KR20080061080A

KR20080061080A - 트러플 추출물을 함유하는 화장료 조성물

Info

Publication number: KR20080061080A
Application number: KR1020060135932A
Authority: KR
Inventors: 류종성; 김진준; 신현종
Original assignee: 주식회사 엘지생활건강
Priority date: 2006-12-28
Filing date: 2006-12-28
Publication date: 2008-07-02

Abstract

본 발명은 트러플 추출물을 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 특히 트러플 추출물을 유효성분으로 포함함으로써 피부에 자극이 없는 안전한 물질로서, 피부 노화의 원인 물질인 활성유해산소 제거를 통해 피부노화를 방지하는 항산화 효과와 피부 도포시 모세혈관의 확장을 통한 혈류량 개선 효능을 가지는 항산화 또는 혈류량 개선 촉진용 화장료 조성물에 관한 것이다.

항산화, 혈류량, 트러플, 화장료

Description

트러플 추출물을 함유하는 화장료 조성물 {Cosmetic composition comprising Tuber Melanosporum}

도 1은 본 발명의 화장료 조성물에 사용되는 트러플 추출물의 항산화 효과를 측정한 결과를 나타내는 그래프이다.

도 2는 본 발명의 화장료 조성물에 사용되는 트러플 추출물의 인체에 대한 피부 혈류량 개선 효능을 측정한 결과를 나타내는 그래프이다.

본 발명은 트러플 추출물을 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 피부에 자극이 없는 안전한 물질로서, 피부 노화의 원인 물질인 활성유해산소 제거를 통해 피부노화를 방지하는 항산화 효과와 피부 도포시 모세혈관의 확장을 통한 혈류량 개선 효능을 가지는 항산화 또는 혈류량 개선 촉진용 화장료 조성물에 관한 것이다.

화장품은 외관상 피부를 아름답게 만들어 주며 미를 극대화하는데 그 목적이 있다. 미백, 주름개선, 피부보호 등 다양한 효능을 가진 원료들이 스크리닝되어 화장품 제조시에 첨가된다. 그 중에서도 항산화 효과는 피부노화의 원인물질인 활 성유해산소를 제거함으로 피부노화를 지연시켜줌으로 상대적으로 피부노화를 예방하고, 피부 혈류량 개선은 피부의 원활한 혈류량 개선을 통해 칙칙하고 탄력 없는 피부를 싱싱하고 맑고 투명한 피부로 만들어 주며 외관상 돋보이는 건강한 피부를 만들어 준다.

그러나 항산화 및 혈류량 개선 효능을 가진 물질은 극히 제한적이거나 효능을 가진 물질도 많이 알려져 있지 않으며, 현재 사용되는 소수의 물질도 화학적으로 합성하여 사용하고 있다.

피부는 외부 환경에 직접적으로 노출되는 부위로서, 과도한 자외선이나 오염물질 등에 노출되면 피부 내 활성유해산소가 생성되어 피부 탄력섬유의 붕괴를 촉진시켜 피부주름의 증가 등 피부노화를 가속화시키는 것으로 알려져 있다.

피부는 노화됨에 따라 각질화와 표피세포의 융합속도가 점차 느려지게 되며, 표피세포층은 얇게, 각질층은 두꺼워지며, 진피층과의 경계선도 완만하게 된다. 진피에서는 섬유아세포가 노화되어 섬유질과 기질의 생성능력이 감소하게 되고, 피부세포는 나이가 들수록 세포내에 과산화물 수치가 급격히 증가하며, 각종 오염물질과 스트레스 등에 영향을 쉽게 받게 된다. 세포 및 세포막의 구성성분이 과산화물질로 변하고 단백질 손상이 일어나 세포는 그 기능을 원활히 수행할 수 없게 되어 세포의 대사활성이 저하되고, 이러한 기능적, 구조적 손상으로 주름이 생기게 되어 이들로 인해 피부노화가 더욱 촉진된다. 이러한 피부노화 메커니즘에 관여되는 단계를 막아주는 것이 피부노화를 근본적으로 방지할 수 있다.

