KR102550653B1 - 버섯 복합발효추출물을 함유하는 화장료 조성물 - Google Patents

버섯 복합발효추출물을 함유하는 화장료 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 버섯 복합발효추출물을 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 구체적으로는 운지버섯, 차가버섯 및 잎새버섯을 표고버섯 균사체 배양액으로 발효시켜 제조되는 버섯 복합발효추출물을 함유하여 우수한 항산화, 피부세포재생 및 피부 진정 활성을 나타내는 화장료 조성물에 관한 것이다.

Description

버섯 복합발효추출물을 함유하는 화장료 조성물{Cosmetic composition for anti oxidant and cell protection containing mushroom complex}
본 발명은 버섯 복합발효추출물을 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 구체적으로는 운지버섯, 차가버섯, 잎새버섯을 표고버섯 균사체 배양액으로 발효시켜 제조되는 버섯 복합발효추출물을 함유하여 우수한 항산화, 피부세포재생 및 피부 진정 활성을 나타내는 화장료 조성물에 관한 것이다.
인체의 피부는 표피, 진피 및 피하지방으로 이루어진 몸의 외피로서, 다양한 환경적인 요인에 대해 신체를 보호하는 물리적 장벽의 기능, 촉각 및 온도 조절 등의 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 이러한 피부는 외부환경에 항상 노출되어 있어 시간이 흐름에 따라서 생리적인 기능이 저하되는 노화현상을 겪게 된다.
특히 자외선과 호흡을 통해 생성되는 활성산소는 피부노화에 주요한 원인이 된다. 활성산소는 피부세포 및 조직손상을 주도하며 체내 항산화 방어체계를 파괴함으로써 산화제와 항산화제 사이의 균형을 무너뜨린다.
버섯은 섬유질, 무기질, 비타민류와 같은 다양한 생리활성물질을 포함하고 있으며 베타글루칸 등을 함유하여 항산화, 면역증강 등에 효과적인 식품 및 화장품원료로 이용되고 있다. 한편, 에르고티오네인은 버섯에 함유된 항산화 기능성분이며 인체 내 구성성분이지만 인간, 동물 등은 스스로 생합성하지 못하고 외부로부터 공급 받아야만 하는 성분이다. 버섯으로부터 에르고티오네인을 얻을 수 있으나, 그 수율이 낮아 경제적 가치가 낮은 것으로 알려져 있다.
이에 본 발명들은 버섯으로부터 에르고티오네인을 고함량으로 함유하는 추출물을 제조하고자 연구하였으며, 운지버섯, 차가버섯, 잎새버섯을 혼합하고 표고버섯 균사체 배양액으로 발효시켜 제조되는 버섯 복합발효추출물은 고함량의 에르고티오네인을 함유하며 우수한 항산화, 피부세포재생 및 피부 진정 효과를 가짐을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
(001) 대한민국 공개특허 제10-2010-0025825호(2010.03.10.) (002) 대한민국 등록특허 제10-2111882호(2020.05.11) (003) 대한민국 공개특허 제10-2010-0088880호(2010.08.11)
본 발명은 운지버섯, 차가버섯, 잎새버섯을 표고버섯 균사체 배양액으로 발효시켜 제조되는 버섯 복합발효추출물을 유효성분으로 함유하여 우수한 항산화, 피부재생 및 피부진정효과를 나타내는 화장료 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
또한, 본 발명은 상기 버섯 복합발효추출물의 제조방법을 제공하는 것을 다른 목적으로 한다.
상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명에 따르면, 운지버섯, 차가버섯 및 잎새버섯으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 2이상의 버섯을 혼합하여 이루어지는 버섯 혼합물을 표고버섯 균사체 배양액으로 발효시켜 제조되는 버섯 복합발효추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물이 제공된다.
바람직하게는, 상기 버섯 복합발효추출물은 발효과정에서 UVB를 조사하여 에르고티오네인 함량이 증대된 것임을 특징으로 한다.
바람직하게는, 상기 버섯 혼합물은 운지버섯, 차가버섯 및 잎새버섯이 각각 동일 중량비율로 혼합되어 이루어지는 것임을 특징으로 한다.
