KR102039189B1 - 중증열성혈소판감소증후군 바이러스의 외막 당단백질에 결합하는 항체 및 이의 용도 - Google Patents

중증열성혈소판감소증후군 바이러스의 외막 당단백질에 결합하는 항체 및 이의 용도 Download PDF

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Abstract

본 발명은 중증열성혈소판감소증후군(Severe Fever with Thrombocytopenia Syndrome, SFTS)의 병원체인 중증열성혈소판감소증후군 바이러스(Severe Fever with Thrombocytopenia Syndrome Virus, SFTSV)를 효과적으로 검출 또는 진단하고, SFTS를 치료하기 위해 사용되는 SFTSV의 외막 당단백질에 특이적으로 결합하는 항체에 관한 것이다.

Description

중증열성혈소판감소증후군 바이러스의 외막 당단백질에 결합하는 항체 및 이의 용도
본 출원은 2016년 3월 23일에 출원된 한국특허출원 제10-2016-0034727호에 기초한 우선권을 주장하며, 해당 출원의 명세서 및 도면에 개시된 모든 내용은 본 출원에 원용된다.
본 발명은 중증열성혈소판감소증후군(Severe Fever with Thrombocytopenia Syndrome, SFTS)의 병원체인 중증열성혈소판감소증후군 바이러스(Severe Fever with Thrombocytopenia Syndrome Virus, SFTSV)를 검출 또는 진단하고, SFTS를 치료하기 위해 사용되는 SFTSV의 외막 당단백질에 특이적으로 결합하는 항체에 관한 것이다.
중증열성혈소판감소증후군(Severe Fever with Thrombocytopenia Syndrome, SFTS)은 신종 진드기매개 감염병 질환으로, 주로 작은소참진드기(Haemaphysalis longicornis) 또는 참진드기류(Amblyomma testudinarium)에 의해 매개되는 중증열성혈소판감소증후군 바이러스(Severe Fever with Thrombocytopenia Syndrome Virus, SFTSV)에 의해 발생한다. SFTS는 2009년에 중국에서 최초로 보고되었고, 2012년 일본 및 한국에서도 질환 및 바이러스가 보고된 바 있다. SFTS의 주요 증상은 발열, 복통, 구역, 구토 혈소판 감소증 또는 백혈구 감소증 등이며, 중증인 경우 다발성 장기부전이 발생하여 사망에 이를 수도 있다. SFTS는 매년 중국, 일본 또는 한국에서 꾸준하게 발생하고 있으며, 이로 인한 치사율은 매우 높으며, 봄에서 여름 사이의 기간에 주로 발생한다. SFTSV의 야생 숙주는 등줄쥐가 유력하고, 중국의 주요 발병지에서는 염소, 소, 개 또는 닭 등의 가축에서 혈청 항체가 높은 비율로 발견되어, 가축이 숙주 역할을 할 수도 있는 것으로 추정된다. 감염자의 체액을 매개로 하여 사람간 감염이 일어난 것이 보고된 바 있으나, 현재까지 SFTS를 효과적으로 치료할 수 있는 것으로 증명된 치료제 또는 예방법은 없다.
SFTS 감염 여부를 확인하기 위해 혈액내 항 SFTSV 항체가를 확인하는 방법이 있다. 이때 상기 항 SFTSV 항체가는 주로 SFTSV의 N 단백질에 대한 항체로 측정한다. 상기 항체는 SFTSV가 사멸하였을 때 노출되는 SFTSV 내부 단백질에 대한 항체이다. 따라서 기존의 항 SFTSV 항체가 확인을 통한 진단은 살아서 활발히 활동하는 바이러스의 존재를 정확하게 파악할 수 없는 한계점을 가진다. SFTS를 진단하는 또 다른 방법으로, SFTSV의 RNA 서열을 인체 유래 검체에서 검출하는 방법은 높은 정확도를 보인다고 알려져 있지만, 검체로부터 양질의 바이러스 RNA를 분리하는데 어려움이 있다.
한편, 국제공개특허 제2015/053455호(WO2015/053455A1)에서는 SFTSV에 대한 항체의 검출 방법이 개시되어 있으나, 구체적으로 항체가 SFTSV의 어느 항원에 결합하는지 여부 및 이러한 항체의 중화 활성에 대해서는 전혀 개시되어 있지 않다.
따라서, 종래의 사멸된 상태의 SFTSV 단백질 양을 측정하는 효소면역반응 진단방법의 부정확한 바이러스 역가 측정 방법, 또는 종래의 혈액 내 낮은 순도의 바이러스 RNA 분리 방법의 한계를 극복하여, SFTSV를 효과적으로 검출, 분리 또는 정제할 수 있는 항체 또는 방법의 개발이 필요한 실정이다.
본 발명이 해결하고자 하는 과제는 SFTSV를 효과적으로 검출 또는 진단하고 SFTS를 치료할 수 있는 항체를 제공하는 것이다. 또한, 본 발명이 해결하고자 하는 다른 과제는 SFTSV, 특히 SFTSV의 외막 당단백질에 특이적으로 결합하는 항체를 제공하는 것이다.
상기 기술적 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 SFTSV, 특히 이의 외막 당단백질에 특이적으로 결합하는 신규 항체를 제공한다. 또한, 본 발명은 상기 항체를 사용하여 SFTSV를 효과적으로 검출, 분리 또는 정제하는 방법을 제공한다. 또한, 본 발명은 상기 항체를 사용하여 SFTS를 효과적으로 예방 또는 치료하는 방법을 제공한다.
본 발명자들은 종래의 SFTSV의 진단 방법이 갖는 한계점을 극복하기 위하여 예의 연구 노력한 결과, SFTSV의 외막 당단백질, 특히 Gc 또는 Gn에 특이적으로 결합하는 신규 항체를 발견하였고, 이를 이용하여 SFTSV를 효과적으로 검출할 수 있음을 발견하여 본 발명을 완성하였다.
SFTSV는 마이너스 단일가닥 RNA 바이러스로 Bunyaviridae과, phlebovirus속에 속한다. 상기 바이러스는 직경 80~100nm의 구형 바이러스로 작은소참진드기를 매개체로 한다. 상기 바이러스의 유전체는 large(L), Medium(M) 및 small(S) 세그먼트로 구성되어 있으며, 이들은 RNA dependent RNA polymerase(RdRp), glycoprotein precursor(M), glycoprotein N(Gn), glycoprotein C(Gc), nucleocapsid protein(NP) 및 non-structural protein(NSs)의 6개의 단백질을 코딩한다.
본 발명에 있어서, "항체"는 온전한 항체 및 이의 임의의 항원 결합 부분 또는 단일쇄를 포함할 수 있다. 천연 발생 "항체"는 다이설피드 결합에 의해 상호 연결된, 적어도 2개의 중쇄 (H) 및 2개의 경쇄 (L)를 포함하는 당단백질이다. 각각의 중쇄는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 중쇄 불변 영역(CH)으로 이루어진다. 중쇄 불변 영역은 CH1, CH2 및 CH3의 3개의 도메인으로 이루어진다. 각각의 경쇄는 경쇄 가변 영역 (VL) 및 경쇄 불변 영역(CL)으로 이루어진다. 경쇄 불변 영역은 1개의 도메인 CL로 이루어진다. VH 및 VL 영역은 프레임워크 영역(FR)이라 불리는 보다 보존된 영역이 산재되어 있는, 상보성 결정 영역(CDR)이라 불리는 초가변 영역으로 보다 세분화될 수 있다. 각 VH 및 VL은 3개의 CDR 및 4개의 FR로 이루어지며, 이것들은 아미노 말단에서부터 카르복시 말단까지 다음의 순서로 배열된다: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. 중쇄 및 경쇄의 가변 영역은 항원과 상호 작용하는 결합 도메인을 함유한다.
본 발명은 SFTSV의 외막 당단백질, 특히 SFTSV의 외막 당단백질 Gc 또는 Gn에 특이적으로 결합하는 항체를 제공한다. 바람직하게, 상기 항체는 하기와 같은 특정한 아미노산 서열을 포함하거나 또는 이로 이루어질 수 있다. 또한, 중쇄와 경쇄의 불변 영역에서 자명한 일부 변형의 경우, 동일 또는 유사한 결합 특이성을 가지는 범위에서 본 발명의 범주에 포함된다. 또한, 각각의 이들 항체는 SFTSV의 외막 당단백질에 결합할 수 있기 때문에, VH, VL, 전장 경쇄 및 전장 중쇄 서열(아미노산 서열 및 상기 아미노산 서열을 코딩하는 뉴클레오티드 서열)은 혼합 및 매치되어 본 발명의 다른 SFTSV의 외막 당단백질 결합 항체를 생성할 수 있다.
일 실시예에서, 본 발명의 Gc 외막 당단백질에 결합하는 항체 클론(Ab 1~5)의 아미노산 서열을 하기 표 1~8에 나타내었다.
Gc 외막 당단백질에 결합하는 항체의 경쇄 및 중쇄의 아미노산 서열
서열번호 항체 및 부위 서열
1 Ab1의 경쇄 ELTLTQSPATLSLSPGETATLSC GASQSVSTNYLA WYQQKPGLAPRLLIY DASSRAT GIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLAPEDSAVYYC QQYGSSPLT FGGGTKLEIK
2 Ab2의 경쇄 ELVVTQPPSVSGAPGQRVTISC SGSSSNIGNNTVN WYQQLPGTAPKLLIY SNNQRPS GVPDRFSGSKSGTSASLAITGLQADDEADYYC QSFDSSLNDWV FGGGTKLTVL
3 Ab3의 경쇄 ELELTQPPSVSGAPGQRVTISC TGSSSNIGAGYDVH WYQQLPGTAPKLLIY GNSNRPS GVPDRFSGSKSDTSASLAISGLRSEDEADYYC AAWDDSLNGQVV FGGGTKLTVL
4 Ab4의 경쇄 ELVLTQPPSASGTPGQRVTISC SGSSSNIGSNTVN WYQQLPGTAPKLLIY SNNQRPP GVPDRFSGSKSGTSASLAISGLQSEDEADYYC QSYDSSLSYV FGTGTKVTVL
5 Ab5의 경쇄 ELVVTQEPSLTVPPGGTVTLTC GSSTGPVTTTQYPY WFQQKPGQAPRTLIY DTNNRHP WTPARFSGSLLGGKAALTLSGAQPEDDA-YYC LLTSASAPWV FGGGTKLTVL
6 Ab1의 중쇄 QVQLVQSGPEVKKPGSSVKVSCKAS GGTFSTYAIS WVRQAPGQGLEWMG GIIPISGTANYAQKFQG RVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCA VPV---------VPAASGPFDYWG QGTLVTVSS
7 Ab2의 중쇄 EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAAS GFTFSSYSMN WVRQAPGKGLEWVS SISSSSRYIFYADSVKG RFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCA SLGYCSGGSCYGFPEGGNAFDIWG QGTMVTVSS
8 Ab3의 중쇄 QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVS GGSFSGYYWS WIRQPPGKGLEWIG EIIHSGSTNYNPSLKS RVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCA RGDYYD---------SSGAFDYWG QGTLVTVSS
9 Ab4의 중쇄 EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTFSSYSMN WVRQAPGKGLEWVS SISSSSRYIFYADSVKG RFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYY-- SLGYCSGGSCYGFPEGGNAFDIWG QGTMVTVSS
10 Ab5의 중쇄 QVQLVQSGGGLVQPGGSLRLSCSAS GFTFSSYAMH WVRQAPGKGLEYVS AISSDGGSTYYADSVKG RFTISRDNSKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCV NDG------------SSNHFDYWG QGTLVTVSS
Gc 외막 당단백질에 결합하는 항체의 경쇄 또는 중쇄의 프레임워크 영역1(LFR1 또는 HFR1)의 아미노산 서열
서열번호 항체 및 부위 서열
11 Ab1의 LFR1 ELTLTQSPATLSLSPGETATLSC
12 Ab2의 LFR1 ELVVTQPPSVSGAPGQRVTISC
13 Ab3의 LFR1 ELELTQPPSVSGAPGQRVTISC
14 Ab4의 LFR1 ELVLTQPPSASGTPGQRVTISC
15 Ab5의 LFR1 ELVVTQEPSLTVPPGGTVTLTC
16 Ab1의 HFR1 QVQLVQSGPEVKKPGSSVKVSCKAS
17 Ab2의 HFR1 EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAAS
18 Ab3의 HFR1 QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVS
19 Ab4의 HFR1 EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAAS
20 Ab5의 HFR1 QVQLVQSGGGLVQPGGSLRLSCSAS
Gc 외막 당단백질에 결합하는 항체의 경쇄 또는 중쇄의 상보성 결정영역1(LCDR1 또는 HCDR1)의 아미노산 서열
서열번호 항체 및 부위 서열
21 Ab1의 LCDR1 GASQSVSTNYLA
22 Ab2의 LCDR1 SGSSSNIGNNTVN
23 Ab3의 LCDR1 TGSSSNIGAGYDVH
24 Ab4의 LCDR1 SGSSSNIGSNTVN
25 Ab5의 LCDR1 GSSTGPVTTTQYPY
26 Ab1의 HCDR1 GGTFSTYAIS
27 Ab2의 HCDR1 GFTFSSYSMN
28 Ab3의 HCDR1 GGSFSGYYWS
29 Ab4의 HCDR1 GFTFSSYSMN
30 Ab5의 HCDR1 GFTFSSYAMH
Gc 외막 당단백질에 결합하는 항체의 경쇄 또는 중쇄의 프레임워크 영역2(LFR2 또는 HFR2)의 아미노산 서열
서열번호 항체 및 부위 서열
31 Ab1의 LFR2 WYQQKPGLAPRLLIY
32 Ab2의 LFR2 WYQQLPGTAPKLLIY
33 Ab3의 LFR2 WYQQLPGTAPKLLIY
34 Ab4의 LFR2 WYQQLPGTAPKLLIY
35 Ab5의 LFR2 WFQQKPGQAPRTLIY
36 Ab1의 HFR2 WVRQAPGQGLEWMG
37 Ab2의 HFR2 WVRQAPGKGLEWVS
38 Ab3의 HFR2 WIRQPPGKGLEWIG
39 Ab4의 HFR2 WVRQAPGKGLEWVS
40 Ab5의 HFR2 WVRQAPGKGLEYVS
Gc 외막 당단백질에 결합하는 항체의 경쇄 또는 중쇄의 상보성 결정영역2(LCDR2 또는 HCDR2)의 아미노산 서열
서열번호 항체 및 부위 서열
41 Ab1의 LCDR2 DASSRAT
42 Ab2의 LCDR2 SNNQRPS
43 Ab3의 LCDR2 GNSNRPS
44 Ab4의 LCDR2 SNNQRPP
45 Ab5의 LCDR2 DTNNRHP
46 Ab1의 HCDR2 GIIPISGTANYAQKFQG
47 Ab2의 HCDR2 SISSSSRYIFYADSVKG
48 Ab3의 HCDR2 EIIHSGSTNYNPSLKS
49 Ab4의 HCDR2 SISSSSRYIFYADSVKG
50 Ab5의 HCDR2 AISSDGGSTYYADSVKG
Gc 외막 당단백질에 결합하는 항체의 경쇄 또는 중쇄의 프레임워크 영역3(LFR3 또는 HFR3)의 아미노산 서열
서열번호 항체 및 부위 서열
51 Ab1의 LFR3 GIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLAPEDSAVYYC
52 Ab2의 LFR3 GVPDRFSGSKSGTSASLAITGLQADDEADYYC
53 Ab3의 LFR3 GVPDRFSGSKSDTSASLAISGLRSEDEADYYC
54 Ab4의 LFR3 GVPDRFSGSKSGTSASLAISGLQSEDEADYYC
55 Ab5의 LFR3 WTPARFSGSLLGGKAALTLSGAQPEDDA-YYC
56 Ab1의 HFR3 RVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCA
57 Ab2의 HFR3 RFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCA
58 Ab3의 HFR3 RVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCA
59 Ab4의 HFR3 RFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYY--
60 Ab5의 HFR3 RFTISRDNSKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCV
Gc 외막 당단백질에 결합하는 항체의 경쇄 또는 중쇄의 상보성 결정영역3(LCDR3 또는 HCDR3)의 아미노산 서열
서열번호 항체 및 부위 서열
61 Ab1의 LCDR3 QQYGSSPLT
62 Ab2의 LCDR3 QSFDSSLNDWV
63 Ab3의 LCDR3 AAWDDSLNGQVV
64 Ab4의 LCDR3 QSYDSSLSYV
65 Ab5의 LCDR3 LLTSASAPWV
66 Ab1의 HCDR3 VPV---------VPAASGPFDYWG
67 Ab2의 HCDR3 SLGYCSGGSCYGFPEGGNAFDIWG
68 Ab3의 HCDR3 RGDYYD---------SSGAFDYWG
69 Ab4의 HCDR3 SLGYCSGGSCYGFPEGGNAFDIWG
70 Ab5의 HCDR3 NDG------------SSNHFDYWG
Gc 외막 당단백질에 결합하는 항체의 경쇄 또는 중쇄의 프레임워크 영역4(LFR4 또는 HFR4)의 아미노산 서열
서열번호 항체 및 부위 서열
71 Ab1의 LFR4 FGGGTKLEIK
72 Ab2의 LFR4 FGGGTKLTVL
73 Ab3의 LFR4 FGGGTKLTVL
74 Ab4의 LFR4 FGTGTKVTVL
75 Ab5의 LFR4 FGGGTKLTVL
76 Ab1의 HFR4 QGTLVTVSS
77 Ab2의 HFR4 QGTMVTVSS
78 Ab3의 HFR4 QGTLVTVSS
79 Ab4의 HFR4 QGTMVTVSS
80 Ab5의 HFR4 QGTLVTVSS
일부 실시 양태에서, 본 발명의 SFTSV의 외막 당단백질 Gc에 특이적으로 결합하는 항체는 서열번호 1, 2, 3, 4 및 5로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄, 및 서열번호 6, 7, 8, 9 및 10으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다. 이러한 특정한 서열로 이루어진 항체는 외막 당단백질 Gc에 특이적이고 효과적으로 결합할 수 있어, SFTSV의 검출에 매우 유용하게 사용될 수 있다.
