KR102341596B1 - 척수성 근위축증을 치료하기 위한 화합물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 척수성 근위축증을 치료하기 위한 화합물, 이의 조성물 및 용도에 관한 것이다.
Description
본 발명은 척수성 근위축증(Spinal Muscular Atrophy)을 치료하기 위한 화합물, 이의 조성물 및 용도에 관한 것이다.
본원에 서술된 기술은 미국 정부의 지원 하에 이루어지지 않았다.
상호참조
본원은 2012년 2월 10일자 출원된 미국 가출원 제61/597,523호를 우선권 주장하고, 이의 전체 내용은 모든 목적을 위해 본원에 참고로서 혼입된다.
공동 연구 계약에 관한 진술
청구된 발명의 유효 출원일에 또는 그 이전에 시행 중인 공동 연구 계약에 대한 하나 이상의 관계자에 의해 또는 이를 대행하여 개시된 주제가 개발되고 청구된 발명이 이루어졌으며; 청구된 발명은 공동 연구 계약의 범위 내에서 수행된 활동의 결과로서 이루어졌으며; 청구된 발명에 대한 특허출원은 공동 연구 계약의 관계자들의 이름을 개시하고 있거나 개시하도록 정정된다.
척수성 근위축증(SMA)은, 가장 넓은 의미에서, 근육 약화 및 근위축을 유발하는, 척수 및 뇌간에서의 진행성 운동 뉴런 손실을 특징으로 하는 선천적 및 후천적 중추 신경계(CNS) 질환의 집합을 말한다. 가장 보편적인 형태의 SMA는 생존 운동 뉴런(Survival Motor Neuron, SMN) 유전자에서의 돌연변이에 의해 야기되며, 유아에서 성인까지 영향을 미치는 광범위한 중증도를 나타낸다(문헌 [Crawford and Pardo, Neurobiol. Dis., 3:97 (1996)]).
유아 SMA가 상기 신경퇴행성 질환의 가장 심각한 형태이다. 증상으로는 근육 약화, 부족한 근긴장, 약한 울음, 흐느적거림 또는 주저앉는 경향, 빨기 또는 연하 곤란, 폐 또는 목구멍에 분비물의 축적, 섭식 곤란, 및 호흡기 감염에 대한 증가된 감수성이 포함된다. 다리가 팔보다 더 약한 경향이 있으며, 머리 들어올리기 또는 일어나 앉기와 같은 발달 지표에 이를 수 없다. 일반적으로, 증상이 초기에 나타날수록, 수명이 더 짧다. 운동 뉴런 세포가 퇴화되기 때문에, 증상이 곧 나타난다. 질환의 심각한 형태는 치명적이며, 모든 형태들이 확실한 치료법이 없다. SMA의 과정은 운동 뉴런 세포 퇴화 속도 및 초래된 약화의 중증도와 직접 관련된다. 심각한 형태의 SMA를 갖는 유아들은 흔히 호흡을 지지하는 근육의 약화로 인해 호흡기 질환으로 사망한다. 보다 약한 형태의 SMA를 갖는 소아들은 훨씬 더 오래살긴 하지만, 이들, 특히 양상의 더 심각한 쪽 끝에 있는 소아들은 광범위한 의료 지원을 필요로 할 수 있다. SMA 질환의 임상 양상은 하기의 5개 군으로 분류되었다.
(a) 제0형 SMA(태내 SMA)는 질환의 가장 심각한 형태이며 출생 전에 시작된다. 통상적으로, 제0형 SMA의 첫번째 증상은 임신 30 내지 36주 사이에 처음 관찰될 수 있는 태아의 감소된 움직임이다. 출생 후에, 신생아는 움직임이 거의 없으며 연하 및 호흡에 어려움을 갖는다.
(b) 제1형 SMA(유아형 SMA 또는 베르드니히-호프만(Werdnig-Hoffmann) 질환)는 전형적으로 0 내지 6개월 사이에 증상을 나타낸다: 상기 형태의 SMA도 또한 매우 심각하다. 환자들은 결코 앉는 능력을 달성하지 못하며, 사망은 통상적으로 환기 보조 없이 처음 2년 이내에 일어난다.
(c) 제2형 SMA(중간형 SMA)는 7 내지 18개월의 발병 연령을 갖는다. 환자들은 도움 없이 앉는 능력을 달성하지만, 도 움없이 결코 일어서거나 보행하지 못한다. 이 군의 예후는 주로 호흡기 침범 정도에 의존한다.
(d) 제3형 SMA(청소년형 SMA 또는 쿠겔베르그-웰란더(Kugelberg-Welander) 질환)는 일반적으로 18개월 후에 진단된다. 제3형 SMA 환자들은 질환 경과 동안 어느 시점에서 독립적으로 보행할 수 있지만, 종종 청소년기 또는 성인기 동안 휠체어 신세를 지게 된다.
(e) 제4형 SMA(성인 발병 SMA). 약화는 통상적으로 청소년기 말기에 혀, 손 또는 발에서 시작된 다음, 신체 다른 부위로 진행된다. 성인 SMA의 경과는 훨씬 더 느리며 기대 수명에는 거의 또는 전혀 영향을 미치지 않는다.
SMN 유전자는 염색체 5q에서의 복합 영역에 대한 결합 분석에 의해 지도화되었다. 인간에서, 상기 영역은 SMN 유전자의 2개의 거의 동일한 복사체를 생성하는 약 50만개 염기쌍(kb)의 역전된 중복체(inverted duplication)를 함유한다. SMA는 SMN1 유전자 기능 손실을 야기하는, 두 염색체 모두에서 유전자(SMN1)의 텔로미어(telomere) 복사체의 불활성 돌연변이 또는 결실에 의해 야기된다. 그러나, 모든 환자는 유전자(SMN2)의 동원체성(centromeric) 복사체를 보유하며, SMA 환자에서 SMN2 유전자의 복사체 수는 일반적으로 질환 중증도와 역으로 상관된다; 즉, 덜 심한 SMA를 갖는 환자는 더 많은 SMN2 복사체를 갖는다. 그럼에도 불구하고, SMN2는 엑손 7에서의 번역 잠재성 C에서 T로의 돌연변이에 의해 야기된 엑손 7의 선택적 스플라이싱(alternative splicing)으로 인한 SMN1 손실을 완전히 보상할 수 없다. 결과적으로, SMN2로부터 생성된 전사체 대부분은 엑손 7이 없고(SMN2 Δ7), 손상된 기능을 가지며 신속하게 분해되는 절두된(truncated) Smn 단백질을 암호화한다.
Smn 단백질은 snRNP로 불리는 특정 부류의 RNA-단백질 복합체의 조립을 매개하는 잘 특성화된 기능을 가져, RNA 처리 및 대사에 관여하는 것으로 생각된다. Smn은 운동 뉴런에서 다른 기능을 가질 수 있으나, 운동 뉴런의 선택적 변성을 방지하는데 있어서 이의 역할은 제대로 확립되지 못했다.
대부분의 경우에서, SMA는 임상적 증상에 근거하여서, 유전자 검사에 의해 측정된 SMN1 유전자 내의 엑손 7의 모든 복사체의 부재에 의해 진단된다. 그러나, 약 5%의 경우에서, SMA는 전체 SMN1 유전자의 결실 또는 SMN1 유전자 내의 전체 엑속 7의 결실이 아닌 돌연변이에 의해 야기되는데, 일부는 공지되어 있고 나머지는 아직 규정되지 않았다. 이러한 경우에서, SMN1 유전자 검사가 실현가능하지 않거나 어떤 이상도 나타내지 않는 경우, 근전도검사(electromyography, EMG) 또는 근육 생검과 같은 다른 검사가 지시될 수 있다.
현재 SMA 환자에 대한 의료 관리는 호흡, 영양 및 재활 관리를 포함하는 지지 요법으로 제한되며; 질환의 근본적인 원인을 해결하는 것으로 알려진 약물은 없다. SMA에 대한 현행 치료는 만성 운동 단위 손실의 2차 효과의 예방 및 관리로 이루어진다. 제1형 SMA에서의 주요 관리 사안은 대부분의 경우에서 사망의 1차 원인인 폐 문제의 예방 및 조기 치료이다. SMA에 걸린 일부 유아가 성장하여 성인이 되긴 하지만, 제1형 SMA를 가진 이들은 2년 미만의 기대 수명을 갖는다.
SMA에 대한 여러 마우스 모델이 개발되었다. 특히, SMNΔ7 모델(문헌 [Le et al., Hum. Mol. Genet., 14:845 (2005)])은 SMN2 유전자 및 SMN2Δ7 cDNA의 여러 복사체를 모두 가지며, 제1형 SMA의 표현형 특징들의 대부분을 재현한다. SMNΔ7 모델은 SMN2 발현 연구뿐 아니라 운동 기능 및 생존율의 평가 모두에 사용될 수 있다. C/C-대립유전자 마우스 모델(잭슨 래보러토리(Jackson Laboratory) 균주 번호 008714)은 감소된 수준의 SMN2 전장(SMN2 FL) mRNA 및 Smn 단백질 둘 다를 갖는 마우스를 사용한 덜 심한 SMA 질환 모델을 제공한다. C/C-대립유전자 마우스 표현형은 SMN2 유전자 및 선택적 스플라이싱이 일어나는 하이브리드 mSmn1-SMN2 유전자를 갖지만, 명백한 근육 약화는 갖지 않는다. C/C-대립유전자 마우스 모델은 SMN2 발현 연구에 사용된다.
SMA에 대한 유전적 근거 및 병태생리에 대한 개선된 이해의 결과로서, 여러 치료 전략이 연구되었지만, 어느 것도 임상에서 성공을 입증하지 못했다.
바이러스 전달 벡터를 사용한 SMN1의 유전자 치환, 및 분화된 SMN1+/+ 줄기 세포를 사용한 세포 치환은 SMA의 동물 모델에서 효능을 입증하였다. 안전성 및 면역 반응을 측정하고, 상기 접근방법이 인간에게 적용될 수 있기 전 신생아 단계에서의 치료 개시를 위한 필요조건을 해결하기 위해 더 많은 연구가 요구된다.
배양된 세포에서 SMN2의 선택적 스플라이싱의 교정도 치료제로서 합성 핵산을 사용하여 또한 달성되었다: (i) SMN2 플리-mRNA 중의 서열 요소들을 표적화하고 스플라이싱 반응 결과를 전장(full length) SMN2 mRNA의 생성쪽으로 바꾸는 안티센스 올리고뉴클레오티드(문헌 [Passini et al., Sci. Transl. Med., 3:72ra 18 (2011); and Hua et al., Nature, 478:123 (2011)]), 및 (ii) 스플라이싱 동안 돌연변이 단편을 대체하고 전장 SMN1 mRNA를 생성하는 완전히 기능성인 RNA 서열을 제공하는 트랜스-스플라이싱 RNA 분자(문헌 [Coady and Lorson, J Neurosci., 30:126 (2010)]).
연구 중인 다른 접근 방법들은 Smn 수준을 증가시키거나, 잔류 Smn 기능을 향상시키거나, Smn 손실을 보상하는 약물에 대한 탐색을 포함한다. 아미노글리코시드는 비정상적 정지 코돈의 번역 초과(translational read-through)를 촉진함으로써 SMN2Δ7 mRNA로부터 생성된 안정화된 Smn의 발현을 증대시키는 것으로 밝혀졌지만, 불량한 중추 신경계 침투율을 가지며 반복 투약 후 독성이다. 아클라루비신과 같은 화학치료제는 세포 배양물 중 Smn 단백질을 증가시키는 것으로 밝혀졌다; 그러나, 상기 약물들의 독성 프로필은 SMA 환자에서의 장기 사용을 금지한다. SMA 치료를 위한 임상 연구 중인 일부 약물들로는 히스톤 데아세틸라제("HDAC") 억제제(예를 들면, 부티레이트, 발프로산 및 하이드록시우레아)와 같은 전사 활성화제, 및 SMN2 유전자로부터 전사된 전체 RNA의 양을 증가시키기 위한 mRNA 안정화제(레플리젠(Repligen)으로부터의 mRNA 데캡핑(decapping) 억제제)가 포함된다. 그러나, HDAC 억제제 또는 mRNA 안정화제의 사용은 SMA의 근본 원인을 해결하지 못하며, 인간에서 잠재적 안전성 문제를 갖는 전사 및 유전자 발현에서의 전반적인 증가를 야기할 수 있다.
대안적 접근방법으로, 올레스옥심(olesoxime)과 같은 신경보호제가 연구를 위해 선택되었다. 상기 방법은 SMA의 치료를 위한 기능성 Smn의 생성을 증가시키는 것을 목적으로 하지 않고, 대신에 Smn-결손 운동 뉴런을 신경퇴행으로부터 보호하기 위해 연구하고 있다.
SMN2 유전자로부터 전사된 RNA 내로의 SMN의 엑손 7의 혼입을 증가시키는 화합물을 확인하기 위해 고안된 시스템 및 그에 의해 확인된 특정 벤조옥사졸 및 벤조이속사졸 화합물이 2009년 5월 27일자로 출원된 국제출원 제PCT/US2009/003238호(국제특허공개 제WO2009/151546호 및 미국특허공개 제US2011/0086833호로 공개됨)에 기술되었다. SMN2Δ7 mRNA로부터 안정화된 Smn 단백질을 생성하는 화합물을 확인하기 위해 고안된 시스템 및 그에 의해 확인된 특정 이소인돌리논 화합물이 2009년 8월 13일자로 출원된 국제출원 제PCT/US2009/004625호(국제특허공개 제WO2010/019236호 및 미국특허공개 제US2011/0172284호로 공개됨)에 기술되었다. 상기 문서들은 각각 전체로 및 모든 목적을 위해 본원에 인용된다.
본원에 언급된 모든 다른 문서들은 본원에 충분히 나타낸 것처럼 본 출원에 참고로 인용된다.
SMA의 유전적 근거 및 병리생리학을 이해하는데 있어서 이루어진 진보에도 불구하고, 가장 파괴적인 소아 신경 질환의 하나인 척수성 근위축증의 경과를 변화시키는 화합물을 확인하기 위한 필요성이 남아있다.
한 양태에서, 본원에는 하기 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태가 제공된다:
[화학식 I]
상기 식에서,
w1, w2, w3, w4, w5, w6 및 w7은 본원에 정의된 바와 같다.
한 양태에서, 본원에는 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 및 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 포함하는 약학 조성물이 제공된다. 특정 양태에서, 본원에는 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 척수성 근위축증(SMA)을 치료하기 위한 이의 약학 조성물이 제공된다.
SMA는 Smn-결손 운동 뉴런의 선택적 변성을 야기하는 SMN1 유전자의 결실 또는 돌연변이에 의해 야기된다. 인간 대상은 SMN2 유전자의 여러 복사체를 보유하긴 하지만, SMN2로부터 발현된 기능성 Smn 단백질의 소량은 SMN1 유전자로부터 발현된 Smn의 손실을 완전히 보상하지 못한다. 본원에 기술된 화합물, 이의 조성물 및 이의 용도는, 부분적으로, 화학식 I의 화합물이 SMN2 미니유전자(minigene)로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증가시킨다는 본 출원인의 발견을 기반으로 한다. 상기 미니유전자는 SMN2의 엑손 7의 선택적 스플라이싱 반응을 재현하여 SMN2 전사체의 대부분에서 엑손 7 스키핑(skipping)을 야기한다. 따라서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 사용하여 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 조절할 수 있다. 본 출원인은 또한 화학식 I의 화합물이 SMN1 미니유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN1의 엑손 7의 혼입을 증가시키는 것도 또한 발견하였다. 따라서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 사용하여 SMN1 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN1의 엑손 7의 혼입을 조절할 수 있다.
특정 양태에서, 본원에는 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 조절하기 위해 사용될 수 있는 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태가 제공된다. 또 다른 특정 양태에서, 본원에는 SMN1 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN1의 엑손 7의 혼입을 조절하기 위해 사용될 수 있는 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태가 제공된다. 또 다른 양태에서, 본원에는 SMN1 및 SMN2 유전자 각각으로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN1 및 SMN2의 엑손 7의 혼입을 조절하기 위해 사용될 수 있는 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태가 제공된다.
또 다른 양태에서, 본원에는 SMA를 치료하기 위한 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도가 제공된다. 특정 양태에서, 본원에서는, 효과량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 대상에게 투여함을 포함하는, 치료를 필요로 하는 인간 대상에서 SMA를 치료하는 방법이 제공된다. 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태는 바람직하게는 약학 조성물로 인간 대상에게 투여된다. 또 다른 특정 양태에서, 본원에는 화합물이 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 향상시키는, SMA를 치료하기 위한 화학식 I의 화합물의 용도가 제공된다. 이론에 의해 제한되지 않고, 화학식 I의 화합물은 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키고, SMN2 유전자로부터 생성된 Smm 단백질의 수준을 증가시키므로, 치료를 필요로 하는 인간 대상에서 SMA를 치료하기 위해 사용될 수 있다.
또 다른 양태에서, 본원에는 하기 생물학적 실시예에 기술된 프라이머 및/또는 프로브(예를 들면, 서열번호 1, 7, 8, 11 또는 13 및/또는 서열번호 2, 9 또는 12와 같은 SMN 프라이머, 및/또는 서열번호 3 또는 10과 같은 SMN 프로브) 및 상기 프라이머 및/또는 프로브의 용도가 제공된다. 특정 양태에서, 본원에는 서열번호 1, 2, 3, 7, 8, 9, 10, 11, 12 또는 13을 포함하는 분리된 뉴클레오티드 서열이 제공된다. 또 다른 특정 양태에서, 본원에는 필수적으로 서열번호 1, 2, 3, 7, 8, 9, 10, 11, 12 또는 13으로 이루어지는 분리된 뉴클레오티드 서열이 제공된다. 또 다른 특정 양태에서, 본원에는 서열번호 1, 2, 3, 7, 8, 9, 10, 11, 12 또는 13으로 이루어지는 분리된 뉴클레오티드 서열이 제공된다.
특정 양태에서, SMN1 유전자 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지는 않는 mRNA의 양은 본원에 개시된 바와 같은 SMA의 바이오마커로서 사용될 수 있다. 다른 양태에서, SMN1 유전자 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양은 본원에 개시된 바와 같은 화합물로 환자를 치료하기 위한 바이오마커로서 사용될 수 있다. 특정 양태에서, 환자는 SMA 환자이다. 다른 특정 양태에서, 환자는 SMA 환자가 아니다.
특정 양태에서, SMN1 유전자 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양, 및 SMN1 유전자 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지는 않는 mRNA의 양은 본원에 개시된 바와 같은 화합물로 환자를 치료하기 위한 바이오마커로서 사용될 수 있다. 특정 양태에서, 환자는 SMA 환자이다. 다른 특정 양태에서, 환자는 SMA 환자가 아니다.
상기 양태들에 따라서, 하기에 기술되는 SMN 프라이머 및/또는 SMN 프로브는, SMN1 유전자 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하거나 포함하지 않는 mRNA의 양을 평가하고/하거나 정량화하기 위해, PCR(예를 들면, qPCR), 회전환 증폭(rolling circle amplication) 및 RT-PCR(예를 들면, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR)과 같은 분석에 사용될 수 있다.
특정 양태에서, 하기 생물학적 실시예에서 기술된 프라이머 및/또는 프로브(예를 들면, 서열번호 1, 7, 8, 11 또는 13 및/또는 서열번호 2, 9 또는 12와 같은 SMN 프라이머, 및/또는 서열번호 3 또는 10과 같은 SMN 프로브)는, 화합물(예를 들면, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태)이 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키는지를 측정하기 위해, RT-PCR, RT-qPCR, 종말점 RT-PCR, PCR, qPCR, 회전환 증폭, 노던 블롯(Northern blot) 또는 서던 블롯(Sourthern blot)과 같은 분석(예를 들면, 하기 생물학적 실시예에 기술된 바와 같은 분석)에 사용될 수 있다.
특정 양태에서, 하기 생물학적 실시예에 기술된 프라이머 및/또는 프로브(예를 들면, 서열번호 1, 7, 8, 11 또는 13 및/또는 서열번호 2, 9 또는 12와 같은 SMN 프라이머, 및/또는 서열번호 3 또는 10과 같은 SMN 프로브)는, 화합물(예를 들면, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태)이 SMN1 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN1의 엑손 7의 혼입을 증대시키는지를 측정하기 위해, RT-PCR, RT-qPCR, 종말점 RT-PCR, PCR, qPCR, 회전환 증폭, 노던 블롯 또는 서던 블롯과 같은 분석(예를 들면, 하기 생물학적 실시예에 기술된 바와 같은 분석)에 사용될 수 있다.
특정 양태에서, 하기 생물학적 실시예에 기술된 프라이머 및/또는 프로브(예를 들면, 서열번호 1, 7, 8, 11 또는 13 및/또는 서열번호 2, 9 또는 12와 같은 SMN 프라이머, 및/또는 서열번호 3 또는 10과 같은 SMN 프로브)는, 화합물(예를 들면, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태)이 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키는지를 측정하기 위해, RT-PCR, RT-qPCR, 종말점 RT-PCR, PCR, qPCR, 회전환 증폭, 노던 블롯 또는 서던 블롯과 같은 분석(예를 들면, 하기 생물학적 실시예에 기술된 바와 같은 분석)에 사용될 수 있다.
또 다른 양태에서, 하기 생물학적 실시예에 기술된 프라이머 및/또는 프로브(예를 들면, 서열번호 7, 11 또는 13 및/또는 서열번호 9 또는 12와 같은 SMN 프라이머, 및/또는 서열번호 3 또는 10과 같은 SMN 프로브)는, 환자 샘플 중 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양을 모니터링하기 위해, RT-PCR, RT-qPCR, 종말점 RT-PCR, PCR, qPCR, 회전환 증폭, 노던 블롯 또는 서던 블롯과 같은 분석(예를 들면, 하기 생물학적 실시예에 기술된 바와 같은 분석)에 사용될 수 있다. 특정 양태에서, 환자는 SMA 환자이다. 다른 특정 양태에서, 환자는 SMA 환자가 아니다.
또 다른 양태에서, 하기 생물학적 실시예에 기술된 프라이머 및/또는 프로브(예를 들면, 서열번호 7, 11 또는 13 및/또는 서열번호 9 또는 12와 같은 SMN 프라이머, 및/또는 서열번호 3 또는 10과 같은 SMN 프로브)는, 환자 샘플 중 SMN1 유전자로부터 전사되고 SMN1의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양을 모니터링하기 위해, RT-PCR, RT-qPCR, 종말점 RT-PCR, PCR, qPCR, 회전환 증폭, 노던 블롯 또는 서던 블롯과 같은 분석(예를 들면, 하기 생물학적 실시예에 기술된 바와 같은 분석)에 사용될 수 있다. 특정 양태에서, 환자는 SMA 환자이다. 다른 특정 양태에서, 환자는 SMA 환자가 아니다.
또 다른 양태에서, 하기 생물학적 실시예에 기술된 프라이머 및/또는 프로브(예를 들면, 서열번호 7, 11 또는 13 및/또는 서열번호 9 또는 12와 같은 SMN 프라이머, 및/또는 서열번호 3 또는 10과 같은 SMN 프로브)는, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양을 모니터링하기 위해, RT-PCR, RT-qPCR, 종말점 RT-PCR, PCR, qPCR, 회전환 증폭, 노던 블롯 또는 서던 블롯과 같은 분석(예를 들면, 하기 생물학적 실시예에 기술된 바와 같은 분석)에 사용될 수 있다. 특정 양태에서, 환자는 SMA 환자이다. 다른 특정 양태에서, 환자는 SMA 환자가 아니다.
또 다른 양태에서, 하기 생물학적 실시예에 기술된 프라이머 및/또는 프로브(예를 들면, 서열번호 7, 8, 11 또는 13 및/또는 서열번호 9 또는 12와 같은 SMN 프라이머, 및/또는 서열번호 3 또는 10과 같은 SMN 프로브)는, 화합물(예를 들면, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태)에 대한 환자의 반응을 모니터링하기 위해, RT-PCR, RT-qPCR, 종말점 RT-PCR, PCR, qPCR, 회전환 증폭, 노던 블롯 또는 서던 블롯과 같은 분석(예를 들면, 하기 생물학적 실시예에 기술된 바와 같은 분석)에 사용될 수 있다. 특정 양태에서, 환자는 SMA 환자이다. 다른 특정 양태에서, 환자는 SMA 환자가 아니다.
또 다른 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, 화합물(예를 들면, 본원에 기술된 화학식 I의 화합물)이 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키는지를 측정하는 방법이 제공된다: (a) 본원에 기술되거나 2009년 8월 13일자로 출원된 국제출원 제PCT/US2009/004625호(국제특허공개 제WO2010/019236호로 공개됨) 또는 미국특허공개 제US2011/0172284호에 기술된 SMN2 미니유전자로부터 전사되는 mRNA를, 화합물(예를 들면, 본원에 기술된 화학식 I의 화합물)의 존재 하에, 예를 들면, RT-PCR, RT-qPCR, PCR, 종말점 RT-PCR, qPCR 또는 회전환 증폭에 적용가능한 성분들과 함께, 본원에 기술된 프라이머(예를 들면, 서열번호 1 및/또는 2)와 접촉시키고; (b) 상기 미니유전자로부터 전사되고 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양을 검출하되, (1) 화합물의 부재 하에서 미니유전자로부터 전사되고 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해 화합물의 존재 하에서 미니유전자로부터 전사되고 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 증가는 상기 화합물이 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키는 것을 나타내고; (2) 화합물의 부재 하에서 미니유전자로부터 전사되고 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해 화합물의 존재 하에서 미니유전자로부터 전사되고 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화는 화합물이 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키지 않는 것을 나타낸다.
또 다른 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, 화합물(예를 들면, 본원에 기술된 화학식 I의 화합물)이 SMN1 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN1의 엑손 7의 혼입을 증대시키는지를 측정하는 방법이 제공된다: (a) 본원에 기술되거나 2009년 8월 13일자로 출원된 국제출원 제PCT/US2009/004625호(국제특허공개 제WO2010/019236호로 공개됨) 또는 미국특허공개 제US2011/0172284호에 기술된 SMN1 미니유전자로부터 전사되는 mRNA를, 화합물(예를 들면, 본원에 기술된 화학식 I의 화합물)의 존재 하에, 예를 들면, RT-PCR, RT-qPCR, PCR, 종말점 RT-PCR, qPCR 또는 회전환 증폭에 적용가능한 성분들과 함께, 본원에 기술된 프라이머(예를 들면, 서열번호 1 및/또는 2)와 접촉시키고; (b) 상기 미니유전자로부터 전사되고 SMN1의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양을 검출하되, (1) 화합물의 부재 하에서 미니유전자로부터 전사되고 SMN1의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해 화합물의 존재 하에서 미니유전자로부터 전사되고 SMN1의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 증가는 상기 화합물이 SMN1 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN1의 엑손 7의 혼입을 증대시키는 것을 나타내고; (2) 화합물의 부재 하에서 미니유전자로부터 전사되고 SMN1의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해 화합물의 존재 하에서 미니유전자로부터 전사되고 SMN1의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화는 화합물이 SMN1 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN1의 엑손 7의 혼입을 증대시키지 않는 것을 나타낸다.
또 다른 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, 화합물(예를 들면, 본원에 기술된 화학식 I의 화합물)이 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키는지를 측정하는 방법이 제공된다: (a) 본원에 기술되거나 2009년 8월 13일자로 출원된 국제출원 제PCT/US2009/004625호(국제특허공개 제WO2010/019236호로 공개됨) 또는 미국특허공개 제US2011/0172284호에 기술된 SMN2 미니유전자로부터 전사되는 mRNA를, 화합물(예를 들면, 본원에 기술된 화학식 I의 화합물)의 존재 하에, 예를 들면, RT-PCR, RT-qPCR, PCR, 종말점 RT-PCR, qPCR 또는 회전환 증폭 및 적용가능한 경우 노던 블롯 또는 서던 블롯에 적용가능한 성분들과 함께, 본원에 기술된 프로브(예를 들면, 서열번호 3 또는 10)와 접촉시키고; (b) 상기 미니유전자로부터 전사되고 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양을 검출하되, (1) 화합물의 부재 하에서 미니유전자로부터 전사되고 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해 화합물의 존재 하에서 미니유전자로부터 전사되고 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 증가는 상기 화합물이 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키는 것을 나타내고; (2) 화합물의 부재 하에서 미니유전자로부터 전사되고 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해 화합물의 존재 하에서 미니유전자로부터 전사되고 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화는 화합물이 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키지 않는 것을 나타낸다.
또 다른 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, 화합물(예를 들면, 본원에 기술된 화학식 I의 화합물)이 SMN1 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN1의 엑손 7의 혼입을 증대시키는지를 측정하는 방법이 제공된다: (a) 본원에 기술되거나 2009년 8월 13일자로 출원된 국제출원 제PCT/US2009/004625호(국제특허공개 제WO2010/019236호로 공개됨) 또는 미국특허공개 제US2011/0172284호에 기술된 SMN1 미니유전자로부터 전사되는 mRNA를, 화합물(예를 들면, 본원에 기술된 화학식 I의 화합물)의 존재 하에, 예를 들면, RT-PCR, RT-qPCR, PCR, 종말점 RT-PCR, qPCR 또는 회전환 증폭 및 적용가능한 경우 노던 블롯 또는 서던 블롯에 적용가능한 성분들과 함께, 본원에 기술된 프로브(예를 들면, 서열번호 3 또는 10)와 접촉시키고; (b) 상기 미니유전자로부터 전사되고 SMN1의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양을 검출하되, (1) 화합물의 부재 하에서 미니유전자로부터 전사되고 SMN1의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해 화합물의 존재 하에서 미니유전자로부터 전사되고 SMN1의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 증가는 상기 화합물이 SMN1 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN1의 엑손 7의 혼입을 증대시키는 것을 나타내고; (2) 화합물의 부재 하에서 미니유전자로부터 전사되고 SMN1의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해 화합물의 존재 하에서 미니유전자로부터 전사되고 SMN1의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화는 화합물이 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키지 않는 것을 나타낸다.
또 다른 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, 화합물(예를 들면, 본원에 기술된 화학식 I의 화합물)이 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키는지를 측정하는 방법이 제공된다: (a) 본원에 기술되거나 2009년 8월 13일자로 출원된 국제출원 제PCT/US2009/004625호(국제특허공개 제WO2010/019236호로 공개됨) 또는 미국특허공개 제US2011/0172284호에 기술된 SMN2 미니유전자로부터 전사되는 mRNA를, 화합물(예를 들면, 본원에 기술된 화학식 I의 화합물)의 존재 하에, 예를 들면, RT-PCR, RT-qPCR, PCR, 종말점 RT-PCR, qPCR 또는 회전환 증폭 및 적용가능한 경우 노던 블롯 또는 서던 블롯에 적용가능한 성분들과 함께, 본원에 기술된 프라이머(예를 들면, 서열번호 1 또는 2) 및/또는 프로브(예를 들면, 서열번호 3 또는 10)와 접촉시키고; (b) 상기 미니유전자로부터 전사되고 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양을 검출하되, (1) 화합물의 부재 하에서 미니유전자로부터 전사되고 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해 화합물의 존재 하에서 미니유전자로부터 전사되고 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 증가는 상기 화합물이 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키는 것을 나타내고; (2) 화합물의 부재 하에서 미니유전자로부터 전사되고 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해 화합물의 존재 하에서 미니유전자로부터 전사되고 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화는 화합물이 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키지 않는 것을 나타낸다.
또 다른 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, 화합물(예를 들면, 본원에 기술된 화학식 I의 화합물)이 SMN1 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN1의 엑손 7의 혼입을 증대시키는지를 측정하는 방법이 제공된다: (a) 본원에 기술되거나 2009년 8월 13일자로 출원된 국제출원 제PCT/US2009/004625호(국제특허공개 제WO2010/019236호로 공개됨) 또는 미국특허공개 제US2011/0172284호에 기술된 SMN1 미니유전자로부터 전사되는 mRNA를, 화합물(예를 들면, 본원에 기술된 화학식 I의 화합물)의 존재 하에, 예를 들면, RT-PCR, RT-qPCR, PCR, 종말점 RT-PCR, qPCR 또는 회전환 증폭 및 적용가능한 경우 노던 블롯 또는 서던 블롯에 적용가능한 성분들과 함께, 본원에 기술된 프라이머(예를 들면, 서열번호 1 또는 2) 및/또는 프로브(예를 들면, 서열번호 3 또는 10)와 접촉시키고; (b) 상기 미니유전자로부터 전사되고 SMN1의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양을 검출하되, (1) 화합물의 부재 하에서 미니유전자로부터 전사되고 SMN1의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해 화합물의 존재 하에서 미니유전자로부터 전사되고 SMN1의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 증가는 상기 화합물이 SMN1 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN1의 엑손 7의 혼입을 증대시키는 것을 나타내고; (2) 화합물의 부재 하에서 미니유전자로부터 전사되고 SMN1의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해 화합물의 존재 하에서 미니유전자로부터 전사되고 SMN1의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화는 화합물이 SMN1 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN1의 엑손 7의 혼입을 증대시키지 않는 것을 나타낸다.
또 다른 양태에서, 본원에는 하기 생물학적 실시예에 기술된 프라이머 및/또는 프로브(예를 들면, 서열번호 1, 7, 8, 11 또는 13 및/또는 서열번호 2, 9 또는 12와 같은 SMN 프라이머, 및/또는 서열번호 3 또는 10과 같은 SMN 프로브)를 포함하는 키트 및 이의 용도가 제공된다.
도 1은 생물학적 실시예 1에서 언급되며, 2개의 선택적으로 스플라이싱된 mRNA 전사체(엑손 7을 함유하는 전장 mRNA 및 엑손 7이 결실된 Δ7 mRNA)를 생산하는 SMN2-A 미니유전자 구조물의 개략도이다. 핵 잔기 48 다음에 SMN2-A의 엑손 7에 삽입된 아데닌 뉴클레오티드는 문자 "A"로 표시된다. 다르게는, 뉴클레오티드는 또한 시토신 또는 티민일 수 있다. 핵 잔기 48 다음의 하나의 뉴클레오티드(A, C 또는 T)의 삽입에 기인하여, 전장 mRNA는 SMN 개방 판독 프레임 내에 정지(Stop) 코돈을 함유하지 않는 반면, Δ7 mRNA는 "정지"로 표시된, 엑손 8 내에 정지 코돈을 갖는다.
도 2는 생물학적 실시예 1에서 언급되며, SMN2-A 미니유전자 구조물로부터의 미니유전자의 DNA 서열, 서열번호 21을 제공한다(도 2a). 도 2b에 나타낸 바와 같이, 하기의 서브서열들을 확인할 수 있다:
1-70: 5'UTR(deg);
71-79: 엑손 6: 개시 코돈 및 BamHI 부위(atgggatcc);
80-190: 엑손 6;
191-5959: 인트론 6;
5960-6014: 아네닌 뉴클레오티드 "A" 삽입체(위치 6008)를 갖는 엑손 7;
6015-6458: 인트론 7;
6459-6481: 엑손 8의 일부;
6482-8146: BamHI 부위(5' 말단에서의 서열), 코돈 2로 시작하는(개시 코돈 없이) 루시퍼라제 암호화 서열, NotI 부위(3' 말단에서의 서열), TAA 정지 코돈; 및
8147-8266: 3'UTR(deg).
미니유전자의 SMN1 버전을 생성하기 위하여, SMN2-A 미니유전자 구조물의 엑손 7의 6번째 뉴클레오티드(티민 잔기)를, 위치 지정 돌연변이를 사용하여, 시토신으로 바꿨다. 따라서, SMN2-A 미니유전자 구조물과 유사하게, SMN1 미니유전자 구조물은 엑손 7의 핵 잔기 48 다음에 삽입된 단일 아데닌 잔기를 가진다. SMN1 미니유전자 구조물은 SMN1-A로 지칭된다. 유사하게, 엑손 7의 핵 잔기 48 다음의 SMN1 미니유전자 구조물에 삽입된 뉴클레오티드는 또한 시토신 또는 티민으로부터 대안으로 선택될 수 있다.
도 3은 생물학적 실시예 2에서 언급되며, 24시간의 기간 동안 증가하는 농도의 화합물 6(도 3a) 및 화합물 170(도 3b)으로 처리된 세포에서 SMN2 미니유전자 선택적 스플라이싱의 교정을 나타낸다. 전장 SMN2 미니유전자 mRNA의 수준은 역전사-정량적 PCR(RT-qPCR)을 이용하여 정량화하였다. 화합물-처리된 샘플 중 전장 SMN2 미니유전자 mRNA의 수준은 비히클-처리 샘플 중의 상기 수준으로 정규화하고 화합물 농도의 함수로서 플로팅하였다.
도 4는 생물학적 실시예 3에서 언급되며, 24시간의 기간 동안 증가하는 농도의 화합물 6(도 4a) 및 화합물 170(도 4b)으로 처리된 제1형 SMA 환자 섬유아세포에서 SMN2 선택적 스플라이싱의 교정을 나타낸다. 전장 및 Δ7 SMN2 mRNA의 수준은 RT-qPCR을 이용하여 정량화하였다. 화합물-처리된 샘플 중 전장 및 Δ7 SMN2 mRNA의 수준은 비히클-처리 샘플 중의 상기 수준으로 정규화하고 화합물 농도의 함수로서 플로팅하였다.
도 5는 생물학적 실시예 4에서 언급되며, 24시간의 기간 동안 증가하는 농도의 화합물 6(도 5a) 및 화합물 170(도 5b)으로 처리된 제1형 SMA 환자 섬유아세포에서 SMN2 선택적 스플라이싱의 교정을 나타낸다. 전장 및 Δ7 SMN2 mRNA의 수준은 역전사-종말점 PCR(RT-PCR)을 이용하여 정량화하고 PCR 산물은 아가로스 겔 전기영동을 이용하여 분리하였다. 상단 및 하단 밴드는 각각 전장 및 Δ7 SMN2 mRNA에 상응한다. 각 밴드의 강도는 샘플에 존재하는 RNA의 양에 비례한다.
도 6은 생물학적 실시예 5에서 언급되며, 10일 동안 10 mg/kg의 화합물 6(도 6a) 및 화합물 170(도 6b)에 의한 하루 2회(BID) 처리로부터 생성된 C/C-대립유전자 SMA 마우스 모델의 뇌 및 근육 조직에서 SMN2 선택적 스플라이싱(SMN2 유전자 및 하이브리드 마우스 Smn1-SMN2 유전자 둘 다에서)의 교정을 나타낸다. 전장 및 Δ7 SMN2 mRNA의 수준은 RT-qPCR을 이용하여 정량화하고, 전장 및 Δ7 SMN2 mRNA 양을 합하여 1로 설정하고, 전장 및 Δ7 SMN2의 부분량을 계산하였다.
도 7은 생물학적 실시예 6에서 언급되며, 10일 동안 10 mg/kg의 화합물 6(도 7a) 및 화합물 170(도 7b)에 의한 BID 처리로부터 생성된 C/C-대립유전자 SMA 마우스 모델의 뇌 및 근육 조직에서 SMN2 선택적 스플라이싱(SMN2 유전자 및 하이브리드 마우스 Smn1-SMN2 유전자 둘 다에서)의 교정을 나타낸다. 전장 및 Δ7 SMN2 mRNA는 RT-PCR을 이용하여 증폭시켰다. PCR 산물은 아가로스 겔 전기영동을 이용하여 분리하였다. 상단 및 하단 밴드는 각각 전장 및 Δ7 SMN2 mRNA에 상응한다. 각 밴드의 강도는 샘플에 존재하는 RNA의 양에 비례한다.
도 8은 생물학적 실시예 7에서 언급되며, 48시간의 기간 동안 화합물 6(도 8a) 및 화합물 170(도 8b)으로 처리된 제1형 SMA 인간 섬유아세포에서 Smn 단백질 발현의 용량 의존성 증가를 나타낸다.
도 9는 생물학적 실시예 8에서 언급되며, 48시간의 기간 동안 화합물 6(도 9a) 및 화합물 170(도 9b)으로 처리된 제1형 SMA 환자 섬유아세포에서 핵 반점(nuclear speckle) 수(gems)의 증가를 나타낸다. 반점은 형광 현미경을 사용하여 계수하였다. 화합물-처리된 샘플 중 반점의 수는 비히클-처리 샘플 중의 상기 수로 정규화하고 화합물 농도의 함수로서 플로팅하였다.
도 10은 생물학적 실시예 9에서 언급되며, 72시간의 기간 동안 화합물 6(도 10)으로 처리된 제1형 SMA 환자 섬유아세포로부터 생성된 iPS 세포로부터 생성된 운동 뉴런에서 Smn 단백질 발현의 증가(흑색 원)를 나타낸다. Smn 단백질의 수준은 Smn 면역염색 및 공초점 형광 현미경을 사용하여 정량화하였다. 화합물-처리된 샘플 중 Smn 단백질의 수준은 비히클-처리 샘플 중의 상기 수준으로 정규화하고 화합물 농도의 함수로서 플로팅하였다.
생물학적 실시예 11에 언급된 도 11은 100 mg/kg의 화합물 6(도 11a, n = 10인 경우) 및 10 mg/kg의 화합물 170(도 11b, n = 5인 경우)을 사용하는 10일 동안의 BID 처리로부터 유발되는, C/C-대립유전자 SMA 마우스 모델에서의 뇌, 척수 및 근육 조직 내의 증가된 Smn 단백질 발현을 나타낸다. 각각의 도면에서 ANOVA에 의한 p 값은 p < 0.001의 경우 3개의 별표(***)로 표시된다.
생물학적 실시예 12에 언급된 도 12는 화합물 6(뇌, 도 12a; 척수, 도 12b; 근육, 도 12c; 및 피부, 도 12d, n = 6 내지 9인 경우) 및 화합물 170(뇌, 도 12e; 척수, 도 12f; 근육, 도 12g, n = 7인 경우)을 사용하는 7일 동안의 1일 당 1회(QD) 처리로부터 유발되는, 신생 Δ7 SMA 마우스 모델에서의 조직 내의 Smn 단백질 발현에서 투여량 의존적 증가를 나타낸다. 각각의 도면에서 ANOVA에 의한 p 값은 p < 0.05인 경우 1개의 별표(*), p < 0.01인 경우 2개의 별표(**) 및 p < 0.001의 경우 3개의 별표(***)로 표시된다.
생물학적 실시예 13에 언급된 도 13은 화합물 6을 사용하여 출생 후 일(PND) 59까지(도 13a) 및 화합물 170을 사용하여 PND 92까지(도 13b)의 처리로부터 유발되는, 신생 Δ7 SMA 마우스 모델에서의 체중의 차이를 나타낸다.
생물학적 실시예 14에 언급된 도 14는 화합물 6(도 14a) 및 화합물 170(도 14b)을 사용하는 처리로부터 유발되는, 신생 Δ7 SMA 마우스 모델에서의 개선된 정위 반사를 나타낸다.
생물학적 실시예 15에 언급된 도 15는 화합물 6(도 15a) 및 화합물 170(도 15b)을 사용하는 처리로부터 유발되는, 신생 Δ7 SMA 마우스 모델에서의 개선된 생존율을 나타낸다.
생물학적 실시예 15에 언급된 도 16은, 비히클 처리되고 연령-부합된 이형접합 마우스와 비교되고, 화합물 6을 사용하여 PND 156까지(도 16a) 및 화합물 170을 사용하여 PND 185까지(도 16b)의 처리에 의해 유발되는, Δ7 SMA 마우스 모델에서의 뇌, 척수, 및 근육 조직 내의 증가된 Smn 단백질 발현을 나타낸다.
생물학적 실시예 16에 언급된 도 17은 화합물 6(도 17a) 및 화합물 170(도 17b)을 사용하여 7시간 기간에 걸쳐 처리된 HEK293H 인간 세포에서의 SMN1 미니유전자 FL mRNA 내의 투여량 의존적 증가 및 SMN1 미니유전자 Δ7 mRNA 내의 투여량 의존적 감소를 나타낸다. 전장 및 Δ7 SMN1 미니유전자 mRNA는 각각 RT-PCR에 의해 증폭되고, 생성된 PCR 생성물은 아가로스 겔 전기영동에 의해 분리되었다. 상부 및 저부 밴드는 각각 전장 및 Δ7 SMN1 미니유전자 mRNA에 대응한다. 각각의 밴드의 강도는 샘플에 존재하는 RNA의 양에 비례한다.
도 2는 생물학적 실시예 1에서 언급되며, SMN2-A 미니유전자 구조물로부터의 미니유전자의 DNA 서열, 서열번호 21을 제공한다(도 2a). 도 2b에 나타낸 바와 같이, 하기의 서브서열들을 확인할 수 있다:
1-70: 5'UTR(deg);
71-79: 엑손 6: 개시 코돈 및 BamHI 부위(atgggatcc);
80-190: 엑손 6;
191-5959: 인트론 6;
5960-6014: 아네닌 뉴클레오티드 "A" 삽입체(위치 6008)를 갖는 엑손 7;
6015-6458: 인트론 7;
6459-6481: 엑손 8의 일부;
6482-8146: BamHI 부위(5' 말단에서의 서열), 코돈 2로 시작하는(개시 코돈 없이) 루시퍼라제 암호화 서열, NotI 부위(3' 말단에서의 서열), TAA 정지 코돈; 및
8147-8266: 3'UTR(deg).
미니유전자의 SMN1 버전을 생성하기 위하여, SMN2-A 미니유전자 구조물의 엑손 7의 6번째 뉴클레오티드(티민 잔기)를, 위치 지정 돌연변이를 사용하여, 시토신으로 바꿨다. 따라서, SMN2-A 미니유전자 구조물과 유사하게, SMN1 미니유전자 구조물은 엑손 7의 핵 잔기 48 다음에 삽입된 단일 아데닌 잔기를 가진다. SMN1 미니유전자 구조물은 SMN1-A로 지칭된다. 유사하게, 엑손 7의 핵 잔기 48 다음의 SMN1 미니유전자 구조물에 삽입된 뉴클레오티드는 또한 시토신 또는 티민으로부터 대안으로 선택될 수 있다.
도 3은 생물학적 실시예 2에서 언급되며, 24시간의 기간 동안 증가하는 농도의 화합물 6(도 3a) 및 화합물 170(도 3b)으로 처리된 세포에서 SMN2 미니유전자 선택적 스플라이싱의 교정을 나타낸다. 전장 SMN2 미니유전자 mRNA의 수준은 역전사-정량적 PCR(RT-qPCR)을 이용하여 정량화하였다. 화합물-처리된 샘플 중 전장 SMN2 미니유전자 mRNA의 수준은 비히클-처리 샘플 중의 상기 수준으로 정규화하고 화합물 농도의 함수로서 플로팅하였다.
도 4는 생물학적 실시예 3에서 언급되며, 24시간의 기간 동안 증가하는 농도의 화합물 6(도 4a) 및 화합물 170(도 4b)으로 처리된 제1형 SMA 환자 섬유아세포에서 SMN2 선택적 스플라이싱의 교정을 나타낸다. 전장 및 Δ7 SMN2 mRNA의 수준은 RT-qPCR을 이용하여 정량화하였다. 화합물-처리된 샘플 중 전장 및 Δ7 SMN2 mRNA의 수준은 비히클-처리 샘플 중의 상기 수준으로 정규화하고 화합물 농도의 함수로서 플로팅하였다.
도 5는 생물학적 실시예 4에서 언급되며, 24시간의 기간 동안 증가하는 농도의 화합물 6(도 5a) 및 화합물 170(도 5b)으로 처리된 제1형 SMA 환자 섬유아세포에서 SMN2 선택적 스플라이싱의 교정을 나타낸다. 전장 및 Δ7 SMN2 mRNA의 수준은 역전사-종말점 PCR(RT-PCR)을 이용하여 정량화하고 PCR 산물은 아가로스 겔 전기영동을 이용하여 분리하였다. 상단 및 하단 밴드는 각각 전장 및 Δ7 SMN2 mRNA에 상응한다. 각 밴드의 강도는 샘플에 존재하는 RNA의 양에 비례한다.
도 6은 생물학적 실시예 5에서 언급되며, 10일 동안 10 mg/kg의 화합물 6(도 6a) 및 화합물 170(도 6b)에 의한 하루 2회(BID) 처리로부터 생성된 C/C-대립유전자 SMA 마우스 모델의 뇌 및 근육 조직에서 SMN2 선택적 스플라이싱(SMN2 유전자 및 하이브리드 마우스 Smn1-SMN2 유전자 둘 다에서)의 교정을 나타낸다. 전장 및 Δ7 SMN2 mRNA의 수준은 RT-qPCR을 이용하여 정량화하고, 전장 및 Δ7 SMN2 mRNA 양을 합하여 1로 설정하고, 전장 및 Δ7 SMN2의 부분량을 계산하였다.
도 7은 생물학적 실시예 6에서 언급되며, 10일 동안 10 mg/kg의 화합물 6(도 7a) 및 화합물 170(도 7b)에 의한 BID 처리로부터 생성된 C/C-대립유전자 SMA 마우스 모델의 뇌 및 근육 조직에서 SMN2 선택적 스플라이싱(SMN2 유전자 및 하이브리드 마우스 Smn1-SMN2 유전자 둘 다에서)의 교정을 나타낸다. 전장 및 Δ7 SMN2 mRNA는 RT-PCR을 이용하여 증폭시켰다. PCR 산물은 아가로스 겔 전기영동을 이용하여 분리하였다. 상단 및 하단 밴드는 각각 전장 및 Δ7 SMN2 mRNA에 상응한다. 각 밴드의 강도는 샘플에 존재하는 RNA의 양에 비례한다.
도 8은 생물학적 실시예 7에서 언급되며, 48시간의 기간 동안 화합물 6(도 8a) 및 화합물 170(도 8b)으로 처리된 제1형 SMA 인간 섬유아세포에서 Smn 단백질 발현의 용량 의존성 증가를 나타낸다.
도 9는 생물학적 실시예 8에서 언급되며, 48시간의 기간 동안 화합물 6(도 9a) 및 화합물 170(도 9b)으로 처리된 제1형 SMA 환자 섬유아세포에서 핵 반점(nuclear speckle) 수(gems)의 증가를 나타낸다. 반점은 형광 현미경을 사용하여 계수하였다. 화합물-처리된 샘플 중 반점의 수는 비히클-처리 샘플 중의 상기 수로 정규화하고 화합물 농도의 함수로서 플로팅하였다.
도 10은 생물학적 실시예 9에서 언급되며, 72시간의 기간 동안 화합물 6(도 10)으로 처리된 제1형 SMA 환자 섬유아세포로부터 생성된 iPS 세포로부터 생성된 운동 뉴런에서 Smn 단백질 발현의 증가(흑색 원)를 나타낸다. Smn 단백질의 수준은 Smn 면역염색 및 공초점 형광 현미경을 사용하여 정량화하였다. 화합물-처리된 샘플 중 Smn 단백질의 수준은 비히클-처리 샘플 중의 상기 수준으로 정규화하고 화합물 농도의 함수로서 플로팅하였다.
생물학적 실시예 11에 언급된 도 11은 100 mg/kg의 화합물 6(도 11a, n = 10인 경우) 및 10 mg/kg의 화합물 170(도 11b, n = 5인 경우)을 사용하는 10일 동안의 BID 처리로부터 유발되는, C/C-대립유전자 SMA 마우스 모델에서의 뇌, 척수 및 근육 조직 내의 증가된 Smn 단백질 발현을 나타낸다. 각각의 도면에서 ANOVA에 의한 p 값은 p < 0.001의 경우 3개의 별표(***)로 표시된다.
생물학적 실시예 12에 언급된 도 12는 화합물 6(뇌, 도 12a; 척수, 도 12b; 근육, 도 12c; 및 피부, 도 12d, n = 6 내지 9인 경우) 및 화합물 170(뇌, 도 12e; 척수, 도 12f; 근육, 도 12g, n = 7인 경우)을 사용하는 7일 동안의 1일 당 1회(QD) 처리로부터 유발되는, 신생 Δ7 SMA 마우스 모델에서의 조직 내의 Smn 단백질 발현에서 투여량 의존적 증가를 나타낸다. 각각의 도면에서 ANOVA에 의한 p 값은 p < 0.05인 경우 1개의 별표(*), p < 0.01인 경우 2개의 별표(**) 및 p < 0.001의 경우 3개의 별표(***)로 표시된다.
생물학적 실시예 13에 언급된 도 13은 화합물 6을 사용하여 출생 후 일(PND) 59까지(도 13a) 및 화합물 170을 사용하여 PND 92까지(도 13b)의 처리로부터 유발되는, 신생 Δ7 SMA 마우스 모델에서의 체중의 차이를 나타낸다.
생물학적 실시예 14에 언급된 도 14는 화합물 6(도 14a) 및 화합물 170(도 14b)을 사용하는 처리로부터 유발되는, 신생 Δ7 SMA 마우스 모델에서의 개선된 정위 반사를 나타낸다.
생물학적 실시예 15에 언급된 도 15는 화합물 6(도 15a) 및 화합물 170(도 15b)을 사용하는 처리로부터 유발되는, 신생 Δ7 SMA 마우스 모델에서의 개선된 생존율을 나타낸다.
생물학적 실시예 15에 언급된 도 16은, 비히클 처리되고 연령-부합된 이형접합 마우스와 비교되고, 화합물 6을 사용하여 PND 156까지(도 16a) 및 화합물 170을 사용하여 PND 185까지(도 16b)의 처리에 의해 유발되는, Δ7 SMA 마우스 모델에서의 뇌, 척수, 및 근육 조직 내의 증가된 Smn 단백질 발현을 나타낸다.
생물학적 실시예 16에 언급된 도 17은 화합물 6(도 17a) 및 화합물 170(도 17b)을 사용하여 7시간 기간에 걸쳐 처리된 HEK293H 인간 세포에서의 SMN1 미니유전자 FL mRNA 내의 투여량 의존적 증가 및 SMN1 미니유전자 Δ7 mRNA 내의 투여량 의존적 감소를 나타낸다. 전장 및 Δ7 SMN1 미니유전자 mRNA는 각각 RT-PCR에 의해 증폭되고, 생성된 PCR 생성물은 아가로스 겔 전기영동에 의해 분리되었다. 상부 및 저부 밴드는 각각 전장 및 Δ7 SMN1 미니유전자 mRNA에 대응한다. 각각의 밴드의 강도는 샘플에 존재하는 RNA의 양에 비례한다.
하기 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태가 본원에 제공된다:
화학식 I
상기 식에서,
w1 및 w5는 독립적으로 C-Ra 또는 N이고;
w2는 C-Rb 또는 N이고;
w3, w4 및 w7은 독립적으로 C-R1, C-R2, C-Ra 또는 N이고;
w6은 C-R1, C-R2, C-Rc 또는 N이고;
w3, w4, w6 및 w7 중 하나는 C-R1이고, w3, w4, w6 및 w7 중 다른 하나는 C-R2이되,
w3이 C-R1일 때, w6은 C-R2이고 w4 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이거나,
w3이 C-R2일 때, w6은 C-R1이고 w4 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이거나,
w4가 C-R1일 때, w7은 C-R2이고 w3은 C-Ra 또는 N이고 w6은 C-Rc 또는 N이거나,
w4가 C-R2일 때, w7은 C-R1이고 w3은 C-Ra 또는 N이고 w6은 C-Rc 또는 N이고,
w1, w2, w3, w4, w5, w6 및 w7 중 1, 2 또는 3개는 선택적으로 N일 수 있고;
R1은 C1-8알킬, 아미노, C1-8알킬-아미노, (C1-8알킬)2-아미노, C1-8알콕시-C1-8알킬-아미노, (C1-8알콕시-C1-8알킬)2-아미노, (C1-8알콕시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 아미노-C1-8알킬, C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, C1-8알콕시-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (C1-8알콕시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, (C1-8알콕시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬, 아미노-C1-8알킬-아미노, (아미노-C1-8알킬)2-아미노, (아미노-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, C1-8알킬-아미노-C1-8알킬-아미노, (C1-8알킬-아미노-C1-8알킬)2-아미노, (C1-8알킬-아미노-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, (C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬-아미노, [(C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬](C1-8알킬)아미노, 아미노-C1-8알콕시, C1-8알킬-아미노-C1-8알콕시, (C1-8알킬)2-아미노-C1-8알콕시, C1-8알콕시-C1-8알킬-아미노-C1-8알콕시, C1-8알콕시-C1-8알킬-아미노-C1-8알콕시, (C1-8알콕시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알콕시, 아미노-C2-8알켄일, C1-8알킬-아미노-C2-8알켄일, (C1-8알킬)2-아미노-C2-8알켄일, 아미노-C2-8알킨일, C1-8알킬-아미노-C2-8알킨일, (C1-8알킬)2-아미노-C2-8알킨일, 할로-C1-8알킬-아미노, (할로-C1-8알킬)2-아미노, (할로-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 하이드록시-C1-8알킬, 하이드록시-C1-8알콕시-C1-8알킬, 하이드록시-C1-8알킬-아미노, (하이드록시-C1-8알킬)2-아미노, (하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 하이드록시-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (하이드록시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, (하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬, 하이드록시-C1-8알킬-아미노-C1-8알콕시, (하이드록시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알콕시, (하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알콕시, 하이드록시-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬-아미노, (하이드록시-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬)2-아미노, (하이드록시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬-아미노, (하이드록시-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, (하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬-아미노, [(하이드록시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬](C1-8알킬)아미노, [(하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬](C1-8알킬)아미노, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-C1-8알킬, 헤테로사이클릴-C1-8알콕시, 헤테로사이클릴-아미노, (헤테로사이클릴)(C1-8알킬)아미노, 헤테로사이클릴-아미노-C1-8알킬, 헤테로사이클릴-C1-8알킬-아미노, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)2-아미노, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 헤테로사이클릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬, 헤테로사이클릴-옥시, 헤테로사이클릴-카본일, 헤테로사이클릴-카본일-옥시, C3-14사이클로알킬, 아릴-C1-8알킬-아미노, (아릴-C1-8알킬)2-아미노, (아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 아릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (아릴-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, (아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴-C1-8알킬, 헤테로아릴-C1-8알콕시, 헤테로아릴-아미노, 헤테로아릴-C1-8알킬-아미노, (헤테로아릴-C1-8알킬)2-아미노, (헤테로아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 헤테로아릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (헤테로아릴-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬 또는 (헤테로아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬이고,
이때 헤테로사이클릴, C3-14사이클로알킬, 아릴 및 헤테로아릴은 각각의 경우에 1, 2 또는 3개의 R3 치환기로 선택적으로 치환되고, 1개의 추가 R4 치환기로 선택적으로 치환되거나,
헤테로사이클릴, C3-14사이클로알킬, 아릴 및 헤테로아릴은 각각의 경우에 1, 2, 3 또는 4개의 R3 치환기로 선택적으로 치환되고;
R2는 아릴, 아릴-아미노, 아릴-아미노-카본일, 헤테로사이클릴, 헤테로아릴 또는 헤테로아릴-아미노이고,
이때 아릴, 헤테로사이클릴 및 헤테로아릴은 각각의 경우에 1, 2 또는 3개의 R6 치환기로 선택적으로 치환되고, 1개의 추가 R7 치환기로 선택적으로 치환되고;
Ra는 각각의 경우에 독립적으로 수소, 할로겐 및 C1-8알킬로부터 선택되고;
Rb는 수소, 할로겐, C1-8알킬 또는 C1-8알콕시이고;
Rc는 수소, 할로겐 또는 C1-8알킬이고;
R3은 각각의 경우에 독립적으로 시아노, 할로겐, 하이드록시, 옥소, C1-8알킬, 할로-C1-8알킬, C1-8알킬-카본일, C1-8알콕시, 할로-C1-8알콕시, C1-8알콕시-C1-8알킬, C1-8알콕시-카본일, 아미노, C1-8알킬-아미노, (C1-8알킬)2-아미노, 아미노-C1-8알킬, C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, 아미노-C1-8알킬-아미노, C1-8알킬-아미노-C1-8알킬-아미노, (C1-8알킬-아미노-C1-8알킬)2-아미노, (C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬-아미노, [(C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬]2-아미노, (C1-8알킬-아미노-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, [(C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬](C1-8알킬)아미노, C1-8알콕시-C1-8알킬-아미노, (C1-8알콕시-C1-8알킬)2-아미노, (C1-8알콕시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, C1-8알킬-카본일-아미노, C1-8알콕시-카본일-아미노, 하이드록시-C1-8알킬, 하이드록시-C1-8알콕시-C1-8알킬, 하이드록시-C1-8알킬-아미노, (하이드록시-C1-8알킬)2-아미노 또는 (하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노이고;
R4는 C3-14사이클로알킬, C3-14사이클로알킬-C1-8알킬, C3-14사이클로알킬-아미노, 아릴-C1-8알킬, 아릴-C1-8알콕시-카본일, 아릴-설폰일옥시-C1-8알킬, 헤테로사이클릴 또는 헤테로사이클릴-C1-8알킬이고,
이때 C3-14사이클로알킬, 아릴 및 헤테로사이클릴은 각각의 경우에 1, 2 또는 3개의 R5 치환기로 선택적으로 치환되고;
R5는 각각의 경우에 독립적으로 할로겐, 하이드록시, 시아노, 니트로, C1-8알킬, 할로-C1-8알킬, C1-8알콕시, 할로-C1-8알콕시, 아미노, C1-8알킬-아미노, (C1-8알킬)2-아미노 및 C1-8알킬-티오로부터 선택되고;
R6은 각각의 경우에 독립적으로 할로겐, 하이드록시, 시아노, 니트로, C1-8알킬, C2-8알켄일, 할로-C1-8알킬, 하이드록시-C1-8알킬, C1-8알콕시, 할로-C1-8알콕시, C1-8알콕시-C1-8알킬, 아미노, C1-8알킬-아미노, (C1-8알킬)2-아미노 및 C1-8알킬-티오로부터 선택되고;
R7은 C3-14사이클로알킬, C3-14사이클로알킬-옥시, 아릴, 헤테로사이클릴 또는 헤테로아릴이다.