이에, 노화를 방어할 수 있는 물질을 찾는 노력은 과거부터 현재까지 계속해 서 진행되어 왔고, 피부에 직접 도포시 혈류량 개선 효능을 갖는 새로운 원료를 탐색하기 위한 연구가 국내외에서 활발하게 이루어지고 있다.

상기와 같은 종래기술의 문제점을 해결하고자, 본 발명은 피부에 자극이 없는 안전한 물질로서, 피부 노화의 원인 물질인 활성유해산소 제거를 통해 피부노화를 방지하는 항산화 효과와 피부 도포시 모세혈관의 확장을 통한 혈류량 개선 효능을 가지는 화장료 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 트러플 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.

상기 트러플 추출물은 화장료 조성물에 0.0001 내지 30 중량%로 포함되는 것이 바람직하다.

이하 본 발명을 상세하게 설명한다.

본 발명자들은 자연계에 존재하며 한방이나 민간요법으로 많이 사용하는 약재들 중에서 항산화 및 혈류량 개선 효과를 가지는 물질을 탐색하기 위하여 여러 물질의 추출물을 대상으로 연구한 결과, 트러플 추출물이 항산화 효능이 탁월하면서 피부도포시 혈류량 개선 효능이 우수함을 확인하고, 이를 토대로 본 발명을 완성하게 되었다.

본 발명의 화장료 조성물은 트러플 추출물을 유효성분으로 포함하는 것을 특 징으로 한다.

상기 트러플(Tuber Melanosporum)은 '나를 맛보면 신을 사랑하게 된다'는 어느 프랑스 작가의 말처럼 프랑스어로는 '트뤼프', 영어로는 '트러플'이라고 부르며, 생긴 모양 때문에 '버섯꽃'이라고 불리기도 하나, 좀더 현실적으로 고가의 다이아몬드에 비유된 흰 다이아몬드, 검은 다이아몬드로 표현되기도 한다.

검정 트러플 가운데 최고로 치는 것은 프랑스의 페리고르(Perigord) 지역에서 나는 것으로, 이것은 겉과 속이 까맣고 견과류처럼 생겼으며 특유의 진한 향을 가지고 있다. 흰 트러플은 이탈리아의 알바(Alba) 지역에서 나는 것을 최고로 치며, 강하고 우아하면서도 원초적인, 형용할 수 없는 냄새를 지녀 같은 크기의 검정 트러플에 비해 서너 배 높은 가격으로 팔린다.

트러플은 일반적인 자실체와는 달리 방사된 섬사(꽃실)가 스스로 배양되어 트러플이 생겨나서 나무와의 의존적인 관계를 끊고 홀로 자생하는 강인한 생명력과 수분, 단백질, 비타민, 이온, 지질, 섬유질 등 다양한 인체 유용성분을 다량으로 함유하고 있다.

트러플 추출물은 통상의 추출방법에 따라 추출할 수 있으며, 추출용매의 종류 및 함량 등도 목적에 따라 임의로 선정하여 사용할 수 있다. 일예로, 정제한 트러플을 건조 분쇄하여 분말화한 후, 여기에 10 배량의 추출용매를 넣어 5 일간 냉침하여 추출한 추출원액을 여과, 농축하고, 농축된 추출원액을 동결건조하는 통상의 방법으로 제조될 수 있다.

또한 상기 트러플 추출에 사용되는 추출용매는 정제수, 메탄올, 에탄올, 프 로판올, 부탄올, 글리세롤, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 메칠아세테이트, 에틸아세테이트, 핵산, 클로로포름, 벤젠, 및 페트로륨 에테르로 이루어진 군으로부터 1종 또는 2 종 이상 선택하여 사용될 수 있다.

상기 트러플 추출물은 화장료 조성물에 0.0001 내지 30 중량%로 포함되는 것이 바람직하며, 더욱 바람직하게는 0.001 내지 20 중량%로 포함되는 것이다. 그 함량이 상기 범위 내인 경우 항산화 및 혈류량 개선과 제형의 안정성을 동시에 만족시킬 수 있는 장점이 있다.

