CN113384510B

CN113384510B - 一种具有抗光老化、舒缓清凉功效的发酵组合物及其制备方法和应用

Info

Publication number: CN113384510B
Application number: CN202110712831.1A
Authority: CN
Inventors: 周春亚; 周秋娜; 金荣熙; 金炫延; 申彦晟; 金延埈
Original assignee: Cosmax China Cosmetics Co Ltd
Current assignee: Cosmax China Cosmetics Co Ltd
Priority date: 2021-06-25
Filing date: 2021-06-25
Publication date: 2023-01-17
Anticipated expiration: 2041-06-25
Also published as: KR20230000893A; CN113384510A; KR102654331B1

Abstract

本发明公开了一种具有抗光老化、舒缓清凉功效的发酵组合物及其制备方法和应用。所述发酵组合物由以下质量比的组分组成：杜仲：桃花：舒缓组合物＝(20‑50):(0.5‑5):(50‑100)，舒缓组合物为桃树脂：仙人掌：石斛＝3:1:1或者3.5:2:2。本发明提供的发酵组合物能够抵御光老化损伤，尤其是光所携带的热量以及光能转化为热能两方面造成的光老化损伤，同时该组合物能够清除自由基、抑制炎症因子释放、从而减少阳光辐射对皮肤带来的间接损伤。本发明采用发酵的方式能够避免传统提取工艺对活性成分的损失，并且通过组合物的协同作用，可以全方位保护皮肤，提高抗光老化效果，改善皮肤干燥、粗糙、暗沉、老化症状。

Description

一种具有抗光老化、舒缓清凉功效的发酵组合物及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于化妆品领域，具体涉及一种具有抗光老化、舒缓清凉功效的发酵组合物及其制备方法和应用。

背景技术

防晒剂是指利用光的吸收、反射或散射作用，以保护皮肤免受特定紫外线所带来的伤害或保护产品本身而在化妆品中加入的物质。随着消费者对防晒的认知与重视，防晒产品已经不仅限于室外或者夏天等特定场景使用，也不仅限于紫外线防护一个方面，人们更重视全方位的光防护。

然而，高SPF值的产品仍然不能够提供100％的保护，如现代人所面临的蓝光损伤，以及穿透力很强的红外线辐射伤害，防晒产品中的防晒剂无法起到很好的防护作用。同时，防晒剂虽然能够吸收、反射、折射紫外线，但是却对随着光照而带来的热量没有办法，另外，如有机防晒剂，有些防晒剂主要吸收UVB，有些主要吸收UVA，而有些属于广谱防晒剂，既能吸收UVB，又能吸收UVA。这类防晒剂也能将吸收的紫外线的光能转换为热能。

光老化(photoaging)是由于过多的日光照射引起皮肤特征性改变的复杂过程，主要表现为皮肤干燥、松弛、皱纹、色素增加或脱失以及毛细血管扩张等。光老化损伤主要包括DNA损伤，线粒体损伤，细胞内生物大分子(蛋白质、磷脂等)的过氧化和细胞外基质(胶原蛋白、弹性纤维)的降解，炎症级联反应和免疫抑制等。除了紫外线能够引起光老化，越来越多的研究表明VL(可见光)和IR(红外光)也可引起光老化，如大量的ROS可引起氧化应激反应、促进基质金属蛋白酶MMP-1和MMP－9表达、导致炎症细胞浸润和基质胶原蛋白降解从而引起皮肤老化，VL照射引起的色素沉着，造成皮肤暗沉老化。同时，光照所引起的皮肤温度上升以及防晒剂能量转化过程中产生的自由基及热能也进一步促进了皮肤光老化。

晚期糖基化终末产物(Advanced glycation end products，AGEs)是蛋白质、脂类、核酸等大分子物质的游离氨基与还原糖通过非酶糖化反应生成不易降解的大分子棕色产物。研究发现，AGEs在光老化皮肤中大量堆积，并在光老化多个环节中起重要作用。然而，AGEs可被巨噬细胞、成纤维细胞等胞吞后被溶酶体或泛素蛋白酶体降解清除。

