CN113181090A - 一种含抗初老组合物的精华液及其制备方法 - Google Patents
一种含抗初老组合物的精华液及其制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提供一种含抗初老组合物的精华液及其制备方法。所述含抗初老组合物的精华液的制备原料包括抗初老组合物、皮肤调理剂、保湿剂和水；所述抗初老组合物包括姜花根提取物、黄岑根提取物和可可籽提取物；所述皮肤调理剂包括密蒙花提取物、葡糖基芦丁和卤虫提取物。本发明所述抗初老组合物通过调节细胞氧化还原平衡，调节细胞自噬，促进细胞排毒来提高皮肤的耐受力，可与精华液的皮肤调理剂中各成分相互配合，协同增效，抵御过量自由基、提高肌肤自身抗氧化能力，抑制黑色素沉着，并能够有效解决蓝光引起的皮肤光老化问题，促进皮肤胶原蛋白，具有减缓皮肤老化、改善色斑、美白提亮的功效。
Description
技术领域
本发明属于化妆品生产与应用技术领域，具体涉及一种含抗初老组合物的 精华液及其制备方法。
背景技术
细胞衰老是一个细胞进入永久性细胞周期阻滞的过程。细胞衰老常伴随着 许多病理学特证，炎症便是其中之一。其中，炎症衰老的概念在2000年首次被 提出，炎症衰老成为了衰老研究中一个新的方向。正常的炎症反应是用来保护 人类不受致命伤害的一种非特异性免疫反应，而过度的炎症反应除了会导致肌 肤衰老外，还参与了许多衰老相关疾病的病理过程。正常机体内的免疫系统可 识别衰老细胞并将其清除，组织内的母细胞分化形成年轻的细胞代替衰老细胞， 但随着机体老化，损伤，细胞衰老加速，免疫系统对衰老细胞的清除速度减慢， 从而造成体内的衰老细胞增多。
近年来，红外(IR)辐射，尤其是IR-A辐射，引起了皮肤学界越来越多的关 注，IR-A辐射占太阳总辐射能量的30％，能穿透到皮肤的进入表皮，真皮和皮 下组织，引发线粒体的功能性失调。当人类皮肤单次或多次暴露于IR辐射时， 可导致Ⅰ型前胶原蛋白的差异性表达，和TGF-β1，-β2和β3的过表达等，从而诱 导炎症反应。太阳光产生的红外辐射能够将热量传递到皮肤，从而增加皮肤的 温度，皮肤的温度升高会导致热休克自由基的产生，MMPs表达量增加，最终 对胶原蛋白和弹性蛋白产生危害，高温会导致真皮中弹性蛋白原表达增加，原 纤蛋白-1表达减少，进而导致弹性组织变性物质积累。在新颖的皮肤抗衰老化妆品的研发战略中，增强皮肤抵御红外辐射损伤是日益重要的因素。
CN109602665A公开了一种抗氧化精华液，该精华液包含石榴果提取物、 VC乙基醚、四氢甲基嘧啶羧酸、甲基硅烷醇羟脯氨酸酯天冬氨酸酯、硅烷二醇 水杨酸酯、甲基硅烷醇甘露糖醛酸酯、头状胡枝子叶/茎提取物、密蒙花提取物 和水解红藻提取物，虽然在这些组分的协同作用下，具有优良的抗氧化功效， 能够缓解皮肤老化，但对于缺乏从抗炎达到抗衰老的功效。
CN111631969A公开了一种具有抗蓝光功效的修护液及其化妆品，其有效 成分由以下重量份物质组成：金盏花提取物2-5份、密罗木提取物5-20份、牡 丹提取物4-8份、秦椒果提取物4-8份、蜗牛粘液提取物10-50份、甘草根提取 物10-50份、黄岑根提取物10-50份、樱花提取物1-5份、胶原肽0.2-0.6份、 乙基己基甘油6-10份、烟酰胺0.1-0.5份、抗坏血酸0.3-0.8份、甘油20-40份、 1,2-己二醇2-6份、透明质酸钠0.8-1.5份、水800-1200份。该精华液只是对皮 肤炎症和蓝光造成的损伤进行修复，而缺少对炎症未发生前的有效预防与抑制。
因此，开发一种具有高效抗炎、抗氧化、赋能抗压功效的护肤品是本领域 研究的重点。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种含抗初老组合物的精华 液及其制备方法。所述含抗初老组合物的精华液具有长效抗炎、抗氧化、赋能 抗压的功效。
为达此目的，本发明采用以下技术方案：
第一方面，本发明提供一种含抗初老组合物的精华液，所述含抗初老组合 物的精华液的制备原料包括抗初老组合物、皮肤调理剂、保湿剂和水；
所述抗初老组合物包括姜花根提取物、黄岑根提取物和可可籽提取物；
所述皮肤调理剂包括密蒙花提取物、葡糖基芦丁和卤虫提取物。
在本发明中，所述抗初老组合物通过调节细胞氧化还原平衡，调节细胞自 噬，促进细胞排毒来提高皮肤的耐受力，可与精华液的皮肤调理剂中各成分相 互配合，协同增效，从而提高精华液的抗炎、抗氧化、赋能抗压的功效。
