KR101552970B1 - 삼채 추출물을 유효성분으로 포함하는 간 기능 개선 또는 간 손상 보호용 조성물 - Google Patents

삼채 추출물을 유효성분으로 포함하는 간 기능 개선 또는 간 손상 보호용 조성물 Download PDF

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순천대학교 산학협력단
조정희
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Abstract

본 발명은 삼채 추출물을 유효성분으로 포함하는 간질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 및 간 손상 개선용 건강기능식품에 관한 것이다. 본 발명의 삼채 추출물은 간 독성 동물 모델에 적용시 간 손상 지표로 널리 알려진 ALT(Aspartate Aminotransferase) 및 AST(alanine aminotransferase) 값을 유의하게 감소시킬 뿐만 아니라; 카탈라아제(catalase) 및 글루타치온 퍼록시다제(glutathione peroxidase)와 같은 항산화 효소의 발현을 증대시킴으로써, 간 손상에 의해 유발되는 산화적 스트레스로부터 간을 효과적으로 보호할 수 있으므로, 이를 유효성분으로 포함하는 본 발명의 조성물은 간 손상의 예방, 개선 또는 치료에 유용하게 사용될 수 있다. 특히 이러한 삼채 추출물은 식용으로 섭취 가능한 약용작물에 해당하므로, 이를 유효성분으로 포함하는 본 발명의 조성물은 장기적 사용에도 안전한 이점을 가진다.

Description

삼채 추출물을 유효성분으로 포함하는 간 기능 개선 또는 간 손상 보호용 조성물{Composition for improving liver function or protecting liver damage Comprising Allium Hookeri Extract}
본 발명은 삼채 추출물을 유효성분으로 포함하는 간질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 및 간 손상 개선용 건강기능식품에 관한 것이다.
간은 인간의 신체 장기 중 생체 내 대사가 가장 활발하게 일어나는 장기로서, 지방 성분이 포함된 음식 또는 알코올의 과다 섭취, 바이러스의 감염, 각종 약품과 같은 유해물질, 영양부족 등 다양한 원인에 의해 급성 또는 만성의 장애가 일어나며, 지방간, 간염, 황달, 간경화, 간암 등이 야기될 수 있다. 특히 음식을 통한 과다한 지방 섭취 또는 과도한 알코올 섭취는 간 조직에 지질이 쌓이는 지방간을 유발하며, 이때 혈청 속의 AST(aspartate transaminase), ALT(alanine transaminase), LDH(lactate dehydrogenase)등이 증가하게 된다. 간은 완충능력이 큰 기관으로 질환의 초기단계에서는 잘 나타나지 않다가 상당히 악화된 후에야 질환의 증상을 보이게 된다.
또한, 간은 인체에서 혈액의 저장 및 순환, 혈류량 조절과 방어 해독작용을 하며 정신적 활동과 밀접하게 관련되어 있다고 알려져 있다. 산업화에 따른 공해 물질, 유독 물질에 우리의 몸은 항상 노출되어 있어 우리의 간은 끊임없는 해독작용에 시달리고 있다. 더욱이, 심각한 것은 정신적인 스트레스로 인한 간 손상이다. 정신적 휴식을 가질 경우 손상된 간세포는 복구되지만 급박한 현대사회에서는 정신적 휴식의 여유를 찾을 수 없기 때문에 정신적 스트레스, 과음, 흡연으로 간 손상을 가중시켜 인체가 방어 해독작용을 하지 못해 면역체계에 이상을 가져와 다른 질병의 원인이 되기도 한다.
간 보호 활성에 관한 연구는 주로 두 가지 경로에 초점을 맞추어 이루어진다. 한 가지는 사염화탄소 (CCl4), tBHP(tert butyl hydroperoxide), 아세트아미노펜(acetaminophen), 티오아세트아마이드(thioacetamide), 타크린(tacrine), 그리고 루브라톡신 B(rubratoxin B)와 과산화수소(H2O2)와 같은 독성 간독소의 해독반응 뿐만 아니라, 슈퍼옥사이드 디스뮤타아제(superoxide dismutase), 카탈라아제(catalase), 그리고 글루타치온 퍼록시다아제(glutathione peroxidase)와 같은 신체 항산화 방어계 및 phase II 효소계를 함께 평가하는 것이고 다른 하나는 간 손상에 의해 방출된 혈청 글루타메이트 피루베이트 아미노기 전이효소 (serum glutamate pyruvate transaminase; GPT, alanine amino transferase; ALT)와 혈청 글루타메이트 옥살로아세테이트 아미노기전이효소 (serum glutamate oxaloacetate transaminase; GOT, aspartate alanine amino transferase; AST)를 포함하는 혈청조절효소의 수준과 활성을 평가하는 것이다. 시토크롬 P450 (Cytochrome P450) 시스템과 관련된 사염화탄소 물질대사인 트리클로로메틸 프리 라디칼 (trichloromethyl free radical, CCl3)과 트리클로로메틸퍼록시 라디칼 (trichloromethyl peroxy radicals, CCl3OO)같은 자유 라디칼 (free radicals)에 대한 소거 그리고/또는 억제활성은 산화 방지에 대한 세포기관과 세포막에서의 간 보호 활성과 연관 지을 수 있을 것이다.
현재 일반적으로 이용되고 있는 간 질환의 치료방법은 크게 식이 요법과 약제요법으로 구분되고 있으며, 대부분의 경우에 이 두 가지 방법을 병용하고 있다. 간 질환에 대한 약제 요법에서는 간 질환의 발병 원인 및 종류에 따라 다양한 작용 기전을 갖는 약제들이 이용될 수 있는데, 예를 들어 우루소데옥시콜린산(ursodeoxycholic acid), 실리마린(silymarin; Biotech. Therapeutics, 4, 263-270, 1993), DDB(biphenyl dimethyl dicarboxylate; Biochem. Biophy. Res. Comm, 103:1131-1137, 1981), 글루타치온(glutathione), 글리시리진(glycyrrhizin) 등과 같은 간세포 재생촉진제 및 간 기능 보조제, 아시클로바(acyclovir)와 같은 항바이러스제, 코르티코스테로이드 (corticost eroid), 6-메르캅토퓨린(6-mercaptopurine, 6-MP), 아자치오프린 (azathioprin e) 등과 같은 면역 억제제 등의 약제가 일반적으로 사용되고 있다. 그러나 간 질환은 한가지 원인에 의해서만 발생되는 것이 아니고 여러 요인의 복합적인 작용에 의해 발병하기 때문에, 한 가지 작용기전을 갖는 약제에 의한 것만으로는 모든 간 질환에 대해 충분하게 만족스러운 높은 치료효과를 기대할 수는 없다. 또한 현재 사용되고 있는 공지의 간질환 치료약은 급격한 작용이 발생한다거나 대량 또는 장기간 투여 시에는 부작용이 나타나는 단점이 있다.
