KR101214344B1 - 쌀겨와 감초발효추출물을 포함하는 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 쌀겨 및 감초를 장내유산균(Streptococcus thermophilus)으로 발효시켜서 추출한 발효추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로서, 콜라겐의 생합성을 촉진하고, 항산화 효과가 우수하고, 피부 세포의 증진 효과가 뛰어난 화장료 조성물을 제공하며, 특히 피부 내에서 서로 다른 메커니즘을 통해 피부 장벽을 강화하고 피부 보습능을 높여 줌으로서 피부노화방지에 시너지 효과를 일으키는 화장료 조성물에 관한 것이다.

Description

쌀겨와 감초발효추출물을 포함하는 화장료 조성물{Cosmetics composition containing fermented rice bran and licorice extract}

본 발명은 쌀겨 및 감초를 장내유산균(Streptococcus thermophilus)으로 발효시켜서 추출한 쌀겨 및 감초 발효추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는, 쌀겨 및 감초 발효추출물을 함유함으로써 콜라겐의 생합성을 촉진하고, 항산화 효과가 우수하고, 피부 세포의 증진 효과가 뛰어난 화장료 조성물을 제공하며, 특히 피부 내에서 서로 다른 메커니즘을 통해 피부 장벽을 강화하고 피부 보습능을 높여 줌으로서 피부노화방지에 시너지 효과를 일으키는 화장료 조성물에 관한 것이다.

피부의 노화 기작을 규명하기 위한 여러 연구들이 진행되어 여러 가지 피부 노화의 원인들이 밝혀졌다. 피부가 온도의 변화, 습도의 저하 또는 바람 등에 의해 건조하게 되면 외부에 대한 방어벽으로서의 피부 생리 활성이 저하되어 노화가 촉진된다. 또한, 유해 활성산소종 또는 자유 라디칼에 피부가 노출되면 체내의 산화 작용에 의해 과산화 지질이 생성되고 피부를 구성하는 여러 단백질들의 변형을 유발하게 된다.

노화에 따른 피부의 생리적 변화로는 피부의 구성성분인 표피, 진피 및 피하조직의 두께가 얇아지는 현상, 피부장벽의 기능을 맡고 있는 지질 보호막의 지질조성과 함량이 변화하면서 그 기능이 급격하게 저하됨으로써 피부의 수분함량이 떨어지고 피부가 건조해지는 현상, 기미, 주근깨, 색소침착 또는 다양한 피부 병변이 유발되는 현상 등이 있다. 특히, 자외선량의 증가와 대기오염 및 현대인의 과도한 피로와 스트레스 등으로 인해 생성되는 반응성이 높은 활성 산소와 자유 라디칼은 생체성분 (단백질, 핵산, 세포막 지질 등)을 산화시키거나 변성시킴으로써 피부노화의 주원인으로 작용한다. 따라서, 피부노화에 따른 주름형성, 피부탄력 감소, 색소침착, 기미, 주근깨, 건조 등은 화장료 분야에서 피부보호 및 미용차원에서 중요한 과제로 가장 많이 연구되어 지고 있는 영역 중 하나이다.

피부 진피의 대부분(피부 전체 건조 중량의 약 70-80%)을 차지하는 콜라겐과 신축성이 큰 엘라스틴 단백질은 섬유아세포에서 생성되는 주요 단백질로 피부 진피층에서 피부의 기계적 견고성, 조직의 결합력 및 탄력성 등에 관여한다(Journal of the american academy of dermatology, 21:610-613(1989)). 콜라겐은 연령이 증가할수록, 그리고 자외선에 노출이 많이 될수록 양적 감소를 보인다. 콜라겐은 형태와 구조적 특징에 따라서 분류되는데 이들 중에서, 가장 특징이 잘 알려진 것은 타입 I, II, III 그리고 IV이다. 콜라겐 타입 I과 III는 진피층의 세포간질의 구성성분을 이루고 콜라겐 타입 IV는 DEJ (Dermal Epidermal Junction)의 주요 구성물질이 된다. DEJ는 피부의 표피층과 진피층 사이에 위치하여 두 층간의 물질 투과와 수송을 조절해주며 인접한 피부 세포의 분화를 조절하며 피부의 견고성을 유지시켜준다. 피부의 주요 구조적 성분인 콜라겐과 엘라스틴은 자연적 또는 외부 자극에 의해 구조가 변성되거나 생합성량이 감소하게 되는데 이로 인해 피부 노화가 가속화된다.

