KR102472794B1 - 다슬기 효소 분해물 및 녹차 추출물을 이용한 고령친화 다슬기 녹차 겔 제조 방법 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 다슬기 효소 분해물에 녹차추출물을 용매로 첨가하여 아미노산 중 류신 함량을 높일 수 있어 고령화 시대에 대응하여 근감소증을 예방할 수 있는 다슬기 효소 분해물 및 녹차 추출물을 이용한 고령친화 다슬기 녹차 겔을 제조하는 방법에 관한 것이다.
본 발명에 따른 다슬기 효소 분해물 및 녹차 추출물을 이용한 고령친화 다슬기 녹차 겔 제조 방법은 정제수 70중량%, 칡 10중량%, 헛개줄기 10중량%, 헛개열매 5중량% 및 천궁5 중량%를 혼합하여 혼합식물추출액을 제조하는 제1단계; 다슬기 과육, 증류수 및 녹차추출물을 혼합하여 농축다슬기녹차추출액을 제조하는 제2단계; 카라기난 57.45중량%에 정제염 0.1중량%를 혼합하는 제3단계; 상기 카라기난과 정제염 혼합물에 올리고당 15중량%, 상기 혼합식물추출액 15 중량%, 상기 농축다슬기녹차추출액 12중량%, 비타민C 0.2중량%, 엽산 0.1중량%, 젖산칼슘 0.1중량% 및 구연산 0.05중량%를 혼합하는 제4단계; 상기 제4단계에서 혼합된 혼합물을 100℃에서 20분 동안 가열하여 다슬기녹차겔을 제조하는 제5단계; 상기 다슬기녹차겔을 용기에 넣고 밀봉 포장하는 제6단계; 상기 밀봉 포장된 다슬기녹차겔을 멸균하는 제7단계;를 통해 제조되는 것을 특징으로 한다.

Description

다슬기 효소 분해물 및 녹차 추출물을 이용한 고령친화 다슬기 녹차 겔 제조 방법{MANUFACTURING METHOD FOR GEL EFFECTIVE COMPONENTS IN MELANIA SNAIL AND GREEN TEA FOR DEVELOPMENT OF SENIOR-FRIENDLY FOOD}
본 발명은 다슬기 효소 분해물에 녹차추출물을 용매로 첨가하여 아미노산 중 류신 함량을 높일 수 있어 고령화 시대에 대응하여 근감소증을 예방할 수 있는 다슬기 효소 분해물 및 녹차 추출물을 이용한 고령친화 다슬기 녹차 겔을 제조하는 방법에 관한 것이다.
한국은 2018년 고령 사회로 진입하면서 고령친화식품의 산업이 급성장하고 있다. 2016년 국내 고령친화식품 산업규모는 8,554억원이며, ‘23년에는 1조 9,647억원으로 연평균 12.6%의 높은 성장률로 성장할 전망이다. 일본의 사례를 통해 확인하면 고령 사회 진입 후 건강기능식품 시장이 성장하였으므로 국내 건강기능식품 시장도 2026년까지 성장할 것으로 예상된다.
고령친화식품에 가장 필요한 요건은 영양분, 소화, 저작 연하 용이 등의 순서이며, 노인에게 필요한 요소로 영양분(48.8%), 소화 잘되는 정도(26.5%), 치아와 미각 고려한 부드러움(20.3%) 등으로 나타났다.
고령 사회 선진국인 일본과 비교할 때, 우리나라의 고령 친화 식품 시장은 아직 미형성 단계로 판단되며 고령 사회의 문제점을 해결할 수 있는 고령 친화 식품 개발이 시급한 것으로 확인된다.
다슬기는 연체동물 중복족목 다슬기과에 속하는 담수패로서 한국, 일본, 대만 등지에 널리 분포한다. 다슬기는 하천과 호수 등 물이 깊고 물살이 센 곳의 바위틈에 주로 서식하는데, 동의보감, 본초강목 등 동양의학서의 기록에 의하면 숙취해독에 좋고 당뇨예방과 눈을 맑게 하는데 효과가 있으며, 열독을 풀어주고 주독을 해소하며 소갈증(당뇨), 이질, 취질, 위암, 변비에 좋은 것으로 알려져 있다. 또한, 다슬기는 피를 맑게 하여 두통, 여성 어지러움증, 선혈증에 좋으며, 피부미용, 위장병에 특별한 효능이 있다.
다슬기는 요리하면 국물이 푸른빛을 띠는데 이는 혈액 속에 헤모글로빈을 만드는 구리 성분이 미네랄 형태로 함유된 것으로 간의 정화작용에 큰 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 그리고, 최근에 와서 다슬기의 몇 가지 주요 구성성분이 밝혀졌는데, 뼈와 치아를 튼튼하게 하고 불면증을 완화하며 신경전달 기능 및 근육 운동을 원활하게 하여 부정맥을 방지하고 골다공증을 예방하는 수용성 칼슘과 신체각 세포들의 산소공급에 필요한 헤모글로빈의 구성성분을 다량 함유하고 있음이 밝혀졌다.
또한, 녹차의 경우 항산화 물질에 의해 혈전을 막아주고 혈압을 조절하여 심장 동맥을 지켜주며, 면역력 증진 효과가 있고 특히 65세 이상 노인 1만여명을 대상으로 연구한 결과 녹차를 매일 마신 사람은 노화가 진행되었을 때 적절하게 대처할 뿐만 아니라 잘 마시지 않는 사람들에 비해 다양한 일상생활을 더욱 노련하게 하는 것으로 발표되었다. 또한, 녹차는 항산화 물질인 EGCG가 함유되어 있어 두뇌 세포가 원활하게 성장하도록 하여 기억력과 학습력이 강화되는 것으로 밝혀졌다.
따라서 본 발명에서는 고령 친화 식품의 개발을 위해 다슬기와 녹차를 이용하여 노인을 위한 식품에 응용할 수 있도록 유효성분을 추출하는 효과적인 방법에 대해 제시하고자 한다.
일본등록특허 JP4263513B9 (2009-02-20)
본 발명은 상기의 문제점을 해결하기 위해서 안출된 것으로서, 본 발명의 목적은 다슬기의 유효성분을 추출하는 효과적인 방법을 제시하는데 그 목적이 있다.
또한, 본 발명은 다슬기와 녹차에서 추출된 추출물을 이용하여 노인을 위한 식품에 응용할 수 있는 유효 추출물을 제공하는데 그 목적이 있다.
또한, 본 발명의 목적은 다슬기의 생리활성 물질의 새로운 활성분야 도출 및 효소 분해기술을 통한 소재의 영역을 확장하는데 그 목적이 있다.
발명이 해결하고자 하는 기술적 과제들은 이상에서 언급한 기술적 과제들로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 기술적 과제들은 아래의 기재로부터 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
본 발명에 따른 다슬기 효소 분해물 및 녹차 추출물을 이용한 고령친화 다슬기 녹차 겔 제조 방법은,
정제수 70중량%, 칡 10중량%, 헛개줄기 10중량%, 헛개열매 5중량% 및 천궁5 중량%를 혼합하여 혼합식물추출액을 제조하는 제1단계;
다슬기 과육, 증류수 및 녹차추출물을 혼합하여 농축다슬기녹차추출액을 제조하는 제2단계;
카라기난 57.45중량%에 정제염 0.1중량%를 혼합하는 제3단계;
상기 카라기난과 정제염 혼합물에 올리고당 15중량%, 상기 혼합식물추출액 15 중량%, 상기 농축다슬기녹차추출액 12중량%, 비타민C 0.2중량%, 엽산 0.1중량%, 젖산칼슘 0.1중량% 및 구연산 0.05중량%를 혼합하는 제4단계;
상기 제4단계에서 혼합된 혼합물을 100℃에서 20분 동안 가열하여 다슬기녹차겔을 제조하는 제5단계;
상기 다슬기녹차겔을 용기에 넣고 밀봉 포장하는 제6단계;
상기 밀봉 포장된 다슬기녹차겔을 멸균하는 제7단계;를 통해 제조되는 것을 특징으로 한다.
상기 과제의 해결 수단에 의해, 본 발명은 다슬기와 녹차의 유효성분을 추출하는 효과적인 방법을 제시할 수 있다.
또한, 본 발명은 다슬기와 녹차에서 추출된 추출물을 이용하여 노인을 위한 식품에 응용할 수 있는 유효 추출물을 제공할 수 있다.
또한, 본 발명은 다슬기와 녹차의 혼합물에서 아미노산의 함량을 증가시킬 수 있는 추출방법을 제공할 수 있다.
또한, 본 발명은 근감소증 개선을 위해 근관세포(myotube) 분화, 근육 단백질 성장 억제인자(Myostatin) 감소 및 근육 세포 특이 효소인 류신의 활성을 증가시킬 수 있는 추출물을 제공할 수 있다.
도 1은 본 발명인 다슬기 효소 분해물 및 녹차 추출물을 이용한 고령친화 다슬기 녹차 겔 제조 방법을 보여주는 순서도이다.
도 2는 다슬기 12시간 추출물의 효소별 루신의 함량(mg/mL)을 나타낸 그래프이다.
