KR20120022942A

KR20120022942A - 소듐 알기네이트 및 소라페닙을 포함하는 표적화된 서방형 마이크로스피어 혈관 색전제，제조방법 및 그것의 용도

Info

Publication number: KR20120022942A
Application number: KR1020117027048A
Authority: KR
Inventors: 신지안 리; 홍 홍; 게 루
Original assignee: 베이징 신이야오 사이언스 앤 테크놀로지 디벨롭먼트 컴파니 리미티드
Priority date: 2009-04-16
Filing date: 2010-04-14
Publication date: 2012-03-12
Also published as: CN101536986B; CN101536986A; JP2012524031A; EP2420227A4; EP2420227B1; EP2420227A1; JP5802193B2; US20120093932A1; HK1167335A1; WO2010118683A1; DK2420227T3; CA2758820A1; CA2758820C

Abstract

표적화된 서방형 마이크로스피어 혈관 색전제(targeted sustained-release microsphere vascular embolizing agent), 생산 방법 및 그것의 용도를 공개한다. 상기 마이크로스피어는 담체(carrier)로서 소듐 알기네이트(sodium alginate)를 및 표적화된 종양 약물(tumor medicine)로서 소라페닙(sorafenib)을 포함하고 소라페닙은 소듐 알기네이트에 의해 캡슐화되어있다. 소라페닙 대 소듐알기네이트의 중량비(weight ratio)는 1:1 ? 1:30이다. 상기 마이크로스피어는 감소된 체순환 용량, 독성 및 부작용과 함께 표적 부분에서의 높은 농도를 갖는 이점을 갖는, 고체 종양의 치료를 위한 약제를 제조하기 위해 사용된다.

Description

소듐 알기네이트 및 소라페닙을 포함하는 표적화된 서방형 마이크로스피어 혈관 색전제，제조방법 및 그것의 용도{TARGETED SUSTAINED?RELEASE MICROSPHERE OF VASCULAR OCCLUSIVE AGENT CONTAINING SODIUM ALGINATE AND SORAFENIB，PRODUCTION METHOD AND USE THEREOF}

본 발명은 항-종양 약물을 포함하는 마이크로스피어 색전제(microsphere vascular embolizing agent), 생산 방법 및 그것의 용도에 관한 것이다. 특히, 본 발명은 소라페닙(sorafenib)을 포함하는, 표적화된 서방형 소듐 알기네이트 마이크로스피어 혈관 색전제(targeted sustained-release sodium alginate microsphere vascular embolizing agent), 제조 방법 및 그것의 용도에 관한 것이다.

소라페닙(sorafenib)은 분자량이 464.8 g/mol인 화학명 4-{4-[3-(4-클로로-3-트리플루오로-페닐)-우레이도]-페녹실}-피리딘-2-카르복실 메틸아민 [4-{4-[3-(4-chloro-3-trifluoro-phenyl)-ureido]-phenoxyl}-pyridine-2-carboxylic methylamine]을 갖는, 신규한 디아릴 요소(diaryl urea)이다. 임상에서 사용되는 소라페닙은 그것의 토실레이트염(tosylate salt)이다. 소라페닙 토실레이트의 분자식은 C₂₁H₁₆C₁F₃N₄O₃ _?C₇H₈O₃S이고, 상기 분자량은 637.0 g/mol이며, 상기 화학식은 하기와 같다:

.

소라페닙 토실레이트(sorafenib tosylate)의 녹는점은 225-235 ℃이고, 무맛의 고체 종류이며, 백색과 갈색의 중간이다. 이것은 내열성(heat-stable) 및 비흡수성(nonabsorbent)을 갖는다; 그 용해성은 수용성 용액에서는 낮고 강산 조건하에서는 약간 높아진다. 이것은 알코올에서 약간의 용해성을 갖지만 폴리에틸렌 글리세롤 400(polyethylene glycerol 400)에서 용해될 수 있다. 소라페닙은 다(multi)-표적 종양-표적의 치료 약물이고, 이것은 1994년 이래로 Bayer와 ONYX의 공동작업 동안에 그들과 함께 발달하였다. 이것은 미국 FDA(U.S. Food and Drug Administration)에 의해 승인된, 전이성 신장암(metastatic renal cancer)을 치료하기 위한 최초의 종양-표적 약물이다. 소라페닙은 진행성 신장암(advanced renal cancer)을 치료에서 사용되기 위해 2005년 12월에 공식적으로 미국에 의해 승인되었고 그러므로 이것은 최초의 상업적으로 이용가능한 구강 다키나아제(multikinase) 억제제가 되었다. 이것은 2006년 11월 말에 중국에서 시장으로의 진입을 허가받았다.

소라페닙(sorafenib)은 혈관 내피 성장 억제제(vascular endothelial growth inhibitor)뿐 아니라 티로신 키나아제 억제제(tyrosine kinase inhibitor). 혈관 생성 억제제(angiogenesis inhibitor)로 작용한다. 종양의 생존, 성장 및 전이는 효과적인 세포의 증식 및 종양의 혈관 생성에 의존한다. Ras(GTP 결합 단백질; GTP binding protein)/Raf 신호 전달은 종양 세포 증식 및 혈관 생성과 관련있는 핵심적인 경로이다. Raf는 세린/트레오닌(serine/threonine; Ser/Thr) 단백질 키나이제(Protein kinase)이고 Ras 단백질의 하부 작용 효소(downstream effector enzyme)이다. Raf가 활성화되면, 미토겐-활성 단백질 키나이제(mitogen-activated protein kinase; MEK) 1 및 2 모두는 활성화되고, 이것은 다시 인산화(phosphorylation)에 의한 세포외 신호 조절 키나아제(extracellular signal-regulated kinase; ERK) 1 및 2의 활성화를 야기하고 그 후 핵으로 이동한다. 그러므로 전시 개시 및 번역 활성화 경로는 활성화되고, 이것은 세포 증식을 야기한다. 그러므로 상기 신호 전달 경로는 다양한 인간 종양 조직에서 종양 생성(tumorogenesis) 및 종양 발달에서 직접적인 역할을 한다. 반면에, 종양 세포 성장을 직접적으로 억제하기 위해서 소라페닙은 RAF의 활성을 억제함으로써 RAS/RAF/MEK/ERK 신호 전달 경로를 억제한다. 반면, 종양 세포의 성장을 간접적으로 억제하기 위해, 소라페닙은 혈관 내피 성장 인자 수용체 2(vascular endothelial growth factor receptor 2; VEGFR-2) 혈소판 유래 성장 인자 수용체 β(platelet derived growth factor receptor β; PDGFR-β) 및 원-종양유전자 C-kit(proto-oncogene C-kit)를 포함하는, 신혈관생성 및 종양의 발달과 관련된 몇몇의 티로신 키나아제 수용체의 활성을 억제함으로써 종양의 신혈관생성(neovascularization)을 방해하고 또한 종양 세포로의 영양공급을 중단시킨다. 그러므로 소라페닙(sorafenib)은 이중 항-종양 기능(dual anti-tumor function)을 갖는다.

소라페닙은 CYP3A4 효소 산화 대사(YP3A4 enzyme oxidative metabolism) 및 UGTIA9 글루쿠로닉 산 대사(UGTIA9 glucuronic acid metabolism)를 통해서 간에서 주로 대사된다. 8개의 대사 생산물은 동정되었고 그 중 5개는 혈액에서 측정된다. 모든 대사 생산물의 9% - 16%를 차지하는 지배적인 대사 생산물 피리딘 N-옥시드(pyridine N-Oxide)는 시험관 내(in vitro)에서 소라페닙과 유사한 역할을 한다. 100 mg 소라페닙을 포함하는 용액의 일회량(single dose)을 구강으로 섭취하였을 때, 소라페닙의 77%는 14일 내에 대변으로 배출되고, 여기에서 15%는 변화없이 배출된다; 반면에 소라페닙의 19%는 요(urine)에서 글루쿠로닉 산 대사 생산물(glucuronic acid metabolic products)로서 배출된다. 소라페닙은 동류 화합물(congeneric compound) 중에서 임상 시험으로 진입이 허용된 최초의 약물이다. 임상연구의 예비 결과는 소라페닙은 신장암(renal cancer), 간암(liver cancer), 흑색종(melanoma), 비소세포성 폐암(non-small cell lung cancer), 위암(gastric cancer), 난소암(ovarian cancer) 및 그와 같은 고체 종양에서 항-종양 효과를 갖는 것으로 나타났다.

