KR20080069228A

KR20080069228A - 새로운 티오펜 유도체

Info

Publication number: KR20080069228A
Application number: KR1020087013370A
Authority: KR
Inventors: 마틴 볼리; 데이비드 레만; 보리스 마티스; 클라우스 뮤러; 올리버 나일러; 비트 스테이너; 조르그 벨커
Original assignee: 액테리온 파마슈티칼 리미티드
Priority date: 2005-11-23
Filing date: 2006-11-22
Publication date: 2008-07-25
Also published as: TW200738670A; RU2420523C2; IL191540A0; ZA200805407B; EP1954688A1; CN101312959A; US20080300294A1; AU2006318049A1; US7981924B2; NO20082793L; NZ569102A; AR057894A1; BRPI0618871A2; WO2007060626A1; CA2629122A1; RU2008125196A; JP2009516735A

Abstract

본 발명은 새로운 티오펜 유도체, 그의 제조 및 제약학적 활성 화합물로서의 그의 용도에 관련이 있다. 상기 화합물은 특히 면역 억제제로서 작용한다.

Description

새로운 티오펜 유도체{NOVEL THIOPHENE DERIVATIVES}

본 발명은 제약학적 조성물의 제조에서 활성 성분으로서 화학식(I)의 S1P1/EDG1 수용체 작용제 및 그의 용도에 관련이 있다. 발명은 또한 화합물의 제조를 위한 방법, 화학식(I)의 화합물을 함유하는 제약학적 조성물 및, 단독으로 또는 다른 활성 화합물 또는 치료법과 조합으로, 혈관 기능을 증진하는 화합물로서 그리고 면역조절제로서 그의 용도를 포함하는 관련된 양상들에 관한 것이다. 본 발명의 또 다른 양상은 화학식(I)의 화합물을 제조하는데 중간체로서 기능을 하는 화학식(II) 및 (III)의 새로운 화합물과 관련이 있다.

인간 면역 시스템은 감염이나 질병을 유발하는 물질 및 유해한 미생물로부터 신체를 지키도록 설계된다. 복합 조절 메커니즘은 면역 반응이 숙주(host)에 대항하지 않고 침입 물질 또는 생물에 대항하여 표적 되는 것을 책임진다. 일부의 경우에, 이들 제어 메커니즘이 조절되지 않고, 자가면역 반응이 발달할 수 있다. 제어되지 않는 염증성 반응의 결과는 심한 기관, 세포, 조직 또는 관절 손상이 된다. 최신 치료로, 전체 면역 시스템은 일반적으로 억제되고 감염에 반응하는 신체의 능력이 또한 심하게 위태롭게 된다. 이런 부류의 전형적인 약물은 아자티오프린, 클로람부실, 시클로포스파미드, 시클로스포린 또는 메토트렉세이트를 포함한다. 염증 을 감소하고 면역 반응을 억제하는 코르티코스테로이드는 장기간 치료에 사용될 때 부작용을 유발할 수 있다. 비스테로이드성 항염증 약물들(NSAIDs)은 고통 및 염증을 줄일 수 있으나, 약물들은 상당한 부작용을 나타낸다. 대안적 치료는 시토킨 신호(cytokine signaling)를 활성화시키거나 차단하는 약물을 포함한다.

면역 반응을 위태롭게 하지 않고 부작용을 감소시키는, 면역조절 성질을 갖는 경구 활성 화합물은 제어되지 않는 염증성 질병의 최신 치료를 상당히 증진시켰을 것이다.

장기 이식의 분야에서, 숙주 면역 반응은 장기 거부반응을 방지하도록 억제되어야만 한다. 장기 이식 수혜자들이 면역 억제 약물을 복용할 때조차 장기 이식 수혜자들은 일부 거부반응을 경험할 수 있다. 거부반응은 이식 후 첫 몇 주에 가장 빈번하게 일어나지만, 거부 증상의 발현은 또한 이식 후 몇 달 또는 몇 년까지 일어날 수 있다. 3 또는 4 개까지의 약들의 조합은 일반적으로 부작용을 최소화하는 동시에 거부 반응에 저항하여 최대한 보호해 주기 위해 사용된다. 이식된 기관의 거부반응을 치료하기 위해 사용된 최신 표준 약물은 T-타입 또는 B-타입 백혈구의 활성화에서 분리된 세포내 경로들을 방해한다. 이러한 약물들의 예들은 시토킨 방출 또는 신호를 방해하는, 시클로스포린, 다클리주맙, 바실리시맙, 에버롤리무스 또는 FK506; 뉴클레오티드 합성을 억제하는, 아자티오프린 또는 레플루노미드; 또는 백혈구 분화의 저해제인, 15-디옥시스퍼구알린(15-deoxyspergualin)이다.

폭넓은 면역 억제 치료법들의 유익한 효과는 치료법들의 효과와 관련이 있으나; 이들 약물이 불러일으키는 보편화된 면역억제는 감염과 종양에 저항하는 면역 시스템의 방어를 줄인다. 게다가, 표준 면역 억제 약물은 종종 높은 투여량으로 사용되고 기관 손상을 유발하거나 촉진할 수 있다.

본 발명은 G 단백 결합 수용체 S1P1/EDG1에 대한 작용제이고, 림프구의 성숙, 기억 또는 팽창에 영향을 미치지 않는, 순환하는 및 침윤하는 T- 및 B-림프구의 수를 줄여주는 강력하고 오래가는 면역 억제 효과를 갖는 화학식(I)의 새로운 화합물을 제공한다. 선택적으로 S1P1/EDG1 활성화와 관련된 내피 세포층 기능의 관찰된 개선점과 조합한, P1/EDG1 아고니즘(agonism)의 결과로서 순환하는 T-/B-림프구의 감소는 제어되지 않는 염증성 질병을 치료하고 혈관 기능성을 개선하는데 유용한 화합물을 만든다.

표준 면역 억제 치료법과 비교할 때, 감염에 대한 감소된 경향을 갖는 새로운 면역 억제 치료법을 제공하기 위해, 본 발명의 화합물은 단독으로 또는 표준 약물 억제 T-세포 활성화와 조합하여 사용될 수 있다. 더욱이, 한편으로 효과적인 면역 억제 활성도를 제공하는 동시에, 다른 한편으로 표준 면역 억제 약물의 더 높은 투여량과 관련된 말단 기관 손상을 줄이기 위해, 본 발명의 화합물은 전통적인 면역억제 치료법들의 감소된 투여량과 조합하여 사용될 수 있다. S1P1/EDG1 활성화와 관련된 개선된 내피 세포층 기능의 관찰은 혈관 기능을 개선하기 위해 화합물의 추가적인 이점을 제공한다.

인간 S1P1/EDG1 수용체에 대한 뉴클레오티드 배열 및 아미노산 배열이 종래기술에 알려져 있고, 예를 들면: HIa, T., and Maciag, T. J. Biol Chem. 265 (1990), 9308-9313; 1991년 10월 17일에 공개된 WO 91/15583호; 1999년 9월 16일에 공개된 WO 99/46277호에 공개된다. 화학식(I)의 화합물의 효능 및 효력은 각각 EC50 값을 결정하기 위해 GTPγS 분석을 사용하여 및 경구 복용 후 쥐(rat)의 순환하는 림프구를 분석하는 것에 의해 평가된다(예들을 참조하라).

i) 본 발명은 다음의 화학식(I)의 새로운 티오펜 그리고 이러한 화합물의 염 및 용매 복합물과 관련이 있다.

여기서,

R ¹ 은 메틸, 트리플루오로메틸 또는 에틸을 나타내고;

R ² 는 수소, C₁ _-4-알킬, 메톡시 또는 할로겐을 나타내고;

R ³ 은 수소, C₁ _-4-알킬, C₁ _-4-알콕시 또는 할로겐을 나타내고;

R ⁴ 는 수소, C₁ _-4-알킬 또는 할로겐을 나타내고;

R ⁵ 는 수소를 나타내고;

R ⁶ 은 수소 또는 히드록시를나타내고;

R ⁶ 가 히드록시를 나타내는 경우에, R ⁵ 는 추가적으로 히드록시를 나타낼 수 있고;

n은 0을 나타내고;

m은 0 또는 1을 나타내고 ; 및

m이 1인 경우에, n은 추가적으로 1을 나타낼 수 있다.

상기에서 및 이하에서 사용된 일반적 용어들은 바람직하게 본 명세서 내에서 다음의 의미들을 가지며, 그렇지 않으면 다음을 나타낸다:

복수 형태가 화합물, 염, 제약학적 조성물, 질병 기타 등등에 대해 사용된 경우, 이것은 또한 단일 화합물, 염 또는 그와 같은 것을 의미하는 것으로 간주 된다.

화학식(I), (II) 또는 (III)의 화합물에 대해 상기에서 또는 이하에서의 언급은 거울상이성질체, 라세미체와 같은 거울상이성질체의 혼합물, 부분입체이성질체, 부분입체이성질체의 혼합물 및 부분입체이성질체성 라세미체와 같은 부분입체이성질체와 거울상 이성질체의 혼합물 및 염(특히 제약학적으로 용인가능한 염) 및 이러한 화합물의 용매 복합물(수화물을 포함하는) 및 형태학적 모양에 대해 또한 언급하는 것으로서 적당하게 및 적절하게 이해되어야 한다.

단독으로 또는 다른 작용기와 조합하여, 용어 C ₁ _-4 - 알킬은 1개 내지 4개의 탄소 원자를 갖는, 바람직하게는 1개 내지 3개의 탄소 원자를 갖는 포화된, 분지된 또는 바람직하게는 직선 사슬 작용기를 의미한다. C₁ _-4-알킬기의 예들은 메틸, 에틸, n-프로필, 이소-프로필, n-부틸, 이소-부틸, sec-부틸 및 tert-부틸이다.

용어 C ₁ _-4 -알콕시는 R-O 작용기를 의미하는데, 여기서 R은 C₁ _-4-알킬이다. C₁ _-4-알콕시기의 바람직한 예들은 메톡시, 에톡시, 프로폭시 및 이소-프로폭시이다.

용어 할로겐은 플루오로, 클로로, 브로모 또는 이오도를 의미하는데, 바람직하게는 플루오로 또는 클로로를 의미한다.

염은 바람직하게는 화학식(I)의 화합물의 제약학적 용인가능한 염이다.

염-형성 작용기는 염기성 또는 산성 성질을 갖는 라디칼 또는 작용기이다. 예를 들어 아미노, 펩타이드 결합 또는 피리딜 라디칼을 형성하지 않는 2차 아미노기인, 적어도 하나의 염기성 작용기 또는 적어도 하나의 염기성 라디칼을 갖는 화합물은 예를 들어 무기산을 갖는 산 첨가 염을 형성할 수 있다. 몇몇의 염기성 작용기들이 존재할 때 모노- 또는 폴리-산 첨가 염이 형성될 수 있다.

카르복시기 또는 페놀성 히드록시기와 같은, 산성 작용기를 갖는 화합물은 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염과 같은, 금속 또는 암모늄 염 예를 들어 나트륨, 칼륨, 마그네슘 또는 칼슘 염들, 또는 3차 모노아민과 같은, 암모니아 또는 적절한 유기 아민을 갖는 암모늄 염, 예를 들어 트리에틸아민 또는 트리-(2-히드록시에틸)-아민, 또는 헤테로시클릭 염기, 예를 들어 N-에틸-피페리딘 또는 N,N'-디메틸피페라진을 형성할 수 있다. 염의 혼합물도 가능하다.

산성과 염기성 작용기를 모두 갖는 화합물은 분자내 염(internal salts)을 형성할 수 있다.

중간체로서 더욱 사용되는 화합물의 경우와 마찬가지로, 분리 또는 정제의 목적을 위해, 제약학적으로 용인가능하지 않은 염, 예를 들어 피크르산염을 사용하는 것이 또한 가능하다. 그러나, 오직 제약학적으로 용인가능한, 비-독성 염은 치료상의 목적을 위해 사용될 수 있고, 이 염은 그러므로 바람직하다.

