CN116463183B - 融入杏鲍菇的苦荞养生酒及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种融入杏鲍菇的苦荞养生酒及其制备方法，属于白酒生产技术领域。本发明提供了一种融入杏鲍菇的苦荞养生酒及其制备方法，包括：以高粱和苦荞籽粒为原料，加入自制酒曲进行糖化发酵，得到原酒；再利用扩繁杏鲍菇菌丝对酿酒渣进行两次发酵和两次提取，提取物经冻干后与原酒混合，即得。本发明采用高粱和苦荞作为酿酒原料，利用杏鲍菇对酿酒原料渣进行两次发酵和两次提取处理，使苦荞养生酒具有高粱和苦荞特有的香气，同时显著增加了酒中黄酮、酚酸等功能活性成分，还能融入杏鲍菇菌丝中的活性成分，使发酵提取液中富含多种活性成分，实现了对酿酒后原料的废物利用，降低了生产成本，提升了苦荞酒的保健品质。
Description
技术领域
本发明属于白酒生产技术领域，具体涉及一种融入杏鲍菇的苦荞养生酒及其制备方法。
背景技术
苦荞具有古老的栽培历史，被鉴定具有药食同源特性，是理想的保健品原料和食品原料。其富含蛋白质、淀粉、膳食纤维及微量元素等营养物质，并具有其他禾谷类粮食所缺乏的生物活性物质，比如黄酮类化合物(其中芦丁和槲皮素被研究的最多，芦丁含量约为0.8％-3.0％)、酚酸类、生物糖醇等。实验研究发现苦荞具有多方面的药理活性和生理功能，例如降血糖血脂，增强机体免疫力，抗炎，抗氧化，抗衰老、抗肿瘤等功效。因此苦荞被不断探索，将其融入食品、饮料中，从而起到对人体健康调节的作用。
食药用菌自古被称为山珍，含有丰富的膳食纤维和活性成分，具有极高的营养价值和药用价值。杏鲍菇是一种著名的大型食用真菌，在中国具有2000多年的应用历史，《神农本草经》记载将杏鲍菇列为上品，是滋补强壮、扶正固本的珍贵中药，能产生大量的具有生物活性的化合物，具有极高的营养保健价值和发展前景，目前杏鲍菇是保健品中应用较广泛的一种药用真菌。其有效成分主要包括杏鲍菇多糖、蛋白质、氨基酸、多糖肽、三萜、甾醇、生物碱和核苷等。现代医学研究表明，杏鲍菇具有抗氧化、抗肿瘤，增强免疫功能，降血糖，保肝，抗衰老，抗炎，抗凝血等作用。
我国具有几千年的饮酒文化，白酒在中国乃至世界都备受欢迎，饮酒在人们的日常生活中占据了较重的位置。我国人口众多，但是亚健康的人口也逐渐增多，因此具有一定功效的养生白酒不断受到人们的关注。
发明内容
本发明通过结合食药用菌健康元素和苦荞自身适于酿酒且富含功能活性成分的特点，经过一次糖化发酵、两次固态发酵和两次提取，制备出一款具有口感好、香气浓郁且有益于人体健康且富含杏鲍菇活性成分的苦荞养生酒。
本发明提供了一种融入杏鲍菇的苦荞养生酒的制备方法，其包括以下步骤：
A、以红高粱和苦荞籽粒为苦荞酒发酵原料，经清洗、浸泡后，混合均匀，将混合原料进行润料和蒸料，冷却后，加入自制酒曲进行糖化发酵，发酵完成后，进行蒸馏，得到基酒和原料渣，将所得基酒进行澄清、储存和勾调，得到苦荞酒原酒；
B、步骤A中蒸馏所得原料渣经过润料后，装罐灭菌，加入扩繁驯化后的杏鲍菇菌丝进行固态发酵；
C、步骤B固态发酵完成后，将混合发酵物烘干、粉碎，利用超声辅助提取结合渗漉提取方法，提取得到提取液a和残渣1；
D、步骤C所得残渣1经过润料后，装罐灭菌，加入扩繁驯化后的杏鲍菇菌丝进行固态发酵，发酵结束后，将混合发酵物烘干、粉碎，利用超声辅助提取结合渗漉提取方法，提取得到提取液b和残渣2；
E、将步骤C所得提取液a和步骤D所得提取液b混合，经过滤、浓缩和真空冷冻干燥，得到冻干粉；
F、将步骤A所得苦荞酒原酒和步骤F所得冻干粉混合，混合比例为0.3～0.4g冻干粉/500mL苦荞酒原酒，即得融入杏鲍菇的苦荞养生酒；
步骤A中，所述自制酒曲由以下方法制备得到：
a、以苦荞和大米作为原料，经浸泡、烘干和粉碎，得到原料粉；
b、将2/3～4/5质量的原料粉用作培，剩余的原料粉用作裹粉，加入泸州老窖酿酒大曲(参见：李大和,李国红.泸州老窖大曲酒传统操作法——祝贺“泸州老窖大曲酒”荣获巴拿马赛会国际金奖90周年[J].酿酒,2005,(03):107-114.)、水和霉菌，混匀；