한편, 삼채는 학명이 알리움 후커리(allium hookeri)로 알려진 식물로서, 히말리야 산맥의 언저리인 해발 1400-4200m 초고랭지에서 자라는 식물로 미얀마나 부탄 등에서는 뿌리부추로 불리는데, 우리나라에서는 생긴 모양과 맛이 어린 인삼을 닮았다고 해서 삼채라고 불리거나, 쓴맛, 단맛, 매운맛 등 3가지 맛이 있다고 해서 삼채라고 불린다. 이러한 삼채는 비타민A, C, 칼슘, 철분 등이 풍부하고, 혈액순환개선과 항암작용에 효과 있는 유황성분이 마늘 보다 6배 많은 것으로 알려져 있으며, 또한 각종 피부병 치료, 아토피질환 및 당뇨병 개선 효과가 있다고 알려져 있다.
그러나 삼채가 카탈라아제 및 글루타치온 퍼록시다제와 같은 항산화 효소를 활성화시킴으로써, 간 손상에 의해 유발되는 산화적 스트레스로부터 신체를 보호한다는 사실은 보고된 바 없다.
이에 본 발명자들은 생체에 부작용이 없으면서 간 기능을 개선하는 작용이 우수한 천연물질을 찾고자 모색하던 중, 삼채 추출물에 주목하여 그것의 약리학적 효과를 실험한 결과, 삼채 추출물이 간 손상 지표로 널리 알려진 ALT(Aspartate Aminotransferase) 및 AST(alanine aminotransferase) 값을 유의하게 감소시킬 뿐만 아니라; 카탈라아제(catalase) 및 글루타치온 퍼록시다제(glutathione peroxidase)와 같은 항산화 효소를 활성화시킴으로써, 간 손상에 의해 유발되는 산화적 스트레스로부터 간을 효과적으로 보호한다는 사실을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
한국등록특허 제10-0920671호 한국등록특허 제10-1209573호
따라서 본 발명의 목적은 장기간 사용에도 인체에 안정하면서 간 손상에 따른 보호효과가 우수하여 간질환을 효과적으로 예방 또는 치료할 수 있는 약제학적 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 장기간 사용에도 인체에 안정하면서 간 손상에 따른 보호효과가 우수하여 간 기능을 효과적으로 개선할 수 있는 식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 장기간 사용에도 인체에 안정하면서 간 손상에 따른 보호효과가 우수하여 간 기능을 효과적으로 개선할 수 있는 건강기능식품을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 삼채 추출물을 유효성분으로 포함하는 간질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 삼채 추출물은 삼채의 뿌리 또는 잎의 추출물일 수 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 삼채 추출물은 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올, 에틸아세테이트, 아세톤, 물 및 헥산으로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 용매일 수 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올은 메탄올일 수 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 삼채 추출물은 조성물 총 중량에 대하여 0.1 ~ 90 중량%로 포함할 수 있다.
본 발명의 일시예에 있어서, 상기 간질환은 자가면역성 간질환, 약물유인성 간질환, 알코올성 간질환, 감염성 간질환, 선천대사성 간질환, 급성간염, 만성간염, 간경병증, 간경화, 지방간 및 간암으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종일 수 있다.
또한, 본 발명은 삼채 추출물을 유효성분으로 포함하는 간 손상 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명의 일시예에 있어서, 상기 삼채 추출물은 삼채의 뿌리 또는 잎의 추출물일 수 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 삼채 추출물은 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올, 에틸아세테이트, 아세톤, 물 및 헥산으로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 용매로 추출될 수 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올은 메탄올일 수 있다.
또한, 본 발명은 삼채 추출물을 유효성분으로 포함하는 간 손상 예방 또는 개선용 건강기능식품을 제공한다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 식품은 음료류, 육류, 초코렛, 식품류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 사탕류, 아이스크림류, 알코올 음료류, 비타민 복합제 및 건강보조식품류로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다.
본 발명의 삼채 추출물은 간 독성 동물 모델에 적용시 간 손상 지표로 널리 알려진 ALT(Aspartate Aminotransferase) 및 AST(alanine aminotransferase) 값을 유의하게 감소시킬 뿐만 아니라; 카탈라아제(catalase) 및 글루타치온 퍼록시다제(glutathione peroxidase)와 같은 항산화 효소의 발현을 증대시킴으로써, 간 손상에 의해 유발되는 산화적 스트레스로부터 간을 효과적으로 보호할 수 있으므로, 이를 유효성분으로 포함하는 본 발명의 조성물은 간 손상의 예방, 개선 또는 치료에 유용하게 사용될 수 있다. 특히 이러한 삼채 추출물은 식용으로 섭취 가능한 약용작물에 해당하므로, 이를 유효성분으로 포함하는 본 발명의 조성물은 장기적 사용에도 안전한 이점을 가진다.
도 1은 아세트아미노펜에 의해 유도된 간독성 동물 모델에서 삼채 뿌리 추출물(삼채 뿌리의 물 추출물, 삼채 뿌리의 메탄올 추출물) 적용에 따른 AST 수치를 나타낸 것이다.
도 2는 아세트아미노펜에 의해 유도된 간독성 동물 모델에서 삼채 잎 추출물(삼채 잎의 물 추출물, 삼채 잎의 메탄올 추출물) 적용에 따른 AST 수치를 나타낸 것이다.
도 3은 아세트아미노펜에 의해 유도된 간독성 동물 모델에서 삼채 뿌리 추출물(삼채 뿌리의 물 추출물, 삼채 뿌리의 메탄올 추출물) 적용에 따른 ALT 수치를 나타낸 것이다.
도 4는 아세트아미노펜에 의해 유도된 간독성 동물 모델에서 삼채 잎 추출물(삼채 잎의 물 추출물, 삼채 잎의 메탄올 추출물) 적용에 따른 ALT 수치를 나타낸 것이다.
