KR20080033271A - 암종을 위한 다가 동반이행 및 증폭형 면역치료제 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 치료가 필요한 대상에게 플라스미드 및 펩티드 혹은 그의 유사체를 포함하는 면역 조성물을 제공함으로써 암 같은 세포 증식 질환을 치료하는 방법을 제공한다. 본 발명의 실시형태에 따르면 암종 항원의 제I류 MHC 에피토프에 대한 면역반응을 유발, 동반이행 및 증폭시켜 효과적인 항암 면역 반응을 일으키기 위한 방법 및 그 조성물을 제공한다.
Description
본원은, 2005년 6월 17일에 출원된 미국 가특허출원 제60/691,581호를 우선권으로 주장하며, 상기 발명의 내용은 본 명세서에 참고로 반영되어 있다.
여기에 기술된 본 발명은 제I류 MHC 제한 면역반응을 유발하고, 상기 반응의 특성 및 강도를 제어하며, 특히 발병 과정에서 면역학적으로 효과적인 중재를 촉진하는 방법 및 조성물에 관한 것이다. 더 구체적으로, 본 발명은 종양 관련 항원의 다양한 조합에 대해 면역 반응을 유발하는 것으로서, 발병 과정에서 면역학적으로 효과적인 중재를 촉진할 수 있는 방법 및 조성물을 제공한다.
미국 암협회에서는 해마다 백만명 이상이 암에 걸리며 또한 미국 성인 남자 두명 중 한명 및 성인 세명 중 한명이 생애 어느 시점에서 암에 걸리는 것으로 추산했다.
정상적인 체세포는 정상 방식으로 성장, 분할 및 사멸한다. 암 같은 세포 증식형 질환에서 세포는 사멸 대신 통제에서 벗어나 계속 성장 및 분할한다. 수많은 종류의 암이 있으나 이들은 대개 비정상 세포의 통제불가능 성장으로부터 비롯된다.
일반적인 암치료 선택 방법은 수술, 방사선 치료 및 화학요법을 포함한다. 그 네번째 치료 방법으로서 면역요법이 최근에 확립되었다. 면역치료는 암세포를 인식하도록 면역계를 돕고/또는 암세포에 대한 반응을 강화하여 암을 파괴하도록 설계된다. 면역요법은 능동적 및 수동적 면역치료법을 포함한다. 능동적 면역요법은 질병과 싸우도록 신체의 면역계 자극을 시도하는 것이다. 수동적 면역요법은 질병을 공격함에 있어서 보통 환자가 면역계에 의지하지 않고, 대신에 환자의 신체 밖에서 생성된 면역계 성분들(예, 항체)을 이용한다.
면역계는 두 가지 개별 효과기부(effector arms)로서 선천적 면역 및 적응 면역으로 분류할 수 있다. 선천적 면역은 수많은 세포 성분들과 즉시, 그러나 전체적으로 외부의 자극에 반응하는 가용성 인자들을 수반한다. 적응 면역이란 외부 작용제로부터 얻은 세세한 에피토프에 특이적 반응하도록 적응되는 것이다. 적응 면역 반응은 체액성 및 세포성 면역계로 알려진 두가지 효과기부로 구분된다. 체액부는 B-림프구에 의한 항체의 제조에 집중하는 한편, 세포부는 세포독성 T 림프구의 세포독성 작용을 동반한다.
세포독성 T 림프구(CTL: cytotoxic T lymphocytes)는 목표 항원 자체가인피토프를 인식하지는 않는다. 오히려 CTL은 세포 표면에 나타나는 항원 단편을 검출한다. 따라서 항원이 세포에 의해 가공 및 세포 표면에 나타난 후에만, 이 항원은 CTL에서 육안으로 관측된다. 세포의 항원 가공 및 표시계는 널리 확립되어 있다. CTL은 짧은 펩티드 항원을 인식하며, 이들 항원은 제I류 주요 조직적합성 복합 분자(MHC: major histocompatibility complex molecules)의 비공유 연계에서 표면에 나타난다. 따라서 이들 제I류 펩티드는 세포질 단백질의 분해로부터 유래된다.
각종 암 치료방법에도 불구하고, 더욱 효율적인 다른 치료 대안이 지속적으로 요구된다. 이러한 대안 중 하나는 면역화에 의한 면역 반응을 개시 자극 및/또는 향상시키는 능력에 따른 장점 또는 필요한 의학적 치료에 관한 방법을 구상하는 것이다. 이러한 방법은 바람직한 항원성 폴리펩티드에 대한 면역 반응 생성에 따른 것과 또한, 선천적 면역 반응의 개시나 조정에 의존하는 것을 포함한다. 암치료에 있어서의 한가지 접근은 치료적 항원 백신으로 면역계를 조정하는 것이다.
백신이나 다른 면역 조성물을 생성하기 위하여, 면역 반응을 제공할 수 있는 항원이나 에피토프를 대상에게 공급한다. 신생물형 암세포가 정상세포로부터 유래되고 유전자 수준에서 정상세포와 사실상 동일하다고 해도, 수많은 신생물 세포가 종양 관련 항원(TuAAs: tumor-associated antigens)을 나타내는 것은 알려진 사실이다. 이들 항원은 대상의 면역계에 이용되어 신생물 세포를 외부 물질로 인지 및 공격할 수 있다. 아쉽게도 신생물 세포는 숙주의 면역계가 간과하는 것이 일반적이다.
신생물 세포에 대해 활성을 갖는 백신을 생성하려는 시도와 관련하여 다수의 상이한 전략이 당해 분야에서 개발되고 있으나, 뚜렷한 효과를 가진 생성물은 아직 발견되지 않았다. 따라서 본 발명은 당해 분야의 문제를 해결하고 본원에서 개시하는 바와 같이, 암 또는 종양 세포를 표적으로 하는 다수의 면역 조성물을 제공하고자 한다.
본 발명의 실시형태는 효과적인 항암 면역 반응을 생성하기 위해 암종 항원의 제I류 MHC 제한 에피토프에 대한 면역 반응을 유발, 동반이행 및/또는 증폭하는 방법 및 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 실시형태는 각종 암 환자의 면역치료를 위한 종양 관련 항원(TuAAs)의 조합물을 사용하는 방법에 관한 것이다. 바람직한 실시형태에서, TuAAs는 암세포 자체에 의해 발현되는 항원이다. TuAAs의 예는 멜란-A, 티로시나제, SSX-2, NY-ESO-1 및 PRAME 등이 있다. 또 다른 실시형태에서, TuAAs는 종양의 비발암성 성분 즉, 종양 관련 신생혈관(nevasculature) 또는 기타 기질(stroma) 등과 연계된 항원이다. 이러한 항원의 예는 PSMA가 있는데 전립선암의 경우 PSMA는 발암세포에 의해 발현된다. 특히 바람직한 실시형태에서 상기 두종류의 항원이 표적이 된다. 본 발명의 다양한 측면은 면역 조성물, 이의 규합에 따른 규정 산물 및 이들을 사용하기 위한 방법 등을 포함한다.
특정의 실시형태는 하나 이상의 핵산 조성물 및 하나 이상의 펩티드 조성물로 이루어진 다수의 조성물을 포함하는 면역 산물에 관한 것이며; 상기 하나 이상의 핵산 조성물은, SSX-1 에피토프, NY-ESO-1 에피토프, PRAME 에피토프, PSMA 에피토프, 티로시나제 에피토프 및 멜란-A 에피토프로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있고; 상기 하나 이상의 펩티드 조성물은 SSX-1 에피토프, NY-ESO-1 에피토프, PRAME 에피토프, PSMA 에피토프, 티로시나제 에피토프 및 멜란-A 에피토프로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체로 본질적으로 이루어지며; 또한 상기 하나 이상의 펩티드는 선택된 핵산에 의해 발현되는 에피토프에 상응한다.
면역 산물의 일부의 실시형태에서, 하나 이상의 핵산 조성물은 pSEM, pBPL 및 pRP12로 이루어진 군에서 선택된 플라스미드를 포함한다. 일부의 실시형태에서, 펩티드 조성물은, SSX-241-49(서열 번호: 1) 혹은 그의 유사체 KVSEKIFYV(서열 번호: 5); NY-ESO-1157-165(서열 번호: 2) 혹은 그의 유사체 SNvaLMWITQV(서열 번호: 6); PRAME425 -433(서열 번호: 3) 혹은 그의 유사체 S(Nva)LQHLIG(Nle)(서열 번호: 7); PSMA288-297(서열 번호: 4) 혹은 그의 유사체 GLPSIPVHPV(서열 번호: 8); 멜란-A26-35(서열 번호: 9) 혹은 그의 유사체 ENvaAGIGILTV(서열 번호: 11); 티로시나제369 -377(서열 번호: 10) 혹은 그의 유사체 yMdgtmsqNva(서열 번호: 12)으로 이루어진 군에서 선택된 펩티드를 포함한다. 일부의 실시형태에서, 다수의 조성물은 SSX-2 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있는 핵산 분자; NY-ESO-1 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있는 핵산 분자; PRAME 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있는 핵산 분자; PSMA 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있는 핵산 분자; 상기 SSX-2 에피토프 혹은 그의 유사체로 본질적으로 이루어진 펩티드; 상기 NY-ESO-1 에피토프 혹은 그의 유사체로 본질적으로 이루어진 펩티드; 상기 PRAME 에피토프 혹은 그의 유사체로 본질적으로 이루어진 펩티드; 및 상기 PSMA 에피토프 혹은 그의 유사체로 본질적으로 이루어진 펩티드를 포함한다.
면역 산물의 일부의 실시형태에서, 함유된 핵산 분자는 상기 조성물의 일부이다. 일부의 실시형태에서, 핵산 분자들은 동일하다. 일부의 실시형태에서 핵산 분자는 pBPL(서열 번호: 13)의 단체분리(liberation) 서열을 암호화하는 서열을 포함한다. 일부의 실시형태에서 핵산은 pBPL(서열 번호: 16)의 면역 폴리펩티드를 암호화하는 서열을 포함한다. 일부의 실시형태에서 핵산 분자는 pBPL(서열 번호: 20)이다. 일부의 실시형태에서 핵산 분자는 pRP12(서열 번호: 14)의 단체분리 서열을 암호화하는 서열을 포함한다. 일부의 실시형태에서 핵산은 pRP12(서열 번호: 17)의 면역 폴리펩티드를 암호화하는 서열을 포함한다. 일부의 실시형태에서 핵산 분자는 pRP12(서열 번호: 21)이다. 일부의 실시형태에서 SSX-2 에피토프는 SSX-2241-49(서열 번호: 1)이다. 일부의 실시형태에서 NY-ESO-1 에피토프는 NY-ESO-1157-165(서열 번호: 2)이다. 일부의 실시형태에서 PRAME 에피토프는 PRAME425-433(서열 번호: 3)이다. 일부의 실시형태에서 PSMA 에피토프는 PSMA288 -297(서열 번호: 4)이다. 일부의 실시형태에서 SSX-2 유사체는 KVSEKIFYV(서열 번호: 5)이다. 일부의 실시형태에서 NY-ESO-1 유사체는 SNvaLMWITQV(서열 번호: 6)이다. 일부의 실시형태에서 PRAME 유사체는 S(Nva)LQHLIG(Nle)(서열 번호: 7)이다. 일부의 실시형태에서 PSMA 유사체는 GLPSIPVHPV(서열 번호: 8)이다.
면역 산물의 일부의 실시형태에서, 다수의 조성물은, 멜란-A 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있는 핵산 분자; 티로시나제 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있는 핵산 분자; 상기 멜란-A 에피토프 혹은 그의 유사체로 본질적으로 이루어진 펩티드; 상기 티로시나제 에피토프 혹은 그의 유사체로 본질적으로 이루어진 펩티드를 포함한다. 일부의 실시형태에서, 핵산은 상기 조성물의 일부이다. 일부의 실시형태에서 핵산 분자는 동일하다. 일부의 실시형태에서, 핵산 분자는 pSEM(서열 번호: 15)의 단체분리 서열을 암호화하는 서열을 포함한다. 일부의 실시형태에서 핵산은 pSEM(서열 번호: 18)의 면역 폴리펩티드를 암호화하는 서열을 포함한다. 일부의 실시형태에서 상기 핵산 분자는 pSEM(서열 번호: 19)이다. 일부의 실시형태에서 멜란-A 에피토프는 멜란-A26-35(서열 번호: 9)이다. 일부의 실시형태에서 티로시나제 에피토프는 티로시나제369 -377(서열 번호: 10)이다. 일부의 실시형태에서 면역 산물은 추가로: SSX-2 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있는 핵산 분자; 및 NY-ESO-1 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있는 핵산 분자를 포함한다. 일부의 실시형태에서 면역 산물은 또한 NY-ESO-1 에피토프로 본질적으로 이루어진 펩티드를 포함한다. 일부의 실시형태에서 면역 산물은 또한 SSX-2 에피토프로 본질적으로 이루어진 펩티드를 포함한다.
본 발명의 실시형태는 T 세포 반응을 동반이행 및 증폭하는 조성물 및 방법에 관한 것이다. 이 방법은, 핵산 암호화 면역원을 함유하는 조성물을 동물에게 전달하는 동반이행 단계를 포함한다. 이 조성물은 동물의 여러 부위에 전달할 수 있으나, 바람직하게는 림프계(예를 들어 림프절)에 전달한다. 동반이행 단계는 예를 들어, 소정 기간 전체에 걸쳐 분포시키거나 이 기간 동안 연속 형태로 조성물을 1회 이상 전달하는 것을 포함할 수 있다. 상기 방법은 또한, SSX-241-49(서열 번호: 1), NY-ESO-1157-165(서열 번호: 2), PRAME425 -433(서열 번호: 3), PSMA288 -297(서열 번호: 4), 멜란-A26-35(서열 번호: 9), 티로시나제369 -377(서열 번호: 10), 및 핵산 조성물에 암호화된 상응하는 TuAA 에피토프와 실질적으로 유사한 상기 에피토프들의 유사체(서열 번호: 5, 6, 7, 8, 11 및 12로 표시되는 유사체) 등과 같은 펩티드 면역원을 포함하는 조성물을 대상에게 투여하는 증폭 단계를 더 포함할 수 있다. 증폭 단계는 예를 들어, 소정 기간 동안 일정 간격으로 1회 이상 1개의 알약을 투여하거나, 또는 소정 기간 동안 연속으로 투여하는 방식으로 수행할 수 있다. 모든 실시형태에서 필요한 것은 아니지만, 일부의 실시형태는 면역강화제나 조제를 함유한 조성물을 사용하는 것을 포함할 수 있다.
또 다른 실시형태는 상술한 플라스미드를 개별로 또는 조합하여 이용하는 것을 포함한다. 이들 에피토프에 상응하는 펩티드 조성물 및 면역화 기법의 증폭부 중 일부는 자연 서열 또는 실질적으로 자연 에피토프 서열과 유사한 펩티드 유사체가 될 수 있다. 펩티드는 상기 면역원을 개별적으로 또는 2, 3, 4개 또는 그 이상의 조합물로서 상기 증폭 프로토콜에 도입할 수 있다.
또 다른 실시형태는, pSEM(서열 번호: 19), pBPL(서열 번호: 20) 및 pRP12(서열 번호: 21) 플라스미드 및 상응하는 펩티드 면역원이 면역화 기술에서 증폭부로서 투여되었을 때 유사한 조합물로 치환된 또 다른 에피토프(본 명세서에 참고로 반영된, "에피토프 서열"이란 발명의 명칭으로 2002년 4월 4일 출원한 미국 특허출원 제10/117,937호(공개번호 20030220239 A1)에 기술된 바와 같은)를 포함할 수 있다.
본 발명의 실시형태는 예를 들어, 2개의 면역원을 발현하는 하나의 2가 플라스미드 대신 단일 면역원을 발현하는 2개의 1가 플라스미드; 하나의 2가 및 하나의 1가 플라스미드 대신 3개의 면역원을 발현하는 3가 플라스미드; 4가 플라스미드 대신 하나의 3가 플라스미드 및 하나의 1가 플라스미드; 또는 4가 플라스미드 대신 2개의 2가 플라스미드를 포함할 수 있다. 실시형태는 또한 동반이행-및-증폭 면역화법의 증폭 단계의 일부로서 각종 플라스미드 조합체를 사용하는 것을 포함한다.
본 발명의 실시형태는 림프 내에서 각각의 펩티드로 분할될 수 있는 공역 펩티드 아니면 폴리펩티드를, 또한 동반이행-및-증폭 면역화법의 증폭 단계에서 이것을 사용하는 것을 포함할 수 있다.
본 발명의 실시형태는 포유동물의 림프계에 직접 면역 약량을 수차례 투여하는 단계를 포함하고, 그 일련의 투여는 1회 이상의 동반이행 투약량 및 1회 이상의 증폭 투약량을 포함할 수 있으며, 동반이행 투약량은 면역원을 암호화하는 핵산을 함유할 수 있고 또한 증폭 투약량은 바이러스, 바이러스형 벡터 또는 복제가능 벡터 등을 함유하지 않는 것을 특징으로 하는 면역화 방법에 관한 것이다. 이 방법은 또한 항원 특이적 면역 반응을 얻는 것을 포함할 수 있다. 이 방법은 비제한적인 예로서 1 또는 2회의 동반이행 투약량을 포함할 수 있다. 이 방법은 다수의 동반이행 투약량을 포함하며 상기 투약량은 약 1일 내지 7일 동안 투여된다. 동반이행 투약량, 증폭 투약량 또는 동반이행 및 증폭 투약량은 복수쌍의 주사투여로 전달될 수 있으며 상기 쌍 중 첫번째 투여는 두번째 투여에 앞서 4일 이내에 수행할 수 있고, 서로 다른 쌍의 첫번째 투여간 간격은 최소 약 14일이다. 마지막 동반이행 투약량과 1차 증폭 투약량 간의 간격은 약 7일 내지 100일 이내일 수 있으나 이에 제한되지 않는다.
다른 실시형태는 치료가 필요한 환자에게 SSX-2 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있는 핵산 분자; NY-ESO-1 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있는 핵산 분자; PRAME 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있는 핵산 분자; 및 PSMA 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있는 핵산 분자 등을 포함하는 다수의 조성물을 투여하는 단계를 포함한 암종 치료 방법에 관한 것이다. 또 다른 실시형태는 상기 방법에 있어서, SSX-2, NY-ESO-1, PRAME 및 PSMA로 본질적으로 이루어진 에피토프 혹은 그의 유사체로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 펩티드를 투여하는 단계를 더 포함하는 방법에 관한 것이다.
암 치료방법은 하나 이상의 핵산 조성물 및 하나 이상의 펩티드 조성물을 포함하는 다수의 조성물로 이루어진 면역 산물을 투여하는 단계를 포함하며; 상기 하나 이상의 핵산 조성물은 SSX-1 에피토프, NY-ESO-1 에피토프, PRAME 에피토프, PSMA 에피토프, 티로시나제 에피토프 및 멜란-A 에피토프로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있고; 상기 하나 이상의 펩티드 조성물은 SSX-1 에피토프, NY-ESO-1 에피토프, PRAME 에피토프, PSMA 에피토프, 티로시나제 에피토프 및 멜란-A 에피토프로 이루어진 군에서 선택된 상기와 같은 하나 이상의 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체로 본질적으로 이루어지며; 또한 하나 이상의 펩티드는 선택된 핵산에 의해 발현되는 에피토프와 상응하는 것을 특징으로 한다. 일부의 실시형태는 상술한 방법의 이용방법에 관한 것이고 암은 유방암, 난소암, 췌장암, 전립선암, 대장암, 방광암, 폐암, 간암, 위암, 고환암, 자궁암, 뇌종양, 림프종, 피부암, 골수암, 신장암, 직장암, 흑색종, 교아종 또는 육종 등을 포함한다.