杜仲是我国独有的名贵医用树种，包含多种有效活性成分，主要包括黄酮类、绿原酸、环烯醚萜类、多糖类、多酚类、苯丙素类、木脂素类等化合物。能够抗氧化、清除自由基、抗衰老、促进机体功能、抗癌等。研究表明杜仲有防晒，防御光照对皮肤造成热损伤的功效。首先：杜仲对红外线有防御效果，减少红外线对皮肤带来的热量。其次：杜仲对如TRPV4等温度敏感通道有调节作用，通过刺激温度敏感通道起到清凉皮肤的效果。瞬时受体电位通道(TRP)是一种非电压依赖性阳离子通道，广泛在哺乳动物的多种组织中表达，如在皮肤、口腔等也有表达，并参与机体多种重要的生理功能。TRPV1、TRPV4、TRPM8等对温度敏感，有研究发现一些中药成分对TRPM8的功能有调节作用，如大黄和黄连能降低酵母致热大鼠的体温，其作用可能与对TRPV1和TRPM8的有效调节有关。并且：杜仲中的有效成分如桃叶珊瑚苷等，能够舒张血管，增加热量散失而达到降温效果。

桃花是蔷薇科落叶乔木桃树的花,其美容养颜和保健功效在我国传统医疗实践中得到了广泛的应用。在最早的药学专著《神农本草经》中就提到桃花具有“令人好颜色”之功效；《图经本草》称其“可悦泽人面,经润容颜色”；而药王孙思邈的美容方也颇为推崇桃花。现代医学与营养学研究表明，桃花富含多酚、多糖、类胡萝卜素和多种维生素、氨基酸及微量元素化学成分,具有较好的药用与营养价值。

发明内容

为了解决现有技术中防晒产品只关注于紫外线的防护，以及紫外线带来的光老化现象，而没有系统的关注到光照对皮肤的间接损伤，如光照直接带来的热量及防晒剂能量转化过程中产生的热量，直接与间接两个途径对皮肤造成的热损伤，以及VL及IR对皮肤造成氧化应激损伤等多方面促进皮肤光老化的现象。该发酵组合物能够清凉肌肤，抵御皮肤热老化，防护VL及IR等造成的皮肤光老化。同时超声提取能够提高提取效率，并且使乳酸杆菌破裂，释放对皮肤有益的成分。去除细胞壁等诱发皮肤拮抗作用的物质，增加与皮肤亲和力。由于随着防晒产品的使用场景更广泛，使用时间变长，该发酵组合物同时兼具舒缓敏感，缓解刺激的功效，减少晒后皮肤的不适感。该发酵组合物不仅能够从源头抗皮肤光老化，还能舒缓晒后皮肤，减少AGEs积聚、提亮肤色、减少日光性弹力组织变性。采用新鲜植物、低温干燥及发酵的方式能够更多的保留对皮肤有益的活性成分，提高原料的利用率。

本申请通过以下技术方案得以实现：

本发明一方面提供了一种具有抗光老化、舒缓清凉功效的发酵组合物，由以下制备方法得到：将以下质量比为(20-50):(0.5-5):(50-100)的杜仲、桃花、舒缓组合物粉碎发酵提取得到所述的发酵组合物；