표현 제약학적 용인가능한 염은 염산, 브롬산, 요오드산, 황산, 설파민산, 인산, 질산, 아인산, 아질산, 구연산, 포름산, 아세트산, 옥살산, 말레인산, 락트산, 타르타르산, 푸마르산, 벤조산, 만델산, 계피산, 팔모산, 스테아르산, 글루탐산, 아스파르트산, 메탄술포닉산, 에탄술포닉산, 에탄디술포닉산, p-톨루엔술포닉산, 살리실산, 숙신산, 트리플루오로아세트산, 및 살아있는 생물에 대해 비 독성인 것들과 같은 무기산 또는 유기산을 갖는 염 또는 화학식(I)의 화합물이 사실상 산성인 경우에, 알칼리와 같은 무기 염기 또는 토류 알칼리 염기, 예를 들어 수산화 나트륨, 수산화 칼륨 및 이와 같은 것을 내포한다. 제약학적으로 용인가능한 염의 다른 예들에 대해, "Salt selection for basic drugs", lnt J. Pharm (1986), 33, 201 -217가 참조 되었다.

화학식(I), (II) 또는 (III)는 하나 또는 그 이상의 비대칭 탄소 원자를 포함할 수 있고 라세미체와 같은 거울상이성질체의 혼합물, 부분입체이성질체의 혼합물 또는 부분입체이성질체성 라세미체와 같은 거울상이성질체과 디아스테로머의 혼합물과 같은 이성질체의 혼합물 또는 순수 이성질체(바람직한)의 형태로 제조될 수 있다. 본 발명은 이들 형태들 모두를 내포한다. 혼합물은 그 자체로 알려진 방법으로, 예를 들어 칼럼 크로마토그래피, 얇은 막 크로마토그래피(TLC), 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC) 또는 결정화에 의해 분리될 수 있다.

ii) 본 발명의 특정한 실시예는 실시예 i)에 따른 티오펜 유도체와 관련이 있는데, 여기서 R ¹ 은 에틸기를 나타낸다.

iii) 본 발명의 특정한 실시예는 실시예 i)에 따른 티오펜 유도체와 관련이 있는데, 여기서 R ¹ 은 메틸기를 나타낸다.

iv) 본 발명의 특정한 실시예는 실시예 i)에 따른 티오펜 유도체와 관련이 있는데, 여기서 R ¹ 은 트리플루오로메틸기를 나타낸다.

v) 본 발명의 또 다른 특정한 실시예는 실시예 i) 내지 iv) 중 임의의 하나에 따른 티오펜 유도체와 관련이 있는데, 여기서 R ² 는 메톡시기를 나타내고, R ³ 및 R ⁴ 는 수소를 나타낸다.

vi) 본 발명의 또 다른 특정한 실시예는 실시예 i) 내지 iv) 중 임의의 하나에 따른 티오펜 유도체와 관련이 있는데, 여기서 R ² 는 수소를 나타내고, R ³ 및 R ⁴ 는 C₁ _-4-알킬을 나타낸다.

vii) 본 발명의 또 다른 특정한 실시예는 실시예 vi)에 따른 티오펜 유도체와 관련이 있는데, 여기서 R ³ 및 R ⁴ 는 메틸기를 나타낸다.

viii) 본 발명의 또 다른 특정한 실시예는 실시예 vi)에 따른 티오펜 유도체와 관련이 있는데, 여기서 R ³ 및 R ⁴ 는 에틸기를 나타낸다.

ix) 본 발명의 특히 바람직한 실시예는 실시예 vi)에 따른 티오펜 유도체와 관련이 있는데, 여기서 R ³ 는 메틸기를 나타내고 R ⁴ 는 에틸기를 나타낸다.

x) 본 발명의 또 다른 특정한 실시예는 실시예 i) 내지 iv) 중 임의의 하나에 따른 티오펜 유도체와 관련이 있는데, 여기서 R ² 는 수소를 나타내고 R ³ 는 메톡시기를 나타내고, 및 R ⁴ 는 염소 원자를 나타낸다.

xi) 본 발명의 또 다른 특정한 실시예는 실시예 i) 내지 iv) 중 임의의 하나에 따른 티오펜 유도체와 관련이 있는데, 여기서 R ² 는 수소를 나타내고 R ³ 는 메틸기를 나타내고, 및 R ⁴ 는 염소 원자를 나타낸다.

xii) 본 발명의 또 다른 특정한 실시예는 실시예 i) 내지 xi) 중 임의의 하나에 따른 티오펜 유도체와 관련이 있는데, 여기서 R ⁵ 및 R ⁶ 는 수소를 나타낸다.

xiii) 본 발명의 또 다른 특히 바람직한 실시예는 실시예 xii)에 따른 티오펜 유도체와 관련이 있는데, 여기서 n은 0을 나타내고 m은 1을 나타낸다.

xiv) 본 발명의 또 다른 특정한 실시예는 실시예 xii)에 따른 티오펜 유도체와 관련이 있는데, 여기서 n은 1을 나타내고 m은 1을 나타낸다.

xv) 본 발명의 또 다른 특정한 실시예는 실시예 i) 내지 xi) 중 임의의 하나에 따른 티오펜 유도체와 관련이 있는데, 여기서 m은 1을 나타내고 R ⁵ 및 R ⁶ 는 히드록시를 나타낸다.

xvi) 본 발명의 또 다른 특정한 실시예는 실시예 xv)에 따른 티오펜 유도체와 관련이 있는데, 여기서 n은 0을 나타낸다.

xvii) 본 발명의 또 다른 특정한 실시예는 실시예 i) 내지 xi) 중 임의의 하나에 따른 티오펜 유도체와 관련이 있는데, 여기서 R ⁵ 는 수소를 나타내고 R ⁶ 는 히드록시를 나타낸다.

xviii) 본 발명의 더욱 특별한 실시예는 실시예 i)에 따른 티오펜 유도체와 관련이 있는데, 여기서 R ¹ 은 트리플루오로메틸, 메틸 또는 에틸을 나타내고, R ² , R ⁵ 및 R ⁶ 는 수소를 나타내고, R ³ 및 R ⁴ 는 C₁ _-4-알킬을 나타내고, n은 0을 나타내고, 및 m은 1을 나타낸다.

xix) 화학식(I)에 따른 특정 티오펜 화합물은 다음과 같다:

3-{4-[3-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-일)-3-옥소-프로필]-2,6-디메틸-페닐}-프로피온산;

3-{4-[3-(5,5-디메틸-3-트리플루오로메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-일)-3-옥소-프로필]-2-에틸-6-메틸-페닐}-프로피온산;

3-{2-에틸-6-메틸-4-[3-옥소-3-(3,5,5-트리메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-일)-프로필]-페닐}-프로피온산; 및

3-{2-에틸-4-[3-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1 -일)-3-옥소-프로필]-6-메틸-페닐}-프로피온산.

xx) 화학식(I)에 따른 또 다른 특정 티오펜 화합물은 3-{2,6-디메틸-4-[3-옥소-3-(3,5,5-트리메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-일)-프로필]-페닐}-프로피온산이다.

xxi) 본 발명의 또 다른 양상은 다음의 화학식(II)의 새로운 티오펜 그리고 이러한 화합물의 염 및 용매 복합물과 관련이 있다.

여기서 R ¹ , R ² , R ³ , R ⁴ , R ⁵ , R ⁶ , n 및 m은 상기 화학식(I)에 대해 정의된 바와 같고, R ⁷ 은 수소, 메틸, 에틸 또는 tert-부틸을 나타낸다.

xxii) 본 발명의 또 다른 양상은 다음의 화학식(III)의 새로운 티오펜 그리고 이러한 화합물의 염 및 용매 복합물과 관련이 있다.

여기서 R ¹ , R ² , R ³ 및 R ⁴ 는 상기 화학식(I)에 대해 정의된 바와 같고 R ⁷ 은 수소, 메틸, 에틸 또는 tert-부틸을 나타낸다.

화학식(I)의 화합물 및 이의 제약학적으로 용인가능한 염은 예를 들어 소화관내, 모체, 또는 국소 투여를 위한 제약학적 조성물의 형태로, 약제로서 사용될 수 있다. 이들은 예를 들어, 알약, 코팅된 알약, 당의정(dragees), 단단하고 부드러운 젤라틴 캡슐, 용액, 유탁액 또는 현탁액의 형태로 경구적으로, 예를 들어 좌약 형태로 직장으로, 예를 들어 주사 용액 또는 주입 용액의 형태로 비경구적으로, 예를 들어 연고, 크림 또는 오일 형태로 국소적으로 투여될 수 있다.

제약학적 조성물의 제조는, 상기 화학식(I)의 화합물 또는 이의 제약학적으로 용인가능한 염을, 선택적으로 다른 치료상으로 유익한 물질과 조합하여, 적절한, 비-독성의, 불활성인, 제약학적으로 용인가능한 고체 또는 액체 담체(carrier) 물질 및, 필요한 경우, 통상의 제약학적 보조제(adjuvant)와 함께 생약 투여 형태로 산출하는 것에 의한 방식으로 실시될 수 있으며, 이러한 방식은 당업자에게 잘 알려져 있을 것이다(예를 들어 Mark Gibson, Editor, Pharmaceutical Preformulation and Formulation, IHS Health Group, Englewood, CO, USA, 2001 ; Remington, The Science and Practice of Pharmacy, 20th Edition, Philadelphia College of Pharmacy and Science를 참조하라).

화학식(I)의 화합물을 포함하는 제약학적 조성물은 활성화된 면역 시스템과 관련된 질병 또는 질환의 예방 및/또는 치료에 유용하다.

이러한 질병 또는 질환은 이식된 기관, 조직 또는 세포의 거부 반응; 이식에 의해 초래된 이식대숙주병; 류마티스관절염을 포함하는 자가면역성 증후군; 전신홍반루푸스; 항인지질 증후군인 하시모토 갑상선염; 림프구성 갑상선염인 다발경화증; 중증근육무력증; 당뇨병 제1형; 포도막염; 상공막염; 공막염; 가와사키 병인 포도망막염; 뒤쪽 포도막염; 베체트병과 관련된 포도막염; 포도막수막염 증후군; 알레르기성 뇌척수염; 만성 동종이식 혈관병증; 류마티스열 및 감염 수 사구체신염을 포함하는 감염 후 자가면역성 질병; 염증성 및 아토피피부염; 건선(psoriasis); 건선 관절염; 아토피피부염; 근육병증; 근육염; 골수염; 접촉 피부염; 습진 피부염; 지루 피부염; 편평태선; 천포창; 유사천포창; 수포성 표피박리증; 두드러기; 혈관부종; 혈관염; 홍반; 피부 호산구증가증; 여드름; 피부경화증; 원형 탈모증; 각막결막염; 봄철결막염; 각막염; 포진 각막염; 각막 상피 변성; 각막백반; 눈천포창; 무렌각막궤양; 궤양 각막염; 공막염; 그레이브스 안구병증; 보크트-고야나기-하라다 증후군; 사르코이드증; 꽃가루 알레르기; 가역성 폐쇄성 기도 질환; 기관지 천식; 알레르기 천식; 내인성 천식; 외인성 천식; 먼지 천식; 만성 또는 난치성 천식; 후기 천식 및 기도 과잉-반응성; 세기관지염; 기관지염; 자궁내막증; 고환염; 위궤양; 허혈성 장질환; 염증성 장질환; 괴사성 소장대장염; 화상과 관련된 창자 병변; 복강 질환; 직장염; 호산성 위창자염; 비만세포증; 크론병; 궤양 대장염; 허혈성 질환 및 혈전증에 의해 유발된 혈관의 손상; 죽상경화증; 지방성 심장; 심장근육염; 심근경색증; 대동맥염 증후군; 바이러스병에 따른 악액질; 혈관 혈전증; 편두통; 비염; 습진; 간질신장염; 면역글로블린에이신장병증; 굿파스튜어 증후군; 용혈요독 증후군; 당뇨병콩팥병증; 사구체경화증; 사구체신염; 세뇨관간질신염; 간질성 방광염; 다발 근육염; 길랑-바레 증후군; 메니에르 병; 다발신경염; 다발성 신경염; 척수염; 단발신경염; 신경근병증; 갑상선기능항진증; 바세도우 병; 갑상샘항진증; 순수적혈구 무형성증; 무형성 빈혈; 저형성 빈혈; 특발성혈소판감소자색반병; 자가면역성 용혈 빈혈; 자가면역성 저혈소판증; 과립구결핍증; 악성 빈혈; 거대적혈모구빈혈; 홍색무형성증; 골다공증; 폐섬유증; 특발성 간질성 폐렴; 피부근육염; 보통백색피부증; 보통비늘증; 광알레르기 민감도; 피부 T 세포 림프종; 결절성 다발 동맥염; 헌팅톤 무도병; 시덴함 무도병; 심근증; 심장근육염; 피부경화증; 베게너 육아종증; 쇼그렌 증후군; 비만증; 호산성 근막염; 잇몸, 치아주위조직, 이틀뼈, 치아 골 물질의 손상; 남성형 탈모증 또는 노인성 탈모증; 근육퇴행위축; 고름피부증; 세자리(Sezary's) 증후군; 뇌하수체염; 만성 부신기능 부전; 에디슨병; 보존이 일어나는 기관의 허혈-재관류 손상; 내독소 쇼크; 위막성 대장염; 약물 또는 방사선에 의해 유발된 대장염; 허혈성 급성 신부전; 만성 신부전; 폐암; 림프구 근원의 악성종양; 급성 또는 만성 림프구성 백혈병; 림프종; 폐기종; 백내장; 철침착증; 색소망막염; 노인성 황반부변성; 유리체 흉터형성(vitreal scarring); 각막 알칼리화상; 피부염 홍반; 수포성 피부염; 시멘트 피부염; 잇몸염; 치아주위조직염; 폐혈증; 췌장염; 말초 동맥 질환; 발암현상; 고형암종양; 암종의 전이; 고산병; 자가면역성 간염; 원발성 담즙성 간경변; 경화쓸개관염; 부분 간절제; 급성 간괴사; 간경화증; 알코올간경화증; 간부전; 전격 간부전; 후발성 간부전; 및 "만성의 급성화(acute-on-chronic)" 간부전으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

