊敗壞。
2.用於處理貯存中之不同植物部分，包括根、塊莖、莖、種子及其他最終可能用於製備供種植、再種植或農業用途之食物製品的器官。
3.用於將具有可能長黴菌之表面或可能被侵入而發展黴菌問題之點的建築去除污染。
4.用於在將垃圾從一個港口運至另一港口之長程海運中保存垃圾以使其最終醱酵成能源相關產品。
5.用於將可能藏匿潛在之植物病源的微生物之土壤去除污染。
6.用於治療患有結核病及其他漿黴菌感染之患者。
7.用於治療以控制鼻部感染及清除鼻腔通道。
8.用於與特殊設計之聚合物組合，該聚合物可用於包裹以長期安全保存物質(包括食物、纖維及其他物件)。
更普遍地，本發明之組成物可用於抑制選自如下群體之有機體的生長或滅殺之：真菌、細菌、微生物及多種其他微生物或害蟲。使用熟習本技藝之人士所熟知之方法，將至少可部分有效地滅殺或抑制有機體生長的這類組成物之量與該有機體接觸。或者，可用於處理人類或動物廢物，如：作為廢水或固體管理或處理之成分。這類組成物亦可用於將人類或動物廢物除去污染，如：減少或除去細菌及真菌污染。再者，可將建築物、建築材料或建築材料間之空間與有效量之這類組成物或來自這類組成物蒸氣接觸以處理或防治建築材料上及建築間之黴菌。僅用於說明：在房間內或在整棟建築薰蒸時可單獨使用有效量之這類組成物或將其與其他薰蒸劑或活性劑合倂使用。
當用於農業應用中時，本發明提供用於處理或防治果實、種子、植物或圍繞植物之土壤，使其不被有機體侵擾之方法，此法係經由將微生物與有效量之一或多種此處所描述之組成物接觸來進行。
如上述所討論，本發明提供預防、治療、抑制及滅殺細菌、真菌、病毒及/或其他微生物感染之方法。這類方法可包含投予具有這類感染或生長或支持這類感染或生長之物件、動物/哺乳動物或植物受質有效量之本發明組成物--單獨使用或可倂入組成物或調製劑中。因此，本發明提供一或多種用於製藥、個人、工業及/或農業用途之組成物。
微生物治療可經由將細菌、真菌、病毒及/或其他微生物與有效量之本發明組成物接觸來達成。接觸可在玻管內或體內進行。"接觸"意指將本發明這類組成物與這類微生物以足夠防治、抑制及/或排除微生物感染及/或生長之方式放在一起。足以有效用於這類治療之這類組成物的量可藉由經驗測定且這類測定係在本技藝之技術內。抑制包括減少及排除微生物生長/活性二者。
本發明之組成物可經由任何合適途徑以粉末、顆粒、液體、噴霧、油膏、塗劑或乳膏之形式投予或與人類、動物或植物、或物件受質表面接觸，這些途徑包括，但不限於：口或鼻(如：製藥或個人護理應用)，及局部之途徑。因此，本發明之組成物可包含與一或多種可接受之載體，及可選擇地，一或多種其他化合物或其他物質混合的各別成分化合物。這類載體在與調製劑之其他成分/原料相容方面應為"可接受"的且對所需之效果或應用是無害的。
不管所選擇之投遞途徑、治療或投藥，本發明之組成物可藉由熟習本技藝之人士已知之習知方法配製以提供可接受之濃度或劑型。任何這類組成物或其成分(帶有或不帶有載體)之量或濃度將根據所處理之靶的微生物/受質/物件、投藥/遞送之特殊模式及所有上述之其他因子而有變化。與載體物質組合之量通常為提供可有效產生所需之抗微生物效果之最低或最小濃度的這類組成物之量。
本發明組成物中之FFC組成物及另一可選擇之成分的相關量或濃度可在有效範圍內廣泛變化(如下列實例中所示)。所使用之濃度及/或劑量宜經過選擇以取得增強或增加之超越個別先前技藝之單獨成分的活性及/或使最低有效成分濃度之組成物的活性達到最大。因此，產生這類增強活性之重量比及/或濃度百分比不僅取決於所使用之特殊FFC組成物，亦取決於該組成物之特殊終端應用，包括，但不限於：氣候、土壤組成、欲處理之受質、物件及/或微生物宿主之性質及/或暴露於特殊微生物之可能。
製備調製劑或組成物之方法包括將本發明之組成物或一或多種成分化合物與載體，及，可選擇地，一或多種附屬成分結合之步驟。一般而言，該調製劑之製備可經由將這類組成物/成分與載體(如：液體或經精細分割之固態載體)結合，及，若需要時，將產品塑形來進行。
與本發明相關之調製劑(不論是本發明之組成物或任何倂入這類組成物之製造物件)可為膠囊、藥囊、藥丸、錠劑、粉末、顆粒、糊狀物之形式，或可為在水性或非水性液體中之溶液或懸浮液、或可為水中油或油中水液態乳劑、或為酏劑或糖漿、或為錠片(使用惰性基質，諸如凝膠和甘油、或蔗糖及金合歡膠)及/或為藥水(如：霧狀物、噴霧或嘴)，等之形式，其各含有預定量之本發明組成物或其成分。
於其他固態之這類調製劑(如：膠囊、錠劑、藥丸、糖衣藥丸、粉末、顆粒，等)中，本發明之組成物可與一或多種其他活性成分及/或可接受之載體混合，該可接受之載體係諸如檸檬酸鈉或磷酸二鈣，及/或下列之任一項：(1)充填劑或延展劑，諸如澱粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇及/或矽酸；(2)結合劑，諸如，例如：羧甲基纖維素、藻酸鹽、凝膠、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖及/或金合歡膠；(3)濕潤劑，諸如甘油；(4)崩散劑，諸如瓊脂、碳酸鈣、馬鈴薯或木薯粉、藻酸、某些矽酸鹽及碳酸鈉；(5)溶液阻滯劑，諸如石蠟；(6)吸附加速劑，諸如季銨化合物；(7)潤濕劑，諸如，例如：鯨蠟醇及甘油單硬脂酸酯；(8)吸附劑，諸如高嶺土及膨潤土；(9)潤滑劑，諸如滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固態聚乙二醇、月桂基硫酸鈉，及其混合物；及(10)染色劑。在膠囊、錠劑和藥丸之情況中，該組成物亦可包含緩衝劑。類似型態之固態組成物亦可利用諸如乳糖或牛奶糖，以及高分子量聚乙二醇，等這類賦形劑來作為軟及硬填充膠囊中之充填劑。
錠劑可經由壓擠或鑄造，及可選擇地加上一或多種附屬成分來製造。壓擠之錠劑可使用結合劑(例如：凝膠或羥甲基纖維素)、潤滑劑、惰性稀釋劑、防腐劑、崩散劑(例如：澱粉乙醇酸鈉或交聯之羧甲基纖維素鈉)、表面活性劑或分散劑。塑形之錠劑可經由在合適之機器中將以惰性液態稀釋劑濕潤之粉末狀活性成分的混合物塑形來製造。
錠劑和這類組成物或倂入這類組成物之物件的其他固體形式(諸如糖衣藥丸、膠囊、藥丸及顆粒)可選擇地以塗覆層及殼(諸如腸衣和其他調製技藝中所熟知之塗覆層)做記號或製備。其亦可經調製以緩慢釋出或控制釋出其中之活性成分，此可使用，例如：不同比例之羥丙基甲基纖維素來提供所需之釋出輪廓、其他聚合物母質、脂質體及/或微球。這些組成物亦可選擇地含有不透明劑且可為僅釋出活性成分之組成物，或者，宜在胃腸道之某些部分，選擇性地以延遲方式釋出活性成分。可使用之包埋組成物的實例包括聚合物質及蠟。活性成分亦可為微膠囊形式。
供使用或投服本發明之液態形式包括藥學上-或其他方面可接受之乳劑、混合物、微乳劑、溶液、懸浮液、霧狀物、糖漿及酏劑。除了本發明之組成物或其化合物成分外，液態形式可含有常用於本技藝之惰性物質或其他稀釋劑，諸如，例如：水或其他溶劑、助溶劑及乳化劑，諸如乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、醋酸乙酯、丙二醇、1,3-丁二醇、油類(尤其是，棉花籽、落花生、玉米、胚芽、橄欖、蓖麻及芝麻油)、甘油、四氫呋喃醇、聚乙二醇和山梨醇酐之脂肪酸酯，及其混合物。
除了惰性稀釋劑外，這類組成物及/或相關物件亦可包含佐劑，諸如，但不限於：潤濕劑、乳化及懸浮劑(如：供農業應用之黏膠劑及撒佈劑)、染色劑、香水和一或多種其他防腐劑。懸浮液可包含懸浮劑，例如：乙氧基化之異硬脂醯醇、聚氧化乙烯山梨糖醇及山梨醇酐酯類、微晶型纖維素、偏氫氧化鋁、膨潤土、瓊脂和黃蓍膠，及其混合物。
用於受質或局部(如：在個人護理或衛生產品方面)投服/遞送本發明之本組成物及/或合倂這類本發明組成物之物件或產品的調製劑包括粉末、噴霧、油膏、糊狀物、乳膏、塗劑、凝膠、溶液、貼布及吸入劑。除了本發明之本組成物外，這類油膏、糊狀物、乳膏及凝膠可含有賦形劑，諸如動物及蔬菜脂肪、油類、蠟、石蠟、澱粉、黃蓍膠、纖維素衍生物、聚乙二醇、矽膠、膨潤土、矽酸、滑石粉及氧化鋅或其混合物。同樣地，粉末及噴霧可含有賦形劑，諸如乳糖、滑石粉、矽酸、氫氧化鋁、矽酸鈣和聚醯胺粉末，或這些物質之混合物。噴霧可另外含有常用之推進劑，諸如揮發性之未經取代的烴類，諸如丁烷及丙烷，或在正大氣壓下投遞。
可用於本發明組成物中之合適的水性和非水性載體之實例包括水、乙醇、多元醇(諸如甘油、丙二醇、聚乙二醇，等)，及彼等合適之混合物、蔬菜油(諸如橄欖油)和有機酯類，諸如油酸乙酯。適當之流動性可藉由下述方法維持，例如：使用塗覆物質(諸如卵磷脂)、在分散液之情況中維持所需之顆粒大小，及使用界面活性劑。
合倂本發明組成物之物件或產物的廸波(depot)型可經由在生物可降解之聚合物(諸如聚乳酸-聚甘醇酸)中形成活性成分之微膠囊基質來製作。根據活性成分對聚合物之比例及所使用之特殊聚合物的性質可控制活性成分之釋出速率。其他生物可降解聚合物之實例包括聚(原酸酯)及聚(酐)。亦可將活性成分包圍在可與身體組織相容之脂質體或微乳劑中來製備廸波注射調製劑。
再者，本發明組成物及/或合倂這類組成物之物件或產品可包含具有類似及/或不同作用模式之額外的化學及/或生物、多位點及/或單位點抗黴菌或抗真菌、抗細菌及抗微生物劑，如熟習本技藝之人士所熟知者。這類作用劑可包括，但不限於：以碳酸氫鉀、二氧化矽、銅或硫為底質之化合物及/或植物油(如：楝樹油)。再者，這類作用劑可包括，但不限於唑類；聚烯類，諸如兩性黴菌素B及制黴菌素；嘌呤或嘧啶核苷酸抑制劑，諸如氟胞嘧啶；多抗黴素，諸如尼可黴素；其他幾丁抑制劑、延長因子抑制劑(諸如糞殼菌素及其類似物)；線粒體呼吸抑制劑、固醇生物合成作用之抑制劑及/或任何其他殺黴菌劑或熟習本技藝之人士已知之適合用於治療或防止植物、其他受質、動物及/或人類中之酵母菌或真菌、細菌、病毒及/或其他微生物感染、或可在任何之製造物件上或物件中找到之酵母菌或真菌、細菌、病毒及/或其他微生物感染的生物滅殺組成物。