所述的舒缓组合物为桃树脂、仙人掌、石斛的组合；所述桃树脂、仙人掌、石斛酶的质量比为3:1:1或者3.5:2:2；所述舒缓组合物需进行。

作为优选，所述杜仲：桃花：舒缓组合物的质量比为(30-40):(1-3):(60-90)。

进一步优选，所述杜仲：桃花：舒缓组合物的质量比为35:2:75或30:2:80。

作为优选，所述制备方法具体为：

1)将杜仲、桃花、舒缓组合物分拣清洗并低温干燥后，按照比例称取；

2)将桃树脂、仙人掌、石斛粉碎后，加入去离子水浸泡并搅拌2h；

3)将杜仲、桃花粉碎后，加入2)中，进行湿法超微粉碎，得匀浆；

4)将3)所得匀浆接种菌液，匀速搅拌，进行发酵；

5)发酵完成进行超声提取，过滤，灭菌滤液进行离心，得上清液；

6)将5)得到的上清液依次用不同孔径微滤膜进行过滤，收集滤液，即得所述发酵组合物；

进一步优选：

所述步骤1)中的低温干燥的条件为低于50℃的干燥；所述的干燥方法包括但不限于烘箱干燥、冷冻干燥、真空干燥中的一种或两种联用；

所述步骤2)中去离子水的用量为杜仲、桃花舒缓组合物总质量的5～20倍；

所述步骤3)中，所述湿法超微粉碎采用胶体磨或均质机进行。

进一步优选：

所述步骤4)中，接种菌液包括但不限于乳酸杆菌、乳酸菌、酵母菌的一种或两种联用；

所述步骤4)中，菌液接种量为匀浆质量的5％-10％，含菌量为≥1.0×10¹¹cfu/g，发酵的温度为28-35℃，发酵时间为12-48h。

进一步优选：

所述步骤6)中微滤膜孔径范围为0.1-10μm，优选为10μm、0.45μm和0.2μm。

在某些更具体的实施方式中，发酵组合物采用以下工艺制备：

(1)将杜仲、桃花、舒缓组合物分拣清洗并低温干燥后，按照比例称取；

(2)将桃树脂、仙人掌、石斛粉碎后，加入20倍步骤1)所称取杜仲、桃花、舒缓组合物总质量的去离子水浸泡并搅拌2h；

(3)将杜仲、桃花粉碎后，加入2)中，进行湿法超微粉碎，得匀浆；

(4)向3)所得匀浆中接种10％匀浆质量的菌液，在35℃下搅拌发酵48h；其中菌液为乳酸杆菌，菌液中的含菌量为≥1.0×10¹¹cfu/g。

(5)发酵完成超声提取20min，过滤，灭菌，将滤液进行离心，得上清液；

(6)将5)得到的上清液依次用10μm、0.45μm、0.2μm孔径微滤膜进行过滤，收集滤液，即得该发酵组合物。

所述步骤1)中所述的干燥方法为冷冻干燥；

所述步骤3)中，所述湿法超微粉碎采用均质机进行。

所述桃树脂、仙人掌、石斛的质量比为3.5:2:2。

本发明另一方面还提供了一种发酵组合物的制备方法，包括以下步骤：

4)将3)所得匀浆接种菌液，匀速搅拌，进行发酵；

所述步骤2)中去离子水的用量为杜仲、桃花、舒缓组合物总质量的5～20倍；

所述步骤3)中，所述湿法超微粉碎采用胶体磨或均质机进行；

所述步骤4)中，接种菌液包括但不限于乳酸杆菌、乳酸菌、酵母菌的一种或两种联用；菌液接种量为匀浆质量的5％-10％，含菌量为≥1.0×10¹¹cfu/g，发酵的温度为28-35℃，发酵时间为12-48h；

作为优选，所述的杜仲、桃花与由桃树脂、仙人掌、石斛组成的舒缓组合物的质量比为(30-40):(1-3):(60-90)；

所述桃树脂、仙人掌、石斛的质量比为3:1:1或者3.5:2:2。

本发明另一方面还提供了一种化妆品，含有上述的发酵组合物；所述化妆品包括但不限于水剂、乳剂、喷雾、膏霜、面膜、粉底液。

与现有技术相比，本申请可以获得包括以下技术效果：

在总浓度相同时，本发明所提供的发酵组合物的DPPH清除率高于单一组分的清除率，说明3种原料通过组合方式可获得更好地皮肤抗氧化效果。此外本发明以水为溶剂，避免引入有机试剂，原料采用新鲜植物、低温干燥方式、发酵工艺能更多的保留活性成分。并且，发酵后去除细胞壁、细胞膜等成分，能够增加与皮肤的亲和力，减少化妆品带来的刺激源。相比传统方法，提取温度低、效率高。