상기 버섯 복합발효추출물은 조성물 전체 중량에 대하여 0.02 ~ 12 중량% 함유되는 것임을 특징으로 한다.
상기 화장료 조성물은 항산화용, 피부재생용 또는 피부진정용인 것을 특징으로 한다.
상기 다른 목적을 달성하기 위하여 본 발명에 따르면,
(A) 표고버섯 균사체를 PDB(Potato Dextrose Broth) 액체 배지에서 22~28℃의 온도에서 7~10일간 진탕 배양하여 버섯 균사체 배양액을 제조하는 단계; (B) 운지버섯, 차가버섯 및 잎새버섯으로 이루어지는 군으로부터 선택된 2이상의 버섯을 분쇄하고 혼합하여 버섯 혼합물을 제조하는 단계; (C) 상기 버섯 혼합물을 3~5배 중량의 상기 버섯 균사체 배양액에 침지하고 UVB를 매일 1~3시간씩 조사하면서 22~28℃의 온도에서 7~20일간 발효시키는 단계; 및 (D) 여과하는 단계를 포함하는 버섯 복합발효추출물의 제조방법이 제공된다.
이때, 상기 버섯 혼합물은 운지버섯, 차가버섯 및 잎새버섯이 각각 동일 중량비율로 혼합되어 이루어지는 것임을 특징으로 한다.
본 발명의 제조방법에 의하여 제조되는 버섯 복합발효추출물은 에르고티오네인을 고함량으로 함유하여, 우수한 항산화, 피부재생 및 피부진정효과를 나타내므로 화장료로 유용하게 사용될 수 있다.
도 1은 본 발명 제조예에서 제조된 버섯 복합발효추출물의 에르고티오네인 함량을 나타내는 그래프이다.
도 2는 본 발명 제조예에서 제조된 버섯 복합발효추출물의 항산화 활성을 나타내는 그래프이다.
도 3은 본 발명 실시예에서 제조된 버섯 복합발효추출물의 에르고티오네인 함량을 나타내는 그래프이다.
도 4는 본 발명 실시예에서 제조된 버섯 복합발효추출물의 항산화 활성을 나타내는 그래프이다.
도 5는 본 발명 실시예에서 제조된 버섯 복합발효추출물의 wound healing assy 결과를 나타내는 그래프이다.
이하 본 발명을 더욱 구체적으로 설명한다.
운지버섯은 담자균류의 민주름버섯목 구멍장이 버섯과에 속하며, 운지버섯은 나무에 무리지어 붙어 있는 모습이 하늘의 구름 같다 하여 구름버섯으로 불리기도 하며, 전 세계적으로 널리 분포되어 있다. 운지버섯의 polysaccharides, proteins, terpenoids 등은 항암 효과 및 항산화, 항박테리아 등 다양한 약리 작용에 대한 효과가 있는 것으로 알려져 있다.
차가버섯은 담자균류의 소나무비늘버섯과에 속하며, 아시아 및 유럽과 북아메키라 등 주로 산악지대에 자생한다. 차가버섯은 기생 균주의 형태로 자작나무 몸통에 침투하여 자라나며 유럽에서 민간요법으로 사용되어온 버섯이다. 차가버섯은 암, 궤양, 항산화, 면역조절, 지방대사 개선 작용 등의 연구에 이용되어 왔으며 다당, 베툴린을 포함한 다양한 생리활성물질을 함유하고 있다.
잎새버섯은 담자균류 민주름버섯목, 구멍장이버섯과 잎새버섯속에 속하는 버섯으로 아시아, 유럽, 미국 등에 분포하는 버섯이다. 잎새버섯은 암, 염증, 종양 제거 등에 효과를 가진 약용버섯으로 높이 평가 받고 있다. 잎새버섯에는 1,6-베타글루칸이 함유되어 대식세포 및 NK세포의 활성을 증가시켜 면역기능 향상에도 효과적인 것으로 알려져 있다.