양태
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, w1은 C-Ra이다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, w1은 N이다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, w2는 C-Rb이다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, w2는 N이다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, w3은 C-Ra이다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, w3은 N이다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, w4는 C-Ra이다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, w4는 N이다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, w5는 C-Ra이다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, w5는 N이다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, w6은 C-Rc이다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, w6은 N이다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, w7은 C-Ra이다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, w7은 N이다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, w3은 C-R1이고, w6은 C-R2이다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, w3은 C-R2이고, w6은 C-R1이다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, w4는 C-R1이고, w7은 C-R2이다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, w4는 C-R2이고, w7은 C-R1이다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, w3은 C-R1이고, w6은 C-R2이고, w1, w4, w5 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, w3은 C-R2이고, w6은 C-R1이고, w1, w4, w5 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, w4는 C-R1이고, w7은 C-R2이고, w1, w3 및 w5는 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이고, w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, w4는 C-R2이고, w7은 C-R1이고, w1, w3 및 w5는 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이고, w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, w1 및 w2는 N이다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, w1 및 w3은 N이다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, w1 및 w4는 N이다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, w1 및 w5는 N이다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, w1 및 w6은 N이다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, w1 및 w7은 N이다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서,
R1은 C1-8알킬, 아미노, C1-8알킬-아미노, (C1-8알킬)2-아미노, C1-8알콕시-C1-8알킬-아미노, (C1-8알콕시-C1-8알킬)2-아미노, (C1-8알콕시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 아미노-C1-8알킬, C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, C1-8알콕시-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (C1-8알콕시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, (C1-8알콕시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬, 아미노-C1-8알킬-아미노, (아미노-C1-8알킬)2-아미노, (아미노-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, C1-8알킬-아미노-C1-8알킬-아미노, (C1-8알킬-아미노-C1-8알킬)2-아미노, (C1-8알킬-아미노-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, (C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬-아미노, [(C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬](C1-8알킬)아미노, 아미노-C1-8알콕시, C1-8알킬-아미노-C1-8알콕시, (C1-8알킬)2-아미노-C1-8알콕시, C1-8알콕시-C1-8알킬-아미노-C1-8알콕시, (C1-8알콕시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알콕시, (C1-8알콕시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알콕시, 아미노-C2-8알켄일, C1-8알킬-아미노-C2-8알켄일, (C1-8알킬)2-아미노-C2-8알켄일, 아미노-C2-8알킨일, C1-8알킬-아미노-C2-8알킨일, (C1-8알킬)2-아미노-C2-8알킨일, 할로-C1-8알킬-아미노, (할로-C1-8알킬)2-아미노, (할로-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 하이드록시-C1-8알킬, 하이드록시-C1-8알콕시-C1-8알킬, 하이드록시-C1-8알킬-아미노, (하이드록시-C1-8알킬)2-아미노, (하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 하이드록시-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (하이드록시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, (하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬, 하이드록시-C1-8알킬-아미노-C1-8알콕시, (하이드록시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알콕시, (하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알콕시, 하이드록시-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬-아미노, (하이드록시-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬)2-아미노, (하이드록시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬-아미노, (하이드록시-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, (하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬-아미노, [(하이드록시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬](C1-8알킬)아미노, [(하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬](C1-8알킬)아미노, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-C1-8알킬, 헤테로사이클릴-C1-8알콕시, 헤테로사이클릴-아미노, (헤테로사이클릴)(C1-8알킬)아미노, 헤테로사이클릴-아미노-C1-8알킬, 헤테로사이클릴-C1-8알킬-아미노, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)2-아미노, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 헤테로사이클릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬, 헤테로사이클릴-옥시, 헤테로사이클릴-카본일, 헤테로사이클릴-카본일-옥시, C3-14사이클로알킬, 아릴-C1-8알킬-아미노, (아릴-C1-8알킬)2-아미노, (아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 아릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (아릴-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, (아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴-C1-8알킬, 헤테로아릴-C1-8알콕시, 헤테로아릴-아미노, 헤테로아릴-C1-8알킬-아미노, (헤테로아릴-C1-8알킬)2-아미노, (헤테로아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 헤테로아릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (헤테로아릴-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬 또는 (헤테로아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬이고; 이때 헤테로사이클릴, C3-14사이클로알킬, 아릴 및 헤테로아릴은 각각의 경우에 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서,
R1은 아미노, (C1-8알킬)2-아미노, C1-8알콕시-C1-8알킬-아미노, (C1-8알콕시-C1-8알킬)2-아미노, 아미노-C1-8알킬, C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, C1-8알콕시-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (C1-8알콕시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, (C1-8알콕시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬, 아미노-C1-8알킬-아미노, (아미노-C1-8알킬)2-아미노, (아미노-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, C1-8알킬-아미노-C1-8알킬-아미노, (C1-8알킬-아미노-C1-8알킬)2-아미노, (C1-8알킬-아미노-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, (C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬-아미노, [(C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬](C1-8알킬)아미노, 아미노-C1-8알콕시, C1-8알킬-아미노-C1-8알콕시, (C1-8알킬)2-아미노-C1-8알콕시, C1-8알콕시-C1-8알킬-아미노-C1-8알콕시, (C1-8알콕시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알콕시, (C1-8알콕시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알콕시, 아미노-C2-8알켄일, C1-8알킬-아미노-C2-8알켄일, (C1-8알킬)2-아미노-C2-8알켄일, 아미노-C2-8알킨일, C1-8알킬-아미노-C2-8알킨일, (C1-8알킬)2-아미노-C2-8알킨일, 할로-C1-8알킬-아미노, (할로-C1-8알킬)2-아미노, (할로-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 하이드록시-C1-8알킬, 하이드록시-C1-8알콕시-C1-8알킬, 하이드록시-C1-8알킬-아미노, (하이드록시-C1-8알킬)2-아미노, (하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 하이드록시-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (하이드록시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, (하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬, 하이드록시-C1-8알킬-아미노-C1-8알콕시, (하이드록시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알콕시, (하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알콕시, 하이드록시-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬-아미노, (하이드록시-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬)2-아미노, (하이드록시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬-아미노, (하이드록시-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, (하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬-아미노, [(하이드록시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬](C1-8알킬)아미노, [(하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬](C1-8알킬)아미노, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-C1-8알킬, 헤테로사이클릴-C1-8알콕시, 헤테로사이클릴-아미노, (헤테로사이클릴)(C1-8알킬)아미노, 헤테로사이클릴-아미노-C1-8알킬, 헤테로사이클릴-C1-8알킬-아미노, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)2-아미노, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 헤테로사이클릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬, 헤테로사이클릴-옥시, 헤테로사이클릴-카본일, 헤테로사이클릴-카본일-옥시, C3-14사이클로알킬, 아릴-C1-8알킬-아미노, (아릴-C1-8알킬)2-아미노, (아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 아릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (아릴-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, (아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴-C1-8알킬, 헤테로아릴-C1-8알콕시, 헤테로아릴-C1-8알킬-아미노, (헤테로아릴-C1-8알킬)2-아미노, (헤테로아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 헤테로아릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (헤테로아릴-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬 또는 (헤테로아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬이고; 이때 헤테로사이클릴, C3-14사이클로알킬, 아릴 및 헤테로아릴은 각각의 경우에 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서,
R1은 C1-8알킬, 아미노, C1-8알킬-아미노, (C1-8알킬)2-아미노, C1-8알콕시-C1-8알킬-아미노, (C1-8알콕시-C1-8알킬)2-아미노, (C1-8알콕시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 아미노-C1-8알킬, C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, C1-8알콕시-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (C1-8알콕시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, (C1-8알콕시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬, 아미노-C1-8알킬-아미노, (아미노-C1-8알킬)2-아미노, (아미노-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, C1-8알킬-아미노-C1-8알킬-아미노, (C1-8알킬-아미노-C1-8알킬)2-아미노, (C1-8알킬-아미노-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, (C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬-아미노, [(C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬](C1-8알킬)아미노, 아미노-C1-8알콕시, C1-8알킬-아미노-C1-8알콕시, (C1-8알킬)2-아미노-C1-8알콕시, C1-8알콕시-C1-8알킬-아미노-C1-8알콕시, (C1-8알콕시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알콕시, (C1-8알콕시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알콕시, 아미노-C2-8알켄일, C1-8알킬-아미노-C2-8알켄일, (C1-8알킬)2-아미노-C2-8알켄일, 아미노-C2-8알킨일, C1-8알킬-아미노-C2-8알킨일, (C1-8알킬)2-아미노-C2-8알킨일, 할로-C1-8알킬-아미노, (할로-C1-8알킬)2-아미노, (할로-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 하이드록시-C1-8알킬, 하이드록시-C1-8알콕시-C1-8알킬, 하이드록시-C1-8알킬-아미노, (하이드록시-C1-8알킬)2-아미노, (하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 하이드록시-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (하이드록시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, (하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬, 하이드록시-C1-8알킬-아미노-C1-8알콕시, (하이드록시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알콕시, (하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알콕시, 하이드록시-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬-아미노, (하이드록시-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬)2-아미노, (하이드록시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬-아미노, (하이드록시-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, (하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬-아미노, [(하이드록시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬](C1-8알킬)아미노 또는 [(하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬](C1-8알킬)아미노이다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서,
R1은 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-C1-8알킬, 헤테로사이클릴-C1-8알콕시, 헤테로사이클릴-아미노, (헤테로사이클릴)(C1-8알킬)아미노, 헤테로사이클릴-아미노-C1-8알킬, 헤테로사이클릴-C1-8알킬-아미노, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)2-아미노, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 헤테로사이클릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬, 헤테로사이클릴-옥시, 헤테로사이클릴-카본일, 헤테로사이클릴-카본일-옥시, C3-14사이클로알킬, 아릴-C1-8알킬-아미노, (아릴-C1-8알킬)2-아미노, (아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 아릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (아릴-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, (아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴-C1-8알킬, 헤테로아릴-C1-8알콕시, 헤테로아릴-아미노, 헤테로아릴-C1-8알킬-아미노, (헤테로아릴-C1-8알킬)2-아미노, (헤테로아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 헤테로아릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (헤테로아릴-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬 또는 (헤테로아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬이고; 이때 헤테로사이클릴, C3-14사이클로알킬, 아릴 및 헤테로아릴은 각각의 경우에 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서,
R1은 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-C1-8알킬, 헤테로사이클릴-C1-8알콕시, 헤테로사이클릴-아미노, (헤테로사이클릴)(C1-8알킬)아미노, 헤테로사이클릴-아미노-C1-8알킬, 헤테로사이클릴-C1-8알킬-아미노, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)2-아미노, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 헤테로사이클릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬, 헤테로사이클릴-옥시, 헤테로사이클릴-카본일 또는 헤테로사이클릴-카본일-옥시이고; 이때 헤테로사이클릴은 각각의 경우에 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, R1은 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴이다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, R1은 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된 C3-14사이클로알킬이다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서,
R1은 아릴-C1-8알킬-아미노, (아릴-C1-8알킬)2-아미노, (아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 아릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (아릴-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬 또는 (아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬이고; 이때 아릴은 각각의 경우에 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, R1은 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된 아릴-C1-8알킬-아미노이다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서,
R1은 헤테로아릴, 헤테로아릴-C1-8알킬, 헤테로아릴-C1-8알콕시, 헤테로아릴-아미노, 헤테로아릴-C1-8알킬-아미노, (헤테로아릴-C1-8알킬)2-아미노, (헤테로아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 헤테로아릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (헤테로아릴-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬 또는 (헤테로아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬이고; 이때 헤테로사이클릴, C3-14사이클로알킬, 아릴 및 헤테로아릴은 각각의 경우에 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, R1은 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된 헤테로아릴이다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서,
R1은 아제티딘일, 테트라하이드로푸란일, 피롤리딘일, 피페리딘일, 피페라진일, 1,4-다이아제판일, 1,2,5,6-테트라하이드로피리딘일, 1,2,3,6-테트라하이드로피리딘일, 헥사하이드로피롤로[3,4-b]피롤-(1H)-일, (3aS,6aS)-헥사하이드로피롤로[3,4-b]피롤-(1H)-일, (3aR,6aR)-헥사하이드로피롤로[3,4-b]피롤-(1H)-일, 헥사하이드로피롤로[3,4-b]피롤-(2H)-일, (3aS,6aS)-헥사하이드로피롤로[3,4-b]피롤-(2H)-일, 헥사하이드로피롤로[3,4-c]피롤-(1H)-일, (3aR,6aS)-헥사하이드로피롤로[3,4-c]피롤-(1H)-일, 옥타하이드로-5H-피롤로[3,2-c]피리딘일, 옥타하이드로-6H-피롤로[3,4-b]피리딘일, (4aR,7aR)-옥타하이드로-6H-피롤로[3,4-b]피리딘일, (4aS,7aS)-옥타하이드로-6H-피롤로[3,4-b]피리딘일, 헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진-(2H)-온, 헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진-(1H)-일, (7R,8aS)-헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진-(1H)-일, (8aS)-헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진-(1H)-일, (8aR)-헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진-(1H)-일, (8aS)-옥타하이드로피롤로[1,2-a]피라진-(1H)-일, (8aR)-옥타하이드로피롤로[1,2-a]피라진-(1H)-일, 옥타하이드로-2H-피리도[1,2-a]피라진일, 3-아자바이사이클로[3.1.0]헥실, (1R,5S)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥실, 8-아자바이사이클로[3.2.1]옥틸, (1R,5S)-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥틸, 8-아자바이사이클로[3.2.1]옥트-2-엔일, (1R,5S)-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥트-2-엔일, 9-아자바이사이클로[3.3.1]논일, (1R,5S)-9-아자바이사이클로[3.3.1]논일, 2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵틸, (1S,4S)-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵틸, 2,5-다이아자바이사이클로[2.2.2]옥틸, 3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥틸, (1R,5S)-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥틸, 1,4-다이아자바이사이클로[3.2.2]논일, 아자스피로[3.3]헵틸, 2,6-다이아자스피로[3.3]헵틸, 2,7-다이아자스피로[3.5]논일, 5,8-다이아자스피로[3.5]논일, 2,7-다이아자스피로[4.4]논일 또는 6,9-다이아자스피로[4.5]데실로부터 선택된 헤테로사이클릴이고; 이때 헤테로사이클릴은 각각의 경우에 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서,
R1은 아제티딘-1-일, 테트라하이드로푸란-3-일, 피롤리딘-1-일, 피페리딘-1-일, 피페리딘-4-일, 피페라진-1-일, 1,4-다이아제판-1-일, 1,2,5,6-테트라하이드로피리딘-5-일, 1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일, 헥사하이드로피롤로[3,4-b]피롤-1(2H)-일, (3aS,6aS)-헥사하이드로피롤로[3,4-b]피롤-1(2H)-일, (3aS,6aS)-헥사하이드로피롤로[3,4-b]피롤-5(1H)-일, (3aR,6aR)-헥사하이드로피롤로[3,4-b]피롤-5(1H)-일, 헥사하이드로피롤로[3,4-c]피롤-2(1H)-일, (3aR,6aS)-헥사하이드로피롤로[3,4-c]피롤-2(1H)-일, 옥타하이드로-5H--피롤로[3,2-c]피리딘-5-일, 옥타하이드로-6H-피롤로[3,4-b]피리딘-6-일, (4aR,7aR)-옥타하이드로-6H-피롤로[3,4-b]피리딘-6-일, (4aS,7aS)-옥타하이드로-6H-피롤로[3,4-b]피리딘-6-일, 헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진-6(2H)-온, 헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일, (7R,8aS)-헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일, (8aS)-헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일, (8aR)-헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일, (8aS)-옥타하이드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일, (8aR)-옥타하이드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일, 옥타하이드로-2H-피리도[1,2-a]피라진-2-일, 3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-3-일, 8-아자바이사이클로[3.2.1]옥트-3-일, (1R,5S)-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥트-3-일, 8-아자바이사이클로[3.2.1]옥트-2-엔-3-일, (1R,5S)-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥트-2-엔-3-일, 9-아자바이사이클로[3.3.1]논-3-일, (1R,5S)-9-아자바이사이클로[3.3.1]논-3-일, 2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵트-2-일, (1S,4S)-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵트-2-일, 2,5-다이아자바이사이클로[2.2.2]옥트-2-일, 3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥트-3-일, (1R,5S)-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥트-3-일, 1,4-다이아자바이사이클로[3.2.2]논-4-일, 아자스피로[3.3]헵트-2-일, 2,6-다이아자스피로[3.3]헵트-2-일, 2,7-다이아자스피로[3.5]논-7-일, 5,8-다이아자스피로[3.5]논-8-일, 2,7-다이아자스피로[4.4]논-2-일 및 6,9-다이아자스피로[4.5]데크-9-일로부터 선택된 헤테로사이클릴이고; 이때 헤테로사이클릴은 각각의 경우에 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서,
R1은 4-메틸-1,4-다이아제판-1-일, (3aS,6aS)-1-메틸헥사하이드로피롤로[3,4-b]피롤-5(1H)-일, (3aS,6aS)-5-메틸헥사하이드로피롤로[3,4-b]피롤-1(2H)-일, (3aR,6aR)-1-메틸헥사하이드로피롤로[3,4-b]피롤-5(1H)-일, (3aR,6aS)-5-메틸헥사하이드로피롤로[3,4-c]피롤-2(1H)-일, (3aR,6aS)-5-(2-하이드록시에틸)헥사하이드로피롤로[3,4-c]피롤-2(1H)-일, (3aR,6aS)-5-(프로판-2-일)-헥사하이드로피롤로[3,4-c]피롤-2(1H)-일, (3aR,6aS)-5-에틸헥사하이드로피롤로[3,4-c]피롤-2(1H)-일, (4aR,7aR)-1-메틸옥타하이드로-6H-피롤로[3,4-b]피리딘-6-일, (4aR,7aR)-1-에틸옥타하이드로-6H-피롤로[3,4-b]피리딘-6-일, (4aR,7aR)-1-(2-하이드록시에틸)옥타하이드로-6H-피롤로[3,4-b]피리딘-6-일, (4aS,7aS)-1-메틸옥타하이드로-6H-피롤로[3,4-b]피리딘-6-일, (4aS,7aS)-1-(2-하이드록시에틸)옥타하이드로-6H-피롤로[3,4-b]피리딘-6-일, (7R,8aS)-7-하이드록시헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일, (8aS)-8a-메틸옥타하이드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일, (8aR)-8a-메틸옥타하이드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일, (1R,5S,6s)-6-(다이메틸아미노)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-3-일, (1R,5S)-8-메틸-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥트-3-일, 9-메틸-9-아자바이사이클로[3.3.1]논-3-일, (3-엑소)-9-메틸-9-아자바이사이클로[3.3.1]논-3-일, (1R,5S)-9-메틸-9-아자바이사이클로[3.3.1]논-3-일, (1S,4S)-5-메틸-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵트-2-일 및 (1S,4S)-5-에틸-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵트-2-일로부터 선택된 치환된 헤테로사이클릴이다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R1은 헤테로사이클릴-C1-8알킬이고, 이때 헤테로사이클릴은 모폴린일, 피페리딘일, 피페라진일, 이미다졸일 및 피롤리딘일로부터 선택되고, 이때 각각의 경우의 헤테로사이클릴은 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R1은, 모폴린-4-일-메틸, 모폴린-4-일-에틸, 모폴린-4-일-프로필, 피페리딘-1-일-메틸, 피페라진-1-일-메틸, 피페라진-1-일-에틸, 피페라진-1-일-프로필, 피페라진-1-일-부틸, 이미다졸-1-일-메틸, 이미다졸-1-일-에틸, 이미다졸-1-일-프로필, 이미다졸-1-일-부틸, 피롤리딘-1-일-메틸, 피롤리딘-1-일-에틸, 피롤리딘-1-일-프로필 및 피롤리딘-1-일-부틸로부터 선택되는 헤테로사이클릴-C1-8알킬이고, 이때 각각의 경우의 헤테로사이클릴은 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R1은 헤테로사이클릴-C1-8알콕시이고, 이때 헤테로사이클릴은 피롤리딘일, 피페리딘일 및 모폴린일로부터 선택되고, 각각의 경우의 헤테로사이클릴은 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R1은, 피롤리딘-2-일-메톡시, 피롤리딘-2-일-에톡시, 피롤리딘-1-일-메톡시, 피롤리딘-1-일-에톡시, 피페리딘-1-일-메톡시, 피페리딘-1-일-에톡시, 모폴린-4-일-메톡시 및 모폴린-4-일-에톡시로부터 선택되는 헤테로사이클릴-C1-8알콕시이고, 이때 각각의 경우의 헤테로사이클릴은 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R1은 헤테로사이클릴-아미노이고, 이때 헤테로사이클릴은 아제티딘일, 피롤리딘일, 피페리딘일, 9-아자바이사이클로[3.3.1]논일 및 (1R,5S)-9-아자바이사이클로[3.3.1]논일로부터 선택되고, 각각의 경우의 헤테로사이클릴은 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R1은, 아제티딘-3-일-아미노, 피롤리딘-3-일-아미노, 피페리딘-4-일-아미노, 9-아자바이사이클로[3.3.1]논-3-일-아미노, (1R,5S)-9-아자바이사이클로[3.3.1]논-3-일-아미노, 9-메틸-9-아자바이사이클로[3.3.1]논-3-일-아미노, (3-엑소)-9-메틸-9-아자바이사이클로[3.3.1]논-3-일-아미노 및 (1R,5S)-9-메틸-9-아자바이사이클로[3.3.1]논-3-일-아미노로부터 선택되는 헤테로사이클릴-아미노이고, 이때 각각의 경우의 헤테로사이클릴은 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R1은 (헤테로사이클릴)(C1-8알킬)아미노이고, 이때 헤테로사이클릴은 피롤리딘일 및 피페리딘일로부터 선택되고, 각각의 경우의 헤테로사이클릴은 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R1은, (피롤리딘-3-일)(메틸)아미노 및 (피페리딘-4-일)(메틸)아미노로부터 선택되는 (헤테로사이클릴)(C1-8알킬)아미노이고, 이때 각각의 경우의 헤테로사이클릴은 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R1은 헤테로사이클릴-아미노-C1-8알킬이고, 이때 헤테로사이클릴은 테트라하이드로푸란일로부터 선택되고, 각각의 경우의 헤테로사이클릴은 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R1은, 3-(테트라하이드로푸란-3-일-아미노)프로필로부터 선택되는 헤테로사이클릴-아미노-C1-8알킬이고, 이때 각각의 경우의 헤테로사이클릴은 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R1은 헤테로사이클릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬이고, 이때 헤테로사이클릴은 테트라하이드로푸란일, 티엔일 및 피리딘일로부터 선택되고, 각각의 경우의 헤테로사이클릴은 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R1은, 3-[(테트라하이드로푸란-2-일메틸)아미노]프로필, 3-[(티오페닐-3-일메틸)아미노]프로필, 3-[(피리딘-2-일메틸)아미노]프로필 및 3-[(피리딘-4-일메틸)아미노]프로필로부터 선택되는 헤테로사이클릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬이고, 이때 각각의 경우의 헤테로사이클릴은 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R1은 헤테로사이클릴-옥시이고, 이때 헤테로사이클릴은 피롤리딘일 및 피페리딘으로부터 선택되고, 각각의 경우의 헤테로사이클릴은 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R1은, 피롤리딘-3-일옥시 및 피페리딘-4-일옥시로부터 선택되는 헤테로사이클릴-옥시이고, 이때 각각의 경우의 헤테로사이클릴은 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R1은 헤테로사이클릴-카본일이고, 이때 헤테로사이클릴은 피페라진일로부터 선택되고, 각각의 경우의 헤테로사이클릴은 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R1은, 피페라진-1-일-카본일로부터 선택되는 헤테로사이클릴-카본일이고, 이때 각각의 경우의 헤테로사이클릴은 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R1은 헤테로사이클릴-카본일-옥시이고, 이때 헤테로사이클릴은 피페라진일로부터 선택되고, 각각의 경우의 헤테로사이클릴은 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R1은, 피페라진-1-일-카본일-옥시로부터 선택되는 헤테로사이클릴-카본일-옥시이고, 이때 각각의 경우의 헤테로사이클릴은 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R1은 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로헥센일 및 사이클로헵틸로부터 선택된 C3-14사이클로알킬이고; 이때 C3-14사이클로알킬은 각각의 경우에 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, R1은 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로헥센일 및 사이클로헵틸로부터 선택된 C3-8사이클로알킬이고; 이때 C3-8사이클로알킬은 각각의 경우에 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R1은 아릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬이고, 이때 아릴은 페닐로부터 선택되고, 각각의 경우의 아릴은 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R1은, 3-(벤질아미노)프로필로부터 선택되는 아릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬이고, 이때 각각의 경우의 아릴은 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R1은 헤테로아릴이고, 이때 헤테로아릴은 피리딘일로부터 선택되고, 각각의 경우의 헤테로아릴은 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R1은, 피리딘-4-일로부터 선택되는 헤테로아릴이고, 이때 각각의 경우의 헤테로아릴은 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R1은 헤테로아릴-C1-8알킬이고, 이때 헤테로아릴은 1H-이미다졸일로부터 선택되고, 각각의 경우의 헤테로아릴은 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R1은, 1H-이미다졸-1-일-메틸로부터 선택되는 헤테로아릴-C1-8알킬이고, 이때 각각의 경우의 헤테로아릴은 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R1은 (헤테로아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노이고, 이때 헤테로아릴은 피리딘일로부터 선택되고, 이때 각각의 경우의 헤테로아릴은 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R1은, (피리딘-3-일-메틸)(메틸)아미노로부터 선택되는 (헤테로아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노이고, 이때 각각의 경우의 헤테로아릴은 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R1은 헤테로아릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬이고, 이때 헤테로아릴은 티엔일 및 피리딘일로부터 선택되고, 각각의 경우의 헤테로아릴은 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R1은, 티엔-3-일-메틸-아미노-프로필, 피리딘-2-일-메틸-아미노-프로필, 피리딘-3-일-메틸-아미노-프로필 및 피리딘-4-일-메틸-아미노-프로필로부터 선택되는 헤테로아릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬이고, 이때 각각의 경우의 헤테로아릴은 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R3은 시아노, 할로겐, 하이드록시, 옥소, C1-8알킬, 할로-C1-8알킬, C1-8알킬-카본일, C1-8알콕시, 할로-C1-8알콕시, C1-8알콕시-C1-8알킬, C1-8알콕시-카본일, 아미노, C1-8알킬-아미노, (C1-8알킬)2-아미노, 아미노-C1-8알킬, C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, 아미노-C1-8알킬-아미노, C1-8알킬-아미노-C1-8알킬-아미노, (C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬-아미노, C1-8알콕시-C1-8알킬-아미노, C1-8알킬-카본일-아미노, C1-8알콕시-카본일-아미노, 하이드록시-C1-8알킬, 하이드록시-C1-8알콕시-C1-8알킬, 하이드록시-C1-8알킬-아미노, (하이드록시-C1-8알킬)2-아미노 및 (하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노로부터 선택된다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, R3은 시아노, 할로겐, 하이드록시, 옥소, C1-8알킬, 할로-C1-8알킬, C1-8알콕시, C1-8알콕시-C1-8알킬, C1-8알콕시-카본일, 아미노, C1-8알킬-아미노, (C1-8알킬)2-아미노, 아미노-C1-8알킬, C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, C1-8알킬-아미노-C1-8알킬-아미노, C1-8알콕시-C1-8알킬-아미노, C1-8알콕시-카본일-아미노, 하이드록시-C1-8알킬, 하이드록시-C1-8알콕시-C1-8알킬, 하이드록시-C1-8알킬-아미노, (하이드록시-C1-8알킬)2-아미노 및 (하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노로부터 선택된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R3은, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필 및 3급-부틸로부터 선택되는 C1-8알킬이다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, R3은, 에틸, 프로필, 이소프로필 및 3급-부틸로부터 선택되는 C1-8알킬이다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R3은, 트라이할로-메틸, 다이할로-메틸, 할로-메틸, 트라이할로-에틸, 다이할로-에틸, 할로-에틸, 트라이할로-프로필, 다이할로-프로필 및 할로-프로필로부터 선택되는 할로-C1-8알킬이고, 이때 할로는 플루오로, 클로로, 브로모 및 요오도로부터 선택된다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, R3은, 트라이할로-메틸, 다이할로-메틸, 할로-메틸, 트라이할로-에틸, 다이할로-에틸, 트라이할로-프로필 및 다이할로-프로필로부터 선택되는 할로-C1-8알킬이고, 이때 할로는 플루오로, 클로로, 브로모 및 요오도로부터 선택된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R3은, 하이드록시-메틸, 하이드록시-에틸, 하이드록시-프로필, 다이하이드록시-프로필, 하이드록시-부틸 및 다이하이드록시-부틸로부터 선택되는 하이드록시-C1-8알킬이다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, R3은, 하이드록시-메틸, 다이하이드록시-프로필, 하이드록시-부틸 및 다이하이드록시-부틸로부터 선택되는 하이드록시-C1-8알킬이다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R3은, 메톡시, 에톡시, 프로폭시 및 이소프로폭시로부터 선택되는 C1-8알콕시이다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R3은, 트라이할로-메톡시, 다이할로-메톡시, 할로-메톡시, 트라이할로-에톡시, 다이할로-에톡시, 할로-에톡시, 트라이할로-프로폭시, 다이할로-프로폭시 및 할로-프로폭시로부터 선택되는 할로-C1-8알콕시이고, 이때 할로는 플루오로, 클로로, 브로모 및 요오도로부터 선택된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R3은, 메톡시-카본일-아미노, 에톡시-카본일-아미노, 프로폭시-카본일-아미노, 이소프로폭시-카본일-아미노, 3급-부톡시-카본일-아미노로부터 선택되는 C1-8알콕시-카본일-아미노이다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R4는, 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실 및 사이클로헵틸로부터 선택되는 C3-14사이클로알킬이고, 이때 각각의 경우의 C3-14사이클로알킬은 R5 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R4는, 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실 및 사이클로헵틸로부터 선택되는 C3-8사이클로알킬이고, 이때 각각의 경우의 C3-8사이클로알킬은 R5 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R4는 C3-14사이클로알킬-C1-8알킬이고, 이때 C3-14사이클로알킬은 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실 및 사이클로헵틸로부터 선택되고, 각각의 경우의 C3-14사이클로알킬은 R5 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, R4는 C3-8사이클로알킬-C1-8알킬이고, 이때 C3-8사이클로알킬은 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실 및 사이클로헵틸로부터 선택되고, 이때 각각의 경우의 C3-8사이클로알킬은 R5 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R4는 C3-14사이클로알킬-아미노이고, 이때 C3-14사이클로알킬은 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실 및 사이클로헵틸로부터 선택되고; C3-14사이클로알킬은 각각의 경우에 R5 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, R4는 C3-8사이클로알킬-아미노이고, 이때 C3-8사이클로알킬은 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실 및 사이클로헵틸로부터 선택되고; C3-8사이클로알킬은 각각의 경우에 R5 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R4는 아릴-C1-8알킬, 아릴-C1-8알콕시-카본일 또는 아릴-설폰일옥시-C1-8알킬이고, 이때 아릴은 페닐로부터 선택되고, 각각의 경우의 아릴은 R5 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, R4는 아릴-C1-8알킬 또는 아릴-C1-8알콕시-카본일이고, 이때 각각의 경우의 아릴은 R5 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R4는, 옥세탄일, 피롤리딘일, 피페리딘일, 피페라진일, 1,3-다이옥산일 및 모폴린일로부터 선택되는 헤테로사이클릴이고, 이때 각각의 경우의 헤테로사이클릴은 R5 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, R4는, 옥세탄-3-일, 피롤리딘-1-일, 피페리딘-1-일, 피페라진-1-일, 1,3-다이옥산-5-일 및 모폴린-4-일로부터 선택되는 헤테로사이클릴이고, 이때 각각의 경우의 헤테로사이클릴은 R5 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R4는 헤테로사이클릴-C1-8알킬이고, 이때 각각의 경우의 헤테로사이클릴은 피롤리딘일 및 피페리딘일로부터 선택되고, 각각의 경우의 헤테로사이클릴은 R5 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, R4는, 피롤리딘-1-일-C1-8알킬 및 피페리딘-1-일-C1-8알킬로부터 선택되는 헤테로사이클릴-C1-8알킬이고, 이때 각각의 경우의 헤테로사이클릴은 R5 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R5는 할로겐, 하이드록시, 시아노, 니트로, 할로-C1-8알킬, C1-8알콕시, 할로-C1-8알콕시, 아미노, C1-8알킬-아미노, (C1-8알킬)2-아미노 및 C1-8알킬-티오로부터 선택되고, 이때 할로겐 및 할로는 플루오로, 클로로, 브로모 및 요오도로부터 선택된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R5는 하이드록시이다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R5는, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, n-부틸 또는 3급-부틸로부터 선택되는 C1-8알킬이다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, R5는, 에틸, 프로필, 이소프로필 및 3급-부틸로부터 선택되는 C1-8알킬이다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R5는, 트라이할로-메틸, 다이할로-메틸, 할로-메틸, 트라이할로-에틸, 다이할로-에틸, 할로-에틸, 트라이할로-프로필, 다이할로-프로필 및 할로-프로필로부터 선택되는 할로-C1-8알킬이고, 이때 할로는 플루오로, 클로로, 브로모 및 요오도로부터 선택된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R5는, 메톡시, 에톡시, 프로폭시 및 이소프로폭시로부터 선택되는 C1-8알콕시이다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R5는, 트라이할로-메톡시, 다이할로-메톡시, 할로-메톡시, 트라이할로-에톡시, 다이할로-에톡시, 할로-에톡시, 트라이할로-프로폭시, 다이할로-프로폭시 및 할로-프로폭시로부터 선택되는 할로-C1-8알콕시이고, 이때 할로는 플루오로, 클로로, 브로모 및 요오도로부터 선택된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R2는, R6 및 R7 치환기로 선택적으로 치환된 페닐로부터 선택되는 아릴이다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R2는 아릴-아미노이고, 이때 아릴은 페닐로부터 선택되고, 이때 각각의 경우의 아릴은 R6 및 R7 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, R2는, 페닐-아미노로부터 선택되는 아릴-아미노이고, 이때 각각의 경우의 아릴은 R6 및 R7 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R2는 아릴-아미노-카본일이고, 이때 아릴은 페닐로부터 선택되고, 각각의 경우의 아릴은 R6 및 R7 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, R2는, 페닐-아미노-카본일로부터 선택되는 아릴-아미노-카본일이고, 이때 각각의 경우의 아릴은 R6 및 R7 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R2는, 1,2,3,6-테트라하이드로피리딘일, 1,3-벤조다이옥솔릴 및 2,3-다이하이드로-1,4-벤조다이옥신일로부터 선택되는 헤테로사이클릴이고, 이때 각각의 경우의 헤테로사이클릴은 R6 및 R7 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, R2는, 1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일, 1,3-벤조다이옥솔-5-일 및 2,3-다이하이드로-1,4-벤조다이옥신-6-일로부터 선택되는 헤테로사이클릴이고, 이때 각각의 경우의 헤테로사이클릴은 R6 및 R7 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R2는 티엔일, 1H-피라졸릴, 1H-이미다졸릴, 1,3-티아졸릴, 1,2,4-옥사다이아졸릴, 1,3,4-옥사다이아졸릴, 피리딘일, 피리미딘일, 1H-인돌릴, 2H-인돌릴, 1H-인다졸릴, 2H-인다졸릴, 인돌리진일, 벤조푸란일, 벤조티엔일, 1H-벤즈이미다졸릴, 1,3-벤조티아졸릴, 1,3-벤족사졸릴, 9H-푸린일, 푸로[3,2-b]피리딘일, 푸로[3,2-c]피리딘일, 푸로[2,3-c]피리딘일, 티에노[3,2-c]피리딘일, 티에노[2,3-d]피리미딘일, 1H-피롤로[2,3-b]피리딘일, 1H-피롤로[2,3-c]피리딘일, 피롤로[1,2-a]피리미딘일, 피롤로[1,2-a]피라진일, 피롤로[1,2-b]피리다진일, 피라졸로[1,5-a]피리딘일, 피라졸로[1,5-a]피라진일, 이미다조[1,2-a]피리딘일, 이미다조[1,2-a]피리미딘일, 이미다조[1,2-c]피리미딘일, 이미다조[1,2-b]피리다진일, 이미다조[1,2-a]피라진일, 이미다조[2,1-b][1,3]티아졸릴, 이미다조[2,1-b][1,3,4]티아다이아졸릴, [1,3]옥사졸로[4,5-b]피리딘일 및 퀴녹사진일로부터 선택된 헤테로아릴이고; 이때 헤테로아릴은 각각의 경우에 R6 및 R7 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, R2는 티엔-2-일, 티엔-3-일, 1H-피라졸-3-일, 1H-피라졸-4-일, 1H-피라졸-5-일, 1H-이미다졸-1-일, 1H-이미다졸-4-일, 1,3-티아졸-2-일, 1,2,4-옥사다이아졸-3-일, 1,3,4-옥사다이아졸-2-일, 피리딘-2-일, 피리딘-3-일, 피리딘-4-일, 피리미딘-4-일, 1H-인돌-3-일, 1H-인돌-4-일, 1H-인돌-5-일, 1H-인돌-6-일, 1H-인다졸-5-일, 2H-인다졸-5-일, 인돌리진-2-일, 벤조푸란-2-일, 벤조푸란-5-일, 벤조티엔-2-일, 벤조티엔-3-일, 1H-벤즈이미다졸-2-일, 1H-벤즈이미다졸-6-일, 1,3-벤족사졸-2-일, 1,3-벤족사졸-5-일, 1,3-벤족사졸-6-일, 1,3-벤조티아졸-2-일, 1,3-벤조티아졸-5-일, 1,3-벤조티아졸-6-일, 9H-푸린-8-일, 푸로[3,2-b]피리딘-2-일, 푸로[3,2-c]피리딘-2-일, 푸로[2,3-c]피리딘-2-일, 티에노[3,2-c]피리딘-2-일, 티에노[2,3-d]피리미딘-6-일, 1H-피롤로[2,3-b]피리딘-5-일, 1H-피롤로[2,3-c]피리딘-4-일, 피롤로[1,2-a]피리미딘-7-일, 피롤로[1,2-a]피라진-7-일, 피롤로[1,2-b]피리다진-2-일, 피라졸로[1,5-a]피리딘-2-일, 피라졸로[1,5-a]피라진-2-일, 이미다조[1,2-a]피리딘-2-일, 이미다조[1,2-a]피리딘-6-일, 이미다조[1,2-a]피리미딘-2-일, 이미다조[1,2-a]피리미딘-6-일, 이미다조[1,2-c]피리미딘-2-일, 이미다조[1,2-b]피리다진-2-일, 이미다조[1,2-a]피라진-2-일, 이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-6-일, 이미다조[2,1-b][1,3,4]티아다이아졸-6-일, [1,3]옥사졸로[4,5-b]피리딘-2-일 및 퀴녹살린-2-일로부터 선택된 헤테로아릴이고; 이때 헤테로아릴은 각각의 경우에 R6 및 R7 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, R2는 4-메틸티엔-2-일, 1-메틸-1H-피라졸-3-일, 4-메틸-1H-피라졸-3-일, 1-페닐-1H-피라졸-3-일, 1-페닐-1H-이미다졸-4-일, 2-메틸-1-(피리딘-2-일)-1H-이미다졸-4-일, 4-메틸-1,3-티아졸-2-일, 4-(트라이플루오로메틸)-1,3-티아졸-2-일, 4-페닐-1,3-티아졸-2-일, 5-페닐-1,2,4-옥사다이아졸-3-일, 3-플루오로피리딘-4-일, 6-플루오로피리딘-2-일, 2-클로로피리딘-4-일, 4-클로로피리딘-3-일, 5-클로로피리딘-2-일, 6-메틸피리딘-3-일, 2-(트라이플루오로메틸)피리딘-3-일, 4-(트라이플루오로메틸)피리딘-2-일, 6-(트라이플루오로메틸)피리딘-2-일, 2-메톡시피리딘-4-일, 4-메톡시피리딘-3-일, 6-메톡시피리딘-2-일, 2-에톡시피리딘-3-일, 6-에톡시피리딘-2-일, 6-(프로판-2-일-옥시)피리딘-2-일, 6-(다이메틸아미노)피리딘-3-일, 6-(메틸설판일)피리딘-2-일, 6-(사이클로부틸옥시)피리딘-2-일, 6-(피롤리딘-1-일)피리딘-2-일, 2-메틸피리미딘-4-일, 2-(프로판-2-일)피리미딘-4-일, 2-사이클로프로필피리미딘-4-일, 1-메틸-1H-인돌-3-일, 2-메틸-2H-인다졸-5-일, 2-메틸-1-벤조푸란-5-일, 1-메틸-1H-벤즈이미다졸-2-일, 4-메틸-1H-벤즈이미다졸-2-일, 5-플루오로-1H-벤즈이미다졸-2-일, 4-플루오로-1,3-벤족사졸-2-일, 5-플루오로-1,3-벤족사졸-2-일, 4-클로로-1,3-벤족사졸-2-일, 4-요오도-1,3-벤족사졸-2-일, 2-메틸-1,3-벤족사졸-6-일, 4-메틸-1,3-벤족사졸-2-일, 4-(트라이플루오로메틸)-1,3-벤족사졸-2-일, 7-(트라이플루오로메틸)-1,3-벤족사졸-2-일, 2-메틸-1,3-벤조티아졸-2-일, 2-메틸-1,3-벤조티아졸-5-일, 2-메틸-1,3-벤조티아졸-6-일, 4-클로로-1,3-벤조티아졸-2-일, 7-클로로-1,3-벤조티아졸-2-일, 4-(트라이플루오로메틸)-1,3-벤조티아졸-2-일, 5-메틸푸로[3,2-b]피리딘-2-일, 4,6-다이메틸푸로[3,2-c]피리딘-2-일, 5,7-다이메틸푸로[2,3-c]피리딘-2-일, 4,6-다이메틸티에노[3,2-c]피리딘-2-일, 2,4-다이메틸티에노[2,3-d]피리미딘-6-일, 1-메틸피롤로[1,2-a]피라진-7-일, 3-메틸피롤로[1,2-a]피라진-7-일, 1,3-다이메틸피롤로[1,2-a]피라진-7-일, 2-메틸피롤로[1,2-b]피리다진-2-일, 4,6-다이메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일, 5-메틸피라졸로[1,5-a]피리딘-2-일, 4,6-다이메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일, 2-클로로이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-6-일, 2-메틸이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-6-일, 3-메틸이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-6-일, 2-에틸이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-6-일, 2-메틸이미다조[2,1-b][1,3,4]티아다이아졸-6-일, 6-시아노이미다조[1,2-a]피리딘-2-일(또한, 2-이미다조[1,2-a]피리딘-6-카보니트릴로 지칭됨), 6-플루오로이미다조[1,2-a]피리딘-2-일, 8-플루오로이미다조[1,2-a]피리딘-2-일, 6,8-다이플루오로이미다조[1,2-a]피리딘-2-일, 7-(트라이플루오로메틸)이미다조[1,2-a]피리딘-2-일, 8-(트라이플루오로메틸)이미다조[1,2-a]피리딘-2-일, 6-클로로이미다조[1,2-a]피리딘-2-일, 7-클로로이미다조[1,2-a]피리딘-2-일, 8-클로로이미다조[1,2-a]피리딘-2-일, 8-브로모이미다조[1,2-a]피리딘-2-일, 2-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-2-일, 5-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-2-일, 6-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-2-일, 7-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-2-일, 8-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-2-일, 7-에틸이미다조[1,2-a]피리딘-2-일, 8-에틸이미다조[1,2-a]피리딘-2-일, 6,8-다이메틸이미다조[1,2-a]피리딘-2-일, 8-에틸-6-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-2-일, 7-메톡시이미다조[1,2-a]피리딘-2-일, 8-메톡시이미다조[1,2-a]피리딘-2-일, 6-플루오로-8-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-2-일, 8-플루오로-6-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-2-일, 8-클로로-6-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-2-일, 6-메틸-8-니트로이미다조[1,2-a]피리딘-2-일, 8-사이클로프로필이미다조[1,2-a]피리딘-2-일, 2-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일, 2-에틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일, 2,3-다이메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일, 2,8-다이메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일, 2-(트라이플루오로메틸)이미다조[1,2-a]피리딘-6-일, 8-클로로-2-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일, 8-플루오로-2-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일, 6-플루오로이미다조[1,2-a]피리미딘-2-일, 6-클로로이미다조[1,2-a]피리미딘-2-일, 6-메틸이미다조[1,2-a]피리미딘-2-일, 7-메틸이미다조[1,2-a]피리미딘-2-일, 2-메틸이미다조[1,2-a]피리미딘-6-일, 6-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-2-일, 2-메틸-3-(1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)이미다조[1,2-b]피리다진-6-일, 6-메틸이미다조[1,2-a]피라진-2-일, 8-메틸이미다조[1,2-a]피라진-2-일, 6,8-다이메틸이미다조[1,2-a]피라진-2-일, 6-클로로-8-메틸이미다조[1,2-a]피라진-2-일, 6-메틸-8-(트라이플루오로메틸)이미다조[1,2-a]피라진-2-일, 8-(메틸설판일)이미다조[1,2-a]피라진-2-일, 2-메틸이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-6-일, 3-메틸이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-6-일 및 2-메틸이미다조[2,1-b][1,3,4]티아다이아졸-6-일로부터 선택된 치환된 헤테로아릴이다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, R2는 티엔일, 1H-피라졸릴, 1H-이미다졸릴, 1,3-티아졸릴, 1,2,4-옥사다이아졸릴, 1,3,4-옥사다이아졸릴, 피리딘일, 피리미딘일, 1H-인돌릴, 2H-인돌릴, 1H-인다졸릴, 2H-인다졸릴, 인돌리진일, 벤조푸란일, 벤조티엔일, 1H-벤즈이미다졸릴, 1,3-벤조티아졸릴, 1,3-벤족사졸릴 및 9H-푸린일으로부터 선택된 헤테로아릴이고; 이때 헤테로아릴은 각각의 경우에 R6 및 R7 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, R2는 푸로[3,2-b]피리딘일, 푸로[3,2-c]피리딘일, 푸로[2,3-c]피리딘일, 티에노[3,2-c]피리딘일, 티에노[2,3-d]피리미딘일, 1H-피롤로[2,3-b]피리딘일, 1H-피롤로[2,3-c]피리딘일, 피롤로[1,2-a]피리미딘일, 피롤로[1,2-a]피라진일, 피롤로[1,2-b]피리다진일, 피라졸로[1,5-a]피리딘일, 피라졸로[1,5-a]피라진일, 이미다조[1,2-a]피리딘일, 이미다조[1,2-a]피리미딘일, 이미다조[1,2-c]피리미딘일, 이미다조[1,2-b]피리다진일, 이미다조[1,2-a]피라진일, 이미다조[2,1-b][1,3]티아졸릴, 이미다조[2,1-b][1,3,4]티아다이아졸릴, [1,3]옥사졸로[4,5-b]피리딘일 및 퀴녹사진일로부터 선택된 헤테로아릴이고; 이때 헤테로아릴은 각각의 경우에 R6 및 R7 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R2는 헤테로아릴-아미노이고, 이때 헤테로아릴은 피리딘일 및 피리미딘일로부터 선택되고, 이때 각각의 경우의 헤테로아릴은 R6 및 R7 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, R2는, 피리딘-2-일-아미노, 피리딘-3-일-아미노 및 피리미딘-2-일-아미노로부터 선택되는 헤테로아릴-아미노이고, 이때 각각의 경우의 헤테로아릴은 R6 및 R7 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R6은 할로겐, 하이드록시, 시아노, 니트로, C1-8알킬, 할로-C1-8알킬, 하이드록시-C1-8알킬, C1-8알콕시, 할로-C1-8알콕시, C1-8알콕시-C1-8알킬, (C1-8알킬)2-아미노 및 C1-8알킬-티오로부터 선택되고; 할로겐 및 할로는 플루오로, 클로로, 브로모 및 요오도로부터 선택된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R6은, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필 및 3급-부틸로부터 선택되는 C1-8알킬이다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, R6은, 에틸, 프로필, 이소프로필 및 3급-부틸로부터 선택되는 C1-8알킬이다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R6은, 에텐일, 알릴 및 부타-1,3-다이엔일로부터 선택되는 C2-8알켄일이다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, R6은, 에텐일 및 알릴로부터 선택되는 C2-8알켄일이다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R6은, 트라이할로-메틸, 다이할로-메틸, 할로-메틸, 트라이할로-에틸, 다이할로-에틸, 할로-에틸, 트라이할로-프로필, 다이할로-프로필 및 할로-프로필로부터 선택되는 할로-C1-8알킬이고, 이때 할로는 플루오로, 클로로, 브로모 및 요오도로부터 선택된다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, R6은, 하이드록시-메틸, 하이드록시-에틸, 하이드록시-프로필, 다이하이드록시-프로필, 하이드록시-부틸 및 다이하이드록시-부틸로부터 선택되는 하이드록시-C1-8알킬이다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R6은, 하이드록시-메틸, 다이하이드록시-프로필, 하이드록시-부틸 및 다이하이드록시-부틸로부터 선택되는 하이드록시-C1-8알킬이다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R6은, 메톡시, 에톡시, 프로폭시 및 이소프로폭시로부터 선택되는 C1-8알콕시이다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R6은, 트라이할로-메톡시, 다이할로-메톡시, 할로-메톡시, 트라이할로-에톡시, 다이할로-에톡시, 할로-에톡시, 트라이할로-프로폭시, 다이할로-프로폭시 및 할로-프로폭시로부터 선택되는 할로-C1-8알콕시이고, 이때 할로는 플루오로, 클로로, 브로모 및 요오도로부터 선택된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R7은 C3-14사이클로알킬, C3-14사이클로알킬-옥시, 아릴, 헤테로사이클릴 또는 헤테로아릴이고, 이때 C3-14사이클로알킬은 사이클로프로필 및 사이클로부톡시로부터 선택되고, 아릴은 페닐로부터 선택되고, 헤테로사이클릴은 옥세탄일, 피롤리딘일 및 1,2,3,6-테트라하이드로피리딘일로부터 선택되고, 헤테로아릴은 티엔일 및 피리딘일로부터 선택된다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, R7은 C3-14사이클로알킬 또는 C3-14사이클로알킬-옥시이고, 이때 각각의 경우의 C3-14사이클로알킬은 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실 및 사이클로헵틸로부터 선택된다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, R7은 C3-8사이클로알킬 또는 C3-8사이클로알킬-옥시이고, 이때 각각의 경우의 C3-8사이클로알킬은 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실 및 사이클로헵틸로부터 선택된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R7은, 페닐로부터 선택되는 아릴이다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R7은, 옥세탄일, 피롤리딘일 및 1,2,3,6-테트라하이드로피리딘일로부터 선택되는 헤테로사이클릴이다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, R7은, 옥세탄-3-일, 피롤리딘-1-일 및 1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일로부터 선택되는 헤테로사이클릴이다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R7은, 티엔일 및 피리딘일로부터 선택되는 헤테로아릴이다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, R7은, 피리딘일로부터 선택되는 헤테로아릴이다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, R7은, 티엔-2-일 및 피리딘-2-일로부터 선택되는 헤테로아릴이다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, R7은, 피리딘-2-일로부터 선택되는 헤테로아릴이다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, Rc는 수소 또는 C1-8알킬이다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서,
R1은 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-C1-8알킬, 헤테로사이클릴-C1-8알콕시, 헤테로사이클릴-아미노, (헤테로사이클릴)(C1-8알킬)아미노, 헤테로사이클릴-아미노-C1-8알킬, 헤테로사이클릴-C1-8알킬-아미노, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)2-아미노, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 헤테로사이클릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬, 헤테로사이클릴-옥시, 헤테로사이클릴-카본일, 헤테로사이클릴-카본일-옥시, C3-14사이클로알킬, 아릴-C1-8알킬-아미노, (아릴-C1-8알킬)2-아미노, (아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 아릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (아릴-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, (아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴-C1-8알킬, 헤테로아릴-C1-8알콕시, 헤테로아릴-아미노, 헤테로아릴-C1-8알킬-아미노, (헤테로아릴-C1-8알킬)2-아미노, (헤테로아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 헤테로아릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (헤테로아릴-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬 또는 (헤테로아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬이고; 이때 헤테로사이클릴, C3-14사이클로알킬, 아릴 및 헤테로아릴은 각각의 경우에 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환되고;
헤테로사이클릴은 아제티딘일, 테트라하이드로푸란일, 피롤리딘일, 피페리딘일, 피페라진일, 1,4-다이아제판일, 1,2,5,6-테트라하이드로피리딘일, 1,2,3,6-테트라하이드로피리딘일, 헥사하이드로피롤로[3,4-b]피롤-(1H)-일, (3aS,6aS)-헥사하이드로피롤로[3,4-b]피롤-(1H)-일, (3aR,6aR)-헥사하이드로피롤로[3,4-b]피롤-(1H)-일, 헥사하이드로피롤로[3,4-b]피롤-(2H)-일, (3aS,6aS)-헥사하이드로피롤로[3,4-b]피롤-(2H)-일, 헥사하이드로피롤로[3,4-c]피롤-(1H)-일, (3aR,6aS)-헥사하이드로피롤로[3,4-c]피롤-(1H)-일, 옥타하이드로-5H-피롤로[3,2-c]피리딘일, 옥타하이드로-6H-피롤로[3,4-b]피리딘일, (4aR,7aR)-옥타하이드로-6H-피롤로[3,4-b]피리딘일, (4aS,7aS)-옥타하이드로-6H-피롤로[3,4-b]피리딘일, 헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진-(2H)-온, 헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진-(1H)-일, (7R,8aS)-헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진-(1H)-일, (8aS)-헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진-(1H)-일, (8aR)-헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진-(1H)-일, (8aS)-옥타하이드로피롤로[1,2-a]피라진-(1H)-일, (8aR)-옥타하이드로피롤로[1,2-a]피라진-(1H)-일, 옥타하이드로-2H-피리도[1,2-a]피라진일, 3-아자바이사이클로[3.1.0]헥실, (1R,5S)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥실, 8-아자바이사이클로[3.2.1]옥틸, (1R,5S)-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥틸, 8-아자바이사이클로[3.2.1]옥트-2-엔일, (1R,5S)-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥트-2-엔일, 9-아자바이사이클로[3.3.1]논일, (1R,5S)-9-아자바이사이클로[3.3.1]논일, 2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵틸, (1S,4S)-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵틸, 2,5-다이아자바이사이클로[2.2.2]옥틸, 3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥틸, (1R,5S)-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥틸, 1,4-다이아자바이사이클로[3.2.2]논일, 아자스피로[3.3]헵틸, 2,6-다이아자스피로[3.3]헵틸, 2,7-다이아자스피로[3.5]논일, 5,8-다이아자스피로[3.5]논일, 2,7-다이아자스피로[4.4]논일 및 6,9-다이아자스피로[4.5]데실로부터 선택된다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서,
R2는 아릴, 아릴-아미노, 아릴-아미노-카본일, 헤테로사이클릴, 헤테로아릴 또는 헤테로아릴-아미노이고;
아릴은 페닐이고;
헤테로사이클릴은 1,2,3,6-테트라하이드로피리딘일, 1,3-벤조다이옥솔릴 및 2,3-다이하이드로-1,4-벤조다이옥신일로부터 선택되고;
헤테로아릴은 티엔일, 1H-피라졸릴, 1H-이미다졸릴, 1,3-티아졸릴, 1,2,4-옥사다이아졸릴, 1,3,4-옥사다이아졸릴, 피리딘일, 피리미딘일, 1H-인돌릴, 2H-인돌릴, 1H-인다졸릴, 2H-인다졸릴, 인돌리진일, 벤조푸란일, 벤조티엔일, 1H-벤즈이미다졸릴, 1,3-벤조티아졸릴, 1,3-벤족사졸릴, 9H-푸린일, 푸로[3,2-b]피리딘일, 푸로[3,2-c]피리딘일, 푸로[2,3-c]피리딘일, 티에노[3,2-c]피리딘일, 티에노[2,3-d]피리미딘일, 1H-피롤로[2,3-b]피리딘일, 1H-피롤로[2,3-c]피리딘일, 피롤로[1,2-a]피리미딘일, 피롤로[1,2-a]피라진일, 피롤로[1,2-b]피리다진일, 피라졸로[1,5-a]피리딘일, 피라졸로[1,5-a]피라진일, 이미다조[1,2-a]피리딘일, 이미다조[1,2-a]피리미딘일, 이미다조[1,2-c]피리미딘일, 이미다조[1,2-b]피리다진일, 이미다조[1,2-a]피라진일, 이미다조[2,1-b][1,3]티아졸릴, 이미다조[2,1-b][1,3,4]티아다이아졸릴, [1,3]옥사졸로[4,5-b]피리딘일 및 퀴녹사진일로부터 선택되고; 아릴, 헤테로사이클릴 및 헤테로아릴은 각각의 경우에 R6 및 R7 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서,
R1은 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-C1-8알킬, 헤테로사이클릴-C1-8알콕시, 헤테로사이클릴-아미노, (헤테로사이클릴)(C1-8알킬)아미노, 헤테로사이클릴-아미노-C1-8알킬, 헤테로사이클릴-C1-8알킬-아미노, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)2-아미노, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 헤테로사이클릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬, 헤테로사이클릴-옥시, 헤테로사이클릴-카본일, 헤테로사이클릴-카본일-옥시, C3-14사이클로알킬, 아릴-C1-8알킬-아미노, (아릴-C1-8알킬)2-아미노, (아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 아릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (아릴-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, (아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴-C1-8알킬, 헤테로아릴-C1-8알콕시, 헤테로아릴-아미노, 헤테로아릴-C1-8알킬-아미노, (헤테로아릴-C1-8알킬)2-아미노, (헤테로아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 헤테로아릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (헤테로아릴-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬 또는 (헤테로아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬이고;
이때 헤테로사이클릴은 아제티딘일, 테트라하이드로푸란일, 피롤리딘일, 피페리딘일, 피페라진일, 1,4-다이아제판일, 1,2,5,6-테트라하이드로피리딘일, 1,2,3,6-테트라하이드로피리딘일, 헥사하이드로피롤로[3,4-b]피롤-(1H)-일, (3aS,6aS)-헥사하이드로피롤로[3,4-b]피롤-(1H)-일, (3aR,6aR)-헥사하이드로피롤로[3,4-b]피롤-(1H)-일, 헥사하이드로피롤로[3,4-b]피롤-(2H)-일, (3aS,6aS)-헥사하이드로피롤로[3,4-b]피롤-(2H)-일, 헥사하이드로피롤로[3,4-c]피롤-(1H)-일, (3aR,6aS)-헥사하이드로피롤로[3,4-c]피롤-(1H)-일, 옥타하이드로-5H-피롤로[3,2-c]피리딘일, 옥타하이드로-6H-피롤로[3,4-b]피리딘일, (4aR,7aR)-옥타하이드로-6H-피롤로[3,4-b]피리딘일, (4aS,7aS)-옥타하이드로-6H-피롤로[3,4-b]피리딘일, 헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진-(2H)-온, 헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진-(1H)-일, (7R,8aS)-헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진-(1H)-일, (8aS)-헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진-(1H)-일, (8aR)-헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진-(1H)-일, (8aS)-옥타하이드로피롤로[1,2-a]피라진-(1H)-일, (8aR)-옥타하이드로피롤로[1,2-a]피라진-(1H)-일, 옥타하이드로-2H-피리도[1,2-a]피라진일, 3-아자바이사이클로[3.1.0]헥실, (1R,5S)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥실, 8-아자바이사이클로[3.2.1]옥틸, (1R,5S)-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥틸, 8-아자바이사이클로[3.2.1]옥트-2-엔일, (1R,5S)-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥트-2-엔일, 9-아자바이사이클로[3.3.1]논일, (1R,5S)-9-아자바이사이클로[3.3.1]논일, 2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵틸, (1S,4S)-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵틸, 2,5-다이아자바이사이클로[2.2.2]옥틸, 3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥틸, (1R,5S)-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥틸, 1,4-다이아자바이사이클로[3.2.2]논일, 아자스피로[3.3]헵틸, 2,6-다이아자스피로[3.3]헵틸, 2,7-다이아자스피로[3.5]논일, 5,8-다이아자스피로[3.5]논일, 2,7-다이아자스피로[4.4]논일 및 6,9-다이아자스피로[4.5]데실로부터 선택되고; 이때 헤테로사이클릴, C3-14사이클로알킬, 아릴 및 헤테로아릴은 각각의 경우에 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환되고;
R2는 아릴, 아릴-아미노, 아릴-아미노-카본일, 헤테로사이클릴, 헤테로아릴 또는 헤테로아릴-아미노이고;
헤테로사이클릴은 1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일, 1,3-벤조다이옥솔-5-일 및 2,3-다이하이드로-1,4-벤조다이옥신-6-일로부터 선택되고;
헤테로아릴은 티엔일, 1H-피라졸릴, 1H-이미다졸릴, 1,3-티아졸릴, 1,2,4-옥사다이아졸릴, 1,3,4-옥사다이아졸릴, 피리딘일, 피리미딘일, 1H-인돌릴, 2H-인돌릴, 1H-인다졸릴, 2H-인다졸릴, 인돌리진일, 벤조푸란일, 벤조티엔일, 1H-벤즈이미다졸릴, 1,3-벤조티아졸릴, 1,3-벤족사졸릴, 9H-푸린일, 푸로[3,2-b]피리딘일, 푸로[3,2-c]피리딘일, 푸로[2,3-c]피리딘일, 티에노[3,2-c]피리딘일, 티에노[2,3-d]피리미딘일, 1H-피롤로[2,3-b]피리딘일, 1H-피롤로[2,3-c]피리딘일, 피롤로[1,2-a]피리미딘일, 피롤로[1,2-a]피라진일, 피롤로[1,2-b]피리다진일, 피라졸로[1,5-a]피리딘일, 피라졸로[1,5-a]피라진일, 이미다조[1,2-a]피리딘일, 이미다조[1,2-a]피리미딘일, 이미다조[1,2-c]피리미딘일, 이미다조[1,2-b]피리다진일, 이미다조[1,2-a]피라진일, 이미다조[2,1-b][1,3]티아졸릴, 이미다조[2,1-b][1,3,4]티아다이아졸릴, [1,3]옥사졸로[4,5-b]피리딘일 및 퀴녹사진일로부터 선택되고; 이때 헤테로사이클릴 및 헤테로아릴은 각각의 경우에 R6 및 R7 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서,
R1은 C1-8알킬, 아미노, C1-8알킬-아미노, (C1-8알킬)2-아미노, C1-8알콕시-C1-8알킬-아미노, (C1-8알콕시-C1-8알킬)2-아미노, (C1-8알콕시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 아미노-C1-8알킬, C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, C1-8알콕시-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (C1-8알콕시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, (C1-8알콕시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬, 아미노-C1-8알킬-아미노, (아미노-C1-8알킬)2-아미노, (아미노-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, C1-8알킬-아미노-C1-8알킬-아미노, (C1-8알킬-아미노-C1-8알킬)2-아미노, (C1-8알킬-아미노-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, (C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬-아미노, [(C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬](C1-8알킬)아미노, 아미노-C1-8알콕시, C1-8알킬-아미노-C1-8알콕시, (C1-8알킬)2-아미노-C1-8알콕시, C1-8알콕시-C1-8알킬-아미노-C1-8알콕시, (C1-8알콕시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알콕시, (C1-8알콕시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알콕시, 아미노-C2-8알켄일, C1-8알킬-아미노-C2-8알켄일, (C1-8알킬)2-아미노-C2-8알켄일, 아미노-C2-8알킨일, C1-8알킬-아미노-C2-8알킨일, (C1-8알킬)2-아미노-C2-8알킨일, 할로-C1-8알킬-아미노, (할로-C1-8알킬)2-아미노, (할로-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 하이드록시-C1-8알킬, 하이드록시-C1-8알콕시-C1-8알킬, 하이드록시-C1-8알킬-아미노, (하이드록시-C1-8알킬)2-아미노, (하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 하이드록시-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (하이드록시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, (하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬, 하이드록시-C1-8알킬-아미노-C1-8알콕시, (하이드록시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알콕시, (하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알콕시, 하이드록시-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬-아미노, (하이드록시-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬)2-아미노, (하이드록시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬-아미노, (하이드록시-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, (하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬-아미노, [(하이드록시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬](C1-8알킬)아미노 또는 [(하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬](C1-8알킬)아미노이고;
R2는 아릴, 아릴-아미노, 아릴-아미노-카본일, 헤테로사이클릴, 헤테로아릴 또는 헤테로아릴-아미노이고, 이때 아릴, 헤테로사이클릴 및 헤테로아릴은 각각의 경우에 R6 및 R7 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서,
R1은 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-C1-8알킬, 헤테로사이클릴-C1-8알콕시, 헤테로사이클릴-아미노, (헤테로사이클릴)(C1-8알킬)아미노, 헤테로사이클릴-아미노-C1-8알킬, 헤테로사이클릴-C1-8알킬-아미노, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)2-아미노, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 헤테로사이클릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬, 헤테로사이클릴-옥시, 헤테로사이클릴-카본일, 헤테로사이클릴-카본일-옥시, C3-14사이클로알킬, 아릴-C1-8알킬-아미노, (아릴-C1-8알킬)2-아미노, (아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 아릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (아릴-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, (아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴-C1-8알킬, 헤테로아릴-C1-8알콕시, 헤테로아릴-아미노, 헤테로아릴-C1-8알킬-아미노, (헤테로아릴-C1-8알킬)2-아미노, (헤테로아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 헤테로아릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (헤테로아릴-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬 및 (헤테로아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬로부터 선택되고; 이때 헤테로사이클릴, C3-14사이클로알킬, 아릴 및 헤테로아릴은 각각의 경우에 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환되고;
R2는 아릴, 아릴-아미노, 아릴-아미노-카본일, 헤테로사이클릴, 헤테로아릴 또는 헤테로아릴-아미노이고, 이때 아릴, 헤테로사이클릴 및 헤테로아릴은 각각의 경우에 R6 및 R7 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서,
R1은 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-C1-8알킬, 헤테로사이클릴-C1-8알콕시, 헤테로사이클릴-아미노, (헤테로사이클릴)(C1-8알킬)아미노, 헤테로사이클릴-아미노-C1-8알킬, 헤테로사이클릴-C1-8알킬-아미노, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)2-아미노, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 헤테로사이클릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬, 헤테로사이클릴-옥시, 헤테로사이클릴-카본일 또는 헤테로사이클릴-카본일-옥시이고; 이때 헤테로사이클릴은 각각의 경우에 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환되고;
R2는 아릴, 아릴-아미노, 아릴-아미노-카본일, 헤테로사이클릴, 헤테로아릴 또는 헤테로아릴-아미노이고, 이때 아릴, 헤테로사이클릴 및 헤테로아릴은 각각의 경우에 R6 및 R7 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서,
R1은 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴이고;
R2는 아릴, 아릴-아미노, 아릴-아미노-카본일, 헤테로사이클릴, 헤테로아릴 또는 헤테로아릴-아미노이고, 이때 아릴, 헤테로사이클릴 및 헤테로아릴은 각각의 경우에 R6 및 R7 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서,
R1은 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된 C3-14사이클로알킬이고;
R2는 아릴, 아릴-아미노, 아릴-아미노-카본일, 헤테로사이클릴, 헤테로아릴 또는 헤테로아릴-아미노이고, 이때 아릴, 헤테로사이클릴 및 헤테로아릴은 각각의 경우에 R6 및 R7 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서,
R1은 아릴-C1-8알킬-아미노, (아릴-C1-8알킬)2-아미노, (아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 아릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (아릴-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬 또는 (아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬이고; 이때 아릴은 각각의 경우에 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환되고;
R2는 아릴, 아릴-아미노, 아릴-아미노-카본일, 헤테로사이클릴, 헤테로아릴 또는 헤테로아릴-아미노이고, 이때 아릴, 헤테로사이클릴 및 헤테로아릴은 각각의 경우에 R6 및 R7 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서,
R1은 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된 아릴-C1-8알킬-아미노이고;
R2는 아릴, 아릴-아미노, 아릴-아미노-카본일, 헤테로사이클릴, 헤테로아릴 또는 헤테로아릴-아미노이고, 이때 아릴, 헤테로사이클릴 및 헤테로아릴은 각각의 경우에 R6 및 R7 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서,
R1은 헤테로아릴, 헤테로아릴-C1-8알킬, 헤테로아릴-C1-8알콕시, 헤테로아릴-아미노, 헤테로아릴-C1-8알킬-아미노, (헤테로아릴-C1-8알킬)2-아미노, (헤테로아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 헤테로아릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (헤테로아릴-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬 또는 (헤테로아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬이고; 이때 헤테로사이클릴, C3-14사이클로알킬, 아릴 및 헤테로아릴은 각각의 경우에 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환되고;
R2는 아릴, 아릴-아미노, 아릴-아미노-카본일, 헤테로사이클릴, 헤테로아릴 또는 헤테로아릴-아미노이고, 아릴, 헤테로사이클릴 및 헤테로아릴은 각각의 경우에 R6 및 R7 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서,
R1은 R3 및 R4 치환기로 선택적으로 치환된 헤테로아릴이고;
R2는 아릴, 아릴-아미노, 아릴-아미노-카본일, 헤테로사이클릴, 헤테로아릴 또는 헤테로아릴-아미노이고, 이때 아릴, 헤테로사이클릴 및 헤테로아릴은 각각의 경우에 R6 및 R7 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV, 화학식 V, 화학식 VI, 화학식 VII, 화학식 VIII, 화학식 IX, 화학식 X, 화학식 XI, 화학식 XII, 화학식 XIII 및 화학식 XIV의 화합물로부터 선택된 화합물 또는 이의 한 형태이다:
[화학식 II]
[화학식 III]
[화학식 IV]
[화학식 V]
[화학식 VI]
[화학식 VII]
[화학식 VIII]
[화학식 IX]
[화학식 X]
[화학식 XI]
[화학식 XII]
[화학식 XIII]
[화학식 XIV]
화학식 I의 화합물의 하나의 양태에서, w3은 C-R1이고, w6은 C-R2이고, w1, w4, w5 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, w3은 C-R2이고, w6은 C-R1이고, w1, w4, w5 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, w4는 C-R1이고, w7은 C-R2이고, w1, w3 및 w5는 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이고, w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태에서, w4는 C-R2이고, w7은 C-R1이고, w1, w3 및 w5는 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이고, w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 II의 화합물의 하나의 양태에서, w3은 C-R1이고, w6은 C-R2이고, w4, w5 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이다.
화학식 II의 화합물의 다른 양태에서, w3은 C-R2이고, w6은 C-R1이고, w4, w5 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이다.
화학식 II의 화합물의 다른 양태에서, w4는 C-R1이고, w7은 C-R2이고, w3 및 w5는 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이고, w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 II의 화합물의 다른 양태에서, w4는 C-R2이고, w7은 C-R1이고, w3 및 w5는 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이고, w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 III의 화합물의 하나의 양태에서, w3은 C-R1이고, w6은 C-R2이고, w1, w4, w5 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이다.
화학식 III의 화합물의 다른 양태에서, w3은 C-R2이고, w6은 C-R1이고, w1, w4, w5 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이다.
화학식 III의 화합물의 다른 양태에서, w4는 C-R1이고, w7은 C-R2이고, w1, w3 및 w5는 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 III의 화합물의 다른 양태에서, w4는 C-R2이고, w7은 C-R1이고, w1, w3 및 w5는 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 IV의 화합물의 하나의 양태에서, w4는 C-R1이고, w7은 C-R2이고, w1 및 w5는 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이고, w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 IV의 화합물의 다른 양태에서, w4는 C-R2이고, w7은 C-R1이고, w1 및 w5는 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이고, w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 V의 화합물의 하나의 양태에서, w3은 C-R1이고, w6은 C-R2이고, w1, w5 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이다.
화학식 V의 화합물의 다른 양태에서, w3은 C-R2이고, w6은 C-R1이고, w1, w5 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이다.
화학식 VI의 화합물의 하나의 양태에서, w3은 C-R1이고, w6은 C-R2이고, w1, w4 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이다.
화학식 VI의 화합물의 다른 양태에서, w3은 C-R2이고, w6은 C-R1이고, w1, w4 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이다.
화학식 VI의 화합물의 다른 양태에서, w4는 C-R1이고, w7은 C-R2이고, w1 및 w3은 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이고, w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 VI의 화합물의 다른 양태에서, w4는 C-R2이고, w7은 C-R1이고, w1 및 w3은 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이고, w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 VII의 화합물의 다른 양태에서, w4는 C-R1이고, w7은 C-R2이고, w1, w3 및 w5는 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이다.
화학식 VII의 화합물의 다른 양태에서, w4는 C-R2이고, w7은 C-R1이고, w1, w3 및 w5는 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이다.
화학식 VIII의 화합물의 다른 양태에서, w3은 C-R1이고, w6은 C-R2이고, w1, w4 및 w5는 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이다.
화학식 VIII의 화합물의 다른 양태에서, w3은 C-R2이고, w6은 C-R1이고, w1, w4 및 w5는 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이다.
화학식 IX의 화합물의 다른 양태에서, w3은 C-R1이고, w6은 C-R2이고, w4 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이다.
화학식 IX의 화합물의 다른 양태에서, w3은 C-R2이고, w6은 C-R1이고, w4 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이다.
화학식 IX의 화합물의 다른 양태에서, w4는 C-R1이고, w7은 C-R2이고, w2는 C-Rb 또는 N이고, w3은 C-Ra 또는 N이고, w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 IX의 화합물의 다른 양태에서, w4는 C-R2이고, w7은 C-R1이고, w2는 C-Rb 또는 N이고, w3은 C-Ra 또는 N이고, w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 X의 화합물의 다른 양태에서, w3은 C-R1이고, w6은 C-R2이고, w2는 C-Rb 또는 N이고, w5 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이다.
화학식 X의 화합물의 다른 양태에서, w3은 C-R2이고, w6은 C-R1이고, w2는 C-Rb 또는 N이고, w5 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이다.
화학식 XI의 화합물의 다른 양태에서, w4는 C-R1이고, w7은 C-R2이고, w2는 C-Rb 또는 N이고, w5는 C-Ra 또는 N이고, w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 XI의 화합물의 다른 양태에서, w4는 C-R2이고, w7은 C-R1이고, w2는 C-Rb 또는 N이고, w5는 C-Ra 또는 N이고, w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 XII의 화합물의 다른 양태에서, w3은 C-R1이고, w6은 C-R2이고, w4, w5 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이다.
화학식 XII의 화합물의 다른 양태에서, w3은 C-R2이고, w6은 C-R1이고, w4, w5 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이다.
화학식 XII의 화합물의 다른 양태에서, w4는 C-R1이고, w7은 C-R2이고, w3 및 w5는 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 XII의 화합물의 다른 양태에서, w4는 C-R2이고, w7은 C-R1이고, w3 및 w5는 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 XIII의 화합물의 다른 양태에서, w3은 C-R1이고, w6은 C-R2이고, w2는 C-Rb 또는 N이고, w4 및 w5는 독립적으로 C-Ra 또는 N이다.
화학식 XIII의 화합물의 다른 양태에서, w3은 C-R2이고, w6은 C-R1이고, w2는 C-Rb 또는 N이고, w4 및 w5는 독립적으로 C-Ra 또는 N이다.
화학식 XIV의 화합물의 다른 양태에서, w4는 C-R1이고, w7은 C-R2이고, w2는 C-Rb 또는 N이고, w3 및 w5는 독립적으로 C-Ra 또는 N이다.
화학식 XIV의 화합물의 다른 양태에서, w4는 C-R2이고, w7은 C-R1이고, w2는 C-Rb 또는 N이고, w3 및 w5는 독립적으로 C-Ra 또는 N이다.
화학식 I의 화합물의 다른 양태는 하기 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IX, 화학식 XI 및 화학식 XII의 화합물로부터 선택된 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 II
화학식 III
화학식 IX
화학식 XI
화학식 XII
화학식 I의 화합물의 다른 양태는 하기 화학식 II의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 II
화학식 I의 화합물의 다른 양태는 하기 화학식 III의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 III
화학식 I의 화합물의 다른 양태는 하기 화학식 IV의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 IV
화학식 I의 화합물의 다른 양태는 하기 화학식 V의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 V
화학식 I의 화합물의 다른 양태는 하기 화학식 VI의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 VI
화학식 I의 화합물의 다른 양태는 하기 화학식 VII의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 VII
화학식 I의 화합물의 다른 양태는 하기 화학식 VIII의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 VIII
화학식 I의 화합물의 다른 양태는 하기 화학식 IX의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 IX
화학식 I의 화합물의 다른 양태는 하기 화학식 X의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 X
화학식 I의 화합물의 다른 양태는 하기 화학식 XI의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 XI
화학식 I의 화합물의 다른 양태는 하기 화학식 XII의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 XII
화학식 I의 화합물의 다른 양태는 하기 화학식 XIII의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 XIII
화학식 I의 화합물의 다른 양태는 하기 화학식 XIV의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 XIV
화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV, 화학식 V, 화학식 VI, 화학식 VII, 화학식 VIII, 화학식 IX, 화학식 X, 화학식 XI, 화학식 XII, 화학식 XIII 또는 화학식 XIV의 화합물의 하나의 양태는 각각 하기 화학식 Ia, 화학식 IIa, 화학식 IIIa, 화학식 IVa, 화학식 Va, 화학식 VIa, 화학식 VIIa, 화학식 VIIIa, 화학식 IXa, 화학식 Xa, 화학식 XIa, 화학식 XIIa, 화학식 XIIIa 및 화학식 XIVa의 화합물로부터 선택된 화합물 또는 이의 한 형태이다:
[화학식 Ia]
[화학식 IIa]
[화학식 IIIa]
[화학식 IVa]
[화학식 Va]
[화학식 VIa]
[화학식 VIIa]
[화학식 VIIIa]
[화학식 IXa]
[화학식 Xa]
[화학식 XIa]
[화학식 XIIa]
[화학식 XIIIa]
[화학식 XIVa]
화학식 Ia의 화합물의 하나의 양태에서, w3, w4, w6 및 w7 중 하나는 C-R1이고 w3, w4, w6 및 w7 중 다른 하나는 C-R2이되,
w3이 C-R1일 때, w6은 C-R2이고 w4 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이거나;
w3이 C-R2일 때, w6은 C-R1이고 w4 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이거나;
w4가 C-R1일 때, w7은 C-R2이고 w3은 C-Ra 또는 N이고 w6은 C-Rc 또는 N이거나;
w4가 C-R2일 때, w7은 C-R1이고 w3은 C-Ra 또는 N이고 w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 IIa의 화합물의 하나의 양태에서, w3, w4, w6 및 w7 중 하나는 C-R1이고 w3, w4, w6 및 w7 중 다른 하나는 C-R2이되,
w3이 C-R1일 때, w6은 C-R2이고 w4 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이거나;
w3이 C-R2일 때, w6은 C-R1이고 w4 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이거나;
w4가 C-R1일 때, w7은 C-R2이고 w3은 C-Ra 또는 N이고 w6은 C-Rc 또는 N이거나;
w4가 C-R2일 때, w7은 C-R1이고 w3은 C-Ra 또는 N이고 w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 IIIa의 화합물의 하나의 양태에서, w3, w4, w6 및 w7 중 하나는 C-R1이고 w3, w4, w6 및 w7 중 다른 하나는 C-R2이되,
w3이 C-R1일 때, w6은 C-R2이고 w4 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이거나;
w3이 C-R2일 때, w6은 C-R1이고 w4 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이거나;
w4가 C-R1일 때, w7은 C-R2이고 w3은 C-Ra 또는 N이고 w6은 C-Rc 또는 N이거나;
w4가 C-R2일 때, w7은 C-R1이고 w3은 C-Ra 또는 N이고 w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 IVa의 화합물의 하나의 양태에서, w4 및 w7 중 하나는 C-R1이고, 나머지는 C-R2이되, w4가 C-R1일 때, w7은 C-R2이거나; w4가 C-R2일 때, w7은 C-R1이다.
화학식 Va의 화합물의 하나의 양태에서, w3 및 w6 중 하나는 C-R1이고, 나머지는 C-R2이되, w3이 C-R1일 때, w6은 C-R2이거나; w3이 C-R2일 때, w6은 C-R1이다.
화학식 VIa의 화합물의 하나의 양태에서, w3, w4, w6 및 w7 중 하나는 C-R1이고, w3, w4, w6 및 w7 중 다른 하나는 C-R2이되,
w3이 C-R1일 때, w6은 C-R2이고 w4 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이거나;
w3이 C-R2일 때, w6은 C-R1이고 w4 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이거나;
w4가 C-R1일 때, w7은 C-R2이고 w3은 C-Ra 또는 N이고 w6은 C-Rc 또는 N이거나;
w4가 C-R2일 때, w7은 C-R1이고 w3은 C-Ra 또는 N이고 w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 VIIa의 화합물의 하나의 양태에서, w4 및 w7 중 하나는 C-R1이고, 나머지는 C-R2이되, w4가 C-R1일 때, w7은 C-R2이거나; w4가 C-R2일 때, w7은 C-R1이다.
화학식 VIIIa의 화합물의 하나의 양태에서, w3 및 w6 중 하나는 C-R1이고, 나머지는 C-R2이되, w3이 C-R1일 때, w6은 C-R2이거나; w3이 C-R2일 때, w6은 C-R1이다.
화학식 IXa의 화합물의 하나의 양태에서, w3, w4, w6 및 w7 중 하나는 C-R1이고 w3, w4, w6 및 w7 중 다른 하나는 C-R2이되,
w3이 C-R1일 때, w6은 C-R2이고 w4 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이거나;
w3이 C-R2일 때, w6은 C-R1이고 w4 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이거나;
w4가 C-R1일 때, w7은 C-R2이고 w3은 C-Ra 또는 N이고 w6은 C-Rc 또는 N이거나;
w4가 C-R2일 때, w7은 C-R1이고 w3은 C-Ra 또는 N이고 w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 Xa의 화합물의 하나의 양태에서, w3 및 w6 중 하나는 C-R1이고, 나머지는 C-R2이되, w3이 C-R1일 때, w6은 C-R2이거나; w3이 C-R2일 때, w6은 C-R1이다.
화학식 XIa의 화합물의 하나의 양태에서, w4 및 w7 중 하나는 C-R1이고, 나머지는 C-R2이되, w4가 C-R1일 때, w7은 C-R2이거나; w4가 C-R2일 때, w7은 C-R1이다.
화학식 XIIa의 화합물의 하나의 양태에서, w3, w4, w6 및 w7 중 하나는 C-R1이고 w3, w4, w6 및 w7 중 다른 하나는 C-R2이되,
w3이 C-R1일 때, w6은 C-R2이고 w4 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이거나;
w3이 C-R2일 때, w6은 C-R1이고 w4 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이거나;
w4가 C-R1일 때, w7은 C-R2이고 w3은 C-Ra 또는 N이고 w6은 C-Rc 또는 N이거나;
w4가 C-R2일 때, w7은 C-R1이고 w3은 C-Ra 또는 N이고 w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 XIIIa의 화합물의 하나의 양태에서, w3 및 w6 중 하나는 C-R1이고, 나머지는 C-R2이되, w3이 C-R1일 때, w6은 C-R2이거나; w3이 C-R2일 때, w6은 C-R1이다.
화학식 XIVa의 화합물의 하나의 양태에서, w4 및 w7 중 하나는 C-R1이고, 나머지는 C-R2이되, w4가 C-R1일 때, w7은 C-R2이거나; w4가 C-R2일 때, w7은 C-R1이다.
화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IX, 화학식 XI 또는 화학식 XII의 화합물의 하나의 양태는 각각 하기 화학식 Ia, 화학식 IIa, 화학식 IIIa, 화학식 IXa, 화학식 XIa 및 화학식 XIIa로부터 선택된 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 Ia
화학식 IIa
화학식 IIIa
화학식 IXa
화학식 XIa
화학식 XIIa
화학식 I의 화합물의 다른 양태는 하기 화학식 Ia의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 Ia
화학식 II의 화합물의 다른 양태는 하기 화학식 IIa의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 IIa
화학식 III의 화합물의 다른 양태는 하기 화학식 IIIa의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 IIIa
화학식 IV의 화합물의 다른 양태는 하기 화학식 IVa의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 IVa
화학식 V의 화합물의 다른 양태는 하기 화학식 Va의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 Va
화학식 VI의 화합물의 다른 양태는 하기 화학식 VIa의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 VIa
화학식 VII의 화합물의 다른 양태는 하기 화학식 VIIa의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 VIIa
화학식 VIII의 화합물의 다른 양태는 하기 화학식 VIIIa의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 VIIIa
화학식 IX의 화합물의 다른 양태는 하기 화학식 IXa의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 IXa
화학식 X의 화합물의 다른 양태는 하기 화학식 Xa의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 Xa
화학식 XI의 화합물의 다른 양태는 하기 화학식 XIa의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 XIa
화학식 XII의 화합물의 다른 양태는 하기 화학식 XIIa의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 XIIa
화학식 XIII의 화합물의 다른 양태는 하기 화학식 XIIIa의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 XIIIa
화학식 XIV의 화합물의 다른 양태는 하기 화학식 XIVa의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 XIVa
화학식 Ia의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 Ia1, 화학식 Ia2, 화학식 Ia3 또는 화학식 Ia4의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
[화학식 Ia1]
[화학식 Ia2]
[화학식 Ia3]
[화학식 Ia4]
화학식 IIa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 IIa1, 화학식 IIa2, 화학식 IIa3 또는 화학식 IIa4의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
[화학식 IIa1]
[화학식 IIa2]
[화학식 IIa3]
[화학식 IIa4]
화학식 IIIa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 IIIa1, 화학식 IIIa2, 화학식 IIIa3 또는 화학식 IIIa4의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
[화학식 IIIa1]
[화학식 IIIa2]
[화학식 IIIa3]
[화학식 IIIa4]
화학식 IVa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 IVa1 또는 화학식 IVa2의 화합물 또는 이의 한 형태를 포함한다:
[화학식 IVa1]
[화학식 IVa2]
화학식 Va의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 Va1 또는 화학식 Va2의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
[화학식 Va1]
[화학식 Va2]
화학식 VIa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 VIa1, 화학식 VIa2, 화학식 VIa3 또는 화학식 VIa4의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
[화학식 VIa1]
[화학식 VIa2]
[화학식 VIa3]
[화학식 VIa4]
화학식 VIIa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 VIIa1 또는 화학식 VIIa2의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
[화학식 VIIa1]
[화학식 VIIa2]
화학식 VIIIa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 VIIIa1 또는 화학식 VIIIa2의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
[화학식 VIIIa1]
[화학식 VIIIa2]
화학식 IXa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 IXa1, 화학식 IXa2, 화학식 IXa3 또는 화학식 IXa4의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
[화학식 IXa1]
[화학식 IXa2]
[화학식 IXa3]
[화학식 IXa4]
화학식 Xa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 Xa1 또는 화학식 Xa2의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
[화학식 Xa1]
[화학식 Xa2]
화학식 XIa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 XIa1 또는 화학식 XIa2의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
[화학식 XIa1]
[화학식 XIa2]
화학식 XIIa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 XIIa1, 화학식 XIIa2, 화학식 XIIa3 또는 화학식 XIIa4의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
[화학식 XIIa1]
[화학식 XIIa2]
[화학식 XIIa3]
[화학식 XIIa4]
화학식 XIIIa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 XIIIa1 또는 화학식 XIIIa2의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
[화학식 XIIIa1]
[화학식 XIIIa2]
화학식 XIVa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 XIVa1 또는 화학식 XIVa2의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
[화학식 XIVa1]
[화학식 XIVa2]
화학식 Ia의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 Ia1의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 Ia1
화학식 Ia의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 Ia2의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 Ia2
화학식 Ia의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 Ia3의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 Ia3
화학식 Ia의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 Ia4의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 Ia4
화학식 IIa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 IIa1의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 IIa1
화학식 IIa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 IIa2의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 IIa2
화학식 IIa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 IIa3의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 IIa3
화학식 IIa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 IIa4의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 IIa4
화학식 IIIa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 IIIa1의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 IIIa1
화학식 IIIa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 IIIa2의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 IIIa2
화학식 IIIa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 IIIa3의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 IIIa3
화학식 IIIa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 IIIa4의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 IIIa4
화학식 IVa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 IVa1의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 IVa1
화학식 IVa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 IVa2의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 IVa2
화학식 Va의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 Va1의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 Va1
화학식 Va의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 Va2의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 Va2
화학식 VIa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 VIa1의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 VIa1
화학식 VIa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 VIa2의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 VIa2
화학식 VIa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 VIa3의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 VIa3
화학식 VIa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 VIa4의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 VIa4
화학식 VIIa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 VIIa1의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 VIIa1
화학식 VIIa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 VIIa2의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 VIIa2
화학식 VIIIa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 VIIIa1의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 VIIIa1
화학식 VIIIa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 VIIIa2의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 VIIIa2
화학식 IXa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 IXa1의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 IXa1
화학식 IXa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 IXa2의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 IXa2
화학식 IXa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 IXa3의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 IXa3
화학식 IXa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 IXa4의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 IXa4
화학식 Xa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 Xa1의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 Xa1
화학식 Xa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 Xa2의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 Xa2
화학식 XIa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 XIa1의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 XIa1
화학식 XIa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 XIa2의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 XIa2
화학식 XIIa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 XIIa1의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 XIIa1
화학식 XIIa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 XIIa2의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 XIIa2
화학식 XIIa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 XIIa3의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 XIIa3
화학식 XIIa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 XIIa4의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 XIIa4
화학식 XIIIa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 XIIIa1의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 XIIIa1
화학식 XIIIa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 XIIIa2의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 XIIIa2
화학식 XIVa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 XIVa1의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 XIVa1
화학식 XIVa의 화합물의 하나의 양태는 하기 화학식 XIVa2의 화합물 또는 이의 한 형태이다:
화학식 XIVa2
화학식 I의 화합물의 하나의 양태는
로 이루어진 군으로부터 선택된 화합물 또는 이의 한 형태이다.
용어
상기 및 본원의 설명 전체에 걸쳐 사용된 화학 용어들은, 특별히 달리 정의되지 않는 한, 당해 분야에 통상의 기술을 가진 자에 의해 하기에 나타낸 의미를 갖는 것으로 이해된다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "C1-8알킬"은 일반적으로, 메틸, 에틸, n-프로필(프로필 또는 프로판일로도 지칭됨), 이소프로필, n-부틸(부틸 또는 부탄일로도 지칭됨), 이소부틸, 2급-부틸, 3급-부틸, n-펜틸(펜틸 또는 펜탄일로도 지칭됨), n-헥실(헥실 또는 헥산일로도 지칭됨), n-헵틸(헵틸 또는 헵탄일로도 지칭됨), n-옥틸 등을 포함하여(이로 한정되지는 않는다), 직쇄 또는 분지쇄 구조로 1 내지 8개의 탄소 원자를 갖는 포화 탄화수소 라디칼을 말한다. 일부 양태에서, C1-8알킬은 C1-6알킬, C1-4알킬 등을 포함하나, 이로 한정되지는 않는다. C1-8알킬 라디칼은 이용가능한 원자가에 의해 허용되는 경우 본원에 기술된 바와 같은 치환기 종으로 선택적으로 치환된다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "C2-8알켄일"은 일반적으로, 에텐일(비닐로도 지칭됨), 알릴, 프로펜일 등을 포함하여(이로 한정되지는 않는다), 직쇄 또는 분지쇄 구조로 2 내지 8개의 탄소 원자 및 그 안에 하나 이상의 탄소-탄소 이중 결합을 갖는 부분적으로 불포화된 탄화수소 라디칼을 말한다. 일부 양태에서, C2-8알켄일은 C2-6알켄일, C2-4알켄일 등을 포함하나, 이로 한정되지는 않는다. C2-8알켄일 라디칼은 이용가능한 원자가에 의해 허용되는 경우 본원에 기술된 바와 같은 치환기 종으로 선택적으로 치환된다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "C2-8알킨일"은 일반적으로, 에틴일, 프로핀일, 부틴일 등을 포함하여(이로 한정되지는 않는다), 직쇄 또는 분지쇄 구조로 2 내지 8개의 탄소 원자 및 그 안에 하나 이상의 탄소-탄소 3중 결합을 갖는 부분적으로 불포화된 탄화수소 라디칼을 말한다. 일부 양태에서, C2-8알킨일은 C2-6알킨일, C2-4알킨일 등을 포함하나, 이로 한정되지는 않는다. C2-8알킨일 라디칼은 이용가능한 원자가에 의해 허용되는 경우 본원에 기술된 바와 같은 치환기 종으로 선택적으로 치환된다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "C1-8알콕시"는 일반적으로, 메톡시, 에톡시, n-프로폭시, 이소프로폭시, n-부톡시, 이소부톡시, 2급-부톡시, 3급-부톡시, n-펜톡시, n-헥속시 등을 포함하여(이로 한정되지는 않는다), 식 -O-C1-8알킬의 직쇄 또는 분지쇄 구조로 1 내지 8개의 탄소 원자를 갖는 포화 탄화수소 라디칼을 말한다. 일부 양태에서, C1-8알콕시는 C1-6알콕시, C1-4알콕시 등을 포함하나, 이로 한정되지는 않는다. C1-8알콕시 라디칼은 이용가능한 원자가에 의해 허용되는 경우 본원에 기술된 바와 같은 치환기 종으로 선택적으로 치환된다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "C3-14사이클로알킬"은 일반적으로, 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로헥센일, 사이클로헵틸, 사이클로옥틸, 1H-인단일, 인덴일, 테트라하이드로-나프탈렌일 등을 포함하여(이로 한정되지는 않는다), 포화 또는 부분 불포화 모노사이클릭, 바이사이클릭 또는 폴리사이클릭 탄화수소 라디칼을 말한다. 일부 양태에서, C3-14사이클로알킬은 C3-8사이클로알킬, C5-8사이클로알킬, C3-10사이클로알킬 등을 포함하나, 이로 한정되지는 않는다. C3-14사이클로알킬 라디칼은 이용가능한 원자가에 의해 허용되는 경우 본원에 기술된 바와 같은 치환기 종으로 선택적으로 치환된다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "아릴"은 일반적으로, 페닐, 나프틸, 안트라센일, 플루오렌일, 아줄렌일, 페난트렌일 등을 포함하여(이로 한정되지는 않는다), 모노사이클릭, 바이사이클릭 또는 폴리사이클릭 방향족 탄소 원자 고리 구조 라디칼을 말한다. 아릴 라디칼은 이용가능한 원자가에 의해 허용되는 경우 본원에 기술된 바와 같은 치환기 종으로 선택적으로 치환된다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "헤테로아릴"은 일반적으로, 하나 이상의 탄소 원자 고리 구성원이, 구조 안정성에 의해 허용되는 경우, O, S 또는 N 원자와 같은 하나 이상의 헤테로원자로 치환된 모노사이클릭, 바이사이클릭 또는 폴리사이클릭 방향족 탄소 원자 고리 구조 라디칼을 말하며, 푸란일(푸릴로도 지칭됨), 티엔일(티오페닐로도 지칭됨), 피롤릴, 2H-피롤릴, 3H-피롤릴, 피라졸릴, 1H-피라졸릴, 이미다졸릴, 1H-이미다졸릴, 이속사졸릴, 이소티아졸릴, 옥사졸릴, 1,3-티아졸릴, 트라이아졸릴(예를 들면, 1H-1,2,3-트라이아졸릴 등), 옥사다이아졸릴(예를 들면, 1,2,4-옥사다이아졸릴, 1,3,4-옥사다이아졸릴 등), 티아다이아졸릴, 테트라졸릴(예를 들면, 1H-테트라졸릴, 2H-테트라졸릴 등), 피리딘일(피리딜로도 지칭됨), 피리미딘일, 피라진일, 피리다진일, 트리아진일, 인돌릴, 1H-인돌릴, 인다졸릴, 1H-인다졸릴, 2H-인다졸릴, 인돌리진일, 이소인돌릴, 벤조푸란일, 벤조티엔일(벤조티오페닐로도 지칭됨), 벤조이미다졸릴, 1H-벤조이미다졸릴, 1,3-벤조티아졸릴, 1,3-벤족사졸릴(1,3-벤조옥사졸릴로도 지칭됨), 푸린일, 9H-푸린일, 퀴놀린일, 이소퀴놀린일, 퀴나졸린일, 퀴녹살린일, 1,3-다이아진일, 1,2-다이아진일, 1,2-다이아졸릴, 1,4-다이아자나프탈렌일, 아크리딘일, 푸로[3,2-b]피리딘일, 푸로[3,2-c]피리딘일, 푸로[2,3-c]피리딘일, 6H-티에노[2,3-b]피롤릴, 티에노[3,2-c]피리딘일, 티에노[2,3-d]피리미딘일, 1H-피롤로[2,3-b]피리딘일, 1H-피롤로[2,3-c]피리딘일, 1H-피롤로[3,2-b]피리딘일, 피롤로[1,2-a]피라진일, 피롤로[1,2-b]피리다진일, 피라졸로[1,5-a]피리딘일, 피라졸로[1,5-a]피라진일, 이미다조[1,2-a]피리딘일, 3H-이미다조[4,5-b]피리딘일, 이미다조[1,2-a]피리미딘일, 이미다조[1,2-c]피리미딘일, 이미다조[1,2-b]피리다진일, 이미다조[1,2-a]피라진일, 이미다조[2,1-b][1,3]티아졸릴, 이미다조[2,1-b][1,3,4]티아다이아졸릴, [1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피리딘일, [1,2,4]트라이아졸로[4,3-a]피리딘일 등을 포함하나, 이로 한정되지는 않는다. 헤테로아릴 라디칼은 이용가능한 원자가에 의해 허용되는 경우 본원에 기술된 바와 같은 치환기 종으로 탄소 또는 질소 원자 고리 구성원 상에서 선택적으로 치환된다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "헤테로사이클릴"은 일반적으로, 하나 이상의 탄소 원자 고리 구성원이, 구조 안정성에 의해 허용되는 경우, O, S 또는 N 원자와 같은 헤테로원자로 치환된, 포화되거나 부분적으로 불포화된 모노사이클릭, 바이사이클릭 또는 폴리사이클릭 탄소 원자 고리 구조 라디칼을 말하며, 옥시란일, 옥세탄일, 아제티딘일, 테트라하이드로푸란일, 피롤린일, 피롤리딘일, 피라졸린일, 피라졸리딘일, 이미다졸린일, 이미다졸리딘일, 이속사졸린일, 이속사졸리딘일, 이소티아졸린일, 이소티아졸리딘일, 옥사졸린일, 옥사졸리딘일, 티아졸린일, 티아졸리딘일, 트라이아졸린일, 트라이아졸리딘일, 옥사다이아졸린일, 옥사다이아졸리딘일, 티아다이아졸린일, 티아다이아졸리딘일, 테트라졸린일, 테트라졸리딘일, 피란일, 다이하이드로-2H-피란일, 티오피란일, 1,3-다이옥산일, 1,2,5,6-테트라하이드로피리딘일, 1,2,3,6-테트라하이드로피리딘일, 피페리딘일, 피페라진일, 모폴린일, 티오모폴린일, 1,4-다이아제판일, 1,3-벤조다이옥솔릴(벤조[d][1,3]다이옥솔릴로도 지칭됨), 1,4-벤조다이옥산일, 2,3-다이하이드로-1,4-벤조다이옥신일(2,3-다이하이드로벤조[b][1,4]다이옥신일로도 지칭됨), 헥사하이드로피롤로[3,4-b]피롤-(1H)-일, (3aS,6aS)-헥사하이드로피롤로[3,4-b]피롤-(1H)-일, (3aR,6aR)-헥사하이드로피롤로[3,4-b]피롤-(1H)-일, 헥사하이드로피롤로[3,4-b]피롤-(2H)-일, (3aS,6aS)-헥사하이드로피롤로[3,4-b]피롤-(2H)-일, (3aR,6aR)-헥사하이드로피롤로[3,4-b]피롤-(2H)-일, 헥사하이드로피롤로[3,4-c]피롤-(1H)-일, (3aR,6aS)-헥사하이드로피롤로[3,4-c]피롤-(1H)-일, (3aR,6aR)-헥사하이드로피롤로[3,4-c]피롤-(1H)-일, 옥타하이드로-5H-피롤로[3,2-c]피리딘일, 옥타하이드로-6H-피롤로[3,4-b]피리딘일, (4aR,7aR)-옥타하이드로-6H-피롤로[3,4-b]피리딘일, (4aS,7aS)-옥타하이드로-6H-피롤로[3,4-b]피리딘일, 헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진-(1H)-일, (7R,8aS)-헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진-(1H)-일, (8aS)-헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진-(1H)-일, (8aR)-헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진-(1H)-일, (8aS)-옥타하이드로피롤로[1,2-a]피라진-(1H)-일, (8aR)-옥타하이드로피롤로[1,2-a]피라진-(1H)-일, 헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진-(2H)-온, 옥타하이드로-2H-피리도[1,2-a]피라진일, 3-아자바이사이클로[3.1.0]헥실, (1R,5S)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥실, 8-아자바이사이클로[3.2.1]옥틸, (1R,5S)-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥틸, 8-아자바이사이클로[3.2.1]옥트-2-엔일, (1R,5S)-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥트-2-엔일, 9-아자바이사이클로[3.3.1]논일, (1R,5S)-9-아자바이사이클로[3.3.1]논일, 2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵틸, (1S,4S)-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵틸, 2,5-다이아자바이사이클로[2.2.2]옥틸, 3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥틸, (1R,5S)-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥틸, 1,4-다이아자바이사이클로[3.2.2]논일, 아자스피로[3.3]헵틸, 2,6-다이아자스피로[3.3]헵틸, 2,7-다이아자스피로[3.5]논일, 5,8-다이아자스피로[3.5]논일, 2,7-다이아자스피로[4.4]논일, 6,9-다이아자스피로[4.5]데실 등을 포함하나, 이로 한정되지는 않는다. 헤테로아릴 라디칼은 이용가능한 원자가에 의해 허용되는 경우 본원에 기술된 바와 같은 치환기 종으로 탄소 또는 질소 원자 고리 구성원 상에서 선택적으로 치환된다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "C1-8알콕시-C1-8알킬"은 식 -C1-8알킬-O-C1-8알킬의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "C1-8알콕시-C1-8알킬-아미노"는 식 -NH-C1-8알킬-O-C1-8알킬의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "(C1-8알콕시-C1-8알킬)2-아미노"는 식 -N(C1-8알킬-O-C1-8알킬)2의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "C1-8알콕시-C1-8알킬-아미노-C1-8알콕시"는 식 -O-C1-8알킬-NH-C1-8알킬-O-C1-8알킬의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "(C1-8알콕시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알콕시"는 식 -O-C1-8알킬-N(C1-8알킬-O-C1-8알킬)2의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "(C1-8알콕시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알콕시"는 식 -O-C1-8알킬-N(C1-8알킬)(C1-8알킬-O-C1-8알킬)의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "C1-8알콕시-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬"은 식 -C1-8알킬-NH-C1-8알킬-O-C1-8알킬의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "(C1-8알콕시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬"은 식 -C1-8알킬-N(C1-8알킬-O-C1-8알킬)2의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "(C1-8알콕시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬"은 식 -C1-8알킬-N(C1-8알킬)(C1-8알킬-O-C1-8알킬)의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "C1-8알콕시-카본일"은 식 -C(O)-O-C1-8알킬의 라디칼을 말한다.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "C1-8알콕시-카본일-C2-8알켄일"은 식 -C2-8알켄일-C(O)O-C1-8알킬의 라디칼을 지칭한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "C1-8알콕시-카본일-아미노"는 식 -NH-C(O)-O-C1-8알킬의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "C1-8알킬-아미노"는 식 -NH-C1-8알킬의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "(C1-8알킬)2-아미노"는 식 -N(C1-8알킬)2의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "C1-8알킬-아미노-C2-8알켄일"은 식 -C2-8알켄일-NH-C1-8알킬의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "(C1-8알킬)2-아미노-C2-8알켄일"은 식 -C2-8알켄일-N(C1-8알킬)2의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "C1-8알킬-아미노-C1-8알콕시"는 식 -O-C1-8알킬-NH-C1-8알킬의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "(C1-8알킬)2-아미노-C1-8알콕시"는 식 -O-C1-8알킬-N(C1-8알킬)2의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "C1-8알킬-아미노-C1-8알킬"은 식 -C1-8알킬-NH-C1-8알킬의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "(C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬"은 식 -C1-8알킬-N(C1-8알킬)2의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "C1-8알킬-아미노-C1-8알킬-아미노"는 식 -NH-C1-8알킬-NH-C1-8알킬의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "(C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬-아미노"는 식 -NH-C1-8알킬-N(C1-8알킬)2의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "(C1-8알킬-아미노-C1-8알킬)2-아미노"는 식 -N(C1-8알킬-NH-C1-8알킬)2의 라디칼을 말한다.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "[(C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬]2-아미노"는 식 -N[C1-8알킬-N(C1-8알킬)2]2의 라디칼을 지칭한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "(C1-8알킬-아미노-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노"는 식 -N(C1-8알킬)(C1-8알킬-NH-C1-8알킬)의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "[(C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬](C1-8알킬)아미노"는 식 -N(C1-8알킬)[C1-8알킬-N(C1-8알킬)2]의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "C1-8알킬-아미노-C2-8알킨일"은 식 -C2-8알킨일-NH-C1-8알킬의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "(C1-8알킬)2-아미노-C2-8알킨일"은 식 -C2-8알킨일-N(C1-8알킬)2의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "C1-8알킬-카본일"은 식 -C(O)-C1-8알킬의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "C1-8알킬-카본일-아미노"는 식 -NH-C(O)-C1-8알킬의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "C1-8알킬-티오"는 식 -S-C1-8알킬의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "아미노-C2-8알켄일"은 식 -C2-8알켄일-NH2의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "아미노-C1-8알콕시"는 식 -O-C1-8알킬-NH2의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "아미노-C1-8알킬"은 식 -C1-8알킬-NH2의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "아미노-C1-8알킬-아미노"는 식 -NH-C1-8알킬-NH2의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "(아미노-C1-8알킬)2-아미노"는 식 -N(C1-8알킬-NH2)2의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "(아미노-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노"는 식 -N(C1-8알킬)(C1-8알킬-NH2)의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "아미노-C2-8알킨일"은 식 -C2-8알킨일-NH2의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "아릴-C1-8알콕시-카본일"은 식 -C(O)-O-C1-8알킬-아릴의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "아릴-C1-8알킬"은 식 -C1-8알킬-아릴의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "아릴-C1-8알킬-아미노"는 식 -NH-C1-8알킬-아릴의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "(아릴-C1-8알킬)2-아미노"는 식 -N(C1-8알킬-아릴)2의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "(아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노"는 식 -N(C1-8알킬)(C1-8알킬-아릴)의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "아릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬"은 식 -C1-8알킬-NH-C1-8알킬-아릴의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "(아릴-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬"은 식 -C1-8알킬-N(C1-8알킬-아릴)2의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "(아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬"은 식 -C1-8알킬-N(C1-8알킬)(C1-8알킬-아릴)의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "아릴-아미노"는 식 -NH-아릴의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "아릴-아미노-카본일"은 식 -C(O)-NH-아릴의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "아릴-설폰일옥시-C1-8알킬"은 식 -C1-8알킬-O-SO2-아릴의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "벤즈옥시-카본일"은 식 -C(O)-O-CH2-페닐의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "C3-14사이클로알킬-C1-8알킬"은 식 -C1-8알킬-C3-14사이클로알킬의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "C3-14사이클로알킬-아미노"는 식 -NH-C3-14사이클로알킬의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "C3-14사이클로알킬-옥시"는 식 -O-C3-14사이클로알킬의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "할로" 또는 "할로겐"은 일반적으로 플루오로, 클로로, 브로모 및 요오도롤 포함하여 할로겐 원자를 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "할로-C1-8알콕시"는 식 -O-C1-8알킬-할로의 라디칼을 말하며, 이때 C1-8알킬은 이용가능한 원자가에 의해 허용되는 경우 하나 이상의 할로겐 원자로 부분적으로 또는 완전히 치환된다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "할로-C1-8알킬"은 식 -C1-8알킬-할로의 라디칼을 말하며, 이때 C1-8알킬은 이용가능한 원자가에 의해 허용되는 경우 하나 이상의 할로겐 원자로 부분적으로 또는 완전히 치환된다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "할로-C1-8알킬-아미노"는 식 -NH-C1-8알킬-할로의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "(할로-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노"는 식 -N(C1-8알킬)(C1-8알킬-할로)의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "(할로-C1-8알킬)2-아미노"는 식 -N(C1-8알킬-할로)2의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "헤테로아릴-C1-8알콕시"는 식 -O-C1-8알킬-헤테로아릴의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "헤테로아릴-C1-8알킬"은 식 -C1-8알킬-헤테로아릴의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "헤테로아릴-C1-8알킬-아미노"는 식 -NH-C1-8알킬-헤테로아릴의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "(헤테로아릴-C1-8알킬)2-아미노"는 식 -N(C1-8알킬-헤테로아릴)2의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "(헤테로아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노"는 식 -N(C1-8알킬)(C1-8알킬-헤테로아릴)의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "헤테로아릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬"은 식 -C1-8알킬-NH-C1-8알킬-헤테로아릴의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "(헤테로아릴-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬"은 식 -C1-8알킬-N(C1-8알킬-헤테로아릴)2의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "(헤테로아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬"은 식 -C1-8알킬-N(C1-8알킬)(C1-8알킬-헤테로아릴)의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "헤테로아릴-아미노"는 식 -NH-헤테로아릴의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "헤테로사이클릴-C1-8알콕시"는 식 -O-C1-8알킬-헤테로사이클릴의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "헤테로사이클릴-C1-8알킬"은 식 -C1-8알킬-헤테로사이클릴의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "헤테로사이클릴-C1-8알킬-아미노"는 식 -NH-C1-8알킬-헤테로사이클릴의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "(헤테로사이클릴-C1-8알킬)2-아미노"는 식 -N(C1-8알킬-헤테로사이클릴)2의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "(헤테로사이클릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노"는 식 -N(C1-8알킬)(C1-8알킬-헤테로사이클릴)의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "헤테로사이클릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬"은 식 -C1-8알킬-NH-C1-8알킬-헤테로사이클릴의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "(헤테로사이클릴-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬"은 식 -C1-8알킬-N(C1-8알킬-헤테로사이클릴)2의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "(헤테로사이클릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬"은 식 -C1-8알킬-N(C1-8알킬)(C1-8알킬-헤테로사이클릴)의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "헤테로사이클릴-아미노"는 식 -NH-헤테로사이클릴의 라디칼을 말한다.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "(헤테로사이클릴)(C1-8알킬)아미노"는 식 -N(C1-8알킬)(헤테로사이클릴)의 라디칼을 지칭한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "헤테로사이클릴-아미노-C1-8알킬"은 식 -C1-8알킬-NH-헤테로사이클릴의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "헤테로사이클릴-카본일"은 식 -C(O)-헤테로사이클릴의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "헤테로사이클릴-카본일-옥시"는 식 -O-C(O)-헤테로사이클릴의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "헤테로사이클릴-옥시"는 식 -O-헤테로사이클릴의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "하이드록시"는 식 -OH의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "하이드록시-C1-8알콕시-C1-8알킬"은 식 -C1-8알킬-O-C1-8알킬-OH의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "하이드록시-C1-8알킬"은 식 -C1-8알킬-OH의 라디칼을 말하며, 이때 C1-8알킬은 이용가능한 원자가에 의해 허용되는 경우 하나 이상의 하이드록시 라디칼로 부분적으로 또는 완전히 치환된다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "하이드록시-C1-8알킬-아미노"는 식 -NH-C1-8알킬-OH의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "(하이드록시-C1-8알킬)2-아미노"는 식 -N(C1-8알킬-OH)2의 라디칼을 말한다.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "(하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노"는 식 N(C1-8알킬)(C1-8알킬-OH)의 라디칼을 지칭한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "하이드록시-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬"은 식 -C1-8알킬-NH-C1-8알킬-OH의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "(하이드록시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬"은 식 -C1-8알킬-N(C1-8알킬-OH)2의 라디칼을 말한다.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "(하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬"은 식 C1-8알킬-N(C1-8알킬)(C1-8알킬-OH)의 라디칼을 지칭한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "하이드록시-C1-8알킬-아미노-C1-8알콕시"는 식 -O-C1-8알킬-NH-C1-8알킬-OH의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "(하이드록시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알콕시"는 식 -O-C1-8알킬-N(C1-8알킬-OH)2의 라디칼을 말한다.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "(하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알콕시"는 식 -O-C1-8알킬-N(C1-8알킬)(C1-8알킬-OH)의 라디칼을 지칭한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "하이드록시-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬-아미노"는 식 -NH-C1-8알킬-NH-C1-8알킬-OH의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "(하이드록시-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬)2-아미노"는 식 -N(C1-8알킬-NH-C1-8알킬-OH)2의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "(하이드록시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬-아미노"는 식 -NH-C1-8알킬-N(C1-8알킬-OH)2의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "(하이드록시-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노"는 식 -N(C1-8알킬)(C1-8알킬-NH-C1-8알킬-OH)의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "[(하이드록시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬](C1-8알킬)아미노"는 식 -N(C1-8알킬)[C1-8알킬-N(C1-8알킬-OH)2]의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "(하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬-아미노"는 식 -NH-C1-8알킬-N(C1-8알킬,C1-8알킬-OH)의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "[(하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬](C1-8알킬)아미노"는 식 -N(C1-8알킬)[C1-8알킬-N(C1-8알킬)(C1-8알킬-OH)]의 라디칼을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "치환기"는 지정된 원자 상의 하나 이상의 수소 원자를 치환시키는, 지정된 원자 위치에서 결합된 코어 분자의 원자 상의 위치 변수를 의미하되, 치환이 안정한 화합물을 제공하도록 결합 원자는 이용가능한 원자가 또는 공유 원자가를 초과하지 않는다. 따라서, 치환기 및/또는 변수의 조합은 상기 조합이 안정한 화합물을 제공하는 경우에만 허용가능하다. 또한, 임의의 탄소뿐 아니라, 본원에 기술되거나 나타낸 바와 같이 충족되지 않은 것으로 보이는 원자가 수준을 갖는 헤테로원자는 기술되거나 나타낸 원자가를 충족시키기에 충분한 수의 수소 원자를 갖는 것으로 추정됨을 주지해야 한다.