소라페닙의 일반적인 부작용은 피부 홍조(skin redness), 발진(rash), 가려움(itching), 탈모(hair loss) 또는 부분적 탈모, 잦은 설사(diarrhea) 및/또는 연동 이완(enterokinesia relaxation), 메스꺼움(nausea) 또는 구토(vomiting), 구강 궤양(oral ulcer), 피로, 식욕 감퇴(감소), 고혈압, 손-발 신드롬(hand-foot syndrome) 및 그와 같은 것을 포함한다. 소라페닙의 일반적인 부작용 중에, 경피 독성(dermal toxicity) 및 위장 반응(gastrointestinal responses)은 용량을 감소시키거나 또는 약제를 중지하는 주요 이유이다. 소라페닙의 구강 투여를 이용한 치료 동안에, 가장 흔한 부작용은 위장관(gastrointestinal tract)에서 발생하고, 여기에서 95%는 위장 반응이고, 58%는 설사이며, 30%는 어지러움이고, 24%는 구토이며, 47%는 식욕 감퇴와 동반되는 소화불량이다.

미국 FDA에서 발표한 잠재적인 부작용은 선천적 결손증(birth defect) 또는 태아 사망을 포함한다. 따라서, 상기 치료를 하는 동안과 소라페닙 복용 중지 후 2주 동안에는 산아 제한(birth control)의 어떠한 방법은 남성 및 여성 모두에게 적용되어야 한다. 또한, 홍조(redness), 통증, 손바닥에서의 부기(swelling) 또는 수포(blistering) 및 엄지두덩(thenar)와 같은 잠재적인 부작용 관찰될 수 있다. 상기 치료의 첫 6주 동안에 혈압은 매주 체크되어야 한다. 만약 상기 약제 복용중에 고혈압이 발생되면, 제 시간에 치료되어야 한다. 만약 환자가 어떤 잠재적인 심장 문제를 갖고 있다면, 상기 치료 중 심장에서의 어떤 부작용이 발생할 수 있기 때문에 의사에게 약물치료 전 알려주어야 한다.

다수의 유전자 및 키나아제는 종양생성(tumerogenesis) 및 종양 발달과 관련이 있고, 따라서 표적화된 치료법(targeted therapy)가 최근 가장 인기있는 연구 분야 중 하나가 되었다. 나아가 공개된 종양생성의 분자 생물학적 기작에 근거하여, 소라페닙은 유일한 다(multi)-표적 항-종양 활성을 가지는 신규한 약물로서 성공적으로 발달되었다. 임상에서의 그 성공적인 적용은 종양에서 생물학적 표적화된 치료법의 새로운 시대를 도래시켰다. 임상 시험 결과뿐 아니라 작용 기작의 측면에서, 소라페닙(sorafenib)은 세포 독성 효과를 통한 기작 대신에 주로 종양 세포의 성장을 억제하기 때문에 화학치료 약물과 상이하다. 상기 임상 시험 결과는 소라페닙으로 진행성 신장 세포 상피성 암(advanced renal cell carcinoma) 치료 중간선(second-line)을 PFS, OS 및 TTP로 현저하게 연장시킬 수 있다는 것을 확증하였다. 최근 임상 시험 단계에서 가장 큰 관심은 소라페닙의 치료 효과를 증진시키는 방법 및 그것의 치료 효과를 예측할 수 있는 사용가능한 마커를 찾는 방법이다. 종양 성장 및 혈관생성을 억제하기 위해, 소라페닙은 신규한 다-키나아제 억제제(multi-kinase inhibitor)이고, 이것은 RAF-MEK-ERK 경로를 억제할 수 있을 뿐만 아니라 티로신 키나아제 수용체를 억제할 수 있다. 임상 시험 1단계는 이것을 하루에 두 번 400 mg의 구강 복용은 용인이 되고 효과적이며 발생하는 가장 일반적인 부작용은 설사 및 피부 병변(skin lesion)이라는 것을 보였다. 임상 시험 2단계에서는 소라페닙이 간암 및 신장암에서 각각 항-종양 활성을 가진다는 것을 보였다. 진행성 신장암에서 임상 시험 3단계는 상기 환자 대부분에서 종양이 현저히 줄어들었고 평균 수명 시간이 극적으로 연장되었다는 것을 증명하였다. 현재, 중국에서 시행되는 소라페닙을 사용한 간암을 치료하는 임상 시험 3단계와 같은, 많은 임상 시험 3단계가 진행중이다. 따라서, 보다 좋은 결과가 나올 것이고 종양을 치료하는 새로운 희망이 떠오를 것이다. 그 희망을 품는 동안에, 수많은 문제들이 해결되야 하는데, 예를 들면 약제 치료 중에 종양 조직으로 약물이 통과하는 것이 어렵다는 사실이다. 나아가, 종양 조직으로 약물이 도달하는 어려움을 극복하고 적은 투여량(dose)을 사용하여 치료되어야 하는 문제점을 해결하기 위해서 임상 시험은 수행되어야 한다.

소라페닙을 사용한 간암 치료에서 Ghassan et al .에 의해 수행된 임상 2단계 연구는 소라페닙을 이용한 단일치료(monotherapy)가 간암에서 어떤 치료적 효과를 가진다는 것을 보였다. 비록 상기 연구자들이 소라페닙을 이용한 단일치료는 매우 효과적이지 않다고 생각하지만, 소라페닙의 상기 효과는 혼합 화학요법(combined chemotherapy)의 효과와 유사하다. 또한, 소라페닙의 낮은 독성뿐 아니라 작용 기전은 치료 효과를 증진시키기 위하여 다른 항-암 약물과 혼합할 수 있게 한다. 이 연구는 환자가 수술을 할 수 없거나 수술하기를 원치 않는 중간 또는 진행성 간암례에 초점을 맞춘 아시아-태평양 지역에서 다-중심(multi-center) 3단계 임상 시험이다. 간암의 신혈관형성은 공개되었고 새로운 분자 표적 약물이 연구되고 있기 때문에, 진행성 간암을 갖는 환자는 표적화된 치료법을 받을 기회를 가질 수 있다. 대부분의 간암은 간경변(hepatocirrhosis)으로부터 유래되고 따라서 악 신체 조건(poor physical condition) 및 간 이상(liver dysfunction)을 갖는 환자는 화학요법 및 방사선요법(radiotherapy)으로부터 효과를 기대하기 힘들다. 분자 표적 약물의 빠른 발전은 간암을 치료하기 위해 대안적 방법을 제공한다. 즉, 좋은 표적화(good target) 및 낮은 독성을 갖는 분자 표적 치료법(molecular targeted therapy)은 진행성 간암을 치료하는데 폭넓은 가능성을 보인다. 따라서, 아마도 이 종류의 약물은 미래에 간암을 치료하기 위한 가장 잠재력이 있고 유망한 방법이다.