에르고티오네인(ergothioneine)은 아미노산 구조의 화합물로서 세포 및 미토콘드리아의 활성산소를 제거하는 기능을 가지고 있다. 에르고티오네인은 콩과식물 및 일부 박테리아에 포함되어 있으나 가장 많이 포함되어 있는 천연소재는 버섯으로 알려져 있다. 에르고티오네인은 다른 항산화제의 반감기에 비해 상대적으로 긴 반감기를 가지고 있는 것으로 알려져 있으며, 인체에서 항염증 작용과 세포의 정상적인 대사기능에 중요한 역할을 한다.
본 발명은 운지버섯, 차가버섯, 잎새버섯을 표고버섯 균사체 배양액으로 발효시켜 추출함으로써 에르고티오네인을 고함량으로 함유하는 버섯 복합합효추출물을 제조하고 이를 화장료로 이용하는 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따르면, 운지버섯, 차가버섯 및 잎새버섯으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 2이상의 버섯을 혼합하여 이루어지는 버섯 혼합물을 표고버섯 균사체 배양액으로 발효시켜 제조되는 버섯 복합발효추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물이 제공된다.
바람직하게는, 상기 버섯 복합발효추출물은 발효과정에서 UVB를 조사하여 에르고티오네인 함량이 증대된 것임을 특징으로 한다.
더욱 바람직하게는, 상기 버섯 혼합물은 운지버섯, 차가버섯 및 잎새버섯이 각각 동일 중량비율로 혼합되어 이루어진다.
본 발명의 일 구체예에 따르면 상기 버섯 복합발효추출물은 다음과 같은 방법으로 제조된다.
(A) 표고버섯 균사체를 PDB(Potato Dextrose Broth) 액체 배지에서 22~28℃의 온도에서 7~10일간 진탕 배양하여 버섯 균사체 배양액을 제조하는 단계; (B) 운지버섯, 차가버섯 및 잎새버섯으로 이루어지는 군으로부터 선택된 2이상의 버섯을 분쇄하고 혼합하여 버섯 혼합물을 제조하는 단계; (C) 상기 버섯 혼합물을 3~5배 중량의 상기 버섯 균사체 배양액에 침지하고 UVB를 매일 1~3시간씩 조사하면서 22~28℃의 온도에서 7~20일간 발효시키는 단계; 및 (D) 여과하는 단계를 포함하는 방법에 의하여 버섯 복합발효추출물이 제조된다.
먼저, 표고버섯 균사체를 PDB(Potato Dextrose Broth) 배지를 이용하여 22~28℃의 온도에서 7~10일간 배양하여 표고버섯 균사체 배양액을 제조한다.
운지버섯, 차가버섯 및 잎새버섯으로 이루어지는 군으로부터 선택된 2이상의 버섯을 분쇄 후 혼합하여 버섯 혼합물을 제조한다. 이때, 운지버섯, 차가버섯 및 잎새버섯은 각각 0~2:0~2:0~2의 중량비율로 혼합되는 것이 바람직하며, 더욱 바람직하게는 운지버섯, 차가버섯 및 잎새버섯이 동일 중량비율로 혼합된다.
버섯 혼합물을 상기 버섯 균사체 배양액에 침지하여 22~28℃의 온도에서 7~20일간 발효시킨다. 이때 표고버섯 균사체 배양액은 상기 버섯 혼합물 중량의 3~5배를 사용한다. 상기 발효과정에서 매일 1~3 시간씩 300nm, 15w 램프를 이용해 UV-B를 조사하면서 발효시켰다. 이를 통해 에르고티오네인의 함량이 더욱 증가하는 것을 확인할 수 있었다.
상기 발효 후, 배양액을 여과하고 살균하여 버섯 복합발효추출물을 제조한다. 상기 제조된 버섯 복합발효추출물을 물, 에탄올, 에틸렌글리콜, 부틸렌글리콜, 글리세린, 프로필렌글라이콜, 다이프로필렌글라이콜 및 펜틸렌글라이콜로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 용매로 희석하여 사용할 수도 있다.
이와 같이 제조되는 버섯 복합발효추출물은 에르고티오네인의 함량이 높고, 우수한 항산화, 피부세포재생 및 피부진정효과를 나타내었다.
상기 버섯 복합발효추출물은 조성물 전체 중량에 대하여 0.02 ~ 12 중량% 함유된다.