此外本申请的舒缓组合物的桃树脂、仙人掌、石斛都富含多糖类成分，有很强的皮肤保湿功效，并且能够防护皮肤屏障损伤。研究发现舒缓组合物具有很强的抗敏抗刺激功效，能够舒缓化妆品或其他因素对皮肤带来的敏感或者刺激症状。

附图说明

图1为实验例3中使用发酵组合物后MMP-1表达抑制率(％)；

图2为实验例4中使用发酵组合物后AGEs生成抑制率(％)；

图3为实验例6中使用发酵组合物前后皮肤回弹比R2值；

图4为实施例6中使用发酵组合物后经表皮水分流失Tewl值减少率(％)图；

图5为实验例6中使用发酵组合物前后皮肤纹理图。

具体实施方式

以下将通过实施例来详细说明本申请的实施方式，借此对本申请如何应用技术手段来解决技术问题并达成技术功效的实现过程能充分理解并据以实施。

本申请中所用原料、设备，若无特别说明，均为本领域的常用原料、设备，均来自市售产品。本申请中所用方法，若无特别说明，均为本领域的常规方法。

本申请还存在其它多种可实施的技术方案，在此不做一一列举，本申请权利要求中要求保护的技术方案都是可以实施的。

实施例

在本发明下述的实施例及对比例中，具有抗光老化、舒缓清凉功效的发酵组合物采用以下工艺制备：

所述步骤1)中所述的干燥方法为冷冻干燥；

所述步骤3)中，所述湿法超微粉碎采用均质机进行。

所述桃树脂、仙人掌、石斛的质量比为3.5:2:2。

表1所示为实施例1-12及对比例1-3中各发酵组合物的组成比例(杜仲：桃花：舒缓组合物的组成比例以质量计)。根据表1并采用上述方法制备各实施例及对比例的发酵组合物，并对所得发酵组合物进行功效测试。表1

未发酵组

在本发明下述的实验例中的未发酵组，采用以下工艺制备：

其中，各组合物的比例与各实施例及对比例保持一致，区别仅在于使用去离子水代替菌液。

(1)将杜仲、桃花、舒缓组合物分拣清洗并低温干燥后，按照比例称取

(4)向3)所得匀浆中加入10％匀浆质量的去离子水，搅拌48h；

(5)超声提取20min，过滤，灭菌，将滤液进行离心，得上清液；

(6)将5)得到的上清液依次用10μm、0.45μm、0.2μm孔径微滤膜进行过滤，收集滤液，即得该未发酵组合物；

所述步骤1)中的低温干燥方法为冷冻干燥；

所述步骤3)中，所述湿法超微粉碎采用均质机进行。

所述桃树脂、仙人掌、石斛的质量比为3.5:2:2。

空白组

在本发明下述的实验例中的空白组，采用以下工艺制备：

(1)量取一定量的去离子水；

(2)向去离子水中加入去离子水质量10％的菌液，在35℃下搅拌发酵48h；其中菌液为乳酸杆菌，菌液中的含菌量为≥1.0×10¹¹cfu/g。

(3)发酵完成超声提取20min，过滤，灭菌，将滤液进行离心，得上清液；

(4)将3)得到的上清液依次用10μm、0.45μm、0.2μm孔径微滤膜进行过滤，收集滤液，即得该空白组。

实验例1

细胞毒性测评试验：

MTT assay是通过对活细胞数进行测定，在检测细胞毒性或细胞增殖时广泛使用的实验方法，其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使水溶性的黄色盐MTT(3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐)还原为水不溶性的蓝色的甲臜，并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。生成的结晶甲臜一般加入DMSO(二甲亚砜)，溶解后测定吸光度。具体的实验方法是在96多孔板中按照1X10⁴个/孔的密度接种含有10％牛血清的DMEM培养基和角质形成细胞(HaCaT)各100μl，培养24小时后换成无血清培养基。在无血清培养基中分别加入不同浓度的组合物进行处理后培养24小时。之后去除培养基，用20μl的MTT溶液进行处理，在37℃下使其反应2小时。在去除MTT溶液的细胞中加入200μl异丙醇，轻轻地震荡30min，完全溶解结晶甲臜，在570nm处测定吸光度，根据如下公式计算细胞存活率。