상기 설명에 있어서, 화학식 I의 화합물에 대한 하나 이상의 치환기 변수가 화학식 I의 화합물 내에 혼입된 작용기를 포함하는 경우, 개시된 화합물 내의 임의 위치에서 나타나는 각각의 작용기는 독립적으로 선택될 수 있고, 적절한 경우, 독립적으로 및/또는 선택적으로 치환될 수 있다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "독립적으로 선택된" 또는 "각각 선택된"은, 각 경우에서 치환 패턴이 임의의 다른 경우에서의 패턴과 무관한 경우, 코어 분자의 구조 상에서 한번보다 많이 결합될 수 있는 치환기 목록 중의 작용성 변수를 말한다. 또한, 본원에 제공된 화합물에 대한 코어 구조 상의 일반적 치환기의 사용은 특정 종류에 포함되는 치환기 종에 의한 일반 치환기의 치환을 포함하는 것으로 이해된다. 예를 들면, 아릴은 생성된 화합물이 본원에 기술된 화합물의 범위내에 포함되도록 페닐 또는 나프탈렌일(나프틸로도 지칭됨) 등으로 독립적으로 치환될 수 있다.
본원에서 사용된 바와 같이, "...아릴, 아릴-C1-8알킬, 헤테로사이클릴 및 헤테로사이클릴-C1-8알킬, 이때 아릴 및 헤테로사이클릴의 각각의 경우는 1 또는 2개의 치환기로 선택적으로 치환된다"와 같은 어구에서 사용될 때 용어 "각각의 경우"는 아릴 및 헤테로사이클릴 고리의 각각에서 및 아릴-C1-8알킬 및 헤테로사이클릴-C1-8알킬의 아릴 및 헤테로사이클릴 부분에서의 선택적, 독립적 치환을 포함하는 것이다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "선택적으로 치환된"은 특정 치환기 변수, 기, 라디칼 또는 잔기가 그 종류의 범위를 나타내고 코어 분자의 지정된 결합 원자 상의 하나 이상의 수소 원자를 치환하기 위해 필요에 따라 독립적으로 선택될 수 있음을 의미한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "안정한 화합물" 또는 "안정한 구조"는 반응 혼합물 및 이의 배합물로부터 효과적인 치료제로 유용한 순도로 분리될 만큼 충분히 견고한 화합물을 의미한다.
본원에 제공된 화합물 명칭은 ACD 랩스에서 제공한 ACD 랩스 인덱스 네임(Index Name) 소프트웨어 및/또는 케임브리지소프트(CambridgeSoft, 등록상표)에서 제공한 켐드로 울트라(ChemDraw Ultra) 소프트웨어를 이용하여 수득하였다. 본원에 개시된 화합물 명칭이 나타낸 구조와 충돌되는 경우, 나타낸 구조가 의도한 화합물을 정의하기 위한 명칭의 사용을 대신할 것이다. 본원에 정의된 치환기 라디칼에 대한 명칭은 그들이 유도되는 화학명과 약간 다를 수 있다; 당해 분야에 숙련된 자라면 치환기 라디칼의 정의가 화학명에서 확인된 바와 같은 라디칼을 포함하는 것임을 인지할 것이다.
용어 "SMN"은, 본원에서 달리 언급되지 않는 한, 인간 SMN1 유전자, DNA 또는 RNA, 및/또는 인간 SMN2 유전자, DNA 또는 RNA를 말한다. 특정 양태에서, 용어 "SMN1"은 인간 SMN1 유전자, DNA 또는 RNA를 말한다. 또 다른 특정 양태에서, 용어 "SMN2"는 인간 SMN2 유전자, DNA 또는 RNA를 말한다.
인간 SMN1 및 SMN2 유전자에 대한 핵산 서열은 당해 분야에 공지되어 있다. 인간 SMN1의 핵산 서열에 대해서는, 예를 들면, 진뱅크(GenBank) 등록 번호 DQ894095, NM_000344, NM_022874 및 BC062723을 참조하시오. 인간 SMN2의 핵산 서열에 대해서는, 예를 들면, NM_022875, NM_022876, MN_022877, NM_017411, DQ894734(라이프 테크놀로지스, 인코포레이티드(Life Technologies, Inc.)(전 인비트로겐(Invitrogen)), 미국 캘리포니아주 칼즈배드), BC000908, CD070242, CR595484, CR598529, CR609539, U21914 및 BC015308을 참조하시오.
SMN1 유전자는 인간 염색체 5의 정방향 가닥 상에서 대략 뉴클레오티드 70,220,768로부터 대략적으로 뉴클레오티드 70,249,769까지에서 확인될 수 있다. 인간 염색체 5 상의 SMN1의 엑손 6,7 및 8 및 인트론 6 및 7의 대략적인 위치는 다음과 같다:
70,241,893에서 70,242,003까지 엑손 6;
70,242,004에서 70,247,767까지 인트론 6;
70,247,768에서 70,247,821까지 엑손 7;
70,247,822에서 70,248,265까지 인트론 7; 및
70,248,266에서 70,248,839까지 엑손 8.
SMN2 유전자는 인간 염색체 5의 정방향 가닥 상에서 대략 뉴클레오티드 69,345,350에서 대략적으로 뉴클레오티드 69,374,349까지에서 확인될 수 있다.
인간 염색체 5 상의 SMN2의 엑손 6,7 및 8 및 인트론 6 및 7의 대략적인 위치는 다음과 같다:
69,366,468에서 69,366,578까지 엑손 6;
69,366,579에서 69,372,347까지 인트론 6;
69,372,348에서 69,372,401까지 엑손 7;
69,372,402에서 69,372,845까지 인트론 7; 및
69,372,846에서 69,373,419까지 엑손 8.
특정 양태에서, SMN1의 엑손 6, 7 및 8 및 인트론 6 및 7에 대해 상기에 기술된 뉴클레오티드 서열들은 본원에 기술된 SMN1 미니유전자 핵산 구조물에 사용된다. 다른 특정 양태에서, 본원에 제공된 실시예에서 SMN2의 엑손 6, 7 및 8 및 인트론 6 및 7의 뉴클레오티드 서열들은 본원에 기술된 SMN2 미니유전자 핵산 구조물에 사용된다.
용어 "Smn" 또는 "Smn 단백질"은, 본원에서 달리 언급되지 않는 한, SMN1 유전자 및/또는 SMN2 유전자의 엑손 1에서 7까지에 의해 암호화된 아미노산 잔기를 함유하는 인간 Smn 단백질을 말한다. 특정 양태에서, Smn 단백질은 당해 분야에 기술을 가진 자에게 공지된 방법에 의해 평가할 때 시험관내 및/또는 생체내에서 안정하고 기능성이다. 또 다른 특정 양태에서, Smn 단백질은 인간 SMN1 유전자 및/또는 SMN2 유전자에 의해 암호화된 전장 단백질이다. 또 다른 특정 양태에서, Smn 단백질은 진뱅크 등록 번호 NP_000335, AAC50473.1, AAA66242.1 또는 NP_059107에서 확인된 아미노산 서열을 갖는다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시킨다" 및 유사한 용어들은, 본원에서 달리 언급되지 않는 한, 당해 분야에 기술을 가진 자에게 공지된 방법에 의해 평가할 때 시험관내 및/또는 생체내에서 SMN2 유전자로부터 증가된 수준의 Smn 단백질이 생성되도록; 또는 당해 분야에 기술을 가진 자에게 공지된 방법에 의해 평가할 때 시험관내 및/또는 생체내에서 SMN2 유전자로부터 안정하고 기능성인 Smn 단백질의 증가된 발현이 야기되도록; 또는 당해 분야에 기술을 가진 자에게 공지된 방법에 의해 평가할 때 시험관내 및/또는 생체내에서 미니유전자에 의해 암호화된 융합 단백질의 발현이 증가되도록; 또는 이를 필요로 하는 대상(예를 들면, SMA에 대한 동물 모델 또는 인간 대상 또는 SMA 환자)에서 SMN2 유전자로부터 생성된 Smn 단백질의 발현이 증가되도록, 당해 분야에 기술을 가진 자에게 공지된 방법에 의해 평가할 때 시험관내 및/또는 생체내에서 SMN2 유전자로부터 전사되는(즉, 전장 SMN2 mRNA의 생성을 야기하는) 성숙 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 완전, 미손상, 비-절두형 서열의 혼입을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "SMN1 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN1의 엑손 7의 혼입을 증대시킨다" 및 유사한 용어들은, 본원에서 달리 언급되지 않는 한, 당해 분야에 기술을 가진 자에게 공지된 방법에 의해 평가할 때 시험관내 및/또는 생체내에서 SMN1 유전자로부터 증가된 수준의 Smn 단백질이 생성되도록; 또는 당해 분야에 기술을 가진 자에게 공지된 방법에 의해 평가할 때 시험관내 및/또는 생체내에서 SMN1 유전자로부터 안정하고 기능성인 Smn 단백질의 증가된 발현이 야기되도록; 또는 당해 분야에 기술을 가진 자에게 공지된 방법에 의해 평가할 때 시험관내 및/또는 생체내에서 미니유전자에 의해 암호화된 융합 단백질의 발현이 증가되도록; 또는 이를 필요로 하는 대상(예를 들면, SMA에 대한 동물 모델 또는 인간 대상)에서 SMN1 유전자로부터 생성된 Smn 단백질의 발현이 증가되도록, 당해 분야에 기술을 가진 자에게 공지된 방법에 의해 평가할 때 시험관내 및/또는 생체내에서 SMN1 유전자로부터 전사되는(즉, 전장 SMN1 mRNA의 생성을 야기하는) 성숙 mRNA 내로의 SMN1의 엑손 7의 완전, 미손상, 비-절두형 서열의 혼입을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, mRNA의 양에 있어서 용어 "실질적인 변화"는 mRNA의 양이 통계학적으로 유의적인 양만큼, 예를 들면, 0.1, 0.05, 0.01, 0.005, 0.001, 0.0005, 0.0001, 0.00005 또는 0.00001로부터 선택된 값 미만의 p 값만큼 변화하지 않는 것을 의미한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "대상" 및 "환자"는 감각 및 수의 운동력을 가지며 그 생존을 위해 산소 및 유기 식품을 필요로 하는 동물 또는 임의의 살아있는 유기체를 말하기 위해 상호교환적으로 사용된다. 비제한 예로는 인간, 말, 돼지, 소, 래터스(rattus), 뮤린, 개 및 고양이 종들의 구성원이 포함된다. 일부 양태에서, 대상은 포유동물 또는 온혈 척추 동물이다. 특정 양태에서, 대상은 비-인간 동물이다. 특정 양태에서, 대상은 인간이다. 하나의 특정 양태에서, 대상은 인간 SMA 환자이다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "노인"은 65세 이상의 인간을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "성인"은 18세 이상의 인간을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "소아"는 1세에서 18세까지의 인간을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "유아"는 신생아에서 1세까지의 인간을 말한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "걸음마기 유아"는 1세에서 3세까지의 인간을 말한다.
화합물 형태
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "화학식 Ia의 화합물", "화학식 Ia1의 화합물", "화학식 Ia2의 화합물", "화학식 Ia3의 화합물", "화학식 Ia4의 화합물", "화학식 II의 화합물", "화학식 IIa의 화합물", "화학식 IIa1의 화합물", "화학식 IIa2의 화합물", "화학식 IIa3의 화합물", "화학식 IIa4의 화합물", "화학식 III의 화합물", "화학식 IIIa의 화합물", "화학식 IIIa1의 화합물", "화학식 IIIa2의 화합물", "화학식 IIIa3의 화합물", "화학식 IIIa4의 화합물", "화학식 IV의 화합물", "화학식 IVa의 화합물", "화학식 IVa1의 화합물", "화학식 IVa2의 화합물", "화학식 V의 화합물", "화학식 Va의 화합물", "화학식 Va1의 화합물", "화학식 Va2의 화합물", "화학식 VI의 화합물", "화학식 VIa의 화합물", "화학식 VIa1의 화합물", "화학식 VIa2의 화합물", "화학식 VIa3의 화합물", "화학식 VIa4의 화합물", "화학식 VII의 화합물", "화학식 VIIa의 화합물", "화학식 VIIa1의 화합물", "화학식 VIIa2의 화합물", "화학식 VIII의 화합물", "화학식 VIIIa의 화합물", "화학식 VIIIa1의 화합물", "화학식 VIIIa2의 화합물", "화학식 IX의 화합물", "화학식 IXa의 화합물", "화학식 IXa1의 화합물", "화학식 IXa2의 화합물", "화학식 IXa3의 화합물", "화학식 IXa4의 화합물", "화학식 X의 화합물", "화학식 Xa의 화합물", "화학식 Xa1의 화합물", "화학식 Xa2의 화합물", "화학식 XI의 화합물", "화학식 XIa의 화합물", "화학식 XIa1의 화합물", "화학식 XIa2의 화합물", "화학식 XII의 화합물", "화학식 XIIa의 화합물", "화학식 XIIa1의 화합물", "화학식 XIIa2의 화합물", "화학식 XIIa3의 화합물", "화학식 XIIa4의 화합물", "화학식 XIII의 화합물", "화학식 XIIIa의 화합물", "화학식 XIIIa1의 화합물", "화학식 XIIIa2의 화합물", "화학식 XIV의 화합물", "화학식 XIVa의 화합물", "화학식 XIVa1의 화합물" 및 "화학식 XIVa2의 화합물"은 각각 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 아속(subgenera)을 지칭한다.
화학식 I의 화합물의 다양한 아속에 대한 반복 양태 이외에, 특정 양태에서, 용어 "화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태"는 화학식 Ia의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 Ia1의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 Ia2의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 Ia3의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 Ia4의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 II의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 IIa의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 IIa1의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 IIa2의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 IIa3의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 IIa4의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 III의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 IIIa의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 IIIa1의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 IIIa2의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 IIIa3의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 IIIa4의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 IV의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 IVa의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 IVa1의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 IVa2의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 V의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 Va의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 Va1의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 Va2의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 VI의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 VIa의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 VIa1의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 VIa2의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 VIa3의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 VIa4의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 VII의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 VIIa의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 VIIa1의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 VIIa2의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 VIII의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 VIIIa의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 VIIIa1의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 VIIIa2의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 IX의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 IXa의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 IXa1의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 IXa2의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 IXa3의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 IXa4의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 X의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 Xa의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 Xa1의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 Xa2의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 XI의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 XIa의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 XIa1의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 XIa2의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 XII의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 XIIa의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 XIIa1의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 XIIa2의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 XIIa3의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 XIIa4의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 XIII의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 XIIIa의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 XIIIa1의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 XIIIa2의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 XIV의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 XIVa의 화합물 또는 이의 한 형태, 화학식 XIVa1의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 화학식 XIVa2의 화합물 또는 이의 한 형태를 각각 또는 함께 지칭하도록 포괄적으로 사용된다.
따라서, "화학식 I의 화합물"에 대한 양태 및 언급은 화학식 Ia, 화학식 Ia1, 화학식 Ia2, 화학식 Ia3, 화학식 Ia4, 화학식 II, 화학식 IIa, 화학식 IIa1, 화학식 IIa2, 화학식 IIa3, 화학식 IIa4, 화학식 III, 화학식 IIIa, 화학식 IIIa1, 화학식 IIIa2, 화학식 IIIa3, 화학식 IIIa4, 화학식 IV, 화학식 IVa, 화학식 IVa1, 화학식 IVa2, 화학식 V, 화학식 Va, 화학식 Va1, 화학식 Va2, 화학식 VI, 화학식 VIa, 화학식 VIa1, 화학식 VIa2, 화학식 VIa3, 화학식 VIa4, 화학식 VII, 화학식 VIIa, 화학식 VIIa1, 화학식 VIIa2, 화학식 VIII, 화학식 VIIIa, 화학식 VIIIa1, 화학식 VIIIa2, 화학식 IX, 화학식 IXa, 화학식 IXa1, 화학식 IXa2, 화학식 IXa3, 화학식 IXa4, 화학식 X, 화학식 Xa, 화학식 Xa1, 화학식 Xa2, 화학식 XI, 화학식 XIa, 화학식 XIa1, 화학식 XIa2, 화학식 XII, 화학식 XIIa, 화학식 XIIa1, 화학식 XIIa2, 화학식 XIIa3, 화학식 XIIa4, 화학식 XIII, 화학식 XIIIa, 화학식 XIIIa1, 화학식 XIIIa2, 화학식 XIV, 화학식 XIVa, 화학식 XIVa1 및 화학식 XIVa2의 화합물을 포함하는 것으로 의도된다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "형태"는 이의 유리 산, 유리 염기, 염, 동위 이성질체(isotopologue), 입체 이성질체, 라세미체, 거울상 이성질체, 부분입체 이성질체 또는 호변 이성질체로부터 선택된다.
본원에 기술된 특정 양태에서, 화학식 I의 화합물의 형태는 이의 염, 동위 이성질체, 입체 이성질체, 라세미체, 거울상 이성질체, 부분입체 이성질체 또는 호변 이성질체로부터 선택된다.
본원에 기술된 특정 양태에서, 화학식 I의 화합물의 형태는 이의 유리 산, 동위 이성질체, 입체 이성질체, 라세미체, 거울상 이성질체, 부분입체 이성질체 또는 호변 이성질체로부터 선택된다.
본원에 기술된 특정 양태에서, 화학식 I의 화합물의 형태는 이의 유리 염기, 동위 이성질체, 입체 이성질체, 라세미체, 거울상 이성질체, 부분입체 이성질체 또는 호변 이성질체로부터 선택된다.
본원에 기술된 특정 양태에서, 화학식 I의 화합물의 형태는 이의 유리 산, 유리 염기 또는 염이다.
본원에 기술된 특정 양태에서, 화학식 I의 화합물의 형태는 이의 동위 이성질체이다.
본원에 기술된 특정 양태에서, 화학식 I의 화합물의 형태는 이의 입체 이성질체, 라세미체, 거울상 이성질체 또는 부분입체 이성질체이다.
본원에 기술된 특정 양태에서, 화학식 I의 화합물의 형태는 이의 호변 이성질체로이다.
본원에 기술된 특정 양태에서, 화학식 I의 화합물의 형태는 약학적으로 허용되는 형태이다.
본원에 기술된 특정 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태는 사용하기 위해 단리된다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "단리된" 또는 "분리된"은, 본원에 기술되거나 숙련된 전문가에게 공지되어 있는 분리 또는 정제 공정 또는 공정들(예를 들면, 크로마토그래피, 재결정화 등)에 따라서, 본원에 기술되거나 숙련된 전문가에게 공지된 표준 분석 기술에 의해 특성화가능하기에 충분한 순도로, 합성 과정으로부터(예를 들면, 반응 혼합물로부터) 또는 천연 공급원 또는 이의 혼합물로부터 분리되고/되거나 정제된 후의 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 물리적 상태를 의미한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "보호된"은 화학식 I의 화합물의 작용기가, 화합물이 반응에 적용될 때 보호되는 부위에서 바람직하지 않은 부반응을 불가능하게 하도록 개질된 형태인 것을 의미한다. 적합한 보호기는 당해 분야에 통상의 기술을 가진 자에 의해 또는, 예를 들면, 문헌 [T.W. Greene et al., Protective Groups in Organic Synthesis, Wiley, New York (1991)]과 같은 표준 교재를 참조하여 인지될 것이다.
화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 전구약물도 또한 본 발명에 포함된다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "전구약물"은 화학식 I의 화합물 상의 작용기가 활성 또는 더 활성인 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 생성하도록 생체내에서 전환되는 형태(예를 들면, 활성 또는 불활성 약물 전구체로서 작용하는)인 것을 의미한다. 전환은 다양한 메카니즘(예를 들면, 대사 및/또는 비-대사 화학 과정)에 의해, 예를 들면, 혈액, 간 및/또는 다른 장기 및 조직에서 가수분해 및/또는 대사에 의해 일어날 수 있다. 전구약물의 사용에 대한 논의는 문헌 [V.J., Stella, et al., "Biotechnology: Pharmaceutical Aspects, Prodrugs: Challenges and Rewards", American Association of Pharmaceutical Scientists and Srpinger Press (2007)]에 제공되어 있다.
한 예에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태가 카복실산 작용기를 함유하는 경우, 전구약물은 알킬 등과 같은 작용기에 의한 산 기의 수소 원자의 치환에 의해 생성된 에스터를 포함할 수 있다. 또 다른 예에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태가 알콜 작용기를 함유하는 경우, 전구약물은 알킬 또는 치환된 카본일 등과 같은 작용기에 의한 알콜기의 수소 원자의 치환에 의해 생성될 수 있다. 또 다른 예에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태가 아민 작용기를 함유하는 경우, 전구약물은 알킬 또는 치환된 카본일과 같은 작용기에 의한 하나 이상의 아민 수소 원자의 치환에 의해 생성될 수 있다. 또 다른 예에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태가 수소 치환기를 함유하는 경우, 전구약물은 알킬 치환기에 의한 하나 이상의 수소 원자의 치환에 의해 생성될 수 있다.
화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 약학적으로 허용되는 전구약물로는 다음의 기들 중 하나 이상으로 치환된 화합물들이 포함된다: 카복실산 에스터, 설폰에이트 에스터, 아미노산 에스터, 포스폰에이트 에스터, 모노-, 다이- 또는 트라이포스페이트 에스터 또는 적절한 경우 알킬 치환기. 본원에 기술된 바와 같이, 당해 분야에 통상의 기술을 가진 자에 의해 하나 이상의 상기 치환기를 사용하여 전구약물로 사용하기 위한 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 제공할 수 있는 것으로 이해된다.
화학식 I의 화합물은 본 설명의 범위 내에 포함되는 염을 형성할 수 있다. 본원에서 화학식 I에 대한 언급은 달리 나타내지 않는 한 이의 염에 대한 언급을 포함하는 것으로 이해된다. 본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "염"은 무기 및/또는 유기 산에 의해 생성된 산성 염, 및 무기 및/또는 유기 염기에 의해 생성된 염기성 염을 의미한다. 또한, 화학식 I의 화합물이 피리딘 또는 이미다졸(이로 한정되지는 않는다)과 같은 염기성 잔기, 및 카복실산(이로 한정되지는 않는다)과 같은 산성 잔기를 둘 다 함유하는 경우, 양쪽성이온("분자내 염(inner salt)")이 생성될 수 있으며 본원에서 사용된 바와 같은 용어 "염"에 포함된다.
용어 "약학적으로 허용되는 염"은, 본원에서 사용된 바와 같이, 다른 염들도 또한 유용하지만, 포유동물에 사용하기에 안전하고 효과적이며(즉, 무독성이고 생리학적으로 허용되는), 생물 활성을 갖는 본원에 기술된 화합물의 염들을 의미한다. 화학식 I의 화합물의 염은, 예를 들면, 화학식 I의 화합물을, 염이 침전되는 것과 같은 매질 중에서 또는 수성 매질 중에서 당량 또는 화학량론적 양과 같은 일정량의 산 또는 염기와 반응시킨 후 동결건조시킴으로써 생성될 수 있다.
약학적으로 허용되는 염으로는 본원에 기술된 화합물에 존재하는 산성 또는 염기성 기의 하나 이상의 염이 포함된다. 산 부가 염의 예로는 아세테이트, 다이아세테이트, 산 포스페이트, 아스콜베이트, 벤조에이트, 벤젠설폰에이트, 바이설페이트, 바이타르트레이트, 보레이트, 부티레이트, 클로라이드, 시트레이트, 캄포레이트, 캄포설폰에이트, 에탄설폰에이트, 폼에이트, 푸마레이트, 젠티시네이트, 글루코네이트, 글루카로네이트, 글루타메이트, 하이드로브로마이드, 하이드로클로라이드, 다이하이드로클로라이드, 트라이하이드로클로라이드, 하이드로요오다이드, 이소니코티네이트, 락테이트, 말리에이트, 메탄설폰에이트, 나프탈렌설폰에이트, 니트레이트, 옥살레이트, 파모에이트, 판토테네이트, 포스페이트, 프로피오네이트, 사카레이트, 살리실레이트, 숙시네이트, 설페이트, 타르트레이트, 티오시아네이트, 톨루엔설폰에이트(토실레이트로도 알려짐), 트라이플루오로아세테이트, 트라이플루오로아세트산 염 등이 포함되며, 이들로 한정되지는 않는다. 산 부가 염의 하나 이상의 양태는 클로라이드, 하이드로브로마이드, 하이드로클로라이드, 다이하이드로클로라이드, 트라이하이드로클로라이드, 아세테이트, 다이아세테이트, 트라이플루오로아세테이트, 트라이플루오로아세트산 염을 포함한다. 보다 특정 양태는 클로라이드, 하이드로브로마이드, 하이드로클로라이드, 다이하이드로클로라이드, 트라이플루오로아세테이트, 트라이플루오로아세트산 염 등을 포함한다.
또한, 일반적으로 염기성 약학 화합물로부터 약학적으로 유용한 염의 생성에 적합한 것으로 고려되는 산은, 예를 들면, 문헌 [P. Stahl et al., Camille G. (eds.) Handbook of Pharmaceutical Salts. Properties, Selection and Use, Zurich: Wiley-VCH (2002); S. Berge et al., Journal of Pharmaceutical Sciences, 66(1):1-19 (1977); P. Gould, International J. of Pharmaceutics, 33:201-217 (1986); Anderson et al., The Practice of Medicinal Chemistry, Academic Press, New York (1996); and The Organic Book (see, website for Food & Drug Administration, Washington, D.C.)]에 논의되어 있다. 상기 개시내용은 본원에 참고로 인용된다.
적합한 염기성 염으로는 알루미늄, 암모늄, 칼슘, 리튬, 마그네슘, 칼륨, 나트륨, 아연 및 다이에탄올아민 염이 포함되나, 이로 한정되지는 않는다. 본원에 기술된 특정 화합물은 또한 유기 염기(예를 들면, 유기 아민), 예를 들어, 다이사이클로헥실아민, 3급-부틸 아민 등(이로 한정되지는 않는다)과, 및 다양한 아미노산, 예를 들어, 아르기닌, 라이신 등(이로 한정되지는 않는다)과 약학적으로 허용되는 염을 생성할 수 있다. 염기성 질소 함유 기는 저급 알킬 할라이드(예, 메틸, 에틸 및 부틸 클로라이드, 브로마이드 및 요오다이드), 다이알킬 설페이트(예, 다이메틸, 다이에틸 및 다이부틸 설페이트), 장쇄 할라이드(예, 데실, 라우릴 및 스테아릴 클로라이드, 브로마이드 및 요오다이드), 아르알킬 할라이드(예, 벤질 및 펜에틸 브로마이드) 등과 같은 약제로 4급화될 수 있다.
모든 상기 산 염 및 염기 염은 본원의 설명의 범위 내의 약학적으로 허용되는 염인 것이며, 모든 산 및 염기 염은 본원에 기술된 목적에 있어 상응하는 화합물의 유리 형태들과 등가인 것으로 간주된다.
화학식 I의 화합물 및 이의 형태들은 또한 호변 이성질체 형태로 존재할 수 있다. 모든 상기 호변 이성질체 형태는 본 설명의 일부로서 본 발명에 포함된다.
화학식 I의 화합물은 비대칭 또는 키랄 중심을 함유할 수 있으므로, 상이한 입체 이성질체 형태로 존재할 수 있다. 본 설명은 화학식 I의 화합물의 모든 입체 이성질체 형태뿐 아니라, 라세미 혼합물을 포함하여 이의 혼합물을 포함하는 것이다.
본원에 기술된 화학식 I의 화합물은 하나 이상의 키랄 중심을 포함할 수 있으며, 따라서 라세미 혼합물(R/S)로서 또는 실질적으로 순수한 거울상 이성질체 및 부분입체 이성질체로서 존재할 수 있다. 상기 화합물은 또한 실질적으로 순수한 (R) 또는 (S) 거울상 이성질체로 존재할 수 있다(하나의 키랄 중심이 존재하는 경우). 한 양태에서, 본원에 기술된 화학식 I의 화합물은 (S) 이성질체이며, 실질적으로 (S) 이성질체만을 포함하는 거울상 이성질체적으로 순수한 조성물로 존재할 수 있다. 또 다른 양태에서, 본원에 기술된 화학식 I의 화합물은 (R) 이성질체이며, 실질적으로 (R) 이성질체만을 포함하는 거울상 이성질체적으로 순수한 조성물로 존재할 수 있다. 당해 분야에 기술을 가진 자가 인지하듯이, 하나보다 많은 키랄 중심이 존재하는 경우, 본원에 기술된 화학식 I의 화합물은 또한 IUPAC 명명법 권장사항에 의해 정의된 바와 같이 (R,R), (R,S), (S,R) 또는 (S,S) 이성질체로서 기술된 부분들을 포함할 수 있다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "실질적으로 순수한"은 90% 이상의 양으로, 92% 이상의 양으로, 95% 이상의 양으로, 98% 이상의 양으로, 99% 이상의 양으로 실질적으로 단일 이성질체로 이루어지거나, 100%의 양의 단일 이성질체로 이루어지는 화합물을 말한다.
한 양태에서, 화학식 I의 화합물은 90% 이상의 양으로, 92% 이상의 양으로, 95% 이상의 양으로, 98% 이상의 양으로, 99% 이상의 양으로, 또는 100%의 양으로 존재하는 실질적으로 순수한 (S) 거울상 이성질체이다.
한 양태에서, 화학식 I의 화합물은 90% 이상의 양으로, 92% 이상의 양으로, 95% 이상의 양으로, 98% 이상의 양으로, 99% 이상의 양으로, 또는 100%의 양으로 존재하는 실질적으로 순수한(R) 거울상 이성질체이다.
본원에서 사용된 바와 같이, "라세미체"는 제한하지 않고 약 50/50, 약 60/40, 약 70/30, 약 80/20, 약 85/15 또는 약 90/10의 비의 혼합물과 같은 혼합물을 포함하여, "거울상 이성질체적으로 순수"하지 않은 이성질체 형태들의 임의의 혼합물이다.
또한, 본 설명은 모든 기하 및 위치 이성질체를 포함한다. 예를 들면, 화학식 I의 화합물이 이중 결합 또는 융합 고리를 혼입한 경우, 시스- 및 트랜스-형태 둘 다 및 혼합물이 본원 설명의 범위 내에 포함된다.
부분입체 이성질체 혼합물은, 예를 들면, 크로마토그래피 및/또는 분별 결정화와 같은 당해 분야에 숙련된 자에게 공지된 방법에 의해 이의 물리화학적 차이에 근거하여 이의 각각의 부분입체 이성질체로 분리될 수 있다. 거울상 이성질체는 키랄 HPLC 컬럼, 또는 당해 분야에 숙련된 자에게 공지된 다른 크로마토그래피 방법을 사용하여 분리될 수 있다.
거울상 이성질체는 또한, 거울상 이성질체 혼합물을 적절한 광학 활성 화합물(예를 들면, 키랄 알콜 또는 모셔(Mosher)의 산 클로라이드와 같은 키랄 보조제)과의 반응에 의해 부분입체 이성질체 혼합물로 전환시키고, 부분입체 이성질체를 분리하고, 개개 부분입체 이성질체를 상응하는 순수한 거울상 이성질체로 전환(예를 들면, 가수분해)시킴으로써 분리될 수 있다. 또한, 화학식 I의 화합물의 일부는 회전장애 이성질체(atropisomer)(예를 들면, 치환된 바이아릴)일 수 있으며, 본 설명의 일부로 간주된다.
거울상 이성질체 형태(비대칭 탄소의 부재 하에도 존재할 수 있다), 회전이성질체 형태, 회전장애 이성질체, 부분입체 이성질체 형태 및 구조 이성질체(regioisomer) 형태를 포함하여, 다양한 치환기 상의 비대칭 탄소로 인해 존재할 수 있는 본 발명 화합물(이의 염, 용매화물, 에스터 및 전구약물 및 전환된 전구약물 포함)의 모든 입체 이성질체 형태(예를 들면, 기하 이성질체, 광학 이성질체, 위치 이성질체 등)는 본원의 설명의 범위에 포함된다. 예를 들면, 화학식 I의 화합물이 이중 결합 또는 융합 고리를 포함하는 경우, 시스- 및 트랜스-형태 둘 다 및 이의 혼합물은 본원 설명의 범위에 포함된다. 또한, 예를 들면, 상기 화합물의 모든 케토-엔올 및 이민-엔아민 호변 이성질체 형태도 본원 설명에 포함된다. 본원에 기술된 화학식 I의 화합물의 개개 입체 이성질체는, 예를 들면, 실질적으로 다른 이성질체를 함유하지 않을 수 있거나, 상기에서 기술된 바와 같이 라세미 혼합물로 존재할 수 있다.
용어 "염", "전구약물" 및 "전환된 전구약물"의 사용은 본 발명 화합물의 모든 고려되는 동위 이성질체, 입체 이성질체, 라세미체 또는 호변 이성질체의 염, 전구약물 및 전환된 전구약물에 동등하게 적용되는 것이다.
용어 "동위 이성질체"는, 하나 이상의 원자가 자연에서 통상적으로 발견되는 원자 질량 또는 질량수와 상이한 원자 질량 또는 질량수를 갖는 원자로 치환되는 점을 제외하고, 본원에 인용된 것과 동일한 동위원소-농축 화합물을 말한다. 본원에 기술된 화합물 내에 혼입될 수 있는 동위원소의 예로는 수소, 탄소, 질소, 산소, 인, 플루오르 및 염소의 동위원소, 예를 들면, 각각 H2, H3, C13, C14, N15, O18, O17, P31, P32, S35, F18, Cl35 및 Cl36이 포함되며, 이들 각각은 또한 본 설명의 범위에 포함된다.
본원에 기술된 특정 동위원소-농축 화합물(예를 들면, H3 및 C14로 표지된 것들)은 화합물 및/또는 기질 조직 분포 분석에 유용하다. 삼중수소화(즉, H3) 및 탄소-14(즉, C14) 동위원소가 이의 제조 용이성 및 검출능으로 인해 특히 바람직하다. 또한, 중수소와 같은 더 무거운 동위원소로의 치환(즉, "중수소 농축된")은 더 큰 대사 안정성(예를 들면, 증가된 생체내 반감기 또는 감소된 투여량 조건)으로부터 비롯되는 특정 치료 이점을 제공할 수 있으므로, 일부 경우에서 바람직할 수 있다. 화학식 I의 동위원소-농축 화합물은 일반적으로 비-동위원소-농축 시약을 적절한 동위원소-농축 시약으로 대체함으로써 당해 분야에 통상의 기술을 가진 자에게 공지된 절차를 이용하여 제조될 수 있다.
화합물이 중수소로 농축된 경우, 분자의 중수소화된 원자 상의 중수소-대-수소 비는 실질적으로 천연에서 발생하는 중수소-대-수소 비를 초과한다.
본원에 기술된 양태는 화학식 I의 화합물의 동위 이성질체 형태를 포함할 수 있고, 이때 동위 이성질체는 화학식 I의 화합물의 하나 이상의 원자 구성원 상에서 하나 이상의 수소 원자 대신에 하나 이상의 중수소 원자로 치환된다.
본원에 기술된 양태는 화학식 I의 화합물 및 이의 한 형태를 포함할 수 있고, 이때 탄소 원자는 중수소로 선택적으로 대체된 1 내지 3개의 수소 원자를 가질 수 있다.
본원에 기술된 하나 이상의 화합물은 물, 에탄올 등과 같은 약학적으로 허용되는 용매에 의한 용매화된 형태뿐만 아니라 용매화되지 않은 채 존재할 수 있고, 본원의 기술은 용매화된 형태 및 용매화되지 않은 형태를 둘 다 포함하는 것으로 의도된다.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "용매화물"은 하나 이상의 용매 분자와 본원에 기술된 화합물의 물리적인 회합을 의미한다. 이러한 물리적인 회합은 다양한 정도의 이온 및 공유 결합, 예컨대 수소 결합을 포함한다. 특정 경우에, 예를 들어 하나 이상의 용매 분자가 결정성 고체의 결정 격자에 혼입될 때, 용매화물은 단리될 수 있다. 본원에 사용된 바와 같이, "용매화물"은 용액-상 및 단리가능한 용매화물을 둘 다 포함한다. 적합한 용매화물의 비제한적인 예는 에탄올레이트, 메탄올레이트 등을 포함한다.
본원에 기술된 하나 이상의 화합물은 용매화물로 전환될 수 있다. 용매화물의 제법은 일반적으로 공지되어 있다. 전형적인 비제한적인 방법은 화합물을 상온보다 높은 온도에서 목적 용매(유기물 또는 물 또는 이들의 혼합물)의 목적 양에 용해시키는 단계, 및 용액을 추후 표준 방법에 의해 단리되는 결정을 형성하기에 충분한 속도로 냉각하는 단계를 포함한다. 예를 들어 적외선 분광법과 같은 분석 기술은 용매화물(또는 수화물)로서 결정 중 용매(또는 물)의 존재를 나타낸다.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "수화물"은 용매 분자가 물인 용매화물을 의미한다.
화학식 I의 화합물의 다형성 결정 및 무정형 형태, 및 화학식 I의 화합물의 염, 용매화물, 에스터 및 전구약물은 또한 본원에 기술된 화합물의 범위에 포함되는 것이다.
화합물 용도
SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키는 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태가 본원에 기술된다. 상기 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태는 본원에 기술된 분석(하기 생물학적 실시예 부분 참조)을 이용하여 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키는 것으로 밝혀졌다. 따라서, 화학식 I의 화합물 및 이의 한 형태는 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 위한 개선제로서 유용성을 갖는다.
SMN1 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN1의 엑손 7의 혼입을 증대시키기 위한 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태가 본원에 기술된다. 상기 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태는, 예를 들면, SMN1 미니유전자 분석을 이용하여, SMN1 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN1의 엑손 7의 혼입을 증대시킬 수 있다. 따라서, 화학식 I의 화합물 및 이의 한 형태는 SMN1 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN1의 엑손 7의 혼입을 위한 개선제로서 유용성을 가질 수 있다.
한 양태에서, 본원에는 인간 세포를 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 접촉시킴을 포함하는, SMN2 유전자로부터 전사된 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 조절하는 방법이 제공된다. 특정 양태에서, 본원에는, 본원에 기술되거나 각각 본원에 전체로 참고로 인용되는 국제특허공개 제WO2009/151546호 또는 미국특허공개 제2011/0086833호에 기술된 SMN2 미니유전자의 발현을 조절하는 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 인간 세포를 접촉시킴을 포함하는, SMN2 유전자로부터 전사된 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 조절하는 방법이 제공된다. 한 양태에서, 상기 미니유전자는 국제특허공개 제WO2009/151546호 또는 미국특허공개 제2011/0086833호의 실시예에 기술된 미니유전자이다. 또 다른 양태에서, 상기 미니유전자는 하기 생물학적 실시예 1에서 기술된 미니유전자이다. 인간 세포는, 예컨대 비-인간 동물 또는 인간에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 시험관내 및/또는 생체내에서 접촉될 수 있다. 특정 양태에서, 인간 세포는 인간으로부터 유래하거나 인간에 존재한다. 또 다른 특정 양태에서, 인간 세포는 인간 SMA 환자로부터 유래하거나 인간 SMA 환자에 존재한다. 또 다른 특정 양태에서, 인간 세포는 인간 SMA 환자로부터 유래하거나 인간 SMA 환자에 존재하며, 이때 SMA는 SMN1 유전자 기능의 손실을 야기하는, 두 염색체 상의 SMN1 유전자에서 불활성화 돌연변이 또는 결실에 의해 야기된다. 또 다른 양태에서, 인간 세포는 인간 SMA 환자로부터의 인간 세포이다. 특정 양태에서, 인간 세포는 GM03813, GM00232, GM09677 및/또는 GM23240(코리엘 인스티튜트(Coriell Institute)에서 이용가능)과 같은 세포주로부터의 세포이다. 하나의 양태에서, 화합물은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태이다.
특정 양태에서, 본원에는 인간 세포를 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 접촉시킴을 포함하는, SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키기 위한 방법이 제공된다. 또 다른 양태에서, 본원에는, 본원에 기술되거나 각각 본원에 전체로 참고로 인용되는 국제특허공개 제WO2009/151546호 또는 미국특허공개 제2011/0086833호에 기술된 SMN2 미니유전자의 발현을 증대시키는 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 인간 세포를 접촉시킴을 포함하는, SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키는 방법이 제공된다. 한 양태에서, 상기 미니유전자는 국제특허공개 제WO2009/151546호 또는 미국특허공개 제2011/0086833호의 실시예에 기술된 미니유전자이다. 또 다른 양태에서, 상기 미니유전자는 하기 생물학적 실시예 1에서 기술된 미니유전자이다. 인간 세포는, 예컨대 비-인간 동물 또는 인간에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 시험관내 및/또는 생체내에서 접촉될 수 있다. 특정 양태에서, 인간 세포는 인간으로부터 유래하거나 인간에 존재한다. 또 다른 특정 양태에서, 인간 세포는 인간 SMA 환자로부터 유래하거나 인간 SMA 환자에 존재한다. 또 다른 특정 양태에서, 인간 세포는 인간 SMA 환자로부터 유래하거나 인간 SMA 환자에 존재하며, 이때 SMA는 SMN1 유전자 기능의 손실을 야기하는, 두 염색체 상의 SMN1 유전자에서 불활성화 돌연변이 또는 결실에 의해 야기된다. 또 다른 양태에서, 인간 세포는 인간 SMA 환자로부터의 인간 세포이다. 특정 양태에서, 인간 세포는 GM03813, GM00232, GM09677 및/또는 GM23240(코리엘 인스티튜트에서 이용가능)과 같은 세포주로부터의 세포이다. 하나의 양태에서, 화합물은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태이다.
또 다른 양태에서, 본원에는 인간 세포를 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 접촉시킴을 포함하는, SMN1 유전자로부터 전사된 RNA 내로의 SMN1의 엑손 7의 혼입을 증대시키는 방법이 제공된다. 특정 양태에서, 본원에는 인간 세포를 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 접촉시킴을 포함하는, SMN1 유전자로부터 전사된 RNA 내로의 SMN1의 엑손 7의 혼입을 증대시키는 방법이 제공된다. 또 다른 특정 양태에서, 본원에는, 각각 본원에 전체로 참고로 인용되는 국제특허공개 제WO2009/151546호 또는 미국특허공개 제2011/0086833호에 기술된 SMN1 미니유전자의 발현을 조절하는 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 인간 세포를 접촉시킴을 포함하는, SMN1 유전자로부터 전사된 RNA 내로의 SMN1의 엑손 7의 혼입을 증대시키는 방법이 제공된다. 한 양태에서, 상기 미니유전자는 국제특허공개 제WO2009/151546호 또는 미국특허공개 제2011/0086833호의 실시예에 기술된 미니유전자이다. 인간 세포는, 예컨대 비-인간 동물 또는 인간에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 시험관내 및/또는 생체내에서 접촉될 수 있다. 특정 양태에서, 인간 세포는 인간으로부터 유래하거나 인간에 존재한다. 또 다른 특정 양태에서, 인간 세포는 인간 SMA 환자로부터 유래하거나 인간 SMA 환자에 존재한다. 하나의 양태에서, 화합물은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태이다.
특정 양태에서, 본원에는 인간 세포를 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 접촉시킴을 포함하는, SMN1 및 SMN2 유전자로부터 전사된 RNA 내로의 SMN1 및 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키는 방법이 제공된다. 인간 세포는, 예컨대 비-인간 동물 또는 인간에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 시험관내 및/또는 생체내에서 접촉될 수 있다. 특정 양태에서, 인간 세포는 인간으로부터 유래하거나 인간에 존재한다. 또 다른 특정 양태에서, 인간 세포는 인간 SMA 환자로부터 유래하거나 인간 SMA 환자에 존재한다. 하나의 양태에서, 화합물은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태이다.
또 다른 양태에서, 본원에는 SMA에 대한 비-인간 동물 모델에 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 투여함을 포함하는, SMN2 유전자로부터 전사된 RNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 조절하는 방법이 제공된다. 특정 양태에서, 본원에는, 본원에 기술되거나 각각 본원에 전체로 참고로 인용되는 국제특허공개 제WO2009/151546호 또는 미국특허공개 제2011/0086833호에 기술된 SMN2 미니유전자의 발현을 조절하는 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 SMA에 대한 비-인간 동물 모델에게 투여함을 포함하는, SMN2 유전자로부터 전사된 RNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 조절하는 방법이 제공된다. 한 양태에서, 상기 미니유전자는 국제특허공개 제WO2009/151546호 또는 미국특허공개 제2011/0086833호의 실시예에 기술된 미니유전자이다. 또 다른 양태에서, 상기 미니유전자는 하기 생물학적 실시예 1에서 기술된 미니유전자이다. 특정 양태에서, 화합물은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태이다.
특정 양태에서, 본원에는 SMA에 대한 비-인간 동물 모델에게 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 투여함을 포함하는, SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키는 방법이 제공된다. 또 다른 특정 양태에서, 본원에는, 본원에 기술되거나 각각 본원에 전체로 참고로 인용되는 국제특허공개 제WO2009/151546호 또는 미국특허공개 제2011/0086833호에 기술된 SMN2 미니유전자의 발현을 증대시키는 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 SMA에 대한 비-인간 동물 모델에게 투여함을 포함하는, SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키는 방법이 제공된다. 한 양태에서, 상기 미니유전자는 국제특허공개 제WO2009/151546호 또는 미국특허공개 제2011/0086833호의 실시예에 기술된 미니유전자이다. 또 다른 양태에서, 상기 미니유전자는 하기 생물학적 실시예 1에서 기술된 미니유전자이다. 특정 양태에서, 화합물은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태이다.
또 다른 양태에서, 본원에는 SMA에 대한 비-인간 동물 모델에게 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 투여함을 포함하는, SMN1 유전자로부터 전사된 RNA 내로의 SMN1의 엑손 7의 혼입을 증대시키는 방법이 제공된다. 특정 양태에서, 본원에는, 본원에 기술되거나 각각 본원에 전체로 참고로 인용되는 국제특허공개 제WO2009/151546호 또는 미국특허공개 제2011/0086833호에 기술된 SMN1 미니유전자의 발현을 조절하는 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 SMA에 대한 비-인간 동물 모델에게 투여함을 포함하는, SMN1 유전자로부터 전사된 RNA 내로의 SMN1의 엑손 7의 혼입을 증대시키는 방법이 제공된다. 한 양태에서, 상기 미니유전자는 국제특허공개 제WO2009/151546호 또는 미국특허공개 제2011/0086833호의 실시예에 기술된 미니유전자이다. 특정 양태에서, 화합물은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태이다.
특정 양태에서, 본원에는 SMA에 대한 비-인간 동물 모델에 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 투여함을 포함하는, SMN1 및 SMN2 유전자로부터 전사된 RNA 내로의 SMN1 및 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키는 방법이 제공된다. 특정 양태에서, 화합물은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태이다.
또 다른 양태에서, 본원에는 인간 세포를 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 접촉시킴을 포함하는, Smn 단백질의 양을 증가시키는 방법이 제공된다. 특정 양태에서, 본원에는 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키는 화학식 I의 화합물과 인간 세포를 접촉시킴을 포함하는, Smn 단백질의 양을 증가시키는 방법이 제공된다. 또 다른 특정 양태에서, 본원에는 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키는 화학식 I의 화합물과 인간 세포를 접촉시킴을 포함하는, Smn 단백질의 양을 증가시키는 방법이 제공된다. 인간 세포는 비-인간 동물 또는 인간에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 시험관내에서 접촉될 수 있다. 특정 양태에서, 인간 세포는 인간에 존재한다. 또 다른 특정 양태에서, 인간 세포는 인간 SMA 환자에 존재한다. 또 다른 특정 양태에서, 인간 세포는 인간 SMA 환자에 존재하며, 이때 SMA는 SMN1 유전자 기능의 손실을 야기하는, 두 염색체 상의 SMN1 유전자에서 불활성화 돌연변이 또는 결실에 의해 야기된다. 또 다른 양태에서, 인간 세포는 인간 SMA 환자로부터의 인간 세포이다. 특정 양태에서, 인간 세포는 GM03813, GM00232, GM09677 및/또는 GM23240(코리엘 인스티튜트에서 이용가능)과 같은 세포주로부터의 세포이다. 특정 양태에서, 화합물은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태이다.
또 다른 양태에서, 본원에는 SMA에 대한 비-인간 동물 모델에게 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 투여함을 포함하는, Smn 단백질의 양을 증가시키는 방법이 제공된다. 특정 양태에서, 본원에는, 예를 들면, 하기 생물학적 실시예에 기술된 바와 같은 세포-기반 또는 무세포 분석법에서 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키는 화학식 I의 화합물을 SMA에 대한 비-인간 동물 모델에게 투여함을 포함하는, Smn 단백질의 양을 증가시키는 방법이 제공된다. 또 다른 특정 양태에서, 본원에는, 예를 들면, 세포-기반 또는 무세포 분석법에서 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키는 화학식 I의 화합물을 SMA에 대한 비-인간 동물 모델에게 투여함을 포함하는, Smn 단백질의 양을 증가시키는 방법이 제공된다.
한 양태에서, 화학식 I의 화합물은 본원에 기술되거나 각각 본원에 전체로 참고로 인용되는 국제특허공개 제WO2009/151546호 또는 미국특허공개 제2011/0086833호에 기술된 미니유전자의 발현을 증대시킨다. 특정 양태에서, 화학식 I의 화합물은 국제특허공개 제WO2009/151546호 또는 미국특허공개 제2011/0086833호의 실시예에 기술된 미니유전자의 발현을 증대시킨다. 또 다른 특정 양태에서, 화학식 I의 화합물은 하기 생물학적 실시예에 기술된 미니유전자의 발현을 증대시킨다. 하나의 양태에서, 화합물은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태이다.
한 양태에서, 본원에는 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키는 약제의 제조를 위한, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도가 제공된다. 또 다른 양태에서, 본원에는 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시킴으로써 이를 필요로 하는 인간 대상에서 Smn 단백질의 발현을 증가시키는 약제의 제조를 위한, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도가 제공된다. 특정 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태는 본원에 기술된 분석법(예를 들면, 하기 생물학적 실시예 참조)에서 SMN2로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시킨다. 특정 양태에서, 화합물은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태이다.
한 양태에서, 본원에는 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키는 약제의 제조를 위한, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도가 제공된다. 또 다른 양태에서, 본원에는 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시킴으로써 이를 필요로 하는 인간 대상에서 Smn 단백질의 발현을 증가시키는 약제의 제조를 위한, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도가 제공된다. 특정 양태에서, 화합물은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태이다.
또 다른 양태에서, 본원에는 효과량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 인간 대상에게 투여함을 포함하는, 이를 필요로 하는 인간 대상에서 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키는 방법이 제공된다. 특정 양태에서, 본원에는 본원에 기술된 분석법(예를 들면, 하기 생물학적 실시예 참조)에서 측정될 때 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키는 효과량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 인간 대상에게 투여함을 포함하는, 이를 필요로 하는 인간 대상에서 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키는 방법이 제공된다. 특정 양태에서, 효과량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태는 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 포함하는 약학 조성물로 인간 대상에게 투여된다. 특정 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태는 본원에 기술된 분석(예를 들면, 하기 생물학적 실시예 참조)에서 SMN2로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시킨다. 특정 양태에서, 인간 대상은 인간 SMA 환자이다. 또 다른 특정 양태에서, 인간 대상은 인간 SMA 환자이며, 이때 SMA는 SMN1 유전자 기능의 손실을 야기하는, 두 염색체 상의 SMN1 유전자에서 불활성화 돌연변이 또는 결실에 의해 야기된다. 하나의 양태에서, 화합물은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태이다.
또 다른 양태에서, 본원에는 효과량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 인간 대상에게 투여함을 포함하는, 이를 필요로 하는 인간 대상에서 SMN1 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN1의 엑손 7의 혼입을 증대시키는 방법이 제공된다. 특정 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태는 국제특허공개 제WO2009/151546호 또는 미국특허공개 제2011/0086833호에 기술된 분석법에서 SMN1 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN1의 엑손 7의 혼입을 증대시킨다. 특정 양태에서, 효과량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태는 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 포함하는 약학 조성물로 인간 대상에게 투여된다. 특정 양태에서, 인간 대상은 인간 SMA 환자이다. 하나의 양태에서, 화합물은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태이다.
또 다른 양태에서, 본원에는 효과량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 인간 대상에게 투여함을 포함하는, 이를 필요로 하는 인간 대상에서 SMN1 및 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN1 및 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키는 방법이 제공된다. 특정 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태는 각각 본원에 전체로 참고로 인용되는 국제특허공개 제WO2009/151546호 또는 미국특허공개 제2011/0086833호(예를 들면, 상기 공개공보에서의 실시예 참조)에 기술된 분석법에서 SMN1 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN1의 엑손 7의 혼입을 증대시킨다. 특정 양태에서, 효과량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태는 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 포함하는 약학 조성물로 인간 대상에게 투여된다. 특정 양태에서, 인간 대상은 인간 SMA 환자이다. 또 다른 특정 양태에서, 인간 대상은 인간 SMA 환자이며, 이때 SMA는 SMN1 유전자 기능의 손실을 야기하는, 두 염색체 상의 SMN1 유전자에서 불활성화 돌연변이 또는 결실에 의해 야기된다. 하나의 양태에서, 화합물은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태이다.
또 다른 양태에서, 본원에는 효과량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 인간 대상에게 투여함을 포함하는, 이를 필요로 하는 인간 대상에서 Smn 단백질의 발현을 증대시키는 방법이 제공된다. 특정 양태에서, 본원에는, SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키는 효과량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 인간 대상에게 투여함을 포함하는, 이를 필요로 하는 인간 대상에서 Smn 단백질의 발현을 증대시키는 방법이 제공된다. 또 다른 특정 양태에서, 본원에는, SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키는 효과량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 인간 대상에게 투여함을 포함하는, 이를 필요로 하는 인간 대상에서 Smn 단백질의 발현을 증대시키는 방법이 제공된다. 특정 양태에서, 효과량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태는 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 포함하는 약학 조성물로 인간 대상에게 투여된다. 특정 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태는 본원에 기술되거나(예를 들면, 하기 생물학적 실시예 참조) 또는 각각 본원에 전체로 참고로 인용되는 국제특허공개 제WO2009/151546호 또는 미국특허공개 제2011/0086833호(예를 들면, 상기 공개공보에서의 실시예 참조)에 기술된 분석법에서 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시킨다.
특정 양태에서, 인간 대상은 인간 SMA 환자이다. 또 다른 특정 양태에서, 인간 대상은 인간 SMA 환자이며, 이때 SMA는 SMN1 유전자 기능의 손실을 야기하는, 두 염색체 상의 SMN1 유전자의 텔로미어 복사체에서 불활성화 돌연변이 또는 결실에 의해 야기된다. 하나의 양태에서, 화합물은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태이다.
또 다른 양태에서, 본원에는 이를 필요로 하는 인간 대상에서 Smn 단백질의 발현을 증대시키는 약제의 제조를 위한, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도가 제공된다. 특정 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태는 본원에 기술된 분석법(예를 들면, 하기 생물학적 실시예 참조)에서 측정될 때 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시킨다. 또 다른 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태는, 각각 본원에 전체로 참고로 인용되는 국제특허공개 제WO2009/151546호 또는 미국특허공개 제2011/0086833호(예를 들면, 상기 공개공보에서의 실시예 참조)에 기술된 분석법에서 측정될 때 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시킨다. 특정 양태에서, 화합물은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태이다.
또 다른 양태에서, 본원에는 효과량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 대상에게 투여함을 포함하는, 척수성 근위축증(SMA)을 치료하는 방법이 제공된다. 특정 양태에서, 본원에는 효과량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 대상에게 투여함을 포함하는, 이를 필요로 하는 인간 대상에서 SMA를 치료하는 방법이 제공된다. 또 다른 특정 양태에서, 본원에는 효과량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태 및 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 포함하는 약학 조성물을 대상에게 투여함을 포함하는, 이를 필요로 하는 인간 대상에서 SMA를 치료하는 방법이 제공된다. 하나의 양태에서, 화합물은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태이다.
또 다른 양태에서, 본원에는, SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키는 효과량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 대상에게 투여함을 포함하는, 이를 필요로 하는 인간 대상에서 SMA를 치료하는 방법이 제공된다. 특정 양태에서, 본원에는, SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키는 효과량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태 및 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 포함하는 약학 조성물을 대상에게 투여함을 포함하는, 이를 필요로 하는 인간 대상에서 SMA를 치료하는 방법이 제공된다. 또 다른 특정 양태에서, 본원에는, SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키는 효과량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태 및 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 포함하는 약학 조성물을 대상에게 투여함을 포함하는, 이를 필요로 하는 인간 대상에서 SMA를 치료하는 방법이 제공된다. 특정 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태는 본원에 기술된 분석법(예를 들면, 하기 생물학적 실시예 참조)에서 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시킨다. 또 다른 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태는, 본원(예를 들면, 하기 생물학적 실시예 참조)에 기술되거나 각각 본원에 전체로 참고로 인용되는 국제특허공개 제WO2009/151546호 또는 미국특허공개 제2011/0086833호(예를 들면, 상기 공개공보에서의 실시예 참조)에 기술된 분석법에서 측정될 때 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시킨다. 특정 양태에서, 화합물은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태이다.
또 다른 양태에서, 본원에는 이를 필요로 하는 인간 대상에서 SMA를 치료하기 위한 약제의 제조에 있어서 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도가 제공된다. 특정 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태는 본원에 기술된 분석법(예를 들면, 하기 생물학적 실시예 참조)에서 측정될 때 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시킨다. 또 다른 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태는, 본원(예를 들면, 하기 생물학적 실시예 참조)에 기술되거나 각각 본원에 전체로 참고로 인용되는 국제특허공개 제WO2009/151546호 또는 미국특허공개 제2011/0086833호(예를 들면, 상기 공개공보에서의 실시예 참조)에 기술된 분석법에서 측정될 때 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시킨다. 특정 양태에서, 화합물은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태이다.
본원에 제공된 용도 또는 방법의 한 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태는 하나 이상의 추가의 약제와 함께 사용된다. 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태는, 대상에게 투여하거나 세포를 추가의 약제와 접촉시키기 전에, 그와 동시에 또는 그 후에, 대상에게 투여되거나 세포와 접촉할 수 있다. 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태 및 추가의 약제는 단일 조성물 또는 상이한 조성물들로 대상에게 투여되거나 세포와 접촉할 수 있다. 특정 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태는 SMN1의 유전자 치환(예를 들면, 바이러스 전달 벡터를 사용하여)과 함께 사용된다. 또 다른 특정 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태는 분화된 SMN1+/+ 및/또는 SMN2+/+ 줄기 세포를 사용하여 세포 치환과 함께 사용된다. 또 다른 특정 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태는 분화된 SMN1+/+ 줄기 세포를 사용하여 세포 치환과 함께 사용된다. 또 다른 특정 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태는 분화된 SMN2+/+ 줄기 세포를 사용하여 세포 치환과 함께 사용된다. 또 다른 특정 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태는 아클라루비신(aclarubicin)과 함께 사용된다. 또 다른 특정 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태는 전사 활성화제, 예를 들면, 히스톤 데아세틸라제("HDAC") 억제제(예를 들면, 부티레이트, 발프로산 및 하이드록시우레아) 및 mRNA 안정화제(예를 들면, 레플리젠으로부터의 mRNA 데캡핑 억제제 RG3039)와 함께 사용된다.
한 양태에서, 본원에는 호흡, 영양 또는 재활 관리를 포함하여 지지 치료와 함께 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도가 제공된다.
특정 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태(단독으로 또는 추가의 약제와 함께)로 SMA를 치료하는 것은 치료 효과 및/또는 유리한 효과를 갖는다. 특정 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태(단독으로 또는 추가의 약제와 함께)로 SMA를 치료하는 것은 다음의 효과들 중 하나, 2개 또는 그 이상을 제공한다: (i) SMA의 중증도를 경감 또는 개선시킨다; (ii) SMA의 발병을 지연시킨다; (iii) SMA의 진행을 억제한다; (iv) 대상의 입원을 단축시킨다; (v) 대상에게 입원 기간을 감소시킨다; (vi) 대상의 생존을 증가시킨다; (vii) 대상의 삶의 질을 개선시킨다; (viii) SMA와 관련된 증상의 수를 감소시킨다; (ix) SMA와 관련된 증상의 중증도를 경감 또는 개선시킨다; (x) SMA와 관련된 증상의 기간을 감소시킨다; (xi) SMA와 관련된 증상의 재발을 방지한다; (xii) SMA의 발병 또는 증상의 개시를 억제한다; 및/또는 (xiii) SMA와 관련된 증상의 진행을 억제한다.
SMA의 증상으로는 근육 약화, 부족한 근긴장, 약한 울음, 약한 기침, 흐느적거림 또는 주저앉는 경향, 빨기 또는 연하 곤란, 호흡 곤란, 폐 또는 목구멍에 분비물의 축적, 땀에 젖은 손으로 꼭쥔 주먹, 혀의 움직임/진동, 누워있을 때조차 빈번히 한쪽으로 기우는 머리, 팔보다 더 약해지는 경향이 있는 다리, 흔히 "개구리 다리" 자세를 나타내는 다리, 섭식 곤란, 호흡기 감염에 대한 증가된 감수성, 장/방광 약화, 표준보다 낮은 체중, 지지 없이 앉지 못함, 걷지 못함, 기지 못함, 및 전각 세포 손실과 관련된 근긴장저하, 무반사 및 다발성 선천성 구축(관절구축증)이 포함된다.
특정 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태(단독으로 또는 추가의 약제와 함께)로 SMA를 치료하는 것은 다음의 효과들 중 하나, 2개 또는 그 이상을 제공한다: (i) 근력 손실의 감소; (ii) 근력의 증가; (iii) 근위축의 감소; (iv) 운동 기능 손실의 감소; (v) 운동 뉴런의 증가: (vii) 운동 뉴런 손실의 감소; (viii) 퇴행으로부터 SMN 결핍 운동 뉴런의 보호; (ix) 운동 기능의 증가; (x) 폐 기능의 증가; 및/또는 (xi) 폐 기능 손실의 감소.
또 다른 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태(단독으로 또는 추가의 약제와 함께)로 SMA를 치료하는 것은 유아 또는 걸음마기 유아가 일어나 앉는 기능적 능력을 제공하거나 상기 기능적 능력을 보유하도록 돕는다. 또 다른 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태(단독으로 또는 추가의 약제와 함께)로 SMA를 치료하는 것은 유아, 걸음마기 유아, 소아 또는 성인이 도움 없이 일어서는 기능적 능력을 제공하거나 상기 기능적 능력을 보유하도록 돕는다. 또 다른 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태(단독으로 또는 추가의 약제와 함께)로 SMA를 치료하는 것은 유아, 걸음마기 유아, 소아 또는 성인이 도움 없이 보행하는 기능적 능력을 제공하거나 상기 기능적 능력을 보유하도록 돕는다. 또 다른 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태(단독으로 또는 추가의 약제와 함께)로 SMA를 치료하는 것은 유아, 걸음마기 유아, 소아 또는 성인이 도움 없이 달리는 기능적 능력을 제공하거나 상기 기능적 능력을 보유하도록 돕는다. 또 다른 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태(단독으로 또는 추가의 약제와 함께)로 SMA를 치료하는 것은 유아, 걸음마기 유아, 소아 또는 성인이 도움 없이 호흡하는 기능적 능력을 제공하거나 상기 기능적 능력을 보유하도록 돕는다. 또 다른 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태(단독으로 또는 추가의 약제와 함께)로 SMA를 치료하는 것은 유아, 걸음마기 유아, 소아 또는 성인이 도움 없이 수면 중 회전하는 기능적 능력을 제공하거나 상기 기능적 능력을 보유하도록 돕는다. 또 다른 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태(단독으로 또는 추가의 약제와 함께)로 SMA를 치료하는 것은 유아, 걸음마기 유아, 소아 또는 성인이 도움 없이 삼키는 기능적 능력을 제공하거나 상기 기능적 능력을 보유하도록 돕는다.
특정 양태에서, 하기 생물학적 실시예에 기술된 프라이머 및/또는 프로브(예를 들면, 서열번호 1, 7, 8, 11 또는 13 및/또는 서열번호 2, 9 또는 12와 같은 SMN 프라이머, 및 서열번호 3 또는 10과 같은 SMN 프로브)는, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태가 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키는지를 측정하기 위해, RT-PCR, RT-qPCR, 종말점 RT-PCR, PCR, qPCR, 회전환 증폭, 노던 블롯 또는 서던 블롯과 같은 분석에 사용된다. 일부 양태에서, 하기 생물학적 실시예에 기술된 프라이머 및/또는 프로브(예를 들면, 서열번호 1, 7, 8, 11 또는 13 및/또는 서열번호 2, 9 또는 12와 같은 SMN 프라이머, 및/또는 서열번호 3 또는 10과 같은 SMN 프로브)는, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태에 대한 환자의 반응을 모니터링하기 위해, RT-PCR, RT-qPCR, 종말점 RT-PCR, PCR, qPCR, 회전환 증폭, 노던 블롯 또는 서던 블롯과 같은 분석, 또는 하기에 기술되는 바와 같은 약학용 또는 분석용 키트에 사용된다.
하나의 양태에서, 하기 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태가 본원에 기술된 바와 같이 사용된다:
화학식 I
상기 식에서,
w1 및 w5는 독립적으로 C-Ra 또는 N이고;
w2는 C-Rb 또는 N이고;
w3, w4 및 w7은 독립적으로 C-R1, C-R2, C-Ra 또는 N이고;
w6은 C-R1, C-R2, C-Rc 또는 N이고;
w3, w4, w6 및 w7 중 하나는 C-R1이고, w3, w4, w6 및 w7 중 다른 하나는 C-R2이되,
w3이 C-R1일 때, w6은 C-R2이고 w4 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이거나,
w3이 C-R2일 때, w6은 C-R1이고 w4 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이거나,
w4가 C-R1일 때, w7은 C-R2이고 w3은 C-Ra 또는 N이고 w6은 C-Rc 또는 N이거나,
w4가 C-R2일 때, w7은 C-R1이고 w3은 C-Ra 또는 N이고 w6은 C-Rc 또는 N이고,
w1, w2, w3, w4, w5, w6 및 w7 중 1, 2 또는 3개는 선택적으로 N일 수 있고;
R1은 C1-8알킬, 아미노, C1-8알킬-아미노, (C1-8알킬)2-아미노, C1-8알콕시-C1-8알킬-아미노, (C1-8알콕시-C1-8알킬)2-아미노, (C1-8알콕시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 아미노-C1-8알킬, C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, C1-8알콕시-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (C1-8알콕시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, (C1-8알콕시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬, 아미노-C1-8알킬-아미노, (아미노-C1-8알킬)2-아미노, (아미노-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, C1-8알킬-아미노-C1-8알킬-아미노, (C1-8알킬-아미노-C1-8알킬)2-아미노, (C1-8알킬-아미노-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, (C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬-아미노, [(C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬](C1-8알킬)아미노, 아미노-C1-8알콕시, C1-8알킬-아미노-C1-8알콕시, (C1-8알킬)2-아미노-C1-8알콕시, C1-8알콕시-C1-8알킬-아미노-C1-8알콕시, C1-8알콕시-C1-8알킬-아미노-C1-8알콕시, (C1-8알콕시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알콕시, 아미노-C2-8알켄일, C1-8알킬-아미노-C2-8알켄일, (C1-8알킬)2-아미노-C2-8알켄일, 아미노-C2-8알킨일, C1-8알킬-아미노-C2-8알킨일, (C1-8알킬)2-아미노-C2-8알킨일, 할로-C1-8알킬-아미노, (할로-C1-8알킬)2-아미노, (할로-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 하이드록시-C1-8알킬, 하이드록시-C1-8알콕시-C1-8알킬, 하이드록시-C1-8알킬-아미노, (하이드록시-C1-8알킬)2-아미노, (하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 하이드록시-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (하이드록시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, (하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬, 하이드록시-C1-8알킬-아미노-C1-8알콕시, (하이드록시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알콕시, (하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알콕시, 하이드록시-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬-아미노, (하이드록시-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬)2-아미노, (하이드록시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬-아미노, (하이드록시-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, (하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬-아미노, [(하이드록시-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬](C1-8알킬)아미노, [(하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬](C1-8알킬)아미노, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-C1-8알킬, 헤테로사이클릴-C1-8알콕시, 헤테로사이클릴-아미노, (헤테로사이클릴)(C1-8알킬)아미노, 헤테로사이클릴-아미노-C1-8알킬, 헤테로사이클릴-C1-8알킬-아미노, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)2-아미노, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 헤테로사이클릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, (헤테로사이클릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬, 헤테로사이클릴-옥시, 헤테로사이클릴-카본일, 헤테로사이클릴-카본일-옥시, C3-14사이클로알킬, 아릴-C1-8알킬-아미노, (아릴-C1-8알킬)2-아미노, (아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 아릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (아릴-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, (아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴-C1-8알킬, 헤테로아릴-C1-8알콕시, 헤테로아릴-아미노, 헤테로아릴-C1-8알킬-아미노, (헤테로아릴-C1-8알킬)2-아미노, (헤테로아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, 헤테로아릴-C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (헤테로아릴-C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬 또는 (헤테로아릴-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노-C1-8알킬이고,
이때 헤테로사이클릴, C3-14사이클로알킬, 아릴 및 헤테로아릴은 각각의 경우에 1, 2 또는 3개의 R3 치환기로 선택적으로 치환되고, 1개의 추가 R4 치환기로 선택적으로 치환되거나,
헤테로사이클릴, C3-14사이클로알킬, 아릴 및 헤테로아릴은 각각의 경우에 1, 2, 3 또는 4개의 R3 치환기로 선택적으로 치환되고;
R2는 아릴, 아릴-아미노, 아릴-아미노-카본일, 헤테로사이클릴, 헤테로아릴 또는 헤테로아릴-아미노이고,
이때 아릴, 헤테로사이클릴 및 헤테로아릴은 각각의 경우에 1, 2 또는 3개의 R6 치환기로 선택적으로 치환되고, 1개의 추가 R7 치환기로 선택적으로 치환되고;
Ra는 각각의 경우에 독립적으로 수소, 할로겐 및 C1-8알킬로부터 선택되고;
Rb는 수소, 할로겐, C1-8알킬 또는 C1-8알콕시이고;
R3은 각각의 경우에 독립적으로 시아노, 할로겐, 하이드록시, 옥소, C1-8알킬, 할로-C1-8알킬, C1-8알킬-카본일, C1-8알콕시, 할로-C1-8알콕시, C1-8알콕시-C1-8알킬, C1-8알콕시-카본일, 아미노, C1-8알킬-아미노, (C1-8알킬)2-아미노, 아미노-C1-8알킬, C1-8알킬-아미노-C1-8알킬, (C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬, 아미노-C1-8알킬-아미노, C1-8알킬-아미노-C1-8알킬-아미노, (C1-8알킬-아미노-C1-8알킬)2-아미노, (C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬-아미노, [(C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬]2-아미노, (C1-8알킬-아미노-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, [(C1-8알킬)2-아미노-C1-8알킬](C1-8알킬)아미노, C1-8알콕시-C1-8알킬-아미노, (C1-8알콕시-C1-8알킬)2-아미노, (C1-8알콕시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노, C1-8알킬-카본일-아미노, C1-8알콕시-카본일-아미노, 하이드록시-C1-8알킬, 하이드록시-C1-8알콕시-C1-8알킬, 하이드록시-C1-8알킬-아미노, (하이드록시-C1-8알킬)2-아미노 또는 (하이드록시-C1-8알킬)(C1-8알킬)아미노이고;
R4는 C3-14사이클로알킬, C3-14사이클로알킬-C1-8알킬, C3-14사이클로알킬-아미노, 아릴-C1-8알킬, 아릴-C1-8알콕시-카본일, 아릴-설폰일옥시-C1-8알킬, 헤테로사이클릴 또는 헤테로사이클릴-C1-8알킬이고,
이때 C3-14사이클로알킬, 아릴 및 헤테로사이클릴은 각각의 경우에 1, 2 또는 3개의 R5 치환기로 선택적으로 치환되고;
R5는 각각의 경우에 독립적으로 할로겐, 하이드록시, 시아노, 니트로, C1-8알킬, 할로-C1-8알킬, C1-8알콕시, 할로-C1-8알콕시, 아미노, C1-8알킬-아미노, (C1-8알킬)2-아미노 및 C1-8알킬-티오로부터 선택되고;
R6은 각각의 경우에 독립적으로 할로겐, 하이드록시, 시아노, 니트로, C1-8알킬, C2-8알켄일, 할로-C1-8알킬, 하이드록시-C1-8알킬, C1-8알콕시, 할로-C1-8알콕시, C1-8알콕시-C1-8알킬, 아미노, C1-8알킬-아미노, (C1-8알킬)2-아미노 및 C1-8알킬-티오로부터 선택되고;
R7은 C3-14사이클로알킬, C3-14사이클로알킬-옥시, 아릴, 헤테로사이클릴 또는 헤테로아릴이다.
