KR101826531B1 - 약물 저항성 미생물 치료를 위한 메틸설포닐메탄 - Google Patents

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Abstract

ABSTRACT
본 발명의 실시태양은 일반적으로 약물-감수성 및 약물-저항성 미생물을 치료하기 위한 메틸설포닐메탄(MSM),및 하나 또는 그 이상의 치료제를 포함하는 조성물의 이용에 관한 것이다. 여러 실시태양에서, 상기 조성물은 약물 저항성 감염 질병, 예를 들어, MRSA의 치료에 효과적이다.

Description

약물 저항성 미생물 치료를 위한 메틸설포닐메탄{METHYLSULFONYLMETHANE (MSM) FOR TREATMENT OF DRUG RESISTANT MICROORGANISMS}
관련된 출원에 대한 교차-참조
본 출원은 전체가 각각 여기에 참조로서 삽입되는 2009년 10월 30일 가출원된 No. 61/256,935, 2009년 11월 3일 출원된 No. 61/257,751, 2009년 11월 6일에 출원된 No. 61/259,098, 및 2010년 1월 12일 출원된 No. 61/294,437에 기반하여 우선권을 주장한다.
분야
본 발명은 주로 약물 저항성 감염 질병을 치료하기 위한 메틸설포닐메탄(methylsulfonylmethane, MSM)을 포함하는 조성물에 관한 것이다. 일부 실시태양은 약물 저항성 미생물(microbes)을 약물에 대해 민감하게 만드는 것에 관한 것이다. 본 발명에서 밝혀진 몇몇 조성물은 예를 들어, MRSA의 치료에 유용하다.
배경기술
디메틸 설폰(dimethyl sulfone)으로도 또한 알려져 있는 메틸설포닐메탄(MSM; (CH3)2SO2)은 DMSA 및 일부 황-함유 아미노산(sulfur-containing amino acids)의 대사산물(metabolite)인 유기 황화합물(organosulfur compound)이다. MSM는 주로 식이보조제(dietary supplement)로서 내놓아졌다.
감염성 질병은 특히, 바이러스(viruses), 박테리아(bacteria), 곰팡이(fungi), 기생충(parasites), 및 프리온(prions)을 포함한 병원성 미생물 제제(microbial agent)에 의해 초래되는 질병이다. 감염성 질병의 의학적 치료에서의 일부 향상에도 불구하고(항생제 및 백신), 감염성 질병에 의해 초래되는 사망률을 감소시키기 위한 많은 장애물이 남아있다. 중요한 문제는 약물 저항성 병원균의 발생(emergence) 및 확산(spread)이다.
메티실린 저항성 황색포도상 구균((Staphylococcus aureus) (MRSA)은 개방성 상처(open wounds), 침습적 장치(invasive devices) 및 감염의 위험이 일반 대중보다 더 큰 약해진 면역 시스템(immune systems)이 있는 환자들이 있는 병원에서 특별하게 골치거리인 약물 저항성 박테리아성 병원체다. 따라서, 약물 저항성 감염성 질병에 대해 효과적이고 쉽게 투여되는 치료법(therapy)이 필요하다.
개요
본 발명에 기재된 것은 MSM가 MRSA를 포함한 약물 저항성 박테리아성 병원체를 상기 균이 저항성을 갖는 약물에 민감하게하는 예상치 못한 발견이다. 따라서, 놀랍게도, 약물 저항성 박테리아성 병원체는 MSM과의 접촉에 의해 상기 병원균이 저항성을 갖는 약물에 민감해질 수 있으며, 상기 병원균을 MSM 및 약물 모두와 저항성이 있는 병원균과의 접촉에 의해 억제될 수 있다.
따라서, 본 발명은 약물 저항성 박테리아성 병원체를 억제하는, 약물 저항성(drug resistant) 박테리아성 병원체(bacterial pathogen)을 선별하고; 상기 박테리아성 병원체를 약학적으로 유효한 양의 MSM 및 약학적으로 유효한 양의 약물 저항성 박테리아성 병원체의 약물-감수성(drug-sensitive) 형태(form)를 억제함으로써 약물 저항성 병원체를 억제하는 약제(agent)를 포함하는 조성물과 접촉시키는 것을 수반한 방법을 제공한다. 몇몇 실시태양에서, 상기 약물 저항성 박테리아성 병원체는 MRSA이다.
또한, 본 발명은 약물 저항성(drug resistant) 박테리아성 병원체(bacterial pathogen)을 선별하고; 상기 박테리아성 병원체를 약학적으로 유효한 양의 MSM을 포함하는 조성물과 접촉시킴으로써 약물 저항성 박테리아성 병원체를 상기 박테리아성 병원체가 저항성을 가지는 약물에 대해 민감하게 하는 것을 포함하는, 약물 저항성 박테리아성 병원체를 박테리아성 병원체가 저항성을 가지는 약물에 대해 민감하게 만드는 방법을 제공한다,
또한, 본 발명은 방법을 약물 저항성(drug resistant) 박테리아성 병원체(bacterial pathogen)을 선별하고; 상기 박테리아성 병원체를 약학적으로 유효한 양의 MSM을 포함하는 조성물과 접촉시킴으로써 약물 저항성 박테리아성 병원체를 상기 박테리아성 병원체가 저항성을 가지는 약물에 대해 민감하게 하는 방법을 제공한다. 몇몇 실시태양에서, 상기 약물 저항성 박테리아성 병원체는 MRSA이다.
또한, 본 발명은 약물 저항성(drug resistant) 박테리아성 병원체(bacterial pathogen)을 선별하고; 약물-감수성 박테리아성 병원체를 약학적으로 유효한 양의 MSM 및 약학적으로 유효한 양의 약물-감수성 박테리아성 병원체를 억제하함으로써 약물 저항성의 발달로부터 약물-감수성 박테리아성 병원체를 억제하는 약제를 포함하는 조성물에 접촉하는 것을 포함하는 약물-감수성 박테리아성 병원체를 약물 저항성 발달로부터 억제하는 방법을 제공한다. 몇몇 실시태양에서, 상기 약물 감수성 박테리아성 병원체는 황색포도상 구균(Staphylococcus aureus)이다. 본 발명에서 기재된 방법의 여러 실시태양에서, 상기 박테리아성 병원체는 개체안(또는 위)에 있다. 몇몇 실시태양에서, 상기 조성물은 국소적으로 또는 흡입 장치로 개체에 투여된다.
몇몇 실시태양에서, 상기 약제는 베타-탁탐(Beta-lactam)(β-lactam) 항생제(antibiotic)이다.
여러 실시태양에서, 상기 MSM의 유효한 양은 약 5-20% MSM, 약 5-16% MSM, 약 5-10% MSM, 약 5-8% MSM, 약 9-16% MSM 또는 약 10-15% MSM이다. MSM(MSM을 포함하는 조성물의 중량 퍼센트).
약물 저항성 박테리아성 병원체를 억제하는 방법의 한 특정 실시태양에서, 상기 박테리아성 병원체는 MRSA이며, 상기 약제는 베타-락탐 항생제이고, 상기 MSM의 유효한 양은 약 10% MSM 중량 퍼센트이며, 상기 조성물은 국소적으로 투여된다.
약물 저항성 박테리아성 병원체가 저항성을 갖는 약물에 약물 저항성 박테리아성 병원체를 민감하게 하는 방법의 한 특정 실시태양에서, 상기 박테리아성 병원체는 MRSA이고, 상기 MSM의 유효한 양은 약 5-10% MSM 중량 퍼센트이며, 상기 조성물은 국소적으로 투여된다.
약물 저항성 발달로부터 약물-감수성 박테리아성 병원체를 억제하는 방법의 특정 실시태양에서, 상기 박테리아성 병원체는 황색포도상 구균(Staphylococcus aureus)이며, 상기 약제는 베타-락탐 항생제이고, 상기 MSM의 유효한 양은 약 5-10% MSM이며, 상기 조성물은 국소적으로 투여된다.
본 발명에서 발혀진 박테리아성 병원체를 민감하게하는 또는 억제하는 방법은 본 발명에서 자세하게 기재된 특정 상황에서 유용한 것이 추가로 이해될 것이며, 예시는 박테리아성 병원체가 약물 저항성을 가지게되는 여러 조건의 경우에 유용할 것으로 또는 약물 감수성 박테리아성 병원체가 약물 저항성이되는 것을 억제하는 것에 바람직할 것으로 기대된다.
도면의 간단한 설명
도 1은 MSM이 MRSA를 옥사실린에 민감하게 만드는 것을 나타낸 것이다. 황색포도상 구균(Staphylococcus aureus) ATCC 43300 균주(옥사실린 및 메티실린에 대해 저항성이 있는 MRSA 균주)의 실험관내 생존이 MSM, DMSO 및 옥사실린(oxacillin)의 존재하에 시험되었다. 황색포도상 구균(Staphylococcus aureus) ATCC 43300 균주는 5-16% MSM 및 6 μg/㎖ 옥사실린(“MA”), 5-16% MSM, 6 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) 및 1 % DMSO (“MDA”), 또는 1% DMSO 및 6 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) (“DA”)과 함께 48시간 동안 25 ℃에서 배양되었다. 6?μg/㎖ 옥사실린이 상기 MRSA(ATCC) 균주에 대한 MIC이다. 박테리아의 초기 접종은 3.15 x 107 cfu/㎖ (Log = 7.49)이다. 시험된 모든 조건은 시험된 24시간에 걸쳐 cfu/㎖에서의 감소를 보여줬다. 양성 대조군은 107 희석 플레이트에서 TNTC(too numerous to count)를 보여줬다. 1% DMSO 및 6 μg/㎖ 옥사실린의 존재시 또는 1% DMSO, 9-16% MSM 및 6 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) 존재시 보다 낮은 생존율이 9-16% MSM과 6 μg/㎖ 옥사실린의 존재하에 관찰되었다. 가장 낮은 생존율이 12 및 13% MSM과 6 μg/㎖ 항생제 조건에서 관찰되었다. 상기 결과는 MSM의 특정 농도에서만 MRSA 균주의 항생제에 대한 민감도가 DMSO 또는 MSM 및 DMSO의 조합보다 더욱 효과적으로 증가될 수 있음을 보여준다.
도. 2는 MSM이 자극된 처리 코스에서 MRSA를 옥사실린에 대해 민감하게 하는 것을 나타낸다. 실험실내에서 황색포도상 구균(Staphylococcus aureus)(옥사실린 및 메티실린에 저항성이 있는 MRSA 균주)이 MSM 및 옥사실린의 존재하에 시험되었다. 황색포도상 구균(Staphylococcus aureus) ATCC 43300 균주는 5-16% MSM 및 6 μg/㎖ 옥사실린과 함께 24시간 동안 25 ℃에서 배양되었다. 24시간 후, 또 다른 6 μg/㎖ 옥사실린이 12 μg/㎖의 옥사실린 총량을 가지고 있는 배양액에 첨가되었다. 6?μg/㎖ 옥사실린이 상기 MRSA 균주에 대한 MIC이다. 따라서, 상기 박테리아는 옥사실린의 MIC 하에 24시간 동안 있었으며 그 뒤에 2x MIC에서 24시간 동안 있었다. 상기 실험 패러다임은 개체가 과잉 치료 코스를 받게되는 항생제의 반복된 적용을 시뮬레이션하였다. 박테리아의 초기 접종은 9.14 x 105 cfu/㎖ (Log = 5.96)이다. 양성 대조군은 105 희석 플레이트에서 TNTC를 보여줬다. 도 1에서 보여진 결과와 유사하게, 가장 낮은 생존율은 12 및 13% MSM의 존재하에 관찰되었다. 상기 결과들은 MSM이 MRSA를 항생제 처리에 민감하게 만드는 것을 확인하며 특정 농도의 MSM만이 시뮬레이션된 치료 코스에서 MRSA 균주의 항생제에 대한 민감도를 증가시킬 수 있음을 보여준다.
도. 3A-C는 MSM이 MRSA를 다수의 항생제에 대해 민감하게 만드는 것을 나타낸다. 실험실내에서 황색포도상 구균(Staphylococcus aureus) ATCC 43300 균주(옥사실린 및 메티실린 저항성 MRSA 균주)의 생존이 MSM 및 옥사실린 또는 MSM 및 메티실린의 존재하에 시험되었다. 황색포도상 구균(Staphylococcus aureus) ATCC 43300 균주는 6 μg/㎖의 옥사실린 또는 6 μg/㎖의 메티실린과 조합된 5-16% MSM에서 배양되었다. 박테리아의 초기 접종은 2.13 x106 /㎖ (Log = 6.3)였다. 시험된 생장기간(growth periods)은 24시간(도 3A), 48시간(도 3B) 및 5일(도 3C)이다. 상기 박테리아 균주의 옥사실린 및 메티실린에 대한 MIC이다. 추가적인 3.5% MSM 및 6 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) 또는 6 μg/㎖ 메티실린은 매일 첨가되었다. 24시간에, 5% MSM 및 항생제가 가장 낮은 정도의 박테리아 생존을 보였다. 48시간에, 5% MSM 및 메티실린 또는 8% MSM 및 옥사실린은 가장 낮은 정도의 박테리아 생존을 보였다. 5일째에, 13-16% MSM 및 항생제는 가장 낮은 정도의 박테리아 생존을 보였다. 전체적으로, 상기 결과는 MSM이 상기 MRSA 균주의 옥사실린 및 메티실린 모두에 대한 민감도를 증가시키는 것을 나타낸다.
도. 4 는 MSM이 MRSA를 옥사실린의 다수의 농도에 민감하게 만드는 것을 나타낸다. 실험실내에서 황색포도상 구균(Staphylococcus aureus) ATCC 43300 균주(옥사실린 및 메티실린 저항성 MRSA 균주)의 생존이 MSM 및 옥사실린의 존재하에 시험되었다. 각각의 항생제에 대한 상기 MRSA 균주의 2x, 5x 및 10x MIC에 상응하는 옥사실린의 세 다른 농도가 시험되었다. 황색포도상 구균(Staphylococcus aureus) ATCC 43300 균주는 5-16% MSM 및 기재된 항생제의 양과 함께 24시간 동안 25 ℃에서 배양되었다. 따라서, 상기 박테리아는 옥사실린의 2x, 5x, 또는 10x MIC 농도하에 24시간 동안 배양되었다. MSM의 초기 접종은 3.3x105/㎖ (log = 5.52)였다. 상기 시점에, 항생제와 함께 더 낮은 농도의 MSM이 박테리아 생존에서 더 높은 농도의 MSM보다 더 큰 효과를 가졌다. 그러나, 전체적으로, 상기 결과들은 MSM이 MRSA를 옥사실린에 민감해지도록 하는 것을 확인하였다.
도. 5는 MSM이 MRSA를 메티실린의 다수의 농도에 민감하게 만드는 것을 나타낸다. 실험실내에서 황색포도상 구균(Staphylococcus aureus) ATCC 43300 균주(옥사실린 및 메티실린 저항성 MRSA 균주)의 생존이 MSM 및 메티실린의 존재하에 시험되었다. 각각의 항생제에 대한 상기 MRSA 균주의 2x, 5x 및 10x MIC에 상응하는 메티실린의 세 다른 농도가 시험되었다. 황색포도상 구균(Staphylococcus aureus) ATCC 43300 균주는 5-16% MSM 및 기재된 항생제의 양과 함께 24시간 동안 25 ℃에서 배양되었다. 따라서, 상기 박테리아는 메티실린의 2x, 5x, 또는 10x MIC 농도하에 24시간 동안 배양되었다. MSM의 초기 접종은 1.49x105/㎖ (log=5.17)였다. 상기 시점에, 항생제와 함께 더 낮은 농도의 MSM이 박테리아 생존에서 더 높은 농도의 MSM보다 더 큰 효과를 가졌다. 전체적으로, 상기 결과들은 MSM이 MRSA를 메티실린에 민감해지도록 하는 것을 확인하였다.
상세한 설명
I.용어 및 약어
CFU 콜로니 형성 단위(colony forming units)
DMEM: Dulbecco’s modified eagle 배지(medium)
DMSO: 디메틸설폭사이드(dimethyl sulfoxide)
DNA: 디옥시핵산(deoxyribonucleic acid)
ELISA: 효소면역측정법(enzyme-linked immunosorbent assay)
IC 50 : 억제 농도(inhibitory concentration) 50
LAB: 젖산균(lactic acid bacteria)
MDSA: 다중 약물 저항성 황색포도상 구균(multi drug resistant Staphylococcus aureus)
MDR: 다약물 저항성(multidrug resistant)
MIC: 최소 억제 농도(minimum inhibitory concentration)
MRSA: 메티실린 저항성 황색포도상 구균(methicillin resistant Staphylococcus aureus)
MSM: 메틸설포닐메탄(methylsulfonylmethane)
OSRA: 옥사실린(oxacillin)-저항성 황색포도상 구균(resistant Staphylococcus aureus)
PAGE: 폴리아크릴아마이드-젤 전기영동(polyacrylamide-gel electrophoresis)
PBP 페니실린 결합 단백질(penicillin binding protein)
PBS: 인산완충용액(phosphate buffered saline)
PDA: 감자 덱스트로스 아가(potato dextrose agar)
SDS: 황산 도데실 나트륨(sodium dodecyl sulfate)
TNTC: 너무 많아 헤아릴 수 없음(too numerous to count)
TSB: 트립틱 소이 배지(tryptic soy broth)
용어 및 방법의 하기의 표현들은 본 발명의 더 나은 설명 및 본 발명에서 사용된 당업계의 일반적인 기술의 안내를 위해 제공되었다. 문맥이 명확히 구술하지 않는 경우, 단수형 “a,” “an,” 및 “the”는 하나 또는 하나 이상을 말한다. 예를 들어, 용어 “박테리아 세포를 포함하는”은 단일 또는 복수의 박테리아 세포를 포함하고 “적어도 하나의 박테리아 세포를 포함하는” 문장과 같은 것으로 여겨진다. 문맥이 명확히 구술하지 않는 경우, 용어 “또는”은 정해진 양자택일의 요소 또는 둘 또는 그 이상의 요소의 조합의 단일 요소(element)를 말한다. 본 발명에서 사용된 바와 같이, “포함(comprises)”은 “포함(includes)”을 의미한다. 따라서, “A 또는 B를 포함하는,”은 추가적인 요소를 제외하는 것 없이 “A, B, 또는 A 및 B를 포함하는,”을 의미한다.
설명되지 않은 경우, 본 발명에서 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어는 본 발명이속하는 당업자에게 일반적으로 이해되는 같은 의미를 갖는다. 본 발명에 기재된 것과 유사 또는 동일한 방법 및 재료가 본 발명의 관례 또는 시험에서 사용될 수 있을 지라도, 적절한 방법 및 재료가 하기에 기재되었다. 재료, 방법, 및 실시예들은 오직 보여주기 위한 것일 뿐 제한되기 위한 목적이 아니다. 예를 들어, 본 발명에 존재하는 당업계에 잘 알려진 관습적인 방법은 다양한 일반적인 및 더욱 특정한, 예를 들어, Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2d ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989; Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3d ed., Cold Spring Harbor Press, 2001; Ausubel et al., Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing Associates, 1992 (and Supplements to 2000); Ausubel et al., Short Protocols in Molecular Biology: A Compendium of Methods from Current Protocols in Molecular Biology, 4th ed., Wiley ＆ Sons, 1999; Harlow and Lane, Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1990; 및 Harlow and Lane, Using Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1999; Loudon, Organic Chemistry, Fourth Edition, New York: Oxford University Press, 2002, pp. 360361, 10841085; Smith and March, March’s Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, Fifth Edition, Wiley-Interscience, 2001; 또는 Vogel, A Textbook of Practical Organic Chemistry, Including Qualitative Organic Analysis, Fourth Edition, New York: Longman, 1978를 포함한 참고문헌에 기재되어 있다.
분자 유전학에서 일반적으로 사용되는 추가적인 용어가 Benjamin Lewin, Genes V published by Oxford University Press, 1994 (ISBN 0-19-854287-9); Kendrew et al. (eds.), The Encyclopedia of Molecular Biology, published by Blackwell Science Ltd., 1994 (ISBN 0-632-02182-9); 및 Robert A. Meyers (ed.), Molecular Biology and Biotechnology: a Comprehensive Desk Reference, published by VCH Publishers, Inc., 1995 (ISBN 1-56081-569-8)에서 찾을 수 있다.
화학에서 일반적으로 사용되는 추가적인 용어는 Loudon, Organic Chemistry, Fourth Edition, New York: Oxford University Press, 2002, pp. 360361, 10841085; Smith and March, March’s Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, Fifth Edition, Wiley-Interscience, 2001; or Vogel, A Textbook of Practical Organic Chemistry, Including Qualitative Organic Analysis, Fourth Edition, New York: Longman, 1978에서 찾을 수 있다.
투여: 개체, 세포, 또는 표면에 MSM과 같은 화합물(compound) 또는 약제(agent), 또는 MSM과 같은 화합물 또는 약제를 포함하는 조성물(composition)을 어떤 효과적인 경로(routes)로 제공 또는 주기 위함. 표면에 투여하는 경로의 예는, 약제를 포함하는 약제 또는 조성물을 표면에 분무(spraying) 또는 도포(wiping)하는 것을 포함한다. 개체에 투여하는 경로의 예는, 주사(injection)(피하(subcutaneous), 근육내(intramuscular), 피내(intradermal), 복강내(intraperitoneal), 및 정맥(intravenous)과 같은), 경구(oral), 설하(sublingual), 직장(rectal), 경피(transdermal)(국소와 같은), 비강내(intranasal), 질관(vaginal) 및 흡입(inhalation) 경로를 포함하나, 이에 한정하지 않는다. 개체 투여의 특정 타입은 국소 투여 또는 코 점막(nasal mucosa) 또는 흡입에 의한 폐 투여를 포함한다.
약제: 종료 또는 결과를 얻기 위해 유용한 어떤 물질 또는 어떤 물질의 조합; 예를 들어, 박테리아 생장 또는 생존 억제를 위해 유용한 물질 또는 물질의 조합. 약제의 예는, 그 중에서도 MSM, DMSO 및 베타-락탐 항생제(Beta-lactam antibiotics)를 포함한다. 약제는 미생물(microbe) 억제를 위해 유용한 항-미생물(anti-microbial) 약제를 포함한다.
박테리아성 병원체: 질병을 야기하는 박테리아(병원성 박테리아). MSM이 변형을 위해 사용될 수 있는 병원성 박테리아의 예는, 아시네토박터 바우마나이(Acinetobacter baumanii, Actinobacillus sp.)., 방사 선균류 속(Actinomyces sp.)(예를 들어 악티노미세스 이스라에라이(Actinomyces israelii) 및 악티노미세스 네스런다이(Actinomyces naeslundii)), 에로모나스 속(Aeromonas sp.)(예를 들어, 에로모난스 하이드로필라(Aeromonas hydrophila), 에로모나스 베로나이 비오바 소브리아(에로모나스 소프리아)(Aeromonas veronii biovar sobria (Aeromonas sobria)) 및 에로모나스 카비에(Aeromonas caviae)), 아나플라스마 페토사이도필럼(Anaplasma phagocytophilum), 알칼리제니스 자일로스옥시단(Alcaligenes xylosoxidans), 아시네토박터바우마나이(Acinetobacter baumanii), 악티노바실러스 악티노미세템코미탄(Actinobacillus actinomycetemcomitans), 바실루스 속(Bacillus sp.)(예를 들어 탄저균(Bacillus anthracis), 세레우스균(Bacillus cereus), 고초균(Bacillus subtilis), 투린지엔시스균(Bacillus thuringiensis), 및 바실루스 스티로서머필러스(Bacillus stearothermophilus), 가세균 속(Bacteroides sp.)(예를 들어, 박테로이드 프레질리스(Bacteroides fragilis)), 바르토넬라 속(Bartonella sp(예를 들어, 바르토넬라 바실리포르미스(Bartonella bacilliformis) 및 바르토넬라 핸셀레(Bartonella henselae)), 비피더스균 속(Bifidobacterium sp.), 보데텔라 속(Bordetella sp.)(예를 들어 백일해균(Bordetella pertussis), 파라백일해균(Bordetella parapertussis) 및 보데텔라 브론카이셉티카(Bordetella bronchiseptica)), 보렐리아 속(Borrelia sp.)(예를 들어, 회귀열보렐리아(Borrelia recurrentis) 및 보렐리아 버그도르페리(Borrelia burgdorferi)), 브루셀라균 속(Brucella sp.)(예를 들어, 소유산균(Brucella abortus), 개유산균(Brucella canis), 말타열균(Brucella melintensis) 및 돼지유산균(Brucella suis)), 버르크홀데리아 속(Burkholderia sp.)(예를 들어, 버르크홀데리아 수도말레이(Burkholderia pseudomallei) 및 버르크홀데이라 세파시아(Burkholderia cepacia)), 캄필로박터 속(Campylobacter sp.)(예를 들어, 공장캄필로박터(Campylobacter jejuni), 캄필로박터 콜리(Campylobacter coli), 캄필로박터 라리(Campylobacter lari) 및 캄필로박터 태아고균(Campylobacter fetus)), 캅노사이토파가 속(Capnocytophaga sp.), 카르디오박테리움 호미니스(Cardiobacterium hominis), 클라미디아 트라코마티스(Chlamydia trachomatis), 클라미도필라 수모니에(Chlamydophila pneumonia), 앵무병 클라미도필라 (Chlamydophila psittaci), 시트로박터속 콕시엘라 부르네티(Citrobacter sp. Coxiella burnetii), 코리네박테리아 속(Corynebacterium sp.)(예를 들어, 디프테리아균(Corynebacterium diphtheria), 코리네박테리움 제이키움(Corynebacterium jeikeum) 및 코리네박테리움(Corynebacterium)), 클로스트리듐 속(Clostridium sp.)(예를 들어, 웰치균(Clostridium perfringens), 클로스트리듐 디피실리균(Clostridium difficile), 클로스트리듐 보툴리늄(Clostridium botulinum) 및 파상풍균(Clostridium tetani)), 에이케넬라 코로덴스(Eikenella corrodens), 엔테로박터 속(Enterobacter sp.)(예를 들어, 엔테로박터 에어로게네스균(Enterobacter aerogenes), 엔테로박터 아글로메란스(Enterobacter agglomerans), 엔테로박터 클로아케(Enterobacter cloacae) 및 장독성원소 대장균(enterotoxigenic E. Coli), 장침입성 대장균(enteroinvasive E. Coli), 장병원성 대장균(enteropathogenic E. Coli), 장출혈성 대장균(enterohemorrhagic E. Coli), 장관집합성 대장균(enteroaggregative E. Coli) 및 요로질환유발성 대장균(uropathogenic E. coli)과 같은 기회 감염성 대장균을 포함하는 대장균(Escherichia coli)), 장구균 속(Enterococcus sp.)(예를 들어 엔데로코쿠스 페칼리스(Enterococcus faecalis) 및 엔테로코쿠스 페슘(Enterococcus faecium)), 에르리치아 속(Ehrlichia sp.)(예를 들어, 에르리치아 카핀시아(Ehrlichia chafeensia) 및 에프리치아 카니스(Ehrlichia canis)), 돼지단독균(Erysipelothrix rhusiopathiae), 유박테리움 속(Eubacterium sp.), 야토병균(Francisella tularensis), 누클레아튬균(Fusobacterium nucleatum), 가드네렐라 베지날리스(Gardnerella vaginalis), 게멜라 모르빌로럼(Gemella morbillorum), 헤모필루스 속(Haemophilus sp.)(예를 들어, 인플루엔자균(Haemophilus influenzae), 헤모필루스 듀크레이(Haemophilus ducreyi), 헤모필루스 에이집티우스(Haemophilus aegyptius), 헤모피루스 헤모인플루엔자(Haemophilus parainfluenzae), 헤모필루스 헤모리티쿠스(Haemophilus haemolyticus) 및 헤모필루스 파라헤모리티쿠스(Haemophilus parahaemolyticus)), 헬리코박터 속(Helicobacter sp.)(예를 들어, 헬리코박터 피포리(Helicobacter pylori), 헬리코박터 시네디(Helicobacter cinaedi) 및헬리코박터 페넬리에(Helicobacter fennelliae)), 킹겔라 킹게(Kingella kingii), 클레프시엘라 속(Klebsiella sp.)(예를 들어, 폐렴간균(Klebsiella pneumoniae), 클레브시엘라 그라눌로마티스(Klebsiella granulomatis) 및클레브시엘라 옥시토카(Klebsiella oxytoca)), 젖산균 속(Lactobacillus sp.), 리스테리아 모노사이토제니스(Listeria monocytogenes), 렙토스피라 인테로간스(Leptospira interrogans), 레지오필라 뉴모필라(Legionella pneumophila), 렙토스피라 인테로간스(Leptospira interrogans), 펩토사슬알균 속(Peptostreptococcus sp.), 모락셀라 카타르할리스(Moraxella catarrhalis), 모르가넬라 속(Morganella sp.), 모비룬쿠스 속(Mobiluncus sp.), 미구균 속(Micrococcus sp.), 마이코박테리움 속(Mycobacterium sp.)(예를 들어, 나병균(Mycobacterium leprae), 마이코박테리움 인트라셀룰레어(Mycobacterium intracellulare), 조형결핵균(Mycobacterium avium), 소결핵균(Mycobacterium bovis) 및 마이코박테리움 마리넘(Mycobacterium marinum)), 마이코플리즘 속(Mycoplasm sp.)(예를 들어, 폐렴 마이코플라즈마(Mycoplasma pneumoniae), 마이코플라즈마 호미니(Mycoplasma hominis) 및 마이코플라즈마 제니탈리움(Mycoplasma genitalium)), 노카르디아균(Nocardia sp.)(예를 들어, 노카르니아 에스테로이드(Nocardia asteroides), 노카르디아 시리아시지오지카(Nocardia cyriacigeorgica) 및 노카르디아 브라질리엔시스(Nocardia brasiliensis)), 나이세리균(Neisseria sp.)(예를 들어, 임균(Neisseria gonorrhoeae) 및 수막염균(Neisseria meningitidis)), 파스튜렐라 멀토시다(Pasteurella multocida), 플레시오모나스 시겔로이드(Plesiomonas shigelloides), 프리보텔라 속(Prevotella sp.), 포르피로모나스 속(Porphyromonas sp.), 프리보텔라 멜로니노게니카(Prevotella melaninogenica), 프로테우스 속(Proteus sp.)(예를 들어, 프로테우스 불가리스(Proteus vulgaris) 및 프로테우스 미라빌리스(Proteus mirabilis)), 프로비덴시아 속(Providencia sp.)(예를 들어, 프로비덴시아 알칼리파시엔(Providencia alcalifaciens), 프로비덴시아 레트게리(Providencia rettgeri) 및 프로비덴시아 스투아르테(Providencia stuartii)), 녹농균,( Pseudomonas aeruginosa), 프로피온산균 에크니(Propionibacterium acnes), 로도코쿠스 에쿠이(Rhodococcus equi), 리케차 속(Rickettsia sp.)(예를 들어, 로키산홍반반열리케치아(Rickettsia rickettsii), 리케차아카리균(Rickettsia akari) 및 발진티푸스 리케치아(Rickettsia prowazekii), 오리엔티아 쓰쓰가무시(전-쓰쓰가무시병리케치아(Orientia tsutsugamushi (formerly: Rickettsia tsutsugamushi)) 및 발진열리케치아(Rickettsia typhi)), 로도코쿠스 속(Rhodococcus sp.), 적변 세균(Serratia marcescens), 스테노스로포모나스 말토필리아(Stenotrophomonas maltophilia), 살모넬라균 속(Salmonella sp.)(예를 들어, 살모넬라 엔테리카(Salmonella enterica), 장티푸스균(Salmonella typhi), 파라티푸스균(Salmonella paratyphi), 장염균(Salmonella enteritidis), 살모넬라 식중독(salmonella cholerasuis) 및 쥐티푸스균(salmonella typhimurium), 세라티아 속(Serratia sp.)(예를 들어, 영균(Serratia marcesans) 및 세라티아 리뮈파시엔(Serratia liquifaciens)), 시겔라 속(Shigella sp.)(예를 들어, 지하적리균(Shigella dysenteriae), 시겔라 플렉스네리(Shigella flexneri), 보이드 설사균(Shigella boydii) 및 시겔라 소네이균(Shigella sonnei)), 포도상국균 속(Staphylococcus sp.)(예를 들어, 황색포도상구균(staphylococcus aureus), 표피포도상구균(Staphylococcus epidermidis), 스타필로코쿠스 헤모리티쿠스(Staphylococcus hemolyticus), 스타필로코쿠스 사프로피티쿠스(Staphylococcus saprophyticus)), 연쇄상구균 속(Streptococcus sp.)(예를 들어, 폐렴 연쇄상구균(Streptococcus pneumoniae(예로써, 클로람페니콜-내성 혈청형 4 폐렴 연쇄상구균(chloramphenicol-resistant serotype 4 Streptococcus pneumoniae), 스펙티노마이신-내성 혈청형 6B 폐렴 연쇄상구균(spectinomycin-resistant serotype 6B Streptococcus pneumoniae), 스트렙토마이신-내성 혈청형 9V 폐렴 연쇄상구균(streptomycin-resistant serotype 9V Streptococcus pneumoniae), 에리스로마이신-내성 혈청형 14 폐렴 연쇄상구균(erythromycin-resistant serotype 14 Streptococcus pneumoniae), 옵토힌-내성 혈청형 14 폐렴 연쇄상구균(optochin-resistant serotype 14 Streptococcus pneumoniae), 리팜피신-내성 혈청형 18C 폐렴 연쇄상구균(rifampicin-resistant serotype 18C Streptococcus pneumoniae), 테트라사이클린-내성 혈청형 19F 폐렴 연괘상구균(tetracycline-resistant serotype 19F Streptococcus pneumoniae), 페니실린-내성 혈청형 19F 폐렴 연쇄상구균(penicillin-resistant serotype 19F Streptococcus pneumoniae) 및 트리메소프림-내성 혈청형 23F 폐련 연쇄상구균(trimethoprim-resistant serotype 23F Streptococcus pneumoniae), 클로람페니콜-내성 혈청형 4 폐렴 연쇄상구균(chloramphenicol-resistant serotype 4 Streptococcus pneumoniae), 스트렙토마이신-내성 혈청형 9V 폐렴 연쇄상구균(streptomycin-resistant serotype 9V Streptococcus pneumoniae), 옵토힌-내성 혈청형 14 폐렴 연쇄상구균(optochin-resistant serotype 14 Streptococcus pneumoniae), 리팜피신-내성 혈청형 18C 폐렴 연쇄상구균(rifampicin-resistant serotype 18C Streptococcus pneumoniae), 페니실린-내성 혈청형 19F 폐렴 연쇄상구균(penicillin-resistant serotype 19F Streptococcus pneumoniae) 또는 트리메소프림-내성 혈청형 23F 폐련 연쇄상구균(trimethoprim-resistant serotype 23F Streptococcus pneumoniae), 스트렙토코쿠스 아갈락티에(Streptococcus agalactiae), 스트렙토코쿠스 뮤탄(Streptococcus mutans), 화농성 연쇄상구균(Streptococcus pyogenes), A군 용혈연쇄구균(Group A streptococci), 화농성연쇄상구균(Streptococcus pyogenes), B군 용혈연쇄구균(Group B streptococci), 스트렙토코쿠스 아갈락티에(Streptococcus agalactiae), C군 용혈연쇄구균(Group C streptococci), 스트렙토코쿠스 안지노수스(Streptococcus anginosus), 스트렙토코쿠스 이퀴스밀리스(Streptococcus equismilis), D군 용혈연쇄구균(Group D streptococci), 스트렙토코쿠스 보비스(Streptococcus bovis), F군 용혈연쇄구균(Group F streptococci) 및 스트렙토코쿠스 안지노수스(Streptococcus anginosus), G군 용혈연쇄구균( Group G streptococci), 스피릴룸 마이너스(Spirillum minus), 모닐리포르미스연쇄간균(Streptobacillus moniliformi), 트레포네마균 속(Treponema sp.)(예를 들어, 트레포네마 카라튬(Treponema carateum), 트레포네마 페테뉴(Treponema petenue), 매독트레포네마(Treponema pallidum) 및 트레포네마 엔데미쿰(Treponema endemicum), 트로페리마 위펠리(Tropheryma whippelii), 유레아플라스마 유레알티쿰(Ureaplasma urealyticum), 메요넬라 속(Veillonella sp.), 비브리오균 속(Vibrio sp.)(예를 들어, 아시아콜레라균(Vibrio cholerae), 장염비브리오균(Vibrio parahemolyticus), 비브리오 불니피쿠스균(Vibrio vulnificus), 장염비브리오균(Vibrio parahaemolyticus), 비브리오 불니피쿠스(Vibrio vulnificus), 비브리오 알지노리티쿠스(Vibrio alginolyticus), 비브리오 미미쿠스(Vibrio mimicus), 비브리오 홀리세(Vibrio hollisae), 비브리오 플루비알리스(Vibrio fluvialis), 비브리오 메치니코비(Vibrio metchnikovii), 비브리오 뎀셀라(Vibrio damsela) 및 비브리오 푸르니시(Vibrio furnisii)), 예르시니아 속(Yersinia sp.)(예를 들어, 여시니아 엔테로콜리티카(Yersinia enterocolitica) 및 페스트균 (Yersinia pestis)) 및 무엇보다 산토모나스 말토필리아(Xanthomonas maltophilia) 중에 하나 또는 그 이상(또는 그 중의 어떤 조합)을 제한없이 포함한다. 본 발명에 기재된 바와 같이, 박테리아성 병원체는 Mycobacterium tuberculosis, 또는 결핵(tuberculosis)을 야기할 수 있는 다른 박테리움(bacterium)은 포함하지 않는다.
베타-락탐 항생제: 분자 구조에 베타-락탐 중심(Beta-lactam nucleus)을 포함하는 항생제 약제의 종류. 베타-락탐 항생제의 예는 페니실린 파생물(penicillin derivatives), 세팔로스포린(cephalosporins), 페넴(penems), 모노박탐(monobactams), 카르바페넴(carbapenems), 베타-락타마아제 억제제(Beta-lactamase inhibitors) 및 그들의 조합을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 페니실린 파생물의 예는 아미노페니실린(aminopenicillins)(예를 들어, 아목시실린(amoxicillin), 암피실린(ampicillin) 및 에피실린(epicillin)); 카르복시페니실린(carboxypenicillins)(예를 들어, 카르베니실린(carbenicillin), 치키르실린(ticarcillin) 및 테모실린(temocillin)); 우레이도페니실린(ureidopenicillins)(예를 들어, 아졸로실린(azlocillin), 피페라실린(piperacillin) 및 메즈로실린(mezlocillin)); 메실리남(mecillinam), 술베니실린(sulbenicillin), 벤자틴 페니실린(benzathine penicillin), 페니실린 G(벤질페니실린)(penicillin G (benzylpenicillin)), 페니실린 V(페녹시메틸페니실린)(penicillin V (phenoxymethylpenicillin)), 페니실린 O(알릴메르캅토메틸페니실린)(penicillin O (allylmercaptomethylpenicillinic)), 프로카인 페니실린(procaine penicillin), 옥사실린(oxacillin), 메티실린(methicillin), 납실린(nafcillin), 클록사실린(cloxacillin), 다이클록사실린(dicloxacillin), 플루클록사실린(flucloxacillin), 피밤피실린(pivampicillin), 헤타실린(hetacillin), 베캄피실린(becampicillin), 메탐피실린(metampicillin), 타란피시린(talampicillin), 코-아목시클라브(아목시실린+클라블란 산)(co-amoxiclav (amoxacillin plus clavulanic acid)) 및 피페라실린(piperacillion)을 포함하지만 이로써 제한되지 않는다. 세팔로스포린의 예로써는 세팔레키신(cephalexin), 세팔로틴(cephalothin), 세파촐린(cefazolin), 세파클로르(cefaclor), 세프록심(cefuroxime), 세파만돌(cefamandole), 세포테탄(cefotetan), 세폭시틴(cefoxitin), 세포르아나이드(ceforanide), 세프트리악손(ceftriaxone), 세포탁심(cefotaxime), 세프포독심 프로세틸(cefpodoxime proxetil), 세프타지딤(ceftazidime), 세페파임(cefepime), 세포페라존(cefoperazone), 세프티족심(ceftizoxime), 세픽심(cefixime) 및 세프피롬(cefpirome)을 포함하지만 이로써 제한되지 않는다. 페넴(penems)의 예로써는, 제한없이, 파로페넴(faropanem)을 포함한다. 모노박탐(monobactams)의 예로써는, 제한없이, 아즈트레오남(aztreonam) 및 티게모남(tigemonam)을 포함한다. 카르바페남(carbapenems)의 예로써는 비아페넴 도리페넴(biapenenvdoripenem), 에르타페넴, -이미페넴, 메로페넴(ertapenem,-imipenem,-meropenem) 및 파니페넴(panipenem). 베타-락타아마제 억제제의 예는, 타조박탐 ([2S- (2알파,3베타,5알파)]-3-메틸-7-옥소-3-(1H-1,2,3-트리아졸-1-일메틸)-4-티아-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-2-카르복시산 4,4- 나트륨 소금) (tazobactam ([2S- (2alpha,3beta,5alpha)]-3-Methyl-7-oxo-3-(1H-1,2,3-triazol-1-ylmethyl)-4-thia-1-azabicyclo[3.2.0]heptane-2-carboxylic acid 4,4-dioxide sodium salt), 술박탐 (2S,5R)- 3,3-다이메틸-7-옥소-4-티아-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-2-카르복시산 4,4-다이옥사이드 나트륨)(sulbactam (2S,5R)- 3,3-dimethyl-7-oxo-4-thia-1-azabicyclo[3.2.0]heptane-2-carboxylic acid 4,4-dioxide sodium) 및 클라블란 산((2R,5R,Z)-3-(2-하이드록시에틸리덴)-7-옥소-4-옥사-1-아자-비시클로[3.2.0]헵탄-2-카르복시산) 및 클라블란산(clavulanic acid)(((2R,5R,Z)-3-(2-hydroxyethylidene)-7-oxo-4-oxa-1-aza-bicyclo[3.2.0]heptane-2-carboxylic acid))을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
생물학적 활성: 생체(living matter)에서 물질의 유익한 또는 부정적인 효과를 기재하는 표현. 약제가 화학 복합체(complex chemical mixture)일 때, 이 활성은 물질의 활성 성분(active ingredient) 또는 약물분자구조(pharmacophore)에 의해 발휘되나, 다른 구성 요소에 의해 변형될 수 있다. 활성은 대부분 용량-의존적(dosage-dependent)이며 낮은 용량(dose)에서 높은 용량으로 이동할 때 종종 한 개체에 대해 유익에서 부정적인 범위의 효과를 가진다. 한 실시예에서, MSM은 박테리아와 같은 미생물의 생물학적 활성을 증가 또는 감소시키는 것과 같이 변한다.
생물 시료: 개체로부터 얻어진 게노믹(genomic) DNA, RNA(mRNA 포함), 단백질, 세포 전체(whole cells), 세포막(cell membranes) 또는 그들의 조합을 포함하는 생물 시료(biological specimen). 예는 점액(mucus), 말초혈(peripheral blood), 소변(urine), 타액(saliva), 조직 생겸(tissue biopsy), 바늘 흡인물(needle aspirates), 수술적출물(surgical specimen), 양수천자 샘플(amniocentesis samples) 및 부검 재료(autopsy material)를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 한 실시예에서, 샘플은 MRSA 또는 황색포도상 구균(Staphylococcus aureus) 감염과 같은 박테리아로 감염된 개체로부터 얻어진 조직 생검을 포함한다. 또 다른 실시예에서, 폐에 MRSA 또는 황색포도상 구균(Staphylococcus aureus) 감염과 같은 박테리아 감염이 있는 개체로부터 얻어진 점액 샘플을 포함한다.
조성물 (또는 제제): 화학적 화합물 또는 화합물의 혼합물은 제대로 투여되었을 때 원하는 효과를 유도할 수 있다. 조성물은 보통 적어도 하나의 약제를 포함한다. 산업적 조성물은 표면에 제대로 투여되었을 때 원하는 효과를 유도할 수 있는 화학적 화합물 또는 조성물이다. 약학적 조성물은 제대로 개체 또는 세포에 투여되었을 때 원하는 치료적 또는 예방 효과를 유도 가능한 화학적 화합물 또는 조성물이다. 많은 경우에, 산업적 조성물은 또한 개체에 투여될 수 있다. 많은 경우에, 약학적 조성물 또한 표면에 투여될 수 있다. 특정 실시예에서, 조성물은 약제 또는 약물 저항성 박테리아성 병원체를 억제하는 약제를 포함한다. 예를 들어, 조성물은 MSM 및 항-미생물(anti-microbial) 약제를 포함할 수 있다. 몇몇의 실시태양에서, 조성물은 MSM 및 메티실린 또는 옥사실린을 포함한다. 몇몇 실시태양은 DMSO없이 MSM을 포함한 조성물을 제공한다.
접촉: 간접적 물리적 연관 배치; 고체, 액체 및 기체 형태 포함. 접촉은 한 분자및 또다른 분자 사이의 접촉을 포함한다. 접촉은 실험실내(in vitro)에서 분리된 세포 또는 생체내(in vivo)에서 조직 또는 개체에 투여하여 일어날 수 있다.
대조군: 비록 독립적인 세트일지라도, 임상검사치(laboratory value)뿐만 아니라 정상으로 믿어진 시료들(예를 들어, 시험될 변수 부재시 나타나는 활성 또는 기능)은 그런 값들이 실험과 실험 사이에 서로 다를 수 있음을 유념하고 있다. 대조군은 그것의 효과가 시험되는 관심있고 오직 실험군에만 적용되는 단일 변수(variable)를 제외하고 사실상 실험군(treatment group)과 동일하다.
감소 또는 억제: 어떤 것의질, 양, 또는 세기의 감소. 한 실시예에서, MSM의 투여는 하나 또는 그 이상의 미생물의 생장, 생식, 증식, 생존율, 대사, 생존 능력, 견고성(robustness), 행동, 및/또는 기능과 같은 생물학적 활성을 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98%, 또는 100%와 같은 10% 내지 95%, 20% 내지 80%, 30% 내지 70%, 40% 내지 50%를 포함하는, 적어도 10%, 적어도 20%, 적어도 50%, 또는 적어도 90%라도 감소시키거나 줄인다. 그런 감소는 당업자에게 자명한 것처럼 본 발명에서 밝힌 방법을 이용하여 측정될 수 있다. 몇몇 실시태양에서, MSM은 특정 미생물의 생존을 억제하기 위해 사용된다. 몇몇 실시태양에서, 로그-스캐일 감소가 처음 24시간 후에 발생했다.
디메틸설폭사이드(Dimethyl sulfoxide, DMSO):메틸설포닐메탄(methylsulfonylmethane) 또는 메틸 설폭사이드(methyl sulfoxide)로도 알려진 디메틸설폭사이드(DMSO)는 화학식 (CH3)2SO 의 유기황 화합물(organosulfur compound)이다. 상기 무색의 액체는 극성 및 비극성 화합물을 모두 용해시키는 극성 반양성자성 용매(polar aprotic solvent)이며 물처럼 넓은 범위의 혼합성 유기 용매(organic solvent)이다. 구별되는 피부에 손쉽게 투과되는 특성을 가지므로, 바르면 곧 피부에 접촉하여 작용할 것이다. DMSO는 영양 보조제(nutritional supplement) 및 약학적 약제로 잘 알려져있다. 관련있는 업계의 기술자는 상기 용도에 익숙할 것이다. 다양한 품질의 DMSO가 상업적으로 이용가능하며(예를 들어, Sigma-Aldrich, Corp., St. Louis, MO 의 상품 번호 472301) 당업자는 DMSO의 원천(source)에 익숙할 것이다.
약물 저항성(drug resistant) 박테리아성 병원체: 본 용어는 하나 또는 그 이상의 항-미생물 약제에 저항성이 있는 박테리아성 병원체를 말한다. 약물 저항성은 예를 들어, MRSA는 베타-락탐 항생제에 저항성이 있는 약물 저항성 박테리아성 병원체이다. 또 다른 것에는 저항성을 가져도 한 항-미생물 약제에 민감하면 박테리아성 병원체는 한 항-미생물 약제에 민감하면 약물 저항성 및 약물-감수성 모두일 것이다. 본 발명에서 사용된 것과 같이, 약물 저항성 박테리아성 병원체에 접촉한 개체는 약물 저항성 박테리아에 감염된다. 본 발명에서 사용된 바와 같이, 약물 저항성 박테리아성 병원체는 폐렴을 유발할 수 있는 약물 저항성 결핵균(Mycobacterium tuberculosis), 또는 다른 약물 저항성 박테리아성 병원체를 포함하지 않는다.
약물 감수성 박테리아성 병원체: 본 용어는 하나 또는 그 이상의 항-미생물 약제에민감한 박테리아성 병원체를 말한다. 또 다른 것에는 저항성을 가져도 한 항-미생물 약제에 민감하면 박테리아성 병원체는 약물 저항성 및 약물-감수성 모두 일 것이다. 몇몇 실시태양에서, 특정 항-미생물 약제에 저항성이 있는 박테리아성 병원체는 박테리아성 병원체가 MSM과 접촉하면 약제에 민감하게 만들어질 것이다. 본 발명에서 사용된 바와 같이, 약물-감수성 박테리아성 병원체에 접촉한 개체는 약물-감수성 박테리아에 감염될 것이다. 본 발명에서 사용된 바와 같이, 약물 감수성인 박테리아성 병원체는 결핵을 야기시킬 수 있는 약물 감수성의 결핵균(Mycobacterium tuberculosis), 또는 다른 약물 감수성의 박테리아성 병원체를 포함하지 않는다.
향상 또는 증가: 어떤 것의 질, 양, 또는 세기의 증가.
병원성 곰팡이: 질병을 유발하는 곰팡이. MSM이 변형을 위해 사용될 수 있는 병원성 곰팡이의 예는, 백선균 루브럼(Trichophyton rubrum), T. 모창균(T. mentagrophytes), 표피사상균 플로코섬(Epidermophyton floccosum), 견소포자균(Microsporum canis), 피티로스포럼 오르비큘레어(말라세지아 퍼퍼)(Pityrosporum orbiculare(Malassezia furfur)), 칸디다균 속(Candida sp.)(예를 들어, 칸디다 알비칸스), 아스페르길루스 속(Aspergillus sp.)(예를 들어, 아스페르길루스 푸미가투스(Aspergillus fumigates), 아스페르길루스 플라부스(Aspergillus flavus), 아스페르길루스 글라우쿠스(Aspergillus glaucus), 아스페르길루스 니둘란(Aspergillus nidulans), 아스페르길루스 오리제(Aspergillus oryzae), 아스페르길루스 테레우스(Aspergillus terreus), 아스페르길루스 우스투스(Aspergillus ustus), 아스페르길루스 베르시콜러(Aspergillus versicolor) 및 아스페르길루스 클라바투스(Aspergillus clavatus)), 효모균 속(Cryptococcus sp.)(예를 들어, 크립토코쿠스 네오포르만스(Cryptococcus neoformans), 크립토코쿠스 가티(Cryptococcus gattii), 크립토코쿠스 로렌티(Cryptococcus laurentii) 및크립토코쿠스 알미더스(Cryptococcus albidus)), 콕시디오이데스 속(Coccidioidessp.), 히스토플라스마 속(Histoplasma sp.)(예를 들어, 캡슐라툼(Histoplasma capsulatum), 뉴머스티스 속(Pneumocystis sp.)(예를 들어, 뉴머스티스 지로베치(Pneumocystis jirovecii), 스타치보트리스 속(Stachybotryssp.)(예를 들어, 스타치보트리스 차르타룸(Stachybotrys chartarum)), 파라콕시디오이디스(Paracoccidioides), 분아균(Blastomyce), 푸사륨(Fusarium), 스포로트릭스(Sporothrix), 트리코스포론(Trichosporon), 거미줄 곰팡이(Rhizopus), 슈달레스체리아(Pseudallescheria), 패실로마이세스(Paecilomyces), 알터나리아(Alternaria), 커버라리아(Curvularia), 엑소피알라(Exophiala), 완기엘라(Wangiella), 페니실룸(penicillium) 및 세팔로스포리움(Cephalosphorium) 중에 하나 또는 그 이상(또는 그 중의 어떤 조합)을 제한없이 포함한다. 몇몇 실시태양에서, MSM은 하나 또는 그 이상의 상기에 언급된 병원성 곰팡이와 관련된 감염 또는 장애를 억제 또는 예방하기 위해 투여된다.
배양: 용어는 MSM과 같은 약제가 세포 또는 조직과 같은 무언가와 상호작용할 충분한 시간을 포함한다.
흡입제 장치(Inhalant device): 조성물을 예를 들어 개체의 폐 조직과 같은 개체에 전달 가능한 장치. 예를 들어, 흡입제 장치는 흡입기(inhaler), 분무기(nebulizer) 또는 호흡기(ventilator)이다. 본 발명에 기재된 흡입제 장치는 DMSO 및/또는 MSM과 접촉을 위해 적용된 재료로부터 이용된다. 몇몇 실시태양에서, 흡입제 장치는 일회용 또는 교체가능하다. 본 발명에 기재된 흡입제 장치는 DMSO 또는 MSM을 포함한 조성물을 개체의 폐 조직내의 박테리아성 병원체에 직접적으로 접촉하여 전달하도록 설정되었다. 흡입제 장치는 사이즈 범위내의 조성물의 입자(particles)를 생성하도록 설정되었다. 몇몇 실시태양에서, 흡입제 장치는 약 0.1 μm 내지 약 10 μm 또는 약 0.5 μm 내지 약 5 μm의 사이즈 범위내의 조성물 입자(particles)를 생성하도록 설정되었다.
감염 또는 질병의 억제 또는 치료: 박테리아성 감염과 같은 감염의 발달의 위험이 있는 개체에서 감염, 질병 또는 질환의 완전한 발달을 억제. “치료”는 발달하기 시작한 후 질병 또는 병적 상태의 신호 또는 증상을 개선하는 치료적 개입을 말한다. 본 발명에서 사용된 바와 같이, 상기 용어 질병, 병적인 상태 또는 증상과 관련하여, “개선”은 관찰 가능한 어떤 유익한 치료의 효과를 말한다. 유익한 효과는 예를 들어, 민감한 개체에서 감염/질병의 임상적 증상의 시작 지연, 감염/질병의 일부 또는 모든 임상적 증상의 강도의 감소, 감염/질병의 더 느린 진행, 감염/질병의 재발(relapses) 경우의 감소, 전체적인 건강의 향상 또는 개체의 복리, 또는 특정 박테리아 감염과 같은 특히 감염/질병에 특이적인 당업계에 잘 알려진 다른 변수(parameter)에 의해 증명될 수 있다.
메티실린 저항성 황색포도상 구균( Staphylococcus aureus )(MRSA): 전체 또는 일부(또는 중간의)를 가지는 황색포도상 구균(Staphylococcus aureus) 박테리아는 하나 또는 그 이상의 베타-락탐 항생제에 저항성을 갖는다. 또한, MRSA는 다중 약물 저항성 황색포도상 구균(Staphylococcus aureus)(MRSA), 옥사실린-저항성 황색포도상 구균(Staphylococcus aureus)(MRSA) 또는 “골든 스태프(Golden Staph)”로 불리운다. 몇몇 실시태양에서, MRSA와 MSM의 접촉은 MRSA를 MSM과 접촉하기 이전엔 저항성을 가졌던 베타-락탐 항생제에 민감하게 만든다. 항생제 감수성을 측정하기 위한 Etest® 시스템을 이용하여, MRSA는 옥사실린에 대한 적어도 2?μg/㎖의 MIC(예를 들어, Etest® 기술적 매뉴얼, AB bioMerieux, 2008, 참조)를 보여준다.
메틸설포닐메탄(Methylsulfonylmethane, MSM): 화학식 (CH3)2SO2의 유기황 화합물(organosulfur compound). 또한, MSM은 DMSO2, 디메틸 설폰(dimethyl sulfone), 메틸 설폰(methyl sulfone) 및 설포닐비스메탄(sulfonylbismethane)으로도 알려져 있다. MSM은 대체로 식이보조제(dietary supplement)로서 판매되었고 팔렸다.