於某些較佳體系中，倂入本組成物之物件或產物亦可包括一或多種本技藝已知之防腐成分，包括，但不限於：山梨酸或苯甲酸；苯甲酸、山梨酸、羥甲基甘胺酸及丙酸之鈉、鉀、鈣及銨鹽；對苯甲酸甲酯、乙酯、丙酯和丁酯，以及彼等之組合。
本發明之組成物可含有包含酸或鹼官能基之化合物，因此能與藥學上可接受或其他方面可接受之酸及鹼形成藥學上可接受或其他方面可接受之鹽類。"藥學上可接受之鹽"係指這類化合物之相對非毒性、無機和有機酸及鹼加成鹽。無論如何，這類鹽可經由將這類化合物與合適之酸或鹼反應來製備。合適之鹼包括這類可接受之金屬陽離子、氨或這類可接受之有機一級、二級或三級胺的氫氧化物、碳酸鹽或碳酸氫鹽。代表性之鹼或鹼土鹽類包括鋰、鈉、鉀、鈣、鎂及鋁鹽，等。用於形成鹼加成鹽之代表性有機胺包括乙胺、二乙胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、六氫吡井，等。代表性之酸加成鹽包括氫溴酸鹽、氫氯酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、硝酸鹽、醋酸鹽、纈酸鹽、油酸鹽、棕櫚酸鹽、硬脂酸鹽、月桂酸鹽、苯甲酸鹽、乳酸鹽、磷酸鹽、甲苯磺酸鹽、檸檬酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、萘酸鹽、甲磺酸鹽鹽、葡糖庚酸鹽、乳二酸鹽及月桂基磺酸鹽，等。
本發明之組成物可以水性分散液或乳劑之形式使用，且可以含有高比例之FFC(帶有或不帶有界面活性劑)組成物，可在使用前稀釋(如：水或另一種流體成分)之濃縮物形式取得。可乳化之濃縮物或乳劑可經由將本發明之組成物加上任何其他所需之活性成分溶解在選擇性地含有濕潤劑或乳化劑的溶劑中，然後將該混合物加入水(其亦可含有濕潤劑或乳化劑)中來製備。合適之有機溶劑包括醇類及乙二醇醚。較佳地，這些濃縮物應該要能禁得起長期貯存且經過這類貯存後可以水稀釋成水性製劑，且此水性製劑可保持均勻一段足夠時間以使其可藉由習知之噴霧儀器施用。
根據終端用途應用之形式，倂入本發明之組成物的物件或產物亦可包含任何其他所需成分，包括，但不限於：協助施用之固態或液態載體、界面活性劑(包括生物界面活性劑)、保護性膠體、黏著劑、增稠劑、觸變劑、滲透劑、安定劑、多價螫合劑、改性劑、調味劑(如：供採集後或加工食品/飲料施用)、糖類、染色劑，等如熟習本技藝之人士所熟知者。
例如：這類組成物及/或相關物件或產物可用於農業目的並與這類載體或稀釋劑一起調製。該組成物(經調製或未經調製的)可直接施用在植物之葉子、種子或其他生長植物之介質或欲種植植物之介質中，或者，其可被噴灑、噴撒在植物上、或以乳膏或糊狀調製劑之形式施用、或以蒸氣形式或緩慢釋出之顆粒形式施用。施用時可施用在植物之任何部分或接近植物之任何部分上，包括葉子、莖、樹枝或根，或施用在圍繞根之土壤、果實或蔬菜(採收前或後)上、或在種子種植前施用於其上、或廣泛施用在土壤上、施用在灌溉水或水耕培養系統上。亦可利用低體積或壓力、或電動噴灑技術、或任何其他本技藝或工業中已知之處理方法將本發明組成物注射入植物或噴灑在草木(包括果實及蔬菜)上。
於某些較佳體系中，無論是否為農產品或與食品加工有關，倂入本發明組成物之組成物及/或物件或產物可為包含固態稀釋劑或載體(例如：充填劑，亦為諸如：動物墊料或貓砂)、高嶺土、膨潤土、矽藻土、白雲石、碳酸鈣、滑石粉、粉末狀氧化鎂、漂白土、石膏、矽藻土及中國黏土)之可噴撒的粉末或顆粒形式。這類顆粒可為適合施用，不需進一步處理之預先成形的顆粒。這些顆粒可經由將本發明之組成物或另一活性成分注入充填劑小丸，或將活性成分及粉末狀充填劑之混合物製成小丸來製造。例如：用於施用在種子上之組成物可包含用於協助組成物黏附於種子之作用劑(例如：礦物油)；或者，該活性成分可利用有機溶劑調製成供施用在種子上。該組成物亦可為可濕潤之粉末或可分散於水之顆粒形式，其包含濕潤或分散劑以協助分散在液體中。該顆粒或粉末亦可含有充填劑及懸浮劑。或者，該組成物可以微膠囊化之形式使用。其亦可調製成生物可降解之聚合性調製劑，以緩慢、經控制地釋出活性物質。
無論如何，這類包含本發明組成物之固態調製劑可提供於多種不同形式、形狀或鑄形(包括，但不限於：圓錐形、棒狀、塊狀、膠囊、錠劑、藥丸、小丸(如：亦包括寵物食品)、條狀、釘狀，等)之產品或物件中。或者，可將粒化或粉末狀物質壓成錠劑，或填入多種膠囊或殼中。如上述所討論者，本發明之任何這類組成物(不論是經調製或未經調製的)可單獨使用，施用在受質或倂入產品或製造物品中以供多種終端用途應用，包括，但不限於：製藥、個人、工業及農業組成物，以及相關使用方法。
下列非限制性實例及數據說明與本發明之組成物及/或方法相關的不同觀點和特性，包括包含如此處所描述之不同成分化合物的抗微生物組成物類之製備方法和用途。與先前技藝相比較，本組成物和方法提供令人驚訝、出人意表/及與先前技藝相反之結果和數據。雖然本發明之用途係透過數種組成物及可與之一起使用之成分化合物的用途說明，熟習本技藝之人士可理解以多種不同之與本發明範圍相稱的其他組成物和成分化合物可取得可相比擬之結果。
實例1a
分離真菌。在2007年3月自玻利維亞亞馬遜區中生長之植物取出數個小蘇德鳳梨(Ananas ananassoides )莖。將其收集在鄰接12°40'07"S及68°41'58"W之雨林的稀樹草原區並立即送去分析。自莖切下數小(2-5吋)片並在層流淨化罩下置於70%乙醇中30秒。使用一對無菌鑷子將莖分別保持在火焰中以去除多餘之醇。然後，將內部組織(樹皮下方)之小片切除並置於馬鈴薯右旋糖瓊脂(PDA)上，在該瓊脂盤之中間挖一個小洞，並使白黏帚菌分離株620活躍生長於該盤之一側上。此技術可有效地用於選擇其他黏帚菌分離株(Worapong et al.,2001a&b)。在二週之培養期間，定期檢查該培養皿上有無任何真菌生長。一旦觀察到菌絲，將菌絲頂端以無菌方式自瓊脂切出並置於新鮮PDA上。以此方式找到分離株。使用數個培養皿(PDA)測定該真菌是否產生揮發性抗生素。此程序包括自培養皿中間移除1吋大之瓊脂部分，將該分離株栓接種在培養皿之一側上並使其生長數天，然後將測試有機體接種在該溝之另一側。
實例1b
真菌分類學.真菌本質上與小蘇德鳳梨有關且為屬於無孢子菌科(mycelia sterilia)之不全菌(deuteromycete)。當離開直射陽光時，在所有測試介質上之真菌菌落均帶白色。當置於直射陽光下時，在所有測試介質上之真菌菌落均帶粉紅色。在任何條件下均未觀察到孢子或其他子實體。菌絲(0.6-2.7微米)通常隨著生長逐漸分枝，有時形成完美的圈狀(約40微米)且具有與其聯結之花椰菜狀小體(3.5-14微米)。在所有條件下觀察時，所有測試介質上之新長出的菌絲均長成波浪形。PDA上之菌絲在3-4週內覆蓋住培養皿並產生果實味。
模式標本(Holotype )：小蘇德鳳梨上之內寄生菌。在希斯河(Heath River)區中之玻利維亞亞馬遜區中進行收集。模式標本僅來自一種小蘇德鳳梨莖，其係在希斯河區中收集。將存活之培養以捲曲黏帚菌存放於現存蒙大拿州大學真菌收集處，採集編號2347(2/29/2008)。捲曲黏帚菌(B-23)之18S rDNA及ITS序列已送至GenBank，編號EU195297。
完全世代(Telomorph )：此真菌之完全世代可根據GenBank資料庫中捲曲黏帚菌與炭角菌科(Xylariaceae )間18S rDNA基因序列資料之相似性而在炭角菌科中找到(Bruns et al.,1991;Reynolds and Taylor 1993;Mitchell et al.,1995;Guarro et al.,1999;Taylor et al.,1999)。來自捲曲黏帚菌之18S rDNA基因序列的分子數據顯示出與白黏帚菌分離株620為100%同源。
詞源學(Etymology )：屬名黏帚菌係取自拉丁字，意指發黴。此與由該屬之前三個分離株產生的味道性質一致。該種名為crispans，拉丁文意指"捲曲、波浪"。菌絲生長成有規律之波浪樣式。
實例2a
掃描電子顯微鏡檢查在Castillo，等人所描述之程序(2005)後，在實例1之分離株上進行掃描電子顯微鏡檢查。將支持真菌生長之瓊脂片和宿主植物片置於濾紙包中，再將其置於帶有Triton X100(一種濕潤劑)，在0.1 M二甲胂酸鈉緩衝液(pH7.2-7.4)中之2%戊二醛中，吸引5分鐘並留置一整夜。第二天，清洗小片，在水緩衝液1：1中更換6x15分鐘，接著，在10%乙醇中更換15分鐘，在30%乙醇中更換15分鐘，在50%乙醇中更換15分鐘，在70%乙醇中更換5x15分鐘，再在70%乙醇中留置一整夜或更久。然後，在95%中輕洗6次，15分鐘，再在100%乙醇中更換3次，15分鐘，接著，在丙酮中更換3次，15分鐘。將微生物物質經臨界點乾燥、鍍金塗覆後，利用Everhart-Thornley偵測器，以高真空模式之XL30 ESEM FEG記錄影像。利用可在線上取得之Image J軟體測量菌絲。
實例2b