간의 원발암종(primary carcinoma)은 매우 악성 종양이다. 비록 절제(excision)가 최초의 치료법일 수 있지만, 진단받은 환자의 70% 정도가 이미 중간 또는 말기 단계이다. 이 때, 광범위한 병변(lesion) 또는 전이(metastasis) 조차도 일어났고, 이는 종종 간경변(hepatocirrhosis)이 수반되어, 이 경우에 상기 종양은 수술적으로 절제할 수 없다. 트랜스카테테르 동맥 화학색전(Transcatheter arterial chemoembolization; TACE)은 중간 및 진행성 간암을 치료하기 위한 주요한 치료법 중 하나이고 이것은 색전술(embolism)뿐 아니라 화학요법제(chemotherapeutic agents)를 이용함으로써 효과가 있다. 간암 혈액 공급의 90%-95%는 간동맥으로부터 나오기 때문에, 간 동맥을 통한 화학요법제 및 색전 투여는 그들의 혈액 공급을 차단함으로써 종양의 허혈괴사(ischemic necrosis)를 야기할 수 있고, 이것은 결국 치료 효과를 개선하기 위하여 장시간 동안 종양에 작용하는 물질의 고용량을 허용한다. 또한, 간암 수술 전에 TACE 치료는 종양 조직의 괴사, 흡수, 섬유증(fibrosis) 및 두꺼운 섬유성 캡슐의 형성을 일으킬 수 있고, 상기 모든 것은 수술 중 출혈량을 감소시키고 수술과정에 의해 생길 수 있는 종양 세포의 확산 또는 분출(extrusion)을 차단할 것이다. 또한, 어떤 약물의 활성 및 독성은 간에서 감소할 것이고, 이것은 정맥내 주사(intravenous injection)에 의해 거의 도달할 수 없다.

종양은 오늘날 세계에서 가장 치명적인 질환 중 하나이다. 수술, 방사선 요법, 화학요법 및 그와 같은 임상적 치료는 종양 덩어리를 제거하는 효과적인 방법이다. 하지만 수술적 절제는 오직 볼 수 있는 종양에만 적용될 수 있고 볼 수 없는 준임상적 초점(subclinical focus), 림프계 또는 혈류를 통해 정상조직 주변으로의 종양 세포 확산에는 직접적으로 효과가 없다. 방사선 치료요법은 국소 방사선을 통한 치료이고 따라서 방사선 부위외에 있는 종양을 사멸시킬 수 없고 방사선에 민감하지 않은 종양 세포에서도 효과가 없다. 화학요법은 종양 세포에서 선택적이지 않은 억제 효과를 갖고 잠복기 종양 세포에는 효과조차 없는 체순환 치료(systematic treatment)이다. 이러한 이유 때문에, 몇몇의 새로운 방법 및 기술은 최근 몇 년 사이에 종양을 치료하기 위해 발달되었다. 그들 중에서, 분자 표적 치료법은 인기부분(hopspot)이 되었고 최근 연구자들의 트렌드가 되었다. 동양 분자 생물학에 기초하여, 상기 분자 표적 치료법은 특이적 물질 또는 암과 관련된 특이적 분자를 표적하는 표적 분자의 약물을 이용하여 작용한다. 수술, 방사선 요법 및 화학 요법의 세 가지 전통적인 치료법과 비교하여, 질병 세포를 표적으로 하는 이러한 종류의 치료는 종양에서 광범위한 "영구적(permanant)" 효과를 가진다. 하지만, 종양의 원인은 다양하고 따라서 치료 전략은 상이한 측면으로부터 고안되어야 한다. 표적 치료법은 현재 종양 치료에 적용하는 새로운 기술이고 종양 형성 및 종양 발달을 다양한 기전을 통해 억제함으로써 종양을 제거할 수 있다,

소라페닙(sorafenib) 및 소듐 알기네이트(sodium alginate)로부터 만들어진 마이크로스피어(microsphere)가 간암, 신장암, 비소세포성 폐암, 위암, 난소암, 전립선암, 머리 및 목 종양, 흑색종(melanoma) 및 다른 고체 종양을 국소 혈관 색전으로 치료하는데 표적 부위에 적용할 수 있다는 것은 지금까지 중국 또는 다른 나라에서 보고되지 않았다.

따라서, 종양을 치료하는데 있어서 소라페닙의 효과를 극대화시키는 방법은 해결해야될 상기 분야의 시급한 기술적 문제가 되었다.

본 발명의 한 목적은 제공하기 위한 것이다. 소라페닙(sorafenib)을 함유하는, 표적화된 서방화 소듐 알기네이트 마이크로스피어 혈관 색전제(targeted sustained-release sodium alginate microsphere vascular embolizing agent)를 제공한다.

상기 언급된 목적은 하기에 명시된 기술적 해결을 통해 이루어질 수 있다:

소라페닙을 함유하는 표적화된 서방형 소듐 알기네이트 마이크로스피어 혈관 색전제(targeted sustained-release sodium alginate microsphere vascular embolizing agent)는 천연 담체 소듐 알기네이트(natural carrier sodium alginate) 및 항-종양 약물 소라페닙으로 구성되었고, 여기에서 상기 소라페닙은 소듐 알기네이트에 의해 캡슐화되어 있고 상기 소라페닙 대 상기 소듐 알기네이트의 중량비는 1 : 1 - 1 : 30 이다.

본 발명의 또 다른 목적은 소라페닙을 포함하는 상기 표적화된 서방형 소듐 알기네이트 마이크로스피어 혈관 색전제를 제조하는 방법을 제공하는 것이다.

상기-언급된 목적은 하기에 명시된 기술적 해결을 통해 이루어질 수 있다:

소라페닙을 포함하는 표적화된 서방형 소듐 알기네이트 마이크로스피어 혈관 색전제의 제조 방법은 하기에 열거된 단계로 구성된다:

(1) 담체 제조의 해결

주입을 위해 소듐 알기네이트를 생리적 살린(saline) 또는 물에 비례적으로 용해시켜 1 wt% ? 7 wt% 소듐 알기네이트 담체 용액을 제조한다.

(2) 고체화 제조의 해결

칼슘 락테이트(calcium lactate) 또는 칼슘 클로라이드(calcium chloride)의 무게를 측정하고 주입을 위해 생리적 살린(saline) 또는 물에 비례적으로 용해시켜 1 wt% ? 10 wt% 칼슘 락테이트(calcium lactate) 또는 칼슘 클로라이드(calcium chloride) 용액을 수득한다.

(3) 약물 제조의 해결

소라페닙(sorafenib)의 무게를 측정하고 그 후 비례적으로 폴리에틸렌 글리세롤 400(polyethylene glycerol 400) 또는 디메틸 술폭시드(dimethyl sulfoxide; DMSO)에 용해시켜 소라페닙 약물 용액을 수득한다.

(4) 담체 용액 및 약물 용액의 혼합물 제조

고속 혼합기(high-speed mixer)를 사용하여 단계 (3)의 소라페닙 약물 용액을 단계 (1)의 소듐 알기네이트 전달체 용액과 혼합하여 혼합물 용액을 수득한다.

(5) 소라페닙을 함유하는 표적화된 서방형 소듐 알기네이트 마이크로스피어(targeted sustained-release sodium alginate microsphere)의 제조

고전압 정전기 멀티헤드 마이크로스피어 생산 장치(high-voltage electrostatic multihead microsphere generating device)를 통해 단계 (4)에서 수득된 혼합물 용액을 단계 (2)의 고체화 용액과 반응시켜 마이크로스피어(또는 마이크로 겔 비드; micro gel bead)를 수득한다.

바람직한 기술적 해결은 단계 (5)의 고전압 정전기 멀티헤드 마이크로스피어 생산 장치(high-voltage electrostatic multihead microsphere generating device)는 고전압 생산기(high-voltage generator), 중복점 전극(multiplepoint electrode), 마이크로-인퓨젼 펌프(micro-infusion pump), 주사기(syringe), 맞춤 바늘(tailor-made needle), 리프팅 플랫폼(lifting platform), 및 소독된 유리 수거기(sterile glass collector)로 구성되었다는 점에서 특징이 있다.

