KR20030022769A

KR20030022769A - 경구 활성 엘라스타제 억제제로서의 사카린 유도체

Info

Publication number: KR20030022769A
Application number: KR1020027007684A
Authority: KR
Inventors: 페터 아라니; 샌더 바토리; 스테판 데실라; 이스트반 헤르메크즈; 졸탄 카푸이; 페렌크 레바이; 엔드레 미쿠스; 마르크 파스칼; 라조스 티.나기; 브루노 시모노트; 스자보 카탈린 얼반; 말통 바르자; 렐르 바스바리네데브레크지
Original assignee: 사노피-신델라보
Priority date: 1999-12-17
Filing date: 2000-12-14
Publication date: 2003-03-17
Also published as: EE200200317A; AU2210501A; CN1411458A; IS6418A; CA2395486A1; BR0016364A; US20030114449A1; EP1255756A1; NO20022838L; IL149864A0; PL355316A1; ZA200204604B; CZ20022016A3; JP2003516990A; WO2001044245A1; HUP9904624D0; BG106811A; NO20022838D0; RU2002119007A; HUP9904624A2

Abstract

R¹은 메틸, 에틸 또는 2-모르폴리노-에틸기이고 R²는 피페리디노, 모르폴리노 또는 4-메틸-피페라지닐기이고 n은 2 또는 3임을 특징으로 하는 경구 활성 화학식(I)의 화합물 및 이들의 염, 용매화합물 및 수화물.

Description

경구 활성 엘라스타제 억제제로서의 사카린 유도체 {SACCHARIN DERIVATIVES AS ORALLY ACTIVE ELASTASE INHIBITORS}

수개의 화합물 군이 엘라스타제, 특히 사람 백혈구 엘라스타제 억제 활성을 가진다는 것이 문헌으로부터 공지되어 있다. 이러한 유형의 화합물은, 예를 들어 펩티딜트리플루오로메틸-케톤 유도체, 7-디브로모-세팜 유도체 또는 벤즈이소티아졸론 유도체이다.

시험관에서 사람 백혈구 엘라스타제 억제 효능을 가진 많은 1,2-벤즈이소티아졸-(1H)-3-온 유도체가 유럽 특허 출원 제 626.378호 및 제 483.928호 및 참고 문헌(J. Med. Chem. 38(23): 4687-4692, 1995)에 공개되어 있다. 이들 화합물의 대표적인 예로는 2-(3-클로로-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일)-옥시메틸-4-이소프로필-6-메톡시-1,2-벤즈이소티아졸-(1H)-3-온-1,1-디옥사이드 (EP-0626378A실시예 4D) 및 2-[9-(2-피롤리디노-에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일]-옥시메틸-4-이소프로필-6-메톡시-1,2-벤즈이소티아졸-(1H)-3-온-1,1-디옥사이드 (EP-0626378A 실시예 9E)가 있으나, 이들 화합물에 대해서 경구 활성은 상기 문헌 또는 본 기술 분야에 속하는 어느 참고 문헌에서도 언급된 바 없다.

본 발명자들은 엘라스타제 유형- 특히 사람 백혈구 엘라스타제 유형-효소에 대한 높은 경구 억제 활성을 보이고, 우수한 안정성, 시험관내 및 생체내에서의 장기 지속 효능, 높은 선택성, 우수한 흡수성 및 알맞은 약리화학적, 생리화학적 특성을 보여 약물 개발의 좋은 후보가 되는 신규의 엘라스타제 억제 분자를 밝히는 것을 목적으로 한다.

본 발명자들은 2-(4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일)-옥시메틸-4-이소프로필-6-치환된-1,2-벤즈이소티아졸-(1H)-3-온-1,1-디옥사이드 구조의 경우에, 특이 치환기를 피리도[1,2-a]피리미딘 부분의 9-위치로 도입하고, 메톡시, 에톡시 또는 2-모르폴리노-에톡시 기를 벤즈이소티아졸 부분의 6-위치로 도입하면 필요하고 적절한 많은 특성과 함께 매우 중요한 경구 활성을 가지는 신규의 효소 억제제를 획득할 수 있음을 발견하였다.

본 발명은 엘라스타제-유형 효소 억제제로서 유용한 화학식(I)의 경구 활성 화합물, 예를 들어 사람 백혈구 엘라스타제 억제제; 이들의 염, 용매화합물, 화합물의 수화물 또는 이들의 염, 이들 화합물을 함유하는 약제학적 제제, 화학식(I)의 화합물의 용도, 화학식(I)의 화합물의 제조 및 이들의 제조에 사용되는 화학식(Ⅲ)의 신규의 중간물질에 관한 것이다.

본 발명은 화학식(I)의 화합물, 이들의 염, 수화물을 포함하는 용매화합물에 관한 것으로서, 상기 화학식(I)에서 R¹은 메틸기, 에틸기 또는 2-모르폴리노-에틸기를 나타내고; R²는 피페리디노, 모르폴리노 또는 4-메틸-피페라지노기를 나타내고;n은 2 또는 3이다.

용매화합물은 화학식(I)의 화합물의 용매화합물 또는 화학식(I)을 가지는 화합물의 염의 용매화합물을 의미한다.