其中，姜花根提取物，可以调节成纤维细胞的自噬作用，以此实现细胞本 身的代谢需要、某些细胞器的更新以及维持细胞稳态；即使在蓝光压力下也可 以保护成纤维细胞的溶酶体网络，帮助皮肤提高自身天然防护力从而抵御蓝光 /UV损伤，促进细胞排毒，促进皮肤新生等进程。黄岑根提取物能抑制弹性蛋 白酶，干扰分泌，可以消除自由基，从而增加皮肤新陈代谢、增加皮肤弹性和 抗皱性，可以抗初老；促进脑酰胺，改善皮脂使皮肤柔润；能抑制皮炎、增强 皮肤的抵抗力，具有抗炎性；能中和释放的组胺，具有防止过敏的能力。可可 籽提取物富含分子肽、糖类和多酚，蓝光压力下减少活性氧，蓝光压力下保护 视蛋白光感受器，提高胶原蛋白I，原纤蛋白-1和syndecan-4的含量，显著改 善弹性蛋白纤维网状结构，从而改善皮肤弹性，明显改善皮肤皱纹。
其中，密蒙花提取物可以减少由光照诱发的炎症，通过抑制脂氧合酶5-LOX 和环氧合酶COX-2的活性，从而抑制炎症介质白三烯和前列腺素的表达，光照 引起的炎症会导致红斑和色素沉着过度，密蒙花可以显著降低UVB诱导的黑色 素生成，从而防止色素过度沉着导致的黑斑；通过抑制反式尿刊酸异构化和脂 质过氧化，减少自由基并保护皮肤屏障完整性，通过抑制MMP-1释放和刺激弹 性蛋白合成来防止细胞外基质的降解，从而保护肌肤胶原蛋白正常合成，减弱 可见的光老化迹象，维持肌肤年轻，高质量并具有光泽。葡糖基芦丁可以保护 皮肤细胞，预防过早老化，保护胶原蛋白结构。卤虫提取物是富含鸟嘌呤的核 苷酸浓缩物，这种核苷酸能缓解环境压力，对帮助浮游生物在极端恶劣的环境 中存活至关重要，GP4G核苷酸是ATP的前体，是潜在的能量来源。红外辐射 会造成线粒体损伤，卤虫提取物可以提高红外辐射下线粒体的活性，保护线粒 体不受热损伤，增强对热休克，冷休克的抵抗力，保护功能性蛋白，维持细胞 稳态，减少老化损伤。
优选地，在所述抗初老组合物中，所述姜花根提取物、黄岑根提取物和可 可籽提取物的质量比为(3-8):(5-15):(2-7)；
其中“3-8”可以为3、4、5、6、7、8等；
其中“5-15”可以为5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15等；
其中“2-7”可以为2、3、4、5、6、7等。
优选地，在所述皮肤调理剂中，所述密蒙花提取物、葡糖基芦丁和卤虫提 取物的质量比为(1-20):(1-15):(1-5)；
其中“1-20”可以为1、2、4、6、8、10、12、14、16、18、20等；
其中“1-15”可以为1、2、4、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15等；
其中“1-5”可以为1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5等。
优选地，以所述含抗初老组合物的精华液的制备原料的质量为100％计，所 述含抗初老组合物的精华液的制备原料按质量百分含量计包括抗初老组合物 0.01-5％、皮肤调理剂0.01-10％、保湿剂1-20％，余量为水。
其中，抗初老组合物的含量为0.01-5％，例如可以是0.01％、0.02％、0.05％、0.1％、0.15％、0.2％、0.4％、0.5％、0.6％、0.8％、1％、2％、3％、4％、5％等。
其中，皮肤调理剂的含量为0.01-10％，例如可以是0.01％、0.02％、0.05％、0.1％、0.15％、0.2％、0.4％、0.5％、0.6％、0.8％、1％、2％、3％、4％、5％、 6％、7％、8％、9％、10％等。
其中，保湿剂的含量为1-20％，例如可以是1％、2％、3％、4％、5％、6％、 7％、8％、9％、10％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％、20％等。
优选地，所述皮肤调理剂还包括苦参根提取物、胀果甘草根提取物、烟酰 胺、酵母菌/川谷籽发酵产物滤液、二裂酵母发酵产物溶胞物、动物脐带提取物、 动物胎盘蛋白或动物胎盘酶中的任意一种或至少两种的组合。
优选地，以所述含抗初老组合物的精华液的制备原料的质量为100％计，所 述皮肤调理剂包括密蒙花提取物0.5-2％、葡糖基芦丁0.1-0.5％、卤虫提取物 0.5-1.5％、苦参根提取物0.01-0.1％、胀果甘草根提取物0.01-0.1％、烟酰胺 0.1-1％、酵母菌/川谷籽发酵产物滤液0.01-0.3％、二裂酵母发酵产物溶胞物 0.01-0.1％、动物脐带提取物0.01-0.1％、动物胎盘蛋白0.01-0.1％和动物胎盘酶 0.01-0.1％。
其中，密蒙花提取物的含量为0.5-2％，例如可以是0.5％、0.6％、0.8％、1.0％、1.2％、1.4％、1.6％、1.8％、2％等。
其中，葡糖基芦丁的含量为0.1-0.5％，例如可以是0.1％、0.15％、0.2％、0.25％、0.3％、0.35％、0.4％、0.45％、0.5％等。
其中，卤虫提取物的含量为0.5-1.5％，例如可以是0.5％、0.6％、0.8％、1.0％、1.2％、1.4％、1.5％等。
其中，苦参根提取物的含量为0.01-0.1％，例如可以是0.01％、0.02％、0.04％、0.06％、0.08％、0.1％等。