MSM은 구조적으로 디메틸 설폭사이드(, DMSO)와 관련되나, 상기두 물질의 행동은 다르다. MSM이 덜 극성이고 덜 반응적인 반면, DMSO는 물-유사 용해 특성을 가지는 매우 극성 용매이며 훌륭한 리간드이다. 또한, MSM은 DMSO의 대사 산물()이다. MSM은 하기의 화학 구조를 가진다:
Figure 112012043216250-pct00001
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미생물: 고세균계(Archaea), 세균계(Bacteria), 및 효모(yeast) 및 곰팡이(filamentous fungi), 원생동물(protozoa), 조류(algae), 또는 더 높은 원생생물(Protista)을 포함하는 진핵생물계(Eucarya) 도메인으로부터의 원핵 또는 진핵 미생물 종 구성원. 상기 용어 “미생물 세포(microbial cells)” 및 “미생물(microbes)”은 용어 미생물(microorganism)과 교환가능하다.
최소 억제 농도(MIC): 하룻밤 동안 배양한 뒤의 미생물의 가시적인 생장을 억제할 수 있는 항미생물제의 가장 낮은 농도. 최소 억제 농도는 미생물의 항미생물 제제에 대한 저항성을 확인 및 새로운 항미생물 제제의 활성을 관찰하기 위한 실험적 진단에 중요하다.
조절하다 또는 조절: 분자의 생물학적 활성의 증가 또는 감소를 포함하는 활성, 정도(degree) 또는 비율의 조정, 변화, 조절. 한 실시예에서, MSMS은 박테리아의 항-미생물 제제에 대한 감수성을 조절하기 위해 투여된다.
기생충(Parasite): 숙주로서 작용하는(기생충에 대해) 인간 또는 다른 생물체의 안에 사는 생물체. 기생충은 적어도 그들의 생활사(life cycle)의 일부에 대해 그들의 숙주에 의존적이다. 기생충은 그들이 필요한 음식을 섭취, 신체 조직 및 세포를 침식하고, 인간을 아프게 하는 독성 폐기물을 제거하기 때문에 인간에게 해롭다. 밝혀진 방법에 따라 사용된 곰팡이 병원균의 예 및 조성물은 제한 없이 하나 또는 그 이상의(또는 그의 조합) 말라리아(Plasmodium falciparum, P. vivax, P. malariae), 주혈흡충(schistosomes), 트리파노소마(trypanosomes), 리슈마니어(leishmania), 톡소플라스마 곤디이(Toxoplasma gondii), 선포층증(Trichinelosis(Trishinella spiralis)) 또는 콕시디아증(Coccidiosis(Eimeria 종))를 포함한다. MSM은 상기에서 열거된 하나 또는 그 이상의 생물의 활성을 억제 또는 예방하기 위해 사용될 수 있다.
약학적으로 허용가능한 담체(carriers) 또는 비지클(vehicles): 본 발명에서 유용한 약학적으로 허용가능한 담체(비지클)는 관습적이다. Remington’s Pharmaceutical Sciences, by E. W. Martin, Mack Publishing Co., Easton, PA, 19th Edition (1995)는, 본 발명에서 제공하는 하나 또는 그 이상의 펩타이드와 같은 조성물 및 하나 또는 그 이상의 치료적 화합물 또는 분자의 약학적 전달에 적합한 조성물을 기재한다. 일반적으로, 담체의 본성은 사용되는 특정 투여 방식에 의존적일 것이다. 예를 들어, 비경구 조성물은 종종 주사가능한 물, 생리식염수(physiological saline), 균형잡힌 소금물(balanced salt solutions), 수용성 덱스트로스(aqueous dextrose), 글리세롤(glycerol) 또는 비히클 같은 약학적 및 생리학적(physiological)으로 허용가능한 유체를 포함하는 유체(fluid)가 포함한다. 특정 실시태양에서 상기 담체는 치료적 화합물이 피부층을 통과하도록 하는 것이다. 고체 조성물(예를 들어, 가루, 알약(pill), 정제(tablet), 또는 캡슐 형태)을 위해, 예를 들어, 약학적 품직의 만니톨(mannitol), 락토오스(lactose), 전분(starch), 또는 마그네슘 스테아레이트(magnesium stearate)와 같은 관습적인 무-독성 담체가 포함될 수 있다. 또한, 생물학적으로-중성인 담체, 투여될 조성물은 적은 양의 예를 들어, 아세트산 나트륨(sodium acetate) 또는 솔비톨모노라우레이트(sorbitan monolaurate)와 같은 습윤제 또는 유화제, 보존료(preservatives), 및 pH 완충제 등등과 같은 비-독성의 보조 물질이 포함할 수 있다.
정량: 샘플에서 분석적인 정량과 같은 분자 또는 분자의 활성량(관련 정도와 같은)을 측정 또는 측량.
약물 저항성 미생물 민감화: 박테리아성 병원체를 포함하는 미생물의 약물-저항성 감소의 의미. 또 다른 약제의 미생물에 대한 억제 효과를 증가시키는 약제의 이용처럼, 미생물에 대한 변형을 포함한다. 예를 들어, MRSA의 메티실린에 대한 민감화는 예를 들어, MRSA를 MSM과 접촉시키는 것과 같이 MRSA를 MRSA의 메티실린에 대한 저항성을 감소시키는 약제와 접촉시키는 것처럼 메티실린에 더 이상 저항성을 가지지 않는 것와 같은 MRSA를 조절하는 것을 포함한다.
황색포도상 구균( Staphylococcus aureus ): 약 1 μm의 지름의 둥근 세포의 한 면보다 더 많이 분리되기 위한 능력을 나타내는 포도같은 클러스터(cluster)를 형성하는 그람-양성(Gram-positive) 구균(coccus). 호기성(aerobic) 및 혐기성(anaerobic) 호흡이 모두 가능하며 거의 모든 균주는 만니톨을 혐기적으로 발효시킨다. 블러드 아가에서 특징적인 금색 또는 흰색 콜로니를 형성한다. 카탈라아제(catalase), 응고효소(coagulase) 및 세포외 응집 인자(extracellular cell clumping factor)를 생산하며 몇몇 균주는 캡슐을 생산한다(Brown et al., J. Antimicrob. Chemother., 56: 1000-1018, 2005 참조).
개체: 인간 및 비-인간 포유류를 포함하는 카테고리의 살아있는 다-세포 척추 생물. “개체 내”는 물질 또는 미생물(예를 들어, 박테리아성 병원체)이 개체와 접촉하거나 물리적으로 개체와 연결이 있는 것을 말한다.
질병 또는 질환에 민감한 개체: 질병 또는 질환이 발달 가능한, 하기 쉬운, 또는 성향이 있는 개체. 개체가 이미 질병 또는 질환의 증상을 가지거나 보이는 것은 이미 개체가 발달된 그것을 가지므로 “민감한(susceptible)”것으로 고려된다.
표면: 생체의 외층(outer layer)
증상 및 신호: 질병 또는 개체의 상태의 주관적인 증거. 예를 들어, 개체에 의해 감지된 것과 같은 증거; 어떤 신체적 또는 정신적 상태를 나타내는 개체의 상태에서 현저한 변화. “신호”는 개체의 실험 또는 측정에서 발견할 수 있는 질병이 나타내는 어떤 이상. 신호는 질병의 일반적인 목적 지표(objective indication)이다. 신호는 박테리아 또는 바이러스 감염과 같은 장애 또는 질병의 검출을 위한 시험과 같은 측정가능한 변수를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 한 실시예에서, 박테리아 또는 바이러스 감염과 관련된 하나 또는 그 이상의 증상 또는 신호를 감소 또는 억제하는 것은 MSM이 없을 때의 박테리아 생존 또는 바이러스 감염에 비해 원하는 양의 박테리아 생존 또는 바이러스 감염의 감소 또는 억제는, 예를 들어, 적어도 20%, 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 적어도 100%까지를 포함한다.
치료학적 유효한 양 또는 농도: 조성물이 투여된 개체, 또는 세포, 또는 표면에서 원하는 효과를 얻기 위해 필요한, 홀로, 또는 추가적인 약제와 함께인 조성물의 양. 약제 또는 조성물의 유효량은 조성물이 투여된 개체, 세포 또는 표면, 및 투여 방식을 포함한 여러 인자에 의존적일 것이나, 이에 한정되지 않는다. 한 실시예에서, 치료적으로 유효한 양 또는 농도는 예를 들어, MRSA와 같은 약물 저항성 박테리아성 병원체의 억제에 필요한 양이다. 한 실시예에서, 원하는 양은 질병과 관련된 하나 또는 그 이상의 증상의 감소 또는 억제를 위한 양이다. 예를 들어, MRSA 감염과 관련된 증상. 하나 또는 그 이상의 증상은 효과적인 조성물 또는 약제가 효과적이기 위해 완전히 제거될 필요는 없다. 예를 들어, 조성물 또는 약제는 신호 또는 증상을 조성물 또는 약제가 없을 때의 신호 또는 증상에 비해 원하는 양으로, 예를 들어 적어도 20%, 적어도 50%, 적어도 80%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 또는 적어도 100%까지 감소시킬 수 있다. 한 실시예에서, 원하는 효과는 미생물을 조성물 또는 약제가 없을 때의 미생물 생존에 비해, 원하는 양으로, 예를 들어 적어도 20%, 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 또는 적어도 100%까지 감소 또는 억제(미생물의 생존과 같은)시키기 위한 것이다. 또 다른 실시예에서, 원하는 효과는 원하는 양으로 약물 저항성 미생물을 조성물 또는 약제가 없을 때의 미생물의 약물에 대한 감수성에 비해 예를 들어, 적어도 20%, 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 또는 적어도 100%까지 상기 미생물이 저항성을 가지는 약물에 민감하게 하기 위한 것이다.
본 발명의 조성물 또는 약제의 치료적으로 유효한 양이 단일 용량(single dose), 또는 여러 용량으로 치료 과정 동안, 예를 들어, 매일 투여될 수 있다. 그러나. 치료적으로 유효한 양은 조성물 또는 약제가 투여되는 개체 또는 세포 또는 표면, 심각성(severity) 및 처리되는 상태의 타입, 및 투여 방식에 의존적일 수 있다. 약제 또는 조성물의 치료적으로 유효한 양이 혈액(생체내), 또는 버퍼(실험실내)내의 특히, 원하는 효과를 만드는 약제 또는 조성물의 농도(리터 당 몰(mole) 또는 몰라(molar)-M 또는 부피 당 중량 또는 다른 농도 측량(measurement))로서 측정될 수 있다. 또는, 약제 또는 조성물의 치료적으로 유효한 양은 개체의 체중량 당 개체에 투여된 양으로서 예를 들어, 약제 mg/체중량 kg으로 측정될 수 있다.
미처리 세포: MSM과 같은 원하는 약제와 접촉되지 않은 세포. 실시예에서, 미처리된 세포는 MSM이 전달된 비히클을 받는 세포이다.
바이러스: 살아있는 세포 내를 감소시키는 미세한 전염되는 생물체. 바이러스는 단백질 코트로 둘러싸인 핵산의 코어로 필수적으로 이루어져 있고, 오직 살아있는 세포(living cell) 내에서만 복제하는 능력을 가진다. “바이러스 복제(Viral replication)”는 적어도 한 바이러스 생활사의 발생에 의한 추가적인 바이러스의 생산이다. 바이러스는 숙주 세포의 정상적인 기능을 전복시켜 세포를 바이러스에 의해 결정된 방식으로 행동하게 할 것이다. 예를 들어, 바이러스 감염은 세포에서 사이토카인 생산, 또는 감염 안된 세포가 정상적으로 사이토카인을 생산하지 못할 때, 사이토카인에 대응하는 결과를 낳을 것이다. 몇몇 실시예에서, 바이러스는 병원체이다.
기재된 방법 및 조성물에 따라서 처리되었을 지 모르는 바이러스 병원체의 특정한 예는 그 중에서도; 아레나바이러스(Arenaviruses)(예를 들어, 구아나리토 바이러스(Guanarito virus), 라사 바이러스(Lassa virus), 쥬닌 바이러스(Junin virus), 마츄포 바이러스(Machupo virus) 및 사비아(Sabia)), 아르테리바이러스(Arteriviruses), 로니바이러스(Roniviruses), 아스트로바이러스(Astroviruses), 분야바이러스(Bunyaviruses)(예를 들어, 크림-콩고출혈열 바이러스(Crimean-Congo hemorrhagic fever virus) 및 한타 바이러스(Hantavirus)), 바르나바이러스(Barnaviruses), 비르나바이러스(Birnaviruses), 보르나바이러스(Bornaviruses)(예를 들어, 보르나바이러스(Borna disease virus)), 브로모바이러스군(Bromoviruses), 노로바이러스(Caliciviruses), 크리소바이러스(Chrysoviruses), 코로나바이러스군(Coronaviruses)(예를 들어, 코로나바이러스(Coronavirus) 및 SARS)), 시스토바이러스(Cystoviruses), 클로스테로바이러스(Closteroviruses), 코모바이러스(Comoviruses), 딕시트로바이러스(Dicistroviruses), 플라바이러스(Flaviruses)(예를 들어, 황열병 바이러스(Yellow fever virus), 웨스트나일 바이러스(West Nile virus), C형 간염바이러스(Hepatitis C virus), 및 뎅구열바이러스(Dengue fever virus)), 필로바이러스(Filoviruses)(예를 들어, 에볼라 바이러스(Ebola virus) 및 마르부르그 바이러스(Marburg virus)), 플렉시바이러스(Flexiviruses), 헤페바이러스(Hepeviruses)(예를 들어, E형 간염바이러스(Hepatitis E virus)), 인체 아데노바이러스(human adenoviruses)(예를 들어, 인체 아데노바이러스 A-F(human adenovirus A-F)), 인체 아스트로 바이러스(human astroviruses), 인체 BK 폴리마바이러스(human BK polyomaviruses), 인체 보카바이러스(human bocaviruses), 인체 코로바이러스(human coronavirus)(예를 들어, 인체 코로나바이러스 HKU1, NL63 및 OC43(human coronavirus HKU1, NL63, and OC43)), 인체 장내바이러스(human enteroviruses((예를 들어, 인체 장내바이러스 A-D(human enterovirus A-D)), 인체 에리트로바이러스 V9(human erythrovirus V9), 인체 포아미 바이러스(human foamy viruses), 인체 헤르페스바이러스(human herpesviruses)(예를 들어, 인체 헤르페스 바이러스 1(단순헤르페스바이러스 타입 1(human herpesvirus 1 (herpes simplex virus type 1))), 인체 헤르페스 바이러스 2(단순헤르페스바이러스 타입 2(human herpesvirus 2 (herpes simplex virus type 2)), 인체 헤르페스바이러스 3(수두 대상 포진 바이러스)(human herpesvirus 3 (Varicella zoster virus)), 인체 헤르페스 바이러스 4 타입 1(엡스타인-바 바이러스 타입 1)(human herpesvirus 4 type 1 (Epstein-Barr virus type 1)), 인체 헤르페스 바이러스 4 타입 2(엡스타인-바 바이러스 타입 2)(human herpesvirus 4 type 1 (Epstein-Barr virus type 1)), 인체 헤르페스바이러스 5 스트레인 AD169(human herpesvirus 5 strain AD169), 인체 헤르페스바이러스 5 스트레인 멀린 스트레인(human herpesvirus 5 strain Merlin Strain), 인체 헤르페스바이러스 6A(human herpesvirus 6A), 인체 헤르페스바이러스 6B(human herpesvirus 6B), 인체 헤르페스바이러스 7(human herpesvirus 7), 인체 헤르페스바이러스 8 타입 M(human herpesvirus 8 type M), 인체 헤르페스바이러스 8 타입 P(human herpesvirus 8 type P) 및 인체 시토메갈로바이러스(Human Cyotmegalovirus)), 인체면역결핍바이러스(human immunodeficiency viruses (HIV))(예를 들어, HIV 1 및 HIV 2), 인체 메타뉴모바이러스(human metapneumoviruses), 인체 유두종 바이러스(human papillomaviruses)(예를 들어, 인체 유두종 바이러스-1(human papillomavirus1), 인체 유두종 바이러스-18(human papillomavirus18), 인체 유두종 바이러스-2(human papillomavirus2), 인체 유두종 바이러스-54(human papillomavirus54), 인체 유두종 바이러스-61(human papillomavirus61), 인체 유두종 바이러스-cand90(human papillomaviruscand90), 인체 유두종 바이러스 RTRX7(human papillomavirus RTRX7), 인체 유두종 바이러스 타입 10(human papillomavirus type 10), 인체 유두종 바이러스 타입 101(human papillomavirus type 101), 인체 유두종 바이러스 타입 103(human papillomavirus type 103), 인체 유두종 바이러스 타입 107(human papillomavirus type 107), 인체 유두종 바이러스 타입 16(human papillomavirus type 16), 인체 유두종 바이러스 타입 24(human papillomavirus type 24), 인체 유두종 바이러스 타입 26(human papillomavirus type 26), 인체 유두종 바이러스 타입 32(human papillomavirus type 32), 인체 유두종 바이러스 타입 34(human papillomavirus type 34), 인체 유두종 바이러스 타입 4(human papillomavirus type 4), 인체 유두종 바이러스 타입 41(human papillomavirus type 41), 인체 유두종 바이러스 타입 48(human papillomavirus type 48), 인체 유두종 바이러스 타입 49(human papillomavirus type 49), 인체 유두종 바이러스 타입 5(human papillomavirus type 5), 인체 유두종 바이러스 타입 50(human papillomavirus type 50), 인체 유두종 바이러스 타입 53(human papillomavirus type 53), 인체 유두종 바이러스 타입 60(human papillomavirus type 60), 인체 유두종 바이러스 타입 63(human papillomavirus type 63), 인체 유두종 바이러스 타입 6b(human papillomavirus type 6b), 인체 유두종 바이러스 타입 7(human papillomavirus type 7), 인체 유두종 바이러스 타입 71(human papillomavirus type 71), 인체 유두종 바이러스 타입 9(human papillomavirus type 9), 인체 유두종 바이러스 타입 92(human papillomavirus type 92), 및 인체 유두종 바이러스 타입 96(human papillomavirus type 96)), 인체 파라인플루엔자 바이러스(human parainfluenza viruses)(예를 들어, 인체 파라인플루엔자 1-3(human parainfluenza virus 1-3)), 인체 파레초바이러스(human parechoviruses), 인체 파포바이러스(human parvoviruses)(예를 들어, 인체 파포바이러스 4 및 인체 파포바이러스 B19(human parvovirus 4 and human parvovirus B19)), 인체 호흡기합포체 바이러스(human respiratory syncytial viruses), 인체 리노 바이러스(human rhinoviruses)(예를 들어, 인체 리노바이러스 A(human rhinovirus A) 및 인체 리노바이러스 B(human rhinovirus B)), 인체 스투마레트로바이러스(human spumaretroviruses), 인체 T-림프구 바이러스(human Tlymphotropic viruses)(예를 들어, 인체 T-림프구 바이러스 1(human Tlymphotropic virus 1) 및 인체 T-림프구 바이러스 2(human T-lymphotropic virus 2)), 인체 폴리오마 바이러스(Human polyoma viruses), 하이포바이러스(Hypoviruses), 레비바이러스(Leviviruses), 루테오바이러스(Luteoviruses), 림프구성 맥락수막염 바이러스(Lymphocytic choriomeningitis viruses (LCM)), 마르나 바이러스(Marnaviruses), 나르나바이러스(Narnaviruses), 니도비레일(Nidovirales), 노다바이러스(Nodaviruses), 오르토믹소바이러스(Orthomyxoviruses)(예를 들어, 인플루엔자 바이러스(Influenza viruses)), 파르티티바이러스(Partitiviruses), 파라믹소바이러스(Paramyxoviruses)(예를 들어, 홍역 및 귀밑샘염 바이러스(Measles virus and Mumps virus)), 피코르나바이러스(Picornaviruses)(예를 들어, 폴리오바이러스, 감기 바이러스 및 A형 간염 바이러스(Poliovirus, the common cold virus, and Hepatitis A virus)), 포티바이러스(Potyviruses), 수두바이러스(Poxviruses)(예를 들어, 천연두(Variola) 및 우두(Cowpox)), 세퀴바이러스(Sequiviruses), 레오 바이러스(Reoviruses)(예를 들어, 로터바이러스(Rotavirus)), 랩도 바이러스(Rhabdoviruses)(예를 들어, 광견병 바이러스(Rabies virus)), 랩도바이러스(Rhabdoviruses)(예를 들어, 수포성 구내염 바이러스(Vesicular stomatitis virus), 테트라바이러스(Tetraviruses), 토가바이러스(Togaviruses)(예를 들어, 풍징바이러스(Rubella virus) 및 로그 리버 바이러스(Ross River virus)), 톰버스바이러스(Tombusviruses), 토티바이러스(Totiviruses), 티모바이러스(Tymoviruses) 및 노로바이러스(Noroviruses) 중 하나 또는 그 이상(또는 조합)을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
몇몇 실시태양에서, MSM은 상기에 나열된 하나 또는 그 이상의 바이러스의 생물학적 활성을 억제하기 위해 사용되었다.
효모: 약 1,500 종과 함께 기재된 균계(Kingdom Fungi)로 분류된 진핵 미생물. 이분법(binary fission)에 의한 적은 번식일지라도 대부분 출아(budding)에 의해 무성생식(asexually)으로 번식(reproduce)한다. 효모는 몇몇 종이 일련의 출아한 세포들의 가성균사(pseudohyphae) 또는 위조 균사(false hyphae)로 알려진 실 연결 형성을 통해 다세포가 되었을 지라도, 일반적으로 단세포(unicellular)이다. 본 발명의 발명 및 조성물에 사용될 수 있는 효모의 예는 Saccharomyces cerevisiae,Candida albicans,Schizosaccharomyces pombe, Pichia, Cryptococcus, Zygosaccharomyces, Torulopsis, Hansenula, 및 Debaryomyces를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
II.여러 실시태양의 개요
본 발명은 약물 저항성 박테리아성 병원체 선별하는 단계; 및 박테리아성 병원체를 MSM의 치료적으로 유효한 양 및 약물저항성 박테리아성 병원체의 약물-감수성 형태를 억제하는 치료적으로 유효한 양의 약제를 포함하는 조성물과 접촉하는 단계를 수반 함으로써, 약물 저항성 박테리아성 병원체를 억제하는 방법을 제공한다. 몇몇 실시태양에서, 상기 약물 저항성 박테리아성 병원체는 MRSA이다.
또한, 본 발명은 약물 저항성 박테리아성 병원체를 선별하고; 상기 박테리아성 병원체를 치료적으로 유효한 양의 MSM과 포함하는 조성물과 접촉시킴으로서 약물 저항성 박테리아성 병원체를 상기 박테리아성 병원체가 저항성을 가지는 약물에 민감하게 만드는, 약물 저항성 박테리아성 병원체를 상기 박테리아성 병원체가 저항성을 가지는 약물에 대해 민감하게 만드는 방법을 제공한다. 몇몇 실시태양에서, 상기 약물 저항성 박테리아성 병원체는 MRSA이다.
또한, 본 발명은 약물 감수성 박테리아성 병원체를 선별하고; 약물-감수성 박테리아성 병원체를 치료적으로 유효한 양의 MSM 및 치료적으로 유효한 양의 약물-감수성 박테리아성 병원체를 억제하는 약제를 포함하는 조성물과 접촉하는 것을 포함함으로써, 약물-감수성 박테리아성 병원체를 약물 저항성 발달로부터 억제하는 방법을 제공한다. 몇몇 실시태양에서, 상기 약물 감수성 박테리아성 병원체는 황색포도상 구균(Staphylococcus aureus)이다.
본 발명에 기재된 방법의 여러 실시태양에서, 상기 약제는 베타-락탐 항생제이다. 몇몇 실시태양에서, 상기 약제는 페니실린 파생물, 세팔로스포린, 페넴, 모노박탐, 카르바페넴, 베타-락타마아제 억제제 또는 그들의 조합을 포함한다. 몇몇 실시태양에서, 상기 약제는 메티실린 또는 옥사실린을 포함한다. 여러 실시태양에서 상기 치료학적으로 유효한 약제의 양은 베타-락탐 항생제의 약 1-5, 5-10, 10-20, 20-30, 30-40, 40-50, 50-60, 60-70, 70-80, 80-90 또는 약 90-100 MIC를 포함한다. 몇몇 실시태양에서, 약학적으로 유효한 약제의 양은 베타-락탐 항생제의 약 0.001, 0.01, 0.1, 0.5 또는 1 MIC를 포함한다.
본 발명에 기재된 방법의 여러 실시태양에서, 상기 박테리아성 병원체는 개체 내에 있는 것이다. 몇몇 실시태양에서, 상기 박테리아성 병원체는 표면에 있는 것이다.
여러 실시태양에서, MSM의 상기 유효한 양은 약 5-20% MSM, 약 5-16% MSM, 약 5-10% MSM, 약 5-8% MSM, 약 9-16% MSM 또는 약 10-15% MSM이다. MSM(MSM을 포함하는 조성물의 중량 퍼센트). 다른 실시태양에서, 상기 유효한 양의 MSM은 약 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 또는 16 %의 MSM이다. 또한, 다른 실시태양에서, 상기 유효한 양의 MSM은 약 10-16% MSM이다.
여러 실시태양에서, 상기 박테리아성 병원체는 조성물과 약 24, 36, 48, 60, 72, 84, 96, 108 또는 120 시간 동안 접촉한다.
몇몇 실시태양에서, 상기 조성물은 국소적으로 또는 흡입제 기구로 투여된다. 몇몇 실시태양에서, 상기 조성물은 0-5% 염화 나트륨(sodium chloride)을 포함한다.
예를 들어, 약물 저항성 박테리아성 병원체를 억제하는 방법의 한 특정 실시태양에서, 상기 박테리아성 병원체는 MRSA이며, 상기 약제는 베타-락탐 항생제이고, 상기 유효한 양의 MSM는 약 5-10%이며 상기 조성물은 국소적으로 투여된다.
예를 들어, 약물 저항성 박테리아성 병원체를 상기 박테리아성 병원체가 저항성을 가지는 약물에 민감하게 만드는 방법의 한 특정 실시태양에서, 상기 박테리아성 병원체는 MRSA이며, 상기 유효한 양의 MSM은 약 5-10%이고 상기 조성물은 국소적으로 투여된다.
예를 들어, 약물-감수성 박테리아성 병원체를 약물 저항성 발달로부터 억제하는 방법의 한 특정 실시태양에서, 상기 박테리아성 병원체는 황색포도상 구균이며, 상기 약제는 베타-락탐 항생제이고, 상기 유효한 양의 MSM은 약 5-10%이며 상기 조성물은 국소적으로 투여된다.
본 발명에서 밝혀진 박테리아성 병원체를 민감화하는 또는 억제하는 방법이 본 발명에서 자세하게 기재된 특정 상황에서 유용하며, 예시들이 박테리아성 병원체가 약물 저항성이 되는 많은 상태 또는 약물 감수성 박테리아성 병원체가 약물 저항성이 되는 것의 억제에 대해 유용할 것으로 기대되는 것 또한 이해될 것이다.
III.MSM
MSM은 화학식 (CH3)2SO2의 유기황 화합물(organosulfur compound)이다. MSM은 구조적으로 디메틸 설폭사이드(DMSO)와 관련되나, 상기 두 물질의 행동(behavior)은 다르다. MSM이 더 적게 극성이고 더 적게 반응성인 반면 DMSO는 매우 극성 용매이며 물처럼 용해되는 성질을 가진 훌륭한 리간드이다. MSM은 영양 보충제 및 약제로서 잘 알려져있다(예를 들어, Jacob and Appleton, MSM; the definitive guide: A comprehensive review of the science and therapeutics of Methylsulfonylmethane, Topanga, CA: Freedom Press, 2003 참조). 또한, MSM은 퇴행성 관절염(osteoarthritis) (Kim et al., Osteoarthritis Cartilage, 14:286?94, 2006) 및 고초열(hay feve) (Barrager et al., J. Altern. Complement. Med., 8:167?74, 2002)의 치료를 위해 유용할 것으로 알려져있다. 당업자는 상기 용도에 대해 익숙할 것이다. MSM의 여러 품질이 상업적으로 가능하며(예를 들어, Bergstrom Nutrition, Corp., Vancouver, WA 에서 판매한 OptiMSM®); 당업자는 MSM의 출처에 익숙할 것이다. MSM은 매우 물에 잘녹는다. 상온(room temperature)에서, 20%의 MSM 수용성 용매가 쉽게 제조될 수 있다. 높은 MSM 농도의 수용성 용매는 상온보다 높아진 온도에서 가능하다.
IV.DMSO
디메틸 설폭사이드(DMSO)는 화학식 (CH3)2SO의 유기황 화합물이다. 상기 무색 액체는 극성 및 비극성 화합물을 둘 다 용해시키는 극성 비프로톤성 용매(aprotic solvent)이며 물처럼 유기 용매의 넓은 범위에서 혼합성()이다. 매우 손쉽게 피부를 투과하여 피부에 접촉하면 곧 피부 속으로 들어가서 작용하는 구별되는 특성을 가진다. DMSO는 영양 보조제 및 약제로서 잘 알려져있다. 당업계의 당업자는 상기 용도에 익숙할 것이다. DMSO의 여러 품질이 상업적으로 가능하며(예를 들어, Sigma-Aldrich, Corp., St. Louis, MO 상품 번호. 472301) 당업계의 당업자는 DMSO의 출처에 익숙할 것이다.
V.베타-락탐 항생제
베타-락탐 항생제는 그들의 분자 구조에 베타-락탐 중심을 포함하는 모든 항생제 약제로 이루어진 폭 넓은 계열의 항생제 약제이다. 항생제의 상기 계열은 가장 넓게 사용되는 항생제 그룹이다; 당업계의 당업자는 박테리아(bacterium) 억제 또는 치료의 용도를 위한 적절한 베타-락탐 항생제를 어떻게 선택하는지 이해할 것이다.
베타-락탐 항생제의 예는 페니실린 파생물, 세팔로스포린, 페넴, 모노박탐, 카르바페넴, 베타-락타마아제 억제제 및 그들의 조합을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 페니실린 파생물의 예는 아미노페니실린(aminopenicillins)(예를 들어, 아목시실린(amoxicillin), 암피실린(ampicillin) 및 에피실린(epicillin)); 카르복시페니실린(carboxypenicillins)(예를 들어, 카르베니실린(carbenicillin), 치키르실린(ticarcillin) 및 테모실린(temocillin)); 우레이도페니실린(ureidopenicillins)(예를 들어, 아졸로실린(azlocillin), 피페라실린(piperacillin) 및 메즈로실린(mezlocillin)); 메실리남(mecillinam), 술베니실린(sulbenicillin), 벤자틴 페니실린(benzathine penicillin), 페니실린 G(벤질페니실린)(penicillin G (benzylpenicillin)), 페니실린 V(페녹시메틸페니실린)(penicillin V (phenoxymethylpenicillin)), 페니실린 O(알릴메르캅토메틸페니실린)(penicillin O (allylmercaptomethylpenicillinic)), 프로카인 페니실린(procaine penicillin), 옥사실린(oxacillin), 메티실린(methicillin), 납실린(nafcillin), 클록사실린(cloxacillin), 다이클록사실린(dicloxacillin), 플루클록사실린(flucloxacillin), 피밤피실린(pivampicillin), 헤타실린(hetacillin), 베캄피실린(becampicillin), 메탐피실린(metampicillin), 타란피시린(talampicillin), 코-아목시클라브(아목시실린+클라블란 산)(co-amoxiclav (amoxacillin plus clavulanic acid)) 및 피페라실린(piperacillion)을 포함하지만 이로써 제한되지 않는다. 세팔로스포린의 예로써는 세팔레키신(cephalexin), 세팔로틴(cephalothin), 세파촐린(cefazolin), 세파클로르(cefaclor), 세프록심(cefuroxime), 세파만돌(cefamandole), 세포테탄(cefotetan), 세폭시틴(cefoxitin), 세포르아나이드(ceforanide), 세프트리악손(ceftriaxone), 세포탁심(cefotaxime), 세프포독심 프로세틸(cefpodoxime proxetil), 세프타지딤(ceftazidime), 세페파임(cefepime), 세포페라존(cefoperazone), 세프티족심(ceftizoxime), 세픽심(cefixime) 및 세프피롬(cefpirome)를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 페넴의 예는 파로페넴(faropenem)을 제한없이 포함한다. 모노박탐의 예는 아즈트레오남(aztreonam) 및 티제모남(tigemonam)을 제한없이 포함한다. 카르바페넴은 비아페넨도르피페넴(biapenenvdoripenem), 에르타페넴(ertapenem), -이미페넴(-imipenem), -메로페넴(-meropenem), 및 ?페니페넴(-panipenem)을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 베타-락타마아제 억제제의 예는 타조박탐(tazobactam) ([2S- (2알파(alpha),3베타(beta),5알파(alpha))]-3-메틸(Methyl)-7-옥소(oxo)-3-(1H-1,2,3-트리아졸(triazol)-1-일(yl)메틸(methyl))-4-티아(thia)-1-아자비사이클로(azabicyclo)[3.2.0]헵테인(heptane)-2-카르복실산(carboxylic acid) 4,4-디옥사이드염화염(dioxide sodium salt)), 설박탐(sulbactam)((2S,5R)- 3,3-디메틸(dimethyl)-7-옥소(oxo)-4-티아(thia)-1-아자비사이클로(azabicyclo)[3.2.0]헵테인(heptane)-2-카르복실산(carboxylic acid) 4,4-디옥사이드 소듐(dioxide sodium))), 및 클라블란산(clavulanic acid) ((2R,5R,Z)-3-(2-하이드로시에틸리덴(hydroxyethylidene))-7-옥소(oxo)-4-옥사(oxa)-1-아자(aza)-비사이클로(bicycle)[3.2.0]헵테인(heptane)-2-카르복시산(carboxylic acid))을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 상기 항생제는 상업적으로 가능하며 본 발명에서 발견된 항생제의 각각의 출처는 당업계의 당업자에게 익숙할 것이다. 상기 항생제는 상업적으로 가능하며 당업계의 당업자에게 본 발명에서 밝힌 항생제의 각각의 출처는 익숙할 것이다.
베타-락탐 항생제는 살균(bactericidal)이며, 박테리아의 세포 벽의 펩티도글리칸(peptidoglycan) 층의 합성을 억제하여 작용한다. 상기 항생제들은 페니실린-결합 단백질(penicillin-binding proteins, PBPs)과의 비가역적(irreversibly) 결합에 의해 작용한다; 상기 결합은 세포 벽 합성을 방해하고, 세포 분열을 방지한다.
모든 베타-락탐 항생제는 베타-락탐 고리를 그들의 구조에 가지고 있다. 상기 항생제들의 효과는 그들의 온전히 PBP에 도달하는 능력 및 PBP에 결합하는 그들의 능력에 달렸다. 따라서, 베타-락탐에 대한 박테리아의 저항성의 두 주요 방식이 있다.
첫번 째, 박테리아는 베타-락탐 고리(Beta-lactam ring)를 공격하는 효소인 베타-락타마아제 합성에 의해 때때로 베타-락탐 항생제에 저항성을 가지도록 발달한다. 만일 박테리아가 베타-락타마아제(Beta-lactamase) 효소를 생산한다면(또는 페니실리나아제(penicillinase) 효소), 상기 효소는 항생제의 베타-락탐 고리를 열어 파괴하여 항생제를 효과 없도록 만들 것이다. 상기 효소를 암호화하는 유전자는 본질적으로 박테리아의 염색체에 존재하거나 플라스미드 전달(플라스미드 매개 저항성)을 통해 요구될 것이며, 베타-락타마아제 유전자 발현은 베타-락탐에 노출됨으로써 유도될 것이다. 박테리아에 의한 베타-락타마아제의 생성은 모든 베타-락탐 항생제와 함께 모든 치료 옵션을 반드시 배재하는 것은 아니다. 예를 들어, 저항성의 이런 형태를 극복하기 위하여, 베타-락탐 항생제는 종종 클라블란산(clavulanic acid)과 같은 베타-락타마아제 저해제가 함께 제공된다. 그러나, 베타-락타마아제-생산 박테리아로 감염된 것으로 의심되는 모든 경우에, 적절한 베타-락탐 항생제의 선택이 치료에 앞서 조심스럽게 고려되어야 한다. 특히, 베타-락탐 항생제 치료의 적합한 선택은 유도 가능한 베타-락타마아제가 발현된 유기체에 대해 가장 중요하다. 베타-락타마아제 생성이 유도 가능하다면, 치료의 시작에서 가장 적합한 베타-락탐 항생제 치료로의 이용 실패는 베타-락타마아제 생성의 유도의 결과를 낳을 것이며, 다른 베타-락탐 항생제와 더 많은 효과를 만드는 것이 더욱 어려울 것이다.
두번 째, 박테리아는 베타-락탐이 변형되지 않은 PBP에 효과적으로 결합하지 못하게하는 변형된 PBP를 발현할 것이다. 그 결과, 베타-락탐은 세포 벽 생성 방해에 있어 적게 효과적이다. 저항성의 상기 모드(mode)의 주목할만한 예는 페니실린-저항성 폐렴연쇄상 구균(Streptococcus pneumoniae) 및 MRSA를 포함한다.
VI.MRSA
메티실린 저항성 황색포도상 구균(Staphylococcus aureus)(MRSA)은 하나 또는 그 이상의 베타-락탐 항생제에 저항성을 가지는 황색포도상 구균 박테리아이다. 베타-락탐 항생제에 대한 저항성의 정도는 MRSA 균주에 따라 다를 수 있다. 예를 들어, 특정 MRSA 균주는 베타-락탐 항생제에 대해 완전히 또는 일부 저항성을 나타낼 수 있다.
황색포도상 구균(Staphylococcus aureus) 박테리아의 상기 베타-락탐 항생제 저항성은 일반적으로 베타-락탐 항생제에 대해 낮은 친화도를 갖는 PBP2a 또는 PBP2′와 같은 변형된 PBP의 발현 때문이며 원래 PBP를 대체하여 기능할 수 있다. PBP2a는 mecA 유전자에 의해 암호화된다(Brown et al., J. Antimicrob. Chemother., 56: 1000-1018, 2005 참조). 민감한 분리된 균주에게서 또한 발견되는 추가적인 유전자는 황색포도상 구균에서 메티실린 저항성 발현에 영향을 줄 수 있으며, 저항성의 이질성(heterogeneity)의 결과를 낳는다(Brown et al., J. Antimicrob. Chemother., 56: 1000-1018, 2005 참조).
MRSA 감염은 하나 또는 그 이상의 베타-락탐 항생제에 저항성을 전체 또는 일부 가지는 황색포도상 구균(Staphylococcus aureus) 박테리아에 의해 야기된다. 황색포도상 구균(Staphylococcus aureus)은 가장 일반적으로 외비공(anterior nares 또는 the nostrils)에 서식하나, 기도(respiratory tract), 개방창(opened wounds), 정맥내 카테터(intravenous catheters), 및 요로(urinary tract)도 또한 감염에 대한 잠재적인 위치이다. 건강한 개인들은 몇 주 내지 여러 해의 기간 동안 자각증상없이(asymptomatically) MRSA를 가지고 있을 수 있다. 제대로 발휘되지 못하는 면역 시스템을 가진 환자들은 증후성 이차 감염(symptomatic secondary infection)의 상당히 큰 위험을 가진다.
MRSA는 국소 증상(topical symptoms)을 포함하는 증상 시작 24-48 시간 내에 상당히 진행될 것이다. 72시간 후, MRSA는 인간 조직을 장악할 수 있고 결국 치료에 저항성을 가지기 될 것이다. 원칙적으로, MRSA의 초기 존재는 여드름, 거미에게 물린 자국(spider bites), 또는 종기(boils)와 유사한 열 및 가끔 발진을 동반한 작은 붉은색 돌기(bumps)이다. 며칠 내에 상기 돌기는 더 커지고, 더 아파지며, 결국 깊게 개방되며(open into deep), 농포(pus-filled boils)가 된다.
병원(또는 의료) 관련 MRSA(HA-MRSA) 및 지역사회-관련 MRSA(CA-MRSA)를 포함한 MRSA의 많은 균주들이 존재하는 것으로 알려져 있다. CA-MRSA 감염의 약 75 퍼센트가 피부 및 연조직에 위치하였고 종종 효과적으로 치료될 수 있다. 그러나, 몇몇 CA-MRSA 균주는 증가된 독성을 보이며, 더 빨리 퍼지고 기존의 HA-MRSA보다 심각하게 더 아픔을 야기하고, 그것은 중요 기관(vital organs)에 영향을 주고 광범위한 감염(패혈증(sepsis)), 독소 충격 증후군(toxic shock syndrome) 및 괴사성("육식성의(flesh-eating)") 폐렴(necrotizing pneumonia)을 유도한다. 이것은 CA-MRSA 균주에 의해 운반되는 독소(toxins) 때문으로 생각된다. 왜 몇몇 건강한 사람들이 같은 균주로 감염된 다른 사람들은 심각한 감염 또는 죽음으로 도달하는 반면 치료할 수 있는 CA-MRSA 피부 감염이 발달되는 것인지 밝혀지지 않았다.
CA-MRSA의 가장 일반적인 징후(manifestations)는 뇌사성 근막염(necrotizing fasciitis) 또는 화농성근염(pyomyositis)(국소에서 가장 일반적으로 발견되는), 괴사성 폐렴(necrotizing pneumonia), 감염성 심내막염(infective endocarditis)(심장의 판막에 영향을 주는), 또는 뼈 또는 관절 감염과 같은 피부 감염이다. CA-MRSA는 종종 절개(incision) 및 배농(drainage)이 요구되는 농양 형성을 초래한다. MRSA가 공동체(community)로 퍼지기 전에, 농양은 온전한 피부의 침범(violation) 및 포도상 구균(staphylococci)이 정상 피부 서식으로의 도입이 요구되는 감염으로 추정되었기 때문에 농양은 전염되는 것으로 여겨지지 않았다. 그러나, 새롭게 발견된 CA-MRSA는 HA-MRSA로부터 전염될 수 있다(유사하나, 매우 중요한 차이와 함께). 추가적으로, CA-MRSA는 MRSA의 다른 형태보다 봉와직염(cellulitis)을 덜 초래할 것이다.
몇몇 실시태양에서, 본 발명에 기재된 조성물은 MRSA의 치료, 억제 및/또는 민감화에 유용하다. 몇몇 실시태양에서, 본 발명에 기재된 조성물은 개체내의 MRSA 치료, 억제 및/또는 민감화에 유용하다. MRSA 검출 방법 및 MRSA 감염된 개체의 선별을 본 발명에서 밝혔다.
VII.다른 약물 저항성(drug resistant) 박테리아성 병원체
약물 저항성 박테리아성 병원체는 하나 또는 그 이상의 항-미생물 제제에 저항성을가지는 박테리아성 병원체이다. 박테리아성 병원체는 하나의 항-미생물 제제에 민감하면 약물 저항성 및 약물 감수성 모두일 것이나, 또다른 것에는 저항성을 가질 것이다.
몇몇 실시태양에서, 본 발명에서 밝힌 조성물은 약물 저항성 박테리아성 병원체의 치료, 억제 또는 민감화를 위해 사용된다.
일부 실시태양에서, 본 발명에서 밝힌 조성물은 그 중에서도 하나 또는 그 이상의 약물 저항성 형태의 아시네토박터 바우마나이(Acinetobacter baumanii, Actinobacillus sp.)., 방사 선균류 속(Actinomyces sp.)(예를 들어 악티노미세스 이스라에라이(Actinomyces israelii) 및 악티노미세스 네스런다이(Actinomyces naeslundii)), 에로모나스 속(Aeromonas sp.)(예를 들어, 에로모난스 하이드로필라(Aeromonas hydrophila), 에로모나스 베로나이 비오바 소브리아(에로모나스 소프리아)(Aeromonas veronii biovar sobria (Aeromonas sobria)) 및 에로모나스 카비에(Aeromonas caviae)), 아나플라스마 페토사이도필럼(Anaplasma phagocytophilum), 알칼리제니스 자일로스옥시단(Alcaligenes xylosoxidans), 아시네토박터바우마나이(Acinetobacter baumanii), 악티노바실러스 악티노미세템코미탄(Actinobacillus actinomycetemcomitans), 바실루스 속(Bacillus sp.)(예를 들어 탄저균(Bacillus anthracis), 세레우스균(Bacillus cereus), 고초균(Bacillus subtilis), 투린지엔시스균(Bacillus thuringiensis), 및 바실루스 스티로서머필러스(Bacillus stearothermophilus), 가세균 속(Bacteroides sp.)(예를 들어, 박테로이드 프레질리스(Bacteroides fragilis)), 바르토넬라 속(Bartonella sp(예를 들어, 바르토넬라 바실리포르미스(Bartonella bacilliformis) 및 바르토넬라 핸셀레(Bartonella henselae)), 비피더스균 속(Bifidobacterium sp.), 보데텔라 속(Bordetella sp.)(예를 들어 백일해균(Bordetella pertussis), 파라백일해균(Bordetella parapertussis) 및 보데텔라 브론카이셉티카(Bordetella bronchiseptica)), 보렐리아 속(Borrelia sp.)(예를 들어, 회귀열보렐리아(Borrelia recurrentis) 및 보렐리아 버그도르페리(Borrelia burgdorferi)), 브루셀라균 속(Brucella sp.)(예를 들어, 소유산균(Brucella abortus), 개유산균(Brucella canis), 말타열균(Brucella melintensis) 및 돼지유산균(Brucella suis)), 버르크홀데리아 속(Burkholderia sp.)(예를 들어, 버르크홀데리아 수도말레이(Burkholderia pseudomallei) 및 버르크홀데이라 세파시아(Burkholderia cepacia)), 캄필로박터 속(Campylobacter sp.)(예를 들어, 공장캄필로박터(Campylobacter jejuni), 캄필로박터 콜리(Campylobacter coli), 캄필로박터 라리(Campylobacter lari) 및 캄필로박터 태아고균(Campylobacter fetus)), 캅노사이토파가 속(Capnocytophaga sp.), 카르디오박테리움 호미니스(Cardiobacterium hominis), 클라미디아 트라코마티스(Chlamydia trachomatis), 클라미도필라 수모니에(Chlamydophila pneumonia), 앵무병 클라미도필라 (Chlamydophila psittaci), 시트로박터속 콕시엘라 부르네티(Citrobacter sp. Coxiella burnetii), 코리네박테리아 속(Corynebacterium sp.)(예를 들어, 디프테리아균(Corynebacterium diphtheria), 코리네박테리움 제이키움(Corynebacterium jeikeum) 및 코리네박테리움(Corynebacterium)), 클로스트리듐 속(Clostridium sp.)(예를 들어, 웰치균(Clostridium perfringens), 클로스트리듐 디피실리균(Clostridium difficile), 클로스트리듐 보툴리늄(Clostridium botulinum) 및 파상풍균(Clostridium tetani)), 에이케넬라 코로덴스(Eikenella corrodens), 엔테로박터 속(Enterobacter sp.)(예를 들어, 엔테로박터 에어로게네스균(Enterobacter aerogenes), 엔테로박터 아글로메란스(Enterobacter agglomerans), 엔테로박터 클로아케(Enterobacter cloacae) 및 장독성원소 대장균(enterotoxigenic E. Coli), 장침입성 대장균(enteroinvasive E. Coli), 장병원성 대장균(enteropathogenic E. Coli), 장출혈성 대장균(enterohemorrhagic E. Coli), 장관집합성 대장균(enteroaggregative E. Coli) 및 요로질환유발성 대장균(uropathogenic E. coli)과 같은 기회 감염성 대장균을 포함하는 대장균(Escherichia coli)), 장구균 속(Enterococcus sp.)(예를 들어 엔데로코쿠스 페칼리스(Enterococcus faecalis) 및 엔테로코쿠스 페슘(Enterococcus faecium)), 에르리치아 속(Ehrlichia sp.)(예를 들어, 에르리치아 카핀시아(Ehrlichia chafeensia) 및 에프리치아 카니스(Ehrlichia canis)), 돼지단독균(Erysipelothrix rhusiopathiae), 유박테리움 속(Eubacterium sp.), 야토병균(Francisella tularensis), 누클레아튬균(Fusobacterium nucleatum), 가드네렐라 베지날리스(Gardnerella vaginalis), 게멜라 모르빌로럼(Gemella morbillorum), 헤모필루스 속(Haemophilus sp.)(예를 들어, 인플루엔자균(Haemophilus influenzae), 헤모필루스 듀크레이(Haemophilus ducreyi), 헤모필루스 에이집티우스(Haemophilus aegyptius), 헤모피루스 헤모인플루엔자(Haemophilus parainfluenzae), 헤모필루스 헤모리티쿠스(Haemophilus haemolyticus) 및 헤모필루스 파라헤모리티쿠스(Haemophilus parahaemolyticus)), 헬리코박터 속(Helicobacter sp.)(예를 들어, 헬리코박터 피포리(Helicobacter pylori), 헬리코박터 시네디(Helicobacter cinaedi) 및헬리코박터 페넬리에(Helicobacter fennelliae)), 킹겔라 킹게(Kingella kingii), 클레프시엘라 속(Klebsiella sp.)(예를 들어, 폐렴간균(Klebsiella pneumoniae), 클레브시엘라 그라눌로마티스(Klebsiella granulomatis) 및클레브시엘라 옥시토카(Klebsiella oxytoca)), 젖산균 속(Lactobacillus sp.), 리스테리아 모노사이토제니스(Listeria monocytogenes), 렙토스피라 인테로간스(Leptospira interrogans), 레지오필라 뉴모필라(Legionella pneumophila), 렙토스피라 인테로간스(Leptospira interrogans), 펩토사슬알균 속(Peptostreptococcus sp.), 모락셀라 카타르할리스(Moraxella catarrhalis), 모르가넬라 속(Morganella sp.), 모비룬쿠스 속(Mobiluncus sp.), 미구균 속(Micrococcus sp.), 마이코박테리움 속(Mycobacterium sp.)(예를 들어, 나병균(Mycobacterium leprae), 마이코박테리움 인트라셀룰레어(Mycobacterium intracellulare), 조형결핵균(Mycobacterium avium), 소결핵균(Mycobacterium bovis) 및 마이코박테리움 마리넘(Mycobacterium marinum)), 마이코플리즘 속(Mycoplasm sp.)(예를 들어, 폐렴 마이코플라즈마(Mycoplasma pneumoniae), 마이코플라즈마 호미니(Mycoplasma hominis) 및 마이코플라즈마 제니탈리움(Mycoplasma genitalium)), 노카르디아균(Nocardia sp.)(예를 들어, 노카르니아 에스테로이드(Nocardia asteroides), 노카르디아 시리아시지오지카(Nocardia cyriacigeorgica) 및 노카르디아 브라질리엔시스(Nocardia brasiliensis)), 나이세리균(Neisseria sp.)(예를 들어, 임균(Neisseria gonorrhoeae) 및 수막염균(Neisseria meningitidis)), 파스튜렐라 멀토시다(Pasteurella multocida), 플레시오모나스 시겔로이드(Plesiomonas shigelloides), 프리보텔라 속(Prevotella sp.), 포르피로모나스 속(Porphyromonas sp.), 프리보텔라 멜로니노게니카(Prevotella melaninogenica), 프로테우스 속(Proteus sp.)(예를 들어, 프로테우스 불가리스(Proteus vulgaris) 및 프로테우스 미라빌리스(Proteus mirabilis)), 프로비덴시아 속(Providencia sp.)(예를 들어, 프로비덴시아 알칼리파시엔(Providencia alcalifaciens), 프로비덴시아 레트게리(Providencia rettgeri) 및 프로비덴시아 스투아르테(Providencia stuartii)), 녹농균,( Pseudomonas aeruginosa), 프로피온산균 에크니(Propionibacterium acnes), 로도코쿠스 에쿠이(Rhodococcus equi), 리케차 속(Rickettsia sp.)(예를 들어, 로키산홍반반열리케치아(Rickettsia rickettsii), 리케차아카리균(Rickettsia akari) 및 발진티푸스 리케치아(Rickettsia prowazekii), 오리엔티아 쓰쓰가무시(전-쓰쓰가무시병리케치아(Orientia tsutsugamushi (formerly: Rickettsia tsutsugamushi)) 및 발진열리케치아(Rickettsia typhi)), 로도코쿠스 속(Rhodococcus sp.), 적변 세균(Serratia marcescens), 스테노스로포모나스 말토필리아(Stenotrophomonas maltophilia), 살모넬라균 속(Salmonella sp.)(예를 들어, 살모넬라 엔테리카(Salmonella enterica), 장티푸스균(Salmonella typhi), 파라티푸스균(Salmonella paratyphi), 장염균(Salmonella enteritidis), 살모넬라 식중독(salmonella cholerasuis) 및 쥐티푸스균(salmonella typhimurium), 세라티아 속(Serratia sp.)(예를 들어, 영균(Serratia marcesans) 및 세라티아 리뮈파시엔(Serratia liquifaciens)), 시겔라 속(Shigella sp.)(예를 들어, 지하적리균(Shigella dysenteriae), 시겔라 플렉스네리(Shigella flexneri), 보이드 설사균(Shigella boydii) 및 시겔라 소네이균(Shigella sonnei)), 포도상국균 속(Staphylococcus sp.)(예를 들어, 황색포도상구균(staphylococcus aureus), 표피포도상구균(Staphylococcus epidermidis), 스타필로코쿠스 헤모리티쿠스(Staphylococcus hemolyticus), 스타필로코쿠스 사프로피티쿠스(Staphylococcus saprophyticus)), 연쇄상구균 속(Streptococcus sp.)(예를 들어, 폐렴 연쇄상구균(Streptococcus pneumoniae(예로써, 클로람페니콜-내성 혈청형 4 폐렴 연쇄상구균(chloramphenicol-resistant serotype 4 Streptococcus pneumoniae), 스펙티노마이신-내성 혈청형 6B 폐렴 연쇄상구균(spectinomycin-resistant serotype 6B Streptococcus pneumoniae), 스트렙토마이신-내성 혈청형 9V 폐렴 연쇄상구균(streptomycin-resistant serotype 9V Streptococcus pneumoniae), 에리스로마이신-내성 혈청형 14 폐렴 연쇄상구균(erythromycin-resistant serotype 14 Streptococcus pneumoniae), 옵토힌-내성 혈청형 14 폐렴 연쇄상구균(optochin-resistant serotype 14 Streptococcus pneumoniae), 리팜피신-내성 혈청형 18C 폐렴 연쇄상구균(rifampicin-resistant serotype 18C Streptococcus pneumoniae), 테트라사이클린-내성 혈청형 19F 폐렴 연괘상구균(tetracycline-resistant serotype 19F Streptococcus pneumoniae), 페니실린-내성 혈청형 19F 폐렴 연쇄상구균(penicillin-resistant serotype 19F Streptococcus pneumoniae) 및 트리메소프림-내성 혈청형 23F 폐련 연쇄상구균(trimethoprim-resistant serotype 23F Streptococcus pneumoniae), 클로람페니콜-내성 혈청형 4 폐렴 연쇄상구균(chloramphenicol-resistant serotype 4 Streptococcus pneumoniae), 스트렙토마이신-내성 혈청형 9V 폐렴 연쇄상구균(streptomycin-resistant serotype 9V Streptococcus pneumoniae), 옵토힌-내성 혈청형 14 폐렴 연쇄상구균(optochin-resistant serotype 14 Streptococcus pneumoniae), 리팜피신-내성 혈청형 18C 폐렴 연쇄상구균(rifampicin-resistant serotype 18C Streptococcus pneumoniae), 페니실린-내성 혈청형 19F 폐렴 연쇄상구균(penicillin-resistant serotype 19F Streptococcus pneumoniae) 또는 트리메소프림-내성 혈청형 23F 폐련 연쇄상구균(trimethoprim-resistant serotype 23F Streptococcus pneumoniae), 스트렙토코쿠스 아갈락티에(Streptococcus agalactiae), 스트렙토코쿠스 뮤탄(Streptococcus mutans), 화농성 연쇄상구균(Streptococcus pyogenes), A군 용혈연쇄구균(Group A streptococci), 화농성연쇄상구균(Streptococcus pyogenes), B군 용혈연쇄구균(Group B streptococci), 스트렙토코쿠스 아갈락티에(Streptococcus agalactiae), C군 용혈연쇄구균(Group C streptococci), 스트렙토코쿠스 안지노수스(Streptococcus anginosus), 스트렙토코쿠스 이퀴스밀리스(Streptococcus equismilis), D군 용혈연쇄구균(Group D streptococci), 스트렙토코쿠스 보비스(Streptococcus bovis), F군 용혈연쇄구균(Group F streptococci) 및 스트렙토코쿠스 안지노수스(Streptococcus anginosus), G군 용혈연쇄구균( Group G streptococci), 스피릴룸 마이너스(Spirillum minus), 모닐리포르미스연쇄간균(Streptobacillus moniliformi), 트레포네마균 속(Treponema sp.)(예를 들어, 트레포네마 카라튬(Treponema carateum), 트레포네마 페테뉴(Treponema petenue), 매독트레포네마(Treponema pallidum) 및 트레포네마 엔데미쿰(Treponema endemicum), 트로페리마 위펠리(Tropheryma whippelii), 유레아플라스마 유레알티쿰(Ureaplasma urealyticum), 메요넬라 속(Veillonella sp.), 비브리오균 속(Vibrio sp.)(예를 들어, 아시아콜레라균(Vibrio cholerae), 장염비브리오균(Vibrio parahemolyticus), 비브리오 불니피쿠스균(Vibrio vulnificus), 장염비브리오균(Vibrio parahaemolyticus), 비브리오 불니피쿠스(Vibrio vulnificus), 비브리오 알지노리티쿠스(Vibrio alginolyticus), 비브리오 미미쿠스(Vibrio mimicus), 비브리오 홀리세(Vibrio hollisae), 비브리오 플루비알리스(Vibrio fluvialis), 비브리오 메치니코비(Vibrio metchnikovii), 비브리오 뎀셀라(Vibrio damsela) 및 비브리오 푸르니시(Vibrio furnisii)), 예르시니아 속(Yersinia sp.)(예를 들어, 여시니아 엔테로콜리티카(Yersinia enterocolitica) 및 페스트균 (Yersinia pestis)) 및 무엇보다 산토모나스 말토필리아(Xanthomonas maltophilia)를 포함하는 박테리아성 병원체의 다양한 약물 저항성 형태의 치료, 억제 또는 민감화에 효과적이나, 이에 한정되지 않는다.