상기 화장료 조성물의 제형은 제한되지는 않으나 일반적인 유화 제형 및 가용화 제형의 형태로 제조할 수 있다. 유화 제형의 화장품으로는 영양화장수, 크림, 에센스 등이 있으며, 가용화 제형의 화장품으로는 유연화장수가 있다. 또한, 화장품 이외에도 피부 과학적으로 허용 가능한 매질 및 기제를 함유함으로써 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 국소 적용 및 전신 적용할 수 있는 보조제 형태로 제조될 수 있다.
[실시예]
이하, 본 발명의 바람직한 실시예를 통해 본 발명의 구성 및 작용을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 다만, 하기 실시예는 본 발명의 이해를 돕기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 하기 실시예에 한정되지는 않는다.
제조예 1~7: 버섯 복합발효추출물의 제조
PDB 배지를 이용하여 25℃의 온도에서 표고버섯 균사체를 7일간 배양하여 균사체 배양액을 제조하였다. 운지버섯, 차가버섯, 잎새버섯을 분쇄하고 중량비를 하기 표 1과 같이 조절하여 버섯 혼합물을 제조하였다. 버섯 혼합물 30g을 표고버섯 균사체 배양액 100g에 침지하여 23℃의 온도에서 10일간 발효시켰다. 얻어진 발효액을 여과하고 살균하여 버섯 복합발효추출물을 제조하였다.
제조예 운지버섯 차가버섯 잎새버섯
제조예 1 1 1 1
제조예 2 2 1 0
제조예 3 0 1 2
제조예 4 1 0 2
제조예 5 2 0 1
제조예 6 0 2 1
제조예 7 1 2 0
시험예 1: 버섯 복합발효추출물의 단백질 함량 분석
상기 제조예에서 제조된 버섯 추출물의 총단백질 함량을 Pierce BCA protein assay를 이용하여 측정하였다.
정제수에 희석된 각 제조예 시료 25㎕와 BCA solution 200㎕를 96 well plate에 혼합한 뒤 빛은 차단시켜 37℃에서 30분간 반응시킨 다음 ELISA reader를 사용하여 562nm 흡광도에서 측정한 다음 값을 구하였다.
그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.
제조예 Total protein contents(mg)
제조예 1 288.35±2.12
제조예 2 268.48±1.52
제조예 3 272.17±1.45
제조예 4 275.47±11.4
제조예 5 265.45±0.24
제조예 6 268.71±14.25
제조예 7 261.45±8.2
상기 표 2에서 확인되는 바와 같이 운지버섯, 차가버섯 및 잎새버섯이 동일 중량비율로 혼합되어 이루어진 제조예 1의 추출물에서 가장 높은 총단백질량을 나타내었다.
시험예 2: 버섯 복합발효추출물의 에르고티오네인 함량 분석
상기 제조예에서 제조된 버섯 추출물의 에르고티오네인 함량을 분석하기 위해 상기 제조예 시료 0.2g에 10mL cold ethanolic extraction buffer를 첨가한 후 3분 간 sonication한 다음, 2 mL의 1% ethanolic solution을 첨가하고 20분간 원심분리하였다. 이후 상등액 3 mL을 농축하여 50 mM sodium phosphate와 3% acetonitrile에 녹여 HPLC로 분석하였다.
표준용액은 L-Ergothioneine을 이용하였으며 이동상은 3% acetonitrile이 함유된 50mM sodium phosphate를 사용하였고, 유속은 1.0 mL/min, 컬럼온도는 35℃이며, 컬럼은 Shodex HILIC column(4.6mm×250 mm, 5 μm)을 사용하였다. 그 결과를 도 1에 나타내었다.
도 1에서 확인되는 바와 같이, 제조예 1~7의 에르고티오네인 함량 확인 결과, 아미노산 복합체인 에르고티오네인 함량은 상기 총 단백질 함량과 유사한 결과를 나타내었다.
운지버섯, 차가버섯 및 잎새버섯이 동일 중량비율로 혼합되어 추출되었을 때 가장 높은 함량을 나타내었으며, 다음으로는 잎새버섯의 함량이 상대적으로 높은 제조예 3, 제조예 4의 시료에서 높은 에르고티오네인 함량을 나타내었다.
