KR100568658B1 - 6,9-이치환 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]퓨린 - Google Patents

Abstract

본 발명은 화학식 Ⅰ의 화합물, 그의 제약학적으로 허용가능한 염, 광학 이성질체 또는 수화물에 관한 것이다.

<화학식 Ⅰ>

식중, R은 R2, R2NH- 또는 H₂N-R3-이고; R2는 C₁-C₈알킬 및 화학식 Ⅱ로 이루어진 군으로부터 선택되고;

<화학식 Ⅱ>

상기 식에서, Z는 페닐, 헤테로고리 및 시클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고, 각각의 R4는 독립적으로 수소 또는 C₁-C₄알킬이고, n은 정수 1 내지 8이며; C₁-C₄알킬 및 Z 각각은 동일하거나 상이할 수 있으며, Hal, OH 및 C₁-C ₄알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 1 내지 3 개의 치환체로 임의로 치환되고; R3는 C₁-C₈알킬렌이며, R1은 시클로펜틸 및 이소프로필로 이루어진 군으로부터 선택된다. 또한, 본 발명은 세포 주기 진행의 억제 방법을 제공한다. 더욱 구제적으로, 본 발명은 싸이클린 의존성 키나아제, 특히 cdk-2를 억제하는 방법을 제공한다. 또한 본 발명은 신경 세포에서 아팝토시스를 억제하고 신생물의 발달을 억제하는 방법을 제공한다. 추가로, 본 발명은 불활성 담체와 혼합된 분석 가능한 양의 화학식 Ⅰ의 화합물을 포함하는 조성물을 제공한다. 또한, 본 발명은 제약학적으로 허용되는 1종 이상의 담체 또는 부형제와 혼합된 유효 억제량의 화학식 Ⅰ의 화합물을 포함하는 제약 조성물을 제공한다.

싸이클린 의존성 키나아제, 세포 주기 진행, 세포 분열, 신생물

Description

6,9-이치환 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]퓨린{6,9-Disubstituted 2-[Trans-(4-Aminocyclohexyl)Amino]Purines}

본 발명은 6,9-이치환 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]퓨린 및 신생물 억제제로서 또는 신경 손상 및 신경 퇴행의 치료에 이를 사용하는 방법에 관한 것이다.

세포 분열은 정상 및 신생물성 세포 모두에서 규정된 단계에 의해 엄격하게 조절되는 사건이다. 왕성하게 분열하지 않는 정지기의 세포는 최종 분화되거나 일시적으로 분열이 억제된 세포로 G₀기에 머물러 있다. 제1기는 세포가 DNA 합성을 준비하는 제1 간극(G₁)기이다. 세포는 소위 제한 시점 또는 R 시점이라 불리우는 G₁기의 말기에 DNA 합성이 이루어지는 S기로 들어가게 된다. S기가 끝나면, 세포는 분열을 준비하는 두 번째 간극(G₂)기로 들어가고, 그 이후에 체세포 분열(또는 M기)이 일어난다.

세포 주기의 조절에 관한 초기 실험에서는 키나아제 활성을 지닌 헤테로-이량체인 "성숙 촉진 인자(Maturation Promoting Factor)"(MPF)라 불리우는 단백질의 존재를 밝혀내었다. 그 이후에 밝혀진 단백질과 이들의 기초가 되는 유전자를 비교하여 세포 분열 조절(cell division control, cdc) 유전자로 공지된 효모 유전자를 밝혀내었다. 추가의 실험에서, 몇몇 cdc 유전자가 키나아제를 코딩함을 알아내었고, 후에 이를 싸이클린-의존성 키나아제(cyclin-dependent kinase, cdk)라 명명하였다. 이러한 재분류의 결과 몇몇 세포 주기 단백질은 두 가지 이름을 갖게 되었는데, 예를 들어, cdk1은 cdc2라고도 불리운다. MPF의 키나아제 구성분은 현재 p34^cdc2로 확인되었고, MPF의 조절 서브유닛은 현재 싸이클린 B라 불리운다. 싸이클린은 처음에 세포 주기 동안에 그 농도가 변하고 체세포 분열시 특이적으로 분해되는 단백질로 확인되었다. 현재는 동물 싸이클린 A 내지 I 및 cdk 1 내지 8이 확인되었다. 싸이클린 B1 및 B2와 같은 싸이클린 및 cdk의 서브타입이 확인되면서 추가로 명명법이 복잡해졌다.

세포 조절에 관한 후속되는 연구에서, 싸이클린 및 싸이클린-의존성 키나아제(cdk)를 변화시키면 세포 분열 단계가 부분적으로 달성됨을 밝혀내었다. 싸이클린은 순차적으로 cdk를 조절하고, 단백질 키나아제 파트너와의 결합에 관련된 "싸이클린 박스(cyclin box)"라 불리우는 100 개 아미노산의 상동성 영역이 존재한다는 특징이 있다. cdk 단백질들은 서열 및 크기(35 내지 40kDa)가 매우 유사하며, 싸이클린 조절 서브유닛의 결합에 의해 활성화되는 단백질 키나아제이다. cdk 단백질은 약 300 아미노산 크기의 보존적 활성 부위를 포함하는데, 이는 모든 진핵생물 단백질 키나아제의 특징이다. 따라서, 싸이클린 및 cdk 단백질은 매우 보존적인 단백질 군인 것 같다.

각각의 싸이클린 및 cdk를 단리하면 세포 주기의 전이시에 각 성분의 역할 및 상호작용을 추가로 확인할 수 있다. 과량의 cdk가 세포 주기 단계에 유지된다. cdk는 싸이클린이 합성되어 촉매적 cdk 서브유닛에 결합하면 활성화되고, 그 결과 cdk 세린/트레오닌 키나아제 활성을 자극한다. 완전한 cdk의 활성화는, 싸이클린 H 및 cdk7로 구성된 cdk/싸이클린 복합체인 싸이클린-의존성를 키나아제를 활성화시키는 키나아제(cyclin-dependent kinase activating kinase, CAK)에 의한 T-루프에 위치하는 보존된 트레오닌 잔기의 인산화를 필요로 하며, 또한 약 32kDa의 세 번째 단백질을 필요로 한다.

cdk-싸이클린 복합체의 불활성화는 cdk의 ATP-결합 부위에서 트레오닌 및(또는) 타이로신의 인산화 또는 많은 내인성 저해 단백질 중 한 단백질의 결합으로 인해 일어날 수 있다.

D형 싸이클린은 G₁기에 cdk2, cdk4, cdk5 및 cdk6을 비롯한 몇 가지 상이한 cdk에 결합하기는 하지만, 가장 흔하기로는 cdk4 및 cdk6에 결합한다. D형 싸이클린은 외부 신호에 따라 세포 주기를 진행시키는 생장 인자 센서로서 작용하는 것으로 여겨진다. 싸이클린 E-cdk2의 복합체는 포유동물의 세포 주기에서 D형 싸이클린과 cdk의 복합체 형성 이후에 나타난다. 싸이클린 E의 합성은 엄격하게 조절되고, G₁기의 말기 및 S기의 초기에 나타난다. 싸이클린-cdk2의 복합체는 세포가 DNA를 복제하는데 필수적이다.

G₁기의 싸이클린인 싸이클린 D 및 싸이클린 E는 반감기가 약 20분인, 일시적으로 생성된 단백질이다. 짧은 반감기는 이 단백질의 C-말단 영역에 존재하는 PEST 서열로부터 초래되는 것으로 여겨지며, 이 단백질의 분해는 유비퀴틴화 경로에 의해 매개되는 것 같다.

G₂기의 싸이클린인 싸이클린 A 및 싸이클린 B는 간기 동안 안정한 상태로 유지되고, 체세포 분열시 유비퀴틴화 경로를 통해 특이적으로 분해된다. 싸이클린 A 및 싸이클린 B2 모두 그들의 cdk 파트너[싸이클린 A-cdk2 및 싸이클린 A/B-cdk1(cdc2)]와 복합체를 형성했을 때에만 분해되는 것 같다. 그러나, 싸이클린 B1의 분해는 중기가 끝나는 시기에 체세포 분열 장치의 구조적 완전성과 관련되어 있다. 방추체가 부정확하게 모아지거나 염색체가 부정확하게 배열되는 경우, 싸이클린 B1의 분해가 억제된다.

105kDa의 핵 인단백질인 망막아세포종 단백질(Retinoblastoma protein, Rb)은 G₁기에 cdk-2, cdk-4 및 cdk6의 싸이클린-cdk 복합체에 대한 기질이며, 세심하게 조화를 이룬 인산화 및 탈인산화를 거쳐 세포 주기의 주요 검사점(check point) 제어 기구 중 하나로 작용한다. G₀ 및 G₁기에, Rb는 저인산화 상태로 존재한다. 세포가 G₁기의 말기로 진행되면, Rb는 D형 싸이클린 복합체에 의해 과인산화되고, 이는 Rb를 불활성화시켜 세포를 S기로 유도하여, 세포 주기의 진행 및 세포 분열을 초래한다. G₂기에도 Rb는 과인산화 상태로 남아있다. M기에 Rb는 탈인산화되어 저인산화 상태로 돌아간다. Rb 단백질의 인산화는 단백질의 결합성을 변화시킨다. 즉, Rb는 저인산화 상태에서 E2F와 같은 특이적 전사 인자에 결합하여 상기 전사인자를 격리시키는데, 이 결합은 G₁기로부터 다음 주기가 진행되어 나가는 것을 억제한다. 일단 cdk가 Rb를 과인산화시키면 전사 인자가 방출되어 S기의 진행에 필수적인 유전자, 예를 들어, 티미딘 키나아제 유전자, myc, myb, 디하이드로폴레이트 환원효소 유전자 및 DNA 중합효소-α 유전자의 전사를 활성화시킨다.

또한, 싸이클린-CDK의 복합체 위치는 세포 주기 경로에서 각 복합체의 역할을 시사해준다. 핵의 싸이클린 A 및 E는 p107 및 p130에 결합하는데, 이는 이 단백질들이 핵에 존재하기 때문일 수 있다. 포유동물의 싸이클린 B1은 G₂기에 세포질에 축적되고, 체세포 분열 초기에 핵으로 이동한다. 싸이클린 B는 방추체 장치, 특히 방추체 캡과 결합되어 있고, 싸이클린 B-cdc2 키나아제는 체세포 분열 장치의 구성분을 인산화시켜 방추체를 형성하는 것과 관련될 수 있는 것으로 여겨진다. 또한, 싸이클린 B1은 중기 체세포 분열 장치를 정확하게 모아주는 피드백 기작의 일부분이다. 인간의 싸이클린 B2는 거의 대부분 세포막 구획 및 골지체에 결합되어 있다. 싸이클린 B2-cdc2는 세포의 체세포 분열시 골지체의 해체와 관련되어 있다.

cdc2-싸이클린 B 키나아제는 주요 체세포 분열 인자로서, 매우 보존적이며 진핵생물 세포에서 세포 주기의 전이와 관련되어 있을 것으로 여겨진다. 히스톤 H1은 cdc2-싸이클린 B의 기질이며, 체세포 분열시 특정 위치에서 선택적으로 인산화되는데, 이는 염색질 응축에 있어 중요한 것으로 여겨진다. 또한, cdc2-싸이클린 B 복합체는 핵 라미나의 분해를 담당하는 라민을 인산화시킨다. 핵 라미나는 체세포 분열시 과인산화되는 라민 서브유닛의 중합체로 이루어지고, 라민의 인산화는 그를 해체시킨다. 라민은 중간체 필라멘트 단백질 군의 일부이고, cdc2-싸이클린 B 복합체는 체세포 분열시 세포질 중간체 필라멘트 서브유닛, 비멘틴 및 데스민의 인산화 부위를 인산화시킨다. 따라서, cdc2-싸이클린 B 복합체는 체세포 분열시 세포 구성물을 재구성하는 것과 관련되어 있다.

추가로, cdc2-싸이클린 B는 액틴 및 칼모둘린에 결합하고 액토미오신 ATP아제 활성을 억제하는 83kDa의 단백질인 비근육성 칼데스몬의 인산화를 통해 미세 필라멘트를 재구성하는 것과 관련되어 있다. 칼데스몬은 체세포 분열시 cdc2-싸이클린 B에 의해 인산화되고, 이는 액틴에 대한 친화도를 약화시킨 결과 미세 필라멘트로부터 분리된다.

cdc2-싸이클린 B는 수축 고리에서 미오신을 인산화하여 액토미오신 필라멘트 조절에 관여하는데, 이는 세포를 두 개로 나눈다(세포질 분열). 미오신 Ⅱ 조절 경쇄(myosin Ⅱ regulatory light chain, MLC)는 중기에 N-말단에 존재하는 두 주요 부위에서 인산화된다. 일단 인산화가 되면 미오신은 액틴과 상호작용할 수 없다. 이 두 부위는 후기에 탈인산화된다.

또한, cdc2-싸이클린 B는 체세포 분열시 세포막 구획을 재구성하는데 중요한 역할을 한다. 예를 들어, cdc2-싸이클린 B는 rab1Ap 및 rab4p를 인산화한다. rab4p가 cdc2-싸이클린 B에 의해 인산화되는 경우, 세포막 구획으로부터 분리된다.

대부분의 전사는 체세포 분열시 억제된다. 또한, cdc2-싸이클린 B는 TFⅢB의 인산화를 통해 중합효소 Ⅲ에 의해 매개되는 전사를 저해한다. 중합효소 Ⅰ, 중합효소 Ⅱ 및 중합효소 Ⅲ에 의해 매개되는 전사는 TATA-결합 단백질(TBA)와 같은 몇몇 공통적인 인자를 공유하며, cdc2-싸이클린 B는 체세포 분열시 모든 형태의 전사를 저해하는데 관련되어 있을 수 있다.

세포주기 분열을 유도하는데 있어 싸이클린과 cdk의 복합체의 중요성을 고려하면, 이 복합체는 엄격하게 조절되는 기작하에 있어야 한다. 최초의 발견 이래로, 싸이클린 및 cdk는 다른 전사 인자 및 광범위한 세포 기작에 관련된 단백질과 상호작용하는 것으로 밝혀졌다. cdk7는 전사인자 ⅡH(TFⅡH)의 구성분으로 밝혀졌고, 이는 RNA 중합효소 Ⅱ의 C-말단 도메인(CTD) 키나아제 활성을 갖는다. 최근에, 싸이클린 C의 파트너인 cdk8도 RNA 중합효소 Ⅱ의 CTD를 인산화시키는 것으로 밝혀졌으나, 이는 CAK 활성은 나타내지 않는다. 따라서, cdk가 세포 주기외에 광범위한 세포 기능에 관여한다는 것이 명백하다. CDK-저해 단백질(CDI)은 특이적 싸이클린-CDK 복합체, 즉 단량체 CDK에 결합하여 이를 불활성화시키는 작은 단백질이다. 이 저해제는 서열 및 기능적 유사성을 기초로 두 가지 부류로 구분할 수 있다. INK4류로는 cdk4 및 cdk6에 특이적으로 결합하는 p15^INK4B, p16^INK4, p18 및 p19가 있다. p16^INK4 및 p15^INK4B는 네 개의 안키린(ankyrin) 반복 서열을 포함하고, 서로 상당한 상동성을 공유할 뿐만 아니라 9p12 유전자좌상에서 인접한 유전자에 의해 코딩된다.

높은 세포내 농도의 p16은 p16이 싸이클린 D-cdk4 복합체 및 싸이클린 D-cdk6 복합체에 결합하기 때문에 cdk4를 불활성화한다. p16^INK4(MTS1) 유전자는 많은 종양 세포주 및 몇몇 원발성 종양에서 재배열, 결실 또는 돌연변이화되기 때문에, 잠재적 종약 억제 유전자로서 인식된다. 유전성 흑색종의 연구에서, 약 절반이 p16^INK4 유전자에 생식세포 돌연변이를 가지고 있었다. Rb는 p16^INK4의 억제자이다. 돌연변이 또는 바이러스 항원에 의한 세포성 Rb의 불활성화는 p16^INK4의 양 증가와 관련되어 있다. p16^INK4, p15^INK4B 및 p18은 cdk4 및 cdk6와 싸이클린 D의 결합을 저해한다.

CDI의 두 번째 부류는 p21^Cip1,WAF-1, p27^Kip1 및 p57^Kip2를 포함하는 Kip/Cip류이다. p27^Kip1은 증식하는 세포에서 잠복된 또는 차폐된 형태로 존재한다. p27^Kip1은 자극이 되면 차폐물이 해체되고 싸이클린-CDK4/6 복합체에 결합하여 CDK를 저해한다. Kip/Cip류 단백질은 싸이클린-cdk 복합체에 결합하는 지역인 N-말단에 높은 상동성을 가지고 있다. Kip/Cip류 단백질은 M기 보다 G₁기 및 S기에 관련된 싸이클린-cdk 복합체에 우선적으로 결합하여 이를 저해한다.

p21(WAF1, Cip1 및 Sdi1로도 공지됨)은 p53에 의해 유도되며, 싸이클린 A, D1 및 E를 포함하는 몇 가지 싸이클린-CDK2 복합체에서 DNA 중합효소 δ의 서브유닛인 증식 세포 핵 항원(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)과 3차 복합체를 형성한다. 생장하는 세포, 활동이 중지된 세포 및 노화된 세포에서 p21^WAF-1의 발현은 S기로 들어가는 것에 대한 음성 조절자로서 작용한다. p21^WAF-1의 mRNA는 세 포가 노화되거나 세포의 활동이 중지될 때와 활동이 중지된 세포의 혈청 자극 이후에 상승 조절되고, 세포가 S기로 들어갈 때 감소한다. p21은 싸이클린 E-cdk2, 싸이클린 A-cdk2, 싸이클린 D1-cdk4, 싸이클린 D2-cdk4 및 싸이클린 D3-cdk4 복합체를 불활성화시킨다.