真菌生物學該真菌在以水為基礎之基質上產生白色菌絲體。在任何實驗室條件下並未發現任何種類之子實體構造或孢子。菌絲傾向糾結成捲。其他黏帚菌亦具有此傾向(Worapong et al.,2001a)。新長出之菌絲傾向以波狀方式生長而非典形之直線樣式且常糾結成繩狀構造。此生長樣式證明可能可作為活體內接種硏究中鑑定本有機體中的診斷工具。此真菌亦產生花椰菜狀構造，其似乎藉由小股連接菌絲。這些子實體在任何條件下均不會發芽，因此顯示出不會產生孢子。此觀察結果似乎為黏帚菌屬所特有且未曾被注意到出現在任何其他一般的真菌品種。
實例3a
真菌生長及貯存當將數片康乃馨葉置於活躍生長之分離株頂端以助長孢子產生時，該分離株被測定出不會產生孢子或任何其他子實體，且在23℃下培育一週後未觀察到這類構造。亦將真菌接種在數種不同介質上(包括纖維素瓊脂(CA)、麥芽瓊脂(MA)、及玉米粉瓊脂(CMA))以測定是否顯示出製造孢子。除了在一些介質上的生長速率較慢外，該真菌無其他特徵顯示出不同且未觀察到子實體或孢子。
使用數種方法來貯存為純培養之經分離的真菌，其中之一係濾紙技術。亦令真菌生長在PDA上，然後將其切成小方塊，將小方塊置於含15%甘油之小瓶中並貯存在-70℃。亦藉類似方法，使用蒸餾水而非甘油將真菌貯存在4℃。然而，最有效之貯存方法係貯存在-70℃，經擾亂不育之大麥種子上。
實例3b
亦檢查經分離之捲曲黏帚菌的其他，更典型之特性並與白黏帚菌比較。捲曲黏帚菌在所有測試之介質上均產生生長緩慢、稠密、白色的菌絲體，除非其係被置於直射之陽光下(此點使菌絲體發展出淡粉紅色)。此點與白黏帚菌相反，白黏帚菌在所有相當之介質及測試條件下均產生白色的菌絲體(Worapong et al.,2001a)。幼菌絲亦以波狀方式生長而非如常從M.albus觀察到之特有電纜樣方式生長(Strobel et al.,2001)。在任何介質上(包括含有宿主植物物質或康乃馨葉者)均未形成孢子。菌絲之直徑不等(0.8-3.6微米)且通常糾結形成更複雜之構造，甚至是菌絲捲(第1-3圖)。這些菌絲通常較白黏帚菌所具者大(Worapong et al.,2001a)。
實例4
揮發物之定性分析.用於分析在培養皿中生長之10天大菌絲體培養上方空間中之氣體的方法與用於白黏帚菌株cz-620之原始分離株者相當(Strobel et al.,2001)。首先，將烘烤之"固相微萃取法"注射器(Supelco)(其係由在穩定之彈性纖維上的聚二甲基矽氧烷上之50/30二乙烯基苯/carburen所組成)通過在培養皿之一側挖出供真菌長芽的小孔放置。將纖維暴露於真菌之蒸汽相45分鐘。然後，將注射器插入惠普6890氣相色層分析儀(含一30米x0.25毫米I.D.ZB Wax毛細管柱，薄膜厚度0.50毫米)之不分流注射接口中。該管柱之溫度程式設定如下：30℃下2分鐘，接著，以5℃/分鐘達到220℃。載體氣體為超高純度之氦(當地經銷商)，起始管柱頭部壓力為50kPa。捕捉揮發物之前，使該纖維在240℃，氦氣流下適應20分鐘。使用30秒注射時間將樣本纖維引入GC中。氣相色層分析界面係連接以單位解析操作之惠普5973質量選擇檢出器(質譜儀)。在惠普ChemStation軟體系統上取得數據並進行數據演算。由真菌所製造之揮發性混合物中之化合物的初步鑑定係使用NIST資料庫，透過資料庫比較進行。
實例5a
分離真菌DNA及取得ITS-5.8S rDNA序列資料.將生長在PDA上之本發明真菌的10天大培養在25℃下利用快速均化：植物葉DNA增數套組(Cartagen；華盛頓州，USA)培育以作為DNA來源。所使用之一些技術與用於基因表徵其他來自澳洲之白黏帚菌分離株的技術相當(Ezra et al.,2004)。自一週大之培養切下該培養菌絲體之小方塊(0.5平方公分)。自小片之底部刮下瓊脂以儘可能多排除瓊脂。將小片置入1.5毫升Eppendorf小瓶中並在-80℃下培育約10分鐘。然後，根據套組製造者之指示萃取DNA。將萃取之DNA在二次蒸餾之無菌水中稀釋(1：9)，使用1微升樣本進行PCR增數。使用引物ITS1(TCCGTAGGTGAACCTGCGGG)和ITS4(TCCTCCGCTTATTGATATGC)藉由聚合酶鏈反應將ITS1，5.8S ITS2 rDNA序列增數。PCR程序係在含有下列物質之14微升反應混合物中進行：自真菌培養萃取到的1微升DNA(1：9稀釋)、0.5微升引物ITS1和0.5微升引物ITS4、7微升RedMixTM加帶有1.5mM MgCl2 之PCR混合物(GeneChoice,Inc.,馬利蘭州，USA)及5微升二次蒸餾水，PCR級(Fisher Scientific,Wembley,西澳大利亞，澳州)。PCR增數係在Biometra個人循環儀(Goettingen，德國)中進行：在96℃，5分鐘，接著，35個循環之95℃，45秒、50℃，45秒及72℃，45秒，然後，進行一次72℃，5分鐘循環。在1.3%瓊脂糖凝膠上，以TAE緩衝劑(來自Labnet國際公司之GelXLUltra V-2(美國紐澤西州Woodbridge)或來自Wealtec公司之Wealtec GES細胞系統(美國喬治亞州))在100V下利用凝膠電泳法檢查PCR產品30分鐘。將凝膠浸泡在0.5微克/毫升溴化乙啶溶液中5分鐘，然後在蒸餾水中清洗5分鐘。在生物成像系統(模型202D;DNR-成像系統，Kiryat Anavim，以色列)中，在UV光下進行凝膠成像。利用UltraClean PCR Clean Up DNA純化套組(MO BIO實驗室，公司，加州，USA)純化~500bp之PCR產物。將純化之產物送去進行直接PCR定序。利用ITS1和ITS4引物將PCR產物之二股定序。在MegaBACETM1000分析系統(Danyel Biotech Ltd.,Rehovot，以色列)上利用DYEnamic ET終結子進行定序。將序列提交NCBI網站上之GenBank。利用NCBI網站上之BLAST軟體將在本硏究中取得之序列與GenBank資料庫比較。
實例5b
捲曲黏帚菌之分子生物學.18S rDNA、ITS1、5.8S及ITS2之部分序列顯示出為DNA之高度保留區，因此，在有機體之分類中非常有用(Mitchell et al.,1995)。取得捲曲黏帚菌之這些分子識別部分序列並將其與GenBank中之資料比較。搜尋18S rDNA序列後，將525bp之捲曲黏帚菌進行進階BLAST搜尋。結果顯示出與525bp之白黏帚菌(AF324337)為100%相一致。捲曲黏帚菌之部分ITS1及2和5.8S rDNA序列與白黏帚菌(AF324336)、紅斑黏帚菌(M.roseus )(AY034664)、X.enteroleuca CBS 651.89(AF163033)、X.arbuscula CBS 452.63(AF163029)和Hypoxylon fragiform (HFR246218)的比較分析分別達到95、95、90、90和91%同源性。
實例6a
捲曲黏帚菌對抗植物病原之生物測定。依先前文獻中之描述，利用相當簡單之試驗測試捲曲黏帚菌之揮發性副產物蒸汽的微生物抑制活性(Strobel,et al.,2001)。將標準PDA培養盤中之一條瓊脂(2公分寬)移除，接種捲曲黏帚菌並使其生長於培養盤之一側約一週。然後，利用用於真菌之小瓊脂塊將測試真菌或細菌接種在培養皿之另一側。在瓊脂上劃上細菌及酵母菌(1.5公分長)。然後，以一片封口膜包裹培養盤並將其在23℃培育48小時。先藉由確認接種處是否有生長來測定捲曲黏帚菌對測試有機體生長之效果。若觀察到生長，測量二處真菌菌絲之直徑。藉由估計該細菌及酵母菌生長受影響之程度(以對照組培養盤上之生長百分比表示)來評估在細菌及酵母菌上之蒸汽的生物活性(Strobel,et al.,2001)。若未觀察到生長，在暴露於蒸汽後之某些時間點以無菌方式將測試有機體自測試培養盤移出並接種在新鮮PDA盤上，以確認該測試有機體之存活力。
利用前述方法學，當捲曲黏帚菌在23℃下，在PDA上生長7-10天，該真菌之揮發性副產物證明對數種真菌和細菌具致死力。使用革蘭氏陰性和革蘭氏陽性細菌，以及酵母菌和真菌之各主要類別作為測試有機體。大部分測試有機體100%受抑制且在暴露於捲曲黏帚菌之副產物後2天死亡(見表8)。一些測試有機體在暴露2天後不會被捲曲黏帚菌之揮發物殺死，但其生長明顯受該揮發性副產物抑制且其在暴露4天後死亡。這類有機體包括藍酪黴菌(Penicillium roquefortii )、小麥根腐病菌(Bipolaris sorokiniana )、大褐斑菌(Stagonospora )屬及尖鎌孢菌(Fusarium oxysporum )，等。
表8.捲曲黏帚菌之揮發性副產物對植物之許多真菌病原和一些各類細菌之作用。抑制值之計算係以與未受處理之對照組測試有機體相比較時生長被抑制之%表示。重複測試至少3次，所得結果相當。在暴露於真菌及該揮發性真菌副產物之蒸汽後48小時記錄該測試有機體之抑制程度。
*表示這些有機體劃在測試培養盤上若最後形成株落則標示生長指示。經適當暴露於捲曲黏帚菌之揮發性副產物後，將劃線區與對照組培養盤上之生長程度相比較並估計%抑制。最後，將各有機體重新劃在PDA培養盤上以測試存活力。
實例6b
參考表8，捲曲黏帚菌之揮發性副產物的蒸汽對葡萄孢菌(Botrytis)之效果很顯著，尤其是對灰葡萄孢菌(B.cinerea )(其為引起不同植物之灰黴的原因)。該抑制和滅殺效果亦可應用於蔥腐葡萄孢(Botrytis allii )，其引起洋蔥灰頸腐病。不受限於此，這類結果暗示本發明可有效用於修改產物表面或收成後之貯存大氣以預防黴菌和相關問題。同樣地，這類結果支持本發明之FFC組成物可用於治療洋葱(如：Vidalia洋葱)、冬葱及大蒜產物，以預防或控制真菌生長。