이러한 피부노화를 억제하거나 진행 속도를 완화시키기 위하여, 레티놀, 레티노이드, 비타민 C, 플라보노이드 및 토코페롤 등의 여러 가지 피부 보호 성분이 함유된 화장료 또는 피부 보호제가 개발되고 있다. 그러나 이와 같이 화장료 또는 피부 보호제는 최종적인 제형에 있어서 역가가 떨어져 그 효능이 경미하고, 피부 자극이 심한 문제점을 지니고 있다.

본 발명자들은 식물 발효추출물을 이용한 피부 노화 방지, 즉 피부 보호용 화장료 조성물을 개발하고자 예의 연구 노력한 결과, 쌀겨와 감초의 혼합 추출물이 뛰어난 상승효과를 나타내며 장내유산균(Streptococcus thermophilus)으로 발효시켜 수득한 여과액인 쌀겨 및 감초 발효추출물은 피부 세포의 증식 촉진, 항산화 효능, 콜라겐 합성 촉진, 피부 면역 증강 및 피부 보습력 개선에 더욱 우수한 효과가 있음을 발견하여 본 발명을 완성하였다.

따라서, 본 발명의 목적은 상기 발효추출물을 유효 성분으로 포함하여 피부에 자극이 없이 피부 노화 현상인 주름 발생, 탄력 감소, 보습능 상실 등을 모두 해소하는 것을 발견함으로써 피부 노화 방지 효과가 있으며, 피부 면역을 증진함으로써 피부를 효과적으로 보호할 수 있는 화장료 조성물을 제공하는데 그 목적이 있다.

상술한 과제를 해결하기 위하여 본 발명은 다음과 같은 수단을 포함할 수 있다.

본 발명에 따른 수분증발억제용, 피부주름 개선용, 피부탄력증진용, 항산화용 또는 피부노화방지용 화장료 조성물은 쌀겨 및 감초를 동시에 장내유산균(Streptococcus thermophilus)으로 발효시켜서 추출한 쌀겨 및 감초 발효추출물을 유효 성분으로 함유한다.

상기 쌀겨 및 감초 발효추출물은 조성물의 총 중량에 대하여 0.0001 내지 80중량%로 함유하는 것을 특징으로 한다.

본 발명에 따른 화장료 조성물은 상기 발효추출물을 유효 성분으로 함유함으로써 피부에 자극이 없이 피부 노화 현상인 주름 발생, 탄력 감소, 보습능 상실 등을 모두 해소하는 효과가 우수하여 인체 적용시 피부 노화 방지 효과가 있으며, 피부 면역을 증진함으로써 피부를 효과적으로 보호할 수 있도록 한다.

본 발명은 쌀겨 및 감초를 장내유산균(Streptococcus thermophilus)으로 동시에 발효시킨 발효추출물을 함유하는 수분증발억제용, 피부주름 개선용, 피부탄력증진용, 항산화용 또는 피부노화방지용 화장료 조성물을 제공한다.

이하, 본 발명을 보다 상세하게 설명하기로 한다.

본 발명의 유효 성분으로 이용되는 쌀겨는 현미(玄米)를 도정(搗精)하여 정백미(精白米)를 만들 때 생기는 과피(果皮)?종피(種皮)?호분층(糊粉層) 등의 분쇄혼합물을 말하며, 한자어로는 쌀겨(米糠)이라고 한다. 보통 현미의 6～8%의 쌀겨가 생기는데, 현미의 도정도(搗精度)를 높이면 그 양이 증가되고, 또 도정도에 따라서 그 성분도 달라진다. 많이 찧으면 지방?비타민 B1?인(燐)이 증가하고 섬유는 감소된다. 쌀겨의 표준 화학조성을 보면 수분 13.5%, 단백질 13.2%, 지방 18.3%, 당질 38.3%, 섬유 7.8%, 회분(灰分) 8.9%이고 비타민 B1은 100g 중 2.5mg이나 들어 있으며 비타민 E도 많다.

