KR102464415B1 - 편두통형 두통의 치료 또는 예방 방법 - Google Patents

편두통형 두통의 치료 또는 예방 방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편을 사용하는 편두통 예방 방법에 관한 것이다. 특히, 특정 투약법에 따라 환자에게 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편을 투여하는 것을 포함하는 이를 필요로 하는 환자에서 편두통형 두통의 발생을 예방 또는 감소시키는 방법이 개시되어 있다. 본 방법에 사용하기 위한 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편을 포함하는 약제학적 조성물 및 투여 장치가 또한 기재되어 있다.

Description

편두통형 두통의 치료 또는 예방 방법
관련 출원의 상호 참조
본 출원은 2015년 4월 24일에 출원된 미국 가출원 제62/152,708호의 이익을 주장하고, 이는 본원에 그 전문이 참조로 포함된다.
전자적으로 제출된 텍스트 파일의 설명
본 출원은 서열 목록을 포함하고, 이는 ASCII 포맷으로 전자적으로 제출되었고, 그 전문이 본원에 참조로 포함된다. 2015년 8월 3일에 생성된 서열 목적의 컴퓨터 가독 포맷 사본은 A-1945-WO-PCT_ST25.txt로 명명되고, 134 킬로바이트 크기이다.
본 발명의 기술분야
본 출원은 신경학 및 바이오의약품의 기술분야에 관한 것이다. 특히, 본 발명은 인간 칼시토닌 유전자-관련 펩티드 (CGRP) 수용체를 선택적으로 억제하는 항체를 사용하는 편두통의 예방적 치료에 관한 것이다.
편두통은 메스꺼움, 구토, 빛, 소리 및 동작에 대한 민감성을 포함할 수 있는 두통 및 관련 특징의 중증의 간헐적(episodic) 발병을 특징으로 하는 복합하고 일반적인 신경적 질병이다. 일부 환자에서, 두통은 감각적 경고 징후 또는 증상 (즉, 아우라)가 선행되거나 또는 동반된다. 두통 통증은 중증일 수 있고, 또한 특정 환자에서 편층성일 수 있다. 편두통 발병은 일상 생활, 업무 차질로의 매년 수십억 달러 및 손상된 업무능력에 지장을 준다 (문헌 [Modi and Lowder, Am. Fam. Physician, Vol. 73:72-78, 2006]).
편두통은 편두통 발병으로 고통받고 있는 유럽 인구의 대략 15% 및 미국 인구의 12%로 세계적으로 매우 만연된 질환이다 (문헌 [Lipton et al, Neurology, Vol. 68:343-349, 2007]). 추가적으로, 편두통은 수많은 정신의학적 및 의료적 동반 질환, 예컨대 우울증 및 혈관 장애와 관련되는 것으로 밝혀졌다 (문헌 [Buse et al., Neurol. Neurosurg. Psychiatry, Vol. 81:428-432, 2010; Bigal et al., Neurology, Vol.72:1864-1871, 2009]).
편두통형 두통은 통상적으로 진통제 및 트립탄으로 지칭되는 한 부류의 약물로 급성적으로 치료된다 (문헌 [Humphrey et al. Ann NY Acad Sci., Vol. 600:587-598, 1990; Houston and Vanhoutte, Drugs, Vol. 31:149-163 1986]). 선택적 세로토닌 5-HT1B/1D 효능제인 트립탄은 급성 편두통에 대한 효과적인 약물이고 잘 용인되지만, 관상동맥 혈관수축에 대한 이의 잠재성으로 인해 심혈관 질환의 존재시 약물 사용이 금지된다. 또한, 수많은 편두통 환자는 트립탄에 유리하게 반응하지 않는다. 53 시험의 메타 분석에서, 편두통을 가진 모든 환자의 최대 3분의 1 및 모든 편두통 발병의 40%는 트립탄에 반응하지 않았다 (문헌 [Ferrari et al., Lancet, Vol. 358:1668-1675, 2001]).
편두통 예방은 수많은 미충족된 의료 필요성이 있는 분야이다. 편두통 환자 집단의 대략 40%은 예방 요법이 유리할 것이다 (문헌 [Lipton et al., Neurology, Vol. 68:343-349, 2007]). 그러나, 환자의 단지 대략 12%는 이용가능한 예방 요법을 사용하여 부분적으로 제한된 효능 및 상당한 내성 및 안전성 문제점으로 인해 임의의 예방 요법을 받는다. 전압-의존적 나트륨 채널 및 특정 글루타메이트 수용체 (AMPA-카이네이트)를 차단하는 항경련제인 토피라메이트는 미국에서 편두통 예방을 위해 가장 흔히 사용되는 약물이다. 토피라메이트는 무작위 플라시보 대조군 시험을 통해 간헐적 및 만성적 편두통 환자 모두에서 실증된 효능을 갖는 유일한 편두통 예방적 제제이다 (문헌 [Diener et al., Cephalalgia, Vol. 27:814-823, 2007; Silberstein et al., Headache, Vol. 47:170-180, 2007]). 그러나, 환자의 대략 50%는 토피라메이트에 반응하지 못하고 저조하게 용인된다. 토피라메이트와 관련된 공통적인 부작용은 정신운동 완서증, 졸림, 언어 장애, 기억 및 집중의 곤란성을 비롯한 지각이상증, 식욕부진, 및 인지 부작용을 포함한다 (문헌 [Brandes et al., JAMA, Vol. 291:965-973, 2004; Adelman et al., Pain Med., Vol. 9:175-185 2008; Silberstein et al., Arch Neurol., Vol. 61:490-495, 2004]). 오픈-라벨(open-label)에 있어서, 가변적 복용 연구에서, 환자의 20%는 역효과로 인하여 토피라메이트를 포기하였다 (문헌 [Nelles et al., Headache, Vol. 49:1454-1465, 2009]).
따라서, 편두통 환자는 보다 효과적이고 및/또는 허용가능한 치료 선택사항에 대한 긴급한 의료적 필요성을 갖는다.
발명의 요약
본 발명은 부분적으로 최소의 부작용을 갖거나 부작용이 없이 이를 필요로 하는 환자에서의 편두통형 두통의 빈도, 중증도 및/또는 기간을 효과적으로 감소시키기 위한 치료적 요법의 확인에 기초한다. 따라서, 일 구현예에서, 본 발명은 환자에게 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 1개월 마다 약 35 mg 내지 약 210 mg의 용량으로 투여하는 단계를 포함하는, 이를 필요로 하는 환자에서 편두통형 두통의 발생을 예방하거나 감소시키는 방법을 제공한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 환자에게 1개월 당 약 35 mg 내지 약 210 mg 용량의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 투여하는 단계를 포함하는, 편두통에 대해 환자를 예방적으로 치료하는 방법을 제공한다.
본 방법의 일부 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편이 투여되지 않는 환자가 경험하는 1개월 당 편두통형 두통 일수 또는 치료하기 이전에 1개월 당 편두통형 두통 일수와 비교하여 환자가 경험하는 1개월 당 편두통형 두통 일수를 감소시키기 충분한 용량으로 환자에게 투여된다. 일부 구현예에서, 환자에게 투여되는 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 용량은 환자에서 1개월 당 편두통형 두통 일수를 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편이 투여되지 않는 환자가 경험하는 일수 또는 치료 이전의 일수와 비교하여 적어도 50% 감소시키기에 충분하다.
본 방법의 특정 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편이 투여되지 않는 환자가 경험하는 1개월 당 편두통형 두통의 시간 또는 치료하기 이전에 1개월 당 편두통형 시간과 비교하여 환자가 경험하는 1개월 당 편두통형 두통 시간을 감소시키기에 충분한 용량으로 환자에 투여된다. 본 방법의 다른 특정 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편이 투여되지 않는 환자가 경험하는 1개월 당 편두통-특이적 약물 사용 일수 또는 치료 이전의 1개월 당 편두통-특이적 약물 사용 일수와 비교하여 환자가 경험하는 1개월 당 편두통-특이적 약물 사용 일수를 감소시키기에 충분한 용량으로 환자에게 투여된다.
본 방법의 일부 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편이 투여되지 않는 환자가 경험하는 횟수 또는 치료 이전의 횟수와 비교하여 환자에서의 편두통형 두통으로 인한 신체적 손상의 일수를 감소시키기에 충분한 용량으로 환자에게 투여된다. 다른 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편이 투여되지 않는 환자가 경험하는 영향 또는 치료 이전의 영향과 비교하여 일상 활동에 대한 편두통형 두통의 영향을 감소시키기에 충분한 용량으로 환자에게 투여된다. 편두통형 두통 및 일상 활동에 대한 편두통형 두통의 영향으로 인한 신체적 손상은 본원에 기재된 수많은 입증된 설문지를 사용하여 평가할 수 있다.
본 방법의 특정 구현예에서, 1개월 당 편두통형 두통 일수, 1개월 당 편두통형 두통 시간수, 1개월 당 편두통-특이적 사용 일수, 이를 필요로 하는 환자에서의 일상 활동에 대한 편두통의 영향 및/또는 편두통으로 인한 신체적 손상을 감소시키기 충분한 용량은 1개월 당 약 35 mg 내지 약 210 mg이다. 일부 구현예에서, 충분한 용량은 1개월 당 약 70 mg 내지 약 140 mg이다. 하나의 특정 구현예에서, 충분한 용량은 1개월 당 약 70 mg이다. 다른 특정 구현예에서, 충분한 용량은 1개월 당 약 140 mg이다. 이러한 다른 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 용량은 1개월에 한번 투여된다 (QM).
본 방법의 일부 구현예에서, 본원에 기재된 용량으로의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 투여는 환자에서 유해한 부작용을 실질적으로 야기하지 않는다. 특히, 본원에 기재된 용량으로의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 투여는 항간질제, 베타-차단제, 및 항우울제와 관련된 유해한 부작용을 비롯하여 다른 편두통 예방적 치료와 관련된 유해한 부작용을 실질적으로 야기하지 않는다. 특정 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편의 투여와 관련된 유해한 부작용의 수 및 유형은 플라시보의 투여와 관련된 유해한 부작용의 수 및 유형과 통계적으로 상이하지 않다.
본 명세서에서 기재된 방법의 특정 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 환자에게 비경구 투여된다. 특정 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 환자에게 피하 주사로 투여된다. 일 구현예에서, 피하 주사는 환자에게 1개월에 1회로 환자에게 투여되는 볼러스 주사이다. 피하 주사는 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 1개월 당 용량을 함유하는 사전 충전 주사기 또는 자동주사기(autoinjector)로 환자에게 전달될 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 방법에 따라 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편이 투여될 환자는 간헐적 편두통을 갖거나 갖는 것으로 진단된 환자이다. 간헐적 편두통은 낮은 빈도의 간헐적 편두통 또는 높은 빈도의 간헐적 편두통일 수 있다. 다른 구현예에서, 본 발명의 방법에 따라 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편이 투여될 환자는 만성 편두통을 갖거나 갖는 것으로 진단된 환자이다.
본 발명의 방법의 특정 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편이 투여될 환자는 편두통형 두통에 대한 임의의 예방 요법을 사전에 받지 않았다 (즉, 환자는 치료 경험이 없다). 본 발명의 방법의 다른 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편이 투여될 환자는 적어도 하나의 다른 편두통 예방 요법에서 효과가 없거나 또는 불내성이다. 따라서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편이 투여될 환자는 일부 구현예에서 적어도 하나의 항간질제 (예를 들어, 토피라메이트, 발프로산), 삼환계 항우울제 (예를 들어, 아미트립틸린), 베타-차단제 (예를 들어, 프로프라놀롤, 티몰롤), 또는 보툴리늄 독소 A에 대해 효과가 없거나 또는 불내성이다. 일 구현예에서, 환자는 2개의 선행 편두통 예방 요법에 대해 효과가 없거나 또는 불내성이다. 또 다른 구현예에서, 환자는 3개의 선행 편두통 예방 요법에 대해 효과가 없거나 또는 불내성이다.
본원에 개시된 방법의 임의의 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 인간 CRLR 및 인간 CGRP 수용체의 인간 RAMP1 폴리펩티드 성분 모두에서 아미노산으로 형성된 에피토프에 특이적으로 결합되고, 인간 AM1, AM2, 및/또는 아밀린 수용체와 비교하여 인간 CGRP 수용체를 선택적으로 억제한다. 일부 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 항원-결합 단편은 KD ≤ 100 nM로 인간 CGRP 수용체에 특이적으로 결합된다. 다른 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 항원-결합 단편은 KD ≤ 10 nM로 인간 CGRP 수용체에 특이적으로 결합된다.
일 구현예에서, 본 발명의 방법에 따라 환자에게 투여되는 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 서열번호: 14의 서열을 갖는 CDRH1, 서열번호: 23의 서열을 갖는 CDRH2, 서열번호: 34의 서열을 갖는 CDRH3, 서열번호: 44의 서열을 갖는 CDRL1, 서열번호: 55의 서열을 갖는 CDRL2, 및 서열번호: 65의 서열을 갖는 CDRL3을 포함한다. 다른 구현예에서, 본 발명의 방법에 따라 환자에게 투여되는 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 서열번호: 15의 서열을 갖는 CDRH1, 서열번호: 29의 서열을 갖는 CDRH2, 서열번호: 35의 서열을 갖는 CDRH3, 서열번호: 45의 서열을 갖는 CDRL1, 서열번호: 61의 서열을 갖는 CDRL2 및 서열번호: 66의 서열을 갖는 CDRL3을 포함한다.
본 발명의 방법에 사용하기 적합한 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 서열번호: 92의 서열을 포함하는 중쇄 가변 부위 및 서열번호: 80의 서열을 포함하는 경쇄 가변 부위를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 본 발명의 방법에 사용되는 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 서열번호: 98의 서열을 포함하는 중쇄 가변 부위 및 서열번호: 84의 서열을 포함하는 경쇄 가변 부위를 포함한다. 특정 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체는 인간 IgG1 불변 부위 또는 인간 IgG2 불변 부위를 갖는다. 일 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체는 서열번호: 105의 서열을 포함하는 중쇄, 및 서열번호: 123의 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 다른 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체는 서열번호: 111의 서열을 포함하는 중쇄, 및 서열번호: 127의 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다.
본원의 표 7에 기재된 임의의 특이적 항체 또는 그의 항원-결합 단편이 본 발명의 방법에 사용될 수 있다. 특정 구현예에서, 본 발명의 방법에 따라 환자에게 투여되는 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편은 4E4 항체 또는 그의 결합 단편이다. 다른 구현예에서, 본 발명의 방법에 따라 환자에게 투여되는 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편은 9F5 항체 또는 그의 결합 단편이다.
본 발명은 또한 본원에 기재된 방법에 사용하기 위한 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 약제학적 조성물을 제공한다. 약제학적 조성물은 완충액, 계면활성제, 및 안정화제를 비롯하여 1종 이상의 약제학적으로 허용가능한 희석제, 캐리어, 또는 부형제를 포함할 수 있다. 특정 구현예에서, 약제학적 조성물은 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 완충액, 계면활성제, 및 안정화제를 포함한다. 일 구현예에서, 약제학적 조성물은 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 아세테이트 완충액, 폴리소르베이트 20 또는 폴리소르베이트 80, 및 수크로오스를 포함한다. 본원에 기재된 임의의 약제학적 조성물은 본원에 기재된 방법에 따라 환자에게 투여 (예를 들어, 피하 투여)하기 위한 자가-투여 장치, 예컨대 사전 충전 주사기 또는 자동주사기에 혼입될 수 있다.
따라서, 본 발명은 또한 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 아세테이트 완충액, 수크로오스, 및 폴리소르베이트를 포함하는 약제학적 조성물을 포함하는, 이를 필요로 하는 환자에서의 편두통형 두통을 예방적으로 치료하는데 사용하기 위한 사전 충전 주사기 또는 자동주사기를 포함한다. 일부 구현예에서, 사전 충전 주사기 또는 자동주사기는 약 4.8 내지 약 5.5의 pH에서 약 70 mg/mL 내지 약 140 mg/ml의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 약 10 mM 내지 약 15 mM의 아세트산나트륨, 약 0.008% 내지 약 0.012% w/v의 폴리소르베이트, 및 약 8% 내지 약 9% w/v의 수크로오스를 포함하는 약제학적 조성물을 포함한다. 특정 구현예에서, 사전 충전 주사기 또는 자동주사기의 주사 용량은 약 1 ml 이하이다.
일부 구현예에서, 본 발명은 또한 본원에 개시된 약제학적 조성물 또는 자가-투여 장치, 및 예를 들어 이를 필요로 하는 환자에서 편두통형 두통을 예방적으로 치료하기 위한 피하 주사에 의해 치료적으로 효과적인 용량을 전달하기 위한 약제학적 조성물 또는 자가-투여 장치를 사용하기 위한 지침서를 포함하는 키트를 제공한다. 약제학적 조성물이 동결건조된 또는 건조 분말 형태로 제공되는 구현예에서, 상기 키트는 투여 이전에 약제학적 조성물을 재구성하기 위한 희석제 및 지침서를 포함할 수 있다.
본원에 개시된 임의의 방법에서의 또는 본원에 개시된 임의의 방법에 따라 투여하기 위한 약제의 제제를 위한 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 사용이 구체적으로 고려된다. 예를 들어, 본 발명은 이를 필요로 하는 환자에서 편두통형 두통의 발생을 예방하거나 감소시키는 방법에 사용하기 위해 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하고, 상기 방법은 환자에게 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편을 1개월 당 약 35 mg 내지 약 210 mg의 용량으로 투여하는 것을 포함한다. 본 발명은 또한 편두통형 두통에 대해 환자를 예방적으로 치료하는 방법에 사용하기 위해 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하고, 상기 방법은 환자에게 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편을 1개월 당 약 35 mg 내지 약 210 mg의 용량으로 투여하는 것을 포함한다.
본 발명은 또한 이를 필요로 하는 환자에서 편두통형 두통의 발생을 예방하거나 감소시키기 위한 약제의 제조에 있어서의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 용도를 포함하고, 여기서 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편은 1개월 당 약 35 mg 내지 약 210 mg의 용량이다. 본 발명은 추가로 편두통형 두통에 대해 환자를 예방적으로 치료하기 위한 약제의 제조에 있어서의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 용도를 포함하고, 여기서 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편은 1개월 당 약 35 mg 내지 약 210 mg의 용량이다.
도 1은 건강한 인간 대상체 및 편두통 환자에서의 캡사이신-유도 진피 혈류 (DBF)의 억제 백분율을 AMG 334 단일클론성 항체의 혈청 농도의 함수로서 도시한다.
도 2는 건강한 인간 대상체 및 편두통 환자에게 AMG 334를 단일 투여 및 반복 투여 (매4주 1회; Q4W)로 피하 (SC) 투여한 후에 시간에 따른 캡사이신-유도 진피 혈류 (DBF)의 억제 백분율 및 AMG 334 단일클론성 항체의 혈청 농도를 나타낸다. 최대 DBF 억제의 기간은 투여 농도-DBF 관계와 일치한다.
도 3a는 AMG 334 또는 상응하는 플라시보의 단일의 증가 용량을 피하 (SC) 또는 정맥내 (IV) 투여받은 건강한 인간 대상체 (HS) 및 편두통 환자 (MP)에서의 평균 혈청 AMG 334 농도-시간 프로파일을 도시한다.
도 3b는 AMG 334 또는 플라시보를 제1일, 제29일, 및 제57일에 다중 피하 (SC) 투여받은 건강한 인간 대상체 (HS) 및 편두통 환자 (MP)에서의 평균 혈청 AMG 334 농도-시간 프로파일을 도시한다.
도 4a는 단일의 증가된 용량 연구에서 건강한 대상체 및 편두통 환자에서 AMG 334 또는 플라시보의 단일 피하 (SC) 투여 4일 후 캡사이신-유도 진피 혈류의 억제 백분율을 나타낸다.
도 4b는 다중 투여 연구에서 건강한 대상체 및 편두통 환자에서 3회 투여의 AMG 334 중 첫번째 투여 또는 플라시보의 피하 (SC) 투여 8일 후 캡사이신-유도 진피 혈류의 억제 백분율을 나타낸다.
도 5는 플라시보 또는 CGRP 수용체에 대한 인간 단일클론성 항체인 AMG 334의 3가지 1개월 당 피하 용량 (7 mg, 21 mg, 또는 70 mg) 중 하나를 투여받은 간헐적 편두통 환자에서 평균 1개월 당 편두통 일수에 있어서 기준치로부터의 변화를 나타낸다.
도 6은 플라시보 또는 CGRP 수용체에 대한 인간 단일클론성 항체 (AMG 334)의 3가지 1개월 당 피하 용량 (7 mg, 21 mg, 또는 70 mg) 중 하나를 투여받은 간헐적 편두통 환자에서 급성 편두통-특이적 약물 (예를 들어, 트립탄, 에르고타민)의 1개월 당 사용 일수에 있어서 기준치로부터의 변화를 나타낸다.
도 7a는 플라시보 또는 1개월에 1회로 항-CGRP 수용체 항체 (AMG 334)의 70 mg 피하 주사를 투여받은 낮은 빈도의 간헐적 편두통 환자 (기준치에서의 8 미만의 편두통형 두통 일수) 및 높은 빈도의 간헐적 편두통 환자 (기준치에서의 8일 이상의 편두통형 두통 일수)에서 평균 1개월 당 편두통 일수에 있어서 기준치로부터의 변화를 도시한다.
도 7b는 선행 예방적 편두통 치료의 경험이 없거나 그러한 치료에 실패하고 플라시보 또는 1개월에 1회로 항-CGRP 수용체 항체 (AMG 334)의 70 mg 피하 주사를 투여받은 간헐적 편두통 환자에서 평균 1개월 당 편두통 일수에 있어서 기준치로부터의 변화를 도시한다.
도 8은 플라시보 또는 항-CGRP 수용체 항체 (AMG 334)의 3가지 1개월 당 피하 용량 (7 mg, 21 mg, 또는 70 mg) 중 하나를 투여받은 간헐적 편두통 환자에서 평균 1개월 당 편두통 일수에 있어서 기준치로부터의 변화를 나타낸다. 연구의 12주 이중 맹검 단계 이후, 4개의 치료 그룹 각각의 환자는 연구의 오픈 라벨 연장 단계 동안 항-CGRP 수용체 항체를 70 mg의 1개월 당 피하 용량으로 투여받았다. 데이터는 이중 맹검 단계 동안의 최소제곱평균(least square mean) 및 표준 오차 및 오픈-라벨 연장 단계 동안의 평균 및 표준 오차를 나타낸다.
도 9a는 플라시보 또는 항-CGRP 수용체 항체 (AMG 334)의 3가지 1개월 당 피하 용량 (7 mg, 21 mg, 또는 70 mg) 중 하나를 투여받은 간헐적 편두통 환자에서 1개월 당 두통 일수에 있어서 기준치로부터의 변화를 나타낸다. 연구의 12주 이중 맹검 단계 이후, 4개의 치료 그룹 각각의 환자는 연구의 오픈 라벨 연장 단계 동안 항-CGRP 수용체 항체를 70 mg의 1개월 당 피하 용량으로 투여받았다. 데이터는 이중 맹검 단계 동안의 최소제곱평균 및 표준 오차 및 오픈-라벨 연장 단계 동안의 평균 및 표준 오차를 나타낸다.
도 9b는 플라시보 또는 항-CGRP 수용체 항체 (AMG 334)의 3가지 1개월 당 피하 용량 (7 mg, 21 mg, 또는 70 mg) 중 하나를 투여받은 간헐적 편두통 환자에서 1개월 당 편두통-특이적 약물 (예를 들어, 트립탄, 에르고타민)의 사용 일수에 있어서 기준치로부터의 변화를 나타낸다. 연구의 12주간 이중맹검 단계 이후, 4개의 치료 그룹 각각의 환자는 연구의 오픈 라벨 연장 단계 동안 항-CGRP 수용체 항체를 70 mg의 1개월 당 피하 용량으로 투여받았다. 데이터는 이중 맹검 단계 동안의 최소제곱평균 및 표준 오차 및 오픈-라벨 연장 단계 동안의 평균 및 표준 오차를 나타낸다.
인간 환자에서의 편두통형 두통을 치료하기 위한 현재 이용가능한 요법은 수많은 환자가 견딜 수 없거나 또는 견디기를 거부하는 유해한 부작용으로 인해 좋지 않은 이익-위험 프로파일을 갖는다. 본 발명은 부작용이 없거나 또는 최소 부작용으로 효과적인 편두통 예방을 제공하는 항-CGRP 수용체 항체의 신규한 요법을 제공함으로써 이러한 문제점을 부분적으로 해결한다. 본원에 기재된 본 발명의 방법은 간헐적 편두통 뿐만 아니라 만성 편두통을 앓고 있는 환자에서 편두통형 두통의 빈도, 중증도, 및/또는 지속기간을 효과적으로 감소시킬 수 있다.
편두통형 두통은 편측성, 맥동성, 및/또는 보통 내지 중증의 통증 및/또는 신체 활동에 의해 악화되는 통증을 특징으로 하고 약 4 내지 약 72 시간 동안 지속되는 재발성 두통이다. 편두통형 두통은 대개 메스꺼움, 구토, 및/또는 광 (광선 공포증), 소리 (소리공포증), 또는 냄새에 대한 민감성을 동반한다. 일부 환자에서, 아우라는 편두통형 두통의 개시에 선행된다. 아우라는 전형적으로 두통이 곧 발생할 것이라는 것을 신호를 주는 시각, 감각, 언어, 또는 행동 장애이다. 본원에 기재된 방법은 인간 환자에서 아우라가 있거나 없는 편두통형 두통의 하나 이상의 증상을 예방, 치료 또는 완화한다.
일 구현예에서, 본 발명은 이를 필요로 하는 환자에서 편두통형 두통의 발생을 예방하거나 감소시키는 방법으로서, 환자에게 치료 유효량의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 포함하는 약제학적 조성물을 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다. 용어 "환자"는 인간 환자를 포함한다. 본원에 사용되는 "편두통형 두통의 발생을 예방하거나 감소시킴"은 조성물 투여 이전의 편두통형 두통의 빈도, 지속기간 또는 중증도와 비교하여, 또는 조성물을 투여하지 않은 환자 (즉, 대조군 대상체)에서의 편두통형 두통의 빈도, 지속기간 또는 중증도와 비교하여 편두통형 두통의 빈도, 지속기간 또는 중증도에 있어서의 감소를 지칭한다. 따라서, 특정 구현예에서, 본 발명은 치료 유효량의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 포함하는 약제학적 조성물을 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 편두통형 두통에 대해 환자를 예방적으로 치료하는 방법을 제공한다. "예방적 치료"는 환자에서의 편두통형 두통의 빈도, 중증도 및/또는 기간을 감소시키기 위해 편두통 발병 이전에 취해지도록 설계된 치료를 지칭한다. 일부 구현예에서, 예방적 치료는 급성 편두통-특이적 약물의 효과 또는 그에 대한 환자 반응을 증가시킬 수 있다.
본 발명의 방법의 일부 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 투여는 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편의 투여 이전 (즉, 치료전 기준치)의 일수와 비교하여 및/또는 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편을 투여받지 않은 환자가 경험하는 일수와 비교하여, 1개월의 과정에 걸쳐 환자가 경험하는 편두통형 두통의 일수를 감소시킨다. "편두통형 두통 일수"는 그 과정에서 환자가 30분 초과로 지속되는 아우라가 있거나 아우라 없이 "편두통형 두통"의 개시, 지속 또는 재발을 경험하는 임의의 달력상의 일을 포함한다. "편두통형 두통"은 메스꺼움 또는 구토 또는 광 또는 소리에 대한 민감성과 관련된 두통 및/또는 하기 통증 특징: 편측성 통증, 맥동성 통증, 보통 내지 중증 통증 강도, 또는 신체 활동에 의해 악화된 통증 중 적어도 2개를 특징으로 하는 두통이다. 치료전 기준치는 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편의 투여 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6개월 이상 이전에 관련 파라미터 (예를 들어, 편두통형 두통 일수)를 결정함으로써 확립될 수 있다. 일부 구현예에서, 치료전 기준치는 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편의 투여 3개월 전의 특정 파라미터의 측정에 기초하여 확립된다.
특정 구현예에서, 환자가 경험하는 1개월 당 편두통형 두통 일수는 치료전 기준치 및/또는 대조군 대상체 (즉, 항체 또는 결합 단편을 투여받지 않은 환자)와 비교하여 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편의 투여 이후 약 10%, 약 15%, 약 20%, 약 25%, 약 30%, 약 35%, 약 40%, 약 45%, 약 50%, 약 55%, 또는 약 60% 감소된다. 일부 구현예에서, 환자가 경험하는 1개월 당 편두통형 두통 일수는 치료전 기준치 및/또는 대조군 대상체와 비교하여 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편의 투여 이후 65% 이상, 예를 들어, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 또는 적어도 약 80% 감소된다. 일 구현예에서, 환자가 경험하는 1개월 당 편두통형 두통 일수는 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편의 투여 이후 적어도 50% 감소된다. 다른 구현예에서, 환자가 경험하는 1개월 당 편두통형 두통 일수는 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편의 투여 이후 적어도 75% 감소된다.
편두통형 두통의 발생의 감소는 또한 치료전 기준치 및/또는 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편을 투여받지 않은 환자가 경험하는 시간과 비교하여 1개월 기간에 걸쳐 환자가 경험하는 편두통형 두통 시간수에서의 감소로서 평가될 수 있다. "편두통형 두통 시간"은 환자가 아우라가 있거나 없는 "편두통형 두통"의 개시, 지속 또는 재발을 경험하는 임의의 시간이다. 특정 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 투여는 치료전 기준치 및/또는 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편을 투여받지 않은 대조군 대상체에서의 수와 비교하여 환자가 경험하는 1개월 당 편두통형 두통 시간수를 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 또는 적어도 약 70% 감소시킨다.
본원에 기재된 치료 요법의 효능은 또한 환자가 편두통-특이적 약물로의 급성 치료를 필요로 하는 일수, 환자가 편두통으로 인해 신체적 또는 기능적으로 손상된 일수, 또는 환자가 경험하는 편두통 발병의 수와 관련하여 평가될 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 투여는 치료전 기준치 및/또는 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편을 투여받지 않은 환자가 경험하는 일수와 비교하여 환자가 1개월 기간에 걸쳐 급성 편두통 치료의 사용을 필요로 하는 일수를 감소시킨다. 본원에 사용되는 용어 "급성 편두통-특이적 약물 치료일" 또는 "급성 편두통-특이적 약물 사용일"은 환자가 편두통에 특이적인 약물을 사용하는 동안의 임의의 달력상의 일을 지칭한다. 급성 편두통-특이적 약물은 비제한적으로 트립탄 (예를 들어, 알모트립탄, 프로바트립탄, 리자트립탄, 수마트립탄, 나라트립탄, 엘레트립탄, 및 졸미트립탄), 에르고타민 (예를 들어, 카페인이 있는 에르고타민 및 디하이드로에르고타민), 비-스테로이드 항-염증성 약물 (예를 들어, 아세틸살리실산, 이부프로펜, 나프록센, 인도메타신, 및 디클로페낙), 및 오피오이드 (예를 들어, 코데인, 모르핀, 하이드로코돈, 펜타닐, 메페리딘, 및 옥시코돈)을 포함한다. 1개월 당 급성 편두통-특이적 약물 치료의 일수는 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 투여 이후 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 또는 적어도 약 85% 감소될 수 있다. 특정 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 투여는 급성 편두통-특이적 약물의 사용에 대한 필요성을 완전하게 근절한다.
일부 구현예에서, 본원에 기재된 방법에 따른 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 투여는 치료전 기준치 및/또는 항-CGRP 수용체 항체를 투여받지 않은 환자와 비교하여 환자에 의해 보고된 신체적 손상 또는 삶의 질 영향 평점을 감소시킬 수 있다. 편두통형 두통은 대개 환자의 삶의 질에 영향을 미치고, 이들이 여가 및 일상 생활을 하지 못하게 할 뿐만 아니라 환자의 직업에서의 생산성의 손실을 야기한다. 이들 영향은 입증된 설문지 및 조사, 예컨대 변형된 편두통 장애 평가 설문지 (MIDAS), 두통 영향 시험-6 (HIT-6), 편두통-특이적 삶의 질 설문지 (MSQ), 편두통 작용 영향 설문지 (MFIQ), 및 편두통 신체 기능 영향 다이어리 (MPFID)를 사용하여 평가될 수 있다. 따라서, 본 발명의 방법은 이들 설문지 중 하나 이상으로 평가되는 바와 같이 하나 이상의 측면의 환자의 삶의 질을 개선하고 및/또는 하나 이상의 측면의 환자의 신체적, 사회적, 또는 정서적 기능에 대한 편두통의 영향을 감소시킨다.
