CZ20022016A3

CZ20022016A3 - Sacharinové deriváty jako orální aktivní inibitory elastasy

Info

Publication number: CZ20022016A3
Application number: CZ20022016A
Authority: CZ
Inventors: Péter Arányi; Sándor Bátori; Stéphane Dessilla; István Hermecz; Zoltán Kapui; Ferenc Lévai; Endre Mikus; Marc Pascal; NAGY Lajos T.; Bruno Simonot; Szabó Katalin Urbán; Márton Varga; Debreczy Lelle Vasváriné
Original assignee: Sanofi-Synthelabo
Priority date: 1999-12-17
Filing date: 2000-12-14
Publication date: 2003-04-16
Also published as: US20030114449A1; ZA200204604B; EE200200317A; AR035389A1; IS6418A; NO20022838D0; HUP9904624A2; WO2001044245A1; CN1411458A; JP2003516990A; BG106811A; BR0016364A; HUP9904624D0; CA2395486A1; EP1255756A1; RU2002119007A; NO20022838L; PL355316A1; IL149864A0; KR20030022769A

Description

Deriváty sacharinu jako orálně aktivní inhibitory elastázy

Oblast techniky

Tento vynález se týká orálně aktivních sloučenin obecného vzorce (I), které jsou užitečné jako inhibitory enzymů elastázového typu, například inhibitorů elastázy lidských leukocytů; jejich solí, solvátů, hydrátů, těchto sloučenin nebo jejich solí. Dále se týká farmaceutických přípravků obsahujících tyto sloučeniny, použití těchto sloučenin obecného vzorce (I), přípravy sloučenin obecného vzorce (I) a nových meziproduktů obecného vzorce (III) používaných pro jejich přípravu.

Dosavadní stav techniky

Z literatury je známo, že několik skupin sloučenin má elastázovou inhibiční aktivitu, zejména inhibiční aktivitu vůči lidské leukocytdvé elastáze. Mezi takové typy sloučenin patří například deriváty peptidyltrifluormethylketonu, deriváty 7-dibromcefamu nebo deriváty benzisothiazolonu.

Mnoho derivátů 1,2-benzisothiazol-(1H)-3-onu majících in vitro inhibiční účinek vůči elastáze lidských leukocytů je popsáno v evropských patentových přihláškách č. 626 378 a 483 928 a v J. Med. Chem. 38 (23), s. 4687 - 4692 (1995)

Typickými zástupci těchto sloučenin jso-u' 2-(3-chlor-4-oxo4H-pyrido[1,2-a)pyrimidin-2-yl)-oxymethyl-4-isopropyl-6methoxy-1,2-benzisothiazol-(1H)-3-on-l,1-dioxid (EP0626378A, příklad 4D) a 2-[9-(2-pyrrolidino-ethoxy)-4-oxo4H-pyrido[1,2-a]pyrimidin-2-yl]-oxymethyl-4-isopropyl-6methoxy-1,2-benzisothiazol-(1H)-3-on-l,1-dioxid (EP066378A, příklad 9E), u těchto sloučenin není z výše « · 0 · ·

O · · ·

- z “ * ··· · uvedené literatury ani z jiných odkazů náležících do techniky známa žádná orální aktivita.

Cílem tohoto vynálezu bylo nalézt nové molekuly « · · · • 9 · • 9 · · • · · • · 9 · · · stavu inhibující elastázu, které mají vysokou orální inhibiční aktivitu vůči enzymům elastázového,typu, zejména vůči elastáze z lidských leukocytů, dobrou stabilitu, dlouhotrvající účinek jak in vitro tak in vivo, vysokou selektivitu, dobrou absorbovatelnost, příznivé farmakochemické a fyzikálně chemické vlastnosti, které by bylo možné využít při vývoji léčiv.

Původci tohoto vynálezu bylo zjištěno, že v případě struktury 2-(4-oxo-4H-pyrido[1,2-a]pyrimidin-2-yl)oxymethyl-4-isopropyl-6-substituovaného-1,2-benzisothiazol3(2H)-on-1,1-dioxidu lze při zavádění speciálních substituentů do polohy 9 pyrido[1,2-a]pyrimidinové části a methoxyskupiny, ethoxyskupiny nebo 2-morfolinoethoxyskupiny do polohy 6 benzisothiazové části lze připravit nové inhibitory enzymů, které mají velmi významnou orální aktivitu v kombinaci s mnoha žádoucími a příznivými vlastnostmi.

Podstata vynálezu

Tento vynález se konkrétně týká sloučenin obecného vzorce (I), kde

R¹ je methyl, ethyl nebo 2-morfolinoethylová skupina;

R² je piperidinoskupina, morfolinoskupina nebo 4-methylpiperazinoskupina; n je 2 nebo 3;

a jejich solí, solvátů, včetně hydrátů.

• · • · · • ·

Výrazem solváty jsou míněny solváty sloučenin obecného vzorce (I) nebo solváty solí sloučenin mající obecný vzorec (I). Sůl tvořící součást sloučenin obecného vzorce (I) může být jakákoliv farmaceuticky přijatelná organická nebo anorganická sloučenina, jako jsou například pro racemické nebo opticky aktivní organické sloučeniny: kyselina jantarová, kyselina maleinová, kyselina fumarová, kyselina vinná, kyselina citrónová, kyselina benzoová, kyselina mandlová a anorganické sloučeniny: kyselina chlorovodíková, kyselina bromovodíková, kyselina dusičná, kyselina orthofosforečná nebo kyselina sírová.

Obzvláště výhodné sloučeniny obecného vzorce (I) obsahují methoxyskupinu nebo 2-morfolino-ethylskupinu jako substituent R¹, piperidinoskupinu, 4-methylpiperazinoskupinu nebo morfolinoskupinu jako R² a n je 2 nebo 3.

Dále tento vynález poskytuje způsob přípravy sloučenin obecného vzorce (I), který zahrnuje reakci sloučeniny obecného vzorce (II), kde význam R¹ je stejný, jak je uvedeno výše, a X je halogenový atom, se sloučeninou obecného vzorce (III), kde významy R² a n jsou stejné, jak je uvedeno výše, a pokud je to žádoucí, přeměnu výsledných sloučenin obecného vzorce (I), kde významy R¹, R² a n jsou stejné, jak je uvedeno výše, na jejich soli nebo jejich uvolnění z těchto solí.

Reakce sloučenin obecných vzorců (II) a (III) je výhodně prováděna v organickém rozpouštědle, jako je například dimethylformamid, za přítomnosti činidla vážícího kyseliny, výhodně za přítomnosti organické nebo anorganické báze, jako je například triethylamin, při pokojové teplotě nebo vyšší.

Halogenový atom může být fluor, chlor, brom nebo jód. .

Příprava známých sloučenin obecného vzorce (II) a nových sloučenin obecného vzorce (III) začíná ze sloučenin dostupných na trhu způsoby, které jsou známé odborníkům v oboru. ’

Reakcí 2-amino-3-hydroxypyridinu (Biochem J. 46 s. 506-508 (1950)) s 1-(2-halogen-ethyl)piperidinem nebo l—(3— halogen-propyl)morfolimem nebo 2-(4-methylpiperazino)ethanolem byl připraven příslušný 3substituovaný piridin. Reakce halogenderivátů s 2-amino-3hydroxypyridinem byla prováděna ve vodně-organické rozpouštědlové směsi, výhodně v přítomnosti přenosového katalyzátoru. Substituované alkoholy byly spřaženy s 2amino-3-hydroxypyridinem prostřednictvím Mitsunobovy reakce (Organic Reactions /Editor D. Hughes/ sv. 42 s. 335-656 JohnWiley and Sons, New York, 1992.

