CN115517166B - 一种高活力液体负载复合花粉的制备及授粉应用方法 - Google Patents
一种高活力液体负载复合花粉的制备及授粉应用方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115517166B CN115517166B CN202211294558.6A CN202211294558A CN115517166B CN 115517166 B CN115517166 B CN 115517166B CN 202211294558 A CN202211294558 A CN 202211294558A CN 115517166 B CN115517166 B CN 115517166B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- pollen
- liquid
- powder
- shi
- solution
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
- A01H1/00—Processes for modifying genotypes ; Plants characterised by associated natural traits
- A01H1/02—Methods or apparatus for hybridisation; Artificial pollination ; Fertility
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Botany (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
本发明属于杂交制种技术领域，具体为一种高活力液体负载复合花粉的制备及授粉应用方法；S1、将活性成分溶解，配制成特定浓度溶液；S2、称取石松子粉，将石松子粉依照比例加入到S1步骤中制备的溶液中，搅拌；S3、上述溶液中再次加入表面活性剂液体，充分搅拌至石松子粉颗粒被液体完全淋湿，呈粘糊状；S4、将上述粘糊状物质置于带鼓风的烘箱中干燥，温度控制在40～50℃，干燥后，搅拌至固体介质分散成极细颗粒状，得到高分散的活性介质粉剂；S5、将上述活性介质粉剂与的纯花粉按照比例反复过网筛后充分混合均匀，密封保存，即可制备出高活力新型液体负载复合花粉；主要目的在于提出一种提高花粉活力的复合花粉的制备方法。
Description
技术领域
本发明属于杂交制种技术领域，涉及一种利用液体活性物质高效分散于惰性介质后制备复合花粉，从而减少杂交制种过程花粉用量，提高授粉效率的方法，具体为高活力新型液体负载复合花粉的制备方法及在授粉上应用。
背景技术
花粉是植物种质资源的重要形式之一，在植物有性繁殖过程中起着重要作用，是杂交育种的重要材料。不育系种子和杂交种种子的生产种植必须经过花粉采集、人工授粉才能受精结实。以烟草为例，在烟草杂交制种及雄性不育系良种繁育中，采粉、授粉是必不可少的工作，而采粉需要单独种植父本多次分批采集，费时费工，单位花粉的生产成本极高。授粉时，纯花粉粘度较高，分散性差，棉签蘸粉，因花粉团结造成花粉取用量不可控制，授粉时花粉和柱头间粘度不可控也会造成花粉洒落，大量浪费。因此，如何提高花粉的利用效率，减少授粉过程花粉用量的同时保持甚至提高花粉活力，是杂交制种及雄性不育系良种繁育中的关键技术之一。
为解决上述问题，固体介质花粉技术应运而生，但现有报道的固体介质花粉所用的惰性介质如淀粉可溶性淀粉存在介质颗粒粒径不一，分散性一般的问题，而固体介质花粉添加同源性物质，促进花粉萌发活性成分不明确，且活性在惰性介质中难以实现有效分散，即活性成分无法有效加入到固体介质花粉中等问题也逐渐暴露。对花粉技术进行再次改造升级，探索更好材料配方，明确活性成分及含量，提高花粉利用效率，是杂交制种工作需解决关键问题。
由于赤霉素不溶于水，成本相对较高，其溶液需现配现用，否则存储时间过长后容易失活。为进一步改进液体负载型复合花粉效率，在文献调研的基础上，将花粉培养基中的活性物质硼酸应用于新型复合花粉的开发，并探索出其促进花粉萌发的最优浓度区间，应用于实际生产。硼酸常温下在水中溶解度较高，且成本极低，性质稳定，是较为理想的活性成分。
针对上述存在的问题，发明人进行了深入细致的研究，提出高活力新型液体负载复合花粉的制备方法及在授粉上应用。
发明内容
本发明的目的在于提出一种高活力液体负载复合花粉的制备及授粉应用方法，主要目的在于提出一种活性成分明确、分散均匀、能节约花粉用量，提高花粉活力的复合花粉的制备方法，旨在解决现在作物尤其是烟草杂交制种中存在的固体介质花粉制备困难、各批次活性差异较大、活性成分难以分散均匀等问题，从而导致杂交制种成本难以有效控制的技术问题。