c、将混匀配料先于温度28～35℃，培养2～3d，之后于温度35～40℃，继续培养4～5d，曲子成熟，将成熟后的曲子烘干，即得自制酒曲。
其中，上述融入杏鲍菇的苦荞养生酒的制备方法，步骤A中，所述红高粱、苦荞籽粒和自制酒曲的质量比为500～1000：500～1500：100～200。
其中，上述融入杏鲍菇的苦荞养生酒的制备方法，步骤A中，所述糖化发酵的温度为25～28℃；所述糖化发酵的时间为45～60d。
其中，上述融入杏鲍菇的苦荞养生酒的制备方法，制备自制酒曲时，步骤a中，所述苦荞和大米的质量比为3～5：5～10。
其中，上述融入杏鲍菇的苦荞养生酒的制备方法，制备自制酒曲时，步骤a，所述浸泡的时间为4～8h。
其中，上述融入杏鲍菇的苦荞养生酒的制备方法，制备自制酒曲时，步骤a，所得原料粉的粒度为过100～150目筛。
其中，上述融入杏鲍菇的苦荞养生酒的制备方法，制备自制酒曲时，步骤b中，所述泸州老窖酿酒大曲的加入量为培质量的5～10％。
其中，上述融入杏鲍菇的苦荞养生酒的制备方法，制备自制酒曲时，步骤b中，所述水的加入量为培质量的50～70％。
其中，上述融入杏鲍菇的苦荞养生酒的制备方法，制备自制酒曲时，步骤b中，所述霉菌(其由本领域常规市售酒曲分离出来的霉菌)的加入量为培质量的5％～10％；所述霉菌的浓度为107CFU/mL。
其中，上述融入杏鲍菇的苦荞养生酒的制备方法，步骤B中，所述扩繁驯化后的杏鲍菇菌丝由以下方法制备得到：将带杏鲍菇菌丝的培养基于玉米基质(挑选大小均一的玉米粒，浸泡清洗后，经高温高压灭菌，封装在发酵瓶里)中进行驯化培养，培养温度为28～30℃，培养时间为10～15d，使玉米基质上长满杏鲍菇菌丝，即得扩繁驯化后的杏鲍菇菌丝。
其中，上述融入杏鲍菇的苦荞养生酒的制备方法，步骤D中，所述扩繁驯化后的杏鲍菇菌丝由以下方法制备得到：将带杏鲍菇菌丝的培养基于玉米基质(挑选大小均一的玉米粒，浸泡清洗后，经高温高压灭菌，封装在发酵瓶里)中进行驯化培养，培养温度为28～30℃，培养时间为10～15d，使玉米基质上长满杏鲍菇菌丝，即得扩繁驯化后的杏鲍菇菌丝。
其中，上述融入杏鲍菇的苦荞养生酒的制备方法，步骤B中，所述扩繁驯化后的杏鲍菇菌丝的加入量与步骤A所得原料渣的比例为10～15颗玉米粒：300～400g原料渣。
其中，上述融入杏鲍菇的苦荞养生酒的制备方法，步骤D中，所述扩繁驯化后的杏鲍菇菌丝的加入量与步骤C所得残渣1的比例为10～15颗玉米粒：300～400g残渣1。
本发明中，由于杏鲍菇菌丝生长在玉米基质(即玉米粒)上，因此本发明是直接加入长满菌丝的玉米粒。
其中，上述融入杏鲍菇的苦荞养生酒的制备方法，步骤B中，所述固态发酵的温度为28～30℃，发酵的时间为5～7d。
其中，上述融入杏鲍菇的苦荞养生酒的制备方法，步骤D中，所述固态发酵的温度为28～30℃，发酵的时间为7～10d。
其中，上述融入杏鲍菇的苦荞养生酒的制备方法，步骤C中，所述超声辅助提取结合渗漉提取方法的操作为：将烘干粉碎后的混合发酵物与10～20倍质量的乙醇水溶液(一般采用55～65％乙醇水溶液)混合，于室温下浸泡15～20h后，进行超声，然后将整个体系置于渗漉装置中进行渗漉提取，即得提取液a；步骤C中，所述超声提取的条件为：超声时间1～2h，超声功率为500～1000W，超声温度45～55℃；步骤C中，所述渗漉提取的条件为：乙醇水溶液浓度55～65％，乙醇水溶液用量为原料渣质量的10～30倍。
其中，上述融入杏鲍菇的苦荞养生酒的制备方法，步骤D中，所述超声辅助提取结合渗漉提取方法的操作为：将烘干粉碎后的混合发酵物与10～20倍质量的乙醇水溶液(一般采用55～65％乙醇水溶液)混合，于室温下浸泡15～20h后，进行超声，然后将整个体系置于渗漉装置中进行渗漉提取，即得提取液b；步骤D中，所述超声提取的条件为：超声时间1～2h，超声功率为700～1000W，超声温度45～55℃；步骤D中，所述渗漉提取的条件为：乙醇水溶液浓度55～65％，乙醇水溶液是残渣1质量的10～20倍。