또 다른 실시형태는 멜란-A 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있는 핵산 분자; 티로시나제 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있는 핵산 분자; 상기 멜란-A 에피토프 혹은 그의 유사체로 본질적으로 이루어진 펩티드; 및 상기 티로시나제 혹은 그의 유사체로 본질적으로 이루어진 펩티드를 포함하는 다수의 조성물을 치료가 필요한 환자에게 투여하는 단계를 포함하는 암 치료방법에 관한 거이다. 다른 실시형태는 치료 대상 암이 교아섬유종이나 흑색종인 경우의 상기 방법의 이용에 관한 것이다. 그외의 다른 실시형태는 또한 SSX-2 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있는 핵산 분자; NY-ESO-1 제I류 제한 에피토프를 발현할 수 있는 핵산 분자; 상기 NY-ESO-1 제I류 제한 에피토프 혹은 그의 유사체로 본질적으로 이루어진 펩티드; 및 상기 SSX-2 에피토프 혹은 그의 유사체로 본질적으로 이루어진 펩티드를 포함하는 조성물을 치료가 필요한 환자에게 투여하는 또 다른 단계를 포함할 수 있다.
다른 실시형태는, 비제한적인 방식으로 1 내지 6개의 동반이행 투약량과 하나 이상의 증폭 투약량을 포함하는 것으로서 포유동물에게 면역 반응을 유발하기 위한 면역 조성물군에 관한 것이다. 이 실시형태에서, 상기 동반이행 투약량은 면역원을 암호화하는 핵산을 포함할 수 있으며 증폭 투약량은 펩티드 에피토프를 포함할 수 있고 상기 에피토프는 핵산을 발현하는 pAPC에 의해 표현될 수 있다. 하나의 투약량은 조제, 예를 들어 RNA를 포함할 수 있다. 동반이행 및 증폭 투약량은 림프계(예, 림프절 등)에 직접 투여하기에 적합한 담체에 넣어 투여할 수 있다. 핵산은 플라스미드일 수 있다. 에피토프는 제I류 HLA 에피토프일 수 있다. 면역원은 에피토프 배열을 포함할 수 있으며 이 배열은 단체분리 서열을 포함할 수 있다. 면역원은 표적 관련 항원로 본질적으로 이루어질 수 있다. 표적 관련 항원은 종양 관련 항원일 수 있으나 이에 제한되지는 않는다. 면역원은 에피토프 클러스터를 함유할 수 있는 표적 관련 항원의 단편을 포함할 수 있다.
또 다른 실시형태는, 흑색종을 포함한 암종의 치료에 있어서 동반이행-및-증폭 치료 조성물, 4가, 2가 및/또는 1가 플라스미드와 이에 상응하는 펩티드 면역원의 사용방법에 관한 것으로서, 최적의 면역화 스케줄에 따라 림프절 주사(예, 면역 반응이 개시 및 증폭될 기관에 직접 주사)를 통해 투여하는 단계를 포함하는 사용방법에 관한 것이다.
그 밖의 또 다른 실시형태는 본 발명의 조성물을 포함하는 약제의 제조방법에 관한 것이다. 한 실시형태는 대상의 림프계에 투여하기 적합한 약제를 제조하는 방법에 관한 것이다. 또 다른 실시형태는 대상에게 항암 면역 반응을 유발하기에 적합한 약제를 제조하는 방법에 관한 것이다. 또 다른 실시형태는 대상에게 T 세포 반응을 동반이행 및 증폭시키는 약제를 제조하는 방법에 관한 것이다. 또 다른 실시형태는 대상에게 암종 치료에 적합한 약제의 제조방법에 관한 것이다. 또 다른 실시형태는, 하나 이상의 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있는 하나 이상의 핵산 조성물 및 상기와 같은 하나 이상의 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체에 상응하는 하나 이상의 펩티드 조성물을 대상에게 항암 면역 반응을 유발하기에 적합한 약제의 제조에 사용하는 방법에 관한 것이다.
본 발명의 실시형태는 바람직하게는 암세포와 기저 신생혈관에 의해 발현된 복수의 분자에 대해 공동 표적화된 능동 면역의 유발(치료 백신화)에 기초한다. 이 접근은 바람직하게는, 재조합 DNA(플라스미드) 및 합성 펩티드를 직접 림프절에 표적 전달함으로써, 강력한 세포 중재의 면역 반응과 함께, 초기 및 전이적 병변 속으로 종양세포의 생존 및/또는 활력을 궁극적으로 방해할 수 있는 가능성을 유도한다.
본 발명의 방법은 최적의 면역화 스케줄에 따라, 바람직하게는 특히 프라임(플라스미드)/부스팅(펩티드) 접근법을 이용하여 림프절 주사를 통해 투여하는, 재조합 DNA 플라스미드 및 합성 펩티드의 복합 이용법을 포함한다. 바람직한 실시형태에서, 림프절 주사는 면역 반응이 개시 및 증폭되는 기관 속으로 직접 적용된다. 본 발명의 실시형태는 HLA-A2, 특히 HL-A*0201를 발현하는 종양 조직을 가진 환자에게 적용할 수 있다. 상기 면역 프로토콜을 사용함으로써 플라스미드가 면역 반응을 개시할 수 있을 뿐 아니라, 조절인자에 대향하여 효과자 방향으로 반응 및 후속 증폭 작용을 편향시키게 됨을 관측하였다. 이러한 사전 핵산계 면역 반응이 없으면, 반복적 펩티드 투여로 조절 T 세포가 더욱 우위를 점한 반응을 유도한다. 장속하는 효과자 반응 편향성을 동반이행이라 한다.
암종에 이용할 동반이행-및-증폭 치료제에 관하여 상술한 실시형태는 다가 침입을 달성하여, 공격하는 종양의 감도를 증가시키는 장점을 제공한다. 종양 세포에 대한 하나 이상의 항원을 표적으로 할 때, 효율적인 항암제 농도도 따라서 증가한다. 종양 관련 기질 즉, 혈관 생성에 대한 공격은 이를 표적으로 하는 작용제에 대한 종양 세포의 접근성을 증가시킨다. 또한, 다가 공격시 표적이 되는 다른 항원들이 정상 조직에 의해 발현되지 않을 경우, 이 조직에서 발현되는 항원이라도 표적 항원으로 충분히 고려할 수 있다.
상이한 형태의 면역원을 수반하는 면역화 프로토콜을 실행하기 위해서는 2개 이상의 다른 조성물이 필요하며 특히, 단일 표적 항원 이상이 있을 경우 함께 혹은 서로 다른 시간에 투여할 수종의 조성물을 동반할 수 있다. 따라서, 본 발명의 실시형태는 면역 조성물군 및 서브군과 이들의 각 투약량을 포함한다. 다가 특성은 다가 면역원, 1가 면역원의 조합, 하나 이상의 1가 면역원이나 이들의 다양한 조합을 포함하는 조합물을 함께 사용함으로써 달성할 수 있다. 이러한 방법에 따른 특정 처리 방식이나 프로토콜에서 이용하기 위해 제조한 다가 조성물을 면역치료 산물로 정의한다.
일부의 실시형태에서, 상기 산물의 조성물 전체나 일부 서브군을 하나의 키트에 함께 포장한다. 예를 들면, 단일 에피토프나 에피토프군을 표적으로 한 유발 및 증폭 조성물을 함께 포장할 수 있다. 또 다른 예로서, 다수의 유발 조성물을 키트 내에 배치하고 상응하는 증폭 조성물을 또 다른 키트에 배치할 수 있다. 또한 조성물은, 지침에 따른 면역 프로토콜의 바람직한 결과를 달성하기 위해 서로 연계하여 사용할 수 있는 방법을 설명한 인쇄물 또는 기기 판독형 미디어에 입력된 사용지침에 따라 개별 포장 판매하기도 한다. 이 외에도 다양한 변형이 가능하다는 것이 당업자에게는 명백할 것이다. 특정 프로토콜이나 처리 방식에 이용 가능한 조성물 중 일부를 포함하는 각종 포장 방식을 이용하면, 예를 들어, 종양 항원 발현이나 면역치료제 혹은 그의 다양한 성분들에 대한 반응에 근거하여 편리하게 치료를 개별화한다. 이러한 내용은 다음의 출원에 개시되어 있다: 2004년 6월 17일자 미국 가출원 제60/580,969호; 2005년 6월 17일자 미국 특허출원 제11/155,288호(공개 번호 20060008468); 및 2005년 12월 29일자 미국 특허출원 제11/323,964호로서, 이들은 공히 "각종 암에 대한 진단에 이용되는 종양 관련 항원의 조합체"를 발명의 명칭으로 하며, 그 전체 내용은 본 명세서에 참고로 반영되어 있다. 또한, 미국 가출원 제60/580,964호 및 미국 특허출원 제11/155,928호(공개 번호 20050287068)는 공히 "진단 및 치료법 통합에 따른 능동 면역치료 효율의 개선"을 발명의 명칭으로 하며, 그 전체 내용은 본 명세서에 참고로 반영되어 있다.
본 발명의 실시형태는 2, 3, 4 또는 그 이상의 면역원을 개별 또는 조합한 증폭 프로토콜에 도입된 펩티드를 포함한다. 펩티드 에피토프 전체 미만을 사용하는 이유는 다음을 들 수 있으나 이에 한정되지는 않는다: 1) 임의 항원의 준최적(sub-optimal) 발현; 2) 환자는 발현하지 않거나 상응하는 항원의 발현이 없고; 3) 활발치 않은 반응이 하나 또는 또 다른 에피토프에 일어나고, 이 경우 상기 펩티드는 더 균형잡힌 반응을 위해 다른 펩티드의 결핍 하에 제공될 수 있으며; 또한 4) 특정 면역독성을 일으킬 경우 펩티드는 불연속이 될 수 있다.
I. 본 발명의 치료 펩티드와 플라스미드
A. 치료 펩티드와 그의 유사체
본 발명은 암 치료에서 암세포 및 신생 혈관에 의해 발현된 다수 분자를 치료제 용도로 이용하는 것을 고찰한다. 이러한 분자는 암세포 자체에 의해 발현하거나, 예컨대 종양 관련 신생혈관이나 기타 기질 같은 종양의 비발암성 성분과 관련되는 항원인 종양 관련 항원(TuAAs)을 포함한다. TuAAs는 환자의 암 상태 또는 암 종류가 적절한 면역치료제나 치료법에 부합하도록 돕는다. 본 발명에서 고려하는 TuAAs의 비제한적 예는 SSX-2, NY-ESO-1, PRAME, PSMA(전립선 특이적 막항원), 멜란-A 및 티로신을 포함한다. 그러므로 본 발명의 특정 실시형태에서는 TuAAs의 에피토프, 펩티드, 펩티드 유사체가 암 치료제로 제공된다(표 1). 본 발명의 또 다른 실시형태에서, 상기 펩티드는 자연 서열을 포함하거나 또는 NY-ESO-1, SSX-2, 멜란-A, 티로시나제, PRAME 및 PSMA 등의 유사체가 될 수도 있다. 이에 관하여는 다음과 같은 공지 문헌에 개시되어 있다: 미국 가출원 제60/581,001호, 제60/580,962호 및 제60/691,889호; 이들에 상응하는 특허출원 제11/156,253호(공개 번호 20060063913), 제11/155,929호(공개 번호 20060094661), 제11/156,369호(공개 번호 20060057673), .../....(대리인 정리번호 MANNK.052A, 본 출원과 동일자 출원), .../....(대리인 정리번호 MANNK.052A2, 본 출원과 동일자 출원) 및 .../....(대리인 정리번호 MANNK.052A3, 본 출원과 동일자 출원); 및 미국 특허출원 제11/156,369호(공개 번호 20060057673) 및 제11/156,253호(공개 번호 20060063913) 등이며, 이들의 전체 내용은 본 명세서에 참고로 반영되어 있다.
멜라닌 생합성 효소인 티로시나제는 흑색종에서 자주 관측되는 멜라닌 세포에서 고농도로 사전 발현된다. 따라서 티로시나제는 가장 특이적인 흑색종세포 분화의 마커 중 하나로 인식되고 있다. 또한 멜라닌 세포처럼 신경 외배엽에서 개발되는 교아 세포에서도 발현된다. 티로시나제는 따라서 다중형태의 교아섬유종을 포함한 교아섬유종에 유용한 TuAA이다. TuAA로서의 티로시나제에 관한 상세 내용은 미국 특허 제5,747,271호에 기술되어 있으며, 이의 전체 내용은 본 명세서에 참고로 반영되어 있다. 본 발명의 특정 실시형태에서, 서열 번호: 10으로 표시되는 티로시나제369 -377 에피토프를 제공한다(표 1).
본 발명에서 이용된 또 다른 TuAA는 멜란-A으로 이는 MART-1로도 알려져 있다(T 세포가 인지하는 멜라노마 항원). 멜란-A/MART-1는 고농도로 멜라노마에서 발현된 멜라닌 생합성 단백질이다. 멜란-A/MART-1는 미국 특허 제5,994,523호; 제5,874,560호; 및 제5,620,886호 등에 TuAA로 개시되었으며, 이들의 전체 내용은 본 명세서에 참고로 반영되어 있다. 본 발명의 바람직한 실시형태에서, 서열 번호: 9로 표현된 멜란-A TuAA인 멜란-A26-35을 제공한다(표 1).
SSX-2는 Hom-Mel-40이라고도 하며, 고보호 종양고환(C/T) 항원(PSMA) 종류의 일원이다(Gure, A.O. et al., Int. J. Cancer 72:965-971, 1997, 이의 전체 내용은 본 명세서에 참고로 반영되어 있다). 종양고환 항원은 각종 종양에서 발견되나 대체로 고환을 제외한 성인 조직에는 결핍되어 있다. SSX 종류의 상이한 일원들은 각종 종양 세포주에서 발현되었다. TuAA인 SSX-2는 미국 특허 제6,025,191호에 개시되어 있으며 이의 전체 내용은 본 명세서에 참고로 반영되어 있다. 특정의 실시형태에서, SSX-241-49(서열 번호: 1) 및 그의 유사체, SSX-2 유사체(서열 번호: 5)가 제공된다(표 1).
NY-ESO-1은 CTAG-1(종양고환 항원-1) 및 CAG-3(암 항원-3)이라고도 하며 광범위한 종양에서 발견되는 종양고환 항원이다. TuAA인 NY-ESO-1은 미국 특허 제5,804,381호에 개시되어 있으며 이의 전체 내용은 본 명세서에 참고로 반영되어 있다. 바람직한 실시형태에서, 서열 번호: 2 및 서열 번호: 6으로 각각 표현된 NY-ESO-1의 에피토프와 그의 유사체를 제공한다(표 1).
본 발명에서 다루는 또 다른 TuAA는 PRAME으로서 이는 MAPE, DAGE 및 OIP4 등으로 알려져 있다. PRAME은 종양고환(CT) 항원으로 공지되어 있다. 그러나, 다수의 CT 항원, 즉 MAGE, GAGE 및 BAGE 등과 달리 급성 백혈병에서 발현한다. TuAA인 PRAME는 미국 특허 제5,830,753호에 개시되어 있으며 이의 전체 내용은 본 명세서에 참고로 반영되어 있다. 바람직한 실시형태에서, 서열 번호: 3 및 서열 번호: 7로 각각 표현된 PRAME의 에피토프와 그의 유사체를 제공한다(표 1).
또한 본 발명에서 이용된 또 다른 TuAA는 전립선 특이적 막항원(prostate-specific membrane antigen, PSMA)이다. PSMA는 전립선 암세포에서 고발현하는 것으로 밝혀졌다. 그러나, PSMA 발현은 또한 정상의 전립선 상피세포와 전립선외 종양의 신생혈관에서도 확인된다. 항-신행혈관 조제물인 PSMA는 미국 가특허출원 제60/274,063호 및 미국 특허출원 제10/094,699호(공개 번호 20030046714) 및 제11/073,347호(공개 번호 20050260234) 등에 개시되어 있으며, 이들의 전체 내용은 본 명세서에 참고로 반영되어 있다. TuAA인 PSMA는 미국 특허 제5,538,866호에 개시되어 있으며 이의 전체 내용은 본 명세서에 참고로 반영되어 있다. 바람직한 실시형태에서, 서열 번호: 4 및 서열 번호: 8로 각각 표현된 PSMA의 에피토프와 그의 유사체를 제공한다(표 1).
| 서열번호의 부분 목록 | ||
| 서열 번호 | 정의 | 서열 |
| 1 | SSX-241-49 | KASEKIFYV |
| 2 | NY-ESO-1157-165 | SLLMWITQC |
| 3 | PRAME425 -433 | SLLQHLIGL |
| 4 | PSMA288 -0297 | GLPSIPVHPI |
| 5 | SSX-2 유사체 | KVSEKIFYV |
| 6 | NY-ESO-1 유사체 | SNvaLMWITQV |
| 7 | PRAME 유사체 | SNvaLQHLIGNle |
| 8 | PSMA 유사체 | GLPSIPVHPV |
| 9 | 멜란-A26-35 | ELAGIGILTV |
| 10 | 티로시나제 | YMDGTMSQV |
| 11 | 멜란-A 유사체 | ENvaAGIGILTV |
| 12 | 티로시나제 유사체 | YMDGTMSQNva |
| 13 | pBPL 플라스미드 단체분리 서열 |
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| 14 | pRP12 플라스미드 단체분리 서열 |
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| 15 | pSEM 플라스미드 단체분리 서열 |
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| 16 | pBPL 암호화된 면역 폴리펩티드 |
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| 17 | pRP12 암호화된 면역 폴리펩티드 |
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| 18 | pSEM 암호화된 면역 폴리펩티드 |
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본 발명의 항원은 상기에서 검토한 바와 같이 특별히 제한되지 않으나 암과 같은 질환의 치료에 있어서 각종 치료 방식에 이용되고 있다.
B. 플라스미드와 펩티드의 조합을 포함하는 면역 조성물
상술한 바와 같이, 본 발명은 합성 펩티드와 조합하여 사용되는 플라스미드를 포함하는 암 치료용 면역 조성물을 제공한다. 이러한 면역 프로토콜은 특정 암을 표적으로 하는 강력한 세포 중재의 면역 반응을 유도함으로써, 대상의 암을 소거, 소멸 또는 경감시킨다. 본 발명에서 이용되는 바람직한 플라스미드는 pRP12 플라스미드(서열 번호: 21)(미국 가특허출원 제60/691,579호 및 이에 상응하는 미국 특허출원 .......(대리인 정리번호 MANNK.053A, 본 출원과 동일자 출원), 양측 공히 "암세포 및 종양기질에서 발현한 우성 및 준우성 에피토프에 대한 다가 면역 반응을 유발하는 방법 및 조성물"을 발명의 명칭으로 한다), pBPL 플라스미드(서열 번호: 20) 및 pSEM 플라스미드(서열 번호: 19) 등이 있으며 이에 관하여는 미국 가특허출원 제60/691,579호 및 미국 특허출원 제10/292,413호(공개 번호 20030228634)에 각각 개시되어 있다; 이들의 전체 내용은 본 명세서에 참고로 반영되어 있다(이들 문헌에서 pSEM은 pMA2M이라 언급하고 있음에 유의한다). 또 다른 사용가능한 플라스미드로서 상기 참조 문헌 및 미국 특허출원 제10/225,568호(공개 번호 20030138808)에 개시된 것들도 포함된다.
따라서, 다양한 실시형태에서 면역치료 산물은 면역 조성물의 집합체도 포함한다. 이런 집합체는 1, 2 또는 3개의 플라스미드를 개별 조성물의 집합군으로 포함하거나 또는 단일 조성물이 2개 이상의 플라스미드를 포함할 수 있다. 이러한 집합체는 플라스미드에 의해 발현된 에피토프에 상응하는 다수의 펩티드를 포함할 수도 있다. 마찬가지로 이들은 개별 또는 다수의 펩티드를 포함하는 조성물 형태로 제공되기도 한다. 일부의 실시형태에서, 동반이행형 플라스미드는 이에 상응하는 증폭 펩티드와 함께 제공된다. 다른 실시형태에서, 다수의 플라스미드를 이에 상응하는 펩티드 없이 제공하기도 한다. 또 다른 실시형태에서, 상응하는 펩티드의 집합군을, 예를 들어, 동반이행된 반응을 후속으로 증폭하기 위해 플라스미드 없이 제공한다.