为解决上述的技术问题，本发明采用以下技术方案：
高活力新型液体负载复合花粉的制备方法，该方法包括以下步骤：
S1、将活性成分溶解，配制成特定浓度溶液；
S2、称取石松子粉，将石松子粉依照比例加入到S1步骤中制备的溶液中，搅拌；
S3、上述溶液中再次加入表面活性剂，充分搅拌至石松子粉颗粒被液体完全淋湿，呈粘糊状；
S4、将上述粘糊状物质置于带鼓风的烘箱中干燥，温度控制在40～50℃，干燥后，搅拌至固体介质分散成极细颗粒状，得到高分散的活性介质粉剂；
S5、将上述活性介质粉剂与的纯花粉按照比例反复过网筛后充分混合均匀，密封保存，即可制备出高活力新型液体负载复合花粉。
进一步，所述步骤S1中，活性物质为硼酸，配制溶液的浓度为200～900mg/L。
进一步，所述步骤S2中石松子与活性成分溶液的质量体积比为2g：7～8ml。
进一步，所述步骤S3中，表面活性剂与S2溶液的体积比为1～2:3。
进一步，所述步骤S4中干燥时间为6～8h，干燥后轻轻碰触固体，固体即成为分散均匀的颗粒。
进一步，所述步骤S5中活性介质粉剂与的纯花粉混合的质量比为1～2:1。
高活力新型液体负载复合花粉在授粉上的应用，应用步骤为用棉签轻轻蘸取上述液体负载型复合花粉，掐去待授粉烟花顶端花瓣，轻轻涂抹复合花粉于雌蕊柱头表面，完成授粉。
与现有技术相比，本发明至少具有以下有益效果之一：
1、本发明提出的一种高活力液体负载复合花粉的制备及授粉应用方法，将特定浓度的活性成分硼酸溶解后在水中分散至极细的粒径，再以液体的方式与惰性物质石松子粉混合，将特定质量的硼酸极大限度分散负载在石松子颗粒上，从而提高硼酸对花粉的促进效果，提高花粉萌发率，降低花粉用量，降低制种成本。
2、本发明提出的一种高活力液体负载复合花粉的制备及授粉应用方法，将市售的石松子粉与花粉尤其是烟草花粉混合，石松子粉粒径与烟草花粉粒径极为接近，可有效避免传统惰性介质如可溶性淀粉包覆于花粉粒周围，而造成的花粉无法接触雌蕊从而难以授粉成功问题发生，降低花粉用量的同时，确保授粉质量。
附图说明
本发明的上述和/或附加的方面和优点从结合下面附图对实施例的描述中将变得明显和容易理解，其中：
图1为本发明液体负载方式制备复合花粉的流程示意图。
图2为本发明液体负载方式制备复合花粉的离体萌发图。
具体实施方式
如图1-2所示，为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
以下实施例的供试材料为：繁种季节，采集MS云烟87烟草父本顶端泛红，花瓣未打开或处于始开期的花朵，保留花粉囊，去除其他部位，晾晒至花粉囊自然裂开，筛出花粉，放入50ml的PE管中，-80℃密封保存待用。开展离体萌发实验时再取出，上述花粉均由玉溪中烟种子有限责任公司生产。
实施例1
本发明所述的高活力新型液体负载复合花粉的制备方法，具体为：取称硼酸后用水溶解，分别配制成0.01mg/L的水溶液，分别量取15ml于100ml烧杯中待用。分别称取市售石松子粉4g，加入上述取好的硼酸溶液当中，搅拌，同时加入表面活性剂，继续搅拌至固液不分层，石松子粉剂被充分浸湿，呈粘糊状，然后将上述样品转移至40℃烘箱，鼓风干燥8h，至液体消失，固体呈块状，用药匙搅拌后固体破碎散开为极细粉剂，可自由散开为止。称取上述添加了不同量的硼酸的石松子粉1g，与收获的保存的MS云烟87纯花粉按照质量比1:1混合，充分混匀，进行离体萌发实验。
取10％蔗糖溶液作为液体培养基，不添加其他成分，用移液枪转移该溶液1mL至载玻片上，然后将复合花粉均匀地撒在培养基上，将上述把载玻片置于培养盒中，置于28℃，黑暗恒温培养箱中培养4.5h，低温冷冻，培养后在Olympus BX51光学显微镜下观察花粉管的生长状况，每个样本随机测量3个视野，以花粉管长度超过花粉长度作为萌发标准，取其平均值统计花粉萌发率。
实施例2
本发明所述的高活力新型液体负载复合花粉的制备方法，具体为：取称硼酸后用水溶解，分别配制成0.1mg/L的水溶液，分别量取15ml于100ml烧杯中待用。分别称取市售石松子粉4g，加入上述取好的硼酸溶液当中，搅拌，同时加入表面活性剂，继续搅拌至固液不分层，石松子粉剂被充分浸湿，呈粘糊状，然后将上述样品转移至40℃烘箱，鼓风干燥8h，至液体消失，固体呈块状，用药匙搅拌后固体破碎散开为极细粉剂，可自由散开为止。称取上述添加了不同量的硼酸的石松子粉1g，与收获的保存的MS云烟87纯花粉按照质量比1:1混合，充分混匀，进行离体萌发实验。
取10％蔗糖溶液作为液体培养基，不添加其他成分，用移液枪转移该溶液1mL至载玻片上，然后将复合花粉均匀地撒在培养基上，将上述把载玻片置于培养盒中，置于28℃，黑暗恒温培养箱中培养4.5h，低温冷冻，培养后在Olympus BX51光学显微镜下观察花粉管的生长状况，每个样本随机测量3个视野，以花粉管长度超过花粉长度作为萌发标准，取其平均值统计花粉萌发率。