其中，上述融入杏鲍菇的苦荞养生酒的制备方法，步骤E中，所述过滤为：采用0.22μm滤膜进行真空抽滤。
其中，上述融入杏鲍菇的苦荞养生酒的制备方法，步骤E中，所述浓缩为：于温度45～50℃，转速90～100r/min，进行真空旋转蒸发(目的是除去大部分的乙醇和水，一般使最终剩余的体积与原有体积之比为1：10～15)。
其中，上述融入杏鲍菇的苦荞养生酒的制备方法，步骤E中，所述真空冷冻干燥为：于-77～-80℃真空冷冻干燥48～60h。
本发明还提供了一种采用上述方法制备所得融入杏鲍菇的苦荞养生酒。
本发明的有益效果：
本发明采用高粱和苦荞作为酿酒原料，得到的苦荞养生酒具有高粱和苦荞特有的香气，同时融入苦荞中的黄酮、酚酸等功能活性成分。
本发明利用杏鲍菇对酿酒原料渣进行发酵处理，通过杏鲍菇菌丝发酵过程中产生的分解酶对杏鲍菇中的大分子物质进行降解，同时经过两次固态发酵和两次超声辅助-渗漉提取，能够将原料渣中的部分与大分子物质结合的活性成分释放出来。通过超声提取和渗漉提取结合得提取技术，能够将原料渣中的有益成分充分提取出来，实现对原料废渣的二次利用，从而提高苦荞原料利用率，同时利用杏鲍菇进行固态发酵，能融入杏鲍菇菌丝中的活性成分，使发酵提取液中富含多种活性成分。
本发明采用真空冷冻干燥技术，制备得到冻干粉，采用复配的方法加入到苦荞原酒中，该方法可以使冻干粉充分融入到苦荞酒中，使苦荞酒中既含有苦荞活性物质，又融入了杏鲍菇菌中的有效成分。
本发明实现了对酿酒后原料的废物利用，降低了生产成本，提高了原料利用率，提升了苦荞酒的保健品质，苦荞酒富含功能成分和营养成分，为苦荞酒的生产提供了新的思路。
附图说明
图1为总黄酮的标准曲线。
图2为芦丁的标准曲线。
图3为槲皮素的标准曲线。
图4为芦丁和槲皮素标准品的色谱图。
图5为提取液a中芦丁和槲皮素的色谱图。
图6为三萜标准曲线。
图7为三萜标准品的色谱图。
图8为提取液a中三萜的色谱图。
具体实施方式
具体的，一种融入杏鲍菇的苦荞养生酒的制备方法，包括以下步骤：
A、以红高粱和苦荞籽粒为苦荞酒发酵原料，经清洗、浸泡后，混合均匀，将混合原料进行润料和蒸料，冷却后，加入自制酒曲进行糖化发酵，发酵完成后，进行蒸馏，得到基酒和原料渣，将所得基酒进行澄清、储存和勾调，得到苦荞酒原酒；
B、步骤A中蒸馏所得原料渣经过润料后，装罐灭菌，加入扩繁驯化后的杏鲍菇菌丝进行固态发酵；
C、步骤B固态发酵完成后，将混合发酵物烘干、粉碎，利用超声辅助提取结合渗漉提取方法，提取得到提取液a和残渣1；
D、步骤C所得残渣1经过润料后，装罐灭菌，加入扩繁驯化后的杏鲍菇菌丝进行固态发酵，发酵结束后，将混合发酵物烘干、粉碎，利用超声辅助提取结合渗漉提取方法，提取得到提取液b和残渣2；
E、将步骤C所得提取液a和步骤D所得提取液b混合，经过滤、浓缩和真空冷冻干燥，得到冻干粉；
F、将步骤A所得苦荞酒原酒和步骤F所得冻干粉混合，混合比例为0.3～0.4g冻干粉/500mL苦荞酒原酒，即得融入杏鲍菇的苦荞养生酒；
步骤A中，所述自制酒曲由以下方法制备得到：
a、以苦荞和大米作为原料，经浸泡、烘干和粉碎，得到原料粉；
b、将2/3～4/5质量的原料粉用作培，剩余的原料粉用作裹粉，加入泸州老窖酿酒大曲(参见：李大和,李国红.泸州老窖大曲酒传统操作法——祝贺“泸州老窖大曲酒”荣获巴拿马赛会国际金奖90周年[J].酿酒,2005,(03):107-114.)、水和霉菌，混匀；
c、将混匀配料先于温度28～35℃，培养2～3d，之后于温度35～40℃，继续培养4～5d，曲子成熟，将成熟后的曲子烘干，即得自制酒曲。
F、将步骤A所得浓香型苦荞酒和步骤F所得冻干粉混合，将基酒中芦丁含量≥50mg/mL作为指标，使混合比例为0.3～0.4g/500mL，即得融入杏鲍菇的苦荞养生酒。
本发明步骤A中，制备原酒时，清洗、浸泡、润料、蒸料、蒸馏、澄清、储存、勾调均为本领域的常规操作。本发明中所采用的的红高粱营养成分和活性成分含量丰富，是该酒的一个特色。具体的，苦荞原酒的制备方法包括以下步骤：称取适当配比量的高粱和苦荞籽粒，高粱和苦荞籽粒经过挑选、除杂、清洗等预处理后，进行蒸熟熟化，得到熟料；将熟料摊开冷却后，加入特制酒曲，与熟料充分搅拌均匀，然后入罐发酵，发酵温度为25-28℃，发酵时间60d；发酵结束得到酒糟，对酒糟置于甑中进行蒸馏，掐头去尾，酒尾复蒸，即得到苦荞基酒；所得基酒，进行澄清、储存、勾调，得到苦荞酒原酒。