도 5는 아세트아미노펜에 의해 유도된 간독성 동물 모델에서 삼채 뿌리 추출물(삼채 뿌리의 물 추출물, 삼채 뿌리의 메탄올 추출물) 적용에 따른 간세포에서의 CAT 유전자의 mRNA 발현 수준을 나타낸 것이다. CAT 유전자의 mRNA 발현 수준은 내부 대조군으로서 HPRT 유전자의 mRNA 발현양을 기준으로 하여 이에 대한 상대적인 비율로 나타내었다.
도 6은 아세트아미노펜에 의해 유도된 간독성 동물 모델에서 삼채 잎 추출물(삼채 잎의 물 추출물, 삼채 잎의 메탄올 추출물) 적용에 따른 간세포에서의 CAT 유전자의 mRNA 발현 수준을 나타낸 것이다. CAT 유전자의 mRNA 발현 수준은 내부 대조군으로서 HPRT 유전자의 mRNA 발현양을 기준으로 하여 이에 대한 상대적인 비율로 나타내었다.
도 7은 아세트아미노펜에 의해 유도된 간독성 동물 모델에서 삼채 뿌리 추출물(삼채 뿌리의 물 추출물, 삼채 뿌리의 메탄올 추출물) 적용에 따른 간세포에서의 GPx3 유전자의 mRNA 발현 수준을 나타낸 것이다. GPx3 유전자의 mRNA 발현 수준은 내부 대조군으로서 HPRT 유전자의 mRNA 발현양을 기준으로 하여 이에 대한 상대적인 비율로 나타내었다.
도 8은 아세트아미노펜에 의해 유도된 간독성 동물 모델에서 삼채 잎 추출물(삼채 잎의 물 추출물, 삼채 잎의 메탄올 추출물) 적용에 따른 간세포에서의 GPx3 유전자의 mRNA 발현 수준을 나타낸 것이다. GPx3 유전자의 mRNA 발현 수준은 내부 대조군으로서 HPRT 유전자의 mRNA 발현양을 기준으로 하여 이에 대한 상대적인 비율로 나타내었다.
도 9는 아세트아미노펜에 의해 유도된 간독성 동물 모델에서 삼채 뿌리 추출물(삼채 뿌리의 물 추출물, 삼채 뿌리의 메탄올 추출물) 적용에 따른 간세포에서의 GPx4 유전자의 mRNA 발현 수준을 나타낸 것이다. GPx4 유전자의 mRNA 발현 수준은 내부 대조군으로서 HPRT 유전자의 mRNA 발현양을 기준으로 하여 이에 대한 상대적인 비율로 나타내었다.
도 10은 아세트아미노펜에 의해 유도된 간독성 동물 모델에서 삼채 잎 추출물(삼채 잎의 물 추출물, 삼채 잎의 메탄올 추출물) 적용에 따른 간세포에서의 GPx4 유전자의 mRNA 발현 수준을 나타낸 것이다. GPx4 유전자의 mRNA 발현 수준은 내부 대조군으로서 HPRT 유전자의 mRNA 발현양을 기준으로 하여 이에 대한 상대적인 비율로 나타내었다.
본 발명은 삼채 추출물의 신규 용도에 관한 것으로서, 삼채 추출물을 유효성분으로 포함하는 간질환의 예방 또는 치료용 조성물을 제공함에 그 특징이 있다.
본 발명의‘삼채(allium hookeri)’은 히말리야 산맥의 언저리인 해발 1400-4200m 초고랭지에서 자라는 식물로 미얀마나 부탄 등에서는 뿌리부추로 불리는데, 우리나라에서는 생긴 모양과 맛이 어린 인삼을 닮았다고 해서 삼채라고 불리거나, 쓴맛, 단맛, 매운맛 등 3가지 맛이 있다고 해서 삼채라고 불린다.
이러한 삼채는 혈액순환개선, 항암작용, 각종 피부병 치료, 아토피질환 및 당뇨병 개선 효과가 있다고 알려져 있다.
본 발명은 상기와 같은 특징을 갖는 삼채 추출물이 간 손상 지표로 널리 알려진 ALT(Aspartate Aminotransferase) 및 AST(alanine aminotransferase) 값을 유의하게 감소시킬 뿐만 아니라, 항산화 효소의 발현을 증대를 통해 산화적 스트레스로부터 간을 효과적으로 보호할 수 있음을 확인함으로써, 이를 통해 간질환을 예방 또는 치료할 수 있다는 사실을 최초로 규명하였다.
따라서 본 발명은 삼채 추출물을 유효성분으로 포함하여 간질환을 예방 또는 치료할 수 있는 조성물을 제공할 수 있다.
본 발명에 따른 삼채 추출물은 당업계에 공지된 추출 및 분리하는 방법을 사용하여 천연으로부터 추출 및 분리하여 수득한 것을 사용할 수 있으며, 본 발명에서 정의된‘추출물’은 적절한 용매를 이용하여 삼채로부터 추출한 것이며, 예를 들어, 삼채의 조추출물, 극성용매 가용 추출물 또는 비극성용매 가용 추출물을 모두 포함한다.
바람직하게는 삼채의 뿌리 또는 잎에서 추출한 추출물일 수 있다.
상기 삼채로부터 추출물을 추출하기 위한 적절한 용매로는 약학적으로 허용되는 유기용매라면 어느 것을 사용해도 무방하며, 물 또는 유기용매를 사용할 수 있으며, 이에 제한되지는 않으나, 예를 들어, 정제수, 메탄올(methanol), 에탄올(ethanol), 프로판올(propanol), 이소프로판올(isopropanol), 부탄올(butanol) 등을 포함하는 탄소수 1 내지 4의 알코올, 아세톤(acetone), 에테르(ether), 벤젠(benzene), 클로로포름(chloroform), 에틸아세테이트(ethyl acetate), 메틸렌클로라이드(methylene chloride), 헥산(hexane) 및 시클로헥산(cyclohexane) 등의 각종 용매를 단독으로 혹은 혼합하여 사용할 수 있다. 보다 바람직하게는 물 또는 메탄올을 사용할 수 있다.