VIII.약물 저항성 질병
여러 실시태양에서, 본 발명에서 밝힌 조성물은 약물 저항성 감염성 질병의 치료, 억제 또는 민감화에 이용된다.
몇몇 실시태양에서, 본 발명에서 밝힌 조성물은 그 중에서도 약물 저항성, 홍역(measles), 파상풍(tetanus), 말라리아(malaria), 상 및 하기도 감염(upper 및 lower respiratory infections), 간염(hepatitis), 장티푸스(typhoid fever), 반코마이신/클리코펩타이드-매개 황색포도상 구균 감염, 반코마이신-저항성 장구균(enterococci), MRSA, 및 폐렴 연쇄상 구균(streptococcus pneumonia)의 치료 또는 억제에 효과적이다.
다른 실시태양에서, 본 발명에서 밝힌 조성물은 그 중에서도 하나 또는 그 이상의 아시네토박터 감염증(acinetobacter infection), 방선균증(actinomycosis), 아데노바이러스 감염증(Adenovirus infection), 아프리카 수면병(African sleeping sickness (African trypanosomiasis)), 에이즈(AIDS), 아메바성 감염증(amebiasis), 아나플라즈마증(anaplasmosis), 탄저병(Anthrax), 용혈성 아카노박테리아균 감염증(Arcanobacterium haemolyticum infection), 아르헨티나 출혈성 열병(Argentine hemorrhagic fever), 회충증(ascariasis), 아스페르길루스증(aspergillosis), 아스트로바이러스 감염증(astrovirus infection), 바베시아증(babesiosis), 세레우스균 감염증(Bacillus cereus infection), 세균성폐렴(bacterial pneumonia), 세균성 질염(bacterial vaginosis (BV)), 박테로이드 감염증(Bacteroides infection), 발란티듐증(balantidiasis), 베이리사스케리스 감염증(Baylisascaris infection), BK 바이러스 감염증(BK virus infection), 흑색사모증(black piedra), 블라스토시스티스 호미니스 감염증(Blastocystis hominis infection), 분아균증(blastomycosis), 볼리비아 출혈성 열병(Bolivian hemorrhagic fever), 보렐리아 감염증(Borrelia infection), 보툴리눔 식중독(botulism), 브라질 출혈성 열병(Brazilian hemorrhagic fever), 브루셀라병(brucellosis), 버크홀데리아 감염증(Burkholderia infection), 노로바이러스 감염증(Calicivirus infection), 캄필로박테리아증(campylobacteriosis), 칸디다증(모닐리아증;질염)(candidiasis (moniliasis; thrush)), 고양이발톱병(cat-scratch disease), 봉와직염(cellulitis), 샤가스병(Chagas disease), 연성 하감(chancroid), 수두(chickenpox), 클라미디아(Chlamydia), 폐렴 클라미도필라 감염증(Chlamydophila pneumoniae infection), 콜레라(cholera), 색소모세포진균증(chromoblastomycosis), 감흡충증(clonorchiasis), 클로스트리듐 디피실리균 감염증(clostridium difficile infection), 콕시디오이데스 진균증(coccidioidomycosis), 콜로라도 진드기열(Colorado tick fever), 감기)common cold, 크로이펠트-야곱병(creutzfeldt-Jacob disease), 크림-콩고 출혈성 열병(Crimean-Congo hemorrhagic fever), 효모균증(cryptococcosis), 크립토스포리디오시스증(cryptosporidiosis), 유층피부이행증(cutaneous larva migrans (CLM)), 시클로스포리아시스(cyclosporiasis), 낭충증(cysticercosis), 사이토메갈로바이러스 감염증(cytomegalovirus infection), 뎅구열(dengue fever), 디엔타모에비아시스(dientamoebiasis), 디프테리아(diphtheria), 열두조충증(diphyllobothriasis), 드라쿤쿨루스증(dracunculiasis), 에볼라 출혈성 열병(ebola hemorrhagic fever), 단방포충증(echinococcosis), 엘리히증(ehrlichiosis), 요충증(요충 감염)(enterobiasis (Pinworm infection)), 장구균 감염증(Enterococcus infection), 장내 바이러스 감염증(enterovirus infection), 발진티푸스(epidemic typhus), 전염성홍반(erythema infectiosum), 돌발발진(exanthem subitum), 비대흡충증(fasciolopsiasis), 간질 감염증(fasciolosis), 치명적 가족성 불면증(fatal familial insomnia (FFI)), 필라리아병(filariasis), 식중독(food poisoning), 자유 생활 아메바 감염증(free-living amebic infection), 방추형균 감염증(Fusobacterium infection), 가스 괴저(클로스트리듐성근섬유괴사)(gas gangrene (Clostridial myonecrosis)), 지오트리쿰증(geotrichosis), 게르스트만-스트라우슬러-세인커 증후군(Gerstmann-Straussler-Scheinker syndrome (GSS)), 편모충증(giardiasis), 마비저(glanders), 악구충증(gnathostomiasis), 임질(gonorrhea), 서혜부 육아종(도노바니아증)(granuloma inguinale (Donovanosis)), 세균성 인후염(Group A streptococcal infection), B군 구균 감염증(Group B streptococcal infection), 인플루엔자균 감염증(Haemophilus influenzae infection), 수족구병(hand, foot and mouth disease (HFMD)), 한타바이러스(Hantavirus), 헬리코박터피로리 감염증(Helicobacter pylori infection), 용혈성-요독성증후군(hemolytic-uremic syndrome (HUS)), 유행성 출혈열(hemorrhagic fever with renal syndrome (HFRS)), A, B, C, D 또는 E형 간염(Hepatitis A, B, C, D, or E), 단순 포진(herpes simplex), 히스토플라즈마증(histoplasmosis), 갈고리충 감염증(hookworm infection), 인체 보카바이러스 감염증(human bocavirus infection), 인체 유잉 엘리히증(Hhman ewingii ehrlichiosis), 인체 그라눌로시틱 아나플라스모시스(human granulocytic anaplasmosis (HGA)), 인체 메타뉴모바이러스 감염증(human metapneumovirus infection), 인체 모노시틱 엘리히증(human monocytic ehrlichiosis), 인체 유두종 바이러스 감염증(human papillomavirus (HPV) infection), 인체 파라인플루엔자바이러스 감염증(human parainfluenza virus infection) 및 막양조충증(hymenolepiasis)을 포함하는 다양한 약물 저항성 감염성 질병의 약물 저항성 형태의 치료, 억제 또는 민감화에 효과적이나, 이에 한정되지 않는다.
다른 실시태양에서, 본 발명에서 밝힌 조성물은 그 중에서도 엡스타인바 바이러스 점염성 단핵구증(모노)(Epstein-Barr Virus Infectious Mononucleosis (Mono)), 인플루엔자(독감)(Influenza (flu)), 포자충증(Isosporiasis), 가와사키병(Kawasaki disease), 각막염(Keratitis), 킹겔라 킨게 감염증(Kingella kingae infection), 쿠루병(Kuru), 라사열(Lassa fever), 리지오넬로시스(Legionellosis), 리슈마니어증(Leishmaniasis), 나병(Leprosy), 렙토스피라병(Leptospirosis), 선회병(Listeriosis), 라임병(Lyme disease), 림프구성 필라리아병(Lymphatic filariasis), 림프구성 맥낙 뇌막염(Lymphocytic choriomeningitis), 말라리아(Malaria), 마버그 출혈성 열병(Marburg hemorrhagic fever (MHF)), 홍역(Measles), 멜리오이도시스(휘트모어 병)(Melioidosis (Whitmore's disease)), 수막염(Meningitis), 뇌척수막염균 병(Meningococcal disease), 메타고니미아시스(Metagonimiasis), 마이크로스포리디오시스 마이크로스포리디아(Microsporidiosis Microsporidia), 전염성 연속증(Molluscum contagiosum (MC)), 유행성 이하선염(Mumps), 발진열(Murine typhus), 마이코플라스마폐렴(Mycoplasma pneumonia), 균종(Mycetoma), 승저증(Myiasis), 신생아 홍안병(Neonatal conjunctivitis), 사상충증(Onchocerciasis (River blindness)), 파라콕시디오이드진균증(Paracoccidioidomycosis (South American blastomycosis)), 폐흡충증(Paragonimiasis), 파스투렐라병(Pasteurellosis), 두슬증(Pediculosis capitis (Head lice)), 페디큘로시스 코르포리스(이)(Pediculosis corporis (Body lice)), 사면발이기생증(치모슬, 사면발이)(Pediculosis pubis (Pubic lice, Crab lice)), 골반내 염증 질환(Pelvic inflammatory disease (PID)), 백일해(Pertussis (Whooping cough)), 전염병(Plague), 폐렴쌍구균 감염증(Pneumococcal infection), 뉴머시스티성 폐렴(Pneumocystis pneumonia (PCP)), 폐렴(Pneumonia), 급성 회백수염(Poliomyelitis), 폴리오바이러스(Poliovirus), 원발성 아메바성 수막뇌염(Primary amoebic meningoencephalitis (PAM)), 진행성다병소성백질뇌증(Progressive multifocal leukoencephalopathy), 앵무병(Psittacosis), Q열병(Q fever), 광견병(Rabies), 서교증(Rat-bite fever), RS 바이러스(Respiratory syncytial virus), 비육아종(Rhinosporidiosis), 리노바이러스 감염증(Rhinovirus infection), 리케차 감염증(Rickettsial infection), 리케치아두창(Rickettsialpox), 리프트 밸리열(Rift Valley fever (RVF)), 로키산 홍반열(Rocky mountain spotted fever (RMSF)), 로타바이러스 감염증(Rotavirus infection), 풍진(Rubella), 살로넬라증(Salmonellosis), 사스(SARS (Severe Acute Respiratory Syndrome)), 옴(Scabies), 주혈흡충병(Schistosomiasis), 폐혈증(Sepsis), 적리(Shigellosis), 대상포진(Shingles (Herpes zoster)), 천연두(Smallpox), 스포로트리코시스(Sporotrichosis), 포도상 구균식중독(Staphylococcal food poisoning), 포도상구균 감염증(Staphylococcal infection), 간충증(Strongyloidiasis), 매독(Syphilis), 촌충 기생(Taeniasis), 파상풍(개구장애)(Tetanus (Lockjaw)), 백선성모창(모창)(Tinea barbae (Barber's itch)), 두부백성(두피의 백선)(Tinea capitis (Ringworm of the Scalp)), 체부백선(신체의 백선)(Tinea corporis (Ringworm of the Body)), 완선(Tinea cruris (Jock itch)), 수부백선(손의 백선)(Tinea manuum (Ringworm of the Hand)), 흑색선(Tinea nigra), 족부백선(무좀)(Tinea pedis (Athlete’s foot)), 손톱백선(조진균)(Tinea unguium (Onychomycosis)), 전풍(어루러기)(Tinea versicolor (Pityriasis versicolor)), 톡소카라증(안구유충이행충)(Toxocariasis (Ocular Larva Migrans (OLM)), 톡소카라증(장기유충이행충)(Toxocariasis (Visceral Larva Migrans (VLM)), 톡소플라즈마증(Toxoplasmosis), 선모충증(Trichinellosis), 질 트리코모나스증(Trichomoniasis), 편충증(편충 감염증)(Trichuriasis (Whipworm infection)), 야토병(Tularemia), 유레이플라즈마 유레아리티컴 감염증(Ureaplasma urealyticum infection), 베네스웰라형 마뇌염(Venezuelan equine encephalitis), 베네스웰라 출혈성 열병(Venezuelan hemorrhagic fever), 바이러스성 폐렴(Viral pneumonia), 서부 나일강 열병(West Nile Fever), 백색사모(White piedra), 예르시니아증(Yersiniosis), 황열병(Yellow fever) 및 접합균증(Zygomycosis)을 포함하는 하나 또는 그 이상의 약물 저항성 형태의 감염성 질병의 치료, 억제 또는 민감화에 효과적이나, 이에 한정되지 않는다.
VIII.박테리아성 병원체의 치료, 억제 또는 민감화하는 방법
본 발명에서 밝힌 실시태양은 그 중에서도 약물 저항성 박테리아성 병원체를 억제하기 위한 방법, 약물 저항성 박테리아성 병원체를 박테리아성 병원체가 저항성을 가지는 약물에 대해 민감하게 하는 방법 및 약물-감수성 박테리아성 병원체를 약물 저항성 발달로부터 억제하는 방법에서의 조성물의 용도를 포함한다.
몇몇 실시태양은 약물 저항성 병원체 선별 및 병원체를 본 발명에 기재한 조성물, 예를 들어 MSM 및 항미생물 제제를 포함하는 조성물과 접촉하여 박테리아성 병원체를 억제하는 방법을 포함한다. 예를 들어, 선별된 약물 저항성 박테리아성 병원체를 10-16% MSM 및 항-미생물 제제의 MIC 수준을 포함하는 조성물과 접촉하는. 몇몇 실시태양에서 상기 박테리아성 병원체는 MRSA이고 항-미생물 제제는 예를 들어 메티실린 또는 옥세실린과 같은 베타-락탐 항생제이다. 몇몇 실시태양에서, 상기 박테리아성 병원체는 개체 내에, 또는 표면에 있다.
몇몇 실시태양은 약물 저항성 박테리아성 병원체를 선별하고 상기 병원체를 MSM을포함하는 조성물과 접촉하여, 약물 저항성 박테리아성 병원체를 상기 병원체가 저항성을 가지는약물에 민감화하는 방법을 포함한다. 예를 들어, 선별된 박테리아성 병원체를 10-16% MSM을 포함하는 조성물과 접촉시킨다. 몇몇 실시태양에서, 상기 선별된 박테리아성 병원체는 MRSA이다. 몇몇 실시태양에서, 상기 박테리아성 병원체는 개체 내에, 또는 표면에 존재한다.
몇몇 실시태양은 약물 감수성 박테리아성 병원체를 선별하고 상기 병원체를 본 발명에 기재된 바와 같이 예를 들어, MSM 및 항미생물 제제를 포함한 조성물과 접촉시키는 것에 의해 약물 감수성 박테리아성 병원체를 약물 저항성 발달로부터 억제하는 방법을 포함한다. 예를 들어, 선별된 약물 감수성 박테리아성 병원체를 10-16% MSM 및 항-미생물 제제의 MIC 수준과 접촉시킨다. 몇몇 실시태양에서, 상기 박테리아성 병원체는 황색포도상 구균(Staphylococcus aureus)이며 상기 항미생물 제제(antimicrobial agents)는 예를 들어 메티실린 또는 옥사실린과 같은 베타-락탐 항생제이다. 몇몇 실시태양에서, 상기 박테리아성 병원체는 개체 내에, 또는 표면에 존재한다. 몇몇 실시태양에서, MSM 및 항생제의 sub-MIC 농도를 포함하는 조성물은 MIC 수준에서의 항생제 단일 사용에 비해 동일하게 일부 약물 저항성 박테리아의 감소 또는 사멸에 또는 더욱 효과적이다. 다른 실시태양에서, MSM 및 항생제를 포함하는 조성물은 항생제 단일 사용에 비해 감염 자리로부터 박테리아의 감소 또는 제거에 더욱 효과적이다. 여러 실시태양에서, 본 발명어서 밝힌 조성물은 MRSA의 치료를 증가시킨다.
약물 감수성 박테리아성 병원체의 선별
약물 감수성 박테리아성 병원체를 선별하는 방법은 당업자에게 자명하다. 예를 들어, 몇몇 실시태양에서 본 발명에 기재된 바와 같이 약물 감수성 박테리아성 병원체가 검출되었고, 그 뒤 선별됨으로써 약물 감수성 박테리아성 병원체를 선별한다. 본 발명에 기재된 바와 같이 박테리아성 병원체를 검출하는 방법은 당업자에게 자명하다. 예를 들어, 상기와 같은 검출은 약물 감수성 박테리아성 병원체에 대한 항생제 MIC의 검출에 기초할 수 있다. MIC를 측정하는 방법은 당업자에게 자명하다(예를 들어, Andrews, J. of Antimicrobial Chemotherapy, 48 :5-16, 2001 참조). 예를 들어, MIC는 종종 CLSI, BSAC 또는 EUCAST 와 같은 참고가 될만한 많은 예의 가이드라인에 따라 아가 또는 배지 희석 방법에 의해 측정될 수 있다. 잘-수립된 Etest® strips (bioMerieux SA, France) 및the Oxoid MICEvaluator 방법을 포함하는 여러 상업적인 방법이 가능하다. 상기 Etest® 시스템은 아가 플레이트 접종 및 배양에 적용되었을 때 미생물 억제의 타원(ellipses)을 만드는 기정된 및 지속적인 다른 항미생물 제제의 농도 구배를 포함한다. 상기 MIC는 억제의 타원(ellipse)이 줄(strip)과 교차되는 곳에서 측정되며 줄 위에서 MIC 노출 눈금(reading scale)을 쉽게 읽어낸다(예를 들어, Andrews, J. of Antimicrobial Chemotherapy, 48:5-16, 2001 참조).
몇몇 실시태양에서, 본 발명에 기재된 바와 같이 황색포도상 구균(Staphylococcus aureus) 박테리아가 검출되며, 그 뒤 선별됨으로써 약물 감수성 박테리아성 병원체를 선별한다. 황색포도상 구균(Staphylococcus aureus)은 약 1 μm 지름의 둥근 세포이며 평면에서 보다 더욱 분열 능력을 나타내는 포도-유사 클러스터(clusters)를 형성하는 그람-양성 구균이다. 상기 박테리아는 호기성(aerobic) 및 혐기성(anaerobic) 호흡이 모두 가능하며 거의 모든 균주는 만니톨을 혐기적으로 발효시킨다. 블러드 아가에서 특징적인 금색 또는 흰색 콜로니를 형성한다. 카탈라아제(catalase), 응고효소(coagulase) 및 세포외 응집 인자(extracellular cell clumping factor)를 생산하며 몇몇 균주는 캡슐을 생산한다(Brown et al., J. Antimicrob. Chemother., 56: 1000-1018, 2005 참조).
황색포도상 구균의 검출 방법은 당업자에게 자명하다. 제한 없는 검출 방법은 튜브 응고효소(coagulase) 검사, 슬라이드 응고효소 검사, 라텍스 접합(agglutination) 검사, DNase 및 열-안정성 뉴클레아제(heat-stable nuclease) 시험, VITEK 2 system (bioMerieux), Staphychrom II (International Microbio, Signes, France), the Phoenix system (Becton Dickinson Microbiology Systems, Sparks, MD)와 같은 상업적인 생화학 시험 및 PCR- 및 DNA 프로브-기반한(DNA probe-based) 시험을 포함한 분자 시험을 포함한다. 검토를 위해, Brown et al., J. Antimicrob. Chemother., 56: 1000-1018, 2005를 참고하라. Etest®시스템을 이용하여, 약물 감수성 황색포도상 구균 박테리아성 병원체가 일반적으로 옥사실린 μg/㎖ 또는 그 보다 적은 양에 대한 MIC를 가질 것이다(예를 들어, Etest® 기술적 매뉴얼, AB bioMerieux, 2008 참조).
몇몇 실시태양은 약물 감수성 박테리아성 병원체 선별을 포함하며, 여기에서 상기 병원체는 표면에 있다. 상기 실시태양은 약물 감수성 박테리아성 병원체가 표면에 있는지 측정하고, 그런 표면을 선별함으로서 표면위의 약물 감수성 병원체를 선별하는 것을 포함한다. 또는, 몇몇 실시태양은 표면에서 약물 감수성 박테리아성 병원체를 선별하는 것을 포함한다. 당업계의 당업자는 그런 방법을 어떻게 수행하는지 이해될 것이다. 제한 없는 예는 표면 또는 표면에서 얻어진 샘플 및 상기 샘플에서 검출된 약물 감수성 박테리아성 병원체의 관찰을 포함한다. 약물 감수성 박테리아성 병원체의 검출 방법은 당업계의 당업자에게 자명하며 본 발명에 기재되었다. 표면의 관찰의 예는 예를 들어 약물 감수성 박테리아성 병원체가 표면에 접촉된 것으로 알려지면, 표면이 약물 감수성 박테리아성 병원체와 접촉하여 작용했을 때 인식하는 것을 포함한다.
몇몇 실시태양은 약물 감수성 박테리아성 병원체의 선별을 포함하며, 여기에서 상기 병원체는 개체 안에 있다. 상기 실시태양들은 약물 감수성 박테리아성 병원체가 개체 내에 있고, 그런 개체가 선별되어서 개체내에 있는 약물 감수성 병원체가 선별되는 측정을 포함한다. 또는, 몇몇 실시태양은 약물 감수성 박테리아성 병원체가 있는 개체의 선별을 포함한다. 당업계의 당업자는 그런 방법이 어떻게 수행하는지 이해할 것이다. 제한 없는 예시는 개체 또는 개체에서 얻어진 생물학적 샘플 및 상기 샘플에서 검출된 약물 감수성 박테리아성 병원체의 관찰을 포함한다. 약물 감수성 박테리아성 병원체의 검출 방법은 당업계의 당업자에게 자명하며 본 발명에 기재되었다. 개체의 관찰의 예는 개체 내의 박테리아성 병원체의 약물 치료의 성공을 관찰하는 것과 같이 약물 감수성 박테리아성 병원체를 그 안에 가진 개체에게서 나타나는 증상을 인식하는 것을 포함한다.
약물 저항성 박테리아성 병원체의 선별
약물 저항성 박테리아성 병원체를 선별하는 방법은 당업자에게 자명하다. 예를 들어, 몇몇 실시태양에서 본 발명에 기재된 바와 같이 약물 저항성 박테리아성 병원체가 검출되었고, 그 뒤 선별됨으로써 약물 저항성 박테리아성 병원체를 선별한다. 본 발명에 기재된 바와 같이 약물 저항성 박테리아성 병원체를 검출하는 방법은 당업자에게 자명하다. 예를 들어, 상기와 같은 검출은 박테리아성 병원체에 대한 항생제 MIC의 검출에 기초할 수 있다. MIC를 측정하는 방법은 당업자에게 자명하다.
몇몇 실시태양에서, 약물 저항성 박테리아성 병원체 선별은 MRSA을 선별하는 것을 포함한다. 약물 저항성 박테리아성 병원체를 선별하는 방법에서, 상기 병원체는 MRSA인 것은 당업자에게 자명하다. 예를 들어, 몇몇 실시태양에서 본 발명에 기재된 바와 같이 MRSA 박테리아가 검출되었고, 그 뒤에 선별됨으로써 MRSA를 선별한다. MRSA 검출 방법은 당업자에게 자명하다.
예를 들어, MRSA의 검출의 제한-없는 예시는 Etest® 시스템(bioMerieux SA, France)와 의문의 박테리아가 황색포도상 구균인 발견, 디스크 확산법(Disc diffusion), PBP2a 또는 PBP2′에 대한 항체와 함께 라텍스 응집(agglutination) 시험, 및 PCR- 및 DNA 프로브-기초한 포함한 분자 시험을 조합하는 것을 포함한다. 검토를 위해, Brown et al., J. Antimicrob. Chemother., 56: 1000-1018, 2005 및 Sturenburg, Ger. Med. Sci., 6: Doc 06, 2009를 참조하라. 추가적인 방법은 US 특허 7,449,289, 7,297,517, 5,496,706, 5,776,712 및 6,197,504 및 US 특허 출원공개번호 2003/0165953, 2006/0040871, 2007/0082340, 2008/0220428, 2008/0227087, 2009/0081663, 2009/0130115, 2009/0181395, 2009/0203013, 2009/0325147, 2010/0197649에 기재되었다. Etest® 시스템을 이용하여, MRSA 박테리아성 병원체는 일반적으로 옥사실린 2 μg/㎖ 또는 그 이상에 대해 MIC를 가질 것이다(예를 들어, Etest® 기술적 매뉴얼, AB bioMerieux, 2008 참조).
몇몇 실시태양은 약물 저항성 박테리아성 병원체 선별을 포함하며, 여기에서 상기 병원체는 표면에 있다. 상기 실시태양은 약물 저항성 박테리아성 병원체가 표면에 있는지 측정하고, 그런 표면을 선별함으로서 표면위의 약물 저항성 병원체를 선별하는 것을 포함한다. 또는, 몇몇 실시태양은 표면에서 약물 저항성 박테리아성 병원체를 선별하는 것을 포함한다. 당업계의 당업자는 그런 방법을 어떻게 수행하는지 이해될 것이다. 제한 없는 예는 표면 또는 표면에서 얻어진 샘플 및 상기 샘플에서 검출된 약물 저항성 박테리아성 병원체의 관찰을 포함한다. 약물 저항성 박테리아성 병원체의 검출 방법은 당업계의 당업자에게 자명하며 본 발명에 기재되었다. 표면의 관찰의 예는 예를 들어 약물 저항성 박테리아성 병원체가 표면에 접촉된 것으로 알려지면, 표면이 약물 저항성 박테리아성 병원체와 접촉하여 작용했을 때 인식하는 것을 포함한다.
몇몇 실시태양은 약물 저항성 박테리아성 병원체의 선별을 포함하며, 여기에서 상기 병원체는 개체 안에 있다. 상기 실시태양들은 약물 저항성 박테리아성 병원체가 개체 내에 있고, 그런 개체가 선별되어서 개체내에 있는 약물 저항성 병원체가 선별되는 측정을 포함한다. 또는, 몇몇 실시태양은 약물 저항성 박테리아성 병원체가 있는 개체의 선별을 포함한다. 당업계의 당업자는 그런 방법이 어떻게 수행하는지 이해할 것이다. 제한 없는 예시는 개체 또는 개체에서 얻어진 생물학적 샘플 및 상기 샘플에서 검출된 약물 저항성 박테리아성 병원체의 관찰을 포함한다. 약물 저항성 박테리아성 병원체의 검출 방법은 당업계의 당업자에게 자명하며 본 발명에 기재되었다. 개체의 관찰의 예는 개체 내의 박테리아성 병원체의 약물 치료의 실패를 관찰하는 것과 같이 약물 저항성 박테리아성 병원체를 그 안에 가진 개체에게서 나타나는 증상을 인식하는 것을 포함한다.
몇몇 실시태양은 개체 내의 약물 저항성 박테리아성 병원체의 선별을 포함하며, 여기에서 상기 약물 저항성 병원체는 MRSA이다. 상기 실시태양들은 MRSA가 개체내에 있으면, 측정하고, 그런 개체를 선별함으로써 개체내의 MRSA를 선별하는 것을 포함한다. 또는, 몇몇 실시태양은 MRSA가 있는 개체의 선별을 포함한다. 당업계의 당업자는 그런 방법을 어떻게 수행하는지 알 것이다. 제한 없는 예시는 개체 또는 개체로부터 얻어진 샘플 및 샘플 내에서 MRSA의 존재가 검출된 생물학적 샘플의 관찰을 포함한다.
개체의 관찰의 예시는 개체에서 MRSA 감염의 증상의 인식, 박테리아성 병원체 감염, 예를 들어 황색포도상 구균 감염을 가지는 개체의 MRSA 증상을 가지는 개체의 베타-락탐 항생제 처리의 실패가 관찰되는 것과 같이, 베타-락탐 항생제 처리의 실패 관찰을 포함한다. 개체가 MRSA가 있는 개체인지 측정하기 위해 개체를 관찰하는 다른 방법은 당업계의 당업자에게 자명하다.
생물학적 샘플을 개체로부터 얻는 방법 및 샘플을 MRSA의 존재에 대해 시험하는 방법은 당업계의 당업자에게 자명하다. 예를 들어, MRSA는 환자의 비공(nostrils)을 닦아내고(swabbing) 그 안의 발견된 박테리아를 분리하여 검출될 수 있다. 약물 저항성 박테리아성 병원체의 검출 방법은 당업계의 당업자에게 자명하고 본 발명에 기재되었다. 개체의 관찰의 예시는 박테리아성 병원체를 그 안에 가지는 개체에 의해 나타나는 개체 안의 상기 박테리아성 병원체의 약물 치료실패 관찰과 같은, 증상의 인식을 포함한다.
박테리아성 병원체의 접촉
박테리아성 병원체를 조성물과 함께 접촉하는 방법은 당업계의 당업자에게 자명하다. 그런 방법은 박테리아성 병원체의 타입 및 장소 및 사용된 조성물의 타입에 의존적일 것이다. 본 발명은 그 중에서도, 개체에 있는 박테리아성 병원체를 접촉하는 방법, 및 표면에 있는 박테리아성 병원체를 접촉하는 방법을 포함하는, 박테리아성 병원체를 접촉하는 방법을 기재한다. 당업계의 당업자는 사용되는 방법을 알 것이다.
몇몇 실시태양에서, 표면에 있는 박테리아성 병원체와 본 발명에 기재된 바와 같은조성물을 접촉하는 방법이 제공된다. 예를 들어, 본 발명에서 제공되는 조성물을 표면에 분무하여, 또는 본 발명에서 제공되는 조성물을 포함한 도포제로 표면을 도포하여. 당업계의 당업자는 본 발명에 기재된 바와 같이 조성물을 표면에 어떻게 사용하는지 이해할 것이다.
몇몇 실시태양에서, 개체에 있는 박테리아성 병원체를 본 발명에서 제공된 조성물과 접촉하는 방법이 제공된다. 상기 방법은 본 발명에 기재된 바와 같이 조성물의 개체로의 투여를 포함하며, 상기 화합물은 박테리아성 병원체와 접촉하게된다. 예를 들어, MSM과 같은, 화합물 또는 약제는 효과적인 경로를 통해 개체에 주어질 것이다. 투여 경로의 예시는 주사(injection)(피하(subcutaneous), 근육내(intramuscular), 피내(intradermal), 복강내(intraperitoneal), 및 정맥(intravenous)과 같은), 경구(oral), 설하(sublingual), 직장(rectal), 경피(transdermal)(국소와 같은), 비강내(intranasal), 질관(vaginal) 및 흡입(inhalation) 경로를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 개체 투여의 특정 타입은 국소 투여 또는 코 점막(nasal mucosa) 또는 흡입에 의한 폐 투여를 포함한다.
몇몇 실시태양에서, 국소 투여를 위해 만들어진 조성물은 개체의 피부 위에 또는 안에 위치한 박테리아성 병원체와 접촉하도록 이용될 것이다. 흡입 투여를 위해 만들어진 조성물은 그 중에서도, 개체의 기도(airway), 점막의 막(mucosal membranes) 또는 폐에 위치한 박테리아성 병원체와 접촉하도록 이용될 것이다.
몇몇 실시태양에서, MSM을 포함한, 또는 MSM 및 항미생물 제제를 포함한 조성물이 제형화되었고 개체의 위에 또는 안에 위치한 약물 저항성 박테리아성 병원체와 접촉하도록 이용된다. 당업계의 당업자는 국소적 투여가 적절한 때를 이해할 것이다. 예를 들어, 국소적 투여는 박테리아성 병원체가 개체의 피부 또는 개체의 몸의 표면에 위치하였을 때 적절하다.
다른 실시태양에서 MSM 또는 MSM 및 항미생물 제제를 포함한 조성물은 흡입제 기기를 통한 투여를 위해 제형화되며 개체 위에 또는 안에 위치한 약물 저항성 병원체와 접촉하도록 이용된다. 당업계의 당업자는 흡입제 기기를 통한 투여가 적절한 때를 이해할 것이다. 예를 들어, 흡입제 기기를 통한 투여는 박테리아성 병원체가 개체의 점막의 막 또는 개체의 폐 안에 위치할 때 적절하다.
박테리아성 병원체를 접촉하는 방법은 예를 들어 흡입제 기기와 같은, 전문적인 기기를 사용할 것이다. 흡입제 기기는 본 발명에 기재된 바와 같이 조성물을 개체의 점막의 막, 기도 및/또는 폐에 위치한 박테리아성 병원체로 전달하기 유용하다.
몇몇 실시태양에 따르면, 흡입제(Inhalants)는 박테리아성 병원체를 항생제에 민감하게 하기 위해 MSM 및/또는 다른 약제의 감염된 폐 조직으로의 직접적인 접근을 제공한다. 또는, 흡입제는 박테리아성 병원체를 억제 또는 치료하기 위하여 MSM 및 항미생물 제제의 감염된 폐 조직으로의 직접적인 접근을 제공한다. 몇몇 실시태양에 따르면, 흡입제는 MSRA 감염된 폐 조직의 치료에 유용하다.
한 실시태양에서, 흡입제가 MRSA 감염과 같은 여러 감염성 질병의 감염 병변(예를 들어, 폐)를 표적화하는 제공된다. 몇몇 실시태양에서, 흡입제 기기는 분무기(nebulizer)를 포함한다. 다른 실시태양에서, 흡입기(inhaler)가 사용되었다. 몇몇 실시태양에서, 압축 계량-용량 흡입기(pressurized metered-dose inhaler)가 사용되며, 상기 조성물은 에어로졸 액체(liquid aerosol) 형태로 흡입된다. 다른 실시태양에서, 건조 파우더 흡입기가 사용되었고, 조성물은 에어로졸 가루 형태로 흡입된다. 여러 실시태양에서, 흡입제 치료에 추가적으로 또는 대신에 경구, 정맥(intravenous), 근육내(intramuscular) 또는 피하(subcutaneous) 투여가 사용된다.
일부 실시태양에서, 상기 흡입제 기기는 환자의 폐의 세기관지(bronchioles)까지 도달이 가능한 사이즈의 흡입 제형의 입도(droplets) 또는 입자(particles) 전달한다. 몇몇 실시태양에서, 상기 흡입제 기기는 제형을 세기관지까지 전달하기 위해 환자의 호흡 리듬(breathing rhythm)과 동기화(synchronized)된다. 한 실시태양에 따른 흡입 치료는, 감염된 폐의(pulmonary) 표적 조직으로의 더욱 직접적인 흡입 제형 투여를 가능하게 한다. 직접적인 표적화는 감염성 미생물에 대해 제형의 효과가 유지 도는 향상되는 반면 제형에 포함된 항미생물 화합물의 양의 감소가 가능하기 때문에 몇몇 실시태양에서 유용하다. 다른 실시태양에서, 직접적인 투여는 미생물의 하나 또는 그 이상의 약물-저항성 균주에 대한 주어진 항미생물 요법의 효과를 증가시킨다. 다른 실시태양에 따른 직접적인 표적화는, 비-표적 조직과 접속을 최호화하여 부작용(side effects)을 최소화한다.
몇몇 실시태양에 따라 제공된 작은 입도(droplets) 또는 입자(particles) 사이즈는 기존의 호흡(ventilator) 치료에 비해 투여되는 MSM 부피를 감소시킨다.
몇몇 실시태양에서의 항-미생물 제제와 MSM을 흡입(예를 들어, 에어로졸 파우더 형태로)으로 투여하기 위한 능력은 저장-안정성(shelf-stability) 및 사전-포장된(pre-packaged) 용량의 증가를 허용하기 때문에 특히 유용하다. 이것은 특히 의료시설(healthcare facilities)에 규칙적인 접근이 없는 후진국(underdeveloped) 또는 개발 도상국(developing nations)의 개인에게 도움이 된다. 치료의 전체 코스가, 병원에 있어야 하거나 지속적인 방문이 필요없는, 의료 서비스 의사(practitioner)를 한번 방문한 영향을 받은 개체에게 제공될 수 있다. 여러 실시태양에서, 본 발명에서 밝힌 조성물은 자가-투여(self-administratio)에 적합하고(예를 들어, 흡입제 기기를 통해) 따라서 의료 서비스(healthcare)에 접근이 제한된 환자에 대해 특별히 적절하다.
일부 실시태양에서, MSM 및/또는 다른 약제를 포함하는 흡입된 조성물의 총 부피는 약 2-8 ㎖이다. 몇몇 실시태양에서, 상기 MSM 및/또는 다른 약제를 포함하는 흡입된 조성물의 총 부피는 약 2 ㎖ 내지 약 4 ㎖이다. 몇몇 실시태양에서, 상기 MSM 및/또는 다른 약제를 포함하는 흡입된 조성물의 총 부피는 약 6 ㎖ 내지 약8 ㎖이다. 또한, 다른 실시태양에서, 상기 MSM 및/또는 다른 약제를 포함하는 흡입된 조성물의 총 부피는 4, 5, 및 6 ㎖를 포함하는 약 3 ㎖ 내지 약7 ㎖이다. 따라서, 몇몇 실시태양에서, 흡입을 통해 투여된 MSM의 농도 범위는 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20%를 포함하는, 약 0.01% 내지 약 20%이다.
다양한 실시태양에서, 박테리아성 병원체 접촉은 병원체와 치료적으로 유효한 양의 항-미생물 제제의 접촉을 포함한다. 상기 접촉은 단일 용량, 또는 여러 용량의 투여를 예를 들어 매일 동안, 치료 코스 동안 수반할 수 있다.
몇몇 실시태양에서, 박테리아성 병원체를 본 발명에 기재된 바와 같이 조성물과 접촉하는 것은 병원체와 조성물을 약 1시간 내지 약 10일 동안, 또는 그 사이의 어떤 시간 동안 접촉하는 것을 포함한다. 몇몇 실시태양에서, 상기 박테리아성 병원체는 약 12, 24, 36, 48, 60, 72, 84, 96, 108, 또는 약 120시간 동안, 본 발명에 기재된 바와 같이 조성물과 접촉된다. 몇몇 실시태양에서, 상기 박테리아성 병원체는 본 발명에 기재된 바와 같은 조성물과 약 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 또는 약 24 시간 동안 접촉된다. 몇몇 실시태양에서, 상기 박테리아성 병원체는 본 발명에 기재된 바와 같은 조성물과 약 24, 36, 48, 60, 72, 84, 96, 108, 또는 약 120 시간 동안 접촉된다. 몇몇 실시태양에서, 더 높은 또는 더 낮은 접촉 시간이 이용될 수 있다.
X.조성물
본 발명에 기재된 약제들(예를 들어, MSM과 베타 락탐 항생제)은 의도된 용도에 따라 다양한 방법으로 조제될 수 있다. 개체(subject)에 사용될 조성물들과 산업 현장에서 사용될 조성물들을 포함한 다양한 조성물들이 여기에 공개되었다. 당업자라면 언제 특정한 조성물을 사용해야 하는지 알 것이다. 개체에 사용될 조성물의 경우 치료되거나 예방되어야 할 질병의 병변과 종류에 따라 다양한 방법으로 조제될 수 있다. 그러한 조성물들은 그러므로 병변 또는 병변주위에의 국지적 사용과 (심혈관계(cardiovascular system)를 통해 광범위 하게 투여되는) 체계적 사용 모두 제공되었다. 예를 들어, 표면에 사용될 것들 같은, 다른 종류의 조성물들 또한 본 발명에서 밝혔다.
본 발명은 그 범위내에 사람 또는 수의사용 약으로 조제되어 사용될 DMSO, MSM 없는 DMSO, MSM, DMSO 없는 MSM 및/또는 항생제 또는 그것들의 조합을 포함한다.
예를 들어, 제공된 조성물들은 무게 기준으로 0.01% 내지 20%의 MSM으로 구성되어 있는 조성물들을 포함한다. 다른 실시태양에서, 조성물들은 무게기준 0.01% 내지 5%의 MSM을 포함한다. 다른 실시태양들은 약 5% 내지 10%, 약 10-15%, 약 15-20% 의 MSM을 포함한다. 다른 조성물들은 약 5-20% MSM, 약 5-16% MSM, 약 5-10% MSM, 약 5-8% MSM, 약 9-16% MSM, 또는 약 10-15%의 MSM으로 구성되어 있다. 다른 실시태양들은 약 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20%의 MSM을 포함한다. 일부 실시태양들은 약 10-16%, 약 10-14% 또는 약 10-12%의 MSM을 포함한다. 일부 실시태양들에서, 더 높거나 더 낮은 비율이 사용될 수 있다. MSM으로 구성된 조성물들은 일반적으로 인간 개체를 치료하는데 사용되나, 영장류, 개, 고양이, 말과 소 같은 다른 척추동물의 비슷하거나 동일한 질병의 치료에도 사용될 수 있다.
본 발명에 기제된 조성물들은 예를들어 베타 락탐 항생제같은 항생제를 포함하는 조성물들을 포함한다. 예를 들어, 본 발명에 기재된 조성물들은 페니실린 파생물들, 세팔로스포린(cephalosporins), 페넴(penems), 모노박탐(monobactams), 카르바페넴(carbapenems), 베타-락타마아제 억제제(Beta-lactamase inhibitors)와 그것들의 조합을 포함한다. 페니실린 파생물의 예들은 아미노페니실린(aminopenicillins)(예를 들어, 아목시실린(amoxicillin), 암피실린(ampicillin) 및 에피실린(epicillin)); 카르복시페니실린(carboxypenicillins)(예를 들어, 카르베니실린(carbenicillin), 치키르실린(ticarcillin) 및 테모실린(temocillin)); 우레이도페니실린(ureidopenicillins)(예를 들어, 아졸로실린(azlocillin), 피페라실린(piperacillin) 및 메즈로실린(mezlocillin)); 메실리남(mecillinam), 술베니실린(sulbenicillin), 벤자틴 페니실린(benzathine penicillin), 페니실린 G(벤질페니실린)(penicillin G (benzylpenicillin)), 페니실린 V(페녹시메틸페니실린)(penicillin V (phenoxymethylpenicillin)), 페니실린 O(알릴메르캅토메틸페니실린)(penicillin O (allylmercaptomethylpenicillinic)), 프로카인 페니실린(procaine penicillin), 옥사실린(oxacillin), 메티실린(methicillin), 납실린(nafcillin), 클록사실린(cloxacillin), 다이클록사실린(dicloxacillin), 플루클록사실린(flucloxacillin), 피밤피실린(pivampicillin), 헤타실린(hetacillin), 베캄피실린(becampicillin), 메탐피실린(metampicillin), 타란피시린(talampicillin), 코-아목시클라브(아목시실린+클라블란 산)(co-amoxiclav (amoxacillin plus clavulanic acid)) 및 피페라실린(piperacillion)을 포함하지만 이로써 제한되지 않는다. 세팔로스포린의 예로써는 세팔레키신(cephalexin), 세팔로틴(cephalothin), 세파촐린(cefazolin), 세파클로르(cefaclor), 세프록심(cefuroxime), 세파만돌(cefamandole), 세포테탄(cefotetan), 세폭시틴(cefoxitin), 세포르아나이드(ceforanide), 세프트리악손(ceftriaxone), 세포탁심(cefotaxime), 세프포독심 프로세틸(cefpodoxime proxetil), 세프타지딤(ceftazidime), 세페파임(cefepime), 세포페라존(cefoperazone), 세프티족심(ceftizoxime), 세픽심(cefixime) 및 세프피롬(cefpirome)을 포함하지만 이로써 제한되지 않는다. 페넴(penems)의 예로써는, 제한없이, 파로페넴(faropanem)을 포함한다. 모노박탐(monobactams)의 예로써는, 제한없이, 아즈트레오남(aztreonam) 및 티게모남(tigemonam)을 포함한다. 카르바페남(carbapenems)의 예로써는 비아페넴 도리페넴(biapenenvdoripenem), 에르타페넴, -이미페넴, 메로페넴(ertapenem,-imipenem,-meropenem) 및 파니페넴(panipenem). 베타-락타아마제 억제제의 예는, 타조박탐 ([2S- (2알파,3베타,5알파)]-3-메틸-7-옥소-3-(1H-1,2,3-트리아졸-1-일메틸)-4-티아-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-2-카르복시산 4,4- 나트륨 소금) (tazobactam ([2S- (2alpha,3beta,5alpha)]-3-Methyl-7-oxo-3-(1H-1,2,3-triazol-1-ylmethyl)-4-thia-1-azabicyclo[3.2.0]heptane-2-carboxylic acid 4,4-dioxide sodium salt), 술박탐 (2S,5R)- 3,3-다이메틸-7-옥소-4-티아-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-2-카르복시산 4,4-다이옥사이드 나트륨)(sulbactam (2S,5R)- 3,3-dimethyl-7-oxo-4-thia-1-azabicyclo[3.2.0]heptane-2-carboxylic acid 4,4-dioxide sodium) 및 클라블란 산((2R,5R,Z)-3-(2-하이드록시에틸리덴)-7-옥소-4-옥사-1-아자-비시클로[3.2.0]헵탄-2-카르복시산) 클라블란산(clavulanic acid)(((2R,5R,Z)-3-(2-hydroxyethylidene)-7-oxo-4-oxa-1-aza-bicyclo[3.2.0]heptane-2-carboxylic acid)), 또는 다른 베타-락탐 항생제를 포함하나 이에 한정되지 않는다.
많은 항생제들은 특정한 박테리아를 줄이거나 죽이는데 효과적인 농도인, 확립된 최소 억제 농도(minimum inhibitory concentration, MIC)를 갖고 있다. 본 발명에 제시된 구성물중 일부는 본 발명에 기재된 특정한 박테리아성 병원체에 대해 베타락탐 항생제의 약 0.001 내지 100 MIC에 해당하는 양을 포함한다. 당업계의 당업자는 항생제의 특정 박테리아 병원체에 대한 MIC를 알 것이며, 또는 당업자는 특정 박테리아성 병원체에 대한 항생제의 MIC를 어떻게 측정하는지 알 것이다. 예를 들어, Etest® 시스템 이용과 같은 특정 박테리아성 병원체에 대한 특정 항생제의 MIC를 측정하는 방법이 본 발명에 기재된다. 당업자에게 특정 박테리아성 병원체에 대한 특정 항생제의 MIC를 계산하는 것은 자명하다.
또한, 본 발명에서 제공하는 조성물은 예를 들어, MSM 및 베타-락탐 항생제의 조합과 같은 MSM 및 항미생물 화합물의 조합을 포함한다. 상기와 같은 조합은 MSM 및/또는 항-미생물 제제의 양을 오직 MSM 또는 항미생물 제제를 포함하는 조성물로서 포함할 수 있다. 몇몇 실시태양에서, 본 발명에서 제공되는 조성물은 10-16% MSM 및 조성물이 접촉될 박테리아성 병원체에 대한 1 MIC와 동일한 양의 베타-락탐 항생제를 포함한다.
본 발명에서 제공된 MSM을 포함한 상기 조성물은 수성의(water-based) 조성물이다. 본 발명에서 제공된 MSM을 포함한 상기 조성물은 바람직하게는 무게 기준으로 약 0% 내지 약 5%의 염화나트륨(sodium chloride)을 포함한다. 몇몇 실시태양에서, 상기 조성물은 약 0.0001, 0.001, 0.01, 0.1, 0.5, 1, 2, 3, 4 또는 5%의 염화나트륨을 포함한다.
조성물의 제형(dosage form)은 선택된 투여 방식에 의해 영향을 받을 것이다. 예를 들어, 그 밖에 주사 가능한 유체(injectable fluids), 흡입의(inhalational), 국소적인(topical), 눈의(ophthalmic), 복막의(peritoneal), 및 경구의 제제(formulations)가 사용될 수 있다. 흡입 제제(preparations)는 에어로졸(aerosols), 미립자(particulates), 및 등등을 포함할 수 있다. 일반적으로, 흡입제를 위한 입자 사이즈의 목표는 상기 약제가 흡수를 위해 유효하게 폐의 폐포(alveolar) 부위에 도달하는 약 1?μm 또는 그 이하이다.
MSM, DMSO, 항미생물 제제 또는 활성 유효성분(active ingredient)으로서 본 발명에 기재된 약학적 화합물을 포함하는, 또는 유효성분으로서 추가적인 약제와 함께 또는 없이 그것의 둘 또는 그 이상의 혼합물을 포함하는 조성물은 선택된 특정 투여 방식에 따라, 적절한 고체 또는 액체 담체(carrier)와 함께 제형화될 수 있다. 경구 제형은 액체(예를 들어, 시럽, 용액, 또는 현탁액(suspensions)), 또는 고체(예를 들어, 가루, 알약, 정제, 또는 캡슐)일 수 있다. 고체 조성물을 위해, 종래의 비-독성 고체 담체가 약학적 품질의 만니톨, 락토오스, 전분, 또는 마그네슘 스테아레이트를 포함할 수 있다. 상기 제형(dosage form)의 제조의 실제 방법은 당업계의 당업자에게 알려졌거나, 명백할 것이다.
경구 투여를 위해, 상기 조성물은 예를 들어, 결합제(binding agent)(예를 들어, 미리젤라틴화된 옥수수 전분(pregelatinised maize starch), 폴리비닐피롤리돈(polyvinylpyrrolidone) 또는 하이드록시프로필메틸셀룰로오스(hydroxypropyl methylcellulose)); 충진제(fillers)(예를 들어, 락토오스(lactose), 마이크로크리스탈린 셀룰로오스(microcrystalline cellulose) 또는 인산수소칼슘(calcium hydrogen phosphate)); 윤활유(lubricants)(예를 들어, 마그네슘 스테아레이트(magnesium stearate), 탈크(talc) 또는 실리카(silica)); 붕괴제(disintegrants)(예를 들어, 감자 전분 또는 전분글리콘산나트륨(sodium starch glycolate)); 또는 습윤제(예를 들어, 라우릴유산소다(sodium lauryl sulphate))와 같은 약학적으로 허용 가능한 첨가제(excipients)와 종래 방법에 의해 제조된 정제 또는 캡슐의 형태로 될 수 있다. 정제는 당업계에 자명한 방법에 의해 코팅될 수 있다. 경구 투여를 위한 액상 제제는 예를 들어, 용액, 시럽 또는 현탁액의 형태가 될 수 있으며, 또는 사용되기 전에 물 또는 다른 적합한 비지클과 함께 구성되기 위해 건조물로서 존재할 수 있다. 액상 제제는 약학적으로 허용 가능한 추가적인 현탁제(예를 들어, 솔비톨 시럽, 셀룰로오스 파생물 또는 경화 식용 유지(hydrogenated edible fat)); 유화제(예를 들어, 레시틴 또는 아카시아); 비-수용성 비지클(예를 들어, 아몬드 오일, 지방성 에스터(oily esters), 에틸 알코올 또는 분획화된 식용 기름); 및 보존료(preservatives)(예를 들어, 메틸 또는 프로필-p-하이드록시벤조산(propyl-p-hydroxybenzoates) 또는 솔빅산(sorbic acid))와 같은 첨가물과 함께 종래의 방법에 의해 제조될 수 있다. 상기 보존료는 적합하게 완충염(buffer salts), 착향료(flavoring), 착색료(coloring), 및 감미제(sweetening agent)일 수 있다.
흡입에 의한 투여를 위해, 밝혀진 것에 따른 용도를 위한 상기 약제 및 조성물은 편리하게 예를 들어, 디클로로디플루오로메탄(dichlorodifluoromethane), 트리클로로플루오로메탄(trichlorofluoromethane), 디클로로테트라플루오로에탄(dichlorotetrafluoroethane), 카본 디옥사이드(carbon dioxide) 또는 다른 적합한 가스와 같은 적절한 압축가스(propellant)를 이용하여 가압 팩 또는 분무기로부터 에어로졸 분무 방식의 형태로 전달된다. 가압 에어로졸의 경우에, 상기 투여 단위는 전달을 위해 계량된 양으로 벨브 제공되어 측정될 수 있다. 흡입 또는 취분기(insufflator) 용도의 캡슐 및 카트리지는 화합물의 혼합 가루 및 락토오스 또는 전분과 같은 적합한 가루 베이스를 포함하여 만들어질 수 있다.
국소적 투여를 위하여, 상기 화합물은 국소(locally) 투여를 위해, 예를 들어, 액체 전달제와 혼합될 수 있다. 치료적으로 사용된 상기 약제(DMSO, MSM 및/또는 베타-락탐 항생제와 같은 다른 억제제 또는 본 발명에 기재된 치료적 화합물)은 물에 쉽게 용해되거나 현탁될 수 있으며, 그와 같이, 물이 부정적인 생물학적 조직 효과를 야기하지 않기 때문에 전달에 유용할 것이다. 이것은 전달 비지클로부터의 이차 독성 없이 국소적 또는 전신적으로 투여되기에 충분히 높은 용량을 허용한다. 당업계의 당업자는 MSM 및 베타-락탐 항생제를 위한 적절한 완충 조건을 이해할 것이다.
적어도 하나의 본 발명에 기재된 약제를 유효성분으로서 포함하는 조성물은 정상적으로 적합한 고체 또는 액체 담체와 함께, 선택된 특정 투여 방식에 따라 만들어질 것이다. 상기 약학적으로 허용가능한 유용한 본 발명의 담체 및 첨가물은 관습적이다. 예를 들어, 비경구(parenteral) 제형은 주로 물, 생리식염수, 다른 균형잡힌 소금물, 수용성 덱스트로스, 글리세롤 또는 등등과 같은 약학적 및 생리학적으로 허용가능한 유체 비지클인 주사가능한 유체(injectable fluid)를 포함한다. 첨가물은 예를 들어, 인간 혈청 알부민(human serum albumin) 또는 혈장 제제(plasma preparations)와 같은 단백질이 포함될 수 있다. 원한다면, 상기 투여될 조성물은 또한 적은 양의 습윤 또는 유화제, 보존료, 및 pH 완충제 및 예를 들어 아세트산나트륨(sodium acetate) 또는 솔비톨모노라우레이트(sorbitan monolaurate)와 같은 등등과 같은 비-독성 보조 물질(auxiliary substances)을 포함할 수 있다. 투여 형태의 실제 제조 방법은 당업계의 당업자에게 잘 알려졌거나 자명하다.
예를 들어, 비경구 투여를 위한 치료제는 일반적으로 원하는 정도의 순도, 주사 가능한 형태의 용량 단위(용액, 현탁액, 또는 에멀전)으로 예를 들어, 사용된 용량 및 농도의 비-톡성 첨가제 약학적으로 허용 가능한 담체와 함께 그들의 혼합에 의해 만들어질 수 있으며 제형의 다른 성분과 호환가능하다. 약학적으로 허용 가능한 담체는 비-독성 고체, 반고체 또는 액체 충전제(filler), 희석제, 캡슐화 재료 또는 어떤 타입의 보조 제형이다.
일반적으로, 제형은 각각의 약제와 액체 담체 또는 미세하게 분리된 고체 담체 또는 둘 다와의 균일한 및 직접적인 접촉에 의해 제조된다. 그 뒤에, 필료하다면, 상기 산물은 원하는 제형으로 성형된다. 선택적으로, 상기 담체는 비경구 담체이며, 몇몇 실시태양에서 수혜자(recipient)의 혈액과 등장성(isotonic)인 용액이다. 상기 담체 비지클의 예는 물, 염수, 링거 용액(Ringer’s solution), 및 덱스트로스 용액을 포함한다. 고정된 오일(fixed oils) 및 에틸 올레이트(ethyl oleate)과 같은 비-수용성 비지클 또한 리포좀(liposomes) 처럼 본 발명에서 유용하다.
적어도 하나의 약제를 포함한 상기 조성물은, 몇몇 실시태양에서, 개개인에 정확한 용량의 투여를 위해 적합한 용량 단위 형태로 만들어질 것이다. 투여된 활성 화합물의 양은 치료받는 개체, 고통(affliction)의 심각성, 및 투여 방식에 의존적일 것이며, 임상의 처방의 최선의 판단에 달려있다. 상기 한계 내에서, 투여될 상기 제형은 치료되는 개체에서 원하는 효과를 얻기 위해 효과적인 양의 활성 구성요소의 양을 포함할 것이다.
투여를 위한 제제는 치료제(예를 들어, DMSO, MSM, 베타-락탐 항생제 및 등등)의 방출을 조절하기 위해 적절하게 만들어질 것이다. 예를 들어, 상기 조성물은 생분해성의(biodegradable) 폴리머(polymer) 및/또는 폴리사카라이드(polysaccharide) 젤리화 및/또는 바이오 접착(bioadhesive) 폴리머, 양쪽친매성(amphiphilic) 폴리머, 입자의 계면 특성 변형 약제 및 약력학적으로 활성인 물질을 포함하는 입자의 형태일 것이다. 상기 조성물은 활성 물질의 조절된 방출을 허용하는 어떤 생체적합성(biocompatibility) 특성을 나타낸다. 예를 들어, U.S. 특허 번호 5,700,486 참조.
폴리머들은 방출 조절을 위해 이용될 수 있다. 약물 전달 조절의 용도를 위한 다양한 분해가능한(degradable) 및 분해불가능한 폴리머릭 기질(polymeric matrices)은 당업계에 자명하다(Langer, Accounts Chem. Res. 26:537, 1993). 예를 들어, 블록 공중합체(block copolymer), 폴락사머(polaxamer) 407이 낮은 온도에서 점성있는 이동성 액체로서 존재하나, 체온에서는 반고체 젤을 형성한다. 제형에 대해 효과적인 비지클이 되고 재조합 인터루킨-2 및 우레아제(urease)의 지속적인 전달을 보였다(Johnston et al., Pharm. Res. 9:425, 1992; Pec, J. Parent. Sci. Tech. 44(2):58, 1990). 또는, 수산화인회석(hydroxyapatite)은 단백질의 방출 조절을 위해 마이크로 담체로서 사용되었다(Ijntema et al., Int. J. Pharm. 112:215, 1994). 또한, 또 다른 측면에서, 리포좀은 리피드-캡슐화된 화합물(lipid-capsulated compounds)의 약물 표적화(drug targeting)처럼 방출 조절을 위해 사용되었다(Betageri et al., Liposome Drug Delivery Systems, Technomic Publishing Co., Inc., Lancaster, PA, 1993). 치료적 단백질의 전달을 조절하기 위한 많은 추가적인 시스템이 알려졌다(예를 들어, U.S. 특허 번호 5,055,303; U.S. 특허 번호 5,188,837; U.S. 특허 번호 4,235,871; U.S. 특허 번호 4,501,728; U.S. 특허 번호 4,837,028; U.S. 특허 번호 4,957,735; and U.S. 특허 번호 5,019,369; U.S. 특허 번호 5,055,303; U.S. 특허 번호 5,514,670; U.S. 특허 번호 5,413,797; U.S. 특허 번호 5,268,164; U.S. 특허 번호 5,004,697; U.S. 특허 번호 4,902,505; U.S. 특허 번호 5,506,206; U.S. 특허 번호 5,271,961; U.S. 특허 번호 5,254,342; 및 U.S. 특허 번호 5,534,496).