Výsledné 2-amino-3-substituované pyridiny reagovaly s aktivním esterem kyseliny malonové, například s bis-2,4,6trichlorfenylesterem (Monatsch. Chem. 89 S 143-153 (1958)), výhodně při zvýšené teplotě, popřípadě v přítomnosti fosforylchloridu za vzniku 2-hydroxy-9substituovaných-4-oxo-4H-pyrido[1,2-a]pyrimidinů, nových sloučenin obecného vzorce (III), kde významy R² a n jsou stejné, jak je uvedeno výše, což je další aspekt tohoto vynálezu.

Sloučeniny obecného vzorce (II), kde význam R¹ je stejný, jak je specifikováno výše, X je halogenový atom, výhodně chlor nebo brom, byly získány přípravou 4isopropyl-6-methoxy- nebo 4-isopropyl-6-ethoxy-l,2benzíisothiazol-3(2H)-on-1,1-dioxidu (J. Med. Chem. 38 (23) s. 4687 - 4692 (1995), Synlett, listopad 1994, s. 933 až 934)), podobně jak je popsáno v evropských patentových přihláškách č. 626 378 Al příklad 1(b) nebo 483 928 Al příklad 51, a jejich přeměnou na odpovídající 2chlormethyl nebo 2-brommethyl deriváty.

• « · · 4« 9 0 ·*

9 0 9 9 0 9 0 0 8 0

9 0 0 0 9 0 9

999» 9 · 09 · * • 9 9 9 9 0 0

999' 90 999 0000 89 9999

2,4-Dichlor-benzoyloxy-methylový derivát byl připraven podle způsobu uvedeném v přikladu IA posledně zmiňované evropské patentové přihlášky. 2,4-Dichlor-benzoyloxymethylový derivát může být také přeměněn na 2halogenethylderivát.

6-Hydroxyskupina 2-(2,4-dichlor-benzoyloxy-methyl)-4isopropyl-6-hydroxy-l,2-benzisothiazol-3(2H)-on-1,1-dioxidu popsaného v EP 483 928 Al v příkladu 1AW může být přeměněna na heteroarylalkyloxyskupinu.

Dalším předmětem tohoto vynálezu jsou farmaceutické produkty obsahující sloučeniny obecného vzorce (I) a/nebo jejich soli, solváty a hydráty, tyto produkty jsou výhodně určeny pro orálni aplikaci, ale inhalačni a parenterální produkty také spadají do rozsahu tohoto vynálezu. Výše uvedená léčiva mohou být tuhé látky nebo kapaliny, jako jsou tablety, kapsle, roztoky, suspenze nebo emulze.

Výhodné jsou tuhé formy léčiv, především jsou výhodné tablety a kapsle. Výše uvedená léčiva jsou připravena za použití vehikul a běžných technologických pracovních postupů používaných ve farmaceutickém průmyslu.

Sloučeniny obecného vzorce (I) podle tohoto vynálezu jsou užitečné při léčbě onemocnění, jejichž vznik souvisí s uvolněním, vysokou koncentrací a proteolytickou aktivitou enzymu elastázy. Mezi taková onemocnění například patří zánětlivá střevní onemocnění (dráždivá střevní úzkost, dráždivý střevní syndrom, Crohnova choroba, vředovitý zánět tlustého střeva), plicní hypertenze, pediatrická bronchopulmonární dysplazie, rhinitida, chronické obstruktivní onemocnění plic (COPD), cistitida, cistická fibróza, akutní pankreatitida, hepatitida, imunokomplexem zprostředkovaný III. typ imunologického zánětu (lupus erythematodes, Goodpasture syndrom, chronická hepatitida, zánět alveolu), dermatitida, lupénka, růžovka, vaskulitida,

IV. typ imunologických zánětlivých reakcí (například v průběhu tuberkulózy, lepry, Leishmaniózy, blastomykózy, Schistoniázy), glomerulární nefritida, dnové artritida, roztroušená skleróza, průduškové astma, syndrom respirační úzkosti dospělých (ARDS), nedostatek αχ-antitrypsinu, chronická bronchitida, rozedma (včetně neonatšlní rozedmy plic), zápal plic neutrofilního původu, chirurgický zákrok, sepse, trauma, akutní záněty, infekce, DIC-syndrom, infarkt myokardu, revmatická artritida a rakovina.

Leukocyty, proteolytické enzymy uvolněné z leukocytů, jako jsou elastázy, hrají také důležitou úlohu při vývoji různých tkáňových poškození způsobených reperfuzí po ischemické příhodě.

Proto mohou hrát sloučeniny obecného vzorce (I) podle tohoto vynálezu významnou úlohu při prevenci, léčbě a hojení poškozených tkání způsobených reperfuzí, ke které dochází po ischemické události.

Dalším aspektem tohoto vynálezu je použití sloučenin obecného vzorce (I) při léčbě onemocnění uvedených výše.

Ná obsah všech publikací, které zahrnují, ale nejsou omezeny pouze na patenty a patentové přihlášky uvedené v tomto popisu, se tímto odkazuje. Odborníkům v oboru je také zřejmé, že sloučenina obecného vzorce (I) může být také současně podávána s dalšími terapeutickými a/nebo profylaktickými činidly a/nebo léčivy, která s ní nejsou medicínsky neslučitelná.

V následujících příkladech jsou popsány sloučeniny obecných vzorců (I) a (III), jejich příprava a biologická aktivita, přičemž tyto příklady neomezují patentové nároky.

··· *

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

2-Amino-3-(piperidino-ethoxy)pyridin

110,12 g (1 mol) 2-Amino-3-hydroxypyridinu (Biochem J. 45 s. 506 - 508 (1950)) bylo rozpuštěno v 500 ml 40% roztoku hydroxidu sodného. Tento hnědý roztok byl promyt argonem a postupně byly za míchání přidány 2 g tetrabutylamoniumjodidu v 500 ml dichlormethanu a potom byl přidán 1 mol 1-(2-chlorethyl)piperidinchloridu (Chem. Ber. 38 S3136 - 3139(1905)). Takto připravená směs byla míchána při pokojové teplotě po dobu 5 dnů, potom bylo přidáno 500 ml dichlormethanu a 200 ml vody, fáze byly dobře promíchány a odděleny. Vodná fáze byla extrahována 2x 150 ml dichlormethanu, spojené organické fáze byly promyty 3x 200 ml vody, vysušeny síranem hořečnatým a odpařeny.

Načervenale hnědý krystalický surový produkt byl krystalizován z acetonu.

Produkt: 144,71 g (38 %) 2-amino-3-(piperidinoethoxy) pyridin (b.t. 105 - 106 °C).

NMR, δ_Η (200 MHz, DMSO-D6) : 1,37 (2H, m, CH₂(CH₂CH₂) ₂N ),

1,48 (4H, m, CH₂ (CH₂CH₂) ₂N) , 2,42 (4H, m, CH₂ (CH₂CH₂) ₂N) ,

2,64 (2H, t, J 5,8, NCH₂CH₂O) , 4,01 (2H, t, J 5,8,

NCH₂CH₂O), 5,63(2H, s, NH₂) , 6,47 (1H, dd, J 7,7, 5,0,

5-H), 7,03 (1H, dd, J 7,7, 1,2,6-H), 7,51 (1H, dd J 5,0, 1,2, 4-H).