本发明步骤A中，所述红高粱、苦荞籽粒和自制酒曲的质量比为500～1000：500～1500：100～200。
本发明制备自制酒曲时，步骤a中，所述苦荞和大米的质量比为3～5：5～10；步骤a，所述浸泡的时间为4～8h；步骤a，所得原料粉的粒度为过100～150目筛；步骤b中，所述泸州老窖酿酒大曲的加入量为培质量的5～10％；步骤b中，所述水的加入量为培质量的50～70％；步骤b中，所述霉菌(其由本领域常规市售酒曲分离出来的霉菌)的加入量为培质量的5％～10％；所述霉菌的浓度为107CFU/mL。
本发明步骤A所得酒体中的活性成分含量较低。在此基础上，选用富含活性成分的食用真菌杏鲍菇对制酒所得原料渣进行发酵，通过发酵使原料中苦荞成分充分分解、转化，实现活性成分含量的增加及转化增值。
本发明中，所用杏鲍菇菌丝通过在玉米基质中进行扩繁驯化，使该菌适应杂粮基质，提高了该菌的生长速度和发酵速度。通过利用扩繁后的杏鲍菇对酿酒原料渣进行发酵，利用发酵过程中产生水解酶，分解植物材料中大分子物质释放与大分子物质结合存在的活性物质，从而使混合发酵物中富含苦荞活性成分(例如苦荞籽粒中的酚酸、黄酮……)，同时能够加入该菌中的营养成分和活性成分。
步骤B和步骤D中，所述扩繁驯化后的杏鲍菇菌丝由以下方法制备得到：将带杏鲍菇菌丝的培养基于玉米基质(挑选大小均一的玉米粒，浸泡清洗后，经高温高压灭菌，封装在发酵瓶里)中进行驯化培养，培养温度为28～30℃，培养时间为10～15d，使玉米基质上长满杏鲍菇菌丝，即得扩繁驯化后的杏鲍菇菌丝。
利用超声提取结合渗漉提取方法，方法简单、设备易于操作、成本较低，该方法能够使混合发酵物中的有效成分释放，提高提取效率。利用2次发酵、2次提取方式，提高了混合发酵物的利用率。酿造得到的苦荞原酒中加入利用酿酒原料残渣得到的冻干粉，可以有效的融入苦荞和杏鲍菇中的活性成分，从而制备得到一款具有典型风格、香气浓郁、富含苦荞、药用菌健康元素的苦荞养生酒。
本发明步骤B中，所述扩繁驯化后的杏鲍菇菌丝的加入量与步骤A所得原料渣的比例为10～15颗玉米粒：300～400g原料渣；步骤D中，所述扩繁驯化后的杏鲍菇菌丝的加入量与步骤C所得残渣1的比例为10～15颗玉米粒：300～400g残渣1。本发明中，由于杏鲍菇菌丝生长在玉米基质(即玉米粒)上，因此本发明是直接加入长满菌丝的玉米粒。
本发明步骤B中，所述固态发酵的温度为28～30℃，发酵的时间为5～7d；步骤D中，所述固态发酵的温度为28～30℃，发酵的时间为7～10d。
步骤C中，所述超声辅助提取结合渗漉提取方法的操作为：将烘干粉碎后的混合发酵物与10～20倍质量的乙醇水溶液(一般采用55～65％乙醇水溶液)混合，于室温下浸泡15～20h后，进行超声，然后将整个体系置于渗漉装置中进行渗漉提取，即得提取液a；步骤C中，所述超声提取的条件为：超声时间1～2h，超声功率为500～1000W，超声温度45～55℃；步骤C中，所述渗漉提取的条件为：乙醇水溶液浓度55～65％，乙醇水溶液用量为原料渣质量的10～30倍。
步骤D中，所述超声辅助提取结合渗漉提取方法的操作为：将烘干粉碎后的混合发酵物与10～20倍质量的乙醇水溶液(一般采用55～65％乙醇水溶液)混合，于室温下浸泡15～20h后，进行超声，然后将整个体系置于渗漉装置中进行渗漉提取，即得提取液b；步骤D中，所述超声提取的条件为：超声时间1～2h，超声功率为700～1000W，超声温度45～55℃；步骤D中，所述渗漉提取的条件为：乙醇水溶液浓度55～65％，乙醇水溶液是残渣1质量的10～20倍。
本发明步骤E中，所述过滤为：采用0.22μm滤膜进行真空抽滤；所述浓缩为：于温度45～50℃，转速90～100r/min，进行真空旋转蒸发(目的是除去大部分的乙醇和水，一般使最终剩余的体积与原有体积之比为1：10～15)；所述真空冷冻干燥为：于-77～-80℃真空冷冻干燥48～60h。