따라서, 본 발명의 특정 실시형태에서, NY-ESO-1157-165(서열 번호: 2) 및 SSX-241-49(서열 번호: 1) 에피토프를 발현하는 pBPL 플라스미드(미국 특허출원 제10/292,413호(공개 번호 20030228634)에 상세히 기술된 바와 같고, 이는 "표적 관련 항원의 에피토프를 암호화하는 발현 벡터 및 그의 설계방법"을 발명의 명칭으로 하며 이의 전체 내용이 본 명세서에 참고로 반영되어 있다), 및 PRAME425 -433(서열 번호: 3) 및 PSMA288 -297(서열 번호: 4) 에피토프를 발현하는 pRP12 플라스미드(미국 가출원 제60/691,579호 및 미국 특허출원 ......(대리인 정리번호 MANNK.053A, 본 출원서과 동일자 출원)에 상세히 기술된 바와 같고, 양측 공히 "암세포 및 종양기질에서 발현한 우성 및 준우성 에피토프에 대한 다가 면역 반응을 유발하는 방법 및 조성물"을 발명의 명칭으로 하며, 이들의 전체 내용이 본 명세서에 참고로 반영되어 있다)를 포함하는 집합체를 제공한다. pBPL 및 pRP12 플라스미드를 위한 단체분리 서열은 각각 서열 번호: 13 및 14로 각각 표현되며, 이들 또한 미국 특허출원 제10/212,413호(공개 번호 20030228634)에 개시되어 있고 이의 전체 내용이 본 명세서에 참고로 반영되어 있다. 플라스미드는 pAPC에 의해 발현 및 표현될 수 있는 방식으로 에피토프를 암호화한다.
본 발명의 또 다른 특정 실시형태에서, 멜란-A26-35(서열 번호: 9) 및 티로시나제3 69 -377 (서열 번호: 10) 에피토프를 발현하는 pSEM 플라스미드(미국 특허출원 제10/2 92,413호(공개 번호 20030228634)에 상세히 기술된 바와 같으며 pMA2M 이라고 언급되어 있다)를 포함하는 집합체를 제공한다. 펩티드 유사체 멜란-A26-35A27Nva(서열 번호: 11) 및 티로시나제369 -377V377Nva(서열 번호: 12)는 미국 특허출원 제11/156,369호 및 가특허출원 제60/691,889호에 각각 기술되어 있고, 양측 공히 "에피토프 유사체"를 발명의 명칭으로 하며 이들의 전체 내용이 본 명세서에 참고로 반영되어 있다. 이 플라스미드의 단체분리 서열은 여기서 서열 번호: 15로 표현되고, 2005년 6월 17일자 미국 가특허출원 제60/691,579호 및 본 출원서와 동일자 출원인 미국 특허출원 ..../.....(대리인 정리번호 MANNK.053A) 에 개시되어 있으며 양측 공히 "암세포 및 종양기질에서 발현한 우성 및 준우성 에피토프에 대한 다가 면역 반응을 유발하는 방법 및 조성물"을 발명의 명칭으로 한다. pSEM 플라스미드는 멜란-A 및 티로시나제 에피토프를, pAPC가 이들을 발현 및 표현할 수 있는 방식으로 암호화한다.
본 발명의 또 다른 특정 실시형태에서, NY-ESO-1157-165(서열 번호: 2) 및 SSX-241-49(서열 번호: 1) 에피토프를 발현하는 pBPL 플라스미드(상술한 바와 같음), 및 멜란-A26-35(서열 번호: 9) 및 티로시나제369 -377(서열 번호: 10) 에피토프를 발현하는 pSEM 플라스미드를 포함하는 집합체를 제공한다. 펩티드 유사체 멜란-A26-35 A27Nva(서열 번호: 11) 및 티로시나제369-377V377Nva(서열 번호: 12), SSX-241-49 A42V(서열 번호: 5) 및 NY-ESO-1157-165 L158Nva, C165V(서열 번호: 6)는: 미국 가출원 제60/580,962호; 미국 특허출원 제11/155,929호; 및 미국 가출원 제60/581,001호; 미국 특허출원 제11/1 56,253호; 미국 특허출원 제11/156,369호; 및 미국 가특허출원 제60/691,889호에 각각 기술되어 있으며, 이들의 전체 내용이 본 명세서에 참고로 반영되어 있다. 플라스미드 pSEM(서열 번호: 19) 및 pBPL(서열 번호: 20)는 각각의 에피토프(멜란-A, 티로시나제, NY-ESO-1 및 SSX-2)를 이들이 pAPC 에 의해 발현 및 표현될 수 있는 방식으로 암호화한다.
본 발명의 또 다른 특정 실시형태는, PSMA288 -297(서열 번호: 4) 및 PRAME425 -433(서열 번호: 3)를 발현하는 pRP12 플라스미드(상술한 바와 같음), 멜란-A26-35(서열 번호: 9) 및 티로시나제369 -377(서열 번호: 10) 에피토프를 발현하는 pSEM 플라스미드(상술한 바와 같음)를 포함하는 집합체에 관한 것이다. 펩티드 유사체 멜란-A26-35 A27Nva(서열 번호: 11) 및 티로시나제369 -377 V377Nva(서열 번호: 12), PRAME425 -433 L426Nva, I433Nle(서열 번호: 7) 및 PSMA288 -297 I297V(서열 번호: 8)은: 미국 가출원 제60/580,962호; 미국 특허출원 제11/155,929호; 및 가출원 제60/581,001호; 미국 특허출원 제11/156,253호; 미국 특허출원 제11/156,369호; 및 미국 가특허출원 제60/691,889호에 각각 기술되어 있으며, 이들의 전체 내용이 본 명세서에 참고로 반영되어 있다. 상기 양쪽 플라스미드는 모두 각각의 에피토프(멜란-A, 티로시나제, PRAME 및 PSMA)를 이들이 pAPC 에 의해 발현 및 표현될 수 있는 방식으로 암호화한다.
그 밖의 실시형태에서, 상술한 각 집합체들은 이들 플라스미드에 의해 발현된 에피토프에 상응하는(즉, 에피토프에 대한 반응을 증폭시킬 수 있는) 펩티드를 포함한다. 다른 특정의 실시형태는 각 플라스미드와 상기 상응하는 펩티드 중 하나 또는 양쪽 모두를 포함한다(여기서 언급하는 특정 플라스미드는 2가이나 1가 형태로 증폭될 수도 있다).
여기서 언급한 바와 같이, PP 치료 방식은 플라스미드와 펩티드를 PRAME 및 PSMA 항원을 표적으로 투여하는 것을 포함한다. 마찬가지로, MT 방식은 멜란-A/티로시나제 항원을 표적으로 하며 NS 치료 방식은 NY-ESO-1 및 SSX-2 항원을 표적으로 한다.
II
. 세포 증식 질환 및 스크리닝법
플라스미드와 하나 이상의 펩티드 또는 그의 유사체를 포함하는 본 발명의 면역 조성물은 암 등의 세포 증식형 질환의 치료를 위해 대상에 투여할 수 있다. 본 발명의 면역 조성물로 치료할 수 있는 암은 예를 들어, 흑색종, 비소세포 폐암(non-small cell lung cancer, NSCLC)이나 소세포 페암(small cell lung cancer, SCLC) 같은 폐암, 헤파토암종, 망막모세포종, 성상신경교종, 교아섬유종, 백혈병, 신경섬유종, 뇌경부암, 유방암, 췌장암, 신암, 골수암, 고환암, 난소암, 석면암, 자궁경부암, 위장암, 림프종, 결장암, 방광암 및/또는 혈액이나, 뇌, 피부, 눈, 혀 및 잇몸의 암 등을 포함한다. 또한 본 발명의 면역 조성물은 암 이외의 세포 증식형 질환을 치료하는데도 이용된다. 본 발명에서 설명하는 세포 증식형 질환이란 예를 들어, 형성장애, 전암병변(예, 자궁내막증식, 전립선 상피내종양, 자궁경부 이형성, 결장 폴립증) 또는 암종 자체 등을 들 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.
암이 의심되거나 암에 걸린 환자의 세포나 조직은 환자에게 적용할 적절한 면역치료 방식을 보다 정밀하게 결정하기 위해 스크리닝 처리할 수 있다. 이러한 스크리닝은 항원의 사전 선택된 패널 내에서 둘 이상의 발현된 종양 관련 항원(TuAAs)에 관하여 환자의 종양 조직을 분석하여 종양에 관한 항원 프로파일을 개발하는 단계를 포함할 수 있다. 면역치료 방식은 수득된 항원 프로파일에 기초하여 선별할 수 있다. 선별된 방식은 2, 3, 4 또는 그 이상의 발현 항원을 표적으로 하는 하나 이상의 면역치료제를 투여하는 단계를 포함한다. 면역치료제는, 종양에 의해 발현된 2개 이상의 항원 중 각각에 대해 환자의 제I류 MHC 종류에 의해 제한된 하나의 에피토프를 포함하거나 이를 암호화할 수 있다. 항원 발현은 신생물 세포 또는 종양 관련 기질 세포, 또는 양쪽에서 검출될 수 있다.
본 발명에 따른 면역치료 방식은 표적 항원이 PRAME 및 PSMA인 PP 방식을 포함하며 이는 혈관 및 암 테스트 항원을 모두 표적으로 한다. 또 다른 본 발명에 따른 치료방식은 표적 항원이 멜란-A 및 티로시나제인 MT 방식으로서 이는 흑색종 및 교아섬유종에 관련된 조직 특이성 항원을 표적으로 한다. 본 발명에 따른 NS 항원은 표적 항원 NY-ESO-1 및 SSX-2에 관한 것으로 이들은 광범위한 암에 있어서 그 발생빈도가 상이한 암 테스트 항원이다. 또 다른 특정의 실시형태에서 면역치료 방식은: PPNS(공동 표적형 PRAME, PSMA, NYESO-1, SSX2), NSMT(공동 표적형 NYESO-1, SSX2, 멜란 A 및 티로시나제) 또는 PPMT(공동 타겟형 PRAME, PSMA, 멜란 A, 티로시나제) 등을 포함한다.
본 발명에서 이용하는 스크린법은 사전선택된 패널에서 하나 이상의 발현 폴리펩티드를 검출하기 위한 환자의 종양 조직 분석 단계로서, 이때의 패널은 2, 3, 4 또는 그 이상의 TuAAs 및 하나 이상의 혈통 특이적 마커를 포함하며; 또한 상기 분석에 근거하여 암을 진단 확정하는 단계를 포함한다. 패널은 NY-ESO-1, PRAME, PSMA, 티로시나제, 멜란-A/MART-1 및 SSX 단백질로 이루어진 군에서 적어도 2, 3, 4 또는 그 이상의 TuAAs을 포함한다. 경우에 따라, 혈통 특이적 마커는 TuAA 일 수 있으며; 또는 혈통 특이적 마커는 TuAA 이외의 것이다. 예를 들어, 흑색종 또는 교아섬유종에 있어서 혈통 특이적 마커는 티로시나제, 멜란-A/MART-1 또는 gp 100 등이 있고, 전립선 암의 경우 혈통 특이적 마커는 PSA 또는 PSMA 일 수 있다.
종양 항원 발현은 이형성인 경향이 있고 특정의 이종 생검 시료는 발현된 항원 전체에 관하여 완벽한 지표가 되지 않는 경우가 많다. 따라서, 환자의 프로파일이 치료 항원 모두를 함유할 필요는 없다. 본 발명에서 사용되는 스크리닝법은 사전선택된 항원 패널의 발현을 위하여 예측되는 종류의 종양 조직을 분석하는 것을 포함하기도 한다. 경우에 따라, 한 종류의 종양에 대해 형성된 TuAA 패널은 동일한 항원의 일부 및 형성된 발현 프로파일을 발현할 수 있는 다른 종류의 종양을 스크린하는데 이용할 수 있다.
본 발명의 면역 조성물은 HLA-A2, 특히 HLA-A*0201을 발현하는 종양 조직을 가진 환자에게 투여할 수 있다.
어떤 항원 또는 항원의 조합물이 특정 암의 치료에 유용한지를 결정하는데 이용할 수 있는 특정 종양의 항원 발현 프로파일을 제공하기 위한 방법은 예를 들어, 2004년 6월 17일자 미국 가출원 제60/580,969호; 2005년 6월 17일자 미국 출원 제11/155,288호(공개 번호 20060008468); 및 2005년 6월 17일자 미국 출원 제11/323,964호에 개시되어 있으며, 이들 공히 "각종 암에 대한 진단에 이용되는 종양 관련 항원의 조합체"를 발명의 명칭으로 하고 그 전체 내용은 본 명세서에 참고로 반영되어 있다. 특정 암에 대한 면역 반응에 관하여 우수한 장점을 가진 특이적 항원 조합체는 또한: 2003년 6월 17일자 미국 가출원 제60/479,554호 및 2004년 6월 17일자 미국 특허출원 제10/871,708호(공개 번호 20050118186)(이들 공히 "각종 암 용도의 조성을 가진 종양 관련 항원의 조합체"를 발명의 명칭으로 한다); 및 2004년 6월 17일자 PCT 특허출원공개 제WO 2005/112825호에 개시되어 있으며 이들의 전체 내용은 본 명세서에 참고로 반영되어 있다.
III
. 투여용 동반이행-및-증폭 치료제
바람직한 실시형태에서, 본 발명은 프라임(플라스미드)/부스팅(펩티드) 접근법을 이용하여 투여한 재조합 DNA 플라스미드 및 합성 펩티드의 조합체를 포함하는 조성물을 제공한다. 이러한 조성물은 최적의 면역화 스케줄에 따라 림프절 주사를 통하여 전달된다. 본 발명의 실시형태는 HLA-A2, 특히 HLA-A*0201를 발현하는 종양 조직을 가진 환자에게 투여할 수 있다. 따라서, 플라스미드 및 하나 이상의 펩티드 혹은 그의 유사체를 포함하는 면역 조성물은 암을 치료하기 위해 대상에게 투여할 수 있다. 본 발명의 상술한 실시형태는 흑색종을 포함한 암종의 동반이행-및-증폭형 치료제에 관한 것으로서 이는 다중 공격으로 공격할 종양의 감도를 증가시키는 장점을 제공한다.
따라서, 특정의 실시형태에서 본 발명은 암 치료를 위한 다가 동반이행-및-증폭형 치료제를 제공한다. 이러한 다가 치료제는 종양 세포에 대한 하나 이상의 항원을 표적으로 한다. 종양 세포에 대한 하나 이상의 항원을 표적으로 하는 경우, 유효 농도의 항암 치료제가 따라서 증가한다. 종양 관련 기질에 대한 공격은 이들을 표적으로 하는 치료제에 대한 종양 세포의 접근성을 증가시킬 수 있다. 따라서, 일부 정상 조직에서까지 발현하는 항원이라도, 다중 공격에서 표적이 될 다른 항원은 상기 조직에 의해 발현되지 않는 경우, 상기 항원을 표적 항원으로 고려할 수 있다.
A. 2가 동반이행-및-증폭형 치료법
본 발명의 실시형태는 흑색종을 위한 2가 동반이행-및-증폭형 치료법에 관한 것이다. 따라서, 본 발명에 있어서 흑색종 치료를 위한 MT 방식으로 투여되는 것으로서, 멜란-A26-35(서열 번호: 9) 및 티로시나제369 -377(서열 번호: 10) 에피토프와 상응하는 pSEM 플라스미드 및 펩티드를 포함하는 집합체를 제공한다. 바람직한 실시형태에서, 펩티드 유사체 멜란-A26-35 A27Nva(서열 번호: 11) 및/또는 티로시나제3 69 -377 V377Nva(서열 번호: 12)는 증폭 단계에서 활용된다. 본 발명에서 이용되는 동반이행-및-증폭 프로토콜은 상술한 바와 같다.
pSEM 플라스미드 집합체는 흑색종 치료용 4가 동반이행-및-증폭 치료제로서 상술한 바와 유사한 방식으로 전달할 수 있다. 흑색종 환자는 상술한 방법 및 종양 항원 프로파일이 멜란-A 및/또는 티로시나제를 함유하는 환자에게 적용한 MT 방식에 따라 스크리닝할 수 있다. 펩티드 부스팅은 플라스미드에 의해 발현된 항원 중 하나 또는 양쪽 모두를 수반할 수 있다.
마찬가지로 PP 및 NS 방식은, 각각 PSMA288 -297(서열 번호: 4) 및 PRAME425 -433(서열 번호: 3) 에피토프에 상응하는 pRP12 및 펩티드, 또한 NY-ESO-1157-165(서열 번호: 2) 및 SSX-241-49(서열 번호: 1) 에피토프에 상응하는 pBPL 및 펩티드를 포함하는 집합체를 이용하는 2가 치료법에 응용할 수 있다. 이들 2가 방식은 서로 조합하여 하기의 실시형태에서와 같이 더 큰 원자가의 치료 방식을 얻을 수 있으며 다양한 면역 조성물군을 조합하여 이를 뒷받침한다.
B. 4가 동반이행-및-증폭형 치료법
본 발명의 한 실시형태는 암종 치료용 4가 동반이행-및-증폭형 치료법에 관한 것이다. 따라서, 본 발명의 특정 실시형태에서 면역화를 위한 동반이행 면역원으로서 투여되는 것으로서, NY-ESO-1157-165(서열 번호: 2) 및 SSX-241-49(서열 번호: 1) 에피토프를 발현하는 pBPL, 또한 PRAME425 -433(서열 번호: 3) 및 PSMA288 -297(서열 번호: 4) 에피토프를 발현하는 pRP12 플라스미드를 포함하는 집합체(본 명세서에서 PP 방식이라 함)를 제공한다. 본 발명에서 언급하는 "동반이행" 면역원이란 다수의 실시형태에서 T 세포 유발 혈통의 면역 프로파일에 대하여 특별한 안정성을 유도하는 것을 포함한다.
또한, NY-ESO-1, SSX-2, PRAME 및 PSMA 에피토프에 상응하는 4가지 펩티드 조성물을 동반이행 면역원과 동일한 면역화법의 증폭부로서 투여된다. 바람직한 실시형태에서, 펩티드 유사체 NY-ESO-1157-165 L158Nva, C165V(서열 번호: 6), SSX-241-49 A42V(서열 번호: 5), PSMA288 -297 I297V(서열 번호: 8) 및/또는 PRAME425 -433 L426Nva, L433Nle(서열 번호: 7) 등은 증폭 단계에서 활용된다. 본 발명에서 언급하는 T 세포 반응 등의 "증폭" 이란 다수의 실시형태에서 세포수, 활성화된 세포수, 활성 수준, 증식률 또는 특이적 반응에 수반되는 기타의 T 세포 변수들을 증대시키는 방법을 포함한다.
본 발명에서 이용되는 동반이행-및-증폭 프로토콜은 미국 가출원 제60/640,402호; 미국 특허출원 제10/871,707호(공개번호 20050079152); 및 미국 특허출원 제11/323,572호에 상세히 기술되어 있고, 이들은 공히 "예방 또는 치료를 목적으로, MHC 제I류-제한 에피토프에 대한 면역반응을 유발, 향상 및 지속하는 방법"을 발명의 명칭으로 하며 그 전체 내용은 본 명세서에 참고로 반영되어 있다.