상기 감초는 콩과의 다년생 초본으로 목질로 덩굴져 있는 땅속 줄기와 땅속 깊이 길게 뻗어 있는 뿌리를 갖고 있다. 위로 뻗어난 1m 가량의 줄기에는 9 ~ 17개의 길고 둥근 잎을 갖고 있는 잎줄기들이 많이 있다. 이용부위는 3년 된 뿌리와 땅속의 줄기이며 약성은 보통이고 맛은 단 것이 특징이다. 만주감초는 중국동북부, 화북부 및 서북부, 몽고, 시베리아에 분포하고 있으며 스페인감초는 남유럽, 중앙아시아, 중국에 분포되어 있으며 변종으로 러시아감초(G. glabra var. typica), 페르시아감초(G. glabra var. glanduliferra) 등이 있다. 러시아감초는 스페인, 이탈리아에 야생하고 있으며 스페인, 독일, 영국, 시리아에서 재배되며, 페르시아감초는 러시아, 소아시아, 시리아, 중국 남부에 분포한다. 중국에서 재배되는 감초의 종류는 만주감초, 스페인감초, 창과감초를 포함해 8종이 있으며, 주로 재배되는 것은 만주감초, 유럽감초, 창과감초이다. 또한, 감초는 의약품과 담배 및 식료품으로 광범위하게 재배되고 있다. 거담, 변통, 경련 진정, 항알레르기, 항균, 항바이러스, 담즙 촉진, 해열, 진해, 근육 완화, 간 보호 및 항암작용 등의 활성이 있고 일반 감기, 기침, 기관지염, 위궤양 및 십이지장궤양, 관절염, 발진, 간염, 간 및 신장경변증, 생리통, 에디슨씨병(부신 피질 분비 부전증), 습진 및 단순 포진, 콜레스테롤, 트리코모나스 감염, 약이나 음식 중독, 피로, 해열, 심계 항진 등의 여러 가지 질병에 효과가 있음은 물론 다른 약품 조제시 맛을 내기 위해 많이 쓰이기 때문에 가장 많이 이용되는 약초 중의 하나이다.

본 발명에서 사용되는 쌀겨 및 감초 발효추출물은 당업계에 공지된 다양한 추출 및 발효법을 이용하여 얻을 수 있다.

상기 쌀겨 및 감초의 추출물은 각 성분을 별도로 추출하여 혼합하거나, 상기 약재를 혼합한 후 추출하는 것에 의하여 제조될 수 있다. 즉, 약재를 혼합하여 추출하는 것도 가능하고(혼합추출), 각각의 성분별로 추출한 후 추출물을 혼합하는 것도 가능하다. 바람직하게는 약재를 혼합한 후 혼합 추출하는 것이 좋다. 추출법은 통상의 추출법, 즉, 물 등의 용매를 이용하여 추출하는 것이 가능하다.

혼합 추출의 경우, 본 발명의 조성물의 구성비를 좀더 자세하게 설명하면 쌀겨 100 중량부에 대하여 건조된 감초로서 감초 50 ~ 300 중량부를 함유한다.

또한, 본 발명은 상기의 혼합추출물을 장내유산균(Streptococcus thermophilus)으로 발효시켜서 추출한 쌀겨 및 감초 발효추출물을 화장료 조성물에 적용할 수 있게 함으로써, 피부 노화로 인한 주름 발생, 탄력감소, 보습능 상실 등을 해소할 수 있는 기능성 화장품을 제공할 수 있게 한 것이다. 특히, 본 발명에 따라 제조된 쌀겨 및 감초 발효추출물은 피부 세포증식효과, 항산화효과, 콜라겐 합성 증진효과, 보습효과 및 피부탄력효과가 매우 우수하다.

구체적으로, 본 발명은 쌀겨 및 감초를 혼합하여 일정량의 장내유산균(Streptococcus thermophilus)을 접종하여 발효된 원료에 대하여 용매로서 물, 에탄올, 메탄올, 글리세린, 부틸렌글리콜 및 프로필렌글리콜로 구성된 그룹으로부터 선택된 하나 이상의 용매를 1 ~ 20배의 부피량으로 가해서 용매 추출하는 것이 바람직하다. 이는 식물성 혼합물 부피 기준 1배 미만의 용매를 가하면 추출 용매가 너무 적어서 충분하게 유효 성분을 추출할 수 없으며, 쌀겨 및 감초의 혼합물 부피 기준 20배를 초과하여 용매를 가하면 추출액 건조시 불필요한 비용 및 시간이 소요되기 때문이다. 이때 추출 방법으로는 냉각 콘덴서가 장치되어 용매가 증발되는 것을 방지한 상태에서 40 ~ 100℃, 2 ~ 20시간 가열하여 추출하거나 4 ~ 40℃, 1 ~ 15일간 침적시켜 유효성분을 추출하는 방법을 사용하는 것이 유효 성분의 추출 효율에 있어서 바람직하다.

본 발명에 따라 쌀겨 및 감초 혼합물을 용매 추출한 추출액은 화장료 조성물 전체 중량 기준으로 분말 또는 액상의 형태로 0.0001 ~ 80중량%범위에서 혼합하여 사용하는 것이 바람직하다. 이는 0.0001중량%미만이면 상술한 피부 세포의 증식 촉진, 항산화 효능, 콜라겐 합성 촉진, 피부 면역 증강 및 피부 보습력 개선 효과가 미미하고 80중량%를 초과하여 사용하면 제조하고자 하는 화장료 형태의 성상으로 제조하는데 필요한 필수 구성 성분을 충분하게 사용하지 못하기 때문이다.