산업 현장에서의 이용을 위한 조성물은 처리될 표면의 위치 및 타입에 따라 다양한 방법으로 만들어질 수 있다. 상기 조성물은 약학적 조성물이 만들어지는 방법에 따라 만들어질 수 있으나, 추가적으로, 개체에 투여를 위해 비 정상적으로 받아들여질 수 있는 추가적인 방법으로 만들어질 수 있다. 산업 현장에서의 이용을 위한 조성물은 수성이며 0-5%의 염화나트륨을 포함한다. 몇몇 실시태양에서, 상기 조성물은 도포를 통해 표면에 적용되기 위해 만들어진다. 몇몇 실시태양에서 상기 조성물은 표면에 분무되기 위해 만들어진다. 당업계의 당업자는 어떻게 그런 제형을 만드는지 이해할 것이다.
X.다른 실시태양들
본 발명에 기재된 여러 실시태양에서, DMSO 및/또는 MSM을 포함한 제형이 제공된다. 약물-저항성 병원체성 미생물의 유행(prevalence) 증가에도 불구하고, 본 발명의 제형의 여러 실시태양은 뜻밖에 약물-저항성 박테리아 또는 다른 미생물의 치료에 효과적이다. 또한, 다른 약물-저항성 병원성 미생물들은 DMSO 단일, MSM 단일, 또는 DMSO 및 MSM의 조합, 치료제와 함께 처리하여 치료된다.
여러 실시태양에서, DMSO 및 MSM의 조합은 이용될 더 낮은 농도의 DMSO 및/또는 MSM을 허용한다. 다른 실시태양에서, 상기 DMSO 및/또는 MSM의 이용은 제형의 다른 성분(constituents)의 최소 효과적인 농도(minimum efficacious concentration)를 감소시킴으로써, 또한 상기 성분들로부터의 부작용을 감소시킨다. 예를 들어, 한 실시태양에서, DMSO, MSM 또는 DMSO 및 MSM의 첨가는 비교가능한 또는 향상된 치료 효과를 얻기 위한 항생제의 감소된 용량을 허용할 것이다.
여러 실시태양에서, 제형은 약물-저항성 병원체를 약물에 민감하게 하는 DMSO 및/또는 MSM를 포함한다. 한 실시태양에서, DMSO 및/또는 MSM을 일부분 또는 전부 포함하는 제형은 박테리아 균주의 약물-저항성 본성을 뒤바꾼다.
여러 실시태양에서, DMSO 및/또는 MSM 및 적어도 하나의 치료제를 포함하는 제형은 하나 또는 그 이상의 감염 형태의 효과적인 치료를 위해 필요한 DMSO, MSM, 및/또는 치료제의 더 낮은 농도를 초래한다. 한 실시태양에서, DMSO, MSM, 또는 그 둘의 조합을 포함하는 제형은 박테리아(약물-저항성이든 아니든)를 항생제에 민감하게 한다. 따라서, 그런 제형은: (i) 필요한 항생제의 용량을 감소시키고; (ii) 치료 시간을 감소시키며; (iii) 필요한 다른 항생제의 수를 감소시키고, 및/또는 (iv) 항생 효과를 만든다. 따라서, 간 손상, 신장 손상, 안구 결함(ocular defects), 고요산혈증(hyperuricemia), 혈소판 감소증(thrombocytopenia), 백혈구 감소증(leukopenia), 및 호중구 감소증(neutropenia)을 포함하는 항생제와 관련된 원하지 않은 부작용은 여러 실시태양에서 감소될 것이다. 한 실시태양에서, DMSO 및/또는 MSM 제형은 약물-저항성 병원체를 이소니아지드(isoniazid), 리팜피신(rifampicin), 피라진아마이드(pyrazinamide), 및/또는 에탐부톨(ethambutol)에 대해 민감하게 한다. 또 다른 실시태양에서, DMSO 및/또는 MSM은 이소니아지드(isoniazid), 리팜피신(rifampicin), 피라진아마이드(pyrazinamide), 및/또는 에탐부톨(ethambutol)의 비-약물-저항성 폐결핵(tuberculosis)에서의 효과를 향상시킨다.
많은 감염은 지역 염증을 유도한다(또는 감염 위치 주변 조직의 넓은 지역의 염증 조차). 몇몇 실시태양에서, DMSO 및/또는 MSM은 DMSO, MSM 또는 약제 혼자보다 더 큰 정도로 염증을 감소시키기 위해 치료제와 상승적으로 작용한다.
여러 실시태양에서, 치료제와 함께 단일 제형에서의 DMSO 및 MSM는 감염의 표적 위치에 치료제 전달의 효과적인 양을 얻기 위해 필요한 DMSO의 양을 감소시키기 위해 상승적으로 작용한다. 몇몇 실시태양에서, 치료제의 증가된 농도(또는 감소된 기간)에서의 감염 표적 지역으로의 도달을 허용하는 MSM은 DMSO의 침투 효과를 향상시킨다. 따라서, 상기의 몇몇 실시태양에서, MSM 및 DMSO 사이의 상승작용은 그 중에서도, 투여 후의 불쾌한 냄새(unpleasant odor), 메스꺼움(nausea), 설사(diarrhea), 및 피부/목 자극을 포함하는 DMSO 투여와 관련된 부작용을 감소시킨다.
다른 실시태양에서, 치료제와 단일 제형의 DMSO 및 MSM은 감염을 효과적으로 치료하기 위해 필요한 치료제의 양을 감소시키기 위해 상승적으로 작용한다. 예를 들어, 많은 항생제는 어떤 박테리아를 감소 또는 사멸시키는 효과적인 최소 억제 농도(MIC)가 수립되었다. 몇몇 실시태양에서, DMSO 및 MSM 및 항생제의 sub-MIC 농도를 포함하는 제형은 MIC 수준에서 어떤 박테리아를 감소 또는 죽기는 것에 항생제 단일 사용에 비해 같거나 더욱 효과적이다. 다른 실시태양에서, DMSO, MSM 및 항생제를 포함하는 제형은 감염 부위에서 박테리아의 감소 또는 제거에 있어서 항생제 단일 사용에 비해 더욱 효과적이다. 여러 실시태양에서, 본 발명에서 밝힌 제형은 다수의 약물-저항성 박테리아성 병원체의 치료를 증가시킨다.
한 실시태양에서, DMSO 및 에탐부톨을 포함한 제형은 박테리아를 에탐부톨 외의 약물에 민감하게 한다. 몇몇 실시태양에서, DMSO를 포함하는 제형은 에탐부톨, 이소니아지드, 리팜피신, 및 스트렙토마이신(streptomycin)의 sub-MIC 농도와 같은 약물에 대한 감수성 또는 민감도를 약 2-배 내지 약 100-배 향상시킨다. 이전 보고와 달리, 50% 보다 큰 DMSO의 농도는 몇몇 실시태양에서 특히 유리하다(본 발명에 참조로서 포함된 Jagannath et al. J. Antimicrobial Chemotherapy 35, 381-390, 1995). 몇몇 실시태양에서, DMSO 및/또는 MSM은 항생제(또는 다른 치료제)가 약물-저항성 박테리아성 병원체를 포함한 박테리아성 병원체로 감염된 폐 조직에 침투되도록 허용한다. 한 실시태양에서, DMSO 및/또는 MSM은: (i) 항생제가 감염된 조직의 더 깊은 곳까지 닿도록 하며; (ii) 감염된 조직의 직접적인 접촉을 허용하고; (iii) 감염된 조직을 항생제에 노출되는 시간을 늘어나게 하며; 및/또는 (iiv) 원하는 항생제 효과를 얻기 위한 시간을 감소시킨다. 한 실시태양에서, DMSO 및/또는 MSM은 흡입제 이용을 통해 하나 또는 그 이상의 원하는 효과를 얻으며, 여기에서 상기 흡입제는 추가적으로 하나 또는 그 이사의 항생제 또는 다른 치료제를 포함한다.
여러 실시태양에서, MSM의 조합된 이용은 DMSO와 관련된 정상적인 냄새를 감소 또는 제거시킨다. 이것은 의사들이 불괘한 냄새 때문에 DMSO를 높은 농도(또는 어떤 양으로)로 사용하는 것을 꺼리기 때문에 매우 여러 실시태양에서 이익이다.
몇몇 실시태양에서, DMSO 및/또는 MSM 제형은 선충류(nematodes), 촌충류(cestodes), 디스토마류(trematodes), 원충(protozoa), 또는 아메바(amoebae)와 같은 기생충에 의해 야기되는 감염 치료에 효과적인 항기생충(antiparasitic) 약제를 포함한다.
몇몇 실시태양에서, DMSO 및/또는 MSM 제형은 곰팡이에 의해 야기되는 백선(ringworm), 칸디다증(candidiasis), 및 효모균류(Cryptococcus)(예를 들어, 크립토코쿠스 수막염(cryptococcal meningitis))와 같은 곰팡이 감염 치료에 효과적인 항진균제(antifungal agent) 포함한다.
몇몇 실시태양에서, DMSO 및/또는 MSM 제형은 바이러스 감염에 치료에 효과적인 항바이러스제를 포함한다. 몇몇 실시태양에서, 항바이러스제의 특정 클래스가 특정 타입의 바이러스에 의해 야기되는 감염 치료를 위해 이용된다. 몇몇 실시태양에서, HIV, 헤르페스 바이러스(herpes viruses), B 또는 C형 간염 바이러스(hepatitis B 또는 C), 및 인플루엔자 바이러스(influenza viruses)를 표적화하는 약제가 사용된다.
여러 실시태양에서, DMSO 및/또는 MSM 제형은 예를 들어, 박테리아 생장, 대사, 증식, 활성 및/또는 기능 억제에 의한 박테리아 감염 치료에 효과적인 항생제를 포함한다. 몇몇 실시태양에서, 다른 실시태양에서 살균(bactericidal) 항생제가 사용된 반면, 정균(bacteriostatic) 항생제가 사용되었다. 또한, 다른 실시태양에서, 정균 및 살균 항생제가 DMSO 및/또는 MSM이 포함된 단일 제형에 포함되었다. 몇몇 실시태양에서, 하나 또는 그 이상의 클라스의 항생제가 및/또는 MSM이 포함된 제형에 포함되었다. 일부 실시태양에서, 제형은 하나 또는 그 이상의 아미노글리코시드, 안사미신(ansamycin), 카르바세펨(carbacephem), 카르바페넴(carbapenem), 세팔로스포린(1, 2, 3, 4 또는 5 세대)((cephalosporin (1st, 2nd, 3rd, 4th, or 5th generation)), 당펩티다(glycopeptides), 매크로라이드(macrolide), 모노박탐(monobactam), 페니실린(penicillin), 폴리펩타이드(polypeptide), 퀴놀론(quinolone), 술폰아미드(sulfonamide), 테트라시클린(tetracycline), 및 이들의 유사체를 포함한다.
몇몇 실시태양에서, 특정 질병이 특정 항생제의 DMSO 및/또는 MSM을 포함한 제형으로의 포함에 의해 표적화된다. 예를 들어, 아지트로마이신(azithromycin) 또는 에리스로마이신(erythromycin)과 같은, 메크로라이드(macrolides)는 호흡(respiratory) 또는 마이코플라즈마(mycoplasmal) 감염 치료를 위해 이용되는 제형으로 포함된다. 마찬가지로, 아목시실린 또는 옥사실린과 같은 페닐실린이 넓은 범위의 포도상구균 감염 치료에 사용된 제형으로 포함된다.
다른 실시태양에서, 특정 질병-유발 미생물은 DMSO 및/또는 MSM을 포함한 제형으로 포함된 특정 항생제에 의해 표적이 된다. 예를 들어, 네오마이신과 같은 아미노글리코사이드는 대장균(Escherichia coli) 감염 치료에 사용된 제형으로 포함된다. 여러 실시태양에서, 항생제는 주로 미생물 감염 방지하기 위하여 국소적으로 사용된다. 일부 실시태양에서, 항생제는 이소니아지드(isoniazid), 리팜피신(rifampicin), 피라진아마이드(pyrazinamide) 및 에탐부톨(ethambutol)을 포함한 것이 하나 또는 그 이상의 DMSO 및 MSM을 포함한 제형으로 포함되나, 이에 한정되지 않으며, 약물-저항성 박테리아성 병원체를 포함한 박테리아성 병원체의 치료에 사용된다.
본 발명의 여러 실시태양에서, DMSO, MSM 및 하나 또는 그 이상의 하기의 치료제를 포함한 제형이 제공된다: 이소니아지드(isoniazid), 리팜피신(rifampicin), 피라진아마이드(pyrazinamide) 및 에탐부톨(ethambutol). 다른 실시태양에서, DMSO 및 리팜피신(rifampicin), 이소니아지드(isoniazid), 피라진아마이드(pyrazinamide), 및 에탐부톨(ethambutol)중에 적어도 하나를 포함한 제형이 제공된다. 추가적인 실시태양에서, MSM 및 리팜피신(rifampicin), 이소니아지드(isoniazid), 피라진아마이드(pyrazinamide), 및 에탐부톨(ethambutol) 중에 적어도 하나를 포함한 제형이 제공된다. 여러 실시태양에서, DMSO 및/또는 MSM이 리팜피신(rifampicin), 이소니아지드(isoniazid), 피라진아마이드(pyrazinamide), 및 에탐부톨(ethambutol)과 조합되어 포함된 제형이 약물-저항성 박테리아성 병원체를 유발하는 병원체를 치료하기 위해 제공된다.
몇몇 실시태양에서, 리팜피신이 하루 당 약 400 mg 내지 약 800 mg 범위의 총 일일량(daily dose)으로 제공된다. 몇몇 실시태양에서, 다른 실시태양에서 하루 당 560, 570, 580, 590, 600, 610, 620, 630, 및 640 mg을 포함하는 하루 당 약 550 내지 약 650 mg 범위의 총 일일량으로 제공되는 반면, 리팜피신이 하루 당 약 500 mg 내지 약 700 mg 범위의 총 일일량(daily dose)으로 제공된다.
몇몇 실시태양에서, 이소니아지드(isoniazid)가 하루 당 약 100 mg 내지 약 500 mg 범위의 총 일일량(daily dose)으로 제공된다. 몇몇 실시태양에서, 다른 실시태양에서 하루 당 260, 270, 280, 290, 300, 310, 320, 330, 및 340 mg을 포함하는 하루 당 약 250 내지 약 350 mg 범위의 총 일일량으로 제공되는 반면, 이소니아지드(isoniazid)가 하루 당 약 200 mg 내지 약 400 mg 범위의 총 일일량(daily dose)으로 제공된다.
몇몇 실시태양에서, 피라진아마이드(pyrazinamide)가 하루 당 약 1.0 g 내지 약 4.0 g 범위의 총 일일량(daily dose)으로 제공된다. 몇몇 실시태양에서, 다른 실시태양에서 하루 당 2.1, 2.2, 2.3, 및 2.4 g을 포함하는 하루 당 약 2.0 내지 약 2.5 g 범위의 총 일일량으로 제공되는 반면, 피라진아마이드(pyrazinamide)가 하루 당 약 2.0 g 내지 약 3.0 g 범위의 총 일일량(daily dose)으로 제공된다.
몇몇 실시태양에서, 에탐부톨(ethambutol)이 하루 당 약 0.5 g 내지 약 2.5 g 범위의 총 일일량(daily dose)으로 제공된다. 몇몇 실시태양에서, 다른 실시태양에서 하루 당 1.1, 1.2, 1.3, 및 1.4 g을 포함하는 하루 당 약 1.0 내지 약 1.5 g 범위의 총 일일량으로 제공되는 반면, 에탐부톨(ethambutol)이 하루 당 약 1.0 내지 약 2.0 g 범위의 총 일일량(daily dose)으로 제공된다.
몇몇 실시태양에서, DMSO 및/또는 MSM은 감염성 질병으로부터 고통받는 환자의 전 처리(pretreat)에 사용된다. 몇몇 실시태양에서, 환자 전처리에 사용된 DMSO 및/또는 MSM의 용량 범위는 약 10% 내지 50% 부피 중량(weight to volume)이다. 몇몇 실시태양에서, DMSO 및/또는 MSM 전처리 용량 범위는 약 20% 내지 약 40%, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 및 34%를 포함하는 약 25% 내지 35%이다. 몇몇 실시태양에서, 약 50% 내지 약 100%의 DMSO 및/또는 MSM이 사용되었다. 여러 실시태양에서, DMSO 및/또는 MSM와 함께 전처리는 항생제의 박테리아 활성을 억제 및/또는 약물-저항성 균주를 전에 효과적이지 않았던 약물에 민감화하는 능력을 향상시켰다.
몇몇 실시태양에서, 제형은 항미생물이 투여에 앞서 DMSO 및/또는 MSM에 용해되어 제조되었다. 이것은 항미생물 및 DMSO(및 선택적으로 MSM)이 개체에 흡입제를 통해 투여될 수 있기 때문에 특히 일부 실시태양에 유용하다. 몇몇 실시태양에 따른 흡입제는 DMSO 및/또는 MSM의 감염된 폐로의 직접적인 접근을 제공한다.
여러 실시태양에서, MSM의 이용은 비교 가능한 효과를 얻기 위해 필요한 DMSO의 양을 감소 및/또는 DMSO의 효과를 적어도 10%, 25%, 50%, 100%, 2-배(fold), 3- 배, 5- 배, 10- 배, 50- 배, 또는 100- 배 향상시킨다.
다른 실시태양에서, 상기 MSM의 이용은 비교 가능한 효과를 얻기 위해 필요한 치료제의 양을 감소 및/또는 치료제의 효과를 10%, 25%, 50%, 100%, 2-배(fold), 3-배, 5-배, 10-배, 50-배, 또는 100-배 향상시킨다. 추가적인 실시태양에서, 상기 DMSO의 이용은 비교 가능한 효과를 얻기 위해 필요한 치료제의 양을 감소 및/또는 치료제의 효과를 10%, 25%, 50%, 100%, 2-배(fold), 3-배, 5-배, 10-배, 50-배, 또는 100-배 향상시킨다. 다른 실시태양에서, DMSO 및 MSM의 이용은 비교 가능한 효과를 얻기 위해 필요한 치료제의 양을 감소 및/또는 DMSO 또는 MSM 단일 및/또는 치료제 단일로 사용한 것에 비해 치료제의 효과를 10%, 25%, 50%, 100%, 2-배(fold), 3-배, 5-배, 10-배, 50-배, 또는 100-배 향상시킨다.
여러 실시태양에서, DMSO 단일 또는 MSM과 조합하여 포함한 전처리 제형이 DMSO 및/또는 MSM을 항생제와 같은 치료제와 함께 포함한 흡입 치료의 효과를 향상시키기 위해 개체에 정맥주사로(intravenously), 근육 내로(intramuscularly), 국소적으로 또는 경구로 투여된다. DMSO 단일 또는 MSM과 조합한 전처리는 호흡 치료 효과를 적어도 10%, 25%, 50%, 100%, 2-배, 3-배, 5-배, 10-배, 50-배, 또는 100-배 향상시킨다.
여러 실시태양에서, 약물-저항성 감염 질환을 가지는 개체는 DMSO 단일 또는 MSM과 조합으로, 및 하나 또는 그 이상의 항생제와 같은 치료제와 함께 구성되거나 필수적으로 구성되는 포함하는 제형으로 처리된다. 몇몇 실시태양에서, 상기 제형은 추가적으로 다른 치료제, 담체 또는 첨가제를 포함한다. 한 실시태양에서, 상기 제형은 아르기닌(arginine), 비타민 D, 항산화제(antioxidants), 메크로라이드(macrolides), 라인졸리드(linezolid), 티오아세타존(thioacetazone), 티오리다진(thioridazine), 또는 그들의 조합을 추가적으로 포함한다.
DMSO는 빠르게 많은 재료(특히 일회용품 의학 용품 제조에 사용된 플라스틱 및 폴리머)의 완전한 상태를 방해한다.
따라서, 본 발명의 여러 실시태양은 저장 및 DMSO의 투여를 가능하게 하기 위해 기기를 포함한다. 몇몇 실시태양에서, DMSO는 유리병에 저장되고 비-반응 튜빙(non-reactive tubing)을 통해 투여된다. 다른 실시태양에서, 흡입제 기기가 DMSO 저항을 위해 특별히 디자인되었다. 몇몇의 실시태양에서, 흡입제 기기의 일부는 일회용 또는 대체가능하다. 여러 실시태양에 따라서, DMSO를 포함한 제형이 제조되었고, 저장 및/또는 본 발명에 참조로서 전체가 포함된 2006, 9, 11에 등록된 일지정국 진입 단계의 국제 출원(National Phase entry of International Application) 번호 12/066,480인 U.S. 특허 출원번호: 12/066,480에 밝혀진 재료 및 기기를 이용하여 투여되었다.
여러 실시태양에서, MSM의 추가는 예상외로 DMSO 이용에 일반적으로 동반되는 불쾌한 냄새를 감소시켰다. 예를 들어, 일부 실시태양에서, DMSO 및 MSM 제형은 이용 후 감지할 수 있는 냄새를 생산하지 않는다. 50%를 임박 또는 초과하는 DMSO 농도를 가지는 몇몇 다른 실시태양에서, 제형에서의 MSM과의 조합은 DMSO-기반 냄새를 감소 또는 제거한다. 이러한 결과는 예상 외이며, DMSO 이용이 강력한 불쾌한 냄새에 정상적으로 관련을 제공한다.
몇몇 실시태양에서, DMSO 및/또는 MSM의 치료제(항생제와 같은)와의 이용은 작은 입도 또는 입자 사이즈의 제조 및/또는 투여를 허용함으로써, 입도 또는 입자가 환자의 폐 속으로 더욱 깊이 이동하기 때문에, 입 및 목 점막의 자극을 감소시킨다. 몇몇 실시태양에서, 입도 또는 입자의 이동 깊이는 환자의 폐 속에 용해된 항생제의 농도를 증가시킨다.
여러 실시태양에서, DMSO 및/또는 MSM 제형이 치료제(항생제와 같은)와 조합되며 감염성 질병 또는 다른 호흡기 질병의 치료를 위해 국소적으로-작용하는 약물을 호흡기계에 전달하기 위해 에어로졸로 제공된다. 한 실시태양에서, 하기도(lower airways)가 제형과 접촉(또는 독점적으로 접촉)되었다. 다른 실시태양에서, 상기 제형이 병의 전신적인 치료에 사용되었다. 전신적으로-작용하는 약물을 위해, 에어로졸 입자는 폐의 말초 부위의 폐포 표면에 도달하기 위한 크기로 되었다.
몇몇 실시태양에서, 치료제(항생제와 같은)를 포함하는 DMSO 및/또는 MSM 제형의 용도는 특히 빠른 작용의 시작을 제공하기 때문에 유용하다. 한 실시태양에서, 흡입제 전달은 폐의 큰 흡수 범위를 제공한다. 약물의 국소적인 작용을 위해, 작용의 시작이 몇몇 실시태양에서 즉각적이다. 몇몇 실시태양에 따르면, 전신적으로-작용하는 흡입 제형은, 혈류에 빠르게 도달한다. 흡입 치료는 몇몇 실시태양에서 약 1-90분 이내의 치료적 효과를 제공한다. 한 실시태양에서, DMSO 및/또는 MSM은 치료제의 생물학적 이용도(bioavailability)를 향상시킨다. 추가적인 실시태양에서, DMSO 및/또는 MSM은 치료제의의 분해를 감소시킨다. 또 다른 실시태양에서, 본 발명에 기재된 에어로졸 제형은 위장의(gastrointestinal) 부작용 또는 구강 또는 국부 치료를 발생시킬 수 있는 피부 자극을 감소시킨다.
여러 실시태양에서, 흡입제 입자는 작용하는 위치에 도달하지 않고 상기도에 충격을 주는 관성의 영향에 의한 그들 입자의 침전물을 최소화하기 위한 크기로 되었다. 여러 실시태양에서, 상기 입자는 입 및 목에서 최소화하여 넘어가서 원하지 않는 지역 또는 전신적인 부작용을 최소화하기 위한 크기로 되었다. 여러 실시태양에서, 상기 입자는 2, 5 또는 10 μm 보다 더 작다. 한 실시태양에서, 상기 입자는 약 3-5 μm이며 분기점(bifurcations) 및 기관지(bronchii) 및 세기관지(bronchioles)의 더 작은 기도로 이동되었다. 또 다른 실시태양에서, 상기 입제는 3 μm보다 더 작으며 폐포(alveoli) 내로의 공기 흐름(airflow)을 따른다. 여러 실시태양에서, DMSO 및/또는 MSM의 이용이 치료제의 입자 사이즈 최적화를 위해 허용된다. 게다가, 여러 실시태양에서, DMSO 및/또는 MSM의 이용은 약물-저항성 박테리아성 병원체를 항생제에 민감하게 한다.
여러 실시태양에서, DMSO 및/또는 MSM은 용액, 혼합물, 에멀전, 현탁액, 또는 다른 치료제와 적합한 조합을 형성한다. 한 실시태양에서, 균질화(homogenization), 초음파(sonication), 매우 깎인 유체 과정(high shear fluid processing), 또는 다른 기계적은 방법이 치료제의 DMSO 및/또는 MSM과의 조합을 위해 사용되었다. 다른 실시태양에서, 상기 치료제는 DMSO에 빠르게 용해된다. 강한 용매와는 달리, DMSO는 폐 조직에 유해하지 않다. 따라서, DMSO는 폐 조직의 손상 없이 치료제 및 상기 약제의 전달이 모두 가능하기 때문에 특히 몇몇 실시태양에서 유용하다. 몇몇 실시태양에서, DMSO는 치료제의 적어도 50%, 75%, 90%, 95%, 또는 99%를 녹이며, 한 실시태양에서, 치료제의 원치 않는 침전의 방지가 가능하다.
하기의 실시예는 어떤 특정한 특성 및/또는 실시태양을 나타내기 위해 제공된다. 이 실시예들은 본 발명에 기재된 특정 특성 또는 실시태양을 제한하기 위한 것이 아님이 이해되어야 할 것이다.
실시예
실시예 1. MSM 단독은 메티실린 내성 황색포도상구균(MRSA) 생존에 영향을 미치지 않는다.
실시예 1은 MSM 단독의 존재하에서 ATCC 균주 43300 황색포도상구균(메티실린 및 옥사실린 내성 균주)의 생존을 시험하는 인비트로(in vitro) 실험이다. ATCC 균주 43300 황색포도상 구균은 5 내지 16% MSM에서 24시간 및 48시간 동안 배양되었다. 추가적인 3.5%의 MSM을 매일 넣어주었다. 그 결과 MSM은 이 세균 균주의 생존에 영향을 미치지 않았다.
방법:
USP<51>항생 효율 프로토콜(Antimicrobial Effectiveness protocol)을 시험 양식의 견본으로 이용하였다. 시험된 최초 MSM 농도는 5, 8, 10, 12, 13, 14, 15 및 16% MSM 이었다. 모든 농도는 cfu/ml를 확인하기 위해 10-7 희석으로 평판되었다.
Flake OptiMSM®MSM(lot number 0604751), ATCC 균주 43300 황색포도상구균, 30ml의 보로실리케이트 글라스 배양 튜브(Borosilicate glass cultures tubes), 락토오스 브로스(lactose broth)(LB; 알파 바이오사이언스; Lot;L07-03), 변형된 레틴 브로스(modified letheen brothe)(MLS, 알파 바이오사이언스, lot 108-09), 레시틴 및 티윈 80(tween 80)이 들어있는 트립토 소이 아가(trypto soy agar)(TSA; 알파 바이오사이언스, lot; F08-42), 옥사실린 소디움 USP 그레이드 lot J(oxacillin sodium USP grade lot J) 및 메티실린 소디움(AS; cat no. 1410002, lot, KOH338)을 이용하였다.
Flake OptiMSM®MSM는 인증된 Mettler Toledo AG245 SN:1115210833에서 무게를 재었고 각 농도에서 분취(aliquot)되었다. MSM은 30ml 의 보로실리케이트 글라스 배양튜브에 놓았다. MSM은 다음과 같이 첨가되었다: 5% (0.5g), 8% (0.8g), 10% (1.0g), 12% (1.2g), 13% (1.3g), 14% (1.4g), 15% (1.5g), 및 16% (1.6g). 재료는 10ml의 부피에서 계산되었다.
모든 튜브에 2.0×105/ml(로그=5.23) CFU의 최종 수준으로 제공된 MRSA의 희석액을 접종하였다. 튜브는 25℃에서 배양되었고, 주기적으로 혼합되었다. 평판은 24시간 및 48시간에 수행되었다. 각 조건은 1ml의 성장 재료를 9ml의 MLB 희석 브로스(MLB diluent broth)에 희석시킴으로써 평판되었다. 이 혼합물은 10-7로 연속희석되었고, 각 희석 점에서 살균 페트리 디시에 1ml를 넣었다. 20ml의 TSA는 각 희석액에 첨가되었고, 굳어질 수 있도록 저어주었다. 모든 희석액은 24시간 동안 35℃ 배양기에 놓아두었다. 각 평판에 있는 세균 집락을 계수하였고, 집락 계수를 로그 형식은 변형하였다. 양성 및 음성 대조군을 확인하였다.
결과:
그 결과 시험된 모든 농도의 MSM은 24시간 또는 48시간점에서 ATCC 균주 43300 황색포도상구균의 생존에 어떠한 영향도 미치지 않았다.
실시예 2. MSM은 MRSA를 옥사실린에 민감하게 만든다.
실시예 2는 ATCC 균주 43300 황색포도상구균(옥사실린 및 메티실린에 내성을 갖는 MRSA)의 생존을 MSM, DMSO 및 옥사실린의 존재하에서 시험한 인 비트로(in vitro)실험이다. 결과는 도 1에 나타내었다. 6㎍/ml 옥사실린과 함께 9 내지 16%의 MSM의 존재하에서 관찰된 생존율은 1% DMSO 및 6㎍/ml 옥사실린의 존재하에서, 또는 1% DMSO, 9 내지 16% MSM 및 6㎍/ml 옥사실린의 존재하에서 관찰된 생존율 보다 낮았다. 가장 낮은 생존율은 6㎍/ml의 항생 조건과 함께 12 및 13% MSM에서 관찰되었다. 이러한 결과는 MSM 단독의 특정농도가 DMSO 또는 MSM 및 DMSO의 조합에서 보다 항생제에 대한 MRSA 균주의 감수성을 더 효과적으로 증가시킨다는 것을 나타낸다.
방법
USP<51>항생 효율 프로토콜(Antimicrobial Effectiveness protocol)을 실험 양식의 견본으로 이용하였다. 시험된 MSM 농도는 1 씩 증가하면서 5 내지 16% 에서 진행하였다. 모든 농도는 cfu/ml를 확인하기 위해 10-7 희석으로 평판되었다. 옥사실린의 최초농도는 6㎍/ml이었고, 이것은 옥사실린의 MIC(최소생육 저해농도)이다. 이 농도는 임상적용에 있어서, MRSA 내성을 결정하는 산업 표준이다.
Flake OptiMSM®MSM(lot number 0604751), ATCC 균주 43300 황색포도상구균, 30ml의 보로실리케이트 글라스 배양 튜브(Borosilicate glass cultures tubes), 락토오스 브로스(lactose broth)(LB; 알파 바이오사이언스; Lot;L07-03), 변형된 레틴 브로스(modified letheen brothe)(MLS, 알파 바이오사이언스, lot 108-09), 레시틴 및 티윈 80(tween 80)이 들어있는 트립토 소이 아가(trypto soy agar)(TSA; 알파 바이오사이언스, lot; F08-42), 옥사실린 소디움 USP 그레이드 lot J(oxacillin sodium USP grade lot J)를 이용하였다.
Flake OptiMSM®MSM는 인증된 Mettler Toledo AG245 SN:1115210833에서 무게를 재었고 각 농도에서 분취(aliquot)되었다. MSM은 30ml 의 보로실리케이트 글라스 배양튜브에 놓았다. MSM은 다음과 같이 첨가되었다: 5% (0.5g), 8% (0.8g), 10% (1.0g), 12% (1.2g), 13% (1.3g), 14% (1.4g), 15% (1.5g), 및 16% (1.6g). 무균 DMSO를 적당한 튜브에 첨가하였다. 6㎍/ml의 최종 농도를 제공하는 30mg/10ml로부터의 300마이크로리터(microliter)에서 무균 옥사실린을 적당한 튜브에 첨가하였다. 대조군 조건은 6㎍/ml 옥사실린의 존재 및 부재하에서, ATCC 균주 43300 황색포도상구균이 접종된 락토오스 브로스였고, 비 접종된 음성대조군은 어떠한 오염의 징후도 보이지 않았다.
적당한 튜브에 3.15x107/ml(로그 = 7.49)의 CFU의 최종 농도를 제공하는 ATCC 균주 43300 황색포도상구균의 희석액을 접종하였다. 튜브는 25℃에서 배양되었고, 주기적으로 혼합되었다. 평판은 48시간에 수행되었다. 1ml의 재료를 9ml의 MLB 희석 브로스(MLB diluent broth)에 희석함으로써 5 내지 16% 튜브를 평판하였다. 이들은 10-7로 연속희석되었고, 각 희석점에서 무균 페트리 디시에 1ml를 높았다. 그 이후에 20ml의 TSA를 각 희석액에 첨가하였고 굳을 수 있도록 저어주었다. 모든 희석액은 24시간 동안 35℃ 배양기에 놓았다. 평판은 계수되었고 집락 계수를 로그 형식으로 변환하였다. 양성 및 음성 대조군을 확인하였다.
결과:
결과는 표 1 및 도 1에 나타내었다.
48시간동안 5 내지 16% MSM 및 옥사실린에서의 ATCC 균주 43300 황색포도상 구균 (Staphylococcus aureus) 생존율
% MSM
(만약 첨가되었다면)
 (MA)
6 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin)
MSM
(Log cfu/㎖)		 (MDA)
6 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin)
MSM
1% DMSO
(Log cfu/㎖)		 (DA)
6 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin)
No MSM
1% DMSO
(Log cfu/㎖)
16 5.1 5.5 5.8
15 4.9 5.7 5.7
14 4.8 5.7 5.7
13 4.6 5.8 5.4
12 4.6 5.8 5.8
11 4.8 5.8 5.8
10 5.1 5.8 5.7
9 5.5 5.9 5.9
8 5.9 5.8 5.9
7 6.8 5.9 5.9
6 6.6 6.1 6.3
5 6.7 6.2 6.2
이러한 결과는 9 내지 16% MSM이 ATCC 균주 43300 황색포도상 구균의 옥사실린에 대한 감수성을 적어도 48시간 동안 증가시켰다는 것을 보여준다. 5 내지 8%MSM 농도 범위에서의 MA, DA 및 MDA 조건과 함께 cfu/ml의 최소 로그 감소가 관찰되었다. 'cfu/ml의 로그 감소'는 최초에 접종된 세균 배양액의 cfu/ml에 비해 세균 배양액의 cfu/ml이 감소했다는 것을 의미한다. 9% MSM 농도에서의 MA 조건은 cfu/ml의 2.0 로그 감소를 보였고 이와 비교하여, DA 및 MDA 조건에서는 cfu/ml에서의 1.6 로그 감소를 보였다. 10 내지 16% MSM 농도에서 MA 조건은 cfu/ml에서의 최대 2.9 로그 감소를 보였고 이와 비교하여, DA 및 MDA 조건에서는 cfu/ml에서의 각각 1.69 및 2.0 로그 감소를 보였다. 5 내지 7% MSM 농도에서는 MA 조건은 DA 및 MDA 조건에 비해 세균 성장이 증가하는 것으로 나타났다. DMSO는 ATCC 균주 43300 황색포도상구균 성장을 억제하는 9 내지 16% MSM/옥사실린의 활성에 대해 억제 효과를 가질 수 있다.
양성대조군은 106 희석 평판에서 TNTC를 보였다. 음성대조군은 어떠한 오염의 징후도 보이지 않았다. 전체적으로, 이러한 결과는 MSM가 MRSA를 항생제 처리에 민감하게 만든다는 것을 나타낸다.
실시예 3. 모의 치료과정에 있어서, MSM은 MRSAf를 옥사실린에 민감하게 만든다.
실시예 3은 ATCC 균주 43300 황색포도상구균(메티실린 및 옥사실린 내성 균주)의 생존율을 MSM 및 옥사실린의 존재하에서 시험한 인 비트로 실험이다. 결과는 도2에 나타내었다. ATCC 균주 43300 황색포도상구균은 25℃에서 24시간 동안 5 내지 16% MSM 및 6㎍/ml 옥사실린의 존재하에서 배양되었다. 24시간 후에, 추가적인 6㎍/ml의 옥사실린을 배양에 첨가하였고, 총 옥사실린은 12㎍/ml이 첨가되었다. 6㎍/ml은 MRSA에 대한 최소생육억제농도(MIC)이다. 그러므로 세균은 24시간 동안 옥사실린의 MIC 하에 있었고, 그 이후의 24시간 동안 2배의 MIC에 있었다. 이러한 실험양식은 개체가 치료과정에서 받게되는 항생제의 반복 투여를 모의한 것이다. 실시예 2와 비슷한 결과가 나타내었는데, 가장 낮은 생존율은 12 및 13% MSM 의 존재하에서 관찰되었다. 이러한 결과는 MSM이 항생체 처치에 대하여 MRSA를 민감하게 만들고 MSM 단독의 특정 농도가 모의 치료 과정에서 MRSA균주를 항생제 처치에 민감하게 만든다는 것을 나타낸다.
방법:
USP<51>항생 효율 프로토콜(Antimicrobial Effectiveness protocol)을 실험 양식의 견본으로 이용하였다. 시험된 MSM 농도는 1 씩 증가하면서 5 내지 16% 에서 진행하였다. 모든 농도는 cfu/ml를 확인하기 위해 10-7 희석으로 평판되었다. 옥사실린의 최초농도는 6㎍/ml이었고, 이것은 옥사실린의 MIC(최소생육 저해농도)이다. 이 농도는 임상적용에 있어서, MRSA 내성을 결정하는 산업 표준이다. 부가적인 6㎍/ml의 옥사실린을 매일 첨가하였다.
Flake OptiMSM®MSM(lot number 0604751), ATCC 균주 43300 황색포도상구균, 30ml의 보로실리케이트 글라스 배양 튜브(Borosilicate glass cultures tubes), 락토오스 브로스(lactose broth)(LB; 알파 바이오사이언스; Lot;L07-03), 변형된 레틴 브로스(modified letheen brothe)(MLS, 알파 바이오사이언스, lot 108-09), 레시틴 및 티윈 80(tween 80)이 들어있는 트립토 소이 아가(trypto soy agar)(TSA; 알파 바이오사이언스, lot; F08-42), 옥사실린 소디움 USP 그레이드 lot J(oxacillin sodium USP grade lot J) 및 메티실린 소디움(AS; cat no. 1410002, lot, KOH338)을 이용하였다.
Flake OptiMSM®MSM는 인증된 Mettler Toledo AG245 SN:1115210833에서 무게를 재었고 각 농도에서 분취(aliquot)되었다. MSM은 30ml 의 보로실리케이트 글라스 배양튜브에 놓았다. MSM은 다음과 같이 첨가되었다: 5% (0.5g), 8% (0.8g), 10% (1.0g), 12% (1.2g), 13% (1.3g), 14% (1.4g), 15% (1.5g), 및 16% (1.6g). 재료는 10ml의 부피에서 계산되었다. 6㎍/ml 의 최종 농도를 제공하는 30mg/10ml 로부터 300μl의 양으로 무균 옥사실린을 각 실험 조건에 첨가하였다.
모든 튜브에 9.14x105/ml(로그=5.96)의 CFU의 최종농도를 제공하는 MRSA 희석액을 접종하였다. 튜브는 25℃에서 배양되었고 주기적으로 혼합되었다. 평판은 48시간 및 7일에 수행되었다. 5 내지 16% MSM 튜브는 1ml의 재료를 9ml의 MBL 브로스에 희석함으로써 평판되었다. 이것들은 각 희석점에서 무균 페트리 디시에 1ml씩 10-7로 연속희석되었다. 20ml의 TSA는 각 희석액에 첨가되었고 굳을 수 있도록 저어주었다. 모든 배양액은 24시간 동안 35℃배양기에 놓아두었다. 평판을 계수하였고 집락계수는 로그 형식으로 변환하였다. 양성 및 음성대조군을 확인하였다.
결과는 표 2 및 도 2에 나타내었다.
표 2
5 내지 16% MSM 및 옥사실린의 존재하에서 48시간 및 168시간에서의 ATCC 균주 43300 황색포도상구균의 생존율
48 hours 7 days
% MSM 6 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin)
MSM
(Log cfu/㎖)		 6 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin)
MSM
(Log cfu/㎖)
16 5.3 1.0
15 4.1 6.9
14 4.0 7.0
13 3.8 7.2
12 3.8 7.1
10 4.6 7.2
8 4.0 7.6
5 7.0 7.9
이러한 결과는 MSM이 ATCC 43300 황색포도상구균을 적어도 48시간동안 옥사실린에 민감하게 만든다는 것을 나타낸다. 48시간 점에서, 12 내지 15% MSM은 다른 시험된 MSM 농도에서보다 옥사실린에 대한 ATCC 43300 황색포도상구균의 감수성을 증가시켰다. 7일 째에는, 시험된 가장 높은 MSM 농도(16%)를 제외하고는, MSM이 옥사실린에 대한 ATCC 43300 황색포도상구균의 감수성을 증가시키지 않았다. 이러한 결과는 가장 높은 MSM 농도(16%)를 제외하고는, ATCC 균주 43300 황색포도상구균의 최초 MSM-유도 옥사실린 ?감수성이 MSM 및 항생제에 장기간 노출된 후에 감소된 다는 것을 나타낸다. MRSA 미생물의 확인되지 않은 성장과 관련된 위험을 최소화하기 위해 대조군은 48시간 후에 중단되었다.
실시예 4. MSM은 복수 항생제(multiple antibiotics)에 대해 MRSA를 민감하게 만든다.
실시예 4는 ATCC 균주 43300 황색포도상구균(메티실린 및 옥사실린 내성 균주)의 생존율을 MSM 및 옥사실린의 존재하에서, 또는 MSM 및 메티실린의 존재하에서 시험한 인 비트로 실험이다. 시험된 성장 시기는 24시간, 48시간 및 5시간 이었다. 6㎍/ml의 옥사실린 또는 6㎍/ml의 메티실린과 함께 5 내지 16% MSM을 시험하였다. 이것은 세균의 이 균주에 대한 옥사실린 및 메티실린의 최소생육억제농도(MIC)이다. 부가적인 3.5% MSM 및 6㎍/ml의 옥사실린 또는 6㎍/ml의 메티실린을 각 일에 첨가하였다. 결과는 도 3A-3C에 나타내었다. 24시간에, 5% MSM 및 항생제는 가장 낮은 세균 생존율을 나타내었다. 48시간에, 5% MSM 및 메티실린 또는 8% MSM 및 옥사실린은 가장 낮은 세균 생존율을 나타내었다. 5일째에, 13 내지 16% MSM 및 항생제는 가장 낮은 세균 생존율을 나타내었다. 전체적으로, 이러한 결과는 MSM이 옥사실린 및 메티실린에 대한 MRSA의 감수성을 증가시킨다는 것을 나타낸다.
방법:
USP<51>항생 효율 프로토콜(Antimicrobial Effectiveness protocol)을 실험 양식의 견본으로 이용하였다. 시험된 최초 MSM 농도는 5, 8, 10, 12, 13, 14, 15 및 16% 였다. 모든 농도는 cfu/ml를 확인하기 위해 10-7 희석으로 평판되었다. 메티실린 및 옥사실린의 최초농도는 6㎍/ml이었고, 이것은 옥사실린의 MIC(최소생육 저해농도)이다. 이 농도는 임상적용에 있어서, MRSA 내성을 결정하는 산업 표준이다. 부가적인 3.5% MSM 및 6㎍/ml의 옥사실린 또는 6㎍/ml 의 메티실린을 매일 첨가하였다.
Flake OptiMSM®MSM(lot number 0604751), ATCC 균주 43300 황색포도상구균, 30ml의 보로실리케이트 글라스 배양 튜브(Borosilicate glass cultures tubes), 락토오스 브로스(lactose broth)(LB; 알파 바이오사이언스; Lot;L07-03), 변형된 레틴 브로스(modified letheen brothe)(MLS, 알파 바이오사이언스, lot 108-09), 레시틴 및 티윈 80(tween 80)이 들어있는 트립토 소이 아가(trypto soy agar)(TSA; 알파 바이오사이언스, lot; F08-42), 옥사실린 소디움 USP 그레이드 lot J(oxacillin sodium USP grade lot J) 및 메티실린 소디움(AS; cat no. 1410002, lot, KOH338)을 이용하였다.
Flake OptiMSM®MSM는 인증된 Mettler Toledo AG245 SN:1115210833에서 무게를 재었고 각 농도에서 분취(aliquot)되었다. MSM은 30ml 의 보로실리케이트 글라스 배양튜브에 놓았다. MSM은 다음과 같이 첨가되었다: 5% (0.5g), 8% (0.8g), 10% (1.0g), 12% (1.2g), 13% (1.3g), 14% (1.4g), 15% (1.5g), 및 16% (1.6g). 재료는 10ml의 부피에서 계산되었다. 6㎍/ml 의 최종 농도를 제공하는 30mg/10ml 로부터 300μl의 양으로 무균 옥사실린 또는 메티실린을 각 실험 조건에 첨가하였다. 부가적인 3.5% MSM 및 6㎍/ml의 옥사실린 또는 메티실린을 매일 첨가하였다.
모든 튜브에 2.13x106/ml(로그=6.3)의 CFU의 최종농도를 제공하는 MRSA 희석액을 접종하였다. 튜브는 25℃에서 배양되었고 주기적으로 혼합되었다. 평판은 24시간, 48시간 및 5일에 수행되었다. 각 조건은 1ml의 재료를 9ml의 MBL 브로스에 희석함으로써 평판되었다. 이것들은 각 희석점에서 무균 페트리 디시에 1ml씩 10-7로 연속희석되었다. 20ml의 TSA는 각 희석액에 첨가되었고 굳을 수 있도록 저어주었다. 모든 배양액은 24시간 동안 35℃배양기에 놓아두었다. 평판을 계수하였고 집락계수는 로그 형식으로 변환하였다. 양성 및 음성대조군을 확인하였다.
결과:
결과는 표 3에 나타내었다.
24, 48 및 120시간에서의 5 내지 16% MSM의 존재하에서 ATCC 균주 43300 황색포도상구균의 생존율
24 시간
% MSM 6 μg/㎖ 메티실린
MSM
(Log cfu/㎖)		 6 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin)
MSM
(Log cfu/㎖)
16 5.00 5.25
15 5.00 5.23
14 4.90 5.20
13 4.90 5.00
12 4.60 5.20
10 4.40 5.00
8 4.50 5.00
5 4.30 4.90
48 시간
% MSM 6 μg/㎖ 메티실린
MSM
(Log cfu/㎖)		 6 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin)
MSM
(Log cfu/㎖)
16 4.17 4.17
15 4.00 4.40
14 3.98 4.40
13 3.90 4.20
12 3.70 4.30
10 3.70 4.20
8 3.60 3.60
5 3.60 5.20
120 시간
% MSM 6 μg/㎖ 메티실린
MSM
(Log cfu/㎖)		 6 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin)
MSM
(Log cfu/㎖)
16 2.80 3.00
15 2.80 3.00
14 2.90 3.00
13 2.80 TNTC
12 4.20 TNTC
10 TNTC TNTC
8 TNTC TNTC
5 TNTC TNTC
이러한 결과는 MSM이 옥사실린 및 메티실린에 대한 MRSA의 감수성을 증가시킨다는 것을 나타낸다. 24시간에, 모든 시험된 MSM 농도에서, MSM 및 옥사실린 조합보다 MSM 및 메티실린 조합에서 더 적은 cfu/ml이 관찰되었다. MRSA 균주에 대한 메티실린 및 옥사실린의 MIC는 같기 때문에, 이러한 결과는 MSM이 옥사실린 감수성 보다 메티실린 감수성을 더 증가시킨다는 것을 나타낸다. 24시간에, 5% MSM 및 항생제는 가장 낮은 세균 생존을 나타냈다.
비슷한 결과가 48시간에 관찰되었다. 이 시점에, 메티실린에서 관찰된 cfu/ml에서의 평균 로그 감소는 2.7(최초 5% MSM)에서 2.1(최초 16% MSM)이고, 옥사실린은 2.7(최초 8% MSM)에서 2.1(최초 16% MSM)이다. 48시간에, 5% MSM 및 메티실린 도는 8% MSM 및 옥사실린은 가장 낮은 세균 생존율을 보였다. 48시간에, 8 % MSM 및 옥사실린 또는 메티실린 조건에서의 세균 생존율은 같았다.
120시간에, 최초 14 내지 16% MSM 및 옥사실린 조건 및 최초 13 내지 16% MSM 및 메티실린 조건은 cfu/ml에서의 로그 감소가 각각 ~3.3-3.5 였다. 최초 5 내지 10% MSM 및 메티실린 및 최초 13% MSM 및 옥사실린은 계수하기에는 너무 많은 콜로니 계수를 나타냈다(TNTC). 13 내지 16% MSM 및 항생제는 가장 낮은 세균 생존율을 보였다.
전체적으로, 이러한 결과는 MSM이 메티실린 및 옥사실린에 대한 MRSA 균주의 감수성을 증가시킨다는 것을 나타낸다. 또한 이러한 결과는 메티실린 및 MSM의 조합이 MSM 및 옥사실린의 조합보다 더 효과적으로 MRSA 균주의 감수성을 증가시킨다는 것을 나타낸다. 이러한 결과에 대한 본 발명자들의 가설적 설명은 MSM 분자가 어떠한 방법으로 항생제 내성을 극복할 수 있으며, 관통, 또는 세포내로의 항생제 전달 용이성에 의한 것일 수 있다. 또다른 가설적 설명은 메티실린이 MSM과 결합하여, 옥사실린에 비해 많은 수의 MSM 자리 때문에, MRSA 세포내로 전달이 되는 것일 수 있다. 본 발명자들은 24시간 및 48시간점을 관찰하였는데, 항생제와 함께 MSM의 낮은 농도는 5일째에 비해, 더 높은 세균 생존율에 대한 효과를 가진다는 것을 관찰하였다. 이것에 대한 본 발명자들의 가설적 및 제한 없는 설명은 시험 튜브의 MSM의 농도가 시간이 지남에 따라 감소하고, 세균에 의한 작용에 의한 것일 수 있다.
실시예 5. MSM 은 복수 항생제에 대해 MRSA를 민감하게 만든다.
실시예 5는 MSM 및 옥사실린 또는 MSM 및 메티실린의 존재하에서, ATCC 균주 43300 황색포도상구균(옥사실린 및 메티실린에 내성을 가지는 MRSA 균주)의 생존율을 시험한 예비적인 인 비트로 실험이다. 두개의 항생제의 서로 다른 농도 3가지에서 시험하였다: 12, 30 및 60㎍/ml이고, 이것은 각 항생제에 대한 MRSA의 2x, 5x 및 10x MIC에 대응하는 것이다. ATCC 균주 43300 황색포도상구균은 5 내지 16% MSM 및 표시된 양의 항생제에서 25℃에서 24, 48 및 96시간 동안 배양되었다.
방법:
USP<51>항생 효율 프로토콜(Antimicrobial Effectiveness protocol)을 실험 양식의 견본으로 이용하였다. 시험된 최초 MSM 농도는 1%씩 증가하면서 5 내지 16%였다. 모든 농도는 cfu/ml를 확인하기 위해 10-7 희석으로 평판되었다. 옥사실린 및 메티실린의 최초농도는 12, 30, 또는 60㎍/ml이었고, 이것은 옥사실린의 2x, 5x 및 10x MIC(최소생육 저해농도)이다. 이 농도는 임상적용에 있어서, MRSA 내성을 결정하는 산업 표준이다.
Flake OptiMSM®MSM(lot number 0604751), ATCC 균주 43300 황색포도상구균, 30ml의 보로실리케이트 글라스 배양 튜브(Borosilicate glass cultures tubes), 락토오스 브로스(lactose broth)(LB; 알파 바이오사이언스; Lot;L07-03), 변형된 레틴 브로스(modified letheen brothe)(MLS, 알파 바이오사이언스, lot 108-09), 레시틴 및 티윈 80(tween 80)이 들어있는 트립토 소이 아가(trypto soy agar)(TSA; 알파 바이오사이언스, lot; F08-42), 옥사실린 소디움 USP 그레이드 lot J(oxacillin sodium USP grade lot J) 및 메티실린 소디움(AS; cat no. 1410002, lot, KOH338)을 이용하였다.
ATCC 균주 43300 황색포도상구균은 분리를 위해 벗겨졌고, 25 클론을 뽑아내고 하나의 맥파란드 표준(McFarland standard)으로 희석되었다. 그 후에 예측된 값은 성장 배지 및 12, 30 또는 60㎍/ml 메티실린 또는 옥사실린을 포함하는 튜브에 약 10-7cfu/tube로 접종하기 위해 예측된 값은 고려되었다. 항생제의 모든 농도에서 24시간에 탁한 성장을 보인 클론을 나머지 실험을 위해 선별하였다.
Flake OptiMSM®MSM는 인증된 Mettler Toledo AG245 SN:1115210833에서 무게를 재었고 각 농도에서 분취(aliquot)되었다. MSM은 30ml 의 보로실리케이트 글라스 배양튜브에 놓았다. MSM은 다음과 같이 첨가되었다: 5% (0.5g), 8% (0.8g), 10% (1.0g), 12% (1.2g), 13% (1.3g), 14% (1.4g), 15% (1.5g), 및 16% (1.6g). 재료는 10ml의 부피에서 계산되었다. 12, 30 또는 60㎍/ml의 최종농도로 무균의 옥사실린 또는 메티실린을 각 실험조건에 첨가하였다. 항생제가 없고 5 내지 16% MSM 의 대조군 조건을 MRSA 생존에 대해 시험하였다. MSM이 없고 12, 30 또는 60㎍/ml의 항생제가 첨가된 대조군 조건은 MRSA 성장에 대해 시험하였다.
모든 튜브에 9.4x107/ml(로그=7.97)의 CFU의 최종농도를 제공하는 MRSA 희석액을 접종하였다. 튜브는 25℃에서 배양되었고 주기적으로 혼합되었다. 평판은 24시간, 48시간 및 5일에 수행되었다. 각 조건은 1ml의 재료를 9ml의 MBL 브로스에 희석함으로써 평판되었다. 이것들은 각 희석점에서 무균 페트리 디시에 1ml씩 10-7로 연속희석되었다. 20ml의 TSA는 각 희석액에 첨가되었고 굳을 수 있도록 저어주었다. 모든 배양액은 24시간 동안 35℃배양기에 놓아두었다. 평판을 계수하였고 집락계수는 로그 형식으로 변환하였다. 양성 및 음성대조군을 확인하였다.
결과:
결과는 표 4 및 도 3A-C에 나타내었다.
5 내지 16% MSM 및 12, 30 또는 60㎍/ml 옥사실린 또는 메티실린의 존재하에서 24시간 동안 ATCC 균주 43300 황색포도상구균의 생존율
%MSM 12 μg/㎖ 메티실린
MSM (Log cfu/㎖)		 12 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin)
MSM (Log cfu/㎖)
16 4.56 4.77
15 4.7 4.93
14 4.7 4.88
13 4.77 4.9
12 4.89 4.8
11 4.87 4.8
10 4.8 4.96
9 4.99 5.16
8 5.0 5.18
7 5.46 5.18
6 5.2 5.26
5 5.43 5.28
%MSM 30 μg/㎖ 메티실린
MSM (Log cfu/㎖)		 30 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin)
MSM (Log cfu/㎖)
16 4.47 4.59
15 4.54 4.74
14 4.6 4.82
13 4.7 4.9
12 4.7 4.87
11 4.8 4.94
10 4.8 4.99
9 5.07 5.02
8 5.09 5.2
7 5.13 5.12
6 5.18 5.15
5 5.3 5.17
%MSM 60 μg/㎖ 메티실린
MSM (Log cfu/㎖)		 60 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin)
MSM (Log cfu/㎖)
16 4.8 4.6
15 4.65 4.75
14 4.77 4.8
13 4.77 4.83
12 4.68 4.77
11 4.66 4.8
10 4.66 4.87
9 4.9 4.95
8 5.1 5.0
7 5.0 5.14
6 5.2 5.12
5 5.2 5.2
Cfu/ml에서의 로그 감소는 모든 항생제 농도에서 비슷하였다. Cfu/ml에서의 평균 로그 감소는 5% MSM 및 항생제에서 2.2였고, 16% MSM 및 항생제에서는 3.3이었다. 메티실린의 전체적인 효과는 옥사실린 보다 약간 좋았다. 전체적으로 항생제에 대한 감수성은 MSM의 농도가 높아질수록 증가하는 것으로 관찰됐다. 항생제 없는 MSM 대조군 조건에서는 최초에 접종된 것보다 훨씬 많은 집락수가 나타났다. MSM이 없고 항생제가 있는 대조군 조건에서는 TNTC가 나타났고, 항생제 단독으로는 억제효과가 없다는 것을 나타낸다.
48 및 96 시간점에서의 결과는 모든 배양에서 너무 많아서 계수를 할 수 없는 것으로 나타났다. 이것은 모든 항생제 농도에서 많이 성장하고, 자연상태에서 얻어진 큰 내성을 가지는 MRSA 균주를 선택한 클론의 이용으로 설명할 수 있다. 부가적으로 9.4x107/ml(로그=7.97)의 높은 접종 값에 의한 것일 수 있다; 일반적으로 접종은 104 에서 106 cfu/ml 사이 이어야 한다. 이것에 대한 가설적인, 비제한적인 설명은 이러한 실험조건에서 세균 생존에 대한 MSM 및 항생제의 효과는 다른 요소에 의해 가려졌다는 것이다. 대안적으로, 항생제가 분해되었을 수도 있는데 왜냐하면 본 발명자들은 이것을 오랜 실험동안의 마지막에 사용했기 때문이다.
이러한 결과는 MSM이 24시간 점에 옥사실린 및 메티실린에 대한 ATCC 균주 43300 황색포도상구균의 감수성을 증가시켰다는 것을 나타낸다; 그러나, 다른 시간 점에서의 결과는 결론을 내리지 못했다. 24시간 점에서 시험된 항생제의 모든 농도 및 MSM의 모든 농도에서 증가된 감수성이 관찰되었다. 높은 농도의 MSM은 낮은 농도의 MSM에 비해 더 항생제 감수성을 증가시켰다. 이것과 앞선 실험과의 차이는 본 발명자들이 모든 농도에서의 성장 요구를 만족시키기 위해 클론을 선택했다는 것이다.
실시예 6: MRSA에 대한 MSM 및 12, 30 또는 60㎍/ml 옥사실린의 효과
실시예 6은 5 내지 16% MSM 및 최초농도 12, 30 또는 60㎍/ml 옥사실린의 존재하에서 ATCC 균주 43300 황색포도상구균의 생존율을 시험한 인 비트로 실험이다. 옥사실린의 농도는 2x, 5x, 10x MIC에 대응하는 것이다. 부가적인 항생제를 24시간마다 첨가하였다. 시험된 성장기간은 24(도 4), 48, 72, 96 및 120시간었다. 이러한 결과는 MSM이 MRSA 균주를 옥사실린에 민감하게 만든다는 것을 보여준다. 가장 이른 시간점(24 및 48시간), 결과는 감소한 세균 생존을 보여주고, 이것은 시험된 항생제의 모든 농도, 및 시험된 MSM의 모든 농도에서 옥사실린 감수성이 증가하였다는 것을 나타낸다. 그러나, 늦은 시간점(96 및 120시간)에서는, 높은 MSM 농도(10 내지 16% MSM)에서만 감소된 세균 생존이 관찰되었고, 이것은 MSM-유도 옥사실린 감수성이 시간 의존적이라는 것을 보여준다. 결과는 또한 늦은 시간 점에서는 높은 농도의 옥사실린이 감소된 세균 생존과 상관관계가 있다는 것을 보여준다.
방법:
USP<51>항생 효율 프로토콜(Antimicrobial Effectiveness protocol)을 실험 양식의 견본으로 이용하였다. 시험된 최초 MSM 농도는 1%씩 증가하면서 5 내지 16%였다. 모든 농도는 cfu/ml를 확인하기 위해 10-7 희석으로 평판되었다. 옥사실린 최초농도는 12, 30, 또는 60㎍/ml이었고, 이것은 옥사실린의 2x, 5x 및 10x MIC(최소생육 저해농도)이다. 부가적인 항생제를 24시간마다 최초농도에 첨가하였다.
Flake OptiMSM®MSM(lot number 0604751), ATCC 균주 43300 황색포도상구균, 30ml의 보로실리케이트 글라스 배양 튜브(Borosilicate glass cultures tubes), 락토오스 브로스(lactose broth)(LB; 알파 바이오사이언스; Lot;L07-03), 변형된 레틴 브로스(modified letheen brothe)(MLS, 알파 바이오사이언스, lot 108-09), 레시틴 및 티윈 80(tween 80)이 들어있는 트립토 소이 아가(trypto soy agar)(TSA; 알파 바이오사이언스, lot; F08-42), 옥사실린 소디움 USP 그레이드 lot J(oxacillin sodium USP grade lot J)을 이용하였다.
ATCC 균주 43300 황색포도상구균은 분리를 위해 벗겨졌고, 분리된 집락을 선택하였고, 다시 벗기고 배양하였다. 분리된 것을 선택하였고 하나의 맥파란드 표준(McFarland standard)으로 희석되었다. 그 후에 예측된 값은 성장 배지 및 12, 30 또는 60㎍/ml 메티실린 또는 옥사실린을 포함하는 튜브에 약 105cfu/tube로 접종하기 위해 예측된 값은 고려되었다. cfu에서의 로그 감소를 보이지 않은 클론을 나머지 실험을 위해 선별하였다.
Flake OptiMSM®MSM는 인증된 Mettler Toledo AG245 SN:1115210833에서 무게를 재었고 각 농도에서 분취(aliquot)되었다. MSM은 30ml 의 보로실리케이트 글라스 배양튜브에 놓았다. MSM은 다음과 같이 첨가되었다: 5% (0.5g), 8% (0.8g), 10% (1.0g), 12% (1.2g), 13% (1.3g), 14% (1.4g), 15% (1.5g), 및 16% (1.6g). 재료는 10ml의 부피에서 계산되었다. 12, 30 또는 60㎍/ml의 최종농도로 무균의 옥사실린을 각 실험조건에 첨가하였다. 항생제가 없고 5 내지 16% MSM 의 대조군 조건을 MRSA 생존에 대해 시험하였다. MSM이 없고 12, 30 또는 60㎍/ml의 항생제가 첨가된 대조군 조건은 MRSA 성장에 대해 시험하였다.
모든 튜브에 3.3x105/ml(로그=5.52)의 CFU의 최종농도를 제공하는 선택된 ATCC균주 43300 황색포도상구균 희석액을 접종하였다. 튜브는 25℃에서 배양되었고 주기적으로 혼합되었다. 항생제를 미생물에 대한 압박을 위지하기 위해 최초농도에 24시간 마다 재접종하였다. 평판은 24시간, 48시간 , 72시간 및 120시간에 수행되었다. 각 조건은 1ml의 재료를 9ml의 MBL 브로스에 희석함으로써 평판되었다. 각 시점에 이것이 수행된 후에, 성장 배지가 함유된 1ml의 MSM을 일관된 부피 및 MSM농도를 유지하기 위해 튜브에 다시 첨가되었다. 이것들은 각 희석점에서 무균 페트리 디시에 1ml씩 10-7로 연속희석되었다. 20ml의 TSA는 각 희석액에 첨가되었고 굳을 수 있도록 저어주었다. 모든 배양액은 24시간 동안 35℃ 배양기에 놓아두었다. 평판을 계수하였고 집락계수는 로그 형식으로 변환하였다. 3.3 x 105(로그=5.5)보다 큰 모든 cfu/ml은 >3.3x105로 기록되었다.
결과:
이 실험에서 이용된 옥사실린 단독의 세가지 농도에 대한 양성 대조군(MRSA로 접종된 것)은 최초 접종된 값으로부터 cfu에서 유의적인 감소를 보이지 않았다. 결과는 표 5 내지 9에 나타내었다.
24시간에 5 내지 16% MSM 및 12, 30 또는 60㎍/ml 옥사실린의 존재하에서 ATCC 균주 43300 황색포도상구균의 생존율