화학식 I의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV, 화학식 V, 화학식 VI, 화학식 VII, 화학식 VIII, 화학식 IX, 화학식 X, 화학식 XI, 화학식 XII, 화학식 XIII 및 화학식 XIV의 화합물로부터 선택된 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 II
화학식 III
화학식 IV
화학식 V
화학식 VI
화학식 VII
화학식 VIII
화학식 IX
화학식 X
화학식 XI
화학식 XII
화학식 XIII
화학식 XIV
화학식 I의 화합물의 용도의 하나의 양태에서, w3은 C-R1이고, w6은 C-R2이고, w1, w4, w5 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이다.
화학식 I의 화합물의 용도의 다른 양태에서, w3은 C-R2이고, w6은 C-R1이고, w1, w4, w5 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이다.
화학식 I의 화합물의 용도의 다른 양태에서, w4는 C-R1이고, w7은 C-R2이고, w1, w3 및 w5는 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이고, w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 I의 화합물의 용도의 다른 양태에서, w4는 C-R2이고, w7은 C-R1이고, w1, w3 및 w5는 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이고, w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 II의 화합물의 용도의 하나의 양태에서, w3은 C-R1이고, w6은 C-R2이고, w4, w5 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이다.
화학식 II의 화합물의 용도의 다른 양태에서, w3은 C-R2이고, w6은 C-R1이고, w4, w5 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이다.
화학식 II의 화합물의 용도의 다른 양태에서, w4는 C-R1이고, w7은 C-R2이고, w3 및 w5는 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이고, w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 II의 화합물의 용도의 다른 양태에서, w4는 C-R2이고, w7은 C-R1이고, w3 및 w5는 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이고, w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 III의 화합물의 용도의 하나의 양태에서, w3은 C-R1이고, w6은 C-R2이고, w1, w4, w5 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이다.
화학식 III의 화합물의 용도의 다른 양태에서, w3은 C-R2이고, w6은 C-R1이고, w1, w4, w5 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이다.
화학식 III의 화합물의 용도의 다른 양태에서, w4는 C-R1이고, w7은 C-R2이고, w1, w3 및 w5는 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 III의 화합물의 용도의 다른 양태에서, w4는 C-R2이고, w7은 C-R1이고, w1, w3 및 w5는 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 IV의 화합물의 용도의 하나의 양태에서, w4는 C-R1이고, w7은 C-R2이고, w1 및 w5는 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이고, w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 IV의 화합물의 용도의 다른 양태에서, w4는 C-R2이고, w7은 C-R1이고, w1 및 w5는 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이고, w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 V의 화합물의 용도의 하나의 양태에서, w3은 C-R1이고, w6은 C-R2이고, w1, w5 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이다.
화학식 V의 화합물의 용도의 다른 양태에서, w3은 C-R2이고, w6은 C-R1이고, w1, w5 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이다.
화학식 VI의 화합물의 용도의 하나의 양태에서, w3은 C-R1이고, w6은 C-R2이고, w1, w4 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이다.
화학식 VI의 화합물의 용도의 다른 양태에서, w3은 C-R2이고, w6은 C-R1이고, w1, w4 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이다.
화학식 VI의 화합물의 용도의 다른 양태에서, w4는 C-R1이고, w7은 C-R2이고, w1 및 w3은 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이고, w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 VI의 화합물의 용도의 다른 양태에서, w4는 C-R2이고, w7은 C-R1이고, w1 및 w3은 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이고, w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 VII의 화합물의 용도의 다른 양태에서, w4는 C-R1이고, w7은 C-R2이고, w1, w3 및 w5는 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이다.
화학식 VII의 화합물의 용도의 다른 양태에서, w4는 C-R2이고, w7은 C-R1이고, w1, w3 및 w5는 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이다.
화학식 VIII의 화합물의 용도의 다른 양태에서, w3은 C-R1이고, w6은 C-R2이고, w1, w4 및 w5는 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이다.
화학식 VIII의 화합물의 용도의 다른 양태에서, w3은 C-R2이고, w6은 C-R1이고, w1, w4 및 w5는 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이다.
화학식 IX의 화합물의 용도의 하나의 양태에서, w3은 C-R1이고, w6은 C-R2이고, w4 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이다.
화학식 IX의 화합물의 용도의 다른 양태에서, w3은 C-R2이고, w6은 C-R1이고, w4 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w2는 C-Rb 또는 N이다.
화학식 IX의 화합물의 용도의 다른 양태에서, w4는 C-R1이고, w7은 C-R2이고, w2는 C-Rb 또는 N이고, w3은 C-Ra 또는 N이고, w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 IX의 화합물의 용도의 다른 양태에서, w4는 C-R2이고, w7은 C-R1이고, w2는 C-Rb 또는 N이고, w3은 C-Ra 또는 N이고, w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 X의 화합물의 용도의 하나의 양태에서, w3은 C-R1이고, w6은 C-R2이고, w2는 C-Rb 또는 N이고, w5 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이다.
화학식 X의 화합물의 용도의 다른 양태에서, w3은 C-R2이고, w6은 C-R1이고, w2는 C-Rb 또는 N이고, w5 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이다.
화학식 XI의 화합물의 용도의 하나의 양태에서, w4는 C-R1이고, w7은 C-R2이고, w2는 C-Rb 또는 N이고, w5는 C-Ra 또는 N이고, w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 XI의 화합물의 용도의 다른 양태에서, w4는 C-R2이고, w7은 C-R1이고, w2는 C-Rb 또는 N이고, w5는 C-Ra 또는 N이고, w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 XII의 화합물의 용도의 하나의 양태에서, w3은 C-R1이고, w6은 C-R2이고, w4, w5 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이다.
화학식 XII의 화합물의 용도의 다른 양태에서, w3은 C-R2이고, w6은 C-R1이고, w4, w5 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이다.
화학식 XII의 화합물의 용도의 다른 양태에서, w4는 C-R1이고, w7은 C-R2이고, w3 및 w5는 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 XII의 화합물의 용도의 다른 양태에서, w4는 C-R2이고, w7은 C-R1이고, w3 및 w5는 독립적으로 C-Ra 또는 N이고, w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 XIII의 화합물의 용도의 하나의 양태에서, w3은 C-R1이고, w6은 C-R2이고, w2는 C-Rb 또는 N이고, w4 및 w5는 독립적으로 C-Ra 또는 N이다.
화학식 XIII의 화합물의 용도의 다른 양태에서, w3은 C-R2이고, w6은 C-R1이고, w2는 C-Rb 또는 N이고, w4 및 w5는 독립적으로 C-Ra 또는 N이다.
화학식 XIV의 화합물의 용도의 하나의 양태에서, w4는 C-R1이고, w7은 C-R2이고, w2는 C-Rb 또는 N이고, w3 및 w5는 독립적으로 C-Ra 또는 N이다.
화학식 XIV의 화합물의 용도의 다른 양태에서, w4는 C-R2이고, w7은 C-R1이고, w2는 C-Rb 또는 N이고, w3 및 w5는 독립적으로 C-Ra 또는 N이다.
화학식 I의 화합물의 용도의 다른 양태는 하기 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IX, 화학식 XI 및 화학식 XII의 화합물로부터 선택된 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 II
화학식 III
화학식 IX
화학식 XI
화학식 XII
화학식 I의 화합물의 용도의 다른 양태는 하기 화학식 II의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 II
화학식 I의 화합물의 용도의 다른 양태는 하기 화학식 III의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 III
화학식 I의 화합물의 용도의 다른 양태는 하기 화학식 IV의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 IV
화학식 I의 화합물의 용도의 다른 양태는 하기 화학식 V의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 V
화학식 I의 화합물의 용도의 다른 양태는 하기 화학식 VI의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 VI
화학식 I의 화합물의 용도의 다른 양태는 하기 화학식 VII의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 VII
화학식 I의 화합물의 용도의 다른 양태는 하기 화학식 VIII의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 VIII
화학식 I의 화합물의 용도의 다른 양태는 하기 화학식 IX의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 IX
화학식 I의 화합물의 용도의 다른 양태는 하기 화학식 X의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 X
화학식 I의 화합물의 용도의 다른 양태는 하기 화학식 XI의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 XI
화학식 I의 화합물의 다른 양태는 하기 화학식 XII의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 XII
화학식 I의 화합물의 용도의 다른 양태는 하기 화학식 XIII의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 XIII
화학식 I의 화합물의 용도의 다른 양태는 하기 화학식 XIV의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 XIV
화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV, 화학식 V, 화학식 VI, 화학식 VII, 화학식 VIII, 화학식 IX, 화학식 X, 화학식 XI, 화학식 XII, 화학식 XIII 또는 화학식 XIV의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 Ia, 화학식 IIa, 화학식 IIIa, 화학식 IVa, 화학식 Va, 화학식 VIa, 화학식 VIIa, 화학식 VIIIa, 화학식 IXa, 화학식 Xa, 화학식 XIa, 화학식 XIIa, 화학식 XIIIa 및 화학식 XIVa의 화합물로부터 선택된 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 Ia
화학식 IIa
화학식 IIIa
화학식 IVa
화학식 Va
화학식 VIa
화학식 VIIa
화학식 VIIIa
화학식 Xa
화학식 IXa
화학식 XIa
화학식 XIIa
화학식 XIIIa
화학식 XIVa
화학식 Ia의 화합물의 용도의 하나의 양태에서, w3, w4, w6 및 w7 중 하나는 C-R1이고, w3, w4, w6 및 w7 중 다른 하나는 C-R2이되,
w3이 C-R1일 때, w6은 C-R2이고 w4 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이거나;
w3이 C-R2일 때, w6은 C-R1이고 w4 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이거나;
w4가 C-R1일 때, w7은 C-R2이고 w3은 C-Ra 또는 N이고 w6은 C-Rc 또는 N이거나;
w4가 C-R2일 때, w7은 C-R1이고 w3은 C-Ra 또는 N이고 w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 IIa의 화합물의 용도의 하나의 양태에서, w3, w4, w6 및 w7 중 하나는 C-R1이고, w3, w4, w6 및 w7 중 다른 하나는 C-R2이되,
w3이 C-R1일 때, w6은 C-R2이고 w4 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이거나;
w3이 C-R2일 때, w6은 C-R1이고 w4 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이거나;
w4가 C-R1일 때, w7은 C-R2이고 w3은 C-Ra 또는 N이고 w6은 C-Rc 또는 N이거나;
w4가 C-R2일 때, w7은 C-R1이고 w3은 C-Ra 또는 N이고 w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 IIIa의 화합물의 용도의 하나의 양태에서, w3, w4, w6 및 w7 중 하나는 C-R1이고, w3, w4, w6 및 w7 중 다른 하나는 C-R2이되,
w3이 C-R1일 때, w6은 C-R2이고 w4 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이거나;
w3이 C-R2일 때, w6은 C-R1이고 w4 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이거나;
w4가 C-R1일 때, w7은 C-R2이고 w3은 C-Ra 또는 N이고 w6은 C-Rc 또는 N이거나;
w4가 C-R2일 때, w7은 C-R1이고 w3은 C-Ra 또는 N이고 w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 IVa의 화합물의 용도의 하나의 양태에서, w4 및 w7 중 하나는 C-R1이고 나머지는 C-R2이되, w4가 C-R1일 때, w7은 C-R2이거나; w4가 C-R2일 때, w7은 C-R1이다.
화학식 Va의 화합물의 용도의 하나의 양태에서, w3 및 w6 중 하나는 C-R1이고 나머지는 C-R2이되, w3이 C-R1일 때, w6은 C-R2이거나; w3이 C-R2일 때, w6은 C-R1이다.
화학식 VIa의 화합물의 용도의 하나의 양태에서, w3, w4, w6 및 w7 중 하나는 C-R1이고, w3, w4, w6 및 w7 중 다른 하나는 C-R2이되,
w3이 C-R1일 때, w6은 C-R2이고 w4 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이거나;
w3이 C-R2일 때, w6은 C-R1이고 w4 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이거나;
w4가 C-R1일 때, w7은 C-R2이고 w3은 C-Ra 또는 N이고 w6은 C-Rc 또는 N이거나;
w4가 C-R2일 때, w7은 C-R1이고 w3은 C-Ra 또는 N이고 w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 VIIa의 화합물의 용도의 하나의 양태에서, w4 및 w7 중 하나는 C-R1이고 나머지는 C-R2이되, w4가 C-R1일 때, w7은 C-R2이거나; w4가 C-R2일 때, w7은 C-R1이다.
화학식 VIIIa의 화합물의 용도의 하나의 양태에서, w3 및 w6 중 하나는 C-R1이고 나머지는 C-R2이되, w3이 C-R1일 때, w6은 C-R2이거나; w3이 C-R2일 때, w6은 C-R1이다.
화학식 IXa의 화합물의 용도의 하나의 양태에서, w3, w4, w6 및 w7 중 하나는 C-R1이고, w3, w4, w6 및 w7 중 다른 하나는 C-R2이되,
w3이 C-R1일 때, w6은 C-R2이고 w4 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이거나;
w3이 C-R2일 때, w6은 C-R1이고 w4 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이거나;
w4가 C-R1일 때, w7은 C-R2이고 w3은 C-Ra 또는 N이고 w6은 C-Rc 또는 N이거나;
w4가 C-R2일 때, w7은 C-R1이고 w3은 C-Ra 또는 N이고 w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 Xa의 화합물의 용도의 하나의 양태에서, w3 및 w6 중 하나는 C-R1이고 나머지는 C-R2이되, w3이 C-R1일 때, w6은 C-R2이거나; w3이 C-R2일 때, w6은 C-R1이다.
화학식 XIa의 화합물의 용도의 하나의 양태에서, w4 및 w7 중 하나는 C-R1이고 나머지는 C-R2이되, w4가 C-R1일 때, w7은 C-R2이거나; w4가 C-R2일 때, w7은 C-R1이다.
화학식 XIIa의 화합물의 용도의 하나의 양태에서, w3, w4, w6 및 w7 중 하나는 C-R1이고, w3, w4, w6 및 w7 중 다른 하나는 C-R2이되,
w3이 C-R1일 때, w6은 C-R2이고 w4 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이거나;
w3이 C-R2일 때, w6은 C-R1이고 w4 및 w7은 독립적으로 C-Ra 또는 N이거나;
w4가 C-R1일 때, w7은 C-R2이고 w3은 C-Ra 또는 N이고 w6은 C-Rc 또는 N이거나;
w4가 C-R2일 때, w7은 C-R1이고 w3은 C-Ra 또는 N이고 w6은 C-Rc 또는 N이다.
화학식 XIIIa의 화합물의 용도의 하나의 양태에서, w3 및 w6 중 하나는 C-R1이고 나머지는 C-R2이되, w3이 C-R1일 때, w6은 C-R2이거나; w3이 C-R2일 때, w6은 C-R1이다.
화학식 XIVa의 화합물의 용도의 하나의 양태에서, w4 및 w7 중 하나는 C-R1이고 나머지는 C-R2이되, w4가 C-R1일 때, w7은 C-R2이거나; w4가 C-R2일 때, w7은 C-R1이다.
화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IX, 화학식 XI 또는 화학식 XII의 화합물의 용도의 하나의 양태는 각각 하기 화학식 Ia, 화학식 IIa, 화학식 IIIa, 화학식 IXa, 화학식 XIa 및 화학식 XIIa의 화합물로부터 선택된 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 Ia
화학식 IIa
화학식 IIIa
화학식 IXa
화학식 XIa
화학식 XIIa
화학식 I의 화합물의 용도의 다른 양태는 하기 화학식 Ia의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 Ia
화학식 II의 화합물의 용도의 다른 양태는 하기 화학식 IIa의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 IIa
화학식 III의 화합물의 용도의 다른 양태는 하기 화학식 IIIa의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 IIIa
화학식 IV의 화합물의 용도의 다른 양태는 하기 화학식 IVa의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 IVa
화학식 V의 화합물의 용도의 다른 양태는 하기 화학식 Va의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 Va
화학식 VI의 화합물의 용도의 다른 양태는 하기 화학식 VIa의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 VIa
화학식 VII의 화합물의 용도의 다른 양태는 하기 화학식 VIIa의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 VIIa
화학식 VIII의 화합물의 용도의 다른 양태는 하기 화학식 VIIIa의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 VIIIa
화학식 IX의 화합물의 용도의 다른 양태는 하기 화학식 IXa의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 IXa
화학식 X의 화합물의 용도의 다른 양태는 하기 화학식 Xa의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 Xa
화학식 XI의 화합물의 용도의 다른 양태는 하기 화학식 XIa의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 XIa
화학식 XII의 화합물의 용도의 다른 양태는 하기 화학식 XIIa의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 XIIa
화학식 XIII의 화합물의 용도의 다른 양태는 하기 화학식 XIIIa의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 XIIIa
화학식 XIV의 화합물의 용도의 다른 양태는 하기 화학식 XIVa의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 XIVa
화학식 Ia의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 Ia1, 화학식 Ia2, 화학식 Ia3 또는 화학식 Ia4의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 Ia1
화학식 Ia2
화학식 Ia3
화학식 Ia4
화학식 IIa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 IIa1, 화학식 IIa2, 화학식 IIa3 또는 화학식 IIa4의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 IIa1
화학식 IIa2
화학식 IIa3
화학식 IIa4
화학식 IIIa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 IIIa1, 화학식 IIIa2, 화학식 IIIa3 또는 화학식 IIIa4의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 IIIa1
화학식 IIIa2
화학식 IIIa3
화학식 IIIa4
화학식 IVa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 IVa1 또는 화학식 IVa2의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 IVa1
화학식 IVa2
화학식 Va의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 Va1 또는 화학식 Va2의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 Va1
화학식 Va2
화학식 VIa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 VIa1, 화학식 VIa2, 화학식 VIa3 또는 화학식 VIa2의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 VIa1
화학식 VIa2
화학식 VIa3
화학식 VIa4
화학식 VIIa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 VIIa1 또는 화학식 VIIa2의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 VIIa1
화학식 VIIa2
화학식 VIIIa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 VIIIa1 또는 화학식 VIIIa2의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 VIIIa1
화학식 VIIIa2
화학식 IXa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 IXa1, 화학식 IXa2, 화학식 IXa3 또는 화학식 IXa4의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 IXa1
화학식 IXa2
화학식 IXa3
화학식 IXa4
화학식 Xa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 Xa1 또는 화학식 Xa2의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 Xa1
화학식 Xa2
화학식 XIa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 XIa1 또는 화학식 XIa2의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 XIa1
화학식 XIa2
화학식 XIIa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 XIIa1, 화학식 XIIa2, 화학식 XIIa3 또는 화학식 XIIa4의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 XIIa1
화학식 XIIa2
화학식 XIIa3
화학식 XIIa4
화학식 XIIIa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 XIIIa1 또는 화학식 XIIIa2의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 XIIIa1
화학식 XIIIa2
화학식 XIVa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 XIVa1 또는 화학식 XIVa2의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 XIVa1
화학식 XIVa2
화학식 Ia의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 Ia1의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 Ia1
화학식 Ia의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 Ia2의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 Ia2
화학식 Ia의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 Ia3의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 Ia3
화학식 Ia의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 Ia4의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 IIa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 IIa1의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 IIa1
화학식 IIa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 IIa2의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 IIa2
화학식 IIa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 IIa3의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 IIa3
화학식 IIa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 IIa4의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 IIa4
화학식 IIIa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 IIIa1의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 IIIa1
화학식 IIIa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 IIIa2의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 IIIa2
화학식 IIIa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 IIIa3의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 IIIa3
화학식 IIIa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 IIIa4의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 IIIa4
화학식 IVa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 IVa1의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 IVa1
화학식 IVa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 IVa2의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 IVa2
화학식 Va의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 Va1의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 Va1
화학식 Va의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 Va2의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 Va2
화학식 VIa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 VIa1의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 VIa1
화학식 VIa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 VIa2의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 VIa2
화학식 VIa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 VIa3의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 VIa3
화학식 VIa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 VIa4의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 VIa4
화학식 VIIa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 VIIa1의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 VIIa1
화학식 VIIa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 VIIa2의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 VIIa2
화학식 VIIIa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 VIIIa1의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 VIIIa1
화학식 VIIIa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 VIIIa2의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 VIIIa2
화학식 IXa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 IXa1의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 IXa1
화학식 IXa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 IXa2의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 IXa2
화학식 IXa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 IXa3의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 IXa3
화학식 IXa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 IXa4의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 IXa4
화학식 Xa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 Xa1의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 Xa1
화학식 Xa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 Xa2의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 Xa2
화학식 XIa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 XIa1의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 XIa1
화학식 XIa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 XIa2의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 XIa2
화학식 XIIa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 XIIa1의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 XIIa1
화학식 XIIa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 XIIa2의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 XIIa2
화학식 XIIa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 XIIa3의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 XIIa3
화학식 XIIa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 XIIa4의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 XIIa4
화학식 XIIIa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 XIIIa1의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 XIIIa1
화학식 XIIIa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 XIIIa2의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 XIIIa2
화학식 XIVa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 XIVa1의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 XIVa1
화학식 XIVa의 화합물의 용도의 하나의 양태는 하기 화학식 XIVa2의 화합물 또는 이의 한 형태의 용도이다:
화학식 XIVa2
환자 집단
일부 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약학 조성물은 SMA를 앓고 있는 대상에게 투여된다. 다른 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태는 SMA에 걸리기 쉽거나 그에 민감한 대상에게 투여된다. 특정 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약학 조성물은 SMA를 갖는 인간 대상에게 투여되되, SMA는 SMN1 유전자 기능의 손실을 야기하는 두 염색체 상에서의 SMN1 유전자에서 불활성화 돌연변이 또는 결실에 의해 야기된다. 특정 양태에서, 상기 인간 대상은, 대상이 SMN1 유전자 기능의 손실을 야기하는 두 염색체에서 SMN1 유전자의 텔로미어 복사체에 불활성화 돌연변이 또는 결실을 갖는지를 측정하기 위해, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태 또는 이의 약학 조성물의 투여 전에 유전자형결정된다. 일부 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약학 조성물은 제0형 SMA를 갖는 대상에게 투여된다. 일부 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약학 조성물은 제1형 SMA를 갖는 대상에게 투여된다. 다른 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약학 조성물은 제2형 SMA를 갖는 대상에게 투여된다. 다른 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약학 조성물은 제3형 SMA를 갖는 대상에게 투여된다. 일부 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약학 조성물은 제4형 SMA를 갖는 대상에게 투여된다. 특정 양태에서, 인간 대상은 SMA 환자이다.
특정 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약학 조성물은, SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 2의 증대된 혼입으로부터 이익을 얻을 것이거나 얻을 수 있는 대상에게 투여된다. 특정 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약학 조성물은 증대된 Smn 단백질 발현으로부터 이익을 얻을 것이거나 얻을 수 있는 대상에게 투여된다.
특정 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약학 조성물은, 약 0 내지 약 6개월, 약 6 내지 약 12개월, 약 6 내지 약 18개월, 약 18 내지 약 36개월, 약 1 내지 약 5세, 약 5 내지 약 10세, 약 10 내지 약 15세, 약 15 내지 약 20세, 약 20 내지 약 25세, 약 25 내지 약 30세, 약 30 내지 약 35세, 약 35 내지 약 40세, 약 40 내지 약 45세, 약 45 내지 약 50세, 약 50 내지 약 55세, 약 55 내지 약 60세, 약 60 내지 약 65세, 약 65 내지 약 70세, 약 70 내지 약 75세, 약 75 내지 약 80세, 약 80 내지 약 85세, 약 85 내지 약 90세, 약 90 내지 약 95세 또는 약 95 내지 약 100세 범위의 연령을 갖는 인간에게 투여된다.
일부 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약학 조성물은 유아에게 투여된다. 다른 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약학 조성물은 걸음마기 유아에게 투여된다. 다른 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약학 조성물은 소아에게 투여된다. 다른 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약학 조성물은 성인에게 투여된다. 또 다른 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약학 조성물은 노인에게 투여된다.
일부 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약학 조성물은 SMA가 발병할 위험이 있는 환자에서 SMA의 발병을 방지하기 위해 환자에게 투여된다. 다른 양태에서, 효과량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약학 조성물이 SMA가 발병할 위험이 있는 환자에서 SMA의 발병을 방지하기 위해 환자에게 투여된다. 다른 양태에서, 예방 효과량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약학 조성물이 SMA가 발병할 위험이 있는 환자에서 SMA의 발병을 방지하기 위해 환자에게 투여된다. 다른 양태에서, 치료 효과량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약학 조성물이 SMA가 발병할 위험이 있는 환자에서 SMA의 발병을 방지하기 위해 환자에게 투여된다.
일부 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약학 조성물은 SMA를 치료하거나 개선하기 위해 SMA 환자에게 투여된다. 다른 양태에서, 효과량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약학 조성물이 SMA를 치료하거나 개선하기 위해 SMA 환자에게 투여된다. 다른 양태에서, 예방 효과량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약학 조성물이 SMA의 진전을 방지하기 위해 SMA 환자에게 투여된다. 다른 양태에서, 치료 효과량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약학 조성물이 SMA를 치료하거나 개선하기 위해 SMA 환자에게 투여된다.
일부 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약제는 SMA를 앓고 있는 대상에게 투여된다. 다른 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태는 SMA에 걸리기 쉽거나 그에 민감한 대상에게 투여된다. 특정 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약제는 SMA를 갖는 인간 대상에게 투여되되, SMA는 SMN1 유전자 기능의 손실을 야기하는 두 염색체 상에서의 SMN1 유전자에서 불활성화 돌연변이 또는 결실에 의해 야기된다. 특정 양태에서, 상기 인간 대상은, 대상이 SMN1 유전자 기능의 손실을 야기하는 두 염색체 상에서의 SMN1 유전자의 텔로미어 복사체에 불활성화 돌연변이 또는 결실을 갖는지를 측정하기 위해, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태 또는 이의 약제의 투여 전에 유전자형결정된다. 일부 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약제는 제0형 SMA를 갖는 대상에게 투여된다. 일부 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약제는 제1형 SMA를 갖는 대상에게 투여된다. 다른 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약제는 제2형 SMA를 갖는 대상에게 투여된다. 다른 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약제는 제3형 SMA를 갖는 대상에게 투여된다. 일부 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약제는 제4형 SMA를 갖는 대상에게 투여된다. 특정 양태에서, 인간 대상은 SMA 환자이다.
특정 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약제는, SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 2의 증대된 혼입으로부터 이익을 얻을 것이거나 얻을 수 있는 대상에게 투여된다. 특정 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약제는 증대된 Smn 단백질 발현으로부터 이익을 얻을 것이거나 얻을 수 있는 대상에게 투여된다.
특정 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약제는, 약 0 내지 약 6개월, 약 6 내지 약 12개월, 약 6 내지 약 18개월, 약 18 내지 약 36개월, 약 1 내지 약 5세, 약 5 내지 약 10세, 약 10 내지 약 15세, 약 15 내지 약 20세, 약 20 내지 약 25세, 약 25 내지 약 30세, 약 30 내지 약 35세, 약 35 내지 약 40세, 약 40 내지 약 45세, 약 45 내지 약 50세, 약 50 내지 약 55세, 약 55 내지 약 60세, 약 60 내지 약 65세, 약 65 내지 약 70세, 약 70 내지 약 75세, 약 75 내지 약 80세, 약 80 내지 약 85세, 약 85 내지 약 90세, 약 90 내지 약 95세 또는 약 95 내지 약 100세 범위의 연령을 갖는 인간에게 투여된다.
일부 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약제는 유아에게 투여된다. 다른 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약제는 걸음마기 유아에게 투여된다. 다른 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약제는 소아에게 투여된다. 다른 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약제는 성인에게 투여된다. 또 다른 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약제는 노인에게 투여된다.
일부 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약제는 SMA가 발병할 위험이 있는 환자에서 SMA의 발병을 방지하기 위해 환자에게 투여된다. 다른 양태에서, 효과량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약제가 SMA가 발병할 위험이 있는 환자에서 SMA의 발병을 방지하기 위해 환자에게 투여된다. 다른 양태에서, 예방 효과량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약제가 SMA가 발병할 위험이 있는 환자에서 SMA의 발병을 방지하기 위해 환자에게 투여된다. 다른 양태에서, 치료 효과량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약제가 SMA가 발병할 위험이 있는 환자에서 SMA의 발병을 방지하기 위해 환자에게 투여된다.
일부 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약제는 SMA를 치료하거나 개선하기 위해 SMA 환자에게 투여된다. 다른 양태에서, 효과량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약제가 SMA를 치료하거나 개선하기 위해 SMA 환자에게 투여된다. 다른 양태에서, 예방 효과량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약제가 SMA의 진전을 방지하기 위해 SMA 환자에게 투여된다. 다른 양태에서, 치료 효과량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 약제가 SMA를 치료하거나 개선하기 위해 SMA 환자에게 투여된다.
투여 방식
환자에게 투여될 때, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태는 바람직하게는 선택적으로 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 포함하는 조성물의 한 성분으로서 투여된다. 상기 조성물은 경구로, 또는 임의의 다른 편리한 경로에 의해, 예를 들면, 주입 또는 볼루스(bolus) 주사에 의해, 상피 또는 피부점막 내벽(예를 들면, 구강 점막, 직장 및 장 점막)을 통한 흡수에 의해 투여될 수 있으며, 또 다른 생물 활성 약제와 함께 투여될 수 있다. 투여는 전신 또는 국소적일 수 있다. 다양한 전달 시스템, 예를 들면, 리포좀내 캡슐화, 미세입자, 미세캡슐, 캡슐이 알려져 있으며, 화합물을 투여하기 위해 사용될 수 있다.
투여 방법으로는 비경구, 피내, 근육내, 복강내, 정맥내, 피하, 코내, 경막외, 경구, 설하, 코내, 뇌내, 질내, 경피, 직장, 흡입에 의해, 또는 국소적으로, 특히 귀, 코, 눈 또는 피부에 국소적 투여가 포함되나, 이로 한정되지는 않는다. 투여 방식은 전문의의 재량에 맡긴다. 대부분의 경우에서, 투여는 혈류 내로 화합물의 방출을 야기할 것이다. 특정 양태에서, 화합물은 경구 투여된다.
투여량 및 투여형
SMA의 치료에 효과적인 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 양은, 예를 들면, 투여 경로, SMA 유형, 대상의 일반 건강상태, 대상의 인종, 연령, 체중 및 성별, 식사, 시기 및 SMA의 중증도에 따라 달라지며, 전문의의 판단 및 각 환자 또는 대상의 상황에 따라 결정되어야 한다.
특정 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 조성물 또는 약제의 투여와 관련하여 "효과량", "예방 효과량" 또는 "치료 효과량"은 치료 효과 및/또는 유리한 효과를 갖는 화학식 I의 화합물의 양을 말한다. 특정 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 또는 이의 조성물 또는 약제의 투여와 관련하여 "효과량", "예방 효과량" 또는 "치료 효과량"은 다음의 효과들 중 하나, 둘 또는 그 이상을 제공한다: (i) SMA의 중증도를 경감 또는 개선시킨다; (ii) SMA의 발병을 지연시킨다; (iii) SMA의 진행을 억제한다; (iv) 대상의 입원을 단축시킨다; (v) 대상에게 입원 기간을 감소시킨다; (vi) 대상의 생존을 증가시킨다; (vii) 대상의 삶의 질을 개선시킨다; (viii) SMA와 관련된 증상의 수를 감소시킨다; (ix) SMA와 관련된 증상의 중증도를 경감 또는 개선시킨다; (x) SMA와 관련된 증상의 기간을 감소시킨다; (xi) SMA와 관련된 증상의 재발을 방지한다; (xii) SMA의 발병 또는 증상의 개시를 억제한다; 및/또는 (xiii) SMA와 관련된 증상의 진행을 억제한다. 특정 양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 효과량은 SMN2 유전자로부터 전사되는 SMN2 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키는데 효과적인 양이며, SMN2 유전자로부터 생성된 Smn 단백질의 수준을 증가시키며 따라서 이를 필요로 하는 대상에서 목적하는 유리한 효과를 제공한다. 일부 경우에서, 목적하는 효과는 (1) SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입; 또는 (2) SMN2 유전자로부터 생성되는 Smn 단백질의 수준을 분석하거나 정량화함으로써 측정될 수 있다. 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 효과량의 비제한 예는 본원에 기술된다.
예를 들면, 효과량은 이를 필요로 하는 인간 대상에서 SMA를 치료하는데 필요한 양, 또는 이를 필요로 하는 인간 대상에서 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키는데 필요한 양, 또는 이를 필요로 하는 인간 대상에서 SMN2 유전자로부터 생성되는 Smn 단백질의 수준을 증가시키는데 필요한 양일 수 있다. 특정 양태에서, 인간 대상은 SMA 환자이다.
일반적으로, 효과량은 약 1 내지 약 200 kg 범위의 체중을 갖는 환자 또는 대상의 경우 약 0.001 내지 약 500 mg/kg/일의 범위일 것이다. 전형적인 성인 대상은 약 70 내지 약 100 kg 범위의 중간 체중을 가질 것으로 예상된다.
본 발명의 설명의 범위내에서, 약제의 제조에, 약학용 키트의 제조에, 또는 이를 필요로 하는 인간 대상에서 SMA를 치료하기 위한 방법에 사용하기 위한 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 "효과량"은 약 0.001 내지 약 35,000 mg 범위의 양을 포함하는 것이다. 특정 양태에서, 인간 대상은 SMA 환자이다.
본원에 기술된 조성물은 당해 분야에 공지된 임의의 약물 전달 경로를 통해 대상에게 투여하기 위해 제형화된다. 비제한 예로는 입, 눈, 직장, 구강, 국소, 코, 안과, 피하, 근육내, 정맥내(볼루스 및 주입), 뇌내, 경피 및 폐 투여 경로가 포함된다.
약학 조성물
본원에 기술된 양태들은 약학 조성물 중 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 사용을 포함한다. 특정 양태에서, 본원에는 약학적으로 허용되는 부형제와 함께 효과량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 투여함을 포함하는, 이를 필요로 하는 인간 대상에서 SMA를 치료하기 위한 약학 조성물 중 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 사용이 기술된다. 특정 양태에서, 인간 대상은 SMA 환자이다.
화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태는 선택적으로, 상기 화합물 또는 이의 한 형태 및 선택적인 담체, 부형제 또는 희석제를 포함하는 조성물의 형태일 수 있다. 본원에 제공된 다른 양태들은 효과량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태 및 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 포함하는 약학 조성물을 포함한다. 특정 양태에서, 약학 조성물은 동물 및/또는 인간 투여에 적합하다. 본원에 제공된 약학 조성물은 대상에게 조성물이 투여되게 하는 임의의 형태일 수 있다.
특정 양태에서 및 상기와 관련하여, 용어 "약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제"는 연방 또는 주 정부의 관리 기관에 의해 승인되거나, 미국 약전(U.S. Pharmacopeia) 또는 동물, 보다 특히 인간에 사용하기 위한 다른 일반적으로 공지된 약전에 열거된 담체, 부형제 또는 희석제를 의미한다. 용어 "담체"는 그와 함께 치료제가 투여되는 희석제, 보조제(예를 들면, 프로인트(Freund) 보조제(완전 및 불완전)), 부형제 또는 비히클을 말한다. 상기 약학적 담체는 멸균 액체, 예를 들면, 물, 및 석유, 동물, 식물 또는 합성 기원을 갖는 것을 포함한 오일, 예를 들면, 낙화생유, 대두유, 광유, 호마유 등일 수 있다. 물은 정맥내 투여되는 약학 조성물을 위한 특별한 담체이다. 식염수 용액 및 덱스트로스 및 글리세롤 수용액도 또한 특히 주사액을 위한 액체 담체로서 사용될 수 있다.
전형적인 조성물 및 투여형은 하나 이상의 부형제를 포함한다. 적합한 부형제는 약학 분야에 숙련된 자에게 공지되어 있으며, 적합한 부형제의 지제한 예로는 전분, 글루코스, 락토스, 슈크로스, 젤라틴, 맥아, 쌀, 밀가루, 백악, 실리카 겔, 나트륨 스테아레이트, 글리세롤 모노스테아레이트, 활석, 염화나트륨, 탈지분유, 글리세롤, 프로필렌, 글리콜, 물, 에탄올 등이 포함된다. 특정 부형제가 약학 조성물 또는 투여형에 혼입되기에 적합한지 여부는, 투여형이 환자에게 투여될 방식 및 투여형 중의 특정 활성 성분을 포함하나 이로 한정되지는 않는, 당해 분야에 공지된 다양한 요인들에 따라 달라진다. 본원에서는 본원에 기술된 하나 이상의 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 포함하는 무수 약학 조성물 및 투여형이 또한 제공된다. 조성물 및 단일 단위 투여형은 용액 또는 시럽(선택적으로 향미제 사용), 현탁액(선택적으로 향미제 사용), 유화액, 정제(예를 들면, 츄잉정), 환제, 캡슐, 과립, 분말(선택적으로 재구성용), 맛-차폐 또는 서방성 제형 등의 형태를 취할 수 있다.
경구 투여에 적합한 본원에 제공된 약학 조성물은 개별적 투여형, 예를 들면, 정제, 당의정, 캡슐, 과립, 분말 및 액체(이로 한정되지는 않는다)로 제공될 수 있다. 상기 투여형은 사전결정된 양의 활성 성분을 함유하며, 당해 분야에 숙련된 자에게 공지된 제약 방법에 의해 제조될 수 있다.
본원에 제공된 경구 투여형에 사용될 수 있는 부형제의 예로는 결합제, 충전제, 붕해제 및 윤활제가 포함되나, 이로 한정되지는 않는다.
바이오마커
특정 양태에서, SMN1 유전자 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양은 SMA에 대한 바이오마커로서 사용된다. 특정 양태에서, SMN1 유전자 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양은 SMA에 대한 바이오마커로서 사용된다. 다른 양태에서, SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양은 본원에 개시된 바와 같은 화합물로 치료되는 SMA 환자에 대한 바이오마커로서 사용된다. 다른 양태에서, SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양은 본원에 개시된 바와 같은 화합물로 치료되는 SMA 환자에 대한 바이오마커로서 사용된다. 일부 양태에서, SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 변화, 및 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 상응하는 변화는 본원에 개시된 바와 같은 화합물로 치료되는 환자에 대한 바이오마커로서 사용된다. 특정 양태에서, 환자는 SMA 환자이다.
특정 양태에서, 화합물(예를 들면, 본원에 개시된 화학식 I의 화합물)의 투여 후, SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 증가, 및 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 상응하는 감소는 화합물이 SMA를 치료하는데 효과적일 수 있음을 나타낸다. 또 다른 특정 양태에서, 화합물(예를 들면, 본원에 개시된 화학식 I의 화합물)의 투여 후, SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 감소, 및 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 상응하는 증가는 화합물이 SMA를 치료하는데 효과적이지 않을 것임을 나타낸다. 상기 양태들에 따라서, SMN1 유전자 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하거나 포함하지 않는 mRNA의 양을 평가하고/하거나 정량화하기 위해 PCR(예를 들면, qPCR) 및 RT-PCR(예를 들면, RT-qPCR 또는 종말점 RT-PCR)과 같은 분석법에 하기에 기술되는 SMN 프라이머 및/또는 SMN 프로브를 사용할 수 있다.
한 양태에서, 본원에서는 인간 SMN1 및/또는 SMN2를 암호화하거나 이에 의해 암호화된 핵산을 증폭시키기 위한 SMN 프라이머 및/또는 SMN 프로브(예를 들면, 서열번호 1, 7, 8, 11 또는 13의 뉴클레오티드 서열을 갖는 정방향 프라이머; 및/또는 서열번호 9 또는 12의 뉴클레오티드 서열을 갖는 역방향 프라이머; 및/또는 서열번호 3 또는 10과 같은 SMN 프로브)가 제공된다. 상기 프라이머들은, 예를 들면, RT-PCR(예를 들면, 본원에 기술된 바와 같거나 당해 분야에 숙련된 자에게 공지된 바와 같은 RT-PCR, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예를 들면, qPCR) 또는 회전환 증폭에 프라이머로서, 및 혼성화 분석, 예를 들면, 노던 블롯 및/또는 서던 블롯 분석에 프로브로서 사용될 수 있다. 본원에서 생물학적 실시예에 사용된 바와 같이, 종말점 RT-PCR은 특정 수의 증폭 주기 동안(또는 출발 물질이 고갈될 때까지) 수행된 후, 예를 들면, 겔 전기영동 분리, 형광 염료에 의한 염색, 형광의 정량화 등을 이용한 DNA 생성물 각각의 정량화가 이어지는 역전사-중합효소 연쇄 반응이다.
서열번호 1은 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7의 뉴클레오티드 22 내지 40에 상응하는 뉴클레오티드를 포함하는 DNA 또는 RNA에 혼성화되고, 서열번호 2는 반딧불이 루시퍼라제 암호화 서열의 뉴클레오티드 4 내지 26에 상응하는 뉴클레오티드를 포함하는 DNA 또는 RNA에 혼성화되고; 서열번호 7은 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7의 뉴클레오티드 32 내지 54 및 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 8의 뉴클레오티드 1 내지 4에 상응하는 뉴클레오티드를 포함하는 핵산 서열(예를 들면, DNA의 센스 가닥)에 혼성화되고, 서열번호 8은 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7의 뉴클레오티드 87 내지 111 및 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 8의 뉴클레오티드 1 내지 3에 순서대로 상응하는 뉴클레오티드를 포함하는 핵산 서열(예를 들면, DNA의 센스 가닥)에 혼성화되고, 서열번호 9는 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 8의 뉴클레오티드 39 내지 62에 상응하는 뉴클레오티드를 포함하는 핵산 서열(예를 들면, DNA 또는 RNA의 안티센스 가닥)에 혼성화되고, 서열번호 11은 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 6의 뉴클레오티드 43 내지 63에 상응하는 뉴클레오티드를 포함하는 핵산 서열(예를 들면, DNA의 센스 가닥)에 혼성화되고, 서열번호 12는 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 8의 뉴클레오티드 51 내지 73에 상응하는 뉴클레오티드를 포함하는 핵산 서열(예를 들면, DNA 또는 RNA의 안티센스 가닥)에 혼성화되고, 서열번호 13은 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 6의 뉴클레오티드 22 내지 46에 상응하는 뉴클레오티드를 포함하는 핵산 서열(예를 들면, DNA의 센스 가닥)에 혼성화된다.
따라서, 서열번호 9, 11, 12 및/또는 13에 상응하는 올리고뉴클레오티드는, 인간 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7이 결여된 인간 SMN1 및/또는 SMN2를 암호화하거나 그에 의해 암호화된 핵산, 및 인간 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 인간 SMN1 및/또는 SMN2를 암호화하거나 그에 의해 암호화된 핵산을 증폭시키기 위해 증폭 반응에 사용될 수 있다. 대조적으로, 하류 역방향 프라이머(예를 들면, 서열번호 9 또는 12)와 함께 서열번호 8에 상응하는 올리고뉴클레오티드는 인간 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7이 결여된 인간 SMN1 및/또는 SMN2를 암호화하거나 그에 의해 암호화된 핵산을 증폭하기 위해 사용될 수 있고, 하류 역방향 프라이머(예를 들면, 서열번호 9 또는 12)와 함께 서열번호 1 및 7에 상응하는 올리고뉴클레오티드는 인간 SMN1 및/또는 인간 SMN2를 암호화하거나 그에 의해 암호화된 핵산을 증폭하기 위해 사용될 수 있으며 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함한다.
서열번호 3은 인간 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7의 뉴클레오티드 50 내지 54 및 인간 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 8의 뉴클레오티드 1 내지 21에 순서대로 상응하는 뉴클레오티드를 포함하는 핵산 서열(예를 들면, DNA의 센스 가닥)에 혼성화되고, 서열번호 10은 인간 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 8의 뉴클레오티드 7 내지 36에 상응하는 뉴클레오티드를 포함하는 핵산 서열(예를 들면, DNA의 센스 가닥)에 혼성화된다. 서열번호 3은, 본원에 기술되거나 국제특허공개 제WO2009/151546호 또는 미국특허공개 제2011/0086833호(이들은 각각 본원에 전체로 참고로 인용된다)에 기술된 미니유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA를 검출하고, 인간 SMN1 및/또는 SMN2로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA를 검출하기 위한 프로브로서 유용하다. 또한, 서열번호 10은, 미니유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA를 검출하고, 본원에 기술되거나 국제특허공개 제WO2009/151546호 또는 미국특허공개 제2011/0086833호(이들은 각각 본원에 전체로 참고로 인용된다)에 기술된 인간 SMN1 및/또는 SMN2로부터 전사되는 mRNA를 검출하기 위한 프로브로서 유용하다.
특정 양태에서, 하기 생물학적 실시예에 기술된 프라이머 및/또는 프로브(예를 들면, 서열번호 1, 7, 11 또는 13 및/또는 서열번호 2, 9 또는 12와 같은 SMN 프라이머, 및/또는 서열번호 3 또는 10과 같은 SMN 프로브)는, 화합물(예를 들면, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태)이 SMN2 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키는지를 측정하기 위해, RT-PCR, RT-qPCR, 종말점 RT-PCR, PCR, qPCR, 회전환 증폭 및 적용가능한 경우, 노던 블롯 또는 서던 블롯과 같은 분석(예를 들면, 하기 생물학적 실시예에 기술된 바와 같은 분석)에 사용된다.
또 다른 양태에서, 하기 생물학적 실시예에 기술된 프라이머 및/또는 프로브(예를 들면, 서열번호 1, 7, 11 또는 13 및/또는 서열번호 9 또는 12와 같은 SMN 프라이머, 및/또는 서열번호 3 또는 10과 같은 SMN 프로브)는, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양을 모니터링하기 위해, RT-PCR, RT-qPCR, 종말점 RT-PCR, PCR, qPCR, 회전환 증폭 및 적용가능한 경우, 노던 블롯 또는 서던 블롯과 같은 분석(예를 들면, 하기 생물학적 실시예에 기술된 바와 같은 분석)에 사용된다. 특정 양태에서, 환자는 SMA 환자이다.
또 다른 양태에서, 하기 생물학적 실시예에 기술된 프라이머 및/또는 프로브(예를 들면, 서열번호 1, 7, 11 또는 13 및/또는 서열번호 9 또는 12와 같은 SMN 프라이머, 및/또는 서열번호 3 또는 10과 같은 SMN 프로브)는, 화합물(예를 들면, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태)에 대한 환자의 반응을 모니터링하기 위해, RT-PCR, RT-qPCR, 종말점 RT-PCR, PCR, qPCR, 회전환 증폭 및 적용가능한 경우, 노던 블롯 또는 서던 블롯과 같은 분석(예를 들면, 하기 생물학적 실시예에 기술된 바와 같은 분석)에 사용된다. 특정 양태에서, 환자는 SMA 환자이다.
환자로부터의 샘플(예를 들면, 혈액 샘플, PBMC 샘플 또는 조직 샘플, 예를 들면, 피부 또는 근육 조직 샘플)은 당해 분야에 숙련된 자에게 공지된 기술을 사용하여 수득할 수 있으며, 하기 생물학적 실시예에 기술된 프라이머 및/또는 프로브는 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA의 양(예를 들면, SMN2 유전자로부터 전사된 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양)을 측정하기 위한 분석(예를 들면, PCR, RT-PCR, RT-qPCR, qPCR, 종말점 RT-PCR, 회전환 증폭, 노던 블롯 또는 서던 블롯)에 사용될 수 있다. 환자로부터 유도된 샘플은 당해 분야에 숙련된 자에게 공지된 기술을 사용하여 환자로부터 수득된 후 처리되고/되거나 조작되는 샘플을 말한다. 예를 들면, 환자로부터의 샘플은 당해 분야에 기술을 가진 자에게 공지된 기술을 이용하여, 예를 들면, RNA를 추출하기 위해 처리될 수 있다. 환자로부터의 샘플은, 예를 들면, RNA를 추출하기 위해 처리될 수 있고, 상기 RNA는 역전사되어 cDNA를 생성한다. 특정 양태에서, 환자는 SMA 환자이다.
특정 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양을 검출하는 방법이 제공된다: (a) 환자 샘플(예를 들면, 혈액 샘플 또는 조직 샘플) 또는 환자로부터 유도된 샘플(예를 들면, RNA를 추출하기 위해 처리된 혈액 샘플 또는 조직 샘플)을, 예를 들면, RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 적용가능한 성분과 함께, 하기에 기술되는 정방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 1, 7, 11 또는 13) 및/또는 본원에 기술된 역방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 9 또는 12)와 접촉시키고; (b) SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양을 검출한다. 특정 양태에서, 샘플은 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 같은 화합물이 투여된 환자로부터의 샘플 또는 상기 환자로부터 유도된 샘플이다. 특정 양태에서, 환자는 SMA 환자이다.
또 다른 특정 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, SMN1 및 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA의 양을 검출하는 방법이 제공된다: (a) 환자 샘플(예를 들면, 혈액 샘플 또는 조직 샘플) 또는 환자로부터 유도된 샘플(예를 들면, RNA를 추출하기 위해 처리된 혈액 샘플 또는 조직 샘플)을, 예를 들면, RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 적용가능한 성분과 함께, 하기에 기술되는 정방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 1, 7, 11 또는 13) 및/또는 본원에 기술된 역방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 9 또는 12)와 접촉시키고; (b) SMN1 및 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA의 양을 검출한다. 특정 양태에서, 샘플은 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 같은 화합물이 투여된 환자로부터의 샘플 또는 상기 환자로부터 유도된 샘플이다. 특정 양태에서, 환자는 SMA 환자이다.
인간 SMN1 및 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양, 및 인간 SMN1 및 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양은, 예를 들면, SMN1 및 SMN2의 엑손 7을 포함하는 SMN1 및 SMN2 mRNA로부터 및 SMN1 및 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 SMN1 및 SMN2 mRNA로부터 생성된 RNA 또는 DNA 단편의 크기에 의해 서로 구별될 수 있다.
또 다른 특정 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양을 검출하는 방법이 제공된다: (a) 환자 샘플(예를 들면, 혈액 샘플 또는 조직 샘플) 또는 환자로부터 유도된 샘플(예를 들면, RNA를 추출하기 위해 처리된 혈액 샘플 또는 조직 샘플)을, 예를 들면, RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 적용가능한 성분과 함께, 하기에 기술되는 정방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 8, 11 또는 13) 및/또는 본원에 기술된 역방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 9 또는 12)와 접촉시키고; (b) SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양을 검출한다. 특정 양태에서, 샘플은 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 같은 화합물이 투여된 환자로부터의 샘플 또는 상기 환자로부터 유도된 샘플이다. 특정 양태에서, 환자는 SMA 환자이다.
또 다른 특정 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양을 검출하는 방법이 제공된다: (a) 환자 샘플(예를 들면, 혈액 샘플 또는 조직 샘플) 또는 환자로부터 유도된 샘플(예를 들면, RNA를 추출하기 위해 처리된 혈액 샘플 또는 조직 샘플)을, 예를 들면, RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR), 회전환 증폭 및 적용가능한 경우, 노던 블롯 및 서던 블롯에 적용가능한 성분과 함께, 하기에 기술되는 SMN 프로브(예를 들면, 서열번호 3 또는 10)와 접촉시키고; (b) SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양을 검출한다. 특정 양태에서, 샘플은 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 같은 화합물이 투여된 환자로부터의 샘플 또는 상기 환자로부터 유도된 샘플이다. 특정 양태에서, 환자는 SMA 환자이다.
또 다른 특정 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, SMN1 및 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA의 양을 검출하는 방법이 제공된다: (a) 환자 샘플(예를 들면, 혈액 샘플 또는 조직 샘플) 또는 환자로부터 유도된 샘플(예를 들면, RNA를 추출하기 위해 처리된 혈액 샘플 또는 조직 샘플)을, 예를 들면, RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR), 회전환 증폭 및 적용가능한 경우, 노던 블롯 및 서던 블롯에 적용가능한 성분과 함께, 하기에 기술되는 SMN 프로브(예를 들면, 서열번호 3 또는 10)와 접촉시키고; (b) SMN1 및 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA의 양을 검출한다.
인간 SMN1 및 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양, 및 인간 SMN1 및 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양은, 예를 들면, SMN1 및 SMN2의 엑손 7을 포함하는 SMN1 및 SMN2 mRNA로부터 및 SMN1 및 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 SMN1 및 SMN2 mRNA로부터 생성된 RNA 또는 DNA 단편의 크기에 의해 서로 구별될 수 있다. 특정 양태에서, 샘플은 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 같은 화합물이 투여된 환자로부터의 샘플 또는 상기 환자로부터 유도된 샘플이다. 특정 양태에서, 환자는 SMA 환자이다.
또 다른 특정 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양을 검출하는 방법이 제공된다: (a) 환자 샘플(예를 들면, 혈액 샘플 또는 조직 샘플) 또는 환자로부터 유도된 샘플(예를 들면, RNA를 추출하기 위해 처리된 혈액 샘플 또는 조직 샘플)을, 예를 들면, RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR), 회전환 증폭, 또는 노던 블롯 또는 서던 블롯에 적용가능한 성분과 함께, 하기에 기술되는 SMN 프로브(예를 들면, 서열번호 10)와 접촉시키고; (b) SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양을 검출한다. 특정 양태에서, 샘플은 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 같은 화합물이 투여된 환자로부터의 샘플 또는 상기 환자로부터 유도된 샘플이다. 특정 양태에서, 환자는 SMA 환자이다.
특정 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양을 검출하는 방법이 제공된다: (a) 환자 샘플(예를 들면, 혈액 샘플 또는 조직 샘플) 또는 환자로부터 유도된 샘플(예를 들면, RNA를 추출하기 위해 처리된 혈액 샘플 또는 조직 샘플)을, 예를 들면, RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 적용가능한 성분과 함께, 하기에 기술되는 정방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 1, 7, 11 또는 13) 및/또는 본원에 기술된 역방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 9 또는 12) 및/또는 본원에 기술된 SMN 프로브(예를 들면, 서열번호 3 또는 10)와 접촉시키고; (b) SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양을 검출한다. 특정 양태에서, 샘플은 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 같은 화합물이 투여된 환자로부터의 샘플 또는 상기 환자로부터 유도된 샘플이다. 특정 양태에서, 환자는 SMA 환자이다.
특정 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, SMN1 및 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA의 양을 검출하는 방법이 제공된다: (a) 환자 샘플(예를 들면, 혈액 샘플 또는 조직 샘플) 또는 환자로부터 유도된 샘플(예를 들면, RNA를 추출하기 위해 처리된 혈액 샘플 또는 조직 샘플)을, 예를 들면, 적용가능한 경우, RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 적용가능한 성분과 함께, 하기에 기술되는 정방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 1, 7, 8, 11 또는 13) 및/또는 본원에 기술된 역방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 9 또는 12) 및/또는 본원에 기술된 SMN 프로브(예를 들면, 서열번호 3 또는 10)와 접촉시키고; (b) SMN1 및 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA의 양을 검출한다. 특정 양태에서, 환자는 SMA 환자이다.
인간 SMN1 및 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양, 및 인간 SMN1 및 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양은, 예를 들면, SMN1 및 SMN2의 엑손 7을 포함하는 SMN1 및 SMN2 mRNA로부터 및 SMN1 및 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 SMN1 및 SMN2 mRNA로부터 생성된 RNA 또는 DNA 단편의 크기에 의해 서로 구별될 수 있다. 특정 양태에서, 샘플은 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 같은 화합물이 투여된 환자로부터의 샘플 또는 상기 환자로부터 유도된 샘플이다. 특정 양태에서, 환자는 SMA 환자이다.
특정 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양을 검출하는 방법이 제공된다: (a) 환자 샘플(예를 들면, 혈액 샘플 또는 조직 샘플) 또는 환자로부터 유도된 샘플(예를 들면, RNA를 추출하기 위해 처리된 혈액 샘플 또는 조직 샘플)을, 예를 들면, RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 적용가능한 성분과 함께, 하기에 기술되는 정방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 8) 및/또는 본원에 기술된 역방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 9 또는 12) 및/또는 본원에 기술된 SMN 프로브(예를 들면, 서열번호 10)와 접촉시키고; (b) SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양을 검출한다. 특정 양태에서, 샘플은 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 같은 화합물이 투여된 환자로부터의 샘플 또는 상기 환자로부터 유도된 샘플이다. 특정 양태에서, 환자는 SMA 환자이다.
특정 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, 화합물에 대한 SMA 환자의 반응을 평가하는 방법이 제공된다: (a) SMA 환자 샘플(예를 들면, 혈액 샘플 또는 조직 샘플) 또는 SMA 환자로부터 유도된 샘플(예를 들면, RNA를 추출하기 위해 처리된 혈액 샘플 또는 조직 샘플)을, 예를 들면, RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 적용가능한 성분과 함께, 하기에 기술되는 정방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 1, 7, 11 또는 13) 및/또는 본원에 기술된 역방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 9 또는 12)와 접촉시키고[이때, 상기 샘플은 화합물(예를 들면, 본원에 기술된 화합물)이 투여된 SMA 환자로부터의 샘플 또는 상기 환자로부터 유도된 샘플이다]; (b) SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양을 검출하되, (1) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 증가는 환자가 화합물에 대해 반응성이며 화합물이 유리할 수 있거나 유리하고/하거나 환자에게 치료 가치를 가질 수 있거나 갖는 것을 나타내고; (2) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화는 환자가 화합물에 대해 반응하지 않으며 화합물이 유리하지 않고/않거나 환자에게 치료 가치를 갖지 않음을 나타낸다. 특정 양태에서, 환자의 반응은 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 같은 화합물을 투여하고 1시간, 2시간, 4시간, 8시간, 12시간, 16시간, 20시간, 1일, 2일, 3일, 5일, 7일, 14일, 28일, 1개월, 2개월, 3개월, 6개월, 9개월, 12개월 이상 후에 평가된다.
또 다른 특정 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, 화합물에 대한 SMA 환자의 반응을 평가하는 방법이 제공된다: (a) SMA 환자에게 화합물을 투여하고; (b) 환자로부터 수득되거나 유도된 샘플(예를 들면, 혈액 샘플 또는 조직 샘플)을, 예를 들면, RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 적용가능한 성분과 함께, 하기에 기술되는 정방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 1, 7, 11 또는 13) 및/또는 본원에 기술된 역방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 9 또는 12)와 접촉시키고; (c) SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양을 검출하되, (1) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 증가는 환자가 화합물에 대해 반응성이며 화합물이 유리할 수 있거나 유리하고/하거나 환자에게 치료 가치를 가질 수 있거나 갖는 것을 나타내고; (2) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화는 환자가 화합물에 대해 반응하지 않으며 화합물이 유리하지 않고/않거나 환자에게 치료 가치를 갖지 않음을 나타낸다. 특정 양태에서, 환자의 반응은 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 같은 화합물을 투여하고 1시간, 2시간, 4시간, 8시간, 12시간, 16시간, 20시간, 1일, 2일, 3일, 5일, 7일, 14일, 28일, 1개월, 2개월, 3개월, 6개월, 9개월, 12개월 이상 후에 평가된다.
특정 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, 화합물에 대한 SMA 환자의 반응을 평가하는 방법이 제공된다: (a) SMA 환자 샘플(예를 들면, 혈액 샘플 또는 조직 샘플) 또는 SMA 환자로부터 유도된 샘플(예를 들면, RNA를 추출하기 위해 처리된 혈액 샘플 또는 조직 샘플)을, 예를 들면, RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 적용가능한 성분과 함께, 하기에 기술되는 정방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 1, 7, 11 또는 13) 및/또는 본원에 기술된 역방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 9 또는 12) 및/또는 SMN 프로브(예를 들면, 서열번호 3 또는 10)와 접촉시키고[이때, 상기 샘플은 화합물(예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태)이 투여된 SMA 환자로부터의 샘플 또는 상기 환자로부터 유도된 샘플이다]; (b) SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양을 검출하되, (1) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 증가는 환자가 화합물에 대해 반응성이며 화합물이 유리할 수 있거나 유리하고/하거나 환자에게 치료 가치를 가질 수 있거나 갖는 것을 나타내고; (2) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화는 환자가 화합물에 대해 반응하지 않으며 화합물이 유리하지 않고/않거나 환자에게 치료 가치를 갖지 않음을 나타낸다. 특정 양태에서, 환자의 반응은 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 같은 화합물을 투여하고 1시간, 2시간, 4시간, 8시간, 12시간, 16시간, 20시간, 1일, 2일, 3일, 5일, 7일, 14일, 28일, 1개월, 2개월, 3개월, 6개월, 9개월, 12개월 이상 후에 평가된다.
또 다른 특정 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, 화합물에 대한 SMA 환자의 반응을 평가하는 방법이 제공된다: (a) SMA 환자에게 화합물을 투여하고; (b) 환자로부터 수득되거나 유도된 샘플(예를 들면, 혈액 샘플 또는 조직 샘플)을, 예를 들면, RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 적용가능한 성분과 함께, 하기에 기술되는 정방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 1, 7, 11 또는 13) 및/또는 본원에 기술된 역방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 9 또는 12) 및/또는 SMN 프로브(예를 들면, 서열번호 3 또는 10)와 접촉시키고; (c) SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양을 검출하되, (1) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 증가는 환자가 화합물에 대해 반응성이며 화합물이 유리할 수 있거나 유리하고/하거나 환자에게 치료 가치를 가질 수 있거나 갖는 것을 나타내고; (2) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화는 환자가 화합물에 대해 반응하지 않으며 화합물이 유리하지 않고/않거나 환자에게 치료 가치를 갖지 않음을 나타낸다. 특정 양태에서, 환자의 반응은 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 같은 화합물을 투여하고 1시간, 2시간, 4시간, 8시간, 12시간, 16시간, 20시간, 1일, 2일, 3일, 5일, 7일, 14일, 28일, 1개월, 2개월, 3개월, 6개월, 9개월, 12개월 이상 후에 평가된다.
특정 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, 화합물에 대한 SMA 환자의 반응을 평가하는 방법이 제공된다: (a) SMA 환자 샘플(예를 들면, 혈액 샘플 또는 조직 샘플) 또는 SMA 환자로부터 유도된 샘플(예를 들면, RNA를 추출하기 위해 처리된 혈액 샘플 또는 조직 샘플)을, 예를 들면, RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 적용가능한 성분과 함께, 하기에 기술되는 정방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 8, 11 또는 13) 및/또는 본원에 기술된 역방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 9 또는 12)와 접촉시키고[이때, 상기 샘플은 화합물(예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태)이 투여된 SMA 환자로부터의 샘플 또는 상기 환자로부터 유도된 샘플이다]; (b) SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양을 검출하되, (1) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 감소는 환자가 화합물에 대해 반응성이며 화합물이 유리할 수 있거나 유리하고/하거나 환자에게 치료 가치를 가질 수 있거나 갖는 것을 나타내고; (2) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화는 환자가 화합물에 대해 반응하지 않으며 화합물이 유리하지 않고/않거나 환자에게 치료 가치를 갖지 않음을 나타낸다. 특정 양태에서, 환자의 반응은 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 같은 화합물을 투여하고 1시간, 2시간, 4시간, 8시간, 12시간, 16시간, 20시간, 1일, 2일, 3일, 5일, 7일, 14일, 28일, 1개월, 2개월, 3개월, 6개월, 9개월, 12개월 이상 후에 평가된다.
또 다른 특정 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, 화합물에 대한 SMA 환자의 반응을 평가하는 방법이 제공된다: (a) SMA 환자에게 화합물을 투여하고; (b) 환자로부터 수득되거나 유도된 샘플(예를 들면, 혈액 샘플 또는 조직 샘플)을, 예를 들면, RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 적용가능한 성분과 함께, 하기에 기술되는 정방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 8, 11 또는 13) 및/또는 본원에 기술된 역방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 9 또는 12)와 접촉시키고; (c) SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양을 검출하되, (1) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 감소는 환자가 화합물에 대해 반응성이며 화합물이 유리할 수 있거나 유리하고/하거나 환자에게 치료 가치를 가질 수 있거나 갖는 것을 나타내고; (2) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화는 환자가 화합물에 대해 반응하지 않으며 화합물이 유리하지 않고/않거나 환자에게 치료 가치를 갖지 않음을 나타낸다. 특정 양태에서, 환자의 반응은 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 같은 화합물을 투여하고 1시간, 2시간, 4시간, 8시간, 12시간, 16시간, 20시간, 1일, 2일, 3일, 5일, 7일, 14일, 28일, 1개월, 2개월, 3개월, 6개월, 9개월, 12개월 이상 후에 평가된다.
특정 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, 화합물에 대한 SMA 환자의 반응을 평가하는 방법이 제공된다: (a) SMA 환자 샘플(예를 들면, 혈액 샘플 또는 조직 샘플) 또는 SMA 환자로부터 유도된 샘플(예를 들면, RNA를 추출하기 위해 처리된 혈액 샘플 또는 조직 샘플)을, 예를 들면, RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 적용가능한 성분과 함께, 하기에 기술되는 정방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 8, 11 또는 13) 및/또는 본원에 기술된 역방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 9 또는 12) 및/또는 SMN 프로브(예를 들면, 서열번호 10)와 접촉시키고[이때, 상기 샘플은 화합물(예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태)이 투여된 SMA 환자로부터의 샘플 또는 상기 환자로부터 유도된 샘플이다]; (b) SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양을 검출하되, (1) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 감소는 환자가 화합물에 대해 반응성이며 화합물이 유리할 수 있거나 유리하고/하거나 환자에게 치료 가치를 가질 수 있거나 갖는 것을 나타내고; (2) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화는 환자가 화합물에 대해 반응하지 않으며 화합물이 유리하지 않고/않거나 환자에게 치료 가치를 갖지 않음을 나타낸다. 특정 양태에서, 환자의 반응은 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 같은 화합물을 투여하고 1시간, 2시간, 4시간, 8시간, 12시간, 16시간, 20시간, 1일, 2일, 3일, 5일, 7일, 14일, 28일, 1개월, 2개월, 3개월, 6개월, 9개월, 12개월 이상 후에 평가된다.
또 다른 특정 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, 화합물에 대한 SMA 환자의 반응을 평가하는 방법이 제공된다: (a) SMA 환자에게 화합물을 투여하고; (b) 환자로부터 수득되거나 유도된 샘플(예를 들면, 혈액 샘플 또는 조직 샘플)을, 예를 들면, RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 적용가능한 성분과 함께, 하기에 기술되는 정방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 8, 11 또는 13) 및/또는 본원에 기술된 역방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 9 또는 12) 및/또는 SMN 프로브(예를 들면, 서열번호 10)와 접촉시키고; (c) SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양을 검출하되, (1) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 감소는 환자가 화합물에 대해 반응성이며 화합물이 유리할 수 있거나 유리하고/하거나 환자에게 치료 가치를 가질 수 있거나 갖는 것을 나타내고; (2) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화는 환자가 화합물에 대해 반응하지 않으며 화합물이 유리하지 않고/않거나 환자에게 치료 가치를 갖지 않음을 나타낸다. 특정 양태에서, 환자의 반응은 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 같은 화합물을 투여하고 1시간, 2시간, 4시간, 8시간, 12시간, 16시간, 20시간, 1일, 2일, 3일, 5일, 7일, 14일, 28일, 1개월, 2개월, 3개월, 6개월, 9개월, 12개월 이상 후에 평가된다.
특정 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, 화합물에 대한 SMA 환자의 반응을 평가하는 방법이 제공된다: (a) SMA 환자 샘플(예를 들면, 혈액 샘플 또는 조직 샘플) 또는 SMA 환자로부터 유도된 샘플(예를 들면, RNA를 추출하기 위해 처리된 혈액 샘플 또는 조직 샘플)을, 예를 들면, RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 적용가능한 성분과 함께, 하기에 기술되는 정방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 11 또는 13) 및/또는 본원에 기술된 역방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 9 또는 12)와 접촉시키고[이때, 상기 샘플은 화합물(예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태)이 투여된 SMA 환자로부터의 샘플 또는 상기 환자로부터 유도된 샘플이다]; (b) SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양, 및 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양을 검출하되, (1) (i) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 증가, 및 (ii) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 감소는 환자가 화합물에 대해 반응성이며 화합물이 유리할 수 있거나 유리하고/하거나 환자에게 치료 가치를 가질 수 있거나 갖는 것을 나타내고; (2) (i) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화, 및 (ii) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화는 환자가 화합물에 대해 반응하지 않으며 화합물이 유리하지 않고/않거나 환자에게 치료 가치를 갖지 않음을 나타낸다. 특정 양태에서, 환자의 반응은 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 같은 화합물을 투여하고 1시간, 2시간, 4시간, 8시간, 12시간, 16시간, 20시간, 1일, 2일, 3일, 5일, 7일, 14일, 28일, 1개월, 2개월, 3개월, 6개월, 9개월, 12개월 이상 후에 평가된다.
또 다른 특정 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, 화합물에 대한 SMA 환자의 반응을 평가하는 방법이 제공된다: (a) SMA 환자에게 화합물을 투여하고; (b) 환자로부터 수득되거나 유도된 샘플(예를 들면, 혈액 샘플 또는 조직 샘플)을, 예를 들면, RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 적용가능한 성분과 함께, 하기에 기술되는 정방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 11 또는 13) 및/또는 본원에 기술된 역방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 9 또는 12)와 접촉시키고; (c) SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양, 및 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양을 검출하되, (1) (i) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 증가, 및 (ii) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 감소는 환자가 화합물에 대해 반응성이며 화합물이 유리할 수 있거나 유리하고/하거나 환자에게 치료 가치를 가질 수 있거나 갖는 것을 나타내고; (2) (i) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화, 및 (ii) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화는 환자가 화합물에 대해 반응하지 않으며 화합물이 유리하지 않고/않거나 환자에게 치료 가치를 갖지 않음을 나타낸다. 특정 양태에서, 환자의 반응은 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 같은 화합물을 투여하고 1시간, 2시간, 4시간, 8시간, 12시간, 16시간, 20시간, 1일, 2일, 3일, 5일, 7일, 14일, 28일, 1개월, 2개월, 3개월, 6개월, 9개월, 12개월 이상 후에 평가된다.
특정 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, 화합물에 대한 SMA 환자의 반응을 평가하는 방법이 제공된다: (a) SMA 환자 샘플(예를 들면, 혈액 샘플 또는 조직 샘플) 또는 SMA 환자로부터 유도된 샘플(예를 들면, RNA를 추출하기 위해 처리된 혈액 샘플 또는 조직 샘플)을, 예를 들면, RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 적용가능한 성분과 함께, SMN 프로브(예를 들면, 서열번호 10)와 접촉시키고[이때, 상기 샘플은 화합물(예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태)이 투여된 SMA 환자로부터의 샘플 또는 상기 SMA 환자로부터 유도된 샘플이다]; (b) SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양, 및 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양을 검출하되, (1) (i) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 증가, 및 (ii) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 감소는 환자가 화합물에 대해 반응성이며 화합물이 유리할 수 있거나 유리하고/하거나 환자에게 치료 가치를 가질 수 있거나 갖는 것을 나타내고; (2) (i) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화, 및 (ii) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화는 환자가 화합물에 대해 반응하지 않으며 화합물이 유리하지 않고/않거나 환자에게 치료 가치를 갖지 않음을 나타낸다. 특정 양태에서, 환자의 반응은 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 같은 화합물을 투여하고 1시간, 2시간, 4시간, 8시간, 12시간, 16시간, 20시간, 1일, 2일, 3일, 5일, 7일, 14일, 28일, 1개월, 2개월, 3개월, 6개월, 9개월, 12개월 이상 후에 평가된다.
또 다른 특정 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, 화합물에 대한 SMA 환자의 반응을 평가하는 방법이 제공된다: (a) SMA 환자에게 화합물을 투여하고; (b) 환자로부터 수득되거나 유도된 샘플(예를 들면, 혈액 샘플 또는 조직 샘플)을, 예를 들면, RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 적용가능한 성분과 함께, SMN 프로브(예를 들면, 서열번호 10)와 접촉시키고; (c) SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양, 및 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양을 검출하되, (1) (i) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 증가, 및 (ii) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 감소는 환자가 화합물에 대해 반응성이며 화합물이 유리할 수 있거나 유리하고/하거나 환자에게 치료 가치를 가질 수 있거나 갖는 것을 나타내고; (2) (i) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화, 및 (ii) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화는 환자가 화합물에 대해 반응하지 않으며 화합물이 유리하지 않고/않거나 환자에게 치료 가치를 갖지 않음을 나타낸다. 특정 양태에서, 환자의 반응은 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 같은 화합물을 투여하고 1시간, 2시간, 4시간, 8시간, 12시간, 16시간, 20시간, 1일, 2일, 3일, 5일, 7일, 14일, 28일, 1개월, 2개월, 3개월, 6개월, 9개월, 12개월 이상 후에 평가된다.
특정 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, 화합물에 대한 SMA 환자의 반응을 평가하는 방법이 제공된다: (a) SMA 환자 샘플(예를 들면, 혈액 샘플 또는 조직 샘플) 또는 SMA 환자로부터 유도된 샘플(예를 들면, RNA를 추출하기 위해 처리된 혈액 샘플 또는 조직 샘플)을, 예를 들면, RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR) 또는 PCR(예, qPCR)에 적용가능한 성분과 함께, 하기에 기술되는 정방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 11 또는 13) 및/또는 본원에 기술된 역방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 9 또는 12) 및/또는 SMN 프로브(예를 들면, 서열번호 10)와 접촉시키고[이때, 상기 샘플은 화합물(예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태)이 투여된 SMA 환자로부터의 샘플 또는 상기 SMA 환자로부터 유도된 샘플이다]; (b) SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양, 및 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양을 검출하되, (1) (i) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 증가, 및 (ii) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 감소는 환자가 화합물에 대해 반응성이며 화합물이 유리할 수 있거나 유리하고/하거나 환자에게 치료 가치를 가질 수 있거나 갖는 것을 나타내고; (2) (i) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화, 및 (ii) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화는 환자가 화합물에 대해 반응하지 않으며 화합물이 유리하지 않고/않거나 환자에게 치료 가치를 갖지 않음을 나타낸다. 특정 양태에서, 환자의 반응은 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 같은 화합물을 투여하고 1시간, 2시간, 4시간, 8시간, 12시간, 16시간, 20시간, 1일, 2일, 3일, 5일, 7일, 14일, 28일, 1개월, 2개월, 3개월, 6개월, 9개월, 12개월 이상 후에 평가된다.
또 다른 특정 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, 화합물에 대한 SMA 환자의 반응을 평가하는 방법이 제공된다: (a) SMA 환자에게 화합물을 투여하고; (b) 환자로부터 수득되거나 유도된 샘플(예를 들면, 혈액 샘플 또는 조직 샘플)을, 예를 들면, RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 적용가능한 성분과 함께, 하기에 기술되는 정방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 11 또는 13) 및/또는 본원에 기술된 역방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 9 또는 12) 및/또는 SMN 프로브(예를 들면, 서열번호 10)와 접촉시키고; (c) SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양, 및 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양을 검출하되, (1) (i) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 증가, 및 (ii) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 감소는 SMN1 및/또는 환자가 화합물에 대해 반응성이며 화합물이 유리할 수 있거나 유리하고/하거나 환자에게 치료 가치를 가질 수 있거나 갖는 것을 나타내고; (2) (i) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화, 및 (ii) 화합물의 투여 전 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화는 환자가 화합물에 대해 반응하지 않으며 화합물이 유리하지 않고/않거나 환자에게 치료 가치를 갖지 않음을 나타낸다. 특정 양태에서, 환자의 반응은 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 같은 화합물을 투여하고 1시간, 2시간, 4시간, 8시간, 12시간, 16시간, 20시간, 1일, 2일, 3일, 5일, 7일, 14일, 28일, 1개월, 2개월, 3개월, 6개월, 9개월, 12개월 이상 후에 평가된다.
특정 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, 화합물에 대한 SMA 환자의 반응성을 모니터링하는 방법이 제공된다: (a) SMA 환자 샘플(예를 들면, 혈액 샘플 또는 조직 샘플) 또는 SMA 환자로부터 유도된 샘플(예를 들면, RNA를 추출하기 위해 처리된 혈액 샘플 또는 조직 샘플)을, 예를 들면, RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 적용가능한 성분과 함께, 하기에 기술되는 정방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 1, 7, 11 또는 13) 및/또는 본원에 기술된 역방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 9 또는 12)와 접촉시키고[이때, 상기 샘플은 화합물(예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태)이 투여된 SMA 환자로부터의 샘플 또는 상기 환자로부터 유도된 샘플이다]; (b) SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양을 검출하되, (1) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 증가는 환자가 화합물에 대해 반응성이며 화합물이 유리할 수 있거나 유리하고/하거나 환자에게 치료 가치를 가질 수 있거나 갖는 것을 나타내고; (2) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화는 환자가 화합물에 대해 반응하지 않으며 화합물이 유리하지 않고/않거나 환자에게 치료 가치를 갖지 않음을 나타낸다. 특정 양태에서, 환자의 반응은 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 같은 화합물을 투여하고 1시간, 2시간, 4시간, 8시간, 12시간, 16시간, 20시간, 1일, 2일, 3일, 4일, 5일, 7일, 14일, 28일, 1개월, 2개월, 3개월, 6개월, 9개월, 12개월 이상 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 환자가 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25개 이상의 용량의 화합물, 예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 투여받은 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 1 내지 5, 5 내지 10, 10 내지 15, 15 내지 20, 20 내지 30, 30 내지 40, 40 내지 50 또는 50 내지 100 복용량의 화합물, 예컨대 본원에 기술된 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 투여 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 화합물, 예컨대 본원에 기술된 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 연속적인 투여 중에 또는 후에 수일, 수주, 수개월 또는 수년의 기간에 걸쳐 모니터링된다.
또 다른 특정 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, 화합물에 대한 SMA 환자의 반응성을 모니터링하는 방법이 제공된다: (a) SMA 환자에게 화합물을 투여하고; (b) 환자로부터 수득되거나 유도된 샘플(예를 들면, 혈액 샘플 또는 조직 샘플)을, 예를 들면, RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 적용가능한 성분과 함께, 하기에 기술되는 정방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 1, 7, 11 또는 13) 및/또는 본원에 기술된 역방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 9 또는 12)와 접촉시키고; (c) SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양을 검출하되, (1) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 증가는 환자가 화합물에 대해 반응성이며 화합물이 유리할 수 있거나 유리하고/하거나 환자에게 치료 가치를 가질 수 있거나 갖는 것을 나타내고; (2) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화는 환자가 화합물에 대해 반응하지 않으며 화합물이 유리하지 않고/않거나 환자에게 치료 가치를 갖지 않음을 나타낸다. 특정 양태에서, 환자의 반응은 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 같은 화합물을 투여하고 1시간, 2시간, 4시간, 8시간, 12시간, 16시간, 20시간, 1일, 2일, 3일, 4일, 5일, 7일, 14일, 28일, 1개월, 2개월, 3개월, 6개월, 9개월, 12개월 이상 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 환자가 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25개 이상의 용량의 화합물, 예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 투여받은 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 1 내지 5, 5 내지 10, 10 내지 15, 15 내지 20, 20 내지 30, 30 내지 40, 40 내지 50 또는 50 내지 100개 용량의 화합물, 예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 투여 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 화합물, 예컨대 본원에 기술된 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 연속적인 투여 중에 또는 후에 수일, 수주, 수개월 또는 수년의 기간에 걸쳐 모니터링된다.
특정 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, 화합물에 대한 SMA 환자의 반응성을 모니터링하는 방법이 제공된다: (a) SMA 환자 샘플(예를 들면, 혈액 샘플 또는 조직 샘플) 또는 SMA 환자로부터 유도된 샘플(예를 들면, RNA를 추출하기 위해 처리된 혈액 샘플 또는 조직 샘플)을, 예를 들면, RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 적용가능한 성분과 함께, 하기에 기술되는 정방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 1, 7, 11 또는 13) 및/또는 본원에 기술된 역방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 9 또는 12) 및/또는 SMN 프로브(예를 들면, 서열번호 3 또는 10)와 접촉시키고[이때, 상기 샘플은 화합물(예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태)이 투여된 SMA 환자로부터의 샘플 또는 상기 환자로부터 유도된 샘플이다]; (b) SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양을 검출하되, (1) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 증가는 환자가 화합물에 대해 반응성이며 화합물이 유리할 수 있거나 유리하고/하거나 환자에게 치료 가치를 가질 수 있거나 갖는 것을 나타내고; (2) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화는 환자가 화합물에 대해 반응하지 않으며 화합물이 유리하지 않고/않거나 환자에게 치료 가치를 갖지 않음을 나타낸다. 특정 양태에서, 환자의 반응은 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 같은 화합물을 투여하고 1시간, 2시간, 4시간, 8시간, 12시간, 16시간, 20시간, 1일, 2일, 3일, 4일, 5일, 7일, 14일, 28일, 1개월, 2개월, 3개월, 6개월, 9개월, 12개월 이상 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 환자가 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25개 이상의 용량의 화합물, 예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 투여받은 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 1 내지 5, 5 내지 10, 10 내지 15, 15 내지 20, 20 내지 30, 30 내지 40, 40 내지 50 또는 50 내지 100개 용량의 화합물, 예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 투여 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 화합물, 예컨대 본원에 기술된 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 연속적인 투여 중에 또는 후에 수일, 수주, 수개월 또는 수년의 기간에 걸쳐 모니터링된다.