화학식(I)의 화합물로 치료되는 및/또는 예방되는 바람직한 질병 또는 질환은 신장, 간, 심장, 폐, 췌장, 각막 및 피부와 같은 이식된 기관의 거부반응; 줄기 세포 이식에 의해 초래된 이식대숙주병; 류마티스관절염, 다발경화증, 크론병 및 궤양 대장염과 같은 염증성 장질환, 건선, 건선 관절염, 하시모토 갑상선염과 같은 갑상선염, 포도망막염을 포함하는 자가면역성 증후군; 비염, 결막염, 피부염과 같은 아토피성 질환; 천식; 당뇨병 제I형; 류마티스열 및 감염 후 사구체신염을 포함하는 감염 후 자가면역성 질병; 고형암 및 종양 전이로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

화학식(I)의 화합물로 치료되는 및/또는 예방되는 특히 바람직한 질병 또는 질환은 신장, 간, 심장 및 폐로부터 선택된 이식된 기관의 거부반응; 줄기 세포 이식에 의해 초래된 이식대숙주병; 류마티스관절염, 다발경화증, 건선, 건선 관절염, 크론병 및 하시모토 갑상선염으로부터 선택된 자가면역성 증후군; 및 아토피 피부염으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

본 발명은 또한 화학식(I)의 화합물의 제약학적 활성량을 환자에게 투여하는 단계를 포함하는 본원에서 언급된 질병 또는 질환의 예방 또는 치료를 위한 방법과 관련이 있다.

게다가, 화학식(I)의 화합물은 또한 하나 또는 몇몇의 면역조절제와 결합하여, 본원에서 언급된 질병 및 질환의 예방 및/또는 치료에 대해 유용하다. 본 발명의 바람직한 예에 따라, 상기 약제는 면역억제제, 코르티코스테로이드(corticosteroids), NSAID's, 세포독성 약물, 유착분자 억제제, 시토킨, 시토킨 저해제, 시토킨 수용체 길항제 및 재조합 시토킨 수용체로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

본 발명은 또한 본원에서 언급된 질병 및 질환의 예방 또는 치료에 대해, 선택적으로 하나 또는 몇몇의 면역조절제와 조합하여 사용하기 위해, 제약학적 조성물의 제조를 위한 화학식(I)의 화합물의 사용과 관련이 있다.

본 발명은 또한 상기와 같은 화합물(I)의 화합물로 생체 내에서 전환하는 화학식(I)의 화합물의 프로-드러그(pro-drugs)와 관련이 있다. 따라서, 화학식(I)의 화합물에 대한 언급은 화학식(I)의 화합물의 해당 프로-드러그에 대해 또한 언급하는 것으로서 적당하게 및 적절하게 이해되어야 한다.

화학식(I)의 화합물은 아래 제공된 방법에 의해, 예에 주어진 방법에 의해 또는 유사한 방법에 의해 제조될 수 있다. 최적의 반응 조건들은 사용된 용매 또는 특정 반응물에 의하여 변할 수 있지만, 이러한 조건들은 틀에 박힌 최적화 절차에 의하여 당업자에 의해 결정될 수 있다.

본 발명의 화학식(I)의 화합물은 아래 개요된 반응의 일반적 배열에 따라 제조될 수 있다. 화학식(I)의 화합물로 인도하는 오직 몇 개의 합성 가능성만을 기술한다.

화학식(I)의 화합물은 THF, 디옥산, DMF, DMSO, DCM 등등과 같은 첨가 용매의 존재 또는 부재(absence) 하에서, 구조(1)의 화합물을 수용성 LiOH, 수용성 NaOH, 수용성 KOH, 등등과 같은 염기와 또는 수용성 HCl, TFA 등등과 같은 산과 반응하는 것에 의해 제조될 수 있다. 구조(1)의 화합물은 화학식(II)의 화합물의 수첨반응(hydrogenation)에 의해, 제조되거나 n이 0을 나타내고, m은 0을 나타내고, 및 R⁵와 R⁶가 수소를 나타내는 경우에는, 메탄올, 에탄올, THF 등등 또는 이들의 혼합물과 같은 용매에서, Pd/C, Pt/C 등등과 같은 촉매의 존재 하에서, 화학식(III)의 화합물의 수첨반응에 의해 제조될 수 있다.

화학식(II)의 화합물은 에탄올, 이소프로판올 등등 또는 이들의 혼합물과 같은 용매에서 HCl의 존재 하에서, 또는 메탄올, 에탄올, 이소프로판올 또는 이들의 혼합물과 같은 용매에서 NaOH, LiOH 또는 KOH의 존재 하에서, 바람직하게는 0℃와 70℃ 사이의 온도에서, 구조(3)의 화합물과 함께 구조(2)의 화합물을 응축하는 것에 의해 제조될 수 있다. 비슷하게, 화학식(III)의 화합물은 구조(4)의 화합물과 함께 구조(2)의 화합물을 응축하는 것에 의해 제조될 수 있다.

R=H, 메틸, 메틸, 에틸 또는 -CF₃

-20℃와 35℃ 사이의 온도에서, 디에틸 에테르 또는 THF 또는 이들의 혼합물과 같은 용매에서 MeLi와 R이 메틸, 에틸 또는 트리플루오로메틸인 구조(5)의 화합물을 반응시키는 것에 의해 구조(2)의 화합물이 제조될 수 있다. 대신에, 구조(2)의 화합물은 또한 R이 메틸, 에틸 또는 트리플루오로메틸인 구조(6)의 화합물을 메틸 브롬화마그네슘, 메틸 염화마그네슘 또는 메틸 요오드화마그네슘과 반응시키는 것에 의해 제조될 수 있다. 구조(6)의 웨인렙 아미드(Weinreb amide)는 EDC, DCC 등등과 같은 결합 반응물(coupling reagent)의 존재 하에서 구조(5)의 산을 N,O-디메틸히드록실아민 하이드로클로라이드와 반응시키는 것에 의해 제조될 수 있다(Lit. e.g. M. Mentzel, H. M. R. Hoffmann, Journal fuer Praktische Chemie / Chemiker -Zeitung 339 (1997), 517-524; J. Singh, N. Satyamurthi, I. S. Aidhen, Journal fuer Praktische Chemie (Weinheim, Germany) 342 (2000), 340-347; V. K. Khlestkin, D. G. Mazhukin, Current Organic Chemistry 7 (2003), 967-993).

구조(5)의 화합물은 물, 에탄올, 메탄올, THF 등등 또는 이들의 혼합물과 같은 용매에서 구조(7)의 화합물을 수용성 NaOH, 수용성 LiOH, 수용성 KOH 등등과 같은 수용성 염기 또는 수용성 HCl, TFA 등등과 같은 산과 반응시키는 것에 의해 제조될 수 있다.

메탄올, 에탄올, THF, DMF 등등 또는 이들의 혼합물과 같은 용매에서, 바람직하게는 높은 온도에서, 구조(8)의 화합물을 NaOMe, NaOEt, KO-tert-Bu, DBU 등등과 같은 비-수용성 염기로 처리하는 것에 의해 구조(7)의 화합물이 제조된다.

THF, 디옥산, DMF, 에탄올, 메탄올 등등 또는 이들의 혼합물에 있는 NaH, NaOEt, NaOMe, K-tert-부톡사이드 등등과 같은 염기의 존재 하에서, 구조(9)의 화합물을 2-메르캅토아세트산 에스테르로 처리하는 것에 의해 구조(8)의 화합물이 제조된다. 게다가, 구조(5)의 화합물은 또한 상기 반응 배열을 따르는 구조(9)의 화합물로부터 출발하는 1-포트-3-단계 절차(one-pot-three-step procedure)에서 제조될 수 있다.

구조(9)의 화합물은 DCM, CHCl₃, THF 등등과 같은 용매에서 구조(10)의 화합물을 옥살일클로라이드와 같은 염소화제와 반응시키는 것에 의해 제조된다(Lit. e.g. R. E. Mewshaw, Richard E. Tetrahedron Lett. 30 (1989), 3753-3756; F. A. Lakhvich, T. S. Khlebnikova, A. A. Akhrem, Zhurnal Organicheskoi Khimii 25 (1989), 2541-2549).

R이 수소, 메틸 또는 에틸을 나타내는, 구조(10)의 화합물은 THF, 톨루엔, EtOH 등등과 같은 용매에 있는 K-tert-부틸레이트, NaOMe, NaH, LDA 등등과 같은 염기의 존재 하에서, 0과 60℃ 사이의 온도에서, 구조(11)의 화합물을 포름산 에틸 또는 메틸, 아세트산 메틸 또는 에틸, 프로피온산 메틸 또는 에틸, 클로로포르메이트, 염화 아세틸 등등과 같은 적절한 아실화제(acylating agent)로 아실화하는 것에 의해 제조될 수 있다(Lit. e g Ch Kashima, S Shibata, H. Yokoyama, T Nishio, Journal of Heterocyclic Chemistry 40 (2003), 773-782; I. Yavan, Issa, M. Bayat, Tetrahedron 59 (2003), 2001-2005; J P Konopelski, J Lin, P. J Wenzel, H. Deng, G. I. Elliott, B. S. Gerstenberger, Organic Letters 4 (2002), 4121-4124; C. Wiles, P. Watts, S. J. Haswell, E. Pombo-Villar, Tetrahedron Letters 43 (2002), 2945-2948; R. Faure, A. Frideling, J. -P. GaIy, I. Alkorta, J. Elguero, Heterocycles 57 (2002), 307-316; via imine: M Hammadi, D. Villemin, Synthetic Communications 26 (1996), 2901-2904).

