KR20010102081A

KR20010102081A - 치료용 뉴클레오시드 화합물

Info

Publication number: KR20010102081A
Application number: KR1020017010197A
Authority: KR
Inventors: 수잔 메리 달루지
Original assignee: 그레이엄 브레레톤, 레슬리 에드워즈; 글락소 그룹 리미티드
Priority date: 1999-02-12
Filing date: 2000-02-11
Publication date: 2001-11-15
Also published as: DE60002172T2; HK1039935A1; HK1039935B; DK1150981T3; ATE237616T1; DE60002172D1; EP1150981B1; WO2000047581A1; JP2002536448A; US6630477B1; CN1346356A; ES2195861T3; GB9903091D0; AU2450900A; EP1150981A1; PT1150981E

Abstract

본 발명은 (1R,4S)-4-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2-시클로펜텐-1-메탄올 및 B형 간염 바이러스 감염의 치료를 위한 의학적 치료에서의 이의 용도에 관한 것이다.

Description

치료용 뉴클레오시드 화합물 {Therapeutic Nucleoside Compound}

B형 간염 바이러스 (HBV)는 인간을 감염시키는, 작은 DNA 함유 바이러스이다. 이 바이러스는 헤파드나바이러스 (hepadnavirus)로 공지되어 있는 밀접하게 관련된 바이러스 클라스의 한 구성원이며, 이 클라스의 각 구성원은 포유동물 또는 조류 숙주, 예를 들면, 마못 (woodchuck) 및 오리를 선택적으로 감염시킨다. 헤파드나바이러스 게놈의 복제 메카니즘에 관한 근래의 고찰들은 RNA 중간체의 역전사가 중요함을 보여주며, 이는 역전사효소가 화학요법의 이론적 표적임을 시사한다. HBV는 전세계적으로 중요한 주요 바이러스성 병원체이다. 이 바이러스는 병인학적으로 원발성 간세포암과 관련이 있으며, 전세계 간암의 80 %를 유발한다고 여겨진다. HBV 감염의 임상적 결과는 두통, 고열, 불쾌, 구역, 구토, 식욕감퇴 및 복통 등이다. 바이러스의 복제는 통상적으로, 인간의 경우에는 수주 또는 수개월 동안 지속되는 회복기의 면역 반응에 의해 제어되지만, 감염이 상기한 바와 같은 지속적인 만성 간 질병으로 보다 심각하게 진행될 수 있다.

미국 특허 제4,916,224호는 디데옥시카르보시클릭 뉴클레오시드 및 HIV의 치료에서 이의 용도에 관해 기술한다. 문헌 (Wang et al., Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 8, pp.1585-1588, 1998)에는 L-카르보시클릭 2',3'-디데히드로-2',3'-디데옥시아덴노신 및 HIV 감염에서의 이의 용도에 관해 기술되어 있다.

발명의 요약

본 발명의 한 측면은 B형 간염 바이러스 감염의 치료에서 (1R,4S)-4-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2-시클로펜텐-1-메탄올의 용도에 관한 것이다.

발명의 상세한 설명

본 발명은 B형 간염 바이러스 감염의 예방 및 치료를 위한, (1R,4S)-4-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2-시클로펜텐-1-메탄올이라고도 알려져 있는 화학식 I의 화합물 및 이의 제약상 허용가능한 염을 특징으로 한다.

(1R,4S)-4-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2-시클로펜텐-1-메탄올의 생리적으로 허용가능한 염에는 아세트산, 락트산, 타르타르산, 말산, 이세티온산, 락토비온산 및 숙신산 등과 같은 유기 카르복실산염, 메탄술폰산, 에탄술폰산, 벤젠술폰산 및 p-톨루엔술폰산 등의 유기 술폰산염, 및 염산염, 황산염, 인산염 및 술팜산염 등의 무기산염 등이 있다.

치료용으로 사용하기 위해서, (1R,4S)-4-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2-시클로펜텐-1-메탄올은 생리적으로 허용가능할 것이며, 즉, 생리적으로 허용가능한 산에서 유도된 염일 것이다. 그러나 생리적으로 허용가능하지 않은 산의 염들도 예를 들면, 생리적으로 허용가능한 화합물의 제조 또는 정제에 사용될 수 있다. 생리적으로 허용가능한 산에서 유도된 염인지 아닌지에 관계 없이 모든 염들은 본 발명의 범위에 속한다.

(1R,4S)-4-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2-시클로펜텐-1-메탄올의 바람직한 염은 숙신산염이다.