Příklad 2

2-Hydroxy-9-(2-piperidino-ethoxy)-4-oxo-4Hpyrido[1,2-a]pyrimidin

Směs 88,5 g (0,4 mol) 2-amino-3-(2-piperidinoethoxy ) pyridinu a 550 ml bezvodého acetonu byla zahřívána

k varu pod zpětným chladičem, potom k této směsi bylo po malých dávkách přidáno 185,2 g (0,4 mol) bis-2,4,6trichlorfenylmalonatu. Směs byla zahřívána další 1,5 hodiny, potom byla ochlazena a umístěna přes noc do lednice. Vysrážené krystaly byly odfiltrovány, matečný louh byl zahuštěn za vzniku dalších krystalů, které byly přidány k dříve získaným krystalům a promyty acetonem. Výsledný surový produkt byl přečištěn rychlou chromatografií. Nejdříve byl dichlormethanem eluován zbývající 2,4,,6trichlorfenol a potom byla směsí methanol-dichlormethan (1:1) eluována titulní sloučenina, která byla odpařena a vysušena v prostředí vakua.

Produkt: 69,31 g (60 %) 2-hydroxy-9-(2-piperidino-ethoxy)4-oxo-4H-pyrido[1,2-a]pyrimidin (b.t. 171 - 172 °C).

NMR δ_Η (200 MHz, DMSO-D6) : 1,39 (2H, m, CH₂(CH₂CH₂)₂N) , 1,50 (4H, m, CH₂ (CH₂CH₂) ₂N) , 2,50 (4H, m, CH₂ (CH₂CH₂) ₂N) , 2,83 (2H, t, J 5,9, NCH₂CH₂O) , 4,27 (2H, t, J 5,9, NCH₂CH₂O) ,

5,16 (ÍH, s, 3-H), 7,13 (ÍH, t, J 7,3, 7-H), 7,50(lH, d, J 7,3, 8-H), 8,50 (ÍH, d, J 6,4, 6-H).

Příklad 3

2-(.9- (2-Piperidino-ethoxy) -4-oxo-4H-pyrido [1,2-a] pyrimidin2-yl-oxymethyl)-4-isopropyl-6-methoxy-l,2-benzisothiazol3(2H)-on-1,1-dioxid

57,57 g (0,2 mol) 2-Hydroxy-9-(2-piperidino-éthoxy)-4oxo-4H[1,2-a]pirimidinu bylo rozpuštěno v 400 ml bezvodého dimethylformamidu a při pokojové teplotě bylo přidáno 31 ml triethylaminu a 69,66 g (0,2 mol) 2-brommethyl-4-isopropyl6-methoxy- 1, 2-benzisothiazo'l-3 (2H)-on-1,1-dioxidu. Tato suspenze byla míchána v atmosféře argonu při pokojové teplotě po dobu 6 hodin. Potom byla suspenze nalita do 1200 ml ledové vody, vzniklé krystaly byly odfiltrovány a překrystalovány z methanolu.

··· ·

Produkt: 15,39 g (17 %) 2-(9-(2-piperidino-ethoxy)-4-oxo4H-pyrido[1,2-a]pyrimidin-2-yl-oxymethyl)-4-isopropyl-6methoxy-1,2-benzisothiazol-3(2H)-on-1,1-dioxid (b.t. 138 až 139 °C).

Elementární analýza

C₂7H₃₂N₄O7S	C	H	N	S
Vypočtená hodnota	58,26	5, 79	10, 07	5,76
Stanovená hodnota	57.41	6, 02	9,77	5,39

NMR δ_Η (200 MHz, CDC1₃) : 1,30 (6H, d, J 6,8 (CH₃)₂CH, 1,62 (4H, m, CH₂(CH₂CH₂)₂N) , 2,64 (4H, m, CH₂ (CH₂CH₂) ₂N) , 2,98 (2H, t, J 5,8, NCH₂CH₂O) , 3,96 (3H, s, CH₃O) , 4,23 (1H, m, J6,8, (CH₃)₂CH), 4,23 (2H, t, J 5,8, NCH₂CH₂O) , 5,90 (1H, s,

3'-H), 6,23 (2H, s, NCH₂O) , 7,05 (1H, t, J 7,4, 7'-H), 7,14 (1H, dd, J 7,7; 1,3, 8'-H), 7,19 - 7,21 (2H, m, 5-H, 7-H), 8,72 (1H, dd J 7,0, 1,3, 6'-H).

Příklad 4 ¹

Hydrochlorid 2- ( 9-(2-piperidino-ethoxy)-4-oxo-4H-pyrido [1,2-a]pyrimidin-2-yl-oxymethyl)-4-isopropyl-6-methoxy~l,2benzisothiazol-3(2H)-on-1,1-dioxidu

1,5 g (2,7 mmol) 2-(9-(2-Piperidino-ethoxy)-4-oxo-4Hpyrido[1,2-a]pyrimidin-2-yl-oxymethyl)-4-isopropyl-6methoxy-1,2-benzisothiazol-3(2H)-on-1,1-dioxidu bylo rozpuštěno ve 100 ml diethyletheru a k této směsi bylo přidáno 2,5 ml 20 % (m/v) chlorovodíku v diethyletheru. Reakční směs byla míchána po dobu 1 hodiny při pokojové teplotě. Vzniklé krystaly byly odfiltrovány, vysušeny v

• to to to exsikátoru za přítomnosti hydroxidu sodného do konstantní hmotnosti.

Produkt: 1,55 g (97 %) hydrochlorid 2-(9-(2-piperidinoethoxy)-4-oxo-4H-pyrido[ 1,2-a]pyrimídin-2-yl-oxymethyl)-4isopropyl-6-methoxy-l,2-benzisothiazol-3(2H)-on-1,1-dioxidu (b.t. 115 - 120 °C).

NMR δ_Η (200 MHz, CDC1₃)': 1,26 (6H, d, J 6,8 (CH₃)₂CHO, 1,71 2H, m, CH₂ (CH₂CH₂) ₂N) , 3,64 (4H, m, CH₂ (CH₂CH₂) ₂N) , -2, 64: (4H, m, CH₂ (CH₂CH₂) ₂N) , 2,98 (2H, t, J 5,8, NCH₂CH₂O) , 3,96 (3H,

S, CH₃O) , 4,23 (1H, m, 6,8, (CH₃)₂CHO), 4,62 (2H, t, J 5,8

NCH₂CH₂O) , 5,78 (1H, s, 3'-H), 6,10 (2H, s, NCH₂O) ,

7,31 - 7,40 (2H, m, 5-H, 7'- Η), 7,63 (1H, d J 7,0, 8'-H), 7,79 (1H, d, J 2,3, 7-H), 8,65 (1H, d, J 7,3, 6'-H), 10,26 (1H, s) .

Příklad 5

Monovinanová sůl 2-(9-(2-piperidino-ethoxy)-4-oxo-4H-pyrido [1,2-a]pyrimidin-2-yl-oxymethyl)-4-isopropyl-6-methoxy-l,2benzisothiazol-3(2H)-on-1,1-dioxidu.

4,4 g (8,0 mmol) 2-(9-(2-piperidino-ethoxy)-4-oxo-4Hpyrido[1,2-a]pyrimidin-2-yl-oxymethyl)-4-isopropyl-6methoxy-1,2-benzisothiazol-3(2H)-on-1,1-dioxidu bylo rozpuštěno v horkém methanolu (70 ml) a k tomuto roztoku bylo přidáno 1,2 g (8,0 mmol) kyseliny vinné. Reakční směs byla míchána po dobu 15 minut a potom byla ochlazena 10 °C; vzniklé krystaly byly odfiltrovány, promyty a sušeny v prostředí vakua.