实施例3
本发明所述的高活力新型液体负载复合花粉的制备方法，具体为：取称硼酸后用水溶解，分别配制成1mg/L的水溶液，分别量取15ml于100ml烧杯中待用。分别称取市售石松子粉4g，加入上述取好的硼酸溶液当中，搅拌，同时加入表面活性剂，继续搅拌至固液不分层，石松子粉剂被充分浸湿，呈粘糊状，然后将上述样品转移至40℃烘箱，鼓风干燥8h，至液体消失，固体呈块状，用药匙搅拌后固体破碎散开为极细粉剂，可自由散开为止。称取上述添加了不同量的硼酸的石松子粉1g，与收获的保存的MS云烟87纯花粉按照质量比1:1混合，充分混匀，进行离体萌发实验。
取10％蔗糖溶液作为液体培养基，不添加其他成分，用移液枪转移该溶液1mL至载玻片上，然后将复合花粉均匀地撒在培养基上，将上述把载玻片置于培养盒中，置于28℃，黑暗恒温培养箱中培养4.5h，低温冷冻，培养后在Olympus BX51光学显微镜下观察花粉管的生长状况，每个样本随机测量3个视野，以花粉管长度超过花粉长度作为萌发标准，取其平均值统计花粉萌发率。
实施例4
本发明所述的高活力新型液体负载复合花粉的制备方法，具体为：取称硼酸后用水溶解，分别配制成5mg/L的水溶液，分别量取15ml于100ml烧杯中待用。分别称取市售石松子粉4g，加入上述取好的硼酸溶液当中，搅拌，同时加入表面活性剂，继续搅拌至固液不分层，石松子粉剂被充分浸湿，呈粘糊状，然后将上述样品转移至40℃烘箱，鼓风干燥8h，至液体消失，固体呈块状，用药匙搅拌后固体破碎散开为极细粉剂，可自由散开为止。称取上述添加了不同量的硼酸的石松子粉1g，与收获的保存的MS云烟87纯花粉按照质量比1:1混合，充分混匀，进行离体萌发实验。
取10％蔗糖溶液作为液体培养基，不添加其他成分，用移液枪转移该溶液1mL至载玻片上，然后将复合花粉均匀地撒在培养基上，将上述把载玻片置于培养盒中，置于28℃，黑暗恒温培养箱中培养4.5h，低温冷冻，培养后在Olympus BX51光学显微镜下观察花粉管的生长状况，每个样本随机测量3个视野，以花粉管长度超过花粉长度作为萌发标准，取其平均值统计花粉萌发率。
实施例5
本发明所述的高活力新型液体负载复合花粉的制备方法，具体为：取称硼酸后用水溶解，分别配制成10mg/L的水溶液，分别量取15ml于100ml烧杯中待用。分别称取市售石松子粉4g，加入上述取好的硼酸溶液当中，搅拌，同时加入表面活性剂，继续搅拌至固液不分层，石松子粉剂被充分浸湿，呈粘糊状，然后将上述样品转移至40℃烘箱，鼓风干燥8h，至液体消失，固体呈块状，用药匙搅拌后固体破碎散开为极细粉剂，可自由散开为止。称取上述添加了不同量的硼酸的石松子粉1g，与收获的保存的MS云烟87纯花粉按照质量比1:1混合，充分混匀，进行离体萌发实验。
取10％蔗糖溶液作为液体培养基，不添加其他成分，用移液枪转移该溶液1mL至载玻片上，然后将复合花粉均匀地撒在培养基上，将上述把载玻片置于培养盒中，置于28℃，黑暗恒温培养箱中培养4.5h，低温冷冻，培养后在Olympus BX51光学显微镜下观察花粉管的生长状况，每个样本随机测量3个视野，以花粉管长度超过花粉长度作为萌发标准，取其平均值统计花粉萌发率。
实施例6
本发明所述的高活力新型液体负载复合花粉的制备方法，具体为：取称硼酸后用水溶解，分别配制成25mg/L的水溶液，分别量取15ml于100ml烧杯中待用。分别称取市售石松子粉4g，加入上述取好的硼酸溶液当中，搅拌，同时加入表面活性剂，继续搅拌至固液不分层，石松子粉剂被充分浸湿，呈粘糊状，然后将上述样品转移至40℃烘箱，鼓风干燥8h，至液体消失，固体呈块状，用药匙搅拌后固体破碎散开为极细粉剂，可自由散开为止。称取上述添加了不同量的硼酸的石松子粉1g，与收获的保存的MS云烟87纯花粉按照质量比1:1混合，充分混匀，进行离体萌发实验。
取10％蔗糖溶液作为液体培养基，不添加其他成分，用移液枪转移该溶液1mL至载玻片上，然后将复合花粉均匀地撒在培养基上，将上述把载玻片置于培养盒中，置于28℃，黑暗恒温培养箱中培养4.5h，低温冷冻，培养后在Olympus BX51光学显微镜下观察花粉管的生长状况，每个样本随机测量3个视野，以花粉管长度超过花粉长度作为萌发标准，取其平均值统计花粉萌发率。
实施例7
本发明所述的高活力新型液体负载复合花粉的制备方法，具体为：取称硼酸后用水溶解，分别配制成50mg/L的水溶液，分别量取15ml于100ml烧杯中待用。分别称取市售石松子粉4g，加入上述取好的硼酸溶液当中，搅拌，同时加入表面活性剂，继续搅拌至固液不分层，石松子粉剂被充分浸湿，呈粘糊状，然后将上述样品转移至40℃烘箱，鼓风干燥8h，至液体消失，固体呈块状，用药匙搅拌后固体破碎散开为极细粉剂，可自由散开为止。称取上述添加了不同量的硼酸的石松子粉1g，与收获的保存的MS云烟87纯花粉按照质量比1:1混合，充分混匀，进行离体萌发实验。