MIDAS는 직장 및 가정에서의 과거 1개월에 걸쳐 손실된 생산 일수를 합한 5개 항목의 자기 기입식 설문지이다. MIDAS는 또한 가족, 사회, 및 여과 활동에서의 장애를 평가한다. MIDAS 평점은 직장 업무, 가정, 및 비직업 (가족, 사회, 여과) 활동에 있어서 두통으로 인한 손실 일수; 및 생산성이 적어도 절반으로 감소된 직장 업무 또는 가정일에서의 일수의 합이다. 평점은 4개의 중증도 등급: 등급 I = 0 - 5 (최소 또는 드문 장애로 정의됨), 등급 II = 6 - 10 (경미한 또는 드문 장애), 등급 III = 11 - 20 (중간 정도의 장애), 및 등급 IV = 21 이상 (중증 장애)로 분류된다. 특정 구현예에서, 본 발명의 방법에 따른 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 투여는 치료 이전의 환자의 평점 또는 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편을 투여받지 않은 환자의 평점과 비교하여 환자의 MIDAS 평점을 감소시킨다 (즉, 중증도 등급을 감소시키고/편두통에 의해 야기된 장애의 빈도 또는 중증도를 감소시킨다).
MSQ는 (i) 편두통이 어떻게 환자의 일상의 사회적 및 업무-관련 활동을 제한하는지 (역할 기능 제한), (ii) 편두통이 이러한 활동을 어떻게 방해하는지 (역할 기능 방해), 및 (iii) 환자의 편두통과 관련된 감정 (정서 기능)을 측정하는 자기 기입식의 14개 항목의 기재이다. 환자는 6-포인트 크기: 각각 1 내지 6이 배정된 평점인 "시간 없음", "약간의 시간", "일부의 시간", "상당한 정도의 시간", "대부분의 시간", 및 "모든 시간"을 사용하여 항목에 응답한다. 원시(raw dimension) 크기 평점은 항목 응답의 합으로서 계산되고, 더 높은 평점이 더 나은 삶의 질을 나타내도록 0 내지 100 크기로 재설계된다. 일부 구현예에서, 본 발명의 방법에 따른 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 투여는 치료 이전의 환자의 평점 또는 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편을 투여받지 않은 환자의 평점과 비교하여 MSQ에 대한 환자의 평점을 증가시킨다 (즉, 환자의 삶의 질이 개선된다).
MFIQ는 더 넓은 기능성에 대한 편두통의 영향을 측정하기 위한 자기 기입식의 26개 항목의 기재이다. 구체적으로, 이는 신체 기능성, 일상 활동, 사회적 기능성, 및 정서 기능성에 대한 영향을 측정한다. 대상체는 1 내지 5 평점으로 배정되는 5-포인트 크기를 사용하여 항목에 응답하고, 5는 최대 부하(burden)을 나타낸다. 평점은 항목 응답의 합으로 계산되고, 합은 0 - 100 크기로 재설계되고, 더 높은 평점은 더 큰 부하를 나타낸다. 특정 구현예에서, 본 발명의 방법에 따른 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 투여는 치료 이전의 환자의 평점 또는 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편을 투여받지 않은 환자의 평점과 비교하여 MFIQ에 대한 환자의 평점을 감소시킨다 (즉, 환자의 기능성에 대한 편두통의 영향이 감소된다).
MPFID는 신체 기능성을 측정하기 위한 자기 기입식의 13개 항목의 기재이다. 이는 일상 생활 및 신체적 손상에 대한 영향을 평가한다. 대상체는 5-포인트 크기를 사용하여 항목에 응답하고, 곤란성 항목은 "임의의 곤란성 없음" 내지 "생활할 수 없음" 범위이고, 빈도 항목은 "시간 없음" 내지 "모든 시간"의 범위이다. 이들은 1 내지 5 평점으로 배정되고, 5는 최대 부하를 나타낸다. 평점은 항목 응답의 합으로 계산되고, 합은 0 - 100 크기로 재설계되고, 더 높은 평점은 편두통의 더 큰 영향 (즉, 더 높은 부하)를 나타낸다. 일부 구현예에서, 본 발명의 방법에 따른 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 투여는 치료 이전의 환자의 평점 또는 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편을 투여받지 않은 환자의 평점과 비교하여 MPFID에 대한 환자의 평점을 감소시킨다 (즉, 환자의 신체 기능 또는 일상 활동에 대한 편두통의 영향이 감소된다). 하나의 특별한 구현예에서, 환자에게의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 투여는 치료 이전의 환자의 평점 또는 대조군 대상체 (즉, 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편을 투여받지 않은 대상체)와 비교하여 환자의 신체적 손상 평점을 적어도 약 50% 감소시킨다. 일부 구현예에서, MPFID에 의해 측정되는 신체적 손상의 평균 1개월 당 일수는 치료 이전의 일수 또는 대조군 대상체에서의 신체적 손상의 평균 1개월 당 일수와 비교하여 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 투여 이후에 환자에서 감소된다. 또 다른 특정 구현예에서, 환자에게의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 투여는 치료 이전의 환자의 평점 또는 대조군 대상체의 평점과 비교하여 MPFID에 의해 측정된 일상 활동 평점에 대한 환자의 영향을 적어도 약 50% 감소시킨다. 일부 구현예에서, MPFID에 의해 측정되는 일상 활동에 대한 영향의 평균 1개월 당 일수는 치료 이전의 일수 또는 대조군 대상체에서의 일상 활동에 대한 영향의 평균 1개월 당 일수와 비교하여 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 투여 이후 환자에서 감소된다.
본 발명의 방법의 특정 구현예에서, 환자가 경험하는 편두통 발병의 수는 치료 이전에 환자가 경험하는 편두통 발병의 수 또는 대조군 대상체가 경험하는 편두통 발병의 수와 비교하여 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 투여 이후에 감소된다. 본원에 사용되는 용어 "편두통 발병"은 본원에 정의된 바와 같은 임의의 편두통형 두통의 사건을 지칭한다. 수면을 방해하거나 또는 일시적으로 늦춰진 후 48시간 이내에 재발하는 편두통 발병은 일반적으로 단일 발병으로 고려된다. 마찬가지로, 급성 편두통-특이적 약물로 성공적으로 치료되나, 48시간 이내에 재발되는 편두통 발병 또한 단일 발병으로 고려된다. 일부 구현예에서, 편두통 발병의 수는 치료 이전의 발병의 수 또는 대조군 대상체에서의 발병의 수와 비교하여 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 투여 이후에 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 또는 적어도 약 75% 감소된다.
일부 구현예에서, 본 발명의 치료 요법은 이를 필요로 하는 환자에서 편두통과 관련된 하나 이상의 증상을 완화시킨다. 예로서, 본원에 기재된 방법에 따라 환자에게 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편을 투여하는 것은, 대조군 대상체 (즉, 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편을 투여받지 않은 대상체)와 비교하여 환자에서 하나 이상의 증상의 발생을 감소시키거나 또는 이를 치료한다. 본 발명의 방법에 따라 완화되거나 또는 치료될 수 있는 증상은 비제한적으로 혈관운동 증상 (예를 들어, 일과성 열감, 안면 홍조, 발한, 및 도한), 광선공포증 (광에 대한 민감성), 소리공포증 (소리에 대한 민감성), 냄새에 대한 민감성, 현기증, 어지럼증, 메스꺼움, 구토, 및 두통을 포함한다.
일부 양태에서, 본 발명의 방법은 치료 유효량의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 포함하는 약제학적 조성물을 환자에게 투여하는 것을 포함한다. "치료 유효량"은 편두통형 두통 또는 증상, 특히 편두통형 두통과 관련된 상태 또는 증상을 치료하거나, 또는 그렇지 않으면 어떠한 방식으로든 편두통형 두통 또는 편두통형 두통과 관련된 임의의 다른 바람직하지 않은 증상의 진행을 예방, 방지, 지연 또는 역전시키기에 충분한 양을 지칭한다. 특정 구현예에서, 치료 유효량은 편두통형 두통의 개시 또는 재발을 예방하거나 또는 지연시키거나 또는 편두통형 두통 또는 그것의 증상의 개시 또는 재발의 가능성을 감소시키기에 충분한 양이다.
따라서, 일부 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 1개월 당 약 35 mg 내지 약 210 mg의 총 용량으로 환자에게 투여된다. 예로서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 항원-결합 단편의 용량은 1개월 당 약 40 mg, 약 50 mg, 약 60 mg, 약 70 mg, 약 80 mg, 약 90 mg, 약 100 mg, 약 110 mg, 약 120 mg, 약 130 mg, 약 140 mg, 약 150 mg, 약 160 mg, 약 170 mg, 약 180 mg, 약 190 mg, 약 200 mg, 또는 약 210 mg일 수 있다. 임의의 및 모든 이러한 종점 사이의 범위, 예를 들어 1개월 당 약 35 mg 내지 약 70 mg, 약 40 mg 내지 약 90 mg, 약 50 mg 내지 약 80 mg, 약 35 mg 내지 약 140 mg, 약 70 mg 내지 약 140 mg, 약 50 mg 내지 약 100 mg, 약 70 mg 내지 약 210 mg, 약 140 mg 내지 약 210 mg, 또는 약 150 mg 내지 약 200 mg가 또한 고려된다. 일부의 이러한 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 항원-결합 단편의 1개월 당 용량은 체중과 무관하게 환자들 사이에 유사하다. 즉, 이들 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 항원-결합 단편의 1개월 당 용량은 총 용량이고, 환자의 체중에 대해 조절되지 않는다. 일 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 1개월 당 약 70 mg 내지 약 140 mg의 총 용량으로 환자에게 투여된다. 본원에 기재된 방법의 특정 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 1개월 당 약 70 mg의 총 용량으로 환자에게 투여된다. 다른 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 1개월 당 약 140 mg의 총 용량으로 환자에게 투여된다.
특정 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 항원-결합 단편의 1개월 당 용량은 환자의 체중에 기초할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 항원-결합 단편의 1개월 당 용량은 체중 대비 약 0.3 mg/kg 내지 약 3.5 mg/kg, 체중 대비 약 0.5 mg/kg 내지 약 3 mg/kg, 또는 체중 대비 약 1 mg/kg 내지 약 2.5 mg/kg의 범위일 수 있다. 예로서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 항원-결합 단편의 1개월 당 용량은 체중 대비 약 0.3 mg/kg, 약 0.4 mg/kg, 약 0.5 mg/kg, 약 0.6 mg/kg, 약 0.7 mg/kg, 약 0.8 mg/kg, 약 0.9 mg/kg, 약 1 mg/kg, 약 1.1 mg/kg, 약 1.2 mg/kg, 약 1.3 mg/kg, 약 1.4 mg/kg, 약 1.5 mg/kg, 약 1.6 mg/kg, 약 1.7 mg/kg, 약 1.8 mg/kg, 약 1.9 mg/kg, 약 2 mg/kg, 약 2.1 mg/kg, 약 2.2 mg/kg, 약 2.3 mg/kg, 약 2.4 mg/kg, 약 2.5 mg/kg, 약 2.6 mg/kg, 약 2.7 mg/kg, 약 2.8 mg/kg, 약 2.9 mg/kg, 약 3 mg/kg, 약 3.2 mg/kg, 약 3.3 mg/kg, 약 3.4 mg/kg, 또는 약 3.5 mg/kg일 수 있다. 일 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 항원-결합 단편의 1개월 당 용량은 체중 대비 약 0.8 mg/kg 내지 약 1.2 mg/kg이다. 다른 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 항원-결합 단편의 1개월 당 용량은 체중 대비 약 1.6 mg/kg 내지 약 2.2 mg/kg이다.
항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 항원-결합 단편의 용량은 단일 투여료 투여되거나 투여 빈도 기간 과정에 걸쳐 다중 투여로 분할 투여될 수 있다. 예를 들어, 특정 구현예에서, 치료 유효량의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 각각의 주기에서 단일 용량으로 투여된다. 따라서, 일부 구현예에서, 본원에 기재된 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 임의의 용량은 환자에게 1개월에 1회 (QM 투여) 투여될 수 있다. QM 투여 요법을 받는 환자는 전형적으로 매 24 내지 36 일, 바람직하게는 매 28 내지 35 일, 더 바람직하게는 매 28 내지 31 일, 또는 더욱더 바람직하게는 매 28 일 또는 매 30 일에 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편을 투여받는다. 이들 및 다른 구현예에서, 1개월 당 용량은 볼러스 주사로서, 예를 들어, 본원에 기재된 자가-주사 장치를 사용하여 환자에게 투여된다. 예를 들어, 70 mg의 1개월 당 용량은, 임의로 70 mg 용량을 포함하는 자동주사기, 펜 주사기, 또는 사전 충전 주사기를 사용하여 70 mg의 단일 볼러스 주사로서 환자에게 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 1개월 당 용량은 2개 이상의 연속 주사로 주어진다. 예로서, 70 mg의 1개월 당 용량이 임의로 35 mg 용량을 포함하는 2개의 주사 장치 (예를 들어, 자동주사기, 펜 주사기, 또는 사전 충전 주사기)를 사용하여 35 mg의 2개의 연속 주사로 환자에게 투여될 수 있다. 마찬가지로, 140 mg의 1개월 당 용량이 임의로 70 mg 용량을 포함하는 2개의 주사 장치 (예를 들어, 자동주사기, 펜 주사기, 또는 사전 충전 주사기)를 사용하여 70 mg의 2개의 연속 주사로 환자에게 투여될 수 있다. 1일 기간 내에 주어진 연속 주사는 단일 투여인 것으로 고려된다. 즉, 예로서, 1일 기간 내의 70 mg의 단일 볼러스 주사 및 35 mg의 2개의 연속 주사는 모두 70 mg 용량의 단일 투여로 고려될 것이다.
대안적인 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 용량은 투여 빈도 기간의 과정에 걸쳐 2회 이상의 투여로 분할된다. 예를 들어, 1개월의 투여 빈도 기간 동안, 1개월 당 용량은 4회 용량으로 분할되어 매주 투여되거나 2개의 용량으로 분할되어 2주 마다 투여된다. 본원에 기재된 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편의 임의의 용량은 2회 이상의 투여로 분할될 수 있다. 투여 및 개입 간격의 수는 편두통의 유형 및 중증도 (예를 들어, 간헐적 또는 만성), 환자의 나이, 환자의 신체 건강, 다른 약물과의 병행 치료, 및/또는 다른 질병의 존재에 따라 특정 환자마다 조정될 수 있다.
특정 구현예에서, 본원에 기재된 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 용량의 투여 빈도 기간은 1개월 단위이다. 즉, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 용량은 1개월 당 용량이나, 단일 투여 (즉, 1개월에 1회; QM 투여)로 투여될 수 있거나 또는 1개월의 과정에 걸쳐 다중 투여로 분할될 수 있다 (예를 들어, 1개월 당 용량의 1/2이 2주 마다 투여됨). 일부 구현예에서, 투여 빈도는 매2개월 당 1회 (Q2M 투여)이다. 다른 구현예에서, 투여 빈도는 3개월 마다 1회 (Q3M 투여)이다.
본 발명의 방법의 일부 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 한 세트의 치료 기간의 과정에 걸쳐 환자에게 투여된다. "치료 기간"은 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 제1 용량의 투여시 시작되고, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 최종 용량의 투여시 종료된다. 치료 기간은 약 1개월 내지 약 36개월, 예컨대 약 2개월, 약 3개월, 약 4개월, 약 5개월, 약 6개월, 약 7개월, 약 8개월, 약 9개월, 약 10개월, 약 11개월, 약 12개월, 약 13개월, 약 14개월, 약 15개월, 약 18개월, 약 21개월, 약 24개월, 약 27개월, 약 30개월, 또는 약 33개월을 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 치료 기간은 약 6개월이다. 다른 구현예에서, 치료 기간은 약 7개월이다. 다른 구현예에서, 치료 기간은 약 12개월이다. 특정 구현예에서, 치료 기간은 36개월 이상, 예컨대 48 또는 60 또는 64개월 이상일 수 있다. 하나의 특정 구현예에서, 치료 기간은 적어도 약 6개월이고, 미치료 대상체와 비교하여 환자의 편두통형 두통의 빈도, 기간, 또는 중증도에 있어서 통계적으로 상당한 감소를 일으킨다.
본 발명의 방법에 따른 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 투여는 바람직하게는 환자에서 유해한 부작용을 거의 야기하지 않거나 전혀 야기하지 않는다. 본원에 사용되는 용어 "유해한 부작용"은 임의의 비정상, 결함, 돌연변이, 병변, 퇴행, 유해한 또는 바람직하지 않은 반응, 증상, 또는 손상을 지칭하고, 이는 약물 사용에 의해 야기될 수 있다. 일부 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 투여는 다른 편두통 예방적 치료 (예를 들어, 아미트립틸린, 디발프로엑스, 발프로산, 프로프라놀롤, 티몰롤, 토피라메이트, 및 보툴리늄 독소 A)와 관련된 하나 이상의 유해한 부작용을 실질적으로 야기하지 않는다. 다른 편두통 예방적 치료와 관련된 부작용은 비제한적으로 피로, 메스꺼움, 현기증, 불면증, 우울증, 감소된 운동 허용력, 떨림, 지각이상증, 기형발생성, 및 인지 장애를 포함한다. 다른 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 투여는 다른 편두통 예방적 치료와 관련된 유해한 부작용의 비율 또는 수와 비교하여 유해한 부작용의 더 낮은 비율 또는 수와 관련된다. 또 다른 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 투여는 다른 편두통 예방적 치료와 관련된 유해한 부작용으로 인한 중단의 비율과 비교하여 유해한 부작용으로 인한 중단의 낮은 비율과 관련된다. 특정 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편의 투여와 관련된 유해한 부작용의 수 및 유형은 플라시보의 투여와 관련된 유해한 부작용의 수 및 유형과 통계적으로 상이하지 않다. 일부 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 투여는 유해 사례 v4.0에 관한 표준 용어 기준 (CTCAE; Common Terminology Criteria for Adverse Events v4.0)에 의해 평가할 때 등급 2보다 더 높은 유해 사례와 관련되지 않는다. 다른 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 투여는 CTCAE로 평가할 때 등급 1보다 더 높은 유해 사례와 관련되지 않는다.
특정 구현예에서, 본 발명의 방법에 따라 치료될 환자는 간헐적 편두통을 갖거나 앓거나 이것으로 진단된 환자이다. 본원에 정의된 편두통형 두통을 1개월 당 14회 이하 (예를 들어, 편두통형 두통의 적어도 5회 생애 발병(lifetime attack))로 갖는 편두통 이력을 갖는 환자에게 간헐적 편두통이 진단된다. 일부 구현예에서, 간헐적 편두통을 갖거나 앓거나 이것으로 진단된 환자는 평균적으로 1개월 당 4회 이상, 그러나 15회 미만의 편두통형 두통을 갖는다. 관련 구현예에서, 간헐적 편두통을 갖거나 앓거나 이것으로 진단된 환자는 평균적으로 1개월 당 15회 미만의 두통을 갖는다. 본원에 사용되는 "두통 일(headache day)"은 환자가 본원에 정의된 편두통형 두통 또는 30분 초과로 지속되거나 또는 급성 두통 치료를 요구하는 임의의 두통을 경험하는 임의의 달력상의 일이다. 일부 구현예에서, 환자는 높은 빈도의 간헐적 편두통을 갖거나 이를 앓는다고 분류될 수 있다. 높은 빈도의 간헐적 편두통은 1개월 당 8 내지 14의 편두통형 두통 일수를 특징으로 할 수 있다. 다른 구현예에서, 환자는 낮은 빈도의 간헐적 편두통을 갖거나 앓는다고 분류될 수 있다. 낮은 빈도의 간헐적 편두통은 1개월 당 8 미만의 편두통형 두통 일수를 특징으로 할 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 방법에 따라 치료되는 환자는 만성 편두통을 갖거나 앓거나 이것으로 진단된다. 편두통 환자 (즉, 편두통형 두통의 적어도 5회 생애 발병을 갖는 환자)가 1개월 당 15 이상의 두통 일수를 갖고, 8 이상의 두통 일수가 편두통형 두통 일인 경우 만성 편두통이 진단된다. 일부 구현예에서, 만성 편두통을 갖거나 앓거나 이것으로 진단된 환자는 평균적으로 1개월 당 15 이상의 편두통형 두통 일수를 갖는다. 본원에 기재된 방법의 특정 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 투여는 환자에서의 간헐적 편두통이 만성 편두통으로 진행되는 것을 예방, 감소, 또는 지연시킨다.
본원에 기재된 방법의 특정 구현예에서, 환자는 치료 경험이 없다. 일 구현예에서, 환자가 이전에 편두통형 두통에 대한 치료를 받지 않은 경우, 환자는 치료 경험이 없는 것이다. 또 다른 구현예에서, 환자가 편두통형 두통의 치료를 위한 치료제를 투여받지 않은 경우, 환자는 치료 경험이 없는 것이다. 일부 구현예에서, 환자가 이전에 편두통형 두통에 대한 예방 요법을 받지 않은 경우, 환자는 치료 경험이 없는 것이다. 예로서, 특정 구현예에서, 치료 경험이 없는 환자는 사전 요법을 받지 않았거나 간헐적 편두통의 예방적 치료를 위한 치료제를 투여받지 않는 환자이다. 특정 다른 구현예에서, 치료 경험이 없는 환자는 사전 요법을 받지 않았거나 만성 편두통의 예방적 치료를 위한 치료제를 투여받지 않는 환자이다.
본원에 기재된 방법의 특정 구현예에서, 환자는 적어도 하나의 다른 편두통형 두통 예방 요법에 실패하였거나 불내성이다. 예를 들어, 하나의 특별한 구현예에서, 환자는 적어도 하나의 편두통형 두통 예방적 제제를 사용한 사전 요법에 반응하는 것에 실패하였다. 본원에 사용되는 "반응하는 것에 실패" 또는 "치료 실패"는 예방적 제제의 표준 치료 요법에 따라 환자에서 편두통형 두통의 빈도, 지속기간 및/또는 중증도를 감소시키는데 있어서 상기 예방적 제제의 효능의 결여를 지칭한다. 예로서, 일 구현예에서, 편두통 예방적 제제를 사용한 사전 치료에 실패한 환자는, 편두통 예방적 제제의 투여 이후 경험하는 1개월 당 편두통형 두통 일수가 상기 제제를 사용한 치료 이전의 1개월 당 편두통형 두통 일수와 비교하여 동일하거나 더 많은 환자이다. 또 다른 구현예에서, 편두통 예방적 제제를 사용한 사전 치료에 실패한 환자는, 편두통 예방적 제제의 투여 이후에 경험하는 1개월 당 급성 편두통-특이적 약물 치료 일수가 상기 제제를 사용한 치료 이전의 1개월 당 급성 편두통-특이적 약물 치료 일수와 비교하여 동일하거나 더 많은 환자이다. 또 다른 구현예에서, 편두통 예방적 제제를 사용한 사전 치료에 실패한 환자는, 편두통 예방적 제제의 투여 이후의 편두통 발병의 수가 상기 제제를 사용한 치료 이전의 편두통 발병의 수와 비교하여 동일하거나 더 많은 환자이다. 또 다른 구현예에서, 편두통 예방적 제제를 사용한 사전 치료에 실패한 환자는, 편두통 예방적 제제의 투여 후 MPFID에 의해 측정되는 신체적 손상의 수준이 상기 제제를 사용한 치료 이전에 경험하는 신체적 손상의 수준과 비교하여 동일하거나 더 높은 환자 (예를 들어, 신체적 손상을 갖는 평균 1개월 당 일)이다.
편두통 예방적 제제를 사용한 사전 치료에 대한 반응 실패는 또한 편두통 예방적 제제에 대한 불내성을 포함할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 편두통 예방적 제제를 사용한 사전 치료에 실패한 환자는, 제제와 관련된 부작용에 불내성일 수 있는 환자이다. 그와 같은 구현예에서, 제제와 관련된 부작용은 환자가 갖고 있는 또 다른 의료적 병태를 악화시킬 수도 있고 이와 양립불가능할 수도 있다. 예시적으로, 기형발생성의 부작용을 갖는 편두통 예방적 제제는 임신한 환자에서 사용금지될 것이다. 특정 구현예에서, 편두통 예방적 제제를 사용한 사전 치료에 실패한 환자는, 관련된 부작용으로 인해 편두통 예방적 제제를 사용한 치료가 중단된 환자이다. 이러한 및 다른 구현예에서, 편두통 예방적 제제를 사용한 사전 치료에 실패한 환자는, 부작용의 영향이 편두통 예방적 제제의 치료 이점보다 더 크기 때문에 치료를 중지하고, 치료 요법을 변경하거나 또는 상이한 예방적 제제로 전환하도록 결정된 환자이다.
편두통 예방적 제제는 비제한적으로 베타-차단제 (예를 들어, 프로프라놀롤, 티몰롤, 아테놀롤, 메토프롤롤, 및 나돌롤), 항간질제 (예를 들어, 디발프로엑스, 나트륨 발프로에이트, 발프로산, 토피라메이트, 및 가바펜틴), 삼환계 항우울제 (예를 들어, 아미트립틸린, 노르트립틸린, 독세핀, 및 플루옥세틴), 및 보툴리늄 독소 유형 A를 포함한다. 따라서, 특정 구현예에서, 본 발명의 방법에 따라 치료되는 환자는 이들 편두통 예방적 제제 중 하나 이상에 대해 실패하였거나 불내성이다. 일부 구현예에서, 환자는 편두통 예방적 제제 중 적어도 2종에 대해 실패하였거나 불내성이다. 다른 구현예에서, 환자는 적어도 3개의 편두통 예방적 제제를 사용한 치료에 실패하였거나 불내성이다. 특정 구현예에서, 환자는 프로프라놀롤, 티몰롤, 디발프로엑스, 발프로산, 토피라메이트, 아미트립틸린, 또는 보툴리늄 독소 유형 A로부터 선택된 하나 이상의 제제를 사용한 치료에 실패하였거나 불내성이다. 하나의 특별한 구현예에서, 환자는 토피라메이트를 사용한 치료에 실패하였거나 불내성이다. 또 다른 특정 구현예에서, 환자는 프로프라놀롤을 사용한 치료에 실패하였거나 불내성이다. 또 다른 특정한 구현예에서, 환자는 아미트립틸린을 사용한 치료에 실패하였거나 불내성이다.
일부 구현예에서, 환자는 2개의 상이한 부류의 편두통 예방적 제제를 사용한 치료에 실패하였거나 불내성이다. 예를 들어, 일 구현예에서, 환자는 항간질제 (예를 들어, 토피라메이트) 및 베타-차단제 (예를 들어, 프로프라놀롤)를 사용한 치료에 실패하였거나 불내성이다. 또 다른 구현예에서, 환자는 항간질제 (예를 들어, 토피라메이트) 및 항우울제 (예를 들어, 아미트립틸린)를 사용한 치료에 실패하였거나 불내성이다. 또 다른 구현예에서, 환자는 베타-차단제 (예를 들어, 프로프라놀롤) 및 항우울제 (예를 들어, 아미트립틸린)를 사용한 치료에 실패하였거나 불내성이다. 특정 구현예에서, 환자는 3개의 상이한 부류의 편두통 예방적 제제를 사용한 치료에 실패하였거나 불내성이다. 그와 같은 구현예에서, 환자는 항간질제 (예를 들어, 토피라메이트), 베타-차단제 (예를 들어, 프로프라놀롤), 및 항우울제 (예를 들어, 아미트립틸린)를 사용한 치료에 실패하였거나 불내성이다.
본원에 기재된 방법은 또한 다른 유형의 두통 장애, 예컨대 긴장형 두통, 군발성 두통, 편마비성 편두통, 및 망막 편두통에 적용가능하다. 따라서, 본 발명은 또한 본원에 기재된 임의의 투악법으로 이를 필요로 하는 환자에게 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편을 투여함으로써 임의의 상기 언급된 두통 장애를 예방적으로 치료하거나 또는 예방하는 것을 포함하는 치료 방법을 제공한다.
본원에 기재된 방법은 환자에게 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편을 투여하는 것을 포함한다. 본원에 사용되는 용어 "항체"는 표적 항원과의 특이적 결합에 대해 무손상 항체와 경쟁할 수 있는 임의의 아이소타입의 무손상 면역글로불린 또는 그것의 항원-결합 단편을 지칭하고, 예를 들어, 키메라, 인간화, 완전 인간, 이중특이적, 및 다가 항체를 포함한다. 항체의 구조 단위는 전형적으로 하나 이상의 사량체를 포함하고, 일부 종의 포유동물은 단일 중쇄만을 갖는 항체를 생성하기도 하지만 상기 사량체 각각은 2개의 동일 커플렛(couplet)의 폴리펩티드 쇄로 구성된다. 전형적인 항체에서, 각각의 쌍 또는 커플렛은 하나의 전장 "경"쇄 (특정 구현예에서, 약 25 kDa) 및 하나의 전장 "중"쇄 (특정 구현예에서, 약 50-70 kDa)을 포함한다. 각각의 개별적인 면역글로불린 쇄는 다수의 "면역글로불린 도메인"으로 구성되고, 각각은 대략 90 내지 110개의 아미노산으로 이루어지고, 특징적인 폴딩 패턴을 표현한다. 이들 도메인은 항체 폴리펩티드가 구성되는 기본 단위이다. 각각의 쇄의 아미노-말단부는 전형적으로 항원 인식을 담당하는 가변 도메인을 포함한다. 카복시-말단부는 쇄의 다른 말단보다 진화론적으로 더 보존되어 있고, "불변 부위" 또는 "C 부위"로서 지칭된다. 인간 경쇄는 일반적으로 카파 및 람다 경쇄로 분류되고, 이들 각각은 하나의 가변 도메인 및 하나의 불변 도메인을 함유한다. 중쇄는 전형적으로 뮤, 델타, 감마, 알파, 또는 엡실론 쇄로 분류되고, 이들은 각각 IgM, IgD, IgG, IgA, 및 IgE으로서 항체의 아이소타입을 정의한다. IgG는 다수의 하위유형을 갖고, 이는 비제한적으로 IgG1, IgG2, IgG3, 및 IgG4를 포함한다. IgM 하위유형은 IgM, 및 IgM2를 포함한다. IgA 하위유형은 IgA1 및 IgA2를 포함한다. 인간에서, IgA 및 IgD 아이소타입은 4개의 중쇄 및 4개의 경쇄를 함유하고; IgG 및 IgE 아이소타입은 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 함유하고; IgM 아이소타입은 5개의 중쇄 및 5개의 경쇄를 함유한다. 중쇄 C 부위는 전형적으로 효과기 기능을 담당할 수 있는 하나 이상의 도메인을 포함한다. 중쇄 불변 부위 도메인의 수는 아이소타입에 따라 다를 것이다. IgG 중쇄는, 예를 들어 각각이 CH1, CH2 및 CH3로서 공지된 3개의 C 부위 도메인을 함유한다. 본 발명의 방법에서 이용될 수 있는 항체는 임의의 이들 아이소타입 및 하위유형을 가질 수 있다. 특정 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체는 IgG1, IgG2, 또는 IgG4 하위유형의 것이다. 하나의 특별한 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체는 IgG2 항체 (예를 들어, 인간 IgG2 불변 도메인 포함)이다. 또 다른 특정 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체는 IgG1 항체 (예를 들어, 인간 IgG1 불변 도메인 포함)이다.
전장 경쇄 및 중쇄에서, 가변 및 불변 부위는 약 12개 이상의 아미노산의 "J" 부위에 의해 연결되고, 중쇄는 또한 약 10개 이상의 아미노산의 "D" 부위를 포함한다. 예를 들어, 문헌 [Fundamental Immunology, 2nd ed., Ch. 7 (Paul, W., ed.) 1989, New York: Raven Press] (상기 문헌은 어떠한 목적으로든 그 전문이 본원에 참고로 포함됨)을 참조한다. 각각의 경쇄/중쇄 쌍의 가변 부위는 전형적으로 항원 결합 부위를 형성한다. 면역글로불린 쇄의 가변 부위는 일반적으로 동일한 전체 구조를 나타내는데, 보다 종종 "상보성 결정 부위" 또는 CDR로서 지칭되는 3개의 초가변성 부위에 의해 연결된 상대적으로 보존된 프레임워크 부위 (FR)를 포함한다. 각각의 중쇄 및 경쇄 쌍의 2개의 쇄로부터의 CDR은 전형적으로 표적 단백질 (예를 들어, CGRP 수용체) 상의 특정 에피토프에 특이적으로 결합되는 구조를 형성하는 프레임워크 부위에 의해 정렬된다. N-말단으로부터 C-말단까지, 자연 발생 경쇄 및 중쇄 가변 부위 모두는 전형적으로 이들 요소가 하기 순서에 순응된다: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, 및 FR4. 번호매김 시스템은 각각의 이들 도메인에서의 위치를 차지하는 아미노산에 번호를 배정하기 위해 고안되었다. 이러한 번호매김 시스템은 문헌 [Kabat Sequences of Proteins of Immunological Interest (1987 and 1991, NIH, Bethesda, MD)] 또는 문헌 [Chothia & Lesk, 1987, J. Mol. Biol. 196:901-917], [Chothia et al., 1989, Nature 342:878-883]에 정의되어 있다.