Produkt: 4,63 g (82%) titulní sloučeniny (b.t. 158 °C).

Příklad 6

Monofumarátová sůl 2-(9-(2-piperidino-ethoxy)-4-oxo-4Hpyrido[1,2-a]pyrimidin-2-yl-oxymethyl)-4-isopropyl-6methoxy-1,2-benzisothiazol-3 (2H) -on-1 ,.1-dioxidu

Postup přípravy byl shodný s postupem popsaným v příkladu 5 s tím rozdílem, že bylo použito 5,0 g (9,0 mmol) báze výchozí sloučeniny a 1,05 g (9,0 mmol) kyseliny fumarové. Tímto postupem bylo připraveno 4,20 g (69 %) titulní sloučeniny (b.t. 183 °C).

Příklad 7

Benzoátová sůl 2-(9-(2-piperidino-ethoxy)-4-oxo-4H-pyrido[1,2-a]pyrimidin-2-yl-oxymethyl)-4-isopropyl-6-methoxy-l,2benzisothiazol-3(2H)-on-1,1-dioxidu

Postup přípravy byl shodný s postupem popsaným v příkladu 5 s tím rozdílem, že bylo použito 4,88 g (8,76 mmol) báze výchozí sloučeniny a 1,07 g (8,76 mmol) kyseliny benzoové. Konečný produkt byl nakonec krystalizován v methyl-terc.butyletheru, tímto postupem bylo získáno 4,00 g (67 %) titulní sloučeniny (b. t. 114 °C) .

Příklad 8

Monocitrátová sůl 2-( 9-(2-piperidino-ethoxy)-4-oxo-4Hpyrido[1,2-a]pyrimidin-2-yl-oxymethyl)-4-isopropyl-6methoxy-1,2-benzisothiazol-3(2H)-on-1,1-dioxidu.

Postup přípravy byl shodný s postupem popsaným v příkladu 5 s tím rozdílem, že bylo použito 7,30 g (13,11 mmol) báze výchozí sloučeniny a 2,52 g (13,11 mmol) kyseliny citrónové. Konečný produkt byl nakonec krystalizován v methyl-terc.butyletheru, tímto postupem bylo získáno 10,80 g (kvantitativní výtěžek) titulní sloučeniny (b. t. 152 °C) .

• ·· *

Příklad 9

2-(9-(2-Piperidino-ethoxy)-4-oxo-4H-pyrido[1,2-a]pyrimidin2-yl-oxymethyl)-4-isopropyl-6-methoxy-l,2-benzisothiazol3(2H)-on-1,1-dioxid-L-mandelat

Postup přípravy byl shodný s postupem popsaným v příkladu 5 s tím rozdílem, že bylo použito 7,00 g (12,58 mmol) báze výchozí sloučeniny a 1,91 g (12,58 mmol) kyseliny L-mandlové. Konečný produkt byl nakonec krystalizován v cyklohexanu, tímto postupem bylo získáno 7,60 g (85 %) titulní sloučeniny (b. t. 102 °C).

Přiklad 10

4-Isopropyl-6-methoxy-sacharinatová sůl 2-(9-(2-piperidinoethoxy)-4-oxo-4H-pyrido[1,2-a]pyrimidin-2-yl-oxymethyl)-4isopropyl-6-methoxy-l,2-benzisothiazol-3(2H)-on-1, l-dioxidu

55,7 mg 2-(9-(2-Piperidino-ethoxy)-4-oxo-4Hpyrido[1,2-a]pyrimidin-2-yl-oxymethyl)-4-isopropyl-6methoxy-1,2-benzisothiazol-3(2H)-on-1,l-dioxidu bylo rozpuštěno ve 2 ml methanolu (70 ml) a k tomuto roztoku bylo přidáno 25,5 mg 4-isopropyl-6-methoxysacharinu rozpuštěného ve 2 ml ethanolu. Reakční směs byla míchána po dobu 30 minut při pokojové teplotě, vzniklé krystaly byly odfiltrovány, promyty 2x 1 ml studeného methanolu a sušeny v prostředí vakua při pokojové teplotě.

Produkt: 45,6 mg (60%) titulní sloučeniny (b. t. 203 - 205 °C) .

• ··

Příklad 11

2-Amino-3-(3-morfolino-propoxy)pyridin

1,68 g (0,042 mol) Hydroxidu sodného bylo rozpuštěno v 40 ml methanolu a k tomuto roztoku bylo přidáno 4,62 g 2amino-3-hydroxypyridinu. Vzniklá směs byla míchána 20 minut, potom byla odpařena do sucha. Zbytek byl rozpuštěn v 40 ml methylsulfoxidu a k směsi bylo pomalu za stálého ochlazování ledovou vodou přidáváno 6,91 g (0,042 mol)

1- .(3-chlorpropyl)morfolin. Tato směs byla míchána při pokojové teplotě po dobu 18 hodin, potom byla nalita do 200 ml ledové vody a extrahována 3x 30 ml chloroformu. Spojené organické fáze byly promyty 5x 30 ml vody, vysušeny bezvodým síranem sodným a odpařeny.

Produkt: 7,45 g (74%) 2-amino-3-(3-morfolinopropoxy ) pyridin (b. t. 79 - 81 °C).

NMR δδ_Η (200 MHz, CDC1₃) : 2,07 (2H, m, J 6,2, CH₂CH₂CH₂) 2,44 - 2,52 (6H, m, CH₂N(CH₂CH₂)₂O) , 3,72 (4H, t, J 4,6 N(CH₂CH₂)₂O) , 4,04 (2H, t, J 6,2, CH₂CH₂CH₂O), 6,57 (1H, dd,

J 7,7, 5,0, 5-H), 6,93'(1H, dd, J 7,7, 1,2, 6-H) , 7,77 (1H, dd, J 5,0, 1,2, 4-H).

Příklad 12

2- Hydroxy-9-(3-morfolino-propoxy)-4-oxo-4H-pyrido[1,2-a]pyrimidin

Postupem shodným s postupem popsaným v příkladu 2 byly z 2-amino-3-(3-morfolino-propoxy)pyridinu připraveny krystaly 2-hydroxy-9-(3-morfolino-propoxy)-4-oxo-4Hpyrido[1,2-a]pyrimidinu (b.t. 200 - 202 °C), výtěžek 63 %.

NMR δ_Η (200 MHz, DMSO-D6) : 1,97 (2H, m, J 4,6 CH₂CH₂CH₂) ,

2,35 - 2,52 (6H, m, CH₂N (CH₂CH₂) ₂O) , 3,56 (4H, t, J 6,4, N(CH₂CH₂)₂O) , 4,20 (2H, t, J 6,4, CH₂CH₂CH₂O) , 5,19 (1H, S,

7-H), 7,50 (1H, dd, J 7,7; 0,9,

0,9, 6-H) .

999 9 • 9

999 99 9·

999 9 9 9 9 9

9 9 9 9 • 9 9 9 9 ·

9 9 9 9

9999999 99 9999

3-Η) , 8-H) ,

7,18 (1H, t, J 7,3, 8,51 (1H, d, J 7,0;

Příklad 13

2-(9-(3-Morfolino-propoxy)-4-oxo-4H-pyrido[1,2-a]pyrimidin2-yl-oxymethyl)-4-isopropyl-6-methóxy-l,2-benzisothiazol3(2H)-on-1,1-dioxid

Postupem shodným s postupem popsaným v příkladu 3 byly z 2-hydroxy-9-(3-morfolino-propoxy)-4-oxo-4H-pyrido[1,2-a]pyrimidinu připraveny krystaly 2-(9-(3-morfolino-propoxy)4-oxo-4H-pyrido[1,2-a]pyrimidin-2-yl-oxymethyl)-4isopropyl-6-methoxy-l,2-benzisothiazol-3(2H)-on-1,1-dioxidu (b. t. 76 - 80 °C). Výtěžek 17,5 %.