화학식(I)의 화합물에 대해 짝을 형성하는 염은 임의의 약제학적으로 허용되는 유기 또는 무기 화합물인데, 예를 들어 라세미 또는 광학 활성 유기 화합물로서: 숙신산, 말레산, 푸마르산, 타르타르산, 시트르산, 벤조산, 만데릭산, 및 무기화합물로서: 염산, 하이드로브롬산, 질산, 인산 또는 황산이 있다.

화학식(I)의 화합물에서, 치환기 R¹이 메톡시기 또는 2-모르폴리노-에틸기이고, R²가 피페리디노, 4-메틸-피페라지노 또는 모르폴리노기를 함유하며 n이 2 또는 3인 것이 특히 유리하다.

본 발명의 또 다른 면은 화학식(I)의 화합물의 제조방법이고, 이것은 화학식(Ⅱ)의 화합물 (R¹은 상기와 같고 X는 할로겐 원자를 나타낸다)과 화학식(Ⅲ)의 화합물 (R²및 n은 상기와 같다)을 반응시키는 단계, 및 필요한 경우, 생성된 화학식(I) (R¹, R²및 n은 상기와 같다)의 화합물을 이들의 염으로 전환시키거나 이들을 이들의 염으로부터 유리시키는 단계를 포함한다.

바람직하게는 화학식(Ⅱ) 및 (Ⅲ)의 화합물의 반응을 유기 용매, 예를 들어 디메틸포름아마이드에서, 산 결합 제제의 존재하에, 적절하게는 유기 또는 무기 염, 예를 들어 트리에틸아민의 존재하에 실온 이상의 온도에서 수행한다.

할로겐 원자는 플루오로, 클로로, 브로모 또는 요오드 원자이다.

화학식(Ⅱ)의 공지 화합물 및 화학식(Ⅲ)의 신규의 화합물은 구입 가능한 화합물로부터 출발하여 공지된 방법에 의하여 제조한다.

2-아미노-3-히드록시피리딘 (Biochem J. 46: 506-508, 1950)을 1-(2-할로게노-에틸)피페리딘 또는 1-(3-할로게노-프로필)모르폴린 또는 2-(4-메틸-피페라지노)에탄올과 반응시킴에 의해 적절한 3-치환된 피리딘을 제조한다. 할로겐 유도체와 2-아미노-3-히드록시피리딘을, 수용액-유기 용매 혼합물에서, 바람직하게는 상 이동 촉매의 존재하에서 반응시킨다. 치환된 알콜을 미추노부(Mitsunobu)-반응 (Organic reactions/Editor D. Hughes/Vol 42: 335-656 John Wiley and Sons, New York, 1992)을 통하여 2-아미노-3-히드록시피리딘과 결합시킨다.

생성된 2-아미노-3-치환된-피리딘을 말론산의 활성 에스테르, 예를 들어 이의 비스-2,4,6-트리클로로페닐 에스테르 (Monatch. Chem. 89: S 143-153, 1958)와, 바람직하게는 상승된 온도에서, 선택적으로 포스포릴 클로라이드의 존재하에서 반응시켜 본 발명의 또다른 면으로서 화학식(Ⅲ) (R²및 n은 상기와 같다)의 신규의 화합물, 2-히드록시-9-치환된-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘을 획득한다.

화학식(Ⅱ)의 화합물 (R¹은 상기와 같고, X는 할로겐 원자, 바람직하게는 클로로 또는 브로모 원자를 나타낸다)을 유럽 특허출원 제 626378A1호 실시예 1(b) 또는 제 483928A1호 실시예 5I에 기술된 바와 유사하게 4-이소프로필-6-메톡시- 또는 4-이소프로필-6-에톡시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드를 제조하고 (참고 문헌: J. Med. Chem. 38(23): 4687-4692, 1995), 이들을 적절한 2-클로로메틸 또는 2-브로모메틸 유도체로 전환시킴에 의해 획득한다.

2,4-디클로로-벤조일옥시-메틸 유도체를 유럽 특허출원 제 483928A1의 실시예 1A의 방법에 따라 제조한다. 또한, 2,4-디클로로-벤조일옥시-메틸 유도체를 2-할로게노에틸 유도체로 전환시킨다.

EP 483928A1 실시예 1AW에 기술된 2-(2,4-디클로로-벤조일옥시-메틸)-4-이소프로필-6-히드록시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드의 6-히드록시기를 헤테로아릴알킬옥시기로 전환시킨다.

본 발명의 추가의 측면은 화학식(I)의 화합물 및/또는 이들의 염, 용매화합물, 수화물을 함유하는 약제학적 생성물이고, 이는 바람직하게는 경구 적용을 위한 생성물이고, 흡입용 또는 비경구용 생성물 또한 본 발명의 추가의 측면을 구성한다. 상기 약물 생성물은 고체이거나 액체, 예를 들어 타블릿, 캡슐, 용액, 현탁액 또는 에멀젼이다. 고체 약물 생성물 형태는 무엇보다도 타블렛, 캡슐이 바람직하다.