(1R,4S)-4-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2-시클로펜텐-1-메탄올은 과량의 비친핵성 염기, 예컨데 트리에틸아민의 존재하에 환류 n-부탄올 중에서 (1S,4R)-4-아미노-2-시클로펜텐-1-메탄올 또는 이의 염 (4)과 5-아미노-6-클로로피리미딘을 축합시키는 것을 포함하는 공지된 3 단계 방법으로 합성될 수 있다 (예를 들어, 문헌 (Y.F.Shealy and J.D.Clayton, J.Amer.Chem.Soc. 1969, 91: 3075-3887) 및 이의 참조문헌 참조). 이로써 생성되는 피리미딘 중간체 (5)는 촉매량의 산의 존재하에 트리에틸오르토포름산에 의해 6-클로로퓨린 중간체 (6)로 전환될 수 있다. 암모니아를 사용하여 (6)을 아민화시키면 수율과 순도가 양호한 (1)을 생성할 수 있다.

(1S,4R)-4-아미노-2-시클로펜텐-1-메탄올은 예를 들어, 실시예 1에서와 같이, (+)-2-아자비시클로[2.2.1]헵트-5-엔-3-온으로부터 3 단계로 합성될 수 있다.

본 발명의 한 측면은 의학적 치료 요법, 특히 B형 간염 바이러스 감염의 치료용으로 사용하기 위한 (1R,4S)-4-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2-시클로펜텐-1-메탄올 또는 이의 제약상 허용가능한 염을 제공한다.

본 발명은 치료 유효량의 (1R,4S)-4-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2-시클로펜텐-1-메탄올 또는 이의 제약상 허용가능한 염을 숙주에게 투여하는 것을 포함하는, 상기 숙주에서의 B형 간염 바이러스 감염의 치료 방법을 특징으로 한다. 바람직하게는 상기 숙주는 인간이다.

본 발명의 다른 측면은 B형 간염 바이러스 감염의 치료 또는 예방을 위한 의약의 제조에서의 (1R,4S)-4-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2-시클로펜텐-1-메탄올 또는 이의 제약상 허용가능한 염의 용도를 특징으로 한다.

본원에서 활성 성분이라고도 지칭되는 (1R,4S)-4-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2-시클로펜텐-1-메탄올은 치료를 위하여, 경구, 직장내, 비내, 국소 (협측(頰側) 및 설하 포함), 질내 및 비경구 (피하, 근육내, 정맥내 및 피내 포함) 등을 비롯한 어떤 적합한 경로를 통해서라도 투여될 수 있다. 바람직한 경로는 수용자의 상태 및 연령, 감염의 성질 및 선택된 활성 성분에 따라 달라질 것이라는 것이 이해될 것이다.

활성 성분의 필요량은 치료될 상태의 심각성 및 수용자 종류 (identity) 등 다수의 요인에 따라 달라질 것이며, 궁극적으로는 담당 의사 또는 수의사에 의해 판단될 것이다. 그러나 일반적으로 이러한 유용성 및 증상 각각에 대한 화학식 I의 화합물의 적당한 유효 투여량은 수용자 체중 1 kg 당 하루에 0.01 내지 100 mg, 유리하게는 수용자의 체중 1 kg 당 하루에 1 내지 70 mg, 바람직하게는 수용자 체중 1 kg 당 하루에 1 내지 50 mg의 범위일 것이다.

원하는 투여량은 하루 동안 바람직하게는 1 회, 2 회, 3 회 또는 4 회 또는 그 이상의 분할 투여량으로 적당한 간격을 두고 투여된다. 이러한 분할 투여량은 예를 들면, 단위 투여 형태 당 활성 성분 약 25 내지 2,000 mg, 바람직하게는 약 25, 50, 100, 150, 200, 또는 250 mg을 포함하는 단위 투여 형태로 투여될 수 있다.

활성 성분을 단독으로 투여하는 것도 가능하지만, 제약 조성물로 제공하는것이 바람직하다. 본 발명의 추가의 측면은 (1R,4S)-4-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2-시클로펜텐-1-메탄올 또는 이의 제약상 허용가능한 염 및 이의 제약상 허용가능한 담체를 포함하는 제약 조성물을 특징으로 한다.

본 발명의 조성물에는 1 종 이상의 상기 정의된 바와 같은 활성 성분 및 1 종 이상의 이의 제약상 허용가능한 담체 및 경우에 따라 치료제가 포함된다. 각각의 담체는 그 조성물이 다른 성분들과 상용가능하고 그의 수용자에게 해롭지 않다는 의미에서 "허용가능"해야만 한다. 조성물은 경구, 직장내, 비내, 국소 (협측 및 설하 포함), 질내 및 비경구 (피하, 근육내, 정맥내 및 피내 포함) 투여에 적절한 것들을 포함한다.