下面通过实施例对本发明作进一步详细说明，但并不因此将本发明保护范围限制在所述的实施例范围之中。
自制酒曲由以下方法制备得到：①浸米：选择苦荞和大米(质量比为5：10)作为原料，浸泡7h，浸泡后的原料烘干后粉碎，利用150目的筛子过筛得到原料粉；②配料接种：将原料3/4的原料粉用作培，剩余的用作裹粉，加入培质量10％的泸州老窖酿酒大曲、60％的水以及5％的由市售酒曲分离出来的霉菌，搅拌混匀；③制坯和培曲：将混匀配料制成圆形曲坯，将曲坯置于培养室中，温度28～35℃，培养3d，之后设置温度35～40℃，继续培养5d，曲子成熟，将成熟后的曲子取出置于30～45℃烘干，储存备用。
扩繁驯化后的杏鲍菇菌丝由以下方法制备得到：将在培养基上生长的杏鲍菇菌丝直接挑取带菌丝的培养基于玉米基质(挑选大小均一的玉米粒，浸泡清洗后，经高温高压灭菌，封装在发酵瓶里)中进行驯化培养，培养温度为28℃，培养时间为10d，得到玉米基质上长满杏鲍菇菌丝，即得到后续所用扩繁驯化后的杏鲍菇菌丝。
实施例1
融入杏鲍菇健康元素的的苦荞养生酒的制备，按重量份数计，包括以下原料：红高粱700g，苦荞籽粒800g，自制酒曲200g，长满杏鲍菇菌丝的玉米基质。
该养生酒的制备方法包括以下步骤：
1、苦荞酒原酒的具体制备方法包括以下步骤：
称取红高粱和苦荞籽粒，红高粱和苦荞籽粒经过挑选、清洗干净、去除杂质之后，用干净的水浸泡12h，进行蒸熟熟化，得到熟料；
将熟料摊开冷却后，加入自制酒曲，与熟料充分搅拌均匀，然后入罐发酵，发酵温度为25-28℃，发酵时间60d；
发酵结束得到酒糟，将酒糟置于甑中进行蒸馏，掐头去尾，酒尾复蒸，即得到苦荞基酒和原料渣；
所得基酒，进行澄清、储存、勾调，得到苦荞酒原酒。
2、将经过蒸酒的原料渣，用80mL纯净水/100g原料渣润料，装罐灭菌后，加入扩繁驯化后的杏鲍菇菌丝(即长满杏鲍菇菌丝的玉米基质)进行固态发酵，其中扩繁驯化后的杏鲍菇菌丝的加入量与原料渣的比例为10(颗)：300(g原料渣)，发酵温度28℃，发酵时间7d。
3、发酵完成，将混合发酵物烘干，揉碎，将粉碎后的混合发酵物与10倍质量的65％的乙醇水溶液混合，于室温下浸泡24h后，在功率500W和温度50℃下超声1h，然后将整个体系置于渗漉装置中进行渗漉提取，得到提取液a和残渣1；渗漉提取方法工艺条件为：乙醇水溶液浓度为65％，乙醇水溶液质量为原料渣20倍。
4、提取后得到的残渣1，用50mL纯净水/100g残渣1润料，装罐灭菌后，继续加入扩繁驯化后的杏鲍菇菌丝(即长满杏鲍菇菌丝的玉米基质)进行固态发酵，其中扩繁驯化后的杏鲍菇菌丝的加入量与残渣1的比例为15(颗)：400(g残渣1)，在28℃下，发酵7d；发酵结束后利用步骤3的方法提取得到提取液b。
5、将提取液a和b混合，利用具有0.22μm滤膜的真空抽滤装置对混合溶液进行过滤除杂，然后利用真空旋转蒸发装置(条件：温度45℃，转速为100r/min)除去大部分的乙醇和水，使最终剩余的体积与原有体积之比为1：10，将得到的浓缩溶液置于-80℃冷冻冰箱中进行速冻，再利用真空冷冻干燥工艺(条件：温度为-77～-80℃，时间为60h)对浓缩液进行冷冻干燥，得到冻干粉。
6、将冻干粉加入到步骤1中所得浓香型苦荞酒原酒中，将酒中芦丁含量≥50mg/mL作为指标，以0.3g(冻干粉)/500mL(苦荞酒原酒)的比例将冻干粉与苦荞酒原酒复配，即得到融入杏鲍菇健康元素的苦荞养生酒。
实施例2
融入杏鲍菇健康元素的的苦荞养生酒的制备，按重量份数计，包括以下原料：红高粱1000g，苦荞籽粒1000g，特制酒曲200g，长满杏鲍菇菌丝的玉米基质。
该养生酒的制备方法包括以下步骤：
1、苦荞酒原酒的具体制备方法包括以下步骤：
称取红高粱和苦荞籽粒，红高粱和苦荞籽粒经过挑选、清洗干净、去除杂质之后，用干净的水浸泡12h，进行蒸熟熟化，得到熟料；
将熟料摊开冷却后，加入自制酒曲，与熟料充分搅拌均匀，然后入罐发酵，发酵温度为28℃，发酵时间60d；