본 발명의 바람직한 실시형태에서, 플라스미드는 동반이행 면역원으로서 좌측 및 우측의 서혜부 림프절에 결절내 투여한다. 이어서 펩티드를 증폭 면역원으로서 2개를 각각 다른 날에 좌측의 서혜부에 차례로 결절내 투여하고 또 다른 2개를 각각 다른 날에 우측의 서혜부에도 투여한다. 반드시 필요하지는 않으나 바람직하게는, 상응하는 에피토프를 암호화할 플라스미드를 수용하는 펩티드를 동일한 림프절에 투여한다.
암종 환자 특히 난소나 결장, 췌장이나 직장세포 암종 환자는 상술한 바와 같이, 종양 프로파일이 PRAME, PSMA, NY-ESO-1 및/또는 SSX-2를 포함하는 환자에게 적용된 PP 및/또는 NS 치료 방식으로 스크리닝할 수 있다. NY-ESO-1 에피토프는 또한 LAGE 1a/s에서 발견되며, 프로파일에 이런 항원이 존재하는 것으로 종양 프로파일을 고찰할 수 있다는 점에 주목한다. 종양 항원 발현은 이형성인 경향이 있으며 특정의 이종 생검 시료는 발현된 항원 전체에 관하여 완벽한 지표가 되지 않는 경우가 많다. 따라서, 환자의 프로파일이 본 발명의 치료법에 따라 치료할 대상에 있어서 상기 4가지 항원을 모두 함유할 필요는 없다. 그러나, 프로파일은 2, 3 또는 4개의 항원을 함유하는 것이 바람직하다.
C. 흑색종 치료용 4가 동반이행-및-증폭형 치료제
본 발명의 한 실시형태는 흑색종 치료용 4가 동반이행-및-증폭형 치료제에 관한 것으로서, 상기 치료제는 플라스미드 pSEM 및 pBPL과 이의 상응하는 펩티드를 포함한다. pSEM 플라스미드는 멜란-A26-35(서열 번호: 9) 에피토프 및 자연 티로시나제(티로시나제369 -377(서열 번호: 10)) 에피토프 서열의 A27L 유사체를 암호화한다(본 명세서에서 MR 방식이라 함). pBPL 플라스미드는 NY-ESO-1157-165(서열 번호: 2) 및 SSX-241-49(서열 번호: 1) 천연형 에피토프를 암호화한다. 플라스미드 함유 집합체는 흑색종에 대한 면역화법의 동반이행부로서 투여된다. 또한, NY-ESO-1, SSX-2, 멜란-A 및 티로시나제 에피토프에 상응하는 4가지 펩티드 조성물이 동일한 면역화법의 증폭부로서 투여된다. 바람직한 실시형태에서, 펩티드 유사체 멜란-A26-35 A27Nva(서열 번호: 11), 티로시나제369-377 V377Nva(서열 번호: 12), SSX-241-49 A42V(서열 번호: 5) 및 NY-ESO-1157-165 L158Nva, C165V(서열 번호: 6)를 증폭 단계에서 활용된다.
흑색종 같은 암의 치료에 있어서, 플라스미드는 동반이행 면역원으로서 서혜부 림프절에 결절내 투여된다. 이어서 펩티드를 증폭 면역원으로서 바람직하게는 동일자에 1개를 좌측의 서혜부에 다른 1개를 우측의 서혜부에 투여한다. 흑색종 환자를 상술한 방법 및, 종양 항원 프로파일이 멜란-A 및/또는 티로시나제를 포함하는 환자에 적용할, 적절한 방식에 따라 스크린할 수 있다. 펩티드 부스팅은 플라스미드에 의해 발현된 2, 3 또는 4가지 항원을 수반할 수 있다.
D.
교아섬유종
치료용 4가 동반이행-및-증폭형 치료제
본 발명의 한 실시형태에서, 교아섬유종 같은 기타의 암종에 적용되는 것으로서 흑색종 치료용 4가 동반이행-및-증폭형 치료제를 제공한다. 이러한 구체예는, 면역화법의 동반이행부로서 투여되는 것으로서,PSMA288 -297(서열 번호: 4) 및 PRAME425-433(서열 번호: 3) 에피토프를 발현하는 pRP12 플라스미드(상술한 바와 같음), 또한 멜란-A26-35(서열 번호: 9) 및 티로시나제369 -377(서열 번호: 10) 에피토프를 발현하는 pSEM 플라스미드(상술한 바와 같음)의 조합체에 관한 것이다. 또한, PSMA, PRAME, 멜란-A 및 티로시나제 에피토프에 상응하는 4가지 펩티드 조성물은 동일한 면역화법의 증폭부로서 투여된다. 바람직한 실시형태에서, 펩티드 유사체 멜란-A26-35 A27Nva(서열 번호: 11), 티로시나제369 -377 V377Nva(서열 번호: 12), PRAME425-433(L426Nva, L433Nle) 펩티드(서열 번호: 7) 및 PSMA288 -297 I297V(서열 번호: 8) 등은 증폭 단계에서 활용된다.
암 환자는 상술한 방법 및, 종양 항원 파일이 PRAME, PSMA, 멜란-A 및/또는 티로시나제를 포함하는 환자에게 적용되는 PP 및/또는 MT 방식에 따라 스크린할 수 있다. 펩티드 부스팅은 플라스미드가 발현한 2, 3 및 4개의 항원을 동반할 수 있다.
IV
. 본 발명의 조성물을 전달하는 방법
본 발명에서, 프라임으로서 재조합 DNA 플라스미드를 또한 부스팅으로서 합성펩티드를 포함하는 바람직한 면역 조성물 투여 방법은 림프절 주사를 통한 것이다. 플라스미드(프라임)는 펩티드(부스팅)와 별도로 투여될 수 있다. 본 발명의 실시형태는 두개의 면역원을 발휘하는 1개의 2가 플라스미드 대신 2개의 1가 플라스미드를 포함할 수 있다. 다른 실시형태에서, 1개의 2가 및 1개의 1가 플라스미드 대신 3개의 면역원을 발현하는 3가 플라스미드를 이용한다. 경우에 따라, 3가 플라스미드 및 1개의 1가 플라스미드를 4가의 플라스미드 대신, 또는 4가 플라스미드 대신 2개의 2가 플라스미드를 이용한다. 본 발명의 조성물로 이루어진 조합체를 사용할 경우, 면역 반응이 최적의 면역 스케줄에 따라 개시 및 증폭되는 기관에 직접 전달할 수 있으므로, 림프절 주사가 바람직하다.
환자의 림프계에 면역 조성물을 도입하기 위하여, 상기 조성물을 림프관, 림프절, 비장 또는 림프계의 기타 적절한 부분에 전달하는 것이 바람직하다. 일부의 실시형태에서, 각 성분을 알약 형태로 투여하기도 한다. 또 다른 실시형태에서 하나 이상의 성분을 주입액으로 만들어 수시간 내지 수일에 걸쳐 전달하기도 한다. 바람직하게, 상기 조성물은 서혜부나 겨드랑이의 결절 등의 림프절에 카테터나 바늘을 삽입하고, 전달 과정 중 이를 고정 유지함으로써 전달할 수 있다. 적절한 바늘이나 카테터는 금속 혹은 플라스틱(예, 폴리우레탄, 폴리염화비닐(PVC), TEFLON, 폴리에틸렌 등)으로 제작 시판하고 있다. 카테터나 바늘을 예를 들어 서혜부 결절에 삽입할 때, TegadermTM 투명 드레싱(TegadermTM, St. Paul, MN, USA)를 이용하여 고정하는VialonTM Insyte WTM 캐뉼러 및 카테터 24G3/4(Becton Dickinson, USA)에 의한 초음파 제어하에 서혜부 결절을 천공한다. 이 절차는 통상 경험있는 방사선과 전문의가 시행한다. 서혜부 림프절내 카테터 팁의 위치는 최소량의 염수를 주사하여 확인하며 림프절 크기가 즉시 증가함을 육안으로 확인할 수 있다. 후자의 절차는 결절내 팁이 존재함을 확인하기 위한 것이다. 이 절차는 팁이 림프절에서 이탈하지 않도록 하고 또한 카테터 이식후 수일간 반복할 수 있다. 팁이 림프절 내부에서 위치를 이탈하는 경우 새로운 카테터를 이식할 수 있다.
본 발명의 치료 조성물은 당해 분야의 기술자에게 널리 공지된 표준 백신 전달 프로토콜에 부합하는 방식으로 환자에게 투여한다. TuAA의 플라스미드 및 펩티드 혹은 그 유사체를 포함하는 본 발명의 면역 조성물 투여방법은 특별한 제한없이, 경피형, 결절내, 결절 주위, 경구, 정맥내, 피내, 근육내, 복강내 및 점막 투여 방식을 포함하며 주사나 점안법 또는 흡입법을 통해 전달된다. CTL 반응을 유발하기에 특별히 유용한 백신 전달 방법은 호주 특허 제739189호; 및 미국 특허 제6,994,851호 및 제6,977,094호에 개시되어 있으며 이들은 공히 "CTL 반응 유발 방법"을 발명의 명칭으로 한다.
면역 조성물을 대상에게 투여 혹은 전달함에 있어서 각종 파라미터를 고려해야 한다. 또한, 투약 방식과 면역화 스케줄을 이용한다. 일반적으로, 치료 조성물에 함유되는 성분들의 양은 환자별 및 항원별로 다음과 같은 변수에 따라 달라진다: 반응 유발시의 항원의 활성; 환자의 전신을 순환하는 림프의 유속; 대상의 체중과 연령; 질환 종류 및/또는 치료가 필요한 조건; 질환 혹은 그 조건의 위중도; 과거 또는 현재의 치료 장애 조건; 항체 합성에 관여하는 개별적 면역계의 역량; 필요한 보호의 정도; 투여 방식 및 기타. 이들은 모두 숙련자라면 쉽게 결정할 수 있다.
일반적으로 치료 조성물은 약 1 내지 500 마이크로리터/시간 또는 약 24 내지 12000 마이크로리터/일의 유속으로 전달된다. 항원의 농도는 약 0.1㎍ 내지 10,000㎍의 항원을 24 시간 동안 전달하는 방식으로 유지한다. 유속은 매 1분당 약 100 내지 1000의 마이크로리터의 림프액이 성인의 서혜부 림프절에 통과하는 수준으로 한다. 림프계 내에 백신 제형의 국소적 농도를 최대화하는 것을 목표로 한다. 인간을 대상으로 한 백신 조제물에 관한 가장 효능적인 주입 농도를 결정하기 위해 환자에 대한 실험적인 연구가 필요한 경우도 있다.
특정의 실시형태에서, 본 발명의 면역 조성물은 다수회 순서대로 투약할 수 있다. 이러한 다수의 투약은 필요시 2, 3, 4, 5, 6 또는 그 이상의 투약 횟수를 포함한다. 본 발명의 또 다른 실시형태에서, 면역 조성물의 투약은 우측 또는 좌측 서혜부 림프절에 각각 약 수초나 수분 이내에 투여하는 것을 포함한다. 예를 들어, 플라스미드(프라임)을 먼저 우측 림프절에 주사한 뒤 수초 혹은 수분 이내에 좌측 서혜부 림프절에 두번째 플라스미드를 투여한다. 또 다른 경우에서, 하나 이상의 면역원을 발현하는 하나 이상의 플라스미드의 조합물을 투여한다. 림프절에 대한 1차 주사후 후속 주사는 약 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10분 또는 그 이상의 분단위 시간에 실시하는 것이 바람직하며 1차 주사후 약 30, 40, 50 또는 60분을 넘기지 않도록 한다. 마찬가지로 두가지 펩티드를 각각 우측과 좌측 림프절에 투여할 때도 이러한 점에 주의한다. 후속 투여와의 간격이 수일(1, 2, 3, 4, 5, 6 또는 7일 혹은 그 이상의 일수)인 경우, 본 발명의 면역 조성물은 일 간격으로 다수회 투약하는 것이 바람직하다. 본 발명의 조성물은, 초기 투약후 1, 2, 3주 또는 그 이상이나 1, 2, 3개월 또는 그 이상의 기간 내에 양측 서혜부 림프절을 통해 후속 투여하는 것이 바람직하다.
투약 제형에 적합한 방식 및 치료학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명의 면역 조성물의 유효량이나 투약량은 치료할 대상에 적절한 반응을 얻기에 필요한 양이다.
도 1은 펩티드 부스팅에 앞서 pSEM/pBPL 프라임 처리된 동물의 테트라머 분석 결과를 도시한다. 제1, 2 및 3 동물군(n=60)에 대해 pSEM/pBPL 플라스미드 혼합물을 제1일, 4일, 15일 및 18일(100㎍/일) 총 4회에 걸쳐 양측 서혜부 림프절에 주사하여 프라임했다. 테트라머 분석은 최종 플라스미드 주사뒤 10일 후인 제25일에 무처리된 한배 태생의 새끼 대조군(n=5)과 비교하여 실시했다. 테트라머 값(멜란 A, 티로시나제, SSX-2, NY-ESO-1)을 평균치 ± SEM으로 나타낸다.
도 2는 각 동물에 있어서 4가 면역 반응을 나타내는 제39일에 실시된 멜란-A/티로시나제, SSX-2/NY-ESO-1 테트라머 분석 결과를 도시한다. 동물에 대해 pBPL+pSEM 의 플라스미드 혼합물을 제1일, 4일, 15일 및 18일(100㎍/일) 총 4회에 걸쳐 양측 서혜부 림프절에 주사하여 프라임한 후, 왼쪽 림프절에 SSX241 -49 A42V(서열 번호: 5)로 이루어진 펩티드를 오른쪽 림프절에 티로시나제369 -377 V377Nva(서열 번호: 12)를 제28일 및 32일(25㎍/일)에 각각 부스팅했다. 제2군에서 취한 대표 동물(n=3)을 무처리된 한배 태생의 새끼 대조군과 비교하여 나타낸다.
도 3은 pSEM/pBPL로 프라임 처리후 SSX-2/티로시나제 부스팅한 동물의 테트라머 분석 결과를 도시한다. 멜란-A/티로시나제, SSX-2/NY-ESO-1 테트라머 분석은 최종 펩티드 주사뒤 7일 후인 제39일에 실시했다. 제1군 동물(n=10)은, pBPL+pSEM의 플라스미드 혼합물을 제1일, 4일, 15일 및 18일(100㎍/일) 총 4회에 걸쳐 투여하여 프라임 처리한 후, 다시 제28일 및 32일(100㎍/일)에 pBPL+pSEM의 플라스미드 혼합물을 부스팅했다. 제2군 및 제3군 동물(n=50)은 제1군과 마찬가지로, pBPL+pSEM 의 플라스미드 혼합물을 투여하여 프라임 처리한 후, 다시 왼쪽 림프절에 SSX241 -49 A42V(서열 번호: 5)로 이루어진 펩티드를, 오른쪽 림프절에 티로시나제369 -377 V377Nva(서열 번호: 12)를 제28일 및 32일(25㎍/일)에 각각 부스팅하여 준비 했다. 평균 테트라머 값(멜란 A, 티로시나제, SSX-2, NY-ESO-1)을 무처리된 한배 태생의 새끼 대조군(n=5)과 비교하여 평균치 ± SEM으로 나타낸다.
도 4a 및 4b는 1차 펩티드 부스팅 후의 IFN-γELISpot 분석 결과를 도시한다(도 4a). ELISPOT 분석은 제41일에 실시했다. 제1군 동물(n=3 희생수)은, pBPL+pSEM의 플라스미드 혼합물을 제1일, 4일, 15일 및 18일(100㎍/일) 총 4회에 걸쳐 투여하여 프라임한 후, 다시 제28일 및 32일(100㎍/일)에 pBPL+pSEM의 플라스미드 혼합물을 부스팅했다. 제2군 및 제3군 동물(n=6 희생수)은 제1군과 마찬가지로, pBPL+pSEM의 플라스미드 혼합물을 투여하여 프라임한 후, 다시 왼쪽 림프절에 SSX241 -49 A42V(서열 번호: 5)로 이루어진 펩티드를, 오른쪽 림프절에 티로시나제369 -377 V377Nva(서열 번호: 12)를 제28일 및 32일(25㎍/일)에 각각 부스팅했다. 비장내 항원 특이적(멜란 A, 티로시나제, SSX-2, NY-ESO-1) 인터페론-γ 스폿 형성 세포를 무처리된 한배 태생의 새끼 대조군(n=3)과 비교하여 평균치 ± SEM으로 나타낸다; 도 4a에서 IFN-γ ELISpot 분석은 3회 중복 실시하여 그 결과치를 평균 ± SEM으로 나타낸다. 펩티드 자극 농도 10㎍/㎖에서 42시간 동안 배양했다. 도 4b에서 IFN-γ ELISpot 분석은 2차 펩티드 부스팅후 실시했다. ELISPOT 분석은 제63일에 대표 동물을 희생시켜 실시했다. 제1군 동물(n=3 희생수)은, pBPL+pSEM의 플라스미드 혼합물을 제1일, 4일, 15일, 18일, 28일, 32일, 49일 및 53일(100㎍/일)에 주사하여 프라임했다. 제2군 동물(n=4 희생수)은, pBPL+pSEM의 혼합물을 제1일, 4일, 15일 및 18일(100㎍/일)에 주사하여 프라임한 후, 다시 왼쪽 림프절에 SSX241 -49 A42V(서열 번호: 5)로 이루어진 펩티드를, 오른쪽 림프절에 티로시나제369 -377 V377Nva(서열 번호: 12)를 제28일, 32일, 49일 및 53일(25㎍/일)에 각각 부스팅했다. 제3군 동물(n=7 희생수)은, pBPL+pSEM의 혼합물을 제1일, 4일, 15일 및 18일(100㎍/일)에 양쪽 서혜부 림프절에 주사한 후, 왼쪽 림프절에 SSX241 -49 A42V(서열 번호: 5)로 이루어진 펩티드를 오른쪽 림프절에 티로시나제369 -377 V377Nva(서열 번호: 12)를 제28일 및 32일(25㎍/일)에 각각 부스팅하고 또다시 왼쪽 림프절에 NY-ESO-1157-165 L158Nva(서열 번호: 6)와 C165V(제49일 및 53일에 각각 12.5㎍) 및 오른쪽 림프절에 멜란 A26-35 A27Nva(서열 번호: 11)(제49일 및 53일에 각각 25㎍)을 2차 펩티드 부스팅했다. 비장내 항원 특이적(멜란 A, 티로시나제, SSX-2 및 NY-ESO-1) 인터페론-γ 스폿 형성 세포를 무처리된 한배 태생의 새끼 대조군과 비교하였다(도 4b). IFN-γELISpot 분석을 3회 중복 실시하여 그 결과치를 평균 ± SEM으로 나타낸다. 펩티드 자극 농도 10㎍/㎖에서 42시간 동안 배양했다.
도 5는 동물을 총 4개의 종양 관련 항원을 발현하는 인간 흑색종 종양 세포로 챌린지한 체내 연구에서 테트라머 레벨, IFN-γ ELISPOT 및 카르복시-플로레신 디아세테이트 숙신이미딜 에스테르(CFSE) 히스토그램을 도시한 것이다. 새끼 대조군(상부 좌측 패널); 4가 면역된 2마리(상부 우측 패널 및 하부 좌측 패널); 및 멜란-A에 대해 1가 반응을 보인 1마리(하부 우측 패널)에 대해 도시한다.