본 발명에 따른 쌀겨 및 감초 혼합물의 장내유산균(Streptococcus thermophilus) 발효추출물은 화장수, 에센스, 로션, 크림, 팩, 젤, 연고, 패취, 또는 분무제 등의 제형으로 이루어진 종래 화장료 조성물에 첨가하여 사용할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 피부 노화 방지(피부 보호)의 용도를 갖는다. 본 명세서에서 용어 "피부 노화 방지"는 피부 노화 예방 및 치료를 포괄적으로 포함하는 의미를 갖는 것으로서, 피부 보습, 피부주름 개선, 피부탄력증진 및 항산화의 모든 효과를 갖는 것을 의미한다.

본 발명의 화장료 조성물은 피부 세포의 증식 촉진, 항산화 효능, 콜라겐 합성의 촉진에 의한 피부 주름 개선과 피부 탄력 개선, 보습력 향상 및 피부 면역 증강을 통하여 피부 노화를 방지하며, 이와 같은 사실은 하기의 실험예에 명시되어 있다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시 예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.

<제조예 1> 쌀겨 추출물의 제조

건조된 쌀겨를 1kg 달고, 쌀겨 무게의 10배 중량의 물을 첨가하여 가압멸균기(autoclave)에서 3시간 동안 가압추출한 후 150 메쉬(mesh)로 여과하였다. 여과액의 고형분은 약 3%이었다.

<제조예 2> 감초 추출물의 제조

건조된 감초를 1kg 달고, 감초 무게의 10배 중량의 물을 첨가하여 가압멸균기(autoclave)에서 3시간 동안 가압추출한 후 150 메쉬(mesh)로 여과하였다. 여과액의 고형분은 약 7%이었다.

<제조예 3> 쌀겨 및 감초 추출물의 제조

건조된 쌀겨와 감초를 각각 1kg 동량씩 달아 혼합하고, 쌀겨와 감초 혼합 무게의 10배 중량의 물을 첨가하여 가압멸균기(autoclave)에서 3시간 동안 가압추출한 후 150 메쉬(mesh)로 여과하였다. 여과액의 고형분은 약 10%이었다.

<제조예 4> 쌀겨 및 감초 발효추출물의 제조

상기 제조예 3에서 제조한 쌀겨 및 감초 혼합추출물에 트립톤(tryptone) 1.0%, 염화나트륨(sodium chloride) 1.0%, 효모추출물(yeast extract) 0.5%로 구성된 영양배지(nutrient agar; LB broth)를 0.8% 농도로 용해한 후 장내유산균(Streptococcus thermophilus)을 접종하고 50리터 발효조에서 37℃, 40 rpm, pH 7.0 조건으로 48시간 동안 발효하였다. 이후 상기 발효물을 0.2㎛ 필터가 장착된 한외여과로 여과하여 균체를 완전히 제거하고 발효물의 고형분이 30%가 될 때까지 감압 농축기를 이용하여 60 ~ 70℃에서 농축하였다. 농축액에 브틸렌글리콜을 50% 농도가 되도록 첨가하여 발효에 의해 활성화된 성분을 가용화시켜 쌀겨 및 감초 발효추출물을 제조하였다.

시험예 1: 피부 세포 증식 효과

본 발명의 제조예 1 내지 4가 피부 세포 증식에 미치는 효과를 알아보기 위하여 인체 정상 섬유 아세포(한국 세포주 은행)를 96-웰 마이크로 플레이트의 각 웰에 1 x 10⁴ 세포가 되도록 접종하고, DMEM 배지(Sigma사)에서 24시간 동안 37℃에서 배양하였다. 이어 쌀겨추출물, 감초추출물, 쌀겨 및 감초 추출물, 쌀겨 및 감초 발효추출물이 최종 농도 0.01%, 0.05%, 0.1%, 0.5% 및 1%로 포함된 혈청이 없는 DMEM 배지로 교체한 실험군과 추출물이 포함되지 않은 혈청이 없는 DMEM 배지로 교체한 대조군을 24시간 동안 추가로 배양하였다. 또한, 장내유산균(Streptococcus thermophilus) 발효가 쌀겨 및 감초 추출물의 효능 증진에 미치는 영향을 알아보기 위해 제조예 3의 상기 추출물을 또 다른 실험군으로 사용하였다. 이들 실험군과 대조군을 처리한 후 세포 배양한 다음, MTT 용액(3-(4,5-디메틸티아졸-2-일) 2,5-디페닐테트라졸륨 브로마이드: 5 mg/㎖)을 각각 10 ㎕씩 첨가하고, 4시간 동안 배양한 후, 배지를 제거하고, 각 웰 당 100 ㎕의 DMSO 용액을 가하여 20분 동안 진탕시키고, 마이크로 플레이트 판독기(microplate reader, Molecular Devices, 미합중국)를 이용하여 570 nm에서 상층액의 흡광도를 측정하였다. 측정값을 하기의 수학식 1에 대입하여 세포 증식 효과를 산출하고, 그 결과는 하기 표 1에 나타내었다.