Elementární analýza

C₂7H₃₂N4O8S	C	H	N
Vypočtená hodnota	56, 63	5,63	9,78
Stanovená hodnota	56,57	5,76	9,56

NMR δ_Η (200 MHz, CDC1₃) : 1,30 (6H, d, J 6,8, (CH₃)₂CHO),

2,18 (2H, m, J 6,8, CH₂CH₂CH₂) , 2,52 (4H, t, J 4,5,

N (CH₂CH₂CH₂O) , 3,72 (4H, t, J 4,5, N (CH₂CH₂) ₂O) , 3,96 (3H, s, CH₃O), 4,22 - 4,28 (3H, m, (CH₃)₂CH, NCH₂CH₂CH₂O) , 5,91 (1H, s, 3'-H), 6,26 (2H, s, NCH₂O) , 7,08 (1H, t, 7,4, 7'-H),

7,14 (1H, dd, J 7,7, 1,3, 8'-H), 7,19 (1H, s, 5-H), 7,26 (1H, s, 7-H)’, 8,72 (1H, dd, J 7,0, 1,3, 6'-H).

Příklad 14

2-(9-(3-Morfolino-propoxy)-4-oxo-4H-pyrido[1,2-a] pyr imidin2-yl-oxymethyl)-4-isopropyl-6-(2-morfolino-ethoxy)-1,2♦ 9 _ _

999 9

benzisothiazol-3(2H)-on-1,1-dioxid

Postupem shodným s postupem popsaným v příkladu 3 byly z 2-hydroxy-9-(3-morfolino-propoxy)-4-oxo-4Hpyrido[1,2-a]pyrimidinu a 2-brommethyl-4-isopropyl-6-(2morfolino-ethoxy)-1,2-benzisothiazol-3(2H)-on-1,1-dioxidu připraveny krystaly 2-(9-(3-morfolino-propoxy)-4-oxo-4Hpyrido[1,2-a]pyrimidin-2-yl-oxymethyl)-4-isopropyl-6- (2morfolino-ethoxy)-1,2-benzisothiazol-3(2H)-on-1,1-dioxidu (b.t. 145- 150 °C). Výtěžek 13,4 %.

Elementární analýza

C₃₁H₃₉N₅O₉S	C	H	N
Vypočtená, hodnota	56, 61	5,98	10, 65
Stanovená hodnota	57,41	6,34	9, 59

NMR δ_Η (200 MHz, CDC1₃) : 1,30 (6H, d, J 6,8, (CH₃)₂CH), 2,18 (2H, m, J 6,8, CH₂CH₂CH₂) , 2,51 -2,61 (8H, m,

2*N (CH₂CH₂)₂O), 2,69 (2H, t, J 7,1, NCH₂CH₂CH₂O) , 2,85 (2H, t, J, 5,6, NCH2CH2O) , 3,71 - 3,77 (8H, m, 2*N (CH₂CH₂) ₂O) ,

4,19 - 4,28 (5H, ra, (CH₃)₂CH, NCH₂CH₂O, NCH₂CH₂CH₂O, 5,91 (1H, s, 3'-H), 6,26 (2H, s, 7 ^Z-H), 7,14 (1H, dd, J 6,5, 7,27 (1H, s, 7-H), 8,72 (1H,

NCH₂O) , 7,09 (1H, t, J 6,5, 1,5, 8'-H), 7,21 (1H, s, 5-H), dd, J 6,5, 1,5, 6'-H) .

Příklad 15

2-Amino-3-(2-(4-methyl-piperazino)ethoxy)pyridin

K 50 ml bezvodého tetrahydrofuranu bylo v prostředí argonu přidáno 2,6 g (0,02 mol) 2-(4-methylpiperazino) ethanol a 6,4 g trifenylfosfinu. K takto připravené směsi bylo při teplotě 0 - 5 °C přidáno 2,2 g (0,02 mol) 2-amino-3-hydroxypyridinu a potom bylo po • · · '* * · kapkách přidáno 4,2 g diethylazodikarboxylatu. Reakční směs měnící barvu z fialové do hnědé byla míchána při pokojové teplotě po dobu 4 hodin a potom byla odpařena. Zbytek byl chromatograficky přečištěn na silikagelové koloně za použití směsí dichlormethan - methanol 19 : 1 jako eluentu. Frakce obsahující čistý produkt byly shromažďovány a odpařeny.

Produkt: 1,2 g (25 %) 2-amino-3-(2-(4-methyl-piperazino)ethoxy)pyridin, červenohnědý olej.

NMR δ_Η (200 MHz, DMSO-D6) : 2,13 (3H, s, CH₃N), 2,37 (4H, s, CH₃N(CH₂)₂), 2,48 (4H, m, (CH₂)₂N CH₂) , 2,68 (2H, t, J 5,8, NCH₂CH₂O), 4,02 (2H, t, J 5,8, NCH₂CH₂O) , 5,60 (2H, s, NH₂) , 6,47 (1H, dd, J 7,7, 5,0, 5-H), 7,02 (1H, dd, J 7,7; 1,2,

6-H) , 7,50 (1H, dd, J 5,0; 1,2, 4-H) .

Příklad 16

2-Hydroxy-9-(2-(4-methyl-piperazino)ethoxy)-4-oxo-4Hpyrido[1,2-a]pyrimidin

Postupem shodným s postupem popsaným v příkladu 2 byly z 2-amino-3-(2-(4-methyl-piperazino)ethoxy)pyridinu připraveny krystaly 2-hydroxy-9-(2-(4-methylpiperazino) ethoxy) -4-oxo-4H-pyrido [1, 2-a] pyrimidinu (b. t. 180 - 182 °C). Výtěžek 34 %.

NMR δ_Η (200 MHz, DMSO-D6) : 2,16 (3H, s, CH₃N) , 2,34 (4H, s, CH₃N(CH₂)₂), 2,50 (4H, s, (CH₂)₂NCH₂), 2,76 (2H, t, J 5,8,

NCH₂CH₂O) ,	4,23	(2H,	t, J 5,8, NCH₂CH₂O) ,	5,15 (1H, s, 3-H),
7,09 (1H,	t, J	7,4,	7-H), 7,44 (1H, d, J	7,7, 8-H), 8,48
(1H, d, J	6,9,	6-H) .

• 0 • · · ·» · 0 e ·

000 · ··· · · · · « ··· · 9·· · • ··· » · · · · · 0 • 0 0 0 0 9 0

000 00 000 0000 00 0000

Příklad 17

2-(9-(2-(4-Methyl-piperazino)ethoxy)-4-oxo-4Hpyrido [1,2-a] pyrimidin-2-yl-oxymethyl) -4-i.sopropyl-6methoxy-1,2-benzisothiazol-3(2H)-on-1,1-dioxid

Postupem shodným s postupem popsaným v příkladu 3 byly z 2-hydroxy-9-(2-(4-methyl-piperazino)ethoxy)-4-oxo-4Hpyrido[1,2-a]pyrimidinu připraveny.krystaly 2-(9-(2-(4methyl-piperazino)ethoxy)-4-oxo-4H-pyrido[1,2-a]pyrimidin2-yl-oxymethyl)-4-isopropyl-6-methoxy-l,2-benzisothiazol3 (2H)-on-1,1-dioxidu (b. t. 103 - 106 °C). Výtěžek 19 %.