용어 "결합 단편"은 본원에서 용어 "항원-결합 단편"과 상호교환적으로 사용되고, 전장 중쇄 및/또는 경쇄 중에 존재하지만, 항원에 특이적으로 결합할 수 있는 아미노산의 적어도 일부가 결여된 항체의 일부를 지칭한다 (상기 일부가 얻어지거나 또는 합성되는 방식과는 무관함). 이러한 단편은 표적 항원에 특이적으로 결합된다는 점에서 생물학적으로 활성적이고, 소정의 에피토프에 대한 특이적 결합에 대해 무손상 항체를 포함하는 다른 항원 결합 단백질과 경쟁할 수 있다. 일 양태에서, 이와 같은 단편은 전장 경쇄 또는 중쇄 중에 존재하는 적어도 하나의 CDR을 보유할 것이고, 일부 구현예에서 단일 중쇄 및/또는 경쇄 또는 그의 일부를 포함할 것이다. 이러한 생물학적 활성 단편은 재조합 DNA 기법으로 제조될 수도 있고 또는 무손상 항체를 포함하는 항원 결합 단백질의 효소적 또는 화학적 절단에 의해 제조될 수도 있다. 면역학적으로 기능적인 면역글로불린 단편은 비제한적으로 Fab, Fab', F(ab')2, Fv, 도메인 항체 및 단일 쇄 항체를 포함하고, 비제한적으로 인간, 마우스, 랫트, 낙타 또는 토끼를 포함하는 임의의 포유동물 공급원으로부터 유래될 수 있다.
항체 결합 단편은 합성된 또는 유전자 조작된 단백질일 수 있다. 예를 들어, 항체 결합 단편은 경쇄 가변 부위로 이루어진 단리된 단편, 중쇄 및 경쇄의 가변 부위로 이루어진 "Fv" 단편, 및 경쇄 및 중쇄 가변 부위가 펩티드 링커에 의해 연결된 재조합 단일 쇄 폴리펩티드 분자 (scFv 단백질)를 포함한다. 다른 형태의 항체 결합 단편은 항체의 하나 이상의 상보성 결정 부위 (CDR)을 포함하는 펩티드이다. CDR (또한 "최소 인식 단위" 또는 "초가변성 부위"로 명명됨)은 예를 들어 관심 CDR을 엔코딩하는 폴리뉴클레오티드를 구축함으로써 수득된다. 그와 같은 폴리뉴클레오티드는 예를 들어 주형으로서 항체-생산 세포의 mRNA를 사용하여 가변 부위를 합성하는 폴리머라제 연쇄 반응을 사용함으로써 제조된다 (예를 들어, 문헌 [Larrick et al., Methods: A Companion to Methods in Enzymology, 2:106 (1991); Courtenay-Luck, "Genetic Manipulation of Monoclonal Antibodies," in Monoclonal Antibodies Production, Engineering and Clinical Application, Ritter et al. (eds.), page 166, Cambridge University Press (1995); and Ward et al., "Genetic Manipulation and Expression of Antibodies," in Monoclonal Antibodies: Principles and Applications, Birch et al., (eds.), page 137, Wiley-Liss, Inc. (1995)] 참조).
본 발명의 방법에 사용되는 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 인간 CGRP 수용체에 특이적으로 결합된다. 인간 CGRP 수용체는 인간 칼시토닌 수용체-유사 수용체 (CRLR) 폴리펩티드 및 인간 수용체 활성 변경 단백질 1 (RAMP1) 폴리펩티드를 포함하는 이종이량체이다. 일부 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 CRLR 및 RAMP1의 세포외 도메인 부위에 특이적으로 결합된다. 인간 CRLR 및 RAMP1에 대한 예시적인 세포외 도메인 및 전장 단백질에 대한 아미노산 서열은 하기 표에 제공되어 있다.
[표 1] 인간 CRLR 및 인간 RAMP1 폴리펩티드의 서열
Figure 112017117202061-pct00001
항체 또는 결합 단편은 해리 상수 (KD)가 ≤ 10-6 M인 경우에 이의 표적에 "특이적으로 결합"된다고 언급된다. 항체 또는 결합 단편은 KD가 ≤ 1 x 10-8 M인 경우에 "고친화도"로 표적 항원에 특이적으로 결합된다. 일 구현예에서, 항체 또는 결합 단편은 KD ≤ 5 x 10-7 M으로 인간 CGRP 수용체에 결합된다. 또 다른 구현예에서, 항체 또는 결합 단편은 KD ≤ 1 x 10-7 M으로 인간 CGRP 수용체에 결합된다. 또 다른 구현예에서, 항체 또는 결합 단편은 KD ≤ 5 x 10-8 M으로 인간 CGRP 수용체에 결합된다. 또 다른 구현예에서, 항체 또는 결합 단편은 KD ≤ 1 x 10-8 M으로 인간 CGRP 수용체에 결합된다. 또 다른 구현예에서, 항체 또는 결합 단편은 KD ≤ 5 x 10-9 M으로 인간 CGRP 수용체에 결합된다. 특정 구현예에서, 항체 또는 결합 단편은 KD ≤ 1 x 10-9 M으로 인간 CGRP 수용체에 결합한다. 다른 구현예에서, 항체 또는 결합 단편은 KD ≤ 5 x 10-10 M으로 인간 CGRP 수용체에 결합한다. 또는 다른 구현예에서, 항체 또는 결합 단편은 KD ≤ 1 x 10-10 M으로 인간 CGRP 수용체에 결합한다. 친화도는 다양한 기술을 사용하여 결정되고, 그 예는 친화도 ELISA 검정이다. 다양한 구현예에서, 친화도는 BIAcore 검정에 의해 결정된다. 일부 구현예에서, 친화도는 동력학 방법에 의해 결정된다. 다른 구현예에서, 친화도는 평형/용액 방법에 의해 결정된다. 특정 구현예에서, 친화도는 FACS 결합 검정에 의해 결정된다. WO 2010/075238 (상기 문헌은 그 전문이 본 명세서에 참고로 포함됨)는 항-CGRP 수용체 항체에 대한 친화도를 결정하기에 적합한 친화도 검정을 기재하고 있다.
특정 구현예에서, 본원에 기재된 방법에 이용되는 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 인간 CRLR 및 인간 RAMP1 폴리펩티드 모두에서 잔기 또는 잔기의 서열, 또는 부위에 특이적으로 결합된다. 하나의 특정 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 인간 CRLR 및 인간 RAMP1 폴리펩티드 모두에서 아미노산으로 형성된 에피토프에 특이적으로 결합된다. "에피토프"는 항체 또는 그의 결합 단편 또는 T-세포 수용체에 특이적으로 결합할 수 있는 임의의 결정인자를 지칭한다. 에피토프 (예를 들어, (i) 단일 쇄 폴리펩티드의 경우, 폴리펩티드 서열에서 서로 인접하지 않으나 분자의 맥락에서 항원 결합 단백질에 의해 결합되는 아미노산 잔기, 또는 (ii) 2개 이상의 개별 성분을 포함하는 다량체 단백질의 경우, 예를 들어 2개 이상의 개별 성분 상에 존재하나 다량체 단백질의 맥락에서 항체 또는 결합 단편에 의해 결합되는 아미노산 잔기)는 인접되거나 또는 인접되지 않을 수 있다. 일부 구현예에서, 인간 CRLR 및 인간 RAMP1 폴리펩티드 모두에서 아미노산으로 형성된 에피토프는 AspN 프로테아제에 대한 하나 이상의 절단 부위를 포함하고, 이는 아미노 말단에서의 아스파르트산 잔기 및 일부 글루탐산 잔기 뒤에서 펩티드를 절단한다.
특정 구현예에서, 본 발명의 방법에 사용되는 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편은 서열번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 인간 CRLR 폴리펩티드의 세포외 도메인에 특이적으로 결합한다. 대안적으로 또는 추가적으로, 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편은 서열번호: 4의 아미노산 서열을 포함하는 인간 RAMP1 폴리펩티드의 세포외 도메인에 특이적으로 결합된다. 일부 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편은 서열번호: 5 (DSIQLGVTRNKIMTAQY; 서열번호: 3의 아미노산 8-24에 대응됨), 서열번호: 6 (DVAAGTESMQLCP; 서열번호: 3의 아미노산 55-67에 대응됨), 서열번호: 7 (DGNWFRHPASNRTWTNYTQCNVNTH; 서열번호: 3의 아미노산 86-110에 대응됨), 서열번호: 8 (ECYQKIMQ; 서열번호: 3의 아미노산 25-32에 대응됨), 또는 서열번호: 9 (DGWLCWN; 서열번호: 3의 아미노산 48-54에 대응됨)으로부터 선택된 인간 CRLR 폴리펩티드 내의 적어도 하나의 서열에 특이적으로 결합된다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체는 임의로 그것의 본래의 3차원 형태로 서열번호: 5-9를 포함하는 서열번호: 3의 인간 CRLR 폴리펩티드의 하위부위에 결합된다. 대안적으로 또는 추가적으로, 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편은 서열번호: 10 (RELADCTWHMAE; 서열번호: 4의 아미노산 41-52에 대응됨), 서열번호: 11 (DWGRTIRSYRELA; 서열번호: 4의 아미노산 32-44에 대응됨), 서열번호: 12 (ELCLTQFQV; 서열번호: 4의 아미노산 12-20에 대응됨), 또는 서열번호: 13 (DCTWHMA; 서열번호: 4의 아미노산 45-51에 대응됨)으로부터 선택된 인간 RAMP1 폴리펩티드 내의 하나 이상의 서열에 특이적으로 결합된다. 일부 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체는 임의로 그것의 본래의 3차원 형태로 서열번호: 10-13을 포함하는 서열번호: 4의 인간 RAMP1 폴리펩티드의 하위부류에 결합된다.
특정 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편은 서열번호: 6, 서열번호: 7, 서열번호: 8, 및 서열번호: 9의 아미노산 서열을 갖는 인간 CRLR 폴리펩티드에 특이적으로 결합되고, 여기서 서열번호: 6 및 7은 서열번호: 3과 관련하여 아미노산 위치 66 및 105에서 디설파이드 결합에 의해 연결되고, 서열번호: 8 및 9는 서열번호: 3과 관련하여 아미노산 위치 26 및 52에서 디설파이드 결합에 의해 연결되고, 임의로 상기 폴리펩티드는 서열번호: 3의 인간 CRLR의 대응하는 폴리펩티드 부위의 3차 구조를 갖는다. 일부 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편은 서열번호: 12 및 서열번호: 13의 아미노산 서열을 갖는 인간 RAMP1 폴리펩티드에 특이적으로 결합되고, 여기서 상기 서열은 서열번호: 4와 관련하여 아미노산 위치 14 및 46에서 디설파이드 결합에 의해 연결되고, 임의로 여기서 상기 폴리펩티드는 서열번호: 4의 인간 RAMP1의 대응하는 폴리펩티드 부위의 3차 구조를 갖는다. 특정 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편은 인간 CRLR 폴리펩티드 및 인간 RAMP1 폴리펩티드에 특이적으로 결합되고, 여기서 인간 CRLR 폴리펩티드는 서열번호: 6, 서열번호: 7, 서열번호: 8, 및 서열번호: 9의 아미노산 서열을 갖고, 여기서 서열번호: 6 및 7은 서열번호: 3과 관련하여 아미노산 위치 66 및 105에서 디설파이드 결합에 의해 연결되고, 서열번호: 8 및 9는 서열번호: 3과 관련하여 아미노산 위치 26 및 52에서 디설파이드 결합에 의해 연결되고, 여기서 인간 RAMP1 폴리펩티드는 서열번호: 12 및 서열번호: 13의 아미노산 서열을 갖고, 여기서 서열번호: 12 및 13은 서열번호: 4와 관련하여 아미노산 위치 14 및 46에서 디설파이드 결합에 의해 연결된다. 그와 같은 구현예에서, 인간 CRLR 및 인간 RAMP1 폴리펩티드는 각각 서열번호: 3 및 4의 인간 CRLR 및 인간 RAMP1 폴리펩티드의 대응하는 부위의 3차 구조를 갖는다. 관련 구현예에서, 인간 CRLR 및 인간 RAMP1 폴리펩티드는 이종이량체를 형성한다.
본 발명의 방법에 사용하기에 적합한 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편은 바람직하게는 인간 CGRP 수용체의 하나 이상의 생물학적 활성을 억제하거나, 저해하거나, 또는 조절한다. 인간 CGRP 수용체의 생물학적 활성은 비제한적으로 CGRP 수용체 신호 도입 경로의 유도, 혈관확장의 유도, 혈관수축의 억제, 염증, 예를 들어, 신경인성 염증의 유도를 포함한다. 일부 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 CGRP 리간드에 대한 인간 CGRP 수용체의 결합을 실질적으로 억제한다. "결합의 실질적인 억제"는 과량의 항체 또는 그의 결합 단편이 CGRP에 결합된 인간 CGRP 수용체, 또는 그 반대의 것의 양을, 예를 들어, 시험관내 경쟁적 결합 검정에서 결합을 측정함으로써 적어도 약 20%, 약 30%, 약 40%, 약 50%, 약 60%, 약 70%, 약 80%, 약 85%, 약 90%, 약 95%, 약 97%, 약 99% 이상 감소시키는 경우에 일어난다.
특정 구현예에서, 본원에 기재된 방법에 사용하기 위한 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편은 인간 아드레노메둘린 1 (AM1), 아드레노메둘린 2 (AM2), 또는 아밀린 수용체 (예를 들어, 인간 AMY1 수용체)와 비교하여 인간 CGRP 수용체를 선택적으로 억제한다. 인간 AM1 수용체는 인간 CRLR 폴리펩티드 및 RAMP2 폴리펩티드로 이루어지는 반면, 인간 AM2 수용체는 인간 CRLR 폴리펩티드 및 RAMP3 폴리펩티드로 이루어진다. 따라서, 오직 CRLR (RAMP1은 아님)만을 결합하는 항체 또는 다른 결합 단백질은 CGRP 수용체를 선택적으로 억제하는 것으로 예상되지 않을 것이고, 이는 CRLR 폴리펩티드가 또한 AM1 및 AM2 수용체의 성분이기 때문이다. 인간 아밀린 (AMY) 수용체는 인간 칼시토닌 수용체 (CT) 폴리펩티드 및 RAMP1, RAMP2, 또는 RAMP3 소단위 중 하나로 이루어진다. 구체적으로, 인간 AMY1 수용체는 CT 폴리펩티드 및 RAMP1 폴리펩티드로 이루어지고, 인간 AMY2 수용체는 CT 폴리펩티드 및 RAMP2 폴리펩티드로 이루어지고, 인간 AMY3 수용체는 CT 폴리펩티드 및 RAMP3 폴리펩티드로 이루어진다. 따라서, 오직 RAMP1 (CRLR은 아님)만을 결합하는 항체 또는 다른 결합 단백질은 CGRP 수용체를 선택적으로 억제하는 것으로 예상되지 않을 것이고, 이는 RAMP1 폴리펩티드는 또한 인간 AMY1 수용체의 성분이기 때문이다.
항체 또는 그의 항원-결합 단편은 특이적 수용체의 억제 검정에서 항체 또는 그의 항원-결합 단편의 IC50이 또 다른 "참조" 수용체의 억제 검정에서의 IC50보다 적어도 50배 낮은 경우에 다른 수용체에 대하여 특이적 수용체를 "선택적으로 억제"한다. "IC50"은 소정의 생물학적 과정을 절반 억제하는데 필요한 약물 또는 물질의 양이다. 임의의 특정한 물질 또는 길항제의 IC50은 용량-반응 곡선을 구축하고, 특별한 기능적 검정으로 역효능제 활성에 대해 상이한 농도의 상기 약물 또는 길항제의 효과를 조사함으로써 결정될 수 있다. IC50 값은 효능제의 최대 생물학적 반응을 절반 억제하는데 필요한 농도를 결정함으로써 소정의 길항제 또는 약물에 대해 계산될 수 있다. 따라서, 임의의 항-CGRP 항체 또는 결합 단편에 대한 IC50 값은 임의의 기능적 검정에서 CGRP 수용체를 활성화하는 CGRP 리간드의 최대 생물학적 반응을 절반 억제하는데 필요한 항체 또는 결합 단편의 농도를 결정함으로써 계산될 수 있다.
"선택도 비"는 참조 수용체의 IC50을 특정 수용체의 IC50으로 나눈 값이다. 기능적 CGRP 수용체 검정, 예컨대 환식 AMP (cAMP) 검정에서 항체 또는 그의 항원-결합 단편의 IC50이 인간 AM1, AM2 또는 아밀린 수용체 (예를 들어, AMY1)의 억제 검정에서 동일 항체 또는 그의 항원-결합 단편의 IC50보다 적어도 50배 낮은 경우, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 인간 CGRP 수용체를 선택적으로 억제한다. 비제한적인 예로서, 인간 CGRP 수용체의 cAMP 검정에서 특정 항-CGRP 수용체 항체의 IC50이 예를 들어 0.1 nM 내지 20 nM이고 인간 AM1, 인간 AM2 또는 인간 AMY1 수용체의 cAMP 검정에서 동일 항체의 IC50이 1000 nM 이상인 경우, 그 항체는 인간 CGRP 수용체를 선택적으로 억제하는 것으로 고려될 것이다. 선택적 억제의 정도는 임의의 적합한 CGRP 수용체 기능성 검정, 예컨대 WO 2010/075238 (상기 문헌은 그 전문이 본 명세서에 참고로 포함됨)의 실시예 4에 기재된 cAMP 검정을 사용하여 결정될 수 있다. 특정 수용체를 선택적으로 억제하는 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 또한 그 수용체에 대한 중화 항체 또는 항원-결합 단편인 것으로 이해된다. 특정 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 인간 AM1, AM2, 및/또는 AMY1 수용체에 대해 100 이상, 250 이상, 500 이상, 750 이상, 1,000 이상, 2,500 이상, 5,000 이상 또는 10,000 이상의 선택도 비로 인간 CGRP 수용체를 선택적으로 억제할 수 있다. 일 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 인간 AM1, AM2, 및/또는 AMY1 수용체에 대해 100 이상의 선택도 비로 인간 CGRP 수용체를 선택적으로 억제한다. 또 다른 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 인간 AM1, AM2, 및/또는 AMY1 수용체에 대해 500 이상의 선택도 비로 인간 CGRP 수용체를 선택적으로 억제한다.
일부 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 인간 CRLR 및 인간 RAMP1 폴리펩티드 모두에 대해 특이적으로 결합하고, 인간 AM1, 인간 AM2, 및/또는 인간 아밀린 수용체 (예를 들어, AMY1 또는 AMY2)에 대해 특이적으로 결합되지 않는다. 예를 들어, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 KD ≤ 1 μM, ≤ 100 nM, ≤ 10 nM, 또는 ≤ 5 nM으로 인간 CGRP 수용체에 특이적으로 결합될 수 있다. 일부 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 FACS 결합 검정을 사용하여 결정하고 예를 들어 문헌 [Rathanaswami, et al., Biochemical and Biophysical Research Communications 334 (2005) 1004-1013]에 기재된 방법을 사용하여 분석할 때 KD ≤ 100 nM, ≤ 10 nM, 또는 ≤ 5 nM으로 인간 CGRP 수용체에 특이적으로 결합된다. 특정 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 KD ≤ 100 nM으로 인간 CGRP 수용체에 특이적으로 결합된다. 다른 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 KD ≤ 10 nM으로 인간 CGRP 수용체에 특이적으로 결합된다.
특정 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 CGRP 결합 경쟁 검정에서 ≤ 100 nM, ≤ 10 nM, ≤ 1 nM, ≤0.5 nM 또는 ≤0.1 nM의 Ki를 갖는다. "Ki"는 억제 연구에서 결정된 리간드의 평형 해리 상수를 지칭한다. 소정의 리간드에 대한 Ki는 전형적으로 평형 조건 하에 관심 경쟁 물질에 의한 참조 방사선표지 리간드의 결합 억제를 측정하는 경쟁적 방사선표지 리간드 결합 연구로 결정된다. 리간드/수용체 상호작용의 억제제를 평가하기 위한 결합 경쟁 검정은 당해 기술분야의 숙련가에게 공지되어 있고, 방사선표지 리간드 (예를 들어, 방사선표지 CGRP) 및 수용체 (예를 들어, 인간 CGRP 수용체)를 발현하는 세포를 사용하는 검정을 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 Ki는, 인간 CGRP 수용체를 발현하는 세포로부터의 막에 대한 방사선표지 리간드의 결합이 평가되는 방사선표지 125I-CGRP 결합 경쟁 검정을 사용하여 결정된다. 이러한 유형의 검정을 실시하기 위한 예시적인 프로토콜은 WO 2010/075238 (상기 문헌은 그 전문이 본 명세서에 참고로 포함됨)의 실시예 5에 기재되어 있다. 일 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 CGRP 결합 경쟁 검정에서 10 nM 미만의 Ki를 갖는다. 또 다른 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 CGRP 결합 경쟁 검정에서 1 nM 미만의 Ki를 갖는다.
본 발명의 방법에 사용하는데 적합한 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 예는 WO 2010/075238 (상기 문헌은 그 전문이 본 명세서에 참고로 포함됨)에 기재되어 있다. 일 구현예에서, 본원에 기재된 방법에서 이용되는 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 인간 CGRP 수용체에 대한 항체 1E11, 1H7, 2E7, 3B6, 3C8, 4E4, 4H6, 5F5, 9D4, 9F5, 10E4, 11D11, 11H9, 12E8, 12G8, 13H2 및 32H7 (이들 모두는 본원 및 WO 2010/075238에 기재되어 있음) 중 적어도 하나의 결합을 교차-차단한다. 대안적으로 또는 부가적으로, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 항체 1E11, 1H7, 2E7, 3B6, 3C8, 4E4, 4H6, 5F5, 9D4, 9F5, 10E4, 11D11, 11H9, 12E8, 12G8, 13H2 및 32H7 (이들 모두는 본원에 추가로 기재됨) 중 적어도 하나에 의한 인간 CGRP 수용체와의 결합을 교차-차단한다. 이들 항체 모두는 인간 CGRP 수용체의 중화 항체이며, 인간 CGRP 수용체의 본질적으로 동일한 부위에 결합되는 것으로 결정되었고, 이 부위는 비중화 항체에 의해 결합된 수용체의 부위와는 상이한 것이었다. WO 2010/075238의 실시예 7을 참조한다. 용어 "교차-차단", "교차-차단된" 및 "교차-차단함"은 인간 CGRP 수용체에 대한 다른 항체 또는 결합 단편의 결합을 방해하는 항체의 능력을 의미하는 것으로 본원에서 상호교환적으로 사용된다. 항체 또는 결합 단편이 다른 것과 인간 CGRP 수용체의 결합을 방해할 수 있는 정도, 및 이에 따라 이것이 교차 차단한다고 언급될 수 있는지의 여부는 경쟁 결합 검정을 사용하여 결정될 수 있다. 일부 구현예에서, 교차-차단 항체 또는 그의 결합 단편은 참조 항체의 인간 CGRP 수용체 결합을 약 40% 내지 100%, 예컨대 약 60% 내지 약 100%, 구체적으로 약 70% 내지 100%, 및 더 구체적으로 약 80% 내지 100% 감소시킨다. 교차-차단을 감지하는데 특히 적합한 정량적 검정은 Biacore 기기를 사용하고, 이는 표면 플라즈몬 공명 기술을 사용하여 상호작용의 정도를 측정한다. 또 다른 적합한 정량적 교차-차단 검정은, 인간 CGRP 수용체와의 결합 측면에서 항체들 사이의 경쟁을 측정하는 FACS-기반 접근법을 사용한다.
본원에 개시된 방법에 사용하기 위한 항-CGRP 수용체 항체 및 이의 결합 단편은 하나의 중쇄 CDR1 ("CDRH1"), 및/또는 하나의 중쇄 CDR2 ("CDRH2"), 및/또는 하나의 중쇄 CDR3 ("CDRH3"), 및/또는 하나의 경쇄 CDR1 ("CDRL1"), 및/또는 하나의 경쇄 CDR2 ("CDRL2"), 및/또는 하나의 경쇄 CDR3 ("CDRL3")를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편은 CDRH1, CDRH2, 및 CDRH3을 포함하는 적어도 하나의 중쇄 가변 부위 및 CDRL1, CDRL2, 및 CDRL3을 포함하는 적어도 하나의 경쇄 가변 부위를 포함한다. 특정 중쇄 및 경쇄 CDR은 각각 표 2 및 3에 열거되어 있다.
소정의 항체의 상보성 결정 부위 (CDR) 및 프레임워크 부위 (FR)는 문헌 [Kabat et al. in Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed., US Dept. of Health and Human Services, PHS, NIH, NIH Publication no. 91-3242, 1991]에 기재된 시스템을 사용하여 확인될 수 있다. 본원에 개시된 특정 항체 및 결합 단편은 표 2 (중쇄 CDR, 즉 CDRH) 및 표 3 (경쇄 CDR, 즉 CDRL)에 나타낸 CDR 중 하나 이상의 아미노산 서열과 동일하거나 또는 상당한 서열 동일성을 갖는 하나 이상의 아미노산 서열을 포함한다.
표 2. 예시적인 중쇄 CDR 아미노산 서열
Figure 112017117202061-pct00002
Figure 112017117202061-pct00003
표 3. 예시적인 경쇄 CDR 아미노산 서열
Figure 112017117202061-pct00004
Figure 112017117202061-pct00005
일부 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 (i) 서열번호: 14 내지 22로 이루어진 군으로부터 선택된 CDRH1; (ii) 서열번호: 23 내지 33으로 이루어진 군으로부터 선택된 CDRH2; (iii) 서열번호: 34 내지 43으로 이루어진 군으로부터 선택된 CDRH3; 및 (iv) 하나 이상, 예를 들어, 1, 2, 3, 4개 이상의 아미노산 치환 (예를 들어, 보존적 아미노산 치환), 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산의 결실 또는 삽입을 함유하는 (i), (ii) 및 (iii)의 CDRH로부터 선택되는 하나 이상의 중쇄 CDR을 포함한다. 이들 및 다른 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 (i) 서열번호: 44 내지 54로 이루어진 군으로부터 선택된 CDRL1; (ii) 서열번호: 55 내지 64로 이루어진 군으로부터 선택된 CDRL2; (iii) 서열번호: 65 내지 74로 이루어진 군으로부터 선택된 CDRL3; 및 하나 이상, 예를 들어, 1, 2, 3, 4개 이상의 아미노산 치환 (예를 들어, 보존적 아미노산 치환), 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산의 결실 또는 삽입을 함유하는 (i), (ii) 및 (iii)의 CDRL로부터 선택되는 하나 이상의 경쇄 CDR을 포함한다.
특정 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 표 2 및 3에 열거된 CDR의 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6개의 변이체 형태를 포함할 수 있고, 이들 각각은 표 2 및 3에 열거된 CDR 서열에 대해 적어도 80%, 85%, 90% 또는 95% 서열 동일성을 갖는다. 일부 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 표 2 및 3에 열거된 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6개의 CDR을 포함하고, 이들 각각은 이들 표에 열거된 CDR과 1, 2, 3, 4 또는 5개 이하의 아미노산에서 차이가 있다.
일부 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편은 CDRH1, CDRH2, 및 CDRH3을 포함하는 중쇄 가변 부위를 포함하고, 여기서,
(a) CDRH1, CDRH2, 및 CDRH3은 각각 서열번호: 14, 23 및 34의 서열을 갖고;
(b) CDRH1, CDRH2, 및 CDRH3은 각각 서열번호: 15, 24 및 35의 서열을 갖고;
(c) CDRH1, CDRH2, 및 CDRH3은 각각 서열번호: 16, 25 및 36의 서열을 갖고;
(d) CDRH1, CDRH2, 및 CDRH3은 각각 서열번호: 17, 26 및 37의 서열을 갖고;
(e) CDRH1, CDRH2, 및 CDRH3은 각각 서열번호: 18, 27 및 38의 서열을 갖고;
(f) CDRH1, CDRH2, 및 CDRH3은 각각 서열번호: 15, 29 및 35의 서열을 갖고;
(g) CDRH1, CDRH2, 및 CDRH3은 각각 서열번호: 20, 30 및 40의 서열을 갖고;
(h) CDRH1, CDRH2, 및 CDRH3은 각각 서열번호: 15, 31 및 35의 서열을 갖고;
(i) CDRH1, CDRH2, 및 CDRH3은 각각 서열번호: 14, 23 및 41의 서열을 갖고;
(j) CDRH1, CDRH2, 및 CDRH3은 각각 서열번호: 21, 32 및 42의 서열을 갖고;
(k) CDRH1, CDRH2, 및 CDRH3은 각각 서열번호: 22, 33 및 43의 서열을 갖고; 또는
(l) CDRH1, CDRH2, 및 CDRH3은 각각 서열번호: 19, 28 및 39의 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편은 CDRL1, CDRL2, 및 CDRL3을 포함하는 경쇄 가변 부위를 포함하고, 여기서,
(a) CDRL1, CDRL2, 및 CDRL3은 각각 서열번호: 44, 55 및 65의 서열을 갖고;
(b) CDRL1, CDRL2, 및 CDRL3은 각각 서열번호: 45, 56 및 66의 서열을 갖고;
(c) CDRL1, CDRL2, 및 CDRL3은 각각 서열번호: 46, 57 및 67의 서열을 갖고;
(d) CDRL1, CDRL2, 및 CDRL3은 각각 서열번호: 47, 58 및 68의 서열을 갖고;
(e) CDRL1, CDRL2, 및 CDRL3은 각각 서열번호: 48, 59 및 69의 서열을 갖고;
(f) CDRL1, CDRL2, 및 CDRL3은 각각 서열번호: 49, 60 및 70의 서열을 갖고;
(g) CDRL1, CDRL2, 및 CDRL3은 각각 서열번호: 50, 59 및 69의 서열을 갖고;
(h) CDRL1, CDRL2, 및 CDRL3은 각각 서열번호: 45, 61 및 66의 서열을 갖고;
(i) CDRL1, CDRL2, 및 CDRL3은 각각 서열번호: 51, 62 및 71의 서열을 갖고;
(j) CDRL1, CDRL2, 및 CDRL3은 각각 서열번호: 52, 59 및 69의 서열을 갖고;
(k) CDRL1, CDRL2, 및 CDRL3은 각각 서열번호: 53, 63 및 72의 서열을 갖고;
(l) CDRL1, CDRL2, 및 CDRL3은 각각 서열번호: 54, 64 및 73의 서열을 갖고; 또는
(m) CDRL1, CDRL2, 및 CDRL3은 각각 서열번호: 54, 64 및 74의 서열을 갖는다.
특정 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편은 CDRH1, CDRH2, 및 CDRH3을 포함하는 중쇄 가변 부위 및 CDRL1, CDRL2, 및 CDRL3을 포함하는 경쇄 가변 부위를 포함하고, 여기서,
(a) CDRH1, CDRH2, 및 CDRH3은 각각 서열번호: 14, 23 및 34의 서열을 갖고, CDRL1, CDRL2, 및 CDRL3은 각각 서열번호: 44, 55 및 65의 서열을 갖고;
(b) CDRH1, CDRH2, 및 CDRH3은 각각 서열번호: 14, 23 및 41의 서열을 갖고, CDRL1, CDRL2, 및 CDRL3은 각각 서열번호: 44, 55 및 65의 서열을 갖고;
(c) CDRH1, CDRH2, 및 CDRH3은 각각 서열번호: 15, 24 및 35의 서열을 갖고, CDRL1, CDRL2, 및 CDRL3은 각각 서열번호: 45, 56 및 66의 서열을 갖고;
(d) CDRH1, CDRH2, 및 CDRH3은 각각 서열번호: 15, 29 및 35의 서열을 갖고, CDRL1, CDRL2, 및 CDRL3은 각각 서열번호: 45, 61 및 66의 서열을 갖고;
(e) CDRH1, CDRH2, 및 CDRH3은 각각 서열번호: 15, 31 및 35의 서열을 갖고, CDRL1, CDRL2, 및 CDRL3은 각각 서열번호: 45, 61 및 66의 서열을 갖고;
(f) CDRH1, CDRH2, 및 CDRH3은 각각 서열번호: 16, 25 및 36의 서열을 갖고, CDRL1, CDRL2, 및 CDRL3은 각각 서열번호: 46, 57 및 67의 서열을 갖고;
(g) CDRH1, CDRH2, 및 CDRH3은 각각 서열번호: 17, 26 및 37의 서열을 갖고, CDRL1, CDRL2, 및 CDRL3은 각각 서열번호: 47, 58 및 68의 서열을 갖고;
(h) CDRH1, CDRH2, 및 CDRH3은 각각 서열번호: 18, 27 및 38의 서열을 갖고, CDRL1, CDRL2, 및 CDRL3은 각각 서열번호: 48, 59 및 69의 서열을 갖고;
(i) CDRH1, CDRH2, 및 CDRH3 는 각각 서열번호: 18, 27 및 38의 서열을 갖고, CDRL1, CDRL2, 및 CDRL3은 각각 서열번호: 50, 59 및 69의 서열을 갖고;
(j) CDRH1, CDRH2, 및 CDRH3은 각각 서열번호: 19, 28 및 39의 서열을 갖고, CDRL1, CDRL2, 및 CDRL3은 각각 서열번호: 49, 60 및 70의 서열을 갖고;
(k) CDRH1, CDRH2, 및 CDRH3은 각각 서열번호: 20, 30 및 40의 서열을 갖고, CDRL1, CDRL2, 및 CDRL3은 각각 서열번호: 51, 62 및 71의 서열을 갖고;
(l) CDRH1, CDRH2, 및 CDRH3은 각각 서열번호: 21, 32 및 42의 서열을 갖고, CDRL1, CDRL2, 및 CDRL3은 각각 서열번호: 53, 63 및 72의 서열을 갖고;
(m) CDRH1, CDRH2, 및 CDRH3은 각각 서열번호: 22, 33 및 43의 서열을 갖고, CDRL1, CDRL2, 및 CDRL3은 각각 서열번호: 54, 64 및 73의 서열을 갖고; 또는
(n) CDRH1, CDRH2, 및 CDRH3은 각각 서열번호: 22, 33 및 43의 서열을 갖고, CDRL1, CDRL2, 및 CDRL3은 각각 서열번호: 54, 64 및 74의 서열을 갖고; 또는
(o) CDRH1, CDRH2, 및 CDRH3은 각각 서열번호: 18, 27 및 38의 서열을 갖고, CDRL1, CDRL2, 및 CDRL3은 각각 서열번호: 52, 59 및 69의 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, 본 발명의 방법에 사용되는 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 서열번호: 14의 서열을 갖는 CDRH1, 서열번호: 23의 서열을 갖는 CDRH2, 서열번호: 34의 서열을 갖는 CDRH3, 서열번호: 44의 서열을 갖는 CDRL1, 서열번호: 55의 서열을 갖는 CDRL2, 및 서열번호: 65의 서열을 갖는 CDRL3을 포함한다. 다른 구현예에서, 본 발명의 방법에 사용되는 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 서열번호: 15의 서열을 갖는 CDRH1, 서열번호: 29의 서열을 갖는 CDRH2, 서열번호: 35의 서열을 갖는 CDRH3, 서열번호: 45의 서열을 갖는 CDRL1, 서열번호: 61의 서열을 갖는 CDRL2 및 서열번호: 66의 서열을 갖는 CDRL3을 포함한다.
본 명세서에서 기재된 방법의 특정 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 하기 표 4에 나타난 바와 같은 VH1, VH2, VH3, VH4, VH5, VH6, VH7, VH8, VH9, VH10, VH11, VH12, 및 VH13으로 이루어진 군으로부터 선택되는 중쇄 가변 부위, 및/또는 VL1, VL2, VL3, VL4, VL5, VL6, VL7, VL8, VL9, VL10, VL11, VL12, VL13, VL14, VL15, VL16, 및 VL17로 이루어진 군으로부터 선택되는 경쇄 가변 부위, 및 이들 경쇄 및 중쇄 가변 부위의 면역학적 기능적 단편, 유도체, 뮤테인 및 변이체를 포함한다.
표 4. 예시적인 V L 및 V H 쇄 아미노산 서열
Figure 112017117202061-pct00006
Figure 112017117202061-pct00007
Figure 112017117202061-pct00008
표 4에 열거된 각각의 중쇄 가변 부위는 표 4에 나타난 임의의 경쇄 가변 부위와 조합되어 본 발명의 방법에 사용하기에 적합한 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편을 형성할 수 있다. 이러한 조합의 예는 임의의 VL1, VL2, VL3, VL4, VL5, VL6, VL7, VL8, VL9, VL10, VL11, VL12, VL13, VL14, VL15, VL16, 또는 VL17과 조합되는 VH1; 임의의 VL1, VL2, VL3, VL4, VL5, VL6, VL7, VL8, VL9, VL10, VL11, VL12, VL13, VL14, VL15, VL16, 또는 VL17과 조합되는 VH2; 임의의 VL1, VL2, VL3, VL4, VL5, VL6, VL7, VL8, VL9, VL10, VL11, VL12, VL13, VL14, VL15, VL16, 또는 VL17과 조합되는 VH3 등을 포함한다.
일부 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 표 4에 열거된 것으로부터의 적어도 하나의 중쇄 가변 부위 및/또는 하나의 경쇄 가변 부위를 포함한다. 특정 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편은 표 4에 열거된 것으로부터의 적어도 2개의 상이한 중쇄 가변 부위 및/또는 경쇄 가변 부위를 포함한다. 이와 같은 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편의 예는 (a) 하나의 VH1, 및 (b) VH2, VH3, VH4, VH5, VH6, VH7, VH8, VH9, VH10, VH11, VH12, 또는 VH13 중 하나를 포함한다. 다른 예는 (a) 하나의 VH2, 및 (b) VH1, VH3, VH4, VH5, VH6, VH7, VH8, VH9, VH10, VH11, VH12, 또는 VH13 중 하나를 포함한다. 또 다른 예는 (a) 하나의 VH3, 및 (b) VH1, VH2, VH4, VH5, VH6, VH7, VH8, VH9, VH10, VH11, VH12, 또는 VH13 중의 하나 등을 포함한다. 이와 같은 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편의 또 다른 예는 (a) 하나의 VL1, 및 (b) VL2, VL3, VL4, VL5, VL6, VL7, VL8, VL9, VL10, VL11, VL12, VL13, VL14, VL15, VL16, 또는 VL17, VL18, VL19, VL20, 또는 VL21 중 하나를 포함한다. 이와 같은 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편의 또 다른 예는 (a) 하나의 VL2, 및 (b) VL1, VL3, VL4, VL5, VL6, VL7, VL8, VL9, VL10, VL11, VL12, VL13, VL14, VL15, VL16, VL17, VL18, VL19, VL20, 또는 VL21 중 하나를 포함한다. 이와 같은 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편의 또 다른 예는 (a) 하나의 VL3, 및 (b) VL1, VL2, VL4, VL5, VL6, VL7, VL8, VL9, VL10, VL11, VL12, VL13, VL14, VL15, VL16, VL17, VL18, VL19, VL20, 또는 VL21 중의 하나 등을 포함한다. 중쇄 가변 부위의 다양한 조합은 본 기술분야의 통상의 기술자에게 자명한 경쇄 가변 부위의 임의의 다양한 조합과 조합될 수 있다.
다른 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편은 2개의 동일한 경쇄 가변 부위 및/또는 2개의 동일한 중쇄 가변 부위를 포함한다. 예로서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편은 표 4에 열거된 바와 같은 경쇄 가변 부위의 쌍들 및 중쇄 가변 부위의 쌍들의 조합으로 2개의 경쇄 가변 부위 및 2개의 중쇄 가변 부위를 포함한다.
본 명세서에서 기재된 방법의 특정 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 단지 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 또는 15개의 아미노산 잔기에서 VH1, VH2, VH3, VH4, VH5, VH6, VH7, VH8, VH9, VH10, VH11, VH12, 및 VH13으로부터 선택된 중쇄 가변 도메인의 서열과 상이한 아미노산의 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인을 포함하고, 여기서 각각의 이러한 서열 차이는 독립적으로 하나의 아미노산의 결실, 삽입 또는 치환이고, 전술한 가변 도메인 서열에 대해 15개 이하의 아미노산 변화를 생성하는 결실, 삽입 및/또는 치환이다. 일부 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편에서의 중쇄 가변 부위는 VH1, VH2, VH3, VH4, VH5, VH6, VH7, VH8, VH9, VH10, VH11, VH12, 및 VH13의 중쇄 가변 부위의 아미노산 서열에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 97% 또는 99%의 서열 동일성을 갖는 아미노산의 서열을 포함한다.
본 명세서에서 기재된 방법의 일부 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 단지 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 또는 15개의 아미노산 잔기에서 VL1, VL2, VL3, VL4, VL5, VL6, VL7, VL8, VL9, VL10, VL11, VL12, VL13, VL14, VL15, VL16, 또는 VL17로부터 선택되는 경쇄 가변 도메인의 서열과 상이한 아미노산의 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함하고, 여기서 이러한 각각의 서열 차이는 독립적으로 하나의 아미노산의 결실, 삽입 또는 치환이고, 전술한 가변 도메인 서열에 대해 15개 이하의 아미노산 변화를 생성하는 결실, 삽입 및/또는 치환이다. 일부 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편에서의 경쇄 가변 부위는 VL1, VL2, VL3, VL4, VL5, VL6, VL7, VL8, VL9, VL10, VL11, VL12, VL13, VL14, VL15, VL16, 또는 VL17의 경쇄 가변 부위의 아미노산 서열에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 97% 또는 99%의 서열 동일성을 갖는 아미노산의 서열을 포함한다.
특정 구현예에서, 본 발명의 방법에 사용하기에 적합한 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 경쇄 가변 부위 (VL) 및 중쇄 가변 부위 (VH)를 포함하고, 여기서,
(a) VL은 서열번호: 75의 서열을 포함하고, VH는 서열번호: 92의 서열을 포함하고;
(b) VL은 서열번호: 76의 서열을 포함하고, VH는 서열번호: 93의 서열을 포함하고;
(c) VL은 서열번호: 77의 서열을 포함하고, VH는 서열번호: 94의 서열을 포함하고;
(d) VL은 서열번호: 78의 서열을 포함하고, VH는 서열번호: 95의 서열을 포함하고;
(e) VL은 서열번호: 79의 서열을 포함하고, VH는 서열번호: 96의 서열을 포함하고;
(f) VL은 서열번호: 80의 서열을 포함하고, VH는 서열번호: 92의 서열을 포함하고;
(g) VL은 서열번호: 81의 서열을 포함하고, VH는 서열번호: 97의 서열을 포함하고;
(h) VL은 서열번호: 82의 서열을 포함하고, VH는 서열번호: 96의 서열을 포함하고;
(i) VL은 서열번호: 83의 서열을 포함하고, VH는 서열번호: 92의 서열을 포함하고;
(j) VL은 서열번호: 84의 서열을 포함하고, VH는 서열번호: 98의 서열을 포함하고;
(k) VL은 서열번호: 85의 서열을 포함하고, VH는 서열번호: 99의 서열을 포함하고;
(l) VL은 서열번호: 86의 서열을 포함하고, VH는 서열번호: 100의 서열을 포함하고;
(m) VL은 서열번호: 86의 서열을 포함하고, VH는 서열번호: 101의 서열을 포함하고;
(n) VL은 서열번호: 87의 서열을 포함하고, VH는 서열번호: 96의 서열을 포함하고;
(o) VL은 서열번호: 88의 서열을 포함하고, VH는 서열번호: 102의 서열을 포함하고;
(p) VL은 서열번호: 89의 서열을 포함하고, VH는 서열번호: 103의 서열을 포함하고;
(q) VL은 서열번호: 90의 서열을 포함하고, VH는 서열번호: 104의 서열을 포함하고; 또는
(r) VL은 서열번호: 91의 서열을 포함하고, VH는 서열번호: 104의 서열을 포함한다.
일부 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편은 상기 쌍형성에서 특정 가변성 도메인과 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 97% 또는 99% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함할 수 있다. 하나의 특별한 구현예에서, 본원에 기재된 방법에 사용되는 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 서열번호: 92의 서열을 포함하는 중쇄 가변 부위 및 서열번호: 80의 서열을 포함하는 경쇄 가변 부위를 포함한다. 또 다른 하나의 특별한 구현예에서, 본원에 기재된 방법에 사용되는 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 서열번호: 98의 서열을 포함하는 중쇄 가변 부위 및 서열번호: 84의 서열을 포함하는 경쇄 가변 부위를 포함한다.
본 발명의 방법에 유용한 항-CGRP 수용체 항체의 전장 경쇄 및 중쇄의 일부 및 그것의 대응하는 아미노산 서열의 구체적인 예는 표 5 및 6에 요약되어 있다. 표 5는 예시적인 중쇄 서열을 나타내고, 표 6은 예시적인 경쇄 서열을 나타낸다.
표 5. 예시적인 항체 중쇄 아미노산 서열
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표 6. 예시적인 항체 경쇄 아미노산 서열
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예를 들어, 특정 유형의 숙주 세포에서 중쇄 및 경쇄 서열의 발현을 촉진하기 위한 신호 펩티드 서열은 표 5 및 6에 열거된 임의의 중쇄 및 경쇄 서열의 아미노 말단에 부착/융합될 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, MDMRVPAQLLGLLLLWLRGARC (서열번호: 135)의 아미노산 서열을 갖는 신호 펩티드는 표 5 및 6에 열거된 임의의 중쇄 및 경쇄 서열의 아미노 말단에 융합된다. 다른 구현예에서, METPAQLLFLLLLWLPDTTG (서열번호: 136)의 아미노산 서열을 갖는 신호 펩티드는 표 5 및 6에 열거된 임의의 중쇄 및 경쇄 서열의 아미노 말단에 융합된다. 다른 신호 펩티드는 당해 기술분야의 통상의 기술자에게 공지되어 있고, 예를 들어 특정 숙주 세포에서의 발현을 촉진하거나 또는 최적화하기 위해 표 5 및 6에 열거된 임의의 중쇄 및/또는 경쇄 서열에 융합될 수 있다.
표 5에 열거된 각각의 예시적인 중쇄 (H1, H2, H3 등)은 표 6에 나타낸 임의의 예시적인 경쇄와 조합되어 본원에 기재된 방법에 사용하기에 적합한 항-CGRP 수용체 항체를 형성할 수 있다. 이러한 조합의 예는 임의의 L1 내지 L17과 조합되는 H1; 임의의 L1 내지 L17과 조합되는 H2; 임의의 L1 내지 L17과 조합되는 H3 등을 포함한다. 일부 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체는 표 5 및 6에 열거된 것으로부터의 적어도 하나의 중쇄 및 하나의 경쇄를 포함한다. 일부 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체는 표 5 및 6에 열거된 2개의 상이한 중쇄 및 2개의 상이한 경쇄를 포함한다. 다른 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체는 2개의 동일한 경쇄 및 2개의 동일한 중쇄를 포함한다. 예로서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 2개의 H1 중쇄 및 2개의 L1 경쇄, 또는 2개의 H2 중쇄 및 2개의 L2 경쇄, 또는 2개의 H3 중쇄 및 2개의 L3 경쇄 및 표 5 및 6에 열거된 바와 같은 경쇄의 쌍 및 중쇄의 쌍의 다른 유사한 조합을 포함할 수 있다.
본 발명의 방법에서 이용되는 항-CGRP 수용체 항체는 표 5 및 6에 나타낸 중쇄 및 경쇄의 조합에 의해 형성된 항체의 변이체일 수 있고, 각각 이들 쇄의 아미노산 서열에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 97% 또는 99%의 동일성을 갖는 경쇄 및/또는 중쇄를 포함할 수 있다. 일부 경우에서, 이러한 항체는 적어도 하나의 중쇄 및 하나의 경쇄를 포함하고, 반면 다른 경우에서, 변이체는 2개의 동일한 경쇄 및 2개의 동일한 중쇄를 포함한다.
본원에 기재된 방법의 일부 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체는 하기를 포함한다:
(a) 서열번호: 105의 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호: 118의 서열을 포함하는 경쇄;
(b) 서열번호: 106의 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호: 119의 서열을 포함하는 경쇄;
(c) 서열번호: 107의 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호: 120의 서열을 포함하는 경쇄;
(d) 서열번호: 108의 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호: 121의 서열을 포함하는 경쇄;
(e) 서열번호: 109의 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호: 122의 서열을 포함하는 경쇄;
(f) 서열번호: 105의 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호: 123의 서열을 포함하는 경쇄;
(g) 서열번호: 110의 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호: 124의 서열을 포함하는 경쇄;
(h) 서열번호: 109의 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호: 125의 서열을 포함하는 경쇄;
(i) 서열번호: 105의 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호: 126의 서열을 포함하는 경쇄;
(j) 서열번호: 111의 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호: 127의 서열을 포함하는 경쇄;
(k) 서열번호: 112의 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호: 128의 서열을 포함하는 경쇄;
(l) 서열번호: 113의 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호: 129의 서열을 포함하는 경쇄;
(m) 서열번호: 114의 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호: 129의 서열을 포함하는 경쇄;
(n) 서열번호: 109의 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호: 130의 서열을 포함하는 경쇄;
(o) 서열번호: 115의 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호: 131의 서열을 포함하는 경쇄;
(p) 서열번호: 116의 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호: 132의 서열을 포함하는 경쇄;
(q) 서열번호: 117의 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호: 133의 서열을 포함하는 경쇄; 또는
(r) 서열번호: 117의 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호: 134의 서열을 포함하는 경쇄.
하나의 특별한 구현예에서, 본 발명의 방법에 사용된 항-CGRP 수용체 항체는 서열번호: 105의 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호: 123의 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 또 다른 특정 구현예에서, 본 발명의 방법에 사용된 항-CGRP 수용체 항체는 서열번호: 111의 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호: 127의 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다.
본 발명의 방법에 사용하기 위한 예시적인 항-CGRP 수용체 항체는 비제한적으로 항체 1E11, 1H7, 2E7, 3B6, 3C8, 4E4, 4H6, 5F5, 9D4, 9F5, 10E4, 11D11, 11H9, 12E8, 12G8, 13H2 및 32H7을 포함한다. 표 7은 각각의 이들 항체의 구조적인 특징을 요약하고 있다.
표 7. 예시적인 항- CGRP 수용체 항체
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본원에 기재된 방법에 사용되는 항-CGRP 수용체 항체는 단일클론성 항체, 다클론성 항체, 재조합 항체, 인간 항체, 인간화 항체, 키메라 항체, 다중특이적 항체, 또는 그것의 항원-결합 단편일 수 있다. 특정 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체는 단일클론성 항체이다. 그와 같은 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체는 인간 단일클론성 항체일 수 있다. 일부 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체는 인간 항체이고, IgG1-, IgG2-, IgG3-, 또는 IgG4-유형의 것일 수 있다. 따라서, 항-CGRP 수용체 항체는 일부 구현예에서 인간 IgG1 또는 인간 IgG2 불변 도메인을 가질 수 있다. 일 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체는 단일클론성 IgG1 항체이다. 또 다른 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체는 단일클론성 IgG2 항체이다.
단일클론성 항체는 예를 들어 면역화 스케줄의 완료 이후 형질전환 동물로부터 수득된 비장 세포를 불멸화시킴으로써 당해 기술에 공지된 임의의 기술을 사용하여 생성될 수 있다. 비장 세포는 예를 들어 하이브리도마를 생성하기 위해 골수종 세포와 이를 융합시킴으로써 당해 기술에 공지된 임의의 기술을 사용하여 불멸화될 수 있다. 하이브리도마-생성 융합 절차에서 사용하기 위한 골수종 세포는 항체 비-생성이고, 높은 융합 효율, 및 목적하는 융합된 세포 (하이브리도마)만의 성장을 지지하는 특정 선택 배지에서 이들이 성장할 수 없게 하는 효소 결핍을 갖는다. 마우스 융합에서 사용하기에 적합한 세포주의 예는 Sp-20, P3-X63/Ag8, P3-X63-Ag8.653, NS1/1.Ag 4 1, Sp210-Ag14, FO, NSO/U, MPC-11, MPC11-X45-GTG 1.7 및 S194/5XXO Bul을 포함하고, 랫트 융합에서 사용되는 세포주의 예는 R210.RCY3, Y3-Ag 1.2.3, IR983F 및 4B210을 포함한다. 세포 융합에 유용한 다른 세포주는 U-266, GM1500-GRG2, LICR-LON-HMy2 및 UC729-6이다.
일부 경우에서, 하이브리도마 세포주는 동물 (예를 들어, 인간 면역글로불린 서열을 갖는 형질전환 동물)을 CGRP 수용체 면역원으로 면역화하고; 면역화된 동물로부터 비장 세포를 수득하고; 수득된 비장 세포를 골수종 세포주와 융합하고, 이로써 하이브리도마 세포를 생성하고; 하이브리도마 세포로부터 하이브리도마 세포주를 확립하고, CGRP 수용체와 결합하는 항체를 생성하는 하이브리도마 세포주를 확인함으로써 생성된다.
하이브리도마 세포주에 의해 분비된 단일클론성 항체는 당해 기술에 공지된 임의의 기술을 사용하여 정제될 수 있다. 하이브리도마 또는 mAb는 특별한 특성, 예컨대 CGRP 수용체를 발현하는 세포와의 결합 능력, CGRP 리간드 또는 CGRP8 -37 펩티드의 결합을 차단하거나 방해하는 능력, 또는 예를 들어, 본원에 기재된 바와 같은 예를 들어 cAMP 검정 등을 사용하여 수용체를 기능적으로 차단하는 능력을 갖는 mAb를 확인하기 위해 추가로 선별될 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 방법에 사용되는 항-CGRP 수용체 항체는 전술한 서열을 기초로 하는 키메라 또는 인간화 항체이다. 키메라 항체는 기능적 면역글로불린 경쇄 또는 중쇄 또는 그의 면역학적 기능적 일부를 생성하도록 공유 결합된 상이한 항체로부터의 단백질 세그먼트로 구성된 항체이다. 일반적으로, 중쇄 및/또는 경쇄의 일부는 특정 종으로부터 유래되거나 특정 항체 부류 또는 하위부류에 속하는 항체의 대응 서열과 동일하거나 상동성이고, 쇄(들)의 나머지는 다른 종으로부터 유래되거나 또 다른 항체 부류 또는 하위부류에 속하는 항체의 대응 서열과 동일하거나 상동성이다. 키메라 항체와 관련된 방법에 대해서는, 예를 들어 미국 특허 제4,816,567호; 문헌 [Morrison et al., 1985, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81:6851-6855]을 참조하고, 상기 문헌은 본원에 참조로 포함된다. CDR 그라프팅은 예를 들어 미국 특허 제6,180,370호, 제5,693,762호, 제5,693,761호, 제5,585,089호, 및 제5,530,101호에 기재되어 있다.
일반적으로, 키메라 항체를 제조하는 목표는 의도된 종으로부터의 아미노산의 수가 최대화된 키메라를 생성하는 것이다. 하나의 예는 "CDR-그라프팅된" 항체이고, 여기서의 항체는 특정 종으로부터의 또는 특정 항체 부류 또는 하위부류에 속하는 하나 이상의 CDR을 포함하고, 항체 쇄(들)의 나머지는 다른 종으로부터 유래되거나 다른 항체 부류 또는 하위부류에 속하는 항체의 대응 서열과 동일하거나 상동성이다. 인간에서 사용하기 위해, 설치류 항체로부터의 가변 부위 또는 선택된 CDR이 종종 인간 항체로 그라프팅되어 인간 항체의 자연 발생 가변 부위 또는 CDR을 대체한다.
키메라 항체의 한 유용한 유형은 "인간화" 항체이다. 일반적으로, 인간화 항체는 비-인간 동물에서 처음 생성된 단일클론성 항체로부터 생성된다. 전형적으로는 항체의 비-항원 인식 부분으로부터 유래되는 이러한 단일클론성 항체에서의 특정 아미노산 잔기는, 대응 아이소타입의 인간 항체에서 대응 잔기와 상동성이도록 변형된다. 인간화는 예를 들어 설치류 가변 부위의 적어도 일부를 인간 항체의 대응 부위로 치환하는 다양한 방법을 사용하여 수행될 수 있다 (예를 들어, 미국 특허 제5,585,089호, 및 제5,693,762호; 문헌 [Jones et al., 1986, Nature 321:522-525; Riechmann et al., 1988, Nature　332:323-27; Verhoeyen et al., 1988, Science 239:1534-1536] 참조).
일 양태에서, 본원 (표 2 및 3 참조)에 제공된 항체의 경쇄 및 중쇄 가변 부위의 CDR은 동일하거나 또는 상이한 계통발생 종의 항체로부터의 프레임워크 영역 (FR)에 그라프팅된다. 예를 들어, 중쇄 및 경쇄 가변 부위 VH1, VH2, VH3, VH4, VH5, VH6, VH7, VH8, VH9, VH10, VH11, VH12, 및 VH13, 및/또는 VL1, VL2, VL3, VL4, VL5, VL6, VL7, VL8, VL9, VL10, VL11, VL12, VL13, VL14, VL15, VL16, 및 VL17의 CDR은 컨센서스(consensus) 인간 FR에 그라프팅될 수 있다. 컨센서스 인간 FR을 생성하기 위해, 다수의 인간 중쇄 또는 경쇄 아미노산 서열로부터의 FR은 컨센서스 아미노산 서열을 확인하도록 정렬될 수 있다. 다른 구현예에서, 본원에 개시된 중쇄 또는 경쇄의 FR은 상이한 중쇄 또는 경쇄로부터의 FR로 대체된다. 일 양태에서, 항-CGRP 수용체 항체의 중쇄 및 경쇄의 FR에서의 희귀 아미노산은 대체되지 않고, 한편 FR 아미노산의 나머지가 대체된다. "희귀 아미노산"은 특정 아미노산이 FR에서 일반적으로 발견되지 않는 위치에 있는 특정 아미노산이다. 대안적으로, 하나의 중쇄 또는 경쇄로부터의 그라프팅된 가변 부위가, 본원에 개시된 이러한 특정한 중쇄 또는 경쇄의 불변 부위와는 상이한 불변 부위와 함께 사용될 수 있다. 다른 구현예에서, 그라프팅된 가변 부위는 단일 쇄 Fv 항체의 일부이다.
특정 구현예에서, 본 발명의 방법에 사용되는 항-CGRP 수용체 항체 또는 그것의 항원-결합 단편은 완전 인간 항체이다. 상기 방법은 인간을 항원을 노출시키지 않고 상기 소정의 항원에 대해 특이적인 완전 인간 항체 ("완전 인간 항체") 제조에 이용가능하다. 완전 인간 항체의 생산을 실시하기 위해 제공되는 하나의 특정 수단은 마우스 체액성 면역계의 "인간화"이다. 내인성 Ig 유전자가 불활성화된 마우스로의 인간 면역글로불린 (Ig) 유전자좌의 도입은 임의의 목적하는 항원으로 면역화될 수 있는 동물인 마우스에서 완전 인간 단일클론성 항체 (mAb)를 생성하는 한 수단이다. 완전 인간 항체를 사용하는 것은 치료제로서 마우스 또는 마우스-유래 mAb를 인간에 투여함으로써 종종 야기될 수 있는 면역원성 및 알러지성 반응을 최소화할 수 있다.
완전 인간 항체는 내인성 면역글로불린 생산의 부재하에 인간 항체의 레퍼토리를 생성할 수 있는 트랜스제닉 동물 (일반적으로 마우스)을 면역화함으로써 생성될 수 있다. 이러한 목적을 위한 항원은 전형적으로 6개 이상의 인접 아미노산을 갖고, 임의로 캐리어, 예컨대 합텐에 접합된다. 예를 들어, 문헌 [Jakobovits et al., 1993, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:2551-2555; Jakobovits et al.,　1993, Nature 362:255-258; 및 Bruggermann et al., 1993, Year in Immunol. 7:33]을 참고한다. 그와 같은 방법의 일 예에서, 트랜스제닉 동물은 마우스 면역글로불린 중쇄 및 경쇄를 엔코딩하는 내인성 마우스 면역글로불린 유전자좌를 불능으로 하고, 마우스 게놈으로 인간 중쇄 및 경쇄 단백질을 엔코딩하는 유전자좌를 함유하는 큰 단편의 인간 게놈 DNA를 삽입함으로써 생성된다. 인간 면역글로불린 유전자좌의 전체 상보체보다 더 적게 부분적으로 변형된 동물은 이후 모든 목적하는 면역계 변형을 갖는 동물을 얻기 위해 이종 교배된다. 면역원이 투여되는 경우, 이러한 트랜스제닉 동물은 가변 부위를 포함하는 뮤린(murine) 아미노산 서열이 아닌 인간의 것을 갖는 면역원에 대해 면역특이적인 항체를 생성한다. 이러한 방법의 추가의 설명을 위해서는 예를 들어 WO96/33735 및 WO94/02602를 참조한다. 인간 항체를 제조하기 위한 트랜스제닉 마우스와 관련된 추가적인 방법은 미국 특허 제5,545,807호; 제6,713,610; 제6,673,986호; 제6,162,963호; 제5,545,807호; 제6,300,129호; 제6,255,458호; 제5,877,397호; 제5,874,299호 및 제5,545,806호; PCT 공개 WO91/10741, WO90/04036, 및 EP 546073B1 및　EP　546073A1에 기재되어 있다.
본원에서 "HuMab" 마우스로 지칭되는 상기 기재된 트랜스제닉 마우스는 내인성 [mu] 및 [카파] 쇄 유전자좌를 불활성화시키는 표적화된 돌연변이와 함께 재배열되지 않은 인간 중쇄 ([mu] 및 [감마]) 및 [카파] 경쇄 면역글로불린 서열을 엔코딩하는 인간 면역글로불린 유전자 미니로커스를 함유한다 (문헌 [Lonberg et al., 1994, Nature 368:856-859]). 따라서, 마우스는 면역화에 대한 반응시 마우스 IgM 또는 [카파]의 감소된 발현을 나타내고, 도입된 인간 중쇄 및 경쇄 전이유전자는 높은 친화성 인간 IgG [카파] 단일클론성 항체를 생성하는 부류 변환(class switching) 및 체세포 돌연변이가 일어난다 (문헌 [Lonberg et al., 상기 문헌; Lonberg and Huszar, 1995, Intern. Rev. Immunol. 13:65-93; Harding and Lonberg, 1995, Ann. N.Y Acad. Sci. 764:536-546]). HuMab 마우스의 제조는 문헌 [Taylor et al., 1992, Nucleic Acids Research 20:6287-6295; Chen et al., 1993, International Immunology 5:647-656; Tuaillon et al., 1994, J. Immunol. 152:2912-2920; Lonberg et al., 1994, Nature 368:856-859; Lonberg, 1994, Handbook of Exp. Pharmacology 113:49-101; Taylor et al., 1994, International Immunology 6:579-591; Lonberg and Huszar, 1995, Intern. Rev. Immunol. 13:65-93; Harding and Lonberg, 1995, Ann. N.Y Acad. Sci. 764:536-546; Fishwild et al., 1996, Nature Biotechnology 14:845-851]에 상세하게 기재되어 있고, 상기 문헌은 어떠한 목적으로든 그 전문이 본원에 참조로 포함된다. 추가의 미국 특허 제5,545,806호; 제5,569,825호; 제5,625,126호; 제5,633,425호; 제5,789,650호; 제5,877,397호; 제5,661,016호; 제5,814,318호; 제5,874,299호; 및 제5,770,429호; 또한 미국 특허 제5,545,807호; 국제공개 번호 WO 93/1227; WO 92/22646; 및 WO 92/03918를 참조하고, 이의 모든 개시내용은 어떠한 목적으로든 그 전문이 참조로 본원에 포함된다. 이러한 트랜스제닉 마우스에서 인간 항체를 생성하는데 이용하는 기술은 또한 WO 98/24893 및 문헌 [Mendez et al.,　1997, Nature Genetics 15:146-156]에 개시되어 있고, 이는 참조로 본원에 포함된다. 예를 들어, HCo7 및 HCo12 트랜스제닉 마우스 균주는 항-CGRP 수용체 항체를 생성하는데 사용될 수 있다.
본원에 기재된 방법에 사용될 수 있는 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편의 일부는 상기 개시된 항-CGRP 수용체 항체의 변이체 형태 (예를 들어, 표 2-7에 열거된 서열을 갖는 것)이다. 예로서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편은 표 2-7에 열거된 중쇄 또는 경쇄, 가변 부위 또는 CDR 중 하나 이상에서 하나 이상의 보존적 아미노산 치환을 가질 수 있다. 보존적 아미노산 치환은 공통적인 측쇄 특성 (예를 들어, 소수성, 중성 친수성, 산성, 염기성, 및 방향족)을 갖는 다른 아미노산으로의 아미노산 교환을 수반할 수 있다. 예를 들어, 보존적 치환은 다른 소수성 아미노산으로의 소수성 아미노산 (예를 들어, 노르류신, 메티오닌, 알라닌, 발린, 류신, 또는 이소류신)의 치환을 포함한다. 보존적 아미노산 치환은 비-자연 발생 아미노산 잔기를 포괄할 수 있고, 이는 전형적으로 생물학적 시스템에서의 합성에 의한 것이 아닌 화학적 펩티드 합성에 의해 혼입된다. 이들은 아미노산 모이어티의 펩티드유사체 및 다른 역전된 또는 반전된 형태 포함한다.
이러한 변화를 이루는데 있어서, 특정 구현예에 따라, 아미노산의 소수도 지수(hydropathic index)가 고려될 수 있다. 단백질의 소수도 프로파일은 각각의 아미노산에 수치 ("소수도 지수")를 할당하고, 그 다음 반복적으로 펩티드 쇄에 따라 이들 값을 평균화함으로써 계산된다. 각각의 아미노산에는 이의 소수성 및 변화 특징에 기초하여 소수도 지수가 할당되었다. 이는 다음과 같다: 이소류신 (+4.5); 발린 (+4.2); 류신 (+3.8); 페닐알라닌 (+2.8); 시스테인/시스틴 (+2.5); 메티오닌 (+1.9); 알라닌 (+1.8); 글리신 (-0.4); 트레오닌 (-0.7); 세린 (-0.8); 트립토판 (-0.9); 티로신 (-1.3); 프롤린 (-1.6); 히스티딘 (-3.2); 글루타메이트 (-3.5); 글루타민 (-3.5); 아스파르테이트 (-3.5); 아스파라긴 (-3.5); 라이신 (-3.9); 및 아르기닌 (-4.5).
단백질에 상호작용 생물학적 기능을 부여하는데 있어서의 소수도 프로파일의 중요성은 당해 기술분야에서 이해되고 있다 (예를 들어, 문헌 [Kyte et al., 1982, J. Mol. Biol. 157:105-131] 참조). 특정 아미노산은 유사한 소수도 지수 또는 평점을 갖는 다른 아미노산에 대해 치환될 수 있고, 여전히 유사한 생물학적 활성을 보유하는 것으로 알려져 있다. 소수도 지수에 기초하여 변화를 이루는데 있어서, 특정 구현예에서, 소수도 지수가 ±2 내에 있는 아미노산의 치환이 포함된다. 일부 양태에서는 ±1 내에 있는 것이 포함되고, 다른 양태에서는 ±0.5 내에 있는 것이 포함된다.
또한, 본 기술분야에서는 유사 아미노산의 치환이 특히 이에 의해 생성된 생물학적으로 기능성인 단백질 또는 펩티드가 본 경우에서와 같이 면역학적 구현예에서 사용하기 위한 것으로 의도되는 경우에 친수성에 기초하여 효과적으로 이루어질 수 있는 것으로 이해되고 있다. 특정 구현예에서, 단백질의 최대 국소적 평균 친수성은 그것의 인접한 아미노산의 친수성에 의해 지배되는 것과 같이 그것의 면역원성 및 항원-결합 또는 면역원성, 즉 단백질의 생물학적 특성과 상호관련된다.
이들 아미노산 잔기에는 하기 친수성 값이 할당되었다: 아르기닌 (+3.0); 라이신 (+3.0); 아스파르테이트 (+3.0±1); 글루타메이트 (+3.0±1); 세린 (+0.3); 아스파라긴 (+0.2); 글루타민 (+0.2); 글리신 (0); 트레오닌 (-0.4); 프롤린 (-0.5±1); 알라닌 (-0.5); 히스티딘 (-0.5); 시스테인 (-1.0); 메티오닌 (-1.3); 발린 (-1.5); 류신 (-1.8); 이소류신 (-1.8); 티로신 (-2.3); 페닐알라닌 (-2.5) 및 트립토판 (-3.4). 유사한 친수성 값에 기초하여 변화가 이루어지는 경우, 특정 구현예에서, 친수성 값이 ±2 내에 있는 아미노산의 치환이 포함되고, 다른 구현예에서, ±1 내에 있는 것이 포함되고, 다른 구현예에서, ±0.5의 내의 것이 포함된다. 일부 경우에서, 통상의 기술자는 또한 친수성에 기초하여 1차 아미노산 서열로부터 에피토프를 확인할 수 있다. 이러한 영역은 "에피토프 코어 영역"으로 또한 지칭된다.
예시적인 보존적 아미노산 치환은 표 8에 기재되어 있다.
표 8: 보존적 아미노산 치환
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Figure 112017117202061-pct00021
통상의 기술자는 공지된 기술을 사용하여 본원에 기재된 항-CGRP 수용체 항체의 적합한 변이체를 결정할 수 있을 것이다. 당해 기술분야의 통상의 기술자는 활성에 중요한 것으로 여겨지지 않는 영역을 표적화함으로써 활성을 저해하지 않고 변화될 수 있는 분자의 적합한 부분을 확인할 수 있다. 통상의 기술자는 또한 유사 폴리펩티드 중에서 보존되는 분자의 잔기 및 부분을 확인할 수 있을 것이다. 추가 구현예에서, 생물학적 활성 또는 구조에 대해 중요할 수 있는 부분이더라도 생물학적 활성을 저해하지 않고 또는 폴리펩티드 구조에 부정적인 영향을 미치지 않고 보존적 아미노산 치환이 이루어질 수 있다.
추가로, 당해 기술분야의 통상의 기술자는 활성 또는 구조에 중요한 유사 폴리펩티드에서의 잔기를 확인하는 구조-기능 연구를 검토할 수 있다. 이러한 비교의 관점에서, 통상의 기술자는 유사한 단백질에서 활성 또는 구조에 중요한 아미노산 잔기에 상응하는 단백질 아미노산 잔기의 중요성을 예상할 수 있다. 당해분야의 통상의 기술자는 이러한 예상된 중요한 아미노산 잔기에 대해 화학적으로 유사한 아미노산 치환을 선택할 수 있다.
당해 기술분야의 통상의 기술자는 또한 유사 폴리펩티드의 구조와 관련하여 3-차원 구조 및 아미노산 서열을 분석할 수 있다. 이러한 정보의 관점에서, 당해 기술분야의 통상의 기술자는 항체의 아미노산 잔기의 정렬을 그것의 3차원 구조와 관련하여 예측할 수 있다. 당해 기술분야의 통상의 기술자는 단백질의 표면 상에 있을 것으로 예상된 아미노산 잔기에 라디칼 변화가 이루어지지 않도록 선택할 수 있고, 이는 이러한 잔기가 다른 분자와의 중요한 상호작용에 관여될 수 있기 때문이다. 또한, 당해 기술분야의 통상의 기술자는 각각의 목적하는 아미노산 잔기에서 단일 아미노산 치환을 함유하는 시험 변이체를 생성할 수 있다. 이들 변이체는 이후 CGRP 수용체 중화 활성에 대한 검정을 사용하여 선별될 수 있고, 이에 따라 어떠한 아미노산이 변화될 수 있는지와 변화되지 않아야 하는 지에 대한 정보를 얻는다. 즉, 이러한 일상적인 실험으로부터 얻은 정보에 기초하여, 당해 기술분야의 통상의 기술자는 추가의 치환이 단독으로 또는 다른 돌연변이와 조합하여 회피되어야 하는 아미노산 위치를 용이하게 결정할 수 있다.
추가 바람직한 항체 변이체는 시스테인 변이체를 포함하고, 여기서 모 아미노산 서열 또는 원상태의 아미노산 서열에서의 하나 이상의 시스테인 잔기는 결실되거나 또는 다른 아미노산 (예를 들어, 세린)으로 치환된다. 시스테인 변이체는 특히 항체가 생물학적 활성 형태로 재폴딩되어야 하는 경우에 유용하다. 시스테인 변이체는 원상태의 항체보다 더 적은 시스테인 잔기를 가질 수 있고, 전형적으로 쌍을 이루지 않은 시스테인 잔기로부터 생성된 상화작용을 최소화하도록 짝수의 개수를 갖는다.
한 하위부류의 것인 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 하위부류 전환(subclass switching) 방법을 사용하여 상이한 하위부류로부터의 항체 또는 결합 단편으로 변화될 수 있다. 따라서, IgG 항체는 예를 들어 IgM 항체로부터 유래될 수 있고 그 반대일 수도 있다. 이러한 기술은 소정의 항체 (모 항체)의 항원 결합 특성을 가질 뿐만 아니라 모 항체의 것과 상이한 항체 아이소타입 또는 하위부류과 관련된 생물학적 특성을 나타내는 신규 항체의 제조를 가능하게 한다. 재조합 DNA 기법이 이용될 수 있다. 특정 항체 폴리펩티드를 엔코딩하는 클로닝된 DNA, 예를 들어 목적하는 아이소타입의 항체의 불변 도메인을 엔코딩하는 DNA가 이러한 절차에 이용될 수 있다. 예를 들어, 문헌 [Lantto et al., 2002, Methods Mol. Biol. 178:303-316]을 참조한다.
따라서, 본원에 기재된 항-CGRP 수용체 항체는 예를 들어 목적하는 아이소타입 (예를 들어, IgA, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgE, 및 IgD) 뿐만 아니라 이의 Fab 또는 F(ab')2 단편을 갖는 상기 기재된 가변 도메인 조합을 포함하는 것을 포함한다. 또한, IgG4를 목적으로 하는 경우, 이는 또한 IgG4 항체에서의 이종성을 야기할 수 있는 H쇄 내 이황화 결합을 형성하는 경향을 경감시키기 위해 본원에 참조로 포함되는 문헌 [Bloom et al., 1997, Protein Science 6:407]에 기재된 바와 같이 힌지 부위에 점 돌연변이 (CPSCP->CPPCP)를 도입하는 것이 바람직할 수 있다.
또한, 상이한 특성을 갖는 (즉, 이들이 결합하는 항원에 대한 친화도를 변화시키는) 항체를 유도하기 위한 기술이 또한 공지되어 있다. 쇄 셔플링(chain shuffling)으로 지칭되는 이러한 기술 중 하나는 종종 파아지 디스플레이(phage display)로 지칭되는 섬유상 박테리오파아지의 표면 상에 면역글로불린 가변 도메인 유전자 레퍼토리를 나타내는 것을 수반한다. 쇄 셔플링은 문헌 [Marks et al., 1992, BioTechnology 10:779]에 기재된 바와 같이 합텐 2-페닐옥사졸-5-온으로 고친화도 항체를 제조하는데 사용되어 왔다.
특정 바람직한 기능성 및 생화학적 특징을 갖는 CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편을 제조하기 위해 표 4에 기재된 중쇄 및 경쇄 가변 부위 또는 표 2 및 3에 기재된 CDR (및 엔코딩 핵산에 대한 대응되는 변형)에 보존적 변형이 이루어질 수 있다. 이러한 변형을 달성하기 위한 방법은 상기에 기재되어 있다.
본 발명의 방법에 사용하기 위한 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 임의의 수많은 종래 기술에 의해 제조될 수 있다. 예를 들어, 본원에 기재된 항-CGRP 수용체 항체는 당해 기술분야에 공지된 임의의 기술을 사용하여 재조합 발현 시스템에 의해 생성될 수 있다. 예를 들어, 문헌 [Monoclonal Antibodies, Hybridomas: A New Dimension in Biological Analyses, Kennet et al. (eds.) Plenum Press, New York (1980); and Antibodies: A Laboratory Manual, Harlow and Lane (eds.), Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (1988)]을 참조한다.
항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 하이브리도마 세포주 (예를 들어, 특히 항체는 하이브리도마에서 발현될 수 있음) 또는 하이브리도마 이외의 세포주에서 발현될 수 있다. 항체를 엔코딩하는 발현 구조체는 포유동물, 곤충 또는 미생물 숙주 세포를 형질전환시키는데 사용될 수 있다. 형질전환은 예를 들어 바이러스 또는 박테리오파아지에 폴리뉴클레오티드를 패키징하고, 미국 특허 제4,399,216호; 제4,912,040호; 제4,740,461호; 제4,959,455호에 의해 예시된 바와 같이 당해 기술분야에 공지된 형질감염 절차에 의해 구조물로 숙주 세포를 형질도입시키는 것을 포함하는, 숙주 세포로 폴리뉴클레오티드를 도입하기 위한 임의의 공지된 방법을 사용하여 수행될 수 있다. 사용되는 최적의 형질전환 절차는 형질전환될 숙주 세포의 유형에 좌우될 것이다. 포유동물 세포에 이종성 폴리뉴클레오티드를 도입하는 방법은 당해 기술분야에 잘 알려져 있고, 비제한적으로 덱스트란-매개 형질감염, 인산칼슘 침전, 폴리브렌 매개된 형질감염, 원형질 융합, 전기천공, 리포좀에서의 폴리뉴클레오티드(들)의 캡슐화, 양전하-하전된 지질과 핵산의 혼합, 및 핵으로의 DNA의 직접 미세주입을 포함한다.
재조합 발현 구조물은 전형적으로 하기 중 하나 이상을 포함하는 폴리펩티드를 엔코딩하는 핵산 분자를 포함한다: 항-CGRP 수용체 항체의 본원에 제공되는 하나 이상의 CDR; 경쇄 불변 부위; 경쇄 가변 부위; 중쇄 불변 부위 (예를 들어, CH1, CH2 및/또는 CH3); 중쇄 가변 부위; 및/또는 다른 스캐폴드 부분. 이들 핵산 서열은 표준 리게이션 기술을 사용하여 적절한 발현 벡터로 삽입된다. 일 구현예에서, 중쇄 또는 경쇄 불변 부위는 항-CGRP 수용체-특이적 중쇄 또는 경쇄 가변 부위의 C-말단에 부착되고, 발현 벡터로 리게이션된다. 벡터는 전형적으로 이용되는 특정 숙주 세포에서 기능적이도록 선택된다 (즉, 벡터는 숙주 세포 기구와 상용성이고, 유전자의 증폭 및/또는 발현을 가능하게 할 수 있음). 일부 구현예에서, 단백질 리포터, 예컨대 디하이드로폴레이트 환원효소를 사용하는 단백질-단편 상보성 검정(protein-fragment complementation assay)을 이용하는 벡터가 사용된다 (예를 들어, 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 제6,270,964호 참조). 적합한 발현 벡터는 예를 들어 Invitrogen Life Technologies 또는 BD Biosciences (이전 "Clontech")로부터 구입할 수 있다. 항체 및 단편을 클로닝하고 발현하기 위한 다른 유용한 벡터는 문헌 [Bianchi and McGrew, 2003, Biotech. Biotechnol. Bioeng. 84:439-44]에 기재된 것을 포함하고, 이는 본원에 참조로 포함된다. 추가의 적합한 발현 벡터는 예를 들어 문헌 [Methods Enzymol., vol. 185 (D. V. Goeddel, ed.), 1990, New York: Academic Press]에 논의되어 있다.
전형적으로, 임의의 숙주 세포에서 사용되는 발현 벡터는 플라스미드 유지 및 외인성 뉴클레오티드 서열의 클로닝 및 발현을 위한 서열을 함유할 수 있다. 특정 구현예에서, 종합적으로 "플랭킹 서열(flanking sequence)"로서 지칭되는 이러한 서열은 전형적으로 하기의 뉴클레오티드 서열 중 하나 이상을 포함할 것이다: 프로모터, 하나 이상의 인핸서 서열, 복제 기점, 전사 종결 서열, 공여체 및 수용체 스플라이스 부위를 포함하는 완전 인트론 서열, 폴리펩티드 분비를 위한 리더 서열을 엔코딩하는 서열, 리보솜 결합 부위, 폴리아데닐화 서열, 발현될 폴리펩티드를 엔코딩하는 핵산을 삽입하기 위한 폴리링커 부위, 및 선별 마커 성분. 이러한 서열의 각각은 하기에 논의되어 있다.
임의로, 벡터는 "태그"-인코딩 서열, 즉, 항-CGRP 수용체 항체 코딩 서열의 5' 또는 3' 말단에 위치한 올리고뉴클레오티드 분자를 함유할 수 있고; 상기 올리고뉴클레오티드 서열은 폴리His (예컨대 헥사His), 또는 다른 "태그", 예컨대 FLAG®, HA (헤마글루티닌 인플루엔자 바이러스), 또는 myc (이 경우, 상업적으로 이용가능한 항체가 존재함)을 엔코딩한다. 이러한 태그는 전형적으로 폴리펩티드의 발현시 폴리펩티드에 융합되고, 숙주 세포로부터 항-CGRP 수용체 항체를 친화성 정제 또는 검출하는 수단으로서 역할을 할 수 있다. 친화성 정제는 예를 들어 친화성 매트릭스로서 태그에 대한 항체를 사용하는 칼럼 크로마토그래피에 의해 달성될 수 있다. 임의로, 태그는 이후 예컨대 절단을 위한 특정 펩티다아제를 사용하는 다양한 수단에 의해 정제된 항-CGRP 수용체 항체로부터 제거될 수 있다.
플랭킹 서열은 상동성 (즉, 숙주 세포로서 동일한 종 및/또는 균주로부터의 것), 이종성 (즉, 숙주 세포 종 또는 균주 이외의 종으로부터의 것), 하이브리드 (즉, 하나 초과의 공급원으로부터의 플랭킹 서열의 조합), 합성적 또는 원상태의 것일 수 있다. 이와 같이, 플랭킹 서열의 공급원은 임의의 원핵 또는 진핵 유기체, 임의의 척추동물 또는 무척추동물 유기체, 또는 임의의 식물일 수 있고, 단 플랭킹 서열은 그 안에서 기능성이고 숙주 세포 기구에 의해 활성화될 수 있다.
벡터에서 유용한 플랭킹 서열은 본 기술분야에 잘 알려진 다수의 임의의 방법에 의해 얻을 수 있다. 전형적으로, 본원에 유용한 플랭킹 서열은 맵핑에 의해 및/또는 제한 엔도뉴클레아제 소화에 의해 종래에 확인된 것일 수 있고, 이에 따라 적절한 제한 엔도뉴클레아제를 사용하여 적절한 조직 공급원으로부터 단리될 수 있다. 일부 경우에서, 플랭킹 서열의 전체 뉴클레오티드 서열은 공지된 것일 수 있다. 본원에서, 플랭킹 서열은 핵산 합성 또는 클로닝에 대해 본원에 기재된 방법을 사용하여 합성될 수 있다.
플랭킹 서열이 모두 공지되거나 단지 일부만이 공지되어 있는 경우, 이는 폴리머라제 연쇄 반응 (PCR)를 사용하여 및/또는 적합한 프로브, 예컨대 동일한 또는 또 다른 종으로부터의 올리고뉴클레오티드 및/또는 플랭킹 서열 단편으로 게놈 라이브러리를 스크리닝함으로써 수득될 수 있다. 플랭킹 서열이 공지되지 않은 경우, 플랭킹 서열을 함유하는 DNA의 단편은 예를 들어 코딩 서열 또는 심지어 또 다른 유전자 또는 유전자들을 함유할 수 있는 더 큰 조각의 DNA로부터 단리될 수 있다. 단리는 적절한 DNA 단편을 생성하기 위해 제한 엔도뉴클레아제 소화, 이후 아가로스 겔 정제, Qiagen® 칼럼 크로마토그래피 (Chatsworth, CA), 또는 통상의 기술자에게 공지된 다른 방법을 사용하는 단리에 의해 달성될 수 있다. 이러한 목적을 달성하기 위한 적절한 효소의 선별은 본 기술분야의 통상의 기술자에게 용이하게 자명할 것이다.
복제 개시점은 전형적으로 상업적으로 구입한 원핵 발현 벡터의 일부, 및 숙주 세포에서의 벡터 증폭시 개시 보조지점이다. 선택된 벡터가 복제 부위의 개시점을 함유하지 않는 경우, 통상의 기술자는 공지된 서열에 기초하여 화학적으로 합성되어 벡터로 리게이션될 수 있다. 예를 들어, 플라스미드 pBR322 (New England Biolabs, Beverly, MA)으로부터의 복제 개시점은 대부분의 그램-음성 박테리아에 적합하고, 다양한 바이러스 개시점 (예를 들어, SV40, 폴리오마, 아데노바이러스, 소포성 구내염 바이러스 (VSV), 또는 파필로마바이러스, 예컨대 HPV 또는 BPV)이 포유동물 세포에서의 클로닝 벡터에 유용하다. 일반적으로, 포유동물 발현 벡터에는 복제 성분의 개시점이 필요하지 않다 (예를 들어, SV40 개시점은 대개 단독으로 사용되고, 이는 또한 바이러스 초기 프로모터를 함유하기 때문이다).
전사 종결 서열은 전형적으로 폴리펩티드 코딩 부위의 3' 내지 말단에 위치하고, 전사를 종결하는 역할을 한다. 일반적으로, 원핵 세포에서의 전사 종결 서열은 폴리-T 서열이 후속되는 G-C 풍부 단편이다. 상기 서열은 라이브러리로부터 용이하게 클로닝되거나 벡터의 일부로서 상업적으로 구입할 수도 있지만, 또한 핵산 합성에 대한 공지의 방법을 사용하여 용이하게 합성될 수도 있다.
선별 마커 유전자는 선택적 배양 배지에서 성장된 숙주 세포의 생존 및 성장을 위해 필요한 단백질을 엔코딩한다. 전형적인 선별 마커 유전자는 (a) 원핵 숙주 세포에 항생제 또는 다른 독소, 예를 들어 암피실린, 테트라사이클린, 또는 카나마이신에 대한 내성을 부여하거나, (b) 세포의 영양요구성 결핍을 보충하거나, 또는 (c) 복합 또는 제한 배지로부터는 이용가능하지 않은 중요 영양분을 공급하는 단백질을 엔코딩한다. 구체적인 선별 마커는 카나마이신 내성 유전자, 암피실린 내성 유전자, 및 테트라사이클린 내성 유전자이다. 유리하게는, 네오마이신 내성 유전자가 또한 원핵 및 진핵 숙주 세포 모두에서 선별을 위해 사용될 수 있다.
발현될 유전자 증폭에 다른 선별 유전자가 사용될 수 있다. 증폭은 성장 또는 세포 생존에 중요한 단백질의 생산에 요구되는 유전자가 재조합 세포의 연속적 생성되어 염색체 내에 일련하여 반복되는 과정이다. 포유동물 세포에 적합한 선별 마커의 예는 디하이드로폴레이트 환원효소 (DHFR) 및 프로모터 없는 티미딘 키나제 유전자를 포함한다. 포유동물 세포 형질전환체는, 오직 형질전환체만이 벡터 내에 존재하는 선별 유전자로 인해 생존되도록 독특하게 적용되는 선택 압력 하에 배치된다. 선택 압력은 형질전환된 세포를 배지 중 선택 제제의 농도가 연속적으로 증가하고 이로써 선별 유전자 및 다른 유전자, 예컨대 항-CGRP 수용체 항체를 엔코딩하는 DNA 모두의 증폭을 야기하는 조건 하에 배양함으로써 부가된다. 그 결과, 증가된 양의 폴리펩티드, 예컨대 항-CGRP 수용체 항체가 상기 증폭된 DNA로부터 합성된다.
리보솜-결합 부위는 일반적으로 mRNA의 번역 개시에 필요하고, 샤인 달가노 서열 (원핵생물) 또는 코작 서열 (진핵생물)을 특징으로 한다. 전형적으로, 상기 성분은 프로모터에 대해 3'에 위치하고 발현될 폴리펩티드의 코딩 서열에 대해 5'에 위치한다.
일부 경우에서, 예컨대 당화가 진핵 숙주 세포 발현 시스템에서 바람직한 경우, 통상의 기술자는 당화 또는 수율을 개선하기 위해 다양한 프리서열 또는 프로서열을 조작할 수 있다. 예를 들어, 통상의 기술자는 특정 신호 펩티드의 펩티다아제 절단 부위를 변경하거나 또는 당화에 영향을 줄 수 있는 프로서열을 부가할 수 있다. 최종 단백질 생성물은 (성숙 단백질의 첫번째 아미노산에 대해) -1 위치에서 발현에 부수적인 하나 이상의 추가적인 아미노산을 가질 수 있고, 이는 전체적으로 제거되지 않을 수 있다. 예를 들어, 최종 단백질 생성물은 아미노-말단에 부착된, 펩티다아제 절단 부위에서 발견되는 1개 또는 2개의 아미노산 잔기를 가질 수 있다. 대안적으로, 일부 효소 절단 부위의 사용은, 효소가 성숙 폴리펩티드 내의 이러한 부위를 절단하는 경우에는 약간 절단된 형태의 목적하는 폴리펩티드를 생성할 수 있다.
발현 및 클로닝은 전형적으로 숙주 유기체에 의해 인식되고 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편을 엔코딩하는 분자에 작동가능하게 연결되는 프로모터를 함유할 것이다. 프로모터는 구조 유전자의 전사를 조절하는, 구조 유전자 출발 코돈 (일반적으로 약 100 내지 1000 bp 이내) 상류 (즉, 5')에 위치하는 비전사 서열이다. 프로모터는 통상적으로 2개 부류 중 하나로 그룹화된다: 유도성 프로모터 및 구성적(constitutive) 프로모터. 유도성 프로모터는 배양 조건, 예컨대 영양소의 존재 또는 부재 하의 일부 변화 또는 온도의 변화에 반응하여 이의 조절 하에서 DNA로부터의 증가된 수준의 전사를 개시한다. 한편, 구성적 프로모터는 그에 작동가능하게 연결된 유전자를 균일하게 전사하며, 즉 유전자 발현을 거의 조절하지 않거나 전혀 조절하지 않는다. 다양한 잠재적인 숙주 세포에 의해 인식되는 다수의 프로모터는 잘 알려져 있다. 적합한 프로모터는 제한 효소 소화에 의해 공급원 DNA로부터 프로모터를 제거하고, 목적하는 프로모터 서열을 벡터에 삽입함으로써 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편을 포함하는 중쇄 또는 경쇄를 엔코딩하는 DNA에 작동가능하게 연결된다.
효모 숙주와 함께 사용하기에 적합한 프로모터는 또한 당해 기술분야에서 잘 알려져 있다. 효모 인핸서는 유리하게는 효모 프로모터와 함께 사용된다. 포유동물 숙주 세포와 함께 사용하기에 적합한 프로모터가 잘 알려져 있고, 비제한적으로 바이러스, 예컨대 폴리오마 바이러스, 계두 바이러스, 아데노바이러스 (예컨대 아데노바이러스 2), 소 유두종 바이러스, 조류 육종 바이러스, 사이토메갈로바이러스, 레트로바이러스, 간염-B 바이러스, 및 유인원 바이러스 40 (SV40)의 게놈으로부터 수득한 것을 포함한다. 다른 적합한 포유동물 프로모터는 이종성 포유동물 프로모터, 예를 들어, 열-충격 프로모터 및 액틴 프로모터를 포함한다.
관심대상일 수 있는 추가의 프로모터는 비제한적으로 하기를 포함한다: SV40 초기 프로모터 (Benoist and Chambon, 1981, Nature 290:304-310); CMV 프로모터 (Thornsen et al., 1984, Proc. Natl. Acad. U.S.A. 81:659-663); 루(Rous) 육종 바이러스의 3' 긴 말단 반복부에 함유된 프로모터 (Yamamoto et al., 1980, Cell 22:787-797); 헤르페스 티미딘 키나제 프로모터 (Wagner et al., 1981, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 78:1444-1445); 메탈로티오닌 유전자로부터의 프로모터 및 조절 서열 (Prinster et al., 1982, Nature 296:39-42); 및 원핵 프로모터, 예컨대 베타-락타마제 프로모터 (Villa-Kamaroff et al., 1978, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 75:3727-3731); 또는 tac 프로모터 (DeBoer et al., 1983, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 80:21-25). 또한 관심대상의 것은 조직 특이성을 나타내고, 트랜스제닉 동물에서 이용되는 하기 동물 전사 조절 영역이다: 췌장 선포 세포(acinar cell)에서 활성인 엘라스타제 I 유전자 조절 영역 (Swift et al., 1984, Cell 38:639-646; Ornitz et al., 1986, Cold Spring Harbor Symp. Quant. Biol. 50:399-409; MacDonald, 1987, Hepatology 7:425-515); 췌장 베타 세포 내에서 활성인 인슐린 유전자 조절 영역 (Hanahan, 1985, Nature 315:115-122); 림프계 세포에서 활성인 면역글로불린 유전자 조절 영역 (Grosschedl et al., 1984, Cell 38:647-658; Adames et al., 1985, Nature 318:533-538; Alexander et al., 1987, Mol. Cell. Biol. 7:1436-1444); 고환, 유방, 림프구 및 비만 세포에서 활성인 마우스 유선 종양 바이러스 조절 영역 (Leder et al., 1986, Cell 45:485-495); 간에서 활성인 알부민 유전자 조절 영역 (Pinkert et al., 1987, Genes and Devel. 1 :268-276); 간에서 활성인 알파-페토-단백질 유전자 조절 영역 (Krumlauf et al., 1985, Mol. Cell. Biol. 5:1639-1648; Hammer et al., 1987, Science 253:53-58); 간에서 활성인 알파 1-항트립신 유전자 조절 영역 (Kelsey et al., 1987 Genes and Devel. 1:161-171); 골수 세포에서 활성인 베타-글로빈 유전자 조절 영역 (Mogram et al., 1985, Nature 315:338-340; Kollias et al., 1986, Cell 46:89-94); 뇌의 희소돌기교세포 세포에서 활성인 수초 염기성 단백질 유전자 조절 영역 (Readhead et al., 1987, Cell 48:703-712); 골격 근육에서 활성인 미오신 경쇄-2 유전자 조절 영역 (Sani, 1985, Nature 314:283-286); 및 시상하부에서 활성인 생식선자극성 방출 호르몬 유전자 조절 영역 (Mason et al., 1986, Science 234:1372-1378).
인핸서 서열은 보다 고등의 진핵생물에 의한 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는 경쇄 또는 중쇄를 엔코딩하는 DNA의 전사를 증가시키기 위해 벡터로 삽입될 수 있다. 인핸서는 일반적으로 전사를 증가시키기 위해 프로모터에 작용하는 길이가 약 10-300 bp인 DNA의 시스-작용 요소이다. 인핸서는 상대적으로 배향 및 위치 독립적이고, 이는 전사 유닛의 5' 및 3' 모두의 위치에서 발견된다. 포유동물 유전자로부터 이용가능한 다수의 인핸서 서열은 공지되어 있다 (예를 들어, 글로빈, 엘라스타제, 알부민, 알파-페토-단백질 및 인슐린). 그러나, 전형적으로는 바이러스로부터의 인핸서가 사용된다. 당해 기술분야에 공지된 SV40 인핸서, 사이토메갈로바이러스 초기 프로모터 인핸서, 폴리오마 인핸서, 및 아데노바이러스 인핸서는 진핵 프로모터의 활성화를 위한 예시적인 인핸서 성분이다. 인핸서는 코딩 서열에 대해 5' 또는 3'에서 벡터에 배치될 수 있는 한편, 전형적으로는 프로모터로부터 부위 5'에서 위치한다. 적절한 원상태 또는 이종성 신호 서열 (리더 서열 또는 신호 펩티드)을 엔코딩하는 서열은 항체의 세포외 분비를 촉진하기 위해 발현 벡터로 혼입될 수 있다. 신호 펩티드 또는 리더의 선택은 항체가 생성될 숙주 세포의 유형에 좌우되고, 이종성 신호 서열은 원상태 신호 서열을 대체할 수 있다. 포유동물 숙주 세포에서 기능성인 신호 펩티드의 예는 하기를 포함한다: 미국 특허 제4,965,195호에 기재된 인터류킨 7 (IL-7)에 대한 신호 서열; 문헌 [Cosman et al., 1984, Nature 312:768]에 기재된 인터류킨-2 수용체에 대한 신호 서열; 유럽 특허 제0367 566호에 기재된 인터류킨-4 수용체 신호 펩티드; 미국 특허 제4,968,607호에 기재된 1형 인터류킨-1 수용체 신호 펩티드; 유럽 특허 제0 460 846호에 기재된 2형 인터류킨-1 수용체 신호 펩티드. 본원에 기재된 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편을 발현하기 위한 다른 유용한 신호 펩티드는 서열번호: 135 또는 서열번호: 136에 기재된 서열을 갖는 신호 펩티드이다.
본원에 기재된 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 재조합 생산을 위한 발현 벡터는 개시 벡터, 예컨대 상업적으로 입수가능한 벡터로부터 구축될 수 있다. 이러한 벡터는 모든 목적하는 플랭킹 서열을 포함하거나 포함하지 않을 수 있다. 본원에 기재된 플랭킹 서열 중 하나 이상이 이미 벡터에 존재하지 않는 경우, 이는 개별적으로 수득되고 벡터로 리게이션될 수 있다. 플랭킹 서열 각각을 수득하기 위해 사용되는 방법은 당해 기술분야의 통상의 기술자에게 공지되어 있다.
벡터가 구축되고 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편을 포함하는 경쇄, 중쇄, 또는 경쇄 및 중쇄를 엔코딩하는 핵산 분자가 벡터의 적절한 부위로 삽입된 이후에, 완료된 벡터가 증폭 및/또는 폴리펩티드 발현을 위해 적합한 숙주 세포로 삽입될 수 있다. 항원-결합 단백질을 위한 발현 벡터를 선택된 숙주 세포로 형질전환시키는 것은 형질감염, 감염, 인산칼슘 공동침전, 전기천공, 미세주입, 리포펙션, DEAE-덱스트란 매개 형질감염, 또는 다른 공지된 기술을 포함하는 공지된 방법에 의해 달성될 수 있다. 선택된 방법은 부분적으로는 사용될 숙주 세포의 유형에 따라 달라질 것이다. 이들 방법 및 다른 적합한 방법이 통상의 기술자에게 공지되어 있고, 예를 들어 상기 문헌 [Sambrook et al., 2001]에 기재되어 있다.
숙주 세포가 적절한 조건 하에 배양되는 경우 항원 결합 단백질 (예를 들어, 항체 또는 결합 단편)이 합성되는데, 이것은 이후에 배양 배지로부터 수집되거나 (숙주 세포가 배지로 이를 배양하는 경우) 또는 이를 생성하는 숙주 세포로부터 직접적으로 (이것이 분비되지 않는 경우) 수집될 수 있다. 적절한 숙주 세포의 선택은 다양한 인자, 예컨대 목적하는 발현 수준, 활성을 위해 바람직하거나 또는 필요한 폴리펩티드 변형 (예컨대 당화 또는 인산화) 및 생물학적 활성 분자로의 폴딩의 용이함에 따라 달라질 것이다.
발현을 위한 숙주로 이용가능한 포유동물 세포주는 당해 기술분야에 잘 알려져 있고, 비제한적으로 차이니즈 햄스터 난소 (CHO) 세포, HeLa 세포, 베이비 햄스터 신장 (BHK) 세포, 원숭이 신장 세포 (COS), 인간 간세포 암종 세포 (예를 들어, Hep G2), 및 수많은 다른 세포주를 비롯하여 아메리칸 타입 컬쳐 콜렉션 (ATCC; American Type Culture Collection)으로부터 이용가능한 불멸화 세포주를 포함한다. 특정 구현예에서, 세포주는 어떤 세포주가 높은 발현 수준을 갖고 CGRP 수용체 결합 특성을 갖는 항체 또는 결합 단편을 구성적으로 생성하는지를 결정함으로써 선택될 수 있다. 다른 구현예에서, 자신의 항체를 생성하지 못하나 이종성 항체를 생성 및 분비하는 능력을 갖는 B 세포 계통으로부터의 세포주가 선택될 수 있다.
항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 일반적으로 약제학적으로 허용가능한 캐리어, 부형제, 또는 희석제를 포함할 수 있는 약제학적 조성물로 환자에 투여된다. "약제학적으로 허용가능한"은 이용되는 용량 및 농도에서 인간 수령체에 무독성이고 및/또는 인간에게 투여되는 경우 알러지성 반응 또는 부작용을 유발하지 않는 분자, 화합물, 및 조성물을 지칭한다. 특정 구현예에서, 약제학적 조성물은 예를 들어 조성물의 pH, 오스몰농도, 점도, 선명성, 색상, 등장성, 냄새, 멸균성, 안정성, 용해 속도 또는 방출, 흡착 또는 침투를 변형하거나 유지하거나 보존하기 위한 제형 물질을 포함할 수 있다. 그와 같은 구현예에서, 적합한 제형 물질은 비제한적으로 아미노산 (예컨대 글리신, 글루타민, 아스파라긴, 아르기닌 또는 라이신); 항미생물제; 항산화제 (예컨대 아스코르브산, 아황산나트륨 또는 나트륨 수소-설파이트); 완충액 (예컨대 보레이트, 바이카보네이트, 트리스-HCl, 시트레이트, 포스페이트 또는 다른 유기 산); 증량제 (예컨대 만니톨 또는 글리신); 킬레이트제 (예컨대 에틸렌디아민 테트라아세트산 (EDTA)); 착화제 (예컨대 카페인, 폴리비닐피롤리돈, 베타-사이클로덱스트린 또는 하이드록시프로필-베타-사이클로덱스트린); 충전제; 모노사카라이드; 디사카라이드; 및 다른 탄수화물 (예컨대 글루코오스, 만노스 또는 덱스트린); 단백질 (예컨대 혈청 알부민, 젤라틴 또는 면역글로불린); 착색제, 풍미제 및 희석제; 유화제; 친수성 폴리머 (예컨대 폴리비닐피롤리돈); 저분자량 폴리펩티드; 염 형성 반대이온 (예컨대 나트륨); 보존제 (예컨대 벤즈알코늄 염화물, 벤조산, 살리실산, 티메로살, 페네틸 알코올, 메틸파라벤, 프로필파라벤, 클로르헥시딘, 소르브산 또는 과산화수소); 용매 (예컨대 글리세린, 프로필렌 글리콜 또는 폴리에틸렌 글리콜); 당 알코올 (예컨대 만니톨 또는 소르비톨); 현탁화제; 계면활성제 또는 습윤제 (예컨대 플루로닉스, PEG, 소르비탄 에스테르, 폴리소르베이트, 예컨대 폴리소르베이트 20, 폴리소르베이트 80, 트리톤, 트로메타민, 레시틴, 콜레스테롤, 틸록사팔); 안정성 향상제 (예컨대 수크로오스 또는 소르비톨); 긴장성 향상제 (예컨대 알칼리 할로겐화금속, 바람직하게는 나트륨 또는 칼륨 염화물, 만니톨 소르비톨); 전달 비히클; 희석제; 부형제 및/또는 약제학적 아쥬반트를 포함한다. 치료 용도를 위해 분자를 제형화하기 위한 방법 및 적합한 물질은 약제학적 기술분야에 공지되어 있고, 예를 들어, 문헌 [REMINGTON'S PHARMACEUTICAL SCIENCES, 18th Edition, (A.R. Genrmo, ed.), 1990, Mack Publishing Company]에 기재되어 있다.
일부 구현예에서, 약제학적 조성물로 혼입할 캐리어 및 부형제의 선택은 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 물리적 상태, 안정성, 생체내 방출 속도 및 생체내 청소율의 속도에 영향을 미친다. 특정 구현예에서, 약제학적 조성물의 주요 비히클 또는 캐리어는 본래 수성 또는 비-수성일 수 있다. 예를 들어, 적합한 비히클 또는 캐리어는 주사용 물, 생리적 염수 용액 또는 인공 뇌척수액일 수 있고, 가능하게는 비경구 투여용 조성물에 통상적인 다른 물질이 보충된다.
본원에 기재된 방법의 특정 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 비경구로 환자에게 투여된다. 비경구 투여는 복강내, 근육내, 정맥내, 동맥내, 진피내, 피하, 뇌내, 뇌심실내, 및 척추강내 투여를 포함한다. 하나의 특별한 구현예에서, 치료 유효량의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는 약제학적 조성물은 환자에게 피하 투여된다. 약제학적 조성물이 비경구 주사로 투여되는 이들 및 다른 구현예에서, 약제학적 조성물은 주사기로 환자에게 투여될 수 있다. 일부 구현예에서, 주사기는 약제학적 조성물로 사전 충전된다. 약제학적 조성물이 비경구 주사, 예컨대 피하 주사로 환자에게 투여되는 다른 구현예에서, 약제학적 조성물은 자가-투여를 위한 장치를 포함하는 주사 장치로 투여된다. 이와 같은 장치는 상업적으로 이용가능하고, 비제한적으로 자동주사기, 투여 펜, 미세주입 펌프, 및 사전 충전 주사기를 포함한다. 본 발명의 방법에 따른 치료 유효량의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는 약제학적 조성물을 투여하기 위한 예시적인 장치는 자동주사기 (예를 들어, SureClick®, EverGentle®, Avanti®, DosePro®, Molly®, 및 Leva®), 펜 주사 장치 (예를 들어, Madie® 펜 주사기, DCPTM 펜 주사기, BD VystraTM 일회용 펜, BDTM 재사용가능한 펜), 및 사전 충전 주사기 (BD SterifillTM, BD HypakTM, 재충전된 주사기, Baxter 사제)를 포함한다. 일부 구현예에서, 치료 유효량의 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편을 포함하는 약제학적 조성물은 사전 충전 주사기로 환자에게 투여된다. 다른 구현예에서, 치료 유효량의 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편을 포함하는 약제학적 조성물은 자동주사기로 환자에게 투여된다. 특정 관련 구현예에서, 주사 용량은 약 1 mL 이하이다.
일 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 환자에서의 편두통형 두통의 발생을 예방하거나 감소시키기 위해 1개월 당 약 70 mg의 용량으로 환자에게 투여되고, 여기서 상기 용량은 단일 피하 주사로 전달된다. 관련 구현예에서, 단일 피하 주사는 사전 충전 주사기로 전달된다. 다른 관련 구현예에서, 단일 피하 주사는 자동주사기로 전달된다. 특정 구현예에서, 환자는 간헐적 편두통을 갖거나 이로 진단될 수 있다. 다른 구현예에서, 환자는 만성 편두통을 갖거나 이로 진단될 수 있다.
또 다른 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편은 환자에서의 편두통형 두통의 발생을 예방하거나 감소시키기 위해 1개월 당 약 140 mg의 용량으로 환자에게 투여되고, 여기서 상기 용량은 단일 피하 주사로 전달된다. 그와 같은 구현예에서, 단일 주사는 사전 충전 주사기 또는 자동주사기로 전달될 수 있다. 일 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편의 140 mg의 1개월 당 용량은 70 mg 용량을 각각 포함하는 2개의 연속 주사를 통해 환자에게 투여된다. 그와 같은 구현예에서, 2개의 연속 주사는 2개의 사전 충전된 주사기 또는 2개의 자동주사기를 사용하여 전달될 수 있고, 각각은 70 mg 용량을 포함한다. 일부 구현예에서, 환자는 간헐적 편두통을 갖거나 이를 갖는 것으로 진단될 수 있다. 다른 구현예에서, 환자는 만성 편두통을 갖거나 이를 갖는 것으로 진단될 수 있다.
비경구 주사에 적합한 예시적인 약제학적 형태는 멸균된 주사가능 용액 또는 분산물의 즉석 제조를 위한 멸균된 수용액 또는 분산물 및 멸균된 분말을 포함한다. 바람직하게는 약제학적 형태는 멸균되고, 주사기를 통해 전달될 수 있을 만큼 충분하게 유체이다 (즉, 제형은 주사기를 통해 통과되지 않을 만큼 과도하게 점성이 아님). 멸균은 멸균된 여과 막을 통한 여과에 의해 달성될 수 있다. 상기 조성물이 동결건조되는 경우, 이러한 방법을 사용한 멸균은 동결건조 및 재구성 이전 또는 이후에 수행될 수 있다. 비경구 투여를 위한 조성물은 동결건조된 형태 또는 용액으로 저장될 수 있다. 비경구 조성물은 멸균된 접근 포트를 갖는 용기, 예를 들어, 피하 주사 바늘에 의해 뚫릴 수 있는 스토퍼를 갖는 정맥내 용액 백 또는 바이알에 배치될 수 있다. 또한, 비경구 조성물은 주사기, 자동주사기 장치, 또는 펜 주사 장치 또는 이러한 주사 장치와 함께 사용하도록 적용되는 카트리지에 저장될 수 있다.
특정 구현예에서, 본 발명의 방법에 따라 투여될 약제학적 조성물의 제조는 예컨대 데포 주사를 통해 전달될 수 있는 항체 또는 결합 단편의 제어 또는 지속 방출을 제공할 수 있는 주사가능 마이크로구형체, 생체붕괴성 입자, 폴리머 화합물 (예컨대 폴리락트산 또는 폴리글리콜산), 비드 또는 리포좀과 같은 제제를 사용하여 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편을 제형화하는 것을 수반할 수 있다. 특정 구현예에서, 순환시 지속된 기간을 촉진하는 효과를 갖는 하이알루론산이 또한 사용될 수 있다. 특정 구현예에서, 이식형 약물 전달 장치가 사용되어 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편을 전달 할 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 방법에 따라 환자에게 투여될 치료 유효량의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는 약제학적 조성물은 완충액을 추가로 포함한다. 완충액은 조성물을 생리적 pH 또는 약간 낮은 pH, 전형적으로 약 4.5 내지 약 6.5의 pH 범위 내로 유지하는데 사용된다. 적합한 완충액은, 비제한적으로 글루타메이트, 아세테이트, 트리스, 시트레이트, 히스티딘, 석시네이트, 및 인산염 완충액을 포함한다. 특정 구현예에서, 본원에 기재된 방법에 따라 투여되는 약제학적 조성물은 아세테이트 완충액을 포함한다. 아세테이트 완충액은 아세테이트 염, 예를 들어, 아세트산나트륨으로부터 제조될 수 있다. 예를 들어, 예컨대 아세테이트의 칼륨, 암모늄, 칼슘 또는 마그네슘 염과 같은 다른 염이 사용될 수 있다. 아세테이트 완충액을 포함하는 약제학적 조성물은 전형적으로 약 4.5, 약 4.6, 약 4.7, 약 4.8, 약 4.9, 약 5.0, 약 5.1, 약 5.2, 약 5.3, 약 5.4, 및 약 5.5의 pH를 포함하는 약 4.5 내지 약 5.5의 pH 또는 약 4.8 내지 약 5.2의 pH를 갖는다.
치료 유효량의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는 약제학적 조성물은 계면활성제를 추가로 포함할 수 있다. 본원에 사용되는 용어 "계면활성제"는 이것이 용해된 액체의 표면 장력을 감소시키는 작용을 하는 물질을 지칭한다. 계면활성제는 예를 들어 액체 제형에서의 응집, 입자 형성 및/또는 표면 흡착을 방지하거나 조절하기 위해서 또는 동결건조된 제형에서 동결건조 및/또는 재구성 과정 동안 이러한 현상을 방지하거나 조절하기 위한 목적을 비롯하여 다양한 목적을 위해 약제학적 조성물에 포함될 수 있다. 계면활성제는 예를 들어 유기 용매 및 수용액 모두에서 부분적인 용해도를 나타내는 양친매성 유기 화합물을 포함한다. 계면활성제의 일반적인 특징은 물의 표면 장력 감소, 오일과 물 사이의 계면 장력 감소, 및 또한 미셀 형성 능력을 포함한다. 본 발명의 방법에 사용되는 약제학적 조성물로 도입될 수 있는 계면활성제는 비이온성 및 이온성 계면활성제 모두를 포함한다. 적합한 비이온성 계면활성제는 비제한적으로 알킬 폴리 (산화에틸렌), 알킬 폴리글루코사이드, 예컨대 옥틸 글루코사이드 및 데실 말토시드, 지방 알코올, 예컨대 세틸 알코올 및 올레일 알코올, 코카마이드 MEA, 코카마이드 DEA, 및 코카마이드 TEA를 포함한다. 비이온성 계면활성제의 구체적인 예는, 폴리소르베이트, 예를 들어 폴리소르베이트 20, 폴리소르베이트 28, 폴리소르베이트 40, 폴리소르베이트 60, 폴리소르베이트 65, 폴리소르베이트 80, 폴리소르베이트 81, 폴리소르베이트 85 등; 폴록사머, 예를 들어 폴록스알콜(poloxalkol)로도 공지된 폴록사머 188 또는 폴리(에틸렌 옥사이드)-폴리(프로필렌 옥사이드), 폴록사머 407 또는 폴리에틸렌-폴리프로필렌 글리콜 등, 및 폴리에틸렌 글리콜 (PEG) 등을 포함한다. 적합한 이온성 계면활성제는 예를 들어 음이온성, 양이온성 및 쯔비터이온성 계면활성제를 포함한다. 음이온성 계면활성제는 비제한적으로 설포네이트계 또는 카복실레이트계 계면활성제, 예컨대 비누, 지방산 염, 나트륨 도데실 설페이트 (SDS), 암모늄 라우릴 설페이트 및 다른 알킬 설페이트 염을 포함한다. 양이온성 계면활성제는 비제한적으로 4차 암모늄계 계면활성제, 예컨대 세틸 트리메틸암모늄 브로마이드 (CTAB), 다른 알킬트리메틸암모늄 염, 세틸 피리디늄 염화물, 폴리에톡실레이트화된 탈로우 아민 (POEA) 및 벤즈알코늄 염화물을 포함한다. 쯔비터이온성 또는 양쪽성 계면활성제는 예를 들어 도데실 베타인, 도데실 디메틸아민 옥사이드, 코카미도프로필 베타인 및 코코 암포 글리시네이트를 포함한다. 특정 구현예에서, 본원에 기재된 방법에 따라 투여되는 약제학적 조성물은 비이온성 계면활성제를 포함한다. 일 구현예에서, 비이온성 계면활성제는 폴리소르베이트 20이다. 또 다른 구현예에서, 비이온성 계면활성제는 폴리소르베이트 80이다.
특정 구현예에서, 치료 유효량의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는 약제학적 조성물은 안정화제를 추가로 포함한다. 본원에 사용되는 용어 "안정화제"는 폴리펩티드 또는 항체의 원상태 형태를 안정화시키고 및/또는 폴리펩티드 또는 항체의 물리적 또는 화학적 분해를 방지하거나 감소시키는 부형제를 지칭한다. 적합한 안정화제는 비제한적으로 폴리올 (예를 들어, 소르비톨, 글리세롤, 만니톨, 자일리톨, 말티톨, 락티톨, 에리트리톨 및 트레이톨), 당류 (예를 들어, 푸룩토오스, 글루코오스, 글리세르알데하이드, 락토오스, 아라비노오스, 만노스, 자일로스, 리보오스, 람노오스, 갈락토오스 말토오스, 수크로오스, 트레할로오스, 소르보스, 수크랄로스, 멜레지토오스 및 라피노오스), 및 아미노산 (예를 들어, 글리신, 메티오닌, 프롤린, 라이신, 아르기닌, 히스티딘, 또는 글루탐산)을 포함한다. 일부 구현예에서, 약제학적 조성물은 안정화제로서 당을 포함한다. 이들 및 다른 구현예에서, 당은 수크로오스이다.
특정 구현예에서, 본원에 기재된 방법에 따라 편두통형 두통의 예방적 치료에 유용한 약제학적 조성물은 약 35 mg/mL 내지 약 210 mg/ml의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 약 8 mM 내지 약 20 mM 아세트산나트륨, 약 0.002% 내지 약 0.015% 중량/용적 (w/v) 폴리소르베이트, 및 약 7% 내지 약 10% w/v 수크로오스를 포함한다. 다른 구현예에서, 약제학적 조성물은 약 70 mg/mL 내지 약 140 mg/ml의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 약 10 mM 내지 약 15 mM 아세트산나트륨, 약 0.008% 내지 약 0.012% w/v 폴리소르베이트, 및 약 8% 내지 약 9% w/v 수크로오스를 포함한다. 이들 조성물의 pH는 약 4.8 내지 약 5.5의 범위 (예를 들어, 약 4.8, 약 5.0, 약 5.2, 또는 약 5.4의 pH)이다.
일 구현예에서, 본 발명의 방법에 따라 투여되는 약제학적 조성물은 5.2 ± 0.2의 pH에서 약 70 mg/ml의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 약 10 mM 아세트산나트륨, 약 0.004% w/v 폴리소르베이트 20, 및 약 9% w/v 수크로오스를 포함한다. 또 다른 구현예에서, 약제학적 조성물은 5.2 ± 0.2의 pH에서 약 70 mg/ml의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 약 10 mM 아세트산나트륨, 약 0.004% w/v 폴리소르베이트 80, 및 약 9% w/v 수크로오스를 포함한다. 또 다른 구현예에서, 약제학적 조성물은 5.2 ± 0.2의 pH에서 약 140 mg/ml의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 약 10 mM 아세트산나트륨, 약 0.004% w/v 폴리소르베이트 20, 및 약 9% w/v 수크로오스를 포함한다. 또 다른 구현예에서, 약제학적 조성물은 5.2 ± 0.2의 pH에서 약 140 mg/ml의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 약 10 mM 아세트산나트륨, 약 0.004% w/v 폴리소르베이트 80, 및 약 9% w/v 수크로오스를 포함한다. 다른 구현예에서, 약제학적 조성물은 5.2 ± 0.2의 pH에서 약 70 mg/ml의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 약 10 mM 아세트산나트륨, 약 0.010% w/v 폴리소르베이트 20, 및 약 9% w/v 수크로오스를 포함한다. 또 다른 구현예에서, 약제학적 조성물은 5.2 ± 0.2의 pH에서 약 70 mg/ml의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 약 10 mM 아세트산나트륨, 약 0.010% w/v 폴리소르베이트 80, 및 약 9% w/v 수크로오스를 포함한다. 하나의 특별한 구현예에서, 약제학적 조성물은 5.2 ± 0.2의 pH에서 약 140 mg/ml의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 약 10 mM 아세트산나트륨, 약 0.010% w/v 폴리소르베이트 20, 및 약 9% w/v 수크로오스를 포함한다. 또 다른 특정 구현예에서, 약제학적 조성물은 5.2 ± 0.2의 pH에서 약 140 mg/ml의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 약 10 mM 아세트산나트륨, 약 0.010% w/v 폴리소르베이트 80, 및 약 9% w/v 수크로오스를 포함한다.
특정 구현예에서, 본 발명의 방법에 따라 투여되는 약제학적 조성물은 5.2 ± 0.2의 pH에서 약 70 mg/ml의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 약 15 mM 아세트산나트륨, 약 0.010% w/v 폴리소르베이트 20, 및 약 8.2% w/v 수크로오스를 포함한다. 하나의 특별한 구현예에서, 약제학적 조성물은 5.2 ± 0.2의 pH에서 약 70 mg/ml의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 약 15 mM 아세트산나트륨, 약 0.010% w/v 폴리소르베이트 80, 및 약 8.2% w/v 수크로오스를 포함한다. 또 다른 특정 구현예에서, 약제학적 조성물은 5.2 ± 0.2의 pH에서 약 140 mg/ml의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 약 15 mM 아세트산나트륨, 약 0.010% w/v 폴리소르베이트 80, 및 약 8.2% w/v 수크로오스를 포함한다. 또 다른 구현예에서, 약제학적 조성물은 5.2 ± 0.2의 pH에서 약 140 mg/ml의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 약 15 mM 아세트산나트륨, 약 0.010% w/v 폴리소르베이트 20, 및 약 8.2% w/v 수크로오스를 포함한다. 또 다른 구현예에서, 약제학적 조성물은 5.2 ± 0.2의 pH에서 약 70 mg/ml의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 약 15 mM 아세트산나트륨, 약 0.010% w/v 폴리소르베이트 80, 및 약 8.5% w/v 수크로오스를 포함한다. 또 다른 구현예에서, 약제학적 조성물은 5.2 ± 0.2의 pH에서 약 140 mg/ml의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 약 15 mM 아세트산나트륨, 약 0.010% w/v 폴리소르베이트 80, 및 약 8.5% w/v 수크로오스를 포함한다. 일부 구현예에서, 약제학적 조성물은 5.2 ± 0.2의 pH에서 약 70 mg/ml의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 약 15 mM 아세트산나트륨, 약 0.010% w/v 폴리소르베이트 20, 및 약 8.5% w/v 수크로오스를 포함한다. 다른 구현예에서, 약제학적 조성물은 5.2 ± 0.2의 pH에서 약 140 mg/ml의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 약 15 mM 아세트산나트륨, 약 0.010% w/v 폴리소르베이트 20, 및 약 8.5% w/v 수크로오스를 포함한다.
일부 구현예에서, 본 발명의 방법에 따라 투여되는 약제학적 조성물은 5.2 ± 0.2의 pH에서 약 70 mg/ml의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 약 20 mM 아세트산나트륨, 약 0.010% w/v 폴리소르베이트 20, 및 약 8.2% w/v 수크로오스를 포함한다. 일 구현예에서, 약제학적 조성물은 5.2 ± 0.2의 pH에서 약 140 mg/ml의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 약 20 mM 아세트산나트륨, 약 0.010% w/v 폴리소르베이트 20, 및 약 8.2% w/v 수크로오스를 포함한다. 또 다른 구현예에서, 약제학적 조성물은 5.2 ± 0.2의 pH에서 약 70 mg/ml의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 약 20 mM 아세트산나트륨, 약 0.010% w/v 폴리소르베이트 80, 및 약 8.2% w/v 수크로오스를 포함한다. 또 다른 구현예에서, 약제학적 조성물은 5.2 ± 0.2의 pH에서 약 140 mg/ml의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 약 20 mM 아세트산나트륨, 약 0.010% w/v 폴리소르베이트 80, 및 약 8.2% w/v 수크로오스를 포함한다. 또 다른 구현예에서, 약제학적 조성물은 5.2 ± 0.2의 pH에서 약 70 mg/ml의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 약 20 mM 아세트산나트륨, 약 0.010% w/v 폴리소르베이트 80, 및 약 8.5% w/v 수크로오스를 포함한다. 또 다른 구현예에서, 약제학적 조성물은 5.2 ± 0.2의 pH에서 약 140 mg/ml의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 약 20 mM 아세트산나트륨, 약 0.010% w/v 폴리소르베이트 80, 및 약 8.5% w/v 수크로오스를 포함한다. 또 다른 구현예에서, 약제학적 조성물은 5.2 ± 0.2의 pH에서 약 70 mg/ml의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 약 20 mM 아세트산나트륨, 약 0.010% w/v 폴리소르베이트 20, 및 약 8.5% w/v 수크로오스를 포함한다. 또 다른 구현예에서, 약제학적 조성물은 5.2 ± 0.2의 pH에서 약 140 mg/ml의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 약 20 mM 아세트산나트륨, 약 0.010% w/v 폴리소르베이트 20, 및 약 8.5% w/v 수크로오스를 포함한다.
표 7에 기재된 특이적 항-CGRP 수용체 항체를 포함하는 본원에 기재된 임의의 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편은 상기 기재된 임의의 약제학적 조성물에 혼입될 수 있고, 본원에 기재된 방법에 따라 환자에게 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체는 표 7에 기재된 4E4 항체 또는 그의 결합 단편이다. 다른 특정 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체는 표 7에 기재된 9F5 항체 또는 그의 결합 단편이다.
임의의 상기-기재된 약제학적 조성물은 자가-투여 주사 장치에 혼입될 수 있다. 따라서, 본 발명은 또한 이를 필요로 하는 환자에서의 편두통형 두통의 예방적 치료에 적합한 주사 장치를 포함한다. 특정 구현예에서, 본 발명은 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 아세테이트 완충액, 수크로오스, 및 폴리소르베이트를 포함하는 약제학적 조성물을 포함하는 사전 충전 주사기를 제공한다. 일 구현예에서, 사전 충전 주사기는 5.2 ± 0.2의 pH에서 약 70 mg/ml의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 약 15 mM 아세트산나트륨, 약 0.010% w/v 폴리소르베이트 80, 및 약 8.2% w/v 수크로오스를 포함하는 약제학적 조성물을 포함한다. 또 다른 구현예에서, 사전 충전 주사기는 5.2 ± 0.2의 pH에서 약 140 mg/ml의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 약 15 mM 아세트산나트륨, 약 0.010% w/v 폴리소르베이트 80, 및 약 8.2% w/v 수크로오스를 포함하는 약제학적 조성물을 포함한다. 또 다른 구현예에서, 사전 충전 주사기는 5.2 ± 0.2의 pH에서 약 70 mg/ml의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 약 15 mM 아세트산나트륨, 약 0.010% w/v 폴리소르베이트 80, 및 약 8.5% w/v 수크로오스를 포함하는 약제학적 조성물을 포함한다. 또 다른 구현예에서, 사전 충전 주사기는 5.2 ± 0.2의 pH에서 약 140 mg/ml의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 약 15 mM 아세트산나트륨, 약 0.010% w/v 폴리소르베이트 80, 및 약 8.5% w/v 수크로오스를 포함하는 약제학적 조성물을 포함한다. 특정 구현예에서, 사전 충전 주사기의 주사 용량은 약 1 ml 이하 (예를 들어, 0.5 ml)이다.
일부 구현예에서, 본 발명은 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 아세테이트 완충액, 수크로오스, 및 폴리소르베이트를 포함하는 약제학적 조성물을 포함하는 자동주사기를 제공한다. 일 구현예에서, 자동주사기는 5.2 ± 0.2의 pH에서 약 70 mg/ml의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 약 15 mM 아세트산나트륨, 약 0.010% w/v 폴리소르베이트 80, 및 약 8.2% w/v 수크로오스를 포함하는 약제학적 조성물을 포함한다. 또 다른 구현예에서, 자동주사기는 5.2 ± 0.2의 pH에서 약 140 mg/ml의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 약 15 mM 아세트산나트륨, 약 0.010% w/v 폴리소르베이트 80, 및 약 8.2% w/v 수크로오스를 포함하는 약제학적 조성물을 포함한다. 또 다른 구현예에서, 자동주사기는 5.2 ± 0.2의 pH에서 약 70 mg/ml의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 약 15 mM 아세트산나트륨, 약 0.010% w/v 폴리소르베이트 80, 및 약 8.5% w/v 수크로오스를 포함하는 약제학적 조성물을 포함한다. 또 다른 구현예에서, 자동주사기는 5.2 ± 0.2의 pH에서 약 140 mg/ml의 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편, 약 15 mM 아세트산나트륨, 약 0.010% w/v 폴리소르베이트 80, 및 약 8.5% w/v 수크로오스를 포함하는 약제학적 조성물을 포함한다. 특정 구현예에서, 자동주사기의 주사 용량은 약 1 ml 이하 (예를 들어, 0.5 ml)이다.
또한, 본 발명은 본원에 기재된 편두통형 두통 또는 다른 두통 장애의 급성 또는 예방적 치료에 적합한 1종 이상의 제제와 조합하여 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편을 환자에게 투여하는 것을 포함한다. 본원에 사용되는 용어 "조합 요법"은 순차적인 방식으로의 2종의 화합물 (예를 들어, 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편 및 추가 제제)의 투여 (즉, 각각의 화합물이 임의의 순서로 상이한 시점에 투여됨) 뿐만 아니라 실질적으로 동시 방식으로의 2종의 화합물의 투여를 포괄한다. 실질적으로 동시 투여는 동반 투여를 포함하고, 2종의 화합물 모두를 포함하는 단일 제형 (예를 들어, 2종의 화합물 모두를 고정된 비로 포함하는 단일 캡슐 또는 다른 제형 또는 각각의 화합물을 고정된 비로 갖는 사전 충전 주사기)을 투여하는 것에 의해 또는 각각의 화합물을 포함하는 별개의 제형을 동시 투여하는 것에 의해 달성될 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 방법은 CGRP 수용체 신호전달을 조절하는 제2 제제와 함께 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편을 투여하는 것을 포함한다. 예를 들어, 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편은 이를 필요로 하는 환자에서 편두통형 두통을 예방적으로 치료하기 위해 제2 CGRP 수용체 길항제와 함께 조합하여 투여될 수 있다. 다른 CGRP 수용체 길항제는 CGRP 수용체의 소분자 억제제, 예컨대 미국 특허 공개 번호 제20060142273호 및 미국 특허 제7,842,808호; 제7,772,244호; 제7,754,732호; 제7,569,578호; 제8,685,965호; 제8,569,291호; 제8,377,955호; 제8,372,859호; 제8,143,266호; 제7,947,677호; 및 제7,625,901호에 기재된 것을 포함하고 상기 문헌 모두는 그 전문이 본원에 참조로 포함된다. 또한, CGRP 수용체 길항제는 수용체의 펩티드 길항제, 예컨대 미국 특허 제8,168,592호 (이는 그 전문이 본원에 참조로 포함됨)에 기재된 것을 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편은 이를 필요로 하는 환자에서 편두통형 두통을 예방적으로 치료하기 위해 CGRP 리간드가 CGRP 수용체에 결합하는 것을 방해하는 제제와 조합하여 투여될 수 있다. CGRP 리간드가 CGRP 수용체에 결합하는 것을 방해하는 제제는 유인성 또는 가용성 CGRP 수용체 또는 CGRP 리간드에 결합하는 다른 단백질, 예컨대 항-CGRP 항체일 수 있다. 항-CGRP 항체는 당해 기술분야에 공지되어 있고, 예를 들어 WO 2007/054809; WO 2007/076336; WO 2011/156324; 및 WO 2012/162243에 기재되어 있고, 상기 문헌 모두는 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
특정 구현예에서, 본 발명의 방법은 항-CGRP 수용체 항체 또는 그의 결합 단편을 제2 항-편두통 제제와 함께 투여하는 것을 포함한다. 제2 항-편두통 제제는 편두통의 급성 치료를 위해 사용되는 제제, 예컨대 트립탄 (예를 들어, 알모트립탄, 프로바트립탄, 리자트립탄, 수마트립탄, 나라트립탄, 엘레트립탄, 및 졸미트립탄), 에르고타민 (예를 들어, 카페인이 있는 에르고타민 및 디하이드로에르고타민), 비-스테로이드 항-염증성 약물 (예를 들어, 아세틸살리실산, 이부프로펜, 나프록센, 인도메타신, 및 디클로페낙), 및 오피오이드 (예를 들어, 코데인, 모르핀, 하이드로코돈, 펜타닐, 메페리딘, 및 옥시코돈)일 수 있다. 일부 구현예에서, 제2 항-편두통 제제는 편두통의 예방적 치료를 위해 사용되는 제제, 예컨대 항간질제 (예를 들어, 토피라메이트), 베타-차단제 (예를 들어, 프로프라놀롤) 또는 항우울제 (예를 들어, 아미트립틸린)일 수 있다. 다른 구현예에서, 제2 항-편두통 제제는 뇌하수체 아데닐레이트 사이클라제-활성화 폴리펩티드 1형 수용체 (PAC1 수용체)의 활성을 조절하는 제제이다. PAC1 수용체의 활성을 조절하는 제제는 PAC1 수용체에 결합하는 항체 또는 다른 결합 단백질, 예컨대 WO 2014/144632 (상기 문헌은 그 전문이 본 명세서에 참고로 포함됨)에 기재된 것을 포함한다.
본 발명은 또한 이를 필요로 하는 환자에서 편두통형 두통을 예방적으로 치료하기 위한 키트를 포함한다. 일 구현예에서, 상기 키트는 본원에 기재된 항-CGRP 수용체 항체 또는 결합 단편의 약제학적 조성물 및 약제학적 조성물의 사용과 관련된 지침서를 제공하는 포장재를 포함한다. 상기 키트의 약제학적 조성물은 용기, 예컨대 바이알 또는 주사기에 존재할 수 있다. 약제학적 조성물은 용액, 현탁액, 겔, 에멀젼, 고형, 결정, 또는 탈수된 또는 동결건조된 분말로 제공될 수 있다. 약제학적 조성물이 분말로 제공되는 구현예에서, 상기 키트는 또한 약제학적 조성물을 재구성하는데 필요한 희석제 (예를 들어, 물, 염수, 포스페이트-완충액 염수) 뿐만 아니라 투여용 조성물 제조를 위한 지침서를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 키트는 본원에 기재된 약제학적 조성물이 사전 충전된 자가-투여용 주사 장치 (예를 들어, 사전 충전 주사기 또는 자동주사기)를 포함한다. 상기 기재된 임의의 사전 충전 주사기 및 자동주사기는 키트에 포함될 수 있다.
수행되는 실험 및 수득한 결과를 포함하는 하기 실시예는 단지 예시 목적을 위해 제공되고, 첨부된 청구항의 범위를 제한하는 것으로 해석되지 않는다.
실시예
실시예 1. 건강한 대상체 및 편두통 환자에서 캡사이신 -유도 진피 혈류 증가와의 농도 관계를 특성화하기 위한, 단일클론성 항체 AMG 334의 약력학적 /약동학적 모델링
AMG 334 (또한 항체 4E4로 지칭됨)는 높은 생체외 잠재능으로 인간 CGRP 수용체에 결합되는 완전 인간 IgG2 단일클론성 항체이다. 캡사이신 (CAP)-유도 진피 혈류 (DBF) 증가의 억제는 CGRP 수용체 길항제의 약리학적 효과를 특성화하기 위한 번역 모델로서 광범위하게 사용되어 왔다. 이러한 검증된 모델을 사용하여, AMG 334의 단일 또는 다중 투여 이후에 건강한 대상체 (HS) 및 편두통 환자 (MP)에서 DBF에서의 CAP-유도 증가에 대한 AMG 334의 억제 효과를 정량화하고 AMG 334의 약리학적 효과를 특성화하였다.
분석 데이터세트는 AMG 334 (1, 7, 21, 70, 140, 또는 210 mg) 또는 플라시보를 단일 피하 (SC) 투여받은 52명의 대상체 (40 HS, 12 MP), 및 AMG 334 (21, 70, 또는 140 mg) 또는 플라시보를 4주 마다 3회 연속 SC 투여받은 40명의 대상체 (24 HS, 16 MP)를 포함하였다. 하기 표 9를 참조한다. 반복된 CAP 시도 및 DBF 측정은, CAP 투여 전 및 후에 DBF에 대한 AMG 334의 억제 효과를 추정하기 위한 다중 연구 방문에서 레이저 도플러 영상화를 사용하여 동일 대상체 내에서 수행하였다. 혈청 AMG 334 농도는, 약동학적 특성화를 위해 다른 시점에 수집된 추가적인 샘플을 사용하여 DBF 측정에 대한 상응하는 시점에서 결정하였다. 집단 약동학적-약력학적 (PK-PD) 모델링화 방법을 사용하여 AMG 334 농도-DBF 관계를 평가하였다. 상기 모델에서 PK 및 PD 파라미터에 대한 체중 (44.6-104 kg), 성별 (남성 대 여성), 연령 (18-53세) 및 질환 집단 (MP vs. HS)의 영향을 평가하였다.
AMG 334 PK는 수용체-매개 약물 배치(receptor-mediated drug disposition) 모델에 의해 가장 잘 특성화되었고, 이는 AMG 334 청소율 및 분포의 농도/용량 의존성을 설명한다. 완전 SC 흡수는 투여 후 대략 제10일에 일어났다. 70 mg SC 용량을 투여받은 전형적인 대상체 (70 kg)에 대해 추정되는 제거 반감기는 21일이었고, 이는 단일클론성 항체에 대해 전형적인 것이다. AMG 334의 반감기는 이의 농도가 대략 <700 ng/mL인 경우에 신속한 항체 제거로 짧아졌는데 (즉, 21일 미만), 이는 아마도 대부분의 AMG 334가 표적 수용체에 의해 결합되어 제거에 이용가능한 순환 미결합 AMG 334가 더 적게 남겨지기 때문일 것이다. AMG 334는 CAP 이후 DBF를 유의하게 억제하였으나 CAP 이전 DBF에 대하여는 유의한 효과가 없었다. PK-PD 모델은 평균 기준치, CAP-유도 DBF 증가 390 AU 및 최대 DBF 억제 90%로 추정되었다. 최대 억제의 50% (EC50) 및 99% (EC99)에 대해 요구되는 AMG 334 농도는 각각 218 ng/mL 및 1140 ng/mL이었다. 도 1을 참조한다. 결과적으로, 7 mg 초과의 모든 용량은 EC99 또는 최대 DBF 억제 초과의 농도를 생성하였고; 최대 억제 기간은 용량 증가와 함께 증가하였고, 반복 투여 후 유지되었다. 도 2를 참조한다. AMG 334 노출 (DBF는 아님)은 체중 증가에 따라 감소되었다. 체중에 대한 조정 이후 HS과 MP 사이에서 PK 및 PD의 차이는 인식되지 않았다.
AMG 334는 CAP-유도 DBF의 강력하고 재현가능한 억제를 야기하고, 이는 HS 및 MP에서의 완전한 주변 CGRP 수용체 차단을 나타낸다. 체중은 PK에 영향을 주는 유일한 공변량이었으나 PD에는 영향을 주지 않았다. AMG 334의 긴 반감기 및 양호한 농도-DBF 관계는 CGRP 수용체의 지속적 억제를 나타낸다.
표 9. 집단 PK/PD 모델링에 포함된 대상체의 특성
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실시예 2. 건강한 대상체 및 편두통 환자에서 AMG 334의 1상 무작위 이중- 맹 검 플라시보 대조군 단일 투여 및 다중 투여 연구
편두통은 칼시토닌 유전자-관련 펩티드 (CGRP)가 관여한다고 여겨지는 일상생활이 힘든 두통이다. AMG 334 (4E4 항체)는 CGRP 수용체에 대한 완전 인간 단일클론성 항체이다. 본 실시예의 1상 무작위 플라시보 대조군 단일 투여 (SD) 및 다중 투여 (MD) 연구에서는 건강한 대상체 및 편두통 환자에서 AMG 334의 약동학 (PK), 약력학 (PD) 및 안전성을 평가하였다.
SD 연구에서, 대상체는 단일의 증가된 용량의 1 내지 210 mg SC, 140 mg IV의 AMG 334 (n=42) 또는 매칭되는 플라시보 (n=18)를 투여받았다. MD 연구에서, 대상체는 제1일, 제29일 및 제57일에 21 내지 280 mg SC의 AMG 334 (n=35) 또는 플라시보 (n=12)를 다중 투여받았다. 두 연구 모두에서 PK 및 안전성을 평가하였고; PK 측정값은 최대 농도 (Cmax), 시간 0부터 마지막 정량화가능 농도 시간까지의 농도-시간 곡선하 면적 (AUClast), 및 최대 농도까지의 시간 (tmax)을 포함하였다. 두 연구 모두에서 AMG 334에 의한 캡사이신 유도 진피 혈류 (DBF)의 억제를 사용하여 CGRP 수용체 길항작용을 측정하였고; Emax는 최대 억제 백분율을 나타내었다. SD 연구에서, S자형 Emax PK/PD 모델을 적용하여 AMG 334 혈청 노출과 캡사이신-유도 DBF 증가의 억제 사이의 관계를 분석하였다. MD 연구에서는 각각의 투여 후 대략 제7일에 연속적인 24시 이동 혈압 모니터링 (ABPM)을 실시하였다.
SD 연구에서, 42명의 대상체 (36명의 건강한 대상체, 6명의 편두통 환자)는 AMG 334를 투여받았고; 18명 (12명의 건강한 대상체, 6명의 편두통 환자)은 플라시보를 투여받았다. AMG 334의 검출가능한 혈청 수준은, 투여후 100일 이상 동안 검출가능한 수준을 야기하는 70 mg 이상의 용량에서 투여후 제30일 내지 제160일에 관찰되었다. 도 3a를 참조한다. 단일 SC 투여 이후, AMG 334는 비선형 PK를 나타냈는데, AMG 334 노출은 1 내지 70 mg에서는 용량 비례보다 더 크게 증가하였고 70 내지 210 mg에서는 대략 용량 비례하여 증가하였다. 하기 표 10을 참조한다. 70 내지 210 mg의 용량에서는 3배 증가하여 평균 AUClast는 171에서 652μg·일/mL로 3.8배 증가하였고, 평균 Cmax는 6.25에서 15.2 μg/mL로 2.4배 증가하였다 (표 10). 중앙 tmax는 상기 용량 범위에서 4 내지 11일 범위였다 (표 10). SC 투여의 경우 140 mg AMG 334 용량에서 농도-시간 곡선하 상대적 노출 범위 (AUC)는 IV 투여와 비교할 때 대략 54%이었다. 건강한 대상체와 편두통 환자 사이에는 PK에 뚜렷한 차이가 없었다.
표 10. 코호트에 의한 AMG 334 단일 투여 이후 약동학적 파라미터 추정
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SD 연구에서 캡사이신-유도 DBF의 억제에 대해 평가한 최초 시점은 제4일이었다. 제4일에, SC 용량 ≥21 mg에 대해서 플라시보와 비교한 캡사이신-유도 DBF 증가의 억제 백분율은 건강한 대상체에서 상기 용량 범위에 걸쳐 75% 내지 95%의 범위였다 (편두통 대상체에서는 91%). 도 4a를 참조한다. AMG 334 혈청 노출과 캡사이신-유도 DBF 증가 억제 사이의 관계를 분석하기 위해 S자형 Emax PK/PD 모델을 적용한 결과, 94.2% (표준 오차 2.85%)의 Emax 및 286 (표준 오차 37.2) ng/mL의 절반 최대 효과 (EC50)와 관련된 혈청 AMG 334 농도를 야기하였다.
MD 연구에서, 36명의 대상체 (24명의 건강한 대상체, 12명의 편두통 환자)는 AMG 334 (21 내지 280 mg)를 총 3회 투여받았고; 12명의 대상체 (8명의 건강한 대상체, 4명의 편두통 환자)는 플라시보를 투여받았다. 3회의 단일 용량 SC 투여 이후, AMG 334 축적은 건강한 대상체에서는 용량에 대해 1.42 내지 1.69배 범위였고 편두통 환자에서는 용량에 대해 1.50 내지 1.78배 범위였다. 도 3b를 참조한다. Tmax 값은 모든 용량 범위에 대해 첫번째 SC 투여 이후 약 3 내지 13일이었고 세번째 투여 이후 약 6 내지 14일의 범위였다 (도 3b). SD 연구의 결과와 마찬가지로, 건강한 대상체와 편두통 환자 사이에는 PK 파라미터에 뚜렷한 차이가 없었다.
MD 연구에서 캡사이신-유도 DBF의 억제에 대해 평가한 최초 시점은 제8일이었다. 제8일에 건강한 대상체 및 편두통 환자에서의 모든 AMG 334 코호트에 대해 플라시보 대비 유의한 억제를 관찰하였고, 환자 집단 사이에서 약물 효과에 있어 유의한 차이는 없었다. 도 4b를 참조한다. 어떤 환자 집단에서도 AMG 334 그룹에서 뚜렷한 용량 의존성은 없었다. 제57일 및 제85일 (건강한 대상체) 또는 제57일, 제86일 및 제169일 (편두통 환자)에서의 결과는 제8일 조사결과와 일치하였다. 후기 시점 (제113일 이상)은 AMG 334 그룹에서 플라시보 대비 유의한 억제를 나타내지 않았다. MD 연구에서의 DBF 억제는 SD DBF 결과와 일치하였고, 최대 억제는 반복된 투여 간격 동안 유지되었다.
24시 ABPM 결과, AMG 334의 용량 증가에 따라 BP 증가가 없고 BP 일주기(circadian) 리듬에 변화가 없는 것으로 밝혀졌다. 건강한 대상체에서는 모든 AMG 334 그룹에서 플라시보 대비하여 최소제곱평균 24시간 및 야간 BP에 있어 통계적으로 유의한 차이는 관찰되지 않았다. 또한, 편두통 환자에서도 플라시보 대비하여 모든 AMG 334 그룹의 최소제곱평균 24시간 심박 및 야간 심박 BP(nocturnal diastolic BP)에 통계적으로 유의한 차이는 관찰되지 않았다. 치료후 나타나는 부작용은 치료 그룹 사이 및 건강한 대상체와 편두통 환자 사이에서 유형 및 빈도에 있어 유사하였다. AMG 334의 용량과 치료후 나타나는 부작용의 전체 사건 사이에 뚜렷한 관계는 없었다. 활력 징후 또는 실험 값에 있어서 임상적으로 의미있는 차이는 관찰되지 않았다.
AMG 334 PK 프로파일은 다른 인간 IgG2 항체의 것과 일치한다. PK 노출은 단일 투여 이후 1 내지 70 mg에서는 용량 비례보다 더 크게 증가하였고 70 내지 210 mg에서는 대략 용량 비례하여 증가하였으며, 건강한 대상체와 편두통 환자 사이에는 뚜렷한 차이가 없었다. 3회의 단일 용량 SC 투여 이후, 두 집단에서 용량 범위에 대한 PK에서 유사한 경향이 관찰되었다. AMG 334의 투여는 건강한 대상체 및 편두통 환자 모두에서 플라시보 대비하여 캡사이신-유도 DBF 증가의 유의한 억제를 야기하였고, 이는 CGRP 수용체 길항작용을 나타낸다. 캡사이신-유도 DBF 증가의 억제는 건강한 대상체와 편두통 환자 사이에서 유사하였다. AMG 334의 단일 및 다중 투여는 잘 허용되었고, 혈청 AMG 334 농도와 혈압 사이에는 관련성이 없었다.
실시예 3. 간헐적 편두통의 예방에 대한 AMG 334의 효능 및 안전성을 평가하기 위한 무작위 이중 맹검 플라시보 대조군 2상 연구의 결과
본 실시예의 2상 이중 맹검 플라시보 대조군 시험에서는 간헐적 편두통을 예방하는데 있어서의 AMG 334 (즉, 4E4 항체)의 효과를 평가하였다.
간헐적 편두통 (1개월 당 ≥ 4 및 ≤ 14 편두통 일수) 환자를 1개월 당 (QM) 플라시보 또는 AMG 334 (7 mg, 21 mg, 또는 70 mg) 피하 투여 각각에 3:2:2:2 비로 무작위화하였다. 1차 종점(endpoint)은 제12주에 1개월 당 편두통 일수에 있어서의 기준치로부터의 변화였다. 2차 종점은 1개월 당 편두통 일수에 있어서 ≥50% 감소를 갖는 대상체의 비율 (즉, 50% 응답자 비율), 1개월 당 편두통 발병의 감소, 및 안전성/허용성(tolerability)을 포함하였다. 중요 탐구 종점은 1개월 당 두통 일수의 감소 및 1개월 당 급성 편두통-특이적 약물 (예를 들어, 트립탄, 에르고타민) 사용 일수 감소를 포함하였다.
483명의 대상체를 플라시보 (n=160), AMG 334 7 mg (n = 108), 21 mg (n = 108) 또는 70 mg (n = 107)에 무작위화하였다. 대상체는 대부분 여성 (80.5%)이었고; 평균 (SD) 연령은 41.1 (10.8)세였다. 평균 1개월 당 편두통 일수에서의 통계적으로 유의한 감소는 AMG 334 70 mg (-3.40) vs. 플라시보 (-2.28)로 관찰되었다. 도 5를 참조한다. 사후(post-hoc) 분석은 제2주의 이른 시기에 유의한 치료 효과를 나타내었다. 저용량 AMG 334에서의 1개월 당 편두통 일수 감소 (7 mg: -2.18 및 21 mg: -2.39)는 플라시보 그룹 (-2.28)과 비교할 때 통계적으로 유의하지 않았다. 도 5를 참조한다. 50% 응답자 비율은 제12주에 70 mg의 경우 46.5%인 반면 플라시보의 경우 29.9% (P = 0.011)이었다. 1개월 당 두통 일수 (70 mg: -3.54 vs. 플라시보: -2.39; P = 0.022) 및 1개월 당 급성 편두통 특이적 약물 사용 일수 (70 mg: -1.64 vs. 플라시보: -0.69; P = 0.004; 도 6)에서 통계적으로 유의한 감소가 또한 관찰되었다. 1개월 당 편두통 발병에서의 변화는 통계적으로 유의하지 않았다. 하위그룹 분석은 AMG 334의 효능이 성별 (데이터는 나타내지 않음), 기준 편두통 빈도 (도 7a), 또는 예방적 약물 사용의 사전 이력 (도 7b)과 무관하게 유사함을 입증하였다. 다양한 종점에 대한 70 mg 용량의 AMG 334 및 플라시보에 대한 데이터의 요약은 표 11에 나타나 있다. 주요 안전성 결과는 보고되지 않았다. 안전성/허용성 프로파일은 AMG 334와 플라시보 사이에 유사하였다. 플라시보와 비교할 때 AMG 334 치료 그룹에서의 부작용 사례 비율에는 뚜렷한 차이가 관찰되지 않았다. 부작용 사례에서 AMG 334의 용량 의존성은 관찰되지 않았다. AMG 334를 투여받은 대상체 중 6명 (1.9%) 및 이에 대비하여 플라시보를 투여받은 대상체 중 2명 (1.3%)은 이중 맹검 치료 단계 동안의 부작용으로 인해 조사 물질(investigational product)의 투여를 중단하였다.
표 11. 간헐적 편두통 a 에서의 AMG 334 효능
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상기 연구의 12-주 이중 맹검 (DB) 치료 단계 이후, 환자는 최대 256주 동안 오픈-라벨 연장 (OLE) 단계 동안 매월 1회 (QM) AMG 334 70 mg를 투여받을 수 있었다. OLE 단계 동안, 환자는 제64주까지 일일 다이어리(daily diary)를 지속적으로 기입하였다. 이러한 중간 분석을 위해 환자는 최대 제76주까지 AMG 334 70 mg QM을 투여받았다. 안전성 및 허용성은 1개월 마다 평가하였다. 효능 종점을 최대 제64주에 2개의 그룹에서 분석하였다: 제1 그룹 - DB 단계에서 플라시보, AMG 334 7 mg, 또는 AMG 334 21 mg를 투여받은 이후 AMG 334 70 mg QM으로 전환된 환자 (즉, DB 무효(ineffective) 용량); 제2 그룹 - OLE 단계 동안 AMG 334 70 mg QM을 계속 투여받은 환자 (즉, DB 유효 용량). 효능 종점은 하기와 같았다: 1개월 당 편두통 일수에 있어서의 기준치로부터의 변화, 50% 응답자 비율, 75% 응답자 비율, 100% 응답자 비율, 1개월 당 편두통 발병, 1개월 당 편두통 특이적 약물 (예를 들어, 트립탄, 에르고타민) 사용 일수, 및 1개월 당 두통 일수.
OLE에 투입될 수 있는 395명 환자 중 총 383명 (97%)은 오픈 라벨 AMG 334 70 mg QM을 투여받았다. OLE 단계에서 AMG 334 70 mg에 대한 노출의 중간 기간은 239일 (34.1주)이었고, 총 노출은 263.7 환자-년이었다. 도 8은 DB 단계 동안의 1개월 당 편두통 일수 및 OLE 단계의 최초 10개월에서 기준치로부터의 변화를 도시한다. 이 결과는 플라시보, 7 mg AMG 334 또는 21 mg AMG 334를 사전에 투여받았던 환자에서 1개월 당 70 mg AMG 334의 투여가 1개월 당 편두통 일수를 감소시키는 것을 나타낸다. 상세하게는, DB 단계의 제12주 (1차 종점)와 비교할 때, DB 치료를 받은 것과는 무관하게 OLE 단계 (제16주 내지 제64주) 동안 평균 1개월 당 편두통 일수에 있어서 기준치로부터의 추가의 감소가 관찰되었다 (제1 그룹: 제12주에 -2.4일 vs. 제16주에 -4.0일; 제2 그룹: 제12주에 -3.5일 vs. 제16주에 -3.9일). 치료 효과는 OLE 단계 (제16주 내지 제64주) 동안 지속되었는데, 기준치로부터의 1개월 당 편두통 일수 변화가 제1 그룹의 경우 -4.0 내지 -6.2일이었고, 제2 그룹의 경우 -3.7 내지 -4.9일 범위였다. 50% 응답자 비율, 75% 응답자 비율, 및 100% 응답자 비율, 1개월 당 편두통 발병, 1개월 당 두통 일수, 및 편두통-특이적 약물 사용에 대해서도 유사한 결과가 관찰되었다. 제52주에, 환자의 62%는 편두통 일수에서 50% 이상의 감소를 경험하였고, 38%는 편두통 일수에서 75% 이상의 감소를 경험하였으며, 19%는 편두통 일수에서 100% 감소를 경험하였다. DB 단계의 제12주와 비교할 때 OLE 단계 동안 1개월 당 두통 일수 (도 9a) 및 편두통 특이적 약물 사용 일수 (도 9b)에 있어서 연구 기준치로부터의 추가의 감소가 관찰되었다.
부작용 (AE)은 383명의 환자 중 243명 (63%)에서 보고되었다. 가장 흔한 AE (≥ 3%)는 비인두염, 상기도 감염, 관절통, 감기, 요통 및 축농증이었다. 대부분의 AE는 CTCAE 등급 1 또는 2이었다. 심각한 AE는 13명의 환자 (3%)에서 보고되었고, 이 중 1명 (<1%)은 치료와 관련이 있다고 여겨졌다 (조사자에 따라 다름). 11명 (2%)의 환자는 AE로 인해 OLE 단계를 중단하였다. 활력 징후 또는 실험실 검정 (간 기능 시험 포함)에 대해서는 임상적으로 유의한 결과가 없었다.
상기 2상 연구 결과는, AMG 334가 1개월 당 70 mg의 용량으로 투여되는 경우에 간헐적 편두통을 예방하는 효능이 있고, AMG 334가 플라시보와 유사한 안전성/허용성 프로파일을 갖는 것을 나타내었다. AMG 334 70 mg QM을 투여받는 OLE 단계를 계속 진행한 환자는 편두통 일수에서 임상적으로 의미있는 지속된 감소를 나타냈다. 안전성 및 허용성은 DB 단계에서 관찰된 것과 일치하였고, 새로운 안전성 신호는 관찰되지 않았다.
실시예 4. 만성 편두통의 예방에 대한 AMG 334의 효능 및 안전성을 평가하기 위한 무작위 이중 맹검 플라시보 대조군 2상 연구
본 실시예의 2상 연구에서는, 만성 편두통 예방에 있어서의 AMG 334 (즉, 4E4 항체)의 효과를 플라시보와 비교하여 평가하였다.
만성 편두통 (1개월 당 ≥ 15의 두통 일수 및 1개월 당 ≥ 8의 편두통 일수) 환자를 12주 이중 맹검 치료 단계 기간 동안 플라시보, 1개월 당 (QM) AMG 334 70 mg 피하 (SC) 투여, 또는 AMG 334 140 mg SC QM 중 어느 하나에 3:2:2로 무작위화하였다. 1차 종점은 제12주에 1개월 당 편두통 일수에 있어서의 기준치로부터의 변화였다. 2차 종점은 1개월 당 편두통 일수에 있어서 ≥50% 감소를 갖는 대상체의 비율 (즉, 50% 응답자 비율), 1개월 당 편두통 발병의 감소, 및 안전성/허용성을 포함하였다. 중요 탐구 종점은 1개월 당 두통 일수 감소, 1개월 당 누적 두통 시간에 있어서의 기준치로부터의 변화, 편두통 통증의 1개월 당 평균 중증도에 있어서의 기준치로부터의 감소 및 1개월 당 급성 편두통 특이적 약물 (예를 들어, 트립탄, 에르고타민) 사용 일수를 포함하였다.
사전 동의서에 서명한 후, 대상체를 스크리닝 단계 (최대 3주)에 투입하였고, 이 동안에 대상체의 적격성(eligibility)을 평가하였다. 적격 대상체는 아우라가 있거나 없는 편두통의 적어도 5회 발병의 이력 및 1개월 당 적어도 15의 두통 일수 (여기서, 스크리닝 이전 3개월 각각에서 적어도 8의 두통 일수는 편두통 일수였음)의 이력을 갖는 18세 내지 65세 성인을 포함하였다. 트립탄, 에르고트-유도체, 진통제 및 조합 약물 사용의 약물 과용 (MO)이 동시존재하는 대상체는 시험에 대해 적격이었다.
스크리닝 단계로부터의 모든 적격 대상체를 4주 기준 단계에 참여시켰다. 기준 단계 동안 선정 기준을 충족시키는 대상체에 대해서는 치료 단계를 진행하였다. 기준 단계에 대한 선정 기준은 하기를 포함하였다:
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기준 단계 동안 ≥ 15의 두통 일수를 가지며, 이 중 ≥ 8의 두통 일수가 편두통 일수로서의 기준을 충족시킴;
Figure 112017117202061-pct00026
기준 단계 동안 ≥ 4의 별개의 두통 이력을 가지며, 각각은 ≥ 4 시간 지속되거나 또는 더 짧은 경우에는 동일한 달력상의 일자에 트리탄 또는 에르고트-유도체를 사용한 것과 관련이 있음; 및
Figure 112017117202061-pct00027
e다이어리(eDiary)와 적어도 80%의 순응도를 나타냄 (예를 들어, 기준 단계 동안 28일 중 적어도 23일에 대해서는 e다이어리 항목을 완성해야 함).
제1일 방문에서, 기준 단계의 적격 대상체는 12주 이중 맹검 치료 단계로 무작위화되었고, 이중 맹검 조사 물질 QM SC 투여를 시작하였다. 참여한 적격의 대상체를 플라시보, AMG 334 70 mg 또는 AMG 334 140 mg 중 어느 하나에 3:2:2 비로 무작위화하였고, 플라시보 그룹은 대략 210명의 대상체, AMG 334 70 mg 그룹은 대략 140명의 대상체 및 AMG 334 140 mg 그룹은 대략 140명의 대상체가 있었다. 무작위화는 지역 (북아메리카 vs. 기타) 및 기준치에서의 약물 과용 (MO vs. 비-MO)에 따라 분류되었다. 12주 이중 맹검 치료 단계 동안 이중 맹검 AMG 334 70 mg, AMG 334 140 mg, 또는 플라시보를 투여하였다 (즉, 제1일 및 제4주 및 제8주). 이중 맹검 치료 단계 동안 각각의 조사 물질 투여를 위해 2회의 SC 주사가 실시되었다 (즉, 제1일 및 제4주 및 제8주). 안전성 추적조사 방문(safety follow-up visit)은 연구의 완료 및 초기 종료 이후 제12주에 이루어졌다 (즉, 조사 물질의 마지막 투여후 제16주).
최종 분석의 목적은 만성 편두통 대상체에서 AMG 334 70 mg 및 AMG 334 140 mg의 효능 및 안전성을 평가하는 것이다. 연구에 대한 최종 분석은 시험 종료시 수행되었다. 전체 연구 기간으로부터의 효능 및 안전성 데이터는 이중 맹검 치료 그룹에 의해 분석 및 보고되었다. 그 결과는 만성 편두통 대상체에서는 AMG 334 용량-의존성이 플라시보와 비교하여 1개월 당 편두통 일수를 기준치로부터 감소시키고 AMG 334의 부작용 프로파일은 플라시보와 유사하게 나타날 것으로 예상되었다.
연구의 12주 이중 맹검 치료 단계 이후에 오픈 라벨 단계를 시작하였다. 12주 이중 맹검 치료 단계를 완료한 모든 대상체는 오픈 라벨 단계의 참여에 적격이었고, 이 동안 상기 대상체에게는 13개월 동안 1개월 당 70 mg 용량의 AMG 334 SC 투여를 실시한 후에 12주의 안전성 추적조사 방문을 실시하였다. 상기 대상체는 제1일 내지 제3개월 방문, 제5개월 내지 제6개월 방문, 제9개월 내지 제10개월 방문 및 제12개월 내지 제13개월 방문 사이에 매일 전자 다이어리 (e다이어리)를 사용하여 이들의 편두통 및 비-편두통 및 급성 약물 사용에 대한 정보를 보고하였다.
오픈 라벨 단계의 목적은 AMG 334의 장기 투여의 안전성, 허용성, 및 효능을 특성화하는 것이다. 중요 종점은 하기를 포함하였다:
Figure 112017117202061-pct00028
만성 편두통을 앓는 대상체에서 1개월 당 편두통 일수에 있어서의 기준치로부터의 변화;
Figure 112017117202061-pct00029
1개월 당 편두통 일수에 있어서 기준치로부터 적어도 50% 감소를 갖는 대상체의 비율;
Figure 112017117202061-pct00030
만성 편두통을 앓는 대상체에서 1개월 당 편두통 발병에 있어서 기준치로부터의 변화;
Figure 112017117202061-pct00031
편두통 신체 기능 영향 다이어리 (MPFID)에 의해 측정되는 바와 같은 시간에 따른 신체 손상에서의 변화; 및
Figure 112017117202061-pct00032
MPFID에 의해 측정되는 바와 같은 시간에 따른 일상 활동에 대한 영향에서의 변화.
오픈 라벨 연구 결과는 AMG 334의 장기 노출이 만성 편두통을 앓는 대상체에서 안전하고 잘 허용되며, 1개월 당 1회의 70 mg SC 투여는 만성 편두통을 앓는 대상체에서 편두통 일수를 효과적으로 감소시키는 것을 나타낼 것이라 예상된다.
실시예 5. 편두통 예방에 있어서 AMG 334의 효능 및 안전성을 평가하기 위한 3상 무작위화 이중 맹검 플라시보 대조군 연구
본 연구의 1차 목적은 간헐적 편두통을 앓는 대상체에서 평균 1개월 당 편두통 일수에 있어서 기준치로부터의 변화에 대해 AMG 334 (즉, 4E4 항체)의 효과를 플라시보와 비교하여 평가하기 위한 것이다. 본 연구의 2차 목적은 평균 1개월 당 편두통 일수에 있어서 기준치로부터 적어도 50% 감소를 갖는 대상체의 비율, 평균 1개월 당 급성 편두통 특이적 약물 치료 일수에 있어서 기준치로부터의 변화, 편두통 신체 기능 영향 다이어리 (MPFID)에 의해 측정되는 바와 같은 신체 손상에 있어서 기준치로부터의 변화, 및 MPFID에 의해 측정되는 바와 같은 일상 활동에 대한 영향에 있어서 기준치로부터의 변화를 포함한다.
본 연구에서는 AMG 334의 70 및 140 mg의 2가지 용량을 평가하였다. 대상체에게 이중 맹검 치료 단계에서 24주 동안 AMG 334 140 mg, AMG 334 70 mg, 또는 플라시보 중 어느 하나를 1개월 당 1회 (QM) 피하 (SC) 투여한 후, AMG 334 140 mg 또는 AMG 70 mg QM SC를 투여받는 28주 활성 치료 단계를 실시하였다. 간헐적 편두통 (1개월 당 ≥ 4 내지 < 15 편두통 일수)을 앓는 대략 852명의 대상체를 플라시보, AMG 334 70 mg, 또는 AMG 334 140 mg에 1:1:1로 무작위화하였다. 무작위화는 지역 (북아메리카 vs. 기타) 및 편두통 예방적 약물로의 사전 치료 (사전 편두통 예방 약물 치료 실시 vs. 사전 편두통 예방 약물 치료 없음)에 따라 분류되었다.
사전 동의서에 서명한 후, 대상체를 스크리닝 단계에 투입하였다. 스크리닝 단계는 초기 스크리닝 단계 (최대 3주) 이후 4주의 기준 단계로 구성되었다. 스크리닝 및/또는 기준 단계 동안, 대상체를 적격성에 대해 평가하였다. 적격 대상체는 스크리닝 이전 3개월에 걸쳐 평균적으로 1개월 당 < 15의 두통 일수를 갖고 1개월 당 ≥ 4 내지 < 15의 편두통 일수를 경험하고 ≥ 12개월 동안 아우라가 있거나 없는 편두통 이력을 갖는 18세 내지 65세의 성인을 포함하였다.
제1일 방문시, 적격 대상체를 24주 이중 맹검 치료 단계에 참여시켰고 (즉, 무작위화하고), 이중 맹검 조사 물질 QM SC 투여를 시작하였다. 24주 방문에서, 각각의 치료 그룹의 대상체를 28주 활성 치료 단계 동안 AMG 334 70 mg 또는 AMG 334 140 mg로 1:1 재무작위화하고, 단지 용량 수준에 대해서만 맹검을 유지하는 조사 물질 QM SC 투여를 시작하였다. 재무작위화는 이중 맹검 단계 동안 할당된 치료 그룹에 따라 분류되었다. 이중 맹검 AMG 334 70 mg, AMG 334 140 mg, 또는 플라시보를 24주 이중 맹검 치료 단계 (즉, 제1일 및 제4주, 제8주, 제12주, 제16주 및 제20주에서) 동안 투여하고, 활성 AMG 334 70 mg 또는 AMG 334 140 mg를 28주 활성 치료 단계 (즉, 제24주, 제28주, 제32주, 제36주, 제40주, 제44주 및 제48주) 동안 투여하였다. 이중 맹검 치료 단계 및 활성 치료 단계에 걸쳐, 각각의 조사 물질 투여에 대해 2회의 SC 주사가 실시되었다.
안전성 추적조사 방문은 조사 물질의 최종 투여후 제16주에 이루어졌다. 대상체는 기준 단계, 이중 맹검 치료 단계 및 활성 치료 단계에 걸쳐 매일 전자 다이어리 (e다이어리)를 사용하여 이들의 편두통 및 비-편두통 및 급성 두통 약물 사용에 대한 정보를 보고하였다. 대상체는 제4주부터 활성 치료 단계의 종료시까지 1개월 당 임상 연구 방문이 스케줄링되었다.
3상 연구 결과, 간헐적 편두통을 앓는 대상체에서는 AMG 334가 플라시보와 비교할 때 평균 1개월 당 편두통 일수를 기준치로부터 더 크게 감소시킬 것으로 예상된다. 플라시보와 비교할 때 AMG 334의 예상 치료 효과는 70 mg 및 140 mg의 경우에 각각 기준치로부터 1개월 당 편두통 일수에 있어서 1.12 및 1.30의 평균 감소이다.
본원에 논의되고 인용된 모든 공개공보, 특허, 및 특허출원은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다. 개시된 본 발명은 본원에 기재된 특정 방법, 프로토콜, 및 물질로 제한되지 않으며 변형될 수 있다. 또한, 본원에 사용되는 전문 용어는 단지 특정 구현예를 기술하기 위한 목적을 위한 것이며, 첨부된 청구범위를 제한하려는 것이 아니다.
당해 기술분야의 통상의 기술자는 일상적 실험만으로도 본원에 기재된 본 발명의 특정 구현예에 대한 수많은 동등물을 인식하거나 확인할 수 있을 것이다. 이러한 동등물은 하기 청구범위에 포함되는 것으로 한다.
SEQUENCE LISTING <110> AMGEN INC. SUN, Hong DUNAYEVICH, Eduardo LENZ, Robert A. VARGAS, Gabriel <120> METHODS FOR TREATING OR PREVENTING MIGRAINE HEADACHE <130> A-1945-WO-PCT <150> US 62/152,708 <151> 2015-04-24 <160> 136 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 472 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 1 Met Leu Tyr Ser Ile Phe His Phe Gly Leu Met Met Glu Lys Lys Cys 1 5 10 15 Thr Leu Tyr Phe Leu Val Leu Leu Pro Phe Phe Met Ile Leu Val Thr 20 25 30 Ala Glu Leu Glu Glu Ser Pro Glu Asp Ser Ile Gln Leu Gly Val Thr 35 40 45 Arg Asn Lys Ile Met Thr Ala Gln Tyr Glu Cys Tyr Gln Lys Ile Met 50 55 60 Gln Asp Pro Ile Gln Gln Ala Glu Gly Val Tyr Cys Asn Arg Thr Trp 65 70 75 80 Asp Gly Trp Leu Cys Trp Asn Asp Val Ala Ala Gly Thr Glu Ser Met 85 90 95 Gln Leu Cys Pro Asp Tyr Phe Gln Asp Phe Asp Pro Ser Glu Lys Val 100 105 110 Thr Lys Ile Cys Asp Gln Asp Gly Asn Trp Phe Arg His Pro Ala Ser 115 120 125 Asn Arg Thr Trp Thr Asn Tyr Thr Gln Cys Asn Val Asn Thr His Glu 130 135 140 Lys Val Lys Thr Ala Leu Asn Leu Phe Tyr Leu Thr Ile Ile Gly His 145 150 155 160 Gly Leu Ser Ile Ala Ser 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215 <210> 128 <211> 216 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polypeptide <400> 128 Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn 20 25 30 Thr Val Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Thr Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Gln 65 70 75 80 Ser Glu Asp Glu Ala Asp Phe Tyr Cys Ala Ala Arg Asp Glu Ser Leu 85 90 95 Asn Gly Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln 100 105 110 Pro Lys Ala Asn Pro Thr Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu 115 120 125 Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr 130 135 140 Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Gly Ser Pro Val Lys 145 150 155 160 Ala Gly Val Glu Thr Thr Lys Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr 165 170 175 Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His 180 185 190 Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys 195 200 205 Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser 210 215 <210> 129 <211> 216 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polypeptide <400> 129 Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn 20 25 30 Tyr Val Tyr Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Ala Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45 Ile Phe Arg Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg 65 70 75 80 Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu 85 90 95 Ser Gly Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln 100 105 110 Pro Lys Ala Asn Pro Thr Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu 115 120 125 Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr 130 135 140 Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Gly Ser Pro Val Lys 145 150 155 160 Ala Gly Val Glu Thr Thr Lys Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr 165 170 175 Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His 180 185 190 Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys 195 200 205 Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser 210 215 <210> 130 <211> 219 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polypeptide <400> 130 Asp Ile Thr Leu Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Ser Pro Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Ser 20 25 30 Asp Gly Arg Asn Tyr Leu Tyr Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Pro 35 40 45 Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Glu Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Leu Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Ile Tyr Tyr Cys Met Gln Ser 85 90 95 Phe Pro Leu Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110 Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu 115 120 125 Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe 130 135 140 Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln 145 150 155 160 Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser 165 170 175 Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu 180 185 190 Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser 195 200 205 Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 131 <211> 216 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polypeptide <400> 131 Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Ala Ala Pro Gly Gln 1 5 10 15 Lys Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Asn Asn 20 25 30 Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Asp Asn Asn Lys Arg Pro Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Thr Leu Gly Ile Thr Gly Leu Gln 65 70 75 80 Thr Gly Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Thr Trp Asp Ser Arg Leu 85 90 95 Ser Ala Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln 100 105 110 Pro Lys Ala Asn Pro Thr Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu 115 120 125 Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr 130 135 140 Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Gly Ser Pro Val Lys 145 150 155 160 Ala Gly Val Glu Thr Thr Lys Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr 165 170 175 Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His 180 185 190 Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys 195 200 205 Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser 210 215 <210> 132 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polypeptide <400> 132 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Lys Asp 20 25 30 Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile 35 40 45 Tyr Gly Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu 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Leu Arg Gly Ala Arg Cys 20 <210> 136 <211> 20 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 136 Met Glu Thr Pro Ala Gln Leu Leu Phe Leu Leu Leu Leu Trp Leu Pro 1 5 10 15 Asp Thr Thr Gly 20

Claims (122)

  1. 항-칼시토닌 유전자-관련 펩티드 (CGRP) 수용체 단일클론성 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 포함하는, 편두통형 두통 발생의 예방 또는 감소를 필요로 하는 인간 환자에서 편두통형 두통의 발생을 예방 또는 감소시키기 위한 약제학적 조성물이며,
    여기서 항-CGRP 수용체 단일클론성 항체 또는 그의 항원-결합 단편은
    서열번호: 14의 서열을 갖는 CDRH1,
    서열번호: 23의 서열을 갖는 CDRH2,
    서열번호: 34의 서열을 갖는 CDRH3,
    서열번호: 44의 서열을 갖는 CDRL1,
    서열번호: 55의 서열을 갖는 CDRL2 및
    서열번호: 65의 서열을 갖는 CDRL3
    을 포함하고,
    항-CGRP 수용체 단일클론성 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 1개월 당 1회 35 mg 내지 210 mg의 용량으로 인간 환자에게 투여되는 것인 약제학적 조성물.
  2. 항-CGRP 수용체 단일클론성 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 포함하는, 편두통형 두통에 대해 인간 환자를 예방적으로 치료하기 위한 약제학적 조성물이며,
    여기서 항-CGRP 수용체 단일클론성 항체 또는 그의 항원-결합 단편은
    서열번호: 14의 서열을 갖는 CDRH1,
    서열번호: 23의 서열을 갖는 CDRH2,
    서열번호: 34의 서열을 갖는 CDRH3,
    서열번호: 44의 서열을 갖는 CDRL1,
    서열번호: 55의 서열을 갖는 CDRL2 및
    서열번호: 65의 서열을 갖는 CDRL3
    을 포함하고, 항-CGRP 수용체 단일클론성 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 1개월 당 1회 35 mg 내지 210 mg의 용량으로 인간 환자에게 투여되는 것인 약제학적 조성물.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 용량이 1개월 당 1회 70 mg 내지 140 mg인 약제학적 조성물.
  4. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 용량이 1개월 당 1회 약 70 mg인 약제학적 조성물.
  5. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 용량이 1개월 당 1회 약 140 mg인 약제학적 조성물.
  6. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 항-CGRP 수용체 단일클론성 항체 또는 그의 항원-결합 단편이 인간 환자에게 비경구 투여되는 것인 약제학적 조성물.
  7. 제6항에 있어서, 상기 항-CGRP 수용체 단일클론성 항체 또는 그의 항원-결합 단편이 인간 환자에게 피하 투여되는 것인 약제학적 조성물.
  8. 제7항에 있어서, 상기 항-CGRP 수용체 단일클론성 항체 또는 그의 항원-결합 단편이 인간 환자에게 단일 피하 주사로 투여되는 것인 약제학적 조성물.
  9. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 인간 환자가 간헐적 편두통을 갖거나 또는 이를 갖는다고 진단된 것인 약제학적 조성물.
  10. 제9항에 있어서, 간헐적 편두통을 갖거나 또는 이를 갖는다고 진단된 상기 환자가 1개월 당 4회 이상, 그러나 15회 미만의 편두통형 두통을 갖는 것인 약제학적 조성물.
  11. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 인간 환자가 만성 편두통을 갖거나 또는 이를 갖는다고 진단된 것인 약제학적 조성물.
  12. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 인간 환자가 편두통형 두통에 대한 예방 요법을 사전에 받은 적이 없는 것인 약제학적 조성물.
  13. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 인간 환자가 적어도 하나의 다른 편두통형 두통 예방 요법에 실패한 적이 있거나 불내성인 약제학적 조성물.
  14. 제13항에 있어서, 상기 다른 편두통형 두통 예방 요법이 항간질제, 삼환계 항우울제, 또는 베타-차단제인 약제학적 조성물.
  15. 제14항에 있어서, 상기 항간질제가 디발프로엑스, 나트륨 발프로에이트, 발프로산, 토피라메이트, 또는 가바펜틴인 약제학적 조성물.
  16. 제14항에 있어서, 상기 삼환계 항우울제가 아미트립틸린, 노르트립틸린, 독세핀, 또는 플루옥세틴인 약제학적 조성물.
  17. 제14항에 있어서, 상기 베타-차단제가 프로프라놀롤, 티몰롤, 아테놀롤, 메토프롤롤, 또는 나돌롤인 약제학적 조성물.
  18. 제14항에 있어서, 상기 환자가 프로프라놀롤, 티몰롤, 디발프로엑스, 발프로산, 토피라메이트, 아미트립틸린, 또는 보툴리늄 독소 A로부터 선택된 하나 이상의 요법에 대해 실패한 적이 있거나 불내성인 약제학적 조성물.
  19. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 항-CGRP 수용체 단일클론성 항체 또는 그의 항원-결합 단편이
    서열번호: 92의 서열을 포함하는 중쇄 가변 부위 (VH) 및
    서열번호: 80의 서열을 포함하는 경쇄 가변 부위 (VL)
    를 포함하는 것인 약제학적 조성물.
  20. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 항-CGRP 수용체 단일클론성 항체가
    서열번호: 105의 서열을 포함하는 중쇄 및
    서열번호: 123의 서열을 포함하는 경쇄
    를 포함하는 것인 약제학적 조성물.
  21. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 항-CGRP 수용체 단일클론성 항체가 단일클론성 IgG1 또는 단일클론성 IgG2 항체인 약제학적 조성물.
  22. 제1항 또는 제2항에 있어서, 완충액, 계면활성제, 및 안정화제를 추가로 포함하는 약제학적 조성물.
  23. 제22항에 있어서,
    상기 완충액이 아세테이트 완충액이고,
    상기 계면활성제가 폴리소르베이트 20 또는 폴리소르베이트 80이고,
    상기 안정화제가 수크로오스인
    약제학적 조성물.
  24. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 항-CGRP 수용체 단일클론성 항체 또는 그의 항원-결합 단편이, 약제학적 조성물로 사전 충전된 주사기(syringe) 또는 자동주사기(autoinjector)를 사용하여 상기 인간 환자에게 투여되는 것인 약제학적 조성물.
  25. 제24항에 있어서, 상기 주사기 또는 자동주사기의 주사 용량이 1 mL 이하인 약제학적 조성물.
  26. 70 mg 내지 140 mg의 항-CGRP 수용체 단일클론성 항체 또는 그의 항원-결합 단편,
    아세테이트 완충액,
    수크로스, 및
    폴리소르베이트
    를 포함하는 약제학적 조성물을 포함하는, 편두통형 두통의 예방적 치료에 사용하기 위한 사전 충전된 장치이며,
    여기서 항-CGRP 수용체 단일클론성 항체 또는 그의 항원-결합 단편은
    서열번호: 14의 서열을 갖는 CDRH1,
    서열번호: 23의 서열을 갖는 CDRH2,
    서열번호: 34의 서열을 갖는 CDRH3,
    서열번호: 44의 서열을 갖는 CDRL1,
    서열번호: 55의 서열을 갖는 CDRL2 및
    서열번호: 65의 서열을 갖는 CDRL3
    을 포함하는 것인 사전 충전된 장치.
  27. 제26항에 있어서, 주사기 또는 자동주사기인 사전 충전된 장치.
  28. 제26항 또는 제27항에 있어서, 상기 폴리소르베이트가 폴리소르베이트 20 또는 폴리소르베이트 80인 사전 충전된 장치.
  29. 제26항 또는 제27항에 있어서, 상기 항-CGRP 수용체 단일클론성 항체 또는 그의 항원-결합 단편이
    서열번호: 92의 서열을 포함하는 중쇄 가변 부위 (VH) 및
    서열번호: 80의 서열을 포함하는 경쇄 가변 부위 (VL)
    를 포함하는 것인 사전 충전된 장치.
  30. 제26항 또는 제27항에 있어서, 상기 항-CGRP 수용체 단일클론성 항체가
    서열번호: 105의 서열을 포함하는 중쇄 및
    서열번호: 123의 서열을 포함하는 경쇄
    를 포함하는 것인 사전 충전된 장치.
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Families Citing this family (26)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20100266638A1 (en) * 2004-02-26 2010-10-21 Allergan, Inc. Headache treatment method
JO3382B1 (ar) * 2008-12-23 2019-03-13 Amgen Inc أجسام مضادة ترتبط مع مستقبل cgrp بشري
US11844720B2 (en) 2011-02-04 2023-12-19 Seed Health, Inc. Method and system to reduce the likelihood of dental caries and halitosis
US11951140B2 (en) 2011-02-04 2024-04-09 Seed Health, Inc. Modulation of an individual's gut microbiome to address osteoporosis and bone disease
US11951139B2 (en) 2015-11-30 2024-04-09 Seed Health, Inc. Method and system for reducing the likelihood of osteoporosis
US11833177B2 (en) 2013-12-20 2023-12-05 Seed Health, Inc. Probiotic to enhance an individual's skin microbiome
US11839632B2 (en) 2013-12-20 2023-12-12 Seed Health, Inc. Topical application of CRISPR-modified bacteria to treat acne vulgaris
US11826388B2 (en) 2013-12-20 2023-11-28 Seed Health, Inc. Topical application of Lactobacillus crispatus to ameliorate barrier damage and inflammation
US11969445B2 (en) 2013-12-20 2024-04-30 Seed Health, Inc. Probiotic composition and method for controlling excess weight, obesity, NAFLD and NASH
US11980643B2 (en) 2013-12-20 2024-05-14 Seed Health, Inc. Method and system to modify an individual's gut-brain axis to provide neurocognitive protection
US10556945B2 (en) 2014-03-21 2020-02-11 Teva Pharmaceuticals International Gmbh Antagonist antibodies directed against calcitonin gene-related peptide and methods using same
CN111973740A (zh) 2014-03-21 2020-11-24 泰华制药国际有限公司 针对降钙素基因相关肽的拮抗剂抗体及其使用方法
SG10201913032TA (en) 2016-09-23 2020-02-27 Teva Pharmaceuticals Int Gmbh Treating refractory migraine
WO2018160897A1 (en) 2017-03-02 2018-09-07 Beth Israel Deaconess Medical Center, Inc. Preventing post-ictal headaches
WO2019055399A1 (en) * 2017-09-12 2019-03-21 Igc Bio, Inc. ANTI-VEGF ANTIBODIES
BR112020013621A2 (pt) 2018-01-12 2020-12-01 Amgen Inc. anticorpos contra pac1 e usos dos mesmos
US11407838B2 (en) * 2018-04-02 2022-08-09 Amgen Inc. Erenumab compositions and uses thereof
EP4302828A3 (en) * 2018-07-05 2024-01-17 Allergan Pharmaceuticals International Limited Combination therapy with cgrp antagonists and clostridial derivatives
JP2022516956A (ja) 2019-01-08 2022-03-03 ハー・ルンドベック・アクチエゼルスカベット 抗ｃｇｒｐ抗体を用いた頭痛の急性治療及び迅速治療
AU2020267107A1 (en) * 2019-05-02 2021-10-07 H. Lundbeck A/S Treatment of headache using anti-CGRP antibodies
US20210121541A1 (en) 2019-07-05 2021-04-29 Allergan Pharmaceuticals International Limited CGRP Antagonists and Clostridial Derivatives for the Treatment of Neuropsychiatric and Neurological Disorders
US20210128724A1 (en) 2019-07-05 2021-05-06 Allergan Pharmaceuticals International Limited Cgrp antagonists and clostridial derivatives for the treatment of cortical spreading depression associated disorders
WO2021005493A1 (en) 2019-07-05 2021-01-14 Allergan Pharmaceuticals International Limited Cgrp antagonists and botulinum toxins for the treatment of inflammatory and neurologic disorders
CA3161376A1 (en) * 2019-12-18 2021-06-24 Anthony P. FORD Methods for improving neurological diseases and disorders
KR20230157986A (ko) 2021-03-02 2023-11-17 체게에르페 다이어그노스틱스 게엠베하 편투통 발생의 치료 및/또는 저감
WO2023026205A1 (en) 2021-08-24 2023-03-02 Cgrp Diagnostics Gmbh Preventative treatment of migraine

Family Cites Families (81)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4399216A (en) 1980-02-25 1983-08-16 The Trustees Of Columbia University Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US4740461A (en) 1983-12-27 1988-04-26 Genetics Institute, Inc. Vectors and methods for transformation of eucaryotic cells
US4959455A (en) 1986-07-14 1990-09-25 Genetics Institute, Inc. Primate hematopoietic growth factors IL-3 and pharmaceutical compositions
US4912040A (en) 1986-11-14 1990-03-27 Genetics Institute, Inc. Eucaryotic expression system
US4965195A (en) 1987-10-26 1990-10-23 Immunex Corp. Interleukin-7
US4968607A (en) 1987-11-25 1990-11-06 Immunex Corporation Interleukin-1 receptors
GB8823869D0 (en) 1988-10-12 1988-11-16 Medical Res Council Production of antibodies
WO1990005183A1 (en) 1988-10-31 1990-05-17 Immunex Corporation Interleukin-4 receptors
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
US6713610B1 (en) 1990-01-12 2004-03-30 Raju Kucherlapati Human antibodies derived from immunized xenomice
US6673986B1 (en) 1990-01-12 2004-01-06 Abgenix, Inc. Generation of xenogeneic antibodies
DK0710719T3 (da) 1990-01-12 2007-07-09 Amgen Fremont Inc Frembringelse af xenogene antistoffer
AU651596B2 (en) 1990-06-05 1994-07-28 Immunex Corporation Type II interleukin-1 receptors
US5874299A (en) 1990-08-29 1999-02-23 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
US5661016A (en) 1990-08-29 1997-08-26 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes
US5877397A (en) 1990-08-29 1999-03-02 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes
US6255458B1 (en) 1990-08-29 2001-07-03 Genpharm International High affinity human antibodies and human antibodies against digoxin
US5814318A (en) 1990-08-29 1998-09-29 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
EP0814159B1 (en) 1990-08-29 2005-07-27 GenPharm International, Inc. Transgenic mice capable of producing heterologous antibodies
US5625126A (en) 1990-08-29 1997-04-29 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5770429A (en) 1990-08-29 1998-06-23 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
US5633425A (en) 1990-08-29 1997-05-27 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
US6300129B1 (en) 1990-08-29 2001-10-09 Genpharm International Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5789650A (en) 1990-08-29 1998-08-04 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5545806A (en) 1990-08-29 1996-08-13 Genpharm International, Inc. Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
EP0590076A4 (en) 1991-06-14 1997-02-12 Dnx Corp Production of human hemoglobin in transgenic pigs
DE69224906T2 (de) 1991-07-08 1998-10-29 Univ Massachusetts Thermotropes flüssig-kristallines segment-blockcopolymer
DE69324579T2 (de) 1992-03-17 1999-09-23 Novartis Ag Gentechnologisch hergestellte antikörper
JPH07509137A (ja) 1992-07-24 1995-10-12 セル　ジェネシス，インク． 異種抗体の生産
WO1996005221A1 (en) 1994-08-16 1996-02-22 Human Genome Sciences, Inc. Calcitonin receptor
US5785682A (en) 1995-03-22 1998-07-28 Abbott Laboratories Pre-filled syringe drug delivery system
ATE390933T1 (de) 1995-04-27 2008-04-15 Amgen Fremont Inc Aus immunisierten xenomäusen stammende menschliche antikörper gegen il-8
AU6596096A (en) 1996-07-23 1998-02-10 Smithkline Beecham Corporation Calcitonin gene-related peptide receptor component factor (houdc44)
US6255455B1 (en) 1996-10-11 2001-07-03 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Rh(D)-binding proteins and magnetically activated cell sorting method for production thereof
EP0942968B1 (en) 1996-12-03 2008-02-27 Amgen Fremont Inc. Fully human antibodies that bind EGFR
CA2196496A1 (en) 1997-01-31 1998-07-31 Stephen William Watson Michnick Protein fragment complementation assay for the detection of protein-protein interactions
FR2821080B1 (fr) 2001-02-20 2003-12-19 Sanofi Synthelabo Anticorps specifique de l'adrenomedulline humaine, composition pharmaceutique le contenant, ses applications therapeutiques
EP1438325B1 (en) 2001-09-27 2009-12-30 Merck & Co., Inc. Isolated dna molecules encoding humanized calcitonin gene-related peptide receptor, related non-human transgenic animals and assay methods
US7658924B2 (en) 2001-10-11 2010-02-09 Amgen Inc. Angiopoietin-2 specific binding agents
AR039067A1 (es) 2001-11-09 2005-02-09 Pfizer Prod Inc Anticuerpos para cd40
US20040132101A1 (en) 2002-09-27 2004-07-08 Xencor Optimized Fc variants and methods for their generation
US20040110170A1 (en) 2002-05-18 2004-06-10 The Regents Of The University Of California Cloning and characterization of calcitonin gene related peptide receptors
US7842808B2 (en) 2002-06-05 2010-11-30 Bristol-Myers Squibb Company Anti-migraine spirocycles
US7220862B2 (en) 2002-06-05 2007-05-22 Bristol-Myers Squibb Company Calcitonin gene related peptide receptor antagonists
ES2323170T3 (es) 2002-08-12 2009-07-08 Birkir Sveinsson Uso de compuestos antagonistas del cgrp para el tratamiento de la psoriasis.
US20040176577A1 (en) 2002-09-10 2004-09-09 Eva Rojer Immunoassays for specific determination of SCCA isoforms
WO2004097421A2 (en) 2003-04-29 2004-11-11 Bayer Healthcare Ag Diagnostics and therapeutics for diseases associated with calcitonin receptor-like receptor (calcrl)
US7569578B2 (en) 2003-12-05 2009-08-04 Bristol-Meyers Squibb Company Heterocyclic anti-migraine agents
KR20120034237A (ko) 2004-02-11 2012-04-10 아밀린 파마슈티칼스, 인크. 선택가능한 특성을 갖는 하이브리드 폴리펩티드
TW200533398A (en) 2004-03-29 2005-10-16 Bristol Myers Squibb Co Novel therapeutic agents for the treatment of migraine
US7423128B2 (en) 2004-11-03 2008-09-09 Amgen Fremont Inc. Anti-properdin antibodies, and methods for making and using same
EP2284194A1 (en) 2004-12-21 2011-02-16 AstraZeneca AB Antibodies directed to angiopoietin-2 and uses thereof
DE102004063753A1 (de) 2004-12-29 2006-07-13 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg Verwendung ausgewählter CGRP-Antagonisten in Kombination mit anderen Arzneistoffen gegen Migräne für die Behandlung von Migräne
US9072777B2 (en) 2005-06-16 2015-07-07 Takayuki Shindo Method for screening substance having proangiogenic effect
GB0521139D0 (en) 2005-10-18 2005-11-23 Univ Sheffield Therapeutic agent
US8168592B2 (en) 2005-10-21 2012-05-01 Amgen Inc. CGRP peptide antagonists and conjugates
JP5123197B2 (ja) * 2005-11-14 2013-01-16 ライナット ニューロサイエンス コーポレイション カルシトニン遺伝子関連ペプチドに対するアンタゴニスト抗体およびその使用方法
AU2006316642A1 (en) 2005-11-18 2007-05-31 Merck Sharp & Dohme Corp. Spirolactam tricyclic CGRP receptor antagonists
WO2007076336A1 (en) 2005-12-22 2007-07-05 Eli Lilly And Company Treatment of migraine with anti-cgrp antibodies
JP4435288B2 (ja) 2006-05-09 2010-03-17 メルク エンド カムパニー インコーポレーテッド 置換スピロ環ｃｇｒｐ受容体アンタゴニスト
CA2658612C (en) 2006-08-03 2015-11-17 Astrazeneca Ab Antibodies directed to .alpha.v.beta.6 and uses thereof
AU2008239754A1 (en) 2007-04-11 2008-10-23 Merck Sharp & Dohme Corp. CGRP receptor antagonists with tertiary amide, sulfonamide, carbamate and urea end groups
JP2010524934A (ja) 2007-04-16 2010-07-22 メルク・シャープ・エンド・ドーム・コーポレイション アリール複素環式ｃｇｒｐ受容体アンタゴニスト
GB0708002D0 (en) 2007-04-25 2007-06-06 Univ Sheffield Antibodies
NZ587297A (en) 2008-03-04 2012-10-26 Pfizer Ltd Use of anti-CGRP (calcitonin gene-related peptide) antagonists to treat inflammatory pain
AU2009257733A1 (en) 2008-06-12 2009-12-17 Merck Sharp & Dohme Corp. Branched 3- and 6-substituted quinolines as CGRP receptor antagonists
FR2934597B1 (fr) 2008-07-31 2013-04-19 Univ Aix Marseille Ii Anticorps se liant aux recepteurs de l'adrenomedulline et leurs utilisations comme medicament.
CA2737711A1 (en) 2008-09-18 2010-03-25 Merck Sharp & Dohme Corp. Bicyclic dihydroimidazolone cgrp receptor antagonists
EP2340025B1 (en) 2008-10-03 2014-10-15 Merck Sharp & Dohme Corp. Cgrp receptor antagonists
JO3382B1 (ar) 2008-12-23 2019-03-13 Amgen Inc أجسام مضادة ترتبط مع مستقبل cgrp بشري
EP2470207A1 (en) 2009-08-28 2012-07-04 Rinat Neuroscience Corporation Methods for treating visceral pain by administering antagonist antibodies directed against calcitonin gene-related peptide
AR081434A1 (es) 2010-06-10 2012-08-29 Lilly Co Eli Anticuerpo del peptido relacionado con el gen calcitonina (cgrp), composicion farmaceutica que lo comprende, uso de dicho anticuerpo para preparar un medicamento util para tratar dolor de osteoartritis o migranas y fragmento de union a antigeno de dicho anticuerpo
JOP20190250A1 (ar) * 2010-07-14 2017-06-16 Regeneron Pharma صيغ مستقرة تحتوي على الأجسام المضادة لمضاد عامل نمو الأعصاب
CN103702685B (zh) * 2011-05-20 2017-12-15 奥尔德生物控股有限责任公司 抗cgrp抗体和抗体片段用于在有需要的受试者、尤其是偏头痛患者中预防或抑制畏光或厌光的用途
PL2710039T3 (pl) 2011-05-20 2019-07-31 Alderbio Holdings Llc Kompozycje przeciwko CGRP i ich zastosowanie
EP2709662B1 (en) * 2011-05-20 2019-07-31 AlderBio Holdings LLC Use of anti-cgrp or anti-cgrp-r antibodies or antibody fragments to treat or prevent chronic and acute forms of diarrhea
EA032830B1 (ru) 2013-03-15 2019-07-31 Эмджен Инк. Антитела к pac1 человека и их применение для лечения головной боли
US10556945B2 (en) 2014-03-21 2020-02-11 Teva Pharmaceuticals International Gmbh Antagonist antibodies directed against calcitonin gene-related peptide and methods using same
CN111973740A (zh) 2014-03-21 2020-11-24 泰华制药国际有限公司 针对降钙素基因相关肽的拮抗剂抗体及其使用方法
MX2017003247A (es) * 2014-09-15 2017-11-30 Amgen Inc Proteina de union a antigenos, bi-especificos del receptor anti-cgrp/receptor pac1 y usos de las mismas.

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Protocol: A Study to Assess the Long-term Safety and Efficacy of AMG334 in Chronic Migraine Prevention(2015.3.25.)
Protocol: A Study to Evaluate the Efficacy and Safety of AMG334 in Chronic Migraine Prevention(2015.3.25.)

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