수학식 1

세포증식효과(%)=[(실험군 흡광도-대조군의 흡광도)/대조군의 흡광도]×100

시료 농도 (%)		흡광도 (570 nm)	세포증식효과 (%)
대조군		0.602	-
쌀겨추출물	0.01	0.604	0.3
	0.05	0.610	1.3
	0.10	0.621	3.2
	0.50	0.632	5.0
	1.00	0.650	8.0
감초추출물	0.01	0.612	1.7
	0.05	0.622	3.3
	0.10	0.635	5.5
	0.50	0.642	6.7
	1.00	0.676	12.3
쌀겨 및 감초추출물	0.01	0.624	3.7
	0.05	0.657	9.1
	0.10	0.731	21.4
	0.50	0.759	26.1
	1.00	0.803	23.4
쌀겨 및 감초발효추출물	0.01	0.736	22.3
	0.05	0.834	38.5
	0.10	0.862	43.2
	0.50	0.992	64.8
	1.00	0.154	91.7

상기 표 1에서 알 수 있듯이, 쌀겨 및 감초 발효추출물이 처리된 경우 쌀겨 및 감초 발효추출물을 처리하지 않은 대조군과 상기 제조예 1 내지 3의 쌀겨추출물, 감초추출물, 쌀겨 및 감초추출물을 처리한 실험군 보다 매우 우수한 섬유 아세포 증식 효과를 나타낸다. 높은 섬유 아세포의 증식 효과는 피부의 재생 능력을 탁월하게 하고 피부 노화를 방지하는데 매우 중요한 요소이다.

시험예 2: 항산화 효과

본 발명의 제조예 1 내지 4의 항산화 효과를 알아보기 위하여 자유라디칼 소거활성 실험(Free Radical Scavenging Activity Test)을 실시하였다. 자유라디칼 소거활성 실험은 Kim 등(Kor. J. Pharmacogn.,24(4), 299-303(1993))의 방법을 변형한 것으로써, 안정한 자유라디칼인 DPPH(1,1-diphenyl-2-picryhydrazyl, 시그마사) 시약을 사용하였다. 0.2mM DPPH 용액(Blank인 경우는 에탄올) 150 ㎕에 상기 추출물과 발효추출물을 다양한 농도로 제작하여, 이들을 각각 150 ㎕ 첨가하여 혼합하고, 실온에서 30분간 방치한 후 517 nm에서 흡광도를 측정하는 실험군을 설정하였으며, 이에 대한 대조군으로는 정제수를 이용한 경우로 설정하였다. 상기 실험군과 대조군에 대한 흡광도 측정 후, 하기 수학식 2를 이용하여 자유라디칼 소거활성 효과를 구하여 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.

수학식 2

자유라디칼소거효과(%)=100-{[(실험군 흡광도-Blank 흡광도)/대조군의 흡광도]×100}

실험군	농도 (%)	자유라디칼소거효과 (%)
쌀겨추출물	0.01	1.3
	0.05	3.7
	0.10	5.5
	0.50	8.0
	1.00	12.4
감초추출물	0.01	8.6
	0.05	16.9
	0.10	24.0
	0.50	28.1
	1.00	34.6
쌀겨 및 감초추출물	0.01	20.5
	0.05	34.1
	0.10	55.7
	0.50	72.6
	1.00	93.8
쌀겨 및 감초발효추출물	0.01	52.1
	0.05	76.4
	0.10	91.8
	0.50	100
	1.00	100

상기 표 2에 나타난 결과를 통해 본 발명의 쌀겨 및 감초발효추출물은 상기 제조예 1 내지 3의 쌀겨추출물, 감초추출물, 쌀겨 및 감초추출물을 처리한 실험군 보다 자유라디칼 소거능력이 매우 우수함을 알 수 있다.