본 발명의 조성물은 제약 업계에 공지되어 있는 임의의 방법으로 제조되는 단위 투여 형태로 편리하게 제공될 수 있다. 상기 방법은 활성 성분을 1 종 이상의 보조 성분을 구성하는 담체와 결합시키는 단계를 포함한다. 일반적으로, 조성물은 활성 성분을 액체 담체 또는 미분된 고체 담체 또는 둘다와 균일하고 치밀하게 결합시킨 다음, 필요하다면, 이 생성물을 성형하여 제조된다.

경구 투여에 적합한 본 발명의 조성물은 각각 소정량의 활성 성분을 포함하는 캡슐제, 카세제, 과립의 사세 또는 정제 (예컨대, 삼킬 수 있거나, 분산성이거나 또는 씹을 수 있는 정제) 등 별개의 단위; 산제 또는 과립제; 수성 액체 또는 비수성 액체 중의 현탁액제 또는 액제; 또는 수중유 액체 에멀젼제 또는 유중수 액체 에멀젼제로서 제공될 수 있다. 또한, 활성 성분은 농축괴, 연제 또는 페이스트로 제공될 수도 있다.

정제는 경우에 따라 1 종 이상의 보조 성분과 함께 압축시키거나 성형시켜 제조될 수 있다. 압축 정제는 활성 성분을 경우에 따라 결합제, 윤활제, 불활성 희석제, 방부제, 계면활성제 또는 분산제와 혼합하여 적당한 기계 중에서 산제 또는 과립제 등의 불유동 형태 (free-flowing form)로 압축함으로써 제조될 수 있다. 성형 정제는 불활성 액체 희석제로 습윤된 분말 화합물의 혼합물을 적절한 기계 중에서 성형함으로써 제조될 수 있다. 정제는 경우에 따라 코팅되거나 그 안의 활성 성분이 서방출 또는 제어방출 되도록 제형될 수 있다.

입안으로의 국소 투여에 적절한 조성물로는 향미 기제(基劑), 통상적으로는 수크로스 및 아라비아고무 또는 트라가칸트 중에 활성 성분이 포함되어 있는 로젠지; 불활성 기제, 예컨대 젤라틴 및 글리세린, 또는 수크로스 및 아라비아고무 중에 활성 성분이 포함되어 있는 파스틸리스 (pastilles); 및 적절한 액체 담체 중에 활성 성분이 포함되어 있는 함수제 등이 있다.

직장 투여용 조성물은 예를 들면 코코아 버터 또는 살리실레이트 등의 적절한 기제와 함께 좌제로 제공될 수 있다.

질내 투여에 적절한 조성물은 활성 성분 및 당업계에 적절하다고 공지된 담체를 포함하는 페서리 (pessary), 탐폰, 크림제, 겔제, 페이스트, 포움 또는 분무제로 제공될 수 있다.

비경구 투여에 적절한 조성물로는, 항산화제, 완충제, 정균제(靜菌劑), 및 제제가 수성 및 비수성 멸균 현탁액이 되도록 하는 현탁제 및 증점제 등의 용질을 포함할 수 있는 수성 및 비수성 등장 멸균 주사액을 들 수 있다. 조성물은 단위투여량 또는 다투여량 밀봉 용기, 예를 들면 앰플 및 바이알 안에 넣어져 제공될 수 있으며, 사용 직전에, 멸균 액체 담체, 예를 들면 주사용수를 첨가하기만 하면되는 동결건조 상태로 저장될 수 있다. 즉석 주사 용액 및 현탁액은 전술한 종류의 멸균 산제, 과립제 및 정제로부터 제조될 수 있다.

또한, 활성 성분은 활성 성분의 마이크로미터- 또는 나노미터-크기 입자를 포함하는 조성물로 제공될 수 있다.

바람직한 단위 투여 조성물은 활성 성분의 일일 투여량 또는 단위 일일 분할 투여량 (상기한 바와 같은) 또는 이의 적절한 일부를 포함하는 것들이다.

본 발명의 조성물에는 특별히 언급된 상기 성분 뿐 아니라 해당 제제 형태에 대하여 당업계에 통상적인 다른 작용제, 예를 들어 경구 투여에 적절한 것들에는 향미제 또는 미각-차폐제가 포함될 수 있음이 이해되어야 한다.

본 발명의 추가의 측면은 바이러스에 감염된 환자의 치료에 사용될 키트에 관한 것이다. 이 키트에는 화학식 I의 화합물의 1 회 이상의 경구 투여량이 포함되어 있으며, 1 종 이상의 추가의 치료제가 포함되어 있을 수 있다. 설명을 하면, 본 발명의 키트는 화학식 I의 화합물을 포함하는 1 종 이상의 정제, 캡슐제, 카플렛 (caplet), 겔캡 또는 액체 제제, 및 상기 범위의 투여량으로 화학식 I의 화합물을 포함하는 1 종 이상의 정제, 캡슐제, 카플렛, 겔캡 또는 액체 제제를 포함할 수 있다. 이 키트에는 작용제들의 공동투여를 위한 투여 정보가 인쇄된 삽입물이 들어있을 수 있다.