상기 약물 생성물을 약제 산업에서 통상적으로 사용되는 부형제 및 기술적 공정을 적용하여 제조한다.

본 발명에 따른 화학식(I)의 화합물은 질병의 형성이 엘라스타제 효소의 유리, 고농도 및 단백질분해 활성과 관련된 질병의 치료에 유용하다. 이러한 질병에는 예를 들어 염증성 장질환 (과민성 대장 곤란증, 과민성 대장 증후군, 크론병, 궤양성 대장염), 폐고혈압증, 소아 기관지-폐 형성장애, 비염, 만성 폐쇄성 폐 질환 (COPD), 방광염, 낭성 섬유증, 급성 췌장염, 간염, 면역 복합체 매개-제 3형 면역성 염증 (홍반성 루프스, 구드패스츄어 증후군, 만성 간염, 폐포염), 피부염, 건선, 주사비, 맥관염, 제 4형 면역성 염증 반응 (예: 결핵, 한센병, 레슈마니아병, 블라스토마이세스병, 주혈흡충증 진행 중의 제 4형 면역성 염증 반응), 사구체성 신염, 통풍성 관절염, 다발성 경화증, 천식성 기관지염, 성인 호흡 곤란 증후군(ARDS), α₁-항트립신 결핍, 만성 기관지염, 기종 (신생아 폐기종을 포함), 호중성 기원의 폐렴, 외과적 중재, 패혈증, 외상, 급성 염증, 감염, DIC-증후군, 경색증, 류마토이드 관절염 및 암이 있다.

백혈구, 즉 백혈구로부터 유리된 단백질분해 효소로서 예컨데 엘라스타제는 허혈성 사건 후에 나타나는 재관류에 의해 유발되는 다양한 조직손상의 전개에 중요한 역활을 한다.

따라서, 본 발명에 따른 화학식(I)의 화합물은 허혈성 사건 후에 나타나는 재관류에 의해 유발되는 조직 손상의 예방, 처치 및 치료에 중요한 역활을 한다.

본 발명의 추가의 측면은 상기 나열된 질병의 처치를 위한 화학식(I)의 화합물의 용도이다.

본 명세서에서 인용된 특허 및 특허 출원을 포함하나 이에 한정되지 않는 모든 공지 문헌의 내용은 참고문헌에 의해 본원에 통합된다.

또한, 화학식(I)의 화합물을 다른 치료용 및/또는 예방용 제제 및/또는 의학적으로 이와 배합금지되지 않은 약제와 함께 투여될 수 있다.

화학식(I) 및 (Ⅲ)의 화합물, 이들의 제조 및 생물학적 활성은 하기의 실시예에 의해 증명되고 청구범위가 실시예에 한정되지 않는다.

실시예 1:2-아미노-3-(2-피페리디노-에톡시)피리딘

2-아미노-3-히드록시피리딘 110.12g (1몰) (참고문헌: Biochem J. 46:506-508, 1950)을 40% 수산화 나트륨 용액 500㎖에 용해시켰다. 갈색 용액을 아르곤 및 디클로로-메탄 500㎖중의 테트라부틸암모니움 요오드화물 2g으로 플러싱 (flush)한 후, 1-(2-클로로에틸)피페리딘 하이드로클로라이드 184.11g (1 몰) (Chem. Ber. 38: S 3136-3139, 1905)을 교반하에서 이에 첨가하였다. 혼합물을 5일동안 실온에서 교반시킨 후 디클로로메탄 500㎖ 및 물 200㎖을 첨가하고, 다음에 상을 잘 혼합시켜 분리하였다. 수용액층을 디클로로-메탄 2×150㎖로 추출하고, 합체된 유기용액 층을 물 3×200㎖로 세척하고 황산 마그네슘으로 건조시키고 증발시켰다. 적갈색 결정성 미정제 생성물을 아세톤에서 결정화하였다.

생성물: 2-아미노-3-(2-피페리디노-에톡시)-피리딘 144.71g (38%) (m.p.: 105-106℃)

실시예 2:2-히드록시-9-(2-피페리디노-에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘

2-아미노-3-(2-피페리디노-에톡시)피리딘 88.5g (0.4몰) 및 건조 아세톤 550㎖의 혼합물을 환류 온도로 가열하고 소량으로 비스-2,4,6-트리클로로페닐 말로네이트의 185.2g (0.4몰)을 이에 첨가하였다. 1.5시간동안 추가로 가열하고 난 다음 혼합물을 냉각시키고 밤새 냉장고에서 보관하였다. 침전된 결정을 여과하여 제거하고, 모액을 농축하여 2차 수득물(crop)을 수득하고, 수득물들을 합체시켜 아세톤으로 세척하였다. 생성된 미정제 생성물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 처음에 디클로로-메탄에 의해 잔류 2,4,6-트리클로로페놀을, 다음에 메탄올-디클로로-메탄 (1:1) 혼합물에 의해 표제 화합물을 용출하였다. 후자를 진공하에서 증발시켜 건조시켰다.