其中，胀果甘草根提取物的含量为0.01-0.1％，例如可以是0.01％、0.02％、0.04％、0.06％、0.08％、0.1％等。
其中，烟酰胺的含量为0.1-1％，例如可以是0.1％、0.2％、0.4％、0.6％、 0.8％、1％等。
其中，酵母菌/川谷籽发酵产物滤液的含量为0.01-0.1％，例如可以是0.01％、0.02％、0.04％、0.06％、0.08％、0.1％等。
其中，二裂酵母发酵产物溶胞物的含量为0.01-0.3％，例如可以是0.01％、0.02％、0.04％、0.06％、0.08％、0.1％、0.15％、0.2％、0.25％、0.3％等。
其中，动物脐带提取物的含量为0.01-0.1％，例如可以是0.01％、0.02％、0.04％、0.06％、0.08％、0.1％等。
其中，动物胎盘蛋白的含量为0.01-0.1％，例如可以是0.01％、0.02％、0.04％、0.06％、0.08％、0.1％等。
其中，动物胎盘酶0.01-0.1％的含量为0.01-0.1％，例如可以是0.01％、0.02％、0.04％、0.06％、0.08％、0.1％等。
优选地，所述保湿剂包括丁二醇、甘油聚醚-26、海藻糖、透明质酸钠或1,2- 己二醇中的任意一种或至少两种的组合。
优选地，以所述含抗初老组合物的精华液的制备原料的质量为100％计，所 述保湿剂包括丁二醇2-10％、甘油聚醚-262-5％、海藻糖0.1-2％、透明质酸钠 0.1-0.2％和1,2-己二醇0.1-1％。
其中，丁二醇的含量为2-10％，例如可以是2％、3％、4％、5％、6％、7％、 8％、9％、10％等。
其中，甘油聚醚-26的含量为2-5％，例如可以是2％、2.5％、3％、3.5％、 4％、4.5％、5％等。
其中，海藻糖的含量为0.1-2％，例如可以是0.1％、0.2％、0.4％、0.6％、 0.8％、1％、1.2％、1.4％、1.6％、1.8％、2％等。
其中，透明质酸钠的含量为0.1-0.2％，例如可以是0.1％、0.12％、0.14％、0.16％、0.18％、0.2％等。
其中，1,2-己二醇的含量为0.1-1％，例如可以是0.1％、0.2％、0.4％、0.6％、0.8％、1％等。
优选地，所述精华液的制备原料中还包括增稠剂、pH调节剂、螯合剂、抗 氧化剂、增溶剂或芳香剂中的任意一种或至少两种的组合。
优选地，以所述含抗初老组合物的精华液的制备原料的质量为100％计，所 述精华液的制备原料中还包括增稠剂0.1-0.5％、pH调节剂0.1-0.25％、螯合剂 0.01-0.05％、抗氧化剂0.1-1％、增溶剂0.01-0.1％和芳香剂0.01-0.03％。
其中，增稠剂的含量为0.1-0.5％，例如可以是0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、 0.5％等。
其中，pH调节剂的含量为0.1-0.25％，例如可以是0.1％、0.12％、0.14％、0.16％、0.18％、0.2％、0.25％等。
其中，螯合剂的含量为0.01-0.05％，例如可以是0.01％、0.02％、0.03％、0.04％、0.05％等。
其中，抗氧化剂的含量为0.1-1％，例如可以是0.1％、0.2％、0.4％、0.6％、0.8％、1％等。
其中，增溶剂的含量为0.01-0.1％，例如可以是0.01％、0.02％、0.04％、0.06％、0.08％、0.1％等。
其中，芳香剂的含量为0.01-0.03％，例如可以是0.01％、0.015％、0.02％、0.025％、0.03％等。
优选地，所述增稠剂包括聚丙烯酸酯交联聚合物-6和/或卡波姆。
优选地，所述pH调节剂为精氨酸。
优选地，所述螯合剂为EDTA二钠。
优选地，所述抗氧化剂为对羟基苯乙酮。
优选地，所述增溶剂为PEG-40氢化蓖麻油。
优选地，所述芳香剂为香精。
第二方面，本发明提供一种如第一方面所述的含抗初老组合物的精华液的 制备方法，所述精华液的制备方法包括以下步骤：
(1)将保湿剂和水混合，得到水相混合液；
(2)将步骤(1)得到的水相混合液、抗初老组合物和皮肤调理剂混合， 过滤，得到含抗初老组合物的精华液。
优选地，步骤(1)中，所述混合的温度为80-85℃，例如可以是80℃、81℃、 82℃、83℃、84℃、85℃等，所述混合的时间为5-10min，例如可以是5min、 6min、7min、8min、9min、10min。
优选地，步骤(1)中，所述混合还需添加增稠剂。
优选地，步骤(2)所述混合的温度为38-42℃，例如可以是38℃、39℃、 40℃、41℃、42℃等，所述混合的时间为5-15min，例如可以是5min、7min、 9min、11min、13min、15min等。
优选地，步骤(2)中，所述混合还需添加pH调节剂、螯合剂、抗氧化剂、 增溶剂或芳香剂中的任意一种或至少两种的组合。