實例6c
來自捲曲黏帚菌之揮發物的蒸汽亦可有效對抗多種引起腐敗之真菌及穀粒(如：玉米、小麥、大麥、稻米，等)上生長真菌，本發明可與不同果實及蔬菜，諸如馬鈴薯、甜菜、胡蘿蔔甜馬鈴薯...之類穀粒、果實及蔬菜，不論收成前或後、貯存中或運輸中一起使用。因此，本發明之組成物及方法可應用於農業及食品加工領域中一些與主要真菌相關之問題，且可用於瞄準有機體，諸如，但不限於：黑斑病菌、枝孢黴、煙麴黴、青黴菌、二孢菌、鐮孢菌及赤黴菌(見，如：表8)。
實例6d
來自捲曲黏帚菌之副產物的蒸汽可有效對抗斐濟球腔菌(見，表8)。因此，本發明可用於治療香蕉及大蕉之與真菌相關的黑條葉斑病(Black Sigatoka disease)。
實例6e
柑桔潰瘍病(Citrus canker disease)威脅美國柑桔工業之生死存亡。如表8中所示，來自捲曲黏帚菌之副產物的蒸汽可有效殺死引起潰瘍病之病原柑桔潰瘍病菌(Xanthomonas axonipodis p.v.citri )。這類結果暗示本發明之FFC組成物和相關方法可有效用於治療種子、幼苗、圃、儀器或裝置(包括，如：工作儀器及工作服)及/或收成之果實以預防、抑制或控制潰瘍病。
實例7
運作以捲曲黏帚菌之揮發性副產物的蒸汽對抗多種其他植物和人類致病真菌和細菌之生物分析試驗以作為實例6之試驗及結果之追蹤。(見，以下表9)。令真菌生長在X盤上(其中四分之一為PDA)，在室溫下培育3-5天，再接種一或多種測試有機體。在接種同時製作對照組培養盤並令其生長在對個別測試有機體最理想之相同基質上。令測試有機體金黃葡萄球菌6538、豬霍亂沙門氏桿菌(Salmonella cholerasuis ) 10708、大腸桿菌11229、金黃葡萄球菌ATCC43300(MRSA)及霍亂弧菌ATCC14035生長在該X盤之剩餘的三個四分之一盤的胰酶大豆瓊脂(TSA)上。在室溫下，將各有機體之三個培養盤加上適當之對照組暴露於該真菌之副產物的蒸汽下約2、4及6天。為了檢查該測試微生物之存活力，以物理方式移出真菌，將對照組及測試培養盤置於35±1℃之培育箱中至少3至4天，但將分枝桿菌屬再多培育約一個月。以此來確認該副產物之蒸汽是否抑制或殺死該測試有機體並評估該有機體之存活力。依照此相同之議訂計劃測試鼠疫桿菌及炭疽桿菌，但將暴露時間改為3和5天，且將鼠疫桿菌暴露於真菌後在28±1℃和5%CO2 中培育。利用先前描述之議訂計劃，令海洋分枝桿菌ATCC927生長在剩餘的三個四分之一盤中的7H11瓊脂(Difco公司)上並在33±1℃下培育。在所有測試之三個複製組中的各有機體均有相同的表現。
在所有結核分枝桿菌株方面，亦令其生長在7H11上，自培養盤移出一塊瓊脂並插入B-23真菌(在PDA上)。然後，將來自肉湯之培養接種至培養盤上。亦接種在無真菌存在之對照組培養盤上。在各指定之期間自培養盤移出一塊瓊脂並將其轉移入一分開之空培養盤中，再置於35±1℃之培育箱中，以測定該微生物之存活力。將培養盤置於帶有沾濕之紙巾的塑膠袋中，以防止變乾。
令綠膿桿菌15442及泰國伯克霍爾德氏菌(Burkholderia thailandensis )70038二者生長在TSA瓊脂上。將其置於室溫中一段該有機體理想生長的時間，然後移至35±1℃之培育箱中並觀察之。注意：所有利用人類病原之試驗係在嚴格且聯邦政府核准之生物安全條件下進行。所有在人類病原上進行之試驗至少重複二次。
表9.捲曲黏帚菌之揮發性副產物對不同革蘭氏陽性及革蘭氏陰性細菌菌種的效果。暴露時間係根據所欲之特殊有機體而有不同，該測試有機體之存活力係在那段期間後測定(以生長或無生長表列)。
如表9中所示，所有四種耐酸細菌(結核分枝桿菌株)在暴露於活躍生長之捲曲黏帚菌(6-10天大之培養)後2、4、7和14天被殺死。其他在暴露於捲曲黏帚菌至少2天後被殺死之細菌為：金黃葡萄球菌6538、海洋分枝桿菌、鼠疫桿菌及豬霍亂沙門氏桿菌。暴露於捲曲黏帚菌後有點受影響或完全不受影響者如下：綠膿桿菌、泰國伯克霍爾德氏菌、金黃葡萄球菌(MRSA)、大腸桿菌、霍亂弧菌及炭疽桿菌。然而，金黃葡萄球菌(MRSA)僅稍生長成薄膜狀而非明顯之株落，因此，其受捲曲黏帚菌之VOCs影響。另外，炭疽桿菌盤僅有少數株落遺留在暴露之培養盤上，但移除捲曲黏帚菌並接著培育後有更多株落生長。因此，懷疑捲曲黏帚菌之副產物的蒸汽僅在對抗炭疽桿菌之營養細胞時有效，不能對抗孢子。在最後一次觀察時間(14天)後一個月，暴露於該真菌之任何培養盤上均未觀察到出現生長，而所有對照組培養盤均可觀察到出現生長。
下列實例之實驗說明本組成物之不同較佳體系及其用途。表10a中提供一種代表性組成物，但成分之量、濃度或比例不限於此。於某些較佳體系中，異丁酸之量可以相同量或約該量之丙酸取代。於某些這類或其他較佳體系中，可以醋酸取代乙醇及/或以醋酸或丙酸取代2-丁酮。再者，不同酯類可以該列出之酯類的異構物或同系物取代(如，但不限於：丙酸的2-甲基丁酯可以丙酸的3-甲基丁酯取代)。下列實例中所觀察到之結果係以表10a中所列之化合物的組成物取得。與上述者一致，使用不同之其他組成物時可具相當之效果。
表10a.用於控制有害微生物之食品和風味化合物之組成物。
*這些化合物在室溫下為液態且可彼此一起使用以提供可在室溫或可容許揮發之溫度及壓力下輕易揮發之液態組成物。
表10b.藉由電腦協助之ChemBioDrawTM 程式(如熟習本技藝之人士所理解者)，表10a中列出化合物的構造及替代名稱。
用於控制植物疾病之FFC組成物 實例8a
測量FFCs抑制及滅殺測試有機體之相對能力。以表10a中所列之相對比例將化合物置於小瓶中來製備測試溶液。將測試混合物(20微升)置於含PDA之培養皿中央的預先滅菌之微量杯(4×6毫米)中。當不使用時，將混合物貯存在0℃。將新鮮生長之測試有機體(如表9中所提出者)切成3毫米3 瓊脂塊(每一測試真菌至少3個瓊脂塊)，將瓊脂塊置於離開微杯2-3公分處並以二層封口膜包裹該培養盤。經過一段指定之期間後，從瓊脂邊緣測量菌絲體之生長。然而，在白地黴之情況中，將其劃線培養，再將來自已接種過之瓊脂盤的原始區域重新劃線以檢查新的肉眼可見之生長和存活力。亦設立合適之對照組(其中未在微杯中置入測試有機體)。在20微升之FFC混合物上進行至少二次測試，所得結果相當。
實例8b
以無菌方式移出小瓊脂塊，將其置於PDA盤上，1-3天後觀察其生長，或將白地黴在新鮮PDA盤上重新劃線，以測量該測試微生物之存活力。以此方式可評估該微生物之存活力。表11a中所示之結果指出下列表中之有機體均受特殊FFC組成物抑制且在大部分情況中係經由暴露於彼等而被殺死。這些包括：黑黴菌、青黴菌屬(在乳酪上)、菠菜褐斑病菌(Cercospora beticola )、黃萎菌、終極腐黴、棕櫚疫黴、斐濟球腔菌、立枯絲核菌、煙麴黴、白地黴、綠色木黴、靈芝屬、彎孢屬及洋葱灰色腐敗病菌(Botrytis alli )。因此，當適當施用時，FFC組成物有能力控制這些致病微生物。這類結果指出許多其他致病微生物可被此混合物抑制或滅殺。
表11a.不同植物致病微生物及其對本發明之代表性FFC組成物的感受性之簡單列表，該微生物係在經封口膜密封之培養盤中的馬鈴薯右旋糖瓊脂(PDA)上，於23℃下暴露於20微升混合物2天。最後，移出具測試微生物之瓊脂塊並置於正常PDA培養盤上以測試微生物之存活力。
實例8c
參考表11a之數據，所使用之FFC組成物的活性輪廓指出在數種情況下與捲曲黏帚菌及其揮發性副產物之蒸汽相比較時的不同及/或增強之抗微生物效果。
實例8d
參考前述實例及使用相當之技術和程序，以丙酸蒸汽處理相同病原。比較之結果顯示於下列表11b中，表11a之數據複製於A和B欄中，所觀察到之丙酸效果單獨提供於C欄中(%抑制)。20微升時，丙酸之量相當於本發明某些較佳體系中之丙酸的量。丙酸為先前技藝中已知具有抗微生物作用之多種單獨之化合物的代表。然而，如表11b之比較性數據所示，本組成物提供新協同結果，此結果超越吾人對於不在本發內容內之先前技藝單獨成份所獨立預期的結果。如其中所示，雖然先前技藝最佳時僅為抑制性，本發明組成物排除(即，滅殺)許多測試之病原。類似結果係經由與其他這類先前技藝之單獨化合物/組成物比較來取得。
表11b.顯示超越丙酸之改良的抗微生物活性的比較結果。
*100%抑制，但未測定存活力(ND)。
FFC組成物於治療結核病及其他人類病原之用途 實例9a
將四種之臨床藥物抗性株(5901867、50001106、59501228及3081)暴露於FFC組成物。在各分離株方面，將10微升培養置於7H11瓊脂盤之中間，然後以無菌塑膠環均勻塗佈在整個培養盤之表面。將0.65毫升微量離心管之蓋(顯微帽蓋)切除並將其在具有螺旋帽蓋之高壓滅菌管內，在121℃下高壓滅菌15分鐘。使用無菌鑷子移除顯微帽蓋，將其置於該接種盤之中心。對照組盤(每一分離株使用一個盤)未放置顯微帽蓋。各分離株各使用三個培養盤並將5、10或20微升之FFC置於各別培養盤之三個顯微帽蓋的各帽蓋中。然後，將培養盤置入內裝濕毛巾之以拉鍊鎖密封的袋中並在36℃±1℃下培育約28天。約暴露48小時後，移除顯微帽蓋並丟棄之，將培養盤放回培育箱。經常檢查紙中並重新溼潤之以防止介質脫水。所有對照組盤均有生長。所有暴露於5和10微升之揮發物的培養盤均有生長。僅有一暴露於20微升揮發物之分離株(50001106)有生長。注意：結核分枝桿菌之各分離株為本有機體之臨床藥物抗性株。所有實驗係在美國政府核准之生物安全實驗室條件(US Government Approved Biosafety Laboratory Conditions)下進行。
