KR101244609B1

KR101244609B1 - 트리펩티드 및 테트라펩티드 티오에테르

Info

Publication number: KR101244609B1
Application number: KR1020077018022A
Authority: KR
Inventors: 나탈리아 아우레코에체아; 앤드류 비 켈슨; 로버트 더블유 맥사타; 루이스 로빈슨; 안소니 제이 산체스; 니콜라스 엠 산티아고; 스티븐 알 쇼우; 레이나 제이 시몬
Original assignee: 텔리크 인코포레이티드
Priority date: 2005-01-06
Filing date: 2006-01-04
Publication date: 2013-03-25
Also published as: EP1833978B1; IL183107A0; JP4903716B2; AR051890A1; ZA200704488B; CN101080418A; NZ555361A; CA2587284A1; ES2314891T3; HRP20090128T3; TWI317739B; EP1833842B1; ATE410520T1; MX2007008254A; TW200635948A; EA200701399A1; MX2007008255A; NZ555362A; EA200701398A1; AR051889A1

Abstract

트리펩티드 및 테트라펩티드 티오에테르, 그들을 함유하는 약학 조성물, 그들의 약학적 용도, 및 그들의 제조. 상기 화합물은 종양세포에서 화학치료제의 세포독성효과 증대, 선택적으로 종양세포에서 독성의 발휘, 골수에서의 GM 전구체의 생산 증가, 골수의 분화 자극, 화학치료제의 골수 억제 효과 완화 및 골수에서의 조혈의 조절에 유용하다.

Description

트리펩티드 및 테트라펩티드 티오에테르{TRIPEPTIDE AND TETRAPEPTIDE THIOETHERS}

본 발명은 트리펩티드 및 테트라펩티드 티오에테르, 그들을 함유하는 약학 조성물, 그들의 약학적 용도, 및 그들의 제조에 관한 것이다.

미국 특허 번호 5599903; 5763570; 5767086; 5786336; 및 5955432; 유럽 특허 공개 번호 0　645　397; 및 PCT 국제 공개 번호 WO　95/08563 및 WO　96/40205는 하기의 화학식의 화합물을 포함하여 [WO 95/08563], 환원된 글루타치온 (L-γ-글루타밀-L-시스테이닐글리신)의 유사체인 다양한 트리펩티드 및 테트라펩티드 및 그들의 C₁ _-10 알킬 또는 알케닐 또는 C₇ _-12 아르알킬 에스터, 아미드, 및 혼합 에스터/아미드를 개시하였다:

(식 중, Z 는 S, O, 또는 C;

n 은 1 내지 3;

Z 가 S 또는 O 이고 n 이 1인 경우, X 는 비치환 또는 할로, -NO, -NO₂, -NR₂, -OR, 또는 -SR (여기에서, R 은 H 또는 C₁ _-4 알킬)로 단일- 또는 2-치환된, 임의로 1 또는 2개의 비-인접 O, S, 또는 N 헤테로원자를 포함하는 C₁ _-20 히드로카빌이고;

Z 가 S 이고 n 이 2인 경우, 하나의 X 는 상기 정의한 바와 같고, 다른 X 는 C₁ _-4 알킬이며;

Z 가 C 이고 n 이 3일 경우, 하나의 X 는 상기 정의한 바와 같고, 다른 두개의 X 는 독립적으로 H 또는 C₁ _-4　알킬이고;

YCO 는 γ-glu, β-asp, glu, asp, γ-glu-gly, β-asp-gly, glu-gly, asp-gly 이고;

AA_c 는 펩티드 결합을 통해 상기 화합물의 나머지 부분과 연결된 아미노산이다).

상기 화합물은 글루타치온 S-전이효소 (GST) 동종효소를 특징짓는데 유용하고, 크로마토그래피 친화 리간드, 결합제, 및 효소 억제제로서 세포 및 조직의 GST 보체를 검증하는데 유용하며; 치료적으로, 종양세포에서 화학치료제의 세포독성효과 증대, 선택적으로 종양세포에서 독성의 발휘, 골수에서의 과립구 대식구 (GM) 전구체의 생산 증가, 골수 세포의 분화 자극, 화학치료제의 골수 억제 효과 완화 및 골수에서의 조혈의 조절을 위한 시약으로서의 용도를 포함하여, 다양한 용도를 갖는 것으로 기술된다.

상기 특허 및 공개 공보에서 TER 117로 알려지고, γ-Glu-Cys(Bz)-페닐Gly, γE-C(Bz)-φG, γE-C(Bz)-PG, γE-C(벤질)-φG, 및 벤질 PG로 다양하게 명명되는 TLK117은 상기 화합물 중 하나이다. TLK117 은 하기의 화학식을 갖는 화합물이고, L-γ-글루타밀-S-(페닐메틸)-L-시스테이닐-D-페닐글리신으로 명명될 수 있다:

TLK117 는 대략 400 nM의 IC₅₀ 로 GST P1-1 을 억제한다. TER199로서 상기 특허 및 공개 공보에서 알려진 TLK199 은 TLK117 의 다이에틸에스터이다.

US 특허 No. 6627732 및 PCT 국제 공개 No. WO　99/54346는 하기식의 글루타치온 유도체를 개시한다:

(식 중,

A 는 H 또는 C₁ _-20 아실;

R₁ 은 C₁ _-26 알킬 또는 C₃ _-26 알케닐; 및

R₂ 은 H, C₁ _-26 알킬, 또는 C₃ _-26 알케닐이고;

R₁ 이 C₁ _-10 알킬 또는 C₃ _-10 알케닐 그리고 R₂ 가 H, C₁ _-10 알킬, 또는 C₃ _-10 알케닐인 경우는 제외한다).

US 공개 출원 번호 2003/0100511 및 PCT 국제 공개 번호 WO　00/44366 은 하기 화학식을 갖는 화합물들의 다이에스터 또는 그의 약학적으로 허용 가능한 염의 지질 제형 (리포솜 제형 포함)을 개시한다:

(식 중,

각 에스터는 1-25C;

YCO 는 γ-glu 또는 β-asp;

G* 는 페닐글리신;

Z 는 CH₂, O, 또는 S 이고;

X 는 6-8C 알킬, 벤질, 또는 나프틸임); 또는

하기 화학식을 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용 가능한 염:

(식 중,

R₁ 및 R₂ 는 독립적으로, 선형 또는 분지형 알킬기 (1-25C), 시클로알킬기 (6-25C), 치환된 알킬기 (2-25C), 헤테로사이클 (6-20C), 에테르 또는 폴리에테르 (3-25C) 이거나, R₁-R₂ (2-20C)가 함께 상기 화학식과 매크로사이클을 형성함; 그리고,

R₃ 는 6-8C 알킬, 벤질, 또는 나프틸임).

많은 병태가, 골수가 3가지 주요 혈액 성분 (백혈구, 적혈구, 혈소판) 중 하나 이상을 불충분한 수준으로 생산하는 전-백혈병의 일종인 골수형성이상증후군 (MDS)을 포함한, 골수의 고갈에 의해 특징지어진다. 골수에서의 혈액 세포 수준 및 신생 혈액 세포 형성의 감소, 즉 골수 억제는 또한 많은 표준 화학치료 약제의 일반적인 독성 효과이다.

TLK199 는 시험관 내에서 HL-60 전골수구성 백혈병 세포의 분화를 유도하고, 생체 내 및 시험관 내에서 모두 세포독성제의 활성을 증대시키고, 정상 인간의 말초혈액에서 조혈 전구세포의 3 가지 계열 모두의 군락 형성을 자극한다고 알 려졌다. 전임상 시험에서, TLK199는 시스플라틴 또는 플루오로우라실로 처리되어 백혈구가 고갈된 동물뿐만 아니라 정상 동물에서도 백혈구 생산을 증대시킨다고 알려졌다. 유사한 효과가 MDS 를 치료하는데 새로운 접근법을 제공할 수 있다. TLK199 는 현재 MDS 치료를 위 제2상 임상시험에서 평가되고 있다. 2004년 및 2005년에 미국 혈액학 협회 회의에서 보고된 상기 시험의 중간 결과에서, TLK199은 잘 순응되었고, 다계열 혈액 개선을 일으킴을 보여주었다. 또한, 상기 결과는 화학치료 유도된 혈구감소증 치료에서의 TLK199의 잠재적인 역할을 제시한다.

인간에서, 종양세포에서 화학치료제의 세포독성효과 증대, 선택적으로 종양세포에서 독성의 발휘, 골수에서의 GM 전구체의 생산 증가, 골수의 분화 자극, 화학치료제의 골수 억제 효과 완화 및 골수에서의 조혈의 조절을 위해 사용할 수 있는, GST P1-1의 강력한 억제제를 개발하는 것이 요망된다.

제 1 면에서, 본 발명은 하기 화학식을 갖는 화합물; 및 그의 C₁ _-10　알킬, (페닐)-C₁ _-3　알킬, 또는 (C₅ _-6　헤테로아릴)-C₁ _-3　알킬 모노- 또는 다이-에스터; 및 하기 화합물의 염과 그들의 모노- 및 다이-에스터에 관한 것이다:

(식 중:

n 은 0 또는 1;

W 는 L-γ-글루타밀 또는 L-γ-글루타밀글리실;

X 는 임의 치환된 C₅ _-6　시클로알킬, 임의 치환된 C₅ _-6　헤테로시클로알킬, 임의 치환된 페닐, 또는 임의 치환된 C₅ _-6　헤테로아릴;

Y 는 =O, =N-OH, 또는 =N-O (임의 치환된 C₁ _-3　알킬); 및

Z 는 임의 치환된 페닐 또는 임의 치환된 C₅ _-6　헤테로아릴임).

상기 화합물 (특히 산 형태)은 시험관 내 GST P1-1의 매우 강력한 억제제, 전형적으로는 선택적 억제제이다. 다이에스터 형태에서, 상기 화합물은 시험관 내 HL-60 세포로부터의 GSTπ의 면역침전에서 효과적이고, 시험관 내 HL-60 세포에 대해 세포독성이 있다고 또한 알려졌다. 따라서, 상기로부터 및 TLK117, TLK119, 및 관련 화합물의 구조적 유사성으로부터, 본원 발명의 화합물은 종양세포에서 화학치료제의 세포독성효과 증대, 선택적으로 종양세포에서 독성의 발휘, 골수에서의 GM 전구체의 생산 증가, 골수의 분화 자극, 화학치료제의 골수 억제 효과 완화 및 골수에서의 조혈의 조절을 위해 치료적으로 작용할 수 있을 것이라 기대된다.