优选地，步骤(2)所述过滤采用100-200目的滤布进行，例如可以是100 目、120目、140目、160目、180目、200目等。
相对于现有技术，本发明具有以下有益效果：
(1)本发明所述抗初老组合物和皮肤调理剂中各组分协同增效，可有效减 少因外界环境导致的皮肤脆弱敏感的状态，增强肌肤抵抗力，改善皮肤弹性， 减少皱纹，减少肌肤发红，增加皮肤水分，使肌肤保持光泽细腻的健康状态；
(2)本发明所述精华液通过多种植物提取物来调节肌肤的代谢，调节肌肤 油脂分泌，增强肌肤的抵抗力，由表及里营养皮肤，迅速渗入肌肤，能快速水 润唤醒肌肤，促进皮肤修护；
(3)本发明所述精华液通过调节视蛋白，减少蓝光压力，减少由蓝光导致 活性氧产生，从而保护健康的细胞不受炎症因子的攻击，提高红外辐射下线粒 体的活性，保护线粒体不受热损伤，增强对热休克，冷休克的抵抗力，保护功 能性蛋白，维持细胞稳态，减少老化损伤，维持细胞活力；
(4)本发明所述精华液既能够增加肌肤的营养，深层滋润肌肤，防止衰老， 兼具保湿修护，抗炎，抗氧化，赋能抗压，对抗初老等多种功效，短期使用可 以临时提亮，长期使用有细腻肌肤，紧致肌肤的效果。
具体实施方式
下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员 应该明了，所述实施例仅仅是帮助理解本发明，不应视为对本发明的具体限制。
以下制备例中各组分均可由市售购得。
制备例1
本制备例提供一种姜花根提取物，所述姜花根提取物由以下制备方法制备 得到：
(1)将姜花根部在-15℃下冷冻18h后，再在-2℃下进行低温粉碎后过筛， 得到150目的姜花根粉；
(2)将步骤(1)得到的姜花根粉和正丁醇混合，在25℃浸提2h后，将 浸提得到的溶液浓缩，得到浓缩液；再将浓缩液和乙醇混合，在40℃浸提1h 后过滤，得到姜花根粗提取液；
其中，姜花根粉、正丁醇和乙醇的质量比为1:10:8；
(3)将步骤(2)得到的姜花根粗提取液过大孔吸附树脂AB-8，先用去离 子水水洗涤后弃去水液，再用60wt％的乙醇水溶液洗涤，收集洗涤得到的乙醇 水溶液部分，进行浓缩，得到姜花根提取物。
制备例2
本制备例提供一种黄岑根提取物，所述黄岑根提取物由以下制备方法制备 得到：
(a)将黄岑根部粉碎后过筛，得到200目的黄岑根粉；
(b)以质量比为1:10的比例将步骤(a)得到的黄岑根粉和浓度为60wt％ 的乙醇水溶液混合，并以600W的功率微波提取8min后浓缩，得到黄岑根粗 提取物；
(c)采用浓度为10wt％的乙醇水溶液将步骤(b)得到的黄岑根粗提取物 溶解，再采用大孔树脂凝胶柱D101纯化，并采用浓度为60wt％的乙醇水溶液 洗脱，浓缩，得到所述黄岑根提取物。
制备例3
本制备例提供一种可可籽提取物，所述可可籽提取物由以下制备方法制备 得到：
(A)将可可籽粉碎至粒径为100目后，以1:10的质量比将粉碎后的可可 籽与正己烷混合，在30℃下浸泡3h后，过滤并干燥，得到脱脂可可籽粉；
(B)将步骤(A)得到的脱脂可可籽粉和水混合后加热至45℃，再与生物 酶和酸混合，所述脱脂可可籽粉、水和纤维素酶的质量比为1:15:0.006，在45℃、 pH为5的条件下进行酶解反应1.5h后灭活，得到可可籽酶解产物；
(C)以质量比为1:10的比例将步骤(B)得到的可可籽酶解产物和浓度为 60wt％的乙醇水溶液混合，以300W的功率进行超声提取50min，过滤后浓缩， 得到所述可可籽粗提取物。
除姜花根提取物、黄岑根提取物和可可籽提取物由上述制备方法制备得到， 下述实施例和对比例中其余组分均可由市售购得。
实施例1
本实施例提供一种抗初老组合物，所述抗初老组合物包括6份姜花根提取 物、10份黄岑根提取物和4份的可可籽提取物。
实施例2
本实施例提供一种抗初老组合物，所述抗初老组合物按重量份数计包括5 份的姜花根提取物、9份的黄岑根提取物和6份的可可籽提取物。
实施例3
本实施例提供一种抗初老组合物，所述抗初老组合物按重量份数计包括7 份的姜花根提取物、8份的黄岑根提取物和5份的可可籽提取物。
实施例4
本实施例提供一种抗初老组合物，所述抗初老组合物按重量份数计包括3 份的姜花根提取物、15份的黄岑根提取物和2份的可可籽提取物。
实施例5
本实施例提供一种抗初老组合物，所述抗初老组合物按重量份数计包括8 份的姜花根提取物、5份的黄岑根提取物和7份的可可籽提取物。
对比例1
本对比例提供一种组合物，所述组合物按重量份数计包括8份的姜花根提 取物、12份的黄岑根提取物。
对比例2
本对比例提供一种组合物，所述组合物按重量份数计包括11份的姜花根提 取物、9份的可可籽提取物。
对比例3
本对比例提供一种组合物，所述组合物按重量份数计包括8份的黄岑根提 取物、12份的可可籽提取物。
应用例1