또 다른 특정 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, 화합물에 대한 SMA 환자의 반응성을 모니터링하는 방법이 제공된다: (a) SMA 환자에게 화합물을 투여하고; (b) 환자로부터 수득되거나 유도된 샘플(예를 들면, 혈액 샘플 또는 조직 샘플)을, 예를 들면, RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 적용가능한 성분과 함께, 하기에 기술되는 정방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 1, 7, 11 또는 13) 및/또는 본원에 기술된 역방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 9 또는 12) 및/또는 SMN 프로브(예를 들면, 서열번호 3 또는 10)와 접촉시키고; (c) SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양을 검출하되, (1) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 증가는 환자가 화합물에 대해 반응성이며 화합물이 유리할 수 있거나 유리하고/하거나 환자에게 치료 가치를 가질 수 있거나 갖는 것을 나타내고; (2) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화는 환자가 화합물에 대해 반응하지 않으며 화합물이 유리하지 않고/않거나 환자에게 치료 가치를 갖지 않음을 나타낸다. 특정 양태에서, 환자의 반응은 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 같은 화합물을 투여하고 1시간, 2시간, 4시간, 8시간, 12시간, 16시간, 20시간, 1일, 2일, 3일, 4일, 5일, 7일, 14일, 28일, 1개월, 2개월, 3개월, 6개월, 9개월, 12개월 이상 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 환자가 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25개 이상의 용량의 화합물, 예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 투여받은 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 1 내지 5, 5 내지 10, 10 내지 15, 15 내지 20, 20 내지 30, 30 내지 40, 40 내지 50 또는 50 내지 100개 용량의 화합물, 예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 투여 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 화합물, 예컨대 본원에 기술된 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 연속적인 투여 중에 또는 후에 수일, 수주, 수개월 또는 수년의 기간에 걸쳐 모니터링된다.
특정 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, 화합물에 대한 SMA 환자의 반응성을 모니터링하는 방법이 제공된다: (a) SMA 환자 샘플(예를 들면, 혈액 샘플 또는 조직 샘플) 또는 SMA 환자로부터 유도된 샘플(예를 들면, RNA를 추출하기 위해 처리된 혈액 샘플 또는 조직 샘플)을, 예를 들면, RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 적용가능한 성분과 함께, 하기에 기술되는 정방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 8, 11 또는 13) 및/또는 본원에 기술된 역방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 9 또는 12)와 접촉시키고[이때, 상기 샘플은 화합물(예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태)이 투여된 SMA 환자로부터의 샘플 또는 상기 환자로부터 유도된 샘플이다]; (b) SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양을 검출하되, (1) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 감소는 환자가 화합물에 대해 반응성이며 화합물이 유리할 수 있거나 유리하고/하거나 환자에게 치료 가치를 가질 수 있거나 갖는 것을 나타내고; (2) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화는 환자가 화합물에 대해 반응하지 않으며 화합물이 유리하지 않고/않거나 환자에게 치료 가치를 갖지 않음을 나타낸다. 특정 양태에서, 환자의 반응은 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 같은 화합물을 투여하고 1시간, 2시간, 4시간, 8시간, 12시간, 16시간, 20시간, 1일, 2일, 3일, 4일, 5일, 7일, 14일, 28일, 1개월, 2개월, 3개월, 6개월, 9개월, 12개월 이상 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 환자가 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25개 이상의 용량의 화합물, 예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 투여받은 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 1 내지 5, 5 내지 10, 10 내지 15, 15 내지 20, 20 내지 30, 30 내지 40, 40 내지 50 또는 50 내지 100개 용량의 화합물, 예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 투여 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 화합물, 예컨대 본원에 기술된 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 연속적인 투여 중에 또는 후에 수일, 수주, 수개월 또는 수년의 기간에 걸쳐 모니터링된다.
또 다른 특정 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, 화합물에 대한 SMA 환자의 반응성을 모니터링하는 방법이 제공된다: (a) SMA 환자에게 화합물을 투여하고; (b) 환자로부터 수득되거나 유도된 샘플(예를 들면, 혈액 샘플 또는 조직 샘플)을, 예를 들면, RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 적용가능한 성분과 함께, 하기에 기술되는 정방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 8, 11 또는 13) 및/또는 본원에 기술된 역방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 9 또는 12)와 접촉시키고; (c) SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양을 검출하되, (1) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 감소는 환자가 화합물에 대해 반응성이며 화합물이 유리할 수 있거나 유리하고/하거나 환자에게 치료 가치를 가질 수 있거나 갖는 것을 나타내고; (2) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화는 환자가 화합물에 대해 반응하지 않으며 화합물이 유리하지 않고/않거나 환자에게 치료 가치를 갖지 않음을 나타낸다. 특정 양태에서, 환자의 반응은 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 같은 화합물을 투여하고 1시간, 2시간, 4시간, 8시간, 12시간, 16시간, 20시간, 1일, 2일, 3일, 4일, 5일, 7일, 14일, 28일, 1개월, 2개월, 3개월, 6개월, 9개월, 12개월 이상 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 환자가 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25개 이상의 용량의 화합물, 예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 투여받은 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 1 내지 5, 5 내지 10, 10 내지 15, 15 내지 20, 20 내지 30, 30 내지 40, 40 내지 50 또는 50 내지 100개 용량의 화합물, 예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 투여 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 화합물, 예컨대 본원에 기술된 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 연속적인 투여 중에 또는 후에 수일, 수주, 수개월 또는 수년의 기간에 걸쳐 모니터링된다.
특정 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, 화합물에 대한 SMA 환자의 반응성을 모니터링하는 방법이 제공된다: (a) SMA 환자 샘플(예를 들면, 혈액 샘플 또는 조직 샘플) 또는 SMA 환자로부터 유도된 샘플(예를 들면, RNA를 추출하기 위해 처리된 혈액 샘플 또는 조직 샘플)을, 예를 들면, RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 적용가능한 성분과 함께, 하기에 기술되는 정방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 8, 11 또는 13) 및/또는 본원에 기술된 역방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 9 또는 12) 및/또는 SMN 프로브(예를 들면, 서열번호 10)와 접촉시키고[이때, 상기 샘플은 화합물(예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태)이 투여된 SMA 환자로부터의 샘플 또는 상기 환자로부터 유도된 샘플이다]; (b) SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양을 검출하되, (1) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 감소는 환자가 화합물에 대해 반응성이며 화합물이 유리할 수 있거나 유리하고/하거나 환자에게 치료 가치를 가질 수 있거나 갖는 것을 나타내고; (2) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화는 환자가 화합물에 대해 반응하지 않으며 화합물이 유리하지 않고/않거나 환자에게 치료 가치를 갖지 않음을 나타낸다. 특정 양태에서, 환자의 반응은 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 같은 화합물을 투여하고 1시간, 2시간, 4시간, 8시간, 12시간, 16시간, 20시간, 1일, 2일, 3일, 4일, 5일, 7일, 14일, 28일, 1개월, 2개월, 3개월, 6개월, 9개월, 12개월 이상 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 환자가 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25개 이상의 용량의 화합물, 예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 투여받은 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 1 내지 5, 5 내지 10, 10 내지 15, 15 내지 20, 20 내지 30, 30 내지 40, 40 내지 50 또는 50 내지 100개 용량의 화합물, 예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 투여 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 화합물, 예컨대 본원에 기술된 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 연속적인 투여 중에 또는 후에 수일, 수주, 수개월 또는 수년의 기간에 걸쳐 모니터링된다.
또 다른 특정 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, 화합물에 대한 SMA 환자의 반응성을 모니터링하는 방법이 제공된다: (a) SMA 환자에게 화합물을 투여하고; (b) 환자로부터 수득되거나 유도된 샘플(예를 들면, 혈액 샘플 또는 조직 샘플)을, 예를 들면, RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 적용가능한 성분과 함께, 하기에 기술되는 정방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 8, 11 또는 13) 및/또는 본원에 기술된 역방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 9 또는 12) 및/또는 SMN 프로브(예를 들면, 서열번호 10)와 접촉시키고; (c) SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양을 검출하되, (1) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 감소는 환자가 화합물에 대해 반응성이며 화합물이 유리할 수 있거나 유리하고/하거나 환자에게 치료 가치를 가질 수 있거나 갖는 것을 나타내고; (2) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화는 환자가 화합물에 대해 반응하지 않으며 화합물이 유리하지 않고/않거나 환자에게 치료 가치를 갖지 않음을 나타낸다. 특정 양태에서, 환자의 반응은 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 같은 화합물을 투여하고 1시간, 2시간, 4시간, 8시간, 12시간, 16시간, 20시간, 1일, 2일, 3일, 4일, 5일, 7일, 14일, 28일, 1개월, 2개월, 3개월, 6개월, 9개월, 12개월 이상 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 환자가 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25개 이상의 용량의 화합물, 예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 투여받은 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 1 내지 5, 5 내지 10, 10 내지 15, 15 내지 20, 20 내지 30, 30 내지 40, 40 내지 50 또는 50 내지 100개 용량의 화합물, 예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 투여 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 화합물, 예컨대 본원에 기술된 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 연속적인 투여 중에 또는 후에 수일, 수주, 수개월 또는 수년의 기간에 걸쳐 모니터링된다.
특정 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, 화합물에 대한 SMA 환자의 반응을 모니터링하는 방법이 제공된다: (a) SMA 환자 샘플(예를 들면, 혈액 샘플 또는 조직 샘플) 또는 SMA 환자로부터 유도된 샘플(예를 들면, RNA를 추출하기 위해 처리된 혈액 샘플 또는 조직 샘플)을, 예를 들면, RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 적용가능한 성분과 함께, 하기에 기술되는 정방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 11 또는 13) 및/또는 본원에 기술된 역방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 9 또는 12)와 접촉시키고[이때, 상기 샘플은 화합물(예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태)이 투여된 SMA 환자로부터의 샘플 또는 상기 환자로부터 유도된 샘플이다]; (b) SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양, 및 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양을 검출하되, (1) (i) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 증가, 및 (ii) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 감소는 환자가 화합물에 대해 반응성이며 화합물이 유리할 수 있거나 유리하고/하거나 환자에게 치료 가치를 가질 수 있거나 갖는 것을 나타내고; (2) (i) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화, 및 (ii) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화는 환자가 화합물에 대해 반응하지 않으며 화합물이 유리하지 않고/않거나 환자에게 치료 가치를 갖지 않음을 나타낸다. 특정 양태에서, 환자의 반응은 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 같은 화합물을 투여하고 1시간, 2시간, 4시간, 8시간, 12시간, 16시간, 20시간, 1일, 2일, 3일, 4일, 5일, 7일, 14일, 28일, 1개월, 2개월, 3개월, 6개월, 9개월, 12개월 이상 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 환자가 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25개 이상의 용량의 화합물, 예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 투여받은 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 1 내지 5, 5 내지 10, 10 내지 15, 15 내지 20, 20 내지 30, 30 내지 40, 40 내지 50 또는 50 내지 100개 용량의 화합물, 예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 투여 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 화합물, 예컨대 본원에 기술된 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 연속적인 투여 중에 또는 후에 수일, 수주, 수개월 또는 수년의 기간에 걸쳐 모니터링된다.
또 다른 특정 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, 화합물에 대한 SMA 환자의 반응을 모니터링하는 방법이 제공된다: (a) SMA 환자에게 화합물을 투여하고; (b) 환자로부터 수득되거나 유도된 샘플(예를 들면, 혈액 샘플 또는 조직 샘플)을, 예를 들면, RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 적용가능한 성분과 함께, 하기에 기술되는 정방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 11 또는 13) 및/또는 본원에 기술된 역방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 9 또는 12)와 접촉시키고; (c) SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양, 및 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양을 검출하되, (1) (i) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 증가, 및 (ii) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 감소는 환자가 화합물에 대해 반응성이며 화합물이 유리할 수 있거나 유리하고/하거나 환자에게 치료 가치를 가질 수 있거나 갖는 것을 나타내고; (2) (i) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화, 및 (ii) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화는 환자가 화합물에 대해 반응하지 않으며 화합물이 유리하지 않고/않거나 환자에게 치료 가치를 갖지 않음을 나타낸다. 특정 양태에서, 환자의 반응은 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 같은 화합물을 투여하고 1시간, 2시간, 4시간, 8시간, 12시간, 16시간, 20시간, 1일, 2일, 3일, 4일, 5일, 7일, 14일, 28일, 1개월, 2개월, 3개월, 6개월, 9개월, 12개월 이상 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 환자가 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25개 이상의 용량의 화합물, 예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 투여받은 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 1 내지 5, 5 내지 10, 10 내지 15, 15 내지 20, 20 내지 30, 30 내지 40, 40 내지 50 또는 50 내지 100개 용량의 화합물, 예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 투여 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 화합물, 예컨대 본원에 기술된 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 연속적인 투여 중에 또는 후에 수일, 수주, 수개월 또는 수년의 기간에 걸쳐 모니터링된다.
특정 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, 화합물에 대한 SMA 환자의 반응을 모니터링하는 방법이 제공된다: (a) SMA 환자 샘플(예를 들면, 혈액 샘플 또는 조직 샘플) 또는 SMA 환자로부터 유도된 샘플(예를 들면, RNA를 추출하기 위해 처리된 혈액 샘플 또는 조직 샘플)을, 예를 들면, RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 적용가능한 성분과 함께, SMN 프로브(예를 들면, 서열번호 10)와 접촉시키고[이때, 상기 샘플은 화합물(예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태)이 투여된 SMA 환자로부터의 샘플 또는 상기 환자로부터 유도된 샘플이다]; (b) SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양, 및 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양을 검출하되, (1) (i) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 증가, 및 (ii) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 감소는 환자가 화합물에 대해 반응성이며 화합물이 유리할 수 있거나 유리하고/하거나 환자에게 치료 가치를 가질 수 있거나 갖는 것을 나타내고; (2) (i) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화, 및 (ii) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화는 환자가 화합물에 대해 반응하지 않으며 화합물이 유리하지 않고/않거나 환자에게 치료 가치를 갖지 않음을 나타낸다. 특정 양태에서, 환자의 반응은 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 같은 화합물을 투여하고 1시간, 2시간, 4시간, 8시간, 12시간, 16시간, 20시간, 1일, 2일, 3일, 4일, 5일, 7일, 14일, 28일, 1개월, 2개월, 3개월, 6개월, 9개월, 12개월 이상 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 환자가 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25개 이상의 용량의 화합물, 예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 투여받은 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 1 내지 5, 5 내지 10, 10 내지 15, 15 내지 20, 20 내지 30, 30 내지 40, 40 내지 50 또는 50 내지 100개 용량의 화합물, 예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 투여 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 화합물, 예컨대 본원에 기술된 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 연속적인 투여 중에 또는 후에 수일, 수주, 수개월 또는 수년의 기간에 걸쳐 모니터링된다.
또 다른 특정 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, 화합물에 대한 SMA 환자의 반응을 모니터링하는 방법이 제공된다: (a) SMA 환자에게 화합물을 투여하고; (b) 환자로부터 수득되거나 유도된 샘플(예를 들면, 혈액 샘플 또는 조직 샘플)을, 예를 들면, RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 적용가능한 성분과 함께, SMN 프로브(예를 들면, 서열번호 10)와 접촉시키고; (c) SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양, 및 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양을 검출하되, (1) (i) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 증가, 및 (ii) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 감소는 환자가 화합물에 대해 반응성이며 화합물이 유리할 수 있거나 유리하고/하거나 환자에게 치료 가치를 가질 수 있거나 갖는 것을 나타내고; (2) (i) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화, 및 (ii) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화는 환자가 화합물에 대해 반응하지 않으며 화합물이 유리하지 않고/않거나 환자에게 치료 가치를 갖지 않음을 나타낸다. 특정 양태에서, 환자의 반응은 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 같은 화합물을 투여하고 1시간, 2시간, 4시간, 8시간, 12시간, 16시간, 20시간, 1일, 2일, 3일, 4일, 5일, 7일, 14일, 28일, 1개월, 2개월, 3개월, 6개월, 9개월, 12개월 이상 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 환자가 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25개 이상의 용량의 화합물, 예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 투여받은 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 1 내지 5, 5 내지 10, 10 내지 15, 15 내지 20, 20 내지 30, 30 내지 40, 40 내지 50 또는 50 내지 100개 용량의 화합물, 예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 투여 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 화합물, 예컨대 본원에 기술된 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 연속적인 투여 중에 또는 후에 수일, 수주, 수개월 또는 수년의 기간에 걸쳐 모니터링된다.
특정 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, 화합물에 대한 SMA 환자의 반응을 모니터링하는 방법이 제공된다: (a) SMA 환자 샘플(예를 들면, 혈액 샘플 또는 조직 샘플) 또는 SMA 환자로부터 유도된 샘플(예를 들면, RNA를 추출하기 위해 처리된 혈액 샘플 또는 조직 샘플)을, 예를 들면, RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 적용가능한 성분과 함께, 하기에 기술되는 정방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 11 또는 13) 및/또는 본원에 기술된 역방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 9 또는 12) 및/또는 SMN 프로브(서열번호 10)와 접촉시키고[이때, 상기 샘플은 화합물(예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태)이 투여된 SMA 환자로부터의 샘플 또는 상기 환자로부터 유도된 샘플이다]; (b) SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양, 및 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양을 검출하되, (1) (i) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 증가, 및 (ii) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 감소는 환자가 화합물에 대해 반응성이며 화합물이 유리할 수 있거나 유리하고/하거나 환자에게 치료 가치를 가질 수 있거나 갖는 것을 나타내고; (2) (i) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화, 및 (ii) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화는 환자가 화합물에 대해 반응하지 않으며 화합물이 유리하지 않고/않거나 환자에게 치료 가치를 갖지 않음을 나타낸다. 특정 양태에서, 환자의 반응은 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 같은 화합물을 투여하고 1시간, 2시간, 4시간, 8시간, 12시간, 16시간, 20시간, 1일, 2일, 3일, 4일, 5일, 7일, 14일, 28일, 1개월, 2개월, 3개월, 6개월, 9개월, 12개월 이상 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 환자가 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25개 이상의 용량의 화합물, 예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 투여받은 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 1 내지 5, 5 내지 10, 10 내지 15, 15 내지 20, 20 내지 30, 30 내지 40, 40 내지 50 또는 50 내지 100개 용량의 화합물, 예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 투여 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 화합물, 예컨대 본원에 기술된 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 연속적인 투여 중에 또는 후에 수일, 수주, 수개월 또는 수년의 기간에 걸쳐 모니터링된다.
또 다른 특정 양태에서, 본원에는, 다음을 포함하는, 화합물에 대한 SMA 환자의 반응을 모니터링하는 방법이 제공된다: (a) SMA 환자에게 화합물을 투여하고; (b) 환자로부터 수득되거나 유도된 샘플(예를 들면, 혈액 샘플 또는 조직 샘플)을, 예를 들면, RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 적용가능한 성분과 함께, 하기에 기술되는 정방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 11 또는 13) 및/또는 본원에 기술된 역방향 SMN 프라이머(예를 들면, 서열번호 9 또는 12) 및/또는 SMN 프로브(서열번호 10)와 접촉시키고; (c) SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양, 및 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양을 검출하되, (1) (i) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 증가, 및 (ii) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플로부터) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 감소는 환자가 화합물에 대해 반응성이며 화합물이 유리할 수 있거나 유리하고/하거나 환자에게 치료 가치를 가질 수 있거나 갖는 것을 나타내고; (2) (i) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화, 및 (ii) 화합물 또는 일정수의 용량의 화합물의 투여 전에, 또는 일정한 이전의 날짜에 환자로부터의 유사한 샘플(예를 들면, 동일 유형의 조직 샘플) 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양에 비해, 환자 샘플 중 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양의 무변화 또는 실질적인 무변화는 환자가 화합물에 대해 반응하지 않으며 화합물이 유리하지 않고/않거나 환자에게 치료 가치를 갖지 않음을 나타낸다. 특정 양태에서, 환자의 반응은 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태와 같은 화합물을 투여하고 1시간, 2시간, 4시간, 8시간, 12시간, 16시간, 20시간, 1일, 2일, 3일, 4일, 5일, 7일, 14일, 28일, 1개월, 2개월, 3개월, 6개월, 9개월, 12개월 이상 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 환자가 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25개 이상의 용량의 화합물, 예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 투여받은 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 1 내지 5, 5 내지 10, 10 내지 15, 15 내지 20, 20 내지 30, 30 내지 40, 40 내지 50 또는 50 내지 100개 용량의 화합물, 예를 들면, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 투여 후에 모니터링된다. 일부 양태에서, 환자의 반응은 화합물, 예컨대 본원에 기술된 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 연속적인 투여 중에 또는 후에 수일, 수주, 수개월 또는 수년의 기간에 걸쳐 모니터링된다.
특정 양태에서, 환자에서 SMA는 SMN1 유전자 기능의 손실을 야기하는 두 염색체 상에서의 SMN1 유전자에서의 불활성화 돌연변이 또는 결실에 의해 야기된다.
키트
한 양태에서, 본원에는 하나 이상의 용기에 본원에 기술된 SMN 프라이머 또는 프로브 및 사용 설명서를 포함하는 약학 또는 분석 키트가 제공된다. 한 양태에서, 약학 또는 분석 키트는 용기에 하나 이상의 SMN 역방향 프라이머(예를 들면, 서열번호 2, 9 및/또는 12) 및/또는 하나 이상의 SMN 정방향 프라이머(서열번호 1, 7, 8, 11 및/또는 13) 및 사용 설명서를 포함한다. 또 다른 양태에서, 약학 또는 분석 키트는 하나의 용기에 SMN 역방향 프라이머(예를 들면, 서열번호 2, 9 또는 12), SMN 정방향 프라이머(서열번호 1, 7, 8, 11 또는 13) 및 사용 설명서를 포함한다.
한 양태에서, 약학 또는 분석 키트는, 별도의 용기들에, 한 용기 중에 하나의 SMN 역방향 프라이머(예를 들면, 서열번호 2, 9 또는 12), 또 다른 용기 중에 또 다른 SMN 정방향 프라이머(예를 들면, 서열번호 1, 7, 8, 11 또는 13), 및 사용 설명서를 포함한다.
특정 양태에서, PCR(예, qPCR), RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR) 또는 회전환 증폭에 필요한 적용가능한 성분들, 예를 들면, 폴리머라제, 데옥시뉴클레오시드 트라이포스페이트 등이 상기 키트에 포함된다. 일부 양태에서, 혼성화에 필요한 성분들이 상기 키트에 포함된다. 상기 프라이머들을 함유하는 약학 또는 분석 키트는, 예를 들면, (i) 치료제(예를 들면, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태)가 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키는지를 평가하고, (ii) SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양 및 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양을 모니터링하고/하거나, (iii) 치료제(예를 들면, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태)에 대한 대상의 반응을 모니터링하기 위해 PCR 및 RT-PCR에 사용될 수 있다. 다른 양태에서, 대상은 인간 대상이다. 다른 양태에서, 인간 대상은 인간 환자이다. 다른 특정 양태에서, 인간 환자는 인간 SMA 환자이다.
특정 양태에서, 약학 또는 분석 키트는, 하나의 용기에 서열번호 1에서 확인된 서열을 갖는 정방향 프라이머, 및 또 다른 용기에 서열번호 2에서 확인된 서열을 갖는 역방향 프라이머를 포함한다. 특정 양태에서, 상기 프라이머들은, 본원에 기술되거나 각각 본원에 전체로 참고로 인용된 국제특허공개 제WO2009/151546호 또는 미국특허공개 제2011/0086833호에 기술된 바와 같은, 인간 SMN1 미니유전자 또는 인간 SMN2 미니유전자에 의해 암호화된 뉴클레오티드 서열을 증폭시키기 위해 RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 사용된다. 다른 양태에서, 상기 프라이머들은, 예를 들면, 서던 블롯 또는 노던 블롯과 같은 혼성화 분석에 프로브로 사용된다.
특정 양태에서, 약학 또는 분석 키트는, 하나의 용기에 서열번호 7에서 확인된 뉴클레오티드 서열을 갖는 정방향 프라이머, 및 또 다른 용기에 서열번호 9에서 확인된 뉴클레오티드 서열을 갖는 역방향 프라이머를 포함한다. 특정 양태에서, 상기 프라이머들은, 내인성 인간 SMN1 및 SMN2 유전자에 의해 암호화된 뉴클레오티드 서열을 증폭시키기 위해 RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 사용된다. 다른 양태에서, 상기 프라이머들은, 예를 들면, 서던 블롯 또는 노던 블롯과 같은 혼성화 분석에 프로브로 사용된다.
또 다른 특정 양태에서, 약학 또는 분석 키트는, 하나의 용기에 서열번호 8에서 확인된 뉴클레오티드 서열을 갖는 정방향 프라이머, 및 또 다른 용기에 서열번호 9에서 확인된 뉴클레오티드 서열을 갖는 역방향 프라이머를 포함한다. 특정 양태에서, 상기 프라이머들은, 내인성 인간 SMN2 유전자에 의해 암호화된 뉴클레오티드 서열을 증폭시키기 위해 RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 사용된다. 다른 양태에서, 상기 프라이머들은, 예를 들면, 서던 블롯 또는 노던 블롯과 같은 혼성화 분석에 프로브로 사용된다.
특정 양태에서, 약학 또는 분석 키트는, 하나의 용기에 서열번호 7에서 확인된 뉴클레오티드 서열을 갖는 정방향 프라이머, 또 다른 용기에 서열번호 8에서 확인된 뉴클레오티드 서열을 갖는 정방향 프라이머, 및 또 다른 용기에 서열번호 9에서 확인된 뉴클레오티드 서열을 갖는 역방향 프라이머를 포함한다. 특정 양태에서, 상기 프라이머들은, 내인성 인간 SMN1 및 SMN2 유전자에 의해 암호화된 뉴클레오티드 서열을 증폭시키기 위해 RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 사용된다. 다른 양태에서, 상기 프라이머들은, 예를 들면, 서던 블롯 또는 노던 블롯과 같은 혼성화 분석에 프로브로 사용된다.
특정 양태에서, 약학 또는 분석 키트는, 하나의 용기에 서열번호 11에서 확인된 뉴클레오티드 서열을 갖는 정방향 프라이머, 및 또 다른 용기에 서열번호 12에서 확인된 뉴클레오티드 서열을 갖는 역방향 프라이머를 포함한다. 특정 양태에서, 상기 프라이머들은, 내인성 인간 SMN1 및 SMN2 유전자에 의해 암호화된 뉴클레오티드 서열을 증폭시키기 위해 RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 사용된다. 다른 양태에서, 상기 프라이머들은, 예를 들면, 서던 블롯 또는 노던 블롯과 같은 혼성화 분석에 프로브로 사용된다.
특정 양태에서, 약학 또는 분석 키트는, 하나의 용기에 서열번호 11에서 확인된 뉴클레오티드 서열을 갖는 정방향 프라이머, 및 또 다른 용기에 서열번호 9에서 확인된 뉴클레오티드 서열을 갖는 역방향 프라이머를 포함한다. 특정 양태에서, 상기 프라이머들은, 내인성 인간 SMN1 및 SMN2 유전자에 의해 암호화된 뉴클레오티드 서열을 증폭시키기 위해 RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 사용된다. 다른 양태에서, 상기 프라이머들은, 예를 들면, 서던 블롯 또는 노던 블롯과 같은 혼성화 분석에 프로브로 사용된다.
특정 양태에서, 약학 또는 분석 키트는, 하나의 용기에 서열번호 13에서 확인된 뉴클레오티드 서열을 갖는 정방향 프라이머, 및 또 다른 용기에 서열번호 12에서 확인된 뉴클레오티드 서열을 갖는 역방향 프라이머를 포함한다. 특정 양태에서, 상기 프라이머들은, 내인성 인간 SMN1 및 SMN2 유전자에 의해 암호화된 뉴클레오티드 서열을 증폭시키기 위해 RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 사용된다. 다른 양태에서, 상기 프라이머들은, 예를 들면, 서던 블롯 또는 노던 블롯과 같은 혼성화 분석에 프로브로 사용된다.
특정 양태에서, 약학 또는 분석 키트는, 하나의 용기에 서열번호 13에서 확인된 뉴클레오티드 서열을 갖는 정방향 프라이머, 및 또 다른 용기에 서열번호 9에서 확인된 뉴클레오티드 서열을 갖는 역방향 프라이머를 포함한다. 특정 양태에서, 상기 프라이머들은, 내인성 인간 SMN1 및 SMN2 유전자에 의해 암호화된 뉴클레오티드 서열을 증폭시키기 위해 RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 사용된다. 다른 양태에서, 상기 프라이머들은, 예를 들면, 서던 블롯 또는 노던 블롯과 같은 혼성화 분석에 프로브로 사용된다.
특정 양태에서, 약학 또는 분석 키트는, 하나의 용기에 서열번호 1에서 확인된 뉴클레오티드 서열을 갖는 정방향 프라이머, 및 또 다른 용기에 서열번호 9에서 확인된 뉴클레오티드 서열을 갖는 역방향 프라이머를 포함한다. 특정 양태에서, 상기 프라이머들은, 내인성 인간 SMN1 및 SMN2 유전자에 의해 암호화된 뉴클레오티드 서열을 증폭시키기 위해 RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 사용된다. 다른 양태에서, 상기 프라이머들은, 예를 들면, 서던 블롯 또는 노던 블롯과 같은 혼성화 분석에 프로브로 사용된다.
특정 양태에서, 약학 또는 분석 키트는, 하나의 용기에 서열번호 1에서 확인된 뉴클레오티드 서열을 갖는 정방향 프라이머, 및 또 다른 용기에 서열번호 12에서 확인된 뉴클레오티드 서열을 갖는 역방향 프라이머를 포함한다. 특정 양태에서, 상기 프라이머들은, 내인성 인간 SMN1 및 SMN2 유전자에 의해 암호화된 뉴클레오티드 서열을 증폭시키기 위해 RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR), PCR(예, qPCR) 또는 회전환 증폭에 사용된다. 다른 양태에서, 상기 프라이머들은, 예를 들면, 서던 블롯 또는 노던 블롯과 같은 혼성화 분석에 프로브로 사용된다.
특정 양태에서, 약학 또는 분석 키트는 하나의 용기에 본원에 기술된 SMN 프로브(예를 들면, 서열번호 3 또는 10)를 포함한다. 다른 양태에서, 상기 프로브는, 예를 들면, 서던 블롯 또는 노던 블롯과 같은 혼성화 분석에 사용된다. 특정 양태에서, 프로브는 RT-qPCR 또는 qPCR에 사용된다. 특정 양태에서, PCR(예, qPCR), RT-PCR(예, 종말점 RT-PCR 및/또는 RT-qPCR) 또는 회전환 증폭에 필요한 성분들, 예를 들면, 폴리머라제, 데옥시뉴클레오시드 트라이포스페이트, 프라이머 등이 상기 키트에 포함된다. 일부 양태에서, 혼성화에 필요한 성분들이 상기 키트에 포함된다.
한 양태에서, 약학 또는 분석 키트는, 하나의 용기에 SMN 역방향 프라이머(예를 들면, 서열번호 2, 9 또는 12), 또 다른 용기에 SMN 정방향 프라이머(예를 들면, 서열번호 1, 7, 8, 11 또는 13) 및 또 다른 용기에 SMN 프로브(예를 들면, 서열번호 3 또는 10), 및 사용 설명서를 포함한다. 또 다른 양태에서, 약학 또는 분석 키트는 하나의 용기에 하나 이상의 SMN 역방향 프라이머(예를 들면, 서열번호 2, 9 및/또는 12), 또 다른 용기에 하나 이상의 SMN 정방향 프라이머(서열번호 1, 7, 8, 11 및/또는 13) 및 또 다른 용기에 하나 이상의 SMN 프로브(예를 들면, 서열번호 3 및/또는 10), 및 사용 설명서를 포함한다.
특정 양태에서, PCR, RT-PCR 또는 회전환 증폭에 필요한 성분들, 예를 들면, 폴리머라제, 데옥시뉴클레오시드 트라이포스페이트 등이 상기 키트에 포함된다. 상기 프로브 및/또는 프라이머들을 함유하는 약학 또는 분석 키트는, 예를 들면, (i) 치료제(예를 들면, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태)가 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키는지를 평가하고, (ii) SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 엑손 7을 포함하는 mRNA의 양 및 SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사되고 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7을 포함하지 않는 mRNA의 양을 모니터링하고/하거나, (iii) 치료제(예를 들면, 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태)에 대한 대상의 반응을 모니터링하기 위해 PCR 및 RT-PCR에 사용될 수 있다. 다른 양태에서, 대상은 인간 대상이다. 다른 양태에서, 인간 대상은 인간 환자이다. 다른 특정 양태에서, 인간 환자는 인간 SMA 환자이다.
또 다른 양태에서, 본원에는 하나의 용기에 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태, 및 상기 화합물 또는 이의 형태의 사용 설명서를 포함하는 약학 키트가 제공된다. 특정 양태에서, 본원에는 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태 및 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 포함하는 약학 조성물, 및 사용 설명서를 포함하는 약학 키트가 제공된다. 또 다른 특정 양태에서, 본원에는 효과량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태 및 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 포함하는 약학 조성물, 및 사용 설명서를 포함하는 약학 키트가 제공된다. 한 양태에서, 사용 설명서는 다음 중 하나, 둘 또는 그 이상을 설명한다: 용량, 투여 경로, 투여 횟수 및 대상에 대한 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태의 투여 부작용. 다른 양태에서, 인간 대상은 인간 환자이다. 다른 특정 양태에서, 인간 환자는 인간 SMA 환자이다.
본원에 개시된 바와 같이, 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태를 제조하기 위한 일반적인 방법은 공지된 표준 합성 방법을 통해 이용가능하다. 출발 물질의 대부분은 상업적으로 시판하거나, 시판하지 않는 경우, 당해 분야에 숙련된 자에게 공지된 기술을 사용하여 하기에 기술된 경로를 이용하여 제조될 수 있다. 본원에 제공된 합성 도식은 여러 반응 단계를 포함하며, 상기 단계들은 각각 서로 독립적이며 임의의 선행 또는 후속 단계의 존재 또는 부재 하에 수행될 수 있다. 즉, 본원에 제공된 합성 도식들의 개별적 반응 단계들 각각은 별개로 고려된다.
일반적인 합성 방법
반응식 A
R2가 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 아릴, 헤테로사이클릴 또는 헤테로아릴 고리 시스템인 화학식 I의 화합물은 하기 반응식 A에 기술된 바와 같이 제조될 수 있다.
메틸 케톤 화합물 A1을 다이알킬 카본에이트 화합물 A1a(이때, Rx는 C1-4알킬 등임)와 적합한 용매(예컨대, THF 등) 중에서 염기(예컨대, NaH 등)의 존재 하에 반응시켜 화합물 A3을 수득한다. 다르게는, 에스터 화합물 A2를 아세트산 에스터 화합물 A2a(이때, Ry는 C1-4알킬 등임)와 적합한 용매(예컨대, THF 등) 중에서 염기(예컨대, LDA 등)의 존재 하에 반응시켜 화합물 A3을 수득한다. 화합물 A3을 알콜(예컨대, MeOH 등) 및 산 촉매(예컨대, p-TsOH 등)의 존재 하에 추가로 반응시켜 아세탈 화합물 A4(이때, Rz는 C1-4알킬 등임)를 수득한다. 화합물 A3 또는 화합물 A4를 화합물 A5(이때, X는 다양한 반응성 기를 나타내고, 이들은 당업자에게 공지된 기술을 사용하여 적합한 출발 물질을 화합물 A5 또는 화합물 A6과 반응시킴으로써 다수의 R1 작용기 치환기를 제공하도록 사용될 수 있다)와 산(예컨대, PPA, p-TsOH 등) 및 적합한 용매(예컨대, DMA 등)의 존재 하에 반응시켜 화합물 A6을 수득한다.
반응식 B
R2가 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 헤테로사이클릴 또는 헤테로아릴 고리 시스템인 화학식 I의 화합물은 하기 반응식 B에 기술된 바와 같이 제조될 수 있다.
화합물 B1을 화합물 B2(선택적으로 치환된 헤테로사이클릴 또는 헤테로아릴 고리 시스템)(이때, 용어 "Het"는 아미딘-유사 잔기, 예컨대, 비제한적으로, 2-아미노피리딘, 2-아미노피리미딘, 2-아미노피라진, 3-아미노피리다진, 2-아미노티아졸, 4-아미노티아졸, 4-아미노피리미딘 등을 지칭함)와 적합한 용매(예컨대, MeOH 등) 중에서 반응시켜 화합물 B3을 수득한다. 화합물 B3을 아세트산 에스터 화합물 A2a(이때, Ry는 C1-4알킬 등임)와 적합한 용매(예컨대, THF 등) 중에서 염기(예컨대, LDA 등)의 존재 하에 반응시켜 화합물 B4를 수득한다. 화합물 B4를 화합물 A5와 산(예컨대, PPA, p-TsOH 등) 및 적합한 용매(예컨대, DMA 등)의 존재 하에 반응시켜 화합물 B5를 수득한다.
반응식 C
R2가 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 헤테로아릴 고리 시스템인 화학식 I의 화합물은 하기 반응식 C에 기술된 바와 같이 제조될 수 있다.
2,4-다이에스터 피라졸 화합물 C1을 α-클로로 케톤 화합물 C2와 염기(예컨대, K2CO3 등) 및 적합한 용매(예컨대, 아세톤 등)의 존재 하에 반응시켜 화합물 C3을 수득한다. 화합물 C3을 적합한 용매(예컨대, AcOH 등) 중에서 암모늄 아세테이트로 처리하여 화합물 C4를 수득한다. 화합물 C4를 염소화 시약(예컨대, POCl3 등)으로 처리하여 화합물 C5를 수득한다. 화합물 C5를 알킬 보론산(이때, Z는 B(OH)2이고, Rz는 C1-4알킬 등임) 또는 알킬 보론산 에스터(이때, Z는 B2(pin)2(비스(피나콜라토)다이보론으로도 지칭됨)이고, Rz는 C1-4알킬 등임)와 적합한 용매(예컨대, DMF 등) 중에서 촉매(예컨대, Pd(dppf)Cl2 등) 및 염기(예컨대, K2CO3 등)의 존재 하에 반응시켜 스즈끼(Suzuki) 크로스 커플링을 수행하여 화합물 C6을 수득한다. 화합물 C6을 아세트산 에스터 화합물 A2a(이때, Ry는 C1-4알킬 등임)와 적합한 용매(예컨대, THF 등) 중에서 염기(예컨대, LDA 등)의 존재 하에 반응시켜 화합물 C7을 수득한다. 화합물 C7을 화합물 A5와 산(예컨대, pTsOH, PPTs 등) 및 적합한 용매의 존재 하에 반응시켜 화합물 C8을 수득한다.
반응식 D
R2가 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 아릴 또는 헤테로아릴 고리 시스템인 화학식 I의 화합물은 하기 반응식 D에 기술된 바와 같이 제조될 수 있다.
화합물 A5를 말론산 에스터 화합물 D1(이때, Rw는 C1-4알킬, 2,4,6-트라이클로로페닐 등임)과 반응시켜 화합물 D2를 수득한다. 화합물 D2를 염소화 시약(예컨대, POCl3 등)으로 처리하여 화합물 D3을 수득한다. 화합물 D3을 R2 치환된 알킬 보론산(이때, Z는 B(OH)2) 또는 알킬 보론산 에스터(이때, Z는 B2(pin)2임)(이때, R2는 아릴 또는 헤테로아릴임)와 적합한 용매(예컨대, DMF 등) 중에서 촉매(예컨대, Pd(dppf)Cl2 등) 및 염기(예컨대, K2CO3 등)의 존재 하에 반응시켜 스즈끼 크로스 커플링을 수행하여 화합물 A6을 수득한다.
반응식 E
R2가 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 헤테로아릴 고리 시스템인 화학식 I의 화합물은 하기 반응식 E에 기술된 바와 같이 제조될 수 있다.
화합물 E1을 화합물 D3과 적합한 용매(예컨대, DMF 등) 중에서 촉매(예컨대, Pd(dppf)Cl2 등) 및 염기(예컨대, K2CO3 등)와 반응시켜 스즈끼 크로스 커플링을 수행하여 화합물 E2를 수득한다. 화합물 E2를 적합한 용매(예컨대, DMSO 등) 중에서 화합물 C2와 반응시켜 화합물 E3을 수득한다.
반응식 F
R2가 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 헤테로아릴 고리 시스템인 화학식 I의 화합물은 하기 반응식 F에 기술된 바와 같이 제조될 수 있다.
선택적으로 치환된 2-아미노피리딘 화합물 F1을 브롬화 시약(예컨대, Br2 및 NBS 등)과 반응시켜 화합물 F2를 수득한다. 화합물 F2를 화합물 C2와 적합한 용매(예컨대, DMSO 등) 중에서 반응시켜 화합물 F3을 수득한다. 화합물 F3을 화합물 F3a와 적합한 용매(예컨대, 아세토니트릴 등) 중에서 촉매(예컨대, Pd(dppf)Cl2 등) 및 염기(예컨대, KOAc 등)의 존재 하에 반응시켜 화합물 F4를 수득한다. 화합물 F4를 화합물 D3과 적합한 용매(예컨대, DMF 등) 중에서 촉매(예컨대, Pd(dppf)Cl2 등) 및 염기(예컨대, K2CO3 등)와 반응시켜 스즈끼 크로스 커플링을 수행하여 화합물 F5를 수득한다.
반응식 G
R2가 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 헤테로아릴 고리 시스템인 화학식 I의 화합물은 하기 반응식 G에 기술된 바와 같이 제조될 수 있다.
선택적으로 치환된 아졸 화합물 G1(이때, 용어 "Het"는, 선택적으로, 이용가능한 원자가에 의해 허용되는 1, 2 또는 3개의 추가적인 질소 고리원을 추가로 함유하는 아졸 고리 시스템을 지칭함)을 적합한 용매(예컨대, DMSO 등) 중에서 화합물 D3의 존재 하에 반응시켜 화합물 G2를 수득한다.
반응식 H
R2가 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 아릴, 헤테로사이클릴 또는 헤테로아릴 고리 시스템인 화학식 I의 화합물은 하기 반응식 H에 기술된 바와 같이 제조될 수 있다.
화합물 H1(이때, R2는 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 아릴, 헤테로사이클릴 또는 헤테로아릴 고리 시스템임)을 브레데렉(Bredereck) 시약 화합물 H2(또는 DMF-DMA 등)와 반응시켜 화합물 H3을 수득한다. 화합물 H3을 화합물 H4(이때, X는 다양한 반응성 기를 나타내고, 이들은 당업자에게 공지된 기술을 사용하여 적합한 출발 물질을 화합물 H4 또는 화합물 H5와 반응시킴으로써 다수의 R1 작용기 치환기를 제공하도록 사용될 수 있다)와 반응시켜 화합물 H5를 수득한다.
반응식 I
R2가 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 아릴 또는 헤테로아릴 고리 시스템인 화학식 I의 화합물은 하기 반응식 I에 기술된 바와 같이 제조될 수 있다.
화합물 D3(이때, X는 브로모 등임)을 R2 치환된 알킬 보론산(이때, Z는 B(OH)2임) 또는 알킬 보론산 에스터(이때, Z는 B2(pin)2임)(이때, R2는 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 아릴 또는 헤테로아릴 고리 시스템 등임)과 적합한 용매(예컨대, DMF 등) 중에서 촉매(예컨대, Pd(dppf)Cl2 등) 및 염기(예컨대, K2CO3 등)의 존재 하에 반응시켜 스즈끼 크로스 커플링을 수행하여 화합물 I1을 수득한다. 화합물 I1을 R1-H(이때, R1은 친핵성 아미노 또는 하이드록실 기 등을 함유함)와 적합한 용매(예컨대, DMSO 등) 중에서 반응시켜 화합물 I3을 수득한다.
화합물 I1을 또한 R1 치환된 알킬 보론산(이때, Z는 B(OH)2임) 또는 알킬 보론산 에스터(이때, Z는 B2(pin)2임)와 적합한 용매(예컨대, DMF 등) 중에서 팔라듐 촉매(예컨대, Pd(dppf)Cl2 등) 및 염기(예컨대, K2CO3 등)의 존재 하에 반응시켜 스쯔끼 커플링을 수행하여 화합물 I3을 수득한다.
다르게는, 화합물 D3(이때, X는 브로모 등임)은 R1-H(이때, R1은 친핵성 아미노 또는 하이드록실 기 등을 함유함)와 적합한 용매(예컨대, DMSO 등) 중에서 반응시켜 화합물 I2를 수득한다. 화합물 I2를 R2 치환된 알킬 보론산(이때, Z는 B(OH)2임) 또는 알킬 보론산 에스터(이때, Z는 B2(pin)2임)와 적합한 용매(예컨대, DMF 등) 중에서 촉매(예컨대, Pd(dppf)Cl2 등) 및 염기(예컨대, K2CO3 등)의 존재 하에 반응시켜 스즈끼 크로스 커플링을 수행하여 화합물 I3을 수득한다.
반응식 J
R2가 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 아릴, 헤테로사이클릴 또는 헤테로아릴 고리 시스템인 화학식 I의 화합물은 하기 반응식 J에 기술된 바와 같이 제조될 수 있다.
화합물 J1(이때, R2는 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 아릴, 헤테로사이클릴 또는 헤테로아릴 고리 시스템임)을 말론산 에스터 화합물 D1과 염기(예컨대, TEA 또는 DIEA 등), 루이스산(예컨대, MgCl2 등) 및 적합한 용매(예컨대, ACN 등)의 존재 하에 반응시켜 화합물 J2를 수득한다. 화합물 J2를 염소화 시약(예컨대, POCl3 등)으로 염기(예컨대, 휘니히(Huenig) 염기 등)의 존재 하에 처리하여 화합물 J3을 수득한다.
화합물 J3을 화합물 J4(이때, X는 다양한 반응성 기를 나타내고, 이들은 당업자에게 공지된 기술을 사용하여 적합한 출발 물질을 화합물 J4, 화합물 J5 또는 화합물 J6과 반응시킴으로써 다수의 R1 작용기 치환기를 제공하도록 사용될 수 있다)와 염기(예컨대, NaH 등) 및 적합한 용매(예컨대, DMF 등)의 존재 하에 반응시켜 화합물 J5를 수득한다. 화합물 J5의 카복실산 에스터 기를 적합한 용매(예컨대, 물 등) 중에서 산성 조건(예컨대, TFA 등) 하에 가수분해하고 탈카복실화시켜 화합물 J6을 수득한다.
화합물 J7(이때, X는 다양한 반응성 기를 나타내고, 이들은 당업자에게 공지된 기술을 사용하여 적합한 출발 물질을 화합물 J7, 화합물 J8 또는 화합물 J4와 반응시킴으로써 다수의 R1 작용기 치환기를 제공하도록 사용될 수 있다)을 말론산 다이에스터 화합물 D1과 적합한 용매(예컨대, 1,4-다이옥산 등) 중에서 염기(예컨대, Cs2CO3 등), 금속 촉매(예컨대, CuI 등) 및 리간드(예컨대, 2-니코틴산 등)의 존재 하에 반응시켜 다이에스터 화합물 J8을 수득한다. 화합물 J8의 카복실산 에스터 기를 적합한 용매 시스템(예컨대, MeOH 및 물 등) 중에서 염기(예컨대, NaOH 등)에 의해 가수분해하고, 이어서 적합한 용매(예컨대, 물 등) 중에서 산(예컨대, HCl 등)에 의해 탈카복실화시키고 산성화시켜 화합물 J4를 수득할 수 있다.
구체적인 합성 실시예
보다 상세히 기술하고 이해를 돕기 위해, 하기의 비제한적인 실시예는 본원에 기술된 화합물의 범위를 더 상세히 예시하기 위해 제공되며, 본 발명의 범위를 특별히 제한하는 것으로 이해되지 않는다. 당해 분야에 숙련된 자의 이해범위 내에서 확인되는, 현재 알려져 있거나 나중에 개발될 수 있는 본원에 기술된 화합물들의 상기 변형들은 본원에 기술되고 하기에 청구된 바와 같은 화합물의 범위 내에 속하는 것으로 간주된다. 이들 실시예는 특정 화합물들의 제조를 예시한다. 당해 분야에 기술을 가진 자라면, 이들 실시예에 기술된 기술들이, 합성 실행시 적절히 작용하고 따라서 이의 바람직한 실행 방식을 구성하는, 당해 분야에 통상의 기술을 가진 자들에 의해 서술되는 바와 같은 기술들을 대표함을 이해할 것이다. 그러나, 당해 분야에 숙련된 자들은 본 개시내용에 비추어서, 많은 변화들이 개시된 특정 방법에서 이루어질 수 있으며 또한 본 발명의 설명의 진의 및 범위에서 벗어나지 않고 비슷하거나 유사한 결과를 제공할 수 있음을 숙지해야 함을 인지해야 한다.
나타낸 화합물들에 대한 하기 실시예 이외에서, 달리 언급하지 않는 한, 명세서 및 특허청구범위에 사용된 성분들의 양, 반응 조건, 실험 데이터 등을 나타내는 모든 숫자들은 용어 "약"에 의해 수식되는 것으로 이해해야 한다. 따라서, 모든 상기 숫자들은 반응에 의해 또는 가변적 실험 조건의 결과로서 수득되는 것으로 생각되는 목적하는 성질들에 따라 달라질 수 있는 근사치를 나타낸다. 그러므로, 실험 재현성의 예상 범위 내에서, 수득된 데이터의 맥락에서 용어 "약"은 평균으로부터 표준 편차에 따라 달라질 수 있는, 제공된 데이터에 대한 범위를 말한다. 또한, 제공된 실험 결과에 있어서, 수득된 데이터는 유의적 수치의 손실 없이 데이터를 일관되게 제공하기 위해 반올림되거나 반내림될 수 있다. 적어도, 특허청구범위의 범주에 등가의 원칙의 적용을 제한하기 위한 시도로서가 아니라, 각각의 수치 파라미터는 당해 분야에 기술을 가진 자에 의해 사용되는 유의적 자릿수의 숫자 및 라운딩 기술에 비추어 이해되어야 한다.
본 설명의 넓은 범위를 나타내는 수치 범위 및 파라미터는 근사치이지만, 하기에 나타낸 실시예에 나타낸 수치들은 가능한 한 정확하게 보고된 것이다. 그러나, 임의의 수치는 본질적으로 그 각각의 시험 측정치에서 발견되는 표준 편차로부터 필수적으로 비롯되는 특정 오차를 포함한다.
화합물 실시예
상기 및 본원 전반에 걸쳐 사용된 하기 약어는 달리 언급이 없는 한 하기 의미를 갖는 것으로 이해해야 한다:
실시예 1
화합물 72의 제조
단계 A: 3'-플루오로-4'-메톡시아세토페논(336 mg, 2 mmol)을 THF(4 mL)에 용해시켰다. 상기 용액에 다이메틸 카본에이트(0.42 mL, 5 mmol) 및 나트륨 하이드라이드(200 mg, 5 mmol, 광유 중 60% 분산액)를 순차적으로 첨가하였다. 혼합물을 30분 동안 60℃까지 가열하였다. 혼합물을 0℃까지 냉각한 후, 잔류하는 나트륨 하이드라이드를 1N 수성 HCl(20 mL)로 급랭시켰다. 혼합물을 EtOAc(20 mL)로 추출하였다. 유기 층을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 실리카 겔로부터 헥산 중 EtOAc(25%)로 용리하여 메틸 3-(3-플루오로-4-메톡시페닐)-3-옥소프로파노에이트를 연황색 오일로서 수득하였다(405 mg, 89%). MS m/z 227.2 [M+H]+; 1H NMR (CDCl3, 500 MHz): δ 7.76 (1H, dd, J = 8.6 Hz, 2.1 Hz), 7.72 (1H, dd, J = 11.7 Hz, 2.2 Hz), 7.04 (1H, t, J = 8.4 Hz), 3.99 (3H, s), 3.97 (2H, s), 3.78 (3H, s).
단계 B: 메틸 3-(3-플루오로-4-메톡시페닐)-3-옥소프로파노에이트(405 mg, 1.8 mmol)를 메탄올(1 mL)에 용해시켰다. p-톨루엔설폰산 일수화물(17 mg, 0.09 mmol) 및 이어서 트라이메틸오르토폼에이트(0.30 mL, 2.7 mmol)를 상기 용액에 첨가하였다. 용액을 60℃에서 1시간 동안 교반하였다. 휘발성 물질을 질소 증기로 제거하여 조질 메틸 3-(3-플루오로-4-메톡시페닐)-3,3-다이메톡시프로파노에이트를 수득하였다. 1H NMR (DMSO-d 6, 500 MHz): δ 7.18-7.15 (3H, m), 3.85 (3H, s), 3.38 (3H, s), 3.10 (6H, s), 2.98 (2H, s).
단계 C: 단계 B로부터의 조질 물질(1.8 mmol)에 5-플루오로피리딘-2-아민(213 mg, 1.9 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 순수하게 1시간 동안 160℃까지 가열하여 7-플루오로-2-(3-플루오로-4-메톡시페닐)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(475 mg, 92%)을 수득하였다. MS m/z 289.2 [M+H]+; 1H NMR (CDCl3, 500 MHz): δ 8.99 (1H, m), 7.92 (1H, dd, J = 12.5 Hz, 2.2 Hz), 7.90 (1H, d, 8.5 Hz), 7.88 (1H, m), 7.73 (1H, m), 7.10 (1H, t, J = 8.5 Hz), 6.85 (1H, s), 3.99 (3H, s).
단계 D: 7-플루오로-2-(3-플루오로-4-메톡시페닐)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(200 mg, 0.7 mmol)을 다이메틸아세트아미드(0.5 mL) 중 피페라진(430 mg, 3.5 mmol)과 합하였다. 혼합물을 150℃에서 0.5시간 동안 교반한 후, CH2Cl2 중 MeOH(0% → 8%)(3% NH3)로 용리하는 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하였다. 표제 화합물을 황색 분말로서 수득하였다(175 mg, 71%). M.P. 191-195℃; MS m/z 355.0 [M+H]+; 1H NMR (DMSO-d 6, 500 MHz): δ 8.20 (1H, d, J = 2.7 Hz), 8.07-8.02 (3H, m), 7.67 (1H, d, J = 9.7 Hz), 7.28 (1H, t, J = 8.7 Hz), 6.93 (1H, s), 3.13 (4H, m), 2.90 (3H, s), 2.88 (4H, m), 2.34 (1H, br s).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 대체함으로써, 실시예 1에 따라 제조할 수 있다.
실시예 2
화합물 239의 제조
단계 A: 7-브로모-2-(3-플루오로-4-메톡시페닐)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(250 mg, 0.72 mmol), (R)-tert-부틸 3-(메틸아미노)피롤리딘-1-카복실레이트(180 mg, 0.90 mmol), Pd2dba3(61 mg, 0.065 mmol), 다이사이클로헥실(2',6'-다이메톡시바이페닐-2-일)포스핀(SPhos, 78 mg, 0.19 mmol), Cs2CO3(500 mg, 1.53 mmol) 및 1,2-다이메톡시에탄(DME, 2.0 mL)의 혼합물을 아르곤 대기 하에 80℃에서 18시간 동안 교반하였다. 이어서, 반응 혼합물을 CH2Cl2/MeOH(9:1)로 희석하고, 여과하여 고체를 제거하였다. 여액을 진공 하에 농축하였다. 실리카 겔 크로마토그래피(CH2Cl2 중 아세톤 10% → 20%)로 정제하고, 이어서 에터로 세척하여 (R)-tert-부틸 3-((2-(3-플루오로-4-메톡시페닐)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-일)(메틸)아미노)피롤리딘-1-카복실레이트(132 mg, 39%)를 밝은 황갈색 고체로서 수득하였다. MS m/z 469.0 [M+H]+.
단계 B: CH2Cl2(2.0 mL) 및 TFA(500 μL) 중 (R)-tert-부틸 3-((2-(3-플루오로-4-메톡시페닐)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-일)(메틸)아미노)피롤리딘-1-카복실레이트(130 mg, 0.28 mmol)의 용액을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 1N NaOH 용액(50 mL)에 부었다. 생성물을 CH2Cl2/EtOH(9:1)로 추출하였다. 유기 층을 진공 하에 농축하였다. 실리카 겔 크로마토그래피(CH2Cl2/MeOH/NH4OH = 9/1/0.1)로 정제하여 (R)-2-(3-플루오로-4-메톡시페닐)-7-(메틸(피롤리딘-3-일)아미노)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(82 mg, 79%)을 황색 고체로서 수득하였다. MS m/z 369.1 [M+H]+.
단계 C: (R)-2-(3-플루오로-4-메톡시페닐)-7-(메틸(피롤리딘-3-일)아미노)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(45 mg, 0.12 mmol), DCE(500 μL), 폼알데하이드(H2O 중 37% w/w, 200 μL) 및 NaBH(OAc)3(85 mg, 0.40 mmol)의 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 수성 K2CO3 용액에 첨가하고, 표제 생성물을 CH2Cl2로 추출하였다. 유기 층을 진공 하에 농축하였다. 실리카 겔 크로마토그래피(CH2Cl2 중 10% MeOH)로 정제하여 표제 화합물(39 mg, 85%)을 회백색 고체로서 수득하였다. M.P. 143-149℃; MS m/z 383.5 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6): δ 8.13 (d, 1H, J = 3 Hz), 8.0-8.1 (m, 3H), 7.69 (d, 1H, J = 10 Hz), 7.29 (t, 1H, J = 9.0 Hz), 6.90 (s, 1H), 4.58 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 2.93 (3H, s), 2.81 (m, 1H), 2.75 (m, 1H), 2.49 (m, 1H, DMSO-d 6 에 의해 불명료함), 2.20 (m, 2H), 2.28 (s, 3H), 1.76 (m, 1H).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 대체함으로써, 실시예 2에 따라 제조할 수 있다.
실시예 3
화합물 6의 제조
단계 A: 에틸 3-(3,4-다이메톡시페닐)-3-옥소프로파노에이트(2.02 g, 8.0 mmol), 2-아미노-5-플루오로피리딘(0.897 g, 8.0 mmol) 및 p-TsOH(152 mg, 0.8 mmol)의 혼합물을 150℃에서 가열하였다. 혼합물을 용융하고, 이어서 고체화시켰다. 1시간 후, 혼합물을 실온까지 냉각하고, MeCN으로 세척하여 2-(3,4-다이메톡시페닐)-7-플루오로-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온을 황색 고체로서 수득하였다(1.356 g, 56%). MS m/z 367.5 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6): δ 8.92 (1H, dd, J = 2.9 Hz, 4.8 Hz), 8.11-8.07 (1H, m), 7.85-7.82 (1H, m),7.77 (1H, d, J = 2.1 Hz), 7.09 (1H, d, J = 8.6 Hz), 7.06 (1H, s), 6.93 (1H, s), 3.88 (3H, s), 3.84 (3H, s),
단계 B: DMSO(10 mL) 중 2-(3,4-다이메톡시페닐)-7-플루오로-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(1.50 g, 5.0 mmol), 피페라진(1.29 g, 15 mmol) 및 DIEA(1.3 mL, 7.5 mmol)의 혼합물을 120℃에서 가열하였다. 15시간 후, 휘발성 물질을 제거하고, 잔사를 MeCN으로 세척하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(1.674 g, 91%). M.P. 182-184℃; MS m/z 367.5 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6): δ 8.20 (1H, d, J = 2.7 Hz), 8.04 (1H, dd, J = 2.8 Hz, 9.8 Hz), 7.79 (1H, dd, J = 2.1 Hz, 8.5 Hz), 7.74 (1H, d, J = 2.1 Hz), 7.67 (1H, d, J = 9.7 Hz), 7.07 (1H, d, J = 8.5 Hz), 6.93 (1H, s), 3.87 (3H, s), 3.83 (3H, s), 3.12 (4H, m), 2.88 (4H, m).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 대체함으로써, 실시예 3에 따라 제조할 수 있다.
실시예 4
화합물 1의 제조
단계 A: PPA(약 5 g) 중 에틸 3-(3-메톡시페닐)-3-옥소프로파노에이트(2.68 mL, 14.0 mmol) 및 2-아미노-5-플루오로피리딘(1.12 g, 10.0 mmol)의 혼합물을 120℃에서 가열하였다. 0.5시간 후, 진한 자주색 혼합물을 실온까지 냉각하고, 얼음-물로 처리하였다. 침전물을 여과하고, 물 및 MeCN으로 세척하여 2-(4-메톡시페닐)-7-플루오로-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온을 연한 황색 고체로서 수득하였다(1.758 g, 65%). MS m/z 271.2 [M+H]+.
단계 B: 실시예 3 단계 B의 과정에 따라서, DMSO(1 mL) 중 7-플루오로-2-(4-메톡시페닐)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(81 mg, 0.3 mmol) 및 피페라진(129 mg, 1.5 mmol)은 표제 화합물을 황색 고체로서 제공하였다(66 mg, 66%). M.P. 182-184℃; MS m/z 337.3 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6): δ 8.20 (1H, d, J = 2.6 Hz), 8.16 (2H, dd, J = 2.0 Hz, 7.0 Hz), 8.05 (1H, dd, J = 2.7 Hz, 9.7 Hz), 7.67 (1H, d, J = 9.7 Hz), 7.05 (2H, d, J = 1.9 Hz, 7.0 Hz), 6.86 (1H, s), 3.83 (3H, s), 3.12 (4H, m), 2.87 (4H, m).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 대체함으로써, 실시예 4에 따라 제조할 수 있다.
실시예 5
화합물 81 및 화합물 82의 제조
단계 A: 아세톤(30 mL) 중 4-메톡시-3-(트라이플루오로메톡시)벤즈알데하이드(1.0 g, 4.5 mmol)의 용액에 존(Jone) 시약(5 mL)을 첨가하였다. 실온에서 15시간 동안 교반한 후, 메탄올(2 mL)을 첨가하고, 혼합물을 여과하였다. 여액을 농축하고, EtOAc에 용해시키고, 물로 세척하였다. 유기물을 건조하고, 농축하여 4-메톡시-3-(트라이플루오로메톡시)-벤조산을 백색 고체로서 수득하였다(1.02 g, 96%), MS m/z 235.2 [M-H]-.
단계 B: DCM(10 mL) 중 4-메톡시-3-(트라이플루오로메톡시)벤조산(1.02 g, 4.32 mmol)의 용액에 옥살릴 클로라이드(5 mL)를 첨가하였다. 6시간 동안 환류한 후, 용액을 농축하여 4-메톡시-3-(트라이플루오로메톡시)-벤조일 클로라이드를 수득하였다. 조질 산 클로라이드를 DCM(10 mL)에 용해시키고, 0℃까지 냉각하였다. 다이이소프로필에틸아민(1.56 mL, 9.0 mmol) 및 N,O-다이메틸하이드록실아민(0.658 g, 6.7 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 2시간 동안 교반한 후, 혼합물을 물로 세척하였다. 유기물을 건조하고, 농축하고 크로마토그래피(CH2Cl2 중 5% EtOAc)하여 4-다이메톡시-N-메틸-3-(트라이플루오로메톡시)벤즈아미드를 호박색 오일로서 수득하였다(0.58 g, 48%).
단계 C: 0℃의 THF(8 mL) 중 4-다이메톡시-N-메틸-3-(트라이플루오로메톡시)-벤즈아미드(0.58 g, 2.08 mmol)의 용액에 MeMgBr(3.0 M, 0.83 mL, 2.5 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 15시간 동안 교반한 후, 용액을 물로 세척하였다. 유기물을 건조하고, 농축하여 11-(4-메톡시-3-(트라이플루오로메톡시)페닐)에탄온을 백색 고체로서 수득하였다(0.45 g, 96%).
단계 D: THF(8 mL) 중 조질 1-(2-플루오로-4,5-다이메톡시페닐)-에탄온(0.45 g, 2.0 mmol) 및 다이메틸 카본에이트(1.5 mL, 18.2 mmol)의 용액에 실온에서 NaH(60%, 0.44 g, 10.9 mmol)를 첨가하였다. 75℃에서 20분 동안 가열한 후, 혼합물을 NH4Cl(포화)로 급랭시켰다. 1N HCl로 혼합물의 pH를 중성으로 조정하였다. 혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 유기물을 건조하고, 농축하여 메틸 3-(4-메톡시-3-(트라이플루오로메톡시)페닐)-3-옥소프로파노에이트를 수득하였다. MS m/z 299.1 [M+H]+. 조질 생성물을 후속 단계에 직접 사용하였다.
단계 E: MeOH(4 mL) 중 조질 메틸 3-(4-메톡시-3-(트라이플루오로메톡시)페닐)-3-옥소프로파노에이트(2 mmol)(단계 D), p-TsOH(38 mg, 0.2 mmol) 및 트라이메톡시메탄의 용액을 60℃에서 가열하였다. 1시간 후, 휘발성 물질을 제거하고, 2-아미노-5-플루오로피리딘(0.224 g, 2.0 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 150℃에서 1시간 동안 가열하고, 실온까지 냉각하고, MeCN으로 세척하여 7-플루오로-2-(4-메톡시-3-(트라이플루오로메톡시)페닐)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(146 mg, 21%)을 수득하였다. MS m/z 355.1 [M+H]+.
단계 F: DMSO(0.5 mL) 중 7-플루오로-2-(4-메톡시-3-(트라이플루오로메톡시)페닐)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(71 mg, 0.2 mmol), 피페라진(38 mg, 0.4 mmol) 및 다이이소프로필에틸아민(69 μL, 0.4 mmol)의 혼합물을 120℃에서 가열하였다. 15시간 후, 휘발성 물질을 제거하고, 잔사를 크로마토그래피(DCM 중 20% MeOH)하여 2개의 생성물을 수득하였다:
화합물 81(8 mg, 9%)을 황색 고체로서 수득하였다. M.P. 158-162℃; MS m/z 421.1 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6): δ 8.26 (1H, d, J = 2.6 Hz), 8.24 (1H, dd, J = 2.2 Hz, 8.8 Hz), 8.19 (1H, m), 8.08 (1H, dd, J = 2.8 Hz, 9.7 Hz), 7.75 (1H, d, J = 9.7 Hz), 7.37 (1H, d, J = 8.8 Hz), 6.99 (1H, s), 3.94 (3H, s), 3.07 (4H, m), 2.50 (4H, m, DMSO-d 6에 의해 불명료함);
화합물 82(9 mg, 11%)를 황색 고체로서 수득하였다. M.P. 245-248℃; MS m/z 407.2 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6): δ 8.21 (1H, d, J = 2.7 Hz), 8.11 (1H, m), 8.07-8.03 (2H, m), 7.68 (1H, d, J = 9.7 Hz), 7.11 (1H, d, J = 8.6 Hz), 6.87 (1H, s), 3.14 (4H, m), 2.88 (4H, m).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 대체함으로써, 실시예 5에 따라 제조할 수 있다.
실시예 6
화합물 70의 제조
MeOH(0.5 mL) 중 2-(3,4-다이메톡시페닐)-9-플루오로-7-(피페라진-1-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(38 mg, 0.1 mmol, 실시예 3 단계 A 및 B의 과정에 따라 제조됨)의 현탁액에 NaOMe(MeOH 중 0.5M, 1 mL, 0.5 mmol)를 첨가하였다. 80℃에서 15시간 동안 가열한 후, 휘발성 물질을 제거하고, 잔사를 크로마토그래피(10-15% MeOH/CH2Cl2)하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(18 mg, 45%). M.P. 185-187℃; MS m/z 397.3 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6): δ 8.20 (1H, d, J = 2.5 Hz), 7.80 (2H, m), 7.08 (1H, d, J = 9.0 Hz), 7.00 (1H, s), 6.97 (1H, d, J = 2.5 Hz), 3.89 (3H, s), 3.87 (3H, s), 3.83 (3H, s), 3.30 (4H, m), 2.98 (4H, m).
실시예 7
화합물 74의 제조
단계 A: DME(10 mL) 중 2-아미노-5-메틸피라진(1.09 g, 10 mmol)의 용액에 에틸 3-브로모-2-옥소프로파노에이트(1.57 mL, 12.5 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 45분 동안 교반하였다. 침전물을 여과하고, Et2O로 세척하고, 건조하여 황색 고체를 수득하였다. 고체를 EtOH(20 mL)에 현탁하고, 90℃에서 가열하였다. 1.5시간 후, 생성된 갈색 용액을 농축하고, pH 7까지 조정하였다. 혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 유기물을 농축하고 잔사를 마쇄하고, MeCN으로 세척하여 에틸 6-메틸이미다조[1,2-a]피라진-2-카복실레이트를 갈색 고체로서 수득하였다(0.993 g, 48%). MS m/z 206.2 [M+H]+.
단계 B: 실온의 톨루엔(2 mL) 및 Me-THF(8 mL) 중 에틸 6-메틸이미다조[1,2-a]피라진-2-카복실레이트(0.971 g, 4.73 mmol) 및 EtOAc(0.98 mL, 10 mmol)의 용액에 NaH(60%, 0.503 mg, 12.6 mmol)를 첨가하였다. 70℃에서 30분 동안 가열한 후, 혼합물을 실온까지 냉각하고, 얼음으로 급랭시키고, 1N HCl로 pH 7까지 조정하고, EtOAc로 추출하였다. 유기물을 합하고, 건조하고, 농축하고 크로마토그래피하여 에틸 3-(6-메틸이미다조[1,2-a]피라진-2-일)-3-옥소프로파노에이트를 갈색을 띤 오일로서 수득하였다(0.93 g, 78%).
단계 C: 실시예 1 단계 B의 과정에 따라서, MeOH(10 mL) 중 에틸 3-(6-메틸이미다조[1,2-a]피라진-2-일)-3-옥소프로파노에이트(0.913 g, 3.7 mmol), p-톨루엔설폰산 일수화물(70 mg, 0.37 mmol) 및 트라이메틸오르토폼에이트(0.81 mL, 7.4 mmol)는 케탈을 제공하였고, 이를 후속 단계에 직접 사용하였다.
단계 D: 실시예 1 단계 C의 과정에 따라서, 조질 다이메톡시프로파노에이트(단계 C) 및 2-아미노-5-플루오로-피리딘(0.422 g, 3.7 mmol)은 7-플루오로-2-(6-메틸이미다조[1,2-a]피라진-2-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온을 갈색을 띤 고체로서 제공하였다(0.344 g, 31%). MS m/z 295.9 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6): δ 9.09 (1H, s), 8.97-8.96 (1H, m), 8.67 (1H, s), 8.47 (1H, s), 8.15-8.11 (1H, m), 7.85-7.82 (1H, m), 7.08 (1H, s), 2.42 (3H, S).
단계 E: 실시예 3 단계 B의 과정에 따라서, DMSO(0.5 mL) 중 7-플루오로-2-(6-메틸이미다조[1,2-a]피라진-2-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(59 mg, 0.2 mmol) 및 피페라진(52 mg, 0.6 mmol)은 표제 화합물을 황색 고체로서 제공하였다(28 mg, 39%). M.P. 221-225℃; MS m/z 362.2 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6): δ 9.07 (1H, s), 8.62 (1H, s), 8.46 (1H, s), 8.25 (1H, d, J = 2.6 Hz), 8.09 (1H, d, J = 2.7 Hz, 9.7 Hz), 7.67 (1H, d, J = 9.7 Hz), 7.00 (1H, s), 3.16 (4H, m), 2.90 (4H, m), 2.44 (3H, s).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 대체함으로써, 실시예 7에 따라 제조할 수 있다.
실시예 8
화합물 29의 제조
단계 A: 실시예 7 단계 A의 과정에 따라서, MeOH(50 mL) 중 2-아미노-5-메틸피리딘(5.41 g, 50 mmol) 및 에틸 3-브로모-2-옥소프로파노에이트(7.0 mL, 50 mmol)는 에틸 6-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-2-카복실레이트를 황색을 띤 고체로서 제공하였다(9.50 g, 93%), MS m/z 205.1 [M+H]+.
단계 B: 실시예 7 단계 B의 과정에 따라서, 톨루엔(5 mL) 중 에틸 6-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-2-카복실레이트(0.55 g, 2.5 mmol), EtOAc(0.29 mL, 5.0 mmol) 및 NaH(60%, 0.20 g, 5 mmol)는 에틸 3-(6-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-2-일)-3-옥소프로파노에이트를 황색 고체로서 제공하였다(0.62 g, 100%), MS m/z 243.1 [M+H]+.
단계 C: 실시예 4 단계 A의 과정에 따라서, PPA(약 5 g) 중 에틸 3-(6-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-2-일)-3-옥소프로파노에이트(246 mg, 1.0 mmol) 및 2-아미노-5-플루오로피리딘(334 mg, 1.2 mmol)은 7-플루오로-2-(6-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-2-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온을 황색 고체로서 제공하였다(17 mg, 6%), MS m/z 295.2 [M+H]+.
단계 D: 실시예 3 단계 B의 과정에 따라서, DMSO(10 mL) 중 7-플루오로-2-(6-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-2-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(17 mg, 0.06 mmol) 및 피페라진(30 mg, 0.3 mmol)은 표제 화합물을 연갈색 고체로서 제공하였다(19 mg, 83%). M.P. 193-198℃; MS m/z 361.3 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6): δ 8.48 (1H, s), 8.41 (1H, s), 8.25 (1H, d, J = 2.6 Hz), 8.06 (1H, dd, J = 2.7 Hz, 9.7 Hz), 7.66 (1H, d, J = 9.7 Hz), 7.55 (1H, d, 9.3 Hz), 7.18 (1H, d, J = 9.3 Hz), 6.96 (1H, s), 3.23 (4H, m), 3.01 (4H, m), 2.29 (3H, s).
실시예 9
화합물 170의 제조
단계 A: 아세톤(200 mL) 중 다이에틸 1H-피라졸-3,5-다이카복실레이트(10.0 g, 47 mmol) 및 클로로아세톤(3.76 mL, 47 mmol)의 용액에 칼륨 카본에이트(7.2 g, 52 mmol)를 첨가하였다. 30℃에서 6시간 동안 가열한 후, 혼합물을 농축하여 휘발성 물질을 제거하였다. 잔사를 EtOAc에 용해시키고, 물로 세척하였다. 유기물을 MgSO4 상에서 건조하고, 농축하여 다이에틸 1-(2-옥소프로필)-1H-피라졸-3,5-다이카복실레이트를 연갈색 고체로서 수득하고, 이를 후속 단계에 직접 사용하였다, MS m/z 269.1 [M+H]+.
단계 B: 아세트산(300 mL) 중 다이에틸 1-(2-옥소프로필)-1H-피라졸-3,5-다이카복실레이트(약 47 mmol)의 용액에 암모늄 아세테이트(72 g, 940 mmol)를 첨가하였다. 48시간 동안 환류한 후, 혼합물을 최소 부피로 농축하고, 물로 희석하고, 침전물을 여과하고, 물 및 MeCN으로 세척하여 에틸 4-하이드록시-6-메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-카복실레이트를 황갈색 고체로서 수득하였다(6.7 g, 64%), MS m/z 222.1 [M+H]+.
단계 C: POCl3(80 mL) 중 에틸 4-하이드록시-6-메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-카복실레이트(7.18 g, 32.5 mmol)의 혼합물을 15시간 동안 환류하였다. 검은색 혼합물을 농축하고 MeCN으로 세척하여 에틸 4-클로로-6-메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-카복실레이트(5.197 g)를 회백색 고체로서 수득하였다. 여액을 농축하고 크로마토그래피하여 추가적인 1.42 g의 생성물을 수득하였다(6.617 g, 85%), MS m/z 240.1 [M+H]+, 242.1 [M+2+H]+.
단계 D: DMF(100 mL) 중 에틸 4-클로로-6-메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-카복실레이트(5.197 g, 21.7 mmol), MeB(OH)2(3.90 g, 65.1 mmol), K2CO3(14.8 g, 107.5 mmol) 및 Pd(PPh3)2Cl2(456 mg, 0.65 mmol)의 혼합물을 탈기시키고, N2 하에 15시간 동안 가열하였다. 혼합물을 로토뱁 상에서 농축하여 대부분의 DMF를 제거하고, 물로 세척하였다. 잔사를 크로마토그래피(CH2Cl2 중 MeOH 2% → 5%)하여 에틸 4,6-다이메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-카복실레이트를 황색 고체로서 수득하였다(3.90 g, 82%), MS m/z 220.1 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6): δ 8.54 (1H, s), 7.49 (1H, s), 4.36 (2H, q, J = 7.2 Hz), 2.70 (3H, s), 2.42 (3H, s), 1.34 (3H, t, J = 7.2Hz).
단계 E: -78℃의 THF(50 mL) 중 t-부틸 아세테이트(1.63 mL, 12.1 mmol)의 용액에 LDA(1.5M, 0.97 mL, 14.5 mmol)를 첨가하였다. 0.5시간 후, 용액을 -30℃의 THF(100 mL) 중 에틸 4,6-다이메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-카복실레이트(1.33 g, 6.07 mmol)의 용액에 캐뉼레이팅(cannulating)하였다. 1시간 후, 혼합물을 포화 NH4Cl로 급랭시키고, pH 5 내지 6으로 조정하고, EtOAc로 추출하였다. 합한 유기물을 건조하고, 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피(2% → 4% MeOH/CH2Cl2)하여 t-부틸 3-(4,6-다이메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-3-옥소프로파노에이트를 황색 오일로서 수득하였다(1.696 g, 97%), MS m/z 290.2 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6): δ 8.57 (1H, s), 7.50 (1H, s), 4.02 (2H, s), 2.70 (3H, s), 2.43 (3H, s), 1.38 (9H, s).
단계 F: EtOH(30 mmol) 중 t-부틸 3-(4,6-다이메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-3-옥소프로파노에이트(4.86 g, 16.8 mmol)의 용액을 캡핑(capping)된 관에서 120℃에서 가열하였다. 1시간 후, 용액을 실온까지 냉각하고, 휘발성 물질을 제거하여 에틸 3-(4,6-다이메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-3-옥소프로파노에이트를 황색 고체로서 수득하였다(4.44 g, 98%), MS m/z 262.2 [M+H]+.
단계 G: 2-아미노-5-플루오로-피리딘(134 mg, 1.2 mmol), 에틸 3-(4,6-다이메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-3-옥소프로파노에이트(261 mg, 1.0 mmol) 및 PPTs(12.6 mg, 0.05 mmol)의 혼합물을 130℃에서 가열하였다. 8시간 후, 혼합물을 실온까지 냉각하고, 크로마토그래피하여 2-(4,6-다이메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-7-플루오로-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온을 황색 고체로서 수득하였다(220 mg, 71%). MS m/z 310.2 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6): δ 8.97-8.95 (1H, m), 8.55 (1H, s), 8.16-8.12 (1H, m), 7.87-7.85 (1H, m), 7.56 (1H, s), 7.03 (1H, s), 2.73, (3H, s), 2.43 (3H, s).
단계 H: 실시예 3 단계 B의 과정에 따라서, DMA(1.0 mL) 중 2-(4,6-다이메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-7-플루오로-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(309 mg, 1.0 mmol) 및 피페라진(1.1 mL, 10 mmol)은 표제 화합물을 황색 고체로서 제공하였다(313 mg, 80%). M.P. 254-256℃; MS m/z 390.4 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6): δ 8.55 (1H, s), 8.27 (1H, d, J = 2.7 Hz), 8.12 (1H, dd, J = 2.8 Hz, 9.7 Hz), 7.71 (1H, d, J = 9.7 Hz), 7.54 (1H, s), 6.95 (1H, s), 3.25 (4H, m), 2.72 (3H, s), 2.51 (4H, m, DMSO-d 6에 의해 불명료함), 2.43 (3H, s), 2.25 (3H, s).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 대체함으로써, 실시예 9에 따라 제조할 수 있다.
실시예 10
화합물 163의 제조
단계 A: 실시예 5 단계 E의 과정에 따라서, 2-아세틸-4-메틸티아졸(706 mg, 5 mmol), 다이메틸 카본에이트(15 mL, 178 mmol) 및 NaH(광유 중 60% 분산액, 1.14 g, 28.5 mmol)는 메틸 3-(4-메틸티아졸-2-일)-3-옥소프로파노에이트를 제공하였다. 조질 생성물을 후속 단계에 직접 사용하였다. MS m/z 200.1 [M+H]+.
단계 B: 실시예 1 단계 B의 과정에 따라서, MeOH(1.5 mL) 중 3-(4-메틸티아졸-2-일)-3-옥소프로파노에이트(199 mg, 1.0 mmo), 트라이메틸오르토폼에이트(0.25 mL, 2.25 mmol) 및 톨루엔설폰산 일수화물(14.3 mg, 0.075 mmol)은 다이메톡시프로파노에이트를 제공하였다.
단계 C: 실시예 1 단계 C의 과정에 따라서, DMA(1.5 mL) 중 다이메톡시프로파노에이트(단계 B) 및 2-아미노-4-플루오로-피리딘(201.8 mg, 1.8 mmol)은 7-플루오로-2-(4-메틸티아졸-2-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(175.5 mg, 67%)을 제공하였다. MS m/z 262.1 [M+H]+.
단계 D: 실시예 3 단계 B의 과정에 따라서, DMSO(0.8 mL) 중 7-플루오로-2-(4-메틸티아졸-2-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(52.2 mg, 0.2 mmol) 및 피페라진(86 mg, 1 mmol)은 표제 화합물(20 mg, 30%)을 제공하였다. M.P. 142-147℃; MS m/z 328.2 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6): δ 8.27 (1H, dd, J = 2.7 Hz, 18.6 Hz), 8.11-8.16 (1H, m), 7.73 (1H, t, J = 9.2 Hz), 7.56 (1H, s), 6.88 (1H, d, J = 3.2 Hz), 3.29-3.31 (2H, m), 3.16-3.18 (2H, m), 2.89-2.91 (2H, m), 2.67-2.69 (2H, m), 2.47 (3H, s).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 치환함으로써, 실시예 10에 따라 제조할 수 있다.
실시예 11
화합물 92의 제조
단계 A: 5-플루오로니코틴산(1.0 g, 7.1 mmol)을 THF(10 mL) 및 0℃까지 냉각하였다. THF:톨루엔(3:1) 중 메틸마그네슘 브로마이드의 1.4M 용액(11.2 mL, 15.6 mmol)을 상기 용액에 적가하였다. 용액을 실온까지 가온하였다. 용액을 실온에서 4시간 동안 교반하고, 이때 1N 수성 HCl(50 mL)을 천천히 첨가하였다. 혼합물을 EtOAc(200 mL) 및 수성 1N NaOH(200 mL)에 분할하였다. 유기 층을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 헥산 중 EtOAc(0% → 50%)로 용리하면서 실리카 상에서 크로마토그래피하여 1-(5-플루오로피리딘-3-일)에탄온을 백색 분말로서 수득하였다(290 mg, 29%).
단계 B: 실시예 5 단계 D의 과정에 따라서, THF(6 mL) 중에서의 단계 A로부터의 메틸 케톤, 다이메틸 카본에이트(0.44 mL, 5.25 mmol) 및 나트륨 하이드라이드(210 mg, 광유 중 60% 분산액, 5.25 mmol)는 메틸 3-(5-플루오로피리딘-3-일)-3-옥소프로파노에이트를 회백색 분말로서 제공하였다(278 mg, 67%).