取10％蔗糖溶液作为液体培养基，不添加其他成分，用移液枪转移该溶液1mL至载玻片上，然后将复合花粉均匀地撒在培养基上，将上述把载玻片置于培养盒中，置于28℃，黑暗恒温培养箱中培养4.5h，低温冷冻，培养后在Olympus BX51光学显微镜下观察花粉管的生长状况，每个样本随机测量3个视野，以花粉管长度超过花粉长度作为萌发标准，取其平均值统计花粉萌发率。
实施例8
本发明所述的高活力新型液体负载复合花粉的制备方法，具体为：取称硼酸后用水溶解，分别配制成100mg/L的水溶液，分别量取15ml于100ml烧杯中待用。分别称取市售石松子粉4g，加入上述取好的硼酸溶液当中，搅拌，同时加入表面活性剂，继续搅拌至固液不分层，石松子粉剂被充分浸湿，呈粘糊状，然后将上述样品转移至40℃烘箱，鼓风干燥8h，至液体消失，固体呈块状，用药匙搅拌后固体破碎散开为极细粉剂，可自由散开为止。称取上述添加了不同量的硼酸的石松子粉1g，与收获的保存的MS云烟87纯花粉按照质量比1:1混合，充分混匀，进行离体萌发实验。
取10％蔗糖溶液作为液体培养基，不添加其他成分，用移液枪转移该溶液1mL至载玻片上，然后将复合花粉均匀地撒在培养基上，将上述把载玻片置于培养盒中，置于28℃，黑暗恒温培养箱中培养4.5h，低温冷冻，培养后在Olympus BX51光学显微镜下观察花粉管的生长状况，每个样本随机测量3个视野，以花粉管长度超过花粉长度作为萌发标准，取其平均值统计花粉萌发率。
实施例9
本发明所述的高活力新型液体负载复合花粉的制备方法，具体为：取称硼酸后用水溶解，分别配制成200mg/L的水溶液，分别量取15ml于100ml烧杯中待用。分别称取市售石松子粉4g，加入上述取好的硼酸溶液当中，搅拌，同时加入表面活性剂，继续搅拌至固液不分层，石松子粉剂被充分浸湿，呈粘糊状，然后将上述样品转移至40℃烘箱，鼓风干燥8h，至液体消失，固体呈块状，用药匙搅拌后固体破碎散开为极细粉剂，可自由散开为止。称取上述添加了不同量的硼酸的石松子粉1g，与收获的保存的MS云烟87纯花粉按照质量比1:1混合，充分混匀，进行离体萌发实验。
取10％蔗糖溶液作为液体培养基，不添加其他成分，用移液枪转移该溶液1mL至载玻片上，然后将复合花粉均匀地撒在培养基上，将上述把载玻片置于培养盒中，置于28℃，黑暗恒温培养箱中培养4.5h，低温冷冻，培养后在Olympus BX51光学显微镜下观察花粉管的生长状况，每个样本随机测量3个视野，以花粉管长度超过花粉长度作为萌发标准，取其平均值统计花粉萌发率。
实施例10
本发明所述的高活力新型液体负载复合花粉的制备方法，具体为：取称硼酸后用水溶解，分别配制成500mg/L的水溶液，分别量取15ml于100ml烧杯中待用。分别称取市售石松子粉4g，加入上述取好的硼酸溶液当中，搅拌，同时加入表面活性剂，继续搅拌至固液不分层，石松子粉剂被充分浸湿，呈粘糊状，然后将上述样品转移至40℃烘箱，鼓风干燥8h，至液体消失，固体呈块状，用药匙搅拌后固体破碎散开为极细粉剂，可自由散开为止。称取上述添加了不同量的硼酸的石松子粉1g，与收获的保存的MS云烟87纯花粉按照质量比1:1混合，充分混匀，进行离体萌发实验。
取10％蔗糖溶液作为液体培养基，不添加其他成分，用移液枪转移该溶液1mL至载玻片上，然后将复合花粉均匀地撒在培养基上，将上述把载玻片置于培养盒中，置于28℃，黑暗恒温培养箱中培养4.5h，低温冷冻，培养后在Olympus BX51光学显微镜下观察花粉管的生长状况，每个样本随机测量3个视野，以花粉管长度超过花粉长度作为萌发标准，取其平均值统计花粉萌发率。
实施例11
本发明所述的高活力新型液体负载复合花粉的制备方法，具体为：取称硼酸后用水溶解，分别配制成700mg/L的水溶液，分别量取15ml于100ml烧杯中待用。分别称取市售石松子粉4g，加入上述取好的硼酸溶液当中，搅拌，同时加入表面活性剂，继续搅拌至固液不分层，石松子粉剂被充分浸湿，呈粘糊状，然后将上述样品转移至40℃烘箱，鼓风干燥8h，至液体消失，固体呈块状，用药匙搅拌后固体破碎散开为极细粉剂，可自由散开为止。称取上述添加了不同量的硼酸的石松子粉1g，与收获的保存的MS云烟87纯花粉按照质量比1:1混合，充分混匀，进行离体萌发实验。
取10％蔗糖溶液作为液体培养基，不添加其他成分，用移液枪转移该溶液1mL至载玻片上，然后将复合花粉均匀地撒在培养基上，将上述把载玻片置于培养盒中，置于28℃，黑暗恒温培养箱中培养4.5h，低温冷冻，培养后在Olympus BX51光学显微镜下观察花粉管的生长状况，每个样本随机测量3个视野，以花粉管长度超过花粉长度作为萌发标准，取其平均值统计花粉萌发率。