또한, 활성 성분은 활성 성분의 입자 크기가 마이크로미터 또는 나노미터인조성물로 제공될 수 있다.

(1R,4S)-4-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2-시클로펜텐-1-메탄올은 기타의 치료제들과 함께 투여될 수 있다. 기타의 치료제로는 바이러스 감염 또는 관련 상태의 치료에 효과적인 작용제, 예를 들면 뉴클레오시드 역전사 억제제, 예컨대 지도부딘 또는 아바카비르, 2',3'-디데옥시사이티딘, 2',3'-디데옥시아데노신, 2',3'-디데옥시이노신, 2',3'-디데히드로티미딘; (1알파, 2베타, 3알파)-9-[2,3-비스(히드록시메틸)시클로부틸]구아닌[(-)BHCG, SQ-34514]; 옥세타노신-G (3,4-비스-(히드록시메틸)-2-옥세타노실]구아닌); 비환식 뉴클레오시드 (예를 들면, 아시클로비르, 발라시클로비르, 팜시클로비르, 간시클로비르, 펜시클로비르); 비환식 뉴클레오시드 포스포네이트 (예를 들면, (S)-1-(3-히드록시-2-포스포닐-메톡시프로필)시토신 (HPMPC) 또는 PMEA; 프로테아제 억제제, 예컨대 인디나비르, 리토나비르, 넬피나비르, 암프레나비르, 사퀴나비르; 옥사티올란 뉴클레오시드 유사체, 예컨대 라미부딘,시스-1-(2-히드록시메틸)-1,3-옥사티올란-5-일)-5-플루오로시토신 (FTC), 리바비린, 9-[4-히드록시-2-(히드록시메틸)부트-1-일]-구아닌 (H2G), 디옥솔란 G, L-FMAU; 타트 억제제, 예컨대 7-클로로-5-(2-피리디닐)-3H-1,4-벤조디아제핀-2-(H)온 (Ro5-3335), 7-클로로-1,3-디히드로-5-(1H-피롤-2일)-3H-1,4-벤조디아제핀-2-아민 (Ro24-7429); 인터페론, 예컨대 α-인터페론; 신장 배출 억제제, 예컨대 프로벤시드, 뉴클레오시드 수송 억제제, 예컨대 디피리다몰; 펜톡시필린, N-아세틸시스테인 (NAC), 프로시스테인, α-트리코산틴, 포스포노포름산, 및 면역 조절제, 에컨대 인터루킨 II 또는 티모신, 과립구 대식세포 콜로니 촉진 인자, 에리트로포에틴, 가용성 CD₄및 이의 유전 공학적 유도체; 또는 비-뉴클레오시드 역전사 억제제 (NNRTI), 예컨대 네비라핀 (BI-RG-587), 로비리드 (α-APA) 및 델라부리딘 (BHAP), 및 포스포노포름산, 및 1,4-디히드로-2H-3,1-벤족사진-2-온 NNRTI, 예컨대 (-)-6-클로로-4-시클로프로필에티닐-4-트리플루오로메틸-1,4-디히드로-2H-3,1-벤족사진-2-온 (L-743,726 또는 DMP-266), 및 퀴녹살린 NNRTI, 예컨대 이소프로필 (2S)-7-플루오로-3,4-디히드로-2-에틸-3-옥소-1(2H)-퀴녹살린카르복실레이트 (HBY1293) 등이 있다. (1R,4S)-4-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2-시클로펜텐-1-메탄올을 포함하는 치료제들을 동시에, 연속해서, 또는 하나의 조성물의 일부로 투여할 수 있다.

하기 실시예는 설명을 위한 것이며 본 발명의 범위를 어떠 식으로도 제한하지 않는다.

본 발명은 (1R,4S)-4-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2-시클로펜텐-1-메탄올 및 의학적 치료에서의 이의 용도에 관한 것이다.