바람직한 기술적 해결에서 단계 (5)의 제조 과정은 하기와 같다:

1) 10 ? 60 ml 주사기를 맞춤 바늘에 맞추고 그 후 단계 (4)에서 수득된 혼합물 용액의 10 ? 60 ml을 주사기로 흡입시킨다;

2) 단계 1)의 주사기를 마이크로-인퓨젼 펌프(micro-infusion pump)의 주사기 푸싱 슬랏(syringe pushing slot)에 고정시킨다;

3) 상기 고전압 정전기 생성기의 양극(positive interface)을 2 ? 12개 주사기의 맞춤 바늘에 중복점 전극(multiplepoint electrode)을 이용하여 연결시킨다; 반면에 고전압 정전기 생성기의 음극(negative interface)은 중복점 전극(multiplepoint electrode)을 이용하여 단계 (2)의 고체화 용액에 담근, 2 ? 12 b-형태 스테인리스 강 고리(stainless steel ring)의 연장(extension)에 연결시킨다; 맞춤 바늘을 리프팅 플랫폼(lifting platform)에 놓은 소독한 유리 수거기(glass collector) 위에 매단다; 맞춤 바늘 및 소독한 유리 수거기에 있는 액체 표면 사이의 거리를 5 ? 20 cm으로 조절한다; 및 고전압 정전기 생성기 및 마이크로-인퓨젼 펌프(micro-infusion pump)에 있는 시작 버튼을 누르면, 상기 소라페닙을 포함하는 소듐 알기네이트 혼합물 용액이 소독한 유리 수거기에 있는 고체화 용액으로 떨어져 마이크로스피어(또는 마이크로 겔 비드)로 불리는 젖은 비드(bead)를 수득한다.

바람직한 기술적 해결은 뭉뚝한 끝(blunt end)을 가진 스테인리스강(stainless steel)으로부터 맞춤 바늘(tailor-made needle)을 만들었다는 점에서 특징이 있다

바람직한 기술적 해결은 수득된 마이크로스피어(또는 마이크로 겔 비드)는 원심분리기 세척(centrifuge washing) 또는 침전 세척(precipitation washing)을 하고 그 후 보존 용액(preserving solution)에 보관하여 소라페닙을 함유하는 소듐 알기네이트 마이크로스피어(또는 마이크로 겔 비드)를 얻는다는 점에서 특징이 있다; 및 상기 마이크로스피어는 저장하는 동안에 누출(leaking)없이 온전하다는 점에서 특징이 있다.

바람직한 기술적 해결은 상기 보존 용액(preserving solution)은 하기와 같이 제조된다는 점에서 특징이 있다:

칼슘 클로라이드(calcium chloride) 또는 칼슘 락테이트(calcium lactate)의 무게를 측정하고 주입을 위해 비례적으로 물에 용해시켜 3 wt% ? 15 wt%의 보존 용액을 제조한다.

바람직한 기술적 해결은 상기 마이크로스피어(또는 마이크로 겔 비드)의 입자 크기 범위가 50 ? 100 μm, 70 ? 150 μm, 100 ? 200 μm, 100 ? 300 μm, 150 ? 450 μm, 300 ? 500 μm, 500 ? 700 μm, 또는 700 ? 900 μm라는 점에서 특징이 있다.

바람직한 기술적 해결은 상기 수득한 마이크로스피어 또는 마이크로 겔 비드는 냉동 건조(freeze drying)을 통하여 건조되어 그 입자 크기 범위가 20 ? 60 μm, 30 ? 75 μm, 50 ? 100 μm, 70 ? 150 μm, 80 ? 250 μm, 150 ? 300 μm, 250 ? 500 μm 또는 500 ? 700 μm인 건조된 비드(dry bead)를 얻는다는 점에서 특징이 있다.

본 발명의 또 다른 목적은 소라페닙을 포함하는 표적화된 서방형 소듐 알기네이트 마이크로스피어 색전제(targeted sustained-release sodium alginate microsphere vascular embolizing agent)의 용도를 제공하는 것이다.

상기 언급된 목적은 하기에 명시된 기술적 해결을 통해 달성되었다:

간암(liver cancer), 폐암(lung cancer), 난소암(ovarian cancer), 전립선암(prostate cancer), 머리 및 목 종양(head and neck tumor), 흑색종(melanoma) 및 다른 고체 종양 치료의 약제 제조를 위한 상기 소라페닙을 포함하는 표적화된 서방형 소듐 알기네이트 마이크로스피어 색전제의 용도.

상기 적용 과정을 하기에 기술하였다:

카테테르(catheter)를 중재 방사선 검사(interventional radiography) 또는 중재 초음파 검사(interventional ultrasonography)를 통해 표적 기관에 공급하는 동맥으로 삽입하고 그 후 동맥 촬영(arteriography)을 수행한다. 동맥 조영도(arteriogram)에 따라 소라페닙을 포함하는 상기-언급된 표적 서방형 소듐 알기네이트 마이크로스피어 혈관 색전제를 선택한다. 마이크로카테테르(microcatheter)가 바람직하고 무균적으로 조작되어야 한다. 소라페닙을 포함하는 소듐 알기네이트 마이크로스피어(sodium alginate microspheres) (젖은 비드)의 병 안에 상기 보존 용액(preserving solution)은 주사기를 사용하여 제거된다. 상기 마이크로스피어를 식염수(생리학적 살린, physiological saline)의 동일한 양으로 세 번 세척하거나 또는 병으로부터 처음으로 소독된 그릇(bowl)으로 옮기고 그 후 식염수의 50 ? 100 ml으로 1 ? 3번 세척한다. 세척 용액을 제거하고, 조영제(contrast agent) 또는 희석된 조영제의 적절한 양을 첨가하고 마이크로스피어와 혼합하여 조영매질(contrast medium)에 전적으로 현탁된 마이크로스피어를 만들고, 그 후 이것을 특이 조건에 따라, 형광투시경(fluoroscopic)의 조절하에 카테테르(catheter) 통해 초점으로 서서히 주입한다. 조영제의 흐름을 명백히 늦출 때, 상기 색전제가 완성된다. 색전(embolization)의 효과를 평가하기 위해 동맥 촬영은 한 번 더 수행된다.

만약 건조된 비드가 적용되었다면, 상기 마이크로스피어는 그것을 적용하기 전에 식염수에 30분 동안 담구어짐으로써 젖은 비드가 될 때까지 사용될 수 없다.

유익한 효과

투여 경로를 변화시킬 뿐만 아니라 용량 형태(dosage form)을 변화시킴으로써, 본 발명의 소라페닙을 함유하는 표적화된 서방형 소듐 알기네이트 마이크로스피어 혈관 색전제(targeted sustained-release sodium alginate microsphere vascular embolizing agent) 표적 약물이 표적 부위로 향하게 해주고 그 후 빠르고, 오래, 그리고 집중된 효과를 암 조직에 나타낸다. 따라서 그것의 장점은 좋은 표적화(good target), 우수한 치료 효과, 암 세포를 죽이는 동안 정상 조직에 미미한 피해, 낮은 독성, 요구되는 약물의 적은 양 및 낮은 치료 비용을 갖는다는 것에 있다.

상기 소라페닙을 포함하는 표적화된 서방형 소듐 알기네이트 마이크로스피어 혈관 색전제(targeted sustained-release sodium alginate microsphere vascular embolizing agent)는 소라페닙이 표적 부위에 쉽게 도달하는 것을 촉진시키고, 지속적으로 분비시키며 암세포 주변에 집중되도록 촉진시켜 약물의 순환, 요구되는 투여량(dose), 정상 세포의 손상 및 독성을 감소시키는 새로운 기술을 이용함으로써 치료 효과를 증진시킨다.