제 2 면에서, 본 발명은 본 발명의 제 1 면의 화합물, 및 임의로는 하나 이상의 부형제를 포함하는 약학 조성물이다.

제 3 면에서, 본 발명은, 특히 인간에 있어서, 본 발명의 제 1 면의 화합물 또는 본 발명의 제 2 면의 약학 조성물을 투여함에 의한, 종양세포에서 화학치료제의 세포독성효과 증대, 선택적으로 종양세포에서 독성의 발휘, 골수에서의 GM 전구체의 생산 증가, 골수의 분화 자극, 화학치료제의 골수 억제 효과 완화 및 골수에서의 조혈의 조절 중 하나 이상의 치료방법, 및 상기한 치료 방법 중 하나 이상을 위한 의약의 제조에 있어서의 본 발명의 제 1 면의 화합물의 용도이다.

제 4 면에서, 본 발명은 하기 화학식을 갖는 화합물; 및 그의 C₁ _-10　알킬, 페닐-C₁ _-3　알킬, 또는 (C₅ _-6　헤테로아릴)-C₁ _-3　알킬 모노- 또는 다이-에스터; 및 하기 화합물의 염과 그의 모노- 및 다이-에스터이다:

(식 중,

W 는 N-α-R¹-L-γ-글루타밀 또는 N-α-R¹-L-γ-글루타밀글리실 (식 중 R¹ 은 아민 보호기이고); 그리고

n, X, Y, 및 Z 는 청구항 제 1 항에 정의된 바와 같음).

상기 화합물은 본 발명의 제 1 면의 화합물의 제조에서 중간체로서 유용하다.

제 5 면에서, 본 발명은 본 발명의 제 1 면의 화합물의 합성 방법이다.

본 발명의 바람직한 구현예는 본원의 명세서 및 본 출원 청구항 2 내지 21의 내용 및 상기 화합물의 약학 조성물, 방법, 및 용도의 특징에 의해 특징지어진다.

본 발명의 수행 형태

정의

"알킬"은 포화 또는 불포화 (그러나 방향족 불포화는 아님)에서 유도된 1가 기인, 선형, 분지형 또는 탄소원자로부터 수소원자 하나를 제거함에 의한 고리형일 수 있는 탄화수소를 의미하고, 일례로 메틸, 에틸, 프로필, 1-프로페닐, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, sec-부틸, tert-부틸, 펜틸, 헥실, 시클로펜틸, 시클로펜텐-1-일, 시클로프로필메틸, 시클로헥실, 및 시클로헥실메틸이다. 포화 알킬 및 C₁ _-6　알킬이 그 예이다. 본 출원에서 "알킬"의 정의는, 통상 정의보다 넓은 것으로 "시클로알킬", "시클로알킬알킬", "알케닐", 및 "알키닐"로 통상 언급되는 기들을 포함한다.

"치환된 C₁ _-3　알킬" (Y의 정의중)은 할로, 히드록시, 메틸, 트리플루오로메틸, 메톡시, 및 아미노로부터 선택되는 1 또는 2개, 특히 1개의 기로 치환된 C₁ _-3　알킬을 의미한다.

"치환된 C₅ _-6　시클로알킬"은, 할로, 히드록시, 메틸, 트리플루오로메틸, 및 메톡시, 특히 F, Cl, 또는 메틸로부터 선택되는 1 또는 2 개, 특히 1개의 기로 치환된 시클로펜틸 또는 시클로헥실을 의미한다.

"C₅ _-6　헤테로시클로알킬"은, 고리 메틸렌기의 1개가 O, S, SO₂, NH, 또는 N-메틸로 치환된 시클로펜틸 또는 시클로헥실을 의미하고; 이는, 2- 및 3-테트라히드로퓨릴, 3- 및 4-테트라히드로피라닐, 4-테트라히드로티오피라닐 및 그의 S,S-다이옥사이드, 및 2-, 3-, 및 4-피페리디닐을 포함한다. "치환된 C₅ _-6　헤테로시클로알킬"은, 치환된 C₅ _-6　시클로알킬에 대해서 상기한 바와 같이 동일한 방식으로 치환된 C₅ _-6　헤테로시클로알킬을 의미한다.

"치환된 페닐"은, 할로, -CN, -NO₂, -OH, 임의로 할로-치환된 C₁ _-3 알킬 (일례로, 에틸, 트리플루오로메틸), 임의로 할로-치환된 C₁ _-3 알킬옥시, 포르밀, 카복시 및 C₁ _-3　알콕시카보닐로부터 선택되는 3개 이하의 치환기로 치환된 페닐을 의미한다.

"할로겐" 또는 "할로"는 F, Cl, 또는 Br을 의미한다.

"C₅ _-6　헤테로아릴"은, 2- 또는 3-퓨릴, 2- 또는 3-티에닐, 또는 2-, 3-, 또는 4-피리디닐을 의미한다. "치환된 C₅ _-6　헤테로아릴"은, 치환된 페닐에 대해 상기한 바와 같은 동일한 방식으로 치환된 C₅ _-6　헤테로아릴을 의미한다.

"염"은 "본 발명의 화합물"이라는 제목의 단락에서 설명한다.

"아민-보호기"는 본 발명의 제 1 면의 화합물 또는 그의 중간체의 글루타밀 α-아민기를 상기 화합물의 합성 도중 보호할 수 있고, 이어서 본 발명의 제 1 면의 화합물의 나머지에 영향을 미치지 않고 제거될 수 있는 기이다. 그러한 기는 일반적으로, 산분해로 쉽게 제거될 수 있는 tert-부톡시카르보닐 및 벤질옥시카르보닐이다. 아민-보호기는 유기 합성 분야 및 특히 펩티드 합성 분야에서 잘 알려져 있다. 그러한 적합한 기, 및 그의 제거 조건이 Synthesis of Peptides and Peptidomimetics , Workbench edition, M.　Goodman, ed., Georg Thieme Verlag, Stuttgart, Germany, 2004, 및 Protective groups in organic synthesis, 3　ed., T.W.　Greene and P.G.M.　Wuts, eds., John Wiley & Sons, Inc., New York, New York, U.S.A., 1999 과 같은 책들에 기재되어 있고, 당업자에게는 자명할 것이다.

"치료적 유효량"은 치료 방법 중 하나에 의해, 치료 효과를 보이기 위해 포유동물, 특히 인간에게 투여하는 경우, 상기 치료의 목적인 병태에 대해 치료 효과를 내기에 충분한 양을 의미한다. 포유동물에서 병태의 "처치" 또는 "치료"에는 다음 중 하나 이상이 포함된다:

(1) 병태의 발달을 억제, 예컨대, 그 발달을 정지,

(2) 병태를 완화, 예컨대, 퇴행을 야기, 또는 병태를 치료,

(3) 병태의 재발 방지, 및

(4) 병태의 증상 완화.

본 발명의 화합물 및 그의 제조

본 발명 제 1 면의 화합물은 하기식의 화합물 및 그의 C_1-10　알킬, (페닐)-C_1-3　알킬, 또는 (C₅ _-6　헤테로아릴)-C₁ _-3　알킬 모노- 및 다이-에스터; 및 하기 화합물의 염 및 그 모노- 및 다이-에스터이다:

(식 중:

n 은 0 또는 1;

W 는 L-γ-글루타밀 또는 L-γ-글루타밀글리실;

Y 는 =O, =N-OH, 또는 =N-O (임의 치환된 C₁ _-3　알킬); 및

본 발명의 제 1 면의 바람직한 화합물은 하기 특징 중 하나 이상을 갖는 화합물을 포함한다.

1. W 는 L-γ-글루타밀;

2. X 는 시클로펜틸, 시클로헥실, 퓨릴, 티에닐, 또는 피리디닐, 또는 임의 치환된 페닐; 특히 플루오로, 클로로, 시아노, 메틸, 히드록시, 또는 메톡시로 임의 치환된 페닐, 시클로헥실 또는 3-티에닐; 특히 페닐이 비치환 또는 4-위치에 1개의 치환기를 가지는 것; 일례로 페닐, 4-클로로페닐, 및 4-히드록시페닐;

3A. n 은 0; 또는

3B. n 은 1, 및 Y 는 =O, =N-OH, 또는 =N-OCH₂CH₂NH₂;

4. Z-(C=Y)_n- 치환기는, 그것이 부착된 페닐기의 2- 또는 4-위치에 존재하며;

5. Z 는 피리딜, 또는 임의 치환된 페닐;

6A. 화합물은 2산 ; 또는

6B. 화합물은 다이에스터, 특히 C₁ _-6 알킬 다이에스터, 더욱 특히 C₁ _-3 알킬 다이에스터, 특별하게는 다이에틸 에스터임.

일반적으로, 상기 특징을 많이 갖고 있는 화합물이 상기 특징을 적게 갖고 있는 화합물보다 바람직하다; 특히, 상기 특징 전체 미만을 가지는 화합물에 상기 특징 중 하나를 추가하는 것은 그 특징을 갖지 않은 화합물에 비해 바람직한 화합물을 도모할 것이다.

본 발명의 화합물의 적합한 염 (비제한적인 목록으로서 Berge 등, J. Pharm. Sci., 66:1 (1971) 참고)은, 무기 염기 (예컨대, 나트륨, 칼륨, 및 수산화 칼슘) 또는 유기 염기 (예컨대, 에탄올아민, 디에탄올아민, 트리에탄올아민, 에틸렌디아민, 트로메타민, N-메틸글루카민)가 카복실기와 반응할 때 형성되는 것들, 및 무기산 (예컨대, 염산, 브롬화수소산, 황산, 질산, 및 클로로설폰산) 또는 유기산 (예컨대, 아세트산, 프로피온산, 옥살산, 말산, 말레산, 말론산, 푸마르산, 또는 타르타르산, 및 메탄설폰산, 에탄설폰산, 벤젠설폰산, 치환된 벤젠설폰산 (예컨대, 클로로벤젠설폰산 및 톨루엔설폰산), 나프탈렌설폰산 및 치환된 나프탈렌설폰산, 나프탈렌디설폰산 및 치환된 나프탈렌디설폰산, 및 캄포르설폰산과 같은 알칸- 또는 아렌설폰산)이 반응하여 상기 화합물의, 아민기의 산부가염을 형성하는 것들이다. 상기 염은 약학적으로 허용 가능한 산 및 염기로 형성되는 것이 바람직하다. 상기 화합물에 적합한 염은 특히, 염산염과 같은 무기산으로 형성된 산부가염이다.