도 6은 "초기" 대 "확장" 프로토콜의 테트라머 분석 결과를 도시한다. "초 기 프로토콜"(제1군 내지 제3군) 또는 "확장 프로토콜"(제4군 내지 제6군)에 기초하여 동물에 있어서, 우측 서혜부 림프절에 D1(pRP12) 플라스미드(4㎎/㎖)를 좌측 서혜부 림프절에 D2(pBPL) 플라스미드(4㎎/㎖)를 각각 4회씩 주사했다. 그 후 동물에 대해 다시 PSMA, SSX-2, PRAME 및 NY-ESO-1 펩티드로 후속 부스팅했다. 동물은, 제1일, 4일, 15일 및 18일에 D1(pRP12) 플라스미드 및 D2(pBPL) 플라스미드(4㎎/㎖)로 프라임 처리한 후, 초기 프로토콜에서 제29일 및 31일에 PSMA288-297(1297V) 펩티드(RLN)(서열 번호: 8) 및 SSX-241-49(A42V) 펩티드(LLN)(서열 번호: 5)로 부스팅하고; 또한 확장 프로토콜에서 제42일 및 45일에 PRAME425 -433(L426Nva, L433Nle) 펩티드(RLN)(서열 번호: 7) 및 NY-ESO-1157-165(L158Nva, C165V) 펩티드(LLN)(서열 번호: 6)로 2차 부스팅하였다. 분석값은 펩티드 부스팅후 각 동물로부터 평균치 ± SEM으로 나타내며 무처리된 한배 태생의 새끼 대조군(n=5)과 비교하였다.
도 7은 제1군의 대표 동물(도 6)로부터 구한 4가 면역 반응의 결과를 도시한다. 플라스미드 프라임 처리후, PSMA 펩티드(25㎍) 및 PRAME 펩티드(20㎍)를 우측 림프절에 주사했다. 각각 25㎍의 SSX-2 및 NY-ESO-1 펩티드를 좌측 림프절에 주사했다. 데이터는 테트라머 및 ELISpot 분석에 따른 면역 반응 측정 결과를 보여준다.
도 8은 "초기" 대 "확장" 프로토콜의 IFN-γ ELISPOT 분석의 결과를 도시한다. 비장내 항원 특이적(SSX-2, NY-ESO-1, PRAME 및 PSMA) 인터페론-γ 스폿 형성 총세포는, 저, 중 및 고 펩티드 부스팅으로 이루어진 "초기 및 "확장" 프로토콜과 비교하여 나타낸다. IFN-γ ELISPOT 분석은 3회 중복 실시하여 그 결과치를 펩티드 부스팅한 후 평균 ± SEM으로 나타낸다. 비장 세포(3×105 세포/웰)를 96웰 ELISpot 플레이트에서 10㎍/㎖ 농도의 펩티드(SSX-2, NY-ESO-1, PRAME 및 PSMA)로 72 시간 동안 자극시켰다. 이 값을 총 핵화된 비장 세포 총수로부터 외삽처리하여 각 동물의 비장당 평균을 낸다.
도 9는 51Cr 세포독성 분석의 결과를 도시한다. DNA 프라임 및 펩티드 부스팅과 면역화된 생쥐의 시험관내 자극 1주기 후 PRAME425 -433(서열 번호: 3), PSMA288-297(서열 번호: 4), NY-ESO-1157-165(서열 번호: 2) 및 SSX-241-49(서열 번호: 1)에 대한 CTL 반응의 결과를 나타낸다. 데이터는 다음과 같이 표시된다: x축은 효과기 대 표적 비; y축은 이에 상응하는 특이적 용리작용의 백분율이다.
도 10은 PP(PRAME 및 PSMA) 투약 및 NS(NY-ESO-1 및 SSX-2) 투약 2주기의 치료 처치에 따른 면역 반응을 도시함으로써 PRAME의 우위성을 입증한다.
다음 실시예는 본 발명의 바람직한 실시형태를 예시하기 위한 것이다. 당업자라면, 본 발명자가 발견한 방법을 입증하는 실시예에서 개시하는 방법이 본 발명의 실행에 있어 그 작용 효과를 우수하게 보여주고 따라서 바람직한 실행 방식을 구성하고 있음을 이해할 것이다. 한편, 본 명세서의 내용에 기초하여 당업자라면 본 발명의 범위 및 사상 내에서 특정한 실시형태를 다양하게 변화시켜도 유사한 결 과를 달성할 수 있을 이해할 것이다.
실시예
1
실험 절차
동물
인간 T 세포 에피토프에 대한 면역 반응은 고유의 MHC-제한 면역 탓에 초기의 비임상적 모델에서는 연구할 수 없으므로, 유전학적 조작을 거친 마우스 모델을 인간 모집단에서 자주 발현되는 인간 A*0201 유전자(Pascolo et al., 1997)의 발현을 위해 선택하였다. 면역 결핍 마우스들(이종이식 모델의 기초)와 대조적으로 상기 A*0201 형질전환 모델(HHD)은 면역 가능하므로 능동적 면역치료 기법의 평가할 수 있다.
따라서, 8주 내지 12주 연령의 암컷 H-2 제I류 음성(녹아웃) HLA-A2.1-형질전환 HHD 생쥐를 연구에 이용했다. 동물은 질병 부재 조건에서 사육했다.
방법
종양 관련 항원 멜란-A26-35(서열 번호: 9) 및 티로시나제369 - 377(서열 번호: 10)를 암호화할 2가 pSEM 플라스미드(무복제 재조합 DNA) 및 종양 관련 항원 SSX-241-49(서열 번호: 1) 및 NY-ESO-1157-165(서열 번호: 2)를 암호화할 pBPL 2가 플라스미드를 실시예 2 내지 6에서 Tc1(감마 인터페론 생성) 면역 반응을 프라임 처리하는 능력에 관하여 평가했다. 멜란-A26-35(A27Nva; ENvaAGIGILTV(서열 번호: 11)) 펩티드 유사체, 티로시나제369 -377(V377Nva; YMDGTMSQNva(서열 번호: 12)) 펩티드 유사체, NY-ESO-1157-165(L158Nva; C165V; S(Nva)LMWITQV(서열 번호: 6)) 펩티드 유사체 및 SSX-241-49(A42V; KVSEKIFY(서열 번호: 5)) 펩티드 유사체를 후속 부스팅 처리에 이용했다.
플라스미드는 임상 완충액(127mM NaCl, 2.5mM Na2HPO4, 0.88mM KH2PO4, 0.25mM Na2EDTA, 0.5% ETOH을 물에 용해하여 조제)에 용해하여 제형화했다. 멜란-A26-35(A27Nva)(서열 번호: 11) 유사체는 PBS에 1.0㎎/㎖ 농도로 용해하여 제형화했다. 마찬가지로, 티로시나제369 -377(V377Nva)(서열 번호: 12) 유사체는 PBS에 1.0㎎/㎖ 농도로 용해하여 제형화했고 SSX-241-49(A42V)(서열 번호: 5) 유사체도 PBS에 1.0㎎/㎖ 농도로 용해하여 제형화했다. NY-ESO-1157-165(L158Nva,C165V)(서열 번호: 6) 펩티드 유사체는 5% DMSO 함유 PBS에 용해하여 0.5㎎/㎖의 농도로 면역용으로 조제하였다. BD FACS 캘리버 유동 세포분석법을 이용하여 세포분석 데이터를 수득하고 림프구 모집단을 이용하여 CellQuest 소프트웨어를 통해 이를 분석하였다.
플라스미드 및 펩티드의
결절내
전달
투약 조제물을 제1일, 4일, 15일, 18일, 29일, 32일, 49일 및 53일에 양측 서혜부에 대해 결절내 주사로 투여했다. 마우스들을 이소플루란 흡입으로 마취시킨 후 멸균 환경에서 수술했다. 수술 준비가 갖추어지면, 서혜부 관절을 길이 0.5 내지 1cm로 절제하여 서혜부 림프절을 노출시켰다. 0.5㎖ 인슐린 주사를 이용하여, 최대 25㎕(1㎎/㎖ 용액내 25㎍)의 플라스미드나 펩티드를 우측 및 좌측 림프절 에 직접 주사했다. 절제부를 멸균 6.0 나일론 피부 봉합재로 봉합하였다.
플라스미드(
프라임
)/펩티드(
부스팅
) 면역 스케줄
3개 그룹의 암컷 HHD 동물을 상술한 바와 같이 양측의 서혜부 림프절에 대해pSEM/pBPL(100㎍/일)의 혼합물로 면역화 처리했다.
표 2(하기 참조)에서 보는 바와 같이, 제1군(n=10 마우스들)은 제1일, 4일, 15일, 18일, 28일, 32일, 49일 및 53일에 플라스미드 주사하고; 제2군 및 제3군(n=각 군당 25마리 마우스들)은 제1일, 4일, 15일 및 18일에 각각 플라스미드 주사했다.
제2군의 동물은 우측 림프절에 티로시나제 V377Nva(서열 번호: 12)(25㎍/일)펩티드를 좌측 림프절에 SSX-2 A42V(서열 번호: 5)(25㎍/일) 펩티드를 제28일, 32일, 49일 및 53일에 부스팅했다. 또한 표 2에서 보는 바와 같이, 제3군의 동물은 티로시나제 V377Nva(서열 번호: 12)(25㎍/일) 펩티드를 좌측 림프절에 SSX-2 A42V(서열 번호: 5)(25㎍/일) 펩티드를 제28일 및 32일에 부스팅하고, 이어서 우측 림프절에 NY-ESO-1 L158Nva, C165V(서열 번호: 6)(12.5㎍/일) 펩티드를 좌측 림프절에 멜란 A A27Nva(서열 번호: 11)(25㎍/일) 펩티드를 제49일 및 53일에 부스팅했다.
| 면역 스케줄 | |||||||
| 그룹 | N+ | 플라스미드(프라임) | 펩티드(부스팅) | ||||
| 플라스미드 | 일수 | 각 투약량 | 펩티드 및 림프절(R/L) | 일수 | 각 투약량 | ||
| 1 | 10 | pSEM+pBPL | 1,4,15,18,28,32,49,53 | 100㎍ | -- | -- | -- |
| 2 | 25 | pSEM+pBPL | 1,4,15,18 | 100㎍ | 티로시나제(R) | 28,32,49,53 | 25㎍ |
| SSX-2(L) | 28,32,49,53 | 25㎍ | |||||
| 3 | 25 | pSEM+pBPL | 1,4,15,18 | 100㎍ | 티로시나제(R) | 28,32 | 25㎍ |
| SSX-2(L) | 28,32 | 25㎍ | |||||
| NY-ESO-1(R) | 49,53 | 12.5㎍ | |||||
| 멜란-A(L) | 49,53 | 25㎍ | |||||
테트라머
분석
CD8+ 항원 특이적 T 세포수 계산은 제I류 MHC/펩티드 착염에 의해 T 세포 수용체(TCR)의 인지가 필요하다. 각각 특이적 펩티드에 결합 및 형광 단백질과 접합된 4개의 HLA MHC 제I류 분자의 착염으로 구성되는 제I류 MHC 테트라머를 이용하면 이를 달성할 수 있다. 테트라머 분석으로 특정 MHC 분자에 착화된 소정의 펩티드에 대해 특이적인 총 T세포 모집단의 정량분석이 가능하다. 유동 세포분석은 라벨화된 테트라머에 대한 적절한 T 세포 수용체에 대한 세포 결합을 정량 분석할 때 이용한다. 또한, 결합은 작용 경로에 의존하지 않으므로 모집단은 작용 상태와 무관하게 모든 특이적 CD8+ T-세포를 포함한다.
마지막 플라스미드(제25일) 및 펩티드 면역화 처리(제39일 및 60일) 7일 후, 상술한 플라스미드/펩티드 면역 스케줄에서와 같이 면역화된 동물에게서 CTL 반응을 측정했다. 밀도 원심분리후(Lympholyte Mammal, Cedarlane Labs) 단핵 세포를 말초 혈액에서 분리하고 HLA-A*0201 SSX-2(KASEKIFYV(서열 번호: 1))-PE MHC 테트라머(Beckman Coulter, T02001), HLLA-A*0201 NY-ESO(SLIMWITQC(서열 번호: 2))-APC MHC 테트라머(Beckman Coulter, T02001), HLA-A*0201 멜란 A(ELAGIGILTV(서열 번호: 9))-PE MHC 테트라머(Beckman Coulter, T02001), HLA-A*0201 티로시나제(YMDGTMSQV(서열 번호: 10))-APC MHC 테트라머(Beckman Coulter, T02001)를 이용하여 염색했다. 이들 세포를 다시 FITC 공액 래트 항 마우스 CD8a(Ly-2) 단클론 항체(BO Biosciences, 553031)로 공동 염색했다. 데이터는 BD FACS 캘리버 유동 세포분석법으로 수득하고, 림프구 모집단을 이용해서 CD8+ CTL 모집단 내의 테트라머 양성 세포의 백분을 계산하여 Celquest 소프트웨어로 수득 결과를 분석했다.
인터페론-γ(
IFN
-γ)
ELISpot
분석
세포독성 측정 대신, ELISPOT 분석에서 특이적 효과기에 의한 IFN-γ 생성을 측정하여 CD8+ CTL 반응을 평가했다. 이 분석에서 항원-표현 세포(anti-presenting cells, APC)는 마이크로 적정웰의 플라스틱면에 부동화 처리하고 효과기 세포를 다양한 효과기:표적 비로 첨가한다. 항원-특이적 효과기 세포의 APC 결합으로 효과기 세포로 IFN-γ를 포함하는 사이토킨의 생성을 촉발한다. 세포를 염색하여 세포내 IFN-γ의 존재 및 현미경으로 계수한 양성 염색점(스폿)의 갯수를 검출할 수 있다.
마취 동물의 비장을 제27일 및 62일에 분리하여 상술한 바와 같이 플라스미드/펩티드 면역 스케줄에 따라 처리했다. 밀도 원심분리(Lympholyte Mammal, Cedarlane Labs, Burlington, NC) 후 단핵 세포를 HL-1 배지에 재현탁했다. 비장세포(웰당 5×105, 또는 3×105 세포)를 10㎍의 멜란-A26-35(서열 번호: 9) 및 티로시나제369 -377(서열 번호: 10), SSX-241-49(서열 번호: 1) 및 NY-ESO-1157-165(서열 번호: 2) 천연형 펩티드로 96 웰 필터 막 플레이트의 3중웰에서 배양했다(Multiscreen IP 막 96-웰 플레이트, Millipore, Boston, MA). 시료는 반응 전개에 앞서 100%의 습도하에 5% CO2를 이용하여 37℃에서 42시간 동안 배양했다. 마우스 IFN-γ 피복 항체(IFN-γ 항체쌍, U-CyTech Biosciences, The Netherlands)를 비장세포 배양전 코팅제로 이용하였고, 이어서 바이오티닐레이트 검출 항체로 처리했다. U-CyTech에서 얻은 GABA 공액체 및 독자 기질을 IFN-γ 스폿 전개에 이용했다. 면역된 동물의 CTL 반응은 AID 인터내셔날 플레이트 판독기 위에서 IFN-γ 스폿 분석용으로 보상처리된 ELISpot 판독 소프트웨어 3.2.3 버전을 사용하여 전개한 뒤 24시간 후에 측정했다.
51
크롬
-방출 분석
크롬 방출 분석은 CTL 활성을 평가하기 위한 분석으로 잘 알려져 있다. 요약하면, 표면에 항원을 발현하는 표적 세포는 크롬(51Cr)의 방사선 동위원소로 표지화된다. 환자의 세포를 표적 세포와 혼합하고 수시간 동안 배양했다. 항원-발현 세포의 용리 작용으로 51Cr을 배지에 방출한다. 세포 특이적 용리 작용은 환자의 효과기 세포의 존재하에 또는 없는 조건에서 원하는 항원 또는 대조군 항원을 발현하는 표적 세포의 용리 작용을 서로 비교하여 계산하며 보통 특이적 용리율을 %로 표현한다.
실시예
2
펩티드
부스팅전
플라스미드
PSEM
및
PBPL
을 이용한 면역화
이 연구의 목적은 플라스미드 pSEM 및 pBPL 에 의한 면역화가 4개의 종양 관련 항원, 즉, SSX-241-49(서열 번호: 1), NY-ESO-1157-165(서열 번호: 2), 멜란-A26-35(서열 번호: 9) 및 티로시나제369 -377(서열 번호: 10)에 대한 4가 반응을 유발할 수 있는지 확인하기 위한 것이다.
3개 그룹으로 나눈, 8주 내지 12주 연령의 암컷 HHD 동물(H-2 제I류 음성(녹아웃) HLA-A2.1-형질전환 HHD 마우스들)의 양측 서혜부 림프절에 pSEM/pBPL(100㎍/일)의 혼합물을 면역시켰다. 제1군(n=10 마우스들)은 제1일, 4일, 15일, 18일, 28일, 32일, 49일 및 53일에 플라스미드 주사하고; 제2군 및 제3군(n=각 그룹당 25마리의 마우스)은 제1일, 4일, 15일 및 18일에 각각 플라스미드 주사했다(표 2, 상기 참조). 제25일에, 면역된 동물로부터 혈액을 수거하고 CD8+ T 세포 분석은 본 명세서에서 언급한 바와 같이 테트라머 분석을 이용하여 실시하였다. 이 반응을 한배 태생의 새끼 대조군(n=5)과 비교했다.
도 1은 펩티드 부스팅에 앞서 pSEM 및 pBPL의 2가 플라스미드(n=60)의 혼합물을 4회 주사하여 프라임 처리된 동물로부터 얻은 테트라머 데이터를 나타내며, 이는 멜란-A26-35(서열 번호: 9)/티로시나제369 -377(서열 번호: 10) 및 NY-ESO-1157-166(서열 번호: 2)/SSX-241-49(서열 번호: 1)를 각각 암호화하기 위해 설정한 것이다. 일일 100㎍의 약량으로 pSEM/pBPL 플라스미드 혼합물을 4회 주사하여 프라임 처리한 동물은 3가 SSX-2, NY-ESO-1 및 멜란-A 반응을 나타냈으나(제1군 내지 3군, n=60 총수), 테트라머 분석에서 측정시 티로시나제 특이적 CTL은 나타내지 않았다. 또한, 도 1에 나타낸 바와 같이, 멜란-A 및 NY-ESO-1는 2가 플라스미드 pSEM 및 pBPL 각각에 의해 발현된 우성의 에피토프로 나타났다.
실시예
3
플라스미드
프라임
처리된
SSX
-2/
티로시나제를
이용한 개별 면역
플라스미드 프라임 후 준우성 에피토프 펩티드로 부스팅하여 3가 면역 반응을 달성하기에 충분한지 평가했다. 제2군의 동물을 준우성 에피토프로 부스팅하고 티로시나제 V377Nva(서열 번호: 12) 및 SSX-2 A42V(서열 번호: 5) 펩티드 유사체 및 면역 반응을 새끼 대조군과 비교했다.
동물은 제1일, 4일, 15일 및 18일(100㎍/일)에 pBPL+pSEM의 플라스미드 혼합물로 양측 서혜부 림프절에 프라임하고, 이어서 제28일 및 32일(25㎍/일)에 좌측 림프절에 SSX-241-49(서열 번호: 1)를 우측 림프절에 티로시나제369 -377 V377Nva(서열 번호: 12)을 펩티드 부스팅했다. 마지막 펩티드 주사뒤 7일 후인 제39일에 면역된 동물로부터 혈액을 수거하고, 본 명세서에서 기술한 바와 같이 테트라머 분석을 통해 CD8+ T 세포 분석을 실시했다.
도 2는 3마리의 대표 면역 동물에 관하여, 티로시나제 및 SSX-2 펩티드 부스팅 후 제39일에 말초혈액으로부터 테트라머 반응의 결과를 테트라머 유동 세포분석법으로 선별된 새끼 대조군과 비교하여 도시한다. 예를 들어 2번 동물은 SSX-2(5.8%), NY-ESO-1(4.1%), 티로시나제(8.7%) 및 멜란 A(10.8%)에 대한 특이적 테트라머 반응을 나타냈다. 이들 데이터를 함께 취합하면 총 CD8 T 세포 레퍼터리의 29.4%로 구성된 특이적 CTL 반응을 보여준다. 또한, 이 결과는 플라스미드 프라이밍후 준우성 에피토프 펩티드 단독의 부스팅이 4가 면역 반응을 달성하는데 충분하였다는 사실을 보여준다.