생성물: 2-히드록시-9-(2-피페리디노-에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘 69.31g (60%) (m.p.: 171-172℃)

실시예 3:2(-9-(2-피페리디노-에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일-옥시메틸)-4-이소프로필-6-메톡시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드

2-히드록시-9-(2-피페리디노-에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘 57.57g (0.2몰)을 건조 디메틸포름아마이드 400㎖중에 용해시키고, 실온에서 트리에틸아민 31㎖ 및 2-브로모메틸-4-이소프로필-6-메톡시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드 69.66g (0.2몰)을 이에 첨가하였다. 현탁액을 아르곤 대기하에서 실온으로 6시간동안 교반시켰다. 현탁액을 1200㎖의 얼음-물에 옮기고 결정을 여과하여 제거하고 메탄올에서 결정화하였다.

생성물: 2-(9-(2-피페리디노-에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일옥시메틸)-4-이소프로필-6-메톡시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)온-1,1-디옥사이드 15.39g (17%) (m.p.: 138-139℃)

원소 분석:

C₂₇H₃₂N₄O₇S	C	H	N	S
산출량	58.26	5.79	10.07	5.76
확인량	57.41	6.02	9.77	5.39

실시예 4:2(9-(2-피페리디노-에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일-옥시메틸)-4-이소프로필-6-메톡시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드 하이드로클로라이드

2-(9-(2-피페리디노-에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일-옥시메틸)-4-이소프로필-6-메톡시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드 1.5g (2.7mmol)을 디에틸 에테르 100㎖중에 용해시키고 디에틸 에테르 중의 20% (m/v) 염화 수소 2.5㎖을 이에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간동안 교반시키고, 생성되는 결정을 여과하여 제거하고 일정 중량이 될 때까지 수산화 나트륨을 처리하여 건조기에서 건조시켰다.

생성물: 2-(9-(2-피페리디노-에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일-옥시메틸)-4-이소프로필-6-메톡시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드 하이드로클로라이드 1,55g (97%) (mp. 115-120℃)

실시예 5:2-(9-(2-피페리디노-에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일-옥시메틸)-4-이소프로필-6-메톡시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드-D-모노타르타레이트 염

2-(9-(2-피페리디노-에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일-옥시메틸)-4-이소프로필-6-메톡시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드 4.4g (8.0 mmol)을 가열된 메탄올 (70㎖)에 용해시키고 D-타르타르산 1.2g (8.0mmol)을 이 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 15분동안 교반시키고 난 다음 10℃로 냉각시켰다; 생성된 결정을 여과하여 제거하고, 세척하고, 진공하에서 건조시켰다.

생성물: 표제 화합물 4.63g (82%) (m.p.: 158℃)

실시예 6:2-(9-(2-피페리디노-에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일-옥시메틸)-4-이소프로필-6-메톡시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드 모노푸마레이트 염

염기 5.0g (9.0mmol) 및 푸마르산 1.05g (9.0mmol)을 사용하는 것을 제외하고 실시예 5에 기술된 방법에 따라 생성물로서 표제 화합물 4.20g (69%) (m.p.: 183℃)를 수득하였다.

실시예 7:2-(9-(2-피페리디노-에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일-옥시메틸)-4-이소프로필-6-메톡시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드 벤조에이트 염

염기 4.88g (8.76mmol) 및 벤조산 1.07g (8.76mmol)을 사용하는 것을 제외하고 실시예 5에 기술된 방법에 따라, 최종적으로 메틸-3차-부틸에테르 중에서 결정화하여 생성물로서 표제화합물 4.00g (67%) (m.p. 114℃)을 수득하였다.

실시예 8:2-(9-(2-피페리디노-에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일-옥시메틸)-4-이소프로필-6-메톡시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드 모노시트레이트 염

염기 7.30g (13.11mmol) 및 시트르산 2.52g (13.11mmol)을 사용하는 것을 제외하고 실시예 5에 기술된 방법에 따라, 생성물로서 최종적으로 메틸-3차-부틸에테르중에서 결정화하여 표제화합물 10.08g (양, 수율) (m.p.: 152℃)를 수득하였다.

실시예 9:2-(9-(2-피페리디노-에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일-옥시메틸)-4-이소프로필-6-메톡시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드-L-만델레이트

염기 7.00g (12.58mmol) 및 L-만델산 1.91g (12.58mmol)을 사용하는 것을 제외하고 실시예 5에 기술된 방법에 따라, 생성물로서 최종적으로 시클로헥산중에서결정화하여 표제 생성물 7.60g (85%) (m.p.:102℃)를 수득하였다.

실시예 10:2-(9-(2-피페리디노-에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일-옥시메틸)-4-이소프로필-6-메톡시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드-4-이소프로필-6-메톡시-사카리네이트 염

2-(9-(2-피페리디노-에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일-옥시메틸)-4-이소프로필-6-메톡시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드 55.7㎎을 메탄올 2㎖중에 용해시키고, 에탄올 2㎖중에 용해된 4-이소프로필-6-메톡시-사카린 25.5㎎을 이 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 30분동안 교반시키고 생성된 결정을 여과하여 제거하고, 냉각된 메탄올 2×1㎖로 세척하여 실온, 진공하에서 건조하였다.