도 3은 다슬기 12시간 추출물의 혼합 효소별 루신의 함량(mg/mL)을 나타낸 그래프이다.
도 4는 분쇄다슬기의 용매별, 효소 함량별 루신의 함량(mg/mL)을 나타낸 그래프이다.
도 5는 분쇄다슬기 슬러지의 용매별, 효소 함량별 Luecine 함량(mg/mL)을 나타낸 그래프이다.
도 6은 다슬기 12시간 추출물의 효소 함량별 아미노산함량(mg/mL)을 나타낸 그래프이다.
도 7은 다슬기 24시간 추출물의 효소 함량별 아미노산함량(mg/mL)을 나타낸 그래프이다.
도 8(A)는 관능검사에 사용한 다슬기녹차겔 사진이고, 도 8(B)는 다슬기녹차겔을 전자렌지에 2분간 조리한 후 사용한 사진이다.
도 9는 관능검사 결과 중 각 속성별 기호도를 나타낸 결과 그래프이다.
도 10은 관능검사 결과 중 또 다른 각 속성별 기호도를 나타낸 결과 그래프이다.
본 명세서에서 사용되는 용어에 대해 간략히 설명하고, 본 발명에 대해 구체적으로 설명하기로 한다.
본 발명에서 사용되는 용어는 본 발명에서의 기능을 고려하면서 가능한 현재 널리 사용되는 일반적인 용어들을 선택하였으나, 이는 당 분야에 종사하는 기술자의 의도 또는 판례, 새로운 기술의 출현 등에 따라 달라질 수 있다. 따라서 본 발명에서 사용되는 용어는 단순한 용어의 명칭이 아닌, 그 용어가 가지는 의미와 본 발명의 전반에 걸친 내용을 토대로 정의되어야 한다.
명세서 전체에서 어떤 부분이 어떤 구성요소를 “포함”한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성요소를 더 포함할 수 있음을 의미한다.
아래에서는 첨부한 도면을 참고하여 본 발명의 실시예에 대하여 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 상세히 설명한다. 그러나 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 한정되지 않는다.
본 발명에 대한 해결하고자 하는 과제, 과제의 해결 수단, 발명의 효과를 포함한 구체적인 사항들은 다음에 기재할 실시 예 및 도면들에 포함되어 있다. 본 발명의 이점 및 특징, 그리고 그것들을 달성하는 방법은 첨부되는 도면과 함께 상세하게 후술되어 있는 실시 예들을 참조하면 명확해질 것이다.
본 발명인 다슬기 효소 분해물 및 녹차 추출물을 이용한 고령친화 다슬기 녹차 겔 제조방법은 다슬기와 녹차에 포함된 유용 성분을 추출하고 생리활성 물질의 기능성을 확인하고자 한다.
다슬기는 다수 포함된 올레산(oleic acid) 및 리놀레산(linoleic acid) 등을 포함한 필수지방산이 약 38.3%이고, 다슬기에 존재하는 미네랄은 대부분 K, Na, Ca, Mg, Cu, Fe, Zn 등임. 특히 Ca, Cu, Fe를 다량 함유하고 있다. 다슬기에 가장 많이 존재하는 칼슘의 경우, 비타민 D, 라이신과 아르기닌, 유당, 비타민 C와 결합을 통한 체내 흡수를 증진해주는 역할을 하며, 셀레늄의 경우 항암 작용 등에 효과가 있는 것으로 알려져, 칼슘보충제, 면역개선 등에 효과적으로 이용 가능할 것으로 기대된다.
다슬기(Semisulcospira sp.)는 전통적으로 간장과 신장에 작용하여 갈증을 해소하고, 간의 열과 염증 및 위통, 소화불량, 만성간염, 간경화, 지방간에 효능이 있다고 알려져 있다. 다슬기 추출물에 관한 연구로는 항산화 작용, 사염화탄소 및 D-galactosamine에 의해 유발된 간 손상에 대해 보호 효과, 다슬기 추출물을 일정기간 섭식시키는 경우 간세포에 대한 보호 효과가 있으며, 숙취해소에도 효과가 있다는 연구가 진행된 바 있다.
한편, BCAA (branched-chain amino acid)는 류신(Leucine), 이소류신(Isoleucine), 발린(Valine)으로 구성된 아미노산으로 주로 육체 피로와 강한 운동 시 근육세포를 유지, 면역증진, 근육단백질 분해 억제, 글리코겐 합성 및 축적에 관여하여 간 효소의 제어 활동 증진, 혈중 내 글루타티온(GSH) 상승을 통한 항산화 효과 등이 알려져 있다. 본 발명에 의한 다슬기의 효소분해로 단백질 중 다량이 류신으로 전환과 동시에 다른 BCAA 마이노산 함량 또한 증가함을 확인하였다.
상기 BCAA는 골격근에서 대사되고 간 대사를 거치지 않는다고 하여 간질환 환자의 영양공급에 사용이 권장되고 있고, 스트레스 등에 의한 간 손상시 간세포의 치료 및 재생하는 효능, 간섬유화 치료 및 예방에 사용되고 있어 본 발명을 이용하여 간기능 개선을 포함한 고령친화 식품 제조에 도움을 줄 것이라 판단된다.
이하, 첨부된 도면을 참조하여 본 발명을 보다 상세히 설명하기로 한다.
본 발명은 도 1에 나타난 바와 같이, 아래 단계에 의해 실행된다.
먼저, 제1단계(S100)는 정제수 70중량%, 칡 10중량%, 헛개줄기 10중량%, 헛개열매 5중량% 및 천궁5 중량%를 혼합하여 혼합식물추출액을 제조한다.
상기 칡은 퓨라린이 다량 함유되어 있다. 퓨라린은 암세포 증식 억제, 항산화, 당뇨, 심장질환 완화 등에 효과가 있는 것으로 알려져 있어, 예로부터 동양권에 서는 약재로 사용되어져 왔다. 퓨라린과 같은 이소플라본 계열인 다이드진(daidzin)이나 제니스틴(genistin)은 갱년기모델 동물실험 및 임상실험에서 골다공증, 고지혈증, 유방암 같은 갱년기 증후군에 효능이 있다고 보고되었다.
상기 헛개줄기 및 상기 헛개열매는 담즙 색소가 몸 안에 필요 이상으로 생성되거나 몸 밖으로 배출되지 못할 경우 생기는 황달, 당뇨, 혈압 및 만성관절염 등에 효과가 있다.
상기 천궁은 주된 약능이 지통(止通)으로 빈혈증, 냉증, 월경불순 등 부인과 질환과 통증성 질환에 응용되고 있다. 또한, 천궁은 진정작용, 혈압강하작용, 혈관확장작용, 항균작용 및 항산화작용 등의 다양한 약리활성 연구결과가 보고되고 있다.
상기 정제수 70중량%에 상기 칡 10중량% 미만으로 혼합하는 경우 상기 칡의 효능이 미미하고, 상기 칡을 10중량%를 초과하여 혼합하는 경우 상기 칡의 쓴맛으로 제조된 겔의 맛을 저해할 수 있으므로 상기 조건으로 실시하는 것이 바람직하다.
또한, 상기 정제수 70중량%에 상기 헛개줄기 10중량% 미만으로 혼합하는 경우 상기 헛개줄기의 효능이 미미하고, 상기 헛개줄기 10중량%를 초과하여 혼합하는 경우 본 발명에 의해 제조된 다슬기 효소 분해물 및 녹차 추출물을 이용한 고령친화 다슬기 녹차 겔의 류신 함량이 낮아질 우려가 있으므로 상기 조건으로 실시하는 것이 바람직하다.
또한, 상기 정제수 70중량%에 상기 헛개열매 5중량% 미만으로 혼합하는 경우 상기 헛개열매의 효능이 미미하고, 상기 헛개열매 5중량%를 초과하여 혼합하는 경우 본 발명에 의해 제조된 다슬기 효소 분해물 및 녹차 추출물을 이용한 고령친화 다슬기 녹차 겔의 류신 함량이 낮아질 우려가 있으므로 상기 조건으로 실시하는 것이 바람직하다.
또한, 상기 정제수 70중량%에 상기 천궁 5중량% 미만으로 혼합하는 경우 상기 헛개열매의 효능이 미미하고, 상기 천궁 5중량%를 초과하여 혼합하는 경우 본 발명에 의해 제조된 다슬기 효소 분해물 및 녹차 추출물을 이용한 고령친화 다슬기 녹차 겔의 류신 함량이 낮아질 우려가 있으므로 상기 조건으로 실시하는 것이 바람직하다.
다음으로, 제2단계(S200)는 다슬기 과육, 증류수, 녹차추출물을 혼합하여 농축다슬기녹차추출액을 제조한다. 보다 구체적으로, 상기 제2단계(S200)는 아래 단계를 통해 실시되는 것이 바람직하다.
먼저, 제2-1단계(S210)는 상기 다슬기 과육 80중량%에 대하여 상기 증류수 17중량% 및 상기 녹차추출물 3중량%를 혼합한 혼합물에 알칼라아제(Alcalase), 플라보자임(Flavourzyme) 및 뉴트라제(Neutrase)을 혼합한 효소혼합물 0.01 중량부를 혼합한다.