空白组不加入发酵组合物进行试验。表2所示即为实施例1-12和对比例1-3所得的发酵组合物的细胞毒性结果。

表2

实验例2

抗氧化测评试验：

DPPH又称1,1-二苯基-2-三硝基苯肼，是一种很稳定的氮中心的自由基，它的无水乙醇溶液呈紫色，加入自由基清除剂时，自由基数量减少，吸光度变小，溶液颜色变浅，可评价清除自由基的能力。

取所得组合物，用移液器取40μl，再加入160μl的DPPH乙醇溶液(200μg/ml)。混匀后于室温避光条件下反应30min，再于517nm处测吸光度A，每组设置3组平行实验计算平均值，计算方法如下：

清除率％＝[1-(A₁-A₂)/A₀×100

式中：A₀为未加入各发酵组合物的DPPH溶液的吸光度；

A₁为加入各发酵组合物后的DPPH溶液反应后的吸光度；

A₂为DPPH溶液与各发酵组合物混合后反应前的吸光度。

表3所示即为实施例1-12与对比例1-3中各发酵组合物的抗氧化测评试验结果。

表3

由上表可知：

1)实施例1-12所得发酵组合物的DPPH清除率均高于对比例1-3，说明3种原料通过组合方式可获得更好的DPPH清除效果；

2)DPPH清除率和3个原料均具有一定量效关系，质量份数增加到一定范围后，上升趋势减缓。对比实施例1、2、3、4发现，桃花质量份数2和5的DPPH清除率差别不大；实施例2、5、6对比发现杜仲质量份数35、50的DPPH清除率差别不大；实施例5、7、8以及9、11、12对比发现，舒缓组合物质量份数75以及80的清除率最佳。因此，结合DPPH清除能力和经济效益考虑，优选实施例7(35:2:75)和实施例11(30:2:80).

综上所述，3种原料不同比例组合对应的抗氧化能力不同，优选为杜仲：桃花：舒缓组合物的质量比为(30-40):(1-3):(60-90)，更优选地，杜仲：桃花：舒缓组合物的质量比为35:2:75和30:2:80。

实验例3

基质金属蛋白酶1基因表达试验：

基质金属蛋白酶1Matrix metalloproteinase-1(MMP-1)是负责胶原蛋白降解的主要酶，它会在被日光或红外线照射后表达上调，而胶原蛋白的降解是光老化的重要指标，因此MMP-1的表达作为评价抗光老化效果的指标。

采用ELISA法检测人MMP-1，阴性组(未加样、经IR辐照处理)，空白组(无组合物的发酵物、经IR辐照处理)，实施例7-1、7-2(加样0.1％、0.3％、经过IR辐射处理)，实施例7-1未发酵、7-2未发酵(加未发酵组合物0.1％、0.3％、经过IR辐射处理)，实施例11-1、11-2(加样0.1％、0.3％、经过IR辐射处理)，实施例11-1未发酵、11-2未发酵(加未发酵组合物0.1％、0.3％、经过IR辐射处理)，对比例1-1、1-2(加样0.1％、0.3％、经过IR辐射处理)，对比例2-1、2-2(加样0.1％、0.3％、经过IR辐射处理)，对比例3-1、3-2(加样0.1％、0.3％、经过IR辐射处理)。将待测样品(10X)以每孔100μl加入12孔细胞板，于37℃ 5％CO₂恒温培养箱培养72h。每个细胞板均设置阴性对照组(细胞+培养基)，每个浓度组3个复孔。收集细胞培养上清，通过ELISA检测试剂盒进行胶原降解功效评价。

计算公式：MMP-1抑制率％＝(OD450阴性组-OD450待测样品组)/OD450阴性组×100。

在MMP-1表达上，如图1，空白组对MMP-1表达无显著影响，而实施例7(0.1％、0.3％)、实施例11(0.1％、0.3％)相比于对比例1-3能够显著降低MMP-1的表达。同时，发酵组合物相较于未发酵组合物降低MMP-1的效果更显著。证明本发酵组合物改善皮肤光老化作用优于单一成分且发酵后改善光老化效果更优。