또 다른 실시 양태에서, 바람직하게, 본 발명의 SFTSV의 외막 당단백질 Gc에 특이적으로 결합하는 항체는 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 및 서열번호 6의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하는 항체, 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 및 서열번호 7의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하는 항체, 서열번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 및 서열번호 8의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하는 항체, 서열번호 4의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 및 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하는 항체, 및 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하는 항체로 제공될 수 있다.
또 다른 실시 양태에서, 본 발명의 SFTSV의 외막 당단백질 Gc에 특이적으로 결합하는 항체는 서열번호 21, 22, 23, 24 및 25로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정영역1(LCDR1), 서열번호 41, 42, 43, 44 및 45로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정영역2(LCDR2), 서열번호 61, 62, 63, 64 및 65로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정영역3(LCDR3), 서열번호 26, 27, 28, 29 및 30으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR1), 서열번호 46, 47, 48, 49 및 50으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정영역2(HCDR2), 및 서열번호 66, 67, 68, 69 및 70으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정영역3(HCDR3)을 포함할 수 있다.
또 다른 실시 양태에서, 본 발명의 SFTSV의 외막 당단백질 Gc에 특이적으로 결합하는 항체는 서열번호 21의 경쇄 상보성 결정영역1(LCDR1), 서열번호 41의 경쇄 상보성 결정영역2(LCDR2), 서열번호 61의 경쇄 상보성 결정영역3(LCDR3), 서열번호 26의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR1), 서열번호 46의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR2), 및 서열번호 66의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR3)을 포함하는 항체; 서열번호 22의 경쇄 상보성 결정영역1(LCDR1), 서열번호 42의 경쇄 상보성 결정영역2(LCDR2), 서열번호 62의 경쇄 상보성 결정영역3(LCDR3), 서열번호 27의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR1), 서열번호 47의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR2), 및 서열번호 67의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR3)을 포함하는 항체; 서열번호 23의 경쇄 상보성 결정영역1(LCDR1), 서열번호 43의 경쇄 상보성 결정영역2(LCDR2), 서열번호 63의 경쇄 상보성 결정영역3(LCDR3), 서열번호 28의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR1), 서열번호 48의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR2), 및 서열번호 68의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR3)을 포함하는 항체; 서열번호 24의 경쇄 상보성 결정영역1(LCDR1), 서열번호 44의 경쇄 상보성 결정영역2(LCDR2), 서열번호 64의 경쇄 상보성 결정영역3(LCDR3), 서열번호 29의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR1), 서열번호 49의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR2), 및 서열번호 69의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR3)을 포함하는 항체; 또는 서열번호 25의 경쇄 상보성 결정영역1(LCDR1), 서열번호 45의 경쇄 상보성 결정영역2(LCDR2), 서열번호 65의 경쇄 상보성 결정영역3(LCDR3), 서열번호 30의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR1), 서열번호 50의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR2), 및 서열번호 70의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR3)을 포함하는 항체로 제공될 수 있다.
일 실시예에서, 본 발명의 Gn 외막 당단백질에 결합하는 항체 클론(Ab 6~10)의 아미노산 서열을 하기 표 9~16에 나타내었다.
Gn 외막 당단백질에 결합하는 항체의 경쇄 및 중쇄의 아미노산 서열
서열번호 항체 및 부위 서열
81 Ab6의 경쇄 ELALTQPPSVSVAPGKTAKITC GGDDIGSKTVQ WYQQTSGQAPVLVVY DDSDRPS GIPERFSGANSGNTATLTISRVEAGDEADYYC QVWDGRSDHVV FGGGTKLTVL
82 Ab7의 경쇄 ELVLTQPPSVSAAPGQKVTISC SGSSSNIGNNVVS WYQQLPGTAPKLLIY DDNRRPS GIPDRFSGSKSGTSATLDITGLQTGDEADYYC ATWDGSLTAGRVL FGSGTKLTVL
83 Ab8의 경쇄 ELALTQPPSVSVAPAMTAKITC GGDDIGSTTVQ WYQQTSGQAPVLVVY DDSDRPS GIPERFSGANSGNTATLTISRVEAGDEADYYC QVWDGRSDHVV FGGGTKLTVL
84 Ab9의 경쇄 ELELTQPPSVSGTPGKRVSMSC SGSRSNIGGNVVN WYQQLPGKAPKLFIY NNDQRPS GVPDRVSGSKSGTSVSVAISGLQPEDEADYYC AAWDDILNGVV FGGGTQLTVL
85 Ab10의 경쇄 ELVMTQSPSSLSASVGDTVTITC RASQSIYTYLN WYHQTPGKAPKLLIS AASSLQS GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYC QQYADVPVT FGGGTKLEIK
86 Ab6의 중쇄 QVQLVQSGAEVKKPGESLKISCKGS GYIFTNYWIG WVRQMPGKGLEWM GIIYPGDSDTRYSPSFQG QVTISADRSISTAYLQWSSLKASDTAMYYCA RLKLRGFSGGYGSGRRYFDYWG QGTLVTVSS
87 Ab7의 중쇄 QVQLVQSGAEVKKPGESLKISCKGS GYSFTSYWIG WVRQMPGKGLEWM GIIYPGDSDTRYSPSFQG QVTISADKSISTAYLQWSSLKASDTAMYYCA RLKLRGFSGGYGSGSRYFDYWG QGTLVTVSS
88 Ab8의 중쇄 QVQLVQSGAEVKKPGESLKISCKGS GYIFTNYWIG WVRQMPGKGLEWM GIIYPGDSDTRYSPSFQG QVTISADRSISTANLQWSSLKASDTALYYCA RLKLRGFSGGYGSGRRYFDYWG QGTLVTVSS
89 Ab9의 중쇄 QVQLVQSGAEVKKPGESLKISCKGS GYNFTNYWIG WVRQLPGKGLEWM GIIYPGDSDTRYSPSFQG QVTISADKSISTAYLQWSSLKASDTAMYYCA RIRVIGFYD--SSPPPLFDYWG QGTLVTVSS
90 Ab10의 중쇄 EVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAAS GFTFSGYGIH WVRQAPGKGLEWV ALISYDGSNKYYADSVKG RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCA KDR-----DYFGSG--FFDYWG QGTLVTVSS
Gn 외막 당단백질에 결합하는 항체의 경쇄 또는 중쇄의 프레임워크 영역1(LFR1 또는 HFR1)의 아미노산 서열
서열번호 항체 및 부위 서열
91 Ab6의 LFR1 ELALTQPPSVSVAPGKTAKITC
92 Ab7의 LFR1 ELVLTQPPSVSAAPGQKVTISC
93 Ab8의 LFR1 ELALTQPPSVSVAPAMTAKITC
94 Ab9의 LFR1 ELELTQPPSVSGTPGKRVSMSC
95 Ab10의 LFR1 ELVMTQSPSSLSASVGDTVTITC
96 Ab6의 HFR1 QVQLVQSGAEVKKPGESLKISCKGS
97 Ab7의 HFR1 QVQLVQSGAEVKKPGESLKISCKGS
98 Ab8의 HFR1 QVQLVQSGAEVKKPGESLKISCKGS
99 Ab9의 HFR1 QVQLVQSGAEVKKPGESLKISCKGS
100 Ab10의 HFR1 EVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAAS
Gn 외막 당단백질에 결합하는 항체의 경쇄 또는 중쇄의 상보성 결정영역1(LCDR1 또는 HCDR1)의 아미노산 서열
서열번호 항체 및 부위 서열
101 Ab6의 LCDR1 GGDDIGSKTVQ
102 Ab7의 LCDR1 SGSSSNIGNNVVS
103 Ab8의 LCDR1 GGDDIGSTTVQ
104 Ab9의 LCDR1 SGSRSNIGGNVVN
105 Ab10의 LCDR1 RASQSIYTYLN
106 Ab6의 HCDR1 GYIFTNYWIG
107 Ab7의 HCDR1 GYSFTSYWIG
108 Ab8의 HCDR1 GYIFTNYWIG
109 Ab9의 HCDR1 GYNFTNYWIG
110 Ab10의 HCDR1 GFTFSGYGIH
Gn 외막 당단백질에 결합하는 항체의 경쇄 또는 중쇄의 프레임워크 영역2(LFR2 또는 HFR2)의 아미노산 서열
서열번호 항체 및 부위 서열
111 Ab6의 LFR2 WYQQTSGQAPVLVVY
112 Ab7의 LFR2 WYQQLPGTAPKLLIY
113 Ab8의 LFR2 WYQQTSGQAPVLVVY
114 Ab9의 LFR2 WYQQLPGKAPKLFIY
115 Ab10의 LFR2 WYHQTPGKAPKLLIS
116 Ab6의 HFR2 WVRQMPGKGLEWM
117 Ab7의 HFR2 WVRQMPGKGLEWM
118 Ab8의 HFR2 WVRQMPGKGLEWM
119 Ab9의 HFR2 WVRQLPGKGLEWM
120 Ab10의 HFR2 WVRQAPGKGLEWV
Gn 외막 당단백질에 결합하는 항체의 경쇄 또는 중쇄의 상보성 결정영역2(LCDR2 또는 HCDR2)의 아미노산 서열
서열번호 항체 및 부위 서열
121 Ab6의 LCDR2 DDSDRPS
122 Ab7의 LCDR2 DDNRRPS
123 Ab8의 LCDR2 DDSDRPS
124 Ab9의 LCDR2 NNDQRPS
125 Ab10의 LCDR2 AASSLQS
126 Ab6의 HCDR2 GIIYPGDSDTRYSPSFQG
127 Ab7의 HCDR2 GIIYPGDSDTRYSPSFQG
128 Ab8의 HCDR2 GIIYPGDSDTRYSPSFQG
129 Ab9의 HCDR2 GIIYPGDSDTRYSPSFQG
130 Ab10의 HCDR2 ALISYDGSNKYYADSVKG
Gn 외막 당단백질에 결합하는 항체의 경쇄 또는 중쇄의 프레임워크 영역3(LFR3 또는 HFR3)의 아미노산 서열
서열번호 항체 및 부위 서열
131 Ab6의 LFR3 GIPERFSGANSGNTATLTISRVEAGDEADYYC
132 Ab7의 LFR3 GIPDRFSGSKSGTSATLDITGLQTGDEADYYC
133 Ab8의 LFR3 GIPERFSGANSGNTATLTISRVEAGDEADYYC
134 Ab9의 LFR3 GVPDRVSGSKSGTSVSVAISGLQPEDEADYYC
135 Ab10의 LFR3 GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYC
136 Ab6의 HFR3 QVTISADRSISTAYLQWSSLKASDTAMYYCA
137 Ab7의 HFR3 QVTISADKSISTAYLQWSSLKASDTAMYYCA
138 Ab8의 HFR3 QVTISADRSISTANLQWSSLKASDTALYYCA
139 Ab9의 HFR3 QVTISADKSISTAYLQWSSLKASDTAMYYCA
140 Ab10의 HFR3 RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCA
Gn 외막 당단백질에 결합하는 항체의 경쇄 또는 중쇄의 상보성 결정영역3(LCDR3 또는 HCDR3)의 아미노산 서열
서열번호 항체 및 부위 서열
141 Ab6의 LCDR3 QVWDGRSDHVV
142 Ab7의 LCDR3 ATWDGSLTAGRVL
143 Ab8의 LCDR3 QVWDGRSDHVV
144 Ab9의 LCDR3 AAWDDILNGVV
145 Ab10의 LCDR3 QQYADVPVT
146 Ab6의 HCDR3 RLKLRGFSGGYGSGRRYFDYWG
147 Ab7의 HCDR3 RLKLRGFSGGYGSGSRYFDYWG
148 Ab8의 HCDR3 RLKLRGFSGGYGSGRRYFDYWG
149 Ab9의 HCDR3 RIRVIGFYD--SSPPPLFDYWG
150 Ab10의 HCDR3 KDR-----DYFGSG--FFDYWG
Gn 외막 당단백질에 결합하는 항체의 경쇄 또는 중쇄의 프레임워크 영역4(LFR4 또는 HFR4)의 아미노산 서열
서열번호 항체 및 부위 서열
151 Ab6의 LFR4 FGGGTKLTVL
152 Ab7의 LFR4 FGSGTKLTVL
153 Ab8의 LFR4 FGGGTKLTVL
154 Ab9의 LFR4 FGGGTQLTVL
155 Ab10의 LFR4 FGGGTKLEIK
156 Ab6의 HFR4 QGTLVTVSS
157 Ab7의 HFR4 QGTLVTVSS
158 Ab8의 HFR4 QGTLVTVSS
159 Ab9의 HFR4 QGTLVTVSS
160 Ab10의 HFR4 QGTLVTVSS
일 실시 양태에서, 본 발명의 SFTSV의 외막 당단백질 Gn에 특이적으로 결합하는 항체는 서열번호 81, 82, 83, 84 및 85로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄, 및 서열번호 86, 87, 88, 89 및 90으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다. 이러한 특정한 서열로 이루어진 항체는 외막 당단백질 Gn에 특이적이고 효과적으로 결합할 수 있어, SFTSV의 검출에 매우 유용하게 사용될 수 있다.