本应用例提供一种含抗初老组合物的精华液，所述含抗初老组合物的精华 液的制备原料按质量百分含量计包括如下组分：
本实施例所述含抗初老组合物的精华液的制备方法包括以下步骤：
(1)将保湿剂、增稠剂和水在82℃下混合8min，得到水相混合液；
(2)将步骤(1)得到的水相混合液、抗初老组合物、pH调节剂、螯合剂、 抗氧化剂、增溶剂和芳香剂在45℃下混合10min，采用120目的滤布过滤，得 到所述含抗初老组合物的精华液。
应用例2
本应用例提供一种含抗初老组合物的精华液，所述含抗初老组合物的精华 液的制备原料按质量百分含量计包括如下组分：
本实施例所述含抗初老组合物的精华液的制备方法包括以下步骤：
(1)将保湿剂、增稠剂和水在82℃下混合8min，得到水相混合液；
(2)将步骤(1)得到的水相混合液、抗初老组合物、pH调节剂、螯合剂、 抗氧化剂、增溶剂和芳香剂在45℃下混合10min，采用120目的滤布过滤，得 到所述含抗初老组合物的精华液。
应用例3
本应用例提供一种含抗初老组合物的精华液，所述含抗初老组合物的精华 液的制备原料按质量百分含量计包括如下组分：
本实施例所述含抗初老组合物的精华液的制备方法包括以下步骤：
(1)将保湿剂、增稠剂和水在82℃下混合8min，得到水相混合液；
(2)将步骤(1)得到的水相混合液、抗初老组合物、pH调节剂、螯合剂、 抗氧化剂、增溶剂和芳香剂在45℃下混合10min，采用120目的滤布过滤，得 到所述含抗初老组合物的精华液。
应用例4
本应用例提供一种精华液，与应用例1的区别在于，将实施例1提供的抗 初老组合物替换为等质量的实施例4提供的抗初老组合物，其他组分含量及制 备方法同应用例1。
应用例5
本应用例提供一种精华液，与应用例1的区别在于，将实施例1提供的抗 初老组合物替换为等质量的实施例5提供的抗初老组合物，其他组分含量及制 备方法同应用例1。
应用例6
本应用例提供一种精华液，与应用例1的区别在于，不添加苦参根提取物， 胀果甘草根提取物含量增至0.1％，其他组分含量及制备方法同应用例1。
应用例7
本应用例提供一种精华液，与应用例1的区别在于，不添加胀果甘草根提 取物，苦参根提取物含量增至0.1％，其他组分含量及制备方法同应用例1。
应用例8
本应用例提供一种精华液，与应用例1的区别在于，不添加二裂酵母发酵 产物溶胞物，酵母菌/川谷籽发酵产物滤液含量增至0.4％，其他组分含量及制备 方法同应用例1。
应用例9
本应用例提供一种精华液，与应用例1的区别在于，不添加动物脐带提取 物、动物胎盘蛋白和动物胎盘酶，二裂酵母发酵产物溶胞物含量增至0.5％，其 他组分含量及制备方法同应用例1。
对比应用例1
本对比应用例提供一种精华液，与应用例1的区别在于，将实施例1提供 的抗初老组合物替换为等质量的对比例1提供的组合物，其他组分含量及制备 方法同应用例1。
对比应用例2
本对比应用例提供一种精华液，与应用例1的区别在于，将实施例1提供 的抗初老组合物替换为等质量的对比例2提供的组合物，其他组分含量及制备 方法同应用例1。
对比应用例3
本对比应用例提供一种精华液，与应用例1的区别在于，将实施例1提供 的抗初老组合物替换为等质量的对比例3提供的组合物，其他组分含量及制备 方法同应用例1。
对比应用例4
本对比应用例提供一种精华液，与应用例1的区别在于，不添加密蒙花提 取物，葡糖基芦丁含量增至1.0％、卤虫提取物含量增至1.5％，其他组分含量及 制备方法同应用例1。
对比应用例5
本对比应用例提供一种精华液，与应用例1的区别在于，不添加葡糖基芦 丁，密蒙花提取物含量增至1.25％、卤虫提取物含量增至1.25％，其他组分含量 及制备方法同应用例1。
对比应用例6
本对比应用例提供一种精华液，与应用例1的区别在于，不添加卤虫提取 物，密蒙花提取物含量增至1.5％、葡糖基芦丁含量增至1.0％，其他组分含量及 制备方法同应用例1。
试验例1
安全性能测试
对应用例1-9提供的精华液和对比应用例1-6提供的精华液进行安全性能测 试，方法如下：
(1)红细胞溶血实验
红细胞悬液的制备：选择健康家兔，心脏取血9mL，加入2％的草酸钾溶 液1mL，离心，弃去上清液，用20mmol/L的PBS溶液将沉淀物稀释至20mL， 4℃保存备用。选择样品用PBS溶液稀释至不同浓度，每个样品设置5个浓度 梯度。取10mL待测样品的稀释液，加入200μL上述红细胞悬液(控制样品终 浓度分别为5、10、20、50、100mg/mL)，以蒸馏水作为全溶血对照，PBS溶 液作为阴性对照，轻轻混匀，37℃下孵育30min，在2000r/min的转速下离心10min，取上清液，用分光光度计测试其在560nm处的吸光度(A560)，按如 下公式计算溶血率；
绘制溶血率-样品浓度标准曲线，计算50％红细胞发生溶血时的样品浓度 (HD50)。
(2)蛋白变性实验：