实验例4

体外抗糖化活性试验：

建立牛血清蛋白-葡萄糖(BSA-Glucose)模型模拟美拉德反应体系来评价发酵组合物的抗糖基化能力。反应混合物包括牛血清蛋白(BSA)、葡萄糖、磷酸缓冲液(PBS)以及各发酵及未发酵组合物样品(A_sample)，无菌条件下37℃培养28d，其中不含氨基胍(AG)和发酵组合物样品为阴性对照(A_NC)，添加AG代替多糖作为阳性对照(A_sample)。通过荧光分光光法的检测方式，对晚期糖基化终末产物的荧光强度进行测定，对激发波长设置为370nm，发射波长设置为440nm。不同样品对荧光性AGEs生成的抑制率R由以下公式计算：

R(％)＝(A_NC－A_sample)/A_NC×100％

其中A_NC为阴性对照组的吸光度；Asample为发酵组合物或AG组的吸光度。

如图2，实施例7、实施例11的AGEs生成抑制率均高于对比例1、对比例2、对比例3，证明发酵组合物经过优化组合配比，能够达到协同增效的效果，提升抗糖化效果。

实验例5

安全性斑贴测试：

滴加20μl的待测液于斑试器中，对照孔为空白对照(纯水)；将加有受试物的斑试器贴到受试人员前臂屈侧，用手掌轻压使之均匀地贴敷于皮肤上，持续24小时；分别于去除受试物斑试器后30min、24小时、48小时后按表4观察皮肤刺激性和致敏性，并记录观察结果。皮肤封闭型斑贴试验皮肤反应分级标准如表4所示。

表4

实验结果：对实施例7、11进行人体皮肤斑贴测试，结果见表5。人体皮肤斑贴试验结果显示，30人中无皮肤不良反应。

表5

实验例6

1)清凉功效测试：

选取25至45岁之间的女性志愿者30名，10名志愿者涂抹实施例7，10名志愿者涂抹实施例11，另外10名涂抹空白组(安慰剂)，全脸涂抹，单位用量2mg/cm²，每天早晚使用，连续使用2周，在第0天和两周之后采用皮肤表面温度-热成像相机(FLIR T450sc,USA)评估发酵组合物的清凉效果。

实验结果见表6，将空白组，含有实施例7、实施例11的乳液对比后，发现本发明的发酵组合物具有非常优异的清凉效果。

表6

组别	Before(℃)	2weeks(℃)	2weeks,After IR(℃)
				空白组	34.1±0.48	33.9±0.54	36.2±0.20
实施例7	33.4±0.36	32.2±0.28	35.2±0.22
				实施例11	33.6±0.38	32.1±0.24	35.6±0.32

2)皮肤弹性测试：

继续使用14天，使用仪器测试使用前、2周、4周后回弹比R2(A.U.)，R2:无负压时皮肤的回弹量与有负压时的最大拉伸量之比，比值越接近1，说明皮肤弹性越好。结果分别如下所示。

实验结果：结果见图3，实施例7、11对比空白组皮肤弹性显著提升，相比于使用前皮肤弹性提高10.4％、10.5％。

3)皮肤屏障修复测试：

图4为使用不同发酵组合物后经表皮水分流失Tewl值减少率(％)图。由图4可知，实施例7和实施例11能够改善皮肤的经皮水分流失量，修复受损的皮肤屏障，提高肌肤抗敏抗刺激的能力。

4)皮肤纹理测试：

图5为使用不同发酵组合物前后的皮肤纹理图。由图5可知，实施例7和实施例11对皮肤纹理有明显的改善作用。

本申请说明书中未作详细描述的内容属于本领域技术人员的公知常识。

如在通篇说明书及权利要求当中所提及的“包含”为一开放式用语，故应解释成“包含但不限定于”。“大致”是指在可接收的误差范围内，本领域技术人员能够在一定误差范围内解决所述技术问题，基本达到所述技术效果。