또 다른 실시 양태에서, 바람직하게, 본 발명의 SFTSV의 외막 당단백질 Gn에 특이적으로 결합하는 항체는 서열번호 81의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 및 서열번호 86의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하는 항체, 서열번호 82의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 및 서열번호 87의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하는 항체, 서열번호 83의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 및 서열번호 88의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하는 항체, 서열번호 84의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 및 서열번호 89의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하는 항체, 및 서열번호 85의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 및 서열번호 90의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하는 항체로 제공될 수 있다.
또 다른 실시 양태에서, 본 발명의 SFTSV의 외막 당단백질 Gn에 특이적으로 결합하는 항체는 서열번호 101, 102, 103, 104 및 105로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정영역1(LCDR1), 서열번호 121, 122, 123, 124 및 125로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정영역2(LCDR2), 서열번호 141, 142, 143, 144 및 145로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정영역3(LCDR3), 서열번호 106, 107, 108, 109 및 110으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR1), 서열번호 126, 127, 128, 129 및 130으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정영역2(HCDR2), 및 서열번호 146, 147, 148, 149 및 150으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정영역3(HCDR3)을 포함할 수 있다.
또 다른 실시 양태에서, 본 발명의 SFTSV의 외막 당단백질 Gn에 특이적으로 결합하는 항체는 서열번호 101의 경쇄 상보성 결정영역1(LCDR1), 서열번호 121의 경쇄 상보성 결정영역2(LCDR2), 서열번호 141의 경쇄 상보성 결정영역3(LCDR3), 서열번호 106의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR1), 서열번호 126의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR2), 및 서열번호 146의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR3)을 포함하는 항체; 서열번호 102의 경쇄 상보성 결정영역1(LCDR1), 서열번호 122의 경쇄 상보성 결정영역2(LCDR2), 서열번호 142의 경쇄 상보성 결정영역3(LCDR3), 서열번호 107의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR1), 서열번호 127의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR2), 및 서열번호 147의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR3)을 포함하는 항체; 서열번호 103의 경쇄 상보성 결정영역1(LCDR1), 서열번호 123의 경쇄 상보성 결정영역2(LCDR2), 서열번호 143의 경쇄 상보성 결정영역3(LCDR3), 서열번호 108의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR1), 서열번호 128의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR2), 및 서열번호 148의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR3)을 포함하는 항체; 서열번호 104의 경쇄 상보성 결정영역1(LCDR1), 서열번호 124의 경쇄 상보성 결정영역2(LCDR2), 서열번호 144의 경쇄 상보성 결정영역3(LCDR3), 서열번호 109의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR1), 서열번호 129의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR2), 및 서열번호 149의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR3)을 포함하는 항체; 또는 서열번호 105의 경쇄 상보성 결정영역1(LCDR1), 서열번호 125의 경쇄 상보성 결정영역2(LCDR2), 서열번호 145의 경쇄 상보성 결정영역3(LCDR3), 서열번호 110의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR1), 서열번호 130의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR2), 및 서열번호 150의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR3)을 포함하는 항체로 제공될 수 있다.
일 실시 양태에서, 본 발명의 항체는 상기 언급된 항체를 비롯하여, 상기 표 1 또는 표 9에 기재된 중쇄 및 경쇄를 포함하는 항체와 상동성인 아미노산을 포함하는 항체를 포함할 수 있다. 또한, 본 발명의 항체는 상기 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3 서열을 포함하는 경쇄 가변영역, 및 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3 서열을 포함하는 중쇄 가변영역을 포함하며, 이들 CDR 서열 중 1개 이상은 본원에 기재된 항체 또는 이의 보존적 변형을 기초로 하는 특정 아미노산 서열을 가질 수 있다. 또한, 본 발명의 항체는 SFTSV의 외막 당단백질 Gc 또는 Gn 결합 항체의 기능적 특성을 보유하는 항체일 수 있으며, 표 1 또는 표 9에 기재된 중쇄 및 경쇄를 포함하는 항체와 동일한 에피토프에 결합하는 항체일 수 있다. 또한, 본 발명의 항체는 변형된 항체를 조작하기 위한 출발 물질로서 본원에 제시된 1종 이상의 경쇄 또는 항체 서열을 갖는 항체를 사용하여 제조되고, 출발 항체로부터 일부 변경된 특성을 갖는 항체를 모두 포함할 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 항체는 항체의 특성을 개선시키기 위해 경쇄 또는 중쇄 내의 프레임워크 영역에 대해 변형이 이루어진 것을 포함할 수 있다. 또한, 상기 항체는 SFTSV의 외막 당단백질에 대해 적어도 1×107M-1, 1×108M-1, 1×109M-1, 1×1010M-1 또는 1×1011M-1　의 친화도 상수(KA)를 가질 수 있다.
또한, 본 발명의 항체는 SFTSV 외막 당단백질에 특이적으로 결합하는 완전 인간 항체일 수 있다. 이는 키메라 항체 등과 비교할 때, 인간 대상체에 투여되었을 때 더욱 감소된 항원성을 가질 수 있다. 인간 항체는 항체의 가변 영역 또는 전장 쇄가 인간 배선(germline) 면역글로불린 유전자를 사용한 시스템으로부터 수득된 경우에, 특정 배선 서열의 생성물이거나 이로부터 유도된 중쇄 또는 경쇄 가변 영역 또는 전장 중쇄 또는 경쇄를 포함할 수 있다. 또한, 본 발명의 항체는 항원성을 가지는 비면역원화(De-immunized) 항체일 수 있다.
또한, 본 발명에 있어서 항체는 이중특이적 또는 다중특이적 항체일 수 있다. 본 발명의 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 2개 이상의 상이한 결합 부위 또는 표적 분자에 결합하는 이중특이적 분자일 수 있다.
일부 실시 양태에서, 본 발명의 항체는 SFTSV의 외막 당단백질에 특이적으로 결합하는 단일클론 항체일 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 항체는 SFTSV의 외막 당단백질에 특이적으로 결합하는 인간 또는 인간화 단일클론 항체 또는 키메라 항체일 수 있으며, 본 발명의 항체는 인간 중쇄 불변 영역 및 인간 경쇄 불변 영역을 포함할 수 있다. 또한, 본 발명의 항체는 단일쇄 항체일 수 있으며, 본 발명의 항체는 Fab 단편일 수 있으며, scFv(Single-chain variable fragment)일 수 있으며, IgG 이소형일 수 있다. 바람직하게, 본 발명의 항체는 scFv일 수 있다.
본 발명에 있어서, 단일클론항체는 통상의 단일클론 항체 방법에 의해 생성될 수 있으며, 합성된 항체 유전자를 항체 발현용 벡터, 바람직하게는 pcDNA, pCI, pCMV 또는 pCEP4 등에 삽입하여 발현 및 정제할 수 있다. 또한, B 림프구의 바이러스성 또는 발암성 형질 전환을 이용할 수 있으며, 뮤린 시스템을 이용하여 제조된 뮤린 단일클론 항체의 서열을 기초로 하여 제조할 수 있다. 예를 들어, 표준 분자 생물학 기술을 이용하여, 중쇄 및 경쇄 면역글로불린을 코딩하는 DNA를 뮤린 하이브리도마로부터 얻고 이와 함께 비-뮤린 면역글로불린 서열을 함유하게 할 수 있다.
일부 실시 양태에서, 본 발명은 아미노산이 각각의 인간 VH 또는 VL 배선 서열로부터의 항체 프레임워크로 치환된 프레임워크를 포함하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공한다.
또 다른 실시 양태에서, 본 발명은 서열번호 1, 2, 3, 4 및 5로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 폴리펩티드, 및 서열번호 6, 7, 8, 9 및 10으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하는 폴리펩티드를 코딩하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 핵산을 제공한다. 일 구현예에서, 상기 핵산은 서열번호 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169 및 170으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 핵산 서열일 수 있으며, 이를 하기 표 17에 나타내었다(표에서 볼드체로 표시한 부분은 경쇄 가변영역(VL)이며, 밑줄로 표시한 부분은 중쇄 가변영역(VH)이다).