实施例12
本发明所述的高活力新型液体负载复合花粉的制备方法，具体为：取称硼酸后用水溶解，分别配制成900mg/L的水溶液，分别量取15ml于100ml烧杯中待用。分别称取市售石松子粉4g，加入上述取好的硼酸溶液当中，搅拌，同时加入表面活性剂，继续搅拌至固液不分层，石松子粉剂被充分浸湿，呈粘糊状，然后将上述样品转移至40℃烘箱，鼓风干燥8h，至液体消失，固体呈块状，用药匙搅拌后固体破碎散开为极细粉剂，可自由散开为止。称取上述添加了不同量的硼酸的石松子粉1g，与收获的保存的MS云烟87纯花粉按照质量比1:1混合，充分混匀，进行离体萌发实验。
取10％蔗糖溶液作为液体培养基，不添加其他成分，用移液枪转移该溶液1mL至载玻片上，然后将复合花粉均匀地撒在培养基上，将上述把载玻片置于培养盒中，置于28℃，黑暗恒温培养箱中培养3h，低温冷冻，培养后在Olympus BX51光学显微镜下观察花粉管的生长状况，每个样本随机测量3个视野，以花粉管长度超过花粉长度作为萌发标准，取其平均值统计花粉萌发率。
实施例13
本发明所述的高活力新型液体负载复合花粉的制备方法，具体为：取称硼酸后用水溶解，分别配制成2000mg/L的水溶液，分别量取15ml于100ml烧杯中待用。分别称取市售石松子粉4g，加入上述取好的硼酸溶液当中，搅拌，同时加入表面活性剂，继续搅拌至固液不分层，石松子粉剂被充分浸湿，呈粘糊状，然后将上述样品转移至40℃烘箱，鼓风干燥8h，至液体消失，固体呈块状，用药匙搅拌后固体破碎散开为极细粉剂，可自由散开为止。称取上述添加了不同量的硼酸的石松子粉1g，与收获的保存的MS云烟87纯花粉按照质量比1:1混合，充分混匀，进行离体萌发实验。
取10％蔗糖溶液作为液体培养基，不添加其他成分，用移液枪转移该溶液1mL至载玻片上，然后将复合花粉均匀地撒在培养基上，将上述把载玻片置于培养盒中，置于28℃，黑暗恒温培养箱中培养3h，低温冷冻，培养后在Olympus BX51光学显微镜下观察花粉管的生长状况，每个样本随机测量3个视野，以花粉管长度超过花粉长度作为萌发标准，取其平均值统计花粉萌发率。
对照组1
对照组1与实施例1的区别在于，对照组1采用了纯花粉，并且对照组1开展了2次试验，选用的花粉是同一个批次收获的，但是不在同一个PE密封管子里面，最后花粉萌发率取其平均值。
对照组2
对照组2与实施例1的区别在于，对照组2采用石松子粉与花粉1:1混合(0mg/L)，但是没有活性成分。
结果统计如表1所示：
表1不同复合花粉离体萌发率统计表
由表1可以看出，石松子与纯花粉按照1：1混合后，花粉萌发率略微降低-4.61％，而伴随硼酸溶液浓度的增加，在100mg/L之前，其以液体负载方式添加到复合花粉中，并不能起到有效的促进作用，相对于纯花粉，萌发率都有所降低。至硼酸溶液浓度提升至200mg/L时，其表现出显著的促进花粉萌发的效果，相对于纯花粉，萌发率提高了5.97％，相对于未添加硼酸的复合花粉(0mg/L),花粉萌发率提高了10.58％，这种促进效果在200～900mg/L硼酸溶液制备的复合花粉中都得到体现，500mg/L硼酸制备的复合花粉促进效果最为显著，相对于纯花粉提高了9.12％，相对于未添加硼酸的复合花粉提高了13.73％。而当硼酸浓度进一步升高至2000mg/L时，表现出明显的抑制作用，相对于纯花粉，萌发率降低了5.14％。这与文献报道的液体培养基中硼酸促进花粉萌发的浓度不同，是因为文献报道的浓度为硼酸水中溶解后在培养基中的作用浓度，而与复合花粉中硼酸处于固体的高分散状态，所以其作用浓度不同，这也是本发明的创新与不同之处。
实施例14
高活力新型液体负载复合花粉在授粉上应用，选用常规K326、雄性不育系MSK326开展授粉实验研究，在温室大棚内种植常规K326、雄性不育系MSK326，待雄性不育系烟株花朵处于含蕾期或花始开期，挂牌标记用于授粉花朵，掐去顶端泛红的花瓣以及雄蕊柱头，选用实施例9中200mg/L硼酸溶液制备的液体负载型复合花粉及纯花粉(均为K326花粉)，用棉签分别轻轻蘸取上述花粉，涂抹于标记花朵的柱头表面，每个处理授粉100个花朵，授粉32d后待形成蒴果种皮成褐色，采集蒴果，并以常规K326自花授粉形成的蒴果为对照CK，分别测量鲜果尺寸，然后对蒴果进行晾晒，脱粒，测定获得种子千粒重及含水量，然后分别过0.45mm网筛精选，去除不饱满种子及杂质，得到种子进行标准发芽试验。
实施例15