Elementární analýza

C^H^NsCbS	C	H	N
Vypočtená hodnota	56,73	5,82	12,25
Stanovená hodnota	54,51	5,17	11, 02

NMR δ_Η (200 MHz, DMSO-D6):1,25 (6H, d, J 6,8, (CH₃)₂CH),

2,12 (3H, s, CH₃N), 2,33 (4H, s, CH₃N(CH)₂), 2,61 (4H, s, (CH₂)₂NCH₂), 2,84(2H, t, J 5,2, NCH₂CH₂O) , 3,98 (3H, s,

CH₃O), 4,11(1H, m, J 6,8, (CH₃)₂CH), 4,29 (2H, t, J 5,2, NCH₂CH₂O) , 5,76 (1H, s, 3'-H), 6,11 (2H, s, NCH₂O), 7,30 (1H, t, 7,4, 7'-H), 7,38 (1H, d, J 1,8, 5-H), 7,53 (1H, d,

J 7,6, 8'-H), 7,79 (1H, d, J 1,8, 7-H), 8,58 (1H, d, J 6,9, 6'-H).

Příklad 18

2-((2,4-Dichlorbenzoyl)oxymethyl)-4-isopropyl-6-(2morfolinoethoxy)-1,2-benzisothiazol-3(2H)-on-1,1-dioxid

K roztoku 0,13 g (1,0 mmol) 2-morfolinoethanolu bylo přidáno 0,44 g (1,0 mmol) 2-((2,4-dichlorbenzoyl)oxymethyl)-4-isopropyl-6-hydroxy-l,2-benzisothiazol-3(2H)- 18 ·· • Ο 0 0 · « 0 • ·

0 0 0 on-1,1-díoxídu (ΕΡ-483928Α1 - příklad ΙΑ) a 0,22 g (1,2 mmol) diethylazokarboxylatu v 10 ml bezvodého tetrahydrofuranu, potom bylo pomalu přidáno v atmosféře argonu 0,33 g trifenylfosfinu při teplotě 0-5 °C. Tento roztok byl míchán při pokojové teplotě po dobu 20 hodin a potom byl odpařen v prostředí vakua. Získaný olej byl rozetřen s bezvodým ethanolem za vzniku bílé krystalické látky. Tyto krystaly byly odfiltrovány, promyty bezvodým ethanolem a vysušeny v prostředí vakua.

Produkt: 40 mg (72%) 2-((2,4-dichlor-benzoyl)-oxymethyl)-4isopropyl-6-(2-morfolino-ethoxy)-1,2-benzisothiazol-3(2H)on-1,1-dioxidu, (b.t. 134-136 °C).

NMR δ_Η (200 MHz, DMSO-D6) : 1,25 (6H, d, 6, 9, (CH₃) ₂CH) , 2,48 (4H, m, O(CH₂CH₂)₂N) , 2,73 (2H, t, J 5,5, NCH₂CH₂O) , 3,56 (4H, m, O(CH₂)₂N), 4,05 (1H, m, J 6,9, (CH₃) ₂CH) , 4,35 (2H,. t, J 5,5, NCH₂CH₂O) , 6,04 (2H, s, NCH₂O) , 7,38 (1H, d, J 2,0, 7-H), 7,58 - 7,61 (3H, m, 3'-H, 5'-H), 7,85 (1H, d, J, 2,0, 5-H).

Příklad 19

2-(Brommethyl)-4-isopropyl-6-(2-morfolinoethoxy)-1,2benzisothiazol-3(2H)-on-1,1-dioxid

Ke směsi 1,2 g (2 mmol) 2-((2,4-dichlorbenzoyl)oxymethyl)-4-isopropyl-6-(2-morfolinoethoxy)-1,2benzisothiazol-3(2H)-on-1,1-dioxidu, 5 ml bezvodé kyseliny octové a 0,5 ml acetanhydridu bylo při pokojové teplotě přidáno 6,0 ml 36% (obj./hmotn.) bromovodíku v roztoku kyseliny octové. Reakční směs byla míchána při teplotě 80 °C po dobu 4 hodin a potom byla odpařena. Zbytek byl rozetřen s diethyletherem za vzniku bílé krystalické látky. Krystaly byly odfiltrovány, promyty diethyletherem a sušeny v prostředí vakua.

··« · * φ · * · · · * • · · · · · · · • · · · > · · · · · · • · · · · · · ··· · · ·····»· 9 · · ··*

Produkt: 0,75 g (80%) 2-(brommethyl)-4-isopropyl-6-(2morfolinoethoxy)-1,2-benzisothiazol-3(2H)-on-1,1-dioxidu, (b. t. 192 - 194 °C).

NMR δ_Η (200 MHz, CDC1₃) : 1,31 (6H, d, 6,8, (CH₃)₂CH), 3,60 (4H, m, O(CH₂CH₂)₂N) , 3,60 (2H, t, J 5,5, NCH₂CH₂O) , 4,22 (4H, m, O(CH₂CH₂) ₂N), 4,22 (1H, m, J 6,8 , (CH₃) ₂CH) , 4,88 (2H, t, J 5,5, NCH₂CH₂O), 5,49 (2H, s, NCH₂O) , 7,26 (1H, d, J 2,0, 7-H), 7,38 (1H, d, J 2,0, 5-H).

Syntéza 2-(9-(2-pyrrolidino-ethoxy)-4-oxo-4H-pyrido[l,2a]pyrimidin-2-yl-oxymethyl)-4-isopropyl-6-methoxy-l,2benzisothiazol-3(2H)-on-1,1-dioxidu popsaného v EP 0626378, příklad 9E), který byl použit ve srovnávacích biologických experimentech

0,27 g (1 mmol) 2-Hydroxy-9-(2-pyrrolidino-ethoxy)-4oxo-4H-pirodo[1,2-a]pirimidinu, známého z patentové přihlášky EP 0626378, který se připravuje výše uvedenými způsoby, bylo rozpuštěno při pokojové teplotě v 5 ml bezvodého dimethylformamidu. K tomuto roztoku bylo přidáno 0,29 ml triethylaminu a 0,32 g (0,9 mmol) 2-brommethyl-4isopropyl-6-methoxy-l,2-benzisothiazol-3(2H)-on-1,1dioxidu. Suspenze byla promyta argonem, míchána při pokojové teplotě po dobu 60 hodin a potom byla nalita do 200 ml ledové vody. Vysrážené krystaly byly odfiltrovány, krystalizovány z ethanolu, promyty hexanem a sušeny. Surový produkt byl chromatograficky přečištěn na koloně silikagelu za použití směsi dichlormethan-methanol (98 : 2) jako elučního činidla. Frakce s čistým produktem byly shromažďovány a odpařeny, vzniklé krystaly byly vysušeny.

Produkt: 67 mg (5 %) 2-(9-(2-pyrrolidinoethoxy)-4-oxo-4Hpyrido[1,2-a]pyrimidin-2-yl-oxymethyl)-4-isopropyl-6methoxy-1,2-benzisothiazol-3(2H)-on-1,1-dioxid (b.t. 84-90 °C) .