서열번호 항체 핵산 서열
161 Ab1 scFv GAGCTCACACTCACGCAGTCTCCAGCCACCCTGTCTTTGTCTCCAGGGGAAACAGCCACCCTCTCCTGCGGGGCCAGTCAGAGTGTTAGCACCAACTACTTAGCCTGGTACCAGCAGAAACCTGGCCTGGCGCCCAGGCTCCTCATCTATGATGCATCCAGCAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTGGCGCCTGAAGATTCTGCGGTGTATTACTGTCAGCAATATGGTAGCTCACCTCTCACTTTCGGCGGAGGGACCAAGCTGGAGATCAAAGGTGGTTCCTCTAGATCTTCCTCCTCTGGTGGCGGTGGCTCGGGCGGTGGTGGGCAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGCCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGTCCTCGGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGAGGCACCTTCAGCACCTATGCTATCAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGAGGGATCATCCCTATCTCTGGTACAGCAAACTACGCACAGAAATTCCAGGGCAGAGTCACCATTACCGCGGACGAATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGGTACCAGTAGTACCAGCTGCCAGCGGCCCTTTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCAGCC
162 Ab2 scFv GAGCTCGTGGTGACGCAGCCGCCCTCAGTGTCTGGGGCCCCAGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGTTCTGGAAGCAGCTCCAACATCGGAAATAATACTGTAAACTGGTACCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATAGTAATAATCAGCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCACTGGGCTCCAGGCTGACGATGAGGCTGATTATTACTGCCAGTCCTTTGACAGCAGCCTGAATGATTGGGTGTTCGGCGGGGGCACCAAGCTGACCGTCCTAGGCGGTGGTTCCTCTAGATCTTCCTCCTCTGGTGGCGGTGGCTCGGGCGGTGGTGGGGAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCCTGGTCAAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAGCTATAGCATGAACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCATCCATTAGTAGTAGTAGTCGTTACATATTCTACGCAGACTCAGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAACGCCAAGAACTCACTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGAGCCTAGGATATTGTAGTGGTGGTAGCTGCTACGGGTTCCCGGAAGGTGGGAATGCTTTTGATATCTGGGGCCAAGGGACAATGGTCACCGTCTCTTCA
163 Ab3 scFv GAGCTCGAGCTGACTCAGCCACCCTCAGTGTCTGGGGCCCCAGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGCACTGGGAGCAGCTCCAACATCGGGGCAGGTTATGATGTACACTGGTACCAGCAGCTTCCAGGAACAGCCCCCAAACTCCTCATCTATGGTAACAGCAATCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGACACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGACAGCCTGAATGGCCAGGTGGTATTCGGCGGAGGCACCAAGCTGACCGTCCTAGGCGGTGGTTCCTCTAGATCTTCCTCCTCTGGTGGCGGTGGCTCGGGCGGTGGTGGGCAGGTGCAGCTGCAGGAGTCGGGCCCAGGACTGGTGAAGCCTTCGGAGACCCTGTCCCTCACCTGCACTGTCTCTGGTGGGTCCTTCAGTGGTTACTACTGGAGCTGGATCCGCCAGCCCCCAGGAAAGGGGCTGGAGTGGATTGGGGAAATCATTCATAGTGGAAGCACCAACTACAACCCGTCCCTCAAGAGTCGAGTCACCATATCAGTAGACACGTCCAAGAACCAATTCTCCCTGAAGCTGAGCTCTGTGACCGCCGCGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGAGAGGTGATTATTATGATAGTAGTGGTGCCTTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCA
164 Ab4 scFv GAGCTCGTGCTGACTCAGCCACCTTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCTTGTTCTGGAAGCAGCTCCAACATCGGAAGTAATACTGTAAACTGGTACCAGCAGCTCCCCGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATAGTAATAATCAGCGGCCCCCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCAGTCTGAGGATGAGGCTGATTATTACTGCCAGTCCTATGACAGCAGCCTGAGTTATGTCTTCGGAACTGGCACCAAGGTGACCGTCCTAGGCGGTGGTTCCTCTAGATCTTCCTCCTCTGGTGGCGGTGGCTCGGGCGGTGGTGGGGAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCGGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAGCTATAGCATGAACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCATCCATTAGTAGTAGTAGTCGTTACATATTCTACGCAGACTCAGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAACGCCAAGAACTCACTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGAGCCTAGGATATTGTAGTGGTGGTAGCTGCTACGGGTTCCCGGAAGGTGGGAATGCTTTTGATATCTGGGGCCAAGGGACAATGGTCACCGTCTCTTCA
165 Ab5 scFv GAGCTCGTGGTGACCCAGGAGCCCTCACTGACTGTGCCCCCAGGAGGGACAGTCACTCTCACCTGTGGCTCCAGCACTGGACCTGTCACCACTACTCAGTATCCCTACTGGTTCCAGCAGAAGCCTGGCCAGGCCCCCAGGACACTCATTTATGATACCAACAACAGACACCCCTGGACACCTGCCCGCTTCTCAGGCTCCCTCCTTGGGGGCAAGGCTGCCCTGACCCTTTCGGGAGCGCAGCCTGAGGATGACGCTTAGTATTATTGCTTGCTCACCTCTGCTAGCGCTCCTTGGGTGTTCGGCGGAGGCACCAAGCTGACCGTCCTAGGCGGTGGTTCCTCTAGATCTTCCTCCTCTGGTGGCGGTGGCTCGGGCGGTGGTGGGCAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCCAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTTCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAGCTATGCTATGCACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGACTGGAATATGTTTCAGCTATTAGTAGTGATGGGGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGCAGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTTCAAATGAGCAGTCTGAGAGCTGAGGACACGGCTGTATATTACTGTGTGAACGATGGCAGCTCGAACCATTTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCA
166 Ab6 scFv GAGCTCGCCCTGACTCAGCCTCCCTCCGTGTCAGTGGCCCCAGGAAAGACGGCCAAGATTACCTGTGGGGGTGACGACATTGGAAGTAAAACTGTGCAATGGTACCAACAGACCTCAGGCCAGGCCCCTGTGCTGGTCGTCTATGACGATAGCGACCGGCCCTCAGGGATCCCTGAGCGATTCTCCGGCGCCAACTCTGGGAACACGGCCACCCTGACCATCAGCAGGGTCGAAGCCGGGGATGAGGCCGACTATTACTGTCAGGTGTGGGACGGCAGAAGTGATCATGTGGTTTTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTAGGCGGTGGTTCCTCTAGATCTTCCTCCTCTGGTGGCGGTGGCTCGGGCGGTGGTGGGCAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCAGAGGTGAAAAAGCCCGGGGAGTCTCTGAAGATCTCCTGTAAGGGTTCTGGATACATCTTTACCAACTACTGGATCGGCTGGGTGCGCCAGATGCCCGGGAAAGGCCTGGAGTGGATGGGGATCATCTATCCTGGTGACTCTGATACCAGATACAGCCCGTCCTTCCAAGGCCAGGTCACCATCTCAGCCGACAGGTCCATCAGCACCGCCTACCTGCAGTGGAGCAGCCTGAAGGCCTCGGACACCGCCATGTATTACTGTGCGAGACTAAAGCTCCGGGGGTTTTCGGGCGGCTATGGTTCAGGGAGACGCTACTTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCA
167 Ab7 scFv GAGCTCGTGCTGACGCAGCCGCCCTCAGTGTCTGCGGCCCCAGGACTGAAGGTCACCATCTCCTGCTCTGGAAGCAGCTCTAACATTGGGAATAATGTTGTATCCTGGTACCAGCAACTCCCAGGAACAGCCCCCAAACTCCTCATTTATGACGATAACCGGCGACCCTCAGGGATTCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACGTCAGCCACCCTGGACATCACCGGACTCCAGACTGGGGACGAGGCCGATTACTACTGCGCAACATGGGATGGCAGCCTGACTGCTGGCCGTGTGTTGTTCGGCAGTGGCACCAAGCTGACCGTCCTAGGTGGTGGTTCCTCTAGATCTTCCTCCTCTGGTGGCGGTGGCTCGGGCGGTGGTGGGCAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCAGAGGTGAAAAAGCCCGGGGAGTCTCTGAAGATCTCCTGTAAGGGTTCTGGATACAGCTTTACCAGCTACTGGATCGGCTGGGTGCGCCAGATGCCCGGGAAAGGCCTGGAGTGGATGGGGATCATCTATCCTGGTGACTCTGATACCAGATACAGCCCGTCCTTCCAAGGCCAGGTCACCATCTCAGCCGACAAGTCCATCAGCACCGCCTACCTGCAGTGGAGCAGCCTGAAGGCCTCGGACACCGCCATGTATTACTGTGCGAGACTAAAGCTCCGGGGGTTTTCGGGCGGCTATGGTTCAGGGAGCCGCTACTTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCA
168 Ab8 scFv GAGCTCGCCCTGACTCAGCCTCCCTCCGTGTCAGTGGCCCCAGCAATGACGGCCAAGATTACCTGTGGGGGTGACGACATTGGAAGTACTACTGTGCAATGGTACCAACAGACCTCAGGCCAGGCCCCTGTGCTGGTCGTCTATGACGATAGCGACCGGCCCTCAGGGATCCCTGAGCGATTCTCCGGCGCCAACTCTGGGAACACGGCCACCCTGACCATCAGCAGGGTCGAAGCCGGGGATGAGGCCGACTATTACTGTCAGGTGTGGGACGGCAGAAGTGATCATGTGGTTTTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTAGGCGGTGGTTCCTCTAGATCTTCCTCCTCTGGTGGCGGTGGCTCGGGCGGTGGTGGGCAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCAGAGGTGAAAAAGCCCGGGGAGTCTCTGAAGATCTCCTGTAAGGGTTCTGGATACATCTTTACCAACTACTGGATCGGCTGGGTGCGCCAGATGCCCGGGAAAGGCCTGGAGTGGATGGGGATCATCTATCCTGGTGACTCTGATACCAGATACAGCCCGTCCTTCCAAGGCCAGGTCACCATCTCAGCCGACAGGTCCATCAGCACCGCCAACCTGCAGTGGAGCAGCCTGAAGGCCTCGGACACCGCCCTGTATTACTGTGCGAGACTAAAGCTCCGGGGGTTTTCGGGCGGCTATGGTTCAGGGAGACGCTACTTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCA
169 Ab9 scFv GAGCTCGAGCTGACTCAGCCACCCTCAGTGTCTGGGACCCCCGGGAAGAGGGTCAGTATGTCTTGTTCTGGAAGTAGGTCCAACATCGGAGGTAATGTTGTGAACTGGTACCAGCAGCTCCCAGGAAAGGCCCCCAAACTCTTCATCTACAATAATGATCAGCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGAGTCTCTGGCTCCAAGTCAGGCACCTCAGTCTCCGTGGCCATCAGTGGGCTCCAGCCTGAAGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCTTGGGATGACATCCTGAATGGTGTGGTCTTCGGCGGAGGGACCCAGCTGACCGTCCTCGGCGGTGGTTCCTCTAGATCTTCCTCCTCTGGTGGCGGTGGCTCGGGCGGTGGTGGGCAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCAGAGGTGAAAAAGCCCGGGGAGTCTCTGAAGATCTCCTGTAAGGGTTCTGGATACAACTTCACCAACTACTGGATCGGGTGGGTGCGCCAGCTGCCCGGGAAAGGCCTGGAGTGGATGGGGATCATCTATCCTGGTGACTCCGACACCAGATATAGCCCGTCCTTCCAAGGCCAGGTCACCATCTCAGCCGACAAGTCCATCAGCACCGCCTACCTGCAGTGGAGCAGCCTGAAGGCCTCGGACACCGCCATGTATTACTGTGCGAGAATTCGAGTTATCGGATTCTATGATAGTAGCCCCCCGCCCTTATTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCA
170 Ab10 scFv GAGCTCGTGATGACTCAGTCTCCATCTTCCCTGTCCGCATCTGTGGGAGACACAGTCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAGAGCATTTACACCTATTTAAATTGGTATCACCAGACACCAGGGAAAGCCCCTAAACTCCTGATTTCTGCTGCATCTAGTTTGCAAAGTGGTGTCCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGTCTGCAACCTGAGGATTTTGCAACGTACTACTGTCAACAGTATGCGGATGTCCCGGTCACTTTCGGCGGAGGGACCAAGCTGGAGATCAAAGGTGGTTCCTCTAGATCTTCCTCCTCTGGTGGCGGTGGCTCGGGCGGTGGTGGGGAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCGTGGTCCAGCCTGGGAGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTGGCTATGGCATACACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGCAAGGGGCTGGAGTGGGTGGCACTTATATCATATGATGGAAGTAATAAATACTATGCAGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCTGAGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGAAAGATCGGGATTACTTTGGTTCAGGGTTCTTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCA
또 다른 실시 양태에서, 본 발명의 항체는 SFTSV의 외막 당단백질에 대한 항체 특이성이 유지되는 범위 내에서, 상기 표 1~16에 개시된 아미노산 서열 중 어느 하나와 적어도 90%, 95%, 97%, 98% 또는 99%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함할 수 있다. 또한, 본 발명의 상기 항체를 발현시킬 수 있는 핵산은 SFTSV의 외막 당단백질에 대한 항체 특이성이 유지되는 범위 내에서, 상기 표 17에 개시된 핵산 서열 중 어느 하나와 적어도 90%, 95%, 97%, 98% 또는 99%의 서열 동일성을 갖는 핵산 서열을 포함할 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 핵산을 포함하는 벡터 및 숙주 세포를 제공한다. 본 발명의 벡터는 상기 SFTSV의 외막 당단백질 Gc에 결합하는 항체의 아미노산 서열을 코딩하는 핵산, 또는 Gn에 결합하는 항체의 아미노산을 코딩하는 핵산을 포함할 수 있다. 또는 본 발명의 벡터는 상기 2가지 종류의 핵산을 모두 포함함으로써, 이중 특이적 항체를 발현할 수 있다.
일 실시 양태에서, 본 발명은 (1) 본 발명의 항체의 중쇄를 코딩하는 제1 재조합 DNA 절편, 및 (2) 본 발명의 항체의 경쇄를 코딩하는 제2 재조합 DNA 절편을 포함하는 숙주 세포를 제공한다. 또 다른 실시 양태에서, 본 발명은 본 발명의 항체의 중쇄 및 경쇄 각각을 코딩하는 재조합 DNA 절편을 포함하는 숙주 세포를 제공한다. 일부 실시 양태에서, 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 인간 단일클론 항체 또는 이의 항원 결합 단편이다.
본 발명의 SFTSV의 외막 당단백질 결합 항체를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 발현시키기 위해 다양한 발현 벡터가 사용될 수 있다. 포유동물 숙주 세포에서 항체를 생성하기 위해 바이러스-기재 또는 비-바이러스 발현 벡터 둘 다 사용될 수 있다. 예를 들어, pcDNA, pCI, pCMV 또는 pCEP4 등의 벡터와, HEK293, CHO 또는 CHO-DG44 등의 숙주세포가 사용될 수 있다.
본 발명의 항체를 보유하고 발현하는 숙주 세포는 원핵 또는 진핵 세포일 수 있다. 예를 들어, 상기 숙주 세포는 E.Coli, 바람직하게, E.coli ER2738. HB2151, BL21 등일 수 있으며, 이들은 본 발명의 폴리뉴클레오티드를 클로닝하고 발현시키는데 유용할 수 있다. 또한, 다른 미생물 숙주로 바실러스, 예를 들어 바실러스 섭틸리스(Bacillus subtilis), 또는 다른 장내 박테리아, 예를 들어 살모넬라(Salmonella) 또는 세라티아(Serratia), 또는 다양한 슈도모나스(Pseudomonas) 종이 사용될 수 있다. 본 발명의 항체를 발현시키기 위해 다른 미생물, 예를 들어 효모가 사용될 수 있으며, 바큘로바이러스 벡터와 조합된 곤충 세포가 또한 사용될 수 있다.
일부 바람직한 실시양태에서, 포유동물 숙주 세포가 본 발명의 SFTSV 외막 당단백질 결합 폴리펩티드를 발현시키고 제조하는데 사용될 수 있다. 예를 들어, 내인성 면역글로불린 유전자를 발현하는 하이브리도마 세포주 또는 외인성 발현 벡터를 보유하는 포유동물 세포주 일 수 있다. 또한, 임의의 동물 또는 인간 세포로, 예를 들어, CHO 세포주, Cos 세포주, HeLa 세포, 골수종 세포주, HEK 세포주, 형질전환된 B-세포 및 하이브리도마를 포함한다. 또한, 면역글로불린을 분비할 수 있는 수많은 적합한 숙주 세포주가 사용될 수 있으며, 바람직하게는 HEK293, CHO 또는 CHO-DG44가 사용될 수 있다.