상기 다슬기는 깨끗한 물에 3시간 이상 담가 상기 다슬기 내부의 노폐물을 배출한 뒤 3회 이상 세척한다.
상기 녹차추출물은 상기 증류수에 녹차를 투입하여 80℃에서 1시간 동안 추출하여 제조한다.
상기 다슬기 과육 80 중량%에 대하여 상기 증류수 17 중량% 미만으로 혼합하는 경우 아래 제2-2단계(S220)에서 추출이 어려울 수 있고, 상기 증류수 17 중량%를 초과하여 혼합하는 경우 상기 다슬기의 효능이 미미할 수 있으므로 상기 조건으로 실시하는 것이 바람직하다.
또한, 상기 다슬기 과육 80 중량%에 대하여 상기 녹차추출물 3 중량% 미만으로 혼합하는 경우 아래 제2-5단계(S250)에서 동결건조가 어려울 수 있고, 상기 녹차추출물 3 중량%를 초과하여 혼합하는 경우 상기 녹차의 효능이 미미할 수 있으므로 상기 조건으로 실시하는 것이 바람직하다.
상기 효소혼합물은 뉴트라제(Neutrase) 1 중량부에 대하여 알칼라아제(Alcalase) 1 중량부 및 플라보자임(Flavourzyme) 1 중량부를 혼합하는 것이 바람직하다.
상기 뉴트라제(Neutrase) 1 중량부에 대하여 상기 알칼라아제(Alcalase) 1 중량부 미만으로 혼합하는 경우 단백질 분해가 미미하여 류신의 생성률이 낮을 수 있고, 상기 알칼라아제(Alcalase) 1 중량부를 초과하여 혼합하는 경우 관능검사 시 전체적인 기호도가 낮을 우려가 있으므로 상기 조건으로 실시하는 것이 바람직하다.
상기 뉴트라제(Neutrase) 1 중량부에 대하여 상기 플라보자임(Flavourzyme) 1 중량부 미만으로 혼합하는 경우 단백질 분해가 미미하여 류신의 생성률이 낮을 수 있고, 상기 플라보자임(Flavourzyme) 1 중량부를 초과하여 혼합하는 경우 관능검사 시 전체적인 기호도가 낮을 우려가 있으므로 상기 조건으로 실시하는 것이 바람직하다.
또한, 상기 효소혼합물은 농축다슬기녹차추출액 1중량부에 대하여 상기 뉴트라제(Neutrase), 알칼라아제(Alcalase) 및 플라보자임(Flavourzyme) 각각 0.1 중량부 혼합하는 것이 바람직하다.
상기 농축다슬기녹차추출액 1중량부에 대하여 상기 효소혼합물 각각이 0.1 중량부 미만으로 혼합하는 경우 아미노산 중 류신의 함량이 낮아질 우려가 있고, 상기 효소혼합물 0.1 중량부를 초과하여 혼합하는 경우 또한 류신의 함량이 낮아질 우려가 있으므로 상기 조건으로 실시하는 것이 바람직하다.
다음으로, 제2-2단계(S220)는 상기 효소혼합물이 혼합된 혼합물을 진탕배양기(shaking incubator)에서 추출한다. 상기 녹차추출물에 상기 세척한 다슬기 과육과 상기 효소혼합물을 투입하여 추출한다.
상기 추출은 50 ℃에서 12시간 동안 1차 추출한 뒤 90℃에서 1시간 동안 2차 추출을 실시한다. 상기 1차 추출한 뒤 2차 추출을 시행하는 것은 1차 추출을 통해 류신의 함량을 증가시킨 뒤, 2차 추출을 통해 상기 다슬기 및 녹차의 유효성분을 추출하기 위함이다.
상기 1차 추출이 50℃ 미만에서 실시하는 경우 류신의 함량이 낮아질 우려가 있고, 상기 1차 추출이 50℃를 초과하는 경우 상기 효소혼합물이 변질될 우려가 있으므로 상기 조건으로 실시하는 것이 바람직하다.
또한, 상기 1차 추출을 12시간 미만으로 실시하는 경우 류신의 함량이 낮아질 우려가 있고, 상기 1차 추출을 12시간 초과하여 실시하는 경우 류신 함량이 낮아질 우려가 있으므로 상기 조건으로 실시하는 것이 바람직하다.
또한, 상기 2차 추출을 90℃ 미만으로 실시하는 경우 상기 다슬기 과육 및 녹차추출물의 유효성분이 추출되지 않을 수 있고, 상기 2차 추출을 90℃ 초과하여 실시하는 경우 상기 다슬기 과육 및 녹차추출물이 변질될 우려가 있으므로 상기 조건으로 실시하는 것이 바람직하다.
또한, 상기 2차 추출을 1시간 미만으로 실시하는 경우 상기 다슬기 과육 및 녹차추출물의 유효성분이 추출되지 않을 수 있고, 상기 2차 추출을 1시간 초과하여 실시하는 경우 상기 다슬기 과육 및 녹차추출물이 변질될 우려가 있으므로 상기 조건으로 실시하는 것이 바람직하다.
다음으로, 제2-3단계(S230)는 상기 추출된 혼합물을 거름망으로 여과한다. 상기 거름망은 50 내지 100 메쉬의 크기로 여과하여 상기 추출된 혼합물의 여과를 효율적으로 실시한다.
다음으로, 제2-4단계(S240)는 상기 여과된 여과물을 감압농축기로 30℃에서 40rpm 이하 및 30mbar 압력으로 농축한다. 상기 농축은 40 BRIX까지 농축하는 것이 바람직하다.
감압농축은 30℃ 미만으로 실시하는 경우 농축 속도가 느려진다는 문제점이 있고, 30℃를 초과하는 경우 추출물의 열변성 가능성 있을 수 있으므로 상기 조건으로 실시하는 것이 바람직 하다.
또한, 상기 감압농축은 40rpm 미만으로 실시하는 경우 추출물에 열을 빠르게 전달받지 못해 증발이 쉽게 일어나지 않는 문제점이 있고, 40rpm를 초과하는 경우 원심력으로 추출물이 넘칠 가능성이 있을 수 있으므로 상기 조건으로 실시하는 것이 바람직 하다.
또한, 상기 감압농축은 30mbar 미만으로 실시하는 경우 추출물의 끓는점이 낮아지지 않아 농축에 시간이 걸리는 문제점이 있고, 30mbar 를 초과하는 경우 Vacuum pump가 가부하가 걸릴 가능성이 있을 수 있으므로 상기 조건으로 실시하는 것이 바람직 하다.
다음으로, 제2-5단계(S250)는 상기 농축된 농축물을 90hPa 내지 100hPa의 압력 및 -80℃ 내지 -70℃의 온도로 동결건조한다. 상기 동결건조를 통해 분말을 제조한다.
상기 농축물을 90hPa 미만의 압력으로 실시하는 경우 고체에서 기체로 승화 되는 시간이 걸리는 문제점이 있고, 100hPa를 초과하는 경우 Vaccum pump가 과부부하가 걸릴 가능성이 있을 수 있으므로 상기 조건으로 실시하는 것이 바람직 하다.
또한, 상기 농축물을 -80℃ 미만으로 실시하는 경우 용질이 용액에서 분리되지 못한 상태로 문제점이 있고, -70℃를 초과하는 경우 용액이 과포화되면서 용질의 결정체가 침전될 수 있을 가능성이 있을 수 있으므로 상기 조건으로 실시하는 것이 바람직 하다.
다음으로, 제3단계(S300)는 카라기난 57.45 중량%에 정제염 0.1중량%를 혼합한다.
상기 카라기난은 홍조식물에서 채취되는 고무 모양의 물질로, 식품을 제조할 때 증점제로 사용된다.
상기 정제염은 카라기난 용해시 뭉침 현상을 해소하기 위해 정제염과 혼합 후 첨가한다. 상기 정제염은 불순물을 최대한 걷어냈고 수분 함량이 적어 쉽게 짠맛을 내므로 첨가한다.
상기 카라기난 57.45 중량%에 정제염 0.1 중량% 미만으로 혼합하는 경우 상기 정제염의 혼합량이 낮아 상기 카라기난 용해가 미미하여 증점제 효과가 낮을 우려가 있고, 상기 정제염을 0.1중량% 초과하여 혼합하는 경우 불순물이 많아지거나 상기 정제염의 짠맛이 증가되어 식품에 혼합되었을 때 기호도가 낮아질 우려가 있으므로 상기 조건으로 실시하는 것이 바람직하다.
다음으로, 제4단계(S400)는 상기 카라기난과 정제염 혼합물에 올리고당 15중량%, 상기 혼합식물추출액 15 중량%, 상기 농축다슬기녹차추출액 12중량%, 비타민C 0.2중량%, 엽산 0.1중량%, 젖산칼슘 0.1중량% 및 구연산 0.05중량%를 혼합한다.
상기 올리고당은 장내 균총을 개선하고 대장 내 pH를 저하하며 혈중 콜레스티롤 수치와 혈압을 낮추며 칼슘흡수를 돕는 등 설탕섭취로 인한 단점을 보완하기 위해 첨가한다.