% MSM 		12 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin)
MSM
(cfu/㎖)		 12 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin)
MSM
(cfu/㎖)		 12 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin)
MSM
(cfu/㎖)		 24 시간 평균 로그
16 7.6x103 7.4x103 7.6x103 3.88
15 1.35x104 1.30x104 1.29x104 4.11
14 1.00x104 1.02x104 1.01x104 4.00
13 9.0x103 8.7x103 9.2x103 3.95
12 7.0x103 7.0x103 7.3x103 3.85
11 8.2x103 8.5x103 8.0x103 3.91
10 5.8x103 5.6x103 6.0x103 3.76
9 5.6x103 5.2x103 5.0x103 3.72
8 6.6x103 6.6x103 6.9x103 3.82
7 8.2x103 8.5x103 8.3x103 3.91
6 8.6x103 8.5x103 8.0x103 3.92
5 8.4x103 8.0x103 8.0x103 3.91
0 >3.3x105 >3.3X105 >3.3X105 5.5

% MSM 		30 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 30 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 30 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 24 시간 평균 로그
16 8.3x103 8.3x103 8.0x103 3.91
15 8.7x103 8.9x103 8.8x103 3.94
14 6.1x103 6.0x103 6.0x103 3.78
13 4.4x103 4.1x103 4.2x103 3.62
12 3.9x103 3.9x103 3.9x103 3.59
11 3.9x103 3.7x103 3.7x103 3.57
10 2.2x103 2.2x103 2.0x103 3.32
9 1.06x103 1.05x103 1.02x103 3.01
8 1.18x103 1.18x103 1.16x103 3.07
7 9.7x102 9.6x102 9.2x102 2.98
6 2.9x102 2.9x102 2.9x102 2.46
5 3.1x102 3.3x102 3.3x102 2.51
0 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5