상기와 같은 본 발명의 트러플 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물의 제형은 특별히 제한되지 않으며, 목적하는 바에 따라 적절히 선택할 수 있다. 구체적으로, 상기 화장료 조성물은 유연화장수, 영양화장수, 영양크림, 맛사지크림, 에센스, 팩, 젤, 로션, 연고, 패취, 또는 분무제 등의 제형으로 제조할 수 있다.

또한 본 발명의 화장료 조성물은 각각의 제형에 일반 피부화장료에 배합되는 유분, 물, 계면활성제, 보습제, 저급알코올, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 또는 향료 등을 필요에 따라 적절히 배합하여 사용할 수 있다.

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시하나, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐 본 발명의 범위가 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.

[실시예]

실시예 1

트러플을 한약분쇄기를 이용하여 100∼200 메쉬(mesh)의 크기로 분쇄시킨 후 5 배 용량의 에탄올 또는 10 배 용량의 1,3-부틸렌글리콜(1,3-butylene glycol)을 가하여 5 일간 냉침하여 추출하였다. 그 다음, 에탄올을 이용한 추출물을 와트만 여과지(Whatman filter paper No.4)를 사용해 고형분을 제거한 후 회전식 증발농축기(rotatry evaporator)를 이용해 감압농축한 후 트러플 추출물을 제조하였다.

(항산화 효과 측정)

상기 제조한 트러플 추출물의 항산화 효과를 알아보기 위하여 자유라디칼 소거활성실험(free radical scavenging activity test)을 실시하였다. 자유라디칼 소거활성 시험은 Kim 등(Kor. J. Pharmacogn., 24(4), 299-303(1993))의 방법을 변형한 것으로서, 안정한 자유라디칼인 DPPH(1,1-dipheynyl-2-picryhydrazyl, Sigma 사) 시약을 사용하였다.

먼저, 0.2 mM DPPH 용액(Blank인 경우는 메탄올) 1 mL에 상기 제조한 트리플 추출물을 다양한 농도로 준비하여 각각 2 mL씩 첨가하여 혼합한 후, 실온에서 10 분간 방치한 다음, 525 ㎚에서 흡광도를 측정하였다. 이때, 대조군으로는 정제수를 이용한 경우로 설정하였다. 그 다음, 상기 흡광도를 이용하여 하기 수학식 1에 따라 자유라디칼 소거율을 계산하고, 그 결과를 도 1 및 하기 표 1에 나타내었다. 하기 표 1의 자유라디칼 소거율 측정은 5 회 반복 시험하여 구하였다.

[수학식 1]

추출물	농도 (㎍/mL)	자유라디칼 소거율 (%)	SC₅₀ (%)
트러플 추출물	0.1	2.7	0.45
	1	5.3
	10	30.9
	100	42.5
	1,000	58.3
	10,000	63.9

도 1 및 상기 표 1에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 화장료 조성물에 사용되는 트러플 추출물은 자유라디칼 소거능이 우수함을 확인할 수 있었다.

(인체에 대한 피부 혈류량 개선 효능 측정)

건강한 성인 남녀 50 명을 대상으로 피부의 혈류량 촉진 효능을 알아보기 위하여 하기와 같이 전팔 부위에 트러플 추출물 사용 전, 후의 혈류량을 스웨덴 페리메드 AB(Perimed AB, Sweden)사에서 제조한 페리플럭스 시스템 5000(PeriFlux System 5000) 혈류량 측정기기를 이용하여 측정하였다. 본 기기는 모세혈관을 흐르는 적혈구가 레이저 빛을 파장으로 전환시키고, 이렇게 전환된 파장을 회복섬유(returning fiber)가 잡아서 전기적 신호로 다시 전환시켜 이 전기적 신호를 수치로 표현하여 혈류량을 나타내 준다. 즉, 혈류량이 많을수록 수치는 높아지고 혈류량이 적을수록 수치는 낮아진다. 혈류량을 나타내는 수치는 기기자체에서 제공하는 LDPF unit로 표현된다. 피시험자는 항온항습이 유지되는 실험실에 20∼30 분 정도 적응을 시킨 후 시험부위인 전팔(forearm) 부위에 시료를 도포하기 전 혈류량을 측정하였고, 시료 도포 후 10 분 정도 기다린 후 다시 혈류량을 측정하였다. 대조군 시료는 트러플 추출물을 추출하기 위한 용매인 1,3-부틸렌글리콜을 사용하였다. 혈류량 개선 정도는 시료 도포 전, 후의 혈류량 측정값의 비율을 하기 수학식 2에 따라 백분율로 표시하여 계산하였으며, 그 결과를 도 2 및 하기 표 2에 나타내었다.