본 발명 방법에 의한 본 발명 제 1 면 화합물의 제조는, 하기 (a1) 내지 (a4) 단계 중 하나에 관련된다:

(a1) 일반적으로 글루타밀 아민기 R¹-보호된, 하기 화학식의 트리펩티드 또는 테트라펩티드 또는 그 모노- 또는 다이에스터의 시스테인 황원자를,

하기 화학식의 치환된 벤질기로 알킬화함

(식 중

L은 염소, 브롬과 같은 이탈기 또는 임의 치환된 C₁ _-6 알칸- 또는 벤젠설포네이트로, 일례로 메탄-, 트리플루오로메탄-, 벤젠-, 4-톨루엔-, 4-니트로벤젠-, 4-클로로벤젠-, 또는 4-브로모벤젠설포네이트, 특히 브롬임); 또는

(a2) 일반적으로 글루타밀 아민기 R¹-보호된, 하기 화학식의 임의 보호된 디펩티드 또는 트리펩티드 또는 글루타밀 카복시레이트에서의 모노에스터를,

(식 중 n이 1이면, Y 는 =O);

하기 화학식의 아미노산 또는 그 모노에스터와 커플링함 ; 또는

(a3) 하기 화학식의 다이펩티드 또는 그 모노에스터를 글루타밀 α-카복시레이트에서 임의로 에스터화된, 임의 보호된 L-γ-글루타민산 또는 L-γ-글루타밀글리신과 커플링시킴

(식 중 n 이 1이면, Y 는 =O임);

(a4) 하기 화학식의 트리펩티드 또는 테트라펩티드 또는 그 모노- 또는 다이에스터를

Z-보론산과 커플링시켜 하기 화학식의 화합물 또는 그 모노- 또는 다이에스터를 제공함:

(식 중 n이 0임),

임의로 하기의 (b) 내지 (e) 단계 하나 이상이 후속함:

(b) (a) 단계에서 제조된 화합물 중 W 가 N-α-R¹-L-γ-글루타밀 또는 N-α-R¹-L-γ-글루타밀글리실인 경우, 본 발명 제 4 면의 화합물을 탈보호하여 본 발명 제 1 면의 화합물을 제공하고;

(c) n 이 1인 경우, 히드록실아민 또는 O-(임의 치환된 C₁ _-3　알킬)히드록실아민과, Y 가 =O인 화합물을 반응시켜, =N-OH, 또는 =N-O (임의 치환된 C₁ _-3　알킬)인 화합물을 형성하고;

(d1) 화합물이 2산인 경우, 화합물의 모노- 또는 다이에스터를 형성하고; 또는

(d2) 화합물이 모노- 또는 다이에스터인 경우, 화합물을 탈에스터화하여 화합물의 2산을 형성하고; 및

(e) (a) 내지 (e) 중 임의의 단계에서 제조된 화합물의 염을 형성함.

(a1) 단계 방법을 위한 출발 물질은 트리펩티드 및 테트라펩티드로서, 임의로는 모노- 또는 다이에스터화된, 임의로는 글루타밀 아민에서 보호되고, 시스테인 황이 탈보호된 것이다. 이들 글루타치온 유사체는, 당업자에게 공지인 펩티드 합성의 전통적 방법에 의해 간편히 제조된다.

펩티드 합성은 트리페닐메틸과 같은 많은 표준 S-보호기 중 하나를 이용하여 수행가능하고, 결과의 S-보호된 펩티드는 이후 일례로 산분해에 의해 탈보호된다. 일반적으로, S-보호된 펩티드는, 산분해로 제거 가능한 황 보호기를 제거할 수 있을 만큼 충분히 강하면서도 아민보호기는 어느 것도 제거 불가능한 만큼인 산 중에, 임의로는 소거제 (scavenger) 존재하에 용해시킨다. 그러한 적절한 산은, 트리플루오로아세트산 및 트리플루오로메탄설폰산과 같은 기타 강산을 포함하며, 임의로 이는 다이클로로메탄과 같은 공용매가 존재하는 것이고; 적절한 소거제는, 방향족 에테르 및 설파이드, 일례로 아니솔 및 티오아니솔, 크레솔과 같은 페놀, 및 가장 효과적으로는 트리알킬실란을 포함하는 실란, 일례로 트리에틸실란 및 트리이소프로필실란 및 폴리(메틸히드로실록산)과 같은 실란 중합체를 포함하며; 특히 적절한 탈보호제는 폴리(메틸히드로실록산) 존재하의 트리플루오로아세트산이다. S-탈보호된 펩티드는, 일례로 비양자성 비극성 용매, 일례로 탄화수소 또는 에테르와 같은 항용매의 첨가에 의해 반응 혼합물로부터 분리 가능하다.

본 발명 다수 화합물의 출발 물질인 N-α-(벤질옥시카보닐)-L-γ-글루타밀-L-시스테이닐-D-페닐글리신을, 바로 이용 가능한 출발 물질인 N-α-(벤질옥시카보닐)-L-γ-글루탐산 α-벤질 에스터, S-트리페닐메틸-L-시스테인, 및 D-페닐글리신을 이용하여 간편히 제조하는 것은 다음과 같다. N-α-(벤질옥시카보닐)-L-γ-글루탐산 α-벤질 에스터를 무수 1,4-디옥산 중의 N-히드록시숙신이미드 및 다이시클로헥실-카보다이이미드와 반응시켜 N-히드록시숙신이미드 에스터로서 활성화시킨다. N-α-(벤질옥시카보닐)-L-γ-글루탐산 α-벤질 에스터 γ-N-히드록시숙신이미드 에스터를 무수 테트라히드로퓨란에 용해시키고, 물 중의 S-(트리페닐메틸)-L-시스테인 및 트리에틸아민 용액에 첨가하여 O-α-벤질-N-α-(벤질옥시카보닐)-L-γ-글루타밀-S-(트리페닐메틸)-L-시스테인을 제조한다. 이를 N-히드록시숙신이미드 에스터로서 활성화시키고 γ-글루타민 및 시스테인 사이의 커플링에서와 같은 방식으로 D-페닐글리신과 커플링하여 O-α-벤질-N-α-(벤질옥시카보닐)-L-γ-글루타밀-S-(트리페닐메틸)-L-시스테이닐-D-페닐글리신을 제조한다.

상이한 활성기를 사용하는 유사한 방법 또는 커플링을 위한 글루탐산의 γ-카복시기 및/또는 시스테인 카복시기의 활성화 방법을 또한 사용 가능하다; 이들 방법은, 시스테인-페닐글리신 커플링을 먼저 실시하고, 이후 결과의 S-(트리페닐메틸)-L-시스테이닐-D-페닐글리신을 N-α-(벤질옥시카보닐)-L-γ-글루탐산 α-벤질 에스터와 커플링시키는 것이다. N-α-(벤질옥시카보닐)-L-γ-글루탐산 α-카복시기의 다른 보호 또한 사용 가능하며, 단 α-카복시기는 종국적으로 탈보호되어 N-α-(벤질옥시카보닐)-L-γ-글루타밀-S-(트리페닐메틸)-L-시스테이닐-D-페닐글리신 분자의 잔여부분은 완전한채로 남기는 것이다. O-α-벤질-N-α-(벤질옥시카보닐)-L-γ-글루타밀-S-(트리페닐메틸)-L-시스테이닐-D-페닐글리신을 저급 알코올 (일례로 메탄올)에 용해시켜 수성 염기 (일례로 1　M NaOH)로 가수분해하여 벤질에스터를 제거하고, 이후 산성화시켜 N-α-(벤질옥시카보닐)-L-γ-글루타밀-S-(트리페닐메틸)-L-시스테이닐-D-페닐글리신을 산부가염으로 분리하도록 한다. N-α-(벤질옥시카보닐)-L-γ-글루타밀-S-(트리페닐메틸)-L-시스테이닐-D-페닐글리신의 시스테인 황은, 이후 트리플루오로아세트산 및 톨루엔중 폴리(메틸히드로실록산)과의 반응에 의해 탈보호시켜, N-α-(벤질옥시카보닐)-L-γ-글루타밀-L-시스테이닐-D-페닐글리신을 헵탄/메틸 tert-부틸 에테르에서 침전시킬 수 있다.

아미노산 또는 가능하다면 다이펩티드로부터 출발하여 기타 펩티드를 유사한 방법으로 용이하게 제조가능하다. 일례로 D-페닐글리신, D-(4-클로로페닐)글리신, D-(4-히드록시페닐)글리신, D-(3-티에닐)글리신, D-시클로헥실글리신과 같은 아미노산의 다수는 하기식을 가지며, 이는 분리된 형태 및 일부 경우 에스터로 시판된다.

다른 것들은 라세미 형태로 시판되나, 아미노산 분리에 대한 임의의 공지 방법으로 분리 가능하다.

이후, (a1) 단계에서 S-탈보호된 펩티드의 티올레이트 음이온을 하기식의 치환된 벤질기로 알킬화한다

[식 중, L 은 염소, 브롬과 같은 이탈기, 또는 임의 치환된 C₁ _-6 알칸- 또는 벤젠설포네이트로서, 일례로 메탄-, 트리플루오로메탄-, 벤젠-, 4-톨루엔-, 4-니트로벤젠-, 4-클로로벤젠-, 또는 4-브로모벤젠설포네이트, 특히 적절하게 S-알킬화된 펩티드를 제조하기 위해 브롬이다. 이는, 부반응을 최소화하기 위해 글루타밀 아민이 보호된 경우 간편하게 실시되지만, 아민이 탈보호된 경우에도 실시 가능하다.

일반적으로, S-탈보호된 펩티드는 적절한 용매 (일례로 C₁ _-6　알칸올, 1,2-에탄디올 또는 1,3-프로판디올과 같은 디올, 2-메톡시 에탄올, 1,2-디메톡시에탄, 또는 테트라히드로퓨란 등과 같은 에테르) 중의 강염기 (일례로, 알칼리금속 또는 알칼리토금속 히드록시드, 카보네이트, 바이카보네이트, 인산 또는 알콕시드 또는 암모늄 히드록시드; 또는 유기아민 염기로 일례로, 테트라메틸구아니딘, 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데스-7-엔 (DBU) 등) 용액에 용해시켜 티올레이트 음이온을 형성하고, 치환된 벤질기를 가하여 (보통 과량으로), 종결시까지 반응 혼합물을 적절한 온도 및 시간으로 유지한다. 간편한 반응 조건은, 물 중의 20% 테트라히드로퓨란 및 약 10배 초과의 소듐 바이카보네이트를 사용하는 것이다.