发酵结束得到酒糟，对酒糟置于甑中进行蒸馏，掐头去尾，酒尾复蒸，即得到苦荞基酒和原料渣；
所得基酒，进行澄清、储存、勾调，得到苦荞酒原酒。
2、将经过蒸酒的原料渣，用80mL纯净水/100g原料渣润料，装罐灭菌后，加入扩繁驯化后的杏鲍菇菌丝(即长满杏鲍菇菌丝的玉米基质)进行固态发酵，其中扩繁驯化后的杏鲍菇菌丝的加入量与原料渣的比例为10(颗)：300(g原料渣)，发酵温度28℃，发酵时间7d。
3、发酵完成，将混合发酵物烘干、揉碎，将粉碎后的混合发酵物与10倍质量的65％的乙醇水溶液混合，于室温下浸泡12h后，在功率500W和温度50℃下超声1h，然后将整个体系置于渗漉装置中进行渗漉提取，得到提取液a和残渣1；渗漉提取方法工艺条件为：乙醇水溶液浓度65％，乙醇水溶液质量为原料渣20倍。
4、提取后得到的残渣1，用50mL纯净水/100g残渣1润料，装罐灭菌后，继续加入扩繁驯化后的杏鲍菇菌丝(即长满杏鲍菇菌丝的玉米基质)进行固态发酵，其中扩繁驯化后的杏鲍菇菌丝的加入量与残渣1的比例为20(颗)：400(g残渣1)，在28℃下，发酵7d；发酵结束后，将混合发酵物烘干、揉碎，将粉碎后的混合发酵物与10倍质量的55％的乙醇水溶液混合，于室温下浸泡24h后，在功率500W和温度50℃下超声1h，然后将整个体系置于渗漉装置中进行渗漉提取，得到提取液b和残渣2；渗漉提取方法工艺条件为：乙醇水溶液浓度65％，乙醇水溶液质量为残渣1的30倍。
5、将提取液a和b混合，利用具有0.22μm滤膜的真空抽滤装置对混合溶液进行过滤除杂，然后利用真空旋转蒸发装置(条件：温度45℃，转速为100r/min)除去大部分的乙醇和水，使最终剩余的体积与原有体积之比为1：15，将得到的浓缩溶液置于-80℃冷冻冰箱中进行速冻，再利用真空冷冻干燥工艺(条件：温度为-77～-80℃，时间为48h)对浓缩液进行冷冻干燥，得到冻干粉。
6、将冻干粉加入到步骤1中所得浓香型苦荞酒原酒中，将酒中芦丁含量≥50mg/mL作为指标，以0.3g(冻干粉)/500mL(苦荞酒原酒)的比例将冻干粉与苦荞酒基酒复配，即得到融入杏鲍菇健康元素的苦荞养生酒。
有效成分测定：
以总黄酮、芦丁、槲皮素、三萜为指标，测定实施例1和2得到的苦荞酒。总黄酮测定采用紫外分光光度法，芦丁、槲皮素、三萜含量采用高效液相色谱法，测定结果如表2、表3、表4所示。
1、测定方法：
(1)总黄酮含量测定(以芦丁计，以芦丁作为标准品)：
采用三氯化铝比色法测定苦荞发酵物中总黄酮含量(参见：李欣.苦荞麦中黄酮类化合物分析方法的建立[D]；中国农业科学院，2010.)。
表1总黄酮(以芦丁计)标准曲线制定加样操作表
以芦丁为标准品，制定标准曲线，如表1加样操作表所示。取0.2mg/mL的芦丁标准溶液(mL)按梯度分别吸取0、0.25、0.5、1、2、3、4(mL)置于10mL的比色管中，先加入2mL三氯化铝溶液，再加入3mL乙酸钾溶液，然后用70％的甲醇溶液定容至5mL，室温下放置反应30min，在420nm出测OD值并记录，同时做空白对照，以净OD值(即工作溶液吸光度与空白试验吸光度相减)为横坐标，芦丁标准液浓度为纵坐标，绘制标准工作曲线。如图1所示，该标准曲线回归方程为Y＝0.0559X-0.0025，线性系数R2＝0.9999，且线性关系在0.0056-0.0896mg/mL范围内良好。
样品测定中按照上述操作步骤，若超过线性范围则需要适当稀释。取1mL样品于10mL比色管中，先加入2mL三氯化铝溶液，再加入3mL乙酸钾溶液，然后用70％的甲醇溶液定容至5mL，室温下放置反应30min，以0号管做空白对照，在420nm出测OD值并记录，同时做空白对照。根据标准曲线和总黄酮得率计算公式计算苦荞提取液中的总黄酮含量。
2、芦丁、槲皮素含量测定：
(1)色谱条件
色谱条件为：色谱柱：Damonsil C18色谱柱，流动相：甲醇-0.5％磷酸水溶液(40：60)；柱温40℃；流速1.0mL/min；检测波长390nm；进样量10μL，检测时间为5min。