단계 C: 메틸 3-(5-플루오로피리딘-3-일)-3-옥소프로파노에이트(138 mg, 0.7 mmol)를 다이메틸아세트아미드(0.5 mL) 중 5-플루오로피리딘-2-아민(90 mg, 0.8 mmol) 및 톨루엔설폰산 일수화물(6 mg, 0.03 mmol)과 합하였다. 혼합물을 1시간 동안 160℃까지 가열하였다. 혼합물을 120℃까지 냉각한 후, 피페라진(300 mg, 3.5 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 120℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 CH2Cl2 중 MeOH 실리카 상에 적재하고, CH2Cl2 중 MeOH(3% NH3)(0% → 8%)로 용리하였다. 표제 화합물을 황색 분말로서 수득하였다(37 mg, 16%). M.P. 201-208℃; MS m/z 326.2 [M+H]+; 1H NMR (DMSO-d 6, 500 MHz): δ 9.25 (1H, s), 8.70 (1H, d, J = 2.8 Hz), 8.42 (1H, d, J = 10.2 Hz), 8.22 (1H, d, 2.7 Hz), 8.12 (1H, dd, J = 9.8 Hz, 2.8 Hz), 7.74 (1H, d, J = 9.7 Hz), 7.11 (1H, s), 3.16 (4H, m), 2.89 (4H, m), 2.37 (1H, br s).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 치환함으로써, 실시예 11에 따라 제조할 수 있다.
실시예 12
화합물 98의 제조
단계 A: 1H-인돌-5-카복실산(1.0 g, 6.2 mmol)을 CH2Cl2(12 mL) 중에서 N,O-다이메틸하이드록실아민 하이드로클로라이드(907 mg, 9.3 mmol), N-(3-다이메틸아미노프로필)-N'-에틸카보다이이미드 하이드로클로라이드(1.78 g, 9.3 mmol) 및 N,N-다이이소프로필에틸아민(3.2 mL, 18.6 mmol)과 합하였다. 4시간 동안 실온에서 교반한 후, 혼합물을 수성 HCl(1N, 20 mL)로 세척하였다. 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 농축하였다. 조질 생성물을 후속 단계에 직접 사용하였다.
단계 B: 단계 A로부터의 조질 생성물을 THF(20 mL)에 용해시켰다. THF:톨루엔(3:1) 중 메틸마그네슘 브로마이드(11.2 mL, 15.6 mmol)의 1.4M 용액을 상기 용액에 적가하였다. 용액을 실온까지 가온하였다. 용액을 50℃에서 1시간 동안 교반하고, 이때 1N 수성 HCl(50 mL)을 천천히 첨가하였다. 혼합물을 EtOAc(200 mL) 및 수성 1N NaOH(200 mL)에 분할하였다. 유기 층을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 헥산 중 EtOAc(0% → 50%)로 용리하는 실리카 상에서 크로마토그래피하여 1-(1H-인돌-5-일)에탄온을 백색 분말로서 수득하였다(323 mg, 33%).
단계 C: 실시예 5 단계 E의 과정에 따라서, THF(6 mL) 중에서의 단계 B로부터의 메틸 케톤, 다이메틸 카본에이트(0.46 mL, 5.5 mmol) 및 나트륨 하이드라이드(220 mg, 광유 중 60% 분산액, 5.5 mmol)는 메틸 메틸 3-(1H-인돌-5-일)-3-옥소프로파노에이트를 회백색 분말로서 제공하였다(120 mg, 27%). MS m/z 216.1 [M-H].
단계 D: 실시예 11 단계 C의 과정에 따라서, 다이메틸아세트아미드(0.5 mL) 중 메틸 3-(1H-인돌-5-일)-3-옥소프로파노에이트(98 mg, 0.45 mmol), 5-플루오로피리딘-2-아민(56 mg, 0.5 mmol), 톨루엔설폰산 일수화물(9 mg, 0.05 mmol) 및 피페라진(194 mg, 2.25 mmol)은 표제 화합물을 회백색 분말로서 제공하였다(40 mg, 26%). M.P. 266-272℃. MS m/z 346.2 [M+H]+; 1H NMR (DMSO-d 6, 500 MHz): δ 11.3 (1H, s), 8.46 (1H, s), 8.22 (1H, d, J = 2.8 Hz), 8.04 (1H, dd, J = 9.7 Hz, 2.8 Hz), 7.95 (1H, d, J = 8.7 Hz), 7.69 (1H, d, J = 9.7 Hz), 7.49 (1H, d, J = 8.6 Hz), 7.42 (1H, t, J = 2.7 Hz), 6.90 (1H, s), 6.57 (1H, m), 3.14 (4H, m), 2.89 (4H, m), 2.36 (1H, br s).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 치환함으로써, 실시예 12에 따라 제조할 수 있다.
실시예 13
화합물 107의 제조
단계 A: 실시예 12 단계 A의 과정에 따라서, CH2Cl2(12 mL) 중 이미다조[1,2-a]피리딘-7-카복실산(1.0 g, 6.2 mmol), N,O-다이메틸하이드록실아민 하이드로클로라이드(907 mg, 9.3 mmol), N-(3-다이메틸아미노프로필)-N'-에틸카보다이이미드 하이드로클로라이드(1.78 g, 9.3 mmol) 및 N,N-다이이소프로필에틸아민(3.2 mL, 18.6 mmol)은 N-메톡시-N-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-7-카복스아미드(505 mg, 40%)를 제공하였다.
단계 B: 실시예 12 단계 B의 과정에 따라서, THF(10 mL) 중에서의 단계 A로부터의 생성물(505 mg, 2.5 mmol), 메틸마그네슘 브로마이드(3.6 mmol)는 1-(이미다조[1,2-a]피리딘-7-일)에탄온(275 mg, 70%)을 제공하였다.
단계 C: 실시예 5 단계 E의 과정에 따라서, THF(5 mL) 중에서의 단계 B로부터의 메틸 케톤(275 mg, 1.7 mmol), 다이메틸 카본에이트(0.35 mL, 4.25 mmol) 및 나트륨 하이드라이드(170 mg, 광유 중 60% 분산액, 4.25 mmol)는 메틸 3-(이미다조[1,2-a]피리딘-7-일)-3-옥소프로파노에이트를 회백색 분말로서 제공하였다(215 mg, 58%).
단계 D: 실시예 11 단계 C의 과정에 따라서, 다이메틸아세트아미드(1.0 mL) 중 메틸 3-(이미다조[1,2-a]피리딘-7-일)-3-옥소프로파노에이트(215 mg, 1.0 mmol), 5-플루오로피리딘-2-아민(123 mg, 1.1 mmol), 톨루엔설폰산 일수화물(19 mg, 0.1 mmol) 및 피페라진(430 mg, 5 mmol)은 표제 화합물을 회백색 분말로서 제공하였다(40 mg, 12%). M.P. 258-270℃; MS m/z 347.0 [M+H]+; 1H NMR (DMSO-d 6, 500 MHz): δ 8.65 (1H, d, J = 7.2 Hz), 8.46 (1H, s), 8.24 (1H, d, J = 2.7 Hz), 8.11 (1H, dd, J = 9.7 Hz, 2.7 Hz), 8.06 (1H, s), 7.75 (1H, d, J = 9.7 Hz), 7.73 (1H, dd, J = 7.2 Hz, 2.7 Hz), 7.71 (1H, s), 7.10 (1H, s), 3.16 (4H, m), 2.89 (4H, m), 2.34 (1H, br s).
실시예 14
화합물 171의 제조
파트 1 단계 A: 2-아미노-5-플루오로피리딘(11.20 g, 0.10 mol) 및 다이메틸 말론에이트(57.0 mL, 0.50 mol)의 혼합물을 230℃에서 1.5시간 동안 가열하였다. 실온까지 냉각한 후, 침전물을 여과하고, ACN(3x)으로 세척하여 7-플루오로-2-하이드록시-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온을 검은 고체로서 수득하고(14 g), 이를 후속 단계에 직접 사용하였다. MS m/z 181.3 [M+H]+.
파트 1 단계 B: POCl3(50 mL) 및 DIEA(13.3 mL, 77 mmol) 중 조질 7-플루오로-2-하이드록시-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(14g, 약 77 mmol)의 검은 혼합물을 110℃에서 15시간 동안 가열하였다. 휘발성 물질을 제거하고, 검은 잔사를 얼음-물로 처리하고, 물(3x)로 세척하고, 건조하여 갈색 고체를 수득하였다. 조질 갈색 고체를 크로마토그래피(CH2Cl2 중 5% MeOH)하여 2-클로로-7-플루오로-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온을 황색 고체로서 수득하였다(9.84 g, 50%, 2 단계), MS m/z 199.2 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6): δ 8.99 (1H, dd, J = 2.8 Hz, 4.7 Hz), 8.27-8.23 (1H, m), 7.85 (1H, dd, J = 5.4 Hz, 9.8 Hz), 6.56 (1H, s).
파트 2: 다이옥산(8 mL) 중 6-브로모-2-메틸벤조[d]옥사졸(1.06 g, 5.0 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-바이(1,3,2-다이옥사보롤란)(1.40 g, 5.5 mmol), KOAc(1.47 g, 15 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(122 mg, 0.15 mmol)의 혼합물을 탈기하고, N2 하에 85℃에서 가열하였다. 15시간 후, 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 셀라이트를 통해 여과하고, 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피하여 2-메틸-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤조[d]옥사졸을 밝은 주황색 고체로서 수득하였다(1.30 g, 100%), MS m/z 260.4 [M+H]+.
파트 3 단계 A: 2-클로로-7-플루오로-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(0.436 g, 2.2 mmol), 2-메틸-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤조[d]옥사졸(0.647 g, 2.5 mmol), DCM(90 mg, 0.11 mmol) 중 Pd(dppf)Cl2, K2CO3(2M, 3.0 mL, 6.0 mmol), 및 ACN(6 mL)의 혼합물을 탈기시키고, 이어서, N2 하에 60℃에서 3.5시간 동안 가열하였다. 휘발성 물질을 제거하고, 잔사를 크로마토그래피(2.5% MeOH/CH2Cl2)하여 7-플루오로-2-(2-메틸벤조[d]옥사졸-6-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온을 회백색 고체로서 수득하였다(0.64 g, 98%). MS m/z 296.4 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6): δ 8.96-8.95 (1H, m), 8.51 (1H, d, J = 1.6 Hz), 8.26 (1H, dd, J = 8.5 Hz, 1.6 Hz), 8.16-8.12 (1H, m), 7.91-7.88 (1H, m), 7.78 (1H, d, J = 8.4 Hz), 7.17 (1H, s), 2.67 (3H, s).
파트 3 단계 B: DMA(0.3 mL) 중 7-플루오로-2-(2-메틸벤조[d]옥사졸-6-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(60 mg, 0.2 mmol) 및 1-메틸 피페라진(0.11 mL, 1.0 mmol)의 혼합물을 120℃에서 15시간 동안 가열하였다. 휘발성 물질을 제거하고, 잔사를 크로마토그래피하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(46 mg, 61%). M.P. 178-183℃; MS m/z 376.5 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6): δ 8.47 (1H, d, J = 1.5 Hz), 8.25 (1H, d, J = 2.7 Hz), 8.23 (1H, dd, J = 1.6 Hz, 8.4 Hz), 8.11 (1H, dd, J = 2.8 Hz, 9.7 Hz), 7.76 (1H, d, J = 8.6 Hz), 7.74 (1H, d, J = 9.9 Hz), 7.06 (1H, s), 3.25 (4H, m), 2.66 (3H, s), 2.25 (3H, s).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 대체함으로써, 실시예 14에 따라 제조할 수 있다.
실시예 15
109의 제조
단계 A: 2-클로로-7-플루오로-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(990 mg, 5 mmol, 실시예 14 파트 1의 과정에 따라 제조됨)을 2-아미노피리딘-5-보론산 피나콜 에스터(1.21 g, 5.5 mmol), 테트라키스(트라이페닐포스핀) 팔라듐(0)(281 mg, 0.25 mmol), CH3CN(10 mL) 및 수성 K2CO3(1M, 10 mL)과 합하였다. 혼합물을 6시간 동안 80℃까지 가열하였다. 혼합물을 실온까지 냉각하고, 이어서 여과하였다. 수집한 침전물을 CH3CN으로 세척하고, 진공 하에 건조하여 2-(6-아미노피리딘-3-일)-7-플루오로-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온을 황색 분말로서 수득하였다(1.13 g, 88%). MS m/z 257.0 [M+H]+; 1H NMR (DMSO-d 6, 500 MHz): δ 8.90 (1H, m), 8.83 (1H, d, J = 2.1 Hz), 8.17 (1H, dd, J = 8.8 Hz, 2.5 Hz), 8.07 (1H, m), 7.78 (1H, dd, J = 9.8 Hz, 5.3 Hz), 6.87 (1H, s), 6.58 (2H, s), 6.53 (1H, d, 8.9 Hz).
단계 B: 2-(6-아미노피리딘-3-일)-7-플루오로-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(254 mg, 1.0 mmol)을 DMSO(360 μL, 1.65 mmol) 중 클로로아세톤(100 μL, 1.2 mmol)과 합하였다. 혼합물을 30분 동안 120℃까지 가열하였다. 실온까지 냉각한 후, 혼합물을 CH2Cl2 및 포화 수성 NaHCO3에 분할하였다. 유기 층을 농축하였다. 잔사를 CH2Cl2 중 MeOH(0% → 6%)에 의해 실리카로부터 용리하여 7-플루오로-2-(2-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온을 황갈색 분말로서 수득하였다(136 mg, 46%). MS m/z 295.0 [M+H]+; 1H NMR (DMSO-d 6, 500 MHz): δ 9.40 (1H, s), 8.95 (1H, m), 8.14 (1H, m), 7.96 (1H, dd, J = 9.5 Hz, 1.9 Hz), 7.85 (2H, m), 7.54 (1H, J = 9.4), 7.08 (1H, s), 2.36 (3H, s).
단계 C: 7-플루오로-2-(2-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(45 mg, 0.15 mmol)을 다이메틸아세트아미드(0.5 mL) 중 피페라진(65 mg, 0.75 mmol)과 합하였다. 혼합물을 1시간 동안 150℃까지 가열하였다. 혼합물을 실리카 상에 적재하고, CH2Cl2 중 MeOH(3% NH3)(0% → 8%)로 용리하여 표제 화합물을 황갈색 분말로서 수득하였다(33 mg, 61%). M.P. 259-267℃; MS m/z 361.1 [M+H]+; 1H NMR (DMSO-d 6, 500 MHz): δ 9.36 (1H, s), 8.23 (1H, d, J = 2.7 Hz), 8.10 (1H, dd, J = 9.7 Hz, 2.7 Hz), 7.94 (1H, dd, J = 9.5 Hz, 1.8 Hz), 7.82 (1H, s), 7.70 (1H, d, J = 9.7 Hz), 7.52 (1H, d, J = 9.5 Hz), 6.96 (1H, s), 3.15 (4H, m), 2.89 (4H, m), 2.36 (3H, s).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 대체함으로써, 실시예 15에 따라 제조할 수 있다.
실시예 16
화합물 209의 제조
단계 A: 3-플루오로피리딘-2-아민(5.0 g, 45 mmol)을 CH3CN(40 mL) 중 N-브로모석신이미드(8.0 g, 45 mmol)와 합하였다. 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 클로로아세톤(4.3 mL, 54 mmol)을 상기 혼합물에 첨가하였다. 혼합물을 100℃까지 가열하여 CH3CN을 증발시켰다. 1시간 후, 온도를 2시간 동안 120℃까지 상승시켰다. 혼합물은 냉각 시 고체화되었다. 상기 고체 물질을 H2O(50 mL)에 용해시켰다. 100 mL의 포화 수성 NaHCO3을 수용액에 첨가하였다. 침전물이 형성되었고, 진공 여과에 의해 수집되었다. 고체 물질을 H2O로 세척하고, 진공 하에 건조하였다. 상기 물질을 CH2Cl2 중 실리카 상에 적재하고, CH2Cl2 중 EtOAc(0% → 30%)로 용리하여 6-브로모-8-플루오로-2-메틸이미다조[1,2-a]피리딘을 황갈색 분말로서 수득하였다(4.65 g, 45%). MS m/z 229.2 [M+H]+, 231.2 [M+2+H]+; 1H NMR (DMSO-d 6, 500 MHz): δ 8.72 (1H, s), 7.79 (1H, s), 7.39 (1H, d, J = 10.7 Hz), 2.35 (3H, s).
단계 B: 실시예 14 파트 2의 과정에 따라서, 6-브로모-8-플루오로-2-메틸이미다조[1,2-a]피리딘(912 mg, 4 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-바이(1,3,2-다이옥사보롤란)(1.32 g, 4.8 mmol), [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]-다이클로로팔라듐(II)(163 mg, 0.2 mmol) 및 칼륨 아세테이트(784 mg, 8 mmol)는 8-플루오로-2-메틸-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)이미다조[1,2-a]피리딘을 제공하였다. 조질 생성물을 후속 단계에 직접 사용하였다.
단계 C: 실시예 14 파트 3 단계 A의 과정에 따라서, 단계 A로부터의 8-플루오로-2-메틸-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)이미다조[1,2-a]피리딘 및 2-클로로-7-플루오로-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(4 mmol, 실시예 14 파트 1 단계 B에서 제조됨)의 조질 생성물, 테트라키스(트라이페닐포스핀) 팔라듐(0)(225 mg, 0.2 mmol) 및 수성 K2CO3(1M, 8 mL)은 7-플루오로-2-(8-플루오로-2-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온을 황갈색 분말로서 수득하였다(860 mg, 69%). MS m/z 313.0 [M+H]+.
단계 D: 실시예 14 파트 3 단계 B의 과정에 따라서, 7-플루오로-2-(8-플루오로-2-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(65 mg, 0.21 mmol) 및 피페라진(90 mg, 1.05 mmol)은 표제 화합물을 황갈색 분말로서 수득하였다(34 mg, 43%). M.P. 282-288℃; MS m/z 379.4 [M+H]+; 1H NMR (DMSO-d 6, 500 MHz): δ 9.26 (1H, s), 8.21 (1H, d, J = 2.6 Hz), 8.10 (1H, dd, J = 9.7 Hz, 2.7 Hz), 7.93 (1H, d, J = 2.3 Hz), 7.84 (1H, d, J = 12.7 Hz), 7.68 (1H, d, J = 9.8 Hz), 6.98 (1H, s), 3.14 (4H, m), 2.88 (4H, m), 2.39 (3H, s), 2.35 (1H, br s).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을, 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 치환함으로써, 실시예 16에 따라 제조할 수 있다.
실시예 17
화합물 182의 제조
단계 A: 실시예 14 파트 3 단계 A의 과정에 따라서, 3-플루오로-2-메톡시-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘(약 4.85 mmol, 실시예 14 파트 2의 과정에 의해 제조된 조질 생성물) 및 2-클로로-7-플루오로-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(0.64 g, 3.23 mmol, 실시예 14 파트 1에서 제조됨)은 7-플루오로-2-(5-플루오로-6-메톡시피리딘-3-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(1.0 g, 100%)을 갈색 고체로서 제공하였다, MS m/z 290.4 [M+H]+.
단계 B: DMA(1 mL) 중 7-플루오로-2-(5-플루오로-6-메톡시피리딘-3-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(145 mg, 0.5 mmol) 및 피페라진(43 mg, 0.5 mmol)의 혼합물을 120℃에서 가열하였다. 4시간 후, 휘발성 물질을 제거하고, 잔사를 크로마토그래피(20% MeOH/CH2Cl2)하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(63 mg, 36%). M.P. 166-170℃; MS m/z 356.4 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6): δ 8.83 (1H,d, J = 1.9 Hz), 8.39 (1H, dd, J = 1.9 Hz, 11.8 Hz), 8.23 (1H, d, J = 2.6 Hz), 8.10 (1H, dd, J = 2.7 Hz, 9.7 Hz), 7.71 (1H, d, J = 9.7 Hz), 7.02 (1H, s), 4.03 (3H, s), 3.20 (4H, m), 2.94 (4H, m).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을, 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 치환함으로써, 실시예 17에 따라 제조할 수 있다.
실시예 18
화합물 191의 제조
단계 A: 실시예 14 파트 3 단계 A의 과정에 따라서, CH3CN/H2O(1.0 mL/1.0 mL) 중 2-클로로-7-플루오로-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(199 mg, 1 mmol, 실시예 14 파트 1에서 제조됨), 1-메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸(239.2 mg 1.15 mmol), Pd(PPh3)4(57.8 mg, 0.05 mmol) 및 K2CO3(276.4 mg, 2 mmol)은 7-플루오로-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(97.6 mg, 40%)을 제공하였다. MS m/z 245.1 [M+H]+.
단계 B: 실시예 14 파트 3 단계 B의 과정에 따라서, DMSO(0.5 mL) 중 7-플루오로-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(48.8 mg, 0.2 mmol) 및 (S)-2-메틸피페라진(100 mg, 1 mmol)은 표제 화합물(32.1 mg, 49.5%)을 제공하였다. M.P. 168-170℃; MS m/z 325.2 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6): δ 8.35 (1H, s), 8.18 (1H, d, J = 2.8 Hz), 8.06 (1H, s), 8.02 (1H, dd, J = 9.7 Hz, 2.6 Hz), 7.56 (1H, d, J = 9.8 Hz), 6.63 (1H, s), 3.89 (3H, s), 3.54-3.57 (2H, m), 2.99-3.02 (1H, m), 2.80-2.85 (2H, m), 2.58-2.64 (1H, m), 2.24-2.28 (1H, m), 1.05 (3H, d, J = 6.3 Hz).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을, 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 치환함으로써, 실시예 18에 따라 제조할 수 있다.
실시예 19
화합물 128의 제조
단계 A: 2 mL의 아세토니트릴 중 2-클로로-7-플루오로-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(199 mg, 1.0 mmol, 실시예 14 파트 1에서 제조됨)의 용액에 5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피롤로[2,3-b]피리딘(293 mg, 1.2 mmol), 테트라키스트라이페닐포스핀 Pd(0)(57.8 mg, 0.05 mmol) 및 수성 K2CO3(물 중 1M, 2 mmol)을 실온에서 첨가하였다. 혼합물을 85℃에서 3시간 동안 교반하고, 실온까지 냉각하였다. 고체를 여과 제거하고, 다이클로로메탄, 물 및 아세토니트릴로 세척하여 7-플루오로-2-(1H-피롤로[2,3-b]피리딘-5-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(249 mg, 89%)을 수득하였다. MS m/z 281.1 [M+H]+.
단계 B: DMSO(1 mL) 중 7-플루오로-2-(1H-피롤로[2,3-b]피리딘-5-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(100 mg, 0.36 mmol)의 용액을 피페라진(154 mg, 1.79 mmol)으로 실온에서 처리하였다. 용액을 160℃에서 30분 동안 교반하고, 실온까지 냉각하였다. 반응 혼합물을 농축 없이 실리카 겔 상에 적재하고, CH2Cl2 중 MeOH(0% → 20%)로 용리하여 표제 화합물(74.8 mg, 60%)을 수득하였다. M.P. 252-255℃; MS m/z 347.1 [M+H]+; 1H NMR (DMSO-d 6, 500 MHz) δ 11.8 (1H, s), 8.95 (1H, d, J = 2.0 Hz)), 8.64 (1H, d, J = 1.7 Hz), 8.14 (1H, d, J = 2.3 Hz), 8.0-7.9 (1H, m), 7.62 (1H, d, J = 9.6 Hz), 7.45 (1H, m), 6.9 (1H, s), 6.48 (1H, br. m). 3.1 (4H, m), 2.85 (4H, m).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을, 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 치환함으로써, 실시예 19에 따라 제조할 수 있다.
실시예 20
화합물 153의 제조
단계 A: 실시예 14 파트 3 단계 A의 과정에 따라 스쯔끼 커플링에 의해 제조된 2-(3-플루오로-4-하이드록시페닐)-7-(피페라진-1-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(180 mg, 0.53 mmol)을 MeOH(4 mL) 중 다이-tert-부틸 다이카본에이트(131 mg, 0.6 mmol) 및 트라이에틸아민(85 μL, 0.6 mmol)과 합하였다. 혼합물을 50℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하여 황색 분말을 남기고, 이를 MeOH로 세척하고, 진공 하에 건조하여 tert-부틸 4-(2-(3-플루오로-4-하이드록시페닐)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-일)피페라진-1-카복실레이트(230 mg, 99%)를 수득하였다. MS m/z 441.0 [M+H]+.
단계 B: tert-부틸 4-(2-(3-플루오로-4-하이드록시페닐)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-일)피페라진-1-카복실레이트(60 mg, 0.14 mmol)를 DMF(1 mL) 중 K2CO3(39 mg, 0.28 mmol) 및 요오도에탄(48 μL, 0.21 mmol)과 합하였다. 혼합물을 50℃에서 1시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각한 후, H2O(0.5 mL)를 상기 혼합물에 적가하였다. 침전물을 수집하고, H2O로 세척하고, 진공 하에 건조하였다.
단계 C: 트라이플루오로아세트산(1 mL)을 단계 B로부터의 조질 생성물에 첨가하였다. 10분 동안 방치한 후, 휘발성 물질을 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2(4 mL) 및 수성 K2CO3(1M, 2 mL)에 분할하였다. 유기 층을 제거하고, 농축하여 표제 화합물(36 mg, 70%)을 수득하였다. M.P. 180-186℃; MS m/z 369.1 [M+H]+; 1H NMR (DMSO-d 6, 500 MHz): δ 8.21 (1H, d, J = 2.7 Hz), 8.02 (3H, m), 7.68 (1H, d, J = 9.7 Hz), 7.27 (1H, t, J = 8.8 Hz), 6.93 (1H, s), 4.20 (2H, q, J = 7.0 Hz), 3.14 (4H, m), 2.88 (4H, m), 2.36 (1H, br), 1.39 (3H, t, J = 7.0 Hz).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을, 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 치환함으로써, 실시예 20에 따라 제조할 수 있다.
실시예 21
화합물 179의 제조
단계 A: DMSO(1.5 mL) 중 2-클로로-7-플루오로-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(300 mg, 1.5 mmol) 및 4-메틸-1H-이미다졸(429 mg, 6.0 mmol)의 혼합물을 90℃에서 15시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온까지 냉각하고, CH3CN으로 희석하였다. 침전물을 여과하고, CH3CN(3x)으로 세척하고, 건조하여 2-(4-메틸-1H-이미다졸-1-일)-7-(피페라진-1-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온을 회백색 고체로서 수득하였다(225 mg, 61%). MS m/z 345.4 [M+H]+.
단계 B: DMA(0.6 mL) 중 2-(4-메틸-1H-이미다졸-1-일)-7-(피페라진-1-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(73 mg, 0.3 mmol) 및 피페라진(129 mg, 1.5 mmol)의 혼합물을 120℃에서 4시간 동안 가열하였다. DMA를 제거하고, 혼합물을 CH3CN으로 희석하였다. 침전물을 여과하고, CH3CN(3x)으로 세척하고, 건조하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(310 mg, 95%). M.P. 204-206℃; MS m/z 311.1 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6): δ 8.47 (1H,d, J = 1.2 Hz), 8.22 (1H, d, J = 2.7 Hz), 8.13 (1H, dd, J = 2.8 Hz, 9.6 Hz), 7.69 (1H, d, J = 1.1 Hz), 7.63 (1H, d, J = 9.6 Hz), 6.68 (1H, s), 3.14 (4H, m), 2.87 (4H, m), 2.16 (3H, s).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을, 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 치환함으로써, 실시예 21에 따라 제조할 수 있다.
실시예 22
화합물 143의 제조
단계 A: 실시예 1 단계 A의 과정에 따라서, 메탄올(50 mL) 중 메틸 3-(3,4-다이메톡시페닐)-3-옥소프로파노에이트(5.0 g, 20 mmol), 트라이메틸오르토폼에이트(3.5 mL, 30 mmol) 및 p-톨루엔설폰산 일수화물(380 mg, 2 mmol)은 메틸 3-(3,4-다이메톡시페닐)-3,3-다이메톡시프로파노에이트를 제공하였다. 조질 생성물을 추가 정제 없이 후속 단계에 직접 사용하였다. 1H NMR (DMSO-d 6, 500 MHz): δ 6.93 (3H, m), 3.82 (2H, q, J = 7.2 Hz), 3.75 (3H, s), 3.73 (3H, s), 3.12 (6H, s), 2.92 (2H, s), 0.92 (3H, t, J = 7.1 Hz).
단계 B: 5-브로모피리딘-2-아민(3.5 g, 20 mmol)을 상기 케탈 중간체에 첨가하였다. 혼합물을 2시간 동안 150℃까지 가열한 후, 실온까지 냉각하였다. 조질 생성물을 아세토니트릴로 마쇄하고, 여과하여 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다(6.8 g, 94%). MS m/z 360.9 [M+H]+, 362.9 [M+2+H]+.
단계 C: 실시예 14 파트 3 단계 A의 과정에 따라서, 아세토니트릴(2 mL) 중 7-브로모-2-(3,4-다이메톡시페닐)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(181 mg, 0.5 mmol), tert-부틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(170 mg, 0.55 mmol), 칼륨 카본에이트(207 mg, 1.5 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2(36.5 mg, 0.05 mmol)는 tert-부틸 4-(2-(3,4-다이메톡시페닐)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트를 백색 고체로서 수득하였다(0.22 mg, 95%). MS m/z 464.1 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 8.82 (s, 1H), 8.24 (dd, J = 1.5, 9 Hz, 1H), 7.85 (dd, J = 2, 8.5 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 2 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 9 Hz, 1H), 7.05 (s, 1H), 6.54 (s, 1H), 4.09 (bs, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.85 (s, 3H), 3.60-3.59 (m, 2H), 2.64-2.63 (m, 2H), 1.45 (s, 9H).
단계 D: 단계 A로부터 수득한 중간체를 다이옥산 중 HCl의 용액(4M, 4 mL)에 현탁하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고 잔사를 다이클로로메탄과 포화 수성 나트륨 바이카본에이트 사이에 분할하였다. 유기물을 건조하고, 농축하고, 메탄올(10%)과 함께 다이클로로메탄으로 용리하는 염기성 알루미나 컬럼 상에서 크로마토그래피하여 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다(150 mg, 88%). M.P. 196-198℃; MS m/z 364.1 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 8.77 (d, J = 2 Hz, 1H), 8.24 (dd, J = 2, 9.5 Hz, 1H), 7.85 (dd, J = 2, 8.5 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 2 Hz, 1H), 7.71 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.03 (s, 1H), 6.60 (s, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.85 (s, 3H), 3.45 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 2.97 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 2.41 (bs, 2H).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을, 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 치환함으로써, 실시예 22에 따라 제조할 수 있다.
실시예 23
화합물 188의 제조
2-(3,4-다이메톡시페닐)-7-(1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(30 mg, 0.08 mmol), 폼알데하이드(0.05 mL, 37%, 약 0.8 mmol) 및 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(50 mg, 0.24 mmol)의 혼합물을 다이클로로메탄(1 mL)에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 다이클로로메탄으로 희석하고, 나트륨 바이카본에이트로 중화시켰다. 유기물을 건조하고, 농축하여 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다(26 mg, 83%). M.P. 165-168℃; MS m/z 378.4 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 8.79 (d, J = 2 Hz, 1H), 8.25 (dd, J = 2, 9.5 Hz, 1H), 7.85 (dd, J = 2, 8.5 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 2 Hz, 1H), 7.71 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.04 (s, 1H), 6.56 (s, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.85 (s, 3H), 3.09 (bs, 2H), 2.64-2.61 (m, 2H), 2.56 (bs, 2H), 2.51 (s, 3H).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을, 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 치환함으로써, 실시예 23에 따라 제조할 수 있다.
실시예 24
화합물 144의 제조
단계 A: 에틸 아세테이트(25 mL) 중 tert-부틸 4-(2-(3,4-다이메톡시페닐)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(100 mg, 0.22 mmol, 실시예 22 단계 C에 도시된 바와 같이 제조됨) 및 Pd/C(10%)(10 mg)의 혼합물을 1 대기압의 수소 하에 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 농축하고, EtOAc/CH2Cl2(30/70)를 용리하는 실리카 컬럼 상에서 크로마토그래피하여 tert-부틸 4-(2-(3,4-다이메톡시페닐)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-일)피페리딘-1-카복실레이트를 백색 고체로서 수득하고(75 mg, 75%), 이를 추가 정제 없이 후속 단계에 직접 사용하였다. MS m/z 466.4 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 8.57 (s, 1H), 7.80 (dd, J = 2.5, 9.5 Hz, 1H), 7.64 (dd, J = 2, 8.5 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 2 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 9 Hz, 1H), 6.9 (d, J = 9 Hz, 1H), 6.82 (s, 1H), 3.92 (bs, 2H), 3.69 (s, 3H), 3.65 (s, 3H), 2.78-2.71 (m, 2H), 2.69-2.65 (1H, m), 1.69-1.67 (m, 2H), 1.41-1.38 (m, 2H), 1.24 (s, 9H).
단계 B: 실시예 22 단계 D의 과정에 따라서, 다이옥산(4M, 3 mL) 중 HCl 및 단계 A로부터의 상기 생성물은 표제 화합물을 백색 고체로서 제공하였다(49 mg, 83%). M.P. 214-217℃; MS m/z 366.4 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 8.88 (d, J = 2 Hz, 1H), 8.09 (dd, J = 2, 9.5 Hz, 1H), 7.98 (dd, J = 2, 8.5 Hz, 1H), 7.91 (d, J = 2 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 9 Hz, 1H), 7.23 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.15 (s, 1H), 4.02 (s, 3H), 3.98 (s, 3H), 3.30 (d, J = 11.5 Hz, 2H), 3.01 (tt, J = 2 Hz, 12 Hz, 1H), 2.87 (t, J = 12 Hz, 2H), 2.02 (d, J = 12.5 Hz, 2H), 1.80-1.73 (m, 2H).
실시예 25
화합물 164의 제조
실시예 23의 과정에 따라서, 다이클로로메탄(0.5 mL) 중 2-(3,4-다이메톡시페닐)-7-(피페리딘-4-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(10 mg, 0.027 mmol), 폼알데하이드(10 μL, 37%, 0.13 mmol) 및 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(17 mg, 5.7 mmol)는 표제 화합물을 백색 고체로서 제공하였다(7.6 mg, 73% ). M.P. 181-183℃; MS m/z 380.1 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 8.76 (d, J = 2 Hz, 1H), 8.0 (dd, J = 2, 9 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 2, 8.5 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 2 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.01 (s, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.84 (s, 3H), 2.91 (d, J = 9.5 Hz, 2H), 2.73-2.64 (m, 1H), 2.22 (s, 3H), 2.01 (t, J = 8.5 Hz, 2H), 1.88-1.85 (m, 2H), 1.71-1.69 (m, 2H).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을, 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 치환함으로써, 실시예 25에 따라 제조할 수 있다.
실시예 26
화합물 263의 제조
파트 1: 실시예 14 파트 2의 과정에 따라서, 다이옥산(5 mL) 중 7-브로모-2-(3,4-다이메톡시페닐)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(661 mg, 1.8 mmol)(실시예 22 단계 B에서 제조됨), KOAc(530 mg, 5.4 mmol), 비스(핀콜라토)다이보론(700 mg, 2.7 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2(60 mg, 0.09 mmol)는 2-(3,4-다이메톡시페닐)-7-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온을 백색 고체로서 제공하였다(560 mg, 76%). 보론산에 대한 MS m/z 327.1 [M+H]+.
파트 2: 2-메틸테트라하이드로푸란(2.5 mL) 중 tert-부틸 3-옥소피페리딘-1-카복실레이트(482 mg, 2.4 mmol)의 용액에 아르곤 하에서 -78℃의 나트륨 비스(트라이메틸실릴)아미드(2.6 mL, 2.6 mmol, THF 중 1.0M)의 용액을 적가하였다. 혼합물을 -78℃에서 1시간 동안 교반하고, 2-메틸테트라하이드로푸란(2.5 mL) 중 N-(5-클로로피리딘-2-일)-1,1,1-트라이플루오로-N-(트라이플루오로메틸설폰일)-메탄설폰아미드(1.0 g, 2.5 mmol)의 용액을 첨가하고, 이어서 반응 생성물을 2시간에 걸쳐 실온까지 가온하였다. 실온에서 밤새 교반한 후, 반응 생성물을 포화 수성 나트륨 카본에이트로 급랭시키고, 에터로 희석하고, 유기물을 물로 세척하고, 건조하고, 농축하였다. 조질 생성물을 헥산 중 5% 에틸 아세테이트로 용리하는 염기성 알루미나 컬럼 상에서 크로마토그래피하여 표제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다(290 mg, 37%).
파트 3 단계 A: 실시예 14 파트 3 단계 A의 과정에 따라서, 아세토니트릴(4 mL) 중 2-(3,4-다이메톡시페닐)-7-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(370 mg, 0.91 mmol), tert-부틸 3-(트라이플루오로메틸설폰일-옥시)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(290 mg, 0.88 mmol), 칼륨 카본에이트(364 mg, 2.6 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2(58 mg, 0.08 mmol)는 tert-부틸 3-(2-(3,4-다이메톡시페닐)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트를 백색 고체로서 제공하였다(0.22 mg, 62%). MS m/z 464.3 [M+H]+.
파트 3 단계 B: 실시예 22 단계 B의 과정에 따라서, 다이옥산(4M, 5 mL) 중 tert-부틸 3-(2-(3,4-다이메톡시페닐)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(220 mg, 0.47 mmol) 및 HCl은 표제 화합물(160 mg, 79%)을 제공하였다. M.P. 146-150℃; MS m/z 364.2 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 8.73 (d, J = 2 Hz, 1H), 8.23 (dd, J = 2, 9.5 Hz, 1H), 7.85 (dd, J = 2, 8.5 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.71 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.05 (s, 1H), 6.60 (s, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.85 (s, 3H), 3.29 (bs, 2H), 2.40-2.36 (m, 4H).
실시예 27
화합물 237의 제조
단계 A: NaH(광유 중 60% 분산액, 12mg, 0.3 mmol)를 실온의 무수 THF 중 1-Boc-4-하이드록시피페리딘(48.3 mg, 0.24 mmol)에 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 2-(3,4-다이메톡시페닐)-7-F-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(60 mg, 0.2 mmol)을 첨가하였다. 이어서 반응 혼합물을 70℃에서 3시간 동안 가열하였다. 소량의 얼음 물을 첨가하여 반응 생성물을 급랭시켰다. 대부분의 THF를 증발시킨 수, 에터를 혼합물에 첨가하고, 침전물을 여과하고, 건조하여 tert-부틸 4-(2-(3,4-다이메톡시페닐)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-일옥시)피페리딘-1-카복실레이트를 수득하고, 이를 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다.
단계 B: tert-부틸 4-(2-(3,4-다이메톡시페닐)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-일옥시)피페리딘-1-카복실레이트를 0℃에서 CH2Cl2/TFA(0.5 mL/0.5 mL)에 용해시켰다. 출발 물질이 사라질 때까지, 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반하였다. 대부분의 TFA를 증발시킨 후, 빙랭 포화 NaHCO3을 반응 혼합물에 첨가하였다. 혼합물을 CH2Cl2로 추출하였다. 유기 층을 MgSO4 상에서 건조하고, 농축하여 표제 화합물(57 mg, 2 단계에 대해 74.8%)을 수득하였다. M.P. 221-224℃; MS m/z 382.2 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6): δ 8.58 (1H, d, J = 2.9 Hz),7.81-7.86 (2H, m), 7.73-7.78 (2H, m), 7.08 (1H, d, J = 8.7 Hz), 7.01 (1H, s), 4.82-4.86 (1H, m), 3.87 (3H, s), 3.83 (3H, s), 3.23-3.27 (2H, m), 3.04-3.09 (2H, m), 2.13-2.18 (2H, m), 1.85-1.91 (2H, m).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을, 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 치환함으로써, 실시예 27에 따라 제조할 수 있다.
실시예 28
화합물 52의 제조
단계 A: 에틸 2-(3,4-다이메톡시페닐)아세테이트(673 mg, 3 mmol)를 1-tert-부톡시-N,N,N',N'-테트라메틸메탄다이아민(0.68 mL, 3.3 mmol)과 합하였다. 혼합물을 2시간 동안 60℃까지 가열하였다. 혼합물을 후처리 없이 후속 단계에 직접 사용하였다.
단계 B: 4-클로로피리딘-2-아민(424 mg, 3.3 mmol)을 상기 혼합물에 직접 첨가하였다. 혼합물을 20분 동안 120℃까지 가열하였다. 혼합물을 후처리 없이 후속 단계에 직접 사용하였다.
단계 C: 피페라진(1.3 g, 15 mmol)을 단계 B로부터의 혼합물에 첨가하고, 120℃에서 추가로 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 CH2Cl2 중 10% MeOH(1% 트라이에틸아민)에 의해 실리카 상에서 크로마토그래피하여 표제 화합물을 황색 분말로서 수득하였다(120 mg, 11%). M.P. 175-179℃; MS m/z 367.2 [M+H]+; 1H NMR (DMSO-d 6, 500 MHz): δ 8.84 (1H, d, J = 8.2 Hz), 8.40 (1H, s), 7.44 (1H, d, J = 2.1 Hz), 7.34 (1H, dd, J = 8.4 Hz, 2.1 Hz), 7.28 (1H, dd, J = 8.2 Hz, 2.8 Hz), 6.99 (1H, d, J = 8.5 Hz), 6.73 (1H, d, J = 2.8 Hz), 3.80 (3H, s), 3.78 (3H, s), 3.48 (4H, m), 2.82 (4H, m).
실시예 29
화합물 220의 제조
단계 A: 7-브로모-2-클로로-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(130 mg, 0.5 mmol)(실시예 14 파트 1에 따라 제조됨)을 EtOH(2 mL) 중 tert-부틸 피페라진-1-카복실레이트(140 mg, 0.75 mmol) 및 트라이에틸아민(0.14 mL, 1.0 mmol)과 합하였다. 혼합물을 1시간 동안 80℃까지 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각하고, 이어서 여과하였다. 수집된 물질을 CH2Cl2 중 EtOAc(0% → 50%)에 의해 실리카 상에서 크로마토그래피하여 tert-부틸 4-(7-브로모-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일)피페라진-1-카복실레이트(130 mg, 64%)를 수득하였다. MS m/z 409.4 [M+H]+.
단계 B: 단계 A로부터의 중간체(0.3 mmol)를 CH3CN(2 mL) 및 수성 K2CO3(1M, 2 mL) 중 3-플루오로-4-메톡시페닐보론산(77 mg, 0.45 mmol) 및 테트라키스(트라이페닐포스핀) 팔라듐(0)(35 mg, 0.03 mmol)과 합하였다. 혼합물을, 아르곤 하에 2시간 동안 격렬히 교반하면서, 80℃에서 가열하였다. 유기 층을 제거하고, 농축하였다. 잔사를 CH2Cl2 중 EtOAc(0% → 50%)에 의해 실리카 상에서 크로마토그래피하였다.
단계 C: 단계 B로부터의 Boc-보호된 중간체를 트라이플루오로아세트산(1 mL)에 용해시켰다. 20분 후, 휘발성 물질을 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2 및 수성 K2CO3(1M)에 분할하였다. 유기 층을 제거하고, 농축하여 표제 화합물을 백색 분말로서 수득하였다(30 mg, 17%). M.P. 202-206℃; MS m/z 355.0 [M+H]+; 1H NMR (DMSO-d 6, 500 MHz): δ 8.93 (1H, d, J = 2.0 Hz), 8.15 (1H, dd, J = 9.3 Hz, 2.3 Hz), 7.67 (1H, dd, J = 12.7 Hz, 2.3 Hz), 7.54 (1H, m), 7.37 (1H, d, J = 9.2), 7.30 (1H, t, J = 8.8 Hz), 5.62 (1H, s), 3.90 (3H, s), 3.57 (4H, m), 2.75 (4H, m), 2.42 (1H, br s).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을, 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 치환함으로써, 실시예 29에 따라 제조할 수 있다.
실시예 30
화합물 276의 제조
단계 A: 7-브로모-2-클로로-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(1.29 g, 5 mmol)을 3-플루오로-4-메톡시페닐보론산(850 mg, 5 mmol), 테트라키스(트라이페닐포스핀) 팔라듐(0)(281 mg, 0.25 mmol), CH3CN(10 mL) 및 수성 K2CO3(1M, 10 mL)과 합하였다. 혼합물을 6시간 동안 80℃까지 가열하였다. 실온까지 냉각한 후, 혼합물을 CH2Cl2(75 mL) 및 H2O(50 mL)에 분할하였다. 유기 층을 수집하고, 농축하였다. 잔사를 CH2Cl2 중 EtOAc(0% → 50%)로 용리하는 실리카 상에서 크로마토그래피하여 2-클로로-7-(3-플루오로-4-메톡시페닐)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온을 백색 분말로서 수득하였다(520 mg, 34%). MS m/z 305.0 [M+H]+.
단계 B: 2-클로로-7-(3-플루오로-4-메톡시페닐)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(180 mg, 0.6 mmol)을 DMSO(0.75 mL) 중 4-아미노피페리딘(90 mg, 0.9 mmol) 및 트라이에틸아민(165 μL, 1.2 mmol)과 합하였다. 혼합물을 30분 동안 120℃까지 가열하였다. 실온까지 냉각한 후, CH3CN(2 mL)을 상기 혼합물에 첨가하였다. 혼합물을 여과하였다. 수집된 물질을 CH3CN으로 세척하고, 진공 하에 건조하여 표제 화합물을 백색 분말로서 수득하였다(115 mg, 52%). M.P. 268-283℃; MS m/z 369.3 [M+H]+; 1H NMR (DMSO-d 6, 500 MHz): δ 8.94 (1H, d, J = 2.0 Hz), 8.16 (1H, dd, J = 9.3 Hz, 2.3 Hz), 7.68 (1H, dd, J = 12.7 Hz, 2.3 Hz), 7.55 (1H, d, J = 8.5 Hz), 7.39 (1H, d, J = 9.2), 7.30 (1H, t, J = 8.9 Hz), 5.70 (1H, s), 5.20 (2H, br), 4.36 (2H, br), 3.92 (3H, s), 3.04 (3H, m), 1.87 (2H, m), 1.32 (2H, m).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 대체함으로써, 실시예 30에 따라 제조할 수 있다.
실시예 31
화합물 85의 제조
파트 1 단계 A: 0℃의 아세토니트릴(27 mL) 중 MgCl2(2.85 g, 30 mmol)의 현탁액에 다이에틸 말론에이트(3.4 mL, 30 mmol) 및 트라이에틸아민(8.3 mL, 60 mmol)을 적가하였다. 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하였다. 이어서, 3,4-다이메톡시벤조일 클로라이드(5.0 g, 25 mmol)를 분할식으로 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 후, 1N HCl로 처리하고, 에터로 추출하고, 건조하고, 증발시켰다. 잔사를 헥산 중 에틸 아세테이트(5% → 40%)에 의해 실리카 상에서 정제하여 다이메틸 2-(3,4-다이메톡시벤조일)말론에이트(7.38 g, 100%)를 수득하였다. MS m/z 297.1 [M+H]+.
파트 1 단계 B: 실온의 POCl3(9.4 mL, 100 mmol) 중 다이메틸 2-(3,4-다이메톡시벤조일)말론에이트(2.96 g, 10 mmol)의 용액에 DIPEA(2.75 mL, 16.7 mmol)를 적가하였다. 이어서, 혼합물을 100℃에서 3시간 동안 교반하였다. POCl3을 진공 하에 제거하고, 잔사를 얼음-물로 처리하고, 에터로 추출하였다. 유기 층을 1N HCl로 세척하고, 건조하고, 증발시켰다. 잔사를 헥산 중 에틸 아세테이트(5% → 50%)에 의해 실리카 상에서 정제하여 표제 화합물(2.0 g, 64%)을 수득하였다. MS m/z 282.9 [M+H]+.
파트 2: -78℃의 THF(15 mL) 중 LDA(1.5M, 13.3 mL, 20 mmol)의 용액에 THF(10 mL) 중 2,5-다이플루오로피리딘(1.15 g, 10 mmol)의 용액을 적가하였다. 이어서, 온도를 실온까지 상승시키고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 반응 생성물을 수성 NH4Cl로 급랭시켰다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하고, 건조하고, 증발시켰다. 잔사를 헥산 중 에틸 아세테이트(5% → 50%)에 의해 실리카 상에서 정제하여 2-(5-플루오로피리딘-2-일)아세토니트릴(0.8 g, 59%)을 수득하였다. MS m/z 137.0 [M+H]+.
파트 3 단계 A: DMF(0.5 mL) 중 2-(5-플루오로피리딘-2-일)아세토니트릴(44 mg, 0.325 mmol)의 용액에 60% NaH(20 mg, 0.325 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 다이메틸 2-(클로로(3,4-다이메톡시페닐)메틸렌)말론에이트(102 mg, 0.325 mmol)로 처리하였다. 혼합물을 15분 동안 교반하고, 반응 생성물을 포화 NH4Cl 용액으로 급랭시켰다. 혼합물을 여과하였다. 고체를 물로 세척하고, 추가 정제 없이 후속 단계에 직접 사용하였다.
파트 3 단계 B: 단계 A로부터의 조질 고체를 TFA(2.0 mL) 및 물(0.2 mL)로 처리하였다. 혼합물을 100℃에서 밤새 교반하였다. 이어서, 용매를 진공 하에 제거하고, 조질 생성물을 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다.
파트 3 단계 C: 단계 B로부터의 조질 생성물을 DMSO(1.0 mL) 중 피페라진(86 mg, 1.0 mmol)과 함께 120℃에서 밤새 가열하였다. N2에 의해 용매를 제거한 후, 다이클로로메탄 중 메탄올(10%)에 의해 실리카 상에서 정제하여 표제 화합물(30 mg, 25%)을 수득하였다. M.P. 199-202℃; MS m/z 391.2 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ: 8.60 (1H, d, J = 2.2 Hz), 7.98 (1H, d, J = 9.8 Hz), 7.59 (1H, dd, J = 9.5, 2.5 Hz), 7.20 (1H, dd, J = 8.5, 2.2 Hz), 7.12 (1H, d, J = 2.2 Hz), 6.93 (1H, d, J = 8.2 Hz), 6.52 (1H, s), 3.89 (3H, s), 3.88 (3H, s), 3.23-3.21 (4H, m), 3.05-3.03 (4H, m).
실시예 32
화합물 91의 제조
단계 A: MeOH(15 mL) 중 2-(5-플루오로피리딘-2-일)아세토니트릴(0.78 g, 5.7 mmol)의 용액에 트라이메틸실릴 클로라이드(4.4 mL, 34.4 mmol)를 적가하였다. 혼합물을 50℃에서 밤새 교반하였다. 주황색 휘발성 물질을 진공 하에 제거하고, 잔사를 에터와 수성 나트륨 바이카본에이트 사이에 분할하였다. 수성 층을 에터로 추출하였다. 에터 추출물을 합하고, 건조하고, 증발시켜 메틸 2-(5-플루오로피리딘-2-일)아세테이트를 오일로서 수득하고(0.9 g, 93%), 추가 정제 없이 사용하였다. MS m/z 170.1 [M+H]+.
단계 B: 실시예 31 파트 3 단계 A의 과정에 따라서, DMF(3.0 mL) 중 메틸 2-(5-플루오로피리딘-2-일)아세테이트(0.34 g, 2.0 mmol), 60% NaH(176 mg, 4.4 mmol) 및 다이메틸 2-(클로로(3,4-다이메톡시페닐)메틸렌)말론에이트(0.69 g, 2.2 mmol, 실시예 31 파트 1 단계 B에서 제조됨)는 목적 다이메틸 2-(3,4-다이메톡시페닐)-7-플루오로-4-옥소-4H-퀴놀리진-1,3-다이카복실레이트(0.2 g, 24%)를 제공하였다. MS m/z 416.1 [M+H]+.
단계 C: 메탄올(6.0 mL) 중 다이메틸 2-(3,4-다이메톡시페닐)-7-플루오로-4-옥소-4H-퀴놀리진-1,3-다이카복실레이트(0.2 g, 0.48 mmol)의 용액을 수성 LiOH(2.0N, 2.0 mL, 4.0 mmol)로 처리하고, 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 수성 후처리하고, 이어서 증발시켜 검은 잔사를 수득하고, TFA(2.0 mL) 및 물(0.2 mL)로 처리하고, 100℃에서 1시간 동안 교반하였다. N2로 용매를 제거하고, 헥산 중 에틸 아세테이트(25% → 75%)에 의해 크로마토그래피하여 2-(3,4-다이메톡시페닐)-7-플루오로-4H-퀴놀리진-4-온(30 mg, 21%)을 수득하였다. MS m/z 300.2 [M+H]+.
단계 D: DMSO(0.2 mL) 중 2-(3,4-다이메톡시페닐)-7-플루오로-4H-퀴놀리진-4-온(30 mg, 0.1 mmol), (S)-2-메틸 피페라진(30 mg, 0.3 mmol) 및 K2CO3(27 mg, 0.2 mmol)의 용액을 120℃에서 48시간 동안 교반하였다. N2로 용매를 제거하고, 이어서 다이클로로메탄 및 메탄올(10%)로 정제하여 표제 화합물(24 mg, 63%)을 수득하였다. M.P. 243-245℃; MS m/z 380.2 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ: 8.52 (1H, d, J = 2.2 Hz), 7.46 (1H, d, J = 9.8 Hz), 7.30 (2H, dt, J = 10.4, 2.2 Hz), 7.22 (1H, d, J = 1.9 Hz), 6.98 (1H, d, J = 8.5 Hz), 6.84 (2H, s), 3.96 (3H, s), 3.95 (3H, s), 3.58-3.54 (2H, m), 3.50 (1H, s), 3.21-3.19 (1H, m), 3.12-3.04 (2H, m), 2.85-2.80 (1H, m), 2.49 (1H, t, J = 11.1 Hz), 1.20 (3H, d, J = 6.6 Hz).
실시예 33
화합물 106의 제조
단계 A: 톨루엔(40 mL) 중 Pd2(dba)3(0.55 g, 0.6 mmol) 및 DavePhos(0.50 g, 1.26 mmol)의 혼합물에 실온에서 아르곤 대기 하에 헥산 중 LHMDS의 용액(1.0M x 50 mL, 50 mmol)을 적가하였다. 혼합물을 10분 동안 교반하고, 이어서 -10℃까지 냉각하고, tert-부틸 아세테이트(6.2 mL, 46 mmol)를 첨가하고, 추가로 10분 동안 교반하였다. 이어서, 2-브로모-5-플루오로피리딘(3.52 g, 20 mmol)을 분할식으로 첨가하였다. 첨가의 완료 시, 온도를 실온까지 상승시키고, 혼합물을 추가로 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 반응 생성물을 포화 NH4Cl 용액으로 급랭시켰다. 수성 후처리하고, 이어서 헥산 중 에틸 아세테이트(0% → 20%)에 의해 크로마토그래피하여 tert-부틸 2-(5-플루오로피리딘-2-일)아세테이트(2.6 g, 62%)를 수득하였다.
단계 B: 실시예 31 파트 3 단계 A의 과정에 따라서, DMF(1.0 mL) 중 tert-부틸 2-(5-플루오로피리딘-2-일)아세테이트, 60% NaH(80 mg, 2.0 mmol) 및 다이메틸 2-(클로로(3,4-다이메톡시페닐)-메틸렌)말론에이트(0.32 g, 1.0 mmol, 실시예 31 파트 2 단계 B에서 제조됨)는 1-tert-부틸 3-메틸 2-(3,4-다이메톡시페닐)-7-플루오로-4-옥소-4H-퀴놀리진-1,3-다이카복실레이트를 제공하였다. 조질 고체를 추가 정제 없이 후속 단계에 직접 사용하였다.
단계 C: 실시예 31 파트 3 단계 B의 과정에 따라서, 단계 B로부터의 조질 고체, TFA(5 mL) 및 물(2 mL)은 2-(3,4-다이메톡시페닐)-7-플루오로-4H-퀴놀리진-4-온(145 mg, 48%)을 제공하였다. MS m/z 300.2 [M+H]+.
단계 D: 실시예 31 파트 3 단계 C의 과정에 따라서, DMSO(0.5 mL) 중 2-(3,4-다이메톡시페닐)-7-플루오로-4H-퀴놀리진-4-온(75 mg, 0.25 mmol) 및 피페라진(75 mg, 0.87 mmol)은 표제 화합물(30 mg, 33%)을 제공하였다. M.P. 170-172℃; MS m/z 366.1 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ: 8.53 (1H, d, J = 2.2 Hz), 7.46 (1H, d, J = 9.5 Hz), 7.32-7.27 (2H, m), 7.22 (1H, d, J = 1.9 Hz), 6.97 (1H, d, J = 8.5 Hz), 6.84 (2H, s), 3.98 (3H, s), 3.95 (3H, s), 3.25-3.20 (4H, m), 3.13-3.07 (4H, m).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을, 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 치환함으로써, 실시예 33에 따라 제조할 수 있다.
실시예 34
화합물 245의 제조
단계 A: 다이옥산(20 mmol) 중 5-브로모-2-요오도피리딘(2.84 g, 10 mmol), tert-부틸 에틸 말론에이트(3.76 g, 20 mmol), Cs2CO3(9.77 g, 30 mmol), CuI(0.19 g, 1.0 mmol) 및 2-니코틴산(0.246 g, 2.0 mmol)의 혼합물을 90℃에서 밤새 질소 대기 하에 교반하였다. 이어서, 혼합물을 물로 처리하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 건조하고, 증발시켰다. 잔사를 MeOH(100 mL) 및 물(40 mL)에 용해시키고, NaOH(1.2 g, 30 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하고, 이어서, 1N HCl로 pH 4까지 산성화시키고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 건조하고, 헥산 중 에틸 아세테이트(10% → 50%)로 크로마토그래피하여 tert-부틸 2-(5-브로모피리딘-2-일)아세테이트(1.2 g, 44%)를 수득하였다.
단계 B: 실시예 33 단계 B 및 C의 과정에 따라서, tert-부틸 2-(5-브로모피리딘-2-일)아세테이트(0.54 g, 2.0 mmol)를 DMF(2.0 mL) 중 NaH(광유 중 60%, 0.16 g, 4.0 mmol)로 처리하고, 2-(클로로(3,4-다이메톡시페닐)메틸렌)말론에이트(2.0 mmol)와 반응시켰다. 100℃의 TFA(5.0 mL) 및 물(2.0 mL)에서 탈보호 및 탈카복실화시켜 7-브로모-2-(3,4-다이메톡시페닐)-4H-퀴놀리진-4-온(0.17 g, 68%)을 수득하였다. MS m/z 360.1 [M+H]+, 362.0 [M+2+H]+.
단계 C: 아세토니트릴(1.5 mL) 중 7-브로모-2-(3,4-다이메톡시페닐)-4H-퀴놀리진-4-온(0.17 g, 0.47 mmol), tert-부틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(0.18 g, 0.57 mmol), PdCl2dppf(38 mg, 0.047 mmol), K2CO3(2.0 M x 0.75 mL, 1.5 mmol)의 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 물로 처리하고, 다이클로로메탄으로 추출하고, 건조하고, 다이클로로메탄 중 에틸 아세테이트(20% → 100%)로 크로마토그래피하여 tert-부틸 4-(2-(3,4-다이메톡시페닐)-4-옥소-4H-퀴놀리진-7-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(0.16 g, 73%)를 수득하였다. MS m/z 463.3 [M+H]+.
단계 D: tert-부틸 4-(2-(3,4-다이메톡시페닐)-4-옥소-4H-퀴놀리진-7-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(80 mg, 0.17 mmol)를 다이클로로메탄(1.0 mL) 및 TFA(1.0 mL)로 처리하고, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 증발시키고, 다이클로로메탄으로 처리하고, 포화 수성 나트륨 바이카본에이트 용액으로 세척하였다. 유기 층을 건조하고, 증발시켜 표제 화합물(63 mg, 100%)을 수득하였다. M.P. 174-176℃; MS m/z 363.2 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ: 9.04 (1H, s), 7.53 (1H, dd, J = 9.2, 1.9 Hz), 7.47 (1H, d, J = 9.2 Hz), 7.31 (1H, dd, J = 8.5, 2.2 Hz), 7.23 (1H, d, J = 2.2 Hz), 6.99 (1H, J = 8.2 Hz), 6.86 (2H, br s), 6.36 (1H, s), 3.99 (3H, s), 3.97 (3H, s), 3.67-3.60 (2H, m), 3.24-3.13 (2H, m), 2.62-2.55 (2H, m), 2.21 (1H, br s).
실시예 35
화합물 249의 제조
실시예 23의 과정에 따라서, 2-(3,4-다이메톡시페닐)-7-(1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-4H-퀴놀리진-4-온(30 mg, 0.083 mmol), 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(53 mg, 0.25 mmol), 및 다이클로로메탄 중 10% 메탄올(1.0 mL) 중 폼알데하이드(30%, 14 μL, 0.166 mmol)의 수용액은 표제 화합물(26 mg, 83%)을 제공하였다. M.P. 194-196℃; MS m/z 377.2 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ: 9.03 (1H, s), 7.51-7.44 (2H, m), 7.29 (1H, dd, J = 8.5, 2.2 Hz), 7.21 (1H, d, J = 1.9 Hz), 6.98 (1H, J = 8.2 Hz), 6.87-6.82 (2H, m), 6.26 (1H, s), 3.98 (3H, s), 3.95 (3H, s), 3.48 (2H, br s), 3.06-2.97 (2H, m), 2.90-2.80 (2H, m), 2.65 (3H, s).
실시예 36
화합물 306의 제조
파트 1 단계 A: THF(25 mL) 중 2-(벤질옥시)-4-브로모-6-플루오로아닐린(3.74 g, 12.6 mmol)의 용액(1,3-다이플루오로-2-니트로벤젠으로부터 공지된 과정(국제특허공개 제WO2007/067612호)에 따라 3 단계로 제조됨)에 PtO2(0.23 g, 1.0 mmol)를 첨가하였다. 수소(1 atm, 볼룬) 하에 실온에서 23시간 동안 교반한 후, 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하였다. 여액을 농축하여 2-아미노-5-브로모-3-플루오로페놀을 갈색 고체로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. MS m/z 206.1 [M+H]+, 208.0 [M+2+H]+.
파트 1 단계 B: 1,1,1-트라이에톡시에탄(10 mL) 중 조질 2-아미노-5-브로모-3-플루오로페놀(단계 A)의 용액에 TFA(0.96 mL, 12.6 mmol)를 실온에서 첨가하였다. 15시간 후, 혼합물을 Na2CO3으로 중화시키고, 여과하였다. 여액을 농축하고, CH2Cl2에 의해 크로마토그래피하여 6-브로모-4-플루오로-2-메틸벤조[d]옥사졸을 황갈색 고체로서 수득하였다(2.531 g, 88%). MS m/z 230.0 [M+H]+, 232.1 [M+2+H]+.
파트 1 단계 C: 다이옥산(25 mL) 중 6-브로모-4-플루오로-2-메틸벤조[d]옥사졸(2.531 g, 11.0 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-바이(1,3,2-다이옥사보롤란)(3.087 g, 12.2 mmol), KOAc(3.25 g, 33.2 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(449 mg, 0.55 mmol)의 혼합물을 탈기시키고, N2 하에 85℃에서 가열하였다. 15시간 후, LC-MS는 출발 물질의 사라짐 및 약 2/1 비의 보론산 및 보론산 피나콜 에스터의 혼합물로서 생성물을 나타냈다: 보론산 생성물: MS m/z 196.1 [M+H]+; 피나콜 보론산 에스터 생성물: MS m/z 278.2 [M+H]+. 반응 혼합물을 농축 건조하고, 후속 단계에 그대로 사용하였다.
파트 2 단계 A: 조질 보론산 피나콜 에스터/보론산(파트 1)(약 4 g, 약 4 mmol), 2-클로로-7-플루오로-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(0.792 g, 4.0 mmol, 실시예 14 파트 1에서 제조됨), Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(146 mg, 0.20 mmol), K2CO3(2M, 6.0 mL, 12.0 mmol) 및 CH3CN(12 mL)의 혼합물을 탈기시키고, 이어서 N2 하에 60℃에서 2.5시간 동안 가열하였다. 휘발성 물질을 제거하고, 잔사를 물 및 CH3CN으로 세척하여 7-플루오로-2-(4-플루오로-2-메틸벤조[d]옥사졸-6-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온을 회색을 띠는 고체(1.119 g, 89%)로서 수득하였다. MS m/z 314.2 [M+H]+. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 8.88 - 9.01 (1H, m), 8.39 - 8.48 (1H, m), 8.11 - 8.20 (2H, m), 7.86 - 7.96 (1H, m), 7.21 - 7.29 (1H, m), 2.69 (3H, s).
파트 2 단계 B: DMA(0.5 mL) 중 7-플루오로-2-(4-플루오로-2-메틸벤조[d]옥사졸-6-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(63 mg, 0.2 mmol) 및 (S)-2-메틸피페라진(30 mg, 0.3 mmol)의 혼합물을 120℃에서 15시간 동안 가열하였다. 휘발성 물질을 제거하고, 잔사를 크로마토그래피(CH2Cl2 중 MeOH 10-15%)하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(26 mg, 33%). M.P. 207-209℃; MS m/z 394.3 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 8.39 (1H, d, J = 1.3 Hz), 8.20 - 8.24 (1H, m), 8.05 - 8.16 (2H, m), 7.71 - 7.77 (1H, m), 7.11 (1H, s), 3.56 - 3.68 (2H, m), 2.98 - 3.06 (1H, m), 2.78 - 2.88 (2H, m), 2.68 (3H, s), 2.62 - 2.68 (1H, m), 2.27 - 2.34 (1H, m), 1.06 (3H, d, J = 6.3 Hz).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을, 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 치환함으로써, 실시예 36에 따라 제조할 수 있다.
실시예 37
화합물 443의 제조
단계 A: 아세토니트릴(4 mL) 중 7-브로모-2-(3,4-다이메톡시페닐)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(516 mg, 2.0 mmol), tert-부틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(740 mg, 2.4 mmol), 칼륨 카본에이트(828 mg, 6.0 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2(144 mg, 0.2 mmol)의 혼합물을 탈기시키고, 이어서 N2 하에 60℃에서 밤새 가열하였다. 휘발성 물질을 제거하고, 잔사를 크로마토그래피(30% EtOAc/CH2Cl2)하여 tert-부틸 4-(2-(3,4-다이메톡시페닐)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트를 황색 고체로서 수득하였다(579 mg, 80%). MS m/z 362.8 [M+H]+.
단계 B: 단계 A로부터의 생성물(400 mg, 1.1 mmol)에 1-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-인다졸(220 mg, 1.2 mmol), Pd(dppf)Cl2(40 mg, 0.05 mmol), 칼륨 카본에이트(455 mg, 3.3 mmol) 및 CH3CN(2 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 탈기시키고, 이어서 75℃에서 밤새 가열하였다. 혼합물을 물 및 CH3CN으로 세척하였다. 휘발성 물질을 제거하고, 잔사를 CH2Cl2 중 0-2% MeOH로 크로마토그래피하여 tert-부틸 4-(2-(1-메틸-1H-인다졸-5-일)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트를 회백색 고체로서 수득하였다(327 mg, 65%). MS m/z 458.5 [M+H]+.
단계 C: 실시예 22 단계 D의 과정에 따라서, 단계 B로부터의 상기 생성물(327 mg, 0.72 mmol) 및 다이옥산 중 HCl(4M, 5 mL)은 표제 화합물을 회백색 고체로서 제공하였다(194 mg, 76%). M.P. 200-203℃; MS m/z 358.2 [M+H]+; 1H NMR (DMSO-d 6, 500 MHz) δ 8.80 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.72 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.30-8.26 (m, 2H), 8.22 (d, J = 1.6 Hz, 1H ), 7.77 (d, J = 1.6 Hz, 2H), 7.09 (s, 1H), 6.62 (s, 1H), 4.11 (s, 3H), 3.46-3.44 (m, 2H), 2.98-2.96 (m, 2H), 2.43-2.39 (m, 2H).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을, 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 치환함으로써, 실시예 37에 따라 제조할 수 있다.
실시예 38
화합물 342의 제조
단계 A: 실시예 9 단계 G의 과정에 따라서, 2-아미노-5-브로모-피리딘(415 mg, 2.4 mmol), 에틸 3-(4,6-다이메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-3-옥소프로파노에이트(520 mg, 2.0 mmol) 및 PPTs(25 mg, 0.1 mmol)는 2-(4,6-다이메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-7-브로모-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온을 황색 고체로서 제공하였다(498 mg, 67%). MS m/z 370.2 [M+H]+, 372.2 [M+2+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 8.99 - 9.09 (1H, m), 8.53 - 8.62 (1H, m), 8.08 - 8.18 (1H, m), 7.68 - 7.75 (1H, m), 7.55 - 7.63 (1H, m), 7.01 - 7.09 (1H, m), 2.74 (3H, s), 2.44 (3H, s).
단계 B: 실시예 22 단계 C의 과정에 따라서, 아세토니트릴(3 mL) 중 7-브로모-2-(4,6-다이메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(498 mg, 1.3 mmol), tert-부틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(482 mg, 1.56 mmol), 칼륨 카본에이트(538 mg, 3.9 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2(95 mg, 0.13 mmol)는 tert-부틸 4-(2-(4,6-다이메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트를 회백색 고체로서 제공하였다(0.57 g, 84%). MS m/z 473.5 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 8.80 - 8.89 (1H, m), 8.53 - 8.61 (1H, m), 8.23 - 8.32 (1H, m), 7.71 - 7.79 (1H, m), 7.55 - 7.61 (1H, m), 6.99 - 7.04 (1H, m), 4.03 - 4.14 (2H, m), 3.55 - 3.65 (2H, m), 2.74 (3H, s), 2.53 - 2.58 (2H, m), 2.43 (3H, s), 1.44 (9H, s).
단계 C: 실시예 22 단계 D의 과정에 따라서, CH2Cl2(4 mL) 중 tert-부틸 4-(2-(4,6-다이메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트, HCl(2 mL, 다이옥산 중 4N)은 표제 화합물을 회백색 고체로서 제공하였다(234 mg, 84%). M.P. 207-210℃; MS m/z 373.4 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 8.80 (1H, s), 8.55 - 8.60 (1H, m), 8.27 - 8.32 (1H, m), 7.73 - 7.78 (1H, m), 7.58 - 7.63 (1H, m), 7.00 - 7.05 (1H, m), 6.57 - 6.65 (1H, m), 3.42 - 3.47 (2H, m), 2.93 - 2.98 (2H, m), 2.72 - 2.76 (2H, m), 2.44 (3H, s), 2.39 (3H, s).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을, 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 치환함으로써, 실시예 38에 따라 제조할 수 있다.
실시예 39
화합물 629의 제조
(R)-2-(4-에틸-6-메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-7-(3-메틸피페라진-1-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(48 mg, 0.12 mmol, 실시예 9에 따라 제조됨), 폼알데하이드(0.039 mL, 0.48 mmol, 물 중 37%) 및 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(51 mg, 0.24 mmol)의 혼합물을 다이클로로메탄(1 mL)에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 다이클로로메탄으로 희석하고, 나트륨 바이카본에이트로 중화시켰다. 유기물을 건조하고, 농축하고 0-5% MeOH/CH2Cl2로 크로마토그래피하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(45 mg, 90%). M.P. 257-259℃; MS m/z 418.5 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 8.56 (1H, s), 8.25 - 8.26 (1H, m), 8.12 - 8.14 (1H, m), 7.72 - 7.74 (1H, m), 7.55 (1H, s), 6.95 (1H, s), 3.60 - 3.65 (2H, m), 3.08 (2H, q, J = 7.6 Hz), 2.84 - 2.89 (2H, m), 2.43-2.52 (2H, m, DMSO-d 6 에 의해 불명료함), 2.45 (3H, s), 2.29 - 2.31 (1H, m), 2.24 (3H, s), 1.33 (3H, t, J = 7.6 Hz ), 1.91 (3H, d, J = 6.2 Hz).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을, 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 치환함으로써, 실시예 39에 따라 제조할 수 있다.
실시예 40
화합물 625 및 화합물 626
단계 A: 에틸 4-클로로-6-메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-카복실레이트(2.39 g, 10 mmol, 실시예 9 단계 C에서 제조됨) 및 나트륨 메톡사이드(60 mL, 30 mmol, MeOH 중 0.5M)의 혼합물을 30℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하여 대부분의 메탄올을 제거하고, 물로 희석하고, 6N HCl로 중화시켰다. 백색 고체를 침전시키고, 여과하고, 물 및 CH3CN으로 세척하고, 건조하여 에틸 4-메톡시-6-메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-카복실레이트를 백색 고체로서 수득하였다(1.387 g, 62%). MS m/z 222.2 [M-CH3+H]+.
단계 B: 실시예 9 단계 E의 과정에 따라서, tert-부틸 아세테이트(1.6 mL, 12.3 mmol), LDA(10.2 mL, 15.4 mmol, THF 중 1.5M) 및 에틸 4-메톡시-6-메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-카복실레이트(1.387 g, 6.2 mmol)는 tert-부틸 3-(4-메톡시-6-메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-3-옥소프로파노에이트를 오일로서 제공하였다(1.35 g, 72%). MS m/z 306.3 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 8.35 (1H, s), 7.27 (1H, s) 4.05 (3H, s), 4.01 (2H, s), 2.36 (3H, s), 1.38 (9H, s).
단계 C: 실시예 9 단계 F의 과정에 따라서, tert-부틸 3-(4-메톡시-6-메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-3-옥소프로파노에이트(1.35 g, 4.43 mmol) 및 EtOH(10 mL)는 에틸 3-(4-메톡시-6-메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-3-옥소프로파노에이트를 황색을 띤 고체로서 제공하고, 이는 추가 정제 없이 후속 단계에 직접 사용되었다. MS m/z 278.3 [M+H]+.
단계 D: m-자일렌(2.2 mL) 중 에틸 3-(4-메톡시-6-메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-3-옥소프로파노에이트(약 4.43 mmol), 2-아미노-5-플루오로-피리딘(0.596 g, 5.3 mmol), PPTs(100 mg, 0.4 mmol) 및 테트라에틸 오르토실리케이트(1.0 mL, 4.43 mmol)의 혼합물을 130℃에서 가열하였다. 15시간 후, 혼합물을 실온까지 냉각하고, CH2Cl2로 세척하여 7-플루오로-2-(4-메톡시-6-메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온을 황색 고체로서 수득하였다(1.015 g, 70%). MS m/z 326.3 [M+H]+.
단계 E: DMA(0.6 mL) 중 7-플루오로-2-(4-메톡시-6-메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(98 mg, 0.30 mmol) 및 N-메틸-피페라진(150 mg, 1.5 mmol)의 혼합물을 130℃에서 가열하였다. 6시간 후, 혼합물을 실온까지 냉각하고, 5% MeOH/CH2Cl2 및 10% 3.5N NH3(MeOH/CH2Cl2 중)에 의해 크로마토그래피하여 화합물 625(12 mg, 10%) 및 화합물 626(8.5 mg, 7%)을 각각 황색 고체로서 수득하였다.
화합물 625: M.P. 242-244℃; MS m/z 406.5 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.33 - 8.38 (1H, m), 8.24 - 8.30 (1H, m), 8.09 - 8.15 (1H, m), 7.70 - 7.74 (1H, m), 7.34 - 7.39 (1H, m), 6.92 - 6.96 (1H, m), 4.07 (3H, s), 3.21 - 3.29 (4H, m), 2.5 (4H, m, DMSO-d 6 에 의해 불명료함), 2.37 (3H, s), 2.26 (3H, s).
화합물 626: M.P. 280-283℃; MS m/z 392.4 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 11.4 (1H, s), 8.24 - 8.28 (1H, m), 8.09 - 8.14 (1H, m), 7.70 - 7.75 (1H, m), 7.63 - 7.67 (1H, m), 7.48 (1H, s), 6.88 (1H, s), 3.22 - 3.29 (4H, m), 2.51 - 2.56 (4H, m), 2.24 - 2.30 (3H, s), 2.15 (3H, s).
실시예 41
화합물 688의 제조
단계 A: 에틸 4-클로로-6-메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-카복실레이트(0.956 g, 4 mmol, 실시예 9 단계 C에서 제조됨), 다이메틸아민(2.1 mL, 4.2 mmol, THF 중 2.0M) 및 Et3N(0.84 mL, 6.0 mmol)의 혼합물을 60℃에서 가열하였다. 15시간 후, 혼합물을 농축하고, 잔사를 EtOAc에 용해시키고, 물로 세척하고, 건조하고, 농축하여 에틸 4-(다이메틸아미노)-6-메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-카복실레이트를 회백색 고체로서 수득하였다(0.99 g, 99%). MS m/z 249.3 [M+H]+.
단계 B: -20℃의 THF(30 mL) 중 에틸 4-(다이메틸아미노)-6-메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-카복실레이트(0.99 g, 4.0 mmol) 및 EtOAc(1.95 mL, 20 mmol)의 용액에 LiHMDS(11.1 mL, 10 mmol, THF 중 0.9M)를 첨가하였다. 1시간 후, 혼합물을 포화 NH4Cl로 급랭시키고, EtOAc로 추출하였다. 유기물을 농축하고 2% MeOH/DCM에 의해 크로마토그래피하여 에틸 3-(4-(다이메틸아미노)-6-메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-3-옥소프로파노에이트를 연황색 오일로서 수득하였다(0.48 g, 40%). MS m/z 291.3 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 7.73 (1H, s), 7.05 (1H, s), 5.43 (2H, s), 3.96 (2H, q, J = 7.0 Hz), 3.28 (6H, s), 2.20 (3H, s), 1.16 (3H, t, J = 7.0 Hz).
단계 C: 실시예 40 단계 D의 과정에 따라서, m-자일렌(0.8 mL) 중 에틸 3-(4-(다이메틸아미노)-6-메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-3-옥소프로파노에이트(0.48 g, 1.6 mmol), 2-아미노-5-플루오로-피리딘(179 mg, 1.6 mmol), PPTs(40 mg, 0.16 mmol) 및 테트라에틸 오르토실리케이트(0.36 mL, 1.6 mmol)는 2-(4-(다이메틸아미노)-6-메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-7-플루오로-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온을 황색 고체로서 제공하였다(0.39 g, 72%). MS m/z 339.2 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 8.92 - 9.00 (1H, m), 8.06 - 8.18 (1H, m), 7.91 - 7.94 (1H, m), 7.85 - 7.91 (1H, m), 7.55 - 7.61 (1H, m), 6.98 - 7.08 (1H, m), 3.36 (6H, s), 2.25 (3H, s).
단계 D: DMA(0.5 mL) 중 7-플루오로-2-(4-메톡시-6-메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(50 mg, 0.15 mmol) 및 피페라진(86 mg, 1.0 mmol)의 혼합물을 150℃에서 가열하였다. 2시간 후, 혼합물을 실온까지 냉각하고, CH3CN으로 세척하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(60 mg, 98%). M.P. 245-248℃; MS m/z 405.4 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 8.23 - 8.28 (1H, m), 8.06 - 8.11 (1H, m), 7.89 - 7.92 (1H, m), 7.69 - 7.75 (1H, m), 7.50 - 7.55 (1H, m), 6.92 (1H, s), 3.35 (6H, s), 3.12 - 3.19 (4H, m), 2.87 - 2.92 (4H, m), 2.80 (1H, s), 2.24 (3H, s).
실시예 42
화합물 694의 제조
단계 A: 다이클로로에탄(1 mL) 중 2-(4-에틸-6-메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-7-(피페리딘-4-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(78 mg, 0.2 mmol, 실시예 38 및 24의 과정에 따라 제조됨) 및 2,2-다이메틸-1,3-다이옥산-5-온(72 mg, 0.5 mmol, 90% 기술 등급(tech grade))의 혼합물에 NaBH(OAc)3(106 mg, 0.5 mmol) 및 1 점적의 AcOH를 첨가하였다. 혼합물을 60℃에서 교반하였다. 1시간 후, 혼합물을 포화 NaHCO3으로 급랭시키고, CH2Cl2로 추출하고, 농축하고, 크로마토그래피(2-5% MeOH/CH2Cl2)하여 7-(1-(2,2-다이메틸-1,3-다이옥산-5-일)피페리딘-4-일)-2-(4-에틸-6-메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온을 백색 고체로서 수득하였다(70 mg, 70%). MS m/z 503.5 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 8.75 - 8.82 (1H, m), 8.54 - 8.61 (1H, m), 8.00 - 8.10 (1H, m), 7.72 - 7.79 (1H, m), 7.58 - 7.63 (1H, m), 6.99 - 7.03 (1H, m), 3.86 - 3.95 (2H, m), 3.71 - 3.81 (2H, m), 3.06 - 3.15 (2H, m), 3.00 - 3.06 (2H, m), 2.70 - 2.80 (1H, m), 2.53 - 2.59 (1H, m), 2.45 (3H, s), 2.28 - 2.38 (2H, m), 1.82 - 1.90 (2H, m), 1.59 - 1.71 (2H, m), 1.32 - 1.37 (6H, m), 1.27 (3H, s).
단계 B: THF(10 mL) 중 7-(1-(2,2-다이메틸-1,3-다이옥산-5-일)피페리딘-4-일)-2-(4-에틸-6-메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(50 mg, 0.1 mmol)의 혼합물에 HCl(1.3 mL, 2.6 mmol, 2N)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 교반하였다. 15시간 후, 혼합물을 MeOH 중 7N NH3 과량으로 처리하고, 농축하고, 크로마토그래피(10% 2.5N NH3(MeOH/CH2Cl2 중))하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(45 mg, 97%). M.P. 228-230℃; MS m/z 463.6 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 8.77 - 8.84 (1H, m), 8.54 - 8.61 (1H, m), 8.02 - 8.10 (1H, m), 7.90 - 7.94 (1H, m), 7.74 - 7.79 (1H, m), 7.57 - 7.63 (1H, m), 6.99 - 7.05 (1H, m), 4.21 - 4.31 (2H, m), 3.42 - 3.59 (4H, m), 3.10 (2H, q, J = 7.5 Hz), 2.89 - 3.00 (2H, m), 2.70-2.72 (1H, m), 2.57 - 2.62 (1H, m), 2.45 (3H, s), 1.79 - 1.89 (2H, m), 1.63 - 1.75 (2H, m), 1.34 (3H, t, J = 7.5 Hz).