• ·

Elementární analýza

C26H30N4O7S	C	H	N	S
Vypočtená hodnota	57,55	5, 57	10, 33	5, 91
Stanovená hodnota	52, 8	5, 40	8,80

NMR δ_Η (200 MHz, CDC1₃) :1,30 (6H, d, 6,8, (CH₃) ₂CH) , 1,93 (4H, m, (CH₂CH₂) ₂N) , 2,97 (4H, m, (CH₂CH₂)₂N), 3,28 (2H, t, J 5,8, NCH₂CH₂O) , 3,96 (3H, s, CH₃O) , 4,21(1H, m, 6,8, (CH₃)₂CH), 4,45 (2H, t, J 5,8, NCH₂CH₂O), 5,90 (1H, s,

3'-H), 6,23 (2H, s, NCH₂O, 7,06 (1H, t, J 7,4, 7'-H), 7,14 - 7,27 (3H, m, 5-H, 7-H, 8'-H), 8,72 (1H, dd/ J 7,0, 1,3, 6'-H).

Tento produkt je totožný s produktem popsaným v patentové přihlášce EP 062678, příklad 9E.

Silná inhibiční aktivita sloučenin obecného vzorce (I) vůči elastáze při orální aplikaci je ukázána v následujících experimentálních výsledcích:

Inhibice účinku akutního plicního poškození způsobeného enzymem elastázou z lidských leukocytů, stanovení prováděno na myších

Popis metody:

Samcům myší NMRI přibližného stáří 6-8 týdnů vážících 22-26 g byl orálně podáván 0,1% (hmotn./obj.) roztok testované sloučeniny obecného vzorce (I) nebo známé srovnávací látky v karboxymethylcelulóze. Po 60 minutách bylo myším intratracheálně podáno 12,5 mezinárodních jednotek enzymu elastázy z lidských leukocytů rozpuštěné v 25,0 μΐ sterilního fyziologického roztoku chloridu sodného.

	• »9	9 9 9· · 9
21 -	• 9 9 9 9 9··	• 9 9 · • · · · ·
	9 9 • 9 · 9 9 ·	9 9 9 9

Po 3 hodinách byla zvířata podrobena eutanázii nadměrnou dávkou urethanu a plíce byly promyty 1 ml fyziologického roztoku soli.

Průdušnice byla obnažena v ráně otvíracími stěhovacími svorkami a byl proveden malý řez pro umožnění zavedení polyethylénové kanyly, která byla upevněna v místě chirurgickou nití. Jehla o velikosti 18 a délce 1 ^1/2 palce připojená k l,00ml injekční stříkačce byla vložena do kanyly a 0,5 ml vzduchu bylo odebráno z dýchacích cest. Jeden mililitr byl vkapán do dýchacích cest. Potom byl hrudník krátce a jemně masírován. Injekční jehla byla odstraněna z kanyly a bronchoalveolární vyplachovací tekutina (BAL) byla ponechána odtékat do 10,0ml odměrky pro stanovení celkového objemu vyplachovací tekutiny získatelné z plic zatímco zvíře leželo v poloze naznak. Výše zmíněné vkapávání bylo třikrát opakováno. Potom byl k shromažďované bronchoalveolární vyplachovací tekutině přidán Triton X100(konečná koncentrace, 0,2 % obj./obj.) z důvodu rozrušení buněk a byl stanoven spektrofotometricky při 540 nm obsah hemoglobinu.

Účinnost inhibice enzymu elastázy sloučeninami byla stanovena na základě hemoragických reakcí (krvácivosti) podle následujícího vzorce:

% inhibice = [(VE-DE) /(VE-VS)] x 100, kde:

VE = průměrná absorbance BAL tekutin ze skupiny ošetřené orálně pouze nosičem a intratracheálně elastázou;

DE = průměrná absorbance každé BAL tekutiny od zvířat ošetřených orálně možnou inhibiční sloučeninou a intratracheálně elastázou;

4 4 • 444 4

4

4 4 4 4

4 · • 44 ·

4 4

4444

VS = průměrná absorbarbance BAL tekutin ze skupiny ošetřené orálně nosičem a intratracheálně sterilním fyziologickým roztokem.

Jako srovnávací sloučenina byla použita strukturně nejpodobnější známá sloučenina, která je popsaná v patentové přihlášce EP-0626378A1, v příkladu 9E. Její syntéza je popsána výše v posledním příkladu.

Experimentální výsledky jsou uvedeny níže v tabulce 1.

·

Sloučenina/ příklad č.	Orální dávka mg/kg tělesné hm. myši	Inhibice o o
2-(9-(2-piperidino-ethoxy)-4-oxo-4H- pyrido[1,2-a]pyrimidin-2-yl-oxymethyl)-4- isopropy1-6-methoxy-1,2-benzisothiazol- 3(2H)-on-1,1-dioxid příklad 3	10	80
2-(9-(3-morfolino-propoxy)-4-oxo-4H- pyrido[1,2-a]pyrimidin-2-yl-oxymethyl)-4- isopropyl-6-methoxy-l,2-benzisothiazol- 3(2H)-on-1,1-dioxid příklad 7	10	56
2-(9-(2-(4-methyl-piperazino)ethoxy)-4- oxo-4H-pyrido[1,2-a]pyrimidin-2-yl- oxymethyl)-4-isopropyl-6-methoxy-l,2- benzisothiazol-3(2H)-on-1,1-dioxid příklad 11	10	42
2-(9-(3-morfolino-propoxy)-4-oxo-4H- pyrido[1,2-a]pyrimidin-2-yl-oxymethyl)-4- isopropyl-6-(2-morfolino-ethoxy)-1,2- benzisothiaZol-3(2H)-on-1,1-dioxid příklad 8	10	70
Srovnávací sloučeniny 2-(9-(2-pyrrolidino-ethoxy)-4-oxo-4H- pyrido[1,2-a]pyrimidin-2-yl-oxymethyl)-4- isopropyl-6-methoxy-l,2-benzisothiazol- 3(2H)-on-1,1-dioxid (Evropský patentový spis 626378, příklad 9E)	10	15

Výše popsaným způsobem byla stanovena hodnota orální ED₅o u myší, která je · 2,6 mg/kg tělesné hmotnosti v případě nového 2-(9-(2-piperidino-ethoxy)-4-oxo-4H-pyrido[1,2-a]pyrimidin-2-yl-oxymethyl)-4-isopropyl-6-methoxy-l,2benzisothiazol-3(2H)-on-1,1-dioxidu

Výše uvedeným způsobem byla také stanovena hodnota orální ED₅₀ u myší známé srovnávací sloučeniny (EP-0 626 378 Al, příklad 9E), která je 23 mg/kg tělesné hmotnosti.

Z výsledků je zřejmé, že sloučeniny obecného vzorce (I) podle tohoto vynálezu mají silnou orální aktivitu, zatímco orální aktivita strukturně příbuzných sloučenin je slabá.

Obrázek 1 zobrazuje obecný vzorec (I), obrázek 2 zobrazuje obecný vzorec (II), obrázek 3 zobrazuje obecný vzorec (III).