如图2和3所示，芦丁标准曲线回归方程为Y＝6.3517X-27.702，线性系数R2＝0.9994，且线性关系在0.0392～0.558mg/mL范围内良好；槲皮素标准曲线回归方程为Y＝30.258X+7.3619，线性系数R2＝0.9996，且线性关系在0.004～0.06mg/mL范围内良好。
3、三萜含量检测
(1)色谱条件
色谱柱：C18(250mm×4.6mm，5μm)；流动相：甲醇：纯水＝91：9(磷酸调pH为3.0)，流速0.6mL/min，柱温为室温，检测波长为210nm，进样量20μL，检测时间25min。
(2)分别精密称取三萜标准品(齐墩果酸)标准溶液0.2mL、0.5mL、1mL、2mL、5mL，用甲醇定容至10mL，得到浓度分别为2μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL的系列标准工作液，过0.22μm膜后于4℃避光保存备用。测定得到标准品色谱图和样品色谱图，标准曲线。如图6所示，三萜标准曲线回归方程为Y＝23.730X+13.236，线性系数R2＝0.9998，且线性关系在2～50μg/mL范围内良好。
分别测定苦荞酒原酒、冻干粉、成品苦荞养生酒(适当稀释)中的活性成分如表2、表3、表4所示。结果表明，原酒中活性成分含量较低，几乎检测不到，通过添加冻干粉，得到的苦荞酒中富含黄酮类化合物，以及三萜类物质。
表2实施例中原酒主要成分检测结果
| 测定项目 | 总黄酮mg/L | 芦丁mg/L | 槲皮mg/L | 三萜mg/L |
| 实施例1 | — | — | — | — |
| 实施例2 | — | — | — | — |
表3实施例中所得冻干粉检测结果
| 测定项目 | 冻干粉质量g | 总黄酮％ | 芦丁mg/g | 槲皮mg/g | 三萜mg/g |
| 实施例1 | 40±2.03 | 11.63±0.45 | 95.3±1.14 | 5.3±0.34 | 62.5±1.01 |
| 实施例2 | 45±1.03 | 12.43±2.11 | 101.4±1 | 6.6±1.06 | 67.31±0.82 |
表4实施例中成品酒主要成分检测结果
由表2～4检测结果所示，本发明制得的养生酒含有黄酮、芦丁、槲皮素、三萜等有效成分，酒精度在42°左右，对调节人体健康具有与一定效用，例如饮用者软化血管，降低血糖，延缓衰老，改善长期饮酒者身体健康状况等。
将实施例1和2得到的养生酒选取20人进行感官分析，得到本发明养生酒的感官评价，如表5所示：
表5实施例苦荞酒的感官评价
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Claims (10)
1.融入杏鲍菇的苦荞养生酒的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
A、以红高粱和苦荞籽粒为苦荞酒发酵原料，经清洗、浸泡后，混合均匀，将混合原料进行润料和蒸料，冷却后，加入自制酒曲进行糖化发酵，发酵完成后，进行蒸馏，得到基酒和原料渣，将所得基酒进行澄清、储存和勾调，得到苦荞酒原酒；
B、步骤A中蒸馏所得原料渣经过润料后，装罐灭菌，加入扩繁驯化后的杏鲍菇菌丝进行固态发酵；
C、步骤B固态发酵完成后，将混合发酵物烘干、粉碎，利用超声辅助提取结合渗漉提取方法，提取得到提取液a和残渣1；
D、步骤C所得残渣1经过润料后，装罐灭菌，加入扩繁驯化后的杏鲍菇菌丝进行固态发酵，发酵结束后，将混合发酵物烘干、粉碎，利用超声辅助提取结合渗漉提取方法，提取得到提取液b和残渣2；
E、将步骤C所得提取液a和步骤D所得提取液b混合，经过滤、浓缩和真空冷冻干燥，得到冻干粉；
F、将步骤A所得苦荞酒原酒和步骤F所得冻干粉混合，混合比例为0.3～0.4g冻干粉/500mL苦荞酒原酒，即得融入杏鲍菇的苦荞养生酒；
步骤A中，所述自制酒曲由以下方法制备得到：
a、以苦荞和大米作为原料，经浸泡、烘干和粉碎，得到原料粉；
b、将2/3～4/5质量的原料粉用作培养料，剩余的原料粉用作裹粉，加入泸州老窖酿酒大曲、水和霉菌，混匀；
c、将混匀配料先于温度28～35℃，培养2～3d，之后于温度35～40℃，继续培养4～5d，曲子成熟，将成熟后的曲子烘干，即得自制酒曲。
2.根据权利要求1所述的融入杏鲍菇的苦荞养生酒的制备方法，其特征在于：步骤A中，所述红高粱、苦荞籽粒和自制酒曲的质量比为500～1000：500～1500：100～200。
3.根据权利要求1所述的融入杏鲍菇的苦荞养生酒的制备方法，其特征在于：步骤A中，所述糖化发酵的温度为25～28℃；所述糖化发酵的时间为45～60d。
4.根据权利要求1所述的融入杏鲍菇的苦荞养生酒的制备方法，其特征在于：制备自制酒曲时，至少满足下列的一项：
步骤a中，所述苦荞和大米的质量比为3～5：5～10；
步骤a，所述浸泡的时间为4～8h；
步骤a，所得原料粉的粒度为过100～150目筛；
步骤b中，所述泸州老窖酿酒大曲的加入量为培养料质量的5～10％；
步骤b中，所述水的加入量为培养料质量的50～70％；
步骤b中，所述霉菌的加入量为培养料质量的5％～10％；所述霉菌的浓度为107CFU/mL。
5.根据权利要求1所述的融入杏鲍菇的苦荞养生酒的制备方法，其特征在于：至少满足下列的一项：
步骤B中，所述扩繁驯化后的杏鲍菇菌丝由以下方法制备得到：将带杏鲍菇菌丝的培养基于玉米基质中进行驯化培养，培养温度为28～30℃，培养时间为10～15d，使玉米基质上长满杏鲍菇菌丝，即得扩繁驯化后的杏鲍菇菌丝；
步骤D中，所述扩繁驯化后的杏鲍菇菌丝由以下方法制备得到：将带杏鲍菇菌丝的培养基于玉米基质中进行驯化培养，培养温度为28～30℃，培养时间为10～15d，使玉米基质上长满杏鲍菇菌丝，即得扩繁驯化后的杏鲍菇菌丝。
6.根据权利要求1或5所述的融入杏鲍菇的苦荞养生酒的制备方法，其特征在于：至少满足下列的一项：
步骤B中，所述扩繁驯化后的杏鲍菇菌丝的加入量与步骤A所得原料渣的比例为10～15颗玉米粒：300～400g原料渣；
步骤D中，所述扩繁驯化后的杏鲍菇菌丝的加入量与步骤C所得残渣1的比例为10～15颗玉米粒：300～400g残渣1。
7.根据权利要求1所述的融入杏鲍菇的苦荞养生酒的制备方法，其特征在于：至少满足下列的一项：
步骤B中，所述固态发酵的温度为28～30℃，发酵的时间为5～7d；
步骤D中，所述固态发酵的温度为28～30℃，发酵的时间为7～10d。
8.根据权利要求1所述的融入杏鲍菇的苦荞养生酒的制备方法，其特征在于：至少满足下列的一项：
步骤C中，所述超声辅助提取结合渗漉提取方法的操作为：将烘干粉碎后的混合发酵物与10～20倍质量的乙醇水溶液混合，于室温下浸泡15～20h后，进行超声，然后将整个体系置于渗漉装置中进行渗漉提取，即得提取液a；步骤C中，所述超声辅助提取的条件为：超声时间1～2h，超声功率为500～1000W，超声温度45～55℃；步骤C中，所述渗漉提取的条件为：乙醇水溶液浓度55～65％，乙醇水溶液用量为原料渣质量的10～30倍；
步骤D中，所述超声辅助提取结合渗漉提取方法的操作为：将烘干粉碎后的混合发酵物与10～20倍质量的乙醇水溶液混合，于室温下浸泡15～20h后，进行超声，然后将整个体系置于渗漉装置中进行渗漉提取，即得提取液b；步骤D中，所述超声辅助提取的条件为：超声时间1～2h，超声功率为700～1000W，超声温度45～55℃；步骤D中，所述渗漉提取的条件为：乙醇水溶液浓度55～65％，乙醇水溶液是残渣1质量的10～20倍。
9.根据权利要求1～8任一项所述的融入杏鲍菇的苦荞养生酒的制备方法，其特征在于：至少满足下列的一项：
步骤E中，所述过滤为：采用0.22μm滤膜进行真空抽滤；
步骤E中，所述浓缩为：于温度45～50℃，转速90～100r/min，进行真空旋转蒸发；
步骤E中，所述真空冷冻干燥为：于-77～-80℃真空冷冻干燥48～60h。
10.权利要求1～9任一项制备方法所得融入杏鲍菇的苦荞养生酒。
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