[수학식 2]

개선율 (%) = (B-A) / A × 100

상기 수학식 2에서, A는 트러플 추출물 처리 전 혈류량 평균값이고, B는 트러플 추출물 처리 후 혈류량 평균값이다.

구분		혈류량 측정값 평균 (LDPM unit)		개선율 (%)
구분		트러플 추출물 처리 전	트러플 추출물 처리 후	개선율 (%)
트러플 추출물	1 부피% 농도	6.4 ± 2.2	7.3 ± 1.5	14.1
트러플 추출물	5 부피% 농도	7.3 ± 1.9	9.2 ± 2.5	26.0
대조군		8.6 ± 3.6	8.4 ± 5.9	-

도 2 및 상기 표 2에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 화장료 조성물에 사용되는 트러플 추출물은 혈류량 개선 효과가 우수하였으며, 특히 5 부피% 농도의 트러플 추출물은 혈류량 개선 효과가 26.0 %로 높게 나타남을 확인할 수 있었다.

(안정성 검증)

1. 세포독성 평가

트러플 추출물의 1차 안전성을 검증하고자 트러플 추출물에 대하여 V79-4세포(차이니스 햄스터, 폐조직 섬유아세포의 연속 세포주)를 배양하여 MTT 시험을 하는 방법(참고 문헌 : Mossman T. Rapid colorimetric assay for cellular growth & survival : application to proliferation & cytotoxicity assays. Journal of Immunological Methods, 1983, 65, 55~63)을 수행하여 세포독성을 시험하고, 그 결과를 하기 표 3에 나타내었다. 이때, 대조군으로 SLS를 사용하였다.

시료	IC₅₀ (%, w/v)
SLS	0.005
트러플 추출물	10
[주] IC₅₀(Inhibitory Concentration 50) - 50 %의 세포를 사멸시키는 농도

상기 표 3을 통하여, 본 발명의 화장료 조성물에 사용되는 트러플 추출물의 IC₅₀ 값은 10 %로 SLS에 비하여 2,000 배 이상 세포독성이 낮게 나타나 안전성이 우수함을 확인할 수 있었다.

2. 알러지 평가

트러플의 알러지 유발여부를 확인하기 위한 실험으로 LLNA(local lymph node assay) 실험법을 실시하였다(참고문헌 : OECD GUIDELINE FOR THE TESTING OF CHEMICALS ; DRAFT NEW GUIDELINE 429: Skin Sensitization ; Local Lymph Node Assay).

먼저, 트러플 추출물을 20 중량%, 40 중량%, 60 중량% 용액으로 제조하여, 마우스(Balb/c)의 양쪽 귀에 25 ㎕씩 3 일간 발라준 후, 마우스로부터 이개임파절(Auricular lymph node)을 분리하였다. 상기 분리한 임파절을 분쇄하여 단일세포 상태로 만든 후, 방사성 동위원소 [³H]-메틸티미딘(methyl thymidine)을 첨가하여 24 시간 동안 배양한 다음, 세포 증식의 dpm 및 증폭도를 측정하고, 그 결과를 하기 표 4에 나타내었다. 이때, 대조군으로는 에탄올 60 % 용액을 사용하였다.