구조(11)의 화합물은 당업자에게 공지된 절차에 따라 제조된다(Lit. e.g. M. E Flaugh, T. A. Crowell, D. S. Farlow, Journal of Organic Chemistry 45 (1980), 5399-5400; A. M. Badger, M. J. Dimartino, C. K. Mirabelli, E N. Cheeseman, J W. Dorman, D H. Picker, D A Schwartz, Eur. Pat. Appl. EP 310321 A2 (1989); N. R. Natale, R. O. Hutchins, Organic Preparations and Procedures International 9 (1977), 103-108; L M. Rice, B. S. Sheth, J. W. Wheeler, Journal of Heterocyclic Chemistry 10 (1973), 731-735).

게다가, R이 메틸 또는 에틸기를 나타내는, 구조(5)의 화합물은 바람직하게 R이 수소를 나타내는 구조(5)의 화합물[구조(12)]을 THF, 디에틸 에테르, 등등과 같은 용매에서의 n-BuLi, tert-BuLi, LDA 등등과 같은 과량의 강한 염기와 반응시킨 후 적절한 알킬화제(예를 들어 요오드화메틸, 요오드화에틸, Lit. e.g. W.-D. Liu, C.-C. Chi, I.-F. Pai, A.-T. Wu, W.-S. Chung, Journal of Organic Chemistry 67 (2002), 9267-9275; D. W. Knight, A. P. Nott, Tetrahedron Letters 21 (1980), 5051-5054; R. Raap, Canadian Journal of Chemistry 49 (1971), 2155-2157)와 반응시키는 것에 의해 R이 수소를 나타내는 구조(5)의 화합물로부터 제조된다.

R¹이 트리플루오로메틸기를 나타내는 구조(2)의 화합물은 바람직하게 아래 개요된 순서에 의해 제조된다. 따라서, 구조(12)의 화합물은 구조(13)의 웨인렙 아미드로 전환되고, 이것은 LDA와 같은 강한 염기로 처리 후 낮은 온도(예를 들어 -78℃)에서 THF와 같은 용매에서 요오드를 첨가시 요오드화된다. 구조(15)의 트리플루오로메틸 화합물을 제공하기 위해, 문헌(예를 들어 D. E. Nichols, S. Frescas, D. Marona-Lewicka, X. Huang, B. L. Roth, G. A. Gudelksy, J. F. Nash, J. Med . Chem. 37 (1994), 4346-4351)에 기재된 바와 같이 구조(14)의 요오드화된 화합물은 메틸 클로로디플루오로아세테이트와 반응한다. 메틸 그리냐드 시약(methyl Grignard reagent) 또는 메틸 리튬으로 구조(15)의 화합물의 처리는 R¹이 트리플루오로메틸기를 나타내는 구조(2)의 화합물을 제공한다.

다음의 도식은 구조(3) 및 (4)의 화합물들을 제조하는 합성 경로(synthetic routes)를 나타낸다.

(Lit. e.g. F. Orsini, F. Pelizzoni, Synthetic Comm. 17 (1987), 1389-1402)

(Lit. e.g. H. Kotsuki, P. K. Datta, H. Suenaga, Synthesis 1996, 470-472; for bromide or iodide instead of triflate see e.g. V. P. Baillargeon, J. K. Stille, J. Am . Chem . Soc . 108 (1986), 452-461; M. J. Gomez-Escalonilla, F. Langa, J.-M. Rueff, L Oswald, J. F. Nierengarten, Tetrahedron Lett. 43 (2002), 7507-7511; H. Aust, D. Ickenroth, H. Meier, J. Prakt . Chem. 341 (1999), 523-528; Y. Li, B. He, B. Qin, X. Feng, G, Zhang, J. Org . Chem. 69 (2004), 7910-7913).

(Lit. e.g. G. Battistuzzi, S. Cacchi, G. Fabrizi, Org . Lett. 5 (2003), 777-780; N. J. Lawrence, S. Brown, Tetrahedron 58 (2002), 613-619; D. J. Wardrop, M. S. Burge, Chem . Comm . 2004, 1230-1231)

(Lit. e.g. Y. Li, B. He, B. Qin, X. Feng, G, Zhang, J. Org . Chem. 69 (2004), 7910-7913, T. Azemi, M. Kitamura, K. Narasaka, Tetrahedron 60 (2004), 1339-1344; A. Krasovskiy, P. Knochel, Angew . Chem . Int . Ed. 43 (2004), 3333-3336; T. P. Zabawa, D. Kasi, S. R. Chemler, J. Am . Chem . Soc. 127 (2005), 1 1250-11251).

(Lit. e.g. W. P. Gallagher, R. E. Maleczka, J. Org . Chem. 68 (2003), 6775-6779, A.-Y. Peng, Y.-X. Ding, J. Am . Chem . Soc. 125 (2003), 15006-15007).

(Lit. e.g. R. A. Fernandes, M. S. Bodas, P. Kumar, Tetrahedron 58 (2002), 1223-1227; V. P. Baillargeon, J. K. Stille, J. Am . Chem . Soc. 108 (1986), 452-461).

구조(1)의 화합물을 제조하는 대안적 경로는 아래 도식에서 제공된다. 구조(17)의 화합물은 상기 언급된 염기성 또는 산성 조건 하에서 구조(16)의 화합물과 구조(2)의 화합물을 응축하는 것에 의해 얻어진다. 구조(16)의 화합물은 상업적으로 이용가능하거나 또는 당업자에게 공지된 다음의 표준 방법으로 제조된다. 트리에틸아민 또는 피리딘과 같은 염기의 존재 하에서 예를 들어 트리플루오로메탄술폰산 무수물로 구조(17)의 화합물의 처리는 구조(18)의 화합물을 제공한다. 구조(19)의 화합물과 구조(18)의 화합물의 Pd-촉매 헥-형(Pd-catalysed Heck-type) 결합 반응은 구조(20)의 해당 화합물을 제공한다(Lit. e.g. G. Battistuzzi, S. Cacchi, G. Fabrizi, Org . Lett. 5 (2003), 777-780). 응용된 반응 조건에 의존하여, R⁶가 히드록시기를 나타내는 경우에 존재하는 알코올 기능성(functionality)은 일시적 보호가 필요할 수 있다. 구조(20)의 화합물에 존재하는 이중 결합은 이후 구조(1)에서 나타낸 원하는 모티프(motif)로 더욱 상세히 제조될 수 있다. 이러한 단계들은 상기 구조(3) 및 (4)의 화합물들의 제조에 대해 개요된 것들에 유사하고 따라서 포화된 유도체를 얻기 위한 단순한 수첨반응(hydrogenation) 또는 N-메틸 모르폴린-N-산화물(NMO)의 존재 하에서 예를 들어 KMnO₄ 또는 촉매 양의 OsO₄를 사용하는 디히드록시화반응(dihydroxylation)을 포함할 수 있는데, 여기서 벤질 알코올의 환원성 제거가 뒤따를 수 있다(Lit. e.g. N. J. Lawrence, S. Brown, Tetrahedron 58 (2002), 613-619; D. J. Wardrop, M. S. Burge, Chem . Comm. 2004, 1230-1231). 교차 결합 반응은 또한 알켄보다 알킨으로 수행될 수 있다(Sonogashira coupling, e.g. W. P. Gallagher, R. E. Maleczka, J. Org . Chem. 68 (2003), 6775-6779; A.-Y. Peng, Y.-X. Ding, J. Am . Chem . Soc. 125 (2003), 15006-15007). 이러한 생성된 페닐아세틸렌 유도체는 그 다음에 해당하는 포화된 화합물에 대해 순차적 또는 1-단계 방법으로 수소화될 수 있다.

다음의 예들은 본 발명을 설명하지만 그들의 범위를 전혀 제한하지 않는다.

모든 온도는 ℃로 나타낸다. 화합물은 ¹H-NMR(300 MHz) 또는 ¹³C-NMR(75 MHz)에 의해(배리언 옥스포드; 화학적 변위(shift)는 사용된 용매에 관련하여 ppm으로 제공됨; 다중도: s= 단일선, d= 이중선, t= 3중선, p= 5중선, hex= 6중선, hept= 7중선, m= 다중선, br= 폭이 넓은 부분, 결합 상수는 Hz로 제공됨); t_R은 분(min)으로 제공되는, LC-MS에 의해(HP 1100 이원 펌프 및 DAD를 구비한 Finnigan Navigator, 컬럼: 4.6x50 mm, Zorbax SB-AQ, 5 ㎛, 120Å, 구배(gradient): 0.04%의 트리플루오로아세트산과 함께, 물에 5-95%의 아세토니트릴, 1분, 유량: 4.5mL/min); TLC에 의해(Merck로부터 TLC-plates, 실리카 겔 60 F₂₅₄); 또는 녹는점 에 의해 특징지어진다. 화합물은 예비(preparative) HPLC(다른 언급이 없다면, 조건: 컬럼: X-terra RP18, 50x19 mm, 5 ㎛, 구배: 5%의 포름산을 함유하는 물에 10-95% 아세토니트릴)에 의해 또는 MPLC(Labomatic MD-80-100 펌프, 선형 UVIS-201 검출기, 컬럼: 350x18 mm, Labogel-RP-18-5s-100, 구배: 물에 10%의 메탄올 내지 100%의 메탄올)에 의해 정제된다.

(본원에서 사용되는)약어:

aq. 수용성

atm 기압

BSA 보빈 혈청 알부민(bovine serum albumin)

Bu 부틸

cat. 촉매

CC 컬럼 크로마토그래피(column chromatography)

d 하루(들)

DBU 1,8-디아자바이시클로[5.4.0]운덱-7-엔

DCC 디시클로헥실 카르보디이미드(dicyclohexyl carbodiimide)

DCM 디클로로메탄(dichloromethane)

DIBAL 디이소부틸알루미늄 수소화물(diisobutylaluminium hydride)

DIPEA 디이소프로필-에틸아민, Hunig의 염기, 에틸-디이소프로필아민(diisopropyl-ethylamine, Hunig's base, ethyl-diisopropylamine)

DMF 디메틸포름아미드(dimethylformamide)

DMSO 디메틸술폭사이드(dimethylsulfoxide)

EA 에틸 아세테이트(ethyl acetate)

EDC N-(3-디메틸아미노프로필)-N'-에틸-카르보디이미드(N-(3-dimethylaminopropyl)-N'-ethyl-carbodiimide)

Et 에틸

h 시간(들)

HPLC 고성능 액체 크로마토그래피(high performance liquid chromatography)

HV 고진공 조건

i-Prop 이소프로필

LC-MS 액체 크로마토그래피-질량 분광법

LDA 리튬 디이소프로필 아미드

Me 메틸

min 분(들)

MPLC 중압 액체 크로마토그래피

NMO N-메틸 모르폴린-N-산화물(N-methyl morpholine-N-oxide)

NMP 1-메틸-2-피롤리돈(1-methyl-2-pyrrolidone)

OAc 아세테이트

OTMS 트리메틸실릴옥시(trimethylsilyloxy)

Ph 페닐

prep. 예비(preparative)

p-TSOH 파라-톨루엔술폰산(para-toluenesulfonic acid)

rt 실온

sat. 포화된

S1P 스핑고신 1-인산염(sphingosine 1-phosphate)

TBTU 2-(1H-벤조트리아톨-1-일)-1,2,3,3,-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트(2-(1H-benzotriazole-1-yl)-1,2,3,3-tetramethyluronium tetrafluoroborate)

Tf 트리플루오로메탄 술포닐(trifluoromethane sulfonyl)

TFA 트리플루오로아세트산(trifluoroacetic acid)

THF 테트라히드로퓨란(tetrahydrofuran)

