KR20070017938A

KR20070017938A - Ｒｔｋ 억제제로서의 6-치환된 아닐리노 퓨린

Info

Publication number: KR20070017938A
Application number: KR1020067003095A
Authority: KR
Inventors: 다이 쳉; 퀴앙 딩; 동 한; 나타낼 쉬안더 그레이; 구오바오 장
Original assignee: 아이알엠 엘엘씨
Priority date: 2003-08-15
Filing date: 2004-08-13
Publication date: 2007-02-13

Abstract

본 발명은 cSRC, Lck, FGFR3, Flt3, TrkB, Bmx, 및(또는) PFGFRα 키나제 활성과 연관된 질병 또는 장애를 치료 또는 예방하는 신규 부류의 화합물, 상기 화합물을 포함하는 제약 조성물 및 상기 화합물의 사용 방법을 제공한다.

키나제 활성, 아닐리노 퓨린, RTK 억제제

Description

ＲＴＫ 억제제로서의 6-치환된 아닐리노 퓨린 {6-SUBSTITUTED ANILINO PURINES AS RTK INHIBITORS}

<관련 출원에 대한 상호참조>

본 출원은 미국 가출원: 2003년 8월 15일에 출원된 제60/495,406호; 2003년 11월 21일에 출원된 제60/524,357호; 및 2004년 4월 26일에 출원된 제60/565,367호에 대한 우선권의 이익을 청구한다. 상기 명세서의 전문이 모든 목적을 위해 참고문헌으로 혼입되어 있다.

단백질 키나제는 거대 단백질 군을 나타내는데, 이들은 매우 다양한 세포 과정의 조절 및 세포 기능상의 조절을 유지하는데 중요한 역할을 한다. 이러한 키나제의 비제한적 부분 목록은: 수용체 티로신 키나제, 예컨대 Fms-유사 티로신 키나제 3 (Flt3), 혈소판-유도 성장 인자 수용체 키나제 (PDGF-R), 줄기 세포 인자에 대한 수용체 키나제, c-kit, 신경 성장 인자 수용체, trkB, 및 섬유모세포 성장 인자 수용체 (FGFR3); 비-수용체 티로신 키나제, 예컨대 Abl 및 융합 키나제 BCR- Abl, Fes, Lck 및 Syk; 및 세린/트레오닌 키나제, 예컨대 b-RAF, MAP 키나제 (예를 들어, MKK6) 및 SAPK2β를 포함한다. 이상 키나제 활성은 양성 및 악성 증식 장애 및 면역계 및 신경계의 부적합한 활성으로 야기된 질병을 비롯한 여러 질병 상태에서 관찰되어 왔다.

본 발명의 신규 화합물은 1가지 이상의 단백질 키나제의 활성을 억제하여, 키나제-연관된 질병의 치료에 유용할 것으로 기대된다.

<발명의 요약>

한 국면에서, 본 발명은 화학식 I의 화합물, 및 이의 N-옥시드 유도체, 전구약물 유도체, 보호된 유도체, 각각의 이성질체 및 이성질체의 혼합물; 및 상기 화합물의 제약상 허용되는 염 및 용매화물 (예를 들어, 수화물)을 제공한다.

상기 식에서,

R₁은 수소, 할로, C₁ _- ₆알킬, 할로-치환된-C₁ _- ₆알킬, C₁ _- ₆알콕시, 할로-치환된-C₁ _-6알콕시, -OXOR⁵, -OXR⁶, -OXNR₅R₆, -OXONR₅R₆, -XR₆, -XNR₅R₆ 및-XNR₇XNR₇R₇로부터 선택되고; 여기서, X는 결합, C₁ _- ₆알킬렌, C₂ _- ₆알케닐렌및 C₂ _- ₆알키닐렌으로부터 선택 되고; R₇은 수소 또는 C₁ _- ₆알킬로부터 독립적으로 선택되고;

R₅는 수소, C₁ _- ₆알킬 및 -XOR₇로부터 선택되고; 여기서, X는 결합, C₁ _- ₆알킬렌,C_2-6알케닐렌 및 C₂ _- ₆알키닐렌으로부터 선택되고; R₇은 수소 또는 C₁ _- ₆알킬로부터 독립적으로 선택되고;

R₆은 수소, C₁ _- ₆알킬, C₃ _- ₁₂시클로알킬C₀ _- ₄알킬, C₃ _- ₈헤테로시클로알킬C₀ _- ₄알킬, C_6-10아릴C_0-4알킬 및 C₅ _- ₁₀헤테로아릴C₀ _- ₄알킬로부터 선택되거나; 또는

R₅ 및 R₆은 이들 둘 다가 부착되는 질소 원자와 함께 C₃ _- ₈헤테로시클로알킬 또는 C₅ _- ₈헤테로아릴을 형성하고; 여기서, R₅ 및 R₆에 의해 형성된 임의의 헤테로시클로알킬의 메틸렌은 -C(O)- 또는 -S(O)₂-로 임의로 치환될 수 있고;

여기서, R₆의 임의의 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬 또는 헤테로시클로알킬 또는 R₅ 및 R₆의 조합은 -XNR₇R₇, -XOR₇, -XNR₇R₇, -XC(O)NR₇R₇, -XNR₇C(O)R₇, -XOR₇, -XC(O)OR₇, -XC(O)R₇, C₁ _- ₆알킬, C₃ _- ₈헤테로시클로알킬, C₅ _- ₁₀헤테로아릴, C₃ _- ₁₂시클로알킬 및 C₆ _- ₁₀아릴C₀ _- ₄알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 라디칼로 임의로 치환될 수 있고; 여기서, R₁의 임의의 알킬 또는 알킬렌은 -NR₇C(O)-, -C(O)NR₇-, -NR₇-, -C(O)-, -O-, -S-, -S(O)- 및 -S(O)₂-로부터 선택된 2가의 라디칼로 치환된 메틸렌을 임의로 가질 수 있고; 여기서 R₆의 임의의 알킬 또는 알킬렌은 C₅ _- ₈헤테로 아릴, -NR₇R₇, -C(O)NR₇R₇, -NR₇C(O)R₇, 할로 및 히드록시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 라디칼로 임의로 치환될 수 있고; 여기서, R₇은 수소 또는 C₁ _- ₆알킬로부터 독립적으로 선택되고;

R₂는 수소, C₆ _- ₁₀아릴 및 C₅ _- ₁₀헤테로아릴로부터 선택되고; 여기서, R₂의 임의의 아릴 또는 헤테로아릴은 -XNR₇R₇, -XOR₇, -XOR₈, -XC(O)OR₇, -XC(O)R₇, C₁ _- ₆알킬, C_1-6알콕시, 니트로, 시아노, 히드록시, 할로 및 할로-치환된-C₁ _- ₆알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 라디칼로 임의로 치환되고; X 및 R₇ 은 상기 기재한 바와 같고; R₈은 C₆ _- ₁₀아릴C₀ _- ₄알킬이고;

R₃은 수소 및 C₁ _- ₆알킬로부터 선택되고;

R₄는C₃ _- ₁₂시클로알킬C₀ _- ₄알킬, C₃ _- ₈헤테로시클로알킬C₀ _- ₄알킬, C₆ _- ₁₀아릴C₀ _- ₄알킬 및 C_5-10헤테로아릴C_0-4알킬로부터 선택되고; 여기서, R₄의 임의의 알킬렌은 -C(O)-, -S-, -S(O)- 및 -S(O)₂-로부터 선택된 2가 라디칼로 치환된 메틸렌을 임의로 가질 수 있고; R₄의 상기 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬 또는 헤테로시클로알킬은 할로, C_1-6알킬, C₁ _- ₆알콕시, 할로-치환된-C₁ _- ₆알킬, 할로-치환된-C₁ _- ₆알콕시, -XR₉, -XOR₉, -XS(O)_0-2R₇, -XS(O)_0-2R₉, -XC(O)R₇, -XC(O)OR₇, -XP(O)R₇R₇, -XC(O)R₉, -XC(O)NR₇XNR₇R₇, -XC(O)NR₇R₇, -XC(O)NR₇R₉ 및 -XC(O)NR₇XOR₇로부터 선택된 1 내지 3 개의 라디칼로 임의로 치환되고; X 및 R₇은 상기 기재한 바와 같고; R₉는 C₃ _- ₁₂시클로알킬C₀ _- ₄알킬, C_3-8헤테로시클로알킬C_0-4알킬, C₆ _- ₁₀아릴 및 C₅ _- ₁₀헤테로아릴로부터 선택되고; R₉의 임의의 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬 또는 헤테로시클로알킬은 C₁ _- ₆알킬, -XC(O)R₇ 및 -XC(O)NR₇R₇로부터 선택된 1 내지 3개의 라디칼로 임의로 치환되고; 여기서, X 및 R₇은 상기 기재한 바와 같다.

제2 국면에서, 본 발명은 화학식 I의 화합물 또는 이의 N-옥시드 유도체, 각각의 이성질체 및 이성질체의 혼합물; 또는 이의 제약상 허용되는 염을 1종 이상의 적합한 부형제와의 혼합물로 함유하는 제약 조성물을 제공한다.

제3 국면에서, 본 발명은 동물에게 치료 유효량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 N-옥시드 유도체, 각각의 이성질체 및 이성질체의 혼합물, 또는 이의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는, cSRC, Lck, FGFR3, Flt3, TrkB, PDGFRα 및(또는) Bmx 활성의 억제가 질병의 병리상태 및(또는) 증상을 예방, 저해 또는 완화시킬 수 있는, 동물에서의 질병의 치료 방법을 제공한다.

제4 국면에서, 본 발명은 cSRC, Lck, FGFR3, Flt3, TrkB, PDGFRα 및(또는) Bmx 활성이 질병의 병리상태 및(또는) 증상에 기여하는 동물에서의 질병을 치료하기 위한 약제의 제조에서의 화학식 I의 화합물의 용도를 제공한다.

제5 국면에서, 본 발명은 화학식 I의 화합물 및 이의 N-옥시드 유도체, 전구약물 유도체, 각각의 이성질체 및 이성질체의 혼합물, 및 이의 제약상 허용되는 염 의 제조 방법을 제공한다.

정의

기 및 다른 기, 예를 들어 할로-치환된-알킬 및 알콕시의 구조 성분으로서의 "알킬"은 직쇄 또는 분지쇄일 수 있다. C₁ _-4-알콕시는 메톡시, 에톡시 등을 포함한다. 할로-치환된 알킬은 트리플루오로메틸, 펜타플루오로에틸 등을 포함한다.

"아릴"은 6 내지 10개의 고리 탄소 원자를 함유하는 모노시클릭 또는 융합된 비시클릭 방향족 고리 어셈블리를 의미한다. 예를 들어, 아릴은 페닐 또는 나프틸, 바람직하게는 페닐일 수 있다. "아릴렌"은 아릴기로부터 유도된 2가의 라디칼을 의미한다. "헤테로아릴"은 1가지 이상의 고리원이 헤테로원자인 아릴에 대해 정의한 바와 같다. 예를 들어, 헤테로아릴은 피리딜, 인돌릴, 인다졸릴, 퀴녹살리닐, 퀴놀리닐, 벤조푸라닐, 벤조피라닐, 벤조티오피라닐, 벤조[1,3]디옥솔, 이미다졸릴, 벤조-이미다졸릴, 피리미디닐, 푸라닐, 옥사졸릴, 이속사졸릴, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 피라졸릴, 티에닐 등을 포함한다.

"시클로알킬"은 제시된 고리 원자의 수를 함유하는, 포화되거나 또는 부분적으로 불포화된 모노시클릭, 융합된 비시클릭 또는 가교된 폴리시클릭 고리 어셈블리를 의미한다. 예를 들어, C₃ _- ₁₀시클로알킬은 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실 등을 포함한다. "헤테로시클로알킬"은 본 명세서에 정의한 바와 같은 시클로알킬을 의미하며, 단 제시된 하나 이상의 고리 탄소는 -O-, -N=, -NR-, -C(O)-, -S-, -S(O)- 또는 -S(O)₂-로부터 선택된 잔기로 치환되고, 여기서 R은 수소, C₁ _- ₄알킬 또는 질소 보호기이다. 예를 들어, 본 발명의 화합물을 기재하기 위해 본원에 사용된 C₃ _- ₈헤테로시클로알킬은 모르폴리노, 피롤리디닐, 피페라지닐, 피페리디닐, 피페리디닐론, 1,4-디옥사-8-아자-스피로[4.5]데크-8-일 등을 포함한다.

"할로겐" (또는 할로)는 바람직하게는 클로로 또는 플루오로를 나타내나, 또한 브로모 또는 요오도일 수 있다.

"치료하다", "치료하는" 및 "치료"는 질병 및(또는) 이에 수반되는 징후를 경감 또는 완화시키는 방법을 나타낸다. 본 명세서에서, 용어 "치료"는 질병에 걸릴 위험에 처해 있거나 또는 질병에 걸린 것으로 의심되는 환자 및 질병에 걸린 환자의 치료를 비롯한, 방지적 또는 예방적 치료 둘 다 및 치유적 또는 질병 억제적 치료를 포함한다. 이러한 용어는 또한 질병의 진행을 지연시키기 위한 치료를 포함한다.

본원에 사용된 용어 "치유적"은 탈조절된 Flt3 수용체 티로신 키나제 활성에 관련된 진행 중인 에피소드를 치료하는 효능을 의미한다.

용어 "방지적"은 탈조절된 Flt3 수용체 티로신 키나제 활성에 관련된 질병의 발병 또는 재발의 방지를 의미한다.

본원에 사용된 용어 "진행의 지연"은 치료되는 질병의 전기 또는 초기에 있는 환자, 예를 들어 상응하는 질병의 예비-형성이 진단된 환자 또는, 예를 들어 의학적 치료 동안의 상태 또는 상응하는 질병이 발병될 것 같은 상황하의 사고로 발생된 상태에 있는 환자에게 활성 화합물을 투여하는 것을 의미한다.

본원에 사용된 용어 "탈조절된 Flt3 수용체 티로신 키나제 활성에 관련된 질병"은 비제한적으로, 급성 골수성 백혈병 (AML), 범혈구 척수이형성을 갖는 AML (AML/TMDS), 급성 림프아세포성 백혈병 (ALL), 및 골수이형성 증후군 (MDS)을 비롯한 백혈병을 포함한다. 또한, 이 용어는 구체적으로 Flt3 수용체 돌연변이로 유발된 질병을 포함한다.

바람직한 실시양태의 기재

본 발명은 cSRC, Lck, FGFR3, Flt3, TrkB, PDGFRα 및(또는) Bmx 키나제 활성과 연관된 질병 또는 장애를 치료 또는 예방하는 신규 부류의 화합물 및 상기 화합물을 포함하는 제약 조성물 및 상기 화합물의 사용 방법을 제공한다. 특히, 상기 화합물은 Flt3 및 FGFR3 수용체 키나제에 대해 높은 효능을 보여준다.

한 실시양태에서, 화학식 I의 화합물과 관련하여:

R₁은 수소, 할로, C₁ _- ₆알콕시, -OXOR⁵, -OXR⁶, -OXNR₅R₆, -OXONR₅R₆, -XR₆, -XNR₇XNR₇R₇ 및 -XNR₅R₆로부터 선택되고; 여기서, X는 결합, C₁ _- ₆알킬렌, C₂ _- ₆알케닐렌 및 C₂ _- ₆알키닐렌으로부터 선택되고;

R₅는 수소, C₁ _- ₆알킬 및 -XOR₇로부터 선택되고; 여기서, X는 결합, C₁ _- ₆알킬렌, C₂ _- ₆알케닐렌 및 C₂ _- ₆알키닐렌으로부터 선택되고; R₇은 수소 또는 C₁ _- ₆알킬로부터 독립적으로 선택되고;

R₆은 수소, C₁ _- ₆알킬, C₃ _- ₁₂시클로알킬C₀ _- ₄알킬, C₃ _- ₈헤테로시클로알킬C₀ _- ₄알킬, C_6-10아릴C_0-4알킬 및 C₅ _- ₁₀헤테로아릴C₀ _- ₄알킬로부터 선택되고; R₆은 수소 또는 C_1-6알킬이거나; 또는

여기서, R₆ 또는 R₅ 및 R₆의 조합의 임의의 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬 또는 헤테로시클로알킬은 -XNR₇R₇, -XC(O)NR₇R₇, -XOR₇, -XNR₇R₇, -XNR₇C(O)R₇, -XOR₇, -XC(O)R₇, C₁ _- ₆알킬, C₃ _- ₈헤테로시클로알킬 및 C₆ _- ₁₀아릴C₀ _- ₄알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 라디칼로 임의로 치환될 수 있고; R₁의 임의의 알킬 또는 알킬렌은 -NR₇C(O)-, -C(O)NR₇-, -NR₇-, -O-로부터 선택된 2가 라디칼로 치환된 메틸렌을 임의로 가질 수 있고; R₁의 임의의 알킬 또는 알킬렌은 C₅ _- ₈헤테로아릴, -NR₇R₇, -C(O)NR₇R₇, -NR₇C(O)R₇, 할로 및 히드록시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 라디칼로 임의로 치환될 수 있고; R₇은 수소 또는 C₁ _- ₆알킬로부터 독립적으로 선택되고;

R₂는 수소, C₆ _- ₁₀아릴 및 C₅ _- ₁₀헤테로아릴로부터 선택되고; 여기서, R₂의 임의의 아릴 또는 헤테로아릴은 -XNR₇R₇, -XOR₇, -XOR₈, -XC(O)OR₇, C₁ _- ₆알킬, C₁ _- ₆알콕시, 니트로, 시아노, 할로, 할로-치환된-C₁ _- ₆알콕시 및 할로-치환된-C₁ _- ₆알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 라디칼로 임의로 치환되고; X 및 R₇은 상기 기재한 바와 같고; 및 R₈은 C₆ _- ₁₀아릴C₀ _- ₄알킬이고;

R₃은 수소이고;

R₄는 C₆ _- ₁₀아릴C₀ _- ₄알킬 및 C₅ _- ₁₀헤테로아릴C₀ _- ₄알킬로부터 선택되고; 여기서, R₄의 상기 아릴 또는 헤테로아릴은 할로, -XR₉, -XOR₉, -XS(O)₂R₇, -XS(O)₂R₉, -XC(O)R₇, -XC(O)OR₇, -XP(O)R₇R₇, -XC(O)R₉, -XC(O)NR₇XNR₇R₇, -XC(O)NR₇R₇, -XC(O)NR₇R₉ 및 -XC(O)NR₇XOR₇로부터 선택된 1 내지 3개의 라디칼로 치환되고; X 및 R₇은 상기 기재한 바와 같고; R₉는 C₃ _- ₈헤테로시클로알킬C₀ _- ₄알킬이고; R₉는 C₁ _- ₆알킬, -XC(O)R₇ 및 -XC(O)NR₇R₇로부터 선택된 1 내지 3개의 라디칼로 임의로 치환되고; X 및 R₇은 상기 기재한 바와 같다.

다른 실시양태에서, R₁은 수소, 할로, C₁ _- ₆알콕시, -OXOR⁵, -OXR⁶, -OXNR₅R₆, -OXONR₅R₆, -XR₆ 및 -XNR₅R₆로부터 선택되고; 여기서, X는 결합, C₁ _- ₆알킬렌, C_2-6알케닐렌및 C_2-6알키닐렌으로부터 선택되고; R₅는 수소, 메틸, 히드록시-에틸 및 메톡시-에틸로부터 선택되고; R₆은 수소, 페닐, 벤질, 시클로펜틸, 시클로부틸, 디메틸아미노-프로페닐, 시클로헥실, 2,3-디히드록시-프로필, 피페리디닐, 아미노-카르보닐-에틸, 메틸-카르보닐-아미노-에틸, 메틸-아미노-에틸, 아미노-프로필, 메틸-아미노-프로필, 1-히드록시메틸-부틸, 펜틸, 부틸, 프로필, 메톡시-에티닐, 메톡시-에테닐, 디메틸-아미노-부틸, 디메틸-아미노-에틸, 디메틸-아미노-프로필, 테트라히드로피라닐, 테트라히드로푸라닐-메틸, 피리디닐-메틸, 아제판-1-일, [1,4]옥사제판-4-일, 피페리디닐-에틸, 디에틸-아미노-에틸, 아미노-부틸, 아미노-이소프로필, 아미노-에틸, 히드록시-에틸, 2-아세틸아미노-에틸, 카르바모일-에틸, 4-메틸-[1,4]디아제판-1-일, 2-히드록시-프로필, 히드록시-프로필, 2-히드록시-2-메틸-프로필, 메톡시-에틸, 아미노-프로필, 메틸-아미노-프로필, 2-히드록시-2-페닐-에틸, 피리디닐-에틸, 모르폴리노-프로필, 모르폴리노-에틸, 피롤리디닐, 피롤리디닐-메틸, 피롤리디닐-에틸, 피롤리디닐-프로필, 피라지닐, 퀴놀린-3-일, 퀴놀린-5-일, 이미다졸릴-에틸, 피리디닐-메틸, 페네틸, 테트라히드로-피란-4-일, 피리미디닐, 푸라닐, 이속사졸릴-메틸, 피리디닐, 벤조[1,3]디옥솔-5-일, 티아졸릴-에틸 및 티아졸릴-메틸로부터 선택되거나; 또는 R₅ 및 R₆은 이들 둘 다가 부착되는 질소 원자와 함께 피롤리디닐, 피페라지닐, 피페리디닐, 이미다졸릴, 3-옥소-피페라진-1-일, [1,4]디아제판-1-일, 모르폴리노, 3-옥소-피페라진-1-일, 1,1-디옥소-1λ⁶-티오모르폴린-4-일 또는 피라졸릴을 형성하고;

여기서, R₆ 또는 R₅ 및 R₆의 조합의 임의의 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬 또는 헤테로시클로알킬은 메틸-카르보닐, 아미노-메틸, 아미노-카르보닐, 메틸-술포닐, 메톡시, 메톡시-메틸, 포르밀, 플루오로-에틸, 히드록시-에틸, 아미노, 디메틸-아미노, 히드록시, 메틸, 에틸, 아세틸, 이소프로필, 피롤리디닐, 피리미디닐, 모르폴리노, 피리디닐 및 벤질로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 라디칼로 임의로 치환될 수 있고; R₆의 임의의 알킬 또는 알킬렌은 -NHC(O)- 또는 -C(O)NH-로부터 선택된 2가 라디칼로 치환된 메틸렌을 임의로 가질 수 있고; R₆의 임의의 알킬 또는 알킬렌은 아미노, 할로, 피페리디닐 및 히드록시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 라디칼로 임의로 치환될 수 있다.

다른 실시양태에서, R₂는 수소, 페닐, 티에닐, 피리디닐, 피라졸릴, 티아졸릴, 피라지닐, 나프틸, 푸라닐, 벤조[1,3]디옥솔-5-일, 이소티아졸릴, 이미다졸릴 및 피리미디닐로부터 선택되고; 여기서, R₂의 임의의 아릴 또는 헤테로아릴은 메틸, 이소프로필, 할로, 아세틸, 트리플루오로메틸, 니트로, 1-히드록시-에틸, 1-히드록시-1-메틸-에틸, 히드록시-에틸, 히드록시-메틸, 포르마밀, 메톡시, 벤질옥시, 카르복시, 아미노, 시아노, 아미노-카르보닐, 아미노-메틸 및 에톡시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 라디칼로 임의로 치환되는다.

다른 실시양태에서, R₄는 페닐, 벤질, 피리디닐 및 1-옥소-인단-5-일로부터 선택되고; 여기서, 상기 페닐, 벤질, 인다닐 또는 피리디닐은 할로, 아세틸, 트리플루오로메틸, 시클로프로필-아미노-카르보닐, 아제티딘-1-카르보닐, 피페리디닐-카르보닐, 모르폴리노, 메틸-카르보닐, 피페라지닐, 메틸-술포닐, 피페리디닐-술포닐, 4-메틸-피페라지닐-카르보닐, 디메틸-아미노-에틸-아미노-카르보닐, 모르폴리노-카르보닐, 모르폴리노-메틸, 아미노-카르보닐, 프로필-아미노-카르보닐, 히드록시-에틸-아미노-카르보닐, 모르폴리노-에틸-아미노-카르보닐, 4-아세틸-피페라진-1-카르보닐, 4-아미노-카르보닐-피페라진-1-카르보닐, 페닐-카르보닐, 피롤리디닐-1-카르보닐, 프로필-카르보닐, 부틸, 이소프로필-옥시-카르보닐, 시클로헥실-카르보닐, 시클로프로필-카르보닐, 메틸-술포닐, 디메틸-포스피노일, 4-메틸-피페라지닐-술포닐, 1-옥소-인단-5-일, 옥세탄-3-술포닐, 아미노-술포닐 및 테트라히드로-피란-4-술포닐로 임의로 치환되는다.

바람직한 화학식 I의 화합물은 하기 실시예 및 표 1, 2 및 3에 자세히 기재되어 있다. 또한 바람직한 실시예는: N⁶-(4-메탄술피닐-페닐)-N²-메틸-N²-(테트라히드로-피란-4-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-2,6-디아민; (4-메탄술포닐-페닐)-[2-(2-메틸-모르폴린-4-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6-일]-아민; 1-{4-[2-(2-메틸-모르폴린-4-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6-일아미노]-페닐}-에타논; [4-(디메틸-포스피노일)-페닐]-[2-(2-메틸-모르폴린-4-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6-일]-아민; 아제티딘-1-일-{4-[2-(4-모르폴린-4-일-피페리딘-1-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6-일아미노]-페닐}-메타논; 1-(4-{2-[메틸-(1-메틸-피페리딘-4-일)-아미노]-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6-일아미노}-페닐)-에타논; 1-{4-[2-(2-메틸-모르폴린-4-일)-9-티오펜-3-일-9H-퓨린-6-일아미노]-페닐}-에타논; (4-메탄술포닐-페닐)-[2-(4-모르폴린-4-일-피페리딘-1-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6-일]-아민; N⁶-(4-메탄술포닐-페닐)-N²-메틸-N²-(1-메틸-피페리딘-4-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-2,6-디아민; [2-(2-메틸-모르폴린-4-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6-일]-(4-모르폴린-4-일-페닐)-아민; N²-메틸-N²-(1-메틸-피페리딘-4-일)-N⁶-(4-모르폴린-4-일-페닐)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-2,6-디아민; N²-메틸-N²-(1-메틸-피페리딘-4-일)-N⁶-(4-모르폴린-4-일-페닐)-9-티오펜-3-일-9H-퓨린-2,6-디아민; [2-(2,2-디메틸-모르폴린-4-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6-일]-(4-메탄술포닐-페닐)-아민; [2-(2,6-디메틸-모르폴린-4-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6-일]-(4-메탄술포닐-페닐)-아민; [4-(디메틸-포스피노일)-페닐]-[2-(2-에틸-모르폴린-4-일)-9-티오펜-3-일-9H-퓨린-6-일]-아민; [4-(디메틸-포스피노일)-페닐]-[2-(2-플루오로메틸-모르폴린-4-일)-9-티오펜-3-일-9H-퓨린-6-일]-아민; [2-(2,6-디메틸-모르폴린-4-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6-일]-[4-(디메틸-포스피노일)-페닐]-아민; [2-(2,6-디메틸-모르폴린-4-일)-9-티오펜-3-일-9H-퓨린-6-일]-[4-(디메틸-포스피노일)-페닐]-아민; [4-(디메틸-포스피노일)-페닐]-[2-(2-메틸-모르폴린-4-일)-9-티오펜-3-일-9H-퓨린-6-일]-아민; [4-(디메틸-포스피노일)-페닐]-[2-(3-메틸-피페리딘-1-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6-일]-아민; N⁶-(4-메탄술포닐-페닐)-N²-메틸-N²-피리딘-2-일메틸-9-티오펜-3-일-9H-퓨린-2,6-디아민; N²-메틸-N⁶-(4-모르폴린-4-일-페닐)-N²-피리딘-2-일메틸-9-티오펜-3-일-9H-퓨린-2,6-디아민; (2-아제판-1-일-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6-일)-[4-(디메틸-포스피노일)-페닐]-아민; N²-시클로헥실-N⁶-[4-(디메틸-포스피노일)-페닐]-N²-메틸-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-2,6-디아민; N⁶-(4-메탄술포닐-페닐)-N²-메틸-N²-(테트라히드로-피란-4-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-2,6-디아민; N⁶-(4-메탄술포닐-페닐)-N²-피리딘-2-일메틸-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-2,6-디아민; N²-시클로헥실-N⁶-(4-메탄술피닐-페닐)-N²-메틸-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-2,6-디아민; R-(4-메탄술피닐-페닐)-[2-(2-메틸-모르폴린-4-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6-일]-아민; N⁶-(4-메탄술포닐-페닐)-N²-메틸-N²-피리딘-2-일메틸-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-2,6-디아민; {4-[6-(4-메탄술포닐-페닐아미노)-2-(메틸-피리딘-2-일메틸-아미노)-퓨린-9-일]-페닐}-메탄올; R-(4-메탄술포닐-페닐)-[2-(2-메틸-모르폴린-4-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6-일]-아민; R-4-[2-(2-메틸-모르폴린-4-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6-일아미노]-벤젠술폰아미드; 및 {4-[6-(4-메탄술포닐-페닐아미노)-2-(2-메틸-모르폴린-4-일)-퓨린-9-일]-페닐}-메탄올로부터 선택된다.

약리학 및 용도

본 발명의 화합물은 Flt3 수용체 티로신 키나제의 활성을 억제하여, Flt3 활성이 상기 질병의 병리상태 및(또는) 증상에 기여하는 질병 또는 장애의 치료에 유용하다.

Flt3은 Ⅲ형 수용체 티로신 키나제 (RTK) 군의 일원이다. Flt3 (fms-유사 티로신 키나제)은 또한 FLk-2 (태아 간 키나제 2)로서 알려져 있다. Flt3 유전자의 이상 발현은 급성 골수성 백혈병 (AML), 범혈구 척수이형성을 갖는 AML (AML/TMDS), 급성 림프아세포성 백혈병 (ALL), 및 골수이형성 증후군 (MDS)을 비롯한 성인 및 소아 백혈병 둘 다에서 기록되어 있다. Flt3 수용체의 활성화 돌연변이는 급성 골수모세포성 백혈병 (AML) 환자의 약 35%에서 발견되고, 불량한 예후와 연관되어 있다. 가장 통상적인 돌연변이는 아스파라긴 835에서 점 돌연변이를 갖는 환자의 추가 5-10%에서, 막 주변 도메인 내에 인-프레임 중복을 포함한다. 이러한 돌연변이 둘 다는 Flt3의 티로신 키나제 활성의 구조적 활성화와 연관되어 있고, 리간드의 부재시 증식 및 생존성 신호를 생성시킨다. 수용체의 돌연변이 형태를 발현하는 환자는 치료의 기회가 감소하는 것으로 나타났다. 따라서, 과다-활성화된 (돌연변이된) Flt3 키나제 활성이 인간 백혈병 및 골수이형성 증후군에서 역할을 담당한다는 증거가 축적되고 있다. 이것이 현재의 약물 요법이 유용성을 거의 제공하지 못하고, 이전에 현재 유용한 약물 요법 및(또는) 줄기 세포 이식 요법에 실패했던 환자에게서 가능한 치료적 접근으로서, Flt3 수용체의 신규 억제제에 대해 연구하도록 출원인을 자극하였다.

백혈병은 일반적으로 골수, 림프절, 비장 또는 혈액 및 면역계의 다른 기관에서 미성숙 조혈 세포의 DNA에 대한 후천적(선천적이 아님) 유전자 손상으로부터 비롯된다. 그 영향은, 세포 생육 촉진 및 세포 성숙 차단으로 인해 정상적인 혈액 세포로서 작용하지 못하는 "백혈병성 모세포"라 불리는 세포가 축적되고; 정상적인 골수 세포를 생산하지 못하여 적혈구 결핍(빈혈), 혈소판 결핍 및 정상 백혈구 결핍이 일어나는 것이다. 모세포는 보통 골수에 의해 생성되고, 통상 모든 골수 세포의 약 1%를 포함하는 성숙한 혈액 세포로 발생된다. 백혈병에서, 모세포는 적절하게 성숙되지 않고 골수에 축적된다. 급성 골수성 백혈병(AML)에서, 이것들은 골수아세포라 불리는 반면 급성 림프모세포성 백혈병(ALL)에서 이것들은 림프아세포로 알려져 있다. 다른 백혈병은 MLL (혼합-직계성 백혈병 (mixed-lineage leukemia))이다.

용어 "범혈구 골수이형성을 갖는 AML (AML/TMDS)"은, 급성 백혈병, 유도 화학요법에 대한 불량한 반응 및 순수한 골수이형성 증후군의 재발 성향을 수반하는 조혈이상 양상을 특징으로 한 백혈병의 드문 형태에 관한 것이다.

용어 "골수이형성 증후군(MDS)"은, 골수가 정상적으로 기능하는 것을 멈추고, 그 결과 건강한 혈액 세포의 수가 부족해지는 혈액 질환의 군에 관한 것이다. 혈액 세포의 하나의 유형이 다수 생성되는 백혈병에 비하여, 때때로 모든 유형의 혈액 세포가 MDS에 침범된다. 미국에서는 연간 적어도 10,000건의 새로운 경우가 발생한다. MDS로 진단된 환자의 1/3 정도가 급성 골수성 백혈병으로 진행된다. 이러한 이유 때문에, 상기 질병은 때때로 전백혈병이라 불리운다. 또한 골수이형성 증후군은 골수이형성 이상골수성조혈 또는 올리고블라스틱(oligoblastic) 백혈병이라 불리운다. 다수의 모세포가 골수에 남아있을 때, MDS는 또한 스몰더링(smoldering) 백혈병이라 불리운다.

백혈병과 유사하게, 골수이형성 증후군은 골수에 있는 단일 세포의 DNA에 대한 유전자 손상에서 비롯된다. 특정한 염색체 이상성이 MDS 환자에 존재한다. 이러한 이상성은 전좌라고 불리우며, 하나의 염색체의 일부가 파괴되고 상이한 염색체의 파괴된 부분에 결합될 때 발생한다. 동일한 결함이 급성 골수성 백혈병에서 때때로 발견된다. 환자의 모든 혈액 세포가 비정상이고, 동일한 손상된 간세포로부터 모두 유래되기 때문에, MDS는 백혈병과 상이하다. 백혈병 환자에서, 골수는 질병에 걸린 혈액 세포와 건강한 혈액 세포의 혼합물을 함유한다.

현재, AML 및 진행된 골수이형성 증후군은 고투여량의 세포독성 화학요법 약물, 예컨대 시토신 아라비노시드 및 다우노루비신으로 치료되고 있다. 이러한 유형의 치료는 약 70%의 환자가 혈액학적 차도를 나타내는 것을 유도한다. 그러나, 차도를 나타내는 환자의 절반 이상의 장기간에 걸친 화학요법의 투여에도 불구하고 후 재발된다. 초기에 차도를 나타내지 않거나 차도를 얻은 후에 후 재발되는 환자의 거의 모두는 결국 백혈병 때문에 사망할 것이다. 골수 이식은 이 절차를 받은 환자의 50 내지 60% 이하를 치료할 수 있지만, AML 또는 MDS를 갖는 모든 환자의 대략 1/3만이 이식을 받기에 적합하다. 표준 요법으로 차도를 보이지 않는 환자, 후 재발된 환자 및 간세포 이식에 적합하지 않은 환자를 치료하기 위하여, 신규의 효과적인 약물이 긴급히 요구되고 있다. 또한, 합당한 기대를 갖는 표준 요법에 효과적인 신규 약물을 첨가하여, 모든 환자를 위해 개선된 유도 화학요법이 얻어질 수 있다.

FGFR3은 4가지 상이한 유전자로 코딩되는, 구조적으로 관련된 티로신 키나제 수용체 군의 일부이다. FGFR3 유전자의 상이한 도메인에서 특정 점 돌연변이는 수용체의 구조적 활성화를 초래하고, 염색체 우성 골격 장애, 다발성 골수종, 및 대부분의 방광암 및 자궁암과 연관된다 (문헌 [Cappellen, et al, Nature, vol.23]). 마우스 FGFR3 유전자 내에 위치한 활성화 돌연변이 및 마우스에서 성장판 연골에 대해 활성화된 FGFR3의 표적화는 왜소증을 초래한다. 이의 개념과 유사하게, 마우스에서 표적화된 FGFR3의 붕괴는 장골 및 척추의 과다성장을 초래한다. 또한, 다발성 골수종 세포의 20-25%는 FGFR3에 대해 50-100kb 중심립에 위치한 4p16 상에 분해점을 갖는 t(4;14)(p16.3;q32.3) 염색체 전좌를 함유한다. 다발성 골수종의 드문 경우에, 골격 장애에서 이전에 나타난 FGFR3의 활성화 돌연변이가 관찰되고 항상 이러한 염색체 전좌를 수반한다. 최근, FGFR3 미스센스 체세포 돌연변이 (R248C, S249C, G372C, 및 K652E)가 대부분의 방광암 세포 및 일부 자궁암 세포에서 확인되고, 실제로, 이는 신생아 기간에서 치명적인 왜소증의 형태인 치사성 이형성을 야기하는 배아 활성화 돌연변이와 동일하다. 본 발명의 화합물은 방광암에 대해 생활을 바꾸는 방광절제를 피하고, 미래의 임신가능성을 보존하길 희망하는 자궁암 환자에서 현재의 치료보다 효과적으로 다발성 골수종에 대한 치료 유용성을 가질 수 있다.

본 발명의 화합물은, 예를 들어 소세포 폐암에서 종양-억제 물질로서 뿐만 아니라 또한 비-악성 증식성 장애, 예컨대 죽상동맥경화증, 혈전증, 건선, 피부경화증 및 섬유증을 치료하는 작용제, 및 줄기 세포의 보호를 위한, 예를 들어 천식에서 화학치료제, 예컨대 5-플루오로우라실의 혈액독성 효과를 제거하는 작용제로서 사용될 수 있다. 본 발명의 화합물은 특히 PDGF 수용체 키나제의 저해에 반응하는 질병의 치료에 사용될 수 있다.

본 발명의 화합물은 이식, 예를 들어, 동종간 이식, 특히 조직 거부, 예컨대 특히 폐쇄성 세기관지염 (OB), 즉 동종간 폐 이식의 만성 거부의 결과로 일어나는 장애의 치료에서 유용한 효과를 보인다. OB가 없는 환자와 반대로, OB를 가진 환자는 때때로 기관지 폐포액 중에서 증강된 PDGF 농도를 보인다.

본 발명의 화합물은 또한 관상 평활근 세포 이동 및 증식 (또한 PDGF 및 PDGF-R가 때때로 역할을 할 경우)과 연관된 질병, 예컨대 재협착 및 죽상동맥경화증에 효과적이다. 시험관 내 및 생체 내 관상 평활근 세포의 증식 또는 이동에 대한 이의 효과 및 예후는 본 발명의 화합물을 투여함으로써, 또한 기계적 손상에 따른 생체 내 관상 내막의 농후화에 대한 이의 효과를 연구함으로써 설명될 수 있다.

뉴로트로핀 수용체의 trk 군 (trkA, trkB, trkC)은 신경 및 비-신경 조직의 생존, 성장 및 분화를 촉진시킨다. TrkB 단백질은 소장 및 결장의 뉴로엔도크린형 세포 내, 췌장의 알파 세포 내, 비장의 림프절의 단핵세포 및 대식세포 내, 및 표피의 과립층 내에서 발현된다 (문헌 [Shibayama 및 Koizumi, 1996]). TrkB 단백질의 발현은 윌름스 종양 및 신경모세포종의 불리한 진행과 연관되어 있다. 또한, TkrB는 정상 세포에서가 아니라 전립선 암세포에서 발현된다. trk 수용체의 신호 경로 하류는 Shc, 활성화된 Ras, ERK-1 및 ERK-2 유전자, 및 PLC-감마 전달 경로를 통한 MAPK 활성의 캐스케이드를 포함한다 (문헌 [Sugimoto et al., 2001]).

키나제, c-Src는 다수 수용체의 종양원성 신호를 전달한다. 예를 들어, 종양에서 EGFR 또는 HER2/neu의 과다-발현은, 정상 세포에는 존재하지 않는 악성 세포의 특징인 c-src의 구조적 활성화를 초래한다. 다른 한편, c-src의 발현에서 결함이 있는 쥐는 파골세포 기능에서 c-src의 주요 참여 및 관련 장애에서 가능한 발병이 나타난다.

섬유모세포 성장 인자 수용체 3은 뼈 성장에서 네거티브 조절 효과를 보이고 연골세포 증식을 억제하는 것으로 밝혀졌다. 섬유모세포 성장 인자 수용체 3에서의 상이한 돌연변이, 및 TDⅡ FGFR3에서의 1가지 돌연변이에 의해 야기되는 치사성 이형성은 전사 인자 Stat1을 활성화시키고, 세포-주기 억제제의 발현, 성장 정지 및 비정상 뼈 발달을 초래하는 구조적 티로신 키나제 활성을 갖는다 (문헌 [Su et al., Nature, 1997, 386, 288-292]). 또한 FGFR3은 때때로 다발성 골수종-유형 암에서 발현된다.

Lck는 T-세포 신호화의 역할을 담당한다. Lck 유전자가 없는 마우스는 흉선세포를 발생시키는 능력이 불량하다. T-세포 신호화의 포지티브 활성화제로서 Lck의 기능은 Lck 억제제가 자가면역 질병, 예컨대 류마티스 관절염을 치료하는데 유용할 수 있다는 것을 제시한다.

상기한 바에 따르면, 본 발명은 또한 치료 유효량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용되는 염을 상기 기재된 질병 또는 장애의 예방 또는 치료가 필요한 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 이러한 치료를 필요로 하는 환자에서의 상기 기재된 질병 또는 장애의 예방 또는 치료 방법을 제공한다. 상기 임의의 용도에 대해, 필요한 투여량은 투여 경로, 치료되는 특정 상태 및 바람직한 효과에 따라 다양해질 것이다.

투여 및 제약 조성물

일반적으로, 본 발명의 화합물은 단일 또는 하나 이상의 치료제와 조합하여 당업계에 공지된 임의의 일반적이고 허용되는 방식을 통해 치료 유효량으로 투여될 것이다. 치료 유효량은 질병의 중증도, 환자의 연령 및 상대적 건강도, 사용되는 화합물의 효능 및 다른 인자에 따라 널리 다양해질 수 있다. 일반적으로, 약 0.03 내지 2.5 mg/체중 kg의 일일 투여량으로 전신에서 만족스러운 결과를 얻는 것으로 나타났다. 보다 대형 포유동물, 예를 들어, 인간에서 나타난 일일 투여량은 약 0.5 mg 내지 약 100 mg의 범위 내에서, 예를 들어 1일 4회로 나누거나 또는 지연 형태로 편리하게 투여된다. 경구용으로 적합한 단위 투여 형태는 약 1 내지 50 mg의 활성 성분을 포함한다.

본 발명의 화합물은 임의의 통상의 경로, 특히 장관으로, 예를 들어, 경구로, 예를 들어, 정제 또는 캡슐제의 형태로, 또는 비경구로, 예를 들어, 주입가능한 용액제 또는 현탁액제의 형태로, 국소적으로, 예를 들어, 로션, 겔, 연고 또는 크림의 형태로, 또는 비내로 또는 좌제 형태로 제약 조성물로서 투여될 수 있다. 유리 형태 또는 제약상 허용되는 염 형태의 본 발명의 화합물을 1종 이상의 제약상 허용되는 담체 또는 희석제와 함께 포함하는 제약 조성물은 통상의 방식으로 혼합, 과립화 또는 코팅 방법으로 제조될 수 있다. 예를 들어, 경구 조성물은 활성 성분을 a) 희석제, 예를 들어, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 만니톨, 소르비톨, 셀룰로스 및(또는) 글리신; b) 윤활제, 예를 들어, 실리카, 활석, 스테아르산, 이의 마그네슘 또는 칼슘염 및(또는) 폴리에틸렌글리콜; 또한 정제용 c) 결합제, 예를 들어, 마그네슘 알루미늄 실리케이트, 전분 페이스트, 젤라틴, 트래거캔스 고무, 메틸셀룰로스, 소듐 카르복시메틸셀룰로스 및(또는) 폴리비닐피롤리돈; 바람직하게는 d) 붕해제, 예를 들어, 전분, 아가, 알긴산 또는 이의 나트륨염, 또는 발포성 혼합물; 및(또는) e) 흡수제, 착색제, 방향제 및 감미제와 함께 포함하는 정제 또는 젤라틴 캡슐제일 수 있다. 주사가능한 조성물은 등장성 수용액제 또는 현탁액제일 수 있고, 좌제는 지방 에멀젼 또는 현탁액제로부터 제조될 수 있다. 상기 조성물은 살균되고(되거나) 보조제, 예컨대 방부제, 안정화제, 습윤제 또는 유화제, 용액 촉진제, 삼투압 조절용 염 및(또는) 완충액을 함유할 수 있다. 또한, 이들은 기타 치료적으로 유용한 물질을 함유할 수 있다. 경피 적용을 위한 적합한 제제는 본 발명의 유효량의 화합물을 담체와 함께 포함한다. 담체는 숙주의 피부를 통해 투과를 도와주는 흡수가능한 제약상 허용되는 용매를 포함할 수 있다. 예를 들어, 경피 장치는 지지 부재, 임의로 담체와 함께 화합물을 함유하는 저장소, 임의로 지속적인 기간에 걸쳐 조절되고 미리 정해진 속도로 숙주의 피부에 화합물을 전달하는 속도 조절 배리어, 피부에 장치를 고정시키는 수단을 포함하는 밴드의 형태이다. 또한 매트릭스 경피 제제가 사용될 수 있다. 예를 들어, 피부 및 눈으로 국소적 적용을 위해 적합한 제제는 바람직하게는 수용액제, 연고, 크림 또는 당업계에 익히 공지된 겔이다. 이들은 가용화제, 안정화제, 장성 증진제, 완충제 및 방부제를 함유할 수 있다.

본 발명의 화합물은 방사선 및 골수 이식을 비롯한 1종 이상의 치료제와 조합 (제약 조합물)하여 치료 유효량으로 투여될 수 있다. 본 발명의 화합물과 조합하여 사용될 수 있는 화합물의 비제한적인 예는 세포독성 화학요법 약물, 예컨대 시토신 아라비노시드, 다우노루비신, 시클로포스파미드, VP-16, 미톡산트론, 다우노루비신, 시타라빈, 메토트렉세이트, 빈크리스틴, 6-티오구아닌, 6-머캅토퓨린, 파클리탁셀 등, 항-혈관형성제, 예컨대, 비제한적으로 시클로옥시게나제 억제제, 예컨대 셀레콕시브, 면역조절 또는 항염증 물질, 예를 들어, 시클로스포린, 라파마이신, 또는 아스코마이신, 또는 이의 면역억제 유사체, 예를 들어 시클로스포린 A (CsA), 시클로스포린 G, FK-506, 라파마이신, 또는 유사 화합물, 코르티코스테로이드, 시클로포스파미드, 아자티오프린, 메토트렉세이트, 브레퀴나, 레플루노미드, 미조리빈, 미코페놀산, 미코페놀레이트 모페틸, 15-데옥시스페르구알린, 면역억제성 항체, 특히 백혈구 수용체에 대한 모노클로날 항체, 예를 들어 MHC, CD2, CD3, CD4, CD7, CD25, CD28, B7, CD45, CD58 또는 이의 리간드, 또는 다른 면역조절 화합물, 예컨대 CTLA41g이다. 또한, 본 발명의 화합물은 신호 전달 또는 기타 종양원성-표적화 약물의 기타 억제제와 조합하여 상당한 상승 요법을 생성할 수 있다.

본 발명의 화합물이 기타 요법과 조합하여 투여될 경우, 물론, 공-투여된 화합물의 투여는 사용된 공-약물의 형태, 사용된 특정 약물, 치료되는 상태 등에 따라 다양해질 것이다.

본 발명은 또한 a) 유리 형태 또는 제약상 허용되는 염 형태의 본원에 개시된 본 발명의 화합물인 제1 제제, 및 b) 1종 이상의 공-제제를 포함하는 제약 조합물, 예를 들어, 키트를 제공한다. 상기 키트는 이의 투여를 위한 지시 사항을 포함할 수 있다.

본원에 사용된 용어 "공-투여" 또는 "조합 투여" 등은 단일 환자에 대해 선택된 치료제의 투여를 포함하는 것을 의미하고, 상기 제제가 필수적으로 동일한 투여 경로로 또는 동시에 투여되는 것은 아닌 치료 레지멘을 포함하고자 한다.

본원에 사용된 용어 "제약 조합물"은 1종 이상의 활성 성분을 혼합하거나 또는 조합하여 생성된 생성물을 의미하고, 활성 성분의 고정된 및 고정되지 않은 조합물 둘 다를 포함한다. 용어 "고정된 조합물"은 활성 성분, 예를 들어, 화학식 I의 화합물 및 공-제제가 둘 다 단일 물질 또는 단일 투여의 형태로 동시에 환자에 투여되는 것을 의미한다. 용어 "고정되지 않은 조합물"은 활성 성분, 예를 들어, 화학식 I의 화합물 및 공-제제가 둘 다 동시에, 공동으로 또는 특별한 시간 제한 없이 순차적으로 개별 물질로서 환자에게 투여되며, 이러한 투여는 환자의 신체에서 치료 유효 수준의 2종의 화합물을 제공하는 것을 의미한다. 또한 후자는 칵테일 요법, 예를 들어 3종 이상의 활성 성분의 투여에 적용된다.

본 발명의 화합물의 제조 방법

본 발명은 또한 본 발명의 화합물의 제조 방법을 포함한다. 기재된 반응식에서, 반응에서 원하지 않는 침전을 피하기 위해 최종 생성물에 기재된 반응성 관능기, 예를 들어 히드록시, 아미노, 이미노, 티오 또는 카르복시기를 보호할 필요가 있을 수 있다. 통상의 보호기는 표준 시행과 일치되게 사용될 수 있으며, 예를 들어 문헌 [T.W. Greene and P. G. M. Wuts in "Protective Groups in Organic Chemistry", John Wiley and Sons, 1991]을 참조한다.

R₅가 수소인 화학식 I의 화합물은 하기의 반응식 I에서와 같이 제조될 수 있다:

여기서, R₁, R₂, R₃ 및 R₄는 본 발명의 요약에서 화학식 I에 대해 기재된 바와 같고, PG는 질소 보호기 (예를 들어, 테트라히드로-피란-2-일 등)를 나타내고, Z는 할로기, 예를 들어 요오도 또는 클로로, 바람직하게는 클로로를 나타낸다.

화학식 3의 화합물은 화학식 2의 화합물을 적합한 용매 (예를 들어, 에탄올, 부탄올, THF 등)의 존재하에 적합한 염기 (예를 들어, DIEA, Na₂CO₃ 등)를 사용하여 NHR₃R₄와 반응시켜 제조될 수 있다. 화학식 4의 화합물은 화학식 3의 화합물을 적합한 용매 (예를 들어, DME, 에탄올, 부탄올, THF 등), 임의로 적합한 촉매 (예를 들어, 팔라듐 촉매 등)의 존재하에 적합한 염기 (예를 들어, DIEA, Na₂CO₃ 등)를 사용하여 R₁H와 반응시켜 제조될 수 있다. 화학식 I의 화합물은 먼저 적합한 촉매 (예를 들어, p-TSA 등)의 존재하에 적합한 용매 (예를 들어, MeOH 등) 중에서 보호기 (PG)를 제거하여 제조될 수 있다. 또한 반응은 탈보호된 화학식 4의 화합 물을 R₂Y와 반응시켜 진행되며, 여기서 Y는 할로기, 예를 들어 요오도, 브로모 또는 클로로를 나타낸다. 반응은 적합한 용매 (예를 들어, DMF, 디옥산 등)의 존재하에 적합한 염기 (예를 들어, 인산칼륨 등)를 사용하여 약 70 내지 약 110 ℃ 범위의 온도에서 진행되며, 완료되기까지 24시간 정도가 소요될 수 있다.

화학식 I의 화합물은 하기 반응식 Ⅱ에서와 같이 진행되어 제조될 수 있다:

여기서, R₁, R₂, R₃ 및 R₄는 본 발명의 요약에서 화학식 I에 대해 정의한 바와 같고, PG는 질소 보호기 (예를 들어, 테트라히드로-피란-2-일 등)를 나타내고, Z는 할로기, 예를 들어 요오도 또는 클로로, 바람직하게는 클로로를 나타낸다.

화학식 3의 화합물은 화학식 2의 화합물을 적합한 용매 (예를 들어, 에탄올, 부탄올, THF 등)의 존재하에 적합한 염기 (예를 들어, DIEA, Na₂CO₃ 등)를 사용하여 NHR₃R₄와 반응시켜 제조될 수 있다. 화학식 5의 화합물은 먼저 적합한 촉매 (예를 들어, p-TSA 등)의 존재하에 적합한 용매 (예를 들어, MeOH 등) 중에서 보호 기 (PG)를 제거하여 제조될 수 있다. 또한 반응은 화학식 3의 탈보호된 화합물을 적합한 용매 (예를 들어, 디옥산, 메틸렌 클로라이드 등) 및 적합한 촉매 (예를 들어, 구리 아세테이트 등)의 존재하에 적합한 염기 (예를 들어, 피리딘, TEA 등)를 사용하여 R₂B(OH)₂와 반응시켜 진행된다. 반응은 약 20 내지 약 80 ℃ 범위의 온도에서 진행되며, 완료되기까지 168시간 정도가 소요될 수 있다. 화학식 I의 화합물은 화학식 5의 화합물을 적합한 용매 (예를 들어, 부탄올, 에탄올 등)의 존재하에 적합한 염기 (예를 들어, DIEA, Na₂CO₃ 등)를 사용하여 R₁H와 반응시켜 제조될 수 있다.

화학식 I의 화합물은 하기 반응식 Ⅲ에서와 같이 진행되어 제조될 수 있다:

여기서, R₁, R₂, R₃ 및 R₄는 본 발명의 요약에서 화학식 I에 대해 정의한 바와 같고, Z는 할로기, 예를 들어 요오도 또는 클로로, 바람직하게는 클로로를 나타낸다.

화학식 7의 화합물은 화학식 6의 화합물을 적합한 용매 (예를 들어, 디옥 산, 메틸렌 클로라이드 등) 및 적합한 촉매 (예를 들어, 구리 아세테이트 등)의 존재하에 적합한 염기 (예를 들어, 피리딘, TEA 등)를 사용하여 R₂B(OH)₂와 반응시켜 제조될 수 있다. 반응은 약 20 내지 약 80 ℃ 범위의 온도에서 진행되며, 완료되기까지 168시간 정도가 소요될 수 있다. 화학식 5의 화합물은 화학식 7의 화합물을 적합한 용매 (예를 들어, DME, 에탄올, 부탄올, THF 등)의 존재하에 적합한 염기 (예를 들어, DIEA, Na₂CO₃ 등)를 사용하여 임의로 적합한 촉매 (예를 들어, 팔라듐 촉매 등)와 반응시켜 제조될 수 있다. 화학식 I의 화합물은 화학식 5의 화합물을 적합한 용매 (예를 들어, 부탄올, 에탄올, THF 등)의 존재하에 적합한 염기 (예를 들어, DIEA, Na₂CO₃ 등)를 사용하여 R₁H와 반응시켜 제조될 수 있다.

본 발명의 화합물의 추가 제조 방법

본 발명의 화합물은 상기 화합물의 유리 염기 형태를 제약상 허용되는 무기 또는 유기 산과 반응시켜 제약상 허용되는 산 부가염으로서 제조할 수 있다. 별법으로, 본 발명의 화합물의 제약상 허용되는 염기 부가염은 상기 화합물의 유리산 형태를 제약상 허용되는 무기 또는 유기 염기와 반응시켜 제조할 수 있다. 별법으로, 본 발명의 화합물의 염 형태는 출발 물질 또는 중간체의 염을 사용하여 제조될 수 있다.

본 발명의 화합물의 유리 산 또는 유리 염기 형태는 각각 상응하는 염기 부가염 또는 산 부가염으로부터 제조될 수 있다. 예를 들어, 산 부가염 형태에서 본 발명의 화합물은 적합한 염기 (예를 들어, 수산화암모늄 용액, 수산화나트륨 등)로 처리하여 상응하는 유리 염기로 전환시킬 수 있다. 염기 부가염 형태의 본 발명의 화합물은 적합한 산 (예를 들어, 염산 등)으로 처리하여 상응하는 유리산으로 전환시킬 수 있다.

비산화된 형태의 본 발명의 화합물은 0 내지 80 ℃에서 적합한 불활성 유기 용매 (예를 들어, 아세토니트릴, 에탄올, 수성 디옥산 등) 중 환원제 (예를 들어, 황, 이산화황 디옥시드, 트리페닐 포스핀, 리튬 보로히드라이드, 소듐 보로히드라이드, 인 트리클로라이드, 트리브로마이드 등)로 처리하여 본 발명의 화합물의 N-옥시드로부터 제조될 수 있다.

본 발명의 화합물의 전구약물 유도체는 통상의 당업자에게 공지된 방법에 따라 제조될 수 있다 (보다 자세한 사항은, 예를 들어 문헌 [Saulnier et al., (1994), Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, Vol. 4, p. 1985]을 참조한다). 예를 들어, 적합한 전구약물은 비-유도된 본 발명의 화합물을 적합한 카르바밀화제 (예를 들어, 1,1-아실옥시알킬카르바노클로리데이트, 파라-니트로페닐 카르보네이트 등)와 반응시켜 제조될 수 있다.

본 발명의 화합물의 보호된 유도체는 당업자에게 공지된 방법으로 제조될 수 있다. 보호기의 생성 및 제거에 대해 적용가능한 기술의 자세한 기재는 문헌 [T. W. Greene, "Protecting Groups in Organic Chemistry", 3^rd edition, John Wiley and Sons, Inc., 1999]에 기재되어 있다.

본 발명의 화합물은 용매화물 (예를 들어, 수화물)로서 본 발명의 과정 동안 편리하게 제조 또는 형성될 수 있다. 본 발명의 화합물의 수화물은 유기 용매, 예컨대 디옥신, 테트라히드로푸란 또는 메탄올을 사용하여 수성/유기 용매 혼합물로부터 재결정시켜 편리하게 제조될 수 있다.

본 발명의 화합물은 화합물의 라세미체 혼합물을 광학적으로 활성인 분해제와 반응시켜 이성질체 화합물의 쌍을 형성시켜 부분입체 이성질체를 단리하고, 광학적으로 순수한 거울상 이성질체를 회수하여 이들의 개별 입체이성질체로서 제조될 수 있다. 거울상이성질체의 분해가 본 발명의 화합물의 공유 부분입체이성질체 유도체를 사용하여 수행되지만, 분리될 수 있는 복합체 (예를 들어, 결정질 부분입체이성질체 염)가 바람직하다. 부분입체이성질체는 고유의 물리적 성질 (예를 들어, 융점, 비점, 용해도, 반응도 등)을 가지며, 이러한 차이점을 이용하여 쉽게 단 리될 수 있다. 부분입체이성질체는 크로마토그래피, 또는 바람직하게는, 용해도의 차이를 기초로 한 단리/분해 기술로 단리될 수 있다. 광학적으로 순수한 거울상이성질체는 라세미화를 생성시키지 않는 임의의 실제 방법으로 분해제와 함께 회수된다. 이의 라세미체 혼합물로부터의 화합물의 입체이성질체 분해에 적용시킬 수 있는 기술의 보다 자세한 기재는 문헌 [Jean Jacques, Andre Collet, Samuel H. Wilen, "Enantiomers, Racemates and Resolutions" John Wiley and Sons, Inc., 1981]에 기재되어 있다.

요약하면, 화학식 I의 화합물은 하기를 포함하는 방법에 의해 제조될 수 있다:

(a) 반응식 I, Ⅱ 및 Ⅲ의 방법, 예를 들어 화학식 5의 화합물을 반응식 Ⅱ 또는 Ⅲ에 따라 R₁H와 커플링시킴;

(b) 임의로 본 발명의 화합물을 제약상 허용되는 염으로 전환시킴;

(c) 임의로 본 발명의 화합물의 염 형태를 비-염 형태로 전환시킴;

(d) 임의로 본 발명의 화합물의 비산화된 형태를 제약상 허용되는 N-옥시드전환시킴;

(e) 임의로 본 발명의 화합물의 N-옥시드 형태를 이의 비산화된 형태로 전환시킴;

(f) 임의로 이성질체의 혼합물로부터 본 발명의 화합물의 각각의 이성질체분해시킴;

(g) 임의로 본 발명의 비-유도된 화합물을 제약상 허용되는 전구약물 유도전환시킴;

(h) 임의로 본 발명의 화합물의 전구약물 유도체를 이의 비-유도된 형태로 전환시킴.

출발 물질의 제조가 구체적으로 기재되지 않는 한, 상기 화합물은 공지되어 있거나 당업자에게 공지된 방법 또는 하기 실시예에 개시되는 방법으로 유사하게 제조될 수 있다.

당업자는 상기 변환은 단지 본 발명의 화합물의 제조에 대한 대표적인 방법이고, 익히 공지된 기타 방법이 유사하게 이용될 수 있음을 인지할 것이다.

하기의 실시예는 대표 화합물 제조의 상세한 기술을 제공하고, 비제한적으로 본 발명을 예시하기 위해 제공된다.

실시예 1

{4-[2-(4-아미노- 시클로헥실아미노 )-9- 페닐 -9H-퓨린-6- 일아미노 ]- 페닐 }-피페리딘-1-일-메타논

디클로로메탄 (360 mL) 중 피페리딘 (18.0 g, 211.8 mmol)의 용액에 0 ℃에서 4-니트로벤조일 클로라이드 (18.6 g, 100 mmol)를 여러 번에 걸쳐 조심스럽게 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반한 후에 HCl (1%, 2 x 200 mL) 용액 및 물 (300 mL)로 세척하고 Na₂SO₄로 건조시켰다. 용매를 증발시킨 후에, (4-니트로-페닐)-피페리딘-1-일-메타논 (23.2 g, 99%)을 수득하고 수소첨가 반응 (에탄올 400 mL 중 10% Pd/C 1.0 g)에 직접 사용하였다. 촉매를 여과하고 에탄올을 증발시킨 후에, (4-아미노-페닐)-피페리딘-1-일-메타논 (19.6 g, 96%)을 수득하였다.

2,6-디클로로퓨린 (18.80 g, 100 mmol), 3,4-디히드로-2H-피란 (12.62 g, 150 mmol), p-톨루엔술폰산 모노히드레이트 (1.90 g, 10 mmol) 및 무수 디클로로메탄 (200 mL)의 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 여과시킨 후에, Na₂CO₃ (10% 수성, 100 mL), 물 (100 mL)로 세척하고 Na₂SO₄ 상에서 건조시켰다. 용매를 증발시킨 후에, 에틸 아세테이트 (5 mL) 및 헥산 (60 mL)으로 적정하여 침전을 유도하고, 여과에 의해 2,6-디클로로-9-(테트라히드로-피란-2-일)-9H-퓨린 (24.01 g, 88%)을 수득하였다.

2,6-디클로로-9-(테트라히드로-피란-2-일)-9H-퓨린 (5.44 g, 20 mmol), (4-아미노-페닐)-피페리딘-1-일-메타논 (4.08 g, 20 mmol), 디이소프로필에틸아민 (24 mmol) 및 에탄올 (100 mL)의 혼합물을 24시간 동안 환류시켰다. 이어서, 트랜스-1,4-시클로헥산디아민 (6.84 g, 60 mmol) 및 디이소프로필에틸아민 (24 mmol)을 첨가하고 혼합물을 추가 24시간 동안 환류시켰다. 에탄올을 증발시킨 후에 오일성 잔류물을 수득하고, 에틸 아세테이트 (250 mL) 및 물 (200 mL)로 처리하였다. 수 성상을 에틸 아세테이트 (2 x 100 mL)로 추출하고, 합한 유기상을 Na₂SO₄ 상에서 건조시켰다. 증발시킨 후에, 수득한 오일성 잔류물을 55 ℃에서 4시간 동안 메탄올 (100 mL) 중 p-톨루엔술폰산 모노히드레이트 (3.80 g, 20 mmol)로 처리하고, 탈보호화가 완료될 때까지 반응을 모니터링하였다.

디이소프로필에틸아민을 첨가하여 혼합물을 중화시켰다. 수득한 오일성 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (EtOAc:MeOH = 9:1, 이어서 CH₂Cl₂:MeOH (~7 N 암모니아 함유) = 9:1)를 수행하여 2-(4-아미노-시클로헥실아미노)-6-[4-(피페리딘-1-카르보닐)-페닐아미노]-9H-퓨린 (6.50 g, 75%)을 수득하였다.

2-(4-아미노-시클로헥실아미노)-6-[4-(피페리딘-1-카르보닐)-페닐아미노]-9H-퓨린 (86.8 mg, 0.2 mmol)을 함유하는 반응 바이알을 상기와 같이 제조하고, 요오드화구리(I) (38.2 mg, 0.2 mmol) 및 인산칼륨 (170 mg, 0.8 mmol)을 탈기화시키고 무수 질소로 재충전하였다. DMF (700 ㎕) 중 N,N'-디메틸에틸렌디아민 (35.3 mg, 43 ㎕, 0.4 mmol) 및 요오도벤젠 (40.8 mg, 0.2 mmol)을 첨가하고 혼합물을 88 ℃에서 밤새 교반하였다. AcOH-MeOH (1:10, 1.5 mL)을 첨가하여 혼합물을 중화시킨 다음 시린지 여과기를 통해 여과시켰다. 컬럼 크로마토그래피 (EtOAc:MeOH = 9:1, 이어서 CH₂Cl₂:MeOH (~7 N 암모니아 함유) = 9:1)하여 고형물로서 {4-[2-(4-아미노- 시클로헥실아미노 )-9- 페닐 -9H-퓨린-6- 일아미노 ]- 페닐 }-피페리딘-1-일-메타논을 수득하였다.

실시예 2

[4-(2- 클로로 -9- 페닐 -9H-퓨린-6- 일아미노 )- 페닐 ]-피페리딘-1-일- 메타논

에탄올 (110 ml) 중 2,6-디클로로-9-(테트라히드라-피란-2-일)-9H-퓨린 (10 g, 36.6 mmol), (4-아미노-페닐)-피페리딘-1-일-메타논 (7.48 g, 36.6 mmol) 및 디이소프로필에틸아민 (9.5 g, 73.5 mmol)의 혼합물을 밤새 환류시켰다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 진공하에 농축시켜 진황색 고형물로서 [4-(2-클로로-9H-퓨린-6-일아미노)-페닐]-피페리딘-1-일-메타논 (14.7 g, 91%)을 수득하였다.

메탄올 (100 mL) 중 [4-(2-클로로-9H-퓨린-6-일아미노)-페닐]-피페리딘-1-일-메타논 (10 g, 22.7 mmol) 및 p-톨루엔술폰산 모노히드레이트 (0.86 g, 4.5 mmol)의 혼합물을 50 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 메탄올 중에 현탁시켰다. 침전물을 수집하고 에틸 아세테이트로 세척하여 연황색 고형물로서 [4-(2-클로로-9H-퓨린-6-일아미노)-페닐]-피페리딘-1-일-메타논 (7.69 g, 95%)을 수득하였다.

디옥산 (35 mL) 중 활성화 분자체 (4.2 g)의 현탁액에 [4-(2-클로로-9H-퓨린 -6-일아미노)-페닐]-피페리딘-1-일-메타논 (4 g, 11.2 mmol), 페닐 보론산 (2.73 g, 22.4 mmol), 구리 아세테이트 (3.05 g, 16.8 mmol) 및 피리딘 (3.54 g, 44.8 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 다음 40 ℃에서 5시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, THF (50 mL)로 희석하고, 셀라이트를 통해 여과시키고 메탄올로 세척하였다. 여액을 감압하에 농축시키고 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피 (MeOH/디클로로메탄 = 1/50)로 정제하여 황색 고형물로서 [4-(2- 클로로 -9- 페닐 -9H-퓨린-6- 일아미노 )- 페닐 ]-피페리딘-1-일- 메타논 (3.89 g, 80%)을 수득하였다.

실시예 3

{4-[2-(3-디메틸아미노- 피롤리딘 -1-일)-9- 페닐 -9H-퓨린-6- 일아미노 ]- 페닐 }-피페리딘-1-일-메타논

1-부탄올 (0.6 mL) 중 [4-(2-클로로-9-페닐-9H-퓨린-6-일아미노)-페닐)]-피페리딘-1-일메타논 (129 mg, 0.3 mmol) 및 3-(디메틸아미노)-피롤리딘 (103 mg, 0.9 mmol)의 혼합물을 120 ℃에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉 각시키고 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피 (MeOH/디클로로메탄 = 1/50)로 정제하여 진분홍색 고형물로서 {4-[2-(3-디메틸아미노-피롤리딘-1-일)-9-페닐-9H-퓨린-6-일아미노]-페닐}-피페리딘-1-일-메타논 (73.3 mg, 49%)을 수득하였다.

실시예 4

[4-(2- 이미다졸 -1-일-9- 페닐 -9H-퓨린-6- 일아미노 )- 페닐 ]피페리딘-1-일- 메타논

석영 반응 용기 (2 mL)에 NMP (0.3 mL) 중 [4-(2-클로로-9-페닐-9H-퓨린-6-일-아미노)-페닐)]-피페리딘-1-일메타논 (43 mg, 0.1 mmol) 및 이미다졸 (20.4 mg, 0.3 mmol)을 첨가하였다. 이어서 반응 용기를 마이크로파 반응기 (엠리스 (Emrys) 옵티마이저)의 내부에 넣고, 200 ℃에서 30분 동안 방사선을 조사하였다. 조 반응 혼합물을 분취용 HPLC로 정제하여 연황색 고형물로서 [4-(2- 이미다졸 -1-일-9- 페닐 -9H-퓨린-6-일아미노)-페닐]피페리딘-1-일- 메타논 (18.7 mg)의 트리플루오로아세테이트 염을 수득하였다.

실시예 5

{4-[9- 페닐 -2-(퀴놀린-3- 일아미노 )-9H-퓨린-6- 일아미노 ]- 페닐 }-피페리딘-1-일- 메타논

튜브를 [4-(2-클로로-9-페닐-9H-퓨린-6-일아미노)-페닐)]-피페리딘-1-일메타논 (43 mg, 0.1 mmol), 3-아미노퀴놀린 (21.6 mg, 0.15 mmol), 트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐 (O) (7 mg, 0.008 mmol), 2-(디-t-부틸포스피노)비페닐 (8.9 mg, 0.03 mmol), 인산칼륨 (100 mg, 0.47 mmol)로 충전하고, 비우고, 질소로 다시 충전시켰다. DME (0.7 mL)를 질소하에 첨가하였다. 반응 혼합물을 85 ℃에서 16시간 동안 교반하였다. 생성된 연갈색 현탁액을 실온으로 냉각시키고 분취용 HPLC로 정제하여 황색 고형물로서 {4-[9- 페닐 -2-(퀴놀린-3- 일아미노 )-9H-퓨린-6- 일아미노 ]-페닐}-피페리딘-1-일-메타논 (24.5 mg)의 트리플루오로아세테이트 염을 수득하였다.

실시예 6

N ² -(4-아미노- 시클로헥실 )- N ⁶ -(4-모르폴린-4-일- 페닐 )-9- 페닐 -9H-퓨린-2,6- 디아민

분자체 (4A, 12.0 g)를 진공하에 150 ℃에서 밤새 건조시키고 실온으로 냉각시켰다. 이어서 2-플루오로-6-클로로-퓨린 (6.0 g, 35 mmol), 페닐보론산 (8.3 g, 70 mmol), 구리 아세테이트 (9.0 g, 52 mmol) 및 트리에틸아민 (19 mL, 140 mmol)을 첨가하고 무수 디옥산 (100 mL) 중에서 혼합하였다. 반응 혼합물을 부착된 건조 튜브로 실온에서 2일 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후에, 반응 혼합물을 메틸렌 클로라이드 (200 mL) 중에 희석시키고, 셀라이트 패드를 통해 여과시키고, 메틸렌 클로라이드 (200 mL)로 세척하였다. 유기상을 합하고 용매를 회전 증발기로 제거하였다. 조 생성물을 용리액으로서 헥산/에틸 아세테이트를 사용하는 플래쉬 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 연황색 고형물로서 2-플루오로-6-클로로-9-페닐-9H-퓨린 (2.1 g, 24%)을 수득하였다. MS m/z 249.1 (M+1)

2-플루오로-6-클로로-9-페닐-9H-퓨린 (50 mg, 0.20 mmol), 4-모르폴린-4-일-페닐아민 (39 mg, 0.22 mmol) 및 디이소프로필에틸아민 (35 ㎕, 0.2 mmol)을 1-부탄올 (0.4 mL) 중에 혼합하였다. 반응물을 80 ℃에서 2시간 동안 교반한 후에, 트랜스-1,4-시클로헥산디아민 (68 mg, 0.6 mmol) 및 디이소프로필에틸아민 (70 ㎕, 0.4 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 110 ℃에서 밤새 교반하였다. 용매를 회 전 증발기로 제거하였다. 조 혼합물을 DMSO 중에 재용해시키고 HPLC로 정제하여 백색 분말로서 N²-(4-아미노-시클로헥실)-N⁶-(4-모르폴린-4-일-페닐)-9-페닐-9H-퓨린-2,6-디아민의 트리플루오로아세테이트 염을 수득하였다.

실시예 7

N ² -(4-아미노- 시클로헥실 )- N ⁶ -[3-(4- 메틸 -피페라진-1-일)- 페닐 ]-9- 페닐 -9H-퓨린-2,6- 디아민

1-클로로-3-니트로-벤젠 (1.0 g, 7 mmol)을 1-메틸-피페라진 (2.0 mL)과 혼합하고 반응물을 캡핑하고 190 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 후에, 과량의 1-메틸-피페라진을 회전 증발기로 제거하여 황색 오일로서 조 생성물을 수득하였다. 상기 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 컬럼으로 정제하여 1-메틸-4-(3-니트로-페닐)-피페라진 (1.2 g, 수율 78%)을 수득하였다.

1-메틸-4-(3-니트로-페닐)-피페라진 (1.2 g, 5.4 mmol)을 메탄올 (50 mL) 중 에 용해시키고, Pd/C (5%, 120 mg)를 상기 용액에 첨가하였다. 수소 밸룬을 플라스크에 부착시켰다. 상기 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응이 완료된 후에, Pd/C를 여과하고 여액을 수집하고 회전 증발기로 농축시켜 3-(4-메틸-피페라진-1-일)-페닐아민을 수득하였다.

2-플루오로-6-클로로-9-페닐-9H-퓨린 (50 mg, 0.20 mmol), 3-(4-메틸-피페라진-1-일)-페닐아민 (42 mg, 0.22 mmol) 및 디이소프로필에틸아민 (35 ㎕, 0.2 mmol)을 1-부탄올 (0.4 mL) 중에서 혼합하였다. 반응물을 80 ℃에서 2시간 동안 교반한 후, 트랜스-1,4-시클로헥산디아민 (68 mg, 0.6 mmol) 및 디이소프로필에틸아민 (70 ㎕, 0.4 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 110 ℃에서 밤새 교반하였다. 용매를 회전 증발기로 제거하고 조 생성물을 DMSO 중에 재용해시키고 HPLC로 정제하여 백색 분말로서 N ² -(4-아미노- 시클로헥실 )- N ⁶ -[3-(4- 메틸 -피페라진-1-일)- 페닐 ]-9-페닐-9H-퓨린-2,6-디아민을 수득하였다.

실시예 8

1-{4-[2-(2- 메틸 -모르폴린-4-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6- 일아미노 ]- 페닐} - 에타논

1-(4-아미노-페닐)-에타논 (1.0 g, 7.4 mmol)을 2-플루오로-6-클로로-9-(테트라히드로-피란-2-일)-9H-퓨린 (1.90 g, 7.4 mmol), 디이소프로필에틸아민 (1.54 mL, 8.9 mmol) 및 n-부탄올 (50 mL)과 혼합하였다. 상기 반응물을 95 ℃에서 14시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각시킨 후에 용매를 제거하고, 조 생성물을 MeOH/DCM (5%:95%)을 사용하는 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 백색 고형물로서 1-{4-[2-플루오로-9-(테트라히드로-피란-2-일)-9H-퓨린-6-일아미노]-페닐}-에타논 (2.49 g)을 수득하였다.

1-{4-{2-플루오로-9-(테트라히드로-피란-2-일)-9H-퓨린-6-일아미노]-페닐}-에타논 (100 ㎎, 0.28 mmol)을 2-메틸-모르폴린 HCl 염 (58 mg, 0.45 mmol), 디이소프로필에틸아민 (121 ㎕, 0.70 mmol) 및 n-부탄올 (5 mL)과 혼합하였다. 상기 반응물을 100 ℃에서 14시간 동안 교반하였다. 냉각시키고 용매를 제거한 후에, 조 생성물을 EA/헥산 (1:1)을 사용하는 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 황색 고형물로서 1-{4-[2-(2-메틸-모르폴린-4-일)-9-(테트라히드로-피란-2-일)-9H-퓨린-6-일아미노]-페닐}-에타논 (115 mg)을 수득하였다.

1-{4-[2-(2-메틸-모르폴린-4-일)-9-(테트라히드로-피란-2-일)-9H-퓨린-6-일 아미노]-페닐}-에타논 (115 mg, 0.26 mmol)을 에탄올 (1O mL) 중에 용해시키고 TFA (200 ㎕)와 혼합하였다. 반응물을 60 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각시키고 용매 및 TFA를 완전히 제거한 후에, 조 생성물을 요오드화구리(I) (50 mg, 0.26 mmol) 및 인산칼륨 (220 mg, 0.8 mmol)과 혼합하고 탈기시키고, 무수 질소로 재충전시켰다. DMF (4 mL) 중 N,N'-디메틸에틸렌디아민 (46 mg, 0.52 mmol) 및 요오도-티아졸 (53 mg, 0.26 mmol)을 첨가하고 혼합물을 90 ℃에서 14시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각시킨 후에, AcOH-MeOH (1:10, 1.6 mL)을 첨가하여 혼합물을 중화시킨 다음 시린지 여과기를 통해 여과시켰다. 용매를 제거한 후에, 조 생성물을 DMSO 중에 용해시키고 분취용 HPLC로 정제하여 연한 색 고형물로서 1-{4-[2-(2-메틸-모르폴린-4-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6-일아미노]-페닐}-에타논 (71 mg)을 수득하였다.

실시예 9

(4- 메탄술포닐 - 페닐 )-[2-(4-모르폴린-4-일-피페리딘-1-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6-일]-아민

4-메탄술포닐-페닐아민 (1.27 g, 7.4 mmol)을 2-플루오로-6-클로로-9-(테트라히드로-피란-2-일)-9H-퓨린 (1.90 g, 7.4 mmol), 디이소프로필에틸아민 (1.54 mL, 8.9 mmol) 및 n-부탄올 (50 mL)과 혼합하였다. 반응물을 95 ℃에서 14시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각시키고 용매를 제거한 후에, 조 생성물을 MeOH/DCM (7%:93%)을 사용하는 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 백색 고형물로서 [2-플루오로-9-(테트라히드로-피란-2-일)-9H-퓨린-6-일]-(4-메탄술포닐-페닐)-아민 (2.75 g)을 수득하였다.

[2-플루오로-9-(테트라히드로-피란-2-일)-9H-퓨린-6-일]-(4-메탄술포닐-페닐)-아민 (110 mg, 0.28 mmol)을 4-피페리딘-4-일-모르폴린 (76 mg, 0.45 mmol), 디이소프로필에틸아민 (121 ㎕, 0.70 mmol) 및 n-부탄올 (5 mL)과 혼합하였다. 반응물을 100 ℃에서 14시간 동안 교반하였다. 냉각시키고 용매를 제거한 후에, 조 생성물을 EA/헥산 (6:4)를 사용하는 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 황색 고형물로서 (4-메탄술포닐-페닐)-[2-(4-모르폴린-4-일-피페리딘-1-일)-9-(테트라히드로-피란-2-일)-9H-퓨린-6-일]-아민 (145 mg)을 수득하였다.

(4-메탄술포닐-페닐)-[2-(4-모르폴린-4-일-피페리딘-1-일)-9-(테트라히드로-피란-2-일)-9H-퓨린-6-일]-아민 (145 mg, 0.26 mmol)을 에탄올 (1O mL) 중에 용해시키고 TFA (200 ㎕)와 혼합하였다. 반응물을 60 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각시키고 용매 및 TFA를 완전히 제거한 후에, 조 생성물을 요오드화구리 (I) (50 mg, 0.26 mmol) 및 인산칼륨 (220 mg, 0.8 mmol)과 혼합하고 탈기시키고 무수 질소로 재충전하였다. DMF (4 mL) 중 N,N'-디메틸에틸렌디아민 (46 mg, 0.52 mmol) 및 요오도-티아졸 (53 mg, 0.26 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 90 ℃에서 14시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각시킨 후에, AcOH-MeOH (1:10, 1.6 mL)를 첨가하여 혼합물을 중화시킨 다음, 시린지 여과기를 통해 여과시켰다. 용매를 제거한 후에, 조 생성물을 DMSO 중에 용해시키고 분취용 HPLC로 정제하여 백색 고형물로서 (4-메탄술포닐-페닐)-[2-(4-모르폴린-4-일-피페리딘-1-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6-일]-아민 (95 mg)을 수득하였다.

실시예 10

N ⁶ -(4- 메탄술포닐 - 페닐 )- N ² -피리딘-2- 일메틸 -9-티아졸-4-일-9H-퓨린-2,6- 디아민

2-플루오로-6-클로로퓨린 (17.26 g, 100 mmol), 3,4-디히드로-2H-피란 (12.62 g, 150 mmol) 및 p-톨루엔술폰산 모노히드레이트 (1.90 g, 10 mmol)의 혼합물을 무수 디클로로메탄 (200 mL) 중에 용해시키고 실온에서 4시간 동안 교반하였 다. 반응 혼합물을 여과하고, Na₂CO₃ (10% 수용액, 100 mL) 및 물 (100 mL)로 세척하고, 유기층을 Na₂SO₄로 건조시켰다. 용매를 증발시켜 오일을 생성시키고 에틸 아세테이트 (10 mL) 및 헥산 (60 mL)으로 연마처리하여 침전물 형성을 유도하였다. 생성물, 2-플루오로-6-클로로-9-(테트라히드로-피란-2-일)-9H-퓨린을 여과하여 수집하였다.

에탄올 (20 ml) 중 2-플루오로-6-클로로-9-(테트라히드로-피란-2-일)-9H-퓨린 (2.56 g, 10 mmol), 4-(메틸티오)아닐린 (1.39 g, 10 mmol) 및 DIEA (1.93 g, 15 mmol)의 혼합물을 78 ℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 용매를 증발시킨 다음, 컬럼 크로마토그래피 (EtOAc/DCM, 10%에서 30%로)하여 백색 고형물로서 [2-플루오로-9-(테트라히드로-피란-2-일)-9H-퓨린-6-일]-(4-메틸술파닐-페닐)-아민을 수득하였다.

DCM (10 ml) 중 상기 수득한 화합물 (3.33 g, 9.25 mmol)의 용액에 3-클로로퍼옥시벤조산 (6.22 g, 최대 77%, 27.8 mmol)을 천천히 적가하였다 (빙조 내). 첨가한 후에, 상기 혼합물을 실온에서 추가 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 DCM (50 ml)으로 희석하고 유기상이 투명해질 때까지 현탁액을 포화된 Na₂S₂O₃ (50 ml) 및 포화된 NaHCO₃ (50 ml x 2)로 세척하였다. 유기층을 물 (50 ml) 및 염수 (50 ml)로 추가 세척하고 MgSO₄로 건조시켰다. 용매를 증발시킨 다음, 컬럼 크로마토그래피 (EtOAc/DCM, 30%에서 70%로)하여 연황색 고형물로서 [2-플루오로-9-(테트라히드로-피란-2-일)-9H-퓨린-6-일]-(4-메틸술포닐-페닐)-아민을 수득하였다.

2-플루오로퓨린 기질 (4.6 g, 11.8 mmol) 및 2-(아미노메틸)피리딘 (15.0 g)의 혼합물을 84 ℃ 오일 조 내에서 밤새 가열하였다. 상기 혼합물을 에틸 아세테이트 (200 mL) 및 물 (200 mL)에 분배시켰다. 유기상을 NH₄Cl (2 x 150 mL, 포화된 수용액) 및 물 (200 mL)로 세척하고 Na₂SO₄ 상에서 건조시켰다. 용매를 증발시켜 추가 정제 없이 다음 단계에 사용되는 조 생성물을 수득하였다.

상기 수득한 화합물 (1.93 g, 4.02 mmol)을 출발 물질이 더 이상 검출되지 않을 때까지 60 ℃에서 메탄올 (20 mL) 중 p-톨루엔술폰산 모노히드레이트 (950 mg, 5.0 mmol)로 교반하였다 (TLC 또는 LC-MS로 모니터링함). 트리에틸아민 (1.0 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켜 침전물을 형성하고 여과로 수집하여 탈보호된 생성물을 수득하였다.

탈보호된 2,6-이치환된 퓨린 (1.98 g, 5.0 mmol), CuI (475 mg, 2.50 mmol) 및 K₃PO₄ (3.18 g, 15 mmol)를 플라스크 (아르곤으로 후충전) 내에서 합하였다. DMF (9.0 mL) 중 트랜스-N,N'-디메틸시클로헥산-1,2-디아민 (355 mg, 2.50 mmol) 및 4-브로모티아졸 (932 mg, 88% 순도, 5.0 mmol)을 첨가하고 혼합물을 88 ℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시킨 후에, 아세트산 (1.0 mL)을 첨가하고 혼합물을 시린지 여과기 (DMF로 세척)를 통해 여과시켰다. 여액을 역-상 분취용 LC-MS (7.5분 내 아세토니트릴/물/TFA 성분 10-90% CH₃CN, Ultro 120 5 μM C 18Q, 75 x 30 mmID)로 정제하였다. 수집한 생성물의 물/MeCN 용액을 증발시켜 아세토니트릴을 제거하였다. NaHCO₃ (포화된 수용액)를 첨가하여 pH를 9로 올렸다. DCM을 사용하여 생성물을 추출하고, 유기상을 Na₂SO₄ 상에서 건조시켰다. 용매를 증발시켜 유리 염기로서 생성물을 수득하고, 백색 분말로서 N⁶-(4-메탄술포닐-페닐 )-N²-피리딘-2-일메틸-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-2,6-디아민을 수득하였다.

실시예 11

R-(4- 메탄술포닐 - 페닐 )-[2-(2- 메틸 -모르폴린-4-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6-일]-아민

N-벤질에탄올아민 (9.06 g, 60 mmol)을 밀봉된 튜브 내에서 45 ℃에서 밤새 (R)-(+)-프로필렌 옥시드 (6.96 g, 99%, 120 mmol)와 함께 교반하였다. 과량의 프로필렌 옥시드를 진공하에 증발시켜 다음 단계에 직접 사용되는 디올 잔류물을 수득하였다.

디올을 디옥산 (60 mL, 무수) 중에 용해시켰다. KOH (10.08 g, 180 mmol) 및 트리스(3,6-디옥사헵틸)아민 (200 mg, 0.62 mmol)을 첨가하고 혼합물을 0 ℃로 냉각시킨 후에 토실 클로라이드 (12.58 g, 66 mmol, 무수 디옥산 60 mL 중)를 적가 하였다. 반응 혼합물을 0 ℃에서 45분 동안 교반한 후에 실온으로 가온하고 추가 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 여액을 진공하에 증발시켰다. HCl (2 N, 200 mL)을 생성물에 첨가하고 생성된 산성 수용액을 에틸 아세테이트 (150 mL x 2)로 세척하고, 상기 용액을 0 ℃로 냉각시키고 NaOH을 첨가하여 중화시켰다. 이어서 생성물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기상을 Na₂SO₄ 상에서 건조시킨 다음 증발시켰다. 잔류물을 크로마토그래피 (DCM 중 5-20% 에틸 아세테이트)하여 고리화 생성물 (6.66 g)을 수득하였다.

유리 염기를 HCl 염으로 전환시키고 하기와 같이 재결정화하였다: 상기 수득한 유리 염기를 HCl (에테르 중 2 M, 50 mL)로 처리하고 증발시켜 HCl 염을 수득하였다. 염 (6.0 g)을 에틸 아세테이트 (120 mL)와 혼합하고 환류로 가열하였다. EtOH를 고형물 전체가 용해될 때까지 조심스럽게 적가하였다. 이어서, 실온으로 냉각시키고 밤새 냉장고에 두었다. 수득한 침전물을 여과하여 순수한 생성물 (2.8 g)을 수득하였다.

에탄올 (30 mL) 중 재결정화된 염 (1.35 g, 5.94 mmol)의 용액을 10% Pd/C (0.20 g) 상에서 감압 (55 psi) 하에 실온에서 밤새 가수소화하였다. 상기 혼합물을 셀라이트 (EtOH로 세척)를 통해 여과하고 여액을 증발시켜 오일을 수득하였다. 에테르를 첨가하고 이어서 증발시켜 고형물로서 R-2-메틸모르폴린 히드로클로라이드를 수득하였다.

에탄올 (20 ml) 중 2-플루오로퓨린 기질 (4.6 g, 11.8 mmol), R-2-메틸모르폴린 히드로클로라이드 (1.78 g, 12.9 mmol) 및 DIEA (3.78 g, 29.4 mmol)의 혼합물을 밤새 환류시켰다. 에탄올을 증발시키고 잔류물을 DCM (100 ml) 중에 용해시켰다. 포화된 NaHCO₃ (50 ml), 물 (50 ml), 염수 (50 ml)로 세척하고 MgSO₄ 상에서 건조시켰다. 용매를 증발시키고 이어서 컬럼 크로마토그래피 (EtOAc/DCM, 30%에서 50%로)하여 연갈색 고형물로서 R-4-메탄술포닐-페닐)-[2-(2-메틸-모르폴린-4-일)-9-(테트라히드로-피란-2-일)-9H-퓨린-6-일]-아민을 수득하였다.

상기 수득한 화합물 (1.90 g, 4.02 mmol)을 출발 물질이 더 이상 검출되지 않을 때까지 (TLC 또는 LC-MS로 모니터링함), 메탄올 (20 mL) 중 p-톨루엔술폰산 모노히드레이트 (380 mg, 2.0 mmol)와 함께 60 ℃에서 교반하였다. 트리에틸아민 (0.5 mL)을 첨가하고 에탄올을 증발시켰다. 컬럼 크로마토그래피 (MeOH/DCM, 0에서 5%로)하여 탈보호된 생성물을 수득하였다.

2,4-디브로모티아졸 (5.00 g, 20.7 mmol)을 아르곤으로 3회 후충전시킨 플라스크에 두었다. 무수 에테르 (82 mL)를 첨가하고, 상기 용액을 -78 ℃로 냉각시켰다. n-부틸리튬 (시클로헥산 중 2.5 M, 10.0 mL)을 첨가하고 반응 혼합물을 -78 ℃에서 90분 동안 교반한 후에 HCl/에테르 용액 (2.0 m x 15 mL)으로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하였다. 혼합물을 NaHCO₃ (포화된 수용액, 60 mL)로 세척하고 유기상을 Na₂SO₄ 상에서 건조시켰다. 증발시킨 후에, 4-브로모티아졸을 조 생성물로서 수득하였다.

탈보호된 2,6-이치환된 퓨린 (1.44 g, 3.71 mmol), CuI (352 mg, 1.86 mmol) 및 Cs₂CO₃ (3.62 g, 3.0 당량)를 플라스크 (전에 아르곤으로 후충전시킴)에서 합하였다. DMF (8.0 mL) 중 트랜스-N,N'-디메틸시클로헥산-1,2-디아민 (264 mg, 1.86 mmol) 및 4-브로모티아졸 (691 mg, 88% 순수, 3.71 mmol)을 첨가하고 혼합물을 88 ℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시킨 후에, 아세트산 (1.0 mL)을 첨가하고 혼합물을 시린지 여과기 (DMF로 세척)로 여과시켰다. 여액을 역상 분취 용 LC-MS (7.5분 내 아세토니트릴/물/TFA 성분 10-90 % CH₃CN, Ultro 120 5 μM C18Q, 75 x 30 mmID)로 정제하였다. 수집한 생성물의 물/MeCN 용액을 증발시켜 아세토니트릴을 제거하였다. NaHCO₃ (포화된 수용액)를 첨가하여 pH를 9로 올렸다. DCM을 사용하여 생성물을 추출하고 유기상을 Na₂SO₄ 상에서 건조시켰다. 용매를 증발시켜 유리 염기/ 백색 분말로서 R-(4- 메탄술포닐 - 페닐 -)[2-(2- 메틸 -모르폴린-4-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6-일]-아민을 수득하였다.

실시예 12

1-(4-{2-[ 메틸 -(1- 메틸 -피페리딘-4-일-아미노]-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6- 일아미노 }- 페닐 )- 에타논

1-(4-아미노-페닐)-에타논 (1.0 g, 7.4 mmol)을 2-플루오로-6-클로로-9-(테트라히드로-피란-2-일)-9H-퓨린 (1.90 g, 7.4 mmol), 디이소프로필에틸아민 (1.54 mL, 8.9 mmol) 및 n-부탄올 (50 mL)과 혼합하였다. 반응물을 95 ℃에서 14시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각시키고 용매를 제거한 후에, 조 생성물을 MeOH/DCM (5%:95%)을 사용하는 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 백색 고형물로서 1-{4-[2-플루오로-9-(테트라히드로-피란-2-일)-9H-퓨린-6-일아미노]-페닐}-에타논 (2.49 g)을 수득하였다.

1-{4-[2-플루오로-9-(테트라히드로-피란-2-일)-9H-퓨린-6-일아미노]-페닐}-에타논 (100 mg, 0.28 mmol)을 메틸-(1-메틸-피페리딘-4-일)-아민 (58 mg, 0.45 mmol), 디이소프로필에틸아민 (121 ㎕, 0.70 mmol) 및 n-부탄올 (5 mL)과 혼합하였다. 반응물을 100 ℃에서 14시간 동안 교반하였다. 냉각시키고 용매를 제거한 후에, 조 생성물을 EA/헥산 (1:1)을 사용하는 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 황색 고형물로서 1-{4-[2-[메틸-(1-메틸-피페리딘-4-일)-아미노]-9-(테트라히드로-피란-2-일)-9H-퓨린-6-일아미노]-페닐}-에타논 (115 mg)을 수득하였다.

1-{4-[2-[메틸-(1-메틸-피페리딘-4-일)-아미노]-9-(테트라히드로-피란-2-일)-9H-퓨린-6-일아미노]-페닐}-에타논 (115 mg, 0.26 mmol)을 에탄올 (1O mL) 중에 용해시키고 TFA (200 ㎕)와 혼합하였다. 반응물을 60 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각시키고 용매 및 TFA를 완전히 제거한 후에, 조 생성물을 요오드화구리(I) (50 mg, 0.26 mmol) 및 인산칼륨 (220 mg, 0.8 mmol)과 혼합하고 탈기시키고 무수 질소로 재충전시켰다. DMF (4 mL) 중 N,N'-디메틸에틸렌디아민 (46 mg, 0.52 mmol) 및 요오도-티아졸 (53 mg, 0.26 mmol)을 첨가하고 상기 혼합물을 90 ℃에서 14시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각시킨 후에, AcOH-MeOH (1:10, 1.6 mL)을 첨가하여 혼합물을 중화시킨 후에 시린지 여과기를 통해 여과시켰다. 용매를 제거한 후에, 조 생성물을 DMSO 중에 용해시키고 분취용 HPLC로 정제하여 연한 색 고형물로서 1-(4-{2-[메틸-(1-메틸-피페리딘-4-일)-아미노]-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6-일아미노}-페닐)-에타논을 수득하였다.

적절한 출발 물질을 사용하여 상기 실시예에 기재된 절차를 반복함으로써, 표 1, 2 및 3에 나타낸 바와 같은 하기 화학식 I의 화합물을 수득하였다.

표 1의 성분을 합하여 화학식 I의 화합물을 형성하는데, 예를 들어 화합물 13의 성분을 합하여 하기의 구조를 갖는 N ² -(1-벤질-피페리딘-4-일)-9- 페닐 - N ⁶ -[4-(피페리딘-1-술포닐)-페닐]-9H-퓨린-2,6-디아민을 형성한다.

유사하게, 표 2의 성분을 합하여 화학식 I의 화합물을 형성한다. 예를 들어, 화합물 425의 성분을 합하여 하기의 구조를 갖는 (4-{2-[2-(4- 메틸 -티아졸-5-일)-에톡시]-9-티오펜-3-일-9H-퓨린-6-일아미노}-페닐)-피페리딘-1-일-메타논을 형성한다.

표 3의 성분을 합하여 화학식 I의 화합물을 형성하는데, 예를 들어 화합물 605의 성분을 합하여 하기의 구조를 갖는 [2-(2- 메틸 -모르폴린-4-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6-일]-[4-(테트라히드로-피란-4-술포닐)-페닐]-아민을 형성한다.

분석

탈조절된 Flt3 및(또는) FGFR3 수용체 티로신 키나제 활성에 관련된 질병의 치료에 대해 본 발명의 화합물의 효능은 하기의 약리학적 시험의 결과로 예시된다 (실시예 10 내지 13). 이러한 실시예는 이의 범주를 어떠한 방식으로든 제한하지 않으면서 본 발명을 예시한다.

실시예 13

Flt -3: 활성의 생성 및 측정

활성은 상이한 농도의 억제제의 존재 또는 부재하에 γ-³³P-ATP 유래의 ³³P를 적합한 기질로 혼입하는 것을 측정하여 분석한다.

정제된 GST-Flt-3을 사용한 티로신 단백질 키나제 분석은 키나제 완충액 (30 mM 트리스-HCl (pH 7.5), 3 mM MnCl₂, 15 mM MgCl₂, 1.5 mM DTT, 15 μM Na₃VO₄, 7.5 mg/㎖ PEG, 0.25 μM 폴리-EY(Glu, Tyr), 1% DMSO (화합물의 최고 농도에서), 10 μM ATP 및 γ-³³P-ATP (O.1 μCi)) 중 효소 500 ng을 함유하는 최종 부피 40 ㎕ 중에서 하였다. 2가지 용액을 제조하였는데, 제1 용액 (10 ㎕)은 Flt-3 효소 및 억제제를 함유한다. 제2 용액은 키나제 완충액 (30 ㎕) 중 기질 (폴리-EY), ATP, 및 γ-³³P-ATP를 함유한다. 두 용액을 70% 에탄올로 습윤시키고, 1 M 트리스 (7.4)로 세정한 96-웰 PVDF 필터 플레이트 (밀리포어(Millipore), 베드포드, MA, USA) 상에서 혼합하였다. 반응물을 실온에서 20분 동안 인큐베이션하고, 0.1% 인산으로 정지시킨 다음, 진공 다기관을 사용하여 플레이트를 통해 여과하여 상기 기질이 막에 결합하도록 하였다. 이어서 플레이트를 0.1% 인산으로 5회 세척하고, 팩커드 탑카운트(Packard TopCount) 96-웰 어댑터 플레이트에 장착시키고 마이크로신트(Microscint) TM (팩커드) 50 ㎕를 각 웰에 첨가한 후에 계수하였다.

IC₅₀ 값을 8가지 농도 (1 μM 내지 0.0005 μM로 1:3 희석)에서 각 화합물 (이중으로)의 억제율 %를 선형 회귀 분석에 의해 계산하였다. 이 분석에서, 본 발명의 화합물은 O.1 nM 내지 2 μM 범위의 IC₅₀ 값을 갖는다.

실시예 14

일반적 기술은, 증식을 위해 돌연변이체 Flt3에 의존하는 세포주에 대해 가능한 억제제의 효과를, 증식을 위해 돌연변이체 Flt3에 의존하지 않는 세포주와 비교하는 것을 포함한다. 추가의 연구를 위하여, 상이한 활성 (FLT3+ 세포주와 FLT3- 세포주 사이에서 10배 이상의 감수성 차이)을 갖는 화합물을 선택한다.

초기 스크리닝을 위해 사용된 세포주는, 적절한 Flt3 cDNA를 발현하는 레트로바이러스로 감염시킨 후에 돌연변이체를 야생형(비-돌연변이됨) Flt3를 과다-발현하기 위해 조작된 Ba/F3 세포의 서브라인이다. 모세포주 Ba/F3은 증식을 위해 인터류킨-3에 의존하고, IL-3을 제거할 경우 상기 세포는 급속히 증식을 멈추고 사멸한다. 레트로바이러스는 레트로바이러스 LTR로부터 Flt3을 발현하고, IRES 부위로부터 neo 유전자를 발현한다. G418에서 Ba/F3 세포를 선택하고, 형광 활성화 세포 선별(FACS)에 의해 Flt3의 발현을 분석하였다. 2종의 상이한 Flt3 돌연변이를 갖는 세포주를 사용하였다. 하나의 돌연변이체는 엑손 II에 의해 코딩되는 저스타멤브레인 도메인에서 14개 아미노산 복제를 갖는 Flt-3을 발현하고, 특이적 복제는 ...VDFREYEYDLKWEF... (Ba/F3-Flt3-ITD라 명명됨)이었다. 두번째 돌연변이는 835 위치에 있는 아스파라긴을 티로신으로 전환시킨 점 돌연변이 (Ba/F3-FLT3-D835Y라 명명됨)를 갖는다. 양쪽 돌연변이는 모두 Flt-3 키나제 활성화를 유도하고, IL-3에 비의존성으로 만들고, 발현 세포는 IL-3의 부재하에 성장하였다. 야생형 Flt3을 발현하는 Ba/F3 세포를 유사하게 발생시키고 "대조군" 세포주로서 사용하였다. 모세포주(비감염 세포주) 및 야생형 "대조군" 세포주는 증식에 대해 여전히 IL-3에 의존적이었다.

배양 배지로서 10% 태아 소 혈청을 함유한 RPMI 1640을 사용하여, 2 mL 배양액 중의 Ba/F3 세포 (-대조군, -Flt3-ITD, 또는 -Flt3-D835Y)를 500,000 세포/mL로 배양하였다. 대조군 세포를 위한 배지 (돌연변이체-Flt3 세포는 아님)는 IL-3의 공급원으로서 WEHI-3B 세포로부터의 10% 조절 배지를 함유한다. 각 화합물의 10 mM "원" 용액을 디메틸술폭시드 (DMSO) 중에 만들었다. 이어서, 전형적으로 1 nM 내지 10 μM 범위의 최종 약물 농도를 형성하기 위해, 10% 태아 소 혈청을 갖는 RPMI 1640 내로 희석액을 만들었다. 부형제 대조군으로서 작용하도록 DMSO의 유사한 희석액을 만들었다. 화합물 첨가 48 시간 후에, 상기 세포를 증식률 및 세포독성에 대해 분석하였다.

Yo-Pro-1 요오다이드 (분자 프로브)를 NaCl/Na-시트레이트 완충액 중 최종 농도 2.5 μM의 세포에 첨가하였다. 상기 세포를 실온에서 10분 동안 Yo-Pro와 함께 인큐베이션한 다음, 세포독성의 측정을 위해 형광계에서 판독하였다. 그 후, 상기 세포를 NP40/EDTA/EGTA 완충액으로 용해하고, 실온에서 90분 동안 인큐베이션 하고 증식을 측정하기 위해 판독하였다.

야생형 대조군 Ba/F3 세포에 대해서보다 Ba/F3-FLT3-ITD 세포에 대해 선택적으로 더욱 독성인 화합물을 Flt3-D835Y 발현 세포에 대해 추가로 시험하였다.

또한, 활성 화합물의 여러 농도에 노출시키기 전 및 후에, Flt3 단백질을 면역 침전시키기 위해 α-Flt3 항체를 사용하였다. 면역침전된 단백질을 소듐 도데실 술페이트 폴리아크릴아미드 겔에 의해 분리하고, 전기영동적으로 PVDF 막으로 이동시키고, α-포스포-⁵⁹¹Y-Flt3 대한 항체로 면역블롯팅하였다. 이 분석은, 화합물이 수용체의 돌연변이된 형태의 특징인 Flt3의 "자가인산화" 수준을 감소시키는지의 여부를 결정한다.

본 발명의 화합물은 10 μM 이하에서 대조군-Flt3에 대해 비독성인 반면, 전형적으로 나노몰 범위에서 Flt3-ITD에 대해 항증식 활성을 보였다. 본 발명의 화합물은 또한 나노몰 범위에서 세포성 Flt-3의 자가인산화 활성을 감소시켰다.

유리 형태 또는 제약상 허용되는 염 형태의 화학식 I의 화합물은, 예를 들어 본 명세서에 기재된 시험관 내 시험에 의해 나타낸 바와 같이 유용한 약리학적 특징을 보였다. 예를 들어, 화학식 I의 화합물은 상기 기재된 분석에서 Flt3에 대해 1 x 10^-10 내지 2 x 10^-6 M 범위 내, 바람직하게는 100 nM 미만의 IC₅₀을 나타내었다. 예를 들어, {4-[2-(4-아미노- 시클로헥실아미노 )-9-티오펜-3-일-9H-퓨린-6-일아미노]-페닐}-피페리딘-1-일-메타논은 실시예 13에 기재된 분석에서는 IC₅₀이 7 nM인 한편, 실시예 14에 기재된 분석에서는 IC₅₀이 5 nM이었다.

실시예 15

FGFR3 : 활성 측정

활성은 상이한 농도의 억제제의 존재 또는 부재하에, HTRF를 사용하여 펩티드 기질의 인산화를 측정함으로써 분석한다.

정제된 FGFR3 (업스테이트)을 사용하는 티로신 단백질 키나제 분석은 키나제 완충액 (30 mM 트리스-HCl pH 7.5, 15 mM MgCl₂, 4.5 mM MnCl₂, 15 μM Na₃VO₄, 50 μg/㎖ BSA) 중 효소 0.25 μg/㎖, 및 기질 (5 μg/mL 바이오틴-폴리-EY(Glu, Tyr)(CIS-US, Inc.) 및 3 μM ATP)을 함유하는 최종 부피 10 ㎕ 중에서 수행하였다. 2가지 용액을 제조하였는데, 먼저, 키나제 완충액 중 FGFR3 효소를 함유하는 제1 용액 (5 ㎕)을 384-포맷 프록시플레이트(등록상표)(퍼킨-엘머)에 분배하고, 이어서 DMSO 중에 용해시킨 화합물 50 nL을 첨가한 다음, 키나제 완충액 중 기질 (폴리-EY) 및 ATP를 함유하는 제2 용액 (5 ㎕)을 각 웰에 첨가하였다. 반응물을 실온에서 1시간 동안 인큐베이션하고, 30 mM 트리스-HCl pH 7.5, 0.5 M KF, 50 mM EDTA, 0.2 mg/mL BSA, 15 μg/mL 스트렙타비딘-XL665 (CIS-US, Inc.) 및 150 ng/mL 크립테이트 접합된 항-포스포티로신 항체 (CIS-US, Inc.)를 함유하는 HTRF 검출 혼합물 (10 ㎕)을 첨가하여 정지시켰다. 1시간 동안 실온에서 인큐베이션하여 스트렙타비딘-비오틴이 상호작용하도록 한 후에, 시간 분할된 형광 신호를 아날리스트 (Analyst) GT (Molecular Devices Corp.) 상에서 판독하였다.

IC₅₀ 값을 12가지 농도 (1 μM 내지 0.0005 μM로 1:3 희석)에서 각 화합물 (이중으로)의 억제율 %을 선형 회귀 분석에 의해 계산하였다. 이 분석에서, 본 발명의 화합물은 O.1 nM 내지 2 μM 범위의 IC₅₀ 값을 갖는다.

실시예 16

일반적 기술은, 증식을 위해 돌연변이체 FGFR3에 의존하는 세포주에 대해 가능한 억제제의 효과를, 증식을 위해 돌연변이체 Flt3에 의존하지 않는 세포주와 비교하는 것을 포함한다. 추가의 연구를 위하여, 상이한 활성 (활성 (+ 세포주와 FGFR3- 세포주 사이에서 10배 이상의 감수성 차이)을 갖는 화합물을 선택한다.

초기 스크리닝을 위해 사용된 세포주는, TEL-FGFR3 cDNA를 발현하는 레트로바이러스로 감염시킨 후에 TEL-FGFR 접합을 과다-발현하기 위해 조작된 Ba/F3 세포의 서브라인이다. 모세포주 Ba/F3은 증식을 위해 인터류킨-3에 의존하고, IL-3을 제거할 경우, 세포는 급속히 증식을 멈추고 사멸하였다. 반대로, FGFR3 과다-발현된 Ba/F3 세포에서, TEL-FGFR 접합은 리간드-독립적 FGFR3 이량체화와 이후의 FGFR3 키나제 활성화를 야기하고, 이는 IL-3의 부재시 과다-발현된 Ba/F3 세포 성장을 초래하였다.

배양 배지로서 10% 태아 소 혈청을 함유한 RPMI 1640을 사용하여, 현탁액 중의 야생형 Ba/F3 및 형질전환된 Ba/F3 (-TEL-FGFR3) 세포를 800,000 세포/mL로 배양하였다. 대조군 세포를 위한 배지는 재조합 IL-3 (R&D Research) 10 ng/ml를 함유한다. 각 화합물의 10 mM "원" 용액을 디메틸술폭시드 (DMSO) 중에 만들었다. 이어서, 전형적으로 0.05 nM 내지 10 μM 범위의 최종 약물 농도를 형성하는 DMSO로 만들었다. 화합물 첨가 48 시간 후에, 세포를 증식률 및 세포독성에 대해 분석하였다. 알라마르블루 (AlamarBlue)(등록상표)(TREK Diagnostic Systems)를 세포 배양 배지 내에 10%의 최종 농도로 상기 세포에 첨가하였다. 세포를 알라마르블루 (등록상표)와 함께 37 ℃ 조직 배양 인큐베이터에서 4시간 동안 인큐베이션한 다음 증식률 측정을 위해 형광 판독기에서 판독하였다.

추가로, 활성 화합물의 여러 농도에 노출시킨 후에, 과다-발현된 Ba/F3 용해물 중의 인산화 TEL-FGFR3 단백질 수준을 항-인산화-FGFR3 항체로 면역블롯팅된 웨스턴 블롯팅에서 검출하였다. 이 분석은, 화합물이 수용체의 돌연변이된 형태의 특징인 FGFR3의 "자가인산화" 수준을 감소시키는지의 여부를 결정한다.

본 발명의 화합물은 10 μM 이하의 야생형 Ba/F3에 대해 비독성인 반면, 전형적으로 나노몰 범위에서 TEL-FGFR3에 대해 항증식성 활성을 보였다. 본 발명의 화합물은 또한 나노몰 범위에서 세포성 TEL-FGFR3의 자가인산화 활성을 감소시켰다.

실시예 17

업스테이트 키나제프로필러 (Upstate KinaseProfiler )(상표명)-라디오-효소 필터 결합 분석

본 발명의 화합물을 키나제 (부분적인 비제한적 키나제 목록은 cSRC, Lck, FGFR3, Flt3, TrkB, Bmx, 및 PFGFRα를 포함함)의 패널의 각각의 구성원을 억제하는 이들의 능력에 대해 평가하였다. 화합물은 이러한 일반적인 프로토콜 후에 10 μM의 최종 농도에서 이중으로 시험하였다. 키나제 완충액 조성물 및 기질은 "업스테이트 키나제프로필러(상표명)" 패널에 포함되는 상이한 키나제에 대해 다양함에 주의한다. 키나제 완충액 (2.5 ㎕, 10 x- 필요할 경우 MnCl₂ 함유), 키나제 완충액 중 활성 키나제 (0.001-0.01 유닛; 2.5 ㎕), 특정 또는 폴리(Glu4-Tyr) 펩티드 (5-500 μM 또는 0.01 mg/mL) 및 키나제 완충액 (50 μM; 5 ㎕)을 얼음 상에서 에펜도르프로 혼합하였다. Mg/ATP 믹스 (10 ㎕; 67.5 (또는 33.75) mM MgCl₂, 450 (또는 225) μM ATP 및 1 μCi/㎕ [γ-³²P]-ATP (3000 Ci/mmol))를 첨가하고 반응물을 30 ℃에서 약 10분 동안 인큐베이션하였다. 반응 혼합물 (20 ㎕)을 2 cm x 2 cm P81 (포스포셀룰로스, 포지티브로 충전된 펩티드 기질에 대해) 또는 와트만 (Whatman) 제1호 (폴리(Glu4-Tyr) 펩티드 기질에 대해) 페이퍼 스퀘어 상에 스포팅하였다. 분석스퀘어를 각각 5분 동안 0.75% 인산으로 4회 세척하고, 5분 동안 아세톤으로 1회 세척하였다. 분석스퀘어를 신틸레이션 바이알로 옮기고, 신틸레이션 칵테일 5 ml를 첨가하고 펩티드 기질로의 ³²P 혼입 (cpm)을 베크만 신틸레이션 계수기로 칭량하였다. 각 반응에 대해 억제율 (%)을 계산하였다.

10 μM의 농도에서 화학식 I의 화합물은 cSRC, Lck, FGFR3, Flt3, TrkB 및 PFGFRα 키나제에 대해 바람직하게는 50% 이상, 바람직하게는 60% 이상, 보다 바람직하게는 70% 이상의 억제율 (%)을 보였다. 예를 들어:

(i) 화합물 539, N ² - 메틸 - N ² -(1- 메틸 -피페리딘-4-일)- N ⁶ -(4-모르폴린-4-일-페닐)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-2,6-디아민은 하기의 억제 프로파일: Bmx (90%), c-Src (97%), Lck (99%), Flt3 (100%), Rsk1 (82%) 및 TrkB (99%)를 나타내고;

(ii) 화합물 554 (실시예 10), N ⁶ -(4- 메탄술포닐 - 페닐 )- N ² -피리딘-2- 일메 틸-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-2,6-디아민은 하기의 억제 프로파일: Abl (98%), Bmx (86%), c-Src (99%), Lck (95%), Flt3 (100%), FGFR3 (98%) 및 TrkB (99%)를 나타내고;

(iii) 화합물 503, (4- 메탄술포닐 - 페닐 )-(2-모르폴린-4-일-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6-일)-아민은 하기의 억제 프로파일: Abl (81%), Bmx (71%), c-Src (98%), Lck (99%), Flt3 (99%), TrkB (99%)를 나타내었다.

본원에 기재된 실시예 및 실시양태는 단지 예시적인 목적을 위한 것이고 이의 관점에서 다양한 개질 또는 변화가 당업자에게 제안될 것이고, 본원의 취지 및 범주와 첨부된 청구항의 범위 내에 포함되는 것으로 이해된다. 본원에 언급된 모든 공보, 특허 및 특허 명세서는 모든 목적을 위해 참고문헌으로 본원에 혼입되어 있다.

Claims

화학식 I의 화합물, 또는 이의 제약상 허용되는 염, 수화물, 용매화물, 이성질체 또는 전구약물.

<화학식 I>

상기 식에서,

R₁은 수소, 할로, C₁ _- ₆알킬, 할로-치환된-C₁ _- ₆알킬, C₁ _- ₆알콕시, 할로-치환된-C₁ _-6알콕시, -OXOR⁵, -OXR⁶, -OXNR₅R₆, -OXONR₅R₆, -XR₆, -XNR₅R₆ 및-XNR₇XNR₇R₇로부터 선택되고; 여기서 X는 결합, C₁ _- ₆알킬렌, C₂ _- ₆알케닐렌및 C₂ _- ₆알키닐렌으로부터 선택되고; R₇은 수소 또는 C₁ _- ₆알킬로부터 독립적으로 선택되고;

R₅는 수소, C₁ _- ₆알킬 및 -XOR₇로부터 선택되고; 여기서, X는 결합, C₁ _- ₆알킬렌,C_2-6알케닐렌 및 C₂ _- ₆알키닐렌으로부터 선택되고; R₇은 수소 또는 C₁ _- ₆알킬로부터 독립적으로 선택되고;

R₆은 수소, C₁ _- ₆알킬, C₃ _- ₁₂시클로알킬C₀ _- ₄알킬, C₃ _- ₈헤테로시클로알킬C₀ _- ₄알킬, C₆ _-10아릴C_0-4알킬 및 C₅ _- ₁₀헤테로아릴C₀ _- ₄알킬로부터 선택되거나; 또는

R₅ 및 R₆은 이들 둘 다가 부착되는 질소 원자와 함께 C₃ _- ₈헤테로시클로알킬 또는 C₅ _- ₈헤테로아릴을 형성하고; 여기서, R₅ 및 R₆에 의해 형성된 임의의 헤테로시클로알킬의 메틸렌은 -C(O)- 또는 -S(O)₂-로 임의로 치환될 수 있고;

여기서, R₆ 또는 R₅ 및 R₆의 조합의 임의의 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬 또는 헤테로시클로알킬은 -XNR₇R₇, -XOR₇, -XNR₇R₇, -XC(O)NR₇R₇, -XNR₇C(O)R₇, -XOR₇, -XC(O)OR₇, -XC(O)R₇, C₁ _- ₆알킬, C₃ _- ₈헤테로시클로알킬, C₅ _- ₁₀헤테로아릴, C₃ _- ₁₂시클로알킬 및 C₆ _- ₁₀아릴C₀ _- ₄알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 라디칼로 임의로 치환될 수 있고; R₁의 임의의 알킬 또는 알킬렌은 -NR₇C(O)-, -C(O)NR₇-, -NR₇-, -C(O)-, -O-, -S-, -S(O)- 및 -S(O)₂-로부터 선택된 2가의 라디칼로 치환된 메틸렌을 임의로 가질 수 있고; R₆의 임의의 알킬 또는 알킬렌은 C₅ _- ₈헤테로아릴, -NR₇R₇, -C(O)NR₇R₇, -NR₇C(O)R₇, 할로 및 히드록시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 라디칼로 임의로 치환될 수 있고; R₇은 수소 또는 C₁ _- ₆알킬로부터 독립적으로 선택되고;

R₂는 수소, C₆ _- ₁₀아릴 및 C₅ _- ₁₀헤테로아릴로부터 선택되고; 여기서, R₂의 임의의 아릴 또는 헤테로아릴은 -XNR₇R₇, -XOR₇, -XOR₈, -XC(O)OR₇, -XC(O)R₇, C₁ _- ₆알킬, C₁ _- ₆알콕시, 니트로, 시아노, 히드록시, 할로 및 할로-치환된-C₁ _- ₆알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 라디칼로 임의로 치환되고; X 및 R₇은 상기 기재한 바와 같고; R₈은 C₆ _- ₁₀아릴C₀ _- ₄알킬이고;

R₃은 수소 및 C₁ _- ₆알킬로부터 선택되고;

R₄는C₃ _- ₁₂시클로알킬C₀ _- ₄알킬, C₃ _- ₈헤테로시클로알킬C₀ _- ₄알킬, C₆ _- ₁₀아릴C₀ _- ₄알킬 및 C_5-10헤테로아릴C_0-4알킬로부터 선택되고; 여기서, R₄의 임의의 알킬렌은 -C(O)-, -S-, -S(O)- 및 -S(O)₂-로부터 선택된 2가 라디칼로 치환된 메틸렌을 임의로 가질 수 있고; R₄의 상기 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬 또는 헤테로시클로알킬은 할로, C_1-6알킬, C₁ _- ₆알콕시, 할로-치환된-C₁ _- ₆알킬, 할로-치환된-C₁ _- ₆알콕시, -XR₉, -XOR₉, -XS(O)_0-2R₇, -XS(O)_0-2R₉, -XC(O)R₇, -XC(O)OR₇, -XP(O)R₇R₇, -XC(O)R₉, -XC(O)NR₇XNR₇R₇, -XC(O)NR₇R₇, -XC(O)NR₇R₉ 및 -XC(O)NR₇XOR₇로부터 선택된 1 내지 3개의 라디칼로 임의로 치환되고; X 및 R₇은 상기 기재한 바와 같고; R₉는 C₃ _- ₁₂시클로알킬C₀ _- ₄알킬, C_3-8헤테로시클로알킬C_0-4알킬, C₆ _- ₁₀아릴 및 C₅ _- ₁₀헤테로아릴로부터 선택되고; R₉의 임의의 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬 또는 헤테로시클로알킬은 C₁ _- ₆알킬, -XC(O)R₇ 및 -XC(O)NR₇R₇로부터 선택된 1 내지 3개의 라디칼로 임의로 치환되 고; X 및 R₇은 상기 기재한 바와 같다.
제1항에 있어서,

R₁이 수소, 할로, C₁ _- ₆알콕시, -OXOR⁵, -OXR⁶, -OXNR₅R₆, -OXONR₅R₆, -XR₆, -XNR₇XNR₇R₇ 및 -XNR₅R₆로부터 선택되고; 여기서, X가 결합, C₁ _- ₆알킬렌, C₂ _- ₆알케닐렌 및 C₂ _- ₆알키닐렌으로부터 선택되고;

R₅가 수소, C₁ _- ₆알킬 및 -XOR₇로부터 선택되고; 여기서, X가 결합, C_1-6알킬렌, C₂ _- ₆알케닐렌 및 C₂ _- ₆알키닐렌으로부터 선택되고; R₇이 독립적으로 수소 또는 C_1-6알킬로부터 선택되고;

R₆이 수소, C₁ _- ₆알킬, C₃ _- ₁₂시클로알킬C₀ _- ₄알킬, C₃ _- ₈헤테로시클로알킬C₀ _- ₄알킬, C_6-10아릴C_0-4알킬 및 C₅ _- ₁₀헤테로아릴C₀ _- ₄알킬로부터 선택되고; R₆이 수소 또는 C_1-6알킬이거나; 또는

R₅ 및 R₆이 이들 둘 다가 부착되는 질소 원자와 함께 C₃ _- ₈헤테로시클로알킬 또는 C_5-8헤테로아릴을 형성하고; 여기서, R₅ 및 R₆에 의해 형성된 임의의 헤테로시클로알킬의 메틸렌이 -C(O)- 또는 -S(O)₂-로 임의로 치환될 수 있고;

여기서, R₆ 또는 R₅ 및 R₆의 조합의 임의의 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬 또는 헤테로시클로알킬이 -XNR₇R₇, -XC(O)NR₇R₇, -XOR₇, -XNR₇R₇, -XNR₇C(O)R₇, -XOR₇, -XC(O)R₇, C₁ _- ₆알킬, C₃ _- ₈헤테로시클로알킬 및 C₆ _- ₁₀아릴C₀ _- ₄알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 라디칼로 임의로 치환될 수 있고; R₁의 임의의 알킬 또는 알킬렌이 -NR₇C(O)-, -C(O)NR₇-, -NR₇-, -O-로부터 선택된 2가 라디칼로 치환된 메틸렌을 임의로 가질 수 있고; R₁의 임의의 알킬 또는 알킬렌이 C₅ _- ₈헤테로아릴, -NR₇R₇, -C(O)NR₇R₇, -NR₇C(O)R₇, 할로 및 히드록시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 라디칼로 임의로 치환될 수 있고; R₇이 수소 또는 C₁ _- ₆알킬로부터 독립적으로 선택되고;

R₂가 수소, C₆ _- ₁₀아릴 및 C₅ _- ₁₀헤테로아릴로부터 선택되고; 여기서, R₂의 임의의 아릴 또는 헤테로아릴이 -XNR₇R₇, -XOR₇, -XOR₈, -XC(O)OR₇, C₁ _- ₆알킬, C₁ _- ₆알콕시, 니트로, 시아노, 할로, 할로-치환된-C₁ _- ₆알콕시 및 할로-치환된-C₁ _- ₆알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 라디칼로 임의로 치환되고; X 및 R₇이 상기 기재한 바와 같고; R₈이 C₆ _- ₁₀아릴C₀ _- ₄알킬이고;

R₃이 수소이고;

R₄가 C₆ _- ₁₀아릴C₀ _- ₄알킬 및 C₅ _- ₁₀헤테로아릴C₀ _- ₄알킬로부터 선택되고; 여기서, R₄의 상기 아릴 또는 헤테로아릴이 할로, -XR₉, -XOR₉, -XS(O)₂R₇, -XS(O)₂R₉, -XC(O)R₇, -XC(O)OR₇, -XP(O)R₇R₇, -XC(O)R₉, -XC(O)NR₇XNR₇R₇, -XC(O)NR₇R₇, -XC(O)NR₇R₉ 및 -XC(O)NR₇XOR₇로부터 선택된 1 내지 3개의 라디칼로 치환되고; X 및 R₇이 상기 기재한 바와 같고; R₉가 C₃ _- ₈헤테로시클로알킬C₀ _- ₄알킬이고; R₉가 C₁ _- ₆알킬, -XC(O)R₇ 및 -XC(O)NR₇R₇로부터 선택된 1 내지 3개의 라디칼로 임의로 치환되고; X 및 R₇이 상기 기재한 바와 같은 것인 화합물.
제2항에 있어서,

R₁이 수소, 할로, C₁ _- ₆알콕시, -OXOR⁵, -OXR⁶, -OXNR₅R₆, -OXONR₅R₆, -XR₆ 및 -XNR₅R₆로부터 선택되고; 여기서, X가 결합, C₁ _- ₆알킬렌, C₂ _- ₆알케닐렌및 C₂ _- ₆알키닐렌으로부터 선택되고; R₅가 수소, 메틸, 히드록시-에틸 및 메톡시-에틸로부터 선택되고; R₆이 수소, 페닐, 벤질, 시클로펜틸, 시클로부틸, 디메틸아미노-프로페닐, 시클로헥실, 2,3-디히드록시-프로필, 피페리디닐, 아미노-카르보닐-에틸, 메틸-카르보닐-아미노-에틸, 메틸-아미노-에틸, 아미노-프로필, 메틸-아미노-프로필, 1-히드록시메틸-부틸, 펜틸, 부틸, 프로필, 메톡시-에티닐, 메톡시-에테닐, 디메틸-아미노-부틸, 디메틸-아미노-에틸, 디메틸-아미노-프로필, 테트라히드로피라닐, 테트라히드로푸라닐-메틸, 피리디닐-메틸, 아제판-1-일, [1,4]옥사제판-4-일, 피페리디닐-에틸, 디에틸-아미노-에틸, 아미노-부틸, 아미노-이소프로필, 아미노-에틸, 히드록시-에틸, 2-아세틸아미노-에틸, 카르바모일-에틸, 4-메틸-[1,4]디아제판-1-일, 2-히드록시-프로필, 히드록시-프로필, 2-히드록시-2-메틸-프로필, 메톡시-에틸, 아미노-프로필, 메틸-아미노-프로필, 2-히드록시-2-페닐-에틸, 피리디닐-에틸, 모르폴리노-프로필, 모르폴리노-에틸, 피롤리디닐, 피롤리디닐-메틸, 피롤리디닐-에틸, 피롤리디닐-프로필, 피라지닐, 퀴놀린-3-일, 퀴놀린-5-일, 이미다졸릴-에틸, 피리디닐-메틸, 페네틸, 테트라히드로-피란-4-일, 피리미디닐, 푸라닐, 이속사졸릴-메틸, 피리디닐, 벤조[1,3]디옥솔-5-일, 티아졸릴-에틸 및 티아졸릴-메틸로부터 선택 되거나; 또는 R₅ 및 R₆이 이들 둘 다가 부착되는 질소 원자와 함께 피롤리디닐, 피페라지닐, 피페리디닐, 이미다졸릴, 3-옥소-피페라진-1-일, [1,4]디아제판-1-일, 모르폴리노, 3-옥소-피페라진-1-일, 1,1-디옥소-1λ⁶-티오모르폴린-4-일 또는 피라졸릴을 형성하고;

여기서, R₆ 또는 R₅ 및 R₆의 조합의 임의의 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬 또는 헤테로시클로알킬이 메틸-카르보닐, 아미노-메틸, 아미노-카르보닐, 메틸-술포닐, 메톡시, 메톡시-메틸, 포르밀, 플루오로-에틸, 히드록시-에틸, 아미노, 디메틸-아미노, 히드록시, 메틸, 에틸, 아세틸, 이소프로필, 피롤리디닐, 피리미디닐, 모르폴리노, 피리디닐 및 벤질로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 라디칼로 임의로 치환될 수 있고; R₆의 임의의 알킬 또는 알킬렌이 -NHC(O)- 또는 -C(O)NH-로부터 선택된 2가 라디칼로 치환된 메틸렌을 임의로 가질 수 있고; R₆의 임의의 알킬 또는 알킬렌이 아미노, 할로, 피페리디닐 및 히드록시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 라디칼로 임의로 치환될 수 있는 것인 화합물.
제2항에 있어서, R₂가 수소, 페닐, 티에닐, 피리디닐, 피라졸릴, 티아졸릴, 피라지닐, 나프틸, 푸라닐, 벤조[1,3]디옥솔-5-일, 이소티아졸릴, 이미다졸릴 및 피리미디닐로부터 선택되고; 여기서, R₂의 임의의 아릴 또는 헤테로아릴이 메틸, 이소프로필, 할로, 아세틸, 트리플루오로메틸, 니트로, 1-히드록시-에틸, 1-히드록시-1-메틸-에틸, 히드록시-에틸, 히드록시-메틸, 포르밀, 메톡시, 벤질옥시, 카르복시, 아미노, 시아노, 아미노-카르보닐, 아미노-메틸 및 에톡시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 라디칼로 임의로 치환되는 것인 화합물.
제2항에 있어서, R₄가 페닐, 벤질, 피리디닐 및 1-옥소-인단-5-일로부터 선택되고; 여기서, 상기 페닐, 벤질, 인다닐 또는 피리디닐이 할로, 아세틸, 트리플루오로메틸, 시클로프로필-아미노-카르보닐, 아제티딘-1-카르보닐, 피페리디닐-카르보닐, 모르폴리노, 메틸-카르보닐, 피페라지닐, 메틸-술포닐, 피페리디닐-술포닐, 4-메틸-피페라지닐-카르보닐, 디메틸-아미노-에틸-아미노-카르보닐, 모르폴리노-카르보닐, 모르폴리노-메틸, 아미노-카르보닐, 프로필-아미노-카르보닐, 히드록시-에틸-아미노-카르보닐, 모르폴리노-에틸-아미노-카르보닐, 4-아세틸-피페라진-1-카르보닐, 4-아미노-카르보닐-피페라진-1-카르보닐, 페닐-카르보닐, 피롤리디닐-1-카르보닐, 프로필-카르보닐, 부틸, 이소프로필-옥시-카르보닐, 시클로헥실-카르보닐, 시클로프로필-카르보닐, 메틸-술포닐, 디메틸-포스피노일, 4-메틸-피페라지닐-술포닐, 1-옥소-인단-5-일, 옥세탄-3-술포닐, 아미노-술포닐 및 테트라히드로- 피란-4-술포닐로 임의로 치환되는 것인 화합물.
제2항에 있어서, N⁶-(4-메탄술피닐-페닐)-N²-메틸-N²-(테트라히드로-피란-4-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-2,6-디아민; (4-메탄술포닐-페닐)-[2-(2-메틸-모르폴린-4-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6-일]-아민; 1-{4-[2-(2-메틸-모르폴린-4-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6-일아미노]-페닐}-에타논; [4-(디메틸-포스피노일)-페닐]-[2-(2-메틸-모르폴린-4-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6-일]-아민; 아제티딘-1-일-{4-[2-(4-모르폴린-4-일-피페리딘-1-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6-일아미노]-페닐}-메타논; 1-(4-{2-[메틸-(1-메틸-피페리딘-4-일)-아미노]-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6-일아미노}-페닐)-에타논; 1-{4-[2-(2-메틸-모르폴린-4-일)-9-티오펜-3-일-9H-퓨린-6-일아미노]-페닐}-에타논; (4-메탄술포닐-페닐)-[2-(4-모르폴린-4-일-피페리딘-1-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6-일]-아민; N⁶-(4-메탄술포닐-페닐)-N²-메틸-N²-(1-메틸-피페리딘-4-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-2,6-디아민; [2-(2-메틸-모르폴린-4-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6-일]-(4-모르폴린-4-일-페닐)-아민; N²-메틸-N²-(1-메틸-피페리딘-4-일)-N⁶-(4-모르폴린-4-일-페닐)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-2,6-디아민; N²-메틸-N²-(1-메틸-피페리딘-4-일)-N⁶-(4-모르폴린-4-일-페닐)-9-티오펜-3-일-9H-퓨린-2,6-디아민; [2-(2,2-디메틸-모르폴린-4-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6-일]-(4-메탄술포닐-페닐)-아민; [2-(2,6-디메틸-모르폴린-4-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6-일]-(4- 메탄술포닐-페닐)-아민; [4-(디메틸-포스피노일)-페닐]-[2-(2-에틸-모르폴린-4-일)-9-티오펜-3-일-9H-퓨린-6-일]-아민; [4-(디메틸-포스피노일)-페닐]-[2-(2-플루오로메틸-모르폴린-4-일)-9-티오펜-3-일-9H-퓨린-6-일]-아민; [2-(2,6-디메틸-모르폴린-4-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6-일]-[4-(디메틸-포스피노일)-페닐]-아민; [2-(2,6-디메틸-모르폴린-4-일)-9-티오펜-3-일-9H-퓨린-6-일]-[4-(디메틸-포스피노일)-페닐]-아민; [4-(디메틸-포스피노일)-페닐]-[2-(2-메틸-모르폴린-4-일)-9-티오펜-3-일-9H-퓨린-6-일]-아민; [4-(디메틸-포스피노일)-페닐]-[2-(3-메틸-피페리딘-1-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6-일]-아민; N⁶-(4-메탄술포닐-페닐)-N²-메틸-N²-피리딘-2-일메틸-9-티오펜-3-일-9H-퓨린-2,6-디아민; N²-메틸-N⁶-(4-모르폴린-4-일-페닐)-N²-피리딘-2-일메틸-9-티오펜-3-일-9H-퓨린-2,6-디아민; (2-아제판-1-일-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6-일)-[4-(디메틸-포스피노일)-페닐]-아민; N²-시클로헥실-N⁶-[4-(디메틸-포스피노일)-페닐]-N²-메틸-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-2,6-디아민; N⁶-(4-메탄술포닐-페닐)-N²-메틸-N²-(테트라히드로-피란-4-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-2,6-디아민; N⁶-(4-메탄술포닐-페닐)-N²-피리딘-2-일메틸-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-2,6-디아민; N²-시클로헥실-N⁶-(4-메탄술피닐-페닐)-N²-메틸-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-2,6-디아민; R-(4-메탄술피닐-페닐)-[2-(2-메틸-모르폴린-4-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린- 6-일]-아민; N⁶-(4-메탄술포닐-페닐)-N²-메틸-N²-피리딘-2-일메틸-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-2,6-디아민; {4-[6-(4-메탄술포닐-페닐아미노)-2-(메틸-피리딘-2-일메틸-아미노)-퓨린-9-일]-페닐}-메탄올; R-(4-메탄술포닐-페닐)-[2-(2-메틸-모르폴린-4-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6-일]-아민; R-4-[2-(2-메틸-모르폴린-4-일)-9-티아졸-4-일-9H-퓨린-6-일아미노]-벤젠술폰아미드; 및 {4-[6-(4-메탄술포닐-페닐아미노)-2-(2-메틸-모르폴린-4-일)-퓨린-9-일]-페닐}-메탄올로부터 선택되는 화합물.
치료 유효량의 제1항의 화합물을 제약상 허용되는 부형제와 조합하여 포함하는 제약 조성물.
치료 유효량의 제1항의 화합물을 동물에게 투여하는 것을 포함하는, 키나제 활성의 억제가 질병의 병리상태 및(또는) 증상을 예방, 억제 또는 경감시킬 수 있는 동물에서의 질병의 치료 방법.
제8항에 있어서, 키나제가 cSRC, Lck, FGFR3,FIt3, TrkB 및 Bmx 키나제로부터 선택되는 것인 방법.
cSRC, Lck, FGFR3, Flt3, TrkB 및(또는) Bmx의 키나제 활성이 질병의 병리상태 및(또는) 증상에 기여하는 동물에서의 질병을 치료하기 위한 약제의 제조에 있 어서 제1항의 화합물의 용도.