실시예
4
플라스미드
프라임
처리된
SSX
-2/
티로시나제를
이용한 면역화
보다 균형적인 4가 면역 반응을 생성하기 위하여, 준우성 펩티드 에피토프 티로시나제3 69 -377(V377Nva)(서열 번호: 12) 및 SSX-241-49(A42V)(서열 번호: 5)(제2군 및 제3군)를 동물에게 부스팅하고 이에 따른 면역 반응을 pSEM/pBPL 플라스미드의 혼합물(제1군, n=10)로 부스팅한 동물 또는 새끼 대조군(n=10)과 비교했다.
멜란-A/티로시나제, SSX2/NY-ESO-1 테트라머 분석(상술한 바와 같음)은 마지막 펩티드 주사뒤 7일 후인 제39일에 실시하였다. 제1군은(n=10) pBPL+pSEM의 플라스미드 혼합물을 투여하여 제1일, 4일, 15일 및 18일(100㎍/일)에 프라임한 뒤 제28일 및 제32일(100㎍/일)에 pBPL+pSEM의 플라스미드 혼합물을 양측 서혜부 림프절에 부스팅했다. 제2군 및 제3군의 동물들(n=50)은 제1일, 4일, 15일 및 18일(100㎍/일)에 pBPL+pSEM의 플라스미드 혼합물을 양측 서혜부 림프절에 프라임한 뒤, 다시 왼쪽 림프절에 SSX241 -49 A42V(서열 번호: 5)를 오른쪽 림프절에 티로시나제3 69 -377 V377Nva(서열 번호: 12)를 제28일 및 32일(25㎍/일)에 각각 펩티드 부스팅하였다.
멜란 A, 티로시나제, SSX-2 및 NY-ESO-1에 관한 평균 테트라머 값을 무처리된 한배의 새끼 대조군(n=5)과 비교하여 평균치 ± SEM으로 나타내었다. 도 3은 제2군 및 3군(n=50)의 티로시나제 및 SSX-2 부스팅 전 및 후의 면역 반응을 제1군(n=10, 플라스미드 단독)의 결과와 비교하여 나타낸다.
플라스미드 부스팅 후에, 사전 면역 반응은 도 1에서 보는 바와 같이 멜란-A 및 NY-ESO-1 특이성을 나타냈다(제1군). 이에 반하여, 플라스미드 혼합물로 프라임 처리되고 준우성 펩티드로 부스팅한 동물은 티로시나제 반응이 2배, SSX-2 반응이 2.5배 상승하였고, 따라서 도 3에서 보는 바와 같은 균형적인 4가 면역 반응을 달성했다.
따라서, 이 데이터는 준우성 에피토프 펩티드인 티로시나제369 -377(V377Nva)(서열 번호: 12) 및 SSX-241-49(A42V)(서열 번호: 5)로 부스팅함으로써 균형적인 4가 면역 반응을 달성하였음을 보여준다.
실시예
5
1차 및 2차 펩티드
부스팅의
IFN
-γ
ELISPOT
분석
상기 실시예에서 얻은 테트라머 데이터는 제2군에서 선별된 동물의 펩티드 부스팅후 인터페론 감마 생성(IFN-γ) 세포의 발생빈도를 측정함으로써 확인하였다. 1차 펩티드 부스팅(도 4a) 및 2차 펩티드 부스팅(도 4b) 후에 IFN-γ ELISpot 분석을 실행했다.
본 명세서에서 기술한 바와 같이 ELISPOT 분석은, 마지막 펩티드 부스팅 뒤 9일 후인 제41일에 대표 동물을 희생시켜 실행했다. 제1군 동물(n=3 희생수)을 제1일, 4일, 15일 및 18일(100㎍/일)에 pBPL+pSEM의 혼합물로 프라임한 뒤 제28일 및 제32일(100㎍/일)에 pBPL+pSEM의 플라스미드 혼합물을 양측 서혜부 림프절에 부스팅했다. 제2군(n=6 희생수)은 제1일, 4일, 15일 및 18일(100㎍/일)에 pBPL+pSEM의 플라스미드 혼합물을 양측 서혜부 림프절에 프라임한 뒤, 다시 왼쪽 림프절에 SSX241 -49 A42V(서열 번호: 5)를 오른쪽 림프절에 티로시나제369 -377 V377Nva(서열 번호: 12)를 제28일 및 32일(25㎍/일)에 각각 펩티드 부스팅하였다. 비장당 항원 특이적 (멜란-a, 티로시나제, SSX2 및 NY-ESO-1) 인터페론-γ스폿 형성 세포를 무처리된 한배의 새끼 대조군(n=3)의 결과와 비교했다(도 4a).
2차 펩티드 부스팅 뒤, ELISPOT 분석은 제2 펩티드 부스팅 뒤 10일 후인 제63일에 대표 동물을 희생시켜 실시했다. 제1군 동물(n=3, 희생수)은 제1일, 4일, 15일, 18일, 28일, 32일, 49일 및 53일(100㎍/일)에 pBPL+pSEM의 혼합물을 양측 서혜부 림프절에 주사했다. 제2군 동물(n=4, 희생수)은 제1일, 4일, 15일 및 18일(100㎍/일)에 pBPL+pSEM의 혼합물을 양측 서혜부 림프절에 주사한 뒤 제28일, 32일, 49일 및 53일(25㎍/일)에 SSX241 -49 A42V를 좌측 림프절에 또한 티로시나제369 -377 V377Nva를 우측 림프절에 펩티드 부스팅했다. 제3군 동물(n=4, 희생수)은 제1일, 4일, 15일 및 18일(100㎍/일)에 pBPL+pSEM의 혼합물을 양측 서혜부 림프절에 주사한 뒤 제28일 및 32일(25㎍/일)에 SSX241 -49 A42V(서열 번호: 5)를 좌측 림프절에 또한 티로시나제369 -377 V377Nva(서열 번호: 12)를 우측 림프절에 펩티드 부스팅하고, 다시 (제49일 및 53일에 12.5㎍/일)에 NY-ESO-1156-165 L158Nva(서열 번호: 6)를 좌측 림프절에, 또한 멜란 A26-35 A27Nva(서열 번호: 11)를 우측 림프절에 2차 펩티드 부스팅했다. 비장당 항원 특이적(멜란-A, 티로시나제, SSX2 및 NY-ESO-1) 인터페론-γ스폿 형성 세포를 무처리된 한배의 새끼 대조군의 결과와 비교했다(도 4b).
도 4a는 티로시나제 및 SSX-2 펩티드(제2군, n=6)가, 플라스미드 단독 처리된 동물(제1군, n=3)보다 IFNγ 생성 세포가 2 내지 8배 더 큰 3가 반응을 나타냈다는 결과를 보여준다. 또한, 동물에 대해 준우성 에피토프 펩티드인 SSX-2 및 티로시나제(제2군) 또는 우성 에피토프 펩티드인 NY-3SO-1 및 멜란 A(제3군)으로 2차 부스팅 처리를 한 동물의 경우, pSEM 및 pBPL 플라스미드 조합체 단독을 프라임 및 부스팅 처리한 동물(제1군)과 달리 4가 반응을 유지했음을 입증하였다(도 4b). 4가지 항원에 대한 더욱 균형적인 면역 반응은, 준우성 에피토프 유사체 SSX-2 및 티로시나제로 부스팅하면 간단히 달성할 수 있었다.
상술한 실시예(2 내지 5)로부터 얻은 결과를 종합하면, 본 발명의 NS 및/또는 MT 방식으로 면역시킨 동물에게서 4가 면역 반응을 성공적으로 일으킬 수 있음을 알 수 있다. 새끼 동물 대조군 또는 pSEM/pBPL 플라스미드 혼합물 단독 부스팅한 동물(제1군)에서의 면역 반응을 제28일 및 제32일에 준우성 펩티드 에피토프 티로시나제 및 SSX-2으로 부스팅한 동물(제2군 및 제3군)의 경우와 비교하면, 상기 방식으로 면역된 동물에게서 4가 면역 반응이 성공적으로 달성되었음을 확인할 수 있었다. 제3군(n=25)을 우성 에피토프 펩티드인 멜란 A26-35(A27Nva)(서열 번호: 11) 및 NY-3SO-1157-165(L158Nva, C165V)(서열 번호: 6)로 부스팅한 경우 및 제2군(n=25)을 준우성 에피토프 펩티드인 티로시나제369 -377(V377Nva)(서열 번호: 12) 및 SSX-241-49(A42V)(서열 번호: 5)로 부스팅한 경우 제49일 및 53일에 2차 펩티드 부스팅하여 유사한 결과를 달성했다.
실시예
6
인간 흑색종에 대한 면역 반응의 생성
카르복시-플루오레신 디아세테이트 숙신이미딜 에스테르(CFSE) 분석은 세포를 형광 라벨화하는 간단하고 효과적인 방법을 제공한다. 이 방법은 항원 특이적 및 비특이적 T 세포 증식의 분석을 가능하게 한다.
CFSE 방법은 면역 프로토콜의 효능을 평가하는 데 이용했다. 이 테트라머 레벨에 근거하여 선택된 동물을 인간 CFSE 표지화된 흑색종 종양세포를 폐에서 제거할 수 있는 능력에 대해 분석했다.
제61일에 각 그룹에서 두 마리(제1군, 2군 및 3군)를 고 테트라머 레벨에 근거하여 선택한 뒤, CFSE 표지화된 종양 세포를 정맥 주사했다. 더 구체적으로, SSX-2, NY-ESO-1, 티로시나제 및 멜란 A에 대하여 4가지의 종양 관련 항원을 발현하는 인간 624.38 배양된 흑색종 종양세포(10×106)를 CFSEhi(Vybrant CFDA SE 세포 트레이서 키트, Molecular Probes) 형광체(15분간 1.0μM)로 염색하고, 이것을 제1군, 2군 또는 3군의 면역된 마우스들(N=2/군) 또는 CFSElo 형광체(0.1μM)로 염색한 무처리된 새끼 HHD 마우스들(N=2)에게, 등량비의 624.28 HLA-A2 음성 대조군 세포와 함께 주사했다. 이 동물에게 2시간 후 표적 세포를 2차 주사했다.
마우스들을 희생시켜 폐조직을 제거하고 유동 세포분석법을 통해 CFSElo 형광체(FL1 채널)에 대비한 CFSEhi를 측정함으로써, 표적 세포 주사 뒤 14시간 후인 제62일에 인간 표적 세포의 소거율을 측정했다. 특이적 용리작용의 백분율을 계산하기 위한 식은 다음과 같다.
[면역시의 (1-CFSEhi의 백분율(%)/CFSElo의 백분율)-무처리 대조군의 (1-CFSEhi의 백분율/CFSElo의 백분율)] × 100
도 5는 무처리 대조군(상부 좌측 패널), 4가 면역성을 가진 2마리(상부 우측 및 하부 좌측 패널) 및 멜란 A에 대한 1가 반응을 나타내는 1마리(하부 우측 패널)로부터 얻은 테트라머 레벨, IFNγ ELISPOT 결과 및 2개의 정점 CFSE 히스토그램을 도시한다. 예상한 바와 같이, 무처리 대조군은 1가 면역 반응을 보이는 동물과 마찬가지로 양측 히스토그램을 등량비로 유지함으로써, 표적 세포를 소거할 수 없는 것으로 확인되었다. 이와 대조적으로, 상기 4가지 항원에 대한 면역 반응을 나타내는 동물은 특이적 용리 작용율이 각각 71% 및 95%로서 인간 흑색종 종양 표적 세포를 대폭 소거할 수 있는 것으로 나타났다.
실시예
7
초기 및 확장 프로토콜에 의한 면역 반응의 발생
플라스미드 D1(pRP12) 및 D2(pBPL)로 면역화시 4가지 종양 관련 항원 즉: PSMA288-297(ESQ ID NO.4), PRAME425 -433(서열 번호: 3), SSX-241-49(서열 번호: 1) 및 NY-ESO-1157-165(서열 번호: 2)에 대한 HHD-1 마우스들의 4가 반응을 유발할 수 있는지를 평가했다.
2가지 상이한 부스팅 기법을 원하는 면역 반응을 향상시키는 능력에 관하여 시험했다. 1차적 접근("초기" 프로토콜)은 부스팅 절차시 각 펩티드의 단일 주사를 활용하였다. 2차적 접근("확장" 프로토콜)은 각 펩티드를 2회 주사하여 시험한 것이다. 각 펩티드의 3가지 투약 레벨(저, 중, 고)을 투약량 대 반응의 관계를 결정하고 최적의 펩티드 농도를 규정하는데 도움을 주기 위하여 시험했다.
각각 10마리의 암컷 HHD-1 동물로 이루어진 6개의 그룹을, 플라스미드 D1 및 D2를 직접 양측의 서혜부 림프절에 주사하여 면역했다. 제1군 내지 3군의 동물을 "초기" 프로토콜을 이용하여 부스팅하고 제4군 내지 6군의 동물은 "확장" 프로토콜을 이용하여 부스팅했다.
"초기" 프로토콜 상의 동물(제1군 내지 3군, 그룹당 n=10)은, 제1일, 4일, 15일 및 18일에 D1(pRP 12(서열 번호: 21)) 플라스미드를 우측 서혜부 림프절에 4회 주사하고(1회 투약당 100㎍), D2(pBPL(서열 번호: 20) 플라스미드를 좌측 서혜부 림프절에 4회 주사하였다(1회 투약당 100㎍). 이어서, 제29일에는 우측 림프절에 PSMA288 -297(I297)(서열 번호: 8) 및 좌측 림프절에 SSX-241-49(A42V)(서열 번호: 5)를, 또한 제32일에는 우측 림프절에 PRAME425 -433(L426Nva, L433Nle)(서열 번호: 7) 및 좌측 림프절에 NY-ESO-1157-165(L158Nva, C165V)(서열 번호: 6)을 각각 부스팅했다.
"확장" 프로토콜 상의 동물(제4군 내지 6군, 그룹당 n=10)은 제1일, 4일, 15일 및 18일에 D1(pRP 12(서열 번호: 21)) 플라스미드를 우측 서혜부 림프절에 4회 주사하고(1회 투약당 100㎍), D2(pBPL(서열 번호: 20) 플라스미드를 좌측 서혜부 림프절에 4회 주사하였다(1회 투약당 100㎍). 이어서, 제29일 및 32일에는 우측 림프절에 PSMA288 -297(I297)(서열 번호: 8) 및 좌측 림프절에 SSX-241-49(A42V)(서열 번호: 5)를, 또한 제43일 및 46일에는 우측 림프절에 PRAME425 -433(L426Nva, L433Nle)(서열 번호: 7) 및 좌측 림프절에 NY-ESO-1157-165(L158Nva, C165V)(서열 번호: 6)를 각각 부스팅했다.
마지막 펩티드 부스팅뒤 7일 후에 상기 두 프로토콜에서 각 그룹으로부터 혈액을 채취하고, 테트라머 분석을 이용하여 CD8+ T 세포 분석을 실행하였다 (도 6). 이 반응을 무처리된 한배의 새끼 대조군 마우스들(n=5)과 비교하였다. SSX-2, NY-ESO-1, PRAME 및 PSMA 테트라머 값을 저, 중 및 고 펩티드 부스팅으로 구성된 초기 및 확장 프로토콜과 비교하여 도 6에 나타낸다.
D1 및 D2 플라스미드를 4회 주사하여 프라임 처리하고 이어서 펩티드 유사체인 PSMA, PRAME, NY-ESO-1 및 SSX-2로 부스팅한 동물은, 테트라머 분석으로 평가한 바와 같이(도 6), 상기 4가지 항원에 대해 면역 반응을 나타내었으며, 이는 PRAME 및 PSMA에 대한 면역 반응에 의해 우성화되었기 때문이다. 또한, 상기 면역화 기법으로 유발된 4가 면역 반응은 각각의 동물에게서 입증되었다(도 7). 상기 반응은 부스팅 방식(초기 프로토콜 대 확장 프로토콜)과 무관한 것으로 관측되었다. 또한, 각 치료 프로토콜에서 고 투약량 그룹(25㎍ 펩티드)이 가장 큰 반응율을 나타내긴 했지만, 투약량과 반응간의 뚜렷한 관계는 확인되지 않았다. 또한, 테트라머 데이터는 PRAME 및 PSMA가 동물 면역화에 따라 우수한 에피토프인 것을 나타냈다.
실시예
8
초기 대 확장 프로토콜에 의한 면역 반응의
IFN
-γ
ELISPOT
분석
테트라머 분석으로 관측된 결과를 확인하기 위하여, 인터페론-γ(IFN-γ) ELISpot 분석을 시행했다. 실시예 7에서의 각 그룹에서 취한 동물을 마지막 펩티드를 부스팅한 뒤 22일후 희생시키고, IFN-γ ELISPOT 분석을 목적으로 절제하였다.
마취된 동물로부터 제68일에 비장을 분리하고, 밀도 원심분리(Lympholyte Mammal, Cedarlane Labs, Burlington, NC)후 단핵 세포를 HL-1 배지에 재현탁했다. 비장세포(웰당 3×105, 또는 1.5×105 세포)를 10㎍의 PSMA288 -297(서열 번호: 4), PRAME425 -433(서열 번호: 3), SSX-241-49(서열 번호: 1) 또는 NY-ESO-1157-165(서열 번호: 2) 천연형 펩티드로 96 웰 필터 막 플레이트의 3중웰에서 배양했다(Multi-screen IP 막 96-웰 플레이트, Millipore, MA). 시료는 반응 전개에 앞서 100%의 습도하에 5% CO2를 이용하여 37℃에서 42시간 동안 배양했다. 마우스 IFN-γ 피복 항체(IFN-γ 항체쌍, U-CyTech Biosciences, The Netherlands)를 비장세포 배양전 코팅제로 이용하였고, 이어서 바이오티닐레이트 검출 항체로 처리했다. U-CyTech에서 얻은 GABA 공액체 및 독자 기질을 IFN-γ 스폿 전개에 이용했다. 면역된 동물의 CTL 반응은, AID 인터내셔날 플레이트 판독기 위에서 IFN-γ 스폿 분석용으로 보상처리된 ELISpot 판독 소프트웨어 3.2.3 버전을 사용하여 전개한 뒤 24시간 후에 측정했다.
도 7에 나타낸 IFN-γ ELISPOT 결과는 테트라머 데이터(도 6)과 상관 관계가 있으며, "초기" 치료 프로토콜에 유발된 PRAME425 -433(서열 번호: 3), PSMA288 -297(서열 번호: 4), SSX-241-49(서열 번호: 1) 및 NY-ESO-1157-165(서열 번호: 2)에 대한 활발한 면역 반응을 확인할 수 있다. IFN-γ ELISPOT 분석에 따르면 "확장" 프로토콜은 상기 "초기" 프로토콜을 능가할 만한 뚜렷한 장점을 제공하는 것으로 나타나지 않았다.
실시예
9
PP
/
NS
치료 방식에 의해
발생된
4가 면역 반응
준우성 에피토프인 PSMA 및 SSX-2를 이용한 1차 부스팅 및 우성 에피토프인 PRAME 및 NY-ESO-1를 이용한 후속의 부스팅에 의해 4가 면역 반응이 유발될 수 있는지를 평가하였다. 제1군의 대표 동물("초기 프로토콜", 고투약량)에게, 제1일, 4일, 15일 및 18일에 D1(pRP 12(서열 번호: 21)) 플라스미드를 우측 서혜부 림프절에 4회 주사하고(1회 투약당 100㎍), D2(pBPL(서열 번호: 20) 플라스미드를 좌측 서혜부 림프절에 4회 주사하였다(1회 투약당 100㎍). 이어서, 제29일에는 우측 림프절에 PSMA288 -297(I297V)(서열 번호: 8) 및 좌측 림프절에 SSX-241-49(A42V)(서열 번호: 5)를, 또한 제32일에는 우측 림프절에 PRAME425 -433(L426Nva, L433Nle)(서열 번호: 7) 및 좌측 림프절에 NY-ESO-1157-165(L158Nva, C165V)(서열 번호: 6)를 각각 부스팅했다. 이 데이터(도 8)에서 2가지 개별 분석, 즉 테트라머 및 ELISpot 분석을 통해 측정된 4가 면역 반응을 나타낸다.