실시예 1

(+)-(1R,4S)-4-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2-시클로펜텐-1-메탄올

(a) (1S, 4R)-tert-부틸 3-옥소-2-아자비시클로[2.2.1]헵트-5-엔-2-카르복실레이트

(+)-2-아지비시클로[2.2.1]헵트-5-엔-3-온 (키로사이언스 (Chiroscience), 영국 캠브리지; 54.565 g, 0.500 몰)을 건조 테트라히드로푸란 (350 ml)에 용해했다. 디-tert-부틸 카르보네이트 (알드리치 (Aldrich), 114.87 g, 97 %로서 0.510 몰) 및 4-디메틸아미노피리딘 (알드리치, 600 mg)을 교반된 혼합물에 첨가했다. 이로써 생성된 용액을 상온에서 2 시간 동안 교반했다. 용매를 감압하에 증발시키고 오렌지색 고체 잔류물을 톨루엔-헥산으로부터 결정화하여 백색 결정으로서의 표제 화합물을 수득했다 (95.72 g, 91 %). 융점 85-86 ℃;¹H-NMR(CDCl₃) δ: 1.50(s,9H), 2.24(app AB q,J=8.4Hz,2H), 3.39(br s,1H), 4.96(m,1H), 6.66(m,1H), 6.89(m,1H).

분석C₁₁H₁₅NO₃에 대한 계산치: C,63.14; H,7.21; N,6.69. 실측치: C,63.20; H,7.26; N,6.65.

(b) (+)-(1S, 4R)-tert-부틸 N-[4-(히드록시메틸)-2-시클로펜텐-1-일]카르바메이트

테트라히드로푸란 (500 ml)-물 (50 ml) 중의 (1S,4R)-tert-부틸 3-옥소-2-아자비시클로[2.2.1]헵트-5-엔-2-카르복실레이트 (본 실시예의 a 부분에서 수득한 생성물, 95.50 g, 0.456 몰) 용액을 물 (100 ml) 중의 수소화붕소 나트륨 (알드리치, 21.96 g, 99 %로서 0.580 몰)의 격렬하게 교반된 용액에 10 분에 걸쳐 첨가했다. 온도를 35 ℃ 이하로 유지했다. 2 시간 후에, 용액을 냉각하여 온도를 25 ℃ 이하로 유지하면서 진한 염산 (50 ml)을 10 분에 걸쳐 첨가했다. 물 (100 ml)을 추가로 첨가하여 고체를 용해하고, 이 용액을 톨루엔 (4 x 300 ml)으로 추출했다. 유기 층들을 한데 합하여 9 : 1 포화 황산 나트륨/포화 탄산 나트륨 (200 ml)으로 세척하고 건조했다 (황산 나트륨). 용매를 감압하에 증발시켜 무색의 시럽을 수득하고 이를 헥산 (200 ml)으로 교반하면서 결정화시켜 미세 백색 분말로서의 표제 화합물을 수득했다 (87.16 g, 90 %). 융점 72-73 ℃;¹H-NMR(DMSO-d₆) δ:6.78(d,J=7.6Hz,1H), 5.80 및 5.60 (두 개의 m,2H), 4.58(t,J=5.25Hz,2H), 4.45(m,1H), 3.35(m, 물과 겹침), 2.60(m,1H), 2.30(m,1H), 1.38(s,9H), 1.20(m,1H); [α]₅₈₉ ²⁰+2.80°(c 5.0,메탄올).

분석C₁₁H₁₉NO₃에 대한 계산치: C,61.95; H,8.98; N,6.57. 실측치: C,61.87; H,8.97; N,6.55.

(c) (+)-(1R,4S)-4-아미노-2-시클로펜텐-1-메탄올 히드로클로라이드

(+)-(1S,4R)-tert-부틸 N-[4-(히드록시메틸)-2-시클로펜텐-1-일]카르바메이트 (본 실시예의 b 부분에서 수득한 생성물, 10.66 g, 50.0 mmol)을 무수 에탄올 (25 ml) 중에서 진한 염산 (5.0 ml, 60 mequiv)과 함께 2.5 시간 동안 환류시켰다. 휘발물질을 증발시켜 백색 고체로서의 표제 화합물을 수득했다; 질량 스펙트럼 (ES): 114 [M+1];¹H-NMR(DMSO-d₆) δ: 7.9(m,3H), 6.03 및 5.75(두 개의 m, 2H), 4.11(m,1H), 3.41 (d,J=5.4Hz,2H), 2.8(m,1H), 2.36(m,1H), 1.4(m,1H). 이 고체는 다음 실시예에서 즉시 사용되었다.