시험예 3: 버섯 복합발효추출물의 항산화 활성 평가
상기 제조예에서 제조된 버섯 추출물의 항산화 활성을 DPPH 라디칼소거능 분석방법을 이용하여 측정하였다.
Ethanol에 희석된 각 제조예 시료 0.1mL와 DPPH(1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl) 용액 0.1 mL를 혼합 후 30분 동안 방치한 다음, ELISA Reader를 이용하여 520nm에서 시료의 라디칼 소거 활성을 평가하였다. 이 때 양성 대조군으로는 Ascorbic acid를 사용하였으며, 하기의 식으로 DPPH 라디칼 소거 활성을 계산하였다.
DPPH 라디칼 소거 활성(%)= [(control-sample)/control]×100
그 결과를 도 2에 나타내었다. 도 2에서 확인되는 바와 같이 제조예 1과 제조예 3에서 가장 높은 라디칼 소거 활성을 나타내었다.
실시예 1~3: 버섯 복합발효추출물의 제조
PDB 배지를 이용하여 25℃의 온도에서 표고버섯 균사체를 7 일간 배양하여 균사체 배양액을 제조하였다.
분쇄된 운지버섯, 차가버섯 및 잎새버섯을 하기 표 3과 같이, 우수한 에르고티오네인 함량 및 항산화 결과를 나타낸 상기 제조예 1, 3, 4의 중량 비율로 혼합하여 버섯혼합물을 제조하였다. 버섯혼합물 30g을 상기 제조된 표고버섯 균사체 배양액 100g에 침지하여 23℃의 온도에서 10일간 발효시켰다. 이때, 하루 2시간씩 300nm, 15w 램프를 이용하여 UV-B를 조사하면서 발효시켰다. 얻어진 발효액을 여과하고 살균하여 버섯 추출물을 제조하였다.
UV-B조사 운지버섯 차가버섯 잎새버섯
실시예 1 1 1 1
실시예 2 0 1 2
실시예 3 1 0 2
비교예 1~3: 버섯 복합발효추출물의 제조
PDB 배지를 이용하여 25℃의 온도에서 표고버섯 균사체를 7 일간 배양하여 균사체 배양액을 제조하였다.
분쇄된 운지버섯, 차가버섯 및 잎새버섯을 하기 표 4와 같은 중량 비율로 혼합하여 버섯혼합물을 제조하였다. 버섯혼합물 30g을 상기 제조된 표고버섯 균사체 배양액 100g에 침지하여 23℃의 온도에서 10일간 암실에서 발효시켰다. 얻어진 발효액을 여과하고 살균하여 버섯 추출물을 제조하였다.
암실 운지버섯 차가버섯 잎새버섯
비교예 1 1 1 1
비교예 2 0 1 2
비교예 3 1 0 2
시험예 4: 버섯 복합발효추출물의 에르고티오네인 함량 분석
상기 실시예 1~3 및 비교예 1~3 에서 제조된 버섯 추출물의 에르고티오네인 함량을 분석하기 위해 상기 시료 0.2g에 10mL cold ethanolic extraction buffer를 첨가한 후 3분 간 sonication한 다음, 2 mL의 1% ethanolic solution을 첨가하고 20분간 원심분리하였다. 이후 상등액 3 mL을 농축하여 50 mM sodium phosphate와 3% acetonitrile에 녹여 HPLC로 분석하였다.
표준용액은 L-Ergothioneine을 이용하였으며 이동상은 3% acetonitrile이 함유된 50mM sodium phosphate를 사용하였고, 유속은 1.0 mL/min, 컬럼온도는 35℃이며, 컬럼은 Shodex HILIC column(4.6mm×250 mm, 5 μm)을 사용하였다. 그 결과를 도 3에 나타내었다.
도 3에서 확인되는 바와 같이, 암실에서 발효시킨 비교예의 버섯 복합발효추출물과 비교하여 볼 때, UVB를 조사하면서 발효시킨 실시예의 버섯 복합발효추출물에서 높은 에르고티오네인 함량을 나타내었으며, 실시예 1에서 가장 높은 함량을 나타내었다.