상기 비타민C는 근감소증이 우려되는 사람은 권장 섭취량보다 많은 단백질을 먹어야 하므로 단백질 합성 기능이 더욱 높아지는 효과를 볼 수 있는 장점이 있기 위해 첨가한다.
상기 엽산은 근감소증이 우려되는 사람은 권장 섭취량보다 많은 단백질을 먹어야 하므로 단백질 합성 기능이 더욱 높아지는 효과를 볼 수 있는 장점이 있기 위해 첨가한다.
상기 젖산칼슘은 신경과 근육 기능 유지에 필요를 위해 첨가한다.
상기 구연산은 유기산으로서 유산소성 에너지 생산 필요를 위해 첨가한다.
다음으로, 제5단계(S500)는 상기 제4단계(S400)에서 혼합된 혼합물을 100℃에서 20분 동안 가열하여 다슬기녹차겔을 제조한다.
상기 제4단계(S400)에서 혼합된 혼합물을 100℃ 미만으로 혼합하는 경우 겔 형태로 제조되지 못할 우려가 있고, 100℃를 초과하여 혼합하는 경우 상기 제조된 다슬기녹차겔이 변성될 우려가 있으므로 상기 조건으로 실시하는 것이 바람직하다.
또한, 상기 제4단계(S400)에서 혼합된 혼합물을 100℃에서 20분 미만으로 혼합하는 경우 겔 형태로 제조되지 못할 우려가 있고, 20분을 초과하여 혼합하는 경우 상기 제조된 다슬기녹차겔이 변성될 우려가 있으므로 상기 조건으로 실시하는 것이 바람직하다.
다음으로, 제6단계(S600)는 상기 다슬기녹차겔을 용기에 넣고 밀봉 포장한다. 레토르트 설비를 마련하여 상기 다슬기녹차죽을 용기에 넣고 밀봉 포장한다.
다음으로, 제7단계(S700)는 상기 밀봉 포장된 다슬기녹차겔을 멸균한다. 보다 구체적으로, 상기 제7단계(S700)는 121℃에서 30분 동안 실시하는 것이 바람직하다.
상기 멸균은 121℃ 미만으로 실시하는 경우 멸균이 미미할 우려가 있고, 상기 멸균이 121℃를 초과하여 실시하는 경우 내부 다슬기녹차죽이 변질될 우려가 있으므로 상기 조건으로 실시하는 것이 바람직하다.
또한, 상기 멸균은 30분 미만으로 실시하는 경우 멸균이 미미할 우려가 있고, 상기 멸균이 30분 초과하여 실시하는 경우 밀봉 포장이 변형될 우려가 있으므로 상기 조건으로 실시하는 것이 바람직하다.
아래는 본 발명에 의해 제조된 실험예 및 실시예를 나타내고자 한다.
가) 다슬기 추출 방법 및 효소 선정을 위한 예비실험
(1) 아미노산 중 류신 함량을 더 높일 수 있는 방법을 모색하기 위해 예비실험을 진행함
(2) 다슬기 과육 250 g에 대하여 2배수의 용매(녹차추출물)를 첨가하여 Shaking Incubator(Shaking Incubator IS-971R, Lab. Companion, Jeio Tech, Korea)에서 추출함
(3) 효소는 Alcalase 2.4L, Flavourzyme 500MG, Neutrase 0.8L를 혼합하여 사용하였음
(4) 혼합한 효소가 충분히 반응할 수 있게 50 ℃에서 12시간, 24시간동안 추출한 후 90 ℃에서 1시간 추출하였음
(5) 추출물은 거름망으로 여과하였음
나) 분쇄 다슬기와 슬러지의 용매 차이에 따른 아미노산 성분 분석
(1) 다슬기 100 g에 대하여 2배수의 용매인 녹차추출물 200 g을 첨가하여 Shaking Incubator(Shaking Incubator IS-971R, Lab. Companion, Jeio Tech, Korea)에서 추출함
(2) 2배수의 용매인 녹차추출물 200 g을 대신하여 녹찻잎 2 g과 증류수 200 mL를 각각 첨가하여 Shaking Incubator(Shaking Incubator IS-971R, Lab. Companion, Jeio Tech, Korea)에서 추출함
(3) 효소는 예비실험 결과를 토대로 Alcalase 2.4L, Flavourzyme 500MG, Neutrase 0.8L 세가지를 각 0.5 %, 1 % 씩 혼합하였음
(4) 혼합한 효소가 충분히 반응할 수 있게 50 ℃에서 12시간, 24시간동안 추출한 후 90 ℃에서 1시간 추출하였음
(5) 추출물은 거름망으로 여과하였음
(6) 거름망에 여과 된 슬러지를 회수하여 추출물과 동일하게 실험에 사용하였음
다) 다슬기 추출 방법 선정
(1) 아미노산 중 류신 함량을 더 높일 수 있는 방법으로 표준화 실험을 수행함
(2) 다슬기 과육 50 g에 대하여 10배수의 용매(증류수)와 녹차추출물 1%를 첨가하여 Shaking Incubator(Shaking Incubator IS-971R, Lab. Companion, Jeio Tech, Korea)에서 추출함
(3) 효소는 Alcalase 2.4L, Flavourzyme 500MG, Neutrase 0.8L를 혼합하여 사용하였음
(4) 혼합한 효소의 양을 분해물질 대비 0.3%에서 1%, 2%, 3%로 늘렸으며, 늘어난 효소가 충분히 반응할 수 있게 50 ℃에서 12시간, 24시간동안 추출한 후 90℃에서 1시간 추출하였음
(5) 추출물은 거름망으로 여과하였음
아래는 앞서 기재된 실험예 및 실시예를 이용한 아미노산 함량 실험 방법을 나타내고, 본 발명에 의해 제조된 다슬기 녹차겔의 영양성분을 분석하는 방법을 나타내고자 한다.
가) 아미노산 함량
(1) 시료 0.3 g에 증류수 10 mL을 첨가하여 Shaking Incubator(Shaking Incubator SI-600R, Lab. Companion, Jeio Tech, Korea)에 넣고 200 rpm으로 24시간동안 방치함
(2) 10%의 5-Sulfosalicylic acid dihydrate 1 mL를 첨가한 후 4 ℃ 냉장고에서 24시간 동안 방치하여 단백질을 침전시킴
(3) 4,000 rpm으로 5분간 원심분리하여 상층액을 40 ℃이하에서 감압농축기(Rotary evporator, EYELA N-1100V-W, JAPAN)를 이용하여 농축 시킨 후 sample dilution buffer를 5 mL 첨가하여 용해함
(4) 0.45 Membrance filter로 여과하여 120 uL를 아미노산분석기(Sykam S7130 Aminoacid reagent organiger, Germany)로 분석하였고, UV/VIS detector 400 nm(1.00 AU)와 570 nm(1.00 AU)로 검출함
나) 다슬기 녹차겔, 영양성분 분석
영양성분은 식품공전(XX 개정)에 의거하여 분석하였음.
(1) 열량 : 식품공전 제8.일반시험법, 2.식품성분시험법 2.1일반성분시험법 2.1.6열량의 계산
(2) 탄수화물 : 제8.일반시험법, 2.식품성분시험법 2.1일반성분시험법 2.1.4 탄수화물
(3) 수분 : 제8.일반시험법, 2.식품성분시험법 2.1일반성분시험법 2.1.1수분. 2.1.1.1건조감량법
(4) 회분 : 제8.일반시험법, 2.식품성분시험법 2.1일반성분시험법 2.1.2회분
(5) 조단백질 : 제8.일반시험법, 2.식품성분시험법 2.1.3질소화합물 2.1.3.1총질소 및 조단백질
(6) 조지방 : 제8.일반시험법, 2.식품성분시험법 2.1일반성분시험법 2.1.5지질 2.1.5.1조지방
(7) 트랜스지방 : 제8.일반시험법, 2.식품성분시험법 2.1일반성분시험법 2.1.6열량의 계산
(8) 포화지방 : 제8.일반시험법, 2. 식품성분시험법 2.1일반성분시험법 2.1.5지질 2.1.5.4 지방산 제2법
(9) 당류 : 제8.일반시험법, 2. 식품성분시험법 2.1일반성분시험법 2.1.4탄수화물 2.1.4.1당류 2.1.4.1.4기기분석법에 의한 당류의 정량
(10) 나트륨 : 제8.일반시험법, 2. 식품성분시험법 2.2미량영양성분시험법 2.2.1무기질 2.2.1.6나트륨
(11) 콜레스테롤 : 제8.일반시험법, 2.식품성분시험법 2.1일반성분시험법 2.1.5지질 2.1.5.5콜레스테롤
다) 미량원소 분석
(1) 칼슘 : 제8.일반시험법, 2.식품성분시험법 2.2미량영양성분시험법 2.2.1무기질 2.2.1.2칼슘
(2) 인 : 제8.일반시험법, 2.식품성분시험법 2.2미량영양성분시험법 2.2.1무기질 2.2.1.3인
(3) 철 : 제8.일반시험법, 2.식품성분시험법 2.2미량영양성분시험법 2.2.1무기질 2.2.1.4철
(4) 나트륨 : 제8.일반시험법, 2.식품성분시험법 2.2미량영양성분시험법 2.2.1무기질 2.2.1.6나트륨
(5) 칼륨 : 제8.일반시험법, 2.식품성분시험법 2.2미량영양성분시험법 2.2.1무기질 2.2.1.7칼륨
아래는 앞서 기술한 아미노산 함량 실험방법을 이용하여 가) 다슬기 추출 방법 및 효소 선정을 위한 예비실험 결과를 나타내었다.
[표 1]은 다슬기 12시간 추출물의 효소별 아미노산함량(mg/mL) 결과이다. 또한, 도 2는 [표 1]에 나타난 아미노산 중 류신의 함량을 그래프로 나타내었다.
[표 2]는 다슬기 12시간 추출물의 혼합 효소별 아미노산함량(mg/mL) 결과이다. 또한, 도 3은 [표 2]에 나타난 아미노산 중 류신의 함량을 그래프로 나타내었다.
[표 1], [표 2], 도 2 및 도 3의 결과는 예비실험으로 Alcalase, Flavourzyme, Neutrase, Alcalase+Flavourzyme, Alcalase+Neutrase, Flavourzyme+Neutrase, Alcalase+Flavourzyme+Neutrase 등 활용하여 다슬기 12시간 추출물을 분해한 결과를 분석한 결과, Leucine 분석치가 대조구는 0.1060, 효소별로는 2.5450, 2.6154, 3.0908, 5.1762, 4.9542, 4.7929, 6.1277mg/ml로 효소를 병행하여 분해한 결과가 가장 좋음을 확인할 수 있다.
총 아미노산 함량도 Alcalase+Flavourzyme+Neutrase 세가지 병행효소를 활용한 것이 41.9717mg/ml로 가장 높게 나왔는데, 이는 효소별로 각기 분해하는 지점이 달라 효소를 병행하여 분해하는 것이 최적의 분해 조건이라고 판단된다.
No 아미노산명 대조구 알칼라아제
(Alcalase) 2.4L
플라보자임
(Flavourzyme) 500MG
뉴트라제
(Neutrase) 0.8L
효소 X 0.3 % 0.5 % 0.5%
1 O-Phospho-L-serine 0.1729 0.2351 0.1894 0.2007
2 Taurine 0.0430 0.0040 0.0213 0.0321
3 O-Phosphoethanolamine 0.0166 0.0262 0.0086 0.0133
4 Urea 0.0906 0.1214 0.0743 0.0633
5 L-Aspartic Acid 0.2888 0.0210 1.0306 0.2328
6 Hydroxy-L-proline 0.0191 0.0139 0.0492 0.0448
7 L-Threonine 0.0640 0.0921 0.6153 0.5436
8 Theanine 0.4040 0.0192 0.2565 0.1256
9 L-Serine 0.0429 0.0006 0.0005 0.0006
10 L-Asparagine 0.0344 0.0043 0.6385 0.0224
11 L-Glutamic Acid 0.7464 0.3342 3.2662 1.2767
12 D,L-α-Aminoadipic acid 0.4057 0.0192 0.2576 0.1261
13 Proline 0.3174 0.0078 0.7754 0.2718
14 Glycine 0.1774 0.2420 0.8028 0.2849
15 L-Alanine 0.4465 0.9867 1.6947 1.2312
16 L-citrulline 0.0138 0.0040 0.1737 0.0316
17 L-α-Amino-n-butyric acid 0.0018 0.0008 0.0020 0.0025
18 L-Valine 0.0914 0.8385 1.2979 1.2122
19 L-Cystine 0.0028 0.0505 0.0030 0.0148
20 L-Methionine 0.0335 0.9100 0.5576 0.5519
21 L-Isoleucine 0.0242 0.4124 0.9242 0.9943
22 L-Leucine 0.1060 2.5450 2.6154 3.0908
23 L-Tyrosine 0.1096 1.1330 1.1259 0.8458
24 L-Phenylalanine 0.0427 1.4045 1.1187 0.8234
25 b-Alanine 0.0415 0.2052 0.0110 0.0192
26 D,L-β-Aminoisobutyric acid 0.1347 0.4751 0.0143 0.1145
27 4-Amino-n-butyric acid 0.6316 1.0070 0.3967 0.2520
28 L-Histidine 0.0539 0.3222 0.4208 0.3155
29 3-Methyl-L-histidine 0.0021 0.0328 0.0011 0.0049
30 Tryphanhan 0.0004 0.1282 0.0020 0.0002
31 L-Ornithine-monohydrochloride 1.7113 0.8420 2.4655 1.4215
32 L-Lysine 0.2994 1.8293 1.6607 0.5840
33 L-Arginine 0.3819 0.2356 1.0230 0.8452
Totals 6.9526 14.5037 23.4946 15.5940
No 아미노산명 알칼라아제
(Alcalase) 2.4L +
플라보자임
(Flavourzyme) 500MG
알칼라아제
(Alcalase) 2.4L +
뉴트라제
(Neutrase) 0.8L
플라보자임
(Flavourzyme)
500MG +
뉴트라제
(Neutrase) 0.8L
알칼라아제
(Alcalase) 2.4L
+ 플라보자임
(Flavourzyme) 500MG + 뉴트라제
(Neutrase) 0.8L
1 O-Phospho-L-serine 0.2226 0.2781 0.2246 0.2506
2 Taurine 0.0031 0.0037 0.0082 0.0112
3 O-Phosphoethanolamine 0.0187 0.0199 0.0190 0.0204
4 Urea 0.0031 0.1776 0.0538 0.0825
5 L-Aspartic Acid 0.7379 0.1749 1.4138 1.2548
6 Hydroxy-L-proline 0.0294 0.0358 0.0223 0.0550
7 L-Threonine 2.1635 0.3032 1.3120 2.3861
8 Theanine 0.0418 0.0121 0.0431 0.0815
9 L-Serine 0.0096 0.0012 0.0073 0.0475
10 L-Asparagine 2.1160 0.0212 1.2986 2.0745
11 L-Glutamic Acid 3.3091 1.8979 4.1295 1.6649
12 D,L-α-Aminoadipic acid 0.0420 0.0121 0.0289 0.1836
13 Proline 0.1274 0.0901 0.8184 0.0808
14 Glycine 0.9629 0.5324 1.2367 0.9928
15 L-Alanine 2.4450 1.1450 2.4604 2.6670
16 L-citrulline 0.0106 0.0502 0.0436 0.0008
17 L-α-Amino-n-butyric acid 0.0045 0.0131 0.0002 0.0017
18 L-Valine 2.9880 1.7437 3.0066 3.6362
19 L-Cystine 0.0624 0.0430 0.0060 0.0136
20 L-Methionine 1.2373 1.2649 1.2361 1.4654
21 L-Isoleucine 1.9384 1.1950 2.2873 2.7303
22 L-Leucine 5.1762 4.9542 4.7929 6.1277
23 L-Tyrosine 2.6600 1.7956 2.0523 2.7237
24 L-Phenylalanine 2.9908 2.3477 2.3189 3.3007
25 b-Alanine 0.5331 0.3540 0.0308 0.1891
26 D,L-β-Aminoisobutyric acid 0.4015 0.6501 0.0319 0.5157
27 4-Amino-n-butyric acid 0.1834 0.7184 0.1831 0.1710
28 L-Histidine 1.0671 0.5803 0.9052 1.1279
29 3-Methyl-L-histidine 0.0254 0.0685 0.0009 0.0306
30 Tryphanhan 0.1154 0.1575 0.0116 0.1712
31 L-Ornithine-monohydrochloride 0.3072 0.7589 1.8703 0.4998
32 L-Lysine 3.0064 1.0696 2.8032 3.2161
33 L-Arginine 3.8276 1.9899 2.3208 4.1972
Totals 38.7673 24.4597 36.9785 41.9717
아래는 앞서 기술한 아미노산 함량 실험방법을 이용하여 나) 분쇄 다슬기와 슬러지의 용매 차이에 따른 아미노산 성분 분석 결과를 나타내었다.
[표 3]은 분쇄다슬기의 용매별, 효소 함량별 아미노산함량(mg/mL) 결과이다. 또한, 도 4는 [표 3]에 아미노산 중 류신의 함량을 그래프로 나타내었다.
[표 4]는 분쇄다슬기 슬러지의 용매별, 효소 함량별 아미노산함량(mg/mL) 결과이다. 또한, 도 5은 [표 4]에 나타난 아미노산 중 류신의 함량을 그래프로 나타내었다.
[표 3], [표 4], 도 4 및 도 5는 다슬기를 분쇄하여 효소를 처리하였을 때 다슬기의 표면적이 높아 효소분해가 잘 될 수 있을 것이란 생각에서 분해를 한 결과인데, 효소는 세가지 병행 효소를 0.5%, 1.0% 비율로 사용하여 분쇄다슬기+녹차추출물, 분쇄다슬기+녹차잎차+정제수의 두 가지 조건으로 분해하였을 때 Leucine함량은 3.484, 3.951, 3.252, 2.953mg/ml의 결과가 나왔으며, 다슬기를 분해 후 여과지에 남은 슬러지를 사용하여 분해하였을 때, Leucine함량은 3.455, 3.834, 3.215, 1.268mg/ml의 결과가 나왔는데, 분쇄하지 않은 다슬기의 Leucine함량이 더 높게 나왔음을 확인할 수 있다.