시험예 3: 콜라겐 합성 증진 효과

인체 정상 섬유아세포(한국세포주은행)를 96-웰 마이크로 플레이트의 각 웰에 2 x 10⁴ 세포가 되도록 접종하고, DMEM배지에서 37℃에서 24시간 동안 배양하였다. 이어, 상기의 제조예 1 내지 4가 최종 농도 0.01, 0.05 및 0.10%로 포함된 혈청이 없는 DMEM 배지로 교체한 실험군과 상기 추출물이 포함되지 않은 혈청이 없는 DMEM 배지로 교체한 대조군을 48시간 동안 추가로 배양하였다. 배양 후, 각 웰의 상층액을 모아 프로콜라겐(procollagen) 타입 I C-펩타이드(PICP) 양을 키트(Takara, 일본국)를 이용하여 측정함으로써 새로 합성된 콜라겐 양을 측정하였다. PICP 양은 ng/2x10⁴ 세포로 환산하였으며, 그 결과는 하기 표 3에 나타나 있다.

시료농도 (%)		콜라겐 합성량 (ng/2 x 104)
대조군		126
쌀겨추출물	0.01	127
	0.05	128
	0.10	130
감초추출물	0.01	127
	0.05	129
	0.10	135
쌀겨 및 감초추출물	0.01	132
	0.05	156
	0.10	179
쌀겨 및 감초발효추출물	0.01	157
	0.05	181
	0.10	241

상기 표 3의 결과에서 볼 수 있듯이, 본 발명의 쌀겨 및 감초 발효추출물의 농도가 증가할수록 상기 제조예 1 내지 3의 쌀겨추출물, 감초추출물, 쌀겨 및 감초추출물을 처리한 실험군과 비교해 더욱 콜라겐의 합성이 증가하였다. 이로써 본 발명에 사용된 쌀겨 및 감초의 혼합물을 장내유산균(Streptococcus thermophilus)으로 발효했을 때 더욱 콜라겐 합성 증진에 탁월한 효과가 있어 주름개선에 매우 큰 효과가 있음을 알 수 있다.

실시예 및 비교예

상기 제조예에 따라 쌀겨추출물을 함유하는 조성물(실시예1), 감초추출물을 함유하는 조성물(실시예2), 쌀겨 및 감초추출물을 함유하는 조성물(실시예3), 쌀겨 및 감초발효추출물을 함유하는 조성물(실시예4), 아무것도 함유하지 않은 조성물(비교예1)을 하기 표 4의 조성으로 제조하였다.

성분	실시예1 (중량%)	실시예2 (중량%)	실시예3 (중량%)	실시예4 (중량%)	비교예 (중량%)
쌀겨추출물	2.0	-			-
감초추출물	-	2.0			-
쌀겨 및 감초추출물	-	-	2.0	-	-
쌀겨 및 감초발효추출물	-	-	-	2.0	-
글리세린	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0
유동파리핀	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0
폴리솔베이트60	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0
솔비탄세스퀴롤올레이트	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0
스쿠알란	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0
밀납	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0
트리에탄올아민	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5
프로필렌글리콜	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0
카르복실비닐폴리머	1.5	1.5	1.5	1.5	1.5
향	미량	미량	미량	미량	미량
방부제	미량	미량	미량	미량	미량
정제수	잔량	잔량	잔량	잔량	잔량
계	100	100	100	100	100

실험예 4: 보습효과

상기 실시예 1 내지 4 및 비교예에서 제조된 각 화장료의 보습력을 평가하기 위하여, 각 화장료를 도포한 피부를 대상으로 하여 수분 보유능 및 수분 증발량을 다음과 같이 측정하였다.

실험예 4-1: 수분 보유능 측정

22℃ 및 상대습도 45%의 항온 항습실에서 상기 실시예 1 내지 4 및 비교예에서 제조된 각 화장료를 30명의 피시험자 하박 안쪽에 일정량(0.03 g/16 ㎠)을 도포하고, 도포전, 도포 1시간 후 및 도포 2시간 후의 피부의 수분 함량을 측정하였으며, 아무런 처리를 하지 않은 정상 피부를 대조군으로 사용하였다. 측정 기기는 피부의 수분 함량에 따른 피부의 전기 용량을 측정하여 보습력을 측정하는 수분 함량측정기(corneometer CM825, Conrage + Khazaka사, 독일연방국)를 사용하였다. 그 결과는 하기 표 5에 나타나 있다.

구분	실시예1	실시예2	실시예3	실시예4	비교예	대조군
도포전 피부 전기 전도도	50	50	50	50	50	50
도포 1시간 후 피부 전기 전도도	72	75	78	86	72	50
도포 2시간 후 피부 전기 전도도	60	61	63	79	59	50

실험예 4-2: 수분 증발량 측정

팔의 상박 부위에 테입 스트리핑(tape stripping)을 실시하여 피부의 방어막을 약화시킨 후, 실험예 4-1과 동일한 방법으로 피실험자에게 각 화장료를 도포한 후, 수분증발량기(Tewameter TM300, Conrage + Khazaka사, 독일연방국)를 이용하여 12 시간마다 1분 간격으로 5회씩 수분 증발량을 측정하여 평균값을 구하였다. 그 결과는 하기 표 6 및 도 1과 같다.