시험예 5: 버섯 복합발효추출물의 항산화 활성 평가
상기 실시예 1~3 및 비교예 1~3에서 제조된 버섯 추출물의 항산화 활성을 DPPH 라디칼 소거능 분석방법을 이용하여 측정하였다.
Ethanol에 희석된 각 실시예 및 비교예 시료 0.1 mL와 DPPH(1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl) 용액 0.1 mL를 혼합 후 30 분 동안 방치한 다음, ELISA Reader를 이용하여 520nm에서 시료의 라디칼 소거 활성을 평가하였다. 이 때 양성 대조군으로는 Ascorbic acid를 사용하였으며, 하기의 식으로 DPPH 라디칼 소거 활성을 계산하였다.
DPPH 라디칼 소거활성(%)= [(control-sample)/control]×100
그 결과를 도 4에 나타내었다.
UVB를 조사하면서 발효시킨 상기 실시예의 버섯 복합발효추출물은 상기 제조예(도 2)나 비교예의 버섯 복합발효추출물에 비하여 더 높은 라디칼 소거 활성을 나타내었으며, 그 중에서도 운지버섯, 차가버섯 및 잎새버섯이 1:1:1의 중량비율로 혼합되어 발효 추출된 실시예 1에서 더욱 우수한 항산화 효과를 나타내었다.
시험예 6: Wound healing assay 시험
상기 실시예 및 비교예에서 제조된 버섯 추출물의 Wound healing 효과를 측정하였다. HaCaT 세포를 6 well plate에 1×106cells/well의 농도로 분주하여 배양한 후, FBS가 첨가되지 않은 배지로 교체하여 18시간 starvation 시키고, 24시간 동안 배양하였다. 대조군은 FBS가 포함된 배지를 이용하였으며 HaCaT 세포에 시료를 2%씩 처리하고, 24시간 배양한 후 전자현미경 100 배율로 관찰하였다. 그 결과를 도 5에 나타내었다.
Wound healing 효과를 시험한 결과, 상기 비교예에 비해 실시예에서 세포간 간격이 좁음을 확인하였으며, 실시예 1과 2에서 가장 우수한 효과를 나타내었다.
실시예 4: 버섯 추출물을 함유하는 크림 제조
하기 표 5의 조성에 따라 통상의 방법으로 버섯 추출물 함유 크림을 제조하였다.
성 분 함량(중량%)
대조예 실시예
1 2 3 4
버섯 추출물(비교예 1) 4.0 - - -
버섯 추출물(비교예 2) - 4.0 - -
버섯 추출물(비교예 3) - - 4.0 -
버섯 추출물(실시예 1) - - - 4.0
친유형 모노스테아린산글리세린 2.5 2.0 2.0 2.0
스테아릴알콜 2.4 2.2 2.2 2.2
스테아린산 1.5 1.5 1.5 1.5
호호바오일 1.0 1.0 1.0 1.0
폴리솔베이트 80 2.5 1.5 1.5 1.5
솔비탄스테아레이트 0.6 0.6 0.6 0.6
스쿠알란 3.5 3.0 3.0 3.0
MCT 오일 4.0 5.0 5.0 5.0
시어버터 4.0 5.0 5.0 5.0
디메치콘 3.0 1.0 1.0 1.0
시트릭애씨드 0.3 0.1 0.1 0.1
프로필렌글라이콜 5.0 5.0 5.0 5.0
부틸렌글라이콜 3.0 3.0 3.0 3.0
1,2-헥산디올 2.0 1.0 1.0 1.0
소듐히아루로네이트 (1%) 4.0 4.0 4.0 4.0
미량 미량 미량 미량
정제수 잔량 잔량 잔량 잔량
시험예 7: 피부 홍반완화 효과 측정
상기 실시예 및 대조예에서 제조된 크림을 사용하여 자극으로 인한 붉은 피부를 가진 여성 40명을 선정하여 각각 5명씩 그룹으로 나누어 1일 2회씩 2주간 안면부에 사용하도록 하게 한 후의 홍반지수를 측정하였다. 측정 방법은 Mexameter® MX 18(Courage+Khazaka Electronic, Germany)을 이용하여 양 볼 부위에 Mexameter® MX 18을 접촉한 후 1초 이내에 센서를 통하여 홍반지수(Erythema Index, EI)를 측정하였다. 개인당 3번 반복 측정하였다. 그 평균 값은 하기 표 6에 나타내었다.