% MSM 		60 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 60 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 60 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 24 시간 평균 로그
16 6.9x103 6.9x103 6.9x103 3.83
15 6.6x103 6.2x103 6.4x103 3.81
14 1.8x102 1.7x102 1.8x102 2.03
13 6.3x102 6.0x102 6.0x102 2.80
12 7.3x102 7.1x102 7.5x102 2.86
11 6.7x102 6.7x102 6.9x102 2.83
10 4.2x102 4.4x102 4.4x102 2.63
9 3.2x102 3.2x102 3.2x102 2.50
8 4.6x102 4.6x102 5.0x102 2.67
7 2.1x102 2.3x102 2.1x102 2.34
6 2.4x102 2.4x102 2.4x102 2.38
5 3.5x102 3.3x102 3.6x102 2.54
0 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
표 5 및 도 4에 나타났듯이, 24시간 점에 관절된 cfu/ml의 숫자는 모든 옥사실린 농도에서 유사하였다. 낮은 MSM 농도에서 높은 MSM 농도에 비해 집락 계수에서의 더 큰 로그 감소를 보였다. 12㎍/ml 옥사실린에서 cfu/ml의 숫자의 평균 로그 감소는 1.5 로그 였고 이것은 다른 농도에서도 거의 변화가 없거나 약간만 있었다. 30㎍/ml 및 60㎍/ml조건에서는 낮은 수준의 MSM 농도에서 cfu/ml의 숫자에서 로그 감소를 나타냈고, 3 로그 차이의 평균을 나타냈다. 60㎍/ml 조건은 최초 24시간 점의 옥사실린 세가지 농도에서 cfu/ml의 숫자의 가장 큰 로그 감소를 나타냈다. 60㎍/ml 옥사실린 및 14% MSM 조건에서는 cfu/ml의 숫자의 3.5 로그 감소를 나타냈다. 음성 LB 대조군은 오염의 징후를 나타내지 않았다. LB 양성 대조군은 혼탁한 성장을 나타냈다. 음성 5%, 10%, 16% MSM 대조군은 오염의 징후를 나타내지 않았다. 양성 5%, 10%, 16% MSM 대조군은 혼탁한 성장을 나타냈다. 옥사실린 대조군은 최초 접종으로부터 어떠한 유의적인 감소를 보이지 않았고, 음성 대조군은 오염의 징후를 보이지 않았다.
48시간에 5 내지 16% MSM 및 12, 30 또는 60㎍/ml 옥사실린의 존재하에서 ATCC 균주 43300 황색포도상구균의 생존율

% MSM 		12 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 12 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 12 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 48 시간 평균 로그
16 4.2x103 5.0x103 4.3x103 3.7
15 5.0x103 4.5x103 4.6x103 3.7
14 1.0x101 1.2x101 1.1x101 1.0
13 6.8x102 6.8x102 5.8x102 2.8
12 3.6x102 4.0x102 4.2x102 2.8
11 6.4x102 5.8x102 6.5x102 2.8
10 5.6x102 5.4x102 5.4x102 2.7
9 2.4x103 2.5x103 2.3x103 3.4
8 4.9x103 4.9x103 5.4x103 3.7
7 9.0x103 8.9x103 8.5x103 3.9
6 1.7x103 1.4x103 1.7x103 3.2
5 4.5x103 4.0x103 4.2x103 3.6
0 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5

% MSM 		30 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 30 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 30 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 48 시간 평균 로그
16 4.6x102 4.0x102 4.1x102 2.6
15 6.2x102 6.4x102 6.4x102 2.8
14 3.6x102 3.2x102 3.5x102 2.5
13 3.0x102 3.1x102 3.1x102 2.5
12 3.9x102 3.6x102 4.0x102 2.6
11 2.5x102 2.7x102 2.8x102 2.4
10 4.3x102 4.3x102 4.0x102 2.6
9 2.8x102 2.6x102 2.2x102 2.4
8 1.23x103 1.24x103 1.20x103 3.1
7 2.0x102 2.1x102 2.2x102 2.3
6 5.5x103 5.5x103 5.9x103 3.7
5 5.8x103 6.0x103 5.9x103 3.8
0 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5

% MSM 		60 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 60 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 60 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 48 시간 평균 로그
16 9.0x101 9.0x101 6.0x101 1.9
15 1.2x102 1.3x102 1.2x102 2.1
14 1.5x102 1.7x102 1.2x102 2.2
13 6.0x101 4.0x101 5.0x101 1.7
12 1.1x102 1.0x102 1.0x102 2.0
11 1.3x102 1.7x102 1.2x102 2.1
10 1.6x102 1.4x102 1.6x102 2.2
9 1.8x102 1.7x102 1.5x102 2.2
8 7.5x102 7.3x102 7.0x102 2.8
7 1.0x104 1.1x104 1.1x104 4.0
6 6.0x101 5.0x101 6.0x101 1.8
5 3.0x103 2.7x103 3.3x103 3.5
0 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
표 6에 나타냈듯이, 48시간점에 관찰된 cfu/ml의 숫자는 모든 옥사실린 농도에서 유사하였다. 낮은 MSM 농도는 높은 MSM 농도에 비해 모든 옥사실린 농도에서 cfu/ml의 숫자의 더 낮은 로그 감소를 보이는 경향이 관찰되었다. 48시간 점의 30 ㎍/ml 및 60 ㎍/ml 옥사실린 조건은 8 내지 16% MSM 농도의 24시간 점에 비해 cfu/ml의 숫자의 더 큰 로그 감소를 나타냈다. 60 ㎍/ml 옥사실린 조건은 이에 상응하는 24시간 점에 비해 모든 옥사실린의 농도에서 cfu/ml의 숫자의 더 큰 평균 로그 감소를 유지하였다. 의미있는 두가지 결과는 12㎍/ml 옥사실린 및 14%MSM은 cfu/ml의 숫자의 4.5 로그 감소를 가졌고, 60㎍/ml 옥사실린 및 14% MSM은 상응하는 24시간 점에 비해 약간 큰 로그 감소를 가졌다는 것이다. 이것은 옥사실린 및 MSM 처리의 적절한 포인트를 나타낸다. 음성 LB 대조군은 어떠한 오염의 징후를 보이지 않았다. LB 양성 대조군은 혼탁한 성장을 나타냈다. 음성 5%, 10%, 및 16% MSM 대조군은 오염의 징후를 보이지 않았다. 옥사실린 대조군은 최초 접종으로부터 어떠한 유의적인 감소도 보이지 않았고, 음성 대조군은 어떠한 오염의 징후도 보이지 않았다.
72시간에 5 내지 16% MSM 및 12, 30 또는 60㎍/ml 옥사실린의 존재하에서 ATCC 균주 43300 황색포도상구균의 생존율

% MSM		 12 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 12 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 12 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 72 시간 평균 로그
16 1.1x102 1.2x102 1.6x102 2.1
15 2.3x102 2.2x102 1.2x102 2.3
14 1.1x102 1.2x102 1.1x102 2.0
13 5.2x102 5.1x102 5.4x102 2.7
12 1.5x103 1.1x103 1.3x103 3.1
11 4.4x103 4.5x103 4.0x103 3.6
10 1.2x104 1.1x104 1.0x104 4.0
9 4.7x104 4.2x104 4.5x104 4.5
8 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
7 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
6 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
5 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
0 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5

% MSM		 30 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 30 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 30 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 72 시간 평균 로그
16 9x101 8.0x101 8.0x101 1.9
15 2.3x102 2.2x102 2.8x102 2.4
14 1.4x102 1.7x102 1.8x102 2.2
13 9.0x101 8.0x101 4.0x101 1.8
12 4.8x102 3.9x102 4.9x102 2.6
11 1.2x103 1.7x103 1.5x103 3.2
10 8.9x103 9.0x103 8.5x103 3.9
9 8.8x102 8.1x102 8.5x102 2.9
8 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
7 3.6x104 3.6x104 3.2x104 4.5
6 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
5 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
0 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5

% MSM		 60 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
((cfu/㎖))		 60 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 60 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 72 시간 평균 로그
16 6.0x101 6.0x101 5.0x101 1.8
15 0 0 0
14 2.0x101 2.0x101 4.0x101 1.5
13 1.0x101 1.0x101 1.0x101 1
12 2.8x102 2.1x102 2.5x102 2.4
11 1.0x101 1.0x101 2.0x101 1
10 3.9x102 4.0x102 3.4x102 2.6
9 3.3x103 3.3x103 3.2x103 2.5
8 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
7 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
6 6.5x102 6.4x102 6.1x102 2.8
5 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
0 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
표 7에 나타났듯이, 72시간에서의 15% MSM 및 60㎍/ml 옥사실린 조건에서는 집락의 징후가 보이지 않았다. 튜브를 실험에서 빼내었고, ATCC 균주 43300 황색포도상구균의 성장을 시험하였다. 튜브는 10분동안 500rpm에서 원심분리하였다. 그 후에 상등액을 6㎍/ml 옥사실린과 함께, 9ml의 뮬러-힌튼 브로스(Mueller-Hinton broth)에 옮겨 넣었다. 이것은 건강한 또는 스트레스 받은 것으로 나타날 수 있는 모든 MRSA 세포를 배양하고 회복하기 위함이다. 펠렛은 10ml의 뮬러-힌튼 브로스를 가지고 있었고 존재하는 모든 세포를 회복하기 위해 6㎍/ml의 옥사실린을 이것에 넣었다. 모든 용기를 48시간 동안 35℃에서 배양하였고, 24시간마다 평판하였다. 각 용기는 1 cfu 탐지 제한(cfu detection limit)를 얻기 위해 10 희석액으로 평판되었다. 집락은 관찰되지 않았고 이것은 모두 죽었다는 것을 나타낸다. 도식화를 위한 이 시점에서의 수치는 0 로그로 표시될 것이다.
표 7에 나타났듯이, 72시간 점에서 관찰된 cfu/ml의 숫자는 모든 옥사실린 농도에서 유사하였다. 5 내지 12% MSM 조건은 이른 시간 점에 비해 cfu/ml 숫자의 더 낮은 평균 로그 감소를 나타냈다. 이것은 옥사실린에 대한 MRSA 감수성의 감소를 증명한다. 만약 그렇다면 이러한 감소가 MSM 농도와 상관관계가 있다(즉 낮은 MSM 농도 = 높은 옥사실린 내성). 12㎍/ml 옥사실린 조건은 12 내지 16% MSM 농도에서 cfu/ml의 1 로그 감소를 나타냈다. 60㎍/ml 옥사실린 조건은 모든 세가지 옥사실린 농도에서 cfu/ml의 숫자의 높은 로그 감소를 유지하였고, 이것은 최초 24시간 기간과 다르다. 의미있는 두가지 결과는 14% MSM 및 12㎍/ml 옥사실린 조건에서 cfu/ml의 숫자의 4.5 로그 감소를 보였고, 12% MSM 및 60㎍/ml 옥사실린 조건에서 앞선 시간점에 비해, cfu/ml의 숫자의 더 높은 로그 감소를 보였다는 것이다. 이것은 옥사실린 처리의 적절한 포인트를 나타낸다. 음성 LB 대조군은 오염의 징후를 보이지 않았다. 음성 5%, 10%, 16% MSM 대조군은 오염의 징후를 보이지 않았다. 옥사실린 대조군은 최초 접종으로부터 유의적인 감소의 징후를 보이지 않았고, 음성 대조군은 오염의 징후를 보이지 않았다.
96시간에 5 내지 16% MSM 및 12, 30 또는 60㎍/ml 옥사실린의 존재하에서 ATCC 균주 43300 황색포도상구균의 생존율

% MSM		 12 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 12 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 12 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 96 시간 평균 로그
16 1.4x102 1.4x102 1.6x102 2.2
15 1.2x102 1.3x102 1.2x102 2.1
14 6.0x101 6.0x101 5.0x101 1.8
13 1.6x103 1.7x103 1.2x103 3.2
12 6.8x103 7.0x103 6.8x103 3.8
11 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
10 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
9 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
8 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
7 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
6 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
5 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
0 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5

% MSM		 30 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 30 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 30 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 96 시간 평균 로그
16 3.0x101 3.0x101 1.0x101 1.3
15 8.0x101 8.0x101 8.0x101 1.9
14 5.0x101 5.0x101 6.0x101 1.7
13 3.3x102 3.1x102 3.2x102 2.5
12 6.9x103 3.9x103 3.9x103 3.7
11 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
10 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
9 1.0x104 1.02x104 1.01x104 4.0
8 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
7 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
6 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
5 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
0 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5

% MSM		 60 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 60 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 60 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 96 시간 평균 로그
16 2.0x101 3.0x101 2.0x101 1.3
15 0 0 0
14 0 0 0
13 4.0x101 4.0x101 5.0x101 1.6
12 3.0x103 3.5x103 3.1x103 3.5
11 0 0 0
10 3.9x103 4.0x103 3.5x103 3.6
9 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
8 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
7 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
6 4.4x103 4.5x103 4.4x103 3.6
5 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
0 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
표 8에 나타났듯이, 96시간에서의 11% 및 14% MSM 및 60㎍/ml 옥사실린 조건에서는 집락의 징후가 보이지 않았다. 튜브를 실험에서 빼내었고, ATCC 균주 43300 황색포도상구균의 성장을 시험하였다. 튜브는 10분동안 500rpm에서 원심분리하였다. 그 후에 상등액을 6㎍/ml 옥사실린과 함께, 9ml의 뮬러-힌튼 브로스(Mueller-Hinton broth)에 옮겨 넣었다. 이것은 건강한 또는 스트레스 받은 것으로 나타날 수 있는 모든 MRSA 세포를 배양하고 회복하기 위함이다. 펠렛은 10ml의 뮬러-힌튼 브로스를 가지고 있었고 존재하는 모든 세포를 회복하기 위해 6㎍/ml의 옥사실린을 이것에 넣었다. 모든 용기를 48시간 동안 35℃에서 배양하였고, 24시간마다 평판하였다. 각 용기는 1 cfu 탐지 제한(cfu detection limit)를 얻기 위해 10 희석액으로 평판되었다. 집락은 관찰되지 않았고 이것은 모두 죽었다는 것을 나타낸다. 도식화를 위한 이 시점에서의 수치는 0 로그로 표시될 것이다.
표 8에 나타났듯이, 12㎍/ml 옥사실린과 함께, 12 및 13% MSM 조건에서는 앞선 시간 점에 비해서 증가된 집락 수를 나타냈다. 12㎍/ml 옥사실린과 함께, 14 내지 16% MSM 조건은 72시간 점에서와 같은 숫자의 집락 수를 나타내었다. 30㎍/ml 옥사실린 조건은 5 내지 13%의 낮은 MSM 퍼센트에 걸쳐서 옥사실린 내성에 대한 증가된 회귀를 나타냈다. 14 내지 16% MSM에서 관찰된 cfu/ml의 로그 감소는 앞선 시간점에 비해 약간의 차이가 있었고, 일관성을 유지하는 것으로 나타났다. 60㎍/ml 옥사실린과 함께 11 및 14% MSM 조건에서 집락이 관찰되지 않았다. 60㎍/ml 옥사실린과 함께, 5 내지 10% 및 12% MSM 조건에서 관찰된 cfu/ml은 탐지 제한 보다 컸다. 11 내지 12% MSM 에서의 데이터는 MSM 첨가의 양이 미생물의 완전한 감소에 결정적인 수 있는 것으로 나타났는데, 높은 양(14 및 15%)은 완전한 사멸의 감소를 보였기 때문이다.
120시간에 5 내지 16% MSM 및 12, 30 또는 60㎍/ml 옥사실린의 존재하에서 ATCC 균주 43300 황색포도상구균의 생존율
% MSM 12 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 12 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 12 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 120 시간 평균 로그
16 3.0x101 3.0x101 2.0x101 1.5
15 1.1x102 1.3x102 1.2x102 2.0
14 1.1x102 1.2x102 1.1x102 2.0
13 6.2x103 6.7x103 6.2x103 3.8
12 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
11 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
10 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
9 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
8 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
7 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
6 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
5 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
0 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5