對照組盤及暴露於5和10微升之揮發物的培養盤係在4/14/08製成培養盤。暴露於20微升之揮發物的培養盤係在4/22/08製成培養盤。檢查所有培養盤數次。最後一次檢查係在5/19/08進行，未存活之那些有機體在表12中係以"--"表示。
表12.FFCs對具藥物抗性之結核分枝桿菌的生長之抑制效果。
本發明之FFC組成物對另一TB株之確實作用顯示於第1圖中：FFCs對結核分枝桿菌株(110107)的滅殺效果。左邊培養盤為未以20微升之FFCs處理48小時的對照組盤，而右邊培養盤為處理48小時之盤，然後，將此二種盤在36℃培育28天。從這些實驗明顯可知FFCs可殺死3/4之具藥物抗性的結核分枝桿菌的分離株。此為目前對使用這類FFC組成物治療結核病之動物試驗及最終，人類試驗的預期。
實例9b
與前述實例之數據一致，本發明較廣泛之觀點可得到證明。利用熟習本技藝之人士所熟知之材料和技術製備存活之培養及合適介質。例如：暴露於本發明之FFC組成物(如：直接接觸液態組成物或來自該組成物之蒸汽)可抑制下列大腸菌(革蘭氏染色及形狀)之生長或使其死亡：大腸桿菌(革蘭氏陰性，桿狀)、腸炎沙門氏菌(革蘭氏陰性，桿狀)、綠膿桿菌(革蘭氏陰性，桿狀)、金黃葡萄球菌(革蘭氏陽性，球狀)及單核球增多性李斯特菌(革蘭氏陽性，桿狀)。
同樣地，這類結果亦可以多種其他革蘭氏陰性及/或革蘭氏陽性菌取得或證明，這些細菌係諸如，但不限於：仙人掌桿菌(Bacillus cereus )(革蘭氏陽性，桿狀)及肉毒桿菌(Clostridium botulinum )(革蘭氏陽性，桿狀)。
實例10
計算一些已對人工組成物進行測試以模擬捲曲黏帚菌之揮發性副產物的測試有機體之IC50 。(見，表1)。參考表12，使用15微升之人工混合物可100%抑制所有測試有機體，且其中數種可以少如10微升之混合物滅殺之。黃萎菌、黃腐菌及煙麴黴甚至無法以最大體積之混合物(30微升)滅殺，但所有這三種均可以10或15微升之測試混合物100%抑制之。最敏感之有機體為終極腐黴，其可被10微升滅殺且可被2.5微升100%抑制，因此該IC50 值不必然反映該揮發物之滅殺能力，因為終極腐黴及黃腐菌擁有實際上相同之IC50 ，但其中之一被滅殺，另一則否(表13)。
表13.捲曲黏帚菌之揮發性副產物成分的人工混合物對不同植物病原之IC50 。將1微升至30微升之混合物量加入測試培養盤中央的無菌塑膠槽中，並將致病有機體置於該盤周邊。48小時後評估存活力並與未加入混合物，但盤中有無菌槽之對照組盤相比較。經過該期間後顯示出無生長之任何有機體被測定為100%受抑制，而在48小時後顯示出無生長且在48小時之評估後立即分離至PDA上仍然無生長者被視為死亡。以引起50%抑制所需之人工混合物的量(以微升計)除以培養皿之總空間(50毫升)來測定IC50 計算值。
FFC組成物於處理廢物以控制微生物腐壞之用途 實例11
將通常被認為是廢物品項的人工混合物分配至二個胺基彈筒盒。這些品項係由如下群體組成：廢棄之穀物項、花朵部分、肉類廢棄物、報紙纖維及混合之其他廢棄物。將含有0.2毫升前述FFC組成物之小燒杯置於一盒內。將不帶有FFC之燒杯置於另一盒內。將二個盒子在80℉培育10天。在該時間結束時打開盒子並檢查之。很明顯地，帶有FFC之盒中均未發生腐壞。另一方面，對照組盒已大量腐壞。使用FFC組成物來處理垃圾為一種保存垃圾，使垃圾在運送至全世界之設備場(將垃圾醱酵成與能量相關之產物(諸如甲烷))途中保持完整而不腐壞的機會。第4圖說明FFC組成物保護垃圾在此實驗條件下不會被微生物腐壞。
FFC組成物於處理乳酪以控制真菌腐壞之用途 實例12
將含有10毫升前述FFC組成物之小瓶倂入或與之一起及/或用來浸泡一片透明塑膠Saran包裹物10×10吋。將塑膠包裹物浸泡在FFC組成物中6天，滴乾水分再用來包裹滿滿接種青黴菌屬之乳酪株的乳酪塊。於另一實驗中，在乳酪塊上接種該真菌，再以一般Saran包裹物包裹之，然後注射10微升之FFCs。上述說明中指出合適之對照組為接種單獨之青黴菌屬，以單獨之包裹物、單獨之FFC處理及對照組(未處理)。將實驗乳酪塊在室溫下培育一週，再由實驗室工作人員嚐試各乳酪品項之部分。需注意，與新切割之貯存在冰箱中的新鮮乳酪塊相比較，此貯存方式對乳酪之味道並無不良影響。完全被真菌侵擾之乳酪塊未食用。從第2圖可明顯得知在包裹物下使用FFC組成物或使用經處理之包裹物實際上可使乳酪塊受到保護不會腐壞且無青黴菌生長。使用經處理之包裹物及在以單純之Saran包裹的乳酪下單獨注射10微升FFCs亦為相同情況。
FFC組成物於處理食品及植物部分(如：植物產物)以控制真菌腐壞之用途 實例13a
取得數個馬鈴薯以用於這些實驗。推想，污染表面而最終造成腐壞之微生物有豐富之量足夠接種。因此，在含有0.2毫升FFCs之小燒杯的存在下，將二塊馬鈴薯置於帽蓋密封之塑膠盒中。對照組盒中含有不具FFCs之燒杯。然後，將密封盒保持在室溫下10天再檢查之。如第3圖所說明，很明顯地，經處理之馬鈴薯塊的表面及較深處未發展出污染，而對照組馬鈴薯表面發展出數區污點及初期腐壞：未經處理之馬鈴薯在左邊，右邊之馬鈴薯係經FFCs處理。注意左邊之馬鈴薯頂端之大區域真菌腐壞。
實例13b
一種相關之終端應用：FFC組成物及/或其成分可施放在收成之果實或蔬菜產物上，以抵償自其除去之任何天然、蠟狀或保護外衣。例如：可以FFC組成物處理(如：以噴霧施用)收成之南瓜及類似產物(切除莖)來控制/抑制微生物生長，改良市場化及延長貨架壽命。
實例14
根據表2-7和10中所描述之組成物類型，與使用活白黏帚菌來控制由終極腐黴、立枯絲核菌AG2-2及絲囊黴(Aphanomyces cochlioides )引起之甜菜(Beta vulgoris L. )苗病和由根瘤綫蟲(南方根瘤綫蟲(Meloidogyne incognita ))引起之蕃茄(Lycopersicon esculentum )苗病相比較，本發明之合成的FFC組成物毫不遜色。該合成組成物與活真菌之以澱粉為基礎的調製劑在控制全部三種甜菜病原之猝倒病上效力相等且可顯著減少蕃茄根之根結線蟲癭的數目。以所使用之FFC組成物進行之速率硏究顯示出濃度為2微升/公分3 及0.75微升/公分3 之土壤載體/介質成分可分別良好控制甜菜之核菌及腐菌猝倒病。濃度為5微升/公分3 之沙可使南方根瘤綫蟲在24小時內100%死亡。利用活體外硏究相比較，此相同比例之生理性防制較以5克/升之沙施用之白黏帚菌侵擾地大麥調製劑產生較少之根結線蟲癭。
實例15
蕃茄潰病病菌(Corynebacterium michiganese )透過使組織枯萎和凋謝引起蕃茄嚴重損失。將本細菌之有效培養在營養肉湯瓊脂上劃線並將小蓋套放在培養盤之中央。在小蓋套中置入20微升之本發明的實驗室人工製備之FFC組成物。對照組盤不含FFC組成物。將盤培育24小時，再檢查之。經FFC處理之盤上無細菌生長。(見，第5圖)。如此，本發明之FFC組成物可用來治療(但不限於此)蕃茄籽、植物或產品。或者，FFC組成物可與水混合作為前床土浸液。
實例16
參照前述且符合數個前述實例，本發明之一系列FFC組成物可預防或治療活躍之疾病狀態，這類疾病包括，但不限於影響甜菜、蕃茄、洋葱、穀粒、香蕉及大蕉和柑橘作物，等。
更常地，本組成物及方法可針對治療及增進種子、植物、產物及/或相關食品的存活力---不論是預防性或在真菌或細菌微生物之存在下，也不論生命周期之階段(如：游動孢子，等)、發育、生長或感染程度。因此，如本技藝中之人士所理解，不論何種形式(如：粉末、顆粒、液體、薄霧、懸浮液、蒸汽、糊狀物、凝膠、塗覆層，等)，這類組成物可包含及/或施用在種子、幼苗或植物(如：根、莖、葉，等)或來自彼等之產物(如：收成前或後)的表面上或與其接觸。
實例17
FFC組成物及/或其成分(單獨或可倂入不同之其他組成物中)可用於多種家禽、產品和相關食品加工業的終端用途之應用中。下列實例提供數種這類非限制性應用。
實例17a
根據表2-7和10中所描述之組成物類型，本發明之FFC組成物係用於處理多種蛋類產品，包括，但不限於全蛋和液態全蛋、營養强化全蛋、和液態營養强化全蛋、鹹全蛋及液態鹹全蛋、糖全蛋及液態糖全蛋，和這類產品(無論是否為液態)與糖、糖漿固體、糖漿、右旋糖和糊精及/或膠和增濃劑之混合物，加上炒蛋混合物和液態炒蛋混合物、降低膽固醇之蛋產品和液態產品和彼等之混合物，以及含有少於約10%蛋固體的相關產品、有殼蛋及蛋成分，包括，但不限於去膽固醇之蛋黃。熟習本技藝之人士將理解這類術語且這類術語具有工業及正規用途所接受之標準意義。
實例17b
同樣地，本發明之不同FFC組成物(包括，但不限於那些使用丙酸至少部分取代異丁酸者)可用於製備及/或包裝貨架生命延長(ESL)之液態蛋類產品，包括，但不限於：全蛋、炒蛋混合物、蛋黃及蛋白液態產品。
實例17c
同樣地，本發明之不同FFC組成物可用於處理破裂之空蛋殼。如本技藝中所理解者，使用可用之技術及加工儀器，FFC組成物及/或其成分─單獨或倂為另一組成物之一部分─可施用(如：噴灑)在空蛋殼上，再將空蛋殼進一步處理成，如：營養產品。同樣地，使用本技藝已知之設備和技術可將本發明之一或多種組成物施用於或倂入、或用於處理家禽畜體、肉或相關之肉類產品。推而廣之，熟習本技藝之人士可理解本發明亦可用於其他類型之動物畜體、肉、加工之肉類產品以及所有其他型式之動物肉品(如：哺乳動物、鳥類、魚類、蝸牛、蛤蜊、甲殼綱、海產及其他可食物件)，此亦說明於下列之一或多個實例中。