또한, 본 발명은 본 발명의 1종 이상의 SFTSV 외막 당단백질 결합 분자(예를 들어, Gc 또는 Gn 결합 항체 또는 이의 항원 결합 단편)를 포함하는 SFTSV 진단용 조성물을 제공한다. 본 발명의 진단용 조성물은 SFTSV의 검출, 분리 또는 정제에 유용하게 사용될 수 있다. 또한, 상기 조성물은 SFTSV를 진단하기에 적합한 1종 이상의 다른 제제를 추가로 함유할 수 있다. 또한, 본 발명은 본 발명의 항체를 사용하여 SFTSV를 진단하는 방법을 제공한다. 상기 방법은 SFTSV의 정량적 또는 정성적 검출 또는 진단하는데 사용될 수 있다. 구체적으로, 상기 진단 방법은 생물학적 샘플(예를 들어, 혈액, 혈청, 세포 또는 조직)로부터 또는 SFTS를 앓고 있거나 발생할 위험이 있는 대상으로부터 SFTSV의 외막 당단백질 및/또는 핵산 발현 및 SFTSV의 외막 당단백질 기능을 결정하는 진단 검정을 포함할 수 있다. 본 발명에 있어서, 검출은 정량 및/또는 정성 분석을 포함하는 것으로, 존재, 부존재의 검출 및 바이러스 양(titer)의 검출을 포함하는 것으로 이러한 방법은 당업계에 공지되어 있으며, 당업자라면 본원의 실시를 위해 적절한 방법을 선택할 수 있다.
본 발명에 있어서, SFTSV의 진단의 검출 또는 진단은 항원-항체의 복합체를 검출하는 방사상면역분석, 웨스턴블랏, ELISA(Enzyme linked immunosorbent assay) 또는 면역형광분석 등을 통해 검출될 수 있다. 본 발명에 있어서, 항원은 방사능 물질, 효소 또는 형광물질 등의 표지로 표지될 수 있다.
일 양태에서, 본 발명의 진단 방법은 SFTSV의 외막 당단백질에 대한 항체를 자석 비드에 접합시킨 복합체를 이용할 수 있다. 구체적으로, 상기 방법은 SFTSV의 외막 당단백질 Gc 또는 Gn에 특이적인 항체를 자석 비드에 결합시킨 복합체를 이용하여, SFTSV를 보다 효과적으로 검출, 분리 또는 정제할 수 있다. 상기 SFTSV 외막 당단백질에 대한 항체-자석 비드 복합체는 항체의 특성을 이용하여 검체 내에 존재하는 SFTSV와 결합하게 되고, 이때 자력으로 자석 비드를 당기면 바이러스와 검체 내 나머지 물질들을 분리하여 바이러스를 효과적으로 정제할 수 있다. 이렇게 정제된 바이러스는 불순물이 제거되어 상대적으로 RNA 분리에 용이하며, 이를 통해 양질의 정제 결과 데이터를 얻어낼 수 있다. 또한 자석 비드에 붙어있는 상태의 바이러스에 또 다른 항체를 이용한 면역화학반응을 진행할 수 있으며, 이를 통해 검체 내에 존재하는 SFTSV를 신속하게 확인할 수 있다. 상기 진단 방법의 개략적인 도면을 도 4에 나타내었다.
또한 본 발명은 SFTSV의 외막 당단백질에 결합하는 항체를 포함하는 SFTSV의 진단용 키트를 제공한다. 상기 키트는 상기 언급된 항체의 어느 하나 이상 및 항원-항체 복합체 검출용 시약을 포함할 수 있다. 상기 항원-항체 복합체 검출용 시약은 방사상면역분석, ELISA (Enzyme linked immunosorbent assay) 또는 면역형광분석 등에 사용되는 시약이 사용될 수 있다.
예를 들어, 상기 면역 반응의 검출을 위해 검출시약은 검출을 위해 직접적 또는 샌드위치 형태로 간접적으로 표지될 수 있다. 직접적 표지방법의 경우, 어레이 등에 사용되는 혈청 시료는 Cy3 또는 Cy5와 같은 형광 표지로 표지될 수 있다. 샌드위치 방식의 경우, 표지되지 않은 혈청 시료를 먼저 검출시약이 부착된 어레이와 반응시켜 결합시킨 후, 표적 단백질을 표지된 검출 항체와 결합시켜 검출할 수 있다. 샌드위치 방식의 경우, 민감도와 특이성을 높일 수 있어, pg/mL 수준까지 검출이 가능하다. 그 외 방사능 물질, 발색물질, 자기성입자 또는 고밀도전자입자 등이 표지물질로 사용될 수 있다. 형광 광도는 스캐닝 콘포칼 현미경이 사용될 수 있으며, 예를 들어 Affymetrix, Inc. 또는 Agilent Technologies, Inc 등에서 입수할 수 있다.
본 발명의 키트는 추가로 결합분석에 필요한 하나 이상의 부가 성분을 포함할 수 있으며, 예를 들면 결합 버퍼, 시료 준비에 필요한 시약, 혈액채취용 주사기 또는 음성 및/또는 양성대조군을 추가로 포함할 수 있다. 상기 다양한 검출시약을 포함할 수 있는 본원의 키트는 분석양태에 따라 ELISA 분석용, 딥스틱 래피드 키트(dip stick rapid kit) 분석용, 마이크로어레이용, 유전자증폭용, 또는 면역분석용 등으로 제공될 수 있으며, 분석 양태에 맞추어 적절한 검출시약을 선별할 수 있다.
또한, 본 발명은 본 발명의 SFTSV 외막 당단백질에 결합하는 항체를 포함하는 약학적 조성물을 제공한다. 바람직하게, 상기 약학적 조성물은 SFTS의 예방용 또는 치료용으로 사용될 수 있다. 본 발명의 항체는 SFTSV를 중화하여 바이러스의 증식을 차단함으로써, SFTS를 효과적으로 예방 또는 치료할 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 조성물은 SFTSV 관련 질환을 치료 또는 예방하기에 적합한 1종 이상의 다른 제제를 추가로 함유할 수 있다. 약학적 조성물에 사용될 수 있는 담체는 조성물의 효과를 향상시키거나, 조성물을 안정화시키거나, 또는 조성물의 제조를 용이하게 할 수 있다. 약학적으로 허용되는 담체는 생리적으로 허용 가능한 용매, 분산 매질, 코팅제, 항-박테리아제, 항-진균제, 등장화제 또는 흡수 지연제 등을 포함할 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 약학적 조성물은 당업계에 공지된 다양한 방법으로 투여될 수 있으며, 투여 경로 및/또는 방식은 원하는 결과에 따라 달라질 수 있다. 상기 약학적 조성물은 예를 들어, 정맥내, 근육내, 복막내 또는 피하 주사 등의 투여 방식으로 투여될 수 있다. 투여 경로에 따라, 활성 화합물인 항체는 산의 작용 및 화합물을 불활성화시킬 수 있는 다른 천연 조건으로부터 화합물을 보호하는 물질로 코팅될 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 약학적 조성물은 멸균된 유체일 수 있다. 유체 조성물의 적당한 유동성을 유지하기 위해, 예를 들어 레시틴과 같은 코팅제 또는 계면활성제 등이 사용될 수 있다. 또한, 상기 약학적 조성물은 등장화제(예를 들어, 당, 폴리알콜, 만니톨, 소르비톨, 및 염화나트륨 등) 또는 흡수 지연제(알루미늄 모노스테아레이트 또는 젤라틴 등)을 포함할 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 약학적 조성물은 당업계에 공지되고 통상적으로 실시되는 방법에 따라 제조될 수 있으며, 바람직하게 GMP 조건하에 제조될 수 있다. 상기 약학적 조성물은 SFTSV 외막 당단백질 결합 항체의 치료 유효 용량 또는 효능 용량을 포함할 수 있다. 또한, 상기 약학적 조성물 중 활성 성분의 투여량 수준은 환자에게 독성을 나타내지 않으면서 목적하는 치료 효과를 달성하기에 충분한 양일 수 있다.
본 발명에 있어서, 치료 투여량은 안전성 및 효능이 최적화되도록 적정될 수 있다. 본 발명의 항체를 전신 투여하는 경우, 투여량 범위는 숙주 체중 1 kg 당 약 0.0001 내지 100 mg, 더욱 일반적으로는 0.01 내지 15 mg의 범위일 수 있다. 예시적인 치료법은 2주 당 1회, 또는 1개월 당 1회, 또는 3개월 내지 6개월마다 1회의 전신 투여를 수반한다. 전신 투여의 일부 방법에서, 투여량은 1 내지 1000 ㎍/mL, 일부 방법에서는 25 내지 500 ㎍/mL의 혈장 항체 농도가 달성되도록 조정될 수 있다. 또는, 빈도를 덜하게 하여 투여하는 것이 요구되는 경우에는, 지속 방출 제제를 통해 항체를 투여할 수 있다. 투여량 및 빈도는 환자에서의 항체의 반감기에 따라서 달라질 수 있다. 예방적 용도에서는 상대적으로 낮은 투여량을 장기간에 걸쳐 상대적으로 드문 간격으로 투여할 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 약학적 조성물을 사용하여 SFTS를 예방 또는 치료하는 방법을 제공한다. 상기 예방 또는 치료 방법은 본 발명의 항체를 포함하는 조성물의 치료학적으로 유효한 양의 투여를 포함할 수 있다. 상기 "치료학적으로 유효한 양"은 SFTS 질환의 예방 또는 치료에 유효한 본 발명의 항체 또는 이를 포함하는 조성물의 양을 나타낸다.
또한, 본 발명은 SFTSV의 진단용 조성물의 제조를 위한 SFTSV 외막 당단백질 결합 항체의 용도를 제공한다. 상기 진단용 조성물 제조를 위하여, 본 발명의 항체 또는 이를 포함하는 조성물은 허용되는 담체 등의 추가 성분을 포함할 수 있다.
또한, 본 발명은 SFTSV 외막 당단백질 결합 항체의 용도를 제공한다. SFTSV에 특이적으로 결합하는 본 발명의 항체는 SFTSV 진단용으로 사용될 수 있으며, SFTS 질환을 앓고 있거나 발생할 위험이 있는 대상으로부터 SFTSV의 외막 당단백질 및/또는 핵산 발현 및 또한 상기 단백질의 기능을 결정하는 진단 용도로 사용될 수 있다. 또한, 본 발명의 항체는 SFTS가 발생할 위험이 있거나 이를 앓고 있는 대상에 SFTSV에 의해 발병하는 SFTS의 예방 또는 치료 용도로 사용될 수 있다.
본 발명의 항체는 SFTSV의 외막 당단백질 Gc 또는 Gn에 특이적으로 결합할 수 있어, 본 발명의 항체를 사용함으로써 SFTSV를 효과적으로 검출 또는 진단할 수 있으며, SFTS를 치료할 수 있다.
도 1은 항체 클론 Ab1 내지 Ab10의 아미노산 서열을 나타낸 것이다.
도 2는 SFTSV 외막 당단백질 Gc 및 Gn에 대해 정제된 scFv 절편 항체의 ELISA 분석 결과를 나타낸다. 이들 데이터는 3회 반복 샘플의 평균±S.D를 나타낸다.
도 3은 SFTSV 감염의 면역형광분석 결과(A) 및 형광강도 측정 결과(B)이다. 면역형광분석 결과에서, SFTSV 감염된 Vero 세포가 Gn에 대한 항체와 반응하는 것으로 나타났으며, Ab10은 투여량 의존적으로 바이러스 감염을 억제하는 것으로 나타났다. Ab10은 MAb 4-5에 비해 바이러스 침입에 대한 억제 능력이 현저하게 우수하였다.
도 4는 항체-자석 비드 복합체를 사용하여 SFTSV를 검출하는 방법을 나타낸 개략적인 도면이다.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 실시예 등을 들어 상세하게 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명에 따른 실시예들은 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 하기 실시예들에 한정되는 것으로 해석되어서는 안 된다. 본 발명의 실시예들은 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다.
실시예 1: 세포의 준비
아프리카 녹색 원숭이 신장에서 유래된 Vero 세포를 한국 세포주 은행(Korean Cell Line Bank)에서 구입하여, 2% 열 불활성화된 소태아 혈청(Gibco) 및 페니실린-스트렙토마이신(Gibco)로 보충된 Roswell Park Memorial Institute (RPMI)-1640 배지(Welgene)로 5% 이산화탄소 환경에서 37℃로 배양하였다.
실시예 2: 바이러스 균주의 준비
본 실험에 사용된 SFTS 바이러스는 서울대학교 병원에 입원하고 2012년에 사망한 63세 여성 환자의 혈청 샘플에서 분리된 KF358691이다 [Kim KH, Yi J, Kim G, Choi SJ, Jun KI, Kim NH, et al. Severe fever with thrombocytopenia syndrome, South Korea, 2012. Emerging infectious diseases. 2013;19(11):1892-4.]. 상기 분리된 바이러스를 Vero 세포의 단일층에 접종하고 5% 이산화탄소 환경에서 37℃로 배양하였다. 바이러스를 Vero 세포에서 증식시키고, 모든 실험은 바이러스 배양 세번째 계대수(viral passage)에서 수행되었다. Reed-Muench법을 사용하여 Vero 세포에서 50% 조직 배양물 감염 투여량(TCID50)을 적정하였다.
실시예 3: 재조합 SFTS 바이러스 당단백질 및 단쇄 가변절편 항체 융합 단백질의 준비
본 실험에 사용된 SFTS 바이러스 당단백질의 아미노산 서열은 이전에 보고되었다[Kim KH, Yi J, Kim G, Choi SJ, Jun KI, Kim NH, et al. Severe fever with thrombocytopenia syndrome, South Korea, 2012. Emerging infectious diseases. 2013;19(11):1892-4.]. SFTS 바이러스 당단백질을 코딩하는 DNA 가닥을 얻기 위해, 서열번호 171의 SFTS 바이러스 당단백질의 아미노산 서열(GenBank Accession No: AGT98506, Gn 당단백질에 대해 아미노산 20-452, Gc 당단백질에 대해 아미노산 563-1035)에 상응하는 인간 코돈 최적화된 DNA 서열을 합성하였다(GenScript).
인간 면역글로불린 G1(IgG1) Fc 영역(Gc-Fc, Gn-Fc)에 융합되거나, 인간 Ig k-쇄 불변 영역(Gc-Ck, Gn-Ck)에 융합된 재조합 SFTS 바이러스 당단백질 Gc 및 Gn을 과발현시키기 위해, SFTS 당단백질 코딩 유전자를 [Park S, Lee DH, Park JG, Lee YT, Chung J. A sensitive enzyme immunoassay for measuring cotinine in passive smokers. Clinica chimica acta; international journal of clinical chemistry. 2010;411(17-18):1238-42.], [Lee Y, Kim H, Chung J. An antibody reactive to the Gly63-Lys68 epitope of NT-proBNP exhibits O-glycosylation-independent binding. Experimental & molecular medicine. 2014;46:e114.]에서 개시된 방법에 따라 준비하였다.