高活力新型液体负载复合花粉在授粉上应用，选用常规K326、雄性不育系MSK326开展授粉实验研究，在温室大棚内种植常规K326、雄性不育系MSK326，待雄性不育系烟株花朵处于含蕾期或花始开期，挂牌标记用于授粉花朵，掐去顶端泛红的花瓣以及雄蕊柱头，选用实施例10中500mg/L硼酸溶液制备的液体负载型复合花粉及纯花粉(均为K326花粉)，用棉签分别轻轻蘸取上述花粉，涂抹于标记花朵的柱头表面，每个处理授粉100个花朵，授粉32d后待形成蒴果种皮成褐色，采集蒴果，并以常规K326自花授粉形成的蒴果为对照CK，分别测量鲜果尺寸，然后对蒴果进行晾晒，脱粒，测定获得种子千粒重及含水量，然后分别过0.45mm网筛精选，去除不饱满种子及杂质，得到种子进行标准发芽试验。
实施例16
高活力新型液体负载复合花粉在授粉上应用，选用常规K326、雄性不育系MSK326开展授粉实验研究，在温室大棚内种植常规K326、雄性不育系MSK326，待雄性不育系烟株花朵处于含蕾期或花始开期，挂牌标记用于授粉花朵，掐去顶端泛红的花瓣以及雄蕊柱头，选用实施例11中700mg/L硼酸溶液制备的液体负载型复合花粉及纯花粉(均为K326花粉)，用棉签分别轻轻蘸取上述花粉，涂抹于标记花朵的柱头表面，每个处理授粉100个花朵，授粉32d后待形成蒴果种皮成褐色，采集蒴果，并以常规K326自花授粉形成的蒴果为对照CK，分别测量鲜果尺寸，然后对蒴果进行晾晒，脱粒，测定获得种子千粒重及含水量，然后分别过0.45mm网筛精选，去除不饱满种子及杂质，得到种子进行标准发芽试验。
实施例17
高活力新型液体负载复合花粉在授粉上应用，选用常规K326、雄性不育系MSK326开展授粉实验研究，在温室大棚内种植常规K326、雄性不育系MSK326，待雄性不育系烟株花朵处于含蕾期或花始开期，挂牌标记用于授粉花朵，掐去顶端泛红的花瓣以及雄蕊柱头，选用实施例12中900mg/L硼酸溶液制备的液体负载型复合花粉及纯花粉(均为K326花粉)，用棉签分别轻轻蘸取上述花粉，涂抹于标记花朵的柱头表面，每个处理授粉100个花朵，授粉32d后待形成蒴果种皮成褐色，采集蒴果，并以常规K326自花授粉形成的蒴果为对照CK，分别测量鲜果尺寸，然后对蒴果进行晾晒，脱粒，测定获得种子千粒重及含水量，然后分别过0.45mm网筛精选，去除不饱满种子及杂质，得到种子进行标准发芽试验。
结果统计如表2所示：
表2不同花粉授粉后蒴果及种子质量
由表2可以看出，经人工授粉后的采收蒴果要比自花授粉产生蒴果CK尺寸略大，长度增加1.1mm～2.9mm，宽度增加0.1～0.7mm，宽度增加0.3～0.8mm，而采收的种子也更加饱满，千粒重增加了2～7mg。由于经过精选，种子发芽质量都较高，但是由于人工授粉产生饱满种子更多，相对于CK，其发芽势提高了3％～6％，发芽率提高了2％～4％。总而言之，复合花粉能有效提升种子的产量和质量。而从经济效益来看，相对于纯花粉，高活力液体负载型复合花粉节约了花粉用量50％，产生的蒴果、种子与纯花粉授粉的蒴果、种子相当甚至更好，经济效益显著。
尽管这里参照本发明的多个解释性实施例对本发明进行了描述，但是，应该理解，本领域技术人员可以设计出很多其他的修改和实施方式，这些修改和实施方式将落在本申请公开的原则范围和精神之内。更具体地说，在本申请公开、附图和权利要求的范围内，可以对主题组合布局的组成部件和/或布局进行多种变型和改进。除了对组成部件和/或布局进行的变形和改进外，对于本领域技术人员来说，其他的用途也将是明显的。
Claims (3)
1.一种高活力液体负载复合花粉的制备方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：
S1、将活性成分溶解，配制成200～900 mg/L浓度溶液，活性物质为硼酸；
S2、称取石松子粉，将石松子粉依照比例加入到S1步骤中制备的溶液中，搅拌，石松子粉与活性成分溶液的质量体积比为2 g ：7～8ml；
S3、上述溶液中再次加入表面活性剂，充分搅拌至石松子粉颗粒被液体完全淋湿，呈粘糊状，表面活性剂与S2溶液的体积比为1～2 : 3；
S4、将上述粘糊状物质置于带鼓风的烘箱中干燥，温度控制在40～50℃，干燥后，搅拌至固体介质分散成极细颗粒状，得到高分散的活性介质粉剂；
S5、将上述活性介质粉剂与的纯花粉按照比例反复过网筛后充分混合均匀，密封保存，活性介质粉剂与纯花粉混合的质量比为1～2 : 1，纯花粉为烟草花粉，即可制备出高活力新型液体负载复合花粉。
2.根据权利要求1所述的一种高活力液体负载复合花粉的制备方法，其特征在于：所述步骤S4中干燥时间为6～8 h，干燥后轻轻碰触固体，固体即成为分散均匀的颗粒。
