KR100799393B1

KR100799393B1 - 탁산유도체의 제조방법

Info

Publication number: KR100799393B1
Application number: KR1020037006908A
Authority: KR
Inventors: 폰티로리알레산드로; 봄바르델리에지오
Original assignee: 인데나 에스피아
Priority date: 2000-11-28
Filing date: 2001-11-22
Publication date: 2008-01-30
Also published as: ITMI20002553A1; SK286711B6; DK1347984T3; JP2004519434A; JP4237490B2; CA2430070C; NO328143B1; RU2275365C2; WO2002044161A3; CZ20031474A3; EP1347984A2; IT1320107B1; PT1347984E; ATE275149T1; TR200402546T4; CZ300793B6; WO2002044161A2; ES2227316T3; DE60105314D1; CN1478091A

Abstract

본 발명은 β-(N-Boc-β-이소부틸이소세리닐)-14β-하이드록시바카틴Ⅲ1,14-카보네이트의 제조방법에 관한 것이다.

바카틴Ⅲ, 탁산유도체

Description

탁산유도체의 제조방법{A process for the preparation of taxan derivatives}

본 발명은 구조식 (Ⅰ)의 13-(N-복-β-이소부틸이소세리닐)-14β-하이드록시바카틴 Ⅲ 1,14-카보네이트의 제조방법에 관한 것이다.

화합물 (Ⅰ)은, PCT WO 01/02407에 기재되어 있으며, 특히 유방, 폐, 난소, 결장, 전립선, 신장과 췌장 종양에 대하여 활성을 보이며, 또한 예를 들어 아드리아마이신, 빈블라스틴과 백금(Pt) 유도체와 같은 공지된 항종양제의 세포 내성에 대하여도 활성을 보인다. 14β-하이드록시-1,14-카보네이트-데아세틸바카틴 Ⅲ 유도체는 일반적으로 전구물질인 14β-하이드록시-데아세틸바카틴 Ⅲ 으로부터 출발하여 제조되며, 이 화합물은, EP 559,019에 나타난 바와 같이 탁수스 월리차이나(Taxus wallichiana)잎에서 추출에 의해 소량을 획득할 수 있는 천연화합물이다.

특히, 화합물 (Ⅰ)중의 14β-하이드록시-1,14-카보네이트-데아세틸바카틴 Ⅲ 유도체를 제조할 수 있는 쉽고 효과적인 다른 방법이 강하게 요구되었다.

본 발명에 따른 공정은 14β-하이드록시-바카틴 Ⅲ와 반대로 10-데아세틸바카틴 Ⅲ을 출발물질로 할 때 탁수스 바카타(Taxus bacata)잎에서 다량으로 쉽게 얻을 수 있었다.

따라서, 본 발명은 하기 단계로 구성된 구조식 (Ⅰ)의 화합물의 제조방법에 관한 것이다:

a) 10-데아세틸바카틴 Ⅲ의 7- 과 10- 위치에서의 하이드록실의 보호공정:

상기식에서, R 과 R1은, 같거나 다르며, 수소, C₁-C₁₀ 알킬 또는 아릴, C₁-C ₁₀ 알킬- 또는 아릴-카보닐, 트리클로로아세틸, C₁-C₄ 트리알킬실릴 중에서 선택되고; 바람직하기로는 R 과 R₁ 이 같을 때는, 그들은 트리클로로아세틸이고, 반대로 그들이 다를 때는, 바람직하기로는 R 은 트리클로로아세틸이고 R₁ 은 아세틸이거나, R 이 트리에틸 또는 트리메틸실릴 또는 복(BOC) 이고 R₁ 은 아세틸이다;

b) 13- 위치의 카보닐을 산화시키고, 14- 위치에서 하이드록실화 시킨 유도체를 얻기 위한 2개 산화공정:

c) 1- 과 14- 위치의 근접한 하이드록실을 탄산화(carbonation)시켜 1,14-카보네이트 유도체를 제조하는 공정:

d) 13- 위치의 카보닐의 환원공정:

e) 7- 과 10- 위치의 보호 그룹의 제거공정:

f) 10- 위치의 하이드록실의 선택적인 아세틸화 공정:

g) 14β-하이드록시-바카틴-1,14-카보네이트 Ⅲ을 7- 위치에 트리에틸실릴화된 유도체로의 변형공정(transformation):

h) (g) 단계의 화합물과 (4S,5R)-N-복(Boc)-2-(2,4-디메톡시페닐)-4-이소부틸-1-옥사졸리딘-5-카복실산의 반응공정:

i) (h) 단계의 화합물로부터 트리에틸실릴과 디메톡시벤질리딘 보호 그룹의 제거공정:

7- 과 10- 하이드록실의 선별적인 보호 공정은 홀톤등(Holton et al.), Tetrahedron Letters 39, (1998) 2883-2886에 기재되어 있다. 출발 화합물인 데아세틸바카틴 Ⅲ의 하이드록실의 선별적인 보호는 그들의 상이한 반응성 때문에 가능하다. 특히, 아실화, 알킬화 또는 실릴화제에 대한 반응성은 C(7)-OH>C(10)- OH>C(13)-OH>C(1)-OH의 순서대로 다양화 하는 것으로 알려져 있다. 그런 까닭에 7- 과 10-위치의 그룹들은 1-과 13-위치의 자유의 하이드록실이 지켜지는 동안 선택적으로 보호될 수 있다. 더군다나, 반응 상태의 변화에 의해, 7- 과 10-위치의 하이드록실의 반응성 순서를 역전환이 가능한 까닭에 10- 과 7-위치의 하이드록실의 보호에 사용 가능한 반응물질과 반응 상태의 예가 상기 인용 공보 중에 보고되어 있다. 유사한 선택성은 14β-하이드록시바카틴-1,14-카보네이트에서 시작되어도 얻어진다.

바람직한 구체적 태양에 다르면, 데아세틸바카틴 Ⅲ을 촉매량의 디메틸아미노피리딘 (DMAP)을 사용하면서 트리에틸아민 존재하 메틸렌 클로라이드 중에서 트리클로아세틸 클로라이드와 반응시킨다. 보호 트리클로아세틱 그룹들의 사용은 후속적인 산화, 탄산화와 환원 단계들 (각각의 (b), (c) 와 (d))에서 매우 유리한 것임이 입증되었다. 특히 출발 물질로부터 양적인 수득률로 획득된 7,10-비스-트리클로로아세테이트 유도체를 산화시키고 탄산화 시킨 다음, 트리클로아세틱 그룹의 탈보호와 동시에 13- 위치에서 쉽게 환원시켜 14-하이드록시-1,14 카보네이트-데아세틸바카틴 Ⅲ을 얻는 것이다. 촉매량의 DMAP의 사용은 산업적 또 환경적 관점에서 명백한 이익을 주는데, 기질의 아실화 반응을 지금까지는 피리딘 중에서 수행되어와 잔류용매를 처분해야 하는 문제가 내포되어 있음을 고려시 그러하다.

13- 위치의 하이드록실의 산화공정 단계 (b)는 이산화망간 또는 이산화 비스무스 또는 오존과 함께 아세토니트릴, 아세톤 또는 에틸 아세테이트/메틸렌 클로라이드 9 : 1 혼합물 중에서 선택된 용매 중에서 심하게 저어주면서 수행하는데, 바 람직하게는 아세토니트릴 또는 아세톤 중에서 오존 또는 이산화망간으로 반응을 수행한다. 오존과의 반응은 빠르게 13-위치에서 산화된 유도체를 형성하고, 반면에 MnO₂ 와의 반응 진행은 빠르게 진행되어 반응 매체 중에서 회수될 수 있는 산화 유도체를 얻을 수 있는데 반하여, 긴 반응은 13- 위치에서 산화되고 14- 위치에서 하이드록실화된 유도체를 얻을 수 있다.