실시예
10
PRAME
,
PSMA
,
NY
-
ESO
및
SSX
-2에 대한
CTL
활성을 측정하기 위한
51
크롬
-방출 분석
면역된 마우스들에 있어서 DNA 프라임 및 펩티드 부스팅과 1주기의 시험관내 자극처리후, PRAME425 -433(서열 번호: 3), PSMA288 -297(서열 번호: 4), NY-ESO-1157- 165서열 번호: 2), 및 SSX-241-49(서열 번호: 1)에 대한 CTL 반응을 51Cr 세포독성 분석법을 이용하여 평가했다. 펩티드 면역 처리 종료 22일후 면역된 마우스(N=6)로부터 수득된 비장세포를 체외 자극하여 CTL을 일으켰다.
요약하면, 마우스들을 희생시켜 비장을 분리했다. 비장을 균질화한 후 세포 현탁물을 염색하여 단일세포 현탁액을 얻었다. 5×106 세포/웰의 양을 24웰 조직 배양 플레이트에 펼치고 1.5×106 펩티드-펄스처리, γ-조사 및 LPS(당다당류) 처리된 B 세포를 각 플레이트 첨가했다. 마우스 재조합 IL-2를 1ng/㎖ 농도로 추가하였다. 세포는 PRAME 그룹은 4일간, PSMA, SSX-2 및 NY-ESO-1 그룹 각각에 대해서는 6일간 배양했다.
체외 자극후, CTL을 플레이트에서 수거하여 세척한 후, 다시 웰당 총 100㎕에서 106, 3.3×105 및 1.1×105 세포/웰의 농도로 96-웰 둥근 바닥 마이크로 적정 분석 플레이트에 옮겨 담았다. T2 세포를 51Cr로 표지화하고 각각의 펩티드(SSX-2, NY-ESO-1, PSMA 또는 PRAME)를 20㎍/㎖로 이용하여 37℃에서 1.5 시간 동안 펄스처리했다. 배양 후, 세포를 세척 및 재현탁했다. 10,000개의 51Cr-라벨화 및 펩티드 펄스화된 T2 세포를 각 웰에 첨가했다. 세포를 다시 37℃에서 4시간 동안 배양했다.
배양 후, 상청액을 수득하여 감마 계수기로 세포 활성을 3개의 시료에 대해 측정했다. 웰의 각 복제물에 대한 평균 cpm을 이용하여 효과기 세포의 각 농도에 대해 보정된 용리율을 계산하였다(도 8). 특이 용리율은 다음의 식에 따라 계산하였다.
방출율 = 100 × (실험적 방출-자발적 방출)/(최대 방출-자발적 방출)
데이터는 다음과 같다: x축은 효과기 대 표적 상대비이며 y축은 이에 대응하는 특이 용리율을 나타낸다.
실험 결과(도 8)는 표적인 PRAME425 -433(서열 번호: 3)(패널 1), PSMA288 -297(서열 번호: 4)(패널 2), NY-ESO-1157-165(서열 번호: 2)(패널 3) 또는 SSX-241-49(서열 번호: 1)(패널 4) 펩티드로 펄스처리된 T2 세포에 대하여, 각 그룹에서 얻은 CTL에 관한 51크롬 방출 분석(CRA) 데이터를 보여준다. 특이 용리값을 펄스처리되지 않은 T2 대조군 세포와 비교했다. ELISA 분석(데이터는 표시생략) 결과는, PRAME 그룹의 면역성이 매우 커서 항원-유발된 세포 사멸을 피할 수 있으며 PRAME 그룹에 대한 CRA는 4일간의 IVS 프로토콜에 따른다는 것을 보여주었다. PRAME425 -433(서열 번호: 3), PSMA288 -297(서열 번호: 4), SSX-241-49(서열 번호: 1) 및 NY-ESO-1157-165(서열 번호: 2)에 대한 CTL 반응은 51Cr 세포독성 분석법으로 평가한 바와 같이 모든 그룹에서 유발되었다. 이들 CTL는 펩티드 없이는 T2 대조군 세포에 대한 효과가 없다. 그 결과, 면역된 마우스들에서 분리된 CTL에 의한 T2 표적 세포 용리가 펩티드 특이성을 갖는 것이 입증되었다. "초기" 프로토콜과 비교하여, "확장" 프로토콜은 용리율을 현저히 개선하지 못하였으며, 이는 "초기" 프로토콜이 다수의 항원에 대한 실질적인 면역 반응을 유발하기에 충분하다는 것을 제시한다. 또한, CRA 분석의 감지도 증가 때문에, 각 그룹에서 얻은 특이적 NY-ESO-1 반응은 테트라머 및 ELISPOT 분석과 비교할 때 훨씬 뚜렷했다.
실시예
11
복수의 치료주기의 이용
플라스미드 D1(pRP12)(서열 번호: 21) 및 D2(pBPL)(서열 번호: 20)로 면역화시, 1회 이상의 치료주기 후 4가지 종양 관련 항원, 즉, PSMA288 -297(서열 번호: 4), PRAME425 -433(서열 번호: 3), SSX-241-49(서열 번호: 1) 및 NY-ESO-1157-165(서열 번호: 2)에 대한 HHD-1 마우스들의 활성적 면역 반응을 유지할 수 있는지 평가했다.
수컷 및 암컷 HHD-1 마우스들에 대해, 양측 서혜부 림프절에 플라스미드 D1 및 D2을 직접 주사한 뒤 PSMA288 -297(서열 번호: 4), PRAME425 -433(서열 번호: 3), SSX-241-49(서열 번호: 1) 및 NY-ESO-1157-165(서열 번호: 2)로 펩티드 부스팅하여 면역화 처리했다. 동물은, 제1일, 4일, 15일 및 18일에 D1(pRP 12(서열 번호: 21)) 플라스미드를 우측 서혜부 림프절에 4회 주사하고, D2(pBPL(서열 번호: 20) 플라스미드를 좌측 서혜부 림프절에 4회 주사하였다. 이어서, 제29일에는 우측 림프절에 PSMA288 -297(I297V)(서열 번호: 8) 및 좌측 림프절에 SSX-241-49(A42V)(서열 번호: 5)를, 또한 제32일에는 우측 림프절에 PRAME425 -433(L426Nva, L433Nle)(서열 번호: 7) 및 좌측 림프절에 NY-ESO-1157-165(L158Nva, C165V)(서열 번호: 6)를 각각 부스팅했다. 14일간의 휴지기를 거친 후 2차 프라임(플라스미드)/부스팅(펩티드) 치료주기를 반복했다.
동물에 대해, 플라스미드 비히클(N=16마리/그룹); 펩티드 비히클(N=16마리/그룹); 고약량 투약시의 플라스미드(총 투약량 400㎍)(N=16마리/그룹); 고약량 투약시의 펩티드(총 투약량 25㎍)(N=16마리/그룹); 고약량 투약시의 플라스미드(총 투약량 400㎍) + 고약량 투약시의 펩티드(총 투약량 5㎍)(N=16마리/그룹); 저약량 투약시의 플라스미드(총 투약량 100㎍) + 저약량 투약시의 펩티드(총 투약량 25㎍)(N=14마리/그룹); 또는 고약량 투약시의 플라스미드(총 투약량 400㎍) + 고약량 투약시의 펩티드(총 투약량 5㎍)(N=16마리/그룹)를 주사하고 이를 무처리 대조군(N=7마리/그룹)과 비교했다.
각 그룹의 동물을 마지막 펩티드 부스팅 뒤 14일 후에 희생하고 비장을 제거하여 IFN-γ ELISPOT 분석했다(도 9).
이 데이터로부터 동물에서 PP(PRAME 및 PSMA) 방식 및 NY(NY-ESO-1 및 SSX-2) 방식에 의한 2회의 치료주기에 따라 활성적인 면역 반응을 일으킬 수 있는 것으로 확인되었다.
실시예 7 내지 11에서 얻은 데이터는, PP/NS 치료 면역 프로토콜에 따르면 다수의 T 세포에서 실질적으로 항체 반응이 일어나지 않음을 보여준다. 1회의 치료 주기 완료후 ELISA 분석시 펩티드 특이 항체는 면역된 마우스들의 혈청에서 검출되지 않았다(데이터 표시 생략). 또한 항원 특이 T 세포 반응은, PRAME 및 PSMA로 개시하고 SSX-2 및 NY-ESO-1로 마무리함으로써, 효과기 및 기억 T 세포(IFN 사이토킨 생성, 세포독성 및 테트라머 결합)에 수반되었다. 또한 상기 결과에 따라, 치료 프로토콜은 T 세포 면역성 향상을 달성하지 못하며 한편으로, NY-ESO-1 또는 준우성 에피토프에 대한 면역성 향상을 위해서는 치료 주기 내에 우성 펩티드에 대한 준우성 펩티드로의 재배열이 필요한 것으로 지적되었다.
본 출원에서 상술한 내용에 더하여, 다음과 같은 공지 문헌의 내용은 본 명세서에 참고로 반영되어 있다. 제I류 MHC 제한 T 세포 반응 특히, 항원에 대한 효과기 및 기억 CTL 반응을 유발, 동반이행, 유지, 조정 및 증폭함에 있어서 상술한 유사체를 이용하는 바람직한 방법은 다음과 같은 출원에 공지되어 있다: 미국 특허 제6,994,851호(2/7/06) 및 제6,977,074호(12/20/2005), 양측 공히 "CTL 반응의 유발 방법"을 발명의 명칭으로 한다; 2003년 6월 17일자 미국 가출원 제60/479,393호, 발명의 명칭 "제I류 MHC 제한 면역 반응을 제어하는 방법"; 또한, 미국 특허출원 제10/871,707호(공개 번호 2005 0079152) 및 2004년 12월 29일자 가출원 제60/640,402호, 양측 공히 "예방 또는 치료 목적의 MHC 제I류 제한 에피토프에 대한 면역 반응의 유발, 향상 및 유지 방법"을 발명의 명칭으로 한다. 유사체는 또한 후속의 최적화된 유사체를 수득하기 위한 연구에 이용할 수 있다. 다수의 하우스키핑 에피토프가 공지 문헌에 개시되어 있다: 2002년 4월 4일자 미국 출원 제10/117,937호(공개 번호 20030220239 A1), 제10/657,022호(20040180354) 및 2003년 9월 5일자 PCT 출원 제PCT/US2003/027706호(공개 번호 WO 04022709 A2); 2001년 4월 6일자 미국 가출원 제60/282,211호; 2001년 11월 7일자 제60/337,017호; 2002년 3월 7일자 제60/409,123호, 이들 공히 "에피토프 서열"을 발명의 명칭으로 한다. 유사체는 상술한 공지의 출원에 개시된 다양한 방식에 이용될 수 있다. 즉시 유사체를 함유 또는 포함하는 에피토프 클러스터는 공지 문헌에 더 상세히 기술되어 있다: 2000년 4월 28일자 미국 출원 제09/561,571호, 발명의 명칭 "에피토프 클러스터". 즉시 유사체를 사용 및 전달하는 방법은 공지 문헌에 개시되어 있다: 미국 특허출원 제09/380,534호, 특허 제6977074호(2005년 12월 20일 등록) 및 국제 출원 제PCT/US98/14289호(공개 번호 WO 9902183 A2), 이들 공히 "CTL 반응 유발 방법"을 발명의 명칭으로 한다. 면역요법을 위한 유익한 에피토프 선별 원리은 공지 문헌에 개시되어 있다: 2000년 4월 28일자 미국 특허출원 제09/560,465호, 2001년 12월 7일자 제10/026,066호(공개 번호 200301215425 A1), 2001년 11월 7일자 제10/005,905호, 이들 공히 "항원 표현 세포내의 에피토프 동기화"; 미국 특허(2005년 3월 1일, 출원번호 09/561,074), 발명의 명칭 "에피토프 발견 방법"; 2000년 4월 28일자 미국 출원 제09/561,571호, 발명의 명칭 "에피토프 클러스터"; 2002년 3월 7일자 미국 출원 제10/094,699호(공개 번호 20030046714 A1), 발명의 명칭 "암 용도의 항-신생혈관 조제물"; 2002년 4월 4일자 미국 출원 제10/117,937호(공개 번호 20030220239 A1) 및 제PCT/US02/11101호(공개 번호 WO02081646 A2), 양측 공히 "에피토프 서열"을 발명의 명칭으로 한다; 및 2003년 9월 5일자 미국 출원 제10/657,022호 및 PCT 출원 제PCT/US2003/027702호(공개 번호 WO04022709 A2), 양측 공히 "에피토프 서열"을 발명의 명칭으로 한다. 백신 플라스미드의 전체 설계 측면은 공지 문헌에 개시되어 있다: 2000년 4월 28일자 미국 특허출원 제09/561,572호, 발명의 명칭 "표적 관련 항원의 에피토프를 암호화하는 발현 벡터"; 2002년 11월 7일자 미국 특허출원 제10/292,413호(공개 번호 20030228634 A1), 발명의 명칭 "표적 관련 항원의 에피토프를 암호화하는 발현 벡터 및 그 설계 방법"; 2002년 8월 20일자 미국 특허출원 제10/225,568호(공개 번호 2003-01338808), 2003년 8월 19일자 PCT 출원 제PCT/US2003/026231호(공개 번호 WO 2004/018666), 양측 공히 "표적 관련 항원의 에피토프를 암호화하는 발현 벡터"를 발명의 명칭으로 한다; 및 미국 특허 제6,709,844호, 발명의 명칭 "플라스미드 증식에서 불필요한 중간체 복제의 제거". 특정 암에 대한 면역 반응을 위한 장점을 가진 특이 항원 조합체가 공지 문헌에 개시되어 있다: 2003년 6월 17일자 미국 가특허출원 제60/479,554, 2004년 6월 17일자 미국 출원 제10/871,708호, 및 PCT 출원 제PCT/US2004/019571호(공개 번호 WO 2004/112825), 이들은 공히 "각종 암을 위한 백신 중 종양 관련 항원의 조합체"를 발명의 명칭으로 한다. 종양 신생혈관에 관련한 항원(예, PSMA, VEGFR2, Tie-2) 역시 발암성 질환에 유용할 수 있으며, 이 점은 공지 문헌에 개시되어 있다: 2002년 3월 7일자 미국 특허출원 제10/094,699호(공개 번호 20030046714 A1), 발명의 명칭 "암 용도의 항-신생혈관 조제물". 생물학적 반응 변형체의 표적 투여에 의해 면역 반응을 촉발, 유지 및 조정하는 방법은 2004년 12월 29일자 미국 가출원 제60/640,727호에 개시되어 있다. 면역 방법의 유발에 있어서 CD4+ 세포의 바이패스 방법은 2004년 12월 29일자 미국 가출원 제60/640,821호에 개시되어 있다. 질환, 기관, 항원, 또한 표적 기관, 세포 및 질환에 관련된 에피토프의 예시가 공지 문헌에 개시되어 있다: 2001년 2월 2일자 출원의 미국 특허 제6977074호(2005년 12월 20일), 발명의 명칭 "CTL 반응 유발 방법". 방법의 예시가 공지 문헌에 기술되어 있다: 2004년 6월 17일자 미국 가출원 제60/580,969호 및 2006년 1월 12일자 공개의 미국 특허출원 제2006-0008468-A1호, 양측 공히 "바이러스형 암의 진단을 위한 종양 관련 항원의 조합"을 발명의 명칭으로 한다. 즉시 유사체를 활용하는 것을 포함하는 면역 방법과 면역 반응성의 평가 및 관측을 위한 진단 기술의 통합은 공지 문헌에 개시되어 있다: 2004년 6월 17일자 미국 가출원 제60/580,964호 및 2005년 12월 29일자 공개된 미국 특허출원 제US-2005-0287068-A1호, 양측 공히 "치료방법과 진단법을 통합하여 능동 면역요법의 효능 개선"을 발명의 명칭으로 한다. 벡터를 암호화하는 면역 폴리펩티드가 공지 문헌에 개시되어 있다: 2002년 11월 7일자 미국 특허출원 제10/292,413호(공개 번호 20030228634 A1), 발명의 명칭 "표적 관련 항원의 에피토프를 암호화하는 발현 벡터 및 그의 설계 방법"; 2005년 6월 17일자 미국 가출원 제60/691,579호, 발명의 명칭 "암 세포 및 종양 기질 상에 발현된 우성 및 준우성 에피토프에 대한 다가 면역 반응을 발현하는 방법 및 조성물". 방법 및 조성물을 포함한 추가의 유용한 기술 내용이 공지 문헌에 개시되어 있다: 2005년 6월 17일자 미국 가출원 제60/691,581호, 발명의 명칭 "암종용 다가의 동반이행-및-증폭형 면역치료법". 또 다른 방법, 조성물, 펩티드 및 펩티드 유사체도 공지 문헌에 개시되어 있다: 2004년 6월 17일자 미국 가출원 제60/581,001호 및 제60/580,962호, 양측 각각 "SSX-2 펩티드 유사체" 및 "NY-ESO 펩티드 유사체"을 발명의 명칭으로 한다. 상기 언급한 출원 및 특허들은 각각의 내용은 본 명세서에 참고로 반영되어 있다. 또 다른 유사체, 펩티드 및 방법도 공지 문헌에 개시되어 있다: 미국 출원 공개 제20060063913호, 발명의 명칭 "SSX-2 펩티드 유사체"; 2006년 3월 16일 공개된 미국 특허 공개 제2006-0057673 A1호, 발명의 명칭 "에피토프 유사체"; 2005년 6월 17일자 PCT 출원 공개 제WO/2006/009920호, 발명의 명칭 "에피토프 유사체". 또 다른 방법과 조성물도 공지 문헌에 개시되어 있다: 2004년 6월 17일자 미국 가출원 제60/581,001호, 발명의 명칭 "SSX-2-펩티드 유사체"; 및 2004년 6월 17일자 미국 가출원 제60/580,962호, 발명의 명칭 "NY-ESO 펩티드 유사체". 비제한적인 구체적인 예시로서, 이들 각각은 제I류 MHC 제한 에피토프, 유사체, 유사체의 설계, 에피토프 및 유사체의 사용방법, 에피토프의 사용 및 제조방법, 핵산 벡터의 발현 설계 및 사용방법에 관한 내용이 본 명세서에 참고로 반영되어 있다. 그 밖에 본 명세서 참고로 반영된 기타의 출원은 다음과 같다: 2005년 6월 17일자 미국 특허출원 제11/156,253호(공개 번호 20060063913), 발명의 명칭 "SSX-2 펩티드 유사체"; 2005년 6월 17일자 미국 특허출원 제11/155,929호, 발명의 명칭 "NY-ESO-1 펩티드 유사체"(공개 번호 20060094661); 2005년 12월 29일자 미국 특허출원 제11/321,967호, 발명의 명칭 "생물학적 반응 변형체를 림프기관에 표적 투여함에 의한 면역 반응의 촉발, 유지 및 조정 방법"; 2005년 12월 29일자 미국 특허출원 제11/323,572호, 발명의 명칭 "예방 또는 치료의 목적으로 MHC 제I류 제한 에피토프에 대한 면역 반응의 유발, 개선 및 유지방법"; 2005년 12월 29일자 미국 특허출원 제11/323,520호, 발명의 명칭 "면역 반응의 유발시 CD4+ 세포의 바이패스 방법"; 2005년 12월 29일자 미국 특허출원 제11/323,049호, 발명의 명칭 "각종 암 용도의 조성물을 위한 종양 관련 항원의 조합체"; 2005년 12월 29일자 미국 특허출원 제11/323,964호, 발명의 명칭 "각종 암의 진단을 위한 종양 관련 항원의 조합체"; 및 2005년 6월 17일자 미국 가출원 제60/691,889호, 발명의 명칭 "에피토프 유사체".