다양한 인간 종양에 대한 유전적 분석으로 상당히 많은 수의 변형된 세포 주기 단백질이 밝혀졌고, 이러한 변이는 비정상적인 세포 주기를 유발하는 것으로 여겨진다. 예를 들어, 싸이클린 D1은 다양한 인간 종양에서 과다 발현되거나 조절되지 않는 bcl-1/PRAD1 원종양 유전자이다. 염색체 11q13에 위치한 싸이클린 D1/CCND1 유전자는 주로 유방암 및 비-소세포 폐암과 같은 많은 암에서 증폭된다. 이는 싸이클린 D1의 과다 발현이 특이적 11q13 앰플리콘을 갖는 종양에서 나타나는 공통적 특징이라는 관찰과 일관성이 있다. p16의 유전자는 다수의 종양 세포주 및 몇몇 원발성 종양에서 재배열, 결실 또는 돌연변이화된다. cdk4의 돌연변이, 구체적으로 Arg24Cys 돌연변이가 서로 무관한 두 유전성 흑색종 부류에서 확인되었다. 이 돌연변이는 흑색종 환자 11명 중 11명 모두에서 발견되었고, 비감염자 17명 중 2명에서 발견되었으며, 배우자 5명 중에서는 발견되지 않았다(문헌 [Zou, L., et al., Nature Genetics 12 1996:97-99] 참조). 이 돌연변이는 cdk4의 p16^INK4a 결합 도메인에 특이적 효과를 나타내지만, 싸이클린 D에 결합하는 능력 및 기능성 키나아제를 형성하는 능력에는 영향을 끼치지 않는다. 이 돌연변이의 결과 싸이클린 D/cdk4 복합체는 p16^INK4a에 의한 정상적인 생리적 저해에 내성을 나타낸다. 다른 연구 결과, 가족 특유의 흑색종 혈연관계의 절반 정도가 p16^INK4a 유전자를 포함하는 염색체 9q21 영역에 연관되어 있음을 밝혀내었다. 확인된 p16^INK4a 돌연변이의 유형으로는 넌센스 돌연변이, 스플라이스 공여체(splice donor) 돌연변이, p16^INK4a의 전사를 억제하는 미확인 돌연변이, 및 cdk4 또는 cdk6에 결합할 수 없는 3 미스센스(missense) 돌연변이가 있다. 유전자 증폭의 결과로서 cdk4의 과다 발현은 32가지 신경교종 세포주의 연구에서 확인되었다(문헌 [He, J., et al., Cancer Res. 54:5804-5807, 1994] 참조). 이 변화는 손상되지 않은 p16 유전자를 갖는 10명의 환자 경우에서 관찰되었다. 신경교종 세포주의 유전자적 연구 결과, 32가지 신경교종 세포주 중 24가지가 또다른 유전적 변화 두 가지 중 하나를 나타내는 것으로 밝혀졌는데, 각각의 유전적 변화는 증가된 cdk4 키나아제 활성이 신경교종 종양의 발생에 있어 중요함을 의미한다. cdk4는 12번 염색체의 긴 암(arm) 부위에서 지도가 작성되고, SAS 및 MDM2와 같은 다른 관련 유전자를 포함하는 앰플리콘의 구성분으로서의 증폭으로 인하여 특정 종양 세포에서 과다 발현되는 것으로 알려졌다. 이 모든 조건은 cdk4의 활성화를 초래한다. 또한, 백혈병 세포주 및 충실성 종양 세포주에서의 싸이클린 B1 및 E의 과다 발현 뿐만 아니라 유방암에서 싸이클린 E 발현의 변화된 패턴에 대해 보고되어 왔다.

세포의 과다 증식은 무수한 질병 상태에서 일어난다. 가장 흔한 과다 증식성 질환은, 통상 그러한 과다 증식이 시작된 조직의 원천에 따라 명명되는 신생물이다. 신생물이란 자신이 생겨난 조직과 다소 유사하지만, 생리적 기능이 없고 양 성, 잠재적 악성 또는 악성인, 새로 생장되는 동물 또는 식물 조직을 의미한다. 신생물은 정상 조절 능력의 상실 때문에 생장 조절이 불가능해져서 발생한다. 신생물성 세포는 분화 능력이 결여될 수 있고, 국소 조직을 침범하거나 전이시키는 능력을 요한다. 신생물은 임의의 연령에 어떤 기관의 조직에서도 발생할 수 있다. 신생물의 발생율 및 폐사율은 일반적으로 연령에 따라 증가하고, 어떤 신생물은 60 내지 80세에(예를 들어, 전립선암, 위암 및 결장암) 최대로 발생한다. 그러나, 다른 신생물은 출생시부터 10세까지(예를 들어, 급성 림프모세포성 백혈병) 최대로 발생한다. 음식물, 발암물질에의 노출(특히, 흡연) 및 가족의 소양도 특정 신생물의 발생에 영향을 끼친다.

신생물성 세포는 분화 능력의 상실, 증가된 침해성 및 감소된 약물 감응성을 비롯하여 많은 중요한 면에서 정상 세포와 다르다. 다른 중요한 차이점은 이 세포에서 정상 세포의 조절 기작의 상실(이 기작을 불활성화시키거나, 우회 또는 간과하여 신생물성 세포가 정상 조절 기작과 무관하게 증식하게 됨) 때문인 것으로 여겨지는 무제한적 세포의 증식이다. 신생물은 비정상적인 조직 덩어리로서, 신생물의 생장은 정상 조직의 생장을 초과하거나 부조화를 일으키며, 변화를 야기하는 자극을 중단시킨 후에도 이전과 동일하게 과량의 덩어리 형태로 존재한다.

신생물은 양성 또는 악성으로 분류된다. 양성 신생물은 느린 국소 생장을 나타내고, 통상 섬유성 연결 조직 캡슐에 의한 캡슐화로 인해 활동 범위가 한정된다. 양성 신생물은 유기체의 죽음을 초래하지 않는 반면에, 처리되지 않은 악성 신생물은 유기체를 죽일 가능성이 매우 높다. 악성 신생물은 일반적으로 캡슐화되 지 않고, 훨씬 더 빠른 생장 속도를 나타낸다. 악성 신생물은 종종 주변을 둘러싸고 있는 조직 및 혈관을 침해하고, 멀리 떨어진 신체 부위에 퍼진다. 악성 신생물을 총칭하여 "암" 또는 "종양"이라 표현하고, 그 중 종양이란 용어는 종창을 나타낸다.

골수증식성 질환은 하나 이상의 조혈 세포주 또는 연결 조직 요소에 의해 비정상적으로 증식하는 특징이 있는 질환의 군이다. 진성적혈구증가증(원발성 적혈구 증가증, 바퀘즈(Vaquez') 질환), 골수섬유증(원인불명의 골수화생증), 만성 골수성 백혈병 및 원발성(특발성) 혈소판증가증이라는 네 가지 질환이 통상 골수증식성 질환에 포함된다. 또한, 급성 백혈병(특히, 적백혈병) 및 발작성 야간혈색소뇨증도 골수증식성 질환으로 분류된다. 이 질환 각각은 주된 특징 및 증식 부위에 따라 구별된다. 각 질환은 상이한 세포의 증식으로부터 유도된 결과이기는 하지만, 적혈구, 골수, 및 골수의 거핵세포성 전구체의 비정상적 증식을 다양한 정도로 유발시키는, 다능성 간세포 수준에서 발생하는 클론성 증식에 의해 이 질병이 유발되는 것으로 알려져왔다. 모든 골수증식성 질환은 급성 백혈병으로 종결되는 경향이 있다.

백혈병은 조혈 조직의 악성 신생물이다. 인간의 백혈병을 유발하는데 두 가지 이상의 바이러스가 관련되어 있다. 엡스타인바 바이러스(Epstein-Barr vitrus)는 버키트 림프종에 관련되어 있고, 인간 T-세포 림프영양성 바이러스(인간 급성 백혈병 및 림프종 바이러스(HTLV-1)라고도 불리움)는 특정 T 세포 백혈병 및 림프종에 관련되어 있다. 벤젠 및 특정 신생물 억제제와 같은 화학 물질에 장시간 노 출되거나, 또는 전리 방사선, 유전적 소양(예를 들어, 다운 증후군) 및 몇몇 가족성 질환(예를 들어, 판코니 빈혈)에 노출되면 백혈병에 걸릴 소양을 갖게 된다.

백혈병의 발달은 뒤이은 두 단계 이상의 증식 및 클론 확장을 거치는 단일 세포 주기를 통해 유발된다. 현재 백혈병은 세포의 성숙도에 따라 분류되고 있다. 급성 백혈병은 주로 분화되지 않은 세포 군집이고, 만성 백혈병은 더 성숙한 세포 형태이다. 급성 백혈병은 추가로 림프모세포성(ALL, 급성 림프구성 백혈병이라고도 공지됨) 유형 및 골수성(AML, 급성 골수세포성 백혈병, 급성 골수성 백혈병, 급성 골수모세포성 백혈병 또는 급성 골수단일모세포성 백혈병이라고도 공지됨) 유형으로 분류된다. 이들은 프랑스-미국-영국(FAB) 분류법에 따른 형태학적 및 세포화학적 외양에 의해, 또는 분화의 유형 및 정도에 따라 추가로 분류될 수 있다. 만성 백혈병은 림프구성(CLL) 또는 골수성(CML) 백혈병으로 분류된다. CLL은 혈액, 골수 및 림프성 기관에서 성숙한 림프구가 나타나는 특징이 있다. CML은 혈액, 골수, 간, 비장 및 다른 기관에서 주로 모든 분화 단계의 과립구 세포가 나타나는 특징이 있다.

골수이형성 증후군(MDS)은 정상 또는 과세포형 골수가 빈혈 및 골수성 조혈 이상과 연관된 클론 증식성 질병이라는 특징이 있다. 증식할 수 있는 조혈세포는 적혈구, 골수 및 거핵세포성 형태를 포함한다. MDS는 전백혈병, 불응성 빈혈, Ph 염색체-음성 만성 골수성 백혈병, 만성 골수단구성 백혈병 및 원인불명의 골수화생증으로 공지된, 비교적 새로운 명칭의 질병 군이다. FAB 시스템을 이용하여 골수섬유증을 추가로 분류할 수 있다.

림프종은 세망내피세포 및 림프계에서 발생되는 신생물의 이질성 군이다. 림프종의 주요 유형으로는 호지킨병 및 비-호지킨 림프종 뿐만 아니라 드물게는 버키트 림프종 및 균상 식육종이 있다. 호지킨병은 원인불명의 림프세망 증식을 수반하는 만성 질환으로, 국소 형태 또는 분산된 형태로 나타날 수 있으며, 네 가지 조직병리학적 프로파일에 따라 추가로 분류될 수 있다. 통상 비-호지킨 림프종은 신체 전체에 분산되어 나타나는 것으로서 림프세포의 신생물성 증식으로 이루어진 질환의 이질성 군이다. 림프육종 및 세망세포 육종이라는 용어는 현재 기원이 되는 세포 및 질환의 생태를 반영하는 용어로 바뀌어가고 있다. 라파포트(Rappaport) 분류법은 조직병리학, 종양의 분화 정도 및 생장 패턴(확산된 형태인지 또는 결절성 형태인지)을 기초로하는 분류법이다. 룩스(Lukes) 및 콜린스(Collins) 분류법은 기원이 되는 세포를 기초로 하는 분류법이다. 구체적으로는 질환의 기원이 T 세포인지 또는 B 세포인지, 조직구(또는 단핵구) 기원인지 또는 분류할 수 없는 것인지를 기초로 하는 분류법이다. 미국 국립 암협회(National Cancer Institute)의 국제 패널 워킹 포뮬레이션(International Panel Working Formulation)에서는 비-호지킨 림프종을 이 분류법으로 분류한다.

버키트 림프종은 거의 분화되지 않은 B 세포 림프종으로서 림프절 및 세망내피세포계가 아닌 다른 부위와 연관되는 경향이 있다. 버키트 림프종은 다른 림프종과는 달리 특이적인 지리학적 분포를 가지며, 이는 미확인 병원 매개 곤충 및 감염성 작용제 존재의 가능성을 시사한다. 그 증거로 허피스와 유사한 엡스타인바 바이러스가 있다.

균상 식육종은 일차적으로 피부에 영향을 끼치고, 때로는 내부 기관에 영향 을 끼치는, 흔하지 않은 만성 T 세포 림프종이다.

형질세포 질환(PCD), 또는 단일클론 감마병증은 정상적으로 면역글로불린(Ig)를 합성하는 세포의 클론 하나가 불균형적으로 증식하고, 혈청 또는 소변에 구조적 및 전기영동적으로 균질한 IG 또는 폴리펩티드 서브유닛이 존재함을 특징으로 하는 질환이다. 이 질환은 일차적으로 무증후성이지만 명백한 신생물(예를 들어, 다발성 골수종)로 진행된다. 이 질환은 특정 Ig(IgG, IgM, IgA, IgD 또는 IgE)를 생성하는 하나의 클론이 불균형적으로 증식하는 것으로부터 초래한다.

다발성 골수종(형질세포 골수종 또는 골수종증이라고도 공지됨)은 골수 형질 세포에 종양이 존재하고, 손상되지 않은 단일클론 Ig(IgG, IgA, IgD 또는 IgE) 또는 벤스 존스(Bence Jones) 단백질(유리된 단일클론 κ 또는 λ 경쇄임)이 과다 생성됨을 특징으로 하는 진행성 신생물성 질환이다. 광범성 골다공증 또는 불연속 골용해성 손상은 악성 형질 세포에서 분비되는 확장성 형질 세포 종양 또는 파골세포-활성 인자의 교체로 인해 발생한다.

거대글로불린혈증, 또는 원발성 또는 발데스트롬(Waldestrom's) 거대글로불린혈증은 IgM을 정상적으로 합성 및 분비하는 B 세포와 관련된 형질세포 질환이다. 거대글로불린혈증은 골수종 및 다른 PCD와는 구별되고, 림프종성 질환과 유사하다. 많은 환자들은 고점도(hyperviscosity), 피로, 쇠약, 피부 출혈 및 점막 출혈 등의 증상을 나타낸다.

중쇄 질환은 동질성 γ, α, μ 및 δ Ig 중쇄를 과다 생성하는 것을 특징으로 하는 신생물성 형질세포 질환이다. 이 질환에 걸리면 불완전한 단일클론 Ig가 생성된다. 임상 사진을 보면 다발성 골수종보다는 림프종과 더 유사하다.

비장 기능 항진증은 순환성 혈구감소증이 비종대와 함께 나타나는 증후군이다. 비장 기능 항진증 환자는 비장 절제술이 아니라, 근본적인 질환의 치료를 필요로한다. 림프 증식성 질환 및 골수 증식성 질환은 비장 기능 항진증 하나만을 유발하지는 않지만 어느 정도로는 상기 질환을 유발한다. 비장 기능 항진증을 유발하는 골수증식성 질환으로는 진성 적혈구 증가증, 골수 화생증을 수반하는 골수섬유증, 만성 골수성 백혈병 및 특발성 혈소판증가증이 있다. 만성 림프구성 백혈병 및 림프종(호지킨병 포함)은 비장 기능 항진증을 유발할 수 있는 특정 림프증식성 질환이다.

폐 조직은 양성 및 악성 원발성 종양이 모두 생성되는 부위일 뿐만 아니라 암이 다양한 기관 및 조직으로 전이되는 부위이다. 남자의 경우 약 90% 이상, 여자의 경우 약 70%가 흡연으로 인해 폐암이 발생한다. 또한, 석면, 방사선, 비소, 크롬산염, 니켈, 클로로메틸 에테르, 독가스 및 코크스 제조 가마의 배출물과 같은 직업성 약품에 노출되어도 폐암에 걸리게된다. 가장 흔한 유형의 폐암은 편평세포 암종, 소세포 및 대세포 암종, 및 선암종이다.

위암의 약 95%가 암종이고, 이 외에도 림프종 및 평활근육종이 있다. 위암종은 육안적 외형에 따라 분류한다. 즉, 외형이 밀려나온 형태인지, 관통하는 형태(종양이 뾰족하고, 경계선이 뚜렷하며, 궤양이 생기게 할 수 있음)인지, 또는 서로 다른 두 유형의 특성이 퍼지거나 혼합된 형태인지에 따라 분류한다.

췌장암은 대부분이 선포세포보다는 관세포에서 유발된 선암종인 외분비 종양 이거나, 또는 인슐린종을 포함하는 내분비 종양일 수 있다. 비-β형 세포와 관련되었거나 십이지장 벽에 생기는 가스트린-생성 췌장 종양은 가스트린 과다증 징후가 나타나는 졸링거-엘리슨(Zollinger-Ellison) 증후군을 유발할 수 있다. 종종 다른 내분비 기형(특히, 부갑상선, 또는 뇌하수체 및 부신의 기형)이 다발성 내분비 신생물(MEN)과 같은 다분비선 질환을 유발하기도 한다. 비-β형 도세포 종양은 장기간에 걸친 광범위한 수성 설사를 특징으로 하는 VIP종 증후군으로 공지된 질환을 초래할 수 있다.