먼저, 인간 골수유래 cDNA 라이브러리(Clontech Laboratories)로부터 2종의 프라이머 (5'-GAGCCCAAATCTTGTGACAAAACTCAC-3') 및 (5'-GGATCCTCATTTACCCGGGGACAGGGAG-3')를 이용해 인간 IgG1의 Fc 영역을 증폭시켜 획득한 DNA 서열 또는 합성된 인간 Ig k-쇄의 불변 영역(UniProtKB/Swiss-Prot: P01834.1)을 추가되는 유전자 서열의 DNA 3' 쪽에 위치하도록 변형하였다. 추가되는 유전자 서열은 SfiI 제한효소를 통해 유전자 추가가 가능하도록 변형된 pCEP4 벡터(Invitrogen)에 클로닝하였다.
항체 클론은 각 클론의 scFv 코딩 DNA를 사용하여 단쇄 가변 절편-인간 IgG1 Fc 영역 융합 단백질(scFv-Fc)의 형태로 생산되었다. 이후, 상기 벡터를 폴리에틸렌이민(Polysciences)을 사용하여 HEK293F 세포(Invitrogen)에 형질주입시키고, 형질주입된 세포를 100 U/L 페니실린-스트렙토마이신을 포함하는 FreeStyleTM 293 발현 배지에 배양하였다. 과발현된 재조합 SFTS 바이러스 당단백질 융합 단백질을 단백질 A/ KappaSelect 칼럼 및 AKTA 퓨어 크로마토그래피 시스템을 사용하는 친화성 크로마토그래피(GE Healthcare)를 통해 정제하였다.
실시예 4: 항체 라이브러리 구성 및 바이오패닝(biopanning)
Ficoll-Paque 용액(GE Healthcare)을 사용하여 SFTS로부터 회복된 환자의 말초 혈액 단핵 세포를 수집하였다. 전체 RNA를 TRIzol 시약(Invitrogen)을 사용하여 분리하고, 올리고(dT) 프라이밍(priming)과 함께 SuperScript III 첫번째 가닥 cDNA 합성 키트(Invitrogen)를 사용하여 전체 RNA로부터 cDNA를 합성하였다. 상기 cDNA를 사용하여, pComb3XSS 파지미드(phagemid) 벡터를 사용하여 인간 단쇄 가변 절편(scFv) 항체의 파지-디스플레이 라이브러리를 제작하였다. 그리고 [Barbas CF, Burton DR, Scott JK, Silverman GJ. Phage display: a laboratory manual: CSHL Press; 2004.]에 기술된 바와 같이 라이브러리로부터 scFv 클론을 선택하기 위해 4 라운드의 바이오패닝을 수행하였다. 바이오패닝의 각 라운드마다 재조합 SFTS 바이러스 당단백질 Gc 또는 Gn 인간 IgG1 Fc 영역 융합 단백질(Gc-Fc, Gn-Fc)의 3 μg을 제조자의 지시에 따라 5x106 개의 자기성 Dynabeads M-270 에폭시 비드(Invitrogen)를 코팅하는데 사용하였다. 그리고 단백질과 결합된 비드는 바이오패닝 절차에 사용하였다.
실시예 5: SFTS 바이러스에 대한 단쇄 가변 절편 항체의 스크리닝
SFTS 바이러스 당단백질에 결합하는 개별적인 항체 클론을 선택하기 위하여, 바이오패닝의 마지막 라운드로부터 파지 클론을 선택하였고, 파지 효소 면역분석법을 위해 scFv-디스플레이 파지를 제조하였다. 마이크로타이터 플레이트(Corning)를 밤새 4℃에서 웰당 100 ng의 재조합 Gc, Gn 인간 Ig k쇄 불변 영역 융합 단백질(Gc-Ck, Gn-Ck)로 코팅하였다. 상기 웰을 37℃에서 1시간 동안 100 μl의PBS 내 3%(w/v) BSA로 차단하고, 37℃에서 2시간 동안 파지를 포함하는 50 μl의 배양물 상청액으로 배양하고, 150 μl의PBS 내0.05%(v/v) Tween20로 세번 세척하였다. 이후, 차단 버퍼(1:5000)에 희석된 50 ml의 호스래디쉬 퍼옥시다제(HRP)-결합된 항-M13 항체(GE Healthcare)를 각 웰에 첨가하였고, 이후 플레이트를 37℃에서 1시간 동안 배양하였다. 150 μl의 0.05% PBST로 세번 세척한 이후, 50 μl의 2,2-아지노-bis-3-에틸벤조티아졸린-6-설폰산(ABTS) 기질 용액(Pierce)를 각 웰에 첨가하고 실온에서 30분 동안 배양하였다. 이후, 각 웰의 흡광도를 마이크로플레이트 리더(Labsystems)를 사용하여 405 nm에서 측정하였다.
실시예 6: 중화 분석
SFTS 바이러스 특이적 scFv-Fc 융합 항체(100μl/ml)를 계열 희석하여 0.01 μl/ml까지 10배씩 감소시켰다. 각 농도의 scFvs를 100 TCID50 SFTS 바이러스(균주 KF358691)의 동일한 부피로 혼합하고 1시간 동안 37℃에서 배양하였다. 이후 상기 바이러스-항체 혼합물을 8-웰 공초점 현미경 챔버 내 Vero 세포의 단일층으로 옮기고 1시간 동안 37℃로 배양하였다. 바이러스-항체 혼합물을 제거한 이후, 샘플을 5% 이산화탄소 환경 내 37℃에서 2% FBS 및 항생제가 포함된 RPMI-1640 배지로 배양하였다. 8-웰 공초점 현미경 챔버 내 Vero 세포는 면역형광 분석(IFA)를 위해 사용되었다. 모든 실험은 세번 수행되었고 상대적인 중화 효과는 양성 대조군으로 MAb 4-5 [Xiling Guo et al. A human antibody neutralizing SFTS virus, an emerging hemorrhagic fever virus, 2013. Clin. Vaccine Immunol. 2013;20(9):1426-32).] 및 음성 대조군으로 항-뉴캐슬병 바이러스(NDV) 항체와 비교하여 각각 측정하였다.
실시예 7: 면역형광 분석(IFA) 및 형광 강도 측정
상대적인 중화 효과는 면역형광 분석(IFA)을 사용하여 측정하였다. Ab10, MAb 4-5(양성 대조군), 항-NDV(음성 대조군)가 있거나 없는 바이러스-항체 혼합물로 처리되거나 처리되지 않은 세포를 2일 동안 배양하였다. 상기 세포를 실온에서 1시간 동안 인산염-버퍼 식염수(PBS)에서 4% 파라포름알데히드로 고정시켰다. 슬라이드를 1% 소혈청 알부민(BSA) 내 0.1% 트리톤 X-100으로 차단 및 투과시킨 후, 밤새 4℃로 항-SFTS 바이러스 당단백질 Gn 클론 Ab6 항체(5μl/ml)와 함께 배양하였다. 세포를 세척하고 플루오레세인 이소티오시아네이트(FITC)-결합된 항-인간 IgG(Pierce)로 실온에서 1시간 동안 배양하였다. 4',6-디아미디노-2-페닐인돌 디하이드로클로라이드(DAPI)는 핵을 염색하는데 사용하였다. 샘플을 공초점 현미경(Leica, Buffalo Grove, IL, USA)으로 실험하였다. 형광 신호 세기는 컴퓨터 보조 Leica application suite advanced fluorescence (LAS AF)를 사용하여 측정하였다. 현미경 사진은 x10/0.3 렌즈를 사용하여 각 슬라이드의 5개 영역에서 찍었으며, 분석을 위해 3개의 중간 값을 사용했다. 405 nm 청색 다이오드 레이저로 DAPI 신호를 설정하고 아르곤 이온 레이저로 Alexa 488을 조정했다.
실시예 8: SFTS 바이러스에 대한 scFv 항체의 생성
인간 scFv 라이브러리를 재조합 SFTS 바이러스 당단백질에 대해 바이오패닝하였다. 4 라운드의 패닝 이후, 항체 클론을 효소결합 면역흡착 분석법(ELISA)을 통해 스크리닝 하였다. 10개 클론(Gc에 대해 Ab1 내지 5 및 Gn에 대해 Ab6 내지 10)이 ELISA를 통해 SFTS 바이러스를 인식하는 것으로 나타났다. 상기 ELISA 분석 결과를 도 2에 나타내었으며, 각 항체 클론의 아미노산 서열을 도 1에 나타내었다.
실시예 9: SFTS 바이러스에 대한 항체의 중화 활성
SFTS 바이러스에 대해 정제된 scFv-hFc 항체의 중화 활성은 Vero 세포에서 실험하였다. 실험된 10개의 클론(Ab1 내지 Ab10) 가운데, Ab10은 가장 강력한 중화 활성을 보였다. Ab10 scFv-hFc 항체(100 μl/ml)를 0.01 μl/ml로 10배씩 희석하고, 100 TCID50 SFTS 바이러스(KF358691 균주)에 대해 적정하였다. SFTSV 감염의 면역형광분석 결과 및 형광강도 측정 결과를 도 3에 나타내었다.
면역형광 분석(IFA)에서, Ab10(100 μl/ml)로 처리된 세포는 가장 적은 바이러스 감염을 보였으며 중화 활성은 투여량 의존적이었다. 즉, 처리되는 MAb 10의 양이 많을수록 SFTS 바이러스에 감염된 세포의 수가 적었다. MAb 4-5(양성 대조군)에 비해, Ab10은 현저하게 높은 중화 활성을 보였다. 음성 대조군 항체는 중화 활성을 전혀 보이지 않았다.
<110> Seoul National University R&DB FOUNDATION <120> Antibodies which bind to SFTSV(Severe Fever with Thrombocytopenia Syndrome Virus) envelope glycoprotein and their use <130> SNU-2016-0371-PC / SNUE-2017-0074 /PCT17-029 <150> KR 10-2016-0034727 <151> 2016-03-23 <160> 171 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Ab1 Light chain <400> 1 Glu Leu Thr Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Thr Ala Thr Leu Ser Cys Gly Ala Ser Gln Ser Val Ser Thr Asn 20 25 30 Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Leu Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Asp Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Ala 65 70 75 80 Pro Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro 85 90 95 Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 2 <211> 110 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Ab2 Light chain <400> 2 Glu Leu Val Val Thr Gln 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tggcatccca 180 gacaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggcg 240 cctgaagatt ctgcggtgta ttactgtcag caatatggta gctcacctct cactttcggc 300 ggagggacca agctggagat caaaggtggt tcctctagat cttcctcctc tggtggcggt 360 ggctcgggcg gtggtgggca ggtgcagctg gtgcagtctg ggcctgaggt gaagaagcct 420 gggtcctcgg tgaaggtctc ctgcaaggct tctggaggca ccttcagcac ctatgctatc 480 agctgggtgc gacaggcccc tggacaaggg cttgagtgga tgggagggat catccctatc 540 tctggtacag caaactacgc acagaaattc cagggcagag tcaccattac cgcggacgaa 600 tccacgagca cagcctacat ggagctgagc agcctgagat ctgaggacac ggccgtgtat 660 tactgtgcgg taccagtagt accagctgcc agcggccctt ttgactactg gggccaggga 720 accctggtca ccgtctcctc agcc 744 <210> 162 <211> 777 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Ab2 scFv <400> 162 gagctcgtgg tgacgcagcc gccctcagtg tctggggccc cagggcagag ggtcaccatc 60 tcctgttctg gaagcagctc caacatcgga aataatactg taaactggta ccagcagctc 120 ccaggaacgg cccccaaact cctcatctat agtaataatc agcggccctc aggggtccct 180 gaccgattct ctggctccaa 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caagtctgac acctcagcct ccctggccat cagtgggctc 240 cggtccgagg atgaggctga ttattactgt gcagcatggg atgacagcct gaatggccag 300 gtggtattcg gcggaggcac caagctgacc gtcctaggcg gtggttcctc tagatcttcc 360 tcctctggtg gcggtggctc gggcggtggt gggcaggtgc agctgcagga gtcgggccca 420 ggactggtga agccttcgga gaccctgtcc ctcacctgca ctgtctctgg tgggtccttc 480 agtggttact actggagctg gatccgccag cccccaggaa aggggctgga gtggattggg 540 gaaatcattc atagtggaag caccaactac aacccgtccc tcaagagtcg agtcaccata 600 tcagtagaca cgtccaagaa ccaattctcc ctgaagctga gctctgtgac cgccgcggac 660 acggctgtgt attactgtgc gagaggtgat tattatgata gtagtggtgc ctttgactac 720 tggggccagg gaaccctggt caccgtctcc tca 753 <210> 164 <211> 774 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Ab4 scFv <400> 164 gagctcgtgc tgactcagcc accttcagcg tctgggaccc ccgggcagag ggtcaccatc 60 tcttgttctg gaagcagctc caacatcgga agtaatactg taaactggta ccagcagctc 120 cccggaacgg cccccaaact cctcatctat agtaataatc agcggccccc aggggtccct 180 gaccgattct ctggctccaa gtctggcacc tcagcctccc tggccatcag tgggctccag 240 tctgaggatg aggctgatta ttactgccag tcctatgaca gcagcctgag ttatgtcttc 300 ggaactggca ccaaggtgac cgtcctaggc ggtggttcct ctagatcttc ctcctctggt 360 ggcggtggct cgggcggtgg tggggaggtg cagctggtgg agtctggggg aggcttggta 420 cagccggggg ggtccctgag actctcctgt gcagcctctg gattcacctt cagtagctat 480 agcatgaact gggtccgcca ggctccaggg aaggggctgg agtgggtctc atccattagt 540 agtagtagtc gttacatatt ctacgcagac tcagtgaagg gccgattcac catctccaga 600 gacaacgcca agaactcact gtatctgcaa atgaacagcc tgagagccga ggacacggct 660 gtgtattact gtgcgagcct aggatattgt agtggtggta gctgctacgg gttcccggaa 720 ggtgggaatg cttttgatat ctggggccaa gggacaatgg tcaccgtctc ttca 774 <210> 165 <211> 741 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Ab5 scFv <400> 165 gagctcgtgg tgacccagga gccctcactg actgtgcccc caggagggac agtcactctc 60 acctgtggct ccagcactgg acctgtcacc actactcagt atccctactg gttccagcag 120 aagcctggcc aggcccccag gacactcatt tatgatacca acaacagaca cccctggaca 180 cctgcccgct tctcaggctc cctccttggg ggcaaggctg ccctgaccct ttcgggagcg 240 cagcctgagg atgacgctta gtattattgc ttgctcacct ctgctagcgc tccttgggtg 300 ttcggcggag gcaccaagct gaccgtccta ggcggtggtt cctctagatc ttcctcctct 360 ggtggcggtg gctcgggcgg tggtgggcag gtgcagctgg tgcagtctgg gggaggcttg 420 gtccagcctg gggggtccct gagactctcc tgttcagcct ctggattcac cttcagtagc 480 tatgctatgc actgggtccg ccaggctcca gggaagggac tggaatatgt ttcagctatt 540 agtagtgatg ggggtagcac atactacgca gactccgtga agggcagatt caccatctcc 600 agagacaatt ccaagaacac gctgtatctt caaatgagca gtctgagagc tgaggacacg 660 gctgtatatt actgtgtgaa cgatggcagc tcgaaccatt ttgactactg gggccaggga 720 accctggtca ccgtctcctc a 741 <210> 166 <211> 765 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Ab6 scFv <400> 166 gagctcgccc tgactcagcc tccctccgtg tcagtggccc caggaaagac ggccaagatt 60 acctgtgggg gtgacgacat tggaagtaaa actgtgcaat ggtaccaaca gacctcaggc 120 caggcccctg tgctggtcgt ctatgacgat agcgaccggc cctcagggat ccctgagcga 180 ttctccggcg ccaactctgg gaacacggcc accctgacca tcagcagggt cgaagccggg 240 gatgaggccg actattactg tcaggtgtgg gacggcagaa gtgatcatgt ggttttcggc 300 ggagggacca agctgaccgt cctaggcggt ggttcctcta gatcttcctc ctctggtggc 360 ggtggctcgg gcggtggtgg gcaggtgcag ctggtgcagt ctggagcaga ggtgaaaaag 420 cccggggagt ctctgaagat ctcctgtaag ggttctggat acatctttac caactactgg 480 atcggctggg tgcgccagat gcccgggaaa ggcctggagt ggatggggat catctatcct 540 ggtgactctg ataccagata cagcccgtcc ttccaaggcc aggtcaccat ctcagccgac 600 aggtccatca gcaccgccta cctgcagtgg agcagcctga aggcctcgga caccgccatg 660 tattactgtg cgagactaaa gctccggggg ttttcgggcg gctatggttc