펩티드는 출발 아미노산의 상태에 따라, 2산으로서 (비록 이것은 아민 뿐만 아니라 글루타밀 α-카복실의 중간체 보호를 포함할 수 있지만) 또는 모노- 또는 다이에스터로서 제조될 수 있다. 펩티드가 2산으로서 제조된다면, 시스테인 황원자의 알킬화 이전에 모노- 또는 다이-에스터화 (전형적으로 아민-보호 동안)가 될 수 있을 것이고, 에스터화 조건은 본 발명의 제 1 면의 화합물의 에스터화에 사용될 수 있는 것들과 전형적으로 유사할 것이다.

(a2) 및 (a3) 단계에서, 임의로 아민 보호된 시스테인의 티올레이트 음이온은 먼저 하기식의 치환된 벤질기로 알킬화하여, 본 발명 제 1 면의 트리펩티드 또는 테트라펩티드의 중심아미노산을 형성하고; 펩티드는 이후 통상의 펩티드 합성 방법으로 조합된다;

시스테인의 알킬화는, 상기 트리펩티드 또는 테트라펩티드의 알킬화를 위해 사용되는 것들에 대한 유사한 방법에 의해 실시가능하고; 본 발명의 제 1 또는 제 4 면의 화합물인 결과의 펩티드를 제공하는 각종 아미노산의 커플링을, 상기 논의한 것과 유사한 방법으로 또한 실시 가능하다.

단계 (a4)에서, S-[(할로페닐)메틸]-시스테인-포함 트리펩티드 또는 테트라펩티드를 [임의의 통상 방법에 의해 제조된 것으로, 일례로 단계 (a1)에 기재된 방식으로 S-탈보호된 펩티드의 알킬화 또는 시스테인의 알킬화 이후, 상기 단계 (a2) 및 (a3)에 기재된 방식으로 펩티드를 형성하는 커플링], 화학식 Z-B(OH)₂의 보론산과 스즈키 커플링으로 커플링 시킨다.

임의의 단계 (b)에서, 본 발명 제 4 면 화합물의 R¹-보호된 아민기는 보통 트리플루오로아세트산과 같은 강산을 사용하여, 임의로는 다이클로로메탄 존재하에 산분해에 의해 분자의 나머지 부분에는 또한 영향을 미치지 않고 아민 보호기를 제거하기 위한 임의의 적절한 방법으로 탈보호되어, 본 발명의 제 1 면 화합물을 제공한다.

임의 단계 (c)에서, 본 발명 제 1 면의 n 은 1 및 Y 는 =O 인 화합물을, 히드록실아민 또는 O-(임의 치환된 C₁ _-3　알킬)-히드록실아민과 반응시켜 =N-OH 또는 =N-O (임의 치환된 C₁ _-3　알킬)인 화합물을 제조한다. 반응은 보통 염기 존재하에 수성 용액 중 히드록실아민과의 반응에 의해 수행된다 (임의로는 또한 테트라히드로퓨란과 같은 수혼화성 유기 용매를 포함).

임의 단계 (d1) 및 (d2)에서, 본 발명 제 1 면의 화합물은 에스터화 (에스터가 필요한 경우) 또는 탈에스터화 된다 (2산이 필요한 경우). 이들 에스터화 또는 탈에스터화는 통상의 것으로, 당업자에게 공지인 임의의 방법에 의해 실시 가능하고; 특히 간편한 에스터화 기법은 본 발명 제 1 면의 2산 화합물과 알코올을, 알코올을 용매로 사용하여 클로로트리메틸실란과 같은 할로실란 존재하에 실온 내지 알코올의 비점 사이 온도에서 반응시켜 목적 에스터를 제조하는 것이다.

임의 단계 (e)에서, 본 발명 제 1 면의 화합물의 염이 형성된다. 이는, 보통 산부가염이다 (상기 "염"의 정의 참조). 간편하게, 이는 본 발명 제 1 면의 화합물의 생성 직후 실시되고; 비양자성 용매 (일례로 탄화수소 또는 다이클로로메탄과 같은 할로겐화 탄화수소)와 같은 염에 대해 항용매가 되는 용매의 첨가, 및 이후 특히 무수산 단독 또는 비양자성 용매 (일례로 염화수소 기체) 형태인, 염을 형성하기 위해 선택된 산의 첨가에 의해 실시 가능하다. 염을 위한 추가의 항용매로, 일례로 다이에틸에테르, 메틸 tert-부틸 에테르 및 테트라히드로퓨란과 같은 에테르, 특히 메틸 tert-부틸 에테르를 필요시 또는 원하는 경우 첨가 가능하다.

당업자는 그 기술과 본 내용 (실시예 포함)을 고려하여 본 발명 제 1 면 및 제 4 면의 화합물 제조에 어려움을 겪지 않을 것이다.

화합물의 용도 및 방법

본 발명의 제 1 면의 화합물 (특히 산 형태)는 GST P1-1의 매우 강력한 억제제, 전형적으로는 선택적 억제제이다. 또한, 상기 화합물은 시험관 내 HL-60 세포의 분화를 증대시키는 활성을 갖고, 생체 밖에서 쥐 골수 세포로부터 과립구/단핵구 군락 형성을 증대시킴이 알려졌다. 따라서, 상기 화합물은 인간에 있어 하기와 같이 치료적으로 작용할 것으로 기대된다: 종양세포에서 화학치료제의 세포독성효과 증대 (다수의 종양 조직에서 증가된 GTP, 특히 GST P1-1 이 화학치료제에 대한 종양 세포의 저항성과 연관되기 때문에; 따라서 GST 억제제는 종양 세포가 화학치료제를 제거하는 능력을 감소시킨다), 선택적으로 종양세포에서 독성의 발휘 (역시 GST 동종효소 억제 때문), 골수에서의 GM 전구체의 생산 증가, 골수의 분화 자극, 화학치료제의 골수 억제 효과 완화 및 골수에서의 조혈의 조절.

본 발명의 제 4 면의 화합물 및 본 발명의 제 5 면의 방법은 본 발명의 제 1 면의 화합물을 제조하는데 유용하다.

본 발명의 제 2 면은, 본 발명의 제 1 면의 화합물을 포함하고, 임의로는 부형제, 예컨대 약학적으로 허용 가능한 부형제를 추가적으로 포함하는 약학 조성물이다.

본 발명의 제 3 면은, 본 발명 제 1 면의 화합물 또는 본 발명 제 2 면의 약학 조성물을 보통 치료 유효량으로 투여함을 포함하는 치료 방법, 및 종양 세포내 화학치료제의 세포독성 효과를 강화하고, 종양 세포에서 선택적 독성을 발휘하고, 골수 내에서 GM 전구체의 생성을 증가시키고, 골수 분화를 촉진하고, 화학치료제의 골수 억제 효과를 경감하고, 그리고 골수 중 조혈을 조절하는 것 중 하나 이상을 위한 이들 화합물의 용도에 관련된다.

상기 화합물은, 치료를 받는 대상 및 상기 대상의 병태의 특성에 적합한 임의의 적절한 경로로 투여될 수 있다. 투여 경로는, 비제한적으로, 주사 투여 (예컨대, 정맥내 주사, 복강내 주사 및 근육내 피하 주사) 또는 국부 적용, 비강 스프레이, 좌약 등을 통한 점막 투과 또는 경피 전달되거나, 구강 투여될 수 있다. 상기 화합물을 포함하는 약학 조성물은 임의로는 리포솜 제형, 에멀젼, 점막을 가로질러 약물을 투여하기 위해 설계된 제형, 또는 경피 제형일 수 있다. 상기 투여 방법 각각에 대한 적합한 제형은, 예컨대 Remington : The Science and Practice of Pharmacy, 20　ed., A.　Gennaro, ed., Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia, Pennsylvania, U.S.A., 2003 에서 찾을 수 있다. 전형적인 조성물은 경구 또는 정맥내 주입을 위한 용액일 수 있고, 상기 화합물을 포함하며, 전형적으로는 하나 이상의 약학적으로 허용 가능한 부형제를 추가적으로 포함할 것이다. 전형적인 투여 형태는 정제, 정맥내 주입을 위한 용액, 정맥내 주입을 위한 용액으로서 재구성하기 위한 동결건조된 분말, 및 정맥내 투여를 위한 리포솜 제형 및 동결건조된 리포솜 제형일 것이다.

본 발명의 제 1 면의 화합물의 치료 유효량은 약 10 - 2000 mg/m² 신체 표면 넓이, 특히 50　-　1000　mg/m²이다. 투여는 2, 3, 또는 4주 마다 반복하여 투여하며, 1　내지　35　일 간격일 수 있다; 예컨대, 1 내지 5 주 간격, 특히 1, 2, 3, 또는 4 주 간격으로 약 250　-　1000　mg/m², 또는 며칠 동안 (예컨대 5 또는 7 일) 한번/하루 와 같은 것을 포함하여 더 자주일 수 있고, 또는 2, 3 또는 4 주마다 반복하여 투여하며 6 내지 72 시간의 기간 동안 일정하게 주입될 수 있다. 전형적인 치료은 3주마다 5일 동안 한번/하루 투여일 수 있다.

제조 및 실시예

다음의 실시예들은 본 발명의 방법에 의한 유용한 중간체의 제조 및 본 발명의 화합물의 합성 및 치료제로서의 본 발명의 제 1 면의 화합물의 유용성을 보 여준다.

제조 1 및 2 는 시스테인 또는 트리텝티드 및 테트라텝티드의 시스테인의 S-알킬화를 위한 시약 제조를 기술한다. 편의상, 상기 시약은 벤질 브로마이드 (α-브로모톨루엔)의 유도체로 명명된다.