장의 신생물로는 소장 종양, 대장 종양, 및 결장 및 직장암이 있다. 양성 소장 종양은 평활근종, 지방종, 신경섬유종 및 섬유종을 비롯한 공장(空腸) 및 회장 신생물로부터 유발될 수 있다. 선암과 같은 악성 소장 종양은 흔하게 나타나지 않고, 통상 공장 주변에서 유발된다. 소장의 크론병(Crohn's disease) 환자는 결장의 크론병을 앓고 있는 환자보다 더 선암에 걸리기 쉽다. 종양은 크론병 환자의장의 우회 루프 또는 염증 루프의 말초에 나타나는 경향이 있다. 통상, 카르시노이드 종양은 소장(특히, 회장)에서 발생하고, 절반의 경우에 다발성 종양이 존재한다. 이식 받은 사람 및 AIDS 환자에서 빈번히 발생하는 카포시 육종(Kaposi's sarcoma)은 약 절반의 경우가 위장과 관련되어 있다. 위장관 어디에서나 손상이 발생할 수 있지만, 통상 위, 소장 또는 말초 결장에서 발견된다.

대장의 종양에는 결장 및 직장의 용종(茸腫)이 포함된다. 용종은 장의 벽이 루멘으로 돌출하여 생겨난 조직 덩어리이다. 용종은 조직학을 기초로 하여, 관상선암, 관상융모성 선암, 융모성 선암, 증식성 용종, 과오종, 연소성 용종, 용종형 암종, 위용종(僞茸腫), 지방종, 평활근종 및 더욱 희귀한 종양으로 분류된다.

또한, 항문직장에서도 악성 종양이 발생한다. 이 종양은 직장암 및 항문암의 3 내지 5%를 차지하는 항문직장의 표피양(편평세포) 암종이다.

서방 국가에서는 결장암 및 직장암이 매년 증가는 암으로서 폐암 다음으로 두 번째로 많이 발생한다. 미국에서는 1989년에 약 75,000명의 사람이 이 암으로 죽었으며, 이 암의 약 70%가 직장 및 S상 결장에서 발생하였고, 95%가 선암이었다.

간의 신생물로는 비교적 흔하지만 종종 검출되지 않는 양성 신생물 및 악성 신생물이 있다. 양성 간 신생물에서 가장 중요한 것은 간세포성 선암이다. 무증후성의 작은 혈관종이 성인의 1 내지 5%에서 발생한다. 또한, 담관선암 및 다른 간엽 신생물도 발생하지만, 상대적으로 드물게 발생한다. 간의 악성 신생물은 가장 흔하게 나타나는 간암의 형태이고, 간은 통상 폐암, 유방암, 결장암, 췌장암 및 위 1차 종양의 혈액을 통한 전이가 빈번히 나타나는 부위이다. 아프리카 및 남부 아시아의 특정 지역에서는 간암의 발생이 만성 B형 간염 바이러스와 연관되어 있다. 북미, 유럽 및 잘 알려지지 않은 다른 지역에서는, 대부분의 환자에 잠재적인 경변증이 있다. 섬유적층판 암종(fibrolamellar carcinoma)은 유연관계가 낮은 간암의 변종으로서 독특한 형태(섬유 조직의 적층에 걸린 악성 간세포 형태)를 이룬다. 통상, 섬유적층판 암종은 상대적으로 젊은 성인에게 발생하고, 미리 존재하는 경변증, 만성 B형 간염 바이러스 또는 다른 공지된 위험 인자가 없다. 간의 다른 원발성 악성 종양으로는 담관암종(간장 내부의 담증성 상피 조직에서 발생하는 종양), 간모세포종(유아에게 가장 흔한 암 중 하나임) 및 혈관육종(염화비닐에 산업 상 노출되는 것과 관련됨)이 있다. 백혈병 및 관련 질환은 간세포 조직과 관련될 수 있고, 비정상 세포의 침투 때문에 발병한다고 생각된다.

다발성 내분비선 종양(MEN) 증후군은 여러 가지 내분비선에 선암성 증식 및 악성 종양이 형성되는 유전적으로 뚜렷한 가족성 질환이다. 3가지 다른 유형의 증후군이 확인되어 있다. 유형 Ⅰ(MEN-Ⅰ)은 부갑상선, 췌도 및 뇌하수체에 종양이 형성되는 것을 특징으로 한다. 유형 Ⅱ(MEN-Ⅱ)는 갑상선의 수질성 암종, 크롬친화성 종양 및 부갑상선 기능 항진증을 유발하는 것을 특징으로 한다. 유형 Ⅲ(MEN-Ⅲ)는 다발성 점막 신경종, 갑상선의 수질성 암종 및 크롬친화성 종양을 유발하는 것을 특징으로 한다.

통상, 카르시노이드 증후군은 세로토닌, 브라디키닌, 히스타민, 프로스타글란딘 및 폴리펩티드 호르몬을 비롯하여 과량의 혈관 작용성 물질을 분비하는 전이성 장 카르시노이드 종양에 의해 유발된다. 비정상적 농도의 이 물질에 의해 다양한 증상이 유발되는데, 종종 발작성 피부 홍조, 청색증, 복부 경련, 설사 및 심장 판막 질환이 유발된다.

뼈 및 관절의 신생물은 양성 또는 악성이다. 뼈의 양성 종양에는, 10 내지 20세의 아동에게 가장 흔한 골연골종(골연골성 외골증), 10 내지 30세의 아동 및 젊은 성인에게 가장 흔한 양성 연골종(뼈 내부에 위치), 드물지만 10세 내지 20세의 아동에게 가장 흔한 유골 골종, 거대세포 종양 및 섬유종성 손상이 포함된다. 뼈의 원발성 악성 종양에는, 두 번째로 흔한 원발성 뼈 종양인 골원성 육종(골육종), 섬유 육종, 악성 섬유성 조직구종, 연골 육종, 간엽 연골 육종, 유잉(Ewing's) 종양(유잉 육종), 악성 뼈 림프종, 다발성 골수종 및 악성 거대세포 종양이 포함된다.

다른 조직의 원발암은 뼈 조직으로 전이될 수 있다. 가장 흔한 암으로는 유방암, 폐암, 전립선암, 신장암 및 갑상선암이 있다.

중추 신경계(CNS) 신생물은 통상 기관에 따라 분류한다. 원발성 두개내 신생물은 (1)두개골 종양, (2)뇌막 종양, (3)두개골 신경 종양, (4)신경교 및 뇌실막 종양, (5)뇌하수체 또는 송과선 종양 및 (6)선천적 기원의 종양이라는 6가지로 세분된다. 두개골 신생물은 골종, 혈관종, 육아종, 황색종 및 변형성 골염을 포함한다. 뇌막 신생물은 수막종, 육종 및 신경교종증을 포함한다. 두개골 신경의 신생물은 시신경의 신경교종 및 8번째와 5번째 두개골 신경의 슈반종을 포함한다. 신경교 신생물은 신경교종 및 뇌실막 세포종을 포함한다. 뇌하수체 또는 송과체 신생물은 뇌하수체선암 및 송과선암을 포함한다. 선천적 기원의 신생물은 두개인두종, 척삭종, 배아종, 기형종, 유피낭종, 혈관종 및 혈과모세포종을 포함한다.

척수 신생물은 척수 실질조직, 뿌리, 뇌막 또는 척추에서 유발되는, 척수 또는 척수 뿌리를 압박하는 장해이다. 원발성 척수 신생물은 두개내 종양보다 덜 흔하게 발생한다. 전이성 장해는 흔히 발생하고, 폐암, 유방암, 신장암, 갑상선암 또는 림프종으로부터 유발될 수 있다.

비뇨생식기 신생물은 연령 및 성에 무관하게 발생하지만, 남성의 경우에는 암의 약 30%를 차지하고 여성의 경우에는 약 4%를 차지한다. 전립선암은 50세가 넘은 남성에서 매우 전이가 잘된다. 전립선암은 호르몬과 관련되어 있다고 생각되며, 그의 병리는 선천적인 것이다. 신장의 육종인 선암은 성인 암의 약 1 내지 2% 만을 차지하지만, 가장 견고한 신장 종양은 전이성이 있다. 신장의 배아성 선근육종인 윌름(Wilms') 종양은 태아 시기에 발생하고, 여러해 동안 진단되지 않기도 한다. 신우 및 수뇨관 신생물은 조직학적으로 유사하다. 방광 신생물은 아닐린 염료와 같은 공지된 방광 발암물질에 의해 유도될 수 있으며, 가장 흔한 것이 과도기 세포의 육종이고, 덜 흔한 것이 편평세포의 육종이다. 더 진기한 비뇨생식기 신생물에는 요도암 및 음경암이 포함된다. 고환 신생물은 30세 미만의 남성에서 견고한 전이성 암의 대부분을 차지한다. 가장 전이가 잘되는 고환 종양은 원시 배아세포에서 발생하고, 관련된 세포의 유형에 따라 분류된다.

유방암은 여성에게 가장 흔한 암이다. 미국에서, 연령에 따라 유방암이 발생할 누적 위험율은 약 10%이지만, 이 질환으로 사망하는 경우는 약 3.6%이다. 그러나, 연령, 유방암의 가계사, 방사선 노출 및 식생활에 따라 위험성은 증가하고 있다.

유방암은 일상적으로 에스트로겐 수용체 및 프로게스테론 수용체 분석으로 분류한다. 유방 종양 환자의 약 2/3가 에스트로겐 수용체 양성(ER+) 반응을 나타낸다. 이 프로게스테론 양성 유방암은 기능성 에스트로겐 수용체를 갖는 것으로 생각되고, 두 가지 수용체 모두 존재하는 경우가 한 가지 수용체만 존재하는 경우보다 내분비 처리에 더 잘 반응한다. 내분비 치료 요법(통상, 타목시펜의 처리)이 에스트로겐 수용체 양성 종양의 치료에 더 바람직하다. 에스트로겐 및 안드로겐도 효과적이기는 하지만, 많은 양의 이 호르몬에 의한 부작용 때문에 다른 형태의 내분비 치료보다 덜 바람직하다. 유방암은 신체의 어떤 기관에도 전이될 수 있지만, 가장 흔하게 전이되는 부위는 폐, 간, 뼈, 림프절 및 피부이다.

소엽성 동소내 암종(lobular carcinoma in situ, LCIS) 또는 소엽성 신생물은 폐경기 전의 여성에게 가장 빈번하게 나타나는 질환이다. 관상 동소내 암종(ductal carcinoma in situ, DCIS)은 폐경기 전 및 후의 여성 모두에게 발생한다. DCIS는 촉지(觸知)할 수 있는 몽우리를 형성한다. LCIS 및 DCIS는 전체 유방암의 약 90%를 차지한다. 더 진기한 형태인 수질성 유방암 및 세뇨관성 유방암은 쉽게 예측할 수 있다.

가장 흔한 부인과 신생물은 자궁내 암종으로, 이는 유방암, 결직장암 및 폐암 다음으로 여성에게 네 번째로 많이 발생되는 암이다. 자궁내 암종은 임상 단계(원래 위치에서의 단계 0으로부터 멀리 떨어진 기관으로 전이된 상태의 단계 IVB까지)에 의해 특징지워진다. 통상, 자궁내 암종은 에스트로겐을 생성하고, 현행의 치료는 외과적 방법 및 프로게스테론 요법으로 접근하고 있다.

난소암은 전체 부인과 신생물의 약 18%를 차지한다. 약 80%의 전이성 난소암은 난소 상피로부터 발생하고, 그의 조직학적 특성에 따라 분류한다. 종양은 배아세포 또는 기질로부터 발생할 수도 있다.

외음부 종양은 전체 부인과 신생물의 약 3 내지 4%를 차지한다. 외음부 종양은 통상 폐경기 이후에 나타나고, 약 90%가 편평세포 암종이다. 약 4%가 기저세포 암종이며, 나머지로는 상피내 암종, 바토린선암, 섬유 육종 및 흑색종이 포함된다.

질 암종은 부인과 악성 종양의 약 1%를 차지하며, 약 45 내지 65세에 발병률 이 가장 높다. 질 암종의 약 95%가 편평세포 암종이다. 수란관의 원발성 암종은 드물게 나타나고, 통상 직접 퍼지거나 림프관에 의해 퍼진다.

영양막 질환 또는 영양막 세포 기원의 신생물은 자궁내 임신 또는 자궁외 임신 이후에 나타날 수 있다. 퇴행성 임신은 포도상 기태(奇胎)를 초래하며, 이 질환의 약 80%가 양성이다.

신생물은 외이도에 발생하여 청각에 영향을 끼칠 수 있다. 또한, 이구선암도 외이도에 발생하며, 이는 조직학적으로는 양성으로 보이지만 통상적으로 악성이며, 외과 수술에 의한 제거를 통해 치료할 수 있다. 기저세포 및 편평세포 암종은 정기적 일광에 의해 외이에 빈번히 발생하고, 이 암종 또한 외과 수술에 의한 제거를 통해 치료할 수 있다. 중이는 편평세포 암종이 발생하는 위치이다. 비-크롬친화성 부신경절종은 측두골에서 발생할 수 있다.

코 및 부비동에서 가장 흔한 악성 종양은 편평세포 암종이고, 덜 흔하게 나타나는 암종으로 선양낭성 및 점막표피양 암종, 악성 혼합 종양, 선암, 림프종, 섬유종, 골육종, 연골육종 및 흑색종이 있다.

비강 인두의 편평세포 암종은 아동 및 젊은 성인에서 가장 흔하게 발견되는 암종이다.

상기도에 가장 흔한 악성 종양은 편도선 및 후두의 편평세포 암종이다. 상기 두 가지 암종 모두는 남성에게 더 흔하게 나타나고, 흡연 및 알코올 섭취와 관련되어 있으며, 머리 또는 목에 암이 있는 환자의 85%가 흡연 및 음주의 경험이 있다.

머리 및 목의 암 중 약 90%가 편평세포(표피양) 암종이다. 흑색종, 림프종 및 육종은 머리 및 목의 원발성 암 중에서 상대적으로 진기한 암종이다. 머리 및 목의 암은 일차 신생물의 크기 및 발생 부위, 경부 림프절로의 전이 수 및 크기, 및 원격 전이의 증거에 따라 분류한다.

안암은 눈꺼풀의 표면에서 발생할 수 있고, 양성 또는 신생물성일 수 있다. 통상적인 양성 생장은 황색종으로, 이는 피하에 황백색의 평평한 지질 플라크를 형성한다. 기저세포 암종이 가장 흔하고, 외과 수술에 의한 제거 또는 방사선 요법을 통해 치료한다. 이보다 덜 흔한 악성 종양으로 편평세포 암종이나 마이봄선 암종 및 다른 유형의 흑색종이 있다. 안구에서 가장 흔한 원발성 악성 종양은 맥락막의 악성 흑색종이다.

또한, 종양은 피부 조직에서 발생할 수도 있는데, 여기에는 악성 종양 뿐만 아니라 기태, 지방종 등과 같은 양성 종양도 포함된다. 약 40 내지 50%의 악성 흑색종이 기태의 멜라닌 세포로부터 발생한다. 악성 피부암은 기저 세포 또는 편평세포 암종으로 태양에 노출된 피부에서 빈번히 발생한다. 피부암은 가장 흔한 악성 종양이며, 이 암의 발병률은 증가하고 있다. 그보다 덜 흔한 악성 종양으로 악성 흑색종, 유두 또는 유방외 파제트병(Paget's disease), 카포시 육종(Kaposi's sarcoma, KS) 및 피부성 T 세포 림프종(균상 식육종)이 포함된다. AIDS 발병률의 증가로 인해 KS의 발병률이 증가하고 있다. AIDS 환자의 1/3에서 KS가 발병한다.

경구암은 남성의 암 중 약 5%를 차지하고, 여성의 암 중 약 2%를 차지한다. 가장 흔한 형태의 경구암은 편평세포 암종이다. 이 암의 발병률은 연령 및 위험 인자(특히, 흡연 및 음주)에 따라 증가한다.

외과 수술은 신생물의 치료에 유용한 방법 중 가장 오래된 것이다. 신생물이 초기에 발견되고 전이가 일어나지 않았을 때, 주로 외과 수술이 성공한다. 방사선도 중요한 치료 요법으로, 호지킨병, 초기 비-호지킨 림프종 및 머리와 목의 편평세포 암종과 같은 신생물 치료에 바람직하다. 방사선은 외과 수술 및 신생물 억제성 약물의 부가물로서 매우 성공적인 것으로 판명되었다.

또한, 신생물 억제성 약물은 신생물의 치료에 유용하고, 그의 작용 기작에 따라 분류된다. 통상, 작용 기작이 상이한 신생물 억제성 약물들을 사용하는 무수한 조합이 적은 투여량으로 부작용을 최소화시킨다면 치료에 특히 효과적인 것으로 판명되었다. 주로 신생물 억제성 약물은 세포의 복제 또는 생장에 필수적인 생물학적 기본 과정을 표적으로 한다.

메클로레타민 및 시클로포스파미드와 같은 알킬화제는 DNA를 알킬화시켜 DNA 복제를 억제한다.

필수적인 세포 분열 경로를 방해하는 대사 억제제에는 하기와 같은 물질이 포함된다.