현재, 소라페닙(sorafenib)의 구강 투여와 관련하여, 낮은 생물학적 이용가능성, 요구되는 높은 투여량, 및 높은 독성과 같은 문제가 있고, 이는 약물 비용이 너무 높아서 의사나 또는 환자에게 사용가능하지 않다는 문제가 있다. 항-암 약물 및 색전제의 조합은 표적부위에 위치할 때 혼합 효과(combined effect)를 야기한다; 반면에, 동시에 상기 두 가지 약물의 분리된 정상 투여는 효과가 없다. 표적 약물 소라페닙 및 동맥 혈관 색전제를 캡슐화한 마이크로스피어는 보다 장 시간 동안 국소적 조직에서 유지되는 약물의 농도를 허용한다. 소라페닙을 포함한 상기 표적화된 서방형 소듐 알기네이트 마이크로스피어 혈관 색전제(targeted sustained-release sodium alginate microsphere vascular embolizing agent)는 전신 순환(systemic circulation)을 통해 약물이 손상되고 분비되는 1차 대사율(first-pass effect)을 피함으로써, 간, 신장 및 다른 기관에서 약물이 혈장 단백질(plasma protein)에 결합하는 실패의 가능성을 감소시킴으로써, 약물의 기능 시간을 연장함으로써 집중적 효과를 야기하고, 상기 모든 것은 구강투여, 정맥내 화학요법 및 종양 조직에서의 짧은 보유 시간(retention time), 종양으로부터 빠른 제거(clearance) 및 종양에 대한 약물의 부적절한 노출을 포함하는 단순 약물 투여(simple drug infusion)의 결점을 극복할 수 있다. 임상적 약물 동력학(clinical pharmacokinetics) 연구는 사멸된 암 세포의 양이 10 내지 100배 증가하고 항-암 약물의 농도가 국소 조직에서 특정 범위 내에서 두 배가 될 때 상기 치료 효과가 두 배가 된다는 것을 나타냈다. 상기 소라페닙을 포함한 표적화된 서방화 소듐 알기네이트 마이크로스피어 혈관 색전제(targeted sustained-release sodium alginate microsphere vascular embolizing agent)는 성공적으로 개발되었기 때문에, 약물 투여의 전통적 경로는 바뀔 것이고 그러므로 환자는 새로운 형태의 물질에 의해 야기되는 효과, 편안함, 및 편리함을 누릴 수 있을 것이다. 또한, 이것은 고체 종양을 치료하는데 필수적인 역할을 할 것이다.

본 발명의 발명자들은 고전압 정전기 멀티헤드 마이크로스피어 생산 장치(high-voltage electrostatic multihead microsphere generating device)에서 2 ? 12 마이크로-인퓨젼 장치(micro-infusion devices)가 마이크로스피어를 보다 균일하게(uniform) 제조시키고, 그 생산량(yield)을 증가시키며, 상이한 입자 크기의 마이크로스피어를 동시에 생산시킨다는 것을 발견하였다.

이후로, 본 발명은 하기의 실시예에서 더 기술될 것이다. 하지만 하기 실시예는 본 발명의 범위를 제한하지 않는다.

실시예 1

1. 캡슐화(encapsulating)하기 이전의 제조

유리 용품(glass wares)의 처리: 깨끗한 유리 용품을 공기에서 건조시키고 그 후 박테리아를 사멸시키고 발열원(pyrogen)을 제거하기 위해 3시간 동안 260℃의 고온 오븐에서 굽는다.

2. 시약의 준비

(1) 항-종양 약물 소라페닙 용액의 제조

상업적으로 이용되는 소라페닙(sorafenib) 10 mg의 무게를 재고 상기 언급한 유리 용품에 첨가하였다. 그 후 폴리에틸렌 글리세롤 400(polyethylene glycerol 400)의 적절한 양을 상기 소라페닙이 완전히 용해될 때까지 떨어뜨려 소라페닙 용액(sorafenib solution)의 20 ml을 수득하였다.

(2) 소듐 알기네이트 용액(sodium alginate solution)의 제조

2 wt% 소듐 알기네이트 용액의 3 L를 식염수(생리학적 살린, physiological saline)을 소듐 알기네이트에 첨가하고 소듐 알기네이트가 완전히 용해될 때까지 저어주면서 제조하였다.

(3) 고체화 용액(solidifying solution)의 제조

적절한 칼슘 클로라이드(calcium chloride)를 무게를 측정하고 식염수에 용해시켜서 3 wt% 칼슘 클로라이드 용액(calcium chloride solution)을 제조하였다.

(4) 보존 용액(preserving solution)의 제조

적절한 칼슘 클로라이드(calcium chloride)를 무게를 측정하고 주입을 위해 물에 용해시켜 3 wt% 칼슘 클로라이드 용액(calcium chloride solution), 즉 보존 용액(preserving solution)을 제조하였다.

(5) 상기 언급한 소라페닙 약물 용액의 20 ml을 고속 혼합기(high-speed mixer)에 의해 알기네이트 용액의 3 L와 혼합하여 소듐 알기네이트(sodium alginate) 및 소라페닙(sorafenib)을 포함하는 혼합물 용액을 수득하였다.

3. 소라페닙(sorafenib)을 포함하는 소듐 알기네이트 마이크로스피어(sodium alginate microsphere)의 제조

(1) 두 개의 10 ml 주사기(syringe)를 맞춤 바늘에 각각 맞추고 난 후 상기 소라페닙 용액 및 소듐 알기네이트 용액 혼합물을 각각 최소한 151번 주사기로 흡입시켰다(aspirate).

(2) 마이크로스피어의 제조과정의 상기 단계 (1)에서 언급한 주사기를 마이크로-인퓨젼 펌프(micro-infusion pump)의 상기 주사기 푸싱 슬랏(syringe pushing slot)에 고정시켰다.

(3) 고전압 정전기 멀티헤드 마이크로스피어 생산기(high-voltage electrostatic multihead microsphere generator)의 양극(positive interface)를 중복점 전극(multiplepoint electrode)를 통해서 두 개의 주사기의 맞춤 바늘(tailor-made needles)과 연결하였다; 반면에 고전압 정전기 멀티헤드 마이크로스피어 생산기(high-voltage electrostatic multihead microsphere generator)의 음극(negative interface)은 중복점 전극(multiplepoint electrode)를 통해서 단계 (2)의 고체화 용액(solidifying solution)에 담근 두 개의 b-형태 스테인리스 강 고리(stainless steel ring)의 연장(extension)과 연결시켰다; 맞춤 바늘을 소독한 리프팅 플랫폼(lifting platform)에 놓여진 소독된 유리 수거기(glass collector)에 매달었다; 맞춤 바늘의 팁(tip) 및 소독한 유리 수거기에 있는 액체 표면 사이의 거리를 12 cm로 조절하였다; 그리고 고전압 정전기 멀티헤드 마이크로스피어 생산기(high-voltage electrostatic multihead microsphere generator) 및 마이크로-인퓨젼 펌프(micro-infusion pump)의 시작 버튼을 누르면, 상기 소라페닙을 포함하는 소듐 알기네이트 혼합물 용액은 소독한 유리 수거기에 있는 고체화용액에 떨어져 마이크로스피어(또는 마이크로 겔 비드)라고 불리는 젖은 비드(wet bead)를 수득하였다. 상기 맞춤 바늘은 뭉뚝한 말단(blunt end)를 가진 스테인리스강(stainless steel)으로부터 만들었다.

(4) 세척(Washing): 상기 수득한 마이크로스피어(또는 마이크로 겔 비드)를 원심분리 세척(centrifuge washing) 또는 침전 세척(precipitation washing)을 한 후 3 wt% 보존 용액에 저장하였다. 저장하는 동안에, 상기 마이크로스피어는 소라페닙의 유출(leaking)없이 온전히 유지되었다.

(5) 상기 보존 용액에 저장된 마이크로스피어(또는 마이크로 겔 비드)의 입자 크기 범위는 70 내지 150 μm이다.

(6) 상기 소라페닙을 포함하는 수득한 소듐 알기네이트 마이크로스피어 또는 마이크로 겔 비드를 냉동 건조(freeze drying)에 의해 건조시켜 건조된 비드를 얻었고, 이것의 입자 크기 범위는 30 내지 75 μm이다.

상기 마이크로스피어는 적용하기 전에 식염수(생리학적 살린, physiological saline)에 30분 동안 담구어 젖은 비드(wet bead)로 된 후 바로 사용될 수 있다.