생성물: 표제 화합물 45.6㎎ (60%) (m.p.: 203-205℃)

실시예 11:2-아미노-3-(3-모르폴리노-프로폭시)피리딘

수산화 나트륨 1.68g (0.042mol)을 메탄올 40㎖중에 용해시키고 2-아미노-3-히드록시피리딘 4.62g (0.042mol)을 이에 첨가하였다. 혼합물을 20분동안 교반시킨후 증발시켜 건조시켰다. 잔류물을 메틸 설폭시드 40㎖중에 취하고, 얼음-물로 냉각시키면서 혼합물에 1-(3-클로로프로필)모르폴린 6.91g (0.042mol)을 천천히 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 18시간동안 교반시키고 얼음-물 200㎖에 부은 뒤 클로로포름 30㎖×3으로 추출하였다. 합체된 유기용액 층을 물 30㎖×5로 세척하고 무수 황산 나트륨으로 건조시키고 증발시켰다.

생성물: 2-아미노-3-(3-모르폴리노-프로폭시)피리딘 7.45g (74%) (m.p.: 79-81℃)

실시예 12:2-히드록시-9-(3-모르폴리노-프로폭시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘

실시예 2에 기술된 방법에 따라 2-아미노-3-(3-모르폴리노-프로폭시)피리딘으로부터, 2-히드록시-9-(3-모르폴리노-프로폭시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘의 결정 (m.p.: 200-202℃)을 63%의 수율로 수득하였다.

실시예 13:2-(9-(3-모르폴리노-프로폭시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일-옥시메틸)-4-이소프로필-6-메톡시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드

실시예 3에 기술된 방법에 따라 2-히드록시-9-(3-모르폴리노-프로폭시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘으로부터, 2-(9-(3-모르폴리노-프로폭시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일-옥시메틸)-4-이소프로필-6-메톡시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드의 결정 (m.p.: 76-80℃)을 수득하였다. 수율: 17.5%

원소 분석

C₂₇H₃₂N₄O₈S	C	H	N
산출량	56.63	5.63	9.78
확인량	56.57	5.76	9.56

실시예 14:2-(9-(3-모르폴리노-프로폭시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일-옥시메틸)-4-이소프로필-6-(2-모르폴리노-에톡시)-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)온-1,1-디옥사이드

실시예 3에 기술된 방법에 따라 2-히드록시-9-(3-모르폴리노-프로폭시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘 및 2-브로모메틸-4-이소프로필-6-(2-모르폴리노-에톡시)-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)온-1,1-디옥사이드로부터, 2-(9-(3-모르폴리노-프로폭시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일-옥시메틸)-4-이소프로필-6-(2-모르폴리노-에톡시)-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드의 결정 (m.p.: 145-150℃)를 수득하였다. 수율: 13.4%.

원소 분석:

C₃₁H₃₉N₅O₉S	C	H	N
산출량	56.61	5.98	10.65
확인량	57.41	6.34	9.59

실시예 15:2-아미노-3-(2-(4-메틸-피페라지노)에톡시)피리딘

2-(4-메틸-피페라지노)에탄올 2.6g (0.02mol) 및 트리페닐포스핀 6.4g을 아르곤 하에서 건조 테트라하이드로푸란 50㎖에 첨가하였다. 2-아미노-3-히드록시피리딘 2.2g (0.02mol)을 0-5℃에서 혼합물에 첨가하고, 디에틸 아조디카르복실레이트 4.2g을 소량씩 첨가하였다. 처음에 엷은 자색으로 다음에는 갈색으로 변한 반응 혼합물을 실온에서 4시간동안 교반시킨 다음 증발시켰다. 잔류물을 실리카겔 칼럼에서, 용출액으로 디클로로-메탄-메탄올 19:1 혼합물을 사용하여 크로마토그래피로 정제하였다. 순수 생성물을 함유하는 분획을 합하여 증발시켰다.

생성물: 적갈색 오일 형태의 2-아미노-3-(2-(4-메틸-피페라지노)에톡시)피리딘 1.2g (25%)

실시예 16:2-히드록시-9-(2-(4-메틸-피페라지노)에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]-피리미딘

실시예 2에서 기술된 방법에 따라 2-아미노-3-(2-(4-메틸-피페라지노)에톡시)피리딘으로부터, 2-히드록시-9-(2-(4-메틸-피페라지노)에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘의 결정 (m.p.: 180-182℃)을 수득하였다. 수율 34%.

실시예 17:2-(9-(2-(4-메틸-피페라지노)에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일-옥시메틸)-4-이소프로필-6-메톡시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)온-1,1-디옥사이드

실시예 3에서 기술된 방법에 따라 2-히드록시-9-(2-(4-메틸-피페라지노)에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘으로부터, 2-(9-(2-(4-메틸-피페라지노)에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일-옥시메틸)-4-이소프로필-6-메톡시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드의 결정 (m.p.: 103-106℃)을 수득하였다. 수율: 19%.