1- 과 14- 위치의 하이드록실의 후속 탄산화(carbonation)공정 단계 (c)는 일반적으로 포스겐 또는 피리딘에 존재하 메틸렌 클로라이드/톨루엔 혼합물 중에서 유용하다. 계속해서, 얻은 1,14-카보네이트 유도체 결과물을 13- 위치에서 쉽게 환원시켜 상응하는 13-하이드록시 유도체 (단계 (d))를 얻는다. 언급한 환원은 13-위치의 카보닐에서 위치선택적으로 일어나는 반면에, 9-위치의 카보닐은 변하지 않고 남아 있는다. 이 반응은 일반적으로 메탄올 또는 테트라부틸암모니움 보로하이브리드 중에서 소디움 보로하이브리드로 수행되고 높은 수득률을 제공한다. 후속 단계 (e)는 14β-하이드록시-1,14-카보네이트 데아세틸바카틴 Ⅲ 을 7- 과 10- 위치에 하이드록실을 탈보호하여 얻는다. 7- 과10- 위치의 하이드록실의 선택적인 탈보호에 사용될 수 있는 반응조건과 반응물질은 젱등 (Zheng et al.), Tetrahedron Lett., 1995, 36, 2001, 과 다타등(Datta et al.), J. Org. Chem., 1995, 60. 761.에 설명되어 있다.

10- 위치의 선택적인 아실화 공정 (단계 (f))는 세리움, 스칸디움 또는 이터비움 염 존재하 아세틸 무수물로 수행되며, CeCl₃.7H₂O 이 바람직하다. 그 후 7- 위 치의 하이드록실은 실릴화 반응으로 (단계 (g)) 보호된다. 후속 단계 (h)는 14β-하이드록시-7-테스(Tes)-1,14-카보네이트-바카틴 Ⅲ 과 (4S,5R)-N-복(Boc)-2-(2,4-디메톡시페닐)-4-이소부틸-1-옥사졸리딘-5-카복실산의 축합(condensation) 반응을 포함한다. 후자 화합물은 PCT WO 01/02407 에 기재된 것처럼 제조된다. 그 반응은 예를 들어 디시클로헥실카보디이미드 (DCC)와 같은 축합제와 염기 존재하, 무수 무극성 용매(dry apolar organic solvent)중에서 수행된다.

마지막으로, 단계 (i), 트리에틸실릴 그룹은 질소하 아세토니트릴/피리딘 용액 중에서 피리디니움 풀루오리드로 제거될 수 있는 반면에, 디메톡시벤질리딘 그룹은 메틸렌 클로라이드 중에서 메탄올 HCl 으로, 그후 NaHCO₃ 의 첨가에 의해 제거 될 수 있다.

다음의 실시예는 보다 상세하게 발명을 설명한다.

실시예 Ⅰ

7,10-비스트리클로로아세틸-10-데스아세틸바카틴 Ⅲ의 제조.

첫 번째 방법 :

4.77 ml의 트리클로아세틱 언하이드리드 (42.32 mmoles)을 무수 메틸렌 클로라이드 125 ml와 피리딘 42 ml 중에서 10-데아세틸바카틴 Ⅲ 10 g (18.4 mmoles) 용액에 방울방울 떨어트린다. 반응 혼합물은 세 시간 동안 교반 하에 놓아두거나 그렇지 않으면 반응이 완결될 때까지 놓아둔다, 반응의 종료는 용출제로서 n-헥산/ 에틸 아세테이트 1:1 혼합물을 사용한 실리카 겔 상의 TLC를 이용해 관찰했다. 반응이 완성되면, 메탄올 5 ml를 첨가하여 과다한 트리클로로아세틱 언하이드리드를 제거하고 다음 물을 첨가한다. 유기층은 물로 완벽히 씻어내고 HCl로 산성화 시켜 피리딘을 제거하는, 한편 잔존 유기층은 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 진공상태에서 건조상태로 농축시켜, 클로로포름으로 결정화 후에 엷은 노란색의 고체 (17 g) 를 얻는다:

두 번째 방법 :

10-DAB Ⅲ (10 g, 18.38 mmol)을 CH₂Cl₂ (120 ml) 중에 현탁시키고, DMAP(220 mg, 1.4 mmol, 0.1 당량)을 첨가하고 혼합물을 빙욕 중에서 0℃로 냉각시킨다. 그때 Et₃N (10.26 ml, 73.6 mmol, 4 당량)을 가하고 바로 Cl₃COCl (4.12 ml, 36.8 mmol, 2 당량)을 질소 기류하 5분 동안 첨가하고 온도를 10℃ 이하로 유지했다. 첨가 완료 후, 혼합물을 얼음 수조에서 15분 동안 교반시켜 둔다, 수조를 제거하고 혼합물은 1 시간 동안 실온에서 교반시켰다. 1시간 후에 반응을 TLC (AcOEt 2/n-헥산 3, Rf 10-DAB Ⅲ = 0.05, Rf 7,10-비스트리클로로아세틸-10-DAB Ⅲ = 0.26)로 관찰하고 Cl₃CCOCl (1 ml, 0.5 당량)을 첨가했다. 교반을 실온에서 10분 동안 지속시켰고, 혼합물을 분쇄 얼음 160 g 이 담긴 비커에 붓고, 실온에서 평형상태가 될 때까지 교반시킨다(약 1시간). 그 후, 수성 부분을 분리하고 CH₂Cl₂ (3 X 40 ml)로 추출하였다. 모은 유기상을 HCl (20 ml)로 세척하고, NaHCO₃ 포화 용액 (20ml)으로 세척한 다음 Na₂SO₄ 상에서 건조하고 용매는 증발시켜 제거한다. 조제 중량 : 16.5 g. 결정화 후 클로로폼, IR, ¹H-NMR 과 [α]D 스펙트라(spectra)는 피리딘, 틀리클로로아세틱 언하이드리드의 사용으로 획득된 화합물과 일치됐다.

실시예 Ⅱ

10-데아세틸바카틴 Ⅲ 7,10-비스트리클로로아세테이트의 13-위치에서의 산화와 14-위치에서의 하이드록실화.

활성화된 MnO₂ 30 g을 아세토니트릴 (40 ml)의 10-데아세틸바카틴 Ⅲ 7,10-비스트리클로로아세테이트 (3 g) 용액에 첨가하고 현탁액은 자성으로 실내온도로 저어주면서, TLC (석유 에테르-에틸 아세테이트 5:5 ; 출발물질 Rf는 약 0.31)로 관찰했다. 대략 1시간 후, 13-데하이드로 유도체의 형성이 완료되었다(TLC 분석, 13-데하이드로 유도체의 Rf는 약 0.50). 13-데하이드로 유도체가 14β-하이드록시 유 도체(약 0.36 Rf)로 천천히 산화되는 동안, 대략 72시간 동안 휘저어주었다. 반응 혼합물을 셀라이트(Celite)로 여과하고, 덩어리는 에틸 아세테이트로 반복해서 세척한다. 용매는 증발로 제거시키고 잔사를 실리카 겔 (100 ml, 용리제(eluent) 석유 에테르-에틸 아세테이트 7:3)상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 13-데하이드로 유도체 170 mg 과 14β-하이드록시-13-데하이드로 유도체 1,05 g을 얻는다.

13-데하이드로-14β-하이드록시-10-데아세틸바카틴 Ⅲ, 7,10-비스 트리클로로아세테이트 : 흰 분말, 녹는점 97℃ ; IR (KBr disc) : 3440. 1780. 1767, 1736, 1686, 1267, 1232, 1103, 1010. 854 cm-1 ;

실시예 Ⅲ

7-트리에틸실릴바카틴 Ⅲ의 13-위치에서의 산화와 14-위치에서의 하이드록실화.