TLC 박층 크로마토그래피

TMSCN 크리메틸실릴 시안화물(trimethylsilyl cyanide)

t_R 체류(retention) 시간

스캐폴드(Scaffold) A

a) EA(230 mL)에 있는 4,4-디메틸-시클로헥-2-엔온(50g, 403 mmol)의 용액에 EA에서의 Pd/C의 현탁액(2.5g, 10% Pd)을 첨가한다. 현탁액은 1 바(bar) H₂ 하에서 2시간 동안 실온에서 교반 된다. 촉매는 여과되어 제거되고, 여과액의 용매는 조심스럽게 증발되어서 천천히 결정화하는 무색 오일로서 4,4-디메틸-시클로헥사논(50g)을 제공한다; ¹H NMR (CDCl₃): δ2.34(t, J= 6.4 Hz, 4H), 1.66(t, J= 6.4 Hz, 4H), 1.09(s, 6H).

b) THF(700 mL)에 있는 K-tert-부틸레이트(24.5g, 109 mmol, tert-부탄올의 50% 용액)의 얼음같이 찬 용액에, 포름산에틸(120 mL, 123 mmol)을 천천히 첨가한다. 혼합물은 실온에서 30분 동안 교반된 후, 포름산에틸(50 mL) 및 THF(70 mL)에서의 4,4-디메틸-시클로헥사논(50g, 396 mmol)의 용액이 20분의 기간에 걸쳐 첨가된다. 첨가가 완료되었을 때, 교반은 30분 동안 15-20℃에서 지속 된다. 오렌지색 현탁액은 10%의 수용성 구연산 용액(200 mL) 및 염수(200 mL)에 부어지고 EA(2x200 mL)로 추출된다. 유기 추출물은 0.2 N의 수용성 NaOH 및 염수로 세척되고, Na₂SO₄를 통해 건조되고 건조상태(dryness)까지 증발되어 노란색 오일로서 5,5-디메틸-2-옥소-시클로헥산카르브알데하이드(52g)를 제공한다; LC-MS: t_R= 0.89 분, [M+1+CH₃CN]⁺= 196.15.

c) 클로로포름(250 mL)에서의 5,5-디메틸-2-옥소-시클로헥산카르브알데하이드(51g, 331 mmol)의 용액에, 옥살릴 클로라이드(40 mL, 465 mmol)를 신속히 첨가 한다. 3-4분 동안 교반한 후, 얼음을 첨가하고 2 N의 수용성 NaOH(100 mL)를 첨가한다. 유기상이 분리되고 수용성 상(phase)은 한번 더 클로로포름으로 추출된다. 조합된 유기 추출물은 물로 세척되고 Na₂SO₄를 통해 건조된다. 용매는 진공 속에서 제거되어 갈색 오일로서 2-클로로메틸렌-4,4-디메틸-시클로헥사논(50g)을 제공한다; LC-MS: t_R= 0.96 분.

d) 에탄올(500 mL)에서의 나트륨(21g, 875 mmol)의 새롭게 제조된 용액의 일부분(300 mL)에, 메르캅토아세트산 에틸 에스테르(50 mL)를 첨가한다. 생성 용액은 10분의 기간에 걸쳐 THF(170 mL)에서의 2-클로로메틸렌-4,4-디메틸-시클로헥사논(50g, 290 mmol)의 용액에 첨가된다. 혼합물은 따뜻해진다(50℃). 첨가가 완료되었을 때, 에탄올(200 mL)에서의 나트륨의 새롭게 제조된 용액의 남아있는 부분은 반응 혼합물에 첨가된다. 혼합물은 1 N의 수용성 LiOH 용액(300 mL)이 첨가되기 전에 15분 동안 실온에서 교반 된다. 용액은 3시간 동안 환류되고 나서, 16시간 동안 실온에서 교반 된다. THF 및 에탄올은 감소된 압력 하에서 제거되고 남아있는 어두운 색의 용액(dark solution)은 3:1의 헵탄/EA로 추출된다. 수용성 상은 구연산(30g) 및 2 N의 수용성 HCl(200 mL)를 첨가하는 것에 의해 산성화되고 그 다음에 EA로 3번 추출된다. 조합된 유기 추출물은 포화된 수용성 NaHCO₃ 용액으로 3번 세척되고, Na₂SO₄를 통해 건조되고 및 증발된다. 생성된 어두운 갈색 오일은 60℃에서는 아세토니트릴에 용해되고, 5℃에서는 결정화된다. 결정들은 수집되고, 아세토니트릴로 세척되고 및 건조되어 약간 회색의 분말로서 5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라히드 로-벤조[c]티오펜-1-카르복실산(31g)을 제공한다; LC-MS: t_R= 0.95 분, [M+1+CH₃CN]⁺= 252.18; ¹H NMR (CDCl₃): δ7.15(s, 1H), 3.05(t, J= 7.0 Hz, 2H), 2.47(s, 2H), 1.58(t, J= 7.0 Hz, 2H), 0.97(s, 6H).

스캐폴드 B

1) 스캐폴드 A를 통해

-78℃에서 THF에서의 5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-카르복실산(5g, 23.8 mmol)의 용액은 tert-부틸리튬(41 mL, 펜탄의 1.5 M)으로 처리된다. 요오드화메틸(17.1g, 120 mmol)이 방울 모양(dropwise)으로 첨가되기 전에 혼합물은 -78℃에서 15분 동안 교반 된다. 교반은 -78℃에서 30분 동안 지속 된다. 혼합물은 실온에 이르기까지 따뜻해지고, 물(400 mL)로 희석되고, 10%의 수용성 구연산 용액으로 산성화되고 및 EA로 3번 추출된다. 조합된 유기 추출물은 MgSO₄를 통해 건조되고 증발된다. 남아있는 고체는 헵탄/디에틸 에테르에 현탁 되고 여과되고 및 HV 하에서 건조되어 베이지색 분말로서 3,5,5,-트리메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-카르복실산(4.01g)을 제공한다; LC-MS: t_R= 0.97 분; [M+1]= 225.13; ¹H NMR (D₆-DMSO): δ12.49(s br, 1H), 2.87(t, J= 6.7 Hz, 2H), 2.26(s, 5H), 1.45(t, J= 6.7 Hz, 2H), 0.91(s, 6H).

2) 4,4-디메틸-시클로헥사논으로부터 출발하는 직접 경로(direct route)

a) 톨루엔(25 mL)에서의 NaH(2.88g, 광유의 60% 분산, 60 mmol)의 현탁액에, EA(6.5 mL, 66 mmol)를 첨가한다. EA(6 mL)에서의 4,4-디메틸-시클로헥사논(2.52g, 20 mmol)의 용액이 첨가되기 전에, 혼합물은 5분 동안 실온에서 교반 된다. 혼합물은 활발한 반응이 시작되는 55℃까지 가열된다. 흰색 내지 회색 현탁액은 오렌지색으로 바뀌고, 투명해 진다. 투명 용액(clear solution)은 얼음/물에 부어지고 EA로 추출된다. 수용성 상은 pH 4-5에 이르기까지 산성화되고 EA로 한번 더 추출된다. 조합된 유기 추출물은 Na₂SO₄를 통해 건조되고 용매는 진공 속에서 제거되어 노란색 오일로서 2-아세틸-4,4-디메틸-시클로헥사논(2.00g)을 제공한다; ¹H NMR (CDCl₃): δ2.35(t, J= 7.0 Hz, 2H), 2.12(s, 2H), 2.10(s, 1H), 1.48(t, J= 7.0 Hz, 2H), 0.98(s, 6H).

b) 0℃에서, 클로로포름(15 mL)에서의 2-아세틸-4,4-디메틸-시클로헥사논(5.00g, 29.7 mmol)의 용액은 옥살릴 클로라이드(7.54g, 59.4 mmol)로 처리된다. 혼합물은 60℃까지 가열되고 물에 부어지기 전에 15분 동안 교반 된다. 유기 상은 분리되고, 포화된 수용성 NaHCO₃ 용액 및 염수로 세척되고 MgSO₄를 통해 건조되고 및 건조상태까지 증발되어 갈색의 오일로서 미정제 2-(1-클로로-에틸리덴)-4,4-디 메틸-시클로헥사논(3.2g, 위치-이성질체를 함유함)을 제공한다; LC - MS : t _R = 1.00분.

c) THF(10 mL)에서의 NaOEt(에탄올의 2.5 M 용액의 10 mL, 25 mmol)의 혼합물에, 메르캅토아세트산 에틸 에스테르(3.09g, 25.7 mmol)를 첨가한 후 상기 2-(1-클로로-에틸리덴)-4,4-디메틸-시클로헥사논(3.2g, 17.14 mmol)의 용액을 첨가한다. 생성 용액은 45분 동안 60℃에서 교반 된다. 혼합물은 물로 희석되고, EA로 추출된다. 유기 추출물은 Na₂SO₄를 통해 건조되고 증발되고 및 헵탄/톨루엔 그리고 나서 헵탄/EA로 용리하는 실리카 겔 위에 CC에 의해 정제되어 위치 이성질체 3,5,5-트리메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[b]티오펜-2-카르복실산 에틸 에스테르를 함유하는 갈색 오일로서 3,5,5-트리메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[b]티오펜-2-카르복실산 에틸 에스테르(3.1g)를 제공한다. 분석 샘플은 예비 HPLC에 의해 정제되어 무색의 오일로서 순수 3,5,5-트리메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[b]티오펜-2-카르복실산 에틸 에스테르를 제공한다; LC-MS: t_R= 1.13 분; [M+1]= 252.99; ¹H NMR (CDCl₃): δ4.29(q, J= 7.0 Hz, 2H), 3.00(t, J= 6.4 Hz, 2H), 2.30(s, 3H), 2.26(s, 2H), 1.52(t, J= 6.4 Hz, 2H), 1.34(t, J= 7.0 Hz, 3H), 0.96(s, 6H).

d) 에탄올(100 mL)에서의 3,5,5-트리메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[b]티오펜-2-카르복실산 에틸 에스테르(3.0g, 11.9 mmol)의 용액에, 수용성 2 N의 LiOH(50 mL)를 첨가한다. 에탄올이 회전농축기(rotavapor) 상에서 제거되기 전에, 반응 혼합물은 2 시간 동안 65℃에서 교반 된다. 남아있는 용액은 일단 헵탄으로 추출되고 pH 2까지 구연산으로 산성화되고 및 EA로 3번 추출된다. EA 추출물은 조합되고 Na₂SO₄를 통해 건조되고, 여과되고, 증발되고, 및 건조되어 위치 이성질체 3,5,5-트리메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[b]티오펜-2-카르복실산을 함유하는 베이지색 고체로서 3,5,5-트리메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[b]티오펜-2-카르복실산(1.6g)을 제공한다. LC-MS: t_R= 0.98 분, [M+1]= 225.14.

스캐폴드 C

THF(19 mL)에서의 5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-카르복실산(960mg, 4.57 mmol)의 냉각된 용액(-78℃)에, tert-부틸리튬(8 mL, 펜탄의 1.5 M 용액)을 첨가한다. 요오드화에틸(3.80g, 24.37 mmol)이 첨가되기 전에, 혼합물은 10분 동안 -78℃에서 교반 된다. 반응 혼합물은 3시간 동안 -78℃에서 교반 된다. 1:1의 물/메탄올(8 mL)이 첨가된 후 10%의 수용성 구연산 용액이 첨가되고, 혼합물은 EA로 추출된다. 조합된 유기 추출물은 염수로 세척되고 Na₂SO₄를 통해 건조되고 및 증발된다. 남아있는 고체는 아세토니트릴(6 mL)에 현탁되고, 60℃까지 가열되고, 실온까지 냉각되고, 여과되고 및 건조되어 약간 베이지색 고체로서 3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-카르복실산(640mg)을 제공한다; LC-MS: t_R= 1.01 분, [M+1+CH₃CN]= 280.10.