원소 분석:

C₂₇H₃₃N₅O₇S	C	H	N
산출량	56.73	5.82	12.25
확인량	54.51	5.17	11.02

실시예 18:2-((2,4-디클로로-벤조일)옥시메틸)-4-이소프로필-6-(2-모르폴리노-에톡시)-1,2-벤즈이소티아졸-3-(2H)-온-1,1-디옥사이드

2-모르폴리노-에탄올 0.13g (1.0mmol), 2-((2,4-디클로로-벤조일)옥시메틸)-4-이소프로필-6-히드록시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드 (EP-483928A1 실시예 1A) 및 건조 테트라하이드로푸란 10㎖중의 디에틸 아조디카르복실레이트 0.22g (1.2mmol)의 용액에 아르곤 대기하에서, 0-5℃로 트리페닐 포스핀 0.33g을 천천히 첨가하였다. 용액을 실온에서 20시간동안 교반시키고 난 후 진공하에서 증발시켰다.

생성된 오일을 무수 에탄올로 분쇄하여 백색 결정형 물질을 수득하였다. 결정을 여과하여 제거하고 무수 에탄올로 세척한 다음 진공하에서 건조시켰다.

생성물: 2-((2,4-디클로로-벤조일)옥시메틸)-4-이소프로필-6-(2-모르폴리노-에톡시)-1,2-벤즈이소티아졸-3-(2H)-온-1,1-디옥사이드 40㎎ (72%) (m.p.: 134-136℃).

실시예 19:2-(브로모메틸)-4-이소프로필-6-(2-모르폴리노-에톡시)-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드

2-((2,4-디클로로-벤조일)옥시메틸)-4-이소프로필-6-(2-모르폴리노-에톡시)-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드 1.2g (2mmol), 빙초산 5㎖, 무수 초산 0.5㎖의 혼합물에, 초산 용액 중의 36 v/w% 수소 브롬화물 6.0㎖을 실온에서 첨가하고, 반응 혼합물을 80℃에서 4시간동안 교반시킨 다음 증발시켰다. 잔류물을 디에틸 에테르로 분쇄하여 백색 결정형 물질을 수득하였다. 결정을 여과하여 제거하고 디에틸 에테르로 세척하여 진공하에서 건조시켰다.

생성물: 2-(브로모메틸)-4-이소프로필-6-(2-모르폴리노-에톡시)-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드 0.75g (80%) (m.p.: 192-194℃)

생물학적 비교 실험을 위해 사용되는 특허 출원 EP-0626378, 실시예 9E에 기술된 2-(9-(2-피롤리디노-에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일-옥시메틸)-4-이소프로필-6-메톡시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)온-1,1-디옥사이드의 합성

상기 기술된 방법에 의하여 제조된, 특허출원 EP 0626378에서 공지된, 2-히드록시-9-(2-피롤리디노-에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘 0.27g (1.0mmol)을 실온에서 건조 디메틸포름아마이드 5㎖ 중에 용해시켜서 트리에틸아민 0.29㎖ 및 2-브로모메틸-4-이소프로필-6-메톡시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드 0.32g (0.9mmol) 용액에 첨가하였다. 현탁액을 아르곤하에서 플러싱시키고 실온에서 60시간동안 교반시킨 다음, 얼음-물 200㎖에 부었다. 침전된 결정을 여과하여 제거하고 에탄올에서 결정화하여 헥산으로 세척하여 건조시켰다. 미정제 생성물을 디클로로-메탄-메탄올 (98:2) 혼합물을 용출액으로 사용하여 실리카겔 칼럼에서 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 합하여 증발시키고 결정을 건조시켰다.

생성물: 2-(9-(2-피롤리디노-에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일-옥시메틸)-4-(1-이소프로필)-6-메톡시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)온-1,1-디옥사이드 67㎎ (5%) (m.p.: 84-90℃)

원소 분석

C₂₆H₃₀N₄O₇S	C	H	N	S
산출량	57.55	5.57	10.33	5.91
확인량	52.8	5.40	8.80

생성물은 특허 출원 EP 0626378 실시예 9E에 기술된 생성물과 동일하였다.

경구 적용시에 화학식(I)의 화합물의 강한 엘라스타제 억제 활성을 하기 실험 결과로 나타낸다:

마우스에서의 사람 백혈구 엘라스타제 효소에 의해 유발된 급성 폐 손상 효과의 억제

방법:

약 6-8주된, 무게 22-26g의 수컷 NMRI 마우스에, 연구될 화학식(I)의 화합물 또는 공지된 유사한 화합물 각각의 카르복시메틸 셀룰로오스 중의 0.1% (w/v) 용액을 경구로 (per os) 투여하였다. 60분 후에 멸균된 생리 염화 나트륨 용액 25.0㎕중에 용해된 사람 백혈구 에라스타제 효소 12.5 인터내셔널 유닛을 기관내로 주입하였다.

3시간 후에 동물을 유레테인을 과량 투여하여 안락사시키고 허파로 생리 식염수 1㎖을 세척을 위해 도입하였다.