아세토니트릴 (10 ml)의 7-트리에틸실릴바카틴 Ⅲ (1.0 g) 용액에 10 g 의 활성화된 MnO₂를 첨가하고 현탁액은 실내 온도에서 자성으로 저어주고 TLC (원유 에테르-에틸 아세테이트 6:4 ; 출발 물질의 Rf 약 0.25)로 관찰했다. 두시간 후, 13-데하이드로 유도체의 형성이 완료되었다(TLC 분석, 13-데하이드로 유도체의 Rf는 약 0.45). 부가적인 MnO₂ (10 g)를 첨가하는 동안 약 188시간 동안 계속 휘저어주었다. 13-데하이드로 유도체는 14β-하이드록시 유도체(약 0.38 Rf)로 천천히 산화되었다. 반응 혼합물을 셀라이트(Celite)로 여과하고, 덩어리는 에틸 아세테이트로 반복해서 세척한다. 용매는 증발로 제거시키고 잔사는 실리카 겔 (40 ml, 용리제(eluent) 석유 에테르-에틸 아세테이트 7:3)상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 13-데하이드로 유도체 126 mg 과 14β-하이드록시-13-데하이드로 유도체 479 g (46 %) 과 이들의 혼합물 189 mg을 얻었다.

13-데하이드로-14β-하이드록시-10-데아세틸바카틴 Ⅲ, 7,10-비스 트리클로로아세테이트 :

실시예 Ⅳ

1,14-카보네이트-13-데하이드로-7-TES-14β-하이드록시-바카틴 Ⅲ의 제조.

포스겐 (톨루엔 20% 용액 1.8 ml, 3.4 mmol, 20 mol. 당량)과 CH₂Cl₂ (2 ml)중의 피리딘 (0.56 ml, 6,8 mmol, 20 mol. 당량) 용액에 10분 동안 CH₂Cl₂ (1 ml)중의 13-데하이드로-14β-하이드록시-7-트리에틸실릴바카틴 Ⅲ (124 mg, 1,17 mmol)을 방울방울 첨가했다. 혼합물은 실내 온도에서 1시간 동안 저어줬다, 그 후 초과분의 포스겐을 NaHCO₃ 포화 용액으로 소멸시키고 CH₂Cl₂로 추출해낸다. 유기상을 NaHCO₃ 포화 용액과 소금물로 세척하고 건조시켰다(Na₂SO₄). 붉은 잔사를 얻기 위해 용매는 증발 제거시키고, 짧은 실리카겔 컬럼 (대략 5 ml, 용리제 헥산/에틸 아세테이트 8:2) 상에서 정제시켜 탄산염 118 mg (92 %)을 얻게었다. 만약 염기로서 트 리에틸아민을 사용하여 실행하고 반대의 첨가가 없다면, 1,4-카보네이트와 2-데벤조일-1,2-카보네이트-14 벤조에이트의 대략 1:15 혼합물이 획득된다.

13-데하이드로-14β-하이드록시-7-트리에틸실릴바카틴 Ⅲ 1,14-카보네이트.

13-데하이드로-14-하이드록시 바카틴Ⅲ 1,14-카보네이트. 흰색분말. 녹는점

실시예 Ⅴ

1,14-카보네이트-7-O-트리에틸실릴 바카틴 Ⅲ의 제조.

메탄올 (5 ml)중의 13-데하이드로-14β-하이드록시-7-트리에틸실릴바카틴 Ⅲ 1,14-카보네이트 (50 mg) 용액에 초과의 NaBH₄ (대략 20 mg)을 소량씩 첨가한다. 30분 후에 반응 혼합물을 포화된 NH₄Cl에 첨가하고, 에틸 아세테이트로 추출하여, 브린으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조 시켰다. 용매는 증발 제거하고 잔사는 실리카 겔(대략 5 ml, 용리제 헥산-에틸 아세테이트 8:2) 상에서의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 13α-하이드록시 유도체 35 mg 과 13β-하이드록시 유도체 9 mg을 얻었다.