将样品用PBS溶液稀释至10g/L，取10mL待测样品的稀释液，加入200μL 上述红细胞悬液，以蒸馏水作为空白对照，1mg/mL十二烷基硫酸钠(SDS) 溶液作为阳性对照，轻轻混匀，37℃下孵育30min，在2000r/min的转速下离 心10min，取上清液，用分光光度计分别测试其在540nm和575nm处的吸光 度A540和A575，按照如下公式计算蛋白变性指数(D)；
其中，R1＝空白对照组A575/空白对照组A540，R2＝实验组A575/实验组A540， R3＝阳性对照组A575/阳性对照组A540。
根据L/D值对待测样品的刺激性进行评价，其中L/D值为HD50/D，红细胞 溶血实验刺激性分级标准如下表1所示：
表1
| L/D | 分级 |
| >100 | 无刺激性 |
| 10<L/D≤100 | 微刺激性 |
| 1<L/D≤10 | 轻度刺激性 |
| 0.1<L/D≤1 | 中度刺激性 |
上述红细胞溶血实验和蛋白变性实验的测试结果如下表2所示：
表2
由表2的安全性能测试可知，本发明应用例1-9所制备的精华液温和无刺 激；本发明所制备的精华液的50％红细胞发生溶血时的样品浓度HD50在22000 mg/L以上，大于对比应用例1-6制备的精华液的HD50；同时蛋白质变性指数 DI均在3.3％以下，亦明显小于对比应用例1-6制备的精华液，说明添加本发明 所述抗初老组合物能够显著降低精华液的毒副作用和刺激性，更加安全可靠。
试验例2
抗炎性能测试
(1)测试样品：应用例1-9提供的精华液和对比应用例1-6提供的精华液；
(2)测试材料：小鼠巨噬细胞系RAW264.7、小鼠前列腺素E2(PGE2)ELISA 检测试剂盒、小鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)ELISA检测试剂盒、脂多糖(LPS)；
(3)测试方法：
(a)对脂多糖(LPS)刺激RAW264.7细胞释放PGE2的影响，对照组(无 血清培养基)，于LPS刺激18h后收集细胞上清液，按照ELISA试剂盒说明书 要求进行PGE2检测，计算抑制率；
(b)对LPS刺激RAW264.7细胞释放TNF-α的影响，对照组(无血清培 养基)，LPS刺激18h后收集细胞上清，按ELISA试剂盒说明书操作要求进行 TNF-α检测，计算抑制率。
具体测试结果如表3所示：
表3
| 样品 | 对PGE2释放的抑制率/％ | 对TNF-α释放的抑制率/％ |
| 应用例1 | 90.8 | 91.0 |
| 应用例2 | 91.2 | 91.5 |
| 应用例3 | 91.5 | 91.6 |
| 应用例4 | 90.2 | 89.5 |
| 应用例5 | 89.8 | 88.4 |
| 应用例6 | 88.6 | 86.3 |
| 应用例7 | 89.0 | 87.5 |
| 应用例8 | 88.4 | 85.9 |
| 应用例9 | 87.5 | 86.0 |
| 对比应用例1 | 60.5 | 62.3 |
| 对比应用例2 | 57.7 | 63.4 |
| 对比应用例3 | 61.0 | 66.6 |
| 对比应用例4 | 55.7 | 59.3 |
| 对比应用例5 | 58.1 | 60.7 |
| 对比应用例6 | 59.3 | 64.2 |
由表3的测试数据可知，本发明制备得到的精华液对对PGE2释放的抑制 率在87％以上，对TNF-α释放的抑制率在85％以上，说明本发明所述抗初老组 合物同精华液的配方中的皮肤调节剂中的各组分相互配合在一起，从根本上达 到增强皮肤屏障功能，有效抑制炎症因子的释放、传递，能起到抗炎舒敏的作 用，从而有效修复炎症肌肤。
试验例3
抗氧化测试
对应用应用例1～9和对比例应用1～6提供的精华液进行自由基清除测试， 方法如下：
(1)对超氧阴离子自由基清除能力的测定
取0.05mol/L pH为8.2的Tris-HCl缓冲液4.5mL，于25℃水浴锅中预热 20min，再分别加入上述测试样品，再加入0.4mL 25mmol/L的邻苯三酚溶液， 混匀后，于25℃水浴中反应5min，加入8mol/L的HCl 1.0mL终止反应。
以Tris-HCl缓冲液作参比，在299nm处测吸光度值。空白对照用1mL蒸 馏水来替代样品，计算得到清除率。清除率公式(D)(％)＝[1-(A4/A3)]×100％；式 中A3为空白对照的吸光度值；A4为样品的吸光度值；
(2)对羟自由基的清除能力的测定
在25mL比色管中依次加入2mmol/L FeSO43 mL，1mmol/L H2O23 mL， 摇匀，接着加入6mmol/L水杨酸3mL，摇匀，于37℃水浴加热15min后取出， 测其吸光度Ao。然后分别加入100mg·L-1的待测样品，摇匀，继续水浴加热15 min，取出测其吸光度Ax。按上述方法，另取比色管，重复依次加入以上各液 体，不加水杨酸，摇匀，水浴加热15min，测值Axo。其中计算羟自由基清除率 的公式为：羟自由基清除率(％)＝A0-(Ax-Ax0)/A0×100％；式中A0为空白对照体 系的吸光度值；Ax为加入待测样品体系的吸光度值；Ax0为不加显色剂H2O2溶 液本底的吸光度值。