제조 1: 4-(2-피리딜)벤질 브로마이드의 제조

4-(2-피리딜)톨루엔 2　mL (1.98　g, 11.7　mmol), N-브로모숙신이미드 (NBS) 2.5　g (14.0　mmol), 및 α,α'-아조비스(이소부티로니트릴) (AIBN) 23　mg (0.14　mmol)을 35　mL 테트라클로로메탄에 현탁시키고, 24 시간 동안 환류시켰다. 생성물을 여과하였고, 회전 증발기를 이용하여 여과액에서 용매를 제거하였다. 동일 양의 클로로포름 및 물을 첨가하고 생성물을 추출하였다. 클로로포름층을 분리하여 건조시키고, 용매를 제거하였다. 끈적이는 황색 고체로서 4-(2-피리딜)벤질 브로마이드 2　g 을 얻었다.

4'-(4-카복시페닐)벤질브로마이드를 4'-메틸-4-바이페닐 카복시산으로부터 제조하였다; 4'-(4-(메톡시카보닐)벤질브로마이드를 메틸 4'-메틸-4-바이페닐 카복시레이트 (메탄올 및 클로로트리메틸실란으로 에스터화하여 카복시산으로부터 수득함)로부터 제조하고, 4-(벤조일)벤질브로마이드를 본 방법에 의해 4-메틸벤조페논으로부터 제조하였다.

제조 2: 4-(2-메톡시페닐)벤질 브로마이드의 제조

4-브로모톨루엔 171　mg (1　mmol), 2-메톡시페닐보론산 152　mg (1　mmol), 팔라듐 디아세테이트 1　mg (4　μmol), N-부틸암모늄 브로마이드 322　mg (1　mmol), 및 2　M 수성 Na₂CO₃ 1.9　mL (3.8　mmol)을 마이크로파 적용 가능한 압력 바이알 (vial) 에 넣고 150　℃ 로 5　분 동안 가열하였다. 실온으로 냉각한 후, 생성물을 분액 깔때기에 붓고, 물 및 다이에틸에테르 각각 30　mL 를 첨가하였다. 추출 후에, 층을 분리하고 수층을 다시 30　mL 다이에틸에테르로 세척하였다. 상기 에테르 추출물을 수집하고, MgSO₄ 로 건조하고, 용매를 진공하의 회전 증발기를 이용하여 제거하였다. NMR 분석을 통한 95% 순도인 고체 생성물로서 2-메톡시-4'-메틸바이페닐 160　mg (81% 수율)을 얻었다.

2-메톡시-4'-메틸바이페닐 160　mg (0.81　mmol), NBS 158　mg (0.91　mmol), 및 AIBN 1　mg (0.006　mmol)을 7　mL 테트라클로로메탄에 현탁시키고, 24 시간 동안 환류시켰다. 생성물을 여과하였고, 회전 증발기를 이용해 여과액에서 용매를 제거하였다. 동일 양의 다이에틸에테르 및 물을 첨가하여 생성물을 추출하였다. 상기 에테르층을 분리하여 MgSO₄ 로 건조하고, 여과하고 용매를 제거하였다. 오일로서 4-(2-메톡시페닐)벤질 브로마이드 128　mg 을 얻었다.

상기 방법에 의해 4-시아노페닐보론산으로부터 4'-(4-시아노페닐)벤질 브로마이드를 제조하고, 3-(트리플루오로메틸)-페닐보론산으로부터 4'-[3-(트리플루오로메틸)페닐]벤질 브로마이드를 제조하였다.

임의 치환된 페닐, 임의 치환된 C₅ _-6 헤테로아릴, 임의치환된 벤조일 또는 (임의 치환된 C₅ _-6 헤테로아릴)카보닐로 치환된 기타 벤질 브로마이드는 이러한 제 조 방법에 의해 쉽게 제조될 수 있다.

제조 3은 S-알킬화 시스테인의 제조를 설명한다.

제조 3: N-α-(tert-부톡시카르보닐)-S-(4-바이페닐릴메틸)-L-시스테인의 제조

N-α-(tert-부톡시카르보닐)-L-시스테인 1.0　g (4.52　mmol)을 아르곤 버블링 (bubbling) 에 의해 기체를 제거시킨 9　mL 테트라히드로퓨란 및 9　mL 1　M 수성 NaOH 의 혼합물에 용해시켰다. 5　mL 테트라히드로퓨란 중의 4-(브로모메틸)바이페닐, 1.12　g (4.53　mmol) 용액을 첨가하고 아르곤 버블링하면서 실온에서 8 시간 동안 상기 용액을 교반하였다. 상기 THF 를 진공하의 회전 증발기로 제거하고 잔류물을 물로 희석하여 다이에틸 에테르로 세척하였다. 수층을 6　M 수성 HCl 로 pH 3 으로 산성화시키고, 에틸 아세테이트로 3 회 추출하였다. 상기 수집된 유기 추출물을 물, 포화 수성 NaHCO₃, 물, 및 식염수로 세척하고, 그 후 건조 및 농축하여 백색 고체로서 1.44　g 의 N-α-(tert-부톡시카르보닐)-S-(4-바이페닐릴메틸)-L-시스테인 (82% 수율)을 얻었다.

기타 (임의로 보호된) S-알킬화 시스테인은 상기 제조 방법에 의해 쉽게 제조될 수 있다.

합성예 1: L-γ-글루타밀-S-[(4-바이페닐릴)메틸]-L-시스테이닐-D-페닐글리신의 제조 [예시 단계 (a1), (b) 및 (e)]

330 mg 의 N-α-(벤질옥시카르보닐)-L-γ-글루타밀-L-시스테이닐-D-페닐글리신을 아세토니트릴/물 중에 용해시키고, 약 10-배 과량의 탄산수소 나트륨을 첨 가하고, 약간 과량의 4-(브로모메틸)바이페닐을 첨가한 후, 질소 하에서 반응 완결시까지 유지하여, 염산염으로서, 1A의 L-γ-글루타밀-S-[(4-바이페닐릴)메틸]-L-시스테이닐-D-페닐글리신을 제조하였다. 상기 반응 혼합물을 물로 희석하고 다이에틸에테르로 세척하고, 수상을 분리하여 염산으로 pH　2 내지 3 으로 산성화시킨 후, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기상을 무수 MgSO₄ 로 건조시켜 여과하고, 부피를 감소시켜 N-α-(벤질옥시카르보닐)-L-γ-글루타밀-S-[(4-바이페닐릴)메틸]-L-시스테이닐-D-페닐글리신을 얻었다. 아민-보호된 설파이드 화합물, 약 300　mg 을 한 방울의 물을 가지는 95:5 트리플루오로아세트산 (TFA):다이클로로메탄 2 mL 에 용해시키고 45 ℃ 에서 밤새 교반하고, 제조용 HPLC 에 의해 정제하여 L-γ-글루타밀-S-[(4-바이페닐릴)메틸]-L-시스테이닐-D-페닐글리신을 얻었다. L-γ-글루타밀-S-[(4-바이페닐릴)메틸]-L-시스테이닐-D-페닐글리신을 염산염으로서 분리하였다.

화합물 8A의 L-γ-글루타밀-S-{[4-(2-피리딜)페닐)메틸}-L-시스테이닐-D-페닐글리신 및 화합물 9A의 L-γ-글루타밀-S-[(4-벤조일페닐)메틸]-L-시스테이닐-D-페닐글리신과 같은 화합물은 유사한 방법에 의해 제조되었다.

모노- 및 다이에스터인 화합물을 포함하는 본 발명 제 1 면의 기타 트리펩티드 및 테트라펩티드들도 유사한 방법에 의해 쉽게 제조될 수 있다.

합성예 2: L-γ-글루타밀-S-[(4-바이페닐릴)메틸]-L-시스테이닐-D-페닐글리신 다이에틸에스터의 제조 [예시 단계 (d1) 및 (e)].

L-γ-글루타밀-S-[(4-바이페닐릴)메틸]-L-시스테이닐-D-페닐글리신, 30 mg 을 에탄올 및 클로로트리메틸실란으로 에스터화하여, 1B의 L-γ-글루타밀-S-[(4-바이페닐릴)메틸]-L-시스테이닐-D-페닐글리신 다이에틸에스터 염산염으로서, L-γ-글루타밀-S-[(4-바이페닐릴)메틸]-L-시스테이닐-D-페닐글리신 다이에틸에스터를 제조하였다 (정확한 질량은 605, MS (m/z) 606 (M+H)). 상기 L-γ-글루타밀-S-[(4-바이페닐릴)메틸]-L-시스테이닐-D-페닐글리신 다이에틸에스터를 염산염으로서 분리하였다.

화합물 8B인 L-γ-글루타밀-S-{[4-(2-피리딜)페닐)메틸]-L-시스테이닐-D-페닐글리신 다이에틸에스터 및 화합물 9B인 L-γ-글루타밀-S-{[(4-벤조일페닐)메틸]-L-시스테이닐-D-페닐글리신 다이에틸에스터와 같은 화합물을 유사한 방법에 의해 제조하였다. 본 발명 제 1 면 화합물의 기타 에스터, 특히 다이에스터는 유사한 방법에 의해 쉽게 제조될 수 있다.

합성예 3: L-γ-글루타밀-S-[(4-바이페닐릴)메틸]-L-시스테이닐-D-시클로헥실글리신의 제조 [예시 단계 (a3), (b) 및 (e)].

D-시클로헥실글리신 500 mg (3.1 mmol)을 15 mL 에탄올 중의 산에 현탁시키고, 클로로트리메틸실란 2.02 mL (5 당량)을 첨가하여, 상기 혼합물을 50 ℃ 에서 18 시간 동안 가열하여 D-시클로헥실글리신 에틸 에스터를 제조하였다. 진공 하에서 휘발성 성분을 제거하고 잔류물을 에틸 아세테이트에 용해시키고, 수성 NaHCO₃ 및 식염수로 2회 세척하고, MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 증발시켜 유상 고체로서 401　mg D-시클로헥실글리신 에틸 에스터를 얻었다.

N-α-(tert -부톡시카르보닐)-S-(4-바이페닐릴메틸)-L-시스테인 588　mg (1.9　mmol)을 5　mL 다이메틸포름아미드 (DMF) 에 용해시키고, O-벤조트리아졸-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로인산 (HBTU) 860　mg (1.2　당량), 및 다이(이소프로필)에틸아민 990　μL (3　당량)을 첨가하였다. 3 분 후, 4　mL DMF 에 용해시킨 D-시클로헥실글리신 에틸 에스터 360　mg (1　당량)을 첨가하고, 상기 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반한 후, 조 N-α-(tert -부톡시카르보닐)-S-(4-바이페닐릴메틸)-L-시스테이닐-D-시클로헥실글리신 에틸 에스터를 분리하였다. 상기 다이펩티드를 20% TFA/다이클로로메탄 10　mL 에 용해시키고, 실온에서 2 시간 동안 교반한 후, 진공 하에서 휘발성 물질을 제거하여 조 생성물을 분리하였다. 상기 조 S-(4-바이페닐릴메틸)-L-시스테이닐-D-시클로헥실글리신 트리플루오로아세테이트는 직접 다음 단계에 이용되거나, 추가적으로 처리될 수 있다.