<110> MANNKIND CORPORATION
<120> MULTIVALENT ENTRAIN-AND-AMPLIFY IMMUNOTHERAPEUTICS FOR CARCINOMA
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<151> 2005-06-17
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<213> Homo sapien
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<213> Homo sapien
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<213> Homo sapien
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<213> Artificial Sequence
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Man made peptide
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Glu Leu Ala Gly Ile Gly Ile Leu Thr Val
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<212> PRT
<213> Homo sapien
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<213> Artificial Sequence
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<220>
<221> VARIANT
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<223> Xaa = Norvaline
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Tyr Met Asp Gly Thr Met Ser Gln Xaa
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<213> Artificial Sequence
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<223> Man made peptide
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<213> Artificial Sequence
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<223> Man made peptide
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Lys Arg Ser Leu Leu Gln His Leu Ile Gly Leu Gly Asp Ala Ala Tyr
1 5 10 15
Ser Leu Leu Gln His Leu Ile Gly Leu Ile Ser Pro Glu Lys Glu Glu
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Gln Tyr Ile Ala Ser Leu Leu Gln His Leu Ile Gly Leu Lys Arg Pro
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Ser Ile Lys Arg Gly Leu Pro Ser Ile Pro Val His Pro Val
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<223> Man made peptide
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<223> Man made peptide
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Ser Ile Pro Val His Pro Ile Lys Ala Ser Glu Lys Ile Phe Tyr Val
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<223> Man made peptide
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Pro Arg Trp Leu Cys Ala Gly Ala Leu Val Leu Ala Gly Gly Phe Phe
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65 70 75 80
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Glu Ala Val Gly Leu Pro Ser Ile Pro Val His Pro Ile Ala Leu Gln
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Tyr Pro Val Pro Leu Glu Ser Tyr Glu Asp Ile His Gly Thr Leu His
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Leu Glu Arg Leu Ala Tyr Leu His Ala Arg Leu Arg Glu Leu Leu Cys
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Leu Thr Val Tyr Met Asp Gly Thr Met Ser Gln Val Gly Ile Leu Thr
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Val Ile Leu Gly Val Leu Leu Leu Ile Gly Cys Trp Tyr Cys Arg Arg
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<220>
<223> Plasmid
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gccaataggg actttccatt gacgtcaatg ggtggagtat ttacggtaaa ctgcccactt 240
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atggcccgcc tggcattatg cccagtacat gaccttatgg gactttccta cttggcagta 360
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attgacgcaa atgggcggta ggcgtgtacg gtgggaggtc tatataagca gagctctctg 600
gctaactaga gaacccactg cttactggct tatcgaaatt aatacgactc actataggga 660
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gaaatggata cagagccttg atggataaaa gtcttcatgt tggcactcaa tgtgccttaa 900
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tgatcagcct cgactgtgcc ttctagttgc cagccatctg ttgtttgccc ctcccccgtg 1080
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aagatggatt gcacgcaggt tctccggccg cttgggtgga gaggctattc ggctatgact 1500
gggcacaaca gacaatcggc tgctctgatg ccgccgtgtt ccggctgtca gcgcaggggc 1560
gcccggttct ttttgtcaag accgacctgt ccggtgccct gaatgaactg caagacgagg 1620
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catctcacct tgctcctgcc gagaaagtat ccatcatggc tgatgcaatg cggcggctgc 1800
atacgcttga tccggctacc tgcccattcg accaccaagc gaaacatcgc atcgagcgag 1860
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ggctcgcgcc agccgaactg ttcgccaggc tcaaggcgag catgcccgac ggcgaggatc 1980
tcgtcgtgac ccatggcgat gcctgcttgc cgaatatcat ggtggaaaat ggccgctttt 2040
ctggattcat cgactgtggc cggctgggtg tggcggaccg ctatcaggac atagcgttgg 2100
ctacccgtga tattgctgaa gagcttggcg gcgaatgggc tgaccgcttc ctcgtgcttt 2160
acggtatcgc cgctcccgat tcgcagcgca tcgccttcta tcgccttctt gacgagttct 2220
tctgaattat taacgcttac aatttcctga tgcggtattt tctccttacg catctgtgcg 2280
gtatttcaca ccgcatcagg tggcactttt cggggaaatg tgcgcggaac ccctatttgt 2340
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cttcaataat agcacgtgct aaaacttcat ttttaattta aaaggatcta ggtgaagatc 2460
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tcacaaaaat cgacgctcaa gtcagaggtg gcgaaacccg acaggactat aaagatacca 2640
ggcgtttccc cctggaagct ccctcgtgcg ctctcctgtt ccgaccctgc cgcttaccgg 2700
atacctgtcc gcctttctcc cttcgggaag cgtggcgctt tctcatagct cacgctgtag 2760
gtatctcagt tcggtgtagg tcgttcgctc caagctgggc tgtgtgcacg aaccccccgt 2820
tcagcccgac cgctgcgcct tatccggtaa ctatcgtctt gagtccaacc cggtaagaca 2880
cgacttatcg ccactggcag cagccactgg taacaggatt agcagagcga ggtatgtagg 2940
cggtgctaca gagttcttga agtggtggcc taactacggc tacactagaa gaacagtatt 3000
tggtatctgc gctctgctga agccagttac cttcggaaaa agagttggta gctcttgatc 3060
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cgatgtacgg gccag 3315
<210> 20
<211> 3596
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Plasmid
<400> 20
gttgacattg attattgact agttattaat agtaatcaat tacggggtca ttagttcata 60
gcccatatat ggagttccgc gttacataac ttacggtaaa tggcccgcct ggctgaccgc 120
ccaacgaccc ccgcccattg acgtcaataa tgacgtatgt tcccatagta acgccaatag 180
ggactttcca ttgacgtcaa tgggtggagt atttacggta aactgcccac ttggcagtac 240
atcaagtgta tcatatgcca agtacgcccc ctattgacgt caatgacggt aaatggcccg 300
cctggcatta tgcccagtac atgaccttat gggactttcc tacttggcag tacatctacg 360
tattagtcat cgctattacc atggtgatgc ggttttggca gtacatcaat gggcgtggat 420
agcggtttga ctcacgggga tttccaagtc tccaccccat tgacgtcaat gggagtttgt 480
tttggcacca aaatcaacgg gactttccaa aatgtcgtaa caactccgcc ccattgacgc 540
aaatgggcgg taggcgtgta cggtgggagg tctatataag cagagctctc tggctaacta 600
gagaacccac tgcttactgg cttatcgaaa ttaatacgac tcactatagg gagacccaag 660
ctggctagcg tttaaactta agccaccatg tccctgttga tgtggatcac gcagtgcaaa 720
gcttcggaga aaatcttcta tgtgggtctt ccaagtattc ctgttcatcc aattggtctt 780
ccaagtattc ctgttcatcc aattaaagct tcggagaaaa tcttctatgt gtccctgttg 840
atgtggatca cgcagtgcaa agcttcggag aaaatcttct atgtgaaagc ttcggagaaa 900
atcttctacg tacggtgcgg tgccaggggg ccggagagcc gcctgcttga gttctacctc 960
gccatgcctt tcgcgacacc catggaagca gagctggccc gcaggagcct ggcccaggat 1020
gccccaccgc ttcccgtgcc aggggtgctt ctgaaggagt tcactgtgtc cggcaacata 1080
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ccgctcgagt ctagagggcc cgtttaaacc cgctgatcag cctcgactgt gccttctagt 1320
tgccagccat ctgttgtttg cccctccccc gtgccttcct tgaccctgga aggtgccact 1380
cccactgtcc tttcctaata aaatgaggaa attgcatcgc attgtctgag taggtgtcat 1440
tctattctgg ggggtggggt ggggcaggac agcaaggggg aggattggga agacaatagc 1500
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actggatggc tttcttgccg ccaaggatct gatggcgcag gggatcaagc tctgatcaag 1680
agacaggatg aggatcgttt cgcatgattg aacaagatgg attgcacgca ggttctccgg 1740
ccgcttgggt ggagaggcta ttcggctatg actgggcaca acagacaatc ggctgctctg 1800
atgccgccgt gttccggctg tcagcgcagg ggcgcccggt tctttttgtc aagaccgacc 1860
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tattgggcga agtgccgggg caggatctcc tgtcatctca ccttgctcct gccgagaaag 2040
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<210> 21
<211> 3884
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Plasmid
<400> 21
cgttgacatt gattattgac tagttattaa tagtaatcaa ttacggggtc attagttcat 60
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Claims (48)
- 하나 이상의 핵산 조성물 및 하나 이상의 펩티드 조성물을 구비한 다수의 조성물을 포함하되, 상기 하나 이상의 핵산 조성물은 SSX-1 에피토프, NY-ESO-1 에피토프, PRAME 에피토프, PSMA 에피토프, 티로시나제 에피토프 및 멜란-A 에피토프로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있고; 상기 하나 이상의 펩티드 조성물은 SSX-1 에피토프, NY-ESO-1 에피토프, PRAME 에피토프, PSMA 에피토프, 티로시나제 에피토프 및 멜란-A 에피토프로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체로 본질적으로 이루어지며; 또한 상기 하나 이상의 펩티드는 선택된 핵산에 의해 발현되는 에피토프에 대응하는 것인 면역 산물.
- 제1항에 있어서, 상기 하나 이상의 핵산 조성물은 pSEM, pBPL 및 pRP12로 이루어진 군에서 선택된 플라스미드를 포함하는 면역 산물.
- 제1항에 있어서, 상기 하나 이상의 펩티드 조성물은SSX-241-49(서열 번호: 1) 혹은 그의 유사체 KVSEKIFYV(서열 번호: 5);NY-ESO-1157-165(서열 번호: 2) 혹은 그의 유사체 SNvaLMWITQV(서열 번호: 6);PRAME425 -433(서열 번호: 3) 혹은 그의 유사체 S(Nva)LQHLIG(Nle)(서열 번호: 7);PSMA288 -297(서열 번호: 4) 혹은 그의 유사체 GLPSIPVHPV(서열 번호: 8);멜란-A26-35(서열 번호: 9) 혹은 그의 유사체 ENvaAGIGILTV(서열 번호: 11); 및티로시나제369 -377(서열 번호: 10) 혹은 그의 유사체 YMDGTMSQNva(서열 번호: 12)로 이루어진 군에서 선택된 펩티드를 포함하는 면역 산물.
- 제1항에 있어서, 상기 다수의 조성물은(a) SSX-2 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있는 핵산 분자;(b) NY-ESO-1 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있는 핵산 분자;(c) PRAME 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있는 핵산 분자;(d) PSMA 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있는 핵산 분자;(e) 상기 SSX-2 에피토프 혹은 그의 유사체로 본질적으로 이루어진 펩티드;(f) 상기 NY-ESO-1 에피토프 혹은 그의 유사체로 본질적으로 이루어진 펩티드;(g) 상기 PRAME 에피토프 혹은 그의 유사체로 본질적으로 이루어진 펩티드; 및(h) 상기 PSMA 에피토프 혹은 그의 유사체로 본질적으로 이루어진 펩티드를 포함하는 면역 산물.
- 제4항에 있어서, 상기 (a) 및 (b)의 핵산 분자는 상기 조성물의 일부인 면역 산물.
- 제5항에 있어서, 상기 핵산 분자는 동일한 면역 산물.
- 제6항에 있어서, 상기 핵산 분자는 pBPL(서열 번호: 13)의 단체분리(liberation) 서열을 암호화하는 서열을 포함하는 면역 산물.
- 제7항에 있어서, 상기 핵산은 pBPL(서열 번호: 16)의 면역 폴리펩티드를 암호화하는 서열을 포함하는 면역 산물.
- 제8항에 있어서, 상기 핵산 분자는 pBPL(서열 번호: 20)인 면역 산물.
- 제4항에 있어서, 상기 핵산 분자 (c) 및 (d)는 동일한 조성물의 일부인 면역 산물.
- 제10항에 있어서, 상기 핵산 분자는 동일한 면역 산물.
- 제10항에 있어서, 상기 핵산 분자는 pRP12(서열 번호: 14)의 단체분리 서열을 암호화하는 서열을 포함하는 면역 산물.
- 제12항에 있어서, 상기 핵산 분자는 pR12(서열 번호: 17)의 면역성 폴리펩티드를 암호화하는 서열을 포함하는 면역 산물.
- 제12항에 있어서, 상기 핵산 분자는 pRP12(서열 번호: 21)인 면역 산물.
- 제1항에 있어서, SSX-2 에피토프는 SSX-241-49(서열 번호: 1)인 면역 산물.
- 제1항에 있어서, NY-ESO-1 에피토프는 NY-ESO-1157-165(서열 번호: 2)인 면역 산물.
- 제1항에 있어서, PRAME 에피토프는 PRAME425 -433(서열 번호: 3)인 면역 산물.
- 제1항에 있어서, PSMA 에피토프는 PSMA288 -297(서열 번호: 4)인 면역 산물.
- 제1항에 있어서, (e)의 SSX-2 유사체는 KVSEKIFYV(서열 번호: 5)인 면역 산물.
- 제1항에 있어서, (f)의 NY-ESO-1 유사체는 SNvaLMWITQV(서열 번호: 6)인 면역 산물.
- 제1항에 있어서, (g)의 PRAME 유사체는 S(Nva)LQHLIG(Nle)(서열 번호: 7)인 면역 산물.
- 제1항에 있어서, (h)의 PSMA 유사체는 GLPSIPVHPV(서열 번호: 8)인 면역 산물.
- 치료가 필요한 환자에게 제1항에 따른 면역 산물을 투여하는 단계를 포함하는 암 치료방법.
- 제23항에 있어서, 상기 암은 유방암, 난소암, 췌장암, 전립선암, 대장암, 방광암, 폐암, 간암, 위암, 고환암, 자궁암, 뇌종양, 림프종, 피부암, 골수암, 신장암, 직장암, 흑색종, 교아종 또는 육종을 포함하는 암 치료방법.
- 치료가 필요한 환자에게(i) SSX-2 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있는 핵산 분자;(ii) NY-ESO-1 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있는 핵산 분자;(iii) PRAME 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있는 핵산 분자; 및(iv) PSMA 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있는 핵산 분자를 포함하는 다수의 조성물을 투여하는 단계를 포함하는 암종 치료방법.
- 제25항에 있어서, SSX-2, NY-ESO-1, PRAME 및 PSMA를 함유하는 에피토프 혹은 그의 유사체로 본질적으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 펩티드를 투여하는 단계를 더 포함하는 치료 방법.
- 제1항에 있어서, 상기 다수의 조성물은(i) 멜란-A 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있는 핵산 분자;(ii) 티로시나제 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있는 핵산 분자;(iii) 상기 멜란-A 에피토프 혹은 그의 유사체로 본질적으로 이루어진 펩티드; 및(iv) 상기 티로시나제 에피토프 혹은 그의 유사체로 본질적으로 이루어진 펩티드를 포함하는 다수의 조성물을 함유하는 면역 산물.
- 제27항에 있어서, 상기 (i) 및 (ii)의 핵산 분자는 동일한 조성물의 일부인 면역 산물.
- 제28항에 있어서, 상기 핵산 분자는 동일한 면역 산물.
- 제29항에 있어서, 상기 핵산 분자는 pSEM(서열 번호: 15)의 단체분리 서열을 암호화하는 서열을 포함하는 면역 산물.
- 제30항에 있어서, 상기 핵산 분자는 pSEM(서열 번호: 18)의 면역 폴리펩티드를 암호화하는 서열을 포함하는 면역 산물.
- 제31항에 있어서, 상기 핵산 분자는 pSEM인 면역 산물.
- 제27항에 있어서, 멜란-A 에피토프는 멜란-A26-35(서열 번호: 9)인 면역 산물.
- 제27항에 있어서, 티로시나제 에피토프는 티로시나제369 -377(서열 번호: 10)인 면역 산물.
- 제27항에 있어서,(i) SSX-2 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있는 핵산 분자; 및(ii) NY-ESO-1 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있는 핵산 분자를 더 포함하는 면역 산물.
- 제35항에 있어서, NY-ESO-1 에피토프로 본질적으로 이루어진 펩티드를 더 포함하는 면역 산물.
- 제35항 또는 제36항에 있어서, SSX-2 에피토프로 본질적으로 이루어진 펩티드를 더 포함하는 면역 산물.
- 치료가 필요한 환자에게(i) 멜란-A 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있는 핵산 분자;(ii) 티로시나제 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있는 핵산 분자;(iii) 상기 멜란-A 에피토프 혹은 그의 유사체로 본질적으로 이루어진 펩티 드; 및(iv) 상기 티로시나제 에피토프 혹은 그의 유사체로 본질적으로 이루어진 펩티드를 포함하는 다수의 조성물을 투여하는 단계를 포함하는 암 치료방법.
- 제38항에 있어서, 상기 암은 교아섬유종인 암 치료방법.
- 제38항에 있어서, 상기 암은 흑색종인 암 치료방법.
- 제38항에 있어서, 치료가 필요한 환자에게(i) SSX-2 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있는 핵산 분자;(ii) NY-ESO-1 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있는 핵산 분자;(iii) 상기 NY-ESO-1 에피토프 혹은 그 유사체로 본질적으로 이루어진 펩티드; 및(iv) 상기 SSX-2 에피토프 혹은 그 유사체로 본질적으로 이루어진 펩티드를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 더 포함하는 암 치료방법.
- 제1항에 있어서, 상기 다수의 조성물은(a) SSX-2 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있는 핵 산 분자;(b) NY-ESO-1 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있는 핵산 분자;(c) 상기 SSX-2 에피토프 혹은 그 유사체로 본질적으로 이루어진 펩티드; 및(d) 상기 NY-ESO-1 에피토프 혹은 그 유사체로 본질적으로 이루어진 펩티드를 포함하는 면역 산물.
- 제1항에 있어서, 상기 다수의 조성물은(a) PRAME 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있는 핵산 분자;(b) PSMA 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체를 발현할 수 있는 핵산 분자;(c) 상기 PRAME 에피토프 혹은 그의 유사체로 본질적으로 이루어진 펩티드; 및(d) 상기 PSMA 에피토프 혹은 그의 유사체로 본질적으로 이루어진 펩티드를 포함하는 면역 산물.
- 대상의 림프계에 투여하기에 적합한 약제의 제조에서의 제1항에 따른 면역 산물의 용도.
- 대상의 항암 면역 반응을 유발하기에 적합한 약제의 제조에서의 제1항에 따른 면역 산물의 용도.
- 대상의 T 세포 반응을 동반이행 및 증폭시키는 약제의 제조에서의 제1항에 따른 면역 산물의 용도.
- 대상의 암종 치료용 약제의 제조에서의 제1항에 따른 면역 산물의 용도.
- 대상의 항암 면역 반응을 유발하기 적합한 약제의 제조에서의, 하나 이상의 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체 및 상기 제I류 MHC 제한 에피토프 혹은 그의 유사체에 대응하는 하나 이상의 펩티드 조성물을 발현할 수 있는 하나 이상의 핵산 조성물의 용도.
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| US20030138808A1 (en) | 1998-02-19 | 2003-07-24 | Simard John J.L. | Expression vectors encoding epitopes of target-associated antigens |
| EP1118860A1 (en) * | 2000-01-21 | 2001-07-25 | Rijksuniversiteit te Leiden | Methods for selecting and producing T cell peptide epitopes and vaccines incorporating said selected epitopes |
| US20030215425A1 (en) | 2001-12-07 | 2003-11-20 | Simard John J. L. | Epitope synchronization in antigen presenting cells |
| ATE474931T1 (de) | 2000-04-28 | 2010-08-15 | Mannkind Corp | Epitop-synchronisierung in antigen präsentierenden zellen |
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