추출 방법으로는 열수추출법, 냉침추출법, 환류냉각추출법, 용매추출법, 수증기증류법, 초음파추출법, 용출법, 압착법 등의 방법 중 어느 하나를 선택하여 사용할 수 있다. 또한, 목적하는 추출물은 추가로 통상의 분획 공정을 수행할 수도 있으며, 통상의 정제 방법을 이용하여 정제될 수도 있다. 본 발명의 삼채 추출물의 제조방법에는 제한이 없으며, 공지되어 있는 어떠한 방법도 이용될 수 있다.
예를 들면, 본 발명의 조성물에 포함되는 삼채 추출물은 상기한 열수 추출 또는 용매 추출법으로 추출된 1차 추출물을, 감압 증류 및 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조할 수 있다. 또한 상기 1차 추출물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(silica gel column chromatography), 박층 크로마토그래피(thin layer chromatography), 고성능 액체 크로마토그래피(high performance liquid chromatography) 등과 같은 다양한 크로마토그래피를 이용하여 추가로 정제된 분획을 얻을 수도 있다.
따라서 본 발명에 있어서 삼채 추출물은 추출, 분획 또는 정제의 각 단계에서 얻어지는 모든 추출액, 분획 및 정제물, 그들의 희석액, 농축액 또는 건조물을 모두 포함하는 개념이다.
본 발명의 일실시예에 따른 삼채 추출물을 제조하는 방법을 조금 더 구체적으로 살펴보면 다음과 같다.
본 발명에서는 삼채 시료 중량의 약 5 ~ 15배에 달하는 증류수를 넣고 80 ~ 105℃에서 2~5시간 1회 내지 3회 반복 열수 추출한 다음 냉각시킨 후, 여과지를 이용하여 여과하여 잔여 불용성 물질을 제거하고, 이후 동결 건조하는 과정을 통해 제조할 수 있다. 이때, 삼채 시료로는 건조된 뿌리 또는 잎을 사용하는 것이 바람직하다.
또한, 본 발명에서는 삼채 시료 중량의 약 5~15배에 달하는 메탄올을 넣고 50~80℃에서 2~5시간 동안 1회 내지 3회 반복 추출한 다음 냉각시킨 후, 여과지를 이용하여 여과하여 잔여 불용성 물질을 제고하고, 이후 감압 농축한 다음 동결 건조하는 과정을 통해 제조할 수 있다. 이때, 삼채 시료로는 건조된 뿌리 또는 잎을 사용하는 것이 바람직하다.
상기의 삼채 추출물을 유효성분으로 포함하는 본 발명의 조성물은 약제학적 조성물일 수 있다.
본 발명의 약제학적 조성물은 상기 유효성분 이외에 약제학적으로 적합하고 생리학적으로 허용되는 보조제를 사용하여 제조될 수 있으며, 상기 보조제로는 부형제, 붕해제, 감미제, 결합제, 피복제, 팽창제, 윤활제, 활택제 또는 향미제 등을 사용할 수 있다.
상기 약제학적 조성물은 투여를 위해서 상기 기재한 유효성분 이외에 추가로 약제학적으로 허용 가능한 담체를 1종 이상 포함하여 약제학적 조성물로 바람직하게 제제화할 수 있다.
상기 약제학적 조성물의 제제 형태는 과립제, 산제, 정제, 피복정, 캡슐제, 좌제, 액제, 시럽, 즙, 현탁제, 유제, 점적제 또는 주사 가능한 액제 등이 될 수 있다. 예를 들어, 정제 또는 캡슐제의 형태로의 제제화를 위해, 유효 성분은 에탄올, 글리세롤, 물 등과 같은 경구, 무독성의 약제학적으로 허용 가능한 불활성 담체와 결합될 수 있다. 또한, 원하거나 필요한 경우, 적합한 결합제, 윤활제, 붕해제 및 발색제 또한 혼합물로 포함될 수 있다. 적합한 결합제는 이에 제한되는 것은 아니나, 녹말, 젤라틴, 글루코스 또는 베타-락토오스와 같은 천연 당, 옥수수 감미제, 아카시아, 트래커캔스 또는 소듐올레이트와 같은 천연 및 합성 검, 소듐 스테아레이트, 마그네슘 스테아레이트, 소듐 벤조에이트, 소듐 아세테이트, 소듐 클로라이드 등을 포함한다. 붕해제는 이에 제한되는 것은 아니나, 녹말, 메틸 셀룰로스, 아가, 벤토니트, 잔탄 검 등을 포함한다. 액상 용액으로 제제화되는 조성물에 있어서 허용 가능한 약제학적 담체로는, 멸균 및 생체에 적합한 것으로서, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 알부민 주사용액, 덱스트로즈 용액, 말토 덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 및 이들 성분 중 1 성분 이상을 혼합하여 사용할 수 있으며, 필요에 따라 항산화제, 완충액, 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가할 수 있다. 또한 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제를 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주사용 제형, 환약, 캡슐, 과립 또는 정제로 제제화할 수 있다. 더 나아가 해당분야의 적절한 방법으로 Remington's Pharmaceutical Science, Mack Publishing Company, Easton PA에 개시되어 있는 방법을 이용하여 각 질환에 따라 또는 성분에 따라 바람직하게 제제화 할 수 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 본 발명의 삼채 추출물은 조성물 총 중량에 대하여 0.1 ~ 100 중량%로 포함될 수 있다.
본 발명의 약제학적 조성물로 예방 또는 치료할 수 있는 간질환은 간 손상에 따라 유발되는 질환이라면 특별히 그 종류를 한정하지 않으나, 예를 들면, 자가면역성 간질환, 약물유인성 간질환, 알코올성 간질환, 감염성 간질환, 선천대사성 간질환, 급성간염, 만성간염, 간경병증, 간경화, 지방간 및 간암 등일 수 있다.
본 발명의 삼채 추출물은 간 손상 지표로 널리 알려진 ALT(Aspartate Aminotransferase) 및 AST(alanine aminotransferase) 값을 유의하게 감소시킬 뿐만 아니라, 동시에 항산화 효소의 발현을 증대시킴으로써 간세포 손상의 주된 기전으로 알려진 산화스트레스를 억제 및 완화시킬 수 있으므로, 간 손상에 따른 간질환을 효과적으로 예방 또는 치료할 수 있다.
또한 본 발명은 간질환 예방 또는 치료용 의약 또는 식품의 제조를 위한 삼채 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물의 용도를 제공한다. 상기한 삼채 추출물을 유효성분으로 포함하는 본 발명의 조성물은 간질환의 예방 또는 치료용 의약 또는 식품의 제조를 위한 용도로 이용될 수 있다.