No 아미노산명 분쇄다슬기100g+녹차추출물 200mL 분쇄다슬기100g+녹차2g+증류수200ml
알칼라아제(Alcalase) 2.4L + 플라보자임(Flavourzyme) 500MG + 뉴트라제(Neutrase) 0.8L
0.5 % 1.0 % 0.5 % 1.0 %
1 O-Phospho-L-serine 0.147 0.247 0.202 0.149
2 Taurine 0.023 0.024 0.022 0.019
3 O-Phosphoethanolamine 0.007 0.000 0.006 0.011
4 Urea 0.014 0.009 0.008 0.013
5 L-Aspartic Acid 0.808 1.243 1.040 0.624
6 Hydroxy-L-proline 0.019 0.009 0.035 0.002
7 L-Threonine 0.988 1.408 1.158 0.737
8 Theanine 0.022 0.027 0.023 0.021
9 L-Serine 7.802 7.823 11.579 5.484
10 L-Asparagine 0.002 0.005 0.000 0.088
11 L-Glutamic Acid 0.023 0.028 0.038 0.029
12 D,L-α-Aminoadipic acid 0.000 0.000 0.001 0.000
13 Proline 0.001 0.000 0.021 0.000
14 Glycine 0.460 0.653 0.536 0.393
15 L-Alanine 1.727 2.337 1.870 1.583
16 L-citrulline 0.000 0.005 0.000 0.000
17 L-α-Amino-n-butyric acid 0.039 0.042 0.036 0.019
18 L-Valine 1.503 1.847 1.692 1.519
19 L-Cystine 0.126 0.077 0.083 0.103
20 L-Methionine 0.761 0.000 0.040 0.499
21 L-Isoleucine 1.326 1.634 1.355 1.186
22 L-Leucine 3.484 3.951 3.252 2.953
23 L-Tyrosine 1.445 1.465 1.340 1.146
24 L-Phenylalanine 1.637 1.758 1.538 1.371
25 b-Alanine 0.107 0.007 0.059 0.077
26 D,L-β-Aminoisobutyric acid 0.151 0.089 0.129 0.050
27 4-Amino-n-butyric acid 0.392 0.392 0.325 0.320
28 L-Histidine 0.556 0.692 0.585 0.490
29 3-Methyl-L-histidine 0.020 0.020 0.010 0.017
30 Tryphanhan 0.131 0.063 0.093 0.447
31 L-Ornithine-monohydrochloride 1.318 0.252 0.209 0.749
32 L-Lysine 1.983 2.539 2.150 1.699
33 L-Arginine 0.856 2.637 2.225 1.135
Totals 27.877 31.282 31.660 22.932
No 아미노산명 분쇄다슬기100g+녹차추출물 200mL 분쇄다슬기100g+녹차2g+증류수200ml
Alcalase 2.4L + Flavourzyme 500MG + Neutrase 0.8L
0.5 % 1.0 % 0.5 % 1.0 %
1 O-Phospho-L-serine 0.147 0.247 0.202 0.149
2 Taurine 0.023 0.024 0.022 0.019
3 O-Phosphoethanolamine 0.007 0.000 0.006 0.011
4 Urea 0.014 0.009 0.008 0.013
5 L-Aspartic Acid 0.808 1.243 1.040 0.624
6 Hydroxy-L-proline 0.019 0.009 0.035 0.002
7 L-Threonine 0.988 1.408 1.158 0.737
8 Theanine 0.022 0.027 0.023 0.021
9 L-Serine 7.802 7.823 11.579 5.484
10 L-Asparagine 0.002 0.005 0.000 0.088
11 L-Glutamic Acid 0.023 0.028 0.038 0.029
12 D,L-α-Aminoadipic acid 0.000 0.000 0.001 0.000
13 Proline 0.001 0.000 0.021 0.000
14 Glycine 0.460 0.653 0.536 0.393
15 L-Alanine 1.727 2.337 1.870 1.583
16 L-citrulline 0.000 0.005 0.000 0.000
17 L-α-Amino-n-butyric acid 0.039 0.042 0.036 0.019
18 L-Valine 1.503 1.847 1.692 1.519
19 L-Cystine 0.126 0.077 0.083 0.103
20 L-Methionine 0.761 0.000 0.040 0.499
21 L-Isoleucine 1.326 1.634 1.355 1.186
22 L-Leucine 3.484 3.951 3.252 2.953
23 L-Tyrosine 1.445 1.465 1.340 1.146
24 L-Phenylalanine 1.637 1.758 1.538 1.371
25 b-Alanine 0.107 0.007 0.059 0.077
26 D,L-β-Aminoisobutyric acid 0.151 0.089 0.129 0.050
27 4-Amino-n-butyric acid 0.392 0.392 0.325 0.320
28 L-Histidine 0.556 0.692 0.585 0.490
29 3-Methyl-L-histidine 0.020 0.020 0.010 0.017
30 Tryphanhan 0.131 0.063 0.093 0.447
31 L-Ornithine-monohydrochloride 1.318 0.252 0.209 0.749
32 L-Lysine 1.983 2.539 2.150 1.699
33 L-Arginine 0.856 2.637 2.225 1.135
Totals 27.877 31.282 31.660 22.932
아래는 앞서 기술한 아미노산 함량 실험방법을 이용하여 다) 다슬기 추출 방법 선정 결과를 나타내었다.
[표 5]은 다슬기 12시간 추출물의 효소 함량별 아미노산함량(mg/mL) 결과이다. 또한, 도 6는 [표 5]에 아미노산 중 류신의 함량을 그래프로 나타내었다.
[표 6]는 다슬기 24시간 추출물의 효소 함량별 아미노산함량(mg/mL) 결과이다. 또한, 도 7은 [표 6]에 나타난 아미노산 중 류신의 함량을 그래프로 나타내었다.
[표 5], [표 6], 도 6 및 도 7은 다슬기에 녹차추출물 1%를 혼합하고 Alcalase+Flavourzyme+Neutrase 세가지 병행효소를 각 1%, 2%, 3%의 비율로 혼합하고 12, 24시간동안 추출 및 분해하여 실험한 결과인데, Leucine함량은 12시간 샘플은 8.883(1%), 8.812(2%), 9.390(3%)mg/ml, 24시간 샘플은 9.482(1%), 9.800(2%), 7.716(3%)mg/ml로 결과가 높게 나왔음을 확인할 수 있다.
No 아미노산명 알칼라아제(Alcalase) 2.4L + 플라보자임(Flavourzyme) 500MG + 뉴트라제(Neutrase) 0.8L + 가루녹차 1%
효소
사용량
1% 효소
사용량
2% 효소
사용량
3%
1 O-Phospho-L-serine 0.417 0.730 0.786
2 Taurine 0.000 0.000 0.000
3 O-Phosphoethanolamine 0.027 0.059 0.000
4 Urea 0.000 0.000 0.000
5 L-Aspartic Acid 1.499 1.906 1.916
6 Hydroxy-L-proline 0.000 0.000 0.000
7 L-Threonine 3.488 4.137 4.450
8 Theanine 3.396 3.698 4.028
9 L-Serine 3.985 4.158 4.615
10 L-Asparagine 2.498 3.848 4.094
11 L-Glutamic Acid 0.000 0.000 0.000
12 D,L-α-Aminoadipic acid 0.098 0.609 0.575
13 Proline 0.000 0.604 0.330
14 Glycine 1.467 1.693 1.865
15 L-Alanine 3.659 4.078 4.431
16 L-citrulline 0.000 0.000 0.000
17 L-α-Amino-n-butyric acid 0.252 0.182 0.346
18 L-Valine 4.873 5.125 5.753
19 L-Cystine 0.323 0.253 0.340
20 L-Methionine 1.874 1.405 1.508
21 L-Isoleucine 3.943 4.246 4.665
22 L-Leucine 8.883 8.812 9.390
23 L-Tyrosine 4.273 3.943 4.284
24 L-Phenylalanine 4.229 4.244 4.583
25 b-Alanine 0.580 0.388 0.040
26 D,L-β-Aminoisobutyric acid 0.851 0.834 0.018
27 4-Amino-n-butyric acid 0.146 0.140 0.155
28 L-Histidine 1.623 1.668 1.856
29 3-Methyl-L-histidine 0.072 0.000 0.000
30 Tryphanhan 1.337 0.053 0.298
31 L-Ornithine-monohydrochloride 0.066 0.046 0.066
32 L-Lysine 5.953 6.134 6.690
33 L-Arginine 7.024 6.493 7.439
Totals 66.836 69.487 74.522
No 아미노산명 알칼라아제(Alcalase) 2.4L + 플라보자임(Flavourzyme) 500MG + 뉴트라제(Neutrase) 0.8L + 녹차추출물 1%
효소
사용량
1% 효소
사용량
2% 효소
사용량
3%
1 O-Phospho-L-serine 0.378 0.380 0.335
2 Taurine 0.000 0.000 0.000
3 O-Phosphoethanolamine 0.071 0.063 0.029
4 Urea 0.000 0.000 0.000
5 L-Aspartic Acid 1.924 1.968 1.338
6 Hydroxy-L-proline 0.568 0.109 0.104
7 L-Threonine 4.332 4.674 4.177
8 Theanine 3.684 3.146 1.957
9 L-Serine 0.020 0.624 0.000
10 L-Asparagine 4.780 7.376 6.684
11 L-Glutamic Acid 0.000 0.000 0.000
12 D,L-α-Aminoadipic acid 0.383 0.330 0.520
13 Proline 0.077 0.930 0.721
14 Glycine 2.108 2.588 2.128
15 L-Alanine 4.789 5.516 4.511
16 L-citrulline 1.235 0.080 0.000
17 L-α-Amino-n-butyric acid 0.000 0.049 0.000
18 L-Valine 5.317 6.039 4.958
19 L-Cystine 0.496 0.588 0.367
20 L-Methionine 2.137 2.121 1.574
21 L-Isoleucine 4.607 5.153 4.125
22 L-Leucine 9.482 9.800 7.716
23 L-Tyrosine 4.457 4.807 3.998
24 L-Phenylalanine 4.932 5.159 3.966
25 b-Alanine 0.539 0.261 0.246
26 D,L-β-Aminoisobutyric acid 0.674 0.580 0.504
27 4-Amino-n-butyric acid 0.134 0.120 0.000
28 L-Histidine 2.005 2.172 1.688
29 3-Methyl-L-histidine 0.000 0.000 0.000
30 Tryphanhan 0.000 0.000 0.000
31 L-Ornithine-monohydrochloride 6.536 1.000 2.107
32 L-Lysine 6.486 6.854 5.762
33 L-Arginine 0.714 7.329 4.499
Totals 72.865 79.819 64.015
결론적으로, 본 실험에서 추출시간은 12시간 및 24시간으로 추출하였고, 효소첨가량도 1%, 2%, 3%로 달리 첨가하여 분해하였을 때 대량생산을 위한 생산원가 등을 고려한다면 12시간 추출 및 1%의 효소첨가량이 최적 공정으로 적절하다고 판단할 수 있다.