(d) (1R,4S)-4-[(5-아미노-6-클로로-4-피리미디닐)아미노]-2-시클로펜텐-1-메탄올

1-부탄올 (25 ml) 중의 (+)-(1S,4R)-4-아미노-2-시클로펜텐-1-메탄올 히드로클로라이드 (본 실시예의 c 부분에 기재된 10.66 g, 50.0 mmol의 (+)-(1S,4R)-tert-부틸 N-[4-(히드록시메틸)-2-시클로펜텐-1-일]카르바메이트를 탈보호한 것), 5-아미노-4,6-디클로로피리미딘 (알드리치, 16.40 g, 0.100 몰), 및 트리에틸아민(15.2 g, 0.150 몰) 용액을 질소하에 18 시간 동안 환류시켰다. 용액을 냉각하고 1 N 수산화 나트륨 (100 ml)을 첨가했다. 휘발물질을 감압하에 증발시키고 고체 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피했다. 5 % 메탄올-클로로포름으로 용출하여 엷은 황색 유리로서의 표제 화합물 (10.8 g)을 수득했다. 에틸 아세테이트로부터 상기 샘플을 결정화하여 백색 바늘 모양의 표제 화합물을 수득했다. 융점 151-154 ℃;¹H-NMR(DMSO-d₆) δ: 7.75(s,1H), 6.76(d,J=6.8Hz,1H), 5.93 및 5.82 (두 개의 m, 2H), 5.11(m,3H), 4.66(t,J=5.3Hz,1H), 3.40(br t, J=6.1Hz,2H), 2.75(m,1H), 2.20(m,1H), 1.38(m,1H).

(e) (1R,4S)-4-(6-클로로-9H-퓨린-9-일)-2-시클로펜텐-1-메탄올

(1R,4S)-4-[(5-아미노-6-클로로-4-피리미디닐)아미노]-2-시클로펜텐-1-메탄올 (본 실시예의 d 부분에서 수득한 생성물, 9.63 g, 40.0 mmol), 트리에틸오르토포르메이트 (150 ml), 및 진한 염산 (14 ml)을 3 시간 동안 교반했다. 휘발물질을 증발시키고 고체 잔류물을 클로로포름 (300 ml)과 탄산 나트륨 포화 수용액 (100 ml) 사이에 분배했다. 수성 층을 클로로포름 (2 x 100 ml)으로 추출했다. 클로로포름 층들을 한데 합하여 건조시켰다 (황산 나트륨). 휘발물질을 감압하에 증발시키고 황색 유리 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피했다. 에틸 아세테이트로 용출하여 에틸 아세테이트로부터 백색 바늘 모양의 표제 화합물을 수득했다 (7.45 g, 74 %). 융점 121-124 ℃;¹H-NMR(DMSO-d₆) δ: 8.81(s,1H), 8.64(s,1H), 6.24 및6.21 (두 개의 m, 2H), 5.75(m,1H), 4.75(t,J=5.4Hz,1H), 3.34 (m,2H), 2.95(m,1H), 2.75(m,1H), 1.75(m,1H).

분석C₁₁H₁₁N₄ClO에 대한 계산치: C,52.70; H,4.42; N,22.35; Cl,14.14. 실측치: C,52.81; H,4.46; N,22.31; 14.22.

(f) (+)-(1R,4S)-4-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2-시클로펜텐-1-메탄올

(1R,4S)-4-(6-클로로-9H-퓨린-9-일)-2-시클로펜텐-1-메탄올 (본 실시예의 e 부분에서 수득한 생성물, 2.00 g, 7.98 mmol)을 파르 봄 (Parr bomb) 중의 액체 암모니아 (50 ml) 중에 25 ℃에서 18 시간 동안 교반했다. 휘발물질을 증발시키고 고체 잔류물을 메탄올-아세토니트릴로부터 결정화하여 백색 프리즘형의 표제 화합물을 수득했다 (1.61 g, 87 %). 융점 195-200 ℃;¹H-NMR(DMSO-d₆) δ: 8.15(s,1H), 8.06(s,1H), 7.21(br s,2H), 6.15 및 5.95 (두 개의 m, 2H), 5.61(m,1H), 4.76(t,J=5.4Hz,1H), 3.48 (t, J=5.5Hz,2H), 2.92(m,1H), 2.71(m,1H), 1.67(m,1H); [α]₅₈₉+ 4.5°(c 0.5, 메탄올).

분석C₁₁H₁₃N₅O에 대한 계산치: C,57.13; H,5.67; N,30.28. 실측치: C,57.25; H,5.67; N,30.33.

실시예 2

B형 간염 바이러스 활성

<방법>

화합물들의 B형 간염 바이러스에 대한 활성을 문헌 (Jansen, R. et al., Antimicrobial Agents and Chemotherapy, Vol. 37, No.3, pp.441-447, 1993)에 기재된 방법에 따라 시험하였다.

<결과>

B형 간염 바이러스에 대한 (+)-(1R,4S)-4-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2-시클로펜텐-1-메탄올의 IC₅₀은 1.0 μM (n=2)이었다. 세포독성은 200 μM이 넘었다.

실시예 3: 정제

하기 제제 A, B 및 C는 성분들을 프로비돈 용액으로 습윤 과립화시킨 다음, 스테아르산 마그네슘을 첨가하고, 압축하여 제조되었다.