3.根据权利要求1-2任一项一种高活力液体负载复合花粉的制备方法在授粉中的应用，其特征在于：应用步骤为用棉签轻轻蘸取上述液体负载型复合花粉，掐去待授粉烟花顶端花瓣，轻轻涂抹复合花粉于雌蕊柱头表面，完成授粉。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202211294558.6A CN115517166B (zh) | 2022-10-21 | 2022-10-21 | 一种高活力液体负载复合花粉的制备及授粉应用方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202211294558.6A CN115517166B (zh) | 2022-10-21 | 2022-10-21 | 一种高活力液体负载复合花粉的制备及授粉应用方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN115517166A CN115517166A (zh) | 2022-12-27 |
| CN115517166B true CN115517166B (zh) | 2023-10-10 |
Family
ID=84702881
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202211294558.6A Active CN115517166B (zh) | 2022-10-21 | 2022-10-21 | 一种高活力液体负载复合花粉的制备及授粉应用方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN115517166B (zh) |
Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2005336056A (ja) * | 2004-05-24 | 2005-12-08 | Shiseido Co Ltd | 花粉吸着防止剤 |
| CN101554133A (zh) * | 2009-05-08 | 2009-10-14 | 云南省烟草农业科学研究院 | 一种液体介质花粉及其制备方法和应用 |
| CN104137771A (zh) * | 2014-08-01 | 2014-11-12 | 岑建卫 | 一种植物授粉用花粉填充剂及其制备工艺及使用方法 |
| CN104429921A (zh) * | 2014-10-17 | 2015-03-25 | 四川省农业科学院园艺研究所 | 一种猕猴桃花粉混合物及其制备方法和应用 |
| CN106348845A (zh) * | 2016-08-22 | 2017-01-25 | 文山苗乡三七科技有限公司 | 一种用于屏边三七人工授粉介质溶液 |
| CN107771785A (zh) * | 2017-11-24 | 2018-03-09 | 玉溪中烟种子有限责任公司 | 提高低温冻存烟草花粉生活力的方法 |
| CN115462311A (zh) * | 2022-10-21 | 2022-12-13 | 玉溪中烟种子有限责任公司 | 一种液体负载方式制备复合花粉的方法 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ES2674019T3 (es) * | 2009-10-30 | 2018-06-26 | Biogenic Innovations, Llc | Metilsulfonilmetano (MSM) para el tratamiento de microorganismos resistentes a fármacos |
-
2022
- 2022-10-21 CN CN202211294558.6A patent/CN115517166B/zh active Active
Patent Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2005336056A (ja) * | 2004-05-24 | 2005-12-08 | Shiseido Co Ltd | 花粉吸着防止剤 |
| CN101554133A (zh) * | 2009-05-08 | 2009-10-14 | 云南省烟草农业科学研究院 | 一种液体介质花粉及其制备方法和应用 |
| CN104137771A (zh) * | 2014-08-01 | 2014-11-12 | 岑建卫 | 一种植物授粉用花粉填充剂及其制备工艺及使用方法 |
| CN104429921A (zh) * | 2014-10-17 | 2015-03-25 | 四川省农业科学院园艺研究所 | 一种猕猴桃花粉混合物及其制备方法和应用 |
| CN106348845A (zh) * | 2016-08-22 | 2017-01-25 | 文山苗乡三七科技有限公司 | 一种用于屏边三七人工授粉介质溶液 |
| CN107771785A (zh) * | 2017-11-24 | 2018-03-09 | 玉溪中烟种子有限责任公司 | 提高低温冻存烟草花粉生活力的方法 |