agggagacgc 720 tactttgact actggggcca gggaaccctg gtcaccgtct cctca 765 <210> 167 <211> 777 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Ab7 scFv <400> 167 gagctcgtgc tgacgcagcc gccctcagtg tctgcggccc caggactgaa ggtcaccatc 60 tcctgctctg gaagcagctc taacattggg aataatgttg tatcctggta ccagcaactc 120 ccaggaacag cccccaaact cctcatttat gacgataacc ggcgaccctc agggattcct 180 gaccgattct ctggctccaa gtctggcacg tcagccaccc tggacatcac cggactccag 240 actggggacg aggccgatta ctactgcgca acatgggatg gcagcctgac tgctggccgt 300 gtgttgttcg gcagtggcac caagctgacc gtcctaggtg gtggttcctc tagatcttcc 360 tcctctggtg gcggtggctc gggcggtggt gggcaggtgc agctggtgca gtctggagca 420 gaggtgaaaa agcccgggga gtctctgaag atctcctgta agggttctgg atacagcttt 480 accagctact ggatcggctg ggtgcgccag atgcccggga aaggcctgga gtggatgggg 540 atcatctatc ctggtgactc tgataccaga tacagcccgt ccttccaagg ccaggtcacc 600 atctcagccg acaagtccat cagcaccgcc tacctgcagt ggagcagcct gaaggcctcg 660 gacaccgcca tgtattactg tgcgagacta aagctccggg ggttttcggg cggctatggt 720 tcagggagcc gctactttga ctactggggc cagggaaccc tggtcaccgt ctcctca 777 <210> 168 <211> 765 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Ab8 scFv <400> 168 gagctcgccc tgactcagcc tccctccgtg tcagtggccc cagcaatgac ggccaagatt 60 acctgtgggg gtgacgacat tggaagtact actgtgcaat ggtaccaaca gacctcaggc 120 caggcccctg tgctggtcgt ctatgacgat agcgaccggc cctcagggat ccctgagcga 180 ttctccggcg ccaactctgg gaacacggcc accctgacca tcagcagggt cgaagccggg 240 gatgaggccg actattactg tcaggtgtgg gacggcagaa gtgatcatgt ggttttcggc 300 ggagggacca agctgaccgt cctaggcggt ggttcctcta gatcttcctc ctctggtggc 360 ggtggctcgg gcggtggtgg gcaggtgcag ctggtgcagt ctggagcaga ggtgaaaaag 420 cccggggagt ctctgaagat ctcctgtaag ggttctggat acatctttac caactactgg 480 atcggctggg tgcgccagat gcccgggaaa ggcctggagt ggatggggat catctatcct 540 ggtgactctg ataccagata cagcccgtcc ttccaaggcc aggtcaccat ctcagccgac 600 aggtccatca gcaccgccaa cctgcagtgg agcagcctga aggcctcgga caccgccctg 660 tattactgtg cgagactaaa gctccggggg ttttcgggcg gctatggttc agggagacgc 720 tactttgact actggggcca gggaaccctg gtcaccgtct cctca 765 <210> 169 <211> 765 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Ab9 scFv <400> 169 gagctcgagc tgactcagcc accctcagtg tctgggaccc ccgggaagag ggtcagtatg 60 tcttgttctg gaagtaggtc caacatcgga ggtaatgttg tgaactggta ccagcagctc 120 ccaggaaagg cccccaaact cttcatctac aataatgatc agcggccctc aggggtccct 180 gaccgagtct ctggctccaa gtcaggcacc tcagtctccg tggccatcag tgggctccag 240 cctgaagatg aggctgatta ttactgtgca gcttgggatg acatcctgaa tggtgtggtc 300 ttcggcggag ggacccagct gaccgtcctc ggcggtggtt cctctagatc ttcctcctct 360 ggtggcggtg gctcgggcgg tggtgggcag gtgcagctgg tgcagtctgg agcagaggtg 420 aaaaagcccg gggagtctct gaagatctcc tgtaagggtt ctggatacaa cttcaccaac 480 tactggatcg ggtgggtgcg ccagctgccc gggaaaggcc tggagtggat ggggatcatc 540 tatcctggtg actccgacac cagatatagc ccgtccttcc aaggccaggt caccatctca 600 gccgacaagt ccatcagcac cgcctacctg cagtggagca gcctgaaggc ctcggacacc 660 gccatgtatt actgtgcgag aattcgagtt atcggattct atgatagtag ccccccgccc 720 ttatttgact actggggcca gggaaccctg gtcaccgtct cctca 765 <210> 170 <211> 738 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Ab10 scFv <400> 170 gagctcgtga tgactcagtc tccatcttcc ctgtccgcat ctgtgggaga cacagtcacc 60 atcacttgcc gggcaagtca gagcatttac acctatttaa attggtatca ccagacacca 120 gggaaagccc ctaaactcct gatttctgct gcatctagtt tgcaaagtgg tgtcccatca 180 aggttcagtg gcagtgggtc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gaggattttg caacgtacta ctgtcaacag tatgcggatg tcccggtcac tttcggcgga 300 gggaccaagc tggagatcaa aggtggttcc tctagatctt cctcctctgg tggcggtggc 360 tcgggcggtg gtggggaggt gcagctggtg gagtctgggg gaggcgtggt ccagcctggg 420 aggtccctga gactctcctg tgcagcctct ggattcacct tcagtggcta tggcatacac 480 tgggtccgcc aggctccagg caaggggctg gagtgggtgg cacttatatc atatgatgga 540 agtaataaat actatgcaga ctccgtgaag ggccgattca ccatctccag agacaattcc 600 aagaacacgc tgtatctgca aatgaacagc ctgagagctg aggacacggc tgtgtattac 660 tgtgcgaaag atcgggatta ctttggttca gggttctttg actactgggg ccagggaacc 720 ctggtcaccg tctcctca 738 <210> 171 <211> 1073 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> membrane glycoprotein polyprotein of SFTSV <400> 171 Met Met Lys Val Ile Trp Phe Ser Ser Leu Ile Cys Phe Val Ile Gln 1 5 10 15 Cys Ser Gly Asp Ser Gly Pro Ile Ile Cys Ala Gly Pro Ile His Ser 20 25 30 Asn Lys Ser Ala Asp Ile Pro His Leu Leu Gly Tyr Ser Glu Lys Ile 35 40 45 Cys Gln Ile Asp Arg Leu Ile His Val Ser Ser Trp Leu Arg Asn His 50 55 60 Ser Gln Phe Gln Gly Tyr Val Gly Gln Arg Gly Gly Arg Ser Gln Val 65 70 75 80 Ser Tyr Tyr Pro Ala Glu Asn Ser Tyr Ser Arg Trp Ser Gly Leu Leu 85 90 95 Ser Pro Cys Asp Ala Asp Trp Leu Gly Met Leu Val Val Lys Lys Ala 100 105 110 Lys Gly Ser Asp Met Ile Val Pro Gly Pro Ser Tyr Lys Gly Lys Val 115 120 125 Phe Phe Glu Arg Pro Thr Phe Asp Gly Tyr Val Gly Trp Gly Cys Gly 130 135 140 Ser Gly Lys Ser Arg Thr Glu Ser Gly Glu Leu Cys Ser Ser Asp Ser 145 150 155 160 Gly Thr Ser Ser Gly Leu Leu Pro Ser Asp Arg Val Leu Trp Ile Gly 165 170 175 Asp Val Ala Cys Gln Pro Met Thr Pro Ile Pro Glu Glu Thr Phe Leu 180 185 190 Glu Leu Lys Ser Phe Ser Gln Ser Glu Phe Pro Asp Ile Cys Lys Ile 195 200 205 Asp Gly Ile Val Phe Asn Gln Cys Glu Gly Glu Ser Leu Pro Gln Pro 210 215 220 Phe Asp Val Ala Trp Met Asp Val Gly His Ser His Lys Ile Ile Met 225 230 235 240 Arg Glu His Lys Thr Lys Trp Val Gln Glu Ser Ser Ser Lys Asp Phe 245 250 255 Val Cys Tyr Lys Glu Gly Thr Gly Pro Cys Ser Glu Ser Glu Glu Lys 260 265 270 Thr Cys Lys Thr Ser Gly Ser Cys Arg Gly Asp Met Gln Phe Cys Lys 275 280 285 Val Ala Gly Cys Glu His Gly Glu Glu Ala Ser Glu Ala Lys Cys Arg 290 295 300 Cys Ser Leu Val His Lys Pro Gly Glu Val Val Val Ser Tyr Gly Gly 305 310 315 320 Met Arg Val Arg Pro Lys Cys Tyr Gly Phe Ser Arg Met Met Ala Thr 325 330 335 Leu Glu Val Asn Gln Pro Glu Gln Arg Ile Gly Gln Cys Thr Gly Cys 340 345 350 His Leu Glu Cys Ile Asn Gly Gly Val Arg Leu Ile Thr Leu Thr Ser 355 360 365 Glu Leu Lys Ser Ala Thr Val Cys Ala Ser His Phe Cys Ser Ser Ala 370 375 380 Thr Ser Gly Lys Lys Ser Thr Glu Ile Gln Phe His Ser Gly Ser Leu 385 390 395 400 Val Gly Lys Thr Ala Ile His Val Lys Gly Ala Leu Val Asp Gly Thr 405 410 415 Glu Phe Thr Phe Glu Gly Ser Cys Met Phe Pro Asp Gly Cys Asp Ala 420 425 430 Val Asp Cys Thr Phe Cys Arg Glu Phe Leu Lys Asn Pro Gln Cys Tyr 435 440 445 Pro Ala Lys Lys Trp Leu Phe Ile Ile Ile Val Ile Leu Leu Gly Tyr 450 455 460 Ala Gly Leu Met Leu Leu Thr Asn Val Leu Lys Ala Ile Gly Ile Trp 465 470 475 480 Gly Ser Trp Val Ile Ala Pro Val Lys Leu Ile Phe Ala Ile Ile Lys 485 490 495 Lys Leu Met Arg Ala Val Ser Cys Leu Met Gly Lys Leu Met Asp Arg 500 505 510 Gly Arg Gln Val Ile His Glu Glu Ile Gly Glu Asn Arg Glu Gly Asn 515 520 525 Gln Asp Asp Val Arg Ile Glu Met Ala Arg Pro Arg Arg Val Arg His 530 535 540 Trp Met Tyr Ser Pro Val Ile Leu Thr Ile Leu Ala Ile Gly Leu Ala 545 550 555 560 Glu Ser Cys Asp Glu Met Val His Ala Asp Ser Lys Leu Val Ser Cys 565 570 575 Arg Gln Gly Ser Gly Asn Met Lys Glu Cys Val Thr Thr Gly Arg Ala 580 585 590 Leu Leu Pro Ala Val Asn Pro Gly Gln Glu Ala Cys Leu His Phe Thr 595 600 605 Ala Pro Gly Ser Pro Asp Ser Lys Cys Leu Lys Ile Lys Val Lys Arg 610 615 620 Ile Asn Leu Lys Cys Lys Lys Ser Ser Ser Tyr Phe Val Pro Asp Ala 625 630 635 640 Arg Ser Arg Cys Thr Ser Val Arg Arg Cys Arg Trp Ala Gly Asp Cys 645 650 655 Gln Ser Gly Cys Pro Pro His Phe Thr Ser Asn Ser Phe Ser Asp Asp 660 665 670 Trp Ala Gly Lys Met Asp Arg Ala Gly Leu Gly Phe Ser Gly Cys Ser 675 680 685 Asp Gly Cys Gly Gly Ala Ala Cys Gly Cys Phe Asn Ala Ala Pro Ser 690 695 700 Cys Ile Phe Trp Arg Lys Trp Val Glu Asn Pro His Gly Ile Ile Trp 705 710 715 720 Lys Val Ser Pro Cys Ala Ala Trp Val Pro Ser Ala Val Ile Glu Leu 725 730 735 Thr Met Pro Ser Gly Glu Val Arg Thr Phe His Pro Met Ser Gly Ile 740 745 750 Pro Thr Gln Val Phe Lys Gly Val Ser Val Thr Tyr Leu Gly Ser Asp 755 760 765 Met Glu Val Ser Gly Leu Thr Asp Leu Cys Glu Ile Glu Glu Leu Lys 770 775 780 Ser Lys Lys Leu Ala Leu Ala Pro Cys Asn Gln Ala Gly Met Gly Val 785 790 795 800 Val Gly Lys Val Gly Glu Ile Gln Cys Ser Ser Glu Glu Ser Ala Arg 805 810 815 Thr Ile Lys Lys Asp Gly Cys Ile Trp Asn Ala Asp Leu Val Gly Ile 820 825 830 Glu Leu Arg Val Asp Asp Ala Val Cys Tyr Ser Lys Ile Thr Ser Val 835 840 845 Glu Ala Val Ala Asn Tyr Ser Ala Ile Pro Thr Thr Ile Gly Gly Leu 850 855 860 Arg Phe Glu Arg Ser His Asp Ser Gln Gly Lys Ile Ser Gly Ser Pro 865 870 875 880 Leu Asp Ile Thr Ala Ile Arg Gly Ser Phe Ser Val Asn Tyr Arg Gly 885 890 895 Leu Arg Leu Ser Leu Ser Glu Ile Thr Ala Thr Cys Thr Gly Glu Val 900 905 910 Thr Asn Val Ser Gly Cys Tyr Ser Cys Met Thr Gly Ala Lys Val Ser 915 920 925 Ile Lys Leu His Ser Ser Lys Asn Ser Thr Ala His Val Arg Cys Lys 930 935 940 Gly Asp Glu Thr Ala Phe Ser Val Leu Glu Gly Val His Ser Tyr Thr 945 950 955 960 Val Ser Leu Ser Phe Asp His Ala Val Val Asp Glu Gln Cys Gln Leu 965 970 975 Asn Cys Gly Gly His Glu Ser Gln Val Thr Leu Lys Gly Asn Leu Ile 980 985 990 Phe Leu Asp Val Pro Lys Phe Val Asp Gly Ser Tyr Met Gln Thr Tyr 995 1000 1005 His Ser Thr Val Pro Thr Gly Ala Asn Ile Pro Ser Pro Thr Asp Trp 1010 1015 1020 Leu Asn Ala Leu Phe Gly Asn Gly Leu Ser Arg Trp Ile Leu Gly Val 1025 1030 1035 1040 Ile Gly Val Leu Leu Gly Gly Leu Ala Leu Phe Phe Met Ile Met Ser 1045 1050 1055 Leu Phe Lys Leu Gly Thr Lys Gln Val Phe Arg Ser Arg Thr Lys Leu 1060 1065 1070 Ala

Claims (23)

  1. 서열번호 101의 경쇄 상보성 결정영역1(LCDR1), 서열번호 121의 경쇄 상보성 결정영역2(LCDR2), 서열번호 141의 경쇄 상보성 결정영역3(LCDR3), 서열번호 106의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR1), 서열번호 126의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR2), 및 서열번호 146의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR3)을 포함하며, 중증열성혈소판감소증후군 바이러스(Severe Fever with Thrombocytopenia Syndrome Virus)의 외막 당단백질 Gn에 특이적으로 결합하는 항체.