實例17d
作為前述實例之延伸，這類FFC組成物可倂入這類加工之營養產品(如：草本及香料膠囊或錠片)中以抑制細菌/真菌生長。
實例17e
雖然前述實例說明不同之下游加工應用，本發明可更廣泛地用於蛋及家禽產品中。不受限於此，本發明之FFC組成物或相關成分可被引入任何家禽或蛋生產設備中及/或施用於與此相關之任何用具或機器。例如：作物或生長/下蛋設備之空氣或表面處理可控制、減少及/或抑制空中傳播及表面沈積之污染物及接著生長於其上之微生物。
實例18
FFC組成物或一或多種其成分可倂入多種其他加工產品中，包括具有支持微生物生長之水活性的食品產物。例如：可將這類組成物或成分倂入腐殖土、花生醬及其他這類塗醬、調味汁和混合物中。關於花生種植業，本發明之組成物和相關成分可在花生殼破裂之前及之後、首次清洗花生之後施用在花生上、施用在相關之加工產品(如：花生醬)及/或包裝用具和包裝材料上。
實例19
同樣地，本發明之FFC組成物/成分(如：一或多種上述表2-7及10之組成物，或其中所描述之種類的變體)可作為皮膚護理或治療產品或倂入多種皮膚護理或治療產品中，不論調製劑為何(如：擦劑、油膏、乳膏，等)。
實例19a
例如：痤瘡通常係由一或多種侵入皮膚毛囊之細菌種類引起。製備本發明之丙酸取代的FFC組成物之水性調製劑並用於治療出現與年齡相關之痤瘡的青少年男性個體，以證明本發明之其他用途。藉肉眼觀察，每三天敷用一次共三週後可明顯減少痤瘡損害之數目和強度。
實例19b
將本發明之FFC組成物倂入(約2重量%)代表性之開架式皮膚乳膏製劑中以證明本發明於消費者及/或健康護理產品之另一用途。參考第6圖，製備PDA盤並與左上方之對照組乳膏(不含FFC成分或組成物)；右上方之被細菌細胞污染的對照組乳膏；左下方之具有FFC組成物的“經處理”乳膏；及右下方之帶有細菌污染的“經處理”乳膏一起培育一天。如所示，經由倂入適度濃度之本發明FFC組成物可預防細菌在這類皮膚乳膏產品中生長。
實例20
同樣地，本發明可與多種口腔衛生、護理及治療產品一起使用。不受限於此，下列實例證明上述之丙酸取代的FFC組成物種類的這類用途。或者，可根據此文中他處描述之表2-7及10的組成物，或其變體來使用多種不同之其他FFC組成物。
實例20a
例如：使用約1%這類FFC組成物來配製潄口水/清洗產品，以說明這類口腔護理/衛生產品。經由將這類FFC組成物倂入市售之現成潄口水/清洗產品中來製備這類產品中。不論濃度或劑量，亦可將本發明之FFC組成物倂入牙膏/凝膠或相關之牙齦、嘴巴、口腔或牙齒護理產品中。
實例20b
扁平苔癬(Lichen planus)(LP)為可在嘴巴內或其他黏膜上產生之皮膚自體免疫疾病。當膜變得不穩定，細菌或真菌可在這些區域定居並使該組織疼痛、發紅、感染、流血及腫脹。為了減少本疾病中外來細菌涉入的起因，製備含有1%這類FFC組成物之水性溶液的潄口水產品。患者每日清洗嘴巴2至3次，至少3-4分鐘再吐出。在施用治療前及治療3週後照相。3週後，結果顯示出牙齦發紅幾乎完全減輕且嘴巴及牙齦疼痛幾乎完全減輕並回復至接近正常之牙齦顏色及其他黏膜顏色。患者報告與先前經驗相比較，來自LP之疼痛/流血接近完全停止且最為緩解。
實例20c
使用在現成潄口水中之前述FFC組成物的1%溶液來減少牙斑並治療由與口腔問題相關之細菌引起的其他問題。每日清洗嘴巴3至4次，持續二個月可很少或未形成牙斑。最初記錄為紅色、腫脹且容易引起流血(其實際上係由牙醫記錄)之牙齦現在顯示出顏色正常且以"探查"儀器檢查時未流血。
實例20d
為了確認這類FFC組成物的效力，將來自前述實例之嘴巴唾沫置於營養瓊脂盤之一側，將來自非FFC市售潄口水之嘴巴唾沫置於同一瓊脂盤之另一側，非清洗之唾沫置於另一培養盤上。然後，將唾沫培育2天。相比下：非清洗唾沫中之細菌載量高；如所預料者，該非FFC清洗唾沫之細菌載量減少；但FFC清洗唾沫未偵測到細菌。
實例20e
於另一實例中，口腔外科醫師在口腔手術前測試一FFC組成物(如：1%之市售清洗/潄口水產品)。患者將未處理之嘴巴唾沫置於瓊脂盤(營養瓊脂)上，以FFC清洗溶液清洗並將唾沫置於另一瓊脂盤上。培育2-3天後，FFC清洗處理盤上無細菌株落，表示在口腔手術前及後使用可治療或抑制牙齒或其他口腔感染。
實例21
乳牛中之乳腺炎係由與極為相關之複合細菌引起。根據本發明之不同非限制性較佳體系，下述種類之FFC組成物或經鼠李糖脂改質之FFC組成物可無條件在擠奶時間施用以降低細菌感染及乳品污染之預期。
實例22
本發明之不同FFC組成物可用於減少工業/醫療上重要之生物膜上的微生物載量。關於後者，從假牙至人工關節之項目均可在手術植入前以本發明之FFC組成物處理之。
實例23
本發明之FFC組成物可用於控制衣物之真菌及細菌蛀蝕，尤其是那些暴露於潮溼環境者(即，皮革、鞋、靴、帶子、領帶、腰帶)。例如：將0.2毫升之1%上述種類FFC組成物施用在已全濕之靴子上。圍住靴子以保持所產生之蒸氣數小時，再暴露於乾燥空氣中。結果顯示出未蛀蝕且靴子乾燥後未殘留黴味。
實例24
本發明之組成物可包含不同FFC成分且可依熟習本發明技藝之人士所理解者配製。不受限於此，不論終端應用或治療為何，可將一或多種本發明FFC成分及/或相關組成物倂入不同之抗細菌或抗黴菌組成物中。不受限於此，這類組成物可包含鼠李糖脂界面活性劑成分--單獨或與本技藝已知之抗細菌或抗黴菌成分種類聯合。關於後者，這類組成物可包含丁香黴素及/或假單胞黴素成分。
更具體地說，如熟習本技藝之人士所理解者，鼠李糖脂成分可包含一或多種美國專利案編號5,455,232及5,767,090(其全部內容各納為此文之參考資料)中所描述之化合物種類。這類鼠李糖脂化合物(不論是否為本技藝目前所已知或之後分離及/或決定特性者)可具有其中所揭示之結構或有些改變。例如(不受限於此)：不論是從合成衍生或天然產生(如：來自假單胞菌種或其菌株)之酸形式及/或為對應之酸鹽，這類化合物可在一或多個酶羥基位置處被烷基及/或醯基取代(如：分別被甲基及/或乙醯基及其較高之同系物取代)。同樣地，不論為單-及/或二鼠李糖形式，任何這類化合物乏疏水部分可有不同。一種非限制性實例：參考第7A及7B圖，m和n可獨立地為約4至約20，不論這類部分為飽和、單飽和或多飽和，無論該疏水部分是否質子化，其以帶有任何抗衡離子之共軛鹼形式存在或係自其衍生。與本發明之較廣的觀點相一致，用於這類組成物中之鼠李糖脂在構造上僅受限於所產生之表面活性功能及/或聯合本發明之FFC組成物的抗微生物效果。因此，國際刊物WO 99/43334中所描述之結構變化亦為本發明所考量者，這類刊物之全部內容納為此文之參考資料。亦見，第8-9圖之非限制性鼠李糖脂成分/結構。
不考慮抗微生物藥或鼠李糖脂本身，本發明組成物之載體成分可包含選自如下群體(但不限於此)之流體：水、醇、油、氣體或其組合。例如：雖然這類組成物不受限於抗微生物藥之量或濃度(如：重量%)或鼠李糖脂量，包含水及/或醇之載體可用於協助所需之配製、運送、貯存及/或施用性質，以及有效濃度和所產生之活性。
這類鼠李糖脂界面活性劑成分、抗黴菌成分及/或相關組成物包括，但不限於描述於待審申請案序號11/351,572中，尤其是其實例9-15中，這類申請係在2006年2月10日提出且其全部內容納入此文作為參考資料。這類鼠李糖脂界面活性劑成分、抗黴菌成分及/或相關組成物可倂入或可與一或多種本發明之FFC成分及/或FFC組成物一起使用。這類抗細菌及/或抗黴菌成分為熟習本技藝之人士所已知且可購得。不同之鼠李糖脂成分及相關界面活性劑組成物可從Jeneil Biosurfactant,LLC(商標為Zonix)購得。
實例25
用於說明這類鼠李糖脂相關變化，例如：可以一或多種鼠李糖脂成分及一或多種本發明FFC組成物(及/或一或多種其FFC成分)製備多種組成物以作為多種果實及蔬菜之採集後清洗或治療劑，或與其一起使用。不受限於此，在這類組成物中，鼠李糖脂成分(如：前述'572申請案中所描述者)之存在量可為約0.1重量%至約99.9重量%且FFC組成物/成分(如：上述表2-7及10之組成物)之存在量可為約99.9重量%至約0.1重量%。參考適用之EPA條例，前述Zonix鼠李糖脂界面活性劑並無耐受性限制。同樣地，本發明之FFC組成物/成分並無耐受性限制。因此，以這類鼠李糖脂/FFC組成物處理之食物可不需清洗而直接食用。
實例25a
根據前述，鼠李糖脂/FFC組成物可用於清洗柑橘類果實。利用8.5%鼠李糖脂溶液(在水中)及5%FFC溶液(如：在水中之表10a的組成物)製備一種這類清洗/洗滌組成物。將1加侖之95：5(體積/體積)混合物稀釋成425加侖。利用本工業中已知或適用狀態或聯邦條例下所需之程序議定計劃，本組成物可有效清潔及滲透柑橘果皮--殺死表面及內部之細菌和真菌。雖然柑橘類果實顯示出有效之結果，此組成物及相關之鼠李糖脂/FFC組成物可同樣有效地與任何果實或蔬菜(如，但不限於：藍莓、蕃茄、葡萄、洋葱、甜菜、甜薯、蘋果、梨子、鳳梨及不同之其他熱帶產物，諸如，但不限於諾麗果和巴西紫莓，等)之採集後清洗或處理劑一起使用。以本實例之FFC組成物清潔或處理之果實/蔬菜被視為可供人類安全且衛生地食用。
實例25b
不論是否具有倂入之鼠李糖脂成分，本發明之不同FFC組成物可在果實及蔬菜包裝或裝罐時或之前用於處理不同之果實及蔬菜(如，但不限於：梨子、水蜜桃、蘋果、蕃茄、杏桃、芒果，等)，以減少細菌/真菌之負載。
實例26