还需要说明的是，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的商品或者系统不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种商品或者系统所固有的要素。在没有更多限制的情况下，由语句“包括一个……”限定的要素，并不排除在包括所述要素的商品或者系统中还存在另外的相同要素。

上述说明示出并描述了本申请的若干优选实施例，但如前所述，应当理解本申请并非局限于本文所披露的形式，不应看作是对其他实施例的排除，而可用于各种其他组合、修改和环境，并能够在本文所述发明构想范围内，通过上述教导或相关领域的技术或知识进行改动。而本领域人员所进行的改动和变化不脱离本申请的精神和范围，则都应在本申请所附权利要求的保护范围内。

Claims

1.一种具有抗光老化、舒缓清凉功效的发酵组合物，其特征在于，由以下制备方法得到：将以下质量比为35:2:75或30:2:80的杜仲、桃花、舒缓组合物粉碎发酵提取得到所述的发酵组合物；

所述的舒缓组合物为桃树脂、仙人掌、石斛的组合；所述桃树脂、仙人掌、石斛的质量比为3:1:1或者3.5:2:2；

所述的发酵组合物制备方法具体为：

1）将杜仲、桃花、舒缓组合物分拣清洗并低温干燥后，按照比例称取；

2）将桃树脂、仙人掌、石斛粉碎后，加入去离子水浸泡并搅拌2h；

3）将杜仲、桃花粉碎后，加入2）中，进行湿法超微粉碎，得匀浆；

4）将3）所得匀浆接种菌液，匀速搅拌，进行发酵；

5）发酵完成进行超声提取，过滤，灭菌，滤液进行离心，得上清液；

6）将5）得到的上清液依次用不同孔径微滤膜进行过滤，收集滤液，即得所述发酵组合物。

2.如权利要求1所述的发酵组合物，其特征在于，

所述步骤1）中的低温干燥的条件为低于50℃的干燥；所述的干燥方法选自烘箱干燥、冷冻干燥、真空干燥中的一种或两种联用；

所述步骤2）中去离子水的用量为杜仲、桃花、舒缓组合物总质量的5~20倍；

所述步骤3）中，所述湿法超微粉碎采用胶体磨或均质机进行。

3.如权利要求1所述的发酵组合物，其特征在于：

所述步骤4）中，接种菌液选自乳酸杆菌、乳酸菌、酵母菌的一种或两种联用；

所述步骤4）中，菌液接种量为匀浆质量的5%-10%，含菌量为≥1.0×10¹¹cfu/g，发酵的温度为28-35℃，发酵时间为12-48h。

4.如权利要求1所述的发酵组合物，其特征在于：

所述步骤6）中微滤膜孔径范围为0.1-10μm。

5.如权利要求4所述的发酵组合物，其特征在于，所述步骤6）中微滤膜孔径为10μm、0.45μm和0.2μm。

6.一种如权利要求1所述的发酵组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

4）将3）所得匀浆接种菌液，匀速搅拌，进行发酵；

5）发酵完成进行超声提取，过滤，灭菌滤液进行离心，得上清液；

6）将5）得到的上清液依次用不同孔径微滤膜进行过滤，收集滤液，即得所述发酵组合物；

所述步骤2）去离子水的用量为杜仲、桃花、舒缓组合物总质量的5~20倍；

所述步骤3）中，所述湿法超微粉碎采用胶体磨或均质机进行；

所述步骤4）中，接种菌液选自乳酸杆菌、乳酸菌、酵母菌的一种或两种联用；菌液接种量为匀浆质量的5%-10%，含菌量为≥1.0×10¹¹cfu/g，发酵的温度为28-35℃，发酵时间为12-48h；

所述步骤6）中微滤膜孔径范围为0.1-10μm。

7.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述步骤6）中微滤膜孔径为10μm、0.45μm和0.2μm。

8.一种化妆品，其特征在于，含有如权利要求1-5任一所述的发酵组合物；所述化妆品包括水剂、乳剂、喷雾、膏霜、面膜、粉底液。