4. 표적화된 혈관 색전(targeted vessel embolisation)을 통한 환자 치료의 적용

간암을 가지고 있는 환자에게, 중재 방사선 검사(interventional radiography) 또는 중재 초음파 검사(interventional ultrasonography)를 통해 카테테르(catheter)를 표적 장기로 공급되는 동맥으로 삽입한 후 동맥 촬영(arteriography)을 수행하였다. 상기 언급된 소라페닙을 포함하는 표적화된 서방형 소듐 마이크로스피어 혈관 색전제(targeted sustained-release sodium alginate microsphere vascular embolizing agent)를 동맥조영도(arteriogram)에 따라 선택하였다. 초선택적 색전술(superselecting embolism)할 때, 마이크로카테테르(microcatheter)가 바람직할 것이고 이는 살균되어야 한다. 상기 소라페닙을 포함하는 소듐 알기네이트 마이크로스피어(젖은 비드)에 있는 칼슘 클로라이드 용액을 주사기를 사용하여 제거하였다. 상기 마이크로스피어를 식염수의 동일한 양을 사용하여 세 번 씻어주거나 또는 처음으로 병에서 그릇(bowl)으로 옮기고 그 후 식염수의 50 ? 100 ml으로 1 ? 3번 세척한다. 세척 용액을 제거하고, 조영제(contrast agent) 또는 희석된 조영제의 적절한 양을 첨가하고 마이크로스피어와 혼합하여 조영매질(contrast medium)에 완전히 현탁된 마이크로스피어를 만들고, 그 후 이것을 특이 조건에 따라, 형광투시경(fluoroscopic)의 조절하에 카테테르(catheter) 통해 초점으로 서서히 주입한다. 조영제의 흐름을 명백히 늦출 때, 상기 색전제가 완성된다. 색전(embolization)의 효과를 평가하기 위해 동맥 촬영(arteriography)은 한 번 더 수행된다.

실시예 2

1. 캡슐화(encapsulating)하기 전 제조

유리 용품(glass ware)의 처리: 깨끗한 유리 용품을 공기에서 건조시키고 박테리아를 사명시키고 발열물질(pyrogen)을 제거하기 위해서 260℃의 고온 오븐에서 3시간동안 구었다.

2. 시약의 제조

(1) 항-종양 약물 소라페닙 용액(anti-tumor drug sorafenib solution)의 제조

상업적으로 이용가능한 소라페닙의 0.62 g의 무게를 재고 상기 언급한 유리 용품에 첨가하였다. 상기 소라페닙이 완전히 용해될 때까지 적절량의 디메틸 술폭시드(dimethyl sulfoxide; DMSO)를 떨어뜨려 소라페닙 용액의 500 ml을 수득하였다.

(2) 소듐 알기네이트 용액(sodium alginate solution)의 제조

식염수을 소듐 알기네이트에 첨가하여 소듐 알기네이트가 완전히 용해될 때까지 저어줌으로써 1 wt % 소듐 알기네이트 용액의 45 L를 제조하였다.

(3) 고체화 용액(solidifying solution)의 제조

적절한 칼슘 락테이트(calcium lactate)를 무게를 측정하고 식염수에 용해시켜 1 wt% 칼슘 락테이트 용액(calcium lactate solution)을 제조하였다.

(4) 보존 용액(preserving solution)의 제조

적절한 칼슘 클로라이드(calcium chloride)를 무게를 측정하여 주입을 위해 물에 용해시켜 8 wt% 칼슘 클로라이드 용액, 즉 보존 용액을 제조하였다.

(5) 상기 언급된 소라페닙의 용액 500 ml을 고속 혼합기(high-speed mixer)에 의해 소듐 알기네이트 용액의 45 L과 혼합하여 소듐 알기네이트 및 소라페닙을 포함한 혼합 용액을 수득하였다.

3. 소라페닙을 포함하는 소듐알기네이트 마이크로스피어(sodium alginate microsphere)의 제조

(1) 60 ml 주사기 12개를 맞춤 바늘(tailor-made needles)에 맞추고 그 후 소라페닙 용액 및 소듐 알기네이트 용액의 혼합물을 최소 63번 주사기로 흡입시켰다.

(2) 상기 마이크로스피어 과정 제조의 단계 (1)에서 언급한 주사기를 마이크로인퓨젼 펌프(microinfusion pump)의 주사기 푸싱 슬랏(syringe pushing slot)에 고정시켰다. 또한 상기 펌프의 변수(parameter)를 조절하였다.

(3) 고전압 정전기 멀티헤드 마이크로스피어 생산기(high-voltage electrostatic multihead microsphere generator)의 양극(positive interface)를 중복점 전극(multiplepoint electrode)를 통해서 12개의 주사기의 맞춤 바늘(tailor-made needles)과 연결하였다; 반면에 고전압 정전기 멀티헤드 마이크로스피어 생산기(high-voltage electrostatic multihead microsphere generator)의 음극(negative interface)은 중복점 전극(multiplepoint electrode)를 통해서 단계 (2)의 고체화 용액(solidifying solution)에 담근 12개의 b-형태 스테인리스 강 고리(stainless steel ring)의 연장(extension)과 연결시켰다; 맞춤 바늘을 소독한 리프팅 플랫폼(lifting platform)에 놓여진 소독된 유리 수거기(glass collector)에 매달었다; 맞춤 바늘의 팁(tip) 및 소독한 유리 수거기에 있는 액체 표면 사이의 거리를 5 cm로 조절하였다; 그리고 고전압 정전기 멀티헤드 마이크로스피어 생산기(high-voltage electrostatic multihead microsphere generator) 및 마이크로-인퓨젼 펌프(micro-infusion pump)의 시작 버튼을 누르면, 상기 소라페닙을 포함하는 소듐 알기네이트 혼합물 용액은 소독한 유리 수거기에 있는 고체화용액에 떨어져 마이크로스피어(또는 마이크로 겔 비드)라고 불리는 젖은 비드(wet bead)를 수득하였다. 상기 맞춤 바늘은 뭉뚝한 말단(blunt end)를 가진 스테인리스강(stainless steel)으로부터 만들었다.

(4) 세척(Washing): 상기 수득한 마이크로스피어(또는 마이크로 겔 비드)를 원심분리 세척(centrifuge washing) 또는 침전 세척(precipitation washing)을 한 후 8 wt% 보존 용액에 저장하였다. 저장하는 동안에, 상기 마이크로스피어는 소라페닙의 유출(leaking)없이 온전히 유지되었다.

(5) 상기 보존 용액에 저장된 마이크로스피어(또는 마이크로 겔 비드)의 입자 크기 범위는 300 내지 500 μm이다.

(6) 상기 소라페닙(sorafenib)을 포함하는 수득한 소듐 알기네이트 마이크로스피어(sodium alginate microsphere) 또는 마이크로 겔 비드(micro gel bead)를 냉동 건조(freeze drying)에 의해 건조시켜 건조된 비드를 얻었고, 이것의 입자 크기 범위는 150 내지 300 μm이다.

신장암(renal cancer)을 가지고 있는 환자에게, 중재 방사선 검사(interventional radiography) 또는 중재 초음파 검사(interventional ultrasonography)를 통해 카테테르(catheter)를 표적 장기로 공급되는 동맥으로 삽입한 후 동맥 촬영(arteriography)을 수행하였다. 상기 언급된 소라페닙을 포함하는 표적화된 서방형 소듐 마이크로스피어 혈관 색전제(targeted sustained-release sodium alginate microsphere vascular embolizing agent)를 동맥조영도(arteriogram)에 따라 선택하였다. 초선택적 색전술(superselecting embolism)할 때, 마이크로카테테르(microcatheter)가 바람직할 것이고 이는 살균되어야 한다. 상기 소라페닙을 포함하는 소듐 알기네이트 마이크로스피어(젖은 비드)에 있는 칼슘 클로라이드 용액(calcium chloride solution)을 주사기를 사용하여 제거하였다. 상기 마이크로스피어를 식염수의 동일한 양을 사용하여 세 번 씻어주거나 또는 처음으로 병으로부터 그릇(bowl)으로 옮기고 그 후 식염수의 50 ? 100 ml으로 1 ? 3번 세척한다. 세척 용액을 제거하고, 조영제(contrast agent) 또는 희석된 조영제의 적절한 양을 첨가하고 마이크로스피어와 혼합하여 조영매질(contrast medium)에 완전히 현탁된 마이크로스피어를 만들고, 그 후 이것을 특이 조건에 따라, 형광투시경(fluoroscopic)의 조절하에 카테테르(catheter) 통해 초점으로 서서히 주입한다. 조영제의 흐름을 명백히 늦출 때, 상기 색전제가 완성된다. 색전(embolization)의 효과를 평가하기 위해 동맥 촬영(arteriography)은 한 번 더 수행된다.