스캐폴드 D

디에틸 에테르(300 mL)에서의 3,5,5-트리메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-카르복실산(4.10g, 18.28 mmol)의 현탁액에, 메틸리튬(23 mL, 디에틸 에테르의 1.6 M 용액)을 천천히 실온에서 첨가한다. 반응 혼합물은 투명해지고, 노란색을 띠고 및 약간 따뜻해지며(26℃) 및 물로 급냉되기 전에 15분 동안 교반 된다. 유기층은 분리되고, 물로 한번 더 세척되고, MgSO₄를 통해 건조되고 증발된다. 미정제 생성물은 4:1의 헵탄:EA로 용리하는 실리카 겔 위에 CC에 의해 정제되어 옅은 노란색 결정성 고체로서 1-(3,5,5-트리메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-일)-에탄온(2.80g)을 제공한다; LC-MS: t_R= 1.06 분; [M+1]= 223.17; ¹H NMR (CDCl₃): δ3.00(t, J= 7.0 Hz, 2H), 2.43(s, 3H), 2.31(s, 3H), 2.26(s, 2H), 1.51(t, J= 7.0 Hz, 2H), 0.95(s, 6H).

스캐폴드 E

디에틸 에테르(100 mL)에서의 3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-카르복실산(2.10g, 8.81 mmol)의 용액에, 메틸리튬(11 mL, 디에틸 에테르의 1.6 M 용액)의 용액을 실온에서 첨가한다. 또 다른 일부의 메틸리튬(2 mL)을 첨가하기 전에, 옅은 노란색 용액은 15분 동안 실온에서 교반 된다. 교반은 15분 동안 지속 되고 또 다른 일부의 메틸리튬(1 mL)은 첨가되고, 혼합물은 다시 실온에서 15분 동안 교반 된다. 반응은 물로 급냉 된다. 유기층은 분리되고 물로 한번 더 세척되고 MgSO₄를 통해 건조되고 및 증발된다. 미정제 생산물은 7:3의 헵탄:EA로 용리하는 실리카 겔 위에 CC에 의해 정제되어 옅은 노란색 고체로서 1-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-일)-에탄온(1.65g)을 제공한다; LC-MS: t_R= 1.00 분; [M+1]= 237.15; ¹H NMR (CDCl₃): δ3.03(t, J= 7.0 Hz, 2H), 2.73(q, J= 7.6 Hz, 2H), 2.47(s, 3H), 2.31(s, 2H), 1.55(t, J= 7.0 Hz, 2H), 1.28(t, J= 7.6 Hz, 3H), 0.97(s, 6H).

스캐폴드 F

a) DMSO(150 mL)에서의 5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-카르복실산(20g, 95 mmol)의 용액에, N,O-디메틸히드록실아민 하이드로클로라이드(12.06g, 124 mmol) 및 DIPEA(65 mL, 380 mmol)를 첨가한 후 TBTU(33.59g, 105 mmol, DMF(70 mL)에 용해됨)를 첨가한다. 반응 혼합물은 물/얼음에 부어지기 전에 2시간 동안 실온에서 교반 되고 디에틸 에테르로 2번 추출된다(2x100 mL). 유기 추출물은 포화된 수용성 NaHCO₃ 용액, 10%의 수용성 구연산 용액 및 염수로 세척되고 Na₂SO₄를 통해 건조되고, 여과되고, 증발되고 및 건조되어 갈색 오일로서 5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-카르복실산 메톡시-메틸-아미드(23g)를 제공한다; LC-MS: t_R= 1.01 분, [M+1]= 254.14.

b) THF(400 mL)에서의 디이소프로필아민(11.02g, 109 mmol)의 용액에, 0-5℃에서 n-부틸 리튬(72.7 mL, 109 mmol, 펜탄의 1.5 M)을 첨가한다. 용액은 -78℃까지 냉각되고 THF(100 mL)에서의 5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-카르복실산 메톡시-메틸-아미드(23g, 91 mmol)의 용액을 첨가한다. 첨가가 완료되었을 때, THF(100 mL)에서의 요오드(30g, 119 mmol)의 용액을 첨가하기 전에, 혼 합물은 -78℃에서 20분 동안 교반 된다. 교반은 30분 동안 -78℃에서 지속 된다. 반응물은 물/메탄올의 1:1 혼합물(20 mL)을 천천히 첨가하는 것에 의하여 급냉 된다. 용액은 물(400 mL)로 희석되고 디에틸 에테르로 추출된다(3x100 mL). 조합된 유기 추출물은 10%의 수용성 구연산 및 염수로 세척되고, Na₂SO₄를 통해 건조되고, 여과되고 및 증발된다. 미정제 생성물은 DCM으로 용리하는 실리카 겔 위에 CC에 의해 정제되어 갈색을 띤 오일로서 3-이오도-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-카르복실산 메톡시-메틸-아미드(18g)를 산출한다; LC-MS: tR= 1.09 분, [M+1]= 380.21.

c) 3-로도-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-카르복실산 메톡시-메틸-아미드(18g, 47 mmol), CuI(14.5g, 76 mmol) 및 KF(4.4g, 76 mmol)은 DMF(80 mL)에 용해된다. 용액은 134℃까지 가열되고 메틸 클로로디플루오로아세테이트(16.26g, 113 mmol)는 4시간의 기간에 걸쳐 주사기 펌프(syringe pump)를 통해 첨가된다. 가스 방출이 관찰된다. 첨가가 완료되었을 때, 혼합물은 냉각되고 물/얼음에 부어진다. 형성된 침전물은 수집되고, DCM(600 mL)에 현탁 되고, 및 셀라이트 패드(celite pad)를 통해 여과된다. 여과액은 0.5 N의 수용성 HCl(250 mL)로 세척된 후 포화된 수용성 NaHCO₃ 용액으로 세척되고, Na₂SO₄를 통해 건조되고, 여과되고 및 증발되어 갈색 오일로서 5,5-디메틸-3-트리플루오로메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-카르복실산 메톡시-메틸-아미드(14g)를 제공한다; LC-MS: t_R= 1.10 분, [M+1]= 322.20.

d) 디에틸 에테르(400 mL)에서의 5,5-디메틸-3-트리플루오로메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-카르복실산 메톡시-메틸-아미드(14g, 44 mmol)의 용액은 메틸 리튬(80mL, 디에틸 에테르의 1.6 M)으로 실온에서 처리된다. 첨가가 완료되었을 때, 혼합물은 물/얼음에 부어지기 전에 15분 동안 실온에서 교반 되고 수용성 HCl로 중화된다. 에테르 상은 분리되고 수용성 상은 디에틸 에테르로 2번 더 추출된다(2x100 mL). 유기 추출물은 염수로 세척되고, MgSO₄를 통해 건조되고 여과되고 및 증발된다. 미정제 생성물은 20-30%의 DCM을 함유하는 헵탄으로 용리하는 실리카 겔 위에 CC에 의해 정제되어 노란색 오일로서 1-(5,5-디메틸-3-트리플루오로메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-일)-에탄온(9.1g)을 제공한다; LC-MS: t_R= 1.11분; [M+1+CH₃CN]= 318.34; ¹H NMR(CDCl₃): δ3.04(t, J= 7.0 Hz, 2H), 2.57(d, J= 1.2 Hz, 2H), 2.53(s, 3H), 1.58(t, J= 7.0 Hz, 2H), 0.99(s, 6H).

기본 골격(building block) A

a) DCM(50 mL) 및 피리딘(8 mL)에서의 4-히드록시-3,5-디메틸-벤즈알데하이드(5.0g, 33.3 mmol)의 용액에, 트리플루오로메탄술폰산 무수물(6 mL, 36.6 mmol)을 0℃에서 천천히 첨가한다. 첨가가 완료되었을 때, 교반은 실온에서 2시간 동안 지속 된다. 반응 혼합물은 EA로 희석되고 물로 3번 세척된다. 분리된 유기층은 MgSO₄를 통해 건조되고, 여과되고 및 증발된다. 미정제 생성물은 4:1의 헵탄:EA로 용리하는 실리카 겔 위에 CC에 의해 정제되어 약간 노란색의 고체로서 트리플루오로-메탄술폰산 4-포밀-2,6-디메틸-페닐 에스테르(5.3g)를 제공한다; LC-MS: t_R= 1.04분; ¹H NMR(CDCl₃): δ9.97(s, 1H), 7.66(s, 2H), 2.48(s, 6H).

b) 아르곤 하에서 건조 DMF(75 mL)에서의 트리플루오로-메탄술폰산 4-포밀-2,6-디메틸-페닐 에스테르(4.7g, 16.7 mmol)의 교반된 용액에, 트리에틸아민(3.4g, 33.3 mmol), 메틸 아크릴레이트(14.3g, 167 mmol), 1,3-비스-(디페닐포스피노)-프로판(378mg, 0.92 mmol) 및 Pd(OAc)₂(187mg, 0.83 mmol)를 실온에서 연속하여 첨가한다. 혼합물은 115℃까지 가열되고 5시간 동안 교반 된다. 혼합물은 디에틸 에테르(350 mL)로 희석되고 수용성 1N의 HCl로 2번 세척되고 포화된 수용성 NaHCO₃로 한번 세척된다. 유기 추출물은 MgSO₄를 통해 건조되고 여과되고 및 증발된다. 잔류물은 5:1의 헵탄:EA로 용리하는 실리카 겔 위에 CC에 의해 정제되어 약간 노란색의 고체로서 3-(4-포밀-2,6-디메틸-페닐)-아크릴산 메틸 에스테르(2.9g)를 제공한다; LC-MS: t_R= 0.96분.

c) 메탄올(70 mL)에서의 3-(4-포밀-2,6-디메틸-페닐)-아크릴산 메틸 에스테르(2.9g, 13.3 mmol)의 용액에, 2N의 수용성 NaOH(35 mL)를 첨가한다. 현탁액은 실 온에서 30분 동안 교반 된다. 메탄올은 증발되고 수용성 용액은 DCM으로 2번 추출된다. 수용성 층은 2N의 수용성 HCl로 산성화되고 EA로 2번 추출된다. 조합된 EA 추출물은 MgSO₄를 통해 건조되고 여과되고 및 증발된다. 미정제 생성물은 EA로부터 재결정화되어 옅은 노란색 결정으로서 3-(4-포밀-2,6-디메틸-페닐)-아크릴산(2.2g)을 제공한다; LC-MS: t_R= 0.83분, ¹H NMR (D₆-DMSO): δ12.65(s br, 1H), 9.92(s, 1H), 7.66(d, J= 16.4 Hz, 1H), 7.61(s, 2H), 6.12(d, J= 16.4 Hz, 1H), 2.35(s, 6H).

기본 골격 B

a) 에탄올(80 mL)에서의 3-(4-포밀-2,6-디메틸-페닐)-아크릴산(2.2g, 10.8 mmol) 및 DIPEA(2.0 mL, 11.9 mmol)의 용액에, Pd/C(200mg, 10%의 Pd, 50%의 물로 젖음)를 첨가한다. 현탁액은 1시간 동안 H₂의 1 바 하에서 강하게 교반 된다. 혼합물은 셀라이트를 통해 여과되고 여과액은 증발된다. 잔류물은 1N의 수용성 HCl/얼음에 부어지고 EA로 추출된다. 유기 추출물은 1N의 수용성 HCl로 한번 세척되고 염수로 한번 세척되고 MgSO₄를 통해 건조되고 여과되고 및 증발되어 옅은 노란색 수지로서 3-(4-히드록시메틸-2,6-디메틸-페닐-프로피온산(2.2g)을 제공한다; LC-MS: t_R= 0.71분.

b) 아세트산(20 mL)에서의 3-(4-히드록시메틸-2.6-디메틸-페닐)-프로피온산(960mg, 4.6 mmol)의 용액에, MnO₂(1440mg, 16.6 mmol)를 첨가한다. 혼합물은 여과되기 전에 4.5시간 동안 80℃에서 교반 된다. 여과액은 증발되고 미정제 생성물은 8%의 메탄올을 함유하는 DCM으로 용리하는 실리카 겔 위에 CC에 의해 정제되어 베이지색의 고체로서 3-(4-포밀-2,6-디메틸-페닐)-프로피온산(800 mg)을 제공한다; LC-MS: t_R= 0.81분; ¹H NMR (D₆-DMSO): δ12.2(s br, 1H), 9.86(s, 1H), 7.52(s, 2H), 2.93-2.85(m, 2H), 2.38-2.30(m, 8H).