FFC成分化合物之採購.用於本發明組成物之成分化合物可購得或利用為人熟知或文獻中描述之合成技術製備。(見，如：美國專利案編號6,911,338，其全部內容納為此文之參考資料)。
或者，由於與某些較佳體系(包括，但不限於：動物及人類食物和飲料、個人護理及化妝品和相關之加工及製造技術)聯同時可能較佳，GRAS成分化合物及本發明之相關FFC組成物可透過醱酵技術自然衍生且可自威斯康辛州Saukville,Jeneil Biotech公司購得。因此，根據終端使用或應用，本發明之不同組成物可包含衍生自細菌醱酵物之化合物、化學合成之化合物和醱酵及合成來源之化合物的不同混合物。
參考前述，下列實例說明一或多種本發明組成物之非限制性用途或合倂，如熟習本技藝之人士所理解之這類用途或合倂可用來了解本發明且描述於數個先前專利中，其各納為此文之參考資料來用於說明，以使熟習本技藝之人士可解本發明之這類用途或合倂。
實例27
說明其他較佳體系，本發明之不同組成物可經配製來作為果汁飲料之添加劑(如納入參考之美國專利案編號6,566,349中所描述者)。例如：本發明之組成物可與類黄酮化合物及/或抗氧化劑一起加入果汁中或作為其替代品，或可在加工前預先施放在果實及蔬菜上，以增加產品之貨架壽命。如熟習本技藝之人士所理解者，這類'349專利案之組成物可經改質以包含一或多種本發明之組成物，所包含之用於任何終端應用之量均可直接測定，而不需大量實驗。
實例28
本發明之組成物亦可配製成供用於保存茶及茶/水果混合物飲料(如納入參考之美國專利案編號5,866,182中所描述者)。例如：本發明之組成物可與K-山梨酸酯及/Na-苯甲酸酯、抗壞血酸及二碳酸二甲酯一起使用或作為其替代。如熟習本技藝之人士所理解者，這類'182專利案之飲料可經改質以包含一或多種本發明之組成物，所包含之用於任何特殊應用之量均可直接測定，而不需大量實驗。
實例29
本發明之組成物亦可配製成供用於保存及/或增強止汗劑和除臭劑之抗微生物效果(如納入參考之美國專利案編號5,176,903中所描述者)。例如：本發明之組成物可與對苯甲酸酯、咪唑啶脲、季銨鹽-15、苄基醇、苯氧基乙醇和多種其他合適之防腐劑一起使用或作為其替代，且在止汗劑/除臭劑中加入一或多種這類組成物可防止降解、延長貨架壽命及/或增加效力，所包含之量可由本技藝之一般技術人士直接測定，而不需大量實驗。
實例30
本發明之組成物亦可配製成供用於止汗劑中(如納入參考之美國專利案編號4,548,808中所描述者)。例如：可將有效量之一或多種本發明組成物加入'808專利中所描述之實質上無水的非醇類止汗劑產品中，以延長貨架壽命並增強抗微生物之效果，該有效量可由本技藝之一般技術人士輕易地測得，而不需大量實驗。
實例31
本發明之組成物亦可配製成供用於動物/寵物食物(例如：狗食)中(如納入參考之美國專利案編號3,119,691中所描述者)。本技藝之一般技術人士可察知本發明之一或多種組成物可加入低水合狗食、高水分狗食及再水合狗食中以延長產品之貨架壽命(揭示於'691專利案中)，這類組成物之量可容易測定，不需大量實驗。
實例32
本發明之組成物亦可配製成供用於貓砂中(如納入參考之美國專利案編號5,060,598及4,721,059中所描述者)。多種不同之吸附物質(包括，例如：黏土、苜蓿、木片及木屑)和增加吸附之物質(包括黏土類填料('059專利案)和泥炭('598專利案))可用於吸附尿和控制氣味。本發明之一或多種組成物可與這些物質一起使用以減低或排除微生物活性並在使用貓砂後控制氣味，這類組成物之量可容易測定，不需大量實驗。
實例33
本發明之組成物亦可配製成供用於噴霧消毒劑施用中(如納入參考之美國專利案編號6,250,511中所描述者)。'511專利案中描述包含在噴霧瓶中之治療液(其包含約25%至75%之至少一種乙二醇化合物、0.2%至60%之抗微生物成分、5%至45%之界面活性劑和可選擇之有效量的香水、染料及其他添加劑)。例如：本發明之一或多種組成物可與'511專利案中之消毒劑一起使用以替代抗微生物成分或加至其中作為添加劑，這類組成物之量可由熟習本技藝之人士輕易測定，而不需大量實驗。
實例34
本發明之組成物亦可配製成供用於清潔及/或消毒食物及飲料加工設備(如納入參考之美國專利案編號RE40,050中所描述者)。雖然'050 Reissue教示鹵素二氧化物組成物，這類調製劑可由熟習本技藝之人士修改以取代本發明之一或多種組成物，這類組成物之量可由熟習本技藝之人士輕易測定，而不需大量實驗，且可利用'050 Reissue中所描述之儀器和技術與這類加工設備接觸或施用於此。
實例35
本發明之組成物亦可如納入參考之美國專利案編號4,988,576中所描述者，配製成供用於保存木頭(及納入參考之美國專利案編號7,449,130中所描述之木質纖維素)。'576專利案中教示以包含木質磺酸鹽、羥基苄基醇及金屬鹽或金屬鹽之混合物的接枝共聚物之溶液，或至少一種木質磺酸鹽之接枝共聚物(該共聚物為木質磺酸鹽及丙烯酸單體之反應產物)注入木頭。例如：本發明之一或多種組成物可單獨使用或與這類'576專利(或'130專利)所教示之防腐劑組合來注入及保存木頭，這類組成物之量可由熟習本技藝之人士輕易測定，而不需大量實驗。
實例36
本發明之組成物亦可配製成供與衛生及/或消毒拭巾一起使用(如納入參考之美國專利案編號4,575,891中所描述者，該篇教示以消毒劑部分飽和之墊子)。'891專利案中描述為醇溶液之合適消毒劑及其他抗菌溶液。例如：本發明之一或多種組成物可單獨使用或與這類消毒劑一起使用，並倂入這類擦拭巾材料中，這類組成物之量可由熟習本技藝之人士輕易測定，而不需大量實驗。
實例37
本發明之組成物亦可配製成供與手部消毒塗劑一起使用(如納入參考之美國專利案編號6,187,327中所描述者)。例如：本發明之一或多種組成物可配製成供加入'327專利之塗劑中並與其一起作用，或取代該塗劑中之任何活性成分以改良抗微生物效果。'327中亦揭示多種其他已知之手部消毒劑(如：兩性-陽離子界面活性劑、陽離子界面活性劑、濕潤劑及非離子性復原劑)。無論如何，本發明之組成物可納入，以取代任何這類手部消毒劑中之活性成分或與其一起使用，這類組成物之量可由熟習本技藝之人士輕易測定，而不需大量實驗。
實例38
本發明之組成物亦可配製成供用於處理可食性或作物種子(如納入參考之美國專利案編號4,581,238中所描述者，該篇專利教示將種子與具有山梨酸酯分散於其中之蒸氣接觸)。例如：使用其中揭示之技術及裝置使本發明之一或多種組成物揮發或施放在這類種子上，這類組成物之量可由熟習本技藝之人士輕易測定，而不需大量實驗。
實例39
本發明之組成物亦可配製成供用於預防或抑制破壞性有機體之生長(如納入參考之美國專利案編號4,356,204中所描述者，該篇專利教示將食物與可有效抑制生長之酮基己酸量接觸)。本發明之一或多種組成物可單獨使用或與這類酮基己酸一起使用以進一步抑制及/或殺死破壞性有機體。同樣地，納入參考之美國專利案編號2,711,976中建議使用胺基酸來增加蛋奶食品對破壞性有機體及葡萄球菌種之抗性。再者，本發明之一或多種組成物可單獨使用或與這類胺基酸一起組合或取代胺基酸。同樣地，納入參考之美國專利案編號2,866,819中建議使用山梨酸作為食品中之防腐劑。再者，本發明之一或多種組成物可單獨使用或與山梨酸一起組合或取代山梨酸。同樣地，納入參考之美國專利案編號2,910,368中揭示EDTA與山梨酸於增加蔬菜貨架壽命之用途。再者，本發明之一或多種組成物可單獨使用或與EDTA及/或山梨酸組合使用。在各情況中，本發明之這類組成物的使用量可由熟習本技藝之人士輕易測定，而不需大量實驗。
實例40
本發明之組成物亦可配製成供用於處理果實、種子、穀粒及豆科植物(如納入參考之美國專利案編號5,273,769中所描述者，該篇專利教示將任何欲處理之品項置於容器中，再引入二氧化碳及氨)。例如：熟習本技藝之人士了解使用其中所描述之裝置和技術可有效利用本發明之一或多種組成物，而不需大量實驗。
實例41
本發明之組成物亦可配製成供用於處理牙科及醫療物件/裝置和植入物，後者更具體地描述於納入參考之美國專利案編號6,812,217(其教示一種抗微生物聚合物膜，此膜係供施用在可植入之醫療裝置的外表面上)中。例如：使用此文中描述之技術種類亦可將本發明之一或多種組成物置於這類裝置或物件(無論是醫學或牙醫)上或與這類裝置或物件或其上之聚合物膜合倂，以提供抗微生物效果，這類組成物之量可由熟習本技藝之人士輕易測定，而不需大量實驗。
實例42
本發明之組成物亦可配製成供用於處理紡織品(如納入參考之美國專利案編號5,968,207中所描述者，該篇專利教示藉由擴散或注入法將三氯沙酯施用在紡織品纖維或布料上)。例如：本發明之一或多種組成物可配製成供單獨使用或與這類化合物組合以改善紡織品或其纖維(無論是人造、天然或混合的)之抗微生物性質，這類組成物之量可由熟習本技藝之人士輕易測定，而不需大量實驗。
實例43
本發明之組成物可配製成供用於處理食品加工設備、相關儀器及食料之表面(如納入參考之美國專利案編號7,575,744中所描述者)。例如：使用其中描述之技術和設備種類，本發明之一或多種組成物可配製及置於多種食品加工設備之儀器和食料表面上以減少或排除微生物活性，這類設備/儀器包括，但不限於：點心、家禽、柑橘、花生及相關之食品加工設備/儀器。這類組成物之量可由熟習本技藝之人士輕易測定，而不需大量實驗。
實例44