% MSM 		30 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 30 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 30 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 120 hours
Average Log
16 2.0x101 3.0x101 2.0x101 1.3
15 0 0 0 0
14 3.0x101 2.0x101 2.0x101 1.3
13 1.02x103 1.01x103 1.02x103 3.0
12 6.8x104 3.9x104 6.9x104 4.7
11 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
10 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
9 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
8 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
7 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
6 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
5 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
0 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
% MSM 60 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 60 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 60 μg/㎖ 옥사실린(oxacillin) MSM
(cfu/㎖)		 120 hours
Average Log
16 0 0 0 0
15 0 0 0 0
14 0 0 0 0
13 0 0 0 0
12 1.72x104 1.6x104 1.5x104 4.2
11 0 0 0 0
10 1.6x104 1.5x104 1.7x104 4.2
9 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
8 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
7 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
6 3.7x104 3.4x104 2.4x104 4.5
5 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
0 >3.3X105 >3.3X105 >3.3X105 5.5
표 9에 나타났듯이, 30㎍/ml 옥사실린과 함께 15% MSM 조건 및 60㎍/ml 옥사실린과 함께 13 및 16% MSM 조건에서, 120시간에서 집락의 징후가 보이지 않았다. 튜브를 실험에서 빼내었고, ATCC 균주 43300 황색포도상구균의 성장을 시험하였다. 튜브는 10분동안 500rpm에서 원심분리하였다. 그 후에 상등액을 6㎍/ml 옥사실린과 함께, 9ml의 뮬러-힌튼 브로스(Mueller-Hinton broth)에 옮겨 넣었다. 이것은 건강한 또는 스트레스 받은 것으로 나타날 수 있는 모든 MRSA 세포를 배양하고 회복하기 위함이다. 펠렛은 10ml의 뮬러-힌튼 브로스를 가지고 있었고(Mueller ＆ Hinton, Proc. Soc. Exp. Diol. And Med; 48:330-333, 1941) 존재하는 모든 세포를 회복하기 위해 6㎍/ml의 옥사실린을 이것에 넣었다. 모든 용기를 48시간 동안 35℃에서 배양하였고, 24시간마다 평판하였다. 각 용기는 1 cfu 탐지 제한(cfu detection limit)를 얻기 위해 10 희석액으로 평판되었다. 집락은 관찰되지 않았고 이것은 모두 죽었다는 것을 나타낸다. 도식화를 위한 이 시점에서의 수치는 0 로그로 표시될 것이다.
12㎍/ml 농도는 14 내지 16% MSM에서 약간의 감소 및 증가가 나타났다. 30㎍/ml에서 15% MSM 농도는 어떠한 회복도 감지되지 않은 진정한 사멸이 나타났다. 14% 및 16% 농도점은 앞선 시간 점과 비교하여 유의적인 값의 변화가 없었다. 60㎍/ml의 13% 및 16% MSM 농도는 미생물의 회복이 없는 사멸이 나타났다. 12% 농도는 앞선 시간 점과 비교하여 로그의 계속된 증가가 나타났다.
전체적으로, 표 5 내지 9에 나타난 데이터는 최초 24시간에 각 옥사실린 세가지 농도에서 낮은 농도(5 내지 10%)에 대해서 유의적인 로그 감소가 나타났다(16 내지 5% MSM 농도에서 경향성은 음의 슬로프를 가진다). 48시간의 다음 시간점에서 감소율은 낮은 농도 5 내지 10%에서 높은 농도 11 내지 16%로 이동하기 시작했다( 16 내지 5% MSM 농도에서 경향성은 양의 슬로프를 가진다). 72시간 점은 높은 MSM 농도에서 cfu/ml의 로그 감소를 보였고, 낮은 MSM 농도는 cfu/ml의 감소를 거의 보이지 않았다.
96 및 12시간 점에서는 가장 높은 MSM 농도에서 감소된 세균 생존율을 보였지만, 낮은 MSM 농도에서는 세균 생존에 영향을 미치지 않았다.
이 실험의 결과는 아주 흥미로운 질문을 일으킨다. 24시간에서의 데이터는 모든평가된 옥사실린의 농도에서 낮은 퍼센트의 MSM에 대해서 높은 감소를 보였다. 이러한 경향은 중간에서 높은 MSM 농도에서 관찰되는 최대 감소를 보이는 48시간에서 약간 변화하였다. 72시간까지 높은 MSM 농도에서 높은 로그 감소를 보이는 것으로 절대적으로 경향성이 이동하였다. MSM은 부가적인 성장배지(성장 바이알(vial)에서와 똑같은 MSM 농도가 함유된 LB) 바이알에서 원래의 부피를 유지하기 위해 첨가되었을 때만 첨가되었다. 예를 들면 만약 12㎍/ml 옥사실린 및 5% MSM의 1ml 분취량(aliquot)가 평판을 위해 제거되면 5% MSM이 함유된1ml의 LB를 다시 첨가하였다.
다음은 상기에서 보여진 일부 효과의 가설적인 설명을 제공한다; 그러나 이러한 설명에 제한되는 것은 아니다. 하나의 가설 및 제한되지 않는 관찰된 결과에 대한 가능성은 MSM이 미생물에 의해 소비된다는 것이다. 또 다른 가설 및 제한되지 않는 관찰된 결과에 대한 가능성은 MSM의 옥사실린을 MRSA 세포로 운반하는 능력 때문에 기인한 감수성의 회복을 일으키는 MSM의 능력이다. 또 다른 가설 및 제한되지 않는 관찰된 결과에 대한 가능성은 너무 높은 농도의 MSM은 특정 시간점에서는 덜 효과적이다. 예를 들면, 이것은 높은 농도에서 옥사실린과 결합하는 MSM과 경쟁하는 유리 MSM의 과도한 존재의 경쟁에 기인한 것일 수 있다. 이것은 옥사실린과 결합하는 MSM 보다 세포내로 들어가는 유리 MSM가 많을 수 있다. 낮은 농도는 옥사실린과 결합하는 용액 내의 총 MSM의 높은 전체적 퍼센트를 가지고, 이것은 더 많은 옥사실린과 결합하여 세포내로 들어갈 수 있게 한다. 왜냐하면 경쟁하는 유리 MSM이 적기 때문이다. 이러한 가설하에서, MRSA 세포 내로 들어가는 MSM 분자의 주어진 숫자에 있어서, MSM 대 옥사실린의 비율은 최대효과를 얻기 위해서 중요하다. 만약 MSM이 과도하게 존재하면 옥사실린과 결합하지 않은 상대로 세포를 관통하는 MSM 분자의 기회가 증가하게 된다.
실시예 8. 개체내의 약물 저항성(drug resistant) 박테리아성 병원체(pathogen)의 치료
본 실시예는 대표적인 약물 저항성 박테리아 감염된 개체 선별에 의해 약물 저항성 박테리아(예를 들어, MRSA infection)에 감염된 개체를 치료하는 방법 및 개체에 약물 저항성 박테리아 감염을 야기하는 박테리아성 병원체의 약물-감수성(drug-sensitive) 형태를 억제하는 MSM 및 약제의 치료적으로 유효한 량을 투여하는 방법을 기재한다. 본 실시예에서, 상기 개체는 피부에 MRSA 감염을 가지며, 치료는 12% MSM 및 30?μg/㎖의 옥사실린(oxacillin)을 포함하는 화합물의 국소 투여를 포함한다.
우선, MRSA 감염을 가지는 개체를 선별했다. 상기 개체는 개체로부터 생물학적 시료를 얻고 박테리아의 옥사실린(oxacillin)에 대한 MIC 검출에 따른 황색포도상 구균(Staphylococcus aureus) 박테리아의 존재에 대해 상기 생물학적 시료를 시험하여 선별되었다. 환자의 생물학적 시료에서 황색포도상 구균(Staphylococcus aureus) 박테리아에 대한 옥사실린의 MIC가 2 μg/㎖ 보다 크면, 박테리아는 MRSA 계통(strain)의 박테리아이다. 상기 시료가 황색포도상 구균 박테리아를 포함하고 박테리아에 대해 검출된 옥사실린의 MIC가 Etest® 시스템(AB bioMerieux, SA France)을 이용한 옥사실린에 대해 2 μg/㎖ 보다 많다. 따라서, 상기 개체가 선별되었다.
MRSA가 있는 개체의 선별 후에, 12% MSM 및 옥사실린 30 μg/㎖을 포함하는 조성물이 MRSA 감염된 개체의 피부 부위 주변에 국소적으로(topically) 투여되었다. 상기 조성물은 수성(water-based)이고, 국소 투여를 위해 제조되었으며 1% NaCl을 포함한다. 상기 조성물은 하루에 두 번, 10일 동안 투여되었다. 상기 치료 코스에 따라, 개체의 MRSA 감염 증상이 MSM 및 옥사실린 치료 이전에 존재한 MRSA 감염 증상으로부터 개체가 치료된 것을 나타내는 적어도 50%로 감소하는지 관찰되었다.
실시예 9: 국소 제제(Topical Formulation) MSM의 안전한 정도(Safe Level)로 알려진 범위 내의 흡수
본 실시예는 국소 제제 MSM의 흡수가 안전한 정도로 인식되는 범위내인 것을 보여준다.
피부 흡수 연구를 위한 동물 모델로 받아들여지는 뉴질랜드 흰 토끼가 흡수 및 그 결과로 생긴 MSM의 혈중량(blood levels) 평가를 위해 사용되었다. 토끼들은 Charles River Canada(Saint-Constant, Quebec)에서 얻었다. 12-13 주령의 2.6 kg 내지 2.7 kg 범위의 몸무게의 다섯 암컷 토끼들이 피부 흡수 연구를 위해 사용되었다. 토끼들은 랫, 돼지 또는 인간에 비해 더 큰 그들의 피부 투과성 때문에 사용되었다. 따라서, 토끼에 대한 시험은 인간에 이용하기 위한 국소 산물의 안전성에 대해 더욱 보수적인 접근이다. 토끼의 크기는 두 주 간격 내에 6 ㎖/kg 체중량의 혈액 보다 더 많이 수집하는 것을 윤리적으로 제한하는 것에 기초하였다. 본 연구 동안 제거된 혈액의 총 부피는 하루에 10 ㎖이다. 그룹 당 한 동물이 요구되는 동물의 수를 최소화하기 위해 사용되었다. 동물들은 스테인레스 스틸 케이지에서 개별적으로 12 시간 밝고/어두운 사이클로 사육되었다. 동물실 환경은 매일 모니터링되었다(목표 범위: 18-26 ℃ 및 상대 습도 25-50%). 시간 당 동물실 공기의 약 15 내지 17를 바꾸기 위해 신선한 공기가 충분한 비율로 동물실에 공급되었다. 약품 주입(dosing)에 앞서 동물들이 건강하게 하기 위해 모든 동물들에 대한 임상적인 관찰이 수행되었다. 또한, 발병률(morbidity) 및 사망률(mortality) 관찰이 연구 기간 동안 수행되었다.
처리군(treatment group)은 표 10에 보여진 바와 같다:
연구 디자인
그룹 시험 품목(Test Article) 노출된
표면적 		적용된
부피		 동물
수 		혈액 수득
시간(분)
A 10% MSM + 90% Water 6cm2 0.5㎖ 1 0 (전-투여), 10, 30,
120, 480 분
B 50% DMSO + 50% Water 6cm2 0.5㎖ 1 0 (전-투여), 10, 30,
120, 480 분
C 70% DMSO + 30% Water 6cm2 0.5㎖ 1 0 (전-투여), 10, 30,
120, 480 분
D 10% MSM + 50% DMSO + 6cm2 0.5㎖ 1 0 (전-투여), 10, 30,
40% Water 120, 480 분
E 10% MSM + 70% DMSO + 6cm2 0.5㎖ 1 0 (전-투여), 10, 30,
20% Water 120, 480 분
연구 하루 전에, 각각의 토끼 엉덩이를 이발기를 이용하여 바싹 깎았다. 다양한 조성물의 적용이 등가(equivalence)가 되게 하기 위하여6 cm2의 면적이 측정되었고 표시되었다. 각각의 조성물 0.5 ㎖가 피펫팅에 의해 각각의 산물이 시험 면적의 중앙에 사용되었고 시험 면적 전체를 덮도록 펼쳐졌다. 노출 기간 5 분 후에, 상기 조성물은 시험 면적의 도포(wiping), 헹굼(rinsing) 및 건조에 의해 제거되었다.
혈액 수득 전에, EMLA 크림(리도카인(Iidocaine)/프릴로카인(prilocaine))이 귀 동맥을 따라 두 귀에 사용된 후에, 동물들은 오른쪽 뒷다리(hind leg) 근육에 근육 주사(intramuscular injection)에 의한 에이스프로마진(Acepromazine) (1 mg/kg)으로 안정되었다. 혈액은 귀 동맥으로의 21G 바늘(허브 제거된) 삽입에 의해 수득되었다. 총 혈액의 약 2 ㎖가 K2EDTA를 포함한 4 ㎖ 배큐테이너(vacutainer) 튜브(Becton Dickinson, Mississauga, ON) 속으로 수득되었다. 튜브들은 항응고제(anticoagulant)와 섞기 위해 뒤집혔고 원심분리에 의해 혈장이 분리될 때까지 냉장 저장되었다. 혈장은 3000 x g에서 10분 동안 원심분리에 의해 전체 혈액으로부터 분리되었다. 혈장은 수득되었고, 크라이요 바이알(cryovial)에 옮겨지고 -70 ℃에서 MSM 분석을 위한 과정 전까지 저장되었다.
다양한 시험 제품(표 1 참조)에 대한 5 분의 노출 기간 후에, 혈액은 10분 , 30분, 2시간 및 8시간 후에 수득되었다. EMLA 크림의 마취 효과가 약 1 내지 2 시간 유지되기 때문에 혈액 수득 2 및 8시간 전에, EMLA 크림을 귀에 도포했다(상기 혈액(blood draws) 각각의 약 30분 전에). 윤리적 고려 및 본 발명에서 사용되는 동물들의 안녕(wellbeing)을 위해 EMLA 크림 및 에이스프로마진 둘 다가 사용되었다.
혈장(plasma)내의 MSM 의 농도가 수립된 방법에 기초하여 가스 크로마토그래피-질량 분석법(gas chromatography-mass spectrometry) (GC/MS)에 의해 정량되었다. 구체적으로, 혈장 시료 450 ㎕가 생리식염수(physiological saline) 50 ㎕와 혼합되었으며 30초 동안 볼텍싱(vortexed)되었다. 그 후에 아세토니트릴(Acetonitrile) (Fisher, HPLC 품질) 1 ㎖이 혼합물에 첨가되었다. 상기 용액은 60초 동안 세게 볼텍싱되었고 2000 rpm에서 5분 동안 원심분리되었다. 깨끗한 상등액 1 마이크로리터(microliter)가 GC/MS 시스템(GC/MS QP20108 EI, Shimadzu, Kyoto, Japan)에 도입되었다. 분석이 8himadzu SHR5XLB 컬럼(0.25mm ID X 길이 30 m, 필름 0.25 um, Kyoto, Japan)에서 수행되었다. MSM 보유(retention) 시간은 6.1-6.3 분이다. MSM은 MS로 검출되었고 m/z 79(M+-15)가 MSM 이온 SIM 특성을 관찰하기 위해 사용되었다. 헬륨(Helium) 가스가 캐리어 가스로서 사용되었고, 출구 압력(head pressure)은 0.25 kg/cm2, 메이크-업 가스(make-up gas)는 30 ㎖/min, 컬럼 온도는 80 ℃, 주입 온도 120 ℃, 분리기(separator) 온도 200 ℃ 및 이온원(ion source) 온도 250 ℃이다. 이온화 에너지(ionization energy)는 70eV이었다. 외부 표준 그래프(external standard graph)는 하기의 농도로 아세토니트릴에 용해된 MSM로 구성되었다: 62.5 μg/㎖, 31.3 μg/㎖, 15.6 μg/㎖, 7.8 μg/㎖, 3.9 μg/㎖, 1.9 μg/㎖, 0.98 μg/㎖ 및 0.49 μg/㎖. 혈장 시료내의 MSM 농도가 표준 곡선(standard curve)의 기울기로부터 계산되었다. 가장 잘 갖춘 그래프는 0.998의 R2 값에 1차(linear)이다.
모든 동물들은 연구 시작에 앞서 관찰되었고 모두 건강함을 확인하였다. 연구 과정 동안 및 연구 다음에, 모든 동물들은 건강함이 입증되었다. 발병률, 사망률 및 부상은 매일 두 번 평가되었다. 동물들은 어떤 발병률, 사망률 또는 부상이 없음이 입증되었다.
MSM 및 DMSO에 노출 후 혈장 내 MSM의 농도
처리 시점 MSM 농도
(분) (μg/㎖)
0 25.6
10 17.6
10% MSM + 90% 물 30 16.3
120 14.0
480 15.4
0 4.2
10 6.9
50% DMSO + 50% 물 30 6.9
120 7.4
480 12.6
0 56.7
10 89.0
70% DMSO + 30% 물 30 98.9
120 128.7
480 120.2
0 104.2
10 116.5
10% MSM + 50% DMSO + 40% 물 30 127.9
120 128.4
480 140.4
0 26.8
10 37.3
10% MSM + 70% DMSO + 20% 물 30 30.9
120 33.9
480 44.4
흡수 연구 결과는 표 11에 요약되었다. MSM의 혈장 농도 기준(시험 품목에 노출하기 전)은 4.2 μg/㎖ 내지 104.2 μg/㎖의 범위이다. 기준내의 변화는 이전 연구에서 수립된 자연 MSM 농도의 변화의 정상 범위 내이다. 다양한 시험 품목에 노출된 뒤에, 측정된 MSM의 가장 높은 혈장 농도는 약 140 μg/㎖ 보다 적거나 같다. 상기 정점농도(peak concentration)는 10% MSM + 70% DMSO + 20% 물에 노출된 것의 결과이다. MSM 농도 기준(baseline) 내의 자연 변화를 수정했을 때, 혈장 내 MSM의 가장 큰 변화가 70% DMSO + 30% 물 군에서 검출되었다. 상기 데이터는, 흡수에 기인하는 또는 DMSO의 대사에 기인하는, MSM의 변화가 MSM 농도의 자연 범위 내인 것을 시사한다.
실시예 10. 메티실린(methicillin) 12, 30, 또는 60 μg/㎖까지 저항성을 보이는 MRSA의 감수성에서 MSM의 효과.
본 실시예는 5-16% MSM 및 초기 농도 12, 30 또는 60 μg/㎖의 메티실린의 존재하의 황색포도상 구균(Staphylococcus aureus) ATCC 43300 균주의 생존을 시험한 생체내 실험을 기재한다. 이것은 메티실린에 대한 MIC의 2x, 5x 및 10x에 해당한다. 추가적인 항생제(antibiotic)가 매 24시간 첨가되었다. 시험된 생장기는 24 (도 5), 48, 72, 96 및 120 시간이다. 상기 결과는 MSM가 MRSA 균주를 메티실린에 민감하게 만드는 것을 보여준다.
방법:
USP<51> 항균 효과(Antimicrobial Effectiveness) 프로토콜이 실험 패러다임(paradigm)의 주형으로서 사용되었다. 시험된 초기 MSM 농도는 증가하는 5-16%였다. 모든 농도가 10-7 희석에서 cfu/㎖ 확인으로 플레이트 아웃되었다. 메티실린의 초기 농도는 메티실린에 대한 MIC의 2x, 5x 및 10x에 해당하는 12, 30 또는 60 μg/㎖로 사용되었다. 추가적인 항생제는 매 24시간 초기 농도에서 첨가되었다.
사용된 재료는 Flake OptiMSM® MSM(제품번호 0604751), 황색포도상 구균(Staphylococcus aureus) ATCC 43300 균주, 30 ㎖ 붕규산(Borosilicate) 유리 배양 튜브, 락토오스 배지(Lactose Broth)(LB; Alpha Biosciences; Lot: L07-03), 변형 레틴 배지(Modified Letheen Broth)(MLB, Alpha Biosciences, lot I08-09), 레시틴(Lecithin) 및 트윈(Tween) 80 첨가된 트립토 소이 아가(Trypto Soy Agar)(TSA; Alpha Biosciences, lot: F08-42) 및 메티실린(methicillin) 소듐(sodium) USP 품질 lot KOH338.
황색포도상 구균(Staphylococcus aureus) ATCC 43300 균주는 분리를 위해 스트리킹(streaked out)되었다. 분리된 콜로니가 선택되었고 다시 스트리킹되고 배양되었다. 분리주(Isolate)는 선택되었고 그 후에 그것의 맥파랜드 기준(McFarland standard)으로 희석되었다. 추정치(estimated value)가 그 후에 배양 배지 및 12, 30 또는 60 μg/㎖ 메티실린이 담긴 튜브에 접종(inoculate)하기 위해 약 105 cfu/㎖로 옮겨졌다. 상기 튜브는 배양되었고 계수된 cfu에 대해 도말되었다. cfu에서 로그 감소가 관찰되지 않는 클론이 남은 실험을 위해 선별되었다.
Flake OptiMSM® MSM은 공인된 Mettler Toledo AG245 SN: 1115210833 위에서 무게가 달아졌고 각각의 농도에 대해 분리되었다. MSM 은 30 ㎖ 붕규산 유리 배양 튜브에 넣어졌다. MSM은 하기와 같이 튜브에 첨가되었다: 5% (0.5g), 6% (o.6g), 7% (0.7g), 8% (0.8g), 9% (0.9g), 10% (1.0g), 11% (1.1g), 12% (1.2g), 13% (1.3g), 14% (1.4g), 15% (1.5g), 및 16% (1.6g). 재료는 10 ㎖ 부피로 예상되었다. 살균 메티실린이 각각의 실험 조건에 항생제 최종 농도 12, 30 또는 60 μg/㎖로 첨가되었다. 양성 대조군 12 μg/㎖, 30 μg/㎖, 60 μg/㎖ 항생제와 함께 및 항생제 없이 둘 다인 락토오스 배지가 MRSA로 접종되었다. 상기 락토오스 배지는 음성 대조군 세트 또한 있다. 또한, 5%, 10%, 및 16% 농도에서 MSM 대조군(항생제 없음)은 MRSA와 함께 및 MRSA 없이 둘 다 수행되었다. 하기에 기재된 바와 같이, 튜브들은 단일(singlet)로 준비되었으나, 도말은 세배(triplicate)로 되었다.
모든 튜브들은 그 뒤에 1.49x105 /㎖ (log=5.17)의 최종 콜로니 형성 단위(colony forming units)를 갖는 선별된 황색포도상 구균(Staphylococcus aureus) ATCC 43300 균주 클론을 희석하여 접종되었다. 상기 튜브들은 25 ℃에서 배양되었고 주기적으로 혼합되었다. 항생제는 유기체에 가해지는 압력을 유지하기 위해 매 24시간마다 초기 농도에서 재-접종되었다. 도말은 24, 48, 72, 및 120시간에 수행되었다. 각각의 조건은 1 ㎖의 생장 재료를 9 ㎖의 MLB 희석 배지로 희석되어 도말되었다. 상기 수행된 각각의 시간에, MSM-함유 생장 배지 1 ㎖가 정적(constant volume) 및 MSM 농도 유지를 위해 튜브에 다시 첨가되었다. 각각의 희석 시점에 3 배수의 살균된 패트리 접시(petri dish)에 위치한 상기 혼합물은 10-7에 이르기까지 1 ㎖로 순차적으로 희석되었다. TSA 20 ㎖이 각각 희석물에 첨가되었고, 섞이고 굳어졌다(solidify). 모든 희석물(dilution)은 35 ℃ 인큐베이터에 24 내지 72 시간 동안 놓여졌다. 각각의 플레이트 위의 박테리아 콜로니는 계수되었고 그 후에 평균이 로그 형식(log format)으로 바꼈다. 1.49x105 /㎖ (log=5.17)보다 크게 관찰된 cfu/㎖가 TNTC로 기록되었다. 그래프는 다른 측정값(data points) 사이의 비교를 보여주기 위해 TNTC에 대한 5.2의 로그로서 기록되었다.
결과:
본 발명에서 사용된 오직 세 농도의 메티실린(12 μg/㎖, 30 μg/㎖ 및 60 μg/㎖)에 대한 양성 대조군(MRSA로 접종한)은 초기 접종원 값(initial inoculums value)으로부터 콜로니 형성 단위에서 유의적 감소를 보여주지 않았다. 본 연구의 결과는 표 12-16에서 보여졌다.
5-16% MSM 및 12, 30 또는 60 μg/㎖ 메티실린에서의 24 시간 동안의황색포도상 구균( Staphylococcus aureus ) ATCC 43300 균주의 생존

%MSM
농도		 12 μg/㎖
메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 12 μg/㎖ 메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 12 μg/㎖
메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 24 시간 평균 로그(Average Log)
16 1.01x103 1.03x103 1.04x103 3.0
15 6.4x103 6.6x103 6.5x103 3.8
14 8.8X103 8.5X103 8.2X103 3.9
13 3.3x103 3.5x103 3.4x103 3.5
12 2.9x103 3.0x103 2.8x103 3.5
11 2.2x103 2.3x103 2.3x103 3.3
10 1.4x103 1.4x103 1.4x103 3.1
9 9.0x102 9.4x102 9.2x102 3.0
8 9.6x102 9.5x102 9.3x102 3.0
7 4.4x102 4.4x102 5.0x102 2.7
6 4.0x102 4.4x102 4.5x102 2.6
5 7.8x102 8.0x102 8.2x102 2.9
0 TNTC TNTC TNTC

%MSM
농도		 30 μg/㎖ 메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 30 μg/㎖ 메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 30 μg/㎖ 메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 24 시간 평균 로그
16 9.6x103 9.8x103 9.7x103 4.0
15 7.8x103 7.6x103 8.0x103 3.9
14 6.3X103 6.7X103 6.9X103 3.8
13 6.5x103 6.5x103 6.4x103 3.8
12 3.3x103 3.3x103 3.3x103 3.5
11 3.3x103 2.8x103 3.1x103 3.5
10 1.2x103 1.3x103 1.1x103 3.1
9 1.1x103 1.3x103 1.2x103 3.1
8 9.4x102 9.6x102 9.6x102 3.0
7 3.4x102 3.5x102 3.3x102 2.5
6 2.2x102 2.2x102 2.5x102 2.4
5 3.8x102 4.1x102 4.0x102 2.6
0 TNTC TNTC TNTC

%MSM
농도		 60 μg/㎖ 메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 60 μg/㎖ 메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 60 μg/㎖ 메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 24 시간 평균 로그
16 8.4x103 8.4x103 8.5x103 3.9
15 8.3x103 8.5x103 8.4x103 3.9
14 8.3X103 8.8X103 8.5X103 3.9
13 7.0x103 6.8x103 6.5x103 3.8
12 4.5x103 4.1x103 4.7x103 3.6
11 3.5x103 3.8x103 3.9x103 3.6
10 2.2x103 2.1x103 2.0x103 3.3
9 2.0x103 1.6x103 1.8x103 3.2
8 9.4x102 9.8x102 9.7x102 3.0
7 6.1x102 6.3x102 6.2x102 2.8
6 4.2x102 4.2x102 4.8x102 2.6
5 8.3x102 8.1x102 8.1x102 2.9
0 TNTC TNTC TNTC
표 12 및 도 5에 보여진 바와 같이, 24시간에 관찰된 cfu/㎖의 수는 모든 농도 사이에 유사하다. 더 낮은 농도의 MSM에서 더 높은 MSM 농도보다 콜로니 수에서 더 높은 로그 감소(log reduction)를 갖는 경향이 있다. 12 μg/㎖ 메티실린에 대한 콜로니 수에서의 로그 감소의 평균은 적거나 변화가 없는 모든 MSM 농도에서 내내 로그 1.5이다. 30 μg/㎖ 메티실린 조건은 3 로그 차이(log difference)의 평균인 더 낮은 MSM 농도에서 유의적인 감소를 갖는다. 60 μg/㎖ 메티실린 조건은 콜로니 수에서 항생제의 세 농도의 처음 24시간 동안 미세하게 낮은 로그 감소를 보여줬다. 한 시점은 2.2 로그 감소를 가진 16% MSM에서 12 μg/㎖이며, 가장 높은 농도에서 관찰된 것이다. 한 가상의 가능성(hypothetical possibility)은 그것이 상기 농도에 대한 상기 항생제 흡수에 대한 이상값(outlier) 또는 최적 지점(optimal point)인 것이다. 30 μg/㎖는 6% 농도에서의 콜로니 수에서 2.8의 로그 감소 전체에서 가장 높은 값을 가졌다. 음성 대조군 LB는 오염(contamination)에 대한 신호가 없어 보였다. 양성 대조군 LB는 탁한 생장을 보였으며 안전성의 이유로 이 시점에 종료되었다. 음성 대조군 5%, 10%, 및 16% MSM은 오염의 신호가 없었다. 양성 대조군 5%, 10%, 및 16% MSM은 탁한 생장을 보였으며, 도말된 모든 희석물에 대해 TNTC로 자랐으며, 이 시점에서 안전성의 이유로 종료되었다. 항생제 대조군은 초기 접종보다 유의적인 감소를 보이지 않았고, 음성 대조군은 오염의 신호를 보이지 않았다.
5-16% MSM 및 12, 30 또는 60 μg/㎖ 메티실린에서 48시간 동안의 황색포도상 구균( Staphylococcus aureus ) ATCC 43300 균주의 생존

%MSM
농도		 12 μg/㎖
메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 12 μg/㎖ 메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 12 μg/㎖
메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 48 시간
평균
로그
16 8.1x102 8.3x102 8.4x102 2.9
15 5.1x102 5.3x102 5.6x102 2.7
14 5.1x102 5.4x102 5.2x102 2.7
13 3.6x102 3.3x102 3.4x102 2.5
12 6.3x102 6.4x102 6.2x102 2.8
11 5.9x102 5.7x102 6.0x102 2.8
10 4.1x102 4.6x102 4.7x102 2.6
9 2.5x102 2.8x102 3.2x102 2.4
8 1.0x102 1.0x102 1.1x102 2.0
7 4.0x101 3.0x101 4.0x101 1.6
6 1.0x101 1.0x101 2.0x101 1.1
5 2.0x102 1.8x102 2.1x102 2.3
0 TNTC TNTC TNTC

%MSM
농도		 30 μg/㎖
메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 30 μg/㎖ 메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 30 μg/㎖
메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 48 시간
평균
로그
16 4.5x102 4.7x102 4.6x102 2.7
15 5.3x102 5.2x102 5.6x102 2.7
14 7.0x102 6.8x102 7.4x102 2.8
13 4.0x102 4.0x102 4.0x102 2.6
12 4.8x102 5.0x102 5.1x102 2.7
11 1.9x102 1.8x102 2.1x102 2.3
10 1.2x102 1.8x102 1.6x102 2.2
9 2.1x102 2.3x102 2.4x102 2.3
8 4.1x102 4.0x102 3.4x102 2.6
7 1.8x102 1.5x102 1.6x102 2.2
6 2.9x102 2.2x102 2.5x102 2.4
5 4.6x102 4.8x102 4.4x102 2.7
0 TNTC TNTC TNTC

%MSM
농도		 60 μg/㎖
메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 60 μg/㎖ 메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 60 μg/㎖
메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 48 시간
평균
로그
16 2.1x102 2.2x102 1.8x102 2.3
15 3.5x102 3.8x102 3.8x102 2.6
14 2.9x102 2.9x102 3.1x102 2.5
13 4.0x102 3.7x102 3.6x102 2.6
12 3.3x102 3.8x102 3.7x102 2.6
11 5.0x101 5.0x101 4.0x101 1.7
10 2.1x102 2.4x102 2.5x102 2.4
9 1.3x102 1.2x102 1.3x102 2.1
8 8.0x101 6.0x101 7.0x101 1.8
7 2.4x102 2.1x102 2.3x102 2.4
6 2.0x102 2.0x102 3.0x102 2.4
5 1.0x101 2.0x101 1.0x101 1.1
0 TNTC TNTC TNTC
표 13에서 보여진 바와 같이, 콜로니 수에서의 상기 로그 감소는 모든 농도 사이에 더욱 유사하도록 시작한다. 상기 경향은 로그 감소에서 또 더 낮은 MSM 퍼센트 조건에서 유사해지는 더 높은 MSM 퍼센트 조건의 끝을 보여주기 위해 시작하고 있다. 6%-7% MSM에서의 12 μg/㎖ 메티실린 조건은, 콜로니 수에서 가장 높은 로그 감소를 가지는 5% MSM 및 60 μg/㎖ 조건 및 6% MSM 및 12 μg/㎖ 메티실린 조건을 제외한 전체 콜로니 수에서 더 높은 로그 감소를 보이고 있다. 상기 결과에 대한 한 가상의 설명은 상기 시간에 대한 최고의 농도를 보여주는 것이 가능할 것이라는 것이다.
30 및 60 μg/㎖ 메티실린은 8%-12% MSM 조건에서의 24시간의 결과보다 전체적으로 더 감소되었다. 60 μg/㎖는 콜로니 수에서 항생제 세 농도 사이에서의 처음 24시간 기간에 비해 더 높은 평균 로그 감소를 유지한다. 두 시점은 (1) 콜로니 수에서 4.1의 로그 감소를 갖는 12 μg/㎖ 메티실린 조건에서의 6% MSM 및(2) 콜로니 수에서 4.1의 로그 감소를 갖는 60 μg/㎖ 메티실린 조건에서의 5% MSM이다. 상기 결과에 대한 순전히 가상적인 설명은 메티실린이 MSM에 대한 추가적인 극성 결합 자리(polar binding sites)를 가지므로, 세포내로의 흡수를 가능하게 하는 최적의 농도를 제공한다는 것이다. 전체 그래프는 8%에서 16%까지의 MSM 농도에서 더 감소하는 것을 보여주고 있다. 음성 대조군 LB는 오염의 신호를 보이지 않았다. 양성 대조군 LB는 105 도말에서 TNTC의 탁한 생장을 보였다. 음성 대조군 5%, 10%, 및 16% MSM은 오염의 신호를 보이지 않았다. 상기 항생제 대조군은 초기 접종으로부터 유의적인 감소의 신호를 보이지 않았고, 음성 대조군은 오염의 신호를 보이지 않았다.
5-16% MSM 및 12, 30 또는 60 μg/㎖ 메티실린에서 72시간 동안의 황색포도상 구균( Staphylococcus aureus ) ATCC 43300 균주의 생존

%MSM
농도		 12 μg/㎖
메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 12 μg/㎖ 메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 12 μg/㎖
메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 72 시간
평균
로그
16 3.3x102 3.1x102 3.4x102 2.5
15 1.6x102 2.1x102 2.2x102 2.3
14 2.2x102 2.5x102 2.0x102 2.3
13 1.4x102 1.7x102 1.6x102 2.2
12 2.3x102 2.5x102 2.6x102 2.4
11 5.1x102 4.9x102 5.0x102 2.7
10 2.1x102 1.9x102 1.8x102 2.3
9 1.1x102 1.3x102 1.4x102 2.1
8 4x101 5x101 5x101 1.7
7 0 0 0 0
6 0 0 0 0
5 2.4x102 2.7x102 2.6x102 2.4
0 TNTC TNTC TNTC

%MSM
농도		 30 μg/㎖
메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 30 μg/㎖ 메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 30 μg/㎖
메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 72 시간
평균
로그
16 1.0x102 1.2x102 1.1x102 2.0
15 2.7x102 2.7x102 2.9x102 2.4
14 1.9x102 2.0x102 2.2x102 2.3
13 1.7x102 1.8x102 1.7x102 2.2
12 1.6x102 1.9x102 1.9x102 2.3
11 1.1x102 1.3x102 1.1x102 2.1
10 1.0x102 1.0x102 1.0x102 2.0
9 1.2x102 1.1x102 1.0x102 2.0
8 2.2x102 2.5x102 2.4x102 2.4
7 2.0x101 2.0x101 2.0x101 1.3
6 TNTC TNTC TNTC 5.2
5 6x101 8x101 7x101 1.8
0 TNTC TNTC TNTC

%MSM
농도		 60 μg/㎖
메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 60 μg/㎖
메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 60 μg/㎖
메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 72 시간
평균
로그
16 2.0x101 4.0x101 2.0x101 1.4
15 1.3x102 1.3x102 1.3x102 2.1
14 1.1x102 1.4x102 1.4x102 2.1
13 1.7x102 1.5x102 1.8x102 2.2
12 1.2x102 1.3x102 1.2x102 2.1
11 1.0x102 1.0x102 1.1x102 2.0
10 8.0x101 9.0x101 8.0x101 1.9
9 8.0x101 8.0x101 8.0x101 1.9
8 1.0x102 1.1x102 1.1x102 2.0
7 5.0x101 4.0x101 6.0x101 1.7
6 0 0 0 0
5 0 0 0 0
0 TNTC TNTC TNTC
표 14에 보여진 바와 같이, 72시간에서의 6% 및 7% MSM 및 12 μg/㎖ 메티실린 조건은 모든 도말에서 콜로니가 보이지 않았다. 6% 및 7% MSM 튜브는 그 뒤에 실험에서 제외되었고 MRSA에 대해 시험되었다. 상기 튜브는 10분 동안 5000 rpm에서 스핀 다운(spin down)되었다. 상기 상등액은 그 뒤에 6 μg/㎖의 메티실린이 들어있는 90 ㎖의 뮐러-힌튼 배지(Mueller-Hinton broth)에 부어졌다. 상기 실험은 농축 및 건강하거나 스트레스 받은 상태일 것인 MRSA 세포의 회복을 위한 것이다. 상기 펠릿은 존재할지도 모르는 세포를 재생시키기 위해 첨가된 6 μg/㎖의 메티실린이 포함된 10 ㎖의 뮐러-힌튼 배지가 있었다. 두 용기는 35 ℃에서 48시간 동안 배양되었고 각각 24시간에 도말되었다. 각각의 용기(vessel)는 1 cfu 검출 한계를 얻기 위해 10배 희석되어 도말되었다. 모든 용기들이 농축 용액에 1/10로 희석되어 도말되었기 때문에, 상기 방법에서 각각의 용기는 1 cfu/㎖의 검출 한게를 제공했다. 유기체가 회복될 수 없었기 때문에, 총 사멸은 사실로 고려되었다. 도식화 목적을 위해 상기 시점은 0 로그(log)로서 기록될 수 있다.
표 14에서 보여지는 바와 같이, 72시간에서의 5% 및 6% MSM 및 60 μg/㎖ 메티실린 조건은 모든 도말에서 콜로니가 없음을 보여줬다. 5% 및 6% MSM 튜브는 그 뒤에 실험에서 꺼내지고 MRSA에 대해 시험되었다. 상기 튜브들은 5000 rpm에서 10분 동안 스핀 다운되었다. 상기 상등액은 그 뒤에 6 μg/㎖의 메티실린이 들어있는 90 ㎖의 뮐러-힌튼 배지(Mueller-Hinton broth)에 부어졌다. 상기 실험은 농축 및 건강하거나 스트레스 받은 상태일 것인 MRSA 세포의 회복을 위한 것이다. 상기 펠릿에 존재할지도 모르는 세포를 재생시키기 위해 첨가된 6 μg/㎖의 메티실린이 포함된 10 ㎖의 뮐러-힌튼 배지가 부어졌다. 두 용기는 35 ℃에서 48시간 동안 배양되었고 각각 24시간에 도말되었다. 각각의 용기(vessel)는 1 cfu 검출 한계를 얻기 위해 10배 희석되어 도말되었다. 모든 용기들이 농축 용액에 1/10로 희석되어 도말되었기 때문에, 상기 방법에서 각각의 용기는 1 cfu/㎖의 검출 한게를 제공했다. 유기체가 회복될 수 없었기 때문에, 총 사멸은 사실로 고려되었다. 도식화 목적을 위해 상기 시점은 0 로그(log)로서 기록될 수 있다.
실시예 6에 보여진 옥사실린에 대한 실험시에 비해, 72시간 시점에서의 상기 결과는 30 μg/㎖ 메티실린에서의 6% MSM 조건을 제외한 콜로니 수에서 더 큰 로그 감소를 보여준다. 상기에 대한 순전히 가상의 설명은 메티실린이 MSM에 대한 결합 자리를 더 가지고 모든 농도 사이에서 더욱 단일화되는 경향을 가지는 것이다. 72시간 표시 경향은 더 낮은 및 더 높은 농도가 5-7 %의 MSM 농도에서 독자 생존 가능한 유기체(viable organism)의 비-재생에서 큰 효과를 가지는 더 낮은 끝(lower end)과 함께 단일 형태의 감소를 더욱 가지는 것을 보여주기 시작하고 있다. 상기 메티실린 분석은 이전 실험에서의 옥사실린 분석보다 더 낮은 비율로 항생제 저항성으로 복귀되는 것을 보여준다. 상기 결과에 대한 순전히 가상의 설명은 MSM이 메티실린의 가능한 결합 자리의 증가 때문에 더욱 효과적으로 세포내로 들어가지는 것이다. 메티실린의 72시간 시점은 전에 보인 MRSA의 실제 사멸보다 더욱 보여준다. 알게된 것은 MSM이 같은 농도로 대체되며, 이전 실험에서 그랬던 것과 같이 고정된 농도에서는 대체되지 않는 것이다.
5-16% MSM 및 12, 30 또는 60 μg/㎖ 메티실린에서 96시간 동안의 황색포도상 구균( Staphylococcus aureus ) ATCC 43300 균주의 생존

%MSM
농도		 12 μg/㎖
메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 12 μg/㎖ 메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 12 μg/㎖
메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 96 시간
평균
로그
16 1.1x102 1.3x102 1.2x102 2.1
15 1.4x102 1.3x102 1.6x102 2.2
14 1.2x102 1.2x102 1.3x102 2.1
13 1.1x102 1.0x102 1.0x102 2.0
12 1.6x102 1.8x102 1.8x102 2.2
11 1.0x102 1.1x102 1.2x102 2.0
10 1.1x102 1.2x102 1.2x102 2.1
9 TNTC TNTC TNTC 5.2
8 0 0 0 0
7 0 0 0 0
6 0 0 0 0
5 1.33x103 1.40x103 1.47x103 3.1
0 TNTC TNTC TNTC