具体测试结果如表4所示：
表4
由表4的测试数据可知，本发明提供的精华液对超氧阴离子自由基的清除 率在80％以上，对羟自由基的清除率抑制率在62％以上，说明本发明所述精华 液的抗初老组合物和皮肤调理剂中各组分相互配合，协同增效，具有很好地自 由基清除效果，能减少自由基并保护皮肤屏障完整性。
试验例4
美白淡斑效果体外测试
对应用应用例1～9和对比例应用1～6提供的精华液进行美白淡斑效果体外 测试，方法如下：
(1)黑色素合成抑制实验
将B16黑色素瘤细胞以1×105个/mL的密度接种于96孔板中，每孔90μL， CO2孵箱中孵育24小时后，每孔加入样品溶液。同时设立培养基和细胞的空白 对照组。
将培养板置于孵箱中孵育72小时后，弃去上清液，PBS(磷酸缓冲盐溶液) 洗涤两遍，然后每孔加入0.5mL胰酶消化细胞3min，每孔加入2mL维持液终 止消化。混匀后，每种浓度取出0.5mL做细胞计数。其余细胞悬液以2500r/min 离心分离5min，弃去上清液，于沉淀中加入NaOH溶液，加热使黑色素溶解， 选择490nm波长在酶联免疫检测仪下测定吸光度值。
计算样品对黑色素合成抑制率(％)公式如下所示：
其中，A1为药物孔吸光度值，P1为药物孔细胞密度，A2为对照孔吸光度值； P2为对照孔细胞密度，I'为对应样品对黑色素合成抑制率(％)；
(2)抗光老化测试
蓝光下表皮角质形成细胞氧化应激测试，具体测试方法为：使用蓝光辐射 氧化Organotypical皮肤模型，经测试样品抗光老化组合物预处理后进行蓝光照 射，蓝光强度为15J/cm2。由于中高剂量的ROS(活性氧簇)会通过细胞氧化 应激反应诱导细胞凋亡甚至导致其坏死，因此测量ROS在表皮角质形成细胞积 累能够反映出测试样品的抗光老化能力；
具体测试结果如表5所示：
表5
由表5的测试数据可知，本发明提供的精华液后对黑色素合成抑制率在70％ 以上，ROS表皮角质形成细胞积累量在12％以下。说明本发明所述精华液各组 分配伍合理，具有协同增效作用，能够显著降低诱导的黑色素生成，从而防止 色素过度沉着导致的黑斑，并避免光照引起的炎症会导致红斑和色素沉着过度， 能够有效清除自由基，抑制蓝光条件下人体表皮角质细胞ROS的生成，进而保 护皮肤细胞不受蓝光照射的损伤因此，本发明提供的精华液能够从多个方面实 现美白效果，减弱可见的光老化迹象，维持肌肤年轻，高质量并具有光泽。
试验例5
抗皱提亮效果人体测试
对应用应用例1～9和对比例应用1～6提供的精华液进行抗皱提亮效果人体 测试，方法如下：
选取150位年龄在18-50岁之间的女性志愿者，分为15组，每组10人， 每组分别在脸部使用各组测试样品，每天早晚各使用1次，共使用4周。
(1)采用皮肤红黑色素测试仪(Hexameter MX18)评估受试对象使用面 膜组合物前、后皮肤黑色素含量变化。所用仪器的测量范围是0-999，测量数值 越高，说明皮肤中黑色素含量越高。受试对象使用本发明制备的面膜组合物前、 后面部肌肤黑色素的减少量；
(2)VISIA皮肤分析评价：受试志愿者面部清洁后采用VISIA面部图像分 析仪进行面部拍摄，分析面部色素斑、纹理、皱纹的检测数据，数值越高代表 色素斑、纹理的现象越明显。一疗程结束后将VISIA面部图像分析仪得到的信 息与治疗前的信息进行对比，分析受试志愿者的面部色素斑、纹理和皱纹的改 善情况，p＜0.02，具有统计学意义；
(3)提亮功效：利用皮肤色差测试仪(探头CL400及多探头皮肤测试系 统MPA10)分别测试治疗前和治疗后受试志愿者的面部肤色情况，并计算ITA°。 测试条件为22℃、湿度50％的恒温恒湿环境。
具体测试结果如表6所示：
表6
由表6测试数据可知，对比治疗前后的VISIA测试结果可知，使用应用例 1～9提供的精华液治疗期间无不良反应病例发生，总体肤感较好、清爽，受试 对象的黑色素减少量明显，受试志愿者的皮肤色斑和纹理情况均有显著改善， 面部肤色的提亮效果明显，疗效评价为有效。说明本发明所述精华液各组分配 伍合理，具有协同增效作用，可有效解决炎症导致的红斑和色素沉着过度问题， 短期使用可以临时提亮，长期使用有细腻肌肤，紧致肌肤的效果，可改善皮肤 弹性，减少皱纹，减少肌肤发红，使肌肤保持光泽细腻的健康状态。
申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明所述含抗初老组合物的 精华液及其制备方法，但本发明并不局限于上述实施例，即不意味着本发明必 须依赖上述实施例才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的 任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选 择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