本發明之組成物亦可配製成供用於治療農場動物及家畜之與微生物相關的疾病(如：乳腺炎、口啼疫，等)，並抑制作物、植物、穀粒及其他食料上之微生物生長(如納入參考之美國專利案編號7,192,575中所描述者，該篇專利教示施用包含丁香苞油、尤加利樹油、薰衣草油、茶樹和柑橘油之組成物)。例如：本發明之一或多種組成物可單獨使用或與'575專利中所描述者組合，這類組成物之量可由本技藝之一般技術人士輕易測定，而不需大量實驗。
實例45
本發明之組成物亦可配製成供用於保存食料，諸如沙拉醬、醬汁、醃泡汁、作料、塗料、奶油、人造奶油、奶製品，等，使其不被微生物敗壞(如納入參考之美國專利案編號6,156,362中所描述者，該篇專利教示抗微生物成分之組合)。本發明之一或多種組成物可配製成供單獨使用或與一或多種'362專利案中之成分組合，這類組成物之量可由本技藝之一般技術人士輕易測定，而不需大量實驗。
實例46
本發明之組成物亦可配製成供用於與多種水性塗料及有機塗料、著色劑和相關之表面塗層合倂(如納入參考之美國專利案編號7,659,326及其中所列舉之權威內容(如：Kirk-Othmer-Paint;1046-1049頁，第17冊；1996,Arthur A.Leman著，其全部揭示內容納為此文之參考資料)所描述者)。例如：本發明之一或多種組成物可配製成供單獨使用或與'362專利案中之另一抗微生物成分組合，這類組成物之量可由熟習本技藝之人士輕易測定，而不需大量實驗。
實例47
本發明之組成物亦可配製成供用於刮鬍後產品或倂入其中(如納入參考之美國專利案編號6,231,845中所描述者)。例如：本發明之一或多種組成物可配製成與'845專利案中所描述之成分一起使用，以提供先前技藝之這類刮鬍後產品抗微生物效果。這類組成物之存在量可由熟習本技藝之人士輕易測定，而不需大量實驗。
實例48
本發明之組成物亦可配製成供用於或倂入處理畜體、肉類或肉類產品(如：哺乳動物、鳥、魚、蛤蜊、甲殼動物及/或其他形式之海產，和其他可食物種)之產品中(諸如納入參考之美國專利案編號7,507,429中所描述者)。例如：本發明之一或多種組成物可配製成供單獨使用或與另一種抗微生物成分組合以供倂入'429專利中所描述之產品種類中。這類組成物之存在量可由熟習本技藝之人士輕易測定，不需大量實驗，而對應之產品可利用'429專利中所描述之技術和設備施用或使用，或者，本發明技藝中之技術熟習人士可理解之。
實例49
本發明之組成物亦可配製成供用於或倂入用於食品(這類產品包括，但不限於：點心、穀類加工食品及其他食品成分、納入參考之美國專利案編號7,163,708中所描述之該類點心、穀類加工食品和物質種類)之物質(如：用於塗覆之物質或其他倂入物)中(如納入參考之者)。不受限於如何施用這類物質，本發明之一或多種組成物可單獨使用或與一或多種抗微生物劑或這類物質之防腐成分一起使用(如'708專利中所描述者)。因此，熟習本技藝之人士可輕易測定出這類組成物之存在量，而不需大量實驗。
實例50
本發明之組成物可配製成供與多種可食性塗醬組成物(包括，但不限於：花生醬組成物)合倂(如納入參考之美國專利案編號7,498,050中所描述者)。例如：熟習本技藝之人士可理解，本發明之一或多種組成物可與這類可食性塗醬產品一起使用以提供或增强抗微生物效果，這類組成物之存在量可輕易地測出，而不需大量實驗。
第1圖此相片說明暴露2天後，FFCs對抗具藥物抗性之結核分枝桿菌的臨床培養之滅殺效果。
第2圖此一系列相片說明數種使用FFCs來防止真菌(黴菌)在乳酪上生長的方法。
第3圖在0.2毫升FFC組成物之存在下貯藏二天後，FFCs對山芋類之保護效果。10天後為該山芋類照相。(試驗組在左邊，對照組在右邊)。
第4圖FFCs對垃圾在30℃下留置10天後不會腐敗之防護效果。
第5圖顯示對抗蕃茄腐敗/枯萎之效果，左邊為蕃茄潰病病菌(C .michiganense )之對照組盤，右邊為以本發明之20微升FFC組成物處理之盤。
第6圖顯示出本發明FFC組成物倂入皮膚乳膏產品中之效果。
第7A-B和8圖根據本發明之某些非限制性較佳體系，數種非限制性之代表性單鼠李糖脂和二鼠李糖脂化合物的構造。
第9圖提供二種鼠李糖脂成分之較佳體系，如下列數個實例中之描述，根據本發明之某些非限制性較佳體系，分別命名為R1及R2之單鼠李糖脂及二鼠李糖脂構造可單獨使用或彼此組合使用。

Claims (44)

  1. 一種抗微生物組成物，其包含C2 -C5 酸成分；C2 -C5 酸酯成分；C3 -C5 酮成分及至少二種可自經分離之生長在馬鈴薯右旋糖瓊脂上的捲曲黏帚菌(Muscodor crispans )培養物的揮發性副產物分離的C2 -C5 成分，該組成物無萘及薁衍生物化合物。
  2. 如申請專利範圍第1項之組成物，其中該酸成分係選自異丁酸、丙酸或彼等之組合。
  3. 如申請專利範圍第1項之組成物，其中該酯成分係選自醋酸、丙酸或異丁酸之酯類或該等酯類之組合。
  4. 如申請專利範圍第1項之組成物，其包含8-10種該可自捲曲黏帚菌之揮發性副產物分離的成分。
  5. 如申請專利範圍第4項之組成物，其中該組成物之各該成分可自捲曲黏帚菌之揮發性副產物分離。
  6. 如申請專利範圍第5項之組成物，其中各該成分為細菌醱酵產物。
  7. 如申請專利範圍第1項之組成物，其包含鼠李糖脂(rhamnolipid)成分。
  8. 一種抗微生物組成物，其包含8-10種選自下述群體之成分：C2 -C5 醇類、C2 -C5 酮類、C2 -C5 醛類、C2 -C5 酸類及C2 -C5 酸酯類，各該成分可自經分離之生長在馬鈴薯右旋糖瓊脂上的捲曲黏帚菌培養物分離，該組成物無萘及薁衍生物化合物。
  9. 如申請專利範圍第8項之組成物，其中該可分離之 成分為異丁酸。
  10. 如申請專利範圍第9項之組成物，其中丙酸至少部分取代該異丁酸。
  11. 如申請專利範圍第8項之組成物，其中該可分離之成分為2-丁酮。
  12. 如申請專利範圍第11項之組成物，其中醋酸、丙酸或彼等之組合至少部分取代該丁酮。
  13. 如申請專利範圍第8項之組成物，其中該可分離之成分為乙醇。
  14. 如申請專利範圍第13項之組成物，其中醋酸至少部分取代該乙醇。
  15. 如申請專利範圍第8項之組成物，其包含鼠李糖脂成分。
  16. 如申請專利範圍第8項之組成物，其係施用於製造物件。
  17. 如申請專利範圍第16項之組成物，其中該物件係選自人類食品、動物食品、飲品、包裝產品或個人照護產品。
  18. 如申請專利範圍第8項之組成物，其係施用於植物基質。
  19. 如申請專利範圍第18項之組成物，其中該基質係選自種子、植物表面成分、果實、蔬菜或核果。
  20. 如申請專利範圍第19項之組成物，其中該基質係選自收成前之果實、核果或蔬菜或收成後之果實、核果或 蔬菜。
  21. 一種影響微生物活性之方法，該方法包含提供如申請專利範圍第8項之組成物；及令至少一種微生物及可支持微生物活性之基質與該組成物接觸，該組成物之量為至少部分足以影響微生物活性，其中該基質係選自植物表面成分或製造物件。
  22. 如申請專利範圍第21項之方法，其中該接觸係選自直接接觸該組成物或當該組成物至少部分蒸發時。
  23. 如申請專利範圍第22項之方法，其中該接觸係直接與該微生物接觸。
  24. 如申請專利範圍第23項之方法，其中係消除該微生物活性。
  25. 一種如申請專利範圍第1項之組成物用於製造供影響微生物活性的藥物之用途。
  26. 如申請專利範圍第25項之用途，其中該組成物包含8-10種可自捲曲黏帚菌之揮發性副產物分離的成分。
  27. 一種抗微生物組成物，其包含選自C2 -C5 酸、酸鹽或彼等之組合的酸成分；C2 -C5 酸酯成分；C3 -C5 酮成分及至少二種可自經分離之生長在馬鈴薯右旋糖瓊脂上的捲曲黏帚菌(Muscodor crispans )培養物的揮發性副產物分離的C2 -C5 成分，前提是該組成物無萘及薁衍生物化合物。
  28. 如申請專利範圍第27項之組成物，其中該酸成分係選自異丁酸、異丁酸之鹽類或彼等之組合。
  29. 如申請專利範圍第28項之組成物，其中該酸成分 係選自異丁酸或其銨鹽或鉀鹽。
  30. 如申請專利範圍第27項之組成物，其中該酯成分係選自醋酸、丙酸或異丁酸之酯類或該等酯類之組合。
  31. 如申請專利範圍第27項之組成物，其包含8-10種該可自捲曲黏帚菌之揮發性副產物分離的成分。
  32. 如申請專利範圍第27項之組成物，其包含鼠李糖脂成分。
  33. 一種製造物件，其包含如申請專利範圍第1項之組成物。
  34. 如申請專利範圍第33項之物件，其係選自人類食品、動物食品、飲品、包裝產品、固態載體成分、個人照護產品、產品加工儀器、醫藥裝置或牙科裝置。
  35. 如申請專利範圍第34項之物件，其中該人類食品係選自肉類或肉類產品。
  36. 如申請專利範圍第34項之物件，其中該動物食品係寵物食物。
  37. 如申請專利範圍第34項之物件，其中該飲品係水果飲料。
  38. 如申請專利範圍第34項之物件，其中該包裝產品係薄膜。
  39. 如申請專利範圍第34項之物件，其中該個人照護產品係皮膚塗劑(lotion)。
  40. 如申請專利範圍第34項之物件，其中該加工儀器係用於加工人類食品的儀器。
  41. 如申請專利範圍第34項之物件，其中該裝置係選自醫療或牙科用具或醫療或牙科植入物。
  42. 如申請專利範圍第34項之物件，其中該固態載體成分係顆粒。
  43. 如申請專利範圍第42項之物件，其中該顆粒包含黏土。
  44. 如申請專利範圍第43項之物件，其中該顆粒包含膨潤土。
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