외과용 실에 의해 적소에 고정된 폴리에틸렌 캐뉼러의 삽입을 위해 만들어진 봉합 클립 및 작은 절개부를 열어서 기관을 창상부위에 노출시켰다. 1.00㎖ 주사기에 붙은 18 게이지 ×1½인치 바늘을 캐뉼러에 삽입시키고 공기 0.5㎖을 기도로부터 뽑았다. 다음에 1미리리터를 기도로 적하하였다. 다음에 가슴을 가볍게 마사지하였다. 주사기를 배관으로부터 제거하고 기관지폐포세척(BAL) 용액을 10.0㎖ 미터글라스로 배출되도록 하여 동물이 앙와위로 있을 때 허파로부터 회수가능한 세척 용액의 총부피를 결정하였다. 상기에서 언급된 적하과정을 세번 반복하였다. 다음, 트리톤 X100을 수집된 기관지 페포 세척 용액 (최종 농도: 0.2% v/v)에 첨가하여 세포 파쇄를 확보하고 헤모글로빈 양을 540nm에서 분광광도계로 측정하였다.

엘라스타제 효소 억제 화합물의 효과를 하기의 식에 따라 출혈 반응을 기초로 결정하였다:

% 억제 = [(VE-DE)/(VE-VS)]×100,

상기에서,

VE = 경구로는 부형제(vehicle)만으로 전처리되고 기관으로는 엘라스타제로 전처리된 군의 BAL 용액의 평균 흡광도;

DE = 경구로는 잠재적인 억제제 화합물로 전처리되고, 기관으로는 엘라스타제로 전처리된 군의 각 BAL 용액의 흡광도;

VS = 경구로는 부형제로 전처리되고, 기관으로는 멸균 생리 식염수로 전처리된 군의 BAL 용액의 평균 흡광도.

유사한 화합물로는 특허 출원 EP 0626378A1 실시예 9E에 기술된 구조적으로 가장 관련된 공지 화합물이 사용되었다. 이들의 합성은 참고예로 상기에 기재되었다.

실험 결과가 하기의 표 1에 기재되었다.

화합물 / 실시예 번호	P.O. 투여㎎/bw ㎏마우스	억제%
2-(9-(2-피페리디노-에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일-옥시메틸)-4-이소프로필-6-메톡시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드실시예 3.	10	80
2-(9-(3-모르폴리노-프로폭시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일-옥시메틸)-4-이소프로필-6-메톡시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드실시예 13.	10	56
2-(9-(2-(4-메틸-피페라지노)에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일-옥시메틸)-4-이소프로필-6-메톡시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드실시예 11.	10	42
2-(9-(3-모르폴리노-프로폭시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일-옥시메틸)-4-이소프로필-6-(2-모르폴리노에톡시)-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드실시예 14.	10	70
유사 화합물2-(9-(2-피롤리디노-에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일-옥시메틸)-4-이소프로필-6-메톡시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드(EP 626378, 실시예 9E)	10	15

상기 방법에 의해 결정된 바와 같이, 신규 2-(9-(2-피페리디노-에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일-옥시메틸)-4-이소프로필-6-메톡시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드의 경우에 마우스에 대한 경구 ED₅₀값은 2.6 ㎎/bw 이다.

공지 유사 화합물 (EP 0 626 378 A1, 실시예 9E)에 대해서, 마우스에 대한 경구 ED₅₀값은 상기 방법에 의해 결정된 바와 같이 23㎎/bw ㎏이다.

본 발명의 화학식(I)의 화합물은 강한 경구 활성을 나타내고 그 반면에 구조적으로 관련된 화합물의 경구 활성은 약함을 알 수 있다.

도 1은 화학식(I)을 나타내고, 도 2는 화학식(Ⅱ)를 나타내고, 도 3은 화학식(Ⅲ)을 나타낸다.

Claims

하기의 화학식(I)의 화합물, 이들의 염, 용매화합물 및 수화물:

(상기 식에서 R¹은 메틸, 에틸 또는 2-모르폴리노-에틸기이고 R²는 피페리디노, 모르폴리노 또는 4-메틸-피페라지닐기이고, n은 2 또는 3이다).
제 1항에 있어서, R¹은 메틸기이고, R²및 n은 제 1항에서 정의된 바와 같음을 특징으로 하는 화학식(I)의 화합물, 이들의 염, 용매화합물 및 수화물.
제 1항에 있어서, R²는 피페리디노기이고, R¹및 n은 제 1항에서 정의된 바와 같음을 특징으로 하는 화학식(I)의 화합물, 이들의 염, 용매화합물 및 수화물.
2-[9-(2-피페리디노-에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일-옥시메틸]-4-이소프로필-6-메톡시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드, 이의염, 용매화합물 및 수화물.
2-[9-(3-모르폴리노-프로폭시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일-옥시메틸]-4-이소프로필-6-메톡시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드, 이의 염, 용매화합물 및 수화물.
2-[9-(2-(4-메틸-피페라지노)-에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일-옥시메틸]-4-이소프로필-6-메톡시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드, 이의 염, 용매화합물 및 수화물.
2-[9-(3-모르폴리노-프로폭시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일-옥시메틸]-4-이소프로필-6-(2-모르폴리노-에톡시)-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,2-디옥사이드, 이의 염, 용매화합물 및 수화물.
2-[9-(2-피페리디노-에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일-옥시메틸]-4-이소프로필-6-메톡시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드 하이드로클로라이드.
2-[9-(2-피페리디노-에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일-옥시메틸]-4-이소프로필-6-메톡시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드 타르타레이트 염.
2-[9-(2-피페리디노-에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일-옥시메틸]-4-이소프로필-6-메톡시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드 푸마레이트 염.
2-[9-(2-피페리디노-에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일-옥시메틸]-4-이소프로필-6-메톡시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드 벤조에이트 염.
2-[9-(2-피페리디노-에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일-옥시메틸]-4-이소프로필-6-메톡시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드 시트레이트 염.
2-[9-(2-피페리디노-에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일-옥시메틸]-4-이소프로필-6-메톡시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드 만델레이트 염.
2-[9-(2-피페리디노-에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일-옥시메틸]-4-이소프로필-6-메톡시-1,2-벤즈이소티아졸-3(2H)-온-1,1-디옥사이드 4-이소프로필-6-메톡시-사카리네이트 염.
하나 이상의 화학식(I)의 화합물 (여기서, R¹, R²및 n은 제 1항에 정의된 바와 같다) 및/또는 이들의 염을 약제산업에서 적용되는 하나 이상의 보조 물질과 함께 함유함을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
제 15항에 있어서, 제 4항 내지 제 14항에 청구된 하나 이상의 화합물 및 약제산업에서 적용되는 하나 이상의 보조 물질을 함유함을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
하나 이상의 화학식(I)의 화합물 (여기서, R¹, R²및 n은 제 1항에 정의된 바와 같다) 및/또는 이들의 염을 약제산업에서 적용되는 하나 이상의 보조 물질과 함께 함유함을 특징으로 하는, 증가된 엘라스타제 농도에 의한 증후군의 치료를 위한 약제학적 조성물.
제 17항에 있어서, 하나 이상의 화학식(I)의 화합물 (여기서, R¹, R²및 n이 제 1항에 정의된 바와 같다) 및/또는 이들의 염, 수화물을 포함하는 용매화합물을 약제산업에서 적용되는 하나 이상의 보조 물질과 함께 함유함을 특징으로 하는, 만성 폐쇄성 폐질환 (COPD), 성인 호흡 곤란 증후군 (ARDS), 폐 고혈압증, 천식, 류마토이드 관절염, 염증성 대장 질환 및 암의 치료용 약제학적 조성물.
제 17항에 있어서, 화학식(I)의 화합물로서 제 4항 내지 제 14항의 화합물 중 하나 이상을 함유함을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
화학식(I)의 화합물 (여기서, R¹, R²및 n은 제 1항에 정의된 바와 같다)의 증가된 엘라스타제 농도에 의한 증후군의 치료용 용도.
제 20항에 있어서, 화학식(I)의 화합물 (여기서, R¹, R²및 n은 제 1항에 정의된 바와 같다)의 만성 폐쇄성 폐 질환 (COPD), 성인 호흡 곤란 증후군 (ARDS), 폐 고혈압증, 천식, 류마토이드 관절염, 염증성 대장 질환 및 암의 치료용 용도.
R¹, R²및 n이 제 1항에 정의된 바와 같음을 특징으로 하는 화학식(I)의 화합물 및 이들의 염의 제조 방법으로서, 화학식(Ⅱ)의 화합물을 화학식(Ⅲ)의 화합물과 반응시키는 단계; 및 생성된 화학식(I)의 화합물(R¹, R²및 n이 제 1항에 정의된 바와 같다)을 선택적으로 이의 염으로 전환시키거나 이의 염으로부터 유리시키는 단계를 포함함을 특징으로 하는 제조 방법:

,

(상기 화학식(Ⅱ)에서 R¹은 제 1항에 정의된 바와 같고, X는 할로겐 원자, 바람직하게는 클로로- 또는 브로모 원자이고; 상기 화학식(Ⅲ)에서 R²및 n은 제 1항에 정의된 바와 같다).
제 22항에 있어서, 산 결합에 적절한 화합물을 반응 과정 중에 사용함을 특징으로 하는 방법.
제 22항에 있어서, 반응을 유기 용매를 함유하는 매질(medium)에서 수행함을 특징으로 하는 방법.
제 23항에 있어서, 산 결합에 적절한 화합물로서 유기 아민, 바람직하게는트리에틸아민을 사용함을 특징으로 하는 방법.
제 24항에 있어서, 디메틸-포름아마이드를 유기 용매로 사용함을 특징으로 하는 방법.
R²가 피페리디노, 모르폴리노 또는 4-메틸-피페라지닐기이고, n이 2 또는 3임을 특징으로 하는 화학식(Ⅲ)의 화합물 및 이들의 염.
2-히드록시-9-(2-피페리디노-에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘.
2-히드록시-9-(3-모르폴리노-프로폭시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘.
2-히드록시-9-(2-(4-메틸-피페라지노)-에톡시)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘.
화학식(Ⅲ)의 화합물 (여기서, R²및 n이 제 27항에 정의된 바와 같다) 또는 이들의 염의 화학식(I)의 화합물의 제조용 용도.