기본 골격 C

3-(2-에틸-4-포밀-6-메틸-페닐)-아크릴산은 기본 골격 A와 유사하게 제조된다; LC-MS: t_R= 0.87분; ¹H NMR (CDCl₃): δ9.98(s, 1H), 7.96(d, J= 16.4 Hz, 1H), 7.62(s, 1H), 7.59(8s, 1H), 6.13(d, J= 16.4 Hz, 1H), 2.75(q, J= 7.6 Hz, 2H), 2.42(s, 3H), 1.25(t, J= 7.6 Hz, 3H).

기본 골격 D

3-(2-에틸-4-포밀-6-메틸-페닐)-프로피온산은 기본 골격 C로부터 출발하는 기본 골격 B와 유사하게 제조된다; LC-MS: t_R= 0.86분; ¹H NMR (CDCl₃): δ9.93(s, 1H), 7.58(s, 1H), 7.53(s, 1H), 3.11-3.04(m, 2H), 2.75(q, J= 7.6 Hz, 2H), 2.56-2.50(m, 2H), 2.43(s, 3H), 1.28(t, J= 7.6 Hz, 3H)

중간체 1

메탄올(17 mL)에서의 1-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-일)-에탄온(400mg, 1.69 mmol), 3-(4-포밀-2,6-디메틸-페닐)-프로피온산(419mg, 2.03 mmol) 및 NaOH(1.7g, 42.5 mmol)의 용액은 1N의 수용성 HCl로 희석 되기 전에 75분 동안 75℃에서 교반 되고 EA로 2번 추출된다. 유기 추출물은 MgSO₄를 통해 건조되고 여과되고 및 증발된다. 미정제 생성물은 6%의 메탄올을 함유하는 DCM으로 용리하는 실리카 겔 위에 CC에 의해 정제되어 옅은 노란색 고체로서 3-{4-[3-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-일)-3-옥소-프로페닐]-2,6-디메틸-페닐}-프로피온산(620mg)을 제공한다; LC-MS: t_R= 1.17분; [M+1]= 425.34; ¹H NMR(CDCl₃): δ7.68(d, J= 15.8 Hz, 1H), 7.28(s, 2H), 7.27(d, J= 15.8 Hz, 1H), 3.18(t, J= 7.0 Hz, 2H), 3.06-2.98(m, 2H), 2.78(q, J= 7.6 Hz, 2H), 2.54-2.48(m, 2H), 2.39(s, 6H), 2.34(s, 2H), 1.58(t, J= 7.0 Hz, 2H), 1.32(t, J= 7.6 Hz, 3H).

중간체 2A

에탄올(15 mL)에서의 1-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-일)-에탄온(143mg, 0.606 mmol) 및 3-(2-에틸-4-포밀-6-메틸-페닐)-프로피온산(200mg, 0.908 mmol)의 용액은 이소프로판올(3 mL)에서의 5N의 HCl로 처리된 다. 어두운 갈색 반응 혼합물은 3시간 동안 실온에서 교반 되고 그 다음에 DIPEA(4 mL)가 첨가되기 전에 48시간 동안 50℃에서 교반 된다. 용매는 진공 속에서 제거되고 미정제 생성물은 예비 HPLC(그롬-실(Grom-Sil) 120 ODS-4-HE, 30×75 mm, 10㎛, 아세토니트릴/물(0.5%의 HCOOH), 10% 내지 95%의 아세토니트릴)에 의해 정제되어 노란색 오일로서 3-{2-에틸-4-[3-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-일)-3-옥소-프로페닐]-6-메틸-페닐}-프로피온산 에틸 에스테르(157mg)를 제공한다; LC-MS: t_R= 1.27분, [M+1]= 467.43.

중간체 2B

메탄올 NaOH(methanolic NaOH)(8mL, 100mL의 메탄올에서의 10g의 NaOH)에서의 1-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-일)-에탄온(200mg, 0.846 mmol) 및 3-(2-에틸-4-포밀-6-메틸-페닐)-아크릴산(203mg, 0.931 mmol)의 용액은 2N의 수용성 HCl을 첨가하는 것에 의해 pH 1로 조심스럽게 산성화되기 전에 3시간 동안 실온에서 교반 된다. 혼합물은 DCM으로 2번 추출되고 유기 추출물은 물과 염수로 세척되고 MgSO₄를 통해 건조되고 여과되고 및 증발된다. 미정제 생성물은 아세토니트릴(40 mL)로부터 결정화되어 노란색 결정으로서 3-{2-에틸-4-[3-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-일)-3-옥소-프로페닐]-6-메틸-페닐}-아크릴산(222mg)을 제공한다. 모액으로부터 생성물의 제 2 산출량(29mg)은 예비 HPLC(그롬-실 120 ODS-4-HE, 30×75 mm, 10㎛, 아세토니트릴/물(0.5%의 HCOOH), 20% 내지 95%의 아세토니트릴)에 의한 정제 후 획득될 수 있다; LC-MS: t_R= 1.20분, [M+1]= 437.31.

중간체 3

3-{2-에틸-6-메틸-4-[3-옥소-3-(3,5,5-트리메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-일)-프로페닐]-페닐}-아크릴산은 중간체 2B와 유사하게 1-(3,5,5-트리메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-일)-에탄온 및 3-(2-에틸-4-포밀-6-메틸-페닐)-아크릴산으로부터 제조된다; LC-MS: t_R= 1.17분; [M+1]= 423.34; ¹H NMR(CDCl₃): δ7.97(d, J= 16.4 Hz, 1H), 7.68(d, J= 15.2 Hz, 1H), 7.33(s, 2H), 7.28(d, J= 15.8 Hz, 1H), 6.13(d, J= 15.8 Hz, 1H), 3.16(t, J= 7.0 Hz, 2H), 2.77(q, J= 7.6 Hz, 2H), 2.41(s, 3H), 2.39(s, 3H), 2.32(s, 2H), 1.57(t, J= 6.4 Hz, 2H), 1.24(t, J= 7.6 Hz, 3H), 1.00(s, 6H).

중간체 4

3-{4-[3-(5,5-디메틸-3-트리플루오로메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-일)-3-옥소-프로페닐]-2-에틸-6-메틸-페닐}-프로피온산 에틸 에스테르는 스캐폴드 F와 기본 골격 D로부터 출발하는 중간체 2A와 유사하게 제조된다; LC-MS: t_R= 1.29분, [M+1]= 506.68.

중간체 5

3-{2,6-디메틸-4-[3-옥소-3-(3,5,5-트리메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-일)-프로페닐]-페닐}-아크릴산(570mg)은 중간체 2B와 유사하게 기본 골격 B(381mg, 1.87 mmol)와 함께 스캐폴드 D(415mg, 1.87 mmol)를 응축하는 것에 의해 얻어진다; LC-MS: t_R= 1.17분, [M+1]= 409.21.

예 1

에탄올(30 mL)에서의 3-{4-[3-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤 조[c]티오펜-1-일)-3-옥소-프로페닐]-2,6-디메틸-페닐}-프로피온산(610mg, 1.44 mmol) 및 DIPEA(204mg, 1.58 mmol)의 용액에 Pd/C(300mg, 10%의 Pd, 50%의 물로 젖음)를 첨가한다. 슬러리(slurry)는 1 대기압 H₂ 하에서 18시간 동안 실온에서 교반 된다. 혼합물은 여과되고 여과액은 증발된다. 미정제 생성물은 예비 HPLC(그롬-실 120 ODS-4-HE, 30×75 mm, 10㎛, 아세토니트릴/물(0.5%의 HCOOH), 20% 내지 95%의 아세토니트릴)에 의해 정제되어 무색의 리오필리세이트(lyophilisate)로서 3-{4-[3-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-일)-3-옥소-프로필]-2,6-디메틸-페닐}-프로피온산(460mg)을 제공한다; LC-MS: t_R= 1.15분; [M+1]= 427.40; ¹H NMR(CDCl₃): δ6.91(s, 2H), 3.10-2.90(m, 8H), 2.73(q, J= 7.6 Hz, 2H), 2.53-2.46(m, 2H), 2.32(s, 6H), 2.30(s, 2H), 1.54(t, J= 7.0 Hz, 2H), 1.28(t, J= 7.6 Hz, 3H), 0.97(s, 6H).

예 2

a) 에탄올에서의 3-{2-에틸-4-[3-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-일)-3-옥소-프로페닐]-6-메틸-페닐}-프로피온산 에틸 에스테르(153mg, 0.328 mmol)의 용액에, Pd/C(80mg, 10%의 Pd, 50%의 물에 젖음)를 첨가하고 생성된 슬러리는 H₂의 1 바 하에서 72시간 동안 실온에서 교반 된다. 반응 혼합물은 여과되고 여과액은 증발된다. 미정제 생성물은 예비 HPLC(그롬-실 120 ODS-4-HE, 30×75 mm, 10㎛, 아세토니트릴/물(0.5%의 HCOOH), 20% 내지 95%의 아세토니트릴)에 의해 정제되어 비결정 고체로서 3-{2-에틸-4-[3-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-일)-3-옥소-프로필]-6-메틸-페닐}-프로피온산 에틸 에스테르(95mg)를 제공한다; LC-MS: t_R= 1.26분; [M+1]= 469.40.

b) 에탄올(2 mL)에서의 3-{2-에틸-4-[3-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-일)-3-옥소-프로필]-6-메틸-페닐}-프로피온산 에틸 에스테르(92mg, 0.196 mmol)의 용액은 2N의 수용성 NaOH(2 mL)로 처리된다. 용매가 진공 속에서 제거되기 전에, 용액은 1시간 동안 실온에서 교반 된다. 잔류물은 2N의 수용성 HCl에 용해되고 EA로 추출된다. 유기 추출물은 염수로 세척되고, Na₂SO₄를 통해 건조되고, 여과되고 및 증발되어 비결정 고체로서 3-{2-에틸-4-[3-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-일)-3-옥소-프로필]-6-메틸-페닐}-프로피온산을 제공한다; LC-MS: t_R= 1.16분; [M+1]= 441.36; ¹H NMR(CDCl₃): δ6.95(s, 1H), 6.93(s, 1H), 3.12-2.94(m, 8H), 2.74(q, J= 7.6 Hz, 2H), 2.66(q, J= 7.6 Hz, 2H), 2.56-2.48(m, 2H), 2.36(s, 3H), 2.32(s, 2H), 1.56(t, J= 7.0 Hz, 2H), 1.29(t, J= 7.6 Hz, 3H), 1.24(t, J= 7.6 Hz, 3H).

예 3

에탄올에서의 3-{2-에틸-6-메틸-4-[3-옥소-3-(3,5,5-트리메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-일)-프로페닐]-페닐}-아트릴산(중간체 3; 340mg, 0.805 mmol) 및 DIPEA(182mg, 1.41 mmol)의 용액에, Pd/C(340mg, 10%의 Pd, 50%의 물로 젖음)를 첨가하고 생성된 슬러리는 H₂의 10 바 하에서 72시간 동안 50℃에서 교반 된다. 또 다른 일부의 Pd/C가 첨가되고 교반은 H₂의 10 바 하에서 50℃에서 16시간 동안 지속 된다. 반응 혼합물은 여과되고 여과액은 증발된다. 미정제 생성물은 예비 HPLC(그롬-실 120 ODS-4-HE, 30×75 mm, 10㎛, 아세토니트릴/물(0.5%의 HCOOH), 20% 내지 95%의 아세토니트릴)에 의해 정제되어 무색의 기포로서 3-{2-에틸-6-메틸-4-[3-옥소-3-(3,5,5-트리메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-일)-프로필]-페닐}-프로피온산(154mg)을 제공한다; LC-MS: t_R= 1.15분, [M+1]= 427.30.

예 4

3-{4-[3-(5,5-디메틸-3-트리플루오로메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-일)-3-옥소-프로필]-2-에틸-6-메틸-페닐}-프로피온산은 중간체 4로부터 출발하는 예 2와 유사하게 제조된다; LC-MS: t_R= 1.17분, [M+1]= 481.36.