14β-하이드록시-7-트리에틸릴일-13-에피바카틴 Ⅲ 1,14-카보네이트.무정형,

실시예 Ⅵ

13-데하이드로-14β-하이드록시-7,10-비스트리클로로아세틸-바카틴 Ⅲ 1,14-카보네이트의 제조.

CH₂Cl₂ (2 ml)중의 13-데하이드로-14β-하이드록시-7,10-비스트리클로로아세틸-바카틴 Ⅲ (200 mg) 용액을 5분 안에 포스겐 (20 % 톨루엔, 3.6 ml, 20 당량) 용액과 CH₂Cl₂ (2 ml)의 피리딘 (1.12 ml, 20 당량) 에 첨가했다. 혼합물은 1시간동안 실온에서 교반시켰고 그때 과량의 포스겐을 NaHCO₃ 포화 용액 (3 ml)으로 소실시켰다. 혼합물을 CH₂Cl₂로 추출하고, 유기상은 NaHCO₃ 포화 용액과 NaCl 포화 용액으로 세척하고, Na₂SO₄에 의해 건조시킨다. 용매는 증발 제거시키고 잔사는 실리카 겔 (용리제 헥산/AcOEt 9:1) 상의 컬럼 크로마토그래피에 의해 카보네이트 175 mg (89 %)을 얻는다.

13-데하이드로-14β-하이드로-7,10-비스트리클로로아세틸-바카틴 Ⅲ 1,14-카보네이트. 흰 무정형 고체. IR (KBr) 1834, 1771, 1735, 1709, 1232, 1103, 1010, 854 cm-1

실시예 Ⅶ

14β-하이드록시-10-데아세틸바카틴 Ⅲ 1,14-카보네이트의 제조.

MeOH(8 ml)중의 13-데하이드로-14β-하이드록시-7,10-비스트리클로로아세틸-바카틴 Ⅲ 1,14-카보네이트 (500 mg)의 용액을 0 ℃의 얼음 수조에서 냉각시키고 고체 NaBH₄ (44 mg) 을 5분 안에 거기에 첨가했다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반, 0℃로 냉각시키고, 5분 안에 아세톤 (2 ml)에 첨가한 다음 온화한 진공하에서 농축시키고, AcOEt (10 ml)를 첨가하면서 셀라이트(Celite)로 여과한다. 투명한 용액을 NaCl 포화 용액으로 세척하고 Na₂SO₄로 건조시켰다. 용매를 증발 제거하고, 잔사 (C13 에피머스(epimers)의 4.5 : 1 혼합물)은 실리카 겔 컬럼 (용리제 헥산/AcOEt 1:1) 상의 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물 251 mg 과 탈보호된(deprotected) 탄산염의 13-에피머 (전체 88%) 55 mg 을 얻었다.

14β-하이드록시-10-데아세틸바카틴 Ⅲ 1,14-카보네이트. 흰 무정형의 고체. IR (KBr): 3520 (OH), 1834, 1709, 1232, 1103, 1010, 854 cm-1.

실시예 Ⅷ

13-(N-Boc-β-이소부틸세리닐)-14β-하이드록시바카틴 Ⅲ 1,14-카보네이트의 제조.

무수 테트라하이드로퓨란 3 ml 중의 14β-하이드록시-10-데아세틸바카틴 Ⅲ 1,14-카보네이트 (126 mg)의 용액에 CeCl₃.7H₂O 7.5 mg과 아세틱 언하이드리드 0.078 ml를 첨가했다. 반응 혼합물은 실내온도에서 5시간 동안 교반 하에 두었고, 그동안 반응 혼합물은 균질화 되었다. 얼음 1.5 g을 첨가하고, 1시간 동안 교반시켜 둔다. 유기 용매는 진공 하에서 증발 제거되고 잔사는 H₂O 5 ml 에 의하여 희석된다. 형성된 침전물을 여과하고 18 시간 동안의 흡입, 건조시킨다. 반응 생성물 ( 흰 분말, 135 mg)은 다음과 같은 특성을 갖는다.