아래는 앞서 기술한 다슬기 녹차겔, 영양성분 분석 실험방법을 이용하여 본 발명에 의해 제조된 다슬기 녹차겔의 영양성분을 [표 7]에 나타내었다. 본 발명에 의해 제조된 시제품인 다슬기 녹차겔을 ㈜한결분석센터에 영양성분 분석을 의뢰하였다.
제품명 시험항목 분석결과
(100g당 함량)
표시방법에
의한 결과
1일영양성분기준치에대한비율(%)
다슬기 녹차겔 열량 251.7 Kcal 252.0 Kcal
나트륨 11.6 mg 10 mg 1%
탄수화물 60.7 g 61 g 19%
당류 25.3 g 25 g 25%
지방 0.1 g 0 g 0%
트랜스지방 0.0 g 0 g -
포화지방 0.0 g 0 g 0%
콜레스테롤 0.0 mg 0 mg 0%
단백질 2.0 g 2 g 4%
아래는 앞서 기술한 다슬기 녹차겔 미량원소 분석 실험방법을 이용하여 본 발명에 의해 제조된 다슬기 녹차겔의 시간 및 효소별 추출물의 미량원소 함량(mg/kg) 분석결과를 [표 8]에 나타내었다. 본 발명에 의해 제조된 시제품인 다슬기 녹차겔을 효소 함량 1%, 2%, 3%에 따른 다슬기 추출물(12시간, 24시간 추출) 분말과 시제품인 다슬기 녹차겔을 미량원소 분석하였다.
시료 항목
나트륨(mg/kg) 칼슘(mg/kg) 칼륨(mg/kg) 철(mg/kg) 인(mg/kg)
1%, 12hr 12,270 15,730 2,691 825.2 4,000
1%, 24hr 15,200 17,280 3,266 805.9 4,708
2%, 12hr 30,280 11,420 2,724 355.6 2,456
2%, 24hr 28,340 16,060 2,974 722.9 3,659
3%, 12hr 44,780 10,200 2,781 174.0 1,681
3%, 24hr 41,950 11,840 3,082 348.2 2,991
다슬기 시간 및 효소별 추출물의 아미노산 함량은 [표 3 내지 6]에 나타내었다. 효소의 첨가량이 많아질수록 나트륨 함량이 높았으며 12hr 보다는 24hr 추출 하였을 때 나트륨이 함량이 높아 유의적인 차이를 나타내었다.
칼슘 함량은 근육, 신경 기능 조절, 혈액 응고에 도움이 되는 칼슘의 경우 효소 첨가량이 많아질수록 칼슘의 함량은 낮아 졌으며 12hr 보다는 24hr의 칼슘 함량이 높은 것으로 나타났다.
몸속의 노폐물 처리에 도움이 칼륨의 경우 효소 첨가량에 따라 큰 차이를 나타내지 않았으며 12hr과 24hr 추출에 대해서도 큰 차이를 나타내지 않았다.
철의 함량은 효소 첨가량이 많을수록 철의 함량은 1% → 2% (43% 감소) 2% → 3% (48% 감소) 큰 폭으로 감소 하였다.
인의 함량은 효소 첨가량이 많을수록 인의 함량은 1%에 비해 2% 약 40% 감소하였고 2%에 비해 3%는 31% 감소하였다. 12hr, 24hr 추출에 대해서도 감소하는 경향을 보여 유의적인 차이를 나타내었다.
아래는 앞서 기술한 다슬기 녹차겔 미량원소 분석 실험방법을 이용하여 본 발명에 의해 제조된 다슬기 녹차겔의 미량원소 분석(mg/kg) 결과를 [표 9]에 나타내었다.
시료 항목 농도
(ug/mL)
검체량
(g)
Volume
(mL)
희석
배수
계산값
(mg/kg)
표기값
(mg/kg)
다슬기
녹차겔
칼슘 3.826 0.2182 25 - 438.3 438.3
0.727 0.2182 25 - 83.29 83.3
0.004 0.2182 25 - 0.407 0.4
나트륨 0.575 0.2182 25 - 65.89 65.9
칼륨 6.152 0.2182 25 - 704.9 704.9
칼슘은 438.3 mg/kg, 인 83.3 mg/kg, 철 0.4 mg/kg, 나트륨 65.9 mg/kg, 칼륨 704.9 mg/kg을 나타내어 칼륨과 칼슘 함량이 높게 나타내었다.
아래는 본 발명에 의해 제조된 실시예 및 비교예를 이용하여 실시한 관능검사 결과를 나타내고자 한다.
본 검사는 주식회사 정옥에서 고령친화식품으로 개발한 레토르트 겔 1종의 소비자 기호도를 알아보기 위하여 실시하였다.
본 검사에 참여한 40~50대 여성패널 15명은 주식회사 식품환경연구센터에서 모집하였으며, 관능검사 이전에 평가 방법에 대하여 교육한 후 10명씩 관능검사 부스에서 평가를 진행하였다. 관능검사에 사용한 제품은 아래의 [도 8(A)]과 같다. 제품은 제공하기 전 전자렌지에 2분간 조리한 후 따뜻한 상태로 [도 8(B)]와 같이 제공하였으며, 세 자리 난수표를 이용하여 표기하였다.
관능검사는 7점 척도법을 사용하여 진행하였다. 기호도 평가속성은 ‘외관’, ‘색감’, ‘짠맛’, ‘비린맛’, ‘식감’, ‘후미’, ‘전체적인 기호도’에 대하여 검사하였으며, 정도 평가속성은 ‘색감’, ‘짠맛’, ‘비린맛’, ‘식감’, ‘후미’에 대하여 검사하였다. 기호도는 1점 ‘대단히 싫다’, 2점 ‘싫다’, 3점 ‘조금 싫다’, 4점 ‘보통이다’, 5점 ‘조금 좋다’, 6점 ‘좋다’, 7점 ‘대단히 좋다’로 평가하였다. 정도는 1점 ‘대단히 연하(약하/무르)다’, 2점 ‘연하(약하/무르)다’, 3점 ‘약간 연하(약하/무르)다’, 4점 ‘연하(약하/무르)지도 진(강/단단)하지도 않다’, 5점 ‘약간 진(강/단단)하다’, 6점 ‘진(강/단단)하다’, 7점 ‘대단히 진(강/단단)하다’로 평가하였다. 검사 중 패널간의 소통을 금하게 하여 객관적인 평가를 할 수 있도록 하였으며, 충분한 시간 동안 시료를 평가할 수 있게 하였다.
속성 샘플번호
764*
기호도 외관 4.73 ± 0.96
색감 4.40 ± 1.12
짠맛 3.40 ± 1.18
비린맛 3.47 ± 0.99
식감 4.67 ± 1.29
후미 4.20 ± 1.08
전체적인 기호도 4.0 ± 0.85
*764 : 레토르트 겔, 값 : 평균±표준편차, n=15
[표 10]는 40~50대 여성패널 15명을 대상으로 진행한 레토르트 겔의 속성별 기호도를 나타낸 결과이다. 본 제품의 외관, 색감, 식감, 후미, 전체적인 기호도는 4.73점, 4.40점, 4.67점, 4.20점, 4.0점으로 ‘보통이다’로 평가되었다. 짠맛, 비린맛의 기호도는 3.40점, 3.47점으로 ‘조금 싫다’로 평가되었다. 아래의 [도 9]는 40~50대 여성패널 15명을 대상으로 레토르트 겔의 관능검사 결과 중 각 속성별 기호도를 나타낸 결과 그래프이다.