예 5

3-{2,6-디메틸-4-[3-옥소-3-(3,5,5-트리메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-일)-프로필]-페닐}-프로피온산(430mg)은 예 3과 유사하게 중간체 5(548mg, 1.34 mmol)로부터 출발하여 얻어진다; LC-MS: t_R= 1.13분; [M+1]= 413.34; ¹H NMR(CDCl₃): δ0.97(s, 6H), 1.53(t, J= 6.7 Hz, 2H), 2.28(s, 2H), 2.32(s, 6H), 2.33(s, 3H), 2.45-2.54(m, 2H), 2.89-2.99(m, 4H), 2.99-3.10(m, 4H), 6.91(s, 2H).

예 6: EC₅₀ 값을 결정하기 위한 GTPγS 분석(assay)

GTPγS 결합 분석은 재조합 인간 S1P1 수용체를 표현하는 CHO 세포의 막 제조(membrane preparation)를 사용하여 200㎕의 종결 부피(final volume)의 96 웰 미세구멍판(96 well microtiter plates)(Nunc사, 442587)에서 수행된다. 분석 조건들은 20mM 헤페스(Hepes)(Fluka사, 54461), 100 mM NaCl(Fluka사, 71378), 5 mM MgCl₂(Fluka사, 63064), 0.1% BSA(Calbiochem사, 126609), 1μM GDP(Sigma사, G-7127), 2.5% DMSO(Fluka사, 41644), 50 pM ³⁵S-GTPγS(Amersham Biosciences사, SJ1320)이다. pH는 7.4이다. 테스트 화합물은 용해되고 100% DMSO로 희석되고 ³⁵S-GTPγS의 부재하에서, 상기 분석물 완충용액(buffer)의 150㎕에서 30분 동안 실온에서 예비-배양된다. 50㎕의 ³⁵S-GTPγS의 첨가 후에, 분석물은 실온에서 1시간 동안 배양된다. 분석은 Parkard Bioscience사의 세포 수확기를 사용하여, 반응 혼합물을 멀티스크린 판(밀리포레, MAHFC1H60)으로 전달하는 것에 의해 종결되고, 판은 얼음처럼 차가운 10mM Na₂HPO₄/NaH₂PO₄(70%/30%)로 세척되고, 건조되고, 하부에서 밀봉되고 및, 25㎕ MicorScint20(Parkard Bioscience사, 주문 번호 6013621)의 첨가 후에 상부에서 밀봉된다. 막-결합 ³⁵S-GTPγS는 Parkard Bioscience사의 톱카운트(TopCount)로 측정된다.

EC₅₀은 50%의 최대한의 특이적 ³⁵S-GTPγS 결합을 포함하는 작용 물질의 농도이다. 특이적 결합은 최대 결합으로부터 비-특이적 결합을 빼는 것에 의해 결정된다. 최대 결합은 10μM의 S1P의 존재 하에서 멀티스크린 판에 결합한 cpm의 양이다. 비-특이적 결합은 분석에서 작용 물질이 없을 때의 결합의 양이다.

표 1은 본 발명의 화합물의 EC₅₀ 값을 나타낸다. EC₅₀ 값은 상기에서 기술된 방법에 따라 결정되었다.

예의 화합물	EC₅₀[nM]
4	4.0

예 7: 생체 내 효능의 평가

화학식(I)의 화합물의 효능은 정상 혈압의 수컷 위스타 쥐(Wistar Rat)에게 3 내지 30 mg/kg의 화학식(I)의 화합물의 경구 투여 후 순환 림프구를 측정하는 것에 의해 평가된다. 동물들에게 12 시간-낮/밤 주기의 기후-조절 조건의 주거가 제공되고, 일반적인 쥐 먹이와 마실 물에 자유롭게 접근하게 한다. 약물 투여 전 및 약물 투여 후 3시간 6시간 및 24시간의 혈액이 수집된다. 순혈(full blood)은 Advia 혈액학 시스템(Bayer Diagnostics, 취리히, 스위스)을 사용하여 혈액 검사한다.

모든 데이터는 평균(mean)±SEM으로서 나타낸다. 통계 분석은 복수의 비교를 위해 Statistica(StatSoft사) 및 Student-Newman-Keuls 절차를 사용하는 변동 분석(ANOVA)에 의해 수행된다. 영 가설(null hypothesis)은 p<0.05일 때 거절된다.

예로서, 표 2는 오직 매질(vehicle)로만 처리된 동물의 그룹과 비교하여 10 mg/kg의 본 발명의 화합물을 정상 혈압의 수컷 위스타 쥐에게 경구 투여 후 6시간의 림프구 수에 대한 효과를 나타낸다.

예의 화합물	림프구 수
1	-61±5%

Claims

다음의 화학식(I)의 티오펜으로 구성된 그룹으로부터 선택된 화합물 그리고 이러한 화합물의 염 및 용매 복합물.

여기서

R ¹ 은 메틸, 트리플루오로메틸 또는 에틸을 나타내고;

R ² 는 수소, C₁ _-4-알킬, 메톡시 또는 할로겐을 나타내고;

R ³ 은 수소, C₁ _-4-알킬, C₁ _-4-알콕시 또는 할로겐을 나타내고;

R ⁴ 는 수소, C₁ _-4-알킬 또는 할로겐을 나타내고;

R ⁵ 는 수소를 나타내고;

R ⁶ 은 수소 또는 히드록시를 나타내고;

R ⁶ 이 히드록시를 나타내는 경우에, R ⁵ 는 추가적으로 히드록시를 나타낼 수 있고;

n은 0을 나타내고;

m은 0 또는 1을 나타내고; 및

m이 1을 나타내는 경우에, n은 추가적으로 1을 나타낼 수 있음.
제 1항에 있어서, R ¹ 은 에틸기를 나타내는 것을 특징으로 하는 화합물.
제 1항에 있어서, R ¹ 은 메틸기를 나타내는 것을 특징으로 하는 화합물.
제 1항에 있어서, R ¹ 은 트리플루오로메틸기인 것을 특징으로 하는 화합물.
제 1항 내지 제 4항 중 어느 한 항에 있어서, R ² 는 메톡시기를 나타내고, R ³ 및 R ⁴ 는 수소를 나타내는 것을 특징으로 하는 화합물.
제 1항 내지 제 4항 중 어느 한 항에 있어서, R ² 는 수소를 나타내고, R ³ 및 R ⁴ 는 C₁ _-4-알킬을 나타내는 것을 특징으로 하는 화합물.
제 6항에 있어서, R ³ 및 R ⁴ 는 메틸기를 나타내는 것을 특징으로 하는 화합물.
제 6항에 있어서, R ³ 및 R ⁴ 는 에틸기를 나타내는 것을 특징으로 하는 화합물.
제 6항에 있어서, R ³ 는 메틸기를 나타내고, R ⁴ 는 에틸기를 나타내는 것을 특징으로 하는 화합물.
제 1항 내지 제 4항 중 어느 한 항에 있어서, R ² 는 수소를 나타내고, R ³ 은 메톡시기를 나타내고 및 R ⁴ 는 염소 원자를 나타내는 것을 특징으로 하는 화합물.
제 1항 내지 제 4항 중 어느 한 항에 있어서, R ² 는 수소를 나타내고, R ³ 은 메틸기를 나타내고 및 R ⁴ 는 염소 원자를 나타내는 것을 특징으로 하는 화합물.
제 1항 내지 제 11항 중 어느 한 항에 있어서, R ⁵ 및 R ⁶ 는 수소를 나타내는 것을 특징으로 하는 화합물.
제 12항에 있어서, n은 0을 나타내고, 및 m은 1을 나타내는 것을 특징으로 하는 화합물.
제 12항에 있어서, n은 1을 나타내고, 및 m은 1을 나타내는 것을 특징으로 하는 화합물.
제 1항 내지 제 11항 중 어느 한 항에 있어서, m은 1을 나타내고, R ⁵ 및 R ⁶ 는 히드록시를 나타내는 것을 특징으로 하는 화합물.
제 15항에 있어서, n은 0을 나타내는 것을 특징으로 하는 화합물.
제 1항 내지 제 11항 중 어느 한 항에 있어서, R ⁵ 는 수소를 나타내고, 및 R ⁶ 는 히드록시를 나타내는 것을 특징으로 하는 화합물.
제 1항에 있어서, 다음으로 구성된 그룹에서 선택됨을 특징으로 하는 화합 물:

3-{4-[3-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-일)-3-옥소-프로필]-2,6-디메틸-페닐}-프로피온산;

3-{4-[3-(5,5-디메틸-3-트리플루오로메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-일)-3-옥소-프로필]-2-에틸-6-메틸-페닐}-프로피온산;

3-{2-에틸-6-메틸-4-[3-옥소-3-(3,5,5-트리메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-일)-프로필]-페닐}-프로피온산; 및

3-{2-에틸-4-[3-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-일)-3-옥소-프로필]-6-메틸-페닐}-프로피온산.
제 1항에 있어서, 화합물은 3-{2,6-디메틸-4-[3-옥소-3-(3,5,5-트리메틸-4,5,6,7-테트라히드로-벤조[c]티오펜-1-일)-프로필]-페닐}-프로피온산임을 특징으로 하는 화합물.
제 1항 내지 제 19항 중 어느 한 항에 따른 화합물 및 제약학적 용인가능한 담체(carrier)를 포함하는 제약학적 조성물.
제 1항 내지 제 19항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 제 20항에 따른 제약학적 조성물에 있어서, 약으로서 이용함을 특징으로 하는 화합물 또는 조성물.
활성화된 면역 시스템과 관련된 질병 또는 질환의 예방 또는 치료를 위한 제약학적 조성물의 제조를 위한 제 1항 내지 제 19항 중 어느 한 항에 따른 화합물의 용도.
제 22항에 있어서, 신장, 간, 심장, 폐, 췌장, 각막 및 피부와 같은 이식된 기관의 거부반응; 줄기 세포 이식에 의해 초래된 이식대숙주병; 류마티스관절염, 다발경화증, 크론병 및 궤양 대장염과 같은 염증성 장질환, 건선, 건선 관절염, 하시모토 갑상선염과 같은 갑상선염, 포도-망막염을 포함하는 자가면역 증후군; 비염, 결막염, 피부염과 같은 아토피성 질환; 천식; 당뇨병 제 1형; 류마티스열 및 감염 후 사구체신염을 포함하는 감염 후 자가면역 질병; 고형암 및 종양 전이로 구성된 그룹으로부터 선택된 질병 또는 질환의 예방 또는 치료를 위한 용도.
활성화된 면역 시스템과 관련된 질병 또는 질환의 예방 또는 치료를 위한, 면역억제제, 코르티코스테로이드, NSAID's, 세포독성 약물, 유착분자 억제제, 시토킨, 시토킨 저해제, 시토킨 수용체 길항제 및 재조합 시토킨 수용체로 구성된 그룹으로부터 선택된 하나 또는 몇몇의 약제와 조합되어 사용하기 위한 제약학적 조성물의 제조를 위한 제 1항 내지 제 19항 중 어느 한 항에 따른 화합물의 용도.
다음의 화학식(II)의 티오펜으로 구성된 그룹으로부터 선택된 화합물 그리고 이러한 화합물의 염 및 용매 복합물.

여기서 R ¹ , R ² , R ³ , R ⁴ , R ⁵ , R ⁶ , n 및 m은 화학식(I)에 대해 제 1항에서 정의된 바와 같고, 및

R ⁷ 은 수소, 메틸, 에틸 또는 tert-부틸을 나타냄.
다음의 화학식(III)의 티오펜으로 구성된 그룹으로부터 선택된 화합물 그리고 이러한 화합물의 염 및 용매 복합물.

여기서 R ¹ , R ² , R ³ 및 R ⁴ 는 화학식(I)에 대해 제 1항에서 정의된 바와 같고, 및 R ⁷ 은 수소, 메틸, 에틸 또는 tert-부틸을 나타냄.