구분	농도 (%)	임파절세포 수 (세포/mL × 10⁷)	dpm¹ (평균)	S.I.² (증폭도)
에탄올	60	2.27	1895	운반매개물
트러플 추출물	20	1.29	1141	0.6
트러플 추출물	40	1.32	1361	0.7
트러플 추출물	60	1.21	1214	0.6
[주] 1. dpm(disintegraion per minute) - [³H]-메틸티미딘이 세포내로 삽입되는 양 2. S.I.(stimulation index) - 시료의 평균 dpm을 대조군의 평균 dpm으로 나눈 값

알러지 평가 결과는 대조군에 비한 시료군의 임파구 증폭 정도로 나타내며, 한 농도에서라도 시료의 증폭 정도(S.I.)가 3 이상이고, 농도 의존적으로 증가하는 경향을 보일 경우 알러젠으로 간주하게 되는데, 상기 표 4에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 화장료 조성물에 사용되는 트러플 추출물은 증폭 정도가 3 이하로서 알러지 유발 가능성이 없는 것으로 나타났다.

3. 인체첩포 시험

트러플의 인체에 대한 안전성을 알아보기 위하여, 하기와 같이 인체 첩포 시험(Human patch test)을 통하여 인체에 대한 1차 자극시험을 실시하였다. 건강한 성인 남녀 50 명을 대상으로 CTFA 가이드라인(참고문헌 : The Cosmetic, Toility and Fragrance Association. Inc. Washington, D.C., 20036, 1991)에 따라 실시하였다.

먼저, 핀 챔버(Finn Chamber)에 5 % 농도(v/v)의 트러플 추출물, 0.05 % 농도(w/v)의 SLS시료, 및 증류수를 각각 15 ㎕를 적하시킨 후, 이를 시험부위인 피시험자의 등에 얹어 테이프로 고정시켰다. 이어서, 24 시간 동안 첩포한 후, 첩포를 제거하고 다시 4 시간이 경과한 다음 시험부위의 피부 반응을 하기의 기준에 따라 판정하고, 그 결과를 표 5에 나타내었다. 이때, 자극도는 하기 수학식 3에 따라 측정하였다.

판정기준
0	홍반이나 특이한 현상 없음
1	주위보다 약간 붉어짐
2	주위보다 현저히 붉어짐
3	주위보다 심하게 붉어지고 부풀어 오름

[수학식 3]

자극도 = {(0 × 명) + (1 × 명) + (2 × 명) + (3 × 명)} / 피시험자 수

시료	판정결과 (명)				자극도
시료	3	2	1	0	자극도
증류수	-	3	6	41	0.24
0.05% SLS	1	4	11	33	0.44
5% 트러플 추출물	-	-	3	47	0.06

상기 표 5를 통하여, 본 발명의 화장료 조성물에 사용되는 트러플 추출물은 인체도포시 자극이 없는 안전한 원료임을 확인할 수 있었다.

이상의 실험결과로부터, 본 발명의 화장료 조성물에 사용되는 트러플 추출물은 항산화 및 피부 혈류량 개선 효능이 탁월하고, 독성 및 피부에 대한 안전성도 우수한 물질임을 알 수 있었으며, 화장료 조성물로서 화장수, 에센스, 로션, 크림, 팩, 젤, 연고, 패취, 또는 분무제 등의 제형으로 이용될 수 있다.

본 발명에 따른 트러플 추출물을 함유하는 화장료 조성물은 피부에 자극이 없이 안전한 물질로 피부 노화의 원인 물질인 활성유해산소 제거를 통해 피부노화를 방지하는 항산화 효과와 피부 도포시 모세혈관의 확장을 통한 혈류량 개선 효능 을 가지는 효과가 있다.

Claims

트러플 추출물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
제1항에 있어서,

상기 트러플 추출물은 화장료 조성물에 0.0001 내지 30 중량%로 포함되는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
제1항에 있어서,

상기 화장료 조성물은 유연화장수, 영양화장수, 영양크림, 맛사지크림, 에센스, 팩, 젤, 로션, 연고, 패취, 또는 분무제의 제형인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
제1항에 있어서,

상기 화장료 조성물은 항산화 또는 혈류량 개선 촉진용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.