실시예 43
화합물 662의 제조
DMF(1 mL) 중 2-(4,6-다이메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-7-(피페라진-1-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(56 mg, 0.15 mmol, 실시예 24의 과정에 따라 제조됨), 1-브로모-2-플루오로에탄(23 mg, 0.18 mmol) 및 K2CO3(23 mg, 0.18 mmol)의 혼합물을 80℃에서 가열하였다. 7시간 후, 혼합물을 실온까지 냉각하고, 크로마토그래피(5% MeOH/CH2Cl2)하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(29 mg, 44%). M.P. 197-199℃; MS m/z 421.4 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 8.79 - 8.85 (1H, m), 8.55 - 8.60 (1H, m), 8.05 - 8.11 (1H, m), 7.73 - 7.80 (1H, m), 7.57 - 7.62 (1H, m), 7.02 (1H, s), 4.59 - 4.65 (1H, m), 4.48 - 4.55 (1H, m), 3.01 - 3.07 (2H, m), 2.69-2.75 (1H, m), 2.74 (3H, s), 2.68 - 2.72 (1H, m), 2.62 - 2.67 (1H, m), 2.43 (3H, s), 2.12 - 2.21 (2H, m), 1.85-1.88 (2H, m), 1.70-1.88 (2H, m).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을, 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 치환함으로써, 실시예 43에 따라 제조할 수 있다.
실시예 44
화합물 798의 제조
파트 1 단계 A: 에터 중 2,6-다이메틸피페리딘-4-온(1.27 g, 10 mmol, 약 1.5/1 비의 트랜스/시스 이성질체의 혼합물) 및 다이-tert-부틸 다이카본에이트(2.40 g, 11 mmol)의 용액에 NaOH(11 mL, 11 mmol, 물 중 1N)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 교반하였다. 36시간 후, 혼합물을 에터로 추출하였다. 유기물을 농축하고 크로마토그래피(5-30% EtOAc/헥산)하여 약 1.2/1 비의 트랜스/시스 혼합물로서 tert-부틸 2,6-다이메틸-4-옥소피페리딘-1-카복실레이트의 혼합물(1.99 g, 87%, 투명한 오일)을 수득하였다. 밤새 방치 시, 고체가 오일로부터 침전되고, 이를 여과하고, 에터로 세척하여 tert-부틸 트랜스-2,6-다이메틸-4-옥소피페리딘-1-카복실레이트(0.376 g, 16%)(1H NMR에 의해 95% 트랜스)를 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 4.33 - 4.45 (2H, m), 2.80 - 2.90 (2H, m), 2.33 - 2.44 (2H, m), 1.50 (9H, s), 1.26 (6H, d, J = 6.9 Hz). 1H NMR은 시스 및 트랜스-이성질체의 혼합물 중 트랜스-이성질체의 것과 일치한다(US 200839454, JOC, 1993, 58, 1109-1117).
파트 1 단계 B: -78℃의 THF(7 mL) 중 tert-부틸 트랜스-2,6-다이메틸-4-옥소피페리딘-1-카복실레이트(266 mg, 1.17 mmol)의 용액에 NaHMDS를 첨가하였다. 1시간 후, THF(3 mL) 중 N-페닐-비스(트라이플루오로메탄설폰이미드)(0.50 g, 1.4 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 포화 NH4Cl로 급랭시키고, 에터로 추출하였다. 유기물을 농축하고 1% EtOAc/헥산에 의해 크로마토그래피하여 tert-부틸-트랜스-2,6-다이메틸-4-(트라이플루오로메틸설폰일-옥시)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(0.415 g, 98%)를 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 5.77 - 5.85 (1H, m), 4.29 - 4.44 (2H, m), 2.81 - 2.90 (1H, m), 2.15 - 2.23 (1H, m), 1.48 (9H, s), 1.37 (3H, d, J = 6.6 Hz), 1.24 (3H, d, J = 6.6 Hz).
파트 2 단계 A: 실시예 14 파트 2의 과정에 따라서, 다이옥산(6 mL) 중 7-브로모-2-(4,6-다이메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(0.74 g, 2.0 mmol, 실시예 38 단계 A에서 제조됨), KOAc(590 mg, 6.0 mmol), 비스(핀콜라토)다이보론(560 mg, 2.2 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(82 mg, 0.1 mmol)는 2-(4,6-다이메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-일보론산을 제공하였다. 조질 중간체를 후속 단계에 직접 사용하였다. MS m/z 336.3 [M+H]+.
파트 2 단계 B: 실시예 14 파트 3 단계 A의 과정에 따라서, 아세토니트릴(10 mL) 중 2-(4,6-다이메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-일보론산(약 2 mmol), tert-부틸-트랜스-2,6-다이메틸-4-(트라이플루오로메틸설폰일-옥시)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(0.415 g, 1.15 mmol), 칼륨 카본에이트(3.5 mL, 2.0M) 및 Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(82 mg, 0.1 mmol)는 tert-부틸 4-(2-(4,6-다이메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-일)-트랜스-2,6-다이메틸-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트를 황색 고체로서 수득하였다(0.5 g, 87%). MS m/z 501.4 [M+H]+.
파트 2 단계 C: 실시예 38 단계 C의 과정에 따라서, 다이옥산(4M, 0.5 mL) 중 tert-부틸 4-(2-(4,6-다이메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-일)-트랜스-2,6-다이메틸-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(50 mg, 0.1 mmol) 및 HCl은 표제 화합물을 황색 고체로서 제공하였다(25 mg, 62%). M.P. 228-231℃; MS m/z 401.3 [M+H]+; 1HNMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 8.77 - 8.82 (1H, m), 8.54 - 8.58 (1H, m), 8.25 - 8.32 (1H, m), 7.70 - 7.76 (1H, m), 7.57 (1H, s), 7.02 (1H, s), 6.50 - 6.58 (1H, m), 3.64 - 3.75 (1H, m), 3.08 - 3.18 (1H, m), 2.73 (3H, s), 2.41-2.44 (1H, m), 2.43 (3H, s), 1.99 - 2.08 (1H, m), 1.21 (3H, d, J = 6.6 Hz), 1.16 (3H, d, J = 6.3 Hz).
실시예 45
화합물 764의 제조
단계 A: 실시예 9 단계 H의 과정에 따라서, 2-(4,6-다이메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-7-플루오로-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(618 mg, 2.0 mmol), (R)-tert-부틸 피롤리딘-3-일메틸카밤에이트(481 mg, 2.4 mmol) 및 DMA(2.0 mL)는 (S)-tert-부틸 (1-(2-(4,6-다이메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-일)피롤리딘-3-일)메틸카밤에이트(0.90 g, 92%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS m/z 490.5 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 8.50 - 8.59 (1H, m), 7.97 - 8.03 (1H, m), 7.72 - 7.82 (2H, m), 7.48 - 7.57 (1H, m), 7.04-7.08 (1H, m), 6.87 - 6.94 (1H, m), 3.41 - 3.50 (2H, m), 3.35 - 3.41 (1H, m), 2.97 - 3.16 (3H, m), 2.73 (3H, s), 2.47-2.51 (1H, m, DMSO-d 6 에 의해 불명료함), 2.43 (3H, s), 2.04 - 2.16 (1H, m), 1.71 - 1.83 (1H, m), 1.39 (9H, s).
단계 B: 실시예 38 단계 C의 과정에 따라서, (S)-tert-부틸 (1-(2-(4,6-다이메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-일)피롤리딘-3-일)메틸카밤에이트(0.39 g, 0.8 mmol), HCl(2.0 mL, 다이옥산 중 4M) 및 CH2Cl2(10 mL)는 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(0.19 g, 62%). M.P. 244-246℃; MS m/z 390.4 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 8.52 - 8.57 (1H, m), 7.96 - 8.03 (1H, m), 7.73 - 7.80 (2H, m), 7.52 (1H, s), 6.90 (1H, s), 3.42 - 3.50 (2H, m), 3.34 - 3.41 (1H, m), 3.10 - 3.18 (1H, m), 2.73 (3H, s), 2.59 - 2.70 (2H, m), 2.43 (3H, s), 2.34 - 2.42 (1H, m), 2.09 - 2.16 (1H, m), 1.73 - 1.82 (1H, m).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을, 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 치환함으로써, 실시예 45에 따라 제조할 수 있다.
실시예 46
화합물 294의 제조
단계 A: 2-클로로-7-(3-플루오로-4-메톡시페닐)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(182 mg, 0.6 mmol)(실시예 30 단계 A에 따라 제조됨)을 tert-부틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(222 mg, 0.72 mmol), 테트라키스(트라이페닐포스핀) 팔라듐(0)(67 mg, 0.06 mmol), CH3CN(2 mL) 및 수성 K2CO3(1M, 2 mL)과 합하였다. 혼합물을 80℃에서 18시간 동안 가열하였다. 실온까지 냉각한 후, 혼합물을 여과하여 tert-부틸 4-(7-(3-플루오로-4-메톡시페닐)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트를 후속 단계에 직접 사용한 조질 생성물로서 수득하였다.
단계 B: 단계 A로부터의 tert-부틸 4-(7-(3-플루오로-4-메톡시페닐)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트를 TFA(2 mL)에 용해시켰다. 10분 후, 휘발성 물질을 질소 스트림으로 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2 및 수성 K2CO3(1M)에 분할하였다. 유기 층을 CH2Cl2 중 0-10% MeOH(3% NH3)로 용리하는 실리카 겔 상에 적재하여 표제 화합물을 백색 분말로서 수득하였다(150 mg, 72%). M.P. 188-192℃; MS m/z 352.1 [M+H]+; 1H NMR (DMSO-d 6, 500 MHz): δ 9.05 (1H, d, J = 2.3 Hz), 8.28 (1H, dd, J = 9.4 Hz, 2.2 Hz), 7.76 (1H, dd, J = 12.7 Hz, 2.3 Hz), 7.70 (1H, d, J = 9.3 Hz), 7.63 (1H, m), 7.33 (1H, t, J = 8.8 Hz), 7.14 (1H, m), 6.44 (1H, s), 3.92 (3H, s), 3.46 (2H, m), 2.91 (2H, m), 2.39 (2H, m).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을, 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 치환함으로써, 실시예 46에 따라 제조할 수 있다.
실시예 47
화합물 714의 제조
단계 A: 3-브로모-2-니트로피리딘(2.0 g, 10 mmol)을 THF(20 mL)에 용해시켰다. 2-다이사이클로헥실포스피노-2',6'-다이메톡시바이페닐(205 mg, 0.5 mmol) 및 팔라듐(II) 아세테이트(113 mg, 0.5 mmol)를 상기 혼합물에 첨가하였다. 사이클로프로필아연 브로마이드(15 mmol, THF 중 0.5M)를 상기 혼합물에 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, CH2Cl2 중 0-5% EtOAc로 용리하는 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여 3-사이클로프로필-2-니트로피리딘(1.1 g, 67%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS m/z 165.2 [M+H]+.
단계 B: 3-사이클로프로필-2-니트로피리딘(1.1 g, 6.7 mmol)을 MeOH(150 mL)에 용해시켰다. 용액이 H2(30 바) 하에 30℃에서 10% Pd/C를 함유하는 카트리지 위를 통과하도록 하였다. 용액을 농축하여 3-사이클로프로필-2-아미노피리딘(898 mg, 정량적)을 무색 오일로서 수득하였다. MS m/z 135.1 [M+H]+.
단계 C: 실시예 16 단계 A의 과정에 따라서, 3-사이클로프로필-2-아미노피리딘(898 mg, 6.7 mmol), N-브로모석신이미드(1.3 g, 7.4 mmol), CH3CN(15 mL) 및 클로로아세톤(0.81 mL, 10 mmol)은 6-브로모-8-사이클로프로필-2-메틸이미다조[1,2-a]피리딘을 황갈색 분말로서 수득하였다(255 mg, 15%). MS m/z 251.1 [M+H]+, 253.1 [M+2+H]+.
단계 D: 실시예 14 파트 2의 과정에 따라서, 6-브로모-8-플루오로-2-메틸이미다조[1,2-a]피리딘(255 mg, 1.0 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-바이(1,3,2-다이옥사보롤란)(380 mg, 1.5 mmol), [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]-다이클로로팔라듐(II)(41 mg, 0.05 mmol) 및 칼륨 아세테이트(196 mg, 2 mmol)는 8-사이클로프로필-2-메틸-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)이미다조[1,2-a]피리딘을 제공하였다. 조질 생성물을 후속 단계에 직접 사용하였다.
단계 E: 실시예 14 파트 3 단계 A의 과정에 따라서, 단계 D로부터의 조질 생성물인 8-사이클로프로필-2-메틸-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)이미다조[1,2-a]피리딘 및 2-클로로-7-플루오로-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(1 mmol, 실시예 14 파트 1 단계 B에서 제조됨), 테트라키스(트라이페닐포스핀) 팔라듐(0)(112 mg, 0.1 mmol), CH3CN(4 mL) 및 수성 K2CO3(1M, 4 mL)은 2-(8-사이클로프로필-2-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일)-7-플루오로-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온을 황갈색 분말로서 수득하였다(330 mg, 99%). MS m/z 335.2 [M+H]+.
단계 F: 실시예 14 파트 3 단계 B의 과정에 따라서, 2-(8-사이클로프로필-2-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일)-7-플루오로-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(50 mg, 0.15 mmol) 및 피페라진(65 mg, 0.75 mmol)은 표제 화합물을 황갈색 분말로서 제공하였다(38 mg, 63%). M.P. 274-277℃; MS m/z 401.4 [M+H]+; 1H NMR (DMSO-d 6, 500 MHz): δ 9.14 (1H, d, J = 1.7 Hz), 8.21 (1H, d, J = 2.9 Hz), 8.07 (1H, dd, J = 9.7 Hz, 2.8 Hz), 7.79 (1H, d, J = 1.0 Hz), 7.67 (1H, d, J = 9.2 Hz), 7.43 (1H, m), 6.99 (1H, s), 3.14 (4H, m), 2.89 (4H, m), 2.48 (1H, m), 2.37 (3H, s), 2.35 (1H, br s), 1.13 (2H, m), 1.04 (2H, m).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을, 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 치환함으로써, 실시예 47에 따라 제조할 수 있다.
실시예 48
화합물 674의 제조
단계 A: 2-아미노니코틴산(4.8 g, 35 mmol)을 THF(100 mL)에 현탁하였다. 보란 THF 착물(40 mmol, THF 중 1M)을 상기 혼합물에 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 과량의 시약을 수성 칼륨 하이드록사이드(2M, 15 mL)의 첨가에 의해 급랭시켰다. 혼합물을 10분 동안 격렬하게 교반하였다. 유기 층을 수집하고, 농축하였다. 잔사를 CH2Cl2 중 0-10% MeOH로 용리하는 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여 (2-아미노피리딘-3-일)메탄올(1.0 g, 23%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS m/z 125.1 [M+H]+.
단계 B: 실시예 16 단계 A의 과정에 따라서, (2-아미노피리딘-3-일)메탄올(1.0 g, 8 mmol), N-브로모석신이미드(1.57 g, 8.8 mmol), CH3CN(16 mL) 및 클로로아세톤(0.81 mL, 10 mmol)은 (6-브로모-2-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)메탄올을 황갈색 분말로서 수득하였다(82 mg, 4%). MS m/z 241.1 [M+H]+, 243.1 [M+2+H]+.
단계 C: 실시예 14 파트 2의 과정에 따라서, 6-브로모-8-플루오로-2-메틸이미다조[1,2-a]피리딘(85 mg, 0.35 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-바이(1,3,2-다이옥사보롤란)(133 mg, 0.53 mmol), [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]-다이클로로팔라듐(II)(30 mg, 0.035 mmol) 및 칼륨 아세테이트(69 mg, 0.7 mmol)는 (2-메틸-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)메탄올을 제공하였다. 조질 생성물을 후속 단계에 직접 사용하였다.
단계 D: 실시예 14 파트 3 단계 A의 과정에 따라서, 단계 C로부터의 조질 생성물인 (2-메틸-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)메탄올 및 2-클로로-7-플루오로-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(0.35 mmol, 실시예 14 파트 1 단계 B에서 제조됨), 테트라키스(트라이페닐포스핀) 팔라듐(0)(39 mg, 0.035 mmol), CH3CN(2 mL) 및 수성 K2CO3(1M, 2 mL)은 7-플루오로-2-(8-(하이드록시메틸)-2-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온을 황갈색 분말로서 제공하였다(100 mg, 88%). MS m/z 325.2 [M+H]+.
단계 E: 실시예 14 파트 3 단계 B의 과정에 따라서, 7-플루오로-2-(8-(하이드록시메틸)-2-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(120 mg, 0.15 mmol) 및 피페라진(65 mg, 0.75 mmol)은 표제 화합물을 황갈색 분말로서 제공하였다(120 mg, 99%). M.P. >320℃; MS m/z 391.3 [M+H]+; 1H NMR (DMSO-d 6, 500 MHz): δ 9.23 (1H, s), 8.24 (1H, d, J = 2.6 Hz), 8.07 (1H, dd, J = 9.7 Hz, 2.6 Hz), 7.96 (1H, s), 7.79 (1H, s), 7.73 (1H, d, J = 6.7 Hz), 6.87 (1H, s), 4.86 (2H, s), 3.14 (4H, m), 2.89 (4H, m), 2.37 (3H, s).
실시예 49
화합물 353의 제조
단계 A: 에틸 3-(3,4-다이메톡시페닐)-3-옥소프로파노에이트(907 mg, 3.6 mmol)를 메탄올(2 mL)에 용해시켰다. p-톨루엔설폰산 일수화물(34.2 mg, 0.18 mmol)을 상기 용액에 첨가하고, 이어서 트라이메틸오르토폼에이트(0.59 mL, 5.4 mmol)를 첨가하였다. 용액을 80℃에서 1시간 동안 교반하였다. 휘발성 물질을 질소 스트림으로 제거하였다. 5-브로모피리미딘-2-아민(550 mg, 3.1 mmol) 및 다이페닐 에터(2 mL)를 조질 물질에 첨가하였다. 혼합물을 170℃에서 10분 동안 가열하였다. 반응 혼합물이 플래쉬 실리카 컬럼(33% 헥산/CH2Cl2)을 통과하게 하여 에틸-3-(-5-브로모피리미딘-2(1H)-일리덴아미노)-3-(3,4-다이메톡시페닐)아크릴레이트를 황색 고체로서 수득하였다. MS m/z 408.0 [M+H]+, 410.0 [M+2+H]+.
단계 B: 다이페닐 에터(2 mL)를 에틸-3-(-5-브로모피리미딘-2(1H)-일리덴아미노)-3-(3,4-다이메톡시페닐)아크릴레이트에 첨가하였다. 반응 생성물을 1.5시간 동안 220℃까지 가열하였다. 혼합물을 크로마토그래피(100% CH2Cl2)로 정제하여 7-브로모-2-(3,4-다이메톡시페닐)-4H-피리미도[1,2-a]피리미딘-4-온(314 mg, 2 단계에 대해 28%)을 황색 고체로서 수득하였다. MS m/z 361.9 [M+H]+, 363.9 [M+2+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6 ): δ 9.30 (1H, d, J = 2.7 Hz), 9.20 (1H, d, J = 2.9 Hz), 7.88 (1H, dd, J = 8.5 Hz, 2.6 Hz), 7.79 (1H, d, J = 2.2 Hz), 7.15 (1H, s), 7.11 (1H, d, J = 8.5 Hz), 3.88 (3H, s), 3.85 (3H, s).
단계 C: 7-브로모-2-(3,4-다이메톡시페닐)-4H-피리미도[1,2-a]피리미딘-4-온(53.7 mg, 0.15 mmol), tert-부틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(50.5 mg, 0.016 mmol), Pd(dppf)Cl2(11 mg, 0.015 mmol), K2CO3(62.2 mg, 0.45 mmol) 및 ACN(1 mL)의 혼합물을 탈기시키고, 이어서 N2 하에 80℃에서 밤새 가열하였다. 휘발성 물질을 제거하고, 잔사를 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. MS m/z 465.4 [M+H]+.
단계 D: CH2Cl2/TFA(0.5 mL/0.5 mL) 중 tert-부틸 4-(2-(3,4-다이메톡시페닐)-4-옥소-4H-피리미도[1,2-a]피리미딘-7-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트의 용액을 0℃에서 2시간 동안 교반하였다. 회전 증발에 의해 대부분의 TFA 및 CH2Cl2를 제거한 후, 빙랭 포화 NaHCO3을 반응 혼합물에 첨가하였다. 혼합물을 CH2Cl2로 추출하였다. 유기 층을 MgSO4 상에서 건조하고, 농축하고, 크로마토그래피(5% MeOH/CH2Cl2)하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다. MS m/z 365.1 [M+H+].
실시예 50
화합물 486의 제조
단계 A: DMF(10 mL) 중 2-클로로-7-플루오로-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(995 mg, 5 mmol, 실시예 14 파트 1에서 제조됨), CuI(19.0 mg, 0.1 mmol), PdCl2(PPh3)2(70.2 mg, 0.1 mmol), 에틴일트라이메틸실란(2.1 mL, 15 mmol), 트라이에틸아민(2.1 mL, 15 mmol)의 혼합물을 탈기시키고, 이어서, N2 하에 50℃에서 밤새 가열하였다. 휘발성 물질을 제거하고, 조질 7-플루오로-2-((트라이메틸실릴)에틴일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온을 후속 단계에 직접 사용하였다. MS m/z 261.1 [M+H+].
단계 B: 칼륨 카본에이트(1.0 g, 7.5 mmol)를 MeOH(33 mL) 중 조질 7-플루오로-2-((트라이메틸실릴)에틴일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 회전 증발에 의해 MeOH를 제거한 후, 물을 첨가하였다. 침전물을 여과하고, 실리카 크로마토그래피(8% EtOAc/CH2Cl2)로 정제하여 2-에틴일-7-플루오로-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(192.1 mg, 2 단계에 대해 20%)을 황색 고체로서 수득하였다. MS m/z 189.1 [M+H+].
단계 C: DMF(1.7 mL) 중 2-에틴일-7-플루오로-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(192.1 mg, 1.0 mmol), 4-요오도-2,6-다이메틸피리딘-3-올(305.3 mg, 1.2 mmol), CuI(9.7 mg, 0.05 mmol), PdCl2(PPh3)2(35.8 mg, 0.05 mmol), 트라이에틸아민(288 μL, 2 mmol)의 혼합물을 탈기시키고, 이어서 N2 하에 40℃에서 밤새 가열하였다. 대부분의 DMF를 제거한 후, 물을 첨가하였다. 침전물을 여과하고, 크로마토그래피(14% EtOAC/CH2Cl2)로 정제하여 2-(5,7-다이메틸푸로[2,3-c]피리딘-2-일)-7-플루오로-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(126.3 mg, 41%)을 황색 고체로서 수득하였다. MS m/z 310.1 [M+H+].
단계 D: 피페라진(64.6 mg, 0.75 mmol)을 DMA(0.5 mL) 중 2-(5,7-다이메틸푸로[2,3-c]피리딘-2-일)-7-플루오로-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(46.4 mg, 0.15 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 120℃에서 2시간 동안 가열하였다. 대부분의 DMA를 제거한 후, CH3CN을 반응 혼합물에 첨가하였고, 침전물이 형성되었다. 침전물을 여과하고, 물로 세척하고, 건조하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(30 mg, 53%). M.P.198-200℃; MS m/z 376.3 [M+H+]; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6 ): δ 8.25 (1H, d, J = 2.5 Hz), 8.13 (1H, dd, J = 9.9 Hz, 2.5 Hz), 7.73 (1H, d, J = 9.8 Hz), 7.64 (1H, s), 7.41 (1H, s), 6.94 (1H, s), 3.17 (4H, m), 2.90 (4H, m), 2.71 (3H, s), 2.51 (3H, s), 2.07 (1H, s).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을, 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 치환함으로써, 실시예 50에 따라 제조할 수 있다.
실시예 51
화합물 603의 제조
단계 A: 아세토니트릴(8.0 mL) 중 5-브로모피리딘-2-아민(433 mg, 2.5 mmol), tert-부틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(928 mg, 3.0 mmol), PdCl2dppf(204 mg, 0.25 mmol), K2CO3(1.04 g, 7.5 mmol)의 혼합물을 탈기시키고, 이어서 80℃에서 밤새 교반하였다. 휘발성 물질을 제거하고, 잔사를 CH2Cl2 중 7% MeOH에 의해 크로마토그래피하여 tert-부틸 4-(6-아미노피리딘-3-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트를 연황색 오일로서 수득하였다(599 mg, 87%). MS m/z 276.3 [M+H]+.
단계 B: 메탄올(10 mL) 중 단계 A로부터의 생성물(599 mg, 2.2 mmol)의 용액을 파르(Parr) 진탕기(60 psi)에서 Pd/C(10%, 60 mg)에 의해 밤새 수소화시켰다. 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 증발시키고, DCM 중 7% MeOH에 의해 크로마토그래피하여 tert-부틸 4-(6-아미노피리딘-3-일)피페리딘-1-카복실레이트를 갈색 오일로서 수득하였다(600 mg, 99%). MS m/z 278.3 [M+H]+.
단계 C: THF(8.0 mL) 중에서의 단계 B로부터의 생성물(600 mg, 2.2 mmol) 및 비스(2,4,6-트라이클로로페닐)말론에이트(1.0 g, 2.2 mmol)의 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 여과하고, 고체를 DCM으로 세척하였다. 케이크를 수집하고, 건조하여 tert-부틸 4-(2-하이드록시-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-일)피페리딘-1-카복실레이트를 회백색 고체로서 수득하였다(455 mg, 63%). MS m/z 346.4 [M+H]+.
단계 D: NaH(60%, 62 mg, 1.6 mmol)를 실온에서 DMF(6 mL) 중 단계 C로부터의 생성물(455 mg, 1.3 mmol)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 15분 동안 교반하고, 이어서 N-페닐비스(트라이플루오로메탄설폰이미드)(511 mg, 1.4 mmol)를 하나의 분획으로 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 수성 후처리 하고, 이어서 CH2Cl2 중 3% MeOH로 정제하여 tert-부틸 4-(4-옥소-2-(트라이플루오로메틸설폰일-옥시)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-일)피페리딘-1-카복실레이트를 회백색 고체로서 수득하였다(521 mg, 84%).
단계 E: 다이옥산(2.0 mL) 중에서의 단계 D로부터의 생성물(300 mg, 0.62 mmol), 1-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-인다졸(142 mg, 0.81 mmol), PdCl2dppf(51 mg, 0.062 mmol), K3PO4(193 mg, 0.93 mmol)의 혼합물을 탈기시키고, 이어서 100℃에서 밤새 교반하였다. 휘발성 물질을 제거하고, 잔사를 CH2Cl2 중 10% MeOH에 의해 크로마토그래피하여 일부 불순물을 갖는 tert-부틸 4-(2-(1-메틸-1H-인다졸-5-일)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-일)피페리딘-1-카복실레이트(약 300 mg)를 수득하고, 이를 후속 단계에 직접 사용하였다. MS m/z 460.5 [M+H]+.
단계 F: 실시예 22 단계 D의 과정에 따라서, 단계 E로부터의 생성물(약 300 mg) 및 다이옥산 중 HCl(4M, 5 mL)은 표제 화합물을 백색 고체로서 제공하였다(196 mg, 2 단계에서 88%). M.P. 268-270℃; MS m/z 360.4 [M+H]+; 1H NMR (DMSO-d 6, 500 MHz) δ 8.75 (s, 1H), 8.70 (s, 1H), 8.27 (dd, J = 9.0 Hz, 1.6 Hz, 1H), 8.21 (s, 1H), 8.00 (dd, J = 9 Hz, 1.6 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 9 Hz, 2H), 7.06 (s, 1H), 4.10 (s, 3H), 3.06 (d, J = 10 Hz, 2H), 2.84-2.79 (m, 1H), 2.64-2.59 (m, 2H), 2.04 (bs, 1H), 1.81 (d, J = 10 Hz, 2H), 1.56-1.53 (m, 2H).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을, 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 치환함으로써, 실시예 51에 따라 제조할 수 있다.
실시예 52
화합물 769의 제조
단계 A: 7-브로모-2-(4,6-다이메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(270 mg, 0.73 mmol, 실시예 38 단계 A에서 제조됨), CuI(3.4 mg, 5%), PdCl2(PPh3)2(30 mg, 5%), 트라이에틸아민(1 mL) 및 DMF(1 mL)를 오븐 건조되고 아르곤 충전된 플라스크에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 아르곤으로 3회 퍼징하고, 이어서 DMF(1 mL) 중 tert-부틸 프로프-2-인일카밤에이트(0.14 g, 0.88 mmol)의 용액을 첨가하였다. 혼합물을 80℃에서 밤새 가열하고, 이어서 실온까지 냉각하였다. 물을 첨가한 후, 생성된 고체를 여과하고, 물 및 CH3CN으로 순차적으로 세척하여 tert-부틸 3-(2-(4,6-다이메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-일)프로프-2-인일카밤에이트(260 mg, 80%)를 수득하였다. MS m/z 445.2 [M+H]+.
단계 B: 실시예 22 단계 D의 과정에 따라서, 단계 A로부터의 생성물(100 mg, 0.23 mmol) 및 다이옥산 중 HCl(4M, 3 mL)은 7-(3-아미노프로프-1-인일)-2-(4,6-다이메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온을 회백색 고체로서 수득하였다(50 mg, 66%). MS m/z 345.4 [M+H]+.
단계 C: 단계 B로부터의 생성물(50 mg, 0.15 mmol)을 다이클로로메탄/메탄올(1:1, 2 mL) 중 Pd/C(10%, 5 mg)와 혼합하고, 1 대기압의 수소 하에 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 농축하고 CH2Cl2/MeOH(85/15)로 용리하는 실리카 컬럼 상에서 크로마토그래피하여 7-(3-아미노프로필)-2-(4,6-다이메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(45 mg, 89%)을 수득하였다. MS m/z 349.3 [M+H]+.
단계 D: 실시예 23의 과정에 따라서, 다이클로로메탄/메탄올(10:1, 1 mL) 중에서의 단계 B로부터의 생성물(45 mg, 0.13 mmol), 폼알데하이드(0.05 mL, 37%, 약 0.8 mmol) 및 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(50 mg, 0.24 mmol)는 표제 화합물을 백색 고체로서 제공하였다(20 mg, 41%). M.P.136-138℃; MS m/z 377.3 [M+H]+; 1H NMR (DMSO-d 6, 500 MHz) δ 8.84 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.58 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.00 (d, J = 9 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 9 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.02 (s, 1H), 2.79-2.75 (m, 5H), 2.45 (s, 3H), 2.25 (t, J = 10 Hz, 2H), 2.15 (bs, 6H), 1.83-1.76 (m, 2H).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을, 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 치환함으로써, 실시예 52에 따라 제조할 수 있다.
실시예 53
화합물 407의 제조
단계 A: 7-브로모-2-(3,4-다이메톡시페닐)-9-메틸-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(1.5 g, 4.0 mmol, 실시예 22 단계 A 및 B에 예시된 방식으로 제조됨), 1,4-다이옥사-8-아자스피로[4.5]데칸(660 μL, 5.05 mmol), S-Phos(140 mg, 0.34 mmol), Pd2(dba)3(92 mg, 0.1 mmol), Cs2CO3(3.0 g, 9.2 mmol) 및 DME(12 mL)의 혼합물을 아르곤 하에 90℃에서 3시간 동안 가열하였다. 이어서, 반응 혼합물을 CH2Cl2 및 아세톤의 용액에 현탁하고, 여과하였다. 여액을 진공 하에 농축하였다. 실리카 겔 크로마토그래피(1:1 CH2Cl2/EtOAc, 이어서 CH2Cl2 중 20% 아세톤)로 정제하고, 이어서 1:1 헥산/에터로 마쇄하여 2-(3,4-다이메톡시페닐)-9-메틸-7-(1,4-다이옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(878 mg, 50%)을 황색 고체로서 수득하였다. MS m/z 438.2 [M+H]+.
단계 B: CH2Cl2/다이옥산(1:1 v/v, 28 mL) 중 2-(3,4-다이메톡시페닐)-9-메틸-7-(1,4-다이옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(875 mg, 2.0 mmol)의 용액을 6N HCl(7 mL)로 처리하였다. 혼합물을 실온에서 20분 동안 교반한 후, 수성 K2CO3으로 염기성이 되게 하였다. 혼합물을 CH2Cl2로 추출하였다. 유기 층을 MgSO4 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 1:1 헥산/아세톤으로 마쇄하여 2-(3,4-다이메톡시페닐)-9-메틸-7-(4-옥소피페리딘-1-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(758 mg, 96%)을 황색 고체로서 수득하였다. MS m/z 394.3 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6 ): δ 8.27 (1H, d J = 2.5 Hz), 8.08 (1H, s), 7.85 (1H, dd, J = 8.5 Hz, 2.5 Hz), 7.81 (1H, m), 7.09 (1H, d, J = 8.5 Hz), 6.96 (1H, s), 3.88 (3H, s), 3.84 (3H, s), 3.67 (4H, t, J = 6 Hz), 2.64 (3H, s), 2.53 (4H, m, DMSO-d 6 에 의해 불명료함).
단계 C: 2-(3,4-다이메톡시페닐)-9-메틸-7-(4-옥소피페리딘-1-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(50 mg, 0.13 mmol), NaBH(OAc)3(65 mg, 0.31 mmol), DCE(500 μL) 및 n-프로필아민(40 μL, 0.49 mmol)의 혼합물을 70℃에서 15분 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 수성 K2CO3과 CH2Cl2 사이에 분할하였다. 유기 층을 진공 하에 농축하였다. 실리카 겔 크로마토그래피(CH2Cl2 중 10% MeOH, 이어서 9:1:0.1 CH2Cl2:MeOH:NH4OH)로 정제하여 표제 화합물(47 mg, 87%)을 황색 고체로서 수득하였다. M.P.178-184℃; MS m/z 437.5 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6 ): δ 8.17 (1H, d, J = 3 Hz), 8.00 (1H, m), 7.84 (1H, dd, J = 8.5 Hz, 2 Hz), 7.80 (1H, d, J = 2 Hz), 7.08 (1H, d, J = 8.5 Hz), 6.95 (1H, s), 3.88 (3H, s), 3.84 (3H, s), 3.67 (2H, d, J = 12.5 Hz), 2.84 (2H, t, J = 12.5 Hz), 2.61 (3H, s), 2.57 (1H, m), 2.54 (2H, m, DMSO-d 6 피크에 의해 불명료함), 1.95 (2H, d, J = 12.5 Hz), 1.41 (4H, m), 0.89 (3H, t, J = 7.5 Hz).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을, 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 치환함으로써, 실시예 53에 따라 제조할 수 있다.
실시예 54
화합물 322의 제조
단계 A: 6 점적의 DMF를 톨루엔(70 mL) 중 2-메틸벤조[d]옥사졸-6-카복실산(2.54 g, 14.4 mmol) 및 SOCl2(2.05 g, 17.2 mmol)의 혼합물에 첨가하였다. 이어서, 혼합물을 70℃에서 3시간 동안 교반하고, 냉각하고, 증발시켜 방치 시 고체화되는 2-메틸벤조[d]옥사졸-6-카본일 클로라이드를 오일로서 수득하였다(2.9 g, 100%). 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.27 - 8.30 (1H, m), 8.13 (1H, dd, J=8.4, 1.7 Hz), 7.74 (1H, dd, J = 8.5, 0.6 Hz), 2.73 (3H, s).
단계 B: 실시예 31 파트 1 단계 A의 과정에 따라서, 아세토니트릴(15 mL) 중에서 2-메틸벤조[d]옥사졸-6-카본일 클로라이드(2.9 g, 14.4 mmol), 다이메틸말론에이트(1.9 g, 14.4 mmol), MgCl2(1.37 g, 14.4 mmol) 및 트라이에틸아민(2.9 mL, 28.8 mmol)을 반응시켜 다이메틸 2-(2-메틸벤조[d]옥사졸-6-카본일)말론에이트(2.75 g, 66%)를 수득하였다. MS m/z 292.0 [M+H]+.
단계 C: 실시예 31 파트 1 단계 B의 과정에 따라서, 다이메틸 2-(2-메틸벤조[d]옥사졸-6-카본일)말론에이트(2.75 g, 9.5 mmol), POCl3(10 mL) 및 DIPEA(2.6 mL, 15.8 mmol)를 반응시켜 다이메틸 2-(클로로(2-메틸벤조[d]옥사졸-6-일)메틸렌)말론에이트(0.7 g, 24%)를 수득하였다. MS m/z 310.1 [M+H]+.
단계 D: 실시예 33 단계 B 및 C의 과정에 따라서, DMF 중에서 다이메틸 2-(클로로(2-메틸벤조[d]옥사졸-6-일)메틸렌)말론에이트(0.7 g, 2.3 mmol), tert-부틸 2-(5-플루오로피리딘-2-일)아세테이트(0.57 g, 2.7 mmol)(실시예 33 단계 A에서와 같이 제조됨), NaH(0.18 g, 4.5 mmol)를 반응시키고, 이어서 TFA 및 물과 100℃에서 반응시켜 2-(4-아미노-3-하이드록시페닐)-7-플루오로-4H-퀴놀리진-4-온(0.3 g, 48%)을 수득하였다. MS m/z 271.2 [M+H]+.
단계 E: TFA(0.13 mL, 1.8 mmol)를 2-(4-아미노-3-하이드록시페닐)-7-플루오로-4H-퀴놀리진-4-온(0.3 g, 1.1 mmol) 및 트라이메틸 오르토폼에이트(1.4 mL, 11.1 mmol)의 혼합물에 첨가하였다. 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하고, 이어서 증발시켜 7-플루오로-2-(2-메틸벤조[d]옥사졸-6-일)-4H-퀴놀리진-4-온(0.3 g, 99%)을 수득하였다. MS m/z 295.2 [M+H]+.
단계 F: DMA(1.0 mL) 중 7-플루오로-2-(2-메틸벤조[d]옥사졸-6-일)-4H-퀴놀리진-4-온(0.15 g, 0.51 mmol) 및 (S)-2-메틸피페라진(0.2 g, 2.0 mmol)의 혼합물을 130℃에서 밤새 교반하였다. 용매를 질소 스트림으로 제거하고, 잔사를 다이클로로메탄 중 메탄올(10%)로 정제하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(69 mg, 36%). M.P. 115-117℃; MS m/z 375.3 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.55 (1H, d, J=2.2 Hz), 7.79 (1H, d, J=1.3 Hz), 7.73 (1H, d, J=7.9 Hz), 7.64 (1H, dd, J=8.2, 1.6 Hz), 7.49 (1H, d, J=9.5 Hz), 7.33 (1H, d, J=2.5 Hz), 6.86 - 6.91 (2H, m), 3.60 (2H, br. s.), 3.25 - 3.34 (1H, m), 3.10 - 3.22 (2H, m), 2.93 - 3.03 (1H, m), 2.62 - 2.70 (4H, m), 1.31 (3H, d, J=6.3 Hz).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을, 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 치환함으로써, 실시예 54에 따라 제조할 수 있다.
실시예 55
화합물 380의 제조
파트 1 단계 A: 아세토니트릴(6.0 mL) 중 6-클로로피리다진-3-아민(0.26 g, 2.0 mmol), tert-부틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(0.62 g, 2.0 mmol), PdCl2dppf(0.16 g, 0.2 mmol), K2CO3(2.0M, 3.0 mL, 6.0 mmol)의 혼합물을 100℃에서 밤새 교반하였다. 수성 후처리하고, 이어서 다이클로로메탄 중 메탄올(0-10%)로 정제하여 tert-부틸 4-(6-아미노피리다진-3-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(0.51 g, 93%)를 수득하였다. MS m/z 277.2 [M+H]+.
파트 1 단계 B: 에탄올(25 mL) 중 tert-부틸 4-(6-아미노피리다진-3-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(0.4 g, 1.4 mmol)의 용액을 파르 진탕기(60 psi)에서 탄소 상 Pd(OH)2(20%, 0.2 g)로 밤새 수소화시켰다. 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 증발시키고, 다이클로로메탄 중 메탄올(0-10%)로 정제하여 tert-부틸 4-(6-아미노피리다진-3-일)피페리딘-1-카복실레이트(0.25 g, 62%)를 수득하였다. MS m/z 279.2 [M+H]+.
파트 2: THF 중 i-PrMgCl(2.0 M, 3.7 mL, 7.4 mmol)을 -20℃의 THF(15 mL) 중 6-요오도-2-메틸벤조[d]티아졸(2.24 g, 7.3 mmol)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 -10℃ 내지 -20℃에서 1시간 동안 유지한 후, 캐뉼라를 통해 THF(15 mL) 중 5-(비스(메틸티오)메틸렌)-2,2-다이메틸-1,3-다이옥산-4,6-다이온(1.4 g, 5.6 mmol)의 용액으로 옮겼다. 반응은 약간 발열 반응이었다. 혼합물을 실온에서 90분 동안 교반한 후, 수성 NH4Cl 용액으로 급랭시켰다. 수성 후처리하고, 이어서 다이클로로메탄 중 에틸 아세테이트(0-10%)로 정제하여 2,2-다이메틸-5-((2-메틸벤조[d]티아졸-6-일)(메틸티오)메틸렌)-1,3-다이옥산-4,6-다이온(1.26 g, 64%)을 제공하였다. MS m/z 350.1 [M+H]+.
파트 3: 다이페닐 에터(2.0 mL) 중 2,2-다이메틸-5-((2-메틸벤조[d]티아졸-6-일)(메틸티오)메틸렌)-1,3-다이옥산-4,6-다이온(0.13 g, 0.36 mmol) 및 tert-부틸 4-(6-아미노피리다진-3-일)피페리딘-1-카복실레이트(0.1 g, 0.36 mmol)의 혼합물을 140℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 온도를 240℃까지 상승시키고, 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 증발시키고, 잔사를 분취용 HPLC로 정제하여 표제 화합물을 황색 고체(33 mg, 24%)(트라이플루오로아세트산 염)로서 수득하였다. M.P. 230-235℃; MS m/z 378.2 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 8.87 - 8.92 (1H, m), 8.28 - 8.33 (1H, m), 8.08 (1H, d, J=9.1 Hz), 7.99 - 8.04 (1H, m), 7.79 (1H, s), 7.26 (1H, s), 3.41 - 3.48 (2H, m), 3.22 - 3.32 (1H, m), 3.03 - 3.11 (2H, m), 2.84 (3H, s), 2.14 - 2.22 (2H, m), 2.08 (1H, s), 1.92 - 2.03 (2H, m).
실시예 56
화합물 398의 제조
단계 A: 실시예 9 단계 G의 과정에 따라서, 6-클로로피리다진-3-아민(0.65 g, 5.0 mmol), 에틸 3-(3,4-다이메톡시페닐)-3-옥소프로파노에이트(1.77 g, 7.0 mmol) 및 PPTs(63 mg, 0.25 mmol)를 반응시켜 7-클로로-2-(3,4-다이메톡시페닐)-4H-피리미도[1,2-b]피리다진-4-온(0.23 g, 14%)을 수득하였다. MS m/z 318.1 [M+H]+.
단계 B: 실시예 34 단계 C의 과정에 따라서, 아세토니트릴(1.2 mL) 중에서 7-클로로-2-(3,4-다이메톡시페닐)-4H-피리미도[1,2-b]피리다진-4-온(0.12 g, 0.38 mmol), tert-부틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(0.14 g, 0.45 mmol), PdCl2dppf(35 mg, 0.038 mmol), K2CO3(2.0 M, 0.6 mL, 1.2 mmol)을 반응시켜 tert-부틸 4-(2-(3,4-다이메톡시페닐)-4-옥소-4H-피리미도[1,2-b]피리다진-7-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(100 mg, 56%)를 수득하였다. MS m/z 465.3 [M+H]+.
단계 C: 실시예 34 단계 D의 과정에 따라서, tert-부틸 4-(2-(3,4-다이메톡시페닐)-4-옥소-4H-피리미도[1,2-b]피리다진-7-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(100 mg, 0.21 mmol)를 TFA(1.0 mL) 및 다이클로로메탄(1.0 mL)으로 처리하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(50 mg, 65%). M.P. 195-200℃; MS m/z 365.3 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 8.13 (1H, d, J=9.8 Hz), 7.96 (1H, d, J=9.8 Hz), 7.82 (1H, dd, J=8.5, 2.2 Hz), 7.74 (1H, d, J=2.2 Hz), 7.15 (1H, s), 7.08 (1H, d, J=8.8 Hz), 7.01 (1H, br. s.), 3.87 (3H, s), 3.83 (3H, s), 3.57 (2H, br. s.), 3.00 (2H, br. s.), 2.58 (2H, br. s.).
실시예 57
화합물 402의 제조
단계 A: THF(4.0 mL) 중 5-브로모피라진-2-아민(0.17 g, 1.0 mmol) 및 비스(2,4,6-트라이클로로페닐)말론에이트(0.56 g, 1.2 mmol)의 혼합물을 88℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 여과하고, 고체를 에틸 아세테이트로 세척하였다. 케이크를 수집하고, 건조하여 7-브로모-2-하이드록시-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온(0.18 g, 74%)을 수득하였다. MS m/z 242.0 [M+H]+, 244.0 [M+2+H]+.
단계 B: 실시예 34 단계 C의 과정에 따라서, DMF(2.5 mL) 중에서 7-브로모-2-하이드록시-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온(0.18 g, 0.74 mmol), tert-부틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(0.27 g, 0.89 mmol), PdCl2dppf(60 mg, 0.074 mmol), K2CO3(0.31 g, 2.2 mmol)을 반응시켜 tert-부틸 4-(2-하이드록시-4-옥소-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-7-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(0.18 g, 70%)를 수득하였다. MS m/z 345.3 [M+H]+.
단계 C: NaH(60%, 23 mg, 0.57 mmol)를 실온의 DMF(3.0 mL) 중 tert-부틸 4-(2-하이드록시-4-옥소-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-7-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(0.18 g, 0.52 mmol)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 15분 동안 교반한 후, PhNTf2(0.22 g, 0.62 mmol)를 하나의 분획으로 첨가하였다. 혼합물을 밤새 교반하였다. 수성 후처리하고, 이어서 다이클로로메탄 중 에틸 아세테이트(0-20%)로 정제하여 tert-부틸 4-(4-옥소-2-(트라이플루오로메틸설폰일-옥시)-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-7-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(0.1 g, 40%)를 수득하였다. MS m/z 377.1 [M-Boc+H]+.
단계 D: 다이옥산(2.0 mL) 중 tert-부틸 4-(4-옥소-2-(트라이플루오로메틸설폰일-옥시)-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-7-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(80 mg, 0.17 mmol), 3,4-다이메톡시페닐보론산(46 mg, 0.25 mmol), PdCl2dppf(14 mg, 0.017 mmol), K3PO4(54 mg, 0.25 mmol)의 혼합물을 100℃에서 24시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 증발시키고, 다이클로로메탄 중 에틸 아세테이트(0-20%)로 정제하여 tert-부틸 4-(2-(3,4-다이메톡시페닐)-4-옥소-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-7-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(43 mg, 55%)를 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.10 (1H, s), 8.61 (1H, s), 7.72 (1H, s), 7.70 (1H, d, J = 1.8 Hz), 7.00 (3H, m), 4.19 - 4.26 (2H, m), 4.03 (3H, s), 3.98 (3H, s), 3.69 - 3.76 (2H, m), 2.56 - 2.67 (2H, m), 1.51 (9H, s).
단계 E: 실시예 34 단계 D의 과정에 따라서, tert-부틸 4-(2-(3,4-다이메톡시페닐)-4-옥소-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-7-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(43 mg, 0.09 mmol)를 TFA(1.0 mL) 및 다이클로로메탄(1.0 mL)으로 처리하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(34 mg, 100%). M.P. 205-208℃; MS m/z 365.4 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 9.15 (1H, d, J=0.9 Hz), 8.41 (1H, s), 7.85 - 7.94 (1H, m), 7.78 (1H, d, J=1.9 Hz), 7.27 (1H, s), 7.11 (1H, d, J=8.5 Hz), 6.97 - 7.05 (1H, m), 3.89 (3H, s), 3.84 (3H, s), 3.58 (2H, br. s.), 3.21 - 3.42 (3H, m), 3.07 (2H, t, J=5.7 Hz).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을, 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 치환함으로써, 실시예 57에 따라 제조할 수 있다.
실시예 58
화합물 499의 제조
단계 A: THF(12 mL) 중 tert-부틸 4-(6-아미노피리다진-3-일)피페리딘-1-카복실레이트(0.88 g, 3.2 mmol) 및 비스(2,4,6-트라이클로로페닐) 말론에이트(1.76 g, 3.8 mmol)의 혼합물을 40℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 증발시키고, 다이클로로메탄 중 메탄올(0-10%)로 정제하여 tert-부틸 4-(2-하이드록시-4-옥소-4H-피리미도[1,2-b]피리다진-7-일)피페리딘-1-카복실레이트(0.69 g, 63%)를 수득하였다. MS m/z 347.2 [M+H]+.
단계 B: 실시예 57 단계 C의 과정에 따라서, DMF(12 mL) 중에서 tert-부틸 4-(2-하이드록시-4-옥소-4H-피리미도[1,2-b]피리다진-7-일)피페리딘-1-카복실레이트(0.69 g, 2.0 mmol), NaH(60%, 88 mg, 2.2 mmol), PhNTf2(0.79 g, 2.2 mmol)를 반응시켜 tert-부틸 4-(4-옥소-2-(트라이플루오로메틸설폰일-옥시)-4H-피리미도[1,2-b]피리다진-7-일)피페리딘-1-카복실레이트(0.87 g, 91%)를 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.90 (1H, d, J=9.5 Hz), 7.61 (1H, d, J=9.5 Hz), 6.45 (1H, s), 4.28 - 4.36 (2H, m), 3.20 - 3.30 (1H, m), 2.82 - 2.93 (2H, m), 1.94 - 2.02 (2H, m), 1.75 - 1.85 (2H, m), 1.49 (9H, s).
단계 C: 다이옥산(2.0 mL) 중 tert-부틸 4-(4-옥소-2-(트라이플루오로메틸설폰일-옥시)-4H-피리미도[1,2-b]피리다진-7-일)피페리딘-1-카복실레이트(0.24 g, 0.5 mmol), 2-메틸-6-(트라이메틸스탄일)벤조[d]옥사졸(0.18 g, 0.6 mmol), Pd(PPh3)4(58 mg, 0.05 mmol), CuI(23 mg, 0.12 mmol)의 혼합물을 90℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 다이클로로메탄 중 메탄올(0-10%)로 정제하였다. 목적 분획을 합하고, 증발시켰다. 잔사를 TFA(1.0 mL) 및 다이클로로메탄(1.0 mL)으로 처리하고, 실시예 34 단계 D에 기술된 바와 같이 후처리하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(86 mg, 48%). M.P. 126-128℃; MS m/z 362.2 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, 메탄올-d 4) δ 8.20 (1H, s), 7.91 - 7.99 (2H, m), 7.67 (2H, d, J=8.2 Hz), 7.07 (1H, s), 3.45 (2H, d, J=12.3 Hz), 3.07 - 3.21 (2H, m), 3.30 - 3.24 (1H, m), 2.61 (3H, s), 2.14 (4H, br. s.).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을, 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 치환함으로써, 실시예 58에 따라 제조할 수 있다.
실시예 59
화합물 502의 제조
단계 A: m-자일렌(0.36 mL) 중 tert-부틸 4-(5-아미노피라진-2-일)피페리딘-1-카복실레이트(0.2 g, 0.72 mmol), 에틸 3-(4,6-다이메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-3-옥소프로파노에이트(0.21 g, 0.79 mmol), Si(OEt)4(0.16 mL, 0.72 mmol), PPTs(18 mg, 0.072 mmol)의 혼합물을 60℃에서 1시간 동안 및 이어서 130℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 냉각하고, 실리카 컬럼 상에서 직접 적재하고, 다이클로로메탄 중 메탄올(0-10%)로 정제하였다. 다이클로로메탄 중 에틸 아세테이트(20-100%)로 더욱 정제하여 tert-부틸 4-(2-(4,6-다이메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-4-옥소-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-7-일)피페리딘-1-카복실레이트(0.117 g, 34%)를 수득하였다. MS m/z 476.4 [M+H]+.
단계 B: 실시예 34 단계 D의 과정에 따라서, tert-부틸 4-(2-(4,6-다이메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-4-옥소-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-7-일)피페리딘-1-카복실레이트(117 mg, 0.25 mmol)를 TFA(1.0 mL) 및 다이클로로메탄(2.0 mL)으로 처리하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(93 mg, 100%). MS m/z 376.4 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, 메탄올-d 4) δ 9.13 (1H, d, J=1.3 Hz), 8.53 (1H, s), 8.27 (1H, d, J=0.6 Hz), 7.55 (1H, d, J=1.3 Hz), 7.28 (1H, s), 3.27 - 3.34 (2H, m), 2.99 - 3.09 (1H, m), 2.85 - 2.96 (2H, m), 2.75 (3H, s), 2.47 (3H, d, J=0.9 Hz), 2.05 - 2.14 (2H, m), 1.84 - 1.95 (2H, m).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을, 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 치환함으로써, 실시예 59에 따라 제조할 수 있다.
실시예 60
화합물 512의 제조
단계 A: 실시예 59 단계 A의 과정에 따라서, m-자일렌(0.5 mL) 중에서 tert-부틸 4-(6-아미노피리다진-3-일)피페리딘-1-카복실레이트(0.28 g, 1.0 mmol), 에틸 3-(4,6-다이메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-3-옥소프로파노에이트(0.28 g, 1.1 mmol), Si(OEt)4(0.22 mL, 1.0 mL), PPTs(25 mg, 0.1 mmol)를 반응시켜 tert-부틸 4-(2-(4,6-다이메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-4-옥소-4H-피리미도[1,2-b]피리다진-7-일)피페리딘-1-카복실레이트(60 mg, 13%)를 수득하였다. MS m/z 476.4 [M+H]+.
단계 B: 실시예 34 단계 D의 과정에 따라서, tert-부틸 4-(2-(4,6-다이메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-4-옥소-4H-피리미도[1,2-b]피리다진-7-일)피페리딘-1-카복실레이트(60 mg, 0.13 mmol)를 TFA(1.0 mL) 및 다이클로로메탄(1.0 mL)으로 처리하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(47 mg, 100%). MS m/z 376.4 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, 메탄올-d 4) δ 8.27 - 8.31 (1H, m), 8.06 (1H, d, J=9.5 Hz), 7.78 (1H, s), 7.57 (1H, d, J=0.9 Hz), 7.39 (1H, s), 3.25 - 3.30 (2H, m), 3.15 - 3.23 (1H, m), 2.82 - 2.90 (2H, m), 2.79 (3H, s), 2.51 (3H, d, J=0.9 Hz), 2.02 - 2.09 (2H, m), 1.85 - 1.96 (2H, m).
실시예 61
화합물 586의 제조
단계 A: NMP(6.0 mL) 중 2,5-다이브로모피라진(1.45 g, 6.1 mmol), tert-부틸 피페라진-1-카복실레이트(1.13 g, 6.1 mmol) 및 K2CO3(1.26 g, 9.2 mmol)의 혼합물을 120℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 냉각한 후, 수성 후처리하고, 이어서 다이클로로메탄 중 에틸 아세테이트(0-15%)로 정제하여 tert-부틸 4-(5-브로모피라진-2-일)피페라진-1-카복실레이트(1.45 g, 69%)를 수득하였다. MS m/z 343.3 [M+H]+, 345.3 [M+2+H]+.
단계 B: 톨루엔(4.4 mL) 중 tert-부틸 4-(5-브로모피라진-2-일)피페라진-1-카복실레이트(1.25 g, 3.6 mmol), LiHMDS(1.0M, 4.4 mL, 4.4 mmol), Pd(dba)2(105 mg, 0.18 mmol), P t Bu3HBF4(53 mg, 0.18 mmol)의 혼합물을 Ar 대기 하에 40℃에서 밤새 교반하였다. 이어서, 혼합물을 냉각하고, 아세토니트릴(2.0 mL) 및 1N HCl(0.2 mL)로 처리하고, 15분 동안 교반하고, 다이클로로메탄 중 메탄올(0-10%)에 의해 실리카 겔 상에서 정제하여 tert-부틸 4-(5-아미노피라진-2-일)피페라진-1-카복실레이트(0.96 g, 94%)를 수득하였다. MS m/z 280.2 [M+H]+.
단계 C: THF(15 mL) 중 tert-부틸 4-(5-아미노피라진-2-일)피페라진-1-카복실레이트(0.68 g, 2.4 mmol), 비스(2,4,6-트라이클로로페닐) 말론에이트(1.36 g, 2.9 mmol)의 혼합물을 실온에서 64시간 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 여과하였다. 고체를 에틸 아세테이트로 세척하고, 건조하여 tert-부틸 4-(2-하이드록시-4-옥소-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-7-일)피페라진-1-카복실레이트(0.65 g, 77%)를 수득하였다. MS m/z 348.3 [M+H]+.
단계 D: 실시예 57 단계 C의 과정에 따라서, DMF(10 mL) 중에서 tert-부틸 4-(2-하이드록시-4-옥소-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-7-일)피페라진-1-카복실레이트(0.65 g, 1.9 mmol), NaH(60%, 82 mg, 2.1 mmol) 및 PhNTf2(0.74 g, 2.1 mmol)를 반응시켜 tert-부틸 4-(4-옥소-2-(트라이플루오로메틸설폰일-옥시)-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-7-일)피페라진-1-카복실레이트(0.72 g, 80%)를 수득하였다. MS m/z 480.2 [M+H]+.
단계 E: 실시예 57 단계 D의 과정에 따라서, 다이옥산(6.0 mL) 중 PdCl2dppf(64 mg, 0.08 mmol) 및 K3PO4(0.25 g, 1.2 mmol)의 존재 하에 tert-부틸 4-(4-옥소-2-(트라이플루오로메틸설폰일-옥시)-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-7-일)피페라진-1-카복실레이트(0.38 g, 0.79 mmol) 및 2-메틸-2H-인다졸-5-일보론산(0.21 g, 1.2 mmol)을 반응시켜 tert-부틸 4-(2-(2-메틸-2H-인다졸-5-일)-4-옥소-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-7-일)피페라진-1-카복실레이트(0.22 g, 60%)를 수득하였다. MS m/z 462.3 [M+H]+.
단계 F: 실시예 34 단계 D의 과정에 따라서, tert-부틸 4-(2-(2-메틸-2H-인다졸-5-일)-4-옥소-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-7-일)피페라진-1-카복실레이트(0.22 g, 0.48 mmol)를 TFA(1.0 mL) 및 다이클로로메탄(1.0 mL)으로 처리하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(0.17 mg, 99%). M.P. 160-162℃; MS m/z 362.3 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, 메탄올-d 4) δ 9.04 (1H, d, J=1.3 Hz), 8.50 (1H, dd, J=1.6, 0.9 Hz), 8.18 (1H, s), 7.97 - 8.02 (2H, m), 7.71 (1H, d, J=9.1 Hz), 7.01 (1H, s), 4.23 (3H, s), 3.61 - 3.67 (4H, m), 3.133.20 (4H, m).
실시예 62
화합물 695의 제조
파트 1 단계 A: 다이클로로메탄(25 mL) 중 브롬(1.23 mL, 24 mmol)의 용액을 -78℃의 다이클로로메탄(100 mL) 중 1-(1H-피롤-2-일)에탄온(2.18 g, 20 mmol)의 현탁액에 30분에 걸쳐 적가하였다. 첨가 후, 혼합물을 10분 동안 -78℃에서 교반하고, 이어서 얼음-물에 부었다. 수성 층을 다이클로로메탄으로 추출하였다. 주황색 추출물을 합하고, 건조하고, 증발시켰다. 잔사를 다이클로로메탄 중 에틸 아세테이트(0-20%)로 정제하여 1-(4-브로모-1H-피롤-2-일)에탄온(3.48 g, 92%)을 수득하였다. MS m/z 188.0 [M+H]+, 190.0 [M+2+H]+.
파트 1 단계 B: NaH(60%, 0.81 g, 20.4 mmol)를 0℃의 DMF(40 mL) 중 1-(4-브로모-1H-피롤-2-일)에탄온(3.48 g, 18.5 mmol)의 용액에 분할식으로 첨가하였다. 온도를 실온까지 상승시키고, 1-클로로프로판-2-온(1.54 mL, 19.4 mmol)을 적가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 수성 후처리하고, 이어서 헥산 중 에틸 아세테이트(5-30%)로 정제하여 1-(2-아세틸-4-브로모-1H-피롤-1-일)프로판-2-온(2.9 g, 64%)을 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 6.99 (1H, d, J=1.9 Hz), 6.77 (1H, d, J=1.6 Hz), 5.00 (2H, s), 2.39 (3H, s), 2.25 (3H, s).
파트 1 단계 C: 아세트산(100 mL) 중 1-(2-아세틸-4-브로모-1H-피롤-1-일)프로판-2-온(2.9 g, 11.9 mmol) 및 암모늄 아세테이트(18 g, 238 mmol)의 혼합물을 120℃에서 밤새 교반하였다. 이어서, 아세트산을 회전 증발에 의해 제거하고, 이어서 얼음 물을 잔사에 첨가하고, 혼합물을 NaOH에 의해 pH 9까지 염기성이 되도록 하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 주황색 추출물을 합하고, 건조하고, 증발시켰다. 잔사를 다이클로로메탄 중 에틸 아세테이트(0-10%)로 정제하여 7-브로모-1,3-다이메틸피롤로[1,2-a]피라진(2.4 g, 90%)을 수득하였다. MS m/z 225.1 [M+H]+, 227.1 [M+2+H]+.
파트 1 단계 D: 실시예 14 파트 2의 과정에 따라서, 다이옥산(10 mL) 중에서 7-브로모-1,3-다이메틸피롤로[1,2-a]피라진(0.67 g, 3.0 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-바이(1,3,2-다이옥사보롤란)(0.99 g, 3.9 mmol), PdCl2dppf(0.24 g, 0.3 mmol), KOAc(0.88 g, 9.0 mmol)를 반응시켜 1,3-다이메틸-7-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피롤로[1,2-a]피라진을 수득하고, 이를 추가 정제 없이 후속 단계에 직접 사용하였다. MS m/z 191.2 [M-피나콜+H]+.
파트 2 단계 A: 실시예 14 파트 3 단계 A의 과정에 따라서, 2-클로로-7-플루오로-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(0.3 g, 1.5 mmol)을 1,3-다이메틸-7-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피롤로[1,2-a]피라진(1.5 mmol)과 반응시켜 2-(1,3-다이메틸피롤로[1,2-a]피라진-7-일)-7-플루오로-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(0.34 g, 74%)을 수득하였다. MS m/z 309.2 [M+H]+.
파트 2 단계 B: 실시예 14 파트 3 단계 B의 과정에 따라서, 2-(1,3-다이메틸피롤로[1,2-a]피라진-7-일)-7-플루오로-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(0.14 g, 0.45 mmol)을 2,6-다이메틸피페라진(0.26 g, 2.27 mmol)과 반응시켜 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(57 mg, 32%). M.P. 254-256℃; MS m/z 403.4 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, 메탄올-d 4) δ 8.20 (1H, d, J=2.8 Hz), 7.99 (1H, d, J=1.6 Hz), 7.84 - 7.90 (1H, m), 7.72 (1H, d, J=0.6 Hz), 7.58 (1H, d, J=9.5 Hz), 7.25 (1H, t, J=1.1 Hz), 6.69 (1H, s), 3.60 (2H, d, J=9.5 Hz), 3.03 - 3.11 (2H, m), 2.62 (3H, s), 2.37 (2H, t, J=11.3 Hz), 2.31 (3H, d, J=0.9 Hz), 1.21 (6H, d, J=6.3 Hz).
하기 표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 추가의 화합물을, 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 치환함으로써, 실시예 62에 따라 제조할 수 있다.
실시예 63
화합물 731의 제조
파트 1 단계 A: 실시예 57 단계 A의 과정에 따라서, THF(100 mL) 중에서 5-클로로피리딘-2-아민(2.57 g, 20 mmol) 및 비스(2,4,6-트라이클로로페닐) 말론에이트(10.2 g, 22 mmol)를 반응시켜 7-클로로-2-하이드록시-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(3.89 g, 97%)을 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 12.01 (1H, br. s.), 8.89 (1H, d, J=2.2 Hz), 8.10 (1H, dd, J=9.3, 2.4 Hz), 7.44 (1H, d, J=9.5 Hz), 5.19 (1H, br. s.).
파트 1 단계 B: 실시예 57 단계 C의 과정에 따라서, 7-클로로-2-하이드록시-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(3.89 g, 19.8 mmol)을 DMF(50 mL) 중 NaH(60%, 0.87 g, 21.8 mmol) 및 PhNTf2(7.78 g, 21.8 mmol)를 반응시켜 7-클로로-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일 트라이플루오로메탄설폰에이트(5.9 g, 91%)를 수득하였다. MS m/z 370.0 [M+H]+.
파트 2 단계 A: BuLi(1.6M, 4.7 mL, 7.5 mmol)를 -78℃의 THF(20 mL) 중 7-브로모-1,3-다이메틸피롤로[1,2-a]피라진(1.1 g, 4.9 mmol)의 용액에 적가하였다. 혼합물을 -78℃에서 30분 동안 교반하고, 트라이이소프로필 보레이트(1.7 mL, 7.4 mmol)를 첨가하였다. 온도를 실온까지 천천히 상승시켰다. 반응 생성물을 물(1.0 mL)로 급랭시키고, 혼합물을 진공 하에 증발 건조시켰다. 7-클로로-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일 트라이플루오로메탄설폰에이트(1.6 g, 4.9 mmol), PdCl2dppf (0.4 g, 0.49 mmol), K3PO4(1.55 g, 7.3 mmol) 및 다이옥산(40 mL)을 상기 잔사에 첨가하였다. 혼합물을 Ar 대기 하에 100℃에서 밤새 교반하고, 이어서 혼합물을 냉각하고, 증발시키고, 다이클로로메탄 중 메탄올(0-10%)에 의해 실리카를 통해 정제하여 7-클로로-2-(1,3-다이메틸피롤로[1,2-a]피라진-7-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(0.34 g, 22%)을 수득하였다. MS m/z 325.2 [M+H]+.
파트 2 단계 B: THF(1.5 mL) 중 7-클로로-2-(1,3-다이메틸피롤로[1,2-a]피라진-7-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(0.2 g, 0.62 mmol), tert-부틸 4-메틸피페리딘-4-일-카밤에이트(0.17 g, 0.8 mmol), RuPhos-Pd(22 mg, 0.031 mmol), RuPhos(14 mg, 0.031 mmol) 및 나트륨 t-부톡사이드(83 mg, 0.87 mmol)의 혼합물을 Ar 대기 하에 85℃에서 밤새 교반하였다. 이어서, 혼합물을 냉각하고, 아세트산(1.4 당량)을 첨가하고, 이어서 다이클로로메탄 중 메탄올(0-10%)에 의해 실리카 상에서 정제하여 tert-부틸 1-(2-(1,3-다이메틸피롤로[1,2-a]피라진-7-일)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-일)-4-메틸피페리딘-4-일-카밤에이트(70 mg, 22%)를 수득하였다. MS m/z 503.4 [M+H]+.
파트 2 단계 C: 화합물 tert-부틸 1-(2-(1,3-다이메틸피롤로[1,2-a]피라진-7-일)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-일)-4-메틸피페리딘-4-일-카밤에이트(70 mg, 0.14 mmol)를 다이옥산 중 HCl(4N, 1.0 mL)로 30분 동안 처리하였다. 이어서, 용매를 제거하였다. 잔사를 메탄올 중 암모니아로 다시 처리하고, 증발시켰다. 잔사를 다이클로로메탄 중 메탄올(0-10%)로 정제하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(36 mg, 64%). M.P. 244-246℃; MS m/z 403.3 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 8.22 - 8.27 (2H, m), 8.04 (1H, dd, J=9.8, 2.8 Hz), 7.96 (1H, s), 7.60 (1H, d, J=9.8 Hz), 7.41 (1H, t, J=1.3 Hz), 6.82 (1H, s), 3.25 - 3.30 (4H, m), 2.58 (3H, s), 2.27 (3H, d, J=0.9 Hz), 1.47 - 1.65 (6H, m), 1.10 (3H, s).
실시예 64
화합물 743의 제조
단계 A: THF(1.0 mL) 및 물(0.5 mL) 중 7-클로로-2-(1,3-다이메틸피롤로[1,2-a]피라진-7-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(0.14 g, 0.43 mmol) 및 tert-부틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(0.2 g, 0.65 mmol), Pd(OAc)2(1.9 mg, 0.0086 mmol), SPhos(7.0 mg, 0.0172 mmol) 및 K3PO4(0.18 g, 0.86 mmol)의 혼합물을 110℃에서 밤새 교반하였다. 수성 후처리하고, 이어서 다이클로로메탄 중 메탄올(0-10%)로 정제하여 tert-부틸 4-(2-(1,3-다이메틸피롤로[1,2-a]피라진-7-일)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(0.13 g, 65%)를 수득하였다. MS m/z 472.3 [M+H]+.
단계 B: 실시예 63 파트 2 단계 C의 과정에 따라서, tert-부틸 4-(2-(1,3-다이메틸피롤로[1,2-a]피라진-7-일)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(0.13 g, 0.28 mmol)를 다이옥산 중 HCl(1.0 mL)로 처리하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(5 mg, 5%). M.P. 189-191℃; MS m/z 372.3 [M+H]+; 1H NMR (500 MHz, 메탄올-d 4) δ 8.81 (1H, d, J=1.9 Hz), 8.03 (2H, d, J=1.6 Hz), 7.71 (1H, s), 7.62 (1H, d, J=9.5 Hz), 7.28 (1H, s), 6.76 (1H, s), 6.41 - 6.50 (1H, m), 3.58 (2H, d, J=2.5 Hz), 3.15 (2H, t, J=5.8 Hz), 2.63 (3H, s), 2.54 (2H, br. s.), 2.32 (3H, d, J=0.6 Hz).
실시예 65
화합물 804의 제조
단계 A: 5-플루오로-2-니트로피리딘(200 mg, 1.41 mmol), tert-부틸 2,7-다이아자스피로[3.5]-노난-2-카복실레이트(319 mg, 1.41 mmol) 및 K2CO3(195 mg, 1.41 mmol)을 DMSO(8 mL)에서 합하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 15시간 동안 가열하고, 실온까지 냉각하고, 이어서 용매를 증발시켰다. 추출하고(CH2Cl2 및 H2O), 이어서 실리카 겔(CH2Cl2/MeOH: 98/2)에 의해 크로마토그래피하여 7-(6-니트로-피리딘-3-일)-2,7-다이아자-스피로[3.5]노난-2-카복실산 tert-부틸 에스터(320 mg, 65%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS m/z 349.5 [M+H] +.
단계 B: 7-(6-니트로-피리딘-3-일)-2,7-다이아자-스피로[3.5]노난-2-카복실산 tert-부틸 에스터(315 mg, 0.90 mmol) 및 Pd/C(32 mg)를 MeOH(40 mL)에서 합하고, 수소 대기(H2 볼룬) 하에 15시간 동안 위치시켰다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 실리카 겔(CH2Cl2/MeOH: 98/2)에 의해 크로마토그래피하여 7-(6-아미노-피리딘-3-일)-2,7-다이아자-스피로[3.5]노난-2-카복실산 tert-부틸 에스터(227 mg, 78%)를 회백색 고체로서 수득하였다. MS m/z 319.6 [M+H] +.
단계 C: 메틸-1-부탄올(2 mL) 중 7-(6-아미노-피리딘-3-일)-2,7-다이아자-스피로[3.5]노난-2-카복실산 tert-부틸 에스터(100 mg, 0.31 mmol), 에틸 3-(4,6-다이메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-3-옥소프로파노에이트(90 mg, 0.31 mmol, 실시예 9 단계 A 내지 F에 기술된 제법) 및 PPTs(87 mg, 0.345 mmol)의 혼합물을 160℃에서 15시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온까지 냉각하고, 수성 NaOH(1M) 용액에 붓고, CH2Cl2로 추출하였다. 합한 주황색 상을 Na2SO4 상에서 건조하고, 잔사를 실리카 겔(CH2Cl2/MeOH: 9/1; 및, 1% 수성 NH3)에 의해 크로마토그래피하여 표제 생성물(40 mg, 31%)을 황색 고체로서 수득하였다. MS m/z 416.2 [M+H]+. 1H NMR (CDCl3, 600 MHz) δ 8.18 (d, J=1.1 Hz, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.45 (dd, 1H) 7.80 (d, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 3.51 (m, 2H), 3.42 (d, 1H), 3.36 (d, 1H), 3.15 (m, 2H), 3.00 (d, 1H), 2.97 (d, 1H), 2.79 (s, 3H), 2.52 (s, 3H), 2.10 (m, 2H), 1.89 (m, 2H).
실시예 66
화합물 811의 제조
단계 A: Ar 하에 -78℃까지 냉각된 THF(20 mL) 중 5-브로모피리딘-2-아민(1.0 g, 5.8 mmol)을 n-BuLi(3.6 mL, 5.8 mmol, 헥산 중 1.6M)와 합하고, 0.5시간 동안 교반하였다. THF(10 mL) 중 1,2-비스(클로로다이메틸실릴)에탄(1.2 g, 5.8 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 1시간에 걸쳐 상온까지 가온하였다. 이어서, 혼합물을 -78℃까지 다시 냉각하고, 제2당량의 n-BuLi(3.6 mL, 5.8 mmol, 헥산 중 1.6M)를 첨가하였다. 혼합물을 0.5시간 동안 -78℃에서 교반하고, 이어서 1시간에 걸쳐 상온까지 가온하였다. 이어서, 혼합물을 -78℃까지 냉각하고, 제3당량의 n-BuLi(3.6 mL, 5.8 mmol, 헥산 중 1.6M)를 첨가하였다. 혼합물을 1시간 동안 -78℃에서 교반하고, 이어서 THF(10 mL) 중 tert-부틸 4-옥소피페리딘-1-카복실레이트(1.3 g, 6.4 mmol)를 첨가하고, 반응 생성물이 상온에 도달하도록 하였다. 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 염수로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 농축하였다. 잔사를 n-헵탄 중 EtOAc(0-100%)에 의해 실리카로부터 용리하여 tert-부틸 4-(6-아미노피리딘-3-일)-4-하이드록시피페리딘-1-카복실레이트를 연황색 고체로서 수득하였다(1.1 g, 64%). MS m/z 294.2 [M+H]+.
단계 B: 톨루엔(10 mL) 중 비스(2,4,6-트라이클로로페닐) 말론에이트(0.80 g, 1.7 mmol) 및 tert-부틸 4-(6-아미노피리딘-3-일)-4-하이드록시피페리딘-1-카복실레이트(0.50 g, 1.7 mmol)의 혼합물을 60℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 생성물을 농축하여 휘발성 물질을 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2 중 MeOH(0-20%)에 의해 실리카로부터 용리하여 tert-부틸 4-하이드록시-4-(2-하이드록시-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-일)피페리딘-1-카복실레이트를 연황색 고체로서 수득하였다(0.43 g, 70%). MS m/z 362.3 [M+H]+.
단계 C: DMF(3 mL) 중 tert-부틸 4-하이드록시-4-(2-하이드록시-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-일)피페리딘-1-카복실레이트(0.17 g, 0.5 mmol), 1,1,1-트라이플루오로-N-페닐-N-(트라이플루오로메틸설폰일)메탄설폰아미드(0.19 g, 0.5 mmol) 및 칼륨 카본에이트(0.13 g, 0.9 mmol)의 혼합물을 상온에서 교반하였다. 1시간 후, 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 물, 염수로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 농축하였다. 잔사를 n-헵탄 중 EtOAc(10-50%)에 의해 실리카로부터 용리하여 tert-부틸 4-하이드록시-4-(4-옥소-2-(트라이플루오로메틸설폰일-옥시)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-일)피페리딘-1-카복실레이트를 결정질 황색 고체로서 수득하였다(0.08 g, 35%). MS m/z 494.3 [M+H]+.
단계 D: 실시예 15 단계 A의 과정에 따라서, MeCN/물(2 mL/0.3 mL) 중 tert-부틸 4-하이드록시-4-(4-옥소-2-(트라이플루오로메틸설폰일-옥시)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-일)피페리딘-1-카복실레이트(80 mg, 0.16 mmol), 8-플루오로-2-메틸-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)이미다조[1,2-a]피리딘(67 mg, 0.24 mmol, 실시예 16 단계 B에서 제조됨), 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(9 mg, 0.01 mmol) 및 K2CO3(31 mg, 0.32 mmol)은 tert-부틸 4-(2-(8-플루오로-2-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-일)-4-하이드록시피페리딘-1-카복실레이트를 회백색 결정질 고체로서 제공하였다(60 mg, 75%). MS m/z 494.5 [M+H]+.
단계 E: 실시예 24 단계 B의 과정에 따라서, 단계 D로부터의 생성물 및 다이옥산 중 HCl(4M, 2 mL)은 2-(8-플루오로-2-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일)-7-(4-하이드록시피페리딘-4-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온을 백색 고체로서 제공하였다(11 mg, 49%). MS m/z 394.4 [M+H]+. 1H NMR (DMSO-d 6, 300 MHz) δ 9.31 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 9.01 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 8.12 (dd, J = 9.3, 1.8 Hz, 1H), 7.96 (d, J = 2.4Hz, 1H), 7.88 (dd, J = 12.6, 1.2 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 7.06 (s, 1H), 5.34 (br s, 1H), 2.91 (명백한 t, J = 12.0 Hz, 2H), 2.79 (d, J = 12.0 Hz, 2H), 2.39 (s, 3H), 1.89-1.84 (m, 2H), 1.60 (d, J = 12.0 Hz, 2H).
하기 표 1은 적절한 출발 물질, 시약 및 반응 조건을 대체함으로써 기재된 실시예의 절차에 따라 제조될 수 있는 화학식 I의 화합물의 유리 염기 형태의 단리 화합물을 제공한다. 화학식 I의 화합물의 유리 염기 형태로부터의 임의의 염, 동위이성질체, 입체 이성질체, 라세미체, 거울상 이성질체, 부분입체 이성질체 또는 호변 이성질체의 제조가 또한 고려되며 본원에 기술된 범위 내에 추가로 포함된다. 화합물의 유리 염기 형태가 염 형태로부터 단리되지 않은 경우, 당해 분야 통상의 숙련자는 상기 화합물의 유리 염기 형태를 제조 및 분리하는 데 필요한 반응을 수행할 것으로 예상할 수 있다.
실시예 번호에서 *는 화합물에 상응하는 실시예가 상기 제공됨을 나타내고, 용어 "M.P."는 "융점(℃)"을 나타내고, 용어 "MS"는 "질량 분석기 피크 m/z [M+H]+, [M+2+H]+, [M-H]- 또는 [M+2-H]-"를 나타내고, 용어 "D"는 "분해"를 나타내고, 용어 "DR"은 "분해 범위"를 나타내고, 용어 "S"는 "연화"를 나타내고, 용어 "ND"는 값이 "결정되지 않음"을 나타내고, 용어 "NI"는 화합물이 "단리되지 않음"을 나타낸다.
[표 1]
또는 이들의 염, 동위 이성질체, 입체 이성질체, 라세미체, 거울상 이성질체, 부분입체 이성질체 또는 호변 이성질체.
하기 표 2는 또한 적절한 반응물, 시약 및 반응 조건을 사용함으로써 기재된 실시예의 절차에 따라 제조될 수 있는 화학식 I의 화합물의 염 형태의 단리 화합물을 제공한다. 화학식 I의 화합물의 염 형태로부터의 임의의 유리 염기, 동위이성질체, 입체 이성질체, 라세미체, 거울상 이성질체, 부분 입체 이성질체 또는 호변 이성질체의 제조가 또한 고려되며 본원에 기술된 범위 내에 추가로 포함된다. 화합물의 유리 염기 형태가 염 형태로부터 단리되지 않은 경우, 당해 분야 통상의 숙련자는 상기 화합물의 유리 염기 형태를 제조 및 분리하는데 필요한 반응을 수행할 것으로 예상할 수 있다.
실시예 번호에서 *는 화합물에 상응하는 실시예가 상기 제공됨을 나타내고, 용어 "M.P."는 "융점(℃)"을 나타내고, 용어 "MS"는 "질량 분석기 피크 m/z [M+H]+, [M+2+H]+, [M-H]- 또는 [M+2-H]-"를 나타내고, 용어 "D"는 "분해"를 나타내고, 용어 "DR"은 "분해 범위"를 나타내고, 용어 "S"는 "연화"를 나타내고, 용어 "ND"는 값이 "결정되지 않음"을 나타내고, 용어 "NI"는 화합물이 "단리되지 않음"을 나타낸다.
[표 2]
또는 이들의 유리 염기, 동위 이성질체, 입체 이성질체, 라세미체, 거울상 이성질체, 부분입체 이성질체 또는 호변 이성질체.
생물학적 실시예
보다 상세히 기술하고 본 설명의 이해를 돕기 위해, 하기의 비제한적인 생물학적 실시예는 설명의 범위를 더 상세히 예시하기 위해 제공되며, 그 범위를 특별히 제한하는 것으로 이해되지 않는다. 당해 분야에 숙련된 자의 이해범위 내에서 확인되는, 현재 알려져 있거나 나중에 개발될 수 있는 본 발명의 설명의 상기 변형들은 본 설명 및 하기에 청구된 바와 같은 범위 내에 속하는 것으로 간주된다. 이들 실시예는 본원에 기술된 특정 화합물들의 시험관내 및/또는 생체내 검사를 예시하고, SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시킴으로써 SMA의 치료에 대한 화합물의 유용성을 입증한다. 화학식 I의 화합물은 SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증대시키고 SMN2 유전자로부터 생성된 Smn 단백질의 수준을 증가시키므로, 이를 필요로 하는 인간 대상에서 SMA를 치료하는데 사용될 수 있다.
실시예 1
SMN2 미니유전자 구조물
미니유전자 구조물
엑손 6의 5' 말단(ATAATTCCCCC)(서열번호 14)으로부터 개시하여 엑손 8의 핵산 잔사 23(CAGCAC)(서열번호 15)으로 종결되는 SMN2의 영역에 상응하는 DNA를 하기 프라이머를 사용하여 PCR로 증폭시켰다:
정방향 프라이머: 5'-CGCGGATCCATAATTCCCCCACCACCTC-3'(서열번호 16)
역방향 프라이머: 5'-CGCGGATCCGTGCTGCTCTATGCCAGCA-3'(서열번호 17)
엑손 6의 5' 말단(GGATCC)(서열번호 18) 및 엑손 8의 23 번째 뉴클레오티드 후의 3' 말단 둘 다에 BamHI 제한 엔도뉴클레아제 인식 부위를 부가하도록 각각의 프라이머의 5' 말단을 고안하였다. BamHI 제한 엔도뉴클레아제 인식 부위를 사용하여, PCR 단편을 미국특허공개 제US2005/0048549호에 개시된 바와 같이 변형된 원본 pcDNA 3.1/하이그로(Hygro) 벡터의 유도체로 클로닝하였다.