Claims (10)
1.一种含抗初老组合物的精华液，其特征在于，所述含抗初老组合物的精华液的制备原料包括抗初老组合物、皮肤调理剂、保湿剂和水；
所述抗初老组合物包括姜花根提取物、黄岑根提取物和可可籽提取物；
所述皮肤调理剂包括密蒙花提取物、葡糖基芦丁和卤虫提取物。
2.根据权利要求1所述的含抗初老组合物的精华液，其特征在于，在所述抗初老组合物中，所述姜花根提取物、黄岑根提取物和可可籽提取物的质量比为(3-8):(5-15):(2-7)；
优选地，在所述皮肤调理剂中，所述密蒙花提取物、葡糖基芦丁和卤虫提取物的质量比为(1-20):(1-15):(1-5)。
3.根据权利要求1或2所述的含抗初老组合物的精华液，其特征在于，以所述含抗初老组合物的精华液的制备原料的质量为100％计，所述含抗初老组合物的精华液的制备原料按质量百分含量计包括抗初老组合物0.01-5％、皮肤调理剂0.01-10％、保湿剂1-20％，余量为水。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的含抗初老组合物的精华液，其特征在于，所述皮肤调理剂还包括苦参根提取物、胀果甘草根提取物、烟酰胺、酵母菌/川谷籽发酵产物滤液、二裂酵母发酵产物溶胞物、动物脐带提取物、动物胎盘蛋白或动物胎盘酶中的任意一种或至少两种的组合；
优选地，以所述含抗初老组合物的精华液的制备原料的质量为100％计，所述皮肤调理剂包括密蒙花提取物0.5-2％、葡糖基芦丁0.1-0.5％、卤虫提取物0.5-1.5％、苦参根提取物0.01-0.1％、胀果甘草根提取物0.01-0.1％、烟酰胺0.1-1％、酵母菌/川谷籽发酵产物滤液0.01-0.3％、二裂酵母发酵产物溶胞物0.01-0.1％、动物脐带提取物0.01-0.1％、动物胎盘蛋白0.01-0.1％和动物胎盘酶0.01-0.1％。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的含抗初老组合物的精华液，其特征在于，所述保湿剂包括丁二醇、甘油聚醚-26、海藻糖、透明质酸钠或1,2-己二醇中的任意一种或至少两种的组合；
优选地，以所述含抗初老组合物的精华液的制备原料的质量为100％计，所述保湿剂包括丁二醇2-10％、甘油聚醚-262-5％、海藻糖0.1-2％、透明质酸钠0.1-0.2％和1,2-己二醇0.1-1％。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的含抗初老组合物的精华液，其特征在于，所述精华液的制备原料中还包括增稠剂、pH调节剂、螯合剂、抗氧化剂、增溶剂或芳香剂中的任意一种或至少两种的组合；
优选地，以所述含抗初老组合物的精华液的制备原料的质量为100％计，所述精华液的制备原料中还包括增稠剂0.1-0.5％、pH调节剂0.1-0.25％、螯合剂0.01-0.05％、抗氧化剂0.1-1％、增溶剂0.01-0.1％和芳香剂0.01-0.03％。
7.根据权利要求6所述的含抗初老组合物的精华液，其特征在于，所述增稠剂包括聚丙烯酸酯交联聚合物-6和/或卡波姆；
优选地，所述pH调节剂为精氨酸；
优选地，所述螯合剂为EDTA二钠；
优选地，所述抗氧化剂为对羟基苯乙酮；
优选地，所述增溶剂为PEG-40氢化蓖麻油；
优选地，所述芳香剂为香精。
8.根据权利要求1-7中任一项所述的含抗初老组合物的精华液的制备方法，其特征在于，所述精华液的制备方法包括以下步骤：
(1)将保湿剂和水混合，得到水相混合液；
(2)将步骤(1)得到的水相混合液、抗初老组合物和皮肤调理剂混合，过滤，得到含抗初老组合物的精华液。
9.根据权利要求8所述的含抗初老组合物的精华液的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述混合的温度为80-85℃，所述混合的时间为5-10min；
优选地，步骤(1)中，所述混合还需添加增稠剂。
10.根据权利要求8或9所述的含抗初老组合物的精华液的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述混合的温度为38-42℃，所述混合的时间为5-15min；
优选地，步骤(2)中，所述混合还需添加pH调节剂、螯合剂、抗氧化剂、增溶剂或芳香剂中的任意一种或至少两种的组合；
优选地，步骤(2)所述过滤采用100-200目的滤布进行。
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