또한 본 발명은 포유동물에게 삼채 추출물을 투여하는 것을 포함하는 간질환 예방 또는 치료방법을 제공한다.
여기에서 사용된 용어 "포유동물"은 치료, 관찰 또는 실험의 대상인 포유동물을 말하며, 바람직하게는 인간을 말한다.
여기에서 사용된 용어 "치료상 유효량"은 연구자, 수의사, 의사 또는 기타 임상에 의해 생각되는 조직계, 동물 또는 인간에서 생물학적 또는 의학적 반응을 유도하는 유효 성분 또는 약학적 조성물의 양을 의미하는 것으로, 이는 치료되는 질환 또는 장애의 증상의 완화를 유도하는 양을 포함한다. 본 발명의 유효 성분에 대한 치료상 유효 투여량 및 투여횟수는 원하는 효과에 따라 변화될 것임은 당업자에게 자명하다. 그러므로, 투여될 최적의 투여량은 당업자에 의해 쉽게 결정될 수 있으며, 질환의 종류, 질환의 중증도, 조성물에 함유된 유효성분 및 다른 성분의 함량, 제형의 종류, 및 환자의 연령, 체중, 일반 건강 상태, 성별 및 식이, 투여 시간, 투여 경로 및 조성물의 분비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 비롯한 다양한 인자에 따라 조절될 수 있다. 본 발명의 치료방법에 있어서, 성인의 경우, 본 발명의 삼채 추출물을 1일 1회 내지 수회 투여시, 1㎎/kg~10000㎎/kg의 용량으로 투여하는 것이 바람직하다.
본 발명의 치료방법에서 본 발명의 삼채 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 경구, 직장, 정맥내, 동맥내, 복강내, 근육내, 흉골내, 경피, 국소, 안구내 또는 피내 경로를 통해 통상적인 방식으로 투여할 수 있으며, 바람직하게는 경구투여가 좋다.
또한, 본 발명은 삼채 추출물을 유효성분으로 포함하는 간 손상 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명의 식품 조성물은 유효성분인 삼채 추출물을 함유하는 것 외에 통상의 식품 조성물과 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.
상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 향미제는 천연 향미제 (타우마틴), 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제 (사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다.
본 발명의 식품 조성물은 상기 약제학적 조성물과 동일한 방식으로 제제화되어 기능성 식품으로 이용하거나, 각종 식품에 첨가할 수 있다. 본 발명의 조성물을 첨가할 수 있는 식품으로는 예를 들어, 음료류, 육류, 초코렛, 식품류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 사탕류, 아이스크림류, 알코올 음료류, 비타민 복합제 및 건강보조식품류 등이 있다.
또한 상기 식품 조성물은 유효성분인 삼채 추출물 외에 여러 가지 영양제, 비타민, 광물 (전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제 (치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 식품 조성물은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다.
본 발명의 유효성분인 삼채 추출물은 식용으로 섭취 가능한 약용작물을 이용한 천연 추출물에 해당하므로 간 손상 예방 또는 개선을 목적으로 장기간 복용시에도 안심하고 사용할 수 있다.
본 발명은 또한 삼채 추출물을 유효성분으로 포함하는 간 손상 예방 또는 개선용 건강기능식품을 제공한다.
본 발명의 건강기능식품은 간 손상 예방 또는 개선을 목적으로, 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상, 환 등의 형태로 제조 및 가공할 수 있다.
본 발명에서 “건강기능식품”이라 함은 건강기능식품에 관한 법률 제6727호에 따른 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조 및 가공한 식품을 말하며, 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻을 목적으로 섭취하는 것을 의미한다.
본 발명의 건강기능식품은 통상의 식품 첨가물을 포함할 수 있으며, 식품 첨가물로서의 적합 여부는 다른 규정이 없는 한, 식품의약품안전청에 승인된 식품 첨가물 공전의 총칙 및 일반시험법 등에 따라 해당 품목에 관한 규격 및 기준에 의하여 판정한다.
상기 “식품 첨가물 공전”에 수재된 품목으로는 예를 들어, 케톤류, 글리신, 구연산칼슘, 니코틴산, 계피산 등의 화학적 합성물; 감색소, 감초추출물, 결정셀룰로오스, 고량색소, 구아검 등의 천연첨가물; L-글루타민산나트륨제제, 면류첨가알칼리제, 보존료제제, 타르색소제제 등의 혼합제제류 등을 들 수 있다.
예를 들어, 정제 형태의 건강기능식품은 본 발명의 유효성분인 삼채 추출물을 부형제, 결합제, 붕해제 및 다른 첨가제와 혼합한 혼합물을 통상의 방법으로 과립화한 다음, 활택제 등을 넣어 압축성형하거나, 상기 혼합물을 직접 압축 성형할 수 있다. 또한 상기 정제 형태의 건강기능식품은 필요에 따라 교미제 등을 함유할 수도 있다.
캅셀 형태의 건강기능식품 중 경질 캅셀제는 통상의 경질 캅셀에 본 발명의 유효성분인 삼채 추출물을 부형제 등의 첨가제와 혼합한 혼합물을 충진하여 제조할 수 있으며, 연질 캅셀제는 삼채 추출물을 부형제 등의 첨가제와 혼합한 혼합물을 젤라틴과 같은 캅셀기제에 충진하여 제조할 수 있다. 상기 연질 캅셀제는 필요에 따라 글리세린 또는 소르비톨 등의 가소제, 착색제, 보존제 등을 함유할 수 있다.
환 형태의 건강기능식품은 본 발명의 유효성분인 삼채 추출물과 부형제, 결합제, 붕해제 등을 혼합한 혼합물을 기존에 공지된 방법으로 성형하여 조제할 수 있으며, 필요에 따라 백당이나 다른 제피제로 제피할 수 있으며, 또는 전분, 탈크와 같은 물질로 표면을 코팅할 수도 있다.
과립 형태의 건강기능식품은 본 발명의 유효성분인 삼채 추출물과 부형제, 결합제, 붕해제 등을 혼합한 혼합물을 기존에 공지된 방법으로 입상으로 제조할 수 있으며, 필요에 따라 착향제, 교미제 등을 함유할 수 있다.
본 발명의 삼채 추출물을 유효성분으로 포함하는 건강기능식품은 하기 실시예에서도 확인한 바와 같이, 간 손상 지표로 널리 알려진 ALT(Aspartate Aminotransferase) 및 AST(alanine aminotransferase) 값을 유의하게 감소시킬 뿐만 아니라, 동시에 항산화 효소의 발현을 증대시킴으로써 간세포 손상의 주된 기전으로 알려진 산화스트레스를 억제 및 완화시킬 수 있기 때문에, 간 손상 예방 또는 개선에 효과적이다.
상기 건강기능식품은 음료류, 육류, 초코렛, 식품류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 사탕류, 아이스크림류, 알코올 음료류, 비타민 복합제 및 건강보조식품류 등일 수 있다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
< 실시예 >
통계처리
본 실험 결과는 평균±표준편차로 나타내었다. 부형제 대조군에 대한 시료투여군의 비교는 one-way ANOVA를 통해 검증하였으며, 유의성이 인정되었을 경우, 등분산성이 인정되면 Duncan test를, 등분산성이 인정되지 않으면 Dunnett's test를 이용하여 사후검정을 실시하였다. 유의성 인정은 p<0.05 이하로 하였으며 SPSS 10.1 프로그램(Statistical Packages for Social Science, Chicago, IL, USA)을 이용하였다.
< 실시예 1>
본 발명의 삼채 추출물 제조
본 실험에서 사용한 삼채는 전라남도에서 재배 수확된 삼채로, 이의 자연건조된 상태의 뿌리와 잎을 각각 분리하여 사용하였다.
<1-1> 삼채 뿌리의 물 추출물
제공받은 삼채를 대상으로 시료 500 g에 증류수를 5 L 투입하여 105℃에 4시간 2회 반복 열수 추출한 다음에 250 mesh와 whatman 여과지로 불순물을 제거하였다. 여과액 5 L을 바로 동결건조 (Ilshin, Korea)하여 시료를 얻었다. 동결건조된 시료는 4℃에서 보관하면서 하기 실험의 시료로 사용하였다.
<1-2> 삼채 뿌리의 메탄올 추출물
제공받은 삼채를 대상으로 시료 500 g에 메탄올을 5 L 투입하여 70℃에 3시간 2회 반복 열수 추출한 다음에 250 mesh와 whatman 여과지로 불순물을 제거하였다. 추출이 완료된 후 여과액을 45 ℃에서 감압농축하여 메탄올을 증발시키고 동결건조 (Ilshin, Korea)하여 삼채뿌리 메탄올 추출물 시료를 얻었다.
<1-3> 삼채 잎의 물 추출물
삼채 잎을 이용하여 상기 실시예<1-1>과 동일한 방식으로 추출하였다.
<1-4> 삼채 잎의 메탄올 추출물
삼채 잎을 이용하여 상기 실시예<1-2>와 동일한 방식으로 추출하였다.
< 실시예 2>
실험동물의 사육
본 동물실험은 동물실험윤리규정에 준수하여 실시하였다. 실험동물은 200~230 g의 생후 7주령의 수컷 Sprague-Dawley계 흰쥐를 다물사이언스(Daejeon, Korea)로부터 구입하여 7일간의 순화 사육기간을 거쳐 실험에 사용하였다. 실험동물은 23±3℃, 상대습도는 55±15%, 조명시간은 12 hr(오전 8시 점등~오후 8시 소등) 및 조도 150~300 lux로 조건에서 사육하였다. 실험 식이는 방사선 조사로 멸균된 실험동물용 고형사료를 자유롭게 섭취하도록 하였으며, 식수는 수돗물을 자외선 살균기 및 미세여과장치로 소독 한 후, 물병을 이용하여 자유롭게 섭취시켰다. 순화사육기간 동안 일반증상을 관찰하여 증상이 없고 체중감소가 없는 건강한 동물을 실험에 사용하였다.
< 실시예 3>
아세트아미노펜에 의해 유도된 간 손상 동물 모델의 제조
동물의 체중을 측정하고, 평균체중에 가까운 110마리를 선택한 후 각 군별 평균체 중이 최대한 균일하게 분포하도록 무작위법으로 배치하였다. 각 실험군별 10마리를 배치하고 상기 실시예 1을 통해 준비된 본 발명의 삼채 추출물 각각을 부형제와 함께 500 mg/kg/day,100 mg/kg/day의 양으로 14일간 1일 1회 경구투여 하였다. 부형제는 0.5% carboxymethylcellulose(Sigma Chemical Co.)를 이용하였다. SIL(양성대조군)의 경우에는 본 발명의 삼채 추출물 대신 실리마린(Silymarin, Sigma)을 100 mg/kg/day의 양으로 14일간 1일 1회 경구 투여하였다. NOR(아무것도 처리하지 않는 그룹)을 제외한 나머지 실험군은 아세타아미노펜(APAP, Sigma)을 멸균 생리식염수에 조제하여 350 mg/kg/day를 최종 시료투여 60분 후 경구투여하였고, NOR은 멸균 생리식염수만 복강투여 하였다. 혈액과 장기 채취 전 전체 실험군은 24시간 절식시켰다. 혈액과 장기의 채취절식 후 ether로 마취한 다음 채혈하여 vacutainer tube(Sekisui Chemical Co., Osaka, Japan)에 주입하고 15~20분간 상온에 방치하여 응고시킨 후 10분간 원심분리 하여 혈청을 분리한 후 간기능 지표효소 활성 측정에 이용하였다. 혈액을 채취한 후 즉시 간을 적출하여 PBS에 잠깐 보관한 후 하기 실험의 항산화 효소 분석에 사용하였다.
실험동물 그룹
그룹 처리
무처리군(NOR) 아세트아미노펜 투여 없이 멸균 생리식염수만을 복강 투여한 군
음성대조군(CON) 아세트아미노펜을 경구 투여한 군
양성대조군(SIL) 실리마린(100mg/kg/day)+아세트아미노펜 경구 투여 군
실험군 1(RD_100) 삼채 뿌리의 물 추출물(100mg/kg/day)+아세트아미노펜 경구 투여군
실험군 2(RD_500) 삼채 뿌리의 물 추출물(500mg/kg/day)+아세트아미노펜 경구 투여군
실험군 3(RM_100) 삼채 뿌리의 메탄올 추출물(100mg/kg/day)+아세트아미노펜 경구 투여군
실험군 4(RM_500) 삼채 뿌리의 메탄올 추출물(500mg/kg/day)+아세트아미노펜 경구 투여군
실험군 5(LD_100) 삼채 잎의 물 추출물(100mg/kg/day)+아세트아미노펜 경구 투여군
실험군 6(LD_500) 삼채 잎의 물 추출물(500mg/kg/day)+아세트아미노펜 경구 투여군
실험군 7(LM_100) 삼채 잎의 메탄올 추출물(100mg/kg/day)+아세트아미노펜 경구 투여군
실험군 8(LM_500) 삼채 잎의 메탄올 추출물(500mg/kg/day)+아세트아미노펜 경구 투여군
< 실험예 1>
삼채 추출물의 아세트아미노펜 유도 간 독성 랫트에서의 간 보호 효과
아세트아미노펜에 의한 간 손상은 세포막의 투과성을 증가시키고, 간에서 혈액으로 간 손상의 지표로 알려진 아스파테이트 아미노전이효소(Aspartate Aminotransferase, 이하 간략하게 ‘AST’라 약칭함) 및 알라닌 아미노전이효소(alanine aminotransferase, 이하 간략하게 ‘ALT’라 약칭함)를 분비시킨다.
아미노전이효소는 아미노기 전이반응을 촉매하는 효소의 총칭으로 임상에서 가장 많이 사용하는 것이 AST와 ALT의 활성 정도이다. 이들 효소는 아미노산과 a-keto acid 사이의 아미노기 전이 반응을 촉매하는 것으로 체내에 널리 분포되어 있으며 간 손상 시 세포 밖으로 유출되어 혈중에 그 양이 증가하게 된다. 이러한 과정은 세포내의 에너지 공급이 감소되어 세포내의 K+ 이온이 세포외로 유출되고 Na+, Ca++ 및 수분이 세포내로 유입이 되면서 세포는 팽창되고, 세포막이 늘어나게 되어 세포질에 존재하는 AST 및 ALT가 유출된다. 세포 밖으로 빠져나간 AST와 ALT는 순환 혈액으로 빠르게 유입되어 간질환시 정상치보다 현저히 증가됨으로 혈액 내 AST 및 ALT 수치는 간 손상의 지표로 빈번히 사용되고 있다.
따라서 본 실험에서는 상기 실시예 1을 통해 제조된 삼채 추출물의 간 손상(간 독성)에 대한 보호 효과를 살파보기 위하여, 간 손상 동물 모델에 각각의 삼채 추출물을 경구 투여한 후, 혈액 내 AST 및 ALT 수치 변화를 조사하였다. AST 및 ALT 수준은 혈액생화학분석기(Olympus,Melville, NY, USA)를 이용하여 측정하였다.
그 결과 도 1 내지 도 4에서 나타낸 바와 같이, 삼채 뿌리의 물 추출물과 삼채 뿌리의 메탄올 추출물을 경구 투여한 실험군에서는 간 손상의 지표물질인 AST 및 ALT의 수준이 통계적으로 의미 있는 감소를 보이진 않았다. 이에 반해, 삼채 잎의 물 추출물 및 삼채 잎의 메탄올 추출물을 경구 투여한 실험군에서는 음성대조군에 비해 AST 및 ALT의 수준이 감소되는 것을 확인할 수 있었다. 특히 삼채 잎의 메탄올 추출물을 500mg/kg/day의 양으로 경구 투여한 실험군에서, 혈청 내 AST 및 ALT 수치가 유의하게 감소되는 것으로 나타났으며, 이는 현재 간보호 제품으로 알려진 실리마린(silymarin)과 거의 동일 수준인 것을 알 수 있었다.
< 실험예 2>
삼채 추출물의 아세트아미노펜 유도 간 독성 랫트에서의 항산화 효소 발현 증대 효과
본 실험에서는 상기 실시예 1을 통해 제조된 4종류의 삼채 추출물(삼체 뿌리의 물 추추물, 삼채 뿌리의 메탄올 추추물, 삼채 잎의 물 추출물, 삼채 잎의 메탄올 추출물 각각)이 간 독성 동물 모델에서 산화 스트레스에 대한 보호효과를 살펴보기 위하여, 간 조직 내에서 많이 분포하고 있는 항산화 효소로서 카탈라제(catalase, 이하 간략하게 ‘CAT’로 약칭함), 클루타치온 퍼옥시다제(glutathione peroxidase, 이하 간략하게 ‘GPx’로 약칭함)를 대상으로 하여, 이들 유전자의 mRNA 발현 수준을 실시간 RT-PCR을 통해 측정하였다.
항산화계 효소들은 대사과정 중 발생하는 활성 산소 종에 의해 그 활성이 비가역적으로 불활성화 될 수 있으며, 또한 지방산화에 의해 생성된 유리기도 제거하는 능력이 있다고 보고되어 왔다. 생체내의 항산화 방어기구 중에서 효소적 방어 계의 하나인 CAT는 생체 내 생명 현상에서 필수적인 산화환원반응의 일종이 과산화수소수를 물과 산소로 분해하는 효소이다. 글루타치온은 산화적인 손상으로부터 적혈구를 보호한다. 그것은 이황화 결합(disulfide bond)에 의해서 연결된 두 개의 트리펩타이드(tripeptide)에 의해서 환원된 형태(GSH)와 산화된 형태(GSSG) 사이를 순환한다. GSSG는 전자 근원과 같은 NADPH를 사용하는 플래빈단백질(flavoprotein)인 글루타치온 리덕타제(glutathione reductase)에 의해서 GSH로 환원된다. 글루타치온은 호기적 생명체에서 해로운 부산물인 과산화수소와 ?기 과산화물과 함께 반응함으로써 해독 작용에서는 중요한 역할을 수행한다. 이 반응에서 촉매 효소인 GPx는 셀레늄 원자가 공유 결합되어 있는 것이 중요하고 해독작용으로써 큰 역할을 수행하게 된다.
이에, 본 실험에서는 삼채 추출물의 간 독성에 따른 산화 스트레스에 대한 보호 효과를 살펴보기 위하여, 간 조직 내에서 많이 분포하고 있는 항산화 효소로서 CAT 및 GPx의 발현에 미치는 영향을 살펴보았다.
이를 위해, 상기 실시예 3을 통해 준비된 간 조직을 약 0.5 cm2의 조직을 잘라 Tripure Isolation Reagent (Roche 11 667 165 001)를 이용하여 유전자 발현을 분석하였다. Tripure reagent에 담겨진 조직을 균질화(homogenization) 시키고 5μg의 mRNA를 High Capacity cDNA Reverse Transcription Kit (Applied biosystem 4368814)를 이용하여 cDNA로 합성을 하였다. 실험은 제조사의 지시에 따라 수행하였다. 합성된 cDNA 1μl, taqman primer 1μl, Taqman Universal Master Mix II (Appiled biosystem) 10μl, 3차 증류수 8μl를 넣고 Real-time PCR을 수행하였다. 정량 중합 효소 반응에 쓰인 TaqMan gene은 http://www.lifetechnologies.com/kr/ko/home/life-science/pcr/real-time-pcr/real-time-pcr-assays.html 에서 검색하여 주문 후 사용하였고 분석하고자 하는 유전자 특이적 gene의 정보는 표 2에서 나타내었다. 또한 Real-time PCR 반응 조건은 50℃에서 2분 95℃에서 10분 동안 1회 수행하고, 변성 온도 95℃에서 15초 어닐링 온도 60℃에서 15초인 사이클을 40회 반복 수행하였다.
Real-time PCR 수행에 사용된 TaqMan gene 정보
Gene description TaqMan gene expression assay number GenBank accession number
Gene symbol Gene name
CAT Catalase Rn00560930_m1 NM_012520.1
GPx3 Glutathione peroxidase 3 Rn00574703_m1 NM_022525.3
GPx4 Glutathione peroxidase 4 Rn00820818_g1 NM_001039849.1
Hprt1 Hypoxanthine guanine phosphoribosyl transferase
(reference gene)
Rn01527840_m1 NM_012583.2
그 결과 도 5 내지 도 10에서 나타낸 바와 같이, 아세트아미노펜의 경구 투여에 따른 간 손상 동물 모델에서 CAT의 발현이 감소하며(도 5 및 도 6 참조), NADPH에 관계되는 GPx3 및 GPx4 유전자 발현 또한 감소하는 것을 확인할 수 있었다(도 7 내지 도 10 참조). 반면에, 본 발명의 삼채 추출물을 경구 투여한 모든 실험군에서 음성대조군(아세트아미노펜을 경구 투여한 군) 대비 CAT, GPx3 및 GPx4 mRNA 발현양이 증대되는 것으로 나타났다. 특히 삼채 뿌리 추출물 대비 삼채 잎 추출물(삼채 잎의 물 추출물, 삼채 잎의 메탄올 추출물)을 투여한 실험군에서 CAT, GPx3 및 GPx4의 발현이 증대되며, 이는 무처리군(정상군)의 발현 수치와 거의 유사함을 확인할 수 있었다(도 6, 도 8 및 도 10 참조).
상기와 같은 결과를 통해, 본 발명의 삼채 추출물이 간 해독작용에 필요한 효소들의 mRNA 발현을 조절하여 간 독성을 억제시킬 수 있음을 알 수 있었다.
이제까지 본 발명에 대하여 그 바람직한 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 특허청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.
AST: Aspartate Aminotransferase
ALT: alanine aminotransferase
CAT: catalase
GPx: glutathione peroxidase

Claims (12)

  1. 삼채 잎의 메탄올 추출물을 유효성분으로 포함하는, 약물유인성 간질환, 알코올성 간질환, 급성간염 및 지방간으로 이루어진 군으로부터 선택된 1종의 간질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물.
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  5. 제1항에 있어서,
    상기 삼채 잎의 메탄올 추출물은 조성물 총 중량에 대하여 0.1 ~ 90 중량%로 포함되는 것을 특징으로 하는 간질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물.
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  7. 삼채 잎의 메탄올 추출물을 유효성분으로 포함하는, 약물유인성 간질환, 알코올성 간질환, 급성간염 및 지방간으로 이루어진 군으로부터 선택된 1종의 간질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물.
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  11. 삼채 잎의 메탄올 추출물을 유효성분으로 포함하는, 약물유인성 간질환, 알코올성 간질환, 급성간염 및 지방간으로 이루어진 군으로부터 선택된 1종의 간질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품.
  12. 제11항에 있어서,
    상기 식품은 음료류, 육류, 초코렛, 식품류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 사탕류, 아이스크림류, 알코올 음료류, 비타민 복합제 및 건강보조식품류로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 건강기능식품.
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101753061B1 (ko) 2015-06-04 2017-07-05 대한민국 삼채 잎 분말을 유효성분으로 포함하는 당뇨 예방 및 치료용 조성물
KR101782969B1 (ko) 2015-06-10 2017-09-28 대한민국(농촌진흥청장) 발효 삼채를 유효성분으로 포함하는 비만 예방 및 치료용 조성물
KR20200092532A (ko) * 2019-01-24 2020-08-04 동신대학교산학협력단 무우 뿌리 추출물 등을 이용한 항염증용 조성물

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101441609B1 (ko) * 2013-04-05 2014-09-24 김호현 삼채 추출물을 유효성분으로 포함하는 대사성 질환 예방 및 치료용 조성물

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101441609B1 (ko) * 2013-04-05 2014-09-24 김호현 삼채 추출물을 유효성분으로 포함하는 대사성 질환 예방 및 치료용 조성물

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
네이버 블로그, "삼채의 간손상 억제 효과 - 간세포의 산화적 스트레스 억제 효과", 인터넷 URL: http://herbfarm.kr/100189359577 (2013.06.05.)*
배기춘 & 배대열, 대한본초학회지, 2012, 27(6), 55-61

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101753061B1 (ko) 2015-06-04 2017-07-05 대한민국 삼채 잎 분말을 유효성분으로 포함하는 당뇨 예방 및 치료용 조성물
KR101782969B1 (ko) 2015-06-10 2017-09-28 대한민국(농촌진흥청장) 발효 삼채를 유효성분으로 포함하는 비만 예방 및 치료용 조성물
KR20200092532A (ko) * 2019-01-24 2020-08-04 동신대학교산학협력단 무우 뿌리 추출물 등을 이용한 항염증용 조성물
KR102191165B1 (ko) * 2019-01-24 2020-12-16 동신대학교산학협력단 무 뿌리 추출물 등을 이용한 항염증용 조성물

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