실시예 3

1. 캡슐화(encapsulating)하기 전 제조

유리 용품(glass ware)의 처리: 깨끗한 유리 용품을 공기에서 건조시키고 박테리아를 사명시키고 발열물질(pyrogen)을 제거하기 위해서 260℃의 고온 오븐에서 3시간 동안 구었다.

2. 시약의 제조

상업적으로 이용가능한 소라페닙(sorafenib)의 6.9 mg의 무게를 재고 상기 언급한 유리 용품에 첨가하였다. 상기 소라페닙이 완전히 용해될 때까지 적절량의 디메틸 술폭시드(dimethyl sulfoxide; DMSO)를 떨어뜨려 소라페닙 용액의 30 ml을 수득하였다.

(2) 소듐 알기네이트 용액(sodium alginate solution)의 제조

식염수을 소듐 알기네이트에 첨가하여 소듐 알기네이트가 완전히 용해될 때까지 저어줌으로써 7 wt % 소듐 알기네이트 용액(sodium alginate solution)의 2000 ml을 제조하였다.

(3) 고체화 용액(solidifying solution)의 제조

적절한 칼슘 락테이트(calcium lactate)를 무게를 측정하고 식염수(생리학적 살린, physiological saline)에 용해시켜 10 wt% 칼슘 락테이트 용액(calcium lactate solution)을 제조하였다.

(4) 보존 용액(preserving solution)의 제조

적절한 칼슘 락테이트(calcium lactate)를 무게를 측정하여 주입을 위해 물에 용해시켜 15 wt% 칼슘 락테이트 용액을 제조하였다.

(5) 상기 언급된 소라페닙의 용액 30 ml을 고속 혼합기(high-speed mixer)에 의해 소듐 알기네이트 용액의 2000 ml과 혼합하여 소듐 알기네이트(sodium alginate) 및 소라페닙(sorafenib)을 포함한 혼합 용액을 수득하였다.

3. 소라페닙(sorafenib)을 포함하는 소듐알기네이트(sodium alginate) 마이크로스피어(sodium alginate microsphere)의 제조

(1) 50 ml 주사기 10개를 맞춤 바늘(tailor-made needles)에 맞추고 그 후 소라페닙 용액 및 소듐 알기네이트 용액의 혼합물을 최소 4번 주사기로 흡입시켰다.

(2) 상기 마이크로스피어 과정 제조의 단계 (1)에서 언급한 주사기를 마이크로인퓨젼 펌프(microinfusion pump)의 주사기 푸싱 슬랏(syringe pushing slot)에 고정시켰다.

(3) 고전압 정전기 멀티헤드 마이크로스피어 생산기(high-voltage electrostatic multihead microsphere generator)의 양극(positive interface)를 중복점 전극(multiplepoint electrode)를 통해서 10개의 주사기의 맞춤 바늘(tailor-made needles)과 연결하였다; 반면에 고전압 정전기 멀티헤드 마이크로스피어 생산기(high-voltage electrostatic multihead microsphere generator)의 음극(negative interface)은 중복점 전극(multiplepoint electrode)를 통해서 단계 (2)의 고체화 용액(solidifying solution)에 담근 10개의 b-형태 스테인리스 강 고리(stainless steel ring)의 연장(extension)과 연결시켰다; 맞춤 바늘을 소독한 리프팅 플랫폼(lifting platform)에 놓여진 소독된 유리 수거기(glass collector)에 매달었다; 맞춤 바늘의 팁(tip) 및 소독한 유리 수거기에 있는 액체 표면 사이의 거리를 5 cm로 조절하였다; 그리고 고전압 정전기 멀티헤드 마이크로스피어 생산기(high-voltage electrostatic multihead microsphere generator) 및 마이크로-인퓨젼 펌프(micro-infusion pump)의 시작 버튼을 누르면, 상기 소라페닙을 포함하는 소듐 알기네이트 혼합물 용액은 소독한 유리 수거기에 있는 고체화 용액(solidfying solution)에 떨어져 마이크로스피어(microsphere)[또는 마이크로 겔 비드(micro gel bead)]라고 불리는 젖은 비드(wet bead)를 수득하였다. 상기 맞춤 바늘은 뭉뚝한 말단(blunt end)를 가진 스테인리스강(stainless steel)으로부터 만들었다.

(4) 세척(Washing): 상기 수득한 마이크로스피어(microsphere)[또는 마이크로 겔 비드(micro gel bead)]를 원심분리 세척(centrifuge washing) 또는 침전 세척(precipitation washing)을 한 후 15 wt% 보존 용액에 저장하였다. 저장하는 동안에, 상기 마이크로스피어(microsphere)는 소라페닙의 유출(leaking)없이 온전히 유지되었다.

(5) 상기 보존 용액에 저장된 마이크로스피어(microsphere)[또는 마이크로 겔 비드(micro gel bead)]의 입자 크기 범위는 500 내지 700 μm이다.

(6) 상기 소라페닙을 포함하는 수득한 소듐 알기네이트 마이크로스피어(microsphere) 또는 마이크로 겔 비드(micro gel bead)를 냉동 건조(freeze drying)에 의해 건조시켜 건조된 비드(bead)를 얻었고, 이것의 입자 크기 범위는 250 내지 500 μm이다.

상기 마이크로스피어(microsphere)는 적용하기 전에 식염수(생리학적 살린, physiological saline)에 30분 동안 담구어 젖은 비드(wet bead)로 된 후 바로 사용될 수 있다.

폐암(lung cancer)을 가지고 있는 환자에게, 중재 방사선 검사(interventional radiography) 또는 중재 초음파 검사(interventional ultrasonography)를 통해 카테테르(catheter)를 표적 장기로 공급되는 동맥으로 삽입한 후 동맥 촬영(arteriography)을 수행하였다. 상기 언급된 소라페닙을 포함하는 표적화된 서방형 소듐 마이크로스피어 혈관 색전제(targeted sustained-release sodium alginate microsphere vascular embolizing agent)를 동맥조영도(arteriogram)에 따라 선택하였다. 초선택적 색전술(superselecting embolism)할 때, 마이크로카테테르(microcatheter)가 바람직할 것이고 이는 살균되어야 한다. 상기 소라페닙을 포함하는 소듐 알기네이트 마이크로스피어(젖은 비드)에 있는 칼슘 클로라이드 용액(calcium chloride solution)을 주사기를 사용하여 제거하였다. 상기 마이크로스피어를 식염수의 동일한 양을 사용하여 세 번 씻어주거나 또는 처음으로 병으로부터 그릇(bowl)으로 옮기고 그 후 식염수의 50 ? 100 ml으로 1 ? 3번 세척한다. 세척 용액을 제거하고, 조영제(contrast agent) 또는 희석된 조영제의 적절한 양을 첨가하고 마이크로스피어와 혼합하여 조영매질(contrast medium)에 완전히 현탁된 마이크로스피어를 만들고, 그 후 이것을 특이 조건에 따라, 형광투시경(fluoroscopic)의 조절하에 카테테르(catheter) 통해 초점으로 서서히 주입한다. 조영제의 흐름을 명백히 늦출 때, 상기 색전제가 완성된다. 색전(embolization)의 효과를 평가하기 위해 동맥 촬영(arteriography)은 한 번 더 수행된다.

Claims

천연 담체 소듐 알기네이트(natural carrier sodium alginate) 및 항-종양 약물 소라페닙(anti-tumor drug sorafenib)을 포함하는 소라페닙(sorafenib)을 포함하고, 여기서 상기 소라페닙은 소듐 알기네이트(sodium alginate)에 의해 캡슐화되어 있고 소라페닙 대 소듐 알기네이트의 중량비가 1 : 1 ? 1 : 30인 표적화된 서방형 소듐 알기네이트 마이크로스피어 혈관 색전제(targeted sustained-release sodium alginate microsphere vascular embolizing agent).
하기의 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는, 청구항 1에 따른 소라페닙을 포함하는 표적화된 서방형 소듐 알기네이트 마이크로스피어 혈관 색전제(targeted sustained-release sodium alginate microsphere vascular embolizing agent)의 제조 방법:
(1) 담체 용액(carrier solution)의 제조
주입시키기 위해 소듐 알기네이트를 식염수(생리학적 살린, physiological saline) 또는 물에 비례적으로 용해시켜 1 wt% ? 7 wt% 용액을 제조한 후 소듐 알기네이트 담체 용액(sodium alginate carrier solution)을 수득하는 단계;
(2) 고체화 용액(solidifying solution)의 제조
칼슘 락테이트(calcium lactate) 또는 칼슘 클로라이드(calcium chloride)의 무게를 측정하고 주입하기 위하여 식염수 또는 물에 비례적으로 용해시켜 1 wt% ? 10 wt% 칼슘 락테이트 또는 칼슘 클로라이드 용액을 준비하는 단계;
(3) 약물 용액(drug solution)의 제조
소라페닙(sorafenib)의 무게를 측정 한 후 비례적으로 폴리에틸렌 글리세롤 400(polyethylene glycerol 400) 또는 디메틸 술폭시드(dimethyl sulfoxide)에 용해시켜 소라페닙 약물 용액(sorafenib drug solution)을 수득하는 단계;
(4) 담체 용액(carrier solution) 및 약물 용액(drug solution)의 혼합물의 제조
단계 (3)에서 수득된 상기 소라페닙 약물 용액을 고속 혼합기(high-speed mixer)에 의해 단계 (1)의 상기 소듐 알기네이트 담체 용액과 혼합하여 혼합 용액을 수득하는 단계;
(5) 소라페닙을 포함하는 표적화된 서방화 소듐 알기네이트 마이크로스피어(targeted sustained-release sodium alginate microsphere)의 제조
단계 (4)에서 수득한 상기 혼합 용액을 고전압 정전기 멀티헤드 마이크로스피어 생산 장치(high-voltage electrostatic multihead microsphere generating device)를 통해 단계 (2)에서 수득한 고체화 용액(solidifying solution)과 반응시켜 마이크로스피어[또는 마이크로 겔 비드(micro gel beads)]를 수득하는 단계.
제 2항에 있어서, 단계 (5)의 고전압 정전기 멀티헤드 마이크로스피어 생산 장치(high-voltage electrostatic multihead microsphere generating device)가 중복점 전극(multiplepoint electrode), 마이크로-인퓨젼 펌프(micro-infusion pump), 주사기(syringe), 맞춤 바늘(tailor-made needle), 리프팅 플랫폼(lifting platform), 및 소독된 유리 수거기(sterile glass collector)로 구성되는 것을 특징으로 하는, 소라페닙(sorafenib)을 포함하는 표적화된 서방화 소듐 알기네이트 마이크로스피어 혈관 색전제의 제조 방법.
제 3항에 있어서, 단계 (5)의 제조 과정은
1) 10 ? 60 ml 주사기를 맞춤 바늘(tailor-made needle)에 맞춘 후 단계 (4)에서 수득된 상기 혼합 용액의 10 ? 60 ml를 주사기로 흡입시키고;
2) 단계 1)의 상기 주사기를 마이크로-인퓨젼 펌프(micro-infusion pump)의 주사기 푸싱 슬랏(syringe pushing slot)에 고정시키며;
3) 고전압 정전기 생성기(high-voltage electrostatic generator)의 양극(positive interface)을 중복점 전극(multiplepoint electrode)을 통해 2 ? 12개 주사기의 맞춤 바늘과 연결시키고; 반면에 고전압 정전기 생성기의 음극(negative interface)은 중복점 전극을 통해 단계 (2)에서 수득한 고체화 용액에 담근 2 ? 12개의 b-형태 스테인리스강 고리(b-shape stainless steel rings)의 연장(extension)과 연결시키며; 리프팅 플랫폼(lifting platfor)에 놓여있는 소독된 유리 수거기(glass collector) 위에 맞춤 바늘을 걸고; 맞춤 바늘의 팁(tip) 및 상기 소독된 유리 수거기에 있는 액체 표면 사이의 거리를 5 ? 20 cm으로 조절하며; 및 고전압 정전기 생성기(high-voltage electrostatic generator) 및 마이크로-인퓨젼 펌프(micro-infusion pump)의 시작 버튼을 누르면, 상기 소라페닙을 포함하는 소듐 알기네이트 혼합 용액을 소독된 유리 수거기에 있는 고체화 용액으로 떨어뜨려 마이크로스피어(또는 마이크로 겔 비드)라고 불리는 젖은 비드(wet bead)를 수득하는 것을 특징으로 하는 소라페닙을 포함하는 표적화된 서방화 소듐 알기네이트 마이크로스피어 혈관 색전제의 제조 방법.
제 4항에 있어서, 맞춤 바늘(tailor-made needle)이 뭉뚝한 말단(blunt end)을 가지는 스테인리스 강으로부터 만들어진 것을 특징으로 하는, 소라페닙을 포함하는 표적화된 서방화 소듐 알기네이트 마이크로스피어 혈관 색전제의 제조 방법.
제 5항에 있어서, 수득된 마이크로스피어 또는 마이크로 겔 비드를 원심분리 세척(centrifuge washing) 또는 침전 세척(precipitation washing) 한 후 보존 용액(preserving solution)에 저장하여 소듐 알기네이트 마이크로스피어 또는 마이크로 겔 비드를 얻고; 및 상기 마이크로스피어가 저장하는 동안 소라페닙의 유출(leaking) 없이 온전히 보유되는 것을 특징으로 하는, 소라페닙을 포함하는 표적화된 서방화 소듐 알기네이트 마이크로스피어 혈관 색전제의 제조 방법.
제 6항에 있어서, 보존 용액은 칼슘 클로라이드(calcium chloride) 또는 칼슘 락테이트(calcium lactate)를 비례적으로 무게를 측정하고, 주입하기 위해 물에 용해시켜 3 wt% ? 15 wt%의 보존 용액을 제조하는 것을 특징으로 하는 소라페닙을 포함하는 표적화된 서방화 소듐 알기네이트 마이크로스피어 혈관 색전제의 제조 방법.
제 7항에 있어서, 마이크로스피어 또는 마이크로 겔 비드의 입자 크기 범위가 50 ? 100 μm, 70 ? 150 μm, 100 ? 200 μm, 100 ? 300 μm, 150 ? 450 μm, 300 ? 500 μm, 500 ? 700 μm, 또는 700 ? 900 μm인 것을 특징으로 하는 표적화된 서방화 소듐 알기네이트 마이크로스피어 혈관 색전제의 제조 방법.
제 8항에 있어서, 수득된 마이크로스피어 또는 마이크로 겔 비드를 냉동 건조(freeze drying) 또는 오븐 건조(oven drying)를 통해 건조시키고, 비드의 입자 크기 범위는 20 ? 60 μm, 30 ? 75 μm, 50 ? 100 μm, 70 ? 150 μm, 80 ? 250 μm, 150 ? 300 μm, 250 ? 500 μm, 또는 500 ? 700 μm인 것을 특징으로 하는 표적화된 서방화 소듐 알기네이트 마이크로스피어 혈관 색전제의 제조 방법.
간암(liver cancer), 폐암(lung cancer), 신장암(renal cancer), 난소암(ovarian cancer), 전립선암(prostate cancer), 및 머리 및 목 종양(head and neck tumor)을 포함하는 고체 종양의 치료를 위한 약제의 제조를 위한 제 1항에 따른 소라페닙을 포함하는 표적화된 서방화 소듐 알기네이트 마이크로스피어 혈관 색전제의 용도.