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Sloučeniny obecného vzorce (I), kde

R¹ je methyl, ethyl nebo 2-morfolinoethylskupina;

R² je piperidinoskupina, morfolinoskupina nebo 4-methylpiperazinylskupina; n je 2 nebo 3, a jejich soli, solváty a hydráty.
2. Sloučeniny obecného vzorce (I) podle nároku 1, kde

R¹ je methylová skupina,

R² a n jsou definovány stejně jako v nároku 1, a jejich soli, solváty a hydráty.
3. Sloučeniny obecného vzorce (I) podle nároku 1, kde

R² je piperidinoskupina,

R¹ a n jsou definovány stejně jako v nároku 1, a jejich soli, solváty a hydráty.
4. 2-[9-(2-Piperidino-ethoxy)-4-OXO-4Hpyrido[1,2-a]pyrimidin-2-yl-oxymethyl]-4~isopropyl-6methoxy-1,2-benzisothiazol-3(2H)-on-1,1-dioxid a jeho soli, solváty a hydráty.
5. 2-[9-(3-Morfolino-propoxy)-4-oxo-4H-pyrido[1,2-a] pyrimidin-2-yl-oxymethyl]-4-isopropyl-6-methoxy-l,2benzisothiazol-3(2H)-on-1,1-dioxid a jeho soli, solváty a hydráty.
6. 2-[9-(2-(4-Methyl-piperazino)ethoxy)-4-oxo-4H- 2 6 - pyrido[1,2-a]pyrimidin-2-yl-oxymethyl]-4-isopropyl-6methoxy-1,2-benzisothiazol-3(2H)-on-1,1-dioxid a jeho soli, solváty a hydráty.
7. 2-[9-(3-Morfolino-propoxy)-4-oxo-4Hpyrido[1,2-a]pyrimidin-2-yl-oxymethyl]-4-isopropyl-6-(2morfolino-ethoxy)-1,2-benzisothiazol-3(2H)-on-1,1-dioxid a jeho soli, solváty a hydráty.
8. Hydrochlorid 2-[ 9-(2-piperidino-ethoxy)-4-oxo-4Hpyrido[1,2-a]pyrimidin-2-yl-oxymethyl]-4-isopropyl-6methoxy-1,2-benzisothiazol-3(2H)-on-1,1-dioxidu.
9. Vinanové soli 2-[9-(2-piperidino-ethoxy)-4-oxo-4Hpyrido[1,2-a]pyrimidin-2-yl-oxymethyl]-4-isopropyl-6methoxy-1,2-benzisothiazol-3(2H)-on-1,1-dioxidu.
10. Fumarátové soli 2-[9-(2-piperidino-ethoxy)-4-oxo-4Hpyrido[1,2-a]pyrimidin-2-yl-oxymethyl]-4-isopropyl-6methoxy-1,2-benzisothiazol-3(2H)-on-1,1-dioxidu.
11. Benzoatová sůl 2-[9-(2-piperidino-ethoxy)-4-oxo-4Hpyrido[1,2-a]pyrimidin-2-yl-oxymethyl]-4-isopropyl-6methoxy-1,2-benzisothiazol-3(2H)-on-1,1-dioxidu.
12. Citrátové.soli 2-[9-(2-piperidino-ethoxy)-4-oxo-4Hpyrido[1,2-a]pyrimidin-2-yl-oxymethyl]-4-isopropyl-6methoxy-1,2-benzisothiazol-3(2H)-on-1,1-dioxidu.
13. Mandelatové soli 2-[9-(2-piperidino-ethoxy)-4-oxo-4Hpyrido[1,2-a]pyrimidin-2-yl-oxymethyl]-4-isopropyl-6methoxy-1,2-benzisothiazol-3(2H)-on-1,1-dioxidu.
14. 4-Isopropyl-6-methoxysacharinatová sůl 2-(9-(2piperidino-ethoxy)-4-oxo-4H-pyrido[1,2-a]pyrimidin-2-yloxymethyl)-4-isopropyl-6-methoxy-1,2-benzisothiazol-3(2H) on-1,1-dioxidu.
15. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje jednu nebo více sloučenin obecného vzorce (I), kde významy R¹, R² a n jsou uvedeny v nároku 1, a/nebo jejich soli společně s jednou nebo více pomocnými látkami používanými ve farmaceutickém průmyslu.
16. Farmaceutický prostředek podle nároku '15, vyznačující se tím, že obsahuje jednu nebo více sloučenin nárokovaných v nárocích 4 až 14 a jednu nebo více pomocných látek používaných ve farmaceutickém průmyslu.
17. Farmaceutický prostředek vhodný pro léčbu syndromů vyskytujících se z důvodu zvýšené koncentrace elastázy, vyznačující se tím, že obsahuje jednu nebo více sloučenin obecného vzorce (I), kde významy R¹, R² a n jsou uvedeny v nároku 1, a/nebo jejich soli společně s jednou nebo více pomocnými látkami používanými ve farmaceutickém průmyslu.
18. Farmaceutický prostředek pro léčbu chronického obstruktivního plicního onemocnění (COPD), syndromu respirační úzkosti dospělých (ARDS), plicní hypertenze, astmatu, revmatického zánětu kloubů, zánětlivého střevního onemocnění a rakoviny podle nároku 17, vyznačující se tím, že obsahuje jednu nebo více sloučenin obecného vzorce (I), kde významy R¹, R² a n jsou uvedeny v nároku 1, a/nebo jejich soli, solváty, včetně hydrátů, společně s jednou nebo více pomocnými látkami používanými ve farmaceutickém průmyslu.

• ·
19. Farmaceutický prostředek podle nároku 17, vyznačující se tím, že obsahuje jednu nebo více sloučenin obecného vzorce (I) nárokovaných v nárocích 4 až 14.
20. Použití sloučenin obecného vzorce (I), kde významy R¹, R² a n jsou uvedeny v nároku 1, pro léčbu syndromů vyskytujících se z důvodu zvýšené koncentrace elastázy.
21. Použití sloučenin obecného vzorce (I), kde významy R¹,

R² a n jsou uvedeny v nároku 1, podle nároku 20, pro léčbu chronického obstruktivního plicního onemocnění (COPD), syndromu respirační úzkosti dospělých (ARDS), plicní hypertenze, astmatu, revmatického zánětu kloubů, zánětlivého střevního onemocnění a rakoviny.
22. Způsob přípravy sloučenin obecného vzorce (I), kde významy R¹, R² a n.jsou uvedeny v nároku 1, a jejich solí, vyznačující se tím, že sloučenina obecného vzorce (II), kde R¹ má stejný význam, jak je uvedeno v nároku 1, X je atom halogenu, výhodně atom chloru nebo bromu, reaguje se sloučeninou obecného vzorce (III), kde významy R² a n jsou uvedeny v nároku 1, a výsledná sloučenina obecného vzorce (I), kde významy R¹, R² a n jsou uvedeny výše, se popřípadě převede na její sůl nebo se uvolní z její soli.
23. Způsob podle nároku 22, vyznačující se tím, že během reakce se použije vhodná sloučenina pro vázání kyselin.
24. Způsob podle nároku 22, vyznačující se tím, že reakce je prováděna v prostředí obsahujícím organické rozpouštědlo.
25. Způsob podle nároku 23, vyznačující se tím, že organické aminy, výhodně triethylamin, jsou použity jako sloučenina vhodná pro vázání kyselin.
26. Způsob podle nároku 24, vyznačující se tím, že dimethylformamid je použit jako organické rozpouštědlo.
27. Sloučeniny obecného vzorce (III), kde R² je piperidinoskupina, morfolinoskupina nebo 4-methylpiperazinylová skupina, n je 2 nebo 3, a jejich soli.
28. 2-Hydroxy-9-(2-piperidino-ethoxy)-4-oxo-4Hpyrido[1,2-a]pyrimidin.
29. 2-Hydroxy-9-(3-morfolino-propoxy)-4-oxo-4Hpyrido[1,2-a]pyrimidin.
30. 2-Hydroxy-9-(2-(4-methyl-piperazino)-ethoxy)-4-oxo-4Hpyrido[1,2-a]pyrimidin.
31. Použití sloučenin obecného vzorce III nebo jejich solí, kde významy R² a n jsou stejné jako v nároku 27, pro přípravu sloučenin obecného vzorce (I).