폴레이트(folate) 길항제는 데하이드로폴레이트 환원효소에 결합하여 피리미딘의 합성을 방해한다. 폴레이트 길항제는 S기에 특이적이다. 메토트렉세이트는 신생물 억제성 폴레이트 길항제로 매우 흔하게 사용되는 화합물이다.

퓨린 길항제는 퓨린 신합성을 억제하고, S기에 특이적이다. 6-메르캅토퓨린은 퓨린 길항제의 한 예이다.

피리미딘 길항제는 티미딜레이트 합성을 방해하여 티미딘의 생성율을 감소시키고, S기에 특이적이다. 흔히 사용되는 피리미딘 길항제로는 5-플루오로우라실이 있다.

시타라빈은 DNA 중합효소를 억제하고, S기에 특이적이다.

식물 알킬로이드는 빈블라스틴 및 빈크리스틴과 같은 빈카(vinca), 및 에토포시드와 같은 포도필로톡신을 포함한다. 식물 알킬로이드는 중기에 효과적이고, 미세관 단백질의 변화를 포함하는 다양한 기작에 의해 체세포 분열을 억제한다.

항생제로는 DNA 가닥 사이에 끼어들어가 DNA의 풀림을 억제하는 독소루비신 및 다우노마이신, DNA 가닥의 절개를 유발하는 블레오마이신, 및 이관능성 알킬화제로 작용하여 DNA 합성을 억제하는 미토마이신을 포함한다.

니트로소우레아는 카르무스틴 및 로무스틴을 포함하고, DNA를 알킬화시키거나 단백질 내의 아미노산을 카르바모일화시킨다.

시스플라틴과 같은 무기 이온은 DNA 가닥 사이나 내부에 끼어들어가 DNA의 풀림을 억제한다.

인터페론과 같은 생물학적 반응 조정제는 증식 억제 효과가 있기는 하지만, 이들의 구체적인 역할을 아직 밝혀지지 않았다. 인터페론에는 α(백혈구) 인터페론, β(섬유아세포) 인터페론 및 γ(림프구) 인터페론이 있다.

또한, 아스파라기나아제와 같은 효소는 암세포에 중요한 대사 경로를 변화시키는데 사용된다. 아스파라기나아제는 백혈병 세포가 필요로하는 세포 내부의 아스파라긴을 없애준다.

타목시펜, 플루타마이드 및 프로게스테론과 같은 호르몬 및 그의 유사체는 비특이적 효과를 나타내지만, 유방암, 난소암 및 전립선암과 같은 호르몬 관련 신생물의 치료에 유용하다. 유방암 치료에 흔히 사용되는 타목시펜은 세포를 정지기 상태로 만들고, 에스트로겐 수용체에 결합한다. 전립선암 치료에 흔히 사용되는 플루타미드는 안드로겐 수용체에 결합한다.

싸이토키닌은 자연 발생적이거나 인공적인 식물 생장 조절제이다. 자연 발생적인 싸이토키닌은 다양한 단백질 키나아제를 비특이적으로 억제하는 경향이 있다. 싸이토키닌이 세포의 생장 및 분열을 조절하는 분자적 기작은 아직 밝혀지지 않았다. 연구 결과, 싸이토키닌은 DNA 주형의 수용도를 증가시키고, RNA 중합효소를 활성화시키고, 폴리아데닐화 및 mRNA의 이차 구조에 영향을 끼치며, 폴리리보솜의 형성 및 활성을 자극한다는 사실을 알게 되었다. 싸이토키닌은 세포 주기 단백질과 상호작용하여 세포 분열에 영향을 끼치는 것으로 생각된다. 싸이토키닌 및 싸이클린-의존성 키나아제(cdk) 모두는 여러 가지 유사한 세포 주기 조절점(예를 들어, G₁기 및 S기 전이, G₂기 및 M기 전이, S기 및 M기 조절점)에 작용한다.

6-(벤질아미노)-2-[(2-히드록시에틸)아미노]-9-메틸퓨린인 올로모우신 (olomoucine)은 최초로 발견된 제초제이다. 최근에는 올로모우신이 마이크로몰 농도로 p34^cdc2 및 싸이클린 B 키나아제를 포함하는 몇몇 cdk를 특이적으로 억제하지만, cAMP- 및 cGMP-의존성 키나아제, 및 단백질 키나아제 C와 같은 다른 주요 단백질 키나아제에는 영향이 없는 인공적인 싸이토키닌임을 알아냈다. 최근, 올로모우신이 CDK-싸이클린 단백질 키나아제를 잘 선별하지만, 억제 활성이 중간 정도(IC₅₀ 이 약 7μM임)임을 알아냈다(문헌 [Vesely, J., et al., Eur. J. Biochem., 1994, 224, 771-786] 참조). cdk2와 함께 결정화된 올로모우신의 A2.4A 결정 구조에 의해, 올로모우신의 퓨린 부분이 보존적인 ATP 결합 포켓(pocket)에 결합하고, 벤질아미노기는 cdk2 키나아제에 독특하게 나타나는 활성 부위 영역으로 확장됨을 알았다.

2-(1-에틸-2-히드록시에틸아미노)-6-벤질아미노-9-이소프로필퓨린인 로스코비틴(roscovitine)은 최근에 합성된 퓨린으로 몇몇 싸이클린-의존성 키나아제에 선택성을 나타내고, cdk2 및 cdc2에 대해 올로모우신보다 최고 10배까지 더 높은 활성을 나타낸다(문헌 [Meijer, L., et al., Eur. J. Biochem., 243:527-536] 및 PCT/FR96/01905호 참조). 이 문헌에서는 대부분의 키나아제가 로스코비틴에 의해 현저하게 억제되지는 않는다고 보고하였다. 그러나, cdc2-싸이클린 B, cdk2-싸이클린 A, cdk2-싸이클린 E 및 cdk5-p35는 실질적으로 억제되어 IC₅₀의 값이 각각 0.65, 0.7, 0.7 및 0.2μM이었다. 반대로, 로스코비틴은 cdk4-싸이클린 D1 및 cdk6-싸이클린 D2에서는 100μM이 넘는 IC₅₀을 나타내었다.

문헌[Havlicek, L., et al., M. Med. Chem.(1997) 40:408-412]에서는 로스코비틴 및 이와 관련된 유사체(2,6 및(또는) 9 위치에서 치환됨)가 p34^cdc2-싸이클린 B 키나아제를 억제한다고 보고하였다. 어떤 유사체의 IC₅₀ 값도 로스코비틴의 (R) 거울 이성질체의 값(IC₅₀=0.2μM)보다 크지 않았다. (S) 거울 이성질체의 IC₅₀ 값은 0.8μM이었고, 라세미 혼합물(R 및 S)의 IC₅₀ 값은 0.65μM이었다. 이 문헌의 저자들은 로스코비틴의 N⁶-벤질 치환체가 이소펜테닐 또는 시클로헥실메틸 치환체보다 더 우수하다는 결론을 내렸다.

미국 국립 암협회(NCI)는 미국 정부가 운영하는 조직으로 신규의 종양학 치료 생성물을 발견 및 개발하기 위한 조직이다. 1985년에, NCI는 원발성 암 스크린 용도의 생체외 분석법으로 인간의 종양 세포를 포함하는 암에 대한 새로운 스크리닝 전략을 확립하였다. 7가지 암 유형(폐암, 결장암, 흑색종, 신장암, 난소암, 뇌암 및 백혈병)의 세포에서 유래한 총 60가지 인간 종양 세포주를 NCI 패널로 선별하였다(문헌 [Grever, M.R., et al., Seminars in Oncology, 19:1992:622-638] 참조). 또한, 분석에 사용된 프로토콜은 문헌에 보고되어 있다. 아메리칸 타입 컬쳐 콜렉션(ATCC)는 상기 및 다른 종양 세포주의 수탁소 역할을 한다. 유용한 인간 종양 세포주는 하기의 세포주를 포함한다.

MCF7 : 인간 유방선암, 호르몬-의존성,

MDA-MB-231 : 인간 유방선암, 호르몬-독립성,

HT-29 : 인간 결장선암, 등급 Ⅱ로 비교적 잘 분화됨,

HCT-15 : 인간 결장선암,

A549 : 인간 비-소세포 폐 암종,

DMS-114 : 인간 소세포 폐 암종,

PC-3 : 인간 전립선암, 호르몬-독립성, 및

DU 145 : 인간 전립선 암종, 호르몬-독립성.

문헌 [Skehan, P., et al., J. Natl. Cancer Inst. 82:1107-1112, 1990]에서는 신생물 억제성 약물을 스크린하는데 상기와 같은 종양 세포를 사용하는 유용한 프로토콜이 기재되어 있다.

이 문헌[Meijer, et al., Eur. J. Biochem., 243:527-536]]에서는 로스코비틴이 NCI-질환에 대한 생체외 스크린, 즉 평균 IC₅₀ 값이 16μM인 9가지 종양 유형(백혈병, 비-소세포 폐암, 결장암, 중추신경계암, 흑색종, 난소암, 신장암, 전립선암, 유방암)을 포함하는 60가지 인간 종양 세포주의 증식을 억제한다고 보고하였다. 개개의 종양 세포주에 대한 결과는 보고되지 않았다.

두 가지 독특한 cdk 억제제(플라보피리돌 및 올로모우신)는 신경 생존의 두 가지 모델 시스템에서 PC12 신경 세포 및 교감신경 뉴런의 사멸을 억제한다(문헌 [Park et al., J. Biol. Chem. 271(14):8161-8169, 1996] 참조). 생존에 필요한 각 화합물의 농도는 증식 억제에 필요한 양과 서로 연관되어 있었다. 신경 아팝토시스는 신경계의 발달 뿐만 아니라, 신경 손상 및 질환의 성분 모두에 필요한 중요한 특징이다.

PC12 세포주는 최초에 쥐의 부신 수질 크롬친화성 종양으로부터 유래하였다. 혈청이 포함된 배지에서 배양하면, PC12 세포는 분열하여 부신의 크롬 친화 세포 및 교감신경 뉴런의 전구체와 유사하게 된다. 신경 생장 인자(NGF)를 가하면, PC12 세포는 교감신경 뉴런의 형질 특성을 갖게 된다. 혈청을 제거하거나 혈청 및 NGF를 제거하면, 고유의 PC12 세포 및 신경 분화된 PC12 세포에서 아팝토시스가 일어나는데, 이는 교감신경 뉴런의 반응과 유사하다.

아팝토시스에서 세포 주기 조절의 역할은, NGF 또는 혈청의 소멸이 조화롭지 못한 세포 주기의 진행을 초래하여 고유의 PC12 세포를 사멸시키는 것에 의해 증명될 수 있다. cdk 억제제는 영양 보조물을 제거한 후에도 이 증식 가능한 고유의 PC12 세포 사멸을 억제하지 못하였다. 체세포 분열 후에 분화된 뉴런 또는 교감신경 뉴런이 세포 사멸을 초래하는 NGF의 소멸 이후에 부적합한 세포 주기로 재진입할 것이라는 가설을 세웠다. 그러나, cdk를 억제하는 플라보피리돌 또는 올로모우신에 노출시키면 이 세포의 아팝토시스가 억제되었다.

다양한 세포 유형의 아팝토시스 과정 동안에 cdk 및 싸이클린의 활성 변화가 관찰되었다. 캄토테신 또는 araC에 의해 유도된 HL60 세포의 아팝토시스에서 cdc2 활성 및 싸이클린 E-관련 키나아제 활성이 증가되었다. 캄토테신에 의해 유도된 PKO 세포의 아팝토시스에서는 싸이클린 D1의 발현이 증가되었다.

캄토테신은 쥐의 대뇌 피질 뉴런의 아팝토시스성 사멸을 유발한다(문헌 [Morris and Geller, J. Cell Biol. 134:757-770(1996)] 참조). 캄토테신을 처리한 비증식성 신경 분화 PC12 세포는 처리 후 6일 내에 죽었고, 배양된 쥐의 뉴런은 NGF가 존재하더라도 처리 후 5일 내에 사멸하였다(문헌 [Park et al., J. Neurosci. 17(4):1256-1270(1997)] 참조). 그러나, 캄토테신이 존재하거나 존재하지 않는 조건하에서, 올로모우신 또는 플라보피리돌을 모두 처리하거나 각각 처리한 결과, 6일 째에 약 30%의 세포가 사멸하였다. PC12 세포 또는 쥐의 교감신경 뉴런을 사멸로부터 최대로 보호하는 경우는 1μM의 플라포피리돌 및 200μM의 올로모우신을 처리했을 때 관찰되었는데, 그러한 농도는 증식 중인 PC12 세포의 DNA 합성을 전적으로 억제하는 최소 농도이다. 올로모우신의 불활성화 유사체인 이소-올로모우신을 투여하더라도 캄토테신-처리 신경 세포의 세포 사멸을 억제하지는 못하였다.

또한, 플라보피리돌 및 올로모우신은 캄토테신에 의해 유도된 피질 신경의 사멸을 억제하였다(문헌 [Park et al., J. Neurosci. 17(4):1256-1270(1997)] 참조). 플라보피리돌 및 올로모우신의 IC₅₀ 값은 각각 0.1μM 및 100μM이었다. 이소-올로모우신을 투여하더라도 캄토테신-처리 신경 세포의 세포 사멸을 억제하지는 못하였다.

그러한 관찰 결과에는 몇 가지 함축된 의미가 있다. 방사선 및 신생물 억제제로 치료받은 환자가 새로운 신생물의 발달 또는 바람직하지 못한 세포 아팝토시스를 포함하는 부작용을 경험한다는 것은 잘 알려져 있다. 예를 들어, 난치성 백혈병을 치료하기 위해 다량의 araC를 투여한 환자는 푸르킨예(Purkinje) 신경을 잃어버리는 소뇌 독성 증후군에 걸리게 된다(문헌 [Winkelman and Hinges, Ann Neurol. 14:520-527(1983)] 및 [Vogel and Horouipian, Cancer 71:1303-1308(1993)] 참조). cis-백금으로 치료한 환자는 말초 신경병증이 발생한다고 보고되어 있다(문헌 [Wallach, et al., J. Fla. Med. Assoc. 79:821-822(1992)] 및 [Mansfield and Castillo, AJNR Am. J. Neuroradiol. 15:1178-1180(1994)] 참조). 관찰 결과의 관점에서, 신생물을 치료하기 위해 본 발명의 화합물을 함께 투여하거나 단독으로 투여하면 세포 아팝토시스, 특히 신생물 억제성 약물 또는 방사선 치료에 의해 유발되는 신경 손상을 감소시키거나 막을 수 있을 것이다.

뇌혈관 질환은 서방 국가에서 가장 흔하게 발생하는 신경 장애이다. 뇌혈관 질환의 주요 유형으로는 일시적인 혈액 흐름의 방해에서 기인한 대뇌 기능 부전, 경색증, 출혈, 및 동정맥 기형이 있다. 통상 뇌졸중은 허혈성 상해를 지칭한다. 바람직하지 못한 신경 아팝토시스는 뇌혈관 질환에서 발생한다. cdk 억제제를 이용한 치료는 신경 손상을 억제하고, 상기의 경우에 퇴행을 억제하는 접근 방법일 수 있다.

<발명의 요약>

본 발명은 화학식 Ⅰ의 신규 화합물, 제약상 허용되는 그의 염, 광학 이성질체 또는 수화물을 제공한다.

상기 식중,

R은 R2, R2NH- 또는 H₂N-R3-로 이루어진 군으로부터 선택되고;

R2는 C₁-C₈ 알킬 및 화학식 Ⅱ로 이루어진 군으로부터 선택되며;

<화학식 Ⅱ>

상기 식에서,

Z는 페닐, 헤테로고리 및 시클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고, 각각의 R4는 독립적으로 수소 또는 C₁-C₄알킬이고, n은 정수 1 내지 8이며;

C₁-C₈알킬 및 Z 각각은 동일하거나 상이할 수 있으며, Hal, OH 및 C₁-C₄알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 1 내지 3 개의 치환체로 임의로 치환되고;

R3는 C₁-C₈알킬렌이며,

R1은 시클로펜틸 및 이소프로필로 이루어진 군으로부터 선택된다.

추가로, 본 발명은 세포 주기의 진행을 억제하는 방법을 제공한다. 더 구체적으로, 본 발명은 cdk-2를 억제하는 방법을 제공한다.

또한, 본 발명은 신경 세포에서 아팝토시스를 억제하는 방법을 제공한다. 본 발명의 특히 바람직한 방법은 신생물 억제제에 의해 유도되거나 뇌혈관 질환에서 기인하는 신경 세포의 아팝토시스를 억제하는 방법을 제공한다. 본 발명의 다른 바람직한 실시양태는 산소 고갈에 의해 유도되는 아팝토시스를 억제하는 방법이다. 더욱 바람직한 실시양태에서, 본 발명은 뇌혈관 질환에 의해 유도되는 아팝토시스를 억제하는 방법을 제공한다. 다른 바람직한 실시양태에서, 본 발명은 뇌졸 중 또는 경색증에 의해 유도되는 아팝토시스를 억제하는 방법을 제공한다.

본 발명은 신생물의 발생을 억제하는 방법을 제공한다. 또한, 본 발명은 제공된 본 발명 화합물을 투여하는 것을 포함하는, 신생물성 질병 상태에 시달리는 환자의 치료 방법을 제공한다. 투여량은 본 발명 화합물의 치료 유효량인 것이 바람직하다. 본 발명의 바람직한 방법은 제공된 본 발명 화합물을 단일 투여하는 것이다. 다른 방법으로, 본 발명의 바람직한 방법은 본 발명 화합물의 일정량을 다른 신생물 억제제와 혼합하여 투여하는 것이다.

추가로, 본 발명은 불활성 담체와 혼합되거나 그와 함께 분석 가능한 양의 화학식 Ⅰ 화합물을 포함하는 조성물을 제공한다. 또한, 본 발명은 1종 이상의 제약상 허용되는 담체 또는 부형제와 혼합되거나 그와 함께 억제 유효량의 화학식 Ⅰ 화합물을 포함하는 제약 조성물을 제공한다.

본 발명은 화학식 Ⅰ의 신규 화합물, 제약상 허용되는 그의 염, 광학 이성질체 또는 수화물을 제공한다.

<화학식 Ⅰ>

상기 식중,

R은 R2, R2NH 또는 H₂N-R3이고;

R2는 C₁-C₈알킬 및 화학식 Ⅱ로 이루어진 군으로부터 선택되고;

<화학식 Ⅱ>

상기 식에서,

Z는 페닐, 헤테로고리 및 시클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고, 각각의 R4는 독립적으로 수소 또는 C₁-C₄알킬이고, n은 정수 1 내지 8이며;

C₁-C₈알킬 및 Z 각각은 동일하거나 상이할 수 있으며, Hal, OH 및 C₁-C₄알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 1 내지 3 개의 치환체로 임의로 치환되고;

R3는 C₁-C₈알킬렌이며,

R1은 시클로펜틸 및 이소프로필로 이루어진 군으로부터 선택된다.

또한, 화학식 (Ⅰ)의 화합물의 범위에 속하는 것은 화학식 (Ⅰa)의 화합물, 제약상 허용되는 그의 염, 광학 이성질체 또는 수화물이다.

상기 식중,

R은 R2이고;

R2는 동일하거나 상이할 수 있으며, Hal, OH 및 C₁-C₄알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 1 내지 3 개의 치환체로 임의로 치환된 C₁-C₈알킬이며;

R1은 시클로펜틸 및 이소프로필로 이루어진 군으로부터 선택된다.

또한, 화학식 (Ⅰ)의 화합물의 범위에 속하는 것은 화학식 (Ⅰb)의 화합물, 제약상 허용되는 그의 염, 광학 이성질체 또는 수화물이다.

상기 식중,

R은 R2이고;

R2는 화학식 Ⅱ이고;

<화학식 Ⅱ>

상기 식에서,

Z는 동일하거나 상이할 수 있으며, Hal, OH 및 C₁-C₄알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 1 내지 3 개의 치환체로 임의로 치환된 페닐이고, 각각의 R4는 독립적으로 수소 또는 C₁-C₄알킬이고, n은 정수 1 내지 8이며;

R1은 시클로펜틸 및 이소프로필로 이루어진 군으로부터 선택된다.

또한, 화학식 (Ⅰ)의 화합물의 범위에 속하는 것은 화학식 (Ⅰc)의 화합물, 제약상 허용되는 그의 염, 광학 이성질체 또는 수화물이다.

상기 식중,

R은 R2이고;

R2는 화학식 Ⅱ이고;

<화학식 Ⅱ>

상기 식에서,

Z는 동일하거나 상이할 수 있으며, Hal, OH 및 C₁-C₄알킬로 이루어진 군으로 부터 선택되는 1 내지 3 개의 치환체로 임의로 치환된 헤테로고리이고, 각각의 R4는 독립적으로 수소 또는 C₁-C₄알킬이고, n은 정수 1 내지 8이며;

R1은 시클로펜틸 및 이소프로필로 이루어진 군으로부터 선택된다.

또한, 화학식 (Ⅰ)의 화합물의 범위에 속하는 것은 화학식 (Ⅰd)의 화합물, 제약상 허용되는 그의 염, 광학 이성질체 또는 수화물이다.

상기 식중,

R은 R2이고;

R2는 화학식 Ⅱ이고;

<화학식 Ⅱ>

상기 식에서,

Z는 동일하거나 상이할 수 있으며, Hal, OH 및 C₁-C₄알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 1 내지 3 개의 치환체로 임의로 치환된 시클로알킬이고, 각각의 R4는 독립적으로 수소 또는 C₁-C₄알킬이고, n은 정수 1 내지 8이며;

R1은 시클로펜틸 및 이소프로필로 이루어진 군으로부터 선택된다.

또한, 화학식 (Ⅰ)의 화합물의 범위에 속하는 것은 화학식 (Ⅰa2)의 화합물, 제약상 허용되는 그의 염, 광학 이성질체 또는 수화물이다.

상기 식중,

R은 R2NH-이고,

R2는 동일하거나 상이할 수 있으며, Hal, OH 및 C₁-C₄알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 1 내지 3 개의 치환체로 임의로 치환된 C₁-C₈알킬이고;

R1은 시클로펜틸 및 이소프로필로 이루어진 군으로부터 선택된다.

또한, 화학식 (Ⅰ)의 화합물의 범위에 속하는 것은 화학식 (Ⅰb2)의 화합물, 제약상 허용되는 그의 염, 광학 이성질체 또는 수화물이다.

상기 식중,

R은 R2NH-이고;

R2는 화학식 Ⅱ이며;

<화학식 Ⅱ>

상기 식에서,

Z는 동일하거나 상이할 수 있으며, Hal, OH 및 C₁-C₄알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 1 내지 3 개의 치환체로 임의로 치환된 페닐이고, 각각의 R4는 독립적으로 수소 또는 C₁-C₄알킬이고, n은 정수 1 내지 8이며;

R1은 시클로펜틸 및 이소프로필로 이루어진 군으로부터 선택된다.

또한, 화학식 (Ⅰ)의 화합물의 범위에 속하는 것은 화학식 (Ⅰc2)의 화합물, 제약상 허용되는 그의 염, 광학 이성질체 또는 수화물이다.

상기 식중,

R은 R2NH-이고;

R2는 화학식 Ⅱ이며;

<화학식 Ⅱ>

상기 식에서,

Z는 동일하거나 상이할 수 있으며, Hal, OH 및 C₁-C₄알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 1 내지 3 개의 치환체로 임의로 치환된 헤테로고리이고, 각각의 R4는 독립적으로 수소 또는 C₁-C₄알킬이고, n은 정수 1 내지 8이고;

R1은 시클로펜틸 및 이소프로필로 이루어진 군으로부터 선택된다.

또한, 화학식 (Ⅰ)의 화합물의 범위에 속하는 것은 화학식 (Ⅰd2)의 화합물, 제약상 허용되는 그의 염, 광학 이성질체 또는 수화물이다.

상기 식중,

R은 R2NH-이고;

R2는 화학식 Ⅱ이고;

<화학식 Ⅱ>

상기 식에서,

Z는 동일하거나 상이할 수 있으며, Hal, OH 및 C₁-C₄알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 1 내지 3 개의 치환체로 임의로 치환된 시클로알킬이고, 각각의 R4는 독립적으로 수소 또는 C₁-C₄알킬이고, n은 정수 1 내지 8이며;

R1은 시클로펜틸 및 이소프로필로 이루어진 군으로부터 선택된다.

또한, 화학식 (Ⅰ)의 화합물의 범위에 속하는 것은 화학식 (Ⅰe)의 화합물, 제약상 허용되는 그의 염, 광학 이성질체 또는 수화물이다.

상기 식중,

R은 H₂N-R3-이고;

R3는 C₁-C₈알킬렌이고;

R1은 시클로펜틸 및 이소프로필로 이루어진 군으로부터 선택된다.

본 명세서에 사용된 "헤테로고리"란 용어는 고리의 하나 이상의 원자가 탄소가 아닌 원소로 이루어진 임의의 폐환 잔기를 의미하며, 피페리디닐, 피리디닐, 이소옥사졸릴, 테트라히드로푸라닐, 피롤리디닐, 모르폴리닐, 피페라지닐, 벤즈이미다졸릴, 티아졸릴, 티오펜, 푸라닐, 인돌릴, 1,3-벤조디옥솔릴, 테트라히드로피라닐, 이미다졸릴, 테트라히드로티오펜, 피라닐, 디옥사닐, 피롤릴, 피리미디닐, 피라지닐, 티아지닐, 옥사졸릴, 푸리닐, 퀴놀리닐 및 이소퀴놀리닐을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.

본 명세서에 사용된 "C₁-C₄ 알킬"이란 용어는 1 내지 4개의 탄소 원자를 갖는, 포화되거나 포화되지 않은 직쇄 또는 분지쇄 하이드로카르빌 라디칼을 의미하며, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 1-프로페닐, 2-프로페닐, n-부틸, 이소부틸, 3급 부틸, sec-부틸, 1-부테닐, 2-부테닐 및 3-부테닐 등을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.

본 명세서에 사용된 "C₁-C₈ 알킬"이란 용어는 1 내지 8개의 탄소 원자를 갖는, 포화되거나 포화되지 않은 직쇄 또는 분지쇄 하이드로카르빌 라디칼을 의미하며, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 1-프로페닐, 2-프로페닐, n-부틸, 이소부틸, 3급 부틸, sec-부틸, 1-부테닐, 2-부테닐, 3-부테닐, 펜틸, 네오펜틸, 헥실, 헵틸 및 옥틸 등을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.

본 명세서에 사용된 "C₁-C₈ 알킬렌"이란 용어는 1 내지 8개의 탄소 원자를 갖 는, 포화되거나 포화되지 않은 직쇄 또는 분지쇄 하이드로카르빌렌 라디칼을 의미하며, 메틸렌, 에틸렌, 프로필렌, 이소프로필렌, 1-프로필렌, 2-프로필렌, n-부틸렌, 이소부틸렌, 3급 부틸렌, sec-부틸렌, 1-부테닐렌, 2-부테닐렌, 3-부테닐렌, 펜틸렌, 네오펜틸렌, 헥실렌, 헵틸렌 및 옥틸렌 등을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.

본 명세서에 사용된 "시클로알킬"이란 용어는 3 내지 8개의 탄소 원자를 포함하는, 포화되거나 포화되지 않은 지환(指環) 화합물 잔기를 의미하며, 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 시클로헵틸 및 시클로옥틸 등을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.

본 명세서에 사용된 "Hal"이란 용어는 할로겐 잔기를 의미하며, 플루오로, 클로로, 브로모 및 요오도 잔기를 포함한다.

본 명세서에 사용된 "광학 이성질체" 또는 "광학 이성질체들"이란 용어는 주어진 화학식 Ⅰ의 화합물이 존재할 수 있는 임의의 다양한 입체 이성질체적 형상을 의미한다.

본 명세서에 사용된 "수화물" 또는 "수화물들"이란 용어는 H-OH 결합이 분열되지 않은, 화학식 Ⅰ의 화합물과 반응한 하나 이상의 물 분자의 반응 생성물을 의미하며, 다중수화물 뿐만 아니라 일수화물도 포함한다.

본 명세서에 사용된 "제약상 허용되는 염"이란 용어는 임의의 무독성, 유기 또는 무기산 분자 하나 이상이 화학식 Ⅰ의 화합물과 반응한 반응 생성물을 의미한다. 안정한 염을 형성하는 무기산의 예로는 염산, 브롬화수소산, 황산 및 인산과, 나트륨 일수소 오르토-인산염 및 칼륨 수소 황산염과 같은 산 금속염이 포함된다. 안정한 염을 형성하는 유기산의 예로는 모노, 디 및 트리클로로아세트산이 포함된다. 상기 산의 예로는 아세트산, 글리콜산, 락트산, 피루브산, 말론산, 숙신산, 글루타르산, 푸마르산, 말산, 타르타르산, 시트르산, 아스코르브산, 말레산, 히드록시말레산, 벤조산, 히드록시벤조산, 페닐아세트산, 신남산, 살리실산, 2-페녹시벤조산 및 술폰산(예를 들어, 메탄 술폰산, 트리플루오로메탄 술폰산 및 2-히드록시에탄 술폰산)이 있다.

화학식 Ⅰ의 화합물은 잘 공지되고, 당업계의 평범한 기술을 가진 업자가 인정하는 방법 및 기술을 이용하여 제조할 수 있다. 상기 화합물의 제조를 위한 통상의 합성 반응식은 반응식 A(특별한 언급이 없는 한 치환체는 상기 정의한 바와 같음)에 기재되어 있다.

상기 반응식 A에서, 당업계의 평범한 기술을 가진 업자에게 공지된 기술 및 방법을 이용하여, 2,6-디클로로퓨린(1)을 구조식 2의 적합한 알코올과 반응시켜 이에 상응하는 구조식 3의 9-치환-2,6-디클로로퓨린 화합물을 수득한다.

예를 들어, 트리페닐포스핀 및 디에틸 아조디카르복실레이트의 존재하에, 테트라히드로푸란과 같은 적합한 무수 비수소성 용매 중에서 2,6-디클로로퓨린(1)을 구조식 2의 적합한 알코올과 반응시킨다. 통상, 상온에서 5시간 내지 5일 동안 상기 반응물을 교반한다. 결과로 생성된 구조식 3의 9-치환-2,6-디클로로퓨린을 당업계에 공지된 추출법에 의해 회수하거나, 더욱 통상적으로는 결과로 생성된 구조식 3의 9-치환-2,6-디클로로퓨린을 용매 제거 후 바로 실리카겔 컬럼 위에 충전하고 메틸렌 클로라이드나 용매 혼합물(예를 들어, 헥산 및 에틸 아세테이트의 혼합물)로 용출하여 회수할 수 있다. 이어서, 구조식 3의 9-치환-2,6-디클로로퓨린 원료는 크로마토그래피에 의해 정제되거나, 정제 단계 없이 이후의 단계에 사용될 수 있다.

단계 b에서, 구조식 3의 9-치환-2,6-디클로로퓨린을 구조식 4의 적합한 아민과 반응시켜 이에 상응하는 구조식 5의 9-치환-6-아미노-2-클로로퓨린 화합물을 수득한다.

예를 들어, 에탄올과 같은 적합한 무수 극성 용매 중에서 구조식 3의 9-치환-2,6-디클로로퓨린을 구조식 4의 적합한 아민과 반응시킨다. 통상, 환류온도에서 30분 내지 3일 동안 상기 반응물을 교반한다. 결과로 생성된 구조식 5의 9-치환-6-아미노-2-클로로퓨린을 당업계에 공지된 추출법에 의해 회수하거나, 만약 구조식 5의 9-치환-6-아미노-2-클로로퓨린이 용액에서 침전되면 여과에 의해 회수 한다.

단계 c에서, 구조식 5의 9-치환-6-아미노-2-클로로퓨린 관능기를 1,4-시클로헥산디아민(6)과 반응시켜 이에 상응하는 화학식 Ⅰ의 화합물을 수득한다.

예를 들어, 구조식 5의 적합한 9-치환-6-아미노-2-클로로퓨린을 과량 몰농도의 1,4-시클로헥산디아민(6)과 반응시킨다. 통상, 상기 반응물을 가압 튜브에 넣어 밀봉한 후, 약 80℃ 내지 약 150℃의 온도로 30분 내지 3일 동안 가열한다. 결과로 생성된 화학식 Ⅰ의 화합물을 당업계에 공지된 추출법에 의해 회수하여 크로마토그래피에 의해 정제할 수 있다.

반응식 A에 요약된 개괄적 합성 공정에 사용하기 위한 출발물질은 당업자에 의해 쉽게 입수될 수 있다.

하기의 실시예는 반응식 A에 기재된 바와 같은 통상적인 합성법을 나타낸다. 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것이지, 본 발명의 범위를 제한하려는 것은 아니다. 본 명세서에 사용된 하기의 용어는 주어진 의미를 갖는다. "g"은 그램을 의미하고, "mmol"은 밀리몰을 의미하고, "mL"은 밀리리터를 의미하고, "bp"는 비등점을 의미하고, "℃"는 섭씨 온도를 의미하고, "mm Hg"는 수은주 밀리미터를 의미하고, "㎍"은 마이크로그램을 의미하고, "μM"은 마이크로몰을 의미한다.

실시예 1

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(3-요오도벤질아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 a: 2,6-디클로-9-시클로펜틸퓨린

시클로펜탄올(260 mg, 3.02 mmol), 2,6-디클로로퓨린(680 mg, 3.60 mmol) 및 트리페닐 포스핀(950 mg, 3.60 mmol)을 무수 THF(20 ml)중에 용해시키고, 0℃로 냉각시켰다. 디에틸 아조디카르복실레이트(570 ㎕, 3.60 mmol)를 질소 분위기하에 15분에 걸쳐 적가하였다. 생성된 용액을 60시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 진공하에 증발시키고, 직접 실리카겔 칼럼상에 충전시키고, 메틸렌 클로라이드로 용출시켜 조 혼합물로서 표제 화합물을 수득하였다.

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-(3-요오도벤질)아미노)-9-시클로펜틸퓨린

2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린(620 ㎎, 조 생성물), 3-요오도벤질아민 히드로클로라이드(810 ㎎, 3.00 mmol) 및 트리에틸아민(835 ㎕, 6.00 mmol)을 무수 에탄올(20 ml)중에 용해시켰다. 15시간 동안 환류하에 가열하고, 냉각시키고, 고형물을 여과하여 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다(680 ㎎).

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(3-요오도벤질아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

2-클로로-6-(3-요오도벤질)아미노)-9-시클로펜틸퓨린(130 ㎎, 0.287 mmol) 및 1,4-시클로헥산디아민(2.00 g, 과량)을 가압관에서 혼합하고, 밀봉하고, 140℃로 18시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, CH₂Cl₂(40 ml)를 가하고, H₂O(2×20 ml)로 세척하였다. 건조시키고(MgSO₄), 용매를 진공하에 증발시키고, 실리카겔 크로마토그래피(10:1:방울 CH₂Cl₂/MeOH/NH₄OH)를 통해 정제하여 표제 화합물 을 수득하였다(140 ㎎, 92%). 염산염으로 전환시켰다.

실시예 2

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-인돌릴)-2-에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[(3-인돌릴)-2-에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 트립트아민 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[(3-인돌릴)-2-에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-인돌릴)-2-에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[(3-인돌릴)-2-에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-인돌릴)-2-에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 3

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(부틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드 로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-(부틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-6-(부틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린, n-부틸아민 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-(부틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(부틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-(부틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(부틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 4

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[2-(3,4-메틸렌디옥시페닐)에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[2-(3,4-메틸렌디옥시페틸)에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 3,4-메틸렌디옥시페닐에틸아민 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[(2,6-디메톡시벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[2-(3,4-메틸렌디옥 시페닐)에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[2-(3,4-메틸렌디옥시페닐)에틸아미노-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[2-(3,4-메틸렌디옥시페닐)에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 5

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(4-아미노부틸)아미노)]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[(4-아미노부틸)아미노]-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-클로로-9-시클로펜틸퓨린, 1,4-디아미노부탄 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[(4-아미노부틸)아미노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(4-아미노부틸)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[(4-아미노부틸)아미노-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(4-아미노부틸)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 6

(S)-2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(α-메틸벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[(α-메틸벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, (S)-α-메틸벤질)아민 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[(α-메틸벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(α-메틸벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[(α-메틸벤질아미노]-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(α-메틸베질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 7

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-피리딜)-2-에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[(3-피리딜)-2-에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 3-(에틸아미노)퓨린 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[(3- 피리딜)-2-에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-피리딜)-2-에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[(3-피리딜)-2-에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-피리딜)-2-에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 8

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(4-피리딜)메틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[(4-피리딜)메틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 4-아미노에틸피리딘 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[(4-피리딜)메틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(4-피리딜)메틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[(4-피리딜)메틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(4-피리딜)메틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제 조하였다.

실시예 9

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-(4-모르폴리닐)프로필아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[(3-(4-모르폴리닐)프로필아미노]-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 3-아미노프로필모르폴린 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[3-(4-모르폴리닐)프로필아미노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-(4-모르폴리닐)프로필아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[3-(4-모르폴리닐)프로필아미노]-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[3-(4-모르폴리닐)프로필아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 10

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3,4-디클로로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[(3,4-디클로로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 3,4-디클로로벤질아민 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[(3,4-디클로로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3,4-디클로로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[(3,4-디클로로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3,4-디클로로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 11

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-메틸벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[(3-메틸벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 3-메틸벤질아미노 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[(3-메틸벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-메틸벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[(3-메틸벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-메틸벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 12

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[2-(2-피리딜)에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[2-(2-피리딜)에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 2-(에틸아미노)피리딘 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[2-(2-피리딜)에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[2-(2-피리딜)에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[2-(2-피리딜)에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[2-(2-피리딜)에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 13

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[2-(4-모르폴리닐)에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[2-(4-모르폴리닐)에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 2-아미노에틸모르폴린 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[2-(4-모르폴리닐)에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[2-(4-모르폴리닐)에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[2-(4-모르폴리닐)에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[2-(4-모르폴리닐)에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 14

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[2-히드록시에틸히드라지노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[2-히드록시에틸히드라지노]-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 2-히드록시에틸히드라지노 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로- 6-[2-히드록시에틸히드라지노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[2-히드록시에틸히드라지노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[2-히드록시에틸히드라지노]-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[2-히드록시에틸히드라지노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 15

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-클로로)벤질아미노]-9-(2-프로필)퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2,6-디클로로-9-(2-프로필)퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-(2-프로필)퓨린, 3-클로로벤질아민 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[(3-클로로)벤질아미노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-클로로)벤질아미노]-9-(2-프로필)퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[(3-클로로)벤질아미노]-9-(2-프로필)퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-클로로)벤질아미노]-9-(2-프로필)퓨린 디히드로클로라이드를 제 조하였다.

실시예 16

(R)-2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(α-메틸벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[(α-메틸벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, (R)-α-메틸벤질아민 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[(α-메틸벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(α-메틸벤질)아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[(α-메틸벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(α-메틸벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 17

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(2-티오펜메틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-(2-티오펜메틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 2-티오펜메틸아민 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-(2-티오펜메틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(2-티오펜메틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-(2-티오펜메틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(2-티오펜메틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 18

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(2-클로로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[(2-클로로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 2-클로로벤질아민 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[(2-클로로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(2-클로로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[(2-클로로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥 실)아미노]-6-[(2-클로로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 19

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(2-벤즈이미다졸릴)메틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[(2-벤즈이미다졸릴)메틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 2-(메틸아미노)벤즈이미다졸 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[(2-벤즈이미다졸릴)메틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(2-벤즈이미다졸릴)메틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[(2-벤즈이미다졸릴)메틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노-6-[(2-벤즈이미다졸릴)메틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 20

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(옥틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-(옥틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, n-옥틸아민 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-(옥틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(옥틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-(옥틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(옥틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 21

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(4-페닐부틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-(4-페닐부틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 4-페닐부틸아미노 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-(4-페닐부틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(4-페닐부틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-(4-페닐부 틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(4-페닐부틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 22

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(시클로헥실)메틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[(시클로헥실)메틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 아미노에틸시클로헥산 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[(시클로헥실)메틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(시클로헥실)메틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[(시클로헥실)메틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(시클로헥실)메틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 23

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-(3-메틸-4-히드록시)부틸)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[(3-(3-메틸-4-히드록시)부틸)아미노]-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 2-(2-히드록시메틸)부틸아미노 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[(3-(3-메틸-4-히드록시)부틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-(3-메틸-4-히드록시)부틸)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[(3-(3-메틸-4-히드록시)부틸)아미노]-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-(3-메틸-4-히드록시)부틸)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 24

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[3-(페닐)프로필아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[3-(페닐)프로필아미노]-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 3-아미노프로필벤젠 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[3-(페닐)프로필아미노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[3-(페닐)프로필아미 노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[3-(페닐)프로필아미노]-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[3-(페닐)프로필아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 25

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[5-(히드록시)펜틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[5-(히드록시)펜틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 5-히드록시펜틸아민 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[5-(히드록시)펜틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[5-(히드록시)펜틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-(펜틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

실시예 26

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(펜틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드 로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-(펜틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 펜틸아민 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-(펜틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(펜틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-(펜틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(펜틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 27

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(4-클로로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[(4-클로로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 4-클로로벤질아민 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[(4-클로로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(4-클로로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[(4-클로로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(4-클로로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 28

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(메틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-(메틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 메틸아민 히드로클로라이드 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-(메틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(메틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-(메틸아미노-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(메틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 29

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-클로로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[(3-클로로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 3-클로로벤질아민 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[(3-클로로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-클로로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[(3-클로로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-클로로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 30

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(2-테트라히드로피라닐)메틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[(2-테트라히드로피라닐)메틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 2-아미노에틸테트라히드로피란 및 트리에틸아민으로부터 2-클로 로-6-[(2-테트라히드로피라닐)메틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(2-테트라히드로피라닐)메틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[(2-테트라히드로피라닐)메틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(2-테트라히드로피라닐)메틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 31

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(4-피리딜)-2-에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[(4-피리딜)-2-에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 4-(에틸아미노)피리딘 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[(4-피리딜)-2-에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(4-피리딜)-2-에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[(4-피리딜)-2-에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(4-피리딜)-2-에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 32

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(시클로프로필)메틸아미노)-9-(2-프로필)퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[(시클로프로필)메틸아미노]-9-(2-프로필)퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-(2-프로필)퓨린(제조를 위해 실시예 15 참조), 시클로프로필메틸아민 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[(시클로프로필)메틸아미노]-9-(2-프로필)퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(시클로프로필)메틸아미노]-9-(2-프로필)퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[(시클로프로필)메틸아미노]-9-(2-프로필)퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(시클로프로필)메틸아미노]-9-(2-프로필)퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 33

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(에틸아미노)-9-시클로프로필퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-(에틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 에틸아민 히드로클로라이드 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-(에틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(에틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-(에틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(에틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 34

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(시클로프로필)메틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[(시클로프로필)메틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 아미노메틸시클로프로판 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[(시클로프로필)메틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(시클로프로필)메틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[( 시클로프로필)메틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(시클로프로필)메틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 35

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[2-펜에틸히드라지노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[2-펜에틸히드라지노]-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 a에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 2-펜에틸히드라진 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[2-펜에틸히드라지노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[2-펜에틸히드라지노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2-클로로-6[2-펜에티리드라지노]-9-시클로페틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[2-펜에틸히드라지노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 36

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-메틸부틸)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[(3-메틸부틸)아미노]-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 메틸부틸아민 및 트리에틸아민으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-메틸부틸)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-메틸부틸)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[(3-메틸부틸)아미노]-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-메틸부틸)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 37

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(부틸)아미노]-9-(2-프로필)퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[(부틸)아미노]-9-(2-프로필)퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-(2-프로필)퓨린(제조를 위해 실시예 15 참조), 부틸아민 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[(부틸)아미노]-9-(2-프로필)퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(부틸)아미노]-9-(2-프로필)퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[(부틸)아미노]-9-(2-프로필)퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(부틸)아미노]-9-(2-프로필)퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 38

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(2-푸란메틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-(2-푸란메틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 푸르푸릴아민 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-(2-푸란메틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(2-푸란메틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-(2-푸란메틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(2-푸란메틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 39

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-(2-이미다졸릴)프로필)아미노]-9-(2-프로필)퓨린 트리히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[(3-(2-이미다졸릴)프로필)아미노]-9-(2-프로필)퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-(2-프로필)퓨린(제조를 위해 실시예 19 참조), 3-(2-이미다졸릴)프로필아민 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[(3-(2-이미다졸릴)프로필)아미노]-9-(2-프로필)퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-[(3-(2-이미다졸릴)프로필)아미노]-9-(2-프로필)퓨린 트리히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[(3-(2-이미다졸릴)프로필)아미노]-9-(2-프로필)퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-(2-이미다졸릴)프로필)아미노]-9-(2-프로필)퓨린 트리히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 40

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(4-클로로-2-플루오로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[(4-클로로-2-플루오로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 4-클로로-2-플루오로벤질아민 및 트리에틸아민으로부터 2-클로 로-6-[(4-클로로-2-플루오로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(4-클로로-2-플루오로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 C에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[(4-클로로-2-플루오로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(4-클로로-2-플루오로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 41

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(헥실아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-(헥실아미노)-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, n-헥실아민 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-(시클로헥실아미노)-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(헥실아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-(헥실아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실) 아미노]-6-(헥실아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 42

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(2-플루오로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[(2-플루오로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 2-플루오로벤질아민 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[(2-플루오로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(2-플루오로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[(2-플루오로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(2-플루오로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

실시예 43

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[2-(페닐)에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[2-(페닐)에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 2-아미노에틸벤젠 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[2-(페닐)에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[2-(페닐)에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[2-(페닐)에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[2-(페닐)에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 44

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(프로필아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-(프로필아미노)-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, n-프로필아민 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-(프로필아미노)-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(프로필아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-(프로필아미노)-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(프로 필아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 45

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(벤질아미노)-9-(2-프로필)퓨린 트리히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-(벤질아미노)-9-(2-프로필)퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-(2-프로필)퓨린(제조를 위해 실시예 15 참조), 벤질아민 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-(벤질아미노)-9-(2-프로필)퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(벤질아미노)-9-(2-프로필)퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-(벤질아미노)-9-(2-프로필)퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(벤질아미노)-9-(2-프로필)퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 46

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[3-(1-이미다졸릴)프로필아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[3-(1-이미다졸릴)프로필아미노]-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로- 9-시클로펜틸퓨린, 1-(3-아미노프로필)이미다졸 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[3-(1-이미다졸릴)프로필아미노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[3-(1-이미다졸릴)프로필아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[3-(1-이미다졸릴프로필아미노]-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[3-(1-이미다졸릴)프로필아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 47

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[벤질아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[벤질아미노]-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 벤질아민 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[벤질아미노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[벤질아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[벤질아미노]-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[ 벤질아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 48

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(2,4-디클로로벤질)아미노]-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[(2,4-디클로로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 2,4-디클로로벤질아민 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[(2,4-디클로로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(2,4-디클로벤질아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[(2,4-디클로로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(2,4-디클로벤질아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 49

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[2,2,2-트리플루오로에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[2,2,2-트리플루오로에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 2,2,2-트리플루오로에틸아민 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[2,2,2-트리플루오로에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[2,2,2-트리프루오로에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[2,2,2-트리플루오로에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[2,2,2-트리프루오로에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 50

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(4-플루오로벤질아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[(4-플루오로벤질)아미노)]-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 4-플루오로벤질아민 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[(4-플루오로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(4-플루오로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[4-(1-(2- 페닐에틸))피페리디닐아미노]-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(4-플루오로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 51

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-요오도벤질)아미노]-9-(2-프로필)퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[(3-요오도벤질)아미노]-9-(2-프로필)퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린(제조를 위해 실시예 15 참조), 3-요오도벤질아민 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[(3-요오도벤질)아미노]-9-(2-프로필)퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-요오도벤질)아미노]-9-(2-프로필)퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[(3-요오도벤질)아미노]-9-2-(프로필)퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-요오도벤질)아미노]-9-(2-프로필)퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 52

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[2,2,2-트리플루오로에틸히드라지노]-9- 시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[2,2,2-트리플루오로에틸히드라지노]-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 2,2,2-트리플루오로에틸히드라진 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[2,2,2-트리플루오로에틸히드라지노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(2,2,2-트리플루오로에틸히드라지노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[(3-히드록시프로필)아미노]-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[2,2,2-트리프루오로에틸히드라지노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 53

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-히드록시프로필)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[(3-히드록시프로필)아미노]-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 3-아미노-1-프로판올 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[(3-히드록시프로필)아미노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-히드록시프로필)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[(3-히드록시프로필)아미노]-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-히드록시프로필)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

CIMS(NH₃) 374(MH⁺);Rf(분) = 3.17.

실시예 54

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(5-히드록시-1,5-디메틸에틸헥실)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[(5-히드록시-1,5-디메틸헥실)아미노]-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 6-아미노-2-메틸-2헵탄올 히드로클로라이드 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[(5-히드록시-1,5-디메틸헥실)아미노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(5-히드록시-1,5-디메틸헥실)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[(5-히드록시-1,5-디메틸헥실)아미노]-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(5-히드록시-1,5-디메틸헥실)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

실시예 55

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(4-히드록시페닐)에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[(4-히드록시페닐)에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 티라민 히드로클로라이드 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[(4-히드록시페닐)에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(4-히드록시페닐)에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[(4-히드록시페닐)에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(4-히드록시페닐)에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드 제조하였다.

실시예 56

2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(8-아미노옥틸)아미노]-9-시클로펜틸퓨 린 디히드로클로라이드

반응식 A, 단계 b: 2-클로로-6-[(8-아미노옥틸)아미노]-9-시클로펜틸퓨린

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 b에 기재된 바와 같이 2,6-디클로로-9-시클로펜틸퓨린, 1,8-디아미노옥탄 및 트리에틸아민으로부터 2-클로로-6-[(8-아미노옥틸)아미노]-9-시클로펜틸퓨린을 제조하였다.

반응식 A, 단계 c: 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(8-아미노옥틸)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드

기본적으로 실시예 1, 반응식 A, 단계 c에 기재된 바와 같이 2-클로로-6-[(8-아미노옥틸)아미노]-9-시클로펜틸퓨린으로부터 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(8-아미노옥틸)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드를 제조하였다.

본 명세서에 사용된 "신생물성 질병 상태"란 용어는 제어되지 않게 증식하는 특징이 있는 비정상적인 상태 또는 증상을 의미한다. 신생물성 질환 상태에는 백혈병, 암종 및 선암종, 육종, 흑색종, 및 혼합된 유형의 신생물이 포함된다.

백혈병은 급성 림프모세포성 백혈병, 만성 림프구성 백혈병, 급성 골수모세포성 백혈병 및 만성 골수성 백혈병을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.

암종 및 선암종은 경부암, 유방암, 전립선암, 식도암, 위암, 소장암, 결장암, 난소암 및 폐암을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.

육종은 골종, 골원성 육종, 지방종, 지방육종, 혈관종 및 혈관육종을 포함하 지만 이에 제한되지는 않는다.

흑색종은 멜라닌 결핍성 흑색종 및 멜라닌성 흑색종을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.

혼합된 유형의 신생물은 암육종, 림프 조직 유형의 여포성 세망 세포 육종 및 호지킨병을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.

"치료 유효량"의 화학식 Ⅰ 화합물이란 용어는 환자에 단일 투여 또는 다중 투여했을 때, 신생물의 생장 또는 신생물의 전이를 제어하거나, 아팝토시스를 억제하는데 유효한 양을 의미한다. 본 발명 화합물의 치료 유효량은 연령, 체중, 치료할 신생물의 유형, 다른 신생물 억제제와의 배합도, 및 당업계에 공지된 기준(임상 및 실험실의 표준 시험 및 방법을 사용함)에 따라 다를 것이다. 치료 유효량의 본 발명 화합물은 연령, 체중 및 당업계 숙련자에게 공지된 다른 기준 뿐만 아니라, 세포의 아팝토시스 및 불완전 굴곡 골절의 부위에 대한 감응성 유형에 따라 다를 것이다.

신생물의 "생장을 조절하는"이란 용어는 신생물이 생장 또는 신생물의 전이를 느리게 하거나, 방해하거나, 억제하거나, 또는 멈추게하는 것을 의미한다. 또한, 신생물의 "생장을 조절하는"이란 용어는 신생물 또는 신생물의 전이체를 죽이는 것을 의미한다.

치료 유효량의 본 발명 화합물이란 환자에 단일 투여 또는 다중 투여했을 때, 신생물 억제 효과 또는 아팝토시스 억제 효과를 나타내는 양을 의미한다. "신생물 억제 효과"란 신생물 세포가 생장하는 것을 추가로 느리게 하거나, 방해하거 나, 억제하거나, 또는 멈추게하는 것을 의미한다.

본 발명 화합물의 신생물 억제 유효량은 당업계 숙련자인 진단 전문가에 의해, 공지된 기술을 사용하고 유사한 환경하에서 수득된 결과를 관찰하여 쉽게 측정할 수 있다. 유효량을 결정하는데 있어서, 진단 전문가에 의해 고려되는 많은 인자가 있는데, 여기에는 포유동물의 종, 그의 크기와 연령 및 일반 건강, 관련된 특이 질환, 질환의 관련 정도 및 심각도, 개개 환자의 반응, 투여될 특정 구조식의 화합물, 투여 방식, 투여될 제제의 생체 이용률, 선택된 투여 방법, 부수 약물의 용도, 및 다른 적절한 환경이 포함되지만 이에 제한되지는 않는다.

본 발명의 추가의 실시양태는 예방 유효량의 신생물 억제 화합물을 투여하는 것을 포함하는, 신생물성 질환 상태의 발생 위험이 있는 환자의 예방 방법을 포함한다. "신생물성 질환 상태의 발생 위험이 있는 환자"란 용어는 신생물에 대한 유전적 소양을 갖고 있거나, 발암물질에의 노출, 음식물, 연령 또는 신생물성 질환 상태의 발생과 관련된 다른 인자에 의해 신생물성 질환에 걸렸거나 현재 걸린 환자를 의미한다. 종양 유전자 바이러스에 양성 반응을 보이는 환자를 포함하는, 신생물성 질환 상태의 발생 위험이 있는 우선적인 환자는 신생물의 초기 치료에 증상이 완화되고 있거나, 흡연을 하거나, 과거에 석면과 같은 발암물질에 노출된 경험이 있거나, 또는 다양한 신생물성 유전자 머커에 양성반응을 나타내는 환자를 의미한다.

종양 유전자 바이러스는 암과 관련된 바이러스이다. 예를 들면, 닭의 라우스 육종 바이러스, 토끼의 숍 유두종 바이러스, 쥐의 백혈병 바이러스가 다양한 암 을 유발하는 기능을 하는 동물 바이러스로 알려져 있다. 인간 유두종 바이러스는 생식기의 암과 관련되어 있다. 연체동물의 전염성 바이러스는 연체동물의 전염성 종양과 관련되어 있다. 인간 파포바바이러스인 JC 바이러스는 백혈병 및 림프종과 같은 세망내피계 질환과 관련되어 있다. 인간 T-세포 림프영양성 바이러스(HTLV) 유형 1 및 유형 2는 몇몇 인간 백혈병 및 림프종과 관련되어 있다. 인간 면역결핍 바이러스(HIV) 유형 1 및 유형 2는 AIDS를 유발한다. 엡스타인바 바이러스는 비인강 악성 종양, 아프리카 버키트 림프종 및 이식 수용체의 면역억제 기관에서의 림프종을 포함하는 다양한 악성 종양과 관련되어 있다.

유전자 마커에는 BRCA 1, bcl-1/PRAD1, 싸이클린 D1/CCND1, p16, cdk4, 특히 Arg24Cys 돌연변이, p16^INK4a에서의 돌연변이 및 재배열 등이 있다. 유전자 마커는 다양한 신생물의 소양과 관련되어 있다. 예를 들면, BRCA 1 유전자가 변화되면 유방암 및 난소암에 걸릴 위험이 높아진다. 다른 유전자 머커로는, 뇌암 및 전립선암에서 MMCA1과 상호작용하는 MMSC1 유전자의 변화, 유방암 및 난소암에서 BRCA1 유전자와 연관되고 BRCA1 유전자와 결합하며 E1A 종양 유전자 경로와 연관된 CtIP 유전자의 변화, 및 아팝토시스의 활성화에 의해 폐암에서 종약 억제제로 작용하는 세포 주기 조절 유전자인 MKK3 유전자의 변화가 있다. 또한, 신생물성 질환 상태가 발생할 위험이 있는 환자로는 다양한 세포 주기 단백질(cdk4, 싸이클린 B1 및 E 포함)을 과다 발현하는 환자가 포함된다. 신생물성 질환 상태가 발생할 위험이 있는 환자로는 종양 머커의 양이 증가된 환자가 포함된다. 공지된 종양 머커에는 전립선암의 마커인 전립선 특이적 항원(PSA) 및 혈장의 인슐린-유사 생장인자-1(IGF-1)이 포함된다. 핵의 매트릭스 단백질(nuclear matrix protein, NMP)은 암, 특히 방광암 및 결장암과 관련되어 있다.

본 발명 화합물의 일일 유효량은 체중 kg당 약 25ng(25ng/kg/일) 내지 500mg/kg/일으로 기대된다. 본 발명 화합물의 바람직한 유효량은 약 1㎍/kg/일 내지 500㎍/kg/일이다. 본 발명 화합물의 더욱 바람직한 유효량은 약 1㎍/kg/일 내지 50㎍/kg/일이다.

본 발명 화합물은 상기 화합물이 생체에서 이용되는 임의의 형태 또는 방식으로 유효량이 투여된다. 본 발명 화합물은 경구, 피하, 근육내, 정맥내, 피부, 비강내, 직장 및 안구 등으로 투여될 수 있다. 경구 투여가 바람직하다. 제약 조성물을 제조하는 당업계 숙련자는 화합물의 특성, 치료될 질환, 질환의 단계, 다른 환자의 반응 및 적절한 환경을 기준으로 본 발명 화합물의 적합한 투여 형태를 쉽게 결정할 수 있다.

화합물의 조성물을 제조하기 위해, 본 발명의 화합물을 담체, 부형제 또는 다른 화합물과 혼합할 수 있다. 본 발명 화합물의 조성물은 하나 이상의 불활성 담체와 혼합된 형태의 화합물을 포함한다. 본 발명 화합물의 조성물은 대량 수송 또는 저장에 편리한 유용한 화합물이다. 불활성 담체는 분해되지도 않고, 본 발명의 화합물과 공유결합적으로 반응하지 않는 물질이다.

불활성 담체는 고체, 반고체 또는 액체 물질일 수 있다. 바람직한 담체는 물, 수성 완충액, 유기 용매 및 제약상 허용되는 담체 또는 부형제이다. 바람직한 수성 완충액은 본 발명의 화합물이 분해되지 않는 범위에서 완충작용을 한다. 바람직한 완충 범위는 약 pH 4 내지 약 pH 9이다. 바람직한 유기 용매는 아세토니트릴, 에틸 아세테이트 및 헥산이다.

본 발명 화합물의 제약 조성물은 하나 이상의 제약상 허용되는 담체 또는 부형제와 혼합된 형태의 화합물을 포함한다. 제약상 허용되는 담체 또는 부형제는 본 발명 화합물에 대해 비히클 또는 매체로 작용할 수 있는, 고체, 반고체 또는 액체 물질일 수 있다. 제약상 허용되는 담체 또는 부형제로 적합한 것은 당업계 숙련자에게 잘 공지되어 있다.

본 발명 화합물의 제약 조성물은 투여 경로에 따라 변화될 수 있다. 투여 경로가 경구 투여, 비경구 투여 또는 국소 투여일 경우, 본 발명 화합물의 바람직한 제약 조성물은 정제, 알약, 캡슐, 엘리서제, 시럽, 웨이퍼제, 씹기용 껌(chewing gum), 좌약, 용액제 또는 현탁제이다.

바람직한 경구 투여용 제약 조성물은 불활성 희석제 또는 식용 담체와 혼합된 본 발명의 화합물을 포함한다. 경구 투여용 제약 조성물의 바람직한 형태는 정제, 알약, 캡슐, 엘릭서제, 시럽, 웨이퍼제, 씹기용 껌, 용액제 또는 현탁제이다.

본 발명의 바람직한 제약 조성물은 약 4% 내지 약 80%의 본 발명 화합물을 포함한다. 본 발명의 제약 조성물은 바람직하게 약 50ng 내지 약 500㎍의 본 발명 화합물을 포함하고, 더욱 바람직하게는 약 1㎍ 내지 약 200㎍의 본 발명 화합물을 포함한다.

본 발명의 화합물은 단독으로 투여되거나, 제약상 허용되는 담체 또는 부형 제와 배합된 제약 조성물의 형태로 투여될 수 있다.

하기는 본 명세서에 사용된 약어를 설명한 것이다. mg은 밀리그램이고, ㎍은 마이크로그램이고, ng은 나노그램이고, TEA는 트리에틸아민이고, mmol은 밀리몰이고, mL은 밀리리터이고, C는 섭씨이고, hr은 시간이고, TLC는 박층 크로마토그래피이고, CH₂CL₂는 메틸렌 클로라이드이고, MeOH는 메탄올이고, EtOH는 에탄올이고, N은 정상이고, HCl은 염산이고, TFA는 트리플루오로아세트산이고, DIEA는 디이소프로필에틸아민이고, RT PCR은 역전사 중합효소 연쇄반응이고, HEPES는 4-(2-히드록시에틸-1-피페라진 에탄술폰산)이고, MgCl₂는 염화마그네슘이고, EGTA는 에틸렌 글리콜-비스(β-아미노에틸에테르)-N,N,N',N'-테트라이세트산이고, EDTA는 에틸렌디아민테트라아세트산이고, DTT는 디티오트레이톨이고, MOI는 감염 다중도이고, NaF는 플루오르화나트륨이고, BSA는 소의 혈청 알부민이고, p.o.는 경구 투여이고, i.v.는 정맥내 주사이며, s.c.는 피하 투여이다.

실시예 57

싸이클린-의존성 키나아제 4 분석

cdk-4를 억제하는 IC₅₀ 값을 하기의 방법에 의해 측정하였다.

기질:

글루타티온 S-전이효소와 망막모세포종의 융합 단백질(GST-Rb)(문헌 [Kaelin, W. G., Jr., et al., Cell 64:521-532, 1991] 참조)을 윌리암 캘린(William Kaelin) 박사에게 얻었다. 플라스미드 pGEX-Rb(379-928)를 대장균에 형질전환하여 GST-Rb를 제조하였다. 형질전환된 박테리아를 밤새 포화되도록 배양하고 나서, YT 배지로 희석하고 37℃에서 2시간 동안 배양하였다. 0.1mM의 이소프로필트오글리코시드와 함께 3시간 동안 배양하여 단백질의 발현을 유도하였다. 원심분리로 침전시킨 후에, 10% 사르코실이 함유된 STE 완충액(0.1mM NaCl, 10mM Tris, pH 8.0, 0.1mM EDTA) 중에서 세포를 초음파로 용해시켰다. 원심분리에 의해 입자성 물질을 제거하고, 4℃에서 용해물을 글루타티온-세파로오스와 함께 인큐베이션하였다. 상기 비드를 키나아제 완충액으로 세척하고 나서, SDS-PAGE로 분리한 후, 쿠마시 블루(Coomassie blue)로 염색하고, 알려진 농도의 단백질 표준을 이용하여 단백질을 정량화하였다.

곤충 세포에서 CDK4/싸이클린 D1의 발현:

공개된 아미노산 서열을 기초로 역으로 추론한 프라이머를 사용하는 RT PCR에 의해 인간 싸이클린-의존성 키나아제 4(cdk4)를 클로닝하였다(문헌 [Matsushime, H, et al., Cell, 71:323-334, 1992] 참조). MCF-7 세포의 게놈 DNA를 사용하여 RT PCR로 인간 싸이클린 D1에 대한 cDNA를 클로닝하였다. 상기 서열은 공개된 서열(문헌 [Xiong, Y., et al., Cell, 65:691-699, 1991] 참조)과 일치하였다. cdk4 및 싸이클린 D1에 대한 cDNA 모두를 pFastBac(Life Technologies)에 클로닝하고, 라이프 테크놀로지스(Life Technologies, 카탈로그 번호 #10359-016)에서 구입한 백-투-백(Bac-to-Bac) 베큘로바이러스 발현 시스템을 이용하여 상기 cDNA를 포함하는 재조합 백미드(Bacmid) DNA를 위치-지정 전위(transposition)에 의해 제조하였다. Sf9 곤충 세포를 형질감염시키는데 백미드 DNA를 사용하여 재조 합 바이러스를 제조하였다. 바이러스의 플라크(plaque) 정제 이후에, 타이터(titer)가 높은 원액이 될 때까지 바이러스 제조물을 증폭하였다. cdk4 및 싸이클린 D1 모두에서, 감염 후 72시간에 MOI가 0.1인 경우 재조합 단백질의 공동 발현은 최적 상태이었다.

4℃의 500p.s.i의 질소 압력하에서 5분동안 PARR 봄(bomb)을 사용하여, 50mM HEPES(pH 7.5), 10mM MgCl₂, 1mM DTT, 0.1mM 페닐메틸술포닐 플루오라이드, 5㎍/ml 아프로티닌 및 5㎍/ml 류펩틴의 혼합물 중에서 cdk4 및 싸이클린 D1이 함께 감염된 Sf9 세포를 용해시켜 세포 용해물을 제조하였다. 4℃에서 10,000xg로 20분 동안 원심분리하여 불용성 물질을 침전시켰다. 상층액에 글리세롤이 10%가 되도록 가하고 -81℃에서 보관하였다.

키나아제 분석:

미리 젖은 밀리포어 멀티스크린(Millipore Multiscreen) 96-웰 여과 플레이트(0.65㎛ 듀라포어(Durapore) 여과지)에 200㎕의 키나아제 완충액(50mM HEPES, pH 7.5, 10mM MgCl₂, 1mM EDTA)을 넣었다. 글루타티온-세파로오스 비드에 결합된 GST-Rb(0.5㎍)를 각 웰에 50㎕씩 넣고, 진공으로 용액을 제거하였다. 상기 분석물은 50mM HEPES, pH 7.5, 10mM MgCl₂, 1mM EDTA, 1mM DTT, 1mM EGTA, 10mM β-글리세로포스페이트, 0.1mM 나트륨 오르토바나데이트, 0.1mM NaF, 0.25% BSA, 10μM ATP 및 0.25μCi [γ³³P]-ATP를 포함하였다. 0.1㎍의 cdk4/싸이클린 D1(곤충 세포 용해물)을 가하여 분석을 개시하였다. 37℃에서 30분 동안 인큐베이션하였다. 밀리포어 베큠 매니폴드(Millipore Vacuum Manifold)로 여과하여 반응을 종결하였다. TNEN(20mM Tris, pH 8.0, 100mM NaCl, 1mM EDTA, 0.5% 노니데트(nonidet) P-40)으로 4회 세척하였다. 상온에서 상기 플레이트를 건조시킨 후에, 여과지 플레이트를 어댑터(adaptor) 플레이트에 놓고, 각 웰에 40㎕의 마이크로신트-O(등록상표) (Microscint-O

)(Packard)를 가하였다. 정점 밀봉(Top Seal) A 필름을 사용하여 플레이트를 덮은 후, 정점 섬광 계수기(Top Count Scintillation Counter)로 계수하였다.

상기의 결과를 표 1에 기재하였다.

실시예 58

cdk-2 억제 연구

CDK-2를 억제하는 IC₅₀ 값을 하기의 방법에 의해 측정하였다.

싸이클린-의존성 키나아제 2 분석

기질 : 상기 cdk4/싸이클린 D1에 대해 기재된 GST-Rb

곤충 세포에서 CDK2/싸이클린 E의 발현

인간 cdk2 및 싸이클린 E에 대한 재조합 베큘로바이러스를 버클리 캘리포니아 대학의 데이비드 모간 박사에게 얻었다(문헌 [Desai, D. et al. Molec. Biol. Cell, 3:571-582, 1992] 참조). 감염 후 72시간에 MOI가 각각 0.1 및 1.0인 경우 cdk2 및 싸이클린 E 재조합 단백질의 공동 발현은 최적 상태이었다.

키나아제 분석 :

cdk2 및 싸이클린 E의 분석 조건은 기질을 포함하여 cdk4 및 싸이클린 D1의 분석 조건과 동일하였다. 분석시 재조합 cdk2 및 싸이클린 E의 농도는 분석 부피 100㎕ 당 0.1㎍이었다. 인큐베이션은 30℃에서 30분 동안 수행하였다.

상기의 결과를 표 1에 기재하였다.

실시예 59

cdk7/싸이클린 H 분석 프로토콜

기질 : RNA 중합효소Ⅱ의 CTD 서열을 기초로한 H₂N-RRR(YSPTSPS)₄-COOH라는 펩티드 기질

곤충 세포에서 CDK7/싸이클린 H의 발현

역전사 PCR에 의해 인간 cdk7을 클로닝하였다. 상기 서열은 문헌 [Tassan, J. P., et al., J. Cell Biol. 127:467-478, 1994] 및 [Darbon, J. M. et al., Oncogene, 9:3127-3138, 1994]에 보고된 바와 일치하였다. 또한, 싸이클린 H의 cDNA를 역전사 PCR에 의해 클로닝하였고, 그 서열은 문헌 [Fisher & Morgan, Cell, 78:713-724, 1994]에 보고된 바와 일치하였다. 상기 cdk4 및 싸이클린 D1에 기재된 바와 같이 재조합 백미드 DNA 및 바이러스 원액을 제조하였다. 감염 후 48시간에 MOI가 각각 1 및 2인 경우 cdk7 및 싸이클린 H 재조합 단백질의 공동 발현은 최적 상태이었다.

키나아제 분석 :

키나아제 분석은 싸이클린 H에 의해 성취되는 싸이클린-의존성 키나아제 7에 의한 펩티드 기질의 인산화(RNA 중합효소Ⅱ의 C-말단 도메인 기재)를 측정하는 것이다. 상기 효소에 의해 [γ³³P]-인산은 [γ³³P]-ATP로부터 펩티드 기질로 옮겨진다. 상기 분석은 96-웰 V-바닥 플레이트에서 수행하고, 반응을 종결시킨 후에 96-웰 밀리포어 멀티스크린 포스포셀룰로오스 여과 플레이트에 옮겼다. 인산 용액으로 세척한 후에 상기 펩티드는 포스포셀룰로오스 막에 붙어 있었다.

방법 :

96-웰 V-바닥 플레이트에서 총 부피 100㎕로 효소 분석을 수행하였다. 분석물은 15μM ATP, 0.5μCi[γ³³P]-ATP, 50mM Hepes, pH 7.5, 10mM MgCl₂, 1mM EDTA, 1mM DTT, 10mM β-글리세로포스페이트, 0.1mM 나트륨 오르토바나데이트, 0.1mM NaF 및 10μM 펩티드 기질을 포함하였다. 분석을 개시하기 위해, 0.125ng의 cdk7 및 싸이클린 H(곤충 세포 용해물)을 가하고, 24℃에서 5분 동안 인큐베이션하였다. 각각의 시료에 300mM의 차가운 인산 40㎕를 가하여 반응을 종결시켰다. V-바닥 웰의 내용물을 밀리포어 96-웰 포스포셀룰로오스 여과 플레이트로 옮겼다. 상온에서 15분 동안 교반한 후에, 여과 플레이트를 진공으로 만들고, 75mM의 차가운 인산 100㎕로 4회 세척하였다. 암거(暗渠) 부품을 제거한 후에, 여과지를 완전히 건조시키고, 멀티스크린 마이크로플레이트 어댑터에 놓은 후, 각 웰에 40㎕의 마이크로신트-O를 가하였다. 정점 밀봉(Top-Seal) A 필름으로 플레이트를 덮은 후, 패커드사의 정점 섬광 계수기를 사용하여 1.5분 동안 계수하였다.

상기의 결과를 표 1에 기재하였다.

실시예 60

CDK1/싸이클린 B [ ³³ P] SPA 분석 프로토콜

기질 :

본 분석에서는 히스톤 H1의 생체외 p34^cdc2 인산화 부위에서 유래한 바이오티닐화된 기질 펩티드(바이오틴-PKTPKKAKKL)을 사용하였다.

곤충 세포에서 CDK1/싸이클린 B1의 발현 :

역전사 PCR에 의해 인간 cdk1을 클로닝하였다. 상기 서열은 문헌 [Lee, M. G. and Nurse, P. Nature, 327:31-33, 1987]에 보고된 바와 일치하였다. 또한, 싸이클린 H의 cDNA를 RT PCR에 의해 클로닝하였고, 그 서열은 문헌 [Pines, J. and Hunter, T., Cell, 58:833-846, 1989]에 보고된 바와 일치하였다. 상기 cdk4 및 싸이클린 D1에 기재된 바와 같이 재조합 백미드 DNA 및 바이러스 원액을 제조하였다. cdk1 및 싸이클린 B1 모두에서, 감염 후 48시간에 MOI가 0.1인 경우 재조합 단백질의 공동 발현은 최적 상태이었다.

키나아제 분석 :

p34^cdc2 SPA [³³P] 키나아제 효소 분석 키트를 아머샴 라이프 사이언스(Amersham Life Science, 카탈로그 번호 #RPNQ0170)에서 구입하였고, 제조자의 지시에 따라 96-웰 형 분석을 수행하였다. 각각의 분석물은 총 분석 부피 100㎕ 중에 50mM Tris-HCl, pH 8.0, 10mM MgCl₂, 0.1mM Na₃VO₄(나트륨 오르토바나데 이트), 0.05μM ATP, 0.2μCi ³³P-ATP, 2μM DTT, 0.75μM 바이오티닐화 펩티드 및 3㎍ cdk1/싸이클린 B 곤충 세포 용해물을 함유하였다. 30℃에서 30분 동안 인큐베이션하였다. 종결 완충액(인산 완충 식염수 중에 50μM ATP, 5mM EDTA 및 0.1%(부피/부피) 트리톤 X-100) 200㎕를 가하여 반응을 종결시키고, 스트렙타비딘(streptavidin)으로 코팅된 SPA 비드(2.5mg/ml)을 가하였다. 상기 플레이트를 상온에 밤새 놓아 두고, 정점 밀봉 A 필름으로 플레이트를 덮은 후, 패커드사의 정점 섬광 계수기로 계수하였다. 그래프패드 프리즘(GraphPad Prism) 소프트웨어로 데이타를 S형 곡선에 맞추어 IC₅₀ 값을 측정하였다.

실시예 61

생체외 종양 억제

생체외 증식 분석 :

문헌 [Skehan, P., et al., J. Natl. Cancer Inst. 82:1107-1112, 1990]에 기재된 바와 같이 술포로다민(sulforhodamine) B 분석을 이용하여 종양 세포의 증식을 측정하였다. 트립신-EDTA를 이용하여 종양 세포를 수획하고, 트리판 블루(trypan blue)가 차단된 세포를 계수한 후, 96-웰에 넣어 37℃에서 밤새 배양하였다. 배양용 배지로 약물을 희석한 후에 웰에 가하였다. 3일 후에 배지를 제거하고, 신선한 약물을 함유하는 배지를 공급한 후에 추가로 4일 동안 배양하였다. 이어서, 4℃에서 60분 동안 0.1ml의 10% 트리클로로아세트산으로 처리하여 세포를 고정시켰다. 수도꼭지의 물로 플레이트를 5회 세척하고, 공기중에서 건조시킨 후, 1% 아세트산 중의 0.4% 술포로다민 B로 30분 동안 염색하고 나서, 공기중에서 건조시켰다. 10mM Tris(pH10.5) 0.1ml로 5분 동안 처리하여 결합된 염료를 가용화시키고, 타이터텍 멀티스캔(Titertek Multiscan) MCC/340 플레이트 판독기를 이용하여 490nM에서 흡광도를 측정하였다.

다른 방법으로, 세포 증식을 정량화하기 위해 CyQUANT 세포 증식 분석을 사용하였다.

CyQUANT 세포 증식 분석 :

다른 방법으로, 종양 세포 증식을 정량화하기 위해 CyQUANT 세포 증식 분석을 사용하였다. 트립신-EDTA를 이용하여 종양 세포를 수획하고, 트리판 블루(trypan blue)가 차단된 세포를 계수한 후, 96-웰에 넣어 37℃에서 밤새 배양하였다. 배양용 배지로 약물을 희석한 후에 웰에 가하였다. 3일 후에 배지를 제거하고, 플레이트를 -80℃에서 30분 이상 동결시켰다. 플레이트를 해동시킨 후에, 각 웰에 세포 용해 완충액(Molecular Probes #C-7026) 중의 CyQUANT-GR 200㎕를 가하고, 상온에서 3 내지 5분 동안 인큐베이션하였다. 분자 장치(Molecular Device) Fmax 형광 마이크로플레이트 판독기에서 CyQUANT-GR의 형광을 측정(여기 485nm, 방출 530nm)하였다.

세포주 :

MCF7은 인간 유방선암종으로 호르몬-의존성(HTB 22)이고,

MDA-MB-231은 인간 유방선암종으로 호르몬-독립성(HTB 26)이고,

HT-29는 인간 결장선암종으로, 등급 Ⅱ로 비교적 잘 분화(HTB 38)되어 있고,

HCT-15는 인간 결장선암종(CCL 225)이고,

A549는 인간 비-소세포 폐 암종(CCL 185)이고,

PC-3는 인간 전립선암종으로 호르몬-독립성(CRL 1435)이며,

DU 145는 인간 전립선 암종으로 호르몬-독립성(HTB 81)이다.

상기 모든 세포주는 아메리칸 타입 컬쳐 콜렉션으로부터 수득(ATCC 수탁 번호는 괄호에 삽입)하였다. 페놀 레드가 포함되지 않고, 5% 송아지 태아 혈청, 0.01mg/ml 젠타마이신 및 3mM L-글루타민이 제공되는 개질 최소 필수 배지(Biofluids)에서 MCF-7, MDA-MB-435 및 MDA-MB-231 세포주를 배양하였다. 다른 모든 세포주는 5% 송아지 태아 혈청, 0.01mg/ml 젠타마이신 및 3mM L-글루타민이 제공되는 RPMI 1640 배지(Life Technologies)에서 배양하였다.

상기의 결과를 표 1A 내지 1N에 기재하였다.

실시예 62

생체내 분석

신장하부 캡슐 분석 방법

누드 생쥐를 양의 공기 압력하에서 마이크로아이솔레이터(microisolator) 우리에 수용시켰다. 외과 처치 및 투여를 라미나 유동 캐비넷에서 수행하였다. 신장 하부 분석을 문헌[Bogden, A.E., Kelton, D.E., Cobb, W.R. and Esber, H.J. Arapid screening method and A.A.Ovejera (eds.), Proceedings of the Symposium on the Use of Athnmic (Nude) Mice in Cancer Research, pp 231-250. New York: Gustav Fischer New York, Inc. 1978]에 기재된 바와 같이 수행하였다. 간단히 말해, 종양 상태가 유지된 생쥐로부터 얻은 400 내지 500 mm³의 종양을 1 mm³의 조각으로 자르고, 접안마이크로미터 및 해부현미경을 이용하여 크기를 조사하였다. 신장을 밖으로 꺼내고, 종양 단편을 암컷 누드 생쥐(생후 6 내지 8 주)의 신장 캡슐하에서 13 Ga 투관침을 이용하여 이식하였다. 이식 후, 종양 단편의 기장 길고, 가장 짧은 직경을 접안마이크로미터 및 해부현미경을 이용하여 측정하였다. 신장을 체강에 다시 놓고, 체벽 절개부를 실크 봉합선으로 봉하고 피부 절개부를 상처용 클립으로 봉하였다. 이식을 한지 1일에 약물 처치를 하고, 신장이 외부로 노출되는 시기에 12 시간 동안 계속 처치를 하고 상기와 같이 종양 크기를 측정하였다. 종양 체적을 다음과 같이 계산하였다. V = 길이 X 너비²/2(문헌[Houchens, D.P., Ovejera, A.A., and Barker, A.D.. The therapy of human tumors in athymic (nude). In: D.P. Houchens and A.A.Ovejera (eds.), Proceedings of the Symposium on the Athymic (Nude) Mice in Cancer Research, pp. 267-280. New York: Gustav Fischer New York, Inc., 1978.] 참조). 결과를 하기 표 2에 나타냈다.

누드 생쥐에서 PC-3 인간 전립선 종양 생장의 억제 (실험 #1 신장하부 캡슐 분석)

실험 #1		V/VO, mm3 (평균 ± s.e.m.)	%T/Cb
처치 하지않음		4.4 ±0.8a	100
실시예 1	1 ㎎/㎏ (매일 복강내 투여)	4.8 ±3.1a	109
	3 ㎎/㎏ (매일 복강내 투여)	2.0 ±1.0a	44
aV/VO= 0일의 체적/12일째의 체적 b% T/C = (처치된 동물의 12일째에서의 평균 체적/대조용 동물의 12일째의 평균 체적) X 100

Claims (35)

1. 화학식 Ⅰ의 화합물, 그의 제약학적으로 허용가능한 염 또는 광학 이성질체.

   <화학식 Ⅰ>

   

   식중,

   R은 R2, R2NH- 또는 H₂N-R3-로 이루어진 군으로부터 선택되고;

   R2는 C₁-C₈알킬 및 화학식 Ⅱ로 이루어진 군으로부터 선택되고;

   <화학식 Ⅱ>

   

   상기 식에서,

   Z는 페닐, N, S 및 O로 이루어진 군으로부터 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 함유하는 5- 내지 10-원 헤테로고리, 및 C₃-C₈시클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고, 각각의 R4는 독립적으로 수소 또는 C₁-C₄알킬이고, n은 정수 1 내지 8이며;

   C₁-C₈알킬 및 Z 각각은 동일하거나 상이할 수 있으며, Hal, OH 및 C₁-C₄알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 1 내지 3 개의 치환체로 임의로 치환되고;

   R3는 C₁-C₈알킬렌이며,

   R1은 시클로펜틸 및 이소프로필로 이루어진 군으로부터 선택된다.
2. 삭제
3. 제1항에 있어서, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(부틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(옥틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-(3-메틸-4-히드록시)부틸)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(5-히드록시-1,5-디메틸헥실)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[5-(히드록시)펜틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-히드록시프로필)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[(트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(펜틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(메틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(에틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-메틸부틸)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(부틸)아미노]-9-(2-프로필)퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(헥실아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(프로필아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[2,2,2-트리플루오로에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, (S)-2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(α-메틸벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(3-요오도벤질아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3,4-디클로로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-메틸벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-클로로)벤질아미노]-9-(2-프로필)퓨린 디히드로클로라이드, (R)-2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(α-메틸벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(2-클로로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(4-페닐부틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[3-(페닐)프로필아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(4-클로로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-클로로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(4-클로로-2-플루오로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(2-플루오로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 다히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[2-(페닐)에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(4-히드록시페닐)에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(벤질아미노)-9-(2-프로필)퓨린 트리히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[벤질아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(2,4-디클로로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(4-플루오로벤질)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-요오도벤질)아미노]-9-(2-프로필)퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-인돌릴)-2-에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[2-(3,4-메틸렌디옥시페닐)에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-피리딜)-2-에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(4-피리딜)메틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[3-(4-모르폴리닐)프로필아미노]-9-시클로펜틸퓨린 트리히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[2-(2-피리딜)에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[2-(4-모르폴리닐)에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 트리히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(2-티오펜메틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(2-벤즈이미다졸릴)메틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(2-테트라히드로피라닐)메틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(4-피리딜)-2-에틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-(2-푸란메틸아미노)-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(3-(2-이미다졸릴)프로필)아미노]-9-(2-프로필)퓨린 트리히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[3-(1-이미다졸릴)프로필아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[3-(2-이미다졸릴)프로필아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(시클로헥실)메틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(시클로프로필)메틸아미노]-9-(2-프로필)퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(시클로프로필)메틸아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[2,2,2-트리플루오로에틸히드라지노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[2-히드록시에틸히드라지노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[2-펜에틸히드라지노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드, 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(4-아미노부틸)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드 또는 2-[트랜스-(4-아미노시클로헥실)아미노]-6-[(8-아미노옥틸)아미노]-9-시클로펜틸퓨린 디히드로클로라이드인 화합물.
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20. 제약학적으로 허용되는 1종 이상의 담체 또는 부형제와 혼합된 제1항의 화합물을 포함하는, 백혈병, 암종, 선암, 육종, 흑색종 또는 혼합된 유형의 신생물을 치료하기 위한 제약 조성물.
21. 제20항에 있어서, 백혈병이 급성 림프모세포성 백혈병, 만성 백혈병, 급성 골수모세포성 백혈병 또는 만성 골수구성 백혈병으로부터 선택되는 것인 제약 조성물.
22. 제20항에 있어서, 암종이 경부암, 유방암, 전립선암, 식도암, 위암, 소장암, 결장암, 난소암 또는 폐암으로부터 선택되는 것인 제약 조성물.
23. 제20항에 있어서, 선암이 경부암, 유방암, 전립선암, 식도암, 위암, 소장암, 결장암, 난소암 또는 폐암으로부터 선택되는 것인 제약 조성물.
24. 제20항에 있어서, 육종이 골종, 골육종, 지방종, 지방육종, 혈관종 또는 혈관육종으로부터 선택되는 것인 제약 조성물.
25. 제20항에 있어서, 흑색종이 멜라닌 결핍성 흑색종 또는 멜라닌성 흑색종으로부터 선택되는 것인 제약 조성물.
26. 제20항에 있어서, 혼합된 유형의 신생물이 암육종, 림프 조직 유형의 여포성 세망 세포 육종 또는 호지킨병으로부터 선택되는 것인 제약 조성물.
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