제제 A mg/정제

활성 성분 250

락토스 B.P. 210

프로비돈 B.P. 15

나트륨 스타치 글리콜레이트 20

스테아르산 마그네슘5

500

제제 B mg/정제

활성 성분 250

락토스 B.P. 150

아비셀 PH 101 60

프로비돈 B.P. 15

나트륨 스타치 글리콜레이트 20

스테아르산 마그네슘5

500

제제 C mg/정제

활성 성분 250

락토스 B.P. 200

스타치 50

프로비돈 5

스테아르산 마그네슘4

359

하기 제제, D 및 E는 부가혼합된 성분들의 직접타정법으로 제조되었다. 제제 E 중의 락토스는 직접타정법 형태의 것이다 (데어리 크레스트 (Dairy Crest)-"Zeparox").

제제 D mg/정제

활성 성분 250

프리젤라틴화 스타치 NF15150

400

제제 E mg/정제

활성 성분 250

락토스 B.P. 150

아비셀100

500

제제 F (제어방출 제제)

이 제제는 성분들을 프로비돈 용액으로 습윤 과립화시킨 다음, 스테아르산 마그네슘을 첨가하고, 압축하여 제조되었다.

mg/정제

활성 성분 500

히드록시프로필메틸셀룰로스 112

(Methocel K4M Premium)

락토스 B.P. 53

프로비돈 B.P. 28

스테아르산 마그네슘7

700

약물 방출은 약 6-8 시간의 주기로 이루어지고 12 시간 후에는 완결되었다.

실시예 4: 캡슐제

제제 A

캡슐 제제는 상기 실시예 3의 제제 D의 성분들을 부가혼합하고 2-부분 경질 젤라틴 캡슐에 충전함으로써 제조되었다. 제제 B (하기)도 유사한 방식으로 제조되었다.

제제 B mg/캡슐

활성 성분 250

락토스 B.P. 143

나트륨 스타치 글리콜레이트 25

스테아르산 마그네슘2

420

제제 C mg/캡슐

활성 성분 250

마크로겔 (Macrogel) 4000 B.P.350

600

제제 C의 캡슐은 마크로겔 (Macrogel) 4000 B.P.를 용융시켜, 활성 성분을 용융물에 분산하고, 이 용융물을 2-부분 경질 젤라틴 캡슐에 충전함으로써 제조되었다.

제제 D mg/캡슐

활성 성분 250

레시틴 100

낙화생유100

450

제제 D의 캡슐은 활성 성분을 레시틴 및 낙화생유 중에 분산하고 분산액을 연질 탄성 젤라틴 캡슐에 충전함으로써 제조되었다.

제제 E mg/캡슐

활성 성분 150.0

비타민 E TPGS 400.0

폴리에틸렌 글리콜 400 NF 200.5

프로필렌 글리콜 USP 39.5

4 kg의 비타민 E TPGS (이스트맨 케미칼 코. (Eastman Chemical Co.)로부터 구입)를 50 ℃에서 액화될때까지 가열했다. 액화된 비타민 E TPGS에, 50 ℃로 가열된 2.005 kg의 폴리에틸렌 글리콜 400 (PEG 400) (저급 알데히드, < 10 ppm, 유니온 카바이드 (Union Carbide) 또는 다우 케미칼 코. (Dow Chemical Co.)로부터 구입)을 첨가하고 균질한 용액이 형성될 때까지 혼합했다. 이로써 생성된 용액을 65 ℃로 가열했다. 1.5 kg의 활성 성분을 비타민 E TPGS 및 PEG 400의 액화된 용액에 용해했다. 0.395 kg의 프로필렌 글리콜을 실온에서 첨가하고 균질한 용액이 형성될 때까지 혼합했다. 용액을 28-35 ℃로 냉각했다. 그 다음, 용액을 탈기했다. 혼합물을 바람직하게는 28-35 ℃에서 충전 중량이 150 mg의 무-휘발물질 화합물에 상응하도록, 사이즈 12 오블롱 (oblong)의 백색 불투명 연질 젤라틴 캡슐에 캡슐 충전기를 사용하여 캡슐화했다. 캡슐 껍질을 3-6 % 물의 일정 충전 수분 및 7-10 뉴톤의 껍질 경도로 건조하고, 적절한 용기에 넣었다.