시료명 사용 전 홍반지수(EI) 사용 후 홍반지수(EI)
실시예 4 13.2±7.2 8.5±3.3
대조예 1 15.4±5.5 11.2±3.8
대조예 2 13.5±3.8 10.5±2.4
대조예 3 14.9±5.3 10.1±3.6
상기 표 6에서 확인되는 바와 같이, 상기 실시예 1의 에르고티오네인 함량이 증가된 버섯 추출물을 함유하는 실시예 4의 크림은 대조예의 크림에 비해 높은 홍반완화 효과를 나타내어 피부 진정 및 보호 효과를 가지는 것을 알 수 있다.

Claims (9)

  1. 운지버섯, 차가버섯 및 잎새버섯을 혼합하여 이루어지는 버섯 혼합물을 표고버섯 균사체 배양액으로 발효하는 과정에서 UVB를 조사하면서 발효시킴으로써 에르고티오네인 함량을 증대시킨 버섯 복합발효추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물.
  2. 삭제
  3. 제1항에 있어서, 상기 버섯 혼합물은 운지버섯, 차가버섯 및 잎새버섯이 각각 동일 중량비율로 혼합되어 이루어지는 것임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  4. 제1항에 있어서, 상기 버섯 복합발효추출물은 조성물 전체 중량에 대하여 0.02 ~ 12 중량% 함유되는 것임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  5. 제1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 항산화용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  6. 제1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 피부재생용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  7. 제1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 피부진정용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  8. (A) 표고버섯 균사체를 PDB(Potato Dextrose Broth) 액체 배지에서 22~28℃의 온도에서 7~10일간 진탕 배양하여 버섯 균사체 배양액을 제조하는 단계;
    (B) 운지버섯, 차가버섯 및 잎새버섯을 분쇄하고 동일 중량비로 혼합하여 버섯 혼합물을 제조하는 단계;
    (C) 상기 버섯 혼합물을 3~5배 중량의 상기 버섯 균사체 배양액에 침지하고 UVB를 매일 1~3시간씩 조사하면서 22~28℃의 온도에서 7~20일간 발효시키는 단계; 및
    (D) 여과하는 단계를 포함하는 버섯 복합발효추출물의 제조방법.
  9. 삭제
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Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20050068068A (ko) * 2003-12-29 2005-07-05 학교법인 백암교육재단 버섯 및 장뇌삼 추출물을 함유하는 화장료 조성물
JP2009159920A (ja) * 2008-01-10 2009-07-23 Univ Nagoya 菌糸体培養によるエルゴチオネインの製造方法
KR20100025825A (ko) 2008-08-28 2010-03-10 대한민국(관리부서 : 산림청 국립산림과학원장) 에르고티오네인의 함량 증가를 위한 자흑색불로초 균사체 배양 배지 및 자흑색불로초 균사체 배양 방법
KR20100088880A (ko) 2009-02-02 2010-08-11 한불화장품주식회사 발효 생약추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물
KR102111882B1 (ko) 2019-04-17 2020-05-15 김용수 버섯 복합물을 함유하는 화장료 조성물

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20050068068A (ko) * 2003-12-29 2005-07-05 학교법인 백암교육재단 버섯 및 장뇌삼 추출물을 함유하는 화장료 조성물
JP2009159920A (ja) * 2008-01-10 2009-07-23 Univ Nagoya 菌糸体培養によるエルゴチオネインの製造方法
KR20100025825A (ko) 2008-08-28 2010-03-10 대한민국(관리부서 : 산림청 국립산림과학원장) 에르고티오네인의 함량 증가를 위한 자흑색불로초 균사체 배양 배지 및 자흑색불로초 균사체 배양 방법
KR20100088880A (ko) 2009-02-02 2010-08-11 한불화장품주식회사 발효 생약추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물
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