%MSM
농도		 30 μg/㎖
메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 30 μg/㎖
메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 30 μg/㎖
메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 96 시간
평균
로그
16 2.0x101 1.8x101 1.6x101 2.3
15 1.1x102 1.1x102 1.3x102 2.1
14 1.2x102 1.3x102 1.1x102 2.1
13 1.0x102 1.5x102 1.0x102 2.1
12 4.0x101 4.0x101 4.0x101 1.6
11 3.0x101 4.0x101 3.0x101 1.5
10 2.0x101 2.0x101 1.0x101 1.2
9 2.5x102 2.7x102 2.8x102 2.4
8 4.5x102 4.5x102 4.0x102 2.6
7 1.1x102 1.3x102 1.5x102 2.1
6 TNTC TNTC TNTC 5.2
5 4.2x102 4.1x102 4.5x102 2.6
0 TNTC TNTC TNTC 5.2

%MSM
농도		 60 μg/㎖
메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 60 μg/㎖
메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 60 μg/㎖
메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 96 시간
평균
로그
16 4.0x101 7.0x101 6.0x101 1.75
15 1.0x101 1.0x101 1.0x101 1
14 1.0x101 1.0x101 1.0x101 1
13 6.0x101 3.0x101 3.0x101 1.6
12 3.0x101 2.0x101 2.0x101 1.4
11 1.0x101 2.0x101 1.0x101 1.1
10 6.0x101 6.0x101 6.0x101 1.8
9 2.0x101 3.0x101 1.0x101 1.3
8 1.39x104 1.41x104 1.36x104 4.1
7 1.2x104 1.2x104 1.5x104 4.1
6 0 0 0 0
5 0 0 0 0
0 TNTC TNTC TNTC 5.2
표 15에서 보여진 바와 같이, 96시간 및 12 μg/㎖ 메티실린에서, 9% MSM 농도는 더많은 박테리아의 생존을 보였다. 상기 결과에 대한 순전히 가상의 설명은 박테리아가 항생제 저항성을 갖도록 회귀되었다는 것이다. 또한, 5% MSM 조건은 더 많은 박테리아의 생존을 보이고 있다. 8% MSM 농도는 모든 도말에서 콜로니를 보이지 않았다. 8% 튜브는 그 뒤에 실험에서 꺼내지고 MRSA에 대해 시험되었다. 상기 튜브는 10분 동안 5000 rpm에서 스핀 다운되었다. 상기 상등액은 그 뒤에 6 μg/㎖의 메티실린이 들어있는 90 ㎖의 뮐러-힌튼 배지(Mueller-Hinton broth)에 부어졌다. 상기 실험은 농축 및 건강하거나 스트레스 받은 상태일 것인 MRSA 세포의 회복을 위한 것이다. 상기 남은 테스트튜브는 존재할지도 모르는 세포를 재생시키기 위해 첨가된 6 μg/㎖의 메티실린이 포함된 10 ㎖의 뮐러-힌튼 배지가 있었다. 두 용기는 35 ℃에서 48시간 동안 배양되었고 각각 24시간에 도말되었다. 각각의 용기(vessel)는 1 cfu 검출 한계를 얻기 위해 10배 희석되어 도말되었다. 모든 용기들이 농축 용액에 1/10로 희석되어 도말되었기 때문에, 상기 방법에서 각각의 용기는 1 cfu/㎖의 검출 한게를 제공했다. 유기체가 회복될 수 없었기 때문에, 총 사멸은 사실로 고려되었다. 도식화 목적을 위해 상기 시점은 0 로그(log)로서 기록될 수 있다.
표 15에서 보여진 바와 같이, 96시간 및 30 μg/㎖ 메티실린에서, 더 높은 MSM 농도는 cfu/㎖에서 더 큰 로그 감소를 보이고 있다. 5% 내지 9%의 MSM 농도는(6% MSM은 제외하고), cfu/㎖에서 더 적은 감소를 보이고 있다. 96시간 및 60 μg/㎖ 메티실린에서, 9% 내지 16% MSM 농도는 콜로니 수에서 72시간 시점보다 더 큰 로그 감소를 보였다. 7% 및 8% MSM 조건은 cfu/㎖에서 더 적은 감소를 보이고 있다.
8% MSM 및 12 μg/㎖ 조건은 독자 생존 가능한 유기체(viable organisms)가 생존하기 못함을 보인다. TNTC가 7% 및 8% MSM 및 60 μg/㎖ 메티실린, 및 5% MSM 및 12 μg/㎖ 메티실린 조건에서 관찰되었다. 대체로, 96시간에서, 10-16 % MSM 조건은 72시간의 이전 시점에 비해 콜로니 수가 미세하게 낮거나 비슷했다.
30 μg/㎖는 5 내지 9 % MSM 조건을 통틀어 증가된 콜로니 수를 보였다. 콜로니 수에서의 로그 감소는 10-16%에 대해 이전 시점에 비해 미세하게 낮거나 동일하게 유지되었고 계속 변함없다.
5-16% MSM 및 12, 30 또는 60 μg/㎖ 메티실린에서 120시간 동안의 황색포도상 구균( Staphylococcus aureus ) ATCC 43300 균주의 생존

%MSM
농도		 12 μg/㎖
메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 12 μg/㎖
메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 12 μg/㎖
메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 120 시간 평균
로그
16 2.0x102 2.3 x102 2.4 x102 2.3
15 2.9 x102 3.4 x102 3.1 x102 2.5
14 3.5 x102 4.0 x102 3.8 x102 2.6
13 2.0 x102 1.8 x102 2.1 x102 2.3
12 1.21 x103 1.21 x103 1.21 x103 4.1
11 1.24 x104 1.22 x104 1.23 x104 4.1
10 1.10 x104 1.10 x104 1.13 x104 4.0
9 TNTC TNTC TNTC 5.2
8 0 0 0 0
7 0 0 0 0
6 0 0 0 0
5 TNTC TNTC TNTC 5.2
0 TNTC TNTC TNTC 5.2

%MSM
농도		 30 μg/㎖
메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 30 μg/㎖
메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 30 μg/㎖
메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 120 시간
평균
로그
16 0 0 0 0
15 3.0 x101 4.0 x101 3.0 x101 1.5
14 5.0 x101 7.0 x101 6.0 x101 1.8
13 5.0 x101 4.0 x101 4.0 x101 1.6
12 0 0 0 0
11 0 0 0 0
10 0 0 0 0
9 1.3 x103 1.1 x103 1.2 x103 3.1
8 9.0 x102 9.1 x102 9.5 x102 3.0
7 TNTC TNTC TNTC 5.2
6 TNTC TNTC TNTC 5.2
5 1.21 x103 1.21 x103 1.21 x103 3.0
0 TNTC TNTC TNTC 5.2

%MSM
농도		 60 μg/㎖
메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 60 μg/㎖
메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 60 μg/㎖
메티실린 / MSM
(cfu/㎖)		 120 시간
평균
로그
16 1.0 x101 2.0 x101 2.0 x101 1.2
15 0 0 0 0
14 0 0 0 0
13 3.0 x101 3.0 x101 3.0 x101 1.5
12 0 0 0 0
11 0 0 0 0
10 1.0 x101 1.0 x101 1.0 x101 1
9 1.0 x101 1.0 x101 1.0 x101 1
8 TNTC TNTC TNTC 5.2
7 TNTC TNTC TNTC 5.2
6 0 0 0 0
5 0 0 0 0
0 TNTC TNTC TNTC 5.2
표 16에 보여진 바와 같이, 120시간 및 30 μg/㎖메티실린에서, 10%, 11%, 12% 및 16% MSM 농도는 콜로니가 보이지 않았다; 그리고 120시간 및 60 μg/㎖ 메티실린에서, 11%, 12%, 14% 및 15% MSM 농도는 콜로니가 보이지 않았다. 상기 조건에 상응하는 튜브들은 그 뒤에 실험에서 꺼내지고 MRSA에 대해 시험되었다. 상기 튜브들은 10분 동안 5000 rpm에서 스핀 다운되었다. 상기 상등액은 그 뒤에 6 μg/㎖의 메티실린이 들어있는 90 ㎖의 뮐러-힌튼 배지(Mueller-Hinton broth)에 부어졌다. 상기 실험은 농축 및 건강하거나 스트레스 받은 상태일 것인 MRSA 세포의 회복을 위한 것이다. 상기 남은 테스트튜브는 존재할지도 모르는 세포를 재생시키기 위해 첨가된 6 μg/㎖의 메티실린이 포함된 10 ㎖의 뮐러-힌튼 배지가 있었다. 두 용기는 35 ℃에서 48시간 동안 배양되었고 각각 24시간에 도말되었다. 각각의 용기들(vessel)은 1 cfu 검출 한계를 얻기 위해 10배로 되어 도말되었다. 모든 용기들이 농축 용액에 1/10로 희석되어 도말되었기 때문에, 상기 방법에서 각각의 용기는 1 cfu의 검출 한게를 제공했다. 유기체가 회복될 수 없었기 때문에, 총 사멸은 사실로 고려되었다. 도식화 목적을 위해 상기 시점은 0 로그(log)로서 기록될 수 있다.
전체적으로, 120시간 및 12 μg/㎖ 메티실린에서, 13-16% MSM 에서 cfu/㎖에 미세한 증가 및 10%-12% MSM 농도에서 에 이전 시점에 비해 더 큰 증가가 있다. 5% MSM 및 12 μg/㎖ 메티실린 조건은 TNTC cfu/㎖를 보였다. 13-16% MSM의 더 높은 농도만이 cfu/㎖에서 미세한 증가를 보였다. 상기 결과에 대한 순전히 가상의 설명은 박테리아가 항생제 저항성을 갖도록 회귀했다는 것이나, 더 낮은 농도는 유의적으로 cfu/㎖가 증가한 반면, 더 높은 MSM 농도에서는 cfu/㎖가 미세하게 증가하는 것을 봤기 때문에, MSM의 더 높은 농도는 회기 과정을 늦추는 것에 유의적인 영향을 줬다는 것이다.
30 μg/㎖ 메티실린에서, 16%, 12%, 11%, 및 10% MSM 조건은 회복이 보이지 않는 실제 사멸을 보였다. 15%, 14%, 및 13% MSM 조건은 이전 시점보다 cfu/㎖가 미세하게 감소하는 것을 보였다. 5%, 8% 및 9% MSM 조건은 이전 시점보다 미세하게 더 높은 cfu/㎖을 보였다.
60 μg/㎖ 메티실린에서, 15%, 14%, 12% 및 11% MSM 조건은 유기체의 회복없이 실제 사멸을 보였다. 10% 및 9% 농도 포인트는 이전 시점보다 cfu/㎖가 지속적으로 감소하는 것을 보여준다. 한 가능성은 MSM 및 항생제의 상기 농도들이 MRSA에 더 큰 효과를 갖는다는 것이다.
전체적으로, MSM 및 메티실린의 조합은 MRSA 콜로니 형성 단위를 평가된 모든 시점에 유의적으로 감소시키는 능력을 입증했다. 본 실험의 상기 결과들에 기초하여 MSM는 실험실내에서 MRSA의 메티실린에 대한 감수성을 회복시키는 능력을 갖는 것으로 보인다. 이전 실험에서 옥사실린에 비교했을 때, 로그 값에서의 감소 비율은 심지어 더욱 더 농도 전체에 걸친다. 상기 결과에 대한 한 가상의 설명은 메티실린이 모든 실험에서 옥사실린과 구조에서 비교되어 나타났을 때 더 많은 결합 자리는 갖는다는 것이다. 더욱 유의적인 실제 사멸이 있으며 모든 농도에서 메티실린에 의한 감소가 옥사실린에 의한 것 보다 더 크다.
전체적으로, 표 12-16에 나타내어진 상기 데이터는 처음 24시간에 더 낮은 퍼센트의 MSM에서 평가된 메티실린의 모든 세 농도에 대해 더 높은 감소가 있는 것을 보인다. 상기 경향은 중간에서 상위의 MSM 농도에서 관찰된 최고로 감소한 48시간에 미세하게 변한다. 72시간에 경향은 결정적으로 높은 MSM 농도에서 더 높은 로그 감소로 뒤바꼈다. MSM은 추가적인 생장 배지(생장 바이알처럼 동일한 원래의 MSM 농도를 포함하는 LB)가 바이알(vial) 내의 원래의 부피를 유지하기 위해 첨가되었을 때만 첨가되었다. 예를 들어 12 μg/㎖ 메티실린 및 5% MSM의 1 ㎖ 분리표본이 도말을 위해 제거되면, 5% MSM을 포함한 LB 1 ㎖이 다시 첨가될 것이다. 항생제는 이전에 기재된 바와 같이 적절한 농도로 매 24시간에 첨가되었다.
하기는 상기에서 보인 효과의 일부에 대한 가상의 설명으로서 제공된다; 그러나, 본 설명들의 목적은 제한을 위한 것이 아니다. 관찰된 결과들에 대한 가상의 및 비-제한적인 가능성은 MSM이 유기체에 의해 소모되었다는 것이다. 상기 결과들에 대한 또다른 가상의 및 비-제한적인 가능성은 감수성에 대한 회귀를 야기하기 위한 MSM의 능력이 메티실린을 MRSA 세포내로 운반하는 MSM의 능력 때문일 수 있다는 것 이다. 또 다른 상기 결과들에 대한 또다른 가상의 및 비-제한적인 가능성은 너무 높은 MSM 수준은 어떤 시점에서는 덜 효과적인 것이다. 예를 들어, 상기 결과는 높은 농도에서 메티실린과 결합한 MSM과 경쟁하는 과잉 자유 MSM 분자들의 경쟁 때문일 것이다. MSM에 결합한 메티실린보다 더 많은 세포를 통과한 자유 MSM를 가질 것이다. 용매내 더 높은 총 MSM 분자의 전체 퍼센트를 갖는 더 낮은 농도는 세포를 통과하기 위해 메티실린에 결합하고, 경쟁할 자유 MSM이 덜있기 때문에 더 많은 메티실린과의 결합을 허용한다. 상기 가설하에, MRSA 세포를 통과할 주어진 수의 MSM 분자들에 대해, MSM 대 메티실린의 비율은 최고의 효과를 얻기 위해 중요하다. MSM 이 과잉으로 존재하면, MSM 분자들이 세포를 투과하는 메티실린에 결합하지 않을 기회가 증가한다.
당업자에게 본 발명에서 밝혀진 의식으로부터의 출발 없이 많은 다양한 변형이 가능할 것임이 자명하다. 따라서, 본 발명에서 밝혀진 실시태양은 오직 설명임이 명확히 이해될 것이다.

Claims (24)

  1. 시험관 내에서(in vitro) 황색포도상 구균 병원체를 선별하는 단계; 및
    상기 황색포도상 구균 병원체를, 약학적으로 유효한 양의 메틸설포닐메탄(methylsulfonylmethane, MSM) 및 약학적으로 유효한 양의 페니실린 유도체인 항생제를 포함하는 조성물과 시험관 내에서(in vitro) 접촉시키는 단계를 포함하는, 황색포도상 구균 병원체를 억제하는 방법.
  2. 시험관 내에서(in vitro) 황색포도상 구균 병원체를 선별하는 단계; 및
    상기 황색포도상 구균 병원체를, 약학적으로 유효한 양의 메틸설포닐메탄(methylsulfonylmethane, MSM)을 포함하는 조성물과 시험관 내에서(in vitro) 접촉시키는 단계를 포함하는, 황색포도상 구균 병원체를 황색포도상 구균 병원체가 저항성을 가지는 페니실린 유도체 항생제에 대해 민감하게 만드는 방법.
  3. 시험관 내에서(in vitro) 황색포도상 구균 병원체를 선별하는 단계; 및
    상기 황색포도상 구균 병원체를, 약학적으로 유효한 양의 메틸설포닐메탄(methylsulfonylmethane, MSM)을 포함하는 조성물과 시험관 내에서(in vitro) 접촉시키는 단계를 포함하는, 황색포도상 구균 병원체의 페니실린 유도체 항생제에 대한 저항성 발달을 억제하는 방법.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 황색포도상 구균 병원체는 메티실린 저항성 황색포도상 구균인 것을 특징으로 하는 황색포도상 구균 병원체를 억제하는 방법.
  5. 제1항에 있어서,
    상기 페니실린 유도체 항생제는 메티실린(methicillin), 옥사실린(oxacillin) 또는 이들의 조합으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 황색포도상 구균 병원체를 억제하는 방법.
  6. 제1항에 있어서,
    상기 메틸설포닐메탄(methylsulfonylmethane, MSM)의 양은 5-20 중량%인 것을 특징으로 하는 황색포도상 구균 병원체를 억제하는 방법.
  7. 제1항에 있어서,
    상기 조성물은 상기 황색 포도상 구균 병원체와 24-120시간 동안 접촉하는 것을 특징으로 하는 황색포도상 구균 병원체를 억제하는 방법.
  8. 제1항에 있어서,
    상기 조성물은 0-5 중량%의 염화나트륨(sodium chloride)을 포함하는 것을 특징으로 하는 황색포도상 구균 병원체를 억제하는 방법.
  9. 제1항에 있어서,
    상기 황색포도상 구균 병원체는 개체의 표면에 존재하는 것을 특징으로 하는 황색포도상 구균 병원체를 억제하는 방법.
  10. 약학적으로 유효한 양의 메틸설포닐메탄(methylsulfonylmethane, MSM) 및 약학적으로 유효한 양의 페니실린 유도체 항생제를 포함하는, 황색포도상 구균 병원체 억제용 조성물.
  11. 약학적으로 유효한 양의 메틸설포닐메탄(methylsulfonylmethane, MSM)을 포함하는, 페니실린 유도체 항생제에 대해 저항성을 나타내는 황색포도상 구균 병원체의 감작(sensitizing)용 조성물.
  12. 약학적으로 유효한 양의 메틸설포닐메탄(methylsulfonylmethane, MSM)을 포함하는, 황색포도상 구균 병원체의 페니실린 유도체 항생제 저항성 발달 억제용 조성물.



  13. 제2항에 있어서,
    상기 황색포도상 구균 병원체는 메티실린 저항성 황색포도상 구균인 것을 특징으로 하는 황색포도상 구균 병원체를 황색포도상 구균 병원체가 저항성을 가지는 페니실린 유도체 항생제에 대해 민감하게 만드는 방법.
  14. 제2항에 있어서,
    상기 페니실린 유도체 항생제는 메티실린(methicillin), 옥사실린(oxacillin) 또는 이들의 조합으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 황색포도상 구균 병원체를 황색포도상 구균 병원체가 저항성을 가지는 페니실린 유도체 항생제에 대해 민감하게 만드는 방법.
  15. 제2항에 있어서,
    상기 메틸설포닐메탄(methylsulfonylmethane, MSM)의 양은 5-20 중량%인 것을 특징으로 하는 황색포도상 구균 병원체를 황색포도상 구균 병원체가 저항성을 가지는 페니실린 유도체 항생제에 대해 민감하게 만드는 방법.
  16. 제2항에 있어서,
    상기 조성물은 상기 황색 포도상 구균 병원체와 24-120시간 동안 접촉하는 것을 특징으로 하는 황색포도상 구균 병원체를 황색포도상 구균 병원체가 저항성을 가지는 페니실린 유도체 항생제에 대해 민감하게 만드는 방법.
  17. 제2항에 있어서,
    상기 조성물은 0-5 중량%의 염화나트륨(sodium chloride)을 포함하는 것을 특징으로 하는 황색포도상 구균 병원체를 황색포도상 구균 병원체가 저항성을 가지는 페니실린 유도체 항생제에 대해 민감하게 만드는 방법.
  18. 제2항에 있어서,
    상기 황색포도상 구균 병원체는 개체의 표면에 존재하는 것을 특징으로 하는 황색포도상 구균 병원체를 황색포도상 구균 병원체가 저항성을 가지는 페니실린 유도체 항생제에 대해 민감하게 만드는 방법.
  19. 제3항에 있어서,
    상기 황색포도상 구균 병원체는 메티실린 저항성 황색포도상 구균인 것을 특징으로 하는 황색포도상 구균 병원체의 페니실린 유도체 항생제에 대한 저항성 발달을 억제하는 방법.
  20. 제3항에 있어서,
    상기 페니실린 유도체 항생제는 메티실린(methicillin), 옥사실린(oxacillin) 또는 이들의 조합으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 황색포도상 구균 병원체의 페니실린 유도체 항생제에 대한 저항성 발달을 억제하는 방법.
  21. 제3항에 있어서,
    상기 메틸설포닐메탄(methylsulfonylmethane, MSM)의 양은 5-20 중량%인 것을 특징으로 하는 황색포도상 구균 병원체의 페니실린 유도체 항생제에 대한 저항성 발달을 억제하는 방법.
  22. 제3항에 있어서,
    상기 조성물은 상기 황색 포도상 구균 병원체와 24-120시간 동안 접촉하는 것을 특징으로 하는 황색포도상 구균 병원체의 페니실린 유도체 항생제에 대한 저항성 발달을 억제하는 방법.
  23. 제3항에 있어서,
    상기 조성물은 0-5 중량%의 염화나트륨(sodium chloride)을 포함하는 것을 특징으로 하는 황색포도상 구균 병원체의 페니실린 유도체 항생제에 대한 저항성 발달을 억제하는 방법.
  24. 제3항에 있어서,
    상기 황색포도상 구균 병원체는 개체의 표면에 존재하는 것을 특징으로 하는 황색포도상 구균 병원체의 페니실린 유도체 항생제에 대한 저항성 발달을 억제하는 방법.

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Families Citing this family (82)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9427419B2 (en) 2005-09-12 2016-08-30 Abela Pharmaceuticals, Inc. Compositions comprising dimethyl sulfoxide (DMSO)
AU2006291134C1 (en) 2005-09-12 2013-08-15 Abela Pharmaceuticals, Inc. Systems for removing dimethyl sulfoxide (DMSO) or related compounds, or odors associated with same
WO2007033180A1 (en) 2005-09-12 2007-03-22 Abela Pharmaceuticals, Inc. Materials for facilitating administration of dimethyl sulfoxide (dmso) and related compounds
BRPI0921494A2 (pt) * 2008-11-03 2018-10-30 Prad Reasearch And Development Ltd método de planejamento de uma operação de amostragem para uma formação subterrãnea, método de contolar uma operação de amostragem de formação subterrânea, método de controlar uma operação de perfuração para uma formação subterrãnea, e método de realizar uma amostragem durante a operação de perfuração.
CN102834520B (zh) * 2009-10-30 2016-05-25 生物基因创新有限责任公司 甲基磺酰甲烷(msm)用于调制微生物活性的用途
CA2779111C (en) 2009-10-30 2019-08-13 Abela Pharmaceuticals, Inc. Dimethyl sulfoxide (dmso) and methylsulfonylmethane (msm) formulations to treat osteoarthritis
WO2011123695A1 (en) * 2010-03-31 2011-10-06 Abela Pharmaceuticals, Inc. Dimethy sulfoxxide (dmso) formulations for treating autism
RU2446815C1 (ru) * 2011-03-03 2012-04-10 Общество С Ограниченной Ответственностью "Парафарм" Биологически активная добавка к пище для нормализации функции щитовидной железы
EP3659576A1 (en) * 2011-03-09 2020-06-03 Baum, Marc Michael Keratin-based hair straightening formulations, methods and systems
US20120244362A1 (en) 2011-03-22 2012-09-27 Pramanik Pranabes K Multi-layer sheet structure
US8932656B1 (en) 2011-09-20 2015-01-13 Aja Henderson Oil blend for skin treatment
US9446089B1 (en) 2011-09-20 2016-09-20 Aja Henderson Oil blend for skin treatment
US9717757B1 (en) 2011-12-28 2017-08-01 Samuel N. Gasque, Jr. Composition and method to treat and prevent muscle cramping
KR101381794B1 (ko) * 2012-04-10 2014-04-07 씨제이제일제당 (주) 타가토스 및 프로바이오틱 유산균을 함유하는 신바이오틱 식품 조성물
US11931393B2 (en) * 2012-04-10 2024-03-19 Parapharm Llc Biologically active food additive for normalizing the function of the thyroid gland
RU2525426C2 (ru) * 2012-07-16 2014-08-10 Государственное научное учреждение Научно-исследовательский ветеринарный институт Нечерноземной зоны Российской Федерации Российской академии сельскохозяйственных наук Способ коррекции вторичных иммунодефицитов у телят
CA2934448A1 (en) * 2012-12-20 2014-06-26 Rajiv Bhushan Antimicrobial compositions
KR101460777B1 (ko) 2013-03-04 2014-11-19 주식회사 씨앤피코스메틱스 여드름 개선용 화장료 조성물
US9484589B1 (en) * 2013-08-13 2016-11-01 The United States Of America As Represented By Secretary Of The Navy Microbial fuel cell with sediment agitator
CN103435151B (zh) * 2013-08-20 2014-10-08 珠海市德莱环保科技有限公司 提高废水好氧微生物降解cod能力的生物增强剂及方法
GB2521632B (en) * 2013-12-23 2020-12-16 Linscott Goode Steven Vermin control compositions
US20150328139A1 (en) * 2014-05-15 2015-11-19 Keith Marz Orally Ingested or Topically Applied Skin Health and Nutrition Product
US10610552B2 (en) 2016-04-05 2020-04-07 Nch Corporation Nutrient rich germinant composition and spore incubation method
US10766799B2 (en) * 2014-05-23 2020-09-08 Nch Corporation Method for improving quality of aquaculture pond water using a nutrient germinant composition and spore incubation method
BR112017004118B1 (pt) 2014-09-30 2022-04-12 Kimberly-Clark Worldwide, Inc Trama de papel crepado, produto de papel crepado de múltiplas camadas, e, método de fabricação de uma trama de papel crepado prebiótico
WO2016053308A1 (en) 2014-09-30 2016-04-07 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Synergistic prebiotic composition
AU2016250791B2 (en) * 2015-04-23 2021-10-21 Bd Kiestra B.V. Colony contrast gathering
WO2016210074A1 (en) * 2015-06-23 2016-12-29 Carrie D. Alspaugh, M.D., P.A. Hand sanitizing compositions
RU2577816C1 (ru) * 2015-07-10 2016-03-20 Олег Иванович Квасенков Способ получения хлебного кваса
RU2577973C1 (ru) * 2015-07-13 2016-03-20 Олег Иванович Квасенков Способ получения хлебного кваса
RU2590146C1 (ru) * 2015-07-14 2016-07-10 Олег Иванович Квасенков Способ получения хлебного кваса
RU2590148C1 (ru) * 2015-07-14 2016-07-10 Олег Иванович Квасенков Способ получения хлебного кваса
RU2590147C1 (ru) * 2015-07-14 2016-07-10 Олег Иванович Квасенков Способ получения хлебного кваса
US20170156289A1 (en) * 2015-12-04 2017-06-08 Woojo Chung Gait Helper
US10327480B2 (en) * 2015-12-21 2019-06-25 Misbah Khan Disposable liners for body areas
KR101948772B1 (ko) * 2016-01-26 2019-05-10 김양희 표고버섯 재배 방법
US10806769B2 (en) 2016-03-31 2020-10-20 Gojo Industries, Inc. Antimicrobial peptide stimulating cleansing composition
JP2019510036A (ja) 2016-03-31 2019-04-11 ゴジョ・インダストリーズ・インコーポレイテッド プロバイオティクス／プレバイオティクス有効成分を含む清浄剤組成物
US10897922B2 (en) 2016-04-05 2021-01-26 Nch Corporation Composition and method for germinative compounds in probiotic food and beverage products for human consumption
ITUA20162680A1 (it) * 2016-04-18 2017-10-18 Univ Degli Studi Cagliari Composti sulfamidici e/o tiosolfonici anti-batterici per l’utilizzo nel trattamento del virus herpes 8 in fase latente
WO2017195173A1 (en) 2016-05-12 2017-11-16 Verdesian Life Sciences, U.S., Llc Compositions for controlling enzyme-induced urea decomposition
US10076551B2 (en) 2016-11-14 2018-09-18 FREDRICK COBBLE, Jr. Method for treating interstitial lung disease
CA3043748A1 (en) 2016-11-23 2018-05-31 Gojo Industries, Inc. Sanitizer composition with probiotic/prebiotic active ingredient
KR101878599B1 (ko) * 2017-03-28 2018-07-13 전북대학교산학협력단 메틸설포닐메테인과 만니톨의 흡수촉진 및 고미감소를 위한 공침조성물과 이의 제조방법
BR112019020250A2 (pt) 2017-03-28 2020-04-22 Verdesian Life Sciences U.S., Llc compostos de triarilmetano para controlar a decomposição de ureia induzida por enzima
AU2017414704B2 (en) 2017-05-17 2020-12-10 Colgate-Palmolive Company Oral care compositions and methods of use
US20180333349A1 (en) 2017-05-17 2018-11-22 Colgate-Palmolive Company Oral Care Compositions and Methods of Use
KR102065848B1 (ko) * 2017-07-05 2020-01-13 고려대학교 산학협력단 엔테로코코스 카니테스티니(Enterococcus canintestini)균주를 함유하는 항인플루엔자 바이러스 조성물
AR112780A1 (es) * 2017-08-08 2019-12-11 Valent Biosciences Llc Formulaciones granuladas de rizobios y micorrizas y sus mezclas
AU2018337853B2 (en) * 2017-09-21 2021-11-11 Sami Labs Limited Alcoholic beverage composition containing Bacillus coagulans
US11564963B2 (en) 2017-11-22 2023-01-31 Progeneron, Llc Topical compositions, process of large-scale manufacture, and method of use
WO2019104249A1 (en) * 2017-11-22 2019-05-31 Progeneron Topical compositions, process of manufacture and method of use
CN107937290B (zh) * 2017-12-15 2021-01-19 北京工商大学 一株用于水果采后病害防治的拜耳接合酵母及其制备方法与用途
KR102050286B1 (ko) * 2018-02-08 2019-12-02 전북대학교산학협력단 건강기능식품 및 이의 제조방법
US10792320B2 (en) * 2018-03-28 2020-10-06 Michael Alan Beller Methods for treatment of bladder dysfunction
CN108342324A (zh) * 2018-04-10 2018-07-31 中盐工程技术研究院有限公司 一种小球藻保存方法
CN108707568A (zh) * 2018-06-13 2018-10-26 河北康泰药业有限公司 一种混合益生菌的发酵生产方法
US11905286B2 (en) 2018-08-09 2024-02-20 Antabio Sas Diazabicyclooctanones as inhibitors of serine beta-lactamases
CN111265502B (zh) * 2018-12-05 2022-05-20 中国医学科学院药物研究所 香紫苏醇和香紫苏内酯在抗丝状病毒感染中的应用
CA3136356A1 (en) 2019-04-12 2020-10-15 Ecolab Usa Inc. Antimicrobial multi-purpose cleaner and methods of making and using the same
CN110172420B (zh) * 2019-05-15 2022-03-01 福建省农业科学院农业工程技术研究所 一株鼠李糖乳杆菌及其应用
WO2020237244A1 (en) * 2019-05-23 2020-11-26 Professional Compounding Centers Of America, Inc. Skin permeation enhancing composition
RU2723907C1 (ru) * 2019-12-27 2020-06-18 Сергей Александрович Савчук Способ идентификации наркотических и психоактивных веществ в биосубстрате человека
US11576937B2 (en) 2020-02-06 2023-02-14 Nch Corporation Method of reducing gut inflammation reduction in humans by consuming a heated probiotic composition
AU2021254780A1 (en) * 2020-04-16 2022-10-20 Atossa Therapeutics, Inc. Compositions and methods to reduce the infectivity of a virus
KR20220000029A (ko) 2020-06-24 2022-01-03 주식회사 해피마스타 면역력 증강을 위한 건강 기능 식품 및 그 조성물
CN112098384B (zh) * 2020-09-22 2023-09-01 华东交通大学 一种快速预测水质是否生物稳定的简捷方法
CN112237551A (zh) * 2020-11-13 2021-01-19 深圳市薇美经典科技发展有限公司 一种修复护肤制剂制备方法
CN112220966A (zh) * 2020-11-23 2021-01-15 北京大学口腔医学院 一种注射剂、注射剂的制备方法及其在牙髓再生中的应用
CN112516117A (zh) * 2020-11-30 2021-03-19 中国人民解放军陆军特色医学中心 Msm在制备破坏细胞壁及脏器保护药物中的应用
IN202041055641A (ko) * 2020-12-21 2021-11-19
CN113009051A (zh) * 2021-02-22 2021-06-22 中国食品药品检定研究院 肠道病毒71型灭活疫苗中β-内酰胺类抗生素的检测方法
CN113057933A (zh) * 2021-04-04 2021-07-02 山西医科大学 一种维护和重塑皮肤微生态的润肤剂及制备方法
US20220362126A1 (en) * 2021-05-13 2022-11-17 Mark A. Foglietti Cosmetic composition and method
US20230058302A1 (en) * 2021-08-03 2023-02-23 Purina Animal Nutrition Llc Products and methods for inhibiting respiratory conditions
CN114480167B (zh) * 2021-12-23 2024-01-12 美益添生物医药(武汉)有限公司 乳酸乳球菌md-622及其应用
WO2023157003A1 (en) * 2022-02-16 2023-08-24 Yeda Research And Development Co. Ltd. Methods for shortening lag phase duration in microorganisms
CN114965766B (zh) * 2022-05-20 2024-03-08 重庆市食品药品检验检测研究院 豆瓣酱中有害污染源的评估方法
CN114794029B (zh) * 2022-06-09 2023-02-28 上海大学 一种计数秀丽隐杆线虫子宫内发育胚胎数目的方法
CN115517166B (zh) * 2022-10-21 2023-10-10 玉溪中烟种子有限责任公司 一种高活力液体负载复合花粉的制备及授粉应用方法
CN116555126B (zh) * 2023-06-27 2023-09-15 深圳市波尔顿科技有限公司 具有肠炎治疗作用的含益生菌的组合物及其应用
CN117126906A (zh) * 2023-07-13 2023-11-28 中国农业大学 大豆分离蛋白的改性方法、改性大豆分离蛋白及其应用

Family Cites Families (51)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3654165A (en) * 1970-09-10 1972-04-04 Stanley Charles Bryant Telephone cleaner-sanitizer
US4333922A (en) * 1974-09-12 1982-06-08 Herschler R J Method for the treatment of water-living animals with health modifying agents
US4514421A (en) * 1979-08-30 1985-04-30 Herschler R J Dietary and pharmaceutical uses of methylsulfonylmethane and compositions comprising it
US4616039A (en) 1979-08-30 1986-10-07 Herschler R J Methylsulfonylmethane in dietary products
US4568547A (en) * 1979-08-30 1986-02-04 Herschler R J Solid pharmaceutical compositions comprising MSM and their production
US4559329A (en) * 1982-09-14 1985-12-17 Herschler R J Dietary and pharmaceutical uses of methyl-sulfonylmethane and compositions comprising it
US5071878A (en) * 1979-08-30 1991-12-10 Herschler R J Use of methylsulfonylmethane to enhance diet of an animal
US4863748A (en) * 1979-08-30 1989-09-05 Herschler R J Dietary products and uses comprising methylsulfonylmethane
US4477469A (en) * 1979-08-30 1984-10-16 Herschler R J Preparations containing methylsulfonylmethane and methods of use and purification
US4914135A (en) * 1979-08-30 1990-04-03 Herschler R J Use of Methylsulfonylmethane to treat parasitic infections
US4296130A (en) * 1979-08-30 1981-10-20 Herschler R J Methylsulfonylmethane and methods of use
US4973605A (en) * 1979-08-30 1990-11-27 Herschler R J Use of methylsulfonylmethane to relieve pain and relieve pain and nocturnal cramps and to reduce stress-induced deaths in animals
JPH0740911B2 (ja) * 1986-07-31 1995-05-10 麒麟麦酒株式会社 酵母入りビ−ル
US4902517A (en) * 1987-12-28 1990-02-20 The Calpis Food Industry Co., Ltd. Processes for producing milk-derived alcoholic beverages
WO1994005272A1 (en) 1992-09-04 1994-03-17 Aws Shakir Mustafa Salim Skin treatment compositions containing dimethylsulphone and dimethylsulphoxide
CN1069192C (zh) * 1994-04-21 2001-08-08 王世立 一种气溶胶制剂及其配制方法
AU2395095A (en) * 1994-04-29 1995-11-29 G.D. Searle & Co. Method of using (h+/k+) atpase inhibitors as antiviral agents
US5753696A (en) * 1996-12-12 1998-05-19 Cluster Technology Corp. Compositions and methods for enhancement of dehydroepiandrosterone
DE19735120A1 (de) * 1997-08-13 1999-02-18 Peter Hans Prof D Hofschneider Verwendung von Thiolverbindungen zur Inaktivierung von Viren
US6183758B1 (en) * 1998-01-29 2001-02-06 Highland Laboratories, Inc. Phytochemicals, nutrients & medication absorption &/or treatment
ATE270558T1 (de) * 1999-08-26 2004-07-15 Ganeden Biotech Inc Verwendung von emu-öl als träger für fungizide, antibakterielle und antivirale arzneien
WO2001073096A1 (en) * 2000-03-28 2001-10-04 Cubist Pharmaceuticals, Inc. Enhanced production of secondary metabolites in the presence of organic additives
CN1282577A (zh) * 2000-05-31 2001-02-07 陈小川 二甲基亚砜在提高各类抗生素对细菌的敏感性等方面用途
US6440391B1 (en) * 2000-06-02 2002-08-27 Elstan Corporation Management of snoring by oral administration of dimethyl sulfone
GB2368012A (en) * 2000-10-19 2002-04-24 Nicholas John Larkins Preparation for the relief of inflammatory disease
US6328987B1 (en) * 2000-11-03 2001-12-11 Jan Marini Skin Research, Inc. Cosmetic skin care compositions containing alpha interferon
US6416772B1 (en) * 2001-01-12 2002-07-09 H. Wayne Van Engelen Topical dermal anaesthetic
JP3895224B2 (ja) * 2001-12-03 2007-03-22 東京応化工業株式会社 ポジ型レジスト組成物及びそれを用いたレジストパターン形成方法
US6579543B1 (en) * 2002-02-22 2003-06-17 Jackie H. McClung Composition for topical application to skin
US20040001817A1 (en) 2002-05-14 2004-01-01 Giampapa Vincent C. Anti-aging nutritional supplement
GB0212622D0 (en) * 2002-05-31 2002-07-10 Natural Technologies Group Ltd Bacterial transforming agent
US6776979B2 (en) * 2002-12-30 2004-08-17 Marvin B. Frager Periodontal treatment compound and method of use
WO2004067013A1 (en) * 2003-01-24 2004-08-12 Flora Technology Inc. Compositions and methods for restoring bacterial flora
US7572473B2 (en) * 2003-02-19 2009-08-11 Franklin Foods, Inc. Process for making yogurt cream cheese, and the resulting products
US20040229825A1 (en) * 2003-05-13 2004-11-18 Tomihiko Higuchi Pharmaceutical composition for treatment of infection with drug resistant bacterium and disinfectant
US20050118291A1 (en) * 2003-09-10 2005-06-02 Mian-Ying Wang Formulations and methods for treating breast cancer with Morinda citrifolia and methylsulfonymethane
US7351739B2 (en) * 2004-04-30 2008-04-01 Wellgen, Inc. Bioactive compounds and methods of uses thereof
ITBS20040068A1 (it) * 2004-05-24 2004-08-24 Gen Topics Srl Composizione cosmetica e/o farmaceutica per il trattamento della rosacea
US20060084573A1 (en) * 2004-10-12 2006-04-20 Biagro Western Sales, Inc. High calcium fertilizer composition
WO2006129149A2 (en) * 2005-05-31 2006-12-07 Wockhardt Limited Novel supplements for poultry and livestock
US20070021376A1 (en) * 2005-07-21 2007-01-25 Suracell, Inc. Supplement composition and method of use in enhancement of methylation process
WO2007033180A1 (en) * 2005-09-12 2007-03-22 Abela Pharmaceuticals, Inc. Materials for facilitating administration of dimethyl sulfoxide (dmso) and related compounds
US9265792B2 (en) * 2005-11-16 2016-02-23 Patricia A. Riley Integument cell regeneration formulation
JP2009536830A (ja) * 2006-05-12 2009-10-22 アリゾナ ボード オブ リージェンツ， ア ボディー コーポレイト オブ ザ ステート オブ アリゾナ アクティング フォー アンド オン ビハーフ オブ アリゾナ ステート ユニバーシティー 新規Ｃｈｌｏｒｅｌｌａ種およびその使用
US20080038219A1 (en) * 2006-08-07 2008-02-14 Calgenex Corporation Novel Composition for a Topical Skin Treatment Base and Medicated Applications Thereof
US20080260708A1 (en) * 2007-04-19 2008-10-23 Hall Mickey A Methods and related systems and formulations to normalize and improve human body chemistry and healing ability
US7892724B2 (en) * 2007-07-12 2011-02-22 Warsaw Orthopedic, Inc Method for enhancing the viability of mammalian cells, tissues and organs using a solution comprising two low molecular weight PEGs
US7960098B2 (en) * 2007-07-12 2011-06-14 Warsaw Orthoperic, Inc. Methods and compositions for the preservation of cells and tissues
WO2010126376A1 (en) * 2009-04-30 2010-11-04 Bakteriefritt As Composition for sterilizing surfaces
IT1393712B1 (it) * 2009-05-13 2012-05-08 Bruschettini Srl Composizioni oftalmiche per la riepitelizzazione, la cicatrizzazione, e la disinfezione dei tessuti oculari
CN102834520B (zh) * 2009-10-30 2016-05-25 生物基因创新有限责任公司 甲基磺酰甲烷(msm)用于调制微生物活性的用途

Also Published As

Publication number Publication date
BR112012010270A2 (pt) 2016-11-29
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WO2011053854A1 (en) 2011-05-05
JP2013509437A (ja) 2013-03-14
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AU2010313228A1 (en) 2012-06-14
DK2493464T3 (en) 2018-06-18
MX2012005159A (es) 2012-08-03
KR20140015146A (ko) 2014-02-06
AU2010281739A1 (en) 2011-05-26
US20110105623A1 (en) 2011-05-05
US20120220667A1 (en) 2012-08-30
KR101763560B1 (ko) 2017-08-01
IL219320A (en) 2016-02-29
JP2013509197A (ja) 2013-03-14
US9487749B2 (en) 2016-11-08
JP5651186B2 (ja) 2015-01-07
CA2778144C (en) 2020-04-21
CN102724973A (zh) 2012-10-10
EP2493464A1 (en) 2012-09-05
EP2494059A4 (en) 2013-12-04

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