제제 F (제어방출 캡슐)

하기의 제어방출 캡슐 제제는 압출기를 사용하여 성분 a,b, 및 c를 압출한 후, 압출물을 구형화하고 건조시켜 제조되었다. 그 후, 건조된 펠렛을 방출제어막 (d)로 코팅하고, 2-조각의 경질 젤라틴 캡슐에 충전했다.

mg/캡슐

(a) 활성 성분 250

(b) 미소결정질 셀룰로스 125

(c) 락토스 B.P. 125

(d) 에틸 셀룰로스13

513

실시예 5: 주사가능한 제제

제제 A mg

활성 성분 200

염산 용액 0.1 M 또는

수산화 나트륨 용액 0.1 M pH가 4.0 내지 7.0이 될 때까지의

충분량

멸균수 10 ml가 될 때까지의 충분량

활성 성분을 대부분의 물 (35-45 ℃)에 용해하고 경우에 따라 염산 용액 또는 수산화 나트륨 용액을 사용하여 pH를 4.0 내지 7.0으로 조정했다. 물로 배치 (batch)의 부피를 채운 다음, 멸균 미공 필터를 통해 멸균된 10 ml 호박색 유리 바이알 (제1형)로 여과해 넣고 멸균 마개로 밀봉하고 그 위를 밀봉했다.

제제 B

활성 성분 125 mg

발열물질 없는 멸균 인산 완충액 (pH7) 25 ml가 될 때까지의 충분량

실시예 6: 근육내 주사제

활성 성분 200 mg

벤질 알콜 0.10 g

글리코푸롤 75 1.45 g

주사용 물 3.00 ml가 될 때까지의 충분량

활성 성분을 글리코푸롤에 용해했다. 그 다음, 벤질 알콜을 첨가하고 용해하고, 물을 3 ml가 될 때까지 첨가했다. 그 다음, 이 혼합물을 멸균 미공 필터를 통해 여과하고, 멸균된 3 ml 호박색 유리 바이알 (제1형)에 밀봉했다.

실시예 7: 시럽제

활성 성분 250 mg

소르비톨 용액 1.50 g

글리세롤 2.00 g

벤조산 나트륨 0.005 g

향미제, 피치 (Peach) 17.42.3169 0.0125 ml

정제수 5.00 ml가 될 때까지의 충분량

활성 성분을 글리세롤과 대부분의 정제수와의 혼합물에 용해했다. 이 용액에 벤조산 나트륨 수용액을 첨가한 후, 소르비톨 용액을 첨가하고 최종적으로 향미제를 첨가했다. 부피를 정제수로 채우고 잘 혼합했다.

실시예 8: 좌제

mg/캡슐 좌제

활성 성분 250

경질 지방, B.P. (위텝솔 (Witepsol) H15

-아이나미트 노벨 (Dynamit Nobel))1770

2020

위텝솔 (Witepsol) H15의 1/5를 45 ℃ 이하의 증기-재킷 팬에서 용융시켰다. 활성 성분을 200 ㎛의 체를 통하여 사별하고, 절단 헤드가 장착된 실버손 (Silverson)을 사용하여 잘 개어진 분산액이 될 때까지 용융 기제에 첨가하면서 혼합했다. 혼합물을 45 ℃로 유지하면서, 나머지 위텝솔 H15를 현탁액에 첨가하고 확실한 균질 혼합물이 되도록 교반했다. 전체 현탁액을 250 ㎛ 스테인리스 강철 판체에 통과시키고, 계속 교반하면서, 45 ℃로 냉각했다. 38 ℃ 내지 40 ℃의 온도에서, 2.02 g의 혼합물을 적당한, 2 ml 플라스틱 틀에 충전했다. 좌제를 실온으로 냉각했다.

실시예 9: 페서리 (pessaries)

mg/페서리

활성 성분 250

덱스트로스 무수물 380

감자 전분치 363

스테아르산 마그네슘7

1000

상기 성분을 직접 혼합했다.

Claims

항-B형 간염 치료 유효량의 (1R,4S)-4-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2-시클로펜텐-1-메탄올 또는 이의 제약상 허용가능한 염을 인간에게 투여하는 것을 포함하는, 인간의 B형 간염 바이러스 감염의 치료 방법.
제1항에 있어서, 상기 제약상 허용가능한 염이 (1R,4S)-4-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2-시클로펜텐-1-메탄올 숙신산염인 치료 방법.
항-B형 간염 바이러스 유효량의 (1R,4S)-4-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2-시클로펜텐-1-메탄올 또는 이의 제약상 허용가능한 염을 이를 위한 제약상 허용가능한 담체와 함께 포함하는 제약 조성물.
제3항에 있어서, 상기 (1R,4S)-4-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2-시클로펜텐-1-메탄올 이외의 항 바이러스제를 추가로 포함하는 제약 조성물.
제3항 또는 제4항에 있어서, 정제 또는 캡슐제 형태인 제약 조성물.
제3항 또는 제4항에 있어서, 용액제, 현탁액제 또는 시럽제 형태인 제약 조성물.
B형 간염 바이러스 감염의 치료 또는 예방용 의약의 제조를 위한 (1R,4S)-4-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2-시클로펜텐-1-메탄올의 용도.