	실시예1 (%)	실시예2 (%)	실시예3(%)	실시예4(%)	비교예(%)	대조군(%)
0시간 후	100	100	100	100	100	100
12시간 후	88.1	87.6	86.2	80.3	90.3	95.2
24시간 후	75.4	73.9	72.1	67.2	77.5	89.4
36시간 후	59.1	60.5	57.6	45.8	62.2	80.2
48시간 후	51.5	50.8	46.4	28.6	52.6	73.5

상기 실험예 4-1 및 4-2의 결과에서 보듯이, 본 발명의 쌀겨 및 감초 발효추출물을 포함하는 실시예 4는 실시예 1 내지 3과 비교예에 비해서 피부의 전기 전도도가 높고, 적은 수분 손실량을 나타낸다. 따라서, 본 발명의 쌀겨 및 감초 발효추출물을 유효성분으로하는 화장료가 우수한 보습 효과를 나타냄을 알 수 있다.

실험예 5: 피부 탄력 효과

본 발명의 쌀겨 및 감초 발효추출물을 함유하는 화장료 조성물의 피부 탄력 증진효과를 측정하였다.

온도 24-26℃, 습도 75의 조건에서 20세 이상의 건강한 여성 20명(평균연령 37세)을 2 그룹으로 나누고, A 그룹에는 실시예 1을, B 그룹에는 실시예 2를, C 그룹에는 실시예 3을, D 그룹에는 실시예 4를, E 그룹에는 비교예의 제형을 눈가를 중심으로 하루 2회씩 (아침 및 저녁) 12주간 도포한 후, 피부탄력 측정기(Cutometer MPA580, Conrage + Khazaka사, 독일연방국)를 이용하여 피부탄력을 측정하였다. 시험결과는 cutometer MPA580의 R8(R8(12주)-R8(0주)) 값으로 기재하였는데, R8 값은 피부점탄성(Vicoelasticity)의 성질을 나타내며, 결과는 하기 표 7에 기재되어 있다.

구분	실시예1	실시예2	실시예3	실시예4	비교예
피부탄력효과	0.35	0.38	0.40	0.63	0.30

위의 표 7의 결과에서와 같이, 쌀겨 및 감초 발효추출물을 함유한 실시예 4의 피부 탄력은 쌀겨추출물, 감초추출물, 쌀겨 및 감초추출물을 함유한 실시예 1 내지 3과 상기의 발효추출물을 함유하지 않은 비교예에 비해 우수함을 확인할 수 있었다.

실험예 6: 피부 안전성 시험

과거력상 피부자극에 과민반응을 보인 적이 없으며, 현재 피부병 내지 피부 알러지 증상이 없는 20-30대 여성 20명을 대상으로 본 발명의 피부안전성을 확인하기 위하여 상기 [표 4]에서의 화장료에 대해 인체 피부 첩포시험을 하였다. 우선 시험부위를 70% 에탄올로 닦아낸 뒤 건조시켰다. 준비된 시험물질을 15 ㎍씩 핀챔버(Finnchamber, 100x10, EPITEST, 핀란드) 내에 적하시킨 후 시험대상자의 전박(forearm) 안쪽 부위에 밀폐 첩포하였다. 24시간 동안 첩포하고 첩포를 제거한 후 펜으로 시험부위를 표시하였다. 표시 후 각각 1시간 및 24시간 후에 확대경 (8MC-150, DAZOR, 미합중국)을 이용하여 시험 부위를 관찰하여 홍반 및 부종 유무를 관찰하였다.

피부반응은 국제접촉피부염연구회 (ICDRG, International Contact Dermaitis Research Group)의 규정에 따라 판정하고, <수학식 3>에 따라 평균피부반응도(mean response rate)를 구하였다. 그 결과는 하기 [표 9]에 나타낸다.

[피부반응의 평가 기준 및 점수]

기호	점수	평가기준
-	0	무반응
±	0.5	희미한 또는 가벼운 홍반
+	1	경계가 뚜렷하나 약한 홍반, 부종 및 구진
++	2	뚜렷한 홍반, 구진 및 소수포
+++	3	심한 홍반 및 대수포, 가피형성

수학식 3

평균피부반응도(%)=(점수×반응수×100×1/2)/[3(최대점수)×총피검자수(n)]

	1시간 후			24시간 후			반응도(%) (n=20)
	±	+	++	±	+	++
실시예1	1	-	-	-	-	-	0.20
실시예2	1	-	---	--	-	-	0.20
실시예3	1	-	---	--	-	-	0.20
실시예4	-	-	-	-	-	-	0.00
비교예	1	-	-	1	-	-	0.41

피부 안전성 실험의 결과, 쌀겨 및 감초 발효추출물이 함유된 실시예 4는 자극이 없이 안전한 조성물임을 확인하였다.