N-α-(tert -부톡시카르보닐)-O-α-tert-부틸-L-γ-글루타민을 2　mL DMF 에 용해시키고, HBTU 174 mg (1.2 당량) 및 디(이소프로필)에틸아민 330　μL (5　당량)을 첨가하였다. 5 분 후, 2　mL DMF 에 용해시킨 S-(4-바이페닐릴메틸)-L-시스테이닐-D-시클로헥실글리신 트리플루오로아세테이트 200　mg (0.38　mmol)을 첨가하고, 상기 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 0.1 N 수성 시트르산에 붓고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층 을 식염수로 4회 세척하고, MgSO₄ 로 건조시키고 휘발성 물질을 증발시켜 갈색 오일의 N-α-(tert-부톡시카르보닐)-O-α-tert-부틸-L-γ-글루타밀-S-(4-바이페닐릴메틸)-L-시스테이닐-D-시클로헥실글리신을 얻었다. 상기 물질을 20% TFA/다이클로로메탄 10　mL 에 용해시키고, 실온에서 24 시간 동안 교반하였다. 진공 하에서 휘발성 물질을 제거하고 생성물을 역상 HPLC 으로 정제한 후, 화합물 12A인 L-γ-글루타밀-S-(4-바이페닐릴메틸)-L-시스테이닐-D-시클로헥실글리신을 염산염으로서 47mg 분리하였다.

유사한 방법에 의해 염산염으로서 화합물 11A의 L-γ-글루타밀-S-(4-바이페 닐릴메틸)-L-시스테이닐-D-(4-클로로페닐)글리신이 제조되었다.

합성예 4. L-γ-글루타밀-S-({4-[(2-아미노에톡시이미노)(페닐)메틸]페닐}메틸)-L-시스테이닐-D-페닐글리신의 합성 [예시 단계 (c)].

화합물 10A인 L-γ-글루타밀-S-({4-[(2-아미노에톡시이미노)(페닐)메틸]페닐}메틸)-L-시스테이닐-D-페닐글리신을, L-γ-글루타밀-S-[(4-벤조일페닐)메틸]-L-시스테이닐-D-페닐글리신 108　mg (0.18　mmol)을 5　mL 물, 5　mL THF, 및 10　mL 0.5　M 소듐인산 (pH　4.5) 중의 O-(2-아미노에틸)히드록실아민 디히드로클로라이드 26　mg (0.18　mmol)로 처리하여 제조하였다. 혼합물을 50℃로 밤새 가열하고, 생성물을 염산 완충액으로 HPLC 정제하여 각각 약 45mg의 2개의 이성질체 (옥심 질소에서)인 L-γ-글루타밀-S-({4-[(2-아미노에톡시이미노)(페닐)메틸]페닐}메틸)-L--시스테이닐-D-페닐글리신을 염산염으로 수득하였다.

화합물 10B인 L-γ-글루타밀-S-({4-[(2-아미노에톡시이미노)(페닐)메틸]페닐}메틸)-L--시스테이닐-D-페닐글리신 다이에틸 에스터를, 동일한 방법을 이용하여 L-γ-글루타밀-S-[(4-벤조일페닐)메틸]-L-시스테이닐-D-페닐글리신 다이에틸 에스터로부터 출발하여 제조하였고, 이 또한 2개의 이성질체를 제공하였다.

본 발명의 제 1 면의 대표적인 화합물을 하기의 표 1에 나타내었다.

[표 1]

본 발명 제 1면의 2산 화합물

화합물 1A 내지 12A 의 다이에틸에스터 1B 내지 12B 는 상기 논의된 방법 중 하나에 의해 제조되며 단 화합물 9B는 제조되지 않았고; 질량 분석법에 의해 분석되어, 각 화합물은 그의 질량에 대응하는 질량 피크 (M/z)를 갖고, 전형적으 로 양이온화로 M+H, 음이온화로 M-H 를 가졌다.

화합물 10A 및 그 다이에틸에스터 10B를 다이히드로클로라이드 염으로 분리하며, 이는 옥심 질소에서 2개의 이성질체로 존재한다. 이성질체를 분리하였다.

본 발명의 기타 화합물들은, 당업자에게 자명하고 본원에서 개시된 방법을 이용하여, 유사한 방법으로 제조될 수 있다.

시험관 내 어세이 실시예

본 실시예들은 예측 가능한 시험관 내 시험에서의 본 발명의 화합물 (및 비교측정 화합물 TLK117, TLK199 및 TLK 137 중 하나 또는 다른 것)의 효과를 설명한다.

인간 GST　P1-1, A1-1, 및 M1-1 동종효소의 재조합체, 및 토끼 다클론 항-인간 GSTπ 항체를 EMD Biosciences, Inc., San Diego, California, U.S.A. 로부터 얻었다. 마우스 단클론 항-인간 GSTπ 항체를 Dakoctyomation, Inc., Carpinteria, California, U.S.A. 로 부터 얻었다. IRDye800 접합, 친화도 정제된 염소 항-토끼 IgG 항체를 Rockland Immunochemicals, Inc., Gilbertsville, Pennsylvania, U.S.A. 로 부터 얻었다. 인간 암 세포주 HL-60 (전골수구성 백혈병)을 National Cancer Institute, Bethesda, Maryland, U.S.A. 로 부터 얻었다. RPMI 1640 배지 및 이스코브 (Iscove)의 변형된 둘베코 (Modified Dulbecco) 배지 (IMDM)를 Invitrogen, Inc., Carlsbad, California, U.S.A. 로 부터 얻었다. CellTiter-Glo™ 어세이 키트를 Promega Corporation, Madison, Wisconsin, U.S.A. 로 부터 얻어, 제조자의 지시에 따라 사용하였다. 피코에리트린-접합 항-CD11b 항체 및 피코에리트린-접합 동형 대조군 항체를 BD Biosciences, Inc., San Jose, California, U.S.A. 로 부터 얻었다. MethoCult™ M3234 메틸셀룰로스 배지 (소태아혈청, 소혈청알부민, rh 인슐린, h 트랜스페린, 2-메르캅토에탄올, 및 L-글루타민에 의해 보강되는 IMDM 중의 2.5% 메틸셀룰로스)를 StemCell Technologies, Inc., Vancouver, Canada, 으로 부터 얻었고, 제조자의 지시에 따라 희석하였다 (1% 메틸셀룰로스 농도로).

시험관 내 실시예 1. 글루타치온 S-전이효소 동종효소의 억제

본 실시예는 본 발명의 화합물의 글루타치온 S-전이효소 동종효소 GST P1-1, A1-1, 및 M1-1 의 억제제로서의 시험관 내 효과를 설명한다. TLK199 (본 어세이에서 시험된 TLK117 의 다이에틸에스터)는 인간에서 골수자극 활성 및 동물 모델에서 화학적 증강 활성을 보여왔기 때문에, GST P1-1 의 억제는 본 발명의 제 3 면의 치료 방법에서의 예측되는 효능으로 생각된다.

인간 GST　P1-1, A1-1, 및 M1-1 동종효소의 재조합체는 어세이 완충액 (수중의 100　mM KH₂PO₄/K₂HPO₄, 0.1　mM EDTA, pH　6.5) 내에서 최종 농도 각각 0.02, 0.011, 및 0.0083　단위/mL 로 사용되었다 [1　단위는 20 ℃ 및 pH 6.5에서 분당 1　μmol 의 1-클로로-2,4-디니트로벤젠 (CDNB)을 환원된 글루타치온 (GSH)으로 접합시키는 효소의 양이다]. GSH 는 수중의 100 mM 원액으로서 제조되었고, CDNB 는 에탄올 중의 100 mM 원액으로서 제조되었으며, 둘 다 적당한 농도 (평가 되는 동종효소의 최종 농도가 2xK_m이 되도록)로 어세이 완충액으로 희석하였다. 시험 화합물 (2산, 화합물 1A 내지 12A 및 TLK117)을 다이메틸 설폭사이드 (DMSO) 에 용해하고 어세이에 적당한 농도 (예측 IC₅₀ 근방 중간값의 범위에 걸친 8 개의 농도)로 DMSO 로 희석하였다. 각 어세이에 대하여, 상기 시험 화합물 및 GSH 를 상기 동종효소에 첨가하였다. 동종효소/화합물/GSH 용액에 CDNB 용액을 첨가한 직후, 340 nm 에서의 흡광도를 SpectraMax 플레이트 리더 (Molecular Devices, Inc., Sunnyvale, California, U.S.A.)로 5 분 동안 연속하여 기록하였다. 각 화합물의 GST 억제 활성을 시험 화합물의 다양한 농도에서 흡광도/시간 곡선의 기울기로부터 계산하였다. 모든 어세이는 DMSO를 대조군으로하여, 최종 DMSO 농도가 2%로 유지된, 2중 웰 (well)에서 수행되었다. 이러한 분석 결과는 하기 표 2 에 나타난다.

시험관 내 실시예 2. HL-60 세포에서의 세포독성. 본 실시예는 본 발명의 화합물의 HL-60 인간 백혈병 세포주에 대한 시험관 내 세포독성을 예시한다.

대수증식기의 세포를 96-웰 플레이트에서 10% 소태아혈청 (FBS) 및 1% L-글루타민으로 보강된 150 μL 의 RPMI 1640 배지 중에 1500 세포/웰로 시드하고, 37 ℃ 의 공기/5 % CO₂하에서 4 내지 5 시간 동안 배양하였다. 시험 화합물 (다이에틸에스터, 화합물 1B 내지 12B 및 TLK199)을 DMSO 에서 용해시키고 연속적으로 희석하였다 (예측 CC₅₀ 근방 중간값 범위에 걸친 8 개의 농도). 보강된 RPMI 1640 배지에서 추가적으로 1:50 희석 후, 50 μL 의 희석된 화합물을 첨가하 여 최종 DMSO 농도 0.5 % 를 얻었다. 그 후 세포를 72 시간 (약 3 배가시간) 동안 배양하였다. 그 후 세포를 원심분리 (20 ℃ 에서 5 분 동안 1200 rpm)하여 수득하고, 100 μL 의 배양상청액을 제거하고 동일한 부피의 CellTiter-Glo 시약으로 대체하였다. 일정한 혼합과 함께 실온에서 10 분 동안 배양한 후, 발광분석기 (luminometer)를 이용하여 상기 플레이트에서 판독하였고, 여기에서 살아있는 세포의 수는 관찰된 발광에 비례하는 것이다. 모든 어세이는 DMSO 용매를 대조군으로하여 3중 웰에서 수행하였다. CC₅₀ (50% 성장 억제를 유발하는 농도)을 발광/농도 곡선으로부터 계산하였다. 이러한 어세이 결과는 하기 표 2에 나타난다.

