KR101546167B1 - 브루톤 티로신 키나아제의 억제제 - Google Patents

브루톤 티로신 키나아제의 억제제 Download PDF

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Abstract

본 발명은, Btk를 억제하는, 하기 화학식 I의 6-(2-하이드록시메틸-페닐)-2-메틸-2H-피리다진-3-온 유도체에 관한 것이다:
[화학식 I]
Figure 112013020897408-pct00320

상기 식에서,
변수 X, R, 및 Y4는, 본원에 정의된 바와 같다. 상기 화합물은 Btk 활성 조절 및 과도한 Btk 활성과 연관된 질병을 치료하는 데 유용하다. 또한, 상기 화합물은 비정상적 B-셀 증식과 연관된 염증성 및 자가면역 질환, 예컨대 류마티스 관절염을 치료하는 데 유용하다. 또한, 화학식 I의 화합물 및 하나 이상의 담체, 희석제 또는 부형제를 함유하는 조성물이 개시되어 있다.

Description

브루톤 티로신 키나아제의 억제제{INHIBITORS OF BRUTON'S TYROSINE KINASE}
본 발명은, 비정상적 B-세포 활성으로 인한 자가면역 및 염증성 질환을 치료하는 데 유용한 신규한 유도체의 용도에 관한 것이다. 본원에 기재된 신규한 6-(2-하이드록시메틸-페닐)-2-메틸-2H-피리다진-3-온 유도체는 관절염의 치료에 유용하다.
단백질 키나아제는 인간 효소의 최대 패밀리 중 하나를 구성하고, 포스페이트 기를 단백질에 첨가함으로써 다수의 상이한 신호전달 과정을 조절한다(문헌[Hunter, Cell 1987 50:823-829]). 상세하게는, 티로신 키나아제는 티로신 잔기의 페놀 부분 상의 단백질을 인산화한다. 티로신 키나아제 패밀리는 세포 성장, 이동, 및 분화를 조절하는 일원을 포함한다. 비정상적 키나아제 활성은 암, 자가면역 및 염증성 질환을 포함하는 각종 인간 질환에 관련되어 있다. 단백질 키나아제가 세포 신호전달의 핵심 조절자 중에 있기 때문에, 이는 작은 분자의 키나아제 억제제에 의해 세포 기능이 조정되는 표적을 제공하고, 이로써 양호한 약물 설계 표적이 된다. 키나아제-매개의 질환의 치료 과정에 더하여, 키나아제 활성의 선택적 및 효과적 억제제가 또한 세포 신호전달 과정의 연구 및 치료적 관심 대상이 되는 다른 세포 표적의 식별에 유용하다.
자가면역 및/또는 염증성 질환의 발병에 있어서 B 세포가 핵심 역할을 한다는 좋은 증거가 있다. 리투잔(Rituxan)과 같은 B 세포를 감소시키는 단백질-기재의 치료법은 자가항체-유도 염증성 질환, 예컨대 류마티스 관절염에 효과적이다(문헌[Rastetter 등, Annu Rev Med 2004 55:477]). 따라서, B 세포 활성화에서 일부 역할을 하는 단백질 키나아제의 억제제는 B 세포 매개의 질환 병상, 예컨대 자가항체 생산에 대한 유용한 치료제일 수 있다.
B 세포 수용체(BCR)를 통한 신호전달은 증식 및 분화를 포함하는 B 세포 반응의 범위를 성숙한 항체 생산 세포로 제어한다. BCR은 B 세포 활성에 대한 핵심 조절 요소이고, 지나친 신호전달은 다수의 자가면역 및/또는 염증성 질환을 야기하는 병원성 자가항체의 형성 및 탈조절된 B 세포 증식을 야기할 수 있다. 브루톤 티로신 키나아제(Btk)는 막 근위이고 즉시 BCR로부터 후속하는 BCR 비관련 키나아제이다. Btk의 결핍은 BCR 신호전달을 차단하는 것으로 나타내어졌고, 따라서 Btk 의 억제는 B 세포 매개 질환 과정을 차단하는데 유용한 치료적 접근일 수 있다.
Btk는 티로신 키나아제의 Tec 패밀리의 일원이고, 조기 B 세포 발달 및 성숙한 B 세포 활성화 및 생존의 결정적인 조절자인 것으로 나타났다(문헌[Khan 등 Immunity 1995 3:283; Ellmeier 등 J. Exp. Med. 2000 192:1611]). 인간의 Btk 돌연변이는 병태 X-연관 무감마글로불린증(XLA)을 야기한다(문헌[Rosen 등 New Eng. J. Med. 1995 333:431 및 Lindvall 등 Immunol. Rev. 2005 203:200]에서 검토됨). 이러한 환자들은 면역 시스템이 손상되었으며, B 세포의 성숙 장애, 감소된 면역글로불린 및 말초 B 세포 수준, 줄어든 T-세포 의존성 면역 반응 그리고 BCR 자극 후 약화된 칼슘 이동을 나타낸다.
자가면역 및 염증성 질환에서 Btk 의 일부 역할에 대한 증거는 또한 Btk-부족 마우스 모델에 의해 제공되었다. 전신 홍반성 루푸스(SLE)의 임상전 래트과 모델에서, Btk-부족 마우스는 질환 진행의 현저한 개선을 나타낸다. 또한, Btk-부족 마우스는 콜라겐-유도 관절염에 대해 내성이 있다(문헌[Jansson and Holmdahl Clin. Exp. Immunol. 1993 94:459]). 선택적인 Btk 억제제는 마우스 관절염 모델에서 투여량에 의존적인 효력이 있는 것으로 입증되었다(문헌[Pan 등, Chem. Med Chem. 2007 2:58-61]).
Btk는 또한 질환 과정에 관련될 수 있는 B 세포 외의 세포에 의해 발현된다. 예를 들어, Btk 는 비만 세포에 의해 발현되고, Btk-부족 골수 유래의 비만 세포는 항원 유도의 탈과립(degranulation) 작용이 손상되었음을 입증한다(문헌[Iwaki 등 J. Biol. Chem. 2005 280:40261]). 이는 Btk 가 병적 비만 세포 반응, 예컨대 알레르기 및 천식을 치료하는데 유용할 수 있음을 나타낸다. 또한, Btk 활성이 부재한, XLA 환자로부터의 단핵백혈구는 자극 후 TNF 알파 생산 감소를 나타낸다(문헌[Horwood 등 J Exp Med 197:1603, 2003]). 따라서, TNF 알파 매개 염증은 작은 분자의 Btk 억제제에 의해 조절될 수 있다. 또한, Btk 는 아폽토시스(apoptosis)에 있어서 일부 역할을 하는 것으로 보고되었고(문헌[Islam and Smith Immunol. Rev. 2000 178:49]), 이로써 Btk 억제제는 특정 B 세포 림프종 및 백혈병의 치료에 유용할 수 있다(문헌[Feldhahn 등 J. Exp. Med. 2005 201:1837]).
본 발명은 하기 화학식 I의 Btk 억제제 화합물, 이의 사용 방법을 제공한다.
본 발명은 하기 화학식 I의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다:
[화학식 I]
Figure 112013020897408-pct00001
상기 식에서,
Figure 112013020897408-pct00002
는 단일 또는 이중 결합이고;
X는 CH, CH2, 또는 N이고;
R은 H, -R1, -R1-R2-R3, -R1-R3, 또는 -R2-R3이고;
R1은 아릴, 헤테로아릴, 바이사이클릭 헤테로아릴, 사이클로알킬, 또는 헤테로사이클로알킬이며, 이들 각각은 임의적으로 하나 이상의 저급 알킬, 하이드록시, 하이드록시 저급 알킬, 저급 알콕시, 할로, 니트로, 아미노, 아마이도, 시아노, 옥소, 또는 저급 할로알킬로 치환되고;
R2는 -C(=O), -C(=O)O, -C(=O)NR2', -NHC(=O)O, -C(R2')2, -O, -S, -C(=NH)NR2', 또는 -S(=O)2이고;
R2' 각각은 독립적으로 H 또는 저급 알킬이고;
R3는 H 또는 R4이고;
R4는 저급 알킬, 저급 할로알킬, 저급 알콕시, 아미노, 저급 알킬 아미노, 사이클로알킬 아미노, 저급 다이알킬 아미노, 아릴, 아릴알킬, 알킬아릴, 헤테로아릴, 알킬 헤테로아릴, 헤테로아릴 알킬, 사이클로알킬, 알킬 사이클로알킬, 사이클로알킬 알킬, 헤테로사이클로알킬, 알킬 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 알킬, 바이사이클릭 사이클로알킬, 바이사이클릭 헤테로사이클로알킬, 스피로사이클로알킬, 스피로헤테로사이클로알킬, 또는 바이사이클릭 스피로헤테로사이클로알킬이며, 이들은 각각 임의적으로 하나 이상의 저급 알킬, 할로, 저급 알킬 아미노, 저급 다이알킬 아미노, 하이드록시, 하이드록시 저급 알킬, 저급 알콕시, 저급 알칸오일, 할로, 니트로, 아미노, 아마이도, 아실, 시아노, 옥소, 설폰일, 저급 알킬 설폰일, 구아니디노, 하이드록실 아미노, 카복시, 카바모일, 카바메이트, 할로 저급 알콕시, 헤테로사이클로알킬, 또는 할로 저급 알킬로 치환되며, 이때 2개의 저급 알킬기는 함께 고리를 형성할 수 있고;
Y4는 Y4a, Y4b, Y4c, 또는 Y4d이고;
Y4a는 H 또는 할로겐이고;
Y4b는, 임의적으로 저급 할로알킬, 할로겐, 하이드록시, 아미노, 시아노, 및 저급 알콕시로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환체로 치환되는 저급 알킬이고;
Y4c는, 임의적으로 저급 알킬, 저급 할로알킬, 할로겐, 하이드록시, 아미노, 시아노, 및 저급 알콕시로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환체로 치환되는 저급 사이클로알킬이고;
Y4d는, 임의적으로 하나 이상의 저급 알킬, 알콕시 저급 알킬, 또는 하이드록시 저급 알킬로 치환되는 아미노이다.
본 발명은 치료가 필요한 환자에게 화학식 I의 Btk 억제제 화합물을 치료 효과량 투여하는 것을 포함하는 염증성 및/또는 자가면역 증상의 치료 방법을 제공한다.
본 발명은 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 희석제와 혼합된 화학식 I의 임의의 하나의 Btk 억제제 화합물을 포함하는 약학 조성물을 제공한다.
본원에 사용된 단수 형태는 하나 이상의 그 실체를 지칭한다; 예를 들어, 화합물은 하나 이상의 화합물 또는 적어도 하나의 화합물을 지칭한다. 마찬가지로, 대표 단수, "하나 이상" 및 "적어도 하나"는 본원에서 호환하여 사용될 수 있다.
어구 "상기 본원에 정의된 바와 같이"는 발명의 개요에 제공된 각각의 군에 대한 최대 범위의 정의 또는 더 넓은 청구범위를 지칭한다. 하기에 제공하는 모든 기타 실시양태에서, 각각의 실시양태에 존재할 수 있고, 명쾌하게 정의되지 않는 치환기들은 발명의 개요에서 제공되는 최대 범위의 정의를 유지한다.
본 명세서에 사용된 바와 같이, 전이 어구에서든 또는 청구범위의 본문에서든, 용어 "포함하다" 및 "포함"은 제약을 두지 않는 의미를 갖는 것으로서 해석되어야 한다. 즉, 상기 용어는 어구 "그 이상을 가진" 또는 "그 이상을 포함하는" 과 동의어로 해석되어야 한다. 프로세스의 문맥에서 사용되는 경우, 용어 "포함"은 적어도 언급한 단계를 포함하지만, 추가적인 단계를 포함할 수도 있다는 것을 의미한다. 화합물 또는 조성물의 문맥에서 사용되는 경우, 용어 "포함"은 화합물 또는 조성물이 적어도 언급된 특징 또는 성분을 포함하나, 추가적인 특징 또는 성분을 포함할 수도 있다는 것을 의미한다.
본원에 사용된 바와 같이, 달리 구체적으로 언급되지 않는다면, 용어 "또는"은 "및/또는"의 "포괄적"의미로 사용되지, "양자택일"의 "배제적" 의미로 사용되지 않는다.
용어 "독립적으로"는 본원에서 변수들이 동일한 화합물 내에 상동이거나 또는 상이한 정의를 갖는 변수의 존재 또는 부재와 상관없이 임의의 경우에 적용된다는 것을 의미하기 위해 이용된다. 따라서, R"이 2회 출현하고, "독립적으로 탄소 또는 질소"인 것으로 정의되는 화합물에서, 두 R"이 모두 탄소가 될 수도 있고, 두 R"이 모두 질소가 될 수도 있고, 또는 1개의 R"이 탄소이고 나머지가 질소일 수도 있다.
본 발명에서 채용되거나 또는 청구되는 화합물을 묘사하고 기재하는 임의의 부분 또는 화학식에서 임의의 변수(예를 들어, X, X' 또는 Q)가 1회 이상 나타나는 경우, 각 경우에 있어서의 그의 정의는 매 경우마다 그의 정의와 독립적이다. 또한, 치환기들 및/또는 변수들의 조합은 상기 화합물이 안정한 화합물을 제공할 때에만 허용된다.
결합 말단의 "*" 또는 결합을 통과하여 그려진 "
Figure 112013020897408-pct00003
" 기호들은 각각 분자의 일부분인 그의 나머지에 대한 작용기 또는 기타 화합물 부분의 결합 지점을 나타낸다. 따라서, 예를 들어:
MeC(=O)OR4인 경우, R4는
Figure 112013020897408-pct00004
이다.
고리계 내에 그려진(별개의 꼭지점에 연결된 것이 아님) 결합은 해당 결합이 적합한 임의의 고리 원자에 결합될 수 있음을 의미한다.
본원에 사용된 용어 "임의의" 또는 "임의로는"은 후속하여 기재되는 사건 또는 상황이, 반드시 그럴 필요는 없지만, 일어날 수도 있음을 의미하며, 상기 기재는 해당 사건 또는 상황이 발생하는 경우 및 그렇지 않은 경우를 모두 포함한다. 예를 들어, "임의적으로 치환된"은 임의적으로 치환된 부분이 수소 또는 치환기를 포함할 수 있음을 의미한다.
어구 "선택적 결합"은 결합이 존재할 수 있거나 존재하지 않는 것을 의미하고, 명세서에는 단일, 이중 또는 삼중 결합을 포함한다. 치환체가 "결합" 또는 "부재"로 지정되는 경우, 치환체에 연결된 원자가 직접 연결된다.
용어 "약"은 본원에서, 대략, 정도, 대충 또는 근방을 의미하기 위해 이용된다. 용어 "약"이 수치 범위와 연계하여 사용된 경우, 이는 설정한 수치값의 상하 범위로 연장하여 그 범위를 변경한다. 일반적으로, 용어 "약"은 본원에서 수치값을 언급한 값의 상하로 20%의 변동폭으로 변경하기 위해 이용된다.
화학식 I의 화합물은 호변이체를 나타낼 수 있다. 호변이체 화합물들은 2가지 이상의 상호변환가능한 종으로서 존재할 수 있다. 양성자이전성 호변이체는 두 원자들 사이에서의 공유결합으로 결합된 수소 원자의 이동으로 초래된다. 호변이체는 일반적으로 평형으로 존재하며, 개별 호변이체로 단리하려는 시도는 일반적으로, 그의 화학적 및 물리적 특성이 화합물들의 혼합물과 일치하는 혼합물을 제공한다. 평형의 위치는 분자내 화학적 특징에 좌우된다. 예를 들어, 아세트알데히드와 같은 많은 지방족 알데히드 및 케톤에서는 케토 형태가 우세한 반면, 페놀에서는 엔올 형태가 우세하다. 공통적인 양성자이전성 호변이체에는, 케토/엔올(-C(=O)-CH-⇔-C(-OH)=CH-), 아마이드/이미드산(-C(=O)-NH-⇔-C(-OH)=N-) 및 아미딘(-C(=NR)-NH-⇔-C(-NHR)=N-) 호변이체가 포함된다. 뒤의 2가지는 특히 헤테로아릴 및 헤테로사이클 고리에서 일반적이고, 본 발명은 화합물들의 모든 호변이체 형태를 포함한다.
본원에 사용된 과학기술용어는, 달리 정의되지 않는 한, 본 발명이 속하는 분야의 당업자가 일반적으로 이해하는 의미를 갖는다. 당업자에게 공지된 각종 방법론 및 재료들이 본원에 언급된다. 약학의 일반적인 법칙을 설정하는 표준 참고문헌[Goodman 및 Gilman의 The Pharmacological Basis of Therapeutics, 10th Ed., McGraw Hill Companies Inc., New York(2001)]이 포함된다. 당업자에게 공지된 임의의 적합한 재료 및/또는 방법이 본 발명의 수행에 이용될 수 있다. 그러나, 바람직한 재료 및 방법은 기재된다. 하기의 상세한 설명 및 실시예에서 언급되는 재료, 시약 등은, 달리 언급되지 않으면, 판매 공급원으로부터 입수가능하다.
본원에 언급된 정의는, "헤테로알킬아릴", "할로알킬헤테로아릴", "아릴알킬헤테로사이클일", "알킬카본일", "알콕시알킬", "사이클로알킬알킬" 등과 같은 화학적으로 연관된 조합을 형성하기 위해 덧붙여질 수 있다. 용어 "알킬"을, "페닐알킬" 또는 "하이드록시알킬"에서와 같이 또 다른 용어에 접미사로 이용하는 경우, 이는 기타 구체적으로 명명한 기로부터 선택되는 1 또는 2개의 치환기로 치환되어 있는, 상기 정의된 바와 같은 알킬기를 지칭하기 위한 의도이다. 따라서, 예를 들어, "페닐알킬"은 1 또는 2개의 페닐 치환기를 가진 알킬기를 지칭하고, 따라서 벤질, 페닐에틸 및 바이페닐을 포함한다. "알킬아미노 알킬"은 1 또는 2개의 알킬아미노 치환기를 가진 알킬기이다. "하이드록시알킬"에는, 2-하이드록시에틸, 2-하이드록시프로필, 1-(하이드록시메틸)-2-메틸프로필, 2-하이드록시부틸, 2,3-다이하이드록시부틸, 2-(하이드록시메틸), 3-하이드록시프로필 등이 포함된다. 따라서, 본원에 사용된 바와 같이, 용어 "하이드록시알킬"은 하기에 정의된 헤테로알킬기의 서브셋트를 정의하기 위해 이용된다. 용어 -(아르)알킬은 비치환 알킬 또는 아르알킬기를 지칭한다. 용어 (헤테로)아릴 또는 (헤트)아릴은 아릴 또는 헤테로아릴기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "스피로사이클로알킬"은, 스피로사이클릭 사이클로알킬기, 예컨대 스피로[3.3]헵탄을 의미한다. 본원에 사용된 용어 "스피로헤테로사이클로알킬"은 스피로사이클릭 헤테로사이클로알킬, 예컨대 2,6-다이아자 스피로[3.3]헵탄을 의미한다.
본원에 사용된 용어 "아실"은, R이 수소 또는 본원에 정의된 바와 같은 저급 알킬인 화학식 -C(=O)R의 기를 의미한다. 본원에 사용된 용어 "알킬카본일"은 R이 본원에 정의된 바와 같은 알킬은 화학식 C(=O)R의 기를 의미한다. 용어 C1 -6 아실은 6개의 탄소 원자를 포함하는 기 C(=O)R를 지칭한다. 본원에 사용된 용어 "아릴카본일"은, R이 아릴기인 화학식 C(=O)R의 기를 의미하고; 본원에 사용된 용어 "벤조일"은 R이 페닐인 "아릴카본일" 기이다.
본원에 사용된 용어 "에스터"는 R이 본원에 정의된 바와 같은 저급 알킬인, 화학식 -C(=O)OR의 기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "알킬"은, 1 내지 10개의 탄소 원자를 포함하는 비분지형 또는 분지형 사슬의, 포화, 1가 탄화수소 잔기를 의미한다. 용어 "저급 알킬"은 1 내지 6개인 탄소 원자를 포함하는 직쇄 또는 분지쇄 탄화수소 잔기를 의미한다. 본원에 사용된 용어 "C1 -10 알킬"은 1 내지 10개의 탄소로 이루어진 알킬을 지칭한다. 알킬기의 예는, 비제한적으로, 메틸, 에틸, 프로필, i-프로필, n-부틸, i-부틸, t-부틸 또는 펜틸, 이소펜틸, 네오펜틸, 헥실, 헵틸 및 옥틸을 포함하는 저급 알킬기가 포함된다.
"페닐알킬" 또는 "하이드록시알킬"에서와 같이, 용어 "알킬"이 또다른 용어의 접미사로 사용되는 경우, 이는 기타 구체적으로 호명된 기로부터 선택되는 1 내지 2개의 치환기로 치환된, 상기 정의된 바와 같은 알킬기를 지칭하는 것을 의도로 한다. 따라서, 예를 들어, "페닐알킬"은 R'이 페닐 라디칼이고, R"이 본원에 정의된 알킬렌 라디칼인 라디칼 R'R"- 을 지칭하고, 페닐알킬 잔기의 결합 지점은 알킬렌 라디칼 상에 있을 것으로 이해될 것이다. 아릴알킬 라디칼의 예는, 비제한적으로, 벤질, 페닐에틸, 3-페닐프로필이 포함된다. 용어 "아릴알킬" 또는 "아르알킬"은 R'이 아릴 라디칼이라는 점을 제외하고 유사하게 해석된다. 용어 "(헤트)아릴알킬" 또는 "(헤트)아르알킬"은 R'이 임의로 아릴 또는 헤테로아릴 라디칼이라는 점을 제외하고 유사하게 해석된다.
본원에 사용된 용어 "할로알킬" 또는 "할로-저급 알킬" 또는 "저급 할로알킬"은 1 내지 6개의 탄소 원자를 함유한 직쇄 또는 분지쇄 탄화수소 잔류물을 지칭하며, 이때 하나 이상의 탄소 원자는 하나 이상의 할로겐 원자로 치환된다.
본원에 사용된 용어 "알킬렌" 또는 "알킬렌일"은, 달리 언급되지 않는 한, 1 내지 10개의 탄소 원자의 2가 포화 선형 탄화수소 라디칼(예를 들어, (CH2)n) 또는 2 내지 10개의 탄소 원자의 분지형 포화 2가 탄화수소(예를 들어, -CHMe- 또는 -CH2CH(i-Pr)CH2-) 를 의미한다. 메틸렌의 경우를 제외하고, 알킬렌기의 개방된 원자가(open valences)는 동일한 원자에 결합되지 않는다. 알킬렌 라디칼의 예는, 비제한적으로, 메틸렌, 에틸렌, 프로필렌, 2-메틸-프로필렌, 1,1-다이메틸-에틸렌, 부틸렌, 2-에틸부틸렌이 포함된다.
본원에 사용된 용어 "알콕시"는, 알킬이 상기와 같이 정의된 -O-알킬기, 예컨대, 이성질체를 포함하는, 메톡시, 에톡시, n-프로필옥시, i-프로필옥시, n-부틸옥시, i-부틸옥시, t-부틸옥시, 펜틸옥시, 헥실옥시를 의미한다. 본원에 사용된 "저급 알콕시"는, 상기에 정의된 "저급 알킬"기가 있는 알콕시기를 의미한다. 본원에 사용된 "C1 -10 알콕시"는 알킬이 C1 - 10 인 -O-알킬을 지칭한다.
용어 "PCy3"은 3개의 환형 잔기로 삼치환된 포스핀을 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "할로알콕시" 또는 "할로-저급 알콕시" 또는 "저급 할로알콕시"는 저급 알콕시기를 지칭하며, 이때 하나 이상의 탄소 원자는 하나 이상의 할로겐 원자로 치환된다.
본원에 사용된 용어 "하이드록시알킬"은 상이한 탄소 원자 상의 1 내지 3개의 수소 원자가 하이드록실기로 치환된 알킬 라디칼을 의미한다.
본원에 사용된 용어 "알킬설폰일" 및 "아릴설폰일"은 화학식 -S(=O)2R의 기를 지칭하며, 이때 R은 각각 알킬 또는 아릴이고, 알킬 및 아릴은 본원에 정의된 바와 같다. 본원에 사용된 용어 "헤테로알킬설폰일"은 화학식 -S(=O)2R의 기를 지칭하며, 이때 R은 본원에 정의된 바와 같은 "헤테로알킬"이다.
본원에 사용된 용어 "알킬설폰일아미노" 및 "아릴설폰일아미노"는 화학식 -NR'S(=O)2R의 기를 지칭하며, 이때 R은 각각 알킬 또는 아릴이고, R'는 수소 또는 C1-3 알킬이고, 알킬 및 아릴은 본원에 정의된 바와 같다.
본원에 사용된 용어 "사이클로알킬"은 3 내지 8개의 탄소 원자를 포함하는 포화 카보사이클릭 고리를 지칭하는데, 즉 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 아다만틸, 사이클로헵틸 또는 사이클로옥틸이다. 본원에 사용된 "C3 -7 사이클로알킬"은 카보사이클릭 고리 내에 3 내지 7개의 탄소로 이루어진 사이클로알킬을 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "카복시-알킬"은 알킬 잔기를 지칭하며, 이때 1개의 수소 원자는 카복실로 치환되면서 헤테로알킬 라디칼의 부착 지점이 탄소 원자를 통과한다고 이해되어진다. 용어 "카복시" 또는 "카복실"은 -CO2H 잔기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "헤테로아릴" 또는 "헤테로방향족"은 하나 이상의 N, O, 또는 S 헤테로원자가 혼입된 고리 당 4 내지 8개의 원자를 함유하는 하나 이상의 방향족 또는 부분적 불포화 고리를 갖는 5 내지 12개의 고리 원자(남은 고리 원자는 탄소임)의 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 라디칼을 의미하며, 헤테로아릴 라디칼의 부착 지점은 방향족 또는 부분적 불포화 고리 상에 존재한다고 이해된다. 당업자에 널리 공지된 바에 따라서, 헤테로아릴 고리는 이의 모든 탄소 대응자 보다 방향족 특성을 덜 갖는다. 따라서, 본 발명의 목적을 위하여, 헤테로아릴기는 일정한 정도의 방향족 특성을 가질 필요가 있다. 헤테로아릴은 하기 직접 정의된 바와 같이 임의적으로 치환될 수 있다. 헤테로아릴 잔기의 예는, 5 내지 6개의 고리 원자 및 1 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 모노사이클릭 방향족 헤테로환을 포함하며, 비제한적으로, 피리딘일, 피리미딘일, 피라진일, 옥사진일, 피롤일, 피라졸일, 이미다졸일, 옥사졸일, 4,5-다이하이드로-옥사졸일, 5,6-다이하이드로-4H-[1,3]옥사졸일, 이속사졸, 티아졸, 이소티아졸, 트라이아졸린, 티아다이아졸 및 옥사다이아졸린을 포함하고, 이들은 임의적으로 하이드록시, 시아노, 알킬, 알콕시, 티오, 저급 할로알콕시, 알킬티오, 할로, 저급 할로알킬, 알킬설핀일, 알킬설폰일, 할로겐, 아미노, 알킬아미노, 다이알킬아미노, 아미노알킬, 알킬아미노알킬, 및 다이알킬아미노알킬, 니트로, 알콕시카본일 및 카바모일, 알킬카바모일, 다이알킬카바모일, 아릴카바모일, 알킬카본일아미노 및 아릴카본일아미노로부터 선택된 하나 이상의, 바람직하게는 1 또는 2개의 치환체로 치환될 수 있다. 바이사이클릭 잔기의 예는, 비제한적으로, 퀴놀린일, 이소퀴놀린일, 벤조푸릴, 벤조티오페닐, 벤즈옥사졸, 벤즈이속사졸, 벤조티아졸, 나프티리딘일, 5,6,7,8-테트라하이드로-[1,6]나프티리딘일, 및 벤즈이소티아졸이다. 바이사이클릭 잔기는 임의적으로 다른 고리 상에 치환될 수 있으나, 부착 지점은 헤테로원자를 함유하는 고리 상에 있다.
용어 "아릴"은 6 내지 10개의 탄소 고리 원자를 포함하는 1가 방향족 탄소환 모노- 또는 바이사이클릭 고리계를 지칭한다. 아릴 잔기의 예는 페닐 및 나프틸을 포함한다.
본원에 사용된 용어 "헤테로사이클일", "헤테로사이클로알킬" 또는 "헤테로사이클"은, 고리 당 하나 이상의 고리 헤테로원자(N,O 또는 S(O)0-2로부터 선택됨)를 포함하여 3 내지 8개의 원자의 스피로사이클릭 고리계를 포함하는, 하나 이상의 고리, 바람직하게는 1 내지 2개의 고리로 이루어진 1가 포화 사이클릭 라디칼을 지칭하며, 달리 지칭되지 않으면, 이들은 임의적으로 하이드록시, 옥소, 시아노, 저급 알킬, 저급 알콕시, 저급 할로알콕시, 알킬티오, 할로, 저급 할로알킬, 하이드록시알킬, 니트로, 알콕시카본일, 아미노, 알킬아미노, 알킬설폰일, 아릴설폰일, 알킬아미노설폰일, 아릴아미노설폰일, 알킬설폰일아미노, 아릴설폰일아미노, 알킬아미노카본일, 아릴아미노카본일, 알킬카본일아미노, 아릴카본일아미노, 및 이들의 이온 형태로부터 선택된 하나 이상의, 바람직하게는 1 또는 2개의 치환체로 독립적으로 치환될 수 있다. 헤테로사이클릭 라디칼의 예는, 비제한적으로, 모폴린일, 피페라진일, 피페리딘일, 아제티딘일, 피롤리딘일, 헥사하이드로아제핀일, 옥세탄일, 테트라하이드로푸란일, 테트라하이드로티오페닐, 옥사졸리딘일, 티아졸리딘일, 이속사졸리딘일, 테트라하이드로피란일, 티오모폴린일, 퀴누클리딘일 및 이미다졸린일, 및 이의 이온 형태를 포함한다. 또한, 예컨대 3,8-다이아자-바이사이클로[3.2.1]옥탄, 2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.2]옥탄, 또는 옥타하이드로-피라진오[2,1-c][1,4]옥사진일 수 있다.
본 발명은 하기 화학식 I의 6-(2-하이드록시메틸-페닐)-2-메틸-2H-피리다진-3-온 유도체를 개시하며, 이때 변수들은 본원에 기재된 바와 같이 정의된다:
[화학식 I]
Figure 112013020897408-pct00005
어구 "상기 본원에 정의된 바와 같은"은 설명 또는 가장 넓은 청구범위에서 제공된 바와 같이 각 기에 대한 가장 넓은 정의를 지칭한다. 하기 제공된 모든 기타 실시양태에서, 각 실시양태에서 존재할 수 있고 명확하게 정의되지 않은 치환기는 설명에서 제공된 가장 넓은 정의를 보유한다.
화학식 I의 화합물은 브루톤 티로신 키나아제(Btk)를 억제한다. 상위(upstream) 키나아제에 의한 Btk의 활성은 포스포리파아제-Cγ의 활성을 생성하여 예비-염증성 조절자의 분비를 자극한다.
Figure 112013020897408-pct00006
고리계의 측쇄를 포함한 화학식 I의 화합물은, 다른 측쇄를 갖는 유사체에 비해 예상되지 않은 개선된 억제 활성을 보인다. 특히, 불포화 측쇄 상의 불소 치환은 인간 전혈에서 약 5 내지 10배의 예상치 못한 효능 증가를 생성한다. 또한, 불소화된 측쇄는 효능 증가 외에, 분자의 피리다진온 코어와 함께 이용시, 피리딘온 코어를 갖는 것에 비해 예상치못한 개선된 안전성을 갖는다. 특히, 상기 피리다진온 코어 분자는 물질대사 중에서의 반응 대사체 때문에 공유 결합의 허용가능하지 않은 수준을 겪지 않는다. 화학식 I의 화합물은 관절염, 및 다른 항염증성 및 면역반응 질환의 치료에 유용하다. 따라서, 화학식 I의 화합물은 관절염의 치료에 유용하다. 화학식 I의 화합물은 세포 내의 Btk의 억제 및 B-세포 발달의 조절에 유용하다. 또한, 본 발명은 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 희석제와 혼합된 화학식 I의 화합물을 함유하는 약학 조성물을 포함한다.
본 발명은 하기 화학식 I의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다:
[화학식 I]
Figure 112013020897408-pct00007
상기 식에서,
Figure 112013020897408-pct00008
는 단일 또는 이중 결합이고;
X는 CH, CH2, 또는 N이고;
R은 H, -R1, -R1-R2-R3, -R1-R3, 또는 -R2-R3이고;
R1은 아릴, 헤테로아릴, 바이사이클릭 헤테로아릴, 사이클로알킬, 또는 헤테로사이클로알킬이며, 이들 각각은 임의적으로 하나 이상의 저급 알킬, 하이드록시, 하이드록시 저급 알킬, 저급 알콕시, 할로, 니트로, 아미노, 아마이도, 시아노, 옥소, 또는 저급 할로알킬로 치환되고;
R2는 -C(=O), -C(=O)O, -C(=O)NR2', -NHC(=O)O, -C(R2')2, -O, -S, -C(=NH)NR2', 또는 -S(=O)2이고;
R2' 각각은 독립적으로 H 또는 저급 알킬이고;
R3은 H 또는 R4이고;
R4는 저급 알킬, 저급 할로알킬, 저급 알콕시, 아미노, 저급 알킬 아미노, 사이클로알킬 아미노, 저급 다이알킬 아미노, 아릴, 아릴알킬, 알킬아릴, 헤테로아릴, 알킬 헤테로아릴, 헤테로아릴 알킬, 사이클로알킬, 알킬 사이클로알킬, 사이클로알킬 알킬, 헤테로사이클로알킬, 알킬 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 알킬, 바이사이클릭 사이클로알킬, 바이사이클릭 헤테로사이클로알킬, 스피로사이클로알킬, 스피로헤테로사이클로알킬, 또는 바이사이클릭 스피로헤테로사이클로알킬이며, 이들은 각각 임의적으로 하나 이상의 저급 알킬, 할로, 저급 알킬 아미노, 저급 다이알킬 아미노, 하이드록시, 하이드록시 저급 알킬, 저급 알콕시, 저급 알칸오일, 할로, 니트로, 아미노, 아마이도, 아실, 시아노, 옥소, 설폰일, 저급 알킬 설폰일, 구아니디노, 하이드록실 아미노, 카복시, 카바모일, 카바메이트, 할로 저급 알콕시, 헤테로사이클로알킬, 또는 할로 저급 알킬로 치환되며, 이때 2개의 저급 알킬기는 함께 고리를 형성할 수 있고;
Y4는 Y4a, Y4b, Y4c, 또는 Y4d이고;
Y4a는 H 또는 할로겐;
Y4b는, 임의적으로 저급 할로알킬, 할로겐, 하이드록시, 아미노, 시아노, 및 저급 알콕시로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환체로 치환되는 저급 알킬이고;
Y4c는, 임의적으로 저급 알킬, 저급 할로알킬, 할로겐, 하이드록시, 아미노, 시아노, 및 저급 알콕시로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환체로 치환되는 저급 사이클로알킬이고;
Y4d는, 임의적으로 하나 이상의 저급 알킬, 알콕시 저급 알킬, 또는 하이드록시 저급 알킬로 치환되는 아미노이다.
또한, 본원에 기재된 바와 같은 특정 잔류물 R, X 및 Y4와 관련된 모든 실시양태를 또 다른 잔류물 R, X 및 Y4와 관련된 임의의 다른 실시양태와 조합할 수 있다는 것을 이해할 것이다.
본 발명은
Figure 112013020897408-pct00009
가 이중 결합이고, X는 N인 화학식 I의 화합물을 제공한다.
본 발명은
Figure 112013020897408-pct00010
가 단일 결합이고, X는 CH2인 화학식 I의 화합물을 제공한다.
본 발명은
Figure 112013020897408-pct00011
가 이중 결합이고, X는 CH인 화학식 I의 화합물을 제공한다.
본 발명은
Figure 112013020897408-pct00012
가 이중 결합이고, X는 N이고, R이 -R1-R3인 화학식 I의 화합물을 제공한다.
본 발명은
Figure 112013020897408-pct00013
가 이중 결합이고, X가 N이고, R이 -R1-R3이고, R1이 피리딜인 화학식 I의 화합물을 제공한다.
본 발명은
Figure 112013020897408-pct00014
가 이중 결합이고, X가 N이고, R이 -R1-R2-R3인 화학식 I의 화합물을 제공한다.
본 발명은
Figure 112013020897408-pct00015
가 이중 결합이고, X가 N이고, R이 -R1-R2-R3이고, R1이 피리딜인 화학식 I의 화합물을 제공한다.
본 발명은
Figure 112013020897408-pct00016
가 이중 결합이고, X가 N이고, R이 -R1-R3이고, R1이 피리딜이고, R3이 R4인 화학식 I의 화합물을 제공한다.
본 발명은
Figure 112013020897408-pct00017
가 이중 결합이고, X가 N이고, R이 -R1-R2-R3이고, R1이 피리딜이고, R3이 R4인 화학식 I의 화합물을 제공한다.
본 발명은
Figure 112013020897408-pct00018
가 이중 결합이고, X가 N이고, R이 -R1-R3이고, R1이 피리딜이고, R3이 R4이고, Y가 Y4b인 화학식 I의 화합물을 제공한다.
본 발명은
Figure 112013020897408-pct00019
가 이중 결합이고, X가 N이고, R이 -R1-R2-R3이고, R1이 피리딜이고, R3가 R4이고, Y가 Y4b인 화학식 I의 화합물을 제공한다.
본 발명은
Figure 112013020897408-pct00020
가 이중 결합이고, X가 N이고, R이 -R1-R2-R3이고, R1이 피리딜이고, R2가 -C(=O), -C(R2')2, -O-, -S-, -S(=O)2이고, R3가 R4이고, Y가 Y4b인 화학식 I의 화합물을 제공한다.
본 발명은
Figure 112013020897408-pct00021
가 이중 결합이고, X가 N이고, R이 -R1-R2-R3이고, R1이 피리딜이고, R2가 -C(=O)이고, R3가 R4이고, Y가 Y4b인 화학식 I의 화합물을 제공한다.
본 발명은
Figure 112013020897408-pct00022
가 이중 결합이고, X가 N이고, R이 -R1-R3이고, R1이 피리딜이고, R3이 R4이고, Y4b가 3급-부틸인 화학식 I의 화합물을 제공한다.
본 발명은
Figure 112013020897408-pct00023
가 이중 결합이고, X가 N이고, R이 -R1-R2-R3이고, R1이 피리딜이고, R3이 R4이고, Y4b가 3급-부틸인 화학식 I의 화합물을 제공한다.
본 발명은
Figure 112013020897408-pct00024
가 이중 결합이고, X가 N이고, R이 -R1-R2-R3이고, R1이 피리딜이고, R3이 R4이고, R2가 -S(=O)2이고, R4가 저급 알킬인 화학식 I의 화합물을 제공한다.
본 발명은
Figure 112013020897408-pct00025
가 이중 결합이고, X가 N이고, R이 -R1-R2-R3이고, R1이 피리딜이고, R2가 -C(CH3)2이고, R3이 R4이고, R4가, 저급 알킬 아미노, 저급 다이알킬 아미노, 또는 임의적으로 하나 이상의 저급 알킬로 치환되는 헤테로사이클로알킬인, 화학식 I의 화합물을 제공한다.
본 발명은
Figure 112013020897408-pct00026
가 이중 결합이고, X가 N이고, R이 -R1-R2-R3이고, R1이 페닐 또는 피리딜이고, R2가 -C(=O)이고, R3이 R4이고, R4가, 임의적으로 하나 이상의 저급 알킬로 치환되는 모폴린 또는 피페라진인 화학식 I의 화합물을 제공한다.
본 발명은
Figure 112013020897408-pct00027
가 이중 결합이고, X가 N이고, Y4가 3급-부틸인 화학식 I의 화합물을 제공한다.
본 발명은
Figure 112013020897408-pct00028
가 단일 결합이고, X가 CH2이고, Y4가
Figure 112013020897408-pct00029
이고, Y5 및 Y6이 독립적으로 H, 저급 알킬, 또는 저급 할로알킬인 화학식 I의 화합물을 제공한다.
본 발명은
Figure 112013020897408-pct00030
가 이중 결합이고, X가 CH이고, Y4가
Figure 112013020897408-pct00031
이고, Y5 및 Y6이 독립적으로 H, 저급 알킬, 또는 저급 할로알킬인 화학식 I의 화합물을 제공한다.
본 발명은
Figure 112013020897408-pct00032
가 이중 결합이고, X가 N이고, Y4가
Figure 112013020897408-pct00033
이고, Y5가 H, 할로겐, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 I의 화합물을 제공한다.
본 발명은
Figure 112013020897408-pct00034
가 이중 결합이고, X가 N이고, Y4가
Figure 112013020897408-pct00035
이고, Y5 및 Y6이 독립적으로 H 또는 저급 알킬인 화학식 I의 화합물을 제공한다.
본 발명은
Figure 112013020897408-pct00036
가 이중 결합이고, X가 N이고, Y4가 3급-부틸이고, R이 -R1-R3이고, R1이 피리딜 또는 피라졸로피라진이고, R3이 R4이고, R4가 임의적으로 치환되는 저급 알킬, 헤테로사이클로알킬, 또는 알킬 헤테로사이클로알킬인 화학식 I의 화합물을 제공한다.
본 발명은
Figure 112013020897408-pct00037
가 이중 결합이고, X가 N이고, Y4가 3급-부틸이고, R이 -R1-R2-R3이고, R1이 피리딜이고, R2가 -C(CH3)2이고, R3가 R4이고, R4가 저급 알킬 아미노, 저급 다이알킬 아미노, 또는 임의적으로 하나 이상의 저급 알킬로 치환되는 헤테로사이클로알킬인 화학식 I의 화합물을 제공한다.
본 발명은
Figure 112013020897408-pct00038
가 이중 결합이고, X가 N이고, Y4가 3급-부틸이고, R이 -R1-R2-R3이고, R1이 피리딜이고, R2가 -C(=O)이고, R3이 R4이고, R4가 임의적으로 치환되는 헤테로사이클로알킬 또는 바이사이클릭 스피로헤테로사이클로알킬인 화학식 I의 화합물을 제공한다.
본 발명은
Figure 112013020897408-pct00039
가 이중 결합이고, X가 N이고, Y4가 3급-부틸이고, R이 -R1 -R2 -R3이고, R1이 피리딜이고, R2가 -C(=O)이고, R3가 R4이고, R4가 임의적으로 치환되는 모폴린 또는 피페라진인 화학식 I의 화합물을 제공한다.
본 발명은 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 화학식 I의 화합물을 제공한다:
6-3급-부틸-2-(3-{5-[5-(1-에틸아미노-1-메틸-에틸)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-(모폴린-4-카본일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[5-(5-메탄설폰일-피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{5-[5-(3-메톡시-아제티딘-1-일메틸)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-(8-메틸-3,8-다이아자-바이사이클로[3.2.1]옥트-3-일메틸)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-2-(3-{5-[5-(2-다이메틸아미노-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
2-{3-[5-(5-아제티딘-1-일메틸-피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-2-하이드록시메틸-페닐}-6-3급-부틸-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-2-{3-[5-(5-다이메틸아미노메틸-피리딘-2-일아미노)-1-메틸-l-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-2-하이드록시메틸-페닐}-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-2-(3-{5-[(1R,5S)-5-(3,8-다이아자-바이사이클로[3.2.1]옥트-8-일)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
6-{6-[3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-2-하이드록시메틸-페닐]-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로-피리다진-4-일아미노}-N,N-다이메틸-니코틴아마이드;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[1-메틸-6-옥소-5-(5-트라이플루오로메틸-피라진-2-일아미노)-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(3-{5-[5-(2-하이드록시-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
2-(3-{5-[5-(2-아제티딘-1-일-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-6-3급-부틸-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{5-[5-(2-하이드록시-2-메틸-프로폭시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
2-[8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-(모폴린-4-카본일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-1-옥소-1,2-다이하이드로-이소퀴놀린-6-일]-2-메틸-프로피오니트릴;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(3-{5-[5-((S)-2-하이드록시-3-메톡시-프로폭시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(3-{5-[5-((R)-2-하이드록시-3-메톡시-프로폭시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-((S)-1-메틸-피롤리딘-2-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-((R)-1-메틸-피롤리딘-2-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
6-{6-[3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-2-하이드록시메틸-페닐]-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로-피리다진-4-일아미노}-N,N-다이메틸-니코틴아마이드;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{5-[5-(4-하이드록시-4-메틸-피페리딘-1-카본일)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-(6-메틸-2,6-다이아자-스피로[3.3]헵트-2-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-2-{3-[5-(5-에탄설폰일-피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-2-하이드록시메틸-페닐}-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-6-옥소-5-[5-(프로판-2-설폰일)-피리딘-2-일아미노]-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(3-{5-[5-(2-하이드록시-에틸설판일)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(3-{5-[5-(2-하이드록시-에탄설폰일)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{5-[5-(4-이소프로필-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-(1-메틸-피롤리딘-3-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[5-(1'-이소프로필-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-2-{3-[5-(1'-에틸-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-2-하이드록시메틸-페닐}-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-2-{3-[5-(1,5-다이메틸-1H-피라졸-3-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-2-하이드록시메틸-페닐}-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-((S)-1-메틸-피롤리딘-3-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-((R)-1-메틸-피롤리딘-3-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[1-메틸-5-(4-메틸-3,4,5,6-테트라하이드로-2H-[1,2']바이피라진일-5'-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-2-{3-[5-(5-사이클로부틸아미노메틸-피라진-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-2-하이드록시메틸-페닐}-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-2-(3-{5-[5-(2-다이메틸아미노-에톡시)-피라진-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-(4-메틸-피페라진-1-일메틸)-피라진-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-2-(3-{5-[5-(2-다이메틸아미노-1,1-다이메틸-에톡시)-피라진-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-2-(3-{5-[6-(2-다이메틸아미노-1,1-다이메틸-에톡시)-피리다진-3-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[6-(1-메틸-피페리딘-4-일)-피리다진-3-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-(4-메틸-피페라진-1-일메틸)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-[2-하이드록시메틸-3-(5-{5-[(2-메톡시-에틸아미노)-메틸]-피리딘-2-일아미노}-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일)-페닐]-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-((1S,4S)-5-메틸-2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.1]헵트-2-일메틸)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[5-(5-{[(2-메톡시-에틸)-메틸-아미노]-메틸}-피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[6-(4-메틸-피페라진-1-일)-피리다진-3-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[6-((1S,4S)-5-메틸-2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.1]헵트-2-일)-피리다진-3-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
2-(3-{5-[5-(아제티딘-1-카본일)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-6-3급-부틸-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-2-(3-{5-[5-(1,1-다이옥소-1λ6-티오모폴린-4-카본일)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-(2-옥사-6-아자-스피로[3.3]헵탄-6-카본일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-(6-메틸-2,6-다이아자-스피로[3.3]헵탄-2-카본일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
6-{6-[3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-2-하이드록시메틸-페닐]-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로-피리다진-4-일아미노}-N-(2-다이메틸아미노-에틸)-니코틴아마이드;
6-{6-[3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-2-하이드록시메틸-페닐]-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로-피리다진-4-일아미노}-N-(2-하이드록시-에틸)-N-메틸-니코틴아마이드;
1-(6-{6-[3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-2-하이드록시메틸-페닐]-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로-피리다진-4-일아미노}-피리딘-3-카본일)-아제티딘-3-카보니트릴;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{5-[5-(3-하이드록시-피롤리딘-1-카본일)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{5-[5-(4-하이드록시-피페리딘-1-카본일)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-(4-메틸-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-2-(3-{5-[5-((S)-1,2-다이하이드록시-에틸)-피라진-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
2-{3-[5-(5-아제티딘-1-일메틸-1-메틸-1H-피라졸-3-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-2-하이드록시메틸-페닐}-6-3급-부틸-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[1-메틸-5-(5-옥세탄-3-일-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-{3-[5-(1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-2-하이드록시메틸-페닐}-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[5-(1'-메탄설폰일-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-2H-프탈라진-1-온;
2-{3-[5-(1'-아세틸-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-2-하이드록시메틸-페닐}-6-3급-부틸-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[5-(4-하이드록시-4-메틸-3,4,5,6-테트라하이드로-2H-[1,3']바이피리딘일-6'-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[5-(4-하이드록시-3,4,5,6-테트라하이드로-2H-[1,3']바이피리딘일-6'-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-((1R,5S)-3-메틸-3,8-다이아자-바이사이클로[3.2.1]옥트-8-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[1-메틸-5-(1'-메틸-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-2-(3-{5-[1-((R)-2,3-다이하이드록시-프로필)-1H-피라졸-3-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-2-(3-{5-[5-(4-에틸-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{5-[1-(2-하이드록시-2-메틸-프로필)-1H-피라졸-3-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
2-(8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[1-메틸-5-(1'-메틸-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-1-옥소-1,2-다이하이드로-이소퀴놀린-6-일)-2-메틸-프로피오니트릴;
2-(2-{3-[5-(5-아제티딘-1-일메틸-1-메틸-1H-피라졸-3-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-2-하이드록시메틸-페닐}-8-플루오로-1-옥소-1,2-다이하이드로-이소퀴놀린-6-일)-2-메틸-프로피오니트릴;
2-[2-(3-{5-[5-(2-아제티딘-1-일-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-1-옥소-1,2-다이하이드로-이소퀴놀린-6-일]-2-메틸-프로피오니트릴;
2-(8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-1-옥소-1,2-다이하이드로-이소퀴놀린-6-일)-2-메틸-프로피오니트릴;
6-(6-{3-[6-(시아노-다이메틸-메틸)-8-플루오로-1-옥소-1H-이소퀴놀린-2-일]-2-하이드록시메틸-페닐}-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로-피리다진-4-일아미노)-N,N-다이메틸-니코틴아마이드;
2-[8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-((S)-1-메틸-피롤리딘-2-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-1-옥소-1,2-다이하이드로-이소퀴놀린-6-일]-2-메틸-프로피오니트릴;
2-[8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-((S)-1-메틸-피롤리딘-3-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-1-옥소-1,2-다이하이드로-이소퀴놀린-6-일]-2-메틸-프로피오니트릴;
2-[2-(3-{5-[5-(2-아제티딘-1-일-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-1-옥소-1,2,3,4-테트라하이드로-이소퀴놀린-6-일]-2-메틸-프로피오니트릴;
2-(8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[1-메틸-5-(5-옥세탄-3-일-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-1-옥소-1,2-다이하이드로-이소퀴놀린-6-일)-2-메틸-프로피오니트릴;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[1-메틸-5-(1'-옥세탄-3-일-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-2H-프탈라진-1-온;
2-(8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[1-메틸-5-(1'-옥세탄-3-일-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-1-옥소-1,2-다이하이드로-이소퀴놀린-6-일)-2-메틸-프로피오니트릴;
6-3급-부틸-2-{3-[5-(5-에틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-2-하이드록시메틸-페닐}-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
2-(2-{3-[5-(5-에틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-2-하이드록시메틸-페닐}-8-플루오로-1-옥소-1,2-다이하이드로-이소퀴놀린-6-일)-2-메틸-프로피오니트릴;
6-3급-부틸-2-[3-(5-{5-[(1S,4S)-1-(2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.1]헵트-2-일)메틸]-피리딘-2-일아미노}-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일)-2-하이드록시메틸-페닐]-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{5-[5-(4-하이드록시-4-메틸-피페리딘-1-일메틸)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
4-(6-{6-[3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-2-하이드록시메틸-페닐]-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로-피리다진-4-일아미노}-피리딘-3-일)-피페라진-1-카복실산 에틸 에스터;
8-플루오로-6-(2-플루오로-1,1-다이메틸-에틸)-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-(모폴린-4-카본일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-이소퀴놀린-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-((1S,4S)-5-메틸-2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.1]헵트-2-일)-피라진-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
2-[8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-((R)-1-메틸-피롤리딘-3-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-1-옥소-1,2-다이하이드로-이소퀴놀린-6-일]-2-메틸-프로피오니트릴; 및
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-6-옥소-5-[1'-(2,2,2-트라이플루오로-에틸)-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노]-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온.
본 발명은 치료 활성 물질로서 사용하기 위한 상기 기재된 바와 같은 화합물을 제공한다.
본 발명은 치료가 필요한 환자에게 화학식 I의 화합물을 치료 효과량 투여하는 것을 포함하는 염증성 및/또는 자가면역 질환의 치료 방법을 제공한다.
본 발명은 치료가 필요한 환자에게 화학식 I의 화합물을 치료 효과량 투여하는 것을 포함하는 류마티스 관절염의 치료 방법을 제공한다.
본 발명은 치료가 필요한 환자에게 화학식 I의 화합물을 치료 효과량 투여하는 것을 포함하는 천식의 치료 방법을 제공한다.
본 발명은 화학식 I의 화합물을 포함하는 약학 조성물을 제공한다.
본 발명은 화학식 I의 화합물을 포함하고, 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 희석제와 혼합된 약학 조성물을 제공한다.
본 발명은 염증성 질환 치료용 약제의 제조에서의 화학식 I의 화합물의 용도를 제공한다.
본 발명은 자가면역 질환 치료용 약제의 제조에서의 화학식 I의 화합물의 용도를 제공한다.
본 발명은 류마티스 관절염 치료용 약제의 제조에서의 화학식 I의 화합물의 용도를 제공한다.
본 발명은 천식 치료용 약제의 제조에서의 화학식 I의 화합물의 용도를 제공한다.
본 발명은 염증성 및/또는 자가면역 증상의 치료를 위한 상기 기재된 바와 같은 화합물의 용도를 제공한다.
본 발명은 류마티스 관절염의 치료를 위한 상기 기재된 바와 같은 화합물의 용도를 제공한다.
본 발명은 천식의 치료를 위한 상기 기재된 바와 같은 화합물의 용도를 제공한다.
본 발명은 염증성 및/또는 자가면역 증상의 치료에 사용하기 위한 상기 기재된 바와 같은 화합물을 제공한다.
본 발명은 류마티스성 관절염의 치료에 사용하기 위한 상기 기재된 바와 같은 화합물을 제공한다.
본 발명은 천식의 치료에 사용하기 위한 상기 기재된 바와 같은 화합물을 제공한다.
본 발명은 본원에 기재된 바와 같은 화합물, 방법, 또는 조성물을 제공한다.
본 발명은 하기 화학식 I'의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다:
[화학식 I']
Figure 112013020897408-pct00040
상기 식에서,
R은 H, -R1, -R1-R2-R3, -R1-R3, 또는 -R2-R3이고;
R1은 아릴, 헤테로아릴, 사이클로알킬, 또는 헤테로사이클로알킬이며, 이들 각각은 임의적으로 하나 이상의 저급 알킬, 하이드록시, 하이드록시 저급 알킬, 저급 알콕시, 할로, 니트로, 아미노, 아마이도, 시아노, 옥소, 또는 저급 할로알킬로 치환되고;
R2는 -C(=O), -C(=O)O, -C(=O)NR2', -NHC(=O)O, -C(R2')2, -O, -C(=NH)NR2', 또는 -S(=O)2이고;
R2' 각각은 독립적으로 H 또는 저급 알킬이고;
R3는 H 또는 R4이고;
R4는 저급 알킬, 저급 할로알킬, 저급 알콕시, 아미노, 저급 알킬 아미노, 저급 다이알킬 아미노, 아릴, 아릴알킬, 알킬아릴, 헤테로아릴, 알킬 헤테로아릴, 헤테로아릴 알킬, 사이클로알킬, 알킬 사이클로알킬, 사이클로알킬 알킬, 헤테로사이클로알킬, 알킬 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 알킬, 바이사이클릭 사이클로알킬, 바이사이클릭 헤테로사이클로알킬, 스피로사이클로알킬, 또는 스피로헤테로사이클로알킬이며, 이들은 각각 임의적으로 하나 이상의 저급 알킬, 할로, 저급 알킬 아미노, 저급 다이알킬 아미노, 하이드록시, 하이드록시 저급 알킬, 저급 알콕시, 할로, 니트로, 아미노, 아마이도, 아실, 시아노, 옥소, 구아니디노, 하이드록실 아미노, 카복시, 카바모일, 카바메이트, 할로 저급 알콕시, 또는 할로 저급 알킬로 치환되며, 이때 2개의 저급 알킬기는 함께 고리를 형성할 수 있고;
Y4는 Y4a, Y4b, Y4c, 또는 Y4d이고;
Y4a는 H 또는 할로겐이고;
Y4b는, 임의적으로 저급 할로알킬, 할로겐, 하이드록시, 아미노, 시아노, 및 저급 알콕시로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환체로 치환되는 저급 알킬이고;
Y4c는, 임의적으로 저급 알킬, 저급 할로알킬, 할로겐, 하이드록시, 아미노, 시아노, 및 저급 알콕시로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환체로 치환되는 저급 사이클로알킬이고;
Y4d는, 임의적으로 하나 이상의 저급 알킬, 알콕시 저급 알킬, 또는 하이드록시 저급 알킬로 치환되는 아미노이다.
화학식 I'의 하나의 양태에서, Y4는 3급-부틸, 다이메틸 아미노, 사이클로프로필, 또는 이소프로필이다.
화학식 I'의 하나의 양태에서, Y4는 3급-부틸이다.
화학식 I'의 하나의 양태에서, Y4는 다이메틸 아미노이다.
화학식 I'의 하나의 양태에서, Y4는 사이클로프로필이다.
화학식 I'의 하나의 양태에서, Y4는 이소프로필이다.
화학식 I'의 하나의 양태에서, R은 -R1-R3이고; R1은 피리딜이고; R3은 R4이고; R4는 저급 알킬로 임의적으로 치환되는 헤테로사이클로알킬이다.
화학식 I'의 하나의 양태에서, R은 -R1-R2-R3이고; R1은 피리딜이고; R2는 -C(CH3)2이고; R3은 R4이고; R4는 하나 이상의 저급 알킬로 임의적으로 치환되는 저급 알킬 아미노, 저급 다이알킬 아미노, 또는 헤테로사이클로알킬이다.
화학식 I'의 하나의 양태에서, R은 -R1-R2-R3이고; R1은 페닐 또는 피리딜이고; R2는 -C(=O)이고; R3은 R4이고; R4는 하나 이상의 저급 알킬로 임의적으로 치환되는 모폴린 또는 피페라진이다.
화학식 I'의 하나의 양태에서, R1은 피리딜이고; R3은 R4이고; R4는, R4'가 저급 알킬인 -S(=O)2R4'이다.
화학식 I'의 하나의 양태에서, Y4는
Figure 112013020897408-pct00041
이고, 이때 Y5는 H, 할로겐, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬이다.
화학식 I'의 하나의 양태에서, Y4는
Figure 112013020897408-pct00042
이고, 이때 Y5 및 Y6은 독립적으로 H, 저급 알킬, 또는 저급 할로알킬이다.
화학식 I'의 하나의 양태에서, Y4는
Figure 112013020897408-pct00043
이고, 이때 Y5 및 Y6은 독립적으로 H 또는 저급 알킬이다.
화학식 I'의 하나의 양태에서, Y4는
Figure 112013020897408-pct00044
이고, 이때 Y5 및 Y6은 독립적으로 H, 저급 알킬, 또는 저급 할로알킬이다.
화학식 I'의 하나의 양태에서, Y4는 3급-부틸이고; R은 -R1-R3이고; R1은 피리딜이고; R3은 R4이고; R4는, R4'가 저급 알킬인 -S(=O)2R4',이다.
화학식 I'의 하나의 양태에서, Y4는 3급-부틸이고; R은 -R1-R2-R3이고; R1은 피리딜이고; R2는 -C(CH3)2이고; R3은 R4이고; R4는 하나 이상의 저급 알킬로 임의적으로 치환되는 저급 알킬 아미노, 저급 다이알킬 아미노, 또는 헤테로사이클로알킬이다.
화학식 I'의 하나의 양태에서, Y4는 3급-부틸이고; R은 -R1-R2-R3이고; R1은 피리딜이고; R2는 -C(=O)이고; R3은 R4이고; R4는 하나 이상의 저급 알킬로 임의적으로 치환되는 모폴린 또는 피페라진이다.
화학식 I'의 하나의 양태에서, Y4는 3급-부틸이고; R은 -R1-R3이고; R1은 피리딜이고; R3은 R4이고; R4는 저급 알킬로 임의적으로 치환되는 헤테로사이클로알킬이다.
본 발명은 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 화학식 I'의 화합물을 제공한다:
6-3급-부틸-2-(3-{5-[5-(1-에틸아미노-1-메틸-에틸)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-(모폴린-4-카본일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[5-(5-메탄설폰일-피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{5-[5-(3-메톡시-아제티딘-1-일메틸)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-(8-메틸-3,8-다이아자-바이사이클로[3.2.1]옥트-3-일메틸)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-2-(3-{5-[5-(2-다이메틸아미노-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
2-{3-[5-(5-아제티딘-1-일메틸-피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-2-하이드록시메틸-페닐}-6-3급-부틸-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-2-{3-[5-(5-다이메틸아미노메틸-피리딘-2-일아미노)-1-메틸-l-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-2-하이드록시메틸-페닐}-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-2-(3-{5-[(1R,5S)-5-(3,8-다이아자-바이사이클로[3.2.1]옥트-8-일)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
6-{6-[3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-2-하이드록시메틸-페닐]-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로-피리다진-4-일아미노}-N,N-다이메틸-니코틴아마이드; 및
6-3급-부틸-8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[1-메틸-6-옥소-5-(5-트라이플루오로메틸-피라진-2-일아미노)-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-2H-프탈라진-1-온.
본 발명은 치료가 필요한 환자에게 화학식 I'의 Btk 억제제 화합물을 치료 효과량 투여하는 것을 포함하는 염증성 및/또는 자가면역 증상의 치료 방법을 제공한다.
본 발명은 치료가 필요한 환자에게 화학식 I'의 Btk 억제제 화합물을 치료 효과량 투여하는 것을 포함하는 관절염의 치료 방법을 제공한다.
본 발명은 치료가 필요한 환자에게 화학식 I'의 Btk 억제제 화합물을 치료 효과량 투여하는 것을 포함하는 천식의 치료 방법을 제공한다.
본 발명은 치료가 필요한 환자에게 화학식 I'의 Btk 억제제 화합물을 치료 효과량 투여하는 것을 포함하는 B-셀 증식을 억제하는 방법을 제공한다.
본 발명은 임의의 하나의 화학식 I'의 Btk 억제제 화합물을 투여하는 것을 포함하는, Btk 활성을 억제하는 방법을 제공하며, 상기 Btk 억제제 화합물은 Btk 활성의 시험관 내의 생화학적 분석에서 50 μm 이하의 IC50을 나타낸다.
상기 방법의 하나의 양태에서, Btk 억제제 화합물은 Btk 활성의 시험관 내의 생화학적 분석에서 100 μm 이하의 IC50을 나타낸다.
상기 방법의 또 다른 양태에서, 상기 화합물은 Btk 활성의 시험관 내의 생화학적 분석에서 10 μm 이하의 IC50을 나타낸다.
본 발명은 치료가 필요한 환자에게 항염증성 화합물 치료 효과량을 화학식 I'의 Btk 억제제 화합물과 조합하여 병용 투여하는 것을 포함하는 염증성 증상의 치료 방법을 제공한다.
본 발명은 치료가 필요한 환자에게 항염증성 화합물 치료 효과량을 화학식 I'의 Btk 억제제 화합물과 조합하여 병용 투여하는 것을 포함하는 관절염의 치료 방법을 제공한다.
본 발명은 치료가 필요한 환자에게 화학식 I'의 Btk 억제제 화합물을 치료 효과량 투여함으로써 림프종 또는 BCR-ABL1+ 백혈병 세포를 치료하는 방법을 제공한다.
본 발명은, 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 희석제와 혼합된 화학식 I'의 Btk 억제제 화합물을 포함하는 약학 조성물을 제공한다.
본 발명은 염증성 질환 치료용 약제의 제조에서의 화학식 I'의 화합물의 용도를 제공한다.
본 발명은 자가면역 질환 치료용 약제의 제조에서의 화학식 I'의 화합물의 용도를 제공한다.
본 발명은 본원에 기재된 바와 같은 화합물, 방법, 또는 조성물을 제공한다.
본 발명에 포함되고 본 발명의 범위 내에 있는 대표적인 화합물의 예시는 하기의 표에 제시된다. 하기의 실시예 및 제조법은 당업자로 하여금 본 발명을 더욱 명쾌하게 이해하고 실행할 수 있도록 제공된다. 이들은 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 간주되어서는 안되며, 단지 그의 설명 및 대표 예가 된다.
일반적으로, 본 출원에 사용된 명명법은 IUPAC 체계의 명칭을 생성하기 위한 바일슈타인 인스티튜트(Beilstein Institute)의 전산화된 시스템인 오토놈티엠(AUTONOMTM) v.4.0을 기반으로 한다. 도시된 구조와 해당 구조에 부여한 명칭 사이에 불일치가 있다면, 도시된 구조에 더욱 비중을 둔다. 추가로, 구조 또는 구조의 일부분의 입체화학이, 예를 들어 굵은 글자 또는 점선으로 표시되어 있지 않으면, 해당 구조 또는 구조의 일부분은 그의 모든 입체화학을 포함하는 것으로 해석된다.
표 I은 화학식 I에 따른 피리다진온 화합물의 예를 도시한다:
[표 I]
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합성
일반적 합성 반응식
본 발명은 2010년 2월 24일에 출원된 미국 특허 출원 번호 제12/711,312호에 관한 것이며, 이 내용 전체를 본원에 참고로 인용한다.
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상기 반응식에서,
Y4는 Y4a, Y4b, Y4c, 또는 Y4d일 수 있고, Y4a는 H 또는 할로겐일 수 있고, Y4b는, 임의적으로 저급 할로알킬, 할로겐, 하이드록시, 아미노, 시아노, 및 저급 알콕시로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환체로 치환되는 저급 알킬일 수 있고, Y4c는, 임의적으로 저급 알킬, 저급 할로알킬, 할로겐, 하이드록시, 아미노, 시아노, 및 저급 알콕시로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환체로 치환되는 저급 사이클로알킬일 수 있고, Y4d는, 임의적으로 하나 이상의 저급 알킬, 알콕시 저급 알킬, 또는 하이드록시 저급 알킬로 치환되는 아미노일 수 있다.
Figure 112013020897408-pct00077
상기 반응식에서,
R은 H, -R1, -R1-R2-R3, -R1-R3, 또는 -R2-R3일 수 있고, R1은 아릴, 헤테로아릴, 바이사이클릭 헤테로아릴, 사이클로알킬, 또는 헤테로사이클로알킬일 수 있으며, 이들 각각은 임의적으로 하나 이상의 저급 알킬, 하이드록시, 하이드록시 저급 알킬, 저급 알콕시, 할로, 니트로, 아미노, 아마이도, 시아노, 옥소, 또는 저급 할로알킬로 치환될 수 있고; R2는 -C(=O), -C(=O)O, -C(=O)NR2', -NHC(=O)O, -C(R2')2, -O, -S, -C(=NH)NR2', 또는 -S(=O)2일 수 있고, R2' 각각은 독립적으로 H 또는 저급 알킬일 수 있고, R3은 H 또는 R4일 수 있고, R4는 저급 알킬, 저급 할로알킬, 저급 알콕시, 아미노, 저급 알킬 아미노, 사이클로알킬 아미노, 저급 다이알킬 아미노, 아릴, 아릴알킬, 알킬아릴, 헤테로아릴, 알킬 헤테로아릴, 헤테로아릴 알킬, 사이클로알킬, 알킬 사이클로알킬, 사이클로알킬 알킬, 헤테로사이클로알킬, 알킬 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 알킬, 바이사이클릭 사이클로알킬, 바이사이클릭 헤테로사이클로알킬, 스피로사이클로알킬, 스피로헤테로사이클로알킬, 또는 바이사이클릭 스피로헤테로사이클로알킬일 수 있고, 이들 각각은 임의적으로 하나 이상의 저급 알킬, 할로, 저급 알킬 아미노, 저급 다이알킬 아미노, 하이드록시, 하이드록시 저급 알킬, 저급 알콕시, 저급 알칸오일, 할로, 니트로, 아미노, 아마이도, 아실, 시아노, 옥소, 설폰일, 저급 알킬 설폰일, 구아니디노, 하이드록실 아미노, 카복시, 카바모일, 카바메이트, 할로 저급 알콕시, 헤테로사이클로알킬, 또는 할로 저급 알킬로 치환되고, 이때 2개의 저급 알킬기는 함께 고리를 형성할 수 있다.
Figure 112013020897408-pct00078
상기 반응식에서,
R은 -R2-R3 또는 -R3일 수 있고, R2는 -C(=O), -C(=O)O, -C(=O)NR2', -NHC(=O)O, -C(R2')2, -O, -S, -C(=NH)NR2', 또는 -S(=O)2일 수 있고, R2' 각각은 독립적으로 H 또는 저급 알킬일 수 있고, R3는 H 또는 R4일 수 있고, R4는 저급 알킬, 저급 할로알킬, 저급 알콕시, 아미노, 저급 알킬 아미노, 사이클로알킬 아미노, 저급 다이알킬 아미노, 아릴, 아릴알킬, 알킬아릴, 헤테로아릴, 알킬 헤테로아릴, 헤테로아릴 알킬, 사이클로알킬, 알킬 사이클로알킬, 사이클로알킬 알킬, 헤테로사이클로알킬, 알킬 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 알킬, 바이사이클릭 사이클로알킬, 바이사이클릭 헤테로사이클로알킬, 스피로사이클로알킬, 스피로헤테로사이클로알킬 또는 바이사이클릭 스피로헤테로사이클로알킬일 수 있으며, 이들 각각은 임의적으로 하나 이상의 저급 알킬, 할로, 저급 알킬 아미노, 저급 다이알킬 아미노, 하이드록시, 하이드록시 저급 알킬, 저급 알콕시, 저급 알칸오일, 할로, 니트로, 아미노, 아마이도, 아실, 시아노, 옥소, 설폰일, 저급 알킬 설폰일, 구아니디노, 하이드록실 아미노, 카복시, 카바모일, 카바메이트, 할로 저급 알콕시, 헤테로사이클로알킬, 또는 할로 저급 알킬로 치환되고, 이때 2개의 저급 알킬기는 함께 고리를 형성할 수 있다.
Figure 112013020897408-pct00079
상기 반응식에서,
R2' 각각은 독립적으로 H 또는 저급 알킬일 수 있고, Y4는 Y4a, Y4b, Y4c, 또는 Y4d일 수 있고, Y4a는 H 또는 할로겐일 수 있고, Y4b는 임의적으로 저급 할로알킬, 할로겐, 하이드록시, 아미노, 시아노, 및 저급 알콕시로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환체로 치환되는 저급 알킬일 수 있고, Y4c는 임의적으로 저급 알킬, 저급 할로알킬, 할로겐, 하이드록시, 아미노, 시아노, 및 저급 알콕시로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환체로 치환되는 저급 사이클로알킬일 수 있고, Y4d는 임의적으로 하나 이상의 저급 알킬, 알콕시 저급 알킬, 또는 하이드록시 저급 알킬로 치환되는 아미노일 수 있다.
Figure 112013020897408-pct00080
상기 반응식에서,
R2' 각각은 독립적으로 H 또는 저급 알킬일 수 있고, Y4는 Y4a, Y4b, Y4c, 또는 Y4d일 수 있고, Y4a는 H 또는 할로겐일 수 있고, Y4b는 임의적으로 저급 할로알킬, 할로겐, 하이드록시, 아미노, 시아노, 및 저급 알콕시로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환체로 치환되는 저급 알킬일 수 있고, Y4c는 임의적으로 저급 알킬, 저급 할로알킬, 할로겐, 하이드록시, 아미노, 시아노, 및 저급 알콕시로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환체로 치환되는 저급 사이클로알킬일 수 있고, Y4d는 임의적으로 하나 이상의 저급 알킬, 알콕시 저급 알킬, 또는 하이드록시 저급 알킬로 치환되는 아미노일 수 있다.
본원에서 기재된 피리다진온 유도체는 키나아제 억제제, 특히 Btk 억제제이다. 상기 억제제는 포유동물에 있어서, Btk 억제 및/또는 B 세포 증식의 억제에 반응하는 질환을 포함하는, 키나아제 억제에 반응하는 하나 이상의 질환을 치료하는데 유용할 수 있다. 임의 특정한 이론에 구속되기를 바라지는 않지만, 본 발명의 화합물과 Btk의 상호작용은 Btk 활성의 억제를 일으키고, 이에 따라 상기 화합물의 약학적 효용을 도모하는 것으로 여겨진다. 따라서, 본 발명은 Btk 활성의 억제, 및/또는 B 세포 증식의 억제에 반응하는 질환을 가지는 포유동물, 예를 들어 인간을 치료하는 방법으로서, 본원에 제공된 하나 이상의 화학적 물질의 유효량을 상기 질환을 가진 포유동물에 투여하는 것을 포함하는 방법을 포함한다. 유효한 농도는 예를 들어 화합물의 혈중농도를 검정하거나, 또는 이론적으로, 생체유용성(bioavailability)을 계산함으로써, 실험적으로 알아낼 수 있다. Btk 에 더하여 영향받을 수 있는 다른 키나아제에는 비제한적으로, 다른 티로신 키나아제 및 세린/트레오닌 키나아제가 포함된다.
키나아제는 기본적인 세포 과정, 예컨대 증식, 분화, 및 사멸(아폽토시스)을 제어하는 신호전달 경로에 있어서 주목할 만한 역할을 한다. 비정상 키나아제 활성은 다양한 암, 자가면역 및/또는 염증성 질환, 및 급성 염증 반응을 포함하는, 광범위한 질환에 연관됨이 나타내어졌다. 주요한 세포 신호전달 경로에서의 키나아제의 광범위한 역할은 신호전달 경로 및 키나아제를 표적화하는 신규한 약물을 확인할 수 있는 의미 있는 기회를 제공한다.
하나의 실시양태는 Btk 활성 및/또는 B 세포 증식의 억제에 반응하는 자가면역 및/또는 염증성 질환, 또는 급성 염증성 반응을 가지는 환자를 치료하는 방법을 포함한다.
본 발명에 따른 화합물 및 조성물을 사용하여 영향받을 수 있는 자가면역 및/또는 염증성 질환에는 비제한적으로 하기가 포함된다: 건선, 알레르기, 크론씨병, 과민성대장 증후군, 쇼그렌 병(Sjogren's disease), 조직 이식 거부(tissue graft rejection), 및 이식한 장기의 초급성 거부 반응, 천식, 전신 홍반성 루푸스(및 관련 사구체신염), 피부근염, 다발성 경화증, 경피증, 혈관염(ANCA-관련 및 기타 맥관염), 자가면역 용혈성 및 혈소판 감소 상태, 굿패스쳐 증후군(Goodpasture's syndrome)(및 관련된 사구체신염 및 폐출혈), 죽상동맥경화증, 류마티스 관절염, 만성 특발성 혈소판감소성 자반증(ITP), 애디슨병, 파킨슨병, 알츠하이머병, 당뇨병, 패혈성 쇼크(septic shock), 및 중증 근무력증.
본원에 제공된 적어도 하나의 화학적 물질이 항염증제와 병용하여 투여되는 치료 방법이 본원에 포함되어 있다. 항염증제에는 비제한적으로 NSAID, 비특이 및 COX-2 특이 시클로옥스게나제(cyclooxgenase) 효소 억제제, 금화합물, 코르티코스테로이드, 메토트렉세이트, 종양괴사인자 수용체(TNF) 수용체 길항물질, 면역억제제 및 메토트렉세이트가 포함된다.
NSAID의 예에는 비제한적으로, 이부프로펜, 플루르비프로펜, 나프록센 및 나프록센 나트륨, 디클로페낙, 디클로페낙 나트륨 및 미소프로스톨의 조합물, 술린닥, 옥사프로진, 디플루니살, 피록시캄, 인도메타신, 에토돌락, 페노프로펜 칼슘, 케토프로펜, 나트륨 나부메톤, 술파살라진, 톨메틴 나트륨, 및 히드록시클로로퀸이 포함된다. NSAID의 예에는 또한 COX-2 특이 억제제, 예컨대 셀레콕시브, 발데콕시브, 루미라콕시브 및/또는 에토리콕시브가 포함된다.
일부 실시양태에서, 항염증제는 살리실레이트이다. 살리실레이트에는 비제한적으로, 아세틸살리실산 또는 아스피린, 나트륨 살리실레이트, 및 콜린 및 마그네슘 살리실레이트가 포함된다.
상기 항염증제는 또한 코르티코스테로이드일 수 있다. 예를 들어, 코르티코스테로이드는 코르티손, 덱사메타손, 메틸프레드니솔론, 프레드니솔론, 프레드니솔론 나트륨 포스페이트, 또는 프레드니손일 수 있다.
추가의 실시양태에서 항염증제는 금화합물, 예컨대 금 나트륨 티오말레이트 또는 오라노핀이다.
본 발명은 또한 항염증제가 대사 저해제, 예컨대 디히드로폴레이트 환원효소 억제제, 예컨대 메토트렉세이트 또는 디히드로오로테이트 탈수소효소 억제제, 예컨대 레플루노미드인 구현예를 포함한다.
본 발명의 다른 구현예는 하나 이상의 항염증성 화합물이 항-C5 단일클론 항체(예컨대 에쿨리주마브 또는 펙셀리주마브), 항-TNF 알파 단일클론 항체인 TNF 길항물질, 예컨대 엔타네르셉트, 또는 인플릭시마브인 조합물에 관련된다.
본 발명의 또 다른 구현예는 하나 이상의 활성제가 면역억제제 화합물, 예컨대 메토트렉세이트, 레플루노미드, 시클로스포린, 타크로리무스, 아자티오프린, 및 미코페놀레이트 모페틸로부터 선택되는 면역억제제 화합물인 조합물과 관련된다.
BTK 를 발현하는 B 세포 및 B 세포 전구체는 비제한적으로 B 세포 림프종, 림프종(호지킨(Hodgkin's) 및 비-호지킨 림프종 포함), 모양 세포성 림프종, 다발성 골수종, 만성 및 급성 골수성 백혈병 및 만성 및 급성 림프성 백혈병을 포함하는, B 세포 악성 종양의 병상에 관련된 것으로 나타내어졌다.
BTK 는 B-계열 림프성 세포에서 Fas/APO-1(CD-95) 사멸 유도 신호 복합체(DISC)의 억제제인 것으로 나타내어졌다. 백혈병/림프종 세포의 운명은 DISC 에 의해 활성화된 카스페이스(caspase)의 길항하는 전아폽토시스(proapoptotic)의 효과 및 BTK 및/또는 이의 기질과 관련된 상류 항-아폽토시스 조절 메커니즘 사이의 균형 상태로 존재할 수 있다(문헌[Vassilev 등, J. Biol. Chem. 1998, 274, 1646-1656]).
또한 Btk 억제제가 화학요법 감작제(chemosensitizing agent)로서 유용하고, 이로써 다른 화학요법 약물, 특히, 아폽토시스를 유도하는 약물과 병용하여 유용한 것이 발견되었다. 화학요법 감작 Btk 억제제와 병용될 수 있는 다른 화학요법 약물의 예에는 토포이소메라제 I 억제제(캠토테신 또는 토포테칸), 토포이소메라제 II 억제제(예를 들어 다우노마이신 및 에토포시드), 알킬화제(예를 들어 시클로포스파미드, 멜파란 및 BCNU), 튜불린 유도제(예를 들어 택솔 및 빈블라스틴), 및 생물 제제(biological agent)(예를 들어 항체, 예컨대 항 CD20 항체, IDEC 8, 면역독소(immunotoxin), 및 시토킨)가 포함된다.
Btk 활성은 또한 염색체 9 및 22 의 부분의 전좌로부터 생성된 bcr-abl 융합 유전자를 발현하는 일부 백혈병과 연관되었다. 상기 비정상성은 만성 골수성 백혈병에서 흔히 관찰된다. Btk 는 bcr-abl 세포에서 아폽토시스를 피하는 하류 생존 신호를 개시하는 bcr-abl 키나아제에 의해 구조적으로 인산화된다(Feldhahn 등, J. Exp. Med. 2005 201(11):1837-1852).
본 발명의 화합물은 광범위한 경구 투여 형태 및 담체에 제형화될 수 있다. 경구 투여는, 정제, 코팅된 정제, 드라제, 경질 및 연질 젤라틴 캡슐, 용액, 에멀전, 시럽 또는 현탁액의 형태일 수 있다. 본 발명의 화합물은, 다른 투여 경로들 중 특히, 연속(정맥내 드립) 국소 비경구, 근육내, 정맥내, 피하, 경피(침투 증강제를 포함할 수 있음), 협측, 비강, 흡입 및 좌제를 포함하는 기타 투여 경로로 투여될 때 효능적이다. 바람직한 투여 방식은 일반적으로, 활성 성분에 대한 환자의 응답성 및 고통의 정도에 따라 조정될 수 있는 편리한 매일 투여량 요법을 이용하는 경구형이다.
본 발명의 화합물 및 그의 약학적으로 이용가능한 염은, 하나 이상의 통상적인 부형제, 담체 또는 희석제와 함께, 약학적 조성물 및 단위 투여량의 형태로 할 수 있다. 약학적 조성물 및 단위 투여량 형태는, 추가적인 활성 화합물 또는 주성분(principles)의 존재 또는 부재 하에, 통상적인 비율의 통상적인 성분들로 이루어질 수 있고, 단위 투여량 형태는 채용될 의도하는 매일 투여량 범위에 상응하는 임의의 적합한 유효량의 활성 성분을 포함할 수 있다. 약학적 조성물은, 정제 또는 충전된 캡슐, 반고형제, 분말, 서방성 제형과 같은 고체로, 또는 용액, 현탁액, 에멀전, 엘릭서 또는 경구용의 충전된 캡슐과 같은 액체로; 또는 직장 내 또는 질내 투여용의 좌제의 형태로; 또는 비경구적 용도를 위한 멸균 주사 용액의 형태로 채용될 수 있다. 전형적인 제제는 약 5% 내지 약 95% 활성 화합물 또는 화합물들(w/w)을 포함할 것이다. 용어 "제제" 또는 "투여 형태"는 활성 성분의 고체 및 액체 제형의 2가지 모두를 포함하는 것을 의도하며, 당업자는 활성 성분이 표적 장기 또는 조직 및 원하는 투여량 및 약동학적 파라미터에 좌우되는 상이한 제제로 존재할 수 있음을 인지할 것이다.
본원에 사용된 용어 "부형제"는 일반적으로 안전하고, 무독성이고, 생물학적으로나 또는 이외에도 바람직하지 않은 것이 아닌 화합물을 지칭하고, 수의학적 용도 뿐만 아니라 인간 약학적 용도를 위해 허용가능한 부형제를 포함한다. 본 발명의 화합물은 단독으로 투여될 수 있으나, 일반적으로는 의도하는 투여 경로 및 표준 약학적 실시를 감안하여 선택되는 하나 이상의 적합한 약학적 부형제, 희석제 또는 담체와 혼합되어 투여된다.
"약학적으로 허용가능한"은, 일반적으로 안전하고, 무독성이고, 생물학적으로나 또는 그외에도 바람직하지 않은 것이 아닌, 약학적 조성물 제조에 유용한 것을 의미하고, 수의학적 용도뿐만 아니라 인간 약학적 용도로 허용되는 것이 포함된다.
활성 성분의 "약학적으로 허용가능한 염" 형태는 또한, 처음에는 비-염 형태에는 부재하는 활성 성분에 대한 바람직한 약동학적 특성을 의미할 수 있고, 심지어는 신체에서의 그의 치료 활성과 관련하여 활성 성분의 약력학에 긍정적으로 영향을 줄 수도 있다. 어구, 화합물의 "약학적으로 허용가능한 염"은, 약학적으로 허용되고, 본 발명의 바람직한 약학적 활성을 보유하는 염을 의미한다. 상기 염에는 하기의 것이 포함된다: (1) 염산, 하이드로브롬산, 황산, 질산, 인산 등과 같은 무기산으로 형성되거나; 또는 아세트산, 프로피온산, 헥산산, 사이클로펜탄프로피온산, 글리콜산, 피루브산, 락트산, 말론산, 숙신산, 말산, 말레산, 푸마르산, 타르타르산, 시트르산, 벤조산, 3-(4-하이드록시벤조일)벤조산, 신남산, 만델산, 메탄설폰산, 에탄설폰산, 1,2-에탄-다이설폰산, 2-하이드록시에탄설폰산, 벤젠설폰산, 4-클로로벤젠설폰산, 2-나프탈렌설폰산, 4-톨루엔설폰산, 캠퍼설폰산, 4-메틸바이사이클로[2.2.2]-옥트-2-엔-1-카복실산, 글루코헵톤산, 3-페닐프로피온산, 트라이메틸아세트산, 3차 부틸아세트산, 라우릴 황산, 글루콘산, 글루탐산, 하이드록시나프토산, 살리실산, 스테아르산, 뮤콘산 등과 같은 유기산으로 형성된 산 부가염; 또는 (2) 모 화합물에 존재하는 산성 양성자가 금속 이온, 예를 들어, 알칼리 금속 이온, 알칼리 토금속 이온 또는 알루미늄 이온에 의해 치환되거나; 또는 에탄올아민, 다이에탄올아민, 트라이에탄올아민, 트로메타민, N-메틸글루카민 등과 같은 유기 염기로 배위되는 경우 형성되는 염.
고체 형태 제제에는, 분말, 정제, 필, 캡슐, 샤쉐, 좌제 및 분산가능한 과립이 포함된다. 고체 담체는, 희석제, 풍미제, 가용화제, 윤활제, 현탁제, 결합제, 보존제, 정제 붕해제 또는 봉입 재료로서도 작용할 수 있는 하나 이상의 물질일 수 있다. 분말에서, 담체는 일반적으로, 미분된 활성 성분과 함께 혼합물을 이루는 미분된 고체이다. 정제에서, 활성 성분은 일반적으로 적합한 비율로 필요한 결합 용량을 가진 담체와 혼합되고, 원하는 모양 및 크기로 압착된다. 적합한 담체에는, 비제한적으로, 마그네슘 카본에이트, 마그네슘 스테아레이트, 활석, 당, 락토오스, 펙틴, 덱스트린, 전분, 젤라틴, 트래거캔트, 메틸셀룰로스, 나트륨 카르복시메틸셀룰로스, 저융점 왁스, 코코아 버터 등이 포함된다. 고체 형태 제제는, 활성 성분에 추가하여, 색소, 풍미제, 안정화제, 완충제, 인공 및 천연 당화제, 분산제, 증점제, 가용화제 등을 포함할 수 있다.
액체 제형이 또한 경구 투여에 적합하고, 에멀전, 시럽, 엘릭서, 수용액, 수성 현탁액을 포함하는 액체 제형이 포함된다. 여기에는 사용 직전에 액체 형태 제제로 변환시키려는 의도의 고체 형태 제제가 포함된다. 에멀전은 용액, 예를 들어 수성 프로필렌 글리콜 용액에서 제조될 수 있거나, 또는 레시틴, 소르비탄 모노올레에이트 또는 아카시아와 같은 에멀전화제를 포함할 수 있다. 수용액은, 활성 성분을 물에 용해시키고, 적합한 색소, 풍미제, 안정화제 및 증점제를 첨가하여 제조될 수 있다. 수성 현탁액은 미분된 활성 성분을, 천연 또는 합성 검, 수지, 메틸 셀룰로스, 나트륨 카르복시메틸셀룰로스 및 기타 널리 공지된 현탁제와 같은 점성질 물질과 함께 물에 분산시켜 제조될 수 있다.
본 발명의 화합물은 비경구 투여용(예를 들어, 주사, 예를 들어 볼루스 주사 또는 연속 주입에 의한 투여)으로 제형화될 수 있고, 앰플, 예비충전 주사기, 소용량 주입물 또는 보존제가 첨가된 다중-투여량 용기에 단위 투여량 형태로 제시될 수 있다. 조성물은, 오일성 또는 수성 비히클 중의 현탁액, 용액, 또는 에멀전의 형태로, 예를 들어 수성 폴리에틸렌 글리콜 중의 용액과 같은 형태를 취할 수 있다. 오일성 또는 비수성 담체, 희석제, 용매 또는 비히클의 예는, 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 식물성 오일(예를 들어, 올리브 오일), 및 주사가능한 유기 에스테르(예를 들어, 에틸 올레에이트)가 포함되고, 보존제, 습윤제, 에멀전화제 또는 현탁제, 안정화제 및/또는 분산제와 같은 제형 보조제를 포함할 수 있다. 다르게는, 활성 성분은 멸균 고체의 무균 분리에 의해 또는 적합한 비히클, 예를 들어 멸균되고 발열원이 없는 물을 이용하여 사용하기 전에 구성하기 위한 용액으로부터의 동결건조에 의해 수득되는 분말 형태일 수 있다.
본 발명의 화합물은 표피에 연고, 크림 또는 로션으로서, 또는 경피 팻치로서 국소 투여하기 위해 제형화 될 수 있다. 연고 및 크림은, 예를 들어 적합한 증점제 및/또는 겔화제를 첨가하여 수성 또는 오일성 염기를 이용하여 제형화될 수 있다. 로션은 수성 또는 오일성 염기를 이용해 제형화될 수 있고, 또한 일반적으로 하나 이상의 에멀전화제, 안정화제, 분산제, 현탁제, 증점제 또는 착색제를 포함할 것이다. 구강에서의 국소 투여에 적합한 제형에는, 일반적으로는 수크로오스 및 아카시아 또는 트래거캔트인 풍미화된 베이스 중에 활성 성분을 함유하는 로젠지; 젤라틴 및 글리세린 또는 수크로스 및 아카시아와 같은 불활성 염기 중에 활성 성분을 함유하는 사탕형 알약; 및 적합한 액체 담체에 활성 성분을 함유하는 구강 세정제가 포함된다.
본 발명의 화합물은 좌제로 투여하기 위해 제형화될 수 있다. 지방산 글리세라이드 또는 코코아 버터의 혼합물과 같은 저융점 왁스를 먼저 용융시키고, 활성 성분을, 예를 들어 교반하면서 균일하게 분산시킨다. 이어서, 용융된 균질 혼합물은 통상적인 크기의 성형 틀에 부어 냉각시키고, 고형화시킨다.
본 발명의 화합물은 질내 투여용으로 제형화될 수 있다. 활성 성분에 추가하여 상기 담체들을 포함하는 페서리, 탐폰, 크림, 겔, 페이스트, 발포제 또는 스프레이가 당업계에서 적당한 것으로 공지되어 있다.
본 발명의 화합물은 비강 투여용으로 제형화될 수 있다. 용액 또는 현탁액은 통상적인 수단, 예를 들어 점적기, 피펫 또는 스프레이를 이용하는 통상적인 수단에 의해 비강으로 직접 적용된다. 제형은 단일 또는 다중 투여량 형태로 제공될 수 있다. 점적기 또는 피펫의 후자의 경우, 이는 적당한 예정된 부피의 용액 또는 현탁액을 환자에게 투여하여 달성될 수 있다. 스프레이의 경우, 이는 예를 들어 계량 분무 스프레이 펌프(metering atomizing spray pump)를 수단으로 하여 달성될 수 있다.
본 발명의 화합물은 비강내 투여를 포함하는, 특히 호흡기에 대한 에어로졸 투여를 위해 제형화될 수 있다. 화합물은 일반적으로, 예를 들어 5 마이크론 이하 정도의 작은 입자 크기를 갖는다. 상기 입자 크기는, 당업계에 공지된 수단, 예를 들어 마이크로화(micronization)에 의해 수득될 수 있다. 활성 성분은 클로로플루오로 탄소(CFC), 예를 들어 다이클로로다이플루오로메탄, 트라이클로로플루오로메탄 또는 다이클로로테트라플루오로에탄, 또는 이산화탄소 또는 기타 적합한 기체와 같은 적합한 추진체를 이용한 압축 팩에 제공된다. 에어로졸은 또한 통상적으로 레시틴과 같은 계면활성제를 포함할 수 있다. 약물의 투여량은 계량된 밸브로 제어될 수 있다. 다르게는, 활성 성분은 드라이 분말, 예를 들어 락토오스, 전분, 전분 유도체, 예컨대 하이드록시프로필 메틸 셀룰로스 및 폴리비닐피롤리딘(PVP)과 같은 적합한 분말 베이스 중의 화합물의 분말 믹스의 형태로 제공될 수 있다. 분말 담체는 비강에서 겔을 형성할 것이다. 분말 조성물은 예를 들어, 흡입기를 수단으로 분말이 투여될 수 있는, 젤라틴 또는 블리스터 팩의 캡슐 또는 카트리지 내에 단위 투여량 형태로 제시될 수 있다.
원하는 경우, 제형은 활성 성분의 지속 또는 제어 방출 투여를 위해 맞춰진 장용 코팅을 이용해 제조될 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 화합물은 경피 또는 피하 약물 전달 장치 내에 제형화될 수 있다. 상기 전달 시스템은 화합물의 지연 방출이 필요할 때 및 치료 요법에 대한 환자의 준수가 중요할 때 유리하다. 경피 전달 시스템에서의 화합물들은 종종 피부-접착성 고체 지지체에 결합된다. 관심대상의 화합물들은 또한 침투 증강제, 예를 들어, 아존(1-도데실아자-사이클로헵탄-2-온) 과 병용될 수 있다. 지속 방출 전달 시스템은 수술에 의해 또는 주사에 의해 피하층으로 피하삽입된다. 피하 이식물은 지용성 막, 예를 들어 실리콘 고무 또는 생분해성 중합체, 예를 들어 폴리아세트산에 화합물을 봉입시킨다.
약학적 담체, 희석제 및 부형제와 함께 하는 적합한 제형은, 다음 문헌[Remington: The Science and Practice of Pharmacy 1995, E.W. Martin 편저, Mack Publishing Company, 19th edition, Easton, Pennsylvania]. 숙련된 제형 과학자는 본 발명의 조성물을, 불안정하게 하거나 또는 그의 치료 활성에 지장을 주지 않으면서도, 특별한 투여 경로를 위한 다양한 제형을 제공하기 위해 명세서의 교시에 따라 제형을 개질할 수 있다.
본 발명의 화합물을 물 또는 기타 비히클에 더욱 가용성이 되도록 하기 위한 개질은, 예를 들어 소소한 개질(염 제형화, 에스테르화 등)로 쉽게 달성될 수 있고, 이는 당업자에게 널리 공지되어 있다. 본 발명의 화합물의 약동학적 특성을 환자에게 최대한의 이익을 제공하도록 조정하기 위한 특별한 화합물의 투여 경로 및 투여 요법을 개질하는 것도 당업자에게 널리 공지되어 있다.
본원에 사용된 용어 "치료 유효량"은 개인에서 질환의 징후를 감소시키기 위해 필요한 양을 의미한다. 투여량은 각각의 특별한 경우세어 개인의 필요조건에 맞춰질 것이다. 해당 투여량은, 치료할 질환의 심각성, 환자의 연령 및 일반적인 건강 상태, 환자가 처방받는 중인 기타 의약, 투여 경로 및 형태 및 관련 의료진의 선호성 및 경험과 같은 많은 인자들에 좌우되는 광범위한 한계 내에서 다양할 수 있다. 경구 투여용으로, 1일 당 약 0.01 내지 약 1000 mg/체중 kg의 매일 투여량이 단독 요법 및/또는 병용 요법에서 적당할 수 있다. 바람직한 매일 투여량은, 1일 당 약 0.1 내지 약 500 mg/체중 kg이고, 더욱 바람직하게는 0.1 내지 약 100 mg/체중 kg이고, 가장 바람직하게는 1.0 내지 약 10 mg/체중 kg이다. 따라서, 70 kg 성인에 대한 투여에 대해서는 투여량 범위는 1일 당 약 7 mg 내지 0.7 g이다. 매일 투여량은 단일 투여량으로, 또는 일반적으로 1일 당 1 내지 5회 투여량으로 분할 투여량으로 투여될 수 있다. 일반적으로, 치료는 화합물의 최적 투여량보다는 더 적은, 더 적은 투여량으로 개시된다. 이후, 개별 환자에 대한 최적 효과에 도달할 때까지, 투여량은 조금씩 증가된다. 본원에 기재된 질환 치료에서 당업자는, 지나친 실험과정 없이도, 개인의 지식, 경험 및 본 출원의 개시내용을 바탕으로, 주어진 질환 및 환자를 위한 본 발명의 화합물의 치료 유효량을 가늠할 수 있을 것이다.
약학적 제제는 바람직하게는 단위 투여량 형태이다. 상기 형태에서, 제제는 적당량의 활성 성분을 포함하는 단위 투여량으로 분할되어 있다. 단위 투여량 형태는, 개별적 분량의 제제를 포함하도록 포장된 제제일 수 있고, 예컨대 바이알 또는 앰플에 포장된 정제, 캡슐 분말이다. 또한, 단위 투여량 형태는 캡슐, 정제, 샤쉐 또는 로젠지 자체일 수 있거나, 또는 적당한 갯수의 포장된 형태의 것일 수 있다.
실시예
일반적으로 사용되는 약어는 하기를 포함한다: 아세틸(Ac), 아조-비스-이소부티릴니트릴(AIBN), 분위기(Atm), 9-보라바이사이클로[3.3.1]노난(9-BBN 또는 BBN), 2,2'-비스(다이페닐포스피노)-1,1'-바이나프틸(BINAP), 3급-부톡시카본일(Boc), 다이-3급-부틸 피로카보네이트 또는 boc 무수물(BOC2O), 벤질(Bn), 부틸(Bu), 화학 초록 등록 번호(CASRN), 벤질옥시카본일(CBZ 또는 Z), 카본일 다이이미다졸(CDI), 1,4-다이아자바이사이클로[2.2.2]옥탄(DABCO), 다이에틸아미노설퍼 트라이플루오라이드(DAST), 다이벤질리덴아세톤(dba), 1,5-다이아자바이사이클로[4.3.0]논-5-엔(DBN), 1,8-다이아자바이사이클로[5.4.0]운덱-7-엔(DBU), N,N'-다이사이클로헥실카보다이이미드(DCC), 1,2-다이클로로에탄(DCE), 다이클로로메탄(DCM), 2,3-다이클로로-5,6-다이시아노-1,4-벤조퀴논(DDQ), 다이에틸 아조다이카복실레이트(DEAD), 다이-이소프로필아조다이카복실레이트(DIAD), 다이-이소-부틸알루미늄하이드라이드(DIBAL 또는 DIBAL-H), 다이-이소프로필에틸아민(DIPEA), N,N-다이메틸 아세트아마이드(DMA), 4-N,N-다이메틸아미노피리딘(DMAP), N,N-다이메틸포름아마이드(DMF), 다이메틸 설폭사이드(DMSO), 1,1'-비스-(다이페닐포스피노)에탄(dppe), 1,1'-비스-(다이페닐포스피노)페로센(dppf), 1-(3-다이메틸아미노프로필)-3-에틸카보다이이미드 하이드로클로라이드(EDCI), 2-에톡시-1-에톡시카본일-1,2-다이하이드로퀴놀린(EEDQ), 에틸(Et), 에틸 아세테이트(EtOAc), 에탄올(EtOH), 2-에톡시-2H-퀴놀린-1-카복실산 에틸 에스터(EEDQ), 다이에틸 에터(Et2O), 에틸 이소프로필 에터(EtOiPr), O-(7-아자벤조트라이아졸-1-일)-N, N,N'N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 아세트산(HATU), 아세트산(HOAc), 1-N-하이드록시벤조트라이아졸(HOBt), 고압 액체 크로마토그래피(HPLC), 이소-프로판올(IPA), 이소프로필마그네슘 클로라이드(iPrMgCl), 헥사메틸 다이실라잔(HMDS), 헥산(hex), 액체 크로마토그래피 질량 분석기(LCMS), 리튬 헥사메틸 다이실라잔(LiHMDS), 메타-클로로퍼옥시벤조산(m-CPBA), 메탄올(MeOH), 융점(mp), MeSO2-(메실 또는 Ms), 메틸(Me), 아세토니트릴(MeCN), m-클로로퍼벤조산(MCPBA), 질량 스펙트럼(ms), 메틸 t-부틸 에터(MTBE), 메틸 테트라하이드로푸란(MeTHF), N-브로모숙신이미드(NBS), n-부틸리튬(nBuLi), N-카복시무수물(NCA), N-클로로숙신이미드(NCS), N-메틸모폴린(NMM), N-메틸피롤리돈(NMP), 피리디늄 클로로크로메이트(PCC), 다이클로로-((비스-다이페닐포스피노)페로센일) 팔라듐(II)(Pd(dppf)Cl2), 팔라듐(II) 아세테이트(Pd(OAc)2), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(Pd2(dba)3), 피리디늄 다이크로메이트(PDC), 페닐(Ph), 프로필(Pr), 이소프로필(i-Pr), 1 inch2 당 파운드(psi), 피리딘(pyr), 1,2,3,4,5-펜타페닐-1'-(다이-3급-부틸포스피노)페로센(Q-Phos), 실온(주위 온도, rt 또는 RT), sec-부틸리튬(sBuLi), 3급-부틸다이메틸실릴 또는 t-BuMe2Si(TBDMS), 테트라-n-부틸암모늄 플루오라이드(TBAF), 트라이에틸아민(TEA 또는 Et3N), 2,2,6,6-테트라메틸피페리딘 1-옥실(TEMPO), 트라이플레이트 또는 CF3SO2 -(Tf), 트라이플루오로아세트산(TFA), 1,1'-비스-2,2,6,6-테트라메틸헵탄-2,6-다이온(TMHD), O-벤조트라이아졸-1-일-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트(TBTU), 박막 크로마토그래피(TLC), 테트라하이드로푸란(THF), 트라이메틸실릴 또는 Me3Si(TMS), p-톨루엔설폰산 일수화물(TsOH 또는 pTsOH), 4-Me-C6H4SO2- 또는 토실(Ts), 및 N-우레탄-N-카복시무수물(UNCA). 접두사 노말(n), 이소(i-), 2차(sec-), 3차(3급-) 및 네오를 표함하는 통상적인 명명은 알킬 잔기와 함께 사용되는 경우 통상적 의미를 갖는다(문헌[J. Rigaudy 및 D. P. Klesney, Nomenclature in Organic Chemistry, IUPAC 1979 Pergamon Press, Oxford.]).
I-1의 제조
Figure 112013020897408-pct00081
단계 1.
2-(6-클로로피리딘-3-일)프로판-2-올의 제조
Figure 112013020897408-pct00082
실온에서 무수 다이에틸 에터(200 ml) 중의 6-클로로니코틴오일 클로라이드(38.037 g, 216 mmol, Eq: 1.00)의 용액을 교반된 3 M 메틸마그네슘 아이오다이드 용액(158 ml, 475 mmol, Eq: 2.2)에 적가하였다. 첨가한 후, 반응 혼합물을 3시간 동안 환류시켰다. 얼음/200ml 아세트산의 교반된 혼합물에 부어 반응물을 켄칭하고, pH 8이 될 때까지 나트륨 바이카보네이트를 첨가하고, 다이에틸 에터로 추출하고, 염수로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 황색 고체(30.15 g, 0.175 mol)를 수득하였다. MS(H+) = 172.1
단계 2.
N-(2-(6-클로로피리딘-3-일)프로판-2-일)아세트아마이드의 제조
Figure 112013020897408-pct00083
2-(6-클로로피리딘-3-일)프로판-2-올(637 mg, 3.71 mmol, Eq: 1.00)을 아세토니트릴(5 ml)에 용해시켰다. 아세트산(2.9 g, 2.76 ml, 48.3 mmol, Eq: 13)을 실온에서 첨가하고, 첨가한 후, 0℃로 냉각하였다. 진한 황산(5.1 g, 2.77 ml, 52.0 mmol, Eq: 14)을 용액에 적가한 후, 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 얼음에 붓고, pH가 염기가 될 때까지 농축된 NaOH 용액을 첨가하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기상을 염수로 세척하고, 나트륨 설페이트로 건조시키고, 여과하여 황색 고체를 수득하였다. 이 잔류물을 에틸 아세테이트 및 소량의 헥산으로 마쇄하였다. 생성된 침전물을 여과하여 백색 고체(338 mg, 1.59 mmol)를 수득하였다.
MS(H+) = 213.1
단계 3.
2-(6-클로로피리딘-3-일)-N-에틸프로판-2-아민의 제조
Figure 112013020897408-pct00084
N-(2-(6-클로로피리딘-3-일)프로판-2-일)아세트아마이드(11.3 g, 53.1 mmol, Eq: 1.00)를 무수 THF(350 ml)에 용해시키고, 환류시켰다. BMS(THF 중의 2M)(53.1 ml, 106 mmol, Eq: 2)를 상기 용액에 적가하고, 밤새 환류시켰다. 농축 HCl 용액(15 ml)을 환류된 반응 혼합물에 부드럽게 첨가하고, 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축시켰다.
조질 물질을 다이클로로메탄/1 M HCl 용액에 용해시켰다. 수성상을 수집하고, 포화 나트륨 카보네이트 용액으로 처리하고, 다이클로로메탄으로 추출하고, 유기상을 나트륨 설페이트로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조질 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 황색 검(8.03 g, 40.4 mmol)을 수득하였다. 이를 다음 단계에서 사용하였다.
단계 4.
5-(1-에틸아미노-1-메틸-에틸)-피리딘-2-일아민의 제조
Figure 112013020897408-pct00085
2-(6-클로로피리딘-3-일)-N-에틸프로판-2-아민(5 g, 25.2 mmol, Eq: 1.00)을 테트라하이드로푸란(130 ml)에 용해시켰다. 2-(다이사이클로헥실포스피노)바이페닐(1.76 g, 5.03 mmol, Eq: 0.2), 이어서 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(2.3 g, 2.52 mmol, Eq: 0.1)을 아르곤 분위기 하에 첨가하였다. 마지막으로 THF 중의 1 M 리튬 비스(트라이메틸실릴)아마이드(75.5 ml, 75.5 mmol, Eq: 3)를 적가하였다. 반응 혼합물을 밀봉된 플라스크에서 90℃에서 밤새 교반하였다.
반응 혼합물을 포화 NH4Cl(200 ml)에 붓고, DCM(4 x 50 mL)으로 추출하였다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 40 g, DCM 중의 0 내지 15%의 MeOH(0.5% NH4OH 함유))로 정제하여 백색 고체(2.6 g, 14.5 mmol)를 수득하였다.
1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.06(t, J=1.00 Hz, 3 H) 1.44(s, 6 H) 1.86(s, 1 H) 2.37(q, J=1.00 Hz, 2 H) 4.39(s, 2 H) 6.49(d, J=1.00 Hz, 1 H) 7.55(d, J=1.00 Hz, 1 H) 8.08(s, 1 H)
단계 5.
6-클로로-4-[5-(1-에틸아미노-1-메틸-에틸)-피리딘-2-일아미노]-2-메틸-2H-피리다진-3-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00086
I-6의 단계 6에 기재된 유사한 조건 하에 이 반응을 수행하였다. 후처리 후, 생성물을 2 내지 8%의 메탄올/메틸렌 클로라이드의 구배를 사용하는 실리카 겔 상의 분취용 HPLC로 정제하였다. 목적하는 생성물을 황색 분말(328 mg)로서 수득하였다. (M+H)+ = 322 m/e.
Figure 112013020897408-pct00087
마이크로파 반응 바이알에 아세트산 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-6-클로로-벤질 에스터(329 mg, 0.818 mmol), 비스-피나콜-다이보론(416 mg, 1.637 mmol), KOAc(241 mg, 2.454 mmol) 및 x-Phos(39 mg, 0.0818 mmol) 및 다이옥산(4 mL)을 첨가하였다. 15분 동안 아르곤 버블한 한 후, Pd(dba)2(24 mg, 0.0409 mmol)를 첨가하였다. 튜브를 밀봉하고, 18시간 동안 60℃로 가열하였다. 이어서, 반응 혼합물을 EtOAc(5 mL)로 희석하고, NaHCO3(농축됨)(1 X 10 mL) 및 물(10 mL)로 세척하였다. 이어서, 유기상을 농축시키고, Hex 중의 25% EtOAc를 갖는 실리카 겔 컬럼 상에서 정제하여 아세트산 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-6-(4,4, 5,5-테트라메틸-[1,3,2]다이옥사보롤란-2-일)-벤질 에스터를 황색 오일(330 mg, 81%)로서 수득하였다.
단계 6.
아세트산 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-6-{5-[5-(1-에틸아미노-1-메틸-에틸)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-벤질 에스터의 제조
Figure 112013020897408-pct00088
이 반응을 I-6의 단계 7에 기재된 유사한 조건 하에 수행하였다. 후처리 후, 생성물을 10% 메탄올/메틸렌 클로라이드로 용리하는 분취용 TLC(3 플레이트)로 정제하였다. 목적하는 생성물(일부 des-아세틸 생성물과 함께)을 주황색-황색 포움(303 mg)으로서 수득하였다. (M+H)+ = 654(612) m/e.
실시예 1
단계 7.
6-3급-부틸-2-(3-{5-[5-(1-에틸아미노-1-메틸-에틸)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00089
I-6의 제조 방법의 단계 8에서와 같은 유사한 조건 하에 반응을 수행하였다. 후처리한 후, 생성물을 2 내지 10%의 메탄올*/메틸렌 클로라이드(* 메탄올은 2% 암모늄 하이드록사이드를 함유한다)의 구배를 사용하여 실리카 겔 상의 분취용 HPLC로 정제하였다. 생성물을 수집하고, 이를 뜨거운 이소프로필아세테이트/헥산으로 결정화시켜 추가로 정제하였다. 결정 생성물을 여과함으로써 수집하여 목적하는 생성물을 연황백색 분말(341 mg)로서 수득하였다. MP = 229-233 *C.(M+H)+ = 612 m/e. 페이지 079. 1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.05(t, J=7.18 Hz, 3 H) 1.32-1.59(m, 15 H) 2.38(q, J=7.20 Hz, 2 H) 3.81-4.05(m, 4 H) 4.43(s, 2 H) 6.93(d, J=8.31 Hz, 1 H) 7.39-7.82(m, 6 H) 8.28(d, J=2.64 Hz, 2 H) 8.40(d, J=2.27 Hz, 1 H) 8.64(s, 1 H).
I-2의 제조
Figure 112013020897408-pct00090
6- 클로로 -2- 메틸 -4-[5-( 모폴린 -4-카본일)-피리딘-2- 일아미노 ]-2H- 피리다진 -3-온
6-아미노피리딘-3-일-모폴리노-메탄온(800 mg, 3.86 mmol, Eq: 1.00), 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(1 g, 4.48 mmol, Eq: 1.16), 세슘 카보네이트(4.4 g, 13.5 mmol, Eq: 3.5) 및 잔트포스(335 mg, 579 μmol, Eq: 0.15)를 다이옥산(40ml)에 현탁시켰다. 현탁액을 아르곤으로 탈기시켰다. 마지막으로, Pd2(dba)3(265 mg, 290 μmol, Eq: 0.075)를 첨가하고, 반응 혼합물을 90℃ 밤새 아르곤 분위기 하에 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각한 후, 셀라이트로 여과하였다. 여액을 진공에서 농축시켜 연갈색 고체를 수득하였다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 110g, (EtOAc:Hex 1:1) 중의 0 내지 10%의 MeOH)로 정제하여 연황색 고체(408 mg, 1.17 mmol)를 수득하였다. MS(H+)=350.0 1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 3.60-3.80(m, 8 H) 3.83(s, 3 H) 6.96(d, J=8.69 Hz, 1 H) 7.77(dd, J=8.50, 2.45 Hz, 1 H) 8.35-8.44(m, 2 H) 8.47(d, J=2.27 Hz, 1 H).
실시예 2
Figure 112013020897408-pct00091
6-3급-부틸-8- 플루오로 -2-(2- 하이드록시메틸 -3-{1- 메틸 -5-[5-( 모폴린 -4-카본일)-피리딘-2- 일아미노 ]-6-옥소-1,6- 다이하이드로 - 피리다진 -3-일}- 페닐 )-2H- 프탈라진 -1-온
6-클로로-2-메틸-4-(5-(모폴린-4-카본일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온(200 mg, 572 μmol, Eq: 1.00), 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질 아세테이트(525 mg, 743 μmol, Eq: 1.3) 및 세슘 카보네이트(652 mg, 2.00 mmol, Eq: 3.5)를 10% 수성 다이옥산 용액(3.3 ml)에 용해시켰다. 반응 혼합물을 마이크로파에서 35분 동안 125℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하였다. 여액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 물, 이어서 염수로 세척하였다. 유기상을 나트륨 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 640 mg의 연갈색 고체를 수득하였다. 조질 물질을 에틸 아세테이트에 용해시키고, 침전물이 형성될 때까지 헥산으로 처리하였다. 침전물을 여과함으로써 수집하여 354 mg의 회백색 고체를 수득하였다. 고체를 다이옥산(3 ml)에 용해시키고, 1 M 나트륨 하이드록사이드 용액(858 μl, 858 μmol, Eq: 1.5)을 첨가하고, 실온에서 밤새 교반하였다.
반응 혼합물을 24g 컬럼에 로딩하고, 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 24g, (EtOAc:Hex 1:1) 중의 0 내지 13%의 MeOH)로 정제하여 194 mg의 회백색 고체를 수득하였다. 고진공 하에 건조시켜 회백색 결정 생성물(178 mg, 278 μmol)을 수득하였다.
m.p.= 215-220℃ MS(H+)=640.1
1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.44(s, 9 H) 3.63-3.79(m, 8 H) 3.93(s, 3 H) 4.44(s, 2 H) 7.05(d, 1 H) 7.45-7.69(m, 5 H) 7.75-7.82(d, 1 H) 8.29(d, J=2.64 Hz, 1 H) 8.43(s, 1 H) 8.54(s, 1 H) 8.68(s, 1 H).
I-3의 제조
Figure 112013020897408-pct00092
6- 클로로 -4-(5- 메탄설폰일 -피리딘-2- 일아미노 )-2- 메틸 -2H- 피리다진 -3-온
4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(1 g, 4.48 mmol, Eq: 1.00), 5-(메틸설폰일)피리딘-2-아민(771 mg, 4.48 mmol, Eq: 1), 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(388 mg, 671 μmol, Eq: 0.15) 및 세슘 카보네이트(5.1 g, 15.7 mmol, Eq: 3.5)를 다이옥산(80.0 ml)에 현탁시켰다. 마지막으로, 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(307 mg, 336 μmol, Eq: 0.075)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 90℃로 가열하였다.
반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 다이옥산으로 세척하고, 농축시켰다. 조질 물질을 다이클로로메탄으로 마쇄하고, 침전물을 여과함으로써 수집하여 회백색 고체(70 mg, 222 μmol)를 수득하였다.
1H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 3.25(s, 3 H) 3.69(s, 3 H) 7.73(d, J=8.69 Hz, 1 H) 8.16(dd, J=1.00 Hz, 1 H) 8.42(s, 1 H) 8.83(d, J=2.27 Hz, 1 H)
실시예 3
Figure 112013020897408-pct00093
6-3급-부틸-8- 플루오로 -2-{2- 하이드록시메틸 -3-[5-(5- 메탄설폰일 -피리딘-2-일아미노)-1- 메틸 -6-옥소-1,6- 다이하이드로 - 피리다진 -3-일]- 페닐 }-2H- 프탈라진 -1-온
6-클로로-4-(5-메탄설폰일-피리딘-2-일아미노)-2-메틸-2H-피리다진-3-온(40 mg, 127 μmol, Eq: 1.00), 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질 아세테이트(136 mg, 165 μmol, Eq: 1.3) 및 세슘 카보네이트(145 mg, 445 μmol, Eq: 3.5)를 10% 수성 다이옥산 용액(3.3 ml)에 용해시켰다. 반응 혼합물을 마이크로파에서 30분 동안 130℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하였다. 여액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 물, 이어서 염수로 세척하였다. 유기상을 나트륨 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 연갈색 고체를 수득하였다. 조질 물질을 에틸 아세테이트에 용해시키고, 침전물이 형성될 때까지 헥산으로 처리하였다. 침전물을 여과함으로써 수집하여 회백색 고체를 수득하였다. 고체를 다이옥산(2 ml)에 용해시키고, 1 M 나트륨 하이드록사이드 용액(191 μl, 191 μmol, Eq: 1.5)을 첨가하고, 실온에서 밤새 교반하였다.
반응 혼합물을 12 g 컬럼에 담지시키고, 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 12g, (EtOAc:Hex 1:1) 중의 0 내지 13%의 MeOH)로 정제하여 회백색 고체(39 mg, 64.5 μmol)를 수득하였다.
m.p.= 225-230℃ MS(H+)=605.3
1H NMR(400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.36(s, 9 H) 3.03(s, 3 H) 3.87(s, 3 H) 4.38(s, 2 H) 7.00(d, J=1.00 Hz, 1 H) 7.40-7.61(m, 5 H) 8.02(d, J=1.00 Hz, 1 H) 8.22(s, 1 H) 8.56(br. s., 1 H) 8.73(s, 1 H) 8.83(br. s., 1 H).
I-4의 제조
Figure 112013020897408-pct00094
2-클로로-5-(3-메톡시-아제티딘-1-일메틸)-피리딘: 400 mL의 메틸렌 클로라이드 중의 메톡시 아제티딘 HCL 염(24.2 g, 198 mmol, Eq: 1.00)의 슬러리에 트라이에틸아민(24.0 g, 33.1 ml, 237 mmol, Eq: 1.2)을 첨가하였다. 형성된 침전물이 다시 용액으로 되돌아갔다. 이어서, 6-클로로니코틴알데히드(28 g, 198 mmol, Eq: 1.00) 및 아세트산(22.6 ml, 396 mmol, Eq: 2.0)을 첨가하였다. 마지막으로, 나트륨 트라이아세톡시하이드로보레이트(41.9 g, 198 mmol, Eq: 1.00)를 분획 첨가하였다. 첫번째로, 11 g을 첨가하고, 덩어리가 생기길 기다렸다 분산시켰다. 두번째로, 이어서 11g을 첨가하고, 분취량을 TLC로 확인하였다. 잔여물을 분획 첨가하고, 슬러리를 계속 교반하였다. TLC로 첨가를 완료한 후, 일부 알데히드가 남아있는 것 같아 계속 교반하였다. 30분 후, 완료된 것처럼 보였다. 400 mL의 물 및 추가의 200 mL의 메틸렌 클로라이드를 첨가하고, 층을 분리하였다. 약 400 mL의 1.0M NaOH로 수성상을 염기로 만든 후, 400 mL의 메틸렌 클로라이드를 3회 추출하였다. 농축시켜 걸쭉한 무색 오일을 수득하였다. 일정한 중량 28.3g(67.3%)으로 냉매 회수하였다.
5-(3-메톡시-아제티딘-1-일메틸)-피리딘-2-일아민: 2-클로로-5-((3-메톡시아제티딘-1-일)메틸)피리딘(11.5 g, 54.1 mmol, Eq: 1.00), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(1.24 g, 1.35 mmol, Eq: 0.025), 및 바이페닐-2-일 다이사이클로헥실포스핀(948 mg, 2.7 mmol, Eq: 0.05)이 충전된 둥근 바닥 플라스크에 톨루엔(150 ml), 이어서 바로 THF 중의 1.0 M 용액으로서 리튬 비스(트라이메틸실릴)아마이드(81.1 ml, 81.1 mmol, Eq: 1.5)를 첨가하였다. 빨리 환류시키고, 아르곤 하에 밤새 교반하였다. 다음날, 반응을 TLC(9:1 MC:MeOH)로 확인하였는데, 출발 물질이 사라지고, 주로 단일의 낮은 Rf 점으로 대체되었다. 교반하면서 냉각하고, 5 ml의 1.0M HCl을 첨가하였다. 20분 동안 교반하고, 셀라이트로 여과하였다. 상기 여액을 에터로 희석하고, 200 mL의 1.0M NaOH, 이어서 물 및 염수로 세척하였다. 유기상을 나트륨 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 제거하였다. 수득된 암적색 오일은 14.4 g의 중량이다. 오일을 CH2Cl2에 흡수시키고, 플래쉬 크로마토그래피(순수 MC 내지 90:10 MC:MeOH:0.1 Et3N)로 정제하였다. 다음 단계를 위하여 4.4g(42.1%)의 가장 깨끗한 분획을 불그스름한 오일로서 수집하였다.
6-클로로-4-[5-(3-메톡시-아제티딘-1-일메틸)-피리딘-2-일아미노]-2-메틸-2H-피리다진-3-온: 5-(3-메톡시-아제티딘-1-일메틸)-피리딘-2-일아민(130 mg, 0.67 mmol, Eq: 1.0), 4-브로모-6-클로로-2-메틸-2H-피리다진-3-온(165 mg, 223 mmol, Eq: 1.1), 잔트포스(58 mg, 0.1 mmol, Eq: 0.15), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(46 mg, 0.05 mmol, Eq: 0.075) 및 세슘 카보네이트(767 mg, 2.35 mmol, Eq: 3.5)를 마이크로파 바이알에 첨가하였다. 상기 바이알을 캡핑하고, 아르곤으로 퍼지하였다. 탈기된 다이옥산(4.5 ml)을 셉튬(septum)을 통해 바이알에 첨가하고, 바이알을 다시 퍼지한 후, 아르곤으로 역채움하였다. 반응물을 모래욕에서 90℃에서 밤새 가열하였다. 조질 반응 혼합물을 셀라이트를 통하여 여과하고, 소량 첨가된 암모늄 하이드록사이드를 포함한, DCM 중의 5 내지 25%의 메탄올 구배를 사용하는 크로마토그래피로 정제하여 150 mg의 생성물(63.7%)을 수득하였다.
아세트산 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-6-{5-[5-(3-메톡시-아제티딘-1-일메틸)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-벤질 에스터: 6-클로로-4-[5-(3-메톡시-아제티딘-1-일메틸)-피리딘-2-일아미노]-2-메틸-2H-피리다진-3-온(100 mg, 0.29 mmol, Eq: 1.0), 아세트산 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-6-(4,4,5,5-테트라메틸-[1,3,2]다이옥사보롤란-2-일)-벤질 에스터(247 mg, 0.5 mmol, Eq: 1.75), 비스(다이벤질리덴아세톤)팔라듐(8.2 mg, 0.014 mmol, Eq: 0.05), x-phos(13.6 mg, 0.028 mmol, Eq: 0.10), 및 트라이칼륨 포스페이트(121 mg, 0.57 mmol, Eq: 2.0)를 마이크로파 바이알에 첨가하였다. 바이알을 캡핑하고, 질소로 퍼지하였다. 부탄올(2.3 ml) 및 물(0.5 ml)을 첨가하고, 바이알을 다시 퍼지하고, 질소로 역채움 하였다. 반응물을 모래욕에서 2.5시간 동안 110℃에서 가열하였다. 조질 반응물을 셀라이트를 통하여 여과하고, DCM 중의 0 내지 25%의 메탄올의 구배를 사용하는 크로마토그래피로 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획을 이와 합치고, 아세테이트 보호기를 반응 중에 제거하여 175 mg의 물질(약 92%)을 수득하였다.
실시예 4
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{5-[5-(3-메톡시-아제티딘-1-일메틸)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온: 아세트산 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-6-{5-[5-(3-메톡시-아제티딘-1-일메틸)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-벤질 에스터(175 mg, 0.26 mmol, Eq: 1.0)를 2.6 ml의 THF에 용해시켰다. 나트륨 하이드록사이드(물 중의 1.3 ml의 1.0M 용액, 1.3 mmol, Eq: 5.0)를 적가하였다. 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 출발물질이 다음날 아침에 남아있었다. 출발 물질이 더 이상 남아있지 않을 때까지 반응물을 50℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응물을 에틸 아세테이트 및 물로 희석하고, 층을 분리하였다. 유기층을 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 이소프로필 아세테이트로 마쇄하고, 여과하고, 에터로 세척하고, 진공 오븐에서 건조시켜 75 mg(45.7%)의 목적하는 생성물을 백색 분말로서 수득하였다. 1H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.37(s, 9 H) 2.79(t, J=6.80 Hz, 2 H) 3.11(s, 3 H) 3.37-3.44(m, 2 H) 3.46(s, 2 H) 3.77(s, 3 H) 3.92(t, J=5.85 Hz, 1 H) 4.40(br.s., 2 H) 4.52-4.63(m, 1 H) 7.40-7.62(m, 5 H) 7.74(d,J=13.22 Hz, 1 H) 7.86(s, 1 H) 8.15(s, 1 H) 8.48-8.55(m, 2 H) 9.36-9.44(m, 1 H). MS: (M+H)+ = 626. MP = 140-142℃.
I-5의 제조
실시예 5
Figure 112013020897408-pct00095
화합물 I-4를 제조하기 위한 절차를 사용하여, 첫번째 합성 단계에서 메톡시 아제티딘 HCL 염 대신 8-메틸-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄 다이하이드로클로라이드를 사용하고, 상기 유리 염기의 다이하이드로클로라이드 염에 대해 2.5 당량의 트라이에틸 아민을 사용하여, 6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-(8-메틸-3,8-다이아자-바이사이클로[3.2.1]옥트-3-일메틸)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온을 제조하였다. 생성된 벤질 아민 중간체를 남은 합성 단계를 거쳐 65 mg의 최종 생성물인 백색 분말로서 수득하였다. 1 H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ 9.38(s, 1H), 8.48-8.54(m, 2H), 8.10-8.17(m, 1H),7.86(s, 1H), 7.74(d, J = 13.22 Hz, 1H), 7.55-7.62(m, 1H), 7.42-7.55(m, 4H), 4.53 -4.60(m, 1H), 4.39(br. s., 2H), 3.77(s, 3H), 2.93(br. s., 2H), 2.41(d, J = 7.93 Hz, 2H),2.15(d, J = 10.20 Hz, 2H), 2.09(s, 3H), 1.78(d, J = 4.91 Hz, 2H), 1.62(d, J = 6.80 Hz, 2H), 1.37(s, 9H). MS: (M+H)+ = 665. MP = 162-165℃.
I-6의 제조
Figure 112013020897408-pct00096
단계 1.
에틸 2-(6-클로로피리딘-3-일옥시)-2-메틸프로판오에이트의 제조
Figure 112013020897408-pct00097
아세토니트릴(50 mL) 중의 6-클로로피리딘-3-올(5 g, 38.6 mmol) 및 에틸-2-브로모-2-메틸프로판오에이트(6.01 ml, 40.5 mmol)의 용액에 세슘 카보네이트(27 g, 83 mmol)를 첨가하였다. 물질을 48시간 동안 강하게 교반하였다. 혼합물을 물(100 ml) 및 에틸 아세테이트(100 ml)에 용해시키고, 분별 깔때기에 옮기고 진탕시켰다. 유기상을 수집하고, 수성상을 에틸 아세테이트(2 X 50 mL)로 역추출하였다. 유기상을 합치고, 건조시키고(마그네슘 설페이트), 여과하고, 스트립핑하였다. 조질 물질을 5 내지 30%의 에틸 아세테이트/헥산으로 용리하는 분취용 HPLC(실리카 겔; 50 g 컬럼)로 정제하여 목적하는 생성물을 연한 백황색 유동성 오일(6.78 g)로서 수득하였다. (M+H)+ = 244 m/e.
단계 2.
2-(6-클로로피리딘-3-일옥시)-2-메틸프로판-1-올의 제조
Figure 112013020897408-pct00098
질소 분위기 하에 무수 테트라하이드로푸란(80 mL) 중의 에틸 2-(6-클로로피리딘-3-일옥시)-2-메틸프로판오에이트(6.093 g, 25.0 mmol)의 용액을 -20℃로 냉각하였다(아세토니트릴/드라이 아이스 욕). 리튬 알루미늄 하이드라이드(THF 중의 1.0 M, 35 ml)의 용액을 10분에 걸쳐 적가하였다. 혼합물을 -20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 물(0.73 ml)을 첨가하여 조심스럽게 켄칭하였다. 혼합물을 10분 동안 교반한 후, 5% 나트륨 하이드록사이드(1.34 ml)의 수성 용액을 첨가하면서 10분 동안 교반하였다. 마지막으로, 물(1.34 ml)을 첨가하고, 혼합물을 추가 10분 동안 교반하였다. 마그네슘 설페이트를 첨가하고, 물질을 셀라이트의 플러그를 통하여 여과하고, 테트라하이드로푸란으로 잘 세척하였다(추가로, 다이클로로메탄(50 ml) 중의 알루미늄 염을 교반하고 셀라이트로 여과하여 추가 생성물을 수득한다). 여액을 회전 증발기 상에서 스트립핑하여 목적하는 생성물을 반점성 갈색 오일(4.843 g)로서 수득하였다. (M+H)+ = 202 m/e.
단계 3.
2-(6-클로로피리딘-3-일옥시)-2-메틸프로판알의 제조
Figure 112013020897408-pct00099
아르곤 분위기 하에 무수 다이클로로메탄(13 ml)을 함유한 오븐 건조된 플라스크(50 ml, 둥근 바닥)를 -78℃(건조 얼음/아세톤 욕)로 냉각하였다. 옥살일 클로라이드(0.23 ml, 2.67 mmol)를 첨가한 후, 무수 다이메틸 설폭사이드(0.31 ml, 4.31 mmol)를 적가하였다. 혼합물을 10분 동안 교반한 후, 2-(6-클로로피리딘-3-일옥시)-2-메틸프로판-1-올(451 mg, 2.06 mmol)[다이클로로메탄(4 ml)에 용해됨]의 용액을 천천히 적가하였다. 냉각된 용액을 30분 동안 교반한 후, 트라이에틸아민(1.15 ml, 8.2 mmol)을 첨가하고, 냉욕을 제거하였다. 혼합물을 교반하고, 1시간에 걸쳐 주위 온도로 가온하였다. 나트륨 바이카보네이트(20 ml)의 포화 용액, 또한 다이클로로메탄(20 ml)을 첨가하였다. 물질을 옮기고, 분별 깔때기에서 진탕시켰다. 다이클로로메탄 상을 수집하고, 염수 용액(25 mL)으로 세척하였다. 수성상을 메틸렌 클로라이드(2 x 20 mL)로 역추출하고, 유기상을 합치고, 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 스트립핑하였다. 물질을 30%의 에틸 아세테이트/헥산으로 용리하는 실리카 겔(20 g)의 짧은 컬럼으로 여과함으로써 정제하여 생성물을 연황색 오일(361 mg)로서 수득하였다. (M+H)+ = 200 m/e.
단계 4.
2-(6-클로로피리딘-3-일옥시)-N,N,2-트라이메틸프로판-1-아민의 제조
Figure 112013020897408-pct00100
무수 다이클로로메탄(4 ml) 중의 2-(6-클로로피리딘-3-일옥시)-2-메틸프로판알(354 mg, 1.77 mmol) 및 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(940 mg, 4.43 mmol)를 함유한 큰 용량의 마이크로파 튜브에 빙초산(0.81 ml, 14.2 mmol), 이어서 2 M 다이메틸아민(14.2 ml, 28.4 mmol, 테트라하이드로푸란 중)의 용액을 첨가하였다. 상기 튜브를 캡핑하고, 16시간 동안 힘차게 교반하면서 50℃(오일욕)로 가열하였다. 혼합물을 주위 온도로 냉각하고, 내용물을 포화 나트륨 바이카보네이트(30 ml)의 수성 용액을 함유하는 분별 깔때기에 부었다. 다이클로로메탄(30 ml)을 첨가하고, 혼합물을 진탕시켰다. 내용물을 셀라이트의 플러그로 여과하고, 다이클로로메탄으로 세척하였다. 여액을 수집하고, 염수 용액(40 ml)으로 세척하였다. 다이클로로메탄 상을 수집하고, 수성상을 메틸렌 클로라이드(2 X 40 mL)로 역추출하였다. 유기상을 합치고, 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 스트립핑하였다. 물질을 1.8%의 메탄올/다이클로로메탄으로 용리하는 분취용 박층 크로마토그래피(2 플레이트)로 정제하였다. 이어서, 플레이트를 2.6%의 메탄올/다이클로로메탄으로 재전개시키고, 생성물 밴드를 수집하여 목적하는 생성물을 연황색 유동성 오일로서 수득하고, 이를 천천히 고체화시켰다(255 mg). (M+H)+ = 229 m/e.
단계 5.
4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00101
무수 테트라하이드로푸란(6.6 ml) 중의 2-(6-클로로피리딘-3-일옥시)-N,N,2-트라이메틸프로판-1-아민(255 mg, 1.11 mmol)의 용액에 2-(다이사이클로헥실포스피노)바이페닐(78 mg, 0.22 mmol), 이어서 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(102 mg, 0.11 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 진공 탈기시키고, 아르곤 분위기 하에 두었다. 1M 리튬 비스(트라이메틸실릴)아마이드(3.34 ml, 테트라하이드로푸란 중)의 용액을 첨가하고, 튜브를 밀봉하고, 75℃(오일욕)로 가열하면서 밤새 힘차게 교반하였다. 혼합물을 주위 온도로 냉각하고, 내용물을 암모늄 클로라이드(25 ml)의 포화 수성 용액을 함유한 분별 깔때기에 부었다. 다이클로로메탄(30 ml)을 첨가하고, 혼합물을 진탕시켰다. 유기상을 수집하고, 수성상을 메틸렌 클로라이드(4 X 50 mL)로 역추출하였다. 메틸렌 클로라이드 상을 합치고, 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 스트립핑하였다. 물질을 8%의 메탄올/다이클로로메탄으로 용리하는 분취용 박층 크로마토그래피(2 플레이트)로 정제하였다. 극성 밴드를 수집하여 생성물을 적갈색 점성의 오일(229 mg)로서 수득하였다. 이 물질을 다음 단계에 사용하였다.
단계 6.
6-클로로-4-(5-(1-(다이메틸아미노)-2-메틸프로판-2-일옥시)피리딘-2-일아미노)-2-메틸피리다진-3(2H)-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00102
무수 다이옥산(6.6 ml) 중의 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(282 mg, 1.26 mmol), 5-(1-(다이메틸아미노)-2-메틸프로판-2-일옥시)피리딘-2-아민(203 mg, 0.97 mmol), 잔트포스(84 mg, 0.15 mmol) 및 세슘 카보네이트(1.11 g, 3.39 mmol)의 용액을 진공 탈기시키고, 아르곤 분위기 하에 두었다. 이 혼합물에 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(67 mg, 0.073 mmol)을 첨가하고, 진공 탈기 주기를 반복하였다. 물질을 90℃(오일욕)에서 가열하면서 밤새 힘차게 교반하였다. 플라스크를 주위 온도로 냉각하고, 내용물을 셀라이트의 플러그를 통하여 여과하고, 다이옥산으로 세척하였다. 휘발물을 스트립핑하고, 조질을 6%로 용리하고, 이어서 8%의 메탄올/다이클로로메탄으로 재전개되는 분취용 박층 크로마토그래피(4 플레이트)로 정제하였다. 생성물 밴드를 수집하여 목적하는 생성물을 연갈색 분말(196 mg)로서 수득하였다. (M+H)+ = 352 m/e.
Figure 112013020897408-pct00103
마이크로파 반응 바이알에 아세트산 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-6-클로로-벤질 에스터(329 mg, 0.818 mmol), 비스-피나코-다이보론(416 mg, 1.637 mmol), KOAc(241 mg, 2.454 mmol) 및 x-Phos(39 mg, 0.0818 mmol) 및 다이옥산(4 mL)을 첨가하였다. 15분 동안 아르곤으로 버블링한 후, Pd(dba)2(24 mg, 0.0409 mmol)를 첨가하였다. 튜브를 밀봉하고, 18시간 동안 60℃로 가열하였다. 이어서, 반응 혼합물을 EtOAc(5 mL)로 희석하고, NaHCO3(농축됨)(1 X 10mL) 및 물(10 mL)로 세척하였다. 이어서, 유기상을 농축시키고, 헥산 중의 25% EtOAc를 포함하는 실리카 겔 컬럼 상에서 정제하여 아세트산 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-6-(4,4, 5,5-테트라메틸-[1,3,2]다이옥사보롤란-2-일)-벤질 에스터를 황색 오일(330mg, 81%)로서 수득하였다.
단계 7.
아세트산 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-6-{5-[5-(2-다이메틸아미노-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-벤질 에스터의 제조
Figure 112013020897408-pct00104
플라스크에 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질 아세테이트(391 mg, 0.55 mmol), 6-클로로-4-(5-(1-(다이메틸아미노)-2-메틸프로판-2-일옥시)피리딘-2-일아미노)-2-메틸피리다진-3(2H)-온(150 mg, 0.43 mmol), X-phos(31 mg, 0.06 mmol) 및 칼륨 포스페이트 3 염기성(199 mg, 0.94 mmol)을 충전시켰다. 혼합물을 n-부탄올(2.8 ml) 및 물(0.67 ml)에 용해시키고, 진공 탈기시키고, 아르곤 분위기 하에 두었다. 이 혼합물에 비스(다이벤질리덴아세톤)팔라듐(17 mg, 0.03 mmol)을 첨가하고, 진공 탈기 주기를 반복하였다. 물질을 110℃(오일욕)에서 가열하면서 아르곤 분위기 하에 2.5시간 동안 힘차게 교반하였다. 플라스크를 주위 온도로 냉각하고, 내용물을 물(35 ml) 및 에틸 아세테이트(35 ml)에 용해시켰다. 내용물을 분별 깔때기에 옮기고, 진탕시켰다. 유기상을 수집하고, 물(35 ml)로 세척하였다. 수성상을 에틸 아세테이트(2 x 30 ml)로 역추출하고, 유기상을 합치고, 건조시키고(마그네슘 설페이트), 여과하고, 스트립핑하였다. 잔여물을 8%의 메탄올/다이클로로메탄으로 용리하는 분취용 박층 크로마토그래피(3 플레이트)로 정제하여, 목적하는 생성물(일부 des-아세틸 생성물과 함께임)을 금갈색 오일(312 mg)로서 수득하였다. (M+H)+ = 684(642) m/e.
실시예 6
단계 8.
6-3급-부틸-2-(3-{5-[5-(2-다이메틸아미노-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00105
다이옥산(1.5 ml) 중의 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(5-(5-(1-(다이메틸아미노)-2-메틸프로판-2-일옥시)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)-벤질 아세테이트(292mg, 0.43 mmol)의 용액에 2N 나트륨 하이드록사이드(2.5 ml, 5 mmol)의 용액을 첨가하였다. 플라스크를 50℃(오일욕)에서 가열하면서 아르곤 분위기 하에 3시간 동안 강하게 교반하였다. 물질을 주위 온도로 냉각하고, 내용물을 물(25 ml) 및 메틸렌 클로라이드(50 ml)에 용해시키고, 분별 깔때기에 옮기고, 진탕시켰다. 유기상을 수집하고, 50% 희석된 염수(25 ml)의 용액으로 세척하였다. 수성상을 메틸렌 클로라이드(2 x 40 ml)로 역추출하고, 유기상을 합치고, 건조시키고(마그네슘 설페이트), 여과하고, 스트립핑하였다. 잔여물을 6%의 메탄올/다이클로로메탄으로 용리하는 분취용 박층 크로마토그래피(3 플레이트)로 정제한 후, 첫번째로 8%, 이어서 11%의 메탄올/다이클로로메탄을 포함하는 플레이트로 재전개하였다. 생성물 밴드를 수집하여 목적하는 생성물을 연황색-백색 고체(72 mg)로서 수득하였다. MP = 136-144℃; (M+H)+ = 642 m/e. 1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.28(s, 6 H) 1.42(s, 9 H) 2.40(s, 6 H) 2.51(s, 2 H) 3.90(s, 3 H) 4.42(s, 2 H) 6.90(d, J=9.06 Hz, 1 H) 7.33(dd, J=8.69, 3.02 Hz, 1 H) 7.41-7.72(m, 5 H) 8.09(d, J=3.02 Hz, 1 H) 8.20-8.35(m, 2 H) 8.53(s, 1 H).
I-7의 제조
실시예 7
Figure 112013020897408-pct00106
화합물 I-4를 제조하는 절차를 사용하여, 첫번째 단계에서, 메톡시 아제티딘 HCL 염 대신 아제티딘으로 대체하며, 트라이에틸 아민을 사용하지 않고 2-{3-[5-(5-아제티딘-1-일메틸-피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-2-하이드록시메틸-페닐}-6-3급-부틸-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온을 제조하였다. 생성된 벤질 아민 중간체를 나머지 합성 단계에서 수행하여 35 mg의 최종 생성물을 회백색 분말로서 수득하였다. 1 H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ 9.37(s, 1H), 8.47-8.56(m, 2H), 8.15(s, 1H), 7.86(s,1H), 7.74(d, J = 13.22 Hz, 1H), 7.40-7.63(m, 5H), 4.51-4.62(m, 1H), 4.40(br. s., 2H), 3.77(s, 3H), 3.40(s, 2H), 3.06(t, J = 6.80 Hz, 4H), 1.92(quin, J = 6.89 Hz, 2H), 1.37(s, 9H). MS: (M+H)+ = 596. MP = 160-163℃.
I-8의 제조
실시예 8
Figure 112013020897408-pct00107
화합물 I-4를 제조하는 절차를 사용하여, (6-클로로-피리딘-3-일메틸)-다이메틸-아민이 상업적으로 수득가능하기 때문에 첫번째 단계를 제외하여 6-3급-부틸-2-{3-[5-(5-다이메틸아미노메틸-피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-2-하이드록시메틸-페닐}-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온을 제조하였다. 이 화합물을 나머지 합성 단계에서 수행하여 120 mg의 최종 생성물을 회백색 분말로서 수득하였다. 1 H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.40(s, 1 H) 8.47-8.57(m, 2 H) 8.15(s, 1 H) 7.86(s, 1 H) 7.74(d, J=13.2 Hz, 1 H) 7.56-7.65(m, 1 H) 7.42-7.56(m, 4 H) 4.52 -4.61(m, 1 H) 4.40(br. s., 2 H) 3.77(s, 3 H) 3.34-3.40(s, 2 H, DMSO 물 피크에 의해 가려짐) 2.10(s, 6 H) 1.37(s, 9H). MS: (M+H)+ = 584. MP = 170-174℃.
I-9의 제조
Figure 112013020897408-pct00108
3급-부틸 8-(6-니트로피리딘-3-일)-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-카복실레이트
Figure 112013020897408-pct00109
실온에서 트라이에틸아민( 6.87mL, 49.3 mmol)을 8 mL의 DMSO 중의 5-플루오로-2-니트로피리딘(700 mg, 4.93 mmol) 및 (1R,5S)-3급-부틸 3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-카복실레이트(1.05g, 4.93 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 80℃로 가열하였다. 실온으로 냉각한 후, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 포화 암모늄 클로라이드 및 물(3x)로 세척하고, 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켜 1.21 g(73.5%)의 3급-부틸 8-(6-니트로피리딘-3-일)-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-카복실레이트를 황색 고체로서 수득하였다.
3급-부틸 8-(6-아미노피리딘-3-일)-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-카복실레이트
Figure 112013020897408-pct00110
10 ml의 메탄올 중의 3급-부틸 8-(6-니트로피리딘-3-일)-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-카복실레이트(330 mg, 987 μmol)의 용액에 탄소 상의 10% 팔라듐(10 mg)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 50 psi 수소 하에 2시간 동안 수소화시켰다. 반응 혼합물을 셀라이트의 피크로 여과하고, 농축시켜 300 mg(100%)의 3급-부틸 8-(6-아미노피리딘-3-일)-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-카복실레이트를 무색 오일로서 수득하였다. 이 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다.
(1R,5S)-3급-부틸 8-(6-(6-클로로-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)피리딘-3-일)-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-카복실레이트
Figure 112013020897408-pct00111
실시예 6의 단계 6에 기재된 유사한 조건 하에 이 반응을 수행하였다. 후처리 후, 생성물을 2 내지 8%의 메탄올/메틸렌 클로라이드의 구배를 사용하는 실리카 겔 상의 분취용 HPLC로 정제하였다. 목적하는 생성물을 연황색 고체(275 mg 62.4%)로서 수득하였다. (M+H)+ = 447.2 m/e.
3급-부틸 8-(6-(6-(2-(아세톡시메틸)-3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)페닐)-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)피리딘-3-일)-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-카복실레이트
Figure 112013020897408-pct00112
실시예 6의 단계 7에 기재된 유사한 조건 하에 이 반응을 수행하였다. 7 ml의 다이옥산/물(9:1) 중의 (1R,5S)-3급-부틸 8-(6-(6-클로로-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)피리딘-3-일)-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-카복실레이트(100 mg, 224 μmol), 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질 아세테이트(114 mg, 224 μmol), x-Phos(10.7 mg, 22.4 μmol) 및 칼륨 포스페이트(119 mg, 559 μmol)를 10분 동안 질소로 탈기시키고, 비스(다이벤질리덴아세톤)팔라듐(0)(6.42, 11.2 μmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 100℃로 가열하였다. 후처리 후, 생성물을 5 내지 70%의 에틸아세테이트/헥산의 구배를 사용하는 실리카 겔 상의 분취용 HPLC로 정제하였다. 목적하는 생성물을 연황색 고체(105 mg 60.3%)로서 수득하였다. (M+H)+ = 779 m/e.
3급-부틸 8-(6-(6-(3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-2-(하이드록시메틸)페닐)-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)피리딘-3-일)-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-카복실레이트
Figure 112013020897408-pct00113

실시예 I-6의 단계 8에 기재된 유사한 조건 하에 이 반응을 수행하였다. 후처리 후, 생성물을 연황색 분말(90 mg, 90.6%)로서 결정화시켰다. (M+H)+ = 737 m/e.
실시예 9
2-(3-(5-(5-(3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)-2-(하이드록시메틸)페닐)-6-3급-부틸-8-플루오로프탈라진-1(2H)-온
Figure 112013020897408-pct00114
2시간 동안 3급-부틸 8-(6-(6-(3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-2-(하이드록시메틸)페닐)-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)피리딘-3-일)-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-카복실레이트(90 mg, 122 μmol)를 다이클로로메탄(10 mL) 중의 50% 트라이플루오로산으로 탈카복시화시켰다. 반응 혼합물을 농축 건조시킨 후, 에틸 아세테이트와 포화 나트륨 바이카보네이트 사이에 분배시켰다. 유기상을 나트륨 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다.
생성물을 수집하고, 뜨거운 이소-프로필아세테이트/헥산으로 결정화시켜 추가로 정제하였다. 결정 생성물을 여과함으로써 수집하여 목적하는 생성물을 연갈색 분말(53 mg, 68.1%)로서 수득하였다. (M+H)+ = 638 m/e. 1H NMR(500 MHz, DMSO-d6) δ 9.13(s, 1H), 8.49(d, J = 2.44 Hz, 1H), 8.31-8.35(m, 1H), 7.90(d, J = 2.44 Hz, 1H), 7.85(d, J = 1.95 Hz, 1H), 7.73(d, J = 11.71 Hz, 1H), 7.49-7.55(m, 1H), 7.43-7.48(m, 2H), 7.37(d, J = 8.79 Hz, 1H), 7.27(dd, J = 2.93, 9.27 Hz, 1H), 4.48-4.56(m, 1H), 4.38(d, J = 11.23 Hz, 3H), 4.04-4.15(m, 2H), 3.69-3.79(m, 3H), 2.93(d, J = 12.20 Hz, 2H), 2.42-2.46(m, 2H), 1.82-1.93(m, 4H), 1.36(s, 9H)
I-10의 제조
단계 1.
Figure 112013020897408-pct00115
15 mL 마이크로파 바이알에 다이옥산(8 ml) 중의 메틸 6-아미노니코틴에이트(170 mg, 1.12 mmol, Eq: 1.00), 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(250 mg, 1.12 mmol, Eq: 1.00), Cs2CO3(1.28 g, 3.92 mmol, Eq: 3.5) 및 잔트포스(97.1 mg, 168 μmol, Eq: 0.15)를 첨가하였다. 반응물을 아르곤으로 퍼지하고, Pd2(dba)3(76.8 mg, 83.9 μmol, Eq: 0.075)를 첨가하였다. 바이알을 캡핑하고, 마이크로파에서 90℃에서 30분 동안 가열하였다. LC-MS(시간 = 30분)는, 출발 물질이 남아있어서 반응이 완료되지 않았음을 나타내었다. 반응물을 120℃에서 30분 동안 추가로 가열하였다. 샘플을 고체화시켰다. 조질 혼합물을 DCM에 용해시키고, 암갈색 오일성 고체로 스트립핑하였다. 잔류물을 DCM에 용해시키고, 물로 세척하였다. 수성층을 DCM(2 x 50 mL)로 역추출하였다. 유기상을 합치고, 포화 NaCl(1 x 25 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조질 유기상의 LC-MS는 주로 생성물을 나타낸다.
조질 물질을 DCM로 마쇄하고, 냉각하였다. 황갈색 고체를 여과하고, 최소량의 냉각 DCM로 세척하였다. 고체를 진공 하에 건조시켜 158 mg의 연한 황갈색 고체(48% 수율)를 수득하였다. DMSO-d6에서의 1H NMR은 목적하는 생성물에 상응한다.
MS(m+1) = 295.0.
단계 2.
Figure 112013020897408-pct00116
15 mL의 마이크로파 바이알에 다이옥산(5 ml) 및 물(0.5 ml) 중의 메틸 6-(6-클로로-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)니코틴에이트(153 mg, 519 μmol, Eq: 1.00), 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질 아세테이트(334 mg, 675 μmol, Eq: 1.3) 및 Cs2CO3(592 mg, 1.82 mmol, Eq: 3.5)를 첨가하였다. PdDCl2(DPPF)(42.4 mg, 51.9 μmol, Eq: 0.1)를 첨가하고, 현탁액을 아르곤으로 퍼지하였다. 바이알을 캡핑하고, 마이크로파에서 120℃에서 30분 동안 가열하였다. LC-MS(시간 = 30분)는 반응이 완료됨을 나타내었다. DCM으로 희석하고, 셀라이트로 여과하였다. 황색 여액을 진공에서 스트립핑하여 황갈색 고체를 수득하였다. 물질은 DCM에 매우 가용성이 아니다. 후속적인 가수분해를 위해 조질 물질이 사용된다.
단계 3.
Figure 112013020897408-pct00117
250 mL의 둥근 바닥 플라스크에, 메틸 6-(6-(2-(아세톡시메틸)-3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)페닐)-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)니코틴에이트(325 mg, 519 μmol, Eq: 1.00)를 다이옥산(10 ml) 및 1M LiOH(3 ml)과 합쳐 소량의 비용해성 미립제를 함유한 황색 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 17시간 동안 교반하였다. LC-MS(시간 = 17시간)는 반응이 완료됨을 나타내었다. 소량의 1M HCl(산성 약 pH 1)로 켄칭하고, EtOAc로 희석하였다. 상을 분리하고, 수성층을 EtOAc(2 x 25 mL)로 역추출하였다. 합친 유기층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켜 연한 황갈색 고체를 수득하였다. 고체를 진공 하에 건조시켜 34 mg의 연한 황갈색 분말(12% 수율)을 수득하였다. CDCl3에서의 1H NMR은 목적하는 생성물에 상응한다. MS(m-1) = 569.
실시예 10
6-{6-[3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-2-하이드록시메틸-페닐]-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로-피리다진-4-일아미노}-N,N-다이메틸-니코틴아마이드
Figure 112013020897408-pct00118
단계 4.
50 mL의 둥근 바닥 플라스크에, THF(38.7 μl, 77.5 μmol, Eq: 1.3) 중의 6-(6-(3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-2-(하이드록시메틸)페닐)-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)니코틴산(34 mg, 59.6 μmol, Eq: 1.00), 2M의 다이메틸아민 및 후니히 염기(23.1 mg, 31.2 μl, 179 μmol, Eq: 3)를 DMF(1 ml)와 합쳐 황색 용액을 수득하였다. HATU(27.2 mg, 71.5 μmol, Eq: 1.2)를 첨가하고, 반응 혼합물을 21시간 동안 25℃에서 교반하였다. LC-MS(시간 = 21시간)은 반응이 완료됨을 나타내었다. 반응 혼합물을 물 및 DCM로 희석하였다. 2개의 상 혼합물을 여과하고, 수성층을 DCM(3 x 20 mL)로 역추출하였다. 유기상을 합치고, 물로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켜 복숭아색 고체로서 수득하였다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 25 g, DCM 중의 0 내지 5%의 MeOH)로 정제하였다. 생성물을 진공 하에 건조시켜 11 mg의 백색 결정 고체(31% 수율)을 수득하였다. CDCl3에서의 1H NMR은 목적하는 생성물에 상응한다. MS(m+1) = 598.
I-11의 제조
실시예 11
Figure 112013020897408-pct00119
다이옥산(10.0 ml) 중의 5-(트라이플루오로메틸)피라진-2-아민(146 mg, 0.90 mmol), 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(200 mg, 0.90 mmol), 세슘 카보네이트(1.02 g, 3.13 mmol) 및 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔틴(77.7 mg, 0.13 mmol)의 용액에 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(61.5 mg, 0.07 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 아르곤(3X)으로 퍼지한 후, 18시간 동안 90℃로 가온하였다. 혼합물을 냉각하고, 다이클로로메탄 및 물(50 mL)로 희석하고, 층을 분리하였다. 수성상을 메틸렌 클로라이드(2 x 25 mL)로 추출하였다. 수성상을 합치고, MgSO4 상에서 건조시켰다. 혼합물을 여과하고, 증발시키고, 잔류물을 자동화된 플래쉬 크로마토그래피(아날로지스(Analogix), SF15-24g 컬럼, 1 내지 10%의 메탄올/다이클로로메탄 구배)로 정제하여 6-클로로-2-메틸-4-(5-트라이플루오로메틸-피라진-2-일아미노)-2H-피리다진-3-온(197 mg, 72%)을 황색 고체로서 수득하였다: LC/MS m/e 계산치 C10H7ClF3N5O [M]+ 305.03, 측정치 305.9.
n-부탄올(4 ml) 및 물(1 ml) 중의 6-클로로-2-메틸-4-(5-(트라이플루오로메틸)피라진-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온(109 mg, 0.36 mmol), 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질 아세테이트(264 mg, 0.54 mmol), 칼륨 포스페이트(189 mg, 0.89 mmol) 및 2-다이사이클로헥실포스피노-2',4',6'-트라이이소프로필바이페닐(17.0 mg, 0.04 mmol)의 용액을 10분 동안 아르곤 기체로 버블링하였다. 이 용액에 비스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(10.3 mg, 0.02 mmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 2시간 동안 100℃로 가열하였다. 혼합물을 냉각한 후, 포화 암모늄 클로라이드 용액에 부었다. 생성된 혼합물을 메틸렌 클로라이드(2 x 100 ml)로 추출하였다. 수성상을 합치고, MgSO4 상에서 건조시켰다. 혼합물을 여과하고, 증발시키고, 잔류물을 다이옥산(10 mL)에 용해시켰다. 이 용액에 2 M 리튬 하이드록사이드 용액(0.5 mL)을 천천히 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 생성된 혼합물을 포화 암모늄 클로라이드 용액에 부었다. 혼합물을 메틸렌 클로라이드(2 x 150 ml)로 추출하였다. 수성상을 합치고, MgSO4 상에서 건조시켰다. 혼합물을 여과하고, 증발시키고, 잔류물을 자동화된 플래쉬 크로마토그래피(아날로지스, SF15-24g 컬럼, 1 내지 10%의 메탄올/다이클로로메탄 구배)로 정제하여 연황색 고체를 수득하고 이를 메탄올/다이클로로메탄으로 재결정화시켜 6-3급-부틸-8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[1메틸-6-옥소-5-(5-트라이플루오로메틸-피라진-2-일아미노)-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-2H-프탈라진-1-온(65 mg, 31%)을 백색 고체로서 수득하였다: Mp: 250 내지 254℃; LC/MS m/e 계산치 C29H25F4N7O3 [M+H]+ 596.20, 측정치 596.3; 1H NMR(DMSO-d6) δ: 10.38(s, 1H), 8.71-9.08(m, 2H), 8.43-8.66(m, 2H), 7.68-8.02(m, 2H), 7.38-7.65(m, 3H), 4.54-4.76(m, 1H), 4.40(br. s., 2H), 3.82(s, 3H), 1.38(s, 9H).
반응식 A
I-12의 제조
Figure 112013020897408-pct00120
이 실시예는 "6-3급-부틸-8-플루오로-2-(3-{5-[5-(2-하이드록시-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-2H-프탈라진-1-온"의 합성을 예시한다.
단계 1.
2-(6-아미노-피리딘-3-일옥시)-2-메틸-프로피온산 에틸 에스터의 제조
Figure 112013020897408-pct00121
무수 아세토니트릴(25 ml) 중의 6-아미노피리딘-3-올 하이드로브로마이드(2 g, 10.5 mmol) 및 에틸-2-브로모-2-메틸프로판에이트(2.04 g, 10.5 mmol)를 함유한 플라스크에 세슘 카보네이트(10.7 g, 33 mmol)를 첨가하고, 물질을 아르곤 분위기 하에 16시간 동안 교반하였다. 물(60 ml) 및 에틸 아세테이트(60 ml)를 첨가하고, 물질을 분별 깔때기에서 진탕하였다. 유기상을 수집하고, 수성상을 에틸 아세테이트(2 x 50 ml)로 역추출하였다. 합친 유기상을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켜 황색 갈색 고체(1.626 g)로서 수득하였다. (M+H)+ = 225 m/e.
단계 2.
2-[6-(6-클로로-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로-피리다진-4-일아미노)-피리딘-3-일옥시]-2-메틸-프로피온산 에틸 에스터의 제조
Figure 112013020897408-pct00122
무수 다이옥산(60 ml) 중의 2-(6-아미노-피리딘-3-일옥시)-2-메틸-프로피온산 에틸 에스터(1.365 g, 6.09 mmol), 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(1.77 g, 7.91 mmol), 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(528 mg, 0.913 mmol) 및 세슘 카보네이트(6.94 g, 21.3 mmol)를 함유한 플라스크를 진공 하에 비우고, 아르곤으로 역채움(3회 반복)하였다. 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(418 mg, 0.457 mmol)을 첨가하고, 플라스크를 진공 하에 채우고, 아르곤으로 역채움(3회 반복)하였다. 플라스크를 90℃로 가열된 오일욕에 두고, 아르곤 분위기 하에 16시간 동안 교반하였다. 플라스크를 주위 온도로 냉각하고, 물질을 셀라이트의 플러그를 통하여 여과하고, 다이옥산으로 세척하였다. 휘발물을 진공에서 농축시키고, 잔류물을 5 내지 25%의 에틸 아세테이트/헥산으로 용리하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여, 목적하는 생성물을 연황색-갈색 분말(2.035 g)을 수득하였다. (M+H)+ = 367 m/e.
단계 3.
6-클로로-4-[5-(2-하이드록시-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-2-메틸-2H-피리다진-3-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00123
2-[6-(6-클로로-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로-피리다진-4-일아미노)-피리딘-3-일옥시]-2-메틸-프로피온산 에틸 에스터(1.23 g, 3.35 mmol, Eq: 1.00)를 무수 THF(25 ml)에 용해시키고, 질소 분위기 하에 -30℃(건조 얼음/아세토니트릴 냉각 욕)로 냉각하였다. 리튬 알루미늄 하이드라이드(4.7 ml, 4.69 mmol, THF 중의 1.0 M)의 용액을 천천히 첨가하고, 10분에 걸쳐 적가하였다. 혼합물을 1시간 동안 교반하면서 욕조 온도를 약 -20℃로 유지시켰다. 반응물을 물(0.1 ml)을 첨가함으로써 조심스럽게 켄칭하고, 10분 동안 주위 온도로 교반하였다. 이어서, 5%의 나트륨 하이드록사이드(0.19 ml)의 수성 용액을 첨가하고, 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 물(0.19 ml)을 첨가하고, 10분 동안 계속 교반하였다. 마지막으로 마그네슘 설페이트를 첨가하고, 물질을 셀라이트의 플러그를 통하여 여과하고, 테트라하이드로푸란으로 세척하였다. 물질을 회전 증발기 상에서 농축시켜 부피를 약 반으로 만들었다. 에틸 아세테이트(50 ml) 및 물(70 ml)을 첨가하고, 물질을 분별 깔때기에서 진탕하였다. 유기상을 수집하고, 수성상을 에틸 아세테이트(2 x 40 ml)로 역추출하였다. 유기물을 합치고, 마그네슘 설페이트로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 뜨거운 다이클로로메탄/헥산으로 마쇄하여 목적하는 생성물을 연황색-갈색 고체(1.041 g)로서 수득하였다. (M+H)+ = 325 m/e.
단계 4.
아세트산 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-6-{5-[5-(2-하이드록시-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-벤질 에스터의 제조
Figure 112013020897408-pct00124
단계 7, 실시예 I-6에 기재된 유사한 조건이지만, 6-클로로-4-[5-(2-다이메틸아미노-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-2-메틸-2H-피리다진-3-온 대신 6-클로로-4-[5-(2-하이드록시-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-2-메틸-2H-피리다진-3-온으로 대체하여 반응을 수행하였다. 후처리 후, 생성물을 5%의 메탄올/메틸렌 클로라이드로 용리하는 분취용 박층 크로마토그래피(3 플레이트)로 정제하였다. 목적하는 생성물(일부 des-아세틸 생성물과 함께)을 연갈색 점성의 오일(400 mg)로서 수득하였다. (M+H)+ = 657 m/e.
실시예 12
단계 5.
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(3-{5-[5-(2-하이드록시-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-2H-프탈라진-1-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00125
단계 8, 실시예 I-6에 기재된 유사한 조건 하에 이 반응을 수행하였다. 후처리 후, 생성물을 2%의 메탄올/메틸렌 클로라이드로 용리하는 분취용 박층 크로마토그래피(3 플레이트)로 정제하였다. 이어서, 플레이트를 3%, 이어서 5%의 메탄올/메틸렌 클로라이드로 재전개시켰다. 목적하는 생성물을 연황색 고체(226 mg)로서 수득하였다. (M+H)+ = 615 m/e. 1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.27(s, 6 H) 1.43(s, 9 H) 2.14(t, J=6.42 Hz, 1 H) 3.61(d, J=6.04 Hz, 2 H) 3.90(s, 3 H) 3.91-3.95(m, 1 H) 4.42(d, J=6.80 Hz, 2 H) 6.92(d, J=8.69 Hz, 1 H) 7.32(dd, J=8.88, 2.83 Hz, 1 H) 7.43-7.54(m, 3 H) 7.57(t, J=7.90 Hz, 1 H) 7.63-7.70(m, 1 H) 8.09(d, J=3.02 Hz, 1 H) 8.24-8.32(m, 2 H) 8.55(s, 1 H)
반응식 B
I-13의 제조
Figure 112013020897408-pct00126
이 실시예는 "2-(3-{5-[5-(2-아제티딘-1-일-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-6-3급-부틸-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온"의 합성을 예시한다.
단계 1.
2-[6-(6-클로로-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로-피리다진-4-일아미노)-피리딘-3-일옥시]-2-메틸-프로피온알데히드의 제조
Figure 112013020897408-pct00127
6-클로로-4-(5-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일옥시)피리딘-2-일아미노)-2-메틸피리다진-3-(2H)-온(965 mg, 2.97 mmol)을 테트라하이드로푸란(25 ml) 및 다이클로로메탄(15 ml)의 혼합물에 용해시켰다. 현탁액에 데스-마틴(Dess-Martin) 퍼요오디난(1.64 g, 3.86 mmol)을 첨가하고, 플라스크를 캡핑하고, 40분 동안 교반하였다. 나트륨 바이카보네이트(50 ml)의 수성 포화 용액, 이어서 나트륨 티오설페이트(50 ml)의 10%의 수성 용액을 첨가하고, 물질을 15분 동안 강하게 교반하였다. 에틸 아세테이트(50 ml)를 첨가하고, 내용물을 분별 깔때기에 진탕시켰다. 유기상을 수집하고, 염수 용액(50 ml)으로 세척하였다. 에틸 아세테이트 상을 수집하고, 수성상을 다이클로로메탄(2 x 40 ml)으로 역추출하였다. 합친 유기상을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 생성물을 뜨거운 다이클로로메탄/헥산으로 마쇄함으로써 정제하여 갈색 고체(688 mg)를 수득하였다.
(M+H)+ = 323 m/e.
단계 2.
4-[5-(2-아제티딘-1-일-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-6-클로로-2-메틸-2H-피리다진-3-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00128
2-[6-(6-클로로-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로-피리다진-4-일아미노)-피리딘-3-일옥시]-2-메틸-프로피온알데히드(188 mg, 0.582 mmol)를 함유하는 압력 플라스크를 다이클로로메탄(2.5 ml)에 용해시켰다. 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(309 mg, 1.46 mmol) 및 아세트산(0.1 ml, 1.75 mmol)을 첨가하고, 이어서 플라스크를 질소 분위기 하에 빙욕에서 냉각하였다. 아제티딘(0.24 ml, 3.49 mmol)을 첨가하고, 플라스크를 밀봉하였다. 플라스크를 50℃로 가열된 오일욕에 두고, 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 주위 온도로 냉각하고, 다이클로로메탄(50 ml) 및 수성 나트륨 바이카보네이트(50 ml)의 포화 용액에 용해시켰다. 물질을 분별 깔때기에 옮기고, 진탕시켰다. 유기상을 수집하고, 50%의 희석된 염수(50 ml)의 용액으로 세척하였다. 다이클로로메탄 상을 수집하고, 수성상을 메틸렌 클로라이드(2 x 40 ml)로 역추출하였다. 합친 유기상을 건조시키고(마그네슘 설페이트), 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 조질 잔류물을 2개의 분취용 TLC 플레이트 상에 담지시키고, 8% 메탄올/다이클로로메탄으로 용리하였다. 생성물 밴드를 수집하여 목적하는 생성물을 연한 백갈색 분말(139 mg)로서 수득하였다. (M+H)+ = 364 m/e.
단계 3.
아세트산 2-{5-[5-(2-아제티딘-1-일-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-6-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-벤질 에스터의 제조
Figure 112013020897408-pct00129
I-6의 단계 7에 기재된 절차를 사용하여, 아세트산 2-{5-[5-(2-아제티딘-1-일-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-6-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-벤질 에스터를 제조하였다. 후처리 후, 물질을 8%의 메탄올/다이클로로메탄으로 용리하는 분취용 TLC(3 플레이트)로 정제하여, 목적하는 생성물을 연갈색 점성 오일(238 mg)로서 수득하였다. (M+H)+ = 696 m/e.
실시예 13
단계 4.
2-(3-{5-[5-(2-아제티딘-1-일-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-6-3급-부틸-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00130
I-6의 단계 8에 기재된 절차를 사용하여, 2-(3-{5-[5-(2-아제티딘-1-일-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-6-3급-부틸-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온을 제조하였다. 후처리 후, 생성물을 3%의 메탄올/메틸렌 클로라이드로 용리하는 실리카 겔 상에서 분취용 TLC로 정제한 후, 5%, 8%, 마지막으로 11% 메탄올/메틸렌 클로라이드로 재전개시켰다. 목적하는 생성물을 연갈색 분말(96 mg)로서 수득하였다. (M+H)+ = 654 m/e. 1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.21(s, 6 H) 1.40(s, 9 H) 2.11(quin, J = 7.20 Hz, 2 H) 2.58(s, 2 H) 3.35(t, J=6.99 Hz, 4 H) 3.87(s, 3 H) 4.40(s, 2 H) 6.90(d, J=9.06 Hz, 1 H) 7.29(dd, J=8.88, 2.83 Hz, 1 H) 7.39-7.69(m, 5 H) 8.04(d, J=2.64 Hz, 1 H) 8.27(d, J=2.64 Hz, 1 H) 8.32(s, 1 H) 8.51(s, 1 H).
반응식 C
I-14의 제조
Figure 112013020897408-pct00131
이 실시예는 "6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{5-[5-(2-하이드록시-2-메틸-프로폭시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온"의 합성을 예시한다.
단계 1.
1-(6-아미노-피리딘-3-일옥시)-2-메틸-프로판-2-올의 제조
Figure 112013020897408-pct00132
무수 다이메틸포름아마이드(17 ml) 중의 6-아미노피리딘-3-올 하이드로브로마이드(700 mg, 3.66 mmol) 및 1-클로로-2-메틸-2-프로판올(597 mg, 5.5 mmol)을 함유한 마이크로파 플라스크에 세슘 카보네이트(3.7 g, 11.4 mmol)를 첨가하고, 물질을 마이크로파 오븐에서 140℃에서 3시간 동안 가열하였다. 바이알을 주위 온도로 냉각하고, 용매를 진공에서 농축시켰다(회전 증발기/기계 펌프). 잔류물을 메틸렌 클로라이드에 용해시키고, 여과하여 불용성 물질을 제거하고, 메틸렌 클로라이드로 세척하였다. 조질 물질을 2 내지 10%의 메탄올/메틸렌 클로라이드의 구배로 용리하는 실리카 겔 상에서 HPLC로 정제하여 목적하는 생성물을 주황색-갈색 점성의 오일로서 수득하고, 이를 고체화시켰다(449 mg). MS(H+)=183 m/e.
단계 2.
6-클로로-4-[5-(2-하이드록시-2-메틸-프로폭시)-피리딘-2-일아미노]-2-메틸-2H-피리다진-3-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00133
I-6의 단계 6에 기재된 절차를 사용하여, 6-클로로-4-[5-(2-하이드록시-2-메틸-프로폭시)-피리딘-2-일아미노]-2-메틸-2H-피리다진-3-온을 제조하였다. 조질 생성물을 4.5%의 메탄올/메틸렌 클로라이드로 용리하는 분취용 박층 크로마토그래피(3 플레이트)로 정제하여 목적하는 생성물을 연황색 분말(392 mg)로서 수득하였다. (M+H)+ = 325 m/e.
단계 3.
아세트산 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-6-{5-[5-(2-하이드록시-2-메틸-프로폭시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-벤질 에스터의 제조
Figure 112013020897408-pct00134
단계 7, 실시예 I-6의 딘계 7에 기재된 유사한 조건 하에, 6-클로로-4-[5-(2-다이메틸아미노-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-2-메틸-2H-피리다진-3-온 대신 6-클로로-4-[5-(2-하이드록시-2-메틸-프로폭시)-피리딘-2-일아미노]-2-메틸-2H-피리다진-3-온으로 대체하여 이 반응을 수행하였다. 후처리 후, 생성물을 5%의 메탄올/메틸렌 클로라이드로 용리하는 분취용 박층 크로마토그래피(2 플레이트)로 정제하였다. 목적하는 생성물(일부 des-아세틸 생성물과 함께)을 연황색 분말(284 mg)로서 수득하였다.
(M+H)+ = 657 m/e.
실시예 14
단계 4.
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{5-[5-(2-하이드록시-2-메틸-프로폭시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00135
실시예 I-6의 단계 8에 기재된 유사한 조건 하에 이 반응을 수행하였다. 후처리 후, 생성물을 3.5%의 메탄올/메틸렌 클로라이드로 용리하는 분취용 박층 크로마토그래피(2 플레이트)로 정제하였다. 이어서, 플레이트를 5%의 메탄올/메틸렌 클로라이드로 재전개시켰다. 목적하는 생성물을 연황색 고체(195 mg)로서 수득하였다. (M+H)+ = 615 m/e. 1H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.16(s, 6H) 1.37(s, 9 H) 3.72(s, 2 H) 3.76(s, 3 H) 4.32-4.46(m, 2 H) 4.51-4.59(m, 1 H) 4.61(s, 1 H) 7.39(dd, J=8.69, 3.02 Hz, 1 H) 7.43-7.57(m, 4 H) 7.69-7.78(m, 1 H) 7.86(br. s, 1 H) 8.02(d, J=2.64 Hz, 1 H) 8.39(s, 1 H) 8.50(d, J=2.64 Hz, 1 H) 9.31(s, 1 H).
반응식 D
I-15의 제조
Figure 112013020897408-pct00136
이 실시예는 "2-[8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-(모폴린-4-카본일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-1-옥소-1,2-다이하이드로-이소퀴놀린-6-일]-2-메틸-프로피오니트릴"의 합성을 예시한다.
단계 1.
2,4,6-트라이플루오로-N-(2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-벤자마이드의 제조
Figure 112013020897408-pct00137
칼슘 클로라이드 건조 튜브가 장착된 플라스크에 2,4,6-트라이플루오로벤조산(25 g, 142 mmol)을 충전시키고, 무수 다이클로로메탄(220 mL)에 용해시켰다. 물질을 0℃(빙욕)로 냉각하고, 여기에 옥살일 클로라이드(13.2 ml; 156 mmol)를 시린지로 첨가하였다. 이어서, 무수 다이메틸포름아마이드(104 mg; 1.42 mmol)를 첨가하였더니, 적당한 거품이 관찰되었다. 15분 후, 냉욕을 제거하고, 혼합물을 5시간 동안 강하게 교반하였다. 휘발물을 진공에서 농축시키고(회전 증발기), 잔류물을 무수 다이클로로메탄(150 ml)에 용해시키고, 0℃(빙욕)로 냉각하였다. 이 용액에 2-아미노-2-메틸-1-프로판올(27.2 ml, 284 mmol)을 천천히 적가하였다. 완전하게 첨가한 후, 냉욕을 제거하고, 혼합물을 밤새 주위 온도로 가온하였다.
동일한 범위 상에서 반복되는 상기 기재된 바와 같은 반응물, 및 합친 반응 생성물을 하기와 같이 후처리 하였다: 비균질 혼합물을 흡수 여과시키고, 다이클로로메탄(약 300 ml)으로 세척하였다. 첫번째로, 이 여액을 따로 두고, 상기 고체를 느린 중력 여과를 사용하여 다이클로로메탄(500 ml)으로 2회 세척하였다. 두번째 여과로부터의 다이클로로메탄을 진공에서 농축시키고, 매우 순수한 생성물을 백색 결정질 고체(22.9 g)로서 수득하였다. 첫번째 여과로부터의 다이클로로메탄 용액을 진공에서 농축시켜 순수하지 않은 갈색 잔류물을 수득하였다. 이 물질을 다이클로로메탄(200 ml) 및 물(250 ml)에 흡수시키고, 분별 깔때기에서 진탕시켰다. 유기상을 수집하고, 수성상을 다이클로로메탄(2 x 120 ml)으로 역추출하였다. 다이클로로메탄 상을 합치고, 건조시키고(마그네슘 설페이트), 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 조질 잔류물을 뜨거운 다이클로로메탄/헥산으로 마쇄해 정제하여 추가 목적하는 생성물을 황색 고체(43.8 g)로서 수득하였다. (M+H)+ = 246 m/e.
단계 2.
4,4-다이메틸-2-(2,4,6-트라이플루오로-페닐)-4,5-다이하이드로-옥사졸의 제조
Figure 112013020897408-pct00138
무수 다이클로로메탄(400 mL) 중의 2,4,6-트라이플루오로-N-(2-하이드록시-1,1-다이메틸-에틸)-벤자마이드(43.8 g, 177.1 mmol)의 용액에 티온일 클로라이드(58.9 ml, 415 mmol)를 25분에 걸쳐 천천히 적가하였다(온도를 조절하기 위해서 첨가 중에 반응 플라스크를 빙욕 일부에 잠기게 한다). 첨가를 완료한 후, 물질을 주위 온도에서 밤새 교반하였다. 진공 하에 농축시켜 부피가 30%로 감소되었다. 여기에 에터(200 ml)를 첨가하고, 여과함으로써 고체 침전물(39.94 g 회백색 고체)을 수집하였다. 에터 여액을 따로 두고, 고체 물질을 물(120 ml)에 흡수시키고, 나트륨 하이드록사이드(2N, 55 ml)의 수성 용액으로 처리하였다. 에틸 아세테이트(120 ml)를 첨가하고, 혼합물을 분별 깔때기에 옮기고, 진탕시켰다. 유기상을 수집하고, 동일한 부피의 물로 세척하였다. 에틸 아세테이트 상을 수집하고, 수성상을 에틸 아세테이트(2 x 100 ml)로 역추출하였다. 합친 유기상을 건조시키고(마그네슘 설페이트), 여과하고, 진공에서 농축시켜 목적하는 순수한 회백색 고체(33.98 g)로서 수득하였다. (M+H)+ = 230 m/e.
단계 3.
2-(2,4-다이플루오로-6-메틸-페닐)-4,4-다이메틸-4,5-다이하이드로-옥사졸의 제조
Figure 112013020897408-pct00139
무수 테트라하이드로푸란(150 ml) 중의 4,4-다이메틸-2-(2,4,6-트라이플루오로페닐)-4,5-다이하이드로옥사졸(16.8 g, 73.3 mmol)의 냉각된(빙욕) 용액에 메틸 마그네슘 브로마이드(73.3 ml, 에터 중의 3M)의 용액을 천천히 적가하였다. 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반한 후, 6시간에 걸쳐 주위 온도로 가온하였다. 반응물을 암모늄 클로라이드(30 ml)의 추가 포화 수성 용액을 첨가함으로써 조심스럽게 켄칭하고, 물질을 물(200 ml) 및 에틸 아세테이트(150 ml)에 용해시키고, 분별 깔때기로 옮기고, 유기상을 수집하였다. 유기상을 물(200 ml)로 세척하고, 에틸 아세테이트 상을 수집하였다. 수성상을 에틸 아세테이트(2 x 120 ml)로 역추출하고, 유기상을 합치고, 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켜 목적하는 생성물을 연황색 오일(16.31 g)로서 수득하였다. (M+H)+ = 226 m/e.
단계 4.
2-[4-(4,4-다이메틸-4,5-다이하이드로-옥사졸-2-일)-3-플루오로-5-메틸-페닐]-2-메틸-프로피오니트릴의 제조
Figure 112013020897408-pct00140
아르곤 분위기 하에 무수 테트라하이드로푸란(130 ml) 중의 2-(2,4-다이플루오로-6-메틸페닐)-4,4-다이메틸-4,5-다이하이드로옥사졸(14.84 g, 65.9 mmol) 및 이소부티로니트릴(9.11 g, 132 mmol)의 용액을 함유하는 플라스크를 -15 내지 -20℃(아세토니트릴/무수 빙욕)으로 냉각하였다. 칼륨 비스(트라이메틸실릴) 아마이드(171 ml, 톨루엔 중의 0.5M)의 용액을 천천히 적가하였다. 혼합물을 -15℃에서 30분 동안 교반한 후, 약 1.5시간에 걸쳐 15℃로 가온하였다. 물질을 수성 암모늄 클로라이드(100 ml)의 포화 용액을 첨가함으로써 켄칭하였다. 물(80 ml) 및 다이에틸 에터(50 ml)를 첨가하고, 물질을 분별 깔때기에 옮기고, 유기상을 수집하였다. 이를 동등한 부피의 물로 세척하고, 유기상을 수집하였다. 수성상을 에터(2 x 100 ml)로 역추출하고, 합친 유기상을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 물질을 60%의 에틸 아세테이트/헥산으로 용리하는 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 반순수 생성물을 금색 황색 오일(18 g, 75% 순도)로서 수득하였다. 이 물질은 다음 단계에서 사용되었다. (M+H)+ = 275 m/e.
단계 5.
2-(4-(2-시아노프로필-2-일)-2-플루오로-6-메틸페닐)-3,4,4-트라이메틸-4,5-다이하이드로옥사졸-3-이움 아이오다이드의 제조
Figure 112013020897408-pct00141
무수 아세토니트릴(237 ml) 중의 2-[4-(4,4-다이메틸-4,5-다이하이드로-옥사졸-2-일)-3-플루오로-5-메틸-페닐]-2-메틸-프로피오니트릴(23.86g, 60% 순도, 52.2 mmol)의 용액에 메틸 아이오다이드(37 g, 261 mmol)를 10분에 걸쳐 적가하였다. 혼합물을 63℃로 가열된 오일욕에 옮기고, 밤새 교반하였다. 플라스크를 주위 온도로 냉각한 후, 빙욕에 두고, 고체 침전된 생성물을 디켄팅함으로써 수집하여 목적하는 생성물을 회백색 고체로서 수득하고, 이는 정치시키면 연황색(21.9 g)으로 변했다. 물질을 다음 단계에서 사용하였다.
단계 6.
4-(시아노-다이메틸-메틸)-2-플루오로-6-메틸-벤조산의 제조
Figure 112013020897408-pct00142
플라스크에 2-(4-(2-시아노프로필-2-일)-2-플루오로-6-메틸페닐)-3,4,4-트라이메틸-4,5-다이하이드로옥사졸-3-이윰 아이오다이드(21.9 g, 52.7 mmol) 및 메탄올(89 ml)을 충전시켰다. 이 슬러리에 물(178 ml) 중의 나트륨 하이드록사이드(10.5 g, 263 mmol)의 용액을 첨가하고, 80℃에서 물질을 오일욕에 가열하였다. 혼합물을 60분 동안 강하게 교반한 후, 톨루엔(120 ml)을 첨가하였다. 혼합물을 교반하고, 오일욕에서 5분 동안 진탕시켰다. 여전히 뜨거운 물질을 분별 깔때기에 옮기고, 수성상을 수집하였다. 이를 수성 1.5 N 염산(pH = 1로)으로 산성화시켰다. 에틸 아세테이트(25 ml) 및 물(5 ml)을 첨가하고, 혼합물을 분별 깔때기에 진탕시켰다. 유기상을 수집하고, 수성상을 에틸 아세테이트(2 x 40 ml)로 역추출하였다. 합친 유기상을 마그네슘 설페이트로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켜 반순수 생성물을 연황색 고체(5.4 g)로서 수득하였다. (M-H)- = 220 m/e.
단계 7.
4-(시아노-다이메틸-메틸)-2-플루오로-6-메틸-벤자마이드의 제조
Figure 112013020897408-pct00143
4-(2-시아노프로판-2-일)-2-플루오로-6-메틸벤조산(14 g, 35 mmol, 75% 순도)을 무수 테트라하이드로푸란(100 ml)에 흡수시켰다. 여기에 1,1'-카본일다이이미다졸(11.2 g, 69.1 mmol)을 4개의 동등한 분획으로 15분에 걸쳐 첨가하였다. 혼합물을 2.5시간 동안 교반한 후, 암모늄 하이드록사이드(20.4 ml)의 28% 수성 용액을 적가하였다. 물질을 4시간 동안 교반한 후, 감압 하에 농축시켜 90%의 휘발물을 제거하였다. 잔류물을 물(80 ml) 및 다이클로로메탄(80 ml)에 흡수시키고, 분별 깔때기에 진탕시켰다. 유기상을 수집하고, 수성상을 다이클로로메탄(3 x 60 ml)으로 역추출하였다. 합친 유기상을 건조시키고(마그네슘 설페이트), 여과하고, 진공에서 농축시키고, 생성된 반고체를 뜨거운 다이클로로메탄/헥산으로 마쇄함으로써 정제하여 목적하는 생성물을 약간 순수하지 않은 회백색 고체(10.71 g, 80% 순도)로서 수득하였다. (M+H)+ = 221 m/e.
단계 8.
4-(시아노-다이메틸-메틸)-N-[1-다이메틸아미노-메트-(E)-일리덴]-2-플루오로-6-메틸-벤자마이드의 제조
Figure 112013020897408-pct00144
250 ml 둥근 바닥 플라스크에 테트라하이드로푸란(61 ml) 중의 4-(2-시아노프로판-2-일)-2-플루오로-6-메틸벤자마이드(8.71 g, 31.6 mmol, 80% 순도) 및 다이메틸포름아마이드 다이메틸아세탈(7.26 ml, 51.4 mmol)을 넣어 비균질 황색 현탁액을 수득하였다. 반응 혼합물을 63℃(오일욕)로 가열하고, 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 회전 증발기 상에서 농축시킨 후, 헥산(80 ml)에 용해시켰다. 백색 침전물이 형성될 때까지, 이 혼합물을 몇 분 동안 강하게 교반하였다. 생성물을 여과함으로써 수집하고, 헥산으로 잘 세척하여 생성물을 백색 고체(7.02 g)로서 수득하였다. (M+H)+ = 276 m/e.
단계 9.
2-(8-플루오로-1-옥소-1,2-다이하이드로-이소퀴놀린-6-일)-2-메틸-프로피오니트릴의 제조
Figure 112013020897408-pct00145
4-(시아노-다이메틸-메틸)-N-[1-다이메틸아미노-메트-(E)-일리덴]-2-플루오로-6-메틸-벤자마이드(10.66 g, 38.7 mmol)를 무수 테트라하이드로푸란(100 ml)에 용해시키고, 55℃로 가열된 오일욕에 두었다. 칼륨 3급-부톡사이드(58.1 ml, 테트라하이드로푸란 중의 1M)의 용액을 15분에 걸쳐 첨가 깔때기로부터 적가하였다. 반응 혼합물을 62℃로 가열하고, 2시간 동안 교반하였다. 생성된 걸쭉한 현탁액을 주위 온도로 냉각하고, 농축된 염산(5.3 ml)을 적가 처리하였다. 물(30 ml)을 첨가하고, 물질을 분별 깔때기로 옮겼다. 유기상을 수집하고, 염수 용액(25 ml)으로 세척하였다. 수성상을 에틸 아세테이트(25 ml)로 역추출하고, 유기물을 합치고, 마그네슘 설페이트로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 뜨거운 다이클로로메탄/헥산으로 결정화시켜 목적하는 생성물을 회백색 고체(5.91 g)로서 수득하였다. (M+H)+ = 231 m/e.
단계 10.
2-[2-(3-브로모-2-포름일-페닐)-8-플루오로-1-옥소-1,2-다이하이드로-이소퀴놀린-6-일]-2-메틸-프로피오니트릴의 제조
Figure 112013020897408-pct00146
무수 다이메틸설폭사이드(8 ml) 중의 2-(8-플루오로-1-옥소-1,2-다이하이드로-이소퀴놀린-6-일)-2-메틸-프로피오니트릴(250 mg, 1.09 mmol), 2,6-다이브로모벤즈알데히드(459 mg, 1.74 mmol) 및 나트륨 바이카보네이트(182 mg, 2.17 mmol)의 용액을 진공 하에 두고, 아르곤(2회 초과로 반복)으로 역채움하였다. 여기에 구리 아이오다이드(207 mg, 1.09 mmol)를 첨가하고, 플라스크를 비우고, 아르곤(2회 초과로 반복)으로 역채움하였다. 혼합물을 오일욕에서 110℃로 가열하고, 3.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각하고, 에틸 아세테이트(40 ml) 및 물(40 ml)에 용해시켰다. 이상 물질을 셀라이트의 플러그를 통하여 여과하고, 에틸 아세테이트로 잘 세척하였다. 여액 및 세척물을 분별 깔때기에 옮기고, 유기상을 수집하였다. 이를 동일한 부피의 50%의 희석 염수 용액으로 세척하고, 에틸 아세테이트 상을 수집하였다. 수성상을 에틸 아세테이트(2 x 30 ml)로 역추출하였다. 합친 유기상을 마그네슘 설페이트로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 1%의 메탄올/다이클로로메탄으로 용리하는 실리카 겔 상의 HPLC로 정제하여 목적하는 생성물을 연황색 고체(285 mg)로서 수득하였다. (M+H)+ = 413 / 415 m/e.
단계 11.
2-[8-플루오로-2-(2-포름일-3-{1-메틸-5-[5-(모폴린-4-카본일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-1-옥소-1,2-다이하이드로-이소퀴놀린-6-일]-2-메틸-프로피오니트릴의 제조
Figure 112013020897408-pct00147
6-클로로-2-메틸-4-(5-모폴린-4-카본일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온(143 mg, 0.41 mmol), 비스(피나콜레이토)다이보론(135 mg, 0.53 mmol), 2-다이사이클로헥실포스피노-2',4',6'-트라이이소프로필바이페닐(x-phos, 29 mg, 0.061 mmol) 및 칼륨 아세테이트(120 mg, 1.23 mmol)를 무수 다이옥산(6.4 ml)에 용해시키고, 진공 하에 두고, 아르곤(5회 반복)으로 역채움하였다. 여기에 팔라듐 아세테이트(10 mg, 0.045 mmol)를 첨가하고, 플라스크를 비우고, 아르곤(5회 반복)으로 역채움하였다. 혼합물을 오일욕에서 100℃로 가열하고, 16분 동안 교반하였다. 플라스크를 주위 온도로 냉각하고, 이 플라스크의 조질 성분을 두번째 플라스크(아르곤 벌룬 하에 110℃ 오일욕에서 잠기게 함)에 여과하고(셀라이트를 통함, 3 ml 다이옥산으로 세척), 이 성분은 하기 시약의 진공 탈기된 용액을 함유한다: n-부탄올(0.5 ml), 다이옥산(2.1 ml) 및 물(2 ml)의 혼합물 중의 2-(2-(3-브로모-2-포름일페닐)-8-플루오로-1-옥소-1,2-다이하이드로이소퀴놀린-6-일)-2-메틸프로판니트릴(169 mg, 0.41 mmol), 칼륨 카보네이트(283 mg, 2.04 mmol), 트라이사이클로헥실포스핀(35.1 mg, 0.125 mmol) 및 비스(다이벤질리덴아세톤)팔라듐(35 mg, 0.061 mmol). 플라스크를 교반하고, 1시간 동안 가열한 후, 주위 온도로 냉각하였다. 조질 반응 혼합물을 셀라이트의 짧은 플러그로 여과하고, 에틸 아세테이트로 잘 세척하였다. 합친 여액 및 세척물에 물(30 ml)을 첨가하고, 물질을 분별 깔때기에 진탕시켰다. 유기상을 수집하고, 수성상을 에틸 아세테이트(2 x 20 ml)로 역추출하였다. 합친 유기상을 나트륨 설페이트로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 1 내지 9%의 메탄올/다이클로로메탄으로 용리하는 실리카 겔 상의 HPLC로 정제하여 목적하는 생성물을 연황색 고체(224 mg)로서 수득하였다. (M-H)- = 646 m/e.
실시예 15
단계 12.
2-[8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-(모폴린-4-카본일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-1-옥소-1,2-다이하이드로-이소퀴놀린-6-일]-2-메틸-프로피오니트릴의 제조
Figure 112013020897408-pct00148
메탄올(2.8 ml) 및 다이클로로메탄(4.3 ml) 중의 2-[8-플루오로-2-(2-포름일-3-{1-메틸-5-[5-(모폴린-4-카본일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-1-옥소-1,2-다이하이드로-이소퀴놀린-6-일]-2-메틸-프로피오니트릴(224 mg, 0.35 mmol)의 용액을 빙욕에서 냉각하였다. 여기에 물(0.75 ml) 중의 나트륨 보로하이드라이드(65 mg, 1.7 mmol)의 용액을 천천히 적가하였다. 혼합물을 10분 동안 교반하고, 추가의 나트륨 보로하이드라이드(상기 기재된 바와 같음)를 20분에 걸쳐 2회 초과로 첨가하였다. 수성 상부층을 이상 반응 용액으로부터 조심스럽게 제거하였다. 메탄올(1 ml)을 첨가하고, 빠르게 교반하면서 약 25분에 걸쳐 3회 초과의 수성 나트륨 보로하이드라이드(상기 기재된 바와 같음)를 첨가하였다. 물(60 ml) 및 다이클로로메탄(60 ml)을 첨가하고, 물질을 분별 깔때기에 옮기고, 유기상을 수집하였다. 이를 동등한 부피의 50% 희석 염수 용액으로 세척하고, 다이클로로메탄 상을 수집하였다. 수성상을 다이클로로메탄(2 x 40 ml)으로 역추출하였다. 합친 유기상을 마그네슘 설페이트로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 1 내지 8%의 메탄올/다이클로로메탄으로 용리하는 실리카 겔 상의 HPLC로 정제하여 목적하는 생성물을 수득하고, 이를 뜨거운 다이클로로메탄/헥산으로 결정화시킴으로써 추가로 정제하여 목적하는 생성물을 백색 고체(120 mg)로서 수득하였다. (M+H)+ = 650 m/e. 1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.81(s, 6 H) 3.53-3.81(m, 8 H) 3.83-3.91(m, 1 H) 3.92(s, 3 H) 4.26-4.45(m, 2 H) 6.62(dd, J=7.55, 1.89 Hz, 1 H) 7.00(d, J=8.31 Hz, 1 H) 7.22(dd, J=12.46, 1.89 Hz, 1 H) 7.33(d, J=7.18 Hz, 1 H) 7.42(dd, J=7.93, 1.51 Hz, 1 H) 7.53(d, J=1.89 Hz, 1 H) 7.57(t, J=7.93 Hz, 1 H) 7.65-7.70(m, 1 H) 7.78(dd, J=8.69, 2.27 Hz, 1 H) 8.41-8.47(m, 2 H) 8.70(s, 1 H).
반응식 E
I-16의 제조
Figure 112013020897408-pct00149
이 실시예는 "6-3급-부틸-8-플루오로-2-(3-{5-[5-((S)-2-하이드록시-3-메톡시-프로폭시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-2H-프탈라진-1-온"의 합성을 예시한다.
단계 1.
2-클로로-5-((S)-1-옥시란일메톡시)-피리딘의 제조
Figure 112013020897408-pct00150
250 mL의 둥근 바닥 플라스크에, 6-클로로피리딘-3-올(2.116 g, 16.3 mmol), 트라이페닐포스핀(5.14 g, 19.6 mmol) 및 (R)-옥시란-2-일메탄올(1.21 g, 1.08 ml, 16.3 mmol)을 THF(75.0 ml)와 합쳐 무색 용액을 수득하였다. 0℃로 냉각하였다. DEAD(3.41 g, 3.1 ml, 19.6 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물이 25℃에 이르고, 30시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축시켰다. 조질 생성물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 80 g, 헥산 중의 5 내지 25%의 EtOAc), 이어서 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 40 g, DCM 중의 0.5 내지 1%의 MeOH)로 정제하여 목적하는 생성물(1.8 g, 59%)을 백색 고체로서 수득하였다. (M+H)+ = 186 m/e.
단계 2.
(S)-1-(6-클로로-피리딘-3-일옥시)-3-메톡시-프로판-2-올의 제조
Figure 112013020897408-pct00151
125 mL의 둥근 바닥 플라스크에, (S)-2-클로로-5-(옥시란-2-일메톡시)피리딘(1.8 g, 9.7 mmol)을 MeOH(5.88 ml)와 합쳐 무색 용액을 수득하였다. 0℃로 냉각하였다. 보론 트라이플루오라이드 에터에이트(138 mg, 123 μl, 970 μmol)를 첨가하였다. 실온으로 가온하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 조질 반응 혼합물을 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 80 g, 헥산 중의 0 내지 60%의 EtOAc)로 정제하여 목적하는 생성물(1.37 g, 68%)을 오일로서 수득하였다. (M+H)+ = 218 m/e.
단계 3.
5-[(S)-2-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시)-3-메톡시-프로폭시]-피리딘-2-일아민의 제조
Figure 112013020897408-pct00152
(S)-1-(6-클로로피리딘-3-일옥시)-3-메톡시프로판-2-올(1.37 g, 6.29 mmol) 및 이미다졸(857 mg, 12.6 mmol)을 DMF(20 ml)와 합쳤다. DMAP(115 mg, 944 μmol), 이어서 TBDMS-Cl(1.23 g, 8.18 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 25℃에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 150 mL 물에 붓고, 다이에틸 에터(4 x 100 mL)로 추출하였다.
유기 추출물을 염수로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 40 g, 헥산 중의 0 내지 15%의 EtOAc)로 정제하여 1.81g의 (S)-5-(2-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-3-메톡시프로폭시)-2-클로로피리딘(5.4 mmol)을 수득하고, 이를 밀봉된 튜브에서 14 mL의 THF에 용해시켰다. 여기에 2-(다이사이클로헥실포스피노)바이페닐(380 mg, 1.08 mmol)을 첨가하여 연황색 용액을 수득하였다. 이 용액을 아르곤으로 탈기시켰다. 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(497 mg, 542 μmol), 이어서 LiHMDS(THF 중의 16.3 ml의 1M 용액, 16.3 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 아르곤 분위기 하에 두고, 밀봉하였다. 반응 혼합물을 90℃로 가열하고, 15시간 동안 교반하였다. 반응을 LCMS에 의해 완료시켰다. 혼합물을 냉각하고, EtOAc로 희석하였다. 반응 혼합물을 150 mL의 포화 NH4Cl에 붓고, EtOAc(4 x 75 mL)로 추출하였다. 유기층을 MgSO4 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 단계적 구배(실리카 겔, 80 g, 헥산 중의 20 내지 70%의 EtOAc)를 갖는 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 목적하는 생성물(1.09g)을 수득하였다. (M+H)+ = 313 m/e.
단계 4.
4-{5-[(S)-2-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시)-3-메톡시-프로폭시]-피리딘-2-일아미노}-6-클로로-2-메틸-2H-피리다진-3-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00153
50 mL의 둥근 바닥 플라스크에, (S)-5-(2-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-3-메톡시프로폭시)-피리딘-2-아민(340 mg, 1.09 mmol), 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(292 mg, 1.31 mmol) 및 세슘 카보네이트(1.06 g, 3.26 mmol)를 다이옥산(25 ml)과 합쳐 주황색 현탁액을 수득하였다. 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(94.4 mg, 163 μmol), 이어서 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(49.8 mg, 54.4 μmol)을 첨가하였다. 반응 용액을 10분 동안 아르곤으로 탈기시키고, 48시간 동안 95 내지 105℃로 가온하였다.
생성된 반응 혼합물을을 200 ml DCM으로 희석하였다. MgSO4를 첨가하였다. 현탁액을 여과하고, DCM으로 수회 세척하였다. 합친 여액 및 세척물을 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 40 g, 헥산 중의 10 내지 25%의 EtOAc)로 정제하여 목적하는 생성물(451 mg, 91%)을 백색 고체로서 수득하였다. (M+H)+ = 455 m/e.
단계 5.
6-3급-부틸-2-[3-(5-{5-[(S)-2-(3급-부틸-다이메틸-실란일옥시)-3-메톡시-프로폭시]-피리딘-2-일아미노}-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일)-2-하이드록시메틸페닐]-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00154
50 mL의 시험 튜브에, (S)-4-(5-(2-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-3-메톡시프로폭시)피리딘-2-일아미노)-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(178 mg, 391 μmol) 및 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질 아세테이트(332 mg, 469 μmol)를 n-부탄올(4 ml)에 합쳐 주황색 용액을 수득하였다. 1 mL의 물을 첨가하고, 반응 혼합물을 아르곤으로 퍼지하였다. X-PHOS(18.6 mg, 39.1 μmol) 및 칼륨 포스페이트 3 염기성(166 mg, 782 μmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 5분 동안 아르곤 버블링 한 후, 비스(다이벤질리덴아세톤)-팔라듐(0)(11.2 mg, 19.6 μmol)을 첨가하였다. 생성된 현탁액을 110℃에서 1.5시간 동안 오일욕에서 가열하였다. No(S)-4-(5-(2-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-3-메톡시프로폭시)-피리딘-2-일아미노)-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온은 LCMS에 의해 남아있었다. 2개의 주요 생성물은 LCMS, 아세틸화된 및 탈아세틸화된 생성물에 의해 관찰된다. 반응 혼합물을 밤새 25℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 작은 부피로 농축시키고, 75 mL의 물에 붓고, EtOAc(3 x 75 mL)로 추출하였다. 유기층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 24g, 헥산 중의 20 내지 60%의 EtOAc)로 정제하여 2개의 생성물 피크를 수득하였다. 이들을 합치고, 농축시켜 290 mg의 아세틸화된 및 탈아세틸화된 생성물의 1:1 혼합물을 수득하였다. 이 혼합물을 15 mL THF에 용해시키고, 2 mL의 1N NaOH로 처리하였다. 반응 혼합물을 60℃로 가열하고, 20시간 동안 교반하였다. TLC로 측정시 거의 완료되었다. 반응 혼합물을 100 mL 물에 붓고, EtOAc(3 x 50 mL)로 추출하였다. 합친 유기 추출물을 염수로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 40 g, 헥산 중의 20 내지 70%의 EtOAc)로 정제하여 217 mg의 목적하는 생성물(75% 수율)을 수득하였다. (M+H)+ = 745 m/e.
실시예 16
단계 6.
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(3-{5-[5-((S)-2-하이드록시-3-메톡시-프로폭시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-2H-프탈라진-1-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00155
100 mL의 둥근 바닥 플라스크에, (S)-6-3급-부틸-2-(3-(5-(5-(2-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)-3-메톡시프로폭시)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)-2-(하이드록시메틸)페닐)-8-플루오로프탈라진-1(2H)-온(214 mg, 287 μmol, Eq: 1.00)을 THF(6.0 ml)와 합쳐 황색 용액을 수득하였다. TBAF(THF 중의 500 μl의 1M 용액, 500 μmol)를 첨가하고, 생성된 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 LCMS에 의해 완료시켰다. 반응 혼합물을 75 mL의 물에 붓고, EtOAc(1 x 75 mL)로 추출하였다. 에멀젼이 생성되었다. 포화 NaCl을 첨가하고, EtOAc 층을 분리하였다. DCM으로 2회 추출하였다. LCMS에 의해 수성 상에는 생성물이 남아있지 않았다. 유기상을 합치고, MgSO4 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 24g, DCM 중의 0.5 내지 4%의 MeOH)로 정제하여 유리를 수득하였다. 유리를 EtOAc/헥산에 용해시키고, 농축시켜 반고체를 수득하고, 이를 에터로 마쇄하였다. 생성된 백색 고체를 에터/헥산으로 세척하여 112 mg의 순수한 생성물을 백색 분말로서 수득하였다. (M+H)+ = 631 m/e. 1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.44(s, 9 H) 3.44(s, 3 H) 3.53-3.64(m, 2 H) 3.91(s, 3 H) 4.03-4.11(m, 2 H) 4.13-4.22(m, 1 H) 4.42(s, 2 H) 6.98(d, J=8.69 Hz, 1 H) 7.28-7.35(m, 1 H) 7.43-7.62(m, 4 H) 7.64-7.69(m, 1 H) 8.06(d, J=3.02 Hz, 1 H) 8.27-8.32(m, 2 H) 8.48(s, 1 H)
실시예 17
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(3-{5-[5-((R)-2-하이드록시-3-메톡시-프로폭시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-2H-프탈라진-1-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00156
실시예 16과 유사한 절차를 따르되, 단계 1에서 (R)-옥시란-2-일메탄올을 (S)-옥시란-2-일메탄올로 대체하는 것을 제외하고, 목적하는 생성물을 백색 분말(107 mg)로서 수득하였다. (M+H)+ = 631 m/e. 1H NMR(400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.44(s, 9 H) 3.44(s, 3 H) 3.53-3.63(m, 2 H) 3.91(s, 3 H) 4.02-4.12(m, 2 H) 4.14-4.22(m, 1 H) 4.42(s, 2 H) 6.99(d, J=8.78 Hz, 1 H) 7.32(dd, J=9.03, 3.01 Hz, 1 H) 7.45-7.61(m, 4 H) 7.64-7.69(m, 1 H) 8.06(d, J=2.76 Hz, 1 H) 8.29(d, J=2.51 Hz, 1 H) 8.32(s, 1 H) 8.47(s, 1 H)
반응식 F
I-18의 제조
Figure 112013020897408-pct00157
이 실시예는 "6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-((S)-1-메틸-피롤리딘-2-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온"의 합성을 예시한다.
단계 1.
2-클로로-5-((S)-1-메틸-피롤리딘-2-일)-피리딘의 제조
Figure 112013020897408-pct00158
100 mL의 둥근 바닥 플라스크를 아르곤 분위기 하에 두고, 진공에서 아르곤을 탈기시켰다. 용매(헥산(4 ml) 및 톨루엔 12 ml))를 플라스크에 첨가하였다. N,N-다이메틸에탄올아민(1.07 g, 1.21 ml, 12.0 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각하였다. N-부틸 리튬(헥산 중의 8.66 ml의 2.5M, 21.6 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 -20℃로 냉각하였다. (S)-3-(1-메틸피롤리딘-2-일)피리딘(650 mg, 0.64 ml, 4.01 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 -20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 -78℃로 냉각하고, 헥사클로로에탄(3.8 g, 16.0 mmol)을 톨루엔(8 ml)에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 -78℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 포화 NaHCO3(4 mL)로 켄칭하였다. LCMS는, 반응물은 목적하지 않는 6-클로로 피리딘 생성물 상에서 6:1의 비율의 목적하는 구조 이성질체를 수득하는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 50 mL의 물에 붓고, DCM(3 x 125 mL)으로 추출하였다. 유기층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다.
조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 40g, 헥산 중의 0 내지 55%의 EtOAc)로 정제하여 목적하는 생성물(467 mg, 59%)을 수득하였다. 1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.56-2.05(m, 3 H) 2.16-2.40(m 및 중첩 s, 5 H) 3.09(t, J=8.31 Hz, 1 H) 3.17-3.29(m, 1 H) 7.23-7.32(m, 1 H) 7.68(dd, J=8.12, 2.45 Hz, 1 H) 8.30(d, J=2.27 Hz, 1 H)
단계 2.
5-((S)-1-메틸-피롤리딘-2-일)-피리딘-2-일아민의 제조
Figure 112013020897408-pct00159
75 mL의 밀봉된 튜브에, (S)-2-클로로-5-(1-메틸피롤리딘-2-일)피리딘(622 mg, 3.16 mmol) 및 2-(다이사이클로헥실포스피노)바이페닐(222 mg, 633 μmol)을 THF(15 ml)와 합쳐 연황색 용액을 수득하였다. 용액을 아르곤으로 탈기시켰다. 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(290 mg, 316 μmol)을 첨가하였다. LiHMDS(THF 중의 9.49 ml의 1M 용액, 9.49 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 아르곤 분위기 하에 두고, 밀봉하였다. 반응 혼합물을 90℃로 가열하고, 15시간 동안 교반하였다. 활성으로 반응을 완료시켰다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, EtOAc로 희석하였다. 반응 혼합물을 150 mL의 포화 NH4Cl에 붓고, EtOAc(4 x 75 mL)로 추출하였다. 유기층을 MgSO4 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 단계적 구배(실리카 겔, 40 g, 10 내지 50%(60:10:1 = CH2Cl2:메탄올:NH4OH)/CH2Cl2)를 갖는 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 목적하는 생성물(560 mg, 99%)을 수득하였다. 1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.57-2.03(m, 3 H) 2.04-2.39(m 및 중첩된 s, 5 H) 2.92(t, J=8.12 Hz, 1 H) 3.14-3.29(m, 1 H) 4.40(br. s., 2 H) 6.51(d, J=8.69 Hz, 1 H) 7.47(dd, J=8.31, 2.27 Hz, 1 H) 7.95(d, J=2.27 Hz, 1 H)
단계 3.
6-클로로-2-메틸-4-[5-((S)-1-메틸-피롤리딘-2-일)-피리딘-2-일아미노]-2H-피리다진-3-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00160
50 mL의 둥근 바닥 플라스크에, 5-((S)-1-메틸-피롤리딘-2-일)-피리딘-2-일아민(560 mg, 3.16 mmol) ], 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(847 mg, 3.79 mmol) 및 세슘 카보네이트(3.09 g, 9.48 mmol)를 다이옥산(25 ml)과 합쳐 주황색 현탁액을 수득하였다. 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(274 mg, 474 μmol, Eq: 0.15), 이어서 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(145 mg, 158 μmol, Eq: 0.05)을 첨가하였다. 반응물을 아르곤으로 10분 동안 탈기시키고, 4시간 동안 95 내지 105℃에서 가열하였다. 아닐린 출발 물질이 남지 않았다. 반응 혼합물을 200 ml의 DCM로 희석하였다. MgSO4를 첨가하고, 교반하였다. 반응물을 여과하고, 여과케익을 DCM으로 수회 세척하였다. 합친 여액 및 세척물을 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 40 g, DCM 중의 1 내지 2%의 MeOH)로 정제하여 목적하는 생성물(522 mg, 52%)을 수득하였다. (M+H)+ = 320 m/e.
실시예 18
단계 4.
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-((S)-1-메틸-피롤리딘-2-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00161
50 mL의 둥근 바닥 플라스크에, (S)-6-클로로-2-메틸-4-(5-(1-메틸피롤리딘-2-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온(125 mg, 0.39 mmol) 및 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질 아세테이트(331 mg, 468 μmol)를 BuOH(4ml)와 합쳐 주황색 용액을 수득하였다. 1 mL의 물을 첨가하였다. 아르곤으로 퍼지하였다. X-PHOS(18.6 mg, 39.0 μmol) 및 칼륨 포스페이트 3 염기성(166 mg, 780 μmol)을 첨가하였다. 10분 동안 아르곤 버블링 하였다. 비스(다이벤질리덴아세톤)-팔라듐(0)(11.2 mg, 19.5 μmol)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 아르곤으로 퍼지하고, 오일욕에서 110℃에서 1.5시간 동안 가온하였다. 2개의 주요 생성물은 LCMS, 아세틸화된 및 탈아세틸화된 생성물에 의해 관찰된다. 반응물을 밤새 실온으로 냉각한 후, 작은 부피로 농축시켰다. 반응 혼합물을 75 mL의 물에 붓고, EtOAc(3 x 75 mL)로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 24g, DCM 중의 1 내지 5%의 MeOH)로 정제하여 2개의 피크를 수득하였다. 2개의 피크를 합치고, 농축시켜 238 mg의 아세틸화된 및 탈아세틸화된 생성물의 1:1 혼합물을 수득하였다. 이 혼합물을 15 mL의 THF에 용해시키고, 2 mL의 1N NaOH로 처리하였다. 반응 혼합물을 60℃로 가열하고, 25시간 동안 교반하였다. TCL로 측정시 반응이 거의 완료되었다. 반응 혼합물을 100 mL의 물에 붓고, EtOAc(2 x 50 mL) 및 DCM(1X)으로 추출하였다. 수성 상에서 생성물이 남지 않았다. 합친 유기 추출물을 염수로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 24g, DCM 중의 1 내지 5%의 MeOH)로 2회 정제한 후, 에틸 아세테이트/헥산으로 마쇄하여 57 mg의 순수한 생성물을 수득하였다. (M+H)+ = 610 m/e.
실시예 19
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-((R)-1-메틸-피롤리딘-2-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00162
실시예 18의 유사한 절차에 따르되, 단계 1에서 (S)-3-(1-메틸피롤리딘-2-일)피리딘을 (R)-3-(1-메틸피롤리딘-2-일)피리딘으로 대체하는 것을 제외하여 목적하는 생성물을 백색 분말(78 mg)로서 수득하였다. (M+H)+ = 610 m/e.
I-20의 제조
단계 1.
6-아자이도-N,N-다이메틸-니코틴아마이드의 제조
Figure 112013020897408-pct00163
500 mL의 둥근 바닥 플라스크에, 6-클로로-N,N-다이메틸니코틴아마이드(8.15 g, 44.1 mmol)를 DMF(50.0 ml)와 합쳐 갈색 용액을 수득하였다. 나트륨 아자이드(3.44 g, 53.0 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 120℃로 가열하고, 60시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 100 mL의 물로 희석하고, EtOAc(2 x 200 mL)로 추출하였다. 유기상을 합치고, 물(1 x 50 mL) 및 포화 NaCl(1 x 100 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켜 황색 오일을 수득하였다. MeOH를 첨가하고, 모든 혼합물을 농축시켜 고체화시켰다. 조질 생성물을 진공 하에 밤새 건조시켰다. 걸쭉한 고체를 EtOAc/Hex로부터 재결정화시켰다. 고체를 여과하고, 최소량의 헥산으로 세척하였다. 백색 분말을 45℃에서 3시간 동안 진공 하에 건조시켜 2.23 g(26%)의 표제 화합물을 수득하였다. 1H NMR(300MHz, 클로로포름-d) δ: 8.95(s, 1H), 8.09(d, J = 9.1 Hz, 1H), 7.75(dd, J = 9.1, 1.5 Hz, 1H), 3.15(br. s., 6H).
단계 2.
6-아미노-N,N-다이메틸-니코틴아마이드의 제조
Figure 112013020897408-pct00164
250 mL의 둥근 바닥 플라스크에, 6-아자이도-N,N-다이메틸니코틴아마이드(2.26 g, 11.8 mmol)를 에틸 아세테이트(50 ml) 및 메탄올(30 ml)과 합쳐 황색 용액을 수득하였다. 10% Pd/C(200 mg, 1.88 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 비우고, 수소 기체로 2회 채웠다. 반응 혼합물을 H2의 벌룬 압력 하에 25℃에서 17시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통하여 여과하고, 여과 케익을 MeOH로 세척하였다. 여액을 진공에서 농축시키고, 크림색 고체를 진공 하에 45℃에서 3시간 동안 건조시켜 정량적 수율의 표제 화합물을 수득하였다. (M+H)+ = 166 m/e. 1H NMR(300MHz, 클로로포름-d) δ: 8.21(d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.59(dd, J = 8.3, 2.3 Hz, 1H), 6.50(d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.69(br. s., 2H), 3.08(s, 6H).
단계 3.
아세트산 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-6-[5-(5-다이메틸카바모일-피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일]-벤질 에스터의 제조
Figure 112013020897408-pct00165
250 mL의 둥근 바닥 플라스크에, 6-(6-클로로-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)-N,N-다이메틸니코틴아마이드(1.053 g, 3.42 mmol), 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질 아세테이트(2.2 g, 4.45 mmol) 및 Cs2CO3(3.34 g, 10.3 mmol)를 다이옥산(20 ml) 및 물(2.00 ml)과 합쳐 암갈색 현탁액을 수득하였다. 현탁액을 아르곤으로 퍼지하고, PdCl2(DPPF)(83.8 mg, 103 μmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 85℃로 가열하고, 3시간 동안 교반하였다. 25℃로 냉각하고, DCM으로 희석하였다. Na2SO4를 첨가하고, 혼합물을 셀라이트를 통하여 여과하였다. 투명하고, 갈색인 여액을 진공에서 농축시킬 때까지, 여과 케익을 DCM으로 세척하였다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 220 g, DCM 중의 0 내지 5%의 MeOH)로 정제하였다. 생성물을 순수하지 않은 채로 단리되어, 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 220 g, 100% EtOAc)로 다시 정제하여 1.1412 g(52%)의 표제 화합물을 크림색 고체로서 수득하였다. (M+H)+ = 640 m/e.
실시예 20
단계 4.
6-{6-[3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-2-하이드록시메틸-페닐]-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노}-N,N-다이메틸니코틴아마이드의 제조
Figure 112013020897408-pct00166
500 mL의 둥근 바닥 플라스크에, 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(5-(5-(다이메틸카바모일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)벤질 아세테이트(1.142 g, 1.79 mmol)를 다이옥산(25 ml) 및 1M LiOH(10 ml)와 합쳐 연황색 현탁액을 수득하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 17시간 동안 교반하였다. 조질 반응 혼합물을 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 DCM와 물 사이에 분배하였다. 에멀젼을 수득하고, 수성상을 DCM로 완전히 추출하였다. 유기층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 120 g, DCM 중의 0 내지 4%의 MeOH)로 정제하여 0.471 g(44%)의 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. (M+H)+ = 598 m/e. 1H NMR(300MHz, 클로로포름-d) δ: 8.68(s, 1H), 8.46(d, J = 2.6 Hz, 2H), 8.29(d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.79(dd, J = 8.3, 2.3 Hz, 1H), 7.64-7.69(m, 1H), 7.53-7.63(m, 3H), 7.50(t, J = 2.1 Hz, 1H), 7.47(d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.00(d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.43(s, 2H), 3.92(s, 3H), 3.11(s, 6H), 1.43(s, 9H).
I-21의 제조
단계 1.
6-클로로-4-[5-(4-하이드록시-4-메틸-피페리딘-1-카본일)-피리딘-2-일아미노]-2-메틸-2H-피리다진-3-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00167
250 mL의 둥근 바닥 플라스크에, 6-(6-클로로-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)니코틴산(195 mg, 695 μmol), 4-메틸피페리딘-4-올(80.0 mg, 695 μmol), HOBT(138 mg, 903 μmol) 및 후니히 염기(269 mg, 364 μl, 2.08 mmol)를 DMF(13 ml)와 합쳐 연황색 현탁액을 수득하였다. EDC(173 mg, 903 μmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 100℃로 가열하고, 24시간 동안 교반하였다. 추가의 4-메틸피페리딘-4-올(80.0 mg, 695 μmol), HOBT(106 mg, 695 μmol) 및 EDC(133 mg, 695 μmol)를 2 ml DMF와 함께 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃로 가열하고, 24시간 동안 교반하였다. 반응물을 25℃로 냉각하고, 물로 켄칭하였다. 수성층을 EtOAc(3 x 75 mL)로 역추출하였다. 유기상을 합치고, 포화 NaCl(1 x 50 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 DCM/MeOH(9:1)에 용해시키고, 여과하였다. 여액을 진공에서 농축시켜 연황색 고체를 수득하였다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 12 g, DCM 중의 0 내지 10%의 MeOH)로 정제하여 0.033 g(13%)의 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다. (M+H)+ = 378/380 m/e.
단계 2.
아세트산 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-6-{5-[5-(4-하이드록시-4-메틸-피페리딘-1-카본일)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-벤질 에스터의 제조
Figure 112013020897408-pct00168
10 mL의 마이크로파 바이알에 다이옥산(5 ml) 및 물(0.5 ml) 중의 6-클로로-4-(5-(4-하이드록시-4-메틸피페리딘-1-카본일)피리딘-2-일아미노)-2-메틸피리다진-3(2H)-온(33 mg, 87.3 μmol), 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질 아세테이트(56.1 mg, 114 μmol) 및 Cs2CO3(99.6 mg, 306 μmol)를 첨가하였다. 상기 황색 현탁액을 아르곤으로 퍼지하고, PdCl2(DPPF)(7.13 mg, 8.73 μmol)를 첨가하였다. 바이알을 캡핑하고, 마이크로파에서 125℃에서 30분 동안 가열하였다. 반응물을 25℃로 냉각하고, DCM으로 희석하였다. Na2SO4를 첨가하고, 혼합물을 셀라이트를 통하여 여과하였다. 투명한 황색 여액을 진공 하에 건조시킬 때까지, 여과 케익을 DCM으로 세척하여 표제 화합물을 정량적 수율의 갈색 고체로서 수득하였다. (M-H)+ = 708 m/e.
실시예 21
단계 3.
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{5-[5-(4-하이드록시-4-메틸-피페리딘-1-카본일)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00169
250 mL의 둥근 바닥 플라스크에, 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(5-(5-(4-하이드록시-4-메틸피페리딘-1-카본일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)벤질 아세테이트(62 mg, 87.4 μmol)를 다이옥산(5 ml) 및 1M LiOH(1 ml)와 합쳐 갈색 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 5시간 동안 교반하였다. 조질 반응 혼합물을 진공에서 농축시키고, DCM과 물 사이에 분배하였다. 수성층을 DCM(2 x 25 mL)으로 역추출하였다. 유기상을 합치고, 포화 NaCl(1 x 10 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 24 g, DCM 중의 0 내지 8%의 MeOH)로 정제하고, 회백색 분말로서 단리시키고, 진공 하에 25℃에서 3시간 동안 건조시켰다. 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 24 g, DCM 중의 0 내지 4%의 MeOH)로 다시 정제하여 0.008 g(14%)의 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. (M+H)+ = 668 m/e. 1H NMR(300MHz, 클로로포름-d) δ: 8.69(s, 1H), 8.39-8.47(m, 2H), 8.29(d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.75(dd, J = 8.5, 2.1 Hz, 1H), 7.43-7.70(m, 5H), 6.99(d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.43(br. s., 2H), 3.91(s, 3H), 3.20-3.87(m, 4H), 1.65(br. s., 6H)1.43(s, 9H).
I-22의 제조
단계 1.
6-(6-니트로-피리딘-3-일)-2,6-다이아자-스피로[3.3]헵탄-2-카복실산 3급-부틸 에스터의 제조
Figure 112013020897408-pct00170
25 mL의 배모양 플라스크에, 3급-부틸 2,6-다이아자스피로[3.3]헵탄-2-카복실레이트(2.81 g, 14.2 mmol), 5-브로모-2-니트로피리딘(2.88 g, 14.2 mmol), 및 TEA(1.58 g, 2.17 ml, 15.6 mmol)를 DMSO(12 ml)와 합쳐 연황색 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 90℃로 가열하고, 40시간 동안 교반하였다. 25℃로 냉각하고, 반응 혼합물을 50 mL의 물로 희석하고, EtOAc(3 x 50 mL)로 추출하였다. 유기상을 합치고, 포화 NaCl(1 x 50 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 보라색 오일을 조질로서 다음 단계에서 사용하였다. (M+H)+ = 321 m/e.
단계 2.
6-(6-아미노-피리딘-3-일)-2,6-다이아자-스피로[3.3]헵탄-2-카복실산 3급-부틸 에스터의 제조
Figure 112013020897408-pct00171
500 mL의 배모양 플라스크에서, 3급-부틸 6-(6-니트로피리딘-3-일)-2,6-다이아자스피로[3.3]헵탄-2-카복실레이트(4.54 g, 14.2 mmol) 및 10% Pd/C(662 mg, 6.22 mmol)를 에틸 아세테이트(150 ml) 및 메탄올(50 ml)과 합쳐 흑색 현탁액을 수득하였다. 혼합물을 비우고, 수소 기체로 2회 채운 후, H2의 벌룬 압력 하에 밤새 25℃에서 교반하였다. 혼합물을 셀라이트 상에서 여과하고, 여과 케익을 MeOH로 세척하였다. 여액을 진공에서 농축시켜 보라색 오일 고체를 수득하였다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 12 g, DCM 중의 0 내지 4%의 MeOH)로 정제하여 1.29 g(31%)의 표제 화합물을 순수하지 않은 암적색 고체로서 수득하였다. (M+H)+ = 291 m/e.
단계 3.
6-[6-(6-클로로-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로-피리다진-4-일아미노)-피리딘-3-일]-2,6-다이아자-스피로[3.3]헵탄-2-카복실산 3급-부틸 에스터의 제조
Figure 112013020897408-pct00172
250 mL의 둥근 바닥 플라스크에, 3급-부틸 6-(6-아미노피리딘-3-일)-2,6-다이아자스피로[3.3]헵탄-2-카복실레이트(870 mg, 3.00 mmol), 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(670 mg, 3.00 mmol), 잔트포스(260 mg, 449 μmol), Cs2CO3(2.93 g, 8.99 mmol) 및 Pd2(dba)3(137 mg, 150 μmol)을 다이옥산(25.0 ml)과 합쳐 암갈색 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 아르곤 하에 100℃로 가열하고, 20시간 동안 교반하였다. 반응물을 25℃로 냉각하고, DCM으로 희석하고, Na2SO4를 첨가하였다. 혼합물을 셀라이트 상에서 여과하고, 여과 케익을 DCM으로 세척하고, 여액을 진공에서 농축시켜 암갈색 반고체를 수득하였다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 220g, DCM 중의 0 내지 5%의 MeOH)로 정제하였다. 순수하지 않은 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 220 g, DCM 중의 0 내지 4%의 MeOH)로 다시 정제하여 0.320 g(25%)의 표제 화합물을 연황색 분말로서 수득하였다. (M+H)+ = 433/435 m/e. 1H NMR(300MHz, 클로로포름-d) δ: 8.12(s, 1H), 8.08(s, 1H), 7.65(s, 1H), 6.82(d, J = 1.5 Hz, 2H), 4.12(s, 4H), 4.01(s, 3H), 3.80(s, 4H), 1.45(s, 9H).
단계 4.
6-(6-{6-[2-아세톡시메틸-3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-페닐]-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노}-피리딘-3-일)-2,6-다이아자-스피로[3.3]헵탄-2-카복실산 3급 부틸 에스터의 제조
Figure 112013020897408-pct00173
250 mL의 둥근 바닥 플라스크에, 3급-부틸 6-(6-(6-클로로-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)피리딘-3-일)-2,6-다이아자스피로[3.3]헵탄-2-카복실레이트(300 mg, 693 μmol), 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질 아세테이트(445 mg, 901 μmol) 및 Cs2CO3(677 mg, 2.08 mmol)를 다이옥산(20 ml) 및 물(2.00 ml)과 합쳐 황색 현탁액을 수득하였다. 플라스크를 비우고, 아르곤으로 채우고, PdCl2(DPPF)(17.0 mg, 20.8 μmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 85℃로 가열하고, 아르곤 하에 3시간 동안 교반하였다. 추가의 PdCl2(DPPF)(17 mg, 20.8 μmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 85℃로 가열하고, 60시간 동안 교반하였다. 25℃로 냉각하고, DCM으로 희석하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통하여 여과하고, 여액을 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 조질 반응 혼합물을 진공에서 농축시켰다. 갈색 고체를 조질로서 다음 반응에 사용하였다. (M+H)+ = 765 m/e.
단계 5.
6-(6-{6-[3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-2-하이드록시메틸-페닐]-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노}-피리딘-3-일)-2,6-다이아자-스피로[3.3]헵탄-2-카복실산 3급 부틸 에스터의 제조
Figure 112013020897408-pct00174
250 mL의 둥근 바닥 플라스크에, 3급-부틸 6-(6-(6-(2-(아세톡시메틸)-3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)페닐)-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)피리딘-3-일)-2,6-다이아자스피로[3.3]헵탄-2-카복실레이트(530 mg, 693 μmol)를 다이옥산(15 ml) 및 1M LiOH(3 ml)과 합쳐 암갈색 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 4시간 동안 교반하였다. 조질 반응 혼합물을 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 220 g, DCM 중의 0 내지 4%의 MeOH)로 정제하여 0.169 g(34%)의 표제 화합물을 연황색 분말로서 수득하였다. (M+H)+ = 723 m/e. 1H NMR(300MHz, 클로로포름-d) δ: 8.36(s, 1H), 8.26(d, J = 2.6 Hz, 1H), 8.19(s, 1H), 7.37-7.69(m, 6H), 6.84-6.94(m, 1H), 6.80(d, J = 3.0 Hz, 1H), 4.39(d, J = 6.8 Hz, 2H), 4.08(s, 4H), 3.96(s, 4H), 3.85(s, 3H), 1.42(s, 9H), 1.39(s, 9H).
단계 6.
6-3급-부틸-2-(3-{5-[5-(2,6-다이아자-스피로[3.3]헵트-2-일)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00175
250 mL의 둥근 바닥 플라스크에, 3급-부틸 6-(6-(6-(3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-2-(하이드록시메틸)페닐)-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)피리딘-3-일)-2,6-다이아자스피로[3.3]헵탄-2-카복실레이트(169 mg, 234 μmol)를 DCM(10 ml) 및 TFA(2 ml)와 합쳐 황색 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 21시간 동안 교반하였다. 이를 진공에서 농축시켜 표제 화합물을 정량적 수율의 황색 고체로서 수득하였다. (M+H)+ = 623 m/e.
실시예 22
단계 7.
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-(6-메틸-2,6-다이아자-스피로[3.3]헵트-2-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00176
25 mL의 둥근 바닥 플라스크에, 2-(3-(5-(5-(2,6-다이아자스피로[3.3]헵탄-2-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)-2-(하이드록시메틸)페닐)-6-3급-부틸-8-플루오로프탈라진-1(2H)-온(146 mg, 234 μmol), 30% 포름알데히드(42.2 mg, 38.8 μl, 1.41 mmol) 및 나트륨 시아노보로하이드라이드(177 mg, 2.81 mmol)를 메탄올(9 ml)과 합쳐 주황색 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 4시간 동안 교반하였다. 조질 반응 혼합물을 진공에서 농축시키고, 10 mL의 0.1 M NaOH로 희석하고, DCM(3 x 15 mL)로 추출하였다. 유기층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 40 g, DCM 중의 0 내지 10%의 MeOH)로 정제하였다. 연황색 분말을 25℃에서 3시간 동안 진공 하에 건조시켜 0.33 g(22%)의 표제 화합물을 수득하였다. (M+H)+ = 637 m/e. 1H NMR(300MHz, 클로로포름-d) δ: 8.37(s, 1H), 8.28(d, J = 2.3 Hz, 1H), 8.13(s, 1H), 7.38-7.71(m, 6H), 6.75-6.93(m, 2H), 4.40(s, 2H), 3.96(s, 4H), 3.88(s, 3H), 3.47(s, 4H), 2.37(s, 3H), 1.42(s, 9H).
I-23의 제조
단계 1.
5-브로모-2-(2,2,5,5-테트라메틸-[1,2,5]아자다이실롤리딘-1-일)-피리딘의 제조
Figure 112013020897408-pct00177
500 mL의 3목 플라스크에, 5-브로모피리딘-2-아민(5 g, 28.9 mmol)을 THF(80 ml)과 합쳐 연황색 용액을 수득하였다. -78℃로 냉각하고, 헥산(18.2 ml, 29.2 mmol) 중의 n-부틸리튬을 시린지로 첨가하였다. 반응물을 -78℃에서 1시간 동안 교반한 후, 1,2-비스(클로로다이메틸실릴)에탄(6.22 g, 28.9 mmol)을 15분에 걸쳐 적가하였다. -78℃에서 90분 동안 교반한 후, 헥산(18.2 ml, 29.2 mmol) 중의 n-부틸리튬을 첨가하였다. 반응물을 25℃로 가온하고, 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 50 mL의 포화 NaCl로 희석하고, 다이에틸 에터(2 x 200 mL)로 추출하였다. 유기상을 합치고, H2O(1 x 25 mL) 및 포화 NaCl(1 x 25 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조질 갈색 오일을 진공 증류(1mm Hg, 170℃)로 정제하였다. 생성물을 냉각하면서 고체화시켜 4.89 g(54%)의 표제 화합물을 백색 결정질 고체로서 수득하였다. 1H NMR(300MHz, 클로로포름-d) δ: 8.15(d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.47(dd, J = 8.9, 2.5 Hz, 1H), 6.47(d, J = 8.7 Hz, 1H), 0.83(s, 4H), 0.24-0.38(m, 12H).
단계 2.
5-(에틸티오)피리딘-2-아민의 제조
Figure 112013020897408-pct00178
100 mL의 둥근 바닥 플라스크에, 5-브로모-2-(2,2,5,5-테트라메틸-1,2,5-아자다이실롤리딘-1-일)피리딘(519 mg, 1.65 mmol), 에탄티올(102 mg, 122 μl, 1.65 mmol), 잔트포스(47.6 mg, 82.3 μmol) 및 후니히 염기(425 mg, 575 μl, 3.29 mmol)를 다이옥산(10.0 ml)과 합쳐 연황색 용액을 수득하였다. Pd2(dba)3(37.7 mg, 41.1 μmol)를 첨가하고, 혼합물을 비우고, 아르곤으로 채웠다. 반응 혼합물을 110℃로 가열하고, 아르곤 하에 17시간 동안 교반하였다. 혼합물을 25℃로 냉각하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 1M HCl과 에터 사이에 분배하였다. 분리하고, 3M NaOH를 사용하여 수성상으로 염기화시켰다. 수성층을 EtOAc(2 x 125 mL)로 추출하였다. 유기상을 합치고, 물(1 x 50 mL) 및 포화 NaCl(1 x 25 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켜 주황색 오일을 수득하였다. 오일을 25℃에서 진공 하에 밤새 건조시켜 주황색 검을 수득하고, 이를 다음 산화반응에 조질로서 사용하였다. (M+H)+ = 155 m/e.
단계 3.
5-(에탄설폰일)-피리딘-2-아민의 제조
Figure 112013020897408-pct00179
250 mL의 둥근 바닥 플라스크에, 5-(에틸티오)피리딘-2-아민(254 mg, 1.65 mmol), TFA(376 mg, 254 μl, 3.29 mmol) 및 m-CPBA(625 mg, 3.62 mmol)를 DCM(6mL)과 합쳐 연황색 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반하였다. 무거운 현탁액을 수성 Na2SO3로 켄칭하고, DCM으로 희석하였다. 상을 분리하고, 수성층을 DCM(2 x 20 mL)으로 역추출하였다. 유기상을 합치고, 포화 NaHCO3(1 x 15 mL) 및 포화 NaCl(1 x 15 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 24 g, 헵탄 중의 0 내지 90%의 EtOAc)로 정제하여 0.183 g(60%)의 표제 화합물을 백색 분말로서 수득하였다. (M+H)+ = 187 m/e. 1H NMR(300MHz, 클로로포름-d) δ: 8.53(d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.82(dd, J = 8.7, 2.3 Hz, 1H), 6.55(d, J = 8.7 Hz, 1H), 5.23(br. s., 2H), 3.09(q, J = 7.6 Hz, 2H), 1.29(t, 3H).
단계 4.
6-클로로-4-(5-에탄설폰일-피리딘-2yl아미노)-2-메틸-2H-피리다진-3-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00180
250 mL의 둥근 바닥 플라스크에, 5-(에틸설폰일)피리딘-2-아민(183 mg, 983 μmol), 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(263 mg, 1.18 mmol), 잔트포스(85.3 mg, 147 μmol) 및 Cs2CO3(960 mg, 2.95 mmol)를 다이옥산(10 mL)과 합쳐 연갈색 현탁액을 수득하였다. 플라스크를 비우고, 아르곤으로 채웠다. Pd2(dba)3(45.0 mg, 49.1 μmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 아르곤 하에 100℃에서 20시간 동안 교반하였다. 25℃로 냉각하고, DCM으로 희석하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통하여 여과하고, 투명해질 때까지, 여과 케익을 DCM으로 세척하였다. 여액을 농축시키고, 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 40 g, DCM 중의 0 내지 2%의 MeOH)로 정제하여 0.323 g(25%)의 표제 화합물을 황갈색 분말로서 수득하였다. (M+H)+ = 329/331 m/e. 1H NMR(300MHz, DMSO-d6) δ: 10.18(s, 1H), 8.78(d, J = 2.3 Hz, 1H), 8.12(dd, J = 8.9, 2.5 Hz, 1H), 7.74(d, J = 9.1 Hz, 1H), 3.69(s, 3H), 3.32(q, J = 7.4 Hz, 2H), 1.11(t, J = 7.4 Hz, 3H).
단계 5.
아세트산 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-6-[5-(5-에탄설폰일-피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-벤질 에스터의 제조
Figure 112013020897408-pct00181
250 mL의 둥근 바닥 플라스크에, 6-클로로-4-(5-(에틸설폰일)피리딘-2-일아미노)-2-메틸피리다진-3(2H)-온(79 mg, 240 μmol), 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질 아세테이트(154 mg, 312 μmol) 및 Cs2CO3(235 mg, 721 μmol)를 다이옥산(10 ml) 및 물(1 ml)과 합쳐 연황색 현탁액을 수득하였다. 혼합물을 비우고, 아르곤으로 채웠다. PdCl2(DPPF)(9.81 mg, 12.0 μmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 아르곤으로 퍼지하고, 60시간 동안 85℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 DCM으로 희석하고, 셀라이트로 여과하였다. 투명해질 때까지, 여과 케익을 DCM으로 세척하였다. 여액을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켜 암갈색 오일로서 수득하였다. 이 갈색 오일을 다음 단계에 조질로서 사용하였다. (M-H)+ = 659 m/e.
실시예 23
단계 6.
6-3급-부틸-2-{3-[5-(5-에탄설폰일-피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-2-하이드록시메틸-페닐}-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00182
250 mL의 둥근 바닥 플라스크에, 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(5-(5-(에틸설폰일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)벤질 아세테이트(159 mg, 241 μmol)를 다이옥산(5 ml) 및 1M LiOH(1 ml)과 합쳐 갈색 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 18시간 동안 교반하였다. 조질 반응 혼합물을 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 물과 DCM 사이에 분배하였다. 유기층을 MgSO4 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 24 g, DCM 중의 0 내지 4%의 MeOH)로 정제하여 0.039 g(54%)의 표제 화합물을 황갈색 고체로서 수득하였다. (M-H)+ = 617 m/e. 1H NMR(300MHz, 클로로포름-d) δ: 8.85(d, J = 2.3 Hz, 1H), 8.79(s, 1H), 8.63(s, 1H), 8.30(d, J = 2.3 Hz, 1H), 8.06(dd, J = 8.7, 2.3 Hz, 1H), 7.43-7.73(m, 5H), 7.07(d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.45(s, 2H), 3.94(s, 3H), 3.15(d, J = 7.2 Hz, 2H), 1.44(s, 9H), 1.33(t, J = 7.2 Hz, 3H).
실시예 24
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-6-옥소-5-[5-(프로판-2-설폰일)-피리딘-2-일아미노]-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00183
실시예 23의 유사한 절차를 따르되, 단계 2에서 에탄티올을 프로판-2-티올로 대체하는 것을 제외하여 0.033 g(12%)의 표제 화합물을 황갈색 고체로서 수득하였다. (M+H)+ = 633 m/e. 1H NMR(300MHz, 클로로포름-d) δ: 8.81(d, J = 2.3 Hz, 1H), 8.73-8.79(m, 1H), 8.62(s, 1H), 8.29(d, J = 2.3 Hz, 1H), 8.04(dd, J = 8.7, 2.3 Hz, 1H), 7.43-7.70(m, 5H), 7.07(d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.45-4.59(d, 2H), 3.94(s, 3H), 3.21(m, J = 6.8 Hz, 1H), 1.44(s, 9H), 1.34(d, J = 6.8 Hz, 6H).
I-25의 제조
단계 1.
2-(6-아미노피리딘-3-일티오)-에탄올의 제조
Figure 112013020897408-pct00184
100 mL의 둥근 바닥 플라스크에, 5-브로모-2-(2,2,5,5-테트라메틸-1,2,5-아자다이실롤리딘-1-일)피리딘(502 mg, 1.59 mmol), 2-머캅토에탄올(124 mg, 112 μl, 1.59 mmol), 잔트포스(46.1 mg, 79.6 μmol) 및 후니히 염기(411 mg, 556 μl, 3.18 mmol)를 다이옥산(10.0 ml)과 합쳐 연황색 용액을 수득하였다. Pd2(dba)3(36.4 mg, 39.8 μmol)를 합치고, 혼합물을 비우고, 아르곤으로 채웠다. 반응 혼합물을 110℃로 가열하고, 아르곤 하에 17시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 25℃로 냉각하고, 진공에서 농축시키고, 1M HCl과 EtOAc 사이에 분배하였다. 분리하고, 3M NaOH를 사용하여 수성층을 염기화 시켰다. 수성층을 EtOAc(3 x 125 mL)로 추출하였다. 유기상을 합치고, 포화 NaCl(1 x 25 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켜 연황색 고체를 수득하였다. 상기 고체를 25℃에서 21시간 동안 진공 하에서 건조시켜 0.259 g(96%)의 표제 화합물을 수득하였다. 1H NMR(300MHz, DMSO-d6) δ: 7.94(d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.45(dd, J = 8.7, 2.3 Hz, 1H), 6.40(d, J = 8.7 Hz, 1H), 6.03-6.20(m, 2H), 4.77(t, J = 5.7 Hz, 1H), 3.37-3.51(m, 2H), 2.67-2.76(m, 2H).
실시예 25
단계 2.
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(3-{5-[5-(2-하이드록시에틸티오)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-2H-프탈라진-1-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00185
250 mL의 둥근 바닥 플라스크에, 2-(6-아미노피리딘-3-일티오)에탄올(247 mg, 1.45 mmol), 2-(5-브로모-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)-6-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)벤질 아세테이트(806 mg, 1.45 mmol), 잔트포스(126 mg, 218 μmol) 및 Cs2CO3(1.42 g, 4.35 mmol)를 다이옥산(20 ml)과 합쳐 갈색 현탁액을 수득하였다. 반응물을 비우고, 아르곤으로 채웠다. Pd2(dba)3(66.4 mg, 72.5 μmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 100℃로 가열하고, 아르곤 하에 17시간 동안 교반하였다. 25℃로 냉각하고, DCM으로 희석하였다. 반응 혼합물을 셀라이트 상에서 여과하고, 깨끗해질 때까지 여과 케익을 DCM으로 세척하였다. 상기 여액을 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 40 g, DCM 중의 0 내지 3%의 MeOH)로 정제하였다. 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 40 g, 헵탄 중의 0 내지 50%의 아세톤)로 다시 정제하고, 진공에서 농축시켜 백색 분말을 수득하고, 진공 하에 25℃에서 밤새 건조시켰다. 생성물을 다이옥산(15 ml)에 용해시키고, 1M LiOH(3 ml)를 첨가하였다. 반응물을 25℃에서 17시간 동안 교반하였다. 조질 반응 혼합물을 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 15 mL DCM 및 15 mL 물로 희석하였다. 수성층을 DCM(2 x 20 mL)으로 역추출하였다. 유기층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 40 g, 헵탄 중의 0 내지 50%의 아세톤)로 정제하여 0.061 g(7%)의 표제 화합물을 백색 분말로서 수득하였다. (M+H)+ = 603 m/e. 1H NMR(300MHz, 클로로포름-d) δ: 8.61(s, 1H), 8.42(d, J = 2.3 Hz, 1H), 8.38(s, 1H), 8.29(d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.73(dd, J = 8.5, 2.5 Hz, 1H), 7.65(d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.60(d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.53-7.57(m, 2H), 7.45-7.51(m, 1H), 6.95(d, J = 8.3 Hz, 1H), 4.43(s, 2H), 3.92(s, 3H), 3.74(t, J = 5.9 Hz, 2H), 3.04(t, J = 5.9 Hz, 2H), 1.43(s, 9H).
실시예 26
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(3-{5-[5-(2-하이드록시에탄설폰일)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-2H-프탈라진-1-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00186
100 mL의 둥근 바닥 플라스크에, 6-3급-부틸-8-플루오로-2-(3-(5-(5-(2-하이드록시에틸티오)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)-2-(하이드록시메틸)페닐)프탈라진-1(2H)-온(45 mg, 74.7 μmol)을 DCM(4 ml)과 합쳐 연황색 용액을 수득하였다. 혼합물을 0℃로 냉각하고, TFA(17.0 mg, 11.5 μl, 149 μmol) 및 m-CPBA(28.3 mg, 164 μmol)를 첨가하였다. 반응물을 0℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응물을 포화 Na2SO3 및 1M NaOH와 켄칭하였다. DCM(에멀젼)로 희석하고, 분리하였다. 수성층을 DCM(3 x 20 mL)으로 역추출하였다. 유기상을 합치고, 포화 NaCl(1 x 15 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 12 g, 헵탄 중의 0 내지 50%의 아세톤)로 정제하여 0.010 g(22%)의 표제 화합물을 백색 분말로서 수득하였다. (M+H)+ = 634 m/e. 1H NMR(300MHz, 클로로포름-d) δ: 8.87(d, J = 2.3 Hz, 1H), 8.80(s, 1H), 8.66(s, 1H), 8.30(d, J = 2.3 Hz, 1H), 8.07(dd, J = 8.7, 2.6 Hz, 1H), 7.45-7.68(m, 5H), 7.08(d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.45(s, 2H), 4.01-4.09(m, 2H), 3.93(s, 3H), 3.34-3.42(m, 2H), 1.44(s, 9H).
I-27의 제조
실시예 27
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{5-[5-(4-이소프로필-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온 HCl
Figure 112013020897408-pct00187
단계 1.
DMSO(10.0 ml) 중의 5-브로모-2-니트로피리딘(1.0 g, 4.93 mmol, Eq: 1.00)에 1-이소프로필피페라진(632 mg, 4.93 mmol, Eq: 1.00)을 첨가하고, 생성된 용액을 70℃에서 18시간 동안 가열하였다. 용액을 실온으로 냉각하였다. 용액을 50 ml 물로 희석하였다. 생성된 고체를 여과하였다. 고체를 물로 세척하고, 진공 하에 건조시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 80 g, 0 내지 3%의 MeOH/DCM 구배)로 정제하여 1-이소프로필-4-(6-니트로피리딘-3-일)피페라진(788 mg, 64%)을 수득하였다. LC/MS-ESI 관찰값 [M+H]+ 251.
단계 2.
250 mL의 둥근 바닥 플라스크에, EtOH(40 ml) 중의 1-이소프로필-4-(6-니트로피리딘-3-일)피페라진(788 mg, 3.15 mmol, Eq: 1.00)을 탄소 상의 팔라듐(데구싸(DeGussa))(78.2 mg, 735 μmol, Eq: 0.233)과 합쳤다. 혼합물을 수소로 2회 비운 후, 수소 분위기 하에 18시간 동안 교반하였다. 용액을 셀라이트로 여과하고, 셀라이트를 새로운 에탄올로 세척하였다. 용매를 감압 하에 증발시켜 5-(4-이소프로필피페라진-1-일)피리딘-2-아민(425 mg, 61%)을 수득하였다. LC/MS-ESI 관찰값 [M+H]+ 221.
단계 3.
50 mL의 둥근 바닥 플라스크에, 5-(4-이소프로필피페라진-1-일)피리딘-2-아민(200 mg, 908 μmol, Eq: 1.00), 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(243 mg, 1.09 mmol, Eq: 1.2) 및 세슘 카보네이트(887 mg, 2.72 mmol, Eq: 3)를 다이옥산(20 ml)과 합쳐 주황색 현탁액을 수득하였다. 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(78.8 mg, 136 μmol, eq: 0.15)을 첨가하였다. 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(41.6 mg, 45.4 μmol, Eq: 0.05)을 첨가하였다. 용액을 10분 동안 아르곤으로 탈기시켰다. 용액을 48시간 동안 95 내지 105℃에서 가열하였다. 상기 용액을 200 ml DCM으로 희석하였다. MgSO4를 첨가하고, 현탁액을 10분 동안 교반하였다. 고체를 여과하고, DCM으로 수회 세척하였다. 유기물을 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 40 g, 50 내지 100%의 EtOAc/헥산 구배)로 정제하여 6-클로로-4-(5-(4-이소프로필피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-2-메틸피리다진-3(2H)-온(273 mg, 83%)을 수득하였다. LC/MS-ESI 관찰값 [M+H]+ 363.
단계 4.
6-클로로-4-(5-(4-이소프로필피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-2-메틸피리다진-3(2H)-온(123 mg, 340 μmol, Eq: 1.2), 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질 아세테이트(140 mg, 283 μmol, Eq: 1.00), 칼륨 포스페이트 3 염기성(180 mg, 850 μmol, Eq: 3.00) 및 X-PHOS(13.5 mg, 28.3 μmol, Eq: 0.10)를 다이옥산(10 ml) 및 물(1.0 mL)에 용해시켰다. 반응물을 아르곤으로 탈기시켰다. Pd2(dba)3(13.0 mg, 14.2 μmol, Eq: 0.05)을 첨가하고, 반응물을 30분 동안 마이크로파에서 125℃로 가열하였다. 용액을 MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하였다. 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 12 g, 0 내지 5%의 MeOH/DCM 구배)로 정제하여 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(5-(5-(4-이소프로필피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)벤질 아세테이트(153 mg, 78%)를 수득하였다. LC/MS-ESI 관찰값 [M+H]+ 695.
단계 5.
THF(2.0 ml) 중의 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(5-(5-(4-이소프로필피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)벤질 아세테이트(153 mg, 220 μmol, Eq: 1.00)에 1N NaOH(2.0 mL, 2.00 mmol, Eq: 9.08)의 수성 용액을 첨가하였다. 생성된 용액을 60℃에서 2시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각하였다. 용액을 포화 NaHCO3 및 DCM으로 희석하였다. 층을 분리하였다. 수성층을 DCM으로 3회 추출하였다. 합친 유기물을 MgSO4 상에서 건조시켰다. 용액을 여과하였다. 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 12 g, 0 내지 50%(60:10:1 DCM:MeOH:NH4OH)/DCM 구배)로 정제하여 크림색 고체를 수득하였다. 고체를 Et2O로 마쇄하였다. 고체를 여과한 후, 2 ml DCM에 용해시켰다. Et2O(2 ml) 중의 1.0 M HCl의 용액을 첨가하였다. 고체가 형성되었다. 고체를 여과하고, 진공 하에 건조시켜 6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{5-[5-(4-이소프로필-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온 HCl(57.5 mg, 38%)을 수득하였다. LC/MS-ESI 관찰값 [M+H]+ 653. 1H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.28(d, J=6.80 Hz, 6 H) 1.37(s, 9 H) 3.08(d, J=11.33 Hz, 2 H) 3.46(d, J=10.20 Hz, 2 H) 3.76(s, 5 H) 4.39(d, J=6.04 Hz, 2 H) 7.41-7.59(m, 5 H) 7.73(d, J=13.97 Hz, 1 H) 7.86(s, 1 H) 8.06(d, J=2.27 Hz, 1 H) 8.42(s, 1 H) 8.50(d, J=2.27 Hz, 1 H) 9.31(s, 1 H)
I-28의 제조
실시예 28
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-(1-메틸-피롤리딘-3-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온
Figure 112013020897408-pct00188
단계 1.
-78℃에서 100 mL의 3목 플라스크에, THF(30.0 ml) 중의 3급-부틸 3-옥소피롤리딘-1-카복실레이트(1 g, 5.24 mmol, Eq: 1.00)의 용액을 THF(5.6 ml, 5.6 mmol, Eq: 1.07) 중의 리튬 비스(트라이메틸실릴)아마이드 1M로 처리하였다. -78℃에서 15분 동안 교반한 후, THF(10 ml) 중의 N-페닐비스(트라이플루오로메탄설폰이미드)(2.27 g, 6.28 mmol, Eq: 1.20)의 용액을 적가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 실온으로 가온하였다. 반응물을 포화 수성 NaHCO3을 첨가하여 켄칭한 후, 에틸 에터로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 120 g, 0 내지 30%의 EtOAc/Hex 구배)로 정제하여 3-트라이플루오로메탄설폰일옥시-2,5-다이하이드로-피롤-1-카복실산 3급-부틸 에스터(880 mg, 53%)를 수득하였다.
단계 2.
25 mL의 둥근 바닥 플라스크에, 3-트라이플루오로메탄설폰일옥시-2,5-다이하이드로-피롤-1-카복실산 3급-부틸 에스터(780 mg, 2.46 mmol, Eq: 1.00)를 THF(20 ml)와 합쳐 무색 용액을 수득하였다. 용액을 10분 동안 아르곤으로 퍼지하였다. 칼륨 카보네이트(1.72 g, 12.3 mmol, Eq: 5.0), 5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2-아민(649 mg, 2.95 mmol, Eq: 1.20), 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(28.4 mg, 24.6 μmol, Eq: 0.01) 및 물(200 μl)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 70℃로 가열하고, 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 NaHCO3에 붓고, Et2O로 2회 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 40 g, 50%(60:10:1 DCM:MeOH:NH4OH)/DCM)로 정제하여 3-(6-아미노-피리딘-3-일)-2,5-다이하이드로-피롤-1-카복실산 3급-부틸 에스터(538 mg, 84%)를 수득하였다. LC/MS-ESI 관찰값 [M+H]+ 262.
단계 3.
3-(6-아미노-피리딘-3-일)-2,5-다이하이드로-피롤-1-카복실산 3급-부틸 에스터(538 mg, 2.06 mmol, Eq: 1.00)를 메탄올(20 ml)에 용해시켰다. 용액을 아르곤 하에 둔 후, 활성탄 상의 팔라듐(43.8 mg, 20.6 μmol, Eq: 0.01)으로 처리하였다. 현탁액을 수소로 퍼지하고, 수소 하에 18시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실리카 겔로 여과하였다. 여액을 농축시키고, 잔류물을 메탄올(12 ml)에 용해시켰다. 용액을 10분 동안 아르곤으로 퍼지한 후, 활성탄 상의 팔라듐(데구싸)(43.8 mg, 20.6 μmol, Eq: 0.01)으로 처리하였다. 현탁액을 수소로 퍼지하고, 수소 하에 18시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 45 μm 프릿으로 여과하였다. 여액을 진공에서 농축시켜 3급-부틸 3-(6-아미노피리딘-3-일)피롤리딘-1-카복실레이트(422 mg, 78%)를 수득하였다. LC/MS-ESI 관찰값 [M+H]+ 264.
단계 4.
3급-부틸 3-(6-아미노피리딘-3-일)피롤리딘-1-카복실레이트(422 mg, 1.6 mmol, Eq: 1.00), 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(430 mg, 1.92 mmol, Eq: 1.20), 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(139 mg, 240 μmol, Eq: 0.15), 세슘 카보네이트(1.57 g, 4.81 mmol, Eq: 3) 및 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(73.4 mg, 80.1 μmol, Eq: 0.05)을 다이옥산(10 ml)에 합쳤다. 상기 용액을 10분 동안 아르곤으로 탈기시켰다. 혼합물을 100℃에서 18시간 동안 가열하였다. 용액을 실온으로 냉각한 후, 100 ml DCM으로 희석하였다. 유기물을 물로 세척한 후, MgSO4 상에서 건조시켰다. 용액을 여과하였다. 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 40 g, 50 내지 100%의 EtOAC/Hex 구배)로 정제하여 3급-부틸 3-(6-(6-클로로-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)피리딘-3-일)피롤리딘-1-카복실레이트(325 mg, 50%)를 수득하였다. LC/MS-ESI 관찰값 [M+H]+ 406.
단계 5.
3급-부틸 3-(6-(6-클로로-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)피리딘-3-일)피롤리딘-1-카복실레이트(160 mg, 394 μmol, Eq: 1.00)를 포름산(6.0 ml) 및 포름알데히드(37%, 12.0 ml)의 용매 혼합물에 용해시켰다. 용액을 70℃에서 18시간 동안 교반하였다. 용액을 실온으로 냉각하였다. 물을 첨가하였다. 반응 혼합물을 DCM으로 1회 추출하였다. pH = 14가 될 때까지, 고체 K2CO3를수성층에 천천히 첨가하였다. 형성된 고체를 여과하였다. 고체를 건조시켜 6-클로로-2-메틸-4-(5-(1-메틸피롤리딘-3-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온(70 mg, 55%)을 수득하였다. LC/MS-ESI 관찰값 [M+H]+ 320.
단계 6.
50 mL의 시험 튜브에, 6-클로로-2-메틸-4-(5-(1-메틸피롤리딘-3-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온(69 mg, 216 μmol, Eq: 1.00) 및 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질 아세테이트(128 mg, 259 μmol, Eq: 1.20)를 BuOH(4 ml)와 합쳐 주황색 용액을 수득하였다. 물(1.0 ml), 이어서 X-PHOS(10.3 mg, 21.6 μmol, Eq: 0.1) 및 칼륨 포스페이트 3 염기성(91.6 mg, 432 μmol, Eq: 2)을 첨가하였다. 비스(다이벤질리덴아세톤)팔라듐(6.2 mg, 10.8 μmol, Eq: .05)을 첨가하였다. 용액을 아르곤으로 퍼지하였다. 반응 혼합물을 오일욕에서 110℃에서 1.5시간 동안 가온하였다. 용액을 실온으로 냉각하였다. 반응 혼합물을 75 mL 물에 붓고, EtOAc로 추출하였다. 유기층을 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 12 g, 50 내지 100%(60:10:1 DCM:MeOH:NH4OH)/DCM 구배)로 정제하여 생성물 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(1-메틸-5-(5-(1-메틸피롤리딘-3-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)벤질 아세테이트 및 6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-(1-메틸-피롤리딘-3-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온(1:7 비율, 총 109 mg, 75% 수율)의 혼합물을 수득하였다. LC/MS-ESI 관찰값 [M+H]+ 652, 610.
단계 7.
THF(2.0 ml) 중의 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(1-메틸-5-(5-(1-메틸피롤리딘-3-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)벤질 아세테이트 및 6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-(1-메틸-피롤리딘-3-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온(106 mg, 163 μmol, Eq: 1.00)의 혼합물에 수성 1N NaOH(1.95 ml, 1.95 mmol, Eq: 12.0)을 첨가하였다. 용액을 18시간 동안 60℃로 가열하였다. 용액을 실온으로 냉각하였다. 용액을 포화 NaHCO3 및 DCM으로 희석하였다. 층을 분리하였다. 수성층을 DCM으로 3회 추출한 후, Na2SO4 상에서 건조시켰다. 진공에서 농축시켰다. 생성된 고체를 Et2O로 마쇄하였다. 고체를 여과하였다. 모액을 증발시켜 백색 고체를 수득하였다. 고체를 18시간 동안 50℃에서 감압 하에 건조시켜 6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-(1-메틸-피롤리딘-3-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온(41 mg, 41%)을 수득하였다. LC/MS-ESI 관찰값 [M+H]+ 610. 1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.45(s, 9 H) 1.86(dd, J=13.03, 6.99 Hz, 1 H) 2.23-2.60(m, 5 H) 2.76(br. s., 2 H) 3.00(br. s., 1 H) 3.24-3.42(m, 1 H) 3.91(s, 4 H) 4.43(d, J=6.04 Hz, 2 H) 6.92(d, J=8.31 Hz, 1 H) 7.40-7.78(m, 6 H) 8.26(dd, J=12.65, 2.83 Hz, 3 H) 8.62(s, 1 H).
I-29의 제조
실시예 29
6-3급-부틸-8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[5-(1'-이소프로필-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-2H-프탈라진-1-온
Figure 112013020897408-pct00189
단계 1.
50 mL의 둥근 바닥 플라스크에, 5-브로모-2-니트로피리딘(3.28 g, 16.2 mmol, Eq: 1) 및 3급-부틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(5 g, 16.2 mmol, Eq: 1.00)를 다이옥산(80.0 ml)과 합쳐 연황색 용액을 수득하였다. Cs2CO3(10.5 g, 32.3 mmol, Eq: 2) 및 3 mL 물을 첨가하였다. 용액을 아르곤으로 탈기시킨 후, 비스(트라이페닐포스핀)팔라듐(ii) 다이클로라이드(1.13 g, 1.62 mmol, Eq: 0.1)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 80℃로 가열하고, 15시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 300 mL 물에 붓고, EtOAc(3 x 100 mL)로 추출하였다. 합친 유기 추출물을 염수로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시켰다. 조질 반응 혼합물을 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 220 g, 10 내지 100%의 EtOAc/Hex 구배)로 정제하여 암갈색의 순수하지 않은 고체를 수득하였다. 상기 고체를 Et2O로 마쇄하여 3급-부틸 4-(6-니트로피리딘-3-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(685 mg, 69%)를 황갈색 고체로서 수득하였다. LC/MS-ESI 관찰값 [M+H]+ 306.
단계 2.
250 mL의 둥근 바닥 플라스크에, EtOH(25.0 ml) 및 에틸 아세테이트(10 ml) 중의 3급-부틸 4-(6-니트로피리딘-3-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(632 mg, 2.07 mmol, Eq: 1.00)를 탄소 상의 팔라듐(66.1 mg, 62.1 μmol, Eq: 0.03)과 합쳤다. 혼합물을 수소로 2회 비운 후, 22시간 동안 수소-채움 벌룬으로 교반하였다. 수소를 질소로 대체하였다. 상기 용액을 셀라이트로 여과하였다. 상기 셀라이츠를 EtOAc로 수회 세척하였다. 진공에서 농축시켜 3급-부틸 4-(6-아미노피리딘-3-일)피페리딘-1-카복실레이트(635 mg, 정량적 수율)를 수득하였다. LC/MS-ESI 관찰값 [M+H]+ 278.
단계 3.
아르곤 하에 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(509 mg, 2.28 mmol, Eq: 1.00), 3급-부틸 4-(6-아미노피리딘-3-일)피페리딘-1-카복실레이트(632 mg, 2.28 mmol, Eq: 1.00), 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(198 mg, 342 μmol, Eq: 0.15) 및 세슘 카보네이트(2.6 g, 7.98 mmol, Eq: 3.5)를 다이옥산(20 ml)에 현탁시켰다. 마지막으로 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(156 mg, 171 μmol, Eq: 0.075)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 18시간 동안 90℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 다이옥산으로 세척하고, 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 24 g, 20 내지 50%의 EtOAc/Hex 구배)로 정제하여 3급-부틸 4-(6-(6-클로로-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)피리딘-3-일)피페리딘-1-카복실레이트(782 mg, 82%)를 수득하였다. LC/MS-ESI 관찰값 [M+H]+ 420.
단계 4.
DCM(20 ml) 중의 3급-부틸 4-(6-(6-클로로-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)피리딘-3-일)피페리딘-1-카복실레이트(782 mg, 1.86 mmol, Eq: 1.00)에 TFA(2.12 g, 1.43 ml, 18.6 mmol, Eq: 10)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 하에 18시간 동안 교반하였다. 진공에서 농축시켜 6-클로로-2-메틸-4-(5-(피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온(474 mg, 80%)을 수득하였다. LC/MS-ESI 관찰값 [M+H]+ 320.
단계 5.
MeOH(5 ml) 중의 6-클로로-2-메틸-4-(5-(피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온(200 mg, 625 μmol, Eq: 1.00) 및 아세톤(799 mg, 1.01 ml, 13.8 mmol, Eq: 22)의 용액에 나트륨 시아노보로하이드라이드(39.3 mg, 625 μmol, Eq: 1.00) 및 아세트산(656 mg, 625 μl, 10.9 mmol, Eq: 17.5)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 하에 18시간 동안 교반하였다. 추가의 아세톤(1 ml), 이어서 THF(3 ml)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 하에 2시간 동안 계속 교반하였다. 추가의 나트륨 시아노보로하이드라이드(19.7 mg, 313 μmol, Eq: 0.50)를 첨가하였다. 혼합물을 4시간 동안 교반하였다. 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 12 g, 50 내지 100%(60:10:1 DCM:MeOH:NH4OH)/DCM 구배)로 정제하여 6-클로로-4-(5-(1-이소프로필피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)-2-메틸피리다진-3(2H)-온(220 mg, 97%)을 수득하였다. LC/MS-ESI 관찰값 [M+H]+ 362.
단계 6.
50 mL의 시험 튜브에, 6-클로로-4-(5-(1-이소프로필피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)-2-메틸피리다진-3(2H)-온(220 mg, 608 μmol, Eq: 1.00) 및 1703-100(288 mg, 608 μmol, Eq: 1.00)을 BuOH(12.9 ml)와 합쳤다. 물(3.24 ml)을 첨가하였다. X-PHOS(29.0 mg, 60.8 μmol, Eq: .1) 및 칼륨 포스페이트 3 염기성(258 mg, 1.22 mmol, Eq: 2)을 첨가하였다. 비스(다이벤질리덴아세톤)팔라듐(17.5 mg, 30.4 μmol, Eq: .05)을 첨가하였다. 상기 용액을 아르곤으로 퍼지하였다. 반응물을 100℃에서 18시간 동안 오일욕에서 가온하였다. 용액을 실온으로 냉각하였다. 반응 혼합물을 75 mL 물에 붓고, EtOAc로 2회 추출하였다. 유기층을 염수로 세척한 후, MgSO4 상에서 건조시켰다. 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 12 g, 50 내지 100%(60:10:1 DCM:MeOH:NH4OH)/DCM 구배)로 정제하여 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(5-(5-(1-이소프로필피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)벤질 아세테이트(248 mg, 59%)를 수득하였다. LC/MS-ESI 관찰값 [M+H]+ 694.
단계 7.
THF(5.0 ml) 중의 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(5-(5-(1-이소프로필피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)벤질 아세테이트(248 mg, 357 μmol, Eq: 1.00)의 용액에 NaOH(4.29 ml, 4.29 mmol, Eq: 12.0)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 60℃에서 18시간 동안 가열하였다. 상기 용액을 실온으로 냉각한 후, 포화 NaHCO3 및 DCM로 희석하였다. 층을 분리하였다. 수성층을 DCM으로 3회 추출하였다. 유기상을 합친 후, Na2SO4 상에서 건조시켰다. 진공에서 농축시켰다. 고체를 Et2O로 마쇄하고, 진공 하에 건조시켜 6-3급-부틸-8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[5-(1'-이소프로필-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-2H-프탈라진-1-온(202 mg, 87%)을 수득하였다. LC/MS-ESI 관찰값 [M+H]+ 652. 1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.10(d, J=6.42 Hz, 6 H) 1.43(s, 9 H) 1.84(br. m., 5 H) 2.28(br. m., 2 H) 2.50(br. m., 1 H) 2.79(br. s., 1 H) 3.03(d, J=10.20 Hz, 2 H) 3.90(s, 4 H) 4.42(d, J=6.80 Hz, 2 H) 6.92(s, 1 H) 7.40-7.73(m, 6 H) 8.17-8.32(m, 4 H) 8.60(s, 2 H)
I-30의 제조
칼륨(2-(아세톡시메틸)-3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)페닐)트라이플루오로보레이트의 제조:
Figure 112013020897408-pct00190
버블러(bubbler), 온도계, 및 자석 교반기가 장착된 둥근 바닥 플라스크에 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-클로로벤질 아세테이트(10 g, 24.8 mmol, Eq: 1.00), 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-바이(1,3,2-다이옥사보롤란)(9.46 g, 37.2 mmol, Eq: 1.5), Pd(OAc)2(69.7 mg, 310 μmol, Eq: 0.0125), X-PHOS(296 mg, 621 μmol, Eq: 0.025), 및 칼륨 아세테이트(5.29 g, 53.9 mmol, Eq: 2.17)를 충전시켰다. 반응 혼합물을 탈기시켰다(3회). MeTHF를 첨가한 후, 다시 탈기시켰다(3회). 혼합물을 60℃에서 밤새 가열하였다. 반응이 끝나지 않았다. 반응 온도를 65℃로 올리고, 3시간 동안 교반하였다. HPLC는, 반응이 완료됨을 보여주었다. 반응물을 냉각하고, 2 N HCl(31.0 ml, 62.1 mmol, Eq: 2.5)을 첨가하였다. 혼합물을 30분 동안 교반한 후, 셀라이트 플러그를 통과시켜 흑색 물질을 제거하였다. 층을 분리하였다. 유기층을 물(60.0 g, 60.0 ml)로 세척한 후, 무거운 오일로 농축시켰다. 상기 오일을 MeOH(79.2 g, 100 ml)에 용해시키고, 칼륨 수소 플루오라이드, 3M 용액(20.7 ml, 62.1 mmol, Eq: 2.5)으로 처리하였다. LC는, 반응이 밤새 끝나지 않았음을 보여주었다. KHF2의 추가 0.5 당량을 첨가하였다. 생성된 슬러리를 45℃에서 3시간 동안 가온하였다. 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 생성물을 여과함으로서 수집하였다. 케익을 메탄올로 세척하였다.
진공에서 건조시킨 후, 칼륨(2-(아세톡시메틸)-3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)페닐)트라이플루오로보레이트(11.26 g, 23.7 mmol, 95.6% 수율)를 수득하였다.
실시예 30
6-3급-부틸-2-{3-[5-(1'-에틸-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-2-하이드록시메틸-페닐}-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00191
단계 1.
100 mL의 둥근 바닥 플라스크에, 6-클로로-2-메틸-4-(5-(피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온(179 mg, 560 μmol, Eq: 1.00) 및 아세트알데히드(247 mg, 316 μl, 5.6 mmol, Eq: 10.0)를 THF(5.0 ml)와 합쳐 연황색 용액을 수득하였다. 아세트산(33.6 mg, 32.0 μl, 560 μmol, Eq: 1.00)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각하였다. 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(178 mg, 840 μmol, Eq: 1.5)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 물에 부은 후, 염기성이 될 때까지, 포화 NaHCO3를 용액에 첨가하였다. 용액을 EtOAc로 2회 추출한 후, 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켜 고체를 수득하였다. 상기 고체를 에터로 마쇄하여 6-클로로-4-(5-(1-에틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)-2-메틸피리다진-3(2H)-온 (121 mg, 62%)을 수득하였다. LC/MS-ESI 관찰값 [M+H]+ 348.
단계 2.
50 mL의 시험 셀에, 6-클로로-4-(5-(1-에틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)-2-메틸피리다진-3(2H)-온(121 mg, 348 μmol, Eq: 1.00) 및 칼륨(2-(아세톡시메틸)-3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)페닐)트라이플루오로보레이트(165 mg, 348 μmol, Eq: 1.00)를 BuOH(4 ml)와 합쳐 주황색 용액을 수득하였다. 물(1.00 ml)을 첨가하였다. X-PHOS(16.6 mg, 34.8 μmol, Eq: .1) 및 칼륨 포스페이트 3 염기성(148 mg, 696 μmol, Eq: 2)을 첨가하였다. 비스(다이벤질리덴아세톤)팔라듐(10.0 mg, 17.4 μmol, Eq: 0.05)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 아르곤으로 퍼지하였다. 혼합물을 100℃에서 1.5시간 동안 오일욕에서 가열한 후, 실온으로 냉각하였다. 반응 혼합물을 75 mL 물에 붓고, EtOAc로 2회 추출하였다. 유기층을 합치고, Na2SO4 상에서 건조시켰다. 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 12 g, 50 내지 100%(60:10:1 DCM:MeOH:NH4OH)/DCM 구배)로 정제하여 고체를 수득하였다. 상기 고체를 Et2O로 마쇄하여 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(5-(5-(1-에틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)벤질 아세테이트(147 mg, 62%)를 수득하였다. LC/MS-ESI 관찰값 [M+H]+ 680.
단계 3.
MeOH(15 ml) 중의 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(5-(5-(1-에틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)벤질 아세테이트(147 mg, 216 μmol, Eq: 1.00)에 칼륨 카보네이트(59.8 mg, 432 μmol, Eq: 2.0)를 첨가하였다. 반응 생성물을 40℃에서 1시간 동안 교반하였다. 상기 용액을 실온으로 냉각하였다. 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 DCM/물에 흡수시키고, 층을 분리하였다. 수성층을 DCM으로 1회 추출하였다. 유기상을 합친 후, Na2SO4 상에서 건조시켰다. 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 12 g, 25 내지 75%(60:10:1 DCM:MeOH:NH4OH)/DCM 구배)로 정제하여 6-3급-부틸-2-{3-[5-(1'-에틸-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-2-하이드록시메틸-페닐}-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온(108 mg, 78%)을 수득하였다. LC/MS-ESI 관찰값 [M+H]+ 638. 1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.16(br. s., 2 H) 1.43(s, 9 H) 1.84(br. s., 4 H) 2.06(br. s., 2 H) 2.51(br. s., 3 H) 3.11(br. s., 2 H) 3.69-4.09(m 및 중첩된 단일선, 4 H) 4.42(d, J=6.80 Hz, 2 H) 6.91(d, J=8.69 Hz, 1 H) 7.37-7.77(m, 6 H) 8.11-8.36(m, 3 H) 8.60(s, 1 H)
I-31의 제조
실시예 31
6-3급-부틸-2-{3-[5-(1,5-다이메틸-1H-피라졸-3-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-2-하이드록시메틸-페닐}-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온
Figure 112013020897408-pct00192
단계 1.
1,5-다이메틸-1H-피라졸-3-아민(400 mg, 3.6 mmol, Eq: 1.00) 및 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(965 mg, 4.32 mmol, Eq: 1.20)을 다이옥산(10.0 ml) 중의 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(312 mg, 540 μmol, Eq: 0.15), 세슘 카보네이트(3.52 g, 10.8 mmol, Eq: 3) 및 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(165 mg, 180 μmol, Eq: 0.05)과 합쳤다. 상기 용액을 아르곤으로 탈기시켰다. 반응 혼합물을 100℃에서 18시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각하였다. 용액을 100 ml DCM으로 희석하였다. 유기층을 물로 세척하였다. 유기층을 MgSO4 상에서 건조시켰다. 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 40 g, 10 내지 50%(60:10:1 DCM:MeOH:NH4OH)/DCM 구배)로 정제하여 6-클로로-4-(1,5-다이메틸-1H-피라졸-3-일아미노)-2-메틸피리다진-3(2H)-온(408 mg, 45%)을 수득하였다. LC/MS-ESI 관찰값 [M+H]+ 235.
단계 2.
50 mL의 시험 튜브에, 6-클로로-4-(1,5-다이메틸-1H-피라졸-3-일아미노)-2-메틸피리다진-3(2H)-온(100 mg, 394 μmol, Eq: 1.00) 및 칼륨(2-(아세톡시메틸)-3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)페닐)트라이플루오로보레이트(224 mg, 473 μmol, Eq: 1.2)를 BuOH(4.00 ml)와 합쳐 주황색 용액을 수득하였다. 물(1.00 ml)을 첨가하였다. X-PHOS(18.8 mg, 39.4 μmol, Eq: .1) 및 칼륨 포스페이트 3 염기성(167 mg, 788 μmol, Eq: 2)을 첨가하였다. 비스(다이벤질리덴아세톤)팔라듐(11.3 mg, 19.7 μmol, Eq: 0.05)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 아르곤으로 퍼지하였다. 용액을 100℃에서 1.5시간 동안 오일욕에서 가온하였다. 상기 용액을 실온으로 냉각하였다. 반응 혼합물을 75 mL 물에 붓고, DCM으로 추출하였다. 유기층을 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 25 g, 0 내지 30%(60:10:1 DCM:MeOH:NH4OH)/DCM 구배)로 정제하여 고체를 수득하였다. 상기 고체를 Et2O로 마쇄하여 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(5-(1,5-다이메틸-1H-피라졸-3-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)벤질 아세테이트(186 mg, 81%)를 수득하였다. LC/MS-ESI 관찰값 [M+H]+ 586.
단계 3.
MeOH(15.0 ml) 중의 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(5-(1,5-다이메틸-1H-피라졸-3-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)벤질 아세테이트(186 mg, 318 μmol, Eq: 1.00)에 칼륨 카보네이트(87.8 mg, 635 μmol, Eq: 2.0)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 40℃에서 2시간 동안 교반하였다. 상기 용액을 실온으로 냉각하였다. 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 DCM/물에 용해시켰다. 층을 분리하였다. 수성층을 DCM으로 1회 추출하였다. 유기상을 합친 후, Na2SO4 상에서 건조시켰다. 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 12 g, 0 내지 35%(60:10:1 DCM:MeOH:NH4OH)/DCM 구배)로 정제하여 6-3급-부틸-2-{3-[5-(1,5-다이메틸-1H-피라졸-3-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-2-하이드록시메틸-페닐}-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온(75 mg, 44%)을 수득하였다. LC/MS-ESI 관찰값 [M+H]+ 544. 1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.43(s, 9 H) 2.28(s, 3 H) 3.75(s, 3 H) 3.88(s, 3 H) 4.40(s, 2 H) 5.92(s, 1 H) 7.41-7.60(m, 4 H) 7.62-7.69(m, 1 H) 7.78(s, 1 H) 7.96(s, 1 H) 8.29(d, J=2.64 Hz, 1 H)
I-32의 제조
실시예 32
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-((S)-1-메틸-피롤리딘-3-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온
Figure 112013020897408-pct00193
단계 1.
-78℃에서 500 mL의 3목 플라스크에, THF(180 ml) 중의 3급-부틸 3-옥소피롤리딘-1-카복실레이트(4.5 g, 23.6 mmol, Eq: 1.00)의 용액을 THF(25.2 ml, 25.2 mmol, Eq: 1.07) 중의 리튬 비스(트라이메틸실릴)아마이드 1M로 처리하였다. -78℃에서 15분 동안 교반한 후, THF(60.0 ml) 중의 N-페닐비스(트라이플루오로메탄설폰이미드)(10.2 g, 28.3 mmol, Eq: 1.20)의 용액을 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 실온으로 가온하였다. 반응물을 포화 수성 NaHCO3를 첨가함으로써 켄칭한 후, 에틸 에터로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 300 g, 헥산 중의 0 내지 30%의 EtOAc 구배)로 정제하여 3-트라이플루오로메탄설폰일옥시-2,5-다이하이드로-피롤-1-카복실산 3급-부틸 에스터(2.3 g, 31%)를 수득하였다.
단계 2.
250 mL의 둥근 바닥 플라스크에, 3-트라이플루오로메탄설폰일옥시-2,5-다이하이드로-피롤-1-카복실산 3급-부틸 에스터(2.3 g, 7.25 mmol, Eq: 1.00)를 THF(60 ml)와 합쳐 무색 용액을 수득하였다. 상기 용액을 10분 동안 아르곤으로 퍼지하였다. 칼륨 카보네이트(5.06 g, 36.2 mmol, Eq: 5.0), 5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2-아민(1.91 g, 8.7 mmol, Eq: 1.20), 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(83.8 mg, 72.5 μmol, Eq: 0.01) 및 물(1.2 ml)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 70℃로 가열하고, 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 NaHCO3에 붓고, Et2O로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 60 g, 50%(60:10:1 DCM:MeOH:NH4OH)/DCM)로 정제하여 3급-부틸 3-(6-아미노피리딘-3-일)-2,5-다이하이드로-1H-피롤-1-카복실레이트(1.03 g, 54%)를 수득하였다. LC/MS-ESI 관찰값 [M+H]+ 262.
단계 3.
3급-부틸 3-(6-아미노피리딘-3-일)-2,5-다이하이드로-1H-피롤-1-카복실레이트(1.5 g, 5.74 mmol, Eq: 1.00)를 MeOH(60 ml)에 용해시켰다. 용액을 아르곤으로 퍼지한 후, 활성탄 상의 팔라듐(데구싸)(6.11 mg, 57.4 μmol, Eq: 0.01)으로 처리하였다. 현탁액을 수소로 퍼지하고, 수소 분위기 하에 48시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 45 μm 프릿으로 여과하였다. 여액을 진공에서 농축시켜 3급-부틸 3-(6-아미노피리딘-3-일)피롤리딘-1-카복실레이트(1.63 g)를 수득하였다. 거울상 이성질체를 키랄 SFC HPLC를 사용하여 분리하였다.
예비 조건
예비 컬럼: 다이셀(DAICEL) AD 2x25, 오븐 온도: 40℃
변경자: MEOH 변경자%: 15
유속: 70 mL 화합물 중량: 1610 mg
용해도: MeOH에서 우수함, 용해도: 40 mg/mL
주입량: 10 mg, 주입 부피: 0.3 mL
파장: 220 nM 수집 방법: 강제 시간창(Forced Time Window)
주기 시간: 6분, 시행 회수: 161
(S)-3-(6-아미노-피리딘-3-일)-피롤리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터(307 mg, 20%) 및 (R)-3-(6-아미노-피리딘-3-일)-피롤리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스터(399 mg, 26%) 거울상 이성질체를 수득하였다. 2개 모두의 거울상 이성질체에 대한 LC/MS-ESI 관찰값 [M+H]+ 264.
단계 4.
(S)-3급-부틸 3-(6-아미노피리딘-3-일)피롤리딘-1-카복실레이트(307 mg, 1.17 mmol, Eq: 1.00) 및 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(313 mg, 1.4 mmol, Eq: 1.20)을 다이옥산(8.0 ml) 중의 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(101 mg, 175 μmol, eq: 0.15), 세슘 카보네이트(1.14 g, 3.5 mmol, eq: 3) 및 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(53.4 mg, 58.3 μmol, Eq: 0.05)과 합쳤다. 용액을 아르곤으로 탈기시켰다. 반응 혼합물을 100℃에서 18시간 동안 가열하였다. 상기 용액을 실온으로 냉각하고, 100 ml DCM으로 희석하였다. 유기층을 물로 세척한 후, MgSO4 상에서 건조시켰다. 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 24 g, 50 내지 100% EtOAc/Hex 구배)로 정제하여 (S)-3급-부틸 3-(6-(6-클로로-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)피리딘-3-일)피롤리딘-1-카복실레이트(456 mg, 96%)를 수득하였다. LC/MS-ESI 관찰값 [M+H]+ 405.
단계 5.
(S)-3급-부틸 3-(6-(6-클로로-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)피리딘-3-일)피롤리딘-1-카복실레이트(456 mg, 1.12 mmol, Eq: 1.00)를 포름산(20.0 ml) 및 포름알데히드(37%, 40 ml)의 혼합물에 용해시켰다. 반응 혼합물을 70℃에서 18시간 동안 교반하였다. 상기 용액을 실온으로 냉각하고, 물을 첨가하였다. 수성 용액을 DCM으로 1회 추출하였다. 수성층을 고체 K2CO3를 사용하여 pH = 14로 만들었다. 고체가 형성되고, 이를 여과하여 (S)-6-클로로-2-메틸-4-(5-(1-메틸피롤리딘-3-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온(408 mg, 정량적 수율)을 수득하였다. LC/MS-ESI 관찰값 [M+H]+ 320.
단계 6.
50 mL의 시험 튜브에, (S)-6-클로로-2-메틸-4-(5-(1-메틸피롤리딘-3-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온(100 mg, 313 μmol, Eq: 1.00) 및 칼륨(2-(아세톡시메틸)-3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)페닐)트라이플루오로보레이트(163 mg, 344 μmol, Eq: 1.1)를 BuOH(4.0 ml)와 합쳐 주황색 용액을 수득하였다. 물(1.0 ml)을 첨가하였다. X-PHOS(14.9 mg, 31.3 μmol, Eq: 0.10) 및 칼륨 포스페이트 3 염기성(133 mg, 625 μmol, eq: 2.0)을 첨가하였다. 비스(다이벤질리덴아세톤)팔라듐(8.99 mg, 15.6 μmol, eq: 0.05)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 아르곤으로 퍼지한 후, 100℃에서 18시간 동안 오일욕에서 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각한 후, 75 mL 물에 붓고, EtOAc로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척한 후, MgSO4 상에서 건조시켰다. 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 12 g, 50 내지 100%(60:10:1 DCM:MeOH:NH4OH)/DCM) 구배)로 정제하여 (S)-2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(1-메틸-5-(5-(1-메틸피롤리딘-3-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)벤질 아세테이트 및 6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-((S)-1-메틸-피롤리딘-3-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온(총 105 mg, 52% 총 수율)의 혼합물을 수득하였다. LC/MS-ESI 관찰값 [M+H]+ 652 및 610.
단계 7.
MeOH(10 ml) 중의 (S)-2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(1-메틸-5-(5-(1-메틸피롤리딘-3-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)벤질 아세테이트 및 6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-((S)-1-메틸-피롤리딘-3-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온(105 mg, 161 μmol, Eq: 1.00)의 혼합물에 칼륨 카보네이트(44.5 mg, 322 μmol, Eq: 2.0)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 40℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. 혼합물을을 실온으로 냉각하고, DCM/물로 희석하였다. 층을 분리하였다. 수성층을 DCM으로 1회 추출하였다. 유기층을 합치고, Na2SO4 상에서 건조시켰다. 진공에서 농축시켰다. 생성된 고체를 Et2O로 마쇄하여 6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-((S)-1-메틸-피롤리딘-3-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온(80 mg, 81%)을 수득하였다. LC/MS-ESI 관찰값 [M+H]+ 610. CDCl3에서의 1H NMR은 목적하는 생성물과 상응한다.
I-33의 제조
실시예 33
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-((R)-1-메틸-피롤리딘-3-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온
Figure 112013020897408-pct00194
단계 1.
실시예 32의 단계 4와 유사한 조건 하에 반응을 수행하여 (R)-3급-부틸 3-(6-(6-클로로-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)피리딘-3-일)피롤리딘-1-카복실레이트(555 mg, 90%)를 수득하였다. LC/MS-ESI 관찰값 [M+H]+ 405.
단계 2.
실시예 32의 단계 5와 유사한 조건 하에 반응을 수행하여 (R)-6-클로로-2-메틸-4-(5-(1-메틸피롤리딘-3-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온(807 mg, 정량적)을 수득하였다. LC/MS-ESI 관찰값 [M+H]+ 320.
단계 3.
실시예 32의 단계 6과 유사한 조건 하에 반응을 수행하여 (R)-2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(1-메틸-5-(5-(1-메틸피롤리딘-3-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)벤질 아세테이트 및 6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-((R)-1-메틸-피롤리딘-3-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온(총 135 mg, 66% 총 수율)의 혼합물을 수득하였다. LC/MS-ESI 관찰값 [M+H]+ 652 및 610.
단계 4.
실시예 32의 단계 7과 유사한 조건 하에 반응을 수행하여 6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-((R)-1-메틸-피롤리딘-3-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온(124 mg, 98%)을 수득하였다. LC/MS-ESI 관찰값 [M+H]+ 610. CDCl3에서의 1H NMR은 목적하는 생성물과 상응한다.
I-34의 제조
단계 1.
4-메틸-5'-니트로-3,4,5,6-테트라하이드로-2H-[1,2']바이피라진일의 제조
Figure 112013020897408-pct00195
아르곤 하에 15 mL의 아르곤 건조된 마이크로파 반응 바이알에, 브로모니트로피라진(300 mg, 1.47 mmoL, Eq: 1.00) 및 K2CO3(264 mg, 1.91 mmoL, Eq: 1.3)를 첨가하여 연황색 슬러리를 수득하였다. N-메틸피페라진(192 mg, 212 μl, 1.91 mmol, Eq: 1.3)을 적가하고, 반응 혼합물이 주황색 황색 걸쭉한 슬러리가 되었다. 오일욕에서 1.5시간 동안 70℃로 가열한 후, 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 다이옥산(10 mL)으로 희석하고, 소결 깔때기로 여과하고, DCM(10 mL)으로 세척하였다. 합친 여액 및 세척물을 농축 건조시켜 황색 고체(328 mg, 수율 89%)를 수득하고, 이를 직접 다음 단계에서 사용하였다.
단계 2.
4-메틸-3,4,5,6-테트라하이드로-2H-[1,2']바이피라진일-5'-일아민의 제조
Figure 112013020897408-pct00196
실온에서 2-(4-메틸피페라진-1-일)-5-니트로피라진(328 mg, 1.47 mmol)을 MeOH(15 ml)에 용해시켰다. Pd/C(10%)(50 mg)를 첨가하면서 반응 혼합물을 교반하였다. 반응 혼합물을 H2 벌룬 하에 두고, 실온에서 1.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통하여 여과하고, MeOH(30mL)로 세척하였다. 여액을 스트립핑하고, 톨루엔으로 2회 공비혼합시킨 후, 진공 하에 건조시켜 연갈색 끈적한 물질(280 mg, 수율 89%)을 수득하였다.
단계 3.
6-클로로-2-메틸-4-(4-메틸-3,4,5,6-테트라하이드로-2H-[1,2']바이피라진일-5'-일아미노)-2H-피리다진-3-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00197
15 mL의 마이크로파 반응 바이알(열 및 아르곤으로 건조됨)에, 아르곤 버블링하면서 다이옥산(7 ml) 중의 아미노피라진(280 mg, 1.45 mmol, Eq: 1.00)의 용액을 첨가하였다. 이 용액에 브로모클로로피리다진온(421 mg, 1.88 mmol, Eq: 1.3), Cs2CO3(1.3 g, 3.99 mmol, Eq: 2.75), 잔트포스(126 mg, 217 μmol, Eq: 0.15) 및 비스(다이벤질리덴아세톤)팔라듐(62.5 mg, 109 μmol, Eq: 0.075)을 첨가하였다. 반응물을 밀봉하고, 오일욕에서 105℃(욕조 온도)에서 7시간 동안 가열한 후, 실온에서 밤새 교반하였다. 　반응물을 소결 깔때기로 여과하고, 다이옥산(20 mL)으로 세척하였다. 합친 여액 및 세척물을 농축 건조시켰다. 잔류물을 DCM 중의 10% MeOH에 용해시키고, MeOH 중의 10% NH4OH의 DCM 중의 10% 용액에서 분취용 TLC(9X)로 정제하여 71 mg(15%)의 황색 고체를 수득하였다.
실시예 34
단계 4.
6-3급-부틸-8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[1-메틸-5-(4-메틸-3,4,5,6-테트라하이드로-2H-[1,2']바이피라진일-5'-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-2H-프탈라진-1-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00198
15 mL의 마이크로파 반응 바이알에 7 mL n-부탄올 및 1.4 mL 물 중의 6-클로로-2-메틸-4-(4-메틸-3,4,5,6-테트라하이드로-2H-[1,2']바이피라진일-5'-일아미노)-2H-피리다진-3-온(71 mg, 211 μmol, Eq: 1.00)을 첨가하였다. 현탁액을 아르곤 버블링하였다. 슬러리에 칼륨(2-(아세톡시메틸)-3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)페닐)트라이플루오로보레이트(149 mg, 211 μmol, Eq: 1.00), 이어서 X-PHOS(15.1 mg, 31.7 μmol, Eq: 0.15)를 첨가하면서 교반하였다. 이 혼합물에 비스(다이벤질리덴아세톤)팔라듐(9.12 mg, 15.9 μmol, Eq: 0.075)을 첨가하였다. 튜브를 밀봉하고, 110℃(욕조 온도)에서 3시간 동안 가열한 후, 실온으로 냉각하였다. 물(1.5 mL) 중의 NaOH(84 mg, 2.11 mmol, 10 eq)의 용액을 첨가하고, 반응물을 3일 동안 교반하였다.
층을 분리하고, 수성층을 EtOAc로 추출하고, 이전의 유기층과 합쳤다. 합친 추출물을 4 내지 5 mL로 농축시켰다. 조질 물질을 1/1(EtOAc/헵탄) 중의 11%(MeOH 중의 10% NH4OH)를 포함한 분취용 TLC(11X)로 정제하여 50 mg(36%)의 연황색 고체를 수득하였다. Mp: 235 내지 240℃. 1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) 1.43(s, 9 H), 2.36(s, 3 H), 2.51(t, J=5.0Hz, 4 H), 3.50(t, J=5.0Hz, 4 H), 3.90(s, 3 H), 3.95(t, J=6.2Hz, 1H), 4.40(d, J=6.2Hz, 2H), 7.43-7.65(m, 5 H), 7.88(d, J=1.13 Hz, 1 H), 8.03(d, J=1.51 Hz, 1 H), 8.15(s, 1 H), 8.25(s, 1H), 8.30(d, J=2.5, 1 H).
LCMS(ES)：626(M+H), RT = 1.94분.
I-35의 제조
단계 1.
(5-사이클로부틸아미노메틸-피라진-2-일)-카르밤산 3급-부틸 에스터의 제조
Figure 112013020897408-pct00199
실온에서 아르곤 하에 건조된 100mL 둥근 바닥 플라스크에 사이클로부틸아민(740 mg, 889 μl, 10.4 mmol, Eq: 3), K2CO3(480 mg, 3.47 mmol, Eq: 1.00) 및 THF를 첨가하였다. 혼합물에 THF 중의 (5-브로모메틸-피라진-2-일)-카르밤산 3급-부틸 에스터(1 g, 3.47 mmol, Eq: 1.00) 의 용액을 적가하였다. 아르곤 하에 밤새 실온에서 생성된 반응 혼합물을 강하게 교반하였다. 반응물을 농축시키고, 물/DCM로 희석하고, DCM(2 X 30 mL)로 추출하였다. 합친 유기 추출물을 농축시켜 고체를 수득하였다. 조질 생성물 1/1 EtOAc/Hex 중의 5 내지 10%의 MeOH로 용리하는 LC 크로마토그래피(50g 구형 실리카 컬럼)로 정제하여 348 mg(36%)의 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다.
단계 2.
5-사이클로부틸아미노메틸-피라진-2-일아민의 제조
Figure 112013020897408-pct00200
15 mL의 마이크로파 튜브에 2,2,2-트라이플루오로에탄올(119 mg, 12 ml, 1.19 mmol, Eq: 1.00) 중의 3급-부틸 5-((사이클로부틸아미노)메틸)피라진-2-일카바메이트(330mg, 1.19 mmol, Eq: 1.00)에 용해시키고, 생성된 혼합물을 밀봉 튜브에서 150℃에서 3시간 동안 가열하였다. 조질 반응 혼합물을 진공에서 농축시키고, MeOH로 처리하고, 다시 농축시켜 잔류의 트라이플루오로에탄올을 제거하였다. 물질을 톨루엔으로 공비혼합시켜 200 mg(95%)의 표제 화합물을 수득하였다.
단계 3.
6-클로로-4-(5-사이클로부틸아미노메틸-피라진-2-일아미노)-2-메틸-2H-피리다진-3-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00201
15 mL의 마이크로파 반응 바이알에, 아르곤 버블링 하에 다이옥산(7 ml) 중의 5-((사이클로부틸아미노)메틸)피라진-2-아민(280mg, 1.57 mmol, Eq: 1.00)의 용액을 첨가하였다. 이 용액에 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(456 mg, 2.04 mmol, Eq: 1.3), Cs2CO3(1.3 g, 3.99 mmol, Eq: 2.54), 잔트포스(136 mg, 236 μmol, Eq: 0.15) 및 비스(다이벤질리덴아세톤)팔라듐(67.7 mg, 118 μmol, Eq: 0.075)을 첨가하였다. 반응 튜브를 밀봉하고, 105℃(욕조 온도)에서 7시간 동안 오일욕에서 가열한 후, 실온에서 밤새 교반하였다. 조질 반응 혼합물을 여과하고, 고체를 다이옥산(20 mL) 및 DCM(5 mL)으로 세척하였다. 합친 여액 및 세척물을 농축시키고, 실리카 겔 상에서 흡수시켰다. 혼합물을 (1/1) EtOAc/헵탄 중의 0 내지 10%(MeOH 중의 10% NH4OH)로 용리하는 LC 크로마토그래피(실리카 겔, 60g)로 정제하여 197 mg(39%)의 표제 화합물을 수득하였다.
실시예 35
단계 4.
6-3급-부틸-2-{3-[5-(5-사이클로부틸아미노메틸-피라진-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-2-하이드록시메틸-페닐}-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00202
15 mL의 마이크로파 반응 바이알에 7 mL n-부탄올 및 1.4 mL 물 중의 6-클로로-4-(5-사이클로부틸아미노메틸-피라진-2-일아미노)-2-메틸-2H-피리다진-3-온(71 mg, 221 μmol, Eq: 1.00)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 아르곤 버블링 시켰다. 이 반응물에 아세트산 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-6-(4,4,5,5-테트라메틸-[1,3,2]다이옥사보롤란-2-일)-벤질 에스터(218 mg, 309 μmol, Eq: 1.39), 칼륨 포스페이트 3 염기성(103 mg, 487 μmol), 이어서 X-PHOS(15.8 mg, 33.2 μmol, Eq: 0.15)를 첨가하였다. 혼합물을 아르곤으로 퍼지하고, (다이벤질리덴아세톤)팔라듐(9.55 mg, 16.6 μmol, Eq: 0.075)을 첨가하였다. 튜브를 밀봉하고, 110℃(욕조 온도)에서 3시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 물(1.5mL) 중의 NaOH(189 mg)의 용액을 첨가하고, 혼합물을 37℃에서 3시간 동안 오일욕에서 교반하였다. 조질 반응 혼합물을 물(10 mL)로 희석하고, 다이클로로메탄(3 X 10mL)으로 추출하였다. 유기상을 농축시키고, (1/1) EtOAc/n-헵탄 중의 5 내지 10%(MeOH에서 NH4OH 중의 10%)로 용리하는 실리카 겔 상에서 정제하여 순수한 분획(담황색) 및 혼합 분획(황색)을 수득하였다. 순수한 분획을 농축시키고, DCM에 용해시켰다. 메탄올을 첨가하여 DCM 중의 MeOH의 10% 용매 혼합물로 만들었다. 헵탄을 첨가하여 고체의 침전물이 바로 생겼다. 현탁액을 실온에서 밤새 두고, 생성된 고체를 여과하고, n-헵탄으로 세척하고, 건조시켜 35 mg(25%)의 표제 화합물을 회백색 고체로서 수득하였다. mp: 163-167℃. 1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) 1.43(s, 9 H), 1.70-1.72(m, 4H), 2.19-2.22(m, 2 H), 3.28-3.31(m, 1H), 3.75(t, J=6.2Hz, 1H), 3.80(s, 2H), 3.89(s, 3H), 4.40(d, J=6.2Hz, 2H), 7.43-7.65(m, 5 H), 8.28(d, J=1.13 Hz, 1 H) , 8.30(d, J=2.5, 1 H), 8.36(d, J=1.51 Hz, 1 H), 8.40(s, 1 H), 8.60(s, 1H). LCMS(ES): 611(M+H), RT = 2.511분.
I-36의 제조
단계 1.
다이메틸-[2-(5-니트로-피라진-2-일옥시)-에틸]-아민의 제조
Figure 112013020897408-pct00203
100 ml의 건조된 둥근 바닥 플라스크에 브로모니트로피라진(300 mg, 1.47 mmol, Eq: 1.00) 및 CH3CN(10 ml)를 첨가하였다. 아르곤 하에 혼합물에 K2CO3(203 mg, 1.47 mmol, Eq: 1.00)를 첨가하여 연황색 슬러리를 수득하였다. 슬러리에 NN-다이메틸아미노에탄올(131 mg, 148 μl, 1.47 mmol, Eq: 1.00)을 적가하였다. 반응물이 주황색 슬러리가 되고, 이를 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 여과 케익을 CH3CN(3 X 20 mL)로 세척하였다. 합친 여액 및 세척물을 진공에서 농축시키고, 1/1 EtOAc/Hex 용리제 중의 5 내지 10%(MeOH 중의 10% NH4OH)로 용리하는 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 270 mg(87%)의 표제 화합물을 수득하였다.
단계 2.
5-(2-다이메틸아미노-에톡시)-피라진-2-일아민의 제조
Figure 112013020897408-pct00204
N,N-다이메틸-2-(5-니트로피라진-2-일옥시)에탄아민(270mg, 1.27 mmol, Eq: 1.00)을 함유한 500 mL 둥근 바닥 플라스크에 MeOH(20 ml) 및 10% Pd/C(60mg)를 첨가하였다. 반응물을 수소 분위기 하에 2시간 동안 교반한 후, 0℃에서 3일 동안 보관하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통하여 여과하고, MeOH로 세척하였다. 여액을 진공에서 농축시켜 209 mg(90%)의 표제 화합물 끈적한 고체로서 수득하였다.
단계 3.
6-클로로-4-[5-(2-다이메틸아미노-에톡시)-피라진-2-일아미노]-2-메틸2H-피리다진-3-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00205
아르곤 하에 15 mL의 마이크로파 반응 바이알에, 다이옥산(7 ml) 중의 5-(2-(다이메틸아미노)에톡시)피라진-2-아민(190 mg, 1.04 mmol, Eq: 1.00)의 용액을 첨가하였다. 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(303 mg, 1.36 mmol, Eq: 1.3), Cs2CO3(1.02 g, 3.13 mmol, Eq: 3), 잔트포스(90.5 mg, 156 μmol, Eq: 0.15) 및 비스(다이벤질리덴아세톤)팔라듐(45.0 mg, 78.2 μmol, Eq: 0.075)을 첨가하고, 반응 튜브를 105℃(욕조 온도)에서 7시간 동안 오일욕에서 가열한 후, 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 고체를 다이옥산(20 mL) 및 DCM(5 mL)로 세척하였다. 합친 여액 및 세척물을 농축시켰다. 잔류물을 (1/1) EtOAc/헵탄 중의 0 내지 10%(MeOH 중의 10% NH4OH)로 용리하는 LC 크로마토그래피로 정제하여 339 mg(67%)의 표제 화합물을 수득하였다.
실시예 36
단계 4.
6-3급-부틸-2-(3-{5-[5-(2-다이메틸아미노-에톡시)-피라진-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00206
15 mL의 마이크로파 반응 바이알에, 7 mL n-부탄올 및 1.4 mL 물 중의 6-클로로-4-[5-(2-다이메틸아미노-에톡시)-피라진-2-일아미노]-2-메틸2H-피리다진-3-온(89 mg, 274 μmol, Eq: 1.00)을 첨가하였다. 용액에 칼륨 포스페이트 3 염기성(128 mg, 603 μmol), X-PHOS(19.6 mg, 41.1 μmol, Eq: 0.15) 및 아세트산 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-6-(4,4,5,5-테트라메틸-[1,3,2]다이옥사보롤란-2-일)-벤질 에스터(279 mg, 395 μmol, Eq: 1.44)를 첨가하면서, 교반하고, 아르곤 버블링시켰다. 이 혼합물에 비스(다이벤질리덴아세톤)팔라듐(11.8 mg, 20.6 μmol, Eq: 0.075)을 첨가하고, 반응물을 110℃에서 3시간 동안 가열하였다. 반응물을 실온으로 냉각하고, 물(1.5 mL) 중의 NaOH(220 mg)의 용액으로 처리하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 20시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM(50 mL) 및 물(50 mL)로 희석하였다. 유기상을 분리하고, 물(30 mL)로 세척하고, 농축시켰다. 잔류물을 (1/1) EtOAc/Hex 중의 0 내지 10%(MeOH 중의 10% NH4OH)로 용리하는 실리카 겔 상에서 정제하였다. 순수한 분획을 농축시키고, DCM에 용해시켰다. 헵탄을 첨가하여 생성물을 침전시켰다. 액체를 디캔팅하여 81 mg(46%)의 표제 화합물을 회백색 고체로서 수득하였다. mp: 185-190℃.
1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) 1.43(s, 9 H), 2.37(s, 6 H), 2.74(t, J=5.5Hz,2H), 3.85(t, J=6.2Hz, 1H), 3.92(s, 3H), 4.40(m, 4H), 7.43-7.65(m, 5 H), 7.95(d, J=1.13 Hz, 1 H) , 8.06(d, J=1.51, 1 H), 8.26-8.35(m, 3H). LCMS(ES): 615(M+H), RT = 1.925분.
실시예 37
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-(4-메틸-피페라진-1-일메틸)-피라진-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00207
실시예 35와 유사한 절차를 따르되, 단계 1에서 사이클로부틸아민을 메틸피페라진으로 대체하는 것을 제외하고, LC 크로마토그래피, 이어서 DCM/헵탄으로 재결정화시킨 후, 107 mg(53%)의 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. mp: 215-218℃. 1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) 1.43(s, 9 H), 2.30(s, 3H), 2.40-2.61(m, 8H), 3.67(s, 3H), 3.80(t, J=6.2Hz, 1H), 3.93(s, 3H), 4.45(d, J=6.2Hz, 2H), 7.43-7.65(m, 5 H), 8.30(d, J=2.5, 1 H), 8.33(d, J=1.13 Hz, 1 H) ,8.36(d, J=1.51 Hz, 1 H), 8.43(s, 1 H), 8.65(s, 1H). LCMS(ES): 640(M+H), RT = 2.104분.
실시예 38
6-3급-부틸-2-(3-{5-[5-(2-다이메틸아미노-1,1-다이메틸-에톡시)-피라진-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00208
실시예 36과 유사한 절차를 따르되, 단계 1에서 NN-다이메틸아미노에탄올을 1-다이메틸아미노-2-메틸-프로판-2-올로 대체하는 것을 제외하여 100 mg(50%)의 표제 화합물을 수득하였다. mp: 235-240℃. 1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) 1.43(s, 9 H), 1.56(s, 6H), 2.37(s, 6H), 3.80(t, J=6.2Hz, 1H), 3.90(s, 3H), 4.45(d, J=6.2Hz, 2H), 7.43-7.65(m, 5 H), 7.89(d, J=1.13 Hz, 1 H), 7.96(d, J=1.51 Hz, 1 H), 8.24(s, 1 H), 8.30(d, J=2.5, 1 H), 8.35(s, 1H). LCMS(ES): 643(M+H), RT = 2.516분.
I-39의 제조
단계 1.
[2-(6-브로모-피리다진-3-일옥시)-2-메틸-프로필]-다이메틸-아민의 제조
Figure 112013020897408-pct00209
100 mL의 둥근 바닥 플라스크에, 1-(다이메틸아미노)-2-메틸프로판-2-올(1.48 g, 12.6 mmol, Eq: 1.5), THF 및 3,6-다이브로모피리다진(2 g, 8.41 mmol, Eq: 1.00)을 첨가하였다. 플라스크를 0℃로 냉각한 후, NaH(572 mg, 14.3 mmol, Eq: 1.7)를 한 분획 첨가하였다. 터비드 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 생성된 흑색 반응 혼합물을 실리카 겔 상에서 흡수시키고, 1/1 EtOAc/Hex 중의 0 내지 5%의 MeOH로 용리하는 LC 크로마토그래피로 정제하여 1.5 g(65%)의 표제 화합물을 수득하였다.
단계 2.
벤즈하이드릴리덴-[6-(2-다이메틸아미노-1,1-다이메틸-에톡시)-피리다진-3-일]-아민의 제조
Figure 112013020897408-pct00210
15 ml의 마이크로파 반응 바이알에, 2-(6-브로모피리다진-3-일옥시)-N,N,2-트라이메틸프로판-1-아민(500 mg, 1.82 mmol, Eq: 1.00) 및 톨루엔(7 ml)을 첨가하였다. 혼합물을 아르곤으로 버블링시켰다. 이 혼합물에 (R)-(+)-2,2'-비스(다이페닐포스피노)-1,1'-바이나프틸(170 mg, 274 μmol, Eq: 0.15), Cs2CO3(2.38 g, 7.3 mmol, Eq: 4) 및 Pd(OAc)2(30.7 mg, 137 μmol, Eq: 0.075)을 첨가하였다. 반응물을 7시간 동안 120℃에서 오일욕에서 가열한 후, 실온에서 밤새 교반하였다. 적색 용액을 디켄팅하여 회색 고체를 제거하였다. 상기 고체를 EtOAc로 세척하고, 합친 유기상을 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 1/1 EtOAc/헥산으로 용리하는 LC 크로마토그래피로 정제하여 380 mg(56%)의 표제 화합물을 주황색 오일로서 수득하였다.
단계 3.
6-(2-다이메틸아미노-1,1-다이메틸-에톡시)-피리다진-3-일아민의 제조
Figure 112013020897408-pct00211
10 mL의 배모양 플라스크에, 6-(1-(다이메틸아미노)-2-메틸프로판-2-일옥시)-N-(다이페닐메틸렌)피리다진-3-아민(200 mg, 534 μmol, Eq: 1.00) 및 MeOH(5.34 ml)를 첨가하였다. 혼합물에 하이드록실아민 하이드로클로라이드(66.8 mg, 961 μmol, Eq: 1.8) 및 나트륨 아세테이트(105 mg, 1.28 mmol, Eq: 2.4)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 25분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실리카 상에서 흡수시키고, 1/1 EtOAc/헥산 중의 0 내지 5%(MeOH 중의 10% NH4OH)로 용리하는 LC 크로마토그래피로 정제하여 110 mg(98%)의 표제 화합물을 수득하였다.
단계 4.
6-클로로-4-[6-(2-다이메틸아미노-1,1-다이메틸-에톡시)-피리다진-3-일아미노]-2-메틸-2H-피리다진-3-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00212
아르곤 하에 15 mL의 마이크로파 반응 바이알에, 다이옥산(5 ml) 중의 6-(1-(다이메틸아미노)-2-메틸프로판-2-일옥시)피리다진-3-아민(110 mg, 523 μmol, Eq: 1.00)의 용액을 첨가하였다. 용액에 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(152 mg, 680 μmol, Eq: 1.3), Cs2CO3(511 mg, 1.57 mmol, Eq: 3), 잔트포스(45.4 mg, 78.5 μmol, Eq: 0.15) 및 비스(다이벤질리덴아세톤)팔라듐(22.6 mg, 39.2 μmol, Eq: 0.075)을 첨가하였다. 반응 튜브를 밀봉하고, 110℃(욕조 온도)에서 7시간 동안 오일욕에서 가열한 후, 실온으로 냉각하고, 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 고체를 THF(20 mL)로 세척하였다. 합친 여액 및 세척물을 진공에서 농축시켰다. 반응 혼합물을 실리카 상에서 흡수시키고, 1/1 EtOAc/헵탄 중의 0 내지 5%(MeOH)로 용리하는 LC 크로마토그래피로 정제하여 130 mg(70%)의 표제 화합물을 수득하였다.
실시예 39
단계 5.
6-3급-부틸-2-(3-{5-[6-(2-다이메틸아미노-1,1-다이메틸-에톡시)-피리다진-3-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00213
15 mL의 마이크로파 반응 바이알에, 6-클로로-4-(6-(1-(다이메틸아미노)-2-메틸프로판-2-일옥시)피리다진-3-일아미노)-2-메틸피리다진-3(2H)-온(75 mg, 213 μmol, Eq: 1.00), n-BuOH(6 ml) 및 물(1.5 ml)을 첨가하였다. 아르곤 하에 혼합물에 칼륨(2-(아세톡시메틸)-3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)페닐)트라이플루오로보레이트(101 mg, 213 μmol, Eq: 1.00)를 첨가하였다. X-PHOS(10.6 μl, 31.9 μmol, Eq: 0.15) 및 칼륨 포스페이트 3 염기성(99.3 mg, 468 μmol, Eq: 2.2), 이어서 비스(다이벤질리덴아세톤)팔라듐(9.17 mg, 15.9 μmol, Eq: 0.075)을 첨가하였다. 아르곤 하에 튜브를 밀봉하고, 115℃에서 3시간 동안 오일욕에서 가열한 후, 실온에서 밤새 교반하였다. 이 혼합물에 1 mL 증류수 중의 100 mg NaOH를 첨가하였다. 혼합물을 50℃에서 3시간 동안 오일욕에서 가온한 후, 실온에서 밤새 교반하였다. 조질 반응 혼합물을 물(20 mL)로 희석하고, DCM(2 x 30mL)으로 추출하였다. 합친 유기 추출물을 농축시키고, 실리카 겔 상에서 흡수시켰다. 조질 물질을 1/1 EtOAc/헵탄 중의 0 내지 5%(MeOH 중의 10% NH4OH)로 용리하는 LC 크로마토그래피로 정제하여 67 mg(47%)의 표제 화합물을 담황색 고체로서 수득하였다. Mp: 140-145℃. 1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) 1.43(s, 9 H), 1.67(s, 6H), 2.37(s, 6H), 2.80(s, 2H), 3.80(t, J=6.2Hz, 1H), 3.92(s, 3H), 4.45(d, J=6.2Hz, 2H), 6.90(d, J =9Hz, 1H), 7.10(d, J=9Hz, 1H), 7.43-7.65(m, 5 H), 8.20(s, 1 H), 8.28(d, J=2.5, 1 H), 8.55(s, 1H). LCMS(ES): 643(M+H), RT = 1.942분.
I-40의 제조
단계 1.
6-(1-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로-피리딘-4-일)-피리다진-3-일아민의 제조
Figure 112013020897408-pct00214
15 mL의 마이크로파 반응 바이알에, 7 mL n-부탄올 및 1.4 mL 물 중의 칼륨 포스페이트 3 염기성(1.43 g, 6.74 mmol), 6-브로모피리다진-3-아민(335 mg, 1.93 mmol), 1-메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리디늄 클로라이드(500 mg, 1.93 mmol), X-PHOS(138 mg, 289 μmol) 및 비스(다이벤질리덴아세톤)팔라듐(83 mg, 144 μmol)을 첨가하였다. 튜브를 아르곤 하에 밀봉하고, 115℃에서 3시간 동안 오일욕에서 가열한 후, 실온에서 밤새 교반하였다. 상을 분리하고, 수성상을 EtOAc(10 ml)로 추출하였다. 물(20 mL)을 잔류 수성상에 첨가하고, DCM(3 x 10mL)으로 추출하였다. 추출물을 EtOAc 유기상과 합쳤다. 생성된 용액을 실리카 겔 상에서 흡수시키고, 1/1 EtOAc/헥산 중의 0 내지 10%(MeOH 중의 10% NH4OH)로 용리하는 LC 크로마토그래피로 정제하여 300 mg(82%)의 표제 화합물을 수득하였다.
단계 2.
6-(1-메틸-피페리딘-4-일)-피리다진-3-일아민의 제조
Figure 112013020897408-pct00215
6-(1-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)피리다진-3-아민(300 mg, 1.58 mmol, Eq: 1.00)을 EtOH(30 ml)에 용해시켰다. TLC로 측정시 반응이 완전히 완료될 때까지, 혼합물을 주기를 2회 작동함으로써 실온에서 반응 용액을 Pd/C를 포함한 H-Cube 기구(60 psi)에서 수소화시켰다. 용매를 진공 하에 제거하여 270 mg(89%)의 표제 화합물을 수득하였다.
단계 3.
6-클로로-2-메틸-4-[6-(1-메틸-피페리딘-4-일)-피리다진-3-일아미노]-2H-피리다진-3-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00216
15 mL의 반응 바이알에, 다이옥산(7 ml) 중의 6-(1-메틸피페리딘-4-일)피리다진-3-아민(190 mg, 988 μmol, Eq: 1.00)의 용액을 첨가하였다. 용액을 아르곤 버블링하고, 6-클로로-2-메틸-4-(6-(1-메틸피페리딘-4-일)피리다진-3-일아미노)피리다진-3(2H)-온(160 mg, 430 μmol, 43.5% 수율) 및 Cs2CO3(966 mg, 2.96 mmol, Eq: 3)을 첨가하였다. 이 혼합물에 잔트포스(86 mg, 148 μmol, Eq: 0.15) 및 비스(다이벤질리덴아세톤)팔라듐(42.6 mg, 74.1 μmol, Eq: 0.075)를 첨가하였다. 튜브를 아르곤 하에 밀봉하고, 115℃(욕조 온도)에서 7시간 동안 오일욕에서 가열한 후, 실온에서 밤새 교반하였다. 반응물을 THF(10 mL)로 희석하고, 여과하고, 고체를 THF(3 X 10mL)로 세척하였다. 합친 세척물을 농축시키고, 40g 실리카 겔 컬럼으로 담지시키고, 1/1 EtOAc/헥산 중의 10%(MeOH 중의 10% NH4OH)로 용리하는 고체로 정제하여 160 mg(44%)의 표제 화합물을 주황색 고체로서 수득하였다.
실시예 40
단계 3.
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[6-(1-메틸-피페리딘-4-일)-피리다진-3-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00217
15 mL의 마이크로파 반응 바이알에, n-BuOH(7.5 ml) 및 물(1.5 ml)을 포함한 6-클로로-2-메틸-4-(6-(1-메틸피페리딘-4-일)피리다진-3-일아미노)피리다진-3(2H)-온(160 mg, 478 μmol, Eq: 1.00), 칼륨(2-(아세톡시메틸)-3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)페닐)트라이플루오로보레이트(272 mg, 573 μmol, Eq: 1.2)를 첨가하였다. 상기 용액을 5분 동안 아르곤 버블링 시켰다. 혼합물에 X-PHOS(34.2 mg, 71.7 μmol, Eq: 0.15) 및 칼륨 포스페이트 3 염기성(304 mg, 1.43 mmol, Eq: 3)을 첨가하였다. 혼합물을 5분 동안 아르곤 버블링 시켰다. 이 혼합물에 비스(다이벤질리덴아세톤)팔라듐(20.6 mg, 35.8 μmol, Eq: 0.075)을 첨가하였다. 튜브를 아르곤 하에 밀봉하고, 110℃에서 3시간 동안 오일욕에서 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각하고, 1.5 mL 물 중의 220 mg NaOH의 용액으로 적가 처리하였다. 생성된 혼합물을 50℃에서 3시간 동안 오일욕에서 가열하면서 강하게 교반하였다. 반응 혼합물을 물(20 mL)로 희석하고, DCM(3 x 30mL)으로 추출하였다. 합친 추출물을 농축시키고, 40g 실리카 겔 컬럼 상에서 담지시키고, 1/1 EtOAc/헥산 중의 5 내지 10%(MeOH 중의 10% NH4OH)로 용리하는 고체로 정제하여 61 mg(20%)의 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다. mp: 260-265℃. 1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) 1.43(s, 9 H), 1.80-2.20(m, 6H), 2.37(s, 3H), 2.90-3.07(m, 3H), 3.85(t, J=6.2Hz, 1H), 3.92(s, 3H), 4.45(d, J=6.2Hz, 2H), 7.15(d, J =9Hz, 1H), 7.35(d, J=9Hz, 1H), 7.43-7.65(m, 5 H), 8.28(d, J=2.5, 1 H), 8.32(s, 1 H), 8.78(s, 1H). LCMS(ES): 625(M+H), RT = 2.21분.
I-41의 제조
반응식 G
Figure 112013020897408-pct00218
단계 1.
1-(6-클로로-피리딘-3-일메틸)-4-메틸-피페라진: 6-클로로니코틴알데히드(10 g, 70.6 mmol, Eq: 1.00)를 700 ml DCM에 현탁시켰다. 1-메틸피페라진(8.84 g, 88.3 mmol, Eq: 1.25) 및 아세트산(8.48 g, 8.09 ml, 141 mmol, Eq: 2.0)을 첨가하였다. 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(22.5 g, 106 mmol, Eq: 1.5)를 수분에 걸쳐 분획 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 교반하였다. 3.5시간 후, 출발 물질의 표시가 존재하지 않았다. LCMS는, 생성물이 약간 감소된 출발 물질을 포함하는 것을 나타내었다. 물, 이어서 DCM을 첨가하고, 층을 분리하였다. DCM 층을 포화 암모늄 클로라이드로 세척하고, 수성층을 초기 수성층과 합쳤다. 수성 추출물을 1M NaOH로 염기화시켰다. 생성된 수성층을 DCM으로 3회 추출한 후, 건조시키고, 농축시켜 13.5 g의 연황색 오일(84.7%)을 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.
단계 2.
5-(4-메틸-피페라진-1-일메틸)-피리딘-2-일아민: 질소 하에 밀봉된 튜브에 1-((6-클로로피리딘-3-일메틸)-4-메틸피페라진(13.5 g, 59.8 mmol, Eq: 1.00), 2-(다이사이클로헥실포스피노)바이페닐(4.19 g, 12.0 mmol, Eq: 0.20), 트리스(다이벤질리덴아세톤)-다이팔라듐(0)(5.48 g, 5.98 mmol, Eq: 0.10), 및 리튬 비스(트라이메틸실릴)아마이드(THF 중의 1.0M 용액 150 ml)을 첨가하였다. 추가 150 ml THF를 첨가하였다. 플라스크를 아르곤으로 탈기시켰다. 플라스크를 캡핑하고, 반응물을 100℃에서 밤새 가열하였다. 3M HCl을 DCM과 함께 물질에 첨가하고, 층을 분리하였다. 수성층을 3M NaOH로 염기화 시켰다. 이어서, 수성층을 DCM으로 3회 추출하여 3.2 g(25.9%)의 황색 분말을 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.
단계 3.
6-클로로-2-메틸-4-[5-(4-메틸-피페라진-1-일메틸)-피리딘-2-일아미노]-2H-피리다진-3-온: 5-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-아민(3.2 g, 15.5 mmol, Eq: 1.00), 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(3.64 g, 16.3 mmol, Eq: 1.05), 잔트포스(1.35 g, 2.33 mmol, Eq: 0.15) 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(1.07 g, 1.16 mmol, Eq: 0.075) 및 세슘 카보네이트(15.2 g, 46.5 mmol, Eq: 3.00)를 질소 하에 밀봉된 튜브에 첨가하였다. 다이옥산(103 ml)을 첨가하고, 상기 용액을 질소로 탈기시켰다. 튜브를 캡핑하고, 110℃에서 밤새 가열하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통하여 여과하고, 케익을 DCM으로 세척하였다. 1M HCl을 첨가하고, 층을 분리하였다. 수성층을 2M NaOH로 염기화 시키고, DCM으로 수회 추출하였다. 대량의 용매를 증발시키고, 잔류물을 에터로 마쇄하였다. 형성된 고체를 여과하고, 건조시켜 2.75 g(50.8%)의 생성물을 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.
단계 4.
아세트산 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-6-{1-메틸-5-[5-(4-메틸-피페라진-1-일메틸)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-벤질 에스터: 6-클로로-2-메틸-4-(5-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온(3.1 g, 8.89 mmol, Eq: 1.00), 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질 아세테이트(7.69 g, 15.6 mmol, Eq: 1.75), X-PHOS(424 mg, 0.89 mmol, Eq: 0.10), 비스(다이벤질리덴아세톤)팔라듐(255 mg, 0.44 mmol, Eq: 0.05) 및 트라이칼륨 포스페이트(4.72 g, 22.2 mmol, Eq: 2.50)를 큰 마이크로파 바이알에 첨가하였다. 바이알을 캡핑하고, 퍼지하였다. N-부탄올(35.5 ml) 및 물(9 ml)을 첨가하고, 바이알을 다시 퍼지하고, 질소로 역채움 하였다. 반응물을 115℃에서 2.5시간 동안 모래욕에서 가열하였다. 물 및 DCM을 반응물에 첨가하고, 층을 분리하였다. 유기층을 셀라이트로 여과하고, 농축시키고, DCM 중의 0 내지 25%의 메탄올의 구배를 사용하는 크로마토그래피로 정제하였다. 보호기를 갖는 분획 및 보호기가 없는 분획을 합쳐 4.5 g(약 74%)을 수득하였다.
실시예 41
단계 5.
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-(4-메틸-피페라진-1-일메틸)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온: 아세트산 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-6-{1-메틸-5-[5-(4-메틸-피페라진-1-일메틸)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-벤질 에스터(4.5 g, 6.61 mmol, Eq: 1.00) 및 칼륨 카보네이트(1.37 g, 9.92 mmol, Eq: 1.50)를 메탄올에 용해시키고, 40℃에서 1시간 동안 가열하였다. 반응물을 실온으로 냉각하고, 물을 적가하였다. 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 형성된 고체를 여과하고, 물로 세척하고, 진공 오븐에서 주말에 걸쳐 건조시켜 3.64 g(86.2%)의 회백색 결정질 고체를 수득하였다. 1H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.39(s, 1 H) 8.53(s, 1 H) 8.50(d, J=2.3 Hz, 1 H) 8.15(d, J=1.9 Hz, 1 H) 7.86(d, J=1.5 Hz, 1 H) 7.74(dd, J=13.4,1.7 Hz, 1 H) 7.57-7.62(m, 1 H) 7.50-7.57(m, 2 H) 7.43-7.49(m, 2 H) 4.52-4.61(m, 1 H) 4.40(br. s., 2 H) 3.77(s, 3 H) 3.36(s, 2H) 2.30(br. s., 8 H) 2.11(s, 3 H) 1.37(s, 9 H). MS: (M+H)+ = 639.
I-42의 제조
실시예 42
Figure 112013020897408-pct00219
실시예 41에 기재된 절차를 사용하여, 단계 1에서, 1-메틸피페라진 대신 2-메톡시에탄아민으로 대체하여 6-3급-부틸-8-플루오로-2-[2-하이드록시메틸-3-(5-{5-[(2-메톡시-에틸아미노)-메틸]-피리딘-2-일아미노}-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일)-페닐]-2H-프탈라진-1-온을 수득하였다. 합성의 단계 2 이전의 절차를 사용하여, 2차 아민을 BOC 기로 보호하였다. 이 화합물의 합성을 위한 끝에서 두번째 단계에서, 용매로서 THF를 사용하고, 1M NaOH를 사용하여 칼륨 카보네이트 외의 아세테이트 보호기를 제거하고, 60℃에서 2시간 동안 가열한 후, 실온에서 밤새 교반하였다. 1,1,1,3,3,3-헥사플루오로-2-프로판올(용매로서 초과량이 사용됨) 중의 화합물을 마이크로파에서 140℃에서 30분 동안 가열함으로써 BOC 보호기를 합성의 마지막 단계에서 제거하였다. DCM 중의 5 내지 25%의 메탄올의 구배를 사용하여 크로마토그래피로 정제한 후, 75 mg의 생성물을 황색 고체로서 수득하였다. 1H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.37(s, 1 H) 8.51-8.54(m, 2 H) 8.20(d, J=2.3Hz, 1 H) 7.87(s, 1 H) 7.75(d, J=14.4 Hz, 1 H) 7.64-7.69(m, 1 H) 7.42-7.59(m, 4 H)4.57(t, J=5.3 Hz, 1 H) 4.42(br. s., 2 H) 3.77(s, 3 H) 3.61(s, 2 H) 3.37(t,J=5.7 Hz, 2 H) 3.21(s, 3 H) 2.55-2.64(m, 2 H) 1.37(s,9 H). MS: (M+H)+ = 614. MP = 108-110℃.
I-43의 제조
실시예 41(단계 1)에 기재된 바와 같으나, 1-메틸피페라진 대신 (1S,4S)-2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-카복실산 3급-부틸 에스터로 대체하는 것을 제외하여 (1S,4S)-5-(6-클로로-피리딘-3-일메틸)-2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-카복실산 3급-부틸 에스터를 수득하였다.
Figure 112013020897408-pct00220
(1S,4S)-2-(6-클로로-피리딘-3-일메틸)-5-메틸-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]-헵탄의 제조: (1S,4S)-5-(6-클로로-피리딘-3-일메틸)-2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-카복실산 3급-부틸 에스터(1.1 g, 3.4 mmol)를 11.3 ml의 포름산 및 22.6 ml의 포르말린의 혼합물에 용해시켰다. 혼합물을 70℃에서 4시간 동안 가열한 후, 실온으로 냉각하였다. 물을 첨가하고, 수성층을 DCM으로 추출하였다. 수성층을 고체 칼륨 카보네이트로 조심스럽게 염기화시키고, DCM으로 3회 추출하였다. 조질 생성물을 DCM 중의 5 내지 25%의 메탄올의 구배를 사용하는 크로마토그래피로 정제하였다. 암모늄 하이드록사이드(약 2%)를 메탄올에 첨가하였다. 500 mg의 무색 액체(61.9%)를 수득하였다.
실시예 43
Figure 112013020897408-pct00221
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-((1S,4S)-5-메틸-2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.1]헵트-2-일메틸)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온의 제조: 실시예 41에 기재된 절차에 따라서, 단계 2에서, 1-((6-클로로피리딘-3-일메틸)-4-메틸피페라진 대신 (1S,4S)-2-(6-클로로-피리딘-3-일메틸)-5-메틸-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]-헵탄으로 대체하고, THF 중의 NaOH를 사용하여 칼륨 카보네이트 외에 아세테이트 보호기를 제거하여 6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-((1S,4S)-5-메틸-2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.1]헵트-2-일메틸)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온을 수득하였다. 46 mg(98%)의 회백색 분말을 수득하였다. 1H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.38(s, 1 H) 8.54(s, 1 H) 8.52(d, J=2.3 Hz, 1 H) 8.20(d, J=1.9 Hz, 1 H) 7.87(s, 1 H) 7.72-7.76(m, 1 H) 7.64(dd, J=8.5, 2.1 Hz, 1H) 7.43-7.59(m, 4 H) 4.58(t, J=6.0 Hz, 1 H) 4.41(br. s., 2 H) 3.79(s, 3 H) 3.49-3.61(m, 2 H) 3.18(s, 1 H) 3.09(s, 1 H) 3.49-3.61(m,2H) 2.54-2.66(m, 2 H) 2.24(s, 3 H) 1.57(s, 2 H) 1.38(s, 9 H). MS: (M+H)+ = 651. MP = 183-186℃.
I-44의 제조
실시예 41(단계 1-2)에 기재된 절차에 따라서, 단계 1에서, 1-메틸피페라진 대신 2-메톡시에탄아민으로 대체하여 6-클로로-4-(5-{[(2-메톡시-에틸)-메틸-아미노]-메틸}-피리딘-2-일아미노)-2-메틸-2H-피리다진-3-온을 수득하였다. 2차 아민을 표준 절차를 사용하여 BOC 기로 보호하였다.
Figure 112013020897408-pct00222
6-클로로-4-(5-{[(2-메톡시-에틸)-메틸-아미노]-메틸}-피리딘-2-일아미노)-2-메틸-2H-피리다진-3-온의 제조: 3급-부틸(6-(6-클로로-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)피리딘-3-일)메틸(2-메톡시에틸)카바메이트(95 mg, 0.22 mmol)를 0.75 ml의 포름산 및 1.4 ml의 포르말린에 용해시켰다. 반응물을 70℃에서 4시간 동안 가열하였다. 반응물을 실온으로 냉각하고, 물을 첨가하고, 수성층을 DCM으로 추출하였다. 수성층을 고체 칼륨 카보네이트로 조심스럽게 염기화시키고, DCM으로 3회 추출하였다. 조질 생성물을 DCM 중의 5 내지 15%의 메탄올의 구배를 사용하는 크로마토그래피로 정제하여 50 mg(66.0%)의 백색 분말을 수득하였다.
실시예 44
Figure 112013020897408-pct00223
6-3급-부틸-8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[5-(5-{[(2-메톡시-에틸)-메틸-아미노]-메틸}-피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-2H-프탈라진-1-온의 제조: 실시예 41에 기재된 절차에 따라서, 단계 3에서, 6-클로로-2-메틸-4-(5-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온 대신 6-클로로-4-(5-{[(2-메톡시-에틸)-메틸-아미노]-메틸}-피리딘-2-일아미노)-2-메틸-2H-피리다진-3-온으로 대체하여 6-3급-부틸-8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[5-(5-{[(2-메톡시-에틸)-메틸-아미노]-메틸}-피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-2H-프탈라진-1-온을 수득하였다. 스즈키 반응에서, 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질 아세테이트 대신 칼륨(2-(아세톡시메틸)-3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)페닐)트라이플루오로보레이트(Eq: 1.2)를 사용하였다. 메탄올 중의 칼륨 카보네이트를 사용하는 아세테이트 보호기를 제거한 후, 물을 적가하고, 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 형성된 고체를 여과하고, 물, 이어서 에터로 세척하고, 진공 오븐에서 건조시켜 52 mg의 결정질 백색 고체를 수득하였다. 1H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.38(s, 9 H) 2.13(s, 3 H) 2.47( s, 2 H) 3.22(s, 3 H) 3.39-3.49(m, 4 H) 3.79(s, 3 H) 4.43(br. s., 2 H) 4.58(br. s., 1 H) 7.41-7.65(m, 5 H) 7.75(d, J=13.22 Hz, 1 H) 7.87(s, 1 H) 8.17(s, 1 H) 8.46-8.59(m, 2 H) 9.40(s, 1 H). MS: (M+H)+ = 628.
I-45의 제조
실시예 45
Figure 112013020897408-pct00224
6-(4-메틸-피페라진-1-일)-피리다진-3-일아민: 6-클로로-피리다진-3-일아민(2.0 g, 15.4 mmol, Eq: 1.00)을 1-메틸피페라진(15.5 g, 154 mmol, Eq: 10.0)에 용해시키고, 165℃에서 4시간 동안 모래욕에서 가열하였다. 이어서, 반응 혼합물을 마이크로파 반응기에서 200℃에서 2시간 동안 가열하였다. 조질 생성물을 DCM 중의 10% 메탄올(약 2% 암모늄 하이드록사이드 포함)을 사용하는 크로마토그래피로 정제하였다. 여전히 순수하지 않은 생성물에 수성 나트륨 바이카보네이트 및 DCM을 첨가하고, 층을 분리하였다. 수성층을 DCM으로 2회 역추출하였다. 합친 유기층을 농축시키고, 이소프로필 아세테이트로 마쇄하고, 여과하고, 건조시켜 730 mg(24.5%)의 황색 고체를 수득하였다.
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[6-(4-메틸-피페라진-1-일)-피리다진-3-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온: 실시예 41에 기재된 절차에 따라서, 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질 아세테이트 대신 칼륨(2-(아세톡시메틸)-3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)페닐)트라이플루오로보레이트(Eq: 1.2)로 대체하여 6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[6-(4-메틸-피페라진-1-일)-피리다진-3-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온을 수득하였다. 메탄올 중의 칼륨 카보네이트를 포함하는 아세테이트 보호기를 제거한 후, 생성물을 DCM 중의 20% 메탄올을 사용하는 분취용 TLC로 정제하여 30 mg의 최종 생성물을 수득하였다. 1H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.38(s, 9 H) 2.21(s, 3 H) 2.34-2.44(m, 4 H) 3.44-3.53(m, 4 H) 3.79(s, 3 H) 4.41(br. s., 1 H) 4.50-4.61(m, 1 H) 7.39(d, J=9.82 Hz, 1 H) 7.44-7.60(m, 3 H) 7.66(d, J=9.82 Hz, 1 H) 7.75(d, J=13.22 Hz, 1 H) 7.87(s, 1 H) 8.45(s, 1 H) 8.51(d, J=2.27 Hz, 1 H) 9.38(s, 1 H). MS: (M+H)+ = 626.
I-46의 제조
반응식 H
Figure 112013020897408-pct00225
단계 1.
(1S,4S)-3급-부틸 5-메틸-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-카복실레이트: (1S,4S)-3급-부틸 2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-카복실레이트(2.5 g, 12.6 mmol, Eq: 1.00)를 126 ml의 메탄올에 용해시켰다. 포름알데히드(23.5 ml의 37% 수성 용액) 및 아세트산(2.17 ml)을 첨가하였다. 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(4.01 g, 18.9 mmol, Eq: 1.50)를 분획 첨가하였다. 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응물을 회전 증발기 상에서 농축시켰다. DCM 및 나트륨 바이카보네이트를 잔류물에 첨가하고, 층을 분리하였다. 유기층을 희석된 바이카보네이트로 세척하고, 농축시켜 추가 정제 없이 사용하였다.
단계 2.
(1S,4S)-2-메틸-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄: (1S,4S)-3급-부틸 5-메틸-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-카복실레이트(2.5 g, 11.8 mmol)를 50%의 DCM 및 TFA의 혼합물에 용해시켰다. 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시켰다. DCM 및 수성 나트륨 하이드록사이드를 잔류물에 첨가하고, 층을 분리하였다. 수성층을 DCM으로 2번 초과로 역추출하였다. 합친 유기층을 농축시키고, 조질 생성물을 추가 정제 없이 사용하였다.
단계 3.
6-((1S,4S)-5-메틸-2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.1]헵트-2-일)-피리다진-3-일아민: 6-클로로피리다진-3-아민(200 mg, 1.54 mmol, Eq: 1.00) 및 (1S,4S)-2-메틸-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄(693 mg, 6.18 mmol, Eq: 4.00)을 작은 둥근 바닥 플라스크에 합치고, 200℃에서 2시간 동안 가열하였다. 어두운 유리질의 잔류물을 DCM에 용해시키고, DCM 중의 0 내지 25%의 메탄올(2.5% 암모늄 하이드록사이드 포함)의 구배를 사용하는 크로마토그래피로 정제하여 약 100 mg(31.6%)의 갈색 점성 오일을 수득하였다.
단계 4.
아세트산 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-6-{1-메틸-5-[6-((1S,4S)-5-메틸-2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.1]헵트-2-일)-피리다진-3-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-벤질 에스터: 6-((1S,4S)-5-메틸-2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.1]헵트-2-일)-피리다진-3-일아민(100 mg, 0.487 mmol, Eq: 1.00), 아세트산 2-(5-브로모-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일)-6-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-벤질 에스터(284 mg, 0.512 mmol, Eq: 1.05), 잔트포스(42.3 mg, 0.073 mmol, Eq: 0.15), 트리스(다이벤질리덴아세톤)-다이팔라듐(0)(33.5 mg, 0.036 mmol, Eq: 0.075) 및 세슘 카보네이트(476 mg, 1.46 mmol, Eq: 3.00)를 마이크로파 바이알에 첨가하였다. 바이알을 캡핑하고, 퍼지하였다. 탈기된 다이옥산(약 5 ml)을 시린지로 첨가하고, 바이알을 다시 퍼지하고, 질소로 역채움하였다. 반응물을 100℃에서 밤새 모래욕에서 가열하였다. 반응물을 셀라이트를 통하여 여과하고, 농축시켰다. 조질 생성물을 DCM 중의 0 내지 25%의 메탄올의 구배를 사용하는 크로마토그래피로 정제하였다. LCMS 및 NMR은, 주요한 불순물들을 도시하였다. 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다.
실시예 46
단계 5.
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[6-((1S,4S)-5-메틸-2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.1]헵트-2-일)-피리다진-3-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온: 이전 반응으로부터의 순수하지 않은 혼합물을 메탄올에 용해시키고, 칼륨 카보네이트를 첨가하고, 반응물을 40℃에서 1시간 동안 가열하였다. 물을 첨가하고, 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 형성된 고체를 여과하고, 건조시켰다. 조질 생성물을 DCM 중의 10% 메탄올에서의 분취용 TLC로 정제하였다. 플레이트를 2회 용리하여 5 mg의 연황색 고체를 약 85% 순도로 수득하였다. 1H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.40(s, 9 H) 1.70-1.79(m, 1 H) 1.83-1.92(m, 1 H) 2.26(s, 3 H) 2.42(d, J=9.06 Hz, 1 H) 2.70-2.85(m, 1 H) 3.37-3.55(m, 4 H) 3.79(s, 3 H) 4.33-4.66(m, 3 H) 7.06(d, J=9.82 Hz, 1 H) 7.44-7.57(m, 3 H) 7.64(d, J=9.44 Hz, 1 H) 7.75(dd, J=13.41, 1.70 Hz, 1 H) 7.88(d, J=1.89 Hz, 1 H) 8.42(s, 1 H) 8.52(d, J=2.64 Hz, 1 H) 9.32(s, 1 H). MS: (M+H)+ = 638.
I-47의 제조
실시예 47
Figure 112013020897408-pct00226
단계 1.
6-(6-클로로-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로-피리다진-4-일아미노)-니코틴산 메틸에스터의 제조
Figure 112013020897408-pct00227
메틸 6-아미노니코틴에이트(2 g, 13.1 mmol, Eq: 1.00), 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(2.94 g, 13.1 mmol, Eq: 1), 및 (9,9-다이메틸-9H-잔텐-4,5-다이일)비스-(다이페닐포스핀)(400 mg, 691 μmol, Eq: 0.0526)을 가열 하에 DMF(300 ml)에 용해시켰다. 아르곤 분위기 하에 세슘 카보네이트(12.8 g, 39.4 mmol, Eq: 3), 이어서 Pd2(dba)3(301 mg, 329 μmol, Eq: 0.025)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 105℃로 가열하였다. 조질 반응 혼합물을 물(400 mL)에 붓고, 생성된 침전물을 여과하고, 물로 세척하였다. 생성된 여과 케익을 다이클로로메탄에 용해시켰다. 유기상을 염수로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 목적하는 생성물을 회백색 고체(1.523g)로서 수득하였다.
(M+H)+ = 294.9 m/e
단계 2.
6-(6-클로로-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로-피리다진-4-일아미노)-니코틴산의 제조
Figure 112013020897408-pct00228
메틸 6-(6-클로로-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)니코틴에이트(1.523 g, 5.17 mmol, Eq: 1.00)를 다이옥산(90 ml)에 현탁시켰다. 1 M 리튬 하이드록사이드(10.3 ml, 10.3 mmol, Eq: 2)를 적가하였다. 연갈색 현탁액을 밤새 실온에서 교반하였다. 1 M 리튬 하이드록사이드(10.3 ml, 10.3 mmol, Eq: 2)를 다시 첨가하고, 주말에 걸쳐 교반하였다. 에틸 아세테이트/암모늄 클로라이드 용액의 혼합물을 반응 혼합물에 첨가하였다. 생성된 침전물을 여과함으로써 수집하였다. 침전물을 물(200 ml)로 마쇄하고, 여과하고, 에틸 아세테이트로 세척하고, 진공에서 건조시켜 연황색 고체(1.13 g)를 수득하였다. (M+H)+ = 278.8 m/e
단계 3.
4-[5-(아제티딘-1-카본일)-피리딘-2-일아미노]-6-클로로-2-메틸-2H-피리다진-3-온
Figure 112013020897408-pct00229
6-(6-클로로-2-메틸-3-옥소-2 및 3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)니코틴산(100 mg, 356 μmol, Eq: 1.00)을 다이클로로메탄에 현탁시켰다. 옥살일 클로라이드(67.8 mg, 46.8 μl, 534 μmol, Eq: 1.5), 이어서 한 방울의 DMF(10μl)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시켰다. 산 클로라이드를 다음 단계에서 사용하였다. 이를 다이클로로메탄(10 ml)에 용해시켰다. 여기에 아제티딘(20.3 mg, 24.0 μl, 356 μmol, Eq: 1.00), 이어서 DIEA(230 mg, 311 μl, 1.78 mmol, Eq: 5)를 첨가하고, 반응물을 밤새 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 다이클로로메탄으로 희석하고, 포화 나트륨 카보네이트 용액으로 세척하고, 염수로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 연갈색 고체(145 mg)를 수득하고, 이를 DCM/Hex/EtOAc로 마쇄하여 목적하는 생성물을 황색 고체(56 mg)로서 수득하였다.
(M+H)+ = 320.0 m/e.
단계 4.
2-(3-{5-[5-(아제티딘-1-카본일)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-6-3급-부틸-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온의 제조
4-(5-(아제티딘-1-카본일)피리딘-2-일아미노)-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(56 mg, 175 μmol, Eq: 1.00), 칼륨(2-(아세톡시메틸)-3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)페닐)트라이플루오로보레이트(83.1 mg, 175 μmol, Eq: 1), x-phos(13.0 mg, 27.3 μmol, Eq: 0.156) 및 칼륨 포스페이트 3 염기성(81.8 mg, 385 μmol, Eq: 2.2)을 10% 수성 메탄올 용액(10 ml)에 용해시켰다. 반응물을 탈기시켰다. 마지막으로 비스(다이벤질리덴아세톤)팔라듐(9.06 mg, 15.8 μmol, Eq: 0.09)을 첨가하고, 반응 혼합물을 100℃에서 100분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 여과 케익을 메탄올로 세척하였다. 합친 여액 및 세척물을 농축시키고, 에틸 아세테이트 및 물로 추출하였다. 유기상을 분리하고, 염수로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트에 용해시켰다. 침전물이 형성될 때까지, 헥산을 첨가하였다. 침전물을 여과하여 조질 생성물을 황색 고체로서 수득하였다. 이 조질 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 황색 고체를 수득하고, 이를 다이옥산에 용해시켰다. 1 M 나트륨 하이드록사이드 용액(263 μl, 263 μmol, Eq: 1.5)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 1 M 나트륨 하이드록사이드 용액(10 당량)으로 다시 처리하고, 4시간 동안 40℃로 가열하였다. 반응물을 다이클로로메탄 및 물로 희석하고, 다이클로로메탄으로 추출하고, 농축시킨 후, 조질 고체를 수득하였다. 조질 생성물을 에틸 아세테이트 중의 0 내지 10%의 메탄올로 용리하는 12g 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 2-(3-{5-[5-(아제티딘-1-카본일)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1, 6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-6-3급-부틸-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온을 연황색 고체(16 mg)로서 수득하였다.
(M+H)+ = 610.1 m/e
1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.42(s, 9 H) 2.38(quin, J=7.70 Hz, 2 H) 3.79(br. s, 1 H) 3.91(s, 3 H) 4.25(br. s., 2 H) 4.43(br. s., 4 H) 6.99(d, J=8.69 Hz, 1 H) 7.44-7.70(m, 5 H) 8.00(dd, J=8.69, 2.27 Hz, 1 H) 8.29(d, J=2.64 Hz, 1 H) 8.47(s, 1 H) 8.60(d, J=2.27 Hz, 1 H) 8.71(s, 1 H).
I-48의 제조
실시예 48
Figure 112013020897408-pct00230
실시예 47과 유사한 절차에 따라서, 단계 3에서 아제티딘 대신 티오모폴린 1,1-다이옥사이드로 대체하는 것을 제외하여, 6-3급-부틸-2-(3-{5-[5-(1,1-다이옥소-1λ6-티오모폴린-4-카본일)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온을 수득하였다. (M+H)+ = 687.9 m/e.
1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.43(s, 9 H) 3.12(br. s., 4 H) 3.76(br. s, 1 H) 3.91(s, 3 H) 4.13(br. s., 4 H) 4.44(s, 2 H) 7.04(d, J=8.31 Hz, 1 H) 7.44-7.67(m, 5 H) 7.78(dd, J=8.69, 2.27 Hz, 1 H) 8.29(d, J=2.64 Hz, 1 H) 8.46(d, J=2.27 Hz, 1 H) 8.54(s, 1 H) 8.71(s, 1 H)
I-49의 제조
실시예 49
Figure 112013020897408-pct00231
실시예 47과 유사한 절차에 따라서, 단계 3에서, 아제티딘 대신 2-옥사-6-아자-스피로[3.3]헵탄으로 대체하는 것을 제외하여 2-(3-(5-(5-(2-옥사-6-아자스피로[3.3]헵탄-6-카본일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)-2-(하이드록시메틸)페닐)-6-3급-부틸-8-플루오로프탈라진-1(2H)-온을 수득하였다. (M+H)+ = 652.1 m/e
1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.43(s, 9 H) 3.92(s, 3 H) 4.29-4.61(m, 6 H) 4.83(s, 4 H) 7.00(d, J=8.69 Hz, 1 H) 7.45-7.68(m, 5 H) 7.98(dd, J=8.69, 2.27 Hz, 1 H) 8.29(d, J=2.64 Hz, 1 H) 8.50(s, 1 H) 8.58(d, J=2.27 Hz, 1 H) 8.72(s, 1 H)
I-50의 제조
실시예 50
Figure 112013020897408-pct00232
실시예 1과 유사한 절차에 따라서, 단계 3에서, 아제티딘 대신 2-메틸-2,6-다이아자-스피로[3.3]헵탄으로 대체하여 6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-(하이드록시메틸)-3-(1-메틸-5-(5-(6-메틸-2,6-다이아자스피로[3.3]헵탄-2-카본일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)페닐)프탈라진-1(2H)-온을 수득하였다. (M+H)+ = 665.1 m/e.
1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.38-1.47(m, 9 H) 2.38(s, 3 H) 3.52(br. s., 4 H) 3.91(s, 3 H) 4.26(br. s., 2 H) 4.44(s, 4 H) 6.96(d, J=8.69 Hz, 1 H) 7.41-7.78(m, 5 H) 7.95(dd, J=8.50, 2.08 Hz, 1 H) 8.30(d, J=2.27 Hz, 1 H) 8.48(s, 1 H) 8.57(d, J=1.89 Hz, 1 H) 8.68-8.71(m, 1 H)
I-51의 제조
실시예 51
Figure 112013020897408-pct00233
실시예 47과 유사한 절차에 따라서, 단계 3에서, 아제티딘 대신 N,N-다이메틸-에탄-1,2-다이아민으로 대체하는 것을 제외하여 6-(6-(3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-2-(하이드록시메틸)페닐)-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)-N-(2-(다이메틸아미노)에틸)니코틴아마이드를 수득하였다. (M+H)+ = 641.1 m/e.
1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.41(s, 9 H) 2.35(s, 6 H) 2.62(br. t, J=1.00, 1.00 Hz, 2 H) 3.56(t, J=4.90 Hz, 2 H) 3.84(m, J=7.20 Hz, 1 H) 3.92(s, 3 H) 4.44(br. s., 2 H) 6.98(d, J=8.69 Hz, 1 H) 7.46-7.71(m, 5 H) 8.14(d, J=9.44 Hz, 1 H) 8.29(s, 1 H) 8.46(s, 1 H) 8.72-8.82(m, 2 H)
I-52의 제조
실시예 52
Figure 112013020897408-pct00234
실시예 47과 유사한 절차에 따라서, 단계 3에서, 아제티딘 대신 2-메틸아미노-에탄올로 대체하는 것을 제외하여 6-(6-(3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-2-(하이드록시메틸)페닐)-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)-N-(2-하이드록시에틸)-N-메틸니코틴아마이드를 수득하였다. (M+H)+ = 628.1 m/e.
1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.39-1.47(m, 9 H) 3.15(s, 3 H) 3.59-3.90(m, 4 H) 3.91(s, 3 H) 4.43(d, J=5.67 Hz, 2 H) 6.99(d, J=8.31 Hz, 1 H) 7.45-7.69(m, 5 H) 7.81(dd, J=8.69, 2.27 Hz, 1 H) 8.29(d, J=2.64 Hz, 1 H) 8.46(s, 1 H) 8.50(d, J=2.27 Hz, 1 H) 8.70(s, 1 H)
I-53의 제조
실시예 53
Figure 112013020897408-pct00235
실시예 47과 유사한 절차에 따라서, 단계 3에서, 아제티딘 대신 아제티딘-3-카보니트릴로 대체하는 것을 제외하여 1-(6-(6-(3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-2-(하이드록시메틸)페닐)-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)니코틴오일)아제티딘-3-카보니트릴을 수득하였다. MS(m-1) = 633.2.
1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.44(s, 9 H) 3.54-3.68(m, 2 H) 3.93(s, 3 H) 4.44(s, 2 H) 4.49-4.71(m, 2 H) 7.01(d, J=8.69 Hz, 1 H) 7.45-7.70(m, 5 H) 7.98(dd, J=1.00 Hz, 1 H) 8.30(d, J=2.27 Hz, 1 H) 8.50(s, 1 H) 8.56(s, 1 H) 8.73(s, 1 H).
I-54의 제조
실시예 54
Figure 112013020897408-pct00236
실시예 47과 유사한 절차에 따라서, 단계 3에서, 아제티딘 대신 피롤리딘-3-올로 대체하는 것을 제외하여 6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-(하이드록시메틸)-3-(5-(5-(3-하이드록시피롤리딘-1-카본일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)페닐)프탈라진-1(2H)-온을 수득하였다. (M-H) = 640.1 m/e.
1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.41(s, 9 H) 1.99(br. s., 2 H) 3.38-4.00(m, 9 H) 4.42(br. s., 2 H) 4.48-4.60(m, 1 H) 6.93-7.07(m, 1 H) 7.39-7.72(m, 5 H) 7.80-7.89(m, 1 H) 8.29(d, J=2.27 Hz, 1 H) 8.43-8.61(m, 2 H) 8.70(s, 1 H).
I-55의 제조
실시예 55
Figure 112013020897408-pct00237
실시예 47과 유사한 절차에 따라서, 단계 3에서, 아제티딘 대신 1-메틸아미노-펜탄-3-올로 대체하는 것을 제외하여 6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-(하이드록시메틸)-3-(5-(5-(4-하이드록시피페리딘-1-카본일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)페닐)프탈라진-1(2H)-온을 수득하였다. (M+H)+ = 654.0 m/e.
1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.42(s, 9 H) 1.58(br. s., 3 H) 1.87-2.02(m, 2 H) 3.29-3.45(m, 2 H) 3.65(s, 1 H) 3.81(t, J=1.00 Hz, 1 H) 3.93(s, 3 H) 3.97-4.07(m, 2 H) 4.43(d, J=6.42 Hz, 2 H) 6.99(d, J=8.31 Hz, 1 H) 7.45-7.69(m, 5 H) 7.76(dd, J=8.31, 2.27 Hz, 1 H) 8.29(d, J=2.64 Hz, 1 H) 8.41-8.45(m, 2 H) 8.69(s, 1 H).
I-56의 제조
Figure 112013020897408-pct00238
실시예 56
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-(4-메틸-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온
Figure 112013020897408-pct00239
에탄올(20 mL) 중의 1-메틸-4-(6-니트로피리딘-3-일)피페라진(500 mg, 2.25 mmol)의 용액에 10% Pd/C(80 mg, 0.75 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 수소 분위기 하에 18시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 에탄올로 세척하고, 농축시켜 5-(4-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-아민을 수득하였다.
다이옥산(10 ml) 중의 5-(4-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-아민(172 mg, 0.90 mmol), 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(200 mg, 0.90 mmol) 세슘 카보네이트(1.02 g, 3.13 mmol) 및 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(77.7 mg, 0.13 mmol)의 용액을 아르곤으로 플러슁한 후, 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(61.5 mg, 0.07 mmol)을 첨가하고, 생성된 용액을 90℃에서 18시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각하고, 다이클로로메탄 및 물로 희석하였다. 층을 분리하고, 수성층을 다이클로로메탄(2 x 25 mL)으로 추출하였다. 유기상을 합치고, 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 생성된 혼합물을 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 메탄올 및 다이클로로메탄으로 마쇄하고, 여과하고, 에터로 세척하고, 건조시켜 6-클로로-4-[5-(4-메틸-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노]-2-메틸-2H-피리다진-3-온(223 mg, 74%)을 황색 고체로서 수득하였다.
부탄올(4 ml) 및 물(1 mL) 중의 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질 아세테이트(221 mg, 0.45 mmol), 6-클로로-4-(5-(4-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-2-메틸피리다진-3(2H)-온(100 mg, 0.30 mmol), 칼륨 포스페이트(159 mg, 0.75 mmol) 및 다이사이클로헥실(2',4',6'-트라이이소프로필바이페닐-2-일)포스핀(14.2 mg, 0.03 mmol)의 용액을 아르곤으로 플러슁한 후, (비스[다이벤질리덴아세톤] 다이팔라듐)(8.59 mg, 0.01 mmol)을 첨가하고, 생성된 용액을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 생성된 혼합물을 냉각하고, 암모늄 클로라이드의 포화 용액에 붓고, 메틸렌 클로라이드(2 X 100 mL)로 추출하였다. 층을 분리하고, 유기상을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 혼합물을 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 다이옥산(10 mL)에 용해시키고, 리튬 하이드록사이드 용액(0.5 mL, 2.0 M)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 생성된 혼합물을 포화 암모늄 클로라이드 용액에 붓고, 메틸렌 클로라이드(2 X 50 mL)로 추출하였다. 층을 분리하고, 유기상을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 혼합물을 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 24 g, 다이클로로메탄 중의 1 내지 14%의 메탄올)로 정제하고, 다이클로로메탄 및 이소프로필 아세테이트로 재결정화시켜 6-3급-부틸-2-(3-{5-[5-(4-메틸-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온(45 mg, 24%)을 연황색 고체로서 수득하였다. mp: 260-264℃. 1H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.38(s, 9 H) 2.20(s, 3 H) 2.33-2.46(m, 4 H) 2.98-3.19(m, 4 H) 3.77(s, 3 H) 4.27-4.69(m, 3 H) 7.24-8.07(m, 8 H) 8.32-8.74(m, 2 H) 9.23(s, 1 H).
I-57의 제조
Figure 112013020897408-pct00240
실시예 57
6-3급-부틸-2-(3-{5-[5-((S)-1,2-다이하이드록시-에틸)-피라진-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온
Figure 112013020897408-pct00241
다이옥산(10 ml) 중의 (S)-5-(2,2-다이메틸-1,3-다이옥솔란-4-일)피라진-2-아민(WO 2004052869에 의해 제조됨, 실시예 54, 175 mg, 0.90 mmol), 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(200 mg, 0.90 mmol), 세슘 카보네이트(1.02 g, 3.13 mmol) 및 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(77.7 mg, 0.13 mmol)의 용액을 아르곤으로 플러슁한 후, 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(61.5 mg, 0.07 mmol)을 첨가하고, 생성된 용액을 90℃에서 18시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각하고, 다이클로로메탄(50 mL) 및 물로 희석하였다. 층을 분리하고, 수성층을 다이클로로메탄(2 x 25 mL)으로 추출하였다. 유기상을 합치고, 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 생성된 혼합물을 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 형성된 침전물을 여과함으로써 단리시키고, 에터로 세척하고, 진공 하에 건조시켜 6-클로로-4-[5-((S)-2,2-다이메틸-[1,3]다이옥솔란-4-일)-피라진-2-일아미노]-2-메틸-2H-피리다진-3-온(150 mg, 50%)을 황색 고체로서 수득하였다.
부탄올(4 ml) 및 물(1 mL) 중의 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질 아세테이트(307 mg, 0.62 mmol), (S)-6-클로로-4-(5-(2,2-다이메틸-1,3-다이옥솔란-4-일)피라진-2-일아미노)-2-메틸피리다진-3(2H)-온(150 mg, 0.44 mmol), 칼륨 포스페이트(236 mg, 0.01 mmol) 및 다이사이클로헥실(2',4',6'-트라이이소프로필바이페닐-2-일)포스핀(21.2 mg, 0.04 mmol)의 용액을 아르곤으로 플러슁한 후, (비스[다이벤질리덴아세톤] 다이팔라듐)(12.8 mg, 0.02 mmol)을 첨가하고, 생성된 용액을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 생성된 혼합물을 냉각하고, 암모늄 클로라이드의 포화 용액에 붓고, 메틸렌 클로라이드(2 X 100 mL)로 추출하였다. 층을 분리하고, 유기상을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 혼합물을 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 다이옥산(10 mL)에 용해시키고, 리튬 하이드록사이드 용액(0.5 mL, 2.0 M)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 생성된 혼합물을 포화 암모늄 클로라이드 용액에 붓고, 메틸렌 클로라이드(2 X 150 mL)로 추출하였다. 층을 분리하고, 유기상을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 혼합물을 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 24 g, 다이클로로메탄 중의 1 내지 7%의 메탄올)로 정제하여 (S)-6-3급-부틸-2-(3-(5-(5-(2,2-다이메틸-1,3-다이옥솔란-4-일)피라진-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)-2-(하이드록시메틸)페닐)-8-플루오로프탈라진-1(2H)-온(99 mg, 36%)을 연황색 고체로서 수득하였다.
테트라하이드로푸란(4 mL) 중의 (S)-6-3급-부틸-2-(3-(5-(5-(2,2-다이메틸-1,3-다이옥솔란-4-일)피라진-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)-2-(하이드록시메틸)페닐)-8-플루오로프탈라진-1(2H)-온(99 mg, 0.16 mmol)의 용액에 염산(1.0 N, 4 mL)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 암모늄 클로라이드 용액에 붓고, 다이클로로메탄(2 x 50 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 혼합물을 여과하고, 증발시키고, 잔류물을 다이클로로메탄 및 이소프로필 아세테이트로 재결정화시켜 6-3급-부틸-2-(3-{5-[5-((S)-1,2-다이하이드록시-에틸)-피라진-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온(15.4 mg, 17%)을 회백색 고체로서 수득하였다. Mp: 218-224℃. 1H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.37(s, 10 H) 3.44-3.95(m, 5 H) 4.32-4.82(m, 4 H) 5.40(d, J=4.91 Hz, 1 H) 7.22-7.99(m, 5 H) 8.16-8.65(m, 3 H) 8.78(s, 1 H) 9.81(s, 1 H).
I-58의 제조
Figure 112013020897408-pct00242
실시예 58
아세트산 2-[5-(5-아제티딘-1-일메틸-1-메틸-1H-피라졸-3-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-6-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-벤질 에스터
Figure 112013020897408-pct00243
0℃에서 무수 메탄올(20 ml) 중의 5-니트로-1H-피라졸-3-카복실산(1.13 g, 7.19 mmol)의 용액에 티온일 클로라이드(2.23 g, 1.37 ml, 18.7 mmol)를 적가하였다. 생성된 용액을 2시간 동안 가열 환류시켰다. 냉각된 용액을 증발 건조시켜 5-니트로-2H-피라졸-3-카복실산 메틸 에스터(1.17 g, 95%)를 백색 고체로서 수득하였다.
무수 다이메틸 포름아마이드(20 mL) 중의 메틸 5-니트로-1H-피라졸-3-카복실레이트(1.87 g, 10.9 mmol)의 용액에 칼륨 카보네이트(3.02 g, 21.9 mmol) 및 메틸 아이오다이드(2.02 g, 0.89 mL, 14.2 mmol)를 첨가하고, 생성된 용액을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 물(1 x 150 mL)로 희석하고, 다이클로로메탄(3 x 75 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 혼합물을 여과하고, 증발시키고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 25g, 헥산 중의 20 내지 60%의 다이클로로메탄)로 정제하여 2-메틸-5-니트로-2H-피라졸-3-카복실산 메틸 에스터 및 1-메틸-5-니트로-1H-피라졸-3-카복실산 메틸 에스터(1.64 g, 81%)의 혼합물을 백색 고체로서 수득하였다.
0℃에서 테트라하이드로푸란(20 mL) 중의 2-메틸-5-니트로-2H-피라졸-3-카복실산 메틸 에스터 및 1-메틸-5-니트로-1H-피라졸-3-카복실산 메틸 에스터(1.18 g, 6.37 mmol)의 용액에 리튬 알루미늄 하이드라이드 용액(테트라하이드로푸란 중의 1.0M, 7.65 mL, 7.65 mmol)을 적가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 20분 동안 교반하였다. 이 용액에 에틸 아세테이트(1 mL), 이어서 소량 결정의 나트륨 설페이트 10수화물을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 30분 동안 교반한 후, 여과하고, 여과 케익을 에틸 아세테이트로 세척하고, 여액을 증발시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 80 g, 헥산 중의 50 내지 70%의 에틸 아세테이트)로 정제하여 1-메틸-3-니트로-1H-피라졸-5-일)메탄올(496 mg, 50%)을 백색 고체로서 수득하였다.
0℃에서 클로로포름(10 mL) 중의 (1-메틸-3-니트로-1H-피라졸-5-일)메탄올(496 mg, 3.16 mmol)의 용액에 인 트라이브로마이드(854 mg, 0.30 mL, 3.16 mmol)를 시린지로 적가하였다. 생성된 용액을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 0℃로 냉각하고, 다이클로로메탄(50 ml)으로 희석하였다. 생성된 용액을 포화 수성 나트륨 바이카보네이트(20 mL)로 염기성(pH 8.5)을 만들었다. 층을 분리하고, 수성층을 다이클로로메탄(3 x 20 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 생성된 혼합물을 여과하고, 진공에서 농축시키고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 40 g, 헥산 중의 20 내지 40%의 에틸 아세테이트)로 정제하여 5-(브로모메틸)-1-메틸-3-니트로-1H-피라졸(436 mg, 63%)을 백색 고체로서 수득하였다.
테트라하이드로푸란(10 mL) 중의 5-(브로모메틸)-1-메틸-3-니트로-1H-피라졸(436 mg, 1.98 mmol)의 용액에 아제티딘(141 mg, 0.17 mL, 2.48 mmol) 및 다이이소프로필에틸 아민(307 mg, 0.42 mL, 2.38 mmol)을 적가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 용액을 농축시키고, 잔류물을 다이클로로메탄(50 mL)에 용해시키고, 물(50 mL)로 세척하였다. 수성층을 메틸렌 클로라이드(2 x 50 mL)로 추출하고, 유기상을 합치고, 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 생성된 혼합물을 여과하고, 증발시키고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(40 g, 다이클로로메탄 중의 1 내지 5%의 메탄올)로 정제하여 5-(아제티딘-1-일메틸)-1-메틸-3-니트로-1H-피라졸(349 mg, 90%)을 무색 오일로서 수득하였다.
에탄올(20 mL) 중의 5-(아제티딘-1-일메틸)-1-메틸-3-니트로-1H-피라졸(349 mg, 1.78 mmol)의 용액에 탄소 상의 팔라듐(10%, 50 mg)으로 처리하였다. 생성된 혼합물을 수소(1 atm) 하에 48시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트 패드로 여과하고, 상기 패드를 에탄올로 세척하였다. 여액을 진공에서 농축시켜 5-(아제티딘-1-일메틸)-1-메틸-1H-피라졸-3-아민(292 mg, 99%)을 연황색 오일로서 수득하였다.
다이옥산(10 ml) 중의 5-(아제티딘-1-일메틸)-1-메틸-1H-피라졸-3-아민(292 mg, 1.76 mmol), 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(393 mg, 1.76 mmol) 세슘 카보네이트(2.00 g, 6.15 mmol) 및 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(152 mg, 0.26 mmol)의 용액을 아르곤으로 플러슁한 후, 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(121 mg, 0.13 mmol)을 첨가하고, 생성된 용액을 90℃에서 18시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각하고, 다이클로로메탄(50 mL) 및 물로 희석하였다. 층을 분리하고, 수성층을 다이클로로메탄(2 x 25 mL)으로 추출하였다. 유기상을 합치고, 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 생성된 혼합물을 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 형성된 침전물을 여과함으로써 단리시키고, 에터로 세척하고, 진공 하에 건조시켜 4-(5-(아제티딘-1-일메틸)-1-메틸-1H-피라졸-3-일아미노)-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(272 mg, 50%)을 연황색 고체로서 수득하였다.
부탄올(4 ml) 및 물(1 mL) 중의 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질 아세테이트(498 mg, 1.01 mmol), 4-(5-(아제티딘-1-일메틸)-1-메틸-1H-피라졸-3-일아미노)-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(183 mg, 0.59 mmol), 칼륨 포스페이트(315 mg, 1.48 mmol) 및 다이사이클로헥실(2',4',6'-트라이이소프로필바이페닐-2-일)포스핀(28.3 mg, 0.06 mmol)의 용액을 아르곤으로 플러슁한 후, (비스[다이벤질리덴아세톤] 다이팔라듐)(17.0 mg, 0.03 mmol)을 첨가하고, 생성된 용액을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 생성된 혼합물을 냉각하고, 암모늄 클로라이드의 포화 용액에 붓고, 메틸렌 클로라이드(2 X 100 mL)로 추출하였다. 층을 분리하고, 유기상을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 혼합물을 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 다이옥산(10 mL)에 용해시키고, 리튬 하이드록사이드 용액(0.5 mL, 2.0M)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 생성된 혼합물을 포화 암모늄 클로라이드 용액에 붓고, 메틸렌 클로라이드(2 X 150 mL)로 추출하였다. 층을 분리하고, 유기상을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 혼합물을 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 24g, 다이클로로메탄 중의 1 내지 10%의 메탄올)로 정제하여 아세트산 2-[5-(5-아제티딘-1-일메틸-1-메틸-1H-피라졸-3-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-6-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-벤질 에스터(112 mg, 32%)를 회백색 고체로서 수득하였다. mp: 214-217℃. 1H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.01-1.55(m, 10 H) 1.72-2.08(m, 2 H) 2.90-3.67(m, 11 H) 4.28-4.62(m, 3 H) 6.08(s, 1 H) 7.22-8.08(m, 6 H) 8.50(d, J=1.89 Hz, 1 H) 9.15(s, 1 H).
I-59의 제조
Figure 112013020897408-pct00244
실시예 59
아세트산 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-6-[1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-벤질 에스터
Figure 112013020897408-pct00245
0℃에서 무수 메탄올(20 ml) 중의 5-니트로-1H-피라졸-3-카복실산(2.0 g, 12.7 mmol)의 용액에 티온일 클로라이드(3.94 g, 2.42 ml, 33.1 mmol)를 적가하였다. 생성된 용액 2시간 동안 가열 환류시켰다. 냉각된 용액을 증발 건조시키고, 잔류물을 메탄올(20 ml)로 처리하였다. 생성된 용액을 증발 건조시켜 5-니트로-2H-피라졸-3-카복실산 메틸 에스터(1.97 g, 90%)를 백색 고체로서 수득하였다.
아세톤(30 mL) 중의 메틸 5-니트로-1H-피라졸-3-카복실레이트(1g, 5.84 mmol)의 용액에 칼륨 카보네이트(4.04 g, 29.2 mmol) 및 1,2-다이브로모에탄(3.29 g, 1.51 mL, 17.5 mmol)을 첨가하고, 생성된 용액을 2시간 동안 가열 환류시켰다. 생성된 혼합물을 0℃로 냉각하고, 여과하고, 농축시키고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 60 g, 헥산 중의 20 내지 40%의 에틸 아세테이트)로 정제하여 메틸 1-(2-브로모에틸)-3-니트로-1H-피라졸-5-카복실레이트(1.03 g, 63%)를 백색 고체로서 수득하였다.
0℃로 냉각된, 테트라하이드로푸란(20 mL) 중의 메틸 1-(2-브로모에틸)-3-니트로-1H-피라졸-5-카복실레이트(500 mg, 1.8 mmol)의 용액에 리튬 보로하이드라이드(78.3 mg, 3.6 mmol)를 분획 첨가하였다. 생성된 혼합물을 밤새 실온으로 가온하였다. 생성된 혼합물에 에틸 아세테이트(20 ml) 및 물(50 ml)을 첨가하였다. 이상 혼합물을 분리하고, 수성층을 에틸 아세테이트(3 x 20 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고, 생성된 혼합물을 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 아날로직스 시스템(AnaLogix system) SF25-40 g 컬럼, 헥산 중의 20 내지 60%의 에틸 아세테이트)로 정제하여 (1-(2-브로모에틸)-3-니트로-1H-피라졸-5-일)메탄올(158 mg, 35%)을 연황색 오일로서 수득하였다.
0℃로 냉각된, 클로로포름(20 mL) 중의 (1-(2-브로모에틸)-3-니트로-1H-피라졸-5-일)메탄올(482 mg, 1.93 mmol)의 용액에 인 트라이브로마이드(522 mg, 0.18 mL, 1.93 mmol)를 시린지로 적가하였다. 생성된 용액을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 0℃로 냉각하고, 다이클로로메탄(50 ml)으로 희석하였다. 생성된 용액을 포화 수성 나트륨 바이카보네이트(20 mL)로 염기성(pH 8.5)으로 만들었다. 층을 분리하고, 수성층을 다이클로로메탄(3 x 20 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층을 염수(30 mL)로 세척하고, 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 생성된 혼합물을 여과하고, 진공에서 농축시켜 1-(2-브로모에틸)-5-(브로모메틸)-3-니트로-1H-피라졸(469 mg, 78%)을 황색 고체로서 수득하였다.
테트라하이드로푸란(20 mL) 중의 1-(2-브로모에틸)-5-(브로모메틸)-3-니트로-1H-피라졸(469 mg, 1.5 mmol)의 용액에 메틸아민(테트라하이드로푸란 중의 2.0M, 5.25 mL, 10.5 mmol)을 적가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 76시간 동안 교반하였다. 용액을 농축시키고, 생성된 고체를 에틸 아세테이트(10 mL) 및 10% 수성 칼륨 카보네이트(10 mL)의 혼합물과 교반하였다. 층을 분리하고, 수성상을 에틸 아세테이트(2 x30 mL)로 추출하였다. 유기층을 합치고, 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 생성된 혼합물을 여과하고, 진공에서 부피를 감소시키고, 침전물을 여과함으로써 제거하였다. 여액을 농축시키고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 12 g, 다이클로로메탄 중의 2 내지 10%의 메탄올)로 정제하여 5-메틸-2-니트로-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진(67 mg, 24%)을 연황색 고체로서 수득하였다.
에탄올(15 mL) 중의 5-메틸-2-니트로-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진(67 mg, 0.37 mmol)의 용액에 탄소 상의 팔라듐(10%, 20 mg)으로 처리하고, 아르곤으로 플러슁 하였다. 생성된 혼합물을 수소(1 atm) 하에 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트 패드로 여과하고, 상기 패드를 에탄올로 세척하였다. 여액을 진공에서 농축시켜 5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-아민(72 mg, 정량적)을 연황색 오일로서 수득하였다.
다이옥산(6 ml) 중의 5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-아민(55.7 mg, 0.37 mmol), 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(81.8 mg, 0.37 mmol) 세슘 카보네이트(417 mg, 1.28 mmol) 및 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(31.8 mg, 0.05 mmol)의 용액을 아르곤으로 플러슁한 후, 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(25.1 mg, 0.03 mmol)을 첨가하고, 생성된 용액을 90℃에서 18시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각하고, 다이클로로메탄(50 mL) 및 물로 희석하였다. 층을 분리하고, 수성층을 다이클로로메탄(2 x 25 mL)으로 추출하였다. 유기상을 합치고, 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 생성된 혼합물을 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 24 g, 다이클로로메탄 중의 2 내지 7%의 메탄올)로 정제하여 6-클로로-2-메틸-4-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온(61 mg, 57%)을 연황색 고체로서 수득하였다.
부탄올(4 ml) 및 물(1 mL) 중의 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질 아세테이트(153 mg, 0.31 mmol), 6-클로로-2-메틸-4-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온(61 mg, 0.21 mmol), 칼륨 포스페이트(110 mg, 0.52 mmol) 및 다이사이클로헥실(2',4',6'-트라이이소프로필바이페닐-2-일)포스핀(9.87 mg, 0.02 mmol)의 용액을 아르곤으로 플러슁한 후, (비스[다이벤질리덴아세톤] 다이팔라듐)(5.95 mg, 0.01 mmol)을 첨가하고, 생성된 용액을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 생성된 혼합물을 냉각하고, 암모늄 클로라이드의 포화 용액에 붓고, 메틸렌 클로라이드(2 X 100 mL)로 추출하였다. 층을 분리하고, 유기상을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 혼합물을 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 다이옥산(10 mL)에 용해시키고, 리튬 하이드록사이드 용액(0.5 mL, 2.0 M)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 생성된 혼합물을 포화 암모늄 클로라이드 용액에 붓고, 메틸렌 클로라이드(2 X 150 mL)로 추출하였다. 층을 분리하고, 유기상을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 혼합물을 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 24 g, 다이클로로메탄 중의 1 내지 10%의 메탄올)로 정제하여 아세트산 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-6-[1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-벤질 에스터(56 mg, 46%)를 연황색 고체로서 수득하였다. mp: 188-193℃. 1H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.37(s, 9 H) 2.34(s, 3 H) 2.77(t, J=5.29 Hz, 2 H) 3.50(s, 2 H) 3.63-4.06(m, 5 H) 4.17-4.67(m, 3 H) 5.98(s, 1 H) 7.33-8.05(m, 6 H) 8.50(d, J=2.64 Hz, 1 H) 9.24(s, 1 H).
I-60의 제조
Figure 112013020897408-pct00246
실시예 60
아세트산 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-6-[1-메틸-5-(5-옥세탄-3-일-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-벤질 에스터
Figure 112013020897408-pct00247
0℃에서 무수 메탄올(50 ml) 중의 5-니트로-1H-피라졸-3-카복실산(4.88 g, 31.1 mmol)의 용액에 티온일 클로라이드(9.61 g, 5.9 ml, 80.8 mmol)를 적가하였다. 생성된 용액을 2시간 동안 가열 환류시켰다. 냉각된 용액을 증발 건조시켜 5-니트로-2H-피라졸-3-카복실산 메틸 에스터(4.58 g, 86%)를 회백색 고체로서 수득하였다.
아세톤(100 mL) 중의 메틸 5-니트로-1H-피라졸-3-카복실레이트(5.97 g, 34.9 mmol)의 용액에 칼륨 카보네이트(24.1 g, 174 mmol) 및 1,2-다이브로모에탄(19.7 g, 9.02 ml, 105 mmol)을 첨가하고, 생성된 용액을 2시간 동안 가열 환류시킨 후, 실온에서 밤새 교반하였다. 생성된 혼합물을 여과하고, 농축시키고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, SF65-400g, 헥산 중의 20 내지 70%의 에틸 아세테이트)로 정제하여 메틸 1-(2-브로모에틸)-3-니트로-1H-피라졸-5-카복실레이트(4.86 g, 50%)를 연황색 고체로서 수득하였다.
0℃에서 테트라하이드로푸란(100 mL) 중의 리튬 보로하이드라이드(755 mg, 34.7 mmol)의 현탁액에 테트라하이드로푸란(10 mL) 중의 메틸 1-(2-브로모에틸)-3-니트로-1H-피라졸-5-카복실레이트(4.82 g, 17.3 mmol)의 용액을 적가하면서 0℃ 미만으로 온도를 유지시켰다. 생성된 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물에 에틸 아세테이트(20 ml) 및 물(20 ml)을 천천히 첨가하였다. 이상혼합물을 분리하고, 수성층을 에틸 아세테이트(3 x 20 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고, 생성된 혼합물을 여과하고, 진공에서 농축시켜 (1-(2-브로모에틸)-3-니트로-1H-피라졸-5-일)메탄올(4.24 g, 98%)을 연황색 오일로서 수득하였다.
0℃로 냉각된, 클로로포름(100 mL) 중의 (1-(2-브로모에틸)-3-니트로-1H-피라졸-5-일)메탄올(4.24 g, 17.0 mmol)의 용액에 인 트라이브로마이드(4.59 g, 1.6 ml, 17.0 mmol)를 시린지로 적가하였다. 생성된 용액을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 0℃로 냉각하고, 다이클로로메탄(50 ml)으로 희석하였다. 생성된 용액을 포화 수성 나트륨 바이카보네이트(20 mL)로 염기성(pH 8.5)으로 만들었다. 층을 분리하고, 수성층을 다이클로로메탄(3 x 50 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층을 염수(30 mL)로 세척하고, 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 생성된 혼합물을 여과하고, 진공에서 농축시키고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, SF40-240 g, 헥산 중의 15 내지 40%의 에틸 아세테이트)로 정제하여 1-(2-브로모에틸)-5-(브로모메틸)-3-니트로-1H-피라졸(3.56 g, 67%)을 백색 고체로서 수득하였다.
아세토니트릴(20 mL) 중의 1-(2-브로모에틸)-5-(브로모메틸)-3-니트로-1H-피라졸(500 mg, 1.6 mmol)의 용액에 옥세탄-3-아민(140 mg, 1.92 mmol) 및 다이이소프로필에틸 아민(372 mg, 0.50 ml, 2.88 mmol)을 적가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 용액을 농축시키고, 잔류물을 에틸 아세테이트(50 mL)에 용해시키고, 물(50 mL)로 세척하고, 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 생성된 혼합물을 여과하고, 증발시키고, 잔류물 플래쉬 크로마토그래피(SF25-40 g, 헥산 중의 50 내지 100%의 에틸 아세테이트)로 정제하여 2-니트로-5-옥세탄-3-일-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진(255 mg, 71%)을 연황색 고체로서 수득하였다.
에탄올(20 mL) 중의 2-니트로-5-옥세탄-3-일-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진(255 mg, 1.13 mmol)의 용액에 탄소 상의 팔라듐(10%, 60 mg)으로 처리하고, 아르곤으로 플러슁 하였다. 생성된 혼합물을 수소(1 atm) 하에 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트 패드로 여과하고, 상기 패드를 에탄올로 세척하였다. 여액을 진공에서 농축시켜 5-옥세탄-3-일-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아민(217 mg, 99%)을 회백색 고체로서 수득하였다.
다이옥산(8 ml) 중의 5-옥세탄-3-일-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아민(110 mg, 0.57 mmol), 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(127 mg, 0.57 mmol) 세슘 카보네이트(646 mg, 1.98 mmol) 및 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(49.2 mg, 0.08 mmol)의 용액을 아르곤으로 플러슁 한 후, 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(38.9 mg, 0.04 mmol)을 첨가하고, 생성된 용액을 90℃에서 18시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각하고, 다이클로로메탄(50 mL) 및 물로 희석하였다. 층을 분리하고, 수성층을 다이클로로메탄(2 x 25 mL)으로 추출하였다. 유기상을 합치고, 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 생성된 혼합물을 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 형성된 침전물을 여과함으로서 단리시키고, 에터로 세척하고, 진공 하에 건조시켜 6-클로로-2-메틸-4-(5-옥세탄-3-일-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-2H-피리다진-3-온(113 mg, 59%)을 연황색 고체로서 수득하였다.
부탄올(8 ml) 및 물(2 mL) 중의 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질 아세테이트(249 mg, 0.50 mmol), 6-클로로-2-메틸-4-(5-옥세탄-3-일-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-2H-피리다진-3-온(113 mg, 0.34 mmol), 칼륨 포스페이트(178 mg, 0.84 mmol) 및 다이사이클로헥실(2',4',6'-트라이이소프로필바이페닐-2-일)포스핀(16.0 mg, 0.03 mmol)의 용액을 아르곤으로 플러슁 한 후, (비스[다이벤질리덴아세톤] 다이팔라듐)(9.65 mg, 0.02 mmol)을 첨가하고, 생성된 용액을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 생성된 혼합물을 냉각하고, 암모늄 클로라이드의 포화 용액에 붓고, 메틸렌 클로라이드(2 X 100 mL)로 추출하였다. 층을 분리하고, 유기상을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 혼합물을 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 다이옥산(10 mL)에 용해시키고, 리튬 하이드록사이드 용액(0.5 mL, 2.0 M)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 생성된 혼합물을 포화 암모늄 클로라이드 용액에 붓고, 메틸렌 클로라이드(2 X 100 mL)로 추출하였다. 층을 분리하고, 유기상을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 혼합물을 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 24 g, 다이클로로메탄 중의 1 내지 10%의 메탄올)로 정제하여 아세트산 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-6-[1-메틸-5-(5-옥세탄-3-일-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-벤질 에스터(113 mg, 54%)를 연황색 고체로서 수득하였다. mp: 180-185℃. 1H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.37(s, 9 H) 2.66-2.92(m, 2 H) 3.40-3.83(m, 6 H) 3.98(t, J=5.48 Hz, 2 H) 4.26-4.82(m, 7 H) 6.01(s, 1 H) 7.36-8.00(m, 6 H) 8.50(d, J=2.64 Hz, 1 H) 9.25(s, 1 H).
I-61의 제조
반응식 I
Figure 112013020897408-pct00248
단계 1.
3급-부틸 4-(6-아미노피리딘-3-일)피페리딘-1-카복실레이트의 제조
Figure 112013020897408-pct00249
메탄올(50 ml) 중의 3급-부틸 4-(6-아미노피리딘-3-일)피페리딘-1-카복실레이트(3g, 9.83 mmol)를 밤새 50 psi 하에 10% Pd/C(314 mg, 295 μmol)로 수소화 시켰다. 촉매를 여과하고, 여액을 진공에서 농축시켜 무색 오일(2.73 g)을 수득하였다. (M+H)+ = 278 m/e.
단계 2.
3급-부틸 4-(6-(6-클로로-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)피리딘-3-일)피페리딘-1-카복실레이트의 제조
Figure 112013020897408-pct00250
이 반응을 I-6의 단계 6에 기재된 유사한 조건 하에 수행하였다.
무수 다이옥산(80 ml) 중의 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(2.42 g, 10.8 mmol ), 3급-부틸 4-(6-아미노피리딘-3-일)피페리딘-1-카복실레이트(2.73 mg, 9.83 mmol), 잔트포스(853 mg, 1.47 mmol) 및 세슘 카보네이트(9.61 g, 29.5 mmol)의 용액을 진공 탈기시키고, 아르곤 분위기 하에 두었다. 이 혼합물에 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(203 mg, 197 μmol)을 첨가하고, 진공 탈기 주기를 반복하였다. 물질을 90℃(오일욕)에서 가열하면서 밤새 강하게 교반하였다. 플라스크를 주위 온도로 냉각하고, 내용물을 셀라이트의 플러그를 통하여 여과하고, 다이옥산으로 잘 세척하고, 여액을 농축시키고, 생성된 잔류물을 에터/에틸 아세테이트의 1:1 비율로 마쇄하였다. 목적하는 생성물을 회백색 분말(2.73 g, 71.2%)로서 수득하였다. (M+H)+ = 420.2 m/e.
단계 3.
3급-부틸 4-(6-(6-(3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-2-(하이드록시메틸)페닐)-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)피리딘-3-일)피페리딘-1-카복실레이트의 제조
Figure 112013020897408-pct00251
이 반응은 실시예 6의 단계 7에 기재된 유사한 조건 하에서 수행하였다. 10 ml의 다이옥산/물(9:1) 중의 3급-부틸 4-(6-(6-클로로-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)피리딘-3-일)피페리딘-1-카복실레이트(150 mg, 357 μmol), 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질 아세테이트(177 mg, 357 μmol), x-Phos(17 mg, 35.7 μmol) 및 칼륨 포스페이트(190 mg, 893 μmol)의 용액을 10분 동안 질소로 탈기시키고, 비스(다이벤질리덴아세톤)팔라듐(0)(10.3, 17.9 μmol)을 첨가하였다.
반응 혼합물을 2시간 동안 100℃로 가열하였다. 후처리 후, 생성물을 5 내지 70%의 에틸아세테이트/헥산의 구배를 사용하는 실리카 겔 상의 분취용 HPLC로 정제하여 목적하는 생성물을 연황색 고체(220 mg, 81.9%)로서 수득하였다.
단계 4.
3급-부틸 4-(6-(6-(3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-2-(하이드록시메틸)페닐)-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)피리딘-3-일)피페리딘-1-카복실레이트의 제조
Figure 112013020897408-pct00252
이 반응은 I-6의 단계 8에 기재된 유사한 조건 하에 수행하였다. 후처리 후, 목적하는 생성물(85 mg, 40.9%)을 수득하였다. (M+H)+ = 710.5 m/e.
실시예 61
단계 5.
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-(하이드록시메틸)-3-(1-메틸-6-옥소-5-(5-(피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)페닐)프탈라진-1(2H)-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00253
3급-부틸 4-(6-(6-(3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-2-(하이드록시메틸)페닐)-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)피리딘-3-일)피페리딘-1-카복실레이트(85 mg, 120 μmol)를 2시간 동안 다이클로로메탄(10 mL) 중의 50% 트라이플루오로 산으로 처리하여 탈보호시켰다. 반응 혼합물을 농축 건조시킨 후, 에틸 아세테이트와 포화 나트륨 바이카보네이트 사이에 분배하였다. 유기상을 나트륨 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성된 조질 생성물을 뜨거운 이소프로필아세테이트/헥산으로 결정화시켜 추가로 정제하였다. 결정 생성물을 여과함으로써 수집하고, 목적하는 생성물을 백색 고체(48 mg, 65.7%)로서 수득하였다. (M+H)+ = 610 m/e. 1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ: 8.63(s, 1H), 8.27-8.33(m, 2H), 8.21(d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.44-7.72(m, 6H), 6.94(d, J = 8.5 Hz, 1H), 4.46(s, 2H), 3.88-3.96(m, 3H), 3.35-3.44(m, 2H), 2.85-2.99(m, 2H), 2.65-2.78(m, 1H), 1.83-1.97(m, 4H), 1.43(s, 9H).
I-62의 제조
실시예 62
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-(하이드록시메틸)-3-(1-메틸-5-(5-(1-(메틸설폰일)-피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)페닐)프탈라진-1(2H)-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00254
10 mL의 둥근 바닥 플라스크에, 6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-(하이드록시메틸)-3-(1-메틸-6-옥소-5-(5-(피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)페닐)프탈라진-1(2H)-온(35.03 mg, 57.5 μmol, Eq: 1.00)을 DCM(3ml)과 합치고, 0℃로 냉각하였다. DIPEA(8.91 mg, 12.0 μl, 68.9 μmol, Eq: 1.2), 이어서 메탄설폰일 클로라이드(6.58 mg, 4.48 μl, 57.5 μmol, Eq: 1)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 실온으로 교반하였다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 4 g, 50% EtOAc/헥산 중의 0 내지 5%의 MeOH)로 정제하여 백색 고체(16 mg, 45%)를 수득하였다. (M+H)+ = 688.4 m/e. 1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ: 8.56(s, 1H), 8.48(br. s., 1H), 8.29(br. s., 1H), 8.20(br. s., 1H), 7.42-7.70(m, 6H), 7.04(d, J = 8.2 Hz, 1H), 4.42(br. s., 2H), 4.11(q, J = 7.0 Hz, 2H), 3.95(d, J = 11.3 Hz, 2H), 2.82(s, 3H), 2.74-2.81(m, 2H), 2.62(t, J = 11.5 Hz, 1H), 2.04(s, 3H), 1.77-1.99(m, 4H), 1.42(s, 9H).
I-63의 제조
단계 1.
4-(5-(1-아세틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00255
50 mL의 둥근 바닥 플라스크에, 3급-부틸 4-(6-니트로피리딘-3-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(250 mg, 819 μmol, Eq: 1.00)를 DCM(2.5 ml)과 합쳐 연황색 용액을 수득하였다. TFA(5 mL)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지, LCMS로 측정하였다. 조질 반응 혼합물을 진공에서 농축시키고, 생성된 잔류물을 DCM에 용해시키고, 0℃로 냉각하였다. TEA(228 μl, 1.64 mmol, Eq: 2.00), 이어서 아세틸 클로라이드(58 μl, 819 μmol, Eq: 1.00)를 적가하였다. 반응물을 실온으로 가온하였다. 에틸 아세테이트로 추출하고 30분 후, 반응물을 후처리하였다. 유기층을 물 및 포화 NH4Cl로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축 건조시켜 조질 생성물(187 mg)을 회백색 고체로서 수득하였다. (M+H)+ = 247.9 m/e
이 생성물을 메탄올(15 ml)에 용해시키고, 50 psi에서 밤새 10% Pd/C(87.2 mg, 819 μmol)로 수소화 시켰다. 촉매를 여과하고, 생성된 여액을 진공에서 농축시키고, 추가 정제 없이 다음 단계에서 수행하였다.
무수 다이옥산(6 ml) 중의 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(201 mg, 901 μmol), 1-(4-(6-아미노피리딘-3-일)피페리딘-1-일)에탄온(180mg, 819 μmol), 잔트포스(35.5 mg, 61.4 μmol) 및 세슘 카보네이트(801 mg, 2.46 mmol)의 용액을 진공 탈기시키고, 아르곤 분위기 하에 두었다. 이 혼합물에 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(8.48 mg, 8.19 μmol)을 첨가하고, 진공 탈기 주기를 반복하였다. 물질을 90℃(오일욕)에서 가열하면서 밤새 강하게 교반하였다. 플라스크를 주위 온도로 냉각하고, 내용물을 셀라이트의 플러그를 통하여 여과하고, 다이옥산으로 잘 세척하였다. 합친 여액 및 세척물을 농축시키고, 생성된 잔류물을 에터/에틸 아세테이트의 1:1 비율로 마쇄하였다. 목적하는 생성물을 회백색 분말(66 mg, 22%)로서 수득하였다. (M+H)+ = 362, 364 m/e
실시예 63
단계 2.
2-(3-(5-(5-(1-아세틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)-2-(하이드록시메틸)페닐)-6-3급-부틸-8-플루오로프탈라진-1(2H)-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00256
실시예 6의 단계 7에 기재된 유사한 조건 하에 이 반응을 수행하였다. 10 ml의 다이옥산/물(9:1) 중의 4-(5-(1-아세틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(66 mg, 182 μmol), 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질 아세테이트(90.2 mg, 182 μmol), x-Phos(8.7 mg, 18.2 μmol) 및 칼륨 포스페이트(96.8 mg, 456 μmol)의 용액을 10분 동안 질소로 탈기시키고, 비스(다이벤질리덴아세톤)팔라듐(0)(5.24 mg, 9.12 μmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 100℃로 가열하였다. 후처리 후, 생성물을 0 내지 5%의 메탄올/에틸 아세테이트의 구배를 사용하는 실리카 겔 상의 분취용 HPLC로 정제하였다. 목적하는 화합물 및 2-(5-(5-(1-아세틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)-6-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)벤질 아세테이트를 1:1 비율로 수득하였다. 목적하는 혼합물을 메탄올(4 ml)에 용해시키고, 여기에 2 N NaOH(468 μl)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 56시간 동안 교반하였다. 메탄올을 증발시킴으로써 제거하고, 생성된 용액을 1N HCl로 산성화시키고, EtOAc로 추출하였다. 유기 추출물을 물로 세척하고, NaSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 조질 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 4 g, 50% EtOAc/헥산 중의 0 내지 50%의 MeOH)로 정제하여 목적하는 생성물을 백색 고체(61 mg, 26.2%)로서 수득하였다. (M+H)+ = 652.5, 653.7 m/e. 1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ: 8.57(s, 1H), 8.41(br. s., 1H), 8.28(br. s., 1H), 8.19(br. s., 1H), 7.40-7.71(m, 6H), 6.99(d, J = 8.2 Hz, 1H), 4.80(d, J = 12.9 Hz, 1H), 4.41(br. s., 2H), 4.11(q, J = 7.0 Hz, 2H), 3.85-3.99(m, 3H), 3.18(t, J = 12.7 Hz, 1H), 2.52-2.83(m, 2H), 2.13(s, 3H), 1.89(t, J = 12.7 Hz, 2H), 1.60(br. s., 2H), 1.38-1.46(m, 9H).
I-64의 제조
단계 1.
4-메틸-1-(6-니트로피리딘-3-일)피페리딘-4-올의 제조
Figure 112013020897408-pct00257
DMSO(20 ml) 중의 4-메틸피페리딘-4-올(2.72g, 23.6 mmol), 5-브로모-2-니트로피리딘(3.2 g, 15.8 mmol), 및 테트라부틸암모늄 아이오다이드(72 mg, 195 μmol)를 18시간 동안 120℃로 가열하였다. 실온으로 냉각한 후, 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 물(3 x 20mL)로 세척하였다. 이어서, 유기상을 농축시키고, 에터로 마쇄하여 4-메틸-1-(6-니트로피리딘-3-일)피페리딘-4-올을 황색 고체(2.55g, 68.2%)로서 수득하였다. (M+H)+ = 327.9 m/e.
단계 2.
6-클로로-4-(5-(4-하이드록시-4-메틸피페리딘-1-일)피리딘-2-일아미노)-2-메틸피리다진-3(2H)-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00258
메탄올(15 ml) 중의 4-메틸-1-(6-니트로피리딘-3-일)피페리딘-4-올(807 mg, 3.67 mmol)의 용액을 50 psi에서 밤새 10% Pd/C(117 mg, 110 μmol)로 수소화시켰다. 촉매를 여과하고, 생성된 여액을 진공에서 농축시켜 1-(6-아미노피리딘-3-일)-4-메틸피페리딘-4-올을 수득하였다. 생성물을 추가 정제 없이 다음 반응에서 수행하였다.
무수 다이옥산(10 ml) 중의 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(902 mg, 4.04 mmol), 1-(6-아미노피리딘-3-일)-4-메틸피페리딘-4-올(761mg, 3.67 mmol), 잔트포스(159 mg, 275 μmol) 및 세슘 카보네이트(3.59 g, 11 mmol)의 용액을 진공 탈기시키고, 아르곤 분위기 하에 두었다. 이 혼합물에 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(38 mg, 36.7 μmol)을 첨가하고, 진공 탈기 주기를 반복하였다. 물질을 90℃(오일욕)에서 가열하면서 밤새 강하게 교반하였다. 플라스크를 주위 온도로 냉각하고, 내용물을 셀라이트의 플러그를 통하여 여과하고, 다이옥산으로 잘 세척하고, 농축시켰다. 생성물을 5 내지 70%의 에틸아세테이트/헥산의 구배를 사용하는 실리카 겔 상의 분취용 HPLC로 정제하였다. 목적하는 생성물을 연황색 고체(807 mg 62.9%)로서 수득하였다. (M+H)+ = 350, 352 m/e.
실시예 64
단계 3.
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(3-(5-(5-(4-하이드록시-4-메틸피페리딘-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)-2-(하이드록시메틸)-페닐)프탈라진-1(2H)-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00259
실시예 6의 단계 7에 기재된 유사한 조건 하에 이 반응을 수행하였다. 10 ml의 다이옥산/물(9:1) 중의 6-클로로-4-(5-(4-하이드록시-4-메틸피페리딘-1-일)피리딘-2-일아미노)-2-메틸피리다진-3(2H)-온(150 mg, 429 μmol), 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질 아세테이트(212 mg, 429 μmol), x-Phos(20.4 mg, 42.9 μmol) 및 칼륨 포스페이트(228 mg, 1.07 mmol)의 용액을 10분 동안 질소로 탈기시키고, 비스(다이벤질리덴아세톤)팔라듐(0)(12.3 mg, 21.4 μmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 100℃로 가열하였다. 후처리 후, 생성물을 0 내지 5%의 메탄올/에틸 아세테이트의 구배를 사용하는 실리카 겔 상의 분취용 HPLC로 정제하였다. 목적하는 화합물 및 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(5-(5-(4-하이드록시-4-메틸피페리딘-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)벤질 아세테이트의 1:1 비율을 수득하였다. 반응 혼합물을 메탄올(4 ml)에 용해시키고, 여기에 2 N NaOH(600 μl)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 메탄올을 증발시킴으로써 제거하고, 생성된 용액을 1N HCl로 산성화시키고, DCM으로 추출하였다. 생성된 유기 추출물을 NaSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 생성된 황색 고체를 에터로 마쇄하여 목적하는 생성물을 황색 고체(40 mg, 45.8%)로서 수득하였다. (M+H)+ = 640.4 m/e. 1H NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.14-1.24(m, 3 H) 1.31-1.48(m, 12 H) 1.64(br. s., 2 H) 2.35-2.68(m, 2 H) 3.31(br. s., 2 H) 3.52-3.62(m, 1 H) 4.41(d, J=11.29 Hz, 2 H) 7.33-7.60(m, 7 H) 7.75(d, J=13.30 Hz, 1 H) 7.87(s, 1 H) 8.44(br. s., 1 H) 8.52(br. s., 1 H).
I-65의 제조
실시예 65
Figure 112013020897408-pct00260
실시예 64와 유사한 절차를 따르되, 단계 1에서, 4-메틸피페리딘-4-올 대신 피페리딘-4-올로 대체하는 것을 제외하여 6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-(하이드록시메틸)-3-(5-(5-(4-하이드록시피페리딘-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)페닐)프탈라진-1(2H)-온을 황색 고체(65 mg, 38.7%)로서 수득하였다. (M+H)+ = 626.4 m/e. 1H NMR(400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.41(s, 9 H) 1.64-1.77(m, 2 H) 1.96-2.07(m, 2 H) 2.91(t, J=9.77 Hz, 2 H) 3.39-3.53(m, 2 H) 3.80-3.91(m, 3 H) 3.97-4.04(m, 1 H) 4.40(d, J=6.64 Hz, 2 H) 6.89(d, J=8.98 Hz, 1 H) 7.28(br. s., 1 H) 7.42-7.59(m, 3 H) 7.62-7.67(m, 1H) 8.03(br. s., 1 H) 8.17(s, 1 H) 8.27(d, J=2.34 Hz, 1 H) 8.45(s, 1 H).
I-66의 제조
단계 1.
(1R,5S)-3-메틸-8-(6-니트로피리딘-3-일)-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄의 제조
Figure 112013020897408-pct00261
DMSO(8 ml) 중의 (1R,5S)-3-메틸-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄 다이하이드로클로라이드(981 mg, 4.93 mmol), 5-플루오로-2-니트로피리딘(100 mg, 4.93 mmol), 및 트라이에틸아민(4.99 g, 49.3 mmol)의 용액을 2시간 동안 80℃로 가열하였다. 실온으로 냉각한 후, 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 포화 암모늄 클로라이드 및 물로 세척하였다. 이어서, 유기상을 농축시키고, 에터로 마쇄하여 목적하는 생성물을 황색 고체(1 g, 81.8%)로서 수득하였다.
단계 2.
6-클로로-2-메틸-4-(5-((1R,5S)-3-메틸-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00262
6-클로로-4-(5-(4-하이드록시-4-메틸피페리딘-1-일)피리딘-2-일아미노)-2-메틸-피리다진-3(2H)-온의 제조와 유사한 조건 하에 이 반응을 수행하였다. 메탄올(15 ml) 중의 (1R,5S)-3-메틸-8-(6-니트로피리딘-3-일)-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄(500 mg, 2.01 mmol)을 50 psi에서 밤새 10% Pd/C(42.9 mg, 40.3 μmol)로 수소화시켰다. 촉매를 여과하고, 생성된 여액을 진공에서 농축시켜 5-(3-메틸-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-일)피리딘-2-아민을 수득하였다. 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계에서 수행하였다.
무수 다이옥산(10 ml) 중의 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(492 mg, 2.20 mmol), 5-(3-메틸-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-일)피리딘-2-아민(437 mg, 2.0 mmol), 잔트포스(86.8 mg, 150 μmol) 및 세슘 카보네이트(1.95 g, 6.00 mmol)의 용액을 진공 탈기시키고, 아르곤 분위기 하에 두었다. 이 혼합물에 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(31.1 mg, 30 μmol)을 첨가하고, 진공 탈기 주기를 반복하였다. 반응물을 90℃(오일욕)에서 가열하면서 밤새 강하게 교반하였다. 플라스크를 주위 온도로 냉각하고, 내용물을 셀라이트의 플러그를 통하여 여과하고, 다이옥산으로 잘 세척하였다. 합친 여액 및 세척물을 농축시켰다. 생성된 조질 잔류물을 에터로 마쇄하여 목적하는 생성물을 연황색 고체(345 mg, 47.8%)로서 수득하였다. (M+H)+ = 361.0, 363 m/e.
실시예 66
단계 3.
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-((1R,5S)-3-메틸-3,8-다이아자-바이사이클로[3.2.1]옥트-8-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00263
실시예 6의 단계 7에 기재된 유사한 조건 하에 이 반응을 수행하였다. 10 ml의 다이옥산/물(9:1) 중의 6-클로로-2-메틸-4-(5-((1R,5S)-3-메틸-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]-옥탄-8-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온(150 mg, 416 μmol), 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질 아세테이트(206 mg, 416 μmol), x-Phos(19.8 mg, 41.6 μmol) 및 칼륨 포스페이트(221 mg, 1.04 mmol)의 용액을 10분 동안 질소로 탈기시키고, 비스(다이벤질리덴아세톤)팔라듐(0)(12.0 mg, 20.8 μmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 100℃로 가열하였다. 후처리 후, 생성물을 10 내지 20%의 메탄올/다이클로로메탄의 구배를 사용하는 실리카 겔 상의 분취용 HPLC로 정제하여 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(1-메틸-5-(5-(3-메틸-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)벤질 아세테이트를 연황색 고체(69 mg, 24%)로서 수득하였다. (M+H)+ = 693, 694 m/e.
2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(1-메틸-5-(5-(3-메틸-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)벤질 아세테이트(55 mg, 79 μmol)를 MeOH(3 ml)에 용해시키고, 여기에 2 N NaOH(794 μl)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 조질 반응물을 DCM으로 추출하였다. 생성된 유기 추출물을 NaSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시키고, 에터로 마쇄하여 목적하는 생성물을 황색 고체(10.3 mg, 20%)로서 수득하였다. (M+H)+ = 651.5, 652.6 m/e. 1H NMR(400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.41(s, 9 H) 1.59(d, J=11.72 Hz, 1 H) 1.93-2.07(m, 2 H) 2.16-2.35(m, 2 H) 3.88(s, 3H) 3.95-4.04(m, 1 H) 4.09-4.20(m, 2 H) 4.40(d, J=7.03 Hz, 2 H) 5.17-5.40(m, 3 H) 6.90(d, J=8.98 Hz, 1 H) 7.12(dd, J=8.98, 2.73 Hz, 2 H) 7.41-7.59(m, 10 H) 7.65(d, J=7.81 Hz, 2 H) 7.91(d, J=2.73 Hz, 2 H) 8.12(s, 2 H) 8.25-8.31(m, 2 H) 8.40(s, 2 H).
I-67의 제조
단계 1.
6-클로로-4-(1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-2-메틸-2H-피리다진-3-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00264
3급-부틸 4-(6-(6-클로로-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)피리딘-3-일)피페리딘-1-카복실레이트(실시예 29, 단계 1 내지 3에 기재된 바와 같이 제조됨)(1.8g, 4.3 mmol)를 15 mL DCM에 용해시키고, 7.5 mL TFA로 처리하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 조질 반응 혼합물을 진공에서 농축시켰다. 생성된 잔류물을 DCM 및 포화 NaHCO3로 희석하고, DCM으로 추출하였다. 추출물을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켜 620 mg의 목적하는 생성물을 수득하고, 이를 다음 단계에 사용하였다.
단계 2.
6-클로로-2-메틸-4-(1'-메틸-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-2H-피리다진-3-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00265
25 mL의 둥근 바닥 플라스크에, 6-클로로-2-메틸-4-(5-(피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온(620 mg, 1.94 mmol, Eq: 1.00) 및 포름알데히드(1.57 g, 1.44 ml, 19.4 mmol, Eq: 10)를 THF와 합쳐 연황색 용액을 수득하였다. 아세트산(116 mg, 111 μl, 1.94 mmol, Eq: 1.00)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각하였다. 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(616 mg, 2.91 mmol, Eq: 1.5)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. LC/MS는, 반응이 완료됨을 도시하였다. 반응 혼합물을 물에 부었다. 포화 NaHCO3를 첨가하여 염기성으로 만들고, 생성된 혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 합친 추출물을 물로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 생성된 고체를 에터로 마쇄하여 목적하는 생성물을 회백색 고체(580 mg)로서 수득하였다. (M+H)+ = 334 m/e. 이를 이전 배취와 합하여 1.06 g의 6-클로로-2-메틸-4-(1'-메틸-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-2H-피리다진-3-온을 수득하고, 이를 다음 단계에서 사용하였다.
실시예 67
단계 3.
6-3급-부틸-8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[1-메틸-5-(1'-메틸-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-2H-프탈라진-1-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00266
60 ml의 부탄올/물(5:1) 중의 6-클로로-2-메틸-4-(5-(1-메틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온(1.06 g, 3.18 mmol), 칼륨(2-(아세톡시메틸)-3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)페닐)트라이플루오로보레이트(1.51 g, 3.18 mmol), x-Phos(227 mg, 476 μmol) 및 칼륨 포스페이트(1.48 g, 6.99 mmol)의 혼합물을 10분 동안 질소로 탈기시키고, 비스(다이벤질리덴아세톤)팔라듐(0)(137 mg, 238 μmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 3시간 동안 110℃로 가열하였다. 조질 반응 혼합물을 DCM으로 추출하고, 물로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시키면서 고체를 형성하였다. 이 고체를 에터로 마쇄하여 1.67 g의 조질 생성물을 수득하였다. 이전 배취로부터의 300 mg의 조질 물질과 합치고, 실리카 크로마토그래피로 정제하여 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(1-메틸-5-(5-(1-메틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)벤질 아세테이트(1.6 g)를 백색 고체로서 수득하였다.
2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(1-메틸-5-(5-(1-메틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)벤질 아세테이트(1.6 g)를 20 mL THF에 용해시켰다. 반응 용액에 12 mL의 2 N NaOH를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응은 완료되지 않았다. 추가 10 당량의 2 N NaOH를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 추가 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물이 균질해질 때까지 THF를 첨가하고, 반응물을 30분 동안 40℃로 가열하였다. 반응물을 실온으로 냉각하고, 밤새 교반하였다. 반응이 완료됨은 LC/MS에 의해 나타내어진다. 반응물의 부피가 감소하도록 농축시켜 다량의 THF를 제거하였다. 형성된 고체를 여과함으로써 수집하였다. 고체를 DCM으로 재용해시키고, 셀라이트의 팩으로 여과하고, 물로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켜 목적하는 생성물을 백색 고체(1.27 g)로서 수득하였다. (M+H)+ = 624 m/e. 1H NMR(400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.45(s, 9 H) 1.80-1.92(m, 5 H) 2.31-2.58(m, 3 H) 3.03(d, J=8.28 Hz, 1 H) 3.92(s 및 중첩된 다중선, 4 H) 4.45(d, J=6.53 Hz, 2 H) 6.93(d, J=8.28 Hz, 1 H) 7.45-7.63(m, 5 H) 7.65-7.71(m, 1 H) 8.22-8.32(m, 3 H) 8.61(s, 1 H).
I-68의 제조
Figure 112013020897408-pct00267
실시예 68
6-3급-부틸-2-(3-{5-[1-((R)-2,3-다이하이드록시-프로필)-1H-피라졸-3-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00268
다이옥산(10 ml) 중의 (R)-1-((2,2-다이메틸-1,3-다이옥솔란-4-일)메틸)-1H-피라졸-3-아민(WO 2009127546(A1)에 기재된 바와 같이 제조됨, 실시예 49, 177 mg, 0.90 mmol), 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(200 mg, 0.90 mmol) 세슘 카보네이트(1.02 g, 3.13 mmol) 및 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(77.7 mg, 0.134 mmol)의 용액을 아르곤으로 플러슁 한 후, 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(61.5 mg, 0.07 mmol)을 첨가하고, 생성된 용액을 90℃에서 18시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각하고, 다이클로로메탄 및 물로 희석하였다. 층을 분리하고, 수성층을 다이클로로메탄으로 추출하였다. 유기상을 합치고, 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 생성된 혼합물을 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 24 g, 0 내지 10%의 메탄올/다이클로로메탄)로 정제하여 (R)-6-클로로-4-(1-((2,2-다이메틸-1,3-다이옥솔란-4-일)메틸)-1H-피라졸-3-일아미노)-2-메틸피리다진-3(2H)-온(249 mg, 82%)을 황색 고체로서 수득하였다.
부탄올(4 ml) 및 물(1 mL) 중의 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질 아세테이트(247 mg, 0.50 mmol), 6-클로로-2-메틸-4-(5-옥세탄-3-일-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-2H-피리다진-3-온(100 mg, 0.29 mmol), 칼륨 포스페이트(156 mg, 0.74 mmol) 및 다이사이클로헥실(2',4',6'-트라이이소프로필바이페닐-2-일)포스핀(14.0 mg, 0.03 mmol)의 용액을 아르곤으로 플러슁 한 후, (비스[다이벤질리덴아세톤] 다이팔라듐)(8.46 mg, 0.01 mmol)을 첨가하고, 생성된 용액을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 생성된 혼합물을 냉각하고, 암모늄 클로라이드의 포화 용액에 붓고, 메틸렌 클로라이드(2 X 100 mL)로 추출하였다. 층을 분리하고, 유기상을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 혼합물을 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 다이옥산(10 mL)에 용해시키고, 리튬 하이드록사이드 용액(1 mL, 2.0 M)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 생성된 혼합물을 포화 암모늄 클로라이드 용액에 붓고, 메틸렌 클로라이드(2 X 150 mL)로 추출하였다. 층을 분리하고, 유기상을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 혼합물을 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 40 g, 다이클로로메탄 중의 2 내지 10%의 메탄올)로 정제하여 아세트산 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-6-[1-메틸-5-(5-옥세탄-3-일-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-벤질 에스터(138 mg, 72%)를 연황색 고체로서 수득하였다.
테트라하이드로푸란(4 ml) 중의 (R)-6-3급-부틸-2-(3-(5-(1-((2,2-다이메틸-1,3-다이옥솔란-4-일)메틸)-1H-피라졸-3-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)-2-(하이드록시메틸)페닐)-8-플루오로프탈라진-1(2H)-온(135 mg, 0.21 mmol)의 용액에 염산(1.0 N, 4 ml) 용액을 첨가하고, 생성된 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 생성된 혼합물을 포화 수성 암모늄 클로라이드 용액에 붓고, 다이클로로메탄(2 x 50 mL)으로 추출하였다. 유기층을 합치고, 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 혼합물을 여과하고, 증발시키고, 잔류물을 다이클로로메탄 및 이소프로필 아세테이트로 결정화시켰다. 상기 결정을 에터로 세척하고, 건조시켜 6-3급-부틸-2-(3-{5-[1-((R)-2,3-다이하이드록시-프로필)-1H-피라졸-3-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온(52 mg, 41%)을 연황색 고체로서 수득하였다. mp: 245-250℃. 1H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.38(s, 9 H) 3.67-4.24(m, 6 H) 4.27-5.06(m, 5 H) 6.19(d, J=2.27 Hz, 1 H) 7.18-7.96(m, 7 H) 8.51(d, J=2.27 Hz, 1 H) 9.23(s, 1 H).
I-69의 제조
Figure 112013020897408-pct00269
실시예 69
6-3급-부틸-2-(3-{5-[5-(4-에틸-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00270
에탄올(20 mL) 중의 1-에틸-4-(6-니트로피리딘-3-일)피페라진(500 mg, 2.12 mmol)의 용액에 10% Pd/C(113 mg, 0.11 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 수소 분위기 하에 18시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 에탄올로 세척하고, 농축시켜 N-[(E)-2-(4-에틸-피페라진-1-일)-펜타-2,4-다이엔-(Z)-일리덴]-메탄다이아민(377 mg, 86%)을 회색 고체로서 수득하였다.
다이옥산(10 ml) 중의 5-(4-에틸피페라진-1-일)피리딘-2-아민(185 mg, 0.90 mmol), 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(200 mg, 0.90 mmol) 세슘 카보네이트(1.02 g, 3.13 mmol) 및 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(77.7 mg, 0.13 mmol)의 용액을 아르곤으로 플러슁 한 후, 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(61.5 mg, 0.07 mmol)을 첨가하고, 생성된 용액을 90℃에서 18시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각하고, 다이클로로메탄 및 물로 희석하였다. 층을 분리하고, 수성층을 다이클로로메탄(2 x 25 mL)으로 추출하였다. 유기상을 합치고, 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 생성된 혼합물을 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 메탄올 및 다이클로로메탄으로 마쇄하고, 여과하고, 에터로 세척하고, 건조시켜 6-클로로-4-[5-(4-에틸-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노]-2-메틸-2H-피리다진-3-온(138 mg, 44%)을 황색 고체로서 수득하였다.
부탄올(4 ml) 및 물(1 mL) 중의 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질 아세테이트(241 mg, 0.49 mmol), 6-클로로-4-(5-(4-에틸피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-2-메틸피리다진-3(2H)-온(100 mg, 0.29 mmol), 칼륨 포스페이트(152 mg, 0.72 mmol) 및 다이사이클로헥실(2',4',6'-트라이이소프로필바이페닐-2-일)포스핀(13.7 mg, 0.03 mmol)의 용액을 아르곤으로 플러슁 한 후, (비스[다이벤질리덴아세톤] 다이팔라듐)(8.24 mg, 0.01 mmol)을 첨가하고, 생성된 용액을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 생성된 혼합물을 냉각하고, 암모늄 클로라이드의 포화 용액에 붓고, 메틸렌 클로라이드(2 X 100 mL)로 추출하였다. 층을 분리하고, 유기상을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 혼합물을 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 다이옥산(10 mL)에 용해시키고, 리튬 하이드록사이드 용액(0.5 mL, 2.0 M)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 생성된 혼합물을 포화 암모늄 클로라이드 용액에 붓고, 메틸렌 클로라이드(2 X 50 mL)로 추출하였다. 층을 분리하고, 유기상을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 혼합물을 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 24 g, 다이클로로메탄 중의 1 내지 14%의 메탄올)로 정제하고, 다이클로로메탄 및 이소프로필 아세테이트로 재결정화시켜 6-3급-부틸-2-(3-{5-[5-(4-에틸-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온(47 mg, 26%)을 연황색 고체로서 수득하였다. mp: 245-247℃. 1H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.02(t, J=7.18 Hz, 4 H) 1.38(s, 10 H) 2.13-2.42(m, 2 H) 3.09(br. s., 5 H) 3.77(s, 3 H) 4.16-4.72(m, 3 H) 7.20-8.10(m, 9 H) 8.28-8.64(m, 2 H) 9.23(s, 1 H).
I-70의 제조
실시예 70
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{5-[1-(2-하이드록시-2-메틸-프로필)-1H-피라졸-3-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00271
다이옥산(10 ml) 중의 1-(3-아미노-1H-피라졸-1-일)-2-메틸프로판-2-올(US 7,935,699 B2에 따라 제조됨, 실시예 74, 139 mg, 0.90 mmol), 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(200 mg, 0.90 mmol) 세슘 카보네이트(1.02 g, 3.13 mmol) 및 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(77.7 mg, 0.13 mmol)의 용액을 아르곤으로 플러슁 한 후, 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(61.5 mg, 0.07 mmol)을 첨가하고, 생성된 용액을 90℃에서 18시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각하고, 다이클로로메탄 및 물로 희석하였다. 층을 분리하고, 수성층을 다이클로로메탄으로 추출하였다. 유기상을 합치고, 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 생성된 혼합물을 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 24 g, 다이클로로메탄 중의 0 내지 10%의 메탄올)로 정제하여 6-클로로-4-[1-(2-하이드록시-2-메틸-프로필)-1H-피라졸-3-일아미노]-2-메틸-2H-피리다진-3-온(156 mg, 59%)을 연황색 고체로서 수득하였다.
부탄올(4 ml) 및 물(1 mL) 중의 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질 아세테이트(282 mg, 0.57 mmol), 6-클로로-4-(1-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-1H-피라졸-3-일아미노)-2-메틸피리다진-3(2H)-온(100 mg, 0.34 mmol), 칼륨 포스페이트(178 mg, 0.84 mmol) 및 다이사이클로헥실(2',4',6'-트라이이소프로필바이페닐-2-일)포스핀(16.0 mg, 0.03 mmol)의 용액을 아르곤으로 플러슁 한 후, (비스[다이벤질리덴아세톤] 다이팔라듐)(9.66 mg, 0.02 mmol)을 첨가하고, 생성된 용액을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 생성된 혼합물을 냉각하고, 암모늄 클로라이드의 포화 용액에 붓고, 메틸렌 클로라이드(2 X 100 mL)로 추출하였다. 층을 분리하고, 유기상을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 혼합물을 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 다이옥산(10 mL)에 용해시키고, 리튬 하이드록사이드 용액(0.5 mL, 2.0 M)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 생성된 혼합물을 포화 암모늄 클로라이드 용액에 붓고, 메틸렌 클로라이드(2 X 150 mL)로 추출하였다. 층을 분리하고, 유기상을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 혼합물을 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 24 g, 다이클로로메탄 중의1 내지 10%의 메탄올)로 정제하여 6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{5-[1-(2-하이드록시-2-메틸-프로필)-1H-피라졸-3-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온(119 mg, 60%)을 백색 고체로서 수득하였다. MP: 165-170℃. 1H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.91-1.13(m, 6 H) 1.38(s, 8 H) 3.16-3.36(m, 2 H) 3.91(s, 2 H) 4.35-4.65(m, 4 H) 6.20(d, J=2.27 Hz, 1 H) 7.28-7.64(m, 4 H) 7.75(d, J=13.22 Hz, 1 H) 7.82-7.99(m, 2 H) 8.51(d, J=2.27 Hz, 1 H) 9.24(s, 1 H).
I-71의 제조
실시예 71
Figure 112013020897408-pct00272
화합물 I-15에 기재된 절차에 따라서, 단계 11에서, 6-클로로-2-메틸-4-(5-모폴린-4-카본일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온 대신 6-클로로-2-메틸-4-(1'-메틸-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-2H-피리다진-3-온으로 대체하여 2-(8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[1-메틸-5-(1'-메틸-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-1-옥소-1,2-다이하이드로-이소퀴놀린-6-일)-2-메틸-프로피오니트릴을 106 mg의 최종 생성물인 연황색 분말로서 수득하였다. (M+H)+ = 634 m/e, 1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.81(s, 6 H) 1.82-1.90(m, 4 H) 2.02-2.22(m, 2 H) 2.36(s, 3 H) 2.41-2.60(m, 1 H) 2.91-3.12(m, 2 H) 3.91(s, 3 H) 3.96-4.09(m, 1 H) 4.23-4.49(m, 2 H) 6.61(dd, J=7.55, 1.89 Hz, 1 H) 6.91(d, J=8.31 Hz, 1 H) 7.21(dd, J=12.09, 1.89 Hz, 1 H) 7.35(d, J=7.55 Hz, 1 H) 7.42(dd, J=7.74, 1.32 Hz, 1 H) 7.50-7.55(m, 2 H) 7.59(t, J=7.74 Hz, 1 H) 7.67(dd, J=7.93, 1.51 Hz, 1 H) 8.23(d, J=2.27 Hz, 1 H) 8.28(s, 1 H) 8.62(s, 1 H).
I-72의 제조
실시예 72
Figure 112013020897408-pct00273
화합물 I-15에 기재된 절차에 따라서, 단계 11에서, 6-클로로-2-메틸-4-(5-모폴린-4-카본일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온 대신 4-(5-아제티딘-1-일메틸-1-메틸-1H-피라졸-3-일아미노)-6-클로로-2-메틸-2H-피리다진-3-온으로 대체하여 2-(2-{3-[5-(5-아제티딘-1-일메틸-1-메틸-1H-피라졸-3-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-2-하이드록시메틸-페닐}-8-플루오로-1-옥소-1,2-다이하이드로-이소퀴놀린-6-일)-2-메틸-프로피오니트릴을 471 mg의 최종 생성물인 회백색 분말로서 수득하였다. (M+H)+ = 609 m/e. 1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.81(s, 6 H) 2.12(quin, J = 7.20 Hz, 2H) 3.27(t, J = 7.0 Hz, 4 H) 3.55(s, 2 H) 3.81(s, 3 H) 3.88(s, 3 H) 4.03-4.19(m, 1 H) 4.22-4.44(m, 2 H) 5.94(s, 1 H) 6.61(dd, J=7.36, 2.08 Hz, 1 H) 7.21(dd, J=12.09, 1.89 Hz, 1 H) 7.35(d, J=7.55 Hz, 1 H) 7.41(dd, J=7.74, 1.32 Hz, 1 H) 7.52(d, J=1.51 Hz, 1 H) 7.56(t, J=7.74 Hz, 1 H) 7.65(dd, J=7.55, 1.51 Hz, 1 H) 7.82(s, 1 H) 7.91(s, 1 H).
I-73의 제조
실시예 73
Figure 112013020897408-pct00274
화합물 I-15에 기재된 절차에 따라서, 단계 11에서, 6-클로로-2-메틸-4-(5-모폴린-4-카본일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온 대신 4-[5-(2-아제티딘-1-일-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-6-클로로-2-메틸-2H-피리다진-3-온으로 대체하여 2-[2-(3-{5-[5-(2-아제티딘-1-일-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-1-옥소-1,2-다이하이드로-이소퀴놀린-6-일]-2-메틸-프로피오니트릴을 수득하였다. 생성된 스즈키 생성을 합성 단계 12에 따라 수행하여 143 mg의 최종 생성물을 연황색 분말로서 수득하였다. (M+H)+ = 664 m/e. 1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.24(s, 6 H) 1.81(s, 6 H) 2.12(quin, J = 6.80 Hz, 2 H) 2.59(s, 2 H) 3.35(t, J=6.99 Hz, 4 H) 3.91(s, 3 H) 3.95-4.06(m, 1 H) 4.25-4.44(m, 2 H) 6.61(dd, J=7.37, 2.08 Hz, 1 H) 6.89(d, J=8.69 Hz, 1 H) 7.21(dd, J=12.28, 1.70 Hz, 1 H) 7.33(dd, J=8.69, 2.64 Hz, 2 H) 7.34(d, J=7.18 Hz, 1 H) 7.42(dd, J=7.74, 1.32 Hz, 1 H) 7.53(d, J=1.89 Hz, 1 H) 7.59(t, J=7.74 Hz, 1 H) 7.68(dd, J=7.93, 1.51 Hz, 1 H) 8.08(d, J=2.64 Hz, 1 H) 8.27(s, 1 H) 8.55(s, 1 H)
I-74의 제조
실시예 74
Figure 112013020897408-pct00275
화합물 I-15에 기재된 절차에 따라서, 단계 11에서, 6-클로로-2-메틸-4-(5-모폴린-4-카본일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온 대신 6-클로로-2-메틸-4-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-2H-피리다진-3-온으로 대체하여 2-(8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-1-옥소-1,2-다이하이드로-이소퀴놀린-6-일)-2-메틸-프로피오니트릴을 29 mg의 최종 생성물인 연황색 분말로서 수득하였다. (M+H)+ = 595 m/e. 1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.80(s, 6 H) 2.49(s, 3 H) 2.90(t, J=5.70 Hz, 2 H) 3.61(s, 2 H) 3.88(s, 3 H) 4.04-4.11(m, 1 H) 4.10(t, J=5.70 Hz, 2 H) 4.24-4.42(m, 2 H) 5.78(s, 1 H) 6.61(dd, J=7.37, 2.08 Hz, 1 H) 7.21(dd, J=12.09, 1.89 Hz, 1 H) 7.34(d, J=7.55 Hz, 1 H) 7.40(dd, J=7.74, 1.32 Hz, 1 H) 7.52(d, J=1.89 Hz, 1 H) 7.55(t, J=7.93 Hz, 1 H) 7.65(dd, J=7.93, 1.51 Hz, 1 H) 7.84(s, 1 H) 7.98(s, 1 H).
I-75의 제조
실시예 75
Figure 112013020897408-pct00276
화합물 I-15에 기재된 절차에 따라서, 단계 11에서, 6-클로로-2-메틸-4-(5-모폴린-4-카본일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온 대신 6-(6-클로로-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로-피리다진-4-일아미노)-N,N-다이메틸-니코틴아마이드로 대체하여 6-(6-{3-[6-(시아노-다이메틸-메틸)-8-플루오로-1-옥소-1H-이소퀴놀린-2-일]-2-하이드록시메틸-페닐}-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로-피리다진-4-일아미노)-N,N-다이메틸-니코틴아마이드를 246 mg의 최종 생성물인 백색 분말로서 수득하였다. (M+H)+ = 608 m/e. 1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.80(s, 6 H) 3.11(s, 6 H) 3.85-3.91(m, 1 H) 3.92(s, 3 H) 4.26-4.46(m, 2 H) 6.62(dd, J=7.55, 1.89 Hz, 1 H) 6.98(d, J=8.69 Hz, 1 H) 7.21(dd, J=12.28, 1.70 Hz, 1 H) 7.34(d, J=7.55 Hz, 1 H) 7.42(m, 1 H) 7.53(d, J=1.51 Hz, 1 H) 7.60(t, J=7.74 Hz, 1 H) 7.65-7.72(m, 1 H) 7.79(dd, J=8.69, 2.27 Hz, 1 H) 8.44(s, 1 H) 8.47(d, J=2.27 Hz, 1 H) 8.71(s, 1 H).
I-76의 제조
실시예 76
Figure 112013020897408-pct00277
화합물 I-15에 기재된 절차에 따라서, 단계 11에서, 6-클로로-2-메틸-4-(5-모폴린-4-카본일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온 대신 6-클로로-2-메틸-4-[5-((S)-1-메틸-피롤리딘-2-일)-피리딘-2-일아미노]-2H-피리다진-3-온으로 대체하여 2-[8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-((S)-1-메틸-피롤리딘-2-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-1-옥소-1,2-다이하이드로-이소퀴놀린-6-일]-2-메틸-프로피오니트릴을 107 mg의 최종 생성물인 백색 분말로서 수득하였다. (M+H)+ = 620 m/e. 1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.65-1.79(m, 1 H), 1.80(s 3 H) 1.81-2.06(m, 3 H) 2.17(d, J=1.89 Hz, 3 H) 2.23-2.37(m, 2 H) 2.99-3.11(m, 1 H) 3.18-3.31(m, 1 H) 3.91(s, 3 H) 3.96-4.09(m, 1 H) 4.26-4.44(m, 2 H) 6.61(dd, J=7.37, 2.08 Hz, 1 H) 6.95(d, J=8.31 Hz, 1 H) 7.21(dd, J=12.46, 1.89 Hz, 1 H) 7.35(d, J=7.55 Hz, 1 H) 7.42(dd, J=7.93, 1.13 Hz, 1 H) 7.52(d, J=1.89 Hz, 1 H) 7.58(t, J=7.74 Hz, 1 H) 7.65-7.73(m, 2 H) 8.24-8.28(m, 1 H) 8.30(s, 1 H) 8.67(s, 1 H).
I-77의 제조
실시예 77
Figure 112013020897408-pct00278
화합물 I-15에 기재된 절차에 따라서, 단계 11에서, 6-클로로-2-메틸-4-(5-모폴린-4-카본일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온 대신 6-클로로-2-메틸-4-[5-((S)-1-메틸-피롤리딘-3-일)-피리딘-2-일아미노]-2H-피리다진-3-온으로 대체하여 2-[8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-((S)-1-메틸-피롤리딘-3-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-1-옥소-1,2-다이하이드로-이소퀴놀린-6-일]-2-메틸-프로피오니트릴을 18 mg의 최종 생성물인 연황색 분말로서 수득하였다. (M+H)+ = 620 m/e. 1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.81(s, 6 H) 1.82-1.91(m, 1 H) 2.29-2.40(m, 1 H) 2.42(s, 3 H) 2.47-2.52(m, 1 H) 2.63-2.82(m, 2 H) 2.91-3.02(m, 1 H) 3.31-3.40(m, 1H) 3.90(s, 3 H) 4.23-4.47(m, 2 H) 6.61(dd, J=7.55, 1.89 Hz, 1 H) 6.92(d, J=8.31 Hz, 1 H) 7.21(dd, J=12.09, 1.89 Hz, 1 H) 7.35(d, J=7.18 Hz, 1 H) 7.42(dd, J=7.74, 1.32 Hz, 1 H) 7.52(d, J=1.51 Hz, 1 H) 7.54-7.65(m, 2 H) 7.65-7.71(m, 1 H) 8.25(d, J=2.64 Hz, 1 H) 8.28(s, 1 H) 8.63(s, 1 H)
반응식 E
Figure 112013020897408-pct00279
이 실시예는 "2-[2-(3-{5-[5-(2-아제티딘-1-일-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-1-옥소-1,2,3,4-테트라하이드로-이소퀴놀린-6-일]-2-메틸-프로피오니트릴"의 합성을 예시한다.
단계 1.
6,8-다이플루오로-3,4-다이하이드로-2H-이소퀴놀린-1-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00280
교반기가 장착된 1000 ml의 3목 둥근 바닥 플라스크에, 5,7-다이플루오로-2,3-다이하이드로-1H-인덴-1-온(10 g, 59.4 mmol), 무수 다이클로로메탄(100 ml) 및 메탄설폰산(71.3 ml, 1.1 mol)을 충전시켰다. 반응물을 0℃(빙욕)으로 냉각하고, 여기에 20분에 걸쳐 나트륨 아자이드(5.41 g; 83.2 mmol)를 4분획으로 첨가하였다. 반응물을 0℃에서 2시간 동안 교반한 후, 나트륨 하이드록사이드(175 ml)의 20% 수성 용액을 30분에 걸쳐 첨가하면서 강하게 교반하였다. 완료 후, 추가 혼합물을 분별 깔때기에 옮기고, 메틸렌 클로라이드 상을 단리시켰다. 이를 동일한 부피의 50% 희석된 염수 용액으로 진탕시켰다. 유기상을 수집하고, 수성상을 다이클로로메탄(2 x 80 ml)으로 역추출시켰다. 유기상을 합치고, 건조시키고(마그네슘 설페이트), 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 조질 잔류물을 40 내지 95%의 에틸 아세테이트/헥산으로 용리하는 실리카 겔 상의 HPLC로 정제하여 목적하는 생성물을 백색 고체(8.364 g)로서 수득하였다. (M+H)+ = 184 m/e.
단계 2.
2-(8-플루오로-1-옥소-1,2,3,4-테트라하이드로-이소퀴놀린-6-일)-2-메틸-프로피오니트릴의 제조
Figure 112013020897408-pct00281
무수 테트라하이드로푸란(45 ml) 중의 6,8-다이플루오로-3,4-다이하이드로-2H-이소퀴놀린-1-온(4 g, 21.8 mmol) 및 이소부티로니트릴(6.04 g, 87.4 mmol)의 용액을 함유한 플라스크에 칼륨 비스(트라이메틸실릴)아마이드(50.4 ml, 테트라하이드로푸란 중의 0.91 M)의 용액을 첨가하고, 혼합물을 오일욕에 두고, 70℃로 가열하였다. 가열하여 적갈색 균질한 용액을 5분 이내로 수득하였다. 1시간 후, 70℃에서 추가 칼륨 비스(트라이메틸실릴)아마이드(5 ml of 0.91 M)를 첨가하고, 추가 30분 동안 계속 교반하였다. 플라스크를 주위 온도로 냉각하고, 반응물을 물(125 ml)로 켄칭하였다. 에틸 아세테이트(100 ml)을 첨가하고, 물질을 분별 깔때기에 옮겼다. 유기상을 수집하고, 수성상을 에틸 아세테이트(2 x 70 ml)로 역추출 하였다. 합친 유기상을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 100% 다이클로로메탄 내지 3%의 메탄올/다이클로로메탄으로 용리하는 실리카 겔 상의 크로마토그래피로 정제하여 반순수 성분(710 mg, 33% 순도)뿐만 아니라 순수한 생성물을 백색 분말(316 mg)로서 수득하였다. (M+H)+ = 233 m/e.
단계 3.
2-[2-(3-브로모-2-포름일-페닐)-8-플루오로-1-옥소-1,2,3,4-테트라하이드로-이소퀴놀린-6-일]-2-메틸-프로피오니트릴의 제조
Figure 112013020897408-pct00282
실시예 I-15의 단계 5(반응식 D)에 기재된 유사한 조건 하에 이 반응을 수행하였다. 후처리 후, 생성물을 100% 메틸렌 클로라이드 내지 1%의 메탄올/메틸렌 클로라이드의 구배로 용리하는 실리카 겔 상의 HPLC로 정제하였다. 목적하는 생성물을 연황색 고체(278 mg)로서 수득하였다. (M+H)+ = 415/417 m/e.
단계 4.
2-[2-(3-{5-[5-(2-아제티딘-1-일-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-1-옥소-1,2,3,4-테트라하이드로-이소퀴놀린-6-일]-2-메틸-프로피오니트릴의 제조
Figure 112013020897408-pct00283
실시예 1-15의 단계 11(반응식 D)에 기재된 유사한 조건 하에, 6-클로로-2-메틸-4-[5-(모폴린-4-카본일)-피리딘-2-일아미노]-2H-피리다진-3-온 대신 4-[5-(2-아제티딘-1-일-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-6-클로로-2-메틸-2H-피리다진-3-온으로 대체하여 이 반응을 수행하였다. 후처리 후, 생성물을 100% 메틸렌클로라이드 내지 1%의 메탄올/메틸렌클로라이드의 구배로 용리하는 실리카 겔 상의 HPLC로 정제하였다. 목적하는 생성물을 연갈색 고체(172 mg)로서 수득하였다. (M+H)+ = 664 m/e.
I-78의 제조
실시예 78
단계 5.
2-[2-(3-{5-[5-(2-아제티딘-1-일-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-1-옥소-1,2,3,4-테트라하이드로-이소퀴놀린-6-일]-2-메틸-프로피오니트릴의 제조
Figure 112013020897408-pct00284
실시예 I-15의 단계 12(반응식 D)에 기재된 유사한 조건 하에 이 반응을 수행하였다. 후처리 후, 생성물을 3 내지 14%의 메탄올/메틸렌 클로라이드의 구배로 용리하는 실리카 겔 상의 HPLC로 정제하였다. 이어서, 이 물질을 뜨거운 메틸렌 클로라이드/헥산으로 결정화시켜 목적하는 생성물을 백색 고체(108 mg)로서 수득하였다. (M+H)+ = 666 m/e. 1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.23(s, 6 H) 1.76(s, 6 H) 2.11(quin, J=6.99 Hz, 2 H) 2.58(s, 2 H) 3.12(dt, J=16.15, 4.77 Hz, 1 H) 3.27(t, J = 7.0 Hz, 4 H) 3.36-3.45(m, 1 H) 3.90(s, 3 H) 3.93-4.16(m, 3 H) 4.34-4.69(m, 2 H) 6.89(d, J=8.69 Hz, 1 H) 7.14(dd, J=11.71, 1.51 Hz, 1 H) 7.25(s, 1 H) 7.32(dd, J=8.69, 2.64 Hz, 1 H) 7.37-7.44(m, 1 H) 7.47-7.64(m, 2 H) 8.07(d, J=2.64 Hz, 1 H) 8.26(s, 1 H) 8.52(s, 1 H).
I-79의 제조
실시예 79
2-(8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[1-메틸-5-(5-옥세탄-3-일-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-1-옥소-1,2다이하이드로-이소퀴놀린-6-일)-2-메틸-프로피오니트릴의 제조
Figure 112013020897408-pct00285
6-클로로-2-메틸-4-(5-(옥세탄-3-일)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-피리다진-3(2H)-온(실시예 60에 기재된 바와 같이 제조됨, 65 mg, 194 μmol) 비스(피나콜레이토)다이보론(54.1 mg, 213 μmol) 및 칼륨 아세테이트(57.0 mg, 581 μmol)를 다이옥산(9 ml)에 현탁시켰다. 반응 혼합물을 아르곤 하에 탈기시켰다. X-PHOS(13.8 mg, 29.0 μmol) 및 팔라듐(II) 아세테이트(2.17 mg, 9.68 μmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 100℃(외부 온도)에서 45분 동안 아르곤 분위기 하에 교반하였다. LCMS(메탄올에 흡수됨)는, 보론산(M+1=347) 및 일부 목적하지 않은 2-메틸-4-(5-옥세탄-3-일-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-2H-피리다진-3-온으로의 일부 전환을 나타낸다. 가열하여 80℃로 낮춘다. 플라스크를 가열 욕에서 꺼내어 계속 교반한다. 2 mL 다이옥산 중의 2-(2-(3-브로모-2-포름일페닐)-8-플루오로-1-옥소-1,2-다이하이드로이소퀴놀린-6-일)-2-메틸프로판니트릴(실시예 15에 기재된 바와 같이 제조됨, 80 mg, 194 μmol) 및 칼륨 카보네이트(80.3 mg, 581 μmol), 이어서 1 mL 물을 첨가하였다. 트라이사이클로헥실포스핀(5.43 mg, 19.4 μmol) 및 비스(다이벤질리덴아세톤)-팔라듐(0)(5.57 mg, 9.68 μmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 가열하면서 80℃에서 1.5시간 동안 강하게 교반하였다. 조질 반응물을 H2O 및 EtOAc에 붓고, EtOAc로 3회, DCM으로 1회 추출하였다. 합친 유기 추출물을 염수로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 24 g, DCM 중의 1 내지 5%의 MeOH)로 정제하여 약 90 mg의 중간체 2-(8-플루오로-2-(2-포름일-3-(1-메틸-5-(5-(옥세탄-3-일)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)페닐)-1-옥소-1,2-다이하이드로이소퀴놀린-6-일)-2-메틸프로판니트릴을 수득하였다. 25 mL의 둥근 바닥 플라스크에, 2-(8-플루오로-2-(2-포름일-3-(1-메틸-5-(5-(옥세탄-3-일)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)페닐)-1-옥소-1,2-다이하이드로이소퀴놀린-6-일)-2-메틸프로판니트릴(90 mg, 142 μmol)을 무수 CH2Cl2(2 ml) 및 무수 MeOH(0.5 mL)와 합쳐 연황색 용액을 수득하였다. 용액을 0℃로 냉각하였다. 나트륨 보로하이드라이드(9.66 mg, 255 μmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 40분 동안 교반하였다. LCMS로 반응을 완료하였다. 포화 NH4Cl로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 25 mL H2O에 붓고, DCM(2 x 50 mL)으로 추출하였다. 유기층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 24g, 0 내지 3%의 MeOH)로 정제하였다. 순수한 분획을 농축시켜 유리를 만들고, 이를 1 mL DCM에 용해시키고, 20 mL 에터로 침전시켜 목적하는 생성물(18 mg)을 백색 고체로서 수득하였다. (M+H)+ = 637 m/e. 1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.81(s, 6 H) 2.90(t, J=5.48 Hz, 2 H) 3.55-3.71(m, 2 H) 3.77-3.86(m, 1 H) 3.89(s, 3 H) 4.17(t, J=5.48 Hz, 2 H) 4.26-4.42(m, 2 H) 4.66-4.87(m, 4 H) 5.83(s, 1 H) 6.62(dd, J=7.55, 1.89 Hz, 1 H) 7.22(dd, J=12.28, 1.70 Hz, 1 H) 7.34(d, J=7.18 Hz, 1 H) 7.41(dd, J=7.74, 1.32 Hz, 1 H) 7.50-7.61(m, 2 H) 7.63-7.72(m, 1 H) 7.85(s, 1 H) 7.95(s, 1 H).
I-80의 제조
실시예 80
6-3급-부틸-8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[1-메틸-5-(1'-옥세탄-3-일-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-2H-프탈라진-1-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00286
단계 1.
THF(10 ml) 중의 6-클로로-2-메틸-4-(5-(피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온(639 mg, 2.00 mmol, Eq: 1.00) 및 옥세탄-3-온(288 mg, 4.00 mmol, Eq: 2.0)의 용액에 아세트산(360 mg, 343 μl, 5.99 mmol, Eq: 3.0)을 첨가하였다. 반응 혼합물 N2 하에 55℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(847 mg, 4.00 mmol, Eq: 2.0)을 첨가하고, 혼합물을 65℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 DCM 및 포화 NaHCO3 사이에 분배하였다. 층을 분리하고, 유기층을 물로 세척하였다. 이어서, 유기층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 24 g, 0 내지 40%(60:10:1 DCM:MeOH:NH4OH)/DCM) 구배)로 정제하여 6-클로로-2-메틸-4-(1'-옥세탄-3-일-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-2H-피리다진-3-온(453 mg, 60%)을 수득하였다. LC/MS-ESI 관찰값 [M+H]+ 376. CDCl3에서의 1H NMR은 목적하는 생성물과 상응한다.
단계 2.
50 mL의 시험 튜브에, 6-클로로-2-메틸-4-(5-(1-(옥세탄-3-일)피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온(120 mg, 319 μmol) 및 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질 아세테이트(271 mg, 383 μmol)를 BuOH(4 ml)와 합쳐 주황색 용액을 수득하였다. 1 mL의 물을 첨가하였다. 아르곤으로 퍼지하였다. X-PHOS(15.2 mg, 31.9 μmol) 및 칼륨 포스페이트 3 염기성(136 mg, 639 μmol)을 첨가하였다. 5분 동안 아르곤 버블링 하였다. 비스(다이벤질리덴아세톤)-팔라듐(0)(9.18 mg, 16.0 μmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 아르곤 분위기 하에 두고, 110℃에서 1.5시간 동안 오일 욕에서 가온하였다. LCMS에 의해 6-클로로-2-메틸-4-(5-(1-(옥세탄-3-일)피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온이 남지 않았다. 2개의 주요 생성물은 LCMS, 아세틸화된 및 탈아세틸화된 생성물에 의해 관찰되었다. 반응 혼합물을 밤새 실온으로 냉각하고, 적은 부피로 농축시켰다. 반응 혼합물을 75 mL H2O에 붓고, EtOAc(3 x 75 mL)로 추출하였다. 유기층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 24g, DCM 중의 1 내지 6%의 MeOH)로 정제하였다. 순수한 아세틸화된 및 탈아세틸화된 생성물 및 혼합된 분획을 합치고, 농축시켜 162 mg의 혼합물을 수득하였다. 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-6-(1-메틸-5-(5-(1-(옥세탄-3-일)피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)벤질 아세테이트(162 mg, 229 μmol, Eq: 1.00) 및 6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-(하이드록시메틸)-3-(1-메틸-5-(5-(1-(옥세탄-3-일)피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)페닐)프탈라진-1(2H)-온(152 mg, 229 μmol)의 혼합물을 8 mL THF에 용해시켰다. 2 mL의 1N NaOH를 첨가하였다. 반응물을 50℃에서 6시간, 이어서 60℃에서 18시간 동안 가온하였다. 반응 혼합물을 100 mL H2O에 붓고, EtOAc(2 x 75 mL) 및 DCM(1x75 ml)으로 추출하였다. 합친 유기 추출물을 염수로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조질 물질을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 24g, DCM 중의 0 내지 4%의 MeOH), 이어서 분취용 TLC(DCM 중의 3% MeOH로 용리)로 정제하여 목적하는 생성물(78 mg)을 백색 고체로서 수득하였다. (M+H)+ = 666 m/e. 1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.43(s, 9 H) 1.58(br. s., 1 H) 1.72-2.06(m, 3 H) 2.89(br. s., 1 H) 3.75-4.09(m, 4 H) 4.43(d, J=6.80 Hz, 2 H) 4.69(d, J=6.42 Hz, 3 H) 6.92(d, J=8.31 Hz, 1 H) 7.42-7.62(m, 5 H) 7.63-7.71(m, 1 H) 8.17-8.35(m, 3 H) 8.61(s, 1 H)
I-81의 제조
실시예 81
6-3급-부틸-8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[1-메틸-5-(1'-옥세탄-3-일-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-2H-프탈라진-1-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00287
실시예 79와 유사한 절차를 따르되, 6-클로로-2-메틸-4-(5-(옥세탄-3-일)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-피리다진-3(2H)-온 대신 6-클로로-2-메틸-4-(1'-옥세탄-3-일-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-2H-피리다진-3-온으로 대체하는 것을 제외하여 목적하는 생성물을 백색 분말(173 mg)로서 수득하였다. (M+H)+ = 676 m/e. 1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.43-2.10(m 및 중첩된 단일선, 14 H) 2.54(d, J=7.18 Hz, 1 H) 2.91(d, J=9.44 Hz, 2 H) 3.55(br. s., 1 H) 3.91(s, 3 H) 4.01(dd, J=10.20, 4.15 Hz, 1 H) 4.20-4.50(m, 2 H) 4.69(d 및 m, J=6.42 Hz, 3 H) 6.62(dd, J=7.36, 2.08 Hz, 1 H) 6.92(d, J=8.69 Hz, 1 H) 7.22(dd, J=12.46, 1.89 Hz, 1 H) 7.35(d, J=7.55 Hz, 1 H) 7.42(dd, J=7.74, 1.32 Hz, 1 H) 7.49-7.64(m, 3 H) 7.65-7.74(m, 1 H) 8.17-8.33(m, 2 H) 8.63(s, 1 H).
I-82의 제조
실시예 82
6-3급-부틸-2-{3-[5-(5-에틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-2-하이드록시메틸-페닐}-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00288
실시예 59와 유사한 절차를 따르되, 단계 5에서, 메틸 아민 대신 에틸아민으로 대체하는 것을 제외하여 목적하는 생성물을 백색 분말(196 mg)로서 수득하였다. (M+H)+ = 599 m/e. 1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.21(t, J=7.18 Hz, 3 H) 1.43(s, 9 H) 2.67(d, J=6.42 Hz, 2 H) 2.99(br. s., 2 H) 3.70(br. s., 2 H) 3.88(s, 3 H) 4.02(t, J=6.99 Hz, 1 H) 4.15(br. s., 2 H) 4.40(d, J=6.80 Hz, 2 H) 5.83(s, 1 H) 7.41-7.59(m, 4 H) 7.61-7.67(m, 1 H) 7.81(s, 1 H) 7.92(s, 1 H) 8.28(d, J=2.64 Hz, 1 H)
I-83의 제조
실시예 83
2-(2-{3-[5-(5-에틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-2-하이드록시메틸-페닐}-8-플루오로-1-옥소-1,2-다이하이드로-이소퀴놀린-6-일)-2-메틸-프로피오니트릴의 제조
Figure 112013020897408-pct00289
실시예 80과 유사한 절차를 따르되, 6-클로로-2-메틸-4-(5-(옥세탄-3-일)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-피리다진-3(2H)-온 대신 6-클로로-4-(5-에틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-2-메틸-2H-피리다진-3-온으로 대체하는 것을 제외하여 목적하는 생성물을 백색 분말(70 mg)로서 수득하였다. (M+H)+ = 609 m/e. 1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.13-1.29(m, 3 H) 1.57(br. s., 2 H) 1.81(s, 7 H) 2.67(br. s., 1 H) 2.99(br. s., 1 H) 3.70(br. s., 1 H) 3.89(s, 3 H) 4.02-4.21(m, 3 H) 4.22-4.47(m, 2 H) 5.81(s, 1 H) 6.61(dd, J=7.36, 2.08 Hz, 1 H) 7.21(dd, J=12.09, 1.89 Hz, 1 H) 7.35(d, J=7.18 Hz, 1 H) 7.38-7.44(m, 1 H) 7.49-7.60(m, 2 H) 7.63-7.69(m, 1 H) 7.83(s, 1 H) 7.94(s, 1 H).
I-84의 제조
실시예 84
Figure 112013020897408-pct00290
실시예 41에 기재된 절차에 따라서, 1-메틸피페라진 대신 (1S,4S)-3급-부틸 2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-카복실레이트로 대체하여 6-3급-부틸-2-[3-(5-{5-[(1S,4S)-1-(2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.1]헵트-2-일)메틸]-피리딘-2-일아미노}-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일)-2-하이드록시메틸-페닐]-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온을 수득하였다. 이 화합물의 합성을 위한 끝에서 두번째 단계에서, 용매로서 THF를 사용하고, 1M NaOH를 사용하여 칼륨 카보네이트 이외의 아세테이트 보호기를 제거하고, 60℃에서 2시간 동안 가열한 후, 실온에서 밤새 교반하였다. BOC 보호기를 용매로서 알콜을 사용하는 1,1,1,3,3,3-헥사플루오로-2-프로판올로 제거하고, 마이크로파 반응기에서 140℃에서 30분, 이어서 150℃에서 추가 45분 동안 가열하였다. DCM 중의 5 내지 25%의 메탄올의 구배를 사용하는 크로마토그래피로 정제한 후, 50 mg의 생성물을 회백색 분말로서 수득하였다. 1H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.39(s, 1 H) 8.49-8.56(m, 2 H) 8.19-8.50(m, 1 H) 7.88(s, 1 H) 7.71-7.76(m, 1 H) 7.54-7.61(m, 1 H) 7.44-7.51(m, 4 H) 4.56(t, J=5.7 Hz, 1 H) 4.42(br. s., 2 H) 3.91(s, 1 H) 3.77(s, 3 H) 3.52-3.64(m, 4 H) 3.06(d, J=10.2 Hz, 1 H) 2.71(d, J=9.4 Hz, 2 H) 2.38(d, J=9.1 Hz,1H) 1.72(d, J=10.2 Hz, 1 H) 1.44(d, J=7.6 Hz, 1 H) 1.38(s, 9 H). MS: (M+H)+ = 637. MP > 250℃.
I-85의 제조
실시예 85
Figure 112013020897408-pct00291
실시예 41과 유사한 절차를 따르되, 단계 1에서, 1-메틸피페라진 대신 4-메틸-피페리딘-4-올로 대체하는 것을 제외하여 6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{5-[5-(4-하이드록시-4-메틸-피페리딘-1-일메틸)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온(83 mg)을 백색 고체로서 수득하였다. (M+H)+ = 654 m/e. 1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.26(s, 3 H) 1.43(s, 9 H) 1.60(d, J=13.97 Hz, 4 H) 3.91(s 및 중첩된 다중선, 4 H) 4.43(d, J=7.18 Hz, 2 H) 6.94(d, J=8.31 Hz, 1 H) 7.42-7.71(m, 5 H) 8.23-8.34(m, 3 H) 8.65(s, 1 H)
I-86의 제조
실시예 86
Figure 112013020897408-pct00292
실시예 56과 유사한 절차를 따르되, 단계 1에서, 1-메틸-4-(6-니트로피리딘-3-일)피페라진 대신 4-(6-니트로-피리딘-3-일)-피페라진-1-카복실산 에틸 에스터로 대체하는 것을 제외하여 4-(6-{6-[3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-2-하이드록시메틸-페닐]-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로-피리다진-4-일아미노}-피리딘-3-일)-피페라진-1-카복실산 에틸 에스터(43 mg)를 황색 고체로서 수득하였다. (M+H)+ = 654 m/e. 1H NMR(400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.22(t, J=7.15 Hz, 3 H) 1.36(s, 9 H) 3.10(br. s., 4 H) 3.66(br. s., 3 H) 3.83(s, 3 H) 4.11(q, J=7.11 Hz, 2 H) 4.29-4.30(m, 1 H) 4.35(s, 2 H) 7.03(d, J=8.28 Hz, 1 H) 7.34-7.64(m, 6 H) 8.00(br. s., 1 H) 8.22(d, J=2.51 Hz, 1 H) 8.36(s, 1 H).
I-87의 제조
반응식 F
Figure 112013020897408-pct00293
8-플루오로-6-(2-플루오로-1,1-다이메틸-에틸)-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-(모폴린-4-카본일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-이소퀴놀린-1-온의 제조
단계 1. 2-(8-플루오로-1-옥소-1,2-다이하이드로이소퀴놀린-6-일)-2-메틸프로판알의 제조
오븐 건조된 플라스크에서 2-(8-플루오로-1-옥소-1,2-다이하이드로이소퀴놀린-6-일)-2-메틸프로판니트릴(1.77 g, 3.34 mmol)의 용액을 THF/톨루엔에서 제조하였다. 플라스크를 질소 분위기 하에 -78℃로 냉각하였다. 여기에 DiBAL-H(헥산 중의 14 mL의 1M, 14 mmole)를 약 10분에 걸쳐 시린지로 첨가하였다. 반응 혼합물을 -78℃에서 60분 동안 교반한 후, 0℃로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 이 생성된 용액에 50 ml의 3 N HCl(수성) 및 50 ml의 EtOAc를 첨가하였다. 혼합물을 진탕하고, EtOAc 상을 수집하고, 25 ml의 염수로 세척하였다. 수성상을 EtOAc(2 X 40 ml)로 역추출 하였다. 유기층을 건조시키고(MgSO4), 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 단지 344 mg의 조질 생성물을 수득하였다. 생성물을 뜨거운 DCM/헥산으로 결정화시켰다. 생성물을 여과함으로써 수집하여 280 mg의 백색 결정 생성물을 수득하였다. (M+H)+ = 234 m/e.
단계 2. 8-플루오로-6-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)이소퀴놀린-1(2H)-온의 제조
2-(8-플루오로-1-옥소-1,2-다이하이드로이소퀴놀린-6-일)-2-메틸프로판알(137 mg, 587 μmol)을 MeOH에 용해시키고, 냉욕에서 냉각하였다. 생성된 용액에 NaBH4(33mg, 881 μmol)를 한 분획 첨가하였다. 반응 혼합물을 5분 동안 강하게 교반한 후, 냉욕을 제거하고, 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물에 약 40 ml의 10% HCl 및 40 ml의 EtOAc를 첨가하였다. 혼합물을 진탕하고, EtOAc 상을 수집하였다. 유기상을 동일한 부피의 물로 세척하였다. 수성상을 2 x 30 ml EtOAc로 역추출하였다. 합친 유기상을 건조시키고(MgSO4), 여과하고, 진공에서 농축시켜 109 mg의 회백색 분말을 수득하였다. (M+H)+ = 236 m/e.
단계 3. 8-플루오로-6-(1-플루오로-2-메틸프로판-2-일)이소퀴놀린-1(2H)-온의 제조
8-플루오로-6-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일)이소퀴놀린-1(2H)-온(114 mg, 485 μmol)을 DCM(무수)에 용해시키고, 아르곤 하에 -78℃로 냉각하였다. 이용액에 다이에틸아미노설퍼 트라이플루오라이드(90 μl, 678 μmol)를 첨가하고, 반응물을 약 10분 동안 교반한 후, 냉욕을 제거하였다. 반응물을 주위 온도로 가온하고, 이 온도에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물에 25 ml 물 및 20 ml DCM을 첨가하였다. 혼합물을 진탕하고, 유기물을 수집하였다. 유기물을 25 ml 염수로 세척하였다. 수성상을 DCM(2 x 20 ml)으로 추출하였다. 합친 유기물을 건조시키고(MgSO4), 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 조질 생성물을 분취용 TLC(2 플레이트, 4.5% MeOH/DCM로 용리됨)로 정제하여 92 mg의 목적하는 생성물을 회백색 분말로서 수득하였다. (M+H)+ = 238 m/e.
단계 4. 2-클로로-6-[8-플루오로-6-(2-플루오로-1,1-다이메틸-에틸)-1-옥소-1H-이소퀴놀린-2-일]-벤즈알데히드6,8-다이플루오로-3,4-다이하이드로-2H-이소퀴놀린-1-온의 제조
250 mL의 둥근 바닥 플라스크에, 8-플루오로-6-(1-플루오로-2-메틸프로판-2-일)이소퀴놀린-1(2H)-온(92 mg, 388 μmol), 2-브로모-6-클로로벤즈알데히드(136 mg, 620 μmol) 및 칼륨 카보네이트(107 mg, 776 μmol)를 DMSO(1.23 ml)와 합쳐 황색 현탁액을 수득하였다. 혼합물을 5분 동안 아르곤으로 탈기시켰다. 구리(I) 아이오다이드(73.9 mg, 13.1 μl, 388 μmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 오일욕에서 110℃에서 두었다. 반응 혼합물을 110℃로 가열하고, 1.5시간 동안 교반하였다. LCMS에 의해 반응이 완료되지 않았다. 보다 많은 2-브로모-6-클로로벤즈알데히드(70 mg)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 110℃로 가열하고, 3시간 동안 교반한 후, 주위 온도로 냉각하였다. 조질 반응 혼합물을 셀라이트의 플러그로 여과하고, EtOAc로 세척하였다. 합친 여액 및 세척물을 25 ml의 1:1 희석된 포화 NH4Cl/물을 포함한 분별 깔때기에 첨가하였다. 유기상을 수집하고, 동등한 부피의 염수로 세척하였다. 수성상을 EtOAc(2 X 20 ml)로 추출하였다. 합친 유기상을 건조시키고(MgSO4), 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 조질 생성물을 분취용 TLC(2 플레이트, 2% MeOH/DCM으로 용리)로 정제하여 목적하는 생성물(106 mg)을 연황색 반고체로서 수득하였다. (M+H)+ = 376 m/e.
실시예 87
Figure 112013020897408-pct00294
실시예 15(단계 11 내지 12)와 유사한 절차를 따르되, 단계 11에서, 6-클로로-2-메틸-4-(5-모폴린-4-카본일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온 대신 2-클로로-6-[8-플루오로-6-(2-플루오로-1,1-다이메틸-에틸)-1-옥소-1H-이소퀴놀린-2-일]-벤즈알데히드로 대체하는 것을 제외하여 8-플루오로-6-(2-플루오로-1,1-다이메틸-에틸)-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-(모폴린-4-카본일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-이소퀴놀린-1-온(43 mg)을 황색 고체로서 수득하였다. (M+H)+ = 657 m/e. 1H NMR(300 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.36(s, 3 H) 1.43(s, 3 H) 2.92-3.10(m, 2 H) 3.56-3.80(m, 8 H) 3.91(s, 4 H) 4.38(d, J=4.15 Hz, 2 H) 6.57(dd, J=7.55, 1.89 Hz, 1 H) 6.97-7.14(m, 2 H) 7.25(dd, J=10.39, 2.83 Hz, 2 H) 7.41(dd, J=7.74, 1.32 Hz, 1 H) 7.52-7.70(m, 2 H) 7.77(dd, J=8.31, 2.27 Hz, 1 H) 8.38-8.53(m, 2 H) 8.70(s, 1 H).
I-88의 제조
실시예 88
단계 1. 6-클로로-3-메톡시-4-트라이메틸실란일-피리다진의 제조
Figure 112013020897408-pct00295
2목 둥근 바닥 플라스크에, 아르곤 하에 플라스크를 4.0476 g의 증류된 다이이소프로필아민 및 60 mL의 테트라하이드로푸란(알드리치(Aldrich), 무수, 안정화제 없음)을 첨가하였다. 혼합물을 -78℃로 냉각한 후, 사이클로헥산 중의 약 20 mL의 2.0 M 부틸 리튬을 첨가하였다. 혼합물을 빙욕에서 20분 동안 놔둔 후, -78℃로 냉각하고, 12 mL의 테트라하이드로푸란 중의 2.8912 g의 3-클로로-6-메톡시-피리다진 및 3.05 mL의 클로로트라이메틸 실란의 용액을 15분에 걸쳐 첨가하였다. 혼합물을 2시간 동안 교반한 후(진한 적색이 형성된 후, 황색으로 옅어짐), 10 mL의 포화 나트륨 다이하이드로겐 포스페이트 용액을 첨가함으로써 켄칭하였다. 혼합물을 350 mL의 에틸 아세테이트에 용해시키고, 1x 75 mL 염수로 세척하고, 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다.
4.4056 g의 호박색 오일을 실리카 겔(실리사이클 80 g 컬럼, 3.4 x 19.2 cm(174 mL의 부피), 샘플은 다이클로로메탄에 적용됨, 다이클로로메탄-에틸 아세테이트(199:1)로 용리됨) 상의 크로마토그래피로 정제하여 목적하는 생성물(3.4 g)을 수득하였다.
단계 2. 6클로로-2-메틸-4-트라이메틸실란일-2H-피리다진-3-온 및 6-아이오도-2-메틸-4-트라이메틸실란일-2H-피리다진-3-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00296
둥근 바닥 플라스크에 1.6068 g 6-클로로-3-메톡시-4-트라이메틸실란일-피리다진 및 40 mL의 클로로포름(알드리치, 무수, 아밀렌 억제제)을 첨가하였다. 혼합물을 3x 아르곤으로 진공 플러슁한 후, 5 mL의 클로로포름 중의 3.33 mL의 아이오도트라이메틸 실란을 첨가하였다(반응물이 호박색으로 변함). 플라스크를 욕에서 60℃에서 두고, 교반하였다. 2시간 후, 혼합물을 냉각하고, 반응 혼합물을 450 mL의 다이클로로메탄에 용해시키고, 5 g의 나트륨 티오설페이트 및 3.6 g의 K2HPO4를 함유하는 1x 200 mL 염수로 세척하고, 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 조질 생성물을 실리카 겔(실리카 겔, 실리사이클 40(2.6 x 13.3 cm 71 mL의 부피), 샘플은 용매에 적용됨, 다이클로로메탄-에틸 아세테이트(90:10)로 용리됨) 상의 크로마토그래피로 정제하여 2.69 g의 황색 고체를 수득하고, 이는 6-클로로 -4-트라이메틸실란일-2H-피리다진-3-온 및 6-아이오도-4-트라이메틸실란일-2H-피리다진-3-온의 4:3 혼합물로 이루어져 있다. 이 혼합물을 아르곤 하에 둥근 바닥 플라스크에 두었다. 여기에 5.48 g의 세슘 카보네이트 및 15 mL의 다이메틸포름아마이드를 첨가하였다. 혼합물을 빙욕에 냉각하고, 2.38 g의 아이오도메탄을 60초에 걸쳐 첨가하였다. 냉욕을 제거하고, 혼합물을 실온에서 교반하였다. 90분 후, 혼합물을 400 mL 다이클로로메탄에 용해시키고, 3 x 75 mL 물 및 1 x 75 mL 염수로 세척하고, 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 조질 생성물을 실리카 겔(실리사이클 40(2.6 x 13.3 cm, 71 mL의 부피), 샘플은 용매에 적용됨, 다이클로로메탄-에틸 아세테이트(98:2)로 용리됨) 상에서 정제하여 2.53 g의 회백색 고체를 6-클로로-2-메틸-4-트라이메틸실란일-2H-피리다진-3-온 및 6-아이오도-2-메틸-4-트라이메틸실란일-2H-피리다진-3-온의 6:4 혼합물로서 수득하였다.
단계 3. 아세트산 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-6-(1-메틸-6-옥소-5-트라이메틸실란일-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일)-벤질 에스터의 제조
Figure 112013020897408-pct00297
둥근 바닥 플라스크에, 3.21 g 아세트산 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-6-(4,4,5,5-테트라메틸-[1,3,2]다이옥사보롤란-2-일)-벤질 에스터, 2.06 g 나트륨 카보네이트, 0.68 g 비스트라이페닐포스핀 팔라듐 다이클로라이드, 및 1.99 g 6-클로로-2-메틸-4-트라이메틸실란일-2H-피리다진-3-온 및 6-아이오도-2-메틸-4-트라이메틸실란일-2H-피리다진-3-온의 6:4 혼합물, 이어서 130 mL의 다이옥산(EM 드라이솔브(DriSolv))-물(10:1)을 첨가하였다. 혼합물을 5x 아르곤으로 진공 플러슁한 후, 욕에서 95℃에서 두고, 교반하였다(기계적). 5.5시간 후, 혼합물을 냉각하고, 350 mL의 에틸 아세테이트에 용해시키고, 1 x 75 mL의 염수로 세척하였다. 에틸 아세테이트 층을 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 조질 생성물을 실리카 겔(실리사이클 120 g, 3.5 x 21.5 cm, 207 부피), 다이클로로메탄에 적용됨, CH2Cl2-에틸 아세테이트(80:20)로 용리됨) 상의 크로마토그래피, 이어서 실리카 겔(실리사이클 120 g, 3.5 x 21.5 cm, 207 부피), 다이클로로메탄에 적용됨, 다이클로로메탄-에틸 아세테이트(80:20)로 용리됨) 상의 크로마토그래피로 정제하여 2.5418 g(71%)의 생성물을 포움으로서 수득하였다.
단계 4. 아세트산 아세트산 2-(5-브로모-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일)-6-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-벤질 에스터의 제조
Figure 112013020897408-pct00298
환류 응축기가 장착된 둥근 바닥 플라스크에, 2.54 g 아세트산 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-6-(1-메틸-6-옥소-5-트라이메틸실란일-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일)-벤질 에스터, 5.51 g 칼륨 브로마이드, 4.55 g 칼륨 아세테이트, 이어서 약 18.4908 g 브롬을 첨가하였다. 혼합물을 브롬의 첨가로 가온하였다. 혼합물을 실온에서 2분 동안 교반한 후, 욕에서 55℃에서 두고, 교반하였다. 브롬 증기를 함유하기 위해 스토퍼(stopper)를 환류 응축기의 상부에 가볍게 두었다. 70분 후, 혼합물을 실온으로 냉각하고, 질소 스트림 하에 과도한 브롬을 제거하였다. 혼합물을 500 mL의 다이클로로메탄에 용해시키고, 일부 생성된 발열과 함께 12 g 나트륨 비스설파이트를 함유한 1 x 150 mL 염수로 세척하고, 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카 겔(실리사이클 120 g, 3.5 x 21.5 cm, 207 부피), 다이클로로메탄에 적용됨, 다이클로로메탄-에틸 아세테이트(80:20)로 용리됨) 상의 크로마토그래피, 이어서 실리카 겔(실리사이클 120 g, 3.5 x 21.5 cm, 207 부피), 다이클로로메탄에 적용됨, 다이클로로메탄-에틸 아세테이트(80:20)로 용리됨) 상의 크로마토그래피로 정제하여 목적하는 생성물(1.91 g)을 회백색 고체로서 수득하였다.
단계 5. 아세트산 6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5((1S,4S)-5-메틸-2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.1]헵트-2-일)-피라진-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00299
5-((1S,4S)-5-메틸-2,5-다이아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)피라진-2-아민(실시예 34에 4-메틸-3,4,5,6-테트라하이드로-2H-[1,2']바이피라진일-5'-일아민과 유사한 절차에 따라 제조됨, 50 mg, 292 μmol), 2-(5-브로모-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)-6-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)벤질 아세테이트(170 mg, 307 μmol), 세슘 카보네이트(286 mg, 877 μmol), 잔트포스(25 mg, 44 μmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(20 mg, 22 μmol) 및 다이옥산(3 mL)을 마이크로바이알에 합치고, 아르곤으로 탈기시키고, 100℃에서 18시간 동안 가열하였다. 조질 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 농축시키고, DCM 중의 0 내지 25%의 메탄올 구배를 사용하는 크로마토그래피로 정제하였다. 생성된 잔류물(아세틸화된 및 탈아세틸화된 생성물의 혼합물)을 메탄올에 용해시켰다. 칼륨 카보네이트(61 mg, 441 μmol)를 첨가하고, 반응물을 40℃에서 1시간 동안 가열하였다. 물을 적가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 고체를 여과함으로써 수집하였다. DCM 중의 10% 메탄올로 용리하는 분취용 TLC로 정제하여 목적하는 생성물(17 mg)을 황색 분말로서 수득하였다. (M+H)+ = 638 m/e. 1H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.37(s, 9 H) 1.66-1.92(m, 2 H) 2.25(s, 3 H) 2.78(d, J=8.31 Hz, 1 H) 3.41(d, J=10.20 Hz, 2 H) 3.75(s, 3 H) 4.28-4.58(m, 4 H) 7.39-7.55(m, 3 H) 7.68-7.79(m, 2 H) 7.85(d, J=1.51 Hz, 1 H) 8.05(s, 1 H) 8.35(d, J=1.51 Hz, 1 H) 8.49(d, J=2.27 Hz, 1 H) 9.34(s, 1 H).
I-89의 제조
실시예 89
Figure 112013020897408-pct00300
화합물 I-15에 기재된 절차에 따라서, 단계 11에서, 6-클로로-2-메틸-4-(5-모폴린-4-카본일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온 대신 6-클로로-2-메틸-4-[5-((R)-1-메틸-피롤리딘-3-일)-피리딘-2-일아미노]-2H-피리다진-3-온으로 대체하여 2-[8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-((S)-1-메틸-피롤리딘-3-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-1-옥소-1,2-다이하이드로-이소퀴놀린-6-일]-2-메틸-프로피오니트릴을 32 mg의 최종 생성물인 연황색 분말로서 수득하였다. (M+H)+ = 620 m/e.
I-90의 제조
실시예 90
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-6-옥소-5-[1'-(2,2,2-트라이플루오로-에틸)-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노]-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온의 제조
Figure 112013020897408-pct00301
실온에서 DMF(1 ml) 중의 6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-(하이드록시메틸)-3-(1-메틸-6-옥소-5-(5-(피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)페닐)프탈라진-1(2H)-온(10 mg, 16.4 μmol)의 용액에 칼륨 카보네이트(6.8 mg, 49.2 μmol) 및 2,2,2-트라이플루오로에틸 트라이플루오로메탄 설폰에이트(3.81 mg, 2.36 μl, 16.4 μmol)를 첨가하였다. 혼합물을 동일한 온도에서 8시간 동안 교반하였다. EtOAc를 반응 혼합물(10 mL)에 첨가하고, 혼합물을 물(10 mL)에 부었다. 유기층을 분리하고, 물(4 x 5 mL)로 세척하고, 건조시키고(Na2SO4), 진공에서 증발시켰다. 조질 생성물을 분취용 TLC(CH2Cl2:MeOH:NH4OH, 90:9.5:0.5)로 정제하여 8 mg의 순수한 생성물(70% 수율)을 수득하였다. m/z 692[M+H]+.
검정 데이타
브루톤 티로신 키나아제 ( Btk ) 억제 검정
상기 검정은 여과를 통해 방사성 33P 인산화된 생성물을 포착하는 것이다. Btk, 비오틴화된(biotinylated) SH2 펩타이드 기질(Src 상동), 및 ATP의 상호작용은 펩타이드 기질의 인산화를 일으킨다. 비오틴화 생성물은 결합된 스트렙타비딘 세파로스 비드(streptavidin sepharose bead)이다. 모든 결합된, 방사표지된 생성물은 섬광 계수기에 의해 검출된다.
검정된 플레이트는 96-웰 폴리프로필렌(그레이너(Greiner)) 및 96-웰 1.2 ㎛ 친수성 PVDF 필터 플레이트(밀리포어(Millipore))이다. 본원에 기록된 농도는 최종 검정 농도이다: DMSO 중의 10 내지 100 μM 화합물(버딕 앤드 잭슨(Burdick and Jackson)), 5 내지 10 nM Btk 효소(His-태깅됨, 전장(full-length)), 30 μM 펩타이드 기질(Biotin-Aca-AAAEEIYGEI-NH2), 100 μM ATP(시그마(Sigma)), 8 mM 이미다졸(시그마, pH 7.2), 8 mM 글리세롤-2-포스페이트(시그마), 200 μM EGTA(로슈 다이아그노스틱스(Roche Diagnostics)), 1 mM MnCl2(시그마), 20 mM MgCl2(시그마), 0.1 mg/ml BSA(시그마), 2 mM DTT(시그마), 1 μCi 33P ATP(애머샴(Amersham)), 20% 스트렙타비딘 세파로스 비드(애머샴), 50 mM EDTA(깁코(Gibco)), 2 M NaCl(깁코), 2 M NaCl w/1% 인산(깁코), 마이크로신트-20(퍼킨 엘머(Perkin Elmer)).
IC50 측정은 표준 96-웰 플레이트 검정 템플레이트로부터 생성된 데이터를 활용하여 화합물 당 10의 데이터점으로부터 계산된다. 하나의 대조군 화합물 및 7개의 미공지된 억제제를 각각의 플레이트 상에서 시험하였고, 각각의 플레이트를 2회 시험하였다. 전형적으로, 화합물을 100 μM에서 출발하여 3 nM에서 종결되는 단계 희석(half-log)으로 희석하였다. 대조군 화합물은 스타우로스포린이었다. 펩타이드 기질의 부재 하에 백그라운드를 계수하였다. 총 활성을 펩타이드 기질의 존재 하에 측정하였다. 하기 프로토콜을 사용하여 Btk 억제를 측정하였다:
1) 샘플 제조: 시험 화합물을 검정 완충제(이미다졸, 글리세롤-2-포스페이트, EGTA, MnCl2, MgCl2, BSA) 중의 단계 희석 증가량으로 희석하였다.
2) 비드 제조
a. 500 g 에서 원심분리하여 비드를 세척하고,
b. PBS 및 EDTA로 비드를 재구성하여, 20% 비드 슬러리를 제조하였다.
3) 기질(검정 완충제, DTT, ATP, 33P ATP)을 함유하지 않은 반응 혼합물 및 기질(검정 완충제, DTT, ATP, 33P ATP, 펩타이드 기질)을 함유한 혼합물을 30℃에서 15분 동안 예비 인큐베이션함.
4) 검정을 시작하기 위해, 효소 완충제(이미다졸, 글리세롤-2-포스페이트, BSA) 중 10 μL Btk 및 10μL의 시험 화합물을 10분 동안 실온에서 예비 인큐베이션함.
5) 기질을 함유하지 않거나 또는 함유한 30 μL 반응 혼합물을 Btk 및 화합물에 첨가함.
6) 50 μL 총 검정 혼합물을 30분 동안 30℃에서 인큐베이션함.
7) 40 μL의 검정물을 필터 플레이트에서의 150 μL 비드 슬러리로 이동시켜 반응을 중지시킴.
8) 30분 후 필터 플레이트를 하기 단계로 세정함
a. 3 x 250 μL의 NaCl
b. 1% 인산을 함유한 3 x 250 μL의 NaCl
c. 1 x 250 μL의 물
9) 플레이트를 1시간 동안 65℃에서 또는 밤새 실온에서 건조시킴
10) 50 μL 마이크로신트-20 을 첨가하고, 섬광 계수기로 33P cpm 을 계수함.
cpm의 원 데이터(raw data)로부터 %활성을 계산함
%활성 = (샘플 - bkg)/(총 활성 - bkg) x 100
단일부위 용량 반응 S자형 모델을 이용하여, %활성으로부터 IC50을 계산함
y = A + ((B - A)/(1 + ((x / C)D))))
x = 화합물의 농도, y = %활성, A = 최소, B = 최대, C = IC50, D = 1(경사 기울기)
CD69 발현에 의해 측정되는 전혈 중의 B 세포 활성 억제
혈액 중에서 B 세포의 B 세포 수용체 매개된 활성을 억압하는 Btk 억제제의 능력을 시험하는 절차는 하기와 같다:
인간 전혈(HWB)을 다음과 같은 제한조건을 가진 건강한 자원자로부터 얻는다: 24 시간 약물 복용하지 않는 비흡연자. 혈액을 나트륨 헤파린으로 응고방지된 배큐테이너(Vacutainer) 튜브로 정맥 천자에 의해 채혈한다. 시험 화합물을 목적하는 출발 약물 농도의 10배까지 PBS(20x)로 희석한 다음, PBS 중의 10% DMSO로 3배 단계 희석하여 9점 용량 반응 곡선을 생성시킨다. 5.5 μl의 각 화합물 희석물을 2세트로 하여 2 ml 96-웰 V 바닥 플레이트(Analytical Sales and Services, #59623-23)에 첨가하고, 5.5 μl의 PBS 중의 10% DMSO를 대조군 및 비자극 웰에 첨가한다. HWB(100 μl)를 각 웰에 첨가하고, 혼합한 후 플레이트를 37℃, 5% CO2, 100% 습도에서 30분 동안 인큐베이션한다. 염소 F(ab')2 항-인간 IgM(사우전 바이오테크(Southern Biotech), #2022-14)(10 μl의 500 μg/ml 용액, 50 μg/ml 최종 농도)를 각 웰(비자극 웰 제외)에 혼합하면서 첨가하고, 그 플레이트를 추가 20시간 동안 인큐베이션한다.
20시간의 인큐베이션의 종결 무렵에, 샘플을 형광-프로브-표지된 항체(15 μl PE 쥐 항-인간 CD20, BD 파마겐(Pharmingen), #555623, 및/또는 20 μl APC 쥐 항-인간 CD69, BD 파마겐 #555533)와 함께 30분 동안, 37C, 5% CO2, 100% 습도에서 인큐베이션한다. 보상 조정 및 초기 전압 설정을 위한 단일 염색물, 비염색물 및 유도된 대조군이 포함되어 있다. 이어서, 샘플을 1 ml의 1X 파마겐 라이즈 완충제(BD 파마겐 # 555899)에 의해 용해시키고, 플레이트를 1800 rpm에서 5분 동안 원심분리한다. 상청액을 흡입에 의해 제거하고, 잔여 펠릿을 또 다른 1ml 의 1X 파마겐 라이즈 완충제로 다시 용해시키고, 플레이트를 상기와 같이 회전시킨다. 상청액을 뽑아내고, 잔여 펠릿을 FACs 완충제(PBS + 1% FBS)로 세척한다. 최종 회전 후, 상청액을 제거하고, 펠릿을 180 μl의 FACs 완충제에서 재현탁시킨다. 샘플을 BD LSR II 유세포분석기(flow cytometer)의 HTS 96 웰 시스템 상에서 실시되기에 적합한 96 웰 플레이트로 이동시킨다.
사용된 형광단(fluorophore)의 적절한 여기 및 방출 파장을 사용하여, 데이터를 획득하고, %양성 세포 값을 셀 퀘스트 소프트웨어(Cell Quest Software)를 사용하여 얻는다. 결과를 FACS 분석 소프트웨어(Flow Jo)를 사용하여 초기에 분석한다. 시험 화합물의 IC50은 항-IgM에 의한 자극 후 또한 CD20-양성인 CD69-양성 세포의 %(비자극 백그라운드용 8개의 웰의 평균치를 뺀 후의 8개의 대조군 웰의 평균치)를 50% 만큼 감소시키는 농도로서 정의된다. IC50 값을 XLfit 소프트웨어 버전 3, 방정식 201 을 사용하여 계산한다.
상기 검정의 대표적인 화합물의 데이터를 하기 표 II에 나열한다.
[표 II]
Figure 112013020897408-pct00302
Figure 112013020897408-pct00303
Figure 112013020897408-pct00304
Figure 112013020897408-pct00305
B 세포 활성 억제 - Ramos 세포 중의 B 세포 FLIPR 검정
본 발명의 화합물에 의한 B 세포 활성의 억제를, 항-IgM 자극 B 세포 반응에 대한 시험 화합물의 효과를 측정함으로써 증명한다.
FLIPR 검정은 항-IgM 항체에 의한 자극으로부터 세포내 칼슘이 증가하는 것에 대한 가능한 억제제 효과를 측정하는 세포 기재의 기능적 방법이다. Ramos 세포(인간 버킷(Burkitt) 림프종 세포주. ATCC-No. CRL-1596)를 증식용 배지(하기 기재됨)에서 배양하였다. 검정 하루 전, Ramos 세포를 새로운 증식용 배지(상기와 동일함)에 재현탁시키고, 조직 배양 플라스크 내에 0.5 x 106/mL의 농도로 설정하였다. 검정 당일, 세포를 계수하고, 조직 배양 플라스크 내에 1 μM FLUO-3AM(TefLabs 카탈로그 번호 0116, 무수 DMSO 및 10% 플루론산 중에서 제조됨)으로 보충된 증식용 배지에서 1 x 106/mL의 농도로 설정하고, 37℃(4% CO2)에서 1시간 동안 인큐베이션한다. 세포외 염료를 제거하기 위해, 세포를 원심분리(5분, 1000 rpm)에 의해 수합하고, 1 x 106 세포/mL로 FLIPR 완충제(하기 기재됨)에 재현탁시킨 후, 웰 당 1 x 105세포로 96-웰 폴리-D-리신 코팅된 흑색/투명 플레이트(BD 카탈로그 번호 356692)에 분배하였다. 시험 화합물을 100 μM 내지 0.03 μM(7개의 농도, 하기 세부사항) 범위의 다양한 농도로 첨가하고, 30분 동안 실온에서 세포와 함께 인큐베이션시켰다. Ramos 세포 Ca2 + 신호전달을 10 μg/mL 항-IgM(사우전 바이오테크, 카탈로그 번호 2020-01)의 첨가에 의해 자극하고, FLIPR(분자 장치, 480 nM 여기에서 아르곤 레이저를 포함한 CCD 카메라를 사용하여 96 웰 플레이트의 이미지를 포착함)에서 측정하였다.
배지/완충제:
성장 배지: L-글루타민(인비트로겐(Invitrogen), 카탈로그 번호 61870-010), 10% 우태아혈청(FBS, 서밋 바이오테크놀로지(Summit Biotechnology) 카탈로그 번호 FP-100-05); 1 mM 나트륨 피루베이트(인비트로겐 카탈로그 번호 11360-070)을 함유한 RPMI 1640 배지.
FLIPR 완충제: HBSS(인비트로겐, 카탈로그 번호 141175-079), 2 mM CaCl2(시그마 카탈로그 번호 C-4901), HEPES(인비트로겐, 카탈로그 번호 15630-080), 2.5 mM 프로베네시드(시그마, 카탈로그 번호 P-8761), 0.1% BSA(시그마, 카탈로그 번호 A-7906), 11 mM 글루코오스(시그마, 카탈로그 번호 G-7528)
화합물 희석 세부사항:
100 μM의 최고의 최종 검정 농도를 달성하기 위해, 24 μL의 10 mM 화합물 저장 용액(DMSO 중에 제조됨)을 직접 576 μL의 FLIPR 완충제에 첨가한다. 시험 화합물을 FLIPR 완충제(바이오멕(Biomek) 2000 로봇 피펫터(robotic pipettor)를 사용함)로 희석하고, 이는 하기 희석식을 생성한다: 비히클, 1.00 x 10-4 M, 1.00 x 10-5, 3.16 x 10-6, 1.00 x 10-6, 3.16 x 10-7, 1.00 x 10-7, 3.16 x 10-8.
검정 및 분석:
칼슘의 세포내 증가는, 최대 - 최소 통계자료(분자 장치 FLIPR 조절 및 통계자료 익스포팅(exporting) 소프트웨어를 사용하여 자극성 항체의 첨가에 의해 야기된 피크에서 정지된 기준치(resting baseline)를 빼는 것)를 사용하여 기록하였다. 비선형 곡선 적합화(curve fit)(그래프패드 프리즘(GraphPad Prism) 소프트웨어)를 사용하여 IC50을 측정하였다.
여러 경로에 의해 투여되는 주제 화합물의 약학 조성물을 상기 실시예에서 기재된 바와 같이 제조하였다.
경구투여용 조성물(A)
Figure 112013020897408-pct00306
상기 성분들을 혼합하고, 각각 약 100 mg을 함유하도록 캡슐 내로 분배하고, 1개의 캡슐은 1일 총 투여량과 유사할 것이다.
경구투여용 조성물(B)
Figure 112013020897408-pct00307
상기 성분들을 조합하고, 메탄올과 같은 용매를 사용하여 과립화한다. 그 후, 상기 제형물을 건조시키고, 적당한 타정기를 이용하여 정제(약 20 mg의 활성 화합물 함유)로 형성시킨다.
경구투여용 조성물(C)
Figure 112013020897408-pct00308
상기 성분들을 혼합하여 경구투여용 현탁액을 형성시킨다.
비경구 제형(D)
Figure 112013020897408-pct00309
활성 성분을 주사용수의 일부에 용해시킨다. 이어서, 충분한 양의 염화나트륨을 교반하면서 첨가하여, 용액을 등장성이 되게 한다. 나머지 주사용수로 용액의 중량을 보충하고, 0.2 마이크론 막 필터를 통해 여과시키고, 무균 조건 하에서 패키징한다.
좌제 제형(E)
Figure 112013020897408-pct00310
상기 성분들을 함께 용융시키고, 증기욕 상에서 혼합하고, 총 중량 2.5 g을 함유하도록 몰드에 붓는다.
국소 제형(F)
Figure 112013020897408-pct00311
마우스 콜라겐 유도성 관절염( mCIA )
0일째, 마우스의 꼬리 기부 또는 등의 여러 지점에 완전 프로인트 보조물질(Complete Freund's Adjuvant; CFA) 중 제 2형 콜라겐의 에멀젼을(i.d.) 주사한다. 콜라겐 면역 조치 이후, 동물은 21 내지 35 일째 쯤에 관절염을 나타낼 것이다. 관절염의 발병은 21일째에 불완전 프로인트 보조물질(IFA; i.d.) 중 콜라겐의 전신 투여에 의해 동시발생된다(보강(boost)된다). 보강되는 신호인 경미한 관절염(점수 1 또는 2; 하기 기재된 점수 참조)의 임의 발병에 대해 20일째 이후로 매일 동물을 조사한다. 보강된 후에, 마우스의 점수를 매기고, 처방 시간(전형적으로 2-3 주) 및 투약 빈도, 매일(QD) 또는 매일 2회(BID)로 후보 치료제를 투여한다.
래트 콜라겐 유도성 관절염( rCIA )
0일째, 래트의 등의 여러 위치에 불완전 프로인트 보조물질(IFA) 중 소과 제 2 형 콜라겐의 에멀젼을 피내(i.d.) 주사한다. 콜라겐 에멀젼의 보강 주사를 7일째 쯤에 꼬리 또는 등의 대체 부위에 제공한다(i.d.). 관절염은 일반적으로 초기 콜라겐 주사 후 12 내지 14일째에 관찰된다. 동물은 14일째 이후로 하기 기재된 바와 같은 관절염의 발생에 대해 평가될 수 있다(관절염 평가). 2차 도전 시점에서 출발하는 예방 방식으로 처방 시간(전형적으로 2 내지 3주) 및 투약 빈도, 매일(QD) 또는 매일 2회(BID)로 동물에 후보 치료제를 투여한다.
관절염 평가:
양쪽 모델에서, 발 및 사지 관절에 발생된 염증을, 하기 기재된 기준을 따라 4개의 발의 평가를 포함하는 채점 시스템을 사용하여 수량화한다:
채점:
1= 발 또는 하나의 발가락의 부종 및/또는 발적.
2= 2개 이상의 관절의 부종.
3= 2개 초과의 관절을 포함한 발의 심한 부종.
4= 전체 발 및 발가락의 중증의 관절염.
기준치 측정을 위해 평가를 0일째에 하였고, 첫 징후 또는 부종에서 다시 시작하여, 실험이 끝날때까지 1주 당 3회 이하로 평가한다. 각 마우스의 관절염 지수는 개별 발의 4개의 점수를 더하고, 동물 당 최대 점수를 16점으로 부여함으로써 수득된다.
래트 생체내 천식 모델
수컷 갈색-노르웨이 래트를 0.2 ml 명반 중 100 μg의 OA(오브알부민)로 매주 1회 3주 동안(0일째, 7일째, 및 14일째) 복강내 감작시킨다. 21일째(최종 감작한 후 1주째), 그 래트에 OA 에어로졸 도전(45분 동안 1% OA)하기 0.5시간 전에 비히클 또는 화합물 제형을 피하(q.d.)에 투여하고, 도전한 지 4 또는 24시간 후에 종결시킨다. 희생 시점에, 혈청 및 혈장을 각각 혈청 테스트 및 PK를 위해 모든 동물로부터 채혈한다. 기관캐뉼라를 삽입하고, 폐를 PBS로 세척한다(3X). BAL 유체를 총 백혈구 수 및 백혈구 감별 계수를 위해 분석한다. 세포 중 일부(20 내지 100 μl)의 총 백혈구 수를 콜터 계수기(Coulter Counter)로 측정한다. 백혈구 감별 계수를 위해, 50-200 μl의 샘플을 시토스핀(Cytospin)에서 원심분리하고, 슬라이드를 디프-퀵(Diff-Quik)으로 염색한다. 단핵 백혈구, 호산구, 호중구 및 림프구의 비율을 표준 형태학적 기준을 사용하여 광현미경 하에 계수하고, %로 표현한다. 대표적인 Btk 억제제는 대조군의 수준과 비교시 OA 감작 및 도전된 래트의 BAL에서 총 백혈구 수의 감소를 나타낸다.
상기 본 발명은 명쾌함 및 이해를 목적으로 설명 및 실시예를 수단으로 하여 상세하게 기재되었다. 당업자에게는 첨부된 청구의 범위의 범위 내에서 변경 및 변형이 가능하다는 것이 자명할 것이다. 따라서, 상기 명세서는 설명을 의도로 한 것이며, 한정을 의도한 것이 아님이 이해되어야 한다. 따라서, 본 발명의 범위는 상기 설명을 참조로 결정될 것이 아니라, 청구항들이 목적하고자 하는 것의 등가물의 전체 범위를 포괄하여, 하기에 첨부한 특허청구범위를 참조하여 결정되어야 할 것이다.
본 출원에 인용된 모든 특허, 특허 출원 및 공보는, 각각의 개별 특허, 특허 출원 또는 공보가 개별적으로 언급된 것과 같은 정도로 임의의 목적을 위해 본원에 그의 전체가 참고문헌으로 포함된다.

Claims (24)

  1. 하기 화학식 I의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:
    [화학식 I]
    Figure 112014102876418-pct00312

    상기 식에서,
    Figure 112014102876418-pct00313
    는 이중 결합이고;
    X는 N이고;
    R은 H, -R1, -R1-R2-R3, -R1-R3, 또는 -R2-R3이고;
    R1은 피리딜, 피라진일, 피라졸릴, 피리다진일 또는 피라졸로피라진일이며, 이들 각각은 임의적으로 하나 이상의 C1-6 알킬, 하이드록시, 하이드록시 C1-6 알킬, C1-6 알콕시, 할로, 니트로, 아미노, 아마이도, 시아노, 옥소, 또는 C1-6 할로알킬로 치환되고;
    R2는 -C(=O), -C(R2')2, -O, -S 또는 -S(=O)2이고;
    R2' 각각은 독립적으로 H 또는 C1-6 알킬이고;
    R3는 H 또는 R4이고;
    R4는 C1-6 알킬, C1-6 할로알킬, C1-6 알콕시, 아미노, C1-6 알킬-아미노, C3-7 사이클로알킬-아미노, C1-6 다이알킬-아미노, 피롤리딘일, 피페리딘일, 피페라진일, 모폴린일, 아제티딘일, 티오모폴린일, 옥세탄일, 3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥틸, 2-옥사-6-아자스피로[3.3]헵틸, 2,6-다이아자-스피로[3.3]헵틸 또는 2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.1]헵틸이며, 이들은 각각 임의적으로 하나 이상의 C1-6 알킬, 할로, C1-6 알킬-아미노, C1-6 다이알킬-아미노, 하이드록시, 하이드록시-C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C1-6 알칸오일, 할로, 니트로, 아미노, 아마이도, C1-6 아실, 시아노, 옥소, 설폰일, C1-6 알킬-설폰일, 구아니디노, 하이드록실-아미노, 카복시, 카바모일, 카바메이트, 할로 C1-6 알콕시, 아제티딘일, 옥세탄일 또는 할로-C1-6 알킬로 치환되고;
    Y4는 Y4a 또는 Y4b이고;
    Y4a는 H 또는 할로겐이고;
    Y4b는, 임의적으로 C1-6 할로알킬, 할로겐, 하이드록시, 아미노, 시아노, 및 C1-6 알콕시로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환체로 치환되는 C1-6 알킬이다.
  2. 제 1 항에 있어서,
    R이 -R1-R2-R3이고; R1이 피리딜이고; R3이 R4이고; R2가 -S(=O)2이고, 이때 R4가 C1-6 알킬인, 화합물.
  3. 제 1 항에 있어서,
    R이 -R1-R2-R3이고; R1이 피리딜이고; R2가 -C(CH3)2이고; R3가 R4이고; 이때 R4가 C1-6 알킬-아미노; C1-6 다이알킬-아미노; 또는 하나 이상의 C1-6 알킬로 임의적으로 치환되는 피롤리딘일, 피페리딘일, 피페라진일, 모폴린일, 아제티딘일, 티오모폴린일 또는 옥세탄일인, 화합물.
  4. 제 1 항에 있어서,
    R이 -R1-R2-R3이고; R1이 피리딜이고; R2가 -C(=O)이고; R3가 R4이고; R4가, 임의적으로 하나 이상의 C1-6 알킬로 치환되는 모폴린일 또는 피페라진일인, 화합물.
  5. 제 1 항에 있어서,
    Y4가 3급-부틸인, 화합물.
  6. 삭제
  7. 제 5 항에 있어서,
    R이 -R1-R3이고; R1이 피리딜 또는 피라졸로피라진이고; R3이 R4이고; R4는 임의적으로 치환되는 C1-6 알킬, 피롤리딘일, 피페리딘일, 피페라진일, 모폴린일, 아제티딘일, 티오모폴린일 또는 옥세탄일인, 화합물.
  8. 제 5 항에 있어서,
    R이 -R1-R2-R3이고; R1이 피리딜이고; R2가 -C(CH3)2이고; R3이 R4이고; 이때 R4는 C1-6 알킬-아미노, C1-6 다이알킬-아미노, 또는 하나 이상의 C1-6 알킬로 임의적으로 치환되는 피롤리딘일, 피페리딘일, 피페라진일, 모폴린일, 아제티딘일, 티오모폴린일 또는 옥세탄일인, 화합물.
  9. 제 5 항에 있어서,
    R이 -R1-R2-R3이고; R1이 피리딜이고; R2가 -C(=O)이고; R3이 R4이고; 이때 R4는 임의적으로 치환되는 피롤리딘일, 피페리딘일, 피페라진일, 모폴린일, 아제티딘일, 티오모폴린일, 옥세탄일, 2-옥사-6-아자스피로[3.3]헵틸 또는 2,6-다이아자-스피로[3.3]헵틸인, 화합물.
  10. 제 9 항에 있어서,
    R4가 임의적으로 치환되는 모폴린일 또는 피페라진일인, 화합물.
  11. 제 1 항에 있어서,
    하기로 이루어진 군으로부터 선택된 화합물:
    6-3급-부틸-2-(3-{5-[5-(1-에틸아미노-1-메틸-에틸)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-(모폴린-4-카본일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[5-(5-메탄설폰일-피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{5-[5-(3-메톡시-아제티딘-1-일메틸)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-(8-메틸-3,8-다이아자-바이사이클로[3.2.1]옥트-3-일메틸)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-2-(3-{5-[5-(2-다이메틸아미노-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
    2-{3-[5-(5-아제티딘-1-일메틸-피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-2-하이드록시메틸-페닐}-6-3급-부틸-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-2-{3-[5-(5-다이메틸아미노메틸-피리딘-2-일아미노)-1-메틸-l-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-2-하이드록시메틸-페닐}-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-2-(3-{5-[(1R,5S)-5-(3,8-다이아자-바이사이클로[3.2.1]옥트-8-일)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
    6-{6-[3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-2-하이드록시메틸-페닐]-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로-피리다진-4-일아미노}-N,N-다이메틸-니코틴아마이드;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[1-메틸-6-옥소-5-(5-트라이플루오로메틸-피라진-2-일아미노)-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-(3-{5-[5-(2-하이드록시-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
    2-(3-{5-[5-(2-아제티딘-1-일-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-6-3급-부틸-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{5-[5-(2-하이드록시-2-메틸-프로폭시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-(3-{5-[5-((S)-2-하이드록시-3-메톡시-프로폭시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-(3-{5-[5-((R)-2-하이드록시-3-메톡시-프로폭시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-((S)-1-메틸-피롤리딘-2-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-((R)-1-메틸-피롤리딘-2-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
    6-{6-[3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-2-하이드록시메틸-페닐]-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로-피리다진-4-일아미노}-N,N-다이메틸-니코틴아마이드;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{5-[5-(4-하이드록시-4-메틸-피페리딘-1-카본일)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-(6-메틸-2,6-다이아자-스피로[3.3]헵트-2-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-2-{3-[5-(5-에탄설폰일-피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-2-하이드록시메틸-페닐}-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-6-옥소-5-[5-(프로판-2-설폰일)-피리딘-2-일아미노]-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-(3-{5-[5-(2-하이드록시-에틸설판일)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-(3-{5-[5-(2-하이드록시-에탄설폰일)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{5-[5-(4-이소프로필-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-(1-메틸-피롤리딘-3-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[5-(1'-이소프로필-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-2-{3-[5-(1'-에틸-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-2-하이드록시메틸-페닐}-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-2-{3-[5-(1,5-다이메틸-1H-피라졸-3-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-2-하이드록시메틸-페닐}-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-((S)-1-메틸-피롤리딘-3-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-((R)-1-메틸-피롤리딘-3-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[1-메틸-5-(4-메틸-3,4,5,6-테트라하이드로-2H-[1,2']바이피라진일-5'-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-2-{3-[5-(5-사이클로부틸아미노메틸-피라진-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-2-하이드록시메틸-페닐}-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-2-(3-{5-[5-(2-다이메틸아미노-에톡시)-피라진-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-(4-메틸-피페라진-1-일메틸)-피라진-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-2-(3-{5-[5-(2-다이메틸아미노-1,1-다이메틸-에톡시)-피라진-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-2-(3-{5-[6-(2-다이메틸아미노-1,1-다이메틸-에톡시)-피리다진-3-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[6-(1-메틸-피페리딘-4-일)-피리다진-3-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-(4-메틸-피페라진-1-일메틸)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-[2-하이드록시메틸-3-(5-{5-[(2-메톡시-에틸아미노)-메틸]-피리딘-2-일아미노}-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일)-페닐]-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-((1S,4S)-5-메틸-2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.1]헵트-2-일메틸)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[5-(5-{[(2-메톡시-에틸)-메틸-아미노]-메틸}-피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[6-(4-메틸-피페라진-1-일)-피리다진-3-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[6-((1S,4S)-5-메틸-2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.1]헵트-2-일)-피리다진-3-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
    2-(3-{5-[5-(아제티딘-1-카본일)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-6-3급-부틸-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-2-(3-{5-[5-(1,1-다이옥소-1λ6-티오모폴린-4-카본일)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-(2-옥사-6-아자-스피로[3.3]헵탄-6-카본일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-(6-메틸-2,6-다이아자-스피로[3.3]헵탄-2-카본일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
    6-{6-[3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-2-하이드록시메틸-페닐]-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로-피리다진-4-일아미노}-N-(2-다이메틸아미노-에틸)-니코틴아마이드;
    6-{6-[3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-2-하이드록시메틸-페닐]-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로-피리다진-4-일아미노}-N-(2-하이드록시-에틸)-N-메틸-니코틴아마이드;
    1-(6-{6-[3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-2-하이드록시메틸-페닐]-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로-피리다진-4-일아미노}-피리딘-3-카본일)-아제티딘-3-카보니트릴;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{5-[5-(3-하이드록시-피롤리딘-1-카본일)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{5-[5-(4-하이드록시-피페리딘-1-카본일)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-(4-메틸-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-2-(3-{5-[5-((S)-1,2-다이하이드록시-에틸)-피라진-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
    2-{3-[5-(5-아제티딘-1-일메틸-1-메틸-1H-피라졸-3-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-2-하이드록시메틸-페닐}-6-3급-부틸-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[1-메틸-5-(5-옥세탄-3-일-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-{3-[5-(1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-2-하이드록시메틸-페닐}-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[5-(1'-메탄설폰일-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-2H-프탈라진-1-온;
    2-{3-[5-(1'-아세틸-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-2-하이드록시메틸-페닐}-6-3급-부틸-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[5-(4-하이드록시-4-메틸-3,4,5,6-테트라하이드로-2H-[1,3']바이피리딘일-6'-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[5-(4-하이드록시-3,4,5,6-테트라하이드로-2H-[1,3']바이피리딘일-6'-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-((1R,5S)-3-메틸-3,8-다이아자-바이사이클로[3.2.1]옥트-8-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[1-메틸-5-(1'-메틸-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-2-(3-{5-[1-((R)-2,3-다이하이드록시-프로필)-1H-피라졸-3-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-2-(3-{5-[5-(4-에틸-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-2-하이드록시메틸-페닐)-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{5-[1-(2-하이드록시-2-메틸-프로필)-1H-피라졸-3-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-{2-하이드록시메틸-3-[1-메틸-5-(1'-옥세탄-3-일-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-페닐}-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-2-{3-[5-(5-에틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-2-하이드록시메틸-페닐}-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-2-[3-(5-{5-[(1S,4S)-1-(2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.1]헵트-2-일)메틸]-피리딘-2-일아미노}-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일)-2-하이드록시메틸-페닐]-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{5-[5-(4-하이드록시-4-메틸-피페리딘-1-일메틸)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온;
    4-(6-{6-[3-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-2-하이드록시메틸-페닐]-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로-피리다진-4-일아미노}-피리딘-3-일)-피페라진-1-카복실산 에틸 에스터;
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-((1S,4S)-5-메틸-2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.1]헵트-2-일)-피라진-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온; 및
    6-3급-부틸-8-플루오로-2-(2-하이드록시메틸-3-{1-메틸-6-옥소-5-[1'-(2,2,2-트라이플루오로-에틸)-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노]-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-페닐)-2H-프탈라진-1-온.
  12. 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 희석제와 혼합된 제 1 항의 Btk 억제제 화합물을 포함하는, 염증성 및/또는 자가면역 증상의 치료를 위한 약학 조성물.
  13. 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 희석제와 혼합된 제 1 항의 Btk 억제제 화합물을 포함하는, 류마티스 관절염의 치료를 위한 약학 조성물.
  14. 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 희석제와 혼합된 제 1 항의 Btk 억제제 화합물을 포함하는, 천식의 치료를 위한 약학 조성물.
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