HindIII 부위 및 BamHI 제한 부위를 사용하여 다음을 포함하는 새로운 UTR을 변형된 벡터에 부가하였다:
5'DEG UTR: 5'-TAGCTTCTTACCCGTACTCCACCGTTGGCAGCACGATCGCACGTCCCACGTGAACCATTGGTAAACCCTG-3'(서열번호 19)를 BamHI 제한 부위 상류의 개시 코돈과 함께 변형된 pcDNA3.1/하이그로 벡터로 클로닝시키고;
3'DEG UTR: 5'-ATCGAAAGTACAGGACTAGCCTTCCTAGCAACCGCGGGCTGGGAGTCTGAGACATCACTCAAGATATATGCTCGGTAACGTATGCTCTAGCCATCTAACTATTCCCTATGTCTTATAGGG-3'(서열번호 20)를 NotI 제한 부위의 바로 하류의 정지 코돈과 함께 XhoI 제한 엔도뉴클레아제 인식 부위 및 NotI 제한 엔도뉴클레아제 인식 부위를 사용하여 변형된 pcDNA3.1/하이그로 벡터로 클로닝시켰다. 또한 개시 코돈이 결여된 반딧불이 루시퍼라제 유전자를 BamHI 및 NotI 제한 부위를 사용하여 벡터로 클로닝시켰다.
수득된 미니유전자는 5'에서 3' 순서로 다음을 포함한다: 5'-DEG UTR, 개시 코돈, BamHI 제한 부위를 형성하는 6개의 추가 뉴클레오티드, 엑손 6의 핵산 잔기, SMN2의 인트론 6의 핵산 잔기, SMN2의 엑손 7의 핵산 잔기, SMN2의 인트론 7의 핵산 잔기, 및 SMN2의 엑손 8의 처음 23개 핵산 잔기, BamHI 제한 부위를 형성하는 추가의 6개 뉴클레오티드 및 개시 코돈이 결여된 반딧불이 루시퍼라제 유전자.
단일 아데닌 잔기를 부위-지향 돌연변이유발에 의해 SMN2의 엑손 7의 뉴클레오티드 48 다음에 삽입하였다. 상기 미니유전자 구조물은 SMN2-A로 지칭된다.
엑손 6에서 8까지 및 중간의 인트론을 함유하는 미니유전자로부터 유도된 SMN2 전사체들은 이의 내인성 프리-mRNA의 스플라이싱을 재현한다(문헌 [Lorson et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 96(11), 6307 (1999)]). 엑손 6에서 8까지 및 중간의 인트론에 이어 루시퍼라제 리포터 유전자를 함유하는 SMN2-선택적 스플라이싱 리포터 구조물을 제작하였다. 상기 구조물의 핵심적인 특징은 루시퍼라제 유전자에서 개시 코돈의 결여, 엑손 7의 핵산 48 다음에 뉴클레오티드의 삽입에 의한 엑손 7의 종료 코돈(SMN 단백질을 암호화하는 개방 판독 프레임 중)의 불활성화 및 엑손 6의 바로 상류에 개시 코돈(ATG)의 부가이다. 단일 아데닌(SMN2-A)을 엑손 7의 핵산 48 다음에 삽입하였다.
엑손 7이 mRNA에 존재하는 경우 루시퍼라제 리포터가 엑손 6의 바로 상류에 ATG 개시 코돈과 함께 프레임 내에 존재하고 SMN2의 엑손 7이 프리-mRNA의 스플라이싱 동안 제거되는 경우 엑손 6의 바로 상류에 ATG 개시 코돈과 함께 루시퍼라제 리포터가 프레임 밖에 존재하도록 SMN2 미니유전자를 설계하였다. 또한, 엑손 7의 부재 시에, 엑손 6의 바로 상류에 ATG 개시 코돈으로부터 시작하는 개방 판독 프레임은 SMN의 엑손 8의 단편 중에 정지 코돈을 함유한다. 따라서, SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 증가시키는 화합물의 존재 하에서, 엑손 7을 함유하는 더 많은 전사체 및 더 많은 기능성 리포터가 생성된다. 상기 설명을 도식적으로 나타낸 것을 도 1에서 확인할 수 있다.
SMN2-A 구조물로부터의 미니유전자의 DNA 서열인 서열번호 21을 도 2a에 나타내었다. 미니유전자 SMN2-A 서브서열의 그림을 도 2b에 나타내었다.
실시예 2
배양된 세포에서 SMN2 미니유전자 mRNA 스플라이싱 RT-qPCR 분석
역전사-정량적 PCR-기반(RT-qPCR) 분석을 이용하여 상기 미니유전자로 안정하게 형질감염되고 시험 화합물로 처리된 HEK293H 세포주에서 SMN2 엑손 7을 함유하는 전장 SMN2 미니유전자 mRNA의 수준을 정량화하였다.
재료
프로토콜. 전술한 SMN2-A 미니유전자 구조물로 안정하게 형질감염된 HEK298H 세포(10,000 세포/웰)를, 96-웰 평편-바닥 플레이트 중의 200 μL의 세포 배양 배지(DMEM 플러스 10% FBS, 200 μg/mL 하이그로마이신 함유)에 접종하고, 세포의 적절한 분산을 보장하기 위해 플레이트를 즉시 스월링(swirling)시켜 세포들의 고른 단층을 형성시켰다. 세포를 4 내지 6시간 이상 동안 부착시켰다. 시험 화합물을 100% DMSO에 3.16배로 연속 희석시켜 7-포인트 농도 곡선을 작성하였다. 시험 화합물 용액(1 μL, 200x, DMSO 중)을 각각의 세포-함유 웰에 가하고, 플레이트를 세포 배양기(37℃, 5% CO2, 100% 상대 습도)에서 24시간 동안 배양하였다. 각각의 시험 화합물 농도에 대해 2개의 복제물을 제조하였다. 이어서, 세포를 세포-대-Ct(Cells-To-Ct) 용해 완충액에서 용해시키고, 용해물을 -80℃에서 저장하였다.
전장 SMN2-A 미니유전자 및 GAPDH mRNA를 표 3에 나타낸 하기의 프라이머 및 프로브를 사용하여 정량화하였다. 프라이머 SMN 정방향 A(서열번호 1)는 엑손 7(뉴클레오티드 22에서 뉴클레오티드 40) 중의 한 뉴클레오티드 서열에 혼성화되고, 프라이머 SMN 역방향 A(서열번호 2)는 반딧불이 루스퍼라제의 암호화 서열중 한 뉴클레오티드 서열에 혼성화되고, SMN 프로브 A(서열번호 3)는 엑손 7(뉴클레오티드 50에서 뉴클레오티드 54) 및 엑손 8(뉴클레오티드 1에서 뉴클레오티드 21) 중의 한 뉴클레오티드 서열에 혼성화된다. 상기 3개 올리고뉴클레오티드의 조합은 SMN1 또는 SMN2 미니유전자만을 검출하며(RT-qPCR), 내인성 SMN1 또는 SMN2 유전자는 검출하지 못할 것이다.
[표 3]
SMN 정방향 및 역방향 프라이머는 0.4 μM의 최종 농도로 사용되었다. SMN 프로브는 0.15 μM의 최종 농도로 사용되었다. GAPDH 프라이머는 0.2 μM의 최종 농도로 사용되고 프로브는 0.15 μM의 최종 농도로 사용되었다.
7.5 μL의 2x RT-PCR 완충액, 0.4 μL의 25x RT-PCR 효소 혼합물, 0.75 μL의 20x GAPDH 프라이머-프로브 혼합물, 4.0075 μL의 물, 2 μL의 10배 희석된 세포 용해물, 0.06 μL의 100 μM SMN 정방향 프라이머, 0.06 μL의 100 μM SMN 역방향 프라이머, 및 0.225 μL의 100 μM SMN 프로브를 혼합하여 SMN2-미니유전자 GAPDH 혼합물(15 μL의 총 부피)을 제조하였다.
PCR은 지시된 시간 동안 하기의 온도에서 수행하였다: 단계 1: 48℃(15분); 단계 2: 95℃(10분); 단계 3: 95℃(15초); 단계 4: 60℃(1분); 이어서, 단계 3 및 4를 총 40 주기 동안 반복.
각각의 반응 혼합물은 SMN2-A 미니유전자 및 GAPDH 프라이머/프로브 세트(멀티플렉스 설계)를 둘 다 포함하여, 두 전사체들의 수준의 동시 측정을 가능케 하였다.
2개의 SMN 스플라이싱된 생성물이 SMN2 미니유전자로부터 생성되었다. 전장 SMN2 mRNA에 상응하는, 엑손 7을 함유하는 첫번째 스플라이싱 생성물은 본원에서 용어 "SMN2 미니유전자 FL"로 지칭하였다. 엑손 7이 결여된 두번째 스플라이싱 생성물은 본원에서 용어 "SMN2 미니유전자 Δ7"로 지칭하였다.
비히클 대조군으로 처리된 세포에 비해 SMN2 미니유전자 FL mRNA의 증가가 변형 ΔΔCt 방법(문헌 [Livak and Schmittgen, Methods, 25:402-408 (2001)]에 기술된 바와 같은)을 이용하여 실시간 PCR로부터 측정되었다. 증폭 효능 E는 SMN2 미니유전자 FL 및 GAPDH에 대한 증폭 곡선의 기울기로부터 개별적으로 산출하였다. 이어서, SMN2 미니유전자 FL 및 GAPDH의 존재비(abundance)를 (1 + E)-Ct로부터 산출하였으며, 여기서 Ct는 각 앰플리콘(amplicon)에 대한 임계치이다. SMN2 미니유전자 FL의 존재비를 GAPDH 존재비에 대해 정규화하였다. 이어서, 시험 화합물-처리된 샘플로부터의 정규화된 SMN2 미니유전자 FL 존재비를 비히클-처리된 세포로부터의 정규화된 SMN2 미니유전자 FL 존재비로 나누어서 비히클 대조군에 대한 SMN2 FL mRNA의 수준을 측정하였다.
결과. 도 3에서 보이듯이, 화합물 6(도 3a) 및 화합물 170(도 3b)으로 처리된 세포는 낮은 농도에서 SMN2 미니유전자 FL mRNA를 증가시켰다. 2개의 시험 화합물은 미처리 세포에 비해 엑손 7 혼입을 완전히 회복시켰다.
본원에 개시된 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태에 대해, 표 4는 생물학적 실시예 2의 절차에 따라 각각의 시험 화합물에 대해 작성된 7-포인트 농도 데이터로부터 수득된 전장 SMN2 mRNA의 생성을 위한 EC1.5x를 나타낸 것이다. 용어 "전장 SMN2 mRNA의 생성을 위한 EC1.5x"는 비히클-처리 세포에 비해 전장 SMN2 mRNA의 양을 1.5배 이상 더 높은 수준으로 증가시키는데 효과적인 시험 화합물의 농도로서 정의된다. >3 μM 내지 ≤30 μM의 전장 SMN2 mRNA의 생성을 위한 EC1.5x는 별 1개(*)로 나타내고, >1 μM 내지 ≤3 μM의 EC1.5x는 별 2개(**)로 나타내고, >0.3 μM 내지 ≤1 μM의 EC1.5x는 별 3개(***)로 나타내고, >0.1 μM 내지 ≤0.3 μM의 EC1.5x는 별 4개(****)로 나타내고, ≤0.1 μM의 EC1.5x는 별 5개(*****)로 나타내었다.
[표 4]
실시예 3
배양된 세포에서 내인성 SMN2 mRNA RT-qPCR 스플라이싱 분석
역전사-정량적 PCR-기반(RT-qPCR) 분석을 이용하여, 시험 화합물로 처리된 SMN2 유전자를 함유하는 1차 세포 및 세포주에서 전장 및 Δ7 SMN2 mRNA의 수준을 정량화하였다.
재료
프로토콜. GM03813 SMA 환자 세포(5,000 세포/웰)를, 96-웰 평편-바닥 플레이트 중의 200 μL의 세포 배양 배지(DMEM 플러스 10% FBS)에 접종하고, 세포의 적절한 분산을 보장하기 위해 플레이트를 즉시 스월링시켜 세포들의 고른 단층을 형성시켰다. 세포를 4 내지 6시간 이상 동안 부착시켰다. 시험 화합물을 100% DMSO에 3.16배로 연속 희석시켜 7-포인트 농도 곡선을 작성하였다. 시험 화합물 용액(1 μL, 200x, DMSO 중)을 각각의 시험 웰에 가하고, 1 μL DMSO를 각 대조군 웰에 가하였다. 플레이트를 세포 배양기(37℃, 5% CO2, 100% 상대 습도)에서 24시간 동안 배양하였다. 이어서, 세포를 세포-대-Ct 용해 완충액에서 용해시키고, 용해물을 -80℃에서 저장하였다.
SMN2-특이적 스플라이싱 생성물 및 GAPDH mRNA를 표 5에 나타낸 하기의 프라이머 및 프로브를 사용하여 확인하였다. 프라이머 SMN FL 정방향 B(서열번호 7)는 엑손 7(뉴클레오티드 32에서 뉴클레오티드 54) 및 엑손 8(뉴클레오티드 1에서 뉴클레오티드 4) 중의 뉴클레오티드 서열에 혼성화되고, 프라이머 SMN Δ7 정방향 B(서열번호 8)는 엑손 6(뉴클레오티드 87에서 뉴클레오티드 111) 및 엑손 8(뉴클레오티드 1에서 뉴클레오티드 3) 중의 뉴클레오티드 서열에 혼성화되고, 프라이머 SMN 역방향 B(서열번호 9)는 엑손 8(뉴클레오티드 39에서 뉴클레오티드 62) 중의 뉴클레오티드 서열에 혼성화되고, 프로브 SMN 프로브 B(서열번호 10)는 엑손 8(뉴클레오티드 7에서 뉴클레오티드 36) 중의 뉴클레오티드 서열에 혼성화된다. 상기 프라이머 및 프로브들은 인간 SMN1 및 SMN2 mRNA에 공통적인 뉴클레오티드 서열에 혼성화된다. 실시예 3에서 사용된 SMA 환자 세포는 SMN2 유전자만을 함유하기 때문에, RT-qPCR은 SMN2 전장 및 Δ7 mRNA만을 정량화할 수 있다.
[표 5]
SMN 정방향 및 역방향 프라이머는 0.4 μM의 최종 농도로 사용되었다. SMN 프로브는 0.15 μM의 최종 농도로 사용되었다. GAPDH 프라이머는 0.1 μM의 최종 농도로 사용되고 프로브는 0.075 μM의 최종 농도로 사용되었다.
5 μL의 2x RT-PCR 완충액, 0.4 μL의 25x RT-PCR 효소 혼합물, 0.25 μL의 20x GAPDH 프라이머-프로브 혼합물, 1.755 μL의 물, 2.5 μL의 세포 용해물, 0.04 μL의 100 μM SMN FL 또는 SMN Δ7 정방향 프라이머, 0.04 μL의 100 μM SMN 역방향 프라이머, 및 0.015 μL의 100 μM 프로브를 혼합하여 SMN-GAPDH 혼합물(10 μL의 총 부피)을 제조하였다.
PCR을 지시된 시간 동안 하기의 온도에서 수행하였다: 단계 1: 48℃(15분); 단계 2: 95℃(10분); 단계 3: 95℃(15초); 단계 4: 60℃(1분); 이어서, 단계 3 및 4를 총 40 주기 동안 반복.
각각의 반응 혼합물은 SMN2 FL 및 GAPDH, 또는 SMN2 Δ7 및 GAPDH 프라이머/프로브 세트(멀티플렉스 설계)를 포함하여, 두 전사체들의 수준의 동시 측정을 가능케 하였다.
내인성 SMN2 유전자는 2개의 선택적으로 스플라이싱된 mRNA를 생성하였다. 엑손 7을 함유하는 전장 SMN2 mRNA는 용어 "SMN2 FL"을 사용하여 본원에 지칭된다. 엑손 7이 결핍되어 있는 절두된 mRNA는 본원에서 용어 "SMN2 Δ7"로 지칭된다.
비히클 대조군으로 처리된 세포에 비해 SMN2 FL의 증가 및 SMN2 Δ7 mRNA의 감소가 변형 ΔΔCt 방법(문헌 [Livak and Schmittgen, Methods, 25:402-408 (2001)]에 기술된 바와 같은)을 이용하여 실시간 PCR로부터 측정되었다. 증폭 효능(E)는 SMN2 FL, SMN2 Δ7 및 GAPDH에 대한 증폭 곡선의 기울기로부터 개별적으로 산출하였다. 이어서, SMN2 FL, SMN2 Δ7 및 GAPDH의 존재비를 (1 + E)-Ct로부터 산출하였으며, 여기서 Ct는 각 앰플리콘에 대한 임계치이다. SMN2 FL 및 SMN2 Δ7의 존재비는 GAPDH 존재비에 대해 정규화하였다. 이어서, 시험 화합물-처리된 샘플로부터의 정규화된 SMN2 FL 및 SMN2 Δ7 존재비를 비히클-처리된 세포로부터의 정규화된 SMN2 FL 및 SMN2 Δ7 존재비로 각각 나누어서 비히클 대조군에 대한 SMN2 FL 및 SMN2 Δ7 mRNA의 수준을 측정하였다.
결과. 도 4에서 보이듯이, 증가하는 농도의 화합물 6(도 4a) 및 화합물 170(도 4b)으로 처리된 세포는 비히클로 처리된 세포보다 점진적으로 더 많은 SMN2 FL mRNA 및 더 적은 SMN2 Δ7 mRNA를 함유하여, SMN2 선택적 스플라이싱의 교정을 시사하였다.
실시예 4
배양된 세포에서 내인성 SMN2 mRNA 종말점 반-정량적 RT-PCR 스플라이싱 분석
종말점 역전사-PCR 스플라이싱 분석을 이용하여, 시험 화합물로 처리된 SMN2 유전자를 함유하는 1차 세포 및 세포주에서 전장 및 Δ7 SMN2 mRNA의 수준을 가시화하고 정량화하였다.
재료
프로토콜. GM03813 SMA 환자 세포(5,000 세포/웰)를, 96-웰 평편-바닥 플레이트 중의 200 μL의 세포 배양 배지(DMEM 플러스 10% FBS)에 접종하고, 세포의 적절한 분산을 보장하기 위해 플레이트를 즉시 스월링시켜 세포들의 고른 단층을 형성시켰다. 세포를 4 내지 6시간 이상 동안 부착시켰다. 시험 화합물을 100% DMSO에 3.16배로 연속 희석시켜 7-포인트 농도 곡선을 작성하였다. 시험 화합물 용액(1 μL, 200x, DMSO 중)을 각각의 시험 웰에 가하고, 1 μL DMSO를 각 대조군 웰에 가하였다. 플레이트를 세포 배양기(37℃, 5% CO2, 100% 상대 습도)에서 24시간 동안 배양하였다. 이어서, 세포를 세포-대-Ct 용해 완충액에서 용해시키고, 용해물을 -80℃에서 저장하였다.
SMN FL 및 Δ7 mRNA를 표 6에 나타낸 하기의 프라이머를 사용하여 확인하였다. 이들 프라이머는 인간 SMN1 및 SMN2 mRNA에 공통적인 엑손 6(SMN 정방향 C, 서열번호 11)(뉴클레오티드 43에서 뉴클레오티드 63) 및 엑손 8(SMN 역방향 C, 서열번호 12)(뉴클레오티드 51에서 뉴클레오티드 73) 중의 뉴클레오티드 서열에 혼성화된다. 실시예 4에서 사용된 SMA 환자 세포는 SMN2 유전자만을 함유하기 때문에, RT-PCR은 SMN2 전장 및 Δ7 mRNA만을 가시화하고 정량화할 수 있다.
[표 6]
cDNA를 합성하기 위해, 5 μL의 용해물, 4 μL의 5x iScript 반응 혼합물, 1 μL의 역전사효소 및 10 μL의 물을 혼합하고, 25℃에서 5분간 배양한 후, 42℃에서 30분에 이어, 85℃에서 5분간 배양하였다. cDNA 용액을 -20℃에서 저장하였다.
종말점 PCR을 수행하기 위해, 5 μL의 cDNA, 0.2 μL의 100 μM 정방향 프라이머, 0.2 μL의 100 μM 역방향 프라이머 및 22.5 μL의 폴리머라제 슈퍼 믹스를 96웰 세미스커티드(semiskirted) PCR 플레이트에서 혼합하였다. PCR은 지시된 시간 동안 하기의 온도에서 수행하였다: 단계 1: 94℃(2분); 단계 2: 94℃(30초); 단계 3: 55℃(30초); 단계 4: 68℃(1분); 이어서, 단계 2에서 4를 총 33 주기 동안 반복한 후 4℃에서 유지.
10 μL의 각 PCR 샘플을 이중가닥 DNA(dsDNA) 염색 시약(예를 들면, 브롬화 에티듐)으로 염색된 2% 아가로스 E-겔 상에서 14분 동안 전기영동에 의해 분리하고 겔 영상화장치를 사용하여 가시화시켰다.
결과. 도 5에서 보이듯이, 증가하는 농도의 화합물 6(도 5a) 및 화합물 170(도 5b)으로 처리된 세포는 점진적으로 더 많은 SMN2 FL mRNA 및 더 적은 SMN2 Δ7 mRNA를 함유하여, SMN2 선택적 스플라이싱의 교정을 시사하였다.
실시예 5
동물 조직에서 SMN2 mRNA RT-qPCR 스플라이싱 분석
역전사-정량적 PCR-기반(RT-qPCR) 분석을 이용하여, 시험 화합물로 처리된 마우스로부터의 조직 중에서 전장 및 Δ7 SMN2 mRNA의 수준을 정량화하였다.
재료
프로토콜. C/C-대립유전자 SMA 마우스를 0.5% HPMC 및 0.1% 트윈-80에 재현탁시킨 시험 화합물로 10일 동안 하루에 2회(BID) 경구 위관영양법으로 처리하였다. 조직 샘플을 수거하고 RNA 정제를 위해 순간 냉동시켰다.
조직 샘플(20 내지 40 mg)을 1개의 스테인리스 스틸 비드를 사용하여 티슈라이저(TissueLyser) II에서 20 Hz에서 2분 동안 키아졸(QIAzol) 용해 시약에 균질화시켰다. 클로로폼을 첨가한 후, 균질액을 원심분리에 의해 수성 및 유기 상으로 분리하였다. 상부, 수성 상에 분배된 RNA를 추출하고, 에탄올을 첨가하여 적절한 결합 조건을 제공하였다. 이어서, 샘플을 RNeasy 미니 키트로부터의 RNeasy 회전 컬럼에 적용하였으며, 여기서 전체 RNA가 막에 결합하였다. RNA를 RNase-비함유수에 용출시킨 다음 -20℃에서 저장하고, 이어서 7900HT 서모사이클러 상에서 TaqMan RT-qPCR을 이용하여 분석하였다. 전체 RNA를 10배 희석하고, 2.5 μL의 희석 샘플을 TaqMan RT-qPCR 혼합물에 가하였다.
SMN2 스팔라이싱 생성물을 표 7에 나타낸 하기의 프라이머 및 프로브를 사용하여 확인하였다. 프라이머 SMN FL 정방향 B(서열번호 7)는 엑손 7 및 엑손 8 중의 뉴클레오티드 서열에 혼성화되고, 프라이머 SMN Δ7 정방향 B(서열번호 8)는 엑손 6 및 엑손 8 중의 뉴클레오티드 서열에 혼성화되고, 프라이머 SMN 역방향 B(서열번호 9)는 엑손 8 중의 뉴클레오티드 서열에 혼성화되고, 프로브 SMN 프로브 B(서열번호 10)는 엑손 8 중의 한 뉴클레오티드 서열에 혼성화된다. 상기 프라이머 및 프로브들은 인간 SMN1 및 SMN2 mRNA에 공통적인 뉴클레오티드 서열에 혼성화된다. 실시예 5에서 사용된 SMA 환자 세포는 SMN2 유전자만을 함유하기 때문에, RT-qPCR은 SMN2 전장 및 Δ7 mRNA만을 정량화할 수 있다.
[표 7]
SMN 정방향 및 역방향 프라이머는 0.4 μM의 최종 농도로 사용되었다. SMN 프로브는 0.15 μM의 최종 농도로 사용되었다. 5 μL의 2x RT-PCR 완충액, 0.4 μL의 25x RT-PCR 효소 혼합물, 0.25 μL의 20x GAPDH 프라이머-프로브 혼합물, 1.505 μL의 물, 2.5 μL의 RNA 용액, 0.04 μL의 100 μM 정방향 프라이머, 0.04 μL의 100 μM 역방향 프라이머, 및 0.015 μL의 100 μM SMN 프로브를 혼합하여 SMN-GAPDH 혼합물(10 μL의 총 부피)을 제조하였다.
각 PCR 주기는 지시된 시간 동안 하기의 온도에서 수행하였다: 단계 1: 48℃(15분); 단계 2: 95℃(10분); 단계 3: 95℃(15초); 단계 4: 60℃(1분); 이어서, 단계 3 및 4를 총 40 주기 동안 반복.
각각의 반응 혼합물은 SMN2 FL 및 mGAPDH, 또는 SMN2 Δ7 및 mGAPDH 프라이머/프로브 세트(멀티플렉스 설계)를 포함하여, 두 전사체들의 수준의 동시 측정을 가능케 하였다.
비히클 대조군으로 처리된 동물로부터의 조직에 비해 SMN2 FL의 증가 및 SMN2 Δ7 mRNA의 감소가 변형 ΔΔCt 방법(문헌 [Livak and Schmittgen, Methods, 25:402-408 (2001)]에 기술된 바와 같은)을 이용하여 실시간 PCR로부터 측정되었다. 증폭 효능(E)은 SMN2 FL, SMN2 Δ7 및 GAPDH에 대한 증폭 곡선의 기울기로부터 개별적으로 산출하였다. 이어서, SMN2 FL, SMN2 Δ7 및 GAPDH의 존재비를 (1 + E)-Ct로부터 산출하였으며, 여기서 Ct는 각 앰플리콘에 대한 임계치이다. SMN2 FL 및 SMN2 Δ7의 존재비는 GAPDH 존재비에 대해 정규화하였다. 이어서, 시험 화합물-처리된 샘플로부터의 정규화된 SMN2 FL 및 SMN2 Δ7 존재비를 비히클-처리된 세포로부터의 정규화된 SMN2 FL 및 SMN2 Δ7 존재비로 각각 나누어서 비히클 대조군에 대한 SMN2 FL 및 SMN2 Δ7 mRNA의 수준을 측정하였다.
결과. 도 6에서 보이듯이, 화합물 6(도 6a) 및 화합물 170(도 6b)으로 처리된 동물 조직은 비히클로 처리된 조직보다 실질적으로 더 많은 SMN2 FL mRNA 및 더 적은 SMN2 Δ7 mRNA를 함유하여, SMN2 선택적 스플라이싱의 교정을 시사하였다.
실시예 6
동물 조직에서 내인성 SMN2 mRNA 종말점 반-정량적 RT-PCR 스플라이싱 분석
종말점 역전사-PCR(RT-PCR) 스플라이싱 분석을 이용하여, 시험 화합물로 처리된 마우스로부터의 조직 중에서 전장 및 Δ7 SMN2 mRNA의 수준을 정량화하였다.
재료
프로토콜. C/C-대립유전자 SMA 마우스를 0.5% HPMC 및 0.1% 트윈-80 중의 시험 화합물로 10일 동안 BID 경구 위관영양법으로 처리하였다. 조직 샘플을 수거하고 RNA 정제를 위해 순간 냉동시켰다.
조직 샘플(20 내지 40 mg)을 1개의 스테인리스 스틸 비드를 사용하여 티슈라이저 II에서 20 Hz에서 2분 동안 키아졸 용해 시약에 균질화시켰다. 클로로폼을 첨가한 후, 균질액을 원심분리에 의해 수성 및 유기 상으로 분리하였다. 상부, 수성 상으로 분배된 RNA를 추출하고, 에탄올을 첨가하여 적절한 결합 조건을 제공하였다. 이어서, 샘플을 RNeasy 미니 키트로부터의 RNeasy 회전 컬럼에 적용하였으며, 여기서 전체 RNA가 막에 결합하였다. RNA를 RNase-비함유수에 용출시킨 다음 -20℃에서 저장하였다.
SMN2 스팔라이싱 생성물을 표 8에 나타낸 하기의 증폭 프라이머를 사용하여 확인하였다. 이들 프라이머는 인간 SMN1 및 SMN2 mRNA에 공통적인 엑손 6(SMN 정방향 D, 서열번호 13)(뉴클레오티드 22에서 뉴클레오티드 46) 및 엑손 8(SMN 역방향 C, 서열번호 12) 중의 뉴클레오티드 서열에 혼성화된다.
[표 8]
cDNA를 합성하기 위해, 1 μL의 RNA 용액(25 내지 50 ng), 4 μL의 5x iScript 반응 혼합물, 1 μL의 역전사효소 및 10 μL의 물을 혼합하고, 25℃에서 5분간 배양한 후, 42℃에서 30분에 이어, 85℃에서 5분간 배양하였다. cDNA 용액을 -20℃에서 저장하였다.
종말점 PCR을 수행하기 위해, 5 μL의 cDNA, 0.2 μL의 100 μM 정방향 프라이머, 0.2 μL의 100 μM 역방향 프라이머 및 22.5 μL의 폴리머라제 슈퍼 믹스를 96웰 세미스커티드 PCR 플레이트에서 혼합하였다. PCR은 지시된 시간 동안 하기의 온도에서 수행하였다: 단계 1: 94℃(2분); 단계 2: 94℃(30초); 단계 3: 55℃(30초); 단계 4: 68℃(1분); 이어서, 단계 2에서 4를 총 33 주기 동안 반복한 후 4℃에서 유지.
10 μL의 각 PCR 샘플을 dsDNA 염색 시약(예를 들면, 브롬화 에티듐)으로 염색된 2% 아가로스 E-겔 상에서 14분 동안 전기영동에 의해 분리하고 겔 영상화장치를 사용하여 가시화시켰다.
결과. 도 7에서 보이듯이, 증가하는 농도의 화합물 6(도 7a) 및 화합물 170(도 7b)으로 처리된 세포는 점진적으로 더 많은 SMN2 FL mRNA 및 더 적은 SMN2 Δ7 mRNA를 함유하여, SMN2 선택적 스플라이싱의 교정을 시사하였다.
실시예 7
배양된 세포에서 Smn 단백질 분석
SMN HTRF(homogenous time resolved fluorescence, 균질적 시간 분해 형광) 분석을 이용하여, 시험 화합물로 처리된 SMA 환자 섬유아세포에서 Smn 단백질의 수준을 정량화하였다. 분석 결과는 표 9에 나타내었다.
재료
프로토콜. 세포를 해동시키고 DMEM-10% FBS 중에서 72시간 동안 배양하였다. 세포를 트립신처리하고, 계수하고, DMEM-10% FBS 중에 25,000 세포/mL의 농도로 재현탁하였다. 세포 현탁액을 96웰 미세적정 플레이트에 웰 당 5,000개 세포로 플레이팅하고 3 내지 5시간 동안 배양하였다. 대조군 신호를 제공하기 위해, 96웰 플레이트중 3개의 웰은 세포를 수용하지 않았으며, 따라서, 블랭크 대조군 웰로 사용되었다. 시험 화합물을 100% DMSO에 3.16배로 연속 희석시켜 7-포인트 농도 곡선을 작성하였다. 1 μL의 시험 화합물 용액을 세포-함유 웰로 옮기고, 세포를 세포 배양기(37℃, 5% CO2, 100% 상대 습도)에서 48시간 동안 배양하였다. 각 시험 화합물 농도에 대해 3중의 샘플을 마련하였다. 48시간 후에, 상등액을 웰로부터 제거하고, 프로테아제 억제제를 함유하는 RIPA 용해 완충액 25 μL를 웰에 가하고, 실온에서 교반 하에 1시간 동안 배양하였다. 25 μL의 희석제를 가한 다음, 35 μL의 생성 용해물을 384-웰 플레이트로 옮겼으며, 이때 상기 플레이트에서 각 웰은 5 μL의 항체 용액(SMN 재구성 완충액 중의 항-SMN d2 및 항-SMN 크립테이트의 1:100 희석액)을 함유하였다. 플레이트를 1분 동안 원심분리하여 용액을 웰의 바닥으로 가라앉힌 다음, 실온에서 밤새 배양하였다. 665 nm 및 620 nm에서 플레이트의 각 웰에 대한 형광을 엔비전(EnVision) 다중표지 플레이트 판독기(퍼킨-엘머(Perkin-Elmer)) 상에서 측정하였다.
정규화된 형광 신호를, 665 nm에서의 신호 및 620 nm에서의 신호로 나눔으로써 각 샘플, 블랭크 및 비히클 대조군 웰에 대해 산출하였다. 신호를 정규화하는 것은 용해물의 매트릭스 효과로 인해 가능한 형광 소광을 고려하였다. 각 샘플 웰에 대한 ΔF 값(% 값으로서 Smn 단백질 존재비의 측정치)은 각 샘플 웰에 대한 정규화된 형광으로부터 블랭크 대조군 웰에 대한 정규화된 평균 형광을 감한 다음 상기 차이를 블랭크 대조군 웰에 대한 정규화된 평균 형광으로 나누고, 생성된 값을 100으로 곱함으로써 산출하였다. 각 샘플 웰에 대해 수득된 ΔF 값은 시험 화합물-처리 샘플로부터의 Smn 단백질 존재비를 나타낸다. 각 샘플 웰에 대한 ΔF 값을 비히클 대조군 웰에 대한 ΔF 값으로 나누어서 비히클 대조군에 대한 Smn 단백질 존재비의 증가 배수를 산출하였다.
결과. 도 8에서 보이듯이, 시험 화합물 6(도 8a) 및 화합물 170(도 8b)으로 처리된 제1형 SMA 환자 섬유아세포는 SMN HTRF 분석법으로 측정할 때 Smn 단백질 발현에 용량 의존성 증가를 나타내었다.
본원에 개시된 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태에 대해, 표 9는 생물학적 실시예 7의 절차에 따라 각각의 시험 화합물에 대해 작성된 7-포인트 농도 데이터로부터 수득된 Smn 단백질 발현을 위한 EC1.5x를 나타낸 것이다. 용어 "Smn 단백질 발현을 위한 EC1.5x"는 DMSO 비히클 대조군으로부터 생성된 양에 비해 SMA 환자 섬유아세포 중에 1.5배 량의 Smn 단백질을 생성하는데 효과적인 시험 화합물의 농도로서 정의된다. >3 μM 내지 ≤10 μM의 Smn 단백질 발현을 위한 EC1.5x는 별 1개(*)로 나타내고, >1 μM 내지 ≤3 μM의 EC1.5x는 별 2개(**)로 나타내고, >0.3 μM 내지 ≤1 μM의 EC1.5x는 별 3개(***)로 나타내고, ≤0.3 μM의 EC1.5x는 별 4개(****)로 나타내었다.
[표 9]
본원에 개시된 화학식 I의 화합물 또는 이의 한 형태에 대해, 표 10은 생물학적 실시예 7의 절차에 따라 각각의 시험 화합물에 대해 작성된 7-포인트 농도 데이터로부터 수득된 Smn 단백질의 최대 증가 배수(Fold)를 나타낸 것이다. ≤1.2의 최대 증가 배수는 별 1개(*)로 나타내고, >1.2 내지 ≤1.35의 증가 배수는 별 2개(**)로 나타내고, >1.35 내지 ≤1.5의 증가 배수는 별 3개(***)로 나타내고, >1.5 내지 ≤1.65의 증가 배수는 별 4개(****)로 나타내고, >1.65의 증가 배수는 별 5개(*****)로 나타내었다.
[표 10]
실시예 8
Gems 계수(Smn-의존성 핵 반점 수) 분석
Smn 단백질의 수준은 형광 표지된 항-Smn 항체로 세포를 염색 시 생성된, gems로도 알려진 핵 초점(nuclear foci)의 양과 직접 상관된다(문헌 [Liu and Dreyfuss, EMBO J., 15:3555 (1996)]). gems는 Smn 단백질에 의해 그 형성이 응집되는 다중단백질 복합체이며, gems 계수 분석은 세포내 Smn 단백질의 수준을 평가하기 위해 사용된다. 본원에 기술된 바와 같이, gems 계수 분석은 시험 화합물로 처리된 SMA 환자 섬유아세포내 Smn 단백질의 수준을 정량화하기 위해 사용되었다.
재료
프로토콜. 세포를 해동시키고 DMEM-10% FBS 중에서 72시간 동안 배양한 다음, 트립신처리하고, 계수하고, DMEM-10% FBS 중에 100,000 세포/mL로 재현탁하였다. 세포 현탁액(2 mL)을 멸균 커버 슬립이 있는 6-웰 세포 배양 플레이트에 플레이팅하고 3 내지 5시간 동안 배양하였다. 시험 화합물을 100% DMSO에 3.16배로 연속 희석시켜 7-포인트 농도 곡선을 작성하였다. 10 μL의 시험 화합물 용액을 각각의 세포-함유 웰에 가하고, 세포 배양기(37℃, 5% CO2, 100% 상대 습도)에서 48시간 동안 배양하였다. 각 시험 화합물 농도에 대해 2중으로 준비하였다. 0.5%의 최종 농도의 DMSO를 함유하는 세포를 대조군으로 사용하였다.
세포 배양 배지를 커버 슬립을 포함하는 웰로부터 흡인하고 차가운 PBS로 3회 약하게 세척하였다. 세포를 파라폼알데하이드 중에서 실온에서 20분간 배양하여 고정시켰다. 이어서, 세포를 차가운 PBS로 2회 세척한 후 PBS 중에서 0.05% 트리톤 X-100과 함께 실온에서 5분간 배양하여 세포를 투과화시켰다. 고정된 세포를 차가운 PBS로 3회 세척한 후, 이들을 10% FBS로 1시간 동안 차단시켰다. 차단 완충액에 1:1000으로 희석된 1차 항체 60 μL를 가하고 혼합물을 실온에서 1시간 동안 배양하였다. 세포를 PBS로 3회 세척하고, 차단 완충액에 1:5000으로 희석된 2차 항체 60 μL를 가한 다음, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 배양하였다. 커버 슬립을 봉입제를 사용하여 슬라이드 위에 장착하고 밤새 건조시켰다. 손톱 광택제를 커버 슬립의 슬라이드에 도포하고, 슬라이드를 빛으로부터 차단하여 저장하였다. 63x 플랜-아포크로마트(Plan-Apochromat), NA=1.4 대물렌즈를 갖는 제이스 악소버트(Zeiss Axovert) 135를 면역형광 검출 및 계수에 사용하였다. gems 수는 ≥150개 핵에 대하여 계수하였으며, 활성화%는 대조군으로서 DMSO 및 10 nM 보르테조밉(bortezomib)을 사용하여 산출하였다. 각각의 시험 화합물에 대해, 고유 형광을 갖는 시험 화합물을 확인하기 위해 세포를 모든 파장에서 검사하였다.
결과. 도 9에서 보이듯이, 시험 화합물 6(도 9a) 및 화합물 170(도 9b)으로 처리된 제1형 SMA 환자 세포는 DMSO로 처리된 세포에 비해 점진적으로 더 많은 gems를 함유하였다.
실시예 9
인간 운동 뉴런에서 Smn 단백질 분석
Smn 면역형광 공초점 현미경을 사용하여 시험 화합물로 처리된 인간 운동 뉴런에서 Smn 단백질의 수준을 정량화하였다.
프로토콜. SMA iPS 세포로부터 유도된 인간 운동 뉴런(문헌 [Ebert et al., Nature, 457:2770 (2009); and Rubin et al., BMC Biology, 9:42 (2011)])을 다양한 농도의 시험 화합물로 72시간 동안 처리하였다. 세포 핵 중의 Smn 단백질의 수준은 근본적으로 문헌 [Makhortova et al., Nature Chemical Biology, 7:544 (2011)]에 기술된 바와 같이 Smn 면역염색 및 공초점 형광 현미경을 사용하여 정량화하였다. 화합물-처리 샘플 중 Smn 단백질의 수준은 비히클-처리 샘플 중에서의 상기 수준에 대해 정규화시키고 화합물 농도의 함수로서 플로팅하였다.
결과. 도 10에서 보이듯이, 증가하는 농도의 시험 화합물 6으로 72시간 동안 처리된 인간 운동 뉴런은 핵에 점진적으로 더 많은 Smn 단백질을 함유하였다.
실시예 10
동물 조직에서 Smn 단백질 분석
본 Smn 단백질 분석은 인간 SMN2 유전자로부터 생성된 Smn 단백질의 수준의 증가를 측정하기 위해 시험 화합물 처리된 마우스로부터의 조직을 DMSO 비히클 처리된 마우스로부터의 조직과 비교하였다.
재료
프로토콜. 세이프-록(Safe-Lock) 튜브 중의 조직 샘플을 계량하고, 프로테아제 억제제 혼합물을 함유하는 일정 부피의 RIPA 완충액을 각 유형의 조직에 대해 중량 대 부피 비를 기준으로 첨가하였다: 뇌(50 mg/mL), 근육(50 mg/mL) 및 척수(25 mg/mL).
조직들을 비드 밀링에 의해 티슈라이저를 사용하여 균질화시켰다. 5 mm 스테인리스 스틸 비드를 샘플에 가하고, 티슈라이저에서 30 Hz에서 5분 동안 강하게 교반하였다. 이어서, 샘플을 미세원심분리기에서 14,000xg로 20분 동안 원심분리하고 균질액을 PCR 플레이트로 옮겼다. BCA 단백질 분석을 이용하여 균질액을 HTRF를 위해 RIPA 완충액에 약 1 mg/mL로 및 전체 단백질 측정을 위해 약 0.5 mg/mL로 희석하였다. SMN HTRF 분석을 위해, 35 μL의 조직 균질액을 5 μL의 항체 용액(재구성 완충액 중 항-SMNd2 및 항-SMN 크립테이트 각각의 1:100 희석액)을 함유하는 384-웰 플레이트로 옮겼다. 대조군 신호를 제공하기 위해, 플레이트 중 3개의 웰은 RIPA 용해 완충액만을 함유하였으며, 따라서, 블랭크 대조군 웰로 사용되었다. 플레이트를 1분 동안 원심분리하여 용액을 웰의 바닥으로 가라앉힌 다음, 실온에서 밤새 배양하였다. 665 nm 및 620 nm에서 플레이트의 각 웰에 대한 형광을 엔비전 다중표지 플레이트 판독기(퍼킨-엘머) 상에서 측정하였다. 조직 균질액 중 전체 단백질은 BCA 분석법을 제조사의 프로토콜에 따라 사용하여 측정하였다.
정규화된 형광 신호를, 665 nm에서의 신호 및 620 nm에서의 신호로 나눔으로써 각 샘플, 블랭크 및 비히클 대조군 웰에 대해 산출하였다. 신호를 정규화하는 것은 조직 균질액의 매트릭스 효과로 인해 가능한 형광 소광을 고려하였다. 각 조직 샘플 웰에 대한 ΔF 값(% 값으로서 Smn 단백질 존재비의 측정치)은 각각의 조직 샘플 웰에 대한 정규화된 형광으로부터 블랭크 대조군 웰에 대한 정규화된 평균 형광을 감한 다음 상기 차이를 블랭크 대조군 웰에 대한 정규화된 평균 형광으로 나누고 생성된 값을 100으로 곱함으로써 산출하였다. 각 조직 샘플 웰에 대한 ΔF 값을 상기 조직 샘플에 대한 전체 단백질량(BCA 분석을 이용하여 측정)으로 나누었다. 비히클 대조군 대비 각 조직 샘플에 대한 Smn 단백질 존재비의 변화는 시험 화합물의 존재 하에서의 조직 샘플의 ΔF 값, 및 비히클 대조군 신호의 평균 ΔF 값으로 나눈 비히클 대조군 신호의 평균 ΔF 값에서의 퍼센트 차이로서 산출하였다.
실시예 11
성체 C/C-대립유전자 SMA 마우스 조직에서 Smn 단백질 분석
성체 C/C-대립유전자 SMA 마우스에서 Smn 단백질에 대한 분석에 사용하기 위한 조직을 실시예 10에 기술된 바와 같이 준비하였다. 분석은 10일 동안 시험 화합물에 의한 C/C-대립유전자 SMA 마우스의 처리가 SMN2 유전자로부터 생성된 Smn 단백질의 수준을 증가시키는지를 평가하였다.
재료
프로토콜. C/C-대립유전자 SMA 마우스에 10일 동안 10 mg/kg의 시험 화합물 또는 비히클로 BID 경구로(0.1% 트윈-80과 함께 0.5% 하이드록시프로필메틸 셀룰로스(HPMC) 중에서) 투여하였다. 연령-매치된 이형접합 마우스에게 대조군으로 사용하기 위해 비히클을 투여하였다. 실시예 10에 따라 단백질 수준의 분석을 위해 조직을 수거하였다.
결과. 도 11에서 보이듯이, 전체 단백질 정규화된 Smn 수준은 화합물 6을 사용하여 10일 동안 100 mg/kg BID로 처리되거나(도 11a) 화합물 170을 사용하여 10일 동안 10 mg/kg BID로 처리된(도 11b) 성체 C/C-대립유전자 SMA 마우스의 뇌, 척수 및 근육 조직에서 비히클 군에 비해 증가되었다.
실시예 12
신생 Δ7 SMA 마우스의 조직내 Smn 단백질
신생 SMA 마우스 조직에서 Smn 단백질에 대한 분석을 이용하여 시험 화합물에 의한 처리가 SMN2 유전자로부터 생성된 Smn 단백질 수준을 증가시키는지를 측정하였다.
재료
프로토콜. SMA Δ7 동형접합 유전자제거 마우스에게 생후(PND) 3일부터 PND 9까지 시험 화합물 또는 비히클(100% DMSO)을 하루에 1회(QD) 복강내(IP) 투여하였다. 실시예 10에 따라 단백질 수준의 분석을 위해 조직을 수거하였다.
결과. 도 12에 보이듯이, 전체 단백질 정규화된 Smn 수준은 화합물 6으로 처리된 신생 SMA Δ7 동형접합 유전자제거 마우스의 뇌, 척수, 근육 및 피부 조직(각각 도 12a, 12b, 12c 및 12d) 및 화합물 170으로 처리된 신생 SMA Δ7 동형접합 유전자제거 마우스의 뇌, 척수 및 근육(각각 도 12e, 12f 및 12g)에서 용량 의존적으로 증가하였다.
실시예 13
신생 Δ7 SMA 마우스의 체중
신생 SMA 마우스의 체중의 변화를 이용하여 시험 화합물에 의한 처리가 체중을 개선시키는지를 측정하였다.
재료
프로토콜. SMA Δ7 동형접합 유전자제거 마우스에게 PND 3으로부터 투약 요법이 IP에 사용된 용량보다 3.16배 더 높은 용량에서 0.1% 트윈-80과 함께 0.5% 하이드록시프로필메틸 셀룰로스(HPMC) 중에서 BID 경구 투여로 전환될 때까지 시험 화합물 또는 비히클(100% DMSO)을 QD 복강내(IP) 투여하였다. 시험 화합물 또는 비히클로 처리된 SMA Δ7 마우스 및 연령 매치된 이형접합 마우스의 체중을 매일 기록하였다.
결과. 도 13에 보이듯이, 화합물 6(PND 3부터 PND 30까지 IP QD, 이어서 PND 31부터 연구 종료까지 경구 BID 투여됨)(도 13a) 및 화합물 170(PND 3부터 PND 23까지 IP QD, 이어서 PND 24부터 연구 종료까지 경구 BID 투여됨)(도 13b)으로 처리된 신생 SMA Δ7 동형접합 유전자제거 마우스의 비히클 처리된 마우스에 비해 개선되었다.
실시예 14
신생 Δ7 SMA 마우스에서 정위 반사
신생 SMA 마우스의 정위 반사에서의 기능 변화를 이용하여 시험 화합물에 의한 처리가 정위 반사를 개선시키는지를 측정하였다.
재료
프로토콜. SMA Δ7 동형접합 유전자제거 마우스에게 PND 3으로부터 투약 요법이 IP에 사용된 용량보다 3.16배 더 높은 용량에서 0.1% 트윈-80과 함께 0.5% 하이드록시프로필메틸 셀룰로스(HPMC) 중에서 BID 경구 투여로 전환될 때까지 시험 화합물 또는 비히클(100% DMSO)을 QD 복강내(IP) 투여하였다. 정위 반사 시간은 마우스가 반듯이 누여진 후 비틀어 뒤집는데 소요된 시간으로서 측정되었다. 정위 반사는 각 측정 사이에 5분 간격으로 각각의 마우스에 대해 5회 측정하였다(각 시도에 대해 30초의 최대 시간 허용). 시험 화합물 또는 비히클로 처리된 SMA Δ7 동형접합 유전자제거 마우스 및 연령-매치된 이형접합 마우스에 대한 정위 반사 시간은 생후 10, 14 및 18일에 측정하고 플로팅하였다.
결과. 도 14에서 보이듯이, PND 3으로부터 IP QD 투여된 화합물 6(도 14a) 및 화합물 170(도 14b)으로 처리된 신생 SMA Δ7 동형접합 유전자제거 마우스의 정위 반사는 비히클 처리된 마우스에 비해 개선되었다. 시험 화합물 처리된 신생 SMA Δ7 동형접합 유전자제거 마우스의 정위 시간은 PND 18에 연령 매치된 이형접합 마우스의 정위 시간과 유사하였다.
실시예 15
신생 Δ7 SMA 마우스의 생존율
시간 경과에 따른 생존 마우스의 수의 변화를 이용하여 시험 화합물에 의한 처리가 생존율을 개선시키는지를 측정하였다.
재료
프로토콜. SMA Δ7 동형접합 유전자제거 마우스에게 PND 3으로부터 투약 요법이 복강내(IP)에 사용된 용량보다 3.16배 더 높은 용량에서 0.1% 트윈-80과 함께 0.5% 하이드록시프로필메틸 셀룰로스(HPMC) 중에서 BID 경구 투여로 전환되고, 이어서 IP에 사용된 용량보다 6.32배 더 높은 용량에서 0.1% 트윈-80과 함께 0.5% 하이드록시프로필메틸 셀룰로스(HPMC) 중에서 QD 경구 투여로 전환될 때까지 시험 화합물 또는 비히클(100% DMSO)을 하루에 1회(QD) 복강내(IP) 투여하였다. 각 군에서 생존하는 마우스의 수를 매일 기록하고 마우스의 전체 수의 퍼센트로서 플로팅하였다. SMA Δ7 및 연령-매치된 이형접합 마우스의 조직을 Smn 단백질 수준의 측정을 위해 수거하고 실시예 10에서 상술한 바와 같이 처리하였다. 이형접합 마우스에서의 Smn 수준을 100%로 설정하여, 조직에서 측정된 전체 단백질 정규화된 Smn 단백질 수준을 연령-매치된 이형접합 마우스 조직에서 상기 수준의 퍼센트로서 플로팅하였다. 이형접합 마우스 조직 대비 시험 화합물 처리된 마우스 조직에서의 Smn 단백질 수준을 그래프에서 각각의 막대 위의 %값으로서 나타내었다.
결과. 도 15에 보이듯이, 화합물 6(도 15a)(PND 3부터 PND 30까지 IP QD, 이어서 PND 31부터 연구 종료까지 경구 BID 투여됨) 및 화합물 170(도 15b)(PND 3부터 PND 23까지 IP QD, 이어서 PND 31부터 연구 종료까지 경구 BID 투여됨)으로 처리된 신생 SMA Δ7 동형접합 유전자제거 마우스의 생존율은 비히클 처리된 마우스에 비해 개선되었다. 도 16에 보이듯이, 화합물 6(PND 3부터 PND 30까지 IP 10 mg/kg QD, 이어서 PND 31부터 PND 156까지 경구 30 mg/kg BID 투여됨)(도 16a) 및 화합물 170(PND 3부터 PND 23까지 IP 3 mg/kg QD, 이어서 PND 24부터 PND 8까지 경구 10 mg/kg BID, PND 89부터 PND 185까지 경구 20 mg/kg QD 투여됨)(도 16b)으로 처리된 후 SMA Δ7 동형접합 유전자제거 마우스의 뇌, 척수 및 근육 조직 내의 Smn 단백질은 비히클 처리되고 연령-부합된 이형접합 마우스와 비교하여 측정되고 플로팅되었다.
실시예 16
배양된 세포에서 인간 SMN1 미니유전자 mRNA 종말점 반-정량적 RT-PCR 스플라이싱 분석
RT-PCR 분석을 사용하여, 시험 화합물로 처리된 인간 SMN1 미니유전자 구조물을 발현하는 1차 세포 및 세포주에서 인간 SMN1 미니유전자 전장 및 Δ7 mRNA의 수준을 가시화시키고 정량화시켰다.
재료
SMN1 미니유전자 구조물
미니유전자 구조물의 제조
생물학적 실시예 1에 기술된 SMN2 미니유전자 구조물의 제조 과정을 사용하여, 미니유전자의 SMN1 버전을 SMN2-A 미니유전자 구조물의 엑손 7의 6번째 뉴클레오티드(티민 잔기)를 부위-지향된 돌연변이에 의해 시토신으로 대체함으로써 생성시켰다. 따라서, SMN2-A 미니유전자 구조물과 유사하게, SMN1 미니유전자 구조물은 엑손 7의 핵 잔기 48 후에 삽입된 단일 아데닌 잔기를 갖는다. SMN1 미니유전자 구조물은 SMN1-A로 지칭된다.
프로토콜. HEK293H 세포(10,000 세포/웰/199 μL)를 웰 당 15 ng의 SMN1-A 미니유전자 리포터 플라스미드를 갖는 96-웰 플레이트 중에서 푸겐(FuGENE)-6 시약으로 형질감염시켰다. 세포를 형질감염에 이어서 24시간 동안 배양하였다. 시험 화합물을 100% DMSO 중에서 3.16배 멸균 희석하여 7-포인트 농도 곡선을 얻었다. 시험 화합물의 용액(1 μL, DMSO 중 200x)을 각각의 시험 웰에 첨가하였다. 1 μL DMSO를 각각의 대조군 웰에 첨가하였다. 플레이트를 세포 배양기(37℃, 5% CO2, 100% 상대 습도)에서 7시간 동안 배양하였다. 이어서, 세포를 세포-대-Ct 용해 완충액에 용해시키고, 용해물을 -80℃에서 저장하였다.
2개의 SMN 스플라이싱된 mRNA는 SMN1 미니유전자로부터 생성된다. 용어 "SMN1 미니유전자 FL"은 엑손 7을 함유하는 제1 스플라이싱된 생성물(전장 SMN1 mRNA에 상응함)을 지칭한다. 용어 "SMN1 미니유전자 Δ7"은 엑손 7이 결핍된 제2 생성물을 지칭한다.
SMN 미니유전자 FL 및 Δ7 mRNA는 표 1의 프라이머를 사용하여 지칭된다. 프라이머 SMN 정방향 C(서열번호 11)는 엑손 6의 뉴클레오티드 서열(뉴클레오티드 43부터 뉴클레오티드 63까지)로 혼성화되고, 프라이머 SMN 역방향 A(서열번호 2)는 반딧불이 루시퍼라제의 코딩 서열의 뉴클레오티드 서열로 혼성화된다. 이러한 2개의 올리고뉴클레오티드의 조합은 단지 SMN1 또는 SMN2 미니유전자(RT-PCR)를 검출하고, 내인성 SMN1 또는 SMN2 유전자는 검출하지 않는다. 실시에 16에 사용된 HEK293H 세포가 단지 인간 SMN1 미니유전자에 의해 형질감염되므로, RT-PCR은 단지 SMN1 미니유전자 전장 및 SMN1 미니유전자 Δ7 mRNA를 가시화시키고 정량화시킬 수 있다.
[표 11]
cDNA를 합성하기 위하여, 5 μL의 용해물, 4 μL의 5x 아이스크립트 반응 믹스, 1 μL의 역전사효소 및 10 μL의 물을 합하고, 25℃에서 5분, 이어서 42℃에서 30분, 이어서 85℃에서 5분 동안 배양한다. cDNA 용액을 -20℃에서 저장한다.
종말점 PCR을 수행하기 위하여, 5 μL의 cDNA, 0.2 μL의 100 μM 정방향 프라이머, 0.2 μL의 100 μM 역방향 프라이머 및 22.5 μL의 중합효소 수퍼 믹스를 96-웰 세미스커티디 PCR 플레이트에서 합한다. PCR을 하기 지시된 시간 동안 하기 온도에서 수행한다: 단계 1: 94℃(2분), 단계 2: 94℃(30초), 단계 3: 55℃(30초), 단계 4: 68℃(1분), 이어서 총 33 주기 동안 단계 2 내지 4를 반복하고, 4℃에서 유지한다.
10 μL의 각각의 PCR 샘플을 2% 아가로스 E-겔 상에서 14분 동안 전기영동으로 분리하고, dsDNA 염색 시약(예컨대, 에티듐 브로마이드)으로 염색하고, 겔 영상화기를 사용하여 가시화시킨다.
결과. 도 17에 보이듯이, 증가하는 농도의 화합물 6(도 17a) 및 화합물 170(도 17b)으로 처리된 세포는 점진적으로 보다 많은 SMN1 미니유전자 FL mRNA 및 보다 적은 SMN1 미니유전자 Δ7 mRNA를 함유하고, 이는 SMN1 대체 스플라이싱의 교정을 나타낸다.
본원에 인용된 문서가 참고로 인용되는 것으로 구체적으로 및 개별적으로 언급되었지 여부와 무관하게, 본원에 언급된 모든 문서들은 각각의 개별적 언급이 본원에 전체로 나타낸 바와 동일한 정도로 임의의 및 모든 목적으로 본 출원에 참고로 인용된다.
특정 양태들이 상기에서 상세히 기술되었지만, 당해 분야에 통상의 기술을 가진 자라면 이의 교시내용으로부터 벗어나지 않고 상기 양태들에서 많은 변형이 가능함을 명백히 이해할 것이다. 모든 상기 변형은 본원에 기술된 바와 같은 특허청구범위 내에 포함되는 것이다.
SEQUENCE LISTING
<110> PTC THERAPEUTICS, INC.
F. HOFFMANN-LA ROCHE AG
<120> COMPOUNDS FOR TREATING SPINAL MUSCULAR ATROPHY
<130> 10589-162-228
<140> PCT/US2013/025292
<141> 2013-02-08
<150> US 61/597,523
<151> 2012-02-10
<160> 21
<170> FastSEQ for Windows Version 4.0
<210> 1
<211> 19
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SMN Forward Primer A
<400> 1
gaaggaaggt gctcacatt 19
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<211> 22
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SMN Reverse Primer A
<400> 2
tctttatgtt tttggcgtct tc 22
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<211> 26
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SMN Forward Probe A
<400> 3
aaggagaaat gctggcatag agcagc 26
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<211> 21
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> hGAPDH Forward Probe
<400> 4
cgcctggtca ccagggctgc t 21
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<211> 21
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> hGAPDH Forward Primer
<400> 5
caacggattt ggtcgtattg g 21
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<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> hGAPDH Reverse Primer
<400> 6
tgatggcaac aatatccact ttacc 25
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<211> 27
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SMN FL Forward Primer B
<400> 7
gctcacattc cttaaattaa ggagaaa 27
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<211> 28
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SMN delta-7 Forward Primer B
<400> 8
tggctatcat actggctatt atatggaa 28
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<211> 24
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SMN Reverse Primer B
<400> 9
tccagatctg tctgatcgtt tctt 24
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<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SMN Forward Probe B
<400> 10
ctggcataga gcagcactaa atgacaccac 30
<210> 11
<211> 21
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SMN Forward C
<400> 11
gatgctgatg ctttgggaag t 21
<210> 12
<211> 22
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SMN Reverse C
<400> 12
cgcttcacat tccagatctg tc 22
<210> 13
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SMN Forward D
<400> 13
atatgtccag attctcttga tgatg 25
<210> 14
<211> 11
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 5-prime end of exon 6 of the SMN2 gene
<400> 14
ataattcccc c 11
<210> 15
<211> 6
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> nucleic acid residue 23 of exon 8 of the SMN2 gene
<400> 15
cagcac 6
<210> 16
<211> 28
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> PCR forward primer
<400> 16
cgcggatcca taattccccc accacctc 28
<210> 17
<211> 28
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> PCR reverse primer
<400> 17
cgcggatccg tgctgctcta tgccagca 28
<210> 18
<211> 6
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> BamHI restriction endonuclease recognition sequence
<400> 18
ggatcc 6
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<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 5-prime DEG UTR
<400> 19
tagcttctta cccgtactcc accgttggca gcacgatcgc acgtcccacg tgaaccattg 60
gtaaaccctg 70
<210> 20
<211> 120
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 3-prime DEG UTR
<400> 20
atcgaaagta caggactagc cttcctagca accgcgggct gggagtctga gacatcactc 60
aagatatatg ctcggtaacg tatgctctag ccatctaact attccctatg tcttataggg 120
<210> 21
<211> 8266
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> DNA sequence of SMN2-A minigene
<400> 21
tagcttctta cccgtactcc accgttggca gcacgatcgc acgtcccacg tgaaccattg 60
gtaaaccctg atgggatcca taattccccc accacctccc atatgtccag attctcttga 120
tgatgctgat gctttgggaa gtatgttaat ttcatggtac atgagtggct atcatactgg 180
ctattatatg gtaagtaatc actcagcatc ttttcctgac aatttttttg tagttatgtg 240
actttgtttt gtaaatttat aaaatactac ttgcttctct ctttatatta ctaaaaaata 300
aaaataaaaa aatacaactg tctgaggctt aaattactct tgcattgtcc ctaagtataa 360
ttttagttaa ttttaaaaag ctttcatgct attgttagat tattttgatt atacactttt 420
gaattgaaat tatacttttt ctaaataatg ttttaatctc tgatttgaaa ttgattgtag 480
ggaatggaaa agatgggata atttttcata aatgaaaaat gaaattcttt tttttttttt 540
tttttttttg agacggagtc ttgctctgtt gcccaggctg gagtgcaatg gcgtgatctt 600
ggctcacagc aagctctgcc tcctggattc acgccattct cctgcctcag cctcagaggt 660
agctgggact acaggtgcct gccaccacgc ctgtctaatt ttttgtattt ttttgtaaag 720
acagggtttc actgtgttag ccaggatggt ctcaatctcc tgaccccgtg atccacccgc 780
ctcggccttc caagagaaat gaaatttttt taatgcacaa agatctgggg taatgtgtac 840
cacattgaac cttggggagt atggcttcaa acttgtcact ttatacgtta gtctcctacg 900
gacatgttct attgtatttt agtcagaaca tttaaaatta ttttatttta ttttattttt 960
tttttttttt tgagacggag tctcgctctg tcacccaggc tggagtacag tggcgcagtc 1020
tcggctcact gcaagctccg cctcccgggt tcacgccatt ctcctgcctc agcctctccg 1080
agtagctggg actacaggcg cccgccacca cgcccggcta attttttttt atttttagta 1140
gagacggggt ttcaccgtgg tctcgatctc ctgacctcgt gatccacccg cctcggcctc 1200
ccaaagtgct gggattacaa gcgtgagcca ccgcgcccgg cctaaaatta tttttaaaag 1260
taagctcttg tgccctgcta aaattatgat gtgatattgt aggcacttgt atttttagta 1320
aattaatata gaagaaacaa ctgacttaaa ggtgtatgtt tttaaatgta tcatctgtgt 1380
gtgcccccat taatattctt atttaaaagt taaggccaga catggtggct tacaactgta 1440
atcccaacag tttgtgaggc cgaggcaggc agatcacttg aggtcaggag tttgagacca 1500
gcctggccaa catgatgaaa ccttgtctct actaaaaata ccaaaaaaaa tttagccagg 1560
catggtggca catgcctgta atccgagcta cttgggaggc tgtggcagga aaattgcttt 1620
aatctgggag gcagaggttg cagtgagttg agattgtgcc actgcactcc acccttggtg 1680
acagagtgag attccatctc aaaaaaagaa aaaggcctgg cacggtggct cacacctata 1740
atcccagtac tttgggaggt agaggcaggt ggatcacttg aggttaggag ttcaggacca 1800
gcctggccaa catggtgact actccatttc tactaaatac acaaaactta gcccagtggc 1860
gggcagttgt aatcccagct acttgagagg ttgaggcagg agaatcactt gaacctggga 1920
ggcagaggtt gcagtgagcc gagatcacac cgctgcactc tagcctggcc aacagagtga 1980
gaatttgcgg agggaaaaaa aagtcacgct tcagttgttg tagtataacc ttggtatatt 2040
gtatgtatca tgaattcctc attttaatga ccaaaaagta ataaatcaac agcttgtaat 2100
ttgttttgag atcagttatc tgactgtaac actgtaggct tttgtgtttt ttaaattatg 2160
aaatatttga aaaaaataca taatgtatat ataaagtatt ggtataattt atgttctaaa 2220
taactttctt gagaaataat tcacatggtg tgcagtttac ctttgaaagt atacaagttg 2280
gctgggcaca atggctcacg cctgtaatcc cagcactttg ggaggccagg gcaggtggat 2340
cacgaggtca ggagatcgag accatcctgg ctaacatggt gaaaccccgt ctctactaaa 2400
agtacaaaaa caaattagcc gggcatgttg gcgggcacct tttgtcccag ctgctcggga 2460
ggctgaggca ggagagtggc gtgaacccag gaggtggagc ttgcagtgag ccgagattgt 2520
gccagtgcac tccagcctgg gcgacagagc gagactctgt ctcaaaaaat aaaataaaaa 2580
agaaagtata caagtcagtg gttttggttt tcagttatgc aaccatcact acaatttaag 2640
aacattttca tcaccccaaa aagaaaccct gttaccttca ttttccccag ccctaggcag 2700
tcagtacact ttctgtctct atgaatttgt ctattttaga tattatatat aaacggaatt 2760
atacgatatg tggtcttttg tgtctggctt ctttcactta gcatgctatt ttcaagattc 2820
atccatgctg tagaatgcac cagtactgca ttccttctta ttgctgaata ttctgttgtt 2880
tggttatatc acattttatc cattcatcag ttcatggaca tttaggttgt ttttattttt 2940
gggctataat gaataatgtt gctatgaaca ttcgtttgtg ttctttttgt ttttttggtt 3000
ttttgggttt tttttgtttt gtttttgttt ttgagacagt cttgctctgt ctcctaagct 3060
ggagtgcagt ggcatgatct tggcttactg caagctctgc ctcccgggtt cacaccattc 3120
tcctgcctca gcccgacaag tagctgggac tacaggcgtg tgccaccatg cacggctaat 3180
tttttgtatt tttagtagag atggggtttc accgtgttag ccaggatggt ctcgatctcc 3240
tgacctcgtg atctgcctgc ctaggcctcc caaagtgctg ggattacagg cgtgagccac 3300
tgcacctggc cttaagtgtt tttaatacgt cattgcctta agctaacaat tcttaacctt 3360
tgttctactg aagccacgtg gttgagatag gctctgagtc tagcttttaa cctctatctt 3420
tttgtcttag aaatctaagc agaatgcaaa tgactaagaa taatgttgtt gaaataacat 3480
aaaataggtt ataactttga tactcattag taacaaatct ttcaatacat cttacggtct 3540
gttaggtgta gattagtaat gaagtgggaa gccactgcaa gctagtatac atgtagggaa 3600
agatagaaag cattgaagcc agaagagaga cagaggacat ttgggctaga tctgacaaga 3660
aaaacaaatg ttttagtatt aatttttgac tttaaatttt ttttttattt agtgaatact 3720
ggtgtttaat ggtctcattt taataagtat gacacaggta gtttaaggtc atatatttta 3780
tttgatgaaa ataaggtata ggccgggcac ggtggctcac acctgtaatc ccagcacttt 3840
gggaggccga ggcaggcgga tcacctgagg tcgggagtta gagactagcc tcaacatgga 3900
gaaaccccgt ctctactaaa aaaaatacaa aattaggcgg gcgtggtggt gcatgcctgt 3960
aatcccagct actcaggagg ctgaggcagg agaattgctt gaacctggga ggtggaggtt 4020
gcggtgagcc gagatcacct cattgcactc cagcctgggc aacaagagca aaactccatc 4080
tcaaaaaaaa aaaaataagg tataagcggg ctcaggaaca tcattggaca tactgaaaga 4140
agaaaaatca gctgggcgca gtggctcacg ccggtaatcc caacactttg ggaggccaag 4200
gcaggcgaat cacctgaagt cgggagttcc agatcagcct gaccaacatg gagaaaccct 4260
gtctctacta aaaatacaaa actagccggg catggtggcg catgcctgta atcccagcta 4320
cttgggaggc tgaggcagga gaattgcttg aaccgagaag gcggaggttg cggtgagcca 4380
agattgcacc attgcactcc agcctgggca acaagagcga aactccgtct caaaaaaaaa 4440
aggaagaaaa atattttttt aaattaatta gtttatttat tttttaagat ggagttttgc 4500
cctgtcaccc aggctggggt gcaatggtgc aatctcggct cactgcaacc tccgcctcct 4560
gggttcaagt gattctcctg cctcagcttc ccgagtagct gtgattacag ccatatgcca 4620
ccacgcccag ccagttttgt gttttgtttt gttttttgtt tttttttttt gagagggtgt 4680
cttgctctgt cccccaagct ggagtgcagc ggcgcgatct tggctcactg caagctctgc 4740
ctcccaggtt cacaccattc tcttgcctca gcctcccgag tagctgggac tacaggtgcc 4800
cgccaccaca cccggctaat ttttttgtgt ttttagtaga gatggggttt cactgtgtta 4860
gccaggatgg tctcgatctc ctgacctttt gatccacccg cctcagcctc cccaagtgct 4920
gggattatag gcgtgagcca ctgtgcccgg cctagtcttg tatttttagt agagtcggga 4980
tttctccatg ttggtcaggc tgttctccaa atccgacctc aggtgatccg cccgccttgg 5040
cctccaaaag tgcaaggcaa ggcattacag gcatgagcca ctgtgaccgg caatgttttt 5100
aaatttttta catttaaatt ttatttttta gagaccaggt ctcactctat tgctcaggct 5160
ggagtgcaag ggcacattca cagctcactg cagccttgac ctccagggct caagcagtcc 5220
tctcacctca gtttcccgag tagctgggac tacagtgata atgccactgc acctggctaa 5280
tttttatttt tatttattta tttttttttg agacagagtc ttgctctgtc acccaggctg 5340
gagtgcagtg gtgtaaatct cagctcactg cagcctccgc ctcctgggtt caagtgattc 5400
tcctgcctca acctcccaag tagctgggat tagaggtccc caccaccatg cctggctaat 5460
tttttgtact ttcagtagaa acggggtttt gccatgttgg ccaggctgtt ctcgaactcc 5520
tgagctcagg tgatccaact gtctcggcct cccaaagtgc tgggattaca ggcgtgagcc 5580
actgtgccta gcctgagcca ccacgccggc ctaattttta aattttttgt agagacaggg 5640
tctcattatg ttgcccaggg tggtgtcaag ctccaggtct caagtgatcc ccctacctcc 5700
gcctcccaaa gttgtgggat tgtaggcatg agccactgca agaaaacctt aactgcagcc 5760
taataattgt tttctttggg ataactttta aagtacatta aaagactatc aacttaattt 5820
ctgatcatat tttgttgaat aaaataagta aaatgtcttg tgaaacaaaa tgctttttaa 5880
catccatata aagctatcta tatatagcta tctatatcta tatagctatt ttttttaact 5940
tcctttattt tccttacagg gttttagaca aaatcaaaaa gaaggaaggt gctcacattc 6000
cttaaatata aggagtaagt ctgccagcat tatgaaagtg aatcttactt ttgtaaaact 6060
ttatggtttg tggaaaacaa atgtttttga acatttaaaa agttcagatg ttagaaagtt 6120
gaaaggttaa tgtaaaacaa tcaatattaa agaattttga tgccaaaact attagataaa 6180
aggttaatct acatccctac tagaattctc atacttaact ggttggttgt gtggaagaaa 6240
catactttca caataaagag ctttaggata tgatgccatt ttatatcact agtaggcaga 6300
ccagcagact tttttttatt gtgatatggg ataacctagg catactgcac tgtacactct 6360
gacatatgaa gtgctctagt caagtttaac tggtgtccac agaggacatg gtttaactgg 6420
aattcgtcaa gcctctggtt ctaatttctc atttgcagga aatgctggca tagagcagca 6480
cggatccgaa gacgccaaaa acataaagaa aggcccggcg ccattctatc ctctagagga 6540
tggaaccgct ggagagcaac tgcataaggc tatgaagaga tacgccctgg ttcctggaac 6600
aattgctttt acagatgcac atatcgaggt gaacatcacg tacgcggaat acttcgaaat 6660
gtccgttcgg ttggcagaag ctatgaaacg atatgggctg aatacaaatc acagaatcgt 6720
cgtatgcagt gaaaactctc ttcaattctt tatgccggtg ttgggcgcgt tatttatcgg 6780
agttgcagtt gcgcccgcga acgacattta taatgaacgt gaattgctca acagtatgaa 6840
catttcgcag cctaccgtag tgtttgtttc caaaaagggg ttgcaaaaaa ttttgaacgt 6900
gcaaaaaaaa ttaccaataa tccagaaaat tattatcatg gattctaaaa cggattacca 6960
gggatttcag tcgatgtaca cgttcgtcac atctcatcta cctcccggtt ttaatgaata 7020
cgattttgta ccagagtcct ttgatcgtga caaaacaatt gcactgataa tgaattcctc 7080
tggatctact gggttaccta agggtgtggc ccttccgcat agaactgcct gcgtcagatt 7140
ctcgcatgcc agagatccta tttttggcaa tcaaatcatt ccggatactg cgattttaag 7200
tgttgttcca ttccatcacg gttttggaat gtttactaca ctcggatatt tgatatgtgg 7260
atttcgagtc gtcttaatgt atagatttga agaagagctg tttttacgat cccttcagga 7320
ttacaaaatt caaagtgcgt tgctagtacc aaccctattt tcattcttcg ccaaaagcac 7380
tctgattgac aaatacgatt tatctaattt acacgaaatt gcttctgggg gcgcacctct 7440
ttcgaaagaa gtcggggaag cggttgcaaa acgcttccat cttccaggga tacgacaagg 7500
atatgggctc actgagacta catcagctat tctgattaca cccgaggggg atgataaacc 7560
gggcgcggtc ggtaaagttg ttccattttt tgaagcgaag gttgtggatc tggataccgg 7620
gaaaacgctg ggcgttaatc agagaggcga attatgtgtc agaggaccta tgattatgtc 7680
cggttatgta aacaatccgg aagcgaccaa cgccttgatt gacaaggatg gatggctaca 7740
ttctggagac atagcttact gggacgaaga cgaacacttc ttcatagttg accgcttgaa 7800
gtctttaatt aaatacaaag gatatcaggt ggcccccgct gaattggaat cgatattgtt 7860
acaacacccc aacatcttcg acgcgggcgt ggcaggtctt cccgacgatg acgccggtga 7920
acttcccgcc gccgttgttg ttttggagca cggaaagacg atgacggaaa aagagatcgt 7980
ggattacgtc gccagtcaag taacaaccgc gaaaaagttg cgcggaggag ttgtgtttgt 8040
ggacgaagta ccgaaaggtc ttaccggaaa actcgacgca agaaaaatca gagagatcct 8100
cataaaggcc aagaagggcg gaaagtccaa attgcgcggc cgctaaatcg aaagtacagg 8160
actagccttc ctagcaaccg cgggctggga gtctgagaca tcactcaaga tatatgctcg 8220
gtaacgtatg ctctagccat ctaactattc cctatgtctt ataggg 8266
Claims (10)
- 하기 화학식 XIa1의 화합물, 또는 이의 유리 산, 유리 염기, 염, 동위 이성질체(isotopologue), 입체 이성질체, 라세미체, 거울상 이성질체, 부분입체 이성질체 또는 호변 이성질체:
[화학식 XIa1]
상기 식에서,
R1은 헤테로사이클릴이되, 여기서 헤테로사이클릴은 1, 2 또는 3개의 R3 치환기로 선택적으로 치환되고, 1개의 추가적인 R4 치환기로 선택적으로 치환되거나; 또는 헤테로사이클릴은 1, 2, 3 또는 4개의 R3 치환기로 선택적으로 치환되며;
R2는 아릴 또는 헤테로아릴이되, 여기서 아릴 또는 헤테로아릴은 1, 2 또는 3개의 R6 치환기로 선택적으로 치환되고;
Ra는 수소이고;
Rb는 수소 또는 C1-8알킬이고;
Rc는 수소이고;
R3은 각각의 경우에 독립적으로 C1-8알킬 또는 하이드록시-C1-8알킬로부터 선택되고;
R4는 C3-14사이클로알킬이고;
R6은 각각의 경우에 독립적으로 할로겐, C1-8알킬 또는 C1-8알콕시로부터 선택되며,
상기 "아릴"은 페닐, 나프틸, 안트라센일, 플루오렌일, 아줄렌일 또는 페난트렌일이고,
상기 "헤테로아릴"은 하나 이상의 탄소 원자 고리 구성원이, 구조 안정성에 의해 허용되는 경우, O, S 또는 N 원자로부터 선택되는 1개 내지 3개의 헤테로원자로 치환된 모노사이클릭, 바이사이클릭 또는 폴리사이클릭 5-원 내지 10-원 방향족 탄소 원자 고리 구조 라디칼이고,
상기 "헤테로사이클릴"은 1개 내지 3개의 탄소 원자 고리 구성원이, 구조 안정성에 의해 허용되는 경우, O, S 또는 N 원자로부터 선택되는 헤테로원자로 치환된, 포화되거나 부분적으로 불포화된 모노사이클릭, 바이사이클릭 또는 폴리사이클릭 3-원 내지 10-원 탄소 원자 고리 구조 라디칼이다. - 삭제
- 삭제
- 제 1 항에 있어서,
염이 클로라이드, 하이드로브로마이드, 하이드로클로라이드, 다이하이드로클로라이드, 아세테이트, 트라이플루오로아세테이트 또는 트라이플루오로아세트산 염인, 화합물. - 삭제
- 제 1 항에 있어서,
2-(3,4-다이메톡시페닐)-7-(1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(1,3-다이메틸피롤로[1,2-a]피라진-7-일)-7-(1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(2-메틸-1,3-벤족사졸-6-일)-7-(1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온; 하이드로클로라이드(1:1);
2-(2-메틸-1,3-벤족사졸-6-일)-7-(1-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온;
7-(1-에틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-2-(2-메틸-1,3-벤족사졸-6-일)-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(1,3-다이메틸피롤로[1,2-a]피라진-7-일)-7-[1-(프로판-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일]-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(4,6-다이메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-7-(피페리딘-4-일)-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(4,6-다이메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-7-(1-메틸피페리딘-4-일)-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(4,6-다이메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-7-(1-에틸피페리딘-4-일)-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(1-메틸-1H-인다졸-5-일)-7-(1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(1-메틸-1H-인다졸-5-일)-7-(1-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온;
7-(1-에틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-2-(1-메틸-1H-인다졸-5-일)-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(2-메틸-2H-인다졸-5-일)-7-(피페리딘-4-일)-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(2-메틸-2H-인다졸-5-일)-7-(1-메틸피페리딘-4-일)-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온;
7-(1-에틸피페리딘-4-일)-2-(2-메틸-2H-인다졸-5-일)-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온;
7-[1-(2-하이드록시에틸)피페리딘-4-일]-2-(2-메틸-2H-인다졸-5-일)-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(2-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일)-7-(1-메틸피페리딘-4-일)-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온;
7-(1-에틸피페리딘-4-일)-2-(2-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일)-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온;
7-[1-(2-하이드록시에틸)피페리딘-4-일]-2-(2-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일)-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(2-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일)-7-(피페리딘-4-일)-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(2-메틸-2H-인다졸-5-일)-7-(피페라진-1-일)-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(8-클로로-2-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일)-7-(피페리딘-4-일)-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일)-7-(피페리딘-4-일)-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(2-메틸-2H-인다졸-5-일)-7-(4-메틸피페라진-1-일)-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온;
7-(4-에틸피페라진-1-일)-2-(2-메틸-2H-인다졸-5-일)-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온;
7-[4-(2-하이드록시에틸)피페라진-1-일]-2-(2-메틸-2H-인다졸-5-일)-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일)-7-(1-메틸피페리딘-4-일)-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일)-7-(1-에틸피페리딘-4-일)-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일)-7-[1-(2-하이드록시에틸)피페리딘-4-일]-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(8-클로로-2-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일)-7-[1-(프로판-2-일)피페리딘-4-일]-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(8-클로로-2-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일)-7-[1-(2-하이드록시에틸)피페리딘-4-일]-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(2-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일)-7-[1-(프로판-2-일)피페리딘-4-일]-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온;
7-(1-사이클로부틸피페리딘-4-일)-2-(2-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일)-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(4-에틸-6-메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-7-(피페리딘-4-일)-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(4-에틸-6-메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-7-(1-메틸피페리딘-4-일)-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(4-에틸-6-메틸피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)-7-(1-에틸피페리딘-4-일)-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온;
9-메틸-2-(2-메틸-2H-인다졸-5-일)-7-(1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온; 및
9-메틸-2-(2-메틸-2H-인다졸-5-일)-7-(피페리딘-4-일)-4H-피라지노[1,2-a]피리미딘-4-온
으로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물, 또는 이의 염, 거울상 이성질체, 부분입체 이성질체 또는 호변 이성질체. - 제1항, 제4항 및 제6항 중 어느 한 항의 화합물의 유효량, 및 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 포함하는, 척수성 근위축증의 치료를 위한 약학 조성물.
- 제1항, 제4항 및 제6항 중 어느 한 항의 화합물을 포함하고, 상기 화합물이 인간 세포와 접촉되는, SMN2 유전자로부터 전사되는 mRNA 내로의 SMN2의 엑손 7의 혼입을 시험관내(in vitro)에서 증가시키기 위한 조성물.
- 제1항, 제4항 및 제6항 중 어느 한 항의 화합물을 포함하고, 상기 화합물이 인간 세포와 접촉되는, 시험관내에서 SMN 단백질의 양을 증가시키기 위한 조성물.
- 제1항, 제4항 및 제6항 중 어느 한 항의 화합물을 포함하며, 상기 화합물이 인간 세포와 접촉되는, 척수성 근위축증의 치료를 위한 약학 조성물.
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