시험관 내 실시예 3. GSTπ 면역침전 어세이. 본 실시예는 본 발명의 화합물의 GSTπ 면역침전을 유발하는 유익한 효과를 설명한다. TLK199 (본 어세이에서 시험된 TLK117 의 다이에틸에스터)는 인간에서 골수자극 활성 및 동물 모델에서 화학적 증강 활성을 보여왔기 때문에, 이러한 결과는 본 발명의 제 3 면의 치료 방법에서의 예측되는 효능으로 생각된다.

HL-60 세포를 T75 플라스크에서 10% 소태아혈청, 1 mM 글루타민 및 20 μM 젠타마이신으로 보강된 20 mL 의 RPMI-1640 배지에서 6 × 10⁵　세포/mL 로 시드하고, 37 ℃ 의 5% CO₂ 대기에서 밤새 배양하였다. 상기 세포를 0.1% DMSO 또는 0.1% DMSO를 포함하는 배양 배지 중의 20 μM 의 시험 화합물 (다이에틸에스터, 화합물 1B 내지 12B 및 TLK199)로 2 시간 동안 처리하였다. 상기 처리 후, 상기 세포를 원심분리로 수집하고 인산-완충액 식염수로 두 번 세척하였다. 상기 세포 펠릿을 1 mL 용해 완충액 [사용 전에 단백질분해효소억제제 및 인산분해효소억제제 (Roche Diagnostics, Indianapolis, Indiana, U.S.A.)가 첨가되는, 50　mM Tris, pH　8.0, 120　mM NaCl, 0.5%　NP-40 계면활성제, 100　mM NaF] 에 재현탁시키고, 4 ℃ 에서 30 분 동안 약하게 교반하면서 배양하였다. 상기 세포 용해물을 10 분 동안 13,000 rpm 으로 원심분리하여 제거하여, 세포 조직파편을 제거하였다. 면역침전을 위해, 2.1 ㎍ 의 마우스 단클론 항-인간 GSTπ 항체를 1 mg/mL 총단백질의 세포 용해물 500 μL 에 첨가하였다. 4 ℃ 에서 밤새 배양 후, 30 μL 의 Protein A/G 아가로즈 비드 (bead) (Pierce, Rockford, IL)를 상기 혼합물에 첨가하였고 4 ℃ 에서 1 시간 동안 배양하였다. 상기 비드를 원심분리로 수집하고, 용해 완충액으로 3 회 세척하고, 10 μL 비-환원성 리튬 도데실 설페이트 샘플 완충액 (Invitrogen, Carlsbad, California, U.S.A.)에서 재현탁시켰다. 상기 현탁된 샘플을 95 ℃에서 5 분 동안 가열하고, 4　내지　12% 겔 상의 SDS-PAGE를 실시한 후, 이어서 토끼 다클론 항-인간 GSTπ 항체를 이용하여 웨스턴 블롯 분석 (Western blot analysis)을 하고, 그 후, IRDye 800 접합된, 친화도 정제된 염소 항-토끼 IgG 항체를 이용하여 분석한다. GSTπ 단백질 밴드를 가시화하여 밴드의 강도를 Odyssey 적외선 스캐너 (Li-Cor, Lincoln, Nebraska, U.S.A.) 에 의해 수량화하였다. 화합물 처리로부터 얻어진 밴드의 강도를 그의 대응하는 DMSO 대조군과 비교하여 억제 백분률로 표시하였다. 그 결과는 하기 표 2 에 나타난다.

[표 2]

본 발명 2산 화합물의 GST 동종효소 억제, 및 본 발명 다이에틸 에스터 화합물의 HL-60 세포독성 및 GSTπ 면역침전 (* 트리에틸 에스터, 화합물 6 에 대해서는 바이페닐 카복시레이트의 에스터화 포함)

본 발명의 2산 화합물은 모두 GST P1-1의 매우 강력한 억제제이고 (IC₅₀　<　20　nM, 일부는 IC₅₀　<　10　nM), 또한 두 가지 다른 인간 GST 동종효소인 GST A1-1 및 GST M1-1 에 비해 GST P1-1에 대하여 선택적이다. 상기 다이에틸에스터 모두는 HL-60 세포에서는 우수한 세포독성을 나타내고, 다수가 면역침전 어세이에서 측정된 바와 같이 GSTπ 의 상당한 억제를 나타낸다.

또한, 본 발명의 다이에틸에스터 화합물의 일부를 HL-60 세포의 분화를 증가시키는 능력에 대해 또한 시험하였다. 이것은 본 발명의 화합물의 HL-60 인간 백혈병 세포주의 분화를 자극함에 있어 시험관 내 유익한 효과를 설명한다. 상기 어세이에서 분화를 증가시키는 TLK199 이 인간에서 골수자극 활성을 보였기 때문에, 이러한 결과는 인간 골수자극에서의 예측되는 효능으로 생각된다. 대수증식기 세포 (1　× 10⁵ 세포/mL)를 시험관 내 실시예 2에 사용된 2 mL 의 보강 RPMI 1640 배지 및 최종 DMSO 농도가 0.1% 인 상태로 DMSO 에 용해된 시험 화합물에서 37 ℃ , 공기/5% CO₂ 하에서 24 시간 동안 배양하였다. 상기 세포를 원심분리 (20 ℃ 에서 5 분 동안 1250 rpm) 에 의해 수득하고 2% FBS 를 함유하는 빙냉 인산-완충 식염수 (PBS) 2 mL로 세척하고, 이후 10 μL 피코에리트린-접합 항-CD11b 항체 또는 10 μL 피코에리트린-접합 동형 대조군 항체로 염색하였다. 얼음에서 30 분 동안 방치시킨 후, 상기 세포를 2% FBS 를 함유하는 빙냉한 PBS 2 mL 에 재현탁시켰다. 상기 세포를 원심분리 (20 ℃ 에서 5 분 동안 1250 rpm) 에 의해 수득하고 2% FBS 를 함유하는 PBS 0.4 mL 에 재현탁시켰다. 과립구 및 단핵구의 마커인 CD11b의 특정 세포 표면 발현을, FACSCalibur 분석기 (BD Biosciences)를 이용한 플로우 싸이토메트리에 의해 측정하였다. 모든 어세이는 DMSO 대조군과 함께 3중으로 수행하였다. 분화의 정도는 DMSO 대조군 시그날의 배수로 표현되었다. 시험된 화합물 중 몇몇은 HL-60 세포의 분화를 증가시켰다.

상기 결과 및 상기 화합물의 TLK199 와의 구조적 유사성으로부터, 상기 화합물 (특히 다이에스터)은 하기와 같은 치료적 작용을 할 것으로 기대된다: 종양세포에서 화학치료제의 세포독성효과 증대, 선택적으로 종양세포에서 독성의 발휘, 골수에서의 GM 전구체의 생산 증가, 골수의 분화 자극, 화학치료제의 골수 억제 효과 완화 및 골수에서의 조혈의 조절.

제형 실시예. 본 실시예는 본 발명의 화합물, 특히 다이에스터에 적합한 제형을 예시한다.

하기를 조합하고, 그 혼합물을 압축하여 정제로 만들거나 그 혼합물을 경질 젤라틴 캡슐에 채워 (예컨대, 상기 정제 또는 캡슐은 본원 화합물 250 mg 함유), 경구 투여용 고형 제형을 제조하였다:

화합물 25.0% w/w

마그네슘 스테아레이트 0.5% w/w

전분 2.0% w/w

히드록시프로필메틸셀룰로스 1.0% w/w

미세결정질 셀룰로스 71.5% w/w.

원한다면, 정제는 필름-형성제 (예컨대, 히드록시프로필메틸셀룰로스), 색소 (예컨대, 티타늄 다이옥사이드), 및 가소제 (예컨대, 다이에틸프탈레이트)의 현탁액을 적용하고 용매를 증발시켜 상기 필름을 건조시켜 코팅될 수 있다.

IV 투여용 제형을 상기 화합물 (예컨대, 약학적으로 허용 가능한 염으로서)을 인산-완충 식염수에 1% w/v 농도로 용해시키고; 상기 용액을 예컨대 무균 여과로서 멸균 소독하고, 예컨대, 본 발명의 화합물 250 mg 을 함유하는 무균 용기에 밀봉하여 제조한다.

이와 다르게는, 상기 화합물 (예컨대 약학적으로 허용 가능한 염으로서)을 적합한 완충액, 예컨대 상기 언급한 인산-완충 식염수의 인산 완충액에 용해시키고, 상기 용액을 멸균 소독하고 적합한 무균 바이알에 넣어, 상기 용액을 동결건조시켜 물을 제거하고, 바이알을 밀봉하여 동결건조된 제형을 제조한다. 동결건조된 제형은 멸균수를 첨가하여 재구성되고, 상기 재구성된 용액은 0.9% 염화 나트륨 정맥내 주입 또는 5% 덱스트로스 정맥내 주입과 같은 용액으로 투여하기 위하여 추가적으로 희석될 수 있다.

이와 다르게는, 미국 공개 출원 번호 2003/0100511 (예컨대 실시예 4 및 5)의 방법에 의해, 상기 공보의 화합물 9 대신 본 발명의 화합물을 이용하여, 리포솜 제형을 제조할 수 있고, 이를 상기 공개에서 기재된 바와 같이 동결건조할 수도 있다.

치료 실시예. 본 실시예는 본 발명의 화합물을 사용한 적합한 치료 방법을 예시한다.

상기 제형 실시예에서 기재된 바와 같은 정맥내 제형 중의 본 발명의 화합물을, 골수형성이상증후군으로 고통받는 환자에게 30 분에 걸쳐 초기 용량 50 mg/m²로 정맥내 투여하고; 그 용량을 100　mg/m², 200　mg/m², 400　mg/m², 및 600　mg/m²로 증가시킨다. 상기 화합물은 매 3주마다 5일 동안 하루에 한 번 투 여한다.

구체적인 구현예 및 실시예와 함께 본 발명을 설명하였지만, 당업자에게는, 그 기술 및 본 개시내용과 관련하여, 구체적으로 개시한 물질 및 방법의 균등물 또한 본 발명에 적용가능할 것임이 명백해질 것이며; 그러한 균등물을 하기 청구의 범위 내에 포함시키고자 한다.

Claims

하기 식의 화합물; 또는 그의 C_1-10　알킬, 페닐-C_1-3　알킬, 또는 (C_5-6　헤테로아릴)-C_1-3　알킬 모노- 또는 다이-에스터; 또는 하기 화합물 또는 그의 모노- 또는 다이-에스터의 염:

(식 중:

n 은 0 또는 1;

W 는 L-γ-글루타밀 또는 L-γ-글루타밀글리실;

X 는 비치환된 또는 할로, 히드록시, 메틸, 트리플루오로메틸, 및 메톡시로부터 선택되는 1 또는 2 개의 기로 치환된 C_5-6　시클로알킬; 비치환된 또는 할로, 히드록시, 메틸, 트리플루오로메틸, 및 메톡시로부터 선택되는 1 또는 2 개의 기로 치환된 C_5-6　헤테로시클로알킬; 비치환된 또는 할로, -CN, -NO₂, -OH, 비치환된 또는 할로-치환된 C_1-3 알킬, 비치환된 또는 할로-치환된 C_1-3 알킬옥시, 포르밀, 카복시, 및 C_1-3　알콕시카보닐로부터 선택되는 3개 이하의 치환기로 치환된 페닐; 또는 비치환된 또는 할로, -CN, -NO₂, -OH, 비치환된 또는 할로-치환된 C_1-3 알킬, 비치환된 또는 할로-치환된 C_1-3 알킬옥시, 포르밀, 카복시, 및 C_1-3　알콕시카보닐로부터 선택되는 3개 이하의 치환기로 치환된 C_5-6　헤테로아릴;

Y 는 =O, =N-OH, 또는 =N-O (비치환된 또는 할로, 히드록시, 메틸, 트리플루오로메틸, 메톡시, 및 아미노로부터 선택되는 1 또는 2개의 기로 치환된 C_1-3　알킬); 및

Z 는 비치환된 또는 할로, -CN, -NO₂, -OH, 비치환된 또는 할로-치환된 C_1-3 알킬, 비치환된 또는 할로-치환된 C_1-3 알킬옥시, 포르밀, 카복시 및 C_1-3　알콕시카보닐로부터 선택되는 3개 이하의 치환기로 치환된 페닐; 또는 비치환된 또는 할로, -CN, -NO₂, -OH, 비치환된 또는 할로-치환된 C_1-3 알킬, 비치환된 또는 할로-치환된 C_1-3 알킬옥시, 포르밀, 카복시, 및 C_1-3　알콕시카보닐로부터 선택되는 3개 이하의 치환기로 치환된 C_5-6　헤테로아릴임).
제 1 항에 있어서, n이 0인 화합물.
제 1 항에 있어서, n이 1인 화합물.
제 3 항에 있어서, Y가 =O인 화합물.
제 1 항에 있어서, W 가 L-γ-글루타밀인 화합물.
제 1 항에 있어서, X 가 시클로펜틸, 시클로헥실, 티에닐, 푸릴, 피리디닐, 또는 비치환된 또는 할로, -CN, -NO₂, -OH, 비치환된 또는 할로-치환된 C_1-3 알킬, 비치환된 또는 할로-치환된 C_1-3 알킬옥시, 포르밀, 카복시, 및 C_1-3　알콕시카보닐로부터 선택되는 3개 이하의 치환기로 치환된 페닐인 화합물.
제 6 항에 있어서, X 가 시클로헥실인 화합물.
제 6 항에 있어서, X 가 비치환된 또는 1 또는 2개의 플루오로, 클로로, 메틸, 히드록시, 메톡시, 또는 트리플루오로메틸기로 치환된, 페닐인 화합물.
제 8 항에 있어서, 페닐이 비치환된 것인 화합물.
제 8 항에 있어서, 페닐이 치환되고 그 치환기 중 하나가 4-위치에 존재하 는 화합물.
제 10 항에 있어서, 치환기가 단지 하나인 화합물.
제 1 항에 있어서, -(C=Y)_n-Z 치환이 페닐기의 2- 또는 4-위치에 존재하는 화합물.
제 12 항에 있어서, -(C=Y)_n-Z 치환이 페닐기의 2-위치에 존재하는 화합물.
제 12 항에 있어서, -(C=Y)_n-Z 치환이 페닐기의 4-위치에 존재하는 화합물.
제 14 항에 있어서, Z 가 비치환된 또는 플루오로, 클로로, 시아노, 메틸, 히드록시, 메톡시, 또는 트리플루오로메틸로 치환된, 페닐인 화합물.
제 1 항에 있어서, 2산 또는 그 염인 화합물.
제 1 항에 있어서, 다이에스터 또는 그 염인 화합물.
제 17 항에 있어서, C₁ _-6 알킬 또는 벤질 다이에스터, 또는 그 염인 화합물.
제 18 항에 있어서, C₁ _-3 알킬 다이에스터, 또는 그 염인 화합물.
제 19 항에 있어서, 다이에틸에스터 또는 그 염인 화합물.
제 1 항에 있어서, 하기로부터 선택되는 화합물:

L-γ-글루타밀-S-[(4-바이페닐릴)메틸]-L-시스테이닐-D-페닐글리신,

L-γ-글루타밀-S-[(2-바이페닐릴)메틸]-L-시스테이닐-D-페닐글리신,

L-γ-글루타밀-S-[(2'-시아노-4-바이페닐릴)메틸]-L-시스테이닐-D-페닐글리신,

L-γ-글루타밀-S-[(2'-메톡시-4-바이페닐릴)메틸]-L-시스테이닐-D-페닐글리신,

L-γ-글루타밀-S-[(3'-(트리플루오로메틸)-4-바이페닐릴)메틸]-L-시스테이닐-D-페닐글리신,

L-γ-글루타밀-S-[(4'-카복시-4-바이페닐릴)메틸]-L-시스테이닐-D-페닐글리신,

L-γ-글루타밀-S-[(4'-시아노-4-바이페닐릴)메틸]-L-시스테이닐-D-페닐글리신,

L-γ-글루타밀-S-{[4-(2-피리딜)페닐]메틸}-L-시스테이닐-D-페닐글리신,

L-γ-글루타밀-S-[(4-벤조일페닐)메틸]-L-시스테이닐-D-페닐글리신,

L-γ-글루타밀-S-({4-[(2-아미노에톡시이미노)(페닐)메틸]페닐}메틸)-L-시스테이닐-D-페닐글리신,

L-γ-글루타밀-S-[(4-바이페닐릴)메틸]-L-시스테이닐-D-(4-클로로페닐)글리신, 및

L-γ-글루타밀-S-[(4-바이페닐릴)메틸]-L-시스테이닐-D-시클로헥실글리신,

및 그들의 다이에틸에스터, 및 상기 화합물 및 그들의 다이에틸에스터의 염.
제 1 항 내지 제 21 항 중 어느 한 항의 화합물 및 약학적으로 허용가능한 하나 이상의 부형제를 함유하는, 종양세포에서 화학치료제의 세포독성효과 증대, 선택적으로 종양세포에서 독성의 발휘, 골수에서의 GM 전구체의 생산 증가, 골수의 분화 자극, 화학치료제의 골수 억제 효과 완화, 또는 골수에서의 조혈의 조절을 위한 약학 조성물.
하기 중 하나 이상을 위한 의약의 제조를 위해 제 1 항 내지 제 21 항 중 어느 하나의 항의 화합물을 사용하는 방법: 종양세포에서 화학치료제의 세포독성효과 증대, 선택적으로 종양세포에서 독성의 발휘, 골수에서의 GM 전구체의 생산 증가, 골수의 분화 자극, 화학치료제의 골수 억제 효과 완화 및 골수에서의 조혈의 조절.
하기 식의 화합물; 또는 그의 C_1-6　알킬 모노- 또는 다이-에스터; 또는 하기 화합물 또는 그의 모노- 또는 다이-에스터의 염:

(식 중:

n 은 0 또는 1;

W 는 L-γ-글루타밀;

X 는 C_5-6　시클로알킬, 또는 비치환된 또는 3 개 이하의 할로로 치환된 페닐;

Y 는 =O 또는 =N-O (비치환된 또는 1 또는 2 개의 아미노로 치환된 C_1-3　알킬); 및

Z 는 비치환된 또는 할로, -CN, -OH, 비치환된 또는 할로-치환된 C_1-3 알킬, 카복시, 및 C_1-3　알킬옥시로 이루어진 군으로부터 선택되는 1 이상 3 개 이하의 치환기로 치환된 페닐; 또는 비치환된 또는 할로, -CN, -OH, 비치환된 또는 할로-치환된 C_1-3 알킬, 카복시, 및 C_1-3　알킬옥시로 이루어진 군으로부터 선택되는 3 개 이하의 치환기로 치환된 피리딜임).
제 24 항의 화합물 및 약학적으로 허용가능한 하나 이상의 부형제를 함유하는, 암 치료를 위한 약학 조성물.
하기 중 하나 이상을 위한 의약의 제조를 위해 제 24 항의 화합물을 사용하는 방법: 종양세포에서 화학치료제의 세포독성효과 증대, 선택적으로 종양세포에서 독성의 발휘, 골수에서의 GM 전구체의 생산 증가, 골수의 분화 자극, 화학치료제의 골수 억제 효과 완화 및 골수에서의 조혈의 조절.
하기 식의 화합물; 또는 그의 C_1-10　알킬, 페닐-C_1-3　알킬, 또는 (C_5-6　헤테로아릴)-C_1-3　알킬 모노- 또는 다이-에스터; 또는 하기 화합물 또는 그의 모노- 또는 다이-에스터의 염:

(식 중,

W 는 N-α-R¹-L-γ-글루타밀 또는 N-α-R¹-L-γ-글루타밀글리실 (여기서, R¹ 은 아민-보호기) 이고; 그리고

n, X, Y 및 Z 는 제 1 항에서 정의된 바와 동일함).