14β-하이드록시바카틴 Ⅲ 1,14-카보네이트 (130 mg)을 디메틸포름아미드 (4 ml)에 녹이고 N-메틸이미다졸 (0.07 ml)을 첨가했다. 트리에틸클로로실란 (0.042 ml)을 1시간 안에 실내온도에서 강 교반 하의 용액에 첨가했다. 그 혼합물을 강 교반하의 H₂O 10 ml 에 흘려 넣었다. 현탁액은 4℃에 18 시간동안 남겨두고 형성된 흰 침전물은 걸러져 제거되고 H₂O (5 ml)과 헥산 (2 X 3 ml)로 세척했다. 얻어진 흰 고체 (150 mg)는 실시예 Ⅴ에서 제조된 화합물과 같은 분광분석의 특성 갖는다.

1 l 둥근바닥 플라스크에, 14β-하이드록시-7-테스-1,14-카보네이트-바카틴 Ⅲ 20 g 을 정밀히 무수 톨루엔 300 ml 과 함께 넣어두었다; 다음 CH₂Cl₂에 용해된 (4S, 5R)-N-복(Boc)-2-(2,4-디메톡시페닐)-4-이소부틸-1-옥사졸리딘-5-카보실산 10 g, N,N-디메틸아미노피리딘 (DMAP) 2 g 과 디시클로헥실카보디이미드 (DCC) 9.5 g을 첨가했다. 반응 혼합물은 3시간 동안 환류 시키고, 냉각시켜 침전된 요소 생성물(ureic product)을 제거한다. 모액은 NaHCO₃ 포화 용액으로 세척시켜 미반응 산을 제거한 다음, 희석된 하이드로클로릭 산으로 DMAP를 제거하고, 다시 NaHCO₃로 중화시킨다. 유기상은 다음단계에서 사용할 수 있는 생산물 41.5 g 을 획득하기위해 건조로 농축했다.

이 화합물 40 g은 두 단계를 거쳐, 즉 첫 TES와 다음 2,4-디메톡시벤즈알데하이드의 제거로 탈보호 됐다. 질소 하에서 아세토니트릴/피리딘 혼합물 (80:100) 100ml에 화합물 40 g을 용해시킨 다음, 그 혼합물을 0℃ 로 냉각한다. 그때 피리디니움 플루오리드 13 ml를 첨가하고 24시간 동안 교반 하에 둔다. 용액을 2 l의 물 안에 쏟고 생성물은 여과하고 진공 하에 건조시킨다.

잔사를 메틸렌 클로라이드 60 ml에 용해시키고 용액은 0℃에서 강 교반하에 두었다. 그리고 0.6N 메탄올 HCl 40 ml를 첨가했다. 반응 혼합물을 2시간 동안 교반 하에 남겨두고 메틸렌 클로라이드 150 ml로 희석한 다음 NaHCO₃ 용액으로 진탕시켜 pH 6-7로 조정했다. 유기상은 건조 농축하고 잔사는 아세톤/헥산으로 결정화하여 다음과 같은 물리-화학적 및 분광분석적 특성을 갖은 13-(N-복-β-이소부틸이소세리닐)-14β-하이드록시바카틴-1,14-카보네이트 16 g을 얻었다.

시성식 : C44H57NO17

성상 : 흰 분말.

녹는점 : 245 ℃

표 1 : 화학적 변화 (ppm) CDCl3 용액(200 MHz)중 1H-NMR 화학적 변화(ppm)

표 2: 화학적 변화 (ppm) CDCl3 용액(50.308 MHz)의 13C NMR 화학적 변화(ppm)

Claims

하기 공정으로 구성된 구조식 (Ⅰ)의 13-(N-Boc-β-이소부틸이소세리닐)-14β-하이드록시바카틴 Ⅲ 1,14-카보네이트의 제조방법.