| CN115462311A (zh) * | 2022-10-21 | 2022-12-13 | 玉溪中烟种子有限责任公司 | 一种液体负载方式制备复合花粉的方法 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| 李定中等编著.《果树优质高产栽培技术》.中国广播电视出版社,1992,第51页. * |
| 液体介质花粉授粉对烟草坐果和种子活力及幼苗的影响;郑昀晔等;《浙江农业学报》;第23卷(第1期);第36页1.2.1-1.2.2节 * |
| 莎拉·A.科比特编.《授粉博物志 下》.湖北科学技术出版社,2017,第203页. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN115517166A (zh) | 2022-12-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Tulecke | The pollen of Ginkgo biloba: in vitro culture and tissue formation | |
| Morel et al. | Tissue culture of monocotyledons | |
| Jablonski et al. | Cell enlargement and cell division in excised tobacco pith tissue. | |
| CN109924130B (zh) | 一种快速繁殖铁皮石斛种苗的方法 | |
| CN115462311B (zh) | 一种液体负载方式制备复合花粉的方法 | |
| CN114641563A (zh) | 用于植物细胞培养的组合物和方法 | |
| JP5143579B2 (ja) | 溶液授粉用粉体組成物 | |
| Zeraatkar et al. | Preliminary evaluation of artificial pollination in pistachio using pollen suspension spray | |
| CN115517166B (zh) | 一种高活力液体负载复合花粉的制备及授粉应用方法 | |
| CN102517249A (zh) | 一种提高轮台白杏花粉萌发和生长的培养基 | |
| Imbrie-Milligan et al. | Microcallus growth from maize protoplasts | |
| CN111742933B (zh) | 一种提高荔枝花期授粉受精能力的方法 | |
| HADDON et al. | The Effect of Growth Conditions and Origin of Tissue 5 Phaseolus vulgaris L. | |
| CN110506628B (zh) | 一种阳春砂仁液体授粉方法 | |
| CN114521484A (zh) | 含14-羟基芸苔素甾醇的授粉液及其制备方法和应用 | |
| JP2024523113A (ja) | 分げつの増加によるセレンリッチ水稲の収穫量向上方法 | |
| JP4278183B2 (ja) | サトウキビの生産 | |
| KAMEYA | Induction of hybrids through somatic cell fusion with dextran sulfate and gelatin | |
| CN111374001B (zh) | 一种提高玉米授粉率的高产栽培方法 | |
| Gudin et al. | Influence of the pH of the stigmatic exudate on male-female interaction in Rosa hybrida L | |
| Chang et al. | A simple method for staining nuclei of mature and germinated maize pollen | |
| CN117413765A (zh) | 一种基于碳纳米粉的复合花粉制备方法 | |
| Fuller et al. | Anther culture of winter-heading cauliflower | |
| CN105104363B (zh) | 利用烟草种子油脂延长烟草花粉贮藏时间的方法 | |
| CN114478116B (zh) | 一种抗倒富硒叶面阻控剂及其制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |