KR100547048B1 - 포도 즙액의 동충하초 균사체 액상 배양액을 포함하는건강 보조 식품 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 포도즙을 동충하초 균사체로 액상 배양한 배양액을 포함하는, 항암 효과 및 신생혈관 억제 및 항혈액응고 효과를 나타내는 피세탄놀(piceatannol)과 퀘르세틴(quercetin)의 함량이 크게 증가한 건강 보조 식품 및 그의 제조 방법에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 포도와 양파 혼합액을 동충하초 균사체로 액상 배양한 배양액을 포함하는, 퀘르세틴 및 피세탄놀의 함량이 증가하고 양파의 독특한 냄새가 완전히 제거된 건강 보조 식품 및 그의 제조 방법에 관한 것이다. 추가로, 본 발명은 포도와 오이 혼합액을 동충하초 균사체로 배양한 배양액을 포함하는, 피세탄놀 및 퀘르세틴의 함량이 증가하고 티로시나제 저해 효과가 있는 건강 보조 식품 및 그의 제조 방법에 관한 것이다.
본 발명에 따르면, 항암, 신생혈관 억제 및 항혈액응고 효과가 있는 피세탄놀과 퀘르세틴의 함량이 크게 증가되고, 아울러 양파를 혼합한 액상 배양 발효식품의 경우에는 배양과정에서 양파의 독특한 냄새가 제거되고, 또한 오이 혼합 발효 식품의 경우에는 티로시나제 저해 효과, 즉 피부 미백 효과가 크게 향상된 건강 보조 식품을 제공할 수 있다.
포도, 양파, 오이, 동충하초 균사체, 피세탄놀, 퀘르세틴, 피부 미백 효과
Description
도 1은 본 발명의 바람직한 제조 방법의 일실시예를 공정별로 도시한 개략도.
도 2는 포도즙의 성분 분석 결과를 보여주는 HPLC 그래프.
도 3은 포도즙을 14일간 동충하초 균사체로 액상 배양한 배양액의 성분 분석결과를 보여주는 HPLC 그래프.
도 4는 포도 및 양파의 혼합액을 14일간 동충하초 균사체로 액상배양한 배양액의 성분 분석 결과를 나타낸 HPLC 그래프.
도 5는 포도 및 오이의 혼합액을 동충하초 균사체로 액상배양한 배양액의 성분 분석 결과 나타낸 HPLC 그래프.
도 6은 포도에 함유된 폴리페놀계 화합물에 대한 표준물질의 체류 시간을 나타낸 HPLC 그래프이다.
도 7은 포도 및 오이의 혼합액에 동충하초 균사체를 배양한 시간에 따른 티로시나제(tyrosinase) 저해 활성 그래프.
도 8은 포도와 양파를 이용한 건강 보조 식품의 관능 평가 결과를 나타낸 그 래프.
본 발명은 포도, 양파 또는 오이를 이용한 누에 동충하초(Paecilomyces japonica) 균사체 액상 배양 식품 및 그의 제조 방법에 관한 것이다.
상세하게는, 본 발명은 포도즙을 동충하초 균사체로 액상 배양한 배양액을 포함하는, 항암 및 신생혈관 억제 및 항혈액응고 효과를 나타내는 피세탄놀(piceatannol)과 퀘르세틴(quercetin)의 함량이 크게 증가한 건강 보조 식품 및 그의 제조 방법에 관한 것이다.
또한, 본 발명은 포도와 양파 혼합액을 동충하초 균사체로 액상 배양한 배양액을 포함하는, 유효성분(퀘르세틴 및 피세탄놀)의 함량이 증가하고 양파의 독특한 냄새가 완전히 제거된 건강 보조 식품 및 그의 제조 방법에 관한 것이다.
추가로, 본 발명은 포도와 오이 혼합액을 동충하초 균사체로 배양한 배양액을 포함하는, 유효성분(피세탄놀 및 퀘르세틴)의 함량이 증가하고 티로시나제 저해 효과가 있는 건강 보조 식품 및 그의 제조 방법에 관한 것이다.
낙엽덩굴성 과수인 포도(Vitis vinifera Linnaeus)는 세계적으로 50여종이 분포되어 있는데 프랑스의 보르도 지방, 부르고뉴 지방 및 론노 지방 등에서 많이 생산되고 있으며, 우리나라의 경우에는 그 생산량의 50% 이상이 경북 경산 지방을 비롯하여 충북 옥천, 경남 사천 지역 등에서 생산되고 있으며, 품종은 켐벨이 주로 재배되고 있다.
포도는 생혈, 조혈작용을 하는 과실이며 알카리성 식품으로, 전화당, 주석산, 포도산, 탄닌, 칼슘, 인산, 카리 등의 성분을 함유하고, 비타민류도 A, B1, B2, C, D 등이 풍부하다. 또한, 포도는 여성 미용에 영향을 주는 화합물이 존재한다. 자흑색 포도에 많이 존재하는 비타민 B1은 신경조직의 중요한 영양분으로서 이것이 부족하면 각기병의 원인이 되고, 심장이나 혈관 계통의 장애, 부종, 마비현상이 일어나는 다발성 신경염 등 여러 가지 증상이 일어난다.
또한, 포도에는 다양한 생리활성을 갖는 폴리페놀계 화합물이 포함되어 있다. 이들 중 하기 화학식 1에 나타낸 레스베라트롤(resveratrol)은 체내에 흡수된 후 대사과정을 통해 하기 화학식 2의 피세탄놀(piceatannol)로의 변환 과정을 거침으로써 암세포만을 특이적으로 공격해 사멸시키는 항암작용을 유도시킨다 [Science 275, 218, 1997 및 British Journal of Cancer 86, 774, 2002]. 붉은 포도에 함유되어 있는 하기 화학식 3의 퀘르세틴(quercetin)은 전립선암을 예방하고 항혈액응고 효과가 있는 것으로 밝혀졌다 [Am. J. Surg. 158, 351, 1989; Food Chem. Toxicol. 33, 1061, 1995].
그러나, 포도즙에는 생리활성 폴리페놀계 화합물, 특히 피세탄놀과 퀘르세틴은 도 2에 나타낸 바와 같이 극히 소량만이 포함되어 있어 실질적인 생리작용을 기대하기 어렵다. 또한, 포도를 효모로 발효한 포도주에서는 포도보다는 많은 생리활성 폴리페놀계 화합물이 관찰되나, 이 또한 피세탄놀과 퀘르세틴 함량이 낮고 그 절대적인 양과 포도주에 함유되어 있는 알콜성분을 감안한다면 기능성 식품으로 사용하기에는 한계가 있다. 따라서, 포도를 이용하여 생리활성 폴리페놀계 물질을 증가시키는 기술개발이 요구되고 있다.
양파는 퀘르세틴을 비롯한 디메틸치오설페이트 등 다양한 생리활성 물질을 포함하고 있기 때문에 많은 연구자들에 의해 기능성 식품으로의 개발이 시도되었다. 그러나, 양파에 존재하는 "황(S)"에서 기인되는 불쾌한 냄새 때문에 식품으로 이용하기는에는 한계가 있다. 따라서, 양파의 특유한 냄새를 없애는 기술개발이 요구되고 있다.
또한, 포도가 피부 미백 효과를 갖는다는 보고가 있지만 포도 자체만으로는 그 효과에 한계가 있기 때문에, 피부 미백 효과를 향상시키는 기술개발이 요구되고 있다.
따라서, 본 발명의 목적은 항암, 신생혈관 억제 및 항혈액응고 효과를 나타내는 피세탄놀과 퀘르세틴의 함량이 높은 포도를 이용한 건강 보조 식품, 양파의 특이한 냄새가 제거되고 생리활성 물질의 함량이 높은 포도와 양파를 이용한 건강 보조 식품 및 피부 미백 효과가 우수한, 포도와 오이를 이용한 건강 보조 식품 및 이들의 제조 방법을 제공하는 것이다.
본 발명자들은 포도를 동충하초 균사체로 액상 배양함으로써 항암, 신생혈관 억제 및 항혈액응고 효과를 나타내는 피세탄놀과 퀘르세틴의 함량이 증가하고, 포도와 양파를 적절히 배합한 혼합액을 동충하초 균사체로 액상 배양함으로써 양파의 특이한 냄새가 제거되고 생리활성 물질의 함량이 증가하며, 포도와 오이를 적절히 배합한 혼합액을 동충하초 균사체로 액상 배양시켜 티로시나제 저해 활성이 증가된다는 사실을 밝혀내어 본 발명을 완성하였다.
따라서, 본 발명은 포도즙을 동충하초 균사체로 액상 배양한 배양액을 포함하는, 항암, 신생혈관 억제 및 항혈액응고 효과를 나타내는 피세탄놀과 퀘르세틴의 함량이 크게 증가한 기능성 식품 및 그의 제조 방법에 관한 것이다.
또한, 본 발명은 포도와 양파 혼합액을 동충하초 균사체로 액상 배양한 배양 액을 포함하는, 유효성분인 퀘르세틴 및 피세탄놀의 함량이 증가하고 양파의 독특한 냄새가 완전히 제거된 건강 보조 식품 및 그의 제조 방법에 관한 것이다.
추가로, 본 발명은 포도와 오이 혼합액을 동충하초 균사체로 배양한 배양액을 포함하는, 유효성분인 피세탄놀 및 퀘르세틴의 함량이 증가하고 티로시나제 저해 효과, 즉 피부 미백 효과도 갖는 건강 보조 식품 및 그의 제조 방법에 관한 것이다.
본 발명의 건강 보조 식품은 멸균/냉각 처리한 포도즙액, 또는 포도와 양파 또는 오이의 혼합액에 동충하초 균사체를 배양한 후 이를 여과하여 생리활성 물질 함량이 높고, 티로시나제 저해 활성 등이 우수한 건강 보조 식품을 얻을 수 있다.
바람직하게는, 본 발명의 건강 보조 식품은 효과적인 배양을 위하여 균사체를 종배양한 후, 이를 사용하여 본 배양을 실시할 수도 있다. 구체적으로, 종배양을 위해 멸균/냉각 처리한 포도즙액 또는 포도와 양파 또는 포도와 오이의 혼합액을 멸균후 상온으로 냉각하고, 동충하초 균사체를 접종하고 배양한다. 본배양을 위해 상기 단일 포도즙액 또는 혼합액을 배양기에 넣고 멸균/냉각한 후, 종배양액을 접종하여 진탕배양하고, 이어서 배양액을 여과하여 본 발명의 건강 보조 식품을 얻을 수 있다.
상기 배양시에 포도즙 또는 혼합액에는 추가로 동충하초 영양분으로서 감자즙을 포함시킬 수도 있다. 예를 들어, 포도즙 99%에 감자즙 1%, 포도(49.5%)와 오이(49.5%) 혼합액에 감자즙 1%를 포함시킬 수 있고, 이러한 비율은 목적하는 최종 배양액 성분에 따라 변경 가능하다.
이와 같이 제조한 본 발명의 포도 배양 식품은 측정 결과, 생리활성 폴리페놀계 화합물인 피세탄놀과 퀘르세틴 함량이 매우 높아 항암, 신생혈관 억제 및 항혈액응고용 기능성 식품으로 사용이 가능하다. 예를 들어, 포도 단독 배양 식품의 경우, 피세탄놀 함량은 10 내지 80 ppm이고, 퀘르세틴의 함량은 10 내지 45 ppm일 수 있고, 포도와 양파 혼합 배양 식품의 경우에 피세탄놀 함량은 10 내지 60 ppm이고, 퀘르세틴의 함량은 10 내지 140 ppm일 수 있으며, 포도와 오이 혼합 배양 식품의 경우에 피세탄놀 함량은 10 내지 50 ppm이고, 퀘르세틴의 함량은 10 내지 60 ppm일 수 있다.
또한, 포도/양파 배양 식품은 피세탄놀, 퀘르세틴과 같은 생리활성 물질의 함량이 높을 뿐만 아니라, 관능 평가시에 우수한 기호도를 제공하는 것으로 밝혀졌다. 특히, 본 발명의 포도/오이 발효 식품은 피세탄놀, 퀘르세틴과 같은 생리활성 물질의 함량이 높을 뿐만 아니라, 멜라닌 생합성 저해 활성, 구체적으로 티로시나제 활성 저해 효과도 우수하여 피부 미백 효과도 얻을 수 있다 (J. Soc. Cosmet. Chem. 42, 361, 1991 참조).
포도, 양파 및 오이는 널리 식용되고 있는 모든 품종을 본 발명에 사용할 수 있다. 본 발명의 일실시예에서 사용된 포도는 당도가 13-15 브릭스(Brix)인 켐벨 품종을, 양파는 노란색 양파(Yellow onion)를, 오이는 가시오이를 시중에서 구입하여 사용하였다.
본 발명에서 사용된 포도즙은 고온, 예를 들어 100℃에서 일정 시간, 예를 들어 30분간 끓인 후 압착여과하여 얻은 것을, 양파와 오이는 예를 들어 실온에서 압착여과하여 얻은 것을 사용할 수 있다.
발효에 사용한 균주로서 누에 동충하초(Paceilomyces japonica) 균사체를 경상남도 농업기원에서 분양받아 사용하였으며, 멜라닌 생합성 저해 활성, 구체적으로 티로시나제 저해 활성은 버섯 티로시나제 (EC 1. 14. 18. 1)을 Sigma사에서 구입하여 사용하였다.
본 발명의 발효식품에 함유된 생리활성 폴리페놀계 화합물을 구명하기 위하여 사용한 피세탄놀을 비롯한 17종의 표준물질은 Sigma사에서 구입하여 사용하였다. 티로시나제 저해 활성 측정에 이용된 96웰 플레이트는 NUNCTM을 사용하였고, 마이크로플레이트 판독기는 Bio-Rad 3550을 사용하였다. 성분 분석에 이용된 컬럼관은 Hewlett Packard C18 (200 ×4.5 mm, 5.0 ㎛ 입경)을 사용하였다. HPLC는 Waters Liquid Chromatography(Model 2690)을 사용하였고, 검출기는 UV 검출기를 사용하였다.
이하의 실험예에서 본 발명의 발효 식품에 대한 시험예를 상세하게 설명한다.
<실험예 1> 티로시나제 활성 저해 효과 조사
티로시나제 활성에 대한 저해역가는 시료 15 ㎕를 96웰 마이크로플레이트에 넣고, 0.1 M 인산염 완충액(pH 6.5) 150 ㎕와 1.5 mM L-티로신 용액 25 ㎕를 넣은 후, 2100 unit/ml 버섯 티로시나제(Sigma, 0.05 M 인산염 완충액, pH 6.5) 7 ㎕를 첨가하여 30℃에서 10분간 반응시킨 후 마이크로플레이트 판독기(Bio-Rad 3550)를 사용하여 490 nm에서 측정하였다. 티로시나제에 대한 저해율(%)은 다음 식에 의하여 계산하였으며, IC50 값은 효소활성 저해율 50%에 달하는 저해물질의 농도로 결정하였다.
A : 저해제를 첨가한 시료의 반응전 흡광도
B : 저해제를 첨가한 시료의 반응후 흡광도
C : 저해제를 첨가하지 않은 시료의 반응전 흡광도
D : 저해제를 첨가하지 않은 시료의 반응후 흡광도
<실험예 2> HPLC를 이용한 생리활성 폴리페놀계 화합물 조사
분석기기
2개의 펌프를 자동 구배 (gradient) 조절기가 장착된 Waters사의 HPLC(model 2690)를 사용하였으며, 검출기는 Waters사의 검출기(model 996)를 사용하였다. 컬럼은 Hewlett Packard사에서 시판하는 C18(200 × 4.5 mm, 5.0 ㎛ 입경) 컬럼을 이용하였다. 데이터 저장과 평가는 워크스테이션(Workstation) 810 소프트웨어(Water사)와 개인용 컴퓨터를 이용하여 실시하였다.
표준물질
생리활성 폴리페놀계 화합물 분석을 위하여 사용한 표준물질(갈산, 프로토카 테큐산, (+)-카테킨, (-)-에피카테킨, 2,5-디히드록시벤즈알데히드, 카페인산, 바닐린산, 시린진산, 시링알데히드, p-쿠마르산, 피세탄놀, 레스베라트롤, 미리세틴, 퀘르시트린, 퀘르세틴, 칼페롤)은 Sigma사 제품을 사용하였으며, 용매로는 메탄올을 사용하였으며 농도는 200 ppm이 되도록 하였다. 모든 용액을 0.45 ㎛ 막(Millipore사 제품)으로 여과하고, 사용 전에 용액내 기체를 제거하였다.
시료 조제
분석용액 25 ml을 0.1M HCl 용액으로 pH가 2가 되도록 맞추고, 디에틸에테르 (50 ml ×3)로 추출하였다. 유기층을 무수 Na2SO4로 건조시킨 후 농축하였다. 메탄올을 사용하여 농축 잔류물이 800 ppm이 되도록 하였다. 모든 용액은 0.45 ㎛ 막으로 여과하고 사용 전에 용액내 기체를 제거하였다.
분석 조건
모든 시료는 20 ㎕씩 주입하였다. A 용매계(물:초산:메탄올 = 88:2:10)와 B 용매계(물:초산:메탄올 = 8:2:90)를 농도 구배로 사용하여 용리하였다. 즉, 0∼15분까지는 A 용매계가 85%, B 용매계가 15%가 되도록 하였다. 15∼25분까지는 A 용매계가 50%, B 용매계가 50%가 되도록 용리하였다. 25∼34분까지는 A 용매계가 20%, B 용매계가 80%가 되도록 용리하였다. 유속은 0.7 ml/min이 되도록 하였으며 UV 검출기 파장은 280 nm 영역을 사용하였다. 본 발명의 발효 식품의 유효성분의 확인은 도 6에 나타낸 표준물질의 체류 시간을 비교하여 확인하였으며, 최종 확인은 확인하고자 하는 표준물질을 내부기준물질로 사용하여 확인하였다.
이하, 본 발명의 구체적인 방법을 실시예를 들어 상세히 설명하고자 하지만 본 발명의 권리범위는 이들에게만 한정하는 것은 아니다.
<실시예 1> 동충하초 균사체를 이용한 포도 액상 배양 식품의 제조
시중에서 구입한 15 브릭스의 켐벨 품종 포도를 100℃에서 30분간 가열한 후 압착여과하여 포도즙을 얻었다. 동충하초 균사체의 종배양을 위해 1ℓ삼각 플라스크에 동충하초 영양분으로서의 1% 감자즙액과 99% 포도즙 혼합액 400 ml를 넣고 121℃에서 15분간 멸균한 후 실온까지 천천히 냉각시켰다. 100 mm 배양접시 균사체(누에 동충하초) 1/2의 분량을 무균상태에서 접종시켰다. 균사체가 접종된 배양액을 25℃에서 150 rpm으로 진탕배양시켰다. 배양 후 3일부터 동충하초 균사체가 보이기 시작하여 10일 이후부터는 배양용기의 2/3 수준까지 생성되었으며 배양 15 일 전후에 균사체가 거의 포화상태까지 자랐다.
이것을 본배양에 사용하였는데, 본배양 방법으로는 시중에 유통되는 18 ℓ 음용수통을 그대로 이용하였으며, 여기에 1%의 감자즙액과 99%의 포도즙액 혼합액 15 ℓ를 넣고 솜 마개로 봉한 후, 121℃에서 30분간 멸균한다음 상온으로 냉각하고 종배양액 400 ml을 접종하여 25℃에서 120 rpm으로 진탕배양하였다. 발효는 생리활성 피세탄놀과 퀘르세틴의 함량이 각각 60 ppm과 35 ppm 이상이 될 때까지 지속시켰고, 일반적으로 14 내지 16일이 소요되었다. 발효가 완료된 배양액을 거름종이(NO. 2)로 2번 여과하고 필요시 NO. 5번(1㎛의 공극 크기)으로 여과하여 맑은 암자색의 액상 배양 발효식품을 얻었다.
도 2에 도시한 바와 같이, 동충하초 균사체 액상 배양 전에는 피세탄놀과 퀘 르세틴이 3 ppm 이하로 존재하였으나, 발효 후에서 피세탄놀과 퀘르세틴의 함량이 각각 64 ppm과 38 ppm으로 10∼15배 증가하였음을 알 수 있다 (도 3). 배양시간에 따른 유효성분(피세탄놀, 퀘르세틴)의 함량 변화를 하기 표 1에 나타내었다. 유효성분의 함량은 배양 15일 후에 최고치에 이르는 것으로 나타났다.
| 배양시간 | 2일 | 4일 | 6일 | 8일 | 10일 | 12일 | 14일 | 16일 | |
| 성 분 | 피세탄놀 | - | - | 3±2 | 15±5 | 30±10 | 45±10 | 55±10 | 60±10 |
| 퀘르세틴 | - | 2±1 | 7±5 | 15±5 | 20±10 | 25±10 | 35±10 | 35±10 | |
피세탄놀과 퀘르세틴은 항암 효과(27-37 ppm: 피세탄놀, BBRC. 261, 499-503, 1999)와 항혈액응고, 신생혈관 억제(30-57 ppm: 퀘르세틴, Cancer Letters 171, 11-16,2001) 효과가 있다고 이미 밝혀진 바 있다. 따라서, 본 발명에서 개발된 포도 발효식품은 항암, 항혈액응고 및 신생혈관 억제용 기능성 식품으로 사용이 가능하다.
<실시예 2> 동충하초 균사체를 이용한 포도/양파즙 혼합액의 액상 배양 식품의 제조
포도즙은 실시예 1에서 설명한 방법으로 추출하여 사용하였고, 양파는 노란 양파(yellow onion)를 껍질을 벗긴 후 압착하여 얻은 양파즙을 사용하였다. 종배양은 감자즙액 1%, 포도 49.5%와 양파 49.5%의 혼합액 400 ㎖를 1ℓ 삼각플라스크에 넣고 121℃에서 15분간 멸균하였다. 이때 혼합액의 pH는 3.52이었고, 당도는 8 브릭스이었다. 이 멸균된 혼합액에 100 mm 배양접시 분량의 균사체 (누에 동충하초)를 1/2 분량으로 무균상태에서 접종시켰다. 균사체가 접종된 혼합액을 25℃에서 150 rpm으로 진탕배양시켰다. 배양 후 3일부터 동충하초 균사체가 보이기 시작하여 7일 이후부터는 배양용기의 2/3 수준까지 생성되었다. 배양 전후에 산도의 변화는 거의 없었으며 당도는 8 브릭스에서 10 브릭스로 증가되었다.
본배양 방법으로는 실시예 1에서 설명한 것과 같이, 시중에 유통되는 18 ℓ 음용수통에 1% 감자즙액, 49.5%의 포도 즙액과 49.5%의 양파 즙액 혼합액 15 ℓ 넣고 솜 마개로 봉한 후, 121℃에서 30분간 멸균한 다음 상온으로 냉각하고 종배양액 400 ml을 접종하여 25℃에서 120 rpm으로 진탕배양하였다. 이 본배양은 양파에 함유된 황(S)에 의해 만들어지는 독특한 냄새가 사라질 때까지 계속하였고, 일반적으로 10∼14일이 소요되었다. 배양이 완료된 배양액을 거름종이(No. 2)로 2회 여과하고 필요시 거름종이(NO. 5)로 1회 더 여과하여 맑은 암자색의 발효식품을 얻었다.
도 2에 도시한 바와 같이, 동충하초 배양 전에는 피세탄놀과 퀘르세틴이 3 ppm 이하로 존재하였으나, 배양 후에는 피세탄놀과 콰르세틴의 함량이 각각 39 ppm과 138 ppm으로 12 내지 15배 증가하였음을 도 4에서 알 수 있다. 배양시간에 따른 피세탄놀 및 퀘르세틴의 함량 변화를 하기 표 2에 나타내었다. 유효성분 함량은 배양 14일 이후에 최고치에 이르는 것으로 나타났다. 양파에서 생성되는 독특한 냄새는 배양 7일 이후부터는 줄어들기 시작하여 배양 13일 이후에는 완전히 제거되었다.
| 배양시간 | 2일 | 4일 | 6일 | 8일 | 10일 | 12일 | 14일 | 16일 | |
| 성 분 | 피세탄놀 | - | - | 2±1 | 14±3 | 25±10 | 30±10 | 35±10 | 40±10 |
| 퀘르세틴 | 2±1 | 5±3 | 10±5 | 45±10 | 90±10 | 110±10 | 125±10 | 130±10 | |
상기 제조한 본 발명의 발효 식품에 대한 관능 평가를 실시하였다. 관능 평가는 경상대학교 농화학과 대학생 및 대학원생 20명으로 구성된 관능 평가원이 색, 향, 쓴맛, 단맛 및 전체적인 맛을 최상은 5점, 최하를 1점으로 채점하여 평균치로 표시하는 5점법으로 채점하였다. 실험 결과, 도 8에 나타낸 바와 같이 본 발명 포도/양파 액상 발효식품의 색과 향은 모두 좋은 결과로 나타내었다.
양파의 독특한 냄새의 완전한 제거는 본 발명이 이루고자하는 목적 중의 하나로서, 상기 실시예에서 알 수 있는 바와 같이 항암 효과와 항혈액응고 효과가 있는 피세탄놀과 퀘르세틴의 함량은 증가되고, 불쾌한 양파의 냄새가 완전히 제거된 본 발명의 발효식품은 기능성 식품으로 사용이 가능하다.
<실시예 3> 동충하초 균사체를 이용한 포도/오이즙 혼합액의 액상 배양 식품의 제조
종배양을 위해 100℃에서 30분간 가열한 후 압착여과하여 얻은 15 브릭스의 켐벨 품종의 포도즙과 잘 세척한 후 압착 여과한 오이즙을 실시예 2에서와 같은 비율과 혼합한 용액을 121℃에서 15분간 멸균하고, 실온까지 냉각시켰다. 이때 혼합액의 pH는 3.58이었고, 당도는 8 브릭스이었다. 멸균된 혼합액 400 ml에 100 mm 배양접시 분량의 균사체 (누에 동충하초) 1/2의 분량을 무균상태에서 접종시켰다. 균 사체가 접종된 혼합액을 25℃에서 진탕배양시켰다. 배양 후 3일부터 동충하초 균사체 비드가 보이기 시작하여 7일 이후부터는 배양용기의 2/3 수준까지 생성되었다. 배양 전후에 산도의 변화는 거의 없었으며, 당도는 8 브릭스에서 7 브릭스로 낮아졌다. 배양시간은 12∼16일이 소요되었다.
본배양 방법으로는 실시예 1에서 설명한 바와 같이 시중에 유통되는 18ℓ 음용수통에 1%의 감자즙액, 49.5%의 포도즙액과 49.5%의 오이즙액 혼합액 15ℓ를 넣고 솜 마개로 봉한 후, 121℃에서 30분간 멸균한 다음 상온으로 냉각하고 종배양액 400 ml을 접종하여 25℃에서 120 rpm으로 진탕배양하였다. 배양이 완료된 배양액은 거름종이(No. 2)로 2회 여과한 후, 거름종이 (NO. 5)로 2회 여과하여 맑은 암자색의 발효식품을 얻었다.
본 실시예에서 얻어진 배양액의 배양 시간별 티로시나제 저해 활성 정도를 도 7에 나타내었다. 도 7에 도시한 바와 같이, 본 발명의 발효 식품은 멜라닌 생합성 저해 활성, 구체적으로 티로시나제의 활성을 강력하게 저해하여 피부 미백 효과를 갖는다는 것을 알 수 있다.
또한, 본 실시예의 발효식품에서도 실시예 1과 비슷한 경향으로 피세탄놀과 퀘르세틴의 함량이 증가되었다 (도 5 참조). 따라서, 본 발효식품도 항암, 항혈액응고 및 피부미백용 기능성 식품으로 사용이 가능하다.
상기 설명한 바와 같이, 본 발명에 따라 포도 단독으로 또는 포도와 양파 또는 오이의 혼합액을 동충하초 균사체로 액상 배양한 발효식품은 항암, 항혈액응고 효과가 있는 피세탄놀과 퀘르세틴의 함량이 크게 증가되었고, 아울러 양파를 혼합한 액상 배양 발효식품의 경우에는 배양과정에서 양파의 독특한 냄새가 제거되었고, 또한 오이 혼합 발효 식품의 경우에는 티로시나제 저해 효과, 즉 피부 미백 효과가 크게 향상된 것으로 밝혀졌기 때문에, 본 발명은 매우 우수한 기능성 건강 보조 식품을 제공할 수 있다.
Claims (3)
- 포도즙, 포도와 양파 혼합액 또는 포도와 오이 혼합액의 동충하초 균사체 액상 배양액으로 이루어지는 건강 보조 식품으로서, 포도즙의 동충하초 균사체 액상 배양액의 경우 피세탄놀 함량은 10 내지 80 ppm이고, 퀘르세틴의 함량은 10 내지 45 ppm이고, 포도와 양파 혼합액의 동충하초 균사체 액상 배양액의 경우 피세탄놀 함량은 10 내지 60 ppm이고, 퀘르세틴의 함량은 10 내지 140 ppm이고, 포도와 오이 혼합액의 동충하초 균사체 액상 배양액의 경우 피세탄놀 함량은 10 내지 50 ppm이고, 퀘르세틴의 함량은 10 내지 60 ppm인 건강 보조 식품.
- 제1항에 있어서, 포도와 오이 혼합액의 동충하초 균사체 액상 배양액으로 이루어지는, 티로시나제 저해 효과를 갖는 건강 보조 식품.
- 멸균 처리한 포도즙액, 또는 포도와 양파 또는 오이의 혼합액에 동충하초 균사체를 접종하여 배양한 후, 이를 여과하는 것을 포함하는, 포도즙의 동충하초 균사체 액상 배양액의 경우 피세탄놀 함량은 10 내지 80 ppm이고, 퀘르세틴의 함량은 10 내지 45 ppm이고, 포도와 양파 혼합액의 동충하초 균사체 액상 배양액의 경우 피세탄놀 함량은 10 내지 60 ppm이고, 퀘르세틴의 함량은 10 내지 140 ppm이고, 포도와 오이 혼합액의 동충하초 균사체 액상 배양액의 경우 피세탄놀 함량은 10 내지 50 ppm이고, 퀘르세틴의 함량은 10 내지 60 ppm인 건강 보조 식품의 제조 방법.
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2002
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