이하, 본 발명의 화장료 제형예로서 본 발명의 쌀겨 및 감초 추출물을 혼합하여 장내유산균(Streptococcus thermophilus)으로 발효시켜 제조한 발효추출물을 이하 쌀겨 및 감초 발효추출물이라 하여 이를 함유하는 유연화장수(스킨로션), 영양화장수(밀크로션), 영양크림, 마사지크림 및 팩을 예시하고 있으나, 본 발명의 화장료의 제형이 반드시 이에 한정되는 것은 아니다.

제형예 1: 유연화장수(스킨로션)

하기 표에 나타난 바와 같이 유연화장수를 통상의 방법에 따라 제조하였다.

배합성분	함량 (중량%)
쌀겨 및 감초 발효추출물	2.0
1,3-부틸렌글리콜	6.0
글리세린	4.0
올레일알코올	0.1
폴리솔베이트 20	0.5
에탄올	15.0
벤조페논-9	0.05
향, 방부제	미량
정제수	to 100

제형예 2: 영양화장수( 밀크로션 )

하기 표에 나타난 바와 같이 영양화장수를 통상의 방법에 따라 제조하였다.

배합성분	함량 (중량%)
쌀겨 및 감초 발효추출물	2.0
프로필렌글리콜	6.0
글리세린	4.0
트리에탄올아민	1.2
토코페닐아세테이트	3.0
유동파라핀	5.0
스쿠알란	3.0
마카다이아너트오일	2.0
폴리솔베이트 60	1.5
솔비탄세스퀴올레이트	1.0
카르복시비닐 폴리머	1.0
비에치티이	0.01
EDTA-2Na	0.01
향, 방부제	미량
정제수	to 100

제형예 3: 영양크림

하기 표에 나타난 바와 같이 영양크림을 통상의 방법에 따라 제조하였다.

배합성분	함량 (중량%)
쌀겨 및 감초 발효추출물	2.0
세토스테아릴알콜	2.0
글리세릴스테아레이트	1.5
트리옥타노인	5.0
폴리솔베이트 60	1.2
솔비탄스테아레이트	0.5
스쿠알란	5.0
유동파라핀	3.0
싸이클로메치콘	3.0
비에이치티이	0.05
델타-토코페롤	0.2
글리세린	4.0
1,3-부틸렌글리콜	2.0
잔탄검	0.1
EDTA-2Na	0.05
향, 방부제	미량
정제수	to 100

제형예 4: 마사지크림

하기 표에 나타난 바와 같이 마사지크림을 통상의 방법에 따라 제조하였다.

배합성분	함량 (중량%)
쌀겨 및 감초 발효추출물	2.0
프로필렌글리콜	6.0
글리세린	4.0
트리에탄올아민	0.5
밀납	2.0
토코페릴아세테이트	0.1
폴리솔베이트 60	3.0
솔비탄세스퀴올레이트	2.5
세테아릴알코올	2.0
유동파라핀	30.0
카르복시비닐폴리머	0.5
향, 방부제	미량
정제수	to 100

제형예 5: 팩

하기 표에 나타난 바와 같이 팩을 통상의 방법에 따라 제조하였다.

배합성분	함량 (중량%)
쌀겨 및 감초 발효추출물	2.0
프로필렌글리콜	2.0
글리세린	4.0
카르복시비닐 폴리머	0.3
에탄올	7.0
피이지-40 하이드로게네이티드 캐스터 오일	0.8
트리에탄올아민	0.3
비에치티이	0.01
EDTA-2Na	0.01
향, 방부제	미량
정제수	to 100

Claims (4)

1. 건조된 쌀겨와 감초 혼합물에 물을 첨가한 후 가압멸균기에서 가압추출한, 쌀겨 및 감초 혼합물의 추출물을 준비하는 단계;
   상기 준비된 쌀겨와 감초 혼합물의 추출물에 트립톤, 염화나트륨 및 효모추출로 구성된 영양 배지에 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus)을 넣고 발효시켜 발효물을 얻는 단계;
   상기 발효물을 여과시켜 균체를 제거하고, 이를 농축시키는 단계;
   상기 농축물에 브틸렌글리콜을 첨가하여 활성화된 성분을 가용화시키는 단계를 포함하는 방법에 의해 제조된, 쌀겨 및 감초 혼합물의 발효 추출물을 포함하는,
   항산화 효과, 보습효과 및 피부탄력 효과를 가지는, 화장료 조성물.
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