  2. 서열번호 102의 경쇄 상보성 결정영역1(LCDR1), 서열번호 122의 경쇄 상보성 결정영역2(LCDR2), 서열번호 142의 경쇄 상보성 결정영역3(LCDR3), 서열번호 107의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR1), 서열번호 127의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR2), 및 서열번호 147의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR3)을 포함하며, 중증열성혈소판감소증후군 바이러스의 외막 당단백질 Gn에 특이적으로 결합하는 항체.
  3. 서열번호 103의 경쇄 상보성 결정영역1(LCDR1), 서열번호 123의 경쇄 상보성 결정영역2(LCDR2), 서열번호 143의 경쇄 상보성 결정영역3(LCDR3), 서열번호 108의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR1), 서열번호 128의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR2), 및 서열번호 148의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR3)을 포함하며, 중증열성혈소판감소증후군 바이러스의 외막 당단백질 Gn에 특이적으로 결합하는 항체.
  4. 서열번호 104의 경쇄 상보성 결정영역1(LCDR1), 서열번호 124의 경쇄 상보성 결정영역2(LCDR2), 서열번호 144의 경쇄 상보성 결정영역3(LCDR3), 서열번호 109의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR1), 서열번호 129의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR2), 및 서열번호 149의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR3)을 포함하며, 중증열성혈소판감소증후군 바이러스의 외막 당단백질 Gn에 특이적으로 결합하는 항체.
  5. 서열번호 105의 경쇄 상보성 결정영역1(LCDR1), 서열번호 125의 경쇄 상보성 결정영역2(LCDR2), 서열번호 145의 경쇄 상보성 결정영역3(LCDR3), 서열번호 110의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR1), 서열번호 130의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR2), 및 서열번호 150의 중쇄 상보성 결정영역1(HCDR3)을 포함하며, 중증열성혈소판감소증후군 바이러스의 외막 당단백질 Gn에 특이적으로 결합하는 항체.
  6. 제1항에 있어서, 상기 항체는 서열번호 81의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄, 및
    서열번호 86의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하며,
    SFTSV의 외막 당단백질 Gn에 특이적으로 결합하는 항체.
  7. 제2항에 있어서, 상기 항체는 서열번호 82의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄, 및
    서열번호 87의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하며,
    SFTSV의 외막 당단백질 Gn에 특이적으로 결합하는 항체.
  8. 제3항에 있어서, 상기 항체는 서열번호 83의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄, 및
    서열번호 88의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하며,
    SFTSV의 외막 당단백질 Gn에 특이적으로 결합하는 항체.
  9. 제4항에 있어서, 상기 항체는 서열번호 84의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄, 및
    서열번호 89의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하며,
    SFTSV의 외막 당단백질 Gn에 특이적으로 결합하는 항체.
  10. 제5항에 있어서, 상기 항체는 서열번호 85의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄, 및
    서열번호 90의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하며,
    SFTSV의 외막 당단백질 Gn에 특이적으로 결합하는 항체.
  11. 서열번호 81의 아미노산 서열 및 서열번호 86의 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩티드를 코딩하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 핵산.
  12. 서열번호 82의 아미노산 서열 및 서열번호 87의 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩티드를 코딩하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 핵산.
  13. 서열번호 83의 아미노산 서열 및 서열번호 88의 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩티드를 코딩하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 핵산.
  14. 서열번호 84의 아미노산 서열 및 서열번호 89의 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩티드를 코딩하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 핵산.
  15. 서열번호 85의 아미노산 서열 및 서열번호 90의 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩티드를 코딩하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 핵산.
  16. 제11항 내지 제15항 중 어느 한 항의 핵산을 포함하는 벡터.
  17. 제16항의 벡터를 포함하는 숙주 세포.
  18. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항의 항체를 포함하는 SFTSV 감염 여부 진단 또는 검출용 조성물.
  19. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항의 항체를 포함하는 SFTSV 감염 여부 진단 또는 검출용 키트.
  20. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항의 항체를 이용하여 생물학적 샘플로부터 SFTSV를 검출하는 방법.
  21. 제20항에 있어서, 상기 방법은 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항의 항체 및 자석 비드가 결합된 복합체를 이용하는 것을 특징으로 하는 방법.
  22. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항의 항체를 포함하는 중증열성혈소판감소증후군(SFTS)의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  23. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항의 항체를 포함하는 SFTSV 감염 여부 진단용 조성물의 제조 방법.
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20230076376A (ko) 2021-11-24 2023-05-31 대한민국(질병관리청 국립보건연구원장) 중증열성혈소판감소증후군 바이러스 Gc 항원에 특이적으로 결합하는 항체 및 이의 용도

Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102039189B1 (ko) * 2016-03-23 2019-11-01 서울대학교산학협력단 중증열성혈소판감소증후군 바이러스의 외막 당단백질에 결합하는 항체 및 이의 용도
KR102097994B1 (ko) * 2018-04-25 2020-04-07 아이디바이오 주식회사 신규한 중증열성혈소판감소증후군 바이러스
KR102504884B1 (ko) * 2019-07-23 2023-02-28 와이-클론 메디컬 사이언시스 컴퍼니 리미티드 Sftsv에 결합 가능한 나노 항체 및 이의 응용
CN110437333B (zh) * 2019-08-20 2020-04-28 江苏省疾病预防控制中心(江苏省公共卫生研究院) Sftsv抑制剂及其应用
CN110437332B (zh) * 2019-08-20 2020-03-06 江苏省疾病预防控制中心(江苏省公共卫生研究院) 一种抗病毒感染的sftsv蛋白结合分子
KR102545412B1 (ko) * 2019-09-24 2023-06-21 서울대학교산학협력단 중증열성혈소판감소증후증 바이러스에 대한 백신 조성물
BR112022013445A2 (pt) * 2020-01-08 2022-09-13 Univ Texas Método de modificação de células exterminadoras naturais para direcionar tumores cd70-positivos
CN113249334B (zh) * 2021-03-16 2023-12-08 贵州省人民医院 一种分泌抗发热伴血小板减少综合征病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株sftsn5g12
AU2022246607A1 (en) * 2021-03-31 2023-11-16 Janssen Biotech, Inc. Materials and methods for immune effector cells redirection
CN113980125B (zh) * 2021-10-15 2024-03-26 中国科学院武汉病毒研究所 一种抗sftsv的中和性单克隆抗体及其应用
CN117229413A (zh) * 2023-09-04 2023-12-15 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 一种针对SFTSV-Gn和CD3的双特异性抗体及其制备方法

Family Cites Families (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6255455B1 (en) * 1996-10-11 2001-07-03 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Rh(D)-binding proteins and magnetically activated cell sorting method for production thereof
ATE519783T1 (de) 2000-12-22 2011-08-15 Grad Carole Legal Representative Of Kaplan Howard ßPHAGE DISPLAYß BIBLIOTHEKE VON MENSCHLICHEN VH FRAGMENTEN
AU2002368077B2 (en) * 2001-07-12 2010-03-04 Jefferson Foote Super humanized antibodies
KR20040077889A (ko) * 2002-01-28 2004-09-07 메다렉스, 인코포레이티드 전립선 특이적 막 항원 (ｐｓｍａ)에 대한 인간모노클로날 항체
EP1851251A2 (en) 2005-02-18 2007-11-07 Medarex, Inc. Monoclonal antibodies against prostate specific membrane antigen (psma) lacking in fucosyl residues
WO2010045388A2 (en) * 2008-10-14 2010-04-22 Dyax Corp. Use of mmp-9 and mmp-12 binding proteins for the treatment and prevention of systemic sclerosis
US20110286916A1 (en) 2008-11-20 2011-11-24 Jose Miguel Aste-Amezaga Generation and characterization of anti-notch antibodies for therapeutic and diagnostic use
KR101093717B1 (ko) * 2008-11-26 2011-12-19 한국생명공학연구원 Ｖｅｇｆ―특이적인 인간항체
CN102388068B (zh) 2009-03-20 2015-05-20 安姆根有限公司 α-4-β-7异二聚体特异性拮抗剂抗体
WO2010141249A2 (en) 2009-06-02 2010-12-09 Merck Sharp & Dohme Corp. Generation, characterization and uses thereof of anti-notch3 antibodies
UA109888C2 (uk) * 2009-12-07 2015-10-26 ІЗОЛЬОВАНЕ АНТИТІЛО АБО ЙОГО ФРАГМЕНТ, ЩО ЗВ'ЯЗУЄТЬСЯ З β-КЛОТО, РЕЦЕПТОРАМИ FGF І ЇХНІМИ КОМПЛЕКСАМИ
WO2012048340A2 (en) * 2010-10-08 2012-04-12 President And Fellows Of Harvard College High-throughput immune sequencing
GB201020995D0 (en) * 2010-12-10 2011-01-26 Bioinvent Int Ab Biological materials and uses thereof
WO2012098089A1 (en) * 2011-01-19 2012-07-26 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Binding proteins to inhibitors of coagulation factors
US9574002B2 (en) 2011-06-06 2017-02-21 Amgen Inc. Human antigen binding proteins that bind to a complex comprising β-Klotho and an FGF receptor
WO2013063095A1 (en) * 2011-10-24 2013-05-02 Abbvie Inc. Immunobinders directed against sclerostin
EP2793947B1 (en) 2011-12-23 2021-02-03 Innate Pharma Enzymatic conjugation of polypeptides
CN102942629B (zh) * 2012-11-21 2014-03-19 江苏省疾病预防控制中心 一种抗sftsv的人源抗体
CN105143261B (zh) * 2013-01-31 2021-04-09 首尔大学校产学协力团 C5抗体以及用于预防和治疗补体-相关的疾病的方法
KR101630499B1 (ko) * 2013-10-11 2016-06-15 서울대학교산학협력단 중증열성혈소판감소증후군 바이러스 및 이를 이용한 sfts 진단 방법 및 키트
KR102039189B1 (ko) * 2016-03-23 2019-11-01 서울대학교산학협력단 중증열성혈소판감소증후군 바이러스의 외막 당단백질에 결합하는 항체 및 이의 용도

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Clinical & Vaccine Immunology. 2013, 20(9):1426-1432.*

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20230076376A (ko) 2021-11-24 2023-05-31 대한민국(질병관리청 국립보건연구원장) 중증열성혈소판감소증후군 바이러스 Gc 항원에 특이적으로 결합하는 항체 및 이의 용도

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