(하 기)

a) 10-데아세틸바카틴 Ⅲ의 7- 와 10- 위치에서의 하이드록실의 보호공정:

상기식에서, R과 R₁ 은 같거나 다르며, 수소, C₁-C₁₀ 알킬 또는 아릴, C ₁-C₁₀ 알킬- 또는 아릴-카보닐, 트리클로로아세틸, C₁-C₄ 트리알킬실릴중에서 선택되고;

b) 13- 위치의 카보닐을 산화시키고, 14-위치에서 하이드록실화 시킨 유도체 를 얻기위한 2개 산화공정:

c) 1- 과 14- 위치의 근접한 하이드록실을 탄산화(carbonation)시켜 1,14-카보네이트 유도체 제조하는 공정:

d) 13- 위치의 카보닐의 환원공정:

e) 7- 과 10- 위치의 보호그룹의 제거공정:

f) 10- 위치의 하이드록실의 선택적인 아세틸화 공정:

g) 14-β-하이드록시-바카틴-1,14-카보네이트 Ⅲ을 7- 위치에 트리에틸실릴화된 유도체로의 변형공정(transformation):

h) (g) 단계의 화합물과 (4S,5S)-N-복(Boc)-2-(2,4-디메톡시페닐)-4-이소부 틸-1-옥사졸리딘-5-카르복실산의 반응공정:

i) (h) 단계의 화합물로부터 트리에틸실릴과 디메톡시벤질리딘 보호그룹의 제거공정:
청구항 1에 있어서, R = R₁ = 트리클로로아세틸인 제조방법.
청구항 1에 있어서, R 과 R₁ 은 다르고, 그 R 이 트리클로로아세틸이고 R₁ 이 아세틸, 또는 R 은 트리에틸 또는 트리메틸실릴이고 R₁ 이 아세틸인 제조방법.
청구항 1에 있어서, 7- 와 10- 위치의 하이드록실의 탈보호 단계 (a)는 트리에틸아민과 디메틸아미노피리딘의 총매량 존재하 메틸렌 클로라이드 중의 트리클로로아세틸 클로라이드로 수행되는 제조방법.
청구항 1에 있어서, 13- 위치의 하이드록실의 산화와 14- 위치의 하이드록실화 반응 단계 (b)는 아세토니트릴, 아세톤 또는 에틸 아세테이트/ 메틸렌 클로라이드 혼합물로부터 선택된 용매 중에서 이산화망간 또는 이산화비스무스 또는 오존으로 수행되는 제조방법.
청구항 1에 있어서, 1- 과 14- 위치의 하이드록실의 탄산화 단계 (c)는 피리딘 존재하 메틸렌 클로라이드/톨루엔 혼합물에서 포스겐으로 수행되는 제조방법.
청구항 1에 있어서, 13-하이드록시에 대한 환원 단계 (d)는 메탄올 중의 소디움 보로하이드리드로 수행되는 제조방법.
청구항 1에 있어서, 10- 위치의 하이드록실의 아세틸화 단계 (f)는 아세틸 클로라이드로 수행되는 제조방법.
청구항 8에 있어서, 실릴화 단계 (g)는 트리에틸클로로실란으로 수행되는 제조방법.
청구항 1에 있어서, 반응 단계 (h)는 응축제인 디시클로헥실카보디이미드 (DCC) 존재하, 무수 무극성 유기용매(dry apolar organic solvent)중에서 수행되는 제조방법.
청구항 1에 있어서, 단계 (i)에서 트리에틸실릴 보호 그룹이 질소하 아세토니트릴/피리딘 용액 중의 피리디니움 플루오리드로 제거되고, 디메톡시벤질리딘 보호 그룹이 메틸렌 클로라이드 용매 중에서 메탄올 HCl의 첨가로 제거되고 그 다음 NaHCO₃의 첨가로 제거되는 제조방법.