속성 샘플번호
764*
정도 색감 4.87 ± 0.83
짠맛 4.93 ± 0.59
비린맛 4.73 ± 0.88
식감 3.80 ± 0.68
후미 4.47 ± 0.83
*764 : 레토르트 겔, 값 : 평균±표준편차, n=15
[표 11]은 40~50대 여성패널 15명을 대상으로 진행한 레토르트 겔의 특성별 정도를 나타낸 결과이다. 본 제품의 색감, 짠맛, 비린맛, 후미의 정도는 4.87점, 4.93점, 4.73점, 4.47점으로 연(약)하지도 진(강)하지도 않다’로 평가되었으며, 식감의 정도는 3.80점으로 ‘약간 무르다’로 평가되었다. 아래의 [도 10]은 40~50대 여성패널 15명을 대상으로 레토르트 겔의 관능검사 결과 중 각 속성별 정도를 나타낸 결과 그래프이다.
결론적으로, 40~50대 여성패널 15명을 대상으로 진행한 레토르트 겔 제품은 짠맛과 비린맛을 제외한 모든 항목은 4.00점 이상으로 ‘보통이다’로 평가되었다. 짠맛과 비린맛의 정도는 각각 4.93점, 4.73점으로 ‘약하지도 강하지도 않다’로 평가되었지만, 기호도가 3.40점, 3.47점으로 평가되어 짠맛과 비린맛의 정도를 낮출 필요가 있는 것으로 판단된다. 비린맛의 경우 후미에서는 큰 영향을 주지 않는 것으로 판단되는데, 이는 후미의 정도가 4.47점으로 비린맛의 정도가 큰 차이가 없지만, 기호도에선 4.20점으로 ‘보통이다’로 평가되었기 때문이다. 따라서 비린맛의 경우는 제품을 섭취하기 전 나타나는 비린맛에 대하여 개선할 필요가 있는 것으로 판단된다. 7점 척도법으로 관능검사를 진행한 경우 5.0점 이상을 ‘조금 좋다’로 평가하는데, 레토르트 겔의 관능검사 결과 전체적인 기호도가 4.0점으로 ‘보통이다’로 평가되었다. 본 제품의 기호도를 높이기 위해 짠맛과 비린맛에 대하여 개선할 필요가 있는 것으로 판단된다.
상기 과제의 해결 수단에 의해, 본 발명은 다슬기와 녹차의 유효성분을 추출하는 효과적인 방법을 제시할 수 있다.
또한, 본 발명은 다슬기와 녹차에서 추출된 추출물을 이용하여 노인을 위한 식품에 응용할 수 있는 유효 추출물을 제공할 수 있다.
또한, 본 발명은 다슬기와 녹차의 혼합물에서 아미노산의 함량을 증가시킬 수 있는 추출방법을 제공할 수 있다.
또한, 본 발명은 근감소증 개선을 위해 근관세포(myotube) 분화, 근육 단백질 성장 억제인자(Myostatin) 감소 및 근육 세포 특이 효소인 류신의 활성을 증가시킬 수 있는 추출물을 제공할 수 있다.
이와 같이, 상술한 본 발명의 기술적 구성은 본 발명이 속하는 기술분야의 당업자가 본 발명의 그 기술적 사상이나 필수적 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다.
그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적인 것이 아닌 것으로서 이해되어야 하고, 본 발명의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허청구범위에 의하여 나타나며, 특허청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 등가 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.
S100. 정제수 70중량%, 칡 10중량%, 헛개줄기 10중량%, 헛개열매 5중량% 및 천궁5 중량%를 혼합하여 혼합식물추출액을 제조하는 제1단계
S200. 다슬기 과육, 증류수 및 녹차추출물을 혼합하여 농축다슬기녹차추출액을 제조하는 제2단계
S210. 상기 다슬기 과육, 증류수, 녹차추출물을 혼합한 혼합물에 알칼라아제(Alcalase), 플라보자임(Flavourzyme) 및 뉴트라제(Neutrase) 효소을 혼합하는 제2-1단계
S220. 상기 효소가 혼합된 혼합물을 진탕배양기(shaking incubator)에서 추출하는 제2-2단계
S230. 상기 추출된 혼합물을 거름망으로 여과하는 제2-3단계
S240. 감압농축기로 30℃에서 40rpm 이하 및 30mbar 압력으로 농축하는 제2-4단계
S250. 100hPa 이하의 압력 및 -70℃ 이하의 온도로 동결건조하는 제2-5단계
S300. 카라기난 57.45중량%에 정제염 0.1중량%를 혼합하는 제3단계
S400. 상기 카라기난과 정제염 혼합물에 올리고당 15중량%, 상기 혼합식물추출액 15중량%, 상기 농축다슬기녹차추출액 12중량%, 비타민C 0.2중량%, 엽산 0.1중량%, 젖산칼슘 0.1중량% 및 구연산 0.05중량%를 혼합하는 제4단계
S500. 상기 제4단계에서 혼합된 혼합물을 100℃에서 20분 동안 가열하여 다슬기녹차겔을 제조하는 제5단계
S600. 상기 다슬기녹차겔을 용기에 넣고 밀봉 포장하는 제6단계
S700. 상기 밀봉 포장된 다슬기녹차겔을 멸균하는 제7단계

Claims (5)

  1. 정제수 70중량%, 칡 10중량%, 헛개줄기 10중량%, 헛개열매 5중량% 및 천궁5 중량%를 혼합하여 혼합식물추출액을 제조하는 제1단계;
    다슬기 과육, 증류수 및 녹차추출물을 혼합하여 농축다슬기녹차추출액을 제조하는 제2단계;
    카라기난 57.45중량%에 정제염 0.1중량%를 혼합하는 제3단계;
    상기 카라기난과 정제염 혼합물에 올리고당 15중량%, 상기 혼합식물추출액 15 중량%, 상기 농축다슬기녹차추출액 12중량%, 비타민C 0.2중량%, 엽산 0.1중량%, 젖산칼슘 0.1중량% 및 구연산 0.05중량%를 혼합하는 제4단계;
    상기 제4단계에서 혼합된 혼합물을 100℃에서 20분 동안 가열하여 다슬기녹차겔을 제조하는 제5단계;
    상기 다슬기녹차겔을 용기에 넣고 밀봉 포장하는 제6단계;
    상기 밀봉 포장된 다슬기녹차겔을 멸균하는 제7단계;를 통해 제조하되,
    상기 제2단계에서 농축다슬기녹차추출액은,
    상기 다슬기 과육, 증류수 및 녹차추출물에 뉴트라제(Neutrase), 알칼라아제(Alcalase) 및 플라보자임(Flavourzyme)을 혼합한 효소혼합물을 추가하는 것을 특징으로 하는 효소 분해에 따른 다슬기 및 녹차 추출물을 이용한 고령친화 다슬기 녹차 겔 제조 방법.
  2. 제 1항에 있어서,
    상기 농축다슬기녹차추출액은,
    상기 다슬기 과육 80중량%에 대하여 증류수 17중량%, 녹차추출물 3중량%를 혼합한 혼합물에 효소혼합물을 혼합하는 제2-1단계;
    상기 효소혼합물이 혼합된 혼합물을 진탕배양기(shaking incubator)에서 추출하는 제2-2단계;
    상기 추출된 혼합물을 거름망으로 여과하는 제2-3단계;
    감압농축기로 30℃에서 40rpm 이하 및 30mbar 압력으로 농축하는 제2-4단계;
    90hPa 내지 100hPa의 압력 및 -80℃ 내지 -70℃의 온도로 동결건조하는 제2-5단계;를 통해 제조하되,
    상기 효소혼합물은 상기 뉴트라제(Neutrase), 알칼라아제(Alcalase) 및 플라보자임(Flavourzyme)을 동량으로 혼합하는 것을 특징으로 하는 효소 분해에 따른 다슬기 및 녹차 추출물을 이용한 고령친화 다슬기 녹차 겔 제조 방법.
  3. 제 2항에 있어서,
    상기 효소혼합물은,
    상기 농축다슬기녹차추출액 1중량부에 대하여 상기 뉴트라제(Neutrase), 알칼라아제(Alcalase) 및 플라보자임(Flavourzyme) 각각 0.3 중량부 혼합하는 것을 특징으로 하는 효소 분해에 따른 다슬기 및 녹차 추출물을 이용한 고령친화 다슬기 녹차 겔 제조 방법.
  4. 삭제
  5. 제 1항 내지 제 3항 중 어느 한 항의 방법에 의해 제조되는 것을 특징으로 하는 효소 분해에 따른 다슬기 및 녹차 추출물